TW570802B - Improved interferon polymer conjugates - Google Patents

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TW570802B TW087121219A TW87121219A TW570802B TW 570802 B TW570802 B TW 570802B TW 087121219 A TW087121219 A TW 087121219A TW 87121219 A TW87121219 A TW 87121219A TW 570802 B TW570802 B TW 570802B
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Myung-Ok Park-Cho
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Description

570802 五、發明說明（1) 發明之背景 1 ·發明之領域 本發明係關 係關於具有新 2 ·相關技藝之 已建議將生 命，水溶解度 初之對聚乙二 肽之概念揭示 為參考。 姨島素與血 多肽含許多自 連接而無生物 然而，對於 症。必須小心 例如，如果太 物活性可嚴重 白質使用錯誤 共軛物之治療 夠之循環壽命 活性位置（即， 而阻塞時亦生 白質一般在溶 酸鹽之物質預 於干擾素聚合物共軛物。特定言之，本發明 颖干擾素-聚合物連接外形之共軛 說明 物活性蛋白質共軛聚合物以活體改良循環壽 或抗原性之一或更多種性質。例如，一些起 醇（PEG)與類似之水溶性聚合物偶合肽或^ 於美國專利4, 1 79, 337，此揭示在此併^作 紅素為第一批共輛之治療劑 由離胺酸£ -胺基連接位置, 活性之重大損失。 許多生物活性物質，共軛方 以限制因共軛反應造成之生 夕之活化聚合物連接目標蛋 地降低或損失。此外，如果 鍵聯劑或不足量之聚合物連 價值相當受限。經常，此共 增加以補償生物活性之損失 發現具生物活性之處）如聚 成問題。此問題難以避免， 液為主之反應中結合。已建 先阻塞活性位置，但是結果 。這些相當大之 許多聚合物可 法並非 物活性 白質或 接合聚 接至目 軛物並 °在治 合物連 因為聚 議以如 不一致 無併發 之損失。 多肽，生 合物與蛋 標，生成 未證明足 療部份之 接之結果 合物與蛋 吡哆醛磷 。問題隨
570802 五、發明說明（2) 低分子量蛋白質與肽而特別尖銳。這些生物活性物質經常 具有極少之未具生物活性之連接位置。 干擾素，以下亦稱為IFN，為可由改良之聚合物共軛技 術受益之蛋白質之特定實例。例如，參見美國專利 4，7 6 6，1 〇 6與4，9 1 7，8 8 8，其特別敘述與活化聚合物共軛之 厶干擾素，其包括mPEG-2,4,6-三氯-S-三畊，mPEG-N-戊 二酸琥珀醯亞胺酯或mPEG-N-琥珀酸琥珀酸亞胺酯。專利 人揭示蛋白質·之共價改性在5至9之p Η完成，而且在蛋白質 經其離胺酸殘基反應時，蛋白質之共價改性在8至9之pH完 成 亦使用相▲南莫耳過量（10、20與50 -倍）之活化聚合 物。 公告號碼0 2 3 6 9 8 7之歐洲專利申請案敘述在較佳為包 括約7至9之pH之條件下，以高莫耳過量之烷基醯亞胺酯一 活化聚乙二醇反應α與T干擾素。公告號碼〇 5丨〇 3 5 6之 歐洲專利申請案敘述在7至9之“共輛α干擾素及吡啶羰基 與硫碳基活化之PEG。在這些揭示中並未提及離胺酸以外 之胺基酸涉及共軛或對其為有利的。 儘官上述之揭示，大部份之干擾素—聚合物共軛物已因 某種原因而被視為不可接受的。 本發明解決這些缺點。 發明之概要 在一種狀態，本發明包括 物之混合物之藥學組合物。 物-IFN共軛物定義為位置異 含單-聚合物束α干擾素共轭 在混合物中，個別之單—聚合 構物，其視何種胺基酸殘基共
第6頁 570802 五、發明說明（3) 價地連接取 " 胺酸殘其Γ 口物而疋。在此混合物内為/ 工 部c合物共價地共輛α干素上在組 物，其包f少约i5%，而且較佳為至少二。;1物。组合物 =酸之聚合物之事ΐ:二有共價地連接…素 種 取Λ佳為共軛物或位置昱槿^ 行產物有所區別。然 聚合物束，X + Μ 置異構物為每個 本發明之=二二二2在何處連接。 … 及此方法製備之i合：包n干擾素共軛物之方法 二合 4α干擾素之H i s殘某，LV g曰 王乂邛知對如 醯亞胺〜活化聚合物，如碳 里之—氧基幾基-N-二羰 應含α干擾素之溶液而穿備〜:亞胺酯活化之PEG，反 別从τ 表備0部份之這歧鉻杜4 h丄 利於干擾素分子之至少一部份二>、A匕括在足以 ^ iL ^ Ϊ.Α· ♦口物束對組胺酸錄其甘 之，、彳貝連接之pH範圍内進行共輛反應。 麦基胺基 Λ當Λΐί素包括自哺乳動物；離之重組與非重电 «一干擾素。共軛物之聚合物部份 _重、、且 (ΡΑ0)，如單乙氧美令乙ιΛΓΓ為+乳化伸燒基 基♦ 知（mPEG)。在替代具體f妳加 中’亦可使用其他之實質上非抗原性聚合物。例 為具有約2 0 0至約3 5，0 0 0之分子量。 σ物車乂佳 進仃共輛之條件包括以相對α _干擾素為約等莫 相當少莫耳過.量之活化聚合物進行連接反應。此條/隹勺一 步包括在小於約7之ΡΗ而且較佳為約4· 5至約6 8 反應。 Μ進仃 570802
法本毛月亦ί姑在哺乳動物容許條件處理α —干擾素之方 軛舲在，t’處理包括將有效量之含在此所述1 FN共 之、、且σ物對需要此治療之哺乳動物投藥。 如同本發明之結果，[出乎意料地發現，干擾素—聚人 J軛組合物之額外改良為可能#。例如，藉口 :牛，現在可得到含相當高活性單_聚合物IFN共輛物 二勿，其中一部份之《干擾素在獨特位置連接聚合物。f ，已發現在比一般用於共軛更酸之pH程度，以碳酸 =亞胺醋及一些相關之氧基羰基_N_二羰‘亞胺型活化^^白 5物如％ ，進行共輛反應，造成聚合物不僅在^ 之iFNi子上之離胺酸位置，亦選擇性地在j干擾素 ^ 組胺酸位置連接，如較佳之His34胺基酸。 ”之 為了本發明之較佳了解，參考以下之說明及圖式。 圖式之簡要說明 圖1為一系列參考實例1 1之層析圖。 圖2為一系列參考實例1 3之層析圖。 發明之詳細說明 1 ·干擾素 ^聚合物共輛物之干擾素（I FN)部份可由許多來源製傷 ，到’其包括如使用E· c〇l i中表現之合成基因之重級= 術。亦參見Pest ka在人類細胞分裂之”干擾素α ” ，
Blackwell科學刊物ι — 1 6 ( 1 9 92 )，此揭示在此併入作為參 考此外’ I F N亦可為哺乳動物來源萃取物，如人類了 ^ 芻或牛科alFN。一種特佳之IFNgIFNa_2b，紐澤西州
第8頁 570802
Kenilworth之Schering公司之重組地製造之產物。 在此使用U詞”干擾素”或” IFN”表示抑制遽過性病毒 複製及細胞分裂增殖及調節免疫反應之高度同質物種— 定蛋白質族。人類干擾素基於其細胞源與抗原性歸類成三 種·《_干擾素（白血球）、冷-干擾素（纖維母細胞）盥7 — 干擾素（Β細胞）。已發展各組之重組形式及為商業可得 的。各組之次型基於抗原性/結構特徵。至少24種具有獨 特胺基酸序列之干擾素α (歸類成次型Α至"已藉由隔離及 將這些肽序列DNA編碼而證驗。亦參見Visc〇mi之1 9 9 6生物 治療1 0 : 5 9- 8 6，其内容在此併入作為參考。在本申請案 中交換地使用名詞π α -干擾素”、” α干擾素”、”干擾素α ”及”人類白血球干擾素”以敘述此組之成員。天然發生與 重組α -干擾素可用於本發明之實務，其包括如敘述於^ 國專利4, 89 7, 47 1之共同干擾素，其内容在此併入作為參 考。 " 干擾素α由自全血之緩衝塗料部份之人類白血球之純化 敘述於美國專利4, 5 03, 0 3 5。以此方式製備之人類白血球 干擾素含具有不同胺基酸序列之人類白血球干擾素之混合 物。經純化之天然人類α -干擾素及其可用於本發明之實 務之混合物包括但不限於得自日本住友公司之Sumi fe：fQn 干擾素α-nl，得自英國倫敦之G1 axo—Wellcome有限公司 之Wei 1 f eron 干擾素α - η 1 ( I n s )，及得自康乃狄克州 Norwalk 之 Purdue Frederick 公司之Alferon 干擾素 α —π 3 〇
第9頁 570802 五、發明說明（6) 應用於干擾素製造之重組DNA技術之來臨使得成功地合 成許多人類干擾素，因而造成各種干擾素對同質之大規模 激動，製造，隔離，及純化。重組地製造之干擾素保留其 試管與活體抗濾過性病毒及免疫調節活性。亦應了解重組 技術亦包括重組地衍生之多肚之碳水化合物部份加成之苷 化位置。 . 重組DNA質體之構成，其含序列編碼至少部份之人體白 血球干擾素與E. coli中表現之具有人體白血球干擾素之 免疫或生物活性之多肽，揭示於美國專利4, 5 3 0, 9 0 1與歐 洲專利EP 〇 〇32 1 34。含不同次型序列之組合（例如，A與 D ’ A與B，A與F)之混成α -干擾素基因之構成，揭示於美 國專利 4, 414, 150、4, 456, 748 與 4, 678, 751。可用於本發 明實務之典型之適當重組α -干擾素包括但不限於干擾素 a-2b ’如得自紐澤西州Kenilworth之Schering公司之 Intron A，干擾素a-2a，得自紐澤西州Nut ley之 Hof fmann-La Roche公司之R〇f eron A，及得自加州 Thousand Oaks 公司之Infergen 。 如果需要，亦可使用其中外alFN未完全自身化之替代 具體實施例。然而’關鍵為非自身化α丨FN在目標哺乳動 物中具有足夠之生物活性或α丨F N效應，如抗濾過性病毒 活性。包括a IFN部份或原多肽之其他物質亦可包括於本 發明之共扼物中。在此使用之”哺乳動物中之α _IFN效應” 表示對應以α I F N觀察到之活體活性。這些物質藉由使用 熟悉此技藝者已知之技術製備，如組織培育，自動物來源
570802 五、發明說明（7) 萃取或藉重組DNA方法。亦意圖a IFN與相M ★ 、相關部份 移來源。此物質得自基因轉移動物，即，老& π足基因轉 等’其中alFN蛋白質表現於乳汁、血液、以5豬’牛 中。製備α I FN以用於本發明之共軛物之方^其他組織 所述者。為了本發明之目的，alFN因為其生不限於在此 質而較佳。特別地’ α IFN已證明抗濾過性 ^與血清性 其他干擾素更有效地擴散至血統中。 ’母性質及比 2 ·非抗原性聚合物 ,為了將IFN共軛至如聚（氧化伸烷基）之聚人 羥基端基之一轉化成可共軛之反 聚〇物 2JL „ 久恶改吕月匕基0此方法你受 稱為活化Π及產物稱為，，活化"雙入你^ ^ ^万沄、、二书 基）。1他與曾th 53物或活化聚（氧化伸烷 化。”他貝貝上非抗原性聚合物類似地'，活化"或官能 使得連接發生在離胺酸之 ，及如下所述，在組胺酸 適當地活化之Μ基，氧化 上可得之硫醇部份，亦可 活化之聚合物與α IFN反應， ε胺基，Ν -終端半胱胺酸胺基 私基。如果需要，自由緩基， =酸化合物部份，及如果在二 作為補充連接位置。 在本發明之較佳狀態中，
戊 醆，纟且胺酸，Ν-終端）盘、、^^αΙΓΝ胺基酸胺基（即，離胺 乙能（胺甲酸i旨）鍵聯/較估化之聚合物之間，形成胺甲酸 氣基羰基-氧基—N—二魏酿為，胺曱酸乙酯鍵聯使用終端 賴基。替代之活化I包*括1^亞胺基形成，如碳酸琥拍醯亞胺 琥珀醯亞胺，N-酞醯亞胺，N- 驗亞胺’N-四氫酞醯亞 胺與N-曱莰-2, 3 化物
570802 五、發明說明（8) 攻些胺曱酸乙酯形成基敘述於共有之美國專利5，122,614 ’此揭不在此併入作為參考。此專利亦揭示包括亦可與離 胺酸胺基目標形成胺甲酸乙酯鍵聯之聚乙二醇聚之氧化伸 烧基之竣酸N -琥珀醯亞胺酯衍生物。 其中實負上非抗原性聚合物，單活化，院氧基終止聚氧 化伸烧基（ΡΑ0)車父佳，如單曱氧基_終止聚乙二醇（mpEG)。 為了交聯α I FN或提供連接其他部份之方法，如瞄準試劑 以將聚合物-α I FN共軛物局限於特定區域，例如，肝，亦 意圖雙-活化聚氧化伸烷基（二醇）。 適當聚合物實質上以重量比改變。為了本發明之目的， 通常選擇具有範圍為約2 〇 〇至約3 5，〇 〇 〇之分子數量平均分 子ϊ之聚合物。約1，〇 〇 〇至約丨5，〇 〇 〇之分子較 2,〇〇〇至約1 2,5 0 0特佳。 包括之聚合物質在室溫為水溶性亦較佳。此聚合物之非 Τ制性表列包括聚氧化伸烷基均聚物，如聚乙二醇（pE G ) Ϊ聚醇，聚氧化乙烯多元醇’其共聚物及；鼓段共聚 ^條件為維持嵌段共聚物之水溶性。除了 mPEG，亦可 使用Cl _4院基終止聚合物。 -至衍生聚合物之替代，可使用有效非抗原性物 2 ,如糊精，聚乙烯基吡咯啶酮，如HPMA〜甲基丙烯酸羥 2丙醋之聚丙稀醯胺’聚乙浠醇’碳水化合物為主之聚合 為沪：ΐ之共聚物等。熟悉此技藝者應了冑，以上表列僅 ΐίίί及意圖具有在此所述品質之所有聚合物物質。為 本么明之目的，"實質上或有效非抗原性"表示此技藝所
570802 五、發明說明（9) 了解在哺乳動物中為非毒性及未誘出明顯免疫反應之所有 物質。 3 ·反應條件 共輛反應，有時稱為PEG化反應，經常在溶液中進行而 無關聚合物在何處連接蛋白質。此技術亦通常在微鹼性進 行以將a IFN共軛，即，pH7+至約9。然而，本發明之關鍵 為’如果聚合物連接至組胺酸，較佳& IFNa2b上之 His34，保留之iFN生物活性為最大。熟悉此技藝者應了 解’雖然a IFN之各種物質在胺基酸34可或不必具有組胺 酸’干擾素共輛物較佳為包括至少一些含在可得組胺酸 接之聚合物之位置異構物。 本發明之方法因此包括在足以利於個別干擾素分子之至 少一部份聚合物束，對如IFN a2b之His34之組胺酸之共 ，接之pH，以疋里之氧基羰基—氧基—N_二羰醯亞胺—活化 =合，，如碳酸琥珀醯亞胺酯-活化mPEG，反應含α干样 '丁、之溶液。特別地，ρΗ較佳為微酸性，即，小於約7 〇支 更佳為，小於約6· 8而且最佳為在約4·5至約6·8之範圍，。 共輛《反應•件$ 一步包括以相# α —干擾素 2旲耳至約相當少量莫耳過量之活化聚合物進行連接反 :。關於此點’此方法可使用約"倍莫耳過量；較 二.5 - 7倍莫耳過量而且最佳為約1 · 7 5 _ 5倍莫耳過量進·''、 i二共!!反應可在大約室溫2〇 — 25°C進行。亦較佳為ΐ在 旅7之别進行偶合反應相當短之時間，即，1 —2小時。告 上，此反應條件提供聚合物_ifn位置異構物之混合物汽。
第13頁 570802
五、發明說明（ίο) 較佳為，各異構物含經胺基酸殘基連接干擾素之單一取合 接，如同此方法之結果。含這些共輕物之；=使 用或進一步處理以基於分子量分離共軛物。 較佳聚合物束-IFN共軛物（異構物）經陽離子交 為分離尖峰之特徵化顯示，聚合物可在IFN a 2b分子θ上連 接達約八個不同位置。這些表示個別位置異構物之位置為
Cysl 、Lys31 、His34 、Lys49 、Lys83 、Lysl21 、Lysl31 、
Lysl34。在一些較佳具體實施例中，含單—聚合物—ifn共 軛物之反應池可含相當高比例之His位置異構物，即，約 3 0 - 60%，約 7-20%iCysl 位置異構物，及約 7 —15% 之 Lysi2i 位置異構物，其餘為包含其餘之位置異構物。應了解替代 之IFN提供位置異構物之替代性分布，其視起始物質之胺 基酸序列而定。 由於溶液為主之共軛反應之本性，組合物為含在干擾素 分子上不同位置之連接之聚合物束之物種之異質混合物。 在含共軛物之任何溶液中，較易存在至少約3種，較佳為 約6種而且更佳為約8種位置異構物之混合物。例如，在使 用IFNa2b時，溶液含聚合物連接在干擾素之以以、
Lys31 、His34 、Lys49 、Lys83 、Lysl21 、Lysl31 、與
Lysl34之一或更多之共軛異構物。在IFNcj；2b之情形及在 此所述活化聚合物之較佳形式中，3個最顯著之連接位置 為His34(55°/。），Cysl(15%)與Lysl21(15%)。 本發明之較佳組合物為I F N-聚合物異構物之混合物，其
第14頁 570802
物取代-IF N組成。即，至少約1 5 % 五、發明說明（11) 由至少約15%之H is -聚合 之共軛物包含α干擾素對H i s之實質上非抗原性聚合物之 共價連接。在本發明之更佳狀態中，至少約3 〇 %，而且在 最佳狀態中，至少約40%之共軛物包含Hi S34共價聚合物連 接。在使用I F N a 2 b或相關I F N時，組胺酸連接位置較佳為 H i s34。 4·反應pH對PEG-IFN位置異構物分布之影響
本發明之方法利用聚合物在α干擾素上連接之位置大受 反應系統之ρ Η影響之發現。隨著反應溶液之ρ η改變，朝向 各種官能基，如α -胺，咪唑與ε胺，之特定形式活化聚 合物之反應性改變。一般而言，聚合物共軛反應在鹼性ρΗ 進行以使在離胺酸£胺基之連接最大。例如 人之生物技術與應用生化，第15卷，第1〇〇 — 114頁；
( 1 9 92 ) ’評估用於PEG化之sc —pEG試劑，及報告最適反應 性為在約pH 9· 3。然而，本發明之方法包括在較低之pH進 行f應，以使一部份之活化聚合物束連接組胺酸胺基及去 顯著但非排除離胺酸位置之連接。此外，亦已發現各種 聚合物共輛物位置異構物之生物活性出乎意料地不同，即 使在各位置異構物具有相同之聚合物取代程度時。 在此所述之方法提供新穎之聚合物連接，如P E G對I F N分 子中之=定離胺酸殘基。在較佳具體實施例中，共軛反應 生成大量之共軛物，即，至少約30%，在如IFN a 2b上之 H1S34之IFN組胺酸位置鍵聯。 亦已出乎思料地決定位置異構物之相對分布大為視進行
570802 五、發明說明（12) 共軛反應之pH而定。將pH由鹼性轉移至微酸性 ρΗ(5·5-6·5)，有利於在IFN a2b上之His34，及較低程度 之N-末端（Cysl)鍵聯之共軛物之形成。另一方面，在共軛 反應時使用P Η ( 8 -1 〇 )，有利於離胺酸相關連接位置之形 成，其經陽離子交換層析術證實。在未包括ifn a2b之狀 况中，Η1 s 3 4位置當然並非總是存在。反應條件允許活化 聚合物對His之共價連接。因此，申請人已證明反應系統 之pH影響一些型式之活化聚合物對蛋白質表面之配置，特 別疋關於不同之胺基酸殘基（即，離胺酸相對N-對組胺酸）。 5.共軛物之分段 雖然本方法製造大量具有單一聚合物束之共軛物，亦產 生具有不同聚氧化伸烷基取代程度之共軛物。亦可存在 餘之未共軛ΡΑ0及alFN。此混合物一般為含一或更多種 酸鹽、氯化物與碳酸氫鹽陰離子之反應緩衝液。pA〇，、 a IFN與共軛物混合物較佳為在含約卜丨〇毫克/毫升a IFN共軛物之緩衝溶液中分段。適當之分段溶液具有約;a 至約9·0，而且較佳為約7·5至約8.5之？11。溶液較佳為含
一或更多種選自 KC1、NaCl、K2HP04、KH2P〇4、Na2HP0,、5 Na2H2P04、NaHC03、NaB〇4、（NH4)2C03 與甘胺酸“⑽之緩 鹽。磷酸鈉缓衝液較佳。 視反應緩衝液而定，含α 11? N -聚合物共輛物之溶液可、 首先進行緩衝液交換/超過濾。例如，α丨FN共輛物溶液^ 經低分子量切斷（10, 〇〇〇至30, 〇〇〇道耳吞）薄膜過濾岭 五、發明說明（13) 去份如果存在之界面活性劑。 共軛物成為所需私 進行。此介質γ4種刀段較佳為使用陰離子交換介質 凡"負口J選擇性地姓人 -聚合物共軛物，」Ό 〇具有1-4個聚合物束之alFN 各種取代程度之α Ιρ^ 11與未改性α IFN。此分段因為 電點而發生=IFN:=;:稍可預測… 之可得胺基之數量決之此點由蛋白質表面上可得 耗物之連接點。因此％ : : J亦作為聚氧化伸烷基共 算雨S; % π η ^ b酼水乳化伸烷基之取代程度增加， =極性P離子1物結合陰離子交換樹脂之能力減弱。 * t ” 樹脂之使用對本發明之方法特佳。因 =用塗覆第四胺之陰離子交換樹脂。第四胺樹脂可塗 復,σ 1矽石基質上；然而，聚合基質較佳。許多塗覆 在支3基負上之四曱胺，或第四曱胺陰離子交換樹脂為商 業可得的。其中適用於本發明之商業可得第四陰離子交換 樹脂包括得自Bio-Sepra公司之Q-HD ·，法國Garenne之IBF 公司為麻州Mar 1 borough之Sepra cor公司製造之QA TRISACRYL與QMA-SPHEROSIL ，其為塗覆在聚合物基質 上之第四胺樹脂；紐澤西州G i b b s t 〇 w η之E Μ -分離器公司製 造之ΤΜΑΕ650Μ ，其為塗覆在聚合物基質上之四曱胺基乙 基樹脂；QAE550C 與SUPERQC ，其各為塗覆在聚合物基 質上之第四胺樹脂及由賓州Montgomeryville之TosoHaas 公司製造。亦可使用麻州M i 1 1 f 〇 r d之M i 1 1 i ρ 〇 r e公司製造 之 QMA Accell，及紐澤西州Phillipsburg 之JT Baker 公司 製造之PEI樹脂。
第17頁 570802
具==二充/真於管柱中及以習知方法平衡。使用 輛物溶液然後吸二V1:上同pH在及二透壓之缓衝液。含共 .曲 柱上。在裝載完成時，且有捭如a 。之Λ析緩衝液之梯度流動應用於管柱以溶析“化； 子量及取代程度。 μ此^具有本f上均勻之分 較I圭之IFN共耗部份每個aIFN分子具有卜4個聚合物 士二較佳為，此部份每個aIFN分子含約丨_2個，而且最佳 為1..勺1個聚合物束。溶析緩衝液較佳為含—或更多種選自
、NaCl、K2HP04、KH2P〇4、Na2HP〇4、NaH p〇 _4與（關4)2'之鹽。$些部份實質上無其〗共輛二相 何共輛物種然後藉習知技術由管柱反洗。
亦可使用利用增加濃度之多重等位階段之技術。增加濃 度之多重等位溶析階段生成aIFN_聚合物共軛物之^序溶 析。各部份内之聚合物共軛程度為實質上均勻的。然而， 各部份之聚合物共軛程度隨溶析時間降低。共軛物^離子 父換純化亦可使用，例如，得自S e p r a C 〇 Γ公司之Q __ Η [)管 柱’及以稀鱗酸鈉溶液（1 0 mM NaP04離子）進行。樣品以 1 0 mM NaP〇4清洗以去除任何未反應之pA〇然後使用NaC 1之 階段梯度溶析。使用1 0 mM NaC 1之溶析回收含每個ifn具 有大於3個聚合物束PAO之共輪物之部份；使用_ NaCl 之溶析回收含卜2個束之共軛物；使用15〇 mM NaCi回收未 改性之I F N。
第18頁 570802 五、發明說明（15) 6C至約22。〇之溫度進行。p uv吸收偵檢。 PA0— alFN部份藉由在254 nm之 =二可=時間溶析外形完成。較 b •界面活性劑 在另—個較佳具體實施例中， 之存在。用於本發明方法二&應條件包括界面活性劑 種特佳之# ~ A + /之界面活性劑為離子型試劑。一 氏< A剤為十二基硫酸鈿f ς . ^ _ 子性界面活性劑 ：(SDS)。亦可使用其他之離 例如，可“in !使用非離子性界面活性劑。 烯醚（Triton 、 A氧化乙烯葡萄糖醇（TweenS)，聚氧化乙 質盘$ $ t ^之物質。亦參見清潔劑在生物與生化之性 方。( 1 992 )，Calb—司。對用於本發明 性及唯―限制為，其不造成1心大量變 〇 〇1ϋ抑制聚合物共軛。界面活性劑以約 〇· ^ Ϊ為0· 〇5_〇· 5% ;而且最佳為約 劑之混合物°。里存在於反應混合物中。亦意圖界面活性 7·藥學熱力學參數 質混，本發明之組合物含聚合物-if_種之異 接。儘管*聚合物束在干擾素分子上之不同位置連 效果為最大之々之異質本性，組合物具有使干擾素之治療 發明組人物私可預測活體藥學熱力學外形。含IFN «之本 更佳為i少為包括至少約15%之聚合物—His共聚物， 、’ 0%而且最佳為至少約40%之聚合物—His共聚
第19頁 570802 五、發明說明（16) :中二然申請人不受理論所束縛，據信包： 不穩定的。結果，在生理位置異構物為相當 利之開始及延長之效用期間：勿：：f投樂後相當順 未改性⑽較少之劑量將組合物投卜形使…b技藝者以比 8·治療之方法 又’、 夕ί Ϊ明之另一種狀悲提供各種在哺乳動4勿，較佳為人％ 病況之治療方法。此方法包括 已： 製備之組合物之卿聚合物共耗物依；= 南要對哺乳動物投藥。共軛物可用於對干二 陽性地或有利地反庫之治瘅+媒I > ”马主之/口療 在醫療技J已i 干擾素容許…如這些名詞 依照本發明可治療之病況通常為容許使用干擾素α之治 療者。例如’容許之病況包括對忘二 I 士；! 應之病況，如這些名詞在醫療技藝所已知。為 了本七日月之目的，可使用干擾素α治’療之病況包括其中使 ί:擾t:之治療顯示一些效果’但是其可能無法使用干 擾素α >σ療，因為負面副作用超過治療之益處之病況。例 如，伴隨α治療之副作用已實際上排除使用干擾素^之
EpStein Barr病毒治療。比較習知之干擾素α治療，本發 明之實務生成實質上降低或排除副作用。 μ 可，用干擾素治療之例示病況包括但不限於細胞分裂增 瘦失# ’特別是癌症（例如，多毛細胞白血病，卡波季氏 肉瘤，慢性骨髓白血病，多重骨髓瘤，根細胞瘤與惡性黑
第20頁 570802 五、發明說明（17) =瘤，卵巢癌，皮膚T細胞淋巴腺瘤），及濾過性病毒感 木使用干擾素之治療可用以治療由抑制對干擾素敏感之 病毒之複製受益之病況而無限制。可依照本發明治療之濾 過性病毒感染包括A型肝炎，B型肝炎，c型肝炎，其他非 A/非B型肝k，览療病毒，£pstein_Barr病毒（Εβν)，細 胞巨化病毒（CMV)，單純死疹，人類兔疹病毒第6型 (jHV 6 )，乳狀瘤，痘病毒，細小核糖核酸病毒，腺病 f，鼻病毒，人類T型淋巴組織病毒-第1與2型 (HTLV-1/-2)，人類轉病毒，狂犬病，反轉病毒，其包括 人類免疫缺乏病毒（HI V)，腦炎與呼吸病毒感染。本發明 之方法亦可用以修改各種免疫反應。 '# 干擾素α之變體目前在美國及其他國家許可以用於多毛 細胞白血病，靜脈瘤，卡波季氏肉瘤，及慢性非非一Β 型肝炎之治療；以商標名INTR〇n^ a上市（紐澤西州 1^1111以〇1^11之8〇^1^叫公司）之干擾素1213，與以商標名 1?(^61'〇11必人上市（紐澤西州心1：10之}1〇;^1^1111-1^{^〇^公 司）之干擾素α - 2 a，及以商標名I n f e r g e ητΜ上市（加州 Thousand Oaks之Amgen公司）之共同干擾素。由於所有之 干擾素中，干擾素a-2b在全世界具有最廣泛之許可以用 於慢性C型肝炎感染，其依照本發明之實務用於慢性[型 丨_ 炎之治療最佳。 所述劑量之投藥可為每隔一天，但是較佳為一週一次或 兩次。藥劑通常為藉注射投藥超過至少24週期間。 藥劑之投藥可為靜脈内，皮下，肌肉内，或任何其他可
第頁 570802 五、發明說明（18) 接受之全身方法。基於照料之臨床醫師之判斷，投藥之藥 量及治療方法當然視被治療病人之年齡、性別與醫療歷 史，嗜中性計數（例如，中性粒細胞減少之嚴重性），特定 疾病病況之嚴重性及病人對治療之容忍度，如由局部毒性 與全身副作用所證明。劑量與頻率可在嗜中性計數之起初 篩選時決定。 在使用本發明之共軛物組合物時亦可製備習知藥學配 方。此配方包含治療有效量之干擾素-聚合物共軛物組合 物與藥學上可接受載體。例如，如果需要，佐藥，稀釋 劑，防腐劑及/或安定劑可用於本發明之實務中。包括本 發明之干擾素之藥學組合物可包括各種緩衝液之稀釋劑 (例如，Tris-HC1，乙酸鹽，磷酸鹽），其具有一定範圍之 pH及離子強度，載體（例如，人類血清蛋白），安定劑（例 如，非離子活性劑，聚花楸酸鹽），及防腐劑（例如，硫柳 汞醇，斗醇）。例如，參見美國專利4, 49 6, 53 7。 投藥以治療上述病況之a -1 F N聚合物共軛物之量為基於 聚合共軛物之I F Ν活性。其為足以進行正面診斷反應之 量。雖然診斷劑量在一些病人造成一些程度之副作用，對 於包括人類之哺乳動物之最大劑量為不造成無法控制之診 斷上重要副作用之最高劑量。為了本發明之目的，此診斷 上重要之副作用為由於嚴重之流行性感冒症狀，中枢神經 系統衰弱，嚴重之腸胃失常，禿頭，嚴重之癬癢症或發疹 而需要中止治療者。大量白及/或紅血球細胞及/或肝酵素 異常或貧血狀病況亦應限制劑量。
第22頁 570802
自然 聚合物 況，範 •藥。上 與治療 藥學 浮液， 之投藥 亦可使 實例 地，各蘇 τ Γ Μ 而猶微 α 1FN纟且合物之劑量視α IFN部份與所選擇 圍為备不同。然而，通常共軛物以基於哺乳動物病 述:r I約1〇0, 〇〇0至約數百萬IU/平方米之量投 ^園為描述性且熟悉此技藝者可基於診 / =決定所選擇共軛物之最適劑量。 、，，二驗 ::物T為依照此技藝已知之方法製備之溶液，縣 21&膠囊，凍乾粉末等之形式。亦意圖此％人= 要為非腸道路徑，雖然視熟悉此技藝者：物 用口服或吸入路徑。 而要而 以下Λ例用以提供本發明之進一步瞭解，但在任 均不表示限制本發明之有效範圍。 °面 實例1 r alFN-PEG5，_在SDS(0· 1%)之存在下之製備 在此實例中，重組a IFN-2b(r a IFN)，紐澤西州 Kenilworth之Schering - Plough公司之產品，與如美國專 利5，1 2 2，6 1 4所述之活化聚乙二醇-N -碳酸琥站醢亞胺妒 (SC-PEG)共軛。聚合物具有約5, 0 0 0之分子量。 曰 36 毫克之r a IFN 使用 Centricon-ΙΟ(麻州 Beverly 之 Amicon公司之I品）〉穸析至pH 7.5之0.1莫耳填酸納中。 ralFN之最終濃度為約3毫克/毫升。0.1毫升之10% SDs加 入r α I FN及在室溫培育1 0分鐘。然後，42毫克之 SC-PEG^㈣加入蛋白質—SDS溶液及在室溫攪拌兩小時然後 以甘油驟冷。其次，反應混合物使用Centr icon-30滲析至
570802 五、發明說明（20) pH 8之10 mM磷酸鈉以將PEG化IFN分段。 實例2 r a IFN-PEG12,_ 在 SDS((K1%)之存在下製備 在此實例中，重複實例1之步驟，除了聚乙二醇具有約 12，000之分子量。反應步驟確實地相同以提供p£G12剛共 幸厄物。 實例3 2PEG5，_r a IFN 之分段 在此實例中’依照實例1製備之共輛物分段而得到所需 之2-ΡΕ&_部份。磷酸鈉緩衝液中之PEG- α IFN裝在QHD陰 離子交換管柱上。2-PEG部份以〇至4 0 0 氣化鈉於pH 8之 10 mM磷酸鹽之梯度溶析。2-PEG部份使用大小排除層析術 與SDS-PAGE 證驗。 《 ~ 實例4 2pEG12，議r a IFN之分段 實例2之聚合物共軛物以實例3所述之方法分段及以相同 之方法證驗。 ° 實例5 - 8 。在這些實例中，如前所述製備額外之peg^g。—Γ α IFN製 。口，除了未使用界面活性劑。共軛反應後，試驗樣 留活性與PEG數量。結果提供於下表。 之保
第24頁
570802
五、發明說明（21) 表1 !FN-PEGi2,ooo 製備 對照之活性(CPE)% PEG# 實例6 26 1.2 實例7 26 1.3 實例8 24 1.0 實例9 比較數據 在此實例中，試驗實例3之產物（sds-2-PEG r π
IFN)，無界面活性劑而製造之2 —PEGs，議raIFN及未共軛之 r a IFN。使用CPE檢驗以EMC病毒挑戰A549人類肺癌細胞而 測定活性。使用由接受1百萬單位之組之3隻老鼠得到之平 均值測定循環壽命，時間點取為超過？日。
活性(％) 病毒保護檢驗 ^ IC5nfpo;/mn 循環半生期α相 fHRS ^ A.IFN-SDS 2-PEG5,〇〇〇 69 ^__2.2 JJLVO , J 5.8 B. EFN-PEG5,〇〇〇 30 —>__4.0 6.8 C.IFN 100 0.17
570802 五、發明說明（22)
此數據明確地顯示本方法之優點 準技術得到之兩倍。 實例1 0 保留活性超過使用標 軛 述 在此實例中，使用依照上述方法製備之2PEG-r α IFN共 物產生各種藥學熱力學數據。這些樣品比較依照表4所 協定之未改性IFN。以SDS製備樣。
表1 保留活性 樣品 PEG分子量 CPE活性(對照％) A 5,000 35 B 5,000 69 C 12,000 26 D 12,000 26 I
例如： 表4 藥學熱力學協定 動物·· Sprague Daw ley(3隻老鼠/時間點） 劑量：ΙΟχΙΟ6 UN IFN/ 鼠 路徑··皮下（S. C·) 藥物：2-?£〇-1?~«之5,000與12,000莫耳重量？£6 時間點··藥物投藥後0分鐘，5分鐘，1 5分鐘，3 0分鐘，1 小時，2小時，4小時，8小時，24小時，48小時，5日，及 7曰。
第26頁
570802 五、發明說明（23) 檢驗：在EMC病毒與A549人類肺癌使用血清樣品之CPE檢 驗。 AUC=曲線下面積，Cmax，Τ1/2 α ，T1/2 /5 -均具有熟悉此技藝 者一般所認為之意義。
表5與6 PEG-干擾素之藥學熱力學數據之槪要 表5 樣品 IC50 (pg/ml) 活注％ AUC Cmax (IU/ml) 原生IFN α 1.52 pg/ml (N=6) 100% 145,720 60,000 A 4.0 pg/ml (N^) 35% 348,920 24,433 B 2.2 ± 0.5 pg/ml (N=3) 69% 351,037 一 C 5.8 ± 2.2 pg/ml (N=3) 26% 1,574,682 62,750 表6
樣品 Tmax (hr) Τι/2 α 相(hr) T1/2 丰目(HR) 原生IFN α 1 0.17 - A 4 6.8 48 B 2-3 5.8 - C 8 12.1 J J 第27頁 570802 五 發明說明（24) 以上之數據提供以下之結論·· 以5, 〇〇〇與12，〇〇〇分子量製傷之2-peg-r a IFN共輛物在 哺乳動物具有優於未改性干擾素之獨特優點。在皮下投藥 組合物之情形，Tmax因蛋白質與約2PEG之共軛而實質上增 加。對於慢性病況，希望較長之^^及使臨床醫師由於效 用期間之加長而放大重複投藥。然而，甚至更出乎意料的 為2 —pegi2,〇〇g共軛物可出乎意料地增加AUC超過10倍之事 實。此曲線下面積之戲劇性增加並未與額外聚合物重量成
比例。顯然治療優點因此出乎意料之增加而實現。 實例1 1 pH對PEG化之影響
為了探測此影響，在四個不同ipH，5. 4，6· 5，8· 〇與 1 〇 · 0，使用mPEG^ _ (無界面活性劑）重複實例& — 8之聚合 物共輛（PEG化）反應。在pH 5.4，6.5與8:0，2.6克之 SC-PEG12 _對1克之IFN之比例（莫耳比例3 · 9 : 1 )用於反 應，及在pH 10使用2· 1克之3(：忏£〇12 _對1克之1尸^之比例 (莫耳比例3 · 2 · 1 )。反應結束時，加入甘油以驟冷任何殘 餘之PEG化試劑。得自各反應之產物然後在pH 8使用 Q-hyper D樹脂以鹽溶析純化以去除未反應之成份。 評估在不同之PH得到之純化共軛物之生物活性，羥基胺 敏感性及位置異構物之比例。生物活性由特定活性 (MTT-CPE檢驗）測定。 比之共輛物在組胺酸位 胺為已發現選擇性地將 進行羥基胺活性以測定多少百分 置PEG化，其包括IFN - His34。經基
570802 五、發明說明（25)
P E G自I F N組胺酸分離之已知試劑。一等份量之各樣品（5 〇 #1)以pH 7.0之0.45毫升1〇 mM磷酸鈉稀釋。一等份量之 此蛋白質溶液（1 50 # 1)以150 # 1之0· 5M羥基胺處理及在室 溫培育60分鐘。然後，75//1之體積裝在Mini-S管柱上 (Pharmacia生物技術）以用於陽離子交換層析術。移動相八 包括pH 5.3之10 mM乙酸鈉鍰衝液及25%之2-丙醇。移動相 B含5 0 0 mM之氯化鈉溶於移動相A。流速設為〇· 5毫升/分鐘 及在21 4 nm偵檢溶析之蛋白質。個別之pEG—IFN溶液以pH 5·3之1〇 mM乙醇鈉溶液稀釋至1毫克/毫升蛋白質濃度，其 =2-丙醇（5%)。注射體積範圍為1〇至3〇 # i，其視蛋白質、 濃度而定。使用線性梯度。結果敘述於以下之表7及圖1。 顯示得自不同pH反應產物之M〇n〇 —s陽離子交換層析 術ϊ ί之1析圖之重疊。各位置異構物之聚合物共軛之位 置藉得自陽離子交換層析術之個別尖峰使用蛋白解酵素 (、胰蛋白酶’ V8-蛋白酶，胰凝乳蛋白酶或枯草溶菌素）之 肖化peg化碎片之隔離’及終端序列之分析與質譜而 測定。 、 如在圖中所見到，位置異構物之分佈隨反應ρ Η之改變而 重大地改變°ρΗ越高，製造之His34-鍵聯之PEG-IFN越 少’及fysl—鍵聯之PEG-IFN產物戲劇性地越少。 表7歸納使用用於IFN之MTT-CPE生物檢驗測定之特定生 物/舌性’及在2 5 °c對不同之共軛物產物以〇 . 5M羥基胺處理 時釋放之IFN之量。這些發現證實在圖1中見到之差異亦有 關產物之不同生物特徵。在共軛在較高之pH(即，8或1 0 )
570802 五、發明說明（26) 進行時，形成之產物較不生物活性及較抗羥基胺，其因此 表示在較高之pH，較少之聚合物在H is 34上。 在不同之pH產生之PEG-IFN之生物活性與羥基敏感件 — ' ----- 反應pH — 特定活性(CPE檢驗） MIU/mg 藉羥基胺轉化成IFN 之共軛物％ 5.4 —---- 61.8 56% I 6.5 ------- 74.5 47% 33.3 8% 10.0 __ _ 27.8 <1%
以上之結果包括pH為共軛反應之主要變數，及位置異構 物之相對分布隨pH戲劇性地改變。出乎意料地，位置異構 物之生成PEG - I F N混合物之生物活性亦受影響。 實例1 2 胺曱酸乙酯鍵聯形成活化聚合物之比較
在此實例中，使用不同型式之胺曱酸乙酯鍵聯劑比較pH 對反應條件之影響，以看看活性基在測定聚合物連接位置 與生物活性是否具有任何角色。特別地，用於前例之曱氧 基聚（乙二醇）-碳酸琥珀醯亞胺酯MW 1 2,0 0 0 (SC-PEG12，議）比較美國專利5, 382, 657揭示之曱氧基聚（乙二 醇）-碳酸琥珀醯亞胺酯MW 1 2,0 0 0 (PC-PEG12，_)，作為用 於干擾素a - 2b( IF N)之活化聚合物試劑。在pH 6. 5與
第30頁 570802 五、發明說明（27) 10· 0，對各試劑sc-peg12，_與pc-peg12，_進行共軛反應。 用以產生用於分析之4個單位PEG化IFN樣品之條件為 1)SC-PEG12，_ @ pH 6·5 ;2)PC-PEG12，_ @ pH 6.5 ; 3)SC-PEG12，_ @ pH 1〇· 〇 ; 4)PC-PEG12，_ @ pH 10· 0。在 各pH 6· 5之情形，使用3· 9至1莫耳比例之PEG ·· IFN。在各 pH 10· 0之情形，使用3· 2至1莫耳比例之peg : IFN。選擇 這些條件以评估反應pH與鍵聯劑對最終產物之組合物之影 響。 回收得自各反應條件之共軛物質及試驗生物活性（CPE檢 驗）及使用層析術檢驗試驗位置異構物之分佈。 在pH 6· 5以PC-PEG12 _反應IFN產生之PEG-IFN具有比以 SC-PEG” _完成為低之生物活性，儘管兩種試劑均形成胺 曱酸乙酯鍵。因此，其顯示儘管鍵聯劑間之類似， SC PEG，氧基羰基-氧基二羰醯亞胺—活化聚合物，更 佳地連接至H1S34。然而，令人感興趣地，藉由在⑽1 〇以 PC-pegi2，ggg與SC-PEG12咖進行反應產生之PEG-IFN產物均具 有類似之生物活性。然而，在兩者之情形，活性均比 SC — PEGi2，_在？弱· 5得到為低。
Mini -S層析術檢驗顯示組胺酸—34 —鍵聯 PH6.5使政风,_時存在之主要位置異: 12-鍵聯之PEG- IFN為在pH 6. 5使用PC_PEGi2刚時存在之 位置異構物。在pH 10，離胺酸—121—鍵聯之peg—ifn 為使用各試劑之主要產物。參見表8。 因此，酸性pH及氧基羰基-氧基-N_二羰醯亞胺_活化聚
570802 五、發明說明（28) 合物’即’ SC-PEG，製造其為獨特產物之共軛物，其無法 藉由以sc-peg^，，取代如pC—PEGi2，_之另一種胺甲酸乙酯 鍵形成活化聚合物而再現。 以上之物質含總共少於5%之二—pEG及多—pEG_IFN，如大 小排除HPLC檢赞所示。 表8
MiniS檢驗結果之槪要 尖峰號碼面積百分ί±) 樣品 丄 2 3 4 5 6 7 8 SC-PEG; pH6.5 2.1 6.3 ND 0.7 11.8 5.6 3.4 13.3 PC-PEG; pH6.5 ND 4.8 9 9.6 33.8 13 3.8 25.9 SC-PEG; pHIO ND ND 14.8 11.2 57.6 9.5 3.1 3.8 PC-PEG; pHIO ND ND 9.6 13.8 51.7 13.7 3.5 7.8 ND :未彳貞檢 尖峰指定：尖峰2 :His-34鍵聯之PEG-IFN ;尖峰4 :
Lys-31 鍵聯之peg-IFN ;尖峰5 ·ϊνς 191 力土 μ 小遂fi . τ ,η 大峰b . Lys —Ml鍵聯之PEG-IFN ; 穴峰6 .Lys-49鍵聯之PEG_IFN ;尖峰7 P E G - T F M · * i。· m L Υ S 8 d 鍵聯之 ，大峰8 · N-終端（半胱胺酸）鍵 實例1 3 曼知之P E G - I F N。 陽離子交換層析術特徵 在此實例中，使用陽離子交換層析 步驟（pH 6· 5)製造之許多PEG —IFN產物之^ ^例11之 離’以測定聚合物連接位置及證驗個別之位置
570802 五、發明說明（29) 離子交換裝置為Mini-S管柱（Pharmacia生物技術公司）。 移動相A包括pH 5.3之10 mM乙酸鈉緩衝液及25%2-丙醇。 移動相B含5 0 0 mM之氣化鈉溶於移動相A。流速設為〇 5毫 升/分鐘及在214㈣偵檢溶析之蛋白質。個別之pEG_IFN溶 液以pH 5. 3之10 mM乙醇鈉溶液稀釋至}毫克/毫升蛋白 濃度’其含2-丙醇。注射體積範圍i，且 视蛋白質濃度而定。 〃 使用以下之線性梯度： 結 時間(min)
果提供於以下表9及圖形地描述於圖2
第33頁 570802 五、發明說明（30) 表9 陽離子交換層析術之PEG-EFN批料之面積百分比定量 尖峰1 尖峰2 尖峰3/4 尖峰5 尖峰6 尖峰7a 尖峰7b 尖峰8 1 2.6 53.2 5.3 14.2 6.5 3.4 17.2 2 1.5 54.7 3.3 12.6 6.1 3.2 18.6 3 1.6 55.3 2.4 11.9 5.5 3.2 20.1 4 1.7 55.1 2.6 11.6 5.3 3.1 20.5 5 1.7 54.3 2.7 11.8 5.6 3.2 20.7 6 1.7 54.5 2.6 11.8 5.3 2.9 21.1 7 1.9 54.2 2.3 11.6 5.2 3.2 21.5
主要尖峰指定：尖:His-134鍵聯之PEG-IFN ;尖峰 3/4 :His-34 鍵聯之 PEG—IFN ;尖峄 6 :Lys_121 鍵聯之 PEG-IFN 與 Lys-131 鍵聯之 peG-IFN ;尖峰 8 :Cys-1 鍵聯之 PEG-IFN 。 結果描述大部份之共軛物發現於尖峰3與4 ( H丨s _ 3 4鍵聯 之PEG-IFN) °結果亦顯示相對於所預期，大部份之共軛物 為藉由將聚合物連接至組胺酸而非離胺酸胺基之一而形
成0 或本發明之實務之考量’本發 此技藝者為明顯的。意圖使説 發明之真正範圍及精神由以下 由在此所揭示之本說明書 明之其他具體貫施例對孰悉 明書與實例僅視為例示了本 申請專利範圍指示。

Claims (1)

  1. 570802Γ4^； 争月曰士1_補焉 二年U月 曰 修正 六、申請專利範圍 1. 一種用於治療哺乳 合物，其包含〇；干擾素 物，其中該位置異構物 非抗原性聚合物共價共 其中該實質上非抗原性 量；且 其中該非抗原性聚 2 .根據申請專利範圍 擾素係為干擾素a 2 b。 3 .根據申請專利範圍 酸殘基係為H i s 3 4。 4.根據申請專利範圍 擾素位置異構物之混合 5 .根據申請專利範圍 擾素位置異構物之混合 6 .根據申請專利範圍 素位置異構物之混合物 7. 根據申請專利範圍 素係為α干擾素2 b，且 L y s 3 1、His34、Lys49 所組成之群。 8. 根據申請專利範圍 其中該非抗原性聚合物 9 .根據申請專利範圍 動物受α干擾素影響病況之醫藥組 聚合物共耗物位置異構物之混合 中之一包含以組胺酸殘基與實質上 車厄之α干擾素； 聚合物具約2 0 0至約3 5，0 0 0之分子 合物包含聚氧化伸烷基。 第1項之醫藥組合物，其中該干 第2項之醫藥組合物，其中該組胺 第1項之醫藥組合物，其中該α干 物包含至少約3個位置異構物。 第4項之醫藥組合物，其中該α干 物包含至少約6個位置異構物。 第5項之醫藥k合物，其中該a干擾 包含至少約8個位置異構物。 第6項之醫藥組合物，其中該干擾 該位置異構物係選自由C y s 1、 、Lys83 、Lysl21 、Lysl31 及Lysl34 第1至7項中任一項之醫藥組合物， 係為烷氧基終端之聚氧化伸烷基。 第8項中之醫藥組合物，其中該聚
    O:\56\56297-921104.ptc 第36頁 570802 _案號 8Π21219 年Η 月 日_iMz_ 六、申請專利範圍 氧化伸烧基係為聚乙二醇。 1 0.根據申請專利範圍第8項中之醫藥組合物，其中該聚 氧化伸烷基係為單曱氧基-聚乙二醇（mPEG)。 1 1.根據申請專利範圍第1項中之醫藥組合物，其中該實 質上非抗原性聚合物具約1，0 0 0至約1 5，0 0 0之分子量。 1 2.根據申請專利範圍第1 1項中之醫藥組合物，其中該 實質上非抗原性聚合物具約2，0 0 0至約1 2，5 0 0之分子量。 1 3. —種用於製備用於治療哺乳動物受α干擾素影響病 況之醫藥組合物之α干擾素-含有組合物，其包含多種α 干擾素聚合物共軛物，其中至少約1 5 %之該共軛物包括實 質上非抗原性聚合物與α干擾素之組胺酸殘基共價連結； 其中該實質上非抗原性聚合物具約2 0 0至約3 5，0 0 0之分子 量；且 其中該非抗原性聚合物包含聚氧化伸烷基。 1 4.根據申請專利範圍第1 3項之組合物，其中該組合物 之a干擾素部分係為α干擾素2 b，且該組胺酸係為H i s 3 4。 1 5.根據申請專利範圍第1 3項之組合物，其中至少約3 0 °/〇 之該共I厄物包括實質上非抗原性聚合物與α干擾素之組胺 酸- 3 4共價連結。 1 6.根據申請專利範圍第1 5項之組合物，其中至少約40% 之該共I厄物包括實質上非抗原性聚合物與α干擾素之組胺 酸-3 4共價連結。 1 7. —種用於治療哺乳動物受α干擾素影響病況之醫藥 組合物，其包含α干擾素2 b -聚合物位置異構物之混合
    O:\56\56297-921104.ptc 第37頁 570802 ----案號87121219 年丨|月 日 修正_ 六、申請專利範圍 物’其中約3 0%至約6 0%之該位置異構物包括實質上非抗原 性聚合物共軛至α干擾素之H i s 3 4，約7 %至約2 0 %之該位置 異構物包括實質上非抗原性聚合物共軛至^干擾素之 C y s 1 ，及約7 %至約1 5 %之該位置異構物包括實質上非抗原 性聚合物共軛至α干擾素之Lysi 21 ; 其中該實質上非抗原性聚合物具約2 〇 〇至約3 5，0 0 0之 分子量；且 其中該非抗原性聚合物包含聚氧化伸烷基。
    1 8 ·根據申請專利範圍第1 7項之醫藥組合物，其中約5 5 % 之該位置異構物包括實質上非抗原性聚合物共軛至α干擾 素之H i s 3 4，約1 5 %之該位置異構物包括實質上非抗原性聚 合物共軛至α干擾素之Cysl，及約15%之該位置異構物包 括實質上非抗原性聚合物共|厄至干擾素之L y s 1 2 1。 1 9 · 一種製備a干擾素聚合物共軛物位置異構物之方法， 其包含於pH小於7.0下，將a干擾素與氧基羰基一氧基—N—二 羧醯亞胺-活化之非抗原性聚合物接觸；其中該經活化之 非抗原性聚合物存在之莫耳濃度多於該α干擾素者；且 其中該貫質上非抗原性聚合物具約2 〇 〇至約3 5，〇 〇 〇之分 量；
    其中該非抗原性聚合物包含聚氧化伸烧基；且 其中至少約1 5 %之該製備之位置異構物包含以組胺 殘基與非抗原性聚合物共價共軛之α干擾素。 "2 0.根據申請專利範圍第19項之方法，其中該氧基羰基 氧基-Ν -二羧驢亞胺係為碳酸琥珀醯亞胺酿。
    O:\56\56297-921104.ptc 第38頁 570802 _案號87121219 年ί丨月 曰 修正_ 六、申請專利範圍 2 1 .根據申請專利範圍第2 0項之方法，其中該接觸係於 ρ Η小於約6 . 8下進行。 2 2 .根據申請專利範圍第2 1項之方法，其中該接觸係於 ρ Η約4. 5至約6 . 8下進行。 2 3 .根據申請專利範圍第1 9項之方法，其中該莫耳濃度 係指多於約1至8倍。 2 4.根據申請專利範圍第2 3項之方法，其中該莫耳濃度 係指多於約1 · 5至7倍。 2 5 .根據申請專利範圍第2 4項之方法，其中該莫耳濃度 係指多於約1 . 7 5至5倍。 2 6 .根據申請專利範圍第1 9項之方法，其中該實質上非 抗原性聚合物係為烷氧基終端之聚氧化伸烷基。 2 7.根據申請專利範圍第2 6項之方法，其中該聚氧化伸 烷基係為聚乙二醇。 2 8 .根據申請專利範圍第1 9項之方法，其中該實質上非 抗原性聚合物具約1，0 0 0至約1 5，0 0 0之分子量。 2 9 .根據申請專利範圍第2 8項之方法，其中該實質上非 抗原性聚合物具約2，0 0 0至約1 2，5 0 0之分子量。 3 0 .根據申請專利範圍第1 9至2 9項中任一項之方法，其 中該α干擾素係為干擾素a 2 b。 3 1 . —種用於治療哺乳動物受干擾素影響病況之醫藥組 合物，其包含根據申請專利範圍第1 3至1 8項之組合物。 32 根據申請專利範圍第1至1 2項中任一項之醫藥組合 物，其中至少約1 5 %之該位置異構物包含以組胺酸殘基與
    O:\56\56297-921104.ptc 第39頁 570802 _案號 8Ή21219 月 日_修正 六、申請專利範圍 實質上非抗原性聚合物共價共軛之α干擾素。
    第40頁 O:\56\56297-921104.ptc I
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Families Citing this family (216)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
US6057287A (en) 1994-01-11 2000-05-02 Dyax Corp. Kallikrein-binding "Kunitz domain" proteins and analogues thereof
US20080076706A1 (en) 1997-07-14 2008-03-27 Bolder Biotechnology, Inc. Derivatives of Growth Hormone and Related Proteins, and Methods of Use Thereof
US6753165B1 (en) * 1999-01-14 2004-06-22 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
ES2297889T3 (es) * 1997-07-14 2008-05-01 Bolder Biotechnology, Inc. Derivados de hormona de crecimiento y proteinas relacionadas.
US7270809B2 (en) * 1997-07-14 2007-09-18 Bolder Biotechnology, Inc. Cysteine variants of alpha interferon-2
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
IL142282A0 (en) 1998-10-16 2002-03-10 Biogen Inc Compositions containing polymer conjugates of interferon-beta-1a
ATE327254T1 (de) 1998-10-16 2006-06-15 Biogen Idec Inc Interferon-beta fusionsproteine und deren verwendungen
US8288126B2 (en) 1999-01-14 2012-10-16 Bolder Biotechnology, Inc. Methods for making proteins containing free cysteine residues
WO2000051631A2 (en) * 1999-03-02 2000-09-08 Schering Corporation Pegylated alpha interferon for hiv therapy
US6923966B2 (en) 1999-04-08 2005-08-02 Schering Corporation Melanoma therapy
US6362162B1 (en) 1999-04-08 2002-03-26 Schering Corporation CML Therapy
US6605273B2 (en) 1999-04-08 2003-08-12 Schering Corporation Renal cell carcinoma treatment
US6849254B1 (en) 1999-04-19 2005-02-01 Schering Corporation HCV combination therapy
EP1224939A4 (en) 1999-10-12 2005-01-12 Santen Pharmaceutical Co Ltd INTERFERON-BASED COMPLEX AND ITS USE IN MEDICINE
CN1309423C (zh) 1999-11-12 2007-04-11 马克西根控股公司 干扰素γ偶联物
HUP0203409A3 (en) 1999-11-12 2005-06-28 Maxygen Holdings Ltd Redwood C Interferon gamma conjugates
AU782580B2 (en) 2000-01-10 2005-08-11 Maxygen, Inc. G-CSF conjugates
DK1257295T3 (da) 2000-02-11 2009-08-10 Bayer Healthcare Llc Faktor VII eller VIIA-lignende molekyler
EP1263457A2 (en) * 2000-03-09 2002-12-11 Schering Corporation Hiv immune adjuvant therapy
KR100353392B1 (ko) * 2000-03-13 2002-09-18 선바이오(주) 높은 생체 활성도를 갖는 생체 활성 단백질과 ｐｅｇ의결합체 제조방법
US6476062B2 (en) 2000-03-30 2002-11-05 Schering Corporation Chemokine receptor antagonists
EP1335931B1 (en) * 2000-05-16 2005-12-21 Lipoxen Technologies Limited Derivatisation of proteins in aqueous solution
AU2001280035A1 (en) * 2000-07-26 2002-02-05 Ramot University Authority For Applied Research And Industrial Development Ltd. Intracellular delivery system for protein phosphatases and other polypeptides
US7208167B2 (en) * 2000-08-07 2007-04-24 Sciclone Pharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis C with thymosin and peptide combination therapy
JP2004508338A (ja) * 2000-09-08 2004-03-18 グリフォン　セラピューティクス，インコーポレーテッド ポリマー修飾合成タンパク質
US7118737B2 (en) 2000-09-08 2006-10-10 Amylin Pharmaceuticals, Inc. Polymer-modified synthetic proteins
US7052686B2 (en) 2000-09-29 2006-05-30 Schering Corporation Pegylated interleukin-10
US7060675B2 (en) * 2001-02-15 2006-06-13 Nobex Corporation Methods of treating diabetes mellitus
US6867183B2 (en) * 2001-02-15 2005-03-15 Nobex Corporation Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith
WO2002074806A2 (en) 2001-02-27 2002-09-26 Maxygen Aps New interferon beta-like molecules
US6958388B2 (en) 2001-04-06 2005-10-25 Maxygen, Aps Interferon gamma polypeptide variants
US7038015B2 (en) * 2001-04-06 2006-05-02 Maxygen Holdings, Ltd. Interferon gamma polypeptide variants
US6835802B2 (en) 2001-06-04 2004-12-28 Nobex Corporation Methods of synthesizing substantially monodispersed mixtures of polymers having polyethylene glycol moieties
US6828297B2 (en) * 2001-06-04 2004-12-07 Nobex Corporation Mixtures of insulin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same
US6713452B2 (en) 2001-06-04 2004-03-30 Nobex Corporation Mixtures of calcitonin drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same
US6828305B2 (en) * 2001-06-04 2004-12-07 Nobex Corporation Mixtures of growth hormone drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same
US6858580B2 (en) * 2001-06-04 2005-02-22 Nobex Corporation Mixtures of drug-oligomer conjugates comprising polyalkylene glycol, uses thereof, and methods of making same
US7713932B2 (en) * 2001-06-04 2010-05-11 Biocon Limited Calcitonin drug-oligomer conjugates, and uses thereof
US7196059B2 (en) * 2001-09-07 2007-03-27 Biocon Limited Pharmaceutical compositions of insulin drug-oligomer conjugates and methods of treating diseases therewith
WO2003037915A1 (en) * 2001-10-31 2003-05-08 Biopolymed Inc. Biocompatible polymers including peptide spacer
KR100480429B1 (ko) * 2001-12-04 2005-04-06 선바이오(주) 인터페론-알파와 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
KR100480430B1 (ko) * 2001-12-04 2005-04-06 선바이오(주) 인터페론-베타와 폴리에틸렌글리콜 유도체의 배합체
US20050095224A1 (en) * 2001-12-07 2005-05-05 Ramachandran Radhakrishnan Compositions and method for treating hepatitis virus infection
DK3025726T3 (da) 2002-01-18 2019-12-09 Biogen Ma Inc Polyalkylenpolymerforbindelser og anvendelser deraf
AU2003210052A1 (en) * 2002-03-20 2003-09-29 Biopolymed Inc. Preparation of g-csf stoichiometrically conjugated with biocompatible polymers at cystein residue
WO2003103475A2 (en) 2002-06-07 2003-12-18 Dyax Corp. Prevention and reduction of blood loss
US7153829B2 (en) 2002-06-07 2006-12-26 Dyax Corp. Kallikrein-inhibitor therapies
DK1517710T3 (da) 2002-06-21 2011-07-18 Novo Nordisk Healthcare Ag Pegylerede faktor VII-glycoformer
CN100348607C (zh) 2002-06-28 2007-11-14 埃迪尼克斯(开曼)有限公司 用于治疗黄病毒科病毒感染的2’和3’－核苷前药
EP1539814A2 (en) * 2002-07-03 2005-06-15 Maxygen Holdings Ltd. c/o Close Brothers (Cayman) Limited Full-length interferon gamma polypeptide variants
SI2386310T1 (sl) * 2002-08-28 2019-03-29 Dyax Corp. Metode za ohranjanje organov in tkiv
US20040062748A1 (en) * 2002-09-30 2004-04-01 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof
US8129330B2 (en) * 2002-09-30 2012-03-06 Mountain View Pharmaceuticals, Inc. Polymer conjugates with decreased antigenicity, methods of preparation and uses thereof
DE60307881T2 (de) * 2002-11-15 2007-03-08 F. Hoffmann-La Roche Ag Positionelle isomeren von pegyliertem interferon alpha 2a
EP1628618A4 (en) * 2002-12-26 2009-09-09 Mountain View Pharmaceuticals POLYMER CONJUGATES OF CYTOKINES, CHEMOKINS, GROWTH FACTORS, POLYPEPTIDE HORMONES AND ANTAGONISTS THEREOF WITH PRESERVED RECEPTOR BINDING ACTIVITY
RS20050502A (en) 2002-12-26 2007-08-03 Mountain View Pharmaceuticals Inc., Polymer conjugates of interferon- beta with enhanced biological potency
WO2004084949A2 (en) * 2003-03-20 2004-10-07 Xencor Generating protein pro-drugs using reversible ppg linkages
US20050281778A1 (en) * 2003-03-28 2005-12-22 Myung-Ok Park Human growth hormone conjugated with biocompatible polymer
CA2530725A1 (en) * 2003-03-28 2004-10-07 Biopolymed Inc. Biologically active material conjugated with biocompatible polymer with 1:1 complex, preparation method thereof and pharmaceutical composition comprising the same
US20060134736A1 (en) * 2003-03-28 2006-06-22 Jacobs John W Human growth hormone conjugated with biocompatible polymer
ES2340494T3 (es) 2003-04-15 2010-06-04 Glaxosmithkline Llc Mutantes de sustitucion de il-18 humana y sus conjugados.
US20070172446A1 (en) 2003-05-16 2007-07-26 Intermune, Inc. Synthetic chemokine receptor ligands and methods of use thereof
PT1633766T (pt) 2003-05-30 2019-06-04 Gilead Pharmasset Llc Análogos de nucleósido fluorado modificado
EP1664326A2 (en) * 2003-07-31 2006-06-07 Anticancer, Inc. The use of plp with peg-rmetase in vivo for enhanced efficacy
EP1673387B1 (en) 2003-10-10 2010-09-15 Novo Nordisk A/S Il-21 derivatives
AP2287A (en) 2003-10-14 2011-10-31 Intermune Inc Macrocyclic carboxylic acids and acylsulfonamides as inhibitors of HCV replication.
EP2641611A3 (en) 2003-10-17 2013-12-18 Novo Nordisk A/S Combination therapy
US20050089952A1 (en) * 2003-10-22 2005-04-28 Akzo Nobel N.V. Apparatuses and processes for increasing protein PEGylation reaction yields
WO2005040758A2 (en) * 2003-10-24 2005-05-06 Intermune, Inc. Use of pirfenidone in therapeutic regimens
US20070258946A1 (en) * 2003-12-23 2007-11-08 Blatt Lawrence M Combination Therapy for Treating Hepatitis C Virus Infection
ES2720078T3 (es) * 2004-01-21 2019-07-17 Nektar Therapeutics Método para preparar polímeros terminados en ácido propiónico
CA2553040A1 (en) 2004-02-02 2005-08-18 Ambrx, Inc. Modified human four helical bundle polypeptides and their uses
WO2005084303A2 (en) * 2004-03-01 2005-09-15 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Interferon-beta polymer conjugates
CN1984924B (zh) * 2004-03-17 2011-08-10 抗癌公司 提高蛋白质与聚乙二醇（peg）结合度的方法
EP1586334A1 (en) * 2004-04-15 2005-10-19 TRASTEC scpa G-CSF conjugates with peg
US20060018875A1 (en) * 2004-06-14 2006-01-26 Blatt Lawrence M Interferon compositions and methods of use thereof
US20050281872A1 (en) * 2004-06-16 2005-12-22 Peter Summerville Enhanced compliance antiviral medicaments and methods of manufacture and use
CN102603895B (zh) 2004-06-18 2016-09-28 Ambrx公司 新颖抗原结合多肽和其用途
UA103758C2 (ru) 2004-07-19 2013-11-25 Биокон Лимитед Конъюгаты олигомеров инсулина, их композиции и применение
EP1807451A2 (en) 2004-08-03 2007-07-18 Dyax Corporation Hk1-binding proteins
US7632491B2 (en) * 2004-08-12 2009-12-15 Schering Corporation Stable pegylated interferon formulation
WO2006031725A2 (en) 2004-09-14 2006-03-23 Pharmasset, Inc. Preparation of 2'­fluoro-2'- alkyl- substituted or other optionally substituted ribofuranosyl pyrimidines and purines and their derivatives
US7235530B2 (en) 2004-09-27 2007-06-26 Dyax Corporation Kallikrein inhibitors and anti-thrombolytic agents and uses thereof
WO2006073846A2 (en) 2004-12-22 2006-07-13 Ambrx, Inc. Methods for expression and purification of recombinant human growth hormone
KR20070090023A (ko) 2004-12-22 2007-09-04 암브룩스, 인코포레이티드 변형 인간 성장 호르몬
NZ555386A (en) 2004-12-22 2011-01-28 Ambrx Inc Formulations of human growth hormone comprising a non-naturally encoded amino acid
KR101252835B1 (ko) 2004-12-22 2013-04-10 암브룩스, 인코포레이티드 아미노아실-ｔＲＮＡ 합성효소의 조성물 및 그것의 용도
US7365127B2 (en) * 2005-02-04 2008-04-29 Enzon Pharmaceuticals, Inc. Process for the preparation of polymer conjugates
EP1863519B1 (en) 2005-03-31 2013-09-25 The General Hospital Corporation Modulating hgf/hgfr activity for treating lymphodema
CN101247821B (zh) 2005-06-03 2013-01-23 Ambrx公司 经改良人类干扰素分子和其用途
EP1893632B1 (en) 2005-06-17 2015-08-12 Novo Nordisk Health Care AG Selective reduction and derivatization of engineered factor vii proteins comprising at least one non-native cysteine
JP2009503111A (ja) * 2005-08-04 2009-01-29 ネクター セラピューティックス エイエル，コーポレイション Ｇ−ｃｓｆ部分および重合体の複合体
JP5415071B2 (ja) 2005-08-19 2014-02-12 ワイス・エルエルシー Ｇｄｆ−８に対するアンタゴニスト抗体ならびにａｌｓおよびその他のｇｄｆ−８関連障害の処置における使用
KR20080079643A (ko) 2005-11-16 2008-09-01 암브룩스, 인코포레이티드 비-천연 아미노산을 포함하는 방법 및 조성물
CU23556A1 (es) * 2005-11-30 2010-07-20 Ct Ingenieria Genetica Biotech Estructura polimérica semejante a dendrímero para la obtención de conjugados de interés farmacéutico
US8992905B2 (en) 2006-01-12 2015-03-31 Hokusan Co. Ltd. Oral composition containing interferon-α
ITMI20060612A1 (it) * 2006-03-30 2007-09-30 Keryos Spa New activaded poly-ethylene glycols-and related polymers and their applications
CA2648077A1 (en) * 2006-03-31 2007-11-08 Schering Corporation Parenteral low dose type 1 interferons for bladder cancer
EP2581450B1 (en) 2006-05-02 2018-08-15 MedImmune Limited Non-natural amino acid substituted polypeptides
US20080096819A1 (en) * 2006-05-02 2008-04-24 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
JP2009537609A (ja) 2006-05-24 2009-10-29 ノボ ノルディスク ヘルス ケア アーゲー 延長されたｆｉｘアナログ及び誘導体
US20070282170A1 (en) * 2006-05-30 2007-12-06 Sundaram Ravikumar Rake Retractor and Needle Assembly for Minimally Invasive Surgical Applications
US8008948B2 (en) * 2006-07-06 2011-08-30 Denso Corporation Peak voltage detector circuit and binarizing circuit including the same circuit
EP1886685A1 (en) 2006-08-11 2008-02-13 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods, uses and compositions for modulating replication of hcv through the farnesoid x receptor (fxr) activation or inhibition
JP2010510171A (ja) * 2006-08-21 2010-04-02 ユナイテッド セラピューティクス コーポレーション ウイルス感染症の治療のための併用療法
EP2069396B1 (en) 2006-09-08 2015-10-21 Ambrx, Inc. Modified human plasma polypeptide or fc scaffolds and their uses
PT2064333E (pt) 2006-09-08 2014-06-09 Ambrx Inc Supressor híbrido arnt para células de vertebrados
WO2008060356A2 (en) * 2006-09-29 2008-05-22 Canji, Inc. Methods and compositions for gene therapy
US8679472B1 (en) 2006-10-05 2014-03-25 Merck, Sharp & Dohme Corp. Crystal of human interferon alpha 2B in complex with zinc
KR101079993B1 (ko) * 2006-11-17 2011-11-04 동아제약주식회사 폴리에틸렌글리콜 과립구 콜로니 자극인자 접합체
EP2097068B1 (en) 2006-11-24 2013-09-04 Cadila Healthcare Limited Formulations of peg-interferon alpha conjugates
CN104163864B (zh) 2007-03-30 2017-08-01 Ambrx公司 经修饰fgf‑21多肽和其用途
US7964580B2 (en) 2007-03-30 2011-06-21 Pharmasset, Inc. Nucleoside phosphoramidate prodrugs
AU2008247815B2 (en) 2007-05-02 2012-09-06 Ambrx, Inc. Modified interferon beta polypeptides and their uses
CN101361968B (zh) 2007-08-06 2011-08-03 健能隆医药技术（上海）有限公司 白介素-22在治疗脂肪肝中的应用
CL2008002399A1 (es) * 2007-08-16 2009-01-02 Pharmaessentia Corp Conjugado sustancialmente puro que posee una porcion polimerica, una porcion proteica (interferon alfa 2b) y un ligante alifatico de 1 a 10 atomos de carbono, util en el tratamiento de las hepatitis b o c.
CA2707840A1 (en) * 2007-08-20 2009-02-26 Allozyne, Inc. Amino acid substituted molecules
ES2386575T3 (es) * 2007-09-04 2012-08-23 Biosteed Gene Expression Tech. Co., Ltd. Interferón alfa 2a modificado por polietilenglicol, su proceso de síntesis y su aplicación
PL2186830T3 (pl) * 2007-09-04 2012-09-28 Biosteed Gene Expression Tech Co Ltd Interferon alfa 2b zmodyfikowany glikolem polietylenowym, jego wytwarzanie i zastosowanie
BRPI0818004B8 (pt) * 2007-10-16 2021-05-25 Biocon Ltd composição farmacêutica sólida administrável por via oral e o processo da mesma.
PE20091163A1 (es) 2007-11-01 2009-08-09 Wyeth Corp Anticuerpos para gdf8
MX338336B (es) 2007-11-20 2016-04-07 Ambrx Inc Polipeptidos de insulina modificados y sus usos.
CN101939443B (zh) 2008-02-08 2014-01-29 Ambrx公司 经修饰瘦素多肽和其用途
TW200946541A (en) 2008-03-27 2009-11-16 Idenix Pharmaceuticals Inc Solid forms of an anti-HIV phosphoindole compound
KR20110033922A (ko) 2008-07-08 2011-04-01 더 보드 오브 리전츠 오브 더 유니버시티 오브 텍사스 시스템 전사의 신호 변환자 및 활성제（ｓｔａｔｓ）의 증식 및 활성화의 신규한 억제제
PT2318029T (pt) 2008-07-23 2018-01-10 Ambrx Inc Polipéptidos de g-csf bovino modificados e suas utilizações
AR072850A1 (es) * 2008-07-31 2010-09-22 Pharmaessentia Corp Conjugados peptido-polimero
JP2012502906A (ja) * 2008-09-17 2012-02-02 ネクター セラピューティックス オリゴマー−プロテアーゼ阻害剤コンジュゲート
ES2660000T3 (es) 2008-09-26 2018-03-20 Ambrx, Inc. Vacunas y microorganismos dependientes de la replicación de aminoácidos no naturales
EP2342223B1 (en) 2008-09-26 2017-04-26 Ambrx, Inc. Modified animal erythropoietin polypeptides and their uses
WO2010039801A2 (en) 2008-10-02 2010-04-08 The J. David Gladstone Institutes Methods of treating hepatitis c virus infection
DK2379115T3 (da) 2008-12-17 2018-01-29 Merck Sharp & Dohme Fremstilling og anvendelse af mono- og di-PEG-IL-10
EP2376088B1 (en) 2008-12-23 2017-02-22 Gilead Pharmasset LLC 6-O-Substituted-2-amino-purine nucleoside phosphoramidates
TW201031675A (en) 2008-12-23 2010-09-01 Pharmasset Inc Synthesis of purine nucleosides
EP2376514A2 (en) 2008-12-23 2011-10-19 Pharmasset, Inc. Nucleoside analogs
EP2408449A4 (en) 2009-03-18 2012-08-08 Univ Leland Stanford Junior METHODS AND COMPOSITIONS FOR TREATING INFECTION WITH A FLAVIVIRIDAE FAMILY VIRUS
TWI598358B (zh) 2009-05-20 2017-09-11 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
US8618076B2 (en) 2009-05-20 2013-12-31 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside phosphoramidates
US20120283171A1 (en) 2009-12-21 2012-11-08 Ambrx, Inc. Modified bovine somatotropin polypeptides and their uses
SG181769A1 (en) 2009-12-21 2012-07-30 Ambrx Inc Modified porcine somatotropin polypeptides and their uses
HUE039605T2 (hu) 2010-01-06 2019-01-28 Dyax Corp Plazma kallikreint kötõ proteinek
WO2011107591A1 (en) 2010-03-05 2011-09-09 Rigshospitalet Chimeric inhibitor molecules of complement activation
UY33311A (es) 2010-03-31 2011-10-31 Pharmasset Inc Fosforamidatos de nucleosidos
JP2013528374A (ja) 2010-05-10 2013-07-11 パーシード セラピューティクス リミテッド ライアビリティ カンパニー Ｖｌａ４のポリペプチド阻害剤
RU2447083C1 (ru) * 2010-07-20 2012-04-10 Закрытое Акционерное Общество "Биокад" НОВЫЙ ФУНКЦИОНАЛЬНО АКТИВНЫЙ ВЫСОКООЧИЩЕННЫЙ СТАБИЛЬНЫЙ КОНЪЮГАТ ИНТЕРФЕРОНА α С ПОЛИЭТИЛЕНГЛИКОЛЕМ, ПРЕДСТАВЛЕННЫЙ ОДНИМ ПОЗИЦИОННЫМ ИЗОМЕРОМ ПЭГ-NαH-ИФН, С УМЕНЬШЕННОЙ ИММУНОГЕННОСТЬЮ, С ПРОЛОНГИРОВАННЫМ БИОЛОГИЧЕСКИМ ДЕЙСТВИЕМ, ПРИГОДНЫЙ ДЛЯ МЕДИЦИНСКОГО ПРИМЕНЕНИЯ, И ИММУНОБИОЛОГИЧЕСКОЕ СРЕДСТВО НА ЕГО ОСНОВЕ
US9567386B2 (en) 2010-08-17 2017-02-14 Ambrx, Inc. Therapeutic uses of modified relaxin polypeptides
PL2605789T3 (pl) 2010-08-17 2019-11-29 Ambrx Inc Zmodyfikowane polipeptydy relaksyny i ich zastosowania
CN102380091A (zh) 2010-08-31 2012-03-21 健能隆医药技术（上海）有限公司 白介素-22在治疗病毒性肝炎中的应用
AR083006A1 (es) 2010-09-23 2013-01-23 Lilly Co Eli Formulaciones para el factor estimulante de colonias de granulocitos (g-csf) bovino y variantes de las mismas
US8841275B2 (en) 2010-11-30 2014-09-23 Gilead Pharmasset Llc 2′-spiro-nucleosides and derivatives thereof useful for treating hepatitis C virus and dengue virus infections
KR102320178B1 (ko) 2011-01-06 2021-11-02 다케다 파머수티컬 컴패니 리미티드 혈장 칼리크레인 결합 단백질
WO2012107589A1 (en) 2011-02-11 2012-08-16 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment and prevention of hcv infections
KR20140054009A (ko) 2011-07-01 2014-05-08 바이엘 인텔렉쳐 프로퍼티 게엠베하 릴랙신 융합 폴리펩타이드 및 그의 용도
EP2734640A1 (en) 2011-07-20 2014-05-28 INSERM - Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale Methods for determining treatment response in patients infected with hcv genotype 4
WO2013024156A2 (en) 2011-08-17 2013-02-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Combinations of anti-hcv-entry factor antibodies and interferons for the treatment and the prevention of hcv infection
WO2013024158A1 (en) 2011-08-17 2013-02-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Combinations of protein kinase inhibitors and interferons or of protein kinase inhibitors and direct acting antivirals for the treatment and the prevention of hcv infection
US8889159B2 (en) 2011-11-29 2014-11-18 Gilead Pharmasset Llc Compositions and methods for treating hepatitis C virus
AU2012347785B2 (en) 2011-12-06 2017-03-16 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Methods and compositions for treating viral diseases
WO2013174988A1 (en) 2012-05-24 2013-11-28 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods for predicting and monitoring treatment response in hcv- and hcv/hiv-infected subjects
SI2859017T1 (sl) 2012-06-08 2019-05-31 Sutro Biopharma, Inc. Protitelesa, ki vsebujejo specifične nenaravne aminokislinske ostanke, postopki njihove priprave in postopki njihove uporabe
EP2861617A1 (en) 2012-06-15 2015-04-22 Pfizer Inc. Improved antagonist antibodies against gdf-8 and uses therefor
WO2014004639A1 (en) 2012-06-26 2014-01-03 Sutro Biopharma, Inc. Modified fc proteins comprising site-specific non-natural amino acid residues, conjugates of the same, methods of their preparation and methods of their use
WO2014033266A1 (en) 2012-08-31 2014-03-06 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Anti-sr-bi antibodies for the inhibition of hepatitis c virus infection
ES2907763T3 (es) 2012-08-31 2022-04-26 Sutro Biopharma Inc Aminoácidos modificados que comprenden un grupo azido
EA021610B1 (ru) * 2013-03-28 2015-07-30 Илья Александрович МАРКОВ Жидкое противовирусное лекарственное средство
EA021643B1 (ru) * 2013-03-28 2015-07-30 Илья Александрович МАРКОВ Монопегилированный интерферон-альфа линейной структуры и фармацевтическая композиция для приготовления лекарственного средства, обладающего активностью интерферона-альфа
EA023360B1 (ru) * 2013-03-28 2016-05-31 Илья Александрович МАРКОВ Линейный ацилазидный пегилирующий агент, способ его получения и способ получения пегилированного интерферона
BR112015026122A8 (pt) 2013-04-18 2020-01-21 Armo Biosciences Inc agente de polietileno glicol-il-10 (peg-il-10), seu uso, composição farmacêutica, contentor estéril e kit
US9823255B2 (en) 2013-06-17 2017-11-21 Armo Biosciences, Inc. Method for assessing protein identity and stability
EP3019522B1 (en) 2013-07-10 2017-12-13 Sutro Biopharma, Inc. Antibodies comprising multiple site-specific non-natural amino acid residues, methods of their preparation and methods of their use
MX2016002185A (es) 2013-08-27 2016-06-06 Gilead Pharmasset Llc Formulacion combinada de dos compuestos antivirales.
US10010588B2 (en) 2013-08-30 2018-07-03 Armo Biosciences, Inc. Methods of using pegylated interleukin-10 for treating hyperlipidemia
WO2015054658A1 (en) 2013-10-11 2015-04-16 Sutro Biopharma, Inc. Modified amino acids comprising tetrazine functional groups, methods of preparation, and methods of their use
CN104623637A (zh) 2013-11-07 2015-05-20 健能隆医药技术（上海）有限公司 Il-22二聚体在制备静脉注射药物中的应用
US11413332B2 (en) 2013-11-11 2022-08-16 Armo Biosciences, Inc. Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders
WO2015148790A1 (en) 2014-03-27 2015-10-01 Dyax Corp. Compositions and methods for treatment of diabetic macular edema
US10076512B2 (en) 2014-05-01 2018-09-18 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
US11311519B2 (en) 2014-05-01 2022-04-26 Eiger Biopharmaceuticals, Inc. Treatment of hepatitis delta virus infection
HUE044606T2 (hu) 2014-05-01 2019-11-28 Eiger Biopharmaceuticals Inc A hepatitis delta vírusfertõzés kezelése
RU2554761C1 (ru) * 2014-05-13 2015-06-27 Закрытое акционерное общество "Сибирский центр фармакологии и биотехнологии" Противоэнтеровирусное и иммуностимулирующее средство
US10293043B2 (en) 2014-06-02 2019-05-21 Armo Biosciences, Inc. Methods of lowering serum cholesterol
KR101736870B1 (ko) * 2014-08-20 2017-05-18 한국코러스 주식회사 인터페론 접합체를 포함하는 복합체 및 이의 제조방법
WO2016060996A2 (en) 2014-10-14 2016-04-21 Armo Biosciences, Inc. Interleukin-15 compositions and uses thereof
WO2016064817A1 (en) 2014-10-22 2016-04-28 Armo Biosciences, Inc. Methods of using interleukin-10 for treating diseases and disorders
KR20240024362A (ko) 2014-10-24 2024-02-23 브리스톨-마이어스 스큅 컴퍼니 변형된 fgf-21 폴리펩티드 및 그의 용도
KR102540109B1 (ko) 2014-11-06 2023-06-02 파마에센시아 코퍼레이션 Peg화된 인터페론의 투약 요법
US10618970B2 (en) 2015-02-03 2020-04-14 Armo Biosciences, Inc. Method of treating cancer with IL-10 and antibodies that induce ADCC
DK3285768T3 (da) 2015-04-21 2021-01-25 Eiger Biopharmaceuticals Inc Farmaceutiske sammensætninger omfattende lonafarnib og ritonavir
AU2016268403A1 (en) 2015-05-28 2017-12-07 Armo Biosciences, Inc. Pegylated interleukin-10 for use in treating cancer
EP3341012A4 (en) 2015-08-25 2019-03-20 Armo Biosciences, Inc. METHOD FOR USE OF INTERLEUKIN-10 FOR THE TREATMENT OF ILLNESSES AND SUFFERING
CN108367001A (zh) 2015-11-04 2018-08-03 艾格尔峰生物制药有限公司 治疗丁型肝炎病毒感染
NZ744233A (en) 2015-12-11 2023-11-24 Takeda Pharmaceuticals Co Plasma kallikrein inhibitors and uses thereof for treating hereditary angioedema attack
EP3442562B1 (en) 2016-04-15 2022-09-21 Evive Biotechnology (Shanghai) Ltd An il-22 dimer for use in treating necrotizing enterocolitis
CN106539557A (zh) * 2016-10-08 2017-03-29 西安交通大学 一种基于恒速静脉输入的药代动力学参数的测定方法
WO2018087345A1 (en) 2016-11-14 2018-05-17 F. Hoffmann-La Roche Ag COMBINATION THERAPY OF AN HBsAg INHIBITOR, A NUCLEOS(T)IDE ANALOGUE AND AN INTERFERON
US20210308277A1 (en) 2016-11-14 2021-10-07 Hangzhou Dac Biotech Co., Ltd. Conjugation linkers, cell binding molecule-drug conjugates containing the linkers, methods of making and uses such conjugates with the linkers
WO2018134260A1 (en) 2017-01-18 2018-07-26 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for the treatment patients suffering from myeloproliferative disorders
SG10201912034UA (en) 2017-02-08 2020-02-27 Bristol Myers Squibb Co Modified relaxin polypeptides comprising a pharmacokinetic enhancer and uses thereof
EP3658173A1 (en) 2017-07-25 2020-06-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Methods and pharmaceutical compositions for modulating monocytopoiesis
RU2678332C1 (ru) 2017-09-08 2019-01-28 Общество с ограниченной ответственностью "Саентифик Фьючер Менеджмент" (ООО "СФМ") Пегилированный интерферон лямбда, обладающий высокой биодоступностью при пероральном применении, и способ его получения
CA3111576A1 (en) 2018-09-11 2020-03-19 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and their uses
AU2019361206A1 (en) 2018-10-19 2021-06-03 Ambrx, Inc. Interleukin-10 polypeptide conjugates, dimers thereof, and their uses
KR20210136014A (ko) 2019-02-12 2021-11-16 암브룩스, 인코포레이티드 항체-tlr 작용제 콘쥬게이트를 함유하는 조성물, 방법 및 이의 용도
MX2022000742A (es) 2019-07-18 2022-02-14 Enyo Pharma Metodo para disminuir los efectos adversos del interferon.
WO2021178612A1 (en) 2020-03-05 2021-09-10 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Combination therapy for treating hepatitis b virus infection
AU2021233909A1 (en) 2020-03-11 2022-09-29 Ambrx, Inc. Interleukin-2 polypeptide conjugates and methods of use thereof
WO2021228983A1 (en) 2020-05-13 2021-11-18 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) A pharmaceutical composition comprising an arsenic compound, an inductor of type-1 ifn and a protein kinase inhibitor for treating cancer
ES2929379T3 (es) 2020-05-20 2022-11-28 Inst Nat Sante Rech Med Métodos para el tratamiento de infecciones por coronavirus
WO2021263271A1 (en) 2020-06-22 2021-12-30 Janssen Pharmaceuticals, Inc. Compositions and methods for treatment of hepatitis d virus infection
EP3954393A1 (en) 2020-08-13 2022-02-16 Bioasis Technologies Inc. Combination therapies for delivery across the blood brain barrier
JP2023538071A (ja) 2020-08-20 2023-09-06 アンブルックス，インコーポレイテッド 抗体－ｔｌｒアゴニストコンジュゲート、その方法及び使用
WO2022043496A2 (en) 2020-08-28 2022-03-03 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of mait cells as biomarkers and biotargets in covid-19
WO2022079205A1 (en) 2020-10-15 2022-04-21 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Use of ifn-alpha polypeptides for the treatment of coronavirus infections
EP4313163A1 (en) 2021-04-03 2024-02-07 Ambrx, Inc. Anti-her2 antibody-drug conjugates and uses thereof

Family Cites Families (35)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4179337A (en) * 1973-07-20 1979-12-18 Davis Frank F Non-immunogenic polypeptides
US4275000A (en) * 1977-08-22 1981-06-23 National Research Development Corporation Peptide macromolecular complexes
US6936694B1 (en) * 1982-05-06 2005-08-30 Intermune, Inc. Manufacture and expression of large structural genes
DE3380726D1 (en) * 1982-06-24 1989-11-23 Japan Chem Res Long-acting composition
EP0154316B1 (en) * 1984-03-06 1989-09-13 Takeda Chemical Industries, Ltd. Chemically modified lymphokine and production thereof
GB8430252D0 (en) * 1984-11-30 1985-01-09 Beecham Group Plc Compounds
US4917888A (en) * 1985-06-26 1990-04-17 Cetus Corporation Solubilization of immunotoxins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4766106A (en) * 1985-06-26 1988-08-23 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polymer conjugation
US4680338A (en) * 1985-10-17 1987-07-14 Immunomedics, Inc. Bifunctional linker
JP2514950B2 (ja) * 1986-03-10 1996-07-10 エフ・ホフマン―ラ ロシユ アーゲー 化学修飾蛋白質，その製造法および中間体
US4810638A (en) * 1986-07-24 1989-03-07 Miles Inc. Enzyme-labeled antibody reagent with polyalkyleneglycol linking group
US4894226A (en) * 1986-11-14 1990-01-16 Cetus Corporation Solubilization of proteins for pharmaceutical compositions using polyproline conjugation
US4904582A (en) * 1987-06-11 1990-02-27 Synthetic Genetics Novel amphiphilic nucleic acid conjugates
US5080891A (en) * 1987-08-03 1992-01-14 Ddi Pharmaceuticals, Inc. Conjugates of superoxide dismutase coupled to high molecular weight polyalkylene glycols
US5004605A (en) * 1987-12-10 1991-04-02 Cetus Corporation Low pH pharmaceutical compositions of recombinant β-interferon
US5122614A (en) * 1989-04-19 1992-06-16 Enzon, Inc. Active carbonates of polyalkylene oxides for modification of polypeptides
ES2085297T3 (es) * 1989-05-27 1996-06-01 Sumitomo Pharma Procedimiento para preparar derivados de poli(etilenglicol) y proteina modificada.
JP2662311B2 (ja) * 1989-08-07 1997-10-08 デビオファルム ソシエテ アノニム 生物学的に活性な新規薬剤・ポリマー誘導体およびその製造方法
JPH06506217A (ja) * 1991-03-18 1994-07-14 エンゾン，インコーポレーテッド ポリペプチドまたはグリコポリペプチドとポリマーとのヒドラジン含有結合体
US5595732A (en) * 1991-03-25 1997-01-21 Hoffmann-La Roche Inc. Polyethylene-protein conjugates
US5281698A (en) * 1991-07-23 1994-01-25 Cetus Oncology Corporation Preparation of an activated polymer ester for protein conjugation
US5676942A (en) * 1992-02-10 1997-10-14 Interferon Sciences, Inc. Composition containing human alpha interferon species proteins and method for use thereof
US5382657A (en) * 1992-08-26 1995-01-17 Hoffmann-La Roche Inc. Peg-interferon conjugates
CA2101361A1 (en) * 1992-08-27 1994-02-28 Robert A. Snow Low diol polyalkylene oxide biologically active proteinaceous substances
US5605976A (en) * 1995-05-15 1997-02-25 Enzon, Inc. Method of preparing polyalkylene oxide carboxylic acids
AU691225B2 (en) * 1993-11-10 1998-05-14 Schering Corporation Improved interferon polymer conjugates
US5951974A (en) * 1993-11-10 1999-09-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates
US5650234A (en) * 1994-09-09 1997-07-22 Surface Engineering Technologies, Division Of Innerdyne, Inc. Electrophilic polyethylene oxides for the modification of polysaccharides, polypeptides (proteins) and surfaces
US5824784A (en) * 1994-10-12 1998-10-20 Amgen Inc. N-terminally chemically modified protein compositions and methods
US5738846A (en) * 1994-11-10 1998-04-14 Enzon, Inc. Interferon polymer conjugates and process for preparing the same
US5646242A (en) * 1994-11-17 1997-07-08 Eli Lilly And Company Selective acylation of epsilon-amino groups
JP2758154B2 (ja) * 1995-04-06 1998-05-28 エフ・ホフマン−ラ ロシユ アーゲー インターフェロンを含む液体製剤
TW517067B (en) * 1996-05-31 2003-01-11 Hoffmann La Roche Interferon conjugates
US5985263A (en) * 1997-12-19 1999-11-16 Enzon, Inc. Substantially pure histidine-linked protein polymer conjugates
US5981709A (en) * 1997-12-19 1999-11-09 Enzon, Inc. α-interferon-polymer-conjugates having enhanced biological activity and methods of preparing the same

Also Published As

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JP2000508356A (ja) 2000-07-04
EP1039922A1 (en) 2000-10-04
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US6042822A (en) 2000-03-28
WO1999032139A1 (en) 1999-07-01
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SI1039922T1 (en) 2002-10-31
AU1916799A (en) 1999-07-12

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