CN111149623A - 一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，包括用矿物固体颗粒和有机物物料混合的原料做原种的培养基；栽培种生产用机械自动化装袋，全封口，灭菌冷却后在流水线上的无菌环境接种台上，在每一个菌袋上打1‑3个孔接种，再在菌种袋外面套一个无菌套袋，松扎口培养。用该方法进行羊肚菌栽培种的规模化生产，1台装袋机每天可以装袋20000袋以上，人工接种的效率为2000‑2500袋/工时(8小时)，菌丝体长满菌种袋的时间为7‑10天，菌种污染率低于0.1％。该方法可以大大加快生产效率，实现羊肚菌栽培菌种的快速、高效、低污染的规模化生产，每袋降低成本0.15‑0.20元，可以满足羊肚菌栽培产业中对羊肚菌栽培种的巨量需求。

Description

一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法

技术领域

本发明涉及食药用菌菌种生产技术领域，具体涉及一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法。

背景技术

羊肚菌是指真菌界Fungi子囊菌门Ascomycota盘菌亚门Pezizomycotina盘菌纲Pezizomycetes盘菌目Pezizales羊肚菌科Morchellaceae羊肚菌属(Morchella)所有物种的统称，该属有70多个系统学物种。该属分为黑色类群、黄色类群和红色类群等，大部分物种还不能够进行子实体的人工培养，只有黑色、红色的类群有少量物种可以进行商业化栽培。目前国内外能够人工培养子实体的物种有：六妹羊肚菌Morchella sextelata、梯棱羊肚菌Morchella importuna、七妹羊肚菌Morchella eximia、黑脉羊肚菌Morchellaangusticeps、变红羊肚菌Morchella rufobrunnea、头丝羊肚菌Morchella exuberans、欧氏羊肚菌Morchella oweri、Mel-13、Mel-21等。国内外商业化栽培的物种主要是六妹羊肚菌、梯棱羊肚菌2个物种。

羊肚菌大田栽培的播种的季节一般是11-12月，栽培菌种的生产季节是10月初-11月中旬，羊肚菌栽培菌种生产的时间段只有30-50天。羊肚菌栽培过程中需要巨大数量的栽培种，有营养料袋的栽培技术需要栽培菌种数量为400-500袋/亩和1600-2000个营养料袋，生产1000亩羊肚菌栽培菌种的菌种厂必须在30-40天内集中生产40-50万袋栽培种，每天1万袋以上；无营养料袋的栽培技术需要栽培菌种的数量为2000-2500袋/亩，生产1000亩菌种的菌种厂必须在30-40天内集中生产200-250万袋，每天20万袋以上。

传统的羊肚菌栽培种生产的方法存在如下缺点：

一是装袋速度慢。羊肚菌栽培种是用聚丙烯或聚乙烯菌种袋做容器，菌袋的规格是12-18×24-35cm，把培养料装满以后，用3-4cm直径的口圈套在袋口，再盖上带有滤膜的盖子进行灭菌。用口圈和盖子的菌种袋在接种时必须打开盖子，将菌种接入袋中，再盖上盖子进行培养。这样的技术操作十分繁琐，装袋生产速度很慢。

二是污染风险高。用该方法生产羊肚菌栽培种，菌种袋在培养过程中菌袋和菌盖都是处于裸露状态，容易受到外界环境的影响。因为菌袋表面、盖子表面、盖内的滤膜、内卷的袋口、袋口的多层膜之间等部位残留有培养料的细粉，在10月、11月的高温高湿季节下进行培养，很容易受到杂菌的浸染，如链孢霉Neurospora、青霉Penicillium、木霉Trichoderma、黑曲霉Aspergillus、根霉Rhizopus、毛霉Mucor、镰刀菌Fusarium等；这样的方法生产羊肚菌栽培种，根据大量的现场统计数据分析，发现在60％以上的羊肚菌栽培菌种生产厂家生产的羊肚菌栽培菌种中，有20％甚至50％以上的比率发生肉眼可见的外观污染；即使在外观上看不见污染的菌种，也大量存在隐性污染，当羊肚菌栽培菌种播种在大田中以后，也会出现大量的田间污染，上万亩以上的调查表明，有90％以上的栽培田块都会发现有比率不等的霉菌污染，污染面积占田块面积的10％-90％，栽培田块的菌床表面，没有杂菌污染的田块占的比例是非常小的。这样的羊肚菌栽培菌种无法满足高产栽培的技术要求，常常导致大量的栽培户产量低下，经济效益很差，无法获得理想的商业效益。

三是存在烧菌风险。用带盖的菌种在培养过程中，菌袋平行立放在塑料筐中，相互挤压码放，菌种袋紧密接触，散热差，热量堆积，导致高温烧菌，菌种生产失败无法使用。

四是菌丝体难长满菌袋。用带盖的菌袋培养羊肚菌菌种存在的另外一个问题是，菌丝体在前期生长速度较快，菌袋中前面2/3-3/4可以在15-20天长满，剩余后面的1/5-1/4还需要10-20天才能长满，甚至无法长满菌丝体。原因是培养料紧实不通气，菌袋之间相互挤压，菌袋中底部的培养料含水量较高，菌丝体无法继续快速生长，必须要对每一个菌种袋上进行打孔作业，菌丝体才能长满。打孔作业需要消耗大量的劳动力，同时又会带来杂菌污染的风险。

五是菌种容易老化。用带盖的菌袋生产的羊肚菌栽培菌种，长满菌丝体以后，存放20天以后，会出现菌丝体老化、菌种袋表面和口部大量生长菌皮、大量形成菌核、污染率持续增加等问题，菌种的保藏时间很短，一般需要菌丝体长满菌袋以后就立即使用。

六是培养时间长。不采用通气盖直接用细绳、或橡皮筋扎口的菌种，由于通气不良，菌丝体长满菌袋非常困难，培养时间长达40-50天以上，无法满足生产的需求。

用窝口机袋装的菌种，菌袋中央插入一根接种棒，接种时把接种棒取掉，把羊肚菌原种接入菌袋中央很深的部位，盖上棉花塞或泡沫塞，菌丝体在7-10天就可以长满菌袋，这是一种快速高效的羊肚菌栽培菌种生产方法。但是该方法在接种操作、菌种培养过程中菌袋都处于开放的状态，这样的方法生产的菌种也会存在高污染的风险。由于这样的菌袋处于最大的通气量状态，羊肚菌菌丝体快速长满培养料以后，由于氧气充足，菌丝体还会大量生长，在菌袋表面、口部会长出2-10mm厚的菌皮，这种无效的、无用的生长会大量消耗培养料中的营养物质，菌丝体播种后菌丝体的萌发和生长势会减弱。

为减少或杜绝羊肚菌栽培种规模化生产过程中的杂菌污染、生产费工费力、生产效率低下等技术问题，特提出一系列新技术，实现羊肚菌栽培菌种的高效率、低成本、低污染、短周期的生产。

现有技术中涉及羊肚菌栽培菌种生产技术的专利，例如：

申请号为201910192245.1的专利：公开了一种羊肚菌菌种基质及其制备方法和羊肚菌菌种的培养方法，包括步骤S1，按质量百分数取油菜秸秆碎片60-75％，小麦粒25-40％，上述物质的质量百分数之和为100％，用水将油菜秸秆碎片浸透，用质量浓度为1％-1.5％的石灰水将小麦粒浸透；步骤S2，将步骤1中得到的浸透的油菜秸秆碎片和小麦粒混合均匀装入菌种袋中，并且在121℃下灭菌2-2.5h，得到菌种基质。该基质能够激活羊肚菌的漆酶、锰过氧化物酶和木质素过氧化物酶的活性，使羊肚菌菌种基质中的羊肚菌菌丝生长更加旺盛、形成更多菌核，提高最终收获的子实体产量。

申请号：201810229511.9的专利：涉及一种羊肚菌菌种的培育方法，一种羊肚菌菌种的培育方法，其特征在于，包括：(1)母种的制作及培养.制作母种培养基：所述母种培养基的原料组成为，以重量份数计：去皮马铃薯120-180份、葡萄糖11-18份、琼脂12-16份、磷酸二氢钾0.4-0.6份、硫酸镁0.3-0.5份、玉米粉3-7份；将所述去皮马铃薯切块，加水煮沸15-20分钟，捣碎后过滤，得到滤液；向上述滤液中加入上述重量份数的葡萄糖、琼脂、磷酸二氢钾、硫酸镁及玉米粉，加热至琼脂完全溶化，离心，取上清液，于0.1MPa压力下高压灭菌30min，取出冷却，即得母种培养基；B.母种的培养：将野生环境中生长健壮、个大、长势好的羊肚菌子实体去除菌柄，余下的菌盖用体积浓度为70％的酒精表面消毒，并用无菌水冲洗，待干燥后，切取5mm×5mm的菌肉2-3块，接入所述母种培养基中，置于培养箱中培养，直至长成母种；所述培养箱的温度为16℃-20℃；(2)原种的制作及培养A.制作原种培养基：所述原种培养基的原料组成为，以重量份数计：苹果木屑70-80份、麦粒15-20份、石灰0.5-1.5份、石膏0.5-1.5份、土壤3-7份；将上述重量份的各组分混合，加水搅拌，控制水分的含量为60-70％，于0.2MPa压力下高压灭菌1.5-2h，取出冷却，即得原种培养基；B.原种的培养：在接种箱中，将所述母种接种到所述原种培养基中；所述接种箱的温度保持在25℃-30℃；(3)培养种的制作及培养A.制作培养种的液体培养基：所述原种培养基的原料组成为，以重量份数计，尿素6-10份，甘蔗渣10-12份，麦粒32-38份、葡萄糖6-9份、酵母膏10-15份、玉米浆5-10份、氯化钙8-10份、柠檬酸铁3-6份、氯化钙3-5份，石膏1-5份；将上述重量份的各组分混合，滤渣，得到培养液，于0.15Pa压力下灭菌10-20min，取出冷却，即得到液体培养基；B.在接种箱中，将所述原种培养基加入到所述液体培养基中，即获得培养种；所述接种箱的温度保持在15℃-20℃。

申请号：201910896232.2的专利内容是：一种羊肚菌菌种的培育方法，其特征在于，所述羊肚菌菌种的培育方法包括：步骤一：母种的培育，所述母种培育包括羊肚菌子实体的分离，将所分离的部位接种的母种培养基上进行母种培育，得到母种；步骤二，原种的培育，将步骤一所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；步骤三，栽培种的培育，将步骤二所述原接种到栽培种培养基上进行培育，获得栽培种；其中，所述原种培养基包括以下质量百分比的组分：55％-80％的硬杂木屑，3％-8％的黄豆粉，8％-15％的麦麸，2％-6％的玉米粉、2％-5％的腐殖土及0.03％-0.2％的壳聚糖；所述栽培种培养基包括以下质量百分比的组分：65％-84％的农作物秸秆粉，15％-22％的麸皮，0.5％-1.4％的过磷酸钙，0.4％-1.5％的石膏、0.4％-0.8％的石灰、0.8％-2.5％的腐殖土及0.04％-0.3％的壳聚糖。

以上专利申请都未涉及原种的固体颗粒培养基和栽培种菌袋打孔接种和套袋培养的技术内容。

发明内容

本发明的一个目的是解决至少上述问题和/或缺陷，并提供至少后面将说明的优点。

为了实现根据本发明的这些目的和其它优点，提供了一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，包括以下步骤：

步骤一、采用常规琼脂培养基对原始母种进行转扩，培养得到母种；

步骤二、将所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；所述的原种培养基的制备方法为：取重量比为60～85:15～40的原种固体矿物颗粒物料和原种有机物物料搅拌均匀，让每一颗原种固体矿物颗粒表面都裹上一层厚2-5mm的有机物物料；将混合后的物料装入1100～1500mL的聚丙烯大口菌种瓶中，用原种有机物物料填平聚丙烯大口菌种瓶的表面，物料装齐瓶肩；然后用清水清洗瓶口和瓶身，盖好瓶盖，并采用0.13～0.14MPa的压力进行高压灭菌，灭菌时间为1-2小时，得到原种培养基；

所述原种固体矿物颗粒物料的包括以下相同重量份的原料：多孔陶粒、瓦粒、砖粒和火山石粒，该原料均粉碎成大小不等的颗粒物，直径1～2cm，形状不限；并采用0.5wt％石灰水预湿2～3小时；

所述原种有机物物料的颗粒直径大小为1～2mm，其配方的重量百分数为：阔叶树木屑细粉40％～50％，稻壳粉5％，酒糟粉20％～30％，麸皮粉20％～30％，黄豆粉1％～3％，石灰0.5％，碳酸钙1％，石膏1％；将原料加水混合均匀，使含水量为62％～63％；

步骤三、羊肚菌栽培菌种的规模化生产：将小麦、木屑、稻壳、玉米芯、酒糟、石灰、石膏和碳酸钙中的几种原料组成的培养料倒入拌料机的料斗内，搅拌5-10分钟；检测培养料的水分和pH，使培养料含水量为60％～63％，pH为7.5-8.0，放30-60分钟后进行装袋作业；把搅拌好的培养料通过物料输送槽输送到自动装袋机中进行自动装袋；每袋装湿料1000～2000g，采用机械自动热压封口，用传送带传送；把自动装袋机上传送过来的菌种袋人工摆放在灭菌筐中，菌种袋立放或平放；每框放16-24个，把灭菌框放在灭菌架上，送到灭菌锅内进行灭菌；将灭菌冷却后的菌种袋在冷却室中用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂加热熏蒸1-2小时，对冷却后的菌种袋表面进行喷洒消毒处理；把菌种框放在传送带上，送入接种室，将步骤二的原种接种到菌种袋，将接好的菌种送入培养室内培养，避光，温度为20～22℃，摆满一间培养室以后，用0.1-0.15％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠对菌种袋表面喷洒1次；7-10天长满菌丝体，即可使用；在培养室内脱去套袋，把菌种放在菌种转运框、包装箱、大袋子内摆放整齐，送到大田进行播种。

优选的是，所述步骤二中，将原种培养基自然冷却后，在无菌状态下接种母种，且一支试管母种接种7～8菌种瓶原种培养基，其中试管的大小为15～25×150～250mm，菌种瓶的大小为1100～1500mL；接种后送入培养室培养，用75％酒精对瓶口进行喷洒，在22～24℃的恒温培养箱或室内避光培养10-20天，直到羊肚菌菌丝体长满菌种瓶，即原种瓶；每7-10天用0.1％-0.15％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液进行1次消毒处理。

优选的是，所述步骤三中，采用的小麦进行预处理：用清水浸泡24-48小时，或用水蒸气煮沸20-25分钟，使小麦的重量增加1-1.5倍，即1000g干小麦变为2000-3000g，或10粒干小麦由原来的0.40-0.45g增加到重量为0.80-1.10g；小麦水分充足后捞起，沥干明水，至容器下面没有线状明水流出为度，备用。

优选的是，所述步骤三中，培养料的配方的重量百分数为：

小麦粒70％-75％，稻壳20％-25％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，木屑20％-25％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，稻壳10％-15％，木屑10％-15％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，酒糟10％-15％，稻壳10％-15％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％。

或小麦粒70％-75％，酒糟10％-15％，玉米芯10％-15％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，玉米芯20％-25％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％。

优选的是，所述步骤三中，羊肚菌栽培种的菌中袋大小为折径15-22cm，即周长的1/2，长度为30-50cm；每袋装湿料1000-2000g；常压灭菌的菌种袋选用聚乙烯菌袋，高压灭菌的菌袋选用聚丙烯菌袋；均为卷筒袋；并安装在自动装袋机的固定位置，备用。

优选的是，所述步骤三中，灭菌采用的常压灭菌温度为100～105℃，8～12小时；或灭菌采用的高压灭菌压力为0.13～0.15MPa，123～125℃，2～3小时；灭菌后自然降温冷却到80℃以下，打开灭菌锅，把灭菌架推入冷却室内冷却到常温。

优选的是，所述步骤三中，接种前，对接种室进行预处理：接种前用0.1～0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1-2次，二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，紫外线照射30-40分钟，备用；打开无菌接种机送入无菌空气；接种时关掉紫外灯；接种前，对原种瓶的处理：在接种室外用0.1％～0.15wt％的三氯异氰尿酸钠溶液清洗表面，并浸透瓶盖上的滤膜；送入接种室内，备用；每瓶原种瓶可以接种50-80袋羊肚菌栽培菌种；接种前，对接种工具的处理：用金属尖镊接种，先用75％的酒精彻底对金属尖镊进行清洗和消毒，浸在75％的酒精中，备用；接种前，套袋的预处理：套袋为聚乙烯套袋，厚度为10-20μm，折径大于羊肚菌栽培种菌袋2cm，长度比菌种袋长20cm，为40-60cm；采用蛇皮袋包装的，先在接种室外用消毒剂喷洒2次消毒，在整袋送入接种室内；在接种室内剪开袋口，逐卷使用。

优选的是，所述步骤三中，接种的方法为：在接种机下面进行接种，2-3人一组进行操作；

操作员甲：菌种框从传送带上送入无菌接种室后，逐袋摆放在接种台上，立即用75％的酒精溶液喷洒表面；然后用消毒后的金属尖镊子在菌种袋的中央打一个孔，或在两端的1/4处打2个孔，或在菌种袋的两侧不对称位置打2-3个孔；孔的长度为2-3cm；

操作员乙：用消毒后的尖镊从原种瓶中夹取一粒颗粒原种，放入操作员甲打好的孔洞中，操作员甲每打好一个孔就放入1粒菌种；操作员乙把接完种的菌袋传给操作员丙；原种瓶中取完固体矿物颗粒后，剩余的细料也可接入其他的打好孔的菌种袋中；

操作员甲和乙的动作也可以有1人完成，先打孔后再放入原种颗粒；

操作员丙：接过操作员甲或乙传过来的菌种袋，用无菌袋套上，把口部打一个松动的结，立放在菌种框中，摆放整齐，在菌种袋表面喷洒一次75％的酒精溶液。从传送带上送出接种室；

菌种的转运：搬运菌种的车辆用0.1％～0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1-2次后再装运菌种。

优选的是，所述步骤三中，对培养室的预处理：培养室内的地面、墙面、屋顶、培养架和门窗处，先用0.1％～0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1-2次，再用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，备用。

本发明至少包括以下有益效果：本发明用矿物固体颗粒和有机物物料混合的原料做原种的培养基；栽培种生产用机械自动化装袋，全封口，灭菌冷却后在流水线上的无菌环境接种台上，在每一个菌袋上打1-3个孔接种，再在菌种袋外面套一个无菌套袋，松扎口培养。用该方法进行羊肚菌栽培种的规模化生产，1台装袋机每天可以装袋20000袋以上，人工接种的效率为2000-2500袋/工时(8小时)，菌丝体长满菌种袋的时间为7-10天，菌种污染率低于0.1％。该方法可以大大加快生产效率，实现羊肚菌栽培菌种的快速、高效、低污染的规模化生产，每袋降低成本0.15-0.20元，可以满足羊肚菌栽培产业中对羊肚菌栽培种的巨量需求。

本发明的其它优点、目标和特征将部分通过下面的说明体现，部分还将通过对本发明的研究和实践而为本领域的技术人员所理解。

附图说明：

图1为本发明菌袋打孔接种的打孔实物图；

图2为本发明套袋口打结的实物图；

图3为本发明套袋培养的实物图；

图4为本发明长满菌丝体的羊肚菌栽培菌种的实物图。

具体实施方式：

下面结合附图对本发明做进一步的详细说明，以令本领域技术人员参照说明书文字能够据以实施。

应当理解，本文所使用的诸如“具有”、“包含”以及“包括”术语并不配出一个或多个其它元件或其组合的存在或添加。

实施例1：

一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、采用常规琼脂培养基对原始母种进行转扩，培养得到母种；

步骤二、将所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；所述的原种培养基的制备方法为：取重量比为80:20的原种固体矿物颗粒物料和原种有机物物料搅拌均匀，让每一颗原种固体矿物颗粒表面都裹上一层厚2-5mm的有机物物料；将混合后的物料装入1500mL的聚丙烯大口菌种瓶中，用原种有机物物料填平聚丙烯大口菌种瓶的表面，物料装齐瓶肩；然后用清水清洗瓶口和瓶身，盖好瓶盖，并采用0.13MPa的压力进行高压灭菌，灭菌时间为1小时，得到原种培养基；

所述原种固体矿物颗粒物料的包括以下相同重量份的原料：多孔陶粒、瓦粒、砖粒和火山石粒，该原料均粉碎成大小不等的颗粒物，直径1～2cm，形状不限；并采用用0.5wt％石灰水预湿2～3小时；

所述原种有机物物料的颗粒直径大小为1～2mm，其配方的重量百分数为：阔叶树木屑细粉40％，稻壳粉5％，酒糟粉30％，麸皮粉20％，黄豆粉2.5％，石灰0.5％，碳酸钙1％，石膏1％；将原料加水混合均匀，使含水量为62％；

步骤三、羊肚菌栽培菌种的规模化生产：将小麦、木屑、稻壳、玉米芯、酒糟、石灰、石膏和碳酸钙中的几种原料组成的培养料倒入拌料机的料斗内，搅拌10分钟；检测培养料的水分和pH，使培养料含水量为60wt％，pH为7.5，放30分钟后进行装袋作业；把搅拌好的培养料通过物料输送槽输送到自动装袋机中进行自动装袋；每袋装湿料2000g，采用机械自动热压封口，用传送带传送；把自动装袋机上传送过来的菌种袋人工摆放在灭菌筐中，菌种袋立放或平放；每框放24个，把灭菌框放在灭菌架上，送到灭菌锅内进行灭菌；将灭菌冷却后的菌种袋在冷却室中用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂加热熏蒸1小时，对冷却后的菌种袋表面进行喷洒消毒处理；把菌种框放在传送带上，送入接种室，将步骤二的原种接种到菌种袋，将接好的菌种送入培养室内培养，避光，温度为22℃，摆满一间培养室以后，用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠对菌种袋表面喷洒1次；10天长满菌丝体，即可使用；在培养室内脱去套袋，把菌种放在菌种转运框、包装箱、大袋子内摆放整齐，送到大田进行播种；

其中，所述步骤二中，将原种培养基自然冷却后，在无菌状态下接种母种，且一支试管母种接种7-10瓶原种，其中试管的大小为20×200mm，菌种瓶的大小为1200mL；原种接种后送入培养室培养，用75％酒精对瓶口进行喷洒，在22℃的恒温培养箱或室内避光培养10天，直到羊肚菌菌丝体长满菌种瓶，即原种瓶；每10天用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液进行1次消毒处理；

所述步骤三中，采用的小麦进行预处理：用清水浸泡24-48小时，或用水蒸气煮沸20分钟，使小麦的重量增加1倍，即1000g干小麦变为2000g；小麦水分充足后捞起，沥干明水，至容器下面没有线状明水流出为度，备用；

所述步骤三中，培养料的配方的重量百分数为：小麦粒75％，稻壳22.5％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

所述步骤三中，羊肚菌栽培种的菌中袋大小为折径22cm，即周长的1/2，长度为50cm；每袋装湿料2000g；常压灭菌的菌种袋选用聚乙烯菌袋，高压灭菌的菌袋选用聚丙烯菌袋；均为卷筒袋；并安装在自动装袋机的固定位置，备用。

所述步骤三中，灭菌采用的常压灭菌温度为105℃，12小时；灭菌后自然降温冷却到80℃以下，打开灭菌锅，把灭菌架推入冷却室内冷却到常温；

所述步骤三中，接种前，对接种室进行预处理：接种前用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒2次，二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，紫外线照射40分钟，备用；打开无菌接种机送入无菌空气；接种时关掉紫外灯；接种前，对原种瓶的处理：在接种室外用0.15wt％的三氯异氰尿酸钠溶液清洗表面，并浸透瓶盖上的滤膜；送入接种室内，备用；每瓶原种瓶可以接种80袋羊肚菌栽培菌种；接种前，对接种工具的处理：用金属尖镊接种，先用75％的酒精彻底对金属尖镊进行清洗和消毒，浸在75％的酒精中，备用；接种前，套袋的预处理：套袋为聚乙烯套袋，厚度为20μm，折径大于羊肚菌栽培种菌袋2cm，长度比菌种袋长20cm，为60cm；采用蛇皮袋包装的，先在接种室外用消毒剂喷洒2次消毒，在整袋送入接种室内；在接种室内剪开袋口，逐卷使用；

所述步骤三中，接种的方法为：在接种机下面进行接种，3人一组进行操作；

操作员甲：菌种框从传送带上送入无菌接种室后，逐袋摆放在接种台上，立即用75％的酒精溶液喷洒表面；然后用消毒后的金属尖镊子在菌种袋的两侧不对称位置打3个孔；孔的长度为3cm；

操作员乙：用消毒后的尖镊从原种瓶中夹取一粒颗粒原种，放入操作员甲打好的孔洞中，操作员甲每打好一个孔就放入1粒菌种；操作员乙把接完种的菌袋传给操作员丙；原种瓶中取完固体矿物颗粒后，剩余的细料也可接入其他的打好孔的菌种袋中；

操作员甲和乙的动作也可以有1人完成，先打孔后再放入原种颗粒；

操作员丙：接过操作员甲或乙传过来的菌种袋，用无菌袋套上，把口部打一个松动的结，立放在菌种框中，摆放整齐，在菌种袋表面喷洒一次75％的酒精溶液。从传送带上送出接种室；

菌种的转运：搬运菌种的车辆用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次后再装运菌种；

所述步骤三中，对培养室的预处理：培养室内的地面、墙面、屋顶、培养架和门窗处，先用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次，再用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，备用。

实施例2:

一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、采用常规琼脂培养基对原始母种进行转扩，培养得到母种；

步骤二、将所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；所述的原种培养基的制备方法为：取重量比为80:20的原种固体矿物颗粒物料和原种有机物物料搅拌均匀，让每一颗原种固体矿物颗粒表面都裹上一层厚2-5mm的有机物物料；将混合后的物料装入1100-1500mL的聚丙烯大口菌种瓶中，用原种有机物物料填平聚丙烯大口菌种瓶的表面，物料装齐瓶肩；然后用清水清洗瓶口和瓶身，盖好瓶盖，并采用0.13MPa的压力进行高压灭菌，灭菌时间为1小时，得到原种培养基；

所述原种固体矿物颗粒物料的包括以下相同重量份的原料：多孔陶粒、瓦粒、砖粒和火山石粒，该原料均粉碎成大小不等的颗粒物，直径1～2cm，形状不限；并采用用0.5wt％石灰水预湿2～3小时；

所述原种有机物物料的颗粒直径大小为1～2mm，其配方的重量百分数为：阔叶树木屑细粉45％，稻壳粉5％，酒糟粉25％，麸皮粉20％，黄豆粉2.5％，石灰0.5％，碳酸钙1％，石膏1％；将原料加水混合均匀，使含水量为62％；

步骤三、羊肚菌栽培菌种的规模化生产：将小麦、木屑、稻壳、玉米芯、酒糟、石灰、石膏和碳酸钙中的几种原料组成的培养料倒入拌料机的料斗内，搅拌10分钟；检测培养料的水分和pH，使培养料含水量为60wt％，pH为7.5，放30分钟后进行装袋作业；把搅拌好的培养料通过物料输送槽输送到自动装袋机中进行自动装袋；每袋装湿料2000g，采用机械自动热压封口，用传送带传送；把自动装袋机上传送过来的菌种袋人工摆放在灭菌筐中，菌种袋立放或平放；每框放24个，把灭菌框放在灭菌架上，送到灭菌锅内进行灭菌；将灭菌冷却后的菌种袋在冷却室中用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂加热熏蒸1小时，对冷却后的菌种袋表面进行喷洒消毒处理；把菌种框放在传送带上，送入接种室，将步骤二的原种接种到菌种袋，将接好的菌种送入培养室内培养，避光，温度为22℃，摆满一间培养室以后，用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠对菌种袋表面喷洒1次；10天长满菌丝体，即可使用；在培养室内脱去套袋，把菌种放在菌种转运框、包装箱、大袋子内摆放整齐，送到大田进行播种；

其中，所述步骤二中，将原种培养基自然冷却后，在无菌状态下接种母种，且一支试管母种接种7-10瓶原种；其中试管的大小为20×200mm，菌种瓶的大小为1200mL；原种接种后送入培养室培养，用75％酒精对瓶口进行喷洒，在22℃的恒温培养箱或室内避光培养10天，直到羊肚菌菌丝体长满菌种瓶，即原种瓶；每10天用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液进行1次消毒处理；

所述步骤三中，采用的小麦进行预处理：用清水浸泡24-48小时，或用水蒸气煮沸20分钟，使小麦的重量增加1倍，即1000g干小麦变为2000g；小麦水分充足后捞起，沥干明水，至容器下面没有线状明水流出为度，备用；

所述步骤三中，培养料的配方的重量百分数为：小麦粒75％，木屑22.5％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

所述步骤三中，羊肚菌栽培种的菌中袋大小为折径22cm，即周长的1/2，长度为50cm；每袋装湿料2000g；常压灭菌的菌种袋选用聚乙烯菌袋，高压灭菌的菌袋选用聚丙烯菌袋；均为卷筒袋；并安装在自动装袋机的固定位置，备用。

所述步骤三中，灭菌采用的常压灭菌温度为105℃，12小时；灭菌后自然降温冷却到80℃以下，打开灭菌锅，把灭菌架推入冷却室内冷却到常温；

所述步骤三中，接种前，对接种室进行预处理：接种前用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒2次，二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，紫外线照射40分钟，备用；打开无菌接种机送入无菌空气；接种时关掉紫外灯；接种前，对原种瓶的处理：在接种室外用0.15wt％的三氯异氰尿酸钠溶液清洗表面，并浸透瓶盖上的滤膜；送入接种室内，备用；每瓶原种瓶可以接种80袋羊肚菌栽培菌种；接种前，对接种工具的处理：用金属尖镊接种，先用75％的酒精彻底对金属尖镊进行清洗和消毒，浸在75％的酒精中，备用；接种前，套袋的预处理：套袋为聚乙烯套袋，厚度为20μm，折径大于羊肚菌栽培种菌袋2cm，长度比菌种袋长20cm，为60cm；采用蛇皮袋包装的，先在接种室外用消毒剂喷洒2次消毒，在整袋送入接种室内；在接种室内剪开袋口，逐卷使用；

所述步骤三中，接种的方法为：在接种机下面进行接种，3人一组进行操作；

操作员甲：菌种框从传送带上送入无菌接种室后，逐袋摆放在接种台上，立即用75％的酒精溶液喷洒表面；然后用消毒后的金属尖镊子在菌种袋的两侧不对称位置打3个孔；孔的长度为3cm；

操作员乙：用消毒后的尖镊从原种瓶中夹取一粒颗粒原种，放入操作员甲打好的孔洞中，操作员甲每打好一个孔就放入1粒菌种；操作员乙把接完种的菌袋传给操作员丙；原种瓶中取完固体矿物颗粒后，剩余的细料也可接入其他的打好孔的菌种袋中；

操作员甲和乙的动作也可以有1人完成，先打孔后再放入原种颗粒；

操作员丙：接过操作员甲或乙传过来的菌种袋，用无菌袋套上，把口部打一个松动的结，立放在菌种框中，摆放整齐，在菌种袋表面喷洒一次75％的酒精溶液。从传送带上送出接种室；

菌种的转运：搬运菌种的车辆用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次后再装运菌种；

所述步骤三中，对培养室的预处理：培养室内的地面、墙面、屋顶、培养架和门窗处，先用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次，再用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，备用。

实施例3：

一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、采用常规琼脂培养基对原始母种进行转扩，培养得到母种；

步骤二、将所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；所述的原种培养基的制备方法为：取重量比为80：20的原种固体矿物颗粒物料和原种有机物物料搅拌均匀，让每一颗原种固体矿物颗粒表面都裹上一层厚2-5mm的有机物物料；将混合后的物料装入1500mL的聚丙烯大口菌种瓶中，用原种有机物物料填平聚丙烯大口菌种瓶的表面，物料装齐瓶肩；然后用清水清洗瓶口和瓶身，盖好瓶盖，并采用0.13MPa的压力进行高压灭菌，灭菌时间为1小时，得到原种培养基；

所述原种固体矿物颗粒物料的包括以下相同重量份的原料：多孔陶粒、瓦粒、砖粒和火山石粒，该原料均粉碎成大小不等的颗粒物，直径1～2cm，形状不限；并采用用0.5wt％石灰水预湿2～3小时；

所述原种有机物物料的颗粒直径大小为1～2mm，其配方的重量百分数为：阔叶树木屑细粉45％，稻壳粉5％，酒糟粉20％，麸皮粉25％，黄豆粉2.5％，石灰0.5％，碳酸钙1％，石膏1％；将原料加水混合均匀，使含水量为62％；

步骤三、羊肚菌栽培菌种的规模化生产：将小麦、木屑、稻壳、玉米芯、酒糟、石灰、石膏和碳酸钙中的几种原料组成的培养料倒入拌料机的料斗内，搅拌10分钟；检测培养料的水分和pH，使培养料含水量为60wt％，pH为7.5，放30分钟后进行装袋作业；把搅拌好的培养料通过物料输送槽输送到自动装袋机中进行自动装袋；每袋装湿料2000g，采用机械自动热压封口，用传送带传送；把自动装袋机上传送过来的菌种袋人工摆放在灭菌筐中，菌种袋立放或平放；每框放24个，把灭菌框放在灭菌架上，送到灭菌锅内进行灭菌；将灭菌冷却后的菌种袋在冷却室中用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂加热熏蒸1小时，对冷却后的菌种袋表面进行喷洒消毒处理；把菌种框放在传送带上，送入接种室，将步骤二的原种接种到菌种袋，将接好的菌种送入培养室内培养，避光，温度为22℃，摆满一间培养室以后，用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠对菌种袋表面喷洒1次；10天长满菌丝体，即可使用；在培养室内脱去套袋，把菌种放在菌种转运框、包装箱、大袋子内摆放整齐，送到大田进行播种；

其中，所述步骤二中，将原种培养基自然冷却后，在无菌状态下接种母种，且一支试管母种接种7-10瓶原种；其中试管的大小为20×200mm，菌种瓶的大小为1200mL；原种瓶接种后送入培养室培养，用75％酒精对瓶口进行喷洒，在22℃的恒温培养箱或室内避光培养10天，直到羊肚菌菌丝体长满菌种瓶，即原种瓶；每10天用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液进行1次消毒处理；

所述步骤三中，采用的小麦进行预处理：用清水浸泡24-48小时，或用水蒸气煮沸20分钟，使小麦的重量增加1倍，即1000g干小麦变为2000g；小麦水分充足后捞起，沥干明水，至容器下面没有线状明水流出为度，备用；

所述步骤三中，培养料的配方的重量百分数为：小麦粒70％，稻壳15％，木屑12.5％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

所述步骤三中，羊肚菌栽培种的菌中袋大小为折径22cm，即周长的1/2，长度为50cm；每袋装湿料2000g；常压灭菌的菌种袋选用聚乙烯菌袋，高压灭菌的菌袋选用聚丙烯菌袋；均为卷筒袋；并安装在自动装袋机的固定位置，备用。

所述步骤三中，灭菌采用的常压灭菌温度为105℃，12小时；灭菌后自然降温冷却到80℃以下，打开灭菌锅，把灭菌架推入冷却室内冷却到常温；

所述步骤三中，接种前，对接种室进行预处理：接种前用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒2次，二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，紫外线照射40分钟，备用；打开无菌接种机送入无菌空气；接种时关掉紫外灯；接种前，对原种瓶的处理：在接种室外用0.15wt％的三氯异氰尿酸钠溶液清洗表面，并浸透瓶盖上的滤膜；送入接种室内，备用；每瓶原种瓶可以接种80袋羊肚菌栽培菌种；接种前，对接种工具的处理：用金属尖镊接种，先用75％的酒精彻底对金属尖镊进行清洗和消毒，浸在75％的酒精中，备用；接种前，套袋的预处理：套袋为聚乙烯套袋，厚度为20μum，折径大于羊肚菌栽培种菌袋2cm，长度比菌种袋长20cm，为60cm；采用蛇皮袋包装的，先在接种室外用消毒剂喷洒2次消毒，在整袋送入接种室内；在接种室内剪开袋口，逐卷使用；

所述步骤三中，接种的方法为：在接种机下面进行接种，3人一组进行操作；

操作员甲：菌种框从传送带上送入无菌接种室后，逐袋摆放在接种台上，立即用75％的酒精溶液喷洒表面；然后用消毒后的金属尖镊子在菌种袋的两侧不对称位置打3个孔；孔的长度为3cm；

操作员乙：用消毒后的尖镊从原种瓶中夹取一粒颗粒原种，放入操作员甲打好的孔洞中，操作员甲每打好一个孔就放入1粒菌种；操作员乙把接完种的菌袋传给操作员丙；原种瓶中取完固体矿物颗粒后，剩余的细料也可接入其他的打好孔的菌种袋中；

操作员甲和乙的动作也可以有1人完成，先打孔后再放入原种颗粒；

操作员丙：接过操作员甲或乙传过来的菌种袋，用无菌袋套上，把口部打一个松动的结，立放在菌种框中，摆放整齐，在菌种袋表面喷洒一次75％的酒精溶液。从传送带上送出接种室；

菌种的转运：搬运菌种的车辆用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次后再装运菌种；

所述步骤三中，对培养室的预处理：培养室内的地面、墙面、屋顶、培养架和门窗处，先用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次，再用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，备用。

实施例4：

一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、采用常规琼脂培养基对原始母种进行转扩，培养得到母种；

步骤二、将所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；所述的原种培养基的制备方法为：取重量比为80:20的原种固体矿物颗粒物料和原种有机物物料搅拌均匀，让每一颗原种固体矿物颗粒表面都裹上一层厚2-5mm的有机物物料；将混合后的物料装入1100-1500mL的聚丙烯大口菌种瓶中，用原种有机物物料填平聚丙烯大口菌种瓶的表面，物料装齐瓶肩；然后用清水清洗瓶口和瓶身，盖好瓶盖，并采用0.13MPa的压力进行高压灭菌，灭菌时间为1小时，得到原种培养基；

所述原种固体矿物颗粒物料的包括以下相同重量份的原料：多孔陶粒、瓦粒、砖粒和火山石粒，该原料均粉碎成大小不等的颗粒物，直径1～2cm，形状不限；并采用用0.5wt％石灰水预湿2～3小时；

所述原种有机物物料的颗粒直径大小为1～2mm，其配方的重量百分数为：阔叶树木屑细粉45％，稻壳粉5％，酒糟粉20％，麸皮粉25％，黄豆粉2.5％，石灰0.5％，碳酸钙1％，石膏1％；将原料加水混合均匀，使含水量为62％；

步骤三、羊肚菌栽培菌种的规模化生产：将小麦、木屑、稻壳、玉米芯、酒糟、石灰、石膏和碳酸钙中的几种原料组成的培养料倒入拌料机的料斗内，搅拌10分钟；检测培养料的水分和pH，使培养料含水量为60wt％，pH为7.5，放30分钟后进行装袋作业；把搅拌好的培养料通过物料输送槽输送到自动装袋机中进行自动装袋；每袋装湿料2000g，采用机械自动热压封口，用传送带传送；把自动装袋机上传送过来的菌种袋人工摆放在灭菌筐中，菌种袋立放或平放；每框放24个，把灭菌框放在灭菌架上，送到灭菌锅内进行灭菌；将灭菌冷却后的菌种袋在冷却室中用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂加热熏蒸1小时，对冷却后的菌种袋表面进行喷洒消毒处理；把菌种框放在传送带上，送入接种室，将步骤二的原种接种到菌种袋，将接好的菌种送入培养室内培养，避光，温度为22℃，摆满一间培养室以后，用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠对菌种袋表面喷洒1次；10天长满菌丝体，即可使用；在培养室内脱去套袋，把菌种放在菌种转运框、包装箱、大袋子内摆放整齐，送到大田进行播种；

其中，所述步骤二中，将原种培养基自然冷却后，在无菌状态下接种母种，且一支试管母种接种7菌种瓶原种培养基；其中试管的大小为20×200mm，菌种瓶的大小为1200mL；接种后送入培养室培养，用75％酒精对瓶口进行喷洒，在22℃的恒温培养箱或室内避光培养10天，直到羊肚菌菌丝体长满菌种瓶，即原种瓶；每10天用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液进行1次消毒处理；

所述步骤三中，采用的小麦进行预处理：用清水浸泡24-48小时，或用水蒸气煮沸20分钟，使小麦的重量增加1倍，即1000g干小麦变为2000g；小麦水分充足后捞起，沥干明水，至容器下面没有线状明水流出为度，备用；

所述步骤三中，培养料的配方的重量百分数为：小麦粒72％，酒糟15％，稻壳10％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％。

所述步骤三中，羊肚菌栽培种的菌中袋大小为折径22cm，即周长的1/2，长度为50cm；每袋装湿料2000g；常压灭菌的菌种袋选用聚乙烯菌袋，高压灭菌的菌袋选用聚丙烯菌袋；均为卷筒袋；并安装在自动装袋机的固定位置，备用。

所述步骤三中，灭菌采用的常压灭菌温度为105℃，12小时；灭菌后自然降温冷却到80℃以下，打开灭菌锅，把灭菌架推入冷却室内冷却到常温；

所述步骤三中，接种前，对接种室进行预处理：接种前用0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒2次，二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，紫外线照射40分钟，备用；打开无菌接种机送入无菌空气；接种时关掉紫外灯；接种前，对原种瓶的处理：在接种室外用0.15wt％的三氯异氰尿酸钠溶液清洗表面，并浸透瓶盖上的滤膜；送入接种室内，备用；每瓶原种瓶可以接种80袋羊肚菌栽培菌种；接种前，对接种工具的处理：用金属尖镊接种，先用75％的酒精彻底对金属尖镊进行清洗和消毒，浸在75％的酒精中，备用；接种前，套袋的预处理：套袋为聚乙烯套袋，厚度为20μm，折径大于羊肚菌栽培种菌袋2cm，长度比菌种袋长20cm，为60cm；采用蛇皮袋包装的，先在接种室外用消毒剂喷洒2次消毒，在整袋送入接种室内；在接种室内剪开袋口，逐卷使用；

所述步骤三中，接种的方法为：在接种机下面进行接种，3人一组进行操作；

操作员甲：菌种框从传送带上送入无菌接种室后，逐袋摆放在接种台上，立即用75％的酒精溶液喷洒表面；然后用消毒后的金属尖镊子在菌种袋的两侧不对称位置打3个孔；孔的长度为3cm；

操作员乙：用消毒后的尖镊从原种瓶中夹取一粒颗粒原种，放入操作员甲打好的孔洞中，操作员甲每打好一个孔就放入1粒菌种；操作员乙把接完种的菌袋传给操作员丙；原种瓶中取完固体矿物颗粒后，剩余的细料也可接入其他的打好孔的菌种袋中；

操作员甲和乙的动作也可以有1人完成，先打孔后再放入原种颗粒；

操作员丙：接过操作员甲或乙传过来的菌种袋，用无菌袋套上，把口部打一个松动的结，立放在菌种框中，摆放整齐，在菌种袋表面喷洒一次75％的酒精溶液。从传送带上送出接种室；

菌种的转运：搬运菌种的车辆用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次后再装运菌种；

所述步骤三中，对培养室的预处理：培养室内的地面、墙面、屋顶、培养架和门窗处，先用0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1次，再用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，备用。

表1示出了本发明的方法和现有技术的方法的羊肚菌栽培菌种菌丝体生长的培养料占总培养料的百分率％；

表1

表2示出了本发明和现有技术的羊肚菌栽培菌种生产效率比较；

表2

尽管本发明的实施方案已公开如上，但其并不仅仅限于说明书和实施方式中所列运用，它完全可以被适用于各种适合本发明的领域，对于熟悉本领域的人员而言，可容易地实现另外的修改，因此在不背离权利要求及等同范围所限定的一般概念下，本发明并不限于特定的细节和这里示出与描述的图例。

Claims (9)

1.一种规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一、采用常规琼脂培养基对原始母种进行转扩，培养得到母种；

步骤二、将所述母种接种到原种培养基上进行原种培育，得到原种；所述的原种培养基的制备方法为：取重量比为60～85:15～40的原种固体矿物颗粒物料和原种有机物物料搅拌均匀，让每一颗原种固体矿物颗粒表面都裹上一层厚2-5mm的有机物物料；将混合后的物料装入1100～1500mL的聚丙烯大口菌种瓶中，用原种有机物物料填平聚丙烯大口菌种瓶的表面，物料装齐瓶肩；然后用清水清洗瓶口和瓶身，盖好瓶盖，并采用0.13～0.14MPa的压力进行高压灭菌，灭菌时间为1-2小时，得到原种培养基；

所述原种固体矿物颗粒物料的包括以下相同重量份的原料：多孔陶粒、瓦粒、砖粒和火山石粒，该原料均粉碎成大小不等的颗粒物，直径1～2cm，形状不限；并采用0.5wt％石灰水预湿2～3小时；

所述原种有机物物料的颗粒直径大小为1～2mm，其配方的重量百分数为：阔叶树木屑细粉40％～50％，稻壳粉5％，酒糟粉20％～30％，麸皮粉20％～30％，黄豆粉1％～3％，石灰0.5％，碳酸钙1％，石膏1％；将原料加水混合均匀，使含水量为62％～63％；

步骤三、羊肚菌栽培菌种的规模化生产：将小麦、木屑、稻壳、玉米芯、酒糟、石灰、石膏和碳酸钙中的几种原料组成的培养料倒入拌料机的料斗内，搅拌5-10分钟；检测培养料的水分和pH，使培养料含水量为60％～63％，pH为7.5-8.0，放30-60分钟后进行装袋作业；把搅拌好的培养料通过物料输送槽输送到自动装袋机中进行自动装袋；每袋装湿料1000～2000g，采用机械自动热压封口，用传送带传送；把自动装袋机上传送过来的菌种袋人工摆放在灭菌筐中，菌种袋立放或平放；每框放16-24个，把灭菌框放在灭菌架上，送到灭菌锅内进行灭菌；将灭菌冷却后的菌种袋在冷却室中用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂加热熏蒸1-2小时，对冷却后的菌种袋表面进行喷洒消毒处理；把菌种框放在传送带上，送入接种室，将步骤二的原种接种到菌种袋，将接好的菌种送入培养室内培养，避光，温度为20～22℃，摆满一间培养室以后，用0.1-0.15％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠对菌种袋表面喷洒1次；7-10天长满菌丝体，即可使用；在培养室内脱去套袋，把菌种放在菌种转运框、包装箱、大袋子内摆放整齐，送到大田进行播种。

2.如权利要求1所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤二中，将原种培养基自然冷却后，在无菌状态下接种母种，且一支试管母种接种7～8菌种瓶原种培养基，其中试管的大小为15～25×150～250mm，菌种瓶的大小为1100～1500mL；接种后送入培养室培养，用75％酒精对瓶口进行喷洒，在22～24℃的恒温培养箱或室内避光培养10-20天，直到羊肚菌菌丝体长满菌种瓶，即原种瓶；每7-10天用0.1％-0.15％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液进行1次消毒处理。

3.如权利要求1所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，采用的小麦进行预处理：用清水浸泡24-48小时，或用水蒸气煮沸20-25分钟，使小麦的重量增加1-1.5倍，即1000g干小麦变为2000-3000g，或10粒干小麦由原来的0.40-0.45g增加到重量为0.80-1.10g；小麦水分充足后捞起，沥干明水，至容器下面没有线状明水流出为度，备用。

4.如权利要求1所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，培养料的配方的重量百分数为：

小麦粒70％-75％，稻壳20％-25％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，木屑20％-25％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，稻壳10％-15％，木屑10％-15％，石灰0.5％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，酒糟10％-15％，稻壳10％-15％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％。

或小麦粒70％-75％，酒糟10％-15％，玉米芯10％-15％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％；

或小麦粒70％-75％，玉米芯20％-25％，石灰1％，石膏1％，碳酸钙1％。

5.如权利要求1所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，羊肚菌栽培种的菌中袋大小为折径15-22cm，即周长的1/2，长度为30-50cm；每袋装湿料1000-2000g；常压灭菌的菌种袋选用聚乙烯菌袋，高压灭菌的菌袋选用聚丙烯菌袋；均为卷筒袋；并安装在自动装袋机的固定位置，备用。

6.如权利要求1所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，灭菌采用的常压灭菌温度为100～105℃，8～12小时；或灭菌采用的高压灭菌压力为0.13～0.15MPa，123～125℃，2～3小时；灭菌后自然降温冷却到80℃以下，打开灭菌锅，把灭菌架推入冷却室内冷却到常温。

7.如权利要求2所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，接种前，对接种室进行预处理：接种前用0.1～0.15wt％的二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1-2次，二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，紫外线照射30-40分钟，备用；打开无菌接种机送入无菌空气；接种时关掉紫外灯；接种前，对原种瓶的处理：在接种室外用0.1％～0.15wt％的三氯异氰尿酸钠溶液清洗表面，并浸透瓶盖上的滤膜；送入接种室内，备用；每瓶原种瓶可以接种50-80袋羊肚菌栽培菌种；接种前，对接种工具的处理：用金属尖镊接种，先用75％的酒精彻底对金属尖镊进行清洗和消毒，浸在75％的酒精中，备用；接种前，套袋的预处理：套袋为聚乙烯套袋，厚度为10-20μm，折径大于羊肚菌栽培种菌袋2cm，长度比菌种袋长20cm，为40-60cm；采用蛇皮袋包装的，先在接种室外用消毒剂喷洒2次消毒，在整袋送入接种室内；在接种室内剪开袋口，逐卷使用。

8.如权利要求7所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，接种的方法为：在接种机下面进行接种，2-3人一组进行操作；

操作员甲：菌种框从传送带上送入无菌接种室后，逐袋摆放在接种台上，立即用75％的酒精溶液喷洒表面；然后用消毒后的金属尖镊子在菌种袋的中央打一个孔，或在两端的1/4处打2个孔，或在菌种袋的两侧不对称位置打2-3个孔；孔的长度为2-3cm；

操作员乙：用消毒后的尖镊从原种瓶中夹取一粒颗粒原种，放入操作员甲打好的孔洞中，操作员甲每打好一个孔就放入1粒菌种；操作员乙把接完种的菌袋传给操作员丙；原种瓶中取完固体矿物颗粒后，剩余的细料也可接入其他的打好孔的菌种袋中；

操作员甲和乙的动作也可以有1人完成，先打孔后再放入原种颗粒；

操作员丙：接过操作员甲或乙传过来的菌种袋，用无菌袋套上，把口部打一个松动的结，立放在菌种框中，摆放整齐，在菌种袋表面喷洒一次75％的酒精溶液。从传送带上送出接种室；

菌种的转运：搬运菌种的车辆用0.1％～0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1-2次后再装运菌种。

9.如权利要求1所述的规模化生产羊肚菌栽培种的方法，其特征在于，所述步骤三中，对培养室的预处理：培养室内的地面、墙面、屋顶、培养架和门窗处，先用0.1％～0.15wt％的二或三氯异氰尿酸钠溶液喷洒1-2次，再用二氯异氰尿酸钠或三氯异氰尿酸钠气雾消毒剂熏蒸1次，备用。

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