TR201809375T4 - Koloni halinde yaşayan böceklerde viral hastalığa karşı tolerans kazandırma yöntemi. - Google Patents
Koloni halinde yaşayan böceklerde viral hastalığa karşı tolerans kazandırma yöntemi. Download PDFInfo
- Publication number
- TR201809375T4 TR201809375T4 TR2018/09375T TR201809375T TR201809375T4 TR 201809375 T4 TR201809375 T4 TR 201809375T4 TR 2018/09375 T TR2018/09375 T TR 2018/09375T TR 201809375 T TR201809375 T TR 201809375T TR 201809375 T4 TR201809375 T4 TR 201809375T4
- Authority
- TR
- Turkey
- Prior art keywords
- bee
- dsrna
- rna
- iapv
- bees
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 title abstract description 20
- 201000010099 disease Diseases 0.000 title abstract description 18
- 230000003612 virological effect Effects 0.000 title description 19
- 241000238631 Hexapoda Species 0.000 title description 4
- 241000256844 Apis mellifera Species 0.000 claims abstract description 66
- 239000002773 nucleotide Substances 0.000 claims abstract description 21
- 125000003729 nucleotide group Chemical group 0.000 claims abstract description 21
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims abstract description 17
- 150000007523 nucleic acids Chemical class 0.000 claims abstract description 17
- 102000039446 nucleic acids Human genes 0.000 claims abstract description 15
- 108020004707 nucleic acids Proteins 0.000 claims abstract description 15
- 230000000295 complement effect Effects 0.000 claims abstract description 10
- 230000001965 increasing effect Effects 0.000 claims abstract description 9
- 108091028043 Nucleic acid sequence Proteins 0.000 claims abstract description 6
- 229920002477 rna polymer Polymers 0.000 claims abstract description 3
- 241001163131 Israeli acute paralysis virus Species 0.000 claims description 64
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 claims description 38
- 239000002679 microRNA Substances 0.000 claims description 15
- 108091070501 miRNA Proteins 0.000 claims description 11
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 claims description 10
- 108091027967 Small hairpin RNA Proteins 0.000 claims description 6
- 239000007788 liquid Substances 0.000 claims description 5
- 239000004055 small Interfering RNA Substances 0.000 claims description 4
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 claims description 3
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 claims description 3
- 239000007787 solid Substances 0.000 claims description 3
- 108020004459 Small interfering RNA Proteins 0.000 claims 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 239000002924 silencing RNA Substances 0.000 claims 1
- 244000052769 pathogen Species 0.000 abstract description 65
- 230000001717 pathogenic effect Effects 0.000 abstract description 57
- 108091032973 (ribonucleotides)n+m Proteins 0.000 description 141
- 241000257303 Hymenoptera Species 0.000 description 80
- 102000040650 (ribonucleotides)n+m Human genes 0.000 description 76
- 241000700605 Viruses Species 0.000 description 34
- 230000014509 gene expression Effects 0.000 description 34
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 30
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 28
- 208000024780 Urticaria Diseases 0.000 description 25
- 108090000765 processed proteins & peptides Proteins 0.000 description 24
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 22
- 102000004196 processed proteins & peptides Human genes 0.000 description 22
- 230000009368 gene silencing by RNA Effects 0.000 description 20
- 229920001184 polypeptide Polymers 0.000 description 20
- 108091034117 Oligonucleotide Proteins 0.000 description 19
- 230000030279 gene silencing Effects 0.000 description 18
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 16
- 230000000692 anti-sense effect Effects 0.000 description 14
- 108020004999 messenger RNA Proteins 0.000 description 14
- 102000040430 polynucleotide Human genes 0.000 description 14
- 108091033319 polynucleotide Proteins 0.000 description 14
- 239000002157 polynucleotide Substances 0.000 description 14
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 14
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 14
- 235000012907 honey Nutrition 0.000 description 13
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 12
- 238000011282 treatment Methods 0.000 description 12
- 102000053642 Catalytic RNA Human genes 0.000 description 11
- 108091092562 ribozyme Proteins 0.000 description 11
- 108090000994 Catalytic RNA Proteins 0.000 description 10
- 238000012228 RNA interference-mediated gene silencing Methods 0.000 description 10
- JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N [3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-[[5-(2-amino-6-oxo-1H-purin-9-yl)-3-hydroxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxyoxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(5-methyl-2,4-dioxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(6-aminopurin-9-yl)oxolan-2-yl]methoxy-hydroxyphosphoryl]oxy-5-(4-amino-2-oxopyrimidin-1-yl)oxolan-2-yl]methyl [5-(6-aminopurin-9-yl)-2-(hydroxymethyl)oxolan-3-yl] hydrogen phosphate Polymers Cc1cn(C2CC(OP(O)(=O)OCC3OC(CC3OP(O)(=O)OCC3OC(CC3O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)C(COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3COP(O)(=O)OC3CC(OC3CO)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3ccc(N)nc3=O)n3cc(C)c(=O)[nH]c3=O)n3cnc4c3nc(N)[nH]c4=O)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)n3cnc4c(N)ncnc34)O2)c(=O)[nH]c1=O JLCPHMBAVCMARE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 238000013518 transcription Methods 0.000 description 10
- 230000035897 transcription Effects 0.000 description 10
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 9
- 108091027757 Deoxyribozyme Proteins 0.000 description 8
- 238000003776 cleavage reaction Methods 0.000 description 8
- 239000000047 product Substances 0.000 description 8
- 239000000523 sample Substances 0.000 description 8
- 230000007017 scission Effects 0.000 description 8
- 238000013519 translation Methods 0.000 description 8
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 7
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 7
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 7
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 7
- 230000009467 reduction Effects 0.000 description 7
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 7
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 7
- 238000013461 design Methods 0.000 description 6
- 230000003828 downregulation Effects 0.000 description 6
- 230000037361 pathway Effects 0.000 description 6
- 239000013615 primer Substances 0.000 description 6
- 208000024891 symptom Diseases 0.000 description 6
- 241000318498 Black queen cell virus Species 0.000 description 5
- 241001506928 Deformed wing virus Species 0.000 description 5
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 5
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 5
- 235000014680 Saccharomyces cerevisiae Nutrition 0.000 description 5
- 208000036142 Viral infection Diseases 0.000 description 5
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 239000012528 membrane Substances 0.000 description 5
- 239000002243 precursor Substances 0.000 description 5
- 238000012545 processing Methods 0.000 description 5
- 241000894007 species Species 0.000 description 5
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 5
- 230000009385 viral infection Effects 0.000 description 5
- 241000317943 Acute bee paralysis virus Species 0.000 description 4
- 108020000948 Antisense Oligonucleotides Proteins 0.000 description 4
- 108020004414 DNA Proteins 0.000 description 4
- 102100031780 Endonuclease Human genes 0.000 description 4
- 241000033814 Kakugo virus Species 0.000 description 4
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 4
- 206010033799 Paralysis Diseases 0.000 description 4
- 239000000074 antisense oligonucleotide Substances 0.000 description 4
- 238000012230 antisense oligonucleotides Methods 0.000 description 4
- 238000013459 approach Methods 0.000 description 4
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 4
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 4
- 230000029087 digestion Effects 0.000 description 4
- 238000001962 electrophoresis Methods 0.000 description 4
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 4
- 230000006870 function Effects 0.000 description 4
- 230000036541 health Effects 0.000 description 4
- 238000009396 hybridization Methods 0.000 description 4
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 4
- 239000000463 material Substances 0.000 description 4
- 239000004033 plastic Substances 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 4
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000256837 Apidae Species 0.000 description 3
- 102000004163 DNA-directed RNA polymerases Human genes 0.000 description 3
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 description 3
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 description 3
- WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N Formaldehyde Chemical compound O=C WSFSSNUMVMOOMR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000233866 Fungi Species 0.000 description 3
- 108700020796 Oncogene Proteins 0.000 description 3
- 108020002230 Pancreatic Ribonuclease Proteins 0.000 description 3
- 102000005891 Pancreatic ribonuclease Human genes 0.000 description 3
- 230000001154 acute effect Effects 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 244000144987 brood Species 0.000 description 3
- 230000007423 decrease Effects 0.000 description 3
- 241001493065 dsRNA viruses Species 0.000 description 3
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 description 3
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 3
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 3
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 3
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 3
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 3
- 230000007246 mechanism Effects 0.000 description 3
- 230000001404 mediated effect Effects 0.000 description 3
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 3
- 230000036961 partial effect Effects 0.000 description 3
- 230000001124 posttranscriptional effect Effects 0.000 description 3
- 230000032361 posttranscriptional gene silencing Effects 0.000 description 3
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 3
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 3
- 108700022487 rRNA Genes Proteins 0.000 description 3
- 238000003753 real-time PCR Methods 0.000 description 3
- 230000010076 replication Effects 0.000 description 3
- 238000011160 research Methods 0.000 description 3
- 238000003757 reverse transcription PCR Methods 0.000 description 3
- 230000004083 survival effect Effects 0.000 description 3
- 230000008685 targeting Effects 0.000 description 3
- HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N Acrylamide Chemical compound NC(=O)C=C HRPVXLWXLXDGHG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000894006 Bacteria Species 0.000 description 2
- 108090000626 DNA-directed RNA polymerases Proteins 0.000 description 2
- 102000007260 Deoxyribonuclease I Human genes 0.000 description 2
- 108010008532 Deoxyribonuclease I Proteins 0.000 description 2
- 108010042407 Endonucleases Proteins 0.000 description 2
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102100031181 Glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Human genes 0.000 description 2
- 241000711549 Hepacivirus C Species 0.000 description 2
- 241001492486 Nosema apis Species 0.000 description 2
- 101710163270 Nuclease Proteins 0.000 description 2
- 102000043276 Oncogene Human genes 0.000 description 2
- 108010076039 Polyproteins Proteins 0.000 description 2
- 238000002123 RNA extraction Methods 0.000 description 2
- 108010092799 RNA-directed DNA polymerase Proteins 0.000 description 2
- 108020004511 Recombinant DNA Proteins 0.000 description 2
- 102000003990 Urokinase-type plasminogen activator Human genes 0.000 description 2
- 108090000435 Urokinase-type plasminogen activator Proteins 0.000 description 2
- 108020000999 Viral RNA Proteins 0.000 description 2
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 2
- 125000003275 alpha amino acid group Chemical group 0.000 description 2
- 210000004102 animal cell Anatomy 0.000 description 2
- 238000003491 array Methods 0.000 description 2
- 230000008901 benefit Effects 0.000 description 2
- 230000033228 biological regulation Effects 0.000 description 2
- 230000003197 catalytic effect Effects 0.000 description 2
- 238000004113 cell culture Methods 0.000 description 2
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 2
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 2
- 230000001684 chronic effect Effects 0.000 description 2
- 210000001520 comb Anatomy 0.000 description 2
- 239000002131 composite material Substances 0.000 description 2
- 230000003413 degradative effect Effects 0.000 description 2
- 239000005547 deoxyribonucleotide Substances 0.000 description 2
- 125000002637 deoxyribonucleotide group Chemical group 0.000 description 2
- 208000035475 disorder Diseases 0.000 description 2
- 230000002222 downregulating effect Effects 0.000 description 2
- 238000005516 engineering process Methods 0.000 description 2
- 230000002255 enzymatic effect Effects 0.000 description 2
- 238000011156 evaluation Methods 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 239000012634 fragment Substances 0.000 description 2
- 238000001502 gel electrophoresis Methods 0.000 description 2
- 238000012226 gene silencing method Methods 0.000 description 2
- 108020004445 glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase Proteins 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 230000003993 interaction Effects 0.000 description 2
- 230000003834 intracellular effect Effects 0.000 description 2
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 2
- 238000011068 loading method Methods 0.000 description 2
- 108091007426 microRNA precursor Proteins 0.000 description 2
- 238000007479 molecular analysis Methods 0.000 description 2
- 238000010369 molecular cloning Methods 0.000 description 2
- 239000013642 negative control Substances 0.000 description 2
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 description 2
- 230000035764 nutrition Effects 0.000 description 2
- 230000008506 pathogenesis Effects 0.000 description 2
- 239000013612 plasmid Substances 0.000 description 2
- 230000008488 polyadenylation Effects 0.000 description 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 2
- 244000062645 predators Species 0.000 description 2
- 230000008569 process Effects 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 108020003175 receptors Proteins 0.000 description 2
- 102000005962 receptors Human genes 0.000 description 2
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 2
- 230000004044 response Effects 0.000 description 2
- 238000012552 review Methods 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- -1 siRNAs Substances 0.000 description 2
- 235000020374 simple syrup Nutrition 0.000 description 2
- 125000006850 spacer group Chemical group 0.000 description 2
- 238000006467 substitution reaction Methods 0.000 description 2
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 2
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 2
- 230000009261 transgenic effect Effects 0.000 description 2
- 229960005356 urokinase Drugs 0.000 description 2
- WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 3-[6-[4-(trifluoromethoxy)anilino]-4-pyrimidinyl]benzamide Chemical compound NC(=O)C1=CC=CC(C=2N=CN=C(NC=3C=CC(OC(F)(F)F)=CC=3)C=2)=C1 WEVYNIUIFUYDGI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020003589 5' Untranslated Regions Proteins 0.000 description 1
- 206010069754 Acquired gene mutation Diseases 0.000 description 1
- 102000007469 Actins Human genes 0.000 description 1
- 108010085238 Actins Proteins 0.000 description 1
- 208000030090 Acute Disease Diseases 0.000 description 1
- PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N Aniline Chemical compound NC1=CC=CC=C1 PAYRUJLWNCNPSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108020005544 Antisense RNA Proteins 0.000 description 1
- 241000256836 Apis Species 0.000 description 1
- 108091032955 Bacterial small RNA Proteins 0.000 description 1
- KLYCPFXDDDMZNQ-UHFFFAOYSA-N Benzyne Chemical compound C1=CC#CC=C1 KLYCPFXDDDMZNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000537222 Betabaculovirus Species 0.000 description 1
- 108010051109 Cell-Penetrating Peptides Proteins 0.000 description 1
- 102000020313 Cell-Penetrating Peptides Human genes 0.000 description 1
- 241001050320 Chronic bee paralysis virus Species 0.000 description 1
- 235000008733 Citrus aurantifolia Nutrition 0.000 description 1
- 241001246291 Cloudy wing virus Species 0.000 description 1
- 108091026890 Coding region Proteins 0.000 description 1
- 206010009944 Colon cancer Diseases 0.000 description 1
- 208000035473 Communicable disease Diseases 0.000 description 1
- 108091035707 Consensus sequence Proteins 0.000 description 1
- 108020001019 DNA Primers Proteins 0.000 description 1
- 108020003215 DNA Probes Proteins 0.000 description 1
- 239000003155 DNA primer Substances 0.000 description 1
- 239000003298 DNA probe Substances 0.000 description 1
- 230000033616 DNA repair Effects 0.000 description 1
- 102000016911 Deoxyribonucleases Human genes 0.000 description 1
- 108010053770 Deoxyribonucleases Proteins 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N Digoxigenin Natural products C1CC(C2C(C3(C)CCC(O)CC3CC2)CC2O)(O)C2(C)C1C1=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000002250 Hematologic Neoplasms Diseases 0.000 description 1
- 102100021519 Hemoglobin subunit beta Human genes 0.000 description 1
- 108091005904 Hemoglobin subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 208000005176 Hepatitis C Diseases 0.000 description 1
- 101001090713 Homo sapiens L-lactate dehydrogenase A chain Proteins 0.000 description 1
- 108010091358 Hypoxanthine Phosphoribosyltransferase Proteins 0.000 description 1
- 208000026350 Inborn Genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 206010061217 Infestation Diseases 0.000 description 1
- 108010064593 Intercellular Adhesion Molecule-1 Proteins 0.000 description 1
- 108091029795 Intergenic region Proteins 0.000 description 1
- 108091092195 Intron Proteins 0.000 description 1
- 241001468189 Melissococcus Species 0.000 description 1
- 241001468188 Melissococcus plutonius Species 0.000 description 1
- 206010027476 Metastases Diseases 0.000 description 1
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000000636 Northern blotting Methods 0.000 description 1
- 241001126829 Nosema Species 0.000 description 1
- 239000004677 Nylon Substances 0.000 description 1
- CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N O-Xylene Chemical compound CC1=CC=CC=C1C CTQNGGLPUBDAKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 1
- 238000010222 PCR analysis Methods 0.000 description 1
- 241000193418 Paenibacillus larvae Species 0.000 description 1
- ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N Phenol Chemical compound OC1=CC=CC=C1 ISWSIDIOOBJBQZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 108091000080 Phosphotransferase Proteins 0.000 description 1
- 102000000574 RNA-Induced Silencing Complex Human genes 0.000 description 1
- 108010016790 RNA-Induced Silencing Complex Proteins 0.000 description 1
- 101000599054 Rattus norvegicus Interleukin-6 receptor subunit beta Proteins 0.000 description 1
- 102000003661 Ribonuclease III Human genes 0.000 description 1
- 108010057163 Ribonuclease III Proteins 0.000 description 1
- 108010083644 Ribonucleases Proteins 0.000 description 1
- 102000006382 Ribonucleases Human genes 0.000 description 1
- CZMRCDWAGMRECN-UHFFFAOYSA-N Rohrzucker Natural products OCC1OC(CO)(OC2OC(CO)C(O)C(O)C2O)C(O)C1O CZMRCDWAGMRECN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 240000000111 Saccharum officinarum Species 0.000 description 1
- 235000007201 Saccharum officinarum Nutrition 0.000 description 1
- CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L Sodium Carbonate Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]C([O-])=O CDBYLPFSWZWCQE-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 108091081024 Start codon Proteins 0.000 description 1
- 101710132906 Structural polyprotein Proteins 0.000 description 1
- 102000019197 Superoxide Dismutase Human genes 0.000 description 1
- 108010012715 Superoxide dismutase Proteins 0.000 description 1
- 235000011941 Tilia x europaea Nutrition 0.000 description 1
- 241000006364 Torula Species 0.000 description 1
- 108091023040 Transcription factor Proteins 0.000 description 1
- 102000040945 Transcription factor Human genes 0.000 description 1
- 108700019146 Transgenes Proteins 0.000 description 1
- 108060008682 Tumor Necrosis Factor Proteins 0.000 description 1
- 102000000852 Tumor Necrosis Factor-alpha Human genes 0.000 description 1
- 108091023045 Untranslated Region Proteins 0.000 description 1
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000009484 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Human genes 0.000 description 1
- 108010034265 Vascular Endothelial Growth Factor Receptors Proteins 0.000 description 1
- 241000607479 Yersinia pestis Species 0.000 description 1
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 1
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 1
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- 230000009471 action Effects 0.000 description 1
- 239000011543 agarose gel Substances 0.000 description 1
- 230000003321 amplification Effects 0.000 description 1
- 230000033115 angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000010171 animal model Methods 0.000 description 1
- 230000003527 anti-angiogenesis Effects 0.000 description 1
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 230000004888 barrier function Effects 0.000 description 1
- 230000006399 behavior Effects 0.000 description 1
- 102000023732 binding proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091008324 binding proteins Proteins 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 230000005540 biological transmission Effects 0.000 description 1
- 230000000903 blocking effect Effects 0.000 description 1
- 210000001185 bone marrow Anatomy 0.000 description 1
- UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N bromophenol blue Chemical compound C1=C(Br)C(O)=C(Br)C=C1C1(C=2C=C(Br)C(O)=C(Br)C=2)C2=CC=CC=C2S(=O)(=O)O1 UDSAIICHUKSCKT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 1
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 1
- 125000002091 cationic group Chemical group 0.000 description 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 description 1
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 1
- 108091092328 cellular RNA Proteins 0.000 description 1
- 230000002032 cellular defenses Effects 0.000 description 1
- 230000036755 cellular response Effects 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 230000008859 change Effects 0.000 description 1
- 235000013351 cheese Nutrition 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 description 1
- 238000010367 cloning Methods 0.000 description 1
- 208000029742 colonic neoplasm Diseases 0.000 description 1
- 238000010276 construction Methods 0.000 description 1
- 239000007799 cork Substances 0.000 description 1
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 1
- 230000001351 cycling effect Effects 0.000 description 1
- 125000000151 cysteine group Chemical group N[C@@H](CS)C(=O)* 0.000 description 1
- 210000000805 cytoplasm Anatomy 0.000 description 1
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 1
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 1
- 230000003247 decreasing effect Effects 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- 230000018109 developmental process Effects 0.000 description 1
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 1
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N digitoxigenin Natural products CC12CCC(C3(CCC(O)CC3CC3)C)C3C11OC1CC2C1=CC(=O)OC1 QONQRTHLHBTMGP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N digoxigenin Chemical compound C1([C@@H]2[C@@]3([C@@](CC2)(O)[C@H]2[C@@H]([C@@]4(C)CC[C@H](O)C[C@H]4CC2)C[C@H]3O)C)=CC(=O)OC1 SHIBSTMRCDJXLN-KCZCNTNESA-N 0.000 description 1
- 230000009109 downstream regulation Effects 0.000 description 1
- 235000013601 eggs Nutrition 0.000 description 1
- 230000012202 endocytosis Effects 0.000 description 1
- 239000003623 enhancer Substances 0.000 description 1
- 230000001747 exhibiting effect Effects 0.000 description 1
- 108010032819 exoribonuclease II Proteins 0.000 description 1
- 239000012527 feed solution Substances 0.000 description 1
- 239000000796 flavoring agent Substances 0.000 description 1
- 235000019634 flavors Nutrition 0.000 description 1
- 238000007667 floating Methods 0.000 description 1
- 230000002538 fungal effect Effects 0.000 description 1
- 238000001415 gene therapy Methods 0.000 description 1
- 102000034356 gene-regulatory proteins Human genes 0.000 description 1
- 108091006104 gene-regulatory proteins Proteins 0.000 description 1
- 208000016361 genetic disease Diseases 0.000 description 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 description 1
- 102000055848 human LDHA Human genes 0.000 description 1
- 238000003018 immunoassay Methods 0.000 description 1
- 238000001114 immunoprecipitation Methods 0.000 description 1
- 230000001939 inductive effect Effects 0.000 description 1
- 230000000977 initiatory effect Effects 0.000 description 1
- 238000003780 insertion Methods 0.000 description 1
- 230000037431 insertion Effects 0.000 description 1
- 238000009434 installation Methods 0.000 description 1
- 230000010354 integration Effects 0.000 description 1
- 208000032839 leukemia Diseases 0.000 description 1
- 239000003446 ligand Substances 0.000 description 1
- 239000004571 lime Substances 0.000 description 1
- 239000002502 liposome Substances 0.000 description 1
- 239000012160 loading buffer Substances 0.000 description 1
- 210000004962 mammalian cell Anatomy 0.000 description 1
- 230000010534 mechanism of action Effects 0.000 description 1
- 230000009401 metastasis Effects 0.000 description 1
- 230000002906 microbiologic effect Effects 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 239000003607 modifier Substances 0.000 description 1
- 238000012544 monitoring process Methods 0.000 description 1
- 230000004899 motility Effects 0.000 description 1
- 238000002703 mutagenesis Methods 0.000 description 1
- 231100000350 mutagenesis Toxicity 0.000 description 1
- 230000035772 mutation Effects 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 108091027963 non-coding RNA Proteins 0.000 description 1
- 102000042567 non-coding RNA Human genes 0.000 description 1
- 210000000633 nuclear envelope Anatomy 0.000 description 1
- 238000003199 nucleic acid amplification method Methods 0.000 description 1
- 238000007899 nucleic acid hybridization Methods 0.000 description 1
- 230000001293 nucleolytic effect Effects 0.000 description 1
- 229920001778 nylon Polymers 0.000 description 1
- 230000009437 off-target effect Effects 0.000 description 1
- 238000002515 oligonucleotide synthesis Methods 0.000 description 1
- 238000011275 oncology therapy Methods 0.000 description 1
- 238000005457 optimization Methods 0.000 description 1
- 230000017448 oviposition Effects 0.000 description 1
- 230000003071 parasitic effect Effects 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 108010043655 penetratin Proteins 0.000 description 1
- MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N penetratin Chemical compound C([C@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)[C@H]([C@@H](C)CC)NC(=O)[C@H](CCCCN)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CCC(N)=O)NC(=O)[C@@H](N)CCCNC(N)=N)[C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCSC)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(N)=O)C1=CC=CC=C1 MCYTYTUNNNZWOK-LCLOTLQISA-N 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 230000000144 pharmacologic effect Effects 0.000 description 1
- 150000004713 phosphodiesters Chemical class 0.000 description 1
- 102000020233 phosphotransferase Human genes 0.000 description 1
- 230000035479 physiological effects, processes and functions Effects 0.000 description 1
- 230000010152 pollination Effects 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 108091007428 primary miRNA Proteins 0.000 description 1
- 238000007639 printing Methods 0.000 description 1
- 230000000770 proinflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000035755 proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000012514 protein characterization Methods 0.000 description 1
- 238000001742 protein purification Methods 0.000 description 1
- 230000006798 recombination Effects 0.000 description 1
- 238000005215 recombination Methods 0.000 description 1
- 230000009711 regulatory function Effects 0.000 description 1
- 230000009933 reproductive health Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 230000003938 response to stress Effects 0.000 description 1
- 125000002652 ribonucleotide group Chemical group 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 238000012163 sequencing technique Methods 0.000 description 1
- 230000003584 silencer Effects 0.000 description 1
- 108091069025 single-strand RNA Proteins 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 230000037439 somatic mutation Effects 0.000 description 1
- 238000009987 spinning Methods 0.000 description 1
- 238000010186 staining Methods 0.000 description 1
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 1
- RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K thiophosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=S RYYWUUFWQRZTIU-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 230000005026 transcription initiation Effects 0.000 description 1
- 238000012033 transcriptional gene silencing Methods 0.000 description 1
- 238000001890 transfection Methods 0.000 description 1
- 230000014621 translational initiation Effects 0.000 description 1
- 230000005945 translocation Effects 0.000 description 1
- 230000032258 transport Effects 0.000 description 1
- PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N transportan Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@H](C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](C)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(N)=O)[C@@H](C)CC)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CO)NC(=O)[C@H](CC(N)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@H](CC=1C2=CC=CC=C2NC=1)NC(=O)CN)[C@@H](C)O)C1=CC=C(O)C=C1 PBKWZFANFUTEPS-CWUSWOHSSA-N 0.000 description 1
- 108010062760 transportan Proteins 0.000 description 1
- 241001515965 unidentified phage Species 0.000 description 1
- 230000003827 upregulation Effects 0.000 description 1
- 238000011144 upstream manufacturing Methods 0.000 description 1
- 238000002255 vaccination Methods 0.000 description 1
- 238000010200 validation analysis Methods 0.000 description 1
- 230000002792 vascular Effects 0.000 description 1
- 244000052613 viral pathogen Species 0.000 description 1
- 230000001018 virulence Effects 0.000 description 1
- 230000005727 virus proliferation Effects 0.000 description 1
- 238000001262 western blot Methods 0.000 description 1
- 239000008096 xylene Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/7088—Compounds having three or more nucleosides or nucleotides
- A61K31/713—Double-stranded nucleic acids or oligonucleotides
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/12—Antivirals
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
- C12N15/09—Recombinant DNA-technology
- C12N15/11—DNA or RNA fragments; Modified forms thereof; Non-coding nucleic acids having a biological activity
- C12N15/113—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing
- C12N15/1131—Non-coding nucleic acids modulating the expression of genes, e.g. antisense oligonucleotides; Antisense DNA or RNA; Triplex- forming oligonucleotides; Catalytic nucleic acids, e.g. ribozymes; Nucleic acids used in co-suppression or gene silencing against viruses
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2310/00—Structure or type of the nucleic acid
- C12N2310/10—Type of nucleic acid
- C12N2310/14—Type of nucleic acid interfering N.A.
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N2770/00—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA ssRNA viruses positive-sense
- C12N2770/00011—Details
- C12N2770/22011—Dicistroviridae
- C12N2770/22022—New viral proteins or individual genes, new structural or functional aspects of known viral proteins or genes
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Virology (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
Abstract
Mevcut buluş, bir bal arısının bir nükleik aside tamamlayıcı bir RNA dizisi içeren bir izole edilmiş çift zincirli ribonükleik asidi (dsRNA) içeren bir arı tarafından hazmedilebilir bileşimin etkili bir miktarının beslenmesini içeren ve böylece bal arısının hastalığa toleransını arttıran en az bir arı patojeninin bir nükleotid dizisine yüksek ölçüde homolog olan bir nükleotid dizisini içeren bir arı patojeni tarafından neden olunan bir hastalığa toleransının arttırılması için bir yönteme ilişkindir.
Description
Tarifnamenin bir yönüne göre,
patojen Koloni Çöküs Bozuklugu, Torba çürüklügü hastaligi,
Deforme Kanat Hastaligi, Bulutlu Kanat Hastaligi, Kronik Felç,
Nosemosis, Amerikan Yavru Çürüklügü ve benzerleri gibi bir ari
veya ari koloni hastaligina neden olan veya bunu kolaylastiran
bir “ari patojeni” dir.
Burada kullanildigi sekliyle “ari hastaligi” veya “ari
kolonisi hastaligi” terimleri, bir ari veya ari kolonisi
patojenik ajani ile dogrudan veya dolayli olarak temastan
kaynaklanan, arilarin ve/veya bir ari kolonisi popülasyonunun
davranisina, fizyolojisine, morfolojisine, üreme sagligina,
ekonomik degerine, bal üretimine, polenlesme kapasitesine,
enfeksiyona ve/veya infentasyona karsi dirençte istenmeyen
degisiklikler olarak tanimlanir.
Mevcut tarifnamenin yönteni ve bilesimlerinin bazi yönlerine
göre tedaviye uygun olan örnek niteligindeki hastaliga neden
olan patojenlerin sinirlayici olmayan bir listesi ve patojenik
ajanlar ile iliskili arilar ve ari kolonileri ile ilgili
mevcut bulusun sinirlayici olmayan bir listesi asagidaki Tablo
mevcut tarifnamenin yöntemleri ve bilesimleri ile benzer
sekilde hedeflenebilen türler arasindaki olasi filogenetik
iliskilere dair bilgiler 2008 yilinda yayinlanan Palacios ve
ark. Yayininda saglanmaktadir (23 Nisan 2008, Journal of
Virology yayinin basimindan önce online olarak yayinlanmistir)
Tablo II: Ari ve Ari Kolonisi Patojenleri
Parazitik Organizma.Genler
Akut ari felciAkut ari felci virüsü, tam genom.
Virüsü Erisim NC_
Israil akut felçErisim: NC_OO9025, arilarin akut felç
virüsü Virüsü, tam genom (DIZI NO: 16)
Deforme kanatDeforme kanat Virüsü, tam genom.
virüsü Erisim NC_OO483O (DIZI NO: 10)
Kasmir ari Virüsü Erisinu AY275710, kasmir ari Avirüsu, tam
genom (DIZI NO: 9)
Kara kraliçe hücreKara kraliçe hücre virüsü türü- 6 yapisal
Virüsü olmayan poliprotein ve yapisal poliprotein
genleri, tam cds.
Erisim: EF
Kronik felç virüsü› Kronik ari felci virüsü rna 2, tam dizi.
Erisim: NC_OlO
Bulutlu kanatBulutlu kanat virüsü rna polimera (pol)
virüsü geni, kismi cds.
Erisim AF
Paenibacillus
larvalari (Amerikan
Yavru Çürüklügü) Erisim: NZ_AARFOlOOO646 tam genom (saçma)
dizilemesi (DIZI NO: 11)
Melissococcus Erisim: EF666055 Melissococcus plutonius
pluton (Avrupasüperoksit dismutaz (soda) geni (DIZI NO:
Yavru Çürüklügü) 21)
Ascophaera apis
(Kireç hastaligi) Genomik veri yok
Nosema apis, 1) Erisim DQ, Nosema
apis RNA polimeraz 11 en büyük alt birim
2) Erisim EU, EF,
EF kepsi 168 ribozomal
RNA geni
Nosema cerana EFO, EFO91884 (DIZI NO:
13) ve EFO 58 ribozomal
RNA geninin, genler arasi ara parçanin ve
küçük alt birim ribozomal RNA geninin
erisimidir.
Mevcut bulusu uygulamaya geçirirken, bulus sahipleri IAPV'ye
maruz kalan arilarin beslemesinde lAPV'ye özgü bir dsRNA'nin
saglanmasinin, arilarda 4 XKE 8 gün sonra tespit edilen IAPV
dizilerinin insidansini ve seviyelerini önemli ölçüde
azalttigini göstermistir (Sekil 4A - 4C ve 5). Bu nedenle,
mevcut tarifnamenin bazi yönlerinde, yöntemler ve bilesimler,
bir ari veya ari kolonisi patojenik organizmasinin bir
polipeptidinin asagi yönde düzenlenleyici ekspresyonu için
faydalidir. Burada kullanildigi sekliyle “asagi yönde
düzenleyici ekspresyon” terimi, gen ürünlerinin miktari ve
fonkisyonunu indirgemek için istenilen bir genin
transkripsiyonunda dogrudan veya dolayli olarak. indirgemeye,
bahsedilen genin transkripsiyon ürünlerinin (örn. RNA)
miktari, kararliligi veya çevirilebilirliginde indirgemeye,
istenilen gen tarafindan kodlanan polipeptid(ler)in
translasyonunda indirgemeye ve/veya istenilen gen tarafindan
kodlanan polipeptidlerin biyokimyasal fonkisyonunun miktari,
kararliligi ve çevirilebilirliginde indirgemeye yol açmasi
olarak tanimlanir.
Burada kullanildigi sekliyle “asagi yönde düzenleyici
ekspresyon” ayrica bir ari hücresindeki ari patojen RNA
moleküllerinin miktarinda, kararliliginda veya
çevirilebilirliginde indirgemye liskindir, burada ari patojen
genomu tek Zincirli bir RNA Virüsü halinde oldugu gibi, tek
Zincirli bir RNA molekülüdür. Bir gen veya diger bir ari
patojen RNA'sinin asagi yönde düzenleyici ekspresyonu,
örnegin, gen transkriptlerinin dogrudan tespiti ile (örnegin,
PCR ile), gen veya ari patojen RNA'si tarafindan kodlanan
polipeptit(ler)in tespiti ile (örnegin, Western blot veya
immunopresipitasyon ile), gen tarafindan kodlanan
polipeptitlerin biyolojik aktivitesinin tesipiti ile (Örnegin,
katalitik aktivite, ligand baglanmasi ve benzeri) veya
istenilen bir genin veya ari patojen RNA'sinin
ekspresyonundaki indirgemeden kaynaklanan bir hücre veya
organizmada degisikliklerin (örnegin, bir patojenin
proliferasyonunun indirgenmesi, bir patojenin indirgenmis
Virülansi, bir hücrenin hareket kabiliyetinin azalmasi, bir
hücrenin veya organizmanin uyariciya yanitinin azalmasi, Vb.)
izlenmesi ile izlenebilir. Burada kullanildigi sekliyle, asagi
yönde düzenleme, örnegin, asagi yönde düzenleyici bir ajanin
mevcudiyeti süresince veya kalici olarak, organizmanin ve/veya
gelecek kusaklarinin Ömrü boyunca gen ekspresyonunun veya ari
patojen RNA'sinin indirgenmesiyle sonuçlanabilir.
Ari patojen polipetidlerinin asagi yönde düzenlemesi,
transkripsiyon ve/veya translasyona (örn., RNA baskilayici
ajanlar, Ribozim, DNAzim ve antisens) engel olan çesitli
moleküller kullanilarak genomik ve/Veya transkript seviyesinde
gerçeklestirilebilir. Viral enfeksiyonlarin dsRNA ile tedavisi
sayili belgede tarif edilmistir. Böceklerde dsRNA kullanimi
Patentinde tarif edilmistir.
Asagida, ari patojen polipeptidlerinin ekspresyon seviyesini
ve/veya aktivitesini asagi yönde düzenleyebilen ajanlarin bir
listesi bulunmaktadir.
Ari patojen polipeptidlerinin asagi yönde düzenlemesi, RNA
susturmasiyla saglanabilir. Burada kullanildigi sekliyle “RNA
susturma” ifadesi, karsilik gelen bir protein kodlayan genin
veya ari patojen RNA dizisinin ekspresyonunun inhibe
edilmesine veya “baskilanmasina” yol açan RNA molekülleri
tarafindan aracilik edilen bir düzenleyici Hßkanizma grubunu
susturmasi (TGS), transkripsiyon sonrasi gen susturmasi
(PTGS), bastirma, ko-supresyon ve translasyonel baski] ifade
eder. RNA baskilanmasi, bitkiler, hayvanlar ve mantarlar dahil
birçok organizma tipinde gözlenmistir.
Burada kullanildigi sekliyle “RNA baskilayici ajan” terimi,
bir hedef genin ekspresyonunu inhibe veya “susturma”
yetenegine sahip bir RNA'yi ifade eder. Bulusun bazi
yönlerinde, RNA susturucu ajan, bir transkripsiyon sonrasi
susturma mekanizmasi yoluyla bir mRNA. molekülünün tam
islemesini (örn. tam translasyon ve/veya ekspresyon)
önleyebilir. RNA susturucu ajanlar arasinda, kodlanmamis RNA
molekülleri, örnegin çiftlesik zincirler içeren RNA
dublekslerinin yani sira, bu gibi küçük kodlayici olmayan
RNA'larin üretilebildigi öncü RNA'lar bulunur. Örnek
niteligindeki RNA susturucu ajanlar, siRNA'lar, miRNA'lar ve
shRNA'lar gibi dsRNA'lari içerir. Bulusun bir yönünde, RNA
susturucu ajan, RNA interferansini indükleyebilmektedir.
Bulusun baska bir yönünde, RNA susturucu ajan, translasyonel
represyona aracilik edebilir.
RNA interferansi, kisa etkilesen RNA'larin (siRNA'lar)
aracilik ettigi hayvanlarda diziye özgü post-transkripsiyonel
gen susturulmasi islemi ile ilgilidir. Bitkilerde karsilik
gelen islem yaygin olarak post-transkripsiyonel gen
susturulmasi veya RNA susturulmasi olarak adlandirilir ve ayni
zamanda mantarlarda bastirma olarak adlandirilir. Post-
transkripsiyonel gen susturma isleminin, yabanci genlerin
ekspresyonunu önlemek için kullanilan ve çesitli flora ve
filum tarafindan yaygin olarak kullanilan, evrimsel olarak
korunan bir hücresel savunma mekanizmasi oldugu
düsünülmektedir. Yabanci gen ekpresyonundan. but tür korunma,
viral enfeksiyondan türetilen çift zincirli RNA'larin
(dsRNA'lar) üretimine veya transpozon elementlerinin bir
homolog tek zincirli RNA veya viral genomik RNA'yi spesifik
olarak tahrip eden bir hücresel yanit yoluyla bir konakçi
genoma rastgele integrasyonundan yola çikarak gelismis
olabilir.
Hücrelerdeki uzun dsRNA'larin varligi, parçalayici olarak
belirtilen bir ribonükleaz III enziminin aktivitesini uyarir.
Parçalayici dsRNA'nin kisa etkilesen RNA (siRNA) olarak
bilinen kisa dsRNA parçalarina islenmesinde rol oynar.
Parçalayici aktivitesinden türetilen kisa etkilesim RNA'lar
tipik olarak yaklasik 21 ila yaklasik 23 nükleotid
uzunlugundadir ve yaklasik 19 baz çiftli dubleks içerir. RNAi
yaniti ayrica, yaygin olarak siRNA dubleksinin antisens
zincirinin tamamlayan diziye sahip olan tek Zincirli RNA'nin
klevajina aracilik eden bir RNA kaynakli susturucu kompleks
(RISC) olarak adlandirilan bir endonükleaz kompleksine de
sahiptir. Hedef RNA'nin klevaji, siRNA dubleksinin antisens
zincirini tamamlayan bölgenin ortasinda gerçeklesir.
Buna göre, mevcut tarifname, mRNA'dan protein ekspresyonunu
asagi yönde düzenlemek için dsRNA'nin kullanilmasini öngörür.
Bulusun bir yönüne göre, dsRNA 30 bp'den daha büyüktür. Uzun
dsRNA'larin kullanimi, sayisiz siRNA'lari test etme ihtiyacini
hafifleten hücrenin optimal susturucu dizisini seçebilmesi;
uzun dsRNA'lar, kütüphanelerin siRNA'lar için gerekli olandan
daha az karmasikliga sahip olmalarina izin vermrsi ve belki de
en önemlisi, uzun dsRNA. terapötikler olarak kullanildiginda
Viral kaçis mutasyonlarini önleyebilmesi bakimindan sayisiz
avantaj saglayabilir.
Çesitli çalismalar, uzun dsRNA'larin, stres yanitini
indüklemeden veya önemli hedef disi etkilere neden olmadan gen
ekspresyonunu susturmak için kullanilabilecegini
göstermektedir, örnek için bakiniz [Strat et al., Nucleic
Mevcut tarifnamenin bir yönünde, dsRNA, 30 baz çiftinden daha
büyüktür ve DIZI NO: 24, 33 ve 34'te belirtildigi gibidir.
Ari patojen proteinlerinin asagi yönde düzenlenmesinin bir
baska yöntemi, küçük inhibitör RNA'larin (siRNA'lar)
sokulmasidir. “SiRNA” terimi, RNA interferans (RNAi) yolunu
indükleyen küçük inhibitör RNA dubleksleri (genellikle 18 ila
18 baz çifti arasinda, 19 ila 25 baz çifti arasinda) ile
ilgilidir. Tipik olarak, siRNA'lar, kimyasal olarak
sentezlenen 25-30 baz uzunlugundaki RNA dublekslerinin, ayni
lokasyonda 21mer'lere kiyasla, potansiyel olarak 100 kat
artisa sahip olabildigi son zamanda tarif edilmis olmasina
ragmen, merkezi bir 19 hp dubleks bölgesi ve termin üzerinde
Symmetrie 2-base 3'-çikintilar olan 21mer'ler gibi kimyasal
olarak sentezlenmistir. Daha uzun RNA'lar kullanilarak
RNAi'nin tetiklenmesinden elde edilen gözlenen artmis potens,
Parçalayicinin bir ürün (21mer) yerine bir Substrat (27mer)
ile saglanmasindan ve bu da siRNA dubleksinin RISC'nin içine
girisinin oranini veya etkinligini gelistirmesinden
kaynaklanmaktadir.
3'-çikintisinin pozisyonunun bir siRNA'nin potensini
etkiledigi ve antisens zinciri üzerinde bir 3'-çikintisina
sahip asimetrik dublekslerin genellikle sens zinciri
üzerindeki 3'-çikintisi olanlardan daha etkili oldugu
bulunmustur (Rose ve dig., 2005). Bu, antisens transkript
hedeflenirken karsilikli etki modelleri gözlendiginden,
RISC'ye asimetrik zincir yüklemesine dayandirilabilir.
Bir çift Zincirli etkilesen RNA'nin (örn. bir siRNA)
zincirleri, bir hairpin veya gövde döngü yapisi (ör., Bir
shRNA) olusturmak üzere baglanabilir. Bu nedenle, bahsedildigi
gibi, mevcut tarifnamenin RNA susturucu ajani ayrica kisa bir
hairpin RNA (shRNA) olabilir.
Burada kullanildigi sekliyle “shRNA”, bir gövde döngü yapisina
sahip olan ve tamamlayici dizinin bir birinci ve ikinci
bölgesini içeren bir RNA ajanini göstermektedir, bölgelerin
tamamlaycilik. ve oryantasyon derecesi bölgeler arasinda baz
eslesmesinin meydana gelmesi için yeterlidir, birinci ve
ikinci bölgeler bir döngü bölgesi tarafindan birlestirilir,
döngü, döngü bölgesi içindeki nükleotidler (veya nükleotid
analoglari) arasinda baz eslesmesinin olmamasindan
kaynaklanir. Döngüdeki nükleotit sayisi, 3 ila 23 veya 5 ila
veya '7 ila :KB veya 4 ila 9 veya 9 ila 11 arasinda bir
sayidir. Döngüdeki nükleotidlerin bazilari, döngüdeki diger
nükleotidlerle baz çifti etkilesimlerinde yer alabilir.
Döngüyü olusturmak için kullanilabilecek oligonükleotid
dizilerinin örnekleri arasinda 5'-UUCAAGAGA-3' (Brummeikamp,
(Castanotto, D. et al. ( bulunur. Ortaya
çikan tek Zincirli oligonükleotidin, RNAi mekanizmasi ile
etkilesime girebilen çift Zincirli bir bölge içeren bir gövde-
döngü veya hairpin yapisi olusturdugu, teknikte uzman bir kisi
tarafindan anlasilacaktir.
Bulusun bir baska yönüne göre, RNA susturucu ajan bir miRNA
olabilir. miRNA'lar, çesitli boyutlardaki birincil
transkriptleri kodlayan genlerden yapilan küçük RNA'lardir.
Bunlar hem hayvanlarda hem de bitkilerde tanimlanmistir.
Birincil transkript (“pri-miRNA” olarak adlandirilir), daha
kisa bir öncü ndRNA veya “pre-miRNA" ya çesitli nükleolitik
adimlar` vasitasiyla islenir. Pre-miRNA, katlanmis bir formda
bulunur, böylece nihai (olgun) miRNA, bir dublekste bulunur,
çift zincir miRNA olarak adlandirilir (neticede hedef ile baz
çifti olusturacak olan zincir). Pre-miRNA, öncüden miRNA
dubleksini uzaklastiran bir parçalayici formu için bir
substrattir, bundan sonra, siRNA'lara benzer sekilde dubleks,
RISC kompleksine alinabilir. miRNA'larin transjenik olarak
eksprese edilebildigi ve primer formun tamami yerine bir öncü
formunun ekspresyonu yoluyla etkili olabildigi gösterilmistir
siRNA'larin aksine, miRNA'lar sadece kismi tamamlayiciliga
sahip transkript dizilerine baglanir (Zeng et al., 2002,
Molec. Cell 9:1327-1333) ve kararli durumdaki RNA seviyelerini
etkilemeden translasyonu bastirir (Lee et al., 1993, Cell
miRNA'lar hem de siRNA'lar parçalayici tarafindan islenir ve
RNA ile indüklenmis susturucu kompleksin bilesenleri ile
Yakin zamandaki bir rapor (Hutvagner et al., 2002,
yolagi sayesinde gen regülasyonunun, sadece hedef transkript
için tamamlayicilik derecesine göre belirlendigini öne
sürmektedir. mRNA hedefine sadece kismi özdeslige sahip
siRNA'larin, RNA bozunmasini tetiklemekten çok, bir ndRNA'ya
benzer sekilde, translasyonel baskida isleV' görecekleri
düsünülmektedir.
Mevcut tarifnamenin bir yönüne göre, nükleik asit ajani, bir
ari patojen hedef polinükleotit dizinin bölünmesine ve/veya
bozunmasina neden olabilir. Burada kullanildigi sekliyle
içi veya hücre disi patojenik enfeksiyona veya bir hastaliga
bagli olarak dogal sekilde olusan dizi veya heterolog bir
dizinin mevcut oldugu bir ari hücresinde veya bir arida mevcut
olan herhangi bir dizi ile ilgilidir, bu, ari patojen
polinükleotit dizisinin indirgenmesi veya inhibe edilmesi
istenilen bir fonksiyona sahiptir. Ari patojen hedef dizisi,
bir kodlama dizisi olabilir, yani, bir proteini veya bunun
fonksiyonel bir parçasini eksprese etmek üzere çevrilir.
Alternatif olarak, hedef dizi kodlayici olmayabilir, ancak bir
düzenleyici fonksiyona sahip olabilir. Bir hedef polinükleotid
dizisi, enfekte olmus bir ari hücresinde virüsün replikasyonu
ve/veya patojenezi için gerekli olan bir ari patojenik Virüs
polinükleotid dizisidir. Bir ari patojen hedef polinükleotid
dizisinin bir baska yönü, virüs ile indüklenmis bir hastaligin
eksprese edilmemis bir düzenleyici dizisi olup, virüsün, ari
hücresinde, örnegin, enfekte olmus bir arida bu patojenin
replikasyonu ve/veya patojenezi için gerekli olan bir hücre
içi veya hücre disi patojenin bir polinükleotid dizisinin
muhafaza edilmesi için hangi dizinin gerekli oldugudur. Bir
ari patojenik hedef dizisinin bir baska yönü, nükleik asit
ajaninin veya bunlardan türetilen dizilerin baglanma
kabiliyetine sahip oldugu herhangi bir dizi olup, bu baglanma,
bir ari patojen polinükleotitinin klevaji ve/veya bozunmasi
(“susturulmasi”) ile sonuçlanir. “Gen” teriminin, promotörler,
gelistiriciler' ve diger kodlayici olmayan diziler gibi
düzenleyici diziler dahil olmak üzere, transkripsiyona ve/veya
translasyona ugrasin ya da ugramasin “susturulmasi” amaçlanan
herhangi bir hedef dizi kapsamasi amaçlanmistir.
Mevcut tarifnamenin bir yönünde, mevcut tarifname ile kullanim
için uygun olan RNA susturucu ajanlarin sentezi asagidaki gibi
gerçeklestirilebilir. Ilk olarak, ari patojen polipeptidi
mRNA'si veya diger hedef dizi, AA dinükleotid dizileri için
AUG baslangiç kodonunun asagi yönünde taranir. Her bir AA'nin
ve 3' bitisik 19 nükleotidin olusumu potansiyel siRNA hedef
bölgeleri olarak kaydedilir. Tercihen, translasyona ugramamis
bölgeler (UTR'ler) düzenleyici protein baglama bölgelerinde
daha zengin oldugundan siRNA hedef bölgeleri açik okuma
çerçevesinden seçilir. UTR, baglayici proteinler ve/veya
translasyon baslatma kompleksleri, siRNA endonükleaz
kompleksinin baglanmasina engel olabilir [Tuschl ChemBiochem.
2:239-245]. Bununla birlikte, translasyona ugramamis bölgelere
yönelik siRNA'larin, GAPDH için gösterildigi gibi, 5' UTR'de
yönlendirilen siRNA'nin, hücresel GAPDH mRNA'sinda yaklasik %
90'lik bir indirgemeye aracilik ettigi ve tamamen ortadan
kaldirilmis protein seviyesinde de etkili olabilecegi
anlasilacaktir (http://www.ambion.com/techlib/tn/9l/912.html).
Ikinci olarak, potansiyel hedef bölgeler, NCBI Sunucusundan
temin edilebilen BLAST Yazilimi gibi herhangi bir dizi
hizalama yazilimi kullanilarak uygun bir genomik veri tabani
(örn., insan, fare, siçan Vb.) Ile karsilastirilir (www.nc-
bi.nlm.nih.gov/BLAST/)- Diger kodlama dizilerine kayda deger
homoloji sergileyen varsayimsal hedef bölgeler filtrelenir.
Niteleyici hedef diziler siRNA sentezi için sablon olarak
seçilir. G/C içerigi % 55'ten. daha yüksek olanlara kiyasla,
gen susturmaya aracilik etmede daha etkili oldugu kanitlandigi
için düsük G/C içerigi içerenler tercih edilen dizilerdir.
Birkaç hedef bölge tercihen hedef genin uzunlugu veya
degerlendirme için dizi boyunca seçilir. Seçilen siRNA'larin
daha iyi degerlendirilmesi için tercihen birlikte bir negatif
kontrol kullanilir. Negatif kontrol siRNA tercihen siRNA'lar
ile ayni nükleotid bileismini içerir, ancak genom için kayda
deger bir homolojiye sahip degildir. Bu nedenle, baska
herhangi bir gen veya ari patojen hedef dizisine herhangi bir
kayda deger homoloji göstermemesi sartiyla tercihen siRNA'nin
karistirilmis bir nükleotid dizisi kullanilir.
Örnegin, uygun bir ari patojeni siRNA'si, IAPV dizileri DIZI
NO: 33 ve 34'e karsilik gelen lAPV'ye özgü siRNA'yi olabilir.
Ek olarak uygun ari patojen siRNA'lari, herhangi bir ari
patojeninden, örnegin, Akut Ari Paralizi Virüsü (örnegin, DIZI
olmamak üzere, Tablo Il'de ayrintilari verilen dizilere göre
tasarlanabilir. Çoklu ari-patojeni dizi, buradaki Örnek IV'te
ayrintili olarak tarif edilen çoklu ari Virüsü dsRNA'si gibi
birden fazla ari patojenine karsi etkili siRNA'lari üretmek
için uygun dizileri içerecek sekilde tasarlanabilir (DIZI NO:
24). Bu tür çoklu ari-patojeni dsRNA, uzun veya kisa
çesitlilige sahip olabilir ve bir ari patojenleri sinifi
içindeki homolog dizilere karsilik gelen dizileri (örnegin
çoklu ari virüsü dizileri) veya çesitli patojen siniflarina
karsilik gelen dizileri (örnegin viral + bakteriyel + fungal
dizileri, Vb.) içerebilir.
Ayrica, ayni ari patojenin iki veya daha fazla dsRNA dizisini
içerecek sekilde çoklu diziler tasarlanabilir.
Mevcut tarifnamenin yine bir baska yönüne göre, mevcut
tarifname ile kullanim için uygun RNA susturucu ajanlarin
sentezi konakçi genoma entegre oldugu bilinen ari patojen
hedef dizilerine, bir ari patojen enfeksiyonuna dirençle
iliskili oldugundan süphelenilen hedef dizilere, ari patojen
genomunun interjenik bölgelerini temsil eden hedef dizilere ve
patojenin büyümesi ve/veya replikasyonu için kritik oldugu
gösterilen patojene özgü dizilere göre gerçeklestirilebilir.
Mevcut tarifnamenin bir baska yönünde, ari patojenin farkli
türleri arasinda veya bir çesit korunan patojenler arasinda
korunmus bir homolojiye sahip dizilere hedeflenen nükleik asit
ajanlari, bu tür diziler tanimlandiktan sonra, ari patojenin
birden fazla türüne karsi veya hatta farkli ari patojenlerine
karsi etkili olabilecegi anlasilacaktir.
Mevcut tarifnamenin RNA susturucu ajaninin, sadece RNA içeren
moleküller ile sinirli olmayacagi, ayrica kimyasal olarak
modifiye edilmis nükleotidleri ve non-nükleotidleri de
kapsamasi gerektigi anlasilacaktir.
Bulusun. bazi yönlerinde burada saglanan RNA susturucu ajan,
bir hücreye isleyen peptid ile islevsel olarak iliskili
olabilir. Burada kullanildigi sekliyle “hücreye isleyen bir
bir hücrenin plazma ve/veya nükleer zarlari boyunca geçirgen
zar kompleksinin tasinmasiyla iliskili enerjiden bagimsiz
(yani endositoz olmayan) translokasyon özelliklerini veren bir
kisa (yaklasik 12-30 kalinti) amino asit dizisi veya
fonksiyonel motifi içeren bir peptittir. Mevcut tarifnamenin
geçirgen zar kompleksinde kullanilan hücreye isleyen peptidi,
tercihen, bu tür bir baglanti için modifiye edilmis bir çift
zincirli ribonükleik asit ile bir disülfid bagi olusturmak
üzere serbest veya türetilmis olan en az bir fonksiyonel
olmayan sistein kalintisi içerir. Bu tür özellikleri veren
temsili amino asit motifleri 6,348,185 sayili ABD Patentinde
listelenmistir. Mevcut tarifnamenin hücreye isleyen peptitleri
tercihen, bunlarla sinirli olmamakla birlikte, penetratin,
transportan, plsl, TAT (48-60), pVEC, MTS ve MAP'i içerir.
Bir ari patojen polipeptidini asagi yönde düzenleyebilen baska
bir ajan, spesifik olarak bir patojen polipeptidinin bir mRNA
transkriptini veya DNA dizisini parçalayabilen bir DNAzim
molekülüdür. DNAzimler, hem tek hem de çift zincirli hedef
dizileri parçalayabilen tek zinrli polinükleotitlerdir
(Breaker, R.R. and Joyce, G. Chemistry and Biology l995;2:655;
Santoro, S.W. & Joyce, G.F. Proc. Natl, Acad. Sei. USA
önerilmistir. “10-23” DNAzimlerinde, her biri yedi ila dokuz
deoksiribonükleotidin iki substrat tanima alani tarafindan
kusatilmis, 15 deoksiribonükleotidin katalitik bir alani
vardir. Bu tip DNAzim, Substrat RNA'sini pürinzpirimidin
junksiyonunda etkili bir sekilde parçalayabilir (Santoro, S.W.
incelenmesi için bakiniz, Khachigian, LM [Curr Opin Mol Ther
Tek ve çift Zincirli hedef klevaj alanlarini taniyan sentetik,
tasarlanmis DNAzimlerin yapimi ve amplifikasyon örnekleri ABD
Pat. Joyce ve ark. Tarafindan yayinlana 6,326,174 sayili ABD
Patenti'nde tarif edilmistir. Insan ürokinaz reseptörüne karsi
yönlendirilen benzer tasarimli DNAzimlerin, yakin zamanda
Urokinaz reseptör ekspresyonunu inhibe ettikleri ve canli içi
kolon kanseri hücre metastazini basarili bir sekilde inhibe
ettikleri gözlemlenmistir (Itoh et al, 20002, Abstract409, Ann
Meeting Am Soc Gen Therwww.asgt.org). Baska bir uygulamada,
bcr-abl onkogenlerine tamamlayici DNAzimler, lösemi
hücrelerinde onkogen ekspresyonunun inhibe edilmesinde ve CML
ve ALL durumlarinda otolog kemik iligi transplantinda nüksetme
oranlarinin azaltilmasinda basarili olmustur.
Ari patojen polipeptitlerinin asagi yönde düzenlemesi veya ari
patojeni RNA'nin klevaji, ayrica, ari patojen. polipeptidini
veya bir ari patojen RNA hedef dizisini kodlayan bir mRNA
transkripti ile spesifik olarak melezlenebilen bir antisens
polinükleotid kullanilarak da gerçeklestirilebilir.
Bir ari patojen polipeptidini etkin bir sekilde asagi yönde
düzenlemek için kullanilabilen antisens moleküllerin tasarimi,
antisens yaklasimi için önemli olan iki yön dikkate alinarak
gerçeklestirilmelidir. Birinci yön, oligonükleotidin uygun
hücrelerin sitoplazmasi içine iletilmesidir, ikinci yön ise,
hücreler` içindeki belirlenmis mRNA. veya RNA. hedef dizisini,
bunlarin translasyonunu engelleyecek sekilde spesifik olarak
baglayan bir oligonükleotitin tasarimidir. Önceki teknik,
oligonükleotidleri çok çesitli hücre tiplerine verimli bir
sekilde iletmek için kullanilabilen bir dizi iletim
stratejisini hakkinda bilgi vermektedir [örnek için bkz.,Luft
Ek olarak, hedef mRNA ve oligonükleotidde yapisal
degisikliklerin enerjilerini hesaba katan bir termodinamik
döngüye dayali olarak hedef mRNA'lari için en yüksek tahmini
baglanma afinitesine sahip olan. bu dizileri tanimlamak için
algoritmalar da mevcuttur [Örnek için bkz., Walton et al.
Biotechnol Bioeng 65: 1-9 (1999)].
Bu tür algoritmalar, hücrelerde antisens yaklasimi uygulamak
için basariyla kullanilmistir. Örnegin, Walton ve ark.
tarafindan gelistirilen algoritma, bilim adamlari tarafindan
tavsan beta-globin (RBG) ve fare tümörü nekroz faktörü-alfa
(TNF alfa) transkriptleri için antisens oligonükleotidleri
basarili bir sekilde tasarlamalarina olanak saglamistir. Ayni
arastirma grubu daha yakin zamanda, kinetik bir PCR teknigi
ile degerlendirilen hücre kültüründeki üç model hedef
mRNA'lara (insan laktat dehidrogenaz A ve 13 ve siçan gp130)
karsi rasyonel olarak seçilen oligonükleotidlerin antisens
aktivitesi, fosfodiester ve fosforotioat oligonükleotid
kimyasi ile iki hücre tipinde üç farkli hedefe karsi yapilan
testler dahil olmak üzere hemen hemen tüm durumlarda etkili
oldugunu kanitlamistir.
Ek olarak, laboratuvar ortaminda bir sistem kullanilarak
spesifik oligonükleotidlerin verimliligini tasarlamak ve
tahmin etmek için çesitli yaklasimlar da yayinlanmistir
(1998)].
Örnegin, IAPV' mRNA'sina karsi hedeflenen uygun bir antisens
oligonükleotid, DIZI NO: 51 ve 52'de (IAPV' poliproteinleri)
belirtilen dizilerde olacaktir.
Birçok klinik testler, antisens oligonükleotidlerin
güvenligini, fizibilitesini ve aktivitesini göstermistir.
Örnegin, kanser tedavisi için uygun olan antisens
oligonükleotidler basarili bir sekilde kullanilmis [Holmund et
Bcl-Z'yi hedef alan antisens oligonükleotidler yoluyla
hematolojik malignitelerin tedavisi klinik testlere girmis ve
hastalar tarafindan tolere edildigi gösterilmistir [Gerwitz
proteinlerine hedeflenen antisens oligonükleotidler bal
arilarinda etkili bir sekilde kullanilmistir (Fiala et al, J.
Bu nedenle, mevcut konsensüs, son derece hassas antisens
tasarim algoritmalarinin ve çok Çesitli oligonükleotid iletim
sistemlerinin üretilmesine yol açan yukarida tarif edilen
antisens teknolojisi alanindaki son gelismelerin, teknikte
siradan bir uzmanliga sahip bir kisinin, gereksiz tesete ve
hatali deneylere basvurmak zorunda kalmadan, bilinen dizilerin
asagi yönde düzenleyici eskpresyonu için uygun olan antisens
yaklasimlari tasarlama ve uygulama becerisine sahiptir.
Bir ari patojen polipeptidini asagi yönde düzenleyebilen baska
bir ajan, spesifik olarak bir patojen polipeptidini kodlayan
bir mRNA transkriptini parçalayabilen bir ribozim molekülüdür.
Ribozimler, ilgili proteinleri kodlayan mRNA'larin klevaji ile
gen ekspresyonunun diziye özgü inhibisyonu için giderek daha
fazla kullanilmaktadir [Welchi et al., Curr Opin Biotechnol.
9:486-96 (l998)]. Viral RNA› dahil olmak› üzere herhangi bir
spesifik hedef RNA'yi parçalama olasiligindan dolayi
ribozimler hem temel arastirmalar hem de terapötik
uygulamalarda degerli araçlar haline gelmistir. Terapötikler
alaninda, ribozimler enfeksiyöz hastaliklarda viral RNA'lari,
kanserlerde dominant onkojenleri ve genetik bozukluklarda
spesifik. somatik mutasyonlari hedeflemek. için kullanilmistir
önemlisi, HIV hastalari için birkaç ribozim gen tedavisi
protokolü Faz ]. denemelerinde halihazirda bulunmaktadir. Çok
yakin geçmiste, ribozimler transjenik hayvan arastirmalari,
gen hedef validasyonun ve yolagin izahi için kullanilmistir.
Bir çok ribozim klinik testlerin çesitli asamalarinda bulunur.
ANJIYOZIM, insan klinik testlerinde çalisilacak ilk kimyasal
olarak sentezlenmis ribozimdir. ANJIYOZIM, özellikle
anjiyogenez yolaginda önemli bir bilesen olan VEGF-r (Vasküler
Endotelyal Büyüme Faktörü reseptörü) olusumunu inhibe eder.
Diger firmalarla birlikte Ribozyme Pharmaceuticals, Inc.
Firmasi da hayvan modellerinde anti-anjiyogenez
terapötiklerinin önemini göstermistir. Hepatit C Virüsü (HCV)
RNA'sini seçici olarak yok etmek için tasarlanan bir ribozim
olan HEPTAZIM, hücre kültürü tahlillerinde Hepatit C Viral
RNA'sini azaltmada etkili oldugu bulunmustur (Ribozyme
Pharmaceuticals, Incorporated - WEB ana sayfasi).
Hücrelerdeki bir ari patojen polipeptit geninin ekspresyonunu
düzenleyen ek bir yöntem, tripleks Olusturucu oligonüklotidler
(TFO'lar) yoluyla gerçekletirilir. Son çalismalar TFO'larin,
diziye özgü bir sekilde çift zincirli sarmal DNA'daki
polipürin/polipirimidin bölgelerini taniyan ve baglayabilecek
sekilde tasarlanabilecegini göstermistir. Bu tanima kurallari
375408” tarafindan özetlenmistir. Ara ekleyicilerin ve omurga
ornatimlarinin eklenmesi ve baglanma kosullarinin
optimizasyonu (pH ve katyon konsantrasyonu) gibi
oligonüklotidlerin modifikasyonu, yük repulsiyonu ve
instabilite gibi TFO aktivitesine yönelik dogal engellerin
üstesinden gelmede yardimci olmustur ve son zamanlarda,
sentetik oligonükleotidlerin spesifik dizilere
hedeflenebilecegi gösterilmistir (yakin tarihli bir inceleme
94). Genel olarak, tripleks Olusturucu oligonükleotid dizi
benzesmesine sahiptir:
oligo 3'-A G G T
duplex 5'-A G C
duplex 3'-T C G A
Bununla birlikte, A-AT ve G-GC üçlüsünün en büyük üçlü sarmal
kararliliga sahip oldugu gösterilmistir (Reither and Jeltsch,
BMC Biochem, 2002, SeptlZ, Epub). Ayni yazarlar, A-AT ve G-GC
kurallarina göre tasarlanan TFO'larin spesifik olmayan
tripleksler olusturmadigini göstermislerdir, bu da tripleks
olusumunun gerçekten de diziye özgü oldugunu göstermektedir.
Bu nedenle, ari patojen polipeptid düzenleyici bölgesindeki
herhangi bir dizi için, bir tripleks Olusturucu dizi
tasarlanabilir. Tripleks Olusturucu oligonükleotidler tercihen
en az 15, daha tercihen 25, daha da tercihen 30 veya daha
fazla, 50 veya 100 bp'ye kadar nükleotid uzunlugundadir.
Hücrelerin TFO'lar ile transfeksiyonu (örnegin, katyonik
lipozomlar yoluyla) ve hedef DNA ile üçlü sarmal yapinin
olusumu, endojen DNA'da istenilen dizi degisikliklerinin
baslatilmasina ve gen ekspresyonunun spesifik asagi yönde
düzenlemesine neden olan transkripsiyon baslamasini ve
uzamasini bloke ederek, sterik ve fonksiyonel degisiklikleri
indükler. TFO'larla tedavi edilen hücrelerde gen
ekspresyonunun bu tür supresyon örnekleri, memeli hücrelerinde
epizomal supFGl ve endojen HPRT genlerinin nakavt edilmesini
(Vasquezet al., Nucl Acids Res. l999;27:ll76-8l, and Puri,
and. the pro- inflammatory ICAM-l gene (Besch et al, J Biol
önemli olan EtsZ transkripsiyon faktörünün ekspresyonunun
spesifik asagi yönde düzenlenmesini içerir. Ek olarak,
Vuyisich ve Beal yakin zamanda diziye özgü TFO'larin dsRNA'ya
baglanabildigini, RNA'ya bagli kinazlar gibi dsRNA'ya bagli
enzimlerin aktivitesini inhibe ettigini göstermistir (Vuyisich
Buna ek olarak, yukarida belirtilen ilkelere göre tasarlanan
TFO'lar, DNA onarimini gerçeklestirme yetenegine sahip olan
yönlendirilmis mutajenezi indükleyebilir, böylece endojen
genlerin ekspresyonunun hem yukari yönde düzenlenlenmesini hem
de asagi yönde düzenlenmesini saglar (Seidman and Glazer, J
sentezi ve uygulamasinin ayrintili tarifi, Froehler ve
0123476 numarali ABD Patent Basvurularinda ve Lawn'in
,721,138 numarali ABD Patenti'nde bulunabilir.
Mevcut tarifnamenin RNA, dsRNA, siRNA'si veya miRNA'si,
kimyasal veya enzimatik olarak manuel veya otomatik
reaksiyonlar yoluyla veya zararli kontrolünün amaçlandigi
bitki disindaki bir organizmada canli içi üretilebilir. RNA,
ayrica kismi veya toplam organik sentez ile üretilebilir.
Herhangi bir modifiye edilmis ribonükleotid, laboratuvar
ortaminda enzimatik veya organik sentez ile eklenebilir. RNA,
bir hücresel RNA polimerazi veya bir bakteriyofaj RNA
polimerazi (örn., T3, T7, SP6) ile sentezlenebilir. Kimyasal
olarak veya laboratuvar ortaminda enzimatik sentez ile
sentezlenirse, RNA, kabul edilebilir bir tasiyicida
beslenmeden veya formüle edilmeden önce saflastirilabilir ve
sivi, kati veya yari kati olarak arilara saglanabilir. Örnegin
RNA, bir çözücü veya reçine ile öztüleme yoluyla, çökeltme,
elektroforez, kromatografi veya bunlarin bir kombinasyonu ile
bir karisimdan saflastirilabilir. Alternatif olarak, RNA
numune islemeden kaynaklanan kayiplari önlemek için
saflastirma yapilmadan veya minimum saflastirma ile
kullanilabilir. RNA depolama için kurutulabilir veya sulu bir
çözelti içerisinde Çözündürülebilir. Çözelti, dubleks
zincirlerin yeniden birlesmesini ve/veya kararliligini
kolaylasyirma için tamponlar veya tuzlar içerebilir.
Laboratuvar ortaminda bir transgenden veya bir ekspresyon
kasetinden transkripsiyon için, RNA dizisinin (veya
zincirlerinin) transkripsiyonunu modüle etmek için bir
düzenleyici bölge (örnegin, düzenleyici, gelistirici,
susturucu, öncü, intron ve poliadenilasyon) kullanilabilir.
Bu nedenle, bir yönde, nükleik asit ajanini içeren bir
nükleik asit yapisi saglanmaktadir. Nükleik asit yapisi,
mevcut traifnamenin RNA moleküllerinin transkripsiyonunu
kolaylastirmak için yapilandirilmis polinükleotit dizilerine,
bir konakçi hücrede fonksiyonel bir veya daha fazla
düzenleyici diziye islevsel olarak bagli olabilir.
Polinükleotid dizileri, normal olarak konakçi genomda bulunan
endojen bir düzenleyicinin kontrolü altinda yerlestirilebilir.
Mevcut tarifnamenin polinükleotit dizileri, islevsel olarak
bagli bir düzenleyici dizinin kontrolü altinda, ayrica
transkripsiyonunu ve/veya sonuçtaki transkriptin kararliligini
avantajli bir sekilde etkileyen ek dizilerle kusatilabilir. Bu
tür* diziler genellikle düzenleyicinin yukari yönünde 've/veya
ekspresyon yapisinin 3' ucunun asagi yönünde bulunur.
Düzenleyici bir dizi ve yapisal bir nükleotid dizisi ile
ilgili olarak kullanilan “islevsel olarak bagli” terimi,
düzenleyici dizinin bagli yapisal nükleotit dizisinin
düzenlenmis ekspresyonuna neden oldugu anlamina gelir.
nükleotid dizisiin yukari yönünde, içinde veya asagi yönünde
bulunan ve transkripsiyonun, RNA isleminin veya kararliliginin
zamanlamasi ve seviyesini veya miktarini veya iliskili yapisal
nükleotid dizisinin translasyonunu etkileyen nükleotid
dizileri ile ilgildir. Düzenleyici diziler, düzenleyiciler,
translasyon öncü dizileri, intronlar, arttiricilar, gövde-
döngü yapilari, represör baglama dizileri, bitis dizileri,
duraklama dzileri, poliadenilasyon tanima dizileri ve
benzerlerini içerebilir.
Nükleik asit ajanlari, arilara çok çesitli yollarla
verilebilir. Burada ayrintili olarak açiklandigi sekliyle, ari
besleme, hem besinsel hem de diger, örnegin tamamlayici
ihtiyaçlari saglamak için, aricilar arasinda yaygin bir
uygulamadir. Arilar genellikle bal ve polenle beslenirler,
fakat dogal olmayan besinleri de aldiklari bilinmektedir.
Arilar, bunlarla sinirli olmamakla birlikte, wheast (süzme
peynirde yetistirilen bir süt mayasi), soya fasulyesi unu,
maya (örnegin, bira mayasi, torula mayasi) ve kovanin içindeki
kuru karisim veya nemli bir kek olarak veya kovanin disindaki
açik besleyicilerdeki kuru bir karisim olarak soya fasulyesi
unu ve tek basina veya kombinasyon halinde verilen maya
ürünleri gibi çesitli besin maddeleri ile beslenebilir. Ayrica
seker veya bir seker surubu da yararlidir. Arilarin
tamamlayici besinine yüzde 10 ila yüzde 12 arasinda polen
ilavesi, lezzeti arttirir. Yüzde 25 ila yüzde 30'luk. polen
ilavesi, hayati aktivite için arilarin ihtiyaç duydugu temel
besinlerin kalitesini ve miktarini arttirir. Seker kamisi veya
pancar sekeri, izomerlestirilmis misir surubu ve tip-50 seker
surubu, bal arilarinin dogal beslenmesinde bal için tatmin
edici ornatimlaridir. Son ikisi arilar için sadece bir sivi
olarak saglanabilir.
Sivi besleme, kovanin içindeki arilara, örnegin asagidaki
yöntemlerden herhangi biri ile saglanabilir: friction-top
pail, kuluçka haznesi içindeki petekler, bölmeli tahta yemlik,
boardman yemlik vb. kuru seker, ters çevrilmis iç kapaga bir
veya iki parça konularak beslenebilir. Bir su kaynagi arilar
için her zaman açik olmalidir. Bulusun bir yönünde, agaç
kabuklari, mantar veya plastik sünger gibi yüzen desteklerin
bulundugu kap veya tepsiler öngörülur. Arilar için tamamlayici
besinlerin detayli tarifleri, örnegin Standifer ve ark.
tarafindan “Supplemental Feeding of Honey Bee Colonies” (USDA,
Agriculture Information Bulletin No. 413) yayininda
bulunabilir.
Bir kovandaki bütün arilar, burada detayli olarak açiklanan
patojen hastaliklara karsi potansiyel olarak hassastir. Bu
nedenle, bulusun bazi yönlerine göre, arilar, bal arilari,
avci arilari, kovan arilari ve benzerleri olabilir.
Ayrica, patojenlerin neden oldugu hastaliklara karsi
duyarliligi azaltmak için bir yöntem saglanmaktadir, bu
yöntem, arinin, bir patojen RNA'nin› bir polipeptidinin
ekspresyonunu asagi yönde dzenleyen ve/Veya bir ari patojen
RNA'sinin klevajina ve/Veya bozulmasina neden olan bir nükleik
asit ajanini içeren bir nükleik asit veya nükleik asit
yapisinin etkili bir miktari üzerinde beslenmesiyle
gerçeklestirilir. Oligonükleotidleri ve/veya polinükleotidleri
besleyerek bir ari kolonisinin veya ari kovaninin ari
patojenlerine karsi duyarliliginin azaltilmasi için yöntemler
öngörülmektedir. Bu nedenle, bazi yönlerden, mevcut tarifname,
kovandaki birkaç ari ile bir kovandaki ve kovanin çevresindeki
alandaki tüm ari popülasyonuna kadar herhangi bir sayida
arinin yararlanmasi için kullanilabilir. Takdir edilecektir
ki, ari patojen enfeksiyonunun ve infestasyonunun azaltilmasi
için oligonükleotidlerin ve/veya polinükleotitlerin
beslenmesine ek olarak, dogru sanitasyonun uygulanmasi
(örnegin, istila edilmis kovanlarin yeniden kullanimindan
kaçinarak), tedavinin etkinligini ve enfeksiyonlarin
önlenmesini arttirabilir.
Bu basvuru ile olgunlasan bir patentin ömrü boyunca, ari
patojen proteinlerinin asagi yönde düzenlenmesine yönelik pek
çok ilgili yöntemin gelistirilecegi ve ari patojen
proteininin asagi yönde düzenlenmesi” veya ari patojen
polipeptidinin asagi yönde düzenlenmesi” terimlerinin
kapsaminin, bu gibi tüm yeni teknolojileri bir öncelige dahil
edilmesi amaçlanmaktadir.
Burada kullanildigi sekliyel “yaklasik” terimi % ± lO'dur.
terimleri ve bunlarin çekimleri “içeren ancak sinirli olmayan”
anlamina gelir. Bu terim, “olusan” ve “temelde olusan”
terimlerini kapsamaktadir.
bilesenler ve/veya adimlar içerebilecegi, ancak sadece ek
bilesenlerin ve/Veya adimlarin, istemde belirtilen bilesimin
veya yöntemin temel ve yeni özelliklerini maddi olarak
Burada kullanildigi sekliyle “bir” ifadesinin tekil formlari,
aksi açikça belirtilmedikçe çoklu referanslar içerir. Örnegin
dahil olmak üzere çok sayida bilesen içerebilir.
Bu basvuruda, mevcut tarfinameye uygun çesitli yönler belirli
bir aralik içinde sunulabilir. Aralik içinde yapilan
açiklamanin yalnizca kolaylik saglanmasina ve konunun kisa
tutulmasina yönelik oldugu ve bulus kapsamina dayali olarak
esnek› olmayan sinirlama olarak yorumlanmamasi gerektigi
anlasilmalidir. Buna göre, bir araligin açiklamasinin söz
konusu araligin mümkün olan tüm alt araliklarini ve ayrica söz
konusu araliktaki münferit nümerik degerleri spesifik olarak
açikladigi degerlendirilmelidir. Örnegin l ila 6 gibi bir
araliga iliskin açiklamanin, spesifik olarak 1 ila 3, 1 ila 4,
1 ila 5, 2 ila 4, 2 ila 6, 3 ila 6 gibi alt araliklari ve söz
konusu aralikta bulunan 1, 2, 3, 4, 5 ve 6 gibi tekil
rakamlari içerdigi anlasilmalidir. Bu, aralik genisliginden
bagimsiz olarak geçerlidir.
Burada nümerik bir aralik belirtildiginde söz konusu aralik,
söz konusu aralikta belirtilen her türlü sayiyi (kesir ya da
tam) içerecektir. “Araliginda bulunan/araliginda degisiklik
gösteren” birinci belirtim sayisi ve ikinci belirtim sayisi,
sayisindan ikinci belirtim sayisina ifadeleri birbirinin
yerine kullanilabilir ve belirtilen birinci ve ikinci
sayilarla bunlarin arasindaki tüm kesit ve integral sayilari
içerir. Burada kullanildigi sekliyle “yöntem" terimi,
kimyasal, farmakolojik, biyolojik, biyokimyasal ve tibbi
disiplinleri tatbik edenler açisindan bilinen usulleri,
yollari, teknikleri ve prosedürleri ya da bu kisilerin
bildiklerinden kolaylikla gelistirilen usul, yol, teknik ve
prosedürler dahil ancak bunlarla sinirli olmamak üzere
belirtilen bir görevi tamamlamaya yönelik usulleri, yollari,
teknikleri ve prosedürleri ifade eder.
Burada kullanildigi sekliyle “tedavi etme” terimi, bir durumun
ilerlemesini önemli ölçüde inhibe eden, yavaslatan veya
tersine çeviren, klinik veya estetik olarak büyük ölçüde
iyilestiren, bir durumun semptomlarini hafifleten veya bir
durumun klinik veya estetik görünümünün büyük ölçüde önlendigi
belirtileri içerir.
Konunun anlasilmasi açisindan ayri yönlerde açiklanan mevcut
bulusa uygun belirli özelliklerin tek bir yönde kombinasyon
halinde sunulmasi da kabul edilir. Aksine, konunun kisaligini
saglamak. üzere tek bir yönüne göre açiklanan çesitli bulus
özellikleri, mevcut bulusa uygun baska yönlerde ayrica ya da
her türlü uygun alt kombinasyonda ya da bunlara uygun sekilde
saglanabilir. Söz konusu yönün, çesitli yönler baglaminda
açiklanan belirli özellikler olmadan uygulanamaz hale
gelmemesi halinde söz konusu özellikler bu yönlerin esas
özellikleri olarak düsünülmemelidir.
Burada betimlendigi ve asagidaki istemler kisminda
belirtildigi üzere mevcut bulusa uygun çesitli yönlere
asagidaki örneklerde deneysel destek saglanmistir.
REFERANS ÖRNEKLER
Bu bölümde, yukaridaki açiklamalarla birlikte mevcut
tarfinameye uygun bazi yönleri sinirlandirici olmayan sekilde
gösteren asagidaki örneklere basvurulmaktadir.
Genel olarak burada kullanilan nomenklatür ve mevcut bulusta
faydalanilan laboratuvar prosesleri moleküler, biyokimyasal,
mikrobiyolojik ve rekombinant DNA tekniklerini içerir. Söz
konusu teknikler literatürde detayli sekilde açiklanmaktadir.
Örnek için bakiniz, “Molecular Cloning: A laboratory Manual”
Sambrooket al., (1989); “Current Protocols in Molecular
Biology" Volumes 1-111 Ausubel, R. M., ed. (1994); Ausubel et
al., “Current Protocols in Molecular Biology”, John Wiley and
Sons, Baltimore, Maryland (1989); Perbai, “A Practical Guide
to Molecular` Cloning", John Wiley & Sons, New York (1988);
Watson etal., “Recombinant DNA”, Scientific American Books,
New York; Birren etal. (eds) “Genome Analysis: A laboratory
Manual Series”, Vols. 1-4, Cold Spring Harbor Laboratory
Press, NewYork(1998); methodologies as set forth in U.S. Pat.
J. E., ed. (1994); “Culture of Animal Cells -A Manual of Basic
Technique” by Freshney, Wiley-Liss, N. Y. (1994), Third
Edition; “Current Protocols in Immunology” Volumes 1-111
Coligan, J. E., ed. (1994); Stites et al. (eds), “Basic and
Clinical Immunology” (8th Edition), Appleton & Lange, Norwalk,
CT (1994); Mishell and Shiigi (eds), “Selected Methods in
Cellular Immunology”, W. H. Freeman and Co., New York (1980);
available immunoassays are extensively described in the patent
and scientific literature, see, for example, U.S. Pat. Nos.
,281,521; “Oligonucleotide Synthesis" Gait, M. J., ed.
(1984); “Nucleic Acid Hybridization” Harnes, B. D., and
Higgins S. J., eds. (1985); “Transcription and Translation”
Harnes, B. D., and Higgins S. J., eds. (1984); “Animal Cell
Culture” Freshney, R. 1., ed. (1986); “lmmobilized Cells and
Enzymes” IRL Press, (1986); “A Practical Guide to Molecular
Cloning” Perbai, B., (1984) and “Methods in Enzymology” Vol.
1-317, Academic Press; “PCR Protocols: A Guide To Methods And
Applications", Academic Press, San Diego, CA (1990); Marshak
et al., “Strategies for Protein Purification and
Characterization - A Laboratory Course Manual” CSHL Press
(1996). Diger genel referanslar bu doküman boyunca
saglanmistir. Burada belirtilen prosedürlerin teknikte iyi
bilindigine ve okuyucu açisindan kolaylik saglayacak sekilde
temin edildiginde inanilmaktadir. Söz konusu eserlerde ihtiva
edilen tüm bilgiler, buraya referansla dahil edilmistir.
Arilarin IAPV'ye farkli olarak duyarli olup olmadigini
belirlemek için virüs titresinin ari sagkalimi üzerindeki
etkisi test edilmistir. Arilar, plastik kaplara konulmus ve
artan IAPV konsantrasyonlarina (besleme çözeltisinde) maruz
birakilmistir. Kovandaki arilarin hayatta kalmasi 7 günlük bir
süre boyunca izlenmistir.
MALZEMELER VE YÖNTEMLER
0,5 litrelik plastik kaplar içine 50 ari veya 0,25 litrelik
plastik kaplar içine 30 ari sokuldu.
Tüm kaplar, hava akisini saglamak ve sakaroz çözeltisi ve su
ile beslenmeyi saglamak için önceden hazirlanmistir. Arilar,
°C'lik sabit bir sicaklikta karanlikta tutuldu ve günde bir
kez 2 ml % 50 sakaroz çözeltisi ve kaplardaki haznelere
konulan 1 ml su ile beslenmistir.
Sakaroz çözeltisine, sakaroza eklenmis 900 mikrolitre sakaroz
çözeltisinde artan dozlarda (0,0001 ila 0,1
mikrogram/mikrolitre) IAPV dahil edildi: Dikey çizgili
çubuklar-100 ng/ul; Çapraz taranmis çubuklar-ID ng/ul; Noktali
çubuklar-1,0 ng/ul; Yatay çizgili çubuklar-0,1 ng/ul.
Kontroller (damali Çubuklar) Virüs eklenmemistir. Kaplardaki
ölü arilar günlük olarak sayildi ve ölü arilarin toplam
sayisi, kaba ilk giren ari sayisinin yüzdesi olarak
hesaplandi.
Bulgular
Sekil 1'de görüldügü üzere, 1. ve 2. günlerindeki ari
mortalitesi, tüm Viral konsantrasyonlar için ihmal edilebilir
düzeydedir. 3. Günden sonra 6 35 ila 6 60 (viral titreye bagli
olarak) kayda deger mortalite gözlendi ve 6. ve 7. günlerde
sabit bir sekilde % 70 ila % 85'e yükselmistir. Düsük viral
dozlarin baslangiçta daha yüksek Hwrtalite ile sonuçlandigi,
6. güne kadar yükseldigi, daha yüksek konsantrasyonlara maruz
kalan arilarda ölüm oraninin 3. günden itibaren artmaya devam
ettigi kaydedilmistir.
Örnek II
Viral özgü dsRNA'nin beslemesi IAPV'nin neden oldugu bal
arilarinin akut hastaliklarini önlemektedir
Viral enfeksiyona sindirilmis IAPV dsRNA'nin etkinligini
belirlemek için, bal arilarina 4 gün önce ve IAPV virüsü ile
enfeksiyondan 3 gün sonra lAPV'ye özgü ve kontrol dsRNA'si
besin içinde saglanmistir. Deney kovani basina ölü ari sayisi
sayilmis ve Hmleküler analiz için numune canli ve ölü arilar
toplanmistir.
MALZEMELER VE YÖNTEMLER
huni-kovan kolonilerinin kurulmasi: Sakin bir ari kovanindan
yaklasik 2 aylik genç kraliçeler, yaklasik 200 isçi ari ile
birlikte toplandi. Arilar, daha önce düzenli bir kovan
tarafindan insa edilmis olan bir mini petekle donatilmis mini
kovanlara aktarildi. Tüm mini kovanlar kapatildi ve sicaklik
kontrollü bir odaya (30 ° C) yerlestirildi.
dsRNA hazirlamasi: Ari genomuna entegre oldugu bilinen bir
34) ve intergenik bölgeye karsilik gelen IAPV dizileri (bazlar
düzenleyicisi arasinda bir plazmid içine klonlanmistir.
Plazmid DNA'nin yayilmasinin ardindan, T7 düzenleyiciler dahil
viral fragmanlari kesildi, jel-saflastirildi ve T7'ye yönelik
laboratuvar ortaminda transkripsiyon için sablonlar olarak
kullanildi (MEGAscriptm, Ambion, Austin TX). Reaksiyon ürünü,
DNaz sindirimine tabi tutuldu, ardindan fenol öztülemesi ve
etanol çökeltmesi yapildi. Yapilan son hazirlik, nükleaz
içermeyen su içinde çözüldü.
mini kovanlarda dsRNA beslemesi: Her bir petek üzerine 5 gr
polen takviyeli köfte konulmus ve gece boyunca steril bir
Petri kabindaki kovanin içine lO nü, % 50 sakaroz solüsyonu
eklenmistir. Besleme, 7 gün boyunca sürdürüldü ve daha sonra,
yalnizca, kraliçelerin yumurta birakmaya basladigi kovanlar
teste dahil edildi.
Aktif kovanlarin (yumurta birakan kraliçeler) kurulumundan
sonra, mini kovanlardan bazilari viral-spesifik ya da
nonspesifik kontrol (IAPVds ya da GFPds) ile takviye
edilmistir, bunlara kovanlara verilen lO ml % 50 seker
çözeltisi eklenmis, ari basina her besleme için yaklasik 1
mikrogram dsRNA'ya ayarlanmis ve tüm arilarin yaklasik olarak
ayni miktarda sakaroz çözeltisi tükettigi varsayilmistir.
dsRNA beslemesi alti gün boyunca devam etti.
mini kovanlarda IAPV enfeksiyonu: Aktif kovanlarda beslemeden
üç gün sonra, bazi koloniler % 50 agirlik/hacim sakaroz
çözeltisi (IAPV) içerisinde mikrolitre basina 0,01 mikrogram
devam etti. Canli ve ölü arilarin numuneleri (larvalar ve
yetiskinler), IAPV'nin her ardisik 7 gün boyunca sokuldugu her
bir mini-kovan girisinden günlük olarak toplandi. Toplanan her
ari sivi nitrojen içinde donduruldu ve beklemede olan
moleküler analizde -70 °C'de muhafaza edildi. Kolonilerin
canliligi, kovanlarin (dumansiz) açilmasi, mini petegin
çekilmesi ve mini peregin her iki taraftan fotograflanmasiyla
izlendi. Kovan petekleri günlük olarak fotograflandi ve kalan
canli arilarin sayisi izlendi. Fotograflar bir bilgisayara
indirildi ve her bir mini kovan için toplam ari sayisi
sayildi.
dsRNA toksisitesini test etmek için, baska bir kovan grubu,
lAPV'ye özgü dsRNA ile saglandi, fakat IAPV asilanmadi. Iki
set kovan ek kontrol görevi yapti: dsRNA ile tedavi edilmeyen
ve IAPV ile asilanmamis kovanlar ve dsRNA ile tedavi
edilmeyen, ancak IAPV ile asilanan kovanlar.
PT-PCR analizi: Nükleik Asitlerin Özütlenmesi: Toplami RNA,
TRIREAGENT yöntemi kullanilarak (Sigma, St. Louis MO, ABD)
korunmus arilardan öztülendi. Kisaca, RNA, santrifüj ile
çökeltme ve ayirma yoluyla özütlendi, daha sonra RNAsecure
çözeltisinde yeniden süspansiyon haline getirildi.
Gerçek zamanli PT-PCR: Ölçülen RNA miktarlari (viral
ekspresyon analizleri için 100 ng ve 188 rRNA internal
kontroller için lOO pg), Taqman revers transkriptazi (Applied
Biosystems, Foster City, CA) ile SYBR Green PCR master
karisimi kullanilarak tek adimli RT-PCR'ye tabi tutuldu.
Gerçek zamanli RT-PCR, GeneAmp PCR System 5700 (Applied
Biosystems) içinde gerçeklestirldi. Revers transkriptaz
olmadan veya sablonsuz olarak gerçeklestirilen reaksiyonlar
herhangi bir ürünle sonuçlanmadi.. PCR döngüleri asagidaki
gibi olmustur: 48 °C'da 30 dakikalik ve 95 °C'de 10 dakikalik
l döngü, bunu takiben her biri 95 °C'de 15 s, 60 °C'de 30 s ve
72 °C'de 45 s'lik 40 döngü.
Tablo III, gerçek zamanli RT-PCR dahil olmak üzere tüm lAPV
ile iliskili RT-PCR analizleri için primerleri göstermektedir:
Tablo III: PCR için kullanilan primerler
Primerler ve Amaç (5'-3') DIZIAmplifiye Ürün boyutu
in dizi (bp)
(GenBank #)
FTAATACGACTCACTATAGGGCGACCA (NC_ düzenleyici
RTAATACGACTCACTATAGGGCGATA 40 (kalin))
FTAATACGACTCACTATAGGGCGAGAC (NC_ düzenleyici
ACAATTCTTGAAATGCCAAACT 41 009025) si hariç
RTAATACGACTCACTATAGGGCGACAT 42 (kalin))
F: TAATACGACTCACTATAGGGCGAGC (U87625) düzenleyici
CAACACTTGTCACTACTTTCTCTT 43 si hariç
R: TAATACGACTCACTATAGGGCGAAG44 (kalin))
zamanli PCR (XM_
Northern-Blot Analizi: Toplam RNA, tedavi edilmis ve kontrol
arilarindan özütlendi. RNA'ya %l,8 formaldehit eklenmis ve 65
°C'ye isitilmistir. Her serit için 15 pg RNA 5 (gerçek zamanli
PCR sonuçlarinin isiginda, asilanmis bitkilerin üst yapraklari
olmasi durumunda yalniz ,
karistirilarak 70 V, 4°C'de 1,2 agaroz jel üzerinde
elektroforeze tabi tutuldu. Önceden tarif edilen amplifiye
edilmis lAPV-RNA ürünü digoksigenin etiketliydi ve
hibridizasyon için bir prob olarak kullanildi. Tespit, DIG
lüminesan algilama kiti (Roche Diagnostics GmbH, Mannheim,
Almanya) ile gerçeklestirilmistir. RNA boyutlari elektroforez
RNA Molecular Weight Markers I (Roche) ile karsilastirilarak
tahmin edildi. Hibridizasyon yüksek sikilikta gerçeklestirildi
Bulgular
Sekil 3'te gösterildigi üzere, IAPV ile asilanan arilar
arasinda (0. Günde) mortalite, tedavi edilen kontrollere (dolu
kareler) (% 75 mortalite) ve sahte tedavi edilen kontrollere
(GFP-dsRNA, bos kareler) (% 75 mortalite) göre IAPV-dsRNA (bos
daireler) ile tedavi edilen arilarda önemli ölçüde azaldi (%
dsRNA ile tedavi edilen ve IAPV ile asilanan arilarin
mortalitesi, enfekte olmayan arilar (dolu daireler) ile ilgili
olarak artis gösterme egilimindeydi, ancak fark istatistiksel
anlama ulasmadi (LSmeans kontrast, F1,82 = 3,25, NS).
Sekil 3, ardisik IAPV enfeksiyonundan arilarin korunmasinda
lAPV-dsRNA'nin beslenmesinin etkinligini açikça gösterirken,
ilgisiz dsRNA (sahte tedaviye tabi tutulan Kontroller-GFP)
arilarin enfeksiyondan korunmasinda basarisizdir. Sahte
dsRNA'nin yutulmasi, tedavi edilmemis kontrollere göre
arilarin sagkalimi üzerinde hiçbir etkiye sahip degildir.
Sonraki IAPV asilamasi olmaksizin dsRNA'larin yutulmasi (IAPV
ve GFP'nin), herhangi bir sekilde arilara zarar vermemistir,
bu da dsRNA'nin toksisitesinin yoklugunu göstermektedir.
RT-PCR kullanilarak RNA tespit edilirken, dsRNA-IAVP'nin
arilardaki IAPV enfeksiyonu üzerindeki etkisi açiktir. Sekil
4A, IAPV-dsRA ile tedavi edilen arilarin, yalniz rezidüel
virüs transkriptleri (serit 1 ve 2) tasidigini, diger taraftan
tedavi edilmeyen (serit 4) ve GFP-dsRNA ile tedavi edilen
arilarda (serit 3) kayda deger miktarlarda virüs
transkriptleri tespit edildiini göstermektedir. Sekil 4B'deki
serit 1 ila 5'deki (aktin internal kontroller) bant büyüklügü
Ve yogunlugunun kimligi ile gösterildigi gibi, tüm numuneler
karsilastirilabilir miktarlarda sablon RNA içerir.
Gerçek zamanli PCR kullanarak, Sekil 5, IAPV-dsRNA ile tedavi
edilen ari popülasyonlarinda tespit edilen IAPV' düzeyindeki
güçlü düsüsü göstermektedir. IAPV ile asilamadan sonraki
dördüncü günde, IAPV-dsRNA ile tedavi edilmeyen ya da ilgisiz
(GFP) dsRNA (Sekil 5) ile tedavi edilen arilarda tespit edilen
düzeyle karsilastirildiginda, IAPV-dsRNA ile tedavi edilen
arilarda yaklasik olarak iki büyüklügüden (2 log birimi) daha
az IAPV tespit edildi. Çok az istisna disinda, kraliçeler ve
birkaç bakici ari, IAPV enfeksiyonundan, CCD'den etkilenen
kovanlari animsatan bir durumdan kurtuldu. Bu nedenle, dsRNA-
edilen arilardaki viral enfeksiyon ve proliferasyon
seviyelerindeki yogun azalmadan kaynaklanmaktadir.
Bal aralarinda yutulan IAPVCye özgü dsRNA'nin sonucu: dsRNA-
korumasinin etki mekanizmasini daha iyi anlamak için, dsRNA-
toplam RNA Özütlendi, bir nükleaz paneli ile parçalanmaya
birakildi ve PAGE üzerine ayrildi. Sekil 6'da görülebildigi
üzere (bkz. RNase A ile dijesiyonu, DNase I ile sindirimi ve
RNase A ve RNase II ile sindirimini temsil eden serit l, 2 ve
3), tedavi edilen arilarda dsRNA'yi temsil eden bir 500 baz
çifti bandin varligi (RNase A ve DNase I dirençli, ve RNase
yutulmasini ve sürekliligini göstermektedir.
dsRNA-IAPV ile tedavi edilen ve kontrol arilarindan öztülenen
RNA ayrildiginda, boyandiginda ve IAPV'ye özgü diziler için
problandiginda› (bkz. Sekil 7), yalniz dsRNA- IAPV' arilardan
RNA'da az IAPV'ye özgü dizilerin varligi (bkz. Sekil 7, serit
4-7'ye karsilik Sekil 7, serit 3) tespit edildi. Bu nedenle,
dsRNA-IAPV'nin yutulmasi, küçük IAPV'ye özgü peptitlerin
üretilmesine ve tedavi edilen hücrelerde IAVP
reprodüksiyonunun susturulmasina yol açan bir RNAi yolagini
baslatir.
Birlikte alindiginda, bu sonuçlar, lAPV-dsRNA'nin bir segmenti
ya da segmentleri ile beslenerek arilarda lAPV'nin
susturulabildigini göstermektedir ve ayrica bir RNAi ile
ilgili susturma yolaginin aktivitesini göstermektedir. dsRNA
ile ortaya çikan susturma, IAPV enfeksiyonundan kaynaklanan
ari mortalitelerini büyük ölçüde azaltmak için yeterlidir.
Örnek III
spesifik dsRNA'nin büyük ölçekli alan testleri
Yutuluan IAPV dsRNA'nin gerçek alan kosullari altinda Viral
enfeksiyon üzerindeki etkinligini belirlemek ve koloni
sagliginin önemli parametreleri üzerinde etkileri
degerlendirmek için, örnek tam büyüklükteki kovanlardaki
arilara IAPV'ye özgü dsRNA'si, 4 gün önceden ve IAPV ile
enfeksiyondan 3 gün sonra besin içerisinde saglanmistir.
MALZEMELER VE YÖNTEMLER
Böcek malzemesi:
Asagidaki tedavilerden gelen bes ari havuzu; Uzaktan kontrol,
sadece lAPV-dsRNA, sadece IAPV ve lAPV'ye özgü dsRNA + IAPV
her defasinda 0. gün (Virüs uygulama günü), 7. gün ve bitis
noktasi (42. gün). Test birçok kez tekrarlanmistir.
RNA özütlenmesi:
Üretici tarafindan saglanan protokole göre Tri-Reaktif (Sigma,
ABD) kullanilarak RNA özütlemesi. Tüm numuneler DNAsel ile
tedavi edildi ve jel üzerine yüklenmeden önce yükleme tamponu
(% 90 Formamide, 0,05 Bromophenol Mavisi,% 0,05 Ksilen
siyanol) ile yeniden süspansiyon haline getirildi.
Jel elektroforezi ve Blot:
lO ug taze hazirlanmis RNA, nanodrop spektrofotometre
kullanilarak ölçüldü ve dantürasyon ortaminda %; 12 Akrilamid
jel (1:19 akrilamidzBis akrilamid orani) üzerine yüklendi (jel
7M Üre içerir).
Elektroforezden sonra numuneler, elektroblotlama yöntemi
kullanilarak pozitif yüklü naylon zara (Roch, ABD) aktarildi.
Melezleme ve Sinyal tespiti:
Zar, lAPV'ye özgü dsRNA'nin kendisinin dsRNA'sina karsilik
gelmeyen bir bölgeden alinan, taze hazirlanmis IAPV segmenti
DNA probu ile hibritlendi. Bu, üretici protokolüne göre DIG
easyhyb çözeltisinde (Roch, ABD) 42 °C'de DIG PCR prob
hazirlama kiti (Roche, ABD) kullanilarak yapildi. Zar iki kez
ZXSSC/% 0,1 SDS ile, daha sonra serlik olmasi için 65°C'de
0,1XSSC
göre DIG Washand Block Kit (Roch, USA) kullanarak tekrar
yikandi. Tespit CSPD-star Substrat (Roch, ABD) kullanilarak
hazirlandi. Pozitif kontrol, hibritlestirilmis diziye karsilik
gelen 21 nt DNA primeriydi.
Sinyal, Kodak tarafindan üretilen kemilumatörde 2 ila 12 saat
boyunca zar maruziyetiyle tespit edildi.
Bulgular
Bir kovana IAPVFdsRNA beslemesi, koloninin genel sagligini
etkilememektedir:
Ari koloni sagliginin temel parametreleri (kapali kuluçka
sayisi, kovandaki arilarin sayisi, dönen avcilar ve bal
üretimi), IAPV-dsRNA ile beslenen kovanlarda ve IAPV ile
enfeksiyon olmadan kontrol kovanlarinda degerlendirildi. Tablo
Tablo IV: IAPV-dsRNA ile tedavi edilen ve kontrol kovanlari
arasindaki karsilastirma
Saha testlerindeki ortalama parametreler
Toplam Kovandaki Dönen Bal
kapali tahmini avcilarin üretimi
kuluçka arilarin toplami (kg)
(cm2) toplami
lAPV'ye özgü
dsRNA (Virüs
Sonuç N.S. N.S. N.S. N.S.
Tablo IV, açik bir biçimde ölçülen parametrelerin hepsinde
tedavi edilen ve kontrol kovanlari arasinda önemli bir fark
göstermemektedir ve bu durum, IAPV enfeksiyonu olmadan IAPV-
dsRNA beslemesinin, arilar ve bütün olarak koloni için
tehlikesiz oldugunu göstermektedir.
Alan kosullari altinda tedavi edilmis arilardaki IAPV{ye özgü
siRNA'larin tespiti:
Sekiller llA ve llB, jel elektroforezi ve bal arisi RNA'sinin
bir lAPV'ye özgü prob ile hibritlenmesi ile tespit edilen IAPV
dizisine özgü siRNA'lari göstermektedir. 0. günde, tedavi
edilmis veya tedavi edilmemis arilarda lAPV'ye özgü siRNA'lar
tespit edilmedi (Sekil llB). 7. güne kadar, lAPV'ye özgü
siRNA'lar, sadece lAPV'ye özgü dsRNA ile beslenen ve IAPV ile
enfekte edilmis arilarda tespit edildi (Sekil llA, serit 6).
Deneyin sonunda, 42. günde, IAPV ile enfekte edilen arilarin
bir numunesinde (Sekil llA, serit 9) zayif bir biçimde IAPV-
dsRNA ile beslenen fakat IAPV ile enfekte olmayan arilarin bir
numunesinde zayif bir biçimde tespit edildi (Sekil llB, serit
7). Aksine, lAPV'ye özgü dsRNA'yi besleyen ve IAPV'ye maruz
birakilan (Sekil llA, serit 10 ve Sekil llB, serit 9)
arilardan alinan numunelerin her ikisi de, büyük ölçüde artmis
miktarlarda lAPV'ye özgü siRNA'lari gösteren. 21 bp'de güçlü
bir sinyal gösterdi. Tedavi edilmemis (uzaktan) kontrol
arilari (Sekil llA, serit 1 ve 7, SEKIL llB, serit 1 ve 6)
deney periyodu boyunca hiçbir sinyal göstermemislerdir, bu da
lAPV'ye özgü dizilerin yoklugunu göstermektedir. Bu sonuçlar,
lAPV'ye özgü siRNA'nin, sadece lAPV'ye özgü dsRNA ile beslenen
ve sadece IAPV enfeksiyonuna maruz kalan arilarda bulundugunu
göstermektedir. Tek bir hipotezle sinirlandirilmak
istenmemekle birlikte, IAPV enfeksiyonun siddetli oldugu
durumlarda, ilk lAPV'ye özgü dsRNA susturma sinyalinin
amplifiye edildigi (IAPV'ye özgü dsRNA arti IAPV enfeksiyonu,
Sekil lIA serit 10 ve Sekil llB serit 9), siRNA'larin güçlü
varligi, muhtemelen daha uzun bir yasam süresine yol açan
arilarda hastaligin siddetini kisitlar.
semptomlarini önler
Tek basina lAPV'ye özgü dsRNA'nin, tedavi edilmemis kontrole
göre herhangi bir fark yaratmadiktan sonra, sadece Virüs alan
koloniler ve lAPV'ye Özgü dsRNA + Virüsü, IAPV Semptomlarinin
dogrudan önlenmesinde tedavinin etkinligini test etmek için
karsilastirildi.
Koloni Çöküs Bozuklugu (CCD), geri dönen avcilarin sayisinin
azalmasindan dolayi, genellikle kovanin disinda bulunan ölü
arilarla, etkilenen koloni incelmesi ile karakterize edilir.
Sekil 8, virüsle enfekte olmus kolonilerde geri dönen
avcilarin sayisina lAPV-dsRNA'nin beslenmesinin etkisini
göstermektedir. Deneyin baslangicinda, tedaviler arasinda,
geri dönen avcilarin sayisinda küçük (önemsiz) bir fark
görülebilir. Bununla birlikte, IAPV enfeksiyonunu takiben daha
uzun bir süre ile, lAPV'ye özgü dsRNA + IAPV ile tedavi
edilmis koloniler, diger kolonilerle karsilastirildiginda,
daha fazla geri dönen avci oldugunu gösterdi. Tek bir hipotez
ile sinirlandirilmak istenmeksizin, birinci haftada
gözlemlenen geri dönen avcilarin sayisindaki ilk farkliliklar,
baglanabilir.
CCD'nin bir diger önemli parametre özelligi, kovandaki toplam
ari sayisinda bir azalmadir. Sekil 9, alan testi kovanlarinin
orta nokta analizinin, tedavi edilen ve tedavi edilmemis
koloniler arasindaki kovanlardaki tahmini ari sayisinda bir
farklilik göstermemesine ragmen, IAPV'ye Özgü dsRNA'nin
avantajlarinin, testin bitis noktasi tarafindan açikça ortaya
konuldugunu göstermektedir. Sekil 9, IAPV enfeksiyonunu takip
eden 5 haftada, enfekte olmamis kontrol ve IAPV'deki tahmini
ari sayisinin önemsiz ölçüde farkli oldugunu, buna karsilik
lAPV'ye özgü dsRNA alan kolonilerin önemli ölçüde daha nüfuslu
oldugunu göstermektedir (p <0,0l).
Bir kovanin bal üretimi sadece kolonilerdeki ari sayilarini
degil, genel saglik ve saglamliklarini yansitir. Uçus
aktivitesi verileri, tedavi edilen ve kontrol kolonilerinde
bal üretimi ile iliskilendirilmistir.
lAPV'ye özgü dsRNA ve kontrol kolonileri arasinda
karsilastirma yapildiginnda, uçus aktivitesi verileri bal
üretimi ile kuvvetli bir sekilde iliskiliydi. Sekil 10,
lAPV'ye özgü dsRNA + IAPV ile tedavi edilen kovanlarin, lAPV
ile enfekte olmus kovanlardan yaklasik üç kat daha fazla bal
ve enfekte olmamis kontrol kovanlarinin. bal miktarinin
neredeyse iki kati kadar üretildigini göstermektedir. Ayrica,
kayda deger miktarda bal üreten kovanlarin sayisi, lAPV'ye
özgü dsRNA'da, tedavi edilmemis Virüsle enfekte
kolonilerdekine kiyasla çok daha büyüktür. Dahasi, lAPV'ye
özgü dsRNA ile tedavi edilmis kolonilerin hiçbiri (% 0) deney
sirasinda ölmedi, tedavi edilmemis, virüsle enfekte olmus
kolonilerin 20'den dördü öldü (% 20) ve kontrol kolonilerinden
'den biri (% 5) öldü.
Birlikte ele alindiginda, bu sonuçlar, IAPV'nin bir segment
veya lAPV-dsRNA segmentleri ile beslenerek arilarin
susturulmasinin, enfekte kolonilerde IAVP'nin semptomlarinin
önlenmesinde etkili oldugunu ve ari kolonilerinin daha fazla
canliligini ve sasirtici sekilde gelistirilmis bal verimlerini
sagladigini göstermektedir.
Örnek IV
Arilarin ve ari kolonilerinin Viral patojenlere duyarliliginin
azaltilmasinda bir nükleik asit ajaninin kullaniminin
etkinligini arttirmak için, ari Viral dizileri dizi homolojisi
için karsilastirilmis ve çoklu ari virüs dizileri içeren bir
kompozit nükleik asit ajani tasarlanmistir.
Sekil 12, genomlari tamamen dizilenmis çesitli ari virüsleri
arasindaki filogenetik iliskiyi göstermektedir: Akut ari
paraliz Virüsü (ABPV) - GenBank AF, Kasmir
ari Virüsü (KBV) - GenBank AY, Torba
hastaligi Virüsü (SBV) - GenBank NC_, Kara
kraliçe hücre virüsü (BQCV) - GenBank AF,
Kakugo Virüsü (KV) - GenBank ABO, Deforme
kanat Virüsü (DWV) - GenBank AJ ve Israil
akut paraliz Virüsü (IAPV) - GenBank EF21938O (DIZI NO: 6).
ABPV GenBank AF ve KBV AY2757lO,a (DIZI NO:
9) yüksek homolojiye sahip olan IAPV'den diziler, Viral
genomlarin hizalanmasi yoluyla tanimlanmistir. KV GenBank
yüksek homolojiye sahip olan DWV'den diziler de Viral
genomlarin hizalanmasi yoluyla tanimlanmistir. Bunlara BQCV
genomu (DIZI NO: 1) ve SBV genomundan (DIZI NO: 2) diziler
eklenmis ve yukarida bahsedilen ari virüslerinin tamamina
(eklenen pT7 viral dizileriyle) yüksek dizi homolojisine sahip
olan bir kompozit nükleik asit yapisi üretilmistir (DIZI NO:
24, Sekil 13).
Tablo V çoklu ari virüsüne dirençli dsRNA olusturmak için
yararli primerleri göstermektedir:
Tablo V çoklu ari virüsüne dirençli dsRNA için
kullanilan primerler
Primerler ve Amaç (5'-3') DIZI plifiye Ürün boyutu
NO edilmis dizi (bp)
FzAAGAAATCAACCTTTCATGATG
(59 °C)
RzATCTCAATGTTGTCAATGAGA 25
(59 °C) 26
BQCV DIZI NO: 49 155
(60.7° C) R:
DWV/KV/VDV-l homolojisi DIZI NO: 50 153
SBV DIZI NO: 51 160
Bu çoklu ari Viral homolog dizisini içeren bir dsRNA ile
beslenen arilar, enfekte kolonilerdekir enfeksiyon› ve çesitli
ari viral enfeksiyonlarin semptomlarinin tedavisinde ve
önlenmesinde etkili olacaktigi anlasilacaktir. Yine ayrica,
tek bir hipotezle sinirlamaksizin, çoklu ari virüs yapisinin
(DIZI NO: 24) yüksek Çapraz türlerinin homolojisini yansitan
sayisiz konsensüs dizinin, henüz tanimlanmamis ve/veya
dizilenmemis ari virüsleri dahil olmak üzere birçok ari
virüsüne karsi etkili RNAi seklinde islenebildigini (hücrede,
dsRNA isleme enzimleriyle) akla getirmektedir.
Birden fazla tür ya da varyanta karsi korumada etkili olan
dsRNA için çoklu ari-patojen dizilerinin, örnegin yukarida
Tablo II'de ayrintilari verilen patojenik organizmalarin
dizileri kullanarak Viral olmayan ari patojenleri için benzer
sekilde belirlenebildigi anlasilaoaktir. Çoklu ari-patojen
dizileri, belirli bir patojen sinifi (örn., Virüsler,
bakteriler) içinde diziler içerebilir veya hatta farkli ve
çesitli patojen siniflari (örn., virüsler + bakteriler +
mantarlar, vb.) için etkili olan dizileri içerebilir.
CD-ROM Içerigi
Asagida, bu dokümana ekli olan ve basvuruyla birlikte teslim
edilen CD-ROM'larin dosya içerikleri listelenmistir. Dosya
bilgileri söyle saglanmistir: Dosya adi/bayt boyutu/olusturma
tarihi/isletim sistemi/makine formati.
CD-ROMl (1 dosya): Dizi Listeleri/11,3 MB/Pazartesi, 03 Kasim,
2008 /Notepad/PC.
1.44941
CD-ROM2 (1 dosya): Dizi Listeleri/11,3 MB/Pazartesi, 03 Kasim,
2008 /Notepad/PC.
l.44942
CD-ROM3 (1 dosya): Dizi Listeleri/11,3 MB/Pazartesi, 03 Kasim,
2008 /Notepad/PC.
REFERANS LISTESI
(Ek referanslar metinde belirtilmistir)
Araujo et al., Insect Mol. Biol 2006;36:683
Chen YP, et al Appl Environ Microbiol. 2006;72(l):606-ll
Paddison P.J., et al., Proc. Natl Acad. Sei. USA.
of Honey Bee Colonies” (USDA, Agriculture Information Bulletin
Strat et al., Nucleic Acids Research, 2006, Vol. 34, No. 13
Claims (8)
- ISTEMLER sekildeki bir nükleotit dizisisnin en az 21 bitisik nükleotidine tamamlayici bir RNA dizisi içeren bir izole edilmis çift Zincirli ribonükleik asidi (dsRNA) içeren bir ari tarafindan hazmedilebilir` bilesini ile olup, özelligi; dsRNA, toleransini arttirmak için bir yöntemde kullanilmak üzere enfekte olmus bir ari hücresinde Israil Akut Paralizi virüsünün (IAPV) bir gen ürününü asagi yönde düzenleyebilmesidir.
- 2. Istem 1'de tanimlandigi gibi ari tarafindan hazmedilebilir bilesim olup, özelligi; izole edilmis dsRNA'nin, Istem l'e göre kullanim. için DIZI NO: 33 veya 34'te belirtilen bir nükleotit dizisi içeren bir nükleik aside tamamlayici olan bir RNA dizisi içermesidir.
- 3. Istem 1 veya Z'den herhangi birinde tanimlandigi gibi ari tarafindan hazmedilebilir bilesini olup, özelligi; dsRNA'nin, Istem l'e göre kullanim için siRNA, shRNA ve miRNA'dan olusan gruptan seçilmesidir.
- 4. Istemler 1_ ila 3'ten herhangi birinde tanimlandigi gibi ari tarafindan hazmedilebilir bilesim olup, özelligi; ari tarafindan hazmedilebilir bilesimin, Istem l'e göre kullanim için kati formda olmasidir.
- 5. Istem l ila 3'ten herhangi birinde tanimlandigi gibi ari tarafindan hazmedilebilir bilesim olup, özelligi; ari tarafindan hazmedilebilir* bilesimin, Isteni l'e göre kullanim için sivi formda olmasidir.
- 6. Istemler 1. ila 5'ten herhangi birinde tanimlandigi gibi ari tarafindan hazmedilebilir bilesim olup, özelligi; ari tarafindan hazmedilebilir* bilesimin, Isteni l'e göre kullanim için protein içermesidir.
- 7. Istem l `e göre kullanim için istem 1 ila 6'dan herhangi birinde tanimlanan ari tarafindan hazmedilebilir bilesim olup, özelligi; bal arisinin bir koloni üyesi olmasi ve bal arisinin toleransinin arttirilmasinin koloninin IAPV'ye toleransini arttirmasidir.
- 8. Istem l'e göre kullanim için Istem 7'de tanimlananari tarafindan hazmedilebilir bilesim olup, Özelligi; proteinin, polen veya soya köftesi formunda olmasidir.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| US99624407P | 2007-11-07 | 2007-11-07 | |
| US12/222,949 US8097712B2 (en) | 2007-11-07 | 2008-08-20 | Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| TR201809375T4 true TR201809375T4 (tr) | 2018-07-23 |
Family
ID=40588755
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| TR2018/09375T TR201809375T4 (tr) | 2007-11-07 | 2008-11-03 | Koloni halinde yaşayan böceklerde viral hastalığa karşı tolerans kazandırma yöntemi. |
Country Status (10)
| Country | Link |
|---|---|
| US (4) | US8097712B2 (tr) |
| EP (5) | EP2703489B1 (tr) |
| AU (1) | AU2008325989B2 (tr) |
| BR (1) | BRPI0817367A2 (tr) |
| CA (1) | CA2704858C (tr) |
| HK (1) | HK1149047A1 (tr) |
| IL (2) | IL254692B (tr) |
| TR (1) | TR201809375T4 (tr) |
| WO (1) | WO2009060429A2 (tr) |
| ZA (1) | ZA201003861B (tr) |
Families Citing this family (50)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US8097712B2 (en) | 2007-11-07 | 2012-01-17 | Beelogics Inc. | Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof |
| BRPI1007708A2 (pt) * | 2009-05-05 | 2020-08-18 | Beeologics Inc | agente do ácido nucleico isolado, construção de ácido nucleico, ácido nucleico isolado, composição ingerível pelas abelhas, método para reduzir a susceptibilidade de uma abelha a infecção por nosema e método para reduzir a susceptibilidade das abelhas melíferas à infecçção por nosema |
| WO2011017137A2 (en) * | 2009-08-03 | 2011-02-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating insects |
| WO2011021171A1 (en) | 2009-08-21 | 2011-02-24 | Beeologics, Llc | Preventing and curing beneficial insect diseases via plant transcribed molecules |
| CN102906263B (zh) | 2009-10-14 | 2017-05-31 | 耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展公司 | 用于控制蜂中的瓦螨的组合物 |
| US8962584B2 (en) | 2009-10-14 | 2015-02-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. | Compositions for controlling Varroa mites in bees |
| MX2012010479A (es) | 2010-03-08 | 2012-10-09 | Monsanto Technology Llc | Moleculas polinucleotidicas para regulacion genetica en plantas. |
| CA2848680C (en) | 2011-09-13 | 2020-05-19 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| EP3296402B1 (en) | 2011-09-13 | 2020-04-15 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
| EP2755988B1 (en) | 2011-09-13 | 2018-08-22 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
| EP2755466A4 (en) | 2011-09-13 | 2015-04-15 | Monsanto Technology Llc | METHODS AND COMPOSITIONS FOR CONTROLLING WEEDS |
| US10829828B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-11-10 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| US10806146B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-10-20 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| US10760086B2 (en) | 2011-09-13 | 2020-09-01 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| CN102504023B (zh) * | 2011-11-03 | 2013-09-11 | 辽宁医学院 | 一种卵黄抗体的制备方法、用该方法制得的卵黄抗体及其应用 |
| US10240161B2 (en) | 2012-05-24 | 2019-03-26 | A.B. Seeds Ltd. | Compositions and methods for silencing gene expression |
| US10683505B2 (en) | 2013-01-01 | 2020-06-16 | Monsanto Technology Llc | Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression |
| MX2015008611A (es) | 2013-01-01 | 2016-02-03 | Seeds Ltd Ab | Metodos para introducir dsrna en semillas de plantas para modular la expresion genetica. |
| EP2967082A4 (en) | 2013-03-13 | 2016-11-02 | Monsanto Technology Llc | METHOD AND COMPOSITIONS FOR WEED CONTROL |
| BR112015023051A2 (pt) | 2013-03-13 | 2017-11-14 | Monsanto Technology Llc | método para controle de ervas daninhas, composição herbicida, cassete de expressão microbiano e método de produção de polinucleotídeo |
| US10568328B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-25 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| US20160032252A1 (en) * | 2013-04-15 | 2016-02-04 | The University Of Warwick | Strain of deformed wing virus (dwv) |
| JP6668236B2 (ja) | 2013-07-19 | 2020-03-18 | モンサント テクノロジー エルエルシー | Ｌｅｐｔｉｎｏｔａｒｓａ防除用組成物及びその方法 |
| US9850496B2 (en) | 2013-07-19 | 2017-12-26 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling Leptinotarsa |
| US20150123801A1 (en) * | 2013-11-01 | 2015-05-07 | Eltopia Communications, LLC | Monitoring the state of a beehive |
| MX2016005778A (es) | 2013-11-04 | 2016-12-20 | Monsanto Technology Llc | Composiciones y metodos para controlar infestaciones de plagas y parasitos de los artropodos. |
| UA119253C2 (uk) * | 2013-12-10 | 2019-05-27 | Біолоджикс, Інк. | Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл |
| AR099092A1 (es) | 2014-01-15 | 2016-06-29 | Monsanto Technology Llc | Métodos y composiciones para el control de malezas utilizando polinucleótidos epsps |
| EP3125676A4 (en) | 2014-04-01 | 2018-02-14 | Monsanto Technology LLC | Compositions and methods for controlling insect pests |
| CA2953347A1 (en) | 2014-06-23 | 2015-12-30 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for regulating gene expression via rna interference |
| US11807857B2 (en) | 2014-06-25 | 2023-11-07 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for delivering nucleic acids to plant cells and regulating gene expression |
| CN114009454A (zh) | 2014-07-29 | 2022-02-08 | 孟山都技术公司 | 用于控制昆虫害虫的组合物和方法 |
| GB2533618B (en) * | 2014-12-23 | 2019-11-13 | The Marine Biological Ass Of The United Kingdom | Type B DWV for use in superinfection exclusion protection of Apis mellifera against Type A DWV |
| CN108064288B (zh) | 2015-01-22 | 2021-11-26 | 孟山都技术公司 | 用于控制叶甲属的组合物和方法 |
| US20180002692A1 (en) * | 2015-01-30 | 2018-01-04 | Anushree Chatterjee | Sequence Specific and Organism Specific Antimicrobials and Related Materials and Methods |
| EP3302053B1 (en) | 2015-06-02 | 2021-03-17 | Monsanto Technology LLC | Compositions and methods for delivery of a polynucleotide into a plant |
| US10655136B2 (en) | 2015-06-03 | 2020-05-19 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for introducing nucleic acids into plants |
| WO2017030449A1 (en) * | 2015-08-20 | 2017-02-23 | Lester Philip John | Viruses for biocontrol of argentine ants |
| WO2017037605A1 (en) | 2015-08-28 | 2017-03-09 | North-West University | A method and composition for treating bees against varroa mites |
| CN109312344A (zh) | 2016-01-26 | 2019-02-05 | 孟山都技术公司 | 用于控制昆虫害虫的组合物和方法 |
| US11382989B2 (en) | 2017-07-07 | 2022-07-12 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Engineered microbial population |
| CN108318683B (zh) * | 2018-03-27 | 2019-04-16 | 中国农业科学院蜜蜂研究所 | 一种快速诊断以色列急性麻痹病毒试纸及其应用 |
| US11185079B2 (en) | 2018-09-26 | 2021-11-30 | Greenlight Biosciences, Inc. | Control of Coleopteran insects |
| US20210395738A1 (en) | 2018-11-08 | 2021-12-23 | Greenlight Biosciences, Inc. | Control of insect infestation |
| US11666056B2 (en) | 2019-09-05 | 2023-06-06 | Greenlight Biosciences, Inc. | Methods and compositions for control of arthropod pests |
| CN112538548A (zh) * | 2020-12-04 | 2021-03-23 | 福州海关技术中心 | 一种检测蜜蜂克什米尔病毒的引物组和探针及检测方法 |
| WO2022175356A1 (en) * | 2021-02-17 | 2022-08-25 | Viralga Sas | Control of green algae blooms |
| CN112853003A (zh) * | 2021-03-04 | 2021-05-28 | 福州海关技术中心 | 一种检测蜜蜂急性麻痹病毒的引物组和探针与应用及其检测方法 |
| US20230272395A1 (en) * | 2022-02-28 | 2023-08-31 | The United States Of America, As Represented By The Secretary Of Agriculture | Engineered microalgae feed to improve honey bee pathogen resistance and nutrition |
| CN116179608B (zh) * | 2023-01-05 | 2024-03-01 | 昆明理工大学 | 一种dsRNA在免疫缺陷中华蜜蜂模型构建中的应用 |
Family Cites Families (548)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE288618C (tr) | 1911-10-16 | 1915-11-10 | ||
| US3687808A (en) | 1969-08-14 | 1972-08-29 | Univ Leland Stanford Junior | Synthetic polynucleotides |
| US3996345A (en) | 1974-08-12 | 1976-12-07 | Syva Company | Fluorescence quenching with immunological pairs in immunoassays |
| US3984533A (en) | 1975-11-13 | 1976-10-05 | General Electric Company | Electrophoretic method of detecting antigen-antibody reaction |
| US4469863A (en) | 1980-11-12 | 1984-09-04 | Ts O Paul O P | Nonionic nucleic acid alkyl and aryl phosphonates and processes for manufacture and use thereof |
| US5023243A (en) | 1981-10-23 | 1991-06-11 | Molecular Biosystems, Inc. | Oligonucleotide therapeutic agent and method of making same |
| US4476301A (en) | 1982-04-29 | 1984-10-09 | Centre National De La Recherche Scientifique | Oligonucleotides, a process for preparing the same and their application as mediators of the action of interferon |
| US4735250A (en) * | 1982-05-28 | 1988-04-05 | Allied Automation Systems, Inc. | Dual tire seal inflator |
| US5094945A (en) | 1983-01-05 | 1992-03-10 | Calgene, Inc. | Inhibition resistant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthase, production and use |
| US4535060A (en) | 1983-01-05 | 1985-08-13 | Calgene, Inc. | Inhibition resistant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthetase, production and use |
| JPS60179523A (ja) | 1983-11-10 | 1985-09-13 | ル−ク・ラメレン・ウント・クツプルングスバウ・ゲゼルシヤフト・ミツト・ベシユレンクテル・ハフツング | トルク伝達装置 |
| US5331107A (en) | 1984-03-06 | 1994-07-19 | Mgi Pharma, Inc. | Herbicide resistance in plants |
| US4761373A (en) | 1984-03-06 | 1988-08-02 | Molecular Genetics, Inc. | Herbicide resistance in plants |
| US5304732A (en) | 1984-03-06 | 1994-04-19 | Mgi Pharma, Inc. | Herbicide resistance in plants |
| US5550111A (en) | 1984-07-11 | 1996-08-27 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | Dual action 2',5'-oligoadenylate antiviral derivatives and uses thereof |
| US4581847A (en) | 1984-09-04 | 1986-04-15 | Molecular Genetics Research And Development | Tryptophan overproducer mutants of cereal crops |
| DE3587548T2 (de) | 1984-12-28 | 1993-12-23 | Plant Genetic Systems Nv | Rekombinante DNA, die in pflanzliche Zellen eingebracht werden kann. |
| US5185444A (en) | 1985-03-15 | 1993-02-09 | Anti-Gene Deveopment Group | Uncharged morpolino-based polymers having phosphorous containing chiral intersubunit linkages |
| US5166315A (en) | 1989-12-20 | 1992-11-24 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
| US5034506A (en) | 1985-03-15 | 1991-07-23 | Anti-Gene Development Group | Uncharged morpholino-based polymers having achiral intersubunit linkages |
| US5405938A (en) | 1989-12-20 | 1995-04-11 | Anti-Gene Development Group | Sequence-specific binding polymers for duplex nucleic acids |
| US5235033A (en) | 1985-03-15 | 1993-08-10 | Anti-Gene Development Group | Alpha-morpholino ribonucleoside derivatives and polymers thereof |
| EP0218571B1 (en) | 1985-08-07 | 1993-02-03 | Monsanto Company | Glyphosate-resistant plants |
| US4940835A (en) | 1985-10-29 | 1990-07-10 | Monsanto Company | Glyphosate-resistant plants |
| US4810648A (en) | 1986-01-08 | 1989-03-07 | Rhone Poulenc Agrochimie | Haloarylnitrile degrading gene, its use, and cells containing the gene |
| EP0242236B2 (en) | 1986-03-11 | 1996-08-21 | Plant Genetic Systems N.V. | Plant cells resistant to glutamine synthetase inhibitors, made by genetic engineering |
| US5188958A (en) | 1986-05-29 | 1993-02-23 | Calgene, Inc. | Transformation and foreign gene expression in brassica species |
| US5273894A (en) | 1986-08-23 | 1993-12-28 | Hoechst Aktiengesellschaft | Phosphinothricin-resistance gene, and its use |
| US5013659A (en) | 1987-07-27 | 1991-05-07 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase |
| US5378824A (en) | 1986-08-26 | 1995-01-03 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase |
| US5605011A (en) | 1986-08-26 | 1997-02-25 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Nucleic acid fragment encoding herbicide resistant plant acetolactate synthase |
| US5004863B2 (en) | 1986-12-03 | 2000-10-17 | Agracetus | Genetic engineering of cotton plants and lines |
| US5015580A (en) | 1987-07-29 | 1991-05-14 | Agracetus | Particle-mediated transformation of soybean plants and lines |
| US5276019A (en) | 1987-03-25 | 1994-01-04 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
| US5264423A (en) | 1987-03-25 | 1993-11-23 | The United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services | Inhibitors for replication of retroviruses and for the expression of oncogene products |
| US5145783A (en) | 1987-05-26 | 1992-09-08 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-endolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthase |
| US5312910A (en) | 1987-05-26 | 1994-05-17 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthase |
| US4971908A (en) | 1987-05-26 | 1990-11-20 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthase |
| US4924624A (en) | 1987-10-22 | 1990-05-15 | Temple University-Of The Commonwealth System Of Higher Education | 2,',5'-phosphorothioate oligoadenylates and plant antiviral uses thereof |
| US5188897A (en) | 1987-10-22 | 1993-02-23 | Temple University Of The Commonwealth System Of Higher Education | Encapsulated 2',5'-phosphorothioate oligoadenylates |
| US5922602A (en) | 1988-02-26 | 1999-07-13 | Biosource Technologies, Inc. | Cytoplasmic inhibition of gene expression |
| JPH03503894A (ja) | 1988-03-25 | 1991-08-29 | ユニバーシィティ オブ バージニア アランミ パテンツ ファウンデイション | オリゴヌクレオチド ｎ‐アルキルホスホラミデート |
| US5278302A (en) | 1988-05-26 | 1994-01-11 | University Patents, Inc. | Polynucleotide phosphorodithioates |
| US5216141A (en) | 1988-06-06 | 1993-06-01 | Benner Steven A | Oligonucleotide analogs containing sulfur linkages |
| US5258300A (en) | 1988-06-09 | 1993-11-02 | Molecular Genetics Research And Development Limited Partnership | Method of inducing lysine overproduction in plants |
| US5416011A (en) | 1988-07-22 | 1995-05-16 | Monsanto Company | Method for soybean transformation and regeneration |
| GB8825402D0 (en) | 1988-10-31 | 1988-11-30 | Cambridge Advanced Tech | Sulfonamide resistance genes |
| CA2006008C (en) | 1988-12-20 | 2000-02-15 | Donald J. Kessler | Method for making synthetic oligonucleotides which bind specifically to target sites on duplex dna molecules, by forming a colinear triplex, the synthetic oligonucleotides and methods of use |
| US5310667A (en) | 1989-07-17 | 1994-05-10 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthases |
| US7705215B1 (en) | 1990-04-17 | 2010-04-27 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof |
| US5550318A (en) | 1990-04-17 | 1996-08-27 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for the production of stably transformed, fertile monocot plants and cells thereof |
| US5286634A (en) | 1989-09-28 | 1994-02-15 | Stadler Joan K | Synergistic method for host cell transformation |
| US5399676A (en) | 1989-10-23 | 1995-03-21 | Gilead Sciences | Oligonucleotides with inverted polarity |
| US5264562A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
| US5264564A (en) | 1989-10-24 | 1993-11-23 | Gilead Sciences | Oligonucleotide analogs with novel linkages |
| US5177198A (en) | 1989-11-30 | 1993-01-05 | University Of N.C. At Chapel Hill | Process for preparing oligoribonucleoside and oligodeoxyribonucleoside boranophosphates |
| US5587361A (en) | 1991-10-15 | 1996-12-24 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleotides having phosphorothioate linkages of high chiral purity |
| WO1991010725A1 (en) | 1990-01-22 | 1991-07-25 | Dekalb Plant Genetics | Fertile transgenic corn plants |
| US5484956A (en) | 1990-01-22 | 1996-01-16 | Dekalb Genetics Corporation | Fertile transgenic Zea mays plant comprising heterologous DNA encoding Bacillus thuringiensis endotoxin |
| US5321131A (en) | 1990-03-08 | 1994-06-14 | Hybridon, Inc. | Site-specific functionalization of oligodeoxynucleotides for non-radioactive labelling |
| US5837848A (en) | 1990-03-16 | 1998-11-17 | Zeneca Limited | Root-specific promoter |
| US5470967A (en) | 1990-04-10 | 1995-11-28 | The Dupont Merck Pharmaceutical Company | Oligonucleotide analogs with sulfamate linkages |
| US5264618A (en) | 1990-04-19 | 1993-11-23 | Vical, Inc. | Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules |
| EP0536330B1 (en) | 1990-06-25 | 2002-02-27 | Monsanto Technology LLC | Glyphosate tolerant plants |
| US5608046A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-04 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Conjugated 4'-desmethyl nucleoside analog compounds |
| US5677437A (en) | 1990-07-27 | 1997-10-14 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
| US5618704A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-08 | Isis Pharmacueticals, Inc. | Backbone-modified oligonucleotide analogs and preparation thereof through radical coupling |
| US5489677A (en) | 1990-07-27 | 1996-02-06 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligonucleoside linkages containing adjacent oxygen and nitrogen atoms |
| US5610289A (en) | 1990-07-27 | 1997-03-11 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogues |
| US5541307A (en) | 1990-07-27 | 1996-07-30 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Backbone modified oligonucleotide analogs and solid phase synthesis thereof |
| US5623070A (en) | 1990-07-27 | 1997-04-22 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Heteroatomic oligonucleoside linkages |
| US5602240A (en) | 1990-07-27 | 1997-02-11 | Ciba Geigy Ag. | Backbone modified oligonucleotide analogs |
| IL99066A (en) | 1990-08-03 | 1996-01-31 | Sterling Winthrop Inc | Nuclease-resistant compounds containing oligonucleotide sequences having either or both of the ends, and preparations containing them |
| US5177196A (en) | 1990-08-16 | 1993-01-05 | Microprobe Corporation | Oligo (α-arabinofuranosyl nucleotides) and α-arabinofuranosyl precursors thereof |
| US6403865B1 (en) | 1990-08-24 | 2002-06-11 | Syngenta Investment Corp. | Method of producing transgenic maize using direct transformation of commercially important genotypes |
| US5633435A (en) | 1990-08-31 | 1997-05-27 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvylshikimate-3-phosphate synthases |
| US5214134A (en) | 1990-09-12 | 1993-05-25 | Sterling Winthrop Inc. | Process of linking nucleosides with a siloxane bridge |
| US5561225A (en) | 1990-09-19 | 1996-10-01 | Southern Research Institute | Polynucleotide analogs containing sulfonate and sulfonamide internucleoside linkages |
| JPH06505704A (ja) | 1990-09-20 | 1994-06-30 | ギリアド サイエンシズ，インコーポレイテッド | 改変ヌクレオシド間結合 |
| US5866775A (en) | 1990-09-28 | 1999-02-02 | Monsanto Company | Glyphosate-tolerant 5-enolpyruvyl-3-phosphoshikimate synthases |
| US5767366A (en) | 1991-02-19 | 1998-06-16 | Louisiana State University Board Of Supervisors, A Governing Body Of Louisiana State University Agricultural And Mechanical College | Mutant acetolactate synthase gene from Ararbidopsis thaliana for conferring imidazolinone resistance to crop plants |
| USRE36449E (en) | 1991-03-05 | 1999-12-14 | Rhone-Poulenc Agro | Chimeric gene for the transformation of plants |
| FR2673642B1 (fr) | 1991-03-05 | 1994-08-12 | Rhone Poulenc Agrochimie | Gene chimere comprenant un promoteur capable de conferer a une plante une tolerance accrue au glyphosate. |
| FR2673643B1 (fr) | 1991-03-05 | 1993-05-21 | Rhone Poulenc Agrochimie | Peptide de transit pour l'insertion d'un gene etranger dans un gene vegetal et plantes transformees en utilisant ce peptide. |
| DE69232132T3 (de) | 1991-05-15 | 2008-08-14 | Monsanto Technology Llc. | Verfahren zur schöpfung einer transformierten reispflanze |
| US5539082A (en) | 1993-04-26 | 1996-07-23 | Nielsen; Peter E. | Peptide nucleic acids |
| US5719262A (en) | 1993-11-22 | 1998-02-17 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having amino acid side chains |
| US5714331A (en) | 1991-05-24 | 1998-02-03 | Buchardt, Deceased; Ole | Peptide nucleic acids having enhanced binding affinity, sequence specificity and solubility |
| US5731180A (en) | 1991-07-31 | 1998-03-24 | American Cyanamid Company | Imidazolinone resistant AHAS mutants |
| US5571799A (en) | 1991-08-12 | 1996-11-05 | Basco, Ltd. | (2'-5') oligoadenylate analogues useful as inhibitors of host-v5.-graft response |
| JPH0557182A (ja) | 1991-09-03 | 1993-03-09 | Central Glass Co Ltd | 二酸化炭素吸収剤 |
| US5518908A (en) | 1991-09-23 | 1996-05-21 | Monsanto Company | Method of controlling insects |
| FR2684354B1 (fr) | 1991-11-29 | 1995-01-20 | Oreal | Dispositif distributeur pour un recipient contenant un produit liquide a pateux. |
| US5593874A (en) | 1992-03-19 | 1997-01-14 | Monsanto Company | Enhanced expression in plants |
| US5633360A (en) | 1992-04-14 | 1997-05-27 | Gilead Sciences, Inc. | Oligonucleotide analogs capable of passive cell membrane permeation |
| DE69334225D1 (de) | 1992-07-07 | 2008-07-31 | Japan Tobacco Inc | Verfahren zur transformation einer monokotyledon pflanze |
| WO1994001382A1 (en) | 1992-07-10 | 1994-01-20 | Nippon Kayaku Kabushiki Kaisha | Gas generating agent and gas generator for automotive airbag |
| US5339107A (en) | 1992-08-19 | 1994-08-16 | Hewlett-Packard Company | Color optical scanner with rotating color filter assembly |
| EP0642927B1 (en) | 1992-12-14 | 1999-03-10 | Sony Corporation | Water-based ink fixing composition, thermally transferred image covering film using the same, and thermal transfer image recording medium |
| US5476925A (en) | 1993-02-01 | 1995-12-19 | Northwestern University | Oligodeoxyribonucleotides including 3'-aminonucleoside-phosphoramidate linkages and terminal 3'-amino groups |
| US6414222B1 (en) | 1993-02-05 | 2002-07-02 | Regents Of The University Of Minnesota | Gene combinations for herbicide tolerance in corn |
| GB9304618D0 (en) | 1993-03-06 | 1993-04-21 | Ciba Geigy Ag | Chemical compounds |
| AU6412794A (en) | 1993-03-31 | 1994-10-24 | Sterling Winthrop Inc. | Oligonucleotides with amide linkages replacing phosphodiester linkages |
| DE4314274C2 (de) | 1993-04-30 | 1995-11-30 | Foerster Inst Dr Friedrich | Verfahren und Vorrichtung zur automatischen Durchmesserverstellung von an einem rotierend angetriebenen Prüfkopf vorgesehenen Gebern von Meß- und/oder Prüfeinrichtungen |
| US5393175A (en) | 1993-06-18 | 1995-02-28 | Courville; Leo | Diamond core drill |
| US6118047A (en) | 1993-08-25 | 2000-09-12 | Dekalb Genetic Corporation | Anthranilate synthase gene and method of use thereof for conferring tryptophan overproduction |
| DE69409743T2 (de) | 1993-09-14 | 1998-10-22 | Lucas Ind Plc | Kraftstoffzufuhreinrichtung |
| US6969782B2 (en) | 1993-10-06 | 2005-11-29 | Ajinomoto Co., Inc. | Method of producing transgenic plants having improved amino acid composition |
| GB9403941D0 (en) | 1994-03-01 | 1994-04-20 | Sandoz Ltd | Improvements in or relating to organic compounds |
| US5558071A (en) | 1994-03-07 | 1996-09-24 | Combustion Electromagnetics, Inc. | Ignition system power converter and controller |
| US5625050A (en) | 1994-03-31 | 1997-04-29 | Amgen Inc. | Modified oligonucleotides and intermediates useful in nucleic acid therapeutics |
| US5767373A (en) | 1994-06-16 | 1998-06-16 | Novartis Finance Corporation | Manipulation of protoporphyrinogen oxidase enzyme activity in eukaryotic organisms |
| US5939602A (en) | 1995-06-06 | 1999-08-17 | Novartis Finance Corporation | DNA molecules encoding plant protoporphyrinogen oxidase and inhibitor-resistant mutants thereof |
| US5392910A (en) | 1994-07-21 | 1995-02-28 | Transidyne General Corporation | Package for a device having a sharp cutting edge |
| NZ292319A (en) | 1994-08-19 | 1999-06-29 | Monsanto Co | Delivery of exogenous chemical agent to non-woody plant tissue at a site where local physical injury is effected |
| DE4430307A1 (de) | 1994-08-26 | 1996-02-29 | Bayer Ag | Verfahren und Vorrichtung zur gleichzeitigen Dispergierung und Zerstäubung von mindestens zwei Flüssigkeiten |
| US5631152A (en) | 1994-10-26 | 1997-05-20 | Monsanto Company | Rapid and efficient regeneration of transgenic plants |
| US5550398A (en) | 1994-10-31 | 1996-08-27 | Texas Instruments Incorporated | Hermetic packaging with optical |
| US5830430A (en) | 1995-02-21 | 1998-11-03 | Imarx Pharmaceutical Corp. | Cationic lipids and the use thereof |
| ATE342968T1 (de) | 1995-04-20 | 2006-11-15 | Basf Ag | Auf basis ihrer struktur entworfene herbizid resistente produkte |
| US5853973A (en) | 1995-04-20 | 1998-12-29 | American Cyanamid Company | Structure based designed herbicide resistant products |
| FR2734842B1 (fr) | 1995-06-02 | 1998-02-27 | Rhone Poulenc Agrochimie | Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase, tolerantes a certains herbicides |
| US6084155A (en) | 1995-06-06 | 2000-07-04 | Novartis Ag | Herbicide-tolerant protoporphyrinogen oxidase ("protox") genes |
| IL122290A0 (en) | 1995-06-07 | 1998-04-05 | Inex Pharmaceuticals Corp | Lipid-nucleic acid complex its preparation and use |
| DK0812917T3 (da) | 1995-12-27 | 2005-10-17 | Japan Tobacco Inc | Kuldeinducerbare promotorsekvenser |
| US5739180A (en) | 1996-05-02 | 1998-04-14 | Lucent Technologies Inc. | Flat panel displays and methods and substrates therefor |
| US5898031A (en) * | 1996-06-06 | 1999-04-27 | Isis Pharmaceuticals, Inc. | Oligoribonucleotides for cleaving RNA |
| GB9612403D0 (en) | 1996-06-13 | 1996-08-14 | Sandoz Ltd | Organic compounds |
| CZ86798A3 (cs) | 1996-06-21 | 1999-03-17 | Monsanto Company | Fertilní transgenní rostlina pšenice, způsob její přípravy, buňky a semena této rostliny |
| AU3644697A (en) | 1996-06-27 | 1998-01-14 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Plant gene for (p)-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase |
| FR2751347B1 (fr) | 1996-07-16 | 2001-12-07 | Rhone Poulenc Agrochimie | Gene chimere a plusieurs genes de tolerance herbicide, cellule vegetale et plante tolerantes a plusieurs herbicides |
| WO1998006259A2 (en) | 1996-08-16 | 1998-02-19 | Monsanto Company | Sequential application method for treating plants with exogenous chemicals |
| JPH11514534A (ja) | 1996-09-05 | 1999-12-14 | ユニリーバー・ナームローゼ・ベンノートシヤープ | 乳酸菌から誘導される塩誘発プロモーターおよび所望のタンパク質産生のための乳酸菌でのその使用 |
| JPH10117776A (ja) | 1996-10-22 | 1998-05-12 | Japan Tobacco Inc | インディカイネの形質転換方法 |
| DE19652284A1 (de) | 1996-12-16 | 1998-06-18 | Hoechst Schering Agrevo Gmbh | Neue Gene codierend für Aminosäure-Deacetylasen mit Spezifität für N-Acetyl-L-Phosphinothricin, ihre Isolierung und Verwendung |
| AU720780B2 (en) | 1997-01-20 | 2000-06-15 | Plant Genetic Systems N.V. | Pathogen-induced plant promoters |
| US5981840A (en) | 1997-01-24 | 1999-11-09 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Methods for agrobacterium-mediated transformation |
| US6040497A (en) | 1997-04-03 | 2000-03-21 | Dekalb Genetics Corporation | Glyphosate resistant maize lines |
| US7022896B1 (en) | 1997-04-04 | 2006-04-04 | Board Of Regents Of University Of Nebraska | Methods and materials for making and using transgenic dicamba-degrading organisms |
| US7105724B2 (en) | 1997-04-04 | 2006-09-12 | Board Of Regents Of University Of Nebraska | Methods and materials for making and using transgenic dicamba-degrading organisms |
| FR2770854B1 (fr) | 1997-11-07 | 2001-11-30 | Rhone Poulenc Agrochimie | Sequence adn d'un gene de l'hydroxy-phenyl pyruvate dioxygenase et obtention de plantes contenant un tel gene, tolerantes aux herbicides |
| US6245968B1 (en) | 1997-11-07 | 2001-06-12 | Aventis Cropscience S.A. | Mutated hydroxyphenylpyruvate dioxygenase, DNA sequence and isolation of plants which contain such a gene and which are tolerant to herbicides |
| US6069115A (en) | 1997-11-12 | 2000-05-30 | Rhone-Poulenc Agrochimie | Method of controlling weeds in transgenic crops |
| IL122270A0 (en) | 1997-11-20 | 1998-04-05 | Yeda Res & Dev | DNA molecules conferring to plants resistance to a herbicide and plants transformed thereby |
| IL136384A0 (en) | 1997-11-26 | 2001-06-14 | Kamterter Ii Llc | Solid matrix conditioning of seeds |
| US6506559B1 (en) | 1997-12-23 | 2003-01-14 | Carnegie Institute Of Washington | Genetic inhibition by double-stranded RNA |
| US6421956B1 (en) | 1997-12-29 | 2002-07-23 | Van Dok Ijsbrand | Method and apparatus for priming seed |
| US20030027173A1 (en) | 1998-01-16 | 2003-02-06 | Della-Cioppa Guy | Method of determining the function of nucleotide sequences and the proteins they encode by transfecting the same into a host |
| US6303848B1 (en) | 1998-01-16 | 2001-10-16 | Large Scale Biology Corporation | Method for conferring herbicide, pest, or disease resistance in plant hosts |
| US5914451A (en) | 1998-04-06 | 1999-06-22 | Monsanto Company | Efficiency soybean transformation protocol |
| US8598332B1 (en) | 1998-04-08 | 2013-12-03 | Bayer Cropscience N.V. | Methods and means for obtaining modified phenotypes |
| US6906245B1 (en) | 1998-04-30 | 2005-06-14 | Sumitomo Chemical Company, Limited | Method for producing transgenic plants resistant to weed control compounds which disrupt the porphyrin pathways of plants |
| US6307123B1 (en) | 1998-05-18 | 2001-10-23 | Dekalb Genetics Corporation | Methods and compositions for transgene identification |
| AR020078A1 (es) | 1998-05-26 | 2002-04-10 | Syngenta Participations Ag | Metodo para alterar la expresion de un gen objetivo en una celula de planta |
| US6348185B1 (en) | 1998-06-20 | 2002-02-19 | Washington University School Of Medicine | Membrane-permeant peptide complexes for medical imaging, diagnostics, and pharmaceutical therapy |
| WO1999067367A1 (en) | 1998-06-22 | 1999-12-29 | Regents Of The University Of Minnesota | DNA ENCODING OAT ACETYL CoA CARBOXYLASE |
| WO1999067400A1 (en) * | 1998-06-24 | 1999-12-29 | Musc Foundation For Research Development | Tissue-specific and target rna-specific ribozymes |
| WO2000004176A1 (en) | 1998-07-16 | 2000-01-27 | Stichting Centrum Voor Plantenveredelings-En Reproduktieonderzoek (Cpro-Dlo) | Process to collect metabolites from modified nectar by insects |
| JP2000083680A (ja) | 1998-07-16 | 2000-03-28 | Nippon Paper Industries Co Ltd | 光誘導型プロモ―タ―の制御下に置かれた不定芽再分化遺伝子を選抜マ―カ―遺伝子とする植物への遺伝子導入方法及びこれに用いる植物への遺伝子導入用ベクタ― |
| US6121513A (en) | 1998-07-20 | 2000-09-19 | Mendel Biotechnology, Inc. | Sulfonamide resistance in plants |
| US6717034B2 (en) | 2001-03-30 | 2004-04-06 | Mendel Biotechnology, Inc. | Method for modifying plant biomass |
| GB9825839D0 (en) * | 1998-11-26 | 1999-01-20 | Univ Cardiff | Foulbrood treatments |
| WO2000032757A2 (en) | 1998-12-03 | 2000-06-08 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Plant vitamin e biosynthetic enzymes |
| US6355322B1 (en) | 1998-12-08 | 2002-03-12 | 3M Innovative Properties Company | Release liner incorporating a metal layer |
| US6642435B1 (en) | 1998-12-18 | 2003-11-04 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Plant folate biosynthetic genes |
| CA2359868A1 (en) | 1999-01-14 | 2000-07-20 | Monsanto Company | Soybean transformation method |
| IL128207A (en) | 1999-01-24 | 2005-03-20 | Bio Oz Advanced Biotechnologic | Multi-barrel plant inoculation gun |
| EP2314700A1 (en) | 1999-01-28 | 2011-04-27 | Medical College of Georgia Research Institute, Inc | Composition and method for in vivo and in vitro attenuation of gene expression using double stranded RNA |
| DE19956568A1 (de) * | 1999-01-30 | 2000-08-17 | Roland Kreutzer | Verfahren und Medikament zur Hemmung der Expression eines vorgegebenen Gens |
| US6232536B1 (en) | 1999-02-16 | 2001-05-15 | Dekalb Genetics Corporation | Inbred corn plant F307W and seeds thereof |
| US6271359B1 (en) | 1999-04-14 | 2001-08-07 | Musc Foundation For Research Development | Tissue-specific and pathogen-specific toxic agents and ribozymes |
| US6992237B1 (en) | 1999-04-16 | 2006-01-31 | Pioneer Hi-Bred International Inc. | Regulated expression of genes in plant seeds |
| BR0009884A (pt) * | 1999-04-21 | 2002-01-08 | American Home Prod | Processos e composições para a inibição da função das sequências de polinucleotìdeos |
| US6207879B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-03-27 | Dekalb Genetics Corporation | Maize RS81 promoter and methods for use thereof |
| US6232526B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-05-15 | Dekalb Genetics Corp. | Maize A3 promoter and methods for use thereof |
| US6194636B1 (en) | 1999-05-14 | 2001-02-27 | Dekalb Genetics Corp. | Maize RS324 promoter and methods for use thereof |
| US6713077B1 (en) | 1999-07-28 | 2004-03-30 | Monsanto Technology, Llc | Control of shoot/foliar feeding pests with pesticide seed treatments |
| US6326193B1 (en) * | 1999-11-05 | 2001-12-04 | Cambria Biosciences, Llc | Insect control agent |
| DK1235921T3 (da) | 1999-12-07 | 2007-04-23 | Monsanto Technology Llc | Regenerering og transformering af sukkerroer |
| DE10000600A1 (de) | 2000-01-10 | 2001-07-12 | Bayer Ag | Substituierte Oxazolyl- und Thiazolyl-uracile |
| US6303374B1 (en) | 2000-01-18 | 2001-10-16 | Isis Pharmaceuticals Inc. | Antisense modulation of caspase 3 expression |
| GB0001309D0 (en) | 2000-01-20 | 2000-03-08 | Nestle Sa | Valve arrangement |
| IL134830A0 (en) | 2000-03-01 | 2001-05-20 | Chay 13 Medical Res Group N V | Peptides and immunostimulatory and anti-bacterial pharmaceutical compositions containing them |
| JP2001253874A (ja) | 2000-03-10 | 2001-09-18 | Ishihara Sangyo Kaisha Ltd | ピリミジン系化合物、それらの製造方法及びそれらを含有する除草剤 |
| IL151928A0 (en) * | 2000-03-30 | 2003-04-10 | Whitehead Biomedical Inst | Rna sequence-specific mediators of rna interference |
| US6444615B1 (en) | 2000-04-18 | 2002-09-03 | Dow Agrosciences Llc | Herbicidal imidazolidinetrione and thioxo-imidazolidinediones |
| US6768044B1 (en) | 2000-05-10 | 2004-07-27 | Bayer Cropscience Sa | Chimeric hydroxyl-phenyl pyruvate dioxygenase, DNA sequence and method for obtaining plants containing such a gene, with herbicide tolerance |
| PT1280928T (pt) | 2000-05-10 | 2017-01-30 | Univ Louisiana State | Resistência a herbicidas inibidores de aceto-hidroxiácido sintase |
| JP2002080454A (ja) | 2000-06-26 | 2002-03-19 | Nippon Nohyaku Co Ltd | ピリジン−２，３−ジカルボン酸ジアミド誘導体及び除草剤 |
| US7109393B2 (en) | 2000-08-15 | 2006-09-19 | Mendel Biotechnology, Inc. | Methods of gene silencing using inverted repeat sequences |
| BR0003908A (pt) | 2000-08-18 | 2002-06-18 | Suzano Papel & Celulose | Método para transformação genética de eucalyptus spp |
| US6453609B1 (en) | 2000-09-06 | 2002-09-24 | University Of Iowa Research Foundation | Method for uptake of a substance into a seed |
| JP2002138075A (ja) | 2000-10-30 | 2002-05-14 | Nippon Soda Co Ltd | ３−アミノアクリル酸誘導体及び除草剤 |
| US7462481B2 (en) | 2000-10-30 | 2008-12-09 | Verdia, Inc. | Glyphosate N-acetyltransferase (GAT) genes |
| FR2815969B1 (fr) | 2000-10-30 | 2004-12-10 | Aventis Cropscience Sa | Plantes tolerantes aux herbicides par contournement de voie metabolique |
| JP2002145707A (ja) | 2000-11-10 | 2002-05-22 | Sankyo Co Ltd | Ｎ−置換ジヒドロピロール誘導体を含有する除草剤 |
| JP4095895B2 (ja) * | 2000-12-01 | 2008-06-04 | マックス−プランク−ゲゼルシャフト ツール フォーデルング デル ヴィッセンシャフテン エー．ヴェー． | Ｒｎａ干渉を媒介する短鎖ｒｎａ分子 |
| CA2427787C (en) | 2000-12-07 | 2012-07-17 | Syngenta Limited | Herbicide resistant plants |
| WO2002048428A1 (en) | 2000-12-12 | 2002-06-20 | Konica Corporation | Method for forming thin film, article having thin film, optical film, dielectric coated electrode, and plasma discharge processor |
| US7151204B2 (en) | 2001-01-09 | 2006-12-19 | Monsanto Technology Llc | Maize chloroplast aldolase promoter compositions and methods for use thereof |
| JP2002220389A (ja) | 2001-01-26 | 2002-08-09 | Hokko Chem Ind Co Ltd | ピリジルベンズオキサジン誘導体、除草剤および中間体 |
| AU2002256619A1 (en) | 2001-02-16 | 2002-09-04 | Metanomics Gmbh And Co. Kgaa | Method for identifying herbicidally active substances |
| US7700786B2 (en) | 2001-02-20 | 2010-04-20 | Sagami Chemical Research Center | Pyrazole derivative, intermediate therefor, processes for producing these, and herbicide containing these as active ingredient |
| US6843985B2 (en) | 2001-02-28 | 2005-01-18 | The United States Of America As Represented By The Secretary Of Agriculture | Control of parasitic mites of honey bees |
| EP1238586A1 (en) | 2001-03-09 | 2002-09-11 | Basf Aktiengesellschaft | Herbicidal 2-alkynyl-pyri(mi)dines |
| DE10116399A1 (de) | 2001-04-03 | 2002-10-10 | Bayer Ag | Substituierte Azolazin(thi)one |
| US6743905B2 (en) | 2001-04-16 | 2004-06-01 | Applera Corporation | Mobility-modified nucleobase polymers and methods of using same |
| US20070021360A1 (en) | 2001-04-24 | 2007-01-25 | Nyce Jonathan W | Compositions, formulations and kit with anti-sense oligonucleotide and anti-inflammatory steroid and/or obiquinone for treatment of respiratory and lung disesase |
| JP2003064059A (ja) | 2001-06-14 | 2003-03-05 | Nippon Soda Co Ltd | ピリミジン化合物、製造方法および除草剤 |
| DE10130397A1 (de) | 2001-06-23 | 2003-01-09 | Bayer Cropscience Gmbh | Herbizide substituierte Pyridine, Verfahren zu ihrer Herstellung und ihre Verwendung als Herbzide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| ES2192945B1 (es) | 2001-07-06 | 2005-03-01 | Consejo Superior De Investigaciones Cientificas | Un metodo para interferir con la infeccion de virus en plantas. |
| AUPR621501A0 (en) * | 2001-07-06 | 2001-08-02 | Commonwealth Scientific And Industrial Research Organisation | Delivery of ds rna |
| ITMI20011497A1 (it) | 2001-07-13 | 2003-01-13 | Isagro Ricerca Srl | Nuovi derivati di aniline sostituite ad attivita' erbicida |
| US7612194B2 (en) | 2001-07-24 | 2009-11-03 | Monsanto Technology Llc | Nucleic acid sequences from Diabrotica virgifera virgifera LeConte and uses thereof |
| AU2002329667A1 (en) | 2001-07-30 | 2003-02-17 | Uta Griesenbach | Specific inhibition of gene expression by small double stranded rnas |
| AR035087A1 (es) | 2001-08-09 | 2004-04-14 | Syngenta Participations Ag | Piridil-alquinos y piridil-n-oxido-alquinos herbicidas activos, procedimiento para su preparacion, composicion herbicida y para inhibir el crecimiento de plantas, metodo para el control del crecimiento de plantas indeseables , y metodo para la inhibicion del crecimiento de plantas |
| BRPI0211809B1 (pt) | 2001-08-09 | 2019-04-24 | University Of Saskatchewan | Método para o controle de ervas daninhas nas vizinhanças de uma planta de trigo ou triticale, método para modificar a tolerância de uma planta de trigo ou triticale a um herbicida de imidazolinona e método de produção de uma planta de trigo ou triticale transgênica tendo resistência aumentada a um herbicida de imidazolinona |
| US20040198758A1 (en) | 2001-08-17 | 2004-10-07 | Rapado Liliana Parra | N-heterocyclyl substituted thienyloxy-pyrimidines used as herbicides |
| WO2003020704A1 (en) | 2001-08-28 | 2003-03-13 | Syngenta Participations Ag | Sulfonylamino derivatives useful as herbicides |
| WO2003020025A2 (en) | 2001-08-31 | 2003-03-13 | The Dow Chemical Company | Nucleic acid compositions conferring insect control in plants |
| WO2003022051A1 (en) | 2001-09-06 | 2003-03-20 | Syngenta Participations Ag | Herbicidal n-alkylsulfonamino derivatives |
| CA2459359A1 (en) | 2001-09-07 | 2003-03-20 | Basf Aktiengesellschaft | Pyrazolyl-substituted thienyloxypyridines |
| WO2003022831A1 (de) | 2001-09-07 | 2003-03-20 | Basf Aktiengesellschaft | 4-alkylsubstituierte thienyloxy-pyridine als herbizide |
| JP2003096059A (ja) | 2001-09-21 | 2003-04-03 | Otsuka Chem Co Ltd | チアゾール化合物及び除草剤組成物 |
| WO2003029243A2 (de) | 2001-09-24 | 2003-04-10 | Basf Aktiengesellschaft | 2-aryloxy-6-pyrazolyl-pyridine |
| US7550578B2 (en) | 2001-09-26 | 2009-06-23 | Syngenta Participations Ag | Rice promoters for regulation of plant expression |
| US7745418B2 (en) * | 2001-10-12 | 2010-06-29 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Compositions and methods for inhibiting viral replication |
| WO2003037085A1 (en) | 2001-11-01 | 2003-05-08 | Dongbu Hannong Chemical Co., Ltd. | Optically active herbicidal (r)-phenoxypropionic acid-n-methyl-n-2-fluorophenyl amides |
| DE10154075A1 (de) | 2001-11-02 | 2003-05-15 | Bayer Cropscience Ag | Substituierte Pyrimidine |
| US20030150017A1 (en) | 2001-11-07 | 2003-08-07 | Mesa Jose Ramon Botella | Method for facilitating pathogen resistance |
| AU2002367564A1 (en) | 2001-11-08 | 2003-09-29 | Paradigm Genetics, Inc. | Methods for the identification of herbicides and the modulation of plant growth |
| US6766613B2 (en) | 2001-11-16 | 2004-07-27 | University Of Florida Research Foundation, Inc. | Materials and methods for controlling pests |
| CA2467665A1 (en) | 2001-11-29 | 2003-06-05 | Basf Aktiengesellschaft | 2,w-diaminocarboxylic acid compounds |
| DE10256354A1 (de) | 2001-12-06 | 2003-06-18 | Syngenta Participations Ag | Neue Herbizide |
| DE10256353A1 (de) | 2001-12-06 | 2003-06-18 | Syngenta Participations Ag | Neue Herbizide |
| DE10256367A1 (de) | 2001-12-06 | 2003-06-26 | Syngenta Participations Ag | Neue Herbizide |
| AR037754A1 (es) | 2001-12-11 | 2004-12-01 | Syngenta Participations Ag | Herbicidas |
| DE10161765A1 (de) | 2001-12-15 | 2003-07-03 | Bayer Cropscience Gmbh | Substituierte Phenylderivate |
| ATE458718T1 (de) | 2001-12-19 | 2010-03-15 | Basf Se | Alpha-cyanoacrylate |
| AU2002356664A1 (en) | 2001-12-19 | 2003-06-30 | Basf Aktiengesellschaft | Beta-amino-alpha-cyanoacrylates and their use as herbicides |
| EP2221377B2 (en) | 2002-02-01 | 2017-05-17 | Life Technologies Corporation | Oligonucleotide compositions with enhanced efficiency |
| DE10204951A1 (de) | 2002-02-06 | 2003-08-14 | Basf Ag | Phenylalaninderivate als Herbizide |
| AU2003209814B2 (en) * | 2002-03-14 | 2008-12-04 | Commonwealth Scientific & Industrial Research Organisation | Modified gene-silencing RNA and uses thereof |
| AU2003218758A1 (en) | 2002-03-14 | 2003-09-22 | Syngenta Participations Ag | Derivatives of 1-phenyl-3-phenylpyrazole as herbicides |
| EP1487975A2 (de) | 2002-03-20 | 2004-12-22 | Basf Aktiengesellschaft | Serin hydroxymethyltransferase als target für herbizide |
| US7166771B2 (en) | 2002-06-21 | 2007-01-23 | Monsanto Technology Llc | Coordinated decrease and increase of gene expression of more than one gene using transgenic constructs |
| AR039208A1 (es) | 2002-04-03 | 2005-02-09 | Syngenta Participations Ag | Compuestos de fenil- y piridilalquinos, composicion herbicida que los contiene, procedimiento de preparacion de aquellos y procedimiento para combatir el crecimiento de plantas indeseadas |
| IL164487A0 (en) | 2002-04-25 | 2005-12-18 | Basf Ag | 3-Heteroaryl substituted 5-methyloxymethyl isoxazolines used as herbicides |
| EP1500650A4 (en) | 2002-04-26 | 2006-08-23 | Ishihara Sangyo Kaisha | PYRIDINE COMPOUNDS OR SALTS THEREOF AND HERBICIDES CONTAINING SAME |
| US6645914B1 (en) | 2002-05-01 | 2003-11-11 | Ndsu-Research Foundation | Surfactant-ammonium sulfate adjuvant composition for enhancing efficacy of herbicides |
| DE10219435A1 (de) | 2002-05-02 | 2003-11-13 | Bayer Cropscience Ag | Substituierte Pyrazolo-pyrimidin-4-one |
| JP2004051628A (ja) | 2002-05-28 | 2004-02-19 | Ishihara Sangyo Kaisha Ltd | ピリジン系化合物又はその塩、それらの製造方法及びそれらを含有する除草剤 |
| AR040413A1 (es) | 2002-05-31 | 2005-04-06 | Syngenta Participations Ag | Heterociclilalquinos activos como herbicidas |
| AR041181A1 (es) | 2002-07-01 | 2005-05-04 | Syngenta Participations Ag | Tienilalquinos herbicidas y procedimiento de preparacion de tales compuestos |
| AR041182A1 (es) | 2002-07-01 | 2005-05-04 | Syngenta Participations Ag | Derivados de fenoxipropenilfenilo y su uso como herbicidas |
| AU2003247951A1 (en) | 2002-07-10 | 2004-01-23 | Kansas State University Research Foundation | Compositions and methods for controlling parasitic nematodes |
| AU2003249302A1 (en) | 2002-07-17 | 2004-02-02 | Sepro Corporation | Herbicide-resistant plants, and polynucleotides and methods for providing same |
| US7615678B2 (en) | 2002-07-18 | 2009-11-10 | Monsanto Technology Llc | Methods for using artificial polynucleotides and compositions thereof to reduce transgene silencing |
| WO2004010779A2 (en) | 2002-07-24 | 2004-02-05 | Basf Aktiengesellschaft | Synergistically acting herbicidal mixtures |
| DE10234875A1 (de) | 2002-07-25 | 2004-02-05 | Bayer Cropscience Gmbh | 4-Trifluormethylpyrazolyl substituierte Pyridine und Pyrimidine |
| DE10234876A1 (de) | 2002-07-25 | 2004-02-05 | Bayer Cropscience Gmbh | 4-Trifluormethylpyrazolyl substituierte Pyridine und Pyrimidine |
| AU2003252259A1 (en) | 2002-07-26 | 2004-02-16 | Nihon Nohyaku Co., Ltd. | Novel haloalkylsulfonanilide derivatives, herbicides and usage thereof |
| US20040029275A1 (en) | 2002-08-10 | 2004-02-12 | David Brown | Methods and compositions for reducing target gene expression using cocktails of siRNAs or constructs expressing siRNAs |
| FR2844415B1 (fr) | 2002-09-05 | 2005-02-11 | At & T Corp | Systeme pare-feu pour interconnecter deux reseaux ip geres par deux entites administratives differentes |
| US20040053289A1 (en) | 2002-09-09 | 2004-03-18 | The Regents Of The University Of California | Short interfering nucleic acid hybrids and methods thereof |
| JP2004107228A (ja) | 2002-09-17 | 2004-04-08 | Nippon Nohyaku Co Ltd | 双環性ピリミジノン誘導体及びこれを有効成分とする除草剤 |
| AR044743A1 (es) | 2002-09-26 | 2005-10-05 | Nihon Nohyaku Co Ltd | Herbicida, metodo de emplearlo, derivados de tienopirimidina sustituida,compuestos intermediarios, y procedimientos que se utilizan para producirlos, |
| AU2003304398A1 (en) | 2002-10-16 | 2005-02-25 | Board Of Regents, The University Of Texas System | Methods and compositions for increasing the efficacy of biologically-active ingredients |
| AU2003274022A1 (en) | 2002-10-17 | 2004-05-04 | Syngenta Participations Ag | 3-heterocyclylpyridine derivatives useful as herbicides |
| AU2003274025A1 (en) | 2002-10-17 | 2004-05-04 | Syngenta Participations Ag | Pyridine derivatives useful as herbicides |
| AU2003301443A1 (en) | 2002-10-18 | 2004-05-04 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Azolecarboxamide herbicides |
| AU2003274037A1 (en) | 2002-10-18 | 2004-05-13 | Basf Aktiengesellschaft | 1-phenylpyrrolidine-2-one-3-carboxamides |
| EP2314691A3 (en) | 2002-11-14 | 2012-01-18 | Dharmacon, Inc. | Fuctional and hyperfunctional siRNA |
| GB0228326D0 (en) | 2002-12-04 | 2003-01-08 | Syngenta Ltd | Method of controlling unwanted vegitation |
| DE60336849D1 (de) | 2002-12-18 | 2011-06-01 | Athenix Corp | Herbizidresistenz verleihende gene |
| US20040123347A1 (en) | 2002-12-20 | 2004-06-24 | Hinchey Brendan S. | Water-deficit-inducible plant promoters |
| US20040133944A1 (en) | 2003-01-08 | 2004-07-08 | Delta And Pine Land Company | Seed oil suppression to enhance yield of commercially important macromolecules |
| WO2004062351A2 (en) | 2003-01-09 | 2004-07-29 | Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. | Gene encoding resistance to acetolactate synthase-inhibiting herbicides |
| CN1521165A (zh) | 2003-01-30 | 2004-08-18 | 拜尔农作物科学股份公司 | 噻吩衍生物 |
| DE10303883A1 (de) | 2003-01-31 | 2004-08-12 | Bayer Cropscience Ag | Substituierte Pyrimidine |
| MXPA05008725A (es) | 2003-02-18 | 2005-09-20 | Monsanto Technology Llc | 5-enolpiruvilshikimato-3-fosfato sintasa (epsps) clase 1 resistente a glifosato. |
| CN1526704A (zh) | 2003-03-06 | 2004-09-08 | 拜尔农作物科学股份公司 | 取代的三唑甲酰胺化合物 |
| WO2005003362A2 (en) | 2003-03-10 | 2005-01-13 | Athenix Corporation | Methods to confer herbicide resistance |
| EP1628519A2 (en) | 2003-04-11 | 2006-03-01 | Bio-Oz Biotechnologies Ltd. | Liquid discharge apparatus particularly useful as a portable inoculation gun for anti-virus inoculation of plants |
| US7682829B2 (en) | 2003-05-30 | 2010-03-23 | Monsanto Technology Llc | Methods for corn transformation |
| EP3502252B1 (en) | 2003-06-02 | 2023-04-05 | University of Massachusetts | Methods and compositions for controlling efficacy of rna silencing |
| US7578598B2 (en) | 2006-11-13 | 2009-08-25 | Black & Decker Inc. | Battery charging work light |
| JP2005008583A (ja) | 2003-06-20 | 2005-01-13 | Nippon Soda Co Ltd | グアニジン化合物、除草剤および植物成長調節剤 |
| JP2005015390A (ja) | 2003-06-26 | 2005-01-20 | Bayer Cropscience Ag | アゾリジン誘導体及び除草剤 |
| WO2005017108A2 (en) | 2003-06-30 | 2005-02-24 | United Soybean Board | Soybean selection system based on aec-resistance |
| US8633028B2 (en) * | 2003-07-02 | 2014-01-21 | Musc Foundation For Research Development | dsRNA induced specific and non-specific immunity in crustaceans and other invertebrates and biodelivery vehicles for use therein |
| CN1208325C (zh) | 2003-07-04 | 2005-06-29 | 中国科学院上海有机化学研究所 | 2－嘧啶氧基－n－脲基苯基苄胺类化合物、制备方法及其用途 |
| WO2005007627A1 (ja) | 2003-07-18 | 2005-01-27 | Nihon Nohyaku Co., Ltd. | フェニルピリジン誘導体、その中間体及びこれを有効成分とする除草剤 |
| KR100568457B1 (ko) | 2003-07-22 | 2006-04-07 | 학교법인 성균관대학 | 양이온성 올리고펩타이드를 이용한 식물체로의 ｒｎａ전달 기법 |
| US7371927B2 (en) | 2003-07-28 | 2008-05-13 | Arborgen, Llc | Methods for modulating plant growth and biomass |
| AU2004268576A1 (en) | 2003-08-21 | 2005-03-10 | Ischem Corporation | Automated methods and systems for vascular plaque detection and analysis |
| WO2005023086A2 (en) | 2003-08-25 | 2005-03-17 | University Of North Carolina At Chapel Hill | Systems, methods, and computer program products for analysis of vessel attributes for diagnosis, disease staging, and surgical planning |
| WO2005040152A1 (en) | 2003-10-20 | 2005-05-06 | E.I. Dupont De Nemours And Company | Heteroyclylphenyl-and heterocyclylpyridyl-substituted azolecarboxamides as herbicides |
| WO2005047233A1 (en) | 2003-10-31 | 2005-05-26 | Syngenta Participations Ag | Novel herbicides |
| WO2005047281A1 (en) | 2003-11-13 | 2005-05-26 | Syngenta Participations Ag | Novel herbicides |
| ATE526407T1 (de) | 2003-11-17 | 2011-10-15 | Commw Scient Ind Res Org | Insektenresistenz durch inhibierung von genexpression |
| EA200601105A1 (ru) | 2003-12-19 | 2006-12-29 | Басф Акциенгезельшафт | Замещённые бензоилом фенилаланин-амиды |
| BRPI0417813A (pt) | 2003-12-19 | 2007-03-27 | Basf Ag | composto, processo para preparar o mesmo, agente, processos para preparar o mesmo, e para combater vegetação indesejada, e, uso de compostos |
| GT200500013A (es) | 2004-01-23 | 2005-08-10 | Amidas herbicidas | |
| US7297541B2 (en) | 2004-01-26 | 2007-11-20 | Monsanto Technology Llc | Genes encoding 4-hydroxyphenylpyruvate dioxygenase (HPPD) enzymes for plant metabolic engineering |
| US7855323B2 (en) | 2004-02-10 | 2010-12-21 | Monsanto Technology Llc | Recombinant DNA for gene suppression |
| US7622301B2 (en) | 2004-02-24 | 2009-11-24 | Basf Plant Science Gmbh | Compositions and methods using RNA interference for control of nematodes |
| JP4596795B2 (ja) | 2004-02-27 | 2010-12-15 | 住友林業株式会社 | ピペリトールもしくはその誘導体を有効成分とする植物抑制剤 |
| DE102004011705A1 (de) | 2004-03-10 | 2005-09-29 | Bayer Cropscience Gmbh | Substituierte 4-(4-Trifluormethylpyrazolyl)-Pyrimidine |
| KR20070003981A (ko) | 2004-03-27 | 2007-01-05 | 바이엘 크롭사이언스 게엠베하 | 제초제 배합물 |
| JP2005314407A (ja) | 2004-03-31 | 2005-11-10 | Nippon Nohyaku Co Ltd | 新規なハロアルキルスルホンアニリド誘導体、除草剤及びその使用方法並びにその中間体 |
| JPWO2005095335A1 (ja) | 2004-03-31 | 2008-02-21 | 株式会社クレハ | イリド化合物、その製造方法、除草剤および医薬品中間体としての利用 |
| CA2693280C (en) | 2004-04-09 | 2017-09-12 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for control of insect infestations in plants |
| CA2897475C (en) | 2004-04-30 | 2018-07-10 | Dow Agrosciences Llc | Novel herbicide resistance genes |
| EP1752536A4 (en) | 2004-05-11 | 2008-04-16 | Alphagen Co Ltd | POLYNUCLEOTIDE CAUSING RNA INTERFERENCE AND METHOD OF REGULATING GENE EXPRESSION WITH THE USE OF THE SAME |
| WO2006006569A1 (ja) | 2004-07-12 | 2006-01-19 | Nihon Nohyaku Co., Ltd. | フェニルピリジン類又はその塩類、これらを有効成分とする除草剤及びその使用方法 |
| WO2006014013A1 (ja) | 2004-08-04 | 2006-02-09 | Riken | 骨・関節疾患感受性遺伝子およびその用途 |
| BRPI0514527B1 (pt) | 2004-08-19 | 2014-12-02 | Monsanto Technology Llc | Composição herbicida, processo em batelada para preparação de uma solução de sal de glifosato, processo contínuo para preparação de uma composição acabada em forma de uma solução de sal de glifosato e composição herbicida de mistura em tanque |
| US7323310B2 (en) | 2004-08-31 | 2008-01-29 | Qiagen North American Holdings, Inc. | Methods and compositions for RNA amplification and detection using an RNA-dependent RNA-polymerase |
| US20060135758A1 (en) | 2004-08-31 | 2006-06-22 | Kunsheng Wu | Soybean polymorphisms and methods of genotyping |
| US8680290B2 (en) | 2004-09-03 | 2014-03-25 | Syngenta Limited | Isoxazoline derivatives and their use as herbicides |
| US20080103049A1 (en) | 2004-09-16 | 2008-05-01 | Bsdg Aktiengesellschaft | Benzoyl-Substituted Serineamides |
| MX2007001836A (es) | 2004-09-16 | 2007-04-23 | Basf Ag | Serinamidas sustituidas por heteroaroilo. |
| EP2444497B1 (en) | 2004-09-24 | 2015-01-28 | J.R. Simplot Company | Gene silencing |
| US20060247197A1 (en) | 2004-10-04 | 2006-11-02 | Van De Craen Marc | Method for down-regulating gene expression in fungi |
| EP1799657B1 (en) | 2004-10-05 | 2009-12-02 | Syngenta Limited | Isoxazoline derivatives and their use as herbicides |
| EP1807520B1 (en) | 2004-10-25 | 2012-07-25 | Devgen NV | Rna constructs |
| DE102004054665A1 (de) | 2004-11-12 | 2006-05-18 | Bayer Cropscience Gmbh | Substituierte bi- und tricyclische Pyrazol-Derivate Verfahren zur Herstellung und Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| DE102004054666A1 (de) | 2004-11-12 | 2006-05-18 | Bayer Cropscience Gmbh | Substituierte Pyrazol-3-carboxamide, Verfahren zur Herstellung und Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| US7393812B2 (en) | 2004-11-19 | 2008-07-01 | Dow Agrosciences Llc | Methylidene mevalonates and their use as herbicides |
| US20060200878A1 (en) | 2004-12-21 | 2006-09-07 | Linda Lutfiyya | Recombinant DNA constructs and methods for controlling gene expression |
| US8404927B2 (en) | 2004-12-21 | 2013-03-26 | Monsanto Technology Llc | Double-stranded RNA stabilized in planta |
| US8314290B2 (en) | 2004-12-21 | 2012-11-20 | Monsanto Technology Llc | Temporal regulation of gene expression by MicroRNAs |
| CA2593238C (en) | 2005-01-07 | 2014-11-18 | State Of Oregon Acting By And Through The State Board Of Higher Education On Behalf Of Oregon State University | Method to trigger rna interference |
| JP2006232824A (ja) | 2005-01-27 | 2006-09-07 | Sagami Chem Res Center | イミダゾール誘導体、それらの製造方法及びそれらを有効成分として含有する除草剤 |
| JP5268365B2 (ja) | 2005-02-04 | 2013-08-21 | コーニンクレッカ フィリップス エレクトロニクス エヌ ヴィ | 脈管幾何形状及び流れ特性を決定するシステム |
| FR2882062B1 (fr) | 2005-02-14 | 2007-06-15 | Commissariat Energie Atomique | Vecteurs d'expression stable et de longue duree de sirna et leurs applications |
| ZA200707119B (en) | 2005-02-24 | 2009-09-30 | Nihon Nohyaku Co Ltd | Novel haloalkylsulfonanilide derivative, herbicide, and method of use thereof |
| US8088976B2 (en) | 2005-02-24 | 2012-01-03 | Monsanto Technology Llc | Methods for genetic control of plant pest infestation and compositions thereof |
| DE102005014638A1 (de) | 2005-03-31 | 2006-10-05 | Bayer Cropscience Gmbh | Substituierte Pyrazolyloxyphenylderivate als Herbizide |
| JP2006282552A (ja) | 2005-03-31 | 2006-10-19 | Nippon Nohyaku Co Ltd | フェニルへテロアリール類又はその塩類及びこれらを有効成分とする除草剤 |
| DE102005014906A1 (de) | 2005-04-02 | 2006-10-05 | Bayer Cropscience Gmbh | Substituierte N-[Pyrimidin-2-yl-methyl]carboxamide und ihre Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| CN101203611B (zh) | 2005-04-19 | 2013-08-14 | 巴斯福植物科学有限公司 | 控制基因表达的改良方法 |
| GB0510151D0 (en) | 2005-05-18 | 2005-06-22 | Syngenta Ltd | Novel herbicides |
| EP1888509B1 (de) | 2005-05-25 | 2013-05-15 | Basf Se | Benzoylsubstituierte serin-amide |
| CA2609243A1 (en) | 2005-05-25 | 2006-11-30 | Basf Aktiengesellschaft | Heteroaroyl-substituted serine amides |
| EP1907549A1 (en) | 2005-06-17 | 2008-04-09 | Pioneer-Hi-Bred International, Inc. | Methods and compositions for gene silencing |
| DE102005031412A1 (de) | 2005-07-06 | 2007-01-11 | Bayer Cropscience Gmbh | 3-[1-Halo-1-aryl-methan-sulfonyl]-und 3-[1-Halo-1-heteroaryl-methan-sulfonyl]-isoxazolin-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung und Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| US20070011448A1 (en) | 2005-07-06 | 2007-01-11 | Microsoft Corporation | Using non 5-tuple information with IPSec |
| US8013211B2 (en) | 2005-07-07 | 2011-09-06 | FuturaGene Israel, Ltd. | Compositions and methods comprising stinging capsules/cells for delivering a biologically active agent into a plant cell |
| US20070026765A1 (en) * | 2005-08-01 | 2007-02-01 | Renn Richard M | Composition and method for the control of parasitic mites of honey bees |
| US7702116B2 (en) | 2005-08-22 | 2010-04-20 | Stone Christopher L | Microphone bleed simulator |
| ATE544861T1 (de) | 2005-08-24 | 2012-02-15 | Pioneer Hi Bred Int | Verfahren und zusammensetzungen für den ausdruck eines polynukleotid von interesse |
| US7671254B2 (en) | 2005-08-25 | 2010-03-02 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Herbicide resistance gene, compositions and methods |
| US7842856B2 (en) | 2005-08-25 | 2010-11-30 | The Board Of Trustees Of The University Of Illinois | Herbicide resistance gene, compositions and methods |
| WO2007026834A1 (ja) | 2005-09-01 | 2007-03-08 | Kumiai Chemical Industry Co., Ltd. | ピラゾール誘導体及び農園芸用除草剤 |
| BRPI0615792A2 (pt) | 2005-09-16 | 2009-06-16 | Devgen Nv | métodos de controle de pestes com base no uso de rnai |
| UA98445C2 (ru) | 2005-09-16 | 2012-05-25 | Монсанто Текнолоджи Ллс | Способы генетического контроля поражения растений насекомыми и композиции, примененные для этого |
| US8853489B2 (en) | 2005-09-16 | 2014-10-07 | Devgen Nv | Transgenic plant-based methods for plant pests using RNAi |
| WO2007039454A1 (en) | 2005-09-20 | 2007-04-12 | Basf Plant Science Gmbh | Methods for controlling gene expression using ta-siran |
| WO2007038788A2 (en) | 2005-09-29 | 2007-04-05 | The Cleveland Clinic Foundation | Small interfering rnas as non-specific drugs |
| AU2006302969B2 (en) | 2005-10-13 | 2011-09-22 | Monsanto Technology, Llc | Methods for producing hybrid seed |
| WO2007050715A2 (en) | 2005-10-26 | 2007-05-03 | Integrated Plant Genetics, Inc. | Compositions and methods for safe delivery of biologically-active plant transformation agents using non-fibrous silicon carbide powder |
| JP2007161701A (ja) | 2005-11-15 | 2007-06-28 | Hokko Chem Ind Co Ltd | アリールオキシ‐ｎ‐（オキシイミノアルキル）アルカン酸アミド誘導体および用途 |
| EP1951263A4 (en) | 2005-11-21 | 2009-11-18 | Johnson & Johnson Res Pty Ltd | MULTITARGETING DISTURBING RNAS WITH TWO ACTIVE STRANDS AND DESIGN AND APPLICATION METHODS |
| JP2007153847A (ja) | 2005-12-08 | 2007-06-21 | Hokko Chem Ind Co Ltd | フェノキシアルカン酸アミド誘導体および除草剤 |
| WO2007070389A2 (en) | 2005-12-12 | 2007-06-21 | Syngenta Participations Ag | Control of parasitic weeds |
| GB0526044D0 (en) | 2005-12-21 | 2006-02-01 | Syngenta Ltd | Novel herbicides |
| BRPI0619639A2 (pt) | 2005-12-23 | 2012-12-11 | Basf Se | método para controlar ervas daninhas aquáticas, e, uso de uma composição |
| KR100755027B1 (ko) | 2005-12-28 | 2007-09-06 | 한국과학기술연구원 | 꿀벌응애 구제용 사료의 제조방법 |
| AR058408A1 (es) | 2006-01-02 | 2008-01-30 | Basf Ag | Compuestos de piperazina con accion herbicida |
| JP5015174B2 (ja) | 2006-01-05 | 2012-08-29 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 除草作用を有するピペラジン化合物 |
| JP2007182404A (ja) | 2006-01-10 | 2007-07-19 | Hokko Chem Ind Co Ltd | アリールオキシ−ｎ−（アルコキシアルキル）アルカン酸アミド誘導体および除草剤 |
| EP1971688B1 (en) | 2006-01-12 | 2012-03-14 | Devgen NV | Dsrna as insect control agent |
| US8906876B2 (en) | 2006-01-12 | 2014-12-09 | Devgen Nv | Methods for controlling pests using RNAi |
| WO2007080126A2 (en) | 2006-01-12 | 2007-07-19 | Devgen N.V. | Dsrna as insect control agent |
| WO2008063203A2 (en) | 2006-01-27 | 2008-05-29 | Whitehead Institute For Biomedical Research | Compositions and methods for efficient gene silencing in plants |
| US20080022423A1 (en) | 2006-02-03 | 2008-01-24 | Monsanto Technology Llc | IN PLANTA RNAi CONTROL OF FUNGI |
| CN101501199B (zh) | 2006-02-10 | 2016-11-09 | 孟山都技术有限公司 | 用于控制植物寄生线虫的靶基因的鉴定和用途 |
| US20070259785A1 (en) | 2006-02-13 | 2007-11-08 | Monsanto Technology Llc | SELECTING AND STABILIZING dsRNA CONSTRUCTS |
| JP2009526806A (ja) | 2006-02-16 | 2009-07-23 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | ベンゾイル置換アラニン |
| BRPI0707907A2 (pt) | 2006-02-16 | 2011-05-17 | Basf Se | composto, processo para preparação de um composto, agente, processos para a preparação de agentes, e para o combate da vegetação indesejada, e, uso de compostos |
| GB0603891D0 (en) | 2006-02-27 | 2006-04-05 | Syngenta Ltd | Novel herbicides |
| US20070214515A1 (en) | 2006-03-09 | 2007-09-13 | E.I.Du Pont De Nemours And Company | Polynucleotide encoding a maize herbicide resistance gene and methods for use |
| WO2007104570A2 (en) | 2006-03-16 | 2007-09-20 | Devgen N.V. | Nematode control |
| TWI375669B (en) | 2006-03-17 | 2012-11-01 | Sumitomo Chemical Co | Pyridazinone compound and use thereof |
| US7767234B2 (en) * | 2006-03-31 | 2010-08-03 | John I. Haas, Inc. | Compositions and methods for controlling a honey bee parasitic mite |
| US20070281900A1 (en) | 2006-05-05 | 2007-12-06 | Nastech Pharmaceutical Company Inc. | COMPOSITIONS AND METHODS FOR LIPID AND POLYPEPTIDE BASED siRNA INTRACELLULAR DELIVERY |
| WO2008015692A2 (en) | 2006-05-09 | 2008-02-07 | Reliance Life Sciences Pvt Ltd | MOLECULAR CLONING AND SEQUENCING OF ACETYL CoA CARBOXYLASE (ACCase) GENE FROM JATROPHA CURCAS |
| JP2009537480A (ja) | 2006-05-19 | 2009-10-29 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 除草活性を有するヘテロアロイル置換アラニン |
| US20090215628A1 (en) | 2006-05-19 | 2009-08-27 | Basf Se | Benzoyl-Substituted Alanines |
| US7884262B2 (en) | 2006-06-06 | 2011-02-08 | Monsanto Technology Llc | Modified DMO enzyme and methods of its use |
| WO2007141790A2 (en) | 2006-06-07 | 2007-12-13 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem | Plant expression constructs and methods of utilizing same |
| WO2007146767A2 (en) | 2006-06-08 | 2007-12-21 | Athenix Corporation | Bacterial glutamine synthetases and methods of use |
| GB0613901D0 (en) | 2006-07-13 | 2006-08-23 | Univ Lancaster | Improvements in and relating to plant protection |
| GB0614471D0 (en) | 2006-07-20 | 2006-08-30 | Syngenta Ltd | Herbicidal Compounds |
| JP2008074841A (ja) | 2006-08-23 | 2008-04-03 | Nippon Nohyaku Co Ltd | 新規なハロアルキルスルホンアニリド誘導体、除草剤及びその使用方法 |
| JP2008074840A (ja) | 2006-08-23 | 2008-04-03 | Nippon Nohyaku Co Ltd | 新規なハロアルキルスルホンアニリド誘導体、除草剤及びその使用方法 |
| GB0617575D0 (en) | 2006-09-06 | 2006-10-18 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds and compositions |
| US20090306181A1 (en) | 2006-09-29 | 2009-12-10 | Children's Medical Center Corporation | Compositions and methods for evaluating and treating heart failure |
| US7897846B2 (en) | 2006-10-30 | 2011-03-01 | Pioneer Hi-Bred Int'l, Inc. | Maize event DP-098140-6 and compositions and methods for the identification and/or detection thereof |
| TW200829171A (en) | 2006-11-17 | 2008-07-16 | Nihon Nohyaku Co Ltd | Haloalkyl sulfonanilide derivatives or salts thereof, herbicide using it as effective constituent and use-method thereof |
| JP2008133207A (ja) | 2006-11-28 | 2008-06-12 | Hokko Chem Ind Co Ltd | オキサゾリノン誘導体、その製造方法および除草剤 |
| JP2008133218A (ja) | 2006-11-28 | 2008-06-12 | Hokko Chem Ind Co Ltd | フェノキシ酪酸アミド誘導体および除草剤 |
| GB0624760D0 (en) | 2006-12-12 | 2007-01-17 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds |
| GB0625598D0 (en) | 2006-12-21 | 2007-01-31 | Syngenta Ltd | Novel herbicides |
| JP2008169121A (ja) | 2007-01-09 | 2008-07-24 | Bayer Cropscience Ag | ジャスモン酸誘導体及び除草剤並びに除草効力増強剤 |
| EP2121583B1 (de) | 2007-01-11 | 2010-09-22 | Basf Se | Heteroaroylsubstituierte serin-amide |
| CL2008000376A1 (es) | 2007-02-09 | 2008-08-18 | Du Pont | Compuestos derivados de n-oxidos de piridina; composicion herbicida; y metodo para controlar el crecimiento de vegetacion indeseada. |
| WO2008102908A1 (ja) | 2007-02-23 | 2008-08-28 | Nissan Chemical Industries, Ltd. | ハロアルキルスルホンアニリド誘導体 |
| US8781193B2 (en) | 2007-03-08 | 2014-07-15 | Sync-Rx, Ltd. | Automatic quantitative vessel analysis |
| DE102007012168A1 (de) | 2007-03-12 | 2008-09-18 | Bayer Cropscience Ag | 2-[Heteroarylalkyl-sulfonyl]-thiazol-Derivate und 2-[Heteroarylalkyl-sulfinyl]-thiazol-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung, sowie deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| CN101279951B (zh) | 2007-04-06 | 2010-09-01 | 中国中化股份有限公司 | 2-嘧啶氧(硫)基苯甲酸基烯酸酯类化合物及其应用 |
| CN101279950B (zh) | 2007-04-06 | 2010-08-11 | 中国中化股份有限公司 | 2-嘧啶氧(硫)基苯甲酸基乙酰胺类化合物及其应用 |
| GB0709710D0 (en) | 2007-05-21 | 2007-06-27 | Syngenta Ltd | Herbicidal compositions |
| EP1997381A1 (en) | 2007-06-01 | 2008-12-03 | Commissariat à l'Energie Atomique | Use of a compound having a monogalactosyldiacylglycerol synthase inhibitory activity as herbicide or algaecide, herbicide and algaecide compositions |
| RU2485180C2 (ru) | 2007-06-07 | 2013-06-20 | Эгрикалча Энд Эгри-Фуд Кэнэда | Способ трансфекции и трансдукции растительных клеток |
| EP2054395A2 (de) | 2007-06-12 | 2009-05-06 | Basf Se | Piperazinverbindungen mit herbizider wirkung |
| SI2054394T1 (sl) | 2007-06-12 | 2010-02-26 | Basf Se | Spojine piperazinov s herbicidno aktivnostjo |
| US20100167933A1 (en) | 2007-06-22 | 2010-07-01 | Eike Hupe | Piperazine Compounds With Herbicidal Action |
| NL2000719C2 (nl) | 2007-06-22 | 2008-12-23 | Synthesis B V | Werkwijze en inrichting voor het behandelen van plantaardige zaden. |
| KR100884933B1 (ko) | 2007-07-03 | 2009-02-23 | 주식회사경농 | 광활성 (ｒ)-알릴옥시프로피온산 아마이드 화합물 및 이를포함하는 제초제 조성물 |
| US20130084243A1 (en) | 2010-01-27 | 2013-04-04 | Liliane Goetsch | Igf-1r specific antibodies useful in the detection and diagnosis of cellular proliferative disorders |
| CN101139607A (zh) | 2007-08-07 | 2008-03-12 | 西南大学 | 家蚕微孢子虫极丝蛋白ptp1基因 |
| BRPI0815471A2 (pt) | 2007-08-14 | 2015-04-07 | Dsm Ip Assets Bv | Método para desvulcanizar uma borracha vulcanizada |
| EP3150068B1 (en) | 2007-08-16 | 2019-10-09 | Basf Se | Seed treatment compositions and methods |
| CN101842381A (zh) | 2007-08-27 | 2010-09-22 | 波士顿生物医药公司 | 作为微小rna模拟物或抑制剂的不对称rna双链体的组合物 |
| JP2009067739A (ja) | 2007-09-14 | 2009-04-02 | Sumitomo Chemical Co Ltd | 除草用組成物 |
| CL2008002703A1 (es) | 2007-09-14 | 2009-11-20 | Sumitomo Chemical Co | Compuestos derivados de 1,4-dihidro-2h-piridazin-3-ona; composicion herbicida que comprende a dichos compuestos; metodo de control de malezas; uso de dichos compuestos para el control de malezas; y compuestos intermediarios. |
| DE112008002456T5 (de) | 2007-09-21 | 2011-01-13 | Basf Plant Science Gmbh | Pflanzen mit erhöhtem Ertrag |
| CN101889090B (zh) | 2007-10-05 | 2018-01-23 | 陶氏益农公司 | 用于将分子物质转移入植物细胞中的方法 |
| US20110015084A1 (en) | 2007-10-25 | 2011-01-20 | Monsanto Technology Llc | Methods for Identifying Genetic Linkage |
| AU2008324068A1 (en) | 2007-11-05 | 2009-05-14 | Baltic Technology Development, Ltd. | Use of oligonucleotides with modified bases in hybridization of nucleic acids |
| US20110171287A1 (en) | 2007-11-05 | 2011-07-14 | Baltic Technology Develpment, Ltd. | Use of Oligonucleotides with Modified Bases as Antiviral Agents |
| US8097712B2 (en) | 2007-11-07 | 2012-01-17 | Beelogics Inc. | Compositions for conferring tolerance to viral disease in social insects, and the use thereof |
| JP2009114128A (ja) | 2007-11-07 | 2009-05-28 | Hokko Chem Ind Co Ltd | アミノ酸アミド誘導体および除草剤 |
| GB0722472D0 (en) | 2007-11-15 | 2007-12-27 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds |
| JP2009126792A (ja) | 2007-11-20 | 2009-06-11 | Sagami Chem Res Center | ５−置換フェニル−２−トリフルオロメチルピリミジン−６（１ｈ）−オン誘導体及びその製造方法並びに該誘導体を有効成分として含有する除草剤 |
| EP2065374A1 (de) | 2007-11-30 | 2009-06-03 | Bayer CropScience AG | 2-(Benzyl- und 1H-pyrazol-4-ylmethyl)sulfinyl-Thiazol-Derivate als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| EP2065373A1 (de) | 2007-11-30 | 2009-06-03 | Bayer CropScience AG | Chirale 3-(Benzylsulfinyl)-5,5-dimethyl-4,5-dihydroisoxazol-Derivate und 5,5-Dimethyl-3-[(1H-pyrazol-4-ylmethyl) sulfinyl]-4,5-dihydroisoxazol-Derivate, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| JP2009137851A (ja) | 2007-12-04 | 2009-06-25 | Sagami Chem Res Center | ２−トリフルオロメチルピリミジン−６（１ｈ）−オン誘導体及びその製造方法並びに該誘導体を有効成分として含有する除草剤 |
| US8158850B2 (en) | 2007-12-19 | 2012-04-17 | Monsanto Technology Llc | Method to enhance yield and purity of hybrid crops |
| CL2008003785A1 (es) | 2007-12-21 | 2009-10-09 | Du Pont | Compuestos derivados de piridazina; composiciones herbicidas que comprenden a dichos compuestos; y método para controlar el crecimiento de la vegetación indeseada. |
| GB0800856D0 (en) | 2008-01-17 | 2008-02-27 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds |
| US20090188008A1 (en) | 2008-01-17 | 2009-07-23 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods for the suppression of target polynucleotides |
| US8847013B2 (en) | 2008-01-17 | 2014-09-30 | Pioneer Hi Bred International Inc | Compositions and methods for the suppression of target polynucleotides from lepidoptera |
| SI2249642T1 (sl) | 2008-02-20 | 2012-12-31 | Syngenta Participations Ag | Herbicidna formulacija |
| US7807791B2 (en) | 2008-03-03 | 2010-10-05 | Ms Technologies Llc | Antibodies immunoreactive with mutant 5-enolpyruvlshikimate-3-phosphate synthase |
| WO2009116151A1 (ja) | 2008-03-19 | 2009-09-24 | アグロカネショウ株式会社 | １-フェニル-５-ジフルオロメチルピラゾール-４-カルボキサミド誘導体及びこれを有効成分とする除草剤 |
| GB0805318D0 (en) | 2008-03-20 | 2008-04-30 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds |
| US8802923B2 (en) | 2008-04-10 | 2014-08-12 | A.B. Seeds Ltd. | Compositions and methods for enhancing oil content in plants |
| US8271857B2 (en) | 2008-05-13 | 2012-09-18 | International Business Machines Corporation | Correcting errors in longitudinal position (LPOS) words |
| EP2235177B1 (en) | 2008-06-13 | 2012-07-18 | RiboxX GmbH | Method for enzymatic synthesis of chemically modified rna |
| EP2135865A1 (de) | 2008-06-17 | 2009-12-23 | Bayer CropScience AG | Substituierte 1-(Diazinyl) pyrazol-4-yl-essigsäuren, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| WO2009158258A1 (en) | 2008-06-25 | 2009-12-30 | E. I. Du Pont De Nemours And Company | Herbicidal dihydro oxo six-membered azinyl isoxazolines |
| TWI455944B (zh) | 2008-07-01 | 2014-10-11 | Daiichi Sankyo Co Ltd | 雙股多核苷酸 |
| CN106995819B (zh) | 2008-07-01 | 2020-10-20 | 孟山都技术公司 | 用于调控靶基因表达的重组dna构建体和方法 |
| AU2009270020B2 (en) | 2008-07-10 | 2014-09-25 | Regenesance B.V. | Complement antagonists and uses thereof |
| EP2147919A1 (de) | 2008-07-24 | 2010-01-27 | Bayer CropScience Aktiengesellschaft | Heterocyclisch substituierte Amide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Herbizide |
| EP2315760B1 (de) | 2008-07-29 | 2013-03-06 | Basf Se | Piperazinverbindungen mit herbizider wirkung |
| EP2328617A2 (en) | 2008-08-15 | 2011-06-08 | Zoser B. Salama | Carrier system for biological agents containing organosilicon compounds and uses thereof |
| WO2010019271A1 (en) | 2008-08-15 | 2010-02-18 | Georgetown University | Fluorescent regulators of rassf1a expression and human cancer cell proliferation |
| CN102137841B (zh) | 2008-09-02 | 2014-05-14 | 日产化学工业株式会社 | 邻位取代卤代烷基磺酰苯胺衍生物及除草剂 |
| WO2010034153A1 (zh) | 2008-09-25 | 2010-04-01 | 沈阳化工研究院 | 2-嘧啶氧（硫）基苯甲酸基烯酸酯类化合物及其应用 |
| EP2350999A4 (en) | 2008-09-25 | 2017-04-05 | CAE Healthcare Canada Inc. | Simulation of medical imaging |
| CA2735899A1 (en) | 2008-09-25 | 2010-04-01 | Cephalon, Inc. | Liquid formulations of bendamustine |
| BRPI0919519A2 (pt) | 2008-09-30 | 2015-08-18 | Basf Se | Composição, agente herbicida, e, usos de herbicida, e da composição |
| US20100099561A1 (en) | 2008-10-15 | 2010-04-22 | E.I. Du Pont De Nemours And Company | Heterobicyclic alkylthio-bridged isoxazolines |
| CA2741138A1 (en) | 2008-10-29 | 2010-05-06 | Basf Se | Substituted pyridines having herbicidal action |
| WO2010056519A1 (en) | 2008-10-30 | 2010-05-20 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Manipulation of glutamine synthetases (gs) to improve nitrogen use efficiency and grain yield in higher plants |
| US20110318470A1 (en) | 2008-10-31 | 2011-12-29 | Klaus Grossmann | Method For Improving Plant Health |
| US20110207609A1 (en) | 2008-10-31 | 2011-08-25 | Basf Se | Piperazine Compounds With Herbicidal Effect |
| WO2010049405A1 (en) | 2008-10-31 | 2010-05-06 | Basf Se | Method for improving plant health |
| EP2194052A1 (de) | 2008-12-06 | 2010-06-09 | Bayer CropScience AG | Substituierte 1-(Thiazolyl)- und 1-(Isothiazolyl)pyrazol-4-yl-essigsäuren, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| DE102008063561A1 (de) | 2008-12-18 | 2010-08-19 | Bayer Cropscience Ag | Hydrazide, Verfahren zu deren Herstellung und deren Verwendung als Herbizide und Insektizide |
| JP2012512821A (ja) | 2008-12-18 | 2012-06-07 | ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア | 除草作用を有するヘテロ環ジケトン誘導体 |
| US20100249214A1 (en) | 2009-02-11 | 2010-09-30 | Dicerna Pharmaceuticals | Multiplex dicer substrate rna interference molecules having joining sequences |
| EP2204366A1 (de) | 2008-12-19 | 2010-07-07 | Bayer CropScience AG | Herbizid und insektizid wirksame phenylsubstituierte Pyridazinone |
| WO2010099016A1 (en) | 2009-02-25 | 2010-09-02 | Worcester Polytechnic Institute | Automatic vascular model generation based on fluid-structure interactions (fsi) |
| EP2429399A4 (en) | 2009-03-06 | 2013-04-10 | Bio Tree Systems Inc | METHOD AND APPARATUS FOR VESSEL TESTING |
| JP2010235603A (ja) | 2009-03-13 | 2010-10-21 | Sumitomo Chemical Co Ltd | ピリダジノン化合物及びその用途 |
| EP2229813A1 (de) | 2009-03-21 | 2010-09-22 | Bayer CropScience AG | Pyrimidin-4-ylpropandinitril-derivate, Verfahren zu deren Herstellung sowie deren Verwendung als Herbizide und Pflanzenwachstumsregulatoren |
| GB0905441D0 (en) | 2009-03-30 | 2009-05-13 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds |
| EP2756845B1 (en) | 2009-04-03 | 2017-03-15 | Dicerna Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for the specific inhibition of KRAS by asymmetric double-stranded RNA |
| CN102369203B (zh) | 2009-04-06 | 2014-08-20 | 辛根塔有限公司 | 除草化合物 |
| AU2010237801A1 (en) | 2009-04-14 | 2011-10-20 | Syngenta Participations Ag | Haloalkylsulfonanilide derivative |
| AU2010241034A1 (en) | 2009-04-21 | 2011-11-24 | Basf Plant Science Company Gmbh | RNA-mediated induction of gene expression in plants |
| BRPI1007708A2 (pt) | 2009-05-05 | 2020-08-18 | Beeologics Inc | agente do ácido nucleico isolado, construção de ácido nucleico, ácido nucleico isolado, composição ingerível pelas abelhas, método para reduzir a susceptibilidade de uma abelha a infecção por nosema e método para reduzir a susceptibilidade das abelhas melíferas à infecçção por nosema |
| GB0908293D0 (en) | 2009-05-14 | 2009-06-24 | Syngenta Ltd | Herbicidal compounds |
| MX2012000271A (es) | 2009-06-30 | 2012-09-07 | Yissum Res Dev Co | Introduccion de dna en celulas de planta. |
| WO2011003776A2 (de) | 2009-07-09 | 2011-01-13 | Basf Se | Substituierte cyanobutyrate mit herbizider wirkung |
| US20110028412A1 (en) | 2009-08-03 | 2011-02-03 | Cappellos, Inc. | Herbal enhanced analgesic formulations |
| WO2011017137A2 (en) | 2009-08-03 | 2011-02-10 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Methods and compositions for treating insects |
| WO2011021171A1 (en) | 2009-08-21 | 2011-02-24 | Beeologics, Llc | Preventing and curing beneficial insect diseases via plant transcribed molecules |
| BR112012007442B1 (pt) | 2009-09-25 | 2017-08-08 | Bayer Intellectual Property Gmbh | N- (1,2,5-oxadiazol-3-yl) benzamidasbenzamides, its uses, herbicide composition, and method for controlling undesired plants |
| US8962584B2 (en) | 2009-10-14 | 2015-02-24 | Yissum Research Development Company Of The Hebrew University Of Jerusalem, Ltd. | Compositions for controlling Varroa mites in bees |
| CN102906263B (zh) | 2009-10-14 | 2017-05-31 | 耶路撒冷希伯来大学伊森姆研究发展公司 | 用于控制蜂中的瓦螨的组合物 |
| DE102010042864A1 (de) | 2009-10-30 | 2011-06-01 | Basf Se | Substituierte Thioamide mit herbizider Wirkung |
| US8329619B2 (en) | 2009-11-03 | 2012-12-11 | Basf Se | Substituted quinolinones having herbicidal action |
| US8926626B2 (en) | 2009-11-10 | 2015-01-06 | Wake Forest University Health Sciences | Tissue tensioning devices and related methods |
| US9145562B2 (en) | 2009-11-20 | 2015-09-29 | Alberta Innovates—Technology Futures | Variegation in plants |
| RU2764586C2 (ru) | 2009-11-23 | 2022-01-18 | Монсанто Текнолоджи Ллс | Трансгенное событие mon 87427 маиса и относительная шкала развития |
| JP2011195561A (ja) | 2009-11-24 | 2011-10-06 | Sumitomo Chemical Co Ltd | ケトン化合物及びそれを含有する除草剤 |
| WO2011067745A2 (en) | 2009-12-06 | 2011-06-09 | Rosetta Green Ltd. | Compositions and methods for enhancing plants resistance to abiotic stress |
| CN102770531A (zh) | 2009-12-23 | 2012-11-07 | 拜尔知识产权有限公司 | 对hppd抑制剂型除草剂耐受的植物 |
| US9493785B2 (en) | 2009-12-28 | 2016-11-15 | Evogene Ltd. | Isolated polynucleotides and polypeptides and methods of using same for increasing plant yield, biomass, growth rate, vigor, oil content, abiotic stress tolerance of plants and nitrogen use efficiency |
| US9970021B2 (en) | 2010-01-26 | 2018-05-15 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | HPPD-inhibitor herbicide tolerance |
| MX2012010479A (es) | 2010-03-08 | 2012-10-09 | Monsanto Technology Llc | Moleculas polinucleotidicas para regulacion genetica en plantas. |
| EP2385129A1 (en) | 2010-05-03 | 2011-11-09 | BASF Plant Science Company GmbH | Enhanced methods for gene regulation in plants |
| CA2801808A1 (en) | 2010-06-30 | 2012-01-05 | Basf Plant Science Company Gmbh | Novel microrna precursor and use thereof in regulation of target gene expression |
| EP2418283A1 (en) | 2010-08-07 | 2012-02-15 | Nomad Bioscience GmbH | Process of transfecting plants |
| CN101914540A (zh) | 2010-08-09 | 2010-12-15 | 大连大学 | 一种将rna干扰引入植物的方法 |
| CA2815769A1 (en) | 2010-10-25 | 2012-05-03 | A.B. Seeds Ltd. | Isolated polynucleotides expressing or modulating micrornas or targets of same, transgenic plants comprising same and uses thereof in improving nitrogen use efficiency, abiotic stress tolerance, biomass, vigor or yield of a plant |
| EP2633049B1 (en) | 2010-10-27 | 2018-10-10 | Harrisvaccines Inc | Methods and compositions to protect aquatic invertebrates from disease |
| EP4059342A1 (en) | 2010-12-17 | 2022-09-21 | Monsanto Technology LLC | Methods for improving competency of plant cells |
| WO2012092580A2 (en) | 2010-12-30 | 2012-07-05 | Dow Agrosciences Llc | Nucleic acid molecules that target the vacuolar atpase h subunit and confer resistance to coleopteran pests |
| CA2832638A1 (en) | 2011-04-20 | 2012-10-26 | Devgen Nv | Plants resistant to insect pests |
| EP2530159A1 (en) | 2011-06-03 | 2012-12-05 | Sandoz Ag | Transcription terminator sequences |
| RU2619219C2 (ru) | 2011-07-18 | 2017-05-12 | Девген Нв | Подавление экспрессии генов у насекомых-вредителей |
| CA2842709A1 (en) | 2011-08-16 | 2013-02-21 | Syngenta Participations Ag | Methods and compositions for introduction of exogenous dsrna into plant cells |
| US9974508B2 (en) | 2011-09-01 | 2018-05-22 | Ghassan S. Kassab | Non-invasive systems and methods for determining fractional flow reserve |
| EP2755988B1 (en) | 2011-09-13 | 2018-08-22 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
| CA2848680C (en) | 2011-09-13 | 2020-05-19 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| EP2755466A4 (en) | 2011-09-13 | 2015-04-15 | Monsanto Technology Llc | METHODS AND COMPOSITIONS FOR CONTROLLING WEEDS |
| EP3296402B1 (en) | 2011-09-13 | 2020-04-15 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
| AU2012308753B2 (en) | 2011-09-13 | 2018-05-17 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| WO2013039990A1 (en) | 2011-09-13 | 2013-03-21 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| EP3434779A1 (en) | 2011-09-13 | 2019-01-30 | Monsanto Technology LLC | Methods and compositions for weed control |
| AU2012308737B2 (en) | 2011-09-13 | 2018-06-14 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| US10034614B2 (en) | 2012-02-29 | 2018-07-31 | General Electric Company | Fractional flow reserve estimation |
| US8548778B1 (en) | 2012-05-14 | 2013-10-01 | Heartflow, Inc. | Method and system for providing information from a patient-specific model of blood flow |
| US10240161B2 (en) | 2012-05-24 | 2019-03-26 | A.B. Seeds Ltd. | Compositions and methods for silencing gene expression |
| WO2013180851A1 (en) | 2012-05-29 | 2013-12-05 | The Johns Hopkins University | A method for estimating pressure gradients and fractional flow reserve from computed tomography angiography: transluminal attenuation flow encoding |
| US9708607B2 (en) | 2012-08-03 | 2017-07-18 | Alnylam Pharmaceuticals, Inc. | Modified RNAi agents |
| US10683505B2 (en) | 2013-01-01 | 2020-06-16 | Monsanto Technology Llc | Methods of introducing dsRNA to plant seeds for modulating gene expression |
| MX2015008611A (es) | 2013-01-01 | 2016-02-03 | Seeds Ltd Ab | Metodos para introducir dsrna en semillas de plantas para modular la expresion genetica. |
| EP2967082A4 (en) | 2013-03-13 | 2016-11-02 | Monsanto Technology Llc | METHOD AND COMPOSITIONS FOR WEED CONTROL |
| BR112015023051A2 (pt) | 2013-03-13 | 2017-11-14 | Monsanto Technology Llc | método para controle de ervas daninhas, composição herbicida, cassete de expressão microbiano e método de produção de polinucleotídeo |
| US9920316B2 (en) | 2013-03-14 | 2018-03-20 | Pioneer Hi-Bred International, Inc. | Compositions and methods to control insect pests |
| US10568328B2 (en) | 2013-03-15 | 2020-02-25 | Monsanto Technology Llc | Methods and compositions for weed control |
| KR20230066486A (ko) | 2013-03-15 | 2023-05-15 | 몬산토 테크놀로지 엘엘씨 | Rna의 생산 및 전달을 위한 조성물 및 방법 |
| GB201311840D0 (en) | 2013-07-02 | 2013-08-14 | Univ Aberdeen | Control of varroa mite infestation |
| US9850496B2 (en) | 2013-07-19 | 2017-12-26 | Monsanto Technology Llc | Compositions and methods for controlling Leptinotarsa |
| JP6668236B2 (ja) | 2013-07-19 | 2020-03-18 | モンサント テクノロジー エルエルシー | Ｌｅｐｔｉｎｏｔａｒｓａ防除用組成物及びその方法 |
| MX2016005778A (es) | 2013-11-04 | 2016-12-20 | Monsanto Technology Llc | Composiciones y metodos para controlar infestaciones de plagas y parasitos de los artropodos. |
| UA119253C2 (uk) | 2013-12-10 | 2019-05-27 | Біолоджикс, Інк. | Спосіб боротьби із вірусом у кліща varroa та у бджіл |
| EP3125676A4 (en) | 2014-04-01 | 2018-02-14 | Monsanto Technology LLC | Compositions and methods for controlling insect pests |
| CN114009454A (zh) | 2014-07-29 | 2022-02-08 | 孟山都技术公司 | 用于控制昆虫害虫的组合物和方法 |
-
2008
- 2008-08-20 US US12/222,949 patent/US8097712B2/en not_active Expired - Fee Related
- 2008-11-03 BR BRPI0817367-2A patent/BRPI0817367A2/pt not_active Application Discontinuation
- 2008-11-03 EP EP13156180.5A patent/EP2703489B1/en not_active Not-in-force
- 2008-11-03 WO PCT/IL2008/001440 patent/WO2009060429A2/en active Application Filing
- 2008-11-03 AU AU2008325989A patent/AU2008325989B2/en not_active Ceased
- 2008-11-03 TR TR2018/09375T patent/TR201809375T4/tr unknown
- 2008-11-03 EP EP08847971.2A patent/EP2222852B1/en active Active
- 2008-11-03 EP EP18207017.7A patent/EP3480311A1/en not_active Withdrawn
- 2008-11-03 EP EP13156185.4A patent/EP2703490B1/en active Active
- 2008-11-03 EP EP13156183.9A patent/EP2706114B1/en active Active
- 2008-11-03 CA CA2704858A patent/CA2704858C/en active Active
-
2010
- 2010-05-31 ZA ZA2010/03861A patent/ZA201003861B/en unknown
-
2011
- 2011-02-28 HK HK11101987.0A patent/HK1149047A1/xx not_active IP Right Cessation
- 2011-12-21 US US13/332,430 patent/US8507457B2/en active Active
-
2013
- 2013-07-01 US US13/932,051 patent/US10888579B2/en active Active
-
2017
- 2017-09-26 IL IL254692A patent/IL254692B/en active IP Right Grant
-
2020
- 2020-12-27 US US17/134,483 patent/US20210275566A1/en active Pending
-
2021
- 2021-02-25 IL IL281111A patent/IL281111A/en unknown
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| US20130289097A1 (en) | 2013-10-31 |
| WO2009060429A3 (en) | 2009-09-24 |
| BRPI0817367A2 (pt) | 2015-06-16 |
| US20090118214A1 (en) | 2009-05-07 |
| ZA201003861B (en) | 2012-02-29 |
| AU2008325989A1 (en) | 2009-05-14 |
| CA2704858C (en) | 2020-06-09 |
| US20120108497A1 (en) | 2012-05-03 |
| IL254692B (en) | 2021-03-25 |
| US8097712B2 (en) | 2012-01-17 |
| EP2703490A8 (en) | 2014-06-18 |
| US8507457B2 (en) | 2013-08-13 |
| EP2222852B1 (en) | 2015-07-01 |
| CA2704858A1 (en) | 2009-05-14 |
| EP2703489A1 (en) | 2014-03-05 |
| EP2703489B1 (en) | 2019-01-09 |
| WO2009060429A2 (en) | 2009-05-14 |
| HK1149047A1 (en) | 2011-09-23 |
| EP2703490A1 (en) | 2014-03-05 |
| AU2008325989B2 (en) | 2014-11-13 |
| EP3480311A1 (en) | 2019-05-08 |
| US10888579B2 (en) | 2021-01-12 |
| EP2222852A2 (en) | 2010-09-01 |
| IL281111A (en) | 2021-04-29 |
| US20210275566A1 (en) | 2021-09-09 |
| EP2706114B1 (en) | 2017-08-02 |
| IL254692A0 (en) | 2017-11-30 |
| EP2706114A1 (en) | 2014-03-12 |
| EP2703490B1 (en) | 2018-04-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| TR201809375T4 (tr) | Koloni halinde yaşayan böceklerde viral hastalığa karşı tolerans kazandırma yöntemi. | |
| US10801028B2 (en) | Compositions for controlling Varroa mites in bees | |
| EP3272869B1 (en) | Compositions for controlling varroa mites in bees | |
| JP5183064B2 (ja) | 甲殻類動物、及び他の無脊椎動物における、ｄｓＲＮＡで誘導された特異的、及び非特異的免疫、及びそこで使用する生物送達媒体 | |
| CN110997911A (zh) | 水产养殖和其他动物系统中病原菌生物控制的新系统 | |
| AU2021202071B2 (en) | Compositions and methods for controlling arthropod parasite and pest infestations | |
| AU2017204098B2 (en) | Compositions for Conferring Tolerance to Viral Disease in Social Insects, and the Use Thereof |