CN109234171B - 一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法 - Google Patents

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Abstract

一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法，包括以下步骤：步骤1、灵芝母种制备；步骤2、灵芝液态发酵菌种制备；步骤3、灵芝固体发酵培养基制备；步骤4、灵芝培养与菌丝溶解；步骤5、富硒灵芝粉制备。本发明的优点：（1）富硒灵芝菌粉的生产全部建立在有机硒转化的基础上，确保了硒源的绝对安全；（2）产品中不仅含有丰富的有机硒、同时还含有灵芝的功能性成分、酶降解的各种多肽、低聚糖类膳食纤维；（3）本发明工艺中，原料所含的有机硒全部转化进入产品中，有机硒转化利用率较之于利用固体发酵获得富硒灵芝子实体的生产工艺大大提高。

Description

一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法
技术领域
本发明属于农产品精深加工技术领域，涉及一种富硒灵芝粉的制备方法。
背景技术
硒对人类健康非常有益，但是无机硒利用率低、毒性强。植物和微生物都有吸收和转化无机硒为有机硒的能力，目前已知的有机硒主要残渣形态是硒代氨基酸以及带有硒代氨基酸残基的蛋白质、某些生物的多糖类中带有硫酸酯结构也可以发生硒代反应，另外在百合科植物中含有非蛋白态的含硫氨基酸，也可以发生硒代反应，目前也受到了关注。
利用某些具有显著生理功能的食用菌的富硒特性来富集培养基中的有机态硒，进而将富硒食用菌超微化粉碎制备人类食品的富硒添加剂一直是食品行业关注的热点。例如中国发明专利一种富含有机硒的产品配方及其工艺 CN201710280008.1 是将200~300ppm的的亚硒酸钠溶液喷撒在粉碎的桑葚枝条粉上，配置食用菌培养基，待食用菌子实体收获后烘干超微粉碎而成。但是实际上高浓度的亚硒酸钠对食用菌的生长是有害的，其子实体生产效率低。
在藻类中，螺旋藻富硒能力最强，多次添加微量亚硒酸钠的情况下，螺旋藻干粉硒积累量可以达到接近2900mg/kg，其中既有存在于硒代氨基酸、含有硒代氨基酸的多肽、蛋白质中的有机硒、也有以硒酸盐酯键结合在多糖上的有机硒。这些形态的有机硒对于微生物、动物都具有毒性低、可利用率高的特点。
在食用（药用）真菌中，灵芝属于名贵中药材中的上品，具有滋补强壮、固本扶正的功效，俗称仙草。灵芝的富硒能力最强，在培养条件合适的情况下，灵芝菌丝的硒积累量可以达到接近3000mg/kg，灵芝还能够在高粱的种子上很好的生长。
发明内容
本发明的目的是提出一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法，利用灵芝对硒的富集能力超强，而且能够在高粱种子上很好的生长的特性，以富硒高粱种子、富硒螺旋藻粉制作灵芝固体发酵培养基，接种灵芝并当菌丝长满培养容器之后，升温促进灵芝菌丝自溶，释放蛋白分解酶、纤维素酶和淀粉酶对培养基中大分子物质进行降解，获得高吸收效率的有机硒和大量灵芝功能性成分。直接烘干和粉碎即可制备口感很好的富硒食品添加剂。
本发明是通过以下技术方案实现的。
本发明所述的一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法，包括以下步骤。
步骤1、灵芝母种制备。
从中国工业微生物菌种保藏管理中心购买灵芝菌株，以PDA培养基进行活化。使用活化用PDA培养基配方如下：去皮马铃薯200g（煮汁），VB10.01g/l、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然。葡萄糖20g、琼脂18g、水1000ml， pH自然。在30℃，遮光培养。
从活化好的优势菌落的边沿挖取菌丝，接种到驯化培养基中。使用驯化用斜面培养基斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各10g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然。在28℃，遮光培养。
从驯化培养基中挑选长势旺盛的菌丝体接种到母种培养斜面上，在18~30℃下，遮光培养到菌丝铺满3/4斜面，放入4℃冷藏柜，避光保存备用。母种斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然。
步骤2、灵芝液态发酵菌种制备。
在2000ml大锥形瓶中装如1200ml液体培养基，接种3个母管驯化好的灵芝母种，摇床上以最小的摇动频率，在28~30℃下，遮光培养，直到形成密集的菌丝球即可用于固态发酵的接种剂。液体培养基配方：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，调节pH6.0。
步骤3、灵芝固体发酵培养基制备。
灵芝固体发酵培养基配方：富硒高粱种子粉65~75份、富硒螺旋藻粉25~35份，水35~45份，充分混合均匀装入底部铺垫3层无菌纱布的不锈钢蒸笼中，厚度4cm，摊平覆盖3层无菌纱布，100℃蒸汽蒸煮30min，冷却，搬入无菌培养室。
步骤4、灵芝培养与菌丝溶解。
在无菌培养室中，严格按照无菌接种要求，掀开表层覆盖纱布、向灭菌后的固体发酵培养基中接种液态发酵菌种，接种量为固体培养基重量的15%~20%。重新覆盖纱布。在28~30℃下，遮光培养到菌丝全面覆盖培养基，整个过程持续3~5天。
将发酵充分的灵芝培养料装入灭菌好的陶瓷大罐中，保鲜膜封口，移入无菌加工车间智能培养箱中，把温度升高到45℃，保温4~6小时，酶解充分后，立即转入热热风干燥箱中80℃下鼓风干燥到含水率低于12%。
步骤5、富硒灵芝粉制备。
将步骤4制备的灵芝干发酵料以锤片式粉碎机过80~120目网；再以超微粉碎机粉碎过250~300目筛网，得到有机硒含量300~500mg/kg的超微化富硒灵芝粉，以100ml塑料瓶或棕色玻璃瓶灌装密封。产品可以用于食品有机硒的安全添加。
本发明的优点。
（1）富硒灵芝菌粉的生产全部建立在有机硒转化的基础上，确保了硒源的绝对安全。
（2）产品中不仅含有丰富的有机硒、同时还含有灵芝的功能性成分、酶降解的各种低聚糖类、多肽等膳食纤维。
（3）本发明工艺中，原料所含的有机硒全部转化进入产品中，有机硒转化利用率较之于利用固体发酵获得富硒灵芝子实体的生产工艺大大提高。
具体实施方式
本发明将通过以下实施例作进一步说明。
实施例1 。
一种以富硒灵芝粉生产方法，其主要工艺步骤包括：
步骤1、灵芝母种制备。
从中国工业微生物菌种保藏管理中心购买灵芝菌株CICC 14002，以PDA培养基进行活化。使用活化用PDA培养基配方如下：去皮马铃薯200g（煮汁），VB10.01g/l、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然。葡萄糖20g、琼脂18g、水1000ml， pH自然。在30℃，遮光培养。
从活化好的优势菌落的边沿挖取菌丝，接种到驯化培养基中。使用驯化用斜面培养基斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各10g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然。在28℃，遮光培养。
从驯化培养基中挑选长势旺盛的菌丝体接种到母种培养斜面上，在28℃下，遮光培养到菌丝铺满3/4斜面，放入4℃冷藏柜，避光保存备用。母种斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然。
步骤2、灵芝液态发酵菌种制备。
在2000ml大锥形瓶中装如1200ml液体培养基，接种3个母管驯化好的灵芝母种，摇床上以最小的摇动频率，在28℃下，遮光培养，直到形成密集的菌丝球即可用于固态发酵的接种剂。液体培养基配方：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，调节pH6.0。
步骤3、灵芝固体发酵培养基制备。
灵芝固体发酵培养基配方：富硒高粱种子粉65份、富硒螺旋藻粉35份，水40份，充分混合均匀装入底部铺垫3层无菌纱布的不锈钢蒸笼中，厚度4cm，摊平覆盖3层无菌纱布，100℃蒸汽蒸煮30min，冷却，搬入无菌培养室。
步骤4、灵芝培养与菌丝溶解。
在无菌培养室中，严格按照无菌接种要求，掀开表层覆盖纱布、向灭菌后的固体发酵培养基中接种液态发酵菌种，接种量为固体培养基重量的20%。重新覆盖纱布。在28℃下，遮光培养到菌丝全面覆盖培养基，整个过程持续5天。
将发酵充分的灵芝培养料装入灭菌好的陶瓷大罐中，保鲜膜封口，移入无菌加工车间智能培养箱中，把温度升高到45℃，保温6小时，酶解充分后，立即转入热热风干燥箱中80℃下鼓风干燥到含水率低于12%。
步骤5、富硒灵芝粉制备。
将步骤4制备的灵芝干发酵料以锤片式粉碎机过120目网；再以超微粉碎机粉碎过250目筛网，得到有机硒含量900mg/kg的超微化富硒灵芝菌粉，以100ml塑料瓶或棕色玻璃瓶灌装密封。产品可以用于食品有机硒的安全添加。

Claims (1)

1.一种富硒灵芝菌丝粉的制备方法，其特征是包括以下步骤：
步骤1、灵芝母种制备：
从中国工业微生物菌种保藏管理中心购买灵芝菌株，以PDA培养基进行活化；使用活化用PDA培养基配方如下：去皮马铃薯200g煮汁，VB10.01g/l、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然；葡萄糖20g、琼脂18g、水1000ml， pH自然；在30℃，遮光培养；
从活化好的优势菌落的边沿挖取菌丝，接种到驯化培养基中；使用驯化用斜面培养基斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各10g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然；在28℃，遮光培养；
从驯化培养基中挑选长势旺盛的菌丝体接种到母种培养斜面上，在18~30℃下，遮光培养到菌丝铺满3/4斜面，放入4℃冷藏柜，避光保存备用；母种斜面培养基：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，pH自然；
步骤2、灵芝液态发酵菌种制备：
在2000ml大锥形瓶中装如1200ml液体培养基，接种3个母管驯化好的灵芝母种，摇床上以最小的摇动频率，在28~30℃下，遮光培养，直到形成密集的菌丝球即可用于固态发酵的接种剂；液体培养基配方：富硒高粱种子粉、富硒螺旋藻粉各15g、VB10.01g、MgSO40.2g、KH2PO41.0g、葡萄糖5g、琼脂18g、水1000ml，高压蒸汽灭菌，调节pH6.0；
步骤3、灵芝固体发酵培养基制备：
灵芝固体发酵培养基配方：富硒高粱种子粉65~75份、富硒螺旋藻粉25~35份，水35~45份，充分混合均匀装入底部铺垫3层无菌纱布的不锈钢蒸笼中，厚度4cm，摊平覆盖3层无菌纱布，100℃蒸汽蒸煮30min，冷却，搬入无菌培养室；
步骤4、灵芝培养与菌丝溶解：
在无菌培养室中，严格按照无菌接种要求，掀开表层覆盖纱布、向灭菌后的固体发酵培养基中接种液态发酵菌种，接种量为固体培养基重量的15%~20%；重新覆盖纱布；在28~30℃下，遮光培养到菌丝全面覆盖培养基，整个过程持续3~5天；
将发酵充分的灵芝培养料装入灭菌好的陶瓷大罐中，保鲜膜封口，移入无菌加工车间智能培养箱中，把温度升高到45℃，保温4~6小时，酶解充分后，立即转入热风干燥箱中80℃下鼓风干燥到含水率低于12%；
步骤5、富硒灵芝粉制备：
将步骤4制备的灵芝干发酵料以锤片式粉碎机过80~120目网；再以超微粉碎机粉碎过250~300目筛网，得到有机硒含量300~500mg/kg的超微化富硒灵芝粉，以100ml塑料瓶或棕色玻璃瓶灌装密封；产品可以用于食品有机硒的安全添加。
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