CN102173886A - 一种平菇栽培基质及其发酵菌剂与应用 - Google Patents

Abstract

本发明“一种平菇栽培基质及其发酵菌剂与应用”，属于食用菌栽培技术领域。一种平菇栽培基质的发酵菌剂，由放线菌(Actinomycete)菌株W-4，W-10和细菌菌株N-14分别在相同体积的液体培养基中采用各自适宜的发酵温度条件培养相同时间制得的一级菌种液按体积比3∶3∶1的混合而成的混合菌液再在30～35℃进行二级扩大培养60个小时而得。本发明还提供了该发酵菌剂发酵制成的平菇栽培基质，该栽培基质在平菇栽培中的生物转化率为120～130％。相比普通栽培基质，增产20～30％。

Description

一种平菇栽培基质及其发酵菌剂与应用

技术领域

本发明涉及食用菌栽培技术，特别是一种平菇栽培基质的发酵菌剂及其制备方法。

背景技术

平菇，在生物分类学中隶属于真菌门担子菌纲伞菌目白蘑科侧耳属，学名：[Pleurotus ostreatus(Fr.)Kummer]，中文商品名：平菇，地方名：北风菌、蚝菌等。其是栽培广泛的食用菌。平菇含丰富的营养物质，每百克干品含蛋白质20～23克，而且氨基酸成分种类齐全，矿物质含量十分丰富，性味甘、温。具有追风散寒、舒筋活络的功效。平菇中的蛋白多糖体对癌细胞有很强的抑制作用，能增强机体免疫功能。常食平菇不仅能起到改善人体的新陈代谢，调节植物神经的作用，而且对减少人体血清胆固醇、降低血压和防治肝炎、胃溃疡。十二指肠溃疡、高血压等有明显的效果。另外，对预防癌症、调节妇女更年期综合征、改善人体新陈代谢、增强体质都有一定的好处。

目前我国栽培平菇的方法很多。有室内床栽、玉米或大豆与平菇间作、塑料大棚栽培等。常用培养原料有玉米芯、木屑、豆秸、稻草、树叶等。无论哪一种培养料均要求新鲜、无虫、无毒和无杂质。否则，易感染杂菌，造成减产。培养料配方(1)玉米芯(粉碎)78％，玉米面(或麦麸)20％、石灰2％和适量水；(2)玉米芯(粉碎)40％、豆秸(粉碎)40％、玉米面18％、石灰2％和适量水；(3)木屑78％、米糠(或玉米面)20％、石灰2％和适量水；(4)稻草，将稻草切成5-10厘米长，放入2％石灰水中浸泡24小时，捞出滤去多余的水分，即可铺料播种。一般播种量为料重的10％-15％。上层播种量占菌种量的60％，用菌种封闭料表面，以防止杂菌污染。目前的栽培方法中，在接种前，须对培养料进行堆制发酵，一般发酵至60℃左右后进行翻堆，1～2天一次，夏天翻堆6～8次，冬天翻堆8～12次使原料成分降解，以便于菌种充分吸收原料的营养物质，提高生物转化率(生物转化率指：一定量的栽培基质培养出来的蘑菇鲜重与栽培基质中干料的比例)。栽培基质发酵过程中不加选择地利用了原料上存在的杂菌进行发酵降解原料，这些杂菌发酵过程中产生的代谢物都混合于栽培基质中，最终转化到食用菌中，有可能影响食品安全。

发明内容

本发明提供一种用于平菇栽培基质的发酵菌剂及制备方法与应用，该发酵菌剂用于平菇栽培栽培原料的发酵，可以快速发酵，省时省力，得到的栽培基质的生物转化率高达120～130％；发酵菌剂中的菌种为特选菌种，在基质发酵过程中为优势菌群，能够抑制其它杂菌的发酵和代谢，弃除了杂菌可能产生的危害。

一种发酵平菇栽培基质的发酵菌剂，由放线菌(Actinomycete)菌株W-4，W-10和细菌菌株N-14分别在相同体积的液体培养基中采用各自适宜的发酵温度条件培养相同时间制得一级菌种液，一级菌种液按体积比3∶3∶1的混合成混合菌液，混合菌液再在30～35℃进行二级扩大培养60个小时而得。

所述放线菌(Actinomycete)菌株W-4，W-10采用的适宜发酵温度为30℃。

所述细菌菌株N-14采用的适宜发酵温度为35℃

所述放线菌(Actinomycete)菌株W-4，W-10的一级菌种液采用A型培养基，所述A型培养基为以下步骤制备而得：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各20g，加水2000ml，煮沸30分钟后过滤，在滤液中加入高氏1号液体培养基200ml，加水定容至1000ml，121℃灭菌20min。

所述细菌菌株N-14的一级菌种液采用B型培养基，所述B型培养基为以下步骤制备而得：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各20g，加水2000ml，煮沸30分钟后过滤，在滤液中加入牛肉膏蛋白胨液体培养基200ml，加水定容至1000ml，121℃灭菌30min。

所述二级扩大培养采用C型培养基：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各25g，加水1000～2000ml，煮沸30分钟后过滤，滤液加水定容至1000ml，121℃灭菌30min。

所述二级扩大培养时混合菌液的接种量为体积比0.8％。

一种平菇栽培基质，制作步骤如下：

(1)在所述发酵菌剂的50倍稀释液中加入2倍体积的麸皮；

(2)搅拌均匀，常温发酵至产生肉眼可见的白色菌丝为止得到发酵麸皮；

(3)将基质原料100份与发酵麸皮10份混合均匀，并泼洒上含尿素0.5份，过磷酸钙2份，石膏粉2份，熟石灰1份的水溶液，搅拌均匀，调节混合料的PH在6.2～7.0之间；所述基质原料指小麦秸秆、玉米秸秆和/或玉米芯秸秆的粉糠；

(4)堆垛、拍实，覆盖薄膜进行发酵，温度升至75～85℃时翻堆，以后每两天一次，共四次，每次检测并条件含水量在60～70％之间；

(5)混合料呈均匀一致的褐棕色并可见到白色线状菌时散堆降温。

上述平菇栽培基质在栽培平菇中的应用。

本发明提供的发酵菌剂是将分离自海洋温泉泥样和食用菌发酵料中三种微生物进一级培养后混合再二级扩大培养而成。三种微生物为：两种放线菌：W-4、W-10，一种细菌：N-14为本实验室分离而得并记载在：《可用于食用菌栽培料预处理的三个菌株的初步研究》，青岛农业大学学报(自然科学版)，2010年第一期。该菌剂是一种高新复合微生物产品，因采用的微生物菌株具有能产生多种秸秆成分分解酶，发酵分解能力强并且互不拮抗的特点，能分解秸秆中各种有机营养物质，将培养料中养分转化为适合食用菌菌丝生长利用的营养物质，使这些营养物质能被食用菌较快吸收，从而减少浪费，大大提高了养分利用率。利用本发酵剂发酵食用菌栽培料，有益微生物大量、快速繁殖，产生高温高热，可快速杀死大多数危害食用菌的害虫、虫卵及杂菌；功能微生物繁殖过程中形成有益微生物“优势菌株”，形成以“菌”制“菌”的生态保护机制；并能大量分泌酶、抗生素等代谢产物，多方面综合抑制杂菌生长繁殖；大大减少了化学杀虫剂、杀菌剂的使用，全面提高了食用菌的口感、风味、外观等品质，提高产品品级。因此，使用本发酵剂可减少翻堆次数，缩短发酵时间，降低劳动强度，节省大量人力、物力等经济成本，与常规处理相比，使用本发酵剂可使食用菌增产20-30％。

本发明的发酵菌剂的制备过程，三种微生物分别在自己的适宜温度下进行一级培养以保证获得活力最好的一级菌种液，同时保证其他培养条件如培养基体积、培养时间相同以保证其它指数相同，便于量化混合比例。在混合菌液二级培养时，采用的培养温度为兼顾三种菌都比较适宜的温度30～35摄氏度。

本发明优选采用三种微生物各自最适合的培养基进行一级培养，如适合W-4、W-10，的A型培养基，适合N-14的B型培养基。

本发明还提供了一种用上述发酵菌剂制备而得的平菇栽培基质，该栽培基质栽培平菇的生物转化率可达130％。本领域普通技术人员还可以根据本发明的发酵菌剂及获得多种配方的栽培基质，都属于本发明的保护范围。

具体实施方式

实施例1.

菌种：

放线菌W-4、W-10，细菌N-14，为本实验室分离得到，已经发表在《可用于食用菌栽培料预处理的三个菌株的初步研究》中，青岛农业大学学报(自然科学版)，2010年第一期.

平菇2026：青岛农业大学山东省应用真菌重点实验室保存。

平菇18：青岛农业大学山东省应用真菌重点实验室保存。

以上菌种，本实验室均有保存，可向公众发放用于验证实验。

(a)菌株：放线菌W-4、W-10，细菌N-14。

(b)母种活化过程：将保存于冰箱中的W-4，W-10菌株母种接种到高氏一号培养基斜面上活化48h。将保存于冰箱中的N-14菌株母种接种到牛肉膏蛋白胨培养基斜面上活化48h。

(c)一级种子制备：将已活化好的W-4，W-10菌株接种到A型培养基(高氏一号秸秆混合液体培养基)上摇床培养，250ml三角瓶装液量60ml，30℃，130rpm，48h。将已活化好的N-14菌株接种到B型培养基(牛肉膏蛋白胨秸秆混合液体培养基)中摇床培养，250ml三角瓶装液量60ml，温度35℃，转速130rpm，培养时间48h。

A型培养基制作：1000ml混合秸秆液体培养基的组成为：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各20g，加水2000ml，煮沸30分钟，过滤，得滤液。滤液中加入高氏1号液体培养基200ml，加水定容至1000ml，分装，121℃灭菌20min备用。

B型培养基制作：1000ml混合秸秆液体培养基的组成为：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各20g，加水2000ml，煮沸30分钟，过滤，得滤液。滤液中加入牛肉膏蛋白胨液体培养基200ml，加水定容至1000ml，分装，121℃灭菌30min备用。

(d)二级种子制备：将W-4、W-10、N-14的一级种子按照体积比3∶3∶1的比例混合得到混合菌液，混合菌液按0.8％体积比接种到C型培养基(秸秆液体培养基)中进行摇床培养，250ml三角瓶装液量60ml，温度35℃，转速130rpm，培养时间60h得到二级种子，及发酵菌剂。

C型培养基制作：1000ml混合秸秆液体培养基的组成为：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各25g，加水2000ml，煮沸30分钟，过滤，得滤液，加水定容至1000ml，分装，121℃灭菌30min备用。

发酵麸皮：将C型培养基中二级种子加水稀释50倍，按照稀释液∶麸皮＝1∶2的比例将稀释液掺入麸皮，拌匀，常温发酵12天当麸皮呈棕褐色，腐熟均匀，颜色一致，富有弹性，质地松软，无异味，料内有一定量的“白线菌”时，说明麸皮已发酵成功。

(e)发酵培养料：100kg新鲜小麦曝晒2～3天，粉碎成糠。加入发酵麸皮10kg，尿素0.5kg、过磷酸钙2kg、石膏粉2kg、熟石灰1kg，其中尿素、过磷酸钙、石膏粉、熟石灰分别用水化开后泼撒在上述秸秆料上，拌匀，调节栽培料pH值在6.2～7.0之间。堆垛，垛高1.5m，宽2m，拍实，覆盖薄膜，第3天料温升至75～85℃时第一次翻堆，以后每两天翻堆一次，共翻堆4次。每次翻堆时，调节料内含水量，使料含水量维持在60-70％左右。当培养料呈棕褐色，腐熟均匀，颜色一致，富有弹性，质地松软，无异味，料内有一定量的“白线菌”时，说明培养料已发酵成功，可散堆降温，调节含水量适中，pH7～7.5。

(d)装袋：低压聚乙烯塑料袋为筒形，折径×长×厚＝22cm×45cm×0.02cm，待栽培料温度降到室温后装袋。

(e)接种：菌种为2026(青岛农业大学山东省应用真菌重点实验室保存)。接种量以15％～20％为宜，袋两端菌种分别用少量栽培料覆盖，最后扎好袋口，放入清洁干燥、地面撒一层石灰的发菌室内发菌。

(f)培养发菌：发菌期管理5天内17～20℃，5～12天25～27℃，以后若空气湿度过大，应降到15～18℃，否则高温高湿容易发生绿霉，在适宜条件下接种后25天左右菌丝即可发透。

(g)排袋：将发好的菌袋，打开一端，把塑料袋卷退到一端的10cm处，不要全部脱光，避免出菇时带泥。将菌袋摆放两排，袋距2cm、排距10cm的空隙，用土填充，并灌足水，层间覆土3cm，依次摆6～8层。顶层盖土5cm，排间制成凹形给水槽。覆土可用地面30cm以下的深层土，再掺入0.5％的石灰和适量的草木灰，以减少病菌感染。

(h)出菇：菌墙做好后，注意保持湿润，以满足平菇生长对水分的要求。每天通风一次，温度保持在10-20℃为好。当少数菌袋形成菇蕾时，解开袋口，立即向地面、菌棚的四周喷水，增加空气湿度到85％以上，当大量幼蕾出现时，温度调到16～18℃、空气相对湿度85％～95％最为适宜，适当给散射光、加大昼夜温差、加强通风。

(i)采收：从现蕾到菌盖平展需6～8天，即可采收。每潮菇采收后，及时清洁料面，收拢袋口，停水3～4天促使菌丝生长，积累养分。然后给水管理，并且补充营养液，常用的配方为2％的豆饼水，或0.2％的磷酸二氢钾，或0.5％的白糖水结合补水交替使用。

经计算，本实验中获得平菇菇生物转化率为125％。

实施例2.本发明的栽培基质用于平菇18的栽培试验。

发酵菌剂同实施例1。

菌种：平菇18：青岛农业大学山东省应用真菌重点实验室保存，本实验室也有保存，可向公众发放用于验证实验。

(a)平菇栽培料制备：栽培料中使用40kg新鲜的小麦秸秆，30kg玉米秸秆，30kg玉米芯秸秆，曝晒2～3天，粉碎成糠。加入发酵麸皮10kg，尿素0.5kg、过磷酸钙2kg、石膏粉2kg、熟石灰1kg，其中尿素、过磷酸钙、石膏粉、熟石灰分别用水化开后泼撒在上述秸秆料上，拌匀，调节栽培料pH值在6.2～7.0之间。堆垛，垛高1.5m，宽2m，拍实，覆盖薄膜，第3天料温升至75～85℃时第一次翻堆，以后每两天翻堆一次，共翻堆4次。每次翻堆时，调节料内含水量，使料含水量维持在60-70％左右。当培养料呈棕褐色，腐熟均匀，颜色一致，富有弹性，质地松软，无异味，料内有一定量的“白线菌”时，说明培养料已发酵成功，可散堆降温，调节含水量适中，pH7～7.5。

(b)装袋：低压聚乙烯塑料袋为筒形，折径×长×厚＝22cm×45cm×0.02cm，待栽培料温度降到室温后装袋。

(c)接种：菌种为平菇18(青岛农业大学山东省应用真菌重点实验室保存)。接种量以15％～20％为宜，袋两端菌种分别用少量栽培料覆盖，最后扎好袋口，放入清洁干燥、地面撒一层石灰的发菌室内。

其余步骤同实施例1。

本实验中，每潮菇间隔10-15天，可连续采收4-5潮菇，获得的平菇生物转化率为：128％。

Claims (9)

1.一种发酵平菇栽培基质的发酵菌剂，由放线菌(Actinomycete)菌株W-4，W-10和细菌菌株N-14分别在相同体积的液体培养基中采用各自适宜的发酵温度条件培养相同时间制得一级菌种液，一级菌种液按体积比3∶3∶1的混合成混合菌液，混合菌液再在30～35℃进行二级扩大培养60个小时而得。

2.根据权利要求1所述的发酵菌剂，所述放线菌(Actinomycete)菌株W-4，W-10采用的适宜发酵温度为30℃。

3.根据权利要求1所述的发酵菌剂，所述细菌菌株N-14采用的适宜发酵温度为35℃

4.根据权利要求1所述的发酵菌剂，所述放线菌(Actinomycete)菌株W-4、W-10的一级菌种液采用A型培养基，所述A型培养基为以下步骤制备而得：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各20g，加水2000ml，煮沸30分钟后过滤，在滤液中加入高氏1号液体培养基200ml，加水定容至1000ml，121℃灭菌20min。

5.根据权利要求1所述的发酵菌剂，所述细菌菌株N-14的一级菌种液采用B型培养基，所述B型培养基为以下步骤制备而得：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各20g，加水2000ml，煮沸30分钟后过滤，在滤液中加入牛肉膏蛋白胨液体培养基200ml，加水定容至1000ml，121℃灭菌30min。

6.根据权利要求1任一所述的发酵菌剂，所述二级扩大培养采用C型培养基：小麦秸秆、玉米秸秆、玉米芯秸秆粉末各25g，加水1000～2000ml，煮沸30分钟后过滤，滤液加水定容至1000ml，121℃灭菌30min。

7.根据权利要求1～6任一所述的发酵菌剂，所述二级扩大培养时混合菌液的接种量为体积比0.8％。

8.一种平菇栽培基质，制作步骤如下：

(1)在权利要求1～7任一所述发酵菌剂的50倍稀释液中加入2倍体积的麸皮；

(2)搅拌均匀，常温发酵至产生肉眼可见的白色菌丝为止，得到发酵麸皮；

(3)将基质原料100份与发酵麸皮10份混合均匀，并泼洒上含尿素0.5份，过磷酸钙2份，石膏粉2份，熟石灰1份的水溶液，搅拌均匀，调节混合料的PH在6.2～7.0之间；所述基质原料指小麦秸秆、玉米秸秆和/或玉米芯秸秆的粉糠；

(4)堆垛、拍实，覆盖薄膜进行发酵，温度升至75～85℃时翻堆，以后每两天一次，共四次，每次检测并条件含水量在60～70％之间；

(5)混合料呈均匀一致的褐棕色并可见到白色线状菌时散堆降温。

9.权利要求8所述的平菇栽培基质在平菇栽培中的应用。