TWI503322B - 作為ｃｄｋ４／６抑制劑之吡咯并嘧啶化合物 - Google Patents

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Description

作為CDK4/6抑制劑之吡咯并嘧啶化合物
本發明係關於新穎吡咯并嘧啶化合物及其醫藥組合物，特定言之為作為CDK4/6抑制劑之吡咯并嘧啶化合物及其醫藥組合物。本發明亦關於此等化合物及組合物用於治療過度增生病症(諸如癌症)的用途。
哺乳動物細胞週期進程為一個受到嚴格控制的過程，其中不同階段的過渡以高度有序的方式進行且由多個檢查點管控。視網膜胚細胞瘤蛋白(pRb)為G1期至S期過渡的檢驗點蛋白。pRb與E2F轉錄因子家族成員締合以防止其在無適當生長刺激存在下具活性(參看Ortega 等人,Biochimica et Biophysica Acta-Reviews on Cancer 2002;1602(1):73-87；Shapiro,Journal of Clinical Oncology 2006;24(11):1770-1783 )。在有絲分裂原刺激下，靜止期細胞(quiescent cell)藉由新近合成D細胞週期素而開始進入S期，D細胞週期素為細胞週期素依賴性激酶4及6(CDK4/6)活化劑。一旦與細胞週期素結合後，CDK4/6經由磷酸化使pRb蛋白失活。pRb之磷酸化釋放E2F以引導S期所需基因之轉錄。pRb之完全失活需要由細胞週期素D-CDK4/6及細胞週期素E-CDK2兩者磷酸化。已顯示在pRb之特異性位點(Ser780、Ser795)由CDK4/6磷酸化為細胞週期素E-CDK2磷酸化的先決條件(參看Lundberg 等人,Molecular and Cellular Biology 1998;18(2):753-761 )。除了D細胞週期素之外，CDK4/6之活性由INK4a基因所編碼且抑制激酶活性之p16調節(參看Kamb等人,Science 1994;264(5157):436-440 )。CIP/KIP蛋白為細胞週期素E-CDK2之抑制劑，其亦結合於細胞週期素D-CDK4/6複合物，且此藉由螯合CIP/KIP蛋白使其遠離目標而引起CDK2進一步活化(參看Sherr等人,Genes & Development 1999;13(12):1501-1512 )。因此，細胞週期素D-CDK4/6為調節G1至S期的關鍵酶複合物。
在癌症中，D細胞週期素-CDK4/6-INK4a-pRb路徑被普遍破壞，而促成細胞增殖。在多數病例(約80%)中，癌症保持有功能性pRb且利用不同機制提高CDK4/6激酶之活性(參看Ortega等人,Biochimica et Biophysica Acta-Reviews on Cancer 2002;1602(1):73-87；Shapiro,Journal of Clinical Oncology 2006;24(11):1770-1783) )。在套細胞淋巴瘤(MCL)中，細胞週期素D1移位至IgH啟動子(t11:14)，此引起蛋白質組成性表現，導致CDK4/6活化(參看Amin等人,Archives of Pathology & Laboratory Medicine 2003;127(4):424-431；Oudat等人,Modern Pathology 2001;14(1):175A )。在90%以上的MCL病例中觀測到此移位，且其被視為該疾病之病徵(pathognomic)。D細胞週期素亦在20%多發性骨髓瘤中移位(參看Bergsagel等人,Immunological Reviews 2003;194(1):96-104 )。
除了移位之外，D細胞週期素豐度亦可藉由擴增或過表現而被提高，且其實例可見於鱗狀細胞食道癌(其中大部分展現細胞週期素D1擴增)(參看Jiang等人,Cancer Research 1992;52(10):2980-2983 )及乳癌(其中細胞週期素D1過表現頻繁)(參看Arnold等人,Journal of Clinical Oncology 2005 )中。CDK4/6激酶活性亦可藉由擴增CDK4基因本身而被提高，且在幾乎所有的反分化脂肉瘤病例中均觀測到CDK4與MDM2基因之共同擴增(參看Sirvent等人,American Journal of Surgical Pathology 2007;31(10):1476-1489 )。CDK4/6之遺傳抑制劑亦在癌症中被頻繁滅活以實現CDK4/6活化，且其實例包括非小細胞肺癌、黑素瘤及胰腺癌(Brambilla等人,Journal of Pathology 1999;188(4):351-360 ；Cowgill等人,American Journal of Surgery 2003;186(3):279-286 ；Gazzeri等人,Oncogene 1998;16(4):497-504 ；Kamb等人,Science 1994;264(5157):436-440 ；Ortega等人,Biochimica et Biophysica Acta-Reviews on Cancer 2002;1602(1):73-87 )。
除了此等與D細胞週期素-CDK4/6-INK4a-pRb路徑直接相關之遺傳缺陷以外，CDK4/6激酶之活性亦可因提高D細胞週期素表現之有絲分裂原路徑的致癌畸變而被提高。此處之實例包括非小細胞肺癌(NSCLC)中之EGFR擴增、胰腺癌中之活化K-Ras突變、黑素瘤中之V600E B-Raf突變及結腸癌中之PTEN失活(參看Dailey等人,Cytokine & Growth Factor Reviews 2005;16(2):233-247 ；Engelman,Nature Reviews Cancer 2009;9(8):550-562 ；Garcia-Echeverria,Purinergic Signalling 2009;5(1):117-125 ；Gray-Schopfer 等人,Cancer and Metastasis Reviews 2005;24(1):165-183 ；John等人,Oncogene 2009;28:S14-S23 ；Sharma等人,Nature Reviews Cancer 2007;7(3):169-181 )。
總之，大量人類贅瘤藉由提高CDK4/6活性實現增強之細胞增殖，且此等激酶之小分子抑制劑可能提供治療此等疾病之有效方式。
已知CDK抑制劑且已申請關於該等抑制劑之專利申請案(參看例如WO2007/140222)。
因而已嘗試製備抑制CDK4/6活性之化合物，且此項技術中已揭示許多該等化合物。然而，鑒於CDK4/6所介導之病理反應數目，仍不斷需要可用於治療多種病狀(包括癌症)的CDK4/6抑制劑。
本發明係有關式(I)之新穎吡咯并嘧啶化合物，
其中R1 、R2Y 、R4 、R8 -R11 、A及L如本文所定義，且關於其鹽，包括其醫藥學上可接受之鹽。
本發明化合物為CDK4/6抑制劑且可適用於治療由CDK4/6介導之疾病及病症，諸如癌症，包括套細胞淋巴瘤、脂肉瘤、非小細胞肺癌、黑素瘤、鱗狀細胞食道癌及乳癌。本發明另外關於包含本發明化合物之醫藥組合物。本發明另外關於抑制CDK4/6活性之方法及使用本發明化合物或包含本發明化合物之醫藥組合物治療與CDK4/6活性相關之病症。
其中：R1 為C3-7 烷基；C4-7 環烷基，視情況經一個選自由C1-6 烷基及OH組成之群的取代基取代；苯基，視情況經一個選自由C1-6 烷基、C(CH3 )2 CN及OH組成之群的取代基取代；哌啶基，視情況經一個選自由環丙基及C1-6 烷基組成之群的取代基取代；四氫哌喃基，視情況經一個選自由環丙基及C1-6 烷基組成之群的取代基取代；或雙環[2.2.1]庚基；A為CH或N；R11 為氫或C1-4 烷基；L為一鍵、C(O)或S(O)2 ；
V為NH或CH2 ；X 為O或CH2 ；W為O或NH；m與n各自獨立為1、2或3，只要m與n不皆為3；各R2Y 視情況經1至4個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由羥基、NH2 及-S-C1-3 烷基組成之群的取代基取代；CD3 ；鹵基；側氧基(oxo)；C1-3 鹵烷基；羥基；NH2 ；二甲基胺基；苯甲基；-C(O)-C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由NH2 、-SCH3 及NHC(O)CH3 組成之群的取代基取代；-S(O)2 -C1-4 烷基；吡咯啶基-C(O)-；及-C(O)2 -C1-3 烷基；R4 為氫、氘或C(R5 )(R6 )(R7 )；且R5 、R6 、R7 、R8 、R9 及R10 各自獨立為H或氘。
本發明之一個實施例為式(I-B)化合物，
其中L為一鍵或C(O)；
V為NH或CH2 ；X 為O或CH2 ；W為O或NH；m與n各自獨立為1、2或3，只要m與n不皆為3；各R2Y 視情況經1至4個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由羥基、NH2 及-S-C1-3 烷基組成之群的取代基取代；CD3 ；C1-3 鹵烷基；羥基；NH2 ；二甲基胺基；苯甲基；-C(O)-C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由NH2 、-SCH3 及NHC(O)CH3 組成之群的取代基取代；-S(O)2 -C1-4 烷基；吡咯啶基-C(O)-；及-C(O)2 -C1-3 烷基；且R1 、R4 -R11 及A如上文式(I)中所定義。
本發明之另一實施例為式(I-C)化合物，
其中：R1 為環丁基、環戊基、環己基、環庚基，其各自視情況經甲基、乙基或OH之一取代；A為CH或N；L為一鍵、-C(O)-或S(O)2 -；R2Y 為
其中各R2Y 視情況經1或2個獨立地選自鹵素、甲基、乙基或側氧基之取代基取代；V為NH或CH2 ；R4 為氫、氘或C(R5 )(R6 )(R7 )；且R5 、R6 、R7 、R8 、R9 及R10 各自獨立為H或氘。
在本發明之一個實施例中，L為一鍵。在另一實施例中，L為C(O)。
在一個實施例中，A為CH。在另一實施例中，A為N。A較佳為CH。
R11 較佳為氫或甲基。氫最佳。
R4 較佳為C(R5 )(R6 )(R7 )，且R5 、R6 、R7 、R8 、R9 及R10 為氫。
R1 較佳為視情況經一個C1-6 烷基取代之C4-7 環烷基。在一個更佳實施例中，R1 為視情況經取代之環丁基、環戊基、環己基及環庚基。環戊基最佳。未經取代之環丁基、環戊基、環己基及環庚基亦較佳。
在本發明之另一實施例中，R2Y 為：
在另一實施例中，R2Y 為：
在另一實施例中，R2Y 為：
在另一實施例中，R2Y 為
在另一實施例中，R2Y 為
在另一實施例中，R2Y 為
在另一實施例中，R2Y 為
在另一實施例中，R2Y 為
在一個較佳實施例中，R2Y 為
在一個較佳實施例中，R2Y 為視情況經一個C1-3 烷基取代之
在一個較佳實施例中，R2Y 為視情況經一個C1-3 烷基取代之
在一個較佳實施例中，R2Y 為
在一個較佳實施例中，R2Y 為視情況經一個C1-3 烷基取代之
在一個較佳實施例中，R2Y 為視情況經一個C1-3 烷基取代之
在一個較佳實施例中，R2Y 為
在一個較佳實施例中，R2Y 為
R2Y 較佳未經取代。
本發明之特定化合物包括：環戊基-2-(5-(9-羥基-1,5,7-三甲基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；2-(5-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-(4-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環庚基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；2-(5-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2-[5-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺；7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；2-(5-((1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；及7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
本發明之較佳化合物包括選自由以下組成之群的化合物：7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺7-環戊基-2-[5-((1S,5S)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環丁基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺7-環己基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-4-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(3-側氧基-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-4-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；及7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
本發明之較佳化合物包括選自由以下組成之群的化合物：7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,6aR)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；及7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-5-甲基-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
本發明之較佳化合物包括選自由以下組成之群的化合物：7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；及7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。
術語及定義
如本文所用，術語「烷基」係指具有1至6個碳原子(C1-6 烷基)、3至7個碳原子(C3-7 烷基)、1至4個碳原子(C1-4 烷基)或1至3個碳原子(C1-3 烷基)的完全飽和分支或未分支烴部分。烷基之代表性實例包括(但不限於)甲基、乙基、正丙基、異丙基、正丁基、異丁基、第二丁基、第三丁基、正戊基、1-甲基丁基、2-甲基丁基、3-甲基丁基、3,3-二甲基丙基、己基、2-甲基戊基及其類似基團。
如本文所用，術語「環烷基」係指已經部分或完全氫化且可以單環、雙環、三環或螺環形式存在的非芳族碳環。除非另外指出，否則環烷基係指具有3-14個碳原子的環狀烴基。環烷基亦係指具有3至9個環碳原子或4至7個環碳原子的環狀烴基。例示性單環烴基包括(但不限於)環丙基、環丁基、環戊基、環戊烯基、環己基、環己烯基、環庚基及其類似基團。例示性雙環烴基包括基、吲哚基、六氫吲哚基、四氫萘基、十氫萘基、雙環[2.1.1]己基、雙環[2.2.1]庚基、雙環[2.2.1]庚烯基、6,6-二甲基雙環[3.1.1]庚基、2,6,6-三甲基雙環[3.1.1]庚基、雙環[2.2.2]辛基及其類似基團。例示性三環烴基包括金剛烷基及其類似基團。
「氘」或「D」或「d」係指原子核含有一個質子及一個中子的氫同位素。當特定位置被指定為具有氘時，應瞭解，彼位置之氘豐度大於天然氘豐度(通常為0.015%)。除非另外說明，否則當一個位置被特定指定為「D」或「氘」時，應瞭解該位置的氘豐度大於天然氘豐度。
如本文所用，術語「鹵素」或「鹵基」係指氟、氯、溴及碘。
如本文所用，術語「鹵烷基」係指連接於烷基之碳原子的至少一個氫原子被置換為鹵基(較佳為氟基)的烷基。鹵烷基之實例包括單氟甲基、二氟甲基及三氟甲基；單氯甲基、二氯甲基及三氯甲基；單氟乙基、二氟乙基、三氟乙基、四氟乙基及五氟乙基；以及單氯乙基、二氯乙基、三氯乙基、四氯乙基及五氯乙基。
如本文所用，術語「視情況經取代」表示諸如烷基、環烷基或特定R基團之基團可未經取代或經一或多個如本文所定義之取代基取代。關於某一基團之術語「經取代」表示連接於該基團內之原子的氫原子經置換。應瞭解，術語「經取代」包括以下隱含規定：該取代符合所取代原子及取代基之允許化合價；且該取代產生穩定化合物(亦即不會自發發生轉化(諸如經由重排、環化或消除發生轉化)的化合物)。在某些實施例中，單個原子可經一個以上取代基取代，只要該取代符合該原子的允許化合價。本文中關於各經取代或視情況經取代之基團定義適合取代基。
術語「本發明化合物」(除非另外明確標識)係指式(I)化合物及其鹽，包括該等化合物的醫藥學上可接受之鹽，以及所有立體異構體(包括非對映異構體及對映異構體)、互變異構體及經同位素標記之化合物。溶劑合物及水合物一般被視為本發明化合物之醫藥組合物。
如本文所用，此等方法、流程及實例中所用之符號及約定與當代科學文獻中所用一致，例如Journal of the American Chemical Society 或Journal of Biological Chemistry 。除非另外說明，否則所有起始物質獲自商業供應商且未經進一步純化即使用。特定言之，實例及說明書全文中可使用以下縮寫。
ACN　乙腈
AcOH　乙酸
aq.　水溶液
BnBr　苯甲基溴
boc　第三丁氧羰基
C　攝氏度
cat.　催化劑
CDI　羰基二咪唑
CSA　樟腦磺酸
conc.　濃
Cs2 CO3 　碳酸銫
Da　道爾頓(Dalton)
deg　度
DIBAL、DIBAL-H　二異丁基氫化鋁
DIPEA　二異丙基乙胺
DIPC　N,N'-二異丙基碳化二亞胺
DMF　N,N -二甲基甲醯胺
DMI　1,3-二甲基-2-咪唑啶酮
DMP　戴斯-馬丁高碘烷(Dess-Martin periodinane)
DCC　N,N -二環己基碳化二亞胺
DCE　二氯乙烷
DCM　二氯甲烷
DMAP　4-二甲基胺基吡啶
DMSO　二甲亞碸
EtOAc　乙酸乙酯
EtOH　乙醇
eq　當量
g　氣體
h　小時
HATU　O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N,N,N',N'-四甲基六氟磷酸鹽
HMPA　六甲基磷醯胺
hep　庚烷
HCl　鹽酸
inh.　抑制
imid.　咪唑
K　克耳文(Kelvin)
KHMDS　六甲基二矽烷胺基鉀
K2 CO3 　碳酸鉀
LDA　二異丙基胺基鋰
LiBH4 　硼氫化鋰
LHMDS　六甲基二矽烷胺基鋰
LC　液相層析法
LC/MS　液相層析質譜法
M　莫耳
MeCN　乙腈
MeOH　甲醇
MgSO4 　硫酸鎂
MHz　兆赫
min　分鐘
mol.sieves　分子篩
NaBH4 　硼氫化鈉
N　標準/正常
NMR　核磁共振
Pd/C　鈀/碳
PEG(750)　O-(2-胺基乙基)-O'-甲基聚乙二醇750；NH2 (CH2 CH2 O)n CH3 ；CAS#[80506-64-5]；Fluka 07964；平均MW=750
PS　聚苯乙烯
Py　吡啶
PPM　百萬分率
RP　逆相
RT　室溫
Rt 　滯留時間
s 　固體
satd.　飽和
TBS　第三丁基二甲基矽烷基
TMS　三甲基矽烷基
TBAF　氟化四丁基銨
TBTU　O -苯并三唑-1-基-N,N,N',N' -四甲基四氟硼酸鹽
TLC　薄層層析法
TEA　三乙胺
TFA　三氟乙酸
THF　四氫呋喃
h　小時
min　分鐘
m/z　質荷比
MS　質譜法
NMR　核磁共振
熟練技術人員應瞭解，可製備式(I)化合物之鹽，包括醫藥學上可接受之鹽。如本文所用，術語「鹽」係指本發明化合物之酸加成鹽或鹼加成鹽。術語「醫藥學上可接受之鹽」係指保留本發明化合物之生物有效性及特性的鹽，其通常在生物學或其他方面不會不合需要。因此，本發明另外關於式(I)化合物之鹽，較佳為醫藥學上可接受之鹽。
醫藥學上可接受之酸加成鹽可用無機酸及有機酸形成，例如有乙酸鹽、天冬胺酸鹽、苯甲酸鹽、苯磺酸鹽、溴化物/氫溴酸鹽、碳酸氫鹽/碳酸鹽、硫酸氫鹽/硫酸鹽、樟腦磺酸鹽、氯化物/鹽酸鹽、氯茶鹼鹽、檸檬酸鹽、乙二磺酸鹽、反丁烯二酸鹽、葡庚糖酸鹽、葡糖酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、馬尿酸鹽、氫碘酸鹽/碘化物、羥乙基磺酸鹽、乳酸鹽、乳糖酸鹽、月桂基硫酸鹽、蘋果酸鹽、順丁烯二酸鹽、丙二酸鹽、杏仁酸鹽、甲磺酸鹽、甲基硫酸鹽、萘甲酸鹽、萘磺酸鹽、菸鹼酸鹽、硝酸鹽、十八酸鹽、油酸鹽、乙二酸鹽、棕櫚酸鹽、雙羥萘酸鹽、磷酸鹽/磷酸氫鹽/磷酸二氫鹽、聚半乳糖醛酸鹽、丙酸鹽、硬脂酸鹽、丁二酸鹽、磺基水楊酸鹽、酒石酸鹽、甲苯磺酸鹽及三氟乙酸鹽。
可衍生出鹽之無機酸包括例如鹽酸、氫溴酸、硫酸、硝酸、磷酸及其類似酸。
可衍生出鹽之有機酸包括例如乙酸、丙酸、乙醇酸、乙二酸、順丁烯二酸、丙二酸、丁二酸、反丁烯二酸、酒石酸、檸檬酸、苯甲酸、杏仁酸、甲烷磺酸、乙烷磺酸、甲苯磺酸、磺基水楊酸及其類似酸。
醫藥學上可接受之鹼加成鹽可用無機鹼及有機鹼形成。
可衍生出鹽之無機鹼包括例如銨鹽及週期表第I行至第XII行之金屬。在某些實施例中，鹽係源自鈉、鉀、銨、鈣、鎂、鐵、銀、鋅及銅；尤其適合之鹽包括銨鹽、鉀鹽、鈉鹽、鈣鹽及鎂鹽。
可衍生出鹽之有機鹼包括例如一級、二級及三級胺、經取代之胺(包括天然存在之經取代之胺)、環狀胺、鹼性離子交換樹脂及其類似物。某些有機胺包括異丙胺、苄星青黴素(benzathine)、茶鹼膽酸鹽、二乙醇胺、二乙胺、離胺酸、葡甲胺、哌嗪及緩血酸胺。
可藉由習知化學方法自母體化合物(鹼性或酸性部分)合成本發明之醫藥學上可接受之鹽。一般而言，該等鹽可藉由使此等化合物之游離酸形式與化學計算量之適當鹼(諸如Na、Ca、Mg或K之氫氧化物、碳酸鹽、碳酸氫鹽或其類似物)反應，或藉由使此等化合物之游離鹼形式與化學計算量之適當酸反應來製備。該等反應通常在水中或在有機溶劑中或在兩者之混合物中進行。一般而言，若可行，則需要使用如乙醚、乙酸乙酯、乙醇、異丙醇或乙腈之非水性介質。其他適合的鹽之清單可見於例如以下文獻中：「Remington's Pharmaceutical Sciences」,第20版,Mack Publishing Company,Easton,Pa.,(1985)；以及Stahl及Wermuth之「Handbook of Pharmaceutical Salts: Properties,Selection,and Use」(Wiley-VCH,Weinheim,Germany,2002)。
式(I)化合物可含有一或多個不對稱中心(亦稱為對掌性中心)，且因此可以個別對映異構體、非對映異構體或其他立體異構形式或其混合物形式存在。對掌性中心(諸如對掌性碳原子)亦可存在於取代基(諸如烷基)中。若未指明式(I)或本文所示之任何化學結構中存在之對掌性中心的立體化學性，則該結構欲涵蓋任何立體異構體或其混合物。因此，含有一或多個對掌性中心之式(I)化合物可以外消旋混合物、對映異構增濃的混合物或對映異構純的個別立體異構體形式使用。
如本文所用，術語「異構體」係指具有相同分子式但原子排列及構型不同的不同化合物。亦如本文所用，術語「光學異構體」或「立體異構體」係指本發明之既定化合物可能存在的多種立體異構構型中之任一者且包括幾何異構體。應瞭解，取代基可連接於碳原子對掌性中心處。因此，本發明包括化合物之對映異構體、非對映異構體或外消旋物。「對映異構體」為彼此呈不可重疊之鏡像關係的一對立體異構體。一對對映異構體之1:1混合物為「外消旋」混合物。適當時，該術語用於指示外消旋混合物。「非對映異構體」為具有至少兩個不對稱原子，但彼此不呈鏡像關係的立體異構體。根據Cahn-lngold-Prelog R-S系統指定絕對立體化學。當化合物為純對映異構體時，各對掌性碳處之立體化學可以R 或S 來指定。當繪示化合物或取代基之化學結構時，亦可藉由使用粗楔型鍵或陰影線指明立體化學性。絕對構型未知的經解析之化合物可視其在鈉D線波長下旋轉平面偏振光的方向(右旋或左旋)而定指定為(+)或(-)。本文所述之某些化合物含有一或多個不對稱中心或軸且因此可能產生對映異構體、非對映異構體及可根據絕對立體化學確定為(R )-或(S )-之其他立體異構形式。本發明欲包括所有該等可能之異構體，包括外消旋混合物、光學純形式及中間混合物。
光學活性(R )-及(S )-異構體可使用對掌性合成組元或對掌性試劑製備，或使用習知技術解析。任何所得的終產物或中間物之外消旋物可藉由已知方法解析成光學對映體，例如藉由分離用光學活性酸或鹼獲得之其非對映異構鹽，及釋放光學活性酸性或鹼性化合物來達成。詳言之，因而可採用鹼性部分將本發明化合物解析成其光學對映體，例如藉由使與光學活性酸(例如酒石酸、二苯甲醯基酒石酸、二乙醯基酒石酸、二-O,O' -對甲苯甲醯基酒石酸、杏仁酸、蘋果酸或樟腦-10-磺酸)形成之鹽分步結晶來達成。亦可藉由對掌性層析法，例如使用對掌性吸附劑之高壓液相層析法(HPLC)來解析外消旋產物。
若本發明化合物含有雙鍵，則取代基可能為E或Z構型。若化合物含有經雙取代之環烷基，則環烷基取代基可能具有順式或反式構型。亦意欲包括所有互變異構形式。
本發明化合物之任何不對稱原子(例如碳或其類似物)可呈外消旋或對映異構增濃形式，例如為(R )-、(S )-或(R,S )-構型。在某些實施例中，各不對稱原子在(R )-構型或(S )-構型中具有至少50%對映異構過量、至少60%對映異構過量、至少70%對映異構過量、至少80%對映異構過量、至少90%對映異構過量、至少95%對映異構過量或至少99%對映異構過量。若有可能，則具有不飽和鍵之原子處的取代基可以順式(Z )或反式(E )形式存在。
任何所得的異構體之混合物可基於組分之物理化學差異，例如藉由層析法及/或分步結晶而分離成純的或實質上純的幾何或光學異構體、非對映異構體、外消旋物。
經較重同位素(特定言之為氘，亦即2 H或D)取代可因較大代謝穩定性而提供某些治療優勢，例如活體內半衰期增加或劑量需求降低或治療指數有改良。應瞭解，此情形中之氘視為本發明化合物之取代基。該種較重同位素(特定言之為氘)的濃度可由同位素增濃因子確定。如本文所用之術語「同位素增濃因子」意謂指定同位素之同位素豐度與天然豐度之間的比率。若本發明化合物中之取代基經指示為氘，則該化合物關於各指定氘原子的同位素增濃因子為至少3500(各指定氘原子處有52.5%氘併入)、至少4000(60%氘併入)、至少4500(67.5%氘併入)、至少5000(75%氘併入)、至少5500(82.5%氘併入)、至少6000(90%氘併入)、至少6333.3(95%氘併入)、至少6466.7(97%氘併入)、至少6600(99%氘併入)或至少6633.3(99.5%氘併入)。
除了本發明例示之含氘化合物之外，本文中給出之任何式亦意欲表示化合物之未經標記形式以及同位素標記形式。除一或多個原子經置換為具有選定原子質量或質量數之原子以外，經同位素標記之化合物具有由本文中給出之化學式所示的結構。可併入本發明化合物中之同位素的實例包括氫、碳、氮、氧、磷、氟及氯之同位素，分別諸如2 H、3 H、11 C、13 C、14 C、15 N、18 F、31 P、32 P、35 P、36 Cl、125 I。本發明包括如本文所定義之多種同位素標記化合物，例如存在放射性同位素(諸如3 H、13 C及14 C)之化合物。該等同位素標記化合物適用於代謝研究(使用14 C)、反應動力學研究(使用例如2 H或3 H)、偵測或成像技術(諸如正電子發射斷層攝影法(PET)或單光子放射電腦斷層攝影術(SPECT)，包括藥物或受質組織分佈檢定)，或患者之放射性治療。詳言之，18 F或經標記化合物可尤其為PET或SPECT研究所需。本發明之經同位素標記的化合物及其前藥一般可藉由以易獲得之同位素標記試劑代替未經同位素標記之試劑進行下文所述之流程或實例及製備中所揭示之程序來製備。
本發明之經同位素標記之化合物一般可藉由彼等熟習此項技術者已知之習知技術，或藉由與在隨附實例及化合物製備中所描述類似之方法，使用適當之經同位素標記之試劑代替先前採用之未標記試劑來製備。
此外，本發明化合物(包括其鹽)亦可以其水合物形式獲得，或包括用於其結晶之其他溶劑。本發明化合物可固有地或有意地與醫藥學上可接受之溶劑(包括水)形成溶劑合物；因此，可預期本發明涵蓋溶劑化及未溶劑化形式。術語「溶劑合物」係指本發明化合物(包括其醫藥學上可接受之鹽)與一或多個溶劑分子的分子複合物。該等溶劑分子為醫藥技術中通常使用且已知對接受者無害的溶劑分子，例如水、乙醇及其類似物。術語「水合物」係指溶劑分子為水的複合物。此外，本發明的醫藥學上可接受之溶劑合物包括結晶中之溶劑可能經同位素取代(例如，D2 O、d6 -丙酮、d6 -DMSO)的溶劑合物。
本發明亦提供本發明化合物之前藥，其可在活體內轉化成本發明化合物。前藥為活性或非活性化合物，該前藥在投與個體後可經由活體內生理作用(諸如水解、代謝及其類似生理作用)而以化學方式改變成本發明化合物。與製造及使用前藥有關之適宜性及技術為熟習此項技術者所熟知。前藥在概念上可分成互不排斥的兩類，即生物前驅物前藥及載劑前藥。參看The Practice of Medicinal Chemistry ,第31-32章(Wermuth編,Academic Press,San Diego,Calif.,2001)。一般而言，生物前驅物前藥為與相應活性藥物化合物相比不具有活性或具有低活性之化合物，其含有一或多個保護基且可藉由新陳代謝或溶劑分解而轉化成活性形式。活性藥物形式及任何釋放之代謝產物皆應具有可接受之低毒性。
載劑前藥為含有轉運部分之藥物化合物，其例如改良吸收及/或定位遞送至作用位點之模式。對於該種載劑前藥理想的是，藥物部分與轉運部分之間的鍵為共價鍵，前藥不具活性或活性比藥物化合物低，且任何釋放之轉運部分令人可接受的是無毒性。對於意欲轉運部分增強吸收之前藥而言，轉運部分之釋放通常應為快速的。在其他情形下，需要利用提供緩慢釋放之部分，例如，某些聚合物或其他部分，諸如環糊精。載劑前藥可例如用於改良一或多種以下性質：增加之親脂性、增加之藥理學效應持續時間、增加之位點特異性、降低之毒性及不良反應，及/或藥物調配物之改良(例如穩定性、水溶性、抑制不合意之感官或生物化學特性)。例如，可藉由(a)羥基與親脂性羧酸(例如具有至少一個親脂性部分之羧酸)、或(b)羧酸基團與親脂性醇(例如具有至少一個親脂性部分之醇，例如脂族醇)之酯化反應來增加親脂性。
例示性前藥為例如游離羧酸之酯、及硫醇之S -醯基衍生物、及醇類或酚類之O -醯基衍生物，其中醯基具有如本文所定義之含義。適合的前藥通常為可在生理條件下藉由溶劑分解作用轉化成母體羧酸的醫藥學上可接受之酯衍生物，例如低碳烷基酯、環烷基酯、低碳烯基酯、苯甲酯、單取代或二取代之低碳烷基酯，諸如α-(胺基、單或二低碳烷基胺基、羧基、低碳烷氧基羰基)-低碳烷基酯、α-(低碳烷醯基氧基、低碳烷氧基羰基或二-低碳烷基胺基羰基)-低碳烷基酯，諸如特戊醯氧基甲基酯，及其習知用於此項技術中之類似物。此外，胺已經遮蔽而呈經芳基羰氧基甲基取代之衍生物形式，其在活體內由酯酶裂解，從而釋放游離藥物及甲醛(Bundgaard,J. Med. Chem. 2503(1989))。此外，含有酸性NH基團之藥物(諸如咪唑、醯亞胺、吲哚及其類似物)已經N-醯氧基甲基遮蔽(Bundgaard,Design of Prodrugs ,Elsevier(1985))。羥基已經遮蔽而呈酯及醚形式。EP 039,051(Sloan及Little)揭示曼尼希鹼(Mannich-base)異羥肟酸前藥、其製備及用途。
組合物
在另一態樣中，本發明提供一種醫藥組合物，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及醫藥學上可接受之載劑。可針對特定投藥途徑(諸如經口投藥、非經腸投藥及經直腸投藥等)調配醫藥組合物。此外，本發明之醫藥組合物可製成固體形式(包括(但不限於)膠囊、錠劑、藥丸、顆粒、散劑或栓劑)或液體形式(包括(但不限於)溶液、懸浮液或乳液)。該等醫藥組合物可經受習知醫藥操作(諸如滅菌)及/或可含有習知惰性稀釋劑、潤滑劑或緩衝劑以及佐劑(諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑、乳化劑及緩衝劑等)。
通常，醫藥組合物為錠劑或明膠膠囊，其包含活性成份以及以下各物：a)稀釋劑，例如乳糖、右旋糖、蔗糖、甘露糖醇、山梨糖醇、纖維素及/或甘胺酸；b)潤滑劑，例如矽石、滑石、硬脂酸、其鎂鹽或鈣鹽及/或聚乙二醇；對於錠劑而言還包含：c)黏合劑，例如矽酸鎂鋁、澱粉糊、明膠、黃蓍膠、甲基纖維素、羧甲基纖維素鈉及/或聚乙烯吡咯啶酮；若需要，則包含：d)崩解劑，例如澱粉、瓊脂、海藻酸或其鈉鹽或泡騰混合物；及/或e)吸收劑、著色劑、調味劑及甜味劑。
錠劑可根據此項技術中已知之方法包覆薄膜衣或腸衣。適於經口投與之組合物包括有效量之本發明化合物，其呈錠劑、口含錠、水性或油性懸浮液、可分散散劑或顆粒、乳液、硬或軟膠囊、或糖漿或酏劑之形式。意欲經口使用之組合物係根據醫藥組合物製造技術中已知之任何方法來製備，且該等組合物可含有一或多種選自由甜味劑、調味劑、著色劑及防腐劑組成之群的助劑以提供醫藥學上精緻及可口的製劑。錠劑可含有活性成分與適於製造錠劑之醫藥學上可接受之無毒賦形劑混合。此等賦形劑為例如惰性稀釋劑，諸如碳酸鈣、碳酸鈉、乳糖、磷酸鈣或磷酸鈉；成粒劑及崩解劑，例如玉米澱粉或海藻酸；黏合劑，例如澱粉、明膠或阿拉伯膠(acacia)；及潤滑劑，例如硬脂酸鎂、硬脂酸或滑石。錠劑未經包覆或藉由已知技術加以包覆以延遲在胃腸道中崩解及吸收，且藉此在較長時段內提供持續作用。舉例而言，可採用延時材料，諸如單硬脂酸甘油酯或二硬脂酸甘油酯。適於經口使用之調配物可呈活性成份與例如碳酸鈣、磷酸鈣或高嶺土之惰性固體稀釋劑混合的硬明膠膠囊形式，或呈活性成份與水或例如花生油、液體石蠟或橄欖油之油介質混合的軟明膠膠囊形式。
某些可注射組合物為等張水溶液或懸浮液，且栓劑宜由脂肪乳液或懸浮液製備。該等組合物可經滅菌及/或含有佐劑，諸如防腐劑、穩定劑、濕潤劑或乳化劑、溶解促進劑、用於調節滲透壓之鹽及/或緩衝劑。此外，其亦可含有其他治療上有價值之物質。該等組合物分別根據習知混合、粒化或塗覆法來製備，且含有約0.1-75%或含有約1-50%活性成分。
適於經皮施用之組合物包括有效量之本發明化合物及適合的載劑。適於經皮傳遞之載劑包括藥理學上可接受之可吸收溶劑，以有助於通過宿主皮膚。舉例而言，經皮裝置呈繃帶形式，其包含襯底部件、含有化合物與視情況選用之載劑的儲集器、視情況選用之用於在長期時段內依控制且預定之速率向宿主皮膚傳遞化合物之速率控制屏障、及將該裝置固定至皮膚之構件。
適於局部施用(例如施用於皮膚及眼睛)之組合物，包括水溶液、懸浮液、軟膏、乳霜、凝膠或可噴霧調配物，例如藉由噴霧劑或其類似物遞送。該等局部遞送系統將尤其適於經皮施用，例如用於治療皮膚癌，例如以防曬霜、洗劑、噴霧劑及其類似物之形式用於預防性用途。其因而特別適用於此項技術中熟知之局部(包括化妝品)調配物。該等物質可能含有增溶劑、穩定劑、張力增強劑、緩衝劑及防腐劑。
如本文所用之局部施用法亦與吸入或鼻內施用有關。其宜呈乾粉末形式(單獨、呈混合物形式(例如與乳糖之乾摻合物)或呈混合組分粒子形式(例如與磷脂一起))，自乾粉末吸入器遞送，或呈氣溶膠噴霧形式，自加壓容器、泵、噴霧器、霧化器或氣霧器，使用或不使用適合的推進劑來遞送。
本發明進一步提供包含本發明化合物作為活性成份之無水醫藥組合物及劑型，此係因為水可能促進一些化合物之降解。本發明之無水醫藥組合物及劑型可使用無水或含低水分之成份且在低水分或低濕度條件下製備。可製備無水醫藥組合物且加以儲存以至於維持其無水性質。因此，無水組合物使用已知用於防止暴露於水之材料來包裝以至於其可包括在適合配方之套組中。適合的包裝之實例包括(但不限於)密封之箔、塑膠、單位劑量容器(例如小瓶)、發泡包裝及條狀包裝。
本發明進一步提供包含一或多種可使作為活性成份的本發明化合物之降解速率降低之助劑的醫藥組合物及劑型。本文中稱為「穩定劑」之該等助劑包括(但不限於)諸如抗壞血酸之抗氧化劑、pH值緩衝劑或鹽緩衝劑等。
使用方法
本發明化合物為CDK4/6之抑制劑且因此可能夠治療潛在病理學(至少部分)由CDK4/6介導的疾病。該等疾病包括癌症及存在有細胞增殖、細胞凋亡或分化異常現象的其他疾病。
因此，本發明化合物可適用於治療RB+ve(視網膜胚細胞瘤蛋白陽性)腫瘤，包括在Ras、Raf、生長因子受體中具有突變或過表現有生長因子受體之腫瘤。本發明化合物亦可適用於治療具有CDK4及CDK6基因擴增的腫瘤以及過表現細胞週期素依賴性激酶之細胞週期素搭配物的腫瘤。本發明化合物亦可適用於治療RB-ve腫瘤。
本發明化合物亦可適用於治療具有會激活CDK4/6激酶活性之遺傳畸變的腫瘤。此等腫瘤包括(但不限於)具有D細胞週期素移位之癌症，諸如套細胞淋巴瘤及多發性骨髓瘤；具有D細胞週期素擴增之癌症，諸如乳癌及鱗狀細胞食道癌；具有CDK4擴增之癌症，諸如脂肉瘤；具有CDK6擴增或過表現之癌症，諸如T細胞淋巴瘤；及具有p16失活現象之癌症，諸如黑素瘤、非小細胞肺癌及胰腺癌。
本發明化合物可適用於治療在D細胞週期素之上游調節因子中具有遺傳畸變之癌症，若該缺陷導致D細胞週期素豐度增加，則亦可考慮用於治療。此等癌症包括(但不限於)具有FLT3活化現象之急性骨髓白血病；具有Her2/neu過表現、ER依賴性或三陰性表型之乳癌；具有MAPK、PI3K或WNT路徑之活化突變之結腸癌；具有MAPK路徑之活化突變之黑素瘤；具有EGFR路徑之活化畸變之非小細胞肺癌；及具有MAPK路徑之活化畸變(包括K-ras突變)之胰腺癌。
可用本發明化合物治療之癌症的實例包括(但不限於)癌瘤，例如膀胱、乳房、結腸(例如結腸直腸癌，諸如結腸腺癌及結腸腺瘤)、腎臟、表皮、肝臟、肺(例如腺癌、小細胞肺癌及非小細胞肺癌)、食道、膽囊、卵巢、胰腺(例如外分泌胰腺癌)、胃、子宮頸、甲狀腺、鼻、頭及頸、前列腺及皮膚(例如鱗狀細胞癌)之癌瘤。可用本發明化合物治療之癌症的其他實例包括淋巴系統造血性腫瘤，例如白血病、急性淋巴球性白血病、套細胞淋巴瘤、慢性淋巴球性白血病、B細胞淋巴瘤(諸如彌漫型大B細胞淋巴瘤)、T細胞淋巴瘤、多發性骨髓瘤、霍奇金氏淋巴瘤(Hodgkin's lymphoma)、非霍奇金氏淋巴瘤、毛狀細胞淋巴瘤及伯基特氏淋巴瘤(Burkett's lymphoma)；骨髓系統造血性腫瘤，例如急性及慢性骨髓性白血病、骨髓發育不良症候群及前髓細胞白血病。其他癌症包括甲狀腺濾泡癌；間葉細胞源性腫瘤，例如纖維肉瘤或橫紋肌肉瘤；中樞或周邊神經系統之腫瘤，例如星形細胞瘤、神經母細胞瘤、神經膠質瘤或神經鞘瘤；黑素瘤；精原細胞瘤；畸胎上皮癌；骨肉瘤；著色性乾皮病；視網膜胚細胞瘤；角化棘皮瘤；甲狀腺濾泡癌；及卡堡氏肉瘤(Kaposi's sarcoma)。
癌症的一個群包括人類乳癌(例如原發性乳房腫瘤、淋巴結陰性乳癌、侵襲性乳腺管癌、非子宮內膜樣乳癌)；及子宮內膜癌。具有CDK4/6抑制活性之化合物可能具有特別治療益處的另一癌症子集包含多形性膠質母細胞瘤、T細胞ALL、肉瘤、家族性黑素瘤及黑素瘤。
CDK4/6抑制劑亦可適用於治療病毒感染，例如疱疹病毒、痘病毒、EB病毒(Epstein-Barr virus)、辛德比病毒(Sindbis virus)、腺病毒、HIV、HPV、HCV及HCMV；在HIV感染個體中預防AIDS產生；且可適用於治療以下疾病：慢性發炎疾病，例如全身性紅斑性狼瘡症、自體免疫介導之絲球體腎炎、類風濕性關節炎、牛皮癬、發炎性腸病及自體免疫糖尿病；心血管疾病，例如心肥大、再狹窄、動脈粥樣硬化；神經退化性病症，例如阿茲海默氏疾病(Alzheimer's disease)、AIDS相關之癡呆、帕金森氏病(Parkinson's disease)、肌萎縮性側索硬化、色素性視網膜炎、脊髓性肌萎縮及小腦退化；絲球體腎炎；骨髓發育不良症候群、缺血性損傷相關性心肌梗塞、中風及再灌注損傷、心律不整、動脈粥樣硬化、毒素誘發或酒精相關之肝病、血液學疾病，例如慢性貧血及再生不全性貧血；肌肉骨骼系統退化性疾病，例如骨質疏鬆症及關節炎、阿司匹靈敏感性鼻竇炎、囊腫性纖維化、多發性硬化症、腎病、眼科疾病，包括年齡相關性黃斑變性、葡萄膜炎及癌性疼痛。
本發明之治療方法包含向有需要之個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。本發明之個別實施例包括藉由向有需要之個體投與有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽來治療任一種上述病症或疾病的方法。
術語本發明化合物之「治療有效量」係指本發明化合物之量將引起個體之生物或醫學反應，例如降低或抑制酶或蛋白質活性，或改善症狀、緩解病狀、減緩或延遲疾病進展，或預防疾病等。在一個非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指本發明化合物之量當投與個體時可有效達成以下效果：(1)至少部分緩解、抑制、預防及/或改善(i)由CDK4/6介導、或(ii)與CDK4/6活性有關、或(iii)特徵在於CDK4/6活性(正常或異常)的病狀或病症或疾病；或(2)降低或抑制CDK4/6活性；或(3)降低或抑制CDK4/6表現。在另一非限制性實施例中，術語「治療有效量」係指本發明化合物之量當投與細胞或組織或非細胞生物物質或介質時可有效於至少部分降低或抑制CDK4/6活性或至少部分降低或抑制CDK4/6表現。如以上實施例中關於CDK4/6所說明的術語「治療有效量」之含義亦以相同方式適用於任何其他相關蛋白質/肽/酶。
如本文所用，術語「個體」係指動物。動物通常為哺乳動物。個體亦係指例如靈長類動物(例如男性或女性人類)、牛、綿羊、山羊、馬、犬、貓、兔、大鼠、小鼠、魚、鳥及其類似物。在某些實施例中，個體為靈長類動物。在另一實施例中，個體為人類。
如本文所用，術語「治療」任何疾病或病症在一個實施例中，係指改善疾病或病症(亦即減緩或阻止或減輕疾病或其至少一種臨床症狀的發展)。在另一實施例中，「治療」係指減輕或改善至少一個身體參數，包括患者無法辨別之身體參數。在另一實施例中，「治療」係指在身體上(例如穩定可辨別之症狀)、生理上(例如穩定身體參數)或兩方面調節疾病或病症。在另一實施例中，「治療」係指預防或延遲疾病或病症的發作或發展或進展。
如本文所用，若個體將會在生物學、醫學或生活品質上受益於治療，則該個體「需要」該治療。
對於約50-70 kg之個體，本發明之醫藥組合物或組合可呈具有約1-1000 mg活性成分、或約1-500 mg、或約1-250 mg、或約1-150 mg、或約0.5-100 mg、或約1-50 mg活性成分的單位劑量。化合物、醫藥組合物或其組合之治療有效劑量視個體種類、體重、年齡及個別狀況、所治療之病症或疾病或其嚴重程度而定。具有普通技能之醫師、臨床醫師或獸醫可容易地確定為預防、治療病症或疾病或抑制病症或疾病進展所必需的各活性成分之有效量。
宜使用哺乳動物(例如小鼠、大鼠、犬、猴)或其分離之器官、組織及標本在活體外及活體內測試中可證明上述劑量特性。本發明化合物可以溶液(例如水溶液)形式活體外施用，及例如以懸浮液或水溶液形式經腸、非經腸、宜經靜脈活體內施用。活體外劑量可能介於約10-3 莫耳濃度與10-9 莫耳濃度之間。視投藥途徑而定，活體內治療有效量可介於約0.1-500 mg/kg之間或介於約1-100 mg/kg之間。
本發明之一個實施例包括一種調節個體之CDK4/6活性之方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一實施例為一種治療有需要之個體的由CDK4/6介導之病症或疾病的方法，該方法包含向該個體投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一實施例為一種治療有需要之個體的由CDK4/6介導之病症或疾病的方法，該方法包含投與治療有效量之式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其中該病症或疾病係選自由具有會激活CDK4/6激酶活性之遺傳畸變的癌瘤組成之群。此等疾病或病症包括(但不限於)具有D細胞週期素移位之癌症，諸如套細胞淋巴瘤及多發性骨髓瘤；具有D細胞週期素擴增之癌症，諸如乳癌及鱗狀細胞食道癌；具有CDK4擴增之癌症，諸如脂肉瘤；具有CDK6擴增或過表現之癌症，諸如T細胞淋巴瘤；及具有p16失活現象之癌症，諸如黑素瘤、非小細胞肺癌及胰腺癌。
本發明之另一實施例為式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於治療由CDK4介導之病症或疾病。
本發明之另一實施例為式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於治療個體的由CDK4介導之病症或疾病，其中該病症或疾病係選自由具有會激活CDK4/6激酶活性之遺傳畸變的癌瘤組成之群。此等病症或疾病包括(但不限於)具有D細胞週期素移位之癌症，諸如套細胞淋巴瘤及多發性骨髓瘤；具有D細胞週期素擴增之癌症，諸如乳癌及鱗狀細胞食道癌；具有CDK4擴增之癌症，諸如脂肉瘤；具有CDK6擴增或過表現之癌症，諸如T細胞淋巴瘤；及具有p16失活現象之癌症，諸如黑素瘤、非小細胞肺癌及胰腺癌。
本發明之另一實施例為式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用作藥物。
本發明之另一實施例為式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製造用以治療由CDK4/6介導之病症或疾病的藥物，其中該病症或疾病係選自由具有會激活CDK4/6激酶活性之遺傳畸變的癌瘤組成之群。此等病症或疾病包括(但不限於)具有D細胞週期素移位之癌症，諸如套細胞淋巴瘤及多發性骨髓瘤；具有D細胞週期素擴增之癌症，諸如乳癌及鱗狀細胞食道癌；具有CDK4擴增之癌症，諸如脂肉瘤；具有CDK6擴增或過表現之癌症，諸如T細胞淋巴瘤；及具有p16失活現象之癌症，諸如黑素瘤、非小細胞肺癌及胰腺癌。
組合
本發明化合物可與一或多種其他治療劑同時，或在其之前或之後投與。本發明化合物可藉由相同或不同投藥途徑分別投與，或與其他藥劑在同一醫藥組合物中一起投與。
在一個實施例中，本發明提供一種產品，其包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及至少一種其他治療劑作為組合製劑，以同時、各別或依序用於療法中。在一個實施例中，療法為由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀的治療。以組合製劑形式提供之產品包括在同一醫藥組合物中同時包含本發明化合物及其他治療劑，或包含單獨形式(例如呈套組形式)的本發明化合物及其他治療劑的組合物。
在一個實施例中，本發明提供一種包含式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽及另一治療劑的醫藥組合物。視情況而言，醫藥組合物可包含如上所述之醫藥學上可接受之賦形劑。
在一個實施例中，本發明提供一種包含兩種或兩種以上各別醫藥組合物的套組，其中至少一者含有式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽。在一個實施例中，套組包含各別地用於保留該等組合物之構件，諸如容器、分隔之小瓶或分隔之鋁箔封包。該種套組之實例為通常用於封裝錠劑、膠囊及其類似物之發泡包裝。
本發明之套組可用於例如經口及非經腸投與不同劑型，以不同劑量間隔投與各別組合物，或相對於彼此滴定各別組合物。為了有助於順應性，本發明套組通常包含關於投藥之說明書。
在本發明之組合療法中，本發明化合物及另一治療劑可由相同或不同製造商製造及/或調配。此外，本發明化合物及其他治療劑可一起(i)在向醫師推廣組合產品之前(例如在套組包含本發明化合物及另一治療劑的情形中)；(ii)在即將投與之前由醫師自己(或在醫師指導下)；(iii)例如在依序投與本發明化合物與另一治療劑期間由患者自己帶入組合療法中。
因此，本發明提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於治療由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀，其中該藥物有備於與另一治療劑一起投與。本發明亦提供另一治療劑之用途，其係用於治療由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀，其中該藥物與本發明化合物一起投與。
本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀的方法中，其中式(I)化合物有備於與另一治療劑一起投與。本發明亦提供另一治療劑，其係用於治療由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀的方法中，其中該另一治療劑有備於與式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽一起投與。本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽，其係用於治療由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀的方法中，其中式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽與另一治療劑一起投與。本發明亦提供另一治療劑，其係用於治療由CDK4/6抑制介導之疾病或病狀的方法中，其中該另一治療劑與式(I)化合物一起投與。
本發明亦提供式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於治療由CDK4/6介導之疾病或病狀，其中患者先前(例如24小時內)已用另一治療劑治療。本發明亦提供另一治療劑之用途，其係用於治療由CDK4/6介導之疾病或病狀，其中患者先前(例如24小時內)已用式(I)化合物或其醫藥學上可接受之鹽治療。
在一個實施例中，另一治療劑係選自除本發明化合物或其鹽之外的消炎劑、抗增殖劑、化學治療劑、免疫抑制劑、抗癌劑、細胞毒性劑或激酶抑制劑。可與本發明化合物組合投與之藥劑的其他實例包括(但不限於)PTK抑制劑；環孢靈A；CTLA4-Ig；選自抗ICAM-3、抗IL-2受體、抗CD45RB、抗CD2、抗CD3、抗CD4、抗CD80、抗CD86及單株抗體OKT3之抗體；阻斷CD40與gp39之間的相互作用之藥劑；由CD40及gp39構成之融合蛋白；NF-κ B功能之抑制劑；非類固醇消炎藥；類固醇；金化合物；抗增殖劑；FK506；黴酚酸嗎啉乙酯(mycophenolate mofetil)；細胞毒性藥物；TNF-α抑制劑；抗TNF抗體或可溶性TNF受體；雷帕黴素(rapamycin)；mTor抑制劑；來氟米特(leflunimide)；環加氧酶-2抑制劑；太平洋紫杉醇；順鉑(cisplatin)；卡鉑(carboplatin)；小紅莓(doxorubicin)、洋紅黴素(carminomycin)；道諾黴素(daunorubicin)；胺基蝶呤(aminopterin)；甲胺喋呤(methotrexate)；胺甲嘌呤(methopterin)；絲裂黴素C；海鞘素743(ecteinascidin 743)；波弗黴素(porfiromycin)；5-氟尿嘧啶；6-巰基嘌呤；吉西他濱(gemcitabine)；胞嘧啶阿拉伯糖(cytosine arabinoside)；鬼臼毒素(podophyllotoxin)；依託泊苷(etoposide)；磷酸依託泊苷；替尼泊甙(teniposide)；美法侖(melphalan)；長春鹼(vinblastine)；長春新鹼(vincristine)；異長春鹼(leurosidine)；埃坡黴素(epothilone)；長春地辛(vindesine)；洛諾生(leurosine)；B-Raf抑制劑；MEK抑制劑；PI3K抑制劑；HSP90抑制劑；CDK1抑制劑；CDK2抑制劑；CDK5抑制劑；CDK7抑制劑；CDK8抑制劑；CDK9抑制劑；EGFR抑制劑；FGFR抑制劑；PDGFR抑制劑；Her2/neu抑制劑；FLT3抑制劑；雄激素拮抗劑；糖皮質激素及妊娠素受體；SMO抑制劑；WNT抑制劑；Bcl抑制劑；IAP抑制劑；Mcl抑制劑；MDM2抑制劑；p52抑制劑；蛋白體抑制劑(Velcade)或其衍生物。
可提供特定治療益處之特定個別組合包括用mTOR抑制劑(諸如依維莫司(Everolimus))共治療套細胞淋巴瘤或胰腺癌。
本發明化合物亦可與其他藥劑(例如為或不為本發明化合物的其他蛋白激酶抑制劑)組合用於治療個體之蛋白激酶相關之病症。術語「組合」意謂呈一個單位劑型之固定組合；或由用於組合投與之各部分構成的套組，其中本發明化合物與組合搭配物可同時獨立投與或在特定而言允許組合搭配物顯示協同(例如增效)作用的時間間隔內分別投與；或其任何組合。
本發明化合物可與除式I化合物或其醫藥學上可接受之鹽之外的消炎劑、抗增殖劑、化學治療劑、免疫抑制劑、抗癌劑、細胞毒性劑或激酶抑制劑一起同時或依序投與。可與本發明化合物組合投與之藥劑的其他實例包括(但不限於)PTK抑制劑；環孢靈A；CTLA4-Ig；選自抗ICAM-3、抗IL-2受體、抗CD45RB、抗CD2、抗CD3、抗CD4、抗CD80、抗CD86及單株抗體OKT3之抗體；阻斷CD40與gp39之間的相互作用之藥劑；由CD40及gp39構成之融合蛋白；NF-κB功能之抑制劑；非類固醇消炎藥；類固醇；金化合物；抗增殖劑；FK506；黴酚酸嗎啉乙酯；細胞毒性藥物；TNF-α抑制劑；抗TNF抗體或可溶性TNF受體；雷帕黴素；來氟米特；環加氧酶-2抑制劑；太平洋紫杉醇；順鉑；卡鉑；小紅莓、洋紅黴素；道諾黴素；胺基蝶呤；甲胺喋呤；胺甲嘌呤；絲裂黴素C；海鞘素743；波弗黴素；5-氟尿嘧啶；6-巰基噤呤；吉西他濱；胞嘧啶阿拉伯糖；鬼臼毒素；依託泊苷；磷酸依託泊苷；替尼泊甙；美法侖；長春鹼；長春新鹼；異長春鹼；埃坡黴素；長春地辛；洛諾生或其衍生物。
本發明化合物及任何額外藥劑可調配成各別劑型。或者，為了減少向患者投與之劑型數目，本發明化合物及任何額外藥劑可以任何組合調配於一起。舉例而言，本發明化合物抑制劑可調配成一個劑型，且可同時調配額外藥劑而呈另一劑型。可在同一時間或不同時間投與任何各別劑型。
或者，本發明組合物包含如本文所述之額外藥劑。各組分可存在於個別組合物、組合組合物或單個組合物中。
一般合成程序及中間物
一般N-C偶合程序1
在適當反應容器中組合結構1之化合物(1當量)及一般結構2之化合物(1當量)於適當溶劑(諸如(但不限於)二噁烷)中。向此所得溶液中添加乙酸鈀(II)(0.1當量)、配位體(諸如BINAP、XPhos或XantPhos)(0.15當量)及碳酸銫(1.5當量)。接著輕緩地鼓入氮氣，使其通過反應混合物(約5至10分鐘)。接著使用油浴或微波加熱所得反應混合物達到約100至130℃持續適當時間，其中TLC或HPLC MS分析指示反應完成。將反應物自熱源移開且使其冷卻。接著藉由添加適當溶劑(諸如二氯甲烷或乙酸乙酯)處理混合物。藉由過濾移除不溶物質，且用水萃取有機濾液。對水相進行反萃取。合併有機相，經硫酸鈉或硫酸鎂乾燥，過濾且濃縮成殘餘物。藉由矽膠層析法使用適當移動相純化粗殘餘物，產生所要中間物或式(I)化合物。
硝基還原程序1
向適當反應容器中裝入結構3之化合物。使用適當溶劑(諸如甲醇、乙酸乙酯、四氫呋喃或此等溶劑之混合物)溶解結構3之化合物。向此所得混合物中且在氮氣流下以結構3的5至10莫耳%添加催化劑(諸如鈀/碳或氫氧化鈀(碳或適合支撐物上的5至20%金屬含量)。接著淨化所得混合物且在氫氣氛圍下攪拌。根據TLC或LCMS所測定在所有起始物質均已轉化成產物之後，自氫氣源移開反應容器且以氮氣淨化以移除殘餘氫氣。反應混合物在氮氣流下經矽藻土墊過濾，且以額外量之溶劑(諸如二氯甲烷或甲醇)洗滌。合併濾液且濃縮成殘餘物。在真空下乾燥殘餘物直至恆定重量。所得材料直接用於下一反應中，或藉由再結晶或矽膠層析法純化，接著用於下一反應中。
製備式1之醯胺的程序
使用以下一般程序使結構5之羧酸與胺偶合而形成結構6之相應醯胺。
一般醯胺形成方法1
向羧酸(1.01 mmol)於DMF(5 mL)中之溶液中添加O -(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N' -四甲基六氟磷酸鹽(HBTU，580 mg，1.53 mmol，1.5當量)及N,N -二異丙基乙胺(0.55 mL，3.0當量)，且在室溫下攪拌所得混合物約5分鐘。向所得混合物中添加胺(1.18 mmol，1.1當量)。根據TLC或LCMS所判斷，在室溫下攪拌所得混合物適當時間以完成反應，接著以乙酸乙酯稀釋且以0.5 M HCl、水依序洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。所要材料未經進一步純化即直接用於下一步驟，或藉由矽膠層析法使用適當移動相加以純化，接著直接用於下一反應。
一般醯胺形成方法2
向羧酸(呈含5當量LiCl之鹽形式)(1 mmol，1當量)於DMF(5 mL)中之溶液中添加O -(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N' -四甲基六氟磷酸鹽(HBTU，580 mg，1.53 mmol，1.5當量)及N,N -二異丙基乙胺(0.55 mL，3.0當量)，且在室溫下攪拌所得混合物約5分鐘。向所得混合物中添加胺(1.18 mmol，1.1當量)。根據TLC或LCMS所判斷，在室溫下攪拌混合物適當時間以完成反應，接著以乙酸乙酯稀釋且以0.5 M HCl、水依序洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。所要材料未經進一步純化即直接用於下一步驟，或藉由矽膠層析法使用適當移動相加以純化，接著直接用於下一反應。
一般醯胺形成方法3
向羧酸(1當量，含有5當量LiCl)於1 ml DMA或DMF中之溶液中添加O -(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N' -四甲基四氟硼酸(TBTU，1當量)且攪拌所得溶液約10分鐘。接著添加額外3 ml二氯甲烷(約0.03 M最終濃度)，接著添加胺(1當量)及DIPEA(4當量)，且在室溫下攪拌直至TLC及/或LCMS顯示反應完成。對反應混合物以二氯甲烷稀釋，以水、接著鹽水洗滌。經合併之水層以二氯甲烷反萃取。合併之有機層經硫酸鈉或硫酸鎂乾燥，接著過濾，接著濃縮且最終藉由矽膠管柱層析法使用適當移動相純化，接著直接用於下一反應中。
一般醯胺形成方法4
向羧酸(含5當量LiCl)(1當量)於DMA/DCM(1:4，0.07 M)中之混合物的懸浮液/溶液中添加O -(苯并三唑-1-基)-N ,N ,N',N' -四甲基四氟硼酸(TBTU，1.5當量，一般程序B1)或O -(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N' -四甲基六氟磷酸(HBTU，1.5當量，一般程序B2)，且在室溫下攪拌所得混合物5分鐘。反應混合物以胺(1當量)於DMA/DCM(1:4，0.07 M)中之溶液或胺鹽酸鹽(1.0當量)及碳酸氫鈉(1.5當量)於DMA/DCM(1:4，0.07 M)中之懸浮液處理。所得混合物以N,N -二異丙基乙胺(4.0當量)處理，且在室溫下攪拌1小時。將反應混合物稀釋於乙酸乙酯中，以水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠管柱層析法使用適當移動相純化所得殘餘物，接著用於下一反應中。
用於移除中間物之保護基的一般程序
含有保護基之中間物為合成最終的式(I)化合物所必需，此等保護基藉由如「Protective Groups in Organic Synthesis」,第3版,Green及Wutt中所述之標準程序移除。
脫除保護基之方法1：使用HCl移除BOC
在室溫下，向式1化合物之經BOC保護之胺(1. mmol)於二氯甲烷(4 mL)或其他適當溶劑中之正經攪拌的溶液中添加4 M HCl於二噁烷中之溶液(2.54 mL，10.2 mmol，10當量)。在室溫下攪拌反應物，直至根據LCMS或TLC所測定已消耗所有起始物質為止。接著過濾反應混合物，且以諸如二氯甲烷、乙酸乙酯或乙醚之溶劑洗滌。收集殘餘物，且溶解於水中，以1 M NaOH鹼化，且以二氯甲烷或20%異丙醇-二氯甲烷混合物萃取。經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮成殘餘物。藉由矽膠層析法使用適當移動相純化粗殘餘物，接著直接用於下一反應中。
脫除保護基之方法2：使用三氟乙酸移除BOC
向式I化合物之經BOC保護之胺(1. mmol)於二氯甲烷(4 mL)或其他適當溶劑中之正經攪拌的0℃冷溶液中添加4 ml無水三氟乙酸。在0℃下攪拌反應物，且使其升溫至室溫，且攪拌直至根據LCMS或TLC所測定已消耗所有起始物質為止。接著將反應混合物真空濃縮成黏稠殘餘物。殘餘物以二氯甲烷與飽和碳酸氫鈉之混合物萃取。水相以二氯甲烷反萃取。對於極性極大之胺，使用20%異丙醇-二氯甲烷混合物作為有機萃取溶劑。合併有機部分，且經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮成殘餘物。經硫酸鈉或硫酸鎂乾燥經合併之有機層，過濾且減壓濃縮成殘餘物。藉由矽膠層析法使用適當移動相純化粗殘餘物，接著直接用於下一反應中。
脫除保護基之方法3：使用三氟乙酸移除BOC
在室溫下以等體積的三氟乙酸處理式1化合物之經BOC保護之胺於CH2 Cl2 中之溶液(0.1 M)，且在室溫下攪拌1.0小時。真空濃縮反應混合物，且以含7 N NH3 之MeOH逐份處理直至混合物為中性。所得混合物濃縮成黏稠殘餘物。接著藉由製備型HPLC或矽膠層析法使用含7 N NH3 之MeOH/CH2 Cl2 純化所得殘餘物，接著直接用於下一反應中。
一般還原性胺化程序
將含有一級胺或二級胺之式(I)化合物(1當量)與過量(3至8當量)醛(例如甲醛，37%水溶液)或酮(例如丙酮)組合至適合溶劑(諸如四氫呋喃)中，且使其在室溫下與硫酸鎂(1當量)一起攪拌1小時。接著以單份添加三乙醯氧基硼氫化鈉(2當量)，且攪拌反應物直至根據TLC或LCMS所測定已消耗所有起始物質為止。接著停止反應，且溶解於乙酸乙酯中，以Na2 CO3 飽和溶液中和，且以鹽水洗滌。水層以乙酸乙酯反萃取。合併有機層且經Na2 SO4 乾燥。對於極性極大之胺，使用20%異丙醇-氯仿溶液作為萃取溶劑。移除揮發物，且藉由矽膠層析法使用適當移動相純化所得殘餘物產生所要最終產物。
製備2-氯-7 R 1 -N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺中間物之程序
2-氯-7 R2-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
中間物1：
製備2-氯-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
向5-溴-2,4-二氯嘧啶(13.41 g，58.8 mmol)於EtOAc(100 mL)中之溶液中添加DIPEA(13 mL，1.3當量)，隨後添加環庚胺(8.6 mL，1.1當量)，且所得混合物在室溫下攪拌5天。反應混合物以EtOAc(350 mL)稀釋，以水(100 mL)、鹽水(2×100 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。粗產物(18.1 g)未經純化即用於下一反應中。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.10(s,1 H),4.17(七重峰,J=4.6 Hz,1 H),1.94(m,2 H),1.77-1.51(m,10 Hz);MSm/z 305.3(M+H)+ 。
步驟2
製備3-(2-氯-4-(環庚基胺基)嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇
向5-溴-2-氯-N-環庚基嘧啶-4-胺(18.1 g，55.5 mmol)於THF(200 mL)中之黃色溶液中添加丙炔醇(4.5 mL，1.4當量)及氟化四丁基銨於THF中之溶液(1 M，130 mL，2.3當量)，且所得褐色混合物以氮氣流處理15分鐘(在溶液中鼓泡)。混合物接著以氯化雙(三苯膦)鈀(II)(2.09 g，0.054當量)處理，且加熱至回流持續5小時。冷卻後，反應混合物經矽藻土墊過濾(以約350 mL EtOAc沖洗)。濃縮濾液以移除THF，以EtOAc進一步稀釋(總體積250 mL)，以飽和NaHCO3 (2×150 mL)及水(150 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。在丙酮及CH2 Cl2 中滴定殘餘物，產生3-(2-氯-4-(環庚基胺基)嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇(8.65 g，56%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.98(s,1 H),4.45(s,2 H),4.19(七重峰,J=4.5 Hz,1 H),1.95(m,2 H),1.77-1.52(m,10 Hz);MSm/z 280.4(M+H)+ 。
步驟3
製備(2-氯-7-環庚基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇
向3-(2-氯-4-(環庚基胺基)嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇(8.64 g，30.9 mmol)於THF(200 mL)中之懸浮液中添加TBAF於THF中之溶液(1 M，66 mL，2.1當量)，且所得混合物在63℃下加熱5小時。濃縮反應混合物以移除THF，以EtOAc(350 mL)稀釋，以水(140 mL)及鹽水(140 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。使用iPrOH、CH2 Cl2 及MeCN濕磨殘餘物，隨後對母液進行管柱層析(EtOAc/庚烷20至100%)產生(2-氯-7-環庚基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(6.24 g，72%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ8.69(s,1 H),6.45(s,1 H),4.83(s,2 H),4.61(m,1 H),2.54(m,2 H),1.98-1.86(m,4 H),1.73-1.55(m,6 H);MSm/z 280.4(M+H)+ 。
步驟4
製備2-氯-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
向(2-氯-7-環庚基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(6.24 g，22.3 mmol)於DMF(100 mL)中之溶液中添加二甲胺於THF中之溶液(2 M，46 mL，4.1當量)及氰化鈉(1.04 g，0.95當量)，且所得混合物在室溫下攪拌4分鐘。反應混合物以二氧化錳(100.4 g，45當量)分4份處理1小時，且再攪拌1小時。反應混合物經矽藻土墊過濾(以600 mL EtOAc沖洗)。濾液以水(200 mL)洗滌。水相以EtOAc(2×150 mL)萃取。合併之有機物以4% NaCl水溶液(2×250 mL)洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且真空濃縮。在MeCN中濕磨殘餘物，隨後對母液進行管柱層析(EtOAc/庚烷30至100%)產生2-氯-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(6.07 g，85%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ8.81(s,1 H),6.52(s,1 H),4.63(tt,J=11,4.0 Hz,1 H),3.20(s,3 H),3.11(s,3 H),2.52(m,2 H),1.99(m,2 H),1.88(m,2 H),1.70(m,4 H),1.58(m,2 H) MSm/z 321.5(M+H)+ 。
中間物2：
以類似於中間物1之方式製備2-氯-7-環己基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
步驟1
(5-溴-2-氯-嘧啶-4-基)-環己基-胺(23.2 g，78%產率)：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.01-1.17(m,1 H) 1.20-1.31(m,3 H) 1.35-1.50(m,2 H) 1.60(d,J =12.5 Hz,1 H) 1.65-1.83(m,4 H) 3.89(ddd,J =7.8,3.8,3.5 Hz,1 H) 7.26(d,J =8.0 Hz,1 H) 8.22(s,1 H);MS m/z 290.4(M)+ 。
步驟2
3-(2-氯-4-環己基胺基嘧啶-5-基)-丙-2-炔-1-醇(9.1 g，43%產率)：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.14(t,J =12.9 Hz,1 H) 1.23-1.49(m,4 H) 1.62(d,J =13.1 Hz,1 H) 1.67-1.88(m,4 H) 3.83-3.99(m,1 H) 4.35(d,J =6.1 Hz,2 H) 5.37(t,J =5.8 Hz,1 H) 7.00(d,J =8.1 Hz,1 H); MS m/z 266.3(M+H)+ 。
步驟3
(2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)-甲醇(7.3 g，81%產率)：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.28(t,J =12.6 Hz,1 H) 1.33-1.48(m,2 H) 1.70(d,J =12.1 Hz,1 H) 1.78-1.93(m,4 H) 2.34-2.48(m,2 H) 4.24-4.42(m,1 H) 4.67(d,J =5.1 Hz,2 H) 5.50(t,J =5.6 Hz,1 H) 6.55(s,1 H) 8.82(s,1 H);MS m/z 266.5(M+H)+ 。
步驟4
2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.85 g，64%產率)：1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.22(br. s.,1 H) 1.36(d,J =13.6 Hz,2 H) 1.66(br. s.,1 H) 1.85(d,J =10.6 Hz,4 H) 2.30(dd,J =12.4,3.3 Hz,2 H) 3.04(d,J =17.2 Hz,6 H) 4.34(br. s.,1 H) 6.80(s,1 H) 8.97(s,1 H); MS m/z 307.3(M+H)+ 。
中間物3：
遵照製備中間物1之程序，2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺以類似方式製得且為已知文獻化合物(參看WO 2010/020675)。
中間物4：
遵照製備中間物1之程序，以類似方式製備2-氯-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
步驟1
製得5-溴-2-氯-N-(四氫-2H-哌喃-3-基)嘧啶-4-胺(6.47 g，83%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.16(s,1 H),4.20(七重峰,J=4.0 Hz,1 H),3.89(ddd,J=11,4.0,1,5 Hz,1 H),3.79(dt,J=11,4.0 Hz,1 H),3.53(m,1 H),3.40(dd,J=11,8.1 Hz,1 H),2.0(m,1 H),1.82-1.66(m,3 H);MSm/z 293.3(M+H)+ 。
步驟2
製得3-(2-氯-4-(四氫-2H-哌喃-3-基胺基)嘧啶-5-基)丙-2-炔-1-醇(3.21 g，54%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.05(s,1 H),4.45(s,1 H),4.21(七重峰,J=4.0 Hz,1 H),3.90(ddd,J=11,4.0,1.0 Hz,1 H),3.80(dt,J=11,4.0 Hz,1 H),3.52(m,1 H),3.39(dd,J=11,8.3 Hz,1 H),2.01(m,1 H),1.81-1.67(m,3 H);MSm/z 268.4(M+H)+ 。
步驟3
製得(2-氯-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-基)甲醇(2.39 g，75%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.72(s,1 H),6.59(s,1 H),4.77(s,2 H),4.62(m,1 H),4.42(t,J=11 Hz,1 H),4.00-3.91(m,2 H),3.57(m,1 H),2.92(m,1 H),2.07(m,1 H),1.87(m,2 H);MSm/z 268.4(M+H)+ 。
步驟4
製得2-氯-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(1.74 g，58%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.87(s,1 H),6.81(s,1 H),4.53(tt,J=11,4.4 Hz,1 H),4.32(t,J=11 Hz,1 H),3.95(m,2 H),3.52(m,1 H),3.17(s,3 H),3.15(s,3 H),2.77(qt,J=12,5.3 Hz,1 H),2.09(m,1 H),1.87-1.78(m,2 H);MSm/z 309.5(M+H)+ 。
中間物5
遵照製備中間物1之程序，以類似於中間物1之方式製備2-氯-7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
步驟1：
2-(4-(5-溴-2-氯嘧啶-4-基胺基)苯基)-2-甲基丙腈
在30 ml乙腈中組合5-溴-2,4-二氯嘧啶(1.37 gm，6 mmol)、2-(4-胺基苯基)-2-甲基丙腈(0.96 gm，6 mmol)及二異丙基乙胺(1.6 mL，9 mmol)，且在室溫下攪拌16小時。16小時時的LC/MS指示反應完成。有機物以1 M檸檬酸溶液、水、接著鹽水依序洗滌。有機物經硫酸鈉乾燥，接著傾析且蒸發產生粗材料，其依原樣用於下一步驟中。(1.45 gm，69%)。MSm /z 353.3(M+H)
步驟2：
2-(4-(2-氯-5-(3-羥基丙-1-炔基)嘧啶-4-基胺基)苯基)-2-甲基丙腈
在螺帽高壓容器中在12 mL THF中組合2-(4-(5-溴-2-氯嘧啶-4-基胺基)苯基)-2-甲基丙腈(1.4 gm，3.98 mmol)、氯化雙(三苯膦)鈀(II)(0.14 gm，0.2 mmol)、氟化四丁基銨(2.6 gm，9.95 mmol)及丙炔醇(0.357 mL，5.97 mmol)，且在70℃油浴中加熱。2小時後，LC/MS顯示反應完成。移除揮發物且將殘餘物溶解於EtOAc中。過濾有機層以移除不溶煙灰。有機層以水、鹽水洗滌，接著經硫酸鈉乾燥。移除揮發物，且藉由NPLC(含10-75% EtOAc之庚烷，Analogix)純化殘餘物。(869 mg，67%)。MSm /z 327.4(M+H)。
步驟3：
2-(4-(2-氯-6-(羥基甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯基)-2-甲基丙腈
在60℃下，使2-(4-(2-氯-5-(3-羥基丙-1-炔基)嘧啶-4-基胺基)苯基)-2-甲基丙腈與1M氟化四丁基銨於THF中之溶液(5.85 mL，5.85 mmol)(藉由添加無水THF稀釋至10 mL)反應1.5小時。分析型LC指示反應完成(滯留時間轉變最小)。移除揮發物且將殘餘物溶解於乙酸乙酯中。有機物以水、鹽水洗滌，接著經硫酸鈉乾燥。移除揮發物，且藉由NPLC(含10-75%乙酸乙酯之庚烷，Analogix)純化殘餘物，產生所要產物(589 mg，68%)。MS 327.3m /z (M+H)。
步驟4：
2-氯-7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
在6 mL無水DMF中組合2-(4-(2-氯-6-(羥基甲基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-7-基)苯基)-2-甲基丙腈(589 mg，1.8 mmol)、二氧化錳(7.8 gm，90 mmol)及2 M二甲胺之THF溶液(4.51 ml，9 mmol)。攪拌反應物3小時，此時LC/MS顯示反應完成。將反應物倒入鹽水中且萃取至EtOAc中。合併之有機物以水、隨後以鹽水洗滌，接著經硫酸鈉乾燥。移除揮發物，且藉由NPLC(含10-100%乙酸乙酯之庚烷，Analogix)純化殘餘物，產生所要純化合物。(345 mg，52%)。MS 367.7m/z 。
中間物6
6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸LiCl鹽
步驟1
製備6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯
向密封試管中之2-氯-7-環戊基-N,N -二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(5.0 g，17 mmol)於1,4-二噁烷(80 mL)中之懸浮液中添加6-胺基菸鹼酸甲酯(2.86 g，1.10當量)、Pd(OAc)2 (0.096 g，0.025當量)及BINAP(0.532 g，0.050當量)。使N2 鼓泡通過所得混合物持續20分鐘以脫氣且以Cs2 CO3 (8.35 g，1.5當量)處理。將反應混合物在100℃下加熱2.2小時。使反應混合物冷卻至室溫，以100 mL庚烷處理且以音波處理。藉由過濾收集紅色沈澱物，且懸浮於200 mL水中。音波處理後，藉由過濾收集固體，以水(3×50 mL)沖洗且乾燥。在THF中濕磨固體，獲得棕黃色固體6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯(6.6 g，94%產率)。真空濃縮濾液，且藉由管柱層析法(乙酸乙酯/庚烷)純化，產生額外產物(0.4 g，6%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.33(s,1 H),8.89(s,1 H),8.83(d,J =2.1 Hz,1 H),8.44(d,J =8.9 Hz,1 H),8.22(dd,J =8.9,2.2 Hz,1 H),6.67(s,1 H),4.77(m,1 H),3.86(s,3 H),3.06(s,6 H),2.42(m,2 H),2.00(m,4 H),1.68(m,2 H); MSm /z 409.4(M+H)+ 。
步驟2
製備6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸LiCl鹽
向6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯(1.0 g，2.4 mmol)於2-丙醇(60 mL)中之懸浮液中添加LiOH(0.29 g，5.0當量)及水(12 mL)，且所得混合物在60℃下攪拌1小時。懸浮液逐漸變得澄清。冷卻至室溫後，反應混合物以1 N HCl(12.24 mL，5當量)處理且真空濃縮。6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與LiCl(5當量)之混合物的淡黃色固體(1.40 g，95%產率)未經進一步純化即用於下一反應。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 13.30(br s,1 H),11.24(br s,1 H),9.03(s,1 H),8.88(d,J =2,2 Hz,1 H),8.31(dd,J =8.7,2.2 Hz,1 H),8.11(d,J =8.7 Hz,1 H),6.81(s,1 H),4.79(m,1 H),3.06(s,6 H),2.41(m,2 H),2.02(m,4 H),1.67(m,2 H);MSm/z 395.4(M+H)+ 。
中間物7
製備6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸
向6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯(2.0 g，4.9 mmol)於THF(6 mL)中之懸浮液中添加1 M LiOH(水溶液)(6 mL，1.2當量)，且漿料在45℃下攪拌12小時(漿料變得澄清)。冷卻至室溫後，蒸發THF且反應混合物以1 N HCl處理直至pH=1-2。過濾所得沈澱物，且濾液以20%異丙醇/CH2 Cl2 (3×100 mL)萃取，且乾燥合併之有機層，過濾且濃縮成棕黃色固體。棕黃色固體在丙酮中濕磨，產生呈棕黃色固體形式之所要產物6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(1.56 g，73%產率)，其未經進一步純化即使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ10.75(br. s,1H),8.95(s,1H),8.84(d,J =2.5 Hz,1H),8.24-8.33(m,1H),8.13-8.24(m,1H),6.74(s,1H),4.79(五重峰,J =8.8Hz ,1H),3.06(s,1H),2.30-2.46(m,3H),1.90-2.09(m,5H),1.48-1.76(m,3H),1.04(d,J=6.1Hz ,1H);MSm/z 395.5(M+H)+ 。
中間物8
遵照製備中間物1之程序，以類似於中間物1之方式製備2-氯-7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸
步驟1
經移液管向2-氯-7-環庚基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(517 mg，1.2 mmol，1.0當量)、6-胺基-菸鹼酸甲酯(221 mg，1.5 mmol，1.2當量)、Cs2 CO3 (591 mg，1.8 mmol，1.5當量)與BINAP(38 mg，0.06 mmol，0.05當量)之混合物中鼓入N2 持續3分鐘。添加Pd(OAc)2 (14 mg，0.06 mmol，0.05當量)，且密封燒瓶，且在加熱至130℃的油浴中攪拌3小時。經矽藻土墊過濾混合物，且以etOAc洗滌。有機層以水、接著鹽水洗滌，且合併有機層，經Na2 SO4 乾燥。蒸發溶劑，且以乙腈濕磨褐色油狀物，過濾，以ACN洗滌且在高度真空下乾燥，產生呈淡粉紅色固體形式之標題化合物(236 mg，0.53 mmol，44%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 8.84-8.90(m,1 H)8.69(s,1 H)8.61(d,J =9.09 Hz,1 H)8.51(br s,1 H)8.20-8.26(m,1 H)6.40(s,1 H)4.40-4.53(m,1 H)3.87(s,3 H)3.10(s,6 H)2.48-2.64(m,2 H)1.90-2.00(m,2 H)1.76-1.86(m,2 H)1.63-1.72(m,4 H)1.45-1.56(m,2 H).MS(m/z,MH+): 437.5。
步驟2
製備6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸
向6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯(146 mg，0.33 mmol，1.0當量)於THF(1.5 mL)中之溶液中添加含LiOH(94.7 mg，4.0 mmol，12當量)之1.5 mL水。混合物在室溫下攪拌48小時。反應混合物在冰浴中冷卻至0℃，且以1 N HCl酸化直至pH為約1-2。濾出固體沈澱物，且洗滌產生呈淡粉紅色固體形式之標題化合物(52 mg，0.124 mmol，37%)且依原樣使用；或者其可以含20%異丙醇之二氯甲烷萃取。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 12.99(br s,1 H)10.38(br s,1 H)8.87(s,1 H)8.81(d,J =2.01 Hz,1 H)8.53(d,J =9.03 Hz,1 H)8.19(dd,J =9.03,2.01 Hz,1 H)6.67(s,1 H)4.44(br s,1 H)3.07(d,J =13.05 Hz,6 H)2.54-2.60(m,2 H)1.87-1.98(m,2 H)1.75-1.87(m,2 H)1.59-1.75(m,4H) 1.49(m,2 H)。MS(m/z,MH+): 423.5。
中間物9
遵照製備中間物6之程序，以類似於中間物6之方式製備6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸及5當量LiCl。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.70(br s,1 H),8.81(s,1H),8.71(s,1 H),8.42(d,J =8.53 Hz,1 H),8.10(dd,J1 =8.53,J2 =2.01 Hz,1 H),6.63(s,1 H),4.41(m,1 H),3.07(d,6 H),2.70-2.52(m,2 H),1.99-1.39(m,10 H)MSm/z 422.9(M+H)+ 。
實例
實例1
7-環戊基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯
遵照一般N-C偶合程序1，使2-氯-7-環戊基-N,N -二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(5.0 g，17 mmol)與6-胺基菸鹼酸甲酯(2.86 g，1.10當量)組合，此產生6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯(6.6 g，94%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.33(s,1 H),8.89(s,1H),8.83(d,J =2.1 Hz,1 H),8.44(d,J =8.9 Hz,1 H),8.22(dd,J =8.9,2.2 Hz,1 H),6.67(s,1 H),4.77(m,1 H),3.86(s,3 H),3.06(s,6 H),2.42(m,2 H),2.00(m,4 H),1.68(m,2 H);MSm/z 409.4(M+H)+ 。
步驟2
製備6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸及5當量LiCl
向6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯(1.0g ，2.4 mmol)於2-丙醇(60 mL)中之懸浮液中添加LiOH(0.29 g，5.0當量)及水(12 mL)，且所得混合物在60℃下攪拌1小時。冷卻至室溫後，反應混合物以1 N HCl(12.24 mL，5當量)處理，且真空濃縮，產生呈淡黃色固體形式之LiCl(5當量)輔鹽形式的6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(1.40 g)(95%產率)，且未經進一步純化即用於下一反應中。l H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 13.30(br s,1 H),11.24(br s,1 H),9.03(s,1 H),8.88(d,J =2.2 Hz,1 H),8.31(dd,J =8.7,2.2 Hz,1 H),8.11(d,J =8.7 Hz,1 H),6.81(s,1 H),4.79(m,1 H),3.06(s,6 H),2.41(m,2 H),2.02(m,4 H),1.67(m,2 H);MSm/z 395.4(M+H)+ 。
步驟3
遵照一般醯胺形成方法1，將含5當量LiCl之6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯組合，產生(1R,5S)-7-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯(158 mg，77%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.76(s,1 H),8.56(d,J =8.59 Hz,1 H),8.41(s,1 H),8.28(br s,1 H),7.92(d,J =7.07 Hz,1 H),6,47(s,1 H),4.80(m,1 H),4.67-4.29(m,2 H),4.14-3.68(m,3 H),3.48(m,1 H),3.24-2.99(m,7H),2.60(m,2 H),2.26-1.54(m,10 H),1.49(s,9 H);LCMSm/z 619.0(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環戊基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3,1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法2，使(1R,5S)-7-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(47 mg)，產率93%。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.04(s,1 H),8.85(s,1 H),8.60(d,J =8.59 Hz,1 H),8.50(s,1 H),7.83(dd,J1 =8.84 Hz,J2 =2.27 Hz,1 H),6.49(s,1 H),4.91-4.33(m,2 H),4.16-3.10(m,12 H),3.10-2.36(m,5H),2.28-1.53(m,8 H); HRMSm /z 519.2849(M+H)+ 。
實例2
7-環庚基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸-5 LiCl
遵照實例1之製備中的步驟1，以類似方式，獲得6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯(1.34 g，52%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.95(d,J=2.0 Hz,1 H),8.77(s,1 H),8.71(d,J=8.6 Hz,1 H),8.33(dd,J=8.8,2.1 Hz,1 H),6.50(s,1 H),4.55(m,1 H),3.97(s,3 H),3.29(s,6 H),2.65(m,2 H),2.04(m,2 H),1.91(m,2 H),1.83-1.70(m,4 H),1.60(m,2 H);MSm/z 437.5(M+H)+ 。
步驟2
製備6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸及5當量LiCl
遵照實例1之製備中的步驟2，以類似方式，以定量產量獲得6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸-5當量LiCl(1.87 g)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.70(br s,1 H),8.81(s,1 H),8.71(s,1 H),8.42(d,J =8.53 Hz,1 H),8.10(dd,J1 =8.53,J2 =2.01 Hz,1 H),6.63(s,1 H),4.41(m,1 H),3.07(d,6 H),2.70-2.52(m,2 H),1.99-1.39(m,10 H);MSm/z 422.9(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環庚基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將含5當量LiCl之6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯組合，產生(1R,5S)-7-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯(170 mg，83%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1H),8.67(d,J =8.59 Hz,1 H),8.42(s,1 H),8.31(br s,1 H),7.92(d,J =8.08 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.74-3.40(m,7 H),3.22-2.94(m,7 H),2.65(m,2 H),2.16-1.54(m,13H),1,49(s,9H);LCMSm/z 647.1(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環庚基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法2，使(1R,5S)-7-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯轉化成7-環庚基-2-(5-((1R,5S)-9-羥基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(43 mg)，產率96%。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.34(s,1 H),8.88(m,1 H),8.74(m,1 H),8.54(m,1 H),7.85(dd,J1 =8.59 Hz,J2 =2.02 Hz,1 H),6.48(s,1 H),4.80-4.38(m,2 H),4.17-3.09(m,12 H),3.07-2.52(m,5H),2.23-1.50(m,12 H);HRMSm/z 547.3161(M+H)+ 。
實例3
7-環庚基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備5-[6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(52.5 mg，0.124 mmol，1.0當量)與2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(32.0 mg，0.162 mmol，1.5當量)組合，產生5-[6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(59 mg，0.09 mmol，76%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 9.12(br s,1 H)8.85(s,1 H)8.73(br s,1 H)8.61(br s,1 H)7.98(br s,1 H)6.48(s,1 H)4.47-4.65(m,2 H)3.72(br s,1 H)3.52-3.69(m,2 H)3.46(t,J =8.59 Hz,1 H)3.18(s,6 H)2.58-2.74(m,2 H)1.99-2.09(m,2 H)1.83-1.99(m,5 H)1.65-1.83(m,4 H)1.55-1.65(m,2 H)1.37-1.55(m,9 H)。
MS(m/z,MH+): 603.6。
步驟2
製備7-環庚基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將5-[6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(50 mg，0.083 mmol，1.0當量)轉化成呈白色固體形式之7-環庚基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(24 mg，0.05 mmol，57%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 8.89(br s,1 H)8.83(br s,1 H)8.65-8.78(m,1 H)8.51-8.65(m,1 H)7.89-8.05(m,1 H)6.48(s,1 H)4.52(br s,2 H)3.84-3.97(m,1 H)3.66-3.85(m,1 H)3.40-3.54(m,1H) 3.24-3.40(m,1 H) 3.19(s,6 H) 2.67(d,J =11.54 Hz,2 H) 2.03(s,3 H) 1.83-1.99(m,5 H) 1.64-1.83(m,4 H) 1.50-1.65(m,2 H);HR-MS(m/z,MH+): 503.2071。
實例4
2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照醯胺形成方法1，將6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(75 mg，0.178 mmol，1.0當量)與3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(37.7 mg，0.18 mmol，1.0當量)組合，產生呈白色固體形式之3-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(80 mg，0.130 mmol，73%產率)。1 H NMR(400 MHz，氯仿-d )δppm 8.76(s,1 H) 8.68(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.42-8.57(m,1 H) 8.40(d,J =2.02 Hz,1 H) 7.83(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 6.49(s,1 H) 4.46-4.62(m,2 H) 4.29(br s,2 H) 3.19(s,6 H) 2.56-2.73(m,2 H) 1.84-2.12(m,8 H) 1.65-1.84(m,6 H) 1.54-1.65(m,3H) 1.52(s,9 H); MS(m/z,MH+): 617.7。
步驟2
製備2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成呈白色固體形式之2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(60 mg，0.116 mmol，96%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 8.68(s,1 H)8.60(d,J =9.09 Hz,1 H)8.32(d,J =2.02 Hz,1 H)8.20(s,1 H)7.73(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H)6.39(s,1 H)4.33-4.57(m,2 H)3.10(s,6 H)2.45-2.68(m,2 H)1.86-2.00(m,3 H)1.79(br s,7 H)1.56-1.73(m,7 H)1.40-1.56(m,3 H);HR-MS(m/z,MH+): 517.3027。
實例5
2-(5-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備7-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環庚基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(80 mg，0.19 mmol，1.0當量)與2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸第三丁酯(47.1 mg，0.208 mmol，1.1當量)組合，產生呈白色固體形式之7-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸第三丁酯(22 mg，0.035 mmol，18.4%產率)。1 H NMR(400 MHz，氯仿-d )δppm 8.67(s,1 H)8.60(d,J =8.59 Hz,1 H)8.31(d,J =2.02 Hz,1 H)8.16-8.28(m,1 H)7.74(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H)6.39(s,1 H)5.23(s,1 H)4.38-4.51(m,1 H)3.63(s,4 H)3.52(br s,2 H)3.10(s,6 H)2.48-2.66(m,2 H)1.86-2.03(m,2 H)1.56-1.85(m,9 H)1.42-1.56(m,4 H)1.38(s,9 H)。MS(m/z,MH+): 631.7。
步驟2
製備2-(5-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將7-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-2-甲酸第三丁酯轉化成呈灰白色固體形式之2-(5-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(25 mg，0.05 mmol，69%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 9.05(s,1 H) 8.48-8.59(m,1 H) 8.04-8.13(m,1 H) 7.39-7.48(m,1 H) 6.92(s,1 H) 4.53-4.68(m,1 H)3.95(s,4 H) 3.49-3.83(m,4 H) 3.18(d,J =3.54 Hz,6 H)2.46-2.69(m,2 H) 2.03(s,10 H) 1.65-1.82(m,4 H) 1.58(無,2 H);HR-MS(m/z,MH+): 531.3199。
實例6
7-環庚基-2-(5-(8-羥基-8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-苯甲基-8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇
將3-苯甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-酮(200 mg，0.93 mmol)溶解於Et2 O(2 ml)中，且添加至MeMgBr(3 ml 1 M Et2 O溶液)於Et2 O中之溶液中。將所得反應混合物在室溫下攪拌隔夜。混合物以Et2 O稀釋且以NH4 Cl飽和水溶液及1 N NaOH洗滌。水層以Et2 O反萃取。合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮，產生苯甲基-8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇(110 mg，51%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 7.51-7.18(m,5 H) 3.60(br. s.,2 H) 2.73(d,J =10.11 Hz,2 H) 2.52(d,J =9.60 Hz,2 H) 1.85(br. s.,2 H)1.71(br. s.,4 H) 1.55(br. s.,1 H) 1.31(s,3 H)。
步驟2
製備8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇
將3-苯甲基-8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇之樣品(110 mg，0.48 mmol)溶解於MeOH(20 ml)中，且氛圍換為N2 (3×)。添加10% Pd/C(催化劑)，且氛圍換為H2 (3×)。所得反應混合物在室溫下在氣球壓力下攪拌隔夜。當TLC顯示無UV活性點時，濾出Pd/C(使用MeOH保持一直濕潤)，且濃縮濾液，產生8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇(70 mg，99%產率)。NMR顯示無苯甲基。直接使用。
步驟3
製備7-環庚基-2-(5-(8-羥基-8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇組合，產生7-環庚基-2-(5-(8-羥基-8-甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(68 mg，26%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.65(s,1 H) 8.93-8.86(m,1 H) 8.68(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.55(d,J =2.02 Hz,1 H) 7.82(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 6.52-6.39(m,1 H) 4.45-4.60(m,1 H) 4.39(br. s.,1 H) 3.96(br. s.,1 H) 3.63-3.39(m,2 H) 3.15(s,6 H) 2.76-2.51(m,3 H) 2.14(br. s.,1 H) 2.07-1.93(m,2 H) 1.85(ddd,J =6.95,3.41,3.28 Hz,3 H) 1.80-1.61(m,7 H) 1.61-1.48(m,2 H) 1.48-1.36(m,1 H) 1.30(s,3 H);HR-MS(m/z MH+) 546.32 RT 3.99 min。
實例7
7-環庚基-2-(5-((1R,4R,7R)-7-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1R,4R,7R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-7-醇組合，產生7-環庚基-2-(5-((1R,4R,7R)-7-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50 mg，77%產率)。
1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.79(s,0.8 H,旋轉異構體) 9.58(s,0.2 H,旋轉異構體) 8.93-8.82(m,1 H) 8.76-8.55(m,2 H) 7.90(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 6.45(s,1 H) 4.59-4.439(m,1 H) 4.41(br. s.,0.2 H,旋轉異構體) 4.27(br. s.,0.2 H,旋轉異構體) 4.20(br. s.,0.8 H,旋轉異構體) 4.06(s,0.8 H,旋轉異構體) 3.73-3.57(m,2 H) 3.07-3.39(m,7 H) 2.75-2.54(m,2 H) 2.42(br. s.,0.8 H,旋轉異構體) 2.35(br. s.,0.2 H,旋轉異構體) 2.20-1.93(m,4 H) 1.93-1.63(m,7 H) 1.62-1.42(m,3 H);HR-MS(m/z MH+) 518.29 RT 3.66 min。
實例8
2-(5-(8-乙醯基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與1-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)乙酮組合，產生2-(5-(8-乙醯基-3，8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(63 mg，88%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCL3 )δppm 9.69(s,1 H)8.90(s,1 H)8.72(d,J =8.59 Hz,1 H)8.51(d,J =2.02 Hz,1 H)7.78(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H)6.46(s,1 H)4.71(br.s.,1 H)4.51(tt,J =11.12,4.04 Hz,1 H)4.16(br.s.,1 H)3.24-3.10(m,7 H)2.70-2.55(m,2 H)2.18-2.06(m,4 H)2.01(ddd,J =13.64,7.07,4.04H z,4 H)1.95-1.79(m,5 H)1.79-1.62(m,5 H)1.62-1.49(m,2 H).HR-MS(m/z MH+)559.31 RT 3.89 min。
實例9
7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-6-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(具有5當量LiCl之鹽形式)(571 mg，0.942 mmol)與3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-6-甲酸第三丁酯(200 mg，0.942 mmol)組合，產生446 mg 3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-6-甲酸第三丁酯(80%產率)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 588.9。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-6-甲酸第三丁酯轉化成呈二鹽酸鹽形式之7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(275 mg,72%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.58(1 H,br. s.),9.01(1 H,s),8.46(1 H,br.s.),8.05(1 H,br. s.),7.92(1 H,br. s.),6.88(1H,s.),4.80(1 H,五重峰),4.0(1 H,br. s),3.57(4 H,br. s),3.17(3 H,br. s.),3.07(6 H,s),2.59-2.75(1 H,m),2.35-2.45(2 H,br. m),1.84-2.09(6 H,m),1.66-1.70(2 H,m)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 489.9。
步驟3
使用以下條件分離215 mg外消旋物7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之對映異構體的約1:1混合物：As-H,4.6×100 mm,SFC,4 g/min,40C,30% MeOH 0.2%二乙胺，產生各約68 mg之對映異構體7-環戊基-2-[5-((1S,5S)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(異構體1)及7-環戊基-2-[5-((1R,5R)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(異構體2)。
實例10
對映異構體1：7-環戊基-2-[5-((1S,5S)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.02(1 H,s),8.85(1 H,s),8.32-8.38(2 H,m),7.86(1 H,br. s.),6.66(1 H,s),4.71-4.79(1 H,五重峰),3.32-3.38(4 H,br. s.),3.05-3.07(6 H,d),2.86(2 H,br. s.),2.72-2.74(1 H,d),2.33-2.55(2H,m),1.95-2.05(4 H,br. s.),1.53-1.79(4 H,m),1.22-1.35(2 H,m)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 489.1。
實例11
對映異構體2：7-環戊基-2-[5-((1R,5R)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.03(1 H,br. s),8.85(1 H,s),8.33-8.36(2 H,d),7.85(1 H,br. s.),6.66(1 H,s),4.72-4.80(1 H,五重峰),3.25-3.55(5 H,br. m),3.06(6 H,d),2.77-2.90(2 H,br. s.),2.37-2.60(2 H,m),1.99(4 H,br. s),1.66-1.79(4 H,m),1.24-1.37(2 H,br. s)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 489.0。
實例12
7-環戊基-2-{5-[6-(2,2,2-三氟-乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-{5-[6-(2,2,2-三氟-乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
在100 ml圓底燒瓶中，組合7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(165 mg，0.294 mmol)及DIPEA(0.128 ml，0.735 mmol)，將其稀釋於二噁烷(6.00 ml)中產生微黃色異質溶液。接著向此混合物中添加碳酸鉀(406 mg，2.94 mmol)及三氟甲磺酸三氟乙酯(0.106 m1，0.735 mmol)。將反應物加熱至50℃持續18小時。LCMS顯示100%轉化。混合物稀釋於DCM中，且以NaHCO3 飽和水溶液洗滌，隨後鹽水洗滌。接著分離有機層，經MgSO4 乾燥且蒸發產生微黃色固體。此固體與EtOAc一起濕磨，產生98 mg 7-環戊基-2-{5-[6-(2,2,2-三氟-乙基)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(58%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.95(1 H,s),8.84(1 H,s),8.30-8.40(2 H,m),7.81-7.83(1 H,d),6.65(1H,s),4.71-4.78(1H,五重峰),3.23-3.42(7 H,m),3.06(7 H,br. s.),2.30-2.45(2 H,br. s.),1.99(4 H,br. s.),1.55-1.75(4 H,d),1.24-1.35(2 H,br. s)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 570.9。
實例13
7-環戊基-2-[5-(6-甲基-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(6-甲基-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
在50 mL圓底燒瓶中且在MeOH(4.00 ml)/DCM(4.00 ml)中組合7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(183 mg，0.326 mmol)與甲醛(37%水溶液)(0.135 ml，4.89 mmol)產生微黃色溶液。在室溫下攪拌1.5小時後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(90 mg，0.424 mmol)，接著再攪拌反應物持續12小時。LCMS顯示完全轉化。混合物接著以二氯甲烷稀釋，以NaHCO3 飽和水溶液，隨後鹽水洗滌。接著經MgSO4 乾燥經合併之有機相，且蒸發產生淡黃色固體。以乙酸乙酯濕磨，接著以二氯甲烷濕磨，隨後過濾，產生30 mg 7-環戊基-2-[5-(6-甲基-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(18%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 8.81(1 H,s),8.54(2 H,d),8.42(1 H,s),7.90(1 H,d,J =8.53 Hz),6.66(1 H,s),4.91(3 H,s),4.77-4.87(1H，五重峰),3.30(4H,br. s),3.16-3.20(7 H,m),2.65-2.90(3 H,br. s.),2.50-2.60(2H,m),1.93-2.25(5H,m),1.76(2H,br. s)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 502.9。
實例14
2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基}-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(550 mg，0.907 mmol)與(3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基)-胺基甲酸第三丁酯(180 mg，0.907 mmol)組合，產生260 mg{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基}-胺基甲酸第三丁酯(50%產率)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 575.4。
步驟2
製備2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺二鹽酸鹽
遵照脫除保護基之方法1，將{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基}-胺基甲酸第三丁酯(250 mg，0.435 mmol)轉化成2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺二鹽酸鹽(210 mg)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.04(1 H,s),8.99(1 H,s),8.53(1 H,s),8.11(1 H,d),7.83(1 H,br. s.),6.86(1 H,s),4.75-4.84(1 H,五重峰),3.25-4.10(6 H,m),3.07(6 H,s),2.24-2.40(2 H,d),2.00-2.08(5 H,m),1.65-1.67(2 H,d),1.31(1 H,br.s.),0.82(1 H,br. s.);MS(ESI) m/e(M+H+ ): 475.1。
步驟3
使用以下條件分離200 mg外消旋物2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之對映異構體的約1:1混合物：As-H,4.6×100 mm,SFC,4 g/min,40C,45%MeOH,CO2 中0.2% DEA，產生各約56 mg對映異構體2-[5-((S)-1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺及2-[5-((R)-1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。
實例15
對映異構體1：製備2-[5-((S)-1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.07(1H,d),8.86(1 H,s),8.41(1 H,br. s.),8.34-8.37(1 H,t),7.88(1 H,d),6.66(1 H,s),4.73-4.80(1 H,五重峰),3.50-4.09(2 H,m),3.20-3.45(4 H,br. s),3.05-3.07(6 H,d),2.44(2 H,br. s.),2.00(4 H,br. s.),1.66(2 H,br. s.),1.32(1 H,br. s.),1.24(1 H,m),0.38(1 H,br. s.);MS(ESI) m/e(M+H+ ): 475.4。
實例16
對映異構體2：2-[5-((R)-1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.07(1H,d),8.86(1H,s),8.33-8.39(1 H,t),7.86-7.88(1 H,d),6.66(1 H,s),4.73-4.80(1 H,五重峰),3.40-4.20(2 H,m),3.25-3.37(4 H,m),3.05-3.07(6 H,d),2.44(2 H,br. s.),2.00(4 H,br. s.),1.66(2 H,br. s.),1.24-1.37(2 H,m),0.38(1 H,d). MS(ESI) m/e(M+H+ ): 475.3。
實例17
7-環戊基-2-[5-(1-二甲基胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(1-二甲基胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
在50 mL圓底燒瓶中在THF(3.000 ml)/甲醇(3.000 ml)/DCM(3.000 ml)中組合2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(k)(200 mg，0.421 mmol)與甲醛(37%水溶液(0.967 ml，10.54 mmol)產生微黃色懸浮液。在室溫下攪拌2小時後，添加三乙醯氧基硼氫化鈉(223 mg，1.054 mmol)，且反應物再攪拌16小時。最終，反應混合物以NaHCO3 及鹽水洗滌，經MgSO4 乾燥且蒸發產生淡棕色固體。此固體以EtOAc濕磨產生50 mg 7-環戊基-2-[5-(1-二甲基胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(n)，24%產率及>90%純度。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.01(1H,br. s.),8.86(1H,br. s.),8.45(1H,d),8.33(1 H,t),7.91(1H,br. s.),6.65(1 H,s),4.69-4.90(1 H,五重峰),3.75-3.92(2 H,m),3.21-3.36(3 H,m),3.06(6 H,br. s.),2.40(2 H,br. s.),2.29-2.35(6 H,d),2.00(4 H,br. s.),1.40-1.76(2 H,m),1.36-1.43(1 H,d),0.46(1 H,br. s.);MS(ESI)m/e(M+H+ ): 503.4。
實例18
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(400 mg，1.01 mmol)與3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(250 mg，1.18 mmol，1.1當量)組合，在處理後產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯，且未經進一步純化立即用於下一步驟中。MSm/z 589.7(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.290 g，0.594 mmol，59%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.74(m,8H),2.07(m,5H),2.58(m,2H),3.50(br s,2H),3.17(s,7H),4.81(五重峰,J =8.8 Hz,1H),6.48(s,1H),7.79(dd,J =8.8,2.3 Hz),8.30(s,1H),8.39(d,J =2.5 Hz,1H),8.56(d,J =8.6 Hz,1H),8.77(s,1H)；MSm/z 489.6(M+H)+ 。
實例18之替代程序
合成7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：合成6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸
向6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸甲酯(2.0 g，4.9 mmol)於HF(6 mL)中之懸浮液中添加1 M LiOH(水溶液)(6 mL，1.2當量)，且漿料在45℃下攪拌12小時(漿料變得澄清)。冷卻至室溫後，蒸發THF且反應混合物以1 N HCl處理直至pH=1-2。過濾所得沈澱物，且濾液以20%異丙醇/CH2 Cl2 (3×100 mL)萃取，且乾燥合併之有機層，過濾且濃縮成棕黃色固體。棕黃色固體在丙酮中濕磨產生呈棕黃色固體形式之所要產物(1.56 g，73%產率)，其未經進一步純化即使用。MS:(M+H)=395.5。
步驟2：合成3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
向6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(400 mg，1.01 mmol)於DMF(5 mL)中之溶液中添加O -(苯并三唑-1-基)-N,N,N',N' -四甲基六氟磷酸(HBTU，580 mg，1.53 mmol，1.5當量)及N,N -二異丙基乙胺(0.55 mL，3.0當量)，且所得混合物在室溫下攪拌5分鐘。向反應混合物添加3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(250 mg，1.18 mmol，1.1當量)。所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。反應混合物稀釋於EtOAc中，以0.5 M HCl洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。材料未經進一步純化立即用於下一步驟中。MS:(M+H)=589.7。
步驟3：合成標題化合物
在25℃下，向3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(0.232 g，1. mmol)於CH2 Cl2 (4 ml)中之攪拌溶液中添加4 M HCl於二噁烷中之溶液(2.54 mL，10.14 mmol，10當量)。在25℃下攪拌4小時後，過濾反應混合物且以CH2 Cl2 (5 mL)洗滌。收集殘餘物且溶解於水中，接著以1 M NaOH鹼化且以CH2 Cl2 (2×15 mL)萃取。經合併之有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且減壓濃縮成棕黃色固體。使用管柱層析法(MeOH/CH2 Cl2 )純化粗產物產生呈白色固體形式之所要產物(0.290 g，0.594 mmol，59%)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δ8.77(s,1H),8.56(d,J =8.6 Hz,1H),8.39(d,J =2.5 Hz,1H),8.30(s,1H),7.79(dd,J =8.8,2.3 Hz),6.48(s,1H),4.81(五重峰,J =8.8 Hz,1H),3.50(br s,2H),3.17(s,7H),2.58(m,2H),2.07(m,5H),1.74(m,8H);MSm/z 489.6(M+H)+ 。
實例19
7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備5-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-(S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(0.150 g，0.380 mmol)與(S,S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(100 mg，0.504 mmol，1.3當量)組合，產生5-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-(S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯，且直接用於下一步驟中。MSm/z 575.7(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將5-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-(S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(55 mg，0.110 mmol，29%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.91-2.14(m,5 H),2.43-2.62(m,2 H),2.99-3.07(m,1 H),3.09(s,6 H),3.16(d,J =10.11 Hz,1 H),3.35(d,J =11.12 Hz,1 H),3.51-3.76(m,2 H),3.80(br. s.,1 H),4.74(五重峰，J =8.84 Hz,1 H),6.41(s,1 H),7.77-7.96(m,1 H),8.41-8.56(m,2 H),8.68-8.84(m,2 H)。MSm /z 475.5(M+H)+ 。
實例20
7-環戊基-2-[5-(六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法2，將含有5當量氯化鋰之6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(88 mg，0.146 mmol)與八氫吡咯并[1,2-a]吡嗪(0.050 ml，0.264 mmol，1.6當量)組合，在純化後產生呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-(六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(40 mg，0.077 mmol，29%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δppm 1.30(br. s.,2 H),1.49(s,1 H),1.57-1.84(m,6 H),1.88(d,J =10.04 Hz,2 H),2.00-2.20(m,5 H),2.35(br. s.,2 H),2.59(dd,J =12.05,9.03 Hz,2 H),3.07-3.37(m,10 H),4.83(五重峰,J =8.84 Hz,1 H),6.51(s,1 H),7.83(dd,J =8.78,2.26 Hz,1 H),8.43(d,J =2.01 Hz,2 H),8.59(d,J =8.53 Hz,1 H),8.82(s,1 H)。HRMS計算值m/z=503.2883且實驗值m/z=503.2894(M+H)。
實例21
7-環戊基-2-[5-((R)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-((R)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法2，將含有5當量氯化鋰之6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(100 mg，0.165 mmol)與(R)-八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪(40 mg，0.317 mmol，1.9當量)組合，純化後產生呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-((R)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(60 mg，0.113 mmol，69%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.20-1.33(m,2 H),1.69(br. s.,3 H),1.69-1.81(m,4 H),1.81-1.95(m,2 H),1.95-2.16(m,6 H),2.16-2.35(m,2 H),2.48-2.68(m,2 H),3.08-3.15(m,2 H),3.15-3.23(m,7 H),4.80(五重峰,J =8.78 Hz,2 H),6.48(s,1 H),7.82(dd,J =8.78,2.26 Hz,1 H),8.24(s,1 H),8.41(d,J =2.01 Hz,1 H),8.56(d,J =8.53 Hz,1 H),8.77(s,1 H);HRMS計算值m/z=503.2883且實驗值m/z=503.2898(M+H)。
實例22
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備8-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苯甲酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(700 mg，1.78 mmol)與3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苯甲酯(520 mg，2.11 mmol，1.2當量)(參考案：PCT國際申請案2009067108，2009年5月28日)組合，純化後產生呈灰白色固體形式之8-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苯甲酯(550 mg，0.839 mmol，47%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.66-1.86(m,2 H) 1.91-2.18(m,8 H) 2.41-2.65(m,2 H) 2.82(br. s.,2 H) 2.98(br. s.,2 H) 3.11-3.22(m,6 H) 4.17(br. s.,1 H) 4.64(br. s.,1 H) 4.74-4.84(m,1 H) 6.65(s,1 H) 7.92(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.48(d,J =2.53 Hz,1 H) 8.53(d,J =9.60 Hz,1 H) 8.82(s,1 H);MSm/z 623.5(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
將8-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-甲酸苯甲酯(550 mg，0.883 mmol)及10% Pd/C(100 mg，0.1當量)於甲醇(10 ml)中之懸浮液抽真口，接著以N2 淨化3次，接著在氣球壓力下以氫氣回填，且攪拌16小時。反應混合物接著經矽藻土墊過濾，且將濾液濃縮成無色油狀物。向油中添加乙酸乙酯/庚烷，且濕磨所得沈澱物，產生呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(260 mg，0.532 mmol，60%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.68-1.84(m,2 H)1.94-2.12(m,8 H) 2.12-2.18(m,1 H) 2.45-2.61(m,2 H) 2.77(br. s.,2 H) 2.93-3.11(m,2 H) 3.16(s,6 H) 4.16(br. s.,1 H) 4.64(br. s.,1 H) 4.80(t,J =8.84 Hz,1 H) 6.64(s,1 H) 7.92(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 8.47-8.57(m,2 H) 8.85(s,1 H);MSm/z 489.9(M+H)+ 。
實例23
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
步驟1
製備3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，使2-胺基吡啶基-5-甲酸(0.651 g，4.71 mmol)與3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(1.00 g，4.71 mmol)合成，在純化後產生呈白色固體形式之3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(0.780 g，2.35 mmol，50%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.42-1.54(m,17 H) 1.67-1.87(m,4 H) 1.94(br. s.,4 H) 3.10(br. s.,2 H) 3.18(br. s.,2 H) 3.82(d,J =12.63 Hz,2 H) 3.94(br. s.,2 H) 4.81(br. s.,4 H) 6.53(d,J =8.59 Hz,2 H) 7.67(dd,J =8.59,2.02 Hz,2 H) 8.28(s,2 H);MSm/z 277.4(M+H)+ 。
步驟2
製備3-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，使2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺(參看WO 2010020675)(0.150 g，0.538 mmol)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(0.188 g，0.565 mmol，1.05當量)組合，產生呈黃色固體形式之3-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯，且直接用於步驟3中。MSm/z 575.9(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺(60 mg，0.126 mmol，24%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.68-1.87(m,3 H) 1.92-2.04(m,3 H) 2.04-2.19(m,7 H) 2.53-2.71(m,2 H) 2.84(d,J =12.63 Hz,2 H) 2.94(s,3 H) 3.11(br. s.,3 H) 4.22(br. s.,1 H) 4.68(br. s.,1 H) 5.49(五重峰,J =9.01,8.84 Hz,1 H) 6.87(s,1 H) 7.91(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 8.46(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.58(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.80(s,1 H);MSm/z 475.1(M+H)+ 。
實例24
7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
步驟1
製備5-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-(S,S )2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將2-胺基吡啶基-5-甲酸(0.697 g，5.04 mmol)與(S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(1.00 g，5.04 mmol，1.0當量)組合，純化後產生呈白色固體形式之5-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(350 mg，1.01 mmol，20%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.36-1.63(m,10 H) 1.93(br. s.,2 H) 3.34-3.86(m,4 H) 4.35-5.07(m,3 H) 6.55(d,J =8.59 Hz,1 H) 7.71(br. s.,1 H) 8.29(br. s.,1 H);MSm /z 319.4(M+H)+ 。
步驟2
製備(1S,4S)-5-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺(參看WO 2010020675)(0.120 g，0.431 mmol)與(1S,4S)-5-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(0.144 g，0.452 g，1.05當量)組合，產生呈黃色固體形式之(1S,4S)-5-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯。此材料直接用於隨後之步驟3中。MSm/z 561.5(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-2-[5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(1S,4S)-5-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-((1S,4S)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺(70 mg，0.152 mmol，35%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.70-1.85(m,3 H)1.90(s,3 H)2.02-2.15(m,4 H)2.58(d,J =9.09 Hz,2 H)2.92(s,3 H)3.01(t,J =9.35 Hz,1 H)3.15(dd,J =13.89,10.36 Hz,1 H)3.39-3.50(m,1 H)3.66(dd,J =11.37,2.27 Hz,1 H)3.71-3.80(m,1 H)5.47(五重峰,J =8.84 Hz,1 H)6.88(s,1 H)7.83-8.02(m,1 H)8.42-8.60(m,2 H)8.82(s,1 H);MSm/z 461.5(M+H)+ 。
實例25
7-環戊基-2-[5-((3aR,8aS)-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-7-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
(3aR,8aS)-7-苯乙基-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-1-甲酸苯甲酯
向(3aR,8aS)-7-苯乙基-十氫-吡咯并[2,3-c]氮呯(4.0 g，16.37 mmol)(參考案：PCT國際申請案2005097791，2005年10月20日)於乙酸乙酯(100 ml)中之懸浮液中添加碳酸鉀(6.79 g，49.1 mmol，3.0當量)於水(100 ml)中之溶液。兩相溶液冷卻至0℃，接著逐滴添加氯甲酸苯甲酯(2.80 ml，19.64 mmol，1.2當量)。所得混合物在23℃下攪拌3小時。分配混合物，且水層以乙酸乙酯萃取。合併之有機層以水、隨後鹽水洗滌，且乾燥(Na2 SO4 )、過濾有機層，且濃縮濾液產生橙色油狀物。使用矽膠層析法(1:2乙酸乙酯/庚烷至100%乙酸乙酯，隨後12:1 CH2 Cl2 /甲醇)純化粗產物產生(3aR,8aS)-7-苯乙基-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-1-甲酸苯甲酯。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.31-1.52(m,1 H) 1.52-1.81(m,3 H) 1.81-2.03(m,2 H) 2.25-2.53(m,3 H) 2.53-2.68(m,2 H) 2.68-2.97(m,3 H) 3.21-3.40(m,1 H) 3.40-3.55(m,1 H) 3.93-4.16(m,1 H) 5.05(d,J =12.05 Hz,1 H) 5.13(d,J =4.52 Hz,1 H) 7.04(d,J =7.03 Hz,1 H) 7.12-7.30(m,6 H) 7.30-7.44(m,3 H)。
步驟2
(3aR,8aS)-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-1-甲酸苯甲酯
在0℃下，向(3aR,8aS)-7-苯乙基-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-1-甲酸苯甲酯(1.0 g，2.64 mmol)於1,2-二氯乙烷(20 mL)中之溶液中添加氯甲酸1-氯乙酯(0.286 mL，2.64 mmol，1.0當量)。反應物在攪拌下經1小時升溫至23℃，接著回流3小時。真空移除溶劑，接著添加20 mL甲醇，且反應混合物加熱至50℃持續1小時。濃縮反應物，且使用矽膠層析法(1:2乙酸乙酯/庚烷至100%乙酸乙酯，隨後12:1 CH2 Cl2 /甲醇)純化產生(3aR,8aS)-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-1-甲酸苯甲酯。MSm/z 379.3(M+H)+ 。
步驟3
7-環戊基-2-[5-((3aR,8aS)-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-7-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
在23℃下攪拌6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(5當量氯化鋰)(0.088 g，0.146 mmol)、HBTU(0.086 mg，0.226 mmol，1.6當量)及三乙胺(0.100 ml，0.717 mmol，4.9當量)於DMF(3 mL)中之溶液持續5分鐘，接著添加(3aR,8aS)-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-1-甲酸苯甲酯(0.040 mg，0.146 mmol，1.0當量)，且反應物在23℃下攪拌1.5小時。反應混合物以乙酸乙酯稀釋，混合物以0.5 M HCl(水溶液)、接著水(3×)、鹽水洗滌，乾燥(Na2 SO4 )、過濾有機層，且濃縮濾液。使用層析法(甲醇/CH2 Cl2 )純化粗產物產生白色固體。向所得固體(42 mg)中添加10% Pd/C(15 mg)，隨後甲醇(5 mL)。懸浮液在攪拌下以H2 氣球覆蓋持續6小時。反應之內容物年個矽藻土過濾，且濾液濃縮成白色固體，自乙酸乙酯/庚烷濕磨、隨後層析(甲醇/CH2 Cl2 混合物)純化產生7-環戊基-2-[5-((3aR,8aS)-八氫-吡咯并[2,3-c]氮呯-7-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。(20 mg，0.039 mmol，27%)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.62-1.84(m,5 H) 1.84-1.99(m,2 H) 1.99-2.20(m,4 H) 2.31(dd,J =13.05,5.02 Hz,1 H) 2.47-2.62(m,2 H) 2.63-2.80(m,1 H) 3.18-3.27(m,1 H) 3.38-3.61(m,2 H) 3.77(d,J =13.05 Hz,1 H) 3.84-3.98(m,1 H) 4.04(t,J =7.53 Hz,1 H) 4.06-4.19(m,1 H)4.80(五重峰，J =9.03,8.87 Hz,1 H) 6.67(s,1 H) 7.93(dd,J =8.78,2.26 Hz,1 H) 8.45(d,J =2.01 Hz,1 H) 8.53(d,J =8.53 Hz,1 H) 8.82(s,1 H); HRMS計算值m/z=517.3039且實驗值m/z=517.3044(M+H)+ 。
實例26
7-環庚基-2-(5-((1R,4R,7R)-7-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1R,4R,7R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-7-醇組合，產生7-環庚基-2-(5-((1R,4R,7R)-7-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(47 mg，78%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm9.75(br. s.,0.8 H,旋轉異構體) 9.60(br. s.,0.2 H，旋轉異構體) 8.88(s,1 H) 8.60-8.50(m,1 H) 8.61-8.41(m,1 H) 7.93-7.81(m,1 H) 6.47(s,1 H) 4.86-4.71(m,J =8.97,8.97,8.84,8.59 Hz,1 H) 4.39(br. s.,0.2 H，旋轉異構體) 4.24(br. s.,0.2 H,旋轉異構體) 4.19(br. s.,0.8 H,旋轉異構體) 4.05(s,0.8 H,旋轉異構體) 3.73(br. s.,0.8 H,旋轉異構體) 3.67(s,0.2 H,旋轉異構體) 3.65-3.62(m,0.8 H,旋轉異構體) 3.46(m,0.2 H,旋轉異構體) 3.24-3.21(d,J =11.62 Hz,0.8 H,旋轉異構體) 3.16(d,J =11.62 Hz,0.2 H,旋轉異構體) 3.15(s,6 H) 2.66-2.6648(m,2 H) 2.41(br. s.,0.8 H,旋轉異構體) 2.34(br. s.,0.2 H,旋轉異構體) 2.15-1.93(m,6 H) 1.64-1.91(m,3 H) 1.59-1.48(m,0.8 H,旋轉異構體) 1.44(br. s.,0.2 H,旋轉異構體);HR-MS(m/z MH+) 490.26 RT 3.21 min。
實例27
2-(5-(8-乙醯基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與1-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)乙酮組合，產生2-(5-(8-乙醯基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(43 mg，62%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 8.80(s,1 H) 8.53(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.39(d,J =2.02 Hz,1 H) 7.86(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 6.65(s,1 H) 4.80-4.73(m,1 H) 4.73-4.25(m,3 H) 3.86-3.41(m,2 H) 3.16(s,7 H) 2.64-2.42(m,2 H) 2.23-1.99(m,8 H) 1.91(br. s.,2 H) 1.83-1.61(m,3 H);HR-MS(m/z MH+) 531.28 RT 4.27 min。
實例28
製備7-環戊基-2-(5-(8-(2-羥基乙基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與2-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基)乙醇組合，產生7-環戊基-2-(5-(8-(2-羥基乙基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(18 mg，59%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.00-8.87(m,1 H) 8.87-8.78(m,1 H) 8.57(d,J =8.08 Hz,1 H) 8.44(s,1 H) 7.79(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 6.54-6.43(m,1 H) 4.81(dq,J =9.09,8.93 Hz,1 H) 4.51(br. s.,1 H) 3.82-3.49(m,4 H) 3.40-2.99(m,10 H) 2.69-2.44(m,4 H) 2.16-1.99(m,4 H) 1.91(d,J =5.56 Hz,2 H) 1.83-1.45(m,4 H);HR-MS(m/z MH+) 533.30 RT 2.56 min。
實例29
7-環戊基-2-(5-(8-異丙基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
向2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(42 mg，0.086 mmol)於6 ml DCM中之溶液中添加丙酮(0.6 ml)，且所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。添加Na(AcO)3 BH(55 mg，0.26 mmol)，且所得反應混合物在室溫下攪拌隔夜。當LCMS顯示反應完成時，反應混合物以DCM稀釋，以NaHCO3 (2×)、鹽水洗滌。經合併水層以DCM反萃取，且經合併有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾且藉由管柱層析法(0-20% MeOH/CHCl2 )純化，產生7-環戊基-2-(5-(8-異丙基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(64 mg，88%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.43(br. s.,1 H) 8.88(s,1 H) 8.57(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.48(d,J =2.53 Hz,1 H) 7.77(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 6.47(s,1 H) 4.80(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 4.39(br. s.,1 H) 3.74-3.30(m,4 H) 3.26-3.04(m,7 H) 2.68-2.49(m,3 H) 2.18-1.95(m,4 H) 1.86(br. s.,2 H) 1.79-1.62(m,3 H) 1.53(br. s.,1 H) 1.07(d,J =6.06 Hz,6 H)。HR-MS(m/z MH+) 531.32 RT 2.71 min。
實例30
7-環戊基-2-(5-((1S,4S,5S)-5-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1S,4S,5S)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-5-醇組合，產生7-環戊基-2-(5-((1S,4S,5S)-5-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(40 mg，63%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.84(br. s.,0.4 H,旋轉異構體) 9.54(br. s.,0.6 H,旋轉異構體) 8.98-8.82(m,1 H) 8.80(s,0.4 H,旋轉異構體) 8.59(s,0.6 H,旋轉異構體) 8.57-8.48(m,1 H) 7.97(d,J =7.07 Hz,0.4 H,旋轉異構體) 7.86(d,J =6.57 Hz,0.6 H,旋轉異構體) 6.46(s,1 H) 4.78(m,1 H) 4.74(br. s.,0.4 H,旋轉異構體) 4.46(br. s.,1 H) 4.17(br. s.,0.6 H,旋轉異構體) 4.07(d,J =9.09 Hz,0.4 H,旋轉異構體) 3.91(d,J =11.62 Hz,0.6 H,旋轉異構體) 3.64-3.49(m,0.6 H,旋轉異構體) 3.49-3.269(m,1 H+0.4 H,旋轉異構體) 3.15(s,6 H) 2.73(m,0.6 H,旋轉異構體) 2.67(m,0.4 H,旋轉異構體) 2.57(m,2 H) 2.25-1.92(m,5 H) 1.81-1.42(m,5 H)。HR-MS(m/z MH+) 490.26 RT 4.25 min。
實例31
7-環戊基-2-(5-((1S,4S,5R)-5-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1S,4S,5R)-2-氮雜雙環[2.2.1]庚-5-醇組合，產生7-環戊基-2-(5-((1S,4S,5R)-5-羥基-2-氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(40 mg，60%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.51-9.43(m,0.3 H,旋轉異構體) 9.43-9.35(m,0.7 H,旋轉異構體) 8.87(s,1 H) 8.66-8.60(m,0.3 H,旋轉異構體) 8.60-8.52(m,0.7 H,旋轉異構體+1 H) 7.94-7.84(m,1 H) 6.48(s,1 H) 4.86-4.75(m,1 H) 4.75-4.71(m,0.3 H,旋轉異構體) 4.32-4.25(m,0.7 H,旋轉異構體) 4.21-4.13(m,0.7 H,旋轉異構體) 4.08-4.02(m,0.3 H,旋轉異構體) 3.61-3.50(m,1 H) 3.15(s,6 H) 3.10-3.01(m,1 H) 2.93-2.83(m,0.7 H,旋轉異構體) 2.78-2.67(m,0.3 H,旋轉異構體H) 2.65-2.50(m,3 H) 2.36-2.20(m,1 H) 2.15-1.99(m,4 H) 1.99-1.88(m,1 H) 1.80-1.65(m,2 H) 1.59(無,2 H)。HR-MS(m/z MH+) 490.26 RT 4.34 min。
實例32
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備5-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯組合，產生5-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(45 mg，63%產率)。HR-MS(m/z MH+) 589.33 RT 4.31 min。
步驟2
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將5-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(45 mg，0.076 mmol)轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(八氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(18 mg，48%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.18(br. s.,1 H) 8.86(s,1 H) 8.51-8.66(m,2 H) 7.90(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 6.55-6.43(m,1 H) 4.81(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 3.88(br. s.,2 H) 3.57(br. s.,2 H) 3.24-3.05(m,8 H) 2.95-2.68(m,4 H) 2.68-2.51(m,2 H) 2.44(br. s.,1 H) 2.18-1.96(m,4 H) 1.82-1.65(m,2 H)。HR-MS(m/z MH+) 489.27 RT 3.30 min。
實例33
7-環戊基-2-(5-((1R,5S,8r)-8-羥基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備7-環戊基-2-(5-((1R,5S,8r)-8-羥基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-醇(例如參看WO 2007 040282)組合，產生7-環戊基-2-(5-((1R,5S,8r)-8-羥基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50 mg，71%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.03(s,1 H) 8.84(s,1 H) 8.56(d,J =9.60 Hz,1 H) 8.48(s,1 H) 7.80(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 6.48(s,1 H) 4.80(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 4.38(br. s.,1 H) 4.08(t,J =4.80 Hz,1 H) 3.87(br. s.,1 H) 3.55-3.38(m,2 H) 3.16(s,6 H) 2.68(br. s.,1 H) 2.65-2.52(m,J =11.81,8.75,8.75,8.59 Hz,2 H) 2.21-1.91(m,6 H) 1.81-1.65(m,5 H) 1.49(br. s.,1 H)。HR-MS(m/z MH+) 504.27 RT 3.55 min。
實例34
7-環戊基-2-(5-(8-(二甲基胺基)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-苯甲基-N,N-二甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-胺
向3-苯甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-酮(107 mg，0.50 mmol)於DCM(2 ml)中之溶液中添加二甲胺(2 ml，THF中之1 M)，且所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。添加Na(AcO)3 BH(316 mg，1.49 mmol)，且反應混合物在室溫下攪拌隔夜。當TLC顯示完成時，反應混合物以DCM稀釋且以水及鹽水洗滌。經合併水層以DCM反萃取。經合併有機層經Na2 SO4 乾燥，過濾，濃縮且藉由管柱層析法純化，產生3-苯甲基-N,N-二甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-胺(80 mg，67%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 7.47-7.23(m,5 H) 3.86(s,2 H) 2.88(d,J =11.62 Hz,2 H) 2.72(dd,J =12.38,3.28 Hz,2 H) 2.52(s,7 H) 2.35(br. s.,2 H) 1.90-1.73(m,4 H)。
步驟2
製備N,N-二甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-胺
將3-苯甲基-N,N-二甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-胺(80 mg，0.45 mmol)溶解於MeOH(10 ml)中，且氛圍換為N2 (3×)。添加10% Pd/C(催化劑)，且氛圍換為H2 (3×)。所得反應混合物在室溫下在氣球壓力下攪拌隔夜。當TLC顯示無UV活性點時，濾出Pd/C(使用MeOH保持一直濕潤)，且濃縮濾液，產生N,N-二甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-胺(44 mg，87%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 3.45(d,J =12.13 Hz,2 H) 2.88(dd,J =12.38,2.78 Hz,2 H) 2.35(d,J =2.02 Hz,2 H) 2.31-2.23(m,6 H) 2.11(t,J =4.80 Hz,1 H) 2.06-1.92(m,2 H) 1.89-1.79(m,2 H)。
製備7-環戊基-2-(5-(8-(二甲基胺基)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與N,N-二甲基-3-氮雜雙環[3.2.1]辛-8-胺組合，產生7-環戊基-2-(5-(8-(二甲基胺基)-3-氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(12 mg，14%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.82(s,1 H)8.76(s,1 H) 8.55(d,J =9.60 Hz,1 H) 8.44(d,J =2.02 Hz,1 H)7.78(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 6.48(s,1 H) 4.87-4.73(m,1 H) 4.31(br. s.,1 H) 3.75(br. s.,1 H) 3.35(m,2 H) 3.16(s,6 H) 2.68-2.51(m,2 H) 2.30(s,7 H) 2.16-1.97(m,6 H) 1.86-1.66(m,6 H)。HR-MS(m/z MH+) 531.32 RT 2.67 min。
實例35
7-環戊基-2-(5-(8-(1-羥基丙-2-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
向2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(105 mg，0.22 mmol)於二氯甲烷(2 ml)中之溶液中添加1-羥基丙-2-酮(2 ml)，且所得反應混合物在室溫下攪拌1小時。添加三乙醯氧基硼氫化鈉，且反應混合物在室溫下攪拌隔夜。當TLC/LCMS顯示完成時，反應混合物以二氯甲烷稀釋，以飽和NaHCO3 (2×)及鹽水洗滌。合併之水層以二氯甲烷反萃取，且合併之有機層經硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮且藉由管柱層析法(0-20%甲醇/二氯甲烷)純化，產生7-環戊基-2-(5-(8-(1-羥基丙-2-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(39 mg，33%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 9.07(s,1 H) 8.85(s,1 H) 8.57(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.45(s,1 H) 7.78(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 6.48(s,1 H) 4.81(dq,J =9.09,8.93 Hz,1 H) 4.48(br. s.,1 H) 3.75-3.30(m,6 H) 3.23-3.00(m,7 H) 2.69-2.50(m,3 H) 2.16-1.97(m,5 H) 1.97-1.66(m,6 H) 1.10(d,J =6.06 Hz,3 H);HR-MS(m/z MH+) 547.32 RT 2.54 min。
實例36
7-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備6-(7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯
遵照一般N-C偶合程序1，將7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(267 mg，0.84 mmol)與6-胺基菸鹼酸甲酯(140 mg，0.92 mmol)組合，純化後產生6-(7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯(364 mg)，且未經進一步表徵即依原樣使用。MSm /z 435.5(MH+ )。
步驟2
製備6-(7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸
向含6-(7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯(364 mg，0.84 mmol)之四氫呋喃(25 mL)中添加5 ml氫氧化鋰水溶液(176 mg，4.19 mmol)。混合物加熱至60℃持續18小時，接著冷卻，接著以6 N鹽酸酸化至pH 4。所得混合物接著以水稀釋，且以20% 2-丙醇之氯仿溶液(3×)萃取。有機層以鹽水洗滌，接著經無水硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮，產生呈棕色粉末形式之6-(7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸，且直接使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ12.94(br. s,1 H),10.26(s,1 H),8.86(s,1 H),8.82(s,1 H),8.37(d,J =9.1 Hz,1 H),8.22(dd,J =9.1,2.5 Hz,1 H),6.68(s,1 H),4.37(m,1 H),3.05(s,6 H),2.85(m,1 H),2.67(m,1 H),2.36(m,1 H) 1.80(m,1 H),1.57(m,2H),1.23(m,4 H)。MSm/z 421.5(MH+ )。
步驟3
製備3-[6-((1R,2R,4S)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(100 mg，0.24 mmol)與3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(61 mg，0.29 mmol)組合，產生3-[6-((1R,2R,4S)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯，其未經純化或進一步表徵直接使用。
步驟4
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-((1R,2R,4S)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(40 mg，33%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ9.87(s,1 H),8.81(s,1 H),8.28(m,2 H),7.81(m,1 H),6.65(s,1 H),4.35(m,1 H),4.21(br. s,1 H),3.35(m,4 H),3.04(s,6 H),2.88-2.85(m,2 H),2.65(s,1 H),2.35(m,1 H) 1.81-1.75(m,1 H),1.61-1.54(m,6 H),1.23(m,3 H)。MSm/z 515.7(MH+ )。
實例37
7-(4-第三丁基-環己基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-{6-[7-(4-第三丁基-環己基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將反-7-(4-第三丁基-環己基)-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(157 mg，0.43 mmol)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯組合，處理後產生3-{6-[7-(4-第三丁基-環己基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2yl胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯，且依原樣使用。
步驟2
製備反-7-(4-第三丁基-環己基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-{6-[7-(4-第三丁基-環己基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成反-7-(4-第三丁基-環己基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(90 mg，37%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ10.06(s,1 H),8.85(s,1 H),8.47-8.43(m,2 H),7.78(dd,J =8.6,2.5 Hz 1 H),6.65(s,1 H),4.45(m,1 H),4.25(m,1 H),4.03(m,1 H),3.08(s,3 H),3.05(s,3 H),2.83(m,2 H),2.61(m,4 H),1.94-1.81(m,8 H),1.15(m,3 H),0.91(s,9 H)。MSm/z 559.7(MH+ )。
實例38
7-環戊基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-胺基-噠嗪-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-胺基-噠嗪-3-甲酸(212 mg，1.0 mmol)與3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(139 mg，1.0 mmol)組合，產生呈白色固體形式之3-(6-胺基-噠嗪-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(169 mg，0.51 mmol，51%產率)。MS m/z 334.4(M+H)+ 。
步驟2
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(98 mg，0.336 mmol)與3-(6-胺基-噠嗪-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(112 mg，0.336 mmol)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(115 mg，0.195 mmol，58%產率)。MS m/z 590.6(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(110 mg，0.187 mmol)轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(55 mg，0.112 mmol，60%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO):δ10.71(s,1 H),8.88(s,1 H),8.60(d,J =8 Hz,1 H),7.82(d,J =8 Hz,1 H),6.68(s,1 H),4.81-4.72(m,1 H),4.22(d,J =12 Hz,1 H),3.53(d,J =12 Hz,1 H),3.48(br s,1 H),3.29(br s,1 H),3.27(d,J =12 Hz,1 H),3.06(s,3 H),3.05(s,3 H)2.93(d,J =12 Hz,1 H),2.42-2.33(m,2 H),2.01-1.96(m,4 H),1.72-1.58(m,6 H)。HRMS計算值C25 H31 N9 O2 .H+ (M+H)+ 490.2679,實驗值490.2676(M+H)+ 。
實例39
7-環戊基-2-(5-(9-羥基-1,5,7-三甲基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N ,N -二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備7-環戊基-2-(5-(9-羥基-1,5,7-三甲基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N ,N -二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照醯胺形成方法1，將含5當量LiCl之6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與1,3,5-三甲基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬-9-醇組合，且產生7-環戊基-2-(5-(9-羥基-1,5,7-三甲基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N ,N -二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(266 mg，68%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.77(s,1 H),8.56(d,J =8.6 Hz,1 H),8.33(s,1 H),8.17(br s,1 H),7.72(d,J =8.6 Hz,1 H),6.49(s,1 H),4.81(m,2 H),3.74(br m,1 H),3.26(s,1 H),3.18(s,6 H),3.07(br m,1 H),2.70-2.56(m,4 H),2.29(br m,3 H),2.19(s,3 H),2.15-2.03(m,4 H),1.89(m,1 H),1.75(m,2 H),1.00(br s,3 H),0.83(br s 3 H)。HRMSm /z 561.3301(M+H)+ 。
實例40
2-(5-((1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備2-(5-((1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法2，將含5當量LiCl之6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸與(1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲酸第三丁酯組合，且產生(1R,5S)-9-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲酸第三丁酯(115 mg，85%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.78(s,1 H),8.60(d,J =9.09 Hz,1 H),8.44(d,J =2.02 Hz,2 H),7.85(dd,J1 =8.59 Hz,J2 =2.02 Hz,1 H),6.49(s,1 H),4.82(m,1 H),4.59-3.75(m,6 H),3.17(s,4 H),3.02(s,2 H),2.95(s,2 H),2.81(m,4 H),2.57(m,1 H),2.09(m,4 H),1.75(m,1 H),1.49(m,9 H)LCMSm/z 604.9(M+H)+ 。
步驟2
製備2-(5-((1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將(1R,5S)-9-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯胺)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-甲酸第三丁酯轉化成2-(5-((1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(80 mg，83%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.82(s,1 H),8.63(d,J =8.6 Hz,1 H),8.56(s,1 H),8.47(d,J =2.0 Hz,1 H),7.87(dd,J1 =8.78 Hz,J2 =2.26 Hz,1 H),6.51(s,1 H),4.83(m,1 H),4.47(s,1 H),4.09(m,4 H),3.77(s,1 H),3.45-3.21(m,4 H),3.19(s,6 H),2.59(m,2 H),2.11(m,5 H),1.77(m,2 H)。HRMSm/z 505.2665(M+H)+ 。
實例41
2-(5-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備6-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照醯胺形成方法1，6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(199 mg，0.5 mmol，1.0當量)與2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(100 mg，0.5 mmol，1.0當量)組合，且產生呈白色固體形式之6-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(214 mg，0.37 mmol，74%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 8.79(s,1 H) 8.53-8.66(m,2 H) 8.08(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 6.53(s,1 H) 4.74-4.92(m,1 H) 4.20-4.61(m,4 H) 4.07-4.16(m,4 H) 3.18(br s,6 H) 2.47-2.65(m,2 H) 2.03-2.20(m,4 H) 1.68-1.85(m,3 H) 1.46(s,9 H)。MS(m/z,MH+): 575.6。
步驟2
製備2-(5-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將6-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-甲酸第三丁酯(120 mg，0.21 mmol，1.0當量)轉化成2-(5-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(35 mg，0.076 mmol，36%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 8.89(br. s.,1 H)8.84(s,1 H) 8.66(s,1 H) 8.58(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.05(dd,J =9.09,2.53 Hz,1 H) 6.50(s,1 H) 4.74-4.92(m,J =9.09,8.84,8.72,8.72 Hz,1 H) 4.51(br. s,,2 H) 4.33(br s,2 H) 3.83(d,J =8.08 Hz,4 H) 3.18(s,6 H) 2.51-2.69(m,2 H) 2.01-2.19(m,4 H) 1.63-1.91(m,3 H)。HR-MS(m/z,MH+): 475.2584。
實例42
2-[5-((1S,5R,6S)-6-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備{(1S,5R,6S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-6-基}-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(100 mg，0.254 mmol，1.0當量)與(1S,5R,6S)-(3-氮雜-雙環[3.1.0]己-6-基)-胺基甲酸第三丁酯(55.3 mg，0.279 mmol，1.1當量)組合，產生呈油狀物之{(1S,5R,6S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-6-基}-胺基甲酸第三丁酯(165 mg)，且未經純化直接使用。MSm/z 575.4(M+H)+ 。
步驟2：
製備2-[5-((1S,5R,6S)-6-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將{(1S,5R,6S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-6-基}-胺基甲酸第三丁酯轉化成2-[5-((1S,5R,6S)-6-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(76 mg，56%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.47(br. s.,2 H) 1.66(br. s.,3 H) 2.00(br. s.,6 H) 2.34-2.48(m,2 H) 2.69(s,1 H) 3.06(br. s.,7 H) 3.36-3.53(m,2 H) 3.75(d,J =5.56 Hz,1 H) 3.88(d,J =12.13 Hz,1 H) 4.76(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 6.65(s,1 H) 7.87(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 8.33(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.40(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.85(s,1 H) 9.95(s,1 H)。MSm/z 475.5(M+H)+ 。
實例43
7-環戊基-2-[5-((1S,3S,5R)-3-羥基-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-((1S,3S,5R)-3-羥基-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(120 mg，0.304 mmol，1.0當量)與(1S,3S,5R)-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛-3-醇(46.4 mg，0.365 mmol，1.2當量)組合，產生7-環戊基-2-[5-((1S,3S,5R)-3-羥基-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(110 mg，72%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.58-1.71(m,2 H) 1.79(br. s.,2 H) 1.88-2.11(m,8 H) 2.22(d,J =7.58 Hz,3 H) 2.42-2.58(m,2 H) 3.08(s,6 H) 4.16(br. s.,2 H) 4.72(五重峰,J =8.84 Hz,2 H) 6.40(s,1 H) 7.81(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H)8.12(br.s.,1H)8.38(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.47(br. s.,1 H) 8.68(s,1 H)。MSm/z 504.6(M+H)+ 。
實例44
7-環戊基-2-[5-((1S,3R,5R)-3-羥基-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-((1S,3R,5R)-3-羥基-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸與(1S,3R,5R)-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛-3-醇組合，產生7-環戊基-2-[5-((1S,3R,5R)-3-羥基-8-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。
實例45
7-環戊基-2-[5-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(100 mg，0.254 mmol，1.0當量)與8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷(55.5 mg，0.279 mmol，1.1當量)組合，產生呈固體形式之7-環戊基-2-[5-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(77 mg，60%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.56-1.76(m,4 H) 2.01(br. s.,6 H) 2.44(br. s.,4 H) 3.06(br. s.,8 H) 3.33(br. s.,4 H) 3.49(br. s.,4 H) 4.76(五重峰，J =8.84 Hz,1 H) 6.66(s,1 H) 7.82-7.88(m,1 H) 8.33-8.41(m,2 H) 8.85(s,1 H) 10.05(s,1 H)。MSm /z 503.6(M+H)+ 。
實例46
2-[5-(7-苯甲基-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備2-[5-(7-苯甲基-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(200 mg，0.507 mmol，1.0當量)與3-苯甲基-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷(162 mg，0.558 mmol，1.1當量)(參考案：PCT國際申請案2006137769，2006年12月2日)組合，產生呈固體形式之2-[5-(7-苯甲基-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(131 mg，39%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.64-1.83(m,3 H) 2.04(d,J =7.07 Hz,2 H) 2.12(d,J =6.57 Hz,2 H) 2.58(br. s.,4 H) 3.18(s,6 H) 3.45(br. s.,3 H) 3.49-3.57(m,1 H) 3.67-3.80(m,1 H) 3.84(br. s.,2 H) 4.02(br. s.,1 H) 4.66-4.88(m,2 H) 6.51(s,1 H) 7.22-7.28(m,1 H) 7.31-7.37(m,5 H) 7.85(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.27(br. s.,1 H) 8.43(s,1 H) 8.51(br. s.,1 H) 8.78(s,1 H)。MSm/z 595.6(M+H)+ 。
實例47
7-環戊基-2-[5-(9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備7-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(266 mg，0.438 mmol，1.0當量)與9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯(100 mg，0.438 mmol，1.0當量)組合，產生呈淡粉紅色粉末形式之7-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯(90 mg，34%產率)。MSm/z 605.2(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-環戊基-2-[5-(9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將7-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-(9-氧雜-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(15 mg，18%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.75(d,J =6.06 Hz,3 H) 2.06-2.18(m,5 H) 2.49-2.66(m,2 H) 3.03-3.14(m,2 H) 3.18(s,6 H) 3.42(dd,J =12.63,2.02 Hz,2 H) 3.63(br. s.,1 H) 3.81(br. s.,2 H) 4.83(t,J =8.84 Hz,1 H) 6.50(s,1 H) 7.85(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 8.42(br. s.,1 H) 8.45-8.51(m,1 H) 8.60(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.79(s,1 H)。MSm/z 505.1(M+H)+ 。
實例48
7-環戊基-2-[5-(1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬烷-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬烷-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(120 mg，0.198 mmol，1.0當量)與1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬烷(43.3 mg，0.218 mmol，1.1當量)組合，產生7-環戊基-2-[5-(1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬烷-4-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(25 mg，23%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.64-1.81(m,2 H) 1.86(br. s.,2 H) 2.00-2.22(m,6 H) 2.51-2.70(m,2 H) 3.03-3.16(m,5 H) 3.18(s,7 H) 3.79(br. s.,2 H) 4.83(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 6.50(s,1 H) 7.81(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.35-8.44(m,2 H) 8.58(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.79(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 503.2891。
實 例49
7-環戊基-2-[5-((R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備5-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
使用醯胺形成方法1，將(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(1.0 g，4.26 mmol，1.0當量)與6-胺基-菸鹼酸(588 mg，4.26 mmol，1.0當量)組合，產生5-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(420 mg，31%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.35-1.40(m,3 H) 1.40-1.51(m,9 H) 1.89(br. s.,2 H) 3.31-3.50(m,2 H) 3.55(d,J =9.09 Hz,1 H) 3.67(dd,J =13.14,6.57 Hz,1 H) 4.50(br. s.,1 H) 4.64(br. s.,1 H) 4.91(br. s.,1 H) 6.51(d,J =6.57 Hz,1 H) 7.64(br. s.,1 H) 8.24(br. s.,1 H);MSm/z 637.0(M+H)+ 。
步驟2：
製備5-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(200 mg，0.683 mmol，1.0當量)與5-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(217 mg，0.683 mmol，1.0當量)組合，產生5-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(100 mg，25%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.47(br. s.,5 H) 1.52(br. s.,5 H) 1.69-1.83(m,2 H) 1.83-2.00(m,2 H) 2.06-2.20(m,4 H) 2.59(br. s.,2 H) 3.18(s,6 H) 3.38-3.58(m,2 H) 3.58-3.82(m,3 H) 4.56(br. s.,1 H) 4.75-4.91(m,1 H) 6.50(s,1 H) 7.96(br. s.,1 H) 8.35(br. s.,1 H) 8.52(br. s.,1 H) 8.59(br. s.,1 H) 8.78(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 575.3109。
步驟3：
製備7-環戊基-2-[5-((R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將5-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-((R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(20 mg，22%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.65-1.85(m,4 H) 2.03(s,2 H) 2.06-2.19(m,6 H) 2.59(br. s.,2 H) 3.18(s,7 H) 3.33(d,J =9.60 Hz,1 H) 3.52(br. s.,1 H) 3.78(br. s.,2 H) 4.72-4.94(m,1 H) 6.38-6.54(m,1 H) 7.96(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.56(s,1 H) 8.61(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.84(br. s.,1 H);HRMS m/z,(M+H)+ : 475.2582。
實例50
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備(3-(6-胺基-2-甲基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(279 mg，1.31 mmol，1.0當量)與6-胺基-2-甲基菸鹼酸(200 mg，1.31 mmol，1.0當量)組合，產生3-(6-胺基-2-甲基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(400 mg，88%產率)。MSm /z 346.6(M+H)+ 。
步驟2：
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-2-甲基-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(127 mg，0.433 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-2-甲基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(180 mg，0.520 mmol，1.2當量)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-2-甲基-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(70 mg，27%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.51(s,10 H) 1.61(t,J =8.34 Hz,1 H) 1.68-1.81(m,2 H) 1.81-1.93(m,1 H) 1.95-2.18(m,7 H) 2.48(br. s.,2 H) 2.56(d,J =8.59 Hz,3 H) 2.62(br. s.,1 H) 3.09(d,J =7.58 Hz,1 H) 3.18(s,7 H) 3.26-3.36(m,1 H) 3.40(br. s.,1 H) 4.17(br. s.,1 H) 4.37(br. s.,1 H) 4.58(d,J =13.14 Hz,1 H) 4.74-4.89(m,J =9.09,8.84,8.72,8.72 Hz,1 H) 6.48(s,1 H) 7.50(br. s.,1 H) 8.11(br. s.,1 H) 8.38(d,J =8.08 Hz,1 H) 8.76(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 603.3417。
步驟3：
製備7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-2-甲基-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(36 mg，71%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.61-1.79(m,3 H) 1.79-1.97(m,3 H) 1.97-2.18(m,5 H) 2.50(br. s.,3 H) 2.52-2.70(m,3 H) 3.09(d,J =12.63 Hz,1 H) 3.18(s,7 H) 3.34(q,J =11.79 Hz,2 H) 3.46(br. s.,1 H) 3.69(br. s.,1 H) 4.55(d,J =12.13 Hz,1 H) 4.81(五重峰，J =8.84 Hz,1 H) 6.48(s,1 H)7.49(br. s.,1 H) 8.03(s,1 H) 8.35(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.76(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 503.2904。
實例51
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-4-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-(6-胺基-4-甲基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(279 mg，1.31 mmol，1.0當量)與6-胺基-4-甲基菸鹼酸(200 mg，1.31 mmol，1.0當量)組合，產生3-(6-胺基-4-甲基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(251 mg，55%產率)。MSm/z 347.0(M+H)+ 。
步驟2：
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-4-甲基-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將1,2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(140 mg，0.479 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-4-甲基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(199 mg，0.574 mmol，1.2當量)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-4-甲基-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(114 mg，38%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.51(s,10 H) 1.59(d,J =9.60 Hz,2 H) 1.67-1.80(m,2 H) 1.80-1.90(m,1 H) 1.99(br. s.,2 H) 2.07(s,4 H) 2.42-2.66(m,5 H) 3.01-3.14(m,1 H) 3.18(s,6 H) 3.26-3.36(m,1 H) 3.36-3.48(m,1 H) 4.17(br. s.,1 H) 4.36(br. s.,1 H) 4.58(d,J =12.63 Hz,1 H) 4.75-4.88(m,J =9.09,8.84,8.72,8.72 Hz,1 H) 6.49(s,1 H) 7.50(br. s.,1 H) 8.39(br. s.,1 H) 8.75(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 603.3405。
步驟3：
製備7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-4-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-4-甲基-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-4-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(50 mg，57%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.61-1.80(m,5 H) 1.80-1.98(m,4 H) 1.99-2.18(m,6 H) 2.34-2.64(m,7 H) 3.08-3.23(m,10 H) 3.27-3.38(m,2 H) 3.38-3.47(m,1 H) 3.50(br. s.,1 H) 4.57(d,J =13.64 Hz,1 H) 4.81(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 6.48(s,1 H) 7.48(br. s.,1 H) 7.99(s,1 H) 8.36(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.75(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 503.2894。
實例52
7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-苯甲基-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
向3-苯甲基-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷(755 mg，3.49 mmol，1.0當量)於CH2 Cl2 (10 ml)中之溶液中添加碳酸二第三丁酯(990 mg，4.54 mmol，1.3當量)及三乙胺(0.730mL，5.24 mmol，1.5當量)，且混合物在23℃下攪拌16小時。反應混合物以CH2 Cl2 稀釋且以水洗滌。收集有機物且乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮成油狀物。使用矽膠層析法以乙酸乙酯/庚烷混合物溶離純化粗產物，產生呈無色油狀物之所要產物(477 mg，41%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.48(s,9 H) 1.51-1.64(m,1 H) 1.64-1.75(m,2 H) 1.75-1.93(m,2 H) 2.21-2.39(m,2 H) 2.79-2.92(m,3 H) 3.40(s,2 H) 4.06(br. s.,1 H) 4.18(br. s.,1 H) 7.21-7.30(m,1 H) 7.34(d,J =4.55 Hz,4 H)。
步驟2：
製備3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
將苯甲基-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(477 mg，1.51 mmol，1.0當量)及氫氧化鈀/碳(466 mg)於乙醇(10 ml)中之混合物在氣球壓力下氫化攪拌直至不再吸收氫氣。反應物接著經矽藻土過濾且減壓濃縮。使用層析法(MeOH/乙酸乙酯)純化粗產物產生3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(170 mg，47%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.49(s,11 H) 1.57-1.70(m,1 H) 1.70-1.79(m,2 H) 1.79-2.01(m,2 H) 2.43-2.58(m,J =19.14,12.69,6.32,6.32 Hz,1 H) 2.93-3.05(m,2 H) 3.05-3.18(m,2 H) 3.99(br. s.,1 H) 4.11(br. s.,1 H)。
步驟3：
製備3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(170 mg，0.751 mmol，1.1當量)與6-胺基-菸鹼酸(94 mg，0.683 mmol，1.0當量)組合，產生3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(170 mg，72%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.50(s,9 H) 1.55-1.72(m,2 H) 1.74-1.98(m,4 H) 3.20(qd,J =7.41,4.55 Hz,3 H) 3.65-3.82(m,J =13.20,6.66,6.66,4.29 Hz,2 H) 4.18(br. s.,1 H) 4.28(br. s.,1 H) 4.66(br. s.,1 H) 4.85(br. s.,1 H) 6.58(d,J =8.59 Hz,1 H) 7.57(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 8.04(s,1 H) 8.16(d,J =2.02 Hz,1 H)。MSm/z 291.4(M+H)+ 。
步驟4：
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.342 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(130 mg，0.376 mmol，1.1當量)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(121 mg,59%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.51(s,10 H) 1.56-1.70(m,3 H) 1.70-1.81(m,3 H) 1.88(br. s.,3 H) 2.05-2.24(m,6 H) 2.50-2.67(m,2 H) 3.18(s,7 H) 3.55(br. s.,1 H) 3.91(br. s.,1 H) 4.25(br. s.,1 H) 4.78-4.90(m,1 H) 6.50(s,1 H) 7.80(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.28(br. s.,1 H) 8.41(s,1 H) 8.59(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.78(s,1 H);MSm/z 603.6(M+H)+ 。
步驟5：
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(86 mg，96%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.71-1.82(m,3 H) 2.02-2.21(m,8 H) 2.60(dd,J =12.13,8.59Hz ,2 H) 3.18(s,6 H)3.36(br. s.,2 H) 4.83(五重峰,J =8.84 Hz,1 H) 6.50(s,1 H) 7.82(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.44(s,1 H) 8.47(s,1 H) 8.61(d,J =8.59 Hz,1 H)8.81(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 503.2893。
實例53
7-(4-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-{6-[7-(4-第三丁基-苯基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將7-(4-第三丁基-苯基)-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.280 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(93 mg，0.280 mmol，1.0當量)組合，產生3-{6-[7-(4-第三丁基-苯基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(112 mg，58%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.36(s,9 H) 1.43(s,9 H) 1.47-1.69(m,2 H) 1.80(br. s.,2 H) 2.90(br. s.,3 H) 3.05(br. s.,3 H) 4.12(br. s.,2 H) 6.92(s,1 H) 7.41(m,J =8.59 Hz,2 H) 7.59(m,J =8.59 Hz,2 H) 7.68(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.28-8.34(m,2 H) 8.95(s,1 H) 10.05(s,1 H)。MSm/z 653.7(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-(4-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-{6-[7-(4-第三丁基-苯基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯以79%轉化成7-(4-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(67 mg)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.32(s,9 H) 1.61(br. s.,3 H) 2.86(br. s.,3 H) 2.94(br. s.,3 H) 3.39(br. s.,2 H) 6.91(s,1 H) 7.33-7.45(m,2 H) 7.45-7.57(m,2 H) 7.61(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 8.27(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.31(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.96(s,1 H) 10.04(s,1 H)。MSm/z 552.9(M+H)+ 。
實例54
7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-{6-[7-(3-第三丁基-苯基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將7-(3-第三丁基-苯基)-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.280 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(93 mg，0.280 mmol，1.0當量)組合，產生3-{6-[7-(3-第三丁基-苯基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(116 mg，60%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.32(s,9 H) 1.43(s,9 H) 1.59(br. s.,2 H) 1.81(br. s.,2 H) 2.86(br. s.,3 H) 2.94(br. s.,3 H) 4.12(br. s.,2 H) 6.91(s,1 H) 7.37-7.43(m,2 H) 7.45-7.58(m,2 H) 7.67(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.32(dd,J =5.81,2.78 Hz,2 H) 8.96(s,1 H) 10.05(s,1 H)。MSm/z 653.7(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-{6-[7-(3-第三丁基-苯基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(75 mg，89%)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.36(s,10 H) 1.60(br. s.,2 H) 1.70(br. s.,2 H) 2.90(br. s.,3 H) 3.05(br. s.,3 H) 3.57(br. s.,2 H) 6.92(s,1 H) 7.41(m,J =8.59 Hz,2 H) 7.59(m,J =8.59 Hz,2 H) 7.66(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.29(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.31(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.95(s,1 H) 10.05(s,1 H)。MSm /z 552.9(M+H)+ 。
實例55
7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-[6-(7-環丁基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環丁基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(200 mg，0.718 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3，8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(262 mg，0.789 mmol，1.1當量)組合，產生3-[6-(7-環丁基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(218 mg，50%產率)。1H NMR(400 MHz,CHLOROFORM-d )δppm 1.51(s,9 H) 1.62(br. s.,1 H) 1.67(br. s.,1 H) 1.77-2.07(m,6 H) 2.41-2.58(m,2 H) 3.17(s,6 H) 3.19-3.29(m,2 H) 3.64(br. s.,1 H) 4.28(br. s.,2 H) 4.54(br. s.,1 H) 5.01(dq,J =8.84,8.67 Hz,1 H) 6.50(s,1 H) 7.83(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.42(d,J =2.02 Hz,2 H) 8.67(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.78(s,1 H);MSm/z 574.9(M+H)+ 。
步驟：2
製備7-環丁基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環丁基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯以74%轉化成7-環丁基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(128 mg)。1 H NMR(400 MHz，氯仿-d )δppm 1.78-2.08(m,10 H) 2.45-2.57(m,2 H) 3.17(s,6 H) 3.20-3.31(m,3 H) 3.56(br. s.,3 H) 4.53(br. s.,1 H) 5.01(五重峰，J =8.84 Hz,1 H) 6.49(s,1 H) 7.82(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 8.43(s,1 H) 8.60(s,1 H) 8.67(d,J =9.60 Hz,1 H) 8.81(s,1 H); MSm /z 474.9(M+H)+ 。
實例56
7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-{6-[7-(1-環丙基-哌啶-4-基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
使用一般布加沃德(Buchwald)方法1，將2-氯-7-(1-環丙基-哌啶-4-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(95 mg，0.273 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(100 mg，0.300 mmol，1.1當量)組合，產生3-{6-[7-(1-環丙基-哌啶-4-基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(131 mg，71%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 0.46(br. s.,2 H) 0.54(br. s.,2 H) 1.52(s,10 H) 1.61(br. s.,2 H) 1.71(br. s.,2 H) 1.88(d,J =10.11 Hz,3 H) 1.96(d,J =6.06 Hz,2 H) 2.37(t,J =11.62 Hz,2 H) 2.79-3.01(m,2 H) 3.20(s,10 H) 3.63(br. s.,2 H) 4.27(br. s.,2 H) 4.41(br. s.,2 H) 6.50(s,1 H) 7.69(br. s.,1 H) 8.22(s,1 H) 8.41(s,1 H) 8.63(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.77(s,1 H);MS m/z 644.6(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-(1-環丙基-哌啶-4-基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-{6-[7-(1-環丙基-哌啶-4-基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯以27%轉化成7-(1-環丙基-哌啶-4-基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(25 mg)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 0.44-0.62(m,4 H) 1.28(d,J =4.55 Hz,2 H) 1.75(br. s.,1 H) 1.91(br. s.,3 H) 2.02(br. s.,2 H) 2.41(br. s.,2 H) 2.93(dd,J =12.38,3.79 Hz,2 H) 3.20(s,6 H) 3.78(br. s.,2 H) 4.43(t,J =12.38 Hz,1 H) 6.51(s,1 H) 7.71(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 8.44(s,1 H) 8.46(br. s.,1 H) 8.64(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.79(s,1 H);MS m/z 544.6(M+H)+ 。
實例57
7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-{6-[7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將1,7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(90 mg，0.247 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(90 mg，0.272 mmol，1.1當量)組合，產生3-{6-[7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(80 mg，47%產率)。MS m/z 660.3(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-{6-[7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基]-吡啶-3-羰基}-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-(1-第三丁基-哌啶-4-基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(42 mg，59%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.09(s,9 H) 1.55-1.66(m,2 H) 1.77-1.87(m,2 H) 2.09-2.15(m,2 H) 2.70-2.84(m,2 H) 3.07(d,J =11.12 Hz,6 H) 3.16(d,J =10.61 Hz,2 H) 4.18-4.28(m,1 H) 6.66(s,1 H) 7.70(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.30(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.59(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.84(s,1 H) 9.96(s,1 H)。MS m/z 560.6(M+H)+ 。
實例58
7-第三丁基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-[6-(7-第三丁基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將7-第三丁基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(150 mg，0.534 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(178 mg，0.534 mmol，1.0當量)組合，產生3-[6-(7-第三丁基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(189 mg，61%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.43(s,10 H) 1.59(br. s.,2 H) 1.74-1.84(m,12 H) 3.00(d,J =2.53 Hz,7 H) 4.14(br. s.,2 H) 6.48(s,1 H) 7.85(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.28-8.39(m,2 H) 8.80(s,1 H) 9.89(s,1 H)。MS m/z 577.6(M+H)+ 。
步驟2：
7-第三丁基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-第三丁基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-第三丁基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(80 mg，48%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.46-1.69(m,4 H) 1.78(s,9 H) 3.00(d,J =2.53 Hz,6 H) 3.42(br. s.,4 H) 4.20(br. s.,1 H) 6.48(s,1 H) 7.79(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 8.29-8.35(m,2 H) 8.80(s,1 H) 9.86(s,1 H)。MS m/z 476.8(M+H)+ 。
實例59
2-{5-[8-((R)-2-胺基-4-甲基硫基-丁醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備((R)-1-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-3-甲基硫基-丙基)-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.205 mmol，1.0當量)與BOC-D-甲硫胺酸(51 mg，0.205 mmol，1.0當量)組合，產生((R)-1-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-3-甲基硫基-丙基)-胺基甲酸第三丁酯(105 mg，68%產率)。1 H NMR(400 MHz，氯仿-d )δppm 1.39-1.56(m,14 H) 1.63(br. s.,2 H) 1.68-1.82(m,3 H) 1.82-1.99(m,4 H) 1.99-2.18(m,10 H) 2.48-2.68(m,5 H) 3.18(s,7 H) 3.73(dd,J =10.36,6.82 Hz,1 H) 4.51(br. s.,1 H) 4.69(br. s.,3 H) 4.77-4.89(m,2 H) 5.28(t,J =10.11 Hz,1 H) 6.51(s,1 H) 7.80(d,J =6.57 Hz,1 H) 8.36(br. s.,1 H) 8.42(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.59(br. s.,1 H) 8.80(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 720.3682。
步驟2：
製備2-{5-[8-((R)-2-胺基-4-甲基硫基-丁醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2,將((R)-1-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-3-甲基硫基-丙基)-胺基甲酸第三丁酯轉化成2-{5-[8-((R)-2-胺基-4-甲基硫基-丁醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(60 mg,91%)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.67-1.83(m,3 H) 1.88(br. s.,3 H) 1.98-2.21(m,10 H)2.53-2.67(m,3 H) 2.67-2.84(m,2 H) 3.18(s,7 H) 3.84(br. s.,1 H) 3.95(br. s.,1 H) 4.45(br. s.,1 H) 4.83(dq,J =9.09,8.93 Hz,2 H) 6.50(s,1 H) 7.83(d,J =6.57 Hz,1 H) 8.44(d,J =11.62 Hz,1 H) 8.53-8.66(m,1 H) 8.85(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 620.3113。
實例60
2-{5-[8-(2-胺基-乙醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備(2-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基}-2-側氧基-乙基)-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將1,7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.205 mmol，1.0當量)與BOC-甘胺酸(39.4 mg，0.225 mmol，1.1當量)組合，產生(2-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]oct-8-基}-2-側氧基-乙基)-胺基甲酸第三丁酯(71 mg，53%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.39(s,9 H) 1.42-1.59(m,1 H) 1.59-1.75(m,3 H) 1.85(d,J =7.58 Hz,2 H) 2.00(dd,J =14.65,7.58 Hz,5 H) 2.41-2.60(m,2 H) 3.09(s,6 H) 3.89(br. s.,2 H) 4.12(br. s.,1 H) 4.53-4.81(m,2 H) 5.35(br. s.,1 H) 6.42(s,1 H) 7.71(dd,J =8.84,2.3 Hz,1 H) 8.31(d,J =2.0 Hz,1 H) 8.48(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.69(s,1 H);HRMS m/z,(M+H)+ : 646.3467。
步驟2：
製備2-{5-[8-(2-胺基-乙醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將(2-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-8-基}-2-側氧基-乙基)-胺基甲酸第三丁酯轉化成2-{5-[8-(2-胺基-乙醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(48 mg，89%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.06(s,3 H) 1.37(s,2 H) 1.46(br. s.,3 H) 1.62(br. s.,2 H) 1.82(d,J =17.68 Hz,5 H) 2.30(br. s.,3 H) 2.86-2.97(m,6 H) 3.79(br. s.,2 H) 3.98(br. s.,1 H) 4.43(br. s.,2 H) 4.49-4.69(m,1 H) 6.27(s,1 H) 7.64(br. s.,1 H) 8.28(br. s.,4 H)8.72(br. s.,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 546.2932。
實例61
7-環戊基-2-{5-[8-(吡咯啶-2-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備2-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.205 mmol，1.0當量)與BOC-脯胺酸(48.5 mg，0.225 mmol，1.1當量)組合，產生2-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯(95 mg，64%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.36-1.57(m,12 H) 1.63-1.86(m,5 H) 1.91(br. s.,4 H) 1.99-2.29(m,10 H) 2.45-2.67(m,2 H) 3.18(s,7 H) 3.43(d,J =6.57 Hz,2 H) 3.60(br. s.,3 H) 4.42(br. s.,2 H) 4.56(br. s.,2 H) 4.68-4.94(m,2 H) 6.53(s,1 H) 7.83(d,J =8.08 Hz,1 H) 8.41(br. s.,1 H) 8.58(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.76-8.80(m,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 686.3769。
步驟2：
7-環戊基-2-{5-[8-(吡咯啶-2-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將2-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-吡咯啶-1-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-{5-[8-(吡咯啶-2-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(36 mg，65%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.67-1.84(m,3 H) 1.90(dd,J =13.14,6.57 Hz,3 H) 1.99-2.28(m,10 H) 2.45-2.69(m,3 H) 3.19(s,6 H) 3.38-3.67(m,3 H) 4.31(br. s.,1 H) 4.71(br. s.,1 H) 4.76-4.89(m,2 H) 4.92(dd,J =8.84,6.82 Hz,1 H) 6.51(s,1 H) 7.87(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.63(t,J =8.59 Hz,1 H) 8.86(s,1 H)。HRMS m/z,.(M+H)+ : 586.3278。
實例62
2-{5-[8-((R)-2-胺基-3-甲基-丁醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備((R)-1-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-2-甲基-丙基)-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(60 mg，0.123 mmol，1.0當量)與BOC-D-纈胺酸(26.7 mg，0.123 mmol，1.0當量)組合，產生((R)-1-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-2-甲基-丙基)-胺基甲酸第三丁酯(82 mg，92%產率)。HRMS m/z,(M+H)+ : 688.3961。
步驟2：
製備2-{5-[8-((R)-2-胺基-3-甲基-丁醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將((R)-1-{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基}-2-甲基-丙基)-胺基甲酸第三丁酯轉化成2-{5-[8-((R)-2-胺基-3-甲基-丁醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基]-吡啶-2-基胺基}-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(20 mg，28%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.05(d,J =6.06 Hz,6 H) 1.13(br. s.,1 H) 1.81(d,J =6.06 Hz,4 H) 1.99(br. s.,4 H) 2.13(br. s.,6 H) 2.65(br. s.,3 H) 2.87(s,8 H) 3.23(s,7 H) 3.68(br. s.,1 H) 4.39(br. s.,1 H) 4.76(br. s.,1 H) 4.81-5.07(m,2 H) 6.55(s,1 H) 7.87(br. s.,1 H) 8.47(br. s.,1 H) 8.67(d,J =8.08 Hz,1 H) 8.92(br. s.,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 588.3424。
實例63
7-環戊基-2-[5-(8-甲基-d3 -3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(8-甲基-d3 -3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
向7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(111 mg，0.227 mmol，1.0當量)、碳酸鉀(37.7 mg，0.273 mmol，1.2當量)於乙腈(1 mL)中之混合物中添加碘甲烷-d3 (0.021 mL，0.341 mmol，1.5當量)，且混合物在23℃下攪拌5小時。反應混合物以乙酸乙酯及水稀釋，且收集有機物，且乾燥(Na2 SO4 )，過濾且濃縮。使用層析法(乙酸乙酯/庚烷)純化殘餘物，產生所要產物(15 mg，12%產率)。1 H NMR(400 MHz，氯仿-d )δppm 1.61-1.83(m,3 H)2.02-2.18(m,7 H) 2.46-2.68(m,2 H) 3.18(s,7 H) 3.35(br. s.,1 H) 3.42(br. s.,2 H) 3.60(d,J =7.58 Hz,1 H) 3.71(br. s.,1 H) 3.79(br. s.,1 H) 4.57(br. s.,1 H) 4.83(五重峰，J =8.84 Hz,1 H) 6.51(s,1 H) 7.83(dd,J =8.84,2.27 Hz,1 H) 8.50(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.60(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.85(s,2 H)。HRMS m/z,(M+H)+ : 506.3029。
實例64
3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯
向7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.205 mmo;，1.0當量)及二異丙基乙胺(0.071 mL，0.409 mmol，2.0當量)於CH2 Cl2 (5 mL)中之溶液中添加稀釋於3.0 mL CH2 Cl2 中之氯甲酸乙酯(0.022 mL，0.225 mmol，1.1當量)。反應混合物在23℃下攪拌1小時，接著以水稀釋。收集有機物，且經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。使用矽膠層析法純化粗反應物，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸乙酯(25 mg，21%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.22-1.37(m,4 H) 1.60(br. s.,2 H) 1.69-1.82(m,3 H) 1.97(br. s.,3 H) 2.04-2.20(m,4 H) 2.56(d,J =8.59 Hz,2 H) 3.19(s,6 H) 3.60(br. s.,2 H) 4.21(q,J =7.07 Hz,2 H) 4.36(br. s.,2 H) 4.56(br. s.,1 H) 4.83(t,J =8.59 Hz,1 H) 6.52(s,1 H) 7.82(dd,J =8.59,2.02 Hz,1 H) 8.39(d,J =2.02 Hz,1 H) 8.59(d,J =8.59 Hz,1 H) 8.77(s,1 H)。HRMS m/z,(M+H)+ ：561.2946。
實例65
2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(80 mg，0.26 mmol)與3-(6-胺基菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(82 mg，0.26 mmol)組合，產生3-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(40 mg，25%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.84(s,1 H),8.72-8.65(m,1 H),8.42(m,1 H),7.89-7.82(m,1 H),6.56(s,1 H),4.63-4.52(m,1 H),4.52-4.41(m,1 H),4.26(br,2 H),4.08-3.96(m,2 H),3.70-3.49(m,3 H),3.16(S,6 H),3.23-3.02(m,1 H),3.03-2.88(m,1 H),2.18-2.07(m,1 H),2.02-1.57(m,7 H),1.51(s,9 H)。HR-MSm/z 605.3201(M+H)+ 。
步驟2
製備2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼醯基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(35 mg，0.058 mmol)轉化成呈游離鹼形式之2-(5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(11 mg，37%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.80(s,1 H),8.60-8.55(m,1 H),8.48-8.35(m,1 H),7.99-7.85(m,1 H),6.93-6.71(m,1 H),4.59-4.35(m,2 H),4.04-3.95(m,2 H),3.63-3.50(m,3 H),3.50-3.39(m,2 H),3.20(s,3 H),3.17(s,3 H),2.97-2.77(m,2 H),2.15-1.96(m,2 H),1.93-1.74(m,5 H),1.70-1.56(m,1 H);HR-MSm/z 505.2657(M+H)+ 。
實例66
7-環己基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般程序A，合成2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(2.4 gm，17%總產率)。MS m/z 307.5(M+H)+ 。
步驟2
製備6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(800 mg，2.61 mmol)與6-胺基-菸鹼酸甲酯(397 mg，2.61 mmol)組合，產生6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯(720 mg，1.70 mmol，65%產率)。MS m/z 423.6(M+H)+ 。
步驟3
製備6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸。向25 mL含有6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸甲酯(860 mg，2.04 mmol)的THF、水及MeOH(2:2:1)溶液中添加固體LiOH(244 mg，10.2 mmol)。在50℃下攪拌90分鐘後，以1 M HCl將反應物酸化至pH 6，接著與水、異丙醇與氯仿之混合物一起分配至兩相中。移除有機層，且濃縮，產生6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(805 mg，1.97 mmol，97%產率)。MS m/z 409.6(M+H)+ 。
步驟4
製備3-[6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯。向6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(50 mg，0.122 mmol)之1 mL DMF溶液中添加DIPEA(32 mg，0.043 mmol)及HBTU(49 mg，0.129 mmol)。在室溫下攪拌15分鐘後，添加3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(31.2 mg，0.147 mmol)，且反應混合物在室溫下攪拌4小時。藉由倒入鹽水中來淬滅反應，且以EtOAc萃取。有機萃取物以Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由NP-LC(Analogix，含10% MeOH之EtOAc)純化粗產物，產生3-[6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(60 mg，0.10 mmol)。MS m/z 603.5(M+H)+ 。
步驟5
製備7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(105 mg，0.174 mmol)轉化成7-環己基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(78 mg，0.155 mmol，89%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.10(s,1 H),8.85(s,1 H),8.47(d,J =9.03 Hz,1 H),8.33(d,J =2.01 Hz,1 H),7.80(dd,J =8.78,2.26 Hz,1 H),6.66(s,1 H),4.28(m,1 H),3.36(br. s.,10 H),3.07(d,J =14.56 Hz,6 H),2.56(m,1 H),1.85(m,3 H),1.74(d,J =9.54 Hz,1 H),1.65(br. s.,4 H),1.33(m,2 H)。MS m/z 503.5(M+H)+ 。
實例67
7-環己基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備5-[2-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-嘧啶-5-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法1，將6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-菸鹼酸(50 mg，0.122 mmol)與2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(29.1 mg，0.147 mmol)組合，產生5-[2-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-嘧啶-5-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(60 mg，0.102 mmol，84%產率)。MS m/z 589.5(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環己基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將5-[2-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-嘧啶-5-羰基]-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(110 mg，0.187 mmol)轉化成7-環己基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(78 mg，0.160 mmol，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.10(s,1 H),8.85(s,1 H),8.47(d,J =9.03 Hz,1 H),8.33(d,J =2.01 Hz,1 H),7.80(dd,J =8.78,2.26 Hz,1 H),6.76(m,0 H),6.66(s,1 H),4.27(m,2 H),3.36(br. s.,8 H),3.07(d,J =14.56 Hz,7 H),1.85(m,5 H),1.71(m,6 H),1.33(m,4 H)。MS m/z 489.5(M+H)+ 。
實例68
7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-{7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基}-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(70 mg，0.190 mmol)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(63.3 mg，0.190 mmol)組合，產生3-(6-{7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基}-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(63 mg，0.095 mmol，50%產率)。MS m/z 664.2(M+H)+ 。
步驟2
製備7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-(6-{7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基}-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(63 mg，0.095 mmol)轉化成7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。(48 mg，0.085 mmol)，89%產率。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 10.08(s,1 H),8.97(s,1 H),8.28(m,2 H),7.73(d,J =8.59 Hz,2 H),7.68(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H),7.56(d,J =8.59 Hz,2 H),6.97(s,1 H),3.41(m,4 H),3.01(m,8 H),1.77(m,5 H),1.63(d,J =4.04 Hz,4 H),1.26(m,1 H),0.86(s,1 H)。MS m/z 564.5(M+H)+ 。
實例69
7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(0.2 g，0.507 mmol)與3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(0.136 g，0.6 mmol)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(0.269 g，0.433 mmol，85%產率)。MSm/z 602.7(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(0.24 g，0.398 mmol)轉化成7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(203 mg，0.363 mmol，91.4%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 11.7(s,1 H),10.18(s,1 H),9.05(s,1 H),8.52(s,1 H),8.13(d,1 H),7.8(d,1 H),6.85(s,1 H),4.8(m,2 H),4.1(m.寬峰，2 H),3.7(m.寬峰,2 H),3.06(s,3 H),3.05(s,3 H),2.3(m.寬峰，2 H),2.25-1.7(m.寬峰,8 H),1.65(m.寬峰,2 H)。MSm /z 502.7(M+H)+ 。
實例70
7-環戊基-2-[5-(3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備7-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸苯甲酯
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(406 mg，1.03 mmol)與3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸苯甲酯(266 mg，0.9 mmol)組合，產生7-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸苯甲酯(0.466 g，0.723 mmol，80%產率)。MSm/z 639.3(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-(3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
向圓底燒瓶中組合7-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-甲酸苯甲酯(0.461 g，0.722 mmol)、甲醇乙酸乙酯(12 ml)、THF(3 ml)、甲醇(3 ml)及Pd/C/10%。混合物置於氫氣球下且攪拌隔夜。混合物以氮氣淨化，隨後添加二氯甲烷。所得混合物經矽藻土墊過濾。矽藻土以額外二氯甲烷洗滌。合併有機物且濃縮成殘餘物。藉由矽膠層析法純化殘餘物，產生7-環戊基-2-[5-(3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-7-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(338 mg，0.67 mmol，93%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.82(s,1 H),8.63(d,J =8.6 Hz,1 H),8.56(s,1 H),8.47(d,J =2.0 Hz,1 H),7.87(dd,J1 =8.78 Hz,J2 =2.26 Hz,1 H),6.51(s,1 H),4.83(m,1 H),4.47(s,1 H),4.09(m,4 H),3.77(s,1 H),3.45-3.21(m,4 H),3.19(s,6 H),2.59(m,2 H),2.11(m,5 H),1.77(m,2 H);HRMSm/z 505.2665(M+H)+ 。
實例71-72
藉由SFC層析法(Chiralpak AD-H(Chiral Technologies),21.2×250 mm,5 μm,10%甲醇,100毫巴CO2 ,75 g/min流動速率,Thar SFC Prep-80系統)對掌性分離外消旋7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺，產生實例717-環戊基-2-[5-((1S,6R)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(滯留時間約2.5分鐘)及實例27-環戊基-2-[5-((1R,6S)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(滯留時間約3.3分鐘)。
實例71
7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 11.7(s,1 H),10.18(s,1 H),9.05(s,1 H),8.52(s,1 H),8.13(d,1 H),7.8(d,1 H),6.85(s,1 H),4.8(m,2 H),4.1(m.寬峰,2 H),3.7(m.寬峰,2 H),3.06(s,3 H),3.05(s,3 H),2.3(m.寬峰,2 H),2.25-1.7(m.寬峰,8 H),1.65(m.寬峰,2 H)。MSm/z 502.7(M+H)+ 。
實例72
7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 11.7(s,1 H),10.18(s,1 H),9.05(s,1 H),8.52(s,1 H),8.13(d,1 H),7.8(d,1 H),6.85(s,1 H),4.8(m,2 H),4.1(m. 寬峰,2 H),3.7(m. 寬峰,2 H),3.06(s,3 H),3.05(s,3 H),2.3(m. 寬峰,2 H),2.25-1.7(m. 寬峰,8 H),1.65(m. 寬峰,2 H)。MSm/z 502.7(M+H)+ 。
實例73
7-環戊基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-胺基-噠嗪-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯。向6-胺基-噠嗪-3-甲酸(212 mg，1.0 mmol)於DMF(5 mL)中之溶液中添加3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(139 mg，1.0 mmol)、HATU(456 mg，1.2 mmol)及N,N-二異丙基乙胺(0.52 mL，3.0 mmol)。混合物在室溫下攪拌隔夜，此後將其以EtOAc稀釋，以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，濃縮且經標準二氧化矽(0-20%MeOH/DCM)純化，產生白色固體(169 mg，0.51 mmol)。MS m/z 334.4(M+H)+ 。
步驟2
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯。向4 mL微波小瓶中，一起添加2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(98 mg，0.336 mmol)、3-(6-胺基-噠嗪-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(112 mg，0.336 mmol)、BINAP(10.5 mg，0.017 mmol)、Cs2 CO3 (164 mg，0.504 mmol)及Pd(OAc)2 (3.8 mg，0.017 mmol)。將試管蓋上蓋子，接著以N2 淨化3次。添加二噁烷(1.68 mL)，接著在微波反應器中將蓋上蓋子的試管加熱至120℃持續20分鐘。冷卻後，將反應混合物以庚烷稀釋，沈澱出粗產物。藉由過濾分離粗產物，再懸浮於水中，進行劇烈攪拌且以音波處理。藉由過濾再分離之後，藉由標準相二氧化矽層析法(0至20% MeOH/EtOAc梯度)純化產物產生淡棕黃色固體(115 mg，0.195 mmol)。MS m/z 590.6(M+H)+ 。
步驟3：
製備7-環戊基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
在-78℃下，向3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(110 mg，0.187 mmol)於DCM(1 ml)中之溶液中添加TFA(1 mL，13.0 mmol)。升溫至室溫且攪拌1小時後，減壓濃縮反應物。將所得油性殘餘物溶解於2 mL MeOH中，經PL-HCO3 MP-Resin濾筒沖洗移除TFA，接著藉由HPLC純化產生白色固體(55 mg，0.112 mmol)。1 H NMR(400 MHz,DMSO):δ,10.71(s,1 H),8.88(s,1 H),8.60(d,J =8 Hz,1 H),7.82(d,J =8 Hz,1 H),6.68(s,1 H),4.81-4.72(m,1 H),4.22(d,J =12 Hz,1 H),3.53(d,J =12 Hz,1 H),3.48(br s,1 H),3.29(br s,1 H),3.27(d,J =12 Hz,1 H),3.06(s,3 H),3.05(s,3 H)2.93(d,J =12 Hz,1 H),2.42-2.33(m,2 H),2.01-1.96(m,4 H),1.72-1.58(m,6H).;HRMS計算值C25 H31 N9 O2 .H+ (M+H)+ 490.2679，實驗值490.2676(M+H)+ 。
實例74
7-環戊基-2-[5-(8-氧雜-3-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-(8-氧雜-3-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(528 mg，1.34 mmol)與8-氧雜-3-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷(199 mg，1.34 mmol)組合，產生7-環戊基-2-[5-(8-氧雜-3-氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(213 mg，0.435 mmol，32.5%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.74(m,8H),2.07(m,5H),2.58(m,2H),3.17(s,7H),4.81(dd,1H),6.48(s,1H),7.79(dd,8.30(s,1H),8.39(d,1H),8.56(d,1H),8.77(s,1H)。MSm/z 490.5(M+H)+ 。
實例75
7-環戊基-2-[5-(8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯
遵照一般醯胺形成方法3，將6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)菸鹼酸(385 mg，0.97 mmol)與8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(215 mg，0.887 mmol)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(323 mg，0.522 mmol，59%產率)。MS 619.7(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-(8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(313 mg，0.506 mmol)轉化成7-環戊基-2-[5-(8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(187 mg，0.35 mmol，69.1%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 1.75(d,3 H) 2.06-2.18(m,5 H) 2.49-2.66(m,2 H) 3.03-3.14(m,2 H) 3.18(s,6 H) 3.42(dd,2.0 Hz,2 H) 3.63(br. s.,1 H) 3.81(br. s.,2 H) 4.83(t,1 H) 6.50(s,1 H) 7.85(dd,1 H) 8.42(br. s.,1 H) 8.45-8.51(m,1 H) 8.60(d,1 H) 8.79(s,1 H)。MS 518.6(M+H)+ 。
實例76
7-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
藉由SFC層析法(Chiralpak AD-H(Chiral Technologies),21.2×250 mm,5 μm,10%甲醇,100毫巴C02 ,75 g/min流動速率,Thar SFC Prep-80系統)對掌性分離外消旋7-外-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺，產生對映異構體1：7-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(對映異構體1滯留時間1.9分鐘)及對映異構體2：7-(1S,2S,4R)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(對映異構體2滯留時間2.4分鐘)。
步驟2
製備3-[6-((1R,2R,4S)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將17-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(90 mg，0.28 mmol)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(99 mg，0.30 mmol)組合，產生3-[6-((1R,2R,4S)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯，且未經進一步表徵即依原樣使用。
步驟3
製備7-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2,將3-[6-((1R,2R,4S)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-(1R,2R,4S)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(15 mg，10%總產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ9.94(s,1 H),8.82(s,1 H),8.39(s,1 H),8.29(d,J =8.6,1 H),7.89(d,J =8.6,1 H),6.65(s,1 H),4.46(m,1 H),4.35(m,1 H),3.96(m,1 H),3.04(s,6 H),2.86(m,3 H),2.62(m,3 H),2.37(m,1H),1.85-1.79(m,5 H),1.55(m,2H),1.22(m,3 H)。MSm/z 515.7(MH+ )。
實例77
7-(1S,2S,4R)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-[6-((1S,2S,4R)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照實例76中之一般N-C偶合程序1，將7-(1S,2S,4R)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-氯-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(90 mg，0.28 mmol)與3-(6-胺基-吡啶-3-羰基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯組合，產生3-[6-((1S,2S,4R)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯，且未經進一步表徵即依原樣使用。
步驟2
製備7-(1S,2S,4R)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-((1S,2S,4R)-7-雙環[2.2.1]庚-2-基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-羰基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯轉化成7-(1S,2S,4R)-雙環[2.2.1]庚-2-基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺，其純化後產生標題化合物(5 mg，3%總產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ9.94(s,1 H),8.82(s,1 H),8.39(s,1 H),8.29(d,J =8.6,1 H),7.89(d,J =8.6,1 H),6.65(s,1 H),4.46(m,1 H),4.35(m,1 H),3.96(m,1 H),3.04(s,6 H),2.86(m,3 H),2.62(m,3 H),2.37(m,1H),1.85-1.79(m,5 H),1.55(m,2H),1.22(m,3 H)。MSm/z 514.8(MH+ )。
實例78
2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備[3-(6-硝基-吡啶-3-基)-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基]-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶(50 mg，0.246 mmol)與3-氮雜雙環[3.1.0]己-1-基胺基甲酸第三丁酯(48.8 mg，0.246 mmol)組合，產生75 mg[3-(6-硝基-吡啶-3-基)-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基]-胺基甲酸第三丁酯(95%產率)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 321.3。
步驟2
製備[3-(6-胺基-吡啶-3-基)-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基]-胺基甲酸第三丁酯
向[3-(6-硝基-吡啶-3-基)-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基]-胺基甲酸第三丁酯(150 mg，0.468 mmol)於MeOH-CH2 Cl2 (3:1)中之溶液中添加Pd/C(24.92 mg，0.234 mmol)。所得混合物在H2 氣球(H2 /真空交換3次)下在室溫下攪拌4小時。LCMS顯示完全轉化。反應混合物接著與DCM一起經矽藻土墊過濾且濃縮產生黑色沈澱物。此沈澱物稀釋於乙酸乙酯中，隨後過濾。接著蒸發濾液，產生120 mg[3-(6-胺基-吡啶-3-基)-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基]-胺基甲酸第三丁酯(88%產率)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 291.1。
步驟3
製備{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基}-胺基甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基]-胺基甲酸第三丁酯(120 mg，0.413 mmol)與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(121 mg，0.413 mmol)組合，產生200 mg{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基}-胺基甲酸第三丁酯(89%產率)。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 547.0。
步驟4
製備2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將{3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-1-基}-胺基甲酸第三丁酯轉化成2-[5-(1-胺基-3-氮雜-雙環[3.1.0]己-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺，20 mg。MS(ESI) m/e(M+H+ ): 447.5;1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.14(1 H,s),8.72(1 H,s),8.05(1 H,d),7.65(1 H,d),7.00(1 H,dd),6.58(1 H,s),4.67-4.76(1 H,五重峰.),3.62(1 H,d),3.35(5 H,s),3.22(1 H,d),3.05(6 H,d),2.42(2 H,br. s.),1.96-1.99(4 H,d),1.63(2 H,br. s.),0.85(1 H,m),0.55(1 H,m)。
實 例79
7-環戊基-2-[6-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備2-胺基-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
向2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(2.93 g，10 mmol)於50 mL二噁烷中之懸浮液中添加二苯甲酮亞胺(1.90 g，10.5 mmol)、Pd(OAc)2 (0.11 g，0.5 mmol)、BINAP(0.31 g，0.5 mmol)及Cs2 CO3 (4.89 g，15 mmol)，且燒瓶以N2 淨化。接著嘧封試管，且在120℃下加熱混合物1小時。接著，與庚烷一起添加懸浮液且過濾。沈澱物以DCM萃取，且藉由SiO2 管柱層析法純化萃取物產生2-(二苯亞甲基-胺基)-7-(1-乙基-丁基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(3.5 g，8.0 mmol，80%產率)。MS m/z 438.5(M+H)+ 。
步驟2
製備2-胺基-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
向2-(二苯亞甲基-胺基)-7-(1-乙基-丁基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(3.5 g，8.0 mmol)於26.7 mL THF中之溶液中添加2 M HCl水溶液(1.32 mL)，且攪拌混合物20分鐘。向其中添加60 mL庚烷：EtOAc(4:1 v/v)及60 mL 0.5 N HCl水溶液，且分離各層。酸性水層以25% NaOH水溶液鹼化至pH 10，且以EtOAc再次萃取。有機萃取物接著以鹽水洗滌，乾燥(Na2 SO4 )，濃縮且經SiO2 管柱層析法(含0-20% MeOH之EtOAc)純化產生呈白色固體形式之2-胺基-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(1.68 g，6.15 mmol，77%產率)。MS m/z 274.4(M+H)+ 。
步驟3
合成3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
向乾燥壓力管中之3,6-二溴-噠嗪(400 mg，1.68 mmol)於8 mL甲苯中之懸浮液中添加4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(323 mg，1.345 mmol)、Pd2 (dba)3 (154 mg，0.168 mmol)、4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(xantphos)(195 mg，0.336 mmol)及NaOt -Bu(242 mg，2.52 mmol)，且懸浮液以N2 鼓泡3分鐘。接著密封試管，且在100℃下加熱混合物3小時。接著，打開封口，且向混合物添加更多Pd2 (dba)3 (41 mg，0.045 mmol)、4,5-雙(二苯膦基)-9,9-二甲基二苯并哌喃(52 mg，0.091 mmol)、NaOt -Bu(65 mg，0.680 mmol)及2-胺基-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(124 mg，0.453 mmol)。混合物於100℃下再加熱16小時，且懸浮液經矽藻土栓過濾，且以含10% MeOH之DCM洗滌。合併所收集之濾液，且藉由兩次連續SiO2 管柱純化產生呈白色固體形式之3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)噠嗪-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(66 mg，0.112 mmol，8%產率)。MS m/z 590.6(M+H)+ 。
步驟4
合成製備7-環戊基-2-[6-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(60 mg，0.10 mmol)轉化成7-環戊基-2-[6-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(9 mg,0.018 mmol，18%產率)。1 H NMR(400 MHz,二氯甲烷-d 2 )δppm 8.69(s,1 H),8.63(d,J =9.6 Hz,1 H),8.44(br. s.,1 H),7.68(d,J =9.6 Hz,1 H),6.39(s,1 H),4.72(m,1 H),4.36(dd,J =15.2,6.6 Hz,1 H),3.88(d,J =15.2 Hz,1 H),3.72(m,1 H),3.59(m,1 H),3.02(s,6 H),2.87(m,1 H),2.75(m,1 H),2.42(m,2 H),1.98(m,5 H),1.78(m,3 H),1.65(m,2 H)；MS m/z 490.5(M+H)+ ;HRMS:m /z (M+H)計算值C25 H31 N9 O2 : 490.2679,實驗值：490.2693。
實例80
7-環庚基-2-[5-(2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶(110 mg，0.542)與2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(135 mg，0.596 mg)組合，其在矽膠層析法純化後產生3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(290 mg，81%)。MSm/z 349.0(MH+ )，且未經進一步表徵即直接使用。
步驟2
製備3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，在氮氣下添加含3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(290 mg，0.83 mmol)之甲醇(10 mL)，接著添加10%鈀/木炭(200 mg，過量)。以氫氣淨化，且在氫氣氛圍下攪拌16小時。以氮氣淨化，且經矽藻土墊過濾，以甲醇洗滌。真空濃縮產生3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(146 mg，60%)。其未經進一步純化即使用。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ7.73(d,J =2.6 Hz,1 H),7.21(dd,J =9.1,2.6 Hz 1 H),6.43(d,J =9.1 Hz,1 H),6.01(s,2 H),4.38(br. s,1 H),4.26(m,1 H),3.77(m,1 H),3.30(m,1 H),2.17-2.07(m,2 H),2.02-1.95(m,2 H),1.43(s,9 H);MSm/z 319.5(MH+ )。
步驟3
製備7-環庚基-2-[5-(2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(146 mg，0.46 mmol)與2-氯-7-環庚基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(134 mg，0.42 mmol)組合，處理後產生7-環庚基-2-[5-(2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺第三丁酯，且未經進一步表徵直接使用。
步驟4
製備7-環庚基-2-[5-(2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將7-環庚基-2-[5-(2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺第三丁酯轉化成7-環庚基-2-[5-(2-側氧基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，48%產率)。MSm/z 503.6(MH+ );1 H NMR(400 MHz,DMSO-d6 )δ9.78(s,1 H),8.81(s,1 H),8.46(d,J =9.1 Hz,1 H),8.24(d,J =2.5 Hz 1 H),7.70(dd,J =9.1,2.5 Hz 1 H),6.63(s,1 H),4.44(m,1 H),3.76-3.70(m,2 H),3.62(m,1 H),3.16(s,1 H),3.08(s,3 H),3.06(s,3 H)2.54(m,3 H),2.01-1.75(m,8 H),1.74-1.58(m,4 H),1.5-1.43(m,2 H)。
實例81
7-環庚基-2-[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備順-5-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶(4.71 g，23.2 mmol，1.05當量)與順-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(5 g，22.1 mmol，1.0當量)組合，其在矽膠純化後產生順-5-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(6.3 g，81%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(m,2 H),8.34(d,J =9.09 Hz,1 H),4.20(dd,J1 =9.85 Hz,J2 =6.82 Hz,1 H),4.02-3.85(m,2 H),3.80(d,J =10.11 Hz,1H),3.68(m,1H),1.52-1.43(m,3 H)。
步驟2
製備順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，順-5-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(1.05 g，3.01 mmol)以定量產量還原成順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(1.0 g)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.09(s,1 H),7.95(br s,1 H),6.57(d,J =9.6 Hz,1 H),4.58(br s,2H),4.04(dd,J1 =10.11 Hz,J2 =6.57 Hz,1 H). 3.93(dd,J1 =11.62 Hz,J2 =2.02 Hz,1 H) 3.86(t,1 H),3.69-3.55(m,2 H),3.24(m,2 H),3.11(m,1 H),1.48(s,9 H);MSm/z 319.4(M+H)+ 。
步驟3
製備順-5-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50.4 mg，0.157 mmol)與順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(50 mg，0.157 mmol，1.0當量)組合，在矽膠層析後產生順-5-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(90 mg，94%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.76(s,1 H),8.65(d,J =9.6 Hz,1 H),8.54(s,1 H),8.34(s,1 H),8.18(s,1 H),6.46(s,1 H),4.54(m,1 H),4.13(dd,J1 =9.85 Hz,J2 =6.82 Hz,1 H),3.97(d,J =10.61 Hz,1 H),3.89(t,J =9.85 Hz,1 H),3.62-3.76(m,2 H),3.06-3.40(m,9 H),2.65(q,J =10.95 Hz,2 H),2.02(m,2 H),1.89(m,2 H),1.74(m,4 H),1.60(m,2 H),1.49(m,9 H)。MSm/z 603.6(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法2,在純化後獲得7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(64 mg，85%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.73(s,1 H),8.62(d,J =9.6 Hz,1 H),8.42(d,J =2.53 Hz,1 H),8.26(dd,J1 =9.09,J2 =3.03 Hz,1 H),8.01(s,1 H),7.28(s,1 H),6.45(s,1 H),4.54(m,1 H),4.17(m,1 H),3.63(dd,J1 =9.60,J2 =3.03 Hz,1 H),3.53(m,1 H),3.31-3.12(m,8 H),3.11-2.92(m,2 H),2.64(m,2 H),2.02(m,2 H),1.88(m,2 H),1.81-1.67(m,5 H),1.59(m,2 H);HRMSm/z 503.2889(M+H)+ 。
步驟5
藉由CHIRALPAKAS-H對掌性管柱分離順式外消旋化合物7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(56 mg)。分離移動相為含0.2% DEA之30% MeOH。收集到兩個峰。收集到較快移動之對映異構體為對映異構體-1(23 mg，38%產率)，且較慢移動之對映異構體為對映異構體-2(25 mg，43%產率)。
實例82
7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,6aR)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。對映異構體-11 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.73(s,1 H),8.62(d,J =9.09 Hz,1 H),8.42(d,J =2.53 Hz,1 H),8.26(dd,J1 =9.35,J2 =2.78 Hz,1 H),8.02(s,1 H),7.28(s,1 H),6.45(s,1 H),4.54(m,1 H),4.17(m,1 H),3.63(dd,J1 =9.85,J2 =2.78 Hz,1 H),3.53(m,1 H),3.31-3.12(m,8 H),3.11-2.94(m,2 H),2.64(m,2 H),2.02(m,2 H),1.88(m,2 H),1.81-1.67(m,5 H),1.59(m,2 H);HRMSm/z 503.2882(M+H)+ 。
實例83
7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。對映異構體-21 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.73(s,1 H),8.62(d,J =9.09 Hz,1 H),8.42(d,J =2.53 Hz,1 H),8.26(dd,J1 =8.84,J2 =2.78 Hz,1 H),8.00(s,1 H),7.28(s,1 H),6.45(s,1 H),4.54(m,1 H),4.17(m,1 H),3.63(dd,J1 =9.85,J2 =2.78 Hz,1 H),3.53(m,1 H),3.31-3.12(m,8 H),3.11-2.94(m,2 H),2.64(m,2 H),2.02(m,2 H),1.88(m,2 H),1.81-1.67(m,5 H),1.59(m,2H);HRMSm/z 503.2890(M+H)+ 。
實例84
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺與順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯組合，純化後產生順-5-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-甲酸第三丁酯(82 mg，89%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.52(d,J =9.09 Hz,1 H),8,40(s,1 H),8.17(br s,1 H),8.08(s,1 H),6.46(s,1 H),4.81(m,1 H),4.11(dd,J1 =10.11 Hz,J2 =6.57 Hz,1 H),3.96(d,J =11.62 Hz,1 H),3.88(t,J =9.60 Hz,1 H),3.67(m,2 H),3.28(m,2 H),3.14(m,7 H),2.58(m,2 H),2.08(m,4 H),1.74(m,2 H),1.48(m,9 H)。LCMSm/z 575.6(M+H)+ 。
步驟2
遵照脫除保護基之方法2，獲得7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(61 mg，90%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1 H),8.51(d,J =9.09 Hz,1 H),8.44(d,J =2.53 Hz,1 H),8.23(dd,J1 =9.09,J2 =2.53 Hz,1 H),8.13(s,1 H),6.47(s,1 H),4.82(m,1 H),4.16(m,1 H),3.62(dd,J1 =10.11,J2 =3.03 Hz,1 H),3.53(dd,J1 =11.12,J2 =2.02 Hz,1 H),3.29-3.13(m,8 H),3.08-2.98(m,2 H),2.59(m,2 H),2.08(m,5 H),1.75(m,2 H)。HRMSm/z 475.2591(M+H)+ 。
步驟3
藉由CHIRALPAKAS-H對掌性管柱分裂7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-順-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(52 mg)。分離移動相為含0.2% DEA之35% MeOH。收集到兩個峰。收集到較快移動之對映異構體為對映異構體-1(15 mg，29%產率)，且較慢移動之對映異構體為對映異構體-2(18 mg，34%產率)。
實例85
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,6aR)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。對映異構體-1
1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1 H),8.51(d,J =9.09 Hz,1 H),8.44(d,J =2.53 Hz,1 H),8.23(dd,J =9.09,3.03 Hz,1 H),8.06(s,1 H),6.47(s,1 H),4.82(m,1 H),4.17(m,1 H),3.64(dd,J1 =9.85,J2 =2.78 Hz,1 H),3.55(d,J =11.12,1 H),3.29-3.13(m,8 H),3.08-2.98(m,2 H),2.59(m,2 H),2.09(m,5 H),1.75(m,2 H)。HRMSm /z 475.2568(M+H)+ 。
實例86
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。對映異構體-2
1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.51(d,J =9.09 Hz,1 H),8.42(d,J =2.53 Hz,1 H),8.24(dd,J1 =9.09,J2 =2.53 Hz,1 H),8.01(s,1 H),6.47(s,1 H),4.82(m,1 H),4.17(m,1 H),3.62(dd,J =9.85,2.78 Hz,1 H),3.53(d,J =11.62,1 H),3.29-3.13(m,8 H),3.08-2.98(m,2 H),2.59(m,2 H),2.09(m,5 H),1.75(m,2 H)。HRMSm/z 475.2573(M+H)+ 。
實例87
順-5-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯
步驟1
順-5-(6-硝基吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶與順-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯組合，且純化後產生順-5-(6-硝基吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯(1.0 g，85%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.58(d,J =2.53 Hz,1 H),8.28(d,J =8.59 Hz,1 H),8.07(dd,J1 =8.84,J2 =2.27 Hz,1 H),.4.18-3.61(m,4 H),3.29(m,2 H),2.85(m,3 H),2.55(m,1 H),1.47(s,9 H)。LCMSm/z 362.8(M+H)+ 。
步驟2
製備順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，獲得順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯(300 mg，96%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 7.93(d,J =2.02 Hz,1 H),7.45(dd,J1 =9.09,J2 =2.53 Hz,1 H),6.59(d,J =9.09 Hz,1 H),4.92(br s,2 H),3.83-3.00(m,6 H),2.91-2.66(m,3 H),2.48(dd,J1 =16.42,J2 =5.81 Hz,1 H)。LCMSm/z 332.8(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺與順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯組合，且純化後產生順-5-(6-(7-環庚基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯(85 mg，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.77(s,1 H),8.66(d,J =9.09 Hz,1 H),8.48(br s,1 H),8.24(s,1 H),7.64(dd,J1 =9.09 Hz,J2 =2.53 Hz,1 H),6.45(s,1 H),4.53(m,1 H),3.84(dd,J1 =13.14 Hz,J2 =5.56 Hz,1 H),3.70(m,3 H),3.31(m,2 H),3.17(s,6 H),2.82(m,3 H),2.63(m,2 H),2.51(dd,J1 =16.42 Hz,J2 =5.81 Hz,1 H),2.01(m,2 H),1.87(m,2 H),1.73(m,4 H),1.58(m,2 H),1.48(s,9 H)。LCMSm/z 617.7(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法2，獲得7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(64 mg，89%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.64(d,J =9.09 Hz,1 H),8.24(d,J =2.53 Hz,1 H),8.19(s,1 H),7.68(dd,J1 =8.84,J2 =2.78 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.54(m,1 H),3.88(dd,J1 =13.14,J2 =4.04 Hz,1 H),3.63(dd,J1 =13.14,J2 =5.05 Hz,1 H),3.29(m,2 H),3.18(s,6H),2.84-2.50(m,7 H),2.02(m,2 H),1.93-1.66(m,7 H),1.58(m,2 H)。HRMSm/z 517.3062(M+H)+ 。
步驟5
藉由CHIRALPAKAD-H對掌性管柱分離順式外消旋化合物7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(56 mg)。分離移動相為含0.2%DEA之35% MeOH。收集到兩個峰。收集到較快移動之對映異構體為對映異構體-1(16 mg，28%產率)，且較慢移動之對映異構體為對映異構體-2(16 mg，28%產率)。未測定絕對立體構型。
實例88
7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。對映異構體-1
1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.78(s,1 H),8.66(d,J =9.09 Hz,1 H),8.46(s,1 H),8.29(d,J =2.02 Hz,1 H),8.19(s,1 H),7.68(dd,J1 =8.84,J2 =2.78 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.54(m,1 H),3.90(dd,J1 =12.63,J2 =4.04 Hz,1 H),3.71(dd,J1 =13.14,J2 =4.55 Hz,1 H),3.37(m,2 H),3.19(s,6 H),2.94-2.57(m,7 H),2.02(m,2 H),1.96-1.65(m,7 H),1.58(m,2 H)。HRMSm /z 517.3051(M+H)+ 。
實例89
7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。對映異構體-2。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1 H),8.63(d,J =9.09 Hz,1 H),8.35(s,1 H),8.25(d,J =2.53 Hz,1 H),7.66(dd,J1 =9.09,J2 =2.53 Hz,1 H),6.44(s,1 H),4.53(m,1 H),3.87(dd,J1 =13.39,J2 =4.29 Hz,1 H),3.64(dd,J1 =13.14,J2 =5.56 Hz,1 H),3.30(m,2 H),3.17(s,6 H),2.87-2.50(m,7 H),2.04(m,2 H),1.86(m,2 H),1.73(m,3 H),1.58(m,2 H)。HRMSm/z 517.3044(M+H)+ 。
實例90
步驟1
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺與順-5-(6-胺基吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯組合，且純化後產生順-5-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-6-側氧基六氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-2(3H)-甲酸第三丁酯(81 mg，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.79(s,1 H),8.56(s,1 H),8.53(s,1 H),8.24(d,J =2.53 Hz,1 H),7.63(dd,J1 =9.09 Hz,J2 =2.53 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.81(m,1 H),3.84(dd,J1 =13.14 Hz,J2 =5.56 Hz,1 H),3.78-3.63(m,3 H),3.49-3.21(m,2 H),3.16(s,6 H),2.79(m,3 H),2.55(m,3 H),2.07(m,4 H),1.72(m,2 H),1.48(s,9 H)。LCMSm/z 589.6(M+H)+ 。
步驟2
遵照脫除保護基之方法2，獲得7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(64 mg，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.52(d,J =8.59 Hz,1 H),8.22(d,J =2.53 Hz,1 H),8.09(s,1 H),7.66(dd,J1 =8.84 Hz,J2 =2.78 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.81(m,1 H),3.87(dd,J1 =12.88 Hz,J2 =4.29 Hz,1 H),3.63(dd,J1 =12.88 Hz,J2 =5.31 Hz,1 H),3.30(m,2 H),3.17(m,6 H),2.87-2.49(m,7 H),2.07(m,5 H),1.73(m,2 H);HRMSm/z 489.2727(M+H)+ 。
步驟3
藉由CHIRALPAKAD-H對掌性管柱分離順式外消旋化合物7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(56 mg)。分離移動相為含0.2%DEA之40% IPA。收集到兩個峰。收集到較快移動之對映異構體為對映異構體-1(16 mg，28%產率)，且較慢移動之對映異構體為對映異構體-2(17 mg，30%產率)。未測定絕對立體構型。
實例91
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.76(s,1 H),8.53(d,J =9.09 Hz,1 H),8.27(m,2 H),7.66(dd,J1 =9.09 Hz,J2 =2.53 Hz,1 H),6.47(s,1 H),4.81(m,1 H),3.88(d,J =13.64 Hz,1 H),3.66(dd,J1 =13.14 Hz,J2 =5.05 Hz,1 H),3.34(m,2 H),3.17(m,6 H),2.91-2.53(m,7 H),2.07(m,5 H),1.73(m,2 H);HRMSm/z 489.2726(M+H)+ 。
實例92
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1 H),8.52(d,J =9,09 Hz,1 H),8.24(m,2 H),7.66(dd,J1 =9.09 Hz,J2 =2.53 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.81(m,1 H),3.88(dd,J1 =13.14 Hz,J2 =4,55 Hz,1 H),3.65(dd,J1 =13.39 Hz,J2 =4.80 Hz,1 H),3.32(m,2 H),3.17(m,6 H),2.89-2.52(m,7 H),2.07(m,5 H),1.74(m,2 H);HRMSm/ z 489.2726(M+H)+ 。
實例93
製備7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,7aR)-2-甲基-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
向7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,7aR)-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(來自實例89，對映異構體-2)(66 mg，0.128 mmol，1當量)於THF(2.0 mL)中之溶液中添加37%甲醛水溶液(0.048 mL，0.639 mmol，5當量)。反應混合物在室溫下攪拌5分鐘。向混合物中添加固體三乙醯氧基硼氫化鈉(81 mg，0.383 mmol，3當量)。反應物再攪拌10分鐘，且以一滴TFA淬滅，且以含氨氣之甲醇中和。真空濃縮殘餘物，且藉由管柱層析法(NH3 /MeOH/CH2 Cl2 )純化以定量產量產生7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,7aR)-2-甲基-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(67 mg)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.63(d,J =9.09 Hz,1 H),8.27(s,1 H),8.24(d,J =2.53 Hz,1 H),7.67(dd,J1 =9.09,J2 =2.53 Hz,1 H),6.44(s,1 H),4.73(s,3 H),4.52(m,1 H),3.83(dd,J1 =13.14,J2= 4.04 Hz,1 H),3.65(dd,J1 =13.14,J2 =4.04 Hz,1 H),3.17(s,6H),2.91-2.51(m,7 H),2.36(m,4 H),2.01(m,2 H),1.87(m,2 H),1.79-1,51(m,5 H); HRMSm /z 531.3219(M+H)+ 。
實例94
7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備(1R,3r,5S)-3'-(6-(7-環己基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(1R,3r,5S)-3'-(6-胺基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮(0.350 g，0.935 mmol，1.0當量)與2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.287 g，0.935 mmol，1.0當量)組合，產生(1R,3r,5S)-3'-(6-(7-環己基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-8-甲酸第三丁酯(0.454 g，75%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.26-1.45(m,3 H) 1.49(s,9 H) 1.81(d,J =11.62 Hz,1 H) 1.87-2.05(m,7 H) 2.05-2.22(m,4 H) 2.22-2.32(m,2 H) 2.52-2.73(m,2 H) 3.16(s,6 H) 3.72(s,2 H) 4.22-4.47(m,3 H) 6.44(s,1 H) 8.06(dd,J =9.35,2.78 Hz,1 H) 8.32(d,J =2.53 Hz,1 H) 8.43(s,1 H) 8.60(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.76(s,1 H)。MSm/z 645.7(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(1R,3r,5S)-3'-(6-(7-環己基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-8-甲酸第三丁酯(0.450 g，0.713 mmol)轉化成7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.286 g，0.517 mmol，73%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.28-1.51(m,3 H) 1.62(br. s.,1 H) 1.71-1.87(m,3 H) 1.87-1.99(m,5 H) 2.01(d,J =3.01 Hz,1 H) 2.20(d,J =14.05 Hz,2 H) 2.25-2.37(m,2 H) 2.52-2.71(m,2 H) 3.16(s,6 H) 3.65(br. s.,2 H) 3.71(s,2 H) 4.27-4.43(m,1 H) 6.44(s,1 H) 7.91(s,1 H) 8.10(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.22(d,J =2.51 Hz,1 H) 8.58(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.70(s,1 H);HRMS計算值m/z=545.2994且實驗值m/z=545.2989(M+H)。
實例95
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-5-甲基-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3as,6ar)-5-甲基-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺。
實例96
步驟1
4-(6-硝基吡啶-3-基)-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶與1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮組合，且產生4-(6-硝基吡啶-3-基)-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮(418 mg，64%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.53(d,J =2.53 Hz,1 H),8.30(d,J =8.59 Hz,1 H),7.94(dd,J1 =8.59,J2 =2.53 Hz,1H),.4.00-3.93(m,3 H),3.19(m,4 H),2.38(m,2 H),2.13(m,2 H);LCMSm/z 263.4(M+H)+ 。
步驟2
4-(6-胺基吡啶-3-基)-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮
遵照硝基還原程序1，獲得4-(6-胺基吡啶-3-基)-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮(322 mg，88%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 7.73(d,J =2.53 Hz,1 H),7.22(dd,J1 =8.84,J2 =2.78 Hz,1 H),6.44(d,J =8.59 Hz,1 H),5.98(br s,2 H),3.73(s,2 H),3.62(m,1 H),3.05(d,J =7.33 Hz,4 H) 2.25(m,2 H),1.94(m,2 H)。LCMSm/z 233.4(M+H)+ 。
步驟3
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(3-側氧基-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-4-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將4-(6-胺基吡啶-3-基)-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮與2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺組合，且產生7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(3-側氧基-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-4-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(99 mg，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.55(d,J =9.09 Hz,1 H),8.16(d,J =2.02 Hz,1 H),8.09(s,1 H),7.55(dd,J1 =9.09 Hz,J2 =2.53 Hz,1 H),6.47(s,1 H),4.81(m,1 H),3.93(s,2 H),3.82(m,1 H),3.19(m,10 H),2.59(m,2 H),2.41(m,2 H),2.07(m,6 H),1.74(m,2 H);HRMSm/z 489.2740(M+H)+ 。
實例97
7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(3-側氧基-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-4-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺與4-(6-胺基吡啶-3-基)-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-3-酮組合，且產生7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(3-側氧基-1,4-二氮雜雙環[3.2.2]壬-4-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(103 mg，77%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.73(s,1H),8.66(d,J =9.09 Hz,1 H),8.17(d,J =2.02 Hz,1 H),8.14(s,1 H),7.55(dd,J1 =9.09 Hz,J2 =2.53 Hz,1 H),6.45(s,1 H),4.53(m,1 H),3.95(s,2 H),3.83(m,1 H),3.21(m,10 H),2.64(m,2 H),2.42(m,2 H),2.14-1.54(m,12 H);HRMSm/z 517.3049(M+H)+ 。
實例98
7-環己基-2-[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮
遵照一般N-C偶合程序1，將六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.202 g，1.44 mmol)與5-溴-2-硝基吡啶(0.293 g，1.44 mmol，1.0當量)組合，產生呈棕黃色固體形式之2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.170 g，0.616 mmol，43%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.79-2.19(m,1 H) 2.31(br. s.,1 H) 2.77(br. s.,1 H) 2.98-3.16(m,1 H) 3.26(dt,J =12.05,4.52 Hz,1 H) 3.47(br. s.,1 H) 3.80(br. s.,1 H) 3.95-4.23(m,1 H) 8.15(dd,J =8.53,2.51 Hz,1 H) 8.32(d,J =8.53 Hz,1 H) 8.70(d,J =2.51 Hz,1 H)。MSm /z 263.1(M+H)+ 。
步驟2：
2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮
遵照硝基還原程序1，將2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.170 g，0.648 mmol)轉化成2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮，分離出黃色固體(0.126 g，0.542，84%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.78-2.11(m,1 H) 2.16-2.35(m,1 H)2.80(ddd,J =10.04,8.03,6.02 Hz,1 H) 2.97-3.11(m,1 H) 3.11-3.25(m,1 H) 3.42-3.52(m,1 H) 3.59(ddd,J =12.42,4.39,4.27 Hz,1 H) 3.85(ddd,J =12.55,8.53,4.52 Hz,1 H) 6.60(d,J =8.03 Hz,1 H) 7.39(dd,J =9.03,2.51 Hz,1 H) 7.83(d,J =2.01 Hz,1 H)。MSm /z 233.2(M+H)+ 。
步驟3：
7-環己基-2-[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.050 g，0.215 mmol)與2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.066 g，0.215 mmol，1.0當量)組合，且產生呈米色固體形式之7-環己基-2-[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(75 mg，0.139 mmol，65%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.23-1.52(m,4 H) 1.72-1.90(m,2 H) 1.90-2.00(m,6 H) 2.00-2.18(m,2 H) 2.21-2.39(m,1 H) 2.52-2.82(m,3 H) 2.95-3.14(m,3 H) 3.15-3.27(m,8 H) 3.42(t,J =8.28 Hz,1 H) 3.66(dt,J =11.54,4.02 Hz,1 H) 3.95(ddd,J =11.80,9.29,4.52 Hz,1 H) 4.27-4.41(m,1 H) 6.45(s,1 H) 7.69(dd,J =9.03,2.51 Hz,1 H) 8.11(s,1 H) 8.25(d,J =2.51 Hz,1 H) 8.65(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.73(s,1 H);HRMS計算值m/z=503.2883且實驗值m/z=503.2892(M+H)。
實例99
7-環戊基-2-[5-(1-側氧基-八氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮
遵照一般N-C偶合程序1，將六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.300 g，1.945 mmol)與5-溴-2-硝基吡啶(0.395 g，1.945 mmol，1.0當量)組合，且產生2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.481 g，1.567 mmol，81%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.27-1.53(m,2 H)1.54-1.61(m,4 H) 1.66-1.81(m,1 H) 1.94(d,J =12.55 Hz,1 H) 2.22(td,J =11.80,3.01 Hz,1 H) 2.39(d,J =12.55 Hz,1 H) 2.68-2.83(m,2 H) 2.96-3.12(m,2 H) 3.49(d,J =3.51 Hz,1 H) 3.56(dd,J =10.79,2.26 Hz,1 H) 4.16(td,J =11.29,4.52 Hz,1 H) 8.13(dd,J =8.53,2.51 Hz,1 H) 8.29(d,J =8.53 Hz,1 H) 8.68(d,J =2.51 Hz,1 H);MSm/z 277.2(M+H)+ 。
步驟2：
製備2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶并[1,2-a]吡嗪-1-酮
遵照硝基還原程序1，將2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.200 g，0.724 mmol)轉化成2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.170 g，0.690 mmol，95%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.28-1.55(m,1 H) 1.53-1.77(m,1 H) 1.91(d,J =12.05 Hz,1 H) 2.19(td,J =11.42,3.26 Hz,1 H) 2.33-2.48(m,1 H) 2.60-2.75(m,1 H) 2.89-3.06(m,1 H) 3.39(dd,J =11.54,3.01 Hz,1 H) 3.93(td,J =11.80,4.52 Hz,1 H) 4.46(br. s.,1 H) 6.51(d,J =8.53 Hz,1 H) 7.37(dd,J =8.53,2.51 Hz,1 H) 7.99(d,J =2.51 Hz,1 H)。MSm/z 247.2(M+H)+ 。
步驟3：
製備7-環戊基-2-[5-(1-側氧基-八氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.060 g，0.244 mmol)與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.072 g，0.246 mmol，1.01當量)組合，產生7-環戊基-2-[5-(1-側氧基-八氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.070 g，0.136 mmol，56%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.31-1.50(m,2 H) 1.66-1.82(m,4 H) 1.91(br. s.,1 H) 1.98-2.14(m,5 H) 2.21(td,J =11.42,3.26 Hz,1 H) 2.40(br. s.,1 H) 2.58(dd,J =12.30,8.78 Hz,2 H) 2.67-2.81(m,2 H) 2.93-3.07(m,2 H) 3.16(s,7 H) 3.47(dd,J =11.29,3.26 Hz,1 H) 4.02(td,J =11.67,4.77 Hz,1 H) 4.79(dq,J =9.03,8.87 Hz,1 H) 6.46(s,1 H) 7.66(dd,J =9.03,2.51 Hz,1 H) 7.94(s,1 H) 8.23(d,J =2.01 Hz,1 H) 8.54(d,J =9.03 Hz,1 H)8.71(s,1 H)。HRMS計算值m/z=503.2883且實驗值m/z=503.2908(M+H)。
實例100
製備7-環己基-2-[5-(1-側氧基-八氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-1-酮(0.060 g，0.244 mmol)與2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.075 g，0.244 mmol，1.0當量)組合，產生7-環己基-2-[5-(1-側氧基-八氫-吡啶幷[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.020 g，0.039 mmol，16%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.19-1.41(m,6 H) 1.41-1.52(m,5 H) 1.61-1.75(m,4 H) 1.93(br. s.,9 H) 2.21(td,J =11.37,3.54 Hz,2 H) 2.40(br. s.,2 H)2.52-2.81(m,7 H) 2.93-3.05(m,4 H) 3.16(s,11 H) 3.47(dd,J =11.37,2.78 Hz,2 H) 3.93-4.09(m,2 H) 4.26-4.42(m,2 H) 6.44(s,2 H) 7.68(dd,J =8.84,2.78 Hz,2 H) 8.00(s,2 H) 8.23(d,J =2.02 Hz,2 H) 8.63(d,J =9.09 Hz,2 H) 8.71(s,2 H)。HRMS計算值m/z=517.3039且實驗值m/z=517.3046(M+H)。
實例101
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1：
製備(1R,3r,5S)-3'-(6-硝基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮遵照一般N-C偶合程序1，將(1R,3r,5S)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮(0.488 g，1.728 mmol)(參考案：德國專利DE10 2005 030051A1(28/12/2006))與5-溴-2-硝基吡啶(0.351 g，1.728，1.0當量)組合，產生(1R,3r,5S)-3'-(6-硝基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮(0.615 g，1.521 mmol，88%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.49(s,9 H) 1.91-2.10(m,4 H) 2.10-2.33(m,6 H) 3.81(s,2 H) 4.32(br. s.,1 H) 4.37(br. s.,1 H) 8.32(d,J =8.53 Hz,1 H) 8.47-8.57(m,2 H);MSm/z 405.2(M+H)+ 。
步驟2：
製備(1R,3r,5S)-3'-(6-胺基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮
遵照硝基還原程序1，將(1R,3R,5S)-3'-(6-硝基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮(0.705 g，1.743 mmol)轉化成呈灰白色固體形式之(1R,3r,5S)-3'-(6-胺基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮(0.356 g，0.951 mmol，55%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.48(s,9 H) 1.99(br. s.,4 H) 2.07-2.19(m,3 H) 2.23(d,J =6.02 Hz,2 H)3.63(s,2 H)4.27(br. s.,1 H) 4.35(br. s.,1 H) 4.43(br. s.,2 H) 6.55(d,J =9.03 Hz,1 H) 7.27(s,1 H) 7.85-7.91(m,1 H) 7.93(d,J =2.51 Hz,1 H)。MSm/z 375.2(M+H)+ 。
步驟3：
製備(1R,3r,5S)-3'-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(1R,3r,5S)-3'-(6-胺基吡啶-3-基)-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-2'-酮與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生呈深色固體形式之(1R,3r,5S)-3'-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-8-甲酸第三丁酯(0.458 g，0.726 mmol，78%產率)，且未經純化即用於下一步驟中。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.49(s,9 H) 1.66-1.81(m,2 H) 1.98-2.27(m,12 H) 2.48-2.67(m,2 H) 3.16(s,6 H) 3.72(s,2 H) 4.36(br. s.,2 H) 4.80(dq,J =9.03,8.87 Hz,1 H) 6.46(s,1 H) 8.03-8.11(m,2 H) 8.26(d,J =3.01 Hz,1 H) 8.51(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.74(s,1 H)。MSm /z 631.4(M+H)+ 。
步驟4：
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(1R,3r,5S)-3'-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-8-甲酸第三丁酯(0.450 g，0.713 mmol)轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.286 g，0.517 mmol，73%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.62(br. s.,1 H) 1.66-1.84(m,4 H) 1.93-2.14(m,7 H) 2.20(d,J =14.56 Hz,2 H) 2.24-2.37(m,2 H) 2.47-2.68(m,2 H) 3.16(s,6 H) 3.65(br. s.,2 H) 3.71(s,2 H) 4.80(quin,J =8.78 Hz,1 H) 6.46(s,1 H)8.08(dd,J =9.03,2.51 Hz,1 H) 8.19-8.32(m,2 H) 8.50(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.75(s,1 H);HRMS計算值m/z=531.2832且實驗值m/z=531.2858(M+H)+ 。
實例102
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-8-甲基-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-8-甲基-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.216 g，0.407 mmol)轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-8-甲基-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.120 g，0.220 mmol，54%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.52-1.82(m,4 H) 1.93-2.11(m,7 H) 2.11-2.25(m,6 H) 2.34(br. s.,4 H) 2.48-2.68(m,2 H) 3.16(s,6 H) 3.25(br. s.,2 H) 3.71(s,2 H) 4.80(qd,J =8.95,8.78 Hz,1 H) 6.46(s,1 H) 7.98(s,1 H) 8.07(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.23(d,J =2.51 Hz,1 H) 8.49(d,J =9.54 Hz,1 H) 8.72(s,1 H)。HRMS計算值m/z=545.2989且實驗值m/z=545.2988(M+H)+ 。
實例103
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1：
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯(0.510 g，1.887 mmol)(參考案：德國專利DE10 2005 030051A1(28/12/2006))與5-溴-2-硝基吡啶(0.400 g，1.971 mmol，1.05當量)組合，產生呈棕色固體形式之3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯(0.684 g，1.743 mmol，92%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.45(br. s.,9 H) 1.54-1.72(m,1 H) 1.86-2.16(m,3 H) 3.30(d,J =8.03 Hz,1 H) 3.66(br. s.,2 H) 3.81(d,J =9.03 Hz,1 H) 3.94(d,J =7.53 Hz,1 H) 8.33(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.52(br. s.,1 H) 8.60(dd,J =9.03,3.01 Hz,1 H) 。MSm/z 337.1(M+H)+ 。
步驟2：
製備3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將3-(6-硝基-吡啶-3-基)-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-2-酮(0.620 g，1.580 mmol)轉化成呈灰白色固體形式之3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯(0.532 g，1.47 mmol，93%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.47(s,9 H)1.80(dd,J =13.55,9.54 Hz,2 H) 1.86-2.01(m,1 H) 2.06-2.24(m,3 H) 3.18-3.34(m,2 H) 3.58-3.80(m,4 H) 4.40(br. s.,2 H) 6.54(d,J =8.53 Hz,1 H) 7.87-7.97(m,2 H)。MSm /z 363.2(M+H)+ 。
步驟3：
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-2-酮(0.100 g，0.276 mmol)與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.081 g，0.276 mmol，1.0當量)組合，產生呈白色固體形式之7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.075 g，0.139 mmol，50%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.58-1.82(m,4 H) 1.97-2.27(m,14 H) 2.47-2.65(m,2 H) 2.86-3.11(m,4 H) 3.16(s,7 H) 3.80-3.88(m,2 H) 4.80(qd,J =8.95,8.78 Hz,1 H) 6.46(s,1 H) 8.06(s,1 H) 8.13(dd,J =9.03,3.01 Hz,1 H) 8.21-8.32(m,1 H) 8.50(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.72(s,1 H);HRMS計算值m/z=531.2832且實驗值m/z=531.2858(M+H)+ 。
實例104
7-環戊基-2-[5-(8-甲基-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(8-甲基-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(8-甲基-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.062 g，0.112 mmol，77%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.52-1.79(m,5 H) 1.84-2.05(m,8 H) 2.07(t,J =5.27 Hz,2 H) 2.28(s,3 H) 3.06(d,J =10.54 Hz,7 H) 3.90(s,2 H) 4.68-4.84(m,1 H) 6.63(s,1 H) 7.99(dd,J =9.03,2.51 Hz,1 H) 8.33(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.43(d,J =2.51 Hz,1 H) 8.80(s,1 H) 9.73(s,1 H);HRMS計算值m/z=533.2989且實驗值m/z=533.3009(M+H)+ 。
實例105
7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備(S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(S)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生呈白色固體形式之(S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯(0.075 g，0.115 mmol，35%產率)。MSm/z 619.5(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.040 g，0.076 mmol，67%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.67-1.86(m,3 H) 1.91-2.17(m,8 H) 2.19-2.28(m,2 H) 2.49-2.65(m,2 H) 2.86-3.09(m,4 H) 3.11-3.21(m,7 H) 3.95(s,2 H) 4.78(dq,J =9.03,8.87 Hz,1 H) 8.05(dd,J =9.03,3.01 Hz,1 H) 8.40-8.49(m,2 H) 8.75(s,1 H);HRMS計算值m/z=519.2832且實驗值m/z=519.2842(M+H)+ 。
實例106
7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備(R)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(R)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生呈白色固體形式之(R)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯(0.175 g，0.272 mmol，66%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.42(s,9 H) 1.61-1.78(m,3 H) 1.79-1.96(m,3 H) 1.96-2.14(m,7 H) 2.38-2.48(m,2 H) 3.06(d,J =10.54 Hz,6 H) 3.20-3.33(m,2 H) 3.36-3.63(m,2 H) 3.82-3.97(m,2 H) 4.75(quin,J =8.78 Hz,1 H) 6.63(s,1 H) 7.98(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.34(d,J =9.54 Hz,1 H) 8.44(s,1 H) 8.81(s,1 H) 9.78(s,1 H)。MSm/z 619.5(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(R)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一烷-8-甲酸第三丁酯轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜-螺[4.6]十一-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.090 g，0.167 mmol，70%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.65-1.86(m,3 H) 1.97(dd,J =10.79,4.27 Hz,1 H) 2.01-2.29(m,9 H) 2.46-2.64(m,2 H) 2.88-3.11(m,4 H) 3.13-3.22(m,6 H) 3.94(s,2 H) 4.77(dq,J =9.03,8.87 Hz,1 H) 6.63(s,1 H) 8.04(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.40-8.49(m,2 H) 8.76(s,1 H)。HRMS計算值m/z=519.2832且實驗值m/z=519.2834(M+H)+ 。
實例107
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1：
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯(0.546 g，2.130 mmol)(參考案：德國專利DE10 2005 030051A1(28/12/2006))與5-溴-2-硝基吡啶(0.432 g，2.130 mmol，1.0當量)組合，產生呈棕色固體形式之3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯(0.709 g，1.735 mmol，81%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.46(br. s.,9 H) 1.55-1.73(m,2 H) 1.89-2.17(m,3 H) 3.41(br. s.,2 H) 3.65(br. s.,2 H) 3.78-3.88(m,1 H) 3.95(d,J =8.03 Hz,1 H) 8.34(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.54(br. s.,1 H) 8.61(dd,J =9.03,3.01 Hz,1 H)。MSm /z 379.1(M+H)+ 。
步驟2：
製備3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將3-(6-硝基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯(0.605 g,1.599 mmol)轉化成3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯(0.549 g，1.45 mmol，92%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.45(s,1 H) 1.50-1.70(m,1 H) 1.79-2.08(m,1 H) 3.21(t,J =10.04 Hz,1 H) 3.31-3.47(m,1 H) 3.65(d,J =9.03 Hz,1 H) 3.70-3.85(m,1 H) 4.41(br. s.,1 H) 6.55(d,J =8.53 Hz,1 H) 7.91(dd,J =8.78,2.76 Hz,1 H) 7.96(d,J =2.51 Hz,1 H)。MSm /z 349.1(M+H)+ 。
步驟3：
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.084 g，0.287 mmol，1.0當量)組合，且產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯，其直接用於隨後BOC脫除保護基中。
步驟4
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.070 g，0.135 mmol，47%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.54-1.68(m,1 H) 1.68-1.81(m,2 H) 1.81-1.98(m,4 H) 1.98-2.14(m,6 H) 2.46-2.69(m,2 H) 2.77-2.91(m,2 H) 2.91-3.12(m,2 H) 3.16(s,6 H) 3.75(d,J =8.53 Hz,1 H) 3.91(d,J =8.53 Hz,1 H) 4.80(dq,J =9.03,8.87 Hz,1 H) 6.46(s,1 H) 8.13(dd,J =9.03,3.01 Hz,1 H) 8.33(br. s.,1 H) 8.36(d,J =2.51 Hz,1 H) 8.51(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.76(s,1 H)。HRMS計算值m/z=505.2676且實驗值m/z=505.2676(M+H)+ 。
實例108
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(7-甲基-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.116 mmol)轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(7-甲基-2-側氧基-1-氧雜-3，7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(0.052 g，0.098 mmol，85%產率)，其以灰白色固體形式分離得之。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6)δppm 1.51-1.79(m,6 H) 1.85(br. s.,1 H) 1.99(s,5 H) 2.09(br. s.,1 H) 2.22(s,4 H) 2.37-2.48(m,3 H) 2.68(d,J =8.03 Hz,1 H) 3.06(d,J =11.04 Hz,7 H) 3.86-3.98(m,2 H) 4.69-4.83(m,1 H) 6.63(s,1 H) 8.03(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.34(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.48(d,J =3.01 Hz,1 H) 8.81(s,1 H)9.74(s,1 H)。HRMS計算值m/z=519.2832且實驗值m/z=519.2834(M+H)+ 。
實例109
7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備(S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(S)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生呈白色固體形式之(S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯(0.115 g，0.190 mmol，43%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.37-1.51(m,13 H) 1.51-1.69(m,3 H) 1.69-1.84(m,2 H) 1.85-2.15(m,11 H) 2.47-2.68(m,2 H) 3.10-3.19(m,6 H) 3.19-3.33(m,2 H) 3.43(d,J =14.05 Hz,1 H) 3.58-3.71(m,2 H) 3.71-3.80(m,2 H) 3.85(d,J =9.03 Hz,2 H) 4.12(q,J =7.03 Hz,1 H) 4.44(br. s.,1 H) 4.80(五重峰,J =8.78 Hz,1 H) 6.46(s,1 H) 7.87-7.99(m,1 H) 8.11(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.21(br. s.,1 H) 8.30(br. s.,1 H) 8.52(d,J =9.03 Hz,1 H) 8.75(s,1 H)。MSm/z 605.5(M+H)+ 。
步驟2：
製備7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(S)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.062 g，0.123 mmol，71%產率)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.66(ddd,J =9.66,6.65,3.26 Hz,1 H) 1.70-1.81(m,2 H)1.81-2.00(m,2 H) 2.00-2.16(m,5 H) 2.47-2.64(m,2 H) 2.66-2.80(m,1 H) 2.80-2.90(m,1 H) 2.90-2.99(m,1 H) 2.99-3.10(m,1 H) 3.16(d,J =4.52 Hz,7 H) 3.83-3.90(m,1 H) 3.90-3.99(m,1 H) 4.78(dq,J =9.03,8.87 Hz,1 H) 8.07(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.44(s,1 H) 8.46(d,J =5.02 Hz,1 H) 8.75(s,1 H)。HRMS計算值m/z=505.2676且實驗值m/z=505.2683(M+H)+ 。
實例110
7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備(R)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(R)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生呈白色固體形式之(R)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯(0.175 g，0.275 mmol，64%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 1.47(s,9 H) 1.55-1.68(m,2 H) 1.68-1.85(m,3 H) 1.88-2.18(m,8 H) 2.50-2.68(m,2 H) 3.13-3.21(m,6 H) 3.21-3.32(m,1 H) 3.37-3.58(m,1 H) 3.61-3.72(m,1 H) 3.75(d,J =8.53 Hz,2 H) 3.86(d,J =8.53 Hz,2 H) 4.72-4.95(m,J =8.91,8.91,8.78,8.53 Hz,1 H) 6.48(s,1 H) 8.14(dd,J =9.29,2.76 Hz,1 H) 8.31(br. s.,1 H) 8.53(d,J =9.54 Hz,1 H) 8.76(s,1 H)。MSm /z 605.5(M+H)+ 。
步驟2
7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(R)-3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸烷-7-甲酸第三丁酯以85%轉化率轉化成呈白色固體形式之7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.120 g，0.238 mmol)。1 H NMR(400 MHz,MeOD)δppm 1.66(ddd,J =9.79,6.53,3.26 Hz,1 H) 1.70-1.81(m,2 H) 1.81-2.01(m,2 H) 2.01-2.18(m,5 H) 2.47-2.64(m,2 H) 2.69-2.82(m,1 H) 2.85(d,J =6.02 Hz,1 H) 2.91-2.99(m,1 H) 2.99-3.09(m,1 H) 3.10-3.20(m,6 H) 3.82-3.90(m,1 H) 3.90-3.99(m,1 H) 4.78(qd,J =8.95,8.78 Hz,1 H) 6.63(s,1 H) 8.07(dd,J =9.54,2.51 Hz,1 H) 8.44(s,1 H) 8.46(d,J =5.02 Hz,1 H) 8.75(s,1 H)。HRMS計算值m/z=505.2676及實驗值m/z=505.2676(M+H)+ 。
實例111
7-環戊基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備5-(6-硝基-吡啶-3-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
在DMF(60 ml)中組合2-溴-5-硝基吡啶(4.75 g，23.4 mmol，1.0當量)與(R,R)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(5.04 g，25.4 mmol，1.1當量)且加熱至100℃。冷卻反應物，且以乙酸乙酯稀釋，以水隨後以鹽水洗滌若干次，乾燥(Na2 SO4 )有機層，過濾，且濃縮有機物。使用層析法以MeOH/DCM混合物溶離純化粗產物，產生所要產物(4.3 g，57%)。MSm/z 278.4(M-C4 H9 )。
步驟2：
5-(6-胺基-吡啶-3-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯
在帕爾燒瓶(parr flask)中，在50 psi下，在乙酸乙酯(25 mL)中，使用Pd/C(0.250 g)氫化5-(6-硝基-吡啶-3-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(1.00 g，3.12,,ol，1.0當量)持續16小時。反應內容物經矽藻土過濾，以MeOH洗滌，且濃縮濾液。使用(MeOH/CH2 Cl2 )混合物層析純化粗產物，產生紫色固體(0.648 g，68%)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.44(d,J =19.71 Hz,12 H) 1.84-2.07(m,3 H) 3.11(d,J =8.59 Hz,1 H) 3.29-3.51(m,3 H) 3.52-3.60(m,1 H) 4.02(br. s.,2 H) 4,29(s,1 H) 6.46-6.55(m,1 H) 6.84(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H) 7.50(br. s.,1 H);MSm/z 291.6(M+H)+ 。
步驟3：
製備4-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸第三丁酯
使用一般布加沃德方法1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(200 mg，0.683 mmol，1.0當量)與5-(6-胺基-吡啶-3-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(218 mg，0.751 mmol，1.1當量)組合，產生4-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸第三丁酯(350 mg，94%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.32(s,6H) 1.39(s,6 H) 1.62(br. s.,3 H) 1.94(br. s.,8 H) 2.41(br. s.,3 H) 2.92-3.02(m,2 H) 3.05(br. s.,7 H) 3.26(d,J =11.12 Hz,3 H) 3.34(br. s.,3 H) 3.51-3.64(m,1 H) 4.39(s,1 H) 4.45(br. s.,1 H) 4.55(br. s.,1 H) 4.72(t,J =8.59 Hz,1 H) 6.58(s,1 H) 7.12(dd,J =9.09,3.03 Hz,1 H) 7.74(d,J =2.53 Hz,1 H) 8.02(t,J =8.08 Hz,1 H) 8.72(s,1 H) 9.15(s,1 H); MS m/z 547.1(M+H)+ 。
步驟4：
製備7-環戊基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
使用一般脫除保護基之方法2，以TFA處理4-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-哌嗪-1-甲酸第三丁酯以移除BOC基團，產生7-環戊基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(117 mg，47%)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.65(br. s.,3 H) 1.79(s,1 H) 1.90(s,1 H) 1.93-2.02(m,5 H) 2.43(br. s.,3 H) 2.82-2.91(m,3 H) 3.05(br. s.,6 H) 3.49-3.57(m,1 H) 3.64(br. s.,1 H) 4.37(s,1 H) 4.67-4.79(m,1 H) 6.57(s,1 H) 7.04(dd,J =9.09,3.03 Hz,1 H) 7.68(d,J =3.03 Hz,1 H) 8.03(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.71(s,1 H) 9.07(s,1 H);MS m/z 447.2(M+H)+ 。
實例112
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1：
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照實例78步驟1，使用5-溴-2-硝基吡啶(200 mg，0.985 mmol，1.0當量)與(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(934mg，4.40 mmol，4.5當量)，產生3-(6-硝基-吡啶-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(242 mg，74%)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 1.51(s,10 H) 1.75-1.89(m,2 H) 2.01-2.12(m,2 H) 3.27(d,J =11.12 Hz,2 H) 3.59(d,J =11.62 Hz,2 H) 4.48(br. s.,2 H) 7.17(dd,J =9.09,3.03 Hz,1 H) 8.10(d,J =3.03 Hz,1 H) 8.19(d,J =9.09 Hz,1 H);MSm/z 335.1(M+H)+ 。
步驟2：
製備3-(6-胺基-吡啶-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
遵照實例78步驟2，使用5-(6-硝基-吡啶-3-基)-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-甲酸第三丁酯(240 mg，0.718 mmol，1.0當量)與Pd/C(76 mg)，產生3-(6-胺基-吡啶-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(205 mg，94%)。MSm/z 305.2(M+H)+ 。
步驟3：
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
使用一般布加沃德方法1，將2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(139 mg，0.476 mmol，1.0當量)與3-(6-胺基-吡啶-3-基)-3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(145 mg，0.476 mmol，1.0當量)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-3,8-二氮雜-雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(143 mg，51%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.42(s,9 H) 1.57-1.70(m,2 H) 1.74-1.92(m,4 H) 1.98(br. s.,4 H) 2.36-2.48(m,2 H) 2.78(d,J =10.11 Hz,2 H) 3.05(br.s.,6 H) 3.48(d,J =10.11 Hz,2 H) 4.24(br.s.,2 H) 4-73(qd,J =8.76,8.59 Hz,1 H) 6.59(s,1 H) 7.37(dd,J =9.09,3.03 Hz,1 H) 7.94(d,J =3.03 Hz,1 H) 8.13(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.75(s,1 H) 9.24(s,1 H);MS m/z 561.3(M+H)。
步驟4：
7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
使用一般脫除保護基之方法2，以TFA處理3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯以移除BOC基團，產生7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(83 mg，76%)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 1.54-1.72(m,2 H) 1.86-2.04(m,8 H) 2.36-2.48(m,2 H) 2.93-3.11(m,8 H) 3.59(d,J =10.11 Hz,2 H) 4.06(br. s.,2 H) 4.74(qd,J =8.76,8.59 Hz,1 H) 6.60(s,1 H) 7.41(dd,J =9.35,2.78 Hz,1 H) 7.97(d,J =2.53 Hz,1 H) 8.16(d,J =9.09 Hz,1 H) 8.36(br. s.,1 H) 8.75(s,1 H) 9.30(s,1 H);MS m/z 461.2(M+H)。
實例113
步驟1
製備6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬-1-甲酸第三丁酯1
向1,7-二氮雜螺[4,4]壬-6-酮鹽酸鹽(0.98 g，5.4 mmol)於二氯甲烷中之溶液中添加二碳酸第三丁酯(1.41 g，6.48 mmol)及三乙胺(1.3 g，13.5 mmol)。所得溶液在室溫下攪拌隔夜。溶液以水稀釋且以二氯甲烷萃取。分離有機相，乾燥，過濾且濃縮，產生呈白色粉末形式之6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬-1-甲酸第三丁酯產物(1.3 g，100%產率)，且未經進一步純化直接使用。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ6.13-5.74(br,1 H),3.59-3.20(m,4 H),2.75-2.49(m,1 H),2.16-1.76(m,5 H),1.43(s,3 H),1.42(s,6 H)。MSm/z 241.2(M+H)+ 。
步驟2
製備7-(6-硝基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬-1-甲酸第三丁酯(1.3 g，5.41 mmol)與5-溴-2-硝基吡啶(1.10 g，5.41 mmol)組合，產生7-(6-硝基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(1.55 g，79%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 ) 8.94-8.81(m,1 H),8.68-8.59(m,1 H),8.38-8.27(m,1 H),4.17-3.74(m 2 H),3.66-3.45(m,2 H),2.88-2.58(m,1 H),2.26-1.87(m,5 H),1.46 9s,3 H),1.32(s,6 H)。HR-MSm/z 368.1620(M+H)+ 。
步驟2
製備7-(6-胺基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將(7-(6-硝基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(1.55 g，4.28 mmol)轉化成7-(6-胺基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(1 g，70%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.21-8.05(m,1 H),7.87-7.68(m,1 H),6.68-6.57(m,1 H),3.85-3.72(m 2 H),3.60-3.40(m,2 H),2.67-2.47(m,1 H),2.23-1.83(m,5 H),1.46 9s,3 H),1.39(s,6 H)。HR-MSm/z 333.1933(M+H)+ 。
步驟3
製備7-(6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基-胺基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將7-(6-胺基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(114 mg，0.34 mmol)與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(100 mg，0.34 mmol)組合，在矽膠管柱層析法後產生7-(6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-2-基-胺基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(100 mg，49%產率)。MSm/z 589.5(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環戊基-2-[5-(6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬-7-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將7-(6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基-胺基-吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(100 mg，0.17 mmol)轉化成7-環戊基-2-[5-(6-側氧基-1,7-二氮雜-螺[4,4]壬-7-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(80 mg，96%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.77(s,1 H),8.60-8.53(m,1 H),8.50-8.42(m,1 H),8.18-8.16(m,1 H),6.63(s,1 H),4.83-4.67(m,1 H),3.93-3.78(m 2 H),3.25-3.11(m,1 H),3.15(s,6 H),3.06-2.95(m,1 H),2.65-2.46(m,2 H),2.32-1.83(m,10 H),1.83-1.68(m,2 H)。HR-MSm /z 489.2727(M+H)+ 。
實例114
步驟1
製備2-(6-硝基-吡啶-3-基)-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將含1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(200 mg，0.74 mmol)之二噁烷與5-溴-2-硝基吡啶(150 mg，0.74 mmol)組合，純化後產生2-(6-硝基-吡啶-3-基)-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(100 mg，34%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 ) 8.56(d,J=2.51 Hz,1 H),δ8.28(d,J=8.53 Hz,1 H),8.03-7.98(m,1 H),3.91-3.75(m 4 H),3.29-3.16(m,2 H),2.23-1.94(m,6 H),1.65-1.55(m,2 H),1.47(s,9 H)。MSm/z 391.2(M+H)+ 。
步驟2
製備2-(6-胺基-吡啶-3-基)-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將2-(6-硝基-吡啶-3-基)-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(100 mg，0.26 mmol)轉化成2-(6-胺基-吡啶-3-基)-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(92 mg，100%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ7.75(d,J=2.51 Hz,1 H),7.34-7.28(m,1 H),6.59(d,J=9.54 Hz,1 H),3.89-3.74(m,3 H),3.67-3.54(m,3 H),2.11-1.92(m,6 H),1.65-1.52(m,2 H),1.45(s,9 H)。MSm/z 361.5(M+H)+ 。
步驟3
製備2[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-(6-胺基-吡啶-3-基)-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(98 mg，0.27 mmol)與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(80 mg，0.27 mmol)組合，產生2[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(155 mg，92%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.92-8.70(m,1 H),8.63-8.53(m,1 H),8.25-8.13(m,1 H),7.75-7.36(m,1 H),6.59-6.46(m,1 H),4.93-4.70(m,1 H),3.93-3.78(m 2 H),3.74-3.65(m,2 H),3.28-3.18(m,2 H),3.14(s,6 H),2.65-2.49(m,2 H),2.24-1.88(m,9 H),1.85-1.71(m,2 H),1.65-1.50(m,3 H),1.47(s,9 H);HR-MSm /z 617.3583(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環戊基-2-[5-(1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一-2-基)-吡啶-2基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將2[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一烷-9-甲酸第三丁酯(45 mg，0.07 mmol)轉化成7-環戊基-2-[5-(1-側氧基-2,9-二氮雜-螺[5,5]十一-2-基)-吡啶-2基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(30 mg，80%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.77(s,1 H),8.51(d,J=9.03 Hz,1 H),8.18-8.12(m,1 H),7.73-7.64(m,1 H),6.64(s,1 H),4.85-4.71(m,1 H),3.74-3.64(m 2 H),3.15(s,6 H),3.08-2.96(m,2 H),2.92-2.81(m,2 H),2.64-2.48(m,2 H),2.21-1.98(m,10 H),1.81-1.69(m,2 H),1.68-1.58(m,2 H)。HR-MSm/z 517.3040(M+H)+ 。
實例115
7-環戊基-2[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮
遵照一般N-C偶合程序1，將六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮與5-溴-2-硝基吡啶組合，產生2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮(250 mg，66%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.73(d,J=2.51 Hz,1 H),8.37(d,J=8.53 Hz,1 H),8.29-8.19(m,1 H),4.17-4.15(m 1 H),3.86-3.76(m,1 H),3.65-3.56(m,1 H),3.27-3.02(m,3 H),2.89-2.78(m,1 H),2.34-2.20(m,1 H),2.13-1.79(m,3 H)。HR-MSm/z 263.1146(M+H)+ 。
步驟2
製備2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮
遵照硝基還原程序1，將2-(6-硝基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮轉化成2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮(220 mg，99%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.07-7.78(m,1 H),7.65-7.33(m,1 H),7.06-6.55(m,1 H),3.98-3.78(m 1 H),3.69-3.55(m,1 H),3.55-3.44(m,1 H),3.23-2.96(m,3 H),2.87-2.72(m,1 H),2.30-2.12(m,1 H),2.07-1.75(m,3 H)。HR-MSm/z 233.1408(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-2[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-(6-胺基-吡啶-3-基)-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-1-酮與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生7-環戊基-2[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(67 mg，31%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.77(s,1 H),8.52(d,J=9.03 Hz,1 H),8.24(d,J=2.51 Hz,1 H),7.76-7.64(m,1 H),6.64(s,1 H),4.84-4.70(m,1 H),4.01-3.92(m,1 H),3.74-3.64(m,1 H),3.57-3.51(m,1 H),3.16(s,6 H),3.25-3.05(m,3 H),2.87-2.79(m,1 H),2.62-2.50(m,2 H),2.31-2.22(m,1 H),2.16-1.92(m,6 H),1.91-1.82(m,1 H),1.80-1.70(m,2 H)。HR-MSm/z 489.2734(M+H)+ 。
實例116
7-環戊基-2-(5-(六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備2-(6-硝基-吡啶-3-基)-八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶(483 mg，2.38 mmol)與八氫吡咯并[1,2-c]嘧啶(300 mg，2.38 mmol)組合，產生2-(6-硝基-吡啶-3-基)-八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪(270 mg，45%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.19-8.09(m,2 H),7.26-7.14(m,1 H),4.05-3.96(m 1 H),3.92-3.80(m,1 H),3.25-3.08(m,3 H),2.87-2.74(m,1 H),2.44-2.32(m,1 H),2.28-2.08(m,2 H),2.02-1.72(m,3 H),1.61-1.44(m,1 H)。MSm /z 249.2(M+H)+ 。
步驟2
製備5-(六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)吡啶-2-胺
遵照硝基還原程序1，將2-(6-硝基-吡啶-3-基)-八氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪(270 mg，1.09 mmol)轉化成5-(六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)吡啶-2-胺(223 mg，94%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ7.57(s,1 H),7.29(d,J=9.03 Hz,1 H),6.54(d,J=9.02 Hz,1 H),3.50-3.41(m 1 H),3.36-3.24(m,1 H),3.13-3.03(m,2 H),2.81-2.71(m,1 H),2.48-2.34(m,2 H),2.30-2.15(m,2 H),1.95-1.73(m,3 H),1.52-1.37(m,1 H)。HR-MSm /z 219.1612(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-2-(5-(六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(100 mg，0.34 mmol)與5-(六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)吡啶-2-胺(74.6 mg，0.34 mmol)組合，產生7-環戊基-2-(5-(六氫吡咯并[1,2-a]吡嗪-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(60 mg，37%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO)δ9.30(s,1 H). 8.77(s,1 H),8.18-8.12(m,1 H),8.02-7.98(m,1 H),7.48-7.40(m,1 H),6.59(s,1 H),4.78-4.68(m,1 H),3.77-3.72(m,1 H),3.62-3.55(m,1 H),3.08(s,3 H),3.04(s,3 H),2.77-2.63(m,2 H),2.51-2.31(m,4 H),2.30-2.21(m,1 H),2.13-1.91(m,6 H),1.88-1.58(m,5 H),1.43-1.33(m,1 H)。HR-MSm /z 475.2941(M+H)+ 。
實例117
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(1-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸-2-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備2-(6-胺基吡啶-3-基)-3-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將2-(6-硝基吡啶-3-基)-3-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(400 mg，1.06 mmol)轉化成2-(6-胺基吡啶-3-基)-3-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(250 mg，67%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.03(s,1 H),7.73-7.63(m,1 H),6.64-6.56(m,1 H),3.68(s,2 H),3.61-3.48(m,2 H),3.45-3.34(m,2 H),2.51(s,2 H),1.73-1.62(m,4 H),1.45(s,9 H)；HR-MSm/z 347.2092(M+H)+ 。
步驟2
製備2-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-1-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(135 mg，0.46 mmol)與2-(6-胺基吡啶-3-基)-3-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(160 mg，0.46 mmol)組合，產生2-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-1-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(270 mg，97%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.70(s,1 H),8.47-8.36(m,2 H),8.29(s,1 H),8.02-7.94(m,1 H),6.38(s,1 H),4.79-4.66(m,1 H),3.58(s,2 H),3.54-3.45(m,2 H),3.28-3.18(m,2 H),3.02(s,6 H),2.55-2.40(m,2 H),2.42(s,2 H),2.04-1.90(m,4 H),1.73-1.49(m,6 H),1.36(s,9 H);HR-MSm/z 603.3406(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(1-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸-2-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將2-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-1-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(270 mg，0.45 mmol)轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(1-側氧基-2,8-二氮雜螺[4.5]癸-2-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(86 mg，38%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.76(s,1 H),8.53-8.50(m,1 H),8.48-8.42(m,1 H),8.11-8.05(m,1 H),6.64(s,1 H),4.84-4.71(m,1 H),3.79(s,2 H),3.21-3.10(m,6 H),2.96-2.82(m,4 H),2.62-2.50(m,4 H),2.16-2.01(m,4 H),1.82-1.67(m,6 H)。HR-MSm/z 503.2882(M+H)+ 。
實例118
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備1'-(6-胺基吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將1'-(6-硝基吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(400 mg，0.99 mmol)轉化成1'-(6-胺基吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(150 mg，40%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.01(s,1 H),7.69-7.62(m,1 H),6.63-6.55(m,1 H),4.32-4.21(m,2 H),3.52(s,2 H),2.81(s,2 H),2.07-1.83(m,8 H),1.49(s,9 H)。HR-MSm/z 373.2239(M+H)+ 。
步驟2
製備1'-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(162 mg，0.55 mmol)與1'-(6-胺基吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(150 mg，0.55 mmol)組合，產生1'-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(250 mg，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.76(s,1 H),8.56-8.49(m,1 H),8.41(s,1 H),8.08-7.99(m,2 H),6.49(s,1 H),4.88-4.77(m,1 H),4.31(s,2 H),3.62-3.49(m,2 H),3.14(s,6 H),2.82(s,2 H),2.65-2.51(m,2 H),2.16-1.53(m,14 H),1.49(s,9 H)。HR-MSm/z 629.3568(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般醯胺形成方法1，將1'-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(250 mg，0.47 mmol)轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(56 mg，22%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.76(s,1 H),8.50-8.41(m,2 H),8.06-8.00(m,1 H),6.64(s,1 H),4.83-4.72(m,1 H),3.73(br,2 H),3.66(s,2 H),3.16(s,6 H),2.82(s,2 H),2.64-2.49(m,2 H),2.16-1.89(m,12 H),1.83-1.69(m,2 H)。HR-MSm /z 529.3035(M+H)+ 。
實例119
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-(6-硝基吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶(238 mg，1.17 mmol)與2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(300 mg，1.17 mmol)組合，產生3-(6-硝基吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(400 mg，90%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.66(s,1 H),8.51-8.44(m,1 H),8.37-8.31(m,1 H),4.00-3.86(m,1 H),3.74-3.65(m,1 H),3.44-3.28(m,2 H),3.22-3.08(m,2 H),2.08-1.99(m,2 H),1.93-1.81(m,2 H),1.49(s,9 H)。MSm /z 379.1616(M+H)+ 。
步驟2
製備3-(6-胺基吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將3-(6-硝基吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(400 mg，1.06 mmol)轉化成3-(6-胺基吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(370 mg，100%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.00(s,1 H),7.77(d,J=9.03 Hz,1 H),6.64(d,J=9.03 Hz,1 H),3,88-3.75(m,2 H),3.44-3.33(m,2 H),3.31(s,2 H),2.01-1.93(m,2 H),1.89-1.78(m,2 H),1.46(s,9 H)。MSm /z 349.1879(M+H)+ 。
步驟3
製備3-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(133 mg，0.45 mmol)與3-(6-胺基吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(158 mg，0.45 mmol)組合，產生3-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(170 mg，62%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.89(s,1 H),8.76(s,1 H),8.46(d,J=9.03 Hz,1 H),8.38(d,J=2.51 Hz,1 H),7.97-7.92(m,1 H),6.40(s,1 H),4.78-4.68(m,1 H),3.83-3.73(m,2 H),3.71(s,2 H),3.33-3.21(m,2 H),3.02(s,6 H),2.54-2.40(m,2 H),2.05-1.86(m,6 H),1.78-1.58(m,4 H),1.38(s,9 H)。HR-MSm/z 605.3221(M+H)+ 。
步驟4
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸烷-8-甲酸第三丁酯(150 mg，0.25 mmol)轉化成7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(170 mg，62%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO)δ9.72(s,1 H),8.80(s,1 H),8.49-8.43(m,1 H),8.37-8.31(m,1 H),8.05-8.00(m,1 H),6.40(s,1 H),4.81-4.67(m,1 H),3.91(s,2 H),3.35-3.30(m,1 H),3.07(s,3 H),3.04(s,3 H),2.91-2.79(m,2 H),2.75-2.64(m,2 H),2.55-2.36(m,2 H),2.09-1.90(m,4 H),1.83-1.73(m,4 H),1.72-1.59(m,2 H)。HR-MSm/z 505.2694(M+H)+ 。
實例120
N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備1'-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(70.6 mg，0.23 mmol)與1'-(6-胺基吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(62 mg，0.23 mmol)組合，產生1'-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(71 mg，57%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.77(s,1 H),8.65-8.57(m,1 H),8.49(m,1 H),8.15-8.08(m,1 H),6.56(s,1 H),4.63-4.52(m,1 H),4.30(br,2 H),4.08-3.96(m,2 H),3.64-3.51(m,3 H),3.18(S,6 H),2.96-2.86(m,1 H),2.83(s,2 H),2.16-1.99(m,3 H),1.96-1.79(m,5 H),1.77-1.52(m,4 H),1.51(s,9 H)。HR-MSm/z 645.3527(M+H)+ 。
步驟2
製備N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將1'-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-8-甲酸第三丁酯(68 mg，0.125 mmol)轉化成N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(17 mg，25%產率)。1 H NMR(400MHz,CD3 OD)δ8.77(s,1 H),8.52-8.46(m,2 H),8.08-8.03(m,1 H),6.68(s,1 H),4.57-4.39(m,1 H),4.04-3.96(m,2 H),3.65(s,2 H),3.64-3.46(m,3 H),3.20(s,3 H),3.15(s,3 H),2.94-2.84(m,1 H),2.83(s,2 H),2.14-2.04(m,1 H),1.98-1.77(m,11 H)。HR-MSm/z 545.2991(M+H)+ 。
實例121
N,N-二甲基-2-(5-(6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬-7-基)吡啶-2-基胺基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備7-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬烷-1-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-N,N-二甲基-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(76 mg，0.246 mmol)與7-(6-胺基吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(82 mg，0.246 mmol)組合，產生7-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(107 mg，72%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD2 Cl2 )δ8.80(s,1 H),8.69-8.57(m,2 H),8.35-8.25(m,1 H),6.54(s,1 H),4.63-4.52(m,1 H),4.06-3.88(m,2 H),3.86-3.70(m,2 H),3.64-3.46(m,2 H),3.18(S,6 H),3.02-2.84(m,1 H),2.84-2.59(m,1 H),2.24-1.99(m,6 H),1.96-1.79(m,3 H),1.77-1.52(m,1 H),1.48(s,4 H),1.39(s,5 H)。HR-MSm/z 605.3210(M+H)+ 。
步驟2
製備N,N-二甲基-2-(5-(6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬-7-基)吡啶-2-基胺基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將7-(6-(6-(二甲基胺甲醯基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬烷-1-甲酸第三丁酯(100 mg，0.165 mmol)轉化成N,N-二甲基-2-(5-(6-側氧基-1,7-二氮雜螺[4.4]壬-7-基)吡啶-2-基胺基)-7-(四氫-2H-哌喃-3-基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(62 mg，74%產率)。1 H NMR(400 MHz,CD3 OD)δ8.76(s,1 H),8.58-8.56(m,1 H),8.53(s,1 H),8.50(s,1 H),8.20-8.14(m,1 H),4.57-4.42(m,2 H),4.04-3.93(m,2 H),3.90-3.83(m,2 H),3.61-3.51(m,1 H),3.49-3.46(m,1 H),3.21(S,3 H),3.16(s,3 H),3.03-2.96(m,1 H),2.93-2.84(m,1 H),2.24-2.14(m,2 H),2.13-1.77(m,7 H)。HR-MSm /z 505.2693(M+H)+ 。
實例122
7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
向500 ml帕爾振盪瓶中添加10.53 g(45.7 mmol)外消旋9-苯甲基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-4-酮、100 ml甲醇及20 ml四氫呋喃。以各別部分添加11 g(50.4 mmol)二碳酸二第三丁酯。接著將混合物置於氮氣下，且添加約0.5 g10%鈀/碳。所得混合物在振盪下在約50 psi氫氣下氫化36小時。自帕爾振盪器移除混合物，且添加約100 ml二氯甲烷及25 g矽藻土，且攪拌。經矽藻土墊過濾混合物。以過量二氯甲烷洗滌墊子。合併有機物，且濃縮成黏稠殘餘物，將其在真空下固化。使固體自二氯甲烷/庚烷再結晶，白色固體再真空下乾燥，產生4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(10.63 g，98%產率)。MS m/z 241(M+H)+ 。
步驟2
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(1.86 g，7.72 mmol)與5-溴-2-硝基-吡啶(1.51 g，7.42 mmol)組合，自CH2 Cl2 -庚烷再結晶之後，產生3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(1.59 g，58%產率)。TLC Rf約0.45(75%乙酸乙酯-庚烷)。MS m/z 363(M+H)+ 。
步驟3
製備3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(1.59 g，4.24 mmol)轉化成3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(1.41 g，98%產率)。MS m/z 333(M+H)+ 。
步驟4
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般流程5，以1.023 mmol之規模，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯與2-氯-7-環戊基-N,N -二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺組合，在SiO2 膠層析法(5-8% CH3 OH-乙酸乙酯)之後產生0.57 g(95%產率)3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯，TLC RF 0.4(在5% CH3 OH-乙酸乙酯中),MS m/z 589(M+H)+ 。
步驟5
製備7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺二鹽酸鹽
向0.55 g(0.96 mmol)3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯中添加15 ml乙酸乙酯。在室溫下在N2 下攪拌混合物，且冷卻至冰浴溫度。向此混合物添加5 ml含4N HCl之二噁烷。攪拌所得混合物直至所有起始物質消耗完。攪拌所得混合物直至如HPLC-MS所測定所有起始物質均消耗完。向此混合物中添加50 ml乙酸乙酯/乙醚之1:1混合物以沈澱出固體。過濾固體，且以過量之乙酸乙酯/乙醚之1：1混合物洗滌，且真空乾燥直至恆定重量，產生呈二鹽酸鹽形式之7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(0.213 g，45%產率)。MS m/z 489(M+H)+ 。1 H NMR(400 MHz,D6 DMSO)δ10.2(s,1H,寬峰),9.05(s,1H,寬峰),8.35(s,1 H),8.0(d,1 H),7.7(d,1 H),6.9(s,1 H),4.82(m,1H,寬峰),4.6(d,1H),4.25(s,1H,寬峰),4.15(s,1H,寬峰),3.82(m,1H,寬峰),3.5(d,1H),3.05(s,6H),2.82(m,1H),2.3(m,2H),2.2-1.95(m,10 H,寬峰),1.89(m,1H),1.65(m,2H)。
實例123
製備7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
對掌性分離外消旋7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(235 mg)，產生大致等量之(+)及(-)對映異構體。
7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。MS m/z 489(M+H)+ 。1 H NMR(400 MHz,D6 DMSO)δ10.2(s,1H,寬峰),9.05(s,1H,寬峰),8.35(s,1 H),8.0(d,1 H),7.7(d,1 H),6.9(s,1 H),4.82(m,1H,寬峰),4.6(d,1H),4.25(s,1H,寬峰),4.15(s,1H,寬峰),3.82(m,1H),3.5(d,1H),3.05(s,6H),2.82(m,1H),2.3(m,2H),2.2-1.95(m,10 H,寬峰),1.89(m,1H),1.65(m,2H)。
實例123
7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將5-溴-2-硝基吡啶(1 gm，4.93 mmol)與4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(1.18 gm，4.93 mmol)組合，產生3-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(1.4 gm，78%產率)。
步驟2
使用以下條件分離1 gm外消旋物3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯：20×250 mm 5 μm製備型IA管柱，移動相30% MeOH/70%CO2 ，產生約320 mg(1S,6R)-3-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯。MSm/z 363.4(M+H)。
對映異構體2，(1R,6S)-3-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯及(1S,6R)-3-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(320 mg)。MSm /z 363.4(M+H)。
步驟3
製備(1R,6S)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照硝基還原程序1，將(1R,6S)-3-(6-硝基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(360 mg，0.96 mmol)轉化為(1R,6S)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(293 mg，92%產率)。MSm/z 332.9(M+H)。
步驟4
製備(1R,6S)-3-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將(1R,6S)-3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(0.548 gm，1.65 mmol)與2-氯-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(483 mg，1.65 mmol)組合，產生(1R,6S)-3-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(858 mg，88%產率)。MSm/z 588.7(M+H)。
步驟5
製備7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。遵照脫除保護基之方法1，將(1R,6S)-3-(6-(7-環戊基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(858 mg，1.46 mmol)轉化成7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(700 mg，98%產率)。MS m/z 488.7(M+H)+ 。
實例124
自先前進行之實例122之外消旋物的對掌性分離製備7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。1 H NMR(400 MHz,D6 DMSO)δ10.2(s,1H,寬峰),9.05(s,1H,寬峰),8.35(s,1 H),8.0(d,1 H),7.7(d,1 H),6.9(s,1 H),4.82(m,1H,寬峰),4.6(d,1H),4.25(s,1H,寬峰),4.15(s,1H,寬峰),3.82(m,1H),3.5(d,1H),3.05(s,6H),2.82(m,1H),2.3(m,2H),2.2-1.95(m,10 H,寬峰),1.89(m,1H),1.65(m,2H)。MS m/z 489(M+H)+ 。
實例125
7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
步驟1
製備(1R,6S)-3-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環戊基-N-甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺與(1R,6S)-3-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯組合，產生(1R,6S)-3-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(200 mg，78%產率)。MS 575.8m/z (M+H)。
步驟2
製備7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將(1R,6S)-3-[6-(7-環戊基-6-甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯轉化成7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺(550 mg，52%產率)。MS 475.6m/z (M+H)。
步驟3
製備7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺與甲醛組合，產生7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺(100 mg，98%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 8.75(s,1 H),8.49(d,J =9.09 Hz,1 H),8.21(s,1 H),8.16(d,J =2.53 Hz,1 H),7.53(dd,J =8.84,2.78 Hz,1 H),6.66(s,1 H),6.21(d,J =4.55 Hz,1 H),5.48(t,J =8.84 Hz,1 H),4.22(d,J =14.65 Hz,1 H),3.41(m,1 H),3.32(ddd,J =17.43,6.57,6.32 Hz,2 H),3.01(d,J =5.05 Hz,6 H),2.76(dd,J =15.66,7.07 Hz,1H),2.59(m,2 H),2.45(s,3 H),2.20(m,2 H),2.06(br. s.,4 H),1.94(m,2 H)。MS 489.1m/z (M+H)。
實例126
7-環己基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-胺基-噠嗪-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯
在研缽及研杵中，將6-氯-噠嗪-3-基胺(100 mg，0.772 mmol)及3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(180 mg，0.849 mmol)一起研磨，置於密封試管中且加熱至130℃持續16小時。使反應物冷卻至室溫，接著將內容物溶解於少量二氯甲烷中。藉由矽膠層析法使用0-50%乙酸乙酯-庚烷梯度純化粗產物，產生3-(6-胺基-噠嗪-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(70.7 mg，0.232 mmol，30%產率)。MS m/z 306.1(M+H)+ 。
步驟2
純化3-[6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯。
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-環己基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(25.2 mg，0.082 mmol)與3-(6-胺基-噠嗪-3-基)-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]組合，其在矽膠純化(0-10%甲醇-乙酸乙酯梯度)後產生3-[6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(25 mg，0.043 mmol)。MS m/z 576.3(M+H)+ 。
步驟3
製備7-環己基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法2，將3-[6-(7-環己基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-噠嗪-3-基]-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-甲酸第三丁酯(25 mg，0.043 mmol)轉化成7-環己基-2-[6-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛-3-基)-噠嗪-3-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(18 mg，0.038 mmol，88%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.66(m,1 H),8.74(s,1 H),8.21(d,J =9.60 Hz,1 H),7.21(d,J =10.11 Hz,1 H),6.59(s,1 H),4.23(m,1 H),3.81(m,2 H),3.52(br. s.,2 H),3.05(br. s.,6 H),2.92(m,2 H),2.42(m,2 H),1.82(t,J =13.39 Hz,5 H),1.67(m,5 H),1.27(m,3 H)。MS m/z 476.2(M+H)+ 。
實例127
7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-(6-(7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯與2-氯-7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺組合，產生3-(6-(7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(160 mg，89%產率)。MSm/z 664.7。
步驟2
製備7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-(6-(7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯轉化為7-(4-(2-氰基丙-2-基)苯基)-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(72 mg，53%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.91(br. s.,1 H),9.63(br. s.,2 H),8.94(s,1 H),8.23(d,J =8.59 Hz,1 H),8.16(br. s.,1 H),7.72(d,J =8.59 Hz,1 H),7.54(m,1 H),6.95(s,1 H),4.40(d,J =16.17 Hz,1 H),4.16(m,2 H),3.73(dd,J =16.17,6.57 Hz,1 H),3.31(m,3 H),3.02(m,6 H),2.80(dd,J =16.67,7.58 Hz,1 H),2.08(m,3 H),1.89(br. s.,1 H),1.77(s,6 H)。MSm/z 546.0(M+H)。
實例128
2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-[6-(6-二甲基胺甲醯基-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將2-氯-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(181 mg，0.602 mmol)與3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(200 mg，0.602 mmol)組合，產生3-[6-(6-二甲基胺甲醯基-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(320 mg，0.536 mmol，86%產率)。MS m/z 597.6(M+H)+ 。
步驟2
製備2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(6-二甲基胺甲醯基-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(320 mg，0.536 mmol)轉化成2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺鹽酸鹽(200 mg，0.403 mmol)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.74(m,2 H),9.02(s,1 H),8.22(d,J =2.53 Hz,1 H),8.05(d,J =8.08 Hz,1 H),7.70(d,J =7.58 Hz,1 H),7.58(t,J =7.83 Hz,2 H),7.48(m,3 H),6.99(s,1 H),4.44(d,J =16.17 Hz,1 H),4.22(br. s.,2 H),3.76(dd,J =16.17,6.57 Hz,1 H),3.57(s,0 H),2.91(m,8 H),2.10(m,3 H),1.90(m,1 H)。MS m/z 496.8(M+H)+ 。
步驟3
使用對掌性層析法(AD-H管柱，21×250 mm管柱，含0.2%二乙胺之40%異丙醇/60% CO2 )分離2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之對映異構體，產生以下各物。
實例129
2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.74(m,2 H),9.02(s,1 H),8.22(d,J =2.53 Hz,1 H),8.05(d,J =8.08 Hz,1 H),7.70(d,J =7.58 Hz,1 H),7.58(t,J =7.83 Hz,2 H),7.48(m,3 H),6.99(s,1 H),4.44(d,J =16.17 Hz,1 H),4.22(br. s.,2 H),3.76(dd,J =16.17,6.57 Hz,1 H),3.57(s,0 H),2.91(m,8 H),2.10(m,3 H),1.90(m,1 H)。MS m/z 497(M+H)+ 。滯留時間1.88。
實例130
2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.74(m,2 H),9.02(s,1 H),8.22(d,J =2.53 Hz,1 H),8.05(d,J =8.08 Hz,1 H),7.70(d,J =7.58 Hz,1 H),7.58(t,J =7.83 Hz,2 H),7.48(m,3 H),6.99(s,1 H),4.44(d,J =16.17 Hz,1 H),4.22(br. s.,2 H),3.76(dd,J =16.17,6.57 Hz,1 H),3.57(s,0 H),2.91(m,8 H),2.10(m,3 H),1,90(m,1 H)。MS m/z 497(M+H)+ 。滯留時間2.61分鐘。
實 例131
7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
步驟1
製備3-(6-(7-環己基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(120 mg，0.361 mmol)與2-氯-7-環己基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(111 mg，0.361 mmol)組合，產生3-(6-(7-環己基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(120 mg，55.1%產率)。MS m/z 603.6(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-(6-(7-環己基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(120 mg，0.199 mmol)轉化成7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺鹽酸鹽(90 mg，90%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1 H),8.63(d,J =9.03 Hz,1 H),8.18(d,J =2.51 Hz,2 H),7.58(d,J =7.53 Hz,1 H),6.47(s,1 H),4.37(t,J =3.51 Hz,1 H),4.13(d,J =14.56 Hz,1 H),3.75(m,2 H),3.62(dd,J =14.56,6.53 Hz,1 H),3.18(s,6 H),2.97(m,2 H),2.63(d,J =11.04 Hz,2 H),2.03(m,7 H),1.82(d,J =11.54 Hz,2 H),1.40(m,4 H)。MS m/z 502.9(M+H)+ 。
實例132
7-環己基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
使用對掌性層析法(AD-H管柱,21×250 mm管柱，含0.2%二乙胺之40%異丙醇/60% CO2 分離對映異構體：對映異構體1之滯留時間為1.75分鐘，且
實例133
7-環己基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
對映異構體2之滯留時間為2.21分鐘。
實例134
7-環丁基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-(7-環丁基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(119 mg，0.359 mmol)與2-氯-7-環丁基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(100 mg，0.359 mmol)組合，產生3-(6-(7-環丁基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(150 mg，73%產率)。MS m/z 575.2(M+H)+ 。
步驟2
製備7-環丁基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-(6-(7-環丁基-6-(二甲基胺甲醯基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)吡啶-3-基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-9-甲酸第三丁酯(153 mg，0.266 mmol)轉化成7-環丁基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺鹽酸鹽(76m g，60%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 8.75(s,1 H),8.63(d,J =9.09 Hz,1 H),8.17(m,2 H),7.59(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H),6.47(s,1 H),5.00(t,J =8.59 Hz,1 H),4,12(d,J =14.65 Hz,1 H),3.75(m,2 H),3.62(dd,J =14.91,6.32 Hz,1 H),3.24(dd,2 H),3.17(s,6 H),2.94(m,2 H),2.50(m,2 H),1.98(m,7 H)。MS m/z 475.4(M+H)+ 。
實例135
7-環丁基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
使用對掌性層析法(IA管柱，21×250 mm管柱，含0.2%二乙胺之40%異丙醇/60% CO2 )，分離出7-環丁基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之對映異構體。
對映異構體1,7-環丁基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之滯留時間為1.98分鐘。1 H NMR(400 MHz,CDCL3 -d )δppm 8.75(s,1 H),8.63(d,J =9.09 Hz,1 H),8.17(m,2 H),7.59(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H),6.47(s,1 H),5.00(t,J =8.59 Hz,1 H),4.12(d,J =14.65 Hz,1 H),3.75(m,2 H),3.62(dd,J =14.91,6.32 Hz,1 H),3.24(dd,2 H),3.17(s,6 H),2.94(m,2 H),2.50(m,2 H),1.98(m,7 H)。MS m/z 475.4(M+H)+ 。
實例136
7-環丁基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
對映異構體2，7-環丁基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之滯留時間為2.72分鐘。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 -d )δppm 8.75(s,1 H),8.63(d,J =9.09 Hz,1 H),8.17(m,2 H),7.59(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H),6.47(s,1 H),5.00(t,J =8.59 Hz,1 H),4.12(d,J =14.65 Hz,1 H),3.75(m,2 H),3.62(dd,J =14.91,6.32 Hz,1 H),3.24(dd,2 H),3.17(s,6 H),2.94(m,2 H),2.50(m,2 H),1.98(m,7 H)。MS m/z 475.4(M+H)+ 。
實例137
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-9-(甲基磺醯基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-9-(甲基磺醯基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50 mg，0.102 mmol)、甲烷磺醯氯(12.3 mg，0.107 mmol)及二異丙基乙胺(0.027 ml，0.154 mmol)之樣品與攪拌棒一起組合至螺帽小瓶中的1 ml DCM中，且攪拌16小時。接著將反應物溶解於EtOAc中，且以Na2 CO3 飽和溶液萃取，接著以鹽水萃取，且有機層經Na2 SO4 乾燥。藉由正相層析法(含0-75%乙酸乙酯之庚烷)純化粗產物，產生7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-9-(甲基磺醯基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(25 mg，44%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.66(s,2 H),8.47(d,J =9.09 Hz,2 H),8.07(d,J =2.53 Hz,1 H),7.46(m,1 H),6.40(s,1 H),4.73(m,1 H),4.42(m,1 H),4.31(m,1 H),4.20(d,1 H),3.64(s,2 H),3.09(s,6 H),3.00(d,J =4.04 Hz,1 H),2.90(s,3 H),2.49(m,2 H),2.00(m,4 H),1.66(br. s.,4 H)。MSm/z 566.9(M+H)。
實例138
2-(5-((1S,6R)-9-(2-乙醯胺基乙醯基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備2-(5-((1S,6R)-9-(2-乙醯胺基乙醯基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
將2-乙醯胺基乙酸(12 mg，0.102 mmol)與二異丙基乙胺(0.018 ml，0.102 mmol)及HBTU(38.8 mg，0.102 mmol)組合至DMF(1 ml)中持續15分鐘。接著添加7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50 mg，0.102 mmol)，且攪拌反應物持續4小時。接著將反應物倒入鹽水中，且以乙酸乙酯萃取。經合併之乙酸乙酯萃取物以硫酸鈉乾燥，過濾，濃縮，且藉由矽膠層析法純化所得殘餘物，產生2-(5-((1S,6R)-9-(2-乙醯胺基乙醯基)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(45 mg，77%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.71(d,J =8.08 Hz,2 H),8.82(s,1 H),8.14(d,J =2.53 Hz,1 H),8.07(d,J =6.06 Hz,1 H),7.61(d,J =9.09 Hz,2 H),6.63(s,2 H),4.76(m,2 H),4.53(br. s.,1 H),4.44(br. s.,0 H),4.21(d,J =14.65 Hz,0 H),3.95(m,2 H),3.61(dd,J =14.91,5.81 Hz,1 H),3.04(m,6 H),2.78(m,1 H),2.40(m,3 H),2.00(m,6 H),1.89(s,3 H),1.66(m,3 H)。MSm/z 588.6(M+H)。
實例139
2-(5-((1S,6R)-9-乙醯基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備2-(5-((1S,6R)-9-乙醯基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50 mg，0.102 mmol)、乙酸酐(0.020 ml，0.113 mmol)及二異丙基乙胺(0.014 ml，0.154 mmol)之樣品與1 ml DCM組合。攪拌混合物16小時，接著溶解於EtOAc中，以鹽水洗滌，經Na2 SO4 乾燥，過濾且濃縮。藉由矽膠層析法純化粗產物，產生2-(5-((1S,6R)-9-乙醯基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(32 mg，52%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.70(d,J =8.08 Hz,1 H),8.82(s,1 H),8.33(dd,J =9.09,6.06 Hz,1 H),8.13(d,J =2.53 Hz,1 H),7.60(dd,J =9.09,2.53 Hz,1 H),6.63(s,1 H),4.76(t,J =8.84 Hz,1 H),4.70(br. s.,0 H),4.55(m,0 H),4.43(s,0 H),4.34(br. s.,0 H),4.18(d,J =14.65 Hz,0 H),4.06(d,J =14.15 Hz,0 H),3.59(m,1 H),3,06(br. s.,6 H),2.98(d,J =16.17 Hz,1 H),2.87(d,J =14.65 Hz,0 H),2.73(m,1 H),2.44(br. s.,2 H),2.19(m,1 H),2.05(d,J =4.55 Hz,3 H),1.98(m,6 H),1.82(m,2 H),1.66(d,J =5.56 Hz,3 H),1.23(br. s.,1 H)。MSm/z 531.6(M+H)。
實例140
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(90 mg，0.184 mmol)與甲醛(37%水溶液，0.041 ml，1.474 mmol)組合，在矽膠層析後7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(90 mg，97%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.69(s,1 H),8.81(s,1 H),8.31(d,J =9.09 Hz,1 H),8.12(d,J =2.53 Hz,1 H),7.58(dd,J =9.09,2.53 Hz,1 H),6.63(s,1 H),4.76(m,1 H),4.16(d,J =14.65 Hz,1 H),3.35(m,1 H),3.28(m,1 H),3.20(t,J =6.57 Hz,1 H),3.06(br. s.,6 H),2.99(m,1 H),2.46(m,2 H),2.34(s,3 H),2.06(m,6 H),1.81(m,2 H),1.67(m,3 H)。MS m/z 503.6(M+H)+ 。
實例141
7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶 -6-甲酸二甲基醯胺與甲醛(37%水溶液)組合，純化後產生7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(41 mg，80%產率)。1 H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 9.69(s,1 H),8.81(s,1 H),8.31(d,J =9.09 Hz,1 H),8.12(d,J =2.53 Hz,1 H),7.58(dd,J =9.09,2.53 Hz,1 H),6.63(s,1 H),4.76(m,1 H),4.16(d,J =14.65 Hz,1 H),3.35(m,1 H),3.28(m,1 H),3.20(t,J =6.57 Hz,1 H),3.06(br. s.,6 H),2.99(m,1 H),2.46(m,2 H),2.34(s,3 H),2.06(m,6 H),1.81(m,2 H),1.67(m,3 H)。MS m/z 502.9(M+H)+ 。
實例142
7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-異丙基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-異丙基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(65 mg，0.133 mmol)與丙酮(0.05 mL，0.665 mmol)組合，產生7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-異丙基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(61 mg，86%產率)。1 H NMR(400 MHz,氯仿-d )δppm 8.67(s,1 H),8.44(d,J =8.59 Hz,1 H),8.12(s,1 H),8.08(d,J =2.53 Hz,1 H),7.46(dd,J =8.59,2.53 Hz,1 H),6.38(s,1 H),4.73(t,J =9.09 Hz,1 H),4.24(d,J =14.65 Hz,1 H),3.59(m,2 H),3.21(br. s.,1 H),3.08(m,7 H),2.97(br. s.,1 H),2.53(m,3 H),1.95(m,6 H),1.66(m,3 H),1.07(t,J =5.81 Hz,6 H)。MSm/z 531.6(M+H)。
實例143
7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-三氘甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
製備7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-三氘甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照一般還原性烷基化方法1，將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(50 mg，0.102 mmol)與甲醛-d 2 (0.015 ml，0.015 mL)組合，產生7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-9-三氘甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(43 mg，85%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.75(s,1 H),8.53(d,J =9.09 Hz,1 H),8.16(m,1 H),7.56(dd,J =9.09,2.53 Hz,1 H),6.48(s,1 H),4.82(t,J =8.84 Hz,1 H),4.26(m,1 H),3.41(m,6 H),3.16(m,2 H),2.79(m,3 H),2.59(m,2 H),2.24(br. s.,2 H),2.08(m,6 H),1.75(m,3 H)。MSm /z 506.6(M+H)。
實例144
7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-4-側氧基-9-(2,2,2-三氟乙基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
製備7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-4-側氧基-9-(2,2,2-三氟乙基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺
將7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(60 mg，0.123 mmol)之樣品與含三氟甲烷磺酸2,2,2-三氟乙酯(0.035 ml，0.246 mmol)之二甲基甲醯胺(1 mL)組合，且加熱至(80℃)隔夜。接著將反應物倒入水中，且以乙酸乙酯萃取。水相以乙酸乙酯洗滌。合併有機物，經硫酸鈉乾燥，過濾且濃縮產生粗材料，藉由矽膠管柱層析法純化，產生7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-4-側氧基-9-(2,2,2-三氟乙基)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺(45 mg，64%產率)。1 H NMR(400 MHz,CDCl3 )δppm 8.74(s,1 H),8.51(d,J =9.09 Hz,1 H),8.22(s,1 H),8.15(d,J =2.53 Hz,1 H),7.52(dd,J =8.84,2.78 Hz,1 H),6.46(s,1 H),4.80(t,J =8.59 Hz,1 H),4.23(d,J =13.64 Hz,1 H),3.47(m,3 H),3.16(s,6 H),3.06(m,3 H),2.83(dd,J =15,66,7,07 Hz,1 H),2.57(dd,J =12.13,8.59 Hz,2 H),2.04(m,6 H),1.70(m,4 H)。MSm/z 571.6(M+H)。
實例145
7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
步驟1
製備3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-8-氧雜-3.10-二氮雜-螺[4.5]癸烷-10-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(0.776 g，3.03 mmol)與5-溴-2-硝基-吡啶(0.676 g，3.33 mmol)組合，產生3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(0.69 g，1.732，57.2%產率)。MSm/z 379.4(M+H)。
步驟2
製備3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯
遵照一般硝基還原程序，將3-(6-硝基-吡啶-3-基)-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(690 mg，1.824 mmol)轉化成3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(351 mg，1.007 mmol，55.2%產率)。MSm/z 349.3(M+H)。
步驟3
製備3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯
遵照一般N-C偶合程序1，將3-(6-胺基-吡啶-3-基)-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(350 mg，1.047 mmol)與2-氯-7-環戊基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(337 mg，1.151 mmol)組合，產生3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(476 mg，0.787 mmol，75%產率)。MSm/z 604.6(M+H)。
步驟4
製備7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
遵照脫除保護基之方法1，將3-[6-(7-環戊基-6-二甲基胺甲醯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-2-基胺基)-吡啶-3-基]-4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸烷-10-甲酸第三丁酯(470 mg，0.777 mmol)轉化成7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-8-氧雜-3,10-二氮雜雙環[4.3.1]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺(231 mg，0.457 mmol，58.8%產率)。1 H NMR(400 MHz,D6 DMSO)δ10.2(s,1H,寬峰),9.05(s,1H,寬峰),8.35(s,1 H),8.0(d,1 H),7,7(d,1 H),6,9(s,1 H),4.82(m,1H,寬峰),4.6(d,1H),4,25(s,1H,寬峰),4,15(s,1H,寬峰),3.82(m,1H,寬峰),3.5(d,1H),3.05(s,6H),2.82(m,1H),2.3(m,2H),2.2-1.95(m,10H,寬峰),1.89(m,1H),1.65(m,2H)。MSm/z 504.6(M+H)。
實例146-147
對掌性分離7-環戊基-2[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺之樣品，產生(對映異構體1)7-環己基-2-[5-((S)-1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺及(對映異構體2)7-環己基-2-[5-((R)-1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。
實例146
7-環己基-2-[5-((S)-1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺
白色固體(4 mg) MSm/z 489.3(M+H)+ 。
實例147
7-環己基-2-[5-((R)-1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺。白色固體(5 mg) MSm/z 489.3(M+H)+ 。
生物檢定
CDK4/細胞週期素D1酶促活性檢定
使用TR-FRET以384孔格式進行監測pRb在Ser780位點處由CDK4/細胞週期素D1催化之磷酸化的檢定，且其用於IC50 測定及動力學分析。反應在含有0.3 nM CDK4/細胞週期素D1、150 nM生物素-pRb(773-924)、3 μM ATP及1.3% DMSO(或含化合物之DMSO)的30 μL體積之檢定緩衝液(50 mM HEPES-Na(pH 7.5)、5 mM MgCl2 、1 mM DTT、0.02% Tween-20及0.05% BSA)中進行。最後添加3 μM ATP以引發反應。在22℃下培育60分鐘後，以10 μL 240 mM EDTA-Na(pH 8.0)淬滅反應。藉由添加40 μL在偵測緩衝液(50 mM HEPES-Na(pH 7.5)、60 mM EDTA-Na(pH 8.0)、0.05%BSA及0.1% Triton X-100)中含有40 nM SA-APC、143 ng/mL抗-磷酸基-pRb(S780)抗體及1 nM Eu-W1024抗兔IgG抗體的偵測溶液來產生信號。在暗處培育60分鐘後，在Envision(Perkin Elmer 2102-0010)上對板讀數。
人類CDK4/細胞週期素D1經桿狀病毒(baculovirus)感染在Sf21細胞中表現。
可使用CDK4/細胞週期素D1酶促檢定中所述之一般程序進行CDK6/細胞週期素D3酶促活性檢定。CDK6/細胞週期素D3酶複合物可購自商業來源(CarnaBiosciences，目錄號04-107)。
CDK1/細胞週期素B酶促活性檢定
使用384孔微量滴定盤IMAP-FPTM (Molecular Devices Trade Mark Technology)終點檢定量測CDK1/細胞週期素B激酶活性。使用同一檢定測定小分子抑制劑之IC50 。一般而言，激酶反應在20 μL體積反應溶液中進行，該反應溶液由2 μL化合物(在20% DMSO中)、8 μL處於1×反應緩衝液(Molecular Devices,目錄號R8139)中之CDK1/細胞週期素B、Tamra組蛋白-H1肽(Molecular Devices,目錄號R7384)與ATP(Amersham Pharmacia,目錄號27-2056-01)於新鮮添加有1 mM DTT的1×反應緩衝液中之10 μL受質混合物構成。最終反應混合物含有濃度為0.005至10 μM的化合物(抑制劑)、2% DMSO、0.25 nM CDK1/細胞週期素B、100 nM Tamra組蛋白-H1肽及20 μM ATP。
所有反應均在室溫下在黑色384孔平底Costar板(Corning,目錄號3710)中進行120分鐘，接著藉由添加60 μL按400倍稀釋之1×漸進結合緩衝液A(Molecular Devices,目錄號R8139)而淬滅。在室溫下培育2小時之後，在Evision多標籤讀取器(Perkin Elmer,Envision 2102-0010)上讀取螢光偏振信號。注意：IC50 <0.005 nM或IC50 >10 μM表示真實IC50 在偵測範圍之外。
CDK4 細胞檢定
基於細胞之檢定使用酶聯結免疫吸附劑檢定(ELISA)法量測pRb在Ser780位點處之磷酸化程度(表6)。JeKo-1為套細胞淋巴瘤細胞系，由於其已知的移位及細胞週期素D1之後續過表現而選擇其用於此檢定。[參看：Amin,H. M.;McDonnell,T. J.;Medeiros,L. J.;Rassidakis,G. Z.;Leventaki,V.;O'Connor,S. L.;Keating,M. J.;Lai,R. Characterization of 4 mantle cell lymphoma cell lines-Establishment of an in vitro study model.Arch. Pathol. Lab. Med. 2003 ,127,424-431]。
使表現JeKo-1套細胞淋巴瘤細胞系之pRb在由RPMI1640(Gibco目錄號22400-071)、20% FBS(Gibco目錄號10082-131)、2 mM L-麩醯胺酸(Gibco目錄號25030-081)及1%青黴素(Penicillin)/鏈黴素(Streptomycin)(Gibco目錄號15140-133)組成之完全培養基中生長。將JeKo-1細胞以20,000個細胞/孔接種於Biocoat細胞環境聚-D-離胺酸96孔組織培養板(Becton Dickinson目錄號356461)中的100 μL最終體積之完全培養基中。使細胞黏附隔夜。將化合物配製為DMSO中之10 mM儲備溶液，且在96孔組織培養板中在完全培養基中稀釋至110 μM之濃度，接著連續稀釋4倍，允許產生最終濃度為26 nM的7點滴定曲線。接著將10 μL稀釋液轉移至細胞培養板中，使最終濃度在10 μM至2 nM範圍內。在37℃下在5% CO2 下進行培育。所有化合物在各濃度下重複測試3次。在化合物培育之後，移除培養基且將細胞溶解於由50 mM Tris.Cl(pH 7.2)、120 mM NaCl、1 mM EDTA、6 mM EGTA、1% NP-40、完全蛋白酶抑制劑混合液(Roche,目錄號11836170001)及Calbiochem之蛋白酶抑制劑混合液(目錄號524525)組成之35 μL溶解緩衝液中。板置於4℃下，劇烈振盪5分鐘以溶解細胞。所得溶解產物含有約1 μg/μL蛋白質。
將來自Cell signaling technology之4H1總pRb抗體(目錄號9309)以每孔50 ng之濃度添加至透明MaxiSorp板(Nunc目錄號442404)中的50 μL杜爾貝科氏磷酸鹽緩衝生理食鹽水(Dulbecco's Phosphate Buffered Saline，DPBS)(Gibco目錄號14190-144)中。板在4℃下在搖動下培育隔夜。在以250 μL TBST(Teknova目錄號T9501)洗滌且印跡乾燥之後，向各孔中添加250 μL Superblock(Pierce目錄號37535)。在振盪10分鐘後，Superblock溶液換為新鮮Superblock，且板在振盪器上再培育50分鐘。阻斷後，向各孔中一式三份添加30 μL含有約10 μg總蛋白質之JeKo-1細胞溶解產物。向各孔中添加含有10% Superblock(Pierce目錄號37535)之20 μL PBS(Gibco目錄號10010-023)直至最終反應體積為50 μL。接著以Uniseal板密封器(Whatman目錄號7704-0007)密封各板，且在室溫下，在振盪器上培育2小時。各板以3×250 μL TBST洗滌。添加50 μL來自Cell Signaling之抗磷酸基Rb Ser780 (目錄號9307)於PBS/10% Superblock中之1:1000倍稀釋液，且板在室溫下在振盪器上培育1小時。在所有培育步驟中，板以Uniseal板密封器覆蓋。培育後，各板以3×250 μL TBST洗滌。接著，添加50 μL驢抗兔HRP(Promega目錄號W401B)於PBS/10% Superblock中之1:2500倍稀釋液，且各板在室溫下在振盪器上培育30分鐘。各板如上所述作再次洗滌。最終，添加50 μL Ultra TMB ELISA(Pierce目錄號34028)，且在未密封下，在黑暗中培育各板5-15分鐘直至產生藍色。培育後，向各板中添加50 μL 2 M硫酸來中止反應，且在SpectraMax(Molecular Devices,Sunnydale,CA)上，在450 nm下在15分鐘內測定吸光度。所有洗滌均使用Bio-Tek板洗滌器進行。
使用總Rb ELISA套組(Invitrogen目錄號KHO0011)測定總pRb含量。此套組使用預塗覆有用於捕捉之專有總pRb抗體的孔。除細胞溶解產物之外，列出的所有試劑均包括在套組中。對用於捕捉及偵測之抗體的性質標識為專有，且未揭示。將10 μg細胞溶解產物裝載至孔中，且以標準稀釋緩衝液將體積調整至50 μL。各板以套組中所包括之膜密封，且在室溫下在振盪器上培育2小時。接著各板以250 μL洗滌緩衝液手工洗滌3次。向各孔中添加50 μL專有一次抗體(與生物素預結合)，且在室溫下在振盪器上培育1小時。接著，各板如上所述作再次洗滌。二次抗體(與抗生蛋白鏈菌素預結合之HRP)在抗生蛋白鏈菌素-HRP稀釋緩衝液中按1:100倍稀釋，且向各孔中添加50 μL。各板接著培育30分鐘。此後，各板用上文所述之緩衝液洗滌4次。最終，每孔添加50 μL穩定色原體，且各板培育15分鐘，此時添加50 μL停止溶液。接著在Spectramax上在450 nm下對各板讀數。
在定量pRb磷酸化(p-pRb)程度之後，自所測試之各濃度得出抑制百分比，且將其用於求出特定化合物(未經校正)之50%抑制濃度(IC50 )。接著使用總pRb含量調整p-pRb抑制百分比值，以說明由於無pRb蛋白質本身存在所致的任何信號損失，且由經調整之抑制百分比獲得之IC50 值代表經校正之細胞p-pRb IC50 。
自動化電生理學研究(Q-片膜箝制檢定)
細胞培養：組成性表現功能性hERG通道之CHO細胞購自AVIVA Biosciences Corp.(San Diego,CA)。使細胞在補充有10% FBS(Gibco目錄號10082-142)、1%青黴素-鏈黴素(Gibco目錄號15140-122)及1%遺傳黴素(Geneticin)(Gibco目錄號10131-027)之DMEM/F12(Gibco目錄號11039-021)中生長。當細胞達到約70-90%匯合時，藉由自培養物吸出培養基且以杜爾貝科氏PBS(Gibco目錄號14190-136)沖洗細胞單層來分裂細胞。在移除沖洗緩衝液之後，添加胰蛋白酶/EDTA(0.05%，Gibco目錄號25300-054)以覆蓋細胞單層，且在室溫下培育1分鐘。抽吸胰蛋白酶/EDTA且留下細胞再保持1分鐘。藉由輕敲燒瓶自燒瓶移出細胞。添加完全培養基且上上下下吸液若干次以混合及解離細胞團直至細胞分離。計數細胞且將細胞再接種於37℃、5.0%CO2 、100%濕度培育箱中之燒瓶中以進行細胞繼代，且再接種於30℃、5.0% CO2 、100%濕度培育箱中之燒瓶中進行化合物篩選。在QPatch檢定之前，自培養瓶移除生長培養基，且對細胞以12 ml D-PBS溫和沖洗一次。在室溫下，將細胞浸入10 ml胰蛋白酶/EDTA(由具有D-PBS之10×冷凍儲備物新鮮製備)持續約30秒，隨後抽吸溶液，接著在37℃下培育3-4分鐘。在培育結束時，無需任何敲打即可自燒瓶底部容易地移出明顯圓形之細胞。添加QPatch改良型儲存培養基(CHO-S-SFM II、25 mM HEPES及0.04 mg/ml大豆胰蛋白酶抑制劑)，且藉由上上下下吸液6-10次來緩和地再懸浮細胞。以Beckman Vicell測定細胞密度及活力。在QPatch改良型儲存培養基中將細胞密度調整至2至3×106 個/ml。立即將細胞懸浮液施加至QPatch平台上的儲存容器中。
溶液及藥物：離心(150 g，2分鐘)細胞，移除上清液，且洗滌細胞集結粒兩次，且最終再懸浮於含有以下之細胞外溶液(Na-Ringer)中(以mM為單位)：145 NaCl、4 KCl、2 CaCl2 、1 MgCl2 、10 HEPES，調整至pH 7.4。將此懸浮液(3-10 3 106 個細胞/ml)之等分試樣(300 ul)轉移至晶片上。細胞內溶液由以下組成(以mM為單位)：120 KCl、5.374 CaCl2 、1.75 MgCl2 、10 KOH/EGTA、10 HEPES、5 K2-ATP，調整至pH 7.2。阿米替林(Amitriptyline)(參考對照物)來自Sigma。所有化合物均以10 mM在100% DMSO中配製。藉由在96孔板中於100% DMSO中作5倍連續稀釋來配製各濃度(一式三份)。接著轉移各稀釋液且在96孔覆蓋玻璃的板中在細胞外溶液中進一步稀釋333倍(測試濃度0.2至30 μM)。最終DMSO濃度0.3%。
電生理學：用單通道QPatch測試版本進行所有電生理學實驗。Q板具有16個記錄室且各室具有並行操作之片膜箝制放大器。放大器由Sophion之定製數位信號處理器(DSP)板控制，該板以全細胞模式對單個細胞進行電壓箝制。在hERG檢定中，在電壓方案實施期間之全細胞電流的採集速率為10 kHz。此電流信號以3 kHz之截止頻率數位過濾(貝塞爾過濾器(Bessel filter)，等級=4)。CHO-hERG細胞保持於-80 mV靜止膜電位下持續100 msec，且在-50 mV下持續100 msec(漏減)，且去極化至+20 mV持續4 sec(前脈衝)，隨後再極化至-50 mV持續4 sec(測試脈衝)，隨後返回到保持電位-80 mV。該方案每20秒重複一次。在各基線與增加之劑量施加期間，實施約10次電壓方案。
射流學：將細胞懸浮液、化合物樣品及Na-Ringer(洗滌液)(5-15 μl體積)吸移至晶片上。
資料分析：利用希爾等式(Hill equation)，根據實驗劑量反應資料之最佳擬合估算IC50 及希爾係數(Hill coefficient)：
剩餘電流(%)=MaxI+((MinI-MaxI)/(1+((Conc./IC50)^Hill)))，其中MaxI=100，MinI=0
此擬合程序返回兩個可變參數之值：IC50 值及希爾斜率(Hill slope)。
在Q-片膜箝制檢定中評估本發明之特定實例。
生物資料
表1中給出CDK4與CDK1酶促活性檢定及CDK4細胞檢定之結果。

Claims (30)

  1. 一種式(I)化合物， 其中：R1 為C3-7 烷基；C4-7 環烷基，視情況經一個選自由C1-6 烷基及OH組成之群的取代基取代；苯基，視情況經一個選自由C1-6 烷基、C(CH3 )2 CN及OH組成之群的取代基取代；哌啶基，視情況經一個環丙基或C1-6 烷基取代；四氫哌喃基，視情況經一個環丙基或C1-6 烷基取代；或雙環[2.2.1]庚基；A為CH或N；R11 為氫或C1-4 烷基；L為一鍵、C(O)或S(O)2 ； R2Y 為、、、、、 V為NH或CH2 ；X 為O或CH2 ；W為O或NH；m與n各自獨立為1、2或3，只要m與n不皆為3；各R2Y 視情況經1至4個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地 選自由羥基、NH2 及-S-C1-3 烷基組成之群的取代基取代；CD3 ；鹵基；側氧基(oxo)；C1-3 鹵烷基；羥基；NH2 ；二甲基胺基；苯甲基；-C(O)-C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由NH2 、-SCH3 及NHC(O)CH3 組成之群的取代基取代；-S(O)2 -C1-4 烷基；吡咯啶基-C(O)-；及-C(=O)O-C1-3 烷基；R4 為氫、氘或C(R5 )(R6 )(R7 )；且R5 、R6 、R7 、R8 、R9 及R10 各自獨立為H或氘；或其醫藥學上可接受之鹽。
  2. 如請求項1之化合物，其具有式(I-B)， 其中L為一鍵或C(O)； R2Y 為、、、、、 V為NH或CH2 ；X 為O或CH2 ；W為O或NH；m與n各自獨立為1、2或3，只要m與n不皆為3；且各R2Y 視情況經1至4個各自獨立地選自由以下組成之群的取代基取代：C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由羥基、NH2 及-S-C1-3 烷基組成之群的取代基取代；CD3 ；C1-3 鹵烷基；羥基；NH2 ；二甲基胺基；苯甲基；-C(O)-C1-3 烷基，視情況經1或2個各自獨立地選自由NH2 、-SCH3 及NHC(O)CH3 組成之群的取代基取代；-S(O)2 -C1-4 烷基；吡咯啶基-C(O)-；及-C(=O)O-C1-3 烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  3. 如請求項1或2之化合物，其中L為C(O)；或其醫藥學上可接受之鹽。
  4. 如請求項1或2之化合物，其中L為一鍵；或其醫藥學上可接受之鹽。
  5. 如請求項1或2之化合物，其中A為CH且R11 為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  6. 如請求項1或2之化合物，其中R4 為C(R5 )(R6 )(R7 )且R5 、R6 、R7 、R8 、R9 及R10 為氫；或其醫藥學上可接受之鹽。
  7. 如請求項1或2之化合物，其中R1 為視情況經一個C1-6 烷基取代之C4-7 環烷基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  8. 如請求項1或2之化合物，其中R1 為環丁基、環戊基、環己基或環庚基；或其醫藥學上可接受之鹽。
  9. 如請求項1或2之化合物，其中R1 為未經取代之環戊基； 或其醫藥學上可接受之鹽。
  10. 如請求項1或2之化合物，其中R2Y 未經取代；或其醫藥學上可接受之鹽。
  11. 如請求項1或2之化合物，其中R2Y 為或，其中任一者視情況經一個C1-3 烷基取代；或 其醫藥學上可接受之鹽。
  12. 如請求項1或2之化合物，其中R2Y 為視情況經一個C1-3 烷基 取代之；或其醫藥學上可接受之鹽。
  13. 如請求項1之化合物，其具有式(I-C)， 其中：R1 為環丁基、環戊基、環己基、環庚基，其各自視情況經甲基、乙基或OH之一取代； A為CH或N；L為一鍵、-C(O)-或S(O)2 -；R2Y 為 其中各R2Y 視情況經1或2個獨立地選自鹵素、甲基、乙基或側氧基之取代基取代；V為NH或CH2 ；R4 為氫、氘或C(R5 )(R6 )(R7 )；且R5 、R6 、R7 、R8 、R9 及R10 各自獨立為H或氘；或其醫藥學上可接受之鹽。
  14. 如請求項13之化合物，其中A為CH；或其醫藥學上可接受之鹽。
  15. 如請求項14之化合物，其中L為一鍵；或其醫藥學上可接受之鹽。
  16. 如請求項14之化合物，其中L為-C(O)-；或其醫藥學上可接受之鹽。
  17. 如請求項15或16之化合物，其中R4 為CH3 ；且R8 、R9 及R10 為H；或其醫藥學上可接受之鹽。
  18. 如請求項17之化合物，其中R1 為環戊基；或其醫藥學上 可接受之鹽。
  19. 如請求項13之化合物，其選自由以下組成之群：環戊基-2-(5-(9-羥基-1,5,7-三甲基-3,7-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)吡啶-2-基胺基)-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；2-(5-(2,6-二氮雜螺[3.3]庚烷-2-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H -吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-(4-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環庚基-2-[5-(2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；2-(5-(2,7-二氮雜螺[3.5]壬烷-7-羰基)吡啶-2-基胺 基)-7-環庚基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2-[5-(8-甲基-3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺；7-(3-第三丁基-苯基)-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；2-(5-((1R,5S)-3-氧雜-7,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-9-羰基)吡啶-2-基胺基)-7-環戊基-N,N-二甲基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-[4-(氰基-二甲基-甲基)-苯基]-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-8-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡 啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(5'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,3'-吡咯啶]-1'-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2[5-(1-側氧基-六氫-吡咯并[1,2-a]吡嗪-2-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；2-[5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7-苯基-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；及7-環己基-N,N-二甲基-2-(5-(4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽。
  20. 如請求項1之化合物，其選自由以下組成之群：7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺； 7-環戊基-2-[5-((S,S )-2,5-二氮雜雙環[2.2.1]庚烷-2-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-((1S,5S)-3,6-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環丁基-2-[5-((1S,6R)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環己基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-6-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-4-甲基-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-2-[5-(3,9-二氮雜雙環[3.3.1]壬烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(3-側氧基-1,4-二氮雜雙環 [3.2.2]壬-4-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；及7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽。
  21. 如請求項1之化合物，其選自由以下組成之群：7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aS,6aR)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環庚基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(順-6-側氧基四氫-1H-吡咯并[3,4-c]吡啶-5(6H,7H,7aH)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；及7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((3aR,6aS)-5-甲基-1-側氧基六氫吡咯并[3,4-c]吡咯-2(1H)-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽。
  22. 如請求項1之化合物，其選自由以下組成之群：7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,3r,5S)-2'-側氧基-8-氮雜螺[雙環[3.2.1]辛烷-3,5'-噁唑啶]-3'-基)吡啶-2-基胺 基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,8-二氮雜螺[4.6]十一-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-(2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜螺[4.5]癸-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺；7-環戊基-2-[5-((S)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；及7-環戊基-2-[5-((R)-2-側氧基-1-氧雜-3,7-二氮雜-螺[4.5]癸-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺；或其醫藥學上可接受之鹽。
  23. 一種醫藥組合物，其包含如請求項1至22中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
  24. 如請求項1之化合物，其係為7-環戊基-N,N-二甲基-2-(5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)吡啶-2-基胺基)-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲醯胺，具有以下之化學式 ；或其醫藥學上可接受之鹽。
  25. 一種醫藥組合物，其包含如請求項24之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
  26. 如請求項1之化合物，其係為7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺，具有以下 化學式；或其醫藥學上可接受之鹽。
  27. 如請求項1之化合物，其係為7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺，具有以下化學 式；或其醫藥學上可接受之鹽。
  28. 如請求項1之化合物，其係為7-環戊基-2-[5-((1R,6S)-9-甲基-4-側氧基-3,9-二氮雜雙環[4.2.1]壬-3-基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸甲醯胺，具有以下化 學式；或其醫藥學上可接受之鹽。
  29. 如請求項1之化合物，其係為7-環戊基-2-[5-(3,8-二氮雜雙環[3.2.1]辛烷-3-羰基)-吡啶-2-基胺基]-7H-吡咯并[2,3-d]嘧啶-6-甲酸二甲基醯胺，具有以下化學式 ；或其醫藥學上可接受之鹽。
  30. 一種醫藥組合物，其包含如請求項29之化合物或其醫藥學上可接受之鹽，及醫藥學上可接受之載劑或賦形劑。
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Families Citing this family (149)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
RS54876B1 (sr) 2005-05-10 2016-10-31 Incyte Holdings Corp Modulatori indoleamina 2,3-dioksigenaze i metode za upotrebu istih
US7723477B2 (en) 2005-10-31 2010-05-25 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for inhibiting Wnt-dependent solid tumor cell growth
MY171866A (en) 2008-07-08 2019-11-05 Incyte Holdings Corp 1,2,5-oxadiazoles as inhibitors of indoleamine 2,3-dioxygenase
GEP20135785B (en) 2008-08-22 2013-03-11 Novartis Ag Pyrrolopyrimidine compounds as cdk inhibitors
NZ592338A (en) 2008-09-26 2012-11-30 Oncomed Pharm Inc Frizzled-binding agents and uses thereof
TWI535445B (zh) 2010-01-12 2016-06-01 安可美德藥物股份有限公司 Ｗｎｔ拮抗劑及治療和篩選方法
CA2794674A1 (en) 2010-04-01 2011-10-06 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Frizzled-binding agents and uses thereof
EP2558092B1 (en) * 2010-04-13 2018-06-27 Novartis AG Combination comprising a cyclin dependent kinase 4 or cyclin dependent kinase 6 (cdk4/6) inhibitor and an mtor inhibitor for treating cancer
US8691830B2 (en) 2010-10-25 2014-04-08 G1 Therapeutics, Inc. CDK inhibitors
US8501768B2 (en) * 2011-05-17 2013-08-06 Hoffmann-La Roche Inc. Hexahydrocyclopentapyrrolone, hexahydropyrrolopyrrolone, octahydropyrrolopyridinone and octahydropyridinone compounds
ES2676180T3 (es) 2011-07-01 2018-07-17 Novartis Ag Terapia de combinación que comprende un inhibidor de CDK4/6 y un inhibidor de PI3K para el uso en el tratamiento de cáncer
JP2015502958A (ja) * 2011-12-09 2015-01-29 オンコメッド ファーマシューティカルズ インコーポレイテッド がんの処置のための併用療法
EP2831080B1 (en) 2012-03-29 2017-03-15 Francis Xavier Tavares Lactam kinase inhibitors
CN107383009B (zh) 2012-06-13 2020-06-09 因塞特控股公司 作为fgfr抑制剂的取代的三环化合物
WO2014011900A2 (en) 2012-07-11 2014-01-16 Blueprint Medicines Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
CA2880764C (en) 2012-08-03 2022-08-30 Foundation Medicine, Inc. Human papilloma virus as predictor of cancer prognosis
WO2014066328A1 (en) 2012-10-23 2014-05-01 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Methods of treating neuroendocrine tumors using wnt pathway-binding agents
CA2899353A1 (en) 2013-02-04 2014-08-07 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. Methods and monitoring of treatment with a wnt pathway inhibitor
TW201444849A (zh) 2013-03-13 2014-12-01 Janssen Pharmaceutica Nv 經取代的7-氮雜雙環類及其作為食慾激素受體調節劑之用途
TW201444821A (zh) 2013-03-13 2014-12-01 Janssen Pharmaceutica Nv 經取代之哌啶化合物及其作為食慾素受體調節劑之用途
TWI621618B (zh) 2013-03-13 2018-04-21 比利時商健生藥品公司 經取代２－氮雜雙環類及其作為食慾素受體調控劑之用途
US9168300B2 (en) 2013-03-14 2015-10-27 Oncomed Pharmaceuticals, Inc. MET-binding agents and uses thereof
LT2968290T (lt) 2013-03-15 2019-12-10 G1 Therapeutics Inc Laikina normalių ląstelių apsauga chemoterapijos metu
JP6435315B2 (ja) 2013-03-15 2018-12-05 ジー１、セラピューティクス、インコーポレイテッドＧ１ Ｔｈｅｒａｐｅｕｔｉｃｓ， Ｉｎｃ． 高活性抗新生物薬及び抗増殖剤
SG11201508328PA (en) 2013-04-19 2015-11-27 Incyte Corp Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
EP3033086B1 (en) * 2013-08-14 2021-09-22 Novartis AG Combination therapy for the treatment of cancer
EP3060560A1 (en) 2013-10-25 2016-08-31 Blueprint Medicines Corporation Inhibitors of the fibroblast growth factor receptor
WO2015108992A1 (en) 2014-01-15 2015-07-23 Blueprint Medicines Corporation Heterobicyclic compounds and their use as fgfr4 receptor inhibitors
JOP20200094A1 (ar) 2014-01-24 2017-06-16 Dana Farber Cancer Inst Inc جزيئات جسم مضاد لـ pd-1 واستخداماتها
JOP20200096A1 (ar) 2014-01-31 2017-06-16 Children’S Medical Center Corp جزيئات جسم مضاد لـ tim-3 واستخداماتها
WO2015138920A1 (en) 2014-03-14 2015-09-17 Novartis Ag Antibody molecules to lag-3 and uses thereof
WO2015160986A2 (en) 2014-04-16 2015-10-22 Infinity Pharmaceuticals, Inc. Combination therapies
US20150297608A1 (en) 2014-04-17 2015-10-22 G1 Therapeutics, Inc. Tricyclic Lactams for Use as Anti-Neoplastic and Anti-Proliferative Agents
JP2017516855A (ja) * 2014-05-28 2017-06-22 シャンハイ フォチョン ファーマシューティカル カンパニー リミテッド 特定のタンパク質キナーゼ阻害剤
CN105294737B (zh) * 2014-07-26 2019-02-12 广东东阳光药业有限公司 Cdk类小分子抑制剂的化合物及其用途
US9611262B2 (en) * 2014-09-11 2017-04-04 Janssen Pharmaceutica Nv Substituted 2-azabicycles and their use as orexin receptor modulators
WO2016040848A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 G1 Therapeutics, Inc. Treatment of rb-negative tumors using topoisomerase inhibitors in combination with cyclin dependent kinase 4/6 inhibitors
WO2016040858A1 (en) 2014-09-12 2016-03-17 G1 Therapeutics, Inc. Combinations and dosing regimes to treat rb-positive tumors
MA41044A (fr) 2014-10-08 2017-08-15 Novartis Ag Compositions et procédés d'utilisation pour une réponse immunitaire accrue et traitement contre le cancer
EP4245376A3 (en) 2014-10-14 2023-12-13 Novartis AG Antibody molecules to pd-l1 and uses thereof
CN105111201B (zh) * 2014-10-16 2017-01-11 上海页岩科技有限公司 5-甲基-2-(吡啶-2-基氨基)-8H-吡啶并[2,3-d]嘧啶-7-酮化合物
EP3233918A1 (en) 2014-12-19 2017-10-25 Novartis AG Combination therapies
CN107438607B (zh) 2015-02-20 2021-02-05 因赛特公司 作为fgfr抑制剂的双环杂环
MA41551A (fr) 2015-02-20 2017-12-26 Incyte Corp Hétérocycles bicycliques utilisés en tant qu'inhibiteurs de fgfr4
KR20170129802A (ko) 2015-03-10 2017-11-27 아두로 바이오테크, 인코포레이티드 ＂인터페론 유전자의 자극인자＂-의존적 신호전달을 활성화하는 조성물 및 방법
CN107428731B (zh) 2015-03-11 2020-05-05 正大天晴药业集团股份有限公司 作为抗癌药物的取代的2-氢-吡唑衍生物
PT3317301T (pt) 2015-07-29 2021-07-09 Novartis Ag Terapias de associação compreendendo moléculas de anticorpo contra lag-3
WO2017019897A1 (en) 2015-07-29 2017-02-02 Novartis Ag Combination therapies comprising antibody molecules to tim-3
EP3328418A1 (en) 2015-07-29 2018-06-06 Novartis AG Combination therapies comprising antibody molecules to pd-1
HRP20220436T1 (hr) 2015-11-03 2022-05-27 Janssen Biotech, Inc. Protutijela koja se specifično vežu na pd-1 i njihove uporabe
CN106810536A (zh) 2015-11-30 2017-06-09 甘李药业股份有限公司 一种蛋白激酶抑制剂及其制备方法和医药用途
US10112924B2 (en) * 2015-12-02 2018-10-30 Astraea Therapeutics, Inc. Piperdinyl nociceptin receptor compounds
AU2016365400C1 (en) * 2015-12-02 2022-11-10 Astraea Therapeutics, Llc Piperidinyl nociceptin receptor compounds
WO2017106656A1 (en) 2015-12-17 2017-06-22 Novartis Ag Antibody molecules to pd-1 and uses thereof
US11077110B2 (en) 2016-03-18 2021-08-03 Tufts Medical Center Compositions and methods for treating and preventing metabolic disorders
US10449195B2 (en) 2016-03-29 2019-10-22 Shenzhen Pharmacin Co., Ltd. Pharmaceutical formulation of palbociclib and a preparation method thereof
DK3452484T3 (da) * 2016-05-07 2023-09-25 Fochon Pharmaceuticals Ltd Visse protein-kinase-inhibitorer
RU2019102647A (ru) 2016-07-01 2020-08-03 Г1 Терапьютикс, Инк. Антипролиферационные средства на основе пиримидина
WO2018005863A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 G1 Therapeutics, Inc. Pyrimidine-based compounds for the treatment of cancer
WO2018005533A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 G1 Therapeutics, Inc. Antiproliferative pyrimidine-based compounds
US11098077B2 (en) 2016-07-05 2021-08-24 Chinook Therapeutics, Inc. Locked nucleic acid cyclic dinucleotide compounds and uses thereof
US11370790B2 (en) 2016-08-01 2022-06-28 Aptinyx Inc. Spiro-lactam NMDA modulators and methods of using same
JP7036792B2 (ja) 2016-08-01 2022-03-15 アプティニックス インコーポレイテッド スピロ－ラクタムｎｍｄａ受容体修飾因子およびその使用
AU2017306152A1 (en) * 2016-08-01 2019-01-31 Aptinyx Inc. Spiro-lactam NMDA receptor modulators and uses thereof
CN110022900A (zh) 2016-09-08 2019-07-16 蓝图药品公司 成纤维细胞生长因子受体4抑制剂与细胞周期蛋白依赖性激酶抑制剂的组合
EP3804724B1 (en) 2016-10-20 2022-12-07 Pfizer Inc. Cdk inhibitors for treating pah
WO2018081211A1 (en) * 2016-10-26 2018-05-03 Li George Y Deuterated 7-cyclopentyl-n, n-dimethyl-2-((5-(piperazin-1-yl)pyridin-2-yl)amino)-7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimdine-6-carboxamide
CA3041886A1 (en) 2016-11-08 2018-05-17 Dana-Farber Cancer Institute, Inc. Compositions and methods of modulating anti-tumor immunity
TWI749126B (zh) 2016-12-16 2021-12-11 大陸商基石藥業（蘇州）有限公司 Cdk4/6抑制劑
IL267795B2 (en) 2017-01-06 2023-02-01 G1 Therapeutics Inc Combined treatment for cancer
UY37695A (es) 2017-04-28 2018-11-30 Novartis Ag Compuesto dinucleótido cíclico bis 2’-5’-rr-(3’f-a)(3’f-a) y usos del mismo
CN108794452B (zh) 2017-05-05 2021-05-28 上海时莱生物技术有限公司 具有激酶抑制活性的化合物、其制备方法和用途
AR111960A1 (es) 2017-05-26 2019-09-04 Incyte Corp Formas cristalinas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
WO2018237173A1 (en) 2017-06-22 2018-12-27 Novartis Ag ANTIBODY MOLECULES DIRECTED AGAINST CD73 AND CORRESPONDING USES
AU2018291026B2 (en) 2017-06-29 2022-09-01 G1 Therapeutics, Inc. Morphic forms of GIT38 and methods of manufacture thereof
BR112020012635A2 (pt) 2017-12-22 2020-12-01 Ravenna Pharmaceuticals, Inc. derivados de aminopiridina como inibidores de fosfatidilinositol fosfato quinase
AU2019205821B2 (en) 2018-01-08 2024-07-18 G1 Therapeutics, Inc. G1T38 superior dosage regimes
SG11202007256PA (en) 2018-01-31 2020-08-28 Aptinyx Inc Spiro-lactam nmda receptor modulators and uses thereof
BR112020015431A2 (pt) * 2018-02-15 2020-12-08 Nuvation Bio Inc. Compostos heterocíclicos como inibidores de quinase
WO2019168847A1 (en) 2018-02-27 2019-09-06 Incyte Corporation Imidazopyrimidines and triazolopyrimidines as a2a / a2b inhibitors
CN111867586A (zh) * 2018-03-13 2020-10-30 得克萨斯州大学系统董事会 用于治疗具有egfr激活突变的癌症的方法
AU2019262195B2 (en) 2018-05-04 2024-09-12 Incyte Corporation Solid forms of an FGFR inhibitor and processes for preparing the same
CA3099116A1 (en) 2018-05-04 2019-11-07 Incyte Corporation Salts of an fgfr inhibitor
EP3810610A1 (en) 2018-05-18 2021-04-28 Incyte Corporation Fused pyrimidine derivatives as a2a / a2b inhibitors
TW202015726A (zh) 2018-05-30 2020-05-01 瑞士商諾華公司 Ｅｎｔｐｄ２抗體、組合療法、及使用該等抗體和組合療法之方法
KR20210049090A (ko) 2018-07-05 2021-05-04 인사이트 코포레이션 A2a/a2b 억제제로서 융합된 피라진 유도체
CN112839657A (zh) 2018-08-24 2021-05-25 G1治疗公司 1,4-二氮杂螺[5.5]十一烷-3-酮改进的合成
US11066404B2 (en) 2018-10-11 2021-07-20 Incyte Corporation Dihydropyrido[2,3-d]pyrimidinone compounds as CDK2 inhibitors
JP2022504693A (ja) * 2018-10-12 2022-01-13 ボード オブ リージェンツ オブ ザ ユニヴァーシティー オブ ネブラスカ ホスホジエステラーゼ阻害剤
CN111100128B (zh) * 2018-10-26 2022-09-06 广安凯特制药有限公司 一种瑞博西尼中间产品的合成方法及其中间体化合物
US20230065740A1 (en) * 2018-12-28 2023-03-02 Spv Therapeutics Inc. Cyclin-dependent kinase inhibitors
TWI829857B (zh) 2019-01-29 2024-01-21 美商英塞特公司 作為a2a / a2b抑制劑之吡唑并吡啶及三唑并吡啶
WO2020168197A1 (en) 2019-02-15 2020-08-20 Incyte Corporation Pyrrolo[2,3-d]pyrimidinone compounds as cdk2 inhibitors
EA202192260A1 (ru) 2019-02-15 2021-12-17 Инсайт Корпорейшн Биомаркеры циклин-зависимой киназы 2 и их применение
TW202100520A (zh) 2019-03-05 2021-01-01 美商英塞特公司 作為cdk2 抑制劑之吡唑基嘧啶基胺化合物
US11628162B2 (en) 2019-03-08 2023-04-18 Incyte Corporation Methods of treating cancer with an FGFR inhibitor
US11919904B2 (en) 2019-03-29 2024-03-05 Incyte Corporation Sulfonylamide compounds as CDK2 inhibitors
WO2020223558A1 (en) 2019-05-01 2020-11-05 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as cdk2 inhibitors
US11440914B2 (en) 2019-05-01 2022-09-13 Incyte Corporation Tricyclic amine compounds as CDK2 inhibitors
TW202112767A (zh) 2019-06-17 2021-04-01 美商佩特拉製藥公司 作為磷脂酸肌醇磷酸激酶抑制劑之胺基吡啶衍生物
CN112094272A (zh) 2019-06-18 2020-12-18 北京睿熙生物科技有限公司 Cdk激酶抑制剂
WO2021007269A1 (en) 2019-07-09 2021-01-14 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
AU2020319875A1 (en) 2019-08-01 2022-02-17 Incyte Corporation A dosing regimen for an IDO inhibitor
EP4013750A1 (en) 2019-08-14 2022-06-22 Incyte Corporation Imidazolyl pyrimidinylamine compounds as cdk2 inhibitors
JP2022548881A (ja) 2019-09-18 2022-11-22 ノバルティス アーゲー Ｅｎｔｐｄ２抗体、組合せ療法並びに抗体及び組合せ療法を使用する方法
WO2021072232A1 (en) 2019-10-11 2021-04-15 Incyte Corporation Bicyclic amines as cdk2 inhibitors
JP2022552324A (ja) 2019-10-14 2022-12-15 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤としての二環式複素環
US11566028B2 (en) 2019-10-16 2023-01-31 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as FGFR inhibitors
KR20220131900A (ko) 2019-12-04 2022-09-29 인사이트 코포레이션 Fgfr 억제제의 유도체
CA3163875A1 (en) 2019-12-04 2021-06-10 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
WO2021146424A1 (en) 2020-01-15 2021-07-22 Incyte Corporation Bicyclic heterocycles as fgfr inhibitors
KR20230017165A (ko) 2020-03-06 2023-02-03 인사이트 코포레이션 Axl/mer 및 pd-1/pd-l1 억제제를 포함하는 병행 요법
PE20230825A1 (es) 2020-04-16 2023-05-19 Incyte Corp Inhibidores de kras triciclicos fusionados
US11739102B2 (en) 2020-05-13 2023-08-29 Incyte Corporation Fused pyrimidine compounds as KRAS inhibitors
KR20230012547A (ko) 2020-05-19 2023-01-26 쥐원 쎄라퓨틱스, 인크. 의학적 장애의 치료를 위한 시클린-의존성 키나제 억제 화합물
US10988479B1 (en) 2020-06-15 2021-04-27 G1 Therapeutics, Inc. Morphic forms of trilaciclib and methods of manufacture thereof
US11999752B2 (en) 2020-08-28 2024-06-04 Incyte Corporation Vinyl imidazole compounds as inhibitors of KRAS
CN114306245A (zh) 2020-09-29 2022-04-12 深圳市药欣生物科技有限公司 无定形固体分散体的药物组合物及其制备方法
US11767320B2 (en) 2020-10-02 2023-09-26 Incyte Corporation Bicyclic dione compounds as inhibitors of KRAS
CN112375081B (zh) * 2020-11-23 2022-04-12 中国医学科学院医药生物技术研究所 具有抑制CDK4、6或9活性的吡咯[2,3-d]嘧啶衍生物及其制备方法和应用
WO2022113003A1 (en) 2020-11-27 2022-06-02 Rhizen Pharmaceuticals Ag Cdk inhibitors
WO2022149057A1 (en) 2021-01-05 2022-07-14 Rhizen Pharmaceuticals Ag Cdk inhibitors
WO2022155941A1 (en) 2021-01-25 2022-07-28 Qilu Regor Therapeutics Inc. Cdk2 inhibitors
WO2022206888A1 (en) 2021-03-31 2022-10-06 Qilu Regor Therapeutics Inc. Cdk2 inhibitors and use thereof
US12065494B2 (en) 2021-04-12 2024-08-20 Incyte Corporation Combination therapy comprising an FGFR inhibitor and a Nectin-4 targeting agent
EP4352060A1 (en) 2021-06-09 2024-04-17 Incyte Corporation Tricyclic heterocycles as fgfr inhibitors
JP2024522189A (ja) 2021-06-09 2024-06-11 インサイト・コーポレイション Ｆｇｆｒ阻害剤としての三環式ヘテロ環
US11981671B2 (en) 2021-06-21 2024-05-14 Incyte Corporation Bicyclic pyrazolyl amines as CDK2 inhibitors
TW202317565A (zh) 2021-07-07 2023-05-01 美商英塞特公司 作為kras抑制劑的三環化合物
US20230114765A1 (en) 2021-07-14 2023-04-13 Incyte Corporation Tricyclic compounds as inhibitors of kras
US20230022525A1 (en) 2021-07-26 2023-01-26 Celcuity Inc. Methods for the treatment of cancer using 1-(4-{[4-(dimethylamino)piperidin-1-yl]carbonyl}phenyl)-3-[4-(4,6-dimorpholin-4-yl-1,3,5-triazin-2-yl)phenyl]urea
US20230174555A1 (en) 2021-08-31 2023-06-08 Incyte Corporation Naphthyridine compounds as inhibitors of kras
CN117043163A (zh) * 2021-09-08 2023-11-10 希格生科（深圳）有限公司 吡咯并嘧啶类或吡咯并吡啶类衍生物及其医药用途
US12030883B2 (en) 2021-09-21 2024-07-09 Incyte Corporation Hetero-tricyclic compounds as inhibitors of KRAS
WO2023056421A1 (en) 2021-10-01 2023-04-06 Incyte Corporation Pyrazoloquinoline kras inhibitors
IL312114A (en) 2021-10-14 2024-06-01 Incyte Corp Quinoline compounds as Kras inhibitors
MX2024006113A (es) 2021-11-22 2024-07-29 Incyte Corp Terapia de combinación que comprende un inhibidor del receptor del factor de crecimiento de fibroblastos (fgfr) y un inhibidor del sarcoma de rata de kirsten (kras).
WO2023102184A1 (en) 2021-12-03 2023-06-08 Incyte Corporation Bicyclic amine compounds as cdk12 inhibitors
US12084453B2 (en) 2021-12-10 2024-09-10 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK12 inhibitors
US11976073B2 (en) 2021-12-10 2024-05-07 Incyte Corporation Bicyclic amines as CDK2 inhibitors
AR128043A1 (es) 2021-12-22 2024-03-20 Incyte Corp Sales y formas sólidas de un inhibidor de fgfr y procesos para su preparación
WO2023168686A1 (en) 2022-03-11 2023-09-14 Qilu Regor Therapeutics Inc. Substituted cyclopentanes as cdk2 inhibitors
TW202341982A (zh) 2021-12-24 2023-11-01 大陸商上海齊魯銳格醫藥研發有限公司 Ｃｄｋ２抑制劑及其用途
TW202342023A (zh) 2022-03-07 2023-11-01 美商英塞特公司 Ｃｄｋ２抑制劑之固體形式、鹽及製備方法
WO2023213271A1 (en) * 2022-05-05 2023-11-09 Beigene , Ltd. Heterocyclic compounds, compositions thereof, and methods of treatment therewith
TW202413359A (zh) 2022-06-22 2024-04-01 美商英塞特公司 雙環胺ｃｄｋ１２抑制劑
US20240101557A1 (en) 2022-07-11 2024-03-28 Incyte Corporation Fused tricyclic compounds as inhibitors of kras g12v mutants
WO2024026290A1 (en) * 2022-07-25 2024-02-01 Cayman Chemical Company Incorporated NOVEL HETEROCYCLES AS sPLA2-X INHIBITORS
WO2024026484A2 (en) * 2022-07-29 2024-02-01 Cedilla Therapeutics, Inc. Cdk2 inhibitors and methods of using the same

Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007140222A2 (en) * 2006-05-26 2007-12-06 Novartis Ag Pyrrolopyrimidine compounds and their uses

Family Cites Families (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
PT72878B (en) 1980-04-24 1983-03-29 Merck & Co Inc Process for preparing mannich-base hydroxamic acid pro-drugs for the improved delivery of non-steroidal anti-inflammatory agents
AU2003210388B2 (en) 2002-03-07 2007-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag Bicyclic pyridine and pyrimidine P38 Kinase inhibitors
BRPI0406809A (pt) 2003-01-17 2005-12-27 Warner Lambert Co Heterociclos substituìdos de 2-aminopiridina como inibidores da proliferação celular
KR20050101200A (ko) 2003-02-10 2005-10-20 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 Ｎ-아릴 카밤산 에스테르를 할로-헤테로아릴과반응시킴으로써 ｎ-헤테로아릴-ｎ-아릴-아민을 제조하는방법 및 유사 방법
EP1680424A2 (en) 2003-09-05 2006-07-19 Neurogen Corporation Heteroaryl fused pyridines, pyrazines and pyrimidines as crf1 receptor ligands
AU2004270733B2 (en) 2003-09-11 2011-05-19 Itherx Pharma, Inc. Cytokine inhibitors
JP2007511596A (ja) 2003-11-17 2007-05-10 ファイザー・プロダクツ・インク 癌の治療において有用なピロロピリミジン化合物
US7319102B1 (en) 2003-12-09 2008-01-15 The Procter & Gamble Company Pyrrolo[2,3-d]pyrimidine cytokine inhibitors
AR049769A1 (es) * 2004-01-22 2006-09-06 Novartis Ag Derivados de pirazolo(1,5-a)pirimidin 7-il-amina para utilizarse en el tratamiento de enfermedades dependientes de la quinasa de proteina
ES2424642T3 (es) 2004-02-14 2013-10-07 Irm Llc Compuestos y composiciones como inhibidores de la proteína quinasa
EP1725562A1 (en) 2004-03-05 2006-11-29 Taisho Pharmaceutical Co., Ltd Pyrrolopyrimidine derivatives
NZ549925A (en) 2004-04-07 2010-08-27 Novartis Ag Inhibitors of IAP
WO2005107760A1 (en) 2004-04-30 2005-11-17 Irm Llc Compounds and compositions as inducers of keratinocyte differentiation
WO2006008545A2 (en) 2004-07-22 2006-01-26 Astex Therapeutics Limited Thiazole and isothiazole derivatives as protein kinase inhibitors
US7906528B2 (en) 2004-10-05 2011-03-15 Novartis International Pharmaceutical Ltd. Pyrrolo-pyridine, pyrrolo-pyrimidine and related heterocyclic compounds
ES2508766T3 (es) 2004-10-29 2014-10-16 Janssen R&D Ireland Derivados de pirimidina bicíclicos que inhiben el VIH
US7723340B2 (en) 2005-01-13 2010-05-25 Signal Pharmaceuticals, Llc Haloaryl substituted aminopurines, compositions thereof, and methods of treatment therewith
US7521446B2 (en) 2005-01-13 2009-04-21 Signal Pharmaceuticals, Llc Haloaryl substituted aminopurines, compositions thereof, and methods of treatment therewith
AU2006205851A1 (en) 2005-01-14 2006-07-20 Janssen Pharmaceutica N.V. 5-membered annelated heterocyclic pyrimidines as kinase inhibitors
WO2006091737A1 (en) 2005-02-24 2006-08-31 Kemia, Inc. Modulators of gsk-3 activity
JP2006241089A (ja) 2005-03-04 2006-09-14 Astellas Pharma Inc ピロロピリミジン誘導体またはその塩
AR054391A1 (es) 2005-06-20 2007-06-20 Astrazeneca Ab Procedimiento para la preparacion de 3,7- dihidroxi-1,5-diazaciclooctanos
DE102005030051A1 (de) 2005-06-27 2006-12-28 Grünenthal GmbH Substituierte 1-Oxa-3,8-diazaspiro[4,5]-decan-2-on-Verbindungen und deren Verwendung zur Herstellung von Arzneimitteln
WO2007030438A2 (en) 2005-09-06 2007-03-15 Pharmacopeia, Inc. Aminopurine derivatives for treating neurodegenerative diseases
GB0520164D0 (en) 2005-10-04 2005-11-09 Novartis Ag Organic compounds
CN102936221B (zh) 2005-10-06 2014-09-10 日本曹达株式会社 桥联环状胺化合物以及有害生物防除剂
WO2007058990A2 (en) 2005-11-14 2007-05-24 Kemia, Inc. Therapy using cytokine inhibitors
GB0526246D0 (en) 2005-12-22 2006-02-01 Novartis Ag Organic compounds
AU2006331765A1 (en) 2005-12-22 2007-07-05 Wyeth Substituted isoquinoline-1,3(2H,4H)-diones, 1-thioxo-1,4-dihydro-2H-isoquinoline-3-ones and 1,4-dihydro-3(2H)-isoquinolones and use thereof as kinase inhibitor
EP1991547A2 (en) 2006-03-09 2008-11-19 Pharmacopeia, Inc. 8-heteroarylpurine mnk2 inhibitors for treating metabolic disorders
WO2007125405A2 (en) 2006-05-01 2007-11-08 Pfizer Products Inc. Substituted 2-amino-fused heterocyclic compounds
WO2008135232A1 (en) * 2007-05-02 2008-11-13 Riccardo Cortese Use and compositions of purine derivatives for the treatment of proliferative disorders
WO2009049028A1 (en) 2007-10-09 2009-04-16 Targegen Inc. Pyrrolopyrimidine compounds and their use as janus kinase modulators
WO2009067108A1 (en) 2007-11-20 2009-05-28 Bristol-Myers Squibb Company Cyclopropyl fused indolobenzazepine hcv ns5b inhibitors
EP2231656A1 (en) * 2007-12-19 2010-09-29 Amgen Inc. Fused pyridine, pyrimidine and triazine compounds as cell cycle inhibitors
CN101981036B (zh) * 2008-02-06 2013-09-04 诺瓦提斯公司 吡咯并[2,3-d]嘧啶及其作为酪氨酸激酶抑制剂的用途
WO2009115084A2 (de) 2008-03-20 2009-09-24 Schebo Biotech Ag Neue pyrrolopyrimidin-derivate und deren verwendungen
GEP20135785B (en) 2008-08-22 2013-03-11 Novartis Ag Pyrrolopyrimidine compounds as cdk inhibitors
UY33226A (es) 2010-02-19 2011-09-30 Novartis Ag Compuestos de pirrolopirimidina deuterada como inhibidores de la cdk4/6
EP2558092B1 (en) 2010-04-13 2018-06-27 Novartis AG Combination comprising a cyclin dependent kinase 4 or cyclin dependent kinase 6 (cdk4/6) inhibitor and an mtor inhibitor for treating cancer
US20120115878A1 (en) 2010-11-10 2012-05-10 John Vincent Calienni Salt(s) of 7-cyclopentyl-2-(5-piperazin-1-yl-pyridin-2-ylamino)-7h-pyrrolo[2,3-d]pyrimidine-6-carboxylic acid dimethylamide and processes of making thereof

Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007140222A2 (en) * 2006-05-26 2007-12-06 Novartis Ag Pyrrolopyrimidine compounds and their uses

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