CN110249912B

CN110249912B - 一种桑黄工厂化瓶栽的方法

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Publication number: CN110249912B
Application number: CN201910712740.0A
Authority: CN
Inventors: 丁利华; 袁卫东
Original assignee: Hangzhou Institute of Agricultural Sciences
Current assignee: Hangzhou Institute of Agricultural Sciences
Priority date: 2019-08-02
Filing date: 2019-08-02
Publication date: 2021-09-07
Anticipated expiration: 2039-08-02
Also published as: CN110249912A

Abstract

本发明公开了一种桑黄瓶栽用的培养基，以原料总重量为100％计，原料组成包括：玉米芯30％～50％，桑枝木屑10％～30％，棉籽壳10％～30％，麸皮10％～20％，甜菜叶5％～5％，豆粕2％～5％，石膏0.1％～2％，石灰0.1％～2％，磷酸二氢钾0.1％～1％，硫酸镁0.1％～1％。本发明还公开了一种桑黄工厂化瓶栽的方法，包括步骤：将桑黄菌种活化后接种于灭菌后的培养液中，25～30℃下旋转式摇床培养6～10天，得到液体菌种；将所述的桑黄瓶栽用的培养基装瓶，灭菌后接种液体菌种，得到桑黄菌瓶；将桑黄菌瓶在黑暗、通风、培养温度23～25℃的条件下进行发菌培养；将发菌完好的桑黄菌瓶转移到出菇库房中，敞口进行出菇培养，采收。本发明桑黄工厂化栽培的周期短，生产的桑黄高产、优质。

Description

一种桑黄工厂化瓶栽的方法

技术领域

本发明涉及桑黄生产技术领域，具体涉及一种桑黄工厂化瓶栽的方法。

背景技术

桑黄属(Sanghuangporus)，是一种珍贵的药用真菌，因寄生于桑树而得名，是一种滋补强体、扶正固本的名贵药用菌，所含有的多糖体能激活人体的免疫系统，抑制癌细胞生长，增强抗癌活性，具有明显的抗肿癌功能。

现代科学研究证实，桑黄具有抗肿瘤、降血糖、护肝、抗炎、免疫调节、抗氧化等药理作用，是已知高等真菌中抗癌疗效最好的菌类，抗癌机理已逐渐被人们所认识，由于国内外市场对桑黄的需求越来越大，市场前景非常乐观。

目前桑黄栽培主要有袋料培养和段木培养两种。袋料培养是指将栽培基质装入塑料袋中，灭菌后接种，然后置于合适环境下培养，直至长出子实体。公开号为CN 102786333A的专利说明书公开了一种桑黄袋料栽培培养基及采用该培养基栽培桑黄子实体的方法，该培养基包由营养料和水混合装袋制成，营养料包括：桑枝木屑40～80％、桑叶粉5～20％，谷粒10～30％，糖0.5～2％，生石灰1～5％，磷酸氢钾0.1～2％，硫酸镁0.1～2％。栽培方法包括：在无菌环境下，将桑黄母种接入桑黄菌袋中，培养60-90天，待菌袋长满菌丝，将菌袋1/3～1/2埋入土中，栽培3～9天后在菌袋上划开口子出菇。

段木培养是指将切好的木段置于菌袋中，两端切面铺上栽培基质，然后扎紧菌袋，灭菌后接种，待菌袋长满菌丝后进行出菇培养。但现有的段木栽培技术桑黄菌丝体定植速度慢和接种成品率较低，不利于大规模推广。

公开号为CN 109168952 A的专利说明书公开了一种林下仿野栽培桑黄的方法，包括以下步骤：培养基制备：按重量份将细木屑30～40份、桑树枝10～20份、玉米芯10～20份、麦麸15～25份、石膏1～2份、石灰1～2份、甘蔗渣5～10份打碎加水混合，接种、发菌，场地准备，开挖排沟，在4～5月将发菌后的菌棒按照四周间隔30cm的间距放入排沟内，在菌棒四周切开若干小口，菌袋下开直径为5-10cm圆形开口，便于菌袋与土壤之间水分和养分交换，挖沟的土回填至菌袋下三分之一，每日早中晚各喷雾一次，每次20-30分钟，如果阴雨天气无需喷雾，采收3～4年。

然而，随着我国健康产业的发展，珍稀药用菌桑黄抗癌机理已逐渐被人们所认识，国内外市场对桑黄的需求越来越大，市场前景非常乐观，为加速桑黄产品的生产和开发，减少现有桑黄栽培依托椴木和林木砍伐粉碎的限制，因此，亟需探索和研发一种适宜工厂化瓶栽桑黄的培养基及其制备方法，以及工厂化瓶栽秀珍菇的技术方法。

发明内容

针对本领域桑黄栽培以椴木和杂木屑为主要栽培基质及设施栽培存在的不足之处，本发明提供了一种桑黄工厂化瓶栽用的培养基，以玉米芯为主，添加部分桑枝木屑、麸皮、棉籽壳等辅料，原料成本低。使用该培养基栽培桑黄，发菌速度快，劳动力省，效率高，桑黄工厂化栽培的周期短，生产的桑黄具有高产、优质的特点。

一种桑黄瓶栽用的培养基，以原料总重量为100％计，原料组成包括：

现有技术的桑黄袋栽用培养基配方中木屑占70％～80％，麸皮占15％～20％、石膏1％、糖1％，参见涂成荣等在《北方蚕业》2018年39卷2期发表的桑黄的人工栽培与应用研究进展。

本发明的桑黄瓶栽用的培养基中玉米芯为主要栽培基质，以桑枝木屑和麸皮为辅料，选用新型桑黄培养基质配方，在满足桑黄需桑枝木屑的基础上增加了基质速效营养，适用于瓶栽。同时，应用液体菌种和使用1200mL聚丙烯塑料广口瓶自动化机械装瓶生产，可以使装料均匀，在工厂化条件进行培养发菌，可缩短菌瓶菌丝发菌时间和培养更优质的菌瓶。在工厂化设施条件下，打开菌瓶的瓶盖进行催蕾出菇，使桑黄子实体形成于瓶口并逐渐向外生长突出，直到可以采收，减少了菌袋割口出菇的程序、塑料袋料袋分离的影响和菌瓶出菇菇形更加漂亮(固定的瓶口形状)。

本发明又提供了一种所述的桑黄瓶栽用的培养基的制备方法，包括：按配方将原料送入自动拌料机，干料搅拌5min后按含水量要求加水，搅拌40～50min，装瓶。使用1200mL塑料广口瓶，将上述拌料送入自动装瓶机装料，装干料重为350g/瓶，含水率为60％～65％，pH为7.0～7.8。

本发明还提供了一种桑黄工厂化瓶栽的方法，包括步骤：

(1)将桑黄菌种活化后接种于灭菌后的发酵罐培养液中，25～30℃下，发酵罐培养5～6天得到液体菌种；

(2)将所述的桑黄瓶栽用的培养基搅拌后应用自动化塑料瓶栽装置机械进行装瓶，装料高度为距聚丙烯塑料瓶瓶口0.8～1.2cm，装瓶后进行灭菌接种液体菌种，得到桑黄菌瓶；

(3)将桑黄菌瓶在黑暗、通风、培养温度23～25℃的条件下进行发菌培养；

(4)将发菌完好的桑黄菌瓶转移到出菇库房中，打开聚丙烯塑料瓶的瓶盖后进行出菇培养，采收。

本发明生产的关键技术有：1、应用液体菌种和新型培养基；2、瓶装料高度比常规要高1cm，便于菇蕾形成凸起向瓶口方向；3、菌丝发菌速度加快，减少杂菌感染的机会，成品率提高；4、应用全自动装瓶和自动接种等设施设备，劳动力下降约70％，节约大量的成本。

现有桑黄栽培技术都应用传统塑料袋(18cm×38cm)或椴木套袋栽培，并且应用固体培养基，菌包和菌段发菌时间久、污染率高，桑黄出菇的方式是在塑料袋和椴木套袋上割1～2个口进行催蕾出菇，出菇的产量相对偏低，主要原因是应用塑料袋进行生产，在装料过程中会出现装料不均匀，到发菌后期特别是出菇时会造成脱水，使菌包料袋分离，出现在袋壁的菇蕾多，营养消耗大，形成的桑黄子实体相对偏小。

本发明所述的桑黄工厂化瓶栽的方法包括菌种处理、装瓶生产、液体接种、发菌管理和采收等步骤，具体采用广口塑料瓶，控制桑黄栽培基质配方、液体菌种制作、培养、出菇管理控制、菇房的温度、湿度、光照、二氧化碳和培育时间等参数，使桑黄个体大小均匀、整体整齐度高。

所述的桑黄工厂化瓶栽的方法过程简单、易操作，栽培瓶成品率提高，效率也相应提升30％～40％，且利用本发明的出菇方法可使出菇整体产量大幅提升8％～10％。

作为优选，步骤(1)中，以原料总重量为100份计，所述培养液的原料组成包括：

作为优选，步骤(1)中，所述发酵罐培养的压力稳定在0.01～0.03MPa。

作为优选，步骤(2)中，所述的灭菌为高压灭菌，具体条件为：在栽培瓶料中心温度达121℃后维持1.5～2h彻底灭菌后，移入冷却室强制降温并消毒。

作为优选，步骤(3)中，所述发菌培养过程中，25～30天菌丝长满菌瓶，29～31天后熟，比袋栽发菌要缩短近30～45天。

作为优选，步骤(4)中，所述出菇培养的具体步骤为：

(4-1)控制出菇库房温度28～30℃，相对湿度85％～95％，CO₂浓度不低于5000ppm，培养7～10天；

(4-2)待桑黄菌包长出的子实体厚度为3～4mm时，控制出菇库房通风量3～5min/h，温度26～28℃，相对湿度95％～100％，继续培养；

(4-3)待桑黄菌包长出的子实体厚度为5～9mm、长度为10～13cm时，增加出菇库房通风量至10～15min/h，继续培养直至采收。

作为优选，步骤(4-2)、(4-3)中，给予桑黄菌瓶300～500Lux的散射光。

本发明与现有技术相比，主要优点包括：

1、改变出菇模式，以塑料瓶栽培改变原有传统桑黄栽培袋栽割口出菇的模式；桑黄子实体生长在广口塑料瓶口，比传统袋栽在袋壁割口出菇更简单，杂菌污染率更低。

2、原有桑黄栽培原料以杂木屑、椴木、麸皮等为主要栽培基质，本发明将培养基改变为以玉米芯为主，添加部分桑枝木屑、麸皮、棉籽壳等原材料。使用1200mL广口塑料瓶，可装干料350g左右，应用液体菌种在控温控湿的培养室，发菌时间在25～30天完成，比袋栽发菌要缩短近30～45天。

3、适宜工厂化栽培的模式，从搅拌、装瓶、灭菌、接种、培养、发菌、出菇管理、采收等整个生产周期完全应用食用菌工厂化的设施设备，整个生产周期在100～120天，比袋栽桑黄生产周期缩短60～90天(常规生产是12月生产到次年7月结束)。应用工厂化进行培养、出菇，瓶栽桑黄的平均产量达8～15g/瓶(干品)，桑黄子实体的朵型更圆润、品质、整齐度、色泽等各方面都优于袋栽。

4、应用瓶栽桑黄，工厂化设施设备的应用效率提高约30％～40％，节约人工等费用30％～50％；特别是出菇后对废料的处理及栽培瓶的重复利用，大大的改善了对环境的污染。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐述本发明。应理解，这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围。下列实施例中未注明具体条件的操作方法，通常按照常规条件，或按照制造厂商所建议的条件。

对比例

(1)将杂木屑78％、麸皮20％、糖1％、石灰1％按质量比例混合制得干料，然后添加水至含水量达65％，搅拌均匀，得到栽培料；

(2)11月中下旬，将培养料装入聚乙烯塑料袋(17cm×38cm)中(干料重650g)，用套环和套圈封口，制得料袋；料袋于100℃下进行常压灭菌12h，灭菌完后自然冷却；

(3)在无菌条件下按常规方法进行接种，菌种为桑黄S1菌株；

(4)接种完成后，将料袋转移到室内培养场所或设施大棚内发菌，温度控制在25～27℃，15天后，堆温控制在22～25℃，当室温超过28℃，应加大通风等措施降温，空气相对湿度50％～70％。每隔10～15天进行翻堆检查，及时剔除污染菌袋，到2月中下旬菌袋菌丝发满。

(5)菌袋发满后保持50～60天后熟后，对菌棒进行割口处理，在每个菌袋是上半部横向割口，长度为7～8cm月牙形的割口1个，割口处的塑料袋向上掀起，露出割口面即可。

(6)割口后排场，保持出菇场所在黑暗条件下，保持湿度90％以上，温度在28℃，超过30℃要进行通风降温处理。按常规方法进行出菇管理，当桑黄子实体突出割口表面后，给予一定的散射光在300～500Lux，保持湿度在95％以上，温度控制在26～28℃，直到子实体表面出现褐色或耳腹面孢子发生时，即可采收。

实施例

(1)将玉米芯37％，桑枝木屑20％，棉籽壳15％，麸皮15％，甜菜叶5％，豆粕5％，石膏1％，石灰1％，磷酸二氢钾0.5％，硫酸镁0.5％按质量比例混合，制得干料，然后添加水至含水量达60％，搅拌均匀，得到栽培料；

(2)将培养料装入1200mL聚乙烯广口塑料瓶(80mm口径)中，用塑料盖封口，制得料瓶(干料重350g)；在灭菌柜中料瓶中心温度达121℃后维持1.5～2h，灭菌完后自然冷却；移入冷却室强制降温并消毒。

(3)在无菌条件下接入液体菌种(将桑黄菌种活化后接种于灭菌后的发酵罐培养液中，25～30℃下，培养5～6天得到液体菌种)，菌种为桑黄S1菌株，完成盖上塑料盖封口，操作在全自动生产线和接种全自动生产线上完成；

(4)接种完成后，将菌瓶转移到培养室，室内温度控制在26～28℃，相对湿度50～70％，通风量为3～5min/h，约28～35天菌丝长满整个菌瓶，发菌完成；

(5)菌瓶保持15天(d)后熟后，打开并取下菌瓶盖移入出菇库房，保持出菇库房不通风，温度28～30℃，相对湿度85％～95％，培养7～10天，CO₂浓度控制在5000～8000ppm；待桑黄菌包长出的子实体厚度为3～4mm时，控制出菇库房通风量3～5min/h，温度26～28℃，相对湿度95％～100％，并给予桑黄菌瓶300～500Lux的散射光，继续培养；待桑黄菌包长出的子实体厚度为5～9mm超过瓶口时，增加出菇库房通风量至10～15min/h，继续培养直至采收。

(6)出菇房按60瓶/m²(单层)进行出黄管理，就是处理污染菌瓶。防交叉感染。当桑黄子实体有孢子发生时即可采收。

本发明菌瓶工厂化栽培分别在3月20日和8月15日进行了接种，两次栽培的菌瓶菌丝满袋时间4月21日和9月14日；传统栽培是11月21日进行接种，菌丝满袋时间2月26日，比菌瓶工厂化栽培方法慢85～95天，以下对两次栽培与对比例的各项指标作了比较，具体见表1和表2。

表1实施例与对比例各指标对比

表2实施例与对比例各指标比对

由表1可知，工厂化桑黄瓶栽比传统袋栽的满袋时间缩短了65d，菌棒成品率提高9.7％，生物转化率提高9.44％。

由表2可知，工厂化桑黄瓶栽比传统袋栽的满袋时间缩短了59d，菌棒成品率提高10.4％，生物转化率提高6.87％。

可见，本发明的桑黄工厂化瓶栽的方法与传统袋栽方法相比具有明显的优越性。

此外应理解，在阅读了本发明的上述描述内容之后，本领域技术人员可以对本发明作各种改动或修改，这些等价形式同样落于本申请所附权利要求书所限定的范围。

Claims

1.一种桑黄工厂化瓶栽的方法，其特征在于，包括步骤：

（1）将桑黄菌种活化后接种于灭菌后的发酵罐培养液中，25~30℃下，发酵罐培养5~6天得到液体菌种；

以总重量为100份计，所述培养液的原料组成包括：

去皮马铃薯提取液 30~40份，

豆饼粉提取液 20~40份，

桑枝木屑浸出液 5~15份，

酵母粉 1~10份，

葡萄糖 10~15份，

蛋白胨 1~3份，

磷酸二氢钾 0.01~1份，

硫酸镁 0.01~1份，

维生素B1 0.1~0.5份；

（2）将桑黄瓶栽用的培养基搅拌后应用自动化塑料瓶栽装置机械进行装瓶，装料高度为距聚丙烯塑料瓶瓶口0.8~1.2 cm，装瓶后进行灭菌接种液体菌种，得到桑黄菌瓶；

所述桑黄瓶栽用的培养基，以原料总重量为100%计，原料组成包括：

玉米芯 30%~50%，

桑枝木屑 10%~30%，

棉籽壳 10%~30%，

麸皮 10%~20%，

甜菜叶 5%~10%，

豆粕 2%~5%，

石膏 0.1%~2%，

石灰 0.1%~2%，

磷酸二氢钾 0.1%~1%，

硫酸镁 0.1%~1%；

（3）将桑黄菌瓶在黑暗、通风、培养温度23~25℃的条件下进行发菌培养；

（4）将发菌完好的桑黄菌瓶转移到出菇库房中，打开聚丙烯塑料瓶的瓶盖后进行出菇培养，采收；所述出菇培养的具体步骤为：

（4-1）控制出菇库房温度28~30℃，相对湿度85%~95%，CO₂浓度不低于5000 ppm，培养7~10天；

（4-2）待桑黄菌包长出的子实体厚度为3~4 mm时，控制出菇库房通风时间3~5 min/h，温度26~28℃，相对湿度95%~100%，继续培养；

（4-3）待桑黄菌包长出的子实体厚度为5~9 mm、长度为10~13 cm时，增加出菇库房通风时间至10~15 min/h，继续培养直至采收；

步骤（4-2）、（4-3）中，给予桑黄菌瓶300~500 Lux的散射光。

2.根据权利要求1所述的桑黄工厂化瓶栽的方法，其特征在于，步骤（1）中，所述发酵罐培养的压力稳定在0.01~0.03 MPa。

3.根据权利要求1所述的桑黄工厂化瓶栽的方法，其特征在于，步骤（2）中，所述的灭菌为高压灭菌，具体条件为：在栽培瓶料中心温度达121℃后维持1.5~2 h彻底灭菌后，移入冷却室强制降温并消毒。

4.根据权利要求1所述的桑黄工厂化瓶栽的方法，其特征在于，步骤（3）中，所述发菌培养过程中，25~30天菌丝长满菌瓶，29~31天后熟。