SK10052002A3

SK10052002A3 - Indazolové zlúčeniny, farmaceutické kompozície obsahujúce tieto zlúčeniny a spôsoby sprostredkovania alebo zastavenia bunkovej proliferácie

Info

Publication number: SK10052002A3
Application number: SK1005-2002A
Authority: SK
Inventors: Siegfried Heinz Reich; Ted Michael Bleckman; Susan Elizabeth Kephart; William Henry Romines Iii; Michael B. Wallace
Original assignee: Agouron Pharmaceuticals, Inc.
Priority date: 2000-01-18
Filing date: 2001-01-18
Publication date: 2003-03-04
Also published as: IS6474A; PA8509901A1; BR0107783A; DZ3301A1; WO2001053268A3; CA2388885A1; MA27589A1; CO5280070A1; AU785013B2; US6919461B2; KR20020073505A; DOP2001000120A; US20060111322A1; GT200100009A; IL150730A0; AP2002002564A0; YU54202A; ZA200203040B; WO2001053268A2; EE200200398A

Description

Oblast techniky

Predkladaný vynález sa týka indazolových zlúčenín, ktoré ovplyvňujú a/alebo inhibujú proliferáciu buniek, napríklad, prostredníctvom inhibície aktivity proteín kináz, ako je VEGF, GHK-1, a cyklín-dependentnej kinázy (CDKs), ako je CDK1, CDK2, CDK4 a CDK6. Vynález sa ďalej týka farmaceutických prostriedkov obsahujúcich takéto zlúčeniny a prostriedky a spôsobov na liečbu nádorov, rovnako ako iných ochorení spojených s nežiadúcou angiogenéziou a/alebo bunkovou proliferáciou, prostredníctvom podania účinných množstiev takých zlúčenín.

Doterajší stav techniky

Nekontrolovaná proliferácia buniek je známkou nádorov. Proliferácia buniek v reakcii na rôzne stimuly sa prejavuje dereguláciou bunkového cyklu, čo je proces, ktorým sa bunky delia a množia. Nádorové bunky majú typicky poškodené gény, ktoré priamo' alebo nepriamo regulujú progresiu bunkovým cyklom.

Hyperproliferatívne ochorenia, vrátane nádorových ochorení, sú charakterizované bunkami rýchlo a nekontrolovane prechádzajúcimi bunkovým cyklom v dôsledku, napríklad, poškodenia génov, ktoré, priamo alebo nepriamo regulujú progresiu bunkovým cyklom. Preto môžu byt činidlá, ktoré modulujú bunkový cyklus, a tak hyperproliferáciu, použité na liečbu rôznych ochorení spojených s nekontrolovanou alebo nežiaducou proliferáciou buniek. Okrem použitia ako protinádorové chemoterapeutické činidlá sú inhibítory bunkového cyklu tiež navrhnuté ako antiparazitárne činidlá (pozri Gray et al., Curr. Med. Chem. 6, 859-875 (1999)) a novo ako účinné antivirotiká (pozri Schang et al., J. Virol. 74, 2107-2120 (2000)). Ďalej, použitie antiproliferatívnych Činidiel môže byé tiež rozšírené na liečbu kardiovaskulárnych ochorení, ako je ateroskleróza alebo restenosa (pozri BraunDullaeus et al., Circulation, 98, 82-89 (1998)), a na zápalové stavy, ako je artritída (pozri, Taniguchi et at. , Náture Med., 5, 760-767(1999)) alebo psoriáza.

Mechanizmy proliferácie buniek sú skúmané na bunkovej a molekulárnej úrovni. Na bunkovej úrovni sa skúma deregulácia signálnych dráh, strata riadenia bunkového cyklu, neriadená angiogenézia alebo stimulácia zápalových pochodov, zatiaľ čo na molekulárnej úrovni sú tieto procesy modulované rôznymi proteínmi, najmä proteín-kinázami. Zastavenie proliferácie môže bytŕ. tiež dôsledkom programovanej bunkovej smrti, alebo tiež apoptosii, ktorá je tiež regulovaná rôznymi dráhami, z ktorých niektoré zahŕňajú proteolytické enzýmy.

Z kandidátov na regulačné proteíny sú proteín kinázy rodinou enzýmov, ktoré katalyzujú fosforyláciu hydroxylových skupín špecifických tyrosínových, serínových alebo treonínových zvyškov v proteíne. Obvykle taká fosforylácia dramaticky zmení funkciu proteínu a preto sú proteín kinázy zásadné na reguláciu rôznych bunkových procesov, vrátane metabolizmu, proliferácie buniek, diferenciácie buniek a prežívania buniek. Z mnohých rôznych bunkových funkcií, pre ktoré je nutná aktivita proteín kináz, predstavujú niektoré procesy atraktívne ciele na terapeutickú intervenciu pri niektorých ochoreniach. Dvoma príkladmi sú riadenie bunkového cyklu a angiogenázie, v ktorých majú proteín kinázy zásadnú úlohu; tieto procesy sú zásadné na rast solídnych nádorov, rovnako ako pre iné ochorenia.

CDK tvorí triedu enzýmov, ktoré sú zásadné v riadení prechodu medzi rôznymi fázami bunkového cyklu, ako je progresia zo štádia kľudu do G_x (fáza medzi mitózou a zahájením replikácie DNA pre nové kolo bunkového delenia) , do S fázy (fáza aktívnej syntézy DNA), alebo progresia z G₂ do M fázy, v ktorej dochádza k aktívnej mitóze a bunkovému deleniu (pozri, napríklad, články v Science, zväzok 274 (1996) , str. 16431677; a Ann. Rev. Celí Dev. Biol, zväzok 13 (1997), str. 261291, CDK komplexy sa tvoria asociáciou s regulačnou cyklínovou podj ednotkou (napríklad, cyklínom A, BI, B2, Dl, D2, D3, a E) a katalytickou kinázovou podjednotkou (napríklad, cdc2 (CDKI), CDK2, CDK4, CDK5, a CDK6). Ako naznačuje názov, sú CDK absolútne závislé na cyklín podjetnotke pri fosforylácii cieľových substrátov, a rôzne páry kináza/cyklín regulujú progresiu cez jednotlivé fázy bunkového cyklu.

D cyklíny sú citlivé na extracelulárne rastové signály a sú aktivované v reakcii na mitogény počas Gi fázy bunkového cyklu. CDK4/cyklín D má významnú úlohu v progresii bunkového cyklu v dôsledku fosforylácie, a tým inaktivácie retinoblastomového proteínu (Rb) . Hypofosforylovaný Rb sa viaže na rodinu regulátorov transkripcie, ale po hyperfosforylácii Rb komplexom CDK4/cyklín D sa tieto transkripčné faktory uvoľnia a aktivujú gény, ktorých génové produkty sú zodpovedné za progresiu do S fázy. Fosforylácia Rb a inaktivácia CDK4/cyklínu umoňuje priechod buniek reštrikčným bodom Gi fázy, kde už bunky nie sú citlivé na extarcelulárne rastové alebo inhibičné signály a prebieha bunkové delenie. Počas pozdnej G_xfázy je Rb tiež fosforylovaný a inaktivovaný komplexom CDK2/cyklín E, a nové dôkazy naznačujú, že CDK2/cyklín E môže tiež regulovať: progresiu do S fázy cestou paralelnej dráhy, ktorá je nezávislá na fosforylácii Rbt (pozri Lukas et al., Cyclin E-induced S Phase Without Aktivation of the pRb/E2F Pathway, Genes a Dev., zväzok 11 (1997), str. 1479-1492).

Progresia z G_x do S fázy, ktorá je sprostredkovaná komplexami CDK4/cyklín D a CDK2/cyklín E, je predmetom rôznych regulačných mechanizmov, ako negatívnych, tak pozitívnych. Rastové stimuly, ako sú mitogény, spôsobujú zvýšenie syntézy cyklínu Dl a tak zvýšenie množstva funkčného CDK4, naopak, rast buniek môže byt zarazený v reakcii na poškodenie DNA alebo na negatívne rastové stimuly, indukciou endogénnych inhibičných proteínov. Medzi tieto prirodzené inhibítory patrí _P2l^WAF1/clpl, p27^KIP1 a pl6^1HK4 rodina, kde posledný uvedený proteín inhibuje výlučne CDK4 (pozri Harper, Cyclin Dependent Kinase Inhibitors, Cancer Surv., zväzok 29 (1997), str. 91107) . Aberácie v tomto kontrolnom systéme, najmä tie, ktoré postihujú funkciu CDK4 a CDK2, sa predpokladajú pri zmene buniek na vysoko proliferatívne bunky charakteristické pre malignity, ako sú familiárne melanómy, karcinómy pažeráka a karcinómy slinivky brušnej (pozri, napríklad, Halí a Peters, Genetic Alterations of Cyclins, Cyclin-Dependent Kinases, and CDK Inhibitors in Human Cancer, Adv. Cancer Res., zväzok 68 (1996), str.67-108; a Kamb et al., A Celí Cycle Regulátor Potentially Involved in Genesis of Many Tumor Types, Science, zväzok 264 (1994), str. 436-440). Nadmerná expresia cyklínu Dl sa spája s karcinómami pažeráka, prsníka a so spinocelulárnymi karcinómami (pozri, napríklad, DelSal et at. , Celí Cycle a Cancec Critical Events at the S, Restriction Point, Critical

Rev. Oncogenesis, zväzok 71 (1996), str. 127-142). Gény kódujúce CDK4-špecifické inhibítory pl6 rodiny často obsahujú delécie a mutácie pri familiárnom melanóme, gliómoch, leukémiách, sarkómoch, a karcinómoch pankreatu, nemalobunkových karcinómoch pl'úc a karcinómoch hlavy a krku (pozri Nobori et al., Deletions of the Cyclin-Dependent Kinase-4 Inhibítor Gene in Multiple Human Cancers, Náture, zväzok 368(1994), str. 753-756). Amplifikácia a/alebo nadmerná expresia cyklínu E je tiež pozorovaná v mnohých solidných nádoroch, a zvýšená koncentrácia cyklínu E tiež koreluje s nie dobrou prognózou. Ďalej, bunkové hladiny CDK inhibítora p27, ktorý ako substrát, tak ako inhibítor CĎK2/cýklínu E, sú abnormálne nízke v karcinóme prsníka, hrubého čreva a prostaty, a expresie p27 inverzne korelujú so štádiom ochorenia (pozri Loda et al. , ''Increased Proteasome-dependent Degradation of the Cyclin-Dependent Kinase Inhibítor p27 in Aggressive Colorectal Carcinomas, Náture Medicíne, zväzok 3 (1997), str. 231-234). Nedávno boli získané dôkazy o tom, že CDK4/cyklín D môže sekvestrovaú p27, ako opisujú Sherr, et al., Genes Dev., zväzok 13 (1999), str. 1501-1512, p21 proteíny tiež prenášajú inhibičné signály pre nádory od p53 k CDK; tak môžu mutácie p53 v približne 50% všetkých ľudských nádoroch nepriamo viesé na dereguláciu aktivity CDK.

Nové dáta poskytujú veľké dôvody na použitie zlúčenín inhibujúcich CDK, najmä CDK4 a CDK2, ako antiproliferatívnych terapeutických činidiel. Na tento účel boli navrhnuté niektoré biomolekuly. Napríklad, U. S. patent č. 5,621,082, Xiong et al., opisuje nukleové kyseliny kódujúce inhibítory CDK6, a WO 99/06540 inhibítory CDK. Peptidy a peptidomimetické inhibítory sú opísané v Európskej patentovéej prihláške č.0666270 A2, Bandara et at. , Náture Biotechnology, zväzok 15 (1997), str. 896-901 a Chen, et al., Proceedings of the National Academy of

Science, USA, zväzok 96(1999), str. 4325-4329. Peptidové aptamery boli identifikované zo skríningu v Cohen et al. , Proc. Natl. Acad. Sci. USA, zväzok 95 (1998), str. 1427214277, Niekoľko malých molekúl bolo ,identifikovaných ako CDK inhibítory (napríklad pozri Webster, The Therapeutic Potential of Targeting the Celí Cycle, Exp. Opin. Invest. Drugs, zväzok 7 (1998), str. 865-887, a St cez et at. , Recent advances in proteín kinase inhibition: current molecular scaffolds used for inhibitor synthesis, Current Opinion in Drug Discovery and Development, zväzok 2(1999), str. 274-285). Flavon flavopiridol vykazuje strednú selektivitu na inhibíciu CDK vzhľadom k iným kinázam, ale inhibuje rovnako silno CDK4, CDK2 a CDK1, s IC₅₀ v rozmedzí 0,1-0,3 pM. Flavopiridol je v súčasnosti vo fáze II klinického skúšania ako onkologické chemoterapeutikum (Sedlacek et al., Flavopindol (L86-8275; NSC 649890), A New Kinase Inhibitor počas 2Tumor Therapy, Int. J. Oncol., zväzok 9 (1996), str. 1143-1168). Analógy flavopiridolu sú predmetom iných publikácií, napríklad U. S. Patentu č. 5,733,920, Mansuri et at. (Medzinárodná prihláška č. WO 97/16447) a Medzinárodných prihlášok č. WO 97/42949 a WO 98/17662. Výsledky s derivátmi na báze purínu sú opísané v Schow et at., Bioorg. Med. Chain. Lett., zväzok 7 (1997), str.

2697-2702; Grant et at. , Proc. Amer. Assoc. Cancer Res., zväzok 39 (1998), Abst. 1207; Legravend et al. , Bioorg. Med.

Chain. Lett., zväzok 8 (1998), str. 793-798; Gray et al. ,

Science, zväzok 281 (1998), str. 533-538; Charig, et al.,

Chemistry & Biology, zväzok 6(1999), str. 361-375, WO

99/02162, WO 99/43675, a WO 99/43676, Ďalej, nasledujúce publikácie opisujú niektoré pyrimidíny, ktoré inhibujú cyklíndependentné kinázy a kinázy ovplyvňované rastovými faktormi:

Medzinárodná prihláška č. WO 98/33798; Ruetz et al. , Proc.

Amer. Assoc. Cancer Res,. zväzok 39(1998), Abst. 3796; a Meyer et al, Proc. Amer. Assoc. Cancer Res., zväzok 39 (1998), Abst.

3794 .

Benzénsulfonamidy, ktoré blokujú bunky v G_T fáze, sú t

vyvíjané firmou Eisai, ¹ pozri Owa, et al., J. Med. Chain., zväzok 42 (1999), str. 3789-3799. Oxindolový CDK inhibítor je vyvíjaný firmou Glaxo-Wellcome, pozri Luzzio, et at., Proc. Amer. Assoc. Cancer Res., zväzok (1999), Abst. 4102 a WO 99/15500. Paullony boli objavené v spolupráci s NCl, Schultz, et al., J. Med. Chain., zväzok (1999), str. 2909-2919. Indenopyrazoly sú opísané vo WO 99/17769 a v Seitz et al. , 218. ACS Natl. Mtg. (Aug. 22-26, 1999, New Orleans) , Abst MEDI 316. Amínotiazoly sú použité vo WO 99/24416 a WO 99/21845.

CHK1 je inou proteín kinázou. CHK1 má významnú úlohu ako kontrolný bod v progresii bunkového cyklu. Kontrolne body sú kontrolne systémy, ktoré koordinujú bunkový cyklus tým, že ovplyvňujú tvorbu, aktiváciu a následnú inaktiváciu cyklíndependentných kináz. Kontrolne body bránia progresiu bunkového cyklu v nevhodnú dobu, udržujú metabolickú rovnováhu buniek v prípade rastového arestu a v niektorých prípadoch môžu indukovať apoptózu (programovanú bunkovú smrť), keď by požiadavky kontrolného bodu neboli splnené. Pozri napríklad

O'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182 (1997); Nurse, Celí,

91,865-867 (1997); Hartwell et at. , Science, 266 , 1821-1828 (1994); Hartwell et at. , Science, 246, 629-634 (1989).

Jedna séria kontrolných bodov sleduje integritu genómu a po rozpoznaní poškodenia DNA tieto kontrolne body poškodenia DNA blokujú progresiu bunkového cyklu v Gi a G₂ fázach a spomaľujú progresiu cez S fázu. O'Connor, Cancer Surveys, 29, 151-182 (1997); Hartwell et al. , Science, 266, 1821-1828 (1994). Tento účinok umožňuje dokončenie procesov reparácie DNA pred replikáciou genómu a následnou separáciou tohto genetického materiálu do dcériných buniek. Významné je, že najčastejšie mutovaný gén v ľudských nádoroch, p53 tumor supresorový gén, produkuje protein kontrolného bodu poškodenia DNA, ktorý blokuje progresiu bunkového cyklu v G_x fáze a/alebo indukuje apoptózu (programovanú bunkovú smrť) po poškodení DNA. Hartwell et al. , Science, 266, 1821-1828 (1994). p53 tumor supresor tiež zosilňuje účinnosť, kontrolného bodu poškodenia DNA v G₂ fáze bunkového cyklu. Pozri napríklad Bunz at at. , Science, 28, 1497-1501 (1998); Winters at at. , Oncogene, 17,

673-684 (1998); Thompson, Oncogene, 15, 3025-3035 (1997) .

Pri znalosti zásadnej úlohy dráhy p53 tumor supresoru v ľudských nádoroch sa aktívne skúmajú možnosti využitia tejto dráhy v p53-defektných nádoroch. Jednou možnosťou je využitie G₂ kontrolného bodu v p53 defektných nádorových bunkách. Nádorové bunky sú v dôsledku toho, že nemajú Gi kontrolný bod, citlivé na zrušenie poslednej prekážky brániacej ich proti protinádorovým účinkom činidiel poškodzujúcich DNA, ktorou je G₂ kontrolný bod. G₂ kontrolný bod je regulovaný kontrolným systémom, ktorý je konzervovaný od kvasiniek k človeku. Dôležitým prvkom v tomto konzervovanom systéme je kináza CHK1, ktorá prenáša signály z komplexu rozpoznávajúceho poškodenie DNA a inhibuje aktiváciu komplexu cyklínu B/Cdc2 kinázy, ktorý podporuje vstup do mitózy.’ Pozri napríklad Pang at al. , Science, 277, 1501-1505 (1997); Sanchez at at. , Science, 277,

1497-1501 (1997). Bolo preukázané, že inaktivácia CHK1 ruší ako G₂ arest indukovaný poškodením DNA spôsobeným protinádorovými činidlami alebo endogénnymi vplyvmi, rovnako ako vedie k prednostnému usmrcovaniu buniek defektných v tomto kontrolnom bode. Pozri napríklad Nurse, Celí, 91, 865-867 (1997); Weinert, Science, 277, 1450-1451 (1997); Walworth at al., Náture, 363, 368-371 (1993); a Al-Khodairy at al. , Molec. BioL Celí, 5, 147-160 (1994).

Selektívna manipulácia s kontrolným bodom v nádorových bunkách môže byť využitá v protinádorových chemoterapeutických a rádioterapeutických režimoch, a ďalej umožňuje využitie všeobecného rysu nádorových buniek, genetickej nestability, ako základu pre selektívnu deštrukciu nádorových buniek. Mnoho faktorov činí z CHK1 základný cieľ v kontrolnom bode poškodenia DNA. Hodnotenie inhibítorov tejto a ďalších funkčne príbuzných kináz, ako je CDS1/CHK2, a kináz, o ktorých bolo novo zistené, že kooperujú s CHK1 v regulácii progresie S fázou (pozri Zeng et at., Náture, 395, 507-510 (1998); Matsuoka, Science, 282, 1893-1897 (1998)), môže viesť na zisk nových terapeutických entít na liečbu nádorových ochorení.

Inou skupinou kináz sú tyrosín kinázy. Tyrosín kinázy môžu byť receptorové (majúce extracelulárne, transmembránovú a intracelulárnu doménu) alebo· non-receptorové (celé lokalizované intracelulárne). Aspoň jedna z non-receptorových proteín-tyrosín kináz, konkrétne· LCK, sa zrejme podieľa v Tlymfocytoch na prenose signálu z interakcie proteínu na bunkovom povrchu (Cd4) so zosietenou anti-Cd4 protilátkou. Podrobnejší opis non-receptorových tyrosín kináz je uvedený v Bolsn, Oncogene, 8, 2025-2031 (1993), ktorá je tu uvedená ako odkaz.

Okrem svojej úlohy v kontrole bunkového cyklu majú proteínkinázy tiež zásadnú úlohu v angiogenézii, čo je mechanizmus, ktorým sa tvoria nové kapiláry z existujúcich ciev. Keď je to nutné, môže cievny systém generovať nové kapilárne siete zásobujúce tkanivá a orgány. Pre dospelých je ale angiogenézia veľmi obmedzená a vyskytuje sa len pri hojení rán a o

Pozri neovaskularizácii menštruácie endometria počas .. .

Merenmies, J., Paracia, L. F., Henkemeyer, M., Celí Growth & Differentiation, 8, 3-10 (1997). Na druhú stranu, nežiadúca angiogenézia je známkou niekoľkých ochorení, ako je retinopatia, psoriáza, reumatoidná artritída, makulárna degenenerácia súvisiaca s vekom a nádory (solidné nádory). Folkman, Náture Med., 1, 27-31 (1995). Medzi proteín kinázy, ktoré sa podieľajú na angiogénnom procese, patria tri kinázy prislúchajúce do rodiny tyrosín kináz receptora pre rastový faktor: VEGF-R2 (receptor 2 pre vaskulárny endotelový rastový faktor, tiež známy ako KDR (kinázová inzertná doména receptora) a ako FLK-1); FGF-R (receptor pre fibroblastový rastový faktor); a TEK (tiež známy ako Tie-2).

VEGF-R2, ktorý je exprimovaný len na endotelových bunkách, viaže účinný angiogénny faktor VEGF a sprostredkuje následný prenos signálu prostredníctvom aktivácie intracelulárnej kinázovej aktivity. Preto sa predpokladá, že priama inhibícia kinazovej aktivity VEGF-R2 povedie na inhibíciu angiogenézie aj za prítomnosti exogénnneho VEGF (pozri Strawn at at. , Cancer Research, 56,3540-3545 (1996)), ako bolo preukázané s mutantami VEGF-R2, ktoré zlyhávali v sprostredkovaní prenosu signálu. Millauer et at., Cancer Research, '56, 16151620 (1996) . Ďalej sa zdá, že VEGF-R2 nemá pre dospelých žiadnou inú funkciu ako sprostredkovanie angiogénnej aktivity VEGF. Preto sa predpokladá, že selektívny inhibítor kinázovej aktivity VEGF-R2 bude mäč nízku toxicitu.

Podobne, FGF-R sa viaže na angiogénne rastové faktory aFGF a bFGF a sprostredkuje následný intracelulárny prenos signálu.

Nedávno sa objavili správy, že rastové faktory ako je bFGF, môžu mač zásadnú úlohu v indukcii angiogenézie v solidných nádoroch, ktoré dosiahli určitú veľkostí. Yoshiji at al. ,

Cancer Research, 57, 3924-3928 (1997). Oproti VEGF-R2 je ale FGF-R exprimovaný v mnohých rôznych typoch buniek v tele a môže a nemusí mat významné úlohy v normálnych fyziologických procesoch pre dospelého. Ale systémové podanie malých molekúl inhibujúcich kinázovú aktivitu FGF-R blokovalo bFGF-indukovanú angiogenéziu myší bez zreteľnej toxicity. Mohammad at al. , EMBO Journal, 17, 5996-5904 (1998).

TEK (tiež známy ako Tie-2) je inou receptorovou tyrosín kinázou exprímovanou len na endotelových bunkách, ktorá má preukázanú úlohu v angiogenézii. Väzba angiopoietínu-1 vedie na autofosforyláciu kinázovej domény TEK a vedie na prenos signálu, ktorý zrejme sprostredkuje interakciu endotelových buniek s peri-endotelovými podpornými bunkami, čo zjednodušuje zrenie novo vytvorených krvných ciev. Angiopoietín-2, na druhú stranu, zrejme antagonizuje pôsobenie angiopoietínu-1 na TEK a narušuje angiogenéziu. Maisonpierre et at., Science,

277, 55-60 (1997).

V dôsledku vyššie uvedených objavov bolo navrhnuté liečenie angiogenézie za použitia aktivitu VEGF-R2, FGF-R, medzinárodná prihláška č zlúčenín inhibujúcich kinázovú a/alebo TEK. Napríklad, WIPO WO 97/34876 opisuje niektoré cinnolínové deriváty, ktoré sú inhibítormi VEGF-R2, ktoré môžu byt použité na liečbu ochorení asociovaných s abnormálnou angiogenéziou a/alebo zvýšenou permeabilitou ciev, ako sú nádory, diabetes, psoriáza, reumatoidná artritída, Kaposiho sarkóm, haemangióm, akútne a chronické nefropatie, aterómy, arteriálne restenózy, autoimunitné ochorenia, akútne zápaly a očné ochorenia s proliferáciou ciev sietnice. Okrem proteín kináz uvedených vyššie sa mnoho ďalších proteín kináz považuje za terapeutické ciele a mnoho publikácií opisuje inhibítory kinázovej aktivity, napríklad: McMahon et al., Current Opinion in Drug Discpresy & Development, 1, 131-146 (1998); Strawn at at., Exp. Opin. Invest. Drugs, 7, 553-573 (1998).

Ale stále existuje potreba zlúčenín s malou molekulou, ktoré môžu byt jednoducho syntetizované a ktoré sú účinnými inhibítormi bunkovej proliferácie, napríklad inhibítormi jednej alebo viacero proteín kináz, ako je CHK1, VEGF, CDK alebo CDK/cyklínové komplexy. Pretože CDK4 môže slúžié ako všeobecný aktivátor bunkového delenia vo väčšine buniek, a pretože komplexy CDK4/cyklín D a CDK2/cyklín E riadia časnú Gi fázu bunkového cyklu, existuje potreba účinných a špecifických inhibítorov CDK4 a/alebo CDK2 na liečbu jedného alebo viacero typov nádorov.

Podstata vynálezu

Predmetom vynálezu sú účinné anti-proliferatívne činidlá. Preto sú jedným predmetom vynálezu zlúčeniny a prostriedky, ktoré inhibujú aktivitu jednej alebo viacero kináz, ako je CDK, VEGF, a CHK-1, alebo komplexov s cyklínami. Ďalším predmetom vynálezu je účinný spôsob liečby nádorov prostredníctvom inhibície kináz, ako je inhibícia VEGF, CHK-1, komplexov CDK4 alebo CDK4/cyklín D a/alebo CDK2 alebo CDK2/cyklín E. Iným predmetom vynálezu sú farmaceutické prostriedky obsahujúce zlúčeniny účinné v blokovaní prechodu nádorových buniek do proliferačnej fázy. Tieto a ďalšie predmety vynálezu, ktoré budú zrejmé z nasledujúceho podrobného opisu, sú dosiahnuté za použitia činidiel kontrolujúcich bunkový cyklus, ktoré sú opísané ďalej.

V súlade s tým predkladaný vynález poskytuje zlúčeninu všeobecného vzorca (I)

Η

kde:

Ri je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo

V-V *, kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, . karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijateľnú soľ zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijateľnú soľ preliečiva alebo metabolitu. V súlade s tým vynález tiež poskytuje zlúčeninu vzorca II:

kde R' x je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus, heterocyklus alebo ^K \

R.

kde každý R₄ je individuálne H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R'2 je substituovaná alebo nesubstituovaná amino, nitro, alkenylová, alkylová, arylová, heteroarylová, karbocyklická, heterocykl ická, i N alebo

skupina, kde R₄ je nezávisle H alebo nižší alkyl, a X je ubstituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus, alebo heterocyklus; alebo farmaceutický prijateľnú soľ zlúčeniny vzorca II; alebo preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit zlúčeniny vzorca II, alebo farmaceutický prijateľnú soľ preliečiva alebo metabolitu.

Vynález tiež poskytuje farmaceutický prostriedok obsahuj úci:

(a) činidlo ovplyvňujúce bunkový cyklus vybrané zo skupiny zahŕňajúcej:

(i) zlúčeniny vzorca I alebo II, (ii) farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca I alebo II; alebo (iii) preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo farmaceutický prijateľné soli preliečiva alebo metabolitu; a (b) farmaceutický prijateľný nosič.

Vynález tiež poskytuje spôsoby prípravy zlúčeniny vzorca I a II.

Ďalej predkladaný vynález poskytuje spôsob použitia zlúčeniny ako činidla ovplyvňujúceho bunkový cyklus na liečbu ochorení pomocou inhibície kináz, ktorý zahŕňa podanie zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca I alebo II; alebo preliečiva alebo farmaceutický aktívneho metabolitu zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo farmaceutický prijateľné soli metabolitu alebo preliečiva, pacientovi.

Vynález ďalej poskytuje spôsob liečby mykotických infekcií, malignít alebo nádorov, rovnako ako iných ochorení asociovaných s nežiadúcou angiogenáziou a/alebo bunkovou proliferáciou, ktorý zahŕňa podanie účinných množstiev zlúčeniny vzorca I alebo II alebo farmaceutický prijateľnej soli zlúčeniny vzorca I alebo II; alebo preliečiva alebo farmaceutický aktívneho metabolitu zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo farmaceutický prijateľnej soli metabolitu alebo preliečiva, pacientovi, ktorý potrebuje takú liečbu.

Vynález tiež poskytuje spôsob na modulovanie a/alebo inhibíciu kinázovej aktivity pomocou podania zlúčeniny vzorca I alebo II alebo farmaceutický prijateľnej soli zlúčeniny vzorca I alebo II; alebo preliečiva alebo farmaceutický aktívneho metabolitu zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo farmaceutický prijateľnej soli metabolitu alebo preliečiva, pacientovi, ktorý potrebuje takú liečbu.

Vynález tiež poskytuje farmaceutický prostriedok obsahujúci zlúčeniny vzorca I alebo II alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca I alebo II; alebo preliečivá alebo farmaceutický aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo farmaceutický prijateľné soli metabolitu alebo preliečivá, a terapeutické použitie prostriedku pri liečbe ochorenia sprostredkovaného kinázovou aktivitou, ako sú nádory, rovnako ako iné ochorenia asociované s nežiadúcou angiogenéziou a/alebo bunkovou proliferáciou, ako je diabetická retinopatia, neovaskulárny glaukom, reumatoidná artritída a psoriáza.

Pre farmaceutické prostriedky a spôsoby podľa predkladaného vynálezu môže byt vo vzorci I a II R_x tiež vodík.

Činidlá podľa predkladaného vynálezu a prostriedky obsahujúce také činidlá môžu byt použité pri liečbe rôznych ochorení alebo stavov spojených s nekontrolovanou alebo nežiadúcou proliferáciou buniek, ako sú nádory, autoimunitné ochorenia, vírusové ochorenia, mykotická ochorenia, neurodegeneratívne ochorenia a kardiovaskulárne ochorenia. Preto sa vynález tiež týka spôsobov liečby takých ochorení pomocou podania účinného množstva činidiel podľa predkladaného vynálezu.

Ďalšie aspekty, výhody a charakteristiky predkladaného vynálezu budú jasné z nasledujúceho podrobného opisu.

Podrobný opis vynálezu

Zlúčeniny a prostriedky podľa predkladaného vynálezu sú použiteľné ako anti-proliferatívne činidlá a ako inhibítory cicavčích kinázových komplexov, hmyzích kináz a mykotických kinázových komplexov. Napríklad môžu byú inhibované VEGF, CHK1, a/alebo CDK komplexami. Takéto zlúčeniny a prostriedky sú tiež použiteľné na ovplyvnenie proliferácie, diferenciácie a/alebo apoptosiu.

Príklady výhodných významov pre R_x, R₂, R'i a R'₂ pre zlúčeniny vzorca I alebo II sú uvedené ďalej:

b,; r·,

Λ0	-Ap
hn-» zk.«l N	λΡό,
HH-s
	^N NR,R,
HO	X»

Rj R j



g. „c	N
QC ú, OH ’ OH	r^NYY
Ύ &	1
21 A HH-/ ÔH	v
AjF.CI.CH,OH)	ho ho/3

Výhodné Ri a R'i sú:

ň.

kde Y je CH alebo N alebo CR₃, X je rovnaký, ako bol definovaný vyššie a R₃ je H, alebo jeden alebo viacej substituentov umiestnených na kruhu, ako je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, alkenyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus, heterocyklus, hydroxy, halogén, alkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, tioalkyl, tioaryl, tioacyl, tioheteroaryl alebo amino; alebo

kde dva Y môžu byť. rovnaké alebo rôzné.

V tých uskutočneniach, kde Ri alebo R'i je ^M môže byť na fenylovom kruhu jeden alebo viacej R₃ substituentov,

Výhodnejšie sú RxaR'i substituovaný alebo nesubstituovaný

«3 kde R₃ skupiny sú rovnaké, ako boli definované vyššie. Tiež môžu dva R₃ spolu so susedným atómom dusíka tvoriť, heteroarylový alebo heterocyklický kruh.

Výhodne sú R₂ a R'₂ nesubstituovaný alebo substituovaný fenyl alebo

«4 , kde R₄ je H alebo nižší alkyl, a X je substituovaná alebo nesubstituovaná skupina vybraná zo skupiny zahŕňajúcej alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus.

inými výhodnými R₂ a R'₂ skupinami sú substituované alebo nesubstituované heteroaryly, ako je

Iné výhodné R₂ a R'₂ skupiny sú

kde R₃ je rovnaký, ako bol definovaný vyššie.

Najmä výhodné substituenty pre fenyl R₂ sú fluór, chlór, hydroxylová alebo alkoxylová skupina, ako je metoxy skupina.

Príklady výhodných R skupín, X a Y skupín sú uvedené v príkladoch zlúčenín, ktoré nasledujú.

Y j^e výhodne dusík.

X je výhodne aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, najlepšie fenyl.

R₂ a R'2 môžu byt amino (-NR'R), kde R' a R sú nezávisle rovnaké, ako bolo definované vyššie pre R₃, a dohromady so susedným dusíkom môžu tvorít kruh.

R₄ je výhodne vodík, alebo môže byt nižší alkyl obsahujúci 1-6 atómov uhlíka, ktorý môže byt substituovaný alebo nesubstituovaný. Dva R₄' môžu byt rovnaké alebo rôzne.

Ďalšie výhodné R_lz R₂, R'i a R'₂ skupiny sú uvedené v príkladoch zlúčenín, ktoré nasledujú.

Môže byt použitá akákoľvek alkylová skupina, napríklad pre Ri alebo R₂ alebo R'i alebo R'₂ alebo R₃ alebo X. Alkylová skupina môže byt alkylová skupina s priamym alebo rozvetveným retazcom obsahujúca jeden až dvanást atómov uhlíka. Príklady alkylových skupín sú metyl, etyl, n-propyl, izopropyl, butyl, izobutyl, sek.butyl, terc.butyl, pentyl, izopentyl, terc.pentyl, hexyl, izohexyl a podobne. Alkyl môže byt substituovaný alebo nesubstituovaný. Medzi výhodné substituované alkyly patrí fluórmetyl, difluórmetyl, trifluórmetyl, 2-fluóretyl, 3fluórpropyl, hydroxymetyl, 2-hydroxyetyl, 3-hydroxypropyl a podobne.

Ako Ri alebo R₂ alebo R'_x alebo R'₂ alebo R₃ alebo X môže byt použitá akákoľvek arylová, heteroarylová, karbocyklická alebo heterocyklická skupina. Skupiny môžu byt fúzované alebo nefúzované, monocyklické alebo polycyklické.

Medzi výhodné arylové a heteroarylove skupiny patria monocyklické a polycyklické nenasýtené alebo aromatické kruhové štruktúry, kde aryl označuje tie, ktoré sú karbocyklické, a heteroaryl tie, ktoré sú heterocyklické. Príklady kruhových skupín zahŕňajú fenyl, naftyl, 1,2,3,4tetrahydronaftyl, furyl, tienyl, pyrrolyl, pyridyl, pyridinyl, pyrazolyl, imidazolyl, pyrazinyl, pyridazinyl, 1,2,3triazinyl, 1,2,4-oxadiazolyl, 1,3,4-oxadiazolyl, 1-H-tetrazol5-yl, indolyl, chinolyl, benzotiofenyl (tionaftenyl), furanyl, tiofenyl, imidazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, triazolyl, tetrazolyl, izochinolyl, akridinyl, pyrimidinyl, benzimidazolyl, benzofurány1 a podobne.

Medzi výhodné karbocyklické skupiny patria tie, ktoré obsahujú od troch do dvanástich atómov uhlíka, vrátane bicyklických a tricyklických cykloalkylových zlúčenín. Medzi výhodné karbocyklické skupiny patrí cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl, cyklohexyl, cykloheptyl a podobne.

Medzi výhodné heterocyklické skupiny patria nasýtené kruhy obsahujúce 4 alebo 5 atómov v kruhu a aspoň jeden heteroatóm vybraný zo skupiny zahŕňajúcej dusík, kyslík a síru, ktoré neobsahujú nenasýtenú väzbu. Medzi výhodné heterocyklické skupiny patrí pyrrolidinyl, piperidinyl, tiazinyl a morfolinyl.

Ri, R2, R3, Y, X a ďalšie R skupiny môžu byť. nesubstituované alebo substituované akýmikoľvek vybranými substituentami alebo substituentami, ktoré neovplyvňujú nežiadúcim spôsobom požadovanú aktivitu zlúčeniny. Príklady výhodných substituentov sú uvedené v príkladoch zlúčenín, ktoré nasledujú, a okrem iného medzi ne patria halogény (chlór, jód, bróm alebo fluór); Cx.g-alkyl; Ci.₆-alkenyl; Ci-e-alkinyl ;

hydroxyl; Ci_₆ alkoxyl; amino; nitro; tiol; tioéter; imín; kyan; amid; fosfonát; fosfín; karboxyl; tiokarbonyl; sulfonyl; sulfonamid; ketón; aldehyd; ester; kyslík ( = 0) ; halogénalkyl (napr. trifluórmetyl); karbocyklický cykloalkyl, ktorý môže bytí monocyklický alebo fúzovaný alebo nefúzovaný polycyklický (napr. cyklopropyl, cyklobutyl, cyklopentyl alebo cyklohexyl), alebo heterocycloalkyl, ktorý môže bytŕ monocyklický alebo fúzovaný alebo nefúzovaný polycyklický (napr. pyrrolidinyl, piperidinyl, piperazinyl, morfolinyl karbocyklický alebo heterocyklický, fúzovaný alebo nefúzovaný polycyklicklý aryl (napr. fenyl, naftyl, pyrrolyl, indolyl, furanyl, tiofenyl, imidazolyl, oxazolyl, izoxazolyl, tiazolyl, triazolyl, pyridinyl, chinolyl, izochinolyl, pyridazinyl, pyrimidinyl, benzimidazolyl, benzotiofenyl alebo benzofuranyl); amino (primárny, sekundárny alebo terciárny); nitro; tiol; tioéter, 0-nižší alkyl; 0-aryl, aryl; aryl-nižší alkyl; CO₂CH₃; CONH₂; OCH₂OONH₂; NH₂; SO₂NH₂; OCHF₂; 0F₃; OCF₃; a podobne .

alebo tiazinyl) ; monocyklický alebo tetrazolyl, akridinyl, pyrazolyl, pyrazinyl,

Takéto skupiny môžu byt tiež substituované fúzovaným kruhom alebo mostíkom, napríklad OCH₂-O.

Tieto substituenty môžu bytŕ voliteľne ďalej substituované substituentom vybraným z takých skupín.

Výhodnými zlúčeninami sú zlúčeniny uvedené v príkladoch, rovnako ako nasledujúca zlúčenina:

Predkladaný vynález tiež poskytuje medziprodukty použiteľné pri príprave zlúčeniny vzorca I alebo II. Najmä výhodný medziprodukt má vzorec

X

Iný výhodný medziprodukt má vzorec:

X = halogén, N0₂ vo vyššie uvedených troch medziproduktoch môžu byť miesto SEM použité iné známe chrániace skupiny, ako je benzyloxykarbonyl (CBZ), terc.butoxykarbonyl (BOC), tetrahydropyranyl (THP) a fluóren-9-metyloxykarbonyl (FMOC).

SEM

PMB

SEM /

PMB t

Ό c

N

OMe

THP

X y

Skratky SEM a PMB označujú (trimetylsilyl)-etoxymetyl a p-metoxybenzyl, v príslušnom poradí.

Výhodný medziprodukt má vzorec kde PG je chrániaca skupina, T je reaktívna skupina, ako je substituovaný alebo nesubstituovaný bor, halogén, N0₂ alebo NH₂skupina, a T' je reaktívna skupina, ako je CHO, CO₂H, C0₂R₃, CONR3R3, kde R₃ skupiny sú rovnaké, ako boli definované vyššie.

Farmaceutické prostriedky podl'a predkladaného vynálezu môžu, alternatívne alebo spoločne so zlúčeninou vzorca I alebo II, obsahovač ako aktívnu zložku farmaceutický prijateľnú sol zlúčeniny vzorca I alebo II, alebo preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit takejto zlúčeniny, alebo soľ preliečiva alebo metabolitu. Takéto zlúčeniny, soli, preliečivá a metabolity sú tu niekedy dohromady označované ako činidlá ovplyvňujúce bunkový cyklus.

Termín preliečivo označuje metabolický prekurzor zlúčeniny vzorca I alebo II (alebo jej soli), ktorý je farmaceutický prijateľný. Preliečivo môže byť. inaktívne pri podaní jedincovi, ale in vivo je konvertované na aktívnu zlúčeninu vzorca I alebo II. Termín aktívny metabolit označuje metabolický produkt zlúčeniny vzorca I alebo II, ktorý je farmaceutický- prijateľný a účinný. Preliečivá a aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I alebo II môžu byť určené ža. použitia techník známych v odbore.

Preliečivá, a aktívne metabolity zlúčeniny môžu byť identifikované za použitia bežných techník známych v odbore. Pozri napríklad Bertolini at at., J. Med. Chem., 40, 2011-2016 (1997); Shan, et al., J. Pharm. Sci., 86 (7), 765-767; Bagshawe, Drug Day. Res., 34, 220-230 (1995); Bodor, Advances in Drug Res., 13, 224-331(1984); Bundgaard, Design of Prodrugs (Elsevier Press 1985); a Larsen, Design and Application of Prodrugs, Drug Design a Development (Krogsgaard-Larsen et 81,, eds., Harwood Academic Publishers, 1991).

V celom vynáleze je treba si uvedomiť, že zlúčenina vzorca I alebo II môže vykazovať tautomerizmus a že uvedené vzorce predstavujú len jednu z možných tautomérnych foriem. Je treba si uvedomiť, že vynález zahŕňa všetky tautomérne formy, ktoré modulujú a/alebo inhibujú kinázovú aktivitu a nie je obmedzený len na jednu tautomérnu formu uvedenú vo vzorci.

Niektoré zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu existovať ako jediné stereoizoméry (to je v podstate bez iných stereoizomérov), racemáty a/alebo zmesi enantiomérov a/alebo diastereomérov. Všetky takéto jednotlivé stereoizoméry, racemáty a ich zmesi spadajú do rozsahu predkladaného vynálezu. Výhodne sú zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu, ktoré sú opticky aktívne, použité v opticky čistej forme.

Ako je v odbore všeobecne známe, opticky čistá zlúčenina majúca jedno centrum chirality (to je jeden asymetrický atóm uhlíka) je taká zlúčenina, ktorá sa skladá len z jedného z dvoch možných enantiomérov (to je je enantioméricky čistá), a opticky čistá zlúčenina majúca viac ako jedno centrum chirality je taká zlúčenina, ktorá je ako diastereomericky čistá, tak enantiomericky čistá. Výhodne sú zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu použité vo forme, ktorá je aspoň z 90% opticky čistá, to znamená, ktorá obsahuje aspoň 90% jediného izoméru izoméru (80% enantiomerický nadbytok (e.e.) alebo diastereomerický nadbytok (d.e.)), výhodnejšie aspoň 95% (90% e.e. Alebo d.e.), ešte výhodnejšie aspoň 97,5% (95% e.e. Alebo d.e.), a najvýhodnejšie aspoň 99% (98% e.e. Alebo d.e.).

Ďalej, vzorce I a II zahŕňajú solvátované rovnako ako nesolvátované formy daných zlúčenín. Napríklad, vzorce I a II zahŕňajú zlúčeniny uvedených vzorcov v hydrátovanej a nonhydrátovanej frome. Iné príklady solvátov sú uvedené zlúčeniny v kombinácii s izopropanolom, etanolom, metanolom, DMSO, etylacetátom, kyselinou octovou alebo etanolamínom.

Farmaceutický prijateľná soľ je soľ, ktorá si zachováva biologickú účinnosť: voľných kyselín a bázu danej zlúčeniny a ktorá nie je biologicky alebo inak nevhodná. Zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu obsahoval dostatok kyslých, bázických alebo oboch funkčných skupín a tak môžu reagovať s mnohými anorganickými alebo organickými bázami a anorganickými alebo organickými kyselinami za vzniku farmaceutický prijateľných solí. Príklady farmaceutický prijateľných solí sú soli pripravené reakciou zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu s organickou alebo anorganickou kyselinou alebo organickou alebo anorganickou bázou, ako sú sulfáty, pyrosulfáty, bisulfáty, siričitany, kyslé siričitany, fosforečnany, monohydrogénfosforečnany, dihydrogénfosforečnany, metafosforečnany, pyrofosforečnany, chloridy, bromidy, jodidy, acetáty, propionáty, dekanoáty, kapryláty, akryláty, formiáty, izobutyráty, heptanoáty, propionáty, oxaláty, malonáty, suberáty, sebakáty, fumaráty, maleáty, butin-l,4-dioáty, hexyn-1,6-dioáty, benzoáty, chlórbenzoáty, metylbenzoáty, dinitrobenzoáty, hydroxybenzoáty, metoxybenzoáty, ftaláty, sulfonáty, xylenesulfonáty, fenylacetáty, fenylpropionáty, fenylbutyráty, citráty, laktáty, γ-hydroxybutyráty, glykolláty, vínany, metansulfonáty, propansulfonáty, naftalén-l-sulfonáty, naftalén-2-sulfonáty a mandlany.

kaproáty, sukcináty,

Pokiaľ je zlúčenina podľa predkladaného vynálezu báza, tak môže byt požadovaná farmaceutický prijateľná soľ pripravená akoukoľvek metódou známou v odbore, napríklad reakciou voľnej bázy s anorganickou kyselinou, ako je kyselina chlórvodíková, kyselina bromovodíková, kyselina sírová, kyselina dusičná, kyselina fosforečná a podobne, alebo s organickou kyselinou, ako je kyselina octová, kyselina maleinová, kyselina jantárová, kyselina mandlová, kyselina fumarová, kyselina jablčná, kyselina pyrohroznová, kyselina štavelová, kyselina glykolová, kyselina salicylová, kyselina a kyselina pyranosidylová, ako je kyselina glukuronová alebo galakturonová, a-hydroxy kyselina, ako je kyselina citrónová alebo kyselina vínna, aminokyselina, ako je kyselina asparágová alebo glutamová, aromatická kyselina, ako je kyselina benzoová alebo škoricová, sulfonová kyselina, ako je kyselina p-toluénsulfonová alebo etansulfonová a podobne. Pokiaľ je zlúčenina podľa predkladaného vynálezu kyselina, tak môže byť požadovaná farmaceutický prijateľná soľ pripravená akýmkoľvek vhodným spôsobom, napríklad reakciou voľnej kyseliny s anorganickou alebo organickou bázou, ako je amín

I (primárny, sekundárny alebo terciárny), hydroxidom alkalického kovu alebo hydroxidom kovu alkalických zemín, a podobne. Ilustratívne príklady vhodných solí sú organické soli odvodené od aminokyselín, ako je glycín a arginín, amoniak, primárne, sekundárne a terciárne amíny, cyklické amíny, ako je piperidín, morfolín a piperazín, a anorganické soli odvodené od sodíka, vápnika, draslíka, horčíku, mangánu, železa, medi, zinku, hliníka a lítia.

V prípade činidiel, ktoré sú v pevnej forme, bude odborníkom v odbore jasné, že zlúčeniny a soli podľa predkladaného vynálezu môžu existovať v rôznych kryštalických alebo polymorfných formách, ktoré všetky spadajú do rozsahu predkladaného vynálezu.

Činidlá podľa predkladaného vynálezu ovplyvňujúce bunkový cyklus sú použiteľné ako farmaceutické činidlá na liečbu proliferatívnych ochorení cicavcov, najmä človeka, ktoré sú charakterizované nežiadúcou proliferáciou endogénneho tkaniva. Zlúčeniny vzorca I alebo II môžu byť použité na liečbu jedincov majúcich ochorenie asociované s nadmernou proliferáciou buniek, napríklad nádorové ochorenia, psoriáza, imunologické ochorenie spojené s nežiadúcou proliferáciou leukocytov, restenóza a iné ochorenia hladkého svalu. Ďalej môžu byť takéto zlúčeniny použité na prevenciu dediferenciácie tkaniva alebo buniek po mitóze.

abnormálnou hyperplasia bunkovou prostaty, familiárna ateroskleróza,

Medzi ochorenia alebo poruchy asociované s nekontrolovanou alebo abnormálnou proliferáciou buniek patria napríklad:

rôzne nádorové ochorenia, vrátane, napríklad, karcinómov, hematopoetických nádorov lymfoidnej línie, hematopoetických nádorov myeloidnej línie, nádorov mesenchymového pôvodu, nádorov centrálneho a periférneho nervového systému, a iných nádorov vrátane melanómu, seminómu a Kaposiho sarkómu, a podobne;

ochorenia charakterizované

I proliferáciou, napríklad, benigná adenomatózna polypôza, neurofibrómatóza, pľúcna fibróza, artritída, psoriáza, glomerulonefrit.ída,· restenóza po angioplastike alebo cievnom chirurgickom zákroku, tvorba hypertrofických jaziev, zápalové ochorenia čriev, rejekcia transplantátu, endotoxický šok a mykotické infekcie;

- stavy spojené s defektnou apoptózou, ako sú nádory (vrátane napríklad typov uvedených vyššie), vírusové infekcie (vrátane infekcie herpesvírusmi, poxvírusmi, vírusom Epstein-Barrovej, Sindbis vírusom a adenovírusom), prevencia vzniku AIDS osôb infikovaných HIV, autoimunitné ochorenie (vrátane systémového lupus erythematosus, reumatoidnej artritídy, psoriázy, autoimunitnéj glomerulonefritidy, zápalových ochorení čriew a autoimunitného diabetes mellitus), neurodegeneratívne ochorenia (vrátane Alzheimerovej choroby, amyotrofickeh laterálnej sklerózy, retinitis pigmentóza, Parkinsonova choroba, demencia súvisiaca s AIDS, spinálne svalové atrofie a cerebellárna degenerácia), myelodysplastický syndróm, aplastická anémia, ischemické poškodenie spojené s infarktom myokardu, mŕtvicou a reperfúznym poškodením, arytmia, ateroskleróza, pečeňové poruchy indukované toxínmi alebo alkoholom, hematologické ochorenia (vrátane chronickej anémie a aplastickej anémie), degeneratívne ochorenia musculoskeletálneho systému (vrátane osteroporózy a artritídy), aspirín-sensitívny rinosinusitis, cystická fibróza, roztrúsená skleróza, ochorenie ľadvín a bolesť spojená s nádormi.

Aktívne činidlá podľa predkladaného vynálezu môžu byť tiež použité na inhibíciu vývoja invazívnych nádorov, angiogenézie v nádoroch a metastáz.

Ďalej, aktívne činidlá podľa predkladaného vynálezu, napríklad ako inhibítory CDK, môžu modulovať úroveň bunkovej syntézy RNA a DNA a preto sa predpokladá, že budú účinné v liečbe vírusových infekcií spôsobených vírusmi ako je HIV, ľudský papilloma vírus, herpes vírus, vírus Epstein-Barrovej, adenovírus, Sindbis vírus, pox vírus a podobne.

Zlúčeniny a prostriedky podľa predkladaného vynálezu inhibujú kinázovú aktivitu napríklad komplexov CDK/cyklín, ako sú tie, ktoré sú aktívne v G_o alebo G_x fáze bunkového cyklu, napr., CDK2, CDK4, a/alebo CDK6 komplexy.

Špecifické dávky činidla ovplyvňujúceho bunkový cyklus podané na dosiahnutie terapeutického alebo inhibičného účinku môžu byť určené spôsobom známym v odbore podľa konkrétnych okolností prípadu, napríklad podľa konkrétneho podaného činidla, spôsobu podania, liečeného stavu a liečeného subjektu. Príkladom celkovej dennej dávky činidla ovplyvňujúceho bunkový cyklus, ktorá môže byť podaná v jednej alebo viacero dávkach, je dávka od približne 0,01 mg/kg telesnej hmotnosti do približne 50 mg/kg telesnej hmotnosti.

Činidlá ovplyvňujúce bunkový cyklus podľa predkladaného vynálezu môžu byť podané rôznymi vhodnými spôsobmi, ako napríklad orálne, rektálne, transdermálne, podkožné, intravenózne, intramuskulárne alebo intranasálne. Činidlá ovplyvňujúce bunkový cyklus sú výhodne pred podaním formulované do prostriedkov vhodných pre požadovaný spôsob podania.

Farmaceutický prostriedok alebo prípravok podľa predkladaného vynálezu obsahuje účinné množstvo činidla ovplyvňujúceho bunkový cyklus, voliteľne jedno alebo viacero ďalších aktívnych činidiel, a farmaceutický prijateľný nosič, ako je riedidlo alebo prísada pre činidlo; kde keď nosič slúži ako riedidlo, môže byť solidný, semisolidný alebo kvapalný a pôsobí ako vehikulum, prísada alebo médium pre aktívnu zložku. Prostriedky podľa predkladaného vynálezu môžu byť pripravené zmiešaním aktívnej zložky s nosičom, alebo nariedením s nosičom, alebo uzavrením alebo enkapsuláciou v nosiči, ktorý môže byť vo frome kapsule, váčku, papierového zásobníka, a podobne. Príklady ďalších zložiek k jednému alebo viacero činidlám ovplyvňujúcim bunkový cyklus a akýmkoľvek ďalším aktívnym zložkám, zahŕňajú Avicel (mikrokryštálickú celulózu), škrob laktózu, dihydrát síranu vápenatého, terra alba, sacharózu, mastenec, želatínu, agar, pektín, arabskú želatínu, magnézium-stearát, kyselinu stearovú, podzemnicový olej, olivový olej, glyceryl-monostearát, Tween 80 (polysorbát 80), 1,3-butanediol, kakaové maslo, včelí vosk, polyetylénglykol, propylénglykol, sorbitan-monostearát, polysorbát 60, 2oktyldodekanol, benzylalkohol, glycín, kyselinu sorbovú, kalium-sorbát, hydrogénfosforečnan sodný, chlorid sodný a vodu.

Prostriedky môžu byť pripravené v akejkoľvek z mnohých foriem vhodných na požadovaný spôsob podania. Napríklad môžu byť farmaceutické prostriedky pripravené vo forme tabliet, piluliek, práškov, pastiliek, vrecúšok s práškom, medicinálnych oblátok, elixírov, suspenzií, emulzií, roztokov, sirupov, aerosolov (v pevnom alebo v kvapalnom médií), mastí (napríklad obsahujúcich až 10% hmotnostných činidla ovplyvňujúceho bunkový cyklus), kapsulí z mäkkej alebo tuhej želatíny, čapíkov, sterilných injekčných roztokov, sterilné balených práškov a podobne.

Podobne nosič alebo riedidlo môže obsahovať. materiál odďaľujúci uvoľňovanie známy v odbore, ako je glycerylmonostearát alebo glyceryl-distearát, samostatne alebo s voskom, etylcelulózou, hydroxypropylmetylcelulózou, metylmetakrylátom a podobne.

Môžu byť použité rôzne farmaceutické formy. Pokiaľ je použitý pevný nosič, tak môže byť prípravok tabletovaný, vložený do kapsule z tuhej želatíny vo forme prášku alebo pelety alebo môže byť vo forme pastilky alebo medicinálneho bonbónu. Množstvo pevného nosiča môže byť rôzne, ale obvykle je od približne 25 mg do približne 1 g. Pokiaľ je použitý kvapalný nosič, tak môže byť prípravok vo forme sirupu, emulzie, kapsule z mäkkej želatíny, sterilného injekčného roztoku alebo suspenzie v ampuli alebo fiole alebo vo forme sterilnej non-vodnej kvapalnej suspenzie.

Na získanie stabilnej dávkovej formy rozpustnej vo vode sa farmaceutický prijateľná sol činidla podľa predkladaného vynálezu rozpustí vo vodnom roztoku organickej alebo anorganickej kyseliny, ako je 0,3 M roztok kyseliny jantárovej alebo citrónovej. Pokiaľ nie je vhodná sol dostupná, tak sa činidlo môže rozpustiť vo vhodnom korozpúšťadle alebo kombinácii rozpúšťadiel. Príklady vhodných korozpúšťadiel sú, napríklad, alkohol, propylénglykol, polyetylénglykol 300, polysorbát 80, glycerín a podobne, v koncentráciách v rozmedzí od 0-60% celkového objemu. Zlúčenina vzorca I alebo II môže byť rozpustená v DMSO a nariedená vodou. Prostriedok môže byť. tiež vo forme roztoku soli aktívnej zložky vo vhodnom vodnom vehikule, ako je voda alebo izotonický salinický roztok alebo roztok dextrózy.

Prostriedky podľa predkladaného vynálezu môžu byť vyrobené spôsobmi všeobecne známymi na výrobu farmaceutických prostriedkov, napríklad za použitia bežných techník, ako je zmiešanie, rozpúšťanie, granulovanie, výroba dražé, rozmliažd'ovanie, emulzif ikovanie, enkapsulácia, obaľovanie alebo lyofilizácia. Farmaceutické prostriedky môžu byť pripravené bežným spôsobom za použitia jedného alebo viacero fyziologicky prijateľných nosičov, ktoré môžu byť vybrané z prísad a pomocných činidiel, ktoré zjednodušujú spracovanie aktívnej zlúčeniny do prípravkov, ktoré môžu byť použité farmaceutický.

Konkrétna príprava je závislá na vybranom spôsobe podania. Pre injekcie môžu byť činidlá podľa predkladaného vynálezu formulované do vodných roztokov, výhodne vo fyziologicky prijateľných pufroch, ako je Hanksov roztok, Ringerov roztok alebo fyziologický salinický roztok. Na transslizničné podanie môžu prostriedky obsahovať činidlá zlepšujúce priepustnosť cez membránu. Také činidlá sú známe v odbore.

Na orálne podanie môžu byť zlúčeniny formulované zmiešaním aktívnej zlúčeniny s farmaceutický prijateľnými nosičmi známymi v odbore. Takéto nosiče umožňujú formulovanie zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu do formy tabliet, piluliek, dražé, kapsulí, kvapalín, gélov, sirupov, kaší, suspenzií a podobne, na orálnu aplikáciu liečenému pacientovi.

Farmaceutické prostriedky na orálne podanie môžu byt získané za použitia pevných prísad v zmesi s aktívnou zložkou (činidlom), voliteľne rozomletím vzniknutej zmesi a spracovaním zmesi granulí po pridaní vhodných pomocných činidiel za zisku tabliet alebo jadier dražé. Vhodnými prísadami sú; plnidlá ako sú cukry, vrátane laktózy, sacharózy, manitolu alebo sorbitolu; a celulózové prípravky, napríklad, kukuričný škrob, pšeničný škrob, zemiakový škrob, želatína, hydroxypropylmetylcelulóza, karboxymetylcelulóza sodná, metylcelulóza alebo polyvinylpyrrolidón (PVP). Pokiaľ je to žiadúce, môže byt pridané činidlo podporujúce rozpadavost, ako je zosietený polyvinylpyrrolidón, agar alebo kyselina alginová alebo jej sol, ako je natrium-alginát.

Jadrá pre dražé sú vybavené vhodnými potahmi. Na tento účel môžu byt použité koncentrované roztoky sacharidov, ktoré môžu voliteľne obsahovat arabskú želatínu, polyvinylpyrrolidón, Karbopol gél, polyetylénglykol a/alebo oxid titaničitý, roztoky lakov a vhodné organické rozpúštadlá a alebo zmesi rozpúštadiel. Farbivá alebo pigmenty môžu byt pridané do potahov tabliet alebo dražé na identifikáciu alebo na charakterizáciu rôznych kombinácií aktívnych činidiel.

Medzi farmaceutické prostriedky, ktoré môžu byt podané orálne, patria vytláčateľné kapsule vyrobené zo želatíny a zmäkčovacieho činidla, rovnako ako mäkké, uzavrené kapsule vyrobené z želatíny a zmäkčovacieho činidla, ako je glycerol alebo sorbitol. Vytláčateľné kapsule môžu obsahovat aktívne zložky v zmesi s plnivami ako je laktóza, pojivami ako sú škroby, a/alebo klznými činidlami ako je mastenec alebo magnézium-stearát, a voliteľne so stabilizačnými činidlami. V mäkkých kapsuliach môžu byt aktívne činidlá rozpustené alebo suspendované vo vhodných kvapalinách, ako sú mastné oleje, kvapalný parafín alebo kvapalné polyetylénglykoly. Tiež môže byť pridané stabilizačné Činidlo. Všetky prostriedky na orálne podanie by mali byt v dávkach vhodných na takéto podanie. Na bukálne podanie môžu byť prostriedky vo forme tabliet alebo medicinálnych bonbónov vyrobených bežným spôsobom.

Na intranasálne alebo inhalačné podanie sú zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu výhodne podané vo forme aerosolového spreja z tlakovaného zásobníka alebo nebulizátora, za použitia vhodného hnacieho plynu, ako je napríklad dichlórdifluórmetan, trichlórfluórmetan, dichlórtetrafluóretan, oxid uhličitý alebo iný vhodný plyn. V prípade tlakovaného aerosólu môže byť dávková jednotka určená chlopňou odmeriavacou dávku. Kapsule a patróny vyrobené zo želatíny na použitie v inhalátore alebo insuflátore a podobne môžu byť pripravené tak, aby obsahovali práškovú zmes zlúčeniny vhodného práškového základu, ako je laktóza alebo škrob.

Zlúčeniny môžu byť formulované na parenterálne podanie injekciou, napríklad bolusovou injekciou alebo kontinuálnou infúziou. Prostriedky pre injekcie môžu byť. pripravené vo forme dávkových jednotiek, napríklad ampulí, alebo vo forme zásobníkov obsahujúcich viacej dávok, do ktorých je pridané konzervačné činidlo. Prostriedky môžu byť vo forme suspenzií, roztokov, emulzií v olejovom alebo vodnom vehikule, a môžu obsahovať formulačné činidlá ako sú suspendačné, stabilizačné a/alebo disperzné činidlá.

Medzi farmaceutické prostriedky na parenterálne podanie patria vodné roztoky aktívnej zlúčeniny vo forme rozpustnej vo vode. Ďalej, suspenzie aktívnych činidiel môžu byť pripravené ako vhodné olejové suspenzie. Medzi vhodné lipofilné rozpúšťadlá alebo vehikulá patria mastné oleje, ako je sezamový olej, alebo syntetické estery mastných kyselín, ako je etyloleát alebo triglyceridy, alebo lipozómy. Vodné injekčné suspenzie môžu obsahovať substancie, ktoré zvyšujú viskozitu suspenzie, ako je karboxymetylcelulóza sodná, sorbitol alebo dextran. Voliteľne môže suspenzia tiež obsahovať stabilizačné činidlá alebo činidlá, ktoré zvyšujú rozpustnosť zlúčeniny a umožňujú prípravu vysoko koncentrovaných roztokov.

Na podanie do oka je aktívne činidlo podané vo farmaceutický prijateľnom očnom vehikule tak, že zlúčenina je udržiavaná v kontakte s povrchom oka počas dostatočne dlhú dobu na penetráciu do rohovky a vnútorných regiónov oka, vrátane, napríklad, prednej komory, zadnej komory, sklovca, vnútroočného moku, rohovky, dúhovky/corpus ciliare, šošovky, cievnatky/sietnice a skléry. Farmaceutický prijateľné očné vehikulum môže byť masť, rastlinný olej alebo enkapsulačný materiál. Zlúčenina podľa predkladaného vynálezu môže byť injikovaná priamo do sklovca a vnútroočnej kvapaliny.

Alternatívne môže byť aktívna zložka vo forme prášku na rekonštitúciu vo vhodnom vehikule, napríklad sterilnej apyrogénnej vode, pred použitím. Zlúčeniny môžu > byť tiež pripravené vo forme rektálnych prostriedkov ako sú čapíky alebo rektálne nálevy, ktoré obsahujú, napríklad, bežné čapíkové základy, ako je kakaové maslo alebo iné glyceridy.

Zlúčeniny môžu byť- tiež pripravené ako depotné prostriedky. Takéto dlhodobo pôsobiace prostriedky môžu byť aplikované implantáciou (napríklad podkožné alebo intramuskulárne) alebo intramuskulárnou injekciou. Tak môžu byť zlúčeniny pripravené za použitia vhodných poiymérnych alebo hydrofóbnych materiálov (napríklad vo forme emulzií v prijateľnom oleji) alebo vo forme iónomeničových rozpustných derivátov, soli.

živíc, alebo vo forme nie dobre ako sú napríklad nie dobre rozpustné

Farmaceutický nosič pre hydrofóbne zlúčeniny je systém korozpúšťadiel obsahujúci benzylalkohol, nepolárny surfaktant, organický polymér zmiešateľný s vodou a vodnú fázu. Systémom korozpúšťadiel môže byť: VPD systém korozpúšťadiel. VPD je roztok 3% hmôt./obj. benzylalkoholu, 8% hmot./obj. nepolárného surfaktantu polysorbatu 80 a 65% hmot./obj. polyetylénglykolu 300, ktorý sa pripraví v objeme absolútneho etanolu. VPD systém korozpúšťadiel (VPD:5W) obsahuje VPD v riedení 1:1 ’s Tento systém korozpúšťadiel rozpúšťa a má malú toxicitu pri systémovom podaní. Prirodzene, že sa pomery v systéme korozpúšťadiel môžu líšiť, bez narušenia charakteristík rozpustnosti a toxicity. Ďalej sa môže líšiť, identita zložiek korozpúšťacího systému: napríklad môže byť iný nepolárny surfakant s nízkou toxicitou použitý miesto polysorbatu 80; veľkosť frakcie polyetylénglykolu môže byť iná; iné bioompatibílne polyméry môžu byť použité. miesto polyetylénglykolu, napríklad polyvinylpyrrolidón; a iné sacharidy polysacharidy môžu byť použité miesto dextrózy.

5% dextrózou vo vode hydrofóbne zlúčeniny,

Alternatívne môžu byť použité iné systémy na podanie hydrofóbnych farmaceutických zlúčenín. Lipozómy a emulzie sú alebo nosičov pre niektoré organické známe príklady transportných vehikúl hydrofóbne liečivá. Môžu byť použité rozpúšťadlá, ako je dimetylsulfoxid, aj keď obvykle za cenu vyššej toxicity. Ďalej môžu byt zlúčeniny podané za použitia systému so spomaleným uvoľňovaním, ako je semipermeabilná matrica zo solidných hydrofóbnych polymérov obsahujúcich terapeutické činidlo. Používajú sa rôzne materiály so spomaleným uvoľňovaním a tieto materiály sú známe odborníkom v odbore. Kapsule so spomaleným uvoľňovaním môžu, podľa svojho chemického charakteru, uvoľňovať, zlúčeninu počas niekoľkých týždňov až 100 dní. Podľa chemického charakteru a biologickej stability terapeutického činidla môžu byť použité ďalšie stratégie na stabilizáciu proteínu.

Farmaceutické prostriedky môžu tiež obsahovať solidné alebo gélové nosiče alebo prísady. Príklady takých nosičov alebo prísad sú uhličitan vápenatý, fosforečnan vápenatý, sacharidy, škroby, deriváty celulózy, želatína a polyméry, ako sú polyetylénglykoly.

Niektoré zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môžu byť pripravené ako soli s farmaceutický prijateľnými protiónmi. Farmaceutický kompatibilné soli môžu byť pripravené s mnohými kyselinami, vrátane kyseliny chlorovodíkovej, sírovej, octovej, mliečnej, vínnej, jablčnej, jantárovej atď. Soli majú tendenciu byť viacej rozpustné vo vodných alebo iných protonických rozpúšťadlách ako príslušné voľné bázy.

Farmaceutický prostriedok podľa predkladaného vynálezu obsahuje činidlo ovplyvňujúce bunkový cyklus a prípadne jedno alebo viacej ďalších aktívnych činidiel, ako sú známe antiproliferatívne činidlá, ktoré sú kompatibilné s činidlom ovplyvňujúcim bunkový cyklus a ktoré sú vhodné pre danú liečenú indikáciu.

Zlúčeniny sú použiteľné ako anti-angiogénne činidlá a ako činidlá na modulovanie a/alebo inhibíciu aktivity proteín kináz, čo umožňuje liečbu nádorov alebo iných ochorení asociovaných s bunkovou proliferáciou sprostredkovanou proteín kinázami.

Terapeuticky účinné množstvo činidiel podl'a predkladaného vynálezu môže byť. použité na liečbu ochorení sprostredkovaných moduláciou alebo reguláciou proteín kináz. Účinné množstvo je množstvo činidla, ktoré je po podaní cicavcovi ktorý potrebuje takú liečbu, dostatočné na účinnú liečbu ochorení sprostredkovaného aktivitou jednej alebo viacero kináz. Tak je terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny vzorca I alebo II, jej soli, aktívneho metabolitu alebo preliečiva množstvo dostatočné na modulovanie, regulovanie alebo inhibíciu aktivity jednej alebo viacero kináz, čo vedie na zlepšenie alebo zmiernenie aktivitou.

ochorenia, ktoré je ovplyvnené touto

Liečba označuje aspoň zmiernenie ochorenia cicavca, ako je človek, ktorý je postihnutý - aspoň čiastočne - v dôsledku aktivity jednej alebo viacero kináz, a zahŕňa: prevenciu vzniku ochorení cicavca, najmä vtedy, keď je cicavec predisponovaný k ochoreniu, ale ešte nebolo toto ochorenie diagnostikované; moduláciu a/alebo zmiernenie ochorenia.

a/alebo inhibíciu ochorenia;

Činidlá podľa predkladaného vynálezu môžu byť pripravené reakciami uvedenými ďalej, za použitia techník známych v odbore a za použitia východzích materiálov, ktoré sú jednoducho dostupné.

Všeobecné schémy 1-6, uvedené ďalej, môžu byť použité na výrobu zlúčenín podľa predkladaného vynálezu.

Spôsob 1

H \ SEM-C1 χ-α,ι A

ho vOÓ

R,

Halogenovaný medziprodukt A môže byť získaný štandardnou diatozáciou 5-amínoindazolu a reakciou získanej diazoniovej soli s vhodnou soľou halogenidu, ako je CuCl alebo KI. Ďalšia halogenizácia vedúca na zisk 3-haloindazolu B je uskutočnená reakciou s vhodnou bázou, ako je hydroxid sodný alebo hydroxid draselný, a halogénom, ako je jód. Medziprodukt B je chránený za použitia akéhokoľvek počtu chrániacich skupín a reaguje s (výhodne stoichiometrickou) alkyl- alebo aryl-borítou kyselinou alebo esterom a vhodným Pd katalyzátorom, napríklad, Pd(PPh₃)₄, na uskutočnenie selektívnej reakcie v C-3 pozícii. Ďalšia reakcia s druhou alkyl- alebo aryl- boritou kyselinou alebo esterom a vhodným Pd katalyzátorom vedie na zisk požadovaného 3,5-disubstituovaného medziproduktu E, ktorý je potom zbavený chrániacich skupín za zisku finálnej zlúčeniny F. Podmienky odstránenia chrániacich skupín závisia na použitých chrániacich skupinách, napríklad, acidické podmienky sa použijú na odstránenie THP chrániacich skupín. R_xa R₂ sú rovnaké, ako boli definované vyššie, a môžu byť R'i a R'₂.

Variant spôsobu 1

Vyššie uvedený variant syntézy podľa spôsobu 1 zahŕňa reakciu medziproduktu C, kde X je Cl, s alkyldicínom, ako je hexametyldicín, a vhodným Pd katalyzátorom, za zisku medziproduktu G. Reakcia medziproduktu G s alkyl- alebo arylhalogenidom a vhodným Pd katalyzátorom vedie na zisk požadovaného medziproduktu D, ktorý môže byť ďalej spracovaný spôsobom opísaným vyššie.

Spôsob 2 yOl yOý ® H

Alternatívne môže byť, ako je uvedené v schéme 2, 5nitroindazol halogénovaný ako je opísané vyššie pre medziprodukt A, za zisku nitro zlúčeniny H, za použitia reakcie s vhodnou bázou, ako je hydroxid sodný alebo hydroxid draselný, a halogénom, ako je jód, za zisku medziproduktu I, ktorý sa získa po štandardnom chránení vhodnou chrániacou skupinou. Reakcia medziproduktu I s typmi alkyldicínu, ako je hexametyldicín, a vhodným Pd katalyzátorom, môže viesť na zisk medziproduktu J. Ďalšia reakcia nitro zlúčeniny J s alkylalebo aryl- boritou kyselinou alebo esterom a vhodným Pd katalyzátorom vedie na zi$k 3-substituovaného indazolu K. Redukcia K s vhodným redukčným činidlom, ako je vodík s palladiovým katalyzátorom alebo SnCl₂, vedie na zisk amínu. Diazotizácia získaného 5-amínoindazolu a reakcia získanej diazoniovej soli s vhodnou halogenidovou soľou, ako je CuCl alebo KI vedie na zisk medziproduktovej halogénovej zlúčeniny 1. Reakcia zlúčeniny L s alkyl- alebo aryl- boritou kyselinou alebo esterom a vhodným Pd katalyzátorom vedie na zisk medziproduktu M, z ktorého sa spôsobom uvedeným vyššie odstránia chrániace skupiny za zisku konečnej zlúčeniny F. R_x a R₂ sú rovnaké, ako boli definované vyššie, a môžu byť R'i a R'₂.

Spôsob 3

c* P*

V spôsobe 3 je 3-karboxyindazol aktivovaný za zisku aktívnej acylačnej zlúčeniny, napríklad pomocou karbonyldiimidazolu, ktorá potom reaguje s vhodným alkoxyalkylamínom, ako je N,N-dimetylhydroxylamín, za zisku amidu A'. Selektívna halogenácia medziproduktu A' s halogénom ako je bróm alebo jód a výhodne s katalyzátorom, ako je bis (trifluóracetoxy)jódbenzén alebo bis(acetoxy)- jodsobenzén, vedie na zisk 5-halogén-indazolu B'. Chránenie! medziproduktu B' za štandardných podmienok s vhodnou chrániacou skupinou, ako je PMB alebo THP, vedie na zisk chráneného amidu C' . Redukcia C' vhodným redukčným činidlom, ako je hydrid litnohlinitý alebo ekvivalentné hydridové redukčné činidlo, vedie na zisk kľúčového medziproduktu, ktorým je aldehyd D' . R₃ je rovnaký, ' ako bol definovaný vyššie, a je ním výhodne substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, výhodne nižší alkyl.

Spôsob 4

Rj-X μ» odstránenie chrániacich γ skupín

H”

V spôsobe 4 uvedenom vyššie reaguje medziprodukt D' so substituovaným diamínom B a vhodným oxidačným činidlom, ako je síra, za zisku benzimidazolu C. Konverzia zlúčeniny C na príslušný boritanový ester D je uskutočnená reakciou s vhodným druhom dibóru, ako je dipinacolatodibór, alebo iným elektrofilným zdrojom boru, s vhodným palladiovým katalyzátorom. Medziprodukt D potom ďalej reaguje s halogénovaným arylom alebo alkylhalogenidom za katalýzy palládiom za zisku 5-substituovaného indazolového medziproduktu E, z ktorého sa po vhodnom odstránení chrániacich skupín získa konečná zlúčenina H.

I

Alternatívne druhom dibóru, elektrofiIným katalyzátorom, na medziprodukt medziprodukt D' východzia zlúčenina D' reaguje s vhodným ako je bis(pinakolato)dibór, alebo iným zdrojom boru, s vhodným palladiovým za zisku esteru boru F . Premena zlúčeniny F D je uskutočnená spôsobom opísaným vyššie pre

Iná alternatívna konverzia môže byť uskutočnená reakciou aldehydového medziproduktu F so substituovaným aryl- alebo alkylhalogenidom na dodanie R₂ s palladiovým katalyzátorom za zisku G, ktorá potom ďalej reaguje so substituovaným diamínom B a vhodným oxidačným činidlom, ako je síra, za zisku benzimidazolu E' . Odstránenie chrániacich skupín spôsobom opísaným vyššie vedie na zisk konečnej zlúčeniny H . R₂ je rovnaký, ako bol definovaný vyššie a môže byť R'₂₎ R₃ je rovnaký, ako bol definovaný vyššie.

Ešte iná príprava medziproduktu E môže byť uskutočnená reakciou zlúčeniny, ako je C, priamo s vhodnou alkylboritou kyselinou alebo esterom, za vhodnej katalýzy palládiom.

Ďalšie elektrofilné zdroje boru, ktoré môžu byť použité, majú vzorec:

R₃O OR₃

B-B'

R₃Ó OR3 kde R₃ je rovnaký, ako bol definovaný vyššie a dve R₃ skupiny môžu tvoriť kruh.

Špecifické príklady sú:

jx

xxx

Spôsob 5

V spôsobe 5 môže byť alkoholový medziprodukt Xi aktivovaný napríklad reakciou so sulfonylhalogenidom, ako je metánsulfonylchlorid, a s vhodnou bázou, ako je trietyiamín, a táto elektrofilná zlúčenina môže potom reagovať s nukleofilným činidlom, ako je substituovaný amín, za zisku medziproduktu X₂, z ktorého sú potom za vhodných podmienok odstránené chrániace skupiny. R₂ je rovnaký, ako bol definovaný vyššie, a môže byť R'2, R3 je rovnaký, ako bol definovaný vyššie.

Spôsob 6

_ ^?EM

SEM

1) NaNOj, AcOH. HjO 21 KÍ

RjB<oh),' Pd katalyzátor

Hj.PtťC

V spôsobe 6 sa indazolové jadro vytvorí anuláciou 2-halo5-nitrofenylarylketónu Yl hydrazínom za zisku požadovaného 3aryl-5-nitroindazolu Y2. Následné chránenie a redukcia vedú na zisk amínu Y4 . Ako je opísané pre spôsob 2, diazotizácia, reakcia diazoniovej soli s ΚΙ, po ktorej nasleduje Pd katalyzovaná kondenzácia jódového medziproduktu s arylboritou kyselinou, vedie na zisk chráneného 3,5bisarylindazolového medziproduktu Y6. Štandardné odstránenie chrániacich skupín potom vedie na zisk konečných produktov. R_xa R₂ sú rovnaké, ako boli definované vyššie, a môžu byt R'i a R'2,

Príprava špecifických výhodných zlúčenín podľa predkladaného vynálezu je podrobne opísaná v nasledujúcich príkladoch. Odborníkom v odbore bude jasné, že opísané chemické reakcie môžu byt jednoducho upravené na prípravu iných inhibítorov kináz podľa predkladaného vynálezu. Napríklad, syntéza neuvedenej zlúčeniny podľa predkladaného vynálezu môže byt jednoducho uskutočnená za použitia modifikácií jasných odborníkom v odbore, napríklad vhodným chránením interferujúcich skupín, zmenou niektorých činidiel alebo zmenou reakčných podmienok. Alternatívne môžu byt na prípravu zlúčenín podľa predkladaného vynálezu použité iné reakcie známe v odbore.

V nasledujúcich príkladoch sú - pokial nie je uvedené inak - všetky teploty uvedené v stupňoch Celsia a všetky podiely a percentá sú hmotnostné. Reakčné činidlá boli zakúpené od komerčných dodávateľov, ako je Aldrich Chemical Company alebo Lancaster Synthesis Ltd., a boli použité bez ďalšieho prečistenia, pokiaľ nie je uvedené inak. Tetrahydrofuran (THF) destilovaný z hydridu vápenatého a Ν,Ν-dimetylformamidu (DMF), bol zakúpený od Aldrich v Súre seal nádobách a bol použitý tak, ako bol zakúpený. Všetky rozpúšťadlá boli prečistené za použitia štandardných spôsobov známych odborníkom v odbore, pokiaľ nie je uvedené inak.

Reakcie opisované ďalej boli obvykle uskutočnené za pozitívneho tlaku argónu alebo v sušiacej skúmavke, pri teplote miestnosti (pokiaľ nie je uvedené inak), v bezvodých rozpúšťadlách, a -reakčné banky boli opatrené gumeným šeptom pre prívod substrátov a reakčných činidiel pomocou injekčnej striekačky. Sklenené nástroje boli sušené v piecke a/alebo teplom. Analytická chromatografia na tenkej vrstve (TLC) bola uskutočnená na sklenených silikagélových 60 F 254 doskách Analtech (0,25 mm) a elúcia bola uskutočnená vhodným pomerom rozpúšťadiel (obj./obj.), a keď je to nutné, je elúcia opísaná. Reakcie boli hodnotené TLC a boli skončené po vyčerpaní východzieho materiálu.

Vizualizácia TLC dosiek bola uskutočnená za použitia panisaldehydového postrekového činidla alebo kyseliny fosfomolybdenovej (Aldrich Chemical 20 % hmôt. v etanole) a aktivácie teplom. Spracovanie bolo obvykle uskutočnené zdvojením reakčného objemu reakčným rozpúšťadlom alebo extrakčným rozpúšťadlom a potom premytím uvedeného vodného roztoku za použitia 25% objemu extrakčného objemu, pokiaľ nie je uvedené inak. Roztoky produktov sa sušili cez bezvodý Na₂SO₄alebo MgSO₄ pred filtráciou a odparením rozpúšťadiel za redukovaného tlaku na rotačnej odparke a toto sa označuje ako odstránenie rozpúšťadiel vo vákuu. Rýchla chromatografia na kolóne (Still et aL, J. Org. Chem., 43, 2923 (1978)) sa uskutočnila za použitia Baker silikagélu pre rýchlu chromatograf iu (47-61 μπι) a pomeru silikagélu: surového materiálu približne 20:1 až 50:1, pokiaľ nie je uvedené inak.

Hydrogenácia sa uskutočnila pri tlaku uvedenom v príkladoch alebo pri atmosférickom tlaku.

¹H-NMR spektrá sa stanovili na Bruker prístroji pracujúcim pri 300 MHz alebo 500 MHz a ¹³C-NMR spektrá sa stanovili pri 75 MHz. NMR spektrá bola získané v CDC1₃ roztokoch (v ppm), za použitia chlórformu referenčného štandardu (7,25 ppm a 77,00 ppm) alebo CD₃OD (3,4 ppm a 4,8 ppm a 4 9,3 ppm), alebo interného tetrametylsilanu (0,00 ppm), pokiaľ to bolo vhodné. Iné NMR rozpúšťadlá boli použité podľa potreby. Keď sú opísané multiplicity, tak sú použité nasledujúce skratky: s (singlet), d (dublet) , t (triplet), m (multiplet), br (široký), dd (dublet dubletov), dt (dublet tripletov). Kopulačné konštanty, pokiaľ sú uvedené, sú v Hertzoch (Hz).

Infračervené (IR) spektrá boli zaznamenané na Perkin-Elmer FT-IR Spectrometer ako čisté oleje alebo ako KBr pelety, a sú uvedené vo vlnovej dĺžke (cm¹) . Hmotnostné spektrá boli získané za použitia LS/MS alebo elektrospreja. Všetky teploty tavenia (t.t.) sú nekorigované.

Východzie materiály dostupné a/alebo môžu odbore.

použité v príkladoch sú komerčne byť pripravené spôsobmi známymi v

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1:· 5-fenyl-3-styryl-lH-indazol

(a) Medziprodukt la: 5-chlór-3-jód-lH-indazol:

5-amíno-lH-indazol (15,41 g, 116 mmol) sa suspenduje v zmesi vody (250 ml) , ľadu (250 ml) a koncentrovanej HCl (100 ml) . Zmes sa ochladí v kúpeli l'ad-sol' na vnútornú teplotu —5 ’C. Do tejto zmesi sa pridá roztok dusitanu sodného (8,78 g, 127 mmol) vo vode (75 ml) , ktorý sa ochladil na 0 °C.

Vzniknutý diazoniový roztok sa mieša počas 15 minút pri teplote —5 °C. Roztok chloridu medhého (14,9 g, 151 mmol) v v koncentrovanej HCl (150 ml) sa ochladí na 0 °C a potom sa po kvapkách pridá do diazoniového roztoku, za vzniku oranžovej zrazeniny. Chladiaci kúpeľ sa odstráni a reakčná zmes sa nechá zahriat na teplotu miestnosti. Vývoj plynu začne pri vnútornej teplote 10 °C. Po zmiešaní pri teplote miestnosti počas 1,5 hodiny vývoj plynu skončí. Banka sa potom zahrieva pri teplote 60 °C počas 30 minút a potom sa ochladí na —15 °C. Vznikne hnedá zrazenina. Zrazenina sa odoberie filtráciou pomocou sania a suší sa vo vákuovej sušičke cez NaOH počas 16 hodín za zisku surového 5-chlór-lH-indazolu (25,6 g) vo forme svetlo hnedého prášku.

Tento surový medziprodukt sa rozpustí v 1,4-dioxane (400 ml). Do roztoku sa pridá 3 M vodný NaOH (400 ml) a jódové vločky (35,3 g, 139 mmol). Po zmiešaní pri teplote miestnosti počas 2 hodín sa reakčná zmes neutralizuje na pH=6 20% vodným roztokom kyseliny citrónovej, čo spôsobí zmenu tmavej farvy na svetlo zelenú. Do roztoku sa pridá nasýtený vodný roztok tiosíranu sodného (400 ml) , čo spôsobí zmenu farby zo zelenej na žltú, a roztok sa extrahuje etylacetátom (3 x 1000 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný, prefiltrujú sa odsatím cez vrstvu Celitu a zahustia sa na. zelenú kašu, ktorá sa potom znova rozpustí v etylacetáte (500 ml) , prefiltruje sa cez vrstvu Celitu a zahustí sa na zelenú pevnú látku. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (25 % etylacetát v hexánoch) vedie na zisk 5-chlór-3-jód-lH-indazolu

5-amino-ΙΗ-indazolu) vo forme špinavo 1.1. = 198-19.9 °C; Rf = 0,53 (50% etylacetát/hexany); ^{1H NMR} (DMSO-dg) 57,44 (m, 2H) , 7,60 (d, 1H,

J= 8,7 Hz), 13,68 (s, 1H) . Anál. (C₇H₄C11H₂) C, H, N..

la (14,18 g, 44% z bielej pevnej látky:

(b) Medziprodukt lb — 5-chlór-3-jód-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-1H-indazol

5-chlór-3-j ód-1H-indazol la (8,86 g, 31,8 mmol) sa rozpustí v THF (100 ml) a ochladí sa v kúpeli ľad-sol na 0 °C. Pridá sa pevný terc.butoxid sodný (3,67 g, 382 mmol) a zmes sa mieša pri 0 °C počas 1 hodiny. Potom sa pridá 2(trimetylsilyl)etoxymetylchlorid (7,96 g, 38,2 mmol) a miešanie pokračuje pri 0 °C počas 1 hodiny. Roztok sa nariedi etylacetátom (200 ml), premyje sa vodou (100 ml) a solankou (100 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, a zahustí sa. Chromatografiou na silikagéli (5 až 20% etylacetát v hexánoch). sa získa zlúčenina lb (9,75 g,

75%) vo forme žltého oleja: R_t = 0,39 _; (5% etylacetát/hexany) ; ^{1H NMR} (CDC1₃) Ô 0,06 (s, 9H) , 0,87 (t, 2H, J= 8,1Hz), 3,55 (t, 2H, J= 8,1Hz), 5,70 (s, 2H) , 7,43 (dd, 1H, J= 8,9, 1,7 Hz), 7,49 (m, 2H).

Anál. (C₁₃H₁₈CllH₂OSi) C, H, N.

(c) Medziprodukt 10 — 5-chlór-3-styryl-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol:

5-chlór-3-jód-2-SEM-indazol lb (553 mg, 1,35 mmol), kyselina styrylboritá (300 mg, 2,03 mmol), a tetrakis(trifenylfosfin)palládium (78,2 mg, 0,068 mmol) sa rozpustí v toluéne (10 ml) a metanole (1,4 ml). Pridá sa nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (1,7 ml) a zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli pri teplote 90 °C počas 3 hodín. Pozoruje sa mierny spätný tok. Po ochladení na teplotu miestnosti sa roztok nariedi vodou (15 ml) a extrahuje sa etylacetátom (4 x 50 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa a zahustia sa. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (toluén) vedie na zisk čistej zlúčeniny lc (350,7 mg, 67%) vo forme žltého oleja: R_t = 0,20 (toluén); ^{1H NMR} (CDC1₃) δ -0,09 (s, 9H) , 0,86 (t, 2H, J= 8,1Hz), 3,55 (t, 2H, J= 8,3 Hz), 5,65 (s, 2H) , 7,2-7,4 (m, 7H) , 7,54 (d, 2H, J= Ί,β Hz), 7,93 (d, 1H, J= 1,6 Hz). ¹³C NMR (CDC1₃) δ

1,5, 17,7, 66,5, 77,9, 111,0, 119,2, 120,3, 123,6, 126,5,

127,3, 127,4, 128,0, 128,7, 131,6, 136,9, 139,4, 142,5. Anál.

(C₂₁H₂₅ClN₂OSi»0,02 CHC1₃) C, H, N, Cl.

(d) Medziprodukt ld - 5-fenyl-3-styryl-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-indazol:

Do roztoku 5-chlór-3-styryl-2-SEM-indazolu lc (209,4 mg, 0,544 mmol) v suchom 1,4-dioxane (0,5 ml) sa pridá kyselina fenylboritá (69,6 mg, 0,571 mmol), uhličitan cesný (213 mg, 0,653 mmol), a tris(dibenzylidinacetón)dipalládium (10,0 mg, 0,0108 mmol). Pridá sa roztok tri-terc.butylfosfinu v 1,4dioxane (0,1 M, 0,2 17 ml) a zmes sa zahrieva pri 80 °C počas 6 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa roztok nariedi etyléterom (20 ml) a prefiltruje sa cez vrstvu Celitu na odstránenie čiernej pallódiovej zrazeniny. Filtrát sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (toluén) za zisku zlúčeniny ld (77,2 mg, 33%) vo forme bezfarebného oleja: R_t = 0,09 (toluén); ^ih nmr _(CDCl3) § _{0j04 (S/ 9H) f 0},93 2H, J = 8,1Hz), 3,62 (t,

2H, J = 8,1Hz), 5,76 (s, 2H, J), 7,3-7,7 (m, 14H) 8,17 (s,

1H) . Anál. (C₂₇H_3oN₂0Si«0,2 H₂0) C, H, N.

(e) Príklad 1- 5-fenyl-3-styryl-lH-indazol:

Medziprodukt ld (68,1 mg, 0,16 mmol) sa rozpustí v absolútnom etanole (2,0 ml) a 3 M HCI (2,0 ml). Roztok sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 20 hodín, ochladí sa na teplotu miestnosti a extrahuje sa etylacetátom (3 x 30 ml). Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (25 až 50% etylacetát v hexanoch) , za zisku titulnej zlúčeniny (19,2 mg, 40%) vo forme bielej pevnej látky: R_t = 0,14 (25% etylacetát/hexany) ; ^{1H NMR} (CDC1₃) 56,92 (d, 1H, J= 6,3 Hz)., 7,3-7,7 (m, 13H) , 8,20 (s, 1H) , 10,3 (br s,lH). HRMS vypočítané pre C₂iHi₇N₂ 297,1392 (MH⁺) , zistené

297,1398 Anál. (C₂₁H₁₆N₂· 0,7 H₂0) C, H, N.

Príklad 2: 3,5-distyryl-lH-indazol

(a) Medziprodukt 2a

5-jód-lH-indazol:

5-Amíno-lH-indazol (10,21 g, 76,7 mmol) sa suspenduje v zmesi vody (100 ml) , ľadu (100 ml) a koncentrovanej HCl (35 ml). Zmes sa ochladí v kúpeli ľad-soľ na vnútornú teplotu -5 °C. Do tejto zmesi sa pridá roztok dusitanu sodného (5,82 g,

84,4 mmol) vo vode (30 ml), ktorý bol ochladený na 0 °C. Získaný diazoniový roztok sa mieša počas 10 minút pri —5 °C a potom sa pomaly po kvapkách pridá roztok j odídu draselného (15,3 g, 92 mmol) vo vode (50 ml) . Pri prvých kvapkách roztoku KI vznikne pena a potom vznikne dechtovitá živica. Po dokončení adície sa zmes zahrieva pri teplote 90 °C počas l hodiny. Dechtovitá zrazenina sa rozpustí a počas zahrievania vzniká fialová para. Reakčná zmes sa potom ochladí na teplotu miestnosti, čo spôsobí vznik jemnej hnedej zrazeniny. Táto zrazenina sa odoberie filtráciou pomocou odsatia a suší sa vo vákuu za zisku 5-jódindazolu 2a (14,12 g, 75%) vo forme hnedého prášku: R_t = 0,28 (50% etylacetát/hexany); ^1H (DMSOd₆) δ 7,40 (d, 1H, J = 9,0 Hz), 7,56 (dd, 1H, J= 8,5, 1,5 Hz), 6,01 (s, 1H) 8,16 (s, 1H) , 13,23 (s, 1H) . Anál. (C₇H₅1H₂) C,H,I,N.

(b) Medziprodukt 2b — 3,5-dijod-lH-indazol:

Medziprodukt 2b sa pripraví spôsobom syntézy analogickým k syntéze medziproduktu la. Reakcia medziproduktu 2a s jódom a hydroxidom sodným vedie na zisk 3,5-dijód-lH-indazolu 2b (84%) vo forme žltej pevnej látky: R_t =0,39 (30% etylacetát/hexany); ^1H (DMSO-d₆) δ 7,41 (d, 1H, J = 8,7 Hz),

7,66 (dd, 1H, J = 8,7, 1,5 Hz), 7,77 (d, 1H, J = 0,9 Hz) 13,65 (s, 1H).

(c) Medziprodukt 2c — 3,5-dijód-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol:

Spôsobom podobným syntéze medziproduktu lb, sa reakciou

3,5-dijódindazolu 2b s terc.butoxidom sodným a 2(trimetylsilyl)etoxymetylchloridom získa zlúčenina 2c (64%) vo forme žltého oleja: R_t = 0,53 (30% etylacetát/ hexany); ^1H (CDC1₃) δ - 0,05 (s, 9H) , 0,86 (t, 2H, J = 8,1Hz), 3,54 (t, 2H, J = 8,1Hz), 5,69 (s, 2H) , 7,34 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,69 (dd,

1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,87 (d, 1H, J= 1,5 Hz).

(d) Medziprodukt 2d - 3,5-distyryl-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol:

Kyselina styrylboritá (186 mg, 1,26 mmol) sa pridá do roztoku zlúčeniny 2c (210,0 mg, 0,42 mmol) a tetrakis(trifenylfosfin)palládia (48,5 mg, 0,042 mmol) v toluéne (3,5 ml) a metanole (0,5 ml). Pridá sa nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (1,05 ml) a zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 90 °C (mierny spätný tok) počas 4 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa reakčná zmes naleje do vody (15 ml) a extrahuje sa etylacetátom (4 x 50 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (toluén), za zisku zlúčeniny 2d (170,9 mg, 90%) vo forme žltého oleja: R_t = 0,10 (toluén); ^1H(CDC1₃) δ 0,01 (s, 9H),

J = 8,5 Hz) , 5,73 (s, (m, 15H) , 8,05 (s, 1H)

77,7, 110,1, 119,4, 11S

128,6, 128,7, 128,9, 131,3, 137,1, 137,3, 140,6, 143,3. Anál (C₂₉H₃₂N₂OSÍ»0,1 CHCI3) C, H, N.

9H), 0,98	(t, 2H, J =	8,5 Hz) ,
(S, 2H),	7,17 (d, 1H,	J = 16
1H) . ¹³C	NMR (CDCI3)	δ - 1,5,
, 119,8,	123,3, 125,1,	126,3, :

(e) Príklad 2 - 3,5-distyryl-lH-indazol:

Zlúčenina príkladu 2 sa pripraví spôsobom analogickým k príkladu 1, reakciou zlúčeniny 2d s 3M HCl, ktorou sa získa

3,5-distyryl-lH-indazol (33%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: R_t = 0,11 (25% etylacetát/hexany); ^{1H NMR} (CDC1₃) δ 7,27,7 (m, 16H) 8,076 (s, 1H) , 10,05 (br s, 1H) . HRMS vypočítané pre C₂₃H₁₉N₂ 323,1548 (MH⁺) , zistené 323,1552. Anál. (C2₃H₁₈N₂«0,5

H₂0) C, H, N.

Príklad 3: 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-fenyl-lH-indazol

(a) Medziprodukt 3a — 1-[2-(trimeťylsilanyl)-etoxymetyl]-1Hbenzimidazol:

(pozri Whitten et. al., J. Org. Chem. 51, 1891 (1986) ktorý je tu uvedený ako odkaz a kde je uvedený podobný spôsob): Pevný lH-benzimidazol (30 g, 254 mmol) sa pridá po malých podieloch do suspenzie hydridu sodného (10,2 g 60% disperzia v minerálnom oleji, 254 mmol) v DMF (350 ml) pri teplote miestnosti. Zmes sa mieša počas 3 hodín a potom sa ochladí na 0 °C v ľadovom kúpeli. Po kvapkách sa pridá počas 10 minút 2(trimetylsilyl)etoxymetylchlorid (46,57 g, 279 mmol). Reakčná zmes sa mieša počas 16 hodín, zahreje sa na teplotu miestnosti tak, že sa ľadová kúpeľ nechá rozpustiť, potom sa naleje do vody (1 1) a extrahuje sa etylacetátom. Organická vrstva sa premyje solankou, suší sa cez síran sodný, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (50 až 85% etylacetát v hexanoch) za zisku zlúčeniny 3a (56,63 g,

90%) vo forme (50% jantárového oleja: etylacetát/hexany); ^{1H NMR} (CDC1₃) δ - 0,04 (s, 9H) , 0,90 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 3,50 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 5,53 (s, 2H), 7,31 (m,

2H), 7,54 (m, 1H), 7,81 (m, 1H), 7,96 (s, 1H). Anál.

(C₁₃H₂₀N₂OSi*0,5 H₂0) C, H, N.

Rt

0,40 (b) Medziprodukt 3b - 2-jód-1-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-benzimidazol:

Roztok N-SEM-benzimidazolu (medziproduktu 3a) (19,19 g,

77,25 mmol) v suchom etyléteri (150 ml) a ochladený na —78 °C v kúpeli suchý ľad/acetón, sa pridá po kvapkách kanylou do roztoku n-butyll£tia (46 ml 2,5.M v hexánoch, 116 mmol) v suchom etylétere (150 ml) , ktorý bol tiež ochladený —78 °C v kúpeli suchý ľad/acetón. Pridávanie benzimidazolového roztoku trvá 10 minút. Miešanie pokračuje ďalších 15 minút a počas tejto doby vznikne tmavo červené zafarbenie. Výsledný roztok aryllítia sa pridá po kvapkách kanylou do roztoku jódových vločiek (49 g, 193 mmol) v suchom éteri (500 ml) , roztok sa ochladí na —78 °C v kúpeli suchý ľad/acetón. Po dokončení adície (10 minút) sa chladiaci kúpeľ odstráni a reakčná zmes sa nechá zahriat počas 30 minút na vnútornú teplotu —10 °C. Pridá sa voda (250 ml) a zmes sa premyje nasýteným vodným roztokom kyslého siričitanu sodného (2 x 200 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran sodný, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli za zisku 3-jód-nSEM-benzimidazolu 3b (22,84 g, 80%) vo forme žltej pevnej

látky	: t.t. = 60-63 °C; R_t = 0,70 (etylacetát); ^1H	(CDC1₃)	Ô -
0,04	(s, 9H) , 0,92 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 3,58	(t, 2H, J	8,1
Hz) ,	5,53 (s, 2H) , 727 (m, 2H) , 7,51 (m, 1H) ,	7,73 (m,	1H) .

HRMS vypočítané pre C₁₃H₁₉lH₂OSiNa 397,0209 (Mna⁺) , zistené 397,0204. Anál. (C₁₃H₁₉lH₂OSi) C, H, I, N.

(c) Medziprodukt 3c — 5-chlór-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-3 -(trimetylstannyl)-lH-indazol:

Zmes medziproduktu lb (6,25 9, 15,3 mmol), hexametyldicínu (10,2 g, 30,5 mmol) a bis(trifenylfosfín)58 palládium(II)dibromidu (242 mg, 0,306 mmol) v toluéne (50 ml) sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 30 minút, potom sa ochladí, prefiltruje sa a zahustí sa. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (5 až 50% etylacetát v hexanoch) vedie na zisk zlúčeniny 3c (6,34 g, 93%) vo forme svetlo žltého oleja: R_t = 0,21 (5% etylacetát/hexany) , R_t = 0,23 (toluén); ^{1H NMR} (CDC1₂) δ - 0,06 (s, 9H) , 0,56 (s malým vedľajším pásikom, 9H), 0,87 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,54 (t, 2H, J= 8,4 Hz), 5,75 (s, 2H), 7,34 (dd, 1H, J= 8,7, 1,8 Hz), 7,51 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,66 (d, 1H, J= 1,8 Hz). Anál.

(Ci₆H₂₇ClH₂OSiSn) C, H, Cl, N.

(d) Medziprodukt 3d - 5-chlór-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-3-{l-[2-(trimetylsilanyl)-etoxymetyl]-1Hbenzimidazol-2-yl}-lH-indazol:

Zmes zlúčeniny 3c (4,47 g, 10,03 mmol), 3b (4,12 g, 11,03 mmol), tetrakis(trifenylfosfine)palládia(0) (579 mg, 0,50 mmol) a jodidu med'ného (190 mg, 1,00 mmol) v THF (100 ml) sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 1 hodiny. Pridá sa ďalší katalyzátor (580 mg, 0,50 mmol) a Cul (200 mg, 1,05 mmol) a zahrievanie pri teplote spätného toku pokračuje počas 20 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa čierna zrazenina odfiltruje, filtrát sa zahustí a zvyšok sa prečistí chromatografiou na silikagéli (toluén) za zisku čistej zlúčeniny 3d (2,29 g, 43%) vo forme bezfarebného oleja, ktorý kryštalizuje pri státí: t.t. = 80-82 °C; Rf = 0,12 (10% etylacetát/hexany), R_f = 0,13 (toluén); ^{1H NMR} (CDC1₃) δ - 0,15 (s, 9H) , -0,06 (s, 9H) , 0,85 (t, 2H, J= 8,1Hz), 0,91 (t, 2H,

J= 8,4 Hz), 3,60 (t, 2H, J= 8,4 Hz), 3,61 (t, 2H, J= 8,1Hz),

5,80 (s, 2H) , 6,24 (s, 2H) , 7,36 (m, 2H) , 7,47 (dd, 1H, J=

9,0, 2,1 Hz), 7,57 (d, 1H, J= 9,0 Hz),

7,62 (m, 1H) , 7,91 (m, 1H) , 8,73 (d, 1H, J= 2,1 Hz). Anál.

(C₂₆H₃₇ClN₄O₂Si₂) C, H, Cl, N.

(e) Medziprodukt 3e — 5-fenyl-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-3-{l-[2-(trimetylsilanyl)-etoxymetyl]-1Hbenzimidazol-2-yl)-lH-indazol:

Zmes zlúčeniny 3d (192,0 mg, 0,363 mmol), kyseliny fenylboritej (66,4 mg, 0,544 mmol), palládium(II)acetátu (3,3 mg, 0,0146 mmol), CyMAP-1 (pre podobný postup pozri Old et. ml., J. Am. Chem. Soc., 120, 9722 (1998) ) (5,7 mg, 0,0145 mmol) fluoridu cesného (165 mg, 1,09 mmol) v 1,4-dioxane (3,6 ml) sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 100 °C počas 1 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes nariedi etylacetátom (20 ml) a prefiltruje sa na odstránenie čiernej zrazeniny. Filtrát sa premyje 1 M vodným roztokom hydroxidu sodného (20 ml) , suší sa cez síran horečnatý, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (0 až 4% metanol v dichlórmetáne) za zisku zlúčeniny 3e (107,0 mg, 52%) vo forme mierne žltého oleja: R_f = 0,26 (dichlórmetan) ; ^{1H NMR} (CDC1₃) δ — 0,15 (s, 9H) , -0,04 (s, 9H),0,86 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,95 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 3,61 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 3,66 (t, 2H, J= 8,1

Hz), 5,85 (s, 2H), 6,28 (s, 2H), 7,37 (m, 3H), 7,49 (t, 2H, J = 7,5 Hz), 7,63-7,80 (m, 5H) , 7,91 (m, 1H) , 8,88 (s, 1H) .

Anál. (C₃₂H₄₂N₄O₂Si₂»0,4 H₂O) C, H, N.

Príklad 3 - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-fenyl-lH-indazol:

Tetrabutylammóniumf luorid (1,0 M v THF, 3,16 ml) a 1,2diamínoetan (95 mg, 1,58 mmol) sa pridajú k medziproduktu 3 (90,2 mg, 0,158 mmol). Roztok sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 70 °C počas 20 hodín a potom sa zahrieva ďalších 24 hodín pri teplote spätného toku. Po ochladení na teplotu miestnosti sa roztok nariedi etylacetátom (30 ml) a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (20 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (25 až 50% etylacetát v hexanoch) za zisku 3(lH-benzimidazol-2-yl)-5-fenyl-lH-indazolu 3 (33,9 mg, 69%) vo forme bielej pevnej látky: Rf = 0,30 (50% etylacetát/ hexany): ^{1H NMR} (CDC1₃) δ 7,21 (kvintet d, 2H, J = 5,7, 1,5 Hz), 7,39 (t, 1H, J = 7,4 Hz), 7,53 (t, 3H, J = 7,5 Hz), 7,76 (m, 5H), 8,71 (s, 1H) , 13,01 (s, 1H) , 13,70 (s, 1H) . HRMS vypočítané pre C₂oHi₅N₄ 311,1297 (MH⁺) , zistené 311,1283 .

Príklad 4: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-fenol

(a) Medziprodukt 4a — 5-(3-metoxyfenyl)-1-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-3 -{1-[2-(trimetylsilanyl)-etoxymetyl]-1Hbenzimidazol-2-yl]-lH-indazol:

Zmes medziproduktu 3d (371,5 mg, 0,702 mmol), kyseliny 3metoxyfenylboritej (160 mg, 1,05 mmol), palládium(II)acetátu (7,9 mg,0,0355 mmol), CyMAP-1 (pozri Old et. al., J. Am. Chem. Soc., 120, 9722 (1998)) (14 mg, 0,0355 mmol) a fluoridu cesného (320 mg, 2,11 mmol) v 1,4-dioxane (7,1 ml) sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 90 °C počas 22 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes nariedi etylacetátom (50 ml) a prefiltruje sa na odstránenie čiernej zrazeniny. Filtrát sa suší cez síran horečnatý, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (10% etylacetát v hexanoch) za zisku zlúčeniny 4a (178,3 mg, 42%) vo frome svetlo žltého oleja: Rf = 0,20 (10% etylacetát/hexany); ^1H ^R (CDC1₃) δ - 0,14

(s,	9H) ,	-0,03 (s, 9H) , 0,86 (t, 2H, J= 8,1Hz), 0,95 (t, 2H,
J= 8,1Hz)	, 3,61 (t, 2H, J= 8,1Hz), 3,66 (t, 2H, J= 8,1Hz),
3,91	(s,	3H) , 5,85 (s, 2H) , 627 (s, 2H) , 6,93 (ddd, 1H, J=
1,1,	2,5,	8,1Hz), 7,27-7,40 (m, 5H) , 7,63-7,70 (m, 2H) , 7,77
(dd,	1H,	J= 1,5, 8,7 Hz), 7,93 (m, 1H) 8,87 (s, 1H) . Anál.

(C₃₃H₄₄N₄O₃SÍ2) C, H, N.

(b) Príklad 4 — 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl] fenol:

Roztok medziproduktu 4a (88,3 mg, 0,147 mmol) v 1,2dichlóretane (3,0 ml) reaguje s komplexom bromidu boritého metylsulf idu (1,0 M v dichlórmetáne, 0,588 ml) a zmes sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 1 hodiny. Miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 16 hodín. Pridá sa voda (5,0 ml) a miešanie pokračuje počas 30 minút pri teplote miestnosti. Zmes sa nariedi dietyléterom (30 ml) a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (20 ml). Organická vrstva sa premyje IM NaOH (3 x 3 0 ml) . Kombinované vodné výplachy sa okyslia na pH = 1 pomocou 6 M HCl a extrahujú sa postupne éterom (30 ml) , etylacetátom (30 ml) a dichlórmetánom (2 x 20 ml) . Tieto organické extrakty sa kombinujú, sušia sa cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (50 až 75% etylacetát v hexanoch) za zisku fenolu 4 (11,6 mg, 24%) vo forme bieleho prášku: ^{1H NMR}

1,9, 7,7 Hz), 7,12-7,27 (m, 4H) , 7,31 (t, 1H, J= 7,7 Hz), 7,52 (dd, 1H, J= 2,1,6,6 Hz), 7,71 (d, 2H, J= 1,1 Hz), 7,76 (dd,

1H, J= 1,5, 6,8 Hz), 8,67 (s, 1H) , 9,57 (s, 1H) , 13,00 (s,

1H) , 13,68 (s,lH). HRMS vypočítané pre C₂oH₁₅N₄0 327,1246 (MH⁺) , zistené

327,1231.

Príklad 5: 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(3-metoxyfenyl)-1Hindazol (DMSO-d₆) δ 6,78 (dd, 1H, J

(a) Príklad 5— 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(3-metoxyfenyl)-1Hindazol:

Rovnaká surová reakčná zmes, z ktorej bola získaná zlúčenina príkladu 4, sa použije tiež na získanie metoxyfenylového analógu 5, za použitia nasledujúceho spôsobu:

Roztok medziproduktu 4a (88,3 mg, 0,147 mmol)v 1,2dichlóretane (3,0 ml) reaguje s komplexom bromidu boritéhometylsulfidu (1,0 M v dichlórmetáne, 0,588 ml) a zahrieva sa pri teplote spätného toku počas 1 hodiny. Miešanie potom pokračuje pri teplote miestnosti počas 16 hodín. Pridá sa voda (5,0 ml) a miešanie pokračuje počas 30 minút pri teplote miestnosti. Zmes sa nariedi dietyléterom (30 ml) a premyje sa nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (20 ml) . Organická vrstva sa premyje 1 M NaOH (3 x 3 0 ml) . Organická vrstva sa potom suší, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (50 až 75% etylacetát v hexanoch) za zisku zlúčeniny 5 (9,3 mg, 19%) vo forme bieleho prášku. ^XH NMR (DMSO-dg) δ 3,86 (s, 3H) , 6,98 (dd, 1H, J = 2,1, 7,8 Hz), 7,19-7,23 (m, 3H) , 7,30 (d, 1H, J= 7,8 Hz), 7,45 (t,

1H, J= 7,8 Hz), 7,52 (dd, 1H, J= 1,8, 5,7 Hz), 7,75 (m, 3H) ,

8,70 (s, 1H) , 13,00 (S, 1H) , 13,70 (s, 1H) . HRMS vypočítané pre C₂iH_lsN₄0na 363,1222 (MNa⁺) , zistené 363,1225.

Príklad 6: 3-(lH-benzimidazol-2-vl)-5-(2-fluórfenyl)-1Hindazol

(a) Medziprodukt 5a — 5-(2-fluórfenyl)-1-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-3-{1-[2-(trimetylsilanyl)-etoxymetyl]-1Hbenzimidazol-2-yl)-ΙΗ-indazol:

Zmes medziproduktu 3d (419,0 mg, 0,792 mmol), kyseliny 2fluórfenylboritej (166 mg, 1,19 mmol), palládium(II)acetátu (9,0 mg, 0,04 mmol), CyMAP-1 (pozri Old et. at. , J. Am. Chem. Soc., 120, 9722 (1998), ktorý je tu uvedený ako odkaz a ktorý opisuje podobný spôsob) (16 mg, 0,04 mmol) fluoridu cesného (361 mg, 2,38 mmol) v 1,4-dioxane (8,0 ml) sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 70 °C počas 1 hodiny. Pretože sa pozoruje len parciálna konverzia, pridá sa palládium(II)acetát (12 mg, 0,05 mmol) a CyMAP-1 (14 mg, 0,035 mmol) a miešanie pokračuje pri teplote 70 °C počas 16 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes nariedi etylacetátom (50 ml) a prefiltruje sa na odstránenie čiernej zrazeniny. Filtrát sa suší cez síran horečnatý, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (10% etylacetát v hexanoch) za zisku zlúčeniny 6a (155,6 mg, 43%) vo forme bezfarebného

oleja: ^XH NMR (CDC1₃) δ - 0,14 (s,	9H), -0,03 (s,	9H)	, 0,86 (t,
2H, J= 8,1Hz), 0,95 (t, 2H, J= 8,	1Hz), 3,61 (t,	2H,	J= 8,1Hz),
3,66 (t, 2H, J= 8,1Hz), 5,86 (s,	2H) , 6,27 (s,	2H) ,	7,15-7,39
(m, 5H) , 7,57-7,75 (m, 4H) , 7,88	(m, , 1H) 8,82	(s,	1H) . Anál.

(C₃₂H₄₁FN₄O₂SÍ₂»0,4 H₂O) C, H, N.

(b) Príklad 6 — 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(2-fluórfenyl)-1Hindazol:

Zlúčenina príkladu 6 sa pripraví spôsobom syntézy analogickým na prípravu zlúčeniny príkladu 3. Reakciou medziproduktu 6a s tetrabutylammóniumfluoridom sa získa zlúčenina 6 (212 mg, 18%) vo forme bieleho prášku: Rf = 0,35 (50% etylacetát/hexany) ; ¹H NMR (DMSO-dg) δ 7,20 (m, 2H) , 7,337,52 (m, 4H) , 7,62 (m, 2H) , 7,74 (m, 2H) , 8,65 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 13,75 (s, 1H) . HRMS vypočítané pre C₂₀H₁₄FN₄ 329,1202 (MH⁺) , zistené 329,1212. Anál. (C₂qHi₃FN₄·!, 1 H₂0) C, H, N.

Príklad 7': 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4-metoxyfenyl)-1Hindazol

(a) Medziprodukt 7a' - 5-jód-3-((E)-styryl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

Medziprodukt 7a' sa pripraví z 5-nitroindazolu (Acres organics, divízia Fisher Scientific, Pittsburg, PA) v piatich stupňoch za použitia spôsobu použitého na prípravu 6-jód-3((E)-styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazolu z 6nitroindazolu (pozri Kania, Braganza, at al., Patentová prihláška Compounds and Pharmaceutical Compositions počas 2Inhibiting Proteín Kinases, and metods for Their Use, str. 52, riadok 10, až str. 53, riadok 26; a str. 59, riadok 16 až str. 60, riadok 4, U.S. doterajšie poradové č. 60/142130, podaná 2.7.1999, ktorá je tu uvedená ako odkaz vo svojej úplnosti: NMR (CDCl₃) δ - 0,06 (s, 9H) , 0,89 (t, 2H, J = 8,4

Hz), 3,57 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 5,70 (s, 2H) , 7,29-7,44 (m, 6H) , 7,59 (d, 2H, J= 7,0 Hz), 7,67 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 8,36 (s, 1H).

(b) Medziprodukt 7b' - 5-jód-l-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)1H-indazol-3-karbaldehyd:

Ozón sa nechá prebublávač roztokom 5-jod-3-styryl-2-SEMindazolu 7a' (4,93 g, 10,35 mmol) v dichlórmetáne (500 ml) pri teplote —78 °C. Po 20 minútach sa farba roztoku zmení z oranžovej na tmavo modrú. Zmes sa nechá prebublať. argónom počas 30 minút na odstránenie nadbytku ozónu a potom sa pridá dimetylsulfid (1,29 g, 20,7 mmol). Chladiaci kúpel sa odstráni a miešanie pokračuje do tej doby, ako vnútorná teplota dosiahne 15 °C, to je približne 2 hodiny. Roztok sa premyje vodou (2 x 200 ml) , suší sa cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa. Prečistením chromatografiou na silikagéli (10% etylacetát v hexanoch) sa získa aldehyd 7b' (2,74 g, 66%) vo forme žltého oleja: NMR (CDCl₃) δ - 0,05 (s, 9H) , 0,89 (t, 2H, J = 8,4 Hz), 3,56 (t, 2H, J= 8,4 Hz), 5,79 (s, 2H) ,

7,43 (d, IH, J= 8,7 Hz), 7,76 (dd, IH, J= 8,8,1,5 Hz), 8,71 (S, IH) , 10,22 (s, IH) .

(C) Medziprodukt 7c' — 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-jód-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

Do roztoku aldehydu 7b' (2,74 g, 6,81 mmol) v DMF (130 ml) sa pridá 1,2-fenylendiamín (0,74 g, 6,81 mmol) a séra (026 g, 82 mmol). Zmes zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 95 °C počas 14,5 hodín, ochladí sa na teplotu miestnosti a nariedi sa etylacetátom (500 ml). Roztok sa premyje zmesou nasýteného vodného roztoku chloridu sodného (100 ml) a vodou (100 ml). Organická vrstva sa potom premyje nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (100 ml) a potom vodou (100 ml) , suší sa cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (20 % etylacetát v hexanoch) za zisku nečistej zlúčeniny 7c' vo forme svetlo žltej pevnej látky. Vyzrážaním z chlóroformu/hexanov sa získa čistá zlúčenina 7c' (2,15 g, 64%) vo forme bieleho prášku: R_f =

0,23 (20% etylacetát/ hexany) ; ¹H NMR (DMSO-d_s) δ — 0,12 (s,

9H) , 0,82 (t, 2H, J=7,9 Hz), 3,59 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 5,87 (s,

I

2H), 7,23 (m, 2H), 7,52 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,73-7,84 (m, 3H), 8,94 (s, 1H) , 13,13 (s, 1H) . HRMS vypočítané pre C20H23IN4OS1

491,0759 (MH⁺) , zistené 491,0738.

(d) Medziprodukt 7d' - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4-metoxyfenyl) -1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

2M vodný roztok uhličitanu sodného (6,4 ml) sa pridá do roztoku zlúčeniny 7c' (2,50 g, 5,10 mmol), kyseliny 4metoxyfenylboritej (1,01 g, 6,63 mmol) a tetrakis(trifenylfosfín)palládium (0,59 g, 0,51 mmol) v 1,4-dioxane (35 ml) a metanolu (15 ml) . Zmes sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 5 hodín, potom sa ochladí a rozdelí sa medzi etylacetát (300 ml) a zmes nasýteného vodného roztoku chloridu sodného (100 ml) a vody (100 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát v hexánoch) za zisku tmavo hnedej pevnej látky. Vyzrážaním z dichlórmetanu/hexanov sa získa čistá zlúčenina 7d' (948,6 mg,

40%) vo forme bieleho prášku: Rf = 0,13 (20% etylacetát/hexany) ; ¹H NMR (DMSO-d₆) δ - 0,10 (s, 9H) , 0,85 (t,

2H, J = 7,9 Hz), 3,63 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 3,82 (s, 3H), 5,91 (s, 2H) , 7,10 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 7,23 (m, 2H) , 7,43 (m, 1H),

7,54 (d, 1H, J= 6,8 Hz), 7,69 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,80 (m, 1H) , 7,92 (d, 1H, J= 8,9 Hz), 8,70 (s, 1H) , 13,08 (s, 1H) .

(e) Príklad 7' — 3 -(lH-benzimidazol-2-yl) - 5 -(4-metoxy-fenyl)ΙΗ-indazol:

Roztok medziproduktu 7d (148,4 mg, 0,315 mmol) v etylacetáte (15 ml) pri teplote —78 °C reaguje s bromidom boritým (1,0 .M v dichlórmetáne, 4,73 ml). Roztok sa mieša počas 17 hodín a zmes sa nechá postupne ohrial na teplotu miestnosti. Pridá sa voda (10 ml) a zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 6 dní. Roztok reaguje s 3M roztokom hydroxidu sodného na úpravu pH na 10 a potom sa extrahuje etylacetátom (3 x 20 ml). Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa a zahustia sa. Prečistením chromatografiou na silikagéli (50% etylacetát v hexanoch) sa získa zlúčenina 7' (60,5 mg, 56%) vo forme bielej pevnej látky: Rf = 0,21 (50% etylacetát/hexany) ; ^XH NMR (DMSO-d₆) δ

3,82 (s, 3H) , 7,08 (d, 2H, J= 8,9 Hz), 7,21 (m, 2H), 7,53-7,78 (m, 6H) , 8,66 (5, 11-1), 12,96 (s, IH) , 13,63 (s, IH) . Anál. (C₂iH₁₆N₄0»0,25 CH₂C1₂) C, H, N.

Príklad 8': 4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-fenol

Zmes anisolu 7' (44,6 mg, 0,131 mmol) a pyridínhydrochloridu (912 mg, 7,9 mmol) sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 180 °C počas 3 hodín. Pyridínová soľ je pri tejto teplote kvapalná. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes rozdelí medzi etylacetát (20 ml) a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (15 ml) . Vodná vrstva sa ďalej extrahuje etylacetátom (3 x 2 0 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (50% etylacetát/hexany) za zisku čistého fenolu 8' (29,4 mg, 69%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: R_f = 0,23 (60% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 6,91 (d, 2H, J= 8,4 Hz),

7,21 (m, 2H) , 7,53 (m, 3H) , 7,68 (s, 2H) , 7,75 (d, 1H, ď= 6,9

Hz), 8,61 (s, 1H) , 9,53 (s, 1H) , 12,98 (s, 1H) , 13,63 (s, 1H) .

HRMS vypočítané pre C₂₀H₁₄N₄0 327,1246 (MH⁺) , zistené 327,125'3,.

Anál. (C₂₀Hi₃N₄O*0,8 DMSO) C, H, N.

Príklad 9': 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(3-metoxy-2-metylfenyl)-lH-indazol

(a) Medziprodukt 9a'— 3-metoxy-2-metyl-fenylamín:

Suspenzia 2-metyl-3-nitroanisolu (Aldrich Chemicals) (8,87 g, 53 mmol) a 10% palládia na uhlíku (800 mg) v etanole (400 ml) sa pretrepáva pri 40 psi vodíka počas 1 hodiny. Po prefitrovaní cez vrstvu Celitu sa roztok zahustí a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (30% etylacetát v hexanoch) za zisku anilínu 9a (6,94 g, 95%) vo forme mierne oranžového oleja: R_f = 0,20 (25% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-d₆) δ

1,88 (s, 3H) , 3,68 (s, 3H) , 4,74 (br s, 2H), 6,17 (d, 1H, J = 8,1Hz), 6,26 (d, 1H, J = 8,1Hz), 6,81 (t, 1H, J = 8,1Hz). Anál. (CeHuNO) C, H, N.

(b) Medziprodukt 9b' — 1-jód-3-meťoxy-2-metyl-benzén:

3-metoxy-2-metyl-fenylamín (5,28 g, 38,5 mmol) sa diazotizuje spôsobom uvedeným v DeGraw, et al. [De Graw, J.I.; Brown, V.H.; Colwell, W.T.; Morrison, N.E., J. Med. Chem., 17, 762 (1974)], za zisku aryljodidu 9b' (4,17 g, 44%) vo forme žltého oleja: R_f = 0,53 (10% etylacetát/ hexany); ^XH NMR (CDC1₃) δ 2,36 (s, 3H) , 3,80 (s, 3M) , 6,81 (m, 2H) , 7,42 (dd, 1H, J=7,5, 1,5 Hz) .

(c) Medziprodukt 9c' - 2-(3-metoxy-2-metyl-fenyl)-4,4,5,5tetrametyl-[1,3,2]-dioxaborolan:

g, 4 6,0 mmol dichlórpalládiumdl

1-jód-3-metoxy-2-metyl-benzén (3,80 g, 15,3 mmol), bis (pinacolato)dibór (4,28 g, 16,8 mmol), octan draselný (4,51 a 1,1'-bis(difenylfosfino)ferrocen(625 mg, 0,766 mmol) sa rozpustí v DMSO (70 ml) a zmes sa zahrieva pri vnútornej teplote 80 °C počas 1 hodiny. Po ochladení sa zmes nariedi toluénom (400 ml), premyje sa vodou (2 x 100 ml) , suší sa cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (5 až 20% etylacetát v hexanoch) vedie na zisk esteru kyseliny boritej 9c' (19,6 g, 52%) vo forme bielej, kryštalickej pevnej látky: Rf = 0,27 (5% etylacetát/hexany); ¹H NMR (CDCI3) δ 1,34 (s, 12H) , 2,42 (s, 3M) , 3,81 (s, 3H) , 6,91 (d, 1H, J= 8,1Hz), 7,14 (1, 1H, J= 7,8 Hz), 7,34 (d, 1H, J=

7,5 Hz). Anál. (C₁₄H₂iB0₃) C, H.

(d) Medziprodukt 9d'—3- (lH-benzimidazol-2-yl) -5- (3-metoxy-2metyl-fenyl) -1- (2-trimetylsilanyl-etoxymetyl) -lH-indazol:

Vodný roztok uhličitanu sodného (2M, 2,65 ml) sa pridá do roztoku zlúčeniny 7c' (519,4 mg, 1,06 mmol), esteru kyseliny boritej 9c (262,8 mg, 1,06 mmol) a 1,1,bis(difenylfosfíno)ferrocendichlórpalládia(II) (43,2 mg, 0,053 mmol) v DMF (12 ml) . Zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 75 °C počas 4,5 hodiny, potom sa ochladí a rozdelí sa medzi etylacetát (100 ml) a zmes nasýteného vodného roztoku chloridu sodného (50 ml) a vody (50 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa, ale Th NMR tohto surového materiálu ukáže len 60% konverziu. Surová zmes sa opäť rozpustí v DMF (12 ml) a pridá sa ďalší ester kyseliny boritej (253 mg, 1,01 mmol), katalyzátor (140 mg, 0,17 mmol) a roztok uhličitanu sodného. (2,65 ml). Miešanie pokračuje pri 80 °C počas 15,5 hodín. 0 rovnakom spracovaní ako vyššie ukáže ^XH NMR, že zostáva menej ako 5% zlúčeniny 7c' .

Prečistením chromatografiou na silikagéli (10 až 30% etylacetát v hexánoch) sa získa zlúčenina 9d' (410,7 mg, 80%) vo forme bielej peny: Rf =0,37 (30% etylacetát/hexany, rovnaké ako pre zlúčeninu 7c); ^XH NMR (DMSO-d₆) δ - 0,10 (s, 9H) , 0,85 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 2,06 (s, 3H) , 3,64 (t, 2H, J = 7,9 Hz),

3,85 (s, 3M), 5,92 (s, 2H), 6,92 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 7,02 (d, 1H, J= 8,3 Hz), 7,17-7,30 (m, 3H), 7,47-7,53 (m, 2H), 7,70 (d,

1H, J= 7,7 Hz), 7,90 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 8,45 (s, 1H) , 13,09 (s, 1H) . Anál. (C₂8H32N₄0₂Si«0,3 H₂0) C, H, N.

(e) Príklad 9' — 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(3-metoxy-2-metylfenyl)-lH-indazol:

Spôsobom analogickým k spôsobu podľa príkladu 3 sa reakciou medziproduktu 9d s tetrabutylammóniumfluoridom získa zlúčenina 9' (47,2 mg, 30%) vo forme bieleho prášku. Rf = 0,23 (5% metanol/dichlórmetan) ; ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 2,07 (s, 3H) , 3,85 (s, 3H) , 6,91 (d, 1H, J= 7,4 Hz), 7,01 (d, 1H, J= 8,1Hz), 7,24 (m, 3H) , 7,39 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,50 (m, 1H) , 7,68 (d, 2H, J= 8,5 Hz), 8,40 (s, 1H) , 12,96 (s, 1H) , 13,66 (s, 1H) . Anál. (C₂₂Hi₈N₄O»0,3 H₂0) C, H, N.

Príklad 10': 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-2metyl-fenol

Fenol 10' sa pripraví spôsobom syntézy analogickým k syntéze fenolu 8', reakciou zlúčeniny 9' (31,6 mg, 0,089 mmol) s pyridínhydrochloridom, ktorá vedie na zisk fenolu 10' (20,8 mg, 70%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: Rf = 0,21 (60% etylacetát/hexany); ¹H NMR (DMSO-d_s) δ 2,04 (s, 3H) , 6,75

(d, 1H, J= 7,0 Hz), 6,85 (d, 1H, J= 7,7 Hz), 7,08 (t, 1H, J =
7,7 Hz), 7,19 (kvintet, 2H, J= 7,7 Hz), 7,39 (dd, 1H, J=
8,7,1,5 Hz), 7,50 (d,	1H J= 7,5 Hz), 7,68 (m, 2H) , 8,39 (s,
1H), 9,39 (s, 1H),	12,95 (s, 1H) , 13,64 (s, 1H) . HRMS
vypočítané pre C₂iH₁₀N₄0	341,1402 (MH⁺) , zistené 341,1410. Anál.

(C₂₁H₁₆N₄0*l,O MeOH) C, H, N.

Príklad 11: 5-(2-metylfenyl)-3-fenyl-lH-indazol

(b) Medziprodukt 11a - 5-nitro-3-fenyl-lH-indazol:

Do roztoku 2-chlór-5-nitrobenzofenónu (159,57 mmol) v etanole (3 00 ml) sa pridá hydrazínmonohydrát (50 ml, 1 mol) . Získaný roztok sa mieša cez noc (16 hodín) pri teplote miestnosti, potom sa naleje do vody (2 1) a mieša sa počas ďalších 2 hodín. Zrazenina, ktorá vznikne, sa odoberie filtráciou, premyje sa vodou (2 x 100 ml) a suší sa vzduchom za zisku . 5-nitro-3-fenyl-lH-indazolu 11a (13,1 g, 80%) vo forme žltej pevnej látky: *H NMR (DMSO-d₆) δ 7,48 (tt, 1H, J= 1,3, 7,4 Hz), 7,58 (dd, 2H, J= 7,1, 7,4 Hz), 7,78 (d, 1H, J= 9,2 Hz), 8,01 (dd, 2H, 1,3, 7,1Hz), 8,25 (dd, 1H, J= 2,1,

9,2 Hz), 8,91 (d, 1H, J= 2,1Hz), 13,88 (s, 1H). Anál. (C₁₃H₉N₃0₂) C, H, N.

(b) Medziprodukt 11b — 5-nitro-3-fenyl-l-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-indazol:

Diizopropyletylamín' (15 ml, 86,1 mmol) sa pridá, po kvapkách, do roztoku 5-nitro-3-fenyl-lH-indazolu 11a (13 g,

54,3 mmol) a 2 -(trimetylsilyl)etoxymetylchloridu (15 g, 90 mmol) v acetonitrile (400 ml) . Získaná reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 22 hodín, potom sa naleje do vody (1 1) a extrahuje sa etylacetátom (3 x 3 00' ml).. Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný a zahustia sa. Získaný zvyšok sa rozpustí v toluéne (40 ml). Do tohto roztoku sa pridá 2-(trimetylsilyl)etoxymetyl- chlorid (3 ml, 17 mmol), tetrabutylammóniumbromid (500 mg) a oxid kremičitý (40 g) . Táto zmes sa mieša cez noc pri teplote miestnosti a potom sa prefiltruje. Filtrát sa potom zahustí. Chromatografiou na silikagéli (5% etylacetát/ hexany) sa získa zlúčenina llb (15

g, 75%) vo forme žltej pevnej	látky: ^ľH NMR	(DMSO-de) δ -	0,11
(s, 9H) , 0,83 (t, 2H, J = 7,9	Hz), 3,62 (t,	2H, J = 7,9	Hz) ,
5,91 (s, 2H) , 7,52 (tt, 1H, J	= 0,7,7,4 Hz),	7,60 (dd, 2H	, J=
7,1,7,4 Hz), 8,00 (d, 1H, J=	92 Hz), 8,02	(dd, 2H, J=	0,Ί,
7,1Hz), 8,35 (dd, 11-1, J=	2,1,9,2 Hz),	8,91 (d, 1H,	J=

2,1Hz) .

(c) Medziprodukt 11c — 5-amíno-3-fenyl-l-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol:

Zmes 5-nitro-3-fenyl-l-[2-(trimetylsilanyl)-etoxymetyl]-1Hindazolu llb (14 g, 37,9 mmol) a 10% palládia na uhlíku (1 g) v etylacetáte (500 ml) sa mieša v atmosfére vodíka cez noc. Reakčná zmes sa prefiltruje cez celit, potom sa zahustí za zisku zlúčeniny llc (12,2 g, 95%) vo forme bielej pevnej látky: ¹H NMR (DMSO-d_s) δ - 0,12 (s, 9H) , 0,80 (t, 2H, J= 8,0

Hz), 3,54 (t, 2H, J= 8,0 Hz), 5,01 (br s, 2H) , 5,67 (s, ,2H) ,

6,89 (dd, 1H, J = 1,8,8,8 Hz), 7,12 (d, 1H, J = 1,8 Hz) 7,37 (tt, 1H, J = 0,5, 7,4 Hz), 7,47 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,50 (dd,

2H, J= 7,2, 7,4 Hz), 7,87 (dd, 2H, J= 0,5, 7,2 Hz).

(d) Medziprodukt lld — 5-jód-3-fenyl-l-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-indazol:

Medziprodukt 11c (12 g, 35,3 mmol) sa rozpustí v zmesi kyseliny octovej (300 ml) a vody (50 ml) . Zmes sa ochladí v kúpeli ľad-soľ na teplotu —5 °C. Do tejto zmesi sa pomaly pridá roztok dusitanu sodného (4,5 g, 65,2 mmol) vo vode (10 ml) takou rýchlosťou, aby sa udržala reakčná teplota pod 3 °C. Získaný diazoniový roztok sa mieša pri 0 °C počas 20 minút. Potom sa do reakčnej zmesi pomaly pridá roztok jodidu draselného (6,5 g, 39,2 mmol) vo vode (10 ml), opäť takou rýchlosťou, aby sa udržala reakčná teplota pod 3 °C. Reakčná zmes sa mieša cez noc a postupne sa zahreje na teplotu miestnosti. Surová reakčná zmes sa naleje do vody (300 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 500 ml). Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (5% etylacetát/hexany) sa získa zlúčenina lld (4g, 25%) vo forme žltého oleja: ¹H NMR (DMSO-d₆) δ - 0,12 (s, 9H) , 0,83 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 3,57 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 5,BÔ (s, 2H) , 7,45 (tt, 1H, J = 1,3, 7,5 Hz), 7,54 (dd, 2H, J = 7,1, 7,5 Hz), 7,67 (d, 1H, J = 8,8 Hz), 7,75 (dd, 1H, J = 1,5, 8,8 Hz), 7,94 (dd, 2H, J = 1,3, 7,1Hz), 8,40 (d, 1H, J= 1,5 Hz) .

(e) Medziprodukt Íle — 5-(2-metylfenyl)-3-fenyl-l-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-indazol:

Vodný nasýtený roztok hydrogénuhličitanu sodného (2 ml) sa pridá do zmesi medziproduktu lld (130 mg, 0,3 mmol), kyseliny 2-metylfenylboritej (120 mg, 0,9 mmol) a tetrakis(trifenylfosfín)palládia(0) (25 mg, 0,02 mmol) v 1,4dioxane (10 ml) . Získaná reakčná zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 90 °C počas 18 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa surová reakčná zmes naleje do vody (50 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 25 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (10% etylacetát/hexany) sa získa zlúčenina Íle (100 mg, 84%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: ^XH NMR (DMSO-d_s) δ - 0,10 (s, 9H) , 0,85 (1, 2H, J= 8,0

HZ) ,	224	(s,	3H), 3,62	(t, 2H, J=	8,0	Hz) , 5,85 (s,	2H), 729
(m,	4H) ,	7,42	(tt, 1H,	J= 1,4, 7,4	Hz) ,	7,47 (dd, 1H,	J= 1,5,
8,3	HZ) ,	7,52	(dd, 2H,	J = 7,1, 7,	4 Hz)	, 7,84 (d, 1H,	J = 8,3
Hz) ,	7,93	(d,	1H, J = 1	, 5 Hz) , 7,99	(dd,	2H, J= 1,4, 7,	1 Hz) .

(f) Príklad 11 — 5-(2-metylfenyl)-3-fenyl-lH-indazol:

Tetrabutylammóniumfluorid (1,0 M v THF, 2 ml) sa pridá do roztoku medziproduktu 11, (100 mg, 0,24 mmol) v tetrahydrofuráne (5 ml). Tento roztok sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 60 °C počas 18 hodín, potom sa naleje do vody (25 nil) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 25 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/hexany) sa získa

5-(2-metyl fenyl)-3-fenyl-lH-indazol 11 (55 mg, 80%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: ^XH NMR (DMSO-d_s) δ 2,24 (s, 3H) ,

7,28 (m, 4H) , 7,37 (dd, 1H, J= 1,5,8,6 Hz), 7,38 (tt, 1H, J =

1,4,7,5 Hz), 7,50 (dd, 2H, J = 7,1,7,5 Hz), 7,64(d, 1H, J= 8,6 Hz), 7,91 (d, 1H, J= 1,5 Hz), 7,99 (dd, 2H, J= 1,4, 7,1 Hz),

13,30 (s, 1H) . Anál. (C₂₀H₁₆N₂*0, 25 H₂0) C, H, N.

Príklad 12: 3-fenyl-5-[2-(trifluórmetyl)fenyl]-lH-indazol

OH

(Ph₃P)₄Pd, Na₂CO₃, HjÔ. dioxan ,90 °C

48%

TBAF, THF, 60 °C

74%

(a) Medziprodukt 12a — 3-fenyl 5-[2-(trifluórmetyl)fenyl]-1[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol:

Zlúčenina 12a sa pripraví spôsobom syntézy analogickým k spôsobu syntézy medziproduktu Íle.

Palládiom katalyzovaná kondenzácia medziproduktu lld s kyselinou 2-(trifluórometyl)fenylboritou vedie na zisk zlúčeniny 12a (48%) vo forme bielej pevnej látky: ^XH NMR

(DMSO-d₆)	δ - 0,12	(S, 9H) , 0,87	(t, 2H, J=8,lHz), 3,72	(t,	2H,
J=8,lHz),	5,62 (s,	2H),7,32 (m,	1H) 7,38 (tt, 1H, J=	0,8,	7,4
Hz), 7,48	(dd, 2H,	J=7,l, 7,4 Hz)	, 7,51 (m, 1H), 7,63	(dd,	1H,
J=7,2, 7,	7 Hz), 7,	66 (dd, 1H, J ;	= 1,6, 8,6 Hz) , 7,75	(m,	1H) ,
7,82 (d,	1H, J=8,6	Hz), 7,91 (d,	1H, J= 1,6 Hz) , 7,96	(dd,	2H,

J= 0,8, 7,1 Hz).

(b) Príklad 12 — 3-fenyl 5-[2-(trifluórmetyl)fenyl]-1Hindazol:

Zlúčenina 12 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 11. Reakciou zlúčeniny 12a s tetrabutylammónium-fluoridom sa získa 3 - fenyl-5-[2 -(trifluórmetyl)fenyl]-IHindazol 12 (74%) vo forme

bielej pevnej	látky	: NMR (DMSO-dg) .	δ 7,	34 (m,	1H) ,	7,38	(tt,
1H, J= 1,3,7,3	Hz) ,	7,49 (dd, 2H, J=	7,1,	7,3Hz),	7,52	(m,	1H) ,
7,62 (dd, 1H,	J= 7,	4 , 7,7 Hz) , 7,65	(dd,	1H, J=	1,9,	8,6	Hz) ,
7,73 (dd, J =	7,2,	7,5 Hz) , 7,85 (d,	1H,	J= 8,6	HZ) ,	7,94	(d,

1H, J= 1,9 Hz), 7,96 (dd, 2H, J= 1,3, 7,1 Hz). Anál.

(C₂₀H₁₃N₂F₃»0,l H₂0) c, h,n.

Príklad

13: 5-(4-hydroxy-2-metylfenyl)-3-fenyl-lH-indazol

GH »

(a) Medziprodukt 13a — 5-(2-metyl-4-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetoxy]fenyl)-3-fenyl-l-[2- (trimetylsilenyl)-etoxymetyl]ΙΗ-indazol:

Zlúčenina 13a sa pripraví podobne ako medziprodukt Íle.

palládiom katalyzovaná kondenzácia medziproduktu lld s kyselinou (2-metyl-4-(2-(trimetylsilanyl)etoxymetoxy]fenyl)boritou vedie na zisk zlúčeniny 13a (59%) vo forme svetlo žltej peny: ¹H NMR (DMSO-d₆) δ - 0,09 (s, 9H), 0,00 (s,

9H) ,

0,85

(t,

2H,

J=

8,0

Hz) ,

0,92

(t,

2H,

J=8,1

Hz) ,

2,22

(s,

3H) ,

3,62

(t,

2H,

J=

8,0

Hz) ,

3,73

(t,

2H,

J=8,1

Hz) ,

5,25

(s,

2H) ,

5,85

(s,

2H)

, 6

,93

(dd,

1H, J:

= 2,6

, 8,

3 Hz) ,

6,98

(d,

1H,

J=2,6 Hz), 7,22 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,43 (tt, 1H, J=0,9, 7,7

Hz), 7,45 (dd, 1H, J= 1,3, 8,6 Hz), 7,52 (dd, 2H, J=7,2, 7,7 Hz), 7,82 (d, 1H, J=8,6 Hz), 7,89 (d, 1H, J=l,3 Hz), 7,99 (dd, 2H, J= O,9, 7,2 Hz).

(b) Príklad 13 — 5-(4-hydroxy-2-metylfenyl)-3-fenyl-lHindazol:

Zlúčenina 13 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 11. Reakciou zlúčeniny 13a s tetrabutylammónium-fluoridom sa získa 5-(4-hydroxy-2-metylfenyl)-3-fenyl-lHindazol 13 (75%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 2,17 (s, 3H) , 6,66 (dd, 1H, J= 2,3, 8,2 Hz), 6,70 (d, 1H, J=2,3 Hz), 7,08

(d,	1H,	J= 8,2	Hz), 7,32 (dd, 1H, J = 1,5, 8,6 Hz), 7,39 (	tt,
1H,	J=	1/4,7,7	Hz), 7,50 (dd, 2H, J= 7,2, 7,7 Hz), 7,59	(d,
1H,	J=	8,6 Hz) ,	7,83 (d, 1H, J= 1,5 Hz), 7,97 (dd, 2H, J= 1	,4,
7,2	Hz)	9,28 (s	, 1H) , 13,22 (s, 1H) . Anál. (C₂oHi₅N₂O»O, 8 H₂0)	c,

H, N.

Príklad 14: 3-fenyl-5-(pyrid-4-yl)-ΙΗ-indazol

(PháPkPd, N_B2CO_3tHjO, dioxán ,90°C

76%

(a) Medziprodukt 14a — 3-fenyl-5-(pyrid-4-yl)-1-[2trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-indazol:

Zlúčenina 14a sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu Íle. Palládiom katalyzovaná kondenzácia medziproduktu lld s kyselinou pyridin-4-boritou vedie na zisk zlúčeniny 14a (76%) vo (s, 9H), (s, 2H) ,

Hz), 7,56 Hz), 7,85 Hz), 8,41 forme bielej pevnej látky: ^XH NMR (DMSO-d₆) δ -

0,84	(t,	2H, J=7,9 Hz)	, 3,62 (1,	2H,	J=7,9 Hz),
7,46	(tt	, 1H, J= 1,1,	7,4 Hz),	7,51	(d, 1H, J=
(dd,	2H,	, J= 7,1, 7,4	Hz), 7,80	(dd,	1H, J= 1,4,
(dd,	2H,	, J= 1,6, 4,5	Hz), 8,07	(dd,	2H, J= 1,1,
(d,	1H,	J= 1,4 Hz), 8,	64 (dd, 2H,	, J=	1,6, 4,5 Hz)

0,11

5,86

8,3

7,1 (b) Príklad 14 — 3-fenyl 5-(pyrid-4-yl)-ΙΗ-indazol:

Zlúčenina 14 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 11. Reakciou zlúčeniny 14a s tetrabutylammónium-fluoridom sa získa

3-fenyl-5-(pyrid-4-yl)-lH-indazol 14 (85%) vo forme bielej pevnej látky: ^XH NMR (DMSO-d_s) δ 7,43 (tt, 1H, J= 1,2,7,6Hz),

7,54	(dd, 2H, J=	7,1, 7,6	Hz) ,	7,72	(d, 1H, J=8,8	Hz) ,
(dd,	2H, J= 1,6,	4,5 Hz) ,	7,84	(dd,	1H, J=l,5, 8,8	Hz) ,
(dd,	2H, J= 1,2,	7,1 Hz),	8,40	(d,	1H, J=l,5 Hz),	8,63

2Η, J= 1,6,

4,5 Hz) 13,39 (s, 1H). Anál.

C₁₈H₁₃N₃*0,2H₂0)

7,83

8,07 (dd,

C, H,

N.

(a) Medziprodukt 14b' —3-fenyl-5-(pyrid-3-yl)-1-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol:

Zlúčenina 14b' sa pripraví podobne ako medziprodukt Íle, palládiom katalyzovaná kondenzácia medziproduktu lld s kyselinou pyridin-3-boritou vedie na zisk zlúčeniny 14b' (66%) vo forme bielej pevnej látky. ¹H NMR (DMSO-d₆) δ - 0,10

(s,	9H) ,	0,83	(t, 2H, J=7,9 Hz	), 3,63	(t, 2H, J=7,9 Hz),
5,86	(s,	2H) ,	7,43 (tt, 1H,	J= 1,2,	7,5 Hz), 7,51 (dd,	1H,
J=4,	7, 8,0 Hz)	, 7,54 (dd, 2H,	J=7,l,	7,5 Hz) , 7,65 (d, 1H,	J=
8,6	Hz) ,	7,73	(dd, 1H, J= 1,5,	8,6 Hz)	, 8,07 (dd, 2H,

J=l,2, 7,1 Hz), 8,18 (ddd, IH, J=l,6, 2,3, 8,0 Hz), 8,32 (d, IH, J=l,5 Hz), 8,56 (dd, IH, J=l,6, 4,7 Hz), 8,90 (d, IH, J=2,3 Hz).

(b) Príklad 14b — 3-fenyl-5-(pyrid-3-yl)-ΙΗ-indazol:

Podobne ako v príklade 11 sa reakciou zlúčeniny 14b' s tetrabutytammóniumfluoridom získa 3-fenyl-5-(pyrid-3-yl)-1Hindazol 14b (79%) vo forme bielej pevnej látky. ¹H NMR

(DMSO-dg) δ	7,41 (tt, IH, J=	1,3, 7,4	Hz), 7,49	(dd,	IH, J=
4,7, 7,9 Hz)	i, 7,53 (dd, 2H, J=	7,1, 7,4	Hz), 7,70	(d, IH	, J=8,7
Hz), 7,76 (dd, IH, J= 1,5, 8,7	Hz), 8,08 (dd, 2H,
J= 1,3, 7,1	Hz), 8,17 (ddd, IH	, J= 1,7,	2,0, 7,9	Hz) , 8	,31 (d,
IH, J= 1,5	Hz) 8,56 (dd, IH,	J= 1,7,	4,7 Hz),	8,99	(d, IH,

J=2,0 Hz), 13,35 (s, IH) . Anál. (C₁₈H₁₃N₃) C, H, N.

Príklad 15: 2-metyl-3-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-fenol

(a) Medziprodukt 15a' — 5-(3-metoxy-2-metyl-fenyl)-3-((E) styryl) -1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

Medziprodukt 15a' sa pripraví zo zlúčeniny 7a' (571,8 mg,

1,42 mmol) spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny 9d' , za zisku styrylového analógu 15a' (442,5 mmol, 66%) vo forme

žltého oleja:	¹H	NMR (DMSO-dg) δ -	• 0,10 (s,	9H), 0,83	(t,	2H,
J=8,1 Hz), 2,	07 (	s, 3H), 3,58 (t,	2H, J=7,9	Hz), 3,84	(s,	3H) ,
5,79 (S, 2H),	6,91 (d, 1H, J= 7,6	Hz), 6,99	(d, 1H, J=	8,3	Hz) ,
7,22-7,41 (m,	5H)	, 7,56 (d, 2H, J=	: 5,1 Hz) ,	7,70-7,78	(m,	3H) ,

8,09 (s, 1H).

(b) Medziprodukt 15b' — 5-(3-metoxy-2-metyl-fenyl)-3-((E)styryl)-ΙΗ-indazol:

Zlúčenina 15b'¹ sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 3. Reakcia zlúčeniny 15a (211,4 mg, 0,449 mmol) vedie na zisk zlúčeniny 15b' (132,7 mg, 87%) vo forme bielej peny: Rf =0,38 (50% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-d6) δ 1,98 .(s, 3H) , 3,84 (s, 3H) , 6,91 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 6,98 (d, 1H, J= 8,1 Hz),

7,21-7,61 (m, 8K) , 7,70 (d, 2H, J= 7,4 Hz), 8,05 (s, 1H) ,

13,18 (s, 1H) . HRMS vypočítané pre C23H20N2O 341,1648 (MH⁺) , zistené 341,1638. Anal. (C23H₂oN₂0«0,2 H₂0) C, H, N.

(c) Príklad 15 — 2-metyl-3-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]fenol:

Fenol 15' sa pripraví podobne ako fenol 8. Reakcia medziproduktu 15b' (63,1 mg, 0,185 mmol) s pyridínhydrochloridom vedie na zisk fenolu 15' (39,7 mg, 66%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: R_f = 0,24 (50% etylacetát/hexany); *H NMR (DMSO-d₆) δ 2,05 (s, 3H) , 6,74 (d,

1H, J= 7,5 Hz), 6,83 (d, 1H, J= 7,9 Hz), 7,05 (t, 1H, J=7,7 Hz), 725-7,62 (m, 7H) , 7,70 (d, 2H, J=7,2 Hz), 8,03 (s, 1H) ,

9,34 (s, 1H) , 13,16 (s, 1H) . HRMS vypočítané pre C22H18N2O

327,1497 (ΜΗ), zistené 327,1487. Anal.

(C₂2H₁₈N₂O*0,5 H₂O) C, H, N.

Príklad 16: 4-[3-( (E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín

SEM

4-brómizocbinolln

SEM

64% nBu_aNF,THF. etyléndiamlrb reflux

(a) Medziprodukt 16a - 3-((E)-styryl)-5-(4,4,5,5,tetrametyl[1,3,2] dioxaborolan-2-yl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1Hindazol:

Zmes zlúčeniny 7a' (2,0 g, 4,2 mmol), bis(pinakolato)dibóru (1,17 g, 4,6 mmol), octanu draselného (124 g, 12,6 mmol) a DMSO (25 ml) sa zbaví plynu vo vákuu s tromi výmenami argónu. Pridá sa 1,1-bis(difenylfosfin)ferrocendichlórpalládium(ll)-CH₂C1₂ (0,172 g, 0,21 mmol) a odplynovanie sa zopakuje. Reakčná zmes sa zahrieva pri teplote 80 °C počas 1 hodiny a zmes sa naleje do vody a extrahuje sa etylacetátomhexanmi (2:1), premyje sa solankou, suší sa cez MgSO₄ a zahustí sa. Chromatografiou na oxide kremičitom s elúciou zmesí 6:1 hexany-Et₂0 sa získa 1,09 g zlúčeniny 16a (55%). ¹H NMR (CDC1₃) δ 8,51 (s, 1H), 7,88 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,64 (d, 1H, J=

7.2 Hz), 7,58 (m, 2H) , 7,48 (s, 1H) , 7,41 (m, 3H) , 7,31 (m, 1H) , 3,59 (t, 2H, J=7,3 Hz), 1,41 (s, 12H) , 0,91 (t, 2H, J=

8.3 Hz), -0,06 (s, 9H) . Anál. (C₂₇H37N₂O₃SiB) C, H, N.

(b) Medziprodukt 16b- 4-[3-( (E)-styryl)-1-(2-trimetylsilanyletoxymetyl) -lH-indazol-5-yl]-izochinolín: ŕ

Medziprodukt 16a (0,218 g, 0,47 mmol)', 4-brómoizochinolín (0,082 g, 0,39 mmol) a Na₂C0₃ (0,1 g, 0,95 mol) sa zmieša s 3 ml DME a 0,5 ml vody a zmes sa odplynuje a prebublá sa argónom. Pridá sa tetrakis(trifenylfosfín)palládium(O) (0,023 g, 0,02 mmol) a zmes sa znovu odplynuje a potom sa zahrieva pri teplote spätného toku pod argónom počas 15 hodín. Po spracovaní vodou ako pre zlúčeninu 16a a chromatografiu na oxide kremičitom (4:1 hexany-etylacetát) vedie na zisk 0,181 g (96%) zlúčeniny 16b. ^XH NMR (CDC1₃) δ 8,59 (s, 1H) , 8,13 (m, 2H), 7,97. (d, 1H, J= 7,6 Hz), 7,73 (m, 3H) , 7,58 (m, 3H) , 7,50 (d, 2H, J= 9,5 Hz), 7,26 (m, 4H) , 5,82 (s, 2H) , 3,68 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,97 (t, 2H, J= 8,3 Hz), -0,03 (s, 9H) . Anál. (C₃₀H₃₁N₃OSÍ«0,75 H₂0) C, H, N.

(c) Príklad 16 - 4 -[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]izochinolín:

Roztok zlúčeniny 16b (0,17 g, 0,35 mmol) v 3,6 ml IM tetrabutylammóniumfluoridu v THF a etylénediamínu (0,475 μΐ, 0,427 g, 7,1 mmol) sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 1 hodiny. Reakčná zmes sa nariedi etylacetátom a pH sa upraví na 7 pomocou 0,4 M KC1, premyje sa solankou, suší sa cez MgSO₄a zahustí sa. Chromatografia na oxide kremičitom (1:1 hexanyetylacetát) vedie na zisk 0,079 g (64%) zlúčeniny 16 vo forme bielej pevnej látky. ^XH NMR (CDC1₃) δ 10,20 (br s, 1H) , 9,31 (s, 1H) , 8,59 (s, 1H) , 8,16 (s, 1H) , 8,09 (d, 1H, J=72 Hz), 7,93 (d, iN, J= 7,2 Hz), 7,20-7,75 (m, 11H) . Anál. (C₂₄H₁₇N₃*0,4

H₂0) C, H, N.

Príklad 17: 4-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yt]-chinolín

79% reflux

4-chlórchinolIn

SEM PdtPPhsh. DME. NajCOa

SEM

50% nBu«NF.THF, etyléndiamln-^”

(a) Medziprodukt 17a-4-[3-((E)-styryl)-1-(2-trimetylsilanyletoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-chinolín

Zlúčenina 17a sa pripraví spôsobom syntézy analogickým k syntéze medziproduktu 16b.

Za použitia 4-chlórchinolínu sa zlúčenina 17a pripraví s výťažkom 79%. ^XH NMR (CDC1₃) δ 8,99 (d, 1H, J=4,4 Hz), 8,21 (d, 1H, J=7,9 Hz), 8,15 (s, 1H,), 7,95 (d, 1H, J=8,4 Hz),

7,72 (m, 2H) , 7,42-7,62 (m, 10H) , 5,82 (s, 2H) , 3,67 (t, 2H,

J=9,3 Hz), 0,97 (t, 2H, J=8,3 Hz), -0,02 (s, 9H). Anál.

(C₃₀H₃₁N₃0Si*0,5 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 17 - 4-[3-( (E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-chinolín

Zlúčenina príkladu 17 sa pripraví podobne ako medziprodukt

16. Zlúčenina 17a sa zbaví chrániacich skupín za zisku zlúčeniny 17 s výťažkom 50% vo forme bielej pevnej látky. ¹H

NMR (CDC1₃) δ 13,10 (br s, 1H) , 8,98 (d, 1H, J= 4,4 Hz), 8,37 (s, 1H) , 8,15 (d, 1H, J=8,4 Hz), 8,00 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,5487

7,79 (m, 9H) , 7,37 (m, 2H) , 7,26 (m, 1H) . Anál. (C₂₄H₁₇N₃*1, O

H₂0) C, H, N.

Príklad 18: 5-(4-pyridyl)-3-(2-pyrrolyl)-lH-indazol w

^ΟϊΝγ^|Α>Η . θ⁸*'

99*

AJOj.CJCHjCHja Oj

18b ^EM

SEMO.THF

M*

18c p 69*

18a

(a) Medziprodukt 18 — 2-fluór-5-nitrobenzoylchlorid:

Roztok kyseliny 2-chlór-5-nitrobenzoovej (10,3 g, 56 mmol) v tionylchloride (90 ml, 1,2 mol) sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 22 hodín. Nadbytok tionylchloridu sa odstráni zahustením vo vákuu. Získaný zvyšok sa rozpustí v éteri (150 ml) , potom sa zahustí za zisku 2-fluór-5nitrobenzoylchloridu 18a (11,21 g, 99%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: ¹H NMR (DMSO-d_s) δ 7,62 (dd, 1H, J=9,l,

9,6 Hz), 8,48 (ddd, 1H, J= 3,0, 6,9, 9,1 Hz), 8,60 (dd, 1H, J=

3,0, 6,3 Hz). Anál. (C₇H₃NO₃C1F) C, H, N, Cl.

(b) Medziprodukt 18b — 1-(2-fluór-5-nitrofenyl)-1-(lH-pyrrol2-yl)metanón:

Roztok 2-chlór-5-nitrobenzoylchloridu 18a (10,04 g, 49 mmol) a pyrrolu (3,4 ml, 329 g, 49 mmol) v 1,2-dichlóretane (110 ml) sa ochladí na 0°C pred pridaním A1C1₃ (6,61 g, 49,6 mmol) vo forme pevnej látky. Získaná reakčná zmes sa mieša cez noc a postupne sa zahreje na teplotu miestnosti. Surová reakčná zmes sa potom naleje do zmesi koncentrovanej HCl (20 ml) a lade/vody (200 ml). Po miešaní počas ďalších 90 minút sa vrstvy separujú a vodná fáza sa extrahuje s CH₂C1₂ (2 x 200 ml) . Kombinované organické extrakty sa premyjú vodou (200 ml) a nasýteným NaHCO₃ (200 ml), sušia sa cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (25% etylacetát/hexany) sa získa zlúčenina 18b (7,23 g, 63%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: ¹H NMR (DMS0-d₆) δ 6,28 (ddd, IH, J= 2,1, 2,3, 3,6 Hz), 6,74 (ddd, IH, J= 1,3, 2,3, 2,5 Hz), 7,32 (ddd, IH, J= 1,3, 2,4, 3,6 Hz), 7,65 (dd, IH, J=9,0, 9,1 Hz), 8,39 (dd, IH, J= 3,0, 5,8 Hz), 8,45 (ddd, IH, J=3,0, 4,4·, 9,1 Hz), 12,33 (široký, IH) . Anál. (C₁₁H₇N₂0₃F»0,1 HCl) C, H, N.

(c) Medziprodukt 18c — 1-(2-fluór-5-nitrofenyl)-1-(1-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-pyrrol-2-yl)metanón:

Roztok 1-(2-fluór-5-nitrofenyl)-1-(lH-pyrrol-2-yl)metanónu 18b (1,72 g, 7,3 mmol) v THF (30 ml) sa pridá po kvapkách, pod atmosférou argónu, do miešanej suspenzie NaH (350 mg, 8,75 mmol) v THF (15 ml) pri teplote 0 °C. Táto zmes sa mieša pri 0 °C počas '45 minút pred pridaním 2(trimetylsilyl)etoxymetylchloridu (1,70 g, 10,2 mmol) v jednom podiele vo forme kvapaliny. Získaná reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti cez noc, potom sa naleje do nasýteného NaHC0₃ (80 ml) . Vrstvy sa separujú a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml) . Kombinované organické extrakty sa premyjú solankou (60 ml) , sušia sa cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (10% etylacetát/hexany) sa získa zlúčenina 18c (2,24 g, 84%) vo forme žltého sirupu: ^XH

NMR	(DMS0-d_s) δ-0,07 (s, 9H) , 0,83 (t	, 2H,	J=	7,8 Hz),	3,53	(t,
2H,	J= 7,8 Hz) , 5,74 (s, 2H) , 6,27	(dd,	1H,	J=2,5,	4,0	Hz) ,
6,75	(dd, 1H, J= 1,4, 4,0 Hz),
7,57	(dd, 1H, J= 1,4, 2,5 Hz), 7,64	(dd,	1H,	J=9,0,	9, 1	Hz) ,
8,29	(dd, 1H, J=3,0, 5,8 Hz), 8,45	(ddd,	1H,	J=3,0,	4,6,	9,1
Hz) .	Anál. (C₁₇H₂₁N₂0₄FSi) C, H„ N.

(d) Medziprodukt I8d — 1-(5-amíno-2-fluórfenyl)-1-(1-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-pyrrol-2-yl)metanón:

Zmes 1-(2-fluór-5-nitrofenyl) -1-(1-[2-(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-pyrrol-2-yl)metanónu 18c (3,63 g, 10 mmol) a 10% palládia na uhlíku (365 mg) v etylacetáte (90 ml) sa mieša v atmosfére vodíka cez noc. Reakčná zmes sa prefiltruje cez celit, potom sa zahustí za zisku zlúčeniny I8d (3,30 g, 99%) vo forme jantárového sirupu: ¹H NMR (DMS0-d₆) δ - 0,07 (s, 9H) ,

0,82	(t, 2H, J= 8,0 Hz) ,	3,50	(t, 2H, J= 8,0 Hz) ,	5,12 (br s,
2H) ,	5,71 (s, 2H) , 6,20	(dd,	1H, J= 2,5, 3,9 Hz)	, 6,59 (dd,
1H,	J= 2,9,5,6 Hz) 6,60	(dd,	1H, J= 1,8,3,9 Hz),	6,66 (ddd,
1H,	J= 2,9,4,3, 8,8 Hz),	6,93	(dd, 1H, J= 8,8, 9,	7 Hz), 7,42
(dd,	1H, J= 1,8, 2,5 Hz).	Anál.	(C₁₇H₂₃N₂0₂FSÍ) C, H,	N.

(e)Medziprodukt 18e —1-(2-fluór-5-jódfenyl)-1-(1-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-pyrrol-2-yl)metanón:

Medziprodukt 18d (332 mg, 1,0 mmol) sa rozpustí v zmesi kyseliny octovej (10 ml) a acetonitrilu (10 ml) . Tento dôkladne zmiešaný roztok sa ochladí v kúpeli ľad-soľ na —5 °C predtým, ako sa pridá roztok dusitanu sodného (83 mg, 1,2 mmol) vo vode (10 ml) . Získaný diazoniový roztok sa mieša počas 45 minút, postupne sa zahreje na 5 °C. Reakčná zmes sa opäť ochladí na —5 °C pred pridaním roztoku jodidu draselného (232 mg, 1,4 mmol) vo vode (3 ml) . Získaná zmes sa mieša počas ďalších 2 hodín, zahreje sa na teplotu 15 °C, potom sa naleje do zmesi K₂C0₃ (30 g) a ľadu/vody (100 ml) . Táto vodná zmes sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Kombinované organické extrakty sa premyjú 10% vodným roztokom Na₂S₂0₃ (50 ml) , sušia sa cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (5% etylacetát/hexany) sa získa zlúčenina 18e (160 mg, 36%) vo forme bezfarebného oleja: ¹H NMR (DMS0-d₆) δ - 0,08 (s, 9H) , 0,81 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 3,50 (1, 2H, J=7,9 Hz), 5,71

(s,	2H) ,	6,24 (dd, 1H, J= 2,6, 4,0 Hz),	6,63	(dd,	1H,	J= 1,7,
4,0	Hz) ,	7,18	(dd, 1H, J=8,7, 9,7 Hz),	7,51	(dd,	1H,	J= 1,7,
2,6	Hz) ,	7,74	(dd, 1H, J=2,3, 6,4 Hz) ,	7,90	(ddd,	1H,	J=2,3,
4,9,	8,7	Hz) .	Anál. (Ci₇H₂₁NO₂FSil) C, H,	N, I.

(1) Medziprodukt 18f — 1-[2-fluór-5-(4-pyridyl)fenyl]-1-(1-[2(trimetylsilenyl) etoxymetyl] -ΙΗ-pyrrol -2 -yl) metanón:

Diizopropyletylamín (1,3 ml, 7,5 inmol) sa pridá do zmesi 1- (2-fluór-5-jódfenyl) -1- (1- [2- (trimetylsilanyl) -etoxymetyl] lH-pyrrol-2-yl) metanónu 18e (798 mg, 1,8 mmol), tetrakis(trifenylfosfín)palládia(0) (65 mg, 0,06 mmol) a kyseliny pyridín-4-boritej (323 mg, 2,6 mmol) v DMF (20 ml). Získaná reakčná zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli pri 90 °C počas 18 hodín, v atmosfére argónu. Po ochladení na teplotu miestnosti sa surová reakčná zmes naleje do vody (100 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 75 ml) . Kombinované organické extrakty sa premyjú vodou (6 x 75 ml) , sušia sa cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/CH₂Cl₂) sa získa zlúčenina 18f (407 mg, 57%) vo forme svetlo žltého oleja: ¹H NMR (DMSO-d₆) Ô - 0,06 (s, 9H) ,

0,84 (1,2H, J= 7,9 Hz), 3,54 (t, 2H, J=7,9 Hz), 5,76 (s, 2H) ,

6,24	(dd,	1H, J=2,6, 4,0	Hz) ,	6,68	(dd, 1H, J = 1,8, 4,0 Hz)
7,49	(dd,	1H, J= 8,7, 9,3	Hz) ,	7,51	(dd, 1H, J= 1,8, 2,6 Hz),
7,72	(d,	2H, J = 6,2 Hz) ,	7,87	(dd,	1H, J= 2,4, 6,5 Hz), 8,02
(ddd,	1H,	J= 2,4, 4,9, 8,7	Hz) ,	8,63	(d, 2H, J= 6,2 Hz)'.

Anál. (C₂₂H₂5N₂0₂FSi) C, H, N.

(g) Medziprodukt I8g — 5-(4-pyridyl)-3-(l-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-pyrrol-2-yl)-lH-imidazol:

Roztok 1-(2-fluór-5-(4-pyridyl)fenyl]-1-(1-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-pyrrol-2-yl)metanónu 18f (504 mg, 1,3 mmol) a hydrazínu monohydrátu (1,7 ml, 35 mmol) v etanole (35 ml) sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 42 hodín. Etanol sa potom odstráni zahustením vo vákuu. Získaný zvyšok sa rozdelí medzi vodu (25 ml) a etylacetát (25 ml) . Vrstvy sa separujú a vodná fáza sa extrahuje etylacetátom (25 ml). Kombinované organické extrakty sa premyjú nasýteným NaHCO₃(30 ml), sušia sa cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (3% CH₃OH/CH₂C1₂) sa získa zlúčenina 18g (430 mg, 87%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: *H NMR (DMS0-d₆) Ô - 0,28 (s, 9H) , 0,63 (t, 2H, J=8,0 Hz), 328 (1, 2H, J=8,0 Hz), 5,72 (s, 2H) , 6,26 (dd, 1H, J= 2,8, 3,5 Hz), 6,79 (dd, 1H, J= 1,7, 3,5 Hz) 7,10 (dd, 1H, J= 1,7, 2,8 Hz), 7,67 (d, IN, J=8,9 Hz), 7,77 (d, 2H, J=6,2 Hz),

7,81 (dd, 1H, J=l,6, 8,9 Hz), 8,19 (d, 1H, J=l,6 Hz), 8,61 (d, 2H, J=6,2 Hz), 13,25 (s, 1H) . Anál. (C₂₂H₂₆N₄0Si) C, H, N.

(h) Príklad 18— 5-(4-pyridyl)-3-(2-pyrrolyl)-lH-indazol:

Tetrabutylammóniumfluorid (1,0 M v THF, 5 ml) sa pridá do roztoku medziproduktu 18g (366 mg, 0,9 mmol) a 1,2diamínoetanu (150 mg, 2,5 mmol) v tetrahydrofuráne (20 ml).

Tento roztok sa zahrieva pri teplote spätného toku počas 42 hodín, potom sa naleje do nasýteného roztoku NaHCO₃ (30 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2x 25 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (3% CH₃OH/CH₂C1₂) sa získa 5-(4pyridyl)-3-(2-pyrrolyl)-lH-indazol 18 (71 mg, 29%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: ^ΧΗ NMR (DMS0-d_s) δ 6,20 (dd, 1H, J= 2,6, 5,6 Hz), 6,82-6,92 (m, 2H) , 7,64 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,81 (dd, 1H, J= 1,4,8,7 Hz), 7,83 (d, 2H, J= 6,1 Hz), 8,37 (d, 1H, J= 1,4 Hz), 8,62 (d, 2H, J=6,l Hz), 11,37 (s, 1H) ,

13,09 (s, 1H) . Anál. (Ci₆Hi₂N₄ · 0,05 CH₂C1₂) C, H, N.

Príklad 18b' - 5-nitro-3-(2-pyrrolyl)-lH-indazol

NHzNH-i, EtOH 87%

Zlúčenina 18b' sa pripraví podobne ako medziprodukt 11a. Reakciou 1-(2-fluór-5-nitrofenyl)-1-(lH-pyrrol-2-yl)-metanónu 18b s hydrátom hydrazinu sa získa 5-nitro-3-(2-pyrrolyl)-1Hindazol 18b' (75%) vo forme oranžovo červenej pevnej látky: ¹H

NMR (DMSO-dg) δ 6,23 (ddd, 1H, J=2,4, 2,6, 3,6Hz), 6,81 (ddd, 1H, J= 1,5, 2,5, 3,6 Hz), 6,93 (ddd, 1H, J= 1,5, 2,1, 2,6 Hz), 7,70 (d, 1H, J=9,2 Hz), 8,21 (dd, 1H, J= 2,0, 9,2 Hz), 8,90 (d, 1H, J=2,0 Hz), 11,57 (široký, 1H) , 13,62 (s, 1H) . Anál. (CnH₈N₄0₂) C, H, N.

Príklad 19: 4 -[3 - (4-chlór-lH-benzimidazol-2-yl)-ΙΗ-indazol-5yl]-izochinolín

(a) Medziprodukt 19a -metoxy-metylamid kyseliny lH-indazol-3karboxylovej:

3-karboxyindazol (100 g, 617 mmol) vil ĽMF reaguje s karbonyldiimidazolom (110 g, 678 mmol) pri teplote 25°C s evolúciou plynu počas 15 minút. Reakčná zmes sa zahrieva pri teplote 60-65°C počas 22 hodín a potom sa nechá vychladnúť na 25°C. Pridá sa N,O-dDimetylhydroxylamín-HCl (66,2 g, 678 mmol) vo forme pevnej látky a zmes sa zahrieva pri teplote 65°C počas 23 hodín. Reakčná zmes sa zahustí na pastu a odoberú sa 2 1 CH₂C1₂, premyje sa vodou a potom 2N HCI. Produkt sa viditeľne zráža z roztoku. Pevný materiál sa prefiltruje prepláchne sa etylacetátom. Etylacetátové a CH2CI2 vrstvy sa samostatne premyjú NaHCO₃ a solankou, sušia sa cez MgSO₄ a zahustia sa. Získané pevné látky sa kombinujú, triturujú sa s 1:1 zmesou CH₂Cl₂-éterom, prefiltrujú sa a sušia sa za zisku 106 g (84%) medziproduktu

19a vo forme bielej pevnej látky: R_f = 0,38 (75% etylacetát v hexánoch); ^XH NMR (DMS0-d₆) δ 13,60 (s, 1H, ) , 7,80 (d, 1H,

J=8,2 Hz), 7,60 (d, 1H,J = 8,2 Hz), 7,41 (t, 1H, J=8,0

Hz), 7,22 (t, 1H, J= 8,0 Hz), 3,77 (s, 3H) , 3,44 (s, 3H) .

Anál. (CioHnN₃O₂) C, H, N.

(b) Medziprodukt 19b — Metoxymetyl-amid kyseliny 5-jód-lHindazbl-3-karboxylovej:

Do amidu 19a (20 g, 97,4 mmol) v 11 CH₂C1₂ sa pridá bis (trifluóracetoxy)jódbenzén (46 g, 107 mmol) potom po podieloch jód (14,849, 58,5 mmol) pri teplote 25°C. Po 1 hodine sa pridá 600 ml nasýteného Na₂HSO₃ a pevné látky vytvárajú zrazeninu, ktorá sa prefiltruje a prepláchne sa nadbytkom CH₂C1₂. Filtrát sa premyje solankou, suší sa cez MgSO₄, zahustí sa a zostávajúce pevné látky sa triturujú s minimálnym množstvom CH₂C1₂₍ Kombinované pevné látky sa sušia vo vákuu cez KOH za zisku 29,26 g (91%) jodidu 19b vo forme svetlo bielej pevnej látky: R_f = 0,31 (50% etylacetát v hexánoch); ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 13,79 (s, 1H) , 8,39 (s, 1H) , 7,65 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,48 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 3,76 (s, 3H) , 3,44 (s, 3H) .

Anál. (CioHioNgl0₂) C, H.

(c) Medziprodukt 19c — Metoxymetyl-amid kyseliny 5-jód-l-(4metoxy-benzyl)-lH-indazol-3-karboxylovej:

Do jodidu 19b (15 g, 45,3 mmol) v 200 ml THF sa pridá NaH (1,9 g 60% disperzia v minerálnom oleji, 1,14 g, 47,6 mmol), po častiach, za evolúcie plynu. Po 15 minútach sa reakčná zmes ochladí na teplotu 0 °C a pridá sa p-metoxybenzylchlorid (8,51 g, 54,4 mmol) a potom Nal (679 mg, 4,5 mmol) . Zmes sa zahrieva pri teplote 45 °C počas 29 hodín a ochladí sa na teplotu 25°C. Roztok sa nariedi etylacetátom, premyje sa nasýteným vodným roztokom NH₄C1, solankou a suší sa cez MgSO₄ a zahustí sa na viskózny olej. Do oleja sa pridá éter a vznikne pevná látka, ktorá sa prefiltruje a prepláchne sa éterom za zisku 14,18 g (70%) zlúčeniny 19c vo forme žltej pevnej látky. : Rf = 0,42 (50% etylacetát v hexanoch): ^XH NMR (CDC1₃) δ 8,60 (s, 1H) , 7,56 (dd, 1H, J=8,8, 1,6 Hz), 7,11 (m, 3H) , 6,80 (dd, 2H, J= 6,7, 2,1Hz), 5,52 (s, 2H) , 3,81 (s, 3H) , 3,75 (s, 3H) , 3,61 (s, 3H) . Anál. (C₁₈H₁₈N₃O₃I) C, H, N, I.

(d) Medziprodukt 19d - 5-jód-1-(4-metoxy-benzyl)-lH-indazol-3-; karbaldehyd:

Amid 19c (12,8 g, 28,3 mmol) v 3 00 ml THF sa ochladí na teplotu -5°C a po častiach sa počas 10 minút pridá LiAlH₄ (1,29 g, 34 mmol) . Po 30 minútach sa reakcia tlmí pomalým pridaním etylacetátu pri teplote -5°C a celá zmes sa naleje do 0,4 N NaHSO₄. Organická vrstva sa premyje solankou, suší sa cez MgSO₄a zahustí sa za zisku a mierne špinavo bielej pevnej látky, ktorá sa trituruje s minimálnym množstvom éteru, prefiltruje sa, premyje sa éterom a suší sa za zisku 9,79 g (88%) aldehydu 19d vo forme bielej pevnej látky: Rf = 0,57 (50% etylacetát v hexanoch); ^XH NMR (CDCl₃) δ 10,20 (s, 1H) , 8,96 (s, 1H) , 7,63

(dd, 1H, J=	8,8,	1,6	Hz), 7,18 (m,	3H) ,	6,83	(d, 1H, J= 8,7
Hz), 5,57	(s,	3H)	, 3,75 (s,	3H) .	Anál.	(C₁₆H₁₃N₂0₂I*0,l
etylacetát)	C, H,	N,	I .

(e) Medziprodukt 19e — 1-(4-metoxy-benzyl)-5-(4,4,5,5tetrametyl[1,3,2]-dioxaborolan-2-y1)-1H-indazol-3-karbaldehyd:

Bis(pinakolato)dibór (Aldrich Chemicals) (7,05 g, 27,8 mmol), jodid 19d (9,90 g, 25,24 mmol), octan draselný (12,4 g, 126 mmol), a 1,1'-bis(difenyl-fosfino)ferrocendichlórpalládium(II) (515 mg, 0,631 mmol) sa rozpustí v dimetysulfoxide (150 ml), zmes sa odplynuje a zahrieva sa v olejovom kúpeli s teplotou 80 °C počas 1 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes rozdelí medzi etylacetát (200 ml) a vodu (150 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (25% etylacetát v hexanoch) za zisku esteru kyseliny boritej 19e (9,75 g, 98%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: Rf =0,37 (25% etylacetát v hexanoch); ^XH NMR (DMS0-d_s) δ 1,31 (s, 12H) , 3,69 (s, 3H) , 5,75 (s, 2H) , 6,87 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,27 (d, 2H, J=8,7 Hz), 7,74 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,91 (d, 1H, J=8,4 Hz), 8,52 (s, 1H), 10,17 (s, 1H) . Anál. (C₂₂H₂₅BN₂0₄) C, H, N.

(f) Medziprodukt 19f — 5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxy-benzyl)1H-indazol-3-karbaldehyd:

Do odplynovaného roztoku esteru kyseliny boritej 19e (6,00 g, 15,30 mmol) a 4-brómizochinolínu (5,17 g, 24,8 mmol) v etylénglykoldimetyléteri (DME, 76 ml) sa pridá vodný roztok uhličitanu sodného (2,0 M, 38,2 ml, 76,4 mmol) a potom tetrakis(trifenylfosfín)palládium(0) (883 mg, 0,76 mmol). Zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 80 °C počas 5 hodín, za udržiavania maximálnej vnútornej teploty 78 °C. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes nariedi etylacetátom (200 ml) , premyje sa vodou (100 ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (50 ml) . Organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a spracujú sa na kolóne (silikagél, 30 až 70% etylacetát v hexanoch) , za zisku zlúčeniny 19f (3,56 g, 59%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: Rf = 0,16 (50% etylacetát v hexanoch); ^XH NMR (DMSO-d₆) Ô

3,71 (s, 3H) ,	5,83 (S,	2H) , 6,92 (d,	2H,	J=8,7	Hz) ,	7,38 (d,
2H, J= 8,7 Hz)	, 7,74 (m,	4H), 8,10 (d,	1H,	J=8,7	Hz) ,	8,22 (m,
2H), 8,48 (s,	1H), 9,37	(s, 1H), 10,21	(s,	1H) .

(g) Medziprodukt 19g — 3-chlór-benzén-l,2-diamín:

Roztok borohydridu sodného (1,90 g, 50,2 mmol) vo vode (40 ml) sa pridá do suspenzie 10% palládia na . uhlíku (250 mg) vo vode (50 ml) za prebublávania argónu roztokom prostredníctvom pipety. Do tejto zmesi sa po kvapkách lievikom pridá roztok 3chlór-2-nitroanilínu (Astatech Chemicals) (4,33 g, 25,1 mmol) v 2N vodnom roztoku hydroxidu sodného (125 ml) , dostatočne pomalou rýchlosťou, aby bola kontrolovaná evolúcia plynu. Zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 10 minút, prefiltruje sa cez vrstvu Celitu, okyslí sa 3N vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej a extrahuje sa dichlórmetánom (3 x 2 00 ml) . Kombinované organické vrstvy sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (1 až 20% etylacetát v dichlórmetáne) za zisku diamínu 19g (2,13 g, 60%) vo forme žltého oleja: Rf = 0,30 (dichlórmetan) ; ¹H NMR (DMSO-ds) δ 4,60 (br s, 2H) , 4,80 (br s, 2H) , 6,37 (t, 1H, J = 7,8 Hz), 6,48 (m, 2H) . Anál. (C_eH₇ClH) C,

H, Cl, N.

(h) Medziprodukt 19h — 4-[3-(4-chlór-lH-benzimidazol-2-yl)-1(4-metoxy-benzyl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

Aldehyd 19f (405,6 mg, 1,03 mmol) a diamín 19g (147 mg,

I, 03 mmol) sa kondenzujú za prítomnosti prvkovej síry (50 mg,

1,55 mmol) spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 7c', za zisku medziproduktu 19h (275,5 mg, 52%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: R_f = 0,12 (50% etylacetát v hexanoch); ^XH

NMR (DMSO-dg) δ 3,74 (s, 3H) , 5,83 (s, 2H) , 6,93 (d, 2H, J= 8,8

Hz), 7,22 (m, 2H), 7,38 (d, 2H, J= 8,5 Hz), 7,48 (d, IH, J=7,2 Hz), 7,67 (dd, IH, J=8,7, 1,5 Hz), 7,76 (m, 3H), 8,04 (d, IH, J=8,7 Hz), 8,26 (dd, IH, J=7,4, 1,5 Hz), 8,54 (s, IH) , 8,64 (S, IH) , 9,40 (s, IH), 13,41 (s, IH) .

(i) Príklad 19— 4-[3-(4-chlór-lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol<

5-yl]-izochinolín:

Koncentrovaná kyselina sírová (0,3 ml] zlúčeniny 19h (121,6 mg, 0,236 trifluóroctovej (3,0 ml) sa pridá do roztoku mmol) v kyseline mieša pri teplote a zmes sa miestnosti počas 19 hodín. Zmes sa potom nariedi vodou (50 ml) , reaguje s koncentrovaným vodným roztokom hydroxidu amónneho do dosiahnutia pH =8, a extrahuje sa etylacetátom (3 x 50 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli za zisku zlúčeniny 19 (41,5 mg,

44%) vo forme bielej pevnej látky: R_f =0,40 (75% etylacetát v hexanoch) ; ¹H NMR ' (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 7,22 (m, 2H), 7,48 (d,

IH, J= 7,2 Hz), 7,64 (d, IH, J=8,7), 7,79 (m, 4H) , 8,27 (d,

IH, J=7,5), 8,55 (s, IH) , 8,63 (s, IH) , 9,40 (s, IH) , 13,39 a

13,56 (2s, IH spoločne), 13,94 (s, IH) . Anál. (C₂₃Hi4ClN₅«CH₃OH)

C, H, Cl, N.

Príklad 20: 4-{3-[5-(4-metyl-piperazin-l-yl)-lH-benzimidazol-2yl]-lH-indazol-5-yl}-izochinolín

(a) Medziprodukt 20a — 4-{l-(4-metoxy-benzyl)-3-[5-(4-metylpiperazin-l-yl) -lH-benzimidazol-2-yl]-lH-indazol-5-yl)izochinolín:

Suspenzia 5- (4-metyl-piperazin-l-yl)-2-nitro-fenylamínu (513,0 mg, 2,17 mmol) [pozri Kim, Jung Sun; et al. ; J. Med. Chem.; 39; 992 (1996), kde je uvedený spôsob syntézy tejto zlúčeniny] a 10% palládia na uhlíku (200,8 mg) v etylacetáte (50 ml) sa pretrepe pri 40 psi H₂ počas 17 hodín. Katalyzátor sa odstráni filtráciou cez vrstvu celitu a zmes sa zahustí za zisku surového 4-(4-metyl-piperazin-l-yl)-benzén-1,2-diamínu (522 mg) vo forme žltej peny. Tento surový diamín sa pridá do roztoku aldehydu 19f (853,7 mg, 2,17 mmol) a prvkovej síry (83 mg, 2,60 mmol) v bezvodom dimetylf ormamide (40 ml) a roztok sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 80 °C počas 6 hodín.

Po ochladení na teplotu miestnosti sa roztok nariedi etylacetátom (150 ml) a premyje sa vodou (50 ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (50 ml) .

Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (1:20:400 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH : EtOH : CH₂C1₂) , za zisku zlúčeniny 20a (623 mg, 50%) vo forme oranžovo-hnede j peny: Rf = 0,20 (10% etanol v dichlórmetáne); ¹H NMR (DMSO-d₆)

100 [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 2,23 (s, 3H) , 2,49 (m, 4H) , 3,10 (m, 4H),.3,71 (s, 3H) , 5,80 (s, 2H) , 6,91 (m, 4H) , 7,36 a 7,47 (2 d, 3H spoločne, J=8,3, 8,7 Hz), 7,64 (d, 1H, J=8,9 Hz), 7,77 (m, 3H) , 7,99 (m, 1H) , 825 (d, 1H, J = 7,2 Hz), 8,53 (s, 1H) , 8,62 a 8,64 (2s, 1H spoločne), 9,39 (s, 1H) , 12,78 a 12,83 (2 s, 1H spoločne). Anál. (C₃₆H₃₃N₇O*0,9 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 20 — 4-(3-[5-(4-metyl-piperazin-l-yl)-1Hbenzimidazol-2-yl]-lH-indazol-5-yl)-izochinolín:

Anisol (229,4 mg, 2,12 mmol) sa pridá do roztoku zlúčeniny 20a (123,0 mg, 0,21 mmol) v ľadovej kyseline octovej (2,12 ml) . Pridá brómovod í kove j vodný roztok kyseliny sa zahrieva pri teplote sa koncentrovaný (2,12 ml) a zmes spätného toku počas 21 hodín. Po ochladení sa reakčná zmes pridá po kvapkách do rýchlo zmiešanej zmesi dichlórmetánu (50 ml) , tetrahydrofuránu (20 ml) a nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného (30 ml). Vrstvy sa separujú a organická vrstva sa premyje nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (20 ml) a potom vodou (20 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (1:20:100 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH:EtOH:CH₂C1₂) , za zisku mierne nečistej zlúčeniny 20 (76,0 mg, 78%) vo forme červenej peny. Ďalšie prečistenie zrážaním z dichlórmetanu/hexanov sa získa čistá zlúčenina 20 (47,1 mg,

48%) vo forme ružovej pevnej látky: Rf = 0,20 (1:20:50 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH:EtOH:CH₂Cl₂) ; ^ΧΗ NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 2,23 (s, 3H) , 2,49 (m, 4H) , 3,11 (m, 4H) , 6,91 (m, 2H) , 7,35 a 7,47 (2 d, 1H spoločne, J= 9,0, 8,9 Hz), 7,61 (d, 1H, J= 8,9 Hz), 7,80 (m, 4H), 8,26 (d, 1H, J= 7,7 Hz), 8,54 (s, 1H), 8,59

101 a 8,62 (2s, 1H spoločne), 9,39 (s, 1H) , 12,74 a 12,79 (2 s, 1H spoločne), 13,73 a 13,76 (2 s, 1H spoločne). Anal. (C23H25N7 ·

0,7 H₂0) C, H, N.

Príklad 21: 2-[5-(3-hydroxy-2-metyl-fenyl)-lH-indazol-3-yl] lH-benzimidazol-4-ol

(a) Medziprodukt 21a- 2-[5-jód-l-(2-trimetylsilyl-etoxymetyl)lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ol

Aldehyd 7b' (2,66 g, 6,62 mmol) a 2,3-diamínofenol (Aldrich

Chemicals) (822 mg, 6,62 mmol) sa kondenzujú za prítomnosti prvkovej síry· spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 7c', za zisku zlúčeniny 21a (2,04 g,

61%) vo forme žltej pevnej látky: Rf = 0,15 (25% etylacetát v hexánoch); ^XH NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ — 0,13 (s, 9H) , 0,82 (t,

2H, J= 8,1 Hz	) ,	3,59	(t, 2H, J= 7,	8 Hz) ,	5,	85 (s,	2H), 6,59
(d, 1H, J= 7,	5	Hz) ,	7,01 (m, 2H) ,	7,71	(d,	1H, J:	= 8,7 Hz),
7,81 (dd, 1H,	J=	8,8,	1,5 Hz), 8,90	a 9,04	(2	S, 1H	spoločne),
9,49 a 9,-74	(2	s,	1H spoločne),	12,69	a	12,96	(2 s, 1H
spoločne). Anal.	(C2₀H₂3lH₄O₂SÍ) C, H,	N.

102 (b) Medziprodukt 21b — 2-[5-(3-metoxy-2-metyl-fenyl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1H-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol4-ol: '

Ester kyseliny boritej 9c' (250 mg, 1,01 mmol) a jodid 21a (510,6 mg, 1,01 mmol) sa kondenzujú spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 9d, za zisku zlúčeniny 21b (256,7 mg,

51%) vo forme žltej peny: Rf = 0,22 (30% etylacetát v hexanoch, súčasne s 21a); ^XH NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ — 0,11 (s, 9H) , 0,85 (t,

2H, J=8,lHz), 2,06 (s, 3H) , 3,64 (t, 2H, J= 7,7 Hz), 3,85 (s,

3H) , 5,90 (s, 2H) , 6,55 (dd, 1H, J= 7,2, 1,1 Hz), 6,96 (m,

4H) , 7,26 (t, 1H, J= 7,9 Hz), 7,46 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz),

7,87 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 8,40 a 8,55 (28, 1H spoločne), 9,45 a 9,61 (2s, 1H spoločne), 12,62 a 12,91 (2s, 1H spoločne). Anál. (C₂₈H₃₂N₄O₃Si»0,4 H₂0) C, H, N.

(c) Medziprodukt 21c — 2-[5-(3-metóxy-2-metyl-fenyl)-1Hindazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ol:

Spôsobom analogickým k spôsobu podl'a príkladu 3, reakciou zlúčeniny 21b (174,5 mg, 0,349 mmol) s tetrabutytammóniumfluoridom sa získa zlúčenina 21c (59,8 mg, 46%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: Rf = 026 (5% metanol v dichlórmetáne); Ή NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 2,07 (s, 3H) , 3,85 (s,

3H) , 6,53 a 6,62(2 d, 1H spoločne, J=7,4, 7,7 Hz), 6,96 , (m, 4H) , 7,26 (t, 1H, J=7,9Hz), 7,37 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,66 (d, 1H, J=8,5 Hz), 8,35 a 8,49 (2s, 1H spoločne), 9,45 a 9,55 (2 s, 1H spoločne), 12,53 a 12,78 (2 s, 1H spoločne), 13,57 a 13,62 (2 s, 1H spoločne). HRMS vypočítané pre C₂₂Hi₉N₄O₂ 371,1508 (MH⁺) , zistené 371,1523.

103 (d) Príklad 21 — 2-[5-(3-hydroxy-2-metyl-fenyl)-lH-indazol-3yl]-lH-benzimidazol-4-ol:

Postupom analogickým k syntéze fenolu 8' sa reakciou zlúčeniny 21c (45,9 mg, 0,124 mmol) s pyridín-hydrochloridom získa zlúčenina 21 (29,0 mg, 66%) vo forme svetlo hnedého prášku. Rf = 0,28 (10% metanol v dichlórmetáne); ¹H NMR (DMSOde) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 2,04 (s, 3H), 6,54 a 6,62 (dd a d, 1H spoločne,

J = 7,2, 1,3 a 7,7 Hz), 6,75 (d, 1H, J= 7,4 Hz) , 6,85 (d, 1H,

J = 7,9 Hz) 7,01 (m, 3H) , 7,37 a 7,38 (dd a dd, 1H spoločne,

J= 8,5, 1,5 Hz pre každý), 7,65 a 7,66 (2 d, 1H spoločne, J=

8,7 Hz pre každý), 8,35 a 8,48 (2 s, 1H spoločne), 9,38 a 9,39 (2s, 1H spoločne), 9,46 a 9,56 (2 s, 1H spoločne), 12,52 a

12,77 (2 s, 1H spoločne), 13,55 a 13,60 (2 s, 1H spoločne).

HRMS vypočítané pre C₂iH₁₇N₄O₂ 357,1351 (MH⁺) , zistené 357,1360.

Anál. (C₂iH₁₆N₄0₂»0,8 CH₃OH) C, H, N.

Príklad 22: 6-(3-hydroxy-propyl)-2-metyl-3-[3-((E)-styryl-1Hindazol-5-yl]-fenol

104 (a) Medziprodukt 22a — 3-amíno-2-metyl-fenol:

Suspenzia 2-metyl-3-nitro-fenolu (Aldrich Chemicals) (29,8

9,194,6 mmol) a 10% palládia na uhlíku (3,01 g) v etanole (350 ml) sa pretrepáva pri 4 0 psi vodíka počas 3,5 hodiny. Po filtrácii cez vrstvu celitu sa roztok zahustí a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (50% etylacetát v hexanoch) za zisku anilínu 22a (20,32 g, 85%) vo forme bezfarebnej pevnej látky: Rf =0,50 (50% etylacetát/hexany); ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1,87 (s, 3H) , 4,63 (s, 2H) , 6,08 (dd, 2H, J= 7,9, 10,5 Hz), 6,64 (t, 1H, J=7,9 Hz), 8,76 (s, 1H). Anál. (C₇H₉NO) C, H, N.

(b) Medziprodukt 22b — 3-jód-2-metyl-fenol:

3-amíno-2-metyl-fenol 22a (18,35 g, 149 mmol) sa diazotizuje spôsobom podľa DeGraw, et al. [DeGraw, J.I.; Brown, V.H.; Colweli, W.T.; Morrison, N.E., J. Med. Chem.,

I

17,762(1974)]. Po chromatografii na kolóne (10-50% etylacetát v hexanoch) sa aryljodid 22b (9,06 g, 26%) izoluje vo forme oranžovej pevnej látky. Ďalším prečistením rekryštalizáciou z hexanov sa získa 5,63 g svetlo oranžových ihličiek: R_f = 0,35 (20% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 2,22 (s, 3H), 6,80 (m, 2H) , 724 (dd, 1H, J=7,5, 1,5 Hz), 9,75' (s, 1H) .

(c) medziprodukt 22c —l-allyloxy-3-jód-2-metyl-benzén:

Allylbromid (1,57 g, 13,0 mmol) sa pridá do roztoku 3-jód2-metylfenolu (2,026g. 8,66 mmol) v acetóne (18 ml). Roztok zahrieva pri teplote spätného toku počas 22 hodín, potom sa ochladí na teplotu miestnosti, nariedi sa etylacetátom (50 ml) a okyslí sa 1 N vodným roztokom kyseliny chlorovodíkovej na pH = 2. Vrstvy sa separujú a vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (2 x 10 ml). Kombinované organické extrakty sa

105 sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (5% etylacetát v hexanoch) za zisku allyléteru 22c (2,1353 g, 90%) vo forme žltého oleja: R_f = 0,60 (20% etylacetát/hexany) ; 'Ή NMR (CDC1₃) δ 2,40 (s, 3H), 4,53 (d t, 2H, J= 5,1, 1,5 Hz), 528 (d q, 1H, J= 10,6, 1,5 Hz), 5,42 (d q, 1H, J=17,3, 1,5 Hz), 6,05 (m, 1H), 6,82 (m, 2H), 7,43 (dd, 1H, J= 7,2, 1,9 Hz).

(d) Medziprodukt 22d — 6-allyl-3-jód-2-metyl-fenol:

Medziprodukt 22c (1,0954 g, 3,996 mmol) sa zahrieva v uzavrenej banke v olejovom kúpeli s teplotou 200 °C počas 2 hodín. Po ochladení a chromatografii na kolóne sa získa fenol 22d (767,2 mg, 70%) vo forme jantárového oleja: Rf = 0,31 (10% etylacetát/hexany) . ^ΧΗ NMR (DMSO-d₆) δ 2,30 (s, 3H) , 3,28 (d,

2H, J= 6,6 Hz), 5,02 (m, 2H), 5,90 (m, 1H),

6,66 (d, 1H, J=7,9 Hz), 7,26 (d, 1H, J=8,l Hz), 8,63 (s, 1H).

(e) Medziprodukt 22e — 6-(3-hydroxy-propyl)-3-jód-2-metylfenol:

Komplex boran-dimetylsulfid (0,159 ml, 1,68 mmol boranu) sa pridá po kvapkách do chladeného roztoku (0 °C) medziproduktu 22d (459,8 mg, 1,677 mmol) v suchom éteri (5,0 ml). Chladiaci kúpeľ sa odstráni a miešanie pokračuje počas 1 hodiny. Pridá sa absolútny etanol (2,5 ml) a potom vodný roztok hydroxidu sodného (2,5 N, 3,35 ml). Zmes sa opäť ochladí na 0 °C, pridá sa peroxid vodíka (30 % hmôt. V H₂0, 0,27 ml). Po miešaní pri teplote 0 °C počas 15 minút sa chladiaci kúpeľ odstráni a zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti počas 1 hodiny. Roztok sa rozdelí medzi éter (50 ml) a 1 N vodný roztok kyseliny chlorovodíkovej (finálne pH -2-3). Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa na oranžový

106 olej . Prečistenie chromatografiou na silikagéli vedie na zisk alkoholu 22, (353,1 mg, 72%) vo forme žltého oleja. Rf = 0,11 (20% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-dg) δ 1,64 (kvintet, 2H, J= 7,0 Hz), 2,29 (s, 3H) , 2,54 (t, 2H, J= 7,5 Hz), 3,39 (t, 2H, J= 6,5 Hz), 4,54 (br s, 1H), 6,68 (d, 1H, J= 8,1 Hz), 7,23 (d, 1H, J= 8,1 Hz), 8,58 (s, 1H).

(f) Medziprodukt 22f — 6-(3-hydroxy-propyl)-2-metyl-3-[3-((E)styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]fenol:

Vodný roztok uhličitanu sodného (2M, 1,79 ml) sa pridá do odplynovaného roztoku esteru kyseliny boritej 16a (534,1 mg,

1,12 mmol), aryljodidu 22e (209,1 mg, 0,716 mmol) a l,l'-bis (difenylfosfino)ferrocendichlórpalládia(II) (29 mg, 0,036 mmol) v DMF (3,2 ml) . Zmes zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 80 °C počas 1,5 hodiny, potom sa ochladí a rozdelí sa medzi etylacetát (50 ml) a vodu (10 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa. Prečistením chromatografiou na silikagéli (20 až 50% etylacetát v hexanoch) sa získa 221 (301,9 mg, 82%) vo forme žltej peny: Rf = 0,07 (20% etylacetát/hexany); ⁴H NMR (DMSO-dg) δ - 0,09 (s, 9H), 0,83' (t, 2H, J=7,9 Hz), 1,73 (kvintet, 2H, J= 7,5 Hz), 2,09 (s, 3H) , 2,65 (t, 2H, J=7,5 Hz), 3,46 (t, 2H, J=6,5 Hz), 3,58 (t, 2H, J=8,0 Hz), 5,78 (s, 2H) , 6,74 (d, 1H, J=7,7 Hz), 6,98 (d, 1H, J=7,9 Hz),

7,27 (m, 1H) , 7,37 (m, 3H) , 7,56 (m, 2H) , 7,73 (m, 3H) , 8,06 (s, 1H) , 8,25 (br s, 1H) . Anál. (CsiHasNsOjSi^O, 5 CH₂C1₂) C, H, N.

(g) Medziprodukt 22 — 6-(3-hydroxy-propyl)-2-metyl-3-[3-((E)styryl)-1H-indazol- 5-yl]-fenol:

107

Zlúčenina 22 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 3, reakciou medziproduktu 22f (202, 9 mg, 0,394 mmol) s tetrabutylammóniumfluoridom za zisku zlúčeniny 22 (34,3 mg,

23%) vo forme bieleho prášku: Rf =0,19 (50% etylacetát/ hexany) ; ^XH NMR (DMSO-d_s) δ 1,72 (kvintet, 2H, J=7,4 Hz) 2,10 (s, 3H) , 2,64 (t, 2H, J=7,4 Hz) , 3,45 (t, 2H, J=6,2 Hz), 4,59 (br s, IH) , 6,74 (d, IH, J= 7,7 Hz), 6,97 (d, IH, J= 7,7 Hz), 7,33 (m, 4H) , 7,45 (m, 5H) , 8,02 (s, IH) , 8,26 (s, IH) , 13,18 (s, IH) . Anál. (C₂₅H₂₄N₂O₂ · 0,6 H₂O) C, H, N.

Príklad 23: 3-[3-(4-hydroxymetyl-lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-2-metyl-fenol

(a) Medziprodukt 23a — (2-amíno-3-nitro-fenyl)-metanol:

Kyselina 3-nitroantranilová [pozri Chapman, E. a Stephen, H. 4, Chem. Soc., 127, 1791, (1925), kde je uvedená syntéza tohto činidla) (5,00 g, 27,45 mmol) sa redukuje s komplexom boran-dimetylsulfid spôsobom [Mickelson, John W.; et at. J.

podl'a Mikelson, et al. Med. Chem.; 39; 4654 (1996)], za zisku benzylalkoholu 23a (4,27 g, 93%) vo forme oranžovej kryštalickej pevnej látky: Rf

0,22 (75% etylacetát

108 hexanoch); ^ΤΗ NMR (DMSO-d₆) δ 4,50 (d, 2H, J=5,4 Hz), 5,43 (t,

IH, J=5,4 Hz), 6,65 (dd, IH, J = 8,7, 7,2 Hz), 7,10 (br s,

2H) , 7,47 (d, IH, J = 1,0 Hz), 7,94 (dd, IH, J= 8,8, 1,5 Hz).

Anál. (C₇H₈N₂O₃) C, H, N.

(b) Medziprodukt 23b — (2,3-diamíno-fenyl)-metanol:

Spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny 9a' sa medziprodukt 23a (3,16 g, 18,8 mmol) hydrogenuje v etanole (300 ml) za zisku zlúčeniny 23b (223g, 86%) vo forme žltohnedej pevnej látky. Ďalším prečistením rekryštalizáciou z .etanolu sa získa zlúčenina 23b (1,04 g, 40%) vo forme žltých ihličiek: Rf = 0,17 (75% etylacetát v hexanoch); ²N NMR (DMSOdg) δ 4,36 (br s, 6H) , 4,90 (br s, IH) , 6,42 (m, 3H) . Anál.

(C₇H₁₀N₂0) C, N, N.

(c) Medziprodukt 23c — {2-[5-jód-1-(2-trimetylsilanyletoxymetyl) -lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl)-metanol:

Zlúčenina 23c sa pripraví podobne ako zlúčenina 7c'. Kondenzácia diamínu 23b (587,3 mg, 4,25 mmol) s aldehydom 7b' (1,71 g, 425 mmol) za prítomnosti prvkovej síry sa získa zlúčenina 23c (1,57 g, 71%) vo forme žltej pevnej látky: ²H NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ — 0,13 (s, 9H) , 0,82 (t, 2H, J= 7,7 Hz), 3,58 (t, 2H, J = 7,9 Hz), 4,87 (br s, IH) , 5,04’ (br s, IH) , 5,22 (br s, IH), 5,87 (s, 2H), 7,26 (m, 2H), 7,39 a 7,67 (m a br s,

IH spoločne), 7,75 (d, IH, J=8,7 Hz), 7,83 (dd, IH, J=8,8, 1,5

Hz), 8,95 (d, IH, J=l,l Hz), 12,97 a 13,13 (2s, IH spoločne).

Anál. (C₂₁H₂5lN₄0₂SÍ) C, H, I, N.

109 (d) Medziprodukt 23d - 2-metyl-3-(4,4,5,5-tetrametyl[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-fenol:

Spôsobom syntézy analogickým k syntéze zlúčeniny 9c' sa jodid 22b (1,21 g, 5,17 mmol) premení na ester kyseliny boritej 23d (1,15 g, 95%), bielu, kryštalickú pevnú látku: R_f = 0,18 (10% etylacetát v hexanoch); ¹H NMR (CDC1₃) δ 1,35 (s, 12H) , 2,46 (s, 3H) , 6,87 (dd, 1H, J= 7,9, 1,0 Hz), 7,08 (t, 1H, J= 7,5 Hz), 7,35 (dd, 1H, J= 7,4, 1,1 Hz). Anál.

(C,iHi₉BO₃*O,2 H₂0) C, H.

(e) Medziprodukt 23e — 3-[3-(4-hydroxymetyl-lH-benzimidazol-2yl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-2-metylfenol:

Zlúčenina 23e sa pripraví podobne ako zlúčenina 9d' . Jodid 23c (276,3 mg, 0,514 mmol) a ester kyseliny boritej 23d (300 mg, 1,28 mmol) sa kondenzuje za zisku zlúčeniny 23e (128,2 mg, 50%) vo forme žltej pevnej látky: Rf = 0,16 (40% etylacetát v hexanoch); ^XH NMR (DMS0-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie) δ - 0,11 (s, 9H) , 0,85 (t,

2H, J= 7,9 Hz), 2,03 a 2,07 (2 s, 3H spoločne), 3,63 (t, 2H,

J= 7,7 Hz), 4,87 a 4,97 (2 d, 2H spoločne, J= 5,8 a 5,5 Hz), 5,11 a 5,25 (2 t, 1H spoločne, J= 5,6 a 6,1 Hz), 5,92 a 5,93 (2 s, 2H spoločne), 6,76 (dd, 1H, J= 7,5, 3,4 Hz), 6,86 (d,

1H, J=7,9 Hz), 7,17 (m,	3H), 7,39 a 7,60 (dd a d, 1H spoločne,
J=6,8, 2,1 a 7,9 Hz),	7,49 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,89	(d, 1H,
J=8,9 Hz), 8,44 a 8,47	(2s, 1H spoločne), 9,46 a 9,48	(2s, 1H
spoločne), 12,91 a	13,09 (2 s, 1H spoločne) .	Anál.
(C₂8H₃2N₄0₃Si»0,3 H₂0) C,	H, N.

(f) Príklad 23 — 3-[3-(4-hydroxymetyl-lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-2-metyl-fenol:

110

Zlúčenina 23 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 3.

Reakciou zlúčeniny 23e (130,7 mg, 0,261 mmol) s tetrabutylammóniumfluoridom sa získa zlúčenina 23 (61,6 mg,

64%) vo forme bielej pevnej látky: R_f = 0,22 (70% etylacetát v hexánoch); ¹H NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 2,04 a 2,07 (2 s, 3H spoločne), 4,86 a 4,97(2 d, 2H spoločne, J=6,0 a 5,7 Hz), 5,10 a 5,23 (2 t, 1H spoločne, J=5,6 a 6,0 Hz), 6,76 (d, 1H, J=7,2 Hz), 6,85 (d, 1H, J=8,l Hz), 7,14 (m, 3H) , 7,37 a 7,58 (dd a d, 1H spoločne, J=7,2, 1,9 a 7,7 Hz), 7,40 (dd, 1H, J=8,5, 1,5 Hz), 7,67 (d, 1H, J= 8,1 Hz), 8,39 a 8,42 (28, 1H spoločne), 9,43 a 9,45 (2 s, 1H spoločne), 12,81 a 12,96 (2 s, 1H spoločne), 13,65 a 13,70 (2 s, 1H spoločne). Anál.

(C₂₂₄H_eN₄O₂»l,0 CH₃OH) C, H, N.

Príklad 24: 7-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín

(a) Medziprodukt 24a — izochinolin-7-yl-ester kyseliny 1,1,1trifluór-metansulfónovej:

Anhydrid kyseliny trifluórmetansulfónovej (4,54 mmol) sa pridá po kvapkách do chladenej (0 °C) hydroxyizochinolínu (1,9477 g, 13,24 mmol, g, 16,10 zmesi 7Lancaster

111

Chemicals) v pyridíne (14 ml) . Miešanie pokračuje pri teplote 0 °C počas 1 hodiny, potom pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Roztok sa rozdelí medzi dichlórmetan a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (50% etylacetát v hexanoch) za zisku triflátu 24a (3,27 g, 88%) vo forme svetlo žltého oleja: R_f =0,23 (50% etylacetát/hexany); ^aH NMR (DMS0-d₆) δ 7,72 (dd,

1H, J= 9,0,2,5 Hz), 7,80 (d, 1H, J= 5,8 Hz), 8,06 (d, 1H, J=

9,0 Hz), 8,23 (d, 1H, J= 2,5 Hz), 8,55 (d, 1H, J= 5,7 Hz),

9,39 (S, 1H) . ¹³C NMR (DMSO-d₆) δ 118,33 (q, J=320 Hz), 119,35, 119,99, 124,17, 128,03, 129,9, 134,31, 144,09, 147,02, 152,46.

Anál. (C₁₀H₆F₃NO₃S«O, 1 H₂0) C, H, N, S.

(b) Medziprodukt 24b — 7-[3-((E)-styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

Izochinolín-triflát 24a (150 mg, 0,540 mmol) sa pridá do odplynovaného roztoku esteru kyseliny boritej 16a (282,9 mg,

0,594 mmol), práškového fosforečnanu draselného (344 mg, 1,62 mmol), 1, ľ-bis(difenylfosfíno)ferrocen- dichlórpalládia(II) (13 mg, 0,016 mmol) a 1,1'-bis(difenylfosfíno)ferrocenu (9 mg, 0,016 mmol) v 1,4-dioxane (10 ml). Zmes zahrieva v. olejovom kúpeli s teplotou 80 °C počas 26 hodín a potom sa ochladí a rozdelí sa medzi etylacetát (50 ml) a nasýtený vodný roztok chloridu sodného (2 5 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa. Prečistením chromatografiou na silikagéli (10 až 75% etylacetát v hexanoch) sa získa zlúčenina 24b (92,7 mg, 36%) vo forme fluórescentného ružového gélu: Rf = 0,06 (20% etylacetát/hexany); ^XH NMR (CDC1₃) δ - 0,04 (s, 9H) , 0,94 (t,

2H, J=8,4 Hz), 3,64 (t, 2H, J=8,lHz), 5,79 (s, 2H), 7,30-8,09 (m, 14H) , 8,26 (d, 2H, J= 12,9 Hz).

112 (c) Príklad 24 — 7-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]izochinolín:

Podobne ako v príklade 3 sa reakciou medziproduktu 24b (86 mg, 0,18 mmol) s tetrabutylammóniumfluoridom získa zlúčenina 24 (27,2 mg, 43%) vo forme bielej pevnej látky: Rf = 0,11 (70% etylacetát v hexánoch); ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 7,29 (t, 1H, J=72 Hz), 7,41 (t, 2H, J=7,2 Hz), 7,66 (m, 2H) , 7,88 (t, 2H, J=5,7 Hz), 8,09 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,29 (dd, 1H, J=8,4, 1,8 Hz),

8,51 (m, 3H) , 9,41 (s, 1H) , 13,28 (s, 1H) . Anál. (C₂₄H₁₇N₃· 0,6 CH₂OH) C, H, N.

Príklad 25: 4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl] izochinolín

(a) Medziprodukt 25a — 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4,4,5,5tetrametyl-[1,3,2]-dioxaborolan-2-yl)-1-(2 -trimetylsilanyletoxymetyl)-lH-indazol:

Postupom analogickým k syntéze esteru kyseliny boritej 19e sa jodid 7c' (2,36 g, 4,81 mmol) premení na ester kyseliny

113 boritej 25a (l,43g, 61%), bielu, kryštalickú pevnú látku: ¹H

NMR (DMSO-d₆) δ - 0,13 (s, 9H) , 0,82 (t, 2H, J=7,7 Hz) , 1,35 (s, 12H) , 3,59 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 5,89 (s, 2H) , 7,24 (m, 2H) ,

7,53 (m, 1H) , 7,83 (m, 3H) , 8,95 (s, 1H) , 13,15 (s, 1H) . Anál.

(C₂6H₃₅BN₄0₃SÍ) C, H, N.

(b) Medziprodukt 25b — 4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl) -lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

Postupom analogickým k syntéze zlúčeniny 19f sa 4brómizochinolín (238 mg, 1,14 mmol) kondenzuje s esterom kyseliny boritej 25a (280,4 mg, 0,572 mmol) za zisku zlúčeniny 25b (237,5 mg, 84%) vo forme bielej pevnej látky: Rf = 0,20 (50% etylacetát v hexanoch); ^XH NMR (DMSO-dg) δ - 0,07 (s, 9H) , 0,86 (m, 2H), 3,67 (t, 2H, J= 7,9 Hz), 5,98 (s, 2H) , 7,20 (br m, 2H) , 7,55 (br m, 1H) , 7,65 (br m, 1H) , 7,71 (m, 4H) , 8,07 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 8,27 (dd, 1H, J=7,2, 1,7 Hz), 8,56 (s, 1H), 8,66 (d, 1H, J=0,8 Hz), 9,41 (s, 1H),

13,17 (s, 1H).

(c) Príklad 25 — 4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]izochinolín:

Zlúčenina 25 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 3. Medziprodukt 25b (152,4 mg, 0,310 mmol) reaguje s tetrabutylammóniumfluoridom za zisku zlúčeniny 25 (61,9 mg,

55%) vo forme bielej peny: R_f = 0,16 (70% etylacetát v hexanoch); ¹H NMR (DMSO-dg) δ 7,18 (br m, 2H) , 7,56 (br m, 2H) ,

7,63 (dd, 1H, J= 8,5, 1,7 Hz), 7,81 (m, 4H), 8,27 (dd, 1H, J=

7,4,1,2 Hz), 8,55 (s, 1H) , 8,62 (s, 1H) , 9,40 (s, 1H) , 13,05 (br S, 1H) , 13,84 (s, 1H) .

114

Príklad 26: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-6-(3hydroxy-propyl)-2-metyl-fenol

(a) Medziprodukt 26a - 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-6- (3-hydroxypropyl)-2-metyl-fenol:

Postupom analogickým k syntéze zlúčeniny 25b sa ester kyseliny boritej 25a (303 mg, 0,618 mmol) kondenzuje s jodidom 22, (180,5 mg, 0,618 mmol), za zisku zlúčeniny 26a (124,4 mg, 38%) vo forme bielej pevnej látky: R_f = 0,30 (50% etylacetát v hexánoch); ^XH NMR (DMS0-d₆) δ - 0,11 (s, 9H) , 0,85

(t, 2H, J	= 7,9	Hz) ,	1,74	(kvintet,	2H,	J= 7,0. Hz) , 2,08
(s, 3H) ,	2,66	(t,	2H, J	= 7,7 Hz)	, 3	,47 (q, 2H, J= 5,3	Hz) ,
3,63 (t,	2H,	J= 7,	9 Hz)	, 4,60 (t	, 1	H, J= 5,0 Hz), 5,91	(s,
2H), 6,75	(d,	1H, J=	-- ί,ί	Hz), 7,01	(d,	1H, J= 7,7 Hz), 7,20
(kvintet,	2H,	J=8,1	Hz) ,	7,49 (m,	2H)	, 7,71 (d, 1H J=7,7	Hz) ,
7,88 (d,	1H, J	= 8,7	Hz) ,	8,33 (S, 1	• H) ,	8,42 (s, 1H), 13,11	(s,

K). Anál. (C₃₀H₃₆N₄0₃Si«0,6 etylacetát) C, H, N.

(b) Príklad 26 — 3- [3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1H-indazol-5-yl] 6 - (3 -hydroxy-propyl)-2-metyl-fenol:

Postupom analogickým k príkladu 3, sa po odstránení chrániacich skupín zo zlúčeniny 26 (99,4 mg, 0,188 mmol) za použitia tetrabutytammóniumfluoridu získa zlúčenina 26 (26,9 mg, 36%) vo forme bielej pevnej látky: R_f = 0,19 (70% etylacetát v hexanoch); ³Η NMR (DMSO-dg) δ 1,74 (kvintet, 2H, J=7,4 Hz), 2,08 (s, 3H) , 2,66 (t, 2H, J= 7,4 Hz), 3,47 (q,

2H, J= 5,1 Hz), 4,59 (t, 1H, J= 5,1 Hz), 6,74 (d, 1H,

J=7,7 Hz), 7,00 (d, 1H, J=7,7 Hz), 7,19 (kvintet, 2H, J=7,9

Hz), 7,38 (dd, 1H J= 8,5, 1,5 Hz), 7,50 (d, 1H, J= 7,4 Hz),

7,67 (m, 2H) , 8,30 (s, 1H) , 8,37 (s, 1H) , 12,96 (s, 1H) , 13,66 (s, 1H) . Anál. (C₂₄H₂₂N₄0₂*0,4 etylacetát) C, H, N.

Príklad 27: 1-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-piperidin-4-ol

TBDMSCl ImMazol ,0^(¾ 59%

7ť

CyMAP-1. Pd(dba)3. NaOtBu, DMÉ, 80 *C

56%

(a) Medziprodukt 27a — 4-(terc.butyl-dimetyl-silanyloxy) piperidín:

Imidazol (4,18 g, 61,4 mmol), 4-hydroxypiperidín (2,07 g, 20,46 mmol) a terc.butyldimetylsilylchlorid (4,63 g, 30,7 mmol) sa rozpustia v dichlórmetáne (50 ml) a zmes sa mieša pri teplote 23 °C počas 24 hodín. Zmes sa potom premyje nasýteným vodným roztokom hydrogénuhličitanu sodného (3 x 50 ml) a vodou (50 ml), suší sa cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa vo vysokom vákuu za zisku zlúčeniny 27a (2,60 g, 59%) vo

116

forme žltého	oleja, ktorý	kryštalizuje	pri	Státí: *H NMR
(CDC1₃) δ	0,05	(s, 6H),
0,90 (s,	9H) ,	1,46 (m, 2H) ,	1,81 (m, 2H)	, 2,71	(m, 2H), 3,09
(m, 3H) ,	3,77	(septet, 1H,	J= 3,9 Hz) .	Anál.	(CuH₂₅NOSi»0,2
CH₂C1₂) c,	H, N		1

(b) Medziprodukt 27b — 5-{4-[(dimetyl-etyl)-dimetylsilanyloxy]-piperidin-l-yl)-3-((E)-styryl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

Terc.butoxid sodný (163 mg, 1,70 mmol), tris(dibenzylidinacetón)dipalládium(0) (26 mg,0,03 mmol), a

CyMAP-1 (pozri Old et. al. , J. Am. Chem. Soc., 120, 9722 (1998), kde je uvedená štruktúra tohto ligandu) (33 mg, 0,085 mmol) sa pridá do odplynovaného roztoku zlúčeniny 27, (241,1 mg, 1,12 mmol) a jodidu 7,' (269,3 mg, 0,565 mmol) v etylénglykoldimetyléteri (DME, 2,0 ml). Zmes sa zahrieva v olejovom kúpeli s teplotou 80 °C počas 17 hodín. Po ochladení na teplotu miestnosti sa zmes nariedi etylacetátom (50 ml) a prefiltruje sa na odstránenie čiernej zrazeniny. Filtrát sa premyje vodou (10 ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (10 ml), suší sa cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (10 až 50% etylacetát v hexánoch) za zisku zlúčeniny 27b (177,7 mg,

56%) vo	forme oranžového oleja:	R_f =0,28 (20%	etylacetát v
hexánoch)	; ^XH	NMR (CDCI3) δ - 0,06	(S, 9H), 0,09	(s, 6H), 0,90
(m, 2H) ,	0,92	(s, 9H) , 1,80 (m, 2H) , 1,97 (m,	2H) , 3,07 (m,
2H), 3,44	(m,	2H), 3,58 (t, 2H, J=	8,4 Hz), 3,92	(m, 1H), 5,69
(s, 2H),	7,29	(m, 2H), 7,41 (m, 6H)	, 7,61 (d, 2H,	J= 8,7 Hz) .

(c) Príklad 27 - 1-[3-( (E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-piperidin4 -ol :

117

Postupom analogickým k príkladu 3 sa reakciou medziproduktu

27b (121,4 mg, 0,22 mmol) s tetrabutylammóniumfluoridom získa zlúčenina 27 (33,1 mg, 47%) vo forme žltej peny: R_f = 0,15 (70% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 1,55 (m, 2H) , 1,86 (m,

2H) , 2,83 (m, 2H) , 3,47 (m, 2H) , 3,61 (m, 1H), 4,68 (d, 1H, J=

4,2 Hz), 722 (m, 2H) , 7,37 (m, 5H) , 7,55 (d, 1H, J= 16,5 Hz),

7,69 (d, 2H, J=7,2 Hz), 12,89 (s, 1H) . Anál. (C₂oH₂₁N₃0»0,4

Η₂0·0,4 etylacetát) C, H, N.

Príklad 28: 1-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-piperidin-3-ol

(a) Medziprodukt 28a — 3-(terc(butyl-dimetyl-silanyloxy)piperidín:

Postupom analogickým k syntéze zlúčeniny 27a sa 3hydroxypiperidín, hydrochlorid (2,76 g, 20,06 mmol) premení na zlúčeninu 28a (2,929, 68%), žltý olej, ktorý kryštalizuje pri státí: ^ΧΗ NMR (CDC1₃) δ 0,05 (s, 6H) , 0,89 (s, 9H) , 1,46 (m,

2H) , 1,77 (m, 2H) , 2,39 (br s, 1H) , 2,61 (m, 2H) , 2,82 (m,

1H) , 2,97 (dd, 1H, J= 12,3, 2,7 Hz), 3,66 (septet, 1H, J=3,6

Hz). Anál. (CuH₂₅NOSi»0,2 CH₂C1₂) C, H, N.

118 (b) Medziprodukt 28b — 5-{3-[(dimetyl-etyl)-dimetylsilanyloxy]-piperidin-l-yl}-3-((E)-styryl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

Zlúčenina 28b sa pripraví postupom analogickým k syntéze zlúčeniny 27b. Medziprodukty 7a' (269,3 mg, 0,565 mmol) a 28a

(244 mg, 1,13 mmol)	sa použijú na	prípravu	zlúčeniny	28b
(212,0 mg, 66%) vo	forme hnedého	oleja	: R_f	= 0,17	(10%
etylacetát v hexánoch)	; ^XH NMR (CDC1₃)	δ -	0,05	(s, 9H) ,	0,09
(s, 6H) , 0,92 (m, 2H)	, 0,96 (s, 9H),·	1,44	(m,	1H), 1,65-	2,05
(m, 3H) , 2,69 (m, 2H)	, 3,56 (m, 4H) ,	3,92	(m,	1H), 5,70	(s,
2H) , 7,25 (m, 2H) , 7,40 (m, 6H)., 7,60	(d, 2H, J=	= 8,4 Hz) . Anal .
(C₃₂H₄₉N₃O₂Si₂*0,6 H₂0) C	, H, N.

(C) Príklad 28 - 1-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-piperidin3-ol:

Postupom analogickým k príkladu 3 sa reakciou medziproduktu 28b (181,5 mg, 0,322 mmol) s tetrabutylammóniumfluoridom získa

zlúčenina 28 (47,6 mg, 46%) vo forme žltej peny:	R_f = 0,19	(70%
etylacetát/hexany); ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 1,34 (m,	1H) , 1,70	(m,
1H) , 1,95 (m, 2H) , 2,55 (m, 1H) , 2,72 (m, 1H) ,	3,46 (m,	1H) ,
3,63 (m, 1H) , 3,74 (m, 1H) , 4,88 (d, 1H, J=4,5	Hz), 7,24	(dd,
1H, J=9,0, 1,8 Hz), 7,33 (t, 1H, J= 7,2 Hz),	7,42 (m,	5H) ,
7,63.(d, 1H, J= 16,5 Hz), 7,76 (d, 2H, J=7,2	Hz), 12,97	(s,
1H) . Anal. (C₂oH₂iN₃O«O , 3 H₂0) C, H, N.

119

Príklad 29: [2 -(5 - izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzolimidazol-4-yl]-metanol

(a) Medziprodukt 29a - {2-[5-(4,4,5,5-tetrametyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1Hindazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl}-metanol:

Postupom podobným ako pri syntéze esteru kyseliny boritej 19 sa jodid 23c (512,8 mg, 0,985 mmol) premení na ester kyseliny boritej 29a (312,0 mg, 61%) vo forme bielej peny:

Rf = 0,28 (5% metanol v dichlórmetáne); ¹H NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ - 0,13 (s, 9H), 0,83 (t, 2H, J= 7,7 Hz), 1,35 (s, 12H), 3,60 (t, 2H, J=8,l Hz), 4,87 (br s, 1H), 5,06 (br s, 1H), 5,24 (m, 1H), 5,90 (s, 2H), 7,26 (m, 2H), 7,40 a 7,71 (2 d, 1H spoločne, J=7,2 a 7,9 Hz), 7,82 (m, 2H) , 8,95 (s, 1H) , 12,93 a 13,10 (2s, 1H spoločne) . Anál. (C₂₇H₃7BN₄0₄Si*0,5 H₂0) C, H, N.

(b) Medziprodukt 29b — {2-[5-izochinolin-4-yl-l-(2trimetylsilanyl-etoxy-metyl)-lH-indazol-3-yl]-ΙΗ-benzimidazol4-yl}-metanol:

120

Postupom podobným ako pri syntéze zlúčeniny 19f sa 4brómizochinolín (193 mg, 0,927 mmol) kondenzuje s esterom kyseliny boritej 29a (241,2 mg, 0,463 mmol) za zisku zlúčeniny

29b (171,1 mg, 71%) vo forme bielej peny: Rf = 0,22 (75% etylacetát v hexanoch) ; ¹H NMR (DMS0-d₆) [niektoré, piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ — 0,08 (s, 9H) ,

0,88 (t, 2H, J=7,7 Hz), 3,68 (t, 2H, J=7,9 Hz), 4,88 (d, 2H,

J=5,3 Hz), 5,05 a 5,25 (2 -br s, 1H spoločne), 5,98 (s, 2H) , 7,22 (m, 2H) , 7,40 a 7,5/ (2m, 1H spoločne), 7,77 (m, 4H) , 8,07 (d, 1H, J=8,5 Hz), 8,27 (dd, 1H, J=72, 1,5 Hz), 8,57 (s,

1H) , 8,70 (br s, 1H) , 9,41 (s, 1H) , 12,97 a 13,14 (28,1H spoločne). Anál. (C₃₀H₃iN₅O₂Si*0,4 H₂0) C, H, N.

(c) Príklad 29 — [2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-yl]-metanol:

Zlúčenina 29 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 3. Reakciou medziproduktu 29b (129,0 mg, 0,247 mmol) s tetrabutylammóniumfluoridom sa získa zlúčenina 29 (58,3 mg, 60%) vo forme bieleho prášku: ^XH NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] D 4,88 (t, 2H, J=6,2 Hz), 5,03 a 523 (2 t, 1H spoločne, J= 5,6 a 62 Hz), 7,20

(m, 2H) , 7,38	a	7,53	(m a d, 1H	spoločne, J= 7,4 Hz pro
dublet) , 7,63	(dd	, 1H,	J=8,7,	1,3 Hz), 7,82 (m, 4H), 8,27 (d,
1H, J=7,4 Hz),	8,	55	(s	, 1H) ,	8,63 a	8,66 (2 s, 1H spoločne),
9,40 (s, 1H) ,	12,	87	a	13,02	(2s, 1H	spoločne), 13,81 a 13,86

(2 s, 1H spoločne). Anál. (C₂₄H₁₇N₅0»0,4 Η₂0·0,3 CH₂C1₂) C, H, N.

171

Príklad 30: 2-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-yl]-etanol

(a) Medziprodukt 30a — 2-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl) -lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl}-etanol:

Suspenzia 10% palládia na uhlíku (66 mg) a 2-(2-amíno-3nitrofenyl)etanolu [pozri Seno, Kaoru; Hagishita, Sanji; Saté, Tomohiro; Kunyama, Kaoru; J. Chem. Soc. Perkv Trans. 1; 2012 (1984), kde je uvedená syntéza tohto činidla] (531,5 mg, 2,92 mmol) v absolútnom etanole (50 ml) sa pretrepáva pri 40 psi vodíka počas 23 hodín. Po filtrácii a zahustení sa získa surový 2-(2,3-diamínofenyl)etanol (474,4 mg) vo forme červeného oleja, ktorý kryštalizuje pri státí: Rf = 0,08 (75% etylacetát v hexanoch); ^XH NMR (DMSO-d₆) δ 2,58 (t, 2H, J=6,9 Hz), 3,53 (t, 2H, J= 7,2 Hz), 4,32 (br s, 5H) , 6,29 (m, 2H) ,

6,40 (dd, 1H, J= 6,9, 2,1Hz).

Bez ďalšieho prečistenia sa tento surový diamín kondenzuje s aldehydom 19f (1,10 g, 2,81 mmol) za prítomnosti síry, podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c', za zisku zlúčeniny 30a (930,8 mg, 63%) vo forme žltej peny: Rf = 0,19 (etylacetát); ^XH NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 3,10 (m, 2H) , 3,71 (s,

3H) , 3,74 (m, 2H), 4,66 a 4,80(2 br s, 1H spoločne), 5,82 (s,

2H) , 6,93 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,05 (m, 2H), 7,39 (m, 3H) , 7,65 (d, 1H, J= 9,2 Hz), 7,81 (m, 3H) , 8,00 (m, 1H) , 8,26 (dd, 1H,

122

J= 7,2,2,1Hz), 8,54 (s, 1H), 8,65 (s, 1H), 9,39 (s, 1H), 12,96 a 13,02 (28, 1H spoločne).

(b) Príklad 30— 2 -[2 -(5-izochinolin-4-yl-1H-indazol-3-yl)-1H-benzimidazol-4-yl]-etanol

Medziprodukt 30, (169,1 mg, 0,322 mmol) sa zbaví chrániacich skupín spôsobom analogickým k príkladu 19, za zisku zlúčeniny 30 (28,2 mg, 22%) vo forme bieleho prášku. Rf = 0,33 (etylacetát); ^XH NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v

dôsledku tautomérnej	izomerizácie]	δ 3,11 (m, 2H) ,	3,73	(m,
2H) , 4,68 a 4,85 (2	t, 1H spoločne,	J=5,2 a 5,5 Hz) ,	7,04	(m,
2H) , 7,35 a 7,47 (2	d, 1H spoločne,	J=7,9 a 7,2 Hz) ,	7,63	(d,
1H, J=8,7 Hz), 7,83	(m, 4H) , 8,26	(d, 1H, J=7,5),	8,55	(s,
1H), 8,63 (s, 1H),	9,39 (s, 1H) ,	12,97 a 13,01	(2 S,	1H
spoločne), 13,86 a 13,87(28, 1H spoločne). Anál. (C25H19N5OO, 3

Η₂0·0,4 etylacetát»0,06 S) C, H, N.

Príklad 31: [2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-ylmetyl]-dimetyl-etanol

193 (a) Medziprodukt 31a - {2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl)-lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl}metanol

Syntézou podobnou ako pri syntéze zlúčeniny I9h, sa aldehyd 19f (3,67 g, 9,33 mmol) a diamín 23b (1,29 g, 9,33 mmol) kondenzujú za prítomnosti síry za zisku zlúčeniny 31a (2,60g. 54%) vo forme žltej pevnej látky: Rf = 0,19 (75 % etylacetát v hexanoch) ; ¹H NMR (DMSO-d₆) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 3,71 (s, 3H) , 4,88 (d, 2H, J= 5,5 Hz), 5,04 a 5,25 (2 t, IH spoločne, J= 5,6 a 6,1Hz),

5,81 a 5,83 (2 S. 2H spoločne), 6,93 (d, 2H, J=8,5 Hz), 7,21 (m, 2H) , 7,38 a 7,54 (2 d, 3H spoločne, J = 7,4 a 7,5 Hz), 7,66 (d, IH, J= 8,7 Hz), 7,77 (m, 3H) , 8,01 (dd, IH, J= 8,7,4,0 Hz), 826 (d, IH, J= 7,7 Hz), 8,54 a 8,55 (2 s, IH spoločne), 8,65 a 8,68 (2 s, IH spoločne), 9,39 (s, IH), 12,88 a 13,05 (2s, IH spoločne). Anál. (C₃₂H₂₅N₅0₂*0,3 H₂0) C, H, N.

(b) Medziprodukt 31b — {2-[5-isoqulnolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl) -lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl)-dimetylamín:

Metansulfonylchlorid (119,3 mg, 1,04 mmol) sa pridá po kvapkách do roztoku zlúčeniny 31a (527,5 mg, 1,03 mmol) a diizopropyletylamínu (153,3 mg, 1,19 mmol) v tetrahydrofuráne (12,0 ml) a zmes sa ochladí na 0 °C v ľadovom kúpeli. Po miešaní pri teplote 0 °C počas 22,5 hodín sa reakčná banka opatrí chladičom so suchým ľadom a plynný dimetylamín sa kondenzuje do reakčného roztoku do tej doby, ako sa objem zvýši o približne 5 ml. Miešanie pokračuje pri teplote 0 °C počas 24 hodín, potom pri teplote miestnosti počas 15 hodín. Zmes sa rozdelí medzi etylacetát (100 ml) a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného (2 0 ml) . Organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a

124 spracujú sa na kolóne (silikagél, 5 až 10% metanol v dichlórmetáne), za zisku zlúčeniny 31b (250,2 mg, 45%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: R_f = 0,26 (10% metanol v dichlórmetáne); ^ΧΗ NMR (DMS0-d₆) δ 2,20 (s, 6H) , 3,71 (s, 3H) ,

3,84 (s, 2H) , 5,83 (s, 2H) , 6,93 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,14 (m, 2H) , 7,36 (d, 2H, J=8,5 Hz), 7,48 (m, 1H) , 7,67 (d, 1H, J=8,9 ^x Hz), 7,77 (kvintet, 2H, J= 6,4 Hz), 7,89 (m, 1H), 8,00 (d, 1H, J= 8,9 Hz), 8,26 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 8,55 (s, 1H) , 8,71 (s,

1H) , 9,39, (S, 1H) , 13,03 (br s, 1H) . Anál. (Ο₃₄Η_3ΟΝ₆0·1,1 H₂0) C, H, N.

(c) Príklad 31 - [2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-ylmetyl]-dimetyl-amín

Zmes zlúčeniny 31b (125,7 mg, 0,233 mmol), anisolu (252 mg, 2,33 mmol), kyseliny trifluóroctovej (2,3 ml) a koncentrovanej kyseliny sírovej (0,2 ml) sa mieša pri teplote miestnosti počas 66 hodín a potom sa pridá po kvapkách do rýchlo miešanej zmesi nasýteného vodného roztoku hydrogénuhličitanu sodného (75 ml) a etylacetátu (25 ml) . Vrstvy sa separujú a vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (2 x 50 ml). Kombinované organické vrstvy sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (25 až 40% metanol v dichlórmetáne) za zisku zlúčeniny 31 (35,8 mg, 37%) vo forme bieleho prášku: Rf = 0,09 (10% metanol v dichlórmetáne); ¹H NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 2,15 a 2,21 (2 br s, 6H

spoločne),	3,80	(s, 2H), 7,	12	(br s, 2H),	7,40 a 7,54 (2 m, 1H
spoločne),	7,64	(d, 1H, J=	9,0	Hz), 7,83 (	:m, 4H), 8,26 (d, 1H,
J= 7,5 Hz)	, 8,55 (s, 1H),	8,63 a 8,73 (2	br s, 1H spoločne) ,
9,39 (s,	1H) ,	13,02 (br	s,	1H), 13,83	(br s, 1H) . Anál.

(C₂₆H₂₂N₆*0,7 Η₂0·1,0 CH₃OH) C, H, N.

19^

Príklad 32: [2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-lHbenzimidazol-4-ylmetyl]-metyl-amín

(a) Medziprodukt 32 - {2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl)-lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl}-metylamín:

Postupom podobným ako pri syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31b (516,6 mg, 1,01 mmol) s metanesulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 1 hodiny. Ale miesto kondenzovaného plynu sa potom pridá roztok metylamínu v tetrahydrofurane (2,0 M, 5,0 ml) a miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 15 hodín. Extrakciou a chromatografiiou na silikagéli podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa mono-metylový analóg 32a (170,5 mg, 32%) vo forme špinavo bielej pevnej látky: Rf = 0,16 (1:20:300 kone. vodný roztok NH₄OH:etanol:dichlórmetán); ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 2,26 (s, 3H) , 3,71 (s, 3H), 4,03 (s, 2H) , 5,82 (s, 2H) , 6,93 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,14 (d, 2H, J= 4,7 Hz), 7,37 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,46 (m, IH), 7,67 (dd, IH, J= 8,7, 1,3 Hz), 7,77 (m, 2H), '7,89 (d, IH, J=7,7 Hz), 8,01 (d, IH, J=8,5 Hz), 825 (dd, IH, J= 7,0, 1,8 Hz), 8,55 (s, IH), 8,68 (s, IH), 9,39 (s, IH). Anál. (C₃₃H₂₈N₆O*0,6 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 32 — [2-(5-izochinolin-4-yl-IH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-ylmetyl]-metyl-amín:

126

Odstránenie chrániacich skupín podobné ako pri syntéze zlúčeniny 31 vedie na zisk zlúčeniny 32 (47,5 mg, 63%) vo forme špinavo bielej peny: R_f =0,29 (120:100 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH:etanol:dichlórmetán) ; ¹H NMR (DMS0-d₆) δ 2,30 (s, 3H) , 4,07 (s, 2H) , 7,15 (d, 2H, J=4,5 Hz), 7,47 (m, 1H) ,

7,64 (dd, 1H, J=8,5, 1,5 Hz), 7,83 (m, 4H), 8,26 (d, 1H, J=7,2

Hz), 8,56 (s, 1H) , 8,66 (s, 1H) , 9,39 (s, 1H) . Anál.

(C2₅H2oN₆*EtOH*0,2 hexany) C, H, N.

Príklad 33: 4-[3 -(4-pyrrolidin-l-ylmetyl-lH-benzimidazol-2yl)-1H-indazol-5-yl]-izochinolín

(a) Medziprodukt 33a — 4-[1-(4-metoxy-benzyl)-3-(4-pyrrolidinl-ylmetyl-lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

Spôsobom syntézy analogickým k syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31a (435,0 mg, 0,850 mmol) s metansulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 22 hodín. Pridá sa pyrrolidín (605 mg, 8,5 mmol) a zmes sa nechá zahriať na teplotu miestnosti počas 20 hodín. Extrakciou a chromatografiou na silikagéli podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa zlúčenina 33a (303,0 mg, 63%) vo forme žltej peny: Rf = 0,13 (1:20:400 koncentrovaný vodný roztok

NH₄OH:etanol .-dichlórmetán) ; ⁴H NMR (DMS0-d₆) δ 1,61 (br s, 4H) ,

2,51 (br s, 4H) , 3,71 (s, 3H) , 3,97 (s, 2H) , 5,83 (s, 2H) ,

6,93 (d, 2H, J= 8,8 Hz), 7,14 (d, 2H, J=3,6 Hz), 7,36 (d, 2H,

J=8,7 Hz), 7,45 (m, 1H), 7,67 (d, 1H, J=8,5 Hz), 7,76 (m, 2H),

7,89 (m, 1H) , 8,00 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,25 (d, 1H, J=6,6 Hz),

127

8,54 (s, 1H) , 8,70 (br s, 1H) , 9,39 (s, 1H) , 13,03 (br s, 1H) .

Anál. (0_2θΗ₂₄Ν₆·0,02 CH₂C1₂) C, H, N.

(b) Príklad 33 — 4-[3-(4-pyrrolidin-l-ylmetyl-lH-benzimidazol2-yl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

.Roztok zlúčeniny 33a (109,2 mg, 0,193 mmol) v 25% koncentrovanej kyseline sírovej/kyseline trifluóroctovej (2,0 ml) sa mieša pri teplote miestnosti počas 21 hodín a potom sa pridá po kvapkách do rýchlo sa miešanej zmesi tetrahydrofuránu (25 ml) a nasýteného vodného roztoku uhličitanu sodného (25 ml) . Pridá sa etylacetát (25 ml) a voda (15 ml) a vrstvy sa separujú. Vodná vrstva sa extrahuje etylacetátom (3 x 50 ml) a kombinované organické frakcie sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa a zahustia sa. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (120:100 koncentrovaný vodný roztok

NH₄0N:etanol:dichlórmetán) sa získa zlúčenina 33 (25,4 mg, 30%) vo forme bieleho prášku: ^XN NMR (CD₃OD) δ 1,77 (br s, 4H) , 2,69 (br s, 4H) , 4,12 (s, 2H) , 7,24 (d, 2H, J=4,0 Hz), 7,80 (m,

5H), 8,06 (d, 1H, J= 7,9 Hz), 8,23 (d, 1H, J=7,5 Hz), 8,53 (s, 1H) , 8,69 (s, 1H) , 9,29 (s, 1H) . Anál. (C₂₀H₂₄N₆*0, 9 MeOH) C, H, N.

Príklad 34: 4-{3 -[4 -(2-pyrrolidin-1-yl-etyl)-lH-benzimidazol-2 -

128 (a) Medziprodukt 34a — 4-{l-(4-metoxy-benzyl)-3-[4-(2pyrrolidin-l-yletyl)-lH-benzimidazol-2-yl]-lH-indazol-5-yl}izochinolín:

Postupom podobným ako pri syntéze zlúčeniny 33a sa alkohol 30a (441,5 mg, 0,84 mmol) premení na zlúčeninu 34a (204,6 mg,

42%) vo forme špinavo bielej peny: R_f = 0,08 (1:20:400 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH:etanol:dichlórmetán); ¹H NMR

(DMSO-dg) δ 1,38 (br s, 4H) ,	2,31 (br s, 4H) ,	2,79	(m, 2H) ,
3,07 (m, 2H) , 3,71 (s, 3H) ,	5,81 (s, 2H), 6,93	(d,	2H, J=8,8
Hz), 6,98 (d, 1H, J=72 Hz),	7,08 (t, 1H, J=7,7	Hz) ,	7,36 (d,
2H, J=8,7 Hz), 7,39 (m, 1H)	, 7,66 (dd, 1H, J=	8,5,	1,5 Hz),

7,76 (m, 2H) , 7,89 (d, 1H, J=7,7Hz), 8,01 (d, 1H, J=8,7 Hz),

8,25 (d, 1H, J=7,4 Hz), 8,53 (s, 1H) , 8,75 (br· S, 1H) , 9,38 (s,lH), 13,00 (br s, 1H) . Anál. (0₃₇Κ₃₄Ν₆0·0,6 N₂0) C, H, N.

(b) Príklad 34 — 4-{3-[4-(2-pyrrolidin-l-yl-etyl)-1Hbenzimidazol-2-yl]-lH-indazol-5-yl}-izochinolín:

Zlúčenina 34 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 33, reakciou zlúčeniny 34a (66,2 mg, 0,114 mmol) s 3:1 zmesou kyseliny trifluóroctovej/kyseliny sírovej, ktorá vedie na zisk zlúčeniny 34 (24,7 mg, 47%) vo forme bieleho prášku. R_f = 0,38 (1:20:100 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH:etanol:dichlórmetán) ^TH NMR (DMSO-dg) δ 1,37 (br m, 6H) , 2,27 (br m, 2H) , 2,80 (m,

2H) ,	3,07 (m,	2H) , 6,98 (d, 1H, J= 7,2	Hz), 7,09	(t,	1H, J=
7,5	Hz), 7,36	(br s, 1H) , 7,63 (dd, 1H,	J=8,5, 1,	5 Hz)	, 7,82
(m,	4H) , 8,26	(d, 1H, J=7,4 Hz), 8,54	(S, 1H),	8,75	(br s,
1H) ,	9,39 (s,	1H) , 12,98 (br s, 1H) ,	13,79 (s,	1H) .	Anál.

(C₂9H₂gNg·0,7 EtOH) C, H, N.

129

Príklad 35: 3-{[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4- ylmetyl] -amino]-2-metyl-propán-l-ol

(a) Medziprodukt 35a — Cyklopropylmetyl-{2-[5-izochinolin-4-yl1-(4-metoxy-benzyl)-lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4ylmetyl}-amín:

Postupom podobným ako pri syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31a (512,0 mg, 1,00 mmol) s metansulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 1 hodiny. Potom sa pridá amínometylcyklopropan (712 mg, 10,0 mmol) a miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 15 hodín. Po extrakcii a chromatografii na kolóne podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa medziprodukt 35a (209,3 mg, 37%) vo forme špinavo bieleho prášku: R_f = 0,16 (1:20:300 koncentrovaný vodný roztok NH₄OH:etanol:dichlórmetan) ; ¹H NMR (DMSO-d₆) δ —0,24 (br s, 2H) , -0,04 (br s, 2H) , 0,66 (br s, 1H) , 2,30 (br s, 2H) , 3,71 (s,

3H) , 4,04 (br s, 2H) , 5,83 (s, 2H) , 6,93 (d, 2H, J=8,7 Hz), 7,11 (m, 2H), 7,37 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,42 (m, 1H), 7,67 (dd,

1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,76 (m, 2H) , 7,87 (d, 1H, J=8,l Hz), 8,02 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,25 (dd, 1H,J= 6,8, 1,9 Hz), 8,53 (s, 1H) , 8,68 (br s, 1H) , 9,38 (s, 1H) . Anál. (CsgHsjNgO^O, 5 H₂0) C,

H, N.

(b) Príklad 35- 3-{ [2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indanzol-3-yl)lH-benzimidazol-4-ylmetyl] -amíno]-2-metyl-propan-l-ol:

130

Zlúčenina 35 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 33, reakciou zlúčeniny 35a (107,1 mg, 0,19 mmol) s 3;1 zmesou kyseliny trifluóroctovej/kyseliny sírovej, ktorá vedie na zisk analógu 35 s otvoreným kruhom (25,3 mg, 29%) vo forme bieleho prášku Rf = 0,35 (1:20:100 koncentrovaný vodný roztok NH₄0H: etanol: dichlórmetán); ^ΧΗ NMR (CD₃OD) δ 0,67 (d, 3H, J=6,8

Hz) ,	1,33 (m, 1H) ,	1,80 (m, 1H), 2,60 (m,	1H) , 2	,75 (m	, 1H) ,
320	(m, 1H) , 4,26	(s, 2H) , 7,22 (m, 2H) ,	7,57 (d, 1H,	J=7,7
Hz) ,	7,63 (dd, 1H,	J=8,7, 1,7 Hz), 7,79 (m	, 1H) ,	7,99 (d, 1H,
J=7,5Hz), 8,22 (d,	1H, J=7,5 Hz), 8,51 (s	, 1H) ,	8,72	(br s,
1H) ,	9,29 (s, 1H) .	¹³C NMR (CD₃OD, DEPT)	δ 15,0	(CH₃)	, 35,6
(OH)	, 50,9 (CH₂) ,	54,0 (CH₂) , 67,4 (CH₂),	111,7	(CH) ,	123,4
(CH)	, 124,0 (CH),	124,3 (CH), 125,8 (CH),	128,9	(CH) ,	129,3
(CH)	, 130,4 (CH),	132,6 (CH), 142,9 (CH),	152,6	(CH) .	Anál.
(C₂₈H₂₆N₈0«0,6 CH₂C1«C	),4 hexany) C, H, N.

Príklad 36: Dietyl-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzoimidazol-4-ylmetyl-amín

(a) Medziprodukt 36a — Dietyl-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4metoxybenzyl)-lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl)amín:

Postupom podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31b (511,4 mg, 1,00 mmol) metansulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 2,5 hodiny. Potom sa pridá dietylamín (731,4 mg, 10,0 mmol) a miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 25 hodín. Po extrakcii a

131 chromatografii na kolóne podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa medziprodukt 36a (434,6 mg, 77%) vo forme žltej peny: Rf 0,22 (1:20:400 koncentrovaný vodný roztok

NH₄OH: etanol: dichlórmetánu) ¹H NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 0,87 a 1,01 (2 br s,6H spoločne), 2,41 a 2,56 (2 br s, 4H spoločne), 3,71 (s, 3H) , 3,89 a 3,94 (2 br s,2H spoločne), 5,82 (s, 2H), 6,92 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,13 (m, 2H) , 7,37 (d, 2H, J= 8,5 Hz), 7,50 (m, 1H) , 7,67 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,76 (m, 2H) , 7,91 (m, 1H) , 8,01 (d, 1H, J=8,7 Hz), 8,25 (dd, 1H, J=6,6, 1,9 Hz), 8,53 (s, 1H), 8,63 a 8,77 (2 br s, 1H spoločne), 9,38 (s, 1H), 13,02 (s, 1H). Anál.

(C₃₆H34N₆O»0,4 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 36 — Dietyl-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3yl)-lH-benzimidazol-4-ylmetyl]-amín

Podobne ako v príklade 33, vedie reakcia zlúčeniny 36a (266,5 mg, 0,47 mmol) s 3:1 zmesou kyseliny trifluóroctovej /kyseliny sírovej na zisk zlúčeniny 36 (67,5 mg, 32%) vo forme bieleho prášku. R_f = 0,30 (1:20:200 koncentrovaný vodný roztok

NH₄0H:etanol:dichlórmetan). ³H NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie] δ 0,94 (br m, 6H) , 2,44 a 2,55 (2 br s, 4H spoločne), 3,94 (br s, 2H) , 7,14 (br s, 2H), 7,39 a 7,50 (2 br s, 1H spoločne), 7,64 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,77 (m, 4H) , 8,25 (d, 1H, J= 7,4 Hz), 8,54 (s, 1H) , 8,63 a 8,74 (2 br s, 1H spoločne) , 9,39 (s, 1H) , 12,99 (s, 1H) , 13,81 (s, 1H) .

Anál. (C₂₈N₂₅N₆*0,5 EtOH) C, H, N.

132

Príklad 37: Etyl-[2- (5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-ylmetyl]-amín

(a) Medziprodukt 37a— Etyl-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl) -lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl}-amín:

Spôsobom podobným syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31a (371,5 mg, 0,726 mmol) s metánsulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 22,5 hodín. Reakčná zmes sa potom ochladí v chladiči so suchým ľadom a plynný etylamín sa kondenzuje do reakčného roztoku do tej doby, ako sa jeho objem zvýši o približne 5 ml. Miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 15 hodín. Po extrakcii a chromatografii na kolóne podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa medziprodukt 37a (260,1 mg, 67%) vo forme svetlo

žltej	peny	: ^XH	NMR (DMSO-de)	δ 0,84	(br	s,	3H)	, 3	,39 (b	r s,
2H) ,	3,71	(s,	3H) , 4,04 (s,	2H), 5,	82 '	(s,	2H) ,	6,	93 (d,	2H,
J=8,7	Hz) ,	7,1	2 (m, 2H) , 7,	37 (d,	2H,	J=	8,7	Hz)	, 7,44	(m,
1H) ,	7,67	(dd,	1H, J= 8,7,	1,5 Hz)	, 7,	76	(m,	2H)	, 7,89	(m,
1H) ,	8,01	(d,	1H, J=8,7 Hz)	, 8,25	(dd,	1H	, J=	= 6,6	, 1,9	Hz) ,

133

8,54 (s, 1H) , 8,67 (s, 1H) , 9,39 (s, 1H) . Anál. (C₃4H₃₀NoO»0,7

H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 37 — Etyl-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indaz:ol-3-yl)1H-benzimidazol-4-ylmetyl]-amín:

Podobne ako v príklade 33 vedie reakce zlúčeniny 37a (123,3 mg, 0,229 mmol) s 3:1 zmesou kyseliny trifluóroctovej/kyseliny sírovej na zisk zlúčeniny 37. (21,8 mg, 23%) vo forme špinavo

bieleho prášku	. ^ΧΗ NMR (DMSO-	-d₆) δ	0,84	(br s, 3H)	, 2,57	(br s,
2H) , 4,10 (s,	2H) , 7,13 (m,	2H) ,	7,46	(m, 1H) ,	7,64 (dd, 1H,
J=8,7, 1,7 Hz)	, 7,80 (m, 4H)	, 826	(dd,	1H, J=72,	1,7 Hz)	, 8,55
(s, 1H), 8,66	(s, 1H) , 9,39	(s,	1H) ,	13,85 (br	s, 1H) .	Anál.

(C₂₆H₂₂N₆*0,6 EtOH»l,0 CH₂C1₂) C, H, N.

Príklad 38: izopropyl-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)lH-benzimidazol-4-ylmetyl]-amín

(a) Medziprodukt 38a — izopropyl-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4metoxy-benzyl)-1H-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl}amín:

Postupom podobným ako pri syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31a (518,0 mg, 1,01 mmol) s metansulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 22,5 hodín. Potom sa pridá izopropylamin (597 mg, 10,1 mmol) a miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Po extrakcii a chromatografii na kolóne podobne ako pri syntéze zlúčeniny

134

31b sa získa medziprodukt 38a (417,8 mg, 75%) vo forme žltej peny: ^XH NMR (DMSO-dg) δ 0,77 (br s, 6H) , 2,63 (br s, 1H) , 3,71

(s,	3H) ,	4,02	(br s, 2H) , 5,82 (s, 2H) , 6,93 (d, 2H, J= 8,7
Hz) ,	7,11	(m,	2H), 7,37 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,42 (m, 1H), 7,67
(dd,	1H,	J= 8	,7, 1,5 Hz), 7,76 (m, 2H) , 7,88 (d, 1H, J= 7,7
Hz) ,	8,02	(d,	1H, J=8,7 Hz), 8,25 (dd, 1H, J= 6,6, 2,1 Hz),
8,53	(s,	1H)	, 8,69 (br s, 1H) , 9,38 (s, 1H) . Anál.

(C₃₅H₃₂N₆0»0,7 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 38 — izopropyl-[2-(5-izoóhinolin-4-yl-lH-indazol-3yl)-lH-benzoimidazol-4-ylmetyl]-amín:

Zlúčenina 38 sa pripraví podobne ako zlúčenina príkladu 33, reakciou zlúčeniny 38a (243,3 mg, 0,44 mmol) s 3:1 zmesou kyseliny trifluóroctovej/kyseliny sírovej, ktorá vedie na zisk zlúčeniny 38 (89,9 mg, 47%) vo forme špinavo bieleho prášku: ^ΧΗ NMR (CD₃OD) δ 1,03 (d, 6H, J=6,4 Hz), 2,99 (septet, 1H, J=6,4 Hz), 4,27 (s, 2H), 7,23 (m, 2H) ,

7,57 (dd, 1H, J=7,7, 1,1Hz), 7,67 (dd, 1H, J=8,7,

1,7 Hz), 7,81 (m, 3H) , 8,01 (d, 1H, J=8,3 Hz), 8,23 (d, 1H, J=7,5Hz), 8,51 (s, 1H), 8,71 (br s, 1H), 9,30 (s, 1H).

Príklad 39: Terc.butyl-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-

135 (a) Medziprodukt 39a - Terc.butyl-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-Ηπιε t oxy- benzyl )-1H-indazol-3-y1]-ΙΗ-benzimidazol-4-ylmetyl}amín:

Spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31a (6232 mg, 1,22 mmol) s metánsulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 1 hodiny. Potom sa pridá terc.butytamín (890 mg, 122 mmol) a miešanie pokračuje pri teplote miestnosti počas 20 hodín. Po extrakcii a chromatografii na kolóne podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa medziprodukt 39a (299,7 mg, 43%) vo forme žltej peny: ^XH NMR (CD₃OD) 8 1,01 (s, 9H), 3,76 (s, 3H), 4,11 (s, 2H), 5,78

2H, J= 8,7 Hz) , 7,19 (m, 2H) (dd, 1H, J=7,9,1,1Hz), 7,62

8,7,1,7 Hz), 7,77 (m, 3H) , 7,95 (d, 1H,

1H, J= 7,0, 1,7 Hz), 8,48 (s, 1H) , 8,74 (i Anál. (C36H₃₄N₆O»0,3 H₂0) C, H, N.

4,11	(s, 2H),	5,78
2H) ,	7,36	(d,	2H,
7,62	(dd,	1H,	J=
7,9	Hz) ,.	822	(dd,
1H) ,	9,29	(s,	1H) .

J=8,7 Hz), 7,50 (b) Príklad 39 — Terc.butyl-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol3-yl)-lH-benzoimidazol-4-ylmetyl]-amín:

Roztok zlúčeniny 39b (103,7 mg, 0,183 mmol), kyseliny trifluórmetansulfonovej (0,48 ml) a kyseliny trifluóroctovej (1,6 ml) sa mieša pri teplote miestnosti počas 17 hodín a ' 1 potom pri teplote 100 C počas 1,5 hodiny. Roztok sa pridá po kvapkách do rýchlo miešanej zmesi koncentrovaného vodného roztoku NH₄OH (10 ml) , vody (10 ml) a etylacetátu (10 ml) . Extrakciou a prečistením podobným ako pri syntéze zlúčeniny

príkladu	33 sa	získa zlúčenina	39 <	HO,2	mg,	49%)	vo forme
bieleho	prášku.	^XH NMR (CD₃OD) δ	1,30	(s,	9H) ,	4,56	(s, 2H) ,
7,33 (m,	2H), 7,	68 (m, 2H), 7,81	(m,	3H) ,	8,01	(d, 1H, J= 8,5
Hz), 825	(d, 1H,	J= 8,5 Hz), 8,51	(s,	1H) ,	8,73	(s,	1H) , 9,32

(s, 1H) . Anál. (C₂₈H₂₆N₆·!, 6 HOAc) C, H, N.

136

Príklad 40: 4-[3-(4-imidazol-l-ylmetyl-lH-benzimidazol-2-yl)lH-indazol-5-yl]-izochinolín

(a) Medziprodukt 40a - 4-[3-(4-imidazol-1-ylmetyl-1Hbenzimidazol-2-yl)-1-(4-metoxy-benzyl)-lH-indazol-5-yl]izochinolín:

Spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny 31b reaguje alkohol 31b (572,0 mg, 1,12 mmol) s metansulfonylchloridom a diizopropyletylamínom pri teplote 0 °C počas 1 hodiny. Potom sa pridá imidazol (761 mg, 112 mmol) a miešanie . pokračuje pri teplote miestnosti počas 24 hodín. Po extrakcii a chromatografii na kolóne podobne ako pri syntéze zlúčeniny 31b sa získa medziprodukt 40a (269,1 mg, 43%) vo forme bieleho

prášku. ¹H	NMR (CD₃OD) Ô 3,77	(s,	3H) , 5,58 (s,	2H), 5,79	(s,
2H) , 6,73	(br s, 1H) , 6,91	(d,	2H, J=8,8 Hz),	7,07 (d,	1H,
J=7,4 Hz),	7,23 (m, 2H), 7,36	(d,	2H, J=8,8 Hz),	7,53-7,83	(m,
6H), 8,03	(d, 1H, J=7,9 Hz) ,	8,22	(d, 1H, J=7,9	Hz), 8,51	(s,
1H), 8,73	(br s,1H), 9,28 (s,	1H) .	Anál. (C35H27N7O) C, H, N.

137 (b) Príklad 40 — 4-[3-(4-imidazol-l-ylmetyl-lH-benzimidazol-2yl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

Roztok zlúčeniny 40a (152,0 mg, 0271 mmol), kyseliny trifluórmetansulfonovej (2,71 ml) a kyseliny trifluóroctovej (2,71 ml) sa mieša pri teplote 60 °C počas 1 hodiny. Roztok sa pridá po kvapkách do rýchlo miešanej zmesi koncentrovaného vodného roztoku NH₄OH (10 ml) , vody (10 ml) , THF (10 ml) a etylacetátu (20 ml) . Extrakcia a prečistenie podobne ako pri syntéze zlúčeniny príkladu 33 vedie na zisk surovej zlúčeniny 40 vo forme ružovej pevnej látky (24,9 mg), ktorá je stále kontaminovaná nečistotami podľa ¹H NMR spektra. Trituráciou z acetonitrilu sa získa čistá zlúčenina 40 (11,0 mg, 9%) vo forme ružového prášku. ¹H NMR (CD₃OD) δ 5,59 (s, 2H) , 6,74 (br

S, 1H) , 7,08 (d, 1H, J= 7,4 Hz), 7,25 (m, 2H) , 7,55-7,85 (m,

6H) , 8,07 (d, 1H, J= 7,9 Hz), 8,24 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 8,54 (s, 1H) , 8,72 (br s, 1H) , 9,30 (5, 1H) . HRMS vypočítané pre C27H20N7 442,1780 (MH⁺) , zistené 442,1794 .

Príklad 41: 5-(3-metyl-pyridin-4-yl)-3-(E) - styryl-lH-indazol

(a) Medziprodukt 41, - 5-(3-Metyl-pyridin-4-yl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

138

Medziprodukt 16 (300 mg, 0,63 mmol), 4-bróm-3-metyl-pyridín (pozri Baliki et al., Gazz. Chim. Ital. 124, 9, 1994, 385-386) (112 mg, 0,65 mmol) a uhličitan sodný (140 mg, 1,3 mmol) sa mieša v DME (6 ml)/H₂0 (1 ml) v banke prebublávanej argónom.

Pridá sa tetrakis(trifenylfosfín)palládium(O) (60 mg, 0,05 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote spätného toku pod argónom počas 24 hodín. Roztok sa nariedi etylacetátom, premyje sa H₂O a solankou, suší sa cez Na₂SO₄ a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/hexany) vedie na zisk 234 mg (84%) medziproduktu 41a vo forme číreho oleja. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,56 (s,

1H), 8,52 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,95 (s, 1H) , 7,24-7,67 (m, 10H) , 5,78 (s, 2H) , 3,64 (t, 2H, J=8,l Hz), 2,33 (s, 3H) , 0,94 (t, 2H, J=8,l Hz), -0,04 (s, 9H) . Anál. (C₂₇H₃iN₃OSi«0,2 H₂0) C, H,

N.

(b) Príklad 41 - 5-(3-metyl-pyridin-4-yl)-3-(E)-styryl-lHindazol:

Medziprodukt 41a (218 mg, 0,49 mmol) sa mieša v zmesi etylénediamínu (0,34 ml, 4,9 mmol) a TBAF (1 M v THF, 2,5 ml, 2,5 mmol) pri teplote 72 °C počas 20 hodín. Roztok sa nariedi etylacetátom, premyje sa nasýteným roztokom NaHCO₃ a solankou, suší sa (Na₂SO₄) a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (1:1:1 etylacetát/THF/hexany) vedie na zisk 122 mg (79%) titulnej zlúčeniny vo forme bielej pevnej látky. ^ΤΗ NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,29 (s, 1H) , 8,52 (s, 1H) , 8,46 (d, 1H, J=4,8Hz), 8,22 (s, 1H) , 7,55-7,73 (m,

SN), 726-7,44 (m, 5H) , 2,31 (s, 3H) . Anál. (C₂iH₁₇N₃) C, H, N.

MS (ES) [m+H]/z - vypočítané 312, zistené 312; [m+H]/z vypočítané 310, zistené 310.

139

Príklad 42: 5-(4-chlór-pyridin-3-yl)-3-(E)-styryl-1H-indazol

(a) Medziprodukt 42a - 5-(4-chlór-pyridin-3 yl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 73% medziproduktu 16a a 4-chlór-3-jód-pyridínu (pozri Cho et al., Heterocycles, 43,8, 1996, 1641-1652) spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 41a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,67 (s, 1H), 8,52 (d, 1H, J=7,8 Hz), 8,08 (s, 1H), 7,26-7,70 (m, 10H), 5,79 (s, 2H) , 3,64 (t, 2H, J=8,l Hz), 0,94 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -0,03 (s, 9H) . Anal. (C₂₆H₂₈ClH₃OSi»0,3 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 42 - 5-(4-chlór-pyridin-3-yl)-3-(E)-styryl-lHindazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 66% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 42a spôsobom analogickým k príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,30 (s, 1H), 8,70 (s, 1H) , 8,56 (d, 1H, J=5,4 Hz), 8,31 (s, 1H) , 7,537,73 (m, 4H), 7,57 (d, 2H, J=4,2 Hz), 7,50 (dd, 1H, J=8,4, 1,2 Hz), 726-7,40 (m, 3H) . Anal. (C₂₀H₁₄C1N₃«0,05 H₂0) C, N, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 332/334, zistené 332/334; [m-H]/z vypočítané 330/332, zistené 330/332.

140

Príklad 43: 5-(4-metyl-pyridin-3-yl-3-(E)-styryl-lH-indazol

(a) Medziprodukt 43a - 5-(4-metyl-pyridin-3-yl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 90% z medziproduktu 16a a 3-bróm-4-metyl-pyridinu spôsobom podobným syntéze medziproduktu 41a. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,54 (s,

1H) , 8,50 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,95 (s, 1H) , 723-7,67 (m, 10H) ,

5,78 (S, 2H) , 3,64 (t, 2H, J=8,lHz), 2,33 (s, 3H) , 0,94 (t, 2H, J=8,l Hz), -0,04 (s, 9H) . Anál. (C₂7H₃iN₃OSi) C, H, N.

(b) Príklad 43 - 5-(4-metyl-pyridin-3-yl)-3-(E)-styryl-lHindazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 48% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 43a spôsobom analogickým k príkladu 41, ^XH NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,26 (s, 1H) , 8,47 (s, 1H) , 8,44 (d, 1H, J=4,8 Hz), 8,20 (s, 1H) ,

7,71 (d, 2H, J= 7,2 Hz), 7,55-7,64 (m, 3H) , 7,26-7,42 (m, 5H) , 2,31 (s, 3H) . Anál. (C₂₁H₁₇N₃*0,13 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 312, zistené 312; [m-H]/z vypočítané 310, zistené

310.

141

Príklad 44: 5-fluór-4-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]izochinolín

(42*)

SEM

Ha NO 2) Δ

(PhjPliW.N.jCO,

H,CVDME,a5°C,24h (a) Medziprodukt 44a - 4-bróm-5-fluór-izochinolín:

5-amíno-4-bróm-izochinolín (pozri Gordon et al., 4, Heterocycl. Chem., 4, 1967, 410-411) (1,86 g, 8,34 mmol) sa mieša v 48% kyseline fluórboritej (15 ml)/EtOH (15 ml) do úplného rozpustenia. Roztok sa ochladí na teplotu 0 °C a po kvapkách sa pridá dusitan sodný (660 mg, 9,59 mmol) v H₂0 (1 ml). Roztok sa nariedi Et₂0 (30 ml) a svetlo hnedá diazoniumfluórboritanová sol sa odoberie filtráciou a suší sa vo vákuu. Pevné látky sa vnesú do banky a tá sa starostlivo uzavrie pod plameňom na odčerpanie dusíka. Tmavo hnedý zvyšok sa nariedi 10% NaOH a extrahuje sa chloroformom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez MgSO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (40% až 50% etylacetát/hexany) vedie na zisk 798 mg (42%) 4-bróm-5-fluórizochinolínu vo forme bielej pevnej látky. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,36 (d, IH, J= 2,4 Hz), 8,74 (s, IH) , 8,07-8,11 (m, IH) , 7,70-7,80 (m, 2H) . Anál. (C₉K₅BrFN) C, N, N.

(b) Medziprodukt 44b - 5-fluór-4-[3 -((E)-styryl)-1-(2 trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

142

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 83% z medziproduktu 16a a 4-bróm-5-fluór-izochinolínu podobne ako medziprodukt 41a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,32 (d, 1H, J= 1,8

Hz), 8,52 (s, 1H) , 8,07 (s, 1H) , 7,91 (dd, 1H, J=8,l, 0,9 Hz), 7,26-7,66 (m, 11H) , 5/80 (s, 2H) , 3,67 (t, 2H, J=8,l Hz), 0,95 (t, 2H, J=8,l Hz), -0,03 (s, 9H) . Anál. (C₃₀H₃₀FN₃OSi*0,2 H₂0) C, H, N.

(c) Príklad 44 - 5-fluór-4-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]izochinolín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 83% SEModstránením chrániacich skupín z, medziproduktu 44b spôsobom analogickým k príkladu 41, ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,26 (s, 1H) , 9,44 (d, 1H, J= 1,8 Hz), 8,47 (s, 1H) , 829 (s, 1H) , 8,12 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,44-7,78 (m, 8H) , 7,35 (t, 2H, J= 7,2Hz), 724 (t, 1H, J= 7,2 Hz). Anál. (C₂₄H₁₆FN₃*0,6 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 366, zistené 366; [m-H]/z vypočítané

364, zistené 364.

Príklad 45: 4-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolin-8ylamín

143 (a) Medziprodukt 45a - 4-[3-((E)-styryl)-1-(2-trimetylsilanyletoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolin-8-ylamín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 82% z medziproduktu 16a a 8-amíno-4-bróm-izochinolínu (pozri Elpern

et al.,	J. Amer. Chem. Soc.,	68,	1948,	1436) podobne	ako pri
syntéze	medziproduktu 41a. ¹H	NMR	(300	MHz, CDC1₃) δ	9,36 (d,
1H, J=	0,6 Hz) , 8,53 (s, 1H) ,	8,13	(s,	1H) 7,26-7,72	(m, 11H),

6,86 (dd, 1H, J= 7,5, 0,6 Hz), 5,8,1 (s, 2H) , 4,51 (s, 2H) , 3,66 (t, 2H, J=8,l Hz), 0,96 (t, 2H, J=8,l Hz), -0,03 (s, 9H). Anál. (C_3oH₃₂N₄OSi) C, H, N.

(b) Príklad 45 - 4-[3-((E)-styryl)-lH-indazol-5-yl]izochinolin-8-ylamín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 70% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 45a spôsobom analogickým syntéze medziproduktu 41. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,30 (s, 1H) , 9,50 (s, 1H) , 8,36 (s, 1H) , 8,26 (s, 1H) ,

7,24-7,71 (m, 1OH), 6,91 (d, 1H, J=7,8 Hz), 6,77 (t, 1H, J=7,8

Hz), 6,33 (s, 2H) . Anál. (C₂₄H₁₈N₄*0,45 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 363, zistené 363.

Príklad 46: 5-(4-chlór-5-etyl-pyridin-3-yl)-3-(E)-styryl-lHindazol

144 (a) Medziprodukt 46a - 4-chlór-3-etyl-5-jód-pyridín:

LDA sa pripraví adíciou n-butyllítia (2,5 M v hexanoch, 0,95 ml, 2,38 mmol) do roztoku diizopropylamínu (0,345 ml, 2,42 mmol) v THF (5 ml) pri teplote —20 °C. Po 10 minútach sa roztok ochladí na teplotu —78 °C. Po kvapkách sa pridá 4-chlór3- jód-pyridín (500 mg, 2,09 mmol) v THF (3 ml) a reakčná zmes sa mieša počas 3 0 minút. Pridá sa jódoetan (0,2 ml, 2,5 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 1 hodiny pri teplote —78 °C, potom po dobu 1 hodiny za súčasného zahriatia na teplotu 0 °C. Reakcia sa utlmí nasýteným roztokom NH₄C1, alkalizuje sa nasýteným roztokom NaHCO₃ a extrahuje sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/hexany) vedie na zisk 429 mg (77%)

4- chlór-3-etyl-5-jód-pyridínu vo forme voskovej bielej pevnej látky. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,78 (s, 1H) , 8,33 (s, 1H) ,

2,83 (q, 2H, J= 7,5 Hz), 126 (t, 3H, J = 7,5 Hz). Anál.

(C7H7CIIH) C, H, N.

(b) Medziprodukt 46b - 5-(4-chlór-5-etyl-pyridin-3-yl)-3-((E)styryl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 69% z medziproduktu 16a a 4-chlór-3-etyl-5-jód-pyridínu podobne ako

pri	syntéze medziproduktu	41a. *H NMR (300	MHz,	CDC1₃)	δ	8,49
(d,	2H, J= 3,3 Hz), 8,06	(s, 1H) 7,26-7,69	(m,	9H), 5,	79	(s,
2H) ,	3,65 (t, 2H, J = 8,1	Hz), 2, '88 (q, 2H,	J =	7,5 Hz)	Z	1,35
(t,	3H, J 7,5 Hz), 0,95	(t, 2H, J = 8,1 Hz)	/
-0,03 (s, 9H) . Anál. (C₂₈H₃₂ClN₃OSi) C, H, N.

(C) Príklad 46 - 5-(4-chlór-5-etyl-pyridin-3-yl)-3-(E) -styryllH-indazol:

145

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 80% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 46b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41, ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,25 (s, 1H) , 8,55 (a, 1H) , 8,50 (s, 1H) , 8,27 (s, 1H) , 7,55-7,72 (m, 5H) , 7,26-7,48 (m, 4H) , 2,83 (q, 2H, J= 7,5 Hz), 1,26 (t, 2H, J= 7,5 Hz). Anál.

(C₂₂H₁₈N₃C1«0,3 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 360, zistené 360.

Príklad 47: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-2metoxy-fenol

(a) Medziprodukt 47a - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-{2-metoxy-3(2- (2-trimetylsilanyl-etoxymetyl) -etoxy] -fenyl}-l- (2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-ΙΗ-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 92% z medziproduktu 7c' a 2-metoxy-3-[2-(2-trimetylsilanyl-etoxy) etoxy]-boritej kyseliny (Kania, Braganza, et al. , patentová prihláška Compounds and Pharmaceutical Compositions for Inhibiting Proteín Kinases, and Metods for Their Use, str.

146

52, riadok 10 až str. 53, riadok 26; a str. 59, riadok 16 až str. 60, riadok 4, U.S. doterajšia prihláška poradové č.

60/142,130, podaná 2.7.1999, tu uvedená ako odkaz), podobne ako pri syntéze medziproduktu 7d' . ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ

9,92 (s, IH) , 8,79 (s, IH) , 7,86-7,89 (m, IH), 7,79 (dd, IH,

J= 8,7, 1,5 Hz), 7,63 (d, IH, J= 8,7 Hz), 7,49-7,52 (m, IH) ,

7,28-7,31 (m, 3H), 7,19 (dd, IH, J= 8,4, 1,8 Hz), 7,15 (d, IH, J= 7,8 Hz), 5,82 (s, 2H) , 5,34 (s, 2H) , 3,86 (t, 2H, J= 8,4 Hz), 3,65 (t, 2.H, J= 8,1 Hz), 3,59 (s, 3H) , 0,92-1,02 (m, 4H) ,

0,02 (s, 9H), -0,03 (s, 9H) .

(b) Príklad 47 - 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]2-metoxy-fenol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 61% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 47a spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^XH NMR

(300	MHZ, DMSO-dg) δ	13,64 1	(s,	IH) ,	12,98 (s, IH) , 9,36 (s,
IH) ,	8,59 (s, IH), 7,68 (dd,	IH,	J =	8,4, 0,6 Hz), 7,60 (br s,
2H) ,	7,59 (dd, IH, J	= 8,4,	1,5	Hz)	, 7,18-7,22 (m, 2H), 7,03
(t,	IH, J= 7,8 Hz),	6,83-6,	92	(m,	2H) , 3,46 (s, 3H) . Anál.
(c₂₁h	_1οΝ₄Ο₂·1,Ο h₂o) C,	H, N.	MS	(ES)	[m+H]/z vypočítané 357,

zistené 357; [m-H]/z vypočítané 355, zistené 355.

Príklad 48: 3 -(lH-benzimidazol-2-yl]-5 -(IH-indol-4-yl)-1Hindazol

2>wu&<a («>*)

Vbows ** tJrrtuttTHF.-TÍ'C

2)B(CM»)»

VeoMS

4»

147

(Ρκ,ρμΜ .Ν»,όο* Kj&MtOH'benwi rwtiff, 19 h (a) Medziprodukt 48a- 4-bróm-(terc.butyl-dimetyl-silanyl)-1Hindol:

Hydrid sodný (60% disperzia v minerálnom oleji, 1,84 g, 46 mmol) sa premyje hexanmi a potom sa mieša v THF (3 0 ml) pod atmosférou argónu pri teplote 0 °C. Pomaly sa pridá 4brómoindol (3,0 g, 15,3 mmol) v THF (10 ml) a reakčná zmes sa mieša 1 hodinu za ohriatia na teplotu miestnosti. Pridá sa terc.butyl-dimetylsilylchlorid (3,5 g, 23 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 16 hodín predtým, ako sa nariedi éterom (100 ml) a pomaly utlmí H₂0. Organické látky sa separujú a premyjú sa solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (5% éter/hexany) vedie na zisk 4,28 g (90%) medziproduktu 48a vo forme bielej pevnej látky. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,44 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,27 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,22 (d, 1H, J= 3,3 Hz), 7,00 (t, 1H, J= 8,1 Hz), 6,67 (dd, 1H, J= 3,3, 0,9 Hz), 0,92 (s, 9H) , 0,60 (s, 6H) . Anál. (Ci₄H₂₀BrNSi) C, H, N.

(b) Medziprodukt 48b - Kyselina 1-(terc.butyl-dimetylsilanyl)-lH-indole-4-boritá:

Medziprodukt 48a (2,22 9,7,16 mmol) sa mieša v suchom THF (15 ml) pri teplote —78 °C. Pomaly sa pridá n-butyllítium (2,5

148

M v hexanoch, 3,45 ml, 8,6 mmol). Reakčná zmes sa mieša počas 20 minút predtým, ako sa prenesie kanylou do banky obsahujúcej trimetylboritan (8,0 ml, 72 mmol) v suchom THF (10 ml) pri teplote —78 °C. Reakčná zmes sa mieša počas 30 minút pri teplote —78 °C a potom 3. hodiny za ohriatia na teplotu miestnosti. Reakcia sa utlmí H₂0 a reakčná zmes sa extrahuje éterom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (33% etylacetát/hexany) vedie na zisk 1,28 g (65%) medziproduktu 48b vo forme bielej peny. ^XH NMR (300 MHz, DMSOd₆wD₂0) δ 7,55 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,45 (d, 1H, J=8,4 Hz), 7,28 (s, 1H) , 7,03-7,09 (m, 1H) , 6,96 (s, 1H) , 0,84 (s, 9H) , 0,57 (s, 6H) . Anál. (Ci₄H₂₂BNO₂Si - 0,9 H₂0) C, H, N.

(c) Medziprodukt 48c - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-[1(terc.butyl-dimetyl-silanyl)-lH-indol-4-yl]-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 95% z medziproduktu 7c' a medziproduktu 48b podobne ako pri syntéze medziproduktu 7ď . ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,90 (s, 1H) , 8,96 (d, 1H, J= 0,9 Hz), 7,84-7,90 (m, 2H), 7,69 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,48-7,53 (m, 2H), 7,23-7,33 (m, 5H), 6,82 (d, 1H, J= 3,3 Hz),

5,84 (s, 2H) , 3,67 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,96 (s, 9H) , 0,94 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,65 (s, 6H) , -0,03 (s, 9H) . Anál. (C₂₂H₄₃N₅OSi₂) C, H, N.

(d) Príklad 48 - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(lH-indol-4-yl)lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 79% SEM,TBDMSodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 48c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz,

149

DMSO-d₆) Ô 13,66 (s, 1H) , 12,97 (s, 1H) , 11,25 (s, 1H) , 8,78 (s, 1H) , 7,68-7,81 (m, 3H) , 7,51 (d, 1H, J=7,2 Hz), 7,42-7,46 (m, 2H) , 7,14-7,26 (m, 4H) , 6,59 (t, 1H, J= 2,1Hz). Anál.

(C₂₂H₁₅N₅*0,3 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 350, zistené 350; [m-H)/z vypočítané 348, zistené 348.

Príklad 49: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-2,4difluór-fenol

1) n-lMA THF.-7B “C

(a) Medziprodukt 49a - [2-(2,4-difluór-fenoxymetoxy)-etyl]trimetyl-silan:

2,4-difluór-fenol (6,0 g, 46,1 mmol) a DIEA (9,64 ml, 55,3 mmol) sa mieša v suchom CH₂C1₂ (100 ml) pri teplote miestnosti. Pridá sa 2- (trimetylsilyl) etoxymetylchlorid (9,0 ml, 50,8 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 1 hodiny. Roztok sa premyje H₂0 a solankou, suší sa cez Na₂SO₄ a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli vedie na zisk 10,88 g (91%) titulnej zlúčeniny vo forme číreho oleja. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,11-7,20 (m, 1H) , 6,74-6,89 (m, 2H) , 5,20 (s, 2H) , 3,77-3,83 (m, 2H) , 0,93-0,99 (m, 2H) , 0,01 (s, 9H) .

(b) Medziprodukt 49b - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5{2,6-difluór3-[2-(2-trimetylsilanyl-etoxy-etoxy)-fenyl] -1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

150

Medziprodukt 4 9a (1,4 g, 5,38 mmol) sa mieša v suchom THF (16 ml) pod atmosférou argónu pri teplote —78 °C. Po kvapkách sa pridá n-butyllítium (2,5 M v hexanoch, 2,32 ml, 5,8 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 20 minút. Roztok sa potom prenesie do banky obsahujúcej suchý chlorid zinočnatý pod atmosférou argónu pri teplote miestnosti. Po 30 minútach sa pridá medziprodukt 7c' (320 mg, 0,65 mmol) a tetrakis(trifenylfosfin)palládium(0) (60 mg, 0,05 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote miestnosti počas 22 hodín. Roztok sa nariedi éterom a premyje sa H₂0, nasýteným NaHCO₃ a solankou. Organické látky sa sušia cez Na₂SO₄ a zahustia sa. vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (20% až 30% Et₂O/hexany) vedie na zisk 372 mg (92%) titulnej zlúčeniny vo

forme bielej pevnej	látky. ^XH	NMR (300 MHz,	CDC1₃) δ	9,	89 (S,
1H) ,	8,80	(s, 1H) ,	7,86-7,89	(m, 1H), 7,70	(dd, 1H,	J	= 8,7,
0,9	Hz) ,	7,58 (dd,	1H, J= 8,	7, 1,2 Hz),	7,49-7,53	(m	, 1H) ,
7,17	-7,31	(m, 3H) ,	6,90-6,97	(m, 1H) , 5,82	(S, 2H),	5,	28 (s,
2H) ,	3,86	(t, 2H, J	= 8,4 Hz),	3,67 (t, 2H,	J= 8,1 Hz),	0,92-
1,04	(m,	4H) , 0	,02 (s,	9H), -0,02	(s, 9H)		Anal.

(C₃₂H₄₀F₂N₄O₃Si₂*0,25 H₂0) C, H, N.

(c) Príklad 49 - 3-[-3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-2,4-difluór-fenol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 70% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 49b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^ľH NMR

(300	MHz,	DMSO-dg)	δ 13,75	(s, 1H),	13,00 (s,	1H) , 9,88	(s,
1H) ,	8,56	(s, 1H),	7,70-7,78	(m, 2H) ,	7,48-7,53	(m, 2H), 7,	17-
7,25	(m,	2H) , 6,99	-7,05 (m,	2H) . Anál	. (C₂₀Hi₂FN₄O*0,33 H₂0)	c,

H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 363, zistené 363; [m+H]/z vypočítané 361, zistené 361.

151

Príklad 50: 4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-3,5difluór-fenol a príklad 51: 2- [-3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-3,5-difluór-fenol

1)ινΒυΙζΤΗΡ,-78*Ό

2}ZnClj

TBAF (36%)/(40%)

(a) Medziprodukt 50a trimetyl-silan:

[2-(3,5-difluór-fenoxymetoxy)-etyl]Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 94% z 3,5difluórfenolu spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 49a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 6,55-6,60 (m, 2H) , 6,40-6,48 (m,

1H) , 5,18 (s, 2H) , 3,70-3,76 (m, 2H) , 0,92-0,98 (m, 2H) ,

0,01 (s, 9H).

152 (b) Zmes medziproduktov 50b a 50c - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)5-{2,6-difluór-4-(2- (2-trimetylsilanyl-etoxy-etoxy]-fenyl)-1(2-trimetylsilanyl)-etoxymetyl)-ΙΗ-indazolu a 3-(lHbenzimidazol-2-yl)-5{2,4-difluór-6-[2-(2-trimetylsilanyl-etoxyetoxy-fenyl}-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol:

Titulné zlúčeniny sa pripravia s výťažkom 52% vo forme neseparovateľnej zmesi z medziproduktu 50b podobne ako pri syntéze medziproduktu 49b. ’Ή NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,89 (s,

1H) , 8,44-8,75 (m, 1H) , 7,83-7,93 (m, 1H) , 7,45-7,69 (m, 3H) ,

7,26-7,39 (m, 2,5H), 6,58-6,88 (m, 1,5H), 5,81 (s, 1H) , 5,80 (s, 1H) , 5,26 (s, 1H) , 5,13 (s, 1H) , 3,57-3,82 (m, 4H) , 0,861,04 (m, 4H), -0,06-0,02 (m, 18H).

(c) Príklad 50 - 4-[-3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-3,5-difluór-fenol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 36% SEModstránením chrániacich skupín zo zmesi medziproduktov 50b a 50c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,73 (s, 1H) , 13,01 (s, 1H) , 10,50 (s, 1H) , 8,50 (s, 1H) , 7,70-7,74 (m, 2H) , 7,43-7,52 (m, 2H) ,

7,15-7,25 (m, 2H) , 6,62 (dd, 2H, J = 13,8, 1,5 Hz) . Anál.

(C₂oHi₂FN₄O*O, 7 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H] / vypočítané 363, zistené 363; [m-H]/ vypočítané 361, zistené 361.

(d) Príklad 51 - 2- [-3- (lH-benzimidazol-2-yl)-1H-indazol-5yl]-3,5-difluór-fenol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 40% SEModstránením chrániacich skupín zo smesi medziproduktov 50b a 50c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^ΧΗ

153

NMR (300 MHz, DMSO-d₆) Ô 13,65 (s, 1H) , 12,98 (s, 1H) , 10,39 (s, 1H) , 8,47 (s, 1H) , 7,66-7,72 (m, 2H) , 7,50 (d, 1H. J= 7,2

Hz), 7,40 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,14-7,24 (m, 2H), 6,73-6,80 (m,

1H) , 6,64 (d, 1H, J= 10,5 Hz). Anál. (C₂₀ H₁₂FN₄O*0,9 H₂0) C, H, !

N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 363, zistené 363; [m-H]/z vypočítané 361, zistené 361.

Príklad 52: 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4-chlór-pyridin-3-yl)IH-indazol

Medziprodukt 52a - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4-chlórpyridin-3-yl) -1- (2-trimetylsilanyl-etoxymetyl) -ΙΗ-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 88% z medziproduktu 25a a 4-chlór-3-jód-pyridínu podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,96 (s,

1H) , 8,77 (s, 1H) , 8,72 (s, 1H) , 8,53 (d, 1H, J = 5,4 Hz),

7,65-7,B9 (m, 1H) , 7,72 (dd, 1H, J= 8,7, 0,9 Hz), 7,61 (dd,

1H, J= 8,7, 1,5 Hz) ,7,50-7,53 (m, 1H) , 7,47 (d, 1H, J= 5,4

Hz), 7,28-7,35 (m, 2H), 5,84 (s, 2H) , 3,65 (t, 2H, J= 8,1 Hz),

0,95 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -Ó,03 (s, 9H).

(b) Príklad 52 - 3-(lH-benzimidazol-2-yl) -5-(4-chlór-pyridin3-yl)-ΙΗ-indazol:

154

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 54% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 52a spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR

(300	MHz, DMSO·	-d₆)	δ 13,81 (s,	1H) , 13,02 (s,	1H) ,	8,70	(s,
1H) ,	8,56-8,60	(m,	2H) , 8,22 (S,	1H) , 7,55-7,80	(m, 5H) ,	7,20
(d,	5H, J= 3,6	Hz)	. Anál. (C₂₂Hia	C1N₃*O,5 H₂0) C,	H, N.	, MS	(ES)

[m+H]/z vypočítané 346, zistené 346.

Príklad 53: 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl]-lH-indazol-5-yl]-4metyl- [3,4'] bipyridinyl

(a) Medziprodukt 53a - 5-(brómo-4-metyl-[3,4']bipyridinyl:

3,5-dibróm-4-metyl-pyridín (2,21 g, 8,8 mmol), kyselina 4pyridylboritá (1,08 g, 8,8 mmol) a fosforečnan draselný (2,8 g, 132 mmol) sa mieša v DMA (50 ml)/H₂0 (6 ml) v banke prefúknutej argónom. Pridá sa tetrakis(trifenylfosfín)palládium(O) (812 mg, 0,7 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote 92 °C pod atmosférou argónu počas 16 hodín. Roztok sa zahustí vo vákuu a zvyšok sa rozpustí v etylacetáte. Organické látky sa premyjú H₂0 a solankou, sušia sa (Na₂SO₄) , a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (40% až

155

50% etylacetát/hexany) vedie na zisk 1,14 g (60%) medziproduktu 53 vo forme bielej pevnej látky. ¹H NMR (300 MHz,

CDC1₃) δ 8,73 (dd, 2H, J = 4,5, 1,5 Hz), 8,72 (s, 1H), 8,32 (s,

1H) , 7,25 (dd, 2H, J = 4,5, 1,5 Hz), 2,35 (s, 3H) . Anál.

(CuH₉BFN₂) C, H, N.

(b) Medziprodukt 53b - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metyl[3,4']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 64% z medziproduktu 25a a medziproduktu 53a podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,21 (s, 1H) , 8,70-8,76 (m, 3H) , 8,61 (s, 1H) , 8,46 (s, 1H) , 7,85-7,88 (m, 1H) , 7,72 (dd., 1H, J= 8,7, 0,9Hz), 7,47-7,53 (m, 2H) , , 7,247,37 (m, 4H) , 5,84 (s, 2H) , 3,64 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 2,19 (s, 3H), 0,94 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H) .

(c) Príklad 53 - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-[3,4']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 71% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 53b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 13,79 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,71 (d, 2H, J= 4,8 Hz), 8,55 (S, 1H), 8,51 (s, 1H), 8,47 (s, 1H), 7,78 (d, 1H, J=

8,7 Hz), 7,52-7,58 (m, 5H) , 7,18-7,21 (m, 2H) , 2,17 (s, 3H) .

Anál. (C₂5H₁₈N₆»0,75 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané

403, zistené 403; (m-H]/z vypočítané 401, zistené 401.

156

Príklad 54: 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]1,2,3,4,4a,8a-hexahydro-[1,7]naftyridín

1)LDA,Tŕ».-7#*C

(a) Medziprodukt 54a

3- (3,5-dibróm-pyridin-4-yl)-propylamín

LDA sa pripraví pridaním n-butyllítia (2,5 M v hexanoch,

6,8 ml, 17,0 mmol) do roztoku diizopropylamínu (2,5 ml, 17,8 mmol) v THF (40 ml) pri teplote —20°C. Po 10 minútach sa roztok ochladí na teplotu -78 °C. Po kvapkách sa pridá . 3,5di'brómopyridín (3,84 g, 16,2 mmol) v THF (25 ml) a reakčná zmes sa mieša počas 30 minút. Pridá sa l-(3-brómopropyl)2,2,5,5-tetrametyl-l-aza-2,5-disilacyklopentát (5 g, 17,8 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 1 hodiny pri teplote 78 °C a potom počas 1 hodiny za ohriatia na teplotu 0 °C. Reakcia sa utlmí nasýteným roztokom NH₄C1, reakčná zmes sa alkalizuje nasýteným NaHCO₃ a extrahuje sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (15% MeOH/CHCl₃) vedie na zisk 2,72 g (54%) medziproduktu 54a vo forme svetlo hnedého oleja. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,55 (d,

2H) , 2,72-3,05 (m, 6H) , 1,70-1,77 (m, 2H) .

157 (b) Medziprodukt 54b - Kyselina 2 -trimetylsilanyletansulfonová, [3-(3,5-dibróm-pyridin-4-yl)-propyl]-amid:

Medziprodukt 54a (2,7 g, 9,2 mmol) sa mieša s trietylamínom (1,92 ml, 13,8 minol) v suchom DMF (2 0 ml) pri teplote 0 °C. Pomaly sa pridá 2-trimetylsilanyl-etanesulfonylchlorid, SESCl, (pozri Weinreb et al. , Tet. Lett. 27, 19, 1986, 2099-2102) (1,99, 9,5 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 1,5 hodín pri teplote 0 °C. Reakčná zmes sa nariedi H₂0 a extrahuje sa éterom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (33% etylacetát/hexany) vedie na zisk 2,37 g (56%) medziproduktu 54b vo forme bielej pevnej látky. NMR (300

MHz, CDC1₃) δ 8,58 (s, 2H) , 4,36 (t, 1H, J= 6,3 Hz), 3,26 (q,

2H, J= 6,3 Hz), 2,93-3,06 (m, 4H) , 1,81-1,89 (m, 2H) , 1,001,07 (m, 2H) , 0,07 (s, 9H) . Anal. (Ci3H₂₂Br₂N₂O₂SSi) C, H, N, S.

(c) Medziprodukt 54c - 5-bróm-l-(2-trimetylsilanyletanesulfonyl)-1,2,3,4-tetrahydro-[1,7]naftyridín:

Medziprodukt 54b (860 mg, 1,88 mmol) a uhličitan draselný (390 mg, 2,82 mmol) sa mieša v suchom toluéne (15 ml) v banke prefúknutej argónom. Pridá sa tetrakis(trifenylfosfin)palládium (0) (218 mg, 0,19 mmol) a reakčná zmes sa mieša pod atmosférou argónu pri teplote 102 °C počas 48 hodín. Reakčná zmes sa nariedi etylacetátom a premyje sa solankou, suší sa (Na₂SO₄) a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (25% etylacetát/hexany) vedie na zisk 372 mg (52%) medziproduktu 54c vo forme voskovej bielej pevnej látky. ¹H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 8,70 (s, 1H), 8,42 (s, 1H) , 3,72-3,76 (m, 2H), 3,07-3,14 (m, 2H), 2,83 (t, 2H, J= 6,9 Hz), 2,07-2,12 (m,

158

2Η) , 1,04-1,11 (m, 2Η) , 0,05 (s, 9Η) . Anál. (Ci₃H₂₁BrN₂O₂SSi) C,

H, N.

(d) Medziprodukt 54d - 5-[3 -(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-1- (2- ¹ trimetylsilanyl-etanesulfonyl)-1,2,3,4,4a,8a-hexahydro[1,7]naftyridín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 51% z medziproduktu 25a a medziproduktu 54c podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,36 (s, 1H) ,

8,88 (s, 1H) , 8,64 (t, 1H, J = 0,9 Hz), 8,29 (s, 1H) , 3,823,86 (m, 1H) , 7,69 (dd, 1H, J = 8,7, 0,9 Hz), 7,50-7,52 (m,

1H) , 7,41 (dd, 1H, J = 8,7, 1,5 Hz), 7,26-7,33 (m, 2H) , 5,83 (s, 2H) , 3,80 (t, 2H, J= 5,7 Hz), 3,63 (t, 2H, J= 8,1 Hz),

3,13-3,20 (m, 2H) , 2,72 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 1,93-1,99 (m,

2H) , 1,10-1,16 (m, 2H) , 0,94 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 0,09 (s,

9H), -0,05 (s, 9H).

(e) Príklad 54 - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl] 1,2,3,4,4a,8a-hexahydro-[1,7]naftyridín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 64%' SEM,SESodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 54d spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 13,71 (s, 1H) , 13,00 (s, 1H) , 8,41 (s, 1H) , 7,82 (s, 1H), 7,69 (d, 2H, J= 8,7Hz), 7,63 (s, 1H), 7,50 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,44 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,16-7,22 (m, 2H) , 6,11 (s, 1H) , 3,23 (br s, 2H) , 2,55 (t, 2H, J= 6,0 Hz), 1,68-1,73 (m, 2H) . Anál. (C₂₂H_1SN₆*O, 45 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 366, zistené 366.

159

Príklad 55: N-{4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl] -

(a) Medziprodukt 55a- N-(4-bróm-izochinolin-8-yl) nikotínamid:

8-amíno-4-bróm-izochinolín (328 mg, 1,47 mmol), trietylamín (820 pl,5,9 mmol) a DMAP (10 mg) sa mieša v CH₂C1₂ (50 ml). Pridá sa nikotínoylchlorid, hydrochlorid (395 mg, 2,2 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote spätného toku počas 18 hodín. Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (3% MeOH/etylacetát) za zisku 272 mg (56%) medziproduktu 55a vo forme bielej pevnej látky. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,95 (s, 1H) , 9,46 (s, 1H) , 9,25 (d, 1H, J = 1,5 Hz), 8,81 (dd, 2H, J = 4,8, 1,5 Hz), 8,40-8,45 (m, 1H) , 7,92-8,06 (m, 3H) , 7,597,64 (m, 1H) . Anál. (C₁₅Hi₀BrN₃O) C, H, N.

160 (b) Medziprodukt 55b - N-(4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-ethyoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolin-8yl}-nikotínamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 76% z medziproduktu 25a a medziproduktu 55a podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,27 (s, 1H) , 9,48 (s, 1H) , 9,29 (d, 1H, J = 1,8 Hz), 8,83-8,88 (m, 2H) , 8,79 (s, 1H), 8,58 (s, 1H), 8,36 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 8,02 (d, 1H, J = 6,9 Hz), 7,73-7,81 (m, 3H), 7,58-7,65 (m, 2H), 7,477,53 (m, 2H), 7,24-7,29 (m, 2H), 5,86 (s, 2H), 3,67 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,96 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -0,04 (s, 9H).

(c) Príklad 55 - N-(4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-izochinolin-8-yl}-nikotínamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 78% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 55b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,85 (s, 1H) , 13,04 (s, 1H) , 10,98 (s,

1H) ,	9,54	(s,	1H) ,	9,30	(d,	2H, J =	1,8 Hz), 8,83 (dd, 1H,	J =
4,8,	1,8	Hz) ,	8,65	(s,	1H) ,	8,59 (	s, 1H) , 8,45-8,50 (m,	4H) ,
7,52-	-7,66	(m,	4H) ,	7,18	(br	s, 2H).	Anál. (C₂₉H₁₉N₇O*0,5 H₂0	) c,

H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 482, zistené 482.

161

Príklad 56: N-{4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]izochinolin-8-yl}-acetamid

1) MjO. OtEA, CHC^ t3*C,1lh

2)«*ί*^Ο«ΐ0Μ75ΤΪ «Μ»)

(a) Medziprodukt 56a- N-(4-brómo-izochinolin-8-yl)-acetamid:

8-amíno-4-bróm-izochinolín (300 mg, 1,35 mmol), DIEA (0,94 ml, 5,3 8 mmól) a anhydrid kyseliny octovej (2 55 μΐ, 2,7 mmol) sa mieša v chloroforme (20 ml) pri teplote spätného toku počas 16 hodín. Roztok sa premyje H₂0 a solankou, suší sa (Na₂SO₄) a zahustí sa vo vákuu. Zvyšok sa mieša v etanole (6 ml) s HOAc (2 ml) pri teplote 72 °C počas 20 hodín. Roztok sa nechá vychladnúť a nariedi sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú IN NaOH a solankou, sušia sa (MgSO₄) a zahustia sa· vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (etylacetát) vedie na zisk 232 mg (65%) medziproduktu 56a vo forme bielej pevnej látky. ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,31 (s, 1H) , 9,47 (s,

1H) , 8,77 (s, 1H) , 7,90-7,97 (m, 3H) , 2,21 (s, 3H) . Anál.

(CnHsBrNjO) C, H, N.

(b) Medziprodukt 56b - N-(4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-ethyoxymetyl)-lH-indazol-5-yl] -izochinolin-8yl}-acetamid:

162

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 80% z medziproduktu 25a a medziproduktu 56a podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,39 (s, 1H) ,

9,46 (s, 1H) , 8,76 (s, 1H) , 8,53 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 7,91 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,89 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,62-7,.,72 (m, 3H), 7,48-7,57 (m, 3H) , 7,24-7,28 (m, 1H) , 5,83 (s, 2H) , 3,65 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 2,35 (s, 3H) , 0,95 (t, 2H, J=8,l Hz), 0,04 (s, 9H).

(c) Príklad 56 - N-{4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)lH-indazol-5yl]-izochinolin-8-yl}-acetamid:

Titulná zlúčenina sa' pripraví s výťažkom 68% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 56b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^XH NMR (300 MHz,

DMSO-d₆) Ô 13,84 (s, 1H) , 13,03 (s, 1H) , 10,34 (s, 1H) , 9,56 (s, 1H), 8,61 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 7,82-7,89 (m, 2H) , 7,74 (t, 1H, J= 7,2 Hz), 7,59-7,66 (m, 3H) , 7,51 (d, 1H, J= 7,2

Hz), 7,13-7,21 (m, 2H) , 2,25 (s, 3H) . Anál. (C₂₅H₁₀N₆O· 0,4 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 419, zistené 419.

Príklad 57: N-{4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)lH-indazol-5-yl]izochinolin-8-yl}-benzyl-amín

57»

163

(a) Medziprodukt 57a

Benzyl-(4-bróm-izochinolin-8-yl)-amín:

8-amíno-4-bróm-izochinolín (220 mg, 0,99 mmol) a benzaldehyd (110 μΐ, 1,1 mmol) sa mieša v etanole (15 ml)/H0Ac (0,2 ml) pri teplote spätného toku počas 24 hodín. Reakčná zmes sa ochladí na teplotu 0 °C a po častiach sa pridá kyanbórohydrid sodný (622 mg, 9,9 mmol) . Po miešaní počas 1 hodiny sa reakčná zmes nariedi H₂0 a extrahuje sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa (Na₂SO₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (33% etylacetát/hexany) vedie na zisk 136 mg (44%) medziproduktu 57a vo forme svetlo žltej pevnej látky. ¹H NMR (300 MHz, CDCI3)

δ 9	,61	(s, IH)	, 8,64	(s, IH) , 7,79 (t, IH, J = 5,7	Hz) ,	7,55
(t,	IH,	J= 8,1	Hz), 7,	28-7,42 (m, 4H), 7,15-7,24 (m,	2H) ,	6,58
(d,	IH,	J= 8,4	Hz), 4,	53 (d, 2H, J = 5,7 Hz). Anál.	(CieH₁₃	BrN₃)
c,	H, N

(b) Medziprodukt 57b- N-{4-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-ethyoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolin-8yl}-benzyl-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výéažkom 72% z medziproduktu 25a a medziproduktu 57a podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,02 (s, IH) ,

9,38 (s, IH) , 8,82 (s, IH) , 8,56 (s, IH) , 7,82 (d, IH, J=8,7

Hz), 7,73 (d, IH, J= 8,7 Hz), 7,63 (dd, IH, J= 8,4, 1,5 Hz),

7,24-7,52 (m,9H), 7,17 (d, IH, J= 8,4 Hz), 6,69 (d, IH, J= 7,5

164

Hz), 5,86 (S, 2H) , 5,23 (s, 1H) , 4,58 (d, 2H, J=4,5 Hz), 3,67 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,97 (t, 2H, J=8,l Hz), -0,03 (s, 9H) .

(c) Príklad 57 - N-{4- (3-(lH-benzimidazol-2-yl)lH-indazol-5yl]-izochinolin-8-yl}-benzyl-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 72% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 57b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,80 (s, 1H), 13,01 (s, 1H) , 9,71 (s, 1H) , 8,56 (s,

1H) ,	8,42	(s,	1H), 7,71-7,81	(m, 2H), 7,30-7,63 (m, 8H),
7,25	(m,	3H) ,	6,90 (d, 1H,	J= 7,2 Hz), 6,52 (d, 1H,
Hz) ,	4,57	(d,	2H, J= 5,4 Hz)	. Anál. (C₃oH₂2N₆*O , 5 H₂0) C,

MS (ES) [m+H]/z vypočítané 467, zistené 467.

Príklad 58: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl- [3,3'] bipyridinyl

sa*

H/VDMA

W*C,18h (54%)

(Ph/’Wd.N.zCOí,

HjOMtoxv* “C, 40 n

P7%)

165 (a) Medziprodukt 58a - 5-bróm-4-metyl-[3,3']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 54% z 3,5-dibróm4-metyl-pyridínu a kyseliny 3-pyridyl-borítej analogicky k syntéze medziproduktu 53a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,67-8,71 (m, 2H) , 8,59 (dd, 1H, J= 2,4, 0,6 Hz), 8,33 (s, 1H) , 7,627,66 (m, 1H) , 7,39-7,44 (m, 1H) , 2,35 (m, 3H) . Anál. (CuH₉BrN₂*0,1 H₂0) C, H, N.

(b) Medziprodukt 58b - 3-(3-.(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metyl[3,3']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 37% z medziproduktu 25a a medziproduktu 58a analogicky k syntéze medziproduktu 41a. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,24 (s, 1H) ,

8,68-8,71 (m, 3H) , 8,61 (s, 1H) , 8,47 (s, 1H) , 7,85-7,88 (m,

1H), 7,70-7,78 (m, 2H), 7,42-7,53 (m, 3H) , 7,26-7,33 (m, 2H) ,

5,83 (s, 2H), 3,64 (t, 2H, J = 8,1 Hz), 2,19 (s, 3H), 0,95 (t,

2H, J= 8,1 Hz), -0,05 (s, 9H).

(c) Príklad 58- 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-[3,3']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 74% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 58b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,79 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,72 (d, 1H, J= 1,5 Hz), 8,65 (dd, 1H, J= 4,8, 1,5 Hz), 8,54 (s, 1H) , 8,52 (s, 1H) , 8,48 (s, 1H) , 7,96-8,00 (m, 1H) , 7,78 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,69 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 7,49-7,57 (m, 3H) , 7,17-7,23 (m, 2H) ,

2,16 (s, 3H) . Anál. (C₂₅Hi₈Ng«0,6 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 403, zistené 403.

166

Príklad 59: (E)-3 - {5-[3-(lH-benzitnidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-4-metyl-pyridin-3-yl}-prop-2-en-l-ol a príklad 60: (E)-3{5- [3- (lH-benzimidazol-2-yl) -lH-indazol-5-yl] -4-metyl-pyridin3 -yl}-propán-1-ol

(a) Medziprodukt 59a - 5-bróm-4-metyl-pyridin-3-karbaldehyd

3,5-dibróm-4-metyl-pyridín (3,8 g, 15,1 mmol) sa mieša v suchom THF (150 ml) pri teplote -100 °C (N₂/éter) pod atmosférou argónu. Po kvapkách sa pridá n-butyllítium (2,5 M v hexanoch, 62 ml, 15,4 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 25 minút. Pridá sa DMF (1,8 ml, 2 3,2 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 20 minút pri teplote -100 °C a potom počas 1 hodiny pri teplote -78 °C. Reakcia sa utlmí nasýteným roztokom NH₄C1 a extrahuje sa éterom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie

167 chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/ hexany) vedie na zisk 2,18 g (72%) medziproduktu 59a vo forme číreho oleja, ktorý pomaly tuhne. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,25 (s, 1H) ,

8,84 (s, 1H) , 8,83 (s, 1H) , 2,76 (s, 3H) . Anál. (C₇H₆BrNO) C, H, N.

(b) Medziprodukt 59b - Etylester kyseliny (E)-3-(5-bróm-4metyl-pyridin-3-yl)-akrylovej

Medziprodukt 59a (690 mg, 3,45 mmol), etylhydrogen- malonát (600 mg, 4,5 mmol) a piperidín (170 μ1,1,73 mmol) sa zahrievajú pri teplote spätného toku v pyridíne (5 ml) počas 27 hodín. Reakčná zmes sa zahustí vo vákuu a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/hexany) za zisku 560 mg (60%) medziproduktu 59b vo forme voskovej bielej pevnej látky. ¹H NMR

(300	mhz, cdci₃;	1 δ	8,65	(S, 1H), 8,57	(s, 1H)	, 7,87 (d,	1H, J=
15,9	Hz), 6,39	(d,	1H,	J= 15,9 Hz),	4,29 (q	, 2H, J= 7,	2 Hz) ,
2,50	(s, 3H), 1	,35	(t,	3H, J= 7,2 Hz)	. Anál.	(CnH₁₂BrNO₂)	C, H,

N.

(c) Medziprodukt 59c - Etylester kyseliny (E)-3-{5-[3-(1Hbenzimidazol-2-yl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1Hindazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-yl)-akrylovej

Titulná zlúčenina sa pripraví výťažkom 83% medziproduktu 25a a medziproduktu 59b podobne ako pri syntéze medziproduktu 41a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,00 (s, 1H) ,

8,74 (s, 1H) , 8,65 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 7,99 (d, 1H, J=15,S

Hz), 7,83-7,87 (m, 1H) , 7,71 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,50-7,53 (m,

1H) , 7,43 (dd, 1H, J = 8,7, 1,5 Hz), 7,27-7,32 (m, 2H) , 6,5( (d, 1H, J= 15,9 Hz), 5,84 (s, 2H) , 4,31 (q, 2H, J= 7,2 Hz),

3,65 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 2,36 (s, 3H) , 1,37 (t, 3H, J= 7,; Hz), 0,95 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -0,04' (s, 9H) .

168 (d) Medziprodukt 59d - (E)-3-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metylpyridin-3-yl)-prop-2-en-l-ol:

Roztok medziproduktu 59c (402 mg, 0,73 mmol) v éteri (10 ml) sa pridá po kvapkách do miešanej suspenzie ĽAH (180 mg, 4,74 mmol) v éteri (10 ml) pri teplote 0 °C. Reakčná zmes sa mieša počas 23 hodín za ohriatia na teplotu miestnosti. Reakcia sa utlmí vodou a extrahuje sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa cez Na₂SO₄ a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (50% to 100% etylacetát/hexany) vedie na zisk 72 mg (19%) medziproduktu 59d vo forme bielej peny (a potom 186 mg (50%) medziproduktu 59e) .

^XH NMR (300 MHz, CDCI3) Ô 9,99 (s, 1H) , 8,64	(s, 1H), 8,63	(s,
1H) ,	8,45 (s, 1H) , 7,83-7,87	(m, 1H), 7,69	(d, 1H, J=8,7	Hz) ,
7,50	-7,53 (m, 1H), 7,43 (dd,	1H, J=8,7, 1,5	Hz), 7,26-7,32	(m,
2H) ,	6,86 (d, 1H, J= 15,9	Hz), 6,33-6,41	(m, 1H) , 5,84	(s,
2H) ,	4,42 (br s, 2H) , 3,65	(t, 2H, J= 8,1	Hz) , 228 (s,	3H) ,
1,73	(br s, 1H), 0,95 (t, 2H,	J=8,1 Hz) , -0,04 (s, 9H) .
(e)	Medziprodukt 59e- (E)-3-	{5- [3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1	- (2-

trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl)-4-metyl-pyridin3-yl}-propan-l-ol

Pozri postup pri syntéze medziproduktu 59d, vyššie. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,17 (s, 1H) , 8,63 (s, 1H) , 8,40 (s, 2H) ,

7,83-7,87 (m, 1H) , 7,68 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,49-7,52 (m, 1H) , 7,43 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,26-7,31 (m, 2H) , 5,83 (s, 2H), 3,77 (t, 2H, J= 6,3 Hz), 3,65 (t, 2H, J=8,l Hz), 2,82 (t, 2H, J= 7,5 Hz), 224 (s, 3H) , 1,88-1,95 (m, 2H) , 1,74 (br

1H), 0,94 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -0,05 (s, 9H).

S,

169 (f) Príklad 59 - (E)-3-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-yl}-prop-2-en-l-ol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 50% SEModstránením chrániacich skupín medziproduktu 59d spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,78 (s, 1H), 13,02 (s, 1H), 8,63 (s, 1H), 8,43 (s,

1H) ,	8,35	(s	, 1H)	, 7,75 (d,	1H, J=8,7	Hz) ,	7,63	(br.a, 1H) ,
7,55	(br	s,	1H) ,	7,46 (dd,	1H, J=8,7,	1,5	Hz) ,	7,20 (br s,
2H) ,	6,83	(d,	1H,	J= 15,9 Hz)	, 6,37-6,48	(m,	1H) ,	4,99 (t, 1H,

J=5,4 Hz), 4,19 (s, 2H) , 2,23 (s, 3H) . Anál. (C23H19N5OO, 6 H₂0)

C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 382, zistené 382.

(g) Príklad 60- (E)-3-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol5-yl]-4-metyl-pyridin-3-yl}-propan-l-ol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 62% SEModstránením chrániacich skupín medziproduktu 59, spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,77 (s, 1H), 13,02 (s, 1H), 8,41 (s, 1H), 8,37 (s,

1H) ,	8,30 (s, 1H) , 7,73 (d,	1H, J=8,7 Hz), 7,67 (br.s, 1H) ,
7,52	(br s, 1H) ,	7,44 (dd,	1H, J=8,7, 1,5 Hz), 7,19	(br s,
2H) ,	4,57 (t, 1H,	J=5,1 Hz),	3,49 (q, 2H, J=6,0 Hz) , 2,	74 (t,
2H,	J = 7,8 Hz)	, 2,21 (s,	3H) , 1,69-1,79 (m, 2H) .	Anál.

(C₂₃H₂iN₅O.0,5 H₂0) C, H, N. MS (ES) (m+H]/z vypočítané 384, zistené 384.

170

Príklad 61: 5-[3-(lH-benzimidazol-2yl)-lH-indazol-5-yl]-4etyl- [3,4'] bipyridinyl

(a) Medziprodukt 61a - 3,5-dibróm-4-etyl-pyridín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 74% substitúciou jódetanu za jódmetan v syntéze 3,5-dibróm-4-metyl-pyridínu (pozri Gu, et al., Tet. Lett., 37, 15, 1996, ‘2565-2568). ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,49 (s, 2H) , 2,92 (q, 2H, J= 7,5 Hz), 1,12 (t, 3H, J= 7,5 Hz).

(b) Medziprodukt 61b- 5-(bróm-4-etyl-[3,4'] bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 51% z medziproduktu 61 a kyseliny 4-pyridylboritej podobne ako pri syntéze medziproduktu 53a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,71-8,74 (m, 3H) , 8,28 (s, 1H), 7,24 (dd, 2H, J= 4,5, 1,5 Hz), 2,70 (q, 2H, J=7,5 Hz), 1,10 (t, 3H, J=7,5 Hz). Anal. (Ci₂H₁₁BrN₂) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 263/265, zistené 263/265.

171 (c) Medziprodukt 61c - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-4-etyl[3,4]bipyridinyl:

Medziprodukt 61b (188 mg, 0,71 mmol), medziprodukt 25 (385 mg, 0,79 mmol) a fosforečnan draselný (226 mg, 1,06 mmol) sa mieša v DMA (6 ml)/H₂0 (0,8 ml) v banke prepláchnutej argónom. Pridá sa tetrakis(trifenylfosfin)palládium(0) (82 mg, 0,07 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote 92 °C pod atmosférou argónu počas 16 hodín. Roztok sa nariedi etylacetátom, premyje sa H₂0 a soiankou, suší sa cez Na₂SO₄ a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (75% až 100% etylacetát/hexany) vedie na zisk 232 mg (60%) medziproduktu 61c vo forme číreho oleja. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,18 (s,

1H) , 8,71-8,75 (m, 3H) , 8,57 (s, 1H) , 8,41 (s, 1H) , 7,84-7,87 (m, 1H), 7,71 (d, 1H, J= 8,0 Hz), 7,48-7,53 (m, 2H), 7,36 (dd, 2H, J= 4,5, 1,5 Hz), 7,26-7,32 (m, 2H) , 5,84 (s, 2H) , 3,65 (t,

I

2H, J=8,l Hz), 2,64 (q, 2H, J= 7,5 Hz), 0,94 (t, 2H, J=8,l

Hz), 0,77 (t, 3H, J=7,5Hz), -0,04 (s, 9H).

(d) Príklad 61 - 5-[3-(lH-benzimidazol-2yl)-lH-indazol-5-yl]4-etyl-[3,4']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 61% SEModstránením chrániacich skupín medziproduktu 61c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-ds) δ 13,79 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,71 (dd, 2H, J=4,5,

1,5 Hz), 8,51 (s, 2H) , 8,40 (s, 1H) , 7,78 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,68 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,49-7,56 (m, 4H) , 7,14-7,25 (m, 2H) , 2,59 (q, 2H, J=7,5 Hz), 0,69 (t, 3H, J=7,5 Hz). Anál.

(0₂₆Η₂οΝ₆·0,3 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H] /z vypočítané 417, zistené 417.

172

Príklad 62: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl- [2,3'] bipyridinyl

(a) Medziprodukt 62a - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-jód-1-(4metoxy-benzyl)-IH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 59% z medziproduktu 19d a fenylendiamínu podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c'. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,06 (s, IH) ,

8,91 (s, IH) , 7,70-7,78 (m, 31-1), 7,51 (dd, IH, J= 6,3, 2,1

Hz), 7,19-7,28 (m, 4H) , 6,88 (dd, 2H, J= 6,6, 2,1 Hz), 5,72 (s, 2H) , 3,69 (s, 3H) . Anál. (C₂₂H₁₇IN₄O) C, H, N.

(b) Medziprodukt 62b - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(4-metoxybenzyl )-5-(4,4,5,5 -tetrametyl[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-1Hindazol:

173

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 73% z medziproduktu 62, spôsobom analogickým na prípravu medziproduktu 19. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,03 (s, 1H) ,

8,93 (d, 1H, J=4,2 Hz) , 7,78-7,84 (m, 2H) , 7,73 (dd, 1H, J=

8,7, 0,9 Hz), 7,51 (d, 1H, J= 7,'2 Hz), 7,20-7,27 (m, 4H) , 6,87 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 5,74 (s, 2H), 3,68 (s, 3H), 1,34 (s, 12H).

Anál, (C28H29BN4O3) C, H, N.

(c) Medziprodukt 62c- 5'-bróm-4'-metyl-(2,3']bipyridinyl:

3,5-dibróm-4-metyl-pyridín (2,0 g, 7,8 mmol) a 2tributylstannanyl-pyridín (2,4 g, 6,5 mmol) sa mieša v dioxane (20 ml) v banke prepláchnutej argónom. Pridá sa tetrakis(trifenylfosfirin)palládium(0) (600 mg, 0,5 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote 100 °C počas 80 hodín. Roztok sa zahustí vo vákuu a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (30% to 50% etylacetát/hexany, dve prečistenia) za zisku 788 mg (49%) medziproduktu 82c vo forme bielej pevnej látky. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,72-8,75 (m, 1H) , 8,70 (s, 1H) , 8,46 (s, 1H) , 7,78-7,84 (m, 1H), 7,31-7,42 (m, 2H) , 2,42 (s, 3H) . Anál. (C_uH₉BrN₂) C, H, N.

(d) Medziprodukt 62d - 3 - [3 - (lH-benzimidazol-2-yl)-1(4-metoxy-benzyl)-1H-indazol-5-yl]-4-metyl-[2,3']bipyridinyl:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 76% z medziproduktu 62b a medziproduktu 62c podobne ako pri syntéze medziproduktu 61c. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,08 (s, 1H) ,

8,73 (d, 1H, J=4,2 Hz), 8,52-8,57 (m, 3H) , 7,92-7,98 (m, 2H) ,

7,68-7,72 (m, 2H) , 7,58 (dd, 1H, J=8,7, 1,5 Hz), 7,51 (d, 1H,

J= 7,2 Hz), 7,43-7,47 (m, 1H) , 7,36 (d, 2H, J=8,7 Hz), 7,177,23 (m, 2H) , 6,91 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 5,79 (s, 2H) , 3,70 (s,

3H) , 221 (a. 3H) . Anál. (C₃₃H₂6NgO) C, H, N.

174 (e) Príklad 62 - 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-[2,3']bipyridinyl:

Medziprodukt 62d (400 mg, 9,77 mmol) sa mieša v roztoku koncentrovanej H₂S0₄ (1 ml) a anizolu (1 ml) v TFA (8 ml) počas 48 hodín. Roztok sa zahustí na 3 ml vo vákuu a potom sa reakcia utlmí nasýteným roztokom NaHCO₃ a zmes sa extrahuje 4:1 zmesou etylacetát/THF. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa (MgSO₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (0,2% NH₄OH/6% až 10% MeOH/etylacetát) vedie na zisk 102 mg (33%) zlúčeniny príkladu 62 vo forme bielej pevnej látky. ^XH NMR (3 00 MHz, DMSO-d₆) δ 13,78 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,74 (d, 1H, J= 4,2 Hz), 8,57 (s, 1H) , 8,53 (s, 1H) , 7,51 (s, 1H) , 7,93-7,99 (m, 1H) , 7,77 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,70 (d, 2H, J= 7,8 Hz), 7,43-7,56 (m, 3H) , 7,20 (br s, 2H) , 2,23 (s, 3H) . Anál. (C₂₅H₁₈N₈· 0,5 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 403, zistené 403.

Príklad 63: l-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]3,4 -dihydro-2H- [1,7] naftyridín-1-yl}-etanón

175 (a) Medziprodukt 63a - 5-bróm-l,2,3,4-tetrahydro[1,7]naftyridín:

Medziprodukt 54c (1,16 g, 3,08 mmol) sa mieša s tetrabutylammóniumfluoridom, hydrátom (2,0 g, 7,65 mmol) v acetonitrile (16 ml) pri teplote 72 °C počas 18 hodín. Roztok sa nechá ochladit a nariedi sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú nasýteným roztokom NaHCO₃ a solankou, sušia sa (Na₂SO₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli vedie na zisk 524 mg (80%) medziproduktu 63a vo forme bielej pevnej látky. NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 7,96 (s,

1H) , 7,74 (s, 1H) , 4,00 (br s, 1H) , 3,28-3,33 (m, 2H) , 2,74 (q, 2H, J= 6,6 Hz), 1,92-2,01 (m, 2H) . Anál. (C₃H₉BrN₂) C, H,

N.

(b) Medziprodukt 63b - 1-(5-bróm-3,4-dihydro-2H-[1,7]naftyridin-1-yl)etanón:

Medziprodukt 63a (212 mg, 1,0 mmol), DIEA (1,4 ml, 8,0 mmol) a anhydrid kyseliny octovej (4,0 mmol) sa mieša v suchom chloroforme (10 ml) pri teplote 68 °C počas 40 hodín. Roztok sa premyje nasýteným roztokom NaHCO₃ a solankou, suší sa (Na₂SO₄) a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (70% etylacetát/hexany) vedie na zisk 242 mg (95%) medziproduktu 63b vo forme bielej pevnej látky. ^ΣΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,61 (br s, 1H) , 8,46 (s, 1H) , 3,79 (q, 2H, J= 6,0 Hz), 2,83 (t, 2H, J=6,9 Hz), 2,93 (s, 3H) , 2,01-2,08 (m,

2H) . Anál. (σ₁₀Η_χ1ΒΓΝ₂Ο) C, H, N.

(c) Medziprodukt 63c - 1-{5-(3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-3,4dihydro[1,7]naftyridin-1-y1}-etanón:

176

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 83% z medziproduktu 25a a medziproduktu 63c podobne ako pri syntéze medziproduktu 61c. ³Η NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,06 (s, 1H) , 8,68 (s, 1H) , 8,55 (br 8,1H), 8,42 (s, 1H), 7,84-7,87 (m, 1H) , 7,71 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,50-7,53 (m, 1H) , 7,46 (dd, 1H,

J=8,7,l,5 Hz), 7,27-7,32 (m, 2H) , 5,84 (s, 2H) , 3,84 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 3,64 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 2,70 (t, 2H, J = 6,6 Hz), 2,36 (s, 3H) , 1,87-1,93 (m, 2H) , 0,94 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 0,04 (s, 9H) . Anál. (C₂₄H₂₀N₆O₂SÍ»0,5 H₂0) C, H, N.

(d) Príklad 63 - 1-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-3,4-dihydro-2H-[1,7]naftyridin-l-yl}-etanón:

f

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 65% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 63c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) Ô 13,77 (s, 1H), 13,02 (s, 1H) , 8,78 (s, 1H), 8,46 (br s, 1H) , 8,27 (s, 1H) , 7,75 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,67 (br s, 1H) , 7,49 (dd, 2H, J=5,7, 1,5 Hz), 7,20 (br s, 2H) , 3,74 (1, 2H, J= 6,3 Hz), 2,63 (t, 2H, J= 6,3 Hz), 2,27 (s, 3H) , 1,791,85 (m, 2H) . Anál. (C₂₄H₂oN,0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 409, zistené 409.

Príklad 64: 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-nikotínamid.

1)lvBull,THF.-100*C

8)TMS-WCO ‘NH, «4« (9%)

(P»bP>«W ,K»PO₄Η,ΟΟΜΧ M*C, (75%)

177

(a) Medziprodukt 64a - 3-bróm-4-metyl-5-karboxamoyl-pyridín:

Roztok 3,5-dibrómpyridínu (3g, 11,9 mmol) v 150 ml suchého

THF sa ochladí na teplotu -100 °C (kúpeľ éter-N₂) a po kvapkách sa počas 3 minút pridá BuLi (5 ml 2,5 M roztoku v hexanoch,

12,5 mmol) . Po 2 ďalších minútach sa pridá k žltému aniónu trimetylsilylizokyanatan (3,8 ml 85% roztoku, 3,24 g, 24 mmol) a zmes sa mieša počas 30 minút pri teplote -100 °C, 30 minút pri teplote -60 °C a potom sa nechá ohriať na 25 °C a mieša sa počas 12 hodín. Reakčná zmes sa naleje do nasýteného vodného roztoku NH₄C1, extrahuje sa etylacetátom, organické vrstvy sa premyjú solankou, sušia sa (Na₂SO₄) a zahustia sa. Prečistením zvyšku chromatografiou na oxide kremičitom (5:1 až 10:1 hexany-etylacetát, potom 100% etylacetát) sa získa 236 mg (9%) amidu 64a. Rf =0,09 (50% etylacetát v hexanoch); ¹H NMR (300

MHz, CDCI3) δ 8,70 (bs, 1H), 8,54 (bs, 1H), 5,98 (bs, 1H), 5,93 (bs, 1H) . (LCMS: M⁺ 215) .

(b) Medziprodukt 64b - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metylnikotínamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 75% z medziproduktu 25a a medziproduktu 64, podobne ako medziprodukt 61c. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,18 (s, 1H) , 8,66 (s, 1H) , 8,64 (s, 1H) , 8,59 (s, 1H) , 7,82-7,86 (m, 1H) , 7,70 (d, 1H,

J=8,4 Hz), 7,48-7,52 (m, 1H) , 7,42 (dd, 1H, J=8,4, 1,5 Hz), 7,26-7,31 (m, 2H) , 6,13 (br s, 1H) , 5,91 (br s, 1H) , 5,83 (s,

178

2Η) , 3,64 (t, 2Η, J= 8,1 Hz), 2,40 (s, 3H) , 0,94 (t, 2H, J=

8,1 Hz), -0,04 (s, 9H).

(c) Príklad 64- 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-nikotínamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 77% SEModstránením chrániacich skupín medziproduktu 64b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,80 (s, 1H) , 13,03 (s, 1H) , 8,54 (s, 1H) , 8,50 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H) , 8,05 (s, 1H) , 7,76 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,68 (br s, 2H) , 7,44-7,52 (m, 2H) , 7,16-7,22 (m,

2H) , 2,29 (s, 3H) . Anál. (C₂₁Hi₆N₆0*0,55 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 369, zistené 369.

Príklad 65: 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-[5-(lH-imidazol-4-yl)4-metyl-pyridin-3-yl]-1H-indazol

(a) Medziprodukt 65a 3-bróm-4-metyl-5-lH-imidazol-4-yl-pyridín

Do miešanej suspenzie tosylmetylizokyanidu (1,02 g, 5,25 mmol) a 3-bróm-4-metyl- 5 -formylpyridínu (1,09,5 mmol) v 5 ml

170 suchého etanolu sa pridá NaCN vo forme jemného prášku (25mg, 0,5 mmol) pri teplote 2 5 °C. Po 3 0 minútach sa reakčná zmes zahustí na olej. Získaný olej sa pridá do nasýteného roztoku amoniaku v suchom metanole v uzavrenej skúmavke a zmes sa zahrieva pri teplote 100 °C počas 24 hodín. Ochladením, zahustením, a potom chromatografiou na oxide kremičitom (10:1 etylacetát-hexany), sa získa 167 mg (14%) zlúčeniny 65a vo forme bielej pevnej látky. NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 12,45 (bs, 1H) , 8,71 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 7,83 (s, 1H) , 7,52 (s, 1H) , 2,56 (s, 3H) .

(b) Medziprodukt 65b - 3-bróm-4-metyl-5-(1-(2-trimetylsilanyletoxymetyl) -lH-imidazol-4-yl]-pyridín:

Medziprodukt 65a sa chráni SEM s výťažkom 45% spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 49a. ^XH NMR (300 MHz,

CDC1₃) δ 8,67	(s,	1H)	, 8,60 (s, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,21 (d, 1H,
J= 1,2 Hz), 5	,33	(s,	2H), 3,56 (t, 2H, J= 8,1 Hz), 2,58
(S, 3H), 0,	94	(t,	2H, J=8,l Hz), 0,00 (s, 9H). Anál.
(Ci5H₂₂BrN₃OSi)	c,	H,	N.

(c) Medziprodukt 65c - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-{5-[1-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-lH-imidazol-4-yl]-4-metyl-pyridin3-yl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1H-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 83% z medziproduktu 25a a medziproduktu 65b podobne ako pri syntéze

medziproduktu	61c.	^XH NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 10,09 (s, 1H) ,
8,85 (s, 1H) ,	7,70	(s,	1H) , 8,50	(s,	1H) , 7,84-7,88 (m, 1H) ,
7,68-7,74 (m,	2H) ,	7,47-7,52 (m,	2H) ,	7,26-7,31 (m, 3H), 5,84
(s, 2H), 5,36	(s,	2H) ,	3,55-3,68	(m,	4H) , 2,41 (s, 3H) , 0,92-

0,98 (m, 4H), -0,01 (s, 9H), -0,05 (s, 9H).

180 (d) Príklad 65- 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-[5-(1H-imidazol-4 yl)-4-metyl-pyridin-3-yl]-1H-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 43% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 65c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ¹H NMR (300 MHz,

DMSO	-d₆)	δ 13,78 (	s, 1H)	, 13,02	(s,	1H) , 12,38 (S, 1H) ,	8,83
(s,	1H) ,	8,47 (s,	1H) ,	8,35	(s,	1H)	, 7,83	(d, 1H, J=0,9	Hz) ,
7,76	(d,	1H, J=8,4	Hz) ,	8,69	(d,	1H,	J= 7,5	Hz), 7,47-7,51	(m,
3H) ,	7,16	i-7,22 (m,	2H) ,	2,37	(s,	3H)	. Anál.	(C₂₃H₁₇N₇ .2,5	H₂0)

C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 392, zistené 392.

Príklad 66: 4-[3-(4,5,6,7-tetrahydro-lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-izochinolín

(a) Medziprodukt 66a- 5-jód-3-(4,5,6,7-tetrahydro-lHbenzimidazol-2-yl)-ΙΗ-indazol:

Roztok medziproduktu 7b' (500 mg, 1,24 mmol), 1,2cyklohexanediónu (14 6 mg, 1,3 mmol) a octanu amónneho (5 75 mg, 7,44 mmol) v etanole (12 ml) sa mieša pri teplote spätného toku počas 24 hodín. Reakčná zmes sa nariedi etylacetátom a premyje sa solankou, suší sa (Na₂SO₄) a zahustí sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (20% etylacetát/hexany) vedie na zisk 366 mg (60%) titulnej

181 zlúčeniny vo forme svetlo žltej peny. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,47 (br s, 1H), 8,88 (d, 1H, J=0,9 Hz), 7,69 (dd, 1H,

J=8,7,l,5 Hz), 7,31 (d, 1H, J=8,7 Hz), 5,67 (s, 2H) , 3,52 (t,

2H, J= 8,1 Hz), 2,70 (br s, 4H), 1,89 (br s, 4H) , 0,88 (t, 2H, J = 8,1 Hz), -0,06 (s, 9H) . Anál. (C₂₀H₂7lN₄OSi) C, H, N.

(b) Medziprodukt 66b- 4- [3- (4,5,6,7-tetrahydro-1Hbenzimidazol-2-yl)-1-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1Hindazol-5-yl]-izochinolín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 75% z medziproduktu 66 a kyseliny izochinolín-4-boritej (EP 976747) podobne ako pri syntéze medziproduktu 7ď . ¹H NMR (3 00 MHz,

CDC1₃	) δ 9,57	(br s	, 1H)	, 9,28 (s,	1H)	, 8,67 (s,	1H) ,	8,58	(s,
1H) ,	8,04-8,08	(m,	1H) ,	7,85-7,89	(s,	1H), 7,57	-7,70	(m,	4H) ,
5,80	(s, 2H),	3,63	(t,	2H, J= 8,1	Hz)	, 2,7 (br	s, 4	H) ,	1,86

(br s, 4 H), 0,96 (t, 2H, J= 8,1 Hz), -0,03 (s, 9H) .

(c) Príklad 66- 4-[3-(4,5,6,7-tetrahydro-lH-benzimidazol-2yl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 64% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 66b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^XH NMR (300 MHz,

DMSO-d₆) δ 13,31 (s, 1H) , 12,25 (s, 1H) , 9,36 (s, 1H) , 8,49 (s, 1H) , 8,43 (s, 1H) , 8,24 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,69-7,85 (m, 4H) , 7,53 (dd, 1H, J=8,7, 1,8 Hz), 2,50 (br s, 4H) , 1,73 (br s,

4H) . Anál. (C₂₃H₁₉N₅ · 0,2 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 366, zistené 366.

182

Príklad 67: 4 -[3 -(4-metyl-5-fenvl-IH-imidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-izochinolín

(a) Medziprodukt 67a - 5-jód-1-(4-metoxy-benzyl)-3-(4-metyl-5fenyl-lH-imidazol-2-yl)-ΙΗ-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví z medziproduktu 19d a 1fenyl-1,2-propandionu podobne ako medziprodukt 66a. '‘'H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,87 (br s, 0,5H), 9,71 (br s, 0,5H), 8,98 (br s, 0,5H), 8,92 (br s, 0,5H), 7,84 (d, IH, J= 7,2 Hz), 7,61 (dd,

IH, J = 8,7, 1,5 Hz), 7,44-7,53 (m, 3H) , 7,31 (d, IH, J=7,5 Hz), 7,11 (app d, 3H, J=8,7 Hz), 6,81 (dd, 2H, J=6,6, 1,8 Hz) , 5,49 (s, 2H) , 3,77 (s, 3H) , 2,55 (s, 3H) . Anál. (C₂₅H₂₁IN₄O) C, H, N.

(b) Medziprodukt 67b- 4-[1-(4-metoxy-benzyl)-3-(4-metyl-5fenyl-lH-imidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-izochinolín

Titulná zlúčenina sa pripraví s výéažkom 75% z medziproduktu 67a a kyseliny izochinolín-4-boritej (EP 976747) spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 7ď . ¹H NMR (300 MHz, CDCI3) δ 9,97 (br s, 0,5H), 9,85 (br s, 0,5H), 9,28 (s,

IH), 8,76 (br s, 0,5H), 8,70 (br s, 0,5H), 8,59 (s, IH), 8,038,10 (m, IH) , 7,90 (br s, IH), 7,75 (br s, IH) , 7,37-7,68 (m,

183

8Η) , 7,20-7,26 (m, 2Η) , 6,86 (dd, 2Η, J= 6,6, 1,5 Hz), 5,60 (s, 2H), 3,78 (s, 3H), 2,54 (br s, 1,5H), 2,49 (br s, 1,5H).

(c) Príklad 67 - 4 -[3 -(4-metyl-5-fenyl-1H-imidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-izochinolín: i

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 15% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 67b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 12,67 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 9,38 (s, 1H) , 8,57 (s, 1H) , 8,53 (s, 1H), 8,25 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,667,91 (m, 6H), 7,57 (dd, 1H, J=8,7, 1,5 Hz), 7,307,33 (m, 2H) , 7,15-7,18 (m, 1H) , 2,50 (s, 3H) . Anál. (C₂gHi₉Ng*0,5 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 402, zistené 402.

Príklad 68: Dimetyl-{2-[5-(4-metyl-[3,4'] bipyridinyl-5-yl]-1Hindazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl]-amín

184

(a) Medziprodukt 68a - {2-[5-jód-l-(4-metoxy-benzyl)-1Hindazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl}-metanol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 40% z medziproduktu 19d a medziproduktu 23b podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c'. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,02 (s, 0,5H), 12,87 (s, 0,5H), 8,91 (s, 1H), 7,64-7,77 (m, 2,5H), 7,37 (dd,

0,5H, J= 7,5, 1,5 Hz), 7,18-7,27 (m, 4H) , 6,88	(d,	2H, J= 8,4
Hz), 5,73 (s, 1H) , 5,71	(S, 1H)‘,	5,14-5,24 (m,	1H)	, 5,03 (d,
1H, J=5,7 Hz), 4,86 (d,	1H, J=5,7	Hz), 3,69

(s, 3H).

(b) Medziprodukt 68b - {2-[5-jód-l-(4-metoxy-benzyl)-1Hindazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl)-dimetyl-amín:

Medziprodukt 68a (2,5 g,4,9 mmol) a DIEA (1,38 ml, 10 mmol) sa mieša v THF (90 ml) pri teplote 0 °C. Pridá sa metansulfonylchlorid (0,76 ml, 9,8 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 2,5 hodiny pri teplote 0 °C. Dimetylamín sa nechá prebublávať roztokom počas 1 minúty a reakčná zmes sa mieša počas 2 hodín za ohriatia na teplotu miestnosti. Roztok sa utlmí H₂0 a extrahuje sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú nasýteným roztokom NaHCO₃ a solankou, sušia sa (Na₂SO₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (0,2% NH₄OH/3% MeOH/etylacetát) vedie na zisk 2,56 g (97%) medziproduktu 68b vo forme bielej peny. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,07 (d, 1H, J= 0,9 Hz), 7,80 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,63

185 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,07-7,25 (m, 5H) , 6,85 (dd, 2H,

J=6,6, 1,8 Hz), 5,61 (s, 2H), 3,77 (app s, 5H), 2,33 (s, 6H).

(c) Medziprodukt 68c- {2-[1-(4-metoxy-benzyl)-5-(4,4,5,5tetrametyl-[1,3,2]dioxaborolan-2-yl)-lH-indazol-3-yl]-1Hbenzimidazol-4-ylmetyl}-dimetyl-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 62% z medziproduktu 68b podobne ako medziprodukt 19e. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,11 (s, 1H), 7,82 (dd, 2H, J=8,4, 0,9 Hz), 7,35 (dd, 1H, J=8,4,0,9 Hz), 7,16-7,21 (m, 4H) , 6,85 (dd, 2H, J= 6,9, 1,8 Hz), 5,64 (s, 2H) , 3,80 (br s, 2H) , 3,76 (s, 3H) , 2,35 (s, 6H), 1,37 (s, 12H).

(d) Medziprodukt 68d - Dimetyl-{2-[5-(4-metyl-[3,4']bipyridinyl-5-yl)-1- (4-metoxy-benzyl)-lH-indazol-3-yl]-1Hbenzimidazol-4-ylmetyl)-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 85% z medziproduktu 68c a medziproduktu 53a podobne ako pri syntéze medziproduktu 61c. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,69-8,75 (m, 4H) , 8,57 (s, 1H) , 8,43 (s, 1H) , 7,75 (d, 1H, J=8,l Hz), 7,46 (d,

1H, J=8,7 Hz), 7,34-7,40 (m, 3H), 7,25-7,28 (m, 1H), 7,19 (t,

1H, J=7,6 Hz), 7,08 (d, 1H, J=7,2 Hz), 6,89 (d, 2H, J= 8,7

Hz), 5,70 (s, 2H) , 3,79 (app a, 5H) , 2,34 (s, 6H) , 2,19 (s,

3H) .

(e) Príklad 68 - Dimetyl-.(2-[5-(4-metyl-[3,4 ' ] -bipyridinyl-5yl)-lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-ylmetyl)-amín

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 20% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 68d spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ^XH NMR

186 (300 MHz, DMSO-d₆) Ô 13,80 (s, IH) , 13,01 (s, IH) , 8,71 (dd,

2H, J=4,5, 1,5 Hz), 8,56 (br s, 2H) , 8,47 (s, IH) , 7,78 (d, IH, J= 8,7 Hz), 7,39-7,58 (m, 4H) , 7,17 (br s, 2H) , 3,76-3,99 (m, 2H) , 2,14-7,29 (m, 9H) . Anál. (Ο₂8Η₂₅Ν₇·1,5 H₂0) C, H, N. MS (ES) (m+H]/z vypočítané 460, zistené 460.

Príklad 69: (3-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridín-3-yl}-fenyl]-metanol

(a) Medziprodukt 69a- [3 -(5-bróm-4-metyl-pyridin-3-yl)- fenyl]metanol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 79% z 3,5-dibróm4-metyl-pyridínu a kyseliny 3-(hydroxymetyl)-fenyl-borítej podobne ako pri syntéze medziproduktu 53a. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,62 (s, IH) , 8,22 (s, IH) , 7,42-7,46 (m, 2H)7,29 (s, IH) , 7,16-7,20 (m, IH) , 4,76 (d, 2H, J=5,7 Hz), 2,48 (t, IH, J= 5,7 Hz), 2,32 (s, 3H) . Anál. (Ci₃H₁₂BrNO»0,2 H₂0) C, H,

N.

187 (b) Medziprodukt 69b - (3-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(4metoxy-benzyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-yl)-fenyl)metanol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 83% z medziproduktu 62b a medziproduktu 69a podobne ako pri syntéze

medziproduktu	61c.	^ΧΗ NMR (300 MHz,	CDC1₃)	Ô 10,39	(s,	1H) ,
8,69 (s, 1H) ,	8,45	(s, 1H) , 8,36 (s,	1H) ,	7,83-7,87	(m,	1H) ,
7,36-7,49 (m,	7H) ,	7,22-7,31 (m, 4H),	6,84	(d, 2H, J=	8,7	Hz) ,
5,60 (S, 2H) ,	4,79	(S, 2H) , 3,76 (S	, 3H) ,	, 2,51 (br	s,	1H) ,

2,11 (s, 3H).

(c) Príklad 69 - (3-{5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1H-indazol-5 yl]-4-metyl-pyridin-3-yl)-fenyl)-metanol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 41% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 69b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. NMR (300 MHz, DMSO-dg) Ô 13,79 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,49 (d, 2H, J= 6,3 Hz), 8,41 (s, 1H) , 7,76 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,34-7,69 (m, 7H) , 7,19-7,22 (m, 2H) , 5,25 (br s, 1H) , 4,58 (s, 2H) ,

2,15 (s, 3H) . Anál. (0₂7Η₂ιΝ₅0₂·1,2 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 432, zistené 432.

188

Príklad 70: N-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-3Hbenzimidazol- 5-yl]-metansulfonamid (a) Medziprodukt 70a- N-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl ) -1H-indazol- 3-yl]-3H-benzimidazol-5-yl}-metansulfonamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 89% z medziproduktu 19f a N-(3,4-diamínofenyl)metansulfonamidu (pozri Rajappa et al. , Indián J. Chem. Sect. B, 19, 7, 1980, 533-535) podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c' . ¹H NMR (300 MHz, MeOD-d₄) δ 9,26 (s, 1H) , 8,63 (s, 1H) , 8,49 (s, 1H), 8,20 (d, 1H, J= 7,8 Hz), 7,96 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,72-7,81 (m, 3H), 7,58-7,63 (m, 3H) , 7,35 (d, 2H, J=8,7 Hz), 7,16 (br s, 1H) ,

6,89 (d, 2H, J = 8,7 Hz), 5,76 (s, 2H), 3,75 (s, 3H), 2,93 (s, 3H) .

(b) Príklad 70- N-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-3Hbenzimidazol-5-yl]-metansulfonamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 48% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 70a spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,83 (s, 1H) , 13,04 (s, 1H) , 9,54 (br s, 1H) , 9,40 (S, 1H) , 8,60 (s, 1H) , 8,55 (s, 1H) , 8,27 (d, 1H, J= 8,7 Hz),

7,72-7,88 (m, 4H) , 7,63 (dd, 1H, J=8,7, 1,5 Hz), 7,54 (br s,

189

1Η) , 7,46 (s, 1H) , 7,07 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 2,91 (s, 3H) . Anál. (C₂₄H₁₈N₆O₂S· 1,05 H₂0) C, H, N, S. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 455, zistené 455.

Príklad 71: N-{2 - [5- (4-metyl - [3,4'] bipyridinyl -5-yl) - 1Hindazol-3-yl)-3H-benzimidazol-5-yl]-metansulfonamid

(a) Medziprodukt 71a- 1-(4-metoxy-benzyl)-5-(4-metyl[3,4']bipyridinyl-5-yl)-lH-indazol-3-karbaldehyd:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 76% z medziproduktu 19 a medziproduktu 53a podobne ako pri syntéze

medziproduktu 61c. ^XH	NMR	(300 1	MHz,	CDC1₃) δ	10,28 (s, 1H) ,
8,73	(dd, 2H, J= 4,5,	1,5	Hz) ,	8,49	(s, 1H),	8,43 (s, 1H) ,
8,31	(s, 1H) , 7,53 (d,	1H,	J=8,7	Hz) ,	7,40 (dd,	1H, J=8,7, 1,5
Hz) ,	7,26-7,34 (m, 4H)	, 6,	89 (d,	2H,	J=8,7 Hz)	, 5,67 (S,2H),
3,79	(s, 3H), 2,15 (s,	3H) .	Anál.	(C₂₇H₂₂N₄0₂*0,25

H₂0) C, H, N.

190 (b) Medziprodukt 71b- N- (2-[5-(4-metyl-[3,4']bipyridinyl-5yl)-1-(4-metoxy-benzyl)-lH-indazol-3-yl] -3H-benzimidazol-5-yl}metansulfonamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výtažkom 96% z medziproduktu 71a a N- (3,4-diamínofenyl)metánsulfonamidu podobne ako pri syntéze medziproduktu 7d. ^XH NMR (300 MHz, MeOD-d₄) δ 8,66 (dd, 2H, J= 4,5, 1,5 Hz), 8,52 (s, 2H) , 8,39 (S, 1H) , 7,73 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,47-7,65 (m, 5H) , 7,35 (d,

2H, J=8,7 Hz), 7,17 (br s, 1H) , 6,86 (d, 2H, J=8,7 Hz), 5,72 (S, 2H), 3,73 (s, 3H), 2,94 (s, 3H), 2,24 (s, 3H).

(c) Príklad 71- N-{2-[5-(4-metyl-[3,4']bipyridinyl-5-yl)-1Hindazol-3-yl] -3H-benzimidazol-5-yl}-metánsulfonamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výtažkom 35% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 71b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,79 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 9,56 (s, 1H) , 8,70 (d, 2H, J= 5,7 Hz), 8,54 (s, 1H), 8,47 (d, 2H, J=7,8 Hz), 7,78 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,49-7,58 (m, 5H) , 7,10 (d, 1H, J=8,7 Hz), 2,93 (s, 3H) , 2,17 (s, 3H) . Anál. (C₂₆H₂₁N₇0₂S·!, 45

H₂0) C, H, N, S. MS (ES) (m+H]/z vypočítané 496, zistené 496.

Príklad 72: {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridin-3-yl}-metanol

Ste

NaBHt.lUOH t»2*)

-^OH

T2i

191

‘B

fyyDMA ’NH B2*C,1Bft

(a) Medziprodukt 72a- (5-brómo-4-metyl-pyridin-3-yl)-metanol:

!

Medziprodukt 59a (1,5 g, 7,5 mmol) sa mieša v MeOH pri teplote 0 °C. Po častiach sa pridá bórohydrid sodný (850 mg,

22,5 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 1 hodiny. Roztok sa nariedi etylacetátom a organické látky sa premyjú H₂0 a solankou, sušia sa (MgS0₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (80% až 100% etylacetát/ hexany) vedie na zisk 1,39 g (92%) medziproduktu 72a vo forme bielej pevnej látky. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,59 (s, 1H) , 8,38 (s, 1H), 8,43 (s, 1H) , 4,75 (d, 1H, J= 5,4 Hz), 2,45 (s, 3H) , 2,37 (t, 1H, J= 5,4 Hz).

(b) Medziprodukt 72b- {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(4metoxy-benzyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-yl}-metanol

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 92% z medziproduktu 62b a medziproduktu 72a podobne ako pri syntéze medziproduktu 61c. ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,48 (s, 1H) ,

8,62 (s, 1H) , 8,48 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 7,83 (br s, 1H) ,

7,45 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,21-7,32 (m, 5H) , 6,83 (d, 2H, J=8,7

Hz), 5,60 (d, 2H, J=4,5 Hz), 4,80 (s, 2H) , 3,76 (s, 3H) , 2,25 (s, 3H), 1,94 (br s, 1H).

192 (c) Príklad 72 - [5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-4-metyl-pyridin-3-yl}-metanol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 59% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 72b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-de) δ 13,78 (s, 1H) , 13,01 (s, 1H) , 8,52 (s, 1H), 8,43 (s, 1H) , 8,39 (s, 1H) , 7,75 (dd, 1H, J=8,4, 0,6 Hz), 7,68 (d, 1H, J=7,2 Hz), 7,50 (d, 1H, J=7,2 Hz), 7,44 (dd, 1H, J=8,4, 1,5

Hz), 7,15-7,23 (m, 2H) , 5,29 (t, 1H, J= 5,4 Hz), 4,64 (d, 2H, J= 5,4 Hz), 2,22 (s, 3H) . Anál. (C₂iH₁₇N₅0· 1,25 H₂0) C, H, N.

MS (ES) [m+H]/z vypočítané 356, zistené 356.

Príklad 73: {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridin-3-ylmetyl}-dimetyl-amín

(a) Príklad 73- {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-pyridín-3-ylmetyl}-dimetyl-amín

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 36% zo zlúčeniny príkladu 72 á dimetylamínu spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 68b. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,77 (s, 1H) ,

13,02 (s, 1H), 8,38-8,42 (m, 3H), 7,67-7,76 (m, 2H), 7,50 (d,

1H, J=7,8 Hz), 7,44 (dd, 1H, J=8,7, 1,5 Hz), 7,14-7,24 (m,

2H) , 3,48 (br s, 2H) , 2,28 (s, 3H) , 2,21 (s, 6H) . Anál.

(C₂₃H₂₂N₆· 0,8 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 383, zistené 383.

193

Príklad 74: {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridin-3-ylmetyl}-etylamín

(a) Príklad 74 - {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-etyl-amín

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 23% zo zlúčeniny príkladu 72 a etylamínu spôsobom analogickým k syntéze medziproduktu 68b. ^ľH NMR (300 MHz, DMSO-d_s) δ 13,76 (s, 1H) ,

13,01 (s, 1H) , 8,48 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 8,36 (s, 1H) , 7,74 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,68 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 7,50 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,43 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,14-7,23 (m, 2H) ,

3,81 (s, 2H) , 2,65 (q, 2H, J= 7,2 Hz), 2,26 (s, 3H), 1,08 (t, 3H, J= 7,2 Hz). Anál. (C23H22N60,5 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H] / vypočítané 383, zistené 383.

Príklad 75: (3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4,5-dimetyl-pyridin3-yl)-lH-indazol

194 (a) Medziprodukt 75a - 5-brómo-3,4-dimetyl-pyridín:

Titulná zlúčenina sa pripraví z 3,5-dibróm-4-metyl-pyridínu a j odmetanú podobne ako pri syntéze medziproduktu 59a. ^ΧΗ NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,50 (s, 1H) , 8,22 (s, 1H) , 2,36 (s, 3H) ,

2,30 (s, 3H).

(b) Medziprodukt 75b - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4,5dimetyl-pyridin-3-yl)-1- (4-metoxy-benzyl)-lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 79% z medziproduktu 62b a medziproduktu 75a podobne ako pri syntéze

medziproduktu	61c.	^XH NMR (3 00 MHz, CDCl₃)	δ 10,66	(s,	1H) ,
8,64 (s, 1H) ,	8,40	(s, 1H) , 8,36 (s, 1H) ,	7,81-7,85	(m,	1H) ,
7,41-7,49 (m,	2H) ,	7,18-7,27 (m, 5H), 6,81	(d, 2H, J=	=4,5	Hz) ,
5,57 (s, 2H),	3,74	(S, 3H), 2,31 (s, 3H), 2,	16 (S, 3H)

(C) Príklad 75 - 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4,5-dimetylpyridin-3-yl)-lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 37% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 75b spôsobom analogickým k príkladu 62. ^XH NMR (300 MHz, DMS0-d₆) δ 13,76 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 8,38 (s, 1H) , 8,31 (s, 1H) , 7,74 (dd, 1H, J= 8,4, 0,6 Hz), 7,51-7,69 (m, 2H) , 7,44 (dd, 1H, J= 8,7, 1,8 Hz), 7,17-7,22 (m, 2H) 2,33 (s, 3H) , 2,18 (s, 3H) . Anál. (Ο₂ιΗ₁₇Ν₅·1,0 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 340, zistené 340.

1CK

Príklad 76: 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-ÍH-indazol-5-yl]-4metyl-chinolín

(a) Medziprodukt 76a - 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(4metoxy-benzyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metyl-chinolín

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 86% z medziproduktu 62b a 3-bróm-4-metylchinolínu (pozri Kwon et al., Synthesis, 1976, 249) podobne ako medziprodukt 61c. ¹H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,24 (s, 1H) , 8,94 (s, 1H) , 8,78 (s, 1H) ,

8,25 (dd, 1H, J=7,8, 0,3 Hz), 8,14 (dd, 1H, J=7,8, 0,3 Hz),

7,75-7,88 (m, 2H), 7,64-7,70 (m, 1H), 7,45-7,57 (m, 3H), 7,277,35 (m, 4H), 6,91 (d, 2H, J = 6,9 Hz), 5,68 (s, 2H), 3,82 (s, 3H) , 2,70 (s, 3H) . Anál. (C₃₂H₂₆N₅0*0,15 H₂0) C, H, N.

(b) Príklad 75- 3-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-imidazol-5-yl]4-metyl-chinolín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 72% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 76a spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,81 (s, 1H), 13,06 (s, 1H), 8,86 (s, 1H), 8,55 (s, 1H) , 8,23 (d, 1H, J= 7,8 Hz), 8,09 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,687,84 (m, 3H) , 7,55-7,59 (m, 3H) , 7,17-7,23 (m, 2H) , 2,66 (s,

196

3Η) . Anál. (C₂₄H₁₇N₈· O , 8 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 376, zistené 376.

Príklad 77: 5-[3-(lH-benzimldazol-2-yl)-1H-indazol-5-yl]-4metyl-chinolín

(a) Medziprodukt 77a - 5-bróm-4-metyl-pyridin-3-ol:

3,5-dibróm-4-metyl-pyridín (2,42 g, 9,64 mmol) a metoxid sodný (3,12 g, 57,8 mmol) sa mieša v zmesi DMF (8 ml) a MeOH (2 ml) v uzavrenej banke pri teplote 180 °C počas 24 hodín. Reakčná zmes sa nechá schladnúť a zahusti sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (100% etylacetát) vedie na zisk 1,10 g (61%) medziproduktu 77a vo forme bielej pevnej látky. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 10,31 (s, 1H) , 8,12 (s, 1H) , 8,04 (s, 1H) , 2,21 (s, 3H) . Anál. (C₆H₆BrNO) C, H, N.

(b) Medziprodukt 77b - 3-bróm-5-(4-metoxy-benzyloxy)-4-metylpyridín:

Medziprodukt 77a (1,0 g, 5,3 mmol), tetrametylammóniumjodid (107 mg, 0,53 mmol) a uhličitan draselný (1,47 g, 10,6

197 mmol) sa mieša v acetóne (3 0 ml) . Pridá sa p-metoxybenzylchlorid (1,08 ml, 7,98 mmol) a reakčná zmes sa mieša pri teplote 55 °C počas 8 hodín. Roztok sa nariedi etylacetátom. Organické látky sa premyjú H₂0 . a solankou, sušia sa (MgSO₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (25% etylacetát/hexany) vedie na zisk 648 mg (40%) medziproduktu 77b vo forme bielej pevnej látky, ’ή NMR (300 MHz, CDCla) δ 8,33 (s, 1H) , 8,16 (s, 1H) , 7,34 (d, 2H, J=8,7 Hz), 7,93 (d, 2H, J=8,7 Hz), 5,08 (s, 2H) , 3,83 (s, 3H) , 2,34 (s, 3H) . Anál. (C₁₄H₁₄BrN0₂) C, H, N.

(c) Medziprodukt 77c - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-1-(4metoxy-benzyl)-lH-indazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-ol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 89% z medziproduktu 62b a medziproduktu 77b podobne ako pri syntéze medziproduktu 61c. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,17 (s, 1H) , 8,64 (s, 1H) , 8,29 (s, 1H), 8,25 (s, 1H), 7,81-7,86 (m, 1H),

7,34-7,49 (m, 5H) , 7,21-7,29 (m, 4H), 6,95 (d, 2H, J= 8,7 Hz),

6,85 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 5,61 (s, 2H) , 5,16 (s, 2H) , 3,83 (s, 3H), 3,76 (s, 3H), 2,20 (s, 3H).

(d) Príklad 77 - 5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-pyridin-3-ol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 47% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 77c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,74 (s, 1H) , 13,01 (s, 1H) , 9,91 (s,

1H) , 8,43 (s, 1H) , 8,14 (s, 1H) , 7,98 (s, 1H) , 7,72 (dd, 1H,

J=8,4, 0,6 Hz), 7,69 (bs, 1H), 7,51 (bs, 1H), 7,45 (dd,

198

IH, J=8,7, 1,5 Hz), 7,17-7,22 (m, 2H) 2,09 (s, 3H) . Anál. (C₂₀Hi₅N₅0*0,3 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 340, zistené 340.

Príklad 78: [5-[3 -(lH-benzimidazol-2-yl)-IH-indazol-5-yl]-4 metyl-pyridin-3-ylmetyl}izopropyl-amín

(a) Príklad 78 - {5-[3 -(lH-benzimidazol-2-yl)-IH-indazol-5yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-izopropyl-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 28% zo zlúčeniny príkladu 72 a izopropylamínu za použitia postupu analogického na prípravu medziproduktu 68b. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,76 (s, 1H), 13,01 (s, 1H), 8,48 (s, 1H), 8,42 (s, 1H), 8,35 (s, 1H) , 7,74 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7,68 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,50 (d, 1H, J= 7,2 Hz), 7,43 (dd, 1H, J=8,7, 1,5 Hz), 7,15-7,25 (m, 2H) , 3,79 (s, 2H) , 2,80-2,86 (m, IH), 2,27 (s, 3H) , 1,07 (d, 6H, J= 6,6 Hz). Anál. ' (C₂₄H₂₄N₈«0,7 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 397, zistené 397.

Príklad 79: (5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-ylmetylén)pyrrol-1-yl-amin

199 (a) medziprodukt 79a - 5-izochinolin-4-yl-l-(2trimetylsilanyl-etoxymetyl)-1H-indazol-3-karbaldehyd

Titulná zlúčenina sa pripraví spôsobom analogickým na prípravu medziproduktu 19f, za nahradenia SEM-chránenia (pozri medziprodukt 3a) PMB-chránením medziproduktu 19c. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,30 (s, 1H) , 9,30 (s; 1H) , 8,54 (s, 1H) ,

8,48	(s, 1H), 8,08	(dd, 1H, J	= 6,6, 2,4 Hz), 7,86 (dd, 1H,	J=
6,6,	0,6 Hz), 7,81	(dd, 1H,	J= 8,7, 0,9 Hz), 7,64-7,70	(m,
3H) ,	5,91 (s, 2H) ,	3,66 (t,	2H, J = 8,4 Hz), 0,97 (t,	2H,
J=8,4	Hz), -0,02 (s,	, 9H) .

(b) Medziprodukt 79b - [5-izochinolin-4-yl-l-(2-trimetylsilanyl-etoxymetyl) -lH-indazol-3-ylmetylén] Tpyrrol-1yl-amín:

Medziprodukt 79a (400 mg, 0,99 mmol) a 1-amínopyrrol (98 mg, 1,2 mmol) sa mieša s kyselinou p-toluénsulfonovou (10 mg) v toluéne (6 ml) pri teplote 80 °C počas 2 hodín. Roztok sa zahustí vo vákuu a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (50% etylacetát/hexany) za zisku 410 mg (89%) medziproduktu 79b vo forme žltého oleja. ^XH NMR (300 MHz, CDCI3) δ 9,31 (s,

1H) , 8,77 (s, 1H), 8,58-8,60 (m, 2H), 8,09 (dd, 1H, J=7,2, 0,9

Hz), 7,92 (d, 1H, J=7,8 Hz), 7,76 (dd, 1H, J=8,7, 0,9 Hz),

7,63-7,70 (m, 3Hj , 7,19 (t, 2H, J=2,4 Hz), 6,26 (t, 2H, J=2,4

Hz), 5,85 (S, 2H) , 3,66 (t, 2H, J=8,4 Hz), 0,97 (t, 2H, J=8,4

Hz), -0,02 (s, 9H).

(c) Príklad 79 - (5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-ylmetyléne) pyrrol-1-yl-amín:

200

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 68% SEModstránením chrániacich skupín z medziproduktu 79b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 41. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,82 (s, 1H) , 9,38 (s, 1H) , 9,09 (s, 1H) ,

8,52 (s, 1H) , 8,41 (s, 1H) , 8,24 (dd, 1H, J=7,2, 1,5 Hz), 7,71-7,85 (m, 4H), 7,61 (dd, 1H, J= 8,4, 1,5 Hz), 7,46 (t, 2H, J= 2,4 Hz), 6,15 (t, 2H, J= 2,4 Hz). Anál. (C₂iHi₅N₅) C, H, N.

MS (ES) [m+H]/z vypočítané 338, zistené 338.

Príklad 80: Metylamid kyseliny 2-[5-(5-etylamínometyl-4-metylpyridin-3-yl]-lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-karboxylovej

(a) Medziprodukt 80a- (5-brómo-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl)etyl-amín

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 95% z medziproduktu 72a a etylamínu za použitia spôsobu analogického

201 spôsobu použitého na syntézu medziproduktu 68b. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,59 (s, 1H) , 8,37 (s, 1H) , 3,83 (s, 2H) , 2,73 (q, 2H, J=7,2 Hz), 2,48 (s, 3H) , 1,16 (t, 3H, J= 7,2 Hz).

(b) Medziprodukt 80b - Dimetyl-etyl ester kyseliny 5-brómo-4r metyl-pyridin-3-ylmetyl)-etyl-karbamovej

Medziprodukt 80a (850 mg, 3,7 mmol) sa mieša v roztoku THF (80 ml) a IN NaOH (10 ml) . Pridá sa di-terc-butyldikarbonát (1,09 g, 5 mmol) a reakčná zmes sa mieša počas 2 hodín pri teplote miestnosti. Roztok sa nariedi etylacetátom. Organické látky sa premyjú H₂0 a solankou, sušia sa (MgSO₄) a zahustia, sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (33% etylacetát/hexany) vedie na zisk 760 mg (62%) medziproduktu 80b vo forme číreho oleja. ⁷H NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 8,60 (s,

1H) , 8,24 (s, 1H) , 4,49 (s, 2H) , 3,18 (bs, 2H) , 2,39 (s, 3H) , 1,47 (s, 9H), 1,05 (t, 3H, J= 7,2 Hz).

(c) Medziprodukt 80c - Dimetyl-etylester kyseliny etyl-[5-(3formyl-1H-indazol-5-yl) -4-metyl-pyridin-3-ylmetyl]karbamovej :

Titulná ' zlúčenina sa pripraví s výťažkom 85% z medziproduktu 19e a medziproduktu 80b podobne ako pri syntéze

medziproduktu	61c. ^XH NMR	(300 MHz, CDCI3) δ 10,27	(s, 1H),
8,38 (s,	1H) ,	8,35 (s, 1H)	, 8,23 (s, 1H) , 7,49 (dd, 1H, J=
8,7, 0,6	Hz) ,	7,26-7,51 (m,	3H), 6,89 (dd, 2H, J=6,6,	2,1 Hz) ,
5,66 (s,	2H) ,	4,53 (s, 2H),	3,79 (s, 3H) , 3,24 (bs,	2H), 2,18
(s, 3H),	1,48	(s, 9H), 1,10	(t, 3H, J=7,2 Hz).

(d) Medziprodukt 80d- Dimetyl-etyl ester kyseliny etyl-(5-[l(4-metoxy-benzyl) -3- (4-metylkarbamoyl-lH-benzimidazol-2-yl) lH-indazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-karbamovej :

202

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 78% z medziproduktu 80c a 2-amíno-N-metyl-3-nitro-benzamidu ( Kania, Braganza, et al. , Patentová prihláška Compounds and Pharmaceutical Compositions for Inhibiting Proteín Kinases, and Metods for Their Uses, str. 52, riadok 10 až str. 53, riadok 26; a str.59, riadok 16 až str. 60, riadok 4, U.S. doterajšia prihláška poradové č. 60/142,130, podaná 2.7.1999, ktorá je tu uvedená ako odkaz vo svojej úplnosti), podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c'. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 11,50 (s, 0,3H), 10,21 (s, 0,7H), 9,86 (bs, IH), 8,36-8,57 (m, 3H) ,

8,18 (dd, 0,7H, J= 7,8, 1,2 Hz), 7,97 (dd, 0,3H, J=7,8, 1,2 Hz), 7,63 (dd, 0,7H, J=7,8, 1,2 Hz), 7,24 (m, 5,3H), 6,88 (d, 2H, J=6,3 Hz), 5,65 (s, 1,4H), 5,63 (s, 0,6H), 4,57 (bs, 2H) , 3,79 (s, 3H), 3,27 (bs, 2H), 3,12 (d, 0,9H, J = 4,8 Hz), 3,06 (d, 2,1H, J= 4,8 Hz), 2,29 (s, 2,1H), 2,21 (s, 0,9H), 1,48 (s,

9H), 1,11 (t, 3H, J= 6,9 Hz).

(e) Príklad 80- Metylamid kyseliny 2-[5-(5-etylamínometyl-4metyl-pyridin-3-yl)-lH-indazol-3-yl] -lH-benzimidazol-4karboxylovej:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 36% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 80d spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62, s konečným prečistením preparatívnou HPLC (0,1% TFA-ACN/0,1%TFA-H₂O) . ^XH

NMR	(300 MHz,	DMSO-dg) δ	14,02 (S, IH),	13,62	(bs, IH) ,	9,72
(bs,	IH), 8,88	(bs, 2H),	8,63 (s, 2H) , 8,	44 (S,	IH), 7,83-	7,88
(m,	2H) , 7,72	(d, IH, J:	= 7,2 Hz) , 7,52	(dd,	1H, J=8,4,	1,5
Hz) ,	7,36 (t,	IH, J= 7,8	Hz), 4,33 (bs,	2H) , 3	,15 (q, 2H	, J=
7,2	Hz), 2,90	(d, 3H, J=	4,5 Hz), 2,43	(s, 3H)	, 1,27 (t,	3H,

J= 7,2 Hz). Anál. (C₂₈H_2SN₇»3 TFA) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 440, zistené 440.

203

Príklad 81: Etyl-4-{metyl-5 -[3 -(4-metylsulfanyl-1Hbenzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-pyridin-3-ylmetyl]-amín

MeSH

NO,

H,, 10* PdC EtOAc. 45 p*l 6h (ββ*)

NH,

4HJ

NH,

Sia

NH,

Blb

(a) Medziprodukt 81a

3-metylsulfanyl-2-nitro-fenylamín:

3-chlór-2-nitro-anilín (1,0 g, 5,8 mmol) a uhličitan draselný (880 mg, 6,4 mmol) sa mieša v suchom DMF (15 ml) v skúmavke s uzáverom pri teplote 0 °C. Metantiol sa nechá prebublávať roztokom počas 4 minút. Skúmavka sa uzavrie a reakčná zmes sa mieša pri teplote 122 °C počas 16 hodín. Ochladená reakčná zmes sa nariedi H₂0 a extrahuje sa etylacetátom. Organické látky sa premyjú solankou, sušia sa (Na₂SO₄) a zahustia sa vo vákuu. Prečistenie chromatografiou na silikagéli (33% etylacetát/hexany) vedie na zisk 950 mg (89%)

medziproduktu	81a	vo	forme	svetlo červeno-oranžovej	pevnej
látky. ’H NMR	(300	MHz,	CDC1₃)	δ 7,21 (t, 1H, J= 8,1 Hz)	, 6,55
(d, 2H, J =	8,1	Hz) ,	5,93	(bs, 2H), 2,42 (s, 3H).	Anál.
(C₇H₈N₂0₂S) C,	H, N,	S.

204 (b) Medziprodukt 81b - 3-metylsulfanyl-benzén-1,2-diamín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 96% z medziproduktu 81 podobne ako pri. hydrogenačnom postupe uvedenom pre medziprodukt 9a'. ¹H NMR (300 MHz, CDCl₃) δ 6,936,97 (m, IH) , 6,63-6,70 (m, 2H) , 3,71 (bs, 4H) , 2,36 (s, 3H) . Anál. (C₇H₁₀N₂S) 0, H, N, S.

(c) Medziprodukt 81c - Dimetyletyl estes kyseliny etyl-{5-[l(4-metoxy-benzyl)-3-(4-metylsulfanyl-lH-benzimidazol-2-yl)-1Hindazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-karbamovej:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 80% z medziproduktu 81b a medziproduktu 80c podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c'. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 10,15 (s, 0,6H),

10,1	2 (s, 0,4H)	, 8,	64 (s, 0,4H), 8,59 (s,	0,6H)	, 8,47 (s,	. IH) ,
8,37	(s, IH),	7,72	(d, 0,6H, J=7,5 Hz),	7,45	(t, IH,	J=7,2
Hz) ,	7,19-7,34	(m,	5H) , 7,10 (d, 0,4H, J:	= 7,5	Hz), 6,83	-6,89
(m,	2H) , 5,65	(s,	12H) , 5,61 (s, 0,8K),	4,55	(bs, 2H) ,	3,78
(s,	1,8H), 3,77	(s,	1,2H), 3,26 (bs, 2H),	2,67	(S, 1,2H),	2,57
(s,	1,8H), 2,24	(s,	1,2H), 2,22 (s, 1,8H)	, 1,4!	9 (s, 9H) ,	1,12
(t,	3H, J= 6,9 :	Hz) .

(d) Príklad 81 - Etyl-4-{metyl-5-[3-(4-metylsulfanyl-lHbenzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl] -pyridin-3-ylmetyl)-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 25% PMBodstránením chrániacich skupín z medziproduktu 81c spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. ^XH NMR (300 MHz, DMSO-d_s) δ 13,78 (s, IH) , 13,10 (s, IH) , 8,48 (s, IH) , 8,44 (s, IH) , 8,39 (s, IH) ,. 7,75 (d, IH, J= 8,7 Hz), 7,44 (d, IH, J=8,7, 1,8 Hz), 7,30 (d, IH, J=7,8 Hz), 7,19 (t, IH, J=7,8 Hz), 6,99 (d, IH, J=7,2 Hz), 3,82 (s, 2H), 2,66 (q, 2H, J=7,2

205

Hz), 2,56 (s, 3H) , 2,28 (s, 3H) , 1,08 (t, 3H, J= 7,2 Hz).

Anál. (C₂₄H₂₄N₀S·!, 5 H₂0) C, H, N, S. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 429, zistené 429.

Príklad 82: N-{2-[5-(5-etylamínometyl-4-metyl-pyridin-3-yl)-1Hindazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl}-acetamid

(a) Medziprodukt 82a- N-(2,3-diamíno-fenyl)-acetamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 98% z N-(2-amíno3-nitro-fenyl)-acetamidu (pozri Harvey et al., 4, Chem. Soc.

Perk. Trans. 1, 1988, 1939-1944) spôsobom analogickým k hydrogenácii medziproduktu 9a'. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 9,04 (s, 1H), 6,35-6,49 (m, 3H), 4,38 (bs, 4H), 2,00 (s, 3H) .

(b) Medziprodukt 82b - Dimetyletylester kyseliny {5-(3-(4acetylamíno-lH-benzimidazol-2-yl)-1-(4-metoxy-benzyl) -THindazol-5-yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-etyl-karbamovej

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 65% z medziproduktu 82a a medziproduktu 80c podobne ako pri syntéze medziproduktu 7c'. ^XH NMR (300 MHz, CDC1₃) δ 12,35 (bs, 1H) ,

10,80 (bs, 1H) ,‘ 7,90-8,85 (m, 4H) , 6,76-7,46 (m, 8H) , 5,60 (bs, 2H) , 4,51 (bs, 21-1), 3,78 (s, 3H) , 3,61 (be, 2H) , 3,19 (bs, SN), 1,74 (bs, 12H) , 1,18 (bs, 3H) . MS (ES) [m+H]/z vypočítané 660, zistené 660.

206 (c) Príklad 82 - N- {2-[5-(5-etylamínometyl-4-metyl-pyridin-3 yl)-1H-indazol-3-yl]-ΙΗ-benzimidazol-4-yl}-acetamid:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 6% PMB-odstránením chrániacich skupín z medziproduktu 82b spôsobom analogickým k syntéze zlúčeniny príkladu 62. NMR (300 MHz, MeOD-d₄) δ 8,64 (s, 1H) , 8,58 (s, 1H) , 8,45 (s, 1H) , 7,82 (d, 1H, J= 8,4 Hz), 7,57 (d, 1H, J=7,2 Hz), 7,50 (d, 2H, J=7,2 Hz), 7,34 (t, 1H,

J= 8,4 Hz), 4,44 (s, 2H) , 3,27 (q, 2H, J= 7,5 Hz), 2,43 (s,

3H) , 2,22 (s, 3H), 1,41 (t, 3H, J= 7,5 Hz).

MS (ES) [m+H]/z vypočítané 440, zistené 440.

Príklad 83: 5-(2,6-difluórfenyl)-3-fenvl-lH-indazol

(a) Medziprodukt 83a - 5-(2,6-difluórfenyl)-3-fenyl-l-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-lH-indazol·.

Spôsobom syntézy analogickým k syntéze medziprodukt Íle sa palládiom katalyzovanou kondenzáciou medziproduktu lld s kyselinou 2,6-difluórfenylboritou získa zlúčenina 83a (65%) vo forme svetlo žltej peny: ^XH NMR (DMSO-d_e) δ -0,09 (s, 9H) ,

207

0,84 (t, 2H, J=8,0 Hz), 3,62 (t, 2H, J=8,0 Hz), 5,86 (s,

2H),7,24 (dd, 2H, J=8,l, 8,3 Hz), 7,44 (tt, 1H, J= 1,3, 7,2

Hz), 7,47-7,58 (m, 4H) , 7,92 (dd, 1H, J= 0,5, 8,8 Hz), 7,98 (dd, 2H, J= 1,3, 8,2 Hz), 8,14 (d, 1H, J=0,5 Hz).

(a) Príklad 83 — 5-(2,6-difluórfenyl)-3-fenyl-lH-indazol:

Podobne ako v príklade 7' sa reakciou zlúčeniny 83a s tetrabutylamóniumfluoridom získa 5-(2,6-difluórfenyl)-3-fenyllH-indazol 83 (95%) vo forme žltej pevnej látky: : ^XH NMR (DMSO-dg) δ 7,23 (dd, 2H, J= 8,1, 8,3 Hz), 7,40 (tt, 1H, J=

1,3, 7,2 Hz), 7,43-7,56 (m, 4H) , 7,70 (dd, 1H, J= 0,6, 8,7 Hz), 7,98 (dd, 2H, J= 1,3, 8,4 Hz), 8,11 (d, 1H, J=0,6 Hz),

13,38 (s, 1H) . Anál. (Ci₉Hi₂N₂F2) C, H, N.

Príklad 84: 5-amino-3-(2-pyrrolyl]-1H-indazol

Spôsobom syntézy analogickým k syntéze medziproduktu 18c sa hydrogenáciou 5-nitro-3-(2-pyrrolyl)-ΙΗ-indazolu 18b' cez 10% palládium na uhlíku získa 5-amíno-3-(2-pyrrolyl)-lH-indazol 84

208

(99%)	vo	forme béžovej	pevnej	látky	: ^XH	NMR (DMSO-dg) δ
(dd,	1H,	J= 2,4,2,6	Hz)	, 6,49	(dd,	1H,	J= 1,5,2,4 Hz),
(dd,	1H,	J= 1,5, 2,6	Hz)	, 6,79	(dd,	1H,	J= 2,1, 8,9 Hz),

(d, 1H, J= 2,1 Hz

7,22 (d, 1H, J= 8,9 Hz), 11,16 (s,

6,13 6,76 7,03 1H) ,

12,45 (s, 1H). Anál.

(CnH_loN₄«0,2 etylacetát) C, H, N.

Príklad 85: 5-(benzylamíno)-3-(2-pyrrolyl]-lH-indazol

Benzaldehyd (100 mg, 1 mmol) sa pridá do roztoku 5-amíno-3(2-pyrrolyl)-1H-indazolu 84 (100 mg, 0,5 mmol) v EtOH (100 ml). Získaný roztok sa mieša počas 2 hodín pri teplote miestnosti pred pridaním NaBH₃CN' (50 mg, 0,8 mmol) v jedinom podiele vo forme pevnej látky. Po miešaní počas ďalších 2 hodín sa surová reakčná zmes naleje do H₂0 (200 ml) a extrahuje sa etylacetátom (2 x 100 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran sodný a zahustia sa. Chromatografiou na silikagéli (60% etylacetát/hexany) sa získa zlúčenina 85 (21%) vo forme béžovej pevnej látky: ¹H NMR (DMSO-d₆) δ 4,33 (s, 2H) , 6,11 (dd, 1H, J= 2,5, 2,6 Hz), 6,38 (dd, 1H, J=l,5, 2,5 Hz), 6,74 (dd, 1H, J = 1,5, 2,6 Hz), 6,81 (s, 1H), 6,91 (dd, 1H, J= 1,9, 8,9 Hz), 7,17-7,36 (m, 5H), 7,43 (d, 1H, J=8,9 Hz), 7,45 (d, 1H, J= 1,9 Hz), 11,13 (s, 1H) , 12,48 (s, 1H) . Anál. (Ci₈H₁₈N₄«0,33 H₂0) C, H, N.

Príklad 86: 5-(3-metoxyfenyl)-3-(fenyl)-1H-indazol

209

(a) Medziprodukt 86a - 5-metoxyfenyl)-3-fenyl-l-[2(trimetylsilanyl)etoxymetyl]-ΙΗ-indazol:

Spôsobom syntézy podobným ako pri syntéze medziproduktu Íle sa palládiom katalyzovanou kondenzáciou medziproduktu lld s kyselinou 3-metoxyfenylboritou získa zlúčenina 86a (46%) vo forme svetlo žltej pevnej látky: ^ΧΗ NMR (DMSO-dg) δ -0,10 (s,

9H) , 0,84 (t, 2H, J=8,0 Hz), 3,62 (t, 2H, J= 8,0 Hz), 5,86 (s, 2H) , 7,24-7,34 (m, 4H) , 7,38-7,56 (m, 4H) , 7,84 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,91-8,03 (m, 3H).

(b) Príklad 86 — 5-(3-metoxyfenyl)-3-fenyl-lH-indazol:

Podobne ako v príklade 11 sa reakciou zlúčeniny 86a s tetrabutylammóniumfluoridom získa 5-(3-metoxyfenyl)-3-fenyllH-indazol 86 (71%) vo forme bielej pevnej látky: ¹H NMR (DMSOdg) δ 3,83 (s, 3H) , 6,93 (dd, 1H, 4 1,9, 8,0 Hz), 7,22-7,75 (m, 8H) , 8,04 (dd, 2H, J= 1,3,7,2 Hz), 8,20 (d, 1H, J= 0,3 Hz),

13,27(s, 1H) . Anál. (C₂₀Hi₆N₂0*0,2 H₂0) C, H, N.

Príklad 87: {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridin-3-ylmetyl}-i zobutyl-amín

(a) Príklad 87 - (5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-izobutylamín

210

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 81% zo zlúčeniny príkladu 72 a izobutylamínu za použitia postupu analogického s prípravou medziproduktu 68b. ^XH NMR (3 0 0 MHz, DMSO-dg) δ

13,77 (s,	1H)	, 13,02 (s,	1H), 8,50	(s, 1H), 8,42 (s,	1,37	(s,
1H), 7,74	(d,	1H, J=8,7	Hz), 7,68	(d, 1H, J=7,5 Hz) ,	7,50	(d,
1H, J=	) .	7,43 (dd, :	LH, J=8,7,	1,5 Hz), 7,14-7,24	(m,	2H) ,
3,85 (S,	2H) ,	2,49 (bs,	2H) ,	s, 3H) , 1,73-1,79	(m,	1H) ,
0,90 (d,	6H,	J= 6,6 Hz)	. Anál. (C	:₂₅η₂₈ν₆·ο,3 h₂o) C,	H, N	. MS

(ES) [m+H]/z vypočítané 411, zistené 411.

Príklad 88: [5-[3 -(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4 -metyl-pyridin-3-ylmetyl}-benzyl-amín.

(a) Príklad 88- {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-benzyl-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 73% zo zlúčeniny príkladu 72 a benzylylamínu podobne ako medziprodukt 68b. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,77 (s, ), 13,02 (s, 1H), 8,51 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 8,38 (s, 1H) , 7,74 (d, 1H, J=8,7 Hz), (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,50 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,16-7,44 (m, 8H), 3,90 (bs, 4H) , 2,23 1H) . Anál. (Ο₂₈Η₂₄Ν6·1,2 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 445, zistené

211

Príklad 89: 2-({5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridin-metyl}-amino)-etanol

(a) Príklad 89 - 2-({5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-amino)-etanol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 54% zo zlúčeniny príkladu 72 a anolamínu podobne ako medziprodukt 68b. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,78 (s, ), 13,01 (s, 1H), 8,54 (s, 1H) ,

8,43 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 7,75 (d, 1H, J=8,7 Hz), 7 (d,

1H, J=7,5 Hz), 7,51 (d, 1H, J=7,5 Hz), 7,43 (dd, 1H, J=8,7,

1,5 Hz), 7,15- 7,23 (m, 2H), 4,82 (bs, 1H) , 4,03 (s, 2H) , 3,60 (d, 2H, J= 2,7 Hz), 2,87 (t, 2H, J= Hz), 2,29 (s, 3H) .

Anál. (0₂₃Η₂₂Ν₅0·0,1 H₂0) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 399, zistené 399.

Príklad 90: {1-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)-1Hbenzimidazol-4-yl]-etyl}-metyl-amín

75%

1. Oj. CHjCÍj, •es *c

2. DMS

Hj(40psi).

92%

CHjNH* NaCNBHj. HCl Dioien ,

MeOH. THF

55%

212

4:1

TFA.'CFaSOaH 50 *C

35%

(a) Medziprodukt 90a — N- (2-acetyl-6-nitro-fenyl)-acetamid:

Roztok 2,3-dimetyl-7-nitroindolu. (Acros Organic, 13,55 g, 71,24 mmol) v dichlórmetáne (1,0 1) sa ochladí na vnútornú teplotu —60 °C a reaguje s plynným ozónom počas 1,5 hodiny. Počas tejto doby sa pozoruje zmena farby z oranžovej za žltozelenú. Argón sa nechá prebublávať roztokom počas 1 hodiny, čo spôsobí zmenu farby roztoku na žltú. Pridá sa dimetylsulfid (10,5 ml, 142,5 mmol) a miešanie pokračuje pri teplote —60 °C počas 1,5 hodiny. Po zahriatí na teplotu miestnosti sa roztok zahustí vo vákuu na 200 ml, premyje sa vodou (2 x 50 ml), suší sa cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (50 až 100 % etylacetát v hexánoch) za zisku zlúčeniny 90a (11,85 g, 75%) vo forme oranžovej pevnej látky. R_f = 0,36 (75% etylacetát/hexany); ¹H

NMR (DMSO-dg) δ 2,02 (s, 3H) , 2,52 (s, 3H) , 7,52 (t, 1H, J=7,9 Hz), 8,00 (dd 1H, J=7,9, 1,5 Hz), 8,05 (dd, 1H, J=8,l, 1,5 Hz), 10,32 (s, 1H) . Anál. (C₁₀H_loN₂0₄*0,4 H₂0) C, H, N.

(b) Medziprodukt 90b — 1-(2-amíno-3-nitro-fenyl)-etanón:

Koncentrovaná kyselina chlorovodíková (40 ml) sa pridá do roztoku zlúčeniny 90a (4,00 g, 18,0 mmol) v absolútnom etanole (80 ml) a vode (4 0 ml) . Zmes zahrieva pri teplote spätného toku (vnútorná teplota 87 °C) počas 1 hodiny. Po ochladení na teplotu miestnosti sa pridá nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného na úpravu pH na 8. Roztok sa

213 extrahuje etylacetátom (2 x 200 ml) . Kombinované organické extrakty sa sušia cez síran horečnatý, prefiltrujú sa, zahustia sa a prečistia sa chromatografiou na silikagéli (20 až 70% etylacetát v hexánoch) za zisku zlúčeniny 90b (2,67 g,

82%) vo forme žltej pevnej , látky. Rf = 0,45. (50% etylacetát/hexany); ¹H NMR (DMSO-d_s) δ 2,62 (s, 3H) , 6,74 (t,

1H, J=8,l Hz), 8,31 (m, 2H) , 8,85 (br s, 2H) . Anál. (C₈H₈N₂03) C, H, N.

(c) Medziprodukt 90c — 1-(2,3-diamíno-fenyl)-etanón:

Spôsobom syntézy analogickým k syntéze zlúčeniny 9a sa hydrogenáciou zlúčeniny 90b (2,00 g, 11,1' mmol) v etanole získa zlúčenina 90c (1,54 g, 92%) vo forme svetlo žltých kryštálov. Rf = 0,34 (50% etylacetát/hexany); ^XH NMR (DMSO-de) δ 2,47 (s, 3H) , 4,75 (br s, 2H) , 6,40 (dd, 1H, J=7,5, 8,1 Hz), 6,69 (dd, 1H, J= 7,5, 1,3 Hz), 6,79 (br s, 2H), 7,10 (dd, 1H, J=8,l, 1,3 Hz). Anál. (C₈H₁₀N₂0) C, H, N.

(d) Medziprodukt 90d -1-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl) -lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl)-etanón:

Podobne ako pri syntéze zlúčeniny 19h sa aldehyd 19f (2,02 g, 5,13 mmol) a diamín 90c (771 mg, 5,13 mmol) kondenzujú za prítomnosti síry za zisku zlúčeniny 90d (1,83 g, 68%) vo forme svetlo žltej pevnej látky. Rf = 0,19 (75% etylacetát/hexany);

^XH NMR (DMSO-dg) [niektoré piky sú dvojité v dôsledku tautomérnej izomerizácie) δ 2,72 a 2,87 (2 br s, 3H spoločne), 3,71 (s, 3H) , 5,85 (s, 2H), 6,93 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,34 (m, 3H) , 7,75 (m, 5H) , 8,07 (m, 2H) , 8,25 (d, 1H, J=7,5 Hz), 8,56 a 8,80 (2 br s, 2H spoločne), 9,38 (s, 1H) , 11,83 (s, 1H) ,

13,53 (s, 1H).

214 (e) Medziprodukt 90e — (1-{2-[5-izochinolin-4-yl-l-(4-metoxybenzyl) -lH-indazol-3-yl]-lH-benzimidazol-4-yl}-etyl)-metylamín:

Roztok metylamínu v metanole (2,0 M, 3,i02 ml, 6,04 mmol) sa pridá do ketónu 90d (527,8 mg, 1,01 mmol) pri teplote miestnosti a potom sa pridá kyselina chlorovodíková (4,0 ml v dioxane, 0,504 ml, 2,02 mmol), metanol (6,0 ml) a kyanbórohydrid sodný (38,0 mg, 0,605 mmol). Suspenzia sa mieša pri teplote miestnosti počas 23 hodín, ale pri TLC analýze sa nepozoruje žiadna reakcia. Na zvýšenie rozpustnosti sa pridá bezvodý THF (10 ml) a miešanie pokračuje počas 70 hodín. Zmes sa rozdelí medzi etylacetát a nasýtený vodný roztok hydrogénuhličitanu sodného. Organická fáza sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa, zahustí sa a prečistí sa chromatografiou na silikagéli (1:20:200 vodný roztok NH₄0H: etanol .-dichlórmetán) , za zisku zlúčeniny 90, (275,0 mg, 51%) vo forme žltej peny. Rf = 0,09 (1:20:400 vodný roztok NH₄OH:

etanol: dichlórmetán); ^ΧΗ NMR (CD₃OD) δ 1,53 (d, 3H, J= 6,8

Hz) ,	224	(s, 3H),	3,75	(s,	, 3H) ,	4,28	(q, 1H, J=	6,8	Hz), 5,45
(s,	1H) ,	5,77 (s,	2H) ,	6,	89 (d,	2H,	J=8,7 Hz) ,	7,22	(m, 2H) ,
7,34	(d,	2H, J=8,7	Hz) ,	7,	52 (d,	1H,	J= 7,9 Hz),	7,61	(dd, 1H,

J= 8,7, 1,5 Hz), 7,76 (m, 3H) , 7,99 (d, 1H, J= 8,3

Hz), 8,20 (dd, 1H, J=7,2, 1,7 Hz), 8,48 (s, 1H), 8,70 (s, 1H), 9,27 (s, 1H) . Anál. (σ₃₄Η₃₀Ν₆0·1,0 H₂0) C, H, N.

(f) Príklad 90 — {l-[2-(5-izochinolin-4-yl-lH-indazol-3-yl)lH-benzimidazol-4-yl]-etyl}-metyl-amín:

Roztok zlúčeniny 90 (179,7 mg, 0,334 mmol), kyseliny trifluórmetansulfonovej (0,84 ml) a kyseliny trifluóroctovej (3,34 ml) sa mieša pri 50 °C počas 2 hodín. Roztok sa potom pridá po kvapkách do rýchlo miešanej zmesi koncentrovaného

215 vodného roztoku NH₄OH (10 ml) a etylacetátu (30 ml) . Extrakciou a prečistením podobne ako pri syntéze zlúčeniny príkladu 33 sa získa zlúčenina 90 vo forme špinavo bielej pevnej látky (140,9 mg). Aj keď sa tento materiál zdá byť čistý podľa HPLC a ^XH NMR analýz, prvková analýza ukáže významné nečistoty. Nečistý materiál sa rozpustí v etylacetáte (50' ml) a premyje sa vodou (10 ml), nasýteným vodným roztokom hydrogenuhličitanu sodného (10 ml) a nasýteným vodným roztokom chloridu sodného (10 ml) . Organická vrstva sa suší cez síran horečnatý, prefiltruje sa a zahustí sa za zisku zlúčeniny 90 (49,4 mg,

35%) vo forme bielej pevnej látky: ^XH NMR (CD₃OD) δ 1,71 (d, 3H, J=6,8 Hz), 2,45 (s, 3H) , 4,66 (q, 1H, J=7,0 Hz), 7,24 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 7,32 (t, 1H, J= 7,7 Hz), 7,61 (dd, 1H, J=7,9,

1,0 Hz),7,67 (dd, 1H, J=8,5, 1,5 Hz), 7,82 (m, 3H) , 8,03 (d,

1H, J=8,3 Hz), 8,24 (d, 1H, J= 7,5 Hz), 8,53 (s, 1H), 8,71 (s,

1H) , 9,30 (s, 1H) . Anál. (C₂₆H₂₂N₆*0,4 CH₂C1₂) C, H, N.

Príklad 91: 3-(lH-benzimidazol-2-yl)-5-(4-metyl-5-morfolin-4ylmetyl-pyridín-3-yl)-1H-indazol (a) Príklad 91- 3-(lH-benzimidazol-2~yl)-5-(4-metyl-5morfolin-4-ylmetyl-pyridin-3-yl)-lH-indazol:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 68% zo zlúčeniny príkladu 72 a morfolínu za použitia spôsobu analogického na prípravu medziproduktu 68b. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-d₆) δ 13,78 (s, 1H) , 13,02 (s, 1H) , 8,42 (s, 2H) , 8,40 (s, 1H) , 7,75 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,59 (br s, 2H) , 7,44 (dd, 1H, J= 8,7, 1,5 Hz), 7,17-7,22 (m, 2H) , 3,58-3,67 (m, 6H) , 2,48 (br s, 4H) ,

216

2,30 (s, 3H) . Anál. (C₂5H₂₄N₆0*0,7 H₂O) C, H, N. MS (ES) [m+H]/z vypočítané 425, zistené 425.

Príklad 92: {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridín-3-ylmetyl}-cyklopentyl-amín

(a) Príklad 92- {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-cyklopentyl-amín:

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 49% zo zlúčeniny príkladu 72 a cyklopentylamínu za použitia postupu analogického syntéze medziproduktu 68b. ^XH NMR (300 MHz, MeODd₄) δ 8,49 (s, 1H) , 8,46 (s, 1H) , 8,42 (s, 1H) , 7,73 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,64 (br s, 2H), 7,45 (d, 1H, J= 8,7 Hz), 7,24-7,28

(m, 2H), 3,95	(s,	2H) ,	3,25	(br
(m, 2H) , 1,	71-1	. 78	(m,	2H)
(C₂₆H₂₆N₆*0,25	H₂0)	c,	H, N.	MS

zistené 423.

1,46-1,67 (m, 4H). Anál.

(ES) [m+H]/z vypočítané 423,

Príklad 93: {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5-yl]-4metyl-pyridin-3-ylmetyl}-pyridin-3-yl-amín

(a) Príklad 93 - {5-[3-(lH-benzimidazol-2-yl)-lH-indazol-5yl]-4-metyl-pyridin-3-ylmetyl}-pyridin-3-yl-amín:

217

Titulná zlúčenina sa pripraví s výťažkom 10% zo zlúčeniny príkladu 72 a 3-amíno-pyridínu za použitia postupu analogického na prípravu medziproduktu 68b. ¹H NMR (300 MHz, DMSO-dg) δ 13,79 (s, IH) , 13,03 (s, IH) , 8,49 (s, 11-1) , 8,45

(s,	IH) ,	8,42	(s, IH) , 8,09 (S,	IH) ,	7,83 (s, IH) , 7,75 (d,
IH,	J= 8,	7 Hz) ,	7,59 ' (br s, 2H) ,	7,45	(d,	IH, J=8,7 Hz) , 7,09-
7,22	(m,	4H) ,	6,55 (br s, IH) ,	4,40	(d,	1H, J=6,0 Hz) , 2,28
(s,	3H) .	Anál.	. (C₂₆H₂₁N₇*0,5 H₂0)	c,	H,	N. MS (ES) [m+H]/z

vypočítané 432, zistené 432.

Biochemické a biologické hodnotenia

Aktivita cyklín-dependentnej kinázy sa merala kvantifikáciou enzýmom katalyzovanej, časovo závislej inkorporácie rádioaktívneho fosfátu z [³²P]ATP alebo [³³P]ATP do proteínového substrátu. Pokiaľ nie je uvedené inak, boli testy uskutočnené v 96-jamkových platniach v celkovom objeme 50 μΐ, za prítomnosti 10 mM HEPES (kyselina N-[2hydroxyetyl]piperazín-N'-[2-etanesulfonová]) (pH 7,4), 10 mM

MgCl₂, 25 pM adenosin- trifosfátu (ΑΤΡ), 1 mg/ml ovalbuminu, 5 pg/ml leupeptínu, 1 mM ditiotreitolu, 10 mM betaglycerofosfátu, 0,1 mM natrium- vanadátu, 1 mM fluoridu sodného, 2,5 mM kyseliny etylénglykol-bis (β-amínoetyléter) Ν,Ν,Ν'Ν'-tetraoctovej (EGTA), 2% (obj./obj.) dimetylsulfoxidu a 0,03-0,4 μθϊ [^32/33P]ATP na reakcii. Reakcie sa iniciovali s vhodným enzýmom, reakčná zmes sa inkubovala pri teplote 30°C a reakcie sa skončili za 20 minút pridaním kyseliny etyléndiamíntetraoctovej (EDTA) do 250 mM. Fosf orylovaný substrát sa potom zachytil na nitrocelulózovej alebo fosfocelulózovej membráne za použitia zariadenia na filtráciu 96-jamkových platní, a neinkorporovaná rádioaktivita sa odstránila opakovaným premytím 0,85% kyselinou fosforečnou.

218

Rádioaktivita sa kvantifikovala expozíciou vysušených membrán na zariadení zobrazujúcom rádioaktívny fosfor.

Zreteľné hodnoty Kí sa merali testovaním aktivity enzýmu za prítomnosti rôznych koncentrácií inhibičných zlúčenín a odčítaním základnej hodnoty rádioaktivity meranej za neprítomnosti enzýmu. Dáta na inhibíciu boli upravené podľa rovnice na kompetitívnu inhibíciu za použitia Kaleidagraph (Synergy Software), alebo boli upravené pre rovnicu na kompetitívnu inhibíciu s tesnou väzbou za použitia softwaru KineTic (BioKin, Ltd.).

Inhibícia CDK4/Cyclinu D Retinoblastomovej kinázovej aktivity

Komplex ľudskej CDK4 a cyklínu D3, alebo komplex ľudskej CDK4 a geneticky skráteného (1-264) cyklínu D3, bol prečistený za použitia tradičných biochemických chromatografických techník z hmyzích buniek, ktoré boli ko-infikované príslušnými bakulovírusovými expresnými vektormi (pozri napr., Meijer a Kim, Chemical Inhibitors of Cyclin-Dependent Kinases, Metods in Enzymol,. zväzok 283 (1997), str. 113-128). Enzýmový komplex (5 alebo 50 nM) sa testuje s 0,3-0,5 μ9 prečisteného fragmentu rekombinantného retinoblastomového proteínu (Rb) ako substrátu. Upravený Rb fragment (zbytky 386-928 prirodzeného retinoblastomového proteínu; 62,3 kDa) obsahuje väčšinu fosforylačných miest prítomných v prirodzenom 106-kDa proteíne, rovnako ako koncovku tvorenú šiestimi histidínovými zvyškami, ktorá zjednodušuje prečistenie. Fosforylovaný Rb substrát sa zachytil mikrofiltráciou na nitrocelulózovej membráne a kvantifikoval sa za použitia zobrazovacieho prístroja, ako bolo opísané vyššie. Na meranie inhibítorov tesnej väzby sa koncentrácia enzýmového komplexu znížila na 5

219 nM a trvanie testu sa predĺžilo na 60 minút, počas ktorých bola časová závislosť tvorby produktu lineárna.

Inhibícia CDK2/Cyklín A retinoblastomovej kinázovej aktivity

CDK2 bol prečistený za použitia publikovaného spôsobu (Rosenblatt et al. , Purification and Crystallization of Human Cyclin-dependent Kinase 2 J. Mol. Biol., zväzok 230, 1993, str. 1317-1319) z hmyzích buniek, ktoré boli infikované bakulovirusovým expresným vektorom. Cyklín A bol prečistený z buniek E. coli exprimujúcich kompletný rekombinantný cyklín A, a skrácený cyklín A bol získaný limitovanou proteolýzou a bol prečistený spôsobom opísaným skôr (Jeffrey et al., Mechanism of CDK áktivation revealed by the stručture of a cyklín A-CDK2 complex, Náture, zväzok 376 (27 July 1995), str. 313-320). Komplex CĎK2 a pŕoteolyzovaného cyklínu A sa pripravil a prečistil gélovou filtráciou. Substrát na tento test bol rovnaký Rb substrát ako substrát použitý pre CDK4 testy, a postup pri CDK2/cyklín A a CDK4/cyklín D3 testoch bol v podstate rovnaký s tou výnimkou, že CDK2 bola použitá v koncentrácii 150 nM alebo 5 nM. Hodnoty K< sa merali spôsobom opísaným vyššie.

Stimulácia proliferácie buniek rastovými faktormi, ako je VEGF a iné, je závislá na indukcii autofosforylácie každej ich receptorovej tyrosín kinázy. Preto schopnosť inhibítora proteín kináz blokovať bunkovou proliferáciou indukovanou týmito rastovými faktormi priamo koreluje s ich schopnosťou blokovať autofosforyláciu receptora. Na meranie aktivity zlúčeniny v inhibícii proteín kináz sa použili nasledujúce konštrukty.

220

VEGF-R2 konštrukt pre test

Tento konštrukt určuje schopnosť testovanej zlúčeniny inhibovať tyrosín-kinázovú aktivitu. Konštrukt (VEGF-R2Á50) cytosolovej domény receptora 2 pre ľudský endotelový rastový faktor (VEGF-R2) bez 50 centrálnych zvyškov zo 68 zvyškov kinázovej inzertnej domény bol exprimovaný v systéme hmyzovej bunky/bakulovírus. Z 1356 zvyškov kompletného VEGF-R2 obsahuje VEGF-R2A50zbytky 806-939 a 990-1171, a tiež jednu bodovú mutáciu (E990V) v kinázovej inzertnej doméne v porovnaní s prirodzeným VEGF-R2. , Autofosforylácia prečisteného konštruktu bola uskutočnená inkubáciou enzýmu v koncentrácii 4 μΜ za prítomnosti 3 mM ATP a 40 mM MgCl₂ v 100 mM Hepes, pH

7,5, obsahujúcom 5% glycerol a 5 mM DTT, pri teplote 4 °C počas 2 hodín. Po autofosforylácii bolo preukázané, že tento konštrukt má katalytickú aktivitu v podstate ekvivalentnú konštruktu autofosforylovanej kinázovej domény. Pozri Parast et al., Biochemistry, 37, 16788-16801 (1998).

CHK1 konštrukt pre test

Kompletná ľudská CHKl s His koncovkou na C-konci (FL-CHK1) sa exprimovala za použitia systému bakulovírus/hmyzové bunky. Obsahuje 6 histidínových zvyškov (6 x His-koncovka) na C-konci 476 amínokyselinového ľudského CHK1. Proteín bol prečistený bežnými chromatografickými technikami.

VEGF-R2 test

Spojený spektrofotometrický (FLVK-P) test

Produkcia ADP z ATP, ktorá sprevádza prenos fosfátov, bola spojená s oxidáciou NADH za použitia fosfoenolpyruvátu (PEP) a

221 systému obsahujúceho pyruvát-kinázu (PK) a laktátdehydrogenázu (LDH). Oxidácia NADH bola sledovaná podľa zníženia absorbancie pri 340 nm (e₃₄₀ = 6,22 cm'¹ mM'¹) za použitia Beckman DU 650 spektrofotometru. Testovacie podmienky pre fosforylovaný VEGF-R2A50 (v nasledujúcich tabuľkách označený ako FLVK-P) boli nasledujúce: 1 mM PEP; 250 μΜ NADH; 50 jednotiek LDH/ml; 2 0 jednotiek PK/ml; 5 mM DTT; 5,1 mM poly(E₄Yi); 1 mM ATP; a 25 mM MgCl₂ v 200 mM Hepes, pH 7,5. Testovacie podmienky pre nefosforylovaný VEGF-R2A50 (v nasledujúcich tabuľkách označený ako FLVK) boli nasledujúce: 1 mM PEP; 250 μΜ NADH; 50 jednotiek LDH/ml; 20 jednotiek PK/ml; 5 mM DTT; 20 mM poly(E₄Yi) ; 3 mM ATP; a 60 mM MgCl₂ a 2 mM MnCl₂ v 200 mM Hepes, pH 7,5. Testy boli zahájené s 5 až 40 nM enzýmu. Hodnoty Kí boli určené meraním aktivity enzýmu za prítomnosti rôznych koncentrácií testovanej zlúčeniny. Dáta boli analyzované za použitia Enzýme Kinetic a Kaleidagraph softwaru.

ELISA test

Tvorba fosfogastrínu bola sledovaná za použitia biotinylovaného gastrínového peptidu (1-17) ako substrátu. Biotinylovaný fosfogastrín bol imobilizovaný za použitia streptavidínom potiahnutých 96-jamkových mikrotitračných platní a potom sa uskutočnila detekcia za použitia antifosfotyrosínovej protilátky konjugovanej na chreňovú peroxidázu. Aktivita chreňovej peroxidázy bola sledovaná za použitia 2,2'-azino-di-[3-etylbenzatiazolín-sulfonátu(6)], diammóniovej soli (ABTS). Typický testovací roztok obsahoval: 2 μΜ biotinylovaného gastrínu; 5 mM DTT; 2 0 μΜ ATP; 26 mM MgCl₂; a 2 mM MnCl₂ v 200 mM Hepes, pH 7,5. Test bol zahájený s 0,8 nM fosforylovaného VEGF-R2A50. Aktivita chreňovej peroxidázy sa testovala za použitia ABTS, 10 mM. Reakcia

222 chreňovej peroxidázy sa utlmila pridaním kyseliny (H₂S0₄) , a potom sa odčítala absorbancia pri 4 05 nm. Hodnoty Kí sa určili meraním aktivity enzýmu za prítomnosti rôznych koncentrácií testovaných zlúčenín. Dáta sa analyzovali za použitia Enzýme Kinetic a Kaleidagraph softwaru.

CHK1 test

Produkcia ADP z ATP, ktorá sprevádza prenos fosfátov na syntetický peptidový substrát Syntide-2 (PLARTLSVAGLPGKK) bola spojená s oxidáciou NADH za použitia fosfoenolpyruvátu (PEP) a pyruvát-kinázy (PK) a. laktát-dehydrogenázy (LDH). Oxidácia NADH bola sledovaná podľa zníženia absorbancie pri 340 nm (e₃₄₀= 6,22 cm'¹ mM'¹) za použitia HP8452 spektrofotometru. Typický reakčný roztok obsahoval 4 mM PEP; 0,15 mM NADH; 28 jednotiek LDH/ml; 16 jednotiek PK/ml; 3 mM DTT; 0,125 mM Syntide-2; 0,15 mM ATP; 25 mM MgCl₂ v 50 mM TRIS, pH 7,5; a 400 mM NaCI. Testy sa zahájili s 10 nM FL-CHK1. Hodnoty Kí sa určili meraním aktivity enzýmu za prítomnosti rôznych koncentrácií testovaných zlúčenín. Dáta sa analyzovali za použitia Enzýme Kinetic a Kaleidagraph softwaru.

Inhibícia fosforylovaného FGF receptora a Laktivity CK tyrosín-kinázy

Klonovanie, expresia a prečistenie cytosolovej domény FGFR1 tyrosín kinázy (aminokyseliny 456-766) obsahujúcej tri amínokyselinové substitúcie (L457V, C488A, a C584S) sa uskutočnilo opísaným spôsobom (Mohammadi, M., Schtessinger, J., & Hubbard, S. R. (1996) Celí 86, 577-587). Táto doména sa exprimovala v Sf9 hmyzích bunkách za použitia bakulovírusového expresného vektora a proteín sa prečistil za použitia bežných techník. LCK tyrosín kináza sa exprimovala v hmyzích bunkách

223 s N-terminálnou deléciou od aminokyselín 223 do konca proteínu v aminokyseline 509. N-koniec proteínu obsahoval tiež dve aminokyselinové substitúcie, P223M a C224D. Kinázy sa prečistili za použitia bežných chromatografických metód.

Tyrosín-kinázová aktivita sa merala za použitia spojeného kontinuálneho spektrofotometrického testu, v ktorom je produkcia fosforylovaného poly(Glu,Tyr; 4:1) substrátu a ADP spojená s pyruvat kinázou-katalyzovaným prenosom fosfátu z fosfoenolpyruvátu na ADP, s tvorbou pyruvátu a regeneráciou ATP. Produkcia pyruvátu sa potom spojí s laktatdehydrogenázou-katalyzovanou redukciou pyruvátu za vzniku laktátu, so súčasnou konverziou NADH na NAD⁺. Úbytok NADH sa sleduje meraním absorbancie pri 340 nm (pozri napríklad, Technikova-Dobrova et al. , Spectrophotometric determination of functional characteristics of protein kinases with coupled enzymatic assay, FEBS Letters, zväzok 292 (1991), str. 6972). Aktivita enzýmu sa merala za prítomnosti 200 mM HEPES (pH 7,5), 2 mM fosfoenolpyruvátu, 0,3 mM NADH, 20 mM MgCl2, 100 μΜ ATP, 5 mM DTT, 5,1 alebo 25 mM poly (Glu, Tyr) 4:1 pre P-FGF alebo P-LCK testy, v príslušnom poradí, a 15 jednotiek/ml pyruvátkinázy a laktatdehydrogenázy.

Fosforylovaná FGF-receptorová kináza bola prítomná v koncentrácii 100 nM a fosforylovaná LCK kináza bola prítomná v koncentrácii 50 nM. Testy boli uskutočnené za počiatočných pomerov pri teplote 37 °C a pomery boli korigované pre akékoľvek pozadie merané za neprítomnosti enzýmu. Percento inhibície bolo vypočítané vzhľadom ku kontrolnému enzýmu testovanému za prítomnosti 2% (obj./obj.) DMSO. Výsledky sú uvedené v tabuľke 1.

224

Spojený spektrofotometrický (FAK) test

Tyrosín kinázové testy boli sledované za použitia Beckman DU 650 spektrofotometra. Produkcia ADP bola spojená s oxidáciou NADH za použitia fosfoenolpyruvátu (PEP) pomocou pôsobenia pyruvát kinázy (PK) a laktat dehydrogenázý (LDH). Oxidácia NADH bola sledovaná podl'a zníženia absorbancie pri 340 nm (e₃₄o=6,22 cm'¹ mM'¹) . Typický reakčný roztok obsahoval: 1 mM PEP, 250 μΜ NADH, 50 jednotiek LDH/ml, 20 jednotiek PK/ml, 5 mM DTT, v 200 mM Hepes, pH 7,5 a rôzne 'koncentrácie poly(E₄Y,), ATP a MgCl₂, testy boli zahájené s 40 nM cdFGFRl,

Výsledky testov uskutočnených so zlúčeninami sú uvedené v tabuľke 14. Pokiaľ nie je výslovne uvedené inak, sú jednotky a použité testy také, aké sú uvedené v danom stĺpci.

Tabuľka 1: K_x pre kinázy

Príkl č.	K, CDK4/D (mM)	K, CDK2/A (mM)	K, CHK1 (mM) alebo % inhib.	K, VEGF (mM) alebo % inhib. pri lmM	K, LCK (mM) alebo % inhib. pri lmM	K, FGF (mM) alebo % inhib. pri lmM	FAK % inhib. pri lmM
1	1,7+/- 0,6	11+/- 2	' 6,7+/0,09	NT	NT	NT	32
2	7,9+/- 3,0	NT	NT	NT	NT	NT	NT
3	0,37+/- 0,05	0,24+/- 0,01	75% inhibícia pri 20mM	NT	NT	NT	NT
4	0,11+/- 0,02	0,14+/- 0,01	1,09+/- 0,12	0,0264 +/- 0,002	NT	NT	NT
5	0,48+/- 0,04	0,69+/- 0,03	56% inhibícia pri 20mM	NT	NT	NT	NT
6	0,2+/- 0,03	0,16+/- 0,02	80% inhibícia pri 20mM	64% ·	11%	53%	NT
7'	1,2+/- 0,3	0,79+/- 0,12	NT	NT	NT	NT	NT
8'	0,59+/- 0,10	0,37+/- 0,04	NT	NT	NT	NT	NT
9'	2,2+/-	0,67+/-	NT	NT	NT	NT	NT

225

	0,3	0,07
10'	0,074 +/- 0,009	0,033 +/- 0,003	5% inhibícia pri lOmM	NT	21%	61%	NT
11	39% inhib. pri lOmM	2,6+/0,3	NT	NT	NT	NT	NT
11a	48% inhib. pri 100 mM	13	NT	NT	NT	NT	NT
12	19% inhib. pri 5mM	6,3+/- 1,1	NT	NT	NT	NT	NT
13	3,4+/- 0,7	2,7+/- 0,7	NT	NT	NT	NT	NT
14	2,4+/- 0,5	2,5+/- 0,4	NT	NT	NT	NT	NT
14b	20% inhib. pri lmM	NT	NT ,	NT	NT	. NT	NT
15'	0,018	0,062 +/- 0,007	16% inhibícia pri lmM	NT	17%	87%	NT
16	0,035	0,015	81	36%	NT	1	47%
17	NT	1,4	NT	NT	NT	42,6%	NT
18	0,96	NT	NT	, NT	NT	NT	NT
18b'	6,6	3,3	NT	NT	NT	NT	NT
19	0,054	0,001	NT	NT	NT	31,3% inhib.	NT
20	0,0021	0,00093	NT	NT	NT	96,9% ,	NT
21	0,237	0,049	8,55	NT	23%	54%	NT
22	0,015	0,094	NT	NT	NT	93,5%	NT
23	0,065	0,041	NT	NT	NT	0,8	NT
24	0,69	1,1	NT	NT	NT	45,4%	NT
25	0,01	0,001	NT	NT	NT	0,44	NT
26	0,083	0,072	NT	NT	NT	NT	NT
. 27	1,5	1,6	NT	NT	NT	NT	44%
28	0,68	0,72	NT	NT	NT	NT	61%
29	0,0077	0,00047	NT	6%	NT	2,2	NT
30	0,011	0,001	NT	NT	NT	52,4%	NT
31	0,00037	0,00021	NT	2,9; 17%	NT	55,5%	NT
32	0,00041	0,00025	NT	NT	NT	29,7%	NT
33	0,0011	0,001	NT	NT	NT	51,6%	NT
34	0,019	0,001	NT	NT	NT	26,9%	NT
35	0,0032	0,001	NT	NT	NT	40,5%	NT
36	0,0023	0,001	NT	15%	NT	55,8%	NT
37	0,00076	0,00022	NT	17%	NT	34,4%	NT
38	0,000798	0,001	NT	9%	NT	42,4%	NT
39	0,009	0,0011	NT	NT	NT	NT	NT

226

40	0,0022	0,00038	NT	NT	NT	NT	NT
41	0,078	0,25	NT	NT	NT	NT	NT
42	0,0082	0,0172	NT	NT	NT	70,3%	78%
43	0,015	0,029	NT	NT	NT	59,6%	NT
44	0,019	0,029	NT	NT	NT	56,2%	NT
45	0,012	0,017	NT	NT	NT	58,7%	63%
46	0,03	0,028	NT	51%	NT	50,5%	NT
47	0,094	0,1	NT	NT	NT	81,1%	NT
48	0,021	0,055	7,82	NT	NT	68,5%	NT
49	0,095	0,049	NT	NT	NT	86,7%	NT
50	0,253	0,073	NT	NT	NT	89,6%	NT
51	1,1	0,4	NT	NT	NT	NT	NT
52	0,0035	0,0026	NT	38%	NT	55%	NT
53	0,0026	0,00029	NT	32%	NT	32%	NT
54	0,026	0,00027	NT	46%	NT	81,5%	NT
55	0,041	0,0011	NT	32%	NT	83,6%	NT
56	0,036	0,001	NT	NT	NT	NT	NT
57	0,65	0,037	NT	NT	NT	NT	NT
58	0,0067	o;ooi	NT	17%	NT	3; 20,3%	NT
59	0,0016	0,00058	NT	31%	NT	47,6%	NT
60	0,0016	0,0006	NT	26%	NT	40,8%	NT
61	0,017	0,0012	NT	18%	NT	0,48; 60,7%	NT
62	0,05	0,0037	NT	NT	NT	NT	NT
63	0,22	0,0012	NT	NT	NT	NT	NT
64	0,19	0,014	NT	NT	NT	NT	NT
65	0,0028	0,001	NT	NT	NT	44,1%	NT
66	0,055	0,001	NT	NT	NT	NT	NT
67	0,22	0,016	NT	NT	NT	NT	NT
68	0,0047	0,011	NT	NT	NT	12,6%	NT
69	0,015	0,0041	NT	38%	NT	25,6%	NT
70	0,0018	0,00023	NT	45%	NT	63%	NT
71	0,00085	0,001	NT	42%	NT	28,8%	NT
72	0,012	0,0076	NT	24%	NT	48,6%	NT
73	0,0069	0,0027	NT	15%	NT	42,9	NT
74	0,00052	0,0016	NT	14%	NT	82,6	NT
75	0,0098	0,0014	NT	NT	NT	NT	NT
76	0,15	0,027	NT	NT	NT	NT	NT
77	0,0058	0,00038	NT	NT	NT	NT	NT
78	0,0055	0,0007	NT	NT	NT	NT	NT
79	0,0022	0,00042	NT	NT	NT	NT	NT
80	0,014	0,00025	NT	NT	NT	NT	NT
81	0,0008	0,0049	NT	NT	NT	NT	NT
82	0,11	0,0024	NT	NT	NT	NT	NT
83	30% pri 10mM	30% pri lOmM	NT	NT	NT	NT	NT
84	34	28	22,5	NT	NT	NT	NT
85	16	6,6	NT	NT	NT	NT	NT
86	18% pri lOmM	45% pri lOmM	NT	NT	NT	NT	NT
87	0,0042	0,0019	NT	NT	NT	NT	NT
88	0,0035	0,0014	NT	NT	NT	NT	NT
89	0,001	0,00094	NT	NT	NT	NT	NT

227

90	0,00009	0,0003	NT	NT	NT	NT	NT
91	0,0075	0,0028	NT	NT	NT	NT	NT
92	0,0078	0,0027	NT	NT	NT	NT	NT
93	0,0019	0,00061	NT	NT	NT	NT	NT

NT = netestované

Inhibícia rastu buniek: hodnotenie cytotoxicity

Inhibícia rastu buniek sa merala za použitia testu s tetrazoliovou soľou, ktorý je založený na schopnosti živých buniek redukovať 3-(4,5-dimetyltiazol-2-yl)-2,5-[2H]difenyltetrazoliumbromid (MTT) na formazan (Mossman, Journal of Immunological Metods, zväzok 65, 1983, str. 55-58). Vo vode nerozpustný formazan sa potom detekoval spektrofotometricky. HCT 116 bunková línia sa kultivovala v 96-jamkových platniach. Bunky sa kultivovali vo vhodnom médií v objeme 135 μΐ/jamku v McCoyovom 5A médií. Platne sa pred počas 4 hodín, sa pridávali v pridaním inhibičnej

Rôzne koncentrácie 0,5% (obj./obj.) zlúčeniny kultivovali inhibičných zlúčenín dimetylsulfoxidu (15 μΙ/jamku) a bunky sa inkubovali pri 37 °C (5% C0₂) počas 4-6 dní (Podľa typu buniek). Na konci inkubácie sa MTT pridal v konečnej koncentrácii 0,2 mg/ml a bunky sa inkubovali počas 4 hodín alebo viacej pri teplote 37 °C. Po odstredení platní a odstránení média sa absorbancia formazanu (rozpusteného v dimetylsulfoxide) merala pri. 540 nm. Koncentrácia inhibičnej zlúčeniny spôsobujúca 50% inhibíciu rastu sa určila z lineárnej časti semilogaritmickej krivky závislosti koncentrácie inhibítora/percenta inhibície. Všetky výsledky boli porovnávané s kontrolnými bunkami ošetrenými len 0,5% (obj./obj.) dimetylsulfoxidom.

Tabuľka 2

Príklad č.

HCT 116 IC50 (mM)

HCT 116 IC90 (mM)

228

4	2,7	6,2
6	6	21
10	1,5	3,8
15	1,2	2,5
16	3	5
17	3,2	5
19	0,78	1,6
20	0,07	0,4
22	5	5
23	4	5
25	0,33	1,1
26	'2,8	5
29	0,18	0,8
30	0,18'	0,62
31	0,22	0,058
32	0,086	0,23
33	0,055	0,16
34	0,2	0,58
35	0,13	0,37
36	0,024	0,06
' 37	0,041	0,12
38	0,029	0,06
39	0,018	0,06
42	3	5
43	1,9	5
44	5	5
45	2,1	5
47	2,1	5
48	3,9	5
49	2,3	4,8
50	1,8	5
52	0,5	2,2
53	0,2	0,75
54	0,079	0,23
55	1,5	5
56	0,48	1,3
57	2	5
58	0,46	1,3
59	0,2	0,48
60	0,2	0,5
61	0,22	0,5
62	1	2,4
63	0,43	1,3
64	1,3	5
65	0,39	1,3
66	0,49	1,6
67	2	4,7
68	0,16	0,6

229

69	0,69	2,1
70	0,18	0,44
71	0,7	2
72	0,15	0,53
73	0,2	0,6
75	0,4	1,3
76	0,5	0,5
77	0,31	0,5
78	0,085	0,22
79	0,5	0,5
80	0,09	0,22
81	0,086	0,21
82	>0,5	>0,5
87	0,16	0,42
88	>0,5	>0,5
89	0,15	0,25
90	0,03	0,12
91	0,34	>0,5
92	0,18	0,5
93	0,32	>0,5

Príklady uvedené vyššie ilustrujú zlúčeniny vzorca I a II a testy, ktoré môžu byť jednoducho uskutočnené na určenie ich aktivity proti komplexom rôznych kináz. Je jasné, že takéto testy alebo iné vhodné testy známe v odbore môžu byť použité na selekciu inhibítora s požadovanou aktivitou proti vybranému cieľu.

Zlúčeniny uvedené vyššie môžu byť pripravené vo forme farmaceutických prostriedkov za použitia nasledujúcich všeobecných príkladov,

Parenterálny prostriedok

Na prípravu parenterálneho farmaceutického prostriedku vhodného na podanie injekciou sa 100 mg vo vode rozpustné soli zlúčeniny vzorca I alebo II rozpustia v DMSO a potom sa zmiešajú so 10 ml 0,9% sterilného fyziologického roztoku. Zmes sa vnesie do dávkovej jednotky vhodnej na podanie injekcií.

Orálny prostriedok

230

Na prípravu orálneho farmaceutického prostriedku sa 100 mg zlúčeniny vzorca I alebo II zmieša so 750 mg laktózy. Zmes sa pripraví vo forme dávkovej jednotky, ako je kapsula z tuhej želatíny, vhodnej na orálnu injekciu.

I

Je treba si uvedomiť, že uvedený opis je len ilustratívny a uvádza príklady vynálezu a jeho výhodné uskutočnenia. Rozsah vynálezu je obmedzený len pripojenými patentovými nárokmi, nie uvedeným opisom.

Claims

1. Zlúčenina všeobecného vzorca (I):

kde:

Ri je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo v-V *, kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus alebo

V-V

K.

kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus,. alebo farmaceutický prijateľná soľ zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijateľná soľ preliečiva alebo metabolitu.

2. Zlúčenina, farmaceutický prijateľná soľ, preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit podľa nároku 1, kde:

232

Ri D e kde R₄ je vodík; alebo kde Y je CH alebo N a R₃ je H alebo substituovaný nesubstituovaný alkyl, aryl, karbocyklus, heteroaryl heterocyklus; alebo

Rs alebo alebo kde Y je C alebo N a R₃ je H alebo substituovaný nesubstituovaný alkyl, aryl, karbocyklus, heteroaryl heterocyklus.

3. Zlúčenina alebo alebo vybraná zo skupiny zahŕňajúcej:

233

234 alebo ich farmaceutický prijateľná soľ, preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit, alebo farmaceutický prijateľná sol preliečiva alebo metabolitu.

4. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

(a) množstvo činidla ovplyvňujúceho bunkový cyklus účinné na inhibíciu proteín-kinázy, kde uvedené činidlo ovplyvňujúce bunkový cyklus je zlúčenina všeobecného vzorca (I):

kde:

Ri je vodík alebo substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo

235 kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X j e.substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijateľná soľ zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijateľná soľ preliečiva alebo metabolitu; a (b) farmaceutický prijateľný nosič.

5. Spôsob liečby ochorenia alebo stavu sprostredkovaného inhibíciou komplexu kináz vyznačujúci sa tým, že pacientovi, ktorý potrebuje takú liečbu, je podané činidlo ovplyvňujúce bunkový cyklus vybrané zo skupiny zahŕňajúcej zlúčeninu vzorca I:

kde Ri je vodík alebo substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo

236 kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivá alebo farmaceutický aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijateľné soli preliečivá alebo metabolitu.

6. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa tým, že obsahuje:

(a) terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny vzorca (I) (D kde Ri je vodík alebo substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

237

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus alebo «*, kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijateľnú soľ zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijateľnú soľ preliečiva alebo metabolitu; a (b) farmaceutický prijateľný nosič, riedidlo, vehikulum alebo prísadu.

7. Spôsob liečby ochorenia alebo stavu sprostredkovaného kinázovou aktivitou vyznačujúci sa tým, že cicavcovi, ktorý potrebuje takú liečbu, je podané terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny vzorca I:

kde Ri je vodík alebo substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo *, kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

238

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X jé substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca I; alebo preliečiva alebo farmaceutický aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijatelné soli preliečiva alebo metabolitu.

8. Spôsob podľa nároku 7vyznačujúci sa tým, že ochorenie cicavca je asociované s rastom nádorov, bunkovou proliferáciou alebo angiogenéziou.

9. Spôsob na modulovanie alebo inhibíciu aktivity receptorovej proteín kinázy vyznačujúci sa tým, že zahŕňa kontaktovanie receptora s účinným množstvom zlúčeniny vzorca I:

(0 kde Ri je vodík alebo substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo

239 kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo v-V

K, kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijatelné soli zlúčeniny vzorca I; alebo preliečiva alebo farmaceutický aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijatelné soli preliečiva alebo, metabolitu.

10. Spôsob podľa nároku 9vyznačujúci sa tým, že receptorová proteín kináz.a je CDK komplex, VEGF alebo CHK1.

11. Farmaceutický prostriedok vyznačujúci sa tým, že obsahuje činidlo ovplyvňujúce bunkový cyklus v množstve inhibujúcom kinázový komplex, kde uvedené činidlo má vzorec (I) :

kde

R_x je vodík alebo substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo

240 kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijatelné soli zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivá alebo farmaceuticky aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijatelné soli preliečivá alebo metabolitu.

12. Spôsob liečby ochorenia alebo poruchy spojenej s nekontrolovanou bunkovou proliferáciou vyznačuj úci sa t ý m, že jedincovi potrebujúcemu liečbu je podané terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny vzorca I:

kde

241 x

kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl,' aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a

R₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo kde R₄ je H alebo nižší alkyl a X je substituovaný alebo nesubstituovaný aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus, alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca I; alebo preliečivá alebo farmaceutický aktívne metabolity zlúčeniny vzorca I, alebo farmaceutický prijateľné soli preliečiva alebo metabolitu.

13. Zlúčenina vzorca (II) kde R'i je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus alebo alebo

242 kde každý R₄ je samostatne H alebo nižší alkyl, a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; a nitro, kde R₄ sú nezávisle H alebo nižší alkyl, a X je substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, aryl, heteroaryl, karbocyklus alebo heterocyklus; alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca II; alebo preliečivá alebo farmaceutický aktívne metabolity zlúčeniny vzorca II, alebo farmaceutický prijateľné soli preliečivá alebo metabolitu.

14. Zlúčenina, farmaceutický prijateľná Soľ, preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit podľa nároku 13, kde R\ je kde Y je nezávisle CH, CH₃ alebo N a R₃ sú nezávisle jeden alebo viacej H, substituovaný alebo nesubstituovaný alkyl, alkenyl, aryl, karbocyklus, heteroaryl, heterocyklus, hydroxy, halogén, alkoxy, aryloxy, heteroaryloxy, tioaryl, tioheteroaryl, tioalkyl, tioacyl alebo amín, s podmienkou, že môže byť prítomná viac ako jedna R₃ skupina.

243

15. Zlúčenina podľa nároku 14, kde R'₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný heteroaryl obsahujúci dusík a R\ je

16. Zlúčenina podľa nároku 13, kde R'₂ je substituovaný alebo nesubstituovaný heterocyklus obsahujúci dusík.

17. Zlúčenina podľa nároku 13, kde R'₂ je substituovaná alebo nesubstituovaná skupina vzorca

18. Zlúčenina podľa nároku 13, kde R'₂ je substituovaná alebo nesubstituovaná skupina vzorca

19. Zlúčenina podľa nároku 13, kde R'₂ je substituovaná alebo nesubstituovaná skupina vzorca

20. Zlúčenina podľa nároku 14, kde R'₂ je substituovaná alebo nesubstituovaná skupina vzorca

244

21. Zlúčenina podľa nároku 13, kde R'₂ je substituovaná alebo nesubstituovaná skupina vzorca

245

246

247

248

F

249

Η

250

251

Η

252 alebo ich farmaceutický prijateľné soli, preliečivá alebo farmaceutický aktívne metabolity, alebo farmaceutický prijateľné soli preliečivá alebo metabolitu.

23. Farmaceutický prostriedok na liečbu ochorenia asociovaného s nekontrolovanou bunkovou proliferáciou vyznačuj úci sa t ý m, že obsahuje:

(i) zlúčeninu podľa nároku 13 alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, preliečivo alebo farmaceutický aktívny metabolit; alebo farmaceutický prijateľnú soľ preliečivá alebo metabolitu; a (ii) farmaceutický prijateľný nosič.

24. Spôsob liečby ochorenia alebo poruchy spojenej s nekontrolovanou bunkovou proliferáciou vyznačujúci sa t ý m, že jedincovi potrebujúcemu liečbu je podané terapeuticky účinné množstvo zlúčeniny podľa nároku 13 alebo farmaceutický prijateľné soli zlúčeniny vzorca (II) ; alebo preliečivá alebo farmaceutický aktívneho metabolitu zlúčeniny

253 vzorca (II) ; alebo farmaceutický prijateľné soli preliečiva alebo metabolitu.

254 kde R₂ je

255

256

26. Zlúčenina podľa nároku 13, kde R\ je