CH632270A5

CH632270A5 - Verfahren zur herstellung von cephalosporinverbindungen.

Info

Publication number: CH632270A5
Application number: CH523277A
Authority: CH
Inventors: Daniel Bouzard; Abraham Weber; Jaques Stemer
Original assignee: Bristol Myers Co
Priority date: 1976-04-27
Filing date: 1977-04-27
Publication date: 1982-09-30
Also published as: PH17254A; DE2718741C2; US4504657A; FR2365570B1; ES458241A1; AT350183B; IE44872B1; PH16581A; GB1532682A; GR72788B; CA1115268A; BE853974A; NL7704618A; FR2349589B1; JPS60185718A; KE3064A; FI771339A; JPH0246009B2; SE437521B; USRE31730E

Description

Die vorliegende Erfindung bezieht sich auf ein verbessertes Verfahren zur Herstellung der Cephalosporinverbindung 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure, geschützt durch GB-PS 1 240 687. Diese Verbindung trägt den Namen Cefadroxil und hat die folgende Struktur:

CH-C-NH

HO

NH,

CH.

COOH

Die vorliegende Erfindung umfasst ebenfalls ein Verfahren zur Herstellung eines neuen kristallinen Monohydrats von Cefadroxil.

Cefadroxil (inklusive pharmazeutisch verwendbare Salze davon und insbesondere das neue kristalline Monohydrat davon) ist wirksam als breitbandiges Antibiotikum bei der Behandlung von Krankheiten, die durch die verschiedensten gram-positiven oder gram-negativen Mikroorganismen verursacht werden. Von besonderem Interesse ist es als orales Cephalosporin-Antibiotikum.

GB-PS 1 240 687 beschreibt die Herstellung von Cefadroxil durch Acylieren von 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure (7-ADCA) mit einem Amino-geschützten Derivat von D-(-)-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-essigsäure. Von den verschiedenen Amino-geschützten Acylierungsmitteln lieferte die D-(-)-a-(p-Hydroxyphenyl)-a-(t-butoxycarbonylamino)-essigsäure über die sogenannte t-BOC-Methode die höchsten Ausbeuten. Die Ausbeuten bei diesem Verfahren waren jedoch nicht so hoch wie es wünschbar ist für eine industrielle Produktion und die benötigten Reagenzien für das t-BOC-Verfahren sind sehr teuer.

US-PS 3 985 741 beschreibt die Herstellung von Cefadroxil durch Acylieren von 7-ADCA mit dem gemischten Anhydrid von D-(-)-a-(p-Hydroxyphenyl)-glycin, wenn die a-Amino-gruppe des letzteren durch eine ß-Ketoverbindung wie Me-thylacetoacetat geschützt war. Dieses Verfahren ist ebenfalls, obschon es einige Vorteile gegenüber dem t-BOC-Verfahren aufweist, nicht wirtschaftlich genug für eine befriedigende industrielle Produktion.

Die Herstellung von Cefadroxil durch enzymatische Hydrolyse seines O-Acetylderivats wird in BE-PS 829 758 beschrieben.

Infolge der vielen bekannten Vorzüge von Cefadroxil ist es wünschbar, ein wirtschaftliches Verfahren zur Herstellung dieses Antibiotikums in hoher Ausbeute zu haben, das weniger Kosten verursacht als die bisher bekannten Verfahren.

Dementsprechend liefert die vorliegende Erfindung ein verbessertes Verfahren zur Herstellung von Cefadroxil oder einem pharmazeutisch verwendbaren Salz davon, das dadurch gekennzeichnet ist, dass

(a) 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure in einem inerten im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel silyliert wird;

(b) das silylierte 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure-Produkt aus Reaktionsschritt (a) mit D-(-)-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetylchlorid-hydrochlorid in einem inerten und im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel und in Gegenwart eines Säureakzeptors acyliert wird;

(c) die Silylgruppen des Acylierungsprodukts aus Reaktionsschritt (b) durch Hydrolyse oder Alkoholyse abgespalten werden; und

(d) die gewünschte Cephalosporansäure oder das entsprechende pharmazeutisch verwendbare Salz davon isoliert wird.

Der oben genannte Begriff «pharmazeutisch verwendbare Salze», bezieht sich auf z.B. (1) nicht-toxische pharmazeutisch verwendbare Salze der sauren Carbonsäuregruppe wie

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die Natrium-, Kalium-, Calcium-, Aluminium- und Ammoniumsalze und nichttoxische substituierte Ammoniumsalze mit Aminen wie Tri(niedrig)alkylaminen, Procain, Dibenzyl-amin, N-Benzyl-ß-phenäthylamin, 1-Ephenamin, N,N'-Dibenzyläthylendiamin, Dehydroabiäthylamin, N,N'-Bisde-hydroabietyläthylendiamin, N-(nieder)-Alkylpiperidine, wie N-Äthylpiperidin und anderen Aminen, die bisher zur Bildung von Salzen mit Benzyl-Penicillin verwendet wurden; sowie (2) nicht-toxische pharmazeutisch verwendbare Säureadditionssalze (d.h. Salze des basischen Stickstoffs) wie (a) die Mineralsäure-Additionssalze wie Hydrochloride, Hydro-bromide, Hydrojodide, Sulfate, Sulfamate, Sulfonate, Phosphate etc. und (b) die organischen Säureadditionssalze wie Maleat, Acetat, Citrat, Tartrat, Oxalat, Succinat, Benzoat, Fumarat, Malat, Mandelat, Ascorbat, ß-Naphthalinsulfonat und p-Toluolsulfonat. Der verwendete Begriff «(nieder)-Alkyl» bedeutet einen geradkettigen oder verzweigtkettigen gesättigten Kohlenwasserstoffrest mit 1-10 C-Atomen.

Beim genannten Verfahren wird 7-ADCA zuerst durch Reaktion mit einem Silylierungsmittel in einem inerten und im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel silyliert.

Geeignete Lösungsmittel für diese Silylierungsreaktion sind solche inerte, im wesentlichen wasserfreie organische Lösungsmittel wie Methylenchlorid, Tetrahydrofuran, Chloroform, Tetrachloräthan, Nitromethan, Benzol und Diäthyl-äther. Ein bevorzugtes Lösungsmittel ist Methylenchlorid.

Silylierungsmittel, die geeignet sind für das genannte Verfahren sind bekannt (siehe z.B. US-PS 3 654 266,3 575 970, 3 499 909,3 349 622,3 595 855,3 249 622 und GB-PS 1 339 605,959 853 und 1 008 468). Obschon irgendein bekanntes Silylierungsmittel verwendet werden kann, wird doch bevorzugt eines der folgenden Formel verwendet darstellt, worin R5 Wasserstoff oder niedriges Alkyl bedeutet und R6 niedriges Alkyl oder

R

RJ I

•Si-

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R

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oder

R

I

■Si-

1»

-X

Beispiele für geeignete Silylierungsmittel sind Trime-thylchlorsilan, Hexamethyldisilazan, Triäthylchlorsilan, Me-thyltrichlorsilan, Dimethyldichlorsilan, Triäthylbromsilan, Tri-n-propylchlorsilan, Brommethyldimethylchlorsilan, Tri-is n-butylchlorsilan, Methyldiäthylchlorsilan, Dimethyl-äthylchlorsilan, Phenyldimethylbromsilan, Benzylmethyl-äthylchlorsilan, Phenyläthylmethylchlorsilan, Triphenyl-chlorsilan, Triphenylfluorsilan, Tri-o-tolylchlorsilan, Tri-p-di-methylaminophenylchlorsilan, N-Äthyltriäthylsilylamin, 2o Hexaäthyldisilazan, Triphenylsilylamin, Tri-n-propylsi-lamin, Tetraäthyldimethyldisilazan, Tetramethyldiäthyldisi-lazan, Tetramethyldiphenyldisilazan, Hexaphenyldisilazan und Hexa-p-tolyldisilazan. Andere geeignete Silylierungsmittel sind Hexa-alkylclotrisilazane oder Octa-alkylcyclote-25 trasilazane und Silylamide und Silylureide wie Trialkylsilyl-acetamid und bis-Trialkylsilylacetamid. Die am meisten bevorzugten Silylierungsmittel sind Trimethylchlorsilan und Hexamethyldisilazan.

Wenn ein Silylhalogenid, z.B. Trimethylchlorsilan ver-30 wendet wird, erfolgt der Silylierungsschritt in einem inerten, im wesentlichen wasserfreien, aprotischen Lösungsmitteln in Gegenwart eines Säureakzeptors (Halogenwasserstoff), vorzugsweise einer Stickstoffbase wie Triäthylamin, Dimethyl-amin, Dimethylanilin, Chinolin, Lutidin oder Pyridin. 35 Bevorzugte Säureakzeptoren sind Triäthylamin oder ein Gemisch von Triäthylamin und Dimethylanilin. Wenn ein Silazan, z.B. Hexamethyldisilazan verwendet wird, erfolgt der Silylierungsschritt in geeigneter Weise durch Erhitzen des Silazans mit 7-ADCA, so dass Ammoniak oder Aminderi-40 vate, wie sie als Nebenprodukte der Reaktion gebildet werden, abdestillieren.

Bei der Herstellung von silylierter 7-ADCA im genannten Verfahren können theoretisch ein bis zwei molare Äquivalente von Silylierungsmittel pro Mol von 7-ADCA zur Bil-45 dung von mono- oder disilylierter 7-ADCA oder von Gemischen davon verwendet werden. Demzufolge erhält man,

wenn 7-ADCA mit ca. 1 Äquivalent von Silylierungsmittel umgesetzt wird, monosilylierte 7-ADCA. Wenn Trimethylchlorsilan oder Hexamethyldisilazan verwendet werden, so so hat das Produkt die Formel

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worin R2, R3 und R4 Wasserstoff, Halogen, niedriges Alkyl, durch Halogen substituiertes Alkyl, Phenyl, Benzyl, Tolyl oder Dimethylaminophenyl darstellt, wobei mindestens einei der genannten Reste R2, R3 und R4 verschieden von Halogen oder Wasserstoff ist; worin R1 niedriges Alkyl, m eine ganze Zahl von 1 oder 2 und X Halogen oder

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C00S1(CH3)3

-N

\r<

Das Disilylderivat von 7-ADCA kann so hergestellt werden, dass beim Silylierungsschritt mindestens zwei äqui-65 valente Silylierungsmittel pro Mol 7-ADCA verwendet werden. Wenn die bevorzugten Trimethylchlorsilan oder Hexamethyldisilazan verwendet werden, so hat die gebildete 7-ADCA die Formel

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H-N

CH,

Der Silylierungsschritt kann in einem weiten Temperaturbereich erfolgen, z.B. zwischen Zimmertemperatur bis zu Rückflusstemperatur des verwendeten Lösungsmittelsystems. Gute Resultate wurden im allgemeinen erhalten bei Zimmertemperatur mit den Silylhalogeniden (20-30°C) und bei erhöhten Temperaturen, z.B. Rückflusstemperatur im Fall der Silazane, die im allgemeinen weniger aktiv sind.

Sowohl die mono- als auch die disilylierte 7-ADCA oder ein Gemisch davon kann anschliessend mit D-(-)-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetylchlorid-hydrochlorid (besonders bevorzugt in der Form des Hemidioxan-Solvats, gemäss US-PS 3 925 418) acyliert werden, wobei in situ ein silyliertes Cefadroxil-Zwischenprodukt erhalten wird. Die im Molekül vorhandenen Silylgruppen werden anschliessend durch Hydrolyse oder Alkoholyse abgespalten, worauf das gewünschte Cefadroxil-Endprodukt aus dem Reaktionsmedium abgetrennt wird, z.B. durch Neutralisation bis zum isoelektrischen Punkt, wobei das Cefadroxil ausfällt.

Die bei der Acylierung des silylierten 7-ADCA verwendeten Lösungsmittel sind dieselben wie sie beim Silylierungsschritt (a) genannt werden.

Ein bevorzugter Temperaturbereich für die Acylierung liegt zwischen -20 bis +70°C. Diese Temperatur ist nicht kritisch und es können auch Temperaturen angewandt werden, die höher oder tiefer als die genannten liegen. Besonders bevorzugte Temperaturen für die Durchführung der Acylierung sind zwischen -10 und + 10°C.

Die Acylierung erfolgt vorzugsweise in Gegenwart eines Säureakzeptors, welcher derselbe sein kann oder welcher verschieden sein kann von demjenigen, der bei der Herstellung der silylierten 7-ADCA verwendet wird. Bestergebnisse werden erhalten, wenn eine schwächere tertiäre Aminbase (d.h. pKa-^7) wie Dimethylanilin, Pyridin oder Chinolin verwendet wird. Vorzugsweise wird auch ein Salz eines schwachen tertiären Amins wie z.B. das Hydrochlorid von Dimethylanilin zugegeben, um überschüssiges Amin zu inaktivieren (siehe z.B. US-PS 3 678 037).

Obschon eine Reaktion eintritt, unabhängig der molaren Zusammensetzung der Ausgangsprodukte, ist doch zur Erreichung einer optimalen Ausbeute die Verwendung von ca. 1 Mol Acylierungsmittel oder von einem leichten Überschuss davon pro Mol silylierte 7-ADCA bevorzugt.

Das silylierte Cefadroxil-Acylierungsprodukt wird anschliessend zur Abspaltung der Silyl-Schutzgruppen durch Hydrolyse oder Alkoholyse behandelt. Das silylierte Zwischenprodukt kann durch Zugabe von Wasser hydrolysiert werden oder in bevorzugter Weise durch Zugabe eines geeigneten Alkohols alkoholisiert werden, vorzugsweise eines Alkanols mit 1-4 C-Atomen wie Methanol, Äthanol, n-Pro-panol, Isopropanol, n-Butanol etc. Für den genannten Abspaltungsschritt kann auch ein Gemisch von Wasser und einem niedrigen Alkanol mit 1-4 C-Atomen verwendet werden.

Das Cefadroxil kann anschliessend nach bekannten Methoden aus dem Reaktionsgemisch isoliert werden. So kann es z.B. durch Verschieben des pH des Reaktionsgemisches nach oben als neutrales Molekül ausgefällt werden. Für diese genannte Verschiebung des pH wird vorzugsweise eine nicht-wässrige Aminbase wie Triäthylamin verwendet. Cefadroxil in Form der freien Säure kann anschliessend durch Reaktion mit einer entsprechenden Base oder Säure in ein pharmazeutisch verwendbares Salz der Carbonsäure oder ein Säureadditionssalz übergeführt werden.

Eine bevorzugte Ausführungsform des Verfahrens besteht darin, dass 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure mit Hexamethyldisilazan in einem im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel, vorzugsweise Methylencholorid, durczh Erhitzen, vorzugsweise auf Rückflusstemperatur des Lösungsmittels, silyliert wird, zur in situ-Bildung von disily-lierter 7-ADCA der Formel

(CH^Si-NH-

C005i(CH3)3

Die disilylierte 7-ADCA wird anschliessend direkt in derselben Lösung acyliert (vorzugsweise bei -10 bis + 10°C) mit D-(-)-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetylchlorid-hydrochlorid, vorzugsweise in Form des Hemidioxan-Solvats und in Gegenwart eines Säureakzeptors, vorzugsweise einer tertiären Aminbase mit pKa^7 wie Dimethylanilin, Pyridin oder Chinolin. Nach der Acylierung wird das silylierte Cefa-droxil-Acylierungsproduktmit einem Alkanol mit 1-4 C-Atomen, vorzugsweise Methanol oder n-Butanol behandelt, wodurch die im Molekül vorhandenen Silylgruppen abgespalten werden, worauf das Produkt (nach eventuellem Filtrieren) durch Neutralisieren bis zum isoelektrischen Punkt durch Zugabe einer tertiären Aminbase, vorzugsweise Triäthylamin, durch Ausfällen gewonnen wird.

Die Verwendung von Hexamethyldisilazan als Silylierungsmittel anstelle der üblicherweise verwendeten Silylhalo-genide wie Trimethylchlorsilan verhindert die Bildung von Säurehalogenid-Nebenprodukt und macht demzufolge die Verwendung eines Säureakzeptors im Silylierungsschritt unnötig. Die Abwesenheit dieses Säureakzeptors im Reaktionsmedium bewirkt, dass weniger unlösliches Salz, z.B. Triäthylamin • HCl gebildet wird, das die nachfolgenden Reaktionsschritte beeinträchtigen könnte. Durch die Verwendung von Hexamethyldisilazan erhält man deshalb höhere Ausbeuten von Cefadroxil als mit der konventionellen Tri-methylchlorsilan-Silylierung.

Ein weiterer Aspekt der vorliegenden Erfindung bildet die Herstellung eines neuen kristallinen Monohydrats von Cefadroxil, das sich besonders als Cephalosporin-Antibiotikum für pharmazeutische Zusammensetzungen eignet.

Dieses kristalline Cefadroxil-Monohydrat ergab bei Röntgen-Diffraktion die folgenden Werte:

Linie Abstände d (Â) Relative

Intensität

1 8.84 100

2 7.88 40

3 7.27 42

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Diese Röntgen-Diffraktionsmessung wurde wie folgt durchgeführt:

Ein kleiner Anteil einer Probe wurde in einem Glaska-pillar-Rohr von 0,2 oder 0,5 mm Durchmesser verschlossen, worauf dieses Rohr in eine Debye-Scherrer-Pulver-Diffrak-tionskamera von 114,6 mm Durchmesser montiert wurde. Anschliessend wurde während 3 h belichtet auf einem Norelco-Röntgengenerator mit 35 KV, -20 mA und einer Standard-Kupfernetz-Röntgenröhre (gewogenes Cu Ka Wellenlänge X= 1,5418 À). Als Filmmaterial wurde Kodak No-Screen X-Ray-Film verwendet und während 3 min bei 20°C in flüssigem Kodak-Röntgenentwickler entwickelt.

Ein kleiner Anteil von kristallinem Natriumfluorid wurde zur internen Kalibrierung mit einigen der Proben vermischt. Ferner wurde eine Probe von reinem Natriumfluorid ebenfalls wie oben beschrieben gemessen.

Die entwickelten Filme wurden anschliessend auf einem Norelco-Debye-Scherrer-Film-reader ausgewertet, wobei die Positionen der Diffraktionsringe auf 0,05 mm genau bestimmt wurden. Die erhaltenen Daten wurden wegen der Filmschrumpfung korrigiert und die Abstände (d-Abstände) wurden aus den korrigierten Daten bestimmt. Die Berechnungen erfolgten mit Hilfe eines Computer-Programms (XRAY, von P. Zugenmaier) und die erhaltenen Werte für die d-Abstände wiesen einen Fehler von ca. 1% auf.

Die Intensitätsmessungen für alle Filme erfolgten auf einem Joyce-Loeble Mark UIC Recording microdensito-meter (scan ration 5:1,0,1 O.D. wedge) und die gemessenen Werte wurden anschliessend auf einer Skala von 1-100 transformiert, wobei der Hintergrund korrigiert wurde.

Mit einer Probe des kristallinen Monohydrats wurde ein IR-Spektrum aufgenommen (auf KBr), das in Fig. 1 wiedergegeben ist.

Das Verfahren zur Herstellung des oben genannten kristallinen Cefadroxil-Monohydrats, ist dadurch gekennzeichnet, dass

(a) 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure in einem inerten, im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel silyliert wird,

(b) das silylierte 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure-Produkt aus Reaktionsschritt (a) mit D(-)-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetylchlorid in einem inerten, im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel und in Gegenwart eines Säureakzeptors acyliert wird;

(c) die nach Reaktionsschritt (b) vorhandenen Silylgruppen des Acylierungsprodukts durch Hydrolyse oder Alkoholyse abgespalten werden; und

(d) das gewünschte Monohydrat nach einer der folgenden Methoden gebildet wurde:

(1) Verschieben des pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) in Gegenwart von überschüssigem Dimethylformamid zur Bildung des Dimethylformamid-Solvats von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-car-bonsäure; Auflösen des genannten Dimethylformamid-Sol-vats in angesäuertem Wasser oder einem Gemisch von angesäuertem Wasser und Acetonitril und Verschieben des pH der genannten angesäuerten Lösung zur Ausfällung des gewünschten kristallinen Monohydrats;

(2) durch Verschieben des pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) nach oben in Gegenwart eines Überschusses von Dimethylformamid zur Bildung des Dimethylformamid-Solvats von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyI)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure und Kontaktieren des genannten Dimethylformamidsolvats mit Wasser oder einem teilweise wässrigen Medium zur Ausfällung des gewünschten kristallinen Monohydrats; oder

(3) durch Verschieben des pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) nach oben zur Bildung von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbon-säure und Kontaktieren dieser Säure mit Wasser oder einem teilweise wässrigen Medium zur Kristallisation des gewünschten Monohydrats.

Bei der Herstellung des kristallinen Cefadroxil-Monohydrats nach dem genannten Verfahren erfolgt die Silylie-rung, Acylierung und Abspaltung der Silylgruppen wie weiter oben beschrieben im Zusammenhang mit dem verbesserten Acylierungsverfahren zur Herstellung von Cefadroxil.

Das gewünschte kristalline Monohydrat kann anschliessend nach irgendeiner der nachfolgend genannten Varianten gewonnen werden.

In einer Methode wird die Lösung von Cefadroxil nach dem Solvolyse-Schritt mit einer basischen Verbindung neutralisiert, z.B. mit einer tertiären Aminbase wie Triäthylamin, in Gegenwart von überschüssigem Dimethylformamid bis das Dimethylformamid-Solvat von Cefadroxil aus der Lösung ausfällt. Das Solvat kann anschliessend abgetrennt und gewaschen werden (vorzugsweise ohne Trocknen) wobei ein kristallines Produkt erhalten wird, das identisch ist mit demjenigen aus Beispiel 6A in US-PS 3 985 741. Das Cefa-droxil-Dimethylformamid-Solvat kann anschliessend durch Auflösen in angesäuertem Wasser oder einem Gemisch von angesäuertem Wasser und Acetonitril und anschliessendem Neutralisieren der angesäuerten Lösung zur Ausfällung des Monohydrat-Produkts in das gewünschte Cefadroxil-Mono-hydrat übergeführt werden.

Die Auflösung des Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvats erfolgt bei einem pH von ca. 2-2,4, was durch Zugabe einer Mineralsäure, z.B. HCl, zu einem Gemisch des Solvats in Wasser oder einem Acetonitril-Wasser-Gemisch erreicht wird. Feste Verunreinigungen können an diesem Punkt des Verfahrens durch Filtrieren der angesäuerten Lösung nach Behandlung mit Aktivkohle und/oder Filtrierhilfsstoffen abgetrennt werden.

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Die angesäuerte Lösung wird anschliessend neutralisiert, vorzugsweise unter Umrühren und Erwärmen auf ca. 35-60°C, durch Zugabe einer geeigneten Base, z.B. eines aliphatischen tertiären Amins wie Triäthylamin, zur Erhöhung des pH in der Lösung bis zum Punkt, wo Cefadroxil-Mono-hydrat auskristallisiert.

Acetonitril wird vorzugsweise als Fällungsmittel zur Lösung zugegeben während der genannten Neutralisation, um eine maximale Ausbeute des gewünschten Produkts zu erhalten. Diese Ausbeute kann auch erhöht werden durch Zugabe von Impfkristallen zur Lösung entweder vorgängig und/oder während dem Neutralisationsschritt

Eine weitere Methode zur Herstellung des kristallinen Cefadroxil-Monohydrats besteht darin, dass Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat wie oben beschrieben hergestellt wird, worauf dieses Solvat mit Wasser oder einem teilweise wässrigen Medium in Kontakt gebracht wird, bis das gewünschte Monohydrat aus dem Lösungsmittelsystem auskristallisiert.

Das Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat wird in Wasser oder einem Gemisch von Wasser und einem organischen Lösungsmittel wie Acetonitril, Aceton, einem Alkanol mit 1-5 C-Atomen (Methanol, Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, n-Butanol, Amylalkohol etc.) oder einem Gemisch davon gelöst. Die Verwendung von zumindest teilweise wässrigen organischen Lösungsmittelsystemen ist bevorzugt, da diese organischen Lösungsmittel viele Verunreinigungen aufnehmen, was ein reineres Endprodukt bewirkt.

Bei der Verwendung von Gemischen von Wasser und organischen Lösungsmitteln können die Volumenanteile dieser Lösungsmittel über weite Bereiche variiert werden. Die bevorzugten Mischungsverhältnisse wurden für die nachfolgend genannten teilweise wässrigen Lösungsmittelsystemen wie folgt bestimmt:

Wasser: Aceton (1:3)

Wasser: Isopropanol (1:3)

Wasser: Acetonitril (1:3)

Wasser: n-Butanol (1:1)

Beim Wasser-Acetonitril-System wird bevorzugt n-Butanol zugegeben (vorzugsweise nach Auflösen des Sol-vats) um zu bewirken, dass das Lösungsmittelsystem während der Kristallisation homogen bleibt. Vorzugsweise wird genügend n-Butanol zum genannten System gegeben um ein Volumenverhältnis von Wasser:Acetonitril:n-Butanol von 1:2:1 zu erhalten.

Die Konzentration von Solvat im wässrigen oder teilweise wässrigen Kristallisationsmedium ist nicht kritisch. Beste Ausbeuten wurden erhalten bei Verwendung von Konzentrationen von zwischen ca. 400 und 800 g/1 der Lösung. Das Solvat wird vorzugsweise in kleinen Portionen zum Lösungsmittelsystem gegeben, während dieses gerührt wird, wobei diese Zugabe während einer Zeitdauer von einigen Minuten bis mehreren Stunden erfolgt.

Die Kristallisation kann in einem weiten Temperaturbereich erfolgen, z.B. zwischen Zimmertemperatur bis zum Siedepunkt des Lösungsmittelsystems. Gute Ergebnisse wurden erhalten bei Temperaturen von ca. 35-60°C, wobei am meisten bevorzugt Temperaturen zwischen 40 und 45°C sind.

Die Ausbeuten von Monohydrat werden verbessert durch Zugabe von Impfkristallen des Cefadroxil-Monohydrats zur Lösung von Dimethylformamid-Solvat.

Eine weitere Methode zur Herstellung des gewünschten Monohydrats besteht darin, dass (1) das silylierte Cefadroxil hergestellt wird, worauf die Silyl-Schutzgruppen durch Hydrolyse oder Alkoholyse wie beschrieben abgespalten werden, (2) dass die Lösung aus dem Abspaltungsreaktions-

schritt bis zum isoelektrischen Punkt von Cefadroxil (~pH 5,7-5,8) mit einer geeigneten Base, vorzugsweise einem aliphatischen tertiären Amin wie Triäthylamin neutralisiert wird, um das rohe Cefadroxil zu fällen, und (3) dass dieses Rohprodukt von Cefadroxil mit Wasser oder einem Gemisch von Wasser mit einem geeigneten organischen Lösungsmittel, vorzugsweise Acetonitril, Aceton, einem Alkanol mit 1-5 C-Atomen (z.B. Methanol, Äthanol, n-Propanol, Isopropanol, n-Butanol, Amylalkohol, etc.) oder einem Gemisch davon kontaktiert wird, bis das Cefadroxil-Monohydrat aus der Lösung auskristallisiert.

Die Neutralisation der Cefadroxil-Lösung zur Bildung des rohen Cefadroxil (amorph) kann bei Zimmertemperatur in der Weise erfolgen, dass die Base portionenweise zu der gerührten Lösung zugegeben wird. Das rohe Cefadroxil kann anschliessend in gleicher Weise wie oben beschrieben für das Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat kristallisiert werden. Wie im Fall des Dimethylformamidsolvat-Kristallisations-verfahrens besteht das am meisten bevorzugte Lösungsmittelsystem aus Wasser: Acetonitril:n-Butanol im Volumenverhältnis 1:2:1.

Die am meisten bevorzugte Ausführungsform des erfin-dungsgemässen Verfahrens zur Herstellung von kristallinem Cefadroxil-Monohydrat aus Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat oder rohem Cefadroxil ist dadurch gekennzeichnet, dass

(a) das Dimethylformamid-Solvat von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-car-bonsäure in angesäuertem Wasser oder einem Gemisch von angesäuertem Wasser und Acetonitril gelöst wird, worauf das pH der genannten angesäuerten Lösung so lange nach oben verschoben wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung auskristallisiert; oder dass

(b) 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure oder das Dimethylformamid-Solvat davon mit Wasser oder einem teilweise wässrigen Medium in Kontakt gebracht wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung auskristallisiert.

Das Dimethylformamid-Solvat und Cefadroxil wie sie als Ausgangsprodukte im genannten Verfahren zur Anwendung gelangen, können nach dem in vorliegender Beschreibung genannten Verfahren erhalten werden oder nach anderen bekannten Verfahren, z.B. den in GB-PS 1 240 687, US-PS 3 985 741 und BE-PS 829 758 genannten Verfahren.

Die bevorzugten Bedingungen zur Bildung von Cefadroxil-Monohydrat im genannten Verfahren sind diejenigen wie beschrieben im Zusammenhang mit dem vorher genannten vollständigen Reaktionsschema, d.h. Silylierung, Acylierung und Monohydrat-Bildung.

Bei Anwendung dieser genannten bevorzugten Reaktionsbedingungen werden Ausbeuten von rohem Cefadroxil bis zu 90% erreicht und bei der nachfolgenden Umwandlung des genannten Cefadroxil oder seines Dimethylformamid-Solvats zu Cefadroxil-Monohydrat ergibt Ausbeuten bis zu ca. 83%. Die Totalausbeute für Cefadroxil-Monohydrat aus 7-ADCA beträgt bis zu ca. 75%, ohne bis ca. 5% zusätzlicher Ausbeute zu berücksichtigen, die dadurch erhalten werden, dass die Mutterlauge der ersten Kristallisation aufgearbeitet wird, wie im nachfolgenden Beispiel 5 beschrieben.

Das kristalline Monohydrat, hergestellt nach irgendeinem der genannten Verfahren, kann in herkömmlicher Weise isoliert werden, z.B. durch Filtrieren, Waschen und Trocknen, und kann anschliessend zu pharmazeutischen Zusammensetzungen verarbeitet werden, die geeignet sind für die Bekämpfung der verschiedensten bakteriellen Erkrankungen durch Antibiotika. Beispiele für solche pharmazeutische Zusam8

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mensetzungen (z.B. Kapseln oder Tabletten), Dosierungen, Verabreichungsarten von Cefadroxil-Monohydrat und seinen pharmazeutischen Zusammensetzungen werden in US-PS 3 489 752 und 3 985 741 für die amorphe Form von Cefadroxil beschrieben.

Die folgenden Beispiele sollen die vorliegende Erfindung näher erläutern. Alle Temperaturangaben sind in Celsiusgraden gegeben. 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure wird abgekürzt als 7-ADCA, Triäthylamin als TEA, Dimethylanilin als DMA und Dimethylformamid als DMF.

Beispiel 1

Herstellung von kristallinem Cefadroxil-Monohydrat

A. Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat

In einen 3-Halskolben mit Rührer und Thermometer wurden 2250 ml Methylenchlorid (K.F. 0,05%) 100 g 7-ADCA, 80,5 g Dimethylanilin und 105 g Trimethylchlorsilan gegeben. Zu diesem Reaktionsgemisch wurden anschliessend 18,1 g Triäthylamin unter Umrühren während ca. 20-30 min gegeben. Die Temperatur wurde während dieser Zugabe von TEA auf 25-27° gehalten. Das Reaktionsgemisch wurde anschliessend während 60 min bei 25-27° gerührt, worauf 67 g einer Lösung von Methylenchlorid, enthaltend 33 Gew.% DMA • HCl (K.F. ^£0,1%) zugegeben wurden. Die Lösung wurde auf 4-6° abgekühlt und 128,5 g D(-)-(p-Hydroxyphenyl)-glycyl-chloridhydrochlorid wurden in 5 aliquoten Teilen zugegeben mit Pausen von jeweils 10 min zwischen den Zugaben. Nach Beendigung der Zugabe des Acylierungsmittels wurde das Reaktionsgemisch während weiterer 60 min bei 4-6° gerührt. Anschliessend wurden 500 ml Wasser zur Lösung gegeben und diese 20 min gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde auf Dicalite (Great Lakes Carbon Corporation) filtriert und mit 150 ml Wasser und 300 ml Methylenchlorid gewaschen. Die wässrige Phase wurde abgetrennt und bei 20° mit 1100 ml Isopropanol und so viel Triäthylamin versetzt, um das pH der Lösung auf 4,4-4,5 zu bringen. Die Lösung wurde anschliessend auf 24-26° erhitzt und 2250 ml Dimethylformamid wurden langsam unter Umrühren während 20 min zugegeben. Nach 60 min wurde das Reaktionsgemisch auf 3° abgekühlt und während weiterer 120 min gerührt. Das Cefadroxil-Dimethyl-formamid-Solvat kristallisierte dabei aus der Lösung aus und wurde abfiltriert und mit 400 ml Dimethylformamid gewaschen.

B. Überführen von Cefadroxil-DMF-Solvat in Cefadroxil-Monohydrat.

In ein Gefäss von 2000 ml Inhalt wurden unter Umrühren bei 20-25° 225 ml Wasser, 700 ml Acetonitril, der feuchte Kuchen von Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat (erhalten in A), 10 g Aktivkohle (Darco KB von Atlas Chemical Industries, Inc.), 30 g Dicalite und so viel 6N HCl um vollständige Auflösung zu erreichen (pH 2,0-2,4) gegeben. Die Lösung wurde anschliessend während 15 min gerührt und auf Dicalite filtriert. Das Filtrat wurde anschliessend mit 460 ml eines Gemisches, enthaltend 110 ml Wasser und 350 ml Acetonitril gewaschen. Nach Erwärmen der Lösung und der Waschlösungen auf35-37° wurden unter Umrühren während 10 min so viel Triäthylamin zugegeben, um das pH auf 2,2-2,3 zu bringen, und ferner wurden 600 ml Acetonitril zugegeben. Die Lösung wurde während 30-40 min bei 35-37° gerührt. Anschliessend wurden 600 ml Acetonitril während 10 min zugegeben und anschliessend unter Umrühren während weiterer 40 min so viel Triäthylamin um das pH auf 4,4-4,5 zu bringen. Das Reaktionsgemisch wurde während 30 min bei 35-37° gerührt, worauf unter Umrühren 900 ml Acetonitril während 25 min zugegeben wurden, wobei die Temperatur auf 35-37° gehalten wurde. Nach 90 min wurde das Gemisch

632270

auf 20° abgekühlt und während 120 min gerührt. Die gebildeten Kristalle von Cefadroxil-Monohydrat wurden abfiltriert, mit 400 ml eines Gemisches von 100 ml Wasser und 300 ml Acetonitril gewaschen und in Luftstrom während 16 h getrocknet. Man erhielt 94,7 g kristallines Cefadroxil-Mono-hydrat mit den folgenden Daten:

Beschreibung: kristallines gelblich-weisses Pulver. IR-Spektrum: wie in Fig. 1. Feuchtigkeit: (K.F.):5,1%. pH: 4,5. Spezifische Drehung: +158°. Chemischer Test (jodo-metrisch): 952 mcg/mg. Biologischer Test: 922 mcg/mg.

Beispiel 2

Herstellung von kristallinem Cefadroxil-Monohydrat

A. Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat

In ein Reaktionsgefäss von 6 Liter Inhalt wurden unter Umrühren 3,51 wasserfreies Methylenchlorid, 149,8 g (0,693 Mol) 7-ADCA, 189 ml (1,5 Mol) Trimethylchlorsilan und 87 g (0,717 Mol) Dimethylanilin gegeben. Anschliessend wurden 196 ml (1,40 Mol) Triäthylamin während 20 min und unter Umrühren bei einer Temperatur unterhalb 25° zugegeben. Das Gemisch wurde während 1 h bei 20-25° gerührt und anschliessend auf 0-+5° abgekühlt. Zu der Lösung wurden 91 ml DMA • HCl (30 Gew.% in Methylenchlorid; 0,717 Mol) gefolgt von 177,6 g (0,64 Mol) D(-)-(p-Hydroxy-phenyl)-glycylchlorid-hydrochlorid in 5 Portionen und unter Umrühren während 1 h gegeben. Das Gemisch wurde während 2 h bei 0 bis +5° gerührt, und anschliessend wurden 70 ml Methanol während 15 min und anschliessend 800 ml Wasser zugegeben. Nach 15 min Umrühren wurde das pH auf 2,3 durch Zugabe von 120 ml TEA eingestellt. Die wässrige Lösung wurde abgetrennt, auf Celite filtriert (Handelsmarke für Diatomeenerde hergestellt durch Johns-Manville Products Corporation) und durch Zugabe von TEA auf pH 4,5 eingestellt. Anschliessend wurden 1,71 Isopropanol und 3,41 DMF zugegeben. Nach einigen Minuten kristallisierte das Cefadroxil-DMF-Solvat und die erhaltene Suspension wurde anschliessend während 3 h gerührt und über Nacht stehengelassen. Der gebildete Feststoff wurde abgetrennt, mit DMF und zweimal mit Aceton gewaschen und während 24 h bei 50° getrocknet, wobei 267 g erhalten wurden.

Analytische Daten: Spezifische Drehung: cxd(1% H2O) = + 124°. Feuchtigkeit (K.F.): 1,83%. Chemischer Test (jodo-metrisch): 765 mcg/mg. Ausbeute: 80%. IR-Spektrum: Identisch mit demjenigen in Beispiel 6A in US-PS 3 925 418.

B. Cefadroxil-Monohydrat

50 g Cefadroxil-DMF-Solvat (0,105 Mol) wurden in 150 ml Wasser und 8,8 ml HCl (36%) gelöst. Anschliessend wurden 2,7 g Aktivkohle und 1,35 g Celite zugegeben. Nach 30 min Rühren wurde das Gemisch durch Celite filtriert und mit Wasser gewaschen. Die filtrierte Lösung wurde auf 40° erhitzt und das pH durch Zugabe von Triäthylamin auf 2,5 eingestellt. Das Gemisch wurde anschliessend mit Kristallen von Cefadroxil-Monohydrat geimpft und das pH mit Triäthylamin auf 4,5 eingestellt. Die erhaltene Suspension wurde während 1 h bei 50° gerührt und anschliessend langsam auf Zimmertemperatur abgekühlt und schliesslich während 1 h bei 0 bis 5° gehalten. Das kristalline Cefadroxil-Monohydrat wurde abfiltriert, zweimal mit kaltem Wasser gewaschen und bei 40° getrocknet, wobei 30,8 g (76-77% Ausbeute) eines Produkts mit denselben physikalischen Eigenschaften wie in Beispiel 1 beschrieben erhalten wurden.

Beispiel 3

Herstellung von Cefadroxil (beschreibt die am meisten bevorzugte Ausführungsform von Silylierung, Acylierung und Aufarbeiten)

Zu einer Aufschlämmung von 1,0 kg (4,6 Mol) 7-ADCA

9

5

10

15

20

25

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35

40

45

50

55

60

65

632270

10

von 98,2% Reinheit (K.F. = 0,1%) in 3,5 Liter trockenem Methylenchlorid (KF^0,01%) wurden unter Umrühren 770 ml (3,7 Mol) Hexamethyldisilazan gegeben. Die Aufschläm-mung wurde während 8 h rückflussiert, um vollständige Auflösung zu erreichen und anschliessend während weiterer s 16 h unter Stickstoff rückflussiert. Zum Reaktionsgemisch wurden anschliessend so viel Methylenchlorid gegeben, um das Totalvolumen auf 8,5 Liter zu ergänzen. Nach Abkühlen auf20-25° wurden 605 ml (4,7 Mol) N,N'-Dimethylanilin (DMA) gefolgt von 467 ml (0,95 Mol) einer 32%igen Lösung xo von DMA* HCl unter Umrühren zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde auf —5 bis —7° abgekühlt, worauf 1310 g (4,65 Mol) D(-)-p-Hydroxyphenylglycylchlorid-hydrochlorid in 5 Portionen von 262 g und in Zeitabständen von 10 min bei einer Temperatur von -5° zugegeben wurden. Das Reak- is tionsgemisch wurde anschliessend mit trockenem Stickstoffgas bedeckt und während 1,5 h bei - 5° weiter gerührt. Das Reaktionsgemisch wurde anschliessend auf 0 bis 3°

erwärmt und während weiterer 2-3 h gerührt, bis vollständige Auflösung erreicht wurde. Diese Lösung wurde dann auf 20° 20 erwärmt und während 30-45 min bei dieser Temperatur gehalten. Anschliessend wurden 3,75 Liter trockenes Methanol so rasch als möglich und unter Festhalten der Temperatur auf 25-30° zugegeben. Nach 10 min Umrühren, um vollständige Lösung zu erreichen, wurde die Lösung filtriert und 25 das Reaktionsgemisch mit 930 ml trockenem Methanol und 1860 ml trockenem Methylenchlorid gewaschen. Die Waschlösungen wurden zum Filtrat gegeben, wobei ein Totalvo-Iumen von 17,5 Liter erhalten wurde. Das Filtrat wurde anschliessend durch Zugabe von Triäthylamin auf pH 2,8 30 eingestellt (ca. 450 ml Triäthylamin) gefolgt von einer kontinuierlichen langsamen Zugabe von Triäthylamin während 30 min, wodurch Cefadroxil als flockiges amorphes Produkt ausgefällt wurde. Das pH wurde mit Triäthylamin auf ca. 5,7—5,8 eingestellt (Totalverbrauch von TEA ca. 1500-1520 35 ml). Die Aufschlämmung wurde weiter gerührt und auf 20-22° abgekühlt und durch Zugabe von Methylenchlorid auf ein Total volumen von 28 Liter ergänzt. Die Aufschlämmung wurde während weiterer 30 min gerührt und anschliessend filtriert und mit 4:1 -Methylenchlorid: Methanol und 40 Methylenchlorid gewaschen und bei 45-50° getrocknet,

wobei rohes Cefadroxil erhalten wurde. Dieses Produkt wurde in Ausbeuten von ca. 1640 g pro 1 kg 7-ADCA als Aus-gangsprodukt erhalten und hatte eine biologische Wirksamkeit von ca. 900 mcg/mg. Durch Tests wurde ermittelt, dass 45 weniger als 2 ppm Dimethylanilin im Produkt vorhanden waren. Das Produkt war sehr gut wasserlöslich.

Aus der Mutterlauge konnte ein weiterer Anteil (ca. 125 g) Cefadroxil in der Weise erhalten werden, dass (1) das Volumen des Filtrats reduziert wurde, (2) dass 28 Liter Me- so thylenchlorid zugegeben wurden und die Aufschlämmung auf Rückflusstemperatur erhitzt wurde, dass (3) die Aufschlämmung während 25-30 min bei Rückflusstemperatur gehalten wurde, (4) die Aufschlämmung filtriert wurde, (5) der erhaltene Rückstand mit Methylenchlorid gewaschen wurde und ss dass (6) der Rückstand bei 45-50° getrocknet wurde.

Beispiel 4

Herstellung von Cefadroxil (beschreibt die Silylierung mit Trimethylchlorsilan) 60

Zu einer Aufschlämmung von 21,4 g 7-ADCA (97,4% Reinheit), 250 ml trockenem Methylenchlorid, 18 ml Dimethylanilin und 26,1 ml Trimethylchlorsilan wurden 27 ml Triäthylamin während 20 min und bei einer Temperatur von 25-30° zugegeben. Die Temperatur wurde während 1,5 h auf 65 25-30° gehalten und das Reaktionsgemisch anschliessend auf —5 bis —7° abgekühlt. Eine Lösung von 11,0 ml DMA • HCl (32%ig) in Methylenchlorid wurde zugegeben, gefolgt von der

Zugabe von 28,3 g D(-)-p-Hydroxyphenylglycylchlorid-hydrochlorid-hemidioxan-solvat in 7 Teilen von ca. 4 g während 40 min, wobei die Temperatur auf zwischen —2 und +5C gehalten wurde. Anschliessend wurden 1 ml Dimethylformamid und 100 ml trockenes Methanol zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde gerührt, filtriert und das Filtrat mit 35 ml Triäthylamin während 30 min auf pH 5,9 gebracht. Zu der erhaltenen Aufschlämmung wurden unter Umrühren 150 ml Methylenchlorid gegeben, die Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen mit 200 ml Methylenchlorid: Methanol (4:1) und mit 260 ml Methylenchlorid gewaschen und getrocknet, wobei rohes Cefadroxil (34,75 g) erhalten wurde. Biologische Wirksamkeit: 965 mcg/mg, Biologische Ausbeute: 94,6%.

Beispiel 5

Herstellung von Cefadroxil-Monohydrat (beschreibt das am meisten bevorzugte Kristallisationsverfahren unter Verwendung von Wasser:Acetonitril:n-Butanol (1:2:1)).

Zu einer gerührten Lösung von 370 ml deionisiertem Wasser und 370 ml Acetonitril bei 40-45° wurden langsam 50-60 g rohes Cefadroxil (biologische Aktivität:

840 mcg/mg) während 10 min zugegeben. Die erhaltene klare Lösung wurde mit Kristallen von Cefadroxil-Monohydrat geimpft. Nach Umrühren während ca. 10 min bildete sich eine kristalline Aufschlämmung, die während weiterer 5 min gerührt wurde. Anschliessend wurde weiteres rohes Cefadroxil in Portionen von 40-50 g und in Zeitabständen von 5-6 min zugegeben, bis ein totaler Anteil von 1000 g Cefadroxil zugegeben war. Die Aufschlämmung wurde anschliessend bei 40-45° während ca. 30 min gerührt, worauf 370 ml Acetonitril langsam während 15 min zugegeben wurden und worauf während weiterer 5 min gerührt wurde. 370 ml n-Butanol wurden langsam während 15 min zu der Aufschlämmung gegeben, worauf die erhaltene Aufschlämmung während 1 h bei 25° weiter gerührt wurde. Anschliessend wurde sie auf 0 bis +3° abgekühlt, und während 30 min bei dieser Temperatur gehalten. Das endgültige Verhältnis von Wasser : Acetonitril : n-Butanol betrug 1:2:1. Die Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen wurde mit ca. 1150 ml Waser: Acetonitril (1:3) gewaschen und bei 50° während 12 h im Luftstrom getrocknet.

Man erhielt 745 g eines weissen kristallinen Cefadroxil-Monohydrats. Biologische Wirksamkeit: 940 mcg/mg, K.F. =4,6%.

Die Aktivität im genannten Filtrat zeigt ein Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat von guter Qualität an, das durch Wiederholen des genannten Verfahrens durch Substituieren eines äquivalenten Gewichtsteils von Cefadroxyl- DMF-Solvat für das Cefadroxil-Ausgangsprodukt zu weiterem Cefadroxil-Monohydrat umgesetzt werden. Dieses Vorgehen geschieht wie folgt:

1. Im Vakuum und bei einer Temperatur von unterhalb 50° wurde das Filtrat zu einem schweren Sirup eingedickt.

2. Zu diesem Sirup wurden 430 ml DMF gegeben und auf 45° erwärmt. Das Gemisch wurde bis zum Erreichen von vollständiger Homogenität gerührt. Anschliessend wurden Kristalle von Cefadroxil • DMF-Solvat zugegeben und mit

145 ml Isopropanol versetzt, worauf während 2 h bei 25° gerührt wurde. Die Aufschlämmung wurde anschliessend bei 20-25° während 3 h gerührt und anschliessend auf 0-3° abgekühlt und während 3 h auf dieser Temperatur gehalten.

3. Die Aufschlämmung wurde filtriert und mit 200 ml DMF gewaschen.

4. Der erhaltene Rückstand wurde mit 500 ml Aceton gewaschen.

11

632270

5. Der Rückstand wurde bei 45-50° während 12 h im Luftstrom getrocknet.

6. Man erhielt eine Ausbeute von 91 g DMF-Solvat mit biologischer Wirksamkeit von 750 mcg/mg.

7. Das DMF-Solvat kann, wenn es als Ausgangsprodukt im Verfahren von Beispiel 5 verwendet wird, in Cefadroxil-Monohydrat in 86,7%iger Ausbeute übergeführt werden. Biologische Wirksamkeit: 925 • K.F. = 5,0%. Man erhält demzufolge ca. 64 g Monohydrat zusätzlich, wodurch sich die Totalausbeute von Monohydrat, bezogen auf das rohe Cefadroxil auf ca. 90% erhöht.

Beispiel 6

Cefadroxil-Monohydrat (Wasser: Acetonitril : n-Butanol-System)

27,0 g rohes Cefadroxil (hergestellt nach Beispiel 4) wurden aus einem Wasser: Acetonitril:n-Butanol-Lösungs-mittelgemisch entsprechend dem folgenden Profil auskristallisiert:

Einzelne Zeit Temperatur

Zugaben (in min) (°C)

von

Cefadroxil (ing)

2

0

50

Anfängliches

Lösungsmittelsystem enthielt 10 ml Wasser und 4 ml Acetonitril

2

6

50

geimpft mit Kristallen von Cefadroxil • H2O

2

12

50

Zugabe von 6 ml Acetonitril

2

17

50

2

23

45

2

29

47

2

36

50

2

42

51

2

47

52

Zugabe von 3 ml Acetonitril

2

58

51

2

63

50

2

69

47

Zugabe von 2 ml Acetonitril

2

79

47

1

83

49

Zugabe von 1 ml Acetonitril

98

47

Zugabe von 4 ml Acetonitril

118

42

Zugabe von 10 ml n-Butanol-Heizvorrichtung ausschalten

178

27

198

15

218

12

278

3

filtrieren.

Total 20 ml Acetonitril und 10 ml n-Butanol wurden verwendet. Die kristalline Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen mit 30 ml Acetonitril : Wasser (3:1) gewaschen und getrocknet, wobei 22,0 g (81,3%) des Monohydrat-produkts erhalten wurden. Biologische Wirksamkeit: 960 mcg/mg.

Beispiel 7

Cefadroxil-Monohydrat (Kristallisation aus Wasser) 28 g Cefadroxil (Rohprodukt) wurde in Portionen zu erwärmten (55°) Wasser gegeben und nach dem folgenden Profil auskristallisiert:

Einzelne Zeit Temperatur

Zugaben (in min) (°C)

von

Cefadroxil (ing)

2

0

55

Ausgangsvolumen 25 ml Wasser

2

6

55

Impfen mit Kristallen von

Cefadroxil • H2O

1

9

55

1

14

55

3

29

52

4

39

52

2

44

52

2

46

52

1

49

52

Zugabe von 10 ml Wasser

3

54

52

1

59

52

1

59

52

2

64

52

1

69

52

Zugabe von 10 ml Wasser

2

74

52

1

79

52

Zugabe von 5 ml Wasser,

Ausschalten der Heizvorrichtung. Abkühlenlassen auf Zimmertemperatur, Abkühlen im Eisbad und Rühren während ca. 1 weiteren Stunde.

Es wurden total 50 ml Wasser verbraucht. Die kristalline Aufschlämmung wurde anschliessend filtriert und der Filterkuchen wurde mit 35 ml Eiswasser gewaschen und getrocknet, wobei 20,65 g (79%) des im Titel genannten Produkts erhalten wurden. Biologische Wirksamkeit: 960 mcg/ mg • DMA < 2 ppm • KF = 4,6%. Klett-Farbe: 375 (10%ige Lösung). Chemische Wirksamkeit: 963 mcg/mg.

Beispiel 8

Cefadroxil-Monohydrat (Umkristallisieren aus Wasser-Acetonitril)

8,0 g rohes Cefadroxil wurden in Portionen von 1 g zu einem Gemisch von 5 ml Waser und 5 ml Acetonitril bei 40°C während 45 min zugegeben. Die Lösung wurde durch Zugabe von Cefadroxil • H20-Kristallen angeimpft. Das Reaktionsgemisch wurde während 15 min gerührt, worauf 10 ml Acetonitril während weiterer 15 min zugegeben wurden. Die kristalline Aufschlämmung wurde während ca. 3 h auf Zimmertemperatur abkühlen gelassen und anschliessend filtriert. Der Filterkuchen wurde mit 7 ml Acetonitril: Waser (3:1) gewaschen und getrocknet, wobei 6,25 g (81,5%) der im Titel genannten Verbindung erhalten wurden. Biologische Wirksamkeit: 950 mcg/mg • KF = 4,7%. Chemische Wirksamkeit: 965 mcg/mg.

Beispiel 9

Cefadroxil-Monohydrat (Kristallisation aus Butanol: Wasser)

11,7 g rohes Cefadroxil wurden zu einem Gemisch von 8,35 ml Wasser und 7,0 ml n-Butanol in Anteilen von 1 g während 2 h bei 48° zugegeben. Das Reaktionsgemisch wurde mit Kristallen von Cefadroxil • H2O geimpft und während den 2 h gerührt. Die kristalline Aufschlämmung wurde anschliessend auf Zimmertemperatur abkühlen gelassen (ca. 2 h) und anschliessend filtriert. Der Filterkuchen wurde mit n-Butanol, Wasser und Isopropanol gewaschen und getrocknet, wobei 9,4 g (82,7%) der im Titel genannten Vers

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

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12

bindung erhalten wurden. Biologische Wirksamkeit: 940 mcg/mg • KF=5,3%. Chemische Wirksamkeit: 966 mcg/mg.

Beispiel 10

Cefadroxil-Monohydrat (aus Cefadroxil • DMF-Solvat, unter Verwendung von Wasser : Acetonitril: n-Butanol als Lösungsmittel.

27,0 g Cefadroxil-Dimethylformamid-Solvat wurden in Portionen zu einer gerührten Lösung von 10 ml Wasser und 3 ml Acetonitril gegeben und nach dem folgenden Profil kristallisiert:

Einzelne Zeit Temperatur

Zugaben (in min) (°C)

von

Cefadroxil (ing)

2

0

25

2

4

45

Impfen mit Cefadroxil • H2O, Zugabe von 2 ml Acetonitril

2

13

42

2

23

45

Zugabe von 5 ml Acetonitril

2

33

43

2

39

42

2

44

42

2

50

42

2

57

42

2

65

42

2

71

43

2

83

43

2

90

42

1

98

42

128

42

Zugabe von 10 ml Acetonitril

156

39

Zugabe von 10 ml n-Butanol

198

27

Abkühlen im Eisbad

263

Filtrieren.

Im ganzen wurden 20 ml Acetonitril und 10 ml n-Butanol verbraucht. Die kristalline Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen wurde mit 30 ml Acetonitril: Wasser (4:1) gewaschen. Nach Trocknen des Kuchens erhielt man 18,85 g (86,7%) des Monohydrat-Produkts. Biologische Wirksamkeit: 925 mcg/mg. KF: 5,0%. DMF=0,1%; Acetonitril: 0,2%; n-Butanol: 0,1%. Klett-Farbe: 98 (10%ige Lösung). Chemische Wirksamkeit: 963 mcg/mg.

Beispiel 1I

Cefadroxil-Monohydrat (Kristallisierung aus Wasser: Isopropanol)

700 g rohes Cefadroxil wurden in Portionen zu einer gerührten Lösung von 260 ml Wasser und 260 ml Isopropanol gegeben und gemäss dem folgenden Profil umkristallisiert:

Einzelne Zeit (in Temperatur Zugaben min) (°C)

von

Cefadroxil (ing)

56,26

0

45

57,87

4

50

56,00

11

45

69,62

20

55

67,95

28

57

Einzelne Zugaben von

Cefadroxil (ing)

Zeit (in min)

Temperatui ra r

64,93

39

54

70,82

55

48

64,11

65

44

17,00

70

42

72,41

110

47

52,87

120

50

28,90

128

50

21,08

135

49

155

42

160

42

Zugabe von 260 ml Isopropanol

177

41

Zugabe von 260 ml Isopropanol

290

Eisbad

325

17

Filtrieren.

Im ganzen wurden 780 ml Isopropanol verwendet. Die kristalline Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen wurde mit 800 ml Isopropanol-Wasser (3:1) gewaschen. Da der Filterkuchen eine dunkle Färbung aufwies, wurde er ein zweites Mal in 800 ml Isopropanol : Wasser (3:1) aufgeschlämmt, filtriert, mit 3:1-Isopropanol : Wasser gewaschen und getrocknet, wobei 520,95 g der im Titel genannten Verbindung erhalten wurden. Biologische Wirksamkeit: 955 mcg/mg. KF: 5,0%. Klett-Farbe: 226 (10%ige Lösung). Isopropanol: 1,2%. Chemische Wirksamkeit: 917 mcg/mg.

Beispiel 12

Cefadroxil-Monohydrat (Umkristallisieren aus Wasser : Acetonitril : n-Butanol)

700 g rohes Cefadroxil wurden in Portionen zu einer gerührten Lösung von 260 ml Wasser und 260 ml Acetonitril gemäss dem folgenden Profil zugegeben:

Einzelne Zeit Temperatur Zugaben (in min) (°C)

von

Cefadroxil (ing)

17,72

0

25

»

15,67

5

25

30,01

10

45

Impfen mit Cefadroxil • H2O

23,94

17

45

26,06

25

45

33,67

29

44

35,28

37

43

34,66

43

41

41,80

49

40

43,22

59

37

55,00

68

35

55,70

77

35

54,70

52,94

54,94

108

35

55,71

228

30

46,00

253

30

323

Zugabe von 260 ml Acetonitril

333

Zugabe von 260 ml n-Butanol

413

26

Eisbad

473

3

Filtrieren.

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

13

632270

Im ganzen wurden 520 ml Acetonitril und 260 ml n-Butanol verbraucht. Die kristalline Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen wurde mit 100 ml Acetonitril: Wasser (3:1) und 700 ml Acetonitril: Wasser (4:1) gewaschen. Nach Trocknen erhielt man 521,5 g (83,5%) des Mono-hydrat-Produkts. Biologische Wirksamkeit: 905 mcg/mg. KF: 4,6%. Klett-Farbe: 97 (10%ige Lösung). Acetonitril: 0,5%, n-Butanol: 0,1%. Chemische Wirksamkeit: 940 mcg/mg.

Beispiel 13

Cefadroxil-Monohydrat (Umkristallisieren aus Wasser: Aceton)

700 g rohes Cefadroxil wurden portionenweise zu einer gerührten Lösung von 260 ml Wasser und 260 ml Aceton gegeben und gemäss dem folgenden Profil umkristallisiert:

Einzelne

Zeit

Temperatur

Zugaben

(in min)

(°C)

von

Cefadroxil

('"g)

79,84

0

55 Impfen mit Cefadroxil • H2O

54,99

10

49

54,43

18

47

58,62

28

44

61,60

39

44

Einzelne

Zeit

TemperatUi

Zugaben

(in min)

CC)

von

Cefadroxil

5 (ing)

54,25

50

43

58,39

62

43

50,63

75

43

53,11

89

43

10 53,37

101

43

50,59

113

43

44,45

127

43

27,07

137

42

154

42

Zugabe von 260 ml Aceton

15

169

39

Zugabe von 260 ml Aceton

274

26

Abkühlen auf 10-12° und Stehenlassen während I-V2 h vor dem Filtrieren.

20

Im ganzen wurden 780 ml Aceton verbraucht. Die kristalline Aufschlämmung wurde filtriert und der Filterkuchen wurde anschliessend mit90 ml Aceton: Wasser (3:1) gewaschen und getrocknet, wobei 507,21 g der im Titel genannten 25 Verbindung erhalten wurden. Biologische Wirksamkeit: 945 mcg/mg. KF: 5,2%. Klett-Farbe: 190 (10%ige Lösung), Aceton: 1,47%. Chemische Wirksamkeit: 928 mcg/mg.

1 Blatt Zeichnungen

Claims

632270

PATENTANSPRÜCHE

1. Verfahren zur Herstellung von 7-[D-a-Amino-a-(p-àydroxyphenyl}-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbon-säure, oder einem pharmazeutisch verwendbaren Salz davon, dadurch gekennzeichnet, dass

(a) 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure in einem inerten, im wesentlichen wasserfreien aprotischen Lösungsmittel silyliert wird;

(b) das 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure-Produkt aus Reaktionsschritt (a) mit D(-)-a-Amino-a-(p-hydroxy-phenyl)-acetylchlorid-hydrochlorid in einem inerten, im wesentlichen wasserfreien, aprotischen Lösungsmittel und in Gegenwart eines Säureakzeptors acyliert wird;

(c) die Silylgruppen des Acylierungsprodukts aus Reaktionsschritt (b) durch Hydrolyse oder Alkoholyse abgespalten werden; und

(d) die gewünschte Cephalosporansäure oder ein pharmazeutisch verwendbares Salz davon isoliert wird.
2. Verfahren nach Anspruch 1, worin die Silylierungsreak-tion im Schritt (a) in der Weise durchgeführt wird, dass 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure mit einem Silylie-rungsmittel der Formel

Si

NH

NH

Si

Si

R2 Si; X

umgesetzt wird, worin R2, R3 und R4 Wasserstoff, Halogen, niedriges Alkyl, durch Halogen substituiertes niedriges Alkyl, Phenyl, Benzyl, Tolyl oder Dimethylaminophenyl darstellt, wobei mindestens einer der genannten Reste R2, R3 und R4 verschieden von Halogen oder Wasserstoff ist; worin R1 niedriges Alkyl darstellt und m eine ganze Zahl von 1 oder 2 bedeutet und X Halogen oder darstellt, worin R5 Wasserstoff oder niedriges Alkyl und R6 niedriges Alkyl oder

R2 SÌ

darstellt.
3. Verfahren nach Ansprüchen 1 und 2, worin das in Reaktionsschritt (a) verwendete Silylierungsmittel Trime-thylchlorsilan oder Hexamethyldisilazan ist.
4. Verfahren nach Ansprüchen 1-3, worin disilylierte 7-Aminodesacetoxycephalosporansäure in Reaktionsschritt (a) unter Verwendung von mindestens zwei Äquivalenten des Silylierungsmittels pro Mol der 7-Aminodesacetoxycephalo-sporansäure hergestellt wird.
5. Verfahren nach Ansprüchen 1-4, worin der Reaktionsschritt (a) in der Weise durchgeführt wird, dass 7-Aminodes-acetoxycephalosporansäure mitTrimethylchlorsilan in im wesentlichen wasserfreiem aprotischen Lösungsmittel in Gegenwart eines Säureakzeptors silyliert wird.
6. Verfahren nach Ansprach 5, worin der Silylierungs-schritt in im wesentlichen wasserfreiem Methylenchlorid und in Gegenwart eines Säureakzeptors Triäthylamin oder einem Gemisch von Triäthylamin und Dimethylanilin und bei einer Temperatur von 20-30°C durchgeführt wird.
7. Verfahren nach Ansprüchen 1-4, worin der Reaktionsschritt (a) in der Weise durchgeführt wird, dass 7-Aminodes-acetoxycephalosporansäure mit Hexamethyldisilazan in im wesentlichen wasserfreiem aprotischen Lösungsmittel unter Erhitzen silyliert wird.
8. Verfahren nach Anspruch 7, worin der Silylierungs-schritt in im wesentlichen wasserfreiem Methylenchlorid bei Rückflusstemperatur erfolgt.
9. Verfahren nach Ansprüchen 1-8, worin der Acylie-rungsschritt (b) in im wesentlichen wasserfreiem Methylenchlorid bei einer Temperatur von ca. —10 bis + 10°C und in Gegenwart eines Säureakzeptors in Form einer tertiären Amin-Base mit pKa^7 durchgeführt wird.
10. Verfahren nach Anspruch 9, worin der genannte Säureakzeptor Dimethylanilin ist.
11. Verfahren nach Ansprüchen 1-10, worin in Reaktionsschritt (c) Silylgruppen durch Behandeln mit Wasser oder einem Alkanol mit 1-4 C-Atomen oder einem Gemisch davon abgespalten werden.
12. Verfahren nach Ansprüchen 1-11, worin in Reaktionsschritt (c) Silylgruppen durch Behandeln mit einem Alkanol mit 1-4 C-Atomen abgespalten werden.
13. Verfahren nach Ansprüchen 1-12, worin in Reaktionsschritt (d) 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure in der Weise isoliert wird, dass das pH im Reaktionsgemisch so lange erhöht wird, bis die gewünschte Säure aus der Lösung ausfällt.
14. Verfahren nach Anspruch 13, worin die Einstellung des pH mit Triäthylamin erfolgt.
15. Verfahren nach Ansprüchen 1-14, worin 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure erhalten wird und anschliessend in herkömmlicher Weise in ein pharmazeutisch verwendbares Salz davon übergeführt wird.
16. Verfahren zur Herstellung von kristallinem 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydrat mit den folgenden Röntgen-Diffraktions-Werten:

Linie

Abstände d (Â)

Relative Intensität

1

8.84

100

2

7.88

40

3

7.27

42

4

6.89

15

5

6.08

70

6

5.56

5

7

5.35

63

8

4.98

38

9

4.73

26

10

4.43

18

2

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

3

632270

dadurch gekennzeichnet, dass man nach Patentanspruch 1 die Verfahrensschritte (a), (b) und (c) nacheinander durchführt und anschliessend in einem Schritt das Monohydrat herstellt.
17. Verfahren nach Patentanspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass das Monohydrat gebildet wird durch Verschieben des pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) nach oben in Gegenwart eines Überschusses von Dimethylformamid zur Bildung des Dimethylformamid-Solvats von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure; Auflösen des genannten Dimethylformamid-Solvats in angesäuertem Wasser oder einem Gemisch von angesäuertem Wasser und Acetonitril und Verschieben des pH der genannten angesäuerten Lösung nach oben zur Ausfällung des gewünschten kristallinen Monohy-drats.
18. Verfahren nach Patentanspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass das Monohydrat gebildet wird, durch Verschieben des pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) nach oben in Gegenwart eines Überschusses von Dimethylformamid zur Bildung von Dimethylformamid-Solvat von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure und Kontaktieren des genannten Dimethylformamid-Solvats mit Wasser oder einem zum Teil wässrigen Medium zur Ausfällung des gewünschten kristallinen Monohydrats.
19. Verfahren nach Patentanspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass das Monohydrat gebildet wird durch Verschieben des pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) nach oben, zur Bildung von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure und Kontaktieren der genannten Säure mit Wasser oder einem zum Teil wässrigen Medium zur Ausfällung des gewünschten Monohydrats.
20. Verfahren nach Ansprüchen 16 und 17, worin der Reaktionsschritt (d) darin besteht, dass

(1) das pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) durch Zugabe von Triäthylamin und in Gegenwart eines Überschusses von Dimethylformamid nach oben verschoben wird, bis das Dimethylformamid-Solvat von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-car-bonsäure aus der Lösung ausfällt;

(2) das genannte Dimethylformamid-Solvat in angesäuertem Wasser gelöst wird; und

(3) das pH dieser Lösung durch Zugabe von Triäthylamin nach oben verschoben wird, bis das gewünschte kristalline Monohydrat ausfällt.
21. Verfahren nach Anspruch 20, worin die letztgenannte Einstellung des pH zur Fällung des gewünschten kristallinen Monohydrats bei einer Temperatur von ca. 35-60°C durchgeführt wird.
22. Verfahren nach Ansprüchen 20 und 21, worin Acetonitril während der letztgenannten pH-Einstellung zugefügt wird.
23. Verfahren nach Ansprüchen 20-22, worin vorgängig oder während der letztgenannten Einstellung des pH Impfkristalle von 7-[D-a-Amino-cc-(p-hydroxyphenyl)-acet-amido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydratnach Anspruch 16 zugegeben werden.
24. Verfahren nach Ansprüchen 16 und 18, worin Reaktionsschritt (d) darin besteht, dass

(1) das pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) durch Zugabe von Triäthylamin und in Gegenwart eines Überschusses von Dimethylformamid nach oben eingestellt wird, bis das Dimethylformamid-Solvat von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbon-säure aus der Lösung ausfällt; und

(2) das genannte Dimethylformamid-Solvat mit einem Lösungsmittelsystem, enthaltend Wasser oder ein Gemisch von Wasser mit einem oder mehreren organischen Lösungsmitteln wie Acetonitril, Aceton oder einem Alkanol mit 1-5 C-Atomen kontaktiert wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung ausfällt.
25. Verfahren nach Anspruch 24, worin der genannte Monohydrat-Kristallisationsschritt (2) bei einer Temperatur von ca. 35-60°C durchgeführt wird.
26. Verfahren nach Anspruch 24 und 25, worin das zur Kristallisation verwendete Lösungsmittelsystem aus Schritt (2) aus Wasser: Acetonitril:n-Butanol in einem Volumenverhältnis von 1:2:1 besteht.
27. Verfahren nach Ansprüchen 24 und 25, worin das Kri-stallisations-Lösungsmittelsystem aus Schritt (2) aus Wasser: Aceton (1:3), Wasser: Isopropanol (1:3),

Wasser: Acetonitril (1:3) oder Wasser:n-Butanol (1:1) besteht.
28. Verfahren nach Ansprüchen 24-27, worin Impfkristalle von 7-[D-cc-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydratnach Anspruch 16, während dem letzten Kristallisationsschritt zugegeben werden.
29. Verfahren nach Ansprüchen 16 und 19 worin Reaktionsschritt (d) darin besteht, dass

(1) das pH der Lösung aus Reaktionsschritt (c) durch Zugabe von Triäthylamin nach oben verschoben wird, zur Bildung von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acet-amido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure; und

(2) die genannte Cephalosporansäure mit einem Lösungsmittel, enthaltend Wasser oder ein Gemisch von Wasser mit einem oder mehreren organischen Lösungsmitteln wie Acetonitril, Aceton oder einem Alkanol mit 1-5 C-Atomen kontaktiert wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung ausfällt; und

(3) das gewünschte Monohydrat isoliert wird.
30. Verfahren nach Anspruch 29, worin der Monohydrat-Kristallisationsschritt (2) bei einer Temperatur von ca. 35-60°C durchgeführt wird.
31. Verfahren nach Ansprüchen 29 und 30, worin das Kri-stallisations-Lösungsmittelsystem aus Schritt (2) aus Wasser: Acetonitril:n-Butanol in einem Volumenverhältnis von 1:2:1 besteht.
32. Verfahren nach Ansprüchen 29 und 30, worin das Kri-stallisations-Lösungsmittelsystem aus Schritt (2) aus Wasser: Aceton (1:3), Wasser: Isopropanol (1:3),

Wasser: Acetonitril (1:3) oder Wasser:n-Butanol (1:1) besteht.
33. Verfahren nach Ansprüchen 29-32, worin Impfkristalle von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydratnach Anspruch 16, während dem letzten Kristallisationsschritt zugegeben werden.
34. Verfahren zur Herstellung von kristallinem 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydrat nach Anspruch 16, dadurch gekennzeichnet, dass entweder

(a) das Dimethylformamid-Solvat von 7-[D-a- Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-car-bonsäure in angesäuertem Wasser oder einem Gemisch von angesäuertem Wasser und Acetonitril gelöst wird, worauf das pH der genannten angesäuerten Lösung so lange nach oben verschoben wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung kristallisiert; oder

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

632270

(b) die 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure oder das Dimethylformamid-Solvat davon mit Wasser oder einem teilweise wässrigen Medium kontaktiert wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung auskristallisiert.
35. Verfahren nach Anspruch 34, worin das gewünschte Monohydrat in der Weise hergestellt wird, dass

(1) das Dimethylformamid-Solvat von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-car-bonsäure in angesäuertem Wasser aufgelöst wird; und

(2) das pH der genannten Lösung durch Zugabe von Triäthylamin nach oben verschoben wird, wobei das Mono-hydrat-Produkt ausfällt.
36. Verfahren nach Anspruch 35, worin der genannte letzte Schritt der Einstellung des pH zur Ausfällung des gewünschten kristallinen Monohydrats bei einer Temperatur von 35-60°C durchgeführt wird.
37. Verfahren nach Ansprüchen 35 und 36, worin Acetonitril während der letzten Einstellung des pH zugegeben wird.
38. Verfahren nach Ansprüchen 35-37, worin Impfkristalle von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydratnach Anspruch 16 vorgängig zu der letzten Einstellung des pH zugegeben werden.
39. Verfahren nach Anspruch 34, worin das gewünschte Monohydrat in der Weise hergestellt wird, dass

(1) die 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure oder das Dimethylformamid-Solvat davon mit einem Lösungsmittelsystem, enthaltend Wasser oder ein Gemisch von Wasser mit einem oder mehreren organischen Lösungsmitteln wie Acetonitril, Aceton oder einem Alkanol mit 1-5 C-Atomen kontaktiert wird, bis das gewünschte Monohydrat aus der Lösung auskristallisiert.
40. Verfahren nach Anspruch 39, worin der Monohydrat-Kristallisationsschritt bei einer Temperatur von 35-60°C durchgeführt wird.
41. Verfahren nach Ansprüchen 39 und 40, worin das Monohydrat-Kristallisations-Lösungsmittelsystemaus Wasser:Acetonitril:n-Butanol in einem Volumenverhältnis von 1:2:1 besteht.
42. Verfahren nach Anspruch 39 und 40, worin das Monohydrat-Kristallisations-Lösungsmittelsystem aus Wasser: Aceton (1:3), Wasser: Isopropanol (1:3),

Wasser: Acetonitril (1:3) oder Wassenn-Butanol (1:1) besteht.
43. Verfahren nach Ansprüchen 39-42, worin Impfkristalle von 7-[D-a-Amino-a-(p-hydroxyphenyl)-acetamido]-3-methyl-3-cephem-4-carbonsäure-monohydratnach Anspruch 16 während der letzten Kristallisation zugegeben werden.