CN105993590A - 一种羊肚菌子实体的培养方法 - Google Patents

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    • A01G18/00—Cultivation of mushrooms

Abstract

本发明公开了一种羊肚菌子实体的培养方法，包括以下步骤：菌种准备、菌种培养、土壤处理、播种、覆盖保温、菌丝生长期间的管理、催菇处理、出菇期间的管理、采收；本发明免去了传统技术必须从菌种瓶或袋中掏菌种、菌种水合、土壤表面摆放大量营养料袋等操作环节，使羊肚菌大田或室内栽培技术更加简便，减少3/4以上的营养料袋成本，较大降低了羊肚菌栽培的生成成本，使羊肚菌栽培的技术难度大大降低，经济效益大为提高。

Description

一种羊肚菌子实体的培养方法
技术领域
本发明属于食药用菌栽培技术领域，具体地说，涉及一种羊肚菌子实体的培养方法。
背景技术
羊肚菌是羊肚菌科羊肚菌属(Morchella)所有物种的统称，不直接指一个具体的物种。栽培的羊肚菌种类属于梯棱羊肚菌M.importuna M.Kuo,O‘Donnell&T.J.Volk,Mycologia 104(5):1172(2012)、七妹羊肚菌Morchellaseptimelata M.Kuo,in Kuo,Dewsbury,O'Donnell,Carter,Rehner,Moore,Moncalvo,Canfield,Stephenson,Methven&Volk,Mycologia 104(5):1159-1177(2012)；六妹羊肚菌Morchella sextelata M.Kuo,in Kuo,Dewsbury,O'Donnell,Carter,Rehner,Moore,Moncalvo,Canfield,Stephenson,Methven&Volk,Mycologia 104(5):1159-1177(2012)。该属的其他物种栽培成功的还很少有报道。
羊肚菌商业化栽培技术在国内得到了快速发展，近5年来全国栽培面积已经由近1000亩发展到了2015/2016年的近25000亩，我国已经成为世界最大的羊肚菌大田栽培国，干羊肚菌产量达到了120t以上。这些栽培技术的最重要的关键技术是播种10-25d以后必须在土壤表面摆放营养料袋，一般的密度为3-5个/m2，每667m2需要的数量为1600-2200个，构成了羊肚菌栽培的主要成本；营养料袋的大小为12-25×20-30cm，装干料的质量为200～600g/袋甚至更多，湿料重量为200-2000g/袋，配方以麦粒为主，添加了不同数量的木屑、草粉、生土、谷壳等成分；由于营养料袋体积大，灭菌成本大大提高；营养料袋体积大，常常导致灭菌不彻底，摆放到大田中带来大量污染，导致羊肚菌减产或绝收；营养料袋需要摆放40-140d，长期裸露在土面，容易生长多种害虫，这些害虫最后危害羊肚菌子实体，导致子实体产量下降或绝收。
专利一种小麦套作羊肚菌人工仿生栽培的方法(公开号：CN103141308A，发明日：2013-04-03)涉及一种小麦套作羊肚菌人工仿生栽培的方法，包括：1)制种；2)做畦；3)接种与覆土；4)发菌管理；5)补充营养液；6)出菇管理。专利一种羊肚菌的栽培方法(公开号：CN103202177A，发明日：2013-04-15)涉及一种羊肚菌的栽培方法：包括：田间准备：间隔隆厢和挖沟，厢面宽90-110cm，沟宽30-40cm、沟深20-30cm；羊肚菌和小麦播种：撒播75-50kg/亩羊肚菌菌种在厢面，再覆盖一层土；浇水后施用复合肥；施复合肥1-10d后再在厢面上撒播2-5kg/亩小麦，覆盖遮阳网，2-3d/次浇水；施入羊肚菌生长促进剂：小麦播种后35-45d，厢面施入羊肚菌生长促进剂；羊肚菌出菇采菇田间管理：遮阴、浇水，厢面湿度60％-80％；小麦田间管理：除草、追肥。专利粗腿羊肚菌的林下栽培方法(公开号：CN 103190292A，发明日：2013-04-27)涉及一种粗腿羊肚菌的林下栽培方法：其林下栽培方法是利用空闲林地生产粗腿羊肚菌的一种栽培方法，所述栽培方法为：选择适合粗腿羊肚菌生长的林地作为待栽培林地；在播种前对待栽培林地进行整地；将粗腿羊肚菌固体栽培菌种散播于已进行整地的待栽培林地；播种后实施林地管理至粗腿羊肚菌采收。专利一种羊肚菌的栽培新方法(公开号：CN 102823429A，发明日：2012-09-03)涉及一种羊肚菌的栽培新方法：是将野生羊肚菌通过组织分离等方法获得菌种，再将菌种制作成母种、原种、栽培种等菌种。涉及栽培中羊肚菌的菌种原料与配方及制作方法；栽培工艺流程及栽培新方法。专利梯棱羊肚菌的栽培方法(公开号：CN 103168622A，发明日：2013-04-03)涉及梯棱羊肚菌(Morchella importuna)的栽培方法，包括梯棱羊肚菌菌种制作、栽培料制作、水合处理和管护等步骤。栽培种经过水合处理后，撒播于整好地的厢面上、覆土，制作并添加栽培料和田间常规管理80-120天，即可获得子实体。
专利利用生料栽培羊肚菌的方法(公开号：CN 103583240A，发明日：2013-11-24)涉及一种利用生料栽培羊肚菌的方法。在土质疏松及潮湿、排水良好的地方构建可营造三分阳七分阴环境的菇房；用玉米芯、木屑、麸皮、谷壳、豆粉、草木灰、磷肥、石膏、糖为原料；在菇房内挖栽培坑，然后在栽培坑内铺两层料及施撒两层菌种，再进行覆土；最后将菇房的空气湿度保持在85％～95％，温度在5～16℃，在这样的环境下一个月左右就可出子实体。专利羊肚菌培养料配方及羊肚菌天然栽培方法(公开号：CN 101628834，发明日：2009-08-20)公开了两种羊肚菌天然栽培方法。第一种方法是将羊肚菌栽培种与羊肚菌培养料和土壤混合均匀形成羊肚菌栽培种-培养料-土壤混合物，然后将上述含羊肚菌栽培种的混合物播入土地中，盖土厚度为0.5厘米～2.5厘米；所用羊肚菌培养料配方包括牧草类草本植物、农作物秸秆、麸皮及KH2PO4、MgSO4和尿素等营养物质。第二种方法是将羊肚菌栽培种直接穴播于土地中，盖土厚度为0.5厘米～2.5厘米。上述两种方法，当菌丝成熟时均至少进行一次营养补充，所用营养补充液由草灰浸出液、KH2PO4、MgSO4和尿素配制而成。专利一种尖顶羊肚菌生态栽培方法(公开号：CN101283658，发明日：2008-06-02)提供了一种尖顶羊肚菌生态栽培方法，包括尖顶羊肚菌菌种准备、圆叶杨培育、圆叶杨接种菌种前处理、尖顶羊肚菌菌种接种于圆叶杨、圆叶杨被接尖顶羊肚菌菌种后移栽和管护步骤，其特征是圆叶杨根部进行机械损伤10-80％并消毒后，移至尖顶羊肚菌菌种中培养10-120天。专利一种羊肚菌培养料及其栽培技术(公开号：CN103583232A，发明日：2013-11-08)公开了一种羊肚菌培养料及其栽培技术，菌种配方中加入了有特效的原料牡丹根；技术处理中也加入了突破性的技术手段：①找出了与牡丹根的共生关系，在配方中添加适量的牡丹根颗粒；②栽培过程中对出菇场地适时漫水浸泡；③利用给人输液的原理，给羊肚菌原基提供水温10℃-22℃的清水。专利羊肚菌的室内栽培方法及其所用温室(公开号：CN 101926262A，发明日：2010-04-16)公开了一种羊肚菌的室内栽培方法及其所用温室，包括如下步骤：(1)制备栽培料；(2)填装：取等体积的栽培料和土壤填装入经过消毒的袋或罐中；(3)消毒；(4)接种：将带有羊肚菌中的琼脂置于步骤(2)所述土壤层上，接种菌核；(5)菌核生长：避光，保持温度和相对空气湿度；(6)培养基的制备：将菌核均匀夹入上下两层各1～3cm厚的土壤中间，保持室内温度和相对空气湿度；(7)浇水：向所述培养基浇水，使其完全被水渗透；(8)均匀通风；(9)成蘑：保持培养基湿度，同时保持室内温度和相对空气湿度，至羊肚菌成熟。采用上述方法能够实现具有高营养价值的羊肚菌的室内栽培，可大规模生产，产量高。专利羊肚菌扩繁方法(公开号：CN 1860842，发明日：2006-06-15)涉及一种羊肚菌的扩繁方法。该发明的技术方案为：(1)选择适合羊肚菌扩繁的林地、采伐地、空地等：(2)清林；(3)播种；(4)日常管理；(5)采集。专利羊肚菌大田商业化栽培新方法(公开号：CN 1860842，发明日：2006-06-15)涉及一种羊肚菌的栽培新方法，通过克隆技术进行组织细胞分离、培养、获得母种。将水稻田耕作后，播上羊肚菌的菌种，盖上塑料薄膜保温，保湿，荫度70％～90％，温度5～20℃，土壤含水量60％～65％，空气相对湿度80％～95％，通过这些方法至出菇收获。发明号00112812.4无权，羊肚菌的栽培方法：是在一定的温度条件下，用80％～90％的泥土、混入10％-18％的植物有机物，再播入10％的菌种，经一定时期的控温控湿培养至出菌收获。
在现有技术中，羊肚菌实体的培养方法中存在着以下问题和缺点。主要是每亩需要1600～2000个营养料袋或称为二次营养袋、外源营养袋，单袋装料质量干重为250～1500g，每亩使用的营养料袋灭菌后的湿料重量达到1～2吨，需要大规模的灭菌设备进行灭菌，成本在1000～1500元，为栽培原料的一个主要成本；大量使用营养料袋，需要大规模的灭菌设备，限制了羊肚菌的栽培面积的扩大；大量使用营养料袋，无法远距离运输，或者远距离运输的成本很高；营养料袋长时间裸露摆放在土面，导致土面大面积的杂菌污染，同时滋生各种害虫，这些病虫害会导致羊肚菌子实体无法生长发育或减产。其次是羊肚菌栽培过程中的菌种全部是均匀地撒布在土面或沟内，混淆了子实体形成的边缘效应，导致减产。
发明内容
为了解决上述技术问题，本发明公开了一种羊肚菌子实体的培养方法，该方法是一种在土壤表面直接摆放菌种直接出菇的方法，免去了传统技术必须从菌种瓶或袋中掏菌种、菌种水合、土壤表面摆放大量营养料袋等操作环节，使羊肚菌大田或室内栽培技术更加简便，减少3/4以上的营养料袋成本，较大降低了羊肚菌栽培的生成成本，使羊肚菌栽培的技术难度大大降低，经济效益大为提高。
本发明所采用的技术方案是：一种羊肚菌子实体的培养方法，包括以下步骤：
1)菌种准备：羊肚菌菌种购买或自行从栽培或野生子实体上进行分离得到；
2)菌种培养：通过母种制作、原种培养以及栽培种培养制备得到栽培种；
3)土壤处理；
4)播种：把塑料瓶装或菌袋装的栽培种从中央切成2段；在畦面上每1～1.5m2打1个直径为15～20cm的孔洞，孔洞的深度为5～10cm；将切开的菌种瓶或菌种袋露出菌种的一端放入孔洞中，稍压实，使菌种培养料与土壤接触紧密，菌种瓶或菌种袋四周用土压严实；
5)覆盖保温：畦面用一层黑色农膜覆盖，四周有土块压住；或用长竹片起拱，拱高20～25cm，在竹片上覆盖白色农膜；
6)菌丝生长期间的管理：保持土壤含水量不低于16％，干燥时适当喷水；
7)催菇处理：在播种后第70～80d开始使用催菇液，用量为0.3～0.4kg/m2；揭开农膜，用喷雾器均匀喷洒，喷后通风30～50min，再遮盖农膜；
8)出菇期间的管理：羊肚菌子实体原基形成的温度为5～15℃，子实体生长的温度为10～18℃，羊肚菌的出菇期在南方地区一般从2月初到4月初，北方地区为4月到6月初；子实体原基形成以后继续盖膜，当子实体长到2～3cm高时，揭开农膜；保持土壤含水量在18％～20％之间；适当通风；子实体从原基形成到最后成熟的生长时间为15～25d；注意防治高温，土面温度一般控制不要超过20℃；
9)采收：当子实体总高度达到7～12cm时就要及时采收，从地面1～2cm处切断菌柄，基部留在土壤表面。
进一步地，步骤2)中菌种培养具体为：
2.1)母种制作：制备母种培养基，在无菌状态下接种，22-23℃恒温培养箱内避光培养3～5d，使斜面长满菌丝，继续培养7～10d；菌丝体为黄褐色、灰褐色，在琼脂培养基表面或试管壁上形成大量黄色菌核，备用；
2.2)原种培养：制备原种培养基，在无菌状态下接入母种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用；
2.3)栽培种培养：制备栽培种培养基，无菌状态下接入原种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用。
进一步地，母种培养基的配方为：麸皮25～30g，玉米粉或黄豆粉2～3g，干松针20～50g，10～23g葡萄糖或蔗糖或麦芽糖，1～2g蛋白胨或酵母粉，琼脂18～22g。
进一步地，母种培养基通过以下制备方法获得：称量：麸皮25～30g，玉米粉或黄豆粉2～3g，干松针20～50g，10～23g葡萄糖或蔗糖或麦芽糖，1～2g蛋白胨或酵母粉，琼脂18～22g；在玻璃或金属容器内，按照配方称取麸皮、玉米粉或黄豆粉、干松针，加1200mL水，煮沸20min，用4层纱布进行过滤并洗涤，得到滤液1000mL。在滤液中加入琼脂，加热到全部琼脂融化，再把葡萄糖或蔗糖或麦芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一加入溶解。然后分装到试管中，试管塞上棉塞或乳胶塞。在高压锅内0.1MPa灭菌15-20min，冷却后从高压锅内取出摆成斜面培养基；放置5-7天，使斜面上的水珠全部散尽后使用。
进一步地，以干重计，原种培养基按照质量百分比由以下组分构成：80％～85％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，5％～10％稻壳或木屑，5％～10％熟土。
进一步地，原种培养基通过以下步骤获得：以干重计，按照质量百分比称量以下组分：80％～85％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，5％～10％稻壳或木屑，5％～10％熟土；将称量好的小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一装入尼龙袋中，每袋装入总体积1/3～1/2的固体物，放入质量分数为1％～2％的石灰水中浸泡16～24h，捞起后袋内没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；稻壳或木屑直接在清水中浸泡24～48h，捞起后稻壳中没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入菌种瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌60-80min，冷却后取出。
进一步地，栽培种培养基通过以下步骤制备得到：以干重计，按照质量百分比称量以下组分：40％～50％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，30％～40％木屑，5％～10％稻壳，5％～10％熟土；将称量好的小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一装入尼龙袋中，每袋装入总体积1/3～1/2的固体物，放入质量分数为1％～2％的石灰水中浸泡16～24h，捞起后袋内没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；稻壳直接在清水中浸泡24～48h，捞起后稻壳中没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；木屑加1:1的清水拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入750mL塑料菌种瓶或12～15×20～25cm的聚乙烯或聚丙烯菌种袋中，菌种瓶用透气盖封口，菌种袋用口圈加透气盖封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌120-130min，冷却后取出。
进一步地，步骤3)中土壤处理具体为：
3.1)选地：选择靠近自然水源，地势平坦的旱地或水田进行羊肚菌的栽培；
3.2)大田预处理：播种前3～4个月，每667m2耕地加入细木屑200～250kg，稻麦草粉200～250kg，树叶100～120kg，均匀撒在土壤表面；用旋耕机耕地，将前述原料均匀地混合在土壤表层10～20cm内，灌一次透水，用薄膜覆盖土壤闲置一季；
3.3)整地：当年11月初开始整地，用旋耕机翻地、耙细土壤，大土粒的直径不超过5cm；
3.4)放线开畦：按照畦面宽度为60～80cm、走道宽为50～60cm进行放线，用石灰粉划线；将走道内的土壤翻到畦面上，使走道的深度达到20～25cm；平整畦面，用圆形金属筒碾压畦面，使其平整；
3.5)搭建双层遮阳网棚架：用竹竿、木杆、钢管材料搭棚，棚架的高度为1.8～2.5m，用6针密度的遮阳网遮盖顶层，顶层下再搭一层遮阳网，一般每5～10亩搭建一个独立的遮阳网棚架；四周围严实，外面用途压实；浇灌1次大水，使土壤含水量达到18％～20％；土壤含水量的计算方法如下：土壤含水量＝[(湿土重量-烘干土重)/湿土重量×100％]。
进一步地，催菇液通过以下步骤制备得到：按照质量百分比称量以下组分：葡萄糖或蔗糖0.5％～1.0％，硫酸镁0.01％，磷酸二氢钾0.01％，硫酸亚铁0.001％，余量为水，先将葡萄糖或蔗糖、磷酸二氢钾溶于水中，再加入硫酸镁溶解，最后才加入硫酸亚铁，搅拌均匀兑成水溶液，制备得到催菇液。
与现有技术相比，本发明可以获得包括以下技术效果：
不用把菌种与土壤成分混合，不需要覆土，不需要摆放营养料袋，有益的效果是操作简便、生产成本降低、适应范围广，不容易带来杂菌和虫害。
当然，实施本发明的任一产品必不一定需要同时达到以上所述的所有技术效果。
附图说明
此处所说明的附图用来提供对本发明的进一步理解，构成本发明的一部分，本发明的示意性实施例及其说明用于解释本发明，并不构成对本发明的不当限定。在附图中：
图1是本发明羊肚菌子实体培养接种方式；
图2是本发明羊肚菌原基形成情况；
图3是本发明羊肚菌子实体形成和生长情况。
具体实施方式
以下将配合实施例来详细说明本发明的实施方式，藉此对本发明如何应用技术手段来解决技术问题并达成技术功效的实现过程能充分理解并据以实施。
实施例1：室内正常季节栽培
本发明的目的是提供一种羊肚菌子实体的培养方法，具体而言，自然温度室内栽培的其步骤包括：
栽培季节可以是正常的季节，每年11月10日-12月30日前播种；
1)羊肚菌菌种购买或自行从栽培或野生子实体上进行分离得到；
2)菌种培养：通过母种制作、原种培养以及栽培种培养制备得到栽培种；
2.1)母种制作：培养基配方：麸皮25～30g，玉米粉或黄豆粉2～3g，干松针20～50g，10～23g葡萄糖或蔗糖或麦芽糖，1～2g蛋白胨或酵母粉，琼脂18～22g。方法：称取所用的麸皮、玉米粉或黄豆粉、干松针，在玻璃或金属容器内，加1200mL水，煮沸20min，用4层纱布进行过滤并洗涤，得到滤液1000mL，在滤液中加入琼脂，加热到全部琼脂融化，再将葡萄糖或蔗糖或麦芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一等加入溶解，然后分装到试管中，试管塞上棉塞或乳胶塞，在高压锅内0.1MPa灭菌15-20min，冷却后从高压锅内取出摆成斜面培养基；放置5-7d，使斜面上的水珠全部散尽后使用；无菌状态下接种，22-23℃恒温培养箱内避光培养3～5d，使斜面长满菌丝，继续培养7～10d；菌丝体为黄褐色、灰褐色，在琼脂培养基表面或试管壁上形成大量黄色菌核，备用；
2.2)原种培养：培养基配方：风干原料质量百分比为80％～85％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，5％～10％稻壳或木屑，5％～10％熟土。方法：按照配方称取小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一装入尼龙袋中，每袋装入总体积1/3～1/2的固体物，放入质量分数为1％～2％的石灰水中浸泡16～24h，捞起后袋内没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；稻壳或木屑直接在清水中浸泡24～48h，捞起后稻壳中没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入菌种瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌60-80min，冷却后取出。无菌状态下接入母种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用；
2.3)栽培种培养：培养基配方：方法：40％～50％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，30％～40％木屑，5％～10％稻壳，5％～10％熟土。方法：小麦等、稻壳的处理方法同原种；木屑加1:1的清水拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入750mL塑料菌种瓶或12～15×20～25cm的聚乙烯或聚丙烯菌种袋中，菌种瓶用透气盖封口，菌种袋用口圈加透气盖封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌120-130min，冷却后取出。无菌状态下接入原种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用；
3)土壤处理：
3.1)容器处理：各种规格的塑料筐、塑料盆，清洗干净，常规消毒液喷洒，晾干；
3.2)土壤处理：取普通稻田土或旱地土壤，拌入一定量的木屑、草粉、树叶，加水淹没，薄膜密封处理3-4个月。栽培前用常规杀虫剂拌土，薄膜覆盖，用气雾消毒剂熏蒸，密闭处理24h；土壤水分调节到18％～20％；
3.3)装土：容器内装入12～15cm厚的上述处理后的土壤，稍压实压平；中央挖一个孔洞，直径12-15cm，深度3-5cm；
4)播种：将菌种瓶或袋切成2段，将有菌种露出的一端直接插入挖好的空洞内，四周用土壤压实；
5)覆盖保温：用黑色农膜覆盖住容器顶部；再用双层6针遮遮阳网遮盖；
6)菌丝生长期间的管理：每3-5天揭开农膜通风10-20min；冬天自然温度培养；保持土壤含水量不低于16％，干燥时适当喷水；
7)催菇处理：按照质量百分比称量以下组分：葡萄糖或蔗糖0.5％～1.0％，硫酸镁0.01％，磷酸二氢钾0.01％，硫酸亚铁0.001％，余量为水，先将葡萄糖或蔗糖、磷酸二氢钾溶于水中，再加入硫酸镁溶解，最后才加入硫酸亚铁，搅拌均匀兑成水溶液，制备得到催菇液，播种50-60d后喷洒催菇液，用量为0.1～0.3kg/m2；
8)出菇期间的管理：春天的2-3月开始形成子实体，保持空气相对湿度达到80％～90％，土壤含水量为18％～21％，原基形成的温度为5～15℃，原基形成以后到子实体高度达到2cm前，不宜直接在子实体上喷水；子实体长高以后可以适当喷水；
9)采收：大的子实体长到7-12cm高以后可采收，从土面1-2cm高剪下菌柄和菌盖，菌柄基部留在土内。
实施例2：室内反季节栽培
本发明的目的是提供一种羊肚菌子实体的培养方法，具体而言，夏秋季节反季节室内栽培的其步骤包括：
反季节栽培在有控温条件的培养室内进行，室内温度可以控制在10～22℃。
菌丝生长期间的管理：每3-5天揭开农膜通风10-20min；冬天自然温度培养；室内温度控制在15-22℃，空气相对湿度控制在60％～70％；
出菇管理：菌丝培养40～60d后室内温度降低到12-15℃，保持空气相对湿度达到80％～90％，土壤含水量为18％～21％；10-15d后开始形成子实体原基；原基形成以后到子实体高度达到2cm前，不宜直接在子实体上喷水；子实体长高以后可以适当喷水；
容器处理、土壤处理、装土、播种、覆盖、催菇处理、采收步骤同实施例1。
实施例3：大田正常季节栽培
1)准备菌种：羊肚菌菌种可以购买或自行从栽培或野生子实体上进行分离得到；
2)菌种培养
2.1)母种制作：培养基配方：麸皮25～30g，玉米粉或黄豆粉2～3g，干松针20～50g，10～23g葡萄糖或蔗糖或麦芽糖，1～2g蛋白胨或酵母粉，琼脂18～22g。方法：称取所用的麸皮、玉米粉或黄豆粉、干松针，在玻璃或金属容器内，加1200mL水，煮沸20min，用4层纱布进行过滤并洗涤，得到滤液1000mL，在滤液中加入琼脂，加热到全部琼脂融化，再将葡萄糖或蔗糖或麦芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一等加入溶解，然后分装到试管中，试管塞上棉塞或乳胶塞，在高压锅内0.1MPa灭菌15-20min，冷却后从高压锅内取出摆成斜面培养基；放置5-7d，使斜面上的水珠全部散尽后使用；无菌状态下接种，22-23℃恒温培养箱内避光培养3～5d，使斜面长满菌丝，继续培养7～10d；菌丝体为黄褐色、灰褐色，在琼脂培养基表面或试管壁上形成大量黄色菌核，备用；
2.2)原种培养：培养基配方：风干原料质量百分比为80％～85％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，5％～10％稻壳或木屑，5％～10％熟土。方法：按照配方称取小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一装入尼龙袋中，每袋装入总体积1/3～1/2的固体物，放入质量分数为1％～2％的石灰水中浸泡16～24h，捞起后袋内没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；稻壳或木屑直接在清水中浸泡24～48h，捞起后稻壳中没有线状水流出即可倒在地面上进行拌料；土壤直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入菌种瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌60-80min，冷却后取出。无菌状态下接入母种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用；
2.3)栽培种培养：培养基配方：方法：风干原料质量百分比为40％～50％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，30％～40％木屑，5％～10％稻壳，5％～10％熟土。方法：小麦等、稻壳的处理方法同原种；木屑加1:1的清水拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入750mL塑料菌种瓶或12～15×20～25cm的聚乙烯或聚丙烯菌种袋中，菌种瓶用透气盖封口，菌种袋用口圈加透气盖封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌120-130min，冷却后取出。无菌状态下接入原种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用；
3)土壤处理
3.1)选择靠近自然水源，地势平坦的旱地或水田进行羊肚菌的栽培；
3.2)大田预处理：播种前3～4个月，每667m2耕地地加入细木屑200～250kg，稻麦草粉200～250kg，树叶100～120kg，均匀撒在土壤表面；用旋耕机耕地，将前述原料均匀地混合在土壤表层10～20cm内，灌一次透水，用薄膜覆盖土壤闲置一季；
3.3)整地：当年11月初开始整地，用旋耕机翻地、耙细土壤，大土粒的直径不超过5cm；
3.4)放线开畦：按照畦面宽度为60～80cm、走道宽为50～60cm进行放线，用石灰粉划线；将走道内的土壤翻到畦面上，使走道的深度达到20～25cm；平整畦面，用圆形金属筒碾压畦面，使其平整；
3.5)搭建双层遮阳网棚架：用竹竿、木杆、钢管等材料搭棚，棚架的高度为1.8～2.5m，用6针密度的遮阳网遮盖顶层，顶层下再搭一层遮阳网，一般每5～10亩搭建一个独立的遮阳网棚架；四周围严实，外面用途压实；浇灌1次大水，使土壤含水量[(湿土重量-烘干土重)/湿土重量×100％]达到18％～20％；
4)播种：把塑料瓶装或菌袋装的栽培种从中央切成2段；在畦面上每1～1.5m2打1个直径为15～20cm的孔洞，孔洞的深度为5～10cm；将切开的菌种瓶或菌种袋露出菌种的一端放入孔洞中，稍压实，使菌种培养料与土壤接触紧密，菌种瓶或菌种袋四周用土压严实；
5)覆盖保温：畦面用一层黑色农膜覆盖，四周有土块压住；或用长竹片起拱，拱高20～25cm，在竹片上覆盖白色农膜；
6)菌丝生长期间的管理：保持土壤含水量不低于16％，干燥时适当喷水；
7)催菇液：按照质量百分比称量以下组分：葡萄糖或蔗糖0.5％～1.0％，硫酸镁0.01％，磷酸二氢钾0.01％，硫酸亚铁0.001％，余量为水，先将葡萄糖或蔗糖、磷酸二氢钾溶于水中，再加入硫酸镁溶解，最后才加入硫酸亚铁，搅拌均匀兑成水溶液，制备得到催菇液；在播种后第70～80d开始使用，用量为0.3～0.4kg/m2；揭开农膜，用喷雾器均匀喷洒；喷后通风30～50min；再遮盖农膜；
8)出菇期间的管理：羊肚菌子实体原基形成的温度为5～15℃，子实体生长的温度为10～18℃，羊肚菌的出菇期在南方地区一般从2月初到4月初，北方地区为4月到6月初。子实体原基形成以后继续盖膜，当子实体长到2～3cm高时，揭开农膜；保持土壤含水量在18％～20％之间；适当通风。子实体从原基形成到最后成熟的生长时间为15～25d。注意防治高温，土面温度一般控制不要超过20℃，
9)采收：当子实体总高度达到7～12cm时就要及时采收，从地面1～2cm处切断菌柄，基部留在土壤表面。
羊肚菌子实体的生长情况如图1至图3所示，采用本发明的栽培方法，出菇效果可以得到50-130个子实体/m2，单位面积鲜菇产量为150-200kg/667m2。
上述说明示出并描述了发明的若干优选实施例，但如前所述，应当理解发明并非局限于本文所披露的形式，不应看作是对其他实施例的排除，而可用于各种其他组合、修改和环境，并能够在本文所述发明构想范围内，通过上述教导或相关领域的技术或知识进行改动。而本领域人员所进行的改动和变化不脱离发明的精神和范围，则都应在发明所附权利要求的保护范围内。

Claims (9)

1.一种羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：
1)菌种准备：羊肚菌菌种购买或自行从栽培或野生子实体上进行分离得到；
2)菌种培养：通过母种制作、原种培养以及栽培种培养制备得到栽培种；
3)土壤处理；
4)播种：把塑料瓶装或菌袋装的栽培种从中央切成2段；在畦面上每1～1.5m2打1个直径为15～20cm的孔洞，孔洞的深度为5～10cm；将切开的菌种瓶或菌种袋露出菌种的一端放入孔洞中，稍压实，使菌种培养料与土壤接触紧密，菌种瓶或菌种袋四周用土压严实；
5)覆盖保温：畦面用一层黑色农膜覆盖，四周有土块压住；或用长竹片起拱，拱高20～25cm，在竹片上覆盖白色农膜；
6)菌丝生长期间的管理：保持土壤含水量不低于16％，干燥时适当喷水；
7)催菇处理：在播种后第70～80d开始使用催菇液，用量为0.3～0.4kg/m2；揭开农膜，用喷雾器均匀喷洒，喷后通风30～50min，再遮盖农膜；
8)出菇期间的管理：羊肚菌子实体原基形成的温度为5～15℃，子实体生长的温度为10～18℃，羊肚菌的出菇期在南方地区一般从2月初到4月初，北方地区为4月到6月初；子实体原基形成以后继续盖膜，当子实体长到2～3cm高时，揭开农膜；保持土壤含水量在18％～20％之间；适当通风；子实体从原基形成到最后成熟的生长时间为15～25d；注意防治高温，土面温度一般控制不要超过20℃；
9)采收：当子实体总高度达到7～12cm时就要及时采收，从地面1～2cm处切断菌柄，基部留在土壤表面。
2.根据权利要求1所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述步骤2)中菌种培养具体为：
2.1)母种制作：制备母种培养基，在无菌状态下接种，22-23℃恒温培养箱内避光培养3～5d，使斜面长满菌丝，继续培养7～10d；菌丝体为黄褐色、灰褐色，在琼脂培养基表面或试管壁上形成大量黄色菌核，备用；
2.2)原种培养：制备原种培养基，在无菌状态下接入母种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用；
2.3)栽培种培养：制备栽培种培养基，无菌状态下接入原种，22-23℃恒温培养箱内避光培养15～20d，使菌种瓶长满菌丝，继续培养7～10d，在培养料的表面大量形成菌核，备用。
3.根据权利要求2所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述母种培养基的配方为：麸皮25～30g，玉米粉或黄豆粉2～3g，干松针20～50g，10～23g葡萄糖或蔗糖或麦芽糖，1～2g蛋白胨或酵母粉，琼脂18～22g。
4.根据权利要求3所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述母种培养基通过以下制备方法获得：称量：麸皮25～30g，玉米粉或黄豆粉2～3g，干松针20～50g，10～23g葡萄糖或蔗糖或麦芽糖，1～2g蛋白胨或酵母粉，琼脂18～22g；在玻璃或金属容器内，按照配方称取麸皮、玉米粉或黄豆粉、干松针，加1200mL水，煮沸20min，用4层纱布进行过滤并洗涤，得到滤液1000mL，在滤液中加入琼脂，加热到全部琼脂融化，再把葡萄糖或蔗糖或麦芽糖其中任一、蛋白胨或酵母粉中任一加入溶解。然后分装到试管中，试管塞上棉塞或乳胶塞，在高压锅内0.1MPa灭菌15-20min，冷却后从高压锅内取出摆成斜面培养基；放置5-7d，使斜面上的水珠全部散尽后使用。
5.根据权利要求2所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，以干重计，所述原种培养基按照质量百分比由以下组分构成：80％～85％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，5％～10％稻壳或木屑，5％～10％熟土。
6.根据权利要求5所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述原种培养基通过以下步骤获得：以干重计，按照质量百分比称量以下组分：80％～85％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，5％～10％稻壳或木屑，5％～10％熟土；将称量好的小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一装入尼龙袋中，每袋装入总体积1/3～1/2的固体物，放入质量分数为1％～2％的石灰水中浸泡16～24h，捞起后袋内没有线状水流出即倒在地面上进行拌料；稻壳或木屑直接在清水中浸泡24～48h，捞起后稻壳中没有线状水流出即倒在地面上进行拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入菌种瓶中，聚丙烯膜用橡皮筋封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌60-80min，冷却后取出。
7.根据权利要求2所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述栽培种培养基通过以下步骤制备得到：以干重计，按照质量百分比称量以下组分：40％～50％小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一，30％～40％木屑，5％～10％稻壳，5％～10％熟土；将称量好的小麦或水稻或高粱或小米或燕麦其中任一装入尼龙袋中，每袋装入总体积1/3～1/2的固体物，放入质量分数为1％～2％的石灰水中浸泡16～24h，捞起后袋内没有线状水流出即倒在地面上进行拌料；稻壳直接在清水中浸泡24～48h，捞起后稻壳中没有线状水流出即倒在地面上进行拌料；木屑加1:1的清水拌料；熟土直接敲碎后拌入上述原料中；拌匀后装入750mL塑料菌种瓶或12～15×20～25cm的聚乙烯或聚丙烯菌种袋中，菌种瓶用透气盖封口，菌种袋用口圈加透气盖封口，高压锅内0.13～0.14MPa灭菌120-130min，冷却后取出。
8.根据权利要求1所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述步骤3)中土壤处理具体为：
3.1)选地：选择靠近自然水源，地势平坦的旱地或水田进行羊肚菌的栽培；
3.2)大田预处理：播种前3～4个月，每667m2耕地加入细木屑200～250kg，稻麦草粉200～250kg，树叶100～120kg，均匀撒在土壤表面；用旋耕机耕地，将前述原料均匀地混合在土壤表层10～20cm内，灌一次透水，用薄膜覆盖土壤闲置一季；
3.3)整地：当年11月初开始整地，用旋耕机翻地、耙细土壤，大土粒的直径不超过5cm；
3.4)放线开畦：按照畦面宽度为60～80cm、走道宽为50～60cm进行放线，用石灰粉划线；将走道内的土壤翻到畦面上，使走道的深度达到20～25cm；平整畦面，用圆形金属筒碾压畦面，使其平整；
3.5)搭建双层遮阳网棚架：用竹竿、木杆、钢管材料搭棚，棚架的高度为1.8～2.5m，用6针密度的遮阳网遮盖顶层，顶层下再搭一层遮阳网，一般每5～10亩搭建一个独立的遮阳网棚架；四周围严实，外面用途压实；浇灌1次大水，使土壤含水量达到18％～20％；土壤含水量的计算方法如下：土壤含水量＝[(湿土重量-烘干土重)/湿土重量×100％]。
9.根据权利要求1所述的羊肚菌子实体的培养方法，其特征在于，所述催菇液通过以下步骤制备得到：按照质量百分比称量以下组分：葡萄糖或蔗糖0.5％～1.0％，硫酸镁0.01％，磷酸二氢钾0.01％，硫酸亚铁0.001％，余量为水，先将葡萄糖或蔗糖、磷酸二氢钾溶于水中，再加入硫酸镁溶解，最后才加入硫酸亚铁，搅拌均匀兑成水溶液，制备得到催菇液。
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