CN107691105A - 一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及野生菌栽培领域，具体涉及一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法。一种羊肚菌的育种方包括如下步骤：制备营养液、培养基，将野生的羊肚菌作为原种进行培养，培养出的羊肚菌栽培种较常规的培养方法培养出的羊肚菌栽培种遗传性能好、不易老化，且用该羊肚菌栽培种进行栽培，选择环境为核桃林地，自然通风生长，不施肥。本发明提供了一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法，该发明提供的育种方法得到的羊肚菌栽培种，种性不易老化，菌核较大，且使用该发明提供的在核桃林下的栽培方法，防野生羊肚菌的生长环境，羊肚菌的产量明显提高，且羊肚菌天然无污染。

Description

一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法

技术领域

本发明涉及野生菌栽培领域，具体涉及一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法。

背景技术

羊肚菌是一种营养价值极高的菌类食品，今年来，对羊肚菌的研究层出不穷，因羊肚菌的播种时期一般为8月底至9月初，但是其制种时间一般适宜在4月份-5月份，中间保存时间较长，其常规的栽培种制作方法制得的羊肚菌栽培种，种性易老化，菌核较小，且其产量低，加上种植环境的影响，主要是温度、湿度、以及土壤的酸碱度的影响，羊肚菌的产量一直较低，且人工栽培出的羊肚菌农药以及化肥的污染都较高，营养价值远远低于野生羊肚菌的营养价值，本发明针对这种现象，发明了一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法，该发明提供的羊肚菌的育种方法，其培养基培养出的羊肚菌栽培种，种性不易老化，菌核较大，且使用该发明提供的在核桃林下的栽培方法，防野生羊肚菌的生长环境，羊肚菌的产量明显提高、且无污染。

发明内容

本发明提供了一种羊肚菌的育种方法及其栽培方法，该发明提供的育种方法得到的羊肚菌栽培种，种性不易老化，菌核较大，且使用该发明提供的在核桃林下的栽培方法，防野生羊肚菌的生长环境，羊肚菌的产量明显提高，且羊肚菌天然无污染。

一种羊肚菌的育种方法：其特征在于，包括如下步骤：

（1）将质量比例为10:3的腐殖质土与水搅拌均匀，静置沉淀30min,取上清液，再将上清液过400目，进行过滤，备用；

（2）制备营养液：取1600ml 以步骤（1）方法制得的上清液，加200g去皮的土豆片、100g麦麸、80g阔叶树木屑，搅拌均匀，放入不锈钢锅中进行熬煮，中火熬制15分钟，即可，捞出、过滤，取滤液1000ml，加20g琼脂，放置在不锈钢锅中，煮至完全融化，再加入葡萄糖20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1粉末0.3g、分装在试管中，试管溶液占试管高度1/5即可，用硅胶塞密封，将试管捆住并排存放，用双层纸板盖在硅胶塞上方，放入121℃无菌环境下进行灭菌30min，并在该环境下烘干硅胶塞，将试管倾斜放置在超净工作台上，与水平面的夹角为25°，冷却备用；

（3）制备菌核：采集外形完整、品相美观的野生羊肚菌，将野生羊肚菌灭菌处理，在无菌环境下，将羊肚菌母种放入步骤（2）中的试管中，保持环境温度为15-20℃，放置18-22天，即可培育出菌核，挑取直径为0.8-1.2cm的较大的菌核，放入3-5℃的无菌环境下，进行保存，备用；

（4）制备栽培种：将小麦用清水浸泡6h，入沸水煮至12min，捞出，加入木屑、麦麸、泥土，小麦、木屑、麦麸、泥土的质量比为15:3:1:1，均匀混合，将该混合物装入瓶中，将含水量为63%-65%的泥土平铺在该混合物上表面，泥土厚度为0.5cm，泥土表面与瓶口距离为0.7-1cm,将瓶口用棉塞密封，放入压强为0.15MP的高压锅中，在121℃温度环境下灭菌2小时，等待气压表针自然回到“0”时，打开高压锅盖，取出瓶子，放置在超净工作台，冷却后打开瓶盖，得到培养基，将步骤（3）中制得的菌核接种到该培养基上，在环境为20-22℃的培养室中培养20天，即得羊肚菌栽培种。

传统的羊肚菌栽培种的制作方法如下：在无菌环境下将羊肚菌母种放置在培养皿上，盖上钟罩经过8-12h，收集孢子，用紫外线照射30min，将手术刀消毒后，将孢子粉刮落收集到培养基试管，然后将培养基放在15-18℃环境下进行培养，5-6天即得羊肚菌菌核，将菌核放置在3-5℃环境中储存3-4个月，即得羊肚菌栽培种，该方法制得的羊肚菌栽培种易老化，遗传性能降低，较小，一般为0.2cm-0.4cm，而本发明提供的羊肚菌育种方法，其菌核形成时间为3-4天，菌核的大小为0.8cm-1.2cm，栽培种不易老化，其老化率降低了70%-80%。

本发明还提供了使用该育种方法育种出来的羊肚菌的栽培方法，包括如下步骤：

（1）收集新鲜的核桃树叶，选取高度处于1.5m-2m之间的叶片，叶片含水量为50%-70%，堆积， 开始后每天翻堆2-3次，控制堆体中心温度为60℃-70℃，放置10-15天，备用；

（2）选取十五年以上的核桃林，保证树田土地的湿度为60%-70%，进行松土、整平作畦宽1米，高15cm的种植行，行距为50cm；

（3）在种植行内，以0.5kg/平方米的播种，将步骤（3）中制得的羊肚菌栽培种进行播种，盖土，盖土厚度为3-5cm,将步骤（1）中堆放的核桃树叶均匀铺盖在种植行内，厚度为1-2cm；

（4）第3天时，往种植行内喷洒水，保持其土壤湿度在50%-60%之间，第20天时，进行灌溉，灌水程度为距畦表面6-7cm时停止灌溉，第45天-50天时,进行第二次灌溉，灌水程度为距畦表面7-8cm时停止灌溉，第100天后，进行第三次灌溉，选择在夜间，环境温度为3-5℃，灌水程度为距畦表面7-8cm时停止灌溉；

（5）待羊肚菌长出并且露出畦面0.5cm后，每隔1d，选择在早上8：00-10：00和下午3:00-5：00进行喷水，保持土壤湿度为60%-70%，自然通风生长。

优选地，所述步骤（2）中核桃林地的pH值为6.8-7.2。

优选地，所述步骤（3）中铺在种植行内的核桃树叶的厚度为2cm。

优选地，所述步骤（5）中喷水次数为6-9次。

传统的栽培方法没有过多考虑种植环境对农作物的影响，羊肚菌属于喜阴喜潮的生物菌种，常规的方法只是在种植地搭建防晒网，而防晒网经长时间风吹日晒，会出现风干导致不能正常使用等情况。本发明在树龄为十五年以上的核桃林下种植，利用的核桃树的树叶、树枝形成的自然遮挡屏进行遮挡，为羊肚菌提供了阴凉的生长环境，种植过程不使用任何农药化肥，进行适宜的灌溉即可，所需的营养物质全部来自于核桃树林下的土壤，仿造野生羊肚菌的生长方式。

目前很多土壤因烂施肥，导致土壤酸化，不适宜农作物生长，该发明优选的取PH值为6.8-7.2的核桃林，在该环境下羊肚菌长势较好，相对于传统土地加传统育种方法培育出的栽培种，产量提高20%-25%左右。

铺盖在种植行内的核桃树叶的厚度为1-2cm，核桃叶厚度不宜过高，也不宜过低，厚度低使得土壤的保湿时间不够，保温差，温度过低，羊肚菌也不易长出。

羊肚菌长出后，喷水次数不宜过多，6-9次即可，保证其湿度在60%-70%，过多的水会导致羊肚菌根部腐烂，利用上述育种方法育出的羊肚菌栽培种在该栽培环境下，产量提高了223.3%-300%。

本发明提供的一种羊肚菌栽培种的育种方法以及羊肚菌的栽培方法，培育出的羊肚菌栽培种种性不易老化，其形成菌核时间短，菌核大，种植出的羊肚菌产量高，无污染。

具体实施方式

实施例1

1.培育羊肚菌栽培种，步骤如下：

（1）将2000g的腐殖质土与600g的水搅拌均匀，静置沉淀30min,取上清液，再将上清液过400目过滤，备用；

（2）制备营养液：取1600ml 以步骤（1）方法制得的上清液，加200g去皮的土豆片、100g麦麸、80g阔叶树木屑，搅拌均匀，放入不锈钢锅中进行熬煮，中火熬制15分钟，即可，捞出、过滤，取滤液1000ml，加20g琼脂，放置在不锈钢锅中，煮至完全融化，再加入葡萄糖20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1粉末0.3g、分装在试管中，试管溶液占试管高度1/5即可，用硅胶塞密封，将试管捆住并排存放，用双层纸板盖在硅胶塞上方，放入121℃无菌环境下进行灭菌30min，并在该环境下烘干硅胶塞，将试管倾斜放置在超净工作台上，与水平面的夹角为25°，冷却备用；

（3）制备菌核：采集外形完整、品相美观的野生羊肚菌，将野生羊肚菌灭菌处理，在无菌环境下，将羊肚菌母种放入步骤（2）中的试管中，保持环境温度为15℃，放置18天，即可培育出菌核，挑取直径为0.8-0.9cm的菌核，放入3℃的无菌环境下，进行保存，备用；

（4）制备栽培种：将小麦600g用清水浸泡6h，入沸水煮至12min，捞出，加入木屑120g、麦麸40g、泥土40g，均匀混合，将该混合物装入瓶中，将含水量为63%的泥土平铺在该混合物上表面，泥土厚度为0.5cm，泥土表面与瓶口距离为0.7cm,将瓶口用棉塞密封，放入压强为0.15MP的高压锅中，在121℃温度环境下灭菌2小时，等待气压表针自然回到“0”时，打开高压锅盖，取出瓶子，放置在超净工作台，冷却后打开瓶盖，得到培养基，将步骤（3）中制得的菌核接种到该培养基上，在环境为20℃的培养室中培养20天，即得羊肚菌栽培种，取100g储存在试管中进行密封。

2.羊肚菌的栽培

（1）收集新鲜的核桃树叶，选取高度处于1.5m之间的叶片，叶片含水量为50%-55%，堆积， 开始后每天翻堆2次，控制堆体中心温度为60℃，放置10天，备用；

（2）选取十五年以上的核桃林一亩，核桃林地的PH值为6.8，树田土地的湿度为65%，进行松土、整平作畦宽1米，高15cm的种植行，行距为50cm；

（3）在种植行内，以0.5kg/平方米的量进行播种，将用1中方法制得的羊肚菌栽培种进行播种，盖土，盖土厚度为3cm，将步骤（1）中堆放的核桃树叶均匀铺盖在种植行内，厚度为1cm；

（4）第3天时，往种植行内喷洒水，保持其土壤湿度在50%-60%之间，第20天时，进行灌溉，灌水程度为距畦表面6cm时停止灌溉，第45天时,进行第二次灌溉，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉，第100天后，进行第三次灌溉，选择在夜间，环境温度为3℃，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉；

（5）待羊肚菌长出并且露出畦面0.5cm后，每隔1d，选择在早上8：00进行喷水三次和下午3：00喷水三次，保持土壤湿度为60%，自然通风生长。

实施例2

1.培育羊肚菌栽培种，步骤如下：

步骤（1）和（2）与实施例1相同；

（3）制备菌核：采集外形完整、品相美观的野生羊肚菌，将野生羊肚菌灭菌处理，在无菌环境下，将羊肚菌母种放入步骤（2）中的试管中，保持环境温度为17℃，放置20天，即可培育出菌核，挑取直径为0.9-1.0cm的菌核，放入4℃的无菌环境下，进行保存，备用；

（4）制备栽培种：将小麦450g用清水浸泡6h，入沸水煮至12min，捞出，加入木屑90g、麦麸30g、泥土30g，均匀混合，将该混合物装入瓶中，将含水量为65%的泥土平铺在该混合物上表面，泥土厚度为0.5cm，泥土表面与瓶口距离为0.8,将瓶口用棉塞密封，放入压强为0.15MP的高压锅中，在121℃温度环境下灭菌2小时，等待气压表针自然回到“0”时，打开高压锅盖，取出瓶子，放置在超净工作台，冷却后打开瓶盖，得到培养基，将步骤（3）中制得的菌核接种到该培养基上，在环境为21℃的培养室中培养20天，即得羊肚菌栽培种，取100g储存在试管中进行密封的。

2.羊肚菌的栽培

（1）收集新鲜的核桃树叶，选取高度处于1.8m之间的叶片，叶片含水量为60%-70%，堆积， 开始后每天翻堆2次，控制堆体中心温度为60℃-65℃，放置12天，备用；

（2）选取十五年以上的核桃林一亩，核桃林地的PH值为7.0，保证树田土地的湿度为60%-70%，进行松土、整平作畦宽1米，高15cm的种植行，行距为50cm；

（3）在种植行内，以0.5kg/平方米的播种，将步骤（3）中制得的羊肚菌栽培种进行播种，盖土，盖土厚度为4cm,将步骤（1）中堆放的核桃树叶均匀铺盖在种植行内，厚度为2cm;

（4）第3天时，往种植行内喷洒水，保持其土壤湿度在50%-60%之间，第20天时，进行灌溉，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉，第48天时,进行第二次灌溉，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉，第100天后，进行第三次灌溉，选择在夜间，环境温度为3-5℃，灌水程度为距畦表面6cm时停止灌溉。

（5）待羊肚菌长出并且露出畦面0.5cm后，每隔1d，选择在早上10：00喷水四次和下午5：00喷水两次，喷水7次，保持土壤湿度为60%-70%，自然通风生长。

实施例3

1.培育羊肚菌栽培种，步骤如下：

步骤（1）、（2）与实施例1相同，

（3）制备菌核：采集外形完整、品相美观的野生羊肚菌，将野生羊肚菌灭菌处理，在无菌环境下，将羊肚菌母种放入步骤（2）中的试管中，保持环境温度为20℃，放置20天，即可培育出菌核，挑取直径为1.2的较大的菌核，放入5℃的无菌环境下，进行保存，备用；

（4）制备栽培种：将小麦750g用清水浸泡6h，入沸水煮至12min，捞出，加入木屑150g、麦麸50g、泥土50g，均匀混合，将该混合物装入瓶中，将含水量为70%的泥土平铺在该混合物上表面，泥土厚度为0.5cm，泥土表面与瓶口距离为1cm,将瓶口用棉塞密封，放入压强为0.15MP的高压锅中，在121℃温度环境下灭菌2小时，等待气压表针自然回到“0”时，打开高压锅盖，取出瓶子，放置在超净工作台，冷却后打开瓶盖，得到培养基，将步骤（3）中制得的菌核接种到该培养基上，在环境为22℃的培养室中培养20天，即得羊肚菌栽培种，取100g储存在试管中进行密封。

2.羊肚菌的栽培

（1）收集新鲜的核桃树叶，选取高度处于2.0m之间的叶片，叶片含水量为50%-55%，堆积， 开始后每天翻堆3次，控制堆体中心温度为68℃，放置10天，备用；

（2）选取十五年以上的核桃林一亩，，核桃林地的PH值为7.2，树田土地的湿度为60%，进行松土、整平作畦宽1米，高15cm的种植行，行距为50cm；

（3）在种植行内，以0.5kg/平方米的量进行播种，将用1中方法制得的羊肚菌栽培种进行播种，盖土，盖土厚度为3cm，，将步骤（1）中堆放的核桃树叶均匀铺盖在种植行内，厚度为2cm；

（4）第3天时，往种植行内喷洒水，保持其土壤湿度在50%-60%之间，第20天时，进行灌溉，灌水程度为距畦表面6cm时停止灌溉，第45天时,进行第二次灌溉，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉，第100天后，进行第三次灌溉，选择在夜间，环境温度为3℃，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉。

（5）待羊肚菌长出并且露出畦面0.5cm后，每隔1d，选择在早上8：00和下午3：00进行喷水，喷水次数为6次，保持土壤湿度为60%，自然通风生长。

对比例1：将常规的育种方法培育出的羊肚菌种植在实施例1-3中羊肚菌的栽培环境下进行栽培。

1.培养羊肚菌栽培种

（1）将事先灭菌好的培养基试管、镊子、接种针、培养皿、手术刀、棉签、钟罩、打火机、酒精灯放在净化室的超净工作台，将采集的外形完整、品相美观的野生羊肚菌利用消毒水消毒5次，再使用所述棉签擦干水份，使其含水量不超过30%，放入超净工作台，用紫外线灯照射30分钟，然后将羊肚菌放入所述培养皿上，盖上钟罩，经过10小时后，在培养皿上出现较多淡黄色的孢子，继续开启紫外线灯照射3omin，然后放手术刀在酒精灯外焰上烧1min，然后用手术刀将孢子粉刮到一起，用接种针挑取三分之一的孢子接入到培养基试管中；

（2）将接好的试管移入环境温度为15℃的培养室，倾斜放置，与水平面夹角25°，进行培养，5-6天后，可看见长满试管的菌核；

（3）将步骤（2）中的菌核放入5℃的冰箱中储存，继续培养4个月，即得羊肚菌栽培种。取100g储存在试管中进行密封。

对比例2：对比例1中的育种方法培育出的羊肚菌栽培种在常规选取的三种土地中进行栽培。

与对比例1培育方法相同，取100g储存在试管中进行密封。

栽培方法：

（1）选取三块面积均为一亩的土地，编号A、B、C，PH值分别6.9、7.0、7.1，保证树田土地的湿度为60%-70%，进行松土、整平作畦宽1米，高15cm的种植行，行距为50cm；

（2）在种植行内，以0.5kg/平方米的量进行播种，将对比例1中方法制得的羊肚菌栽培种进行播种，盖土，盖土厚度为3cm，并在土地上方搭建防晒网；

（3）第3天时，往种植行内喷洒水，保持其土壤湿度在50%-60%之间，第20天时，进行灌溉，灌水程度为距畦表面6cm时停止灌溉，第45天时,进行第二次灌溉，灌水程度为距畦表面7cm时停止灌溉，第100天后，进行第三次灌溉，选择在夜间，环境温度为3℃；

（4）待羊肚菌长出并且露出畦面0.5cm后，每隔1d，选择在早上8：00和下午3：00进行喷水，喷水次数为6次，保持土壤湿度为60%；

（5）待120天时，对A、B、C三块土地分别进行不施肥、施肥30kg，施肥50kg，然后自然生长。

对比例3：实施例1-3的育种方法培育出的羊肚菌栽培种分别在对比例2中选取的三块土地种植环境下种植，

羊肚菌栽培种的育种：

与实施例1、实施例2、实施例3中的羊肚菌栽培种的育种方法相同。

羊肚菌的种植：

将实施例1育种出来的栽培种种植在A土地中，将实施例2培育出来的栽培种种植在B土地中，将实施例3培育出来的栽培种种植C土地中。其余种植环境与对比例3中的A、B、C三块土地的种植环境相同。

实验数据如下：

一、实施例1-3中羊肚菌育种方法与对比例1中的育种方法得到的菌核的形成时间以及大小对比如下：

二、将三个实施例中储存的100g羊肚菌栽培种以及对比例1中储存的100g羊肚菌栽培种进行试验检测，测试羊肚菌老化率，得到的实验数据如下：

三、实施例1、实施例2、实施例3与对比例1、对比例2、对比例3的年产量分别如下表所示：

Claims (5)

1.一种羊肚菌的育种方法：其特征在于，包括如下步骤：

（1）将质量比例为10:3的腐殖质土与水搅拌均匀，静置沉淀30min,取上清液，再将上清液过400目过滤，备用；

（2）制备营养液：取1600ml 以步骤（1）方法制得的上清液，加200g去皮的土豆片、100g麦麸、80g阔叶树木屑，搅拌均匀，放入不锈钢锅中进行熬煮，中火熬制15分钟即可，捞出、过滤，取滤液1000ml，加20g琼脂，放置在不锈钢锅中，煮至完全融化，再加入葡萄糖20g、蛋白胨5g、磷酸二氢钾3g、硫酸镁1.5g、维生素B1粉末0.3g、分装在试管中，试管溶液占试管高度1/5即可，用硅胶塞密封，将试管捆住并排存放，用双层纸板盖在硅胶塞上方，放入121℃无菌环境下进行灭菌30min，并在该环境下烘干硅胶塞，将试管倾斜放置在超净工作台上，与水平面的夹角为25°，冷却备用；

（3）制备菌核：采集外形完整、品相美观的野生羊肚菌，将野生羊肚菌灭菌处理，在无菌环境下，将羊肚菌母种放入步骤（2）中的试管中，保持环境温度为15—20℃，放置18-22天，即可培育出菌核，挑取直径为0.8-1.2cm的较大的菌核，放入3—5℃的无菌环境下，进行保存，备用；

（4）制备栽培种：将小麦用清水浸泡6h，入沸水煮至12min，捞出，加入木屑、麦麸、泥土，小麦、木屑、麦麸、泥土的质量比为15:3:1:1，均匀混合，将该混合物装入瓶中，将含水量为63%-65%的泥土平铺在该混合物上表面，泥土厚度为0.5cm，泥土表面与瓶口距离为0.7—1cm,将瓶口用棉塞密封，放入压强为0.15MP的高压锅中，在121℃温度环境下灭菌2小时，等待气压表针自然回到“0”时，打开高压锅盖，取出瓶子，放置在超净工作台，冷却后打开瓶盖，得到培养基，将步骤（3）中制得的菌核接种到该培养基上，在环境为20—22℃的培养室中培养20天，即得羊肚菌栽培种。

2.一种羊肚菌的栽培方法，包括如下步骤：

（1）收集新鲜的核桃树叶，选取高度处于1.5m-2m之间的叶片，叶片含水量为50%-70%，堆积， 开始后每天翻堆2-3次，控制堆体中心温度为60℃—70℃，放置10-15天，备用；

（2）选取十五年以上的核桃林，保证树田土地的湿度为60%—70%，进行松土、整平作畦宽1米，高15cm的种植行，行距为50cm；

（3）在种植行内，以0.5kg/平方米的量进行播种，将羊肚菌栽培种进行播种，盖土，盖土厚度为3—5cm，所述羊肚菌栽培种由权利要求1育种的方法得到的，将步骤（1）中堆放的核桃树叶均匀铺盖在种植行内，厚度为1—2cm；

（4）第3天时，往种植行内喷洒水，保持其土壤湿度在50%-60%之间，第20天时，进行灌溉，灌水程度为距畦表面6-7cm时停止灌溉，第45天-50天时,进行第二次灌溉，灌水程度为距畦表面7-8cm时停止灌溉，第100天后，进行第三次灌溉，选择在夜间，环境温度为3-5℃，灌水程度为距畦表面7-8cm时停止灌溉，（5）待羊肚菌长出并且露出畦面0.5cm后，每隔1d，选择在早上8：00—10：00和下午3:00—5：00分别进行喷水，保持土壤湿度为60%—70%，自然通风生长。

3.如权利要求2所述的羊肚菌的栽培方法，其特征在于：所述步骤（2）中核桃林地的pH值为6.8—7.2。

4.如权利要求3所述的羊肚菌的栽培方法，其特征在于：所述步骤（3）中，铺在种植行内的核桃树叶的厚度为2cm。

5.如权利要求2所述的羊肚菌的栽培方法，其特征在于：所述步骤（5）中喷水次数为6-9次。