CN107371785A - 一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及生物种植栽培技术领域，具体是一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法,包括以下步骤：采集羊肚菌，制备原种；将培养基A装入菌种袋内培养后灭菌处理；将原种接种到菌种袋内的培养基A上培养20天‑30天，得到种料；制作稻田培养基质，然后在种料中加入拌种剂，然后播种；田间管理：所述种料播种12‑15天后浸水，浸水深度不超过沟深的90％，保持2‑3小时后排干水分，让土壤保持润湿；然后每隔12天‑15天重复一次浸水；菌渣返田。本发明利用羊肚菌菌核为接种体，以谷类废弃物和土壤为基质，进行栽培，同时菌肥可“反哺”稻田和菜园，变废为宝，综合利用，实现良性循环。

Description

一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法

技术领域

本发明涉及生物种植栽培技术领域，具体是一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法。

背景技术

羊肚菌又称羊雀菌、麻子菌等，因其子实体外观形似羊肚而得名，主要包括黑色羊肚菌和黄色羊肚菌两类。在我国主要分布于东北四省、山东、安徽、浙江、湖北、甘肃、陕西诸省，以及新疆、台湾等地。国内外一直视其为高档宴席上的佳肴，同时羊肚菌实体还可入药，具有益肠胃、消化助食、化痰理气、补肾、提神之功能。受气候和环境条件的影响，野生羊肚菌采集不易，只能少数人享用，人工栽培羊肚菌是人们梦寐以求的愿望。

早在1892年，REPN以培养羊肚菌菌丝体做菌种，播种在花园地上，1896年获得菌丝体，再经石灰处理至碱性的干叶组成的菌床上和以苹果残渣填满的山沟中也都长出羊肚菌，但这种仿生栽培产量极不稳定，因此，羊肚菌完全人工栽培一直是广大羊肚菌爱好者努力的目标。国外最早是1982年OWER等发明的羊肚菌人工栽培方法。2004年，MILIER等申请了羊肚菌人工种植的专利，栽培方法是一个显著特点就是在羊肚菌菌丝生长阶段必须与植物相互作用，才能形成羊肚菌子实体。我国从20世纪80年代至今，不时有栽培成功的报道，但产量稀少。因此实现羊肚菌规模化、工厂化、可持续栽培依然是广大羊肚菌爱好者不懈努力的共同目标。

中国发明专利申请公布号为CN 105123259 A、申请日为2015.07.21中公开了一种羊肚菌的仿野生栽培方法，包括母种制作、原种制作、栽培种制、发菌培养、出菇管理和采收工序，其特征在于：在母种制作、原种制作栽培种制作阶段，控制培育温度在18-20℃，培养基含水量在60％-65％，空间湿度为55％-60％，控制菌丝生长的pH值7.0-7.5范围内生长，环境中的CO2浓度控制在0.3％以下，发菌培养和出菇期管理阶段，控制培育温度在6-20℃，培养基含水量在60％-95％，空间湿度为60％-90％，出菇期基质的pH值范围为7.0 -7.5，环境中的CO2浓度控制在0.3％以下，光照控制范围为400-600流明，所述发菌培养、出菇管理可以在大田或室内进行，出菇过程中施用催菇剂，所述催菇剂每平方800-1000ml，所述催菇剂为出菇刺激所需的多种原料配制。但是，栽培成本高，周期长，且对菌渣并未循环利用，造成资源浪费。

中国发明专利申请公布号为CN 104885786 A、申请日为2015.06.16中公开了一种尖顶羊肚菌的人工栽培方法，包括以下步骤：采集尖顶羊肚菌，制备原种；将培养基A装入菌种袋内培养后灭菌处理；将原种接种到菌种袋内的培养基A上培养20天-30天，得到种料；在种料中加入拌种剂，然后播种；拌种剂加入量为种料重量的5％-10％；拌种剂的配比为：尿素10g-20g，KH2P041g-2g，MgSO41g-2g，水800g-1200g。本发明的方法，包含了菌种的选育、分离、接种培养，田间栽培的所有过程，全面的公开了尖顶羊肚菌的人工栽培方法，适合羊肚菌的推广栽培，提高产量。但是，成本高，不经济，无法实现良性循环。

发明内容

本发明所要解决的技术问题在于克服现有技术的不足，提供了一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，解决了传统羊肚菌栽培成本高、产量低、资源利用率低的问题。

为解决以上技术问题，本发明现提出以下技术方案：一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，主要包括以下步骤：

1)采集羊肚菌，制备原种；

2)将培养基A装入菌种袋内培养后灭菌处理；

3)将原种接种到菌种袋内的培养基A上培养20天-30天，得到种料；

4)制作稻田培养基质，然后在步骤3)所述的种料中加入拌种剂，然后播种；

5)田间管理：所述种料播种12-15天后浸水，浸水深度不超过沟深的90％，保持2-3小时后排干水分，让土壤保持润湿；然后每隔12天-15天重复一次浸水；

6)摆袋：播种的土壤上出现孢子后在土壤上铺设折角袋，所述折角袋上设有孔；

7)菌渣返田：将由以上步骤生产的羊肚菌采摘后，留下菌渣，将纤维素产生菌、碳水化合物产生菌、氨基酸产生菌、谷氨酸产生菌按一定比例均匀撒在所述稻田菌渣的表面，控制水分和pH值，发生生物发酵；每隔3天-5天测量一次发酵液的成分，每次测量3-4次，取平均值，直至发酵液各成分的含量变化在0.01％以内；根据最终侧得值添加营养元素，组合成稻田土壤基质，种植谷物；

8)循环种植：重复以上步骤，实现羊肚菌良性循环种植。

进一步的，所述拌种剂加入量为种料重量的5％-10％；拌种剂的配比为：尿素10g-20g， KH2P04 1g-2g，MgSO4 1g-2g，水800g-1200g，所述步骤4)中，播种后将拌好的菌种颗粒均匀的撒在厢面，用细土均匀覆盖，覆土厚度为3cm；覆土后将厢面用滚筒压实并浇透水一次。

进一步的，所述步骤2)中的灭菌处理方法包括高压蒸汽灭菌和常压蒸汽灭菌，其中高压蒸汽灭菌的压力为0.15MPa，灭菌时间为3-4小时；所述常压蒸汽灭菌的温度为100℃，灭菌时间为10小时-14小时。

进一步的，所述步骤3)中的培养条件为温度18℃-20℃，湿度55％-65％。

进一步的，所述原种的制备过程为：

A、选择种菇：采集人工种植或者野生的尖顶羊肚菌，晾晒至含水量为60％-75％，得到种菇；

B、菌种分离：用刀片将种菇的菌盖纵向切开，用接种钩钩取小块菌肉，接入分离培养基斜面上，并在15℃-20℃条件下培养9天-12天；得到菌种；

C、将菌种分离出来置于培养基B内继续培养，于15℃-20℃条件下培养9天-12天；得到母种；

D、将母种置于含有培养基C的原种培养瓶内培养，培养温度为18-20℃，湿度55％-65％，二氧化碳浓度低于2000ppm，每天光照2小时-3小时。

进一步的，所述分离培养基的配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，甘草甜素1g，芸苔素内酯0.5g，水1000ml；调节pH至中性。

进一步的，所述培养基B的配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，蛋白胨3g，KH2P04 1g，MgSO4 1g，水1000mL。

进一步的，所述培养基C的重量配比为：泡高粱40％，泡谷壳40％，土16％，石膏1％，KH2P04 1％，石灰2％；该培养基的制备方法为：将高粱和谷壳加入水浸泡，同时加入石灰，泡制24 小时以上后捞出晾干，然后加入土、石膏和KH2P04混合均匀。

与现有技术相比较，本发明的有益效果在于：1、本发明利用羊肚菌菌核为接种体，以谷类废弃物和土壤为基质，进行栽培，同时菌肥可“反哺”稻田和菜园，变废为宝，综合利用，实现良性循环；

2、通过本发明羊肚菌的循环种植，成本低，效益高，同时有效利用了土地资源，实现林地立体农业发展模式。

具体实施方式

为使对本发明的结构特征及所达成的功效有更进一步的了解和认识，用以较佳的实施例配合详细的说明，具体说明如下：

实施例1

1、羊肚菌的菌种分离

分离培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，甘草甜素1g，芸苔素内酯0.5g，水1000ml，PH 7.0。

制备方法：选择优质马铃薯，去皮切片，称取200g，加水1000ml放入锅内煮沸20分钟，趁热过滤后取滤液，并用热水补充到1000ml，加入其它材料，搅拌融化后趁热分装。容器采用20mm×200mm的玻璃试管，培养基装量为10-15ml，为试管长度的1/5，用试管塞封口。

本发明根据羊肚菌和杂菌在同一环境中额生长情况，调整了羊肚菌的分离培养基，本发明的分离培养基可以使羊肚菌种菌在培养基内形成优势菌群，其他杂菌不易形成优势菌群，降低了分离难度，也有利于羊肚菌群的培养。

灭菌方法：将试管直立放在高压锅内灭菌。当压力上升至0.05MPa时，排气一次。继续加热，至0.15MPa时，维持40分钟。

斜面制作：趁热将试管口一端垫放到1cm高的支架上，斜面长度达试管全长的2/3为宜。

种菇选择：采集当地人工种植或野生的尖顶羊肚菌品种，选择6-7层熟，菇型最好的鲜菇，整棵拔起，晾至含水量70％；得到种菇。

菌种分离：用刀片将菌盖纵向切开，在菌盖内壁用接种钩钩取小块菌肉，接入空白培养基斜面的中部，塞好试管塞。

在18℃下培养3-5天后即可看到组织块周围长出白色稀疏纤细的菌丝，8-10天菌丝即可长满试管，即得到菌种。

2、羊肚菌的母种制作

培养基配方：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，蛋白胨3g，KH2P04 1g，MgSO41g，水1000mL，PH值自然。

制备方法：按照菌种分离的方法制备培养基，摆成斜面后备用。

接种操作：从组织分离管中挑取7mm见方大的培养基，放入空白培养基上，每支母种可接20-30支。分离的母种只能扩繁一次，否则会影响出菇。

培养：在18℃下培养1天后即可看到菌种块周围长出白色稀疏的菌丝，8-10天菌丝即可长满试管。

3、羊肚菌的原种制作

培养基配方：高粱40％，谷壳40％，土16％，石膏1％，KH2P04 1％，石灰2％，测量其中的含水量55％。

制作过程：高粱和谷壳提前48小时加水浸泡，同时加入2％的石灰。高粱浸泡至无白心时，捞出沥干摊晾。土选用菜园地20cm以下的生土，粒径在1cm以下。按照配方将各种材料混合均匀后装瓶。装瓶时装至瓶肩，要求种瓶上下松紧一致，用棉花或者塑料薄膜封口。

灭菌：采用高压蒸汽灭菌，压力要求0.15MPa维持3小时。

接种：菌种瓶温降至18℃，接种需严格按照无菌操作进行。将斜面前端1cm长的菌丝块挖去，剩余的斜面分成6段，接入原种瓶内，棉塞过火焰后塞好。如此一支试管可接6瓶原种。每接完一支试管，接种钩要重新消毒。

培养：培养室温度18-20℃，湿度55-65％。一般2-3天菌丝即可吃料，5-7天菌丝即可封面。待菌丝封面后，加强通风换气，二氧化碳浓度1800ppm，15天左右每天光照2小时，产生大量菌核，一般培养25天菌丝即可长满瓶。

4、羊肚菌的栽培种制作

培养基配方：高粱40％，谷壳20％，土36％，过磷酸钙1％，石膏1％，石灰2％。含水量55％。

按照原种的制备方法，土块粒径要求在1-2cm将原材料混合均匀后装入菌种袋。菌种袋采用15cm*30cm聚丙烯折角袋，厚度0.05cm。装袋要求松紧上下一致。袋口用专用套环和盖子封口。

灭菌：高压蒸汽灭菌压力在0.15MPa维持3.5-4小时。常压蒸汽灭菌温度在100℃维持 12小时。

接种：接种时先将原种瓶表面1cm厚的老菌种块挖掉，将菌种捣碎成粒径1cm的颗粒，接入栽培种菌袋内，压实，上盖。1瓶原种可接40-50袋栽培种。

培养：置于专门的培养室中的培养架上培养。培养架宽80cm，层数为5-7层，每层高30cm，底层离地20cm。培养室温度18-20℃，湿度55-65％。15天左右每天光照2小时，产生大量菌核，经过20-25天菌丝可长满全袋。满袋15天内播种完毕，避免老化。

5、制作稻田培养基质

整地：用耕整机将地打碎，土块粒径小于3cm，按厢面宽1m、沟宽0.5m开厢，用消毒杀虫剂在厢面喷洒，将稻田谷物废弃物原料经平整、预湿后，再盖上黑色地膜焖3-5天，然后在种料中加入拌种剂，播种；

播种：将菌种掰成粒径1-2cm的颗粒，大容器成装，每10kg菌种加入1kg拌种剂。拌种剂配方为：尿素20g，KH2P04 1g，MgSO4 1g，水1000g。将拌好的菌种颗粒均匀的撒在厢面，用细土均匀覆盖，覆土厚度为3cm。覆土后将厢面用滚筒压实并浇透水一次。

6、羊肚菌的田间管理

建棚：播种前后均可建棚，长度、宽度不限，高度为2.5米，用竹子、木材、水泥柱等材料搭建，上盖单层4-6针遮阳网，并加固。

浸水：播种15天左右，浸第一次水，浸水深度为沟深的90％，维持2-3小时后排干，让土壤一直处于湿润的状态，以后每隔15天左右浸水一次。

摆袋：在播种后大约20天，浸水7天左右土表面就会出现分生孢子，开始摆袋。袋子用 15cm*30cm的折角袋，一面扎孔20个，扎孔面向下平放于土壤表面，每亩用量1500袋。

7、羊肚菌的出菇管理

温度管理：羊肚菌的原基形成和子实体生长需要的温度基本相似，它从8-22℃都能生长，以10-18℃为宜，温度高子实体肉薄、柄长、帽短小、色黄，商品价值低。温度过低子实体生长缓慢、肉厚、色黑。

湿度管理：发现原基后，隔5天浸水一次直至采菇，开始采菇后每天早晚喷雾化水1次，保持空间湿度80-90％。

光照管理：羊肚菌适宜在阴凉暗光的环境下生长，幼菇生长需要一定的散射光，保持出菇棚三分阳七分阴的条件。

通风管理：出菇期间要求空气新鲜、无灰尘、无农药、无放射性的气味和无臭异味。要注意用塑料薄膜覆盖的塑料大棚栽培，必须保证空气流通，二氧化碳浓度700ppm以下，防止闷气或闭气影响正常出菇。

酸碱度管理：保持土壤pH在6.0-8.5之间，浇灌用水pH为7-7.5。

羊肚菌的人工栽培成败关键除了温湿度而外，病虫害防治也是很关键的，在栽培过程中不提倡施用化学农药，强调预防为主，综合防治，化学防治为辅。

8、菌渣返田

羊肚菌采摘后，留下菌渣，将纤维素产生菌、碳水化合物产生菌、氨基酸产生菌、谷氨酸产生菌按一定比例均匀撒在所述稻田菌渣的表面，控制水分和pH值，发生生物发酵；每隔 3天-5天测量一次发酵液的成分，每次测量3-4次，取平均值，直至发酵液各成分的含量变化在0.01％以内；根据最终侧得值添加营养元素，组合成稻田土壤基质，种植谷物。

9、循环种植

取至少两块稻田为一组，轮流交替种植谷物与羊肚菌，实现良性循环。

最后应说明的是：以上实施例仅用以说明本发明的技术方案，而非用以对其限制；尽管参照前述实施例对本发明进行了详细的说明，本领域的技术人员应当理解，其依然可以对前述实施例记载的技术方案进行修改，或者对其中部分技术特征进行等同替换；而这些修改或替换，并不使相应技术方案的本质脱离本发明各实施例技术方案的精神与范围。

Claims (8)

1.一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，主要包括以下步骤：

1)采集羊肚菌，制备原种；

2)将培养基A装入菌种袋内培养后灭菌处理；

3)将原种接种到菌种袋内的培养基A上培养20天-30天，得到种料；

4)制作稻田培养基质：将稻田谷物废弃物原料经平整、预湿后，然后在步骤3)所述的种料中加入拌种剂，然后播种；

5)田间管理：所述种料播种12-15天后浸水，浸水深度不超过沟深的90％，保持2-3小时后排干水分，让土壤保持润湿；然后每隔12天-15天重复一次浸水；

6)摆袋：播种的土壤上出现孢子后在土壤上铺设折角袋，所述折角袋上设有孔。

7)菌渣返田：将由以上步骤生产的羊肚菌采摘后，留下菌渣，将纤维素产生菌、碳水化合物产生菌、氨基酸产生菌、谷氨酸产生菌按一定比例均匀撒在所述稻田菌渣的表面，控制水分和pH值，发生生物发酵；每隔3天-5天测量一次发酵液的成分，每次测量3-4次，取平均值，直至发酵液各成分的含量变化在0.01％以内；根据最终侧得值添加营养元素，组合成稻田土壤基质，种植谷物；

8)循环种植：重复以上步骤，实现羊肚菌良性循环种植。

2.根据权利要求1所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述拌种剂加入量为种料重量的5％-10％；拌种剂的配比为：尿素10g-20g，KH2P041g-2g，MgSO41g-2g，水800g-1200g，所述步骤4)中，播种后将拌好的菌种颗粒均匀的撒在厢面，用细土均匀覆盖，覆土厚度为3cm；覆土后将厢面用滚筒压实并浇透水一次。

3.根据权利要求1所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述步骤2)中的灭菌处理方法包括高压蒸汽灭菌和常压蒸汽灭菌，其中高压蒸汽灭菌的压力为0.15MPa，灭菌时间为3-4小时；所述常压蒸汽灭菌的温度为100℃，灭菌时间为10小时-14小时。

4.根据权利要求1所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述步骤3)中的培养条件为温度18℃-20℃，湿度55％-65％。

5.根据权利要求1所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述原种的制备过程为：

A、选择种菇：采集人工种植或者野生的尖顶羊肚菌，晾晒至含水量为60％-75％，得到种菇；

B、菌种分离：用刀片将种菇的菌盖纵向切开，用接种钩钩取小块菌肉，接入分离培养基斜面上，并在15℃-20℃条件下培养9天-12天；得到菌种；

C、将菌种分离出来置于培养基B内继续培养，于15℃-20℃条件下培养9天-12天；得到母种；

D、将母种置于含有培养基C的原种培养瓶内培养，培养温度为18-20℃，湿度55％-65％，二氧化碳浓度低于2000ppm，每天光照2小时-3小时。

6.根据权利要求6所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述分离培养基的配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，甘草甜素1g，芸苔素内酯0.5g，水1000ml；调节pH至中性。

7.根据权利要求6所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述培养基B的配方为：马铃薯200g，葡萄糖20g，琼脂粉20g，蛋白胨3g，KH2P041g，MgSO41g，水1000mL。

8.根据权利要求6所述的一种人工栽培羊肚菌综合利用的方法，其特征在于，所述培养基C的重量配比为：泡高粱40％，泡谷壳40％，土16％，石膏1％，KH2P041％，石灰2％；该培养基的制备方法为：将高粱和谷壳加入水浸泡，同时加入石灰，泡制24小时以上后捞出晾干，然后加入土、石膏和KH2P04混合均匀。