CZ301750B6

CZ301750B6 - Bicyklický pyrrolový derivát, jeho použití pri výrobe léciva, farmaceutická kompozice tento derivát obsahující a pro použití pri lécení

Info

Publication number: CZ301750B6
Application number: CZ20022207A
Authority: CZ
Inventors: Joseph Cox@Paul; Nadeem Majid@Tahir; Yeun Quai Lai@Justine; David Morley@Andrew; Amendola@Shelley; Deprets@Stephanie; Edlin@Chris
Original assignee: Aventis Pharma Limited
Priority date: 1999-12-24
Filing date: 2000-12-27
Publication date: 2010-06-09
Also published as: IL193615A0; CA2699568A1; AU2209401A; PL355819A1; US6770643B2; CZ301751B6; DZ3377A1; EP1263759A2; HRP20020547B1; MA26857A1; AP1917A; NZ519121A; BG66176B1; SK9012002A3; AP2006003492A0; EP1990343B1; EP1990343A3; AP1587A; US20040009983A1; KR20020062663A

Abstract

Rešení se týká bicyklických pyrrolových derivátu obecného vzorce I, ve kterém mají substituenty specifické významy, jejich použití pri výrobe léciva pro lécení onemocnení, jejichž prubeh muže být zlepšen podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy, jakož i farmaceutické kompozice, která jako úcinnou látku obsahuje uvedený bicyklický pyrrolový derivát a která je urcena pro použití pri lécení uvedených onemocnení.

Description

Bicyklický pyrrotový derivát, jeho použiti při výrobě léčiva, farmaceutická kompozice tento derivát obsahující a pro použití při léčení s Oblast techniky

Vynález se týká bicyklických pyrrolových derivátů, použití při výrobě léčiva pro léčení onemocnění, jejich jejichž průběh může být zlepšen podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy, jakož i farmaceutické kompozice, která obsahuje jako účinnou látku uvedený bicyklický pyrí o rolový derivát a která je určena pro použití při léčení uvedených onemocnění.

Dosavadní stav techniky

Proteinové kinázy se účastní signalizace, která řídí aktivaci, růst a diferenciací buněk jako odpověď na extracelulámí mediátory a změny prostředí. Obecně se tyto kinázy dělí do několika skupin; některé výhodně fosforylují serinové a/nebo threoninové zbytky a některé výhodně fosforylují tyrosinové zbytky [S. K. Hanks a T. Hunter, FASEB. J. 1995, 9, strana 576-596. Mezi serinové/threoninové kinázy patří například isoformy proteinové kinázy C [A.C. Newton, J. Biol.

Chem. 1995, 270, strana 28 495-28 498] a skupina na cyklinu závislých kináz, jako je cdc2 [J. Pins, Trends in Biochemical Sciences 1995,18, strana 195-197]. Mezi tyrosinové kinázy patří membránové receptoiy růstového faktoru, jako je receptor epidermálního růstového faktoru [S. Iwashita a M Kobayashi, Celular Signaíing 1992,4, strana 123-132] a cytosolické nereceptorové kinázy, jako jsou p56tck, p59fYn, ZAP-70 a csk kinázy [Co Chán a kol., Ann. Rev.

Immunol. 1994,12, strana 555-592].

Příliš vysoká aktivita proteinové kinázy se objevuje u řady chorob, které jsou následkem abnormální funkce buněk, která může být přímo nebo nepřímo, například selháním správného kontrolního mechanismu kinázy, spojena například s mutací, nadměrnou expresí nebo nevhodnou akti30 vací enzymu; nebo způsobena malou produkcí cytokinů nebo růstových faktorů, které se rovněž účastní přenosu signálu po nebo proti kináze. Ve všech těchto případech může mít příznivý vliv selektivní inhibice působení kinázy.

Syk je 72-kDa cytoplazmická proteinová tyrosinová kináza, která je exprimována různými hema35 topoietickými buňkami a je klíčovým prvkem některých kaskád, které spojují antigenové receptory a buněčné reakce. Proto hraje Syk ústřední roli při signalizaci vysoké afinity IgE receptoru, FceRl, v buňkách prsu a při signalizaci receptorového antigenu u lymfocytůT a B. Signální přenosové cesty mají u buněk prsu a buněk T a B společné rysy. Vazebná místa ligandu receptoru postrádají vnitřní aktivitu tyrosinové kinázy, ale interagují s převodními podjednotkami, které obsahují imunoreceptorové tyrosinové aktivační motivy (ITAMs) [M. Reth, Nátuře, 1989, 338, strany 383-384]. Tyto motivy jsou přítomny v β i γ podjednotkách FceRl, v ξ-podjednotce receptoru buněk T (TCR) a v IgGa a IgGp podjednotkách B buněčných receptorů (BCR). [N.S. van Oers a A. Weiss, Seminars in Immunology, 1995,7, strany 227-236]. Po navázání antigenu a multimerizaci se ITAM zbytky fosforylují proteinovou tyrosinovou kinázou ze skupiny Src. Syk patří do unikátní skupiny tyrosinových kináz, které mají dvě dvojice Src homologických 2 (SH2) domén a C-koncovou katalytickou doménu. Tyto SH2 domény se váží s vysokou afinitou k ITAMs a tato SH2-spojená asociace Syk s aktivovaným receptorem stimuluje aktivitu Syk kinázy a lokalizuje Syk v plazmové membráně.

U Syk deficitních myší je inhibována degranulace buněk prsní žlázy, což naznačuje, že se jedná o důležitý cíl vývoje činidel stabilizujících buňky prsní tkáně [P.S. Costelo, Oncogene 1996,13, strany 2595-2605]. Podobné studie dokázaly kritickou roli Syk v BCR a TCR signalizaci [A.M. Cheng, Nátuře, 1995, 378, strany 303-306, (1995) a D.H. Chu a kol., Immunological Reviews, 1998, 165, strany 167-180], Syk se také účastní přežití eosinofílu jako reakce na IL-5 aGM-CSF [S. Yousefi a kol., J. Exp. Med., 1996, 183, strany 1407-1414]. Vzdor klíčové roli

-1 CZ 301750 B6 u buněk prsní žlázy a u BCR a T buněk je velmi málo známo o mechanismu, kterým Syk přenáší efektory. Jako substráty Syk u B buněk a buněk prsní žlázy se ukázaly být dva adaptérové proteiny, a to BLNK (spojovací protein buněk, SLP-65) a SLP-76, které byly postupovány jako rozhraní mezi Syk a efektory [M. Ischiai a kol, Immunity, 1999, 10, strany 117-125 a L.R. Hen5 dricks-Taylor a kol., J. Bioi Chem., 1997, 272, strany 1 363-1 367]. Dále se zdám, že Syk hraje důležitou roli v signální dráze CD40, který hraje důležitou roli při proliferaci buněk B [M. Faris a kol., J. Exp. Med., 1994,179, strany 1923-1931].

Syk se dále účastní aktivace krevních destiček stimulovaných nízkoafinitním receptorem IgG (Fc ío gamma-RIIA) nebo stimulovaných kolagenem [F. Yanaga a kol., Biochem. J, 1995, 311, (Pt. 2) strany 471-478].

Fokální adhezní kináza (FAK) je nereceptorová tyrosinová kináza, která se účastní integrinem zprostředkovaných signálních přenosových drah. FAK se kolokalizuje s integriny ve fokálních kontaktních místech a aktivace FAK a fosfoiylace jejího tyrosinu byla prokázána v řadě buněčných typů jako závislá na vazbě integrinů na jejich extracelulámí ligandy. Výsledky některých studií podporují hypotézu, že by inhibitory FAK mohly být vhodné pro léčení rakoviny. Například FAK-deficitní buňky špatně migrují následkem chemotaktických signálů a vysoká exprese C-koncových domén FAK blokuje rozptyl a chemotaktickou migraci (Sieg a kol, J, Cell Science

1999, 112, 2677-2691; Richardson A. a ParsonsT., Cell 1997, 97, 221-231); a navíc nádorové buňky ošetřené FAK antioligonukleotidy ztrácejí své připojení a podléhají apoptose (Xu a kol., Cell Growth Differ. 1996, 4, 413-418). Nadměrná exprese FAK byla publikována u rakoviny prostaty, prsu, štítné žlázy, tlustého střeva a plic. Úroveň exprese FAK má přímý vztah s nádory, které vykazují nej agresivnější fenotyp.

Pro embryonální vývoj a organogenezi má klíčový význam angiogeneze nebo tvorba nových cév vývojem z preexistující vaskulatury. Abnormálně rozvinutá neovaskularizace se vyskytuje u revmatoidní arthritidy, diabetické retinopatie a během vývoje nádoru (Folkman, Nat. Med. 1995, 1, 27-31). Angiogeneze je komplexní mnohastupňový proces, který zahrnuje aktivaci, migraci, proliferaci a přežívání endothelových buněk. Rada studií v oblasti angiogeneze nádoru v posledních dvaceti letech definovala řadu terapeutických cílů zahrnujících kinázy, proteázy a integriny, což vedlo k objevení řady nových antiangiogenických činidel včetně inhibitorů KDR, z nichž některé se již klinicky testují (Jekunen a kol., Cancer Treatment Rev. 1997,23,263-286). Inhibitory angiogeneze lze použít v první linii jako podporu, a také preventivně při vzniku nebo návratu malignit.

U kvasinek a drosofil byly nalezeny některé proteiny, které se účastní segregace chromosomů a tvorby vřeténka. Rozrušení těchto proteinů vede ke špatné segregaci chromosomů a monopolárním nebo přerušeným vřeténkům. Mezi tyto kinázy patří lpi I a aurorové kinázy S. cerevisiae a drosofily, které jsou nutné pro separaci centrosomů a segregaci chromosomů. Několik laboratoří v poslední době klonovalo a charakterizovalo jeden lidský homolog kvasinkové Ipll. Tato kináza označovaná jako Aurora2, STK15 nebo BTAK patří do skupiny serinových/threon lnových kináz. Bischoff a kol. prokázali, že Aurora2 je onkogen a je rozšířena v lidských kolorektálních rakovinných buňkách (EMBOJ., 1998, 17, 3052-3065) a byla také prokázána v nádorech epitelu, jako je rakovina prsu.

-2CZ 301750 Bó

Podstata vynálezu

Předmětem vynálezu je farmaceutická kompozice, jejíž podstata spočívá v tom, že obsahuje účin5 né množství selektivního inhibitoru kinázy, kterým je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I:

ve kterém:

R¹ znamená arylovou skupinu nebo heteroarylovou skupinu, z nichž každá je případně substituovaná jednou nebo více skupinami zvolenými ze souboru zahrnujícího acylovou skupinu, alkylendioxyskupinu, alkenylovou skupinu, alkenyloxyskupinu, alkynylovou skupinu, arylovou skupinu, kyanoskupinu, halogen, hydroxyskupinu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, nitro skupinu, R‘-C(=O)-NY'Y², -C(=O)-OR⁵, -ΝΥ'Υ², -N(R⁴)-C(=O)-R’, -N(R⁶)15 C(=O)-NY³Y⁴, -N(R‘)-C(=O)-OR⁷, -N(R⁶)-SO2-R⁷, -N(R⁶)-SO2-NY³Y⁴, -so₂-ny‘y² a-Z²R⁴;

R² znamená atom vodíku, acylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, C2jl-alkenylovou skupinu nebo Ci^-alkylovou skupinu případně substituovanou substituentem zvoleným ze sou20 boru zahrnujícího kyanoskupinu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, Z’R⁸, -C(O)-NY³Y⁴, -CO2R⁸, -NY³Y⁴ -N(R⁶X(=0)-R, -N(R⁶K(=O)-NY³Y⁴, -N(R⁶)-C(=O> OR⁷, -N(R⁶)-SO2R⁷, -N(R⁶>SO2-NY³Y⁴ a jeden nebo více atomů halogenů;

R³ znamená atom vodíku, arylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, heteroarylovou skupinu, C_M-alkylovou skupinu, -C(=O)-OR⁵ nebo -C(=O)-NY³Y⁴;

R⁴ znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu nebo cykloalkylalkylovou skupinu, z nichž každá je případně substituovaná substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího arylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, -CHO nebo její 5-, 6- nebo 7-členný cyklický acetalový derivát, -C(=O)~NY^lY², -C(=O>0R⁵, -NY*N², -N(R⁶)-C(=O)-R⁷, -<(O}-NY³Y⁴, -N(R⁶)-SO₂-R⁷, -N(R⁶)hSO2-NY³Y⁴, -OR⁷, a jednu nebo více skupin zvolených ze souboru zahrnujícího hydroxyskupinu a karboxyskupinu;

R^s znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu;

R⁶ znamená atom vodíku nebo Ci^-alkylovou skupinu;

R⁷ znamená alkylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, cykloalkylalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, heteroarylalkylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu nebo heterocykloalkylalkylovou skupinu;

R⁸ znamená atom vodíku nebo Ci^-alkylovou skupinu;

-3CZ 301750 B6

Y¹ a Y² nezávisle znamenají atom vodíku, alkenylovou skupinu, arylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo alkýlovou skupinu případně substituovanou jednou nebo více skupinami zvolenými ze souboru zahrnujícího arylovou skupinu, atom halogenu, heteroarylovou skupinu, hydroxyskupinu, -C(=O)-NY³Y⁴, -C(=O)-OR⁵, -NY³Y⁴, -N(R⁶)-C(=O>5 R⁷, -N(R⁶)-C(=O)“NY³Y⁴, -N(R⁶)-SO2-R⁷, -N(RVS0r-NY³Y⁴ a -OR⁷; nebo skupina -NY*N² může tvořit cyklický amin;

Y³ a Y⁴ nezávisle znamenají atom vodíku, alkenylovou skupinu, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, aiylalkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo hetero10 aiylalkylovou skupinu; nebo skupina -NY³Y⁴ může tvořit cyklický amin;

Z¹ znamená O nebo S;

Z² znamená O nebo S(O)„;

n znamená nulu nebo celé číslo 1 nebo 2;

přičemž

2o (a) „acylová skupina“ znamená H-CO- nebo alkyl-CO-skupinu;

(b) „alkylová skupina“ znamená, pokud není uvedeno jinak, alifatickou uhlovodíkovou skupinu, která může mít přímý nebo rozvětvený řetězec obsahující 1 až 15 uhlíkových atomů v řetězci a případně substituovaný jedním nebo více atomy halogenů;

(c) „alky lenová skupina“ znamená alifatickou dvouvalenční skupinu odvozenou od přímé nebo rozvětvené alky love skupiny;

(d) „alkenylová skupina“ znamená alifatickou uhlovodíkovou skupinu, která obsahuje dvojnou vazbu uhlík—uhlík a která může mít přímý nebo rozvětvený řetězec obsahující 2 až 15 uhlíkových atomů v řetězci;

(e) „alkynylová skupina“ znamená alifatickou uhlovodíkovou skupinu, která obsahuje trojnou vazbu uhlík—uhlík a která může mít přímý nebo rozvětvený řetězec obsahující 2 až 15 uhlíkových atomů v řetězci;

(f) „aiylová skupina“ jako skupina nebo součást skupiny znamená: (i) monocyklický nebo vícecyklický aromatický karbocyklický zbytek obsahující 6 až 14 uhlíkových atomů; nebo (ii) částečně nasycený vícecyklický aromatický karbocyklický zbytek, ve kterém jsou arylová skupina a cykloalkylová skupina nebo cykloalkenylová skupina zkondenzovány dohromady k vytvoření cyklické struktury, pokud není definována jinak, přičemž aiylové skupiny jsou případně substituované jedním nebo více substituenty arylové skupiny, které mohou být stejné nebo odlišné a které jsou zvoleny ze souboru zahrnujícího acylovou skupinu, acylaminoskupinu, alkoxyskupinu, alkoxy karbony lovou skupinu, alkylendioxyskupinu, alkylsutfínylovou skupinu, alkyl sul fony45 lovou skupinu, alkylthioskupinu, aroylovou skupinu, aroylaminovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkyloxyskupinu, arylalkyloxykarbonylovou skupinu, arylalkylthioskupinu, aryloxyskupinu, ary loxykarbony lovou skupinu, aryIsulfinylovou skupinu, arylsulfonylovou skupinu, arylthioskupinu, karboxyskupinu nebo bioisoster kyseliny, kyanoskupinu, atom halogenu, heteroaroylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, heteroarylaikyloxyskupínu, heteroaroylaminovou skupinu, heteroaryloxyskupinu, hydroxyskupinu, nitro skupinu, trifluormethylovou skupinu, -NY³Y⁴, -CONY³Y⁴, -S02NY³Y⁴-NY³-C(=0)alkylovou skupinu, -NY³S02alkylovou skupinu nebo alkylovou skupinu případně substituovanou aiylovou skupinou, heteroarylovou skupinou, hydroxy skupinou, a -NY³Y⁴;

-4CZ 301750 Bó (g) „heteroarylová skupina“ jako skupina nebo součást skupiny znamená: (i) aromatický monocyklický nebo vícecyklický organický 5- až 10-členný zbytek obsahující 1, 2 nebo 4beteroatomy, zvolené ze souboru sestávajícího z N, O a S, a který je případně substituován jedním nebo více substituenty arylové skupiny definovanými v (f); (ii) částečně nasycený vícecyklický hetero5 karbocyklický zbytek, ve kterém jsou heteroarylová skupina a cykloalkylová nebo cykloalkenylová skupina zkondenzovány dohromady k vytvoření cyklické struktury případně substituované jedním nebo více substituenty arylové skupiny, definovanými v (ť);

(h) „cykloalkylová skupina“ znamená nasycený monocyklický nebo bicyklický kruhový systém io obsahující 3 až 10 uhlíkových atomů a případně substituovaný skupinou oxo;

(i) „cykloalkenylová skupina“znamená nearomatický jednokruhový nebo vícekruhový kruhový systém obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu uhlík-uhlík a 3 až 10 uhlíkových atomů;

ts (j) „heterocykloalkylová skupina“ znamená: (i) cykloalkylovou 3- až 7-člennou skupinu obsahující 1 nebo 2 heteroatomy zvolené ze souboru sestávajícího z O a N, která může být případně substituovaná oxo-skupinou; (ii) částečně nasycený vícecyklický heterokarbocyklický zbytek, ve kterém arylový nebo heteroaiylový kruh, z nichž každý je případně substituován jedním nebo více substituenty arylové skupiny, a heterocykloalkylová skupina jsou zkondenzovány dohroma20 dy k vytvoření cyklické struktury; a (k) „cyklický amin“ znamená 3- až 8-členný monocyklický cykloalkylový kruhový systém, ve kterém je jeden z kruhových uhlíkových atomů nahrazen dusíkem a který (i) může rovněž obsahovat další heteroatom-obsahující skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího O, S, SO₂ nebo

NY⁷, kde Y⁷ znamená vodík, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, -C(=O)-R⁷, -C(=O)-OR⁷ nebo -SO₂R⁷, a (ii) může být kondenzován k dalším arylovým, heteroarylovým, heterocykloalkylovým nebo cykloalkylovým kruhům k vytvoření bicyklického nebo tricyklického kruhového systému;

a jeho odpovídající N-oxidy a jeho esterová proléčiva a jeho kyselinové bioisostery; a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, těchto sloučenin a jejich N-oxidy a jejich esterová proléčiva a jejich kyselinové bioisostery; společně s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči nebo pomocnými látkami;

přičemž „kyselinový bioisoster“ znamená sloučeninu, ve které je skupina -COOH nahrazena skupinou zvolenou ze souboru zahrnujícího -C(=O)-NHOH, -C(=O>-CH₂OH, -C(=O)-CH₂SH, -C(-O)-N/7-CN, sulfoskupinu, fosfonoskupinu, alkylsulfonylkarbamoylovou skupinu, tetrazolylovou skupinu, arylsulfonylkarbamoylovou skupinu, heteroaryl sulfonylkarbamoylovou skupinu, N-methoxykarbamoylovou skupinu, 3-hydroxy-3-cyklobuten-l,2-dionovou skupinu, 3,540 dioxo-l,2,4-oxadiazolidinylovou skupinu, 3-hydroxyisoxazolylovou skupinu a 3-hydroxy-lmethylpyrazolylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I nezahrnující 6-fenyI-5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin, 6-(4-methoxyfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin, 6-(4-chlorfenyI)-5//-pyrrolo45 [2,3-ó]pyrazin, 6-{2-chlorfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin, 3-methyl-ó-fenyI-5tf-pyrrolo[2,3-ójpyrazin, 2-methyl-6-fenyl-57/-pyrrolo[2,3-óJpyrazin a 7-methyl-6-fenyl-577-pyrrolo[2,3-ůjpyrazin.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou heteroarylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou azaheteroaiylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou indolylovou skupinu, případné substituovanou furylovou skupinu, případně substituovanou pyridylovou skupinu, případně substituovanou pyrrolylovou skupinu, případně substituovanou pyrazolylovou skupinu, případně substituovanou chinolylovou skupinu, případně substituovanou isochinolylovou skupinu, případně substituovanou imidazolylovou skupinu, případně substituovanou indazolylovou skupinu, případně substituovanou indolizínylovou skupinu, případně substituovanou tetrahydroindolizinylovou skupinu nebo případně substituovanou indazolínylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém případnými substituenty v rámci R¹ jsou jedna nebo více skupin zvolených ze souboru zahrnujícího alkylendioxyskupinu, alkenylovou skupinu, alkenyloxyskupinu, arylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, hydroxyskupinu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, R⁴, -C(=O)-NY^!N², -C(=O)-OR⁵, -NY^lN² a -OR⁴.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce 1, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou azylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená fenylovou skupinu substituovanou jednou nebo více skupinami zvolenými ze souboru zahrnujícího alkylendioxyskupinu, atom halogenu, R⁴, -NY*N² a -OR⁴.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R² znamená atom vodíku.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R² znamená atom halogenu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R² znamená Ci^alkylovou skupinu případně substituovanou karboxyskupinou, kyanoskupinou, atomem halogenu, hydroxyskupinou, tetrazolylovou skupinou nebo -€ONY³Y⁴.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R² znamená C₂ 4alkenylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R³ znamená atom vodíku.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R³ znamená případně substituovanou arylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R³ znamená případně substituovanou fenylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, ve kterém R³ znamená C_Malkylovou skupinu.

-6CZ 301750 B6

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce 1, který má vzorec Ia:

(1«) ve kterém R² a R³ mají významy uvedené pro vzorec I; R⁹ znamená atom vodíku, R⁴, alkenylovou skupinu nebo heterocykloalkylovou skupinu; R¹⁰ znamená:

(i) hydroxyskupinu;

(ii) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu;

io (iii) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu nebo cykloalkylalkylovou skupinu, z nichž každá je substituovaná jednou nebo více hydroxyskupinami;

(iv) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu substituovanou alkoxyskupinou;

(v) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu nebo cykloalkylovou skupinu, z nichž každá je substituovaná jednou nebo více karboxyskupinami;

(vi) -OR⁴ kde R⁴ znamená cykloalkylovou skupinu substituovanou skupinou -(/(^Ο^ΝΥ’Ν²;

(vii) -N(R⁶)-C(=O)-R⁷;

(viii) -C0NY*N²;

(ix) karboxy skupinu;

(x) alkylovou skupinu substituovanou karboxyskupinou;

(xi) heteroarylovou skupinu;

(xii) -C(=O)-R⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu; nebo (xiii) tetrazolylovou skupinu nebo N-methyltetrazolylovou skupinu, kde R⁶, R⁷, Y¹ a Y² mají významy uvedené pro vzorec I; a p znamená nulu nebo celé Číslo 1 nebo 2;

a jeho esterová proléčiva a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Ia a jejich esterová proléčiva.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce la, ve kterém R² znamená atom vodíku.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ia, ve kterém R³ znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo Ci ₄—alkýlovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ia, ve kterém R⁹ znamená:

-7CZ 301750 Bó (i) atom vodíku;

(ii) C_M-alkýlovou skupinu;

(iii) C] 4-alkylovou skupinu substituovanou hydroxy skupinou;

(iv) C₁₄-alkylovou skupinu substituovanou skupinou -NR⁶C(=O)~R⁷;

(v) Cj 4-alkylovou skupinu substituovanou skupinou-C^Oj-NY¹!^²; nebo (vi) cykloalkylalkýlovou skupinu substituovanou hydroxyskupinou.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce la, ve kterém R¹⁰ je připojen v poloze 5 indolylového kruhu.

o

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, který má vzorec Ib:

ve kterém R², R³, R⁹, R¹⁰ a p mají významy definované pro obecný vzorec la, a jeho esterová proléčiva a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Ib a jejich esterová proléčiva.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ib, ve kterém R² znamená atom vodíku.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ib, ve kterém R³ znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo CM-alkylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ib, ve kterém R⁹ znamená atom vodíku nebo C] _4-al kýlovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ib, ve kterém p znamená nulu. Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, který má vzorec Ic:

-8CZ 301750 B6 ve kterém R², R³, R⁹, R¹⁰ a p mají významy uvedené pro obecný vzorec Ia, a jeho esterová proléčiva a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Ic a jejich esterová proléčiva.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ic, ve kterém R² znamená atom vodíku.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ic, ve kterém R³ znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo Ci ^-alkylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ic, ve kterém R⁹ znamená atom vodíku nebo Ci-4-alkylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ic, ve kterém p znamená 1.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ic, ve kterém R^lú znamená heteroarylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Ic, ve kterém R¹⁰ je připojen v polo20 ze 4 pyrrolového kruhu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, který má vzorec Id:

ve kterém R², R³, R¹⁰ a p mají významy uvedené pro obecný vzorec Ia, a jeho esterová proléčiva 25 a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Id a jejich esterová proléčiva.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Id, ve kterém R² znamená atom vodíku, Ci^-alkylovou skupinu, Ci^-alkylovou skupinu substituovanou skupinou -CONY³Y⁴, C_w30 alkylovou skupinu substituovanou karboxylovou skupinou, Cv4-alkýlovou skupinu substituovanou tetrazolylovou skupinou nebo C]^-alkylovou skupinu substituovanou hydroxyskupinou.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Id, ve kterém R³ znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo C_M-alkylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Id, ve kterém p znamená I.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Id, ve kterém R’° znamená alkylovou skupinu.

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce Id, ve kterém R¹⁰ je připojen v poloze 4 fenylového kruhu.

-9CZ 301750 Bti

Výhodný je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I tvořený 6-(5-methoxy-1 -methylltf-indol-3-yl)-5tf-pyrrolo[2,3-ů]pyrazinem a jeho esterovými proléčivy a farmaceuticky přijatelnými solemi a solváty těchto sloučenin a jejich esterovými proléčivy.

Předmětem vynálezu je rovněž bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I nebo odpovídající esterové proléčivo nebo farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát této sloučeniny nebo jejich esterové proléčivo jako léčivo pro použití v terapii, výhodně při léčení pacientů trpících nebo ohrožených onemocněním, které se může zlepšit podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy.

ío

Předmětem vynálezu je rovněž kompozice obsahující účinné množství selektivního inhibitoru kinázy, kterým je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, pro použití při léčení pacientů trpících nebo ohrožených onemocněním, které se může zlepšit podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy, výhodně při léčení zánětlivých onemocnění, astmatu, psoriázy, zánětu klou15 bů, zánětlivého onemocnění střev nebo rakoviny.

Předmětem vynálezu je rovněž použití bicyklického pyrrolového derivátu obecného vzorce I nebo odpovídajícího esterového pro léčiva nebo farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátu této sloučeniny nebo jejich esterového proléčiva při výrobě léčiva pro léčení pacienta trpícího nebo ohroženého onemocněním, které se může zlepšit podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy, výhodně při léčení astmatu, psoriázy, zánětu kloubů, zánětlivého onemocnění střev nebo rakoviny.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu vykazují vhodnou farmakologickou aktivitu, a proto se používají do farmaceutických prostředků, a dále se používají pro léčení pacientů trpících některými zdravotními problémy. Předkládaný vynález proto v dalším aspektu poskytuje sloučeniny podle předkládaného vynálezu a prostředky, které je obsahují, pro použití při léčení.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu blokují katalytickou aktivitu kináz podle testů popsa30 ných v literatuře a in vitro postupů popsaných níže. Výsledky těchto testů se považují za odpovídající farmakologické aktivitě u lidí a dalších savců. Předkládaný vynález tak v dalším provedení poskytuje sloučeniny podle předkládaného vynálezu a prostředky, které je obsahují, pro použití při léčení pacientů trpících stavy, které lze zlepšit podáváním inhibitorů proteinových kináz (například Syk, FAK, KDR nebo Aurora2). Sloučeniny podle předkládaného vynálezu jsou například vhodné pro léčení zánětlivých chorob, jako jsou astma; zánětlivé dermatosy (například psoriasa, dermatitis herpetiformis, ekzém, nekrotizace a kožní vaskulitida, puchýře); alergická rhinitida a alergická konjunktivítída; záněty vaziva včetně arthritidy, revmatoídní arthritidy a dalších arthritických stavů, jako je revmatoídní spondylítida, dna, traumatická arthritida, rubeolitická arthritida, psoriatická arthritida a osteoarthrítida, Uvedené sloučeniny jsou rovněž vhodné pro léčení chronické obstruktivní plicní choroby (COPD), akutní synovitidy, autoimunitního diabetů, autoimunitní encefalomyelitidy, kolitidy, atherosklerosy, choroby periferních cév, kardiovaskulárních chorob, roztroušené sklerosy, restenosy, myokarditidy, lymfomasy buněk B, systém i cké lupus erythematosus, odmítnutí transplantátu a spojených potíží, rakoviny a nádorů (jako je kolorektální rakovina, rakovina prostaty, prsu, thyroidu, střeva a plic) a zánětlívá choroba vnitřností. Navíc jsou uvedené sloučeniny vhodné proti angiogenezi nádorů.

Speciálním provedením léčebného způsobu podle předkládaného vynálezu je léčení astmatu.

Dalším speciálním provedením způsobu podle předkládaného vynálezu je léčení psoriasy.

Dalším speciálním provedením způsobu podle předkládaného vynálezu je léčení zánětů vaziva.

Dalším speciálním provedením způsobu podle předkládaného vynálezu je léčení zánětlivé choroby vnitřností.

- 10CZ 301750 Bó

Speciálním provedením léčebného způsobu podle předkládaného vynálezu je léčení rakoviny a nádorů.

Dalším předmětem předkládaného vynálezu je způsob léčení lidí nebo zvířat trpících stavy, které lze zlepšit podáváním inhibitoru proteinové kinázy (například Syk, FAK, KDR nebo Aurora2), například stavů popsaných výše, který zahrnuje podávání účinného množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu nebo kompozice obsahující sloučeninu podle předkládaného vynálezu pacientům. „Účinné množství“ znamená množství sloučeniny podle předkládaného vynálezu schopné inhibovat katalytickou aktivitu proteinové kinázy, jako je Syk, FAK, KDR nebo Auro* i o ra2, a tak vyvolat požadovaný terapeutický efekt.

Zde uvedený termín léčení zahrnuje profylaktické léčení i léčení již nastalých stavů.

Předkládaný vynález rovněž zahrnuje farmaceutické kompozice obsahující alespoň jednu slouče15 ninu podle předkládaného vynálezu ve spojení s farmaceuticky přijatelným nosičem nebo přísadou.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze podávat libovolnou vhodnou cestou. V praxi lze sloučeniny podle předkládaného vynálezu obecně podávat parenterálně, topicky, rektálně, pero20 rálně nebo inhalačně, zejména perorálně.

Kompozice podle předkládaného vynálezu lze připravit běžnými postupy za použití jedné nebo několika farmaceuticky přijatelných přísad. Mezi přísady mezi jinými patří ředidla, sterilní vodná média a různá netoxická organická rozpouštědla. Kompozice mohou být ve formě tablet, pilulek, granulí, prášků, vodných roztoků nebo suspenzí, injektovatelných roztoků, nápojů nebo sirupů a mohou obsahovat jedno nebo několik činidel vybraných ze skupiny, kterou tvoří sladidla, příchuti, barviva nebo stabilizátory, za účelem získání farmaceuticky přijatelného přípravku. Výběr nosiče a stanovení množství aktivní látky v nosiči se obecně stanoví podle rozpustnosti a chemických vlastností aktivní sloučeniny, konkrétního způsobu podávání a farmaceutické praxe. Například při přípravě tablet lze použít přísady, jako je laktosa, citrát sodný, uhličitan vápenatý, hydrogenfosforeČnan vápenatý a rozkladné látky, jako je škrob, alginová kyselina a některé komplexní silikáty spojené s Iubrikanty, jako je stearan hořečnatý, laurylsulfát sodný a mastek. Při přípravě tobolek je vhodné použít laktosu a vysokomolekulámí polyethylenglykoly. Při použití vodných suspenzí mohou tyto obsahovat emulgátory nebo suspendující činidla.

Rovněž lze použít ředidla, jako je sacharosa, ethanol, polyethylenglykol, propylenglykol, glycerol a chloroform nebo jejich směsi.

Při parenterálním podávání se používají emulze, suspenze nebo roztoky produktů podle předkládaného vynálezu v rostlinném oleji, například sezamovém oleji, podzemnicovém oleji nebo olivovém oleji, nebo vodné organické roztoky, jako je voda a propylenglykol, injektovatelné organické estery, jako je ethyloleát, a sterilní vodné roztoky farmaceuticky přijatelných solí. Roztoky solí produktů podle předkládaného vynálezu jsou zejména vhodné pro podávání svalovými nebo podkožními injekcemi. Vodné roztoky rovněž obsahující roztoky solí v čisté destilované vodě lze použít pro nitrožilní podávání, pokud je jejich pH vhodně upraveno tak, že jsou puťrová45 ny, a jsou isotonicky upraveny dostatečným množstvím glukosy nebo chloridu sodného a jsou sterilizovány teplem, ozařováním nebo mikrofiltrací.

Pro topické podávání lze použít gely (na bázi vody nebo alkoholu), krémy nebo masti obsahující sloučeniny podle předkládaného vynálezu. Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou být rovněž v gelu nebo matrici pro aplikaci formou náplastí, což umožňuje řízené uvolňování sloučenin přes transdermální bariéru.

Při podávání inhalací se sloučeniny podle předkládaného vynálezu rozpustí nebo suspendují v nosiči vhodném pro použití v rozprašovači nebo aerosolu, nebo mohou být absorbovány nebo adsorbovány na pevném nosiči vhodném pro použití v inhalátoru suchého prášku.

-11CZ 301750 B6

Pevné prostředky pro rektální podávání zahrnují čípky, které se připraví známými způsoby a obsahují alespoň jednu sloučeninu podle předkládaného vynálezu.

Podíl aktivní složky v kompozici podle předkládaného vynálezu se může lišit, ale musí být takový, aby bylo získána správná dávka. Samozřejmě lze také najednou podat několik dávkových jednotek. Použitou dávku stanoví lékař a tato dávka závisí na požadovaném terapeutickém účinku, způsobu podávání, délce léčení a stavu pacienta. U dospělých se dávka obecně pohybuje při inhalaci od 0,001 do 50, vhodně od 0,001 do 5 mg/kg tělesné hmotnosti za den; při perorálním io podávání od 0,01 do 100, vhodně od 0,1 do 70, vhodněji od 0,5 do 10 mg/kg tělesné hmotnosti za den; a při nitrožilním podávání od 0,001 do 10, vhodně od 0,01 do 1 mg/kg tělesné hmotnosti za den. V každém konkrétním případě se dávka stanoví podle znaků, které léčený subjekt vykazuje, jako je věk, hmotnost, celkový zdravotní stav, a dalších znaků, které mohou ovlivnit účinnost léčiva.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze podávat tak často, jak je potřeba, aby byl dosažen požadovaný léčebný účinek. Někteří pacienti mohou rychle reagovat na vyšší nebo nižší dávku a může u nich být potřebná o hodně slabší udržovací dávka. U jiných pacientů může podle fyziologických požadavků každého konkrétního pacienta být nutné dlouhodobé léčení za podávání 1 až 4 dávek za den. Aktivní produkt lze obecně podávat perorálně lx až 4x za den. U některých pacientů ale může být samozřejmě nezbytné nepřekročit 1 nebo 2 dávky za den.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze připravit aplikací nebo adaptací známých metod, kterými jsou myšleny zde použité metody nebo metody popsané v literatuře, například v publika25 ci R. C. Larock, Comprehensive Organic Transformations, VCH publishers, 1989.

V níže popsaných reakcích může být nezbytné chránit reaktivní funkční skupiny, například hydroxyskupiny, aminoskupiny, iminoskupiny, thioskupiny nebo karboxyskupiny, pokud jsou tyto žádoucí ve finálním produktu, aby se zabránilo jejich nežádoucí účasti v reakcích. V souladu s běžnou praxí lze využít konvenční chránící skupiny, například viz. T. W. Green a P. G. M. Wuts, „Protective Groups in Organic Chemistry“, John Wiley a Sons, 1991.

Sloučeniny vzorce I, kde R¹, R² a R³ jsou definovány výše, a X¹ je atom dusíku nebo skupina CH, lze připravit aplikací nebo adaptací postupů popsaných v publikaci Davis a kol., Tetrahedron,

1992, 48, strana 939-952, například:

(i) reakcí sloučeniny vzorce III:

S (III),

N kde R² a R³ jsou definovány výše a X¹ je atom dusíku nebo skupina CH, s vhodnou bází, jako je 40 diisopropylamid lithný (nebo butyllithium), v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě od -26 °C;

(ii) reakcí výsledného aniontu s nitrilem vzorce IV:

R'-GN (IV), kde R^l je definována výše, při teplotě od -15 °C do teploty místnosti.

-12CZ 301750 BÓ

Tento postup je velmi vhodný pro přípravu sloučenin vzorce I, kde R¹ je popřípadě substituovaná N-methylindol-3-ylová skupina, R² a R³ jsou atomy vodíku a X¹ je atom dusíku nebo skupina CH.

Sloučeniny vzorce I, kde R¹, R², R³ a X¹ jsou definovány výše, lze rovněž připravit aplikací nebo adaptací postupů popsaných v publikaci Chang a Bag, J. Org. Chem., 1995, 21, strany 7030-7032, například reakcí sloučeniny vzorce V:

kde R¹, R², R³ a X¹ jsou definovány výše a X² je atom halogenu, vhodně jodu, nebo triflát, io s boronovou kyselinou vzorce VI:

R'-B(OH)₂ (VI), kde R¹ je skupina definovaná výše. Spojovací reakci lze výhodně provést například v přítomnosti komplexního kovového katalyzátoru, jako je tetrakis(trifenylfosfin)palladium(0), a hydrogenuhličitanu sodného ve vodném dimethylformamidu při teplotě až do teploty varu směsi.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze také připravit vzájemnou přeměnou jiných sloučenin podle předkládaného vynálezu.

Tak například sloučeninu vzorce 1 obsahující karboxyskupinu lze připravit hydrolýzou odpovídajícího esteru. Hydrolýzu lze výhodně provést alkalicky za použití báze, jako je hydroxid alkalického kovu, například hydroxid íithný, nebo uhličitan alkalického kovu, například uhličitan draselný, v přítomnosti směsi vodného/organického rozpouštědla, za použití organického rozpouš25 tědla, jako je dioxan, tetrahydroťuran nebo methanol, při teplotě od teploty místnosti do teploty varu. Hydrolýzu esteru lze také provést kyselým způsobem za použití anorganické kyseliny, jako je kyselina chlorovodíková, v přítomnosti směsi vodného/inertního organického rozpouštědla za použití organického rozpouštědla, jako je dioxan nebo tetrahydrofuran, při teplotě od 50 do 80 °C.

Dalším příkladem přípravy sloučeniny vzorce I obsahující karboxyskupinu je kyselinou katalyzované odstranění í-butylskupiny odpovídajícího Z-butylesteru za použití standardních reakčních podmínek, například reakcí s trifluoroctovou kyselinou pří teplotě místnosti.

Dalším příkladem přípravy sloučeniny vzorce I obsahující karboxyskupinu je hydrogenace odpovídajícího benzylesteru. Reakci lze provést v přítomnosti mravenčanu amonného a vhodného kovového katalyzátoru, například palladia, na inertním nosiči, jako je uhlí, výhodně v rozpouštědle, jako je methanol nebo ethanol, při teplotě kolem teploty varu směsi. Reakci lze alternativně provést v přítomnosti vhodného kovového katalyzátoru, například platiny nebo palladia, popřípadě zakotveného na inertním nosiči, jako je uhlí, výhodně v rozpouštědle, jako je methanol nebo ethanol.

Jako příklad vzájemné přeměny lze sloučeniny vzorce I obsahující skupinu -<(=O)-NY¹Y²připravit spojením sloučeniny vzorce I obsahující karboxyskupinu s aminem vzorce ΗΝΥ'Υ² za získání amidické vazby použitím standardních postupů peptidové syntézy, například spojením

-13CZ 301750 B6 v přítomnosti O-(7-azabenzotriazol-l-y 1)-1,1,3,3-tetramethyluroniumhexafluorfosfátu a triethylaminu (nebo diisopropylethy laminu) v tetrahydrofiiranu (nebo dimethylformamídu) při teplotě místnosti. Spojení lze provést reakcí sloučeniny vzorce I obsahující karboxy skup inu s N-{(dimethylamino) (1//-1,2,3-triazolo[4,5-/>] pyridin-l-yl)methy len}-N-methylmethan5 aminiumhexafluorfosfát-N-oxidem v přítomnosti vhodné báze, jako je diisopropylethylamin, v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě místnosti a následnou reakcí s aminem vzorce HNY i (pro přípravu sloučeniny vzorce I obsahující skupinu -C(=O)-NH₂ lze použít chlorid amonný).

io Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze připravit sloučeniny vzorce I obsahující skupinu -CH₂OH redukcí odpovídající sloučeniny vzorce I obsahující skupinu -CHO nebo skupinu -CO₂R⁷ (kde R⁷ je nižší alkylová skupina). Redukci lze například výhodně provést reakcí s tetrahydridohlini taném lithným v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě místnosti až teplotě varu směsi.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R¹je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -CO₂Me (Me znamená methyl):

(i) reakcí sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná hydroxyskupinou, s N-fenyltriťluormethansulfonimidem v přítomnosti vhodné báze, jako je triethylamin, v inertním rozpouštědle, jako je di chlormethan, při teplotě -78 °C;

(ii) reakcí výsledného triflátu s oxidem uhelnatým v přítomnosti a vhodného katalyzátoru (napří25 klad octanu palladnatého), l,3-bis(difenylfosfino)propanu, triethy laminu a methanolu v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při tlaku 100 kPa (1 atm), při teplotě místnosti.

Tento postup je zejména vhodný pro přípravu sloučenin vzorce I, kde R¹ je 5-karboxymethyl-Nmethylindol-3-ylová skupina.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R¹je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -δΟ^Υ'Υ²:

(i) reakcí sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituo35 váná hydroxyskupinou, s N-fenyltrifluormethansulfonimidem postupem popsaným výše;

(ii) reakcí výsledného triflátu s z-butylmerkaptanem v přítomnosti Z-butoxidu sodného, octanu palladnatého, chloridu lithného a R(+)-2,2'-bis(difenylfosfmo)-l,r-binaftylem v inertním rozpouštědle, jako je toluen, při teplotě 110 až 120 °C;

(iii) reakcí výsledné sloučeniny vzorce I, kde R^l je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -S'Bu (Bu znamená butyl), s trifluoroctovou kyselinou a octanem rtuťnatým v inertním rozpouštědle, jako je toluen, při teplotě místnosti a následnou reakcí se sulfanem;

(iv) reakcí výsledné sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -SH, s chlorem ve vodné octové kyselině při teplotě místnosti;

(v) reakcí výsledné sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -SO₂C1, s aminem vzorce HNY*Y².

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R^lje arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná arylovou skupinou (nebo heteroarylovou skupinou), reakcí sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná hydroxyskupinou, s N-fenyltrifluormethansulfonimidem postupem popsa55 ným výše a následnou reakcí výsledného triflátu s ary testerem (nebo heteroarylesterem) borono- 14CZ 301750 Bó vé kyseliny v přítomnosti vhodného katalyzátoru (například tetrakis(trifenylfosfinpalladia) a vodného hydrogenuhličitanu sodného v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě 120 až 150 °C.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R¹je aiylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná hydroxyskupinou, reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná methoxyskupinou, s Lewisovou kyselinou, jako je bromid boritý, v inertním rozpouštědle, jako je dichlormethan, při teplotě od 0 °C do teploty místnosti.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R¹je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -OR⁴, lze připravit alkylací odpovídající sloučeniny vzorce 1, kde R je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná hydroxyskupinou, se sloučeninou vzorce Vil:

R⁴-X³ (VII), kde R⁴ je definována výše a X³ je atom halogenu, výhodně bromu, nebo tosylová skupina, za použití standardních alkylačních podmínek. Alkylaci lze například provést v přítomnosti báze, jako je uhličitan alkalického kovu (například uhličitan draselný nebo uhličitan česný), alkoxid alkalického kovu (například Z-butoxid draselný) nebo hydrid alkalického kovu (například hydrid sodný), v dimethylformamidu nebo dimethylsulfoxidu při teplotě od 0 do 100 °C.

Alternativně lze sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -OR⁴, připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná hydroxylovou skupinou, s odpovídajícím alkoholem vzorce VIII:

R⁴-OH (VIII), kde R⁴ je definována výše, v přítomnosti triarylfosfinu, jako je tri feny lfosfin a dialkylacetylendikarboxylátu, jako je diisopropylacetylendikarboxylát nebo dimethylacetylendikarboxylát, v inertním rozpouštědle, jako je toluen, při teplotě místnosti. Tento postup je zejména vhodný pro přípravu sloučenin vzorce I, kde R¹ je heteroarylová skupina substituovaná skupinou -OR⁴.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R¹je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -OR⁴, kde R⁴ je propylová skupina substituovaná hydroxyskupinou, reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -OR⁴, kde R⁴ je propeny40 lová skupina, s boranem a následnou reakcí s peroxidem vodíku v přítomnosti hydroxidu sodného. Tento postup je zejména vhodný pro přípravu sloučenin vzorce I, kde R¹ je indolylová skupina substituovaná skupinou -OCH₂CH(CH₃)OH a-OCH₂CH₂-CH₂OH.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R¹ je arylová skupina nebo heteroarylová skupina substituovaná skupinou -OR⁴, kde R⁴ je 1,3—dihydroxyalkylenová skupina, reakcí odpovídající sloučeniny, kde R⁴ je alkenylová skupina, s oxidem osmiČelým v přítomnosti Φ-methylmorfolin-N-oxidu. Reakci lze vhodně provést v inertním rozpouštědle, jako je aceton, při teplotě místnosti.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce la, kde R⁹je alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo alkylová skupina substituovaná skupinou -QMDj-NY^², skupinou -OR⁶, skupinou -C(=O)-OR⁷, skupinou -NY^!Y², alkylaci odpovídající sloučeniny vzorce la, kde R⁹ je atom vodíku, odpovídajícím halogenidem vzorce IX:

- 15CZ 301750 B6

R-X⁴ (IX), kde R⁹ je alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina, heterocykloalkylová skupina nebo alkylová skupina substituovaná skupinou -C(=O)NY^lY², skupinou -OR⁷, skupinou

-C(=0>OR^S, skupinou -ΝΥ'Υ², a X⁴ je atom halogenu, vhodně atom bromu, za použití standardních alkylaěních podmínek, které jsou například popsány výše.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I obsahující skupinu -N(R⁶HC(=O)NY₃Y₄, kde R⁶ a Y³ jsou atomy vodíku a Y⁴ je definována výše, io reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I obsahující aminoskupinu s isokyanátem vzorce

O=C=NY⁴ v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě místnosti.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I obsahující sulfoxidové spojky oxidací odpovídající sloučeniny obsahující spojky -S-. Například lze tuto oxidaci vhodně provést reakcí s peroxykyselinou, například 3-chlorperbenzoovou kyselinou, vhodně v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu, vhodně při teplotě místnosti nebo jí blízké teplotě nebo alternativně pomocí hydrogenperoxosíranu draselného v rozpouštědle, jako je vodný methanol pufrovaný na pH 5, při teplotě 0 °C až teplotě místnosti. Tento druhý způsob je výhodný pro sloučeniny obsahující skupiny labilní v kyselém prostředí.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce í obsahující sulfonové spojky oxidací odpovídajících sloučenin obsahujících spojky -S~ nebo sulfoxidové spojky. Například lze oxidaci vhodně provést reakcí s peroxykyselinou, například 3-chlorperbenzoovou kyselinou, vhodně v inertním rozpouštědle, například dichlormethanu, vhodně při teplotě místnosti nebo v její bl ízkosti.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I obsahující kyanoskupinu reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I obsahující skupinu -C(=O)-NH2 s chloridem fosforečným v přítomnosti triethylaminu. Reakci lze vhodně provést v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě varu směsi.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce 1 obsahující tetrazolylovou skupinu reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I obsahující kyanoskupinu s azidotributylcínem. Reakci lze vhodně provést v inertním rozpouštědle, jako je toluen, při teplo35 tě varu směsi.

Jako další příklad přípravy vzájemnou přeměnou lze uvést přípravu sloučeniny vzorce I, kde R²je atom fluoru, reakcí odpovídající sloučeniny vzorce I, kde R je atom vodíku, s methylmagnesiumbromidem (v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě kolem 0 °C) a nás40 lednou reakcí s 1-chlonnethyM-fluor-l ,4-diazoniabicyklo[2,2,2]oktanbis(tetrafluorborátem) při teplotě 0 ^ŮC až teplotě varu směsi.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou obsahovat asymetrická centra. Tato asymetrická centra mohou být nezávisle buď v konfiguraci R, nebo S. Odborníkům v této oblasti je zřejmé, že některé sloučeniny podle předkládaného vynálezu mohou rovněž vykazovat geometrickou izomerii. Rozumí se, že předkládaný vynález zahrnuje jednotlivé geometrické izomery a stereoizomery a jejich směsi včetně racemických směsí sloučenin vzorce l popsaných výše. Tyto izomery lze z jejich směsi oddělit aplikací nebo adaptací známých metod, například chromatografických technik a rekiystalizaěních technik, nebo se připraví odděleně z odpovídajících izomerů jejich meziproduktů.

V dalším aspektu vynálezu lze připravit reakcí volné báze s vhodnou kyselinou aplikací nebo adaptací známých metod kyselé adiční soli sloučenin podle předkládaného vynálezu. Například lze kyselé adiční soli sloučenin podle předkládaného vynálezu připravit buď rozpuštěním volné báze ve vodě nebo vodném alkoholickém roztoku nebo jiném vhodném rozpouštědle obsahujícím

- 16CL 3U173V BO vhodnou kyselinu a izolací soli odpařením roztoku, nebo reakcí volné báze s kyselinou v organickém rozpouštědle, kdy se sůl přímo oddělí, nebo se získá zahuštěním roztoku.

Kyselé adíění soli sloučenin podle předkládaného vynálezu lze ze solí regenerovat aplikací nebo adaptací známých metod. Například lze původní sloučeniny podle předkládaného vynálezu regenerovat z jejich kyselých adičních solí reakcí sbází, například vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného nebo vodným roztokem amoniaku.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze aplikací nebo adaptací známých metod regenerovat z jejich bazických adičních solí. Například lze původní sloučeniny podle předkládaného vynálezu regenerovat z jejich bazických adičních solí reakcí s kyselinou, například kyselinou chlorovodíkovou.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu lze vhodně připravit nebo vyrobit způsobem podle předkládaného vynálezu jako solváty (například hydráty). Hydráty sloučenin podle předkládaného vynálezu lze vhodně připravit rekrystalizací ze směsi vodné/organické rozpouštědlo za použití organického rozpouštědla, jako je dioxan, tetrahydrofuran nebo methanol.

V dalším aspektu předkládaného vynálezu lze reakcí volné kyseliny s vhodnou bází za aplikace nebo adaptace známých metod připravit bazické adiční soli sloučenin podle předkládaného vynálezu. Například lze bazické adiční soli sloučenin podle předkládaného vynálezu připravit buď rozpuštěním volné kyseliny ve vodě nebo vodném alkoholickém roztoku nebo jiném vhodném rozpouštědle obsahujícím vhodnou bázi a izolací soli odpařením roztoku, nebo reakcí volné kyseliny a báze v organickém rozpouštědle, kdy se sůl přímo oddělí nebo se získá zahuštěním roztoku.

Výchozí látky a meziprodukty lze připravit aplikací nebo adaptací známých metod, například metod popsaných v referenčních příkladech nebo jejich zřejmých chemických ekvivalentů.

Sloučeniny vzorce ÍV, kde R¹ je definována výše, lze připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce 1:

R‘-CHO (1), kde R¹ je definována výše, s hydrochloridem hydroxylaminu v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě kolem 150 °C.

Sloučeniny vzorce IV, kde R¹ je skupina vzorce Ha, kde R¹⁰ a p jsou definovány výše a R⁹ je alkylová skupina, alkenylová skupina, cykloalkylová skupina nebo alkylová skupina substituo40 váná skupinou -C(=O)NY^lY², skupinou -OR⁴, skupinou -C(=O)-OR , skupinou -NY*Y², lze připravit alkylací odpovídajícího l//-indolu vzorce IV, kde R¹ je skupina vzorce Ha, kde R*° a p jsou definovány výše a R⁹ je atom vodíku, s odpovídajícím (popřípadě substituovaným)alkylhalogenidem, alkenylhalogenidem nebo cykloalkylhalogenidem za použití standardních alkylačních podmínek. Alkylaci lze například provést v přítomnosti báze, jako je uhličitan alkalického kovu, například uhličitan draselný, nebo hydrid alkalického kovu, například hydrid sodný, v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid nebo dimethylsulfoxid, při teplotě místnosti až 100 °C. Sloučeniny vzorce IV, kde R¹ je 5,6,7,8-tetrahydroindolizin-l-yIová skupina, lze připravit:

(i) reakcí piperidin-2-karboxylové kyseliny s kyselinou mravenčí a acetanhydridem při teplotě místností;

(ii) reakcí výsledného l-formyIpiperidin-2-karboxylátu sodného s 4-toluensuífonylchloridem v inertním rozpouštědle, jako je dichlormethan, při teplotě místnosti;

- 17CZ 301750 B6 (ίίί) reakcí s akry lonitri lem v přítomnosti triethylaminu při teplotě místnosti.

Sloučeniny vzorce 1, kde R¹ je definována výše, lze připravit formylací sloučeniny vzorce 2;

R‘-H (2), kde R je definována výše, za použití standardních reakčních podmínek, například za použití Vilsmeier-Haackovy formylační reakce s trichlorid-oxidem fosforečným v dimethylformamidu. Tento postup je zejména vhodný při přípravě sloučenin vzorce 1, kde R* je popřípadě substituoi o vana N-methylindol-3-ylová skupina.

Sloučeniny vzorce V, kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše a X² je atom jodu, lze připravit jodací sloučeniny vzorce 3:

kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše. Jodaci lze vhodně provést aplikací nebo adaptací postupu popsaného v publikaci Saulnier a Gribble, J. Org. Chem., 1982, 47, 1982, například reakcí sloučeniny vzorce 3 s diisopropylamidem lithným v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě -78 °C a následnou reakcí výsledného aniontu s jodem. Tato reakce se vhodně provádí s NH skupinou indolu chráněnou například tosylovou skupinou.

Sloučeniny vzorce 3, kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše, lze připravit cyklizací sloučenin vzorce 4:

ch₂r (4), ,CHO kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše. Cyklizační reakci lze vhodně provést v přítomnosti 25 alkoxidu alkalického kovu, jako je ethoxid sodný, v inertním rozpouštědle, jako je ethanol, při teplotě místnosti až teplotě varu směsi.

Sloučeniny vzorce 3, kde R³ a X¹ jsou definovány výše a R² je atom vodíku, lze připravit cyklizací sloučeniny vzorce 5:

kde R³ a X¹ jsou definovány výše a Et znamená ethyl. Cyklizační reakci lze vhodně provést v přítomnosti sodamidu v N-methylanilinu při teplotě 120 až 200 °C.

- 18CZ 301750 B6

Sloučeniny vzorce 3, kde R³ a X¹ jsou definovány výše a R² je methylová skupina (nebo alkylová skupina obsahující 1 až 4 atomy uhlíku popřípadě substituovaná skupinou -Z^lR⁸, kde Z’ a R⁸jsou definovány výše), lze připravit cyklizací sloučenin 6:

kde R³ a X¹ jsou definovány výše, R¹¹ je atom vodíku (nebo alkylová skupina obsahující 1 až 3 atomy uhlíku popřípadě substituovaná skupinou -Z'R⁸, kde Z¹ a R⁸ jsou definovány výše) a X⁵je atom halogenu, vhodně atom bromu nebo triflátová skupina. Cyklizaci lze vhodně provést v přítomnosti komplexního kovového katalyzátoru, jako je tetrakis(trifenylfosfin)pailadium (0), ío terciárního aminu, jakojetriethylamin, a triarylfosfinu, jakojetrifenylfosfin, v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě 60 až 120 °C. Tento postup je zejména vhodný pro přípravu sloučenin vzorce 3, kde R³ a X¹ jsou definovány výše, X¹ je atom dusíku a R² je skupina

C-CH₃.

Sloučeniny vzorce 3, kde R³, R² a X¹ jsou definovány výše, lze připravit:

(i) reakcí sloučeniny vzorce 7:

(7), kde R³ a X¹ jsou definovány výše a X⁶ je atom halogenu, vhodně jodu, s acetylenem vzorce 8:

R²-C=C-SiMe₃ (8), kde R² je definována výše, v přítomnosti komplexního kovového katalyzátoru, jako je dichloro[l,r-bis(difenylfosfino)ferrocen]palladnatý komplex, chlorid lithný a uhličitan sodný v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě do 100 °C.

(ii) desilylací.

Sloučeniny vzorce 4, kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše, lze připravit reakcí sloučeniny vzor30 ce 9:

(9), kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše, se směsí kyseliny mravenčí a acetanhydridu.

-19CZ 301750 B6

Sloučeniny vzorce 5, kde R³ a X¹ jsou definovány výše, lze připravit reakcí odpovídající sloučeniny vzorce 9, kde R³ a X¹ jsou definovány výše a R² je atom vodíku, s triethylorthoformiátem, v přítomnosti kyselého katalyzátoru, jako je chlorovodík, v ethanolu při teplotě místnosti až teplotě varu směsi.

Sloučeniny vzorce 6, kde R³, R¹¹ a X¹ jsou definovány výše a X⁵ je atom halogenu, lze připravit alkylací sloučeniny vzorce 7, kde R³, X¹ a X⁶ jsou definovány výše, vhodným alkenyl halogenidem vzorce 10:

io

R^llCH=CH-CH₂-X⁷ (10), kde Rⁿ je definována výše a X⁷ je atom halogenu, vhodně bromu. Alkylaci lze vhodně provést v přítomnosti hydridu alkalického kovu, jako je hydrid sodný, v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě místnosti.

Sloučeniny vzorce 7, kde R³ a X¹ jsou definovány výše a X⁶ je atom bromu, lze připravit bromací sloučeniny vzorce 11:

(11).

kde R³ a X¹ jsou definovány výše, v dimethylsulfoxidu.

Sloučeniny vzorce 7, kde R³ a X¹ jsou definovány výše a X⁵ je atom jodu, lze připravit jodací sloučeniny vzorce 11, kde R³ a X¹ jsou definovány výše. Jodaci lze provést aplikací nebo adaptací postupu z publikace W-W. Sy, Synth. Comm., 1992, 22, strany 3 215-3 219.

Sloučeniny vzorce V, kde R¹, R², R³ a X¹ jsou definovány výše a X⁵ je triflátová skupina, lze připravit reakcí sloučeniny vzorce 12:

(12), kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše, s triflylanhydridem v přítomnosti Hiinigovy báze v inertním rozpouštědle, jako je dichlormethan, při teplotě kolem 0 °C. Tato reakce se vhodně provádí s NH skupinou indolu chráněnou například tosylovou skupinou.

Sloučeniny vzorce 12, kde R², R³ a X¹ jsou definovány výše, lze připravit reakcí sloučeniny vzorce 13:

-20CZ 301750 Bó

(13), kde R³ a X¹ jsou definovány výše, s metachlorperbenzoovou kyselinou v inertním rozpouštědle, jako je dichlormethan, při teplotě kolem 5 °C. Tato reakce se vhodně provádí s NH skupinou indolu chráněnou například tosylovou skupinou.

Sloučeniny vzorce 13, kde R³ a X¹ jsou definovány výše, lze připravit reakcí sloučeniny vzorce 14:

(14), kde R³ a X¹ jsou definovány výše, s diisopropylamidem lithným v inertním rozpouštědle, jako je io tetrahydrofíiran, a následně reakcí s dimethylformamidem při teplotě kolem -78 °C. Tato reakce se vhodně provádí s NH skupinou indolu chráněnou například tosylovou skupinou.

Sloučeniny vzorce 14, kde R³ a X¹ jsou definovány výše, lze připravit reakcí sloučeniny vzorce 7, kde R³ a X¹ jsou definovány výše a X⁶ je atom jodu, s trimethylsilylacetylenem v přítomnosti komplexního kovového katalyzátoru, jako je dichloro-[l,r-bis(difenylfosfmo)fenOcen]palladnatý komplex, a následnou děsily lácí.

Sloučeniny vzorce VI, kde R¹ je definována výše, lze připravit reakcí sloučeniny vzorce 15:

R-X⁸ (15), kde R¹ je definována výše a X⁸ je atom halogenu, vhodně bromu, v přítomnosti tributylborátu s vhodnou bází, jako je butyllithium, v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě kolem-100 °C.

Sloučeniny vzorce VI, kde R¹ je definována výše lze rovněž připravit reakcí sloučeniny vzorce 15, kde R^l je definována výše a X⁸ je skupina -HgOAc (Ac znamená acetyl) sboranem v inertním rozpouštědle, jako je tetrahydrofuran, při teplotě místnosti.

Sloučeniny vzorce 15, kde R¹ je popřípadě substituovaná indol-3-ylová skupina a X⁸ je atom bromu, lze připravit reakcí popřípadě substituovaného indolu s bromem v inertním rozpouštědle, jako je dimethylformamid, při teplotě místnosti.

Sloučeniny vzorce 13, kde R¹ je popřípadě substituovaná indol-3-ylová skupina a X⁸ je skupina

-HgOAc, lze připravit reakcí popřípadě substituovaného indolinu s octanem rtuťnatým v ledové octové kyselině při teplotě místnosti.

-21 CZ 301750 B6

Příklady provedeni vynálezu

Předkládaný vynález je dále ilustrován, ale nikoliv vymezen, následujícími příklady a referenč5 nimi příklady.

Spektra 400 MHz 'H nukleární magnetické resonance (NMR) byla měřena na přístroji Varian Unity INOVA. Ve spektrech nukleární magnetické resonance (NMR) jsou chemické posuny (6) vyjádřeny vppm vzhledem k tetramethylsilanu. Použité zkratky mají následující význam: io s- singlet; d = dublet; t = triplet; m = mul tiplet; q = kvadruplet; dd = dublet dubletu; ddd = dublet dubletu dubletu.

Retenční časy u vysokotlaké kapalinové chromatografie (HPLC: R_T) byly měřeny:

způsob A; kolona 08 Fenomenex (150 x4,6 mm), eluce gradientem směsi acetonitrilu a vody s 0,1 % trifluoroctové kyseliny (0 až 1 minuta 5 % acetonitrilu; 1 až 12 minuta vzestup na 95 % acetonitrilu; 12 až 14,95 minut 95 % acetonitrilu; 14,95 až 15 minut 0 % acetonitrilu); nebo způsob B: kolona YMC ODS-AQ (2 x 50 mm), eluce gradientem směsi acetonitrilu a vody $0,1 % mravenčí kyseliny [95/5/0,1 % (A) až 5/95/0,1 % (B)]pri průtoku 0,4 ml/min); nebo způsob C: eluce gradientem směsi acetonitrilu a vody s0,l % mravenčí kyseliny (95/5/0,1 %, voda/acetonitril/kyselina mravenčí, 0,1 minuty, lineární gradient na 5/95/0,1 %, voda/acetonitril/kyselina mravenčí ve 2 minutě až do 3,5 minuty).

Tenkovrstvá chromatografie (TLC, Rp) se měřila na fóliích silikagelu od firmy Merck.

Příklad 1 (a) 6-{5“Methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin

Do míchajícího se roztoku 59,9 ml diisopropylaminu ve 1400 ml tetrahydrofuranu se během 25 minut při -15 °C v atmosféře dusíku přidá 131 ml 1,6M roztoku n-butyllithia v hexanu, při35 čemž se teplota udržuje pod -10 °C. Směs se míchá 30 minut a pak se během 15 přidá 26,8 g methylpyrazinu, směs se 1 hodinu míchá a pak se přidá roztok 53 g 5-methoxy-l-methyl-l/řindol-3-karbonitrilu [referenční příklad 1 (a)] v 600 ml tetrahydrofuranu za udržování teploty pod -10 °C. Reakční směs se během 2 hodin vytemperuje na teplotu místnosti, nechá se stát přes noc a pak se přidá 100 ml vody. Tetrahydrofuran se pak odstraní ve vakuu a zbytek se extrahuje mezi

5 00 ml ethylacetátu a 200 ml vody. Vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje 200 ml ethylacetátu. Spojené organické vrstvy se promyjí 500 ml vody a pak se odpaří. Zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (19:1, objemově) za získání 19,4 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě Šedé pevné látky s teplotou tání 270 až 272 °C. Hmotnostní spektrum: 279 (MH⁺).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití l-methyl-índol3-karbonitrilu [referenční příklad 2(b)], se připraví 6-(l-methyl-l//-indol-3-yl)-57/-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 264 až 266 °C. [Elementární analýza: C, 72,34; H, 4,68; N, 22,28 %. Vypočteno pro C₁₅Hi₂N₄: C, 72,56; H, 4,87; N, 22,57 %].

(c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3-brombenzonitrilu, se připraví 6-{3-bromfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 247 až 249 °C. Hmotnostní spektrum: 276 (MFT).

-22CZ 301750 B6 (d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 1 (a) výše, ale za použití 2-isobutylpyrazinu a benzonitrilu, se připraví 7-isopropyl-6-fenyl-5//-pyrrolo[2,3-/)]pyrazin ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 216 až 218 °C. Hmotnostní spektrum: 238 (MH).

(e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4-brombenzonitrilu, se připraví 6-(4-bromfenyl)-57/-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 326 až 329 °C. Hmotnostní spektrum: 276 (MPf).

(f) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2-(4-kyanoio fenyl)-l,3-dioxanu (připraví se podle americké patentové přihlášky US 5 750 723 například 3a), se připraví 6-(4-[l,3]dioxan-2-ylfenyl)-57/-pynOlo[2,3-á]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 288 až 289 °C. Chromatografie na tenké vrstvě: Rp - 0,34 (ethylacetát/pentan:

l/l).

(g) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2-(3-kyanofenyl)-l,3-dioxanu (připraví se podle popisu v americké patentové přihlášce US 5 750 723 například 3a), se připraví 6-{3-[l,3]dioxan-2-ylfenyl)-5í/-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 205 až 206 °C. [Elementární analýza: C, 68,28; H, S,46; N, 15,02%. Vypočteno pro Ci₆Hi₅N₃O₂: C, 68,31; H, 5,37; N, 14,94 %].

(h) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2-chÍnolinkarbonitrílu( se připraví 2-(5/ř-pyrrolo[2,3-d]pyrazin-6-yl)chinolin ve formě světle žluté pevné látky s teplotou tání 293 až 295 °C. Hmotnostní spektrum: 247 (MH⁺). [Elementární analýza: C, 72,76; H, 3,82; N, 22,56 %. Vypočteno pro C₎₆Hi₅N₃O2: C, 73,16; H, 4,09; N, 22,56 %].

(i) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3-isochinolinkarbonitrilu, se připraví 3-(5/7-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-ó-yl)isochinolin ve formě zelené pevné látky s teplotou tání 281 až 285 °C. Hmotnostní spektrum: 247 (MH⁺).

(j) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 1-methyl-1Hindol-5-karbonitrilu·[referenční příklad 2(c)], se připraví 6-[ 1 -methyl-1//—indol—5—y 1 ]-SHpyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 260 až 265 °C. Hmotnostní spektrum: 249 (MH⁺).

(k) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2,6-dimethylpyrazinu, se připraví 6-(5-methoxy-l-methyl-1//—indol—3—yl)-2-methyl-5tf-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 293 (MH⁺). 1H NMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,2-12,3 (1H, široký s); 8,54, 8,56 (2x 1H, s); 7,50 (1H, d, J=8,9 Hz); 7,47 (1H, d, J=2,4 Hz); 6,96 (1H, dd, J=8,9 a 2,4 Hz); 6,91 (1H, s); 3,91, 3,87 a 2,57 (3x 3H, s), (l) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2,5-dimethylpyrazinu a 1 -methyl-1 H-\ndol-3-karbonitrilu [referenční příklad 2(c)], se připraví 3-methyl-ó(l-methyl-l//-indol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazÍn ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 170 až 175 ^ÓC. Hmotnostní spektrum: 263 (MH*).

(m) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití l-benzyl-5methoxy-l/Ž-indol-3-karbonitrilu [referenční příklad 2(g)]), se připraví 6-(l-benzyl-5methoxy-l//-indol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 240 až 244 °C. Chromatografie na tenké vrstvě: Rp = 0,5 (dichlormethan/methanol:19/l).

(n) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 1-methyl-l// pyrrol-3-karbonitrilu [referenční příklad 2(i)], se připraví 6-( 1-methyl-\H-pyrrol-3-yI)-5Hpyrrolo[2,3-ň]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 211 až 213 °C. Hmotnostní spektrum: 199 (MH⁺).

-23CZ 301750 B6 (o) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 1-methyl-1/7 pyrrol-2-karbonitrilu [referenční příklad 2(j)], se připraví 6—(1—methyl—1//—pyrrol—2—yl)—5//— pyrrolo[2,3-á]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 208 až 209 °C. Hmotnostní spektrum: 199 (MH⁺).

(p) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití indolizin—1— karbonitrilu [referenční příklad 5], se připraví 6-índolízin-l-yl-5//-pyrrolo[2,3-/)]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 224 až 225 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 235 (MH⁺).

io (q) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3-methylindolizin-1-karbonitrilu [referenční příklad 6], se připraví 6-(3-methylindolizin-l-yl)-5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 233 až 235 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 249 (MH⁺).

(r) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití l-methyl-5fenyl-l/7-pyrrol-3-karbonitrilu [referenční příklad 2(k)], se připraví 6-( l-methyl-5-feny 1—177— pyiTol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky $ teplotou tání 221 až 222 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 275 (MH⁴).

(s) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 5,6,7,8-tetrahydroindolizin-1 -karbonitrilu [referenční příklad 8], se připraví 6-(5,6,7,8-tetrahydroindolizinl-yl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 236 až 238 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 239 (MH⁺).

(t) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3-furonítrilu, se připraví 6-furan-3-yl-5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin ve formě oranžové pevné látky. Hmotnostní spektrum: 186,79 (MíT). Chromatografie na tenké vrstvě: R_F = 0,45 (dichlormethan/methanol:19/l).

(u) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4-N,N-dimethylaminobenzonitrilu, se připraví dimethyl[4-(5//-pyrrolo[2,3-d]pyrazin-6-yÍ)fenyl]amin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 297 až 298 °C. Hmotnostní spektrum: 239 (MlT).

(v) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a), ale za použití ethylpyrazinu, se připraví 6-(5-methoxy-l-methyl-177-indol-3-yl)-7-methyl-577-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 243 až 244 °C. HPLC (způsob A): R_T = 6,73 minut.

(w) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4-Z-butylbenzo40 nitrilu, se připraví 6-(4_í-butylfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin ve formě žluté pevné látky.

LCMS: Rt-3,29 minut; 252 (MH⁴).

(x) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2-ethylpyrazinu a 4-/-butylbenzonitrilu, se připraví 6^4-/-butylfenyl)-7-methyl-5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazÍn ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 213 až 214 °C. Hmotnostní spektrum: 266 (MH⁺).

(y) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3,4-dimethoxybenzonitrilu, se připraví 6-(3,4-dimethoxyfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-b]pyrazin ve formě žlutooranžové pevné látky s teplotou tání 212 až 214 °C. Hmotnostní spektrum: 256 (MÍT).

(z) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2-ethylpyrazinu a 4-aminobenzonitrilu, se připraví 6-(4-aminofenyl)-7-methyl-577-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě hnědé pevné látky s teplotou tání 330 až 332 °C. Hmotnostní spektrum; 225 (MH⁺).

-24CZ 301750 B6 (aa) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4—(1—methyl)ethoxybenzonitrilu [referenční příklad 51], se připraví 6-[4-(l_methyl)ethoxyfenyl]“5//pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 254 (MH ).* HPLC (způsob B): R_T = 1,64 minut.

(ab) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití l/ř-5-kyano-lmethyI-2-methylthioimidazolu [referenční příklad 52], se připraví 6-(l//—l—methyl—2-<methylthio)ímidazol—5—yl)-5//-pyrrolo [2,3-6] pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 230 °C, Hmotnostní spektrum: 246 (ΜΒΓ).

(ac) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3-kyano-lmethyl-l//-indazolu [referenční příklad 56(a)], se připraví 6-( 1-methyl-1/7-indazo 1-3-y 1)-5//pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 250 (MH⁺), 248 (MH”). H NMR [(CD₃)₂SO]: 812,5-12,6 (1H, široký s); 8,38 (1H, d, J=2,4 Hz); 8,24 (d, 1H, J=7,9 Hz); 8,21 (s, 1H, J=2,4 Hz); 7,76 (d, 1H, J=8,l Hz); 7,48 (t, 1H); 7,32 (t, 1H); 7,29 (s, 1H); 4,18 (s, 3H).

(ad) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 3-kyano-lmethyl-4-fenyl-l//-pyrrolu [referenční příklad 56(b)], se připraví 6-(l-methyM-fenyl-l//20 pyrrol-3-yl)-5//-pyrroIo[2,3-ó]pyrazin ve formě pevné látky s teplotou tání 195 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 275 (MH+).

(ae) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu I(a) výše, ale za použití 4-fluorbenzonitrilu, se připraví 6—(4-fluorfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě šedobílé pevné látky.

1HNMR[(CD₃)₂SO]: δ 12,3 (s, 1H) 8,4 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 8,05 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 7,2 (s, 1H). Hmotnostní spektrum: 213 (MH*).

(af) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4—methoxybenzonitrilu, se připraví 6-(4—methoxyfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazÍn ve formě šedobílé pevné látky s teplotou tání 244 až 246 °C. Hmotnostní spektrum: 225 (MH*).

(ag) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4-(/-butyl)benzonitrilu a 4-{pyrazinyl)-I-butenu [referenční příklad 59], se připraví 6-[4-(/-butyl)fenyl]-7(propenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 207 až 208 °C.

Hmotnostní spektrum: 292 (MH*).

(ah) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4-(methylthio)benzonitrilu, se připraví 6-(4-methylthiofenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 242 (MH+). *H NMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,48 (1H, s); 8,37 (1H, s); 8,18 (1H, s); 7,98 (2H, d, J=7,9 Hz); 7,19 (2H, d, J=7,9 Hz); 7,11 (1H, s); 2,52 (3H, s).

(ai) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu I(a) výše, ale za použití 3-methoxybenzonitrilu, se připraví 6-(3-methoxyfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě oranžové pevné látky s teplotou tání 194 až 196 °C. Hmotnostní spektrum: 226 (MH^4-).

(aj) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití l-methyl-4kyanopyrazolu (připraví se postupem popsaným v publikaci Yoshida, J. Het. Chem,, 1995, 32, strana 701), se připraví 6-(l-methyl-l//-pyrazol^4-yl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě oranžové pevné látky s teplotou tání 232 až 234 °C. Hmotnostní spektrum: 200 (MIT).

(ak) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití l-methyl-3kyano-5-fenylpyrazoIu [referenční příklad l(k)], se připraví 6-(l-methyl-5-fenyl-l//-pyrazol3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě oranžové pevné látky s teplotou tání 222 až 223 °C. HPLC R_T = 7,36 minut.

-25CZ 301750 B6 (al) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 2-kyanopyridinu, se připraví 6-(pyridin-2-yl)-5//-pynOlo[2,3-ó]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 234 až 235 °C. 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 8,71 (1H, d, >4,1 Hz); 8,38 (1H, s); 8,24 (1H, s); 8,17 (1H, d, >8,2 Hz); 7,93 (IH, t, >8,2 Hz); 7,41 (1H, m); 7,36 (1H, s).

(am) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu l(a) výše, ale za použití 4-kyanopyridinu, se připraví 6-(pyridin-4-yl)-5//-pynolo[2,3-á]pyrazin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 324 až 326 °C. 'HNMR [(CDs^SO]: δ 8,69 (2H, d, >7,1 Hz); 8,45 (1H, s); 8,33 (1H, s); 8,00 (2H, d, >7,1 Hz); 7,47 (1H, s).

Příklad 2 (a) 3-[3-(5/>pynOlo[2,3-6]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]propan-l-ol

Do roztoku 29 g 6-{l-[3-(>butyldimethylsilyIoxy)propyl]-l/í-indol-3-yl}-5//~pyrrolo[2,3~ ójpyrazin [referenční příklad 3(a)] v 500 ml tetrahydrofuranu se v atmosféře dusíku přidá 144 ml l,0M roztoku fluoridu tetrabutylamonného v tetrahydrofiiranu. Směs se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti a pak se zahustí ve vakuu. Ke zbytku se přidá voda za získání pevné látky, která se filtruje, pak promyje vodou a pak vysuší za získání 17,5 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutohnědé pevné látky s teplotou tání 220 až 221 °C. Hmotnostní spektrum: 293 (MH).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 2(a) výše, ale za použití 6-{ l-[3—(z—butyldÍmethy1silyloxy)propyl]-5-methoxy_lí>indol-3-yl}-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazinu [referenční příklad 3(b)], se připraví 3-[5-methoxy-3-(5//-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]propanl-ol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 225 až 228 °C. Hmotnostní spektrum: 323 (MH⁺). Chromatografie na tenké vrstvě: R_F = 0,16 (dichlormethan/methanol: 19/1).

(c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 2(a) výše, ale za použití 6-{ 1 —[2—<7—buty 130 dimethyIsilyloxy)ethyl]-l/ř-indol-3-yl}-5/>pyrrolo[2,3-ó]pyrazinu [referenční příklad 3(c)], se připraví 2-[3-(5/>pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)indol-l-yÍ]ethanol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 272 až 273 °C. Hmotnostní spektrum: 279 (MH⁺).

(d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 2(a) výše, ale za použití 6-{ 1 -[2-(/-butyl35 dimethylsílyloxy)ethyl]-5-methoxy-l//-indol-3-yl}“5/>pyrrolo[2,3-Ž>]pyrazinu [referenční příklad 3(d)], se připraví 2-[5-methoxy-345H-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-6-yl)Índol-l-yl]ethanol ve formě šedé pevné látky s teplotou tání 270 až 273 °C. Hmotnostní spektrum: 309,43 (MH+).

Příklad 3 (a) 3-[345/>pyrrolo[2,3-Z>]pyrazÍn-ó-yl)indol-l-yl]propylamin

Do roztoku 12 g 3-[3-(5//-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]propan-l-olu [příklad 2(a)] a 19,1 g bromidu uhličitého ve 300 ml dichlormethanu se během 5 minut při teplotě místnosti přidá roztok 12,9 g trifenylfosfinu ve 100 ml dichlormethanu. Směs se 3 hodiny míchá při teplotě místnosti, reakční směs se filtruje a pevná látka se promyje malými podíly dichlormethanu. Filtrát se odpaří za získání hnědého lepidla, které se v uzavřené tlakové nádobě smíchá s 80 ml kapalného amoniaku a směs se 18 hodin míchá při teplotě místnosti. Nádoba se pak ochladí na

-78 °C a pak se opatrně zavzdušní. Amoniak se nechá odpařit a zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí dichlormethan/methanol a koncentrovaný amoniak (900:100:7, objemově) za získání 3 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 170 °C. 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 8,28 (1H, d, >2,7 Hz); 8,18 (1H, s); 8,10, 7,64 (2x 1H, d, >7,7 Hz); 8,09 (1H, d, >2,7 Hz); 7,29, 7,23 (2x 1H, td, >7,1 a 1,0 Hz); 6,97 (1H, s); 4,32 (2H, t, >7,0 Hz); 2,57 (2H, t, >6,5 Hz); 1,89 (2H, kvintet, >6,4 Hz).

-26CZ 301750 Bó (b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 3(a) výše, ale za použití 3-[5-methoxy-3(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]propan-l-olu [Příklad 2(b)], se připraví 3-[5methoxy-3-(5//-pynOlo[2,3-ů]pyrazin-ó-yl)indol-l-yl]propylamin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 95 až 100 °C a 150 až 160 °C. Hmotnostní spektrum: 322 (MH*). Chromatografie na tenké vrstvě: Rp - 0,2 (dichlormethan/methanol/koncentrovaný amoniak: 900/100/7, objemově).

io Příklad 4

N-{3-[3-(5Z/-pynOlo [2,3-ó] pyrazin-6-yl)indol-1 —yljpropyl} acetamid

Do roztoku 100 mg 3-[3-(5//-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]propylaminu [příklad

3(a)] se při teplotě místnosti a v atmosféře dusíku po kapkách přidá 31 μΐ acetylchloridu a 52,2 μΐ triethy laminu a 20 ml dichlormethanu. Směs se 24 hodin míchá při teplotě místnosti a pak se odpaří. Zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (9:1, objemově) za získání 82 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 260 °C. Hmotnostní spektrum: 334 (MH*).

Příklad 5 (a) 6-[ 1 -ý3-MorfoIin-4-ylpropy 1)-1 tf-indoI-3-yl]-5tf-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin

Směs 250 mg 3-[3-(57/-pynOlo[2,3-á]pyrazin-6-yl)Índol-l-yl]propylbromidu [referenční příklad 4], 0,5 ml morfolinu, 100 mg uhličitanu draselného a 2 krystalů jodidu draselného se v ethylmethylketonu zahřívá 2 hodiny k varu. Směs se pak během 16 hodin nechá ochladnout na teplotu místnosti a pak se odpaří. Zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí dichlormethan/methanol (9:1, objemově) za získaní a žlutého skla, které se převrství ethylacetátem a pentanem za získání 40 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 180 až 185 ’C. Hmotnostní spektrum: 362 (MH⁺).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 5(a) výše, ale za použití piperidinu, se připraví 6-[l-(3-piperidin-l-yl-propyí)_l/ř-indol-3-yÍ]-5/f-pyrrolo[2,3-ů]pyrazÍn ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 240 °C. Hmotnostní spektrum: 360 (MH⁺).

Příklad 6

6-{l-[3-(Pyridin-3-yloxy)propyl]-17/-indol-3-yl}-5/í-pyrrolo[2,3-Z)]pyrazÍn

Do roztoku 359 mg trifenylfosfinu ve 2,5 ml tetrahydrofuranu se při 0 °C v atmosféře dusíku během 2 minut po kapkách přidá roztok 269 μΐ diisopropylazodikarboxylátu v 0,5 ml tetrahydro45 furanu. Směs se 20 minut míchá při stejné teplotě a pak se během 1 minuty přidá roztok 65 mg 3-hydroxypyridinu v 1 ml tetrahydrofuranu (1 ml) a pak suspenze 200 mg 3-[3-(5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-ó-yl)indol-l-yl]propan-l-olu [příklad 2(a)] ve 2 ml tetrahydrofuranu. Směs se během 18 hodin vytemperuje na teplotu místnosti a pak se odpaří. Zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí ethylacetát/methanol (9:1, objemově) za získání 110 mg slouče50 niny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 208 až 209 °C. Hmotnostní spektrum: 370 (MH).

-27CZ 301750 B6

Příklad 7

1-Methyl-3-(5/f-pyrrolo[2,3-Z)]pyrazin-6-yl)~l//-indol-5-ol

Směs 200 mg 6-(5-methoxy-l-methyl-l/7-indol-3-yl)-5//- pyrrolo[2,3-/)]pyrazinu [příklad l(a)], 500 μΐ 48% bromovodíkové kyseliny a 3 ml ledové octové kyseliny se 14 hodin zahřívá k varu. Po ochlazení se směs neutralizuje přidáním nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného, výsledná tmavá pevná látka se oddělí filtrací a pak se vysuší za získání 180 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě černé pevné látky s teplotou taní 289 až 290 °C. Hmotnostní speklo trum: 264 (MH*).

Příklad 8

6-(2-Chlor-5-methoxy-l-methyl-l/ř-indol-3-yl)-5íř-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin

Do roztoku 100 mg 6-(5-methoxy-l-methyl-ltf-indol-3-yl)-5/f-pynOlo[2,3-ó]pyrazinu [příklad 1 (a)] v 25 ml dimethoxyethanolu ochlazeného na -78 °C se přidá 172 μΐ 2,5M roztoku nbutyIlithia v hexanu. Směs se 30 minut míchá s 82 mg 4-toluensulfonyl chloridu a pak se pomalu vytemperuje na teplotu místnosti a pak se odpaří. Zbytek se chromatograficky čistí na silikagelu za eluce směsí dichlormethan/methanol (19:1, objemově) za získání 45 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě černé pevné látky. Hmotnostní spektrum: 313 (MH⁺), Ή NMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,20 (1H, s); 8,39 (1H, d, J=3 Hz); 8,21 (1H, d, J=3 Hz); 7,54 (1H, d, J=9 Hz); 7,30 (1H, d, J=2 Hz); 6,96 (1H, dd, J=9 a 2 Hz); 6,84 (1H, d, J=2 Hz); 3,82 (3H, s); 3,81 (3H, s).

Příklad 9 (a) 3-(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)benzaldehyd

Do roztoku 1,6 g 6—(3—[ 1,3]dioxan-2-ylfeny l)-5H-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazinu [příklad 1 (g)] v 50 ml dichlormethanu se přidá 5 ml trifluoroctové kyseliny. Výsledná směs se 6 hodin zahřívá k varu, pak se nechá pres noc ochladnout a pak se odpaří. Zbytek se převrství diethyletherem za získání žluté pevné látky, která se rekrystalizuje z ethylacetátu za získání 0,6 g sloučeniny uvede35 né v názvu ve formě žluté krystalické pevné látky s teplotou tání 268 až 270 °C. [Elementární analýza: C, 69,96; H, 3,92; N, 18,69%. Vypočteno pro C,₃H₉N₃O: C, 69,96; H, 4,06; N, 18,82%].

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 9(a) výše, ale za použití 6-(4-[ 1,3]dioxan40 2-ylfenyl)~5//~pyrrolo[2,3-ó]pyrazinu [Příklad l(f)], se připraví hydrát 4-(5//-pyrrolo[2,3~ó]pyrazin-6-yl)benzaldehydu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání >295 °C. [Elementární analýza: C, 67,57; H, 4,33; N, 18,04%. Vypočteno pro CbH^OCHjO: C, 67,23; H, 4,34; N, 18,09%].

Příklad 10 (a) [3-(57/-pynOlo[2,3-Z)]pyrazin-6-yl)fenyl]methanol

Do suspenze 0,4 g 3-(5//-pyrrolo[2,3 Z>]pyrazin-6-yl)benzaldehydu [příklad 9(a)] v ethanolu (50 ml) se přidá 200 mg tetrahydroborotanu sodného a směs se 1 hodinu míchá při teplotě místnosti, pak se přidá 10 ml vody a pak se odpaří. Pevný zbytek se převrství 50 ml vody za získání světle žluté pevné látky, která se promyje vodou a pak se rekrystalizuje z methanolu za získání 0,35 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté krystalické látky s teplotou tání 225 až 226 °C.

-28CZ 30Í750 Bó [Elementární analýza: C, 68,72; H, 4,73; N, 18,44%. Vypočteno pro CnHtiN₃O: C, 69,32; H, 4,92; N, 18,65%].

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 10(a) vysel ale za použití 4-(5/í-pyrrolo5 [2,3-ů]pyrazin-6-yl)benzaldehydu [příklad 9(b)], se připraví [4-(5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6“ yl)fenyl]methanol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 284 až 285 °C. [Elementární analýza: C, 68,61; H, 4,65; N, 18,28. Vypočteno pro C₁₃H_nN₃O: C, 69,32; H, 4,92; N, 18,65 %].

io Přikladli

6-(5-Methoxy-ltf-indol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin

Do roztoku 50 mg 6-(l-benzyl-5-methoxy-l//-indol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazinu [pří15 klad l(m)] ve 20 ml tetrahydrofuranu ochlazeného na-78 °C se přidá 20 ml kapalného amoniaku a pak 100 mg sodíku. Směs se 30 minut míchá při -78 °C, pak se pomalu vytemperuje na teplotu místnosti, pak se přidá 50 ml vody a směs se pak třikrát extrahuje 50 ml ethylacetátu. Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a pak se odpaří. Zbytek se převrství diethyletherem za získání mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě hnědé pevné látky s teplotou tání 268 až 271 °C. 20 Hmotnostní spektrum: 265,24 (MET).

Příklad 12

2-[5-Methoxy-3-(5/ř-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)Índol“l“yl]“l“morfoiin-4-ylethanon

Do míchajícího se roztoku 70 mg 6-(5-methoxy-l//-indol-3-yl)-5//-pyrroIo[2,3-Z>]pyrazinu [přikladli] v 10ml suchého dimethylformamidu se přidá 21,6mg hydridu sodného (60% disperze v minerálním oleji), Směs se 30 minut míchá a pak se přidá roztok 44,1 mg 4-(2-chlor30 acetyl)morfolinu v 1 ml dimethylformamidu a míchání pokračuje další 3 hodiny. Reakční směs se nalije do 20 ml vody a pak se třikrát extrahuje 30 ml ethylacetátu. Spojené extrakty se vysuší síranem sodným a pak se odpaří. Zbytek se převrství diethyletherem za získání 55 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 263 až 267 °C. Hmotnostní spektrum: 392,21 (MET),

Příklad 13 (a) [5-Methoxy-3-( 1 tf-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl)indol-l-yl]octová kyselina

Směs 4,67 g ethylesteru {5-methoxy-3-[l-{toluen-4-sulfonyI)-l_Jř/^Lpym)lo[2,3-Z>]pyridin-2yl]indol-l-yl}octové kyseliny [referenční příklad 13(a)], 250 ml methanolu a 25 ml 5M vodného hydroxidu draselného se 7 hodin zahřívá k varu. Methanol se odstraní za sníženého tlaku a ke zbytku se přidá 20 ml vody a pH tohoto roztoku se upraví na 7 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Výsledná žlutá pevná látka se oddělí filtrací a chromatograficky se čistí na šilikagelu za eluce směsí ethylacetát/methanol (7:3, objemově) za získání 1,69 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pevné látky. Hmotnostní spektrum: 320 (M-H⁺). HPLC (způsob A): R_T = 6,67 minut, (b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 13(a), ale za použití 4-methoxy-2-(5methoxy-1 -methyl- l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl)-l/ř-pyrrolo[2,3-á]pyridinu [referenční příklad 2(1)], se připraví 4-methoxy-2-(5-methoxy-l-methyl-ltf-indol-3-yl)-l//pyrroío[2,3-ójpyridin ve formě žlutohnědé pevné látky s teplotou tání 288 až 289 °C. Hmotnostní spektrum: 307 (MH).

-29CZ 301750 B6 (c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 13(a), ale za použití 4-methoxy-2-(5methoxy-1 /Ž-indol-3-yl)-l-(toluen^t-sulfonyÍ)-l//-pyrrolo[2,3á]pyridinu (referenční příklad 39), se připraví 4-methoxy-2-(5-methoxy-17/-indol-3-yl)-lH-pyrrolo[2,3-ů]pyridin ve formě žlutohnědé pevné látky s teplotou tání 294 až 295 °C. Hmotnostní spektrum: 294 (MH’).

(d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 13(a), ale za použití 4—chlor-2-(4-z-butylfenyl)-l-(toluen-4-sulfonyl)-líf-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [referenční příklad 12(j)], se připraví 4-chlor-2-(4-z-butylfenyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin ve formě krémově zbarvené pevné látky. Chromatografie na tenké vrstvě: R_F = 0,71 (ethylacetát/heptan 1:1). ^!H NMR [(CD₃)2SO]: δ 12,52 iú (1H, s); 8,16 (1H, d, J=6,l Hz); 7,93 (2H, d, J=8,l Hz); 7,50 (2H, d, J=8,l Hz); 7,21 (1H, d, J=6,1 Hz); 6,96 (1H, s); 1,30 (9H, s).

(e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 13(a), ale za použití 2-(5-methoxy-lmethyl-177-indoÍ-3-yl)-5-fenyl-l-(toluen^4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-á]pyridinu [referenční příklad 13(j)], se připraví 2-(5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-5-fenyl-l/f-pyrrolo[2,3ůjpyridin ve formě krémově zbarvené pevné látky s teplotou tání 240 až 242 °C. Hmotnostní spektrum: 354 (MH⁺).

io Příklad 14 (a) 2-{[5-Methoxy-3-(l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)indol-l-yl]-l-morfolin-4-yl}ethanon

Do suspenze 60 mg [5-methoxy-341^-pynOlo[2,3-ů]pyridin-2-yl)indol-l-yl]octové kyseliny [příklad 13(a)] v 7 ml suchého dimethylformamidu se přidá 71 mg N-{(dimethylamino)(177l,2,3-triazolo[4,5-ů]pyridin-l-yl)methyIen}-N-methylmethanamoniumhexafluorfosfát-Noxidu a 45 μΐ diisopropylethylaminu. Směs se 30 minut míchá při teplotě místnosti, pak se přidá 18 μΐ morfolinu a směs se míchá při teplotě místnosti dalších 12 hodin. Rozpouštědlo se odstraní ve vakuu a zbytek se suspenduje v nasyceném roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Vzniklá sraženina se oddělí filtrací a vysuší za získání 10 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě fialové pevné látky s teplotou tání 243 až 247 °C. Hmotnostní spektrum: 391 (MH*).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-[l-methyl-3(1 H-pyrrolo[2,3-ójpyridin-2-y 1)-177-indol-5-yloxy]cyklobutankarboxylové kyseliny [příklad

15(c)] a chloridu amonného, se připraví amid l-[l-methyl-3-(l/ř-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)l//-indol-5-yloxy]cyklobutankarboxylové kyseliny ve formě světle fialové pevné látky s teplotou tání 267 až 268 °C, Hmotnostní spektrum: 361 (MH).

(c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu I4(a) výše, ale za použití l-[l-methyl-340 (1Λ/—pyrrolo[2,3—ó Jpyridin—2—y 1)— l //-indol-5-yloxy]cyklobutankarboxylové kyseliny [příklad

15(c)] a methylaminu, se připraví methylamid l-[l-methyl-3-(l//-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2yl)-l//-indol-5-yloxy]cyklobutankarboxylové kyseliny ve formě světle fialové pevné látky s teplotou tání 249 až 250 °C. Hmotnostní spektrum: 375 (MH⁴).

(d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl}-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a methylaminu, se připraví methylamid 1 -methy 1-3-(1 //-pyrrolo[2,3-6jpyridin-2-yl)- 1/7-indo 1-5karboxylové kyseliny ve formě světle oranžové pevné látky s teplotou tání 186 °C. Hmotnostní spektrum: 304 (MH⁺).

(e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(1//-pyrrolo [2,3-/]pyridin-2-yl)^-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a ethanolaminu, se připraví (2-hydroxyethyl)amid l-methyl-3-(l//-pyrrolo[2,3-ó]pyrÍdÍn-2-yl)-l//indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 256 až 257 °C. Hmot55 nostní spektrum: 335 (MH).

-30CZ 301750 B6 (f) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(lř/-pyrrolo[2,3~ó]pyridin-2-yl)-lH-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a 2-aminoethylmorfolinu, se připraví (2-morfolin-4~y lethy l)amid 1-methy 1-3-( l//-pyrrolo[2,3-Z>]pyri5 din-2-yl)-líf-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 268 až 270 °C. Hmotnostní spektrum: 404 (ΜΡΓ).

(g) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(l/ř-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-l/f-Índol-5-karboxyÍové kyseliny [Příklad 15(d)] a β-alaninío amidu, se připraví (2-karbamoyIethyl)amid 1-methy 1-3-( ltf-pyrrolo[2,3-Z>]pyridin-2-y 1)-1//indol-5-karboxylové kyseliny ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 286 až 288 °C Hmotnostní spektrum: 362 (MH).

(h) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3is (l/ř-pyrrolo[2,3-Ď]pyridin-2-yl)-ltf-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a diethanolaminu, se připraví bis(2-hydroxyethyl)amid 1 -methy 1-3-(1 //-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl)-l//indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 230 až 232 °C. Hmotnostní spektrum: 379 (MH⁺).

(i) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(l//-pyn^,olo[2,3-ů]pyridín-2-yl)-l//-índol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a chloridu amonného, se připraví amid l-methyl-3-(l//“pynOlo[2,3-/]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 330 až 332 °C. Hmotnostní spektrum: 291 (Mít).

(j) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 1-methy 1-3(I//-pyrrolo[2,3-g]pyridin-2-yl)-lŽ/-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a tris(hydroxymethyl)aminomethanu, se připraví (2-hydroxy-l,l-bishydroxymethylethyl)amid 1methy 1-3-(l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-l/Z-indol-5-karboxylove kyselina ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 205 až 206 °C. Hmotnostní spektrum: 395 (MÍT).

(k) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(1//-pyrrolo [2,3-ó]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a 2-amino2-methyl— 1,3-propandiolu, se připraví (2-hydroxy-l-hydroxymethyl-l-methylethyl)arnid 135 methyl-3~(17/-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2-yl)-l//-Índol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 180 až 182 °C. Hmotnostní spektrum: 379 (MH‘).

(l) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(l//-pyrrolo[2,3-Z>]pyridin-2-yl)-l/y-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a 3-amino40 1,2-propandiolu, se připraví (2,3-dihydroxypropyl)amid l-methyl-3-(17/-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 171 až 172 °C. Hmotnostní spektrum: 365 (MH').

(m) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-345 (ltf-pyrrolo[2,3-Ů]pyridin-2-yl)-17/-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a 2-amino2-methy 1-1 -propanolu, se připraví (2-hydroxy-1,1 -dimethy lethy l)amid 1 -methy 1-3-( 1 H~ pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 161 až 162 °C. Hmotnostní spektrum: 365 (MH').

(n) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(l//-pyrrolo[2,3-/>]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(d)] a serinolu, se připraví (2-hydroxy-1 -hydroxymethy lethy l)am id 1 -methy 1-3-( 1 //-pyrrolo [2,3-ó]pyrid in—2— yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 178 až 179 °C. Hmotnostní spektrum: 365,41 (MET).

-31 CZ 301750 B6 (o) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 1-methy 1-3(l//“pyrrolo[2,3-Z>lpyridin-2-yl)“l//-indol-ó-karboxylové kyseliny [příklad 15(g)] a hydrochloridu 3-aminopropionamidu, se připraví (2-karbamoylethyl)amid l-methy 1-3-( 1/Z-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2-yl>-l//-indol-6-karboxylové kyseliny ve formě světle žluté pevné látky s teplotou tání 277 až 280 °C. Hmotnostní spektrum: 362 (MH*), (p) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(l//-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl)-l//-indol-6-karboxylové kyseliny [příklad 15(g)] a ethanolaminu, se připraví (2-hydroxyethyl)amid 1 -methy 1-3-( l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridín-2-y 1)-1//io indol-6-karboxylové kyseliny ve formě hnědé pevné látky s teplotou tání 264 až 267 °C. Hmotnostní spektrum: 335 (MH⁺).

(q) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 1-methy 1-3(l//-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl)-l//-indol-6-karboxylové kyseliny [příklad 15(g)] a \H15 [l,2,4]-triazol-3-ylaminu, se připraví (1 //-[ 1,2,4]triazol-3-yl)amid 1 -methy 1-3-(l//-pyrrolo[2,3-Z>]pyridin-2-yl)-l/Z-indol-6-karboxyíové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 343 až 345 °C. Hmotnostní spektrum: 358 (MH^).

(r) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-320 (l//-pyrrolo[2,3-/)]pyrÍdin-2-yl)-l//-indol-6-karboxylové kyseliny [příklad 15(g)] a serinolu, se připraví (2-hydroxy-l-hydroxymethylethyl)amid l-methyl-3-(l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2yl)-l//-indol-6-karboxylové kyseliny ve formě světle hnědé pevné látky s teplotou tání 247 až 249 °C. Hmotnostní spektrum: 365 (MH⁺).

(s) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a), ale za použití 1-methy 1-3-(5//pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a 2-amino-2methyl-l-propanolu, se připraví (2-hydroxy-l,l-dimethylethyl)amíd l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-6-yl)-l//-Índol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 210 až 214 °C. Hmotnostní spektrum: 364 (MH).

(t) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-[6-(4-/-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]propionové kyseliny [příklad 25(a)] a methylaminu, se připraví 3-[6-(4-z-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-7-yl]-N-methylpropionamid ve formě šedobílé pevné látky s teplotou tání 222 až 228 °C. Hmotnostní spektrum: 337 (ΜΡΓ).

(u) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-[6-(4-/-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin-7-yl]propionové kyseliny [příklad 25(a)] a dimethylaminu, se připraví 3-[6-(4-/-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-/>]pyrazÍn-7-yl]-N,N-dimethylpropionamid ve formě šedobílé pevné látky s teplotou tání 203 až 204 °C. Hmotnostní spektrum: 351 (MH⁺).

(v) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 151] a2-methoxyethylaminu, se připraví 2-methoxyethylamid l-methyl-3-(5//-pyrroto[2,3-6]pyrazm-ó~yl}“ l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě oranžové pevné látky. Hmotnostní spektrum:

350 (MH’). HPLC (způsob C): R_T = 1,27 minut.

(w) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl>l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a 2-thien2-ylethylaminu, se připraví 2-thien-2-ylethylamid l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-650 yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 402 (MH’). HPLC (způsob C): R_T = 1,45 minut.

(x) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 1-methy 1-3(5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-6-yl)-]//indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a 2-fluor55 ethylaminu, se připraví 2-fluorethylamid 1 -methy 1—3—<5//-pyrrolo[2,3-/>]pyrazin-6-y 1)-1//-32CZ 301750 B6 indol-5-karboxylové kyseliny ve formě oranžové pevné látky MS: 338 (MH*). HPLC (způsob C): R_T = 1,30 minut (y) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-35 (5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a hydrochloridu ethylesteru alaninu, se připraví 2-karboethoxyethylamid l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,36]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě oranžové pevné látky. Hmotnostní spektrum: 392 (MH). HPLC (způsob C): R_T = 1,38 minut io (z) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-6-yl)-l//-Índol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(Í)] a hydrochloridu methylesteru šeřinu, se připraví (hydroxymethyl)karbomethoxymethylamÍd 1-methyl3-<5//-pyrrolo[2,3-í]pyrazin-6-yl)-l/ř-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě oranžové pevné látky. Hmotnostní spektrum: 391(MH⁺), HPLC (způsob C): R_T = 1,24 minut.

(aa) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a ethanolaminu, se připraví 2-hydroxyethylamid 1-methy 1-3-(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-y 1)-1//indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 171 až 173 °C (rozklad).

Hmotnostní spektrum: 336 (MH⁺).

(ab) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14 (a) výše, ale za použití l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-Índol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a methylaminu, se připraví methylamid l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-indol-525 karboxylové kyseliny ve formě béžové pevné látky. Hmotnostní spektrum: 304 (MH*), ’H NMR: δ 8,64 (1H, široký s); 8,59 (d, 1H, >1,0 Hz), 8,27 (d, 1H, J=2,4 Hz); 8,17 (s, 1H), 8,15 (d, 1H, >2,4 Hz), 7,82 (dd, 1H, >1,0 Hz, 7,9 Hz); 7,62 (d, 1H, J=7,9 Hz); 7,21 (s, 1H); 3,96 (s, 3H); 2,82 (s, 3H).

(ac) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a), ale za použití l-methyl-3-(5/řpyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//~indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a dimethylaminu, se připraví dimethylamid l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-é]pyrazin-6-yl)-l//~indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 320 (MH). *HNMR: 6 8,26 (d, 1H, >2,1 Hz); 8,18 (s, 1H); 8,15 (d, 1H, >2,1 Hz); 7, 621(d, >8,1 Hz); 7,372 (dd, 1H, >1,0 Hz, 8,1 Hz); 6,98 (s, 1H); 3,94 (s, 3H); 3,05 (s, 6H).

(ad) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-3(5í/-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl}-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a morfolinu, se připraví [l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-yl]niorfolin^l-ylketon ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 362 (MH⁺).

(ae) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14 (a) výše, ale za použití l-methyl-3(5/T-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a 4hydroxypiperidínu, se připraví 4-hydroxy-[l-[l-methyI-3-(5/ř-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)45 l/>indol-5-yl]karbonylpiperidin ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 376 (MH⁺), 398 (MNa⁺).

(af) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-[l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-yl]karbonylaminopropionové kyseliny [příklad

15(1)] a methylaminu, se připraví methylamid 3-[ l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-6-yl)l//-indol-5-yl]karbonylaminopropionové kyseliny ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 377 (M/Γ). HPLC (Způsob C): RT = 1,20 minut.

(ag) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití l-methyl-355 (5//-pynOlo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 15(i)] a 3-33CZ 301750 B6 hydroxypropylaminu, se připraví 3-hydroxypropylamid l-methyl-3-(5//-pyrrolo[2_?3-/)]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 350 (MH⁺). HPLC (způsob C): R_T = 1,22 minut.

(ah) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-{6—[4—(l— methyl)ethoxyfenyl]-5//-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-7-yl}propionové kyseliny [příklad 25(b)] a methylaminu, se připraví methylamid 3-(6-(4-(l-methyl)ethoxyfenyl]-5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin-7-yl} propionové kyseliny ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 339 (MPf). HPLC (způsob C): R_T = 1,49 minut.

io (ai) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-(6-(4methoxyfenyl)-5//-pyTrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]propionové kyseliny [příklad 25(d)] a methylaminu, se připraví methylamid 3-[6-(4-methoxyfenyl)-5/7-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin“7-yl]propionové kyseliny ve formě Šedobílé pevné látky. ’HNMR [(DC₃)₂SO]: δ 12,0 (s, 1H) 8,3 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,7 (d, 2H), 7,1 (d, 2H), 3,8 (s, 3H), 3,05 (t, 2H), 2,6 (t, 2H) 2,5 (s, 3H).

Hmotnostní spektrum: 310 (MH~).

(aj) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-(6-(4-(1methy I )ethoxyfeny l]-5//-py rrolo[2,3-6] pyrazin-7-yl} propionové kyseliny [referenční příklad

25(b)] a chloridu amonného, se připraví 3-{6-[4-(l-methyl)ethoxyfenyl]-5Z/-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-7-yl}propionamid ve formě bílé pevné látky. Hmotnostní spektrum: 325 (ΜΡΓ). HPLC (způsob C): Rj= 1,44 minut.

(ak) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-(6-(425 hydroxyfenyl)-5/ř-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl}propionové kyseliny [příklad 30] a chloridu amonného, se připraví 3-(6-(4-hydroxyfenyl)-5í/-pyrrolo[2,3~6]pyrazin-7-yl}propionamid ve formě bílé pevné látky. Hmotnostní spektrum: 283 (MH). HPLC (způsob C): R_T - 2,18 minut.

(al) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 14(a) výše, ale za použití 3-(6-( 4-fluor30 fenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]propionové kyseliny [příklad 25(c)] a methylaminu, se připraví methylamid 3-(6-(4-fluorfenyl )-57/-pyrrolo [2,3-0] pyrazin-7-yl] propionové kyseliny ve formě šedobílé pevné látky. 'H NMR [(DC,)₂SO]: δ 12,5 (s, 1H) 8,4 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,8 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 3,1 (t, 2H), 2,6 (t, 2H), 2,5 (s, 3H). Hmotnostní spektrum: 298 (MH*).

Příklad 15 (a) [l-Methyl-3-(l//-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2-yl)-1//-indol-5-yloxy]octová kyselina

Do roztoku 500 mg ethylesteru (l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-ltf-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2~yl]-l//-indol-5-yloxy} octové kyseliny [referenční příklad 15(b)] v 25 mí methanolu se přidají 3 ml 5M roztoku hydroxidu draselného a směs se pak 16 hodin zahřívá k varu. Rozpouštědlo se odstraní za sníženého tlaku a ke zbytku se přidá 10 ml vody. pH této směsi se upraví na 7 přidáním octové kyseliny a výsledná bezbarvá pevná látka se oddělí filtrací a pak se vysuší za získání 170 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání >300 °C. Hmotnostní spektrum: 322 (MH+).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití ethylesteru 3-( 1 methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridÍn-2-yl]-l//-indol-5-yloxy}propÍo50 nové kyseliny [referenční příklad 15(c)], se připraví 3-[l-methyl-3-(177-pyrrolo[2,3-ó]pyridin2-yl)-l//-indol-5-yloxy]propionová kyselina ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 177 až 178 °C. Hmotnostní spektrum: 336 (MH⁺).

(c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití ethylesteru l-{ l-methyl-3-[l-(toluen-4—sulfonyi)-lH-pyrrolo[2,3ó]pyridin-2-ylJ-17/-indol-5-yloxy}-34CZ 301750 B6 cyklobutankarboxylové kyseliny [referenční příklad 15(d)], se připraví 1 -[1 -methy 1-3-(1 Hpyrrolo[2,3-/>]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-yloxy]cyklobutankarboxylúvá kyselina ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 168 až 169 °C. Hmotnostní spektrum: 362 (ΜΗ⁴).

(d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití methylesteru l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-lÍř-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-ltf-indol“5-karboxylové kyseliny [referenční příklad 19(a)], se připraví 1 -methy 1-3-( l//-pyrrolo[2,3—ájpyridin~2—yl>— 1 tf-indol-5-karboxylová kyselina ve formě žluté pevné látky s teplotou tání >300 °C. Hmotnostní spektrum: 291 (MH⁺).

io (e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití l—methyl—3—[l— (toluen-4- sulfonyl}-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-olu [referenční příklad 14(a)], se připraví l-methyl-3-{líf-pyn^,olo[2,3-á]pyridin-2-yl)-líf-indol-5-ol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 199 až 200 °C. Hmotnostní spektrum: 264 (MLT).

(f) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití ethylesteru l-{ Hethyl(cyklobutankarboxylát)-3-[ Htoluen-4-sulfonyl)-l/f-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2-y 1]1 H-índol-5-yloxy} cyklobutankarboxylové kyseliny [referenční příklad 23(d)], se připraví l-{l-(cyklobutankarboxylová kyselina)-3-[l/f-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yI]-lJí-Índol-5-yl20 oxyjcyklobutankarboxylová kyselina ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 240 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 444 (MH“).

(g) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití methylesteru l-methyl-3-[l-(toluen—4-sulfonyl)-l/ř-pyrrolo[2,3-é]pyridin-2-yI]-l//-indol-6-karboxylové kyseliny [referenční příklad 13(g)] se připraví 1 -methy 1-3-(l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin—2—yl)— 17/-indol-6-karboxy lová kyselina ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 359 až 361 °C. MS 292 (MH⁺).

(h) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití ethylesteru

3-{l-methyl-3-[l-(toluen-^-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-l/f-indol-5-yl}propionové kyseliny [referenční příklad 3 8(a)], se připraví 3-[ 1 -methy 1-3-( ltf~pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-yl]propionová kyselina ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 268 až 270 °C. Hmotnostní spektrum: 320 (MH’).

(i) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a), ale za použití methyl-l-methyl-3(5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin-6-yl)-Í//-indol-5-karboxylátu [referenční příklad 19(b)], se připraví 1 -methyl-3-(5//- pyrrolo[2,3-Z>Jpyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylová kyselina ve formě hnědé pevné látky s teplotou tání 350 °C. HPLC (způsob A): R_T - 5,85 minut (j) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití ethylesteru [2-methoxy-5-(5tf-pyrrolo[2,3-Á]pyrazin-6-yl)fenoxy]octové kyseliny [příklad 27], se připraví [2-methoxy-5-(5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin-6-yl)fenoxy]octová kyselina ve formě bílé pevné látky s teplotou tání 330 až 332 °C. Hmotnostní spektrum: 300 (MH⁺).

(k) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití ethyl-3-[2-dimethyIamino-5“ý5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazÍn-6-yI)fenyl]propionátu [referenční příklad 38(b)], se připraví 3-[2-dimethylamino-5-(5tf-pyrrolo[2,3-£]pyrazin-6-yl)fenyl]propionová kyselina ve formě oranžové pevné látky s teplotou tání 269 až 271 °C. Hmotnostní spektrum: 311 (MH⁺).

(1) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 15(a) výše, ale za použití 2-karboethoxyethylamidu l-methyl-3-(5//-pyiTolo[2,3-Z)]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-karboxylové kyseliny [příklad 14(y)] a hydroxidu sodného, se připraví 35 mg 3-[l-methyl-3-(5tf-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin-6-yí)-l//-indol-5-yl]karbaminopropionové kyseliny ve formě oranžové pevné látky. Hmotnostní spektrum: 364 (MFC). HPLC (způsob C): Rt = 1,24 minut,

-35CZ 301750 B6

Příklad 16 (a) 2-[ 1 -Methy 1-3-( 1 //-pyrrolo[2,3-6]pyrÍdin-2-yl)-l žf-indol-5-yloxy]ethanol

Do roztoku 120 mg ethylesteru {l-methyl-3-[Htoluen-4-sulfonyl)-l/ř-pyrrolo[2,3-&]pyridin-2-yl]-l//-índol-5-yloxy}octové kyseliny [referenční příklad 15(b)] v 5 ml suchého tetrahydrofuranu se při 0 °C přidá v atmosféře dusíku 50 μΐ l,0M roztoku tetrahydridohlinitanu lithného v tetrahydrofuranu. Směs se vytemperuje na teplotu místnosti, pak se 3 hodiny míchá io a pak se opatrně nalije do 75 ml vody. Směs se třikrát extrahuje 25 ml ethylacetátu a spojené organické extrakty se promyjí 75 ml nasyceného roztoku chloridu sodného, pak se vysuší síranem sodným a pak odpaří za získání 45 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 209 až 210 °C. Hmotnostní spektrum: 308 (MH⁺).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 16(a) výše, ale za použití ethylesteru

3- {1 -methyl-3-[ 1 -(toluen-4-sulfonyI>-1 tf-pyrrolo [2,3-6] pyridin-2-y 1]-1 Zf-indol-5-y loxy} propionové kyseliny [referenční příklad 15(c)], se připraví 3-[l-methyl-3-(l//-pyrrolo[2,3-A]pyridin-2-yl)-l//-indol“5-yloxyJpropan-l-ol ve formě bezbarvé pevné látky steplotou tání 164 až 165 °C. Hmotnostní spektrum: 320 (MHj.

(c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 16(a) výše, ale za použití ethylesteru

1- { l-methyI-3-[l-(toluen-4-sulfonyl>-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridÍn-2-yl]-l/í-indol-5-yloxy}‘ cyklobutankarboxylové kyseliny [referenční příklad 15(d)], se připraví {l-[l-methy 1-3-(1//pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-y1)-l//-Índol-5-yloxy]cykíobutyl}methanol ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 144 až 146 °C. Hmotnostní spektrum: 348 (MH⁺). HPLC (způsob A): R_T = 6,37 minut.

(d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu I6(a) výše, ale za použití (6-fenyl-5//pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl)octové kyseliny [referenční příklad 35], se připraví 2-(6-fenyl_5/ř30 pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl)ethanol ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 201 až 202 ^QC. Hmotnostní spektrum: 348 (MHJ. HPLC (způsob A): R_T = 6,37 minut. [Elementární analýza: C, 70,68; H, 5,77; N, 17,44 %. Vypočteno pro C,₃Hi,N₃O: C, 70,28; H, 5,48; N, 17,56 %].

(e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 16(a) výše, ale za použití ethylesteru [2-methoxy-5-(5//-pyrrolo[2,3~6]pyrazin-6--yl)fenoxy]octové kyseliny [příklad 27], se připraví

2- [2-methoxy-5-(5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-6-yl)fenoxy]ethanol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 203 až 205 °C. Hmotnostní spektrum: 286 (ΜΡΓ).

(f) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 16(a) výše, ale za použití ethyl—3-[2-di40 methylamino-5-(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)fenyl]propionátu [referenční příklad 38(b)), se připraví 3-[2-dimethylamino-5-(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyTazin-6-yí)fenyl]propan-l-ol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 203 až 204 °C. Hmotnostní spektrum: 297 (MH⁺).

(g) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu I6(a) výše, ale za použití 3-{6-[4-(145 methyl)ethoxyfenyl]-5//-pyrTolo[2,3-6]pyrazin-7-yl} propionové kyseliny [příklad 25(b)], se připraví 7 mg 3-{6—[4—(1 -methy l)ethoxyfenyl]-5//-pyrroIo[2,3-ó]pyrazin-7-y 1}propanol ve formě žluté pevné látky. Hmotnostní spektrum: 312 (MH⁺). HPLC (způsob C): R_T = 2,9 minut.

-36CZ 301750 Bó

Příklad 17 (a) 2-(5-Methoxy-1 -methyl-1 //—indol—3—y 1)— 1 //-pyrrolo[2,3-ó]pyridin

Do roztoku 1,45 g 2-(5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-l-(toluen^t-sulfonyl)-l//pyrrolo[2,3-6]pyridinu [referenční příklad 13(b)] ve 100 ml methanolu se přidá 15 ml 5M roztoku hydroxidu draselného a směs se 2 hodiny zahřívá k varu. Reakční směs se ochladí a pak se odpaří, zbytek se převrství 150 ml vody a výsledná pevná látka se oddělí filtrací a pak se vysuší za získání 0,75 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutohnědé pevné látky s teplotou tání io 226 až 227 °C. Hmotnostní spektrum: 278 (MH*).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 3-{ 1-methy 1-3[l-(toluen-4-sulfonyl)-l //-pyrrolo[2,3-6] pyridin—2—yl]—1 //-indol-5-yloxy} propan- 1,2-diolu [referenční příklad 16], se připraví 3-[l-methy 1-3-(ltf-pyrrolo[2,3—6]pyridin—2—yí)—1//—indol—

5-yloxy]propan-l,2-diol ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 202 až 203 °C. Hmotnostní spektrum: 338 (MH⁺).

(c) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 3-{ 1-methy 1-3[ 1 -(toluen-4-sulfonyl)-1 //-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-y 1]-1 H-indol-5-y loxy} propan- l-olu [referenční příklad 17] se připraví 3—[l-methyl—3—(l//—pyrrolo[2,3-Z?]pyridin—2—yl)—l//—indol—

5-yloxy]propan-l-ol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 192 až 193 °C. Hmotnostní spektrum: 322 (MH*).

(d) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 3-{ 1-methy 1-325 [ 1 -(toluen-4-sulfony 1)-1 tf-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]- l//-indoI-5-y loxy} propan-2-olu [referenční příklad 17], se připraví 3-[l-methyl-3~(17/-pyrrolo[2,3-/)]pyridin-2-yl)-17/ -indol5-yloxy]propan-2-ol ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 201 až 202 °C. Hmotnostní spektrum: 322 (MtT).

(e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-[l-methyl-5(l-trimethylstanyí-l//-tetrazol-5-y!)-l//-indol-3-yl]-l-(toluen—4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3ó]pyridinu [referenční příklad 20], se připraví 2-(l-methyl-5-(2//-tetrazol-5-yl)-lř/-indol-3yl]-ltf-pyrrolo[2,3-6]pyridin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 303 °C. Hmotnostní spektrum: 316 (Μ1Γ).

(f) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-[l-methyl-5(2-methyl-2/Z-tetrazoI-5-yl)-l7í-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-é]pyridínu [referenční příklad 21], se připraví 2-[ 1-methy 1-5-(2-methyl-2řř-tetrazol-5-yl)-l//-indol3-yl]-l//-pyrrolo[2,3-Z»]pyridin ve formě béžové pevné látky s teplotou tání 299 až 300 °C (roz40 klad). Hmotnostní spektrum: 330 (ΜΡΓ).

(g) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-[ 1-methy 1-5(1 -methyl-1 //-tetrazol-5-yl)-l //-indol-3-yÍ]-Htoluen-^-sulfonyl)-1 Zf-pyrrolo[2,3-6]pyridinu [referenční příklad 21], se připraví 2-[ 1-methy 1-5-(1 -methyl-1//-tetrazo!-5-y1)—1//—indol—

3-yl]-1H-pyrrolo[2,3-6]pyridin ve formě béžové pevné látky s teplotou tání 286 až 289 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 330 (MH⁺).

(h) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití I -[1-methy 1-3{(l-(toluen-4-sulfonyI)-l íf-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2-yl}-l íf-indol-5-yl]ethanonu [referenční příklad 22], se připraví 1-[1-methy 1-3-( 17/-pyrrolo[2,3- 0]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-ylJethanon ve formě béžové pevné látky s teplotou tání 210 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 290 (MH).

(i) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-(5,6-di55 methoxy-1-methy 1-1 Tf-indol-3-y 1)-1-( to! uen^l-sulfonyl)-l /f-pyrrolo[2,3 -/>] pyridin [refe-37CZ 301750 B6 renční příklad 13(d)], se připraví 2-(5,6-dimethoxy-l-methyl-17/-indol-3-yl)-l//-pyrrolo[2,3ůjpyridin ve formě béžové pevné látky s teplotou tání 283 až 285 °C (rozklad). Hmotnostní spektrum: 308 (MH⁺).

(j) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití (S)—3—{l— methy 1—3—[ Htoluen^l-sulfony 1)-1 //—pyrrolo[2,3—ó]pyridín—2—y 1]—1 /7-indol-5-y loxy} propan1,2-diolu [referenční příklad 24(a)], se připraví (S)-3-[l-methyl-3-(l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin2-yl)-\H-indol-5-yloxyjpropan-1,2-diol ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 182 až 185 °C. Hmotnostní spektrum: 338 (MH⁺).

io (k) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití (R)—3—{l— methyl-3-[l-<toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3“2]pyridin-2-yl]-ltf-Índol-5-yloxy}propan1,2-diolu [referenční příklad 24(b)], se připraví (R)-3-[l-methyl-3-(líř-pyrrolo[2,3-ó]pyridin2-yl)-l/ř-indol-5-yloxy]propan-1,2-diol ve formě bezbarvé pevné látky s teplotou tání 153 až

156 °C. Hmotnostní spektrum: 338 (MH⁺).

(l) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2—[5—(2— methoxy-l-methylethoxy)-l-methyl-l//-índol-3-yl]-l-(toluen^4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3ójpyridinu [referenční příklad 25], se připraví 2-[5-(2-methoxy-l-methylethoxy)-l-methyl20 l//-indol-3-yl]-l//-pynOlo[2,3-ó]pyridin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 150 až 151 °C. Hmotnostní spektrum: 336 (MH⁴).

(m) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-[l-methyl-5(5-methyl-[l,2,4]oxadiazol-3-yl)-l//-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-&]25 pyridinu [referenční příklad 27], se připraví 2-[l-methyl-5-(5-methyl-[l,2,4]oxadiazol-3-yl)1 //-indol-3-yl]-l/f-pyrrolo[2,3-/>] pyridin ve formě krémově zbarvené pevné látky s teplotou tání 290 až 294 °C. Hmotnostní spektrum: 330 (MH⁴).

(n) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití (S)-3-{630 methoxy-l-methyI-3-[l-(toliien-4-suIfonyl>-lŽř-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-l//~indol-5-yloxy} propan-1,2-diolu [referenční příklad 24(c)], se připraví (S)-3-[6-methoxy-l-methy 1-3(l//-pyrrolo[2,3-d]pyridin-2-yl)-l/ř-Índol-5-yloxy]propan-l,2-diol ve formě krémově zbarvené pevné látky. Hmotnostní spektrum: 368 (MH⁴). HPLC (způsob A): R_T = 5,81 minut.

(o) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-(5-hydroxy6-methoxy-1 -methyl-1H-indol-3-y 1)-1 -(toluen-4-sulfonyl)-1 //-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [referenční příklad 28], se připraví 6-methoxy-l-methy 1-3-( l/ř~pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-lHindol-5-ol ve formě hnědé pevné látky. Hmotnostní spektrum: 294 (MH⁴). HPLC (způsob A): Rt = 6,37 minut.

(p) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a), ale za použití 2-(5-methoxy-lmethyl-l//-indol-3-yl)-4-fenyl-l-(toluen-4-sulfonyl)-l_Jř/-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [referenční příklad 2(m)], se připraví 2-(5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-4-fenyl-l//-pynOlo[2,3ůjpyridín ve formě žluté pevné látky. H NMR [(CD-^SO]; δ 11,98 (1H, s); 8,21 (1H, d,

J=3,5 Hz); 7,94 (1H, s); 7,86 (2H, d, >8,8 Hz); 7,59 (2H, t, >8,8 Hz); 7,47 (2H, m); 7,39 (1H, d, >1,9 Hz); 7,11 (1H, d, >3,5 Hz); 6,93 (1H, dd, >8,8, 1,9 Hz); 6,82 (1H, s); 3,84 (3H, s); 3,82 (3H, s).

(q) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a), ale za použití 2-[5-(pyridin-4-y 1)50 1-methyl-lŽř-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyÍ)-l//-pynolo[2,3-Ž»]pyridinu (referenční příklad 60), se připraví 2—[ 1—methyl—5—(pyridin--4—yl)—1//—indol—3—yl]^4—1 Z/-pyrrolo[2,3—ά]pyridin ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 325 až 330 °C. 'HNMR [(CDj^SO]; δ 8,65 (2H, d, >7,2 Hz); 8,20 (1H, s); 8,15 (1H, m); 8,04 (1H, s); 7,88 (3H, m); 7,72 (2H, m); 7,03 (1H, t, J—7,2 Hz); 6,96 (1H, s); 3,93 (3H, s).

-38CZ 301750 B6 (r) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 2-(5-methoxyl-methyl-l/ř-indol-3-yI)-l-{toluen--4-sulfonyl)-ltf-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-4-karbonitrilu [referenční příklad 13(h)], se připraví 2~(5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-17í-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-4-karbonitril ve formě oranžově zbarvené pevné látky s teplotou tání 304 až

305 °C. ^ΓΗ NMR [(CDs^SO]: δ 12,60 (1H, s); 8,24 (1H, s); 8,07 (1H, s); 7,50 (3H, m); 6,96 (IH, d, J=8,6 Hz); 6,88 (1H, s); 3,91 (3H, s); 3, 86 (3H, s).

(s) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 17(a) výše, ale za použití 4-chlor-2-(5methoxy-1 -methyl-1 //-indol-3-y l)-l-(toluen-4-sulfonyl)~l Ťf-pyrrolo[2,3-Z?]pyridinu [refei o renční příklad 13 (i)], se připraví 4-chlor-2-(5-methoxy-l-methyl-1 indol—3—y 1)— 1 H-pyrrolo[2,3~ň]pyridin ve formě žlutohnědé pevné látky s teplotou tání 250 až 252 °C. Hmotnostní spektrum: 312 (MH⁺).

Příklad 18

I-Methyl-3-(l//~pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-lí/-indoI-5-ylamin

Do míchajícího se roztoku 0,2 g f-butylesteru [ 1-methy 1-3-(l//-pyrrolo[2,3—Z>]pyridin—2—y 1)20 l//“indol-5-yl]karbamové kyseliny [referenční příklad 30] v dichlormethanu se přidají 2 ml trifluoroctové kyseliny (2 ml). Směs se 16 hodin míchá při teplotě místnosti a pak se odpaří. Zbytek se suspenduje v 10 ml nasyceného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a výsledná pevná látka se filtruje a pak vysuší za získání sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pevné látky s teplotou tání 247 až 248 °C. Hmotnostní spektrum: 263 (Μ1-Γ).

Příklad 19 (a) N-[l-Methyl-34ltf-pyrrolo[2,3-2>]pyridm-2-yl)-l/ř-indol-5-yl]rnethansulfonamid

Roztok 52,4 mg 1-methy 1-3-( ltf-pyrrolo[2,3-á]pyridin-2-yl)-l/í-indol-5-y laminu [Příklad 18] v 5 ml dichlormethanu se reaguje s 30 μΐ triethylaminu a potom se 17 μΐ methansulfonylchloridu. Po 16 hodinách míchání při teplotě místnosti se reakČní směs zředí 10 ml dichlormethanu, potom se promyje 10 ml vody, potom 10 ml solanky, suší se nad síranem hořeč35 natým a odpaří se. Získaná pevná látka se tríturuje diethyletherem a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 223 až 224 °C. MS: 341 (MH~).

(b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 19(a) výše, ale za použití acetylchloridu, se připraví N-[l-methyl-341/f-pyrroÍo[2,3-Z>]pyridin-2-yl)-l//-indol-5-yl]acetamid ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 220 až 221 °C. MS: 305 (MH⁺).

Příklad 20 (a) {1 -[5-( 1 -HydroxymethyIcyklobutoxy)-3-{ 17ř-pyrroIo[2,3-6]pyridin-2-yl)indol-1 -y 1]cyklobuty 1} methanol

Míchající se roztok 0,54 g ethylesteru l-{I-{ethyl-cyklobutankarboxylát)-3-[l“(toluen-4sulfonyl)-ltf-pyrroÍo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-lZ/-indol-5-yloxy}cyklobutankarboxylové kyseliny [Referenční Příklad 23(d)] v 50 ml tetrahydrofuranu se při 0 °C v dusíkové atmosféře po kapkách reaguje s4,9 ml l,0M roztoku tetrahydridohlinitanu lithného v tetrahydrofuranu. Po 2 hodinách míchání při 0 °C se reakční směs nechá stát 18 hodin při teplotě místnosti, potom se přikape 20 ml vody a směs se filtruje přes křemelinu Hyflo Super Cel®. Filtrační lože se promyje 20 ml ethylacetátu, dvoufázový filtrát se rozdělí a vodná vrstva se extrahuje dvakrát 25 ml ethylacetátu.

Spojené organické fáze se promyjí 25 ml solanky, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpa-39CZ 301750 B6 ří se. Zbytek se trituruje diethyl etherem a nerozpustná látka se čisti pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (19:1, objemově) a získá se 0,19 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě krémové, pevné látky teplotě tání 165 až 166 °C. MS: 418 (MH+), (b) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 20(a), ale za použití ethylesteru {1-[1inethyl-3-(5tf-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-yloxy]cyklobutylkarboxylové kyseliny (Referenční Příklad 15(e)) se připraví {1-[1-methy 1-3-( 5í/-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-6-yl)-lířindol-5-yloxy]cyklobutyl}methanol ve formě hnědé, pevné látky o teplotě tání 267 až 271 °C.

ío MS: 349 (MÍT).

Příklad 21 (a) 2-(5-Methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridinmethansulfonát μΐ Methansulfonové kyseliny se při teplotě místnosti přidá k roztoku 300 mg 2-(5-methoxy1- methyl-l/f-indol-3-yl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [Příklad 17(a)] v 20 ml tetrahydrofuranu. Směs se míchá 45 minut a vznikající sraženina se odfiltruje a získá se 390 mg sloučeniny uvede20 né v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 256 až 257 °C. [Elementární analýza: C, 57,60; H, 4,77; N, 10,90%. Vypočteno pro Ci₃H,iN₃O: C, 57,90; H, 5,13; N, 11,25%].

(b) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 21 (a) výše, ale za použití 6-(5methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-5//-pyrrolo[2,3-i]pyrazinu [Příklad l(a)], se připraví 625 (5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-5#-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazininethansulfonátu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 245 až 250 °C. MS: 279 (MH*).

(c) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 21 (a) výše, ale za použití 2-[5™ methoxy-3-( 1 //-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl)indol- l-yl]-l-morpholin-4-ylethanonu [Pří30 klad 14(a)], se připraví 2-[5-methoxy-3-0/>pytTolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)indol-l-yl]-lmorfolin-4-yl-ethanonmethansulfonát ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 214 až 215 °C. MS: 391 (MH*).

(d) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 21 (a) výše, ale za použití (235 hydroxy-l,l-dimethylfethyl)amidu 1-methy 1-3-( l/f-pyrro lo[2,3-6]pyrid in-2-yl)-l//-i ndol-5karboxylové kyseliny [Příklad 14(m)], se připraví (2-hydroxy-1,1-di methy lethyl)arnidmethansulfonát 1 -methy 1-3-( l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-l /T-indoI-S-karboxylové kyseliny ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 190 až 192 °C. MS: 363 (MH*).

(e) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 21(a) výše, ale za použití (2-hydroxy-1,1dimethylethyl)amidu 1 -methy l-3-(5Z/-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)-1 //-índol-5-karboxylové kyseliny [Příklad 14(s)], se připraví 2-[5-(2~-hydroxy-l,l-dimethyIethylkarbamoyl)-l-methyll//-indol-3-yl]-l//-pyrrolo[2,3-6]pyrazinmethansulfonát ve formě hnědé, pevné látky o teplotě tání 240 °C (za rozkladu). ’HNMR[(CD₃)₂SO]: δ8,50 (1H, s); 8,37 (1H, d, >3,0 Hz); 8,32 (1H, d, >3,0 Hz); 8,29 (1H, s);

(f) Podobným postupem, jako je popsáno v příkladu 21 (a), ale za použití 2-[5-methoxy-3(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]-l-morfolin->ylethanonu (Příklad 12), se připraví

2- [5-methoxy-3-(5//-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)Índol-l-yl]-l-morfolin->ylethanon50 methansulfonát o teplotě tání 250^ŮC, 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ8,32 (1H, s); 8,22 (1H, s); 8,11 (1H, s); 7,50 (1H, s); 7,44 (1H, d, >8,8 Hz); 7,04 (IH, s); 6,93 (1H, d, >8,8 Hz); 5,36 (2H, s); 3,90 (3H, s); 3,61 (8H, m); 2,31 (3H, s).

-40CZ 301750 B6

Příklad 22

5-[644-íerc-Butylfenyl-5tf~pyrrolo[2,3-ů]pyrazirw7-yI]ethyl--2tf-tetrazoI

K míchajícímu se roztoku 0,2 g 3-[6-(4-terc-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]propionitrilu [Příklad 23] v 25 ml toluenu se v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti přidá 0,61 ml azidotributylcínu. Reakční směs se zahřeje na 117°C. Po 24 hodinách se přidá další alikvotní podíl 0,21 ml azidotributylcínu a reakční směs se zahřívá dalších 24 hodin. Reakční směs se rozloží přidáním 44 ml ledové kyseliny octové a míchá se 15 minut a extrahuje se mezi vodu a ethylio acetát. Dvě vrstvy se oddělí, organická fáze se promyje vodou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a získá se 0,06 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé, pevné látky. MS: 348 (MH⁺).

HPLC (způsob B): R_T - 1,64 minut.

Příklad 23

3-[6-(4-řerc-Butylfenyl-5H~pyrroIo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]-2//-propionitrÍl

K roztoku 0,1 g 3-[6-(4-Zerc-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-/)]pyrazin-7-yl]propionamidu [Příklad 24] v 15 ml tetrahydrofiiranu se při teplotě místnosti přidá 1 ml triethylaminu a l ml trichlorid-oxidu fosforečného. Reakční směs se zahřívá 30 minut k varu pod zpětným chladičem, potom se nalije do 10% roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Směs se extrahuje ethylacetátem a spojené organické extrakty se promyjí vodou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se.

Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce nejprve směsí ethylacetátu a pentanu (1:1, objemově), potom ethylacetátem a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 215 až 216 °C. MS: 305 (MH*).

Příklad 24

3-[6-(4-terc-Butylfenyl-5H-pyiTolo[2,3-fr|pyrazin-7-yl]propionarnid

K roztoku 0,51 g 3-[6-(4-řerc-butylfenyl-5_Jř/-pyrroío[2,3-ň]pyrazin-7-yl]propionové kyseliny 35 [Příklad 25(a)] v 15 ml dimethylformamidu se v dusíkové atmosféře při teplotě místnosti přidá

0,54 g 0-benzotriazol-l-yl-N,N,N',N'-tetramethyluroniumtetrafiuorborátu a 0,22 ml triethylaminu. Roztokem se 5 minut probublává plynný amoniak a reakční směs se nechá stát při teplotě místnosti přes noc. Roztok se potom nalije do vody a extrahuje se ethylacetátem. Organické extrakty se promyjí vodou a suší se nad síranem sodným a získá se sloučenina uvedená v názvu, která se použije bez dalšího čištění. MS: 323 (MH⁺). HPLC (způsob B): R_T = 4,49 minut.

Příklad 25 (a) 3-[6-(4-tere-ButyIfenyl-5//-pyrrolo[2,3-Zi]pyrazm-7-yl]propionová kyselina

K roztoku 0,4 g dimethyl-3-[6-(4-zerc-butylfenyl“5/7-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-7-yl]propion1,1-dikarboxylátu [Referenční příklad 44(a)] v 20 ml methanolu se přidají 4 ml 1N roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se zahřívá 6 hodin na 50 °C, potom se nechá stát při teplotě místnosti přes noc. Rozpouštědlo se odpaří, přidá se 50 ml 6N roztoku kyseliny sírové a reakční směs se zahřívá 2 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Po ochlazení se roztok zalkalizuje na pH 4 6N roztokem hydroxidu sodného a vznikající sraženina se odfiltruje a suší se ve vakuu a získá se 0,26 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé, pevné látky, která se použije bez dalšího čištění, o teplotě tání 274 až 275 °C. MS: 324 (MH).

-41 CZ 301750 B6 (b) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 25(a), ale za použití dimethyl-3-[6(4-( 1 -methy l)ethoxy feny l)-5//-pyrrol o [2,3-6] pyrazin-7-yl] propion-1,1 -dikarboxylátu [Referenční příklad 44(b)], se připraví 3-{6-[4~(l-methyl)ethoxyfenyl]-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin7-yl}propionová kyselina ve formě žluté, pevné látky. MS: 326 (MH*). HPLC (způsob C):

R_T = 1,56 minut.

(c) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 25(a), ale za použití dimethyl-3-[6(4-fluorfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6] py razí n-7-y l]propion-l ,1-dikarboxy látu [Referenční příklad 44(c)], se připraví 3-[6-(4-fluorfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]propionová kyselí10 na ve formě bělavé, pevné látky. 'H NMR [(CD₃)2SO]: δ 12,3 (s, 1H) 8,4 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,8 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 3,1 (t, 2H), 2,7 (t, 2H). MS: 285 (MH⁺).

(d) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 25(a) výše, ale za použití dimethyl3-[6-{4-methoxyfenyl)-5//-pynOlo[2,3“ó]pyrazin-7-yl]propion-l,l-dikarboxylátu [Referenční příklad 44(d)], se připraví 3-[6-{4-methoxyfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-Ó]pyrazin-7-yl]propionová kyselina ve formě bělavé, pevné látky. *HNMR [(CD₃)2SO]: δ 12,0 (s, 1H) 8,3 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,7 (d, 2H), 7,1 (d, 2H), 3,8 (s, 3H), 3,05 (t, 2H), 2,6 (t, 2H). MS: 297 (MH*).

Příklad 26

3-[6~(4-^rc-Buty Ifeny l)-5/f-pyrrolo[2,3-6]pyrazin“7-yl]propan-1 -ol

Ke směsi 5 ml 4N kyseliny chlorovodíkové v dioxanu (1:1, objemově) se přidá 0,02 g 3—[6—(4—

Zerc-butyl feny l-5//-pyrrolo [2,3-6] pyrazin-7-yl]propionové kyseliny a reakční směs se míchá přes noc při teplotě místnosti. Po odpaření se zbytek suspenduje mezi 10% roztok hydrogenuh liči tanu sodného a ethylacetát. Fáze se oddělí a organická fáze se promyje vodou a suší se nad síranem sodným. Po odpaření se zbytek suspenduje v 50 ml etheru. Přidá se 0,12 ml 1M roztoku tetrahydridohlinitanu lithného v diethyletheru a suspenze se zahřívá 2 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Přidá se další alikvotní podíl 0,12 ml 1M roztoku tetrahydridohlinitanu lithného v diethyletheru a reakční směs se zahřívá další 1 hodinu k varu pod zpětným chladičem. Reakce se rozloží prikapáním studeného vodného 10% roztoku hydrogenuhličitanu draselného, dokud neustane vývoj vodíku, zředí se vodou a extrahuje se etherem. Spojené organické frakce se promyjí vodou, suší se nad síranem sodným a Čistí se pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem za získání 0,035 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé, pevné látky o teplotě tání 187 až 189 °C. MS: 310 (MH*),

Příklad 27

Ethylester [2-methoxy-5-(57/^r-pyrrolo[2,3-6]pyrazÍn-6-yl)fenoxy]octové kyseliny

K roztoku 0,5 g 2-methoxy-5-(5/ř-pynOlo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)fenolu [Příklad 28] v 10 ml dimethylformamidu a 0,67 g uhličitanu česného se přidá 0,025 g ethylchloracetátu. Reakční směs se zahřívá přes noc na 50 °C. Po ochlazení se dimethylformamid odpaří ve vakuu a zbytek se extrahuje mezi ethylacetát a vodu. Organická frakce se suší nad síranem sodným, odpaří se a čistí se pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí 2,5 % methanolu v dichlormethanu. Produkt se dále trituruje směsí ethylacetátu a pentanu a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 183 až 184 °C, MS: 328 (MH*),

-42CZ 301750 Bó

Příklad 28

2-Methoxy-5-(5/ř-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)fenol

K roztoku 1,0 g 6-(3-/erc-butyldimethylsilyloxy-4-methoxy)fenyI-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazinu [Referenční příklad 49] v 50 ml tetrahydrofuranu se přidá 5,63 ml 1M roztoku fluoridu tetrabutylamonného v tetrahydrofuranu. Reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti. Tetrahydrořuran se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se suspenduje ve vodě. Získaná pevná látka se odfiltruje a suší se ve vakuu a získá se 0,56 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné io látky, která se použije bez dalšího čištění. MS; 242 (MH⁺). HPLC (způsob B): R_T = 3,02 minut.

Příklad 29 i s 3-Fluor-2-{5-methoxy-1 -methyl-1 i ndol—3—y 1)— 1 [-pynolo[2,3-ó] pyridin

Roztok 0,1 g 2-(5-methoxy-1 -methyl-1H-indol-3-yl)-1 //-pyrrolo[2,3-ó] pyridinu [Příklad 17(a)] ve 4 ml suchého tetrahydrofuranu se při 0 °C reaguje s 0,042 ml methylmagnesiumbromidu a po 20 minutách míchání se tato směs reaguje s 0,13 g l-chlormethyI-4-fluor-l,420 diazoniabicyklo[2,2,2]oktanbis(tetrafluoroborátu). Reakční směs se míchá 4 hodiny při teplotě místnosti, potom se nechá stát přes noc při teplotě místnosti, potom se 4 hodiny zahřívá na 40 °C, potom 2 hodiny na 80 °C, ochladí se na teplotu místnosti a extrahuje se mezi ethylacetát a vodu. Vodná vrstva se extrahuje třikrát 25 ml ethylacetátu. Spojené extrakty a ethylacetátová vrstva se promyjí solankou, suší se nad síranem hořečnatým a potom se odpaří. Zbytek se trituruje ethyl25 acetátem a získá se 0,057 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 248 až 250 °C. 'H NMR[(CDj^SOJ: δ 12,20 (1H, s); 8,24 (1H, m); 7,81 (IH, s); 7,79 (1H, d, J=9,6Hz); 7,46 (IH, d, J=9,6Hz); 7,27 (1H, s); 7,18 (IH, dd, J=13,l, 6,0 Hz); 6,90 (1H, d, J=9,6 Hz); 3,88 (3H, s); 3,80 (3H, s).

Příklad 30

3-{ 6-(4-HydroxyfenyI)-5íř-pyrrolo[2,3”ó]pyrazin-7-y 1} propionová kyselina

K roztoku 0,77 g dimethyl-3-[6-(4--(l-methyl)ethoxyfenyl)-5/ř“pyrrolo[2,3-ó3pyrazin-7-yl]propion-l,l-dikarboxylátu [Referenční příklad 44(b)] v 45 ml methanolu se přidá 7,7 ml 1N roztoku hydroxidu sodného. Reakční směs se zahřívá 6 hodin na 50 °C, potom se nechá stát přes noc při teplotě místnosti. Rozpouštědlo se odpaří, přidá se 20 ml 6N roztoku kyseliny sírové a reakční směs se zahřívá 12 hodin k varu pod zpětným chladičem. Po ochlazení se roztok zalkalizuje na pH 4 přidáním 4N roztoku hydroxidu sodného a získaná sraženina se odfiltruje a suší ve vakuu za získání 0,42 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky, která se použije bez dalšího čištění. MS: 284 (MFf). HPLC (způsob C): R_T = 2,3 minut.

Příklad 31

Ethyl-3-{6-(4-hydroxyfenyl)-57/-pyrrolo[2,3“ů]pyrazin-7-yl}propionát

Roztok 0,02 g 3-{6-(4-hydroxyfenyl)-57/-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl}propionové kyseliny 50 [Příklad 30] v 2 ml ethanolu se reaguje s katalytickým množstvím p-toluensulfonové kyseliny.

Směs se zahřívá 4 hodiny k varu pod zpětným chladičem, rozpouštědlo se odpaří a sraženina se odfiltruje. Pevná látka se převede do ethylacetátu, organická vrstva se promyje vodou, solankou, suší se nad síranem horečnatým a odpaří se za získání žluté, pevné látky, která se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a získá se sloučenina uvedená v názvu.

MS: 298 (MřT). HPLC (způsob C): R_T = 2,58 minut.

-43CZ 301750 B6

Příklad 32 a Referenční příklad 100

2-(5~Methoxy-l tf-indol-3-yl)-1 />pyrroIo[2,3-á]pyridin-4-karbonitril

Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 12(a), ale za použití 2—jod—l— (toluen-4-sulfonyi)-lZ/-pynOlo[2,3-Z>]pyridin-4-karbonÍtrilu [referenční příklad 62(a)] se připraví sloučenina uvedená v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 303 až 304 °C, TLC Rp-0,07 (ethylacetát/heptan 1:1) a 2-(5-methoxy-l//-Índol-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-4-karbonitril [referenční příklad 100] ve formě hnědého oleje.

i o MS: 443 (MH⁺). TLC: Rp = 0,3 8 (ethylacetát/heptan 1:1),

Příklad 33

6-(4-Methylsulfiny Ifeny l)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin

Míchající se suspenze 0,2362 g 6-(4-methylthiofenyl)-5//-pyrTolo[2,3-ójpyrazinu [Příklad 1 (ah)] v 20 ml díchlormethanu se reaguje s 2,545 g TBA oxonu. Po 2 hodinách se získaný oranžový roztok odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie za eluce směsí methanolu a díchlormethanu (1:1, objemově) a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé, pevné látky. MS: 258 (MH⁺). 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,66 (1H, s); 8,41 (1H, s); 8,24 (3H, m); 7,82 (2H, d, >8,7 Hz); 7,33 (1H, s); 2,81 (3H, s).

Příklad 34

6-(4-Methy 1 su lfony Ifeny l)-5/Z-pyrrolo[2,3-Z>] pyrazin

Míchající se suspenze 0,125 g 6-(4-methylthiofenyl)-5H-pynOlo[2,3-ó]pyrazinu [Příklad 1 (ah)] v 15 ml díchlormethanu se reaguje s 1,35 g TBA oxonu, Po 4 hodinách se reakční směs odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie za eluce směsí methanol u a díchlormethanu (1:1, objemově) a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé, pevné látky. MS: 274 (MH⁺). Ή NMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,78 (1H, s); 8,44 (1H, s); 8,28 (3H, m); 8,04 (2H, d, >8,8 Hz); 7,40 (1H, s); 3,27 (3H, s).

Příklad 35

3-(6-(4-terc-Butylfenyl)-5tf-pyiTolo[2,3-á]pyrazin-7-yl)propylamin

Roztok 0,2 g 3-[6-(4-/ťrc-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-g]pyrazÍn-7-yl]propionamidu [Příklad 24] v 20 ml suchého tetrahydrofuranu se reaguje s 5 ml 1M roztoku tetrahydridohlinotanu lithného v diethyletheru. Roztok se míchá 24 hodin při teplotě místnosti a potom se zpracuje 20 ml vody. Směs se filtruje přes kremelinu a křemelina se promyje dvakrát 20 ml etheru. Spoje45 né filtráty se promyjí vodou, potom solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se za získání 0,12 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky. MS: 309 (MH⁴). HPLC (způsob C): Rj = 2,54 minut.

Příklad 36 (a) N-{3-(6-(4-Zerc-Butylfenyl)-57/-pyiTolo[2,3-Z)]pyrazin-7-yl)propyl}acetamid

Roztok 0,0324 mmol 3-(6-(4-Zerc-butylfenyl)-57/-pyiTolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl)propylaminu 55 [Příklad 35] v 1,5 ml tetrahydrofuranu se reaguje s 0,0324 mmol acetylchloridu a 0,0788 mmol

-44CZ 30Í750 Bó triethylaminu. Roztok se míchá 12 hodin při teplotě místnosti a potom se reaguje s vodou a ethylacetátem. Organická fáze se suší nad síranem hořečnatým a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a potom směsí ethylacetátu a methanolu (9:1, objemově) a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě žluté, pevné látky.

MS: 351 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T = 3,05 minut.

(b) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 36(a) výše, ale za použití cyklopropylkarbonylchloridu, se připraví amid N-{3-(6-{4-terc-butylfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]~ pyrazin-7-yl)propyl}cyklopropylkarboxylové kyseliny ve formě žluté, gumovité, pevné látky.

io MS: 377 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T = 3,25 minut.

(c) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 36(a) výše, ale za použití n-butyroylchloridu, se připraví N-{3-(6-(4-/crc-butylfenyl)-57í-pynOlo[2,3-/]pyrazÍn-7-yl)propyl}butyramid ve formě žluté, gumovité, pevné látky. MS: 379 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T =

3,28 minut.

(d) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 36(a) výše, ale za použití methoxyacetylchloridu, se připraví N-{3-(6-(4-Zerc-butylfenyl)-5/ř-pyrrolo[2,3-&]pyrazin-7-yl)propyl}methoxyacetamid ve formě žluté, pevné látky. MS: 381 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T =

3,15 minut.

(e) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 36(a) výše, ale za použití thien-2ylkarbonylchloridu, se připraví amid N-{3-(6-<+-ř^-butylfenyl)-5/ř-pyiTolo[2,3-á]pyrazín7-yl)propyl}thien-2-yíkarboxylové kyseliny ve formě žluté, pevné látky. MS: 419 (MH⁴).

HPLC (způsob C): R_T = 3,28 minut.

Příklad 37 (a) N-{3-(6-(4-/erc-Butylfenyl)-577-pynOlo[2,3-óJpyrazin-7-yl)propyl}-N -n-propylmočovina

Roztok 0,0324 mmol 3-(6-(4-terc~butylfenyl)-5/f-pynOlo[2,3-Z>]pyrazin-7-yl)propylaminu [Příklad 24] ve 2 ml tetrahydrofuranu se reaguje s 0,0324 mmol η-propylisokyanátu. Roztok se míchá 12 hodin při teplotě místnosti a potom se reaguje se 3 ml vody. Vznikající sraženina se filtruje, potom se promyje vodou a suší se ve vakuu při 50 °C a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě béžové, pevné látky. MS: 394 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T - 3,25 minut.

b) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 37(a) výše, ale za použití ethyl40 isokyanatoacetátu, se připraví N-{3-(6-(4-/erc-butylfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-/?]pyrazin-7-yl)propyl}-N'-karboethoxymethylmoČovina ve formě žluté, pevné látky. MS: 437 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T = 3,18 minut.

Příklad 38

N-{3-(6-(4-/erc-Butylfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-7-yl)propyl}-N',N'-diethylmočovina

Roztok 0,0324 mmol 3-(6-(4-Zerc-butylfenyl)-5/7-pynolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl)propylaminu 50 [Příklad 24] v 1,5 ml tetrahydrofuranu se reaguje s 0,0324 mmol diethylkarbamoylchloridu a 0,0788 mmol triethylaminu. Roztok se míchá 12 hodin při teplotě místnosti a přidá se voda a ethylacetát. Vrstvy se oddělí a organický roztok se suší nad síranem hořečnatým. Sušidlo se odfiltruje a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a potom 10 % methanolu v ethylacetátu a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě žluté, pevné látky. MS: 408 (MH⁴). HPLC (způsob C): R_T = 3,43 minut.

-45CZ 301750 B6

Příklad 39 (a) N~{3-(6-(4_/erc-Butylfenyl)-5//-pyiTolo[2,3-Z?]pyrazin-7-yl)propyl} methansulfonamid

Roztok 0,0324 mmol 3-(6-(4-/crč^,-butylfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-7-yl)propylaminu [Příklad 24] v 1,5 ml tetrahydrofuranu se reaguje s 0,0324 mmol methansulfonylchloridu a 0,0788 mmol triethylaminu. Roztok se míchá 12 hodin při teplotě místnosti a přidá se ethylacetát. Vrstvy se oddělí a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a potom 10% methanolu v ethylacetátu a získá se io sloučenina uvedená v názvu ve formě žluté, pevné látky. MS: 387 (MH*). HPLC (způsob C):

R_T = 3,23 minut.

(b) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 39(a) výše, ale za použití thíen-2ylsulfonylchloridu, se připraví N-{3-(6-(4-terc-Butylfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-g]pyrazin-7-yl)15 propyl}thíen-2-ylsulfonamid ve formě žluté, pevné látky. MS: 455 (MH⁺). HPLC (způsob C): Rt = 3,56 minut.

(c) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 39(a) výše, ale za použití 3,5dimethylisoxazoM-ylsulfonylchloridu, se připraví N-{3-(6-(4-terc-butylfenyl)-5/7-pynolo20 [2,3-ó]pyrazin-7-yl)propyí}dimethylisoxazol-4—ylsulfonamid ve formě gumovité, bílé, pevné látky. MS: 468 (MH⁺). HPLC (způsob C): R_T = 3,55 minut (d) Pomocí podobného postupu, jako je popsáno v příkladu 39(a) výše, ale za použití l-methylirnidazoM-ylsulfonylchloridu, se připraví N-{3-(6-(4-Zerc-butylfenyl)-5//-pyrrolo25 [2,3-6]pyraztn-7-yl)propyl} 1-methyl imidazoM-ylsulfonamid ve formě gumovité, bílé, pevné látky. MS: 453 (MH). HPLC (způsob C): R_T = 3,13 minut.

Referenční příklad 1 (a) 5-Methoxy-l -methyl-1 //-indol-3-karbonitril g 5-Methoxy-l-methyl-177-indol-3-karbaldehydu [referenční příklad 2(a)] a 55,9 g hydrochloridu hydroxy lam i nu se míchá společně s 900 ml dimethylformamidu za varu pod zpětným chladičem 1 hodinu. Směs se nechá ochladnout, potom se nalije do vody a extrahuje se ethylacetátem. Spojené extrakty se promyjí vodou, potom se odpaří za získání 53 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle hnědé pevné látky o teplotě tání 100 až 104 °C. ’H NMR [(CD^SO]: δ 8,17 (1H, s); 7,54 (l H, d, >9,0 Hz); 7,09 (1H, d, >2,4 Hz); 6,97 (1H, dd, >9,0 a 2,4 Hz); 3, 82 a 3, 84 (6H, s).

(b) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu l(a) výše, ale za použití l-methyl-5-fenylpyrazol-3-karbaldehydu [Referenční příklad 53(b)] se připraví l-methyl-3kyano-5-feny Ipyrazo 1.

Referenční příklad 2 (a) 5-Methoxy-1 -methyl-1H-indol-3-karbaldehyd

Roztok 80 g 5-methoxyindol-3-karboxaldehydu v 1 1 dimethylformamidu se v dusíkové atmosféře po částech během 15 minut reaguje s 20,1 g (60% disperze v minerálním oleji) hydridu sodného. Po 30 minutách míchání při teplotě místnosti se směs reaguje po kapkách během 10 minut s 31,3 ml methyljodidu a míchání potom pokračuje další 2 hodiny. Reakční směs se opatrně nalije do vody a potom se extrahuje ethylacetátem. Organická fáze se promyje vodou, potom se suší nad síranem sodným a potom se odpaří. Zbytek se trituruje pentanem a získá se

-46Cž 301750 Bó g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle hnědé pevné látky. Teplota tání 133 až 134 °C;

*H NMR [(CD^SO]: δ 9,86 (1H, s); 8,20 (1H, s); 7,60 (1H, d, J=2,6 Hz); 7,50 (1H, d, J=8,9 Hz);

6,96 (1H, dd, J-8,9 a 2,6 Hz); 3,86 a 3,80 (6H, s).

(b) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použiti

Índol-3-karbonitrilu, se připraví l-methyl-líř-indol-3-karbonitril ve formě bezbarvé krystalické látky, o teplotě tání 61 až 63 °C.

(c) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití io indol-5-karbonitrilu, se připraví l-methyl-l/ř-indol-5-karbonitril ve formě bezbarvé krystalické látky; teplota tání 77 až 79 °C.

(d) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití indol-3-karbonitrilu a (3-brompropoxy)-terc-butyldimethyIsilanu, se připraví 1 -[3-(terč-butyl15 dimethylsilyloxy)propyl]-l/ř-indol-3-karbonitril, ve formě čirého bezbarvého oleje, TLC: R_F = 0,6 (dichlormethan). 'HNMRÍCDCL): 5 7,70 (1H, d, J=8Hz); 7,56 (1H, s); 7,39 (1H, d, J=8 Hz); 7,27 (1H, t, J=8 Hz); 7,22 (1H, t, J=8 Hz); 4,25 (2H, t, J-6 Hz); 3,49 (2H, t, J=6 Hz); 1,95 (2H, kvintet, J=6 Hz); 0,87 (9H, s); 0,00 (6H, s).

(e) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití

5-methoxy-l//-indoí-3-karbonitrilu [Referenční příklad l(a)] a (3-brompropoxy)-fóre-butyldimethylsilanu, se připraví l-[3-(Zerc-butyldimethylsilyloxy)propyl]-5-methoxy-l//-indol-3karbonitril, ve formě čirého bezbarvého oleje, ^lH NMR [(CD₃)₂SO]: δ 8,18 (1H, s); 7,55 (1H, d, J=9 Hz); 7,09 (1H, d, J=2 Hz); 6,95 (1H, dd, J=9 a 2 Hz); 4,27 (2H, t, J=6 Hz); 3,82 (3H, s); 3,53 (2H, t, J=6 Hz); 1,95 (2H, kvintet, >6Hz); 0,87 (9H, s); 0,00 (6H, s).

(f) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití indol-3-karbonitrilu a (2-bromethoxy)-terc-butyldimethylsilanu, se připraví l-[2-{/íTč‘-butyl· dimethylsilyloxy)ethyl]-l//-indol-3-karbonitril, ve formě čirého bezbarvého oleje. TLC: R_F =

0,65 (dichlormethan).

(g) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití 5-methoxy-l//-indol-3-karbonitrílu [Referenční příklad l(a)] a benzylbromidu, se připraví

1- benzyl-5-methoxy-l//-indol-3-karbonitril, ve formě hnědé, pevné látky, MS: 263,22 (MH).

TLC: Rf = 0,8 (dichlormethan/methanol: 19/1).

(h) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití 5-methoxy-l//-indol-3-karbonitrilu [Referenční příklad l(a)] a 2-bromethoxydimethyl-fó/tfbutylsilanu, se připraví l-[2-(terc-butyldimethylsilyloxy)ethyl]-5-methoxy-l//-indol-3-karbo40 nitril, ve formě světle žluté, pevné látky, MS: 331,23 (MH⁺). TLC: R_F - 0,6 (pentan/ethylacetát: 8/2).

(i) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2 (a) výše, ale za použití l//-pyrrol“3-karbonitrilu (připraveného podle postupu popsaného v Tetrahedron Letters, 1972,

52, 5 337-5 340), se připraví 1 -methyl-l//-pyrrol-3-karbonitril, ve formě hnědého oleje, MS:

107 (MH). *H NMR [CDCIJ: δ 7,09 (1H, m); 6,60 (1H, m); 6,40 (1H, m); 3,68 (3H, s).

(j) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2 (a) výše, ale za použití 1//-pyrrol-2-karbonitrilu, se připraví 1 -methyl-1//—pyrrol—2—karbonítril ve formě bezbarvé kapaliny. MS: 106 (MH). *H NMR [CDCIJ: δ 6,80 (1H, m); 6,67 (1H, m); 6,15 (1H, m); 3,79 (3H,s).

(k) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití

2- fenyl-l//-pyrrol-4-karbonitrilu (připraveného podle postupu popsaného v Synthetic Commu-47CZ 301750 B6 nications, 25, (1995) 6, 795-802), se připraví 1-methyl-2-feny 1-1//-pyrroM—karbon itril ve formě krémové pevné látky o teplotě tání 50 až 51 °C. MS: 183 (MET).

(1) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití

4-methoxy-2-(5-methoxy-l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl}-l//-pynOlo[2,3-Z>]pyridinu (Referenční příklad 39) se připraví 4-methoxy-2-(5-methoxy-l-methyl-1//—indol—3—yl)—1 (toluen-4-sulfonyl)-17í-pyrrolo[2,3-ů]pyridin ve formě tmavého oleje, EIPLC (Způsob A): Rt = 9,49 minut. TLC: R_F 0,50 (pentan/ethylacetát: 1/1).

io (m) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 2(a) výše, ale za použití

2-(5-methoxy-l/ř-indol-3-yl)-4-fenyl-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu (Referenční příklad 12(g)) se připraví 2-(5-methoxy-l-methyl-1//—indol—3—yl>-4—fenyl—1— (toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3“ů] pyridin ve formě hnědé, pevné látky. *HNMR [(CD₃)₂SO]; δ 8,39 (1H, d, J=4,4 Hz); 7,71 (2H, d, J=7,2 Hz); 7,63 (3H, m); 7,52 (2H, t,

J=8,5 Hz); 7,44 (3H, m); 7,29 (2H, d, J=7,2 Hz); 6,94 (1H, s); 6,86 (1H, d, J-8,5 Hz); 6,82 (1H,

s); 3,86 (3H, s); 3,71 (3H, s); 2,29 (3H, s).

Referenční příklad 3 (a) 6-{ l-[3-(/erc-Butyldimethylsilyloxy)propyl]-l/í-indol-3-yl}-5tf-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin

Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu l(a) výše, ale za použití l-[3(fórc-butyldimethylsilyloxy)propyl]-l/ř-indol-3-karbonitriIu [Referenční příklad 2(d)], se při25 praví sloučenina uvedená v názvu ve formě pevné látky, ’H NMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,1-12,2 (1H, široký s); 8,27 (1H, d, J=2,7 Hz); 8,14 (1H, s); 8,10, 7,59 (vždy 1H, d, J=7,8 Hz); 8,09 (1H, d, >2,7 Hz); 7,29, 7,23 (vždy 1H, td, >7,1 a 1,1 Hz); 6,96 (1H, s); 4,33 (2H, t, >7,1 Hz); 3,62 (2H, t, >6,0 Hz); 2,03 (2H, kvintet, >6,2 Hz); 0,89 (9H, s); 0,00 (6H, s). MS: 407 (MET).

(b) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu l(a) výše, ale za použití

-[3-(/erc-butyldimethylsilyloxy)propyl]-5-methoxy-l//-indol-3-karbonitrilu [Referenční příklad 2(e)], se připraví 6-{I~[3-(tórc-butyldimethylsilyloxy)propyl]-5-methoxy-lEř-indol-3yl}-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin ve formě pevné látky, TLC: R_F = 0,4 (ethylacetát/pentan: 1/1). δΗ (d⁶ DMSO (dimethylsulfoxid)) 8,27 (1H, d, 4 Hz); 8,08 (2H, m); 7,50 (2H, m); 6,96 (1H, s);

6,91 (1H, dd, 6, 2 Hz); 4,29 (2H, t, 6 Hz); 3,89 (3H, s); 3,61 (2H, t, 6 Hz); 2,00 (2H, m); 0,89 (9H, s); 0,03 (6H, s).

(c) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu l(a) výše, ale za použití l-[2-(fórc-butyldimethylsÍlyloxy)ethyl]-1 //-indol-3-karbonitrilu [Referenční příklad 2(f)], se připraví 6—{1- [3—(Zerc—butyldimethylsilyloxy)ethyl]—1//—indol—3—yl}—5//pynOlo[2,3—&]pyrazin ve formě pevné látky, TLC: R_F - 0,3 (ethylacetát/pentan : 1/1). MS: 393 (MET).

(d) Podobným způsobem, jako je popsáno v referenčním příkladu 1 (a) výše, ale za použití l-[2-(/erc-butyldimethylsilyloxy)ethyl]-5-methoxy-17/-indo 1-3-karbonitrilu [Referenční pří* klad 2(h)], se připraví 6-{ l-[2-(^-butyldimethylsilyloxy)ethyl]-5-methoxy-l//-indol-3yl}-5tf-pyrrolo[2,3-ů]pyrazin ve formě hnědé, pevné látky, TLC: R_F = 0,4 (dichlormethan/methanol: 19/1). MS: 423 (MH⁺).

Referenční příklad 4

3-[3-(5//-Pyrrolo[2,3-á]pyrazin-6-yl)indoI-l-yl]propylbromid

K roztoku 1 g 3-[3-(5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-6-yl)indol-l-yl]propan-l-olu [příklad 2(a)] 55 a 1,59 g tetrachlormethanu v 40 ml dichlormethanu se při teplotě místnosti přidá během 2 minut

-48roztok 1,1 g trifenylfosfinu v 10 ml dichlormethanu. Reakční směs se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti, potom se nechá 18 hodin stát a potom se odpaří za získání sloučeniny uvedené v názvu, která se použije bez dalšího čištění.

CŽ 301750 BÓ

Referenční příklad 5

Indolizin- 1-karbonitril ío Směs 5 g 2-pyridylacetonitrilu a 4,42 g chloracetaldehydu (50% hmotn. roztok ve vodě) se 5,5 hodiny zahřívá k varu pod zpětným chladičem v 25 ml 1,4-dioxanu. Reakční směs se nechá ochladit na teplotu místnosti a potom se odpaří. Zbytek se extrahuje mezi 100 ml ethylacetátu a 100 ml 1M kyseliny chlorovodíkové. Vodná vrstva se extrahuje dvakrát 100 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze se promyjí 50 ml solanky, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpa15 ří se. Zbytek se čistí pomocí kolonové chromatografie na silikagelu za eluce dichlormethanem a získá se 1,83 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 53 až 54 °C. MS: 143 (MH*).

Referenční příklad 6

3-Methy lindolizin-1 -karbonitri 1

Roztok 36 ml propíonaldehydu v 200 ml diethyletheru a 1,7 ml 1,4-dioxanu se během 2 hodin při

5 °C v dusíkové atmosféře po kapkách reaguje s 24,7 ml bromu, přičemž se teplota udržuje na °C. Po dokončení přidávání se reakční směs míchá dalších 30 minut a potom se opatrně promyje 100 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se suší nad síranem sodným a potom se odpaří ve vakuu při 10 °C a potom se okamžitě přidá roztok 8,36 g 2-pyridylacetonitrilu v 50 ml acetonu. Získaná směs se 6 hodin zahřívá v dusíkové atmo30 sféře k varu pod zpětným chladičem, potom se nechá stát při teplotě místnosti přes noc a odpaří se. Zbytek se extrahuje mezi 500 ml ethylacetátu a 100 ml 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové. Organická vrstva se promyje 100 ml solanky a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:4, objemově) a potom se trituruje diethyletherem za získání 4,0 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 98 až 100 °C. MS: 157 (MH*).

Referenční příklad 7 l-Formylpiperidin-2-karboxylát sodný

K roztoku 30 g piperidin-2-karboxylové kyseliny v 230 ml kyseliny mravenčí se přikape 147 ml anhydridu kyseliny octové. Probíhající exotermní reakce se kontroluje chlazením reakční směsi v lázni ze směsi ledu a vody. Po 24 hodinách míchání při teplotě místnosti se reakční směs zředí

20 ml vody a potom se odpaří ve vakuu. Získaný olej se rozpustí ve směsi 50 ml methanolu a 500 ml acetonitrilu. Přidá se 23 ml 10M roztoku hydroxidu sodného a reakční směs se míchá 8 hodin vznikající sraženina se odfiltruje, promyje se acetonitrilem a ethylacetátem a suší se ve vakuové sušárně a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé, pevné látky, která se okamžitě, bez dalšího čištění, použije.

-49CZ 301750 B6

Referenční příklad 8

5,6,7,8-Tetrahydroindolizin-l-karbonitril

K roztoku 2,0 g 1-formy lpiperidin-2-karboxylátu sodného (Referenční příklad 7) v 50 ml dichlormethanu se pří teplotě místnosti v dusíkové atmosféře přidá 2,31 g /Moluensulfonylchloridu. Po 10 minutách míchání se směs po kapkách reaguje s 0,88 ml akrylonitrilu a 1,5 ml triethylaminu a míchání pokračuje další 1 hodinu a přidá se druhá část 1,0 ml triethylaminu. Reakční směs se míchá 18 hodin a dichlormethan se odpaří ve vakuu. Zbytek se převede do io 50 ml vody a extrahuje se 200 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se odpaří ve vakuu a zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:4, objemově) a získá se 1,38 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě oranžového oleje, MS: 147 (MH⁺). IH NMR (CDCI₃): δ 6,48 (IH, d, J=3,1 Hz); 6,36 (IH, d, >3,1 Hz); 3,91 (2H, t, >6,0 Hz); 2,89 (2H, t, >6,0 Hz); 1,98 (2H, m); 1,88 (2H, m).

Referenční příklad 9 (a) l-(Toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin

K roztoku 25 g 7-azaindolu, 44,5 g p-toluensulfonylchloridu a katalytického množství síranu tetrabutylamonného v 300 ml suchého toluenu se přidá 160 g hydroxidu sodného rozpuštěného v 500 ml vody. Dvoufázový roztok se míchá 3 hodiny při teplotě místnosti, potom se extrahuje dvakrát 100 ml toluenu. Spojené extrakty se suší nad síranem hořečnatým a potom se odpaří ve vakuu. Získaná pevná látka se trituruje diethyletherem a potom se suší při 60 °C ve vakuu a získá se 39,74 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 136 až 138 °C.

(b) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 9(a) výše, ale za použití

4-nitro-l//-pyrrolo[2,3-Zř]pyridinu (připraveného podle postupu popsaného v A. Ippolito a kol.,

J. Med. Chem. (1982), 25(10), 1 258-61) se připraví 4-nitro-l-(l-toluen-4-sulfonyl)-l/> pyrrolo[2,3-d]pyrÍdin ve formě oranžové pevné látky o teplotě tání 145 až 146 °C. HPLC (způsob A): R_T = 10,80 minut.

(c) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 9(a) výše, ale za použití

4- chlor-l/f-pynOlo[2,3-fr]pyridinu (Referenční příklad 64) se připraví 4-chlor-l-(toluen-4sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin ve formě bílé, pevné látky. MS: 307 (MH⁺). *HNMR (CDCI₃): δ 8,3 (d, IH), 8,05 (d, 2H), 7,8 (d, IH), 7,3 (d, 2H), 7,2 (d, IH), 6,7 (d, IH), 2,4 (s, 3H).

(d) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 9 (a) výše, ale za použití

5- brom-ltf-pyrrolo[2,3-á]pyridinu se připraví 5-brom-l-(toluen—4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3Ďjpyridin ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 138 až 140 °C.

(e) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 9(a) výše, ale za použití

4-fenyl-1//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazinu (Referenční příklad 42) se připraví 4-fenyl-l-(toluen-^Fsulfonyl)-lH-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin ve formě bílé, pevné látky, která se použije bez dalšího čištění. 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 8,44 (IH, d, >4,5Hz); 8,04 (2H, d, >8,2Hz); 7,98 (IH, d, >4,5Hz); 7,69 (2H, d, >6,8Hz); 7,57 (tt, >6,2, 1,8Hz); 7,51 (IH, tt, >6,8, 1,8Hz); 7,44 (2H, d, >8,2Hz); 7,42 (IH, d, J=4,5Hz); 6,92 (IH, d, J=4,5Hz).

-50CZ 301750 B6

Referenční příklad 10

2-Jod-l-(toluen-4-s^ulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin

Roztok 54,4 g l-{to!uen-4-sulfonyl)-ltf-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [Referenční příklad 9(a)] v 1200 ml suchého tetrahydrofuranu se ochladí na -78 °C a reaguje se 20 minut s 92 ml 2,5M roztoku butyllithia v hexanu. Roztok se udržuje 30 minut při teplotě -78 °C, potom se přidává roztok 101 g jodu v 600 ml tetrahydrofuranu dokud směs nezůstane zbarvená po jodu (asi 300 ml). Směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti a rozpouštědlo se odpaří ve vakuu, io Zbytek se extrahuje mezi 1 000 ml ethylacetátu a 500 ml vody a vodná fáze se extrahuje dvakrát 500 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, suší se nad síranem sodným a odpaří se ve vakuu a získá se žlutá pevná látka, která se trituruje diethyletherem a získá se 79,6 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 105 až 107 °C. MS: 399 (MH⁺),

Referenční příklad 11 (a) terc-Butylester 3-brom-5-methoxyindol-l-karboxyIové kyseliny

Roztok 10 g 5-methoxyindolu v 150 ml suchého dimethylformamidu se při teplotě místnosti po kapkách reaguje s 4 ml bromu, přičemž se zajistí, aby teplota nepřestoupila 30 °C. Směs se okamžitě reaguje s 25 ml triethylaminu a 0,5 g 4-dimethylaminopyridinu a potom se přidá roztok 18 g di-fórc-butyldikarbonátu v 80 ml suchého dimethylformamidu a míchání pokračuje další 4 hodiny. Reakční směs se odpaří a zbytek se extrahuje mezi 250 ml ethylacetátu a 200 ml vody.

Vodná vrstva se extrahuje 100 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze se promyjí 100 ml vody, potom 100 ml solanky, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí pentanu a ethylacetátu (19/1, objemově) a získá se 23,4 g bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 111 až 112 °C.

(b) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 11 (a) výše, ale za použití

5-kyanoindolu, se připraví /erc-butylester 3-brom-5-kyanoindol-l-karboxylové kyseliny ve formě šedé, pevné látky o teplotě tání 172 až 174 °C. MS: 322 (MH*).

(c) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 11 (a) výše, ale za použití

5,6-dimethoxyindolu, se připraví /erc-butylester 3-brom-5,6-dimethoxyindol-l-karboxyIové kyseliny ve formě fialové pevné látky. TLC: R_F = 0,6 (pentan/ethylacetát: 19/1).

(d) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 11 (a) výše, ale za použití 5-benzyloxy-6-methoxyindolu [připraveného podle postupu popsaného v Benigní, J. D. a Min40 nis, R. L., Heterocycles, 387, 2, 1965], se připraví terc-butylester 5-benzyloxy-3-brom-6methoxyindol-l-karboxylové kyseliny ve formě bezbarvé, pevné látky. MS: 433 (MH*). HPLC (způsob A): R_T = 13,99 minut.

(e) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 11 (a) výše, ale za použití

5-aminoindolu a přebytku di-férc-butyldikarbonátu, se připraví zerc-butylester 3-brom-5-íercbutoxykarbonylaminoindol-l-karboxylové kyseliny ve formě oranžového oleje. MS: 412 (MH*). TLC: R_F = 0,8 (pentan/ethylacetát: 9/1).

(f) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 11 (a) výše, ale za použití methylesteru l/ř-indol-6-karboxylové kyseliny [Referenční příklad 31], se připraví \-tercbuťylester 6-methylester 3-bromindol-l,6-dikarboxylové kyseliny ve formě fialové, pevné látky o teplotě tání 117 až 119 °C. MS: 355 (MH*).

-51 CZ 301750 B6

Referenční příklad 12 (a) 2-(5-Methoxy-1 //-indol-3-y 1)-1-(toluen-4-sulfony 1)-1 //-pyrroIo[2,3-Z>]pyridin

Míchající se roztok 50 g Zerc-butylesteru 3-brom-5-methoxyindol-l-karboxylové kyseliny [Referenční příklad 1 l(a)] v 800 ml tetrahydrofuranu se v dusíkové atmosféře reaguje s 49,5 ml tributylborátu, potom se ochladí na -100 °C a reaguje s 94 ml 2,5M roztoku n-butyllíthia v hexanu, přičemž se teplota udržuje pod -90 ^QC, Jakmile se přidávání dokončí, směs se nechá pomalu, během 1 hodiny, ohřát na teplotu místnosti a rozloží se přidáním 10 g ledu. Organické složky se ío odpaří za sníženého tlaku a zbytek se extrahuje mezi 500 ml ethylacetátu a 400 ml vody. Organická vrstva se suší nad síranem hořečnatým a potom se odpaří. Získaná boronová kyselina, která je ve formě 28 g béžové zbarvené pevné látky, se rozpustí v 600 ml dimethylformamidu a roztok se reaguje s 38,3 g 2-jod-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyiTolo[2,3-6]pyridinu [Referenční příklad 10], potom s 200 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a potom s 3 g tetrakis(trifenylfosfin)paIladia[0]. Směs se zahřívá 4 hodiny k varu pod zpětným chladičem, potom se ochladí na teplotu místnosti a odpaří se dimethylformamid. Zbytek se extrahuje mezi 400 ml vody a 500 ml ethylacetátu a vodná fáze se extrahuje dvakrát 300 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze se suší nad síranem sodným a potom se odpaří. Zbývající hnědá gumovitá látka se trituruje ethylacetátem a získá se 27 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle zelené, pevné látky. MS: 418,43 (MH*), (b) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití /črc-butylesteru 3-brom-5-kyanoindol-l-karboxylové kyseliny [Referenční příklad 11 (b)], se připraví 3-[ 1 -(toluen-4-sulfonyl)-1 tf-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-karbonitril ve formě bezbarvé pevné látky u teplotě tání 209 až 214 °C. MS: 413 (MH*).

(c) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití /err-butylesteru 3-brom-5,6-dimethoxytÍndol-l-karboxylové kyseliny [Referenční příklad ll(c)], se připraví 2-(5,6-dimethoxy-líř-indol-3-yl)-l-(toluen-4-suIfonyl)-l//-pyrrolo30 [2,3-ů]pyridin ve formě hnědé, pevné látky, MS: 446 (M-H⁺).

(d) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití /erc-butylesteru 5-benzyíoxy-3-brom-6-methoxyindol-l-karboxylové kyseliny [Referenční příklad 11 (d)], se připraví 2-(5-benzyloxy-ó-methoxy-l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl)35 l//-pyrrolo[2,3-/>|pyridin ve formě bezbarvé, pevné látky. MS: 524 (MH⁴). HPLC (způsob A):

R_T = 10,09 minut.

(e) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití Zerc-butylesteru 3-brom-5-/erc-butoxykarbonylaminoindol-l-karboxylové kyseliny [Referenč40 ní příklad 1 l(e)], se připraví /ere-butylester {3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-lí/-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-yl}karbamové kyseliny ve formě hnědé, pevné látky. MS: 503 (MH’). TLC: R_F = 0,62 (pentan/ethylacetát: 1/1).

(f) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití

1-terc-butylesteru 6-methylesteru 3-brom-indol-l,6-dikarboxylové kyseliny [Referenční příklad ll(f)]» ^se připraví methylester 3-[l-(toluen^í-sulfonyl)-l//-pyrrolo [2,3-ó]pyridin-2-yl]l/ř-indol-6-karboxylove kyseliny ve formě světle žluté, pevné látky o teplotě tání 214 až 216 °C. MS: 446 (MH*).

5tí (g) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití

2-jod-4-fenyl-l-(toIuen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ň]pyridinu [Referenční příklad 62(d)] se připraví 2-(5-methoxy-1 /ř-indol-3-y l)-4-feny 1-1 -(toIuen-4-sulfony 1)-1 //-pyrrolo[2,3-6] pyridin ve formě bílé, pevné látky, HPLC (způsob A): R_T = 11,63 minut. MS: 494 (MH*).

-52CZ 301750 B6 (h) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití

4-chlor-2-jod-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridinu [Referenční příklad 62(b)] se připraví 4-chlor-2-(5-methoxy-l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4—sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin ve formě bílé, pevné látky. MS: 452 (ΜΗ*). 'H NMR (CDC1₃): δ 8,4 (d, 1H), 7,6 (d, 2H), 7,5 (s, 1H), 7,35 (d, 1H), 7,2 (d, 2H), 6,9 (m, 2H), 6,7 (s, 1H), 3,8 (s, 3H), 2,3 (s, 3H).

(i) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití 2-jod-5-fenyl-l-(toluen-4~sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [Referenční příklad 62(c)] se připraví 2-( 5-methoxy-1 íř-indol-3-y 1)-1 -{toIuen-4-siilfony lý-5-feny 1-1 //-pyrrolo[2,3-ů] pyri10 din. MS: 494 (MH*).

(j) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 12(a) výše, ale za použití 4-chlor-2-jod-l-(p-toluensulfonyl)-líř-pyrrolo[2,3-ů]pyridinu [Referenční příklad 62(b)] a 4terc-butylfenylboronové kyseliny, se připraví 4-chlor-2-{4-íerc-butylfenyl)-l-(p-toluen15 sulfonyl)-l/7-pyrrolo[2,3-ó]pyridin ve formě bílé, pevné látky. MS: 439 (MH*). TLC R_F - 0,78 (ethylacetát/heptan, 1:1),

Referenční příklad 13 (a) Ethylester {5-methoxy-3-[ 1 -(toluen—4—sulfonyl)-1 //-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]indol-1 yl} octové kyseliny

Roztok 6,6 g 2-(5-methoxy-l//~indol-3-ylýT-(toIuen--4-sulfonyl}™l//-pyrroIo[2,3-ó]pyndinu 25 [Referenční příklad 12(a)] v 100 ml dimethylformamidu se v dusíkové atmosféře reaguje s 700 mg hydridu sodného (60% disperze v minerálním oleji), Po 30 minutách míchání při teplotě místnosti se směs po kapkách reaguje s 2,0 ml (23,75 mmol) ethylchloracetátu a míchání pokračuje další 4 hodiny. Reakční směs se odpaří a zbytek se extrahuje mezi ethylacetát a vodu.

Organické fáze se promyjí solankou, potom se suší nad síranem sodným a odpaří se za získání 30 5,77 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky. MS: 504 (MH*). HPLC (způsob

A): R_T= 11,88 minut.

(b) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití methyljodidu, se připraví 2-(5-methoxy-l-methyl-líř-indoI-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl)-lH35 pyrrolo[2,3-ů]pyridin, ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 103 až 105 °C. MS: 432 (MH*).

(c) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití

3-[Htoluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3“á]pyridin-2-yl]-l//-indol“5-karbonitrilu [Referenční příklad 12(b)] a methyljodidu, se připraví 1-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo40 [2,3-ů]pyridin-2-yl]-l//-indol-5—karbonitril, ve formě bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 189 až 191 ^ĎC. MS: 427 (MH*).

(d) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití 2-{5,6-dimethoxy-l//-indol-3-yl)-l-(toluen—4-sulfcnyl)-l//-pyrrolo[2,3-á]pyridinu [Refe45 renční příklad 12(c)] a methyljodidu, se připraví 2-(5,6-dimethoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)1- (toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrTolo[2,3-/]pyridin, ve formě hnědé, pevné látky, MS: 462 (MH*).

(e) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití

2- (5-benzyloxy-6-methoxy-1 //-indol-3-yl)-l -(toluen—4-sul fonyl)-1 //-pyrrolo[2,3-/]pyridi50 nu [Referenční příklad 12(d)] a methyljodidu, se připraví 2-{5—benzyloxy-6-methoxy-lmethyl-l//-indol-3-yl)-l-(toÍuen—4-sulfonyI)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin ve formě bezbarvé, pevné látky. MS: 538 (MH*). HPLC (způsob A): R_T = 11,57 minut.

(f) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití 55 férc-butylesteru {3-[l-(toluen—I-sulfonyl)- l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin- 2-yl]-\H- indol-5-yl}-53CZ 301750 B6 karbamové kyseliny [Referenční příklad 12(e)] a methyljodidu, se připraví /erc-butylester {1 -methy l-3-[ 1 Htoluen^ksulfony 1)-1 //-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-1 //—indol—5—y I} karbamové kyseliny ve formě hnědé, pevné látky. MS: 517 (MH¹). TLC: R_F = 0,7 (pentan/ethylacetát: 1/1).

(g) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití methylesteru 3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-17/-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-lH-indol-b-karboxylové kyseliny [Referenční příklad 12(f)] a methyljodidu se připraví methylester 1 -methy 1—3—[ 1(toluen-4-suifonyl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-l//-indol-6-karboxyíové kyseliny ve forio mě hnědé, pevné látky. MS: 460 (MH*). TLC: R_F - 0,6 (pentan/ethylacetát: l/l).

(h) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití 2-(5-methoxy-l //—i ndo I—3—y 1 >— l -(toluen^-sulfony 1)-1 /7-pyrrolo[2,3-6]pyridin^4-karbonítrilu (Referenční příklad 100) se připraví 2-(5-methoxy-l-methyÍ-l//-indol-3-yi)-l-<toluen-415 sulfonyl)-l//“pyrrolo[2,3-6]pyridin-^-karbonitril ve formě žlutého oleje. TLC: R_F = 0,40 (ethylacetát:heptan 1:1). MS: 457 (MH*).

(i) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití

4- chlor-2-(5-methoxy-1 Z/indo l—3—y 1)— 1 -{toluen-4-sulfony 1)-1 H-py rrolo[2,3-6] pyridinu [Referenční příklad 12(h)] a methyljodidu, se připraví 4-chlor-2-(5-methoxy-l-methyl-\Hindol-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl}-l//-pynOlo[2,3-6]pyridin ve formě bělavé pevné látky. MS: 466 (ΜΗ*). Ή NMR (CDCIj): δ 8, 35 (d, 1H); 7,56 (d, 2H), 7,39 (s, 1H); 7,16-7,3 (m, 2H), 7,05 (d, 2H), 6,95-7,0 (m, 2H) 6,6 (s, 1H) 3, 9 (s, 3H) 3,8 (s, 3H) 2,3 (s, 3H).

(j) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 13(a) výše, ale za použití

2-(5-methoxy-l//-indol“3-yl)-5-fenyl-l-(toluen-4-sulfonyl}4#-pyrrolo[2,3-6]pyridinu [Referenční příklad 12(i)] a methyljodidu, se připraví 2-(5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)5- fenyl-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3“6]pyridin ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 181 až 183 °C. MS: 508 (MH*),

Referenční příklad 14 (a) l-Methyl-3-[l-{toluen-4~sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-l//-Índol-5-ol

K roztoku 24,5 g 2-(5-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yí)-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrolo[2,3-ójpyridinu [Referenční příklad 13(b)] v 500 ml dichlormethanu se při 0°C v dusíkové atmosféře přidá 60 ml 1,0M roztoku bromidu boritého v dichlormethanu a směs se míchá 1 hodinu při 0 °C. Reakční směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti a míchání pokračuje

12 hodin. Ke směsi se přidá 250 mí 1M roztoku uhličitanu sodného a intenzivní míchání pokračuje další 3 hodiny. Vysrážená pevná látka se odfiltruje, promyje se 100 ml dichlormethanu a suší se za získání 18,75 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 256 až 257 °C. MS: 418 (MH*).

(b) Podle podobného postupu popsaného v referenčním příkladu 14(a) výše, ale za použití

2-(5-methoxy-l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4~sulfonyl)-l/ř-pynOÍo[2,3-6]pyridinu [Referenční příklad 12(a)], se připraví 3-[l-(toluen^1-sulfonyl)“lZ/-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//-indol5-ol ve formě béžové, pevné látky o teplotě tání 188 až 191 °C. MS: 403 (MH*).

-54CZ 301/50 Βό

Referenční příklad 15 (a) 2-(5-Allyloxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pynOlo[2,3-Zí]pyridin

Roztok 2,1 g 1-methy l-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l/ř-pyiTolo[2,3-á]pyridm-2-yl]-l//-indol5-olu [Referenční příklad 14(a)] v 50 ml suchého dimethylformamidu se při 0°C v dusíkové atmosféře reaguje s 620 mg Zerc-butoxidu draselného. Po 10 minutách míchání se směs reaguje s 480 μΐ allylbromidu a potom se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti. Míchání pokračuje io dalších 6 hodin, potom se reakční směs opatrně nalije do vody a vodná fáze se extrahuje důkladně ethylacetátem. Spojené organické extrakty se dvakrát promyjí 100 ml solanky, potom se suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:1, objemově) a získá se 1,2 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté pěny o teplotě tání 257 až 259 °C.

(b) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 15(a) výše, ale za použití ethyl-2-chloracetátu, se připraví ethylester {l-methyl-3-[l-{toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrroÍo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-yIoxy}octové kyseliny ve formě žluté, pevné látky. TLC: Rp = 0,45 (ethylacetát/pentan : 1/1). MS: 504 (MH⁺).

(c) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 15(a) výše, ale za použití ethyl-2-brompropionátu, se připraví ethylester 3-{l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-yloxy}propionové kyseliny ve formě žluté, pevné látky. TLC: R_F = 0,47 (ethylacetát/pentan : l/l). MS: 519 (MFC).

(d) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 15(a) výše, ale za použití ethy 1-1 -bromcy klobutankarboxylátu, se připraví ethylester 1 - {1 -methy l-3-[ 1 -{toluen-4sulfony 1)-1 /ř-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-1 tf-indol-5-yloxy}cyklobutankarboxylové kyseliny ve formě bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 189 až 190 °C. MS: 544 (MH*).

(e) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 15(a) výše, ale za použití

1-methy 1-3-( 5//-pyrrolo [2,3-/>]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5-olu (příklad 7) a ethylbromcyklobutankarboxylátu, se připraví ethylester {1-[1 -methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-/>lpyrazin-6-y 1)-1//indol-5-yloxy]cyklobutylkarboxylové kyseliny ve formě hnědé, pevné látky. TLC: Rp = 0,23 (dichlormethan/methanol, 19:1). HPLC (způsob A): R_T = 7,71 minut.

Referenční příklad 16

3-{l-Methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-17/-pyrrolo[2_?3-ó]pyridin-2-yl]-177-indol-5-yloxy}propan-l,2-diol

Roztok 45,7 mg 2—(5—allyloxy—1 -methyl-ltf-indol-3-yl)-l-{toluen-4-sulfonyl)-lH-pyrrolo[2,3-ů]pyridinu [Referenční příklad 15(a)] v 10 ml acetonu se reaguje s roztokem 6 ml 4-methyl45 morfolin-N-oxidu v 1 ml vody. Tato směs se potom reaguje s 6 kapkami 2,5% (hmotn.) roztoku oxidu osmičelého v Zerc-butanolu a směs se míchá 12 hodin při teplotě místnosti. Reakční směs se zředí 75 ml vody a důkladně se extrahuje ethylacetátem, Spojené organické extrakty se promyjí dvakrát 75 ml solanky, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a získá se 33 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé, pevné látky. TLC: R_F-0,25 (ethylacetat). MS: 492 (MH*).

-55CZ 301750 B6

Referenční příklad 17

3-{ 1-Methy 1—3—[ 1 -(toluen-4-siilfony 1)-1 />pyrrolo[2,3-ó]pyridÍn-2-y I]-1 H-indol-5-y loxy} propan-l-ol a 3-{ 1 -methyl-3-[l-(toIuen-4-sulfonyl)-1//-pyrrolo [2,3—Z>]pyridin—2—y índol-5-y loxy} propan-2-ol

Roztok 91 mg 2—(5—allyloxy-1 -methy 1-1 /Z—indol—3—yl)—1 H>luen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3—/>]pyridinu [Referenční příklad 15(a)] v 5 ml suchého tetrahydrofuranu se reaguje s 1200 μΐ 1,0M roztoku komplexu boranu-tetrahydrofiiranu v tetrahydrofuranu. Po 7 hodinách míchání při io teplotě místnosti se reakční směs reaguje s 9 kapkami ethanolu, 4 kapkami 5N roztoku hydroxidu draselného a 6 kapkami peroxidu vodíku a míchání pokračuje 12 hodin, během kterých se sráží bílá, pevná látka. Reakční směs se zředí 50 ml vody a pH této směsi se upraví přidáním 1M roztoku hydroxidu draselného na 10 a potom se směs důkladně extrahuje ethylacetátem. Spojené organické extrakty se suší nad síranem sodným a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (2:1, objemově) a získá se 50 mg 3-{ l-methyl-3-[l-(toluen^-sulfonyl)-l// pyrrolo[2,3-/]pyridin-2-yl]-l//indol-5-yloxy}propan-l-olu ve formě bezbarvé, pevné látky [TLC: R_F = 0,15 (ethylacetát). MS: 476 (MH’)] a 8 mg 3-{>methyl-3-[l-{toluen->sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]l//-indol-5-yloxy}propan-2-olu ve formě bezbarvé, pevné látky. [TLC: R_F = 0,3 (ethylacetát);

MS^ÓfMH⁴)].

Referenční příklad 18 (a) l~methyl-3-[ l-{toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-lZ/-indol-5-ylester trifluormethansulfonové kyseliny

Suspenze 398 mg l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-l//indol-5-oIu [Referenční příklad 14(a)] v 10 ml dichlormethanu se v dusíkové atmosféře ochladí na -78 °C a reaguje se s 0,15 ml triethylaminu a potom s 1,7 g N-fenyltrifluormethansulfonimidu. Vznikající směs se nechá pomalu ohřát na teplotu místnosti, míchání pokračuje dalších 12 hodin a potom se přidá 20 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného. Organická fáze se oddělí a vodná fáze se extrahuje dvakrát 20 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se suší nad síranem sodným a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (2:3, objemově) a získá se 380 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé, pevné látky. MS: 492 (MH⁴). HPLC (způsob A): R_T = 2,02 minuty.

(b) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 18(a) výše, ale za použití

1-methyl-3-(5//-pyrrolo[2,3-/]pyrazin-ó-yl)-Í//-indol-5-olu (příklad 7), se připraví 2-(lmethyl-5-trifluormethylsulfonyloxyindol-3-yI)-l//-pyrrolo[2,3-ž]pyrazin ve formě červené, pevné látky. HPLC (způsob A): R_T = 8,12 minut. ^lHNMR [(CD₃)₂SO]: δ 12,30 (1H, s); 8,32 (1H, s); 8,27 (1H, d, >3,5 Hz); 8,23 (1H, s); 7,97 (1H, s); 7,76 (1H, d, >8,6 Hz); 7,08 (1H, s); 3,96 (3H, s).

Referenční příklad 19 (a) Methylester 1 -methy 1—3—[1 -(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3—/?]pyridin—2—y 1]—1//— indol-5-karboxylové kyseliny

Roztok 300 mg 1 -methy »[ I-(toluen-^-sulfonyl)-1 //—pyrrolo[2,3 —ójpyr id i n—2—y 1 j— 1 //— indol-5-ylesteru trifluormethansulfonové kyseliny [Referenční příklad 18(a)] ve směsi 10 ml suchého dimethylformamidu, 6 ml methanolu a 2 ml triethylaminu se reaguje s 24 mg octanu palladnatého a l,3-bis(difenylfosfino)propanem a směs se míchá 30 minut při teplotě místnosti.

-56Cž 3ίϋ75ϋ Bó

Přes septum se do reakční nádoby přivádí stálou rychlostí oxid uhelnatý a směs se zahřívá na 90 °C, dokud podle TLC (ethylacetát/pentan ; 2/3) nevymizí výchozí látka. Směs se potom odpaří ve vakuu a zbytek se extrahuje mezi dichlormethan a vodu. Organická fáze se promyje nasyceným roztokem chloridu lithného, potom se suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (2:3, objemově) a získá se 200 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé, pevné látky. MS: 460 (MH*). HPLC (způsob A): R_T = 10,23 minut.

(b) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 19(a) výše, ale za použití io 2-( 1 -methy l-5-trifluormethylsulfonyloxyindol-3-yl)-l//-pynOlo[2,3-ů]pyrazinu (Referenční příklad 18(b)) se připraví methyl-I-methyl-3-(5/7-pyrrolo[2.3-ó]pyrazin-6-yl)-l//-indol-5karboxylát ve formě hnědé, pevné látky, MS 307 (MFC). HPLC (způsob A): Rt = 6,64 minut.

Referenční příklad 20

2-[l-Methyl-5-(l-trimethylstannanyl-l/f-tetrazol“5-yl)-l//-indol“3”yl]-l-(toluen-^lsulfonyl)-l//-pynOlo[2,3-á]pyridin

Roztok 100 mg l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyridin-2-yl]-l//indol-5-karbonitrilu [Referenční příklad 13(c)] v 10 ml toluenu se reaguje s 56 mg (0,28 mmol) trímethylcínazidu a potom se 14 hodin zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Bílá sraženina se odfiltruje a promyje se 10 ml toluenu a potom se suší za získání 125 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 240 až 243 °C (za rozkladu). MS: 633 (MH*).

Referenční příklad 21

2-[l-Methyl-5-(l-methyl-l/ř-tetrazol-5-yl)-l//-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l/ípyrrolo[2,3-ó]pyridin a 2-[ 1 -methy l-5-(2-methyl-27í-tetrazol-5-y l)-l//-indoI-3-y IJ—1— (toluen-4-sulfony 1)-1 Zf-pyrrolo[2,3-Z?]pyridm

2,5 ml Methyljodidu se při teplotě místnosti přidá k roztoku 620 mg 2-[l-methyl-5-(l-tri35 methylstannanyl>-l/f-tetrazol-5-yl)-l//-indol-3-yt]-l-(toluen-4-sulfonyl>-l//-pynOlo[2,3ůjpyridinu [Referenční příklad 20], Směs se potom nechá míchat 4 hodiny při teplotě místnosti, nalije se do vody a potom se extrahuje ethylacetátem. Spojené organické extrakty se promyjí solankou, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a petroletheru (1:1, objemově) a získá se 191 mg 2-[l-methyl-5-{l-methyl-1 tf-tetrazol-5-yl)-1 tf-indol-3-yl]-l-(toluen-4_ sulfonyl)-lJ/-pyrrolo[2,3-ů]pyridinu ve formě bezbarvé, pevné látky [MS: 506 (MNa⁺). *HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 8,39 (dd, 1H, J=4,8 a 1,6 Hz); 7,97 (m, 1H); 7,96 (d, 1H, J=4,0 Hz); 7,90 (s, 1H); 7,80 (dd, 1H, J=8,7 a 0,6 Hz); 7,70 (dd, 1H, J=8,7 a 1,8 Hz); 7,56 (m, 2H); 7,30 (dd, 1H, J-7,7 a 4,8 Hz); 7,22 (m, 2H); 6,82 (s, 1H); 4,19 (s, 3H); 4,0 (s, 3H); 2,23 (s, 3H)] a 77 mg 2-[l45 methyl-5-{2-methyl-2//-tetrazol-5-yl)-lZř-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonylj-l//-pyrrolo[2,3-Z>]pyridinu ve formě bezbarvé, pevné látky o teplotě tání 215 až 218 °C [MS: 506 (MNa⁺)].

Referenční příklad 22 l-{ l-Methyl-3-[l-(toIuen-4-sulfonyl)-l//-py^olo[2,3-ů]pyridin“-2-yl]-l//-indol-5-yl}ethanon

Ke 110 ml suchého, odplyněného dimethylformamidu se v dusíkové atmosféře při teplotě míst55 nosti postupně přidá 2,2 g 1 -methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-lff-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-57CZ 301750 B6 yl]-\H-indol-5-ylesteru trifluorethansulfonové kyseliny [Referenční příklad 18], 1,15 ml triethylaminu, 2,87 ml w-butylvinyletheru (2,87 ml), 413 mg l,3-bis(difenylfosfmopropanu) a 232 mg octanu palladnatého. Směs se zahřívá 2 hodiny k varu pod zpětným chladičem, potom se ochladí na teplotu místnosti a potom se přidá k 90 ml 1M kyseliny chlorovodíkové. Tato směs se extrahuje 200 ml dichlormethanu. Organický extrakt se promyje nasyceným vodným roztokem hydrogenuhličitanu sodného, potom solankou, suší se nad síranem hořečnatým a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (2:3, objemově) a získá se 1,1 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 177 až 178 °C. MS: 444 (MH⁺).

io

Referenční příklad 23 (a) 2-[5-({S}-(+)-2,2-Dimethyl-[l,3]dioxolan-4-ylmethoxy)- 1-methyl-t//-indo»yl]-l15 (toluen-4-sulfonyf)-l//-pyn^,olo[2,3-á]pyridin

Roztok 1,17 g l-methyl-3-[l-<toluen^sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//-indol5-oIu [Referenční příklad 14(a)] v 50 ml suchého dimethylformamidu se reaguje s 1,1 g uhličitanu česného a 40 mg tetrabutylamoniumhydrogensulfátu. Po 30 minutách míchání při teplotě místnosti se směs reaguje s0,9óg (RH+)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan-4-ylmethyl-ptoluensulfonátu a potom se zahřívá přes noc na 120 °C. Reakční směs se odpaří ve vakuu a zbytek se extrahuje dvakrát mezi 100 ml dichlormethanu a 50 ml vody a vodné vrstvy se extrahují 100 ml dichlormethanu. Spojené organické fáze se dvakrát promyjí 150 ml solanky, potom se suší nad síranem hořečnatým a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (199:1, objemově) za získání 1,04 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutého oleje, MS: 532 (MÍT). 'HNMR [(CD₃>2SO]: δ 1,30 (3H, s); 1,37 (3H, s); 2,29 (3H, s); 3,76 (IH, dd, >8,3 a 6,5 Hz); 3,90 (3H, s); 3,94-3,98 (2H, m); 4,10 (IH, dd, >8,20 a 6,5 Hz); 4,41 (IH, m); 6,74 (IH, s); 6,91 (IH, dd, >8,8 a 2,3 Hz); 6,98 (IH, d, >2,4 Hz); 7,25 (2H, d, >7,9 Hz); 7,29 (IH, a 4,9 Hz); 7,44 (IH, d, >8,8 Hz); 7,56 (IH, d, >8,3 Hz); 7,63 (IH, s); 7,81 (2H, d, >8,0 Hz); 7,92 (IH, dd, >7,7 a 1,6 Hz); 8,33 (IH, dd, >4,9 a 1,7 Hz).

(b) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 23(a) výše, ale za použití (S)-(-)-2,2-dimethyl-l,3-dioxolan->ylmethyl-/?-toluensulfonátu, se připraví 2-[5—<{R}—(-)35 2,2-dimethyl-[ 1,3 ]dioxolan-4-ylnnethoxy)-1-methy 1-1//-i ndol-3-yl]-l-(toliien“4-sulfonyl)l//-pyrrolo[2,3-i]pyridin ve formé žlutého oleje, MS: 532 (MH*). 'HNMR [(CD₃)₂SO]: 8 1,33 (3H, s); 1,37 (3H, s); 2,29 (3H, s); 3,77 (IH, dd, J=8,3 a 6,5 Hz); 3,88 (3H, s); 3,97-3,99 (2H, m); 4,11 (IH, dd, J=8,3 a 6,6 Hz); 4,41 (IH, m); 6,74 (IH, s); 6,94 (IH, dd, J=8,8 a 2,3 Hz); 6,97 (IH, d, J=2,3 Hz); 7,25 (2H, d, J=8,l Hz); 7,29 (IH, dd, J=7,8 a 4,9 Hz); 7,44 (IH, d, J=8,8 Hz);

7,57 (2H, d, J=8,4Hz); 7,63 (IH, s); 7,95 (IH, dd, J=7,81 a 1,7 Hz); 8,33 (IH, dd, J=4,88 a 1,7 Hz).

(c) Podle podobného postupu Jako je popsáno v referenčním příkladu 23(a) výše, ale za použití 2-(5-hydroxy-6-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)“l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyiTolo[2,345 Z»]pyridínu [Referenční příklad 28(a)], se připraví 2-[5-({S}-(+)-2,2-dimethyl-[l ,3]dioxoIan-4ylmethoxy)-ó~methoxy-l-methyl-l//-indol“3--yl]-l-(toluen-4-sulfonyI)-l_Jř/-pyrrolo[2,3-Z>]pyridin ve formě krémové, pevné látky. MS: 548 (MH). HPLC (způsob A): R_T = 11,60 minut.

(d) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 23(a) výše, ale za použití 3-[ l-(toluen-4-sulfonyl)-l //-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l //-indol-5-olu [Referenční příklad 14(b)] a ethyl-l-bromcyklobutankarboxylátu, se připraví ethylester l-{l—(ethylcyklobutankarboxylát)-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ů]pyrÍdin-2-yl]-l//-indol-5-yloxyjcyklobutankarboxylové kyseliny ve formě krémové, pevné látky. MS: 657 (MH⁺). ’H NMR [(CD₃)₃SO]: 8 8,35 (IH, dd, J=4,8 a 1,6 Hz); 7,9 (2H, m); 7,48 (3H, m); 7,28 (IH, dd, J=7,7 a4,8 Hz); 7,24 (2H, d, J=8,4 Hz); 6,71 (IH, dd, J=8,9 a 2,4 Hz); 6,68 (IH, s); 6,64 (IH, d,

-58CZ 30Í75Ó B6 >2,4 Hz); 5,12 (1H, dd, >8,8 a 8,8 Hz); 4,13M,03 (4H, m); 3,66 (1H, dd, >9,4 a 9,4 Hz); 2,64-1,82 (13H, m); 1,15 (3H, t, >7,1 Hz); 0,94 (3H, t, >7,1 Hz).

Referenční příklad 24 (a) (S)-3-{ 1 -Methyl-34 1 -(toluenM-sulfony 1)-1H-pyrrolo[2,3-b]pyridin—2-y 1 ]-1H-indo 1-5y loxy}-propan-1,2-diol i o Roztok 1,04 g 2-[5-( {R}-(-)-2,2-dimethyl-[ 1,3]dioxolan-4-ylmethoxy)-l -methy 1-1 //-indol3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l/>pyrtolo[2,3-6]pyridinu [Referenční příklad 23(b)] v 20 ml methanolu se reaguje s 20 ml 1M roztoku kyseliny chlorovodíkové a potom se zahřívá 3 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se odpaří ve vakuu a zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (2:1, objemově) a získá se

380 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě čirého oleje. TLC: R_F = 0,2 (pentan/ethylacetát: 1/2). MS: 492 (MfT).

(b) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 24(a) výše, ale za použití 2454 {S }4⁺)-2,2-dimethyl41,3 ]dioxolan-4-y lmethoxy)- 1-methyl-1 //—indol—3 —y t ]—1— (toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridinu [Referenční příklad 23(a)], se získá (R)-3-{lmethyl-3-[14^t°í^uen^^sulfbnyl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-yloxy}propan1,2-diol ve formě čirého oleje. MS: 492 (MH). *H NMR [(CDj^SO]: 5 8,33 (1H, dd, 4,9, >1,7 Hz); 7,92 (1H, dd, >7,8 a 1,7 Hz); 7,62 (1H, s); 7,56 (2H, d, >8,8 Hz); 7,45 (1H, d, >8,8 Hz); 7,29 (1H, dd, >7,8 a 4,8 Hz); 7,25 (2H, d, >8,1 Hz); 6,96 (1H, d, >2,3 Hz); 6,92 (1H, dd, >8,8 a 2,3 Hz); 6,75 (1H, s); 4,93 (1H, s); 4,66 (1H, s); 5,13 (1H, d, >5,13 Hz); 3,88 (3H, s); 3,80 (2H, d, >5,9 Hz); 3,46 (2H, s); 2,23 (3H, s).

(c) Podle podobného postupu, jako je popsáno v referenčním příkladu 23(a) výše, ale za použití 2454 {S}4⁺)-2,2-dimethyl41,3]dioxolan-4-ylmethoxy)-6-methoxy-l-methyl“l/>Índol-3³⁰ yl]-14toluen-4-sulfonyl)-l_Jř/-pyrrolo[2,3-6]pyridinu [Referenční příklad 23(c)] se připraví (R>3-{6-methoxy-l-methyl-3-[l4toluenM-sulfonyl)-l/í-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//indol-5-y loxy} propan-1,2-diol ve formě krémové, pevné látky. MS: 522 (MH). HPLC (způsob A): R_T = 8,15 minut.

Referenční příklad 25

2-[542~Methoxy-l-methylethoxy)-l-methyl-l//-indol-3-yl]-14toluen-4-sulfonyl)-l//pyrrolo[2,3-6]pyridin

Roztok 470 mg trifenylfosfinu a 350 μΐ diisopropyldiazodikarboxylátu v 15 ml suchého toluenu se reaguje s 150 mg l-methyl-3-[14toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2-yl]-l//indol-5-olu [Referenční příklad 14 (a)] a potom s 150 μΐ l-methoxy-2-propanolu. Získaná směs se zahřívá 5 hodin k varu pod zpětným chladičem a potom se ochladí a odpaří. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:1, objemově) za získání 50 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě čirého oleje. TLC: RF - 0,65 (pentan/ethylacetát: 1/1). MS: 480 (MH).

-59CZ 301750 B6

Referenční příklad 26

N-Hydroxy- 1-methy l-3-[ l-( toluenů—sulfony!)-17/-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-y 1]-17/indol5 5-karboxamidin

Roztok 2,11 g l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l_Jř/-pyrrolo[2,3-ó]pyrÍdin-2-yl]-l/ř-indol5-karbonitrilu [Referenční příklad 13(c)] v 150 ml ethanolu se při teplotě místnosti reaguje s 1,72 g hydrochloridu hydroxylaminu a 3,43 g uhličitanu draselného. Reakční směs se zahřívá io v dusíkové atmosféře 15 hodin k varu pod zpětným chladičem a potom se filtruje. Filtrát se odpaří za získání 2,8 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě tmavě zelené pevné látky. MS: 460

HPLC (způsob A): R_T = 6,19 minut.

Referenční příklad 27

2-[l-Methyl-5-(5-methyÍ-[l,2,4]oxadiazol-3-yl}-l//-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//pyrrolo[2,3-Z>]pyridin

K suspenzi 0,7 g N-hydroxy-1-methy l-3-[ l-(toÍuen-4-sulfonyl)—1 /ř-pyrrolo[2,3-6]pyridin-2yl]-lH-indol-5-karboxamidinu [Referenční příklad 26] v 30 ml toluenu se při teplotě místnosti v dusíkové atmosféře přidá 0,467 g anhydridu kyseliny octové. Reakční směs se zahřívá 4,5 hodiny k varu pod zpětným chladičem a potom se filtruje. Filtrát se odpaří za získání 0,32 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě tmavě červeného oleje, který se použije okamžitě, bez dalšího čištění v další reakci.

Referenční příklad 28

2-(5-Hydroxy-6-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-l-(toluen-4—sulfonylj-l/ř-pyrrolo[2,3-ójpyridin

Roztok 6,26 g 2-(5-benzyloxy-6-methoxy-l-methyl-l//-indol-3-yl)-l-(toíuen-4-sulfonyl)I//-pyrrolo[2,3-á]pyridinu [Referenční příklad 13(e)] v 500 ml acetonitrilu se reaguje s4,38g jodidu sodného a potom s3,17g trimethylsilylchloridu. Směs se míchá 3 hodiny při 40 °C, potom se reaguje s další částí 4,38 g jodidu sodného a 3,17 ml trimethylsilylchloridu. Po 12 hodinách míchání při 40 °C se reakční směs odpaří. Zbytek se reaguje s 200 ml vody a směs se extrahuje třikrát 200 ml ethylacetátu. Spojené extrakty se suší nad síranem horečnatým a potom se odpaří. Získaná hnědá pěna se trituruje ethylacetátem a diisopropy letherem a získá se 3,04 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle hnědé, pevné látky o teplotě tání 211 až 214 °C. HPLC (způsob A): R_T = 9,30 minut.

Referenční příklad 29

Ethylester l-{6-methoxy-l~tnethyl-3-[l-(toiuen-4-sulfbnyl)-l//-pyrrolo[2,3-Z?]pyridin-2yl]-l//-indol-5-yloxy}cyklobutankarboxylové kyseliny mg hydridu sodného (60% disperze v minerálním oleji) se v dusíkové atmosféře při teplotě 50 místnosti přidá k míchajícímu se roztoku 400 mg 2-(5-hydroxy-6-methoxy-1-methyl-lífindol-3~yI}-l-(toluen-^-sulfonyl)-l/ř-pyrrolo[2,3-Z>]pyridinu [Referenční příklad 28(a)] v 20 ml suchého dimethylformámidu. Směs se nechá míchat 1 hodinu a potom se reaguje s 216 μΐ ethyl- 1-bromcyklobutankarboxylátu a míchání pokračuje přes noc. Přidá se dalších 43 mg hydridu sodného (60% disperze v minerálním oleji) a 216 μΐ ethyl- 1-bromcyklobutankarboxy55 latu a směs se zahřívá 5 hodin na 50 °C. Reakční směs se ochladí a odpaří se a zbytek se extra-60CZ 301750 BÓ huje mezi ethylacetát a vodu. Organická fáze se promyje vodou, potom solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se. Žlutý zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (2:3, objemově) a získá se 266 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě žlutého oleje. MS: 576 (MH*). HPLC (způsob A): Rj = 11,07 minut.

Referenční příklad 30 /erc-Butyl ester [1-methy 1-3-( l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl)-lH-indol-5-yl]karbamové io kyseliny

Roztok 0,3 g íerc-butylesteru {l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-17/-pyrrolo[2,3-6]pyridin2-yl]-l//-indol-5-yl}karbamové kyseliny [Referenční příklad 13(f)] v 15 ml methanolu se reaguje se 2 ml 5N roztoku hydroxidu draselného a potom se směs zahřívá 4 hodiny k varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se odpaří a zbytek se trituruje vodou a získá se 0,2 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě hnědé, pevné látky. MS: 263 (MH*). TLC: R_F = 0,3 (ethylacetát).

Referenční příklad 31

Methylester l//-indol-6-karboxylové kyseliny

Roztok 10 g 17/-indol-6-karboxylové kyseliny v 300 ml methanolu se reaguje s 0,5 ml koncent25 rované kyseliny sírové a potom se zahřívá na parní lázni 10 hodin. Rozpouštědlo se odpaří za sníženého tlaku a zbytek se extrahuje mezi 150 ml nasyceného vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 150 ml dichlormethanu. Vodná vrstva se dále extrahuje dvakrát 150 ml dichlormethanu. Spojené organické extrakty se suší nad síranem sodným a potom se odpaří.

Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu 30 (7:3, objemově) a získá se 7,4 g sloučeniny uvedené v názvu o teplotě tání 79 až 81 °C.

MS: 176 (MH*).

Referenční příklad 32

Dimethyl-(6-fenyl-5//-pynOlo[2,3-ó]pyrazin-7-yImethyl)amin

Roztok 0,5 ml 2M dimethylaminu v tetrahydrofuranu se při 0 °C reaguje s 15 μΐ ledové kyseliny octové a potom s 75 μΐ 40% roztoku formaldehydu. Po 10 minutách míchání při 0 °C se tato směs reaguje s 0,195 g 6-fenyl-5//-pyrrolo[2,3-ů]pyrazinu [Příklad 2(c)] a potom se přidají 3 ml tetrahydrofuranu, aby se zajistilo dokonalé rozpouštění. Reakční směs se nechá ohřát na teplotu místnosti, potom se míchá přes noc, zředí se 5 ml ethylacetátu a extrahuje se třikrát 5 ml 1N kyseliny chlorovodíkové. Spojené kyselé extrakty upraví přidáním 5N roztoku hydroxidu draselného na pH 6 až 7. Vznikající světle žlutá pevná látka se odfiltruje, potom se promyje vodou a suší se za získání 0,16 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě světle žluté pevné látky o teplotě tání 191 až 192 °C.

Referenční příklad 33

Trimethyl-(6-fenyl-5Z/-pynOlo [2,3-i]pyrazin-7-ylmethyl)amoniumjodid

Roztok 5,1 g dimethyl-(6-fenyl-5_Jf/-pyrrolo[2,3“Z>]pyrazin-7-yl-methyl)aminu [Referenční příklad 32] v 100 ml ethylacetátu se při 0 °C reaguje s roztokem 40 ml methyljodidu v 150 ml ethanolu. Získaná směs se míchá 2 hodiny při 0 °C. Vysrážená pevná látka se filtruje, promyje se

-61 CZ 301750 B6 ml ethylacetátu a potom 20 ml diethyletheru a získá se 4,5 g sloučeniny uvedené v názvu o teplotě tání 224 až 225 °C.

Referenční příklad 34 (6-Feny 1-5 tf-pyrro lo[2,3-á] py razí n-7-y I )acetonitri 1

Roztok 0,84 g kyanidu draselného v 20 ml vody se rychle přidá k míchajícímu se roztoku 1,1 g io trimethyl-(6-fenyl-57/-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-ylmethyl)amoniumjodidu [Referenční pří* klad 33] v 20 ml dimethylformamidu a směs se 6 hodin zahřívá na 75 ^ŮC. Ochlazený roztok se zředí 100 ml vody a vysrážená pevná látka se filtruje a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 247 až 248 °C.

Referenční příklad 35 (6-Feny l-5Zř“pyrro lo[2,3-á] pyrazin-7-yl)octová kysel ína

Roztok 70 mg (6-fenyl-5H-pyrrolo[2,3-á]pyrazin-7-yl)acetonitrilu [Referenční příklad 34] v 5 ml 10M roztoku hydroxidu draselného se 1,5 hodiny zahřívá na 100 °C. Reakční směs se nechá vychladnout, potom se zředí 25 ml vody a okyselí se na pH 1 přidáním koncentrované kyseliny chlorovodíkové. Získaná žlutá pevná látka se filtruje, potom se promyje vodou a suší se za získání 40 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 276 až

277 °C.

Referenční příklad 36

1-Methy l-3-[l-(toluen^-sulfonyl)-17/-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-lH-indol-5-karbaldehyd

K roztoku 500 mg l-methyl-3-[l-(toluen^t-sulfonyl)-l//- pynOlo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//indol-5-karbonitrilu [Referenční příklad 13(c)] v 20 ml tetrahydrofuranu se v dusíkové atmosféře při 0°C přidá 12 ml 1M roztoku diisobutylaluminiumhydridu v tetrahydrofuranu. Získaný roztok se potom nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se při této teplotě 2 hodiny. Reakční směs se potom nalije do 20 ml studeného IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové. Po 1 hodině se směs zalkalizuje nasyceným vodným roztokem hydroxidu sodného a extrahuje se 40 ml ethylacetátu. Organická vrstva se oddělí a vodná vrstva se dále extrahuje dvakrát 20 ml ethylacetátu. Organické extrakty se spojí, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu a získá se 221 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 188 až 189 °C. MS: 430 (MH⁺).

Referenční příklad 37

Ethylester 3-{l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-lH-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//-indol5-yl}akrylové kyseliny ml Triethylfosfonoacetátu se při 0 °C přidá k suspenzi 22,4 g hydridu sodného (60% disperze 50 v minerálním oleji) ve 3-dimethoxyethanu. Získaná suspenze se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Přidá se 120 mg l-methyl-3-[I-(toluen-4-sulfonyl>-lř/-pyrrolo[2,3-Zř]pyridin-2-yl]l/f-indol-5-karbaldehydu [Referenční příklad 36] ve 2 ml dimethoxyethanu a míchání pokračuje hodiny. Reakční směs se potom nalije do vody a extrahuje se dvakrát 30 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se promyjí solankou a suší se nad síranem hořečnatým a potom se

-62CZ 301750 Bó odpaří ve vakuu a získá se 126 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 159 až 162 °C. MS: 500 (MH).

Referenční příklad 38 (a) Ethylester 3-{l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//indol-5-yl} propionové kyseliny io 15,7 mg Palladia (10% na aktivním uhlíku) se přidá k suspenzi 100 ml ethylesteru 3-{ 1-methyl3- [14toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3“ó]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-yl}akiylové kyseliny [Referenční příklad 37] v 25 ml průmyslového denaturovaného ethanolu (methanolem). Získaná suspenze se míchá 16 hodin ve vodíkové atmosféře. Reakění směs se potom filtruje přes lůžko z křemeliny a fdtrát se odpaří ve vakuu. Získaná pevná látka se potom trituruje vodou, filtruje se a získá se 92 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 280 až 282 °C. MS: 502 (MH).

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v příkladu 38(a) výše, ale za použití ethyl—3—[2— dimethylamino-5-(5//-pyrrolo[2,3-/)]pyrazin-6-yl)fenyl]prop-2-enonátu (Referenční pfi2ú klad 47), se připraví ethyl-3-[2-dimethylamino-5-(5//-pyrrolo[2,3-Z>]pyrazin-6-yl)fenyl]propionát ve formě oranžové gumy, která se použije přímo, bez dalšího čištění v další reakci. Ή NMR [(CD₃)₂SO]; δ 8,33 (1H, s); 8,17 (1H, s); 7,94 (1H, s); 7,82 (1H, d, >8,4 Hz); 7,20 (1H, d, >8,4 Hz); 7,03 (1H, s); 4,07 (2H, q, >7,6 Hz); 3,38 (2H, t, >7,1 Hz); 3,00 (2H, t, >7,1 Hz); 2,70 (6H, s); 1,19 (3H, t, >7,1 Hz).

Referenční příklad 39

4- Methoxy-2-(5-methoxy-1 /Λ indol-3-yl)-1 -<toluen-4-sulfony 1)-1 //-pyrrolo[2,3-ó]pyridin

Podle podobného postupu, jako je uvedeno v příkladu 18 výše, ale za použití 2-(l-N-/erc-butyloxykarbonyl-5-methoxy-l/ř-indol-3-yl)-4-methoxy-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3ójpyridinu (Referenční příklad 40) se připraví sloučenina uvedená v názvu ve formě hnědé, pevné látky. HPLC (způsob A): R_T = 8,49 minut. MS: 448 (MH).

Referenční příklad 40

2-( l-/erc-Buty loxy karbony l-5-methoxy-l/ř~indol-3-ylp>methoxy-14toluen-4-sulfonyl)40 l/>pyrrolo[2,3-6]pyridin

Míchající se roztok 0,21 ml diísopropylaminu v 5 ml tetrahydrofuranu se při -70 °C, během 5 minut, v dusíkové atmosféře reaguje s 0,6 ml 2,5M roztoku fórc-butyl lithia v hexanu, přičemž se teplota udržuje pod -65 °C. Po 1 hodině se při -30 °C směs přidá k roztoku 280 mg 445 methoxy-l-(l-toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-6]pyridinu (Referenční příklad 41) v 10 ml tetrahydrofuranu, přičemž se teplota udržuje pod -25 °C. Po ohřátí na -15 °C během 1 hodiny se přidá 2,8 ml 0,5M roztoku chloridu zinečnatého v tetrahydrofuranu, přičemž se teplota udržuje pod -10 °C. Po 30 minutách se reakční směs reaguje s 54 mg tetrakis(trifenylfosfín)palladia[0] a 152 mg Zerc-butylesteru 3-brom-5-methoxyindol-l-karboxylové kyseliny (Referenční pří50 klad 1 l(a)) a míchá se 16 hodin při 60 °C, potom se reaguje s 30 ml vody. Směs se extrahuje třikrát 25 ml ethylacetátu. Spojené organické extrakty se dvakrát promyjí 15 ml solanky, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:1, objemově) a získá se 45 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé pěny. TLC R_F = 0,34 (ethylacetát/pentan: 1/1). HPLC (způsob A): R_T”

9,72 minut.

-63CZ 301750 B6

Referenční příklad 41

4-Methoxy-l-( l-toluen-T-sulfonyl)-] 7/pyrrolo[2,3ó] pyridin

Směs 0,77 g 4-nitro-l-(l“toluen-4-sulfonyl)-l/>pyrcolo[2,3-ó]pyridinu [Referenční příklad 9(b)] a 25 ml suchého dimethylformamidu se reaguje s 0,17 g methoxidu sodného a míchá se 16 hodin při 50 °C. Potom se přidá dalších 0,085 g methoxidu sodného a míchání pokračuje 8 hodin a potom se dimethylformamid odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v 100 ml ethylacetátu io a promyje se 60 ml směsi vody a solanky 1/1. Organické extrakty se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce ethylacetátem a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě krémové, pevné látky. HPLC: R_T - 9,73 minut.

'HNMR [(CDj)jSO]: δ 8,22 (IH, d, J=8,2 Hz); 7,96 (2H, d, J=9,4 Hz); 7,71 (IH, d, J=3,5 Hz); 7,39 (2H, d, J=9,4 Hz); 6,89 (IH, d, J=8,2 Hz); 6,72 (IH, d, J=3,5 Hz); 3,93 (3H, s); 2,30 (3H, s).

Referenční příklad 42

4-Fenyl-l />pyrrolo[2,3-&]py r idin

Suspenze 1,0 g l-(2,6-dimethyl-l,4-dihydropyridin-4-on)-l/ř-pyrrolo[2,3-ň]pyridiniumtetrafluorborátu (Referenční příklad 43) v 100 ml tetrahydrofuranu (100 ml) se reaguje s 9,6 ml 1M roztoku fenylmagnesiumbromidu v tetrahydrofuranu a směs se míchá 72 hodin při teplotě místnosti a přidá se 100 ml vody a tetrahydrofuran se odpaří ve vakuu. Zbytek se extrahuje třikrát

1 00 ml chloroformu a spojené extrakty se suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (99:1 objemově) a získá se 83 mg sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky. MS: 195 (MH⁺). 'HNMR[(CD₃)iSO]: δ 8,27 (IH, d, J=4,l Hz); 7,78 (2H, d, J=8,2 Hz); 7,57 (3H,ml; 7,48(IH,t,J=8,2 Hz); 7,19(lH,d, J=3,5 Hz);6,60(lH, s).

Referenční příklad 43

-(2,6-Dimethyl-l ,4-dihydropyridin^>on)-l tf-pyrrolo[2,3-á]pyridiniumtetrafluoroborát

Směs 28,5 g ethyl-0-2,4,6-trimethylsulfonylacetohydroxamátu v 160 ml 70% kyseliny chloristé se míchá 2 hodiny při teplotě místnosti, potom se přidá 30 ml dichlormethanu. Směs se nalije do 1 litru směsi vody a ledu a rychle se extrahuje třikrát 100 ml dichlormethanu. Spojené organické extrakty se dvakrát promyjí 100 ml solanky a suší se nad síranem sodným. Organické extrakty se pomalu přidají k roztoku 11,8 g l// pyrrolo[2,3 d]pyridinu ve 100 ml dichlormethanu. Po filtraci se získá l-amino-l//-pyrroIo[2,3-ájpyridinium-2,4,6-trimethylfenylsulfonát, který se použije přímo v dalším kroku.

Směs 16,6 g l-amino-l//-pyrrolo[2,3-f>]pyridinium-2,4,6-trimethylfenylsulfonátu a 8,8 g 345 acetyl-6-methyl-2//-pyran-2,4(3//)-díonu ve 40 ml koncentrované kyseliny chlorovodíkové se míchá 4 hodiny za varu pod zpětným chladičem, potom se ochladí a odpaří ve vakuu. Zbytek se rozpustí v 30 ml ethanolu a zředí se 30 ml 54% (objemově) roztoku tetrafluoroborité kyseliny v diethyletheru a směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Po filtraci se získá 15,0 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 247 až 248 °C. 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 9,24 (IH, d, >7,5 Hz); 9,13 (IH, d, >7,5 Hz); 8,08 (IH, d, >4,2 Hz); 7,93 (IH, t, >7,5 Hz); 7,22 (IH, d, >4,2 Hz); 6,83 (2H, s); 1,96 (6H, s).

-64CZ 5ϋΙ75ϋ Bó

Referenční příklad 44 (a) Dimethylester 3-[6-(4-Zerc-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]propion-1,1 -di5 karboxylové kyseliny

K roztoku 1,3 g dimethylmalonátu rozpuštěného v 30 ml N-methylpyrrolidinonu se pří 0 °C v dusíkové atmosféře přidá 0,39 g hydridu sodného. Po 10 minutách se přidá roztok 1,12 g [644-terc_butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]methyltrimethylamoniumjodidu [Refeio renční příklad 45(a)], reakční směs se ohřeje na teplotu místnosti a nechá se míchat 3 hodiny.

Reakční směs se nalije do 200 ml vody a třikrát se extrahuje 100 ml ethylacetátu. Spojené organické frakce se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash kolonové chromatografie za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:1, objemově) a získá se 0,5 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky. *H NMR (CDC1₃): δ 9,48 (IH, s); 8,42 (IH, s); 8,16 (IH, s); 7,64 (2H, d, J=9,0 Hz); 7,58 (2H, d, J=9,0 Hz); 4,45 (IH, t, >8,2 Hz); 3,63 (2H, d, >8,2 Hz); 3,58 (6H, s); 1,40 (9H, s).

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 44(a) výše, ale za použití 6444I-methyl)ethoxy)fenyl-5//-pyiTolo [2,3-6]pyrazin-7-yl]methyltrimethylamoniumjodidu Referenční příklad 45(b)], se připraví dimethyl-3-[64441~^methyl)ethoxyfenyl)-5//-pyrrolo2,3-d]pyrazin-7-yl]propion-l,l-dikarboxylát ve formě béžové, pevné látky. MS: 398 (MH*). HNMR [CDCIU]: δ 10,1 (široký s, IH); 8,41 (d, IH, >2,3 Hz); 8,16 (d, IH, >2,3 Hz); 7,6 (d,2H, >8,21 Hz); 7,031 (d, 2H, >8,20 Hz); 4,64 (m, IH); 4,45 (t, IH); 3,78 (d, IH); 3,60 (s, 6H); 1,41 (d, 6H,J=4,41 Hz).

(c) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 44(a) výše, ale za použití [64>fluorfenyl)-5í/-pynOlo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]methyltrirnethylamoniumjodidu [Referenční příklad 45(c)], se připraví dimethyl-3-[644-fluorfenyl)-5#~pyrrolo[2,3-fr|pyrazin-7-yl]propion-l,l-dikarboxylát ve formě bělavé, pevné látky. NMR DMSO 12,2 (s, IH), 8,4 (d, IH), 8,2 (d, IH), 7,8 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 4,4 (t, IH) 3,7 (s, 6H), 3,6 (d, 2H). MS: 357 (MH⁺).

(d) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 44(a) výše, ale za použití [644-methoxyfenyl)-5/ř-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]methyltrimethylamoniumjodÍdu [Referenční příklad 45(d)], se připraví dimethyl-3-[644-methoxyfenyl)-5ř>pyrtolo[2,3-d]pyrazin³⁵ 7-yl]propion-l,l-dikarboxylát ve formě bělavé, pevné látky. MS: 369 (MH*).

Referenční příklad 45 (a) [64>fórc-Butylfenyl-5/ř-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]methyltrimethyÍamoniumjodid

K roztoku 0,8 g [644-fórc-butylfenyl-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]methyldimethylaminu [Referenční příklad 46(a)] v 50 ml tetrahydrofuranu se v dusíkové atmosféře při 40 °C přidá 4,5 ml methyljodidu. Reakční směs se míchá 4 hodiny a rozpouštědlo se odpaří. Zbytek se odpaří s 30 ml toluenu a suší se ve vakuu za získání sloučeniny uvedené v názvu, která se použije okamžitě v další reakci bez dalšího čištění.

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 45(a) výše, ale za použití 64441-methyl)ethoxy)fenyl-5tf-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]methyldimethylaminu [ReferenČ50 ní příklad 46(b)], se připraví [6444>rnethyl)ethoxy)fenyl-5// pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-'yl]methyltrimethylamoniumjodid ve formě béžové, pevné látky, která se použije okamžitě v další reakci bez dalšího čištění.

(c) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 45(a) výše, ale za použití [644-fluorfenyl-5//-pyrroIo[2,3-ó]pyrazin-7-yl]methyldimethylaminu [Referenční pří-65CZ 301750 B6 klad 46(c)], se připraví 6-(4-fluorfenyl)-5//-pyrrolo(2,3-6]pyrazin-7-yl]methyltrimethylamoniumjodid ve formě žluté, pevné látky. *HNMR [(CD^SO]: δ 13,0 (s, 1H), 8,5 (d, 1H), 8,4 (d, ÍH), 7,7 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 3,1 (d, 2H), 2,9 (s, 9H). MS: 285 (MH*).

(d) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 45(a) výše, ale za použití [6-(4-methoxyfenyl-577-pyiTolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]methyldimethylaminu [Referenční příklad 46(d)], se připraví 6-(4—meíhoxyfenyl)-57/-pyrTolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]methyltrimethylamoniumjodid ve formě bělavé, pevné látky. MS: 297 (MH*).

Referenční příklad 46 (a) [6-(4—fórc-ButyIfeny 1-577-pyrrolo [2,3-6] pyrazin-7-yl]methyldimethylamin

K 15 ml 2M roztoku dimethylaminu v tetrahydrofuranu a 0,45 ml kyseliny octové se při 0 °C přidá 2,25 ml 40% vodného roztoku kyseliny octové. Reakční směs se míchá 10 minut. Přidá se roztok 6,9 g 6-(4-/erc-butyIfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazinu [Příklad l(w)] v 400 ml tetrahydrofuranu a reakční směs se nechá míchat přes noc při teplotě místnosti. Reakční směs se promyje 1N roztokem hydroxidu sodného, solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí tetrahydrofuranu a methanolu (1:1, objemově) a získá se 0,8 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky. MS: 309 (MH*), HPLC (způsob A): R_T = 1,93 minut.

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 46(a) výše, ale za použití

6-[4-(l-methyl)ethoxy feny l]-5//-pyrrolo[2,3-6] pyrazinu [příklad l(aa)], se připraví 6-(4-(1methyl)ethoxy)fényl-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin-7-yl}methyldimethylamin ve formě béžové, pevné látky.

(c) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 46(a) výše, ale za použití

6~(4-fluorfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazinu [příklad l(ae)], se připraví [6-(4-fluorfenyl-5//pyrrolo [2,3-6] pyrazin-7-yI]methyldimethy lamin ve formě bělavé, pevné látky. *HNMR E(CD₃)₂SO]: δ 12,0 (s, 1H), 8,5 (d, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,7 (d, 2H), 7,6 (d, 2H), 3,9 (d, 2H), 2,9 (s, 6H), MS: 270 (MH*).

(d) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 44(a) výše, ale za použití

6-(4-methoxyfenyl)-5/fpyrrolo[2,3-6]pyrazinu [příklad l(af)], se připraví [6-(4-methoxyfenyl-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazin-7-yl]methyldimethylamin ve formě bělavé, pevné látky. MS: 282 (MH⁺).

Referenční příklad 47

Ethyl-3-[2-dimethylamino-5-(57í-pyn^,olo[2,3-6]pyrazin-6-yl)fenyl]prop-2-enonát

K roztoku 0,1 g 6-(4-amino-3-brom)fenyl-5//-pyrrolo[2,3-6]pyrazinu [Referenční příklad 48] v 10 ml dimethylformamidu se ve Schlenkově baňce přidá 0,25 ml ethylakrylátu, 0,05 g octanu palladnatého, 0,07 g tri(2-methyIfenyl)fosfinu a 0,8 g tributylaminu. Baňka se uzavře a zahřívá se 24 hodin na 95 °C a potom se nechá 24 hodin stát při teplotě místnosti. Reakční směs se rozloží přidáním 150 ml vody a extrahuje se 100 ml ethylacetátu, promyje se solankou, suší se nad síranem hořečnatým. Po odpaření ve vakuu se získaná oranžová guma trituruje toluenem a získá se 0,04 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě oranžové, pevné látky. TLC: R_F ⁼ 0,46 (ethylacetát). 'HNMR [(CDjhSO]: δ 12,40 (1H, s); 8,38 (1H, s); 8,34 (1H, s); 8,02 (1H, d, >8,6 Hz); 7,89 (IH, d, >16,5 Hz); 7,22 (1H, d, >8,6 Hz); 7,19 (1H, s); 6,81 (1H, d, >16,5 Hz); 4,23 (2H, q, >7,1 Hz); 2,78 (6H, s); 1,30 (3H, t, >7, 1 Hz).

-66CZ 3ÚÍ750 B6

Referenční příklad 48

643-Brom-4-dimethyIamino)fenyl-5/ř-pyrrolo[2,3-Z»]pyrazin

K míchajícímu se roztoku 2,19 g 4-(dimethylamino)benzonitrilu v 15 ml chloroformu se během 45 minut prikape 1,2 ml pyridinu a roztok 0,75 ml bromu v 15 ml chloroformu. Po ukončení přidávání se směs míchá dalších 30 minut. Reakční směs se zředí dichlormethanem a promyje se vodou, solankou a odpaří se za získání 3-brom-4-dimethylaminobenzonitrilu ve formě žlutého ío oleje, který se rozpustí v 25 ml tetrahydrofuranu. Mezitím se míchající se roztok 2,7 ml diisopropylaminu v 50 ml tetrahydrofuranu reaguje 30 minut, při -15 °C v dusíkové atmosféře se

7,70 ml 2,5M roztoku n-butyllíthia v hexanu, přičemž se teplota udržuje pod -10 °C. Po 30 minutách se směs 15 minut reaguje s 1,21 g methylpyrazinu a potom se míchá 1 hodinu. Během 1 hodiny se při teplotě nižší než -10 °C přidá roztok 3-brom-4-(dimethylamino)benzo15 nitrilu. Reakční směs se nechá 2 hodiny ohřívat na teplotu místnosti, potom se nechá stát přes noc, reaguje se S 10 ml vody. Tetrahydrofuran se odpaří ve vakuu a získaná směs se reaguje se směsí vody a ethylacetátu (1/1, objemově) a směs se míchá 15 minut Získaná sraženina se odfiltruje a důkladně se promyje směsí vody a ethylacetátu 1/1 (objemově) a získá se 1,0 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky. TLC: R_F - 0,41 (ethylacetát).

Referenční příklad 49

6-(3-/erc-ButyldimethyIsilyloxy-4-methoxy)fenyl-5//-pyrrolo[2,3-/)]pyrazin

Míchající se roztok 3,6 ml diisopropylaminu v 133 ml tetrahydrofuranu se při -15 °C, v dusíkové atmosféře reaguje s 11,21 ml 2,5M roztoku n-butyllíthia v hexanu, přičemž se teplota udržuje pod -10 °C. Po 30 minutách míchání se směs reaguje 15 minut s 2,04 g methylpyrazinu a potom se 1 hodinu reaguje s roztokem 5,7 g 3~/erc-butyldimethylsilyloxy-4-methoxybenzonitrilu (Referenční příklad 50) v 20 ml tetrahydrofuranu, přičemž se teplota udržuje pod -10 °C. Reakční směs se nechá 2 hodiny ohřívat na teplotu místnosti, potom se nechá stát přes noc a reaguje se s 10 ml vody. Tetrahydrofuran se odpaří ve vakuu a získaná směs se extrahuje mezi ethylacetát a vodu. Dvě vrstvy se oddělí a vodná vrstva se extrahuje ethylacetátem. Spojené organické vrstvy se suší nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silika35 gelu za eluce směsí dichlormethanu a methanolu (32:1, objemově) a získá se 1,62 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě hnědé, pevné látky, která se použije přímo v dalším kroku. 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ8,12 (1H, s); 7,96 (1H, s); 7,44 (1H, d, J-8,2Hz); 7,33 (1H, s); 6,93 (1H, d, J=8,2 Hz); 6,84 (1H, s); 3,63 (3H, s); 0,82 (9H, $); 0,01 (6H, s).

Referenční příklad 50

3-/erc-Butyldimethylsilyloxy-4-methoxybenzonitril

Roztok 10,0 g iso-vanillinu ve 100 ml dimethylformamidu se reaguje s9,14g hydrochloridu hydroxylaminu a zahřívá se 1 hodinu k varu pod zpětným chladičem. Dimethylformamid se odpaří za sníženého tlaku a extrahuje se mezi ethylacetát a vodu. Vodné frakce se extrahují ethylacetátem a spojené organické frakce se suší nad síranem sodným a odpaří se ve vakuu a získá se hnědá pevná látka, která se rozpustí v 200 ml tetrahydrofuranu. Po reakci s 2,8 g hydridu sodného se reakční směs míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Přidá se roztok 10,9g terč-butyldimethylsilylchloridu v 50 ml tetrahydrofuranu a směs se míchá v dusíkové atmosféře přes noc. Směs se extrahuje mezi vodu a diethylether. Organické extrakty se suší nad síranem sodným, odpaří se ve vakuu a čistí se pomocí flash kolonové chromatografie na silikagelu za eluce směsí pentanu a dichlormethanu (1:3, objemově) za získání 14,7 g sloučeniny uvedené v názvu ve for-67CZ 301750 B6 mě bezbarvého oleje, který se použije okamžitě při další reakci. 'HNMR [(CD₃)₂SO]: 5 7,30 (1H, d, J=8,0 Hz); 7,11 (1H, s); 7,01 (1H, s); 3,70 (3H, s); 0,81 (9H, s); 0,01 (6H, s).

Referenční příklad 51

4-( 1 -Methy l)ethoxybenzonitril

Roztok 1 g 4-kyanobenzenu v 10 ml hexamethylentetraminu se míchá při teplotě místnosti do io rozpuštění. Během 30 minut se při teplotě místnosti přidá 2,7 ml 25% vodného roztoku hydroxidu sodného. Přikape se 5,71 g 1-methy lethyljodidu a získaný roztok se míchá 5 hodin při teplotě místnosti a potom se nalije do 30 ml vody. Směs se extrahuje třikrát 30 ml ethylacetátu a spojené organické extrakty se promyjí vodou, potom solankou, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a heptanu (1:1, objemově) a získá se 1,2 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky. MS: 162 (MH‘). 'HNMR(CD₃)₂SO: δ 7,58 (d, 2H, J=8,I2 Hz); 6,84 (d, 2H, J=8,12 Hz); 4,62(m, 1H); l,38(d,6H, J=5,4 Hz).

Referenční příklad 52 /7-5-Kyano-1 -methy l-2-(tnethy lthio)imidazol

Roztok 0,76 g 1/7-1-methyl-2-(methylthio)imidazol-5-karboxaldehydu [Referenční prí25 klad 53(a)] v 15 ml dimethylformamidu se reaguje s 0,68 g hydrochloridu hydroxylaminu. Směs se zahřívá 4 hodiny k varu pod zpětným chladičem a nalije se do vody. Přidá se ethylacetát a organická vrstva se promyje vodou, solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se za získání 0,47 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě béžové, pevné látky, která se použije bez dalšího čištění. Teplota tání 115 °C. MS: 154 (MH⁺).

Referenční příklad 53 (a) 1 /7-1 -Methyl-2-(methylthÍo)imidazol-5-karboxaldehyd

Míchající se roztok 8,1 g 177-l-rnethyl-2-(methylthÍo)ÍmÍdazoI-5-ylmethanoÍu [Referenční příklad 54] a 28,97 g oxidu manganičitého ve 160 ml dichlormethanu se 7 hodin zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se ochladí na teplotu místnosti a filtruje se přes křemelinu. Dichlormethan se odpaří a získá se 6,61 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky, která se použije okamžitě při další reakci.

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 53(a) výše, ale za použití l-methyl-5-fenylpyrazol-3-ylmethanolu [Referenční příklad 66], se připraví 1-methy 1-5-fenylpyrazol-3-karbaldehyd, teplota tání 106 až 108 °C.

Referenční příklad 54 l Η-1 -Methy l-2-(methylthio)imidazol-5-y lmethanol 50

K míchající se suspenzi 5g l/7-l-methyl-2-(merkapto)imidazol-5-ylmethanolu [Referenční příklad 55] v 500 ml methanolu se při teplotě místnosti přikape 36 ml 1N roztoku hydroxidu sodného. Suspenze se míchá 10 minut při teplotě místnosti. Přikape se methyljodid a míchání pokračuje 12 hodin. Odpaří se methanol a zbytek se rozpustí v dichlormethanu a přidá se voda.

Organická vrstva se promyje vodou, solankou, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se.

-68CZ 30Í750 Bó

Zbytek se krystalizuje z etheru a získá se 4,3 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 51 °C.

Referenční příklad 55 l/ř-l-Methyl-2-(nierkapto)ímidazol-5-ylmethanol

Směs 12,8 g dimeru dihydroxyacetonu, 20,7 g thiokyanátu draselného a 12,4 g methylaminu se io přidá k roztoku 16 ml kyseliny octové a 100 ml butanolu. Získaná bílá směs se míchá 70 hodin, potom se suspenduje v 50 ml vody a filtruje se. Pevná látka se promyje 60 ml vody, potom 60 ml diethyletheru a suší se ve vakuu a získá se 16 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 204 °C.

Referenční příklad 56 (a) 3-Kyano-1 -methy 1-1 tf-indazol

0,37 g Hydridu sodného (60% disperze v minerálním oleji) se v dusíkové atmosféře, při teplotě místnosti přidá k roztoku 1,20 g 3-kyano-l//-indazolu (Referenční příklad 57) v 30 ml dimethylformamidu. Směs se nechá míchat 1 hodinu a potom se reaguje s 0,85 ml methyljodidu a míchání pokračuje 1 hodinu. Reakční směs se potom nalije do 15 ml ledové vody. Vysrážená pevná látka se filtruje, potom se promyje vodou a suší se za získání 0,80 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě béžové, pevné látky o teplotě tání 73 °C. 'H NMR [(CD₃)₂SO]: δ 7,91 (m, 2H); 7,60 (t, 1H); 7,42 (t,lH); 4,21 (s, 3H).

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 56(a) výše, ale za použití 3-kyano-4-fenyl-l//-pyrrolu [Referenční příklad 58], se připraví 3-kyano-l-methy M-fenyl30 1//-pyrrol.

Referenční příklad 57 35 3-Kyano-1 //-indazol

Roztok 0,5 g o-aminobenzylkyanidu v 9,6 ml IN vodného roztoku kyseliny chlorovodíkové, se reaguje s 3,85 ml IN roztoku dusitanu sodného. Po 15 minutách míchání při teplotě místnosti se reakční směs filtruje. Pevná látka se rekrystalízuje z ethanolu a získá se 0,4 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě žluté, pevné látky o teplotě tání 138 až 140 ^PC. *HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 7,89 (d, 1H, J=7,7Hz); 7,76 (d, 1H, J=7,9Hz); 7,48 (t, 1H); 7,41 (t, 1H).

Referenční příklad 58

3-Kyano-4-feny 1-1 //-pyrrol

Roztok 16,53 g cinnamonitrilu a 25 g (p-toluensulfonyl)methylisokyanidu ve 450 ml směsi etheru a dimethylsulfoxidu (450 ml, 2:1) se přikape k míchající se suspenzi 6,14 g hydridu sodné50 ho (60% disperze v minerálním oleji) v 50 ml etheru. Probíhá exotermní reakce. Reakční směs se míchá při teplotě místnosti 2 hodiny, potom se přidá 500 ml vody a směs se extrahuje třikrát 250 ml etheru. Spojené extrakty se promyjí solankou, potom se suší nad síranem hořeČnatým a potom se odpaří. Zbytek se čistí pomocí filtrační chromatografie na lůžku ze silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1 1, 1:4, objemově) a potom směsí ethylacetátu a pentanu (2 1, 2:3, objemově). Frakce obsahující požadovanou látku se odpaří a zbytek se za míchání suspenduje '69' v 500 ml pentanu a filtruje se za získání sloučeniny uvedené v názvu ve formě pevné látky o teplotě tání 120 až 122 °C. MS: 167 (MH ).

Referenční příklad 59 4—Pyraziny 1-1 -buten

Roztok diisopropylamidu lithného [připravený při -35 °C ze 100 ml 2,5M butyllithia v hexanu ío a 25,3 g diispropylaminu] se při -20 °C reaguje s roztokem 23,5 g 2-methylpyrazinu v 300 ml suchého tetrahydrofuranu. Směs se míchá 1 hodinu při -20 °C, potom se ochladí na -78 °C a reaguje se s roztokem 30,8 g allylbromidu v 300 ml suchého tetrahydrofuranu. Směs se nechá ohřát na teplotu místnosti a míchá se při této teplotě 2 hodiny, potom se nechá přes noc a reaguje se s 50 ml nasyceného vodného roztoku chloridu amonného a potom s 200 ml vody. Směs se potom dvakrát extrahuje 200 ml etheru. Spojené extrakty se suší nad síranem hořečnatým a potom se odpaří. Zbytek se destiluje za získání 22 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bezbarvého oleje o teplotě varu 70 ^ůC/0,13 kPa.

Referenční příklad 60

2- [5-(pyridin-4-yl)-l-methyl-l//-indol-3-yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyiTolo[2,3-6]pyridin

Směs 1,7 g 2-[5-(l-benzyloxykarbonyl-l,2,5,6-tetrahydropyridin-4-yl)-l-methyl-lH-indol3- yl]-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu (Referenční příklad 61), 53 ml ethanolu a 0,35 g palladia na uhlí se míchá 4 hodiny v přítomnosti vodíku a potom se nechá stát přes noc při teplotě místnosti. Po dalším dni se přidá 0,18 g 10% palladia na uhlí a míchání v přítomnosti vodíku pokračuje dalších 8 hodin. Po 4 dnech stání při teplotě místnosti se směs filtruje přes

Hyflo a filtrační lůžko se promyje ethanolem. Spojené filtráty se reagují s 0,35 g palladia na uhlí a směs se míchá v přítomnosti vodíku. Směs se filtruje přes Hyflo a filtrační lůžko se promyje ethanolem. Spojené filtráty se odpaří a zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (4:1, objemově) a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě světle hnědé, pevné látky o teplotě tání 82 až 85 °C.

Referenční příklad 61

2-[541-benzyloxykarbonyl-l,2,5,6-tetrahydropyridin-4-yl)-l-methyl-l//-indol-3-yl]-l40 (toluen-4—sulfonyl)-l//-pynOlo[2,3-ó]pyridin

Směs 2 g benzyl-l-[3,6-dihydro-4-{4,4,5,5-tetramethyl-l,3,2-dioxaborolan-2-yl](2//)pyndinkarboxylátu (připraveného podle postupu popsaného v P. Eastwood, Tetrahedron Letters, 2000, 41, strany 3705-3 708), 0,25 g dichloro-[l,r~bis(difenylfosfino)fenOcen]palladnatého komple45 xu a 2,42 g uhličitanu draselného se v dusíkové atmosféře reaguje s roztokem 1,6 g l-methyl-3[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//pyrrolo[2₇3-/)lpyndin-2-yl]-l//-indol-5-ylesteru trifluormethansulfonové kyseliny [Referenční příklad 18(a)] v 76 ml dimethylformamidu. Směs se zahřívá 4 hodiny na 80 °C (podle TLC je stále přítomna výchozí látka), potom se reaguje s dalšími 0,15 g l-methyl-3-[l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-l//-indol-5-ylesteru tri50 fluormethansulfonové kyseliny, potom se 4 hodiny zahřívá k varu pod zpětným chladičem a nechá se přes noc při teplotě místnosti. Přidá se dalších 0,15 g l-methyl-3-[l-(toluen-4-suIfonyl)l//-pyiTolo[2,3-ó]pyridin-2-yl]-17/-Índol-5-ylesteru trifluormethansulfonové kyseliny [Referenční příklad 18(a)] a směs se zahřívá další 4 hodiny pod zpětným chladičem a odpaří se. Zbytek se extrahuje mezí ethylacetát a vodu a vodná vrstva se extrahuje třikrát 50 ml ethylacetátu. Spoje55 né organické fáze se promyjí solankou, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se.

-70cz 301750 Bó

Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a pentanu (1:1, objemové) a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě světle hnědé, viskózní kapaliny, která se dále použije bez čištění.

Referenční příklad 62 (a) 2-Jod-1 -(toluen-4-sulfonyl)-1 íf-pyrrolo[2,3-i]pyridin-4-karbonitril io Míchající se roztok 0,38 ml diisopropylaminu v 7 ml tetrahydroťuranu se při -70 °C, v dusíkové atmosféře reaguje 5 minut s 1,6 ml 2,5M roztoku n-butyllithia v hexanu, přičemž se teplota udržuje pod -65 °C. Po 20 minutách míchání se směs při -70 °C přidá k roztoku 0,65 g 1(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyiTolo[2,3-ó]pyridin-4“karbonitrilu (Referenční příklad 63) v 15 ml tetrahydrofuranu a směs se míchá 45 minut při -70 °C. Při -70 °C se potom přidá roztok 0,9 g jodu v 10 ml tetrahydrofuranu, Reakění směs se nechá 1 hodinu ohřívat na teplotu místnosti a míchá se 18 hodin, potom se reaguje s 10 ml vody. Reakění směs se odpaří ve vakuu a zbytek se extrahuje mezi 75 ml ethylacetátu a 50 ml vody. Nerozpustná látka se filtruje, promyje se etherem a suší se ve vakuu a získá se 0,45 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky. Filtrát se oddělí a organická fáze se postupně promyje dvakrát 30 ml nasyceného vodného rozto20 ku thiosíranu sodného, 30 ml vody a 30 ml solanky, suší se nad síranem sodným a odpaří se. Zbytek se trituruje diethyletherem a získá se 0,25 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě krémové, pevné látky. TLC R_F = 0,43 (ethylacetát/heptan 1:1). MS: 424 (MH⁺).

(b) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 62(a) výše, ale za použití

4-chlor-l-(toluen-4-sulfonyl}'l/f-pyrrolo[2,3-ů]pyridinu [Referenční příklad 9(c)], se připraví

4- chlor-2-jod-l-(toluen-4-sulfonyl)-l//-pyTTolo[2,3-á]pyridin ve formě bělavé pěny. MS: 432 (MH*). ‘HNMR(CDC1₃): δ 8,25 (d, 1H), 8,05 (d, 2H), 7,3 (d, 2H), 7,15 (d, 1H), 7,1 (s, 1H), 2,4 (s, 3H).

(c) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 62(a) výše, ale za použití

5- feny 1-1-( toluenů-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3~Zj]pyridinu [Referenční příklad 67], se připraví 2-jod-5-fenyl-l-(toluen-4-sulfonyÍ)Hl//~pynOlo[2,3-ó]pyridin ve formě světle hnědé, pevné látky.

(d) Podle podobného postupu, jako je uvedeno v referenčním příkladu 62(a) výše, ale za použití

4—fenyl-l-(toluen-4-suífonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridinu [Referenční příklad 9(e)], se připraví 2-jod-4~fenyl-l-(toluen-4-sulfonyl)-l/ř-pyrrolo[2,3-Z>]pyridin ve formě bílé, pevné látky, která se použije bez dalšího čištění, ^lH NMR [(CD₃)₂SO]; δ 8,43 (1H, d, >4,5Hz); 8,04 (2H, d, >8,2 Hz); 7,98 (1H, d, >4,5 Hz); 7,69 (2H, dd, >7,2, 1,9Hz); 7,56 (2H, tt, >7,2, 1,9Hz); 7,44 (2H, d, >8,2 Hz); 7,42 (1H, d, J=5,0 Hz), 6,92 (1H, d, >4,0 Hz).

Referenční příklad 63 l-{ToIuen-4-sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-ó]pyridin-4-karbonitril

Směs 5,0 g l-(2,6-dimethyl-l,4-dihydropyridin-4-on)-l//-pyrrolo[2,3-Z>]pyridiniumtetrafluorborátu (Referenční příklad 43) a 80 ml vody se reaguje s25ml nasyceného vodného roztoku kyanidu draselného a míchá se 48 hodin při teplotě místnosti. Přidá se roztok 2,9 g toluen-450 sulfonylchloridu ve 100 ml toluenu, roztok 4,0 g hydroxidu sodného v 10 ml vody a 0,05 g tetrabutylamoniumhydrogensulfátu a směs se míchá 72 hodin při teplotě místnosti. Směs se filtruje přes křemelinu a extrahuje se. Vodná fáze se třikrát extrahuje 50 ml ethylacetátu a spojené organické extrakty se promyjí 50 ml vody, 50 ml solanky, suší se nad síranem hořečnatým a odpaří se ve vakuu. Zbytek se čistí pomocí flash chromatografie na silikagelu za eluce směsí ethylacetátu a heptanu (3/7, objemově) a získá se 1,1 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné

-71 CZ 301750 B6 látky, TLC: R_F-0,60 (ethylacetát/heptan 3:7); 'HNMR [(CD₃)₂SO]: δ 8,54 (1H, d, >4,7 Hz); 8,08 (2H, d, >8,2 Hz); 7,95 (1H, d, >3,6 Hz); 7,44 (1H, d, >4,3 Hz); 7,31 (2H, d, >8,2 Hz); 6,82 (1H, d, >3,3 Hz); 2,39 (3H, s); a 0,13 g l//-pyiTolo[2,3-ó]pyrídÍn-4-karbonitrilu ve formě bíle, pevné látky, TLC R_F = 0,24 (ethylacetát/heptan 3:7); 'H NMR [(CD₃)₂SOj: δ 10,19 (1H, s);

8,44 (1H, d, >4,6 Hz); 7,59 (1H, m); 7,40 (1H, d, >4,6 Hz), 6,78 (1H, m).

Referenční příklad 64 to 4-Chlor-l//-pyrrolo[2,3-ó] pyridin

10,0 g I//-Pyrrolo[2,3-ó]pyridin-N-oxidu (Referenční příklad 65) v 75 ml trichlorid-oxidu fosforečného se 8 hodin zahřívá k varu pod zpětným chladičem. Přebytek trichlorid-oxidu fosforečného se odpaří a zbytek se převede do vody a roztok se zalkalizuje na pH 8 až 9 a vznikající sraženina se filtruje a suší se na vzduchu a získá se 10,2 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě bělavé, pevné látky. MS: 152 (ΜΗ). 'H NMR (CDClj): δ 8,2 (d, 1H), 7,5 (d, 1H), 7,2 (d, 2H), 6,6 (d, 2H).

Referenční příklad 65 //-Pyrrolo[2,3-ó]pyridin-7-oxid

Roztok 224,3 g 3-chlorperbenzoové kyseliny v 1 500 ml dichlormethanu se ochladí na 0 °C. 25 K tomuto roztoku se během 30 minut přikape 59,1 g lfl-pyrrolo[2,3-£]pyridinu. Reakění směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti. Roztok se odpaří, zředí se 1 500 ml methanolu a reaguje se s 300 ml 10% uhličitanu draselného ve vodě. Suspenze se filtruje a filtrát se odpaří do sucha.

Zbytek se čistí pomocí chromatografie na neutrální alumině za eluce směsí 10% methanolu v dichlormethanu a získá se 47,0 g sloučeniny uvedené v názvu ve formě hnědé, pevné látky.

MS: 135 (ΜΗ). Ή NMR (CDClj): δ 13,1 (s, 1H), 8,2 (d, 1H), 7,65 (d, IH), 7,4 (d, 1H), 7,0 (m, 1H), 6,55 (d, 1H).

Referenční příklad 66 l-Methyl-5-fenylpyrazol-3-ylmethanol

Míchající se suspenze 1,28 g tetrahydridoboritanu sodného v 80 ml suchého tetrahydrofuranu se reaguje s 1,88 g chloridu vápenatého. Směs se míchá 1 hodinu a potom se reaguje s roztokem

5,2 g l-methyI-5-fenylpyrazol-3-ylkarboxyIátu (připraveného podle postupu popsaného v Martins a kol., J Heterocycl. Chem. (1999), 36(1), 217 až 220) v 40 ml suchého tetrahydrofuranu. Po 3 dnech míchání při teplotě místnosti a 8 hodinách varu pod zpětným chladičem se směs reaguje s 50 ml IN roztoku hydroxidu sodného. Tato směs se míchá 1 hodinu při teplotě místnosti, potom se odpaří a odstraní se tak organická rozpouštědla a potom se třikrát extrahuje 140 ml dichlormethanu. Spojené extrakty se promyjí vodou, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se za získání sloučeniny uvedené v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 95 až 99 °C.

Referenční příklad 67

5-fenyl-l-(toIuen-4_sulfonyl)-l//-pyrrolo[2,3-^]pyridin

Směs 1,74 g fenylboronové kyseliny, 5g 5 bromo-l-(toluen^>sulfonyl)-l//-pynOlo[2,3 ó]55 pyridinu [referenční příklad 9(d)], 0,49 g tetrakÍs(trifenylfosfin)palladía[0] a 133 ml nasyceného

-72CZ JU173U ου vodného roztoku hydrogenuhličitanu sodného a 266 ml dimethylformamidu se v dusíkové atmosféře zahřívá přes noc k varu pod zpětným chladičem. Reakční směs se filtruje přes Hyflo a odpaří se. Zbytek se extrahuje mezi 50 ml ethylacetátu a 25 ml vody a potom se vodná vrstva extrahuje 25 ml ethylacetátu. Spojené organické fáze, se promyjí 25 ml vody, potom 20 ml solanky, potom se suší nad síranem hořečnatým a odpaří se. Zbytek se čistí pomocí chromatografie na silikagelu za eluce směsí pentanu a etheru (1:1, objemově) a získá se sloučenina uvedená v názvu ve formě bílé, pevné látky o teplotě tání 151 až 152 °C. MS: 335 (MH*).

Postupy in vitro testů

A. In vitro testovací postupy na Syk

1. InhibiČní účinky sloučenin vzhledem k Syk kináze

InhibiČní účinky sloučeniny vzhledem k Syk kináze se určí za použití časově rozlišeného fluorescenčního testu.

Katalytická doména Syk kinázy (zbytky A340-N635) se exprimuje jako fúzní protein v buňkách kvasinek a purifikuje se do homogenní fáze. Aktivita kinázy se určí v 50mM Tris-HCl pufru o pH 7,0 obsahujícím 50mM NaCl, 5mM MgCl₂, 5mM MnCl₂, ΙμΜ adenosintrifosfátu a 10μΜ syntetického peptidu Biotin-(p-alanin)3-DEEDYEIPP-NH₂. Enzymatické reakce se ukončí přidáním pufru obsahujícího 0,4MKF, 133mM EDTA (kyselina ethylendiamintetraoctová) pH 7,0, obsahujícího konjugát streptavidin-XL665 a monoklonální fosfospecifickou protilátku konjugovanou k europiumkryptátu (Eu-K). Vlastnosti dvou fluoroforů, XL-665 a Eu-K, jsou uvedeny v G. Mathis a kol,, Anticancer Research, 1997,17, strany 3 011-3 014. Specifický dlouhodobý signál XL-665, produkovaný pouze pokud je syntetický’ protein fosforylován Syk, se měří na analytickém zařízení Packard Discovery Microplate. Inhibice aktivity Syk sloučeninami podle předkládaného vynálezu se vyjádří jako procentuální inhibice kontrolní aktivity dosažené v nepřítomnosti testovaných sloučenin. Konkrétní sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhi30 bují aktivitu Syk při IC_5O v rozmezí 100 μΜ až 10 nM. Výhodné sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují aktivitu Syk při lesa v rozmezí 100 až 10 nM.

2. Antigenem vyvolaná degranulace buněk bosofílní leukémie u krys (RBL) měřená prostřednictvím uvolňování [³H] 5-hydroxytryptaminu (serotoninu)

2.1 Kultivace buněk, značení buněk RBL-2H3 a test vlastností

Na každou 24jamkovou kultivační destičku, která se má použít, se promyje 6xl0^óbuněk RBL-2H3 a resuspendují se v 15 ml DMEM-10 obsahujícím 25μ1 lmCi/ml [³H]-serotoninu (konečná koncentrace 0,5 pCi/ml) a lpg/ml (15 ml) anti-DNP IgE. Do každé jamky 24jamkové mikrotitrační destičky se přidá 0,5 ml buněčné suspenze. Buňky se inkubují 2 dny při 37 °C, dokud se nedosáhne konfluence. Médium se v každé jamce opatrně promíchá a buňky se potom promyjí testovým pufrem. Potom se ve trojím opakování do jamky přidá konečný objem 200 ml testového pufru (+ nebo testované sloučeniny ve vhodné koncentraci). Do každé jamky (kromě kontrolních jamek, tj. jamek pro měření spontánního uvolnění [³H]-serotoninu v nepřítomnosti receptoru zesítění) se potom přidá 100 ng/ml DNP (antigen). Buňky se potom inkubují 30 minut při 37 °C a reakce se ukončí převedením 100 μΐ supematantu z každého vzorku do kapalinové scintilační mikrotitrační destičky umístěné na ledu. Potom se do každé jamky mikrotitrační destičky přidá 200 μΐ činidla scintillanMO a destička se odečítá na zařízení Topcount Liquid

Scintiílation Counter.

-73CZ 301750 B6

2.2 Výpočet výsledků (i) Pro každou skupinu jamek v trojím opakování se vypočte průměr ± směrodatná odchylka průměru.

(ii) Maximální odezvu měly jamky s pozitivní kontrolou obsahující antigen (10 ng/ml), ale neobsahující sloučeninu.

(iii) Minimální odezvu měly kontrolní jamky neobsahující ani antigen, ani sloučeninu, io (iv) Za použití těchto hodnot jako maximálních (100%) a minimálních (0%) hodnot se údaje normalizovaly za získání procentuální maximální odezvy.

(v) Vynesla se křivka odezvy na dávku a vypočítaly se hodnoty IC₅o pro příslušné sloučeniny.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují aktigenem vyvolanou degranulaci buněk bosofilní leukémie u krys (RBL) při EC₅o v rozmezí 100 až 0,01 μΜ.

B. In vitro postup testu na KDR

1. InhibiČní účinky sloučenin na KDR ínhibiční účinky sloučenina na KDR-substrátový fosforylační test se určily za použití testu „flashplate“ (96jamková mikrotitrační destička, New England Nuclear).

Cytoplazmatická doména humánního enzymu se klonovala jako fúze s glutathion-S-transferázou (GST) do pFastBac-GST značeného (Čtecí rámec) B baculovirového expresního vektoru. Protein se exprimovaí v buňkách SF21 a purifikoval se do 60% homogenity.

Aktivita kinázy se určila v 20mM sodné soli 4-morfolinpropansulfonové kyseliny, 1 OmM mgCl₂, lOmM MnCl₂, lmM Dithiothreitolu, 2,5mM ethylenglycol-bis(beta-aminoethylether)-N,N'tetraoctové kyselině, lOmM β-glycerolfosfátu, pH 7,2 obsahujícím lOmM MgCl₂, 100μΜ Na^VO4, lmM NaF. 10 μΐ sloučeniny se při 4 °C přidá k 70μ1 kinázového pufru obsahujícího 100 ng enzymu receptoru kinázové domény (KDR). Reakce se zahájí přidáním 20 μΐ roztoku obsahujícího 2 μg substrátu (SH2-SH3 fragment PLCy exprimovaný jako GST ťuzní protein), 2 pCi γ³³Ρ[ΑΤΡ] a 2μΜ studeného ATP. Po 1 hodině inkubace při 37 °C se reakce ukončí přidáním 1 objemu (100 μΐ) 200mM EDTA. Testový pufr se potom vylije a jamky se promyjí třikrát 300 μΐ solného roztoku pufrovaného fosfátem (PBS). U každé jamky se měří radioaktivita za použití zařízení Packard Model Top Count NXT.

Signál pozadí se odvodí ze čtyřnásobného měření radioaktivity v jamkách obsahujících radioaktivní ATP a substrát samotný v kinázovém pufru.

Kontrolní aktivita se odvodí měření radioaktivity v jamkách obsahujících úplný testový kokteil (γ³³Ρ-[ΑΤΡ], KDR a substrát) v nepřítomnosti testované sloučeniny.

Inhibice aktivity KDR sloučeninou podle předkládaného vynálezu se vyjádří jako procentuální inhibice aktivity vykazované v nepřítomnosti testované sloučeniny.

Do každé destičky se ve Čtyřnásobném provedení přidá SU5614 1 μΜ (Calbiochem) jako kontrola inhibice.

Hodnoty IC₅o se pro sloučeniny podle předkládaného vynálezu vypočtou vynesením křivky odezvy na dávku. Hodnoty IC₅₀ odpovídají koncentraci sloučeniny podle předkládaného vynále55 zu, která vyvolá 50% inhibici aktivity kinázy.

-74CZ 301750 Bó

Konkrétní sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují aktivitu KDR pri IC₅₀ v rozmezí 100 až 0,3 μΜ.

2. Buněčná aktivita na buňkách endotelu

2.1 Inhibice proliferace humánních dermálních mikrovaskulámích buněk endotelu (HDMEC) závislé na vaskulámím endotelovém růstovém faktoru (VEGF) ío Anti-KDR aktivita molekul podle předkládaného vynálezu se hodnotí pomocí absorpce [¹⁴C]thymidinu do HDMEC (humánních dermálních mikrovaskulámích buněk endotelu) jako odezva na VEGF.

HDMEC (PromoceU, pasáž 5 až 7) se ve dni 1 naočkují do 100 μΐ pri 5,000 buněk na jamku v 96jamkových destičkách Cytostar (Amersham) předem potažených vazebným faktorem („Attachment factor“, AF, Cascad Biologics) při 37 °C, v 5% CO₂. Ve dni 2 se úplné kultivační médium (bazální médium doplněné 5% fetálním bovinním šerem (FCS) a kokteilem růstových faktorů) nahradí minimálním médiem (bazální médium doplněné 5% FCS) a buňky se inkubují dalších 24 hodin. Ve dni 3 se médium nahradí 200 μΐ čerstvého minimálního média doplněného nebo nedoplněného 100 ng/ml VEGF (R&D System) a obsahujícího nebo neobsahujícího sloučeninu podle předkládaného vynálezu a 0,1 pCi [^l4C]-thymidinu. Buňky se 4 dny inkubují při 37 °C v 5% CO2. Absorpce [¹⁴C]-thymídinu se potom kvantifikuje pomocí odečtení radioaktivity. Testy se provádějí v trojnásobném provedení. Konečná koncentrace DMSO pri testu je 0,1%. Procentuální inhibice se vypočte jako [cpm{+VEGF) - cpm (+vEGF + cpd)/cpm<₊vEGF)25 Cpni(BM5%FCS)]X 100,

2.2 Vliv molekul na HDMEC růst nezávislý na VEGF:

HDMEC (5,000 buněk na jamku) se ve dni 1 naočkuje do úplného média (CM) v 96jamkových destičkách Cytostar (Amersham) předem potažených vazebným faktorem (AF, Cascad Biologics) při 37 °C, v 5% CO₂. Úplné médium se potom odstraní a buňky se inkubují v 200 μΐ úplného média obsahujícího molekuly podle předkládaného vynálezu a [¹⁴C]-thymidin (0,1 pCi). Absorpce [^l4C]-thymidinu se kvantifikuje za použití zařízení Wallac betaplate po 3 dnech inkubace. Procentuální inhibice se vypočte podle následujícího vzorce: [cpm₍cM)-cpm (CM + cpd)/ cpn^cM)] xlOO.

C. In vitro test na Aurora2

1. InhibiČní účinky sloučenin na kinázu Aurora2

InhibiČní účinky sloučenin na kinázu Aurora2 se určí za použití nikl-cheiátového radioaktivitního „flashplate“ testu.

N-koncově His-znaČená rekombínantní Aurora2 o plné délce se exprimuje v E. coli a purifikuje se téměř do homogenity.

N-koncově His-značený NuMA (jaderný protein, který se asociuje s mitotickým aparátem) Ckoncový fragment (Q1687-H2101) se exprimuje n E. coli, purifikuje se pomocí nikl-chelátové chromatografie a použije se jako substrát pri testu kinázy Aurora2. Pro určení aktivity kinázy se

NuMA substrát čerstvě ekvilibruje v kinázovém pufru (50mM Tris-HCl, pH 7,5, 50mM NaCI, lOmM MgCl₂) doplněném 10 % (objemově) glycerolu a 0,05% (hmotn./obj.) NP40 pomocí chromatografie na koloně Pharmacia PD10.

Aktivita kinázy Aurora2 se měří na nikl-chelátové destičce „flashplate“ (New England Nuclear, model SMP107), Každá jamka obsahuje 100 μΐ následujícího roztoku: 0,02μΜ Aurora2; 0,5μΜ

-75CZ 301750 B6

NuMA substrátu; ΙμΜ ATP doplněného 0,5 μΟ[γ-^ηΡ]-ΑΤΡ. Roztoky se ínkubují 30 minut pří 37 °C. Testový pufr se potom vylije a jamky se promyjí dvakrát 300 μΐ kinázového pufru. Radioaktivita se měří v každé jamce za použití zařízení Packard Model Top Count NXT.

Signál pozadí se odvodí z měření radioaktivity v dvojnásobném provedení v jamkách obsahujících radioaktivní ATP samotný v kinázovém pufru zpracovaném stejným způsobem, jako jiné vzorky. Kontrolní aktivita se odvodí z měření radioaktivity v dvojnásobném provedení v jamkách obsahujících úplný testovaný koktejl (ATP, Aurora2 a NuMA substrát) v nepřítomnosti testované sloučeniny.

Inhibice aktivity Aurora2 sloučeninou podle předkládaného vynálezu se vyjádří jako procentuální inhibice kontrolní aktivity vykazované v nepřítomnosti testované sloučeniny, Do každé destičky se jako kontrola inhibice přidá staurosporin.

Hodnoty IC₅o se pro sloučeniny podle předkládaného vynálezu vypočtou vynesením křivky odezvy na dávku. Hodnoty lC₅o odpovídají koncentraci sloučeniny podle předkládaného vynálezu, která vyvolá 50% inhibici aktivity kinázy.

Konkrétní sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují aktivitu Aurora2 při IC₅o v rozmezí

100 až 0,3 μΜ.

C. In vitro postup testu na FAK

1. Inhibiční účinky sloučenin na FAK

Inhibiční účinky sloučenin na FAK kinázu - autofosforylaČní test - se určí za použití časově rozlišeného fluorescenčního testu.

cDNA o plné délce humánního enzymu se klonovala do pFastBac HTc bakulovirového expresního vektoru. Protein se exprimoval a čistil do přibližně 70% homogenity.

Aktivita kinázy se určila v 50mM Hepes pH7,2 obsahujícím lOmM MgCl₂, 100μΜ Na3VO4, 15μΜ adenos i ntri fosfátu. Enzymová reakce se ukončí přidáním pufru Hepes pH 7,0, obsahujícího 0,4MKF, 133mM EDTA, BSA 0,1% obsahujícího protilátku anti-6His značenou XL665 (FAK je His-značený) a monoklonální tyrosinovou fosfospecifickou protilátku konjugovanou k europiumkryptátu (Eu-K). Vlastnosti obou fluoroforů, XL-665 a Eu-K, jsou uvedeny v G. Mathis a kol., Anticancer Research, 1997, 17, strany 3 011-3 014, Specifický dlouhodobý signál XL-665, produkovaný pouze pokud je enzym FAK atofosforylován, se měří na zařízení Packard Discovery Microplate analyzer. Inhibice aktivity FAK sloučeninami podle předkláda40 ného vynálezu se vyjádří jako procentuální inhibice kontrolní aktivity vykazované v nepřítomnosti testované sloučeniny.

2. Proliferace/životaschopnost buněk humánního melanomu SK-Mel-28 měřená pomocí absorpce [^I4C]thymidÍnu

2.1 Kultivace buněk, značení SK-Mel-28 a provedení testu

SK-Mel-28 se ve dni 1 naočkují při 5,000 buňkách na jamku do 96jamkových destiček Cytostar (Amersham) při 37 °C, 5% CO₂. Ve dni 2 se médium nahradí čerstvým Eaglovým minimálním základním médiem (MEM) doplněným 10% FCS, 1 % neesenciálních aminokyselin, 1 % pyruvátu sodného a obsahujícím 0,1 pCi [’⁴C]-thymidinu plus vzrůstající koncentrace sloučenin v 200 μΐ konečného objemu. Buňky se inkubují při 37 °C, 5% CO₂ 48 hodin. Absorpce [^I4C]thymidinu se kvantifikuje odečtením radioaktivity 48 hodin po začátku zpracování. Testy se provádějí v jamkách v trojnásobném opakování.

-76CZ 301750 Bó

2.2 Výpočet výsledků (i) U každé sady tří jamek se vypočte průměr ± směrodatná odchylka.

(ii) Maximální odezvu měly pozitivní kontrolní jamky obsahující buňky, ale neobsahující žádnou testovanou sloučeninu.

(iii) Minimální odezvu měly kontrolní jamky neobsahující žádné buňky a žádnou sloučeninu, io (iv) Za použití těchto hodnot jako maximálních (100%) a minimální (0%) hodnoty se údaje normalizují a získá se procentuální hodnota maximální odezvy.

(v) Vynese se křivka odezvy na dávku a vypočtou se hodnoty IC_S0 (koncentrace léčiva, která vyvolá 50% vzrůst absorpce [¹⁴C]-thymidinu) pro sloučeniny.

3. Migrace buněk humánního melanomu SK-Mel-28 na fibronektinové matrici

3.1 Kultivace buněk a provedení testu

SK-Mel-28 (250,000 buněk) se předem ošetří vzrůstajícími koncentracemi sloučenin po dobu 15 minut při 37 °C, 5% CO₂. Potom se umístí v přítomnosti sloučeniny na homí stranu 12gm 12-multijamkové Boydenovy komůrky pro chemotaxi (Becton Dickinson) a nechají se 24 hodin při 37 °C, 5% CO₂, migrovat do dolní komůrky obsahující fibronektin (10 pg/ml) jako chemo25 atraktant v bazálním RPMI kultivačním médiu. Buňky se potom fixují a barví v Diff-Quick (Diff-Quick Fix, roztoky I a II, Dade Behring) a buňky z homí strany komůrky se odstraní. Barva se solubilizuje z dolní strany adherentních buněk a migrace buněk se kvantifikuje pomocí měření optické hustoty. Test se provádí v jamkách v dvojnásobném opakování.

3.2 Výpočet výsledků (i) U každé sady dvou jamek se vypočte průměr ± směrodatná odchylka.

(ii) Maximální odezvu měly pozitivní kontrolní jamky obsahující buňky, ale neobsahující žád35 nou testovanou sloučeninu a umožňovaly migraci na fibronektínu.

(iii) Minimální odezvu měly kontrolní jamky obsahující buňky, ale žádnou sloučeninu a umožňovaly migraci na bazálním kultivačním médiu w/o chemoatraktantu.

(iv) Za použití těchto hodnot jako maximální (100 %) a minimální (0 %) hodnoty se údaje normalizují a získá se procentuální hodnota maximální odezvy.

(v) Vynese se křivka odezvy na dávku a vypočtou se hodnoty IC_So (koncentrace léčiva, která vyvolá 50% snížení migrace buněk) pro sloučeniny.

Konkrétní sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují aktivitu FAK při IC₅o v rozmezí 100 až 0,3 μΜ.

Postupy in vivo testů

1. Inhibice zánětu dýchacích cest vyvolaného antigenem - studie při jednorázovém a vícenásobném denním perorálním podávání

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu se testují na krysách kmene Brown Norway. Modely použité při těchto in vivo studiích napodobují odpovídající patologické charakteristiky

-77CZ 301750 B6 alergického onemocnění dýchacích cest. Tyto studie prokázaly, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují akumulaci zánětlivých buněk v dýchacích cestách alergiků dvacet čtyři hodin po inhalaci antigenu. Výsledky zjištěné na konci studie prokázaly výskyt zánětlivých leukocytů v tekutině z bronchoalveoiámího výplachu (BALF), plicní tekutině a v tkáni, což se analyzovalo pomocí histopatologické analýzy.

Postup senzitizace a antigenní stimulace

Krysy Brown Norway se senzitizují ve dnech 0, 12 a 21 ovalbuminem (100 pg, i.p.) podávaným io s hydroxidem hlinitým (100 mg, i.p.). Ve dni 30 se krysy exponují 1% aerosolu ovalbuminu po dobu 30 minut. Zvířata se potom vrátí do klecí.

Postup dávkování

Testované léčivo se podává perorálně 1 hodinu před zahájením stimulace inhalací alergenu. Čtyři hodiny po ukončení stimulace inhalací antigenu se perorálně podá druhá dávka léčiva. Dávky sloučeniny se podávají rozděleně v množství 3 až 100 mg/kg.

V oddělených studiích se léčivo podává dvakrát denně 4 dny před inhalací antigenu. Poslední dávka sloučeniny při těchto studiích se také podá 4 hodiny po stimulaci antigenem.

Postup získání tekutiny z bronchoalveoiámího výplachu (BAL)

Dvacet čtyři hodin po stimulaci inhalací antigenu se buňky získají zlumenu dýchacích cest pomocí bronchoalveoiámího výplachu usmrcených zvířat a plíce se promyjí třikrát 5ml alikvoty RPMI/FCS. Promývací kapalina se nechá v plicích 30 sekund a potom se opatrně odstraní. Tři vzorky se slijí a v BAL vzorcích se změří celkové a diferenciální počty bílých krvinek. Pro zjištění celkového množství buněk se použije systém ARGOS a pro zjištění diferenciálního počtu buněk se použije světetná mikroskopie cytocentrifugovaných preparátů barvených podle Wright30 Giemsa.

Postup histopatologické analýzy plic

Okamžitě po BAL se plíce insuflují 10% neutrálním pufrovaným formalinem (NBF) pod tlakem (vodní sloupec 30 cm). Plíce se vyjmou a umístí se do nádob s 10% NBF. Po fixaci v 10% NBF minimálně po dobu 24 hodin se plíce zpracují v alkoholové řadě a zalijí do vosku. Z plíce se vytvoří podélné bločky a z každého zvířete se připraví 2μιη podélný řez na úrovni hlavní průdušky. Řezy se potom barví hematoxylinem a eosinem. Provede se patologické vyhodnocení řezů a klasifikace bronchio lamího epitelu a submukózy.

Postup digesce plic

Při některých studiích se plíce samotné naštěpily (natrávily), aby se z nich získaly zánětlivé buňky lokalizované v tkáni. Při těchto studiích se buňky získají promytím levé plíce RPMI/FCS, aby se odstranila krev z buněk okamžitě po BAL. Při těchto studiích se pravá strana plíce insufluje a fixuje se pufrovaným formalinem pro histopatologickou analýzu. Plíce, která se má podrobit digesci, se standardizuje u zvířat odebráním 300mg části plicní tkáně a následným štěpením kolagenázou. Tak se uvolní buňky z plicní tkáně a umožní se jejich získání. U takto získaných buněk se provede celkové a diferenciální sčítání buněk.

Výsledky:

(i) Po inhalaci antigenu došlo k významnému vzrůstu počtu eosinofilů a neutrofilů u neléčených skupin. Toto se prokázalo významným vzrůstem BAL a počtu eosinofilů a neutrofilů po štěpení a také na základě histopatologického skóre.

-78CZ 301750 Bó (ii) Při stimulaci (výzvě) antigenem nebo při jakékoli léčbě léčivem nebyly pozorovány v BAL žádné změny počtu buněk makrofág/monocyt.

(tii) Sloučeniny jsou schopny významně inhibovat infiltraci neutrofilů a eosinofilů 24 hodin po stimulaci antigenem v porovnání s kontrolní neíéčenou skupinou, což prokázaly všechny tři metody uvedené výše. Účinná dávka se pohybovala v rozmezí 3 až 100 mg/kg po.

(iv) Při studii s podáváním více dávek léčiva za den docházelo ke kvantitativně podobné inhibici io buněčného influxu jako při studii s jednou denní dávkou.

Tyto výsledky naznačují, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají protizánětlivou aktivitu, pokud se podávají krysám proťylakticky na modelu infiltrace leukocytů vyvolané antigenem.

2. Inhibice antigenem vyvolaného zánětu dýchacích cest - studie při podávání ip jednou denně Postup senzitizace a stimulace

Krysy Brown Norway se senzitizují ve dnech 0 12 a 21 ovalbuminem (100 pg, i.p.) dávaným s hydroxidem hlinitým (100 mg, i.p.). Ve dni 30 se krysy exponují 1% aerosolu ovalbuminu po dobu 30 minut. Zvířata se potom vrátí do klecí.

Postup dávkování

Testované léčivo se místo p.o. podává čtyřikrát intraperitoneálně. Dávkovači režim byl 30 minut před stimulací a 2, 4 a 8 hodin po stimulací inhalací alergenu.

Postup získání tekutiny z bronchoalveolámího výplachu (BAL)

Dvacet čtyři hodin po stimulaci inhalací antigenu se buňky získají z lumenu dýchacích cest pomocí bronchoalveolámího výplachu usmrcených zvířat a plíce se promyjí třikrát 5ml alikvoty RPMI/FCS. Promývací kapalina se nechá v plicích 30 sekund a potom se opatrně odstraní. Tři vzorky se slijí a v BAL vzorcích se změn celkové a diferenciální počty bílých krvinek. Pro zjiště35 ní celkového množství buněk se použije systém ARGOS a pro zjištění diferenciálního počtu buněk se použije světelná mikroskopie cytocentrifugovaných preparátů po obarvení WrightGiemsa.

Postup histopatologické analýzy plic

Okamžitě po BAL se plíce insuflují 10% neutrálním pufrovaným formalinem (NBF) pod tlakem (30 cm vody). Plíce se vyjmou a umístí se do nádob s 10% NBF. Po fixaci v 10% NBF minimálně po dobu 24 hodin se plíce zpracují v alkoholové řadě a zalijí do vosku. Připraví se podélné bločky a z každého zvířete se připraví 2pm podélný rez na úrovni hlavní průdušky. Řezy se potom barví hematoxylinem a eosinem. Provede se patologické vyhodnocení řezů a klasifikace bronchiolámího epitelu a submukózy.

Postup digesce plic

Při některých studiích se plíce samotné štěpily, aby se z nich získaly zánětlivé buňky lokalizované v tkáni. Při těchto studiích se buňky získají promytím levé plíce RPMI/FCS, aby se odstranila krev z buněk okamžitě po BAL. Při těchto studiích se pravá strana plíce insufluje a fixuje se pufrovaným formalinem pro histopatologickou analýzu. Plíce, která se má podrobit digesci, se standardizuje u zvířat odebráním 300mg části plicní tkáně a štěpením kolagenázou. Tak se uvolní

-79CZ 301750 B6 buňky v plicní tkáni a umožní se jejich získání. U těchto získaných buněk se provede celkové a diferenciální sčítání buněk.

Výsledky:

(i) Po inhalaci antigenu došlo k významnému vzrůstu počtu eosinofilů a neutrofilů u neléčených skupin. Toto se prokázalo významným vzrůstem BAL a počtu eosinofilů a neutrofilů v BAL a po štěpení a také jako histopatologického skóre.

(ii) Sloučeniny podle vynálezu jsou schopny významně inhibovat infiltraci neutrofilů a eosinofílů 24 hodin po stimulaci antigenem v porovnání s kontrolní neléČenou skupinou, což prokázaly všechny tři metody uvedené výše. Účinná dávka se pohybovala v rozmezí 3 až 100 mg/kg p.o.

Tyto výsledky ukazují, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu mají protizánětlivou aktivi15 tu, pokud se podávají proťylakticky na krysím modelu antigenem vyvolané infiltrace leukocytů buď perorálně, nebo intraperitoneálně.

3. Inhibice akutní bronchokonstrikce vyvolané antigenem u alergických krys

Postup senzitizace a stimulace

Krysy Brown Norway se senzitizují ve dnech 0, 12 a 21 ovalbuminem (100 pg, i.p.) podávaným s hydroxidem hlinitým (100 mg, i.p.). Ve dni studie se krysy chirurgicky připraví na měření plicní mechaniky a mechanicky se ventilují. Po pětiminutové době ekvilibrace zvířata dostanou bolus ovalbuminu (1 mg na krysu). Zvířata se potom 15 minut sledují a zaznamená se maximum změn vzhledem k základní linií rezistence jako odezva na stimulaci antigenem.

Postup dávkování

Testované léčivo se podává buď p.o., nebo i.p. 24 a 2 hodiny před i.v. injekcí ovalbuminu. Množství sloučeniny podávané při této studii bylo 10 až 100 mg/kg po.

Výsledky

Po stimulaci antigenem byl u neléčených kontrolních zvířat a kontrolních zvířat s budesonidem významný vzrůst rezistence dýchacích cest vzhledem k základní linii. Naproti tomu sloučeniny podle předkládaného vynálezu významně inhibovaly bronchokonstrikci vyvolanou antigenem.

Výsledky naznačují, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují bronchokonstrikci vyvolanou antigenem,

4. Inhibice edému plic u krys vyvolaného Sephadexem a exprese genu cytokinu u alergických krys

Postup podávání Sephadexu

Samci krys kmene Sprague-Dawley (400 g) se dávkují i.t. vehíkulem (solný roztok) nebo Sephadexem (5 mg/kg) při objemu dávky 1 ml/kg za anestézie halotanem (4% v kyslíku po dobu 3 minut).

-80cl 301750 bó

Postup podávání

Léčivo se podává ρ.ο. I hodinu před a 5 hodin po Sephadexu i.t. při objemu dávky 1 ml/kg.

Postup hodnocení edému na konci testu

Dvacet čtyři hodin po podání Sephadexu se zvířata utratí pomocí Euthatalu (1 ml/kg i.p.), srdce a plíce se vyjmou en bloc. Vzrůst čerstvé hmotnosti se použil jako index edému. Určí se čerstvá hmotnost a koriguje se na 100 g původní tělesné hmotnosti.

Postup RT-PCR (měření exprese genu cytokinu)

RNA se izoluje z tkáně plic pomocí extrakění techniky guanidiumthiokyanát-fenol-chloroform. RNA se podrobí reverzní transkripci na cDNA za použití AMV reverzní transkriptázy. cDNA pro

IL—5, IL-4, eotaxin a GAPDH (kontrolní gen) se amplifikuje pomocí PCR za použití olígonukleotidové sekvence syntetizované (Gibco) z publikovaných sekvencí.

PCR reagenty se převrství minerálním olejem a amplifikace se provádí prostřednictvím 25 až 35 cyklů denaturace pří 95 °C po dobu 1 minuty, nasednutí příměrů při 55 až 65 °C po dobu

1 minuty a prodloužení při 72 ^ŮC po dobu 7 minut. PCR produkty, barvené ethidiumbromidem, se podrobí elektroforéze v 2% agarosových gelech za účelem vizualizace pásů cDNA.

Pásy každého cílového fragmentu se vizualizují pomocí ultrafialové transluminace a fotografují se. Fotografie se skenují na densitometru a integrované optické hustoty (OD x mm) každého pásu se vypočtou pomocí software zobrazovací analýzy (Imagemaster, Pharmacia). Pro každé zvíře se normalizuje množství každého cytokinového PCR produktu na množství GAPDH PCR produktu. Výsledky (i) Vkapávání samotného Sephadexu vyvolá značný edém 32 %.

(ii) Sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují edém v závislosti na dávce při dávkách 10,30 a 100 mg/kg.

(iii) Sephadex způsobil vzrůst exprese Th-2 cytokinů IL—4 a IL—5 společně s CC chemokinem eotaxinem v plicích 24 hodin po stimulaci. Docházelo ke sklonu ke zvýšení exprese 1L-5 a eotaxinu mRNA.

(iv) Exprese L-4 mRNA byla sloučeninami podle předkládaného vynálezu inhibována v závis40 losti na dávce.

Sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují otok plic vyvolaný Sephadexem u krys, který je spojený se snížením indukce IL—4 Sephadexem.

5. Inhibice uvolňování histaminu indukovaného antigenem u alergických krys Brown-Norway

Postup senzitizace a stimulace

Kiysy Brown-Norway se senzitizují ve dnech 0, 12 a 21 ovalbuminem (100 gg, i.p.) podávaným s hydroxidem hlinitým (100 mg, i.p.). Ve dni studie se krysy chirurgicky připraví na infuzi antigenu. Po 5 minutách ekvilibrace dostanou zvířata bolus ovaibuminu (l mg na krysu). Vzorky krve se odebírají 2 minuty po stimulaci ovalbuminem a hladiny histaminu v plazmě se měří za použité histaminového ELISA testu.

-81 CZ 301750 B6

Postup dávkování

Testované léčivo se podává i.p. 30 minut před stimulací ovalbuminem. Při této studii se použila pouze jedna koncentrace 30 mg/kg i.p.

Výsledky

Po stimulaci antigenem inhibitory Syk kinázy významně inhibovaly uvolňování histaminu vyvolané antigenem v porovnání se skupinou léčenou jen vehikulem.

io

Tyto výsledky naznačují, že sloučeniny podle předkládaného vynálezu inhibují antigenem vyvolané uvolňování histaminu.

6. Inhibice ED-1 + alveolámích makrofágů u plicní tkáně krys 15

Postup senzitizace a stimulace

Krysy Brown-Norway se senzitizují ve dnech 0, 12 a 21 ovalbuminem (100 pg, i.p.) podávaným s hydroxidem hlinitým (100 mg, i.p.). Ve dni 30 se krysy exponují 1% aerosolu ovalbuminu na

30 minut. Zvířata se potom vrátí do klecí.

Postup dávkování

Testované léčivo se podává bud* p.o., nebo i.p. 24 a 2 hodiny před injekcí i.v. bolusu ovalbuminu. 25 Množství sloučeniny podávané při této studii se pohybuje mezi 10 až 100 mg/kg po.

Postup EDI kvantifikace

Alveolámí makrofágy se kvantifikují po imunoznačení protilátkou ED-1 na řezech tkáně plic 30 fixovaných v parafinu.

Výsledky (i) Stimulace ovalbuminem vedla k desetinásobnému vzrůstu počtu ED1+ makrofágů v alveo35 lech.

(ii) Inhibice Syk kinázy značně snížila vzrůst počtu EDI alveolámích makrofágů indukovaných albuminem způsobem závislým na dávce.

Perorální podávání sloučenin podle vynálezu poskytne snížení ED-1+ alveolámích makrofágů po stimulaci ovalbuminem závislé na dávce,

7. Inhibice neutrofilie dýchacích cest vyvolané antigenem u krys Brown-Norway 45 Postup senzitizace a stimulace

Krysy Brown-Norway se senzitizují ve dnech 0, 12 a 21 ovalbuminem (100 pg, i.p.) podávaným s hydroxidem hlinitým (100 mg, i.p.). Ve dni 30 se krysy exponují 1% aerosolu ovalbuminu na 30 minut. Zvířata se potom vrátí do klecí.

Postup dávkování

Jednu hodinu před stimulací antigenem se krysy perorálně dávkují. Množství sloučeniny podávané při této studii se pohybuje mezi 10 až 100 mg/kg p.o.

-82CZ 301750 B6

Postup buněčné analýzy

Čtyři hodiny po stimulaci se buňky získají z lumenu dýchacích cest pomocí bronchoalveo lamího výplachu (RPMI/FCS, jak je popsáno výše). Okamžitě po výpíachu se plíce propláchnou

RPMI/FCS za účelem odstranění nahromaděných krevních buněk. Oddělí se 300 mg tkáně a buňky se získají pomocí enzymatického štěpení (kolagenázou). Provede se diferenciální odečet buněk pomocí světelné mikroskopie preparátů po centrífugaci a obarvení Wright-Giemsa. Výsledky (i) Čtyři hodiny po stimulaci antigenem se pozoroval významný vzrůst počtu neutrofilů jak v BAL, tak v plicní tkáni.

(ii) Sloučeninami podle předkládaného vynálezu byl významně potlačen vzrůst počtu neutrofilů v BAL indukovaný ovalbuminem, nikoli však v plicní tkáni.

Claims

1. Farmaceutická kompozice, vyznačená tím, že obsahuje účinné množství selektivního inhibitoru kinázy, kterým je bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I:

ve kterém:

R¹ znamená arylovou skupinu nebo heteroarylovou skupinu, z nichž každá je případně substituovaná jednou nebo více skupinami zvolenými ze souboru zahrnujícího acylovou skupinu,

30 alkylendioxyskupinu, alkenylovou skupinu, alkenyloxyskupinu, alkynylovou skupinu, arylovou skupinu, kyanoskupinu, halogen, hydroxyskupinu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, nitro skupinu, R⁴, -C(=O)-NY^rY², -C(=O)-OR⁵, -ΝΥ'Υ², -N(R⁶>-C(=O)-R’, -N(R⁶)QOj-NYV, -Ν^ΉΤΟΗ»’, -N(R⁶)-SO2-R⁷, -NÍR^Or-NYV, ^-ΝΥ'Υ²a-Z²R⁴;

R² znamená atom vodíku, acylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, C^-alkenylovou skupinu nebo Ci^-alkylovou skupinu případně substituovanou substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího kyanoskupinu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, Z*R⁸, -C(O>-NY³Y⁴, -CO₂R⁸, -NY³Y⁴, -N(R^Ó>C(=O)-R\ -N(R⁶>C(=O)-NY³Y⁴, -N(R⁶)-C(=O>40 OR⁷, -N(R⁶)-SO2-R⁷, -N(R⁶}-SOr-NY³Y⁴ a jeden nebo více atomů halogenů;

R³ znamená atom vodíku, arylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, heteroarylovou skupinu, C^-alkylovou skupinu, -C(=O)-OR⁵ nebo -C(=O)-NY³Y⁴;

45 R⁴ znamená alkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu nebo cykloalkylalkylovou skupinu, z nichž každá je případně substituovaná substituentem zvoleným ze souboru zahrnujícího arylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, heteroarylovou skupinu,

-83CZ 301750 B6 heterocykloalkylovou skupinu, -CHO nebo její 5-, 6- nebo 7-členný cyklický acetalový derivát, -€(=Ο)-ΝΥΎ², -C(=O)-OR⁵, -NY'Y², -N(R⁶>-C(=O)-R’, -N(R⁶)-C(=O)-NY³Y⁴, -N(R⁶)SOí-R⁷, -N(R⁶)-SO2-NY^jY⁴, -OR⁷, a jednu nebo více skupin zvolených ze souboru zahrnujíčího hydroxyskupinu a karboxyskupinu;

R⁵ znamená atom vodíku, alkylovou skupinu, alkenylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu;

R⁶ znamená atom vodíku nebo Ci^-alkylovou skupinu;

15 R⁸ znamená atom vodíku nebo C|^-alkylovou skupinu;

Y¹ a Y² nezávisle znamenají atom vodíku, alkenylovou skupinu, arylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo alkylovou skupinu případně substituovanou jednou nebo více skupinami zvolenými ze souboru zahrnujícího arylovou skupinu, atom halogenu, hete20 roarylovou skupinu, hydroxyskupinu, -C(=O>NY³Y⁴, -C(=O)-OR⁵, -NY³Y⁴, -N(R⁶)-C(=O)R⁷, -N(R⁶)-C(=O>-NY³Y⁴, -N(R⁶)-SOz-R⁷, -N(R⁶)-SOr-NY³Y⁴ a -OR⁷; nebo skupina -NY^lY²může tvořit cyklický amin;

Y³ a Y⁴ nezávisle znamenají atom vodíku, alkenylovou skupinu, alkylovou skupinu, arylovou

25 skupinu, arylalkylovou skupinu, cykloalkylovou skupinu, heteroarylovou skupinu nebo heteroarylalkylovou skupinu; nebo skupina -NY³Y⁴ může tvořit cyklický amin;

Z¹ znamená O nebo S;

30 Z² znamená O nebo S(O)_n;

n znamená nulu nebo celé číslo 1 nebo 2;

přičemž (a) „acylová skupina“ znamená H-€O- nebo alkyl-CO-skupinu;

(b) „alkylová skupina“ znamená, pokud není uvedeno jinak, alifatickou uhlovodíkovou skupinu, která může mít přímý nebo rozvětvený řetězec obsahující 1 až 15 uhlíkových atomů v řetězci

40 a případně substituovaný jedním nebo více atomy halogenů;

(c) „alkylenová skupina“ znamená alifatickou dvouvalenční skupinu odvozenou od přímé nebo rozvětvené alkylové skupiny;

45 (d) „alkenylová skupina“ znamená alifatickou uhlovodíkovou skupinu, která obsahuje dvojnou vazbu uhlík—uhlík a která může mít přímý nebo rozvětvený řetězec obsahující 2 až 15 uhlíkových atomů v řetězci;

(e) „alkynylová skupina“ znamená alifatickou uhlovodíkovou skupinu, která obsahuje trojnou

50 vazbu uhlík—uhlík a která může mít přímý nebo rozvětvený řetězec obsahující 2 až 15 uhlíkových atomů v řetězci;

(f) „arylová skupina“ jako skupina nebo součást skupiny znamená: (i) monocyklický nebo vícecyklický aromatický karbocyklický zbytek obsahující 6 až 14 uhlíkových atomů; nebo

55 (ii) částečně nasycený vícecyklický aromatický karbocyklický zbytek, ve kterém jsou arylová

-84CZ 5ϋϊ75(Ι DĎ skupina a cykloalkylová skupina nebo cykloalkenylová skupina zkondenzovány dohromady k vytvoření cyklické struktury, pokud není definována jinak, přičemž arylové skupiny jsou případně substituované jedním nebo více substituenty arylové skupiny, které mohou být stejné nebo odlišné a které jsou zvoleny ze souboru zahrnujícího acylovou skupinu, acylaminoskupinu,

5 alkoxyskupinu, alkoxykarbonylovou skupinu, alkylendioxyskupinu, alkylsulfinylovou skupinu, alkylsulfonylovou skupinu, alkylthioskupinu, aroylovou skupinu, aroylaminovou skupinu, aiylovou skupinu, arylalkyloxyskupinu, arylalkyloxykarbonylovou skupinu, aryíalkylthioskupinu, aryloxyskupinu, aryloxykarbonylovou skupinu, arylsulfinylovou skupinu, arylsulfonylovou skupinu, aryithioskupinu, karboxyskupinu nebo bioisoster kyseliny, kyanoskupinu, atom haloge10 nu, heteroaroylovou skupinu, heteroarylovou skupinu, heteroarylalkyloxyskupinu, heteroaroylaminovou skupinu, heteroaryloxyskupinu, hydroxyskupinu, nitro skupinu, trifluormethylovou skupinu, -NY³Y⁴, -CONY³Y⁴, -SO2NY³Y⁴, -NY³-C(=O)alkyiovou skupinu, -NY³SO2alkylovou skupinu nebo alkylovou skupinu případně substituovanou arylovou skupinou, heteroarylovou skupinou, hydroxyskupinou, a -NY³Y⁴;

(g) „heteroarylová skupina“ jako skupina nebo součást skupiny znamená: (i) aromatický monocyklický nebo vícecyklický organický 5- až 10-členný zbytek obsahující 1, 2 nebo 4heteroatomy, zvolené ze souboru sestávajícího z N, O a S, a který je případně substituován jedním nebo více substituenty arylové skupiny definovanými v (f); (ii) částečně nasycený vícecyklický hetero20 karbocyklický zbytek, ve kterém jsou heteroarylová skupina a cykloalkylová nebo cykloalkenylová skupina zkondenzovány dohromady k vytvoření cyklické struktury případně substituované jedním nebo více substituenty arylové skupiny, definovanými v (f);

(h) „cykloalkylová skupina“ znamená nasycený monocyklický nebo bicyklický kruhový systém

25 obsahující 3 až 10 uhlíkových atomů a případně substituovaný skupinou oxo;

(i) „cykloalkenylová skupina“ znamená nearomatický jednokruhový nebo vícekruhový kruhový systém obsahující alespoň jednu dvojnou vazbu uhlík—uhlík a 3 až 10 uhlíkových atomů;

30 (j) „heterocykloalkylová skupina“ znamená: (i) cykloalkylovou 3- až 7-člennou skupinu obsahující 1 nebo 2 heteroatomy zvolené ze souboru sestávajícího z O a N, která může být případně substituovaná oxo-skupinou; (ii) částečně nasycený vícecyklický heterokarbocyklický zbytek, ve kterém arylový nebo heteroarylový kruh, z nichž každý je případně substituován jedním nebo více substituenty arylové skupiny, a heterocykloalkylová skupina jsou zkondenzovány dohroma35 dy k vytvoření cyklické struktury; a (k) „cyklický amin“ znamená 3- až 8-členný monocyklický cykloalkylový kruhový systém, ve kterém je jeden z kruhových uhlíkových atomů nahrazen dusíkem a který (i) může rovněž obsahovat další heteroatom-obsahující skupinu zvolenou ze souboru zahrnujícího O, S, SO₂ nebo

40 NY⁷, kde Y⁷ znamená vodík, alkylovou skupinu, arylovou skupinu, arylalkylovou skupinu, -C(O)-R⁷, -C(=O)-OR⁷ nebo -SO₂R⁷, a (ii) může být kondenzován k dalším arytovým, heteroarylovým, heterocykloalkylovým nebo cykloalkylovým kruhům k vytvoření bicyklického nebo tricyklického kruhového systému;

45 a jeho odpovídající N-oxidy a jeho esterová proléčiva a jeho kyselinové bioisostery; a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, těchto sloučenin a jejich N-oxidy a jejich esterová proléčiva a jejich kyselinové bioisostery; společně s jedním nebo více farmaceuticky přijatelnými nosiči nebo pomocnými látkami;

50 přičemž „kyselinový bioisoster“ znamená sloučeninu, ve které je skupina -COOH nahrazena skupinou zvolenou ze souboru zahrnujícího -C(=O>-NHOH, -C(=O)-CH2OH, -C(^O)-CJH₂SH, -C(=O)-NH-CN, sulfoskupinu, fosfonoskupinu, alkylsulfonylkarbamoylovou skupinu, tetrazolylovou skupinu, arylsulfonylkarbamoylovou skupinu, heteroarylsulfonylkarbamoylovou skupinu, N-methoxykarbamoylovou skupinu, 3-hydroxy-3-cyklobuten-l,2-dionovou skupinu, 3,5-85CZ 301750 B6 dioxo-1,2,4—oxadiazolidiny lovou skupinu, 3-hydroxyisoxazolylovou skupinu a 3-hydroxy-lmethylpyrazolylovou skupinu.

2. Bicyklický pyrrolový derivát obecného vzorce I, jak je definován v nároku 1, avšak nezahr5 nující 6-fenyl-5//-pyrrolo[2,

3-ó]pyrazin, 6-(4-methoxyfenyl)-5//-pyrTolo[2,3-6]pyrazin, 6(4~chlorfenyl)-5//-pynOlo[2,3-á]pyrazin, 6-(2-€hlorfenyl)-5//-pyrrolo[2,3-ó]pyrazin, 3methyl-6-fenyl-5//- pyrrolo[2,3-ó]pyrazin, 2-methyl-6-fenyl-5//-pyrrolo[2,3-p]pyrazin a 7methy 1-6-feny l-5//-pyrrolo [2,3-6] pyrazin.

io 3. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou heteroarylovou skupinu.

4. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 3 obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou azaheteroarylovou skupinu.

5. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, ve kterém R^l znamená případně substituovanou índolylovou skupinu, případně substituovanou furylovou skupinu, případně substituovanou pyridylovou skupinu, případně substituovanou pyrrolylovou skupinu, případně substituovanou pyrazolylovou skupinu, případně substituovanou chinolylovou skupinu,

20 případně substituovanou isochinolylovou skupinu, případně substituovanou imidazolylovou skupinu, případně substituovanou indazolylovou skupinu, případně substituovanou indolizinylovou skupinu, případně substituovanou tetrahydro indol iziny lovou skupinu nebo případně substituovanou indazoíinylovou skupinu.

25

6. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 3 až 5 obecného vzorce I, ve kterém případnými substituenty v rámci R¹ jsou jedna nebo více skupin zvolených ze souboru zahrnujícího alky lendioxys kup inu, alkenylovou skupinu, alkeny loxy skup inu, arylovou skupinu, kyanoskupinu, atom halogenu, hydroxyskupinu, heteroarylovou skupinu, heterocykloalkylovou skupinu, R⁴, -ε(=Ο)-ΝΥΎ², -C(=O)-OR , -NY¹ Y² a -OR⁴,

7. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená případně substituovanou arylovou skupinu.

8. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 7 obecného vzorce I, ve kterém R¹ znamená

35 feny lovou skupinu substituovanou jednou nebo více skupinami zvolenými ze souboru zahrnujícího alkylendioxyskupinu, atom halogenu, R⁴, -NY^lY² a -OR⁴.

9. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 8 obecného vzorce I, ve kterém R² znamená atom vodíku.

10. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 8 obecného vzorce I, ve kterém R² znamená atom halogenu.

11. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 8 obecného vzorce 1, ve kterém

45 R² znamená C^-alkylovou skupinu případně substituovanou karboxyskupinou, kyanoskupinou, atomem halogenu, hydroxyskupinou, tetrazolylovou skupinou nebo -CONY³Y⁴.

12. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 8 obecného vzorce I, ve kterém R² znamená C₂^-alkenylovou skupinu,

13. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 12 obecného vzorce I, ve kterém R³ znamená atom vodíku.

14. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 12 obecného vzorce I, ve kterém

55 R³ znamená případně substituovanou arylovou skupinu.

-86CZ 301750 tíó

15. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 12 obecného vzorce I, ve kterém R³ znamená případně substituovanou fenylovou skupinu.

5

16. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 2 až 12 obecného vzorce I, ve kterém

R³ znamená Cw-alkylovou skupinu.

17. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, který má vzorec Ia:

(U), io ve kterém R² a R³ mají významy uvedené v nároku 1; R⁹ znamená atom vodíku, R⁴, alkenylovou skupinu nebo heterocykloalkylovou skupinu; R¹⁰ znamená:

(i) hydroxyskupinu;

15 (ii) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu;

(iii) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu nebo cykloalkylalkylovou skupinu, z nichž každá je substituovaná jednou nebo více hydroxyskupinami;

20 (iv) -OR⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu substituovanou alkoxyskupinou;

25 (ví) -OR⁴, kde R⁴ znamená cykloalkylovou skupinu substituovanou skupinou -CÍ^J-NYV, (vii)-N(R^óý-C(=O)-R⁷;

(viii) -ΟΟΝΥΎ²;

(ix) karboxyskupinu;

(x) alkylovou skupinu substituovanou karboxyskupinou;

35 (xi) heteroarylovou skupinu;

(xii) -C(=O)-R⁴, kde R⁴ znamená alkylovou skupinu; nebo (xiii) tetrazolylovou skupinu nebo N-methyltetrazolylovou skupinu, kde R⁶, R⁷, Y^l a Y² mají významy uvedené v nároku 1; a p znamená nulu nebo celé číslo 1 nebo 2;

a jeho esterová proléčiva a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin

45 vzorce Ia a j ej ich esterová proléčiva.

-87CZ 301750 B6

18. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 17 obecného vzorce Ia, ve kterém R² znamená atom vodíku.

5

19. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 17 nebo 18 obecného vzorce Ia, ve kterém R³ znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo Cj.4-alkýlovou skupinu.

20. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 17 až 19, obecného vzorce Ia, ve kterém R⁹ znamená:

io (i) atom vodíku;

(ií) Ci 4-alkylovou skupinu;

(iii) CM-alkylovou skupinu substituovanou hydroxy skupí nou;

(iv) C] 4-alkylovou skupinu substituovanou skupinou-N(R⁶)C(=O)-R⁷;

15 (v) CM-alkylovou skupinu substituovanou skupinou ^C(=O)-NY^lY²; nebo (vi) cykloalkylalkylovouskupinu substituovanou hydroxyskupinou.

21. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároku 17 až nároku 20 obecného vzorce Ia, ve kterém R¹⁰ je připojen v poloze 5 indolylového kruhu.

22. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, který má vzorec Ib:

ve kterém R², R³, R⁹, R¹⁰ a p mají významy definované v nároku 17, a jeho esterová proléčiva 25 a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Ib a jejich esterová proléčiva.

23. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 22 obecného vzorce Ib, ve kterém R² znamená atom vodíku.

24. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 22 nebo 23 obecného vzorce Ib, ve kterém R³znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo C_M-alkýlovou skupinu.

25. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 22 až 24 obecného vzorce Ib, ve 35 kterém R⁹ znamená atom vodíku nebo CM-alkylovou skupinu.

26. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 22 až 24 obecného vzorce Ib, ve kterém p znamená nulu.

-88CZ 301750 Bó

27. Bicyklický pyrroíový derivát podle nároku 2 obecného vzorce 1, který má vzorec Ic:

ve kterém R², R³, R⁹, R¹⁰ a p mají významy uvedené v nároku 17, a jeho esterová proléčiva 5 a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Ic a jejich esterová proléčiva.

28. Bicyklický pyrroíový derivát podle nároku 27 obecného vzorce Ic, ve kterém R² znamená atom vodíku.

29. Bicyklický pyrroíový derivát podle nároku 27 nebo 28 obecného vzorce Ic, ve kterém R³znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo C ^-alkylovou skupinu.

30. Bicyklický pyrroíový derivát podle některého z nároků 27 až 29 obecného vzorce Ic, ve 15 kterém R⁹ znamená atom vodíku nebo O-alky lovou skupinu.

31. Bicyklický pyrroíový derivát podle některého z nároků 27 až 30 obecného vzorce Ic, ve kterém p znamená 1.

20

32. Bicyklický pyrroíový derivát podle některého z nároků 27 až 31 obecného vzorce Ic, ve kterém R¹⁰ 2namená heteroarylovou skupinu.

33. Bicyklický pyrroíový derivát podle nároku 32 obecného vzorce Ic, ve kterém R¹⁰ je připojen v poloze 4 pyrrolového kruhu.

34. Bicyklický pyrroíový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I, který má vzorec Id:

ve kterém R², R³, R¹⁰ a p mají významy uvedené v nároku 17, a jeho esterová proléčiva a farmaceuticky přijatelné soli a solváty, například hydráty, sloučenin vzorce Id a jejich esterová

30 proléčiva.

35. Bicyklický pyrroíový derivát podle nároku 34 obecného vzorce Id, ve kterém R² znamená atom vodíku, Ci^-alkylovou skupinu, CM-alkylovou skupinu substituovanou skupinou -CONY³Y⁴, CM-alkylovou skupinu substituovanou karboxylovou skupinou, C_M-alkylovou

-89CZ 301750 B6 skupinu substituovanou tetrazolylovou skupinou nebo C_M-alkylovou skupinu substituovanou hydroxy skupinou.

36. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 34 nebo 35 obecného vzorce Id, ve kterém R³

5 znamená atom vodíku, případně substituovanou arylovou skupinu nebo Ci^-aí kýlo vou skupinu.

37. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 34 až 36 obecného vzorce Id, ve kterém p znamená 1, io

38. Bicyklický pyrrolový derivát podle některého z nároků 34 až 37 obecného vzorce Id, ve kterém R¹⁰ znamená alkylovou skupinu.

39. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 38 obecného vzorce Id, ve kterém R¹⁰ je připojen v poloze 4 fenylového kruhu.

40. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I tvořený 6-(5-methoxy-lmethyl-l/ř-indol-3-yl)-5/í-pyrrolo[2,3-ó]pyrazinem a jeho esterovými proléčivy a farmaceuticky přijatelnými solemi a solváty těchto sloučenin a jejich esterovými proléčivy.

20

41. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I nebo odpovídající esterové proléčivo nebo farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát této sloučeniny nebo jejich esterové proléČivo jako léčivo pro použití v terapii.

42. Bicyklický pyrrolový derivát podle nároku 2 obecného vzorce I nebo odpovídající esterové

25 proléčivo nebo farmaceuticky přijatelná sůl nebo solvát této sloučeniny nebo jejich esterové proléčivo pro použití při léčení pacientů trpících nebo ohrožených onemocněním, které se může zlepšit podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy.

43. Kompozice podle nároku l pro použití při léčení pacientů trpících nebo ohrožených

30 onemocněním, které se může zlepšit podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy.

44. Kompozice podle nároku 1 pro použití při léčení zánětlivých onemocnění.

45. Kompozice podle nároku 1 pro použití při léčení astmatu.

46. Kompozice podle nároku I pro použití při léčení psoriázy.

47. Kompozice podle nároku 1 pro použití při léčení zánětu kloubu.

40

48. Kompozice podle nároku 1 pro použití při léčení zánětlivého onemocnění střev.

49. Kompozice podle nároku 1 pro použití při léčení rakoviny.

50. Použití bicyklického pyrrolového derivátu podle nároku 2 obecného vzorce I nebo odpovída45 jícího esterového proléčiva nebo farmaceuticky přijatelné soli nebo solvátu této sloučeniny nebo jejich esterového proléčiva při výrobě léčiva pro léčení pacienta trpícího nebo ohroženého onemocněním, které se může zlepšit podáváním inhibitoru katalytické aktivity Syk kinázy.

51. Použití podle nároku 50, při kterém je léčivo určeno pro léčení astmatu.

52. Použití podle nároku 50, při kterém je léčivo určeno pro léčení psoriázy.

53. Použití podle nároku 50, při kterém je léčivo určeno pro léčení zánětu kloubu.

-90cz 301750 bó

54. Použití podle nároku 50, při kterém je léčivo určeno pro léčení zánětlivého onemocnění střev.

55. Použití podle nároku 50, při kterém je léčivo určeno pro léčení rakoviny.