CN109845575B - 一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法 - Google Patents
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Abstract
一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，该方法严格按标准配置原材料，按麦粒40‑50％、木屑13‑20％、稻壳15‑20％、土壤18‑20％、轻质碳酸钙1％、石膏1％、糖0.5％、磷酸二氢钾0.5％配制制作菌包的培养基，用中间接种方式对菌包接种，并通过控制培养房温度、湿度、二氧化碳浓度等培养条件参数，实现羊肚菌菌种的培养周期从25天缩短至15天，大大缩短菌种培养周期，提高生产效率；并且能够控制培养菌丝菌龄的高度一致性，保证菌丝活力，保证菌种的质量。
Description
技术领域
本发明属于食用菌菌种培养技术领域。
背景技术
羊肚菌(Morchella spp.)隶属于子囊菌门、盘菌纲、盘菌目、羊肚菌科羊肚菌属。羊肚菌是羊肚菌属真菌的统称，其属下分为3个支系，分别为黑色羊肚菌支系、黄色羊肚菌支系和变红羊肚菌支系。目前，已报道的其属下有68个系统发育学物种。
菌种质量、菌龄一致性以及菌丝活力是影响食用菌产量的重要因素，因此，对于食用菌生产及种植业来说，保证菌种质量是关键。
传统的菌种生产工艺，因原材料不规范、生产工艺不成熟、培养参数不明确等原因导致每一批生产的菌种长势差异显著，菌种培养周期太长，出现菌丝老化，活力降低等现象，严重影响菌种质量。
发明内容
本发明的目的是解决现有技术的不足，提供一种可缩短羊肚菌菌种培养周期，以减小菌丝老化、提高菌种质量的方法。
本发明的目的通过如下技术方案实现：
一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，具体方法如下：
(1)原材料标准化：包括主料的标准化、辅料的标准化和生产用水的标准化；
所述主料包括：
1)麦粒，选择《GB 1351—2008小麦》标准规定的2-4级小麦；
2)木屑，选择不含有害物质树种的阔叶树木屑或自然堆积六个月以上的针叶树种木屑，木屑规格8mm，含水量小于50％；
3)稻壳，要求完整颗粒稻壳开裂2-4瓣；
4)土壤，要符合《GB15618土壤环境质量》标准的规定，采用天然的、未受污染的泥炭土或草炭土或农田耕作层以下的土壤；
所述辅料包括麦麸、玉米粉、大豆粉；
所述生产用水要符合《GB 5749-2006》的规定；
所有原料要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味；
(2)确定培养基配方：所述配方按质量百分比计，包括麦粒40-50％、木屑13-20％、稻壳15-20％、土壤18-20％、轻质碳酸钙1％、石膏1％、糖0.5％、磷酸二氢钾0.5％；在此配方下羊肚菌菌丝长势好，生长速度快，能够满足菌丝生长需要的营养物质以及透气度；
(3)固体菌种生产：生产工艺流程包括培养基质的含水量控制、菌种包装的规格的改变、菌种棒的使用、中间接种：
1)制备培养料：根据步骤(2)确定的培养基配方进行配料、加水搅拌，控制培养料含水率39-41％；
2)制作菌包：使用耐高温的聚丙烯塑料袋进行菌种包装，包装袋规格为180mm×340mm，湿料每袋重1000g；使用耐高温塑料套环及盖子，规格为直径40mm；之后将菌包进行加温灭菌、冷却；
3)接种：采用中间接种方式，在菌包中间插入直径为20mm、长为160mm的羊肚菌菌种棒，增加透气性，增加菌丝生长速度，缩短菌种培养周期；
(4)菌种培养：将接种的菌包置于培养房中，控制培养温度17-19℃、湿度50-60％，并通过调节培养房通风量降低二氧化碳浓度，菌丝培养前3天通过调节培养房通风量控制二氧化碳浓度1000ppm左右，在相同通风量下当菌丝培养至7天左右时，培养房二氧化碳浓度达到4000ppm左右，此时加大培养房进新风时间，控制培养房二氧化碳浓度在1500-2500ppm；培养15天，即得羊肚菌菌种成品。
本发明方法所用土壤优选黄沙壤土和黑沙壤土。
本发明通过通过严格把控原材料标准，采用最适羊肚菌菌丝生长的优良培养料配方，同时控制温度、湿度、二氧化碳浓度等培养条件参数，以及通过菌种生产工艺的优化，实现羊肚菌菌种的培养周期从25天缩短至15天，大大缩短菌种培养周期，提高生产效率；并且能够控制培养菌丝菌龄的高度一致性，保证菌丝活力，保证菌种的质量。
具体实施方式
以下结合具体实施例对本发明进行进一步说明，但实施例仅用于说明，并不能限制本发明范围。
实施例1
一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，该方法包括以下步骤：
(1)原材料标准化：所选用的原材料必须标准化、规范化。包括主料的标准化、辅料的标准化和生产用水的标准化；
主料是指组成栽培基质的主要原料，是培养基质中占数量比重大的碳素营养物质。生产羊肚菌菌种的主料包括：
1)麦粒，根据国家标准《GB 1351—2008小麦》，选用2级小麦，具体见表1；
2)木屑，选择不含有害物质树种的阔叶树木屑或自然堆积六个月以上的针叶树种木屑，如栎树、枫树等；木屑规格8mm，含水量40％(质量比)。不能选择包括桉树、樟树、槐树、苦楝等含有有害物质的树种的木屑；
3)稻壳，稻壳颗粒较粗，要求完整颗粒稻壳开裂2-4瓣；
4)土壤，要符合《GB15618土壤环境质量》标准的规定，采用天然的、未受污染的泥炭土或草炭土或农田耕作层以下的土壤，以黄沙壤土、黑沙壤土较为理想；
辅料是指栽培基质组成中数量比重较少、含氮量较高、用来调节培养基质的C/N比的物质。主要辅料有麦麸、玉米粉、大豆粉等。其标准见附录1。
所述生产用水要符合《GB 5749-2006》的规定，不应随意加入药剂、肥料或成分不明的物质；
所有原料要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味；
(2)确定培养基配方：所述配方按质量百分比计，包括麦粒40％，木屑18％，稻壳20％，土壤19％，轻质碳酸钙1％，石膏1％，糖0.5％，磷酸二氢钾0.5％。
培养基配方及原料标准要求见表1；
(3)固体菌种生产：生产工艺流程包括培养基质的含水量控制、菌种包装的规格的改变、菌种棒的使用、中间接种：
1)制备培养料：根据步骤(2)确定的培养基配方进行配料、加水搅拌，控制培养料含水率39-41％；
2)制作菌包：使用耐高温的聚丙烯塑料袋进行菌种包装，包装袋规格为180mm×340mm，湿料每袋重1000g；使用耐高温塑料套环及盖子，规格为直径40mm。本发明采用的包装袋相比传统技术采用的规格140mm×280mm的小包装袋，可增加通气性，达到增氧的目的；
3)灭菌：菌包当天装袋当天灭菌，不能堆积过夜。采用高温高压灭菌，灭菌温度121-123℃，压力0.15MPa，灭菌3小时；
4)冷却：灭菌结束后，将菌包推到预冷间进行预冷，同时除去蒸汽，使菌包冷却至50-60℃，再将菌包推入强冷间进行冷却，使菌包温度降至室温，推入待接种间等待接种。整个过程要求无菌环境；
5)接种：采用中间接种方式，在菌包中间插入直径为20mm、长为160mm的羊肚菌菌种棒，并在菌包顶端封口，可增加透气性，保证菌龄的高度一致性，增加菌丝生长速度，并且缩短菌种培养周期；中间接种方式有效解决了传统的顶端接种方式透气性差、菌丝老化快、菌龄不一致的弊端；
(4)菌丝培养：将接种的菌包置于培养房中，控制培养条件，包括培养温度的控制、增加培养房通风量降低二氧化碳浓度以及控制培养房湿度，培养15天左右，即得羊肚菌菌种成品。培养条件控制如下：
1)培养温度控制：养菌室要求干燥、洁净，保持通风换气，远离禽舍、粮食、饲料、仓库、垃圾堆等产地。菌丝生长阶段不需要光照，即为暗培养。羊肚菌菌丝培养房温度控制在17℃-19℃。羊肚菌菌丝培养产生大量的生物热，要提前做好足够的制冷设备的安装，否则极易产生高温烧菌；
2)增加培养房通风量：羊肚菌菌丝生长快速，大量菌丝呼吸产生大量二氧化碳。菌丝培养前3天可适当减少通风量控制在二氧化碳浓度1000ppm左右，培养7天左右在相同通风量下培养房二氧化碳浓度达到4000ppm左右，此时必须加大培养房进新风时间，控制培养房二氧化碳浓度在1500ppm；
3)要求培养房空间湿度控制在55％-60％。
实施例2
一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，包括以下步骤：
(1)原材料标准化：所选用的原材料必须标准化、规范化。包括主料的标准化、辅料的标准化和生产用水的标准化；
主料包括：
1)麦粒，根据国家标准《GB 1351—2008小麦》，选用3级小麦；
2)木屑，选择不含有害物质树种的阔叶树木屑或自然堆积六个月以上的针叶树种木屑；木屑规格8mm，含水量45％(质量比)；
3)稻壳，稻壳颗粒较粗，要求完整颗粒稻壳开裂2-4瓣；
4)土壤，要符合《GB15618土壤环境质量》标准的规定，采用天然的、未受污染的泥炭土；
主要辅料有麦麸、玉米粉、大豆粉等；
生产用水要符合《GB 5749-2006》的规定；
所有原料要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味；
(2)确定培养基配方：所述配方按质量百分比计，包括麦粒45％，木屑14％，稻壳18％，土壤20％，轻质碳酸钙1％，石膏1％，糖0.5％，磷酸二氢钾0.5％。
培养基配方及原料标准要求见表1；
(3)固体菌种生产：生产工艺流程包括培养基质的含水量控制、菌种包装的规格的改变、菌种棒的使用、中间接种：
1)制备培养料：根据步骤(2)确定的培养基配方进行配料、加水搅拌，控制培养料含水率39-41％；
2)制作菌包：使用耐高温的聚丙烯塑料袋进行菌种包装，包装袋规格为180mm×340mm，湿料每袋重1000g；使用耐高温塑料套环及盖子，规格为直径40mm；
3)灭菌：采用高温高压灭菌，灭菌温度121-123℃，压力0.15MPa，灭菌3小时；
4)冷却：灭菌结束后，将菌包推到预冷间进行预冷，同时除去蒸汽，使菌包冷却至50-60℃，再将菌包推入强冷间进行冷却，使菌包温度降至室温，推入待接种间等待接种；
5)接种：采用中间接种方式，在菌包中间插入直径为20mm、长为160mm的羊肚菌菌种棒，并在菌包顶端封口；
(4)菌丝培养：将接种的菌包置于培养房中培养15天左右，即得羊肚菌菌种成品。培养条件控制如下：
1)培养温度控制：菌丝采用暗培养，培养房温度控制在17℃-19℃；
2)增加培养房通风量：菌丝培养前3天适当减少通风量控制在二氧化碳浓度1000ppm左右，培养7天左右在相同通风量下培养房二氧化碳浓度达到4000ppm左右，此时加大培养房进新风时间，控制培养房二氧化碳浓度在1500ppm；
3)控制培养房空间湿度在55％左右。
实施例3
一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，包括以下步骤：
(1)原材料标准化：所选用的原材料必须标准化、规范化。包括主料的标准化、辅料的标准化和生产用水的标准化；
主料包括：
1)麦粒，根据国家标准《GB 1351—2008小麦》，选用4级小麦；
2)木屑，选择不含有害物质树种的阔叶树木屑或自然堆积六个月以上的针叶树种木屑；木屑规格8mm，含水量不超过50％(质量比)；
3)稻壳，稻壳颗粒较粗，要求完整颗粒稻壳开裂2-4瓣；
4)土壤，要符合《GB15618土壤环境质量》标准的规定，采用天然的、未受污染的草炭土；
主要辅料有麦麸、玉米粉、大豆粉等；
生产用水要符合《GB 5749-2006》的规定；
所有原料要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味；
(2)确定培养基配方：所述配方按质量百分比计，包括麦粒50％，木屑13％，稻壳15％，土壤19％，轻质碳酸钙1％，石膏1％，糖0.5％，磷酸二氢钾0.5％。
培养基要求见表1；
(3)固体菌种生产：生产工艺流程包括培养基质的含水量控制、菌种包装的规格的改变、菌种棒的使用、中间接种：
1)制备培养料：根据步骤(2)确定的培养基配方进行配料、加水搅拌，控制培养料含水率40-41％；
2)制作菌包：使用耐高温的聚丙烯塑料袋进行菌种包装，包装袋规格为180mm×340mm，湿料每袋重1000g；使用耐高温塑料套环及盖子，规格为直径40mm；
3)灭菌：采用高温高压灭菌，灭菌温度121-123℃，压力0.15MPa，灭菌3小时；
4)冷却：灭菌结束后，将菌包推到预冷间进行预冷，同时除去蒸汽，使菌包冷却至50-60℃，再将菌包推入强冷间进行冷却，使菌包温度降至室温，推入待接种间等待接种；
5)接种：采用中间接种方式，在菌包中间插入直径为20mm、长为160mm的羊肚菌菌种棒，并在菌包顶端封口；
(4)菌丝培养：将接种的菌包置于培养房中培养15天左右，即得羊肚菌菌种成品。培养条件控制如下：
1)培养温度控制：菌丝采用暗培养，培养房温度控制在17℃-19℃；
2)增加培养房通风量：菌丝培养前3天适当减少通风量控制在二氧化碳浓度1000ppm左右，培养7天左右在相同通风量下培养房二氧化碳浓度达到4000ppm左右，此时加大培养房进新风时间，控制培养房二氧化碳浓度在1500ppm；
3)控制培养房空间湿度在60％。
实施例4
一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，包括以下步骤：
(1)原材料标准化：包括主料的标准化、辅料的标准化和生产用水的标准化；
主料包括：
1)麦粒，根据国家标准《GB 1351—2008小麦》，选用4级小麦；
2)木屑，选择不含有害物质树种的自然堆积六个月以上的针叶树种木屑；木屑规格8mm，含水量不超过50％(质量比)；
3)稻壳，稻壳颗粒较粗，要求完整颗粒稻壳开裂2-4瓣；
4)土壤，要符合《GB15618土壤环境质量》标准的规定，采用天然的、未受污染的黄沙壤土；
主要辅料有麦麸、玉米粉、大豆粉等；
生产用水要符合《GB 5749-2006》的规定；
所有原料要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味；
(2)确定培养基配方：所述配方按质量百分比计，包括麦粒43％，木屑20％，稻壳16％，土壤18％，轻质碳酸钙1％，石膏1％，糖0.5％，磷酸二氢钾0.5％。
培养基要求见表1；
(3)固体菌种生产：生产工艺流程包括培养基质的含水量控制、菌种包装的规格的改变、菌种棒的使用、中间接种：
1)制备培养料：根据步骤(2)确定的培养基配方进行配料、加水搅拌，控制培养料含水率39-40％；
2)制作菌包：使用耐高温的聚丙烯塑料袋进行菌种包装，包装袋规格为180mm×340mm，湿料每袋重1000g；使用耐高温塑料套环及盖子，规格为直径40mm；
3)灭菌：采用高温高压灭菌，灭菌温度121-123℃，压力0.15MPa，灭菌3小时；
4)冷却：灭菌结束后，将菌包推到预冷间进行预冷，同时除去蒸汽，使菌包冷却至50-60℃，再将菌包推入强冷间进行冷却，使菌包温度降至室温，推入待接种间等待接种；
5)接种：采用中间接种方式，在菌包中间插入直径为20mm、长为160mm的羊肚菌菌种棒，并在菌包顶端封口；
(4)菌丝培养：将接种的菌包置于培养房中培养15天左右，即得羊肚菌菌种成品。培养条件控制如下：
1)培养温度控制：菌丝采用暗培养，培养房温度控制在17℃-19℃；
2)增加培养房通风量：菌丝培养前3天适当减少通风量控制在二氧化碳浓度1000ppm左右，培养7天左右在相同通风量下培养房二氧化碳浓度达到4000ppm左右，此时加大培养房进新风时间，控制培养房二氧化碳浓度在1500ppm；
3)控制培养房湿度在58％左右。
表1 羊肚菌菌种培养基要求
表2 小麦质量要求(GB 1351—2008小麦)
Claims (2)
1.一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，其特征在于，方法如下：
（1）原材料标准化：包括主料的标准化、辅料的标准化和生产用水的标准化；
所述主料包括：
1）麦粒，选择《GB 1351—2008小麦》标准规定的2-4级小麦；
2）木屑，选择不含有害物质树种的阔叶树木屑或自然堆积六个月以上的针叶树种木屑，木屑规格8mm，含水量小于50%；
3）稻壳，要求完整颗粒稻壳开裂2-4瓣；
4）土壤，要符合《GB15618 土壤环境质量》标准的规定，采用天然的、未受污染的泥炭土或草炭土或农田耕作层以下的土壤；
所述辅料包括麦麸、玉米粉、大豆粉；
所述生产用水要符合《GB 5749-2006》的规定；
所有原料要求新鲜、洁净、干燥、无虫、无霉、无异味；
（2）确定培养基配方：所述配方按质量百分比计，包括麦粒40-50%、木屑13-20%、稻壳15-20%、土壤18-20%、轻质碳酸钙1%、石膏1%、糖0.5%、磷酸二氢钾0.5%；
（3）固体菌种生产：生产工艺流程包括培养基质的含水量控制、菌种包装的规格的改变、菌种棒的使用、中间接种：
1）制备培养料：根据步骤（2）确定的培养基配方进行配料、加水搅拌，控制培养料含水率39-41%；
2）制作菌包：使用耐高温的聚丙烯塑料袋进行菌种包装，包装袋规格为180mm×340mm，湿料每袋重1000g；使用耐高温塑料套环及盖子，规格为直径40mm；之后将菌包进行加温灭菌 、冷却；
3）接种：采用中间接种方式，在菌包中间插入直径为20mm、长为160mm的羊肚菌菌种棒，增加透气性，增加菌丝生长速度，缩短菌种培养周期；
（4）菌种培养：将接种的菌包置于培养房中，控制培养温度17-19℃、湿度50-60%，并通过调节培养房通风量降低二氧化碳浓度，菌丝培养前3天通过调节培养房通风量控制二氧化碳浓度1000ppm，在相同通风量下当菌丝培养至7天左右时，培养房二氧化碳浓度达到4000ppm，此时加大培养房进新风时间，控制培养房二氧化碳浓度在1500-2500ppm；共计培养15天，即得羊肚菌菌种成品。
2.根据权利要求1所述的一种缩短羊肚菌菌种培养周期的方法，其特征在于，所用土壤为黄沙壤土或黑沙壤土。
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| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| GR01 | Patent grant | ||
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