SA515361031B1 - المعالجة المناعية للبروتين البشري tau - Google Patents

المعالجة المناعية للبروتين البشري tau Download PDF

Info

Publication number
SA515361031B1
SA515361031B1 SA515361031A SA515361031A SA515361031B1 SA 515361031 B1 SA515361031 B1 SA 515361031B1 SA 515361031 A SA515361031 A SA 515361031A SA 515361031 A SA515361031 A SA 515361031A SA 515361031 B1 SA515361031 B1 SA 515361031B1
Authority
SA
Saudi Arabia
Prior art keywords
ser
antibody
gly
lys
thr
Prior art date
Application number
SA515361031A
Other languages
English (en)
Inventor
سيوبيرت بيتر
باربور روبن
جيمس دولان الثالث فيليب
ليو يوي
Original Assignee
بروثينا بايوسينسيس ليمتد
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by بروثينا بايوسينسيس ليمتد filed Critical بروثينا بايوسينسيس ليمتد
Publication of SA515361031B1 publication Critical patent/SA515361031B1/ar

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/0005—Vertebrate antigens
    • A61K39/0007—Nervous system antigens; Prions
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6801—Drug-antibody or immunoglobulin conjugates defined by the pharmacologically or therapeutically active agent
    • A61K47/6803—Drugs conjugated to an antibody or immunoglobulin, e.g. cisplatin-antibody conjugates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/50—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates
    • A61K47/51—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent
    • A61K47/68—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment
    • A61K47/6835—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site
    • A61K47/6843—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient the non-active ingredient being chemically bound to the active ingredient, e.g. polymer-drug conjugates the non-active ingredient being a modifying agent the modifying agent being an antibody, an immunoglobulin or a fragment thereof, e.g. an Fc-fragment the modifying agent being an antibody or an immunoglobulin bearing at least one antigen-binding site the antibody targeting a material from animals or humans
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00—Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28—Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N33/00—Investigating or analysing materials by specific methods not covered by groups G01N1/00 - G01N31/00
    • G01N33/48—Biological material, e.g. blood, urine; Haemocytometers
    • G01N33/50—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing
    • G01N33/68—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids
    • G01N33/6893—Chemical analysis of biological material, e.g. blood, urine; Testing involving biospecific ligand binding methods; Immunological testing involving proteins, peptides or amino acids related to diseases not provided for elsewhere
    • G01N33/6896—Neurological disorders, e.g. Alzheimer's disease
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/505—Medicinal preparations containing antigens or antibodies comprising antibodies
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K2039/55—Medicinal preparations containing antigens or antibodies characterised by the host/recipient, e.g. newborn with maternal antibodies
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/30—Immunoglobulins specific features characterized by aspects of specificity or valency
    • C07K2317/34—Identification of a linear epitope shorter than 20 amino acid residues or of a conformational epitope defined by amino acid residues
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/50—Immunoglobulins specific features characterized by immunoglobulin fragments
    • C07K2317/55—Fab or Fab'
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/90—Immunoglobulins specific features characterized by (pharmaco)kinetic aspects or by stability of the immunoglobulin
    • C07K2317/92—Affinity (KD), association rate (Ka), dissociation rate (Kd) or EC50 value
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2333/00—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature
    • G01N2333/435—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans
    • G01N2333/46—Assays involving biological materials from specific organisms or of a specific nature from animals; from humans from vertebrates
    • G01N2333/47—Assays involving proteins of known structure or function as defined in the subgroups
    • G—PHYSICS
    • G01—MEASURING; TESTING
    • G01N—INVESTIGATING OR ANALYSING MATERIALS BY DETERMINING THEIR CHEMICAL OR PHYSICAL PROPERTIES
    • G01N2800/00—Detection or diagnosis of diseases
    • G01N2800/28—Neurological disorders
    • G01N2800/2814—Dementia; Cognitive disorders
    • G01N2800/2821—Alzheimer

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Analytical Chemistry (AREA)
  • General Physics & Mathematics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Pathology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Cell Biology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Peptides Or Proteins (AREA)

Abstract

المعالجة المناعية للبروتين البشري TAU TAU IMMUNOTHERAPY الملخـــص يوفر الاختراع أجسام مضادة للبروتين البشري tau. تعمل الأجسام المضادة على تثبيط أو تأخير الأمراض المرتبطة بالبروتين البشري tau وانحسار الأعراض المرضية المصاحبة. الشكل 5.

Description

المعالجة المناعية للبروتين البشري ‎TAU‏ ‎TAU IMMUNOTHERAPY‏ الوصف الكامل خلفية الاختراع البروتين البشري ‎human protein‏ تاو معروف جيداً ‎Cus‏ قد يوجد في أشكال مفسفرة ‎Oh)‏ على سبيل المقال ‎Goedert, ¢(1988)4055-4051:85 Goedert, Proc.
Natl.
Acad.
Sci.
U.S.A.‏ ‎Goedert, £(1989)1624-1615:2 Lee, Neuron ¢(1989)399-393:8 EMBO J.‏ ‎Andreadis, Biochemistry ¢(1989)526-519:3 Neuron 5‏ 1992)10633-10626:31(. تم تقرير أن للبروتين البشري تاو دور في تثبيت الأنابيب الدقيقة؛ وبالأخص في الجهاز العصبي المركزي. يتم إطلاق البروتين البشري تاو الكلي ‎cttan)‏ أي؛ الأشكال المفسفرة وغير المفسفرة) وفوسفو- تاو ‎phospho-tau‏ (-م؛ أي؛ تاو مفسفر) بواسطة المخ استجابة للإصابة العصبية والتنكس العصبي وقد تم تقرير وجوده بمستويات زائدة في ‎CSF‏ مرضى الزهايمر بالنسبة لعامة 0 السكان ‎Jack)‏ وآخرون؛ ‎Lancet Neurol‏ 2010(28-119:9)). تاو هو المكون الرئيسي للتشابكات الليفية العصبية؛ والذي مع اللوبحات يمثلوا سمة مميزة لمرض الزهايمر. تشكل التشابكات لييفات غير طبيعية بقياس قطر 10 نانومتر توجد في أزواج ملفوفة بطريقة حلزونية على فترات منتظمة من 80 نانومتر. التاو داخل التشابكات الليفية العصبية تكون مفسفرة بشكل غير طبيعي (مفرطة الفسفرة) بمجموعات فوسفات ترتبط بمواقع معينة على الجزئ. يُعتبر التورط الشديد للتشابكات الليفية العصبية فى أعصاب الطبقة || للقشرة المخية الأنفية الداخلية؛ ال ‎CAT‏ ومناطق التلفيف المعقفى للحصين؛ اللوزة والطبقات العميقة (الطبقات 0111 ‎V‏ ‏والسطحية ‎(VI‏ للقشرة المخية الحديثة فى مرض الزهايمر. تم ‎Lad‏ تقرير أن التاو مفرط الفسفرة يتدخل مع تجمع الأنيبيب؛ مما قد يعزز انهيار الشبكة العصبية. تضمينات التاو هي ‎gia‏ من العلاج العصبي المحدد للعديد من أمراض التنكس العصبي بما في 0 ذلك مرض الزهايمر؛ التتكس الفصي الجبهي الصدغيء الشلل فوق النووي المتقدم وداء ‎Pick‏ ‏الوصف العام للاختراع
يوفر الاختراع أجسام مضادة أحادية النسية والتي تتنافس للارتباط بالبروتين البشري تاو مع الجسم المضاد أحادي النسيلة 1685. بعض الأجسام المضادة مؤنسنة؛ مخلطة؛ مكسوة أو بشرية. بعض الأجسام المضادة تكون من نمط إسوي ‎IgG‏ بشري (على سبيل المثال» 1801 1802؛ أو 4. تحتوي بعض هذه الأجسام المضادة على منطقة ثابتة 1801 بشرية لها التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 29. تحتوي بعض الأجسام المضادة على منطقة ثابتة كابا بشرية بالتتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 32. تحتوي بعض الأجسام المضادة على طفرة واحدة على الأقل في المنطقة الثابتة. بعض الأجسام المضادة تكون بشكل مؤنسن؛ مخلط أو مكسو من الجسم المضاد ‎al‏ ‏النسيلة 1685. تحتوي ‏ بعض الأجسام المضادة ‏ على ثلاث مناطق تحديد تكامل ‎complementarity determining regions CDRs‏ للسلسلة الخفيفة كما هو معرف بواسطة ‎Kabat‏ ‏0 وثلاث مناطق تحديد تكامل ‎CDRs‏ للسلسلة الثقيلة كما هو معرف بواسطة ‎Kabat‏ للجسم المضاد أحادي النسيلة 1685. ترتبط بعض الأجسام المضادة بالبروتين البشري تاو في أشكال مفسفرة وغير مفسفرة. يوفر الاختراع كذلك أجسام مضادة أحادية النسيلة والتي ترتبط على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 ‎.(Swiss-Prot No.
P10636-8)‏ بعض هذه الأجسام 5 المضادة تكون أجسام مضادة بشرية؛ مؤنسنة؛ مخلطة؛ أو مكسوة. ترتبط بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 44-25 من 10 580 رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 39-30 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة بالبروتين البشري تاو في أشكال مفسفرة وغير مسفرة. يوفر الاختراع كذلك أجسام مضادة أحادية النسيلة تشتمل على منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة 0 ناضجة لها تتابع حمض أميني مطابق 9690 على الأقل (على سبيل المثال» 9695 على الأقل؛ 8 على الأقل» 9699 على الأقل) ل ‎SEQ ID‏ رقم: 15 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة بتطابق 9690 على الأقل (على سبيل ‎(Jha‏ 9695 على ‎(NI‏ 9698 على الأقل» 9699 على الأقل) ل ‎SEQ ID‏ رقم: 22. في تجسيمات معينة؛ يشتمل الجسم المضاد ‎gala)‏ النسيلة على ثلاث م0018 ‎Kabat‏ من ‎SEQ ID‏ رقم: 15 وثلاث ‎Kabat CDRs‏ من ‎SEQ ID‏ رقم: 22. في 5 بعض التجسيمات؛ يكون للمنطقة المتغيرة للسلسلة ‎AL‏ الناضجة تتابع حمض أميني يسمى ‎SEQ‏
‎ID‏ رقم: 15 وللمنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة تتابع حمض أميني يسمى ‎SEQ ID‏ رقم: 42221 23. في بعض الأجسام المضادة؛ يتم ‎Jad‏ واحد على الأقل من المواضع 1113 1148 و1191 بواسطة ‎(Fs MK‏ على التوالي؛ ويتم شغل واحد على الأقل من المواضع ‎Ld (Ll‏ 136 و143 بواسطة ‎«Ss F (L «N‏ على التوالي. في ‎a‏ الأجسام المضادة؛ يتم شغل المواضع ‎H48 ¢H13‏ و1191 بواسطة ‎«Fy MK‏ على التوالي؛ ويتم شغل اثنين على الأقل من المواضع ‎«LA (Ll‏ 136 ‎L435‏ بواسطة اكت نكل ‎¢Ss F‏ على التوالي. في بعض الأجسام ‎«Bala!‏ يتم شغل المواضع 3 8 1191 بواسطة كاء 11 و9 على التوالي؛ ودتم شغل ثلاثة على الأقل من المواضع ‎L1‏ هل ‎L435 L36‏ بواسطة 8 ‎FL‏ و5؛ على التوالي. في بعض الأجسام المضادة؛ يتم ‎Jad‏ المواضع ‎(H13 0‏ 1148 و1191 بواسطة 1 14 ‎(Fy‏ على التوالي» ويتم شغل المواضع 1,آ» ‎L4‏ 136 و143 بواسطة ‎<N‏ ل 1 ‎«Ss‏ على التوالي. في بعض الأجسام المضادة؛ يتم دمج المنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة الناضجة بمنطقة ثابتة للسلسلة الثقيلة ويتم دمج المنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة بمنطقة ثابتة للسلسلة الخفيفة. في بعض الأجسام المضادة؛ تكون المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة شكل طافر من منطقة 5 ثابتة بشرية طبيعية والتي يكون لها ارتباط منخفض بالمستقبل ‎Foy‏ بالنسبة للمنطقة الثابتة البشرية الطبيعية. فى بعض الأجسام المضادة؛ تكون المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة من النمط الإسوي 001]. في بعض الأجسام المضادة؛ تكمن الاختلافات في ثلاث مناطق تحديد تكامل . ‎CDRs‏ ‏للمنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة الناضجة والمنطقة المتغيرة الخفيفة الناضجة من 10 580 أرقام: 0 22515 على التوالي؛ في المواضع 1160-1165 قد تكون الأجسام المضادة أجسام مضادة سليمة أو أجزاء» ‎Jie‏ الجزء ‎Fab‏ ‏قد يقترن أي من الأجسام المضادة أحادية النسيلة بعامل سام خلوي أو تثبيط خلوي. يوفر الاختراع كذلك طرق لأنسنة جسم مضاد. تشتمل بعض الطرق على تحديد تتابعات المناطق المتغيرة للسلسلة الثقيلة والخفيفة للجسم المضاد الفأري؛ تخليق حمض نووي يقوم بترميز 5 سلسلة ثقيلة مؤنسنة تشتمل على ثلاث مناطق تحديد تكامل ‎CDRs‏ السلسلة الثقيلة للجسم المضاد
الفأري وحمض نووي ‎ash‏ بترميز سلسلة خفيفة مؤنسنة تشتمل على ‎CDRs‏ للسلسلة الخفيفة للجسم المضاد الفأري؛ وبقوم بالتعبير الجيني للأحماض النووية في الخلية المضيفة لإنتاج جسم مضاد مؤنسن؛ حيث يكون الجسم المضاد الفأري هو 1635. يوفر الاختراع كذلك طرق لإنتاج جسم مضاد مؤنسن؛ مخلط أو مكسو. تشتمل بعض الطرق على زراعة ‎WA‏ متحولة بواسطة الأحماض النووية التي تقوم بترميز السلاسل الثقيلة والخفيفة للجسم المضاد؛ لكي تفرز الخلية الجسم المضاد؛ وتنقية الجسم المضاد من أوساط مزرعة خلية؛ حيث يكون الجسم المضاد شكل مؤنسن؛ مخلط أو مكسو من 1685. يوفر ‎f‏ لاختراع كذلك طرق لإنتاج خط خلية ينتج جسم مضاد مؤنسن » مخلط أو مكسو. تشتمل بعض الطرق على إدخال ناقل يقوم بترميز السلاسل الثقيلة والخفيفة للجسم المضاد 0 وواصمة قابلة للانتقاء فى خلايا؛ نشر الخلايا فى ظروف لاختيار الخلايا التى تحتوي على عدد النسخ الزائد ‎(Jol‏ عزل ‎WIA‏ مفردة من الخلايا المختارة؛ ووضع الخلايا المستنسخة في بنك من خلية مفردة مختارة على أساس إنتاج الجسم المضاد؛ حيث يكون الجسم المضاد شكل مؤنسن؛ مخلط أو مكسو من 1635. 5 مقبول صيدلياً. يوفر الاختراع كذلك أحماض نووية تشتمل على ‎ask oa‏ بترميز منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة لها التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 10. يوفر الاختراع كذلك أحماض نووية تشتمل على ‎ask oa‏ بترميز منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة بالتتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 15. في بعض الأحماض النووية؛ يكون للجزءٍ تتابع نيوكليوتيد ‎SEQ‏ ‏0 17 رقم: 25. تشتمل بعض الأحماض النووية كذلك على ‎gia‏ يقوم بترميز منطقة ثابتة 61وا؛ اختيارياً منطقة ثابتة 1801 بشرية؛ على سبيل المثال» بتتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 29 شريطة أنه يمكن إهمال لايسين الطرف-0. في بعض الأحماض النووية؛ يكون ‎gall‏ الذي يقوم بترميز المنطقة الثابتة 1801 تتابع نيوكليوتيد ‎SEQ ID‏ رقم: 30. تشتمل بعض هذه الأحماض النووية كذلك على إنترون يرتبط بالأجزاء التي تقوم بترميز المنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة والمنطقة الثابتة 1801. 5 على سبيل المثال؛ قد يكون للإنترون تتابع الإنترون الموجود في 58010 رقم: 31. وبالتالي؛ قد يكون للإنترون والجزء الذي يقوم بترميز المنطقة الثابتة 1861 تتابع نيوكليوتيد 585010 رقم: 31.
يوفر الاختراع كذلك حمض نووي يشتمل على ‎sia‏ يقوم بترميز منطقة متغيرة لسلسلة خفيفة بالتتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 16. يوفر الاختراع كذلك حمض نووي يشتمل على ‎ia‏ يقوم بترميز منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة بالتتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 21( 22 أو 23. في بعض الأحماض النووية؛ يكون ‎gall‏ الذي يقوم بترميز منطقة متغيرة للسلسلة الثقيلة التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 26؛ 27 أو 28. تشتمل بعض هذه الأحماض النووية كذلك على ‎ash gia‏ بترميز منطقة ثابتة كابا. قد تكون المنطقة الثابتة ‎LS‏ ‏منطقة ثابتة ‎LIS‏ بشرية وقد يكون لها التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 32. اختيارياً» يكون للحمض النووي الذي يقوم بترميز المنطقة الثابتة ‎LIS‏ التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 33. تشتمل بعض هذه الأحماض النووية كذلك على إنترون يريط الجزء الذي يقوم بترميز المنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة بالجزء 0 الذي يقوم بترميز المنطقة الثابتة كابا. على سبيل المثال؛ قد يكون للإنترون تتابع الإنترون الموجود في 58010 رقم: 34. وبالتالي؛ قد يكون للإنترون والجزء الذي يقوم بترميز المنطقة الثابتة ‎LIS‏ ‏تتابع نيوكليوتيد 58010 رقم: 34. قد يتضمن أي من الأجسام المضادة المذكورة سابقاً سلسلة ثقيلة تشتمل على منطقة ثابتة 1 بشرية بالتتابع 10 580 رقم: 29 و/أو منطقة خفيفة تشتمل على منطقة ثابتة كابا بشرية 5 بالتتابع ‎SEQID‏ رقم: 32. يوفر الاختراع كذلك جزءِ معزول من البروتين البشري تاو يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو داخل الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السويسرية رقم 8- ‎(P10636‏ تتضمن بعض الأجزاء 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو ‎Jala‏ ‏الرواسب 39-30 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السوسرية رقم 010636-8). تتضمن بعض 0 الأجزاء الرواسب 37-33 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السوسرية رقم 010636-8). ترتبط بعض الأجزاء بجزئ ‎(dels‏ اختيارياً عبر مفساح والذي يساعد على إثارة الأجسام المضادة ضد الجزه. بعض الأجزاء تكون جزءِ من تركيبة صيدلية تشتمل على مادة مساعدة مقبولة للتعاطي يوفر الاختراع كذلك طرق لعلاج أو الوقاية من مرض الزهايمر. تشتمل بعض الطرق على 5 تعاطي نظام فعال من الجسم المضاد والذي يرتبط على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السويسرية رقم 010636-8)؛ أو عامل يحث هذا الجسم المضاد؛
لمريض مصاب ب أو عرضة لخطر الإصابة بمرض الزهايمر وبالتالي علاج أو الوقاية من المرض. وعلى نحو مفضل؛ يكون الجسم المضاد جسم مضاد موصوف هنا. في بعض الطرق؛ يكون العامل الذي يحث الجسم المضاد ‎gia‏ من البروتين البشري تاو والذي يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو ‎dada‏ الرواسب 46-24 من ‎SEQID‏ رقم: 1. في بعض الطرق؛ يكون المريض حامل ‎ApoE4‏
يوفر الاختراع كذلك طرق لعلاج أو الوقاية من مرض مرتبط بالبروتين البشري تاو. تشتمل بعض الطرق على تعاطي نظام فعال من جسم مضاد والذي يرتبط على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السوسرية رقم 010636-8)؛ أو عامل يحث هذا الجسم المضاد؛ لمربيض مصاب ب أو عرضة لخطر الإصابة بالمرض وبالتالي علاج أو 0 الوقاية من المرض. ‎ey‏ نحو مفضل؛ يكون الجسم المضاد جسم مضاد موصوف هنا (على سبيل ‎Jal)‏ جسم مضاد 1685 مؤنسن). في بعض الطرق؛ يكون العامل الذي يحث الجسم المضاد جزء من البروتين البشري تاو والذي يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو داخل الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. في بعض الطرق؛ يكون المرض مرض يوفر الاختراع كذلك طرق لتقليل النقل الشاذ للبروتين البشري تاو. تشتمل بعض الطرق على تعاطي نظام فعال من جسم مضاد والذي يرتبط على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 24- 46 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السويسرية رقم 010636-8)؛ أو عامل يحث هذا الجسم ‎colina)‏ لمريض مصاب ب أو عرضة لخطر الإصابة بمرض يرتبط بالنقل الشاذ للبروتين البشر تاو وبالتالي علاج أو الوقاية من المرض. وعلى نحو مفضل يكون الجسم المضاد جسم مضاد 0 موصوف هنا ‎Jo)‏ سبيل المثال» جسم مضاد 1685 مؤنسن). في بعض الطرق؛ يكون العامل الذي يحث الجسم المضاد جزء من البروتين البشري تاو والذي يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من
البروتين البشري تاو داخل الرواسب 46-24 من ‎SEQID‏ رقم: 1. يوفر الاختراع كذلك طرق لحث بلعمة البروتين البشري تاو. تشتمل بعض الطرق على تعاطي نظام فعال من جسم مضاد والذي يرتبط على وجه التحديد بحاتمة في الرواسب 46-24 5 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السويسرية رقم 010636-8)؛ أو عامل يحث هذا الجسم المضاد؛ لمريض مصاب ب أو عرضة لخطر الإصابة بمرض يرتبط بتراكم البروتين البشري تاو. على نحو
مفضل يكون الجسم المضاد جسم مضاد موصوف هنا (على سبيل المثال؛ جسم مضاد 1685 مؤنسن). في بعض الطرق؛ يكون العامل الذي يحث الجسم المضاد ‎eda‏ من البروتين البشري تاو والذي يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو داخل الرواسب 46-24 من ‎SEQ‏ ‎ID‏ رقم: 1. في بعض الطرق؛ يكون المرض مرض عصبي.
يوفر الاختراع كذلك طرق لتثبيط تجميع أو ترسيب البروتين البشري تاو. في تجسيمات معينة؛ تشتمل الطرق على تعاطي نظام فعال من جسم مضاد والذي يرتبط على وجه التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السوسربة رقم 010636-8)؛ أو عامل يحث هذا الجسم المضاد؛ء لمريض مصاب ب أو عرضة لخطر الإصابة بمرض يرتبط بتجميع أو ترسيب البروتين البشري تاو. على نحو مفضل يكون الجسم المضاد جسم مضاد
0 موصوف هنا ‎Jo)‏ سبيل المثال» جسم مضاد 1685 مؤنسن). في بعض الطرق؛ يكون العامل الذي يحث الجسم المضاد جزء من البروتين البشري تاو والذي يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو داخل الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. في بعض الطرق؛ يكون المرض مرض عصبي.
يوفر الاختراع كذلك طرق لتثبيط تكوين تشابكات البروتين البشري تاو. تشتمل بعض
5 الطرق على تعاطي نظام فعال من جسم مضاد والذي يرتبط على وجه التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السويسرية رقم ‎((P10636-8‏ أو عامل يحث هذا الجسم ‎clad)‏ لمريض مصاب ب أو عرضة لخطر الإصابة بمرض يرتبط بتكوين تشابكات البروتين البشري تاو. على نحو مفضل يكون الجسم المضاد جسم مضاد موصوف هنا (على سبيل ‎(Jal‏ جسم مضاد 1685 مؤنسن). في بعض الطرق؛ يكون العامل الذي يحث الجسم المضاد
جزء من البروتين البشري تاو والذي يتضمن 10-3 رواسب متجاورة من البروتين البشري تاو داخل الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. في بعض الطرق؛ يكون المرض مرض عصبي. يوفر الاختراع كذلك طرق لفحص عامل للنشاط ضد مرض الزهايمر. تشتمل بعض الطرق على تعاطي العامل لحيوان معدل وراثياً يقوم بالتعبير الجيني لترانسجين التاو؛ وتحديد ما إذا كان ‎Jalal‏ ‏يثبط أو يؤخر واحد على الأقل من ‎Ade‏ أو عرض لمرض ‎Gala‏ حيث يكون العامل جسم
5 مضاد والذي يرتبط على ‎dag‏ التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 46-24 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 (البراءة السويسرية رقم 010636-8)؛ أو عامل والذي يحث هذا الجسم المضاد.
شرح مختصر للرسومات شكل 1 يصور نتائج تجارب مصممة لرسم خريطة للحاتمة (الحواتم) المرتبطة بواسطة الجسم المضاد أحادي النسيلة 1685. تم تلطيخ بقع وبسترن تحتوي على كامل طول البروتين البشري تاو أو حذف طافرات البروتين البشري تاو (05-24 أو 025-44) بالأجسام المضادة 1685 (للوحة اليسرى) أو الأجسام المضادة 72046 (اللوحة اليمنى). يرتبط الجسم المضاد 78046 بحاتمة الطرف-6 من البروتين البشري تاو. شكل 2 يصور نتائج تجارب مصممة لرسم خريطة للحاتمة (الحواتم) المرتبطة بالجسم المضاد أحادي النسيلة 1685. تم تلطيخ بقع ويسترن تحتوي على كامل الطول من البروتين البشري تاو أو حذف طافرات البروتين البشري تاو بالأجسام المضادة 1685 (اللوحة اليسرى 0 العلوية) أو الأجسام المضادة 78046 (اللوحة اليمنى). يتم عرض التعرض الطويل للبقعة الملطخة بالأجسام المضادة 1685 في اللوحة اليسرى السفلية. يتضمن حذف طافرات البروتين البشري تاو المحلل في هذه التجرية 025-44» 123-32¢[15-24[ .030-39 « و037-46. شكل 3 يصور تتائج ‎pd‏ فحص الالانين مصممة لرسم خريطة للحاتمة (الحواتم) المرتبطة بالجسم المضاد أحادي النسيلة 1685. تم تلطيخ بقع ويسترن المحتوية على النوع البري 5 .من البروتين البشري تاو ‎wild-type Tau (WT)‏ أو طافرات نقطة الالانين من البروتين البشري تاو بالأجسام المضادة 1685 (اللوحة اليسرى) أو الأجسام المضادة 72046 (اللوحة اليمنى). تتضمن طافرات الالانين للبروتين البشري تاو المحلل في هذه التجربة ‎«Q33A (H32A (M31A (T30A‏ ‎.G42A 5 <A41L «D40A (T39A «D38A « G37AE36A «Q35A D34A‏ شكل 4 يبين الكميات النسبية للبروتين تاو الذي تم الكشف عنه في الجزءٍ الغير قابل 0 لذوبان في الساركوسيل من الجذع الدماغي لفتران معدلة ‎Lp‏ والتي تقوم بالتعبير الجيني للبروتين 1 البشري. تم تحصين ‎al‏ بشكل سلبي إما بالجسم المضاد 1685 أو الجسم المضاد 0 ضابط النمط الإسوي 1801 غير المناعي. تم تحليل العينات بلطخة ويسترن؛ تلطيخ الجسم المضاد؛ وتعيين كمية الإشارة الناتجة. تضمنت الأجسام المضادة المستخدمة للكشف عن البروتين البشري تاو الأجسام المضادة الخاصة بمضاد- فوسفو- تاو ‎AT)‏ اللوحة اليسرى العلوية؛ 5 1100م؛ اللوحة اليسرى السفلية؛ أو 175 اللوحة اليمنى العلوية) وجسم مضاد تاو الشامل ‎(HT7)‏ ‏اللوحة اليمنى السفلية).
شكل 5 يبين نسبة فوسفو- تاو إلى إجمالي البروتين تاو (اللوحة اليسرى) وكمية معايرة من التاو الكلي (اللوحة اليمنى) تم الكشف عنه في إجمالي جناسات الجذع الدماغي ‎idl‏ معدلة وراثياً والتي تقوم بالتعبير الجيني لبروتين ,80.03011) البشري. تم تحصين الفئران بشكل سلبي إما بالجسم المضاد 1635 أو الجسم المضاد 6110 ضابط نمط إسوي 1801 غير مناعي. تم تحليل العينات بواسطة لطخة ويسترن؛ تلطيخ الجسم المضاد؛ وتحديد كمية الإشارة الناتجة. تم استخدام الجسم المضاد ‎ATS‏ للكشف عن الفوسفو- تاو وتم استخدام الجسم المضاد ‎HTT‏ للكشف عن البروتين البشري تاو الكلي. تم استخدام الجسم المضاد مضاد-687111 لمعايرة كمية البروتين البشري تاو الذي تم الكشف ‎die‏ في ‎Glial‏ المعالجة بالجسم المضاد 1685 مقابل الجسم المضاد
0 الضابط.
شكل 6 يصور أقسام نوى_فتران معدلة ‎Why‏ والتي تقوم بالتعبير الجيني لبروتين 2.3011 البشري؛ ملطخ بكيمياء الأنسجة المناعية باستخدام الجسم المضاد مضاد- فوسفو- تاو ‎ATS‏ تم تحصين ‎lll)‏ بشكل سلبي إما بالجسم المضاد 1685 (اللوحة اليسرى العلوية) أو الجسم المضاد 6710 (اللوحة اليسرى السفلية)»؛ ضابط نمط إسوي 1801 غير مناعي. تحديد كمية تلطيخ تاو الذي تم الكشف عنه بواسطة الجسم المضاد ‎ATS‏ في نواة تتوسط المخيخ؛ الجزء
5 الأمامي والجزء الخلفي؛ نواة مخيخ جانبية مرفقة (1018/0/1.87) ويتم عرض المنطقة الوالجة المرفقة للنواة تحت المهادية ‎subthalamic nucleus annex zona incerta (STH/ZI)‏ من ‎Ob‏ ‏محصنة بشكل سلبي بالأجسام المضادة 1685 أو ‎6F10‏ في لوحات الرسم البياني ‎hall‏ ‏العلوية. يتم عرض تحديد كمية تلطيخ فوسفو- تاو الذي تم الكشف عنه باستخدام الجسم المضاد مضاد- فوسفو- تاو ‎ATI00‏ على الأقسام ‎ItA/P/LAT‏ و المنطقة الوالجة المرفقة للنواة تحت
0 المهادية 5711/21 من ‎Gl‏ محصنة بشكل سلبي بواسطة الأجسام المضادة 1685 أو 6310 في لوحات الرسم البياني ‎andl)‏ السفلية. تم تقييم الاهمية الاحصائية باستخدام اختبار ‎Student‏ ‏م<0.05.
شكل 7 يصور تتائج الترسيب المناعي الناتجة بالأجسام المضادة 1685 المخلطة والأجسام المضادة 1685 المؤنسنة (النسخ 11112 و11113). تم ترسيب البروتين البشري تاو
5 مناعياً من كل من الأجزاء الذائبة وغير الذائبة من عينات القشرة المخية الأمامية بعد الوفاة التي تم الحصول عليها من مريض مصاب بمرض الزهايمر. تم الكشف عن التاو الموجود في الرواسب
المناعية الملطخة باستخدام جسم مضاد مضاد- تاو متعدد التسائل ‎polyclonal anti-tau‏ ‎.antibody (tau pAb)‏ تعريفات يتم توفير الأجسام المضادة متعددة النسائل وعوامل علاجية أخرى عادة في شكل معزول. وهذا يعني أن العامل يكون عادة نقي 9650 وزن/حجم على الأقل من البروتينات المتداخلة وملوثات أخرى ‎Lim‏ من إنتاجه أو تنقيته ولكن لا يستبعد إمكانية أن يكون العامل متحد مع زيادة من حامل مقبول (حوامل مقبولة) صيدلياً أو سواغ آخر مقصود لتسهيل استخدامه. أحياناً تكون الأجسام المضادة متعددة النسائل (أو عوامل علاجية أخرى) نقية 9660 9670 9680 %90 5 أو 9699 وزن/حجم على الأقل من البروتينات المتداخلة والملوثات من الإنتاج أو التنقية. ترتبط الأجسام المضادة وفقاً للاختراع عادة بالهدف المخصص لها بثابت ارتباط 10"؛ 0 #10 10 أو 110 مولار ! على الأقل. هذا الارتباط يكون ارتباط خاص والذي به تكون قابلية الكشف أعلى في المقدار وقابلية التمييز من الارتباط غير الخاص الموجود بهدف ليس له صلة واحد على الأقل. قد يكون الارتباط الخاص نتيجة لتكوين روابط بين مجموعات وظيفية معينة أو ملائمة مكانية معينة ‎lo)‏ سبيل ‎(JB‏ من نوع القفل والمفتاح) بينما يكون الارتباط غير 5 الخاص عادة نتيجة لقوى فان دير فالز. لا ينطوي الارتباط الخاص مع ذلك بالضرورة على أن يرتبط الجسم المضاد أحادي النسيلة بهدف واحد وواحد فقط. الوحدة الهيكلية للجسم المضاد الأساسي هو تيترامر من وحدات فرعية. يتضمن كل تيترامر ‎Gang)‏ متطابقين من سلاسل عديد ‎atm‏ يحتوي كل زوج على سلسلة ‎"Aged‏ واحدة (حوالي 25 كيلودالتون) وسلسلة ‎"Ald‏ واحدة (حوالي 70-50 كيلودالتون). يتضمن الجزء بطرف 0 الأمينو لكل سلسلة منطقة متغيرة من حوالي 100 إلى 110 أو أكثر أحماض ‎Lind‏ مسئولة في المقام الأول للتعرف على الأنتيجين. ترتبط هذه المنطقة المتغيرة التي تم تعبيرها الجيني مبدئياً بببتيد إشارة قابل للانشطار. يشار إلى المنطقة المتغيرة بدون ببتيد الإشارة أحياناً بمنطقة متغيرة ناضجة. وبالتالي؛ على سبيل ‎(Jal)‏ تعني؛ المنطقة المتغيرة الناضجة للسلسلة الخفيفة؛ منطقة متغيرة لسلسلة خفيفة بدون ببتيد الإشارة للسلسلة الخفيفة. يحدد الجزء بطرف الكريوكسي لكل سلسلة 5 منطقة ثابتة مسئولة في المقام الأول عن وظيفة مستفعلة. قد تتضمن المنطقة الثابتة أي أو كل من منطقة ‎«CHI‏ منطقة مفصلية» منطقة 0112 ومنطقة ‎.CH3‏
يتم تصنيف السلاسل الخفيفة إلى أما ‎LIS‏ أو لامدا. يتم تصنيف السلاسل الثقيلة إلى جاماء ميوء ‎(lll‏ دلتاء أو إبسيلون؛ وتحدد النمط الإسوي للجسم المضاد ب ‎IgD (IgA IgM IgG‏ ‎IgE‏ على التوالي. داخل السلاسل الخفيفة والثقيلة» يتم ربط السلاسل المتغيرة والثابتة بالمنطقة "ل" من حوالي 12 أو أكثر حمض أميني؛ مع السلسلة الثقيلة التي تتضمن أيضاً منطقة "0" من حوالي 10 أو أكثر حمض أميني. ‎hii)‏ بصفة ‎ple dole‏ المناعة الأساسي ) ‎Paul, W., ed.,‏ ‎ed.
Raven Press, N.Y.‏ 200» 1989)؛ فصل 7) (يدخل بالكامل على سبيل المرجعية لجميع الأغراض).
تشكل المناطق المتغيرة الناضجة لكل زوج سلسلة خفيفة/ثقيلة موقع ارتباط الجسم المضاد. وبالتالي» يحتوي الجسم المضاد السليم على موقعي ارتباط. باستثناء في الأجسام المضادة ثنائية 0 الوظيفة أو ثنائية التخصص» موقعي الارتباط متماثلين. تظهر كل السلاسل نفس الهيكل العام من مناطق إطار العمل المحفوظة نسبياً ‎framework regions (FR)‏ المرتبطة بثلاث مناطق مفرطة التغير» تسمى ‎Load‏ مناطق تحديد تكامل أو ‎CDRs‏ تتحانى مناطق تحديد تكامل ‎CDRs‏ من السلسلتين من كل زوج بمناطق إطار العمل؛ مما يتيح الارتباط بحاتمة خاصة. من الطرف- 11 إلى الطرف-©؛ تشتمل كل من السلاسل الخفيفة والثقيلة على النطاقات ‎«CDR1 «FRI‏ 2.2 ‎«CDR2 5‏ قعص ‎.FR4 5 CDR3‏ تعيين الأحماض الأمينية لكل نطاق يكون وفقاً لتعريفات ‎(Kabat‏ ‏تتابعات البروتينات المعنية مناعباً (المعاهد الوطنية للصحة؛ ‎«MD «Bethesda‏ 1987 5 1991(« ‎Chothia & Lesk, J.
Mol.
Biol. sl‏ 917-901:196 (1987)؛ ‎Chothia‏ وآخرون» الطبيعة 883-878:342 )1989( يوفر ‎Kabat‏ أيضاً اتفاقية ترقيم مستخدمة على نطاق واسع (ترقيم ‎(Kabat‏ والتي بها يتم تعيين الرواسب المقابلة بين السلاسل الثقيلة المختلفة أو بين السلاسل
0 الخفيفة المختلفة بنفس الرقم. يتضمن المصطلح "جسم مضاد" أجسام مضادة سليمة وأجزاء ارتباط منها. عادة؛ تتنافس الأجزاء مع الجسم المضاد السليم والذي منه يتم اشتقاقها لارتباط خاص بالهدف. تتضمن الأجزاء سلاسل ثقيلة منفصلة»؛ سلاسل خفيفة ‎Fab, Fab, F(ab')s, F(ab)c, Fv‏ وأجسام مضادة أحادية النطاق. تتضمن الأجسام المضادة أحادية (متغيرة) النطاق مناطق ‎VH‏ مفصولة عن شركاؤها ‎VL‏ ‏5 (و بالعكس) في أجسام مضادة تقليدية ‎Ward)‏ وآخرون» 1989,؛ الطبيعة 546-544:341) بالإضافة إلى المناطق ‎VH‏ (تعرف أحياناً ب ‎(VHH‏ من أنواع مثل الإبل والأسماك الغضروفية (على سبيل المثال؛ قرش ممرضة) ‎lls‏ بها لا ترتبط المناطق 711 بالمناطق .71 إنظرء على
سبيل المثالء البراءة الدولية 2404678). الأجسام المضادة أحادية النطاق ‎Aly‏ بها يتم فصل سلسلة واحدة عن شركاءها الطبيعيين تعرف أحياناً ب ‎Dabs‏ وتعرف الأجسام المضادة أحادية النطاق من الإبل والأسماك الغضروفية أحياناً بالأجسام المضادة. قد توجد أو قد لا توجد المناطق الثابتة أو أجزاء من المناطق الثابتة في الأجسام المضادة أحادية النطاق. على سبيل المثال؛ تتضمن الأجسام المضادة للمنطقة المتغيرة الأحادية الطبيعية من الإبل منطقة متغيرة ‎(VHH‏ ‏والمناطق الثابتة ‎CH2‏ و0113. قد يتم ‎glad)‏ الأجسام المضادة أحادية النطاق للأنسنة بواسطة طرق مماثلة للأجسام المضادة التقليدية. يتم الحصول على النوع ‎Dabs‏ من الأجسام المضادة ‎sale‏ ‏من أجسام مضادة من أصل بشري. قد يتم إخضاع أنواع الجسم المضاد من نوع الجسم ‎Goll)‏ من أصل الإبل أو القرش وقد يتم إخضاعها للأنسنة. يمكن إنتاج الأجزاء بواسطة تقنيات ‎DNA‏ معادة 0 الاتحادء أو عن طريق الفصل الإنزيمي أو الكيميائي للجلوبيولينات المناعية السليمة. يتضمن أيضاً المصطلح "جسم مضاد" جسم مضاد ثنائي التخصص. الجسم المضاد ثنائي التخصص أو ثنائي الوظيفة هو جسم مضاد هجين اصطناعي به اثنين من أزواج سلسلة ثقيلة/خفيفة مختلفة واثنين من مواقع ارتباط مختلفة (انظرء؛ على سبيل ‎Songsivilai and Lachmann, Clin.
Exp. «Jal‏ ‎dmmunol‏ 321-315:79 (1990)؛ ‎Kostelny‏ وآخرون» ‎«J.
Immunol.‏ 53-1547:148
5 )1992( المصطلح "حاتمة" يشير إلى موقع على أنتيجين والذي يرتبط به الجسم المضاد. قد تتكون الحاتمة من أحماض أمينية متجاورة أو أحماض أمينية غير متجاورة متحاذية بواسطة الطي الثلاثي لبروتين واحد أو أكثر. يتم الاحتفاظ بالحواتم المتكونة من أحماض أمينية متجاورة عادة عند التعرض لتمسخ المذيبات بينما يتم فقد الحواتم المتكونة بواسطة ‎all‏ الثلاثي ‎sale‏ عند المعالجة 0 بمذيبات التمسخ. تتضمن الحاتمة عادة 3 أحماض أمينية على الأقل؛ وعادة ‎jl‏ « 5 أو 10-8 أحماض أمينية على الأقل في تكوين مكاني فريد. عندما يتم ذكر الحاتمة ضمن مدى رواسب حمض أميني في بروتين (على سبيل ‎(JB‏ ضمن الرواسب 25 إلى 44 من البروتين البشري تاو)؛ المدى شامل للرواسب التي تحدد حدودها. تسهم رواسب معينة ضمن المدى في الحاتمة؛ بينما قد لا تسهم حواتم أخرى. قد تكون الرواسب التي تكون الحاتمة أو قد لا تكون مجاورة لبعضها 5 البعض. وبالمثل؛ عندما يرتبط الجسم المضاد بحاتمة موجودة في مدى معين من الأحماض الأمينية؛ لا يحتاج الجسم المضاد لاتصال كل رواسب الأحماض الأمينية داخل المدى؛ قد تكون رواسب الحاتمة التي يتم وصلها بواسطة الجسم المضاد أو قد لا تكون مجاورة لبعضها البعض.
تتضمن طرق تعيين التكوين المكاني للحواتم» على سبيل ‎(Jal‏ التحليل البلوري بالأشعة السينية والرنين النووي المغناطيسي ثنائي الأبعاد. انظرء على سبيل ‎(Jal)‏ بروتوكولات موضعة الحاتمة؛ في طرق في البيولوجيا الجزيئية؛ مجلد 60« ‎Glenn E.
Morris, Ed.‏ (1996). يمكن تعريف الأجسام المضادة التي تتعرف على نفس الحواتم أو الحواتم المتداخلة بمقايسة مناعية بسيطة تظهر قدرة جسم مضاد واحد على المنافسة مع ارتباط جسم مضاد آخر بالأنتيجين المستهدف. يمكن أيضاً تحديد حاتمة الجسم المضاد بواسطة التحليل البلوري بالأشعة السينية للجسم المضاد المرتبط بالأنتيجين الخاص به لتحديد رواسب الاتصال. وعلى نحو بديل؛ يكون للجسمين المضادين نفس الحاتمة إذا كانت كل طفرات الحمض الأميني في الأنتيجين التي تقلل أو تقضي على ارتباط جسم مضاد واحد تقلل أو تقضي على ارتباط الآخر. يحتوي الجسمين 0 المضادين على حواتم متداخلة إذا كانت طفرات الحمض الأميني التي تقلل أو تقضي على ارتباط جسم مضاد واحد تقلل أو تقضي على ارتباط الآخر. يتضمن الاختراع أجسام مضادة والتي تتنافس مع 1685 و/أو التي ترتبط بنفس الحاتمة على البروتين البشري تاو ‎die‏ 1685. يتم تحديد التنافس بين الأجسام المضادة بواسطة مقايسة والتي بها الجسم المضاد تحت الاختبار يثبط الارتباط الخاص للجسم المضاد المرجعي ‎le)‏ سبيل المثال 1685) بأنتيجين 5 مشترك ‎lil)‏ على سبيل المثال» ‎Junghans‏ وآخرون»؛ أبحاث السرطان ¢1495:50 1990). يتنافس الجسم المضاد للاختبار مع الجسم المضاد المرجعي إذا كانت الزيادة من الجسم المضاد الخاص بالاختبار (على سبيل المثال». ‎x20 x10 »*5 x2‏ أو ‎x100‏ على الأقل) تثبط ارتباط الجسم المضاد المرجعي بنسبة 9650 على الأقل ولكن المفضل 9675 9690 أو 1699 كما هو مقاس في مقايسة الارتباط التنافسية. تتضمن الأجسام المضادة المحددة بواسطة مقايسة التنافس 0 (الأجسام المضادة التنافسية) أجسام مضادة ترتبط بنفس الحاتمة حيث يكون الجسم المضاد المرجعي والأجسام المضادة التي ترتبط بحاتمة مجاورة قريبة بما فيه الكفاية بالحاتمة بالحاتمة المرتبطة بالجسم المضاد المرجعي لحدوث المعاوقة الفراغية. يتضمن المصطلح "مريض" إنسان أو كائنات ‎dud‏ أخرى ‎ally‏ تتلقى إما علاج وقائي أو علاجي. لأغراض تصنيف استبدالات الأحماض الأمينية ‎amino acids‏ كمحافظة أو غير محافظة؛ يتم تقسيم الأحماض الأمينية إلى مجموعات كما يلي: مجموعة | (سلاسل جانبية كارهة للماء
‎cala «met :(neutral hydrophilic side chains‏ لد ‎tile <leu‏ مجموعة 1 (سلاسل جانبية محبة للماء محايدة): ‎thr eser cys‏ مجموعة ]11 (سلاسل جانبية حمضية): ‎tglu casp‏ مجموعة ‎IV‏ ‎Jud)‏ جانبية قاعدية): ‎casn‏ صلع» قثن #نياء عته؛ مجموعة 7 (الرواسب المؤثرة على اتجاه السلسلة): ‎cgly‏ 0«م؛ والمجموعة ‎VI‏ (سلاسل جانبية أروماتية): ‎erp‏ “روا عام. تتضمن الاستبدالات المحافظة استبدالات بين الأحماض الأمينية في نفس الفئة. تشكل الاستبدالات غير المحافظة استبدال عضو من أحد هذه الفئات بعضو فئة أخرى. يتم تحديد النسبة المئوية لتطابقات التتابع بتتابعات جسم مضاد محاذية بأقصى حد بواسطة اتفاقية ترقيم ‎Kabat‏ بعد المحاذاة؛ إذا تم مقارنة منطقة جسم المضاد للكائن (على سبيل المثال؛ المنطقة المتغيرة الناضجة الكاملة للسلسلة الثقيلة أو الخفيفة) بنفس المنطقة من الجسم 0 المضاد المرجعيء النسبة المئوية لتطابق التتابع بين الكائن ومناطق الجسم المضاد المرجعي تمثل عدد المواضع التي يتم شغلها بواسطة نفس الحمض الأميني في كل من الكائن ومنطقة الجسم المضاد المرجعي مقسومة على إجمالي عدد المواضع المتحاذية للمنطقتين» مع عدم احتساب الفجوات» ‎Lig puma‏ في 100 للتحويل إلى نسبة مئوية. يشير المصطلح 'مادة مساعدة" إلى مركب والذي عند تعاطيه بالاشتراك مع الأنتيجين 5 يقوي و/أو يعيد توجيه الاستجابة المناعية للأنتيجين» ولكن عن تعاطيه بمفرده لا يولد استجابة مناعية للأنتيجين. تستطيع المواد المساعدة تقوية الاستجابة المناعية بآليتات مختلفة تتضمن توظيف الخلايا اللمفاوية؛ تحفيز الخلايا 13 و/أو 7؛ وتحفيز البلاعم. يرتبط المرض بالبروتين البشري تاو إذا كان السكان المرضى المصابين بالمرض بهم مستويات زائدة من البروتين البشري تاو في المخ؛ أو ترسيب أو تضمينات زائدة من البروتين 0 البشري تاوء أو وجود تشابكات التاو في المخ؛ أو فسفرة زائدة للتاو في المخ (متوسط عدد مجموعات الفوسفات لكل تاو جزئ)؛ أو نقل بينخلوي أو داخل الخلايا شاذ للبروتين البشري تاو مقارنة بالسكان من الأشخاص غير المعروفين بأنهم مصابين بمرض عصبي. . يرتبط المرض أيضاً بالتاو إذا كان المرضى بهم شكل مختلف من الجين تاو بخطر زائد للإصابة بالمرض بالنسبة للمرضى الذين بهم جين تاو من النوع البري (في معظم الأحيان يوجد شكل مختلف في 5 السكان البشربين).
— 6 1 — الفرد يكون في خطر متزايد للإصابة بالمرض إذا كان بالكائن عامل خطر معروف واحد على ‎J‏ لأقل (على سبيل ‎JE‏ جيني كيميائي حيوي؛ تاريخ العائلة؛ التعرض الظرفي) يضع الأفراد المصابين بعامل الخطر هذا عند خطر أكبر هام احصائياً لتطوير المرض من الأفرد بدون عامل الخطر. المصطلح "عرض" يشير إلى دليل شخصي للمرض » مثل تغير المشية؛ كما تدرك من قبل المريض. تشير "العلامة' إلى دليل موضوعي للمرض كما هو ملاحظ من قبل الطبيب. الدلالة الاحصائية تعنى ‎0.05>p‏ ‏الوصف التفصيلى: يوفر الاختراع أجسام مضادة والتي ترتبط بالبروتين البشري تاو. ترتبط بعض الأجسام 0 المضادة على وجه التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 46-23 من ‎SEQ ID‏ رقم 1. ترتبط بعض الأجسام ‎salad)‏ بتاو بصرف النظر عن ‎dls‏ الفسفرة. تعمل بعض الأجسام المضادة وفقاً للاختراع على تثبيط أو تأخير الأمراض المرتبطة بتاو والتدهور العرضي المرتبط. وعلى الرغم من فهم الآلية ليس من المطلوب ممارسة الاختراع» قد يحدث خفض السمية كنتيجة للجسم المضاد المحفز لبلعمة التاو؛ مما يثبط دخول التاو أو التجميع البينخلوي؛ أو الارتباط بالجزيئات الأخرى؛ 5 عن طريق تثبيت التكوين غير السام؛ أو بتثبيط النقل البينخلوي أو داخل الخلايا لأشكال تاو المرضية؛ من بين آليات أخرى. الأجسام المضادة وفقاً للاختراع أو العوامل التي تحث هذه الأجسام المضادة يمكن استخدامها في طرق علاج أو الوقاية من مرض الزهايمر وأمراض أخرى مرتبطة بالبروتين البشري تاو. 2 البروتين البشري تاو ما لم يتضح غير ذلك من السياق؛ تعني الإشارة إلى البروتين البشري تاو شكل بشري طبيعي للتاو بما في ذلك كل الأشكال الإسوية بغض النظر عن وجود تعديل ما بعد الترجمة (على سبيل ‎(Ji‏ فسفرة؛ ارتباط بجزئ سكر؛ أو أستلة). هناك ست أشكال إسوية أساسية (أشكال مختلفة للجديلة) من التاو الموجود في المخ البشري. أطول هذه الأشكال المختلفة يحتوي على 1 حمض أميني؛ والذي له يتم شطر راسب ميت الأولي. يتم ترقيم الرواسب وفقاً للشكل الإسوي 441 وبالتالي؛ على سبيل ‎JEL‏ الإشارة إلى الفسفرة عند الموضع 404 يعني الموضع 404
‏من الشكل الإسوي 441؛ أو موضع مقابل لأي شكل إسوي آخر عند محاذاته بحد أقصى مع‎
Swiss-Prot ‏الشكل الإسوي 441. يشار إلى تتابعات الحمض الأميني للأشكال الإسوية وأرقام‎ ‏أدناه.‎ ‎(1 ‏رقم:‎ SEQ ID) P10636-8 © 5
MAEPRQEFEV MEDHAGTYGL GDRKDQGGYT MHQDQEGDTD AGLKESPLQT
PTEDGSEEPG
70 80 90 10 110 0
SETSDAKSTP TAEDVTAPLV DEGAPGKQAA AQPHTEIPEG TTAEEAGIGD
TPSLEDEAAG 10 30 140 150 16 170 0
HVTQARMVSK SKDGTGSDDK KAKGADGKTK IATPRGAAPP GQKGQANATR
IPAKTPPAPK
190 200 210 220 230 0
TPPSSGEPPK SGDRSGYSSP GSPGTPGSRS RTPSLPTPPT REPKKVAVVR 15
TPPKSPSSAK
250 2© 270 280 290 0
SRLQTAPVPM PDLKNVKSKI GSTENLKHQP GGGKVQIINK KLDLSNVQSK
CGSKDNIKHV ~~ 310 320 330 340 350 360
PGGGSVQIVY KPVDLSKVTS KCGSLGNIHH KPGGGQVEVK SEKLDFKDRV 20
QSKIGSLDNI
370 380 390 400 410 0
THVPGGGNKK IETHKLTFRE NAKAKTDHGA EIVYKSPVVS GDTSPRHLSN
VSSTGSIDMV
430 0 25
DSPQLATLAD EVSASLAKQG L
(2 ‏رقم:‎ SEQ ID) P10363-7
MAEPRQEFEV MEDHAGTYGL GDRKDQGGYT MHQDQEGDTD AGLKESPLQT
PTEDGSEEPG
70 80 90 100 110 0
SETSDAKSTP TAEAEEAGIG DTPSLEDEAA GHVTQARMVS KSKDGTGSDD 5
KKAKGADGKT
130 140 150 160 170 0
KIATPRGAAP PGQKGQANAT RIPAKTPPAP KTPPSSGEPP KSGDRSGYSS
PGSPGTPGSR
190 200 210 220 230 0 10
SRTPSLPTPP TREPKKVAVV RTPPKSPSSA KSRLQTAPVP MPDLKNVKSK
IGSTENLKHQ
250 260 270 280 290 300
PGGGKVQIIN KKLDLSNVQS KCGSKDNIKH VPGGGSVQIV YKPVDLSKVT
SKCGSLGNIH 15 310 320 330 340 350 60
HKPGGGQVEV KSEKLDFKDR VQSKIGSLDN ITHVPGGGNK KIETHKLTFR
ENAKAKTDHG
370 380 390 400 | 0
AEIVYKSPVV SGDTSPRHLS NVSSTGSIDM VDSPQLATLA DEVSASLAKQGL 0
P10636-6) SEQ ID(3 ‏رقم:‎ 10 20 30 40 50 60
MAEPRQEFEV MEDHAGTYGL GDRKDQGGYT MHQDQEGDTD
AGLKAEEAGI GDTPSLEDEA
70 80 90 100 110 0 25
AGHVTQARMYV SKSKDGTGSD DKKAKGADGK TKIATPRGAA PPGQKGQANA
TRIPAKTPPA
130 140 150 160 170 0
PKTPPSSGEP PKSGDRSGYS SPGSPGTPGS RSRTPSLPTP PTREPKKVAV
VRTPPKSPSS
190 20 210 220 230 0
AKSRLQTAPV PMPDLKNVKS KIGSTENLKH QPGGGKVQII NKKLDLSNVQ
SKCGSKDNIK 5 250 260 270 280 290 0
HVPGGGSVQI VYKPVDLSKV TSKCGSLGNI HHKPGGGQVE VKSEKLDFKD
RVQSKIGSLD
310 320 330 340 350 60
NITHVPGGGN KKIETHKLTF RENAKAKTDH GAEIVYKSPV VSGDTSPRHL 10
SNVSSTGSID
370 380
MVDSPQLATL ADEVSASLAK QGL
P10636-5) SEQ ID(4 ‏رقم:‎ 60 15
MAEPRQEFEV MEDHAGTYGL GDRKDQGGYT MHQDQEGDTD AGLKESPLQT
PTEDGSEEPG
70 80 90 100 110 0
SETSDAKSTP TAEDVTAPLV DEGAPGKQAA AQPHTEIPEG TTAEEAGIGD
TPSLEDEAAG 20 130 140 150 160 170 0
HVTQARMVSK SKDGTGSDDK KAKGADGKTK IATPRGAAPP GQKGQANATR
IPAKTPPAPK
190 20 210 220 230 0
TPPSSGEPPK SGDRSGYSSP GSPGTPGSRS RTPSLPTPPT REPKKVAVVR 25
TPPKSPSSAK
250 260 270 280 290 0
SRLQTAPVPM PDLKNVKSKI GSTENLKHQP GGGKVQIVYK PVDLSKVTSK
CGSLGNIHHK
210 320 330 340 350 60
PGGGQVEVKS EKLDFKDRVQ SKIGSLDNIT HVPGGGNKKI ETHKLTFREN
AKAKTDHGAE 5 370 380 390 400 | 0
IVYKSPVVSG DTSPRHLSNV SSTGSIDMVD SPQLATLADE VSASLAKQGL
)5 ‏رقم:‎ SEQ ID) P10636-4 60
MAEPRQEFEV MEDHAGTYGL GDRKDQGGYT MHQDQEGDTD AGLKESPLQT 10
PTEDGSEEPG
70 80 90 100 110 0
SETSDAKSTP TAEAEEAGIG DTPSLEDEAA GHVTQARMVS KSKDGTGSDD
KKAKGADGKT
30 140 150 160 170 0 15
KIATPRGAAP PGQKGQANAT RIPAKTPPAP KTPPSSGEPP KSGDRSGYSS
PGSPGTPGSR
190 200 210 220 230 0
SRTPSLPTPP TREPKKVAVV RTPPKSPSSA KSRLQTAPVP MPDLKNVKSK
IGSTENLKHQ 20 250 260 270 280 290 300
PGGGKVQIVY KPVDLSKVTS KCGSLGNIHH KPGGGQVEVK SEKLDFKDRV
QSKIGSLDNI
210 320 330 340 350 60
THVPGGGNKK IETHKLTFRE NAKAKTDHGA EIVYKSPVVS GDTSPRHLSN 25
VSSTGSIDMV
370 380
DSPQLATLAD EVSASLAKQG L
P10636-2) SEQ ID(6 ‏رقم:‎ ‎10 20 30 40 50 60
MAEPRQEFEV MEDHAGTYGL GDRKDQGGYT MHQDQEGDTD
AGLKAEEAGI GDTPSLEDEA
70 80 90 100 110 120
AGHVTQARMYV SKSKDGTGSD DKKAKGADGK TKIATPRGAA PPGQKGQANA
TRIPAKTPPA
130 140 150 160 170 180 10
PKTPPSSGEP PKSGDRSGYS SPGSPGTPGS RSRTPSLPTP PTREPKKVAV
VRTPPKSPSS
190 200 210 220 230 240
AKSRLQTAPV PMPDLKNVKS KIGSTENLKH QPGGGKVQIV YKPVDLSKVT 15
SKCGSLGNIH
250 260 270 280 290 300
HKPGGGQVEV KSEKLDFKDR VQSKIGSLDN ITHVPGGGNK KIETHKLTFR
ENAKAKTDHG
350 340 330 320 310 ‎AEIVYKSPVV SGDTSPRHLS NVSSTGSIDM VDSPQLATLA DEVSASLAKQ GL‏ تتضمن الإشارة إلى تاو متغيرات طبيعية معروفة حوالي 30 والتي منها يتم إدراج في قاعدة البيانات ‎Swiss-Pro‏ وتباديل منهاء بالإضافة إلى طفرات ترتبط بأمراض البروتين البشري تاو ‎fie‏ الخرف؛ مرض ‎(Pick‏ الشلل الدماغي فوق النووي ‎supranuclear palsy‏ » الخ. (انظرء 5 على سبيل المثال؛ قاعدة بيانات ‎Swiss-Pro‏ و ‎<Poorkaj‏ وآخرون. ‎Ann Neurol.‏ 815:43- 5 (1998)). بعض أمثلة طفرات تاو المرقمة بواسطة الشكل الإسوي 441 هي طفرة اللايسين ‎lysine‏ إلى ثريونين ‎threonine‏ عند راسب الحمض ‎١‏ لأميني ‎amino acid‏ 257 (122571)؛ طفرة أيزوليوسين ‎isoleucine‏ إلى فالين ‎valine‏ عند موضع الحمض الأميني 260 ‎¢(1260V)‏ طفرة
جلايسين ‎glycine‏ إلى فالين ‎valine‏ عند موضع الحمض الأميني 2 (62727)؛ ‎sla‏ ‏أسباراجين ‎asparagine‏ إلى لايسين ‎lysine‏ عند موضع الحمض الأميني 279 ‎¢(N279K)‏ طفرة أسباراجين ‎asparagine‏ إلى هيستيدين ‎histidine‏ عند موضع الحمض الأميني 296 ‎¢(N296H)‏ ‏طفرة برولين ‎proline‏ إلى سيرين ‎serine‏ عند موضع الحمض الأميني 301 ‎sl ¢(P301S)‏ جلايسين ‎glycine‏ إلى فالين ‎valine‏ عند موضع الحمض الأميني 303 (63037)؛ طفرة سيرين ‎serine‏ إلى أسباراجين ‎asparagine‏ عند الموضع 305 ‎¢(S305N)‏ طفرة جلايسين ‎glycine‏ إلى سيرين ‎serine‏ عند موضع الحمض الأميني 335 ‎¢(G335S)‏ طفرة فالين ‎valine‏ إلى ميثيونين ‎methionine‏ عند الموضع 337 ‎¢(V337M)‏ طفرة حمض جلوتاميك ‎glutamic acid‏ إلى فالين ‎valine‏ عند الموضع 342 ‎¢(E342V)‏ طفرة لايسين ‎lysine‏ إلى أيزوليوسين ‎isoleucine‏ عند 00 موضع الحمض الأميني 9 ‎¢(K3691)‏ طفرة جلايسين ‎glycine‏ إلى أرجينين ‎arginine‏ عند موضع الحمض ‎١‏ لأميني 9 (63898)؛ وطفرة أرجينين ‎arginine‏ إلى تريبتوفان ‎tryptophan‏ ‏عند موضع الحمض الأميني 406 (840617). يمكن فسفرة البروتين البشري تاو عند راسب حمض أميني واحد أو أكثر يتضمن التيروزين عند مواضع الحمض الأميني 18( 29؛ ‎OT‏ 310؛ و394 سيرين عند مواضع الحمض الأميني 5 184« 185« 198« و0199 02ك 208 214 235 237 238 262 293 324 356 396 400 404 409 412« 413« و422؛ وثريونين ‎threonine‏ عند مواضع الأحماض الأمينية 175« 181 205« 212 217« 4035231 3 الأجسام المضادة أ نوعية الارتباط والخواص الوظيفية يوفر الاختراع أجسام مضادة ترتبط بتاو. ترتبط بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 46-23 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة على ‎dag‏ ‏التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 44-25 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة ضمن 41-28 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 39-30 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام 5 المضادة على ‎dag‏ التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 36-30 من ‎SEQID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة على ‎dag‏ التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 39-33 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط
بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة ضمن الرواسب 36-33 من ‎SEQID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة على وجه التحديد بحاتمة تتضمن الرواسب 30-28, 31-28, 32-8, 33-28, 34-28, 35-28, 36-28, 37-28, 38-28, 39-28, 40-28, 28- 41 31-29, 32-29, 33-29, 34-29, 35-29, 36-29, 37-29, 38-29, 39-29, 40-29, 41-29, 32-30, 33-30, 34-30, 35-30, 36-30, 37-30, 38-30, 30- 9 40-30, 41-30, 33-31, 34-31, 35-31, 36-31, 37-31, 38-31, 39-31, 40-31, 41-31, 34-32, 35-32, 36-32, 37-32, 38-32, 39-32, 40-32, 32- 1 35-33, 36-33, 37-33, 38-33, 39-33, 40-33, 41-33, 36-34, 37-34 38-34, 39-34, 40-34, 41-34, 37-35, 38-35, 39-35, 40-35, 41-35, 36- 0 38, 39-36, 40-36, 41-36 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. ترتبط بعض الأجسام المضادة بتاو بصرف النظر عن ‎Alla‏ الفسفرة. ترتبط بعض الأجسام المضادة بحاتمة لا تتضمن راسب يخضع للفسفرة. يمكن الحصول على هذه الأجسام المضادة عن طريق التمنيع ببولي ببتيد تاو تم تنقيته من مصدر طبيعي أو تم التعبير الجيني له بشكل معاد الاتحاد. يمكن فحص الأجسام المضادة لارتباط تاو في شكل غير مفسفر بالإضافة إلى شكل يتم فيه فسفرة واحد أو أكثر من الرواسب المعرضة 5 للفسفرة. ترتبط هذه الأجسام المضادة على نحو مفضل بقيم ألفة غير قابلة للتمييز أو على الأقل ضمن عامل 1.5( 2 أو 3- أضعاف بتاو المفسفر مقارنةٌ بتاو غير المفسفر (أي؛ تكون شاملة التخصص). 1685 هو مثال على جسم مضاد أحادي النسيلة شامل التخصص. يوفر الاختراع أيضاً أجسام مضادة ترتبط بنفس الحاتمة ‎Jie‏ أي من الأجسام المضادة السابقة؛ مثل؛ على سبيل المثال؛ الحاتمة 1635. يتم أيضاً تضمين الأجسام المضادة المنافسة للارتباط بتاو مع أي من
الأجسام المضادة السابقة؛ مثل؛ على سبيل المثال؛ المنافسة مع 1685. يمكن توليد الأجسام المضادة سابقة الذكر مرة أخرى من خلال التمنيع بواسطة ببتيد يتضمن الرواسب 46-23, 44-25, 30-28, 31-28, 32-28, 33-28, 34-28, 28- 5. 36-28, 37-28, 38-28, 39-28, 40-28, 41-28, 31-29, 32-29, 33-29, 34-9, 35-29, 36-29, 37-29, 38-29, 39-29, 40-29, 41-29, 32-30, 30- 5 33, 34-30, 35-30, 36-30, 37-30, 38-30, 39-30, 40-30, 41-30, 33-31, 34-1, 35-31, 36-31, 37-31, 38-31, 39-31, 40-31, 41-31, 34-32, 32- 35, 36-32, 37-32, 38-32, 39-32, 40-32, 41-32, 35-33, 36-33, 37-33,
3 36, 39-33, 40-33, 41-33, 36-34, 37-34, 38-34, 39-34, 40-34, 34- 1 37-35, 38-35, 39-35, 40-35, 41-35, 38-36, 39-36, 40-36, 41-36 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 أو عن طريق التمنيع بواسطة بولي ببتيد تاو كامل الطول أو ‎gia‏ منه يشتمل على هذه الرواسب والكشف عن ارتباط معين بببتيد يتضمن هذه الرواسب. يتم إلصاق هذه الببتيدات على نحو مفضل بجزئ متقارن مغاير والذي يساعد في إظهار استجابة جسم مضاد للبيتيد. قد يكون الإلصاق مباشر أو عبر ببتيد مفساح أو حمض أميني. يتم استخدام السيستاين كحمض أميني مفساح لأن مجموعة 511 الحرة الخاصة به تسهل إلصاق جزئ حامل. يمكن أيضاً استخدام رابط بولي جلايسين (على سبيل المثال؛ 6-2 جلايسينات)؛ مع أو بدون راسب سيستاين بين الجلايسينات والببتيد. يعمل الجزئ الحامل على توفير ‎dala‏ خلية-1 والتي تساعد في إظهار 0 استجابة جسم مضاد مقابل الببتيد. هناك العديد من الحوامل شائعة الاستخدام على ‎dag‏ ‏الخصوص هيموسيانين اللزيق ‎ckeyhole limpet hemocyanin (KLH)‏ ألبومين البيض وألبومين المصل البقري ‎bovine serum albumin (BSA)‏ يمكن إضافة مفساحات الببتيد إلى مستمنع ببتيد ‎aS‏ من تركيب ببتيد صلب الطبقة. عادة ما يتم إضافة الحوامل عن طريق التشابك الكيميائي. تتضمن بعض الأمثلة على عوامل التشابك الكيميائي الممكن استخدامها المركب المتصالب 17- 5 ماليميدو-6- أمينو كابرويل إيستر أو «- ماليميدو بنتزويل-؟1- هيدروكسي ساكسينيميد إيستر ‎m-maleimidobenzoyl-N-hydroxysuccinimide ester (MBS)‏ (انظر على سبيل المقال؛ ‎Harlow, E. et al., Antibodies: A Laboratory Manual, Cold Spring Harbor Laboratory‏ ‎Nature, 336:778-780 (1988);‏ .لق ‎Press, Cold Spring Harbor, N.Y. 1988; Sinigaglia et‏ ‎Chicz et al., J.
Exp.
Med., 178:27-47 (1993); Hammer et al., Cell 74:197-203 (1993);‏ ‎Falk K. et al., Immunogenetics, 39:230-242 (1994); WO 98/23635; and, Southwood et ~~ 20‏ ‎J.
Immunology, 160:3363-3373 (1998)‏ .1ه). يمكن إلصاق الحامل والمفساح إن وجد بأي
طرف للمستمنع. يمكن استخدام ببتيد مع مفساح وحامل اختيارياً لتمنيع الحيوانات المختبرية أو خلايا- كما هو موصوف بمزيد من التفصيل أدناه. يمكن اختبار قدرة المواد الطافية لورم هجين على ربط 5 واحد أو أكثر من الببتيدات التي تتضمن الرواسب 46-24, 44-25, 30-28, 31-28, 28- 32, 33-28, 34-28, 35-28, 26 30, 37-28, 38-28, 39-26, 40-28, 41-28, 31-29, 32-29, 33-29, 34-29, 35-29, 36-29, 37-29, 38-29, 39-29, 29-
40, 41-29, 32-30, 33-30, 34-30, 35-30, 36-30, 37-30, 38-30, 39-30, 40-0, 41-30, 33-31, 34-31, 35-31, 36-31, 37-31, 38-31, 39-31, 31- 0 41-31, 34-32, 35-32, 36-32, 37-32, 38-32, 39-32, 40-32, 41-32, 35-3, 36-33, 37-33, 38-33, 39-33, 40-33, 41-33, 36-34, 37-34, 34- 38, 39-34, 40-34, 41-34, 37-35, 38-35, 39-35, 40-35, 41-35, 38-36, 39-6, 40-36, 41-36 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1 و/أو الأشكال المفسفرة وغير المفسفرة من تاو مثل؛ على سبيل المثال؛ شكل إسوي كامل الطول من تاو بالموضع 404 في شكل مفسفر. يمكن إلصاق الببتيد بحامل أو طفرة أخرى لتسهيل مقايسة الفحص. في هذه الحالة؛ يختلف الحامل أو الطفرة بشكل تفضيلي عن التوليفة من المفساح والجزئ الحامل المستخدم للتمنيع لإزالة الأجسام 0 المضادة المخصصة للمفساح أو الحامل بدلاً من ببتيد تاو. يمكن استخدام أي من الأشكال الإسوية لتاو.
يمكن أيضاً انتاج الأجسام المضادة التي لها نوعية ارتباط جسم مضاد فأري مختار (على سبيل المثال ‎(16B5‏ باستخدام ‎hay‏ لطربقة عرض العاثية. انظر البراءة الدولية 92/20791 ‎Winter,‏ هذه الطريقة مناسبة بشكل خاص لإنتاج الأجسام المضادة البشرية. في هذه الطريقة؛ يتم 5 استخدام أي من المناطق المتغيرة الثقيلة أو الخفيفة السلسلة للجسم المضاد الفأري المختار كمادة بداية. في حالة اختيار» على سبيل المثال» منطقة متغيرة خفيفة السلسلة كمادة بداية؛ يتم إنشاء مكتبة عاثية حيث يعرض الأعضاء نفس المنطقة المتغيرة خفيفة السلسلة (أي؛ مادة البداية الفأرية) ومنطقة متغيرة مختلفة ثقيلة السلسلة. يمكن الحصول على المناطق المتغيرة ثقيلة السلسلة على سبيل المثال من مكتبة للمناطق المتغيرة ثقيلة السلسلة البشرية المعادة ترتيبها. يتم اختيار عاثية 0 تظهر ارتباط محدد قوي للهدف المنشود (على سبيل المثال؛ ببتيد تاو) (على سبيل ‎(Jia)‏ 10" على الأقل وعلى نحو مفضل 210 ‎TM‏ على الأقل). تكون المنطقة المتغيرة ثقيلة السلسلة من هذه العاثية بعد ذلك بمثابة ‎sale‏ بداية لإنشاء مكتبة عاثية أخرى. في هذه المكتبة؛ تعرض كل عاثية نفس المنطقة المتغيرة ثقيلة السلسلة (أي؛ المنطقة المحددة من مكتبة العرض الأولى) ومنطقة متغيرة مختلفة خفيفة السلسلة. يمكن الحصول على المناطق المتغيرة خفيفة السلسلة على سبيل 5 المثال من مكتبة لمناطق خفيفة السلسلة متغيرة بشرية معاد ترتيبها. مرة أخرى؛ يتم اختيار عاثية تظهر ارتباط محدد قوي للهدفق المنشود. ‎Bale‏ ما يكون للأجسام المضادة الناتجة نفس نوعية
الحاتمة أو نوعية مماثلة ‎salad‏ البداية الفأرية.
— 6 2 — يمكن الحصول على الأجسام المضادة الأخرى من خلال تطفير ‎cDNA‏ المرمزة للسلاسل الثقيلة والخفيفة لجسم مضاد تمثيلي؛ مثل 1685. الأجسام المضادة أحادية النسيلة التى تكون مطابقة بنسبة 9690 9695 أو 9699 على الأقل ل 1685 في تتابع الحمض الأميني للمناطق المتغيرة الثقيلة و/أو الخفيفة السلسلة الناضجة وتحتفظ بخواصها الوظيفية؛ و/أو التى تختلف عن الجسم المضاد ‎Jad)‏ بعدد صغير من استبدالات الحمض الأميني الغير هامة وظيفياً (على سبيل ‎(JU)‏ استبدالات تحفظية)؛ عمليات الحذف؛ أو الإدخال ترد أيضاً في الاختراع. يتم أيضاً تضمين الأجسام المضادة أحادية النسيلة التى تحتوي على واحد على الأقل وعلى نحو مفضل جميع ‎CDR(s)‏ الستة كما تحدده ‎Kabat‏ والتي تكون مطايقة بنسبة 97690 5 9699 أو 00 ل ‎CDRs‏ المقابلة ل 1685. 0 0 الأجسام المضادة غير البشرية يمكن القيام بإنتاج أجسام مضادة أخرى أحادية النسيلة غير بشرية؛ على سبيل المثال» فأرية؛ خنازير غينيا؛ الرئيسات؛ الأرانب أو الجرذان» مضادة لمستمنع؛ على سبيل المثال؛ تقوم بتمنيع الحيوان بواسطة مستمنع كما هو موصوف سابقاً. انظر ‎Harlow & Lane, Antibodies, A‏ ‎Laboratory Manual (CSHP NY, 1988)‏ (يدخل على سبيل المرجعية لجميع الأغرارض) ‎٠‏ يمكن 5 1 الحصول على هذا المستمنع من مصدر طبيعي عن طريق تركيب ببتيد أو عن طريق التعبير الجينى معاد الاتحاد. اختيارياً» يمكن تعاطي المستمنع مع ‎ale‏ مساعدة. يمكن استخدام العديد من أنواع المواد المساعدة كما هو موصوف أدناه. يتم تفضيل المادة المساعدة فرويند الكاملة متبوعة بمادة مساعدة غير كاملة لتمنيع الحيوانات المختبرية. ‎Bale‏ ما تستخدم الأرانب أو خنازير غينيا لعمل الأجسام 0 المضادة متعددة النسائل. ‎Sale‏ ما تستخدم الفئران لعمل الأجسام المضادة أحادية النسيلة. يتم فحص الارتباط الخاص للأجسام المضادة واختيارياً» يتم فحص ارتباط الأجسام المضادة أيضاً بمنطقة معينة من تاو. يمكن تحقيق هذا الفحص من خلال تحديد ارتباط جسم مضاد بمجموعة من طافرات الحذف لتاو وتحديد أي من طافرات الحذف ترتبط بالجسم المضاد. يمكن تقييم الارتباط على سبيل المثال؛ بواسطة لطخة وبسترن» ‎FACS™‏ أو 51158. ج. الأجسام المضادة المؤنسنة
جسم مضاد مؤنسن هو جسم مضاد تم هندسته جينياً حيث يتم تطعيم ‎CDRs‏ من جسم مضاد ‎"mild‏ غير بشري ‎(Ae)‏ سبيل المثال» 1685) في تتابعات جسم مضاد بشري 'مستقبلة" (انظرء على سبيل المثال» ‎Queen, US 5,530,101 and 5,585,089; Winter, US 5,225,539, Carter,‏ ‎(US 6,407,213, Adair, US 5,859,205 6,881,557, Foote, US 6,881,557‏ قد تكون تتابعات الجسم المضاد المستقبلة؛ على سبيل المثال؛ تتابع جسم مضاد بشري ناضج؛ مركب من هذه التتابعات؛ تتابع توافق من تتابعات جسم مضاد بشري؛ أو تتابع منطقة سلالة جرثومية. وبالتالي؛ جسم مضاد مؤنسن هو جسم مضاد يحتوي على بعض أو كل ‎CDRs‏ بالكامل أو إلى حد كبير من جسم مضاد مانح وتتابعات إطار عمل منطقة متغيرة ومناطق ثابتة؛ إن وجدت؛ بالكامل أو إلى حد كبير من تتابعات جسم مضاد بشري. على نحو مماثل تحتوي سلسلة ثقيلة مؤنسنة على الأقل على 0 واحده اثنين وعادةً كل ‎CDRs‏ الثلاثة بالكامل أو إلى حد كبير من سلسلة ثقيلة لجسم مضاد ‎(mile‏ ‏وتتابع إطار عمل منطقة متغيرة ثقيلة السلسلة ومنطقة ثابتة ثقيلة السلسلة؛ إن وجدت؛ إلى حد كبير من إطار عمل منطقة متغيرة ثقيلة السلسلة بشرية وتتابعات منطقة تابتة. على نحو مماثل تحتوي سلسلة خفيفة مؤنسنة على الأقل على واحد؛ اثنين وعادةً كل ‎CDRs‏ الثلاثة بالكامل أو إلى حد كبير من سلسلة خفيفة لجسم مضاد مانح؛ وتتابع إطار عمل منطقة متغيرة خفيفة السلسلة 5 ومنطقة ثابتة خفيفة السلسلة؛ إن وجدت؛ إلى حد كبير من إطار عمل منطقة متغيرة خفيفة السلسلة بشرية وتتابعات منطقة تابتة. بخلاف الأجسام النانوية و0805؛ يشتمل جسم مضاد مؤنسن على سلسلة ثقيلة مؤنسنة وسلسلة خفيفة مؤنسنة. يكون ‎CDR‏ في جسم مضاد مؤنسن إلى حد كبير من ‎CDR‏ مقابل في جسم مضاد غير بشري عندما تكون %85 9690 1695 أو 96100 على الأقل من الرواسب المقابلة (كما تحدده ‎(Kabat‏ متطابقة بين ‎CDRs‏ المعنية. وتكون تتابعات 0 إطار عمل المنطقة المتغيرة لسلسلة جسم مضاد أو منطقة ثابتة لسلسلة جسم مضاد إلى حد كبير من تتابع إطار عمل منطقة متغيرة بشرية أو منطقة ثابتة بشرية على التوالي عندما تكون 85؛
0.؛ 95 أو 96100 على الأقل من الرواسب المقابلة المحددة من قبل ‎Kabat‏ متطابقة. رغم أن الأجسام المضادة المؤنسنة غالباً ما تتضمن كل ‎CDRs‏ الستة ‎le)‏ نحو مفضل كما تحدده ‎(Kabat‏ من جسم مضاد فأري ؛ فإنه يمكن تصنيعها أيضاً ‎Jab‏ من جميع ‎CDRs‏ (على سببيل ‎(JU‏ على الأقل 3؛ 4؛ أو 5) ‎CDRs‏ من جسم مضاد فأري (على سبيل المثال؛ ‎Pascalis et al., J.
Immunol. 169:3076, 2002; Vajdos et al., Journal of Molecular Biology,‏
320: 415-428, 2002; Iwahashi et al., Mol.
Immunol. 36:1079-1091, 1999; Tamura et al,
‎(Journal of Immunology, 164:1432-1441, 2000‏ . في بعض الأجسام المضادة يكون هناك حاجة إلى ‎gia‏ فقط من ‎«CDRs‏ أي مجموعة فرعية من رواسب ‎CDR‏ المطلوية للارتباط تسمى ‎(SDRs‏ للاحتفاظ بالارتباط في جسم مضاد مؤنسن. يمكن تحديد رواسب ‎CDR‏ الغير متصلة بالانتيجين وليست في ‎SDRs‏ بالاعتماد على الدراسات السابقة (على سبيل المثال رواسب 1160-1165 في ‎H2‏ 008 غالباً ما تكون غير مطلوية)» من مناطق ‎Kabat CDRs‏ التي تقع خارج حلقات ‎Chothia‏ مفرطة التغير ‎Chothia, J.)‏ ‎Biol. 196:901, 7‏ .1401)؛ من خلال النمذجة الجزيئية و/أو بالتجرية؛ أو كما هو موصوف في ‎Mol.
Immunol. 41: 863, 2004‏ لة ‎.Gonzales et‏ في هذه الأجسام المضادة المؤنسنة في 0 المواضع التي لا يوجد فيها واحد أو أكثر من رواسب ‎CDR‏ المائحة أو التي يتم فيها حذف ‎CR‏ ‎mile‏ بالكامل؛ قد يكون الحمض الأميني الذي يشغل الموضع هو حمض أميني يشغل الموضع المقابل (بواسطة ترقيم ‎(Kabat‏ في تتابع الجسم المضاد المستقبل. عدد استبدالات المستقبل للأحماض الأمينية المائحة في ‎CDRs‏ تعكس التوازن بين الاعتبارات المنافسة. هذه الاستبدالات يحتمل أن تكون مفيدة في تقليل عدد الأحماض الأمينية الفأرية في جسم مضاد مؤنسن وبالتالي 5 تقليل الاستمناع المحتمل. ومع ذلك؛ قد تسبب الاستبدالات ‎Lad‏ تغيرات في الألفة؛ ويتم على نحو مفضل تجنب الانخفاضات الكبيرة في الألفة. يمكن ‎Load‏ اختيار مواضع الاستبدال داخل ‎CDRs‏
‏والأحماض الأمينية المستبدلة تجريبياً. يمكن اختيار تتابعات الجسم المضاد المستقبل البشري اختيارياً من بين العديد من تتابعات الجسم المضاد البشري المعروفة لتوفير درجة عالية من تطابق التتابع (على سبيل المثال» 65- 0 9685 تطابق) بين إطارات عمل منطقة متغيرة لتتابع مستقبل بشري وإطارات عمل منطقة متغيرة مقابلة لسلسلة جسم ‎alias‏ مانح. يمكن اختيار بعض الأحماض الأمينية من رواسب إطار عمل منطقة متغيرة بشرية للاستبدال على أساس التأثير المحتمل لها على تشكيل ‎CDR‏ و/أو الارتباط بالانتيجين. تحقيق هذه التأثيرات المحتملة يكون عن طريق النمذجة؛ فحص خصائص الأحماض الأمينية في مواقع معينة؛ 5 أو الملاحظة التجريبية ‎HEY‏ استبدال أو تطفير أحماض أمينية معينة.
— 9 2 — على سبيل المثال» عندما يختلف حمض أمينى بين ‎al)‏ إطار عمل منطقة متغيرة فأرية وراسب إطار عمل منطقة متغيرة بشرية مختارة؛ فإنه يمكن استبدال الحمض الأمينى لإطار العمل البشري بحمض أميني لإطار عمل مكافئ من الجسم المضاد الفأري عندما يكون المتوقع بشكل معقول أن الحمض الأميني: يرتبط بالانتيجين ‎Bale‏ بشكل غير تساهمي؛ يكون مجاور لمنطقة ‎(CDR‏ ‏يتفاعل بخلاف ذلك مع منطقة ‎CDR‏ (على سبيل ‎JE‏ يكون على بعد حوالي 6 ‎A‏ من منطقة ‎(CDR‏ (على سبيل المثال» يتم تحديده علن طريق نمذجة سلسلة خفيفة أو ثقيلة على الهيكل المنحل لسلسلة جلوبيولين مناعي معروفة متماثلة)؛ و ‎aly 10‏ يترسب في السطح البيني ‎.VL-VH‏ ‏رواسب إطار العمل من الفئات )1( )3( كما هو محدد من قبل البراءة الأمريكية 5,530,101 ‎Queen,‏ يشار إليها أحياناً بالتتاوب برواسب معيارية وفيرنييه. رواسب إطار العمل التي تحدد الفئة المعيارية لحلقات ‎CDR‏ المانحة التى تحدد شكل حلقة ‎CDR‏ يشار إليها أحياناً برواسب معيارية ‎Chothia and Lesk, J.
Mol.
Biol. 196, 901-917 (1987), Thornton & Martin J.
Mol.
Biol., )‏ 1996 ,800-815 ,263( هناك طبقة من رواسب إطار العمل التي تدعم تشكيلات الحلقة الرابطة للانتيجين تلعب دور في التوليف الدقيق لملائمة جسم مضاد بالانتيجين ويشار إليها أحياناً برواسب فيرنييه )487-499 ,224 ‎(Foote & Winter, 1992, J Mol Bio.‏ المرشحين الآخرين للاستبدال هي الأحماض الأمينية لإطار العمل البشري المستقبل التي تكون غير معتادة لجلوبيولين مناعي بشري 0 في ذلك الموضع. يمكن استبدال هذه الأحماض الأمينية بأحماض أمينية من الموضع المكافئ للجسم المضاد المانح الفأري أو من المواضع المكافئة للجلوبيولينات المناعية البشرية الأكثر نموذجية. المرشحين الآخرين للاستبدال هي الأحماض الأمينية لإطار عمل بشري مستقبل والتي تكون غير معتادة لجلوييولين مناعي بشري في ذلك الموضع. يوفر الاختراع أشكال مؤنسنة من الجسم المضاد 1685 الفأري. يشتمل الجسم المضاد 5 الفأري على مناطقة متغيرة ناضجة ثقيلة وخفيفة السلسلة لها تتابعات حمض أمينى تشتمل على
‎SEQ ID‏ الأرقام 10 و16 على التوالي. يوفر الاختراع أحد المناطق المتغيرة التمثيلية الناضجة المؤنسنة ثقيلة السلسلة ‎(HT)‏ وثلاثة مناطق متغيرة تمثيلية ناضجة مؤنسنة خفيفة السلسلة ‎(L1)‏ ‏2 و3)). بديل 11112 له نفس الألفة أو ألفة أفضل من 1685 مخلط وسبعة طفرات رجعية. تملك 1111.1 و 11113 نفس الألفة من 1685 مخلط وستة طفرات جينية.
يوفر الاختراع بدائل لجسم مضاد 1635 مؤنسن 11112 والتي فيها تظهر المنطقة المتغيرة الناضجة المؤنسنة ‎ALE‏ السلسلة تطابق بنسبة 9690 9695 9696 9697 9698 أو 9699 على الأقل ل ‎SEQ ID‏ رقم: 15 وتظهر المنطقة المتغيرة الناضجة المؤنسنة خفيفة السلسلة تطابق تتابع بنسبة 9690 9695 9696 9697 9698 أو 9699 على الأقل ل ‎SEQ ID‏ رقم: 22. على نحو ‎Junie‏ في هذه الأجسام المضادة يتم الاحتفاظ ببعض أو كل الطفرات الرجعية في
0 11112. وبعبارة ‎«opal‏ يشغل ‎K‏ على الأقل 1؛ 2؛ أو 3 من مواضع ‎(HI3‏ يشغل 14 الموضع 8 ويشغل ‎F‏ الموضع 1191. على نحو مفضل يشغل ‎N‏ على الأقل» 1 2؛ 3 أو كل الأربع مواضع ل 1ا؛ يشغل ‎L‏ الموضع 4ا؛ يشغل ‎F‏ الموضع ‎Jang L36‏ 5 الموضع 43ا. تكون المناطق ‎CDR‏ لهذه الأجسام المضادة المؤنسنة على نحو مفضل مطابقة أو مطابقة إلى حد كبير لمناطق ‎CDR‏ ل 11112 والتي تكون نفس تلك التي لجسم مضاد مانح فأري. يمكن تحديد مناطق
‎CDR 5‏ بواسطة ‎(of‏ تحديد تقليدي ‎Ae)‏ سبيل المثال» ‎(Chothia‏ ولكن على نحو مفضل كما هو محدد من قبل ‎Kabat‏
‏هناك احتمال واحد لاختلاف إضافي في بدائل 1685 وهو طفرات رجعية إضافية في إطارات عمل المنطقة المتغيرة. العديد من رواسب إطار العمل الغير متصلة ب ‎CDRs‏ في ‎mAb‏ ‏المؤنسنة يمكنها استيعاب استبدالات الأحماض الأمينية من المواضع المقابلة ل ‎mAb‏ فأري مانح
‏0 أو أجسام مضادة أخرى فأرية أو بشرية؛ وحتى العديد من الرواسب المحتملة المتصلة ب ‎CDR‏ ‏تكون أيضاً قابلة للاستبدال أو حتى قد يتم تغيير الأحماض الأمينية داخل ‎(CDRs‏ على سبيل المثال» بالرواسب الموجودة في الموضع المقابل للتتابع المستقبل البشري المستخدم لإمداد إطارات عمل المنطقة المتغيرة. بالإضافة إلى ذلك؛ يمكن استخدام تتابعات مستقبلة بشرية بديلة؛ على سبيل ‎(Jal‏ للسلة الثقيلة و/أو الخفيفة. في حالة استخدام تتابعات مستقبلة مختلفة؛ قد لا يتم إجراء
‏5 واحدة أو أكثر من الطفرات الرجعية المقترحة سابقاً لأن الرواسب المائحة والمستقبلة المقابلة تكون بالفعل هى نفسها بدون طفرة رجعية. على سبيل ‎(JB)‏ عند استخدام تتابع مستقبل ثقيل السلسلة حيث يشغل ‎K‏ موضع 1113 بالفعل لا يكون هناك ضرورة لأي طفرة رجعية.
— 1 3 — يتضمن الاختراع ‎Load‏ أجسام مضادة مؤنسنة حيث تظهر المناطق المتغيرة الناضجة الخفيفة والثقيلة السلسلة تطابق تتابع بنسبة 90( 95 96 97 98 أو 9699 على الأقل مع المناطق المتغيرة الناضجة الخفيفة والثقيلة السلسلة للجسم المضاد ‎HILT‏ 1685 المؤنسن ‎SEQ)‏ ‎ID‏ أرقام: 21 و15؛ على التوالي) أو الجسم المضاد 11113 1635 المؤنسن ‎SEQ ID)‏ أرقام: 23 155 على التوالي). ‎La‏ الأجسام المضادة المخلطة والمكسوة يوفر الاختراع أيضاً أشكال مخلطة ومكسوة من الأجسام المضادة غير البشرية؛ على وجه الخصوص الجسم المضاد ‎.16B5‏ ‏الجسم المضاد المخلط هو جسم مضاد يتم فيه اتحاد المناطق المتغيرة الناضجة لسلاسل 0 خفيفة وثقيلة لجسم مضاد غير بشري (على سبيل ‎(Jha)‏ فأر) مع مناطق ثابتة بشرية خفيفة وثقيلة السلسلة. تحتفظ هذه الأجسام المضادة إلى حد كبير أو تماماً بنوعية الارتباط للجسم المضاد الفأري؛ وتكون حوالي ثلثي تتابع بشري. الجسم المضاد المكسو هو نوع من الأجسام المضادة المؤنسنة التي تحتفظ ببعض ‎Boley‏ ‏كل ‎CDRs‏ وبعض رواسب إطار العمل منطقة متغيرة غير بشرية لجسم مضاد غير بشري لكنها 5 تستبدل رواسب إطار عمل المنطقة المتغيرة الأخرى التي قد تساهم في حواتم الخلية-8 أو -7؛ على سبيل المثال الرواسب المكشوفة )1991 ,28:489 ‎(Padlan, Mol.
Immunol.‏ بالرواسب من المواضع المقابلة لتتابع جسم مضاد بشري. النتيجة هي جسم مضاد تكون فيه ‎CDRs‏ بالكامل أو إلى حد كبير من جسم مضاد غير بشري ودتم جعل إطارات عمل المنطقة المتغيرة للجسم المضاد غير البشري شبه بشرية أكثر عن طريق الاستبدالات. يرد في الاختراع الأشكال المكسوة من أي 0 جسم مضاد 1685. ‎a‏ الأجسام المضادة البشرية يتم توفير الأجسام المضادة البشرية المضادة لتاو بواسطة العديد من التقنيات الموصوفة ‎NERY‏ . تتضمن طرق إنتاج ‎١‏ لأجسام المضادة البشرية طريقة ‎trioma‏ من ‎Oestberg et al.,‏ ‎Hybridoma 2:361-367 (1983); Oestberg, U.S.
Patent No. 4,634,664; and Engleman et‏ ‎cal, US Patent 4,634,666 5‏ استخدام الفئران المعدلة وراثياً متضمنة جينات الجلوبيولين المناعي
— 2 3 — البشرية (انظرء على سبيل المثال» 115 ,5,877,397 ‎Lonberg et al., W093/12227 (1993); US‏ ‎US 5,814,318, US 5,789,650, US 5,770,429, US 5,661,016, US 5,633,425,‏ ,5,874,299 ‎US 5,625,126, US 5,569,825, US 5,545,806, Nature 148, 1547-1553 (1994), Nature‏ ‎Biotechnology 14, 826 (1996), Kucherlapati, WO 91/10741 (1991)‏ وطرق عرض العاثية (انظرء على سبيل المثال» ‎Dower et al, WO 91/17271 and McCafferty et al, WO‏ ‎US 5,877,218, US 5,871,907, US 5,858,657, US 5,837,242, US 5,733,743‏ ,$92/01047 ‎.US 5,565,332‏ و. اختيار المنطقة الثابتة يمكن ربط المناطقة المتغيرة الثقيلة والخفيفة السلسلة لأجسام مضادة مخلطة؛ مؤنسنة 0 (متضمنة المكسوة)؛ أو بشرية ‎olan‏ على الأقل من منطقة ثابتة بشرية. يعتمد اختيار منطقة ثابتة؛ ‎(Lisa‏ على أي من متمم يعتمد على الجسم المضاد و/أو سمية للخلايا بوساطة خلوية. على سبيل المثال؛ يكون للنظائر البشرية 1801 و1803 سمية للخلايا بوساطة متمم بينما يكون للنظائر البشرية 1802 و1504 سمية للخلايا بوساطة متمم قليلة جداً أو منعدمة. قد تكون المناطق الثابتة خفيفة السلسلة لمدا أو كابا. يمكن إجراء التعبير الجيني للأجسام المضادة كتيتراميرات تحتوي على 5 اثنين من السلاسل الخفيفة واثنين من السلاسل الثقيلة؛. كسلاسل ثقيلة؛ سلاسل خفيفة منفصلة؛ فى شكل ‎(Fv (Fab, Fab), F(ab')2‏ أو في شكل أجسام مضادة أحادية السلسلة يتم فيها ربط المناطق المتغيرة الثقيلة والخفيفة السلسلة خلال مفساح. تظهر المناطق الثابتة البشرية اختلاف أنماط خيفية واختلاف أنماط خيفية آيزو بين 0 المواضع متعددة الأشكال. تختلف الأنماط الخيفية آيزو عن الأنماط الخيفية في أن الأمصال التي تدرك نمط خيفى آيزو ترتبط بمنطقة غير متعددة الأشكال لواحد أو أكثر من الأنماط الإسوية الأخرى. تتضمن الإشارة إلى منطقة ثابتة بشرية منطقة ثابتة بأي نمط خيفي طبيعي أو أي تبديل للرواسب التي تشغل المواضع متعددة الأشكال في الأنماط الخيفية الطبيعية أو ما يصل إلى 53 أو 0 1 استبدا لات لتقليل أو زيادة الوظيفة المستفعلة كما هو موصوف أدناه . قد يكون واحد أو العديد من الأحماض الأمينية في طرف الأمينو أو الكريوكسي لسلسلة خفيفة و/أو ثقيلة 3 ‎Jia‏ لايسين الطرف ‎C-‏ للسلسلة الثقيلة مفقود أو مشتق في نسبة من أو كل
الجزيئات. يمكن إجراء الاستبدالات في المناطق الثابتة لتقليل أو زيادة الوظيفة المستفعلة مثل السمية للخلايا بوساطة متمم أو ‎ADCC‏ (انظرء على سبيل المثال؛ ‎Winter et al., US Patent‏ ‎US Patent No. 5,834,597; and Lazar et al., Proc.
Natl.
Acad.‏ لق ‎No. 5,624,821; Tso et‏ ‎(Sei.
USA 103:4005, 2006‏ أو لإطالة نصف العمر في الإنسان (انظرء على سبيل المثال؛ ‎J.
Biol.
Chem. 279:6213, 2004 5‏ ..له ‎(Hinton et‏ تتضمن الاستبدالات التمثيلية ‎Gln‏ في موضع 0 و/أو ‎Leu‏ في موضع 428 (يتم استخدام ترقيم ‎EU‏ في هذه الفقرة للمنطقة الثابتة) لزيادة نصف عمر جسم مضاد. الاستبدال في أي من أو كل المواضع 234 235 236 و/أو 237 يقلل الألفة لمستقبلات ‎Foy‏ على ‎dag‏ الخصوص مستقبل 170/81 (انظر؛ على سبيل ‎(Jud)‏ ‏البراءة الأمريكية 6,624,821( يتم تفضيل استبدال آلانين في المواضع 234 235 و237 ل 0 1801 بشري لتقليل الوظائف المستفعلة. ‎(Las)‏ يتم استبدال المواضع 234 236 و/أو 237 في 1802 بشري بآلانين والموضع 235 بجلوتامين. ‎dail)‏ على سبيل المثال؛ البراءة الأمريكية 6,624,821( ز٠‏ التعبير الجيني للأجسام المضادة معادة الاتحاد_ ‎Expression of Recombinant‏ ‎Antibodies‏ ‏15 يتم ‎Bale‏ إنتاج الأجسام المضادة المخلطة؛ المؤنسنة (متضمنة المكسوة) والبشرية عن طريق التعبير الجيني معاد الاتحاد. قد تكون الأحماض النووية المرمزة للأجسام المضادة محسنة الكودون للتعبير الجيني في نمط الخلية المرغوب فيه (على سبيل المثال» ‎CHO‏ أو 2/0م5). الأحماض النووية المرمزة للمناطق المتغيرة المؤنسنة ذات السلسلة الثقيلة والخفيفة 1685 المبينة هنا لها تتابعات تشتمل على أو تتألف من؛ على سبيل المثال» ‎SEQ ID‏ رقم: 25 (مرمزة ل ‎SEQ ID «(Hul6B5 HI 0‏ رقم: 26 (مرمزة ل 11 ‎SEQ ID ¢(Hul6B5‏ رقم: 27 (مرمزة ل ‎¢(Hul6B5 L2‏ أو ‎SEQ ID‏ رقم: 28 (مرمزة ل ‎L3‏ 101685). بالنسبة للمناطق المتغيرة التي تتضمن ببتيدات إشارة مثل ‎SEQ ID‏ أرقام 10 و16؛ يمكن للحمض النووي ترميز المنطقة المتغيرة مع أو بدون ببتيد الإشارة. قد توجد أجزاء الحمض النووي المرمزة للسلاسل الثقيلة والخفيفة على نفس جزئ الحمض النووي المجاور أو على جزيئات منفصلة. يمكن التعبير الجيني للسلاسل الثقيلة والخفيفة من نفس الناقل أو من ناقلات مختلفة. ‎Bale‏ ما يتم توفير الأحماض النووية في شكل معزول.
قد يتم ربط الأحماض النووية المرمزة لمنطقة متغيرة مؤنسنة ثقيلة السلسلة 1685 بجزءٍ حمض نووي مرمز لمنطقة ثابتة بشرية 1861؛ على سبيل المثال؛ له التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 30. قد تتضمن هذه الأحماض النووية أيضاً إنترون يقع بين الأجزاء المرمزة للمنطقة المتغيرة ثقيلة السلسلة والمنطقة الثابتة 1801, أي» 5“ إلى ‎gall‏ المرمز للمنطقة الثابتة. يتم توضيح تتابع حمض نووي تمثيلي مرمز لمنطقة ثابتة 1801 بشرية ويحتوي على إنترون فأري في الطرف 5“ له في ‎SEQID‏
رقم: 31. يمكن ريط الأحماض النووية المرمزة للمناطق المتغيرة المؤنسنة خفيفة السلسلة ‎gyn 16B5‏ حمض نووي مرمز لمنطقة ثابتة ‎LIS‏ بشرية؛ على سبيل المثال؛ لها تتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 33. قد تتضمن هذه الأحماض النووية أيضاً إنترون بين الأجزاء المرمزة للمنطقة المتغيرة خفيفة السلسلة 0 والمنطقة الثابتة ‎LIS‏ (أي؛ 5“ إلى المنطقة الثابتة كابا). يتم توضيح تتابع حمض نووي تمثيلي مرمز لمنطقة ثابتة ‎LIS‏ بشرية ويحتوي على إنترون بشري في الطرف 5" له في ‎SEQ ID‏ رقم:
34 ‎Bale‏ ما تتضمن تركيبات البولي نيوكليوتيد معادة الاتحاد تتابع تحكم في التعبير الجيني مرتبط بشكل قابل للتشغيل بتتابعات الترميز لسلاسل الجسم المضاد؛ متضمنة مناطق المعزز 5 المرتبطة بطبيعة الحال أو المغايرة. على نحو مفضل؛ تتابعات التحكم في التعبير الجيني هي أنظمة معزز حقيقي النواة في ناقلات قادرة على تحويل أو نقل العدوى للخلايا المضيفة حقيقية النواة. بمجرد إدخال الناقل في المضيف المناسب؛ يتم الاحتفاظ بالمضيف في ظل ظروف مناسبة للتعبير الجيني عالي المستوى لتتابعات النيوكليوتيد؛ وتجميع وتنقية الأجسام المضادة متصالبة التفاعل. قد يحتوي أيضاً الناقل أو الناقلات المرمزة لسلاسل الجسم المضاد على جين قابل 0 لللاختيار؛ مثل ‎JU‏ هيدروفولات ريدكتاز أو جلوتامين ‎Glia‏ للسماح بتضخيم عدد نسخ
الأحماض النووية المرمزة لسلاسل الجسم المضاد. ‎E. coli‏ هو مضيف بدائي النواة مفيد بشكل خاص للتعبير الجيني للأجسام المضادة؛ على وجه الخصوص أجزاء الجسم المضاد. الميكروبات؛ مثل الخميرة مفيدة أيضاً للتعبير الجيني. السكيراء يمثل مضيف خميرة مفضل؛ مع ناقلات مناسبة تحتوي على تتابعات تحكم في التعبير 5 الجيني؛ أصل التنسخ؛ تتابعات الإنهاء وما شابه ذلك كما هو مطلوب. تتضمن المعززات النموذجية 3- فوسفوجليسيرات كيناز والإنزيمات الأخرى الحالة للسكر. تتضمن معززات الخميرة
المحرضة؛ من بين أمور أخرى؛ المعززات من نازعات هيدروجين الكحول؛ آيزوسيتوكروم ‎isocytochrome ©‏ ؛ والإنزيمات المسئولة عن استخدامات المالتوز ‎maltose‏ والجالاكتوز ‎.galactose‏ ‏الخلايا الثديية تمثل مضيف مفضل للتعبير الجيني لأجزاء النيوكليوتيد المرمزة للجلوبيولينات المناعية أو أجزاء منهاء انظر ‎VCH ( <Winnacker, From Genes to Clones‏ ‎(Publishers, NY, 1987‏ هناك عدد من خطوط الخلية المضيفة المناسبة القادرة على إفراز بروتينات مغايرة سليمة قد تم تطويرها في المجال؛ وتتضمن خطوط خلية ‎«CHO‏ خطوط خلية 5 المختلفة؛ خلايا ‎(HeLa‏ خلايا ‎(L LDA (HEK293‏ والمايلومات غير المنتجة للأجسام المضادة متضمنة 502/0 ‎NSO‏ على نحو مفضلء الخلايا تكون غير بشرية. قد تتضمن ناقلات 0 التعبير الجيني لهذه الخلايا تتابعات التحكم في التعبير الجيني؛ مثل أصل تنسخ؛ معزز؛ محسن ‎«(Queen et al., Immunol.
Rev. 89:49 (1986))‏ ومواقع معلومات المعالجة الضرورية؛ مثل مواقع ارتباط الريبوسوم» مواقع تراكب ‎(RNA‏ مواقع تذييل بعديد الأدينيلات؛ وتتابعات منهية نسخية. تتابعات التحكم في التعبير الجيني المفضلة هي المعززات المشتفة من جينات داخلية المنشاًء فيروس مضخم ‎(LIAN‏ 517740؛ فيروسة غدانية؛ فيروس الورم الحليمي البقري؛ وما شابه 5 ذلك. انظر )1992( 148:1149 ‎.Co etal, J.
Immunol.‏ بعد إدخال الناقل (الناقلات) المرمزة للسلاسل الثقيلة والخفيفة لجسم مضاد في مزرعة خلية؛ يمكن فحص نمو الإنتاجية لتجمعات الخلايا وجودة المنتج في أوساط خالية من المصل. يمكن بعد ذلك إخضاع تجمعات الخلايا الأكثر إنتاجاً لاستنساخ الخلايا الأحادي المعتمد على ‎FACS‏ وذلك لتوليد خطوط أحادية النسيلة. يتم تفضيل إنتاجيات محددة أعلى من 50 بيكوجرام أو 0 100 بيكوجرام لكل خلية يومياً؛ والتي تتوافق مع معايير المنتج لمزرعة أكبر من 7.5 جم/لتر. يمكن أيضاً اختبار الأجسام المضادة المنتجة عن طريق استنساخات الخلية الفردية فيما يتعلق بالتعكرء. خواص الترشيح» ‎(EF PAGE‏ فحص الأآشعة فوق البنفسجية؛ ‎(HP—SEC‏ موضعة الكربوهيدرات- قليل السكاريد؛ تحليل الطيف الكتلي؛ ومقايسة الارتباطء مثل ‎ELISA‏ أو ‎‘Biacore‏ ‏يمكن بعد ذلك تكديس نسيلة مختارة في قوارير متعددة وتخزينها مجمدة لاستخدام لاحق. بمجرد إجراء التعبير الجيني؛ يمكن تنقية الأجسام المضادة وفقاً للإجراءات المعيارية بالمجال؛ متضمنة التقاط بروتين م كروماتوجرافيا العمود (على سبيل المثال؛ التفاعل الطارد
للماء أو التبادل الآيوني)؛ انخفاض الأس الهيدروجيني لتعطيل الفيروس وما شابه ذلك (انظر بشكل علي )1982 ‎(Scopes, Protein Purification (Springer-Verlag, NY,‏ يمكن استخدام منهجية الإنتاج التجاري للأجسام المضادة؛ متضمنة تحسين الكودون» اختيار المعززات؛ عناصر ‎all‏ والمواد المنهية؛ استنساخ الخلية الفردي الخالي من المصل؛ تكديس الخلاياء استخدام واسمات الاختيار لتضخيم عدد النسخ؛ منهي ‎«CHO‏ استنساخ الخلية الفردي الخالي من المصل؛ تحسين عيارات البروتين (انظرء على سبيل المثال؛ البراءات الأمريكية 4 6.114.148» 6» 063,598» 7,569,339 والبرارزرءات ‎Leal‏ ‏2004/050884« 2008/012142« 2005/019442« 2008/107388« 1 ولأمركية 5,888,809( 4 المستمنعات النشطة يعمل عامل يستخدم في التمنيع النشط في مريض على حث نفس أنواع الجسم المضاد الموصوفة ‎Lad‏ يتعلق بالتمنيع اللافاعل السابق. قد تكون العوامل المستخدمة للتمنيع النشط من نفس أنواع المستمنعات المستخدمة لتوليد الأجسام المضادة أحادية النسيلة في الحيوانات المختبرية؛ على سبيل المثال؛ ببتيد من 15-3 أو 12-3 أو 12-5( أو 8-5 أحماض أمينية متجاورة من 5 منطقة تاو المقابلة للرواسب 46-23, 44-25, 41-28 أو 39-30 من 588010 رقم 1؛ مثل؛ على سبيل المثال؛ ببتيد يتضمن الرواسب 30-28, 31-28, 32-28, 33-28, 34-28, 35-8, 36-28, 37-28, 38-28, 39-28, 40-28, 41-28, 31-29, 32-29, 29- 33, 34-29, 35-29, 36-29, 37-29, 38-29, 39-29, 40-29, 41-29, 32-30, 33-30, 34-30, 35-30, 36-30, 37-30, 38-30, 39-30, 40-30, 41-30, 31- 0 33, 34-31, 35-31, 36-31, 37-31, 38-31, 39-31, 40-31, 41-31, 34-32, 35-32, 36-32, 37-32, 38-32, 39-32, 40-32, 41-32, 35-33, 36-33, 33- 17 38-33, 39-33, 40-33, 41-33, 36-34, 37-34, 38-34, 39-34, 40-34, 41-4, 37-35, 38-35, 39-35, 40-35, 41-35, 38-36, 39-36, 40-36, 36- 1 من ‎SEQ ID‏ رقم: 1. لحث الأجسام المضادة على الارتباط بنفس الحاتمة أو ‎dala‏ متراكبة ‎die 5‏ 1685 يمكن تعيين نوعية الحاتمة لهذه الأجسام المضادة (على سبيل المثال» من خلال اختبار الارتباط بسلسلة من الببتيدات المتراكبة الممتدة عبر تاو). يمكن بعد ذلك استخدام جزءِ من
تاو الذي يتألف من أو يتضمن أو يتراكب مع الحاتمة كمستمنع. ‎Bale‏ ما تستخدم هذه الأجزاء في الحامل المغاير والمادة المساعدة؛ عند استخدامهما قد يكونا نفس المستخدمين لتوليد جسم
مضاد أحادي النسيلة؛ ولكن قد يتم اختيارهما أيضاً من أجل ملائمة دوائية أفضل للاستخدام في
الإنسان. تتضمن الحوامل المناسبة ألبومينات المصل؛ هيموسيانين اللزيق؛ جزيئات الجلوبيولين المناعي؛ الجلوبيولين الدرقي» ألبومين البيض» ذوفان ‎«BSI‏ أو ذوفان من بكتيريا إمراضية أخرى؛
مثل الخناق ‎(Ao)‏ سبيل المثال؛ ‎((CRMI9T‏ الإشريكية القولونية؛ الكوليراء أو الملوية البوابية؛ أو
مشتق سم موهن. حواتم الخلية ‎T‏ هي أيضاً جزيئات حامل مناسبة. يمكن تشكيل بعض المتقارنات بواسطة عوامل الريط بالاختراع إلى جزئ بوليمر تحفيزي مناعي (على سبيل المثال؛ ثالث
0 بالميتول-5- جليسرين سيستاين ‎((PamaCys)‏ مانان (بوليمر مانوز)؛ أو جلوكان ‎PB)‏ 8 1->2 بوليمر))؛ مركبات سيتوكين ‎Ae)‏ سبيل المثال» 1-اء ألفا 1-اا وببتيدات قي 2ل 7-1117 ‎(GM-CSF 11-0‏ وكيموكينات ‎Ao)‏ سبيل ‎«Jud‏ 0-1101 و8 ؛ 5 ‎RANTES‏ ). قد يتم
ربط المستمنعات بحوامل مع أو بدون مفساحات أحماض أمينية ‎Ae)‏ سبيل ‎«Jal‏ راع-زاع). تتضمن الحوامل الإضافية جسيمات شبيهة بالفيروسات. الجسيمات الشبيهة بالفيروسات ‎Virus-‏
‎dike particles (VLPs) 5‏ تسمى أيضاً فيربونات زائفة أو جسيمات مشتقة من فيروسات؛ تمثل تركيبات وحدة فرعية تتألف من عدة نسخ من قفيصة فيروسية و/أو بروتين غلافي قادر على التجميع الذاتي في الجسيمات الشبيهة بالفيروسات ‎VLPs‏ لتماثل كروي محدد في جسم الكائن الحي. (.415ه:(25 ‎PLoS ONE‏ )2007( .له ‎(Powilleit, et‏ على نحو بديل» يمكن ربط مستمنعات الببتيد بحاتمة خلية-آ1 اصطناعية واحدة على الأقل قادرة على ريط نسبة كبيرة من
‏0 جزيئات ‎MHC‏ من الفئة الثانية؛ ‎Jie‏ حاتمة ‎DR‏ الشاملة ‎("PADRE")‏ يتم وصف ‎PADRE‏ في البراءة الدولية 95/07707< البراءة الأمريكية 142°5,736 « 5 ‎Alexander J et al, Immunity,‏
‏)1994( 1:751-761. قد توجد المستمنعات النشطة في شكل متعدد القسيمات والذي فيه توجد نسخ
‏متعددة من مستمنع و/أو حامل منه في شكل جزئ تساهمي واحد.
‏غالباً ما يتم تعاطي الأجزاء مع مواد مساعدة مقبولة صيدلياً. تعمل المادة المساعدة على
‏5 زبادة عيار الأجسام المضادة المستحثة و/أو ألفة ارتباط الأجسام المضادة المستحثة بالنسبة لحالة استخدام الببتيد بمفرده. قد يتم استخدام مجموعة متنوعة من المواد المساعدة في توليفة مع جزءٍ مستمنع من تاو لإحداث استجابة مناعية. تزيد المواد المساعدة المفضلة من الاستجابة الداخلية
لمستمنع بدون التسبب في تغييرات تكييفية في المستمنع مما يؤثر على الشكل الكيفي للاستجابة. تتضمن المواد المساعدة المفضلة أملاح ألومنيوم»؛ ‎Jie‏ هيدروكسيد الألومنيوم وفوسفات الألومنيوم؛ 0-3- دهن أحادي فسفوريل مرتبط بأسيل ‎(MPL™) A‏ (انظر البراءة البربطانية ‎(RIBI InmunoChem Research Inc., Hamilton, Montana) 2220211‏ وهو ‎OY)‏ جزءِ من ‎Stimulon' QS-21 +(Corixa 5‏ يمثل ثالث تيريين جليكوسيد أو صابونين معزول عن لحاء شجرة ‎Quillaja Saponaria Molina‏ الموجودة في أمريكا الجنوبية (انظر ‎Kensil et al., in Vaccine‏ ‎Design: The Subunit and Adjuvant Approach (eds.
Powell & Newman, Plenum Press,‏ ‎NY, 1995); US 5,057,540), (Aquila BioPharmaceuticals, Framingham, MA; now‏ ‎(Antigenics, Inc., New York, NY‏ . المواد المساعدة الأخرى هي الزيت في مستحلبات الماء ‎Jie) 10‏ السكوالين أو زيت الفول السوداني)؛ اختيارياً في توليفة مع المنشطات المناعية؛ مثل دهن أحادي الفسفوريل ‎A‏ (انظر )1997( 86-91 ,336 ‎et al., N.
Engl.
J.
Med.‏ 50016)؛ بوليمرات بلورونيك» ومتفطرات مقتولة. المواد المساعدة ‎Ribi‏ هي مستحلبات زيت في الماء. تحتوي ‎Ribi‏ ‏على زيت قابل للاستقلاب (سكوالين) مستحلب مع محلول ملحي يحتوي على 80 18660. يحتوي ‎Load Ribi‏ على منتجات متفطرات مكررة التي تعمل كحافزات مناعية ودهن أحادي فسفوريل بكتيري ‎LA‏ هناك مادة مساعدة أخرى وهي البراءة الدولية 98/40100 0م0. يمكن ‎alas‏ المواد المساعدة كمكون من تركيبة علاجية مع عامل نشط أو يمكن تعاطيها بشكل منفصل؛ قبل؛
بالتزامن مع؛ أو بعد تعاطي العامل العلاجي. يمكن أيضاً استخدام نظائر الأجزاء الطبيعية من تاو التي تحث الأجسام المضادة ضد تاو. على سبيل ‎(JU‏ يمكن استبدال واحد أو أكثر أو كل الأحماض الأمينية-ا بالأحماض الأمينية 0 في هذه الببتيدات. يمكن أيضاً عكس ترتيب الأحماض الأمينية (ببتيد رجعي). اختيارياً ببتيد يتضمن كل الأحماض الأمينية-7 بترتيب عكسي (ببتيد رجعي- معكوس). الببتيدات والمركبات الأخرى التي لا تحتوي بالضرورة على تتابع حمض أميني كبير مشابه لببتيدات تاو لكنها مع ذلك تكون بمثابة محاكيات لببتيدات تاو وتحث على استجابة مناعية مماثلة. يمكن أيضاً استخدام الأجسام المضادة للأنماط الذاتية ضد الأجسام المضادة أحادية النسيلة ‎lal‏ كما هو 5 موصوف سابقاً. هذه الأجسام المضادة ل ‎١0‏ تحاكي الانتيجين وتولد استجابة مناعية له (انظر ‎Essential Immunology, Roit ed., Blackwell Scientific Publications, Palo Alto, CA 6th‏
.(ed., p. 181
يمكن أيضاً تعاطي الببتيدات (واختيارياً حامل مندمج مع الببتيد) في شكل حمض نووي مرمز للببتيد والتعبير الجيني لها في موضعها في مريض. عادةً ما يتم ريط جزءِ حمض نووي مرمز لمستمنع بعناصر تنظيمية؛ مثل معزز ومحسن يسمح بالتعبير الجيني ‎gral‏ 0178 في الخلايا المستهدفة المقصودة لمريض. بالنسبة للتعبير الجيني في خلايا ‎coal)‏ حيث يكون مطلوياً لإحداث استجابة مناعية؛ العناصر المعززة والمحسنة من جينات الجلوبيولين المناعي الخفيفة والثقيلة السلسلة أو المعزز والمحسن المبكر للمتوسط الرئيسي ‎CMV‏ تكون مناسبة للتعبير الجيني المباشر. غالباً ما يتم استنساخ العناصر التنظيمية المربوطة وتتابعات الترميز في ناقل. يمكن أيضاً تعاطي الأجسام المضادة في شكل أحماض نووية مرمزة لسلاسل الجسم المضاد الثقيلة و/أو الخفيفة. في حالة وجود كل من السلاسل الثقيلة والخفيفة؛ يتم ربط السلاسل على نحو مفضل 0 كجسم مضاد أحادي السلسلة. يمكن أيضاً تحضير الأجسام المضادة للتعاطي الخامل على سبيل المثال» بواسطة كروماتوجرافيا الألفة من أمصال المرضى المعالجين بمستمنعات الببتيد.
يمكن نقل ال 0178 فى شكل عاري (أى, بدون مواد غروية أو مغلفة). يمكن استخدام عدد من أنظمة ناقل فيروسى ‎Ya‏ من ذلك تتضمن أنظمة قهقرية (انظر , ‎Lawrie and Tumin, , Xie‏ ‎(Cur.
Opin.
Genet.
Develop. 3, 102-109 (1993)‏ نواقل فيروسية غددية [انظر, ‎Bett et , Nie‏ ‎5(al, J.
Virol. 67, 591 1 (1993) 5‏ نواقل فيروسية مرتبطة بالغدد (اتظر, مثلاً, ‎Zhou ct al., J.‏ ‎(Exp.
Med. 179, 1867 (1994)‏ نواقل فيروسية من عائلة الفيروسات الجدرية تتضمن فيروس الوقس وفيروسات جدرى الطيور, نواقل فيروسية من جنس فيروس ألفا مثل تلك المشتقة من فيروسات غابة ستدبيس وسيميليكى (اتظر, مثلاً, 508-519 ,70 ‎Dubensky et al., J.
Virol.‏ (1996)), فيروس التهاب الدماغ المتعلق بالفرس الفنزويلى (انظر البراءة الأمريكية 5,643,576), 0 وفيروسات ريدية, مثل فيروس التهاب الفم الحويصلى (انظر البراءة الدولية 96/34625) وفيروسات الورم الحليمى ) ‎Ohe et al., Human Gene Therapy 6, 325-333 (1995); Woo et al,‏
‎(Xiao & Brandsma, Nucleic Acids.
Res. 24, 2630-2622 (1996) 5s WO 94/12629‏ . يمكن تعبئة ‎DNA‏ الذى يقوم بترميز مستمنع, أو ناقل يحتوى على نفس المستمنع, إلى ليبوسومات. يتم وصف لبيدات مناسبة ونظائر متعلقة بها بواسطة البراءات الأمريكية 5 5,208,036 264,618:5» 5,279,833 و 5,283,185. يمكن ‎Lead‏ امتزاز نواقل و ‎DNA‏ ‏يقوم بترميز مستمنع أو مرتبطة بحوامل جسيمية, تتضمن أمثلة هذه الحوامل بوليمرات بولى ميثيل
— 0 4 — ميثاكريلات ويولى لاكتيدات ويولى (لاكتيد.- جليكوليدات مساعدة) ‎,poly(lactide-co-glycolides)‏ ‏(انظر , مثلاً, 1996 ‎-(McGee et al., J.
Micro Encap.‏ 5. طرق الفحص يمكن فحص الأجسام المضادة ‎dually Liaw‏ لتخصصية الارتباط المراد كما هو موصوف أعلاه. يمكن فحص المستمنعات النشطة أيضاً بالنسبة للسعة لتحفيز أجسام مضادة بتخصصية الارتباط هذه. فى هذه الحالة, يتم استخدام مستمنع نشط لتطعيم حيوان مختبرى واختبار الأمصال الناتجة لتخصصية ا لارتباط المناسبة. يمكن اختبار أجسام مضادة لها تخصصية الارتباط المرغوية حينئذ فى نماذج خلوية وحيوانية. الخلايا المستخدمة لهذا الفحص هى ‎WIS‏ عصبية على نحو مفضل. تم تقرير نموذج 0 خلوى لباثولوجيا البروتين البشري تاو التى يتم فيها إصابة ورم الخلايا البدائية العصبية بعدوى مع نطاق مكرر اربع مرات من تاو, اختيارياً مع طفرة مرتبطة بباثولوجيا تاو (مثل, ‎delta K280‏ ‎(Khlistunova, Current Alzheimer Research 4, 544-546 (2007) kil‏ 4 نموذج أخر , يتم تحفيز تاو فى خط ‎LIA‏ ورم الخلايا البدائية العصبية 1128 ‎neuroblastoma‏ بواسطة إضافة الدوكسى سيكلين ‎.doxycyclin‏ تمكن نماذج الخلايا الشخص من دراسة سمية البروتين البشري تاو 5 فى الحالة القابلة للذويان أو المتجمعة, ظهور مجموعات تاو بعد تشغيل التعبير الجينى لجين تاو, تذويب مجموعات تاو بعد إطفاء التعبير الجينى مرة أخرى, وكفاءة الأجسام المضادة فى تثبيط تكوين مجموعات تاو أو تفكيكها. يمكن ‎Lad‏ فحص أجسام مضادة أو مستمنعات فى نماذج حيوانات معدلة وراثياً فى أمراض مرتبطة بتاو. يمكن أن تتضمن هذه الحيوانات المعدلة وراثياً جين معدل ‎Wis‏ تاو (مثل, 0 أى من الأنماط الإسوية البشرية) وجيم معدل ‎APP Lily‏ بشرى من بين جينات أخرى, مثل كيناز يقوم بفسفرة التاى ‎ApoE phosphorylates tau‏ , بربسينيلين ‎presenilin‏ أو ألفا سينيوكليين ‎alpha‏ ‏«نعاء«سره. يتم تنظيم هذه الحيوانات المعدلة وراثياً لتطوير علامة واحدة أو عرض واحد على الأقل لمرض مرتبط بالتاو. حيوان معدل وراثياً مثالى هو خط ال 163 من الفئران ) ‎Itner et al., Proc.
Natl.
Acad.‏ ‎(Sci.
USA 105(41):15997-6002 (2008) 5‏ هذه الفئران لها جين معدل ‎Wily‏ تاو بشرى بطفرة ‎K‏ ‏1 369 (الطفرة مرتبطة بمرض بيكس) ومعزز ‎Thy‏ 2 . 1 . يبين هذه النموذ ‎z‏ دورة سريعة لتنكس
الأعصاب, عجز الحركة وتنكس الألياف الواردة وخلايا حبيبية مخيخية. حيوان مثالى آخر هو خط ال ‎pRS‏ فى الفئران. هذه الفئران لها جين معدّل وراثياً تاو بشرى بطفرة ,73011 (ترتبط الطفرة بخبل > صدغى) ومعزز ‎Taconic, Germantown, N.Y., Lewis, et al., Nat Genet. ) 1.2 Thy‏ )2000( 25:402-405( هذه الفئران لها دورة أكثر تدريجية من تنكس الأعصاب. تطور الفئران التشابكات العصبية الليفية فى مناطق مخية عديدة والحبل الشوكى, والذى يتم دمجه هنا على سبيل المرجعية فى مجمله). هذا نموذج ممتاز لدراسة نتائج التطور التشابكى ولعلاج الفحص الذى قد يقوم بتثبيط توليد هذه المجموعات. ميزة أخرى لهذه الحيوانات هى البداية المبكرة نسبياً للمريض. فى الخط متماثل اللاقحة, يمكن ملاحظة اضطرابات سلوكية مرتبطة بباثولوجيا تاو كل 3 شهور مبكراً على الأقل, ولكن تبقى الحيوانات صحيحة نسبياً حتى سن 8 شهور على الأقل. بعبارة أخرى, 0 عند 8 شهور, تتحرك الحيوانات, تطعم نفسها, ويمكن أن تؤدى المهام السلوكية بدرجة كافية جيداً لتسمح بمتابعة تأثير العلاج. التطعيم النشط لهذه الفئران من سن 13-6 شهر بعيارات مولدة ‎Al‏ ‎KLH-PHF-1‏ 1» لحوالى 1000 وبينت تشابكات عصبية ليفية أقل, أقل 056:422, وانخفاض فقدان الوزن بالنسبة لفئران التحكم غير المعالجة.
يمكن تقييم نشاط الأجسام المضادة أو العوامل النشطة بواسطة معايير متنوعة تتضمن 5 انخفاض كمية التاو الكلية أو التاو المفسفر, انخفاض فى خصائص باثولوجية أخرى, مثل ترسبات نشوية من ‎AB‏ وتثبيط أو تأخير تأخرات سلوكية. يمكن أيضاً اختبار مستمنعات نشطة لتحفيز أجسام مضادة فى الأمصال. يمكن اختبار كل من المستمنعات الغير فعالة والنشطة لمرور أجسام مضادة عبر حاجز الدم فى الدماغ إلى مخ حيوان معدل وراثياً. يمكن أيضاً اختبار أجسام مضادة أو أجزاء تقوم بتحفيز جسم مضاد فى رئيسيات غير بشرية تطور أعراض أمراض تتميز بالتاو 0 بصورة طبيعية أو من خلال التحفيز. يتم ‎fale‏ تنفيذ اختبارات على جسم مضاد أو عامل نشط بالتزامن مع تحكم يتم فيه توصيل تجرية موازية ماعدا الجسم المضاد أو العامل النشط غائب (مثل, يتم استبداله بمادة تخفيف). يمكن حينئذ تقدير انخفاض, تأخير أو تثبيط علامات أو أعراض
مرض قابل للوص ف إلى جسم مضاد أو عامل نشط تحت الاختبار بالنسبة للتحكم.
6.». مرضى قابلين للعلاج اكتشف وجود تشابكات عصبية ليفية فى أمراض عديدة تتضمن مرض الزهايمر, متلازمة داون, خلل إدراكى طفيف, شلل رعاش تال لالتهاب الدماغ, خرف ما بعد الصدمة أو خرف
الملاكمين, مرض نيمان بيك النوع ©, شلل فوق النواة, خرف جبهى صدغى, التنكس الفصى الجبهى الصدغى, التصلب الجانبى الضمورى/مركب خرف الشلل الرعاش المعقد جوام, وشلل فوق النواة المتقدم ‎PSP‏ يمكن أيضاً استخدام الأنظمة الحالية فى علاج أو الوقاية من أى من هذه الأمراض.
بسبب الارتباط واسع الانتشار بين الأمراض العصبية وحالات التاو, يمكن استخدام الأنظمة الحالية فى علاج أو الوقاية لأى شخص يظهر لديه مسويات مرتفعة من التاو والتاو مفسفر (مثلاً, فى ‎(CSP‏ مقارنةٌ بقيمة متوسطة فى أفراد بدون مرض عصبى. يمكن ‎Lad‏ ‏استخدام الأنظمة الحالية فى علاج أو الوقاية من مرض عصبى فى أفراد لديهم طفرة فى التاو مرتبطة بمرض عصبى. الطرق الحالية مناسبة خصيصاً لعلاج أو الوقاية من مرض الزهايمر,
0 وخصوصاً فى المرضى. يتضمن المرضى القابلين للعلاج أفراد عند خطر مرض ولكن بدون أعراض, وكذلك مرضى تظهر عليهم أعراض حالياً. يتضمن المرضى على خطر مرض أولئك الذين يعانون من خطر مرض وراثى. يتضمن هؤلاء المرضى أولئك الذين لديهم أقارب اكتسبوا هذا المرض, وأولئك الذين يتم تحديد الخطر بواسطة تحليل دلالات وراثية أو بيوكيميائية. تتضمن الدلالات الوراثية 5 للخطر طفرات فى التاو, مثل تلك التى تمت مناقشتها أعلاه, وكذلك طفرات طفرات فى ‎Glia‏ ‏أخرى مرتبطة بمرض عصبى. على سبيل المثال, اليل 800124 فى شكل متخالف اللاقحة وحتى أكثر فى شكل متماثل اللاقحة مرتبط بخطر مرض الزهايمر. تتضمن دلالات حيوية خطر مرض الزهايمر طفرات فى جين ال ‎APP‏ خصوصاً فى الموضع 717 والمواضع 6715670 المشار إليها كطفرات قوية وسويدية بالتبادل, طفرات فى جينات البريزينيلين, 751 و ‎,PS2‏ تاريخ عائلة 0 0م, فرط الكوليسترول فى الدم أو تصلب الشرايين. المرضى الذين يعانون حالياً من مرض الزهايمر يمكن التعرف ‎agile‏ بواسطة التصوير المقطعى بالإصدرار البوزيترونى, من خرف متميز, وكذلك وجود عوامل خطر موصوفة أعلاه. بالإضافة إلى ذلك, عدد من اختبارات تشخيصية متاحة للتعرف على أفراد لديهم ‎LAD‏ تتضمن هذه قياس مستويات ‎CSF tau‏ أو فوسفو تاو و 8042. تدل مستويات التاو أو فوسفو تاو و 8842 منخفضة على وجود ال ‎JAD‏ بعض الطفرات مرتبطة 5 بمرض باركنسون. ‎Ala30Pro‏ أو 1053, أو طفرات فى جينات أخرى مرتبطة بمرض باركنسون مثل كيناز متكرر غنى بالليوسين, ‎PARKS‏ يمكن تشخيص الأفراد بأى من الأمراض العصبية المذكورة أعلاه بواسطة معايير ال ‎DSM IV TR‏
— 3 4 — فى المرضى الذين لا يعانون من أعراض, يمكن أن يبداً العلاج فى أى سن (مثل, 10 ‎Bale (30,20‏ ومع ذلك, من غير الضرورى بدء العلاج حتى يصل مربض سن 40, 50, 60 أو 70 سنة من العمر . يستلزم العلاج ‎Bale‏ جرعات متعددة خلال فترة زمنية . يمكن متابعة العلاج بواسطة مقايسة مستويات جسم مضاد عبر الزمن. إذا لم تتم الاستجابة, يتم الإشارة إلى جرعة منشطة. فى ‎Ala‏ مرضى متلازمة داون المحتملة, يمكن أن يبدا العلاج قبل الولادة بواسطة إعطاء عامل علاجى للام أو بعد الولادة بفترة قصيرة. 7. تركيبات صيدلية وطرق العلاج فى تطبيقات وقائية, يتم إعطاء جسم مضاد أو عامل لتحفيز جسم مضاد أو نفس التركيبة الصيدلية إلى مريض عرضة ل , أو وإلا بخطر مرض (مثل, مرض الزهايمر) فى نظام (الجرعة ‎disks 0‏ الإعطاء) الفعالة لخفض الخطر, تقليل الشدة, أو تأخير بداية علامة واحدة أو عرض واحد على الأقل فى المرض. بالأخص, النظام فعال على نحو مفضل فى تثبيط أو تأخير التاو أو فوسفو- تاو وخيوط مزدوجة مكونة منها فى المخ, و/أو تثبيط أو تأخير آثارها السامة و/أو تثبيط /أو تأخير تطور تأخرات سلوكية. فى تطبيقات علاجية, يتم إعطاء جسم مضاد أو عامل لتحفيز جسم مضاد إلى مريض يتم الاشتباه فيه, أو يعانى بالفعل من مرض (مثل, مرض الزهايمر) فى 5 نظام (جرعة, تكرار وطريقة الإعطاء) فعالة لتخفيف أو على الأقل تثبيط تدهور إضافى لعلامة واحدة أو عرض واحد فى المرض. بالأخص, النظام فعال على نحو مفضل لتخفيض أو تثبيط ‎sal)‏ إضافية على الأقل لمستويات التاو, فوسفور- تاو, أو خيوط مزدوجة منها, سميات مرتبطة و/أو تأخرات سلوكية. يتم اعتبار نظام فعال علاجياً أو وقائياً إذا حقق مريض معالج فردياً نتيجة أكثر مواتاة من 0 النتيجة المتوسطة فى تعداد ضابط لمرضى قابلين للمقارنة لم يتم علاجهم بطرق الاختراع, أو إذا تم توضيح نتيجة أكثر مواتاة فى مرضى معالجين مقابل مرضى ضابط فى تجرية إكلينيكية مضبطة (مثلاً, مرحلة 2, مرحلة 3/2 أو تجرية مرحلة 3) فى ال م < 0.05 أو 0.01 أو حتى مستوى 0.001. تتفاوت الجرعات الفعالة اعتماداً على عوامل كثيرة مختلفة, مثل وسيلة إعطاء, موقع 5 الهدف, ‎dlls‏ المريض الفسيولوجية, سواء كان المريض حامل ل 8001, سواء كان المريض إنسان أو حيوان, أدوية كثيرة تم إعطاؤها, وسواء كان العلاج وقائياً أو علاجياً.
— 4 4 — يكون مدى الجرعة المثالى للأجسام المضادة من حوالى 0.01 إلى 5 مجم/كجم, وأكثر ‎Bile‏ من 0.1 إلى 3 مجم/كجم أو 2-0.15 مجم/كجم أو من 1.5-0.15 مجم/كجم, من وزن جسم المريض. ‎(Sa‏ إعطاء جسم مضاد بهذه الجرعات يومياً, على أيام متبادلة, أسبوعيا, مرة كل أسبوعين, شهرياً, فصلياً, أو وفقاً لأى جدول آخر بواسطة تحليل تجريبى. يستلزم العلاج التجريبى إعطاء جرعات متعددة خلال فترة مطولة, على سبيل المثال, ستة أشهر على الأقل. تستلزم أنظمة العلاج المثالى الإضافى الإعطاء مرة/كل أسبوعين أو مرة كل شهر أو مرة كل من 3 إلى 6 أشهر. تتفاوت كمية عامل للإعطاء النشط من 1 500-0 ميك روجم /مريض وأكثر ‎Bale‏ من 1- 0 أو 10-1 ميكروجم/حقنة للإعطاء البشرى. يمكن أن يتفاوت توقيت الحقنات بصورة كبيرة 0 من مرة/اليوم, إلى مرة/السنة, إلى مرة/عقد. يتكون النظام النموذجى من تطعيم متبوع بحقنات تنشيطية على فترات زمنية, مثل فترات 6 أسابيع أو شهرين. يتكون نظام آخر من تطعيم متبوع بحقنات تنشيطية 1,2 و 12 شهر لاحقاً. يستلزم نظام آخر حقنة/شهرين طول العمر. بدلاً من ذلك, قد تكون الحقنات على أساس غير منتظم كما هو مشار إليه بواسطة متابعة استجابة مناعية. يتم إعطاء أجسام مضادة أو عوامل لتحفيز أجسام مضادة على نحو مفضل عبر منفذ 5 طرفى (أى, واحد يعبر فيه جسم مضاد تم إعطاؤه أو تم تحفيزه ‎Jala‏ الدم فى الدماغ ليصل المكان المرغوب فى المخ. تتضمن طرق الإعطاء ‎lease‏ فى الوريد, عبر الفم, تحت الجلد, داخل الشريان, داخل القحف, داخل القراب, داخل الغشاء البريتونى, داخل الأنف أو فى العضل. الطرق المفضلة لإعطاء الأجسام المضادة فى الوريد وتحت الجلد. الطرق المفضلة للتطعيم النشط تحت الجلد وفى العضل. يتم تنفيذ هذا النوع من الحقن ‎Bale‏ على الأغلب فى الذراع أو عضلات الأرجل. فى بعض الطرق, يتم حقن عوامل مباشرةً إلى نسيج مخصص حيث تتراكم الرواسب, على سبيل المثال الحقن داخل القحف. التركيبات الصيدلية للإعطاء عن طريق الحقن معقمة ومتساوبة التوتر على نحو مفضل ومصنعة تحت ظروف ‎(GMP‏ يمكن توفير تركيبات صيدلية فى شكل جرعة ‎sang‏ (أى, الجرعة 5 للإعطاء المنفرد).
— 5 4 — يمكن تحضير تركيبات صيدلية باستخدام واحد أو ‎HAST‏ من الحوامل, مواد التخفيف, سواغات أو مواد مساعدة مقبولة فسيولوجياً. يعتمد المستحضر على طريقة الإعطاء المختارة. بالنسبة للحقن, يمكن تحضير أجسام مضادة فى محاليل مائية, على نحو مفضل فى دارئات ‎das iia‏ فسيولوجياً مقل محلول هانكز , محلول ‎Joa)‏ , أو د ارىء محلول ملحى أو أسيتات فسيولوجى (لتقليل الألم فى مكان الحقن). يمكن أن يحتوى المحلول على عوامل تحضيرية مثل عوامل تعليق, تثبيت و/أو عوامل تشتت. قد تكون الأجسام المضادة البديلة فى شكل مجفد للتكوين بحمّال مناسب, مثل, ماء معقم خالى من مولد الحمى, قبل الاستخدام. يمكن إعطاء الأنظمة الحالية بالاقتران مع عامل آخر فعال فى علاج أو الوقاية من 0 المرض الجارى علاجه. على سبلي المثال, فى حالة مرض الزهايمر, يمكن توليف الأنظمة الحالية مع علاج مناعى ضد ‎Ap‏ (البراءة الدولية 2000/072880(, مثبطات الكولين إيستريز ‎cholinesterase inhibitors‏ أو الميمانتين ‎memantine‏ أو فى حالة العلاج المناعى لمرض باركتنسون ضد ‎all‏ سينيوكلين ‎alpha synuclein‏ البراءة الدولية 2008/103472, ليفودويا, معززات الدويامين, مثبطات ‎,COMT‏ مثبطات 8180-3, أمانتادين أو عوامل مضادة للكولين ‎.anticholinergic 5‏ التصوير داخل الجسم , طرق تشخيصية, وتفضيل العلاج المناعى يوفر الاختراع طرق لتصوير رواسب البروتين تاو داخل الجسم (مثل, تشابكات عصبية ليفية وشوائب ‎(ul‏ فى ‎٠. Uae‏ تعمل الطرق بواسطة إعطاء كاشف, مثل جسم مضاد يرتبط بالتاو (مثل , جسم مضاد فأر , مؤنسن , خيالى أو 1685 مكسو) , إلى ‎a ll‏ وحينئذ يقوم ‎lakh‏ ‏0 العامل بعد أن ارتبط به. يتم تفضيل ارتباط أجسام مضادة بحاتمة تاو داخل أحماض أمينية 24 إلى 46. فى بعض الطرق, يرتبط الجسم المضاد بحاتمة داخل أحماض أمينية 25 إلى 44, أو داخل أحماض أمينية 30 إلى 39. يمكن تجنب أو خفض استجابة إزالة إلى الأجسام المضادة التى تم إعطاؤها بواسطة استخدام أجزاء جسم مضاد تفتقر إلى منطقة ثابتة كاملة الطول, مثل 55. فى بعض الطرق, يمكن أن يعمل نفس الجسم المضاد كعلاج وكاشف تشخيصى. يمكن إعطاء كواشف تشخيصية بواسطة الحقن فى الوريد إلى جسم المريض, أو مباشرة إلى المخ بواسطة الحقن داخل القحف أو بواسطة حفر ثقب من خلال الجمجمة.
يجب أن تكون ‎deja‏ الكاشف خلال نفس النظاقات مثل طرق العلاج. ‎aby Bale‏ عنونة الكاشف, على الرغم من أنه فى بعض الطرق, يكون الكاشف ‎EY)‏ بانجذاب للتاو غير معنون ويتم استخدام عامل عنونة ثانوى للارتباط بالكاشف الأوّلى. يعتمد اختيار العنوان على وسيلة ‎Cai‏ على سبيل المثال, عنوان استشعاع مناسب للكشف البصرى. استخدام عناوين بارامغناطيسية للكشف الشعاعى الطبقى بدون تدخل جراحى. يمكن أيضاً كشف عناوين مشعة باستخدام ‎PET‏ أو ‎.SPECT‏ ‏طرق التصوير داخل الجسم لرواسب البروتين تاو مفيدة فى تشخيص أو تأكيد تشخيص تجمع بروتين تاو بصورة مرضية, مثل مرض الزهايمر, التنكس الفصى الجبهى الصدغى, شلل فوق النواة متقدم ومرض بيك, أو قابلية التعرض لهذا المرض. على سبيل المثال, يمكن استخدام 0 الطرق على تقديم مريض بأعراض الخرف. إذا كان المريض يعانى من تشابكات عصبية ليفية, حينئذ يكون المريض يعانى على الأرجح من مرض الزهايمر. بدلاً من ذلك, إذا كان المريض يعانى من شوائب التاو غير طبيعية, حينئذ اعتماداً على موقع الشوائب, قد يعانى المريض من تنكس فصى جبهى صدغى. يمكن استخدام الطرق على مرضى بدون أعراض. يشير وجود رواسب البروتين تاو غير طبيعية إلى قابلية التعرض إلى مرض ذو أعراض فى المستقبل. الطرق 5 مفيدة أيضاً لمتابعة تقدم المرض و/أو الاستجابة للعلاج فى مرضى تم تشخيصهم سابقاً بمريض متعلق بالبروتين البشري تاو. يمكن تنفيذ التشخيص بواسطة مقارنة عدد, حجم, و/أو شدة المواضع المعنونة, إلى قيم قيمة قاعدية مقابلة. يمكن أن ‎Jia‏ قيم القيمة القاعدية المستويات المتوسطة فى تعداد أفراد لم تتم إصابتهم بالمرض. يمكن أن تمثل قيم القيمة القاعدية مستويات سابقة محددة فى نفس المربض. 0 على سبيل المثال, يمكن تحديد قيم قيمة قاعدية فى مريض قبل بداية علاج العلاج المناعى تاو, وقيم مقاسة بعد ذلك مقارنة مع قيم القيمة القاعدية. انخفاض فى القيم بالنسبة إلى إشارات قيمة قاعدية استجابة إيجابية للعلاج. فى بعض المرضى, قد تتم مساعدة وجود تجمع مرضى لبروتين تاو بواسطة تنفيذ مسح 7. يمكن تنفيذ مسح ‎PET‏ بواسطة تنفيذ , على سبيل المثال, مصور ‎PET‏ تقليد وجهاز مساعد. 5 يتضمن المسح عادقص منطقة واحدة أو أكثر فى المخ معروفة فى الغالب بأنها مرتبطة برواسب
— 7 4 — بروتين تاو ومنطقة واحدة أو أكثر فيها رواسب قليلة )13 وجدت أى رواسب بشكل ام لتعمل كمواد تحكم . يمكن تمثيل الإشارة التى تم اكتشافها فى مسح ‎PET‏ كصورة متعددة الأبعاد. قد تكون الصورة متعددة الأبعاد فى بعدين يمثلان مقطع عرضى من خلال المخ, قى ثلاثة أبعاد, تمثل المخ ثلاثة الأبعاد, أو فى أربعة أبعاد تمثل تغيرات فى المخ ثلاثى الأبعاد عبر الوقت. يمكن استخدام تدريج ألوان مع ألوان مختلفة تشير إلى كميات مختلفة من العنوان و, استنتاجياً, راسب بروتين تاو الذى تم الكشف عنه. يمكن أيضاً تقديم نتائج المسح عددياً, مع أرقام تتعلق بكمية العنوان الذى تم الكشف عنه وبالتالى كمية رواسب بروتين تاو. يمكن مقارنة العنوان الموجود فى منطقة المخ المعروفة بارتباطها برواسب بالنسبة لتجمع مرضى لبروتين تاو ‎asada‏ ‏0 (ثل, مرض الزهايمر) بالعنوان الموجود فى منطقة معروفة لا ليتم ارتباطها برواسب لتوفير نسبة تشير إلى مدى الرواسب داخل منطقة المكوّن. بالنسبة لنفس اللجين المعنون إشعاعياً, توفر هذه النسب مقياس قابل للمقارنة لرواسب بروتين تاو وتغيرات منها بين مرضى مختلفين. فى بعض الطرق, يتم تنفيذ مسح ‎PET‏ بالتزامن مع أو فى نفس زيارة المريض كما فى مسح ‎MRI‏ أو ‎(CAT‏ يوفر مسح ‎MRI‏ أو ‎CAT‏ تفصيل تشريحى أكثر فى المخ عن مسح ‎PET‏ ‏5 ومع ذلك, يمكن فرض مسح ‎PET‏ على صورة مسح ‎MRI‏ أو ‎CAT‏ تشير بشكل أكثر دقة إلى موقع لجين ‎PET‏ ورواسب تاو بشكل استنتاجى نسبة إلى تراكيب تشريحية فى المخ. يمكن أن تنفذ ‎ar‏ الآلات كل من مسح ‎PET‏ والمسح ‎MRI‏ أو ‎CAT‏ بدون مواضع تغيير ‎a yall‏ بين مرات المسح التى تسهل فرض الصور . تتضمن لجينات ‎PET‏ مناسبة أجسام مضادة معنونة إشعاعياً فى الاختراع (مثل, فأر, جسم 0 مضاد مؤنسن, خيالى أو 1685 مكسو). يمكن أن يكون النظير المشع, على سبيل ‎CJR‏ ‏قاب 01° ‎F'®‏ أو *!1. يمكن أن يعتمد الفاصل بين إعطاء لجين ال ‎PET‏ وتنفيذ المسح على لجين ال ‎PET‏ وخصوصاً معدل امتصاصه وإزالته إلى المخ, وفترة حياة النصف لعنوانه المشع. يمكن أيضاً تنفيذ دورات مسح ال ‎PET‏ كمقياس وقائى فى مرضى بدون أعراض أو فى مرضى لديهم أعراض خلل طفيف فى وظيفة الإدراك ولكن لم يتم تشخيصهم بمرض تجمع وحدات بروتين تاو ولكن لديهم خطر مرتفع لتطور مرض تجمع وحدات بروتين تاو. بالنسبة لمرضى بدون أعراض, تكون دورات المسح مفيدة خصيصاً بالنسبة للمرضى الذين تم اعتبارهم لديهم خطر متزايد
من تجمع وحدات بروتين تاو بسبب تاريخ العائلة, عوامل خطر وراثية أو بيوكيميائية, أوو سن ناضج. يمكن أن تبدأ دورات المسح الوقائية على سبيل المثال, عند سن مريض ما بين 75 و 75
سنة. فى بعض المرضى, يتم تنفيذ دورة مسح أولى فى سن 50 سنة. يمكن تنفيذ دورات مسح وقائية على فترات على سبيل المثال, ما بين ستة أشهر وعشر سنوات, على نحو مفضل ما بين 5-1 سنوات. فى بعض المرضى, يتم تنفيذ دورات مسح وقائية سنوياً. إذا تم تنفيذ دورة مسح ‎PET‏ كمقياس وقائى إلى مستويات مرتفعة بصورة غير طبيعية من رواسب بروتين تاو, يمكن بدء العلاج المناعى وتنفيذ دورات مسح ‎PET‏ كما فى المرضى الذين تم تشخيصهم بتجمع مرضى لبروتين تاو. إذا تم تنفيذ ‎PET‏ الذى تم مسحه كمقياس وقائى فإن هذا يشير إلى مستويات رواسب بروتين تاو داخل المستويات الطبيعية, يمكن تنفيذ دورات مسح ‎PET‏ ‏0 إضافية على فترات ما بين ستة أشهر و 10 سنوات, وعلى نحو مفضل 5-1 سنوات, كما ذكر من قبل, أو فى استجابة إلى ظهور علامات وأعراض تجمع مرضى لبروتين تاو أو خلل طفيف فى ظيفة الإدراك. بواسطة توليف دورات مسح وقائية مع إعطاء علاج مناعى موجه تاو إذا وعندما يتم الكضشف عن مستوى فوق الطبيعى من رواسب بروتين تاو, يمكن خفض مستويات رواسب بروتين تاو إلى, أو بالقرب من, مستويات طبيعية, أو على الأقل تثبيطها من زيادة أيضاً, ويمكن 5 أن يبقى المريض خالياً من تجمع البروتين تاو المرضى لفترة أطول من إذا لم يتلق دورات مسح تلقائية وعلاج مناعى موجه للتاو ‎Sie)‏ على الأقل 5, 10, 15 أو 20 سنة, أو فى باقى ‎sla‏
المريض). يمكن تحديد مستويات طبيعية من رواسب البروتين تاو بواسطة كمية تشابكات عصبية ليفية أو رواسب التاو فى أمخاخ العينة الممثلة للأفراد فى التعداد العام الذين لم يتم تشخيصهم 0 بتجمع مرضى لبروتين تاو (مثل, مرض الزهايمر) ولا بعتبروا عند خطر مرتفع لتطور هذا المريض (مثل, عينة ممثلة لأفراد خاليين من المرض تحت سن ال 50). بدلاً من ذلك, يمكن التعرف على مستوى طبيعى فى مريض فرد إذا كانت إشارة ال ‎PET‏ وفقاً للطرق الحالية فى منطقة فى المخ تعرف فيها رواسب بروتين تاو لتتطور ليست مختلفة (داخل دقة القياس) من الإشارة من منطقة فى المخ تعرف فيها أن هذه الرواسب لا تتطور بصورة طبيعية. يمكن التعرف على مستوى مرتفع فى 5 مربض بواسطة المقارنة بالمستويات الطبيعية (مثلاً خارج المتوسط وتفاوت الانحراف المعيارى) أو ببساطة من إشارة مرتفعة تجاه ‎Und‏ تجرببى فى منطقة المخ المرتبطة برواسب بروتين تاو مقارنة بمنطقة ليست معروفة بارتباطها بالرواسب. لأغراض مقارنة مستويات رواسب بروتين تاو فى
— 9 4 — مريض وتعداد, يجب تحديد رواسب البروتين تاو على نحو مفضل فى نفس المنطقة (المناطق) فى المخ, تتضمن هذه المناطق منطقة واحدة على الأقل تعرف فيها رواسب بروتين تاو المرتبطة بتجمع مرضى لبروتين تاو مخصص ‎Jie)‏ مرض الزهايمر) لتتكون. المريض الى لديه مستوى مرتفع من رواسب بروتين تاو مرشح لبدء العلاج المناعى. بعد بدء العلاج المناعى, يمكن أولاً رؤية انخفاض فى مستوى رواسب بروتين تاو كإشارة إلى أن العلاج يؤتى تأثيره المرغوب. يمكن أن يكون الانخفاض الملحوظ, على سبيل المثال, فى المدى من 96100-1, 4650-1, أ, 9625-1 من ‎dad‏ القيمة القاعدية. يمكن قياس هذه التأثيرات فى منطقة واحدة أو أكثر فى المخ تعرف فيه الرواسب لتكوين أو يمكن قياسها من متوسط هذه المناطق. يمكن تقريب التأثير الكلى للعلاج بواسطة إضافة النسبة 0 المئوية للانخفاض بالنسبة للقيمة القيمة القاعدية إلى زيادة فى رواسب بروتين تاو ‎All‏ تحدث بصورة أخرى فى مريض غير معالج متوسط. الحفاظ على رواسب بروتين تاو عند مستوى ثابت تقريباً أو حتى زيادة صغيرة فى رواسب بروتين تاو يمكن أن يكون أيضا مؤشر على الاستجابة للعلاج ولو كانت استجابة أقل من الأفضل. يمكن مقارنة هذه الاستجابات بدورة زمنية لمستويات رواسب بروتين تاو فى مرضى 5 بتجمع مرضى لبروتين تاو مخصص (مثل, مرض الزهايمر) الذين لم يتلقوا العلاج, لتحديد ما إذا كان العلاج المناعى له تأثير فى تثبيط زيادات إضافية فى رواسب بروتين تاو. تسمح متابعة تغيرات رواسب بروتين تاو بضبط العلاج المناعى أو نظام علاج آخر استجابة للعلاج. توفر متابعة ‎PET‏ مؤشر لطبيعة ومدى الاستجابة للعلاج. يمكن عمل تحديد سواء لضبط العلاج وإذا كان يمكن ضبط العلاج إذا رغب فى ذلك استجابة لمتابعة ال ‎PET‏ ‏20 تسمح متابعة ‎PET‏ بالتالى للعلاج المناعى ‎gall da gall‏ أو نظام علاج ‎AT‏ ليتم ضبطه قبل دلالات حيوية أخرى, تم استجابة قياسات ‎MRI‏ أو إدراكية بطريقة قابلة للكشف. يعنى التغير المؤثر أن مقارنة قيمة متغير بعد العلاج بالنسبة للقاعدة دليل كاف على أن العلاج نتج أو لم ينتج عنه تأثير مفيد. فى بعض الحالات, يوفر تغير قيم متغير فى مربض بذاته دليل أن العلاج نتج عنه أو لم ينتج تأثير مفيد. فى حالات أخرى, تتم مقارنة تغير قيم, إن وجدت , بتغير قيم, إن 5 وجدت, فى تعداد تحكم ممثل من مرضى لم يخضعوا لعلاج مناعى. يمكن أيضاً أن يوفر الاختلاف فى الاستجابة فى مريض مخصص من الاستجابة الطبيعية فى مريض التحكم (مثلاً,
المتوسط + التفاوت للانحراف المعيارى) أيضاً دليل على أن نظام العلاج المناعى يحقق أو لم يحقق التأثير المفيد فى المريض. في بعض المرضى؛ تشير المراقبة إلى انخفاض قابل للكشف في رواسب بروتين تاو ولكن يتبقى مستوى رواسب بروتين تاو فوق العادي. في هؤلاء المرضىء إذا لم يكن هناك آثار جانبية غير قابلة للكشف؛ يمكن استمرار نظام العلاج كما هو أو حتى يزداد عدد مرات التعاطي و/أو الجرعة إن لم تكن بالفعل عند الجرعة القصوى الموصى بها. إذا أشارت المراقبة إلى مستويات رواسب البروتين تاو في مريض تم خفضها إلى المستويات العادية؛ أو بالقرب من المستويات العادية من رواسب البروتين تاو؛ يمكن ضبط نظام العلاج المناعي من واحد للحث (أي؛ الذي يقلل مستوى رواسب البروتين تاو) إلى واحد للصيانة 0 (أي؛ الذي يحفظ رواسب البروتين تاو عند مستوى ثابت تقريباً). يمكن اجراء هذا النظام عن طريق تقليل الجرعة و/أو مرات تعاطي العلاج المناعي. في مرضى ‎(AT‏ قد تشير المراقبة إلى أن العلاج المناعي يكون له بعض التأثير المفيد ولكن تأثير دون المستوى الأمثل. يمكن تعريف التأثير الأمثل بالنسبة المئوية للانخفاض في مستوى رواسب البروتين تاو ضمن النصف أو الريع العلوي من التغير في رواسب البروتين تاو 5 (بقاس أو محسوب على مدى الدماغ كله أو منطقة (مناطق) تمثيلية منها والتي بها تكون رواسب البروتين تاو معروفة للتكوين) مواجهة من قبل عينة تمثيلية لمرضى أمراض تتعلق بالبروتين تاو يخضعون للعلاج المناعي عند نقطة زمنية معينة بعد بدء العلاج. المريض الذي يواجه انخفاض أصغر أو المربض الذي تبقى به رواسب البروتين تاو ثابتة أو حتى تزداد؛ ولكن إلى حد أقل من المتوقع في غياب العلاج المناعي (على سبيل المثال؛ كما يستدل عليه من مجموعة المرضى 0 الضابطة التي لم تتعاطى علاج مناعي) يمكن تصنيفه على أنه يعاني من استجابة إيجابية ولكن دون الحد الأمثل. يمكن تعريض هؤلاء المرضى اختيارياً لضبط نظام والذي به يتم زيادة الجرعة وعدد مرات تعاطي العامل. في بعض المرضىء قد تزداد رواسب البروتين تاو بطريقة مماثلة أو أكبر إلى رواسب تاو في مرضى لا يتلقون العلاج المناعي. إذا استمرت هذه الزيادة خلال فترة زمنية؛ ‎Jie‏ 18 شهر أو 5 سنتتين؛ حتى بعد أي زيادة في تكرار أو جرعة العوامل؛ يمكن وقف العلاج المناعي إذا كان ذلك مطلوب لصالح لعلاجات أخرى.
— 1 5 — الوصف السابق ‎(ad El‏ المراقبة؛ وضبط العلاج للعلاجات التى تم التركيز بها على استخدام عمليات مسح ‎٠ PET‏ ومع ذلك أي تقنية أخرى لتصور و/أو قياس رواسب البروتين تاو والتي تكون قابلة لاستخدام الأجسام المضادة وفقاً للإختراع (على سبيل المثال؛ جسم مضاد 185 فأري ‘ مؤنسن » مخلط أو مكسو) يمكن استخدامه مكان عمليات المسح ‎PET‏ لأداء هذه الطرق . الأمثلة مثال 1. توليد الجسم المضاد 16135 تم ترقية الجسم المضاد الشامل 1685؛ والذي يتعرف على إذا ما كان أو لم يكن تاو مفسفرء إلى تاو منقى ومختار على أساس خواصه للالتقاط مرتفع الألفة في فحص ‎‘ELISA‏ ‏مثال 2. استنساخ وتتابعات الجسم المضاد 1685 تم استخلاص ‎RNA‏ من ‎WIA‏ محببة معبرة عن الجسم المضاد 1685 باستخدام ‎Trizol‏ ‎(Invitrogen) LS‏ تم قياس تركيزات ‎RNA‏ باستخدام مجموعة ‎-(Invitrogen) Quant=IT‏ تم استخدام ‎5°-RACE‏ لتكبير طرف ال 5 ل ‎IgG MRNA‏ باستخدام مجموعة ‎Smart‏ ‎a3. (Clontech) RACE‏ استخدام حوالي 1 ميكروجرام من ‎RNA‏ لتفاعل ال ‎RT‏ وتم ‎aul‏ تكبير برك ال ‎cDNA‏ باستخدام البريمر الشامل المزود مع مجموعة ال ‎Smart RACE‏ وبريمرات نوعية 5 جحينية ‎(GSPs)‏ مصممة في 2:00310. البريمر الشامل: ‎SEQ ID) CTAATACGACTCACTATAGGGC‏ رقم: 7( ‎:GSPs‏ ‎SEQ ID) CTC AAT TTT CTT GTC CAC CTT GGT GC : IgG2as IgGl‏ رقم: 8( ‎SEQ ID) CTC AAG TTT TTT GTC CAC CGT GGT GC : IgG2b 20‏ رقم: 0 كانت منتجات ‎PCR‏ جل منقى ومستنسخ إلى الناقل ‎Adexon, ) pSUPER-blunt‏ ‎(Www.adexonbiotech.com‏ بخصوص السلسلة الثقيلة؛ تم تحضير أدني وتتابع ل 15 مستعمرة. ‎a gad‏ السلسلة الخفيفة؛ تم تنفيذ ‎PRC‏ مستعمرة لتمبيز سلسلة خفيفة شاذة باطنية النموء وتم
فقط تتابع المستعمرات التي لم يتم تكبيرها من ال ‎PCR‏ المستعمرة. تم تحليل نتائج التتابع على ناقل 1. تم عمل علامات تتابعات موائم ويبريمر ‎GSP‏ على خريطة. المناطق بين تتابعات الموائم وال 0 تتابعات سلسلة ‎ALES‏ 186 التي تتضمن مرشد؛ ببتيد إشارة ومنطقة ‎gag V‏ من المنطقة الثابتة. تم عمل علامات ‎ORFs‏ على الخربطة. مثال 3. رسم خرائط حاتمة لجسم مضاد 16835 تحديد حاتمة بواسطة تحليل قطعة ببتيد. تم التعبير عن تتابع تاو البشري مع 4 تكرارات ترابط أنبوب صغير دقيق وبدون مدخلات طرف-لاء والمحتوية على طفرة ‎¢(1Tau) P30IL‏ في ‎E. coli‏ وتنقيته. لهذا الشكل لتاو التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 3؛ مع استبدال بليوسين لبرولين في موضع 3 (الذي يناظر .23011 باستخدام تحويل الترقيم على أساس أطول شكل متماثل لتاو) تم تنفيذ 0 مضامات إنزيمية ل 200 ميكروجرام من تاو مع واحد من أربعة إنزيمات بروتياز مختلفة: تريبسين (الذي ينشق عند طرف الكريوكسيل للتيروزين» تريبوتوفان» فينيل آلانين وليوسين)؛ كيموتريبسين (الذي ينشق ‎Wl‏ عند طرف الكريوكسيل للتيروزين» تريبتوفان» فينيل آلانين وليوسين)؛ 56لا (الذي ينشق أولياً عند طرف الكريوكسيل لليسين)؛ أو 61:0 (الذي ينشق بعد رواسب جلوتامات ونادراً ما يحدث بعد رواسب أسبارتات). تم الحصول على جميع إنزيمات بروتياز من ‎Thermo‏ ‎Sientific 5‏ ¢ وتم تنفيذ الهؤضامات لمدة 16 ساعة في 37 درجة مئوية. تم تحضين قطع الببتيد الناتجة مع 10 ميكروجرام من 1635؛ وترسيبها باستخدام حبيبات مغناطيسة 6 بروتين ‎(NEB)‏ ‏تم غسيل الرواسب تماماً في ‎PBS‏ المحتوي على 300 مل مولار كلوريد صوديوم و960.5 ‎NP=‏ ‏0. ثم استخلاصها ب 1 مولار كلوريد صوديوم في 100 مل مولار ‎uals‏ أس هيدروجيني 8.. تم تجفيف المستخلصات تحت ضغط خلخلة وإعادة تعليقها في 960.1 حمض ثالث فلورو 0 خليك ‎(TFA)‏ تم تحميل المستخلصات المعاد تعليقها على عمود ‎cae 50*4.6 C18‏ ثم تجزئتها بواسطة ‎Infinity system) HPLC‏ 1260 ا«عانعم)_باستخدام ‎mux‏ خطي لأسيتونيتريل مع ‎(TFA %0.075‏ تم تجميع ذروة الأجزاء؛ تجفيفها وإعادة تعليقها في ماء مقطر. تم تحديد كتل وهويات الببتيد بواسطة ‎.\MALDI-TOF/TOF‏ تم تحديد ذروة مناظرة للرواسب 44-25 ل ‎SEQ‏ ‎ID‏ رقم: 1 في ال ‎.LysC MS Spectrum‏ تم تحديد ذروات مناظرة للرواسب 44-25 لذ ‎SEQ ID‏ 5 رقم: 1 و44-24 في آل ‎MS Spectrum‏ دنوم(1. لم يتم الحصول على إشارة من كيموتريبسين وهُضامات ©010؛ مما يشير إلى أن بعض الحواتم قد تشتمل على راسب 29 ل 58010 رقم: 1 و/أو راسب 137 58010 رقم: 1.
تحديد حاتمة عن طريق تحليل طفرة. باستخدام النتائج المحددة عن طريق تحليل قطعة
ببتيد (موصوفة أعلاه)؛ تم تنفيذ إلغاء تطفير 17180 بواسطة تكبير بلازميد الكامل باستخدام طرق البيولوجيا الجزيئية المعيارية. تم التعبير عن البروتين في سعات صغيرة لمزرعة جرثومية؛ وتم القيام برحلان كهربائى لسعات متساوية لحلالة جرثومية مُصفاة؛ تنشيفها؛ وتلطيخها بالجسم المضاد
1685. للقيام بالضبط لتحميل عينة؛ تم استخدام ‎(Taud6‏ جسم مضاد بنوعية لمنطقة الطرف-) لتاو (حاتمة طرف-6)؛ لتلطيخ بقع مزدوجة. تم استخدام كلا الجسمين المضادين بتركيز 0.2 ميكروجرام/مل. تم التقاط صور باستخدام ماسح متألق ‎Odyssey‏ 1160. تم عمل الشطب الآتي لطافرات تاو وتحليلها بهذه الطريقة: ‎Ay 39-30 A 32-23 A 24-5 A‏ 46-37؛ كما هو مبين في الشكلين 1 و2؛ لم يتم شطب طافرات الشطب ‎A‏ 44-25؛ وه 39-30 لتاو بالجسم
0 المضاد 1685 مما يقدم دليل على أن حاتمة تم إدراكها بواسطة 1685 تقع ضمن تلك الرواسب. كانت طافرة الشطب ‎A‏ 46-37 فقطء لتاو يمكن اكتشافها ب 1685؛ مما يقدم الدليل على أن بعض الرواسب بداخل 46-37 ‎Ae)‏ سبيل المثال» ‎andy‏ 37) قد تلعب دوراً في ترابط ال ‎16B5‏ ‏بالتاو. الجسم 1685 المبقع لطافرة الحذف له 32-23 لتاو أقل مدى من ‎A‏ 24-5 وأكبر مدى من طافرتي الحذف ‎Ay 44-25 A‏ 39-30؛ مما يقدم دليلاً على أن 1685 قد يرتبط أيضاً
‎amy 5‏ مشتمل على رواسب 36-33 36-30» 36-30 37-33 37-30 أو 39-33. بصفة عامة؛ تشير البيانات التي تم الحصول عليها من طافرات الحذف تاو إلى أن الحاتمة المدركة بواسطة 1685 قد تشتمل على بعض أو كل رواسب 32-23 ل 88010 رقم: 1 وبعض أو كل رواسب 46-37 ل ‎SEQ ID‏ رقم: 1. على سبيل المثال؛ قد ‎Capi‏ 1635 على ‎dala‏ ‏ضمن الرواسب 38-32 أو 41-28 ل 58010 رقم: 1.
‏20 تحديد حاتمة عن طريق مسح آلانين. تم بالتالي تطفير رواسب فردية بداخل منطقة رواسب اتساع تاو 42-30 بآلانين باستخدام تطفير ‎PCR‏ تم التعبير عن البروتينات المطفرة؛ وتم تحليل الحلالات بواسطة الرحلان الكهربائى وتلطيخها إما بجسم مضاد 1685 أو الجسم المضاد 6. كما هو موصوف أعلاه. النتائج لهذه التحاليل مبينة في شكل 3. تم إدراج طافرات النقطة المحددة المحللة؛ التي تتضمن ‎Q35A « D34A « Q33A« H32A « M3IA (T30A‏ ¢
‎G42A 5 A41L « D40A ¢ T39A « D38A « G3TAE36A 5‏ ؛ فوق البقع. تم إدخال رواسب محددة في صناديق على كل بقعة. تم بالكامل حذف ترابط يمكن اكتشافه ل 1685 عن طريق الطافرة تاو 0338 وبالتالي تم تخفيضه بواسطة الطافرة تاو 0378؛ مما يقدم دليلاً على أن
— 4 5 — الراسب 33« والراسب الأقل مدى 37 قد تكون مكونات ذات أهمية لحاتمة مدركة بواسطة 1685. قد تكون رواسب أخري هى مكونات ذات أهمية لحاتمة مدركة بواسطة تحليل 8:260:8. مثال 4. تحصين منفعل في نموذج فأري معدل جينياً 1:780.03011 لمرض تاو التحصين. تم استخدام ‎oh‏ أنثى ع1780.030117-1 بعمر 3 ‎Lily Heed‏ جينية ‎FVB/N 5‏ لهذه الدراسة. تم ‎shal‏ إعطاء جرعة 10 مجم/كجم من أجسام مضادة اختبار وضابط بالحقن تحت الصفاق»؛ مرة في الأسبوع. كان استمرار العلاج حوالي 5 شهور. بعد 23 حقنة؛ انتهت الدراسة بالتضحية بالفئران. يصف جدول 1 الأجسام المضادة اختبار وضابط المعطاة في هذه الدراسة. جدول 1 مخطط الجرعات ‎ME] Kee‏ نوعية الترايط بداخل 46-23 (انظر مثال 3) ضابط متماثل 1801 غير مناعي 4 ملإكجم ‎RES‏ ‏لوحظ أن الموت المبكر نمط ظاهري في نماذج مرض تاو فأري معدل ‎lim‏ يعمل 0 التنموذج الخاص المستخدم في هذه الدراسة على تطوير تاو المفسفر بإفراط في عمر 6 شهورء رغم التغيرات الشديدة في البداية. تعانى الفئران أيضاً من تأثيرات قوة محركة ‎Jie‏ تشابك الأطراف الخلفية وحركية ‎dole‏ منخفضة؛ وتموت مبكراً في ‎jae‏ 11-8 شهراً ) ‎reMYND unpublished‏ ‎Terwelidata‏ وأخرون»؛ 2005( ‎٠.‏ اتصفت الفئران المطورة لأعراض مرض المرحلة النهائية بعدد مرتفع من الفئران الميتة مبكراً بدون وجود هذه الأعراض. يتم الأخذ في الاعتبار أن سبب الموت
— 5 5 —
في هذه الحالات بأنه غير ذي صلة بمرض تاو مرحلة متأخرة أو جسم مضاد ‎ial‏ وبدلاً من
ذلك يُعتقد أن تكون ذات صلة بخلفية ‎FVB/N‏ الفطرية.
يبين جدول 2 نظرة عامة للبقاء الشامل لجميع الفئران أثناء مسار الدراسة. جدول 2 العلاج أثناء البقاء (جميع حالات الوفاة) ‎N‏ عند بداية الدرإسة | ‎N‏ على قيد الحياة عند | نسبة البقاء التضحية المئوبة ‎J‏ واحد في مجموعة ا استوجب استبداله في بدء الدراسة. يمكن تحليل البيانات مع أو بدون هذا الاستبدال لفأر. بعد التضحية؛ تم تشريح الفئران ومجانسة جذع الدماغ والدماغ المتوسط باستخدام مجانس ميكانيكي من نوع بوتر (540 14 ‎<VOS‏ معدل 750 دورة في الدقيقة؛ ‎(VWR‏ في 10 وزن - حجم منظم تريس- بروتيناز؛ فوسفاتاز - متبط مبرد بثلج (منظم 1701 ( ‎Tris-proteinase-‏ ‎phosphatase-inhibitor buffer‏ يحتوي على: 20 مل مولار تريس- حمض هيدروكلوريك (أس 0 مهيدروجيني 8.1)؛ 150 مل مولار كلوريد صوديوم؛ 1 مل مولار إيثيلين ثاني أمين حمض رابع خليك ‎¢(EDTA, Merck)‏ 1 مل مولار إيثيلين جليكول حمض رابع خليك ‎EGTA, Sigma~)‏ ‎¢(Aldrich‏ 5 مل مولار بيروفوسفات صوديوم ‎¢sodium pyrophosphate (Sigma)‏ 30 مل مولار فلوريد صوديوم ‎¢(Sigma—Aldrich)‏ 1 مل موؤولار ‎¢(Sigma) PMSF‏ 2 مل مولار فانادات صوديوم ‎(Sigma)‏ ¢ 10 مل ‎Ysa‏ 1- أورقو- فينانثرولين أحادي هيدرات ‎Sigma~—)‏ ‎(Aldrich 5‏ 5 ميكروجرام/مل مثبط تربسين فول الصويا؛ 5 ميكروجرام/مل بيبستاتين؛ ومزيج من مقبطات بروتيناز ‎(CPL, Roche Diagnostics GmbH, Germany)‏ تم الطرد المركزي للأحجام الثابتة 140 ميكرولتر و100 ميكرولتر من خليط من جذع الدماغ والدماغ الأوسط ‎(Tot)‏ على التوالي؛ (تقريباً نصف الأحجام الكلية) بمعدل 136000 ‎xg‏ لمدة 60 دقيقة عند 4 درجة مئوية (دوار ‎ Ultracentrifuge, Beckman Coulter «TLA-55‏ 1111176 مصنام0) لتوليد جزءٍ قابل
للذويان في - ‎fraction (SF)‏ 1118-5010016» مع تخزين باقي الخليط الكلي عند -580 درجة مئوية. بسبب وجود عدد محدود من حوامل ‎Seal‏ الطرد المركزي ‎¢(12=N)‏ تم اختيار العينات عشوائياً لموازنة الطرد المركزي وتقسيم مجموعات المعالجة المختلفة على دورات الطرد المركزي المختلفة. تم فصل المادة الطافية (51؛ يشار إليها أيضاً ب "جزء قابل للذوبان" أو ‎(SF‏ عن الكرية (01)؛ تم تحويلها إلى قسامة وتخزينها عند -80 درجة مئوية. تم إذابة الكرية 01 في 10 أحجام وزن من محلول غني بالملح (0.85 مولار كلوريد صوديوم يحتوي على منظم-1001) وتم طردها مركزياً بمعدل 20000ع»؛ لمدة 30 دقيقة عند 4 درجة مئوية. تم تخزين الكرية الناتجة الغنية بالملح ‎(P2)‏ ‏عند -80 درجة مئوية. تم جلب المادة الطافية (52) إلى %1 ‎Sarkosyl‏ مع ‎dc‏ 97610 1 وتم تحضينها عند درجة حرارة الغرفة لمدة 60 دقيقة في قدح دوار قمة- فوق- قمة؛ ثم 0 تم طردها مركزياً بمعدل ‎Xg136000‏ لمدة 60 دقيقة عند 4 درجة مئوية. تم تخزين المادة الطافية القابلة للذويان في ‎Sarkosyl‏ (53) عند -80 درجة مئوية وتم ‎Bale]‏ تعليق الكرية غير القابلة للذويان في ‎Sarkosyl‏ (3©؛ يشار إليها أيضاً ب "جزء غير قابل للذوبان" أو ‎(TF‏ في 30 ميكرولتر منظم 1001 وتم تحويلها إلى قسامة. تم استخدام الخليط ‎AS‏ (10011)؛ أجزاء جذع الدماغ القابلة للذويان في- ‎Tris‏ (57)؛ والغير قابلة للذويان في ‎(IF) Sarkosyl‏ المولدة بواسطة 5 بروتوكول التجزئة الموصوف سابقاً في تحاليل رحلان كهربي هلامي بولي- أكربلاميد ولطخة ويسترن اللاحقة. الرحلان الكهربي الهلامي بولي- أكريلاميد ولطخة ويسترن. لتطبيق ‎SDS-PAGE‏ التقليدية ولطخة ويسترن؛ تم تغيير خواص واختزال العينات عن طريق التحضين عند 95 درجة مثوية لمدة دقائق؛ ثم تم فصلها على هلام تريس- حمض هيدروكلوريك 707.5 ( ‎Criterion XT Precast‏ ‎Gel 0‏ كومب 26- فتحة؛ 15 ميكرولترء 1.0 مم؛ ‎(Biorad‏ بعد التحويل الكهريائي الجاف ‎(iBlot™ Invitrogen)‏ إلى أغشية-1701م ) ‎iBlot™ Gel Transfer Stacks, PVDF, Regular,‏ ‎«(Invitrogen‏ تم غسل الأغشية في 960.4 ‎PFA‏ لمدة 30 دقيقة ثم تم غسلها في محلول ملحي منظم بتريس. تم بعد ذلك تحضين الأغشية في محلول ملحي منظم بتريس ‎(TBS)‏ أس هيدروجيني 6.») يحتوي على 965 (وزن/حجم) حليب ‎Chine‏ منزوع الدسم و 960.1 (حجم/حجم) 1660-7 5 20 لمدة ساعة. تم تحضين اللطخات مع أجسام مضادة أولية مختلفة مضادة لتاو طوال الليل؛ بتركيزات العمل المبينة في جدول 3. بعد الغسل والتحضين مع جسم مضاد ثانوي مقترن ب ‎HRP‏ ‏مضاد للفئران أو ‎alias‏ للأرانب (ماعز- مضاد للفئران أو ماعز مضاد ‎DAKO «il‏ ,0ع1)؛
— 7 5 — تم وضع اللطخات بواسطة نظام الكشف ‎SuperSignal West Femto Maximum ) ECL‏ ‎«(Sensitivity Substrate, product 34096, Thermo Scientific‏ تم تسجيل الصور رقمياً ‎(VisionWorks Acquisition, UVP)‏ بأوقات تعرض مختلفة؛ وتم استخدام برامج مخصصة ‎(VisionWorks Analysis, UVP)‏ لتحليل اللطخات. للمقارنة؛ تم تشغيل هلام مرجعي بين الهلام مع قسامات من ‎aff‏ أجزاء يتم تشغيلها على كل هلام يتم مقارنته. تضمنت الأجسام المضادة أحادية النسيلة الأولية المضادة لتاو المستخدمة للكشف 7100م (فوسفو- تاو 1100 ‎¢Scientific‏ تخفيف 250:1(¢ 18م (فوسفر- تأئىء ‎¢Thermo Scientific‏ تخفيف 500:1)؛ 7 (تاو شامل» ‎¢Pierce‏ تخفيف 1000:1(¢ و1175 (حاتمة غير معروفة ل ‎«Testing Facility‏ ‎<Neotope‏ تخفيف 500:3(. تم إعادة سبر اللطخات بواسطة مضاد - ‎¢Abcam 9485) GAPDH‏ 0 تخفيف 2500:1) كتحكم في التحميل. الأجسام المضادة تاو الشاملة ليست مخصصة لفوسفو- تاو. جدول 3 ملخص الأجسام المضادة المستخدمة لتحليل الكيمياء الحيوبة فوسفو-117- تاو ‎Thermo‏ ‏0م 0 ميكروجرام/مل | 0.8 ميكروجرام/مل ‎pSer212/Thr214 Scientific‏ فوسفو ‎—PHF—‏ تا ‎Ss Thermo‏ و 8 لم 200 ميكروجرام/مل | 0.4 ميكروجرام/مل ‎pS er202/Thr205 Scientific‏ بين الراسب 159 ‎Pierce HT7‏ 200 ميكروجرام/مل 0.2 ميكروجرام/مل 163 * النمط الإسوي ‎JH131-1F5.4.1 <IgG2b‏ ورم هجين» ‎lot # NB-0081‏
كما هو مبين في شكل 4؛ تم ملاحظة انخفاض كبير احصائياً في كمية تاو في أجزاء جذع الدماغ الغير قابلة للذويان في الساركوسيل من حيوانات تم معالجتها بواسطة الجسم المضاد 1685؛ مقارنة بالحيوانات المعالجة بجسم ‎alias‏ التحكم في 6010. تم تقييم الدلالة الإحصائية باستخدام اختبار أ للطالب؛ م<0.05. تم ملاحظة هذا الانخفاض مع كل من الأجسام المضادة المعينة فوسفو- تاو ‎(ATS) 5‏ اللوحة اليسرى العلوية؛ 1100م اللوحة اليسرى السفلية؛ ‎(IFS‏ اللوحة اليمنى العلوية) والأجسام المضادة تاو الشاملة ‎(HT7)‏ اللوحة اليمنى السفلية). أشارت لطخات ويسترن للخليط الكلي أيضاً إلى انخفاض كبير في نسبة فوسفور - تاو إلى تاو الكلية في الحيوانات المعالجة ب بالنسبة لحيوانات التحكم المعالجة بالجسم المضاد ‎(6F10‏ عند الكشف بواسطة جسم مضاد معين- فوسفو. انظر شكل 5 اللوحة اليسرى (تظهر الإشارة المكتشفة بواسطة الجسم المضاد 0 28م المضاد- فوسفو- تاو المقسم بواسطة الإشارة المكتشفة بواسطة الجسم المضاد تاو الشامل ‎(HTT‏ في المقابل؛ لم يكن هناك أي تغيير كبير في نسبة تاو الكلية إلى مستويات ‎GAPDH‏ في المخاليط الكلية للحيوانات المعالجة ب 1685 مقارنةٌ بحيوانات التحكم المعالجة بالجسم المضاد 0. انظر شكل 5 اللوحة اليمنى (تظهر الإشارة المكتشفة بواسطة جسم مضاد تاو الشاملة 7 المقسم بواسطة الإشارة المكتشفة بواسطة الجسم المضاد ‎(GAPDH‏ توفر هذه البيانات دليل 5 على أن مستوى الفوسفو- تاو ولكن ليس تاو الكلية قد تم تخفيضه في الجناسات. التحليل الهيستولوجي. تم اجراء تحليل كيميائي نسيجي مناعي باستخدام أجسام مضادة مضاد- فوسفو- تاو في المنطقة الوالجة المرفقة للنواة تحت المهادية ‎(STH/ZI)‏ ونواة دماغية جانبية مرفقة ‎(IntA/P/LAT)‏ تم تخزين أقسام أداة تشبه المشراح السهمي (40 ميكرومتر) في ‎PBS‏ مع 1 أآزيد صوديوم عند 4 درجة مئوية حتى الاستخدام. تم تلطيخ ثماني أقسام لكل فأر؛ عند 0 البريجما المشار إليها بالتعويم الحر مع ‎AT100 «mAbs ATS‏ أو ‎1F5‏ تم اختيار الأقسام للتلطيخ بالأجسام المضادة المشار إليها كما هو مدرج في جدول 4 أدناه. تم توزيع أقسام كل الحيوانات المختارة لتلطيخ معين عشوائياً للتلطيخ وتحديد الكمية الأعمى. تم تحضين أقسام التعويم الحر في ‎Netwells™‏ ثم تم غسل الأقسام مرتين في ‎PBS‏ وتحضينها لمدة 20 دقيقة في بيروكسيد هيدروجين 961.5 في ‎PBS‏ وميثانول )1:1( لإزالة نشاط 5 البيروكسيداز داخلي المنشاً. بعد غسل الأقسام ثلاث مرات في ‎PBS‏ يحتوي على 9160.1 تربتون 0 (0357)؛ تم إعاقة الأقسام لمدة 30 دقيقة في 9610 مصل ‎dae‏ جنيني ‎(FCS)‏ في 7 متبوعاً بتحضين طوال الليل مع أجسام مضادة أولية ‎¢AT8‏ 7100م )~~ ‎Thermo‏
— 9 5 — ‎(scientific‏ ¢ باستخدام تركيزات من 0.4 ميكروجم/مل ;05 .0 ميكروجم/مل ¢ على التوالي في ‎JFCS 9610 a PBST‏ بعد الشطف؛ تم تحضين الأقسام مع جسم مضاد ثانوي معنون بيروكسيداز ماعز مضاد للفأر ‎<DAKO) (GAMPO)‏ 500/1 في ‎(FCS %10 PBST‏ وتم تطوير الإشارة بواسطة 3,3”- ثاني أمينوبنزيدين رابع هيدروكلوريد ‎DAB)‏ 1 قرص لكل 10 مل ‎Tris—HCI 5‏ مع 3 ميكرو 11.0 لكل 10 مل). تم تلطيخ الأقسام بعداد بواسطة هيماتوكسيلين ‎Mayer‏ تجفيفها في خمس خطوات )50 70 95 ‎x25‏ %100( في إيثانول وزايلين ( ‎Merck‏ ‎(Eurolab‏ وتركيبها في ‎Depex‏ (وسط تركيب ‎(Depex‏ مختبر 311). جدول 4 ‎are |‏ | مسي | ‎ob‏ | 55 )20 ميكروجمامل .0.4 ميكروجم/مل ميكروجمإط ملخص الأجسام المضادة المستخدمة للتحليل النسيجي الكيميائي المناعي
0 تم الحصول على صور بواسطة مجهر 587641 ‎Olympus‏ مزود بكاميرا ‎Olympus‏ 1 لرؤية اللون وتحليلها بكمبيوتر باستخدام برنامج 1190© ‎a3 AnalySIS Five-‏ حفظ إعدادات شدة الضوء والمكثف للمجهر ثابتة على مدى عملية الحصول على الصورة . تم تعريض كل الصور المكتسبة لنفس الوظائف الفرعية للكمبيوتر للحد من تحيز المحقق. تم تطبيق الحد الأدنى من شريحة الكثافة بشكل موحد على مدى التحليل.
5 تتم اختيار المنطقة المهمة كما هو معرف أدناه للتحديد الكمي التلقائي لإشارة (إشارات) التلطيخ. تم تحديد المنطقة الوالجة والنواة تحت المهادية بواسطة السويقة المخيخية الدماغية بطنياً والأم البيضاء ‎(Lgl‏ على التوالي؛ بالإضافة إلى أنه على أساس الاختلافات في كثالة الخلية (بريجما الأقسام الدماغية السهمية 1 1-32( 92). تم تحديد النواة المتوسطة للمخيخ؛ ‎gall‏ الأمامي والخلفي؛ ونواة المخيخ الجانبية بواسطة المادة البيضاء والتغيرات في كثافة الخلية والبطين الثالث (أقسام
المخيخ السهمية؛ بريجما 1( 2-92 164 ‎LAT‏ وصفرء 1-84« 18 ‎٠ (IntA/P‏ لكل تلطيخ؛ تم تضمين 6 أقسام مخ تحتوي على 5711/21 و16 قسم تحتوي على ‎INA/PILAT‏ لكل فأر في التحليل.
— 0 6 — وكما هو مبين في شكل 6؛ تم خفض كمية الفوسفو- تاو التي تم الكشف عنها في الأنوية المخيخية والمنطقة تحت المهادية للحيوانات المعالجة بواسطة الجسم المضاد 1685 بشكل ملحوظ بالمقارنة بكمية الفوسفو- تاو التى تم الكشف عنها فى نفس التركيبات فى الحيوانات الضابطة المعالجة بالجسم المضاد ‎.6F10‏ تم تقييم الدلالة الاحصائية باستخدام اختبار ‎«Student‏ م<0.05. مثال 5. أنسنة 1685 يبين تحليل التتابع أن الجسم المضاد 1685 له نطاق ‎LIS‏ متغير ‎variable kappa (Vk)‏ بتتابع ‎SEQ ID‏ رقم:16 والذي ينتمي إلى المجموعة الفرعية ‎Kabat‏ فأري 1؛ وبناظر المجموعة الفرعية ‎Kabat‏ بشري 4. يتم التأكيد على ‎.Kabat CDRs‏ للنطاق الثقيل المتغير ‎variable heavy‏ ‎(Vh)‏ للجسم المضاد 1685 تتابع ‎SEQ ID‏ رقم:10؛ والذي ينتمي إلى مجموعة فرعية ‎Kabat‏ ‏10 فأري 2ب» وبناظر المجموعة الفرعية ‎Kabat‏ بشري 1 ‎Kabat)‏ وآخرون )1991(¢ ‎Sequences‏ ‎cof Proteins of Immunological Interest‏ الطبعة الخامسة؛ ‎NIH‏ برقم نشر 3242-91). يتم التأكيد على ‎.Kabat CDRs‏ يتضمن نطاق ال ‎Vk‏ 1685 تتابع 0018-12 راسب 7 ‎SEQ ID <WASTRES)‏ رقم:18؛ ‎CDR-L35‏ راسب 8 ‎SEQ ID (KQSYTLRT)‏ رقم:19). ينتمي تتابع ال 0018-11 إلى رتبة 5 مقبولة 3؛ وتنتمي تتابعات ال ‎CDR-L2‏ و0012-13 إلى رتبة 1 ) ,)1996( ‎Martin & Thornton‏ ‎(J.
Mol.
Biol. 263:800-5‏ يتضمن نطاق ال ‎Vh‏ 1685 تتابع ‎CDR-HI‏ راسب 5 ‎SEQ ID «<YHGMD)‏ رقم: 11( على أساس ‎kabat ads‏ أو تتابع 008-111 راسب 10 ‎SEQ ID «GYPFTYHGMD)‏ رقم: 24( على أساس ترقيم ‎ <asgall Chothias Kabat‏ تتابع ‎CDR-H2‏ راسب 17 ‎SEQ ID «WINTYSGVPTYADDFKG) 0‏ رقم: 12(« وتتابع ‎CDR-H3‏ راسب 8 ‎SEQ ID (RRDFTMDF)‏ رقم: 13(. ينتمي تتابع ال 004-131 إلى ,45 مقبولة 1 وينتمي تتابع ال 008-102 إلى رتبة 2 (263:800-15 ‎«(Martin & Thornton (1996), J.
Mol.
Biol.‏ تتابع ال ‎CDR-H3‏ ليس له فئة معيارية؛ إلا أنه من المحتمل أن يكون له قاعدة متشابكة وفقاً لقواعد ‎Shiria‏ وآخرون (1999) 455:188-97 ‎-FEBS Lett.‏ الرواسب في السطح البيني بين النطاقات ‎Vk‏ رطالا هي رواسب ‎dale‏ لهذه المواضع في فأر.
— 1 6 — تم إجراء بحث عبر تتابعات البروتين في قاعدة بيانات ال ‎Deshpande) PDB‏ وآخرون ‎(J.
Virol. 85:1820-33 »)2011(‏ لإيجاد البنايات التي ستوفر نموذج بنائي تقريبي للجسم المضاد 5. تم استخدام بنية ‎Fab gia‏ جسم مضاد لمضاد ذيفان الكوليرا ‎pdb) Te33‏ رمز 1758-11) لا ‎VL‏ بدقة قدرها 1.78 أنجستروم. لقد احتفظت بنفس البنية المعيارية للحلقات ‎Jie‏ 1685. تم استخدام البنية البلورية ‎Fab‏ في معقد ال ‎pdb) Dsbb—Fab‏ رمز ‎(2ZUQ_B‏ ل<تخطيط نطاق ال ‎VH‏ ‏لل 1685. لقد تم حلها بدقة 3.3 أنجستروم واحتوت نفس البنايات المعيارية لا ‎CDR-HI‏ و ‎«CDR-H2‏ وأيضاً نفس الطول 08-113© بقاعدته المتشابكة. ‏ تم استخدام البرنامج ‎BioLuminate‏ لتخطيط بنية تقريبية لل ‎Fv‏ 1685. لقد أتاح بحث قاعدة بيانات تتابع بروتين غير مطول من ‎NCBI‏ مع تتابع ‎CDR“X’ed‏ ‎Fv 0‏ 1685 اختيار هياكل بشرية مناسبة التي يتم لداخلها تطعيم ‎CDRs‏ الفأري. بخصوص ‎Vk‏ تم اختيار سلسلة خفيفة ‎LIS‏ بشرية برمز دخول ‎SEQ ID) ACI71718.pro‏ رقم: 20). هذا التتابع لسلسلة خفيفة ‎LIS‏ بشري له نفس الرتب المعيارية لذ 001-12 و13. بخصوص ‎(Vh‏ تم اختيار سلسلة ثقيلة وا بشري ‎SEQ ID) BAC02002.1‏ رقم: 14)؛ إنها تتشارك مع الشكل المعياري ل 010161 1685و 112 » و113 وهي طول رواسب 8 بقاعدة متشابكة متوقعة. تصميمات السلسلة الثقيلة والخفيفة المؤنسنة والطفرات الرجعية على أساس هذه الهياكل البشرية مبينة في جدولي 5 و6؛ على الترتيب. تم تصميم سلسلة ثقيلة متغيرة 1685 مؤنسنة (111) لها تتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 15. يتضمن التصميم ثلاث طفرات رجعية: ‎V48M ¢R13K‏ و7981 . تم اختيار ‎KM‏ في موضع 13 بسبب أنه أكثر تكرارية عن ‎AV‏ البشر. تم اختيار ال ‎SF‏ موضع 98 لأنه يتم وضعه في سطح بيني؛ 0 مما يجعله مرغوياً للحفاظ على الراسب الفأري. تم تصميم ثلاث تتابعات سلسلة خفيفة متغيرة 1685 المؤنسنة: الإصدار 1 ‎(L1)‏ له التتابع ‎SEQ ID‏ رقم: 21 ويتضمن ثلاث طفرات رجعية: ‎(DIN‏ ‎Y36F ¢‘M4L‏ . تم اختيار ‎N‏ في موضع 1 يسبب أنه يقوم بتكوين ‎Lal,‏ هيدروجيني مرجح مع ‎N61‏ في 2 . تم اختيار ‎L‏ في موضع 4 يسبب اتصاله ب 10296 097 و598 في ‎¢LCDR3‏ ‏25 إنه يتصل أيضاً ب ‎F104‏ وراسب السطح البيني. تم اختيار 1 في الموضع 36 بسبب أن ‎Y‏ يمكن الترابط هيدروجينياً مع 0106 في 10083؛ ‎Lin‏ لا يستطيع ‎F‏ فعل ذلك. سيُشكل الرابط
٠ 6 2 ٠ ‏الهيدروجيني تفاعل إضافي والذي قد يؤثر على وظيفة ال 100183 وبالتالي يتم على نحو مفضل‎ ‏تجنب ذلك.‎ ‏؛‎ MALSDIN ‏طفرات رجعية:‎ aol ‏رقو: 22 ويتضمن‎ SEQ ID ‏للإصدار 2 (12) التتابع‎ ‏و7361 هو نفسه كما للإصدار 1. تم‎ « 104116 «DIN ‏و0435 . عرض الأسباب ل‎ ¢Y36F ‏اختيار 5 في موضع 43 لأن 5 يعمل على تكوين رابط هيدروجيني مع 0110 في 1711 والذي‎ 5 .110013 ‏يكون على مقربة من‎ ‏رقم: 23 ويتضمن ثلاث طفرات رجعية: 1/141؟؛‎ SEQ 1D ‏التتابع‎ (L3) 3 ‏للإصدار‎ ‏؛ و0435 . عرض أسباب لكل من هذه الطفرات هو نفسه كما للإصدارين 1 و2.‎ 7 ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ا تصميم مؤنسن‎ ) ) ‏قفاري | 1711 نز متقبل‎ 2) 2) «V48M «R13K) ١ : : - i
SEQ FRB? SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y91F 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ 1 5 : ‏رقم‎ " vy me
EE vy ym sss ‏تسا‎ 7 ‏اق سل قا قا اق‎
— 6 3 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) ) ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ (V48M (R13K) } }
SEQ FRB2 | SEQ ‏ابي‎ | CDR ‏أو‎ FR | «uly | ‏راسب‎ ‎SEQ ID (Y91F 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ 1 5 : ‏رقم‎ > ‏قا قا 3ق‎ ©" 3 5 1 1
E E E Frl 0 0 1 1
L L L Frl 1 1 1 1
K K K Frl 2 2 1 1
K K Fri 3 3 1 1
Fri 4 4 1 1
G G G Frl 5 5 1 1
A A E Frl 6 6 5 5 1 1 ‏اراي "| 7 3ق 3ق‎
— 6 4 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) ) ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ (V48M (R13K) } }
SEQ FRB2 | SEQ ‏ابي‎ | CDR ‏أو‎ FR | «uly | ‏راسب‎ ‎SEQ ID (Y91F 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ 1 5 : ‏رقم‎ >
EEE EEE
1 1 ‏ل ل ل‎ 1 8 8 1 1
K K K Frl 9 9 2
V V Fri 0 2 5 5 5 1 1 1 2 0 0 0 1 2 2 2
K K K Frl 3 3 2
A A A Frl 4 4
I EE ‏انا‎ ‎2
— 6 5 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ل ل 3 تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | ‏فاري‎ mAb ‏رقم رقم‎ 74811 130 ٍِ ٍِ
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y9IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 H ‏رقم‎ . 2
G G G Frl 6 2
Y Y Y Fri 7 7 2
T S Frl 8 2
F F F Frl 9 3 3
T T T Frl 0
CDR- 3 3
Y S Y H1 1 1
CDR- 3 3
H Y H H1 2 2
G A G
— 6 6 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ل ل 3 تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ 374814 (R13K) ٍِ ٍِ
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y91IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 ‏رقم:‎ .
CDR- 3 3
M 7 M Hl 4 4
CDR- 3 3
N Hl 5 5
CDR- 3
Hi i5
CDR- 3 111 <5 3 3 17 17 17 Fr2 6 3 3 \% 7 7 Fr2 7 7 3 3
K Fr2 8
Fr2 3 3
‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
VI ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) )
SEQ FRB2 | SEQ (sl | CDR SI FR | ‏راسب | راسب‎
SEQ ID (Y9IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ ‏رقم:‎ =
I EE
4
Le fe [ef 4 le [LO] 4 4 0 lo fw [a] 4 4 4
Lee ‏سا‎ ef.
EEE EEE ‏ا ما‎
— 6 8 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ل ل 3 تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | ‏فاري‎ mAb ‏رقم رقم‎ 74811 1310 ٍِ ٍِ
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID )917 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 H ‏رقم‎ . 4 1
M 7 M Fr2 8 4 %
G G G Fr2 9
CDR- 5 17 17 17 H2 0
CDR- 5
I I I H2 1 1
CDR- 5
N N N H2 2 2
CDR- 5
T T T H2 3 2
CDR- 5
Y N Y H2 4 ‏2ب‎ ‎5 T 5
— 6 9 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ل ل ل تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ 74811 «R13K) ٍِ ٍِ
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y91F 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 H ‏رقم‎ .
CDR- 5
G G G H2 6 2
CDR- 5 7 7 H2 7 22
CDR- 5
H2 8 92
CDR- 5
T T H2 9 3
CDR-
Y Y H2 4
CDR- 6
A A H2 1 5
CDR- 6
H2 2
— 7 0 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ل ل ل تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ 74811 1310 ٍِ ٍِ
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y9IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 H ‏رقم‎ .
CDR- 6
F F H2 4
CDR- 6
K K H2 5
CDR- 0 0 0 H2 6 6
Fr3 7 0 5 F Fr3 7 0 7 A Fr3 7 6 5 F Fr3 0
EE
‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
VI ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) )
SEQ FRB2 | SEQ (sl | CDR SI FR | ‏راسب | راسب‎
SEQ ID (Y9IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ ‏رقم:‎ =
HIE ENE
7
L L Fr3 2 1 7 8 Fr3 3 2 7
T T Fr3 4 3 7 5 5 Fr3 5 4 7 7 7 Fr3 6 5 7
S G Fr3 7 7
T T Fr3 8 7
EIEN CE
‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
VI ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) )
SEQ FRB2 | SEQ ‏ابي‎ | CDR ‏أو‎ FR | «uly | ‏راسب‎ ‎SEQ ID (Y91IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ ‏رقم:‎ =
HIE ERE
8 7 7 Fr3 3 8
L L Fr3 4 8 8
Fr3 5 1 8
I 1 Fr3 2 8 8 5 N Fr3 7 2 8 8 5 Fr3 8 <2 8
L L Fr3 z2 ‏ا‎
‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
VI ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) )
SEQ FRB2 | SEQ (sl | CDR SI FR | ‏راسب | راسب‎
SEQ ID (Y91IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ ‏رقم:‎ =
HIE EEE
9 8
A N Fr3 1 4 9 8
E E Fr3 2 5 9
Fr3 3 9 8
T T Fr3 4 7 9 8
A A Fr3 5 8 le [ele 9 9
Y 7 Fr3 7
EEC
— 7 4 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏ل ل ل تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ 74811 1310 ِ ٍِ
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y9IF 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 : ‏رقم‎ > 9 0 0 Fr3 2 1 0
A A Fr3 00 3 1 0
Fr3 01 4
CDR- 1 9 83 02 5
CDR- 1 9
H3 03
CDR- 1 9
H3 04 7
CDR- 1 9
F F H3 05
EIEN
— 7 5 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
VI ‏آٍّ ل تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ (V48M (R13K) } }
SEQ FRB2 | SEQ ‏ابي‎ | CDR ‏أو‎ FR | «uly | ‏راسب‎ ‎SEQ ID (Y91F 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID BEEN ‏كابات‎ ‎1 5 : ‏رقم‎ >
CDR- 1 1
M M H3 07 00
CDR- 1 13 00 1 ‏و0زاب‎ ‎1 ‎00 ‎1 ‏0د‎ ‎1 ‎200 ‎1 ‏0و‎
٠ 7 6 ٠ ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
VI ‏ل :ّ 1 تصميم مؤنسن‎ ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ (V48M (R13K) } }
SEQ sl | CDR ‏أو‎ FR ‏اسب اسب‎
SEQ ID (YOIF SEQ FRB2 E ‏ر و‎ J) 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ 1 5 : ‏رقم‎ .
I EE
1 ‏00ح‎ ‎1 ‏00ط‎ ‎1 ‎«00 ‎1 ‎00 ‎CDR- 1 1
H3 08 01
CDR- 1 1
F F H3 09 02 1 1
Ww 717 Frd 10 03 lo Jf oe fm hh
— 7 7 — ‏جدول‎ ‎16B5 ‏تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة‎
V1 ‏تصميم مؤنسن‎ 0 ) ) ‏متقبل‎ Hu VH | “mAb ‏رقم رقم‎ (V48M (R13K) } }
SEQ FRB2 | SEQ ‏ابي‎ | CDR ‏أو‎ FR | «uly | ‏راسب‎ ‎SEQ ID (Y91F 14 ‏رقم:‎ ID | 10 ‏رقم:‎ ID ‏كابات خطى‎ 1 5 : ‏رقم‎ . fee 1 1
Fed 12 05 1 1
G G Frd 13 06 1 1
T T Frd 14 07 1 1
T S Frd 15 08 1 1 7 7 Frd 16 09 1 1
T T Frd 17 10 1 1 ‏ل ل‎ Fr4 18 11 5 5 Fr4
IE || 3000) A
— 8 7 — جدول 5 تتابعات لأنسنة السلسلة الثقيلة ‎16B5‏ ) ) 0 تصميم مؤنسن ‎V1‏ رقم رقم ‎Hu VH | “mAb‏ متقبل ٍِ ٍِ 1310 74811
SEQ 2 SEQ us! | CDR ‏أو‎ FR ‏راسب راسب‎
SEQ ID (Y9IF كابات خطى ‎ID‏ رقم: 10 | ‎ID‏ ,14:03 . رقم : 5 1 1 1 ‎Frd 20 13‏ 5 5 جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] <D IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | <Y36F | <M4L mAb‏ ‎(P43S | (Y36F 11+ gol fs‏ | وميس رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 لل« عا ‎px wo‏
— 9 7 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | <Y36F | M4L mAb‏ ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23
— 0 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎mAb‏ بتكا | ‎<Y36F | <Y36F‏ ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 قا ‎ems‏ ا اط
— 1 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصمد تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎mAb‏ بتكا | ‎<Y36F | <Y36F‏ ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23
— 2 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎mAb‏ نتفلا | ‎<Y36F | «Y36F‏ ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب | رقم راسب | ‎FR‏ أر | صروعو 88010 نكما ‎SEQID | SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23
— 3 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | MAL mAb‏ | 7368 ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 ‎re [sm] we‏ ق | اق
— 4 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] <D IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | MAL mAb‏ | 7368 ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 اا »لس« ءا ا ا اق ‎sss ls [rm] ® |e‏
— 5 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] <D IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | MAL mAb‏ | 7368 ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 ‎oso | [om] ew‏ ‎ooo | 6 om | Hs‏ اس الس« تا ا تا قا اق ‎EE‏ تا ا تا ا اق
— 6 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | MAL mAb‏ | 7368 ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 ل« ا قال قا قا | اق ل" # ‎vv vy [em‏ ‎a aaa [am] 0s‏
— 7 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | MAL mAb‏ | 7368 ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 »ا 2 ‎vv yy [ym‏ مم »| ‎kx ke‏ اا #* ‎x vy yy Jems]‏ ‎ls few] 8‏ تا قا اق
— 8 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | <Y36F | M4L mAb‏ ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 اس سا ع ا ا اق ‎oso | [om | «|‏
— 9 8 — جدول 6 تتابعات مناطق متغيرة سلسلة خفيفة 1685 مؤنسنة تصميم تصميم امؤنسن ‎١72‏ تصميم مؤنسن 71 | ‎DIN)‏ |مؤنسن ‎V3‏ ‎<M4L) 141] 0 IN)‏ ‎Hu VH‏ متقبل ‎<Y36F | <Y36F | «MAL mAb‏ ‎ols‏ أبوي ‎(P43S | (Y36F FRO‏ | ومين رقم راسب ‎١‏ رقم راسب | ‎SFR‏ | مروعو ا 5880 رقم ‎SEQID |SEQID | SEQID‏ كابات خطي جوم ١رقم:‏ 16 20 رقم: 21 | رقم: 22 | رقم: 23 ‎R R R R R Frd 113 107‏ مثال 6 ألفة تاو لأجسام مضادة 1685 مؤنسنة بيانات الترابط لأجسام مضادة مؤنسنة التي لها تصميم 1111.1 أو 11112 ‎Lane‏ في جدول 7 أدناه. بخصوص المقارنة؛ بيانات الترابط ل 1685 الخيالية مبينة أيضاً. تم إيجاد البيانات باستخدام جهاز ©:31060. لقد تم التوصل إلى أن الإصدار 11112 له أقوى ألفة - هو نفسة ‎Jie‏ ‏5 ذلك لذ 1685 التخيلي علي نحو أساسي. كان للإصدارات 1685 المؤنسنة ‎HILL‏ و11113 ألفة
— 9 0 —
تم ‎chal‏ قياسات رنين بلازمون سطح باستخدام جهاز ‎GE ( Biacore T200‏ ‎(Lifesciences‏ تم إجراء جميع التجارب باستخدام طور متقلب ب 10 مل مولار ‎HEPES‏ أس هيدروجيني 4 150 مل ‎Wee‏ كلوريد صوديوم؛ %0.05 توين -(20 ‎Jara‏ 30 ميكرولتر/دقيقة». عبر شريحة حساس 0145 محضرة بجسم مضاد التقاط مضاد فأري مقترن بأمين
أو مضاد بشري . تم ربط 1685 (شكل تخيلي أو مؤنسن) بجسم مضاد ‎١‏ لالتقاط غير المتقلب ¢ وتم تطبيق تركيزات متغيرة من مأشوب منقى ‎hTau-P30IL‏ على معقد الجسم المضاد بتكرار متتالي. تم فصل بين خطوات التكرار بخطوات تجديد بملح مرتفع أو أس هيدروجيني منخفض. تم تكرار التجارب بتحضيرات مختلفة لجسم مضاد ومولد مضاد ‎٠‏ ثم إجراء تحليل ببرنامج ‎Biacore‏ على المتن.
7 ‏جدول‎ ‎Biacore ‏بيانات‎ ‎Koff Ws | ‏خط عمج‎ Kon KD ‏(لكل ثانية)‎ f | Kon i ‏(مولار) (لكل مولار‎ (ast 3. 3.3 1. 1.43 232 Chil x5 | *10x3 | °10 x5 10 x ‏بيكومولار‎ 05 8. 2.1 1. x3.5 617 Hul6 10 x2 | Y10x5 | “10 x5 °10 ‏بيكومولار‎ 851111 1. 3.4 4. x1.2 286 Hul6 10 x1 | 710 x2 ١ x6 10 ‏تك بيكومولار‎ 1. 3.9 6. 1.25 320 Hul6 10 x8 | 710 x8 ‏ا‎ x2 "10 x ‏3ك بيكومولار‎ ‏مثال 7. اكتشاف ترسيب مناعي ل تاو مع أجسام مضادة 1685 مؤنسنة‎ 0
— 9 1 —
عينة فحص جثة بعد الوفاة لقشرة مخ أمامية من مريض بمرض الزهيمر بدرجة ‎Braak‏ 6 تم الاستخلاص بالتعاقب في محاليل مُنظمة بقوة ذويانية متزايدة؛ بالنظام الآتي: )1( منظم ملح مرتفع (20 مل مولار من ‎(Tris‏ 5 مل مولار من ‎(EDTA‏ 1 مل مولار من ‎DTT‏ %10 ‎Sus‏ 35 ¢« 7500 مل مولار كلوريد صوديوم أس هيدروجيني 4 7( ‘ )2( منظم ‎Triton‏ )20 مل
‎«Tris Nea 5‏ 5 مل مولار ‎(EDTA‏ 1 مل مولار ‎(DTT‏ %10 سكروزنء %1 ‎«Triton X100‏ 500 مل ‎Wee‏ كلوريد صوديوم أس هيدروجيني 4 7( ¢ و(3) منظم ‎Sarkosyl‏ )0 1 مل مولار ‎(Tris‏ 5 مل مولار ‎(EDTA‏ 1 مل مولار ‎(DTT‏ 9010 سكروز» 500 مل مولار كلوريد صوديوم؛
‎Sarkosyl 1‏ أس هيدروجيني 7-4( لكل ‎cde‏ 200 ميكروجرام من ذواب الملح المرتفع» أو 20 ميكروجرام من غير الذواب ال ‎¢sarkosyl 10‏ تم تخفيف أجزاء إلى 400 ميكرولتر من منظم الترسيب المناعي )0 1 مل مولار ‎Tris‏ ‏0 مل مولار كلوريد صوديوم؛ ¢ 900.5 ‎Triton X100‏ 1 مل مولار ‎EGTA‏ 1 مل مولار ‎(EDTA‏ أس هيدروجيني 7.4). تم تصفية العينات مسبقاً بحبوب مغناطيسية © بروتين ( ‎New‏ ‎¢(England Biolabs‏ وتم إضافة 5 ميكروجرام من جسم مضاد إلى كل أنبوب. تتضمنت الأجسام المضادة المستخدمة: 1) جسم مضاد لجسم غير مناعي فأري ‎¢(mIgG) IgG‏ بمثابة ضابط؛ 2) جسم مضاد لجسم غير مناعي بشري ‎¢(hIgG) IgG‏ بمثابة ضابط؛ 3( جسم مضاد 1685 تخيلي ‎¢(Chil6BS5)‏ 4) 1685 مؤنسن» إصدار ‎¢HIL2 (h16B6-HIL2)‏ و1685 مؤنسن» إصدار 33 (01686-11113). تم تحضين الحلالات المصفاة مسبقاً والأجسام المضادة لمدة ساعتين في 4 درجة مئوية. تم ترسيب معقدات الجسم المضاد/مولد المضاد باستخدام حبوب مغناطيسية 6 بروتين 3 تم غسيل المترسبات تماماً = ‎350/PBS‏ مل مولار كلوريد صوديوم ‎٠‏ بعد ‎IA‏ ‏0 باستخدام منظم ‎claemmli‏ يتم حل الشطافات بواسطة ‎SDS-PAGE‏ وتنشيفها باستخدام جسم
‎(DAKO) ‏تاو متعدد النسائل‎ alias
‏كما هو مبين في شكل 7« 1685 التخيلي و1685 المؤنسن 11112 و11113 قد تعرفت على تاو في كلا الجزئين الذواب وغير الذواب من مخ مصاب بالزهيمر. مثال 8. تحديد صفات كيميائية هيستولوجية مناعية لأجسام مضادة تاو 1685 مؤنسنة على مخ
‏25 مصاب بمرض الزهايمر .
— 2 9 — تم أيضاً بطريقة كيميائية هيستولوجية مناعية اختبار جسم مضاد مضاد تاو أحادي النسيلة فأري ومتغيراته الاثنين المؤنسنة 11685-11112 و11685-1010 ؛ على أقسام مجمدة حديثة من قشرة مخ بشري من متبرعين مصابين بمرض الزهيمر وغير مرضى؛ ضوابط مسنين. الطرق: نسيج مخ بشري تم الحصول على قشور مخ أمامية من ‎Health Research Institute‏ 800. تضمنت الحالات ستة مرضى ( بمتوسط عمرى 86.8 + 0.40 ‎(SEM‏ مشخصة بمرض الزهيمر ومؤكدة بتقييم عصبي مرضي عند الوفاة وثلاث ضوابط مسنة غير مريضة (بمتوسط عمرى 7 ‎9.7T+‏ ‎(SEM‏ تم إدراج ديموجرافيات الحالات في جدول 8؛ أدناه. تم تنفيذ كيمياء هيستولوجية مناعية 0 علىء 10 ميكرومتر أقسام مبردة محمولة على شريحة خفيفة ثابتة الأسيتون. جدول 8 ديموجرافيات لحالات مفحوصة بطريقة كيميائية هيستولوجية مناعية ‎sal)‏ العمر الفترة بعد الحالة الجنس ص المنتهي (سنين) الموت (ساعة) 1- ٍِ ‎AD‏ 88 أنتى 2.8 21 03- ‎wf 43‏ ‎AD‏ 88 أنتى 3.3 08- ‎AD‏ ذكر 2.66 06 03- ‎AD‏ ذكر 2.2 52
— 3 9 — جدول 8 ديموجرافيات لحالات مفحوصة بطريقة كيميائية هيستولوجية مناعية 1- ‎AD‏ 87 ذكر 3 16 01- ‎AD‏ ذكر 3 18 10- ضابط 79 ذكر 3 63 0- ضابط 93 ذكر 3 39 ‎nN -10‏ 5 ٍِ ‎pi 9 ala‏ 3.2 22 الكيمياء الهيستولوجية المناعية كانت طريقة إنزيم بيروكسيداز مناعة نظام الاكتشاف الأساسي؛ التي تكونت إما من بيروكسيداز مصنف بوليمر مقترن بجلويولينات مناعية ) ‎EnVision+System HRP labeled‏ ‎(Polymer; Dako K4001‏ أو نظام تكبير ‎Vector ABC‏ لأجسام مضادة مؤنسنة معالجة بالبيوتين ‎«ud (ABC Elite Standard; PK-6100; Vector Laboratories) 5‏ رؤية التلطيخ بكروموجين ‎«(Liquid DAB + Substrate Chromogen System; Dako K3468) DAB‏ والتي أنتجت راسب بني اللون. تكون الضابط السلبي بتنفيذ الإجراء الكيميائي الهيستولوجي المناعي بالكامل على أقسام متجاورة مع جسم مضاد ضابط متماثل 150 أو إهمال الجسم المضاد الأولي. 0 تصنيف المناعى المتألق
— 4 9 — تم القيام بتلطيخ مناعي متألق مزدوج لتحديد العلاقة بين المتغيرين الفأري والبشري للجسم المضاد؛ أجسام مضادة أخرى تاو التي تدرك حواتم متعددة معالجة بالفسفرة؛ وأميلويد بيتا. تم تلطيخ أقسام الأنسجة بالتوازي بتوليفة أجسام مضادة محتوية على جسم مضاد معالج بالبيوتين أو متغيرات 1685 مؤنسنة مصنفة ‎FITC‏ )1 ميكروجرام/مل) وفأري ‎Wl)‏ 1685 أحادي النسيلة (1 ميكروجرام/مك)» ‎AT100 ¢«(1000:1) ATS‏ (1000:1)؛ أو ‎3D6‏ (1 ميكروجرام/مل). تم اكتشاف ‎١‏ لأجسام المضادة الفأرية مع فأري مضاد ماعز مقترن ثانوياً بفلوروفور ‎(Invitrogen)‏ تم اكتشاف الأجسام المضادة المؤنسنة المعالجة بالبيوتين مع استريتافيدين 635. الامتصاصات المسبقة لتقدير نوعية الأجسام المضادة بمولداتها المضاد المستهدفه؛ تم عمل امتصاص مسبق ل 0 1 ميكروجرام/مل من الأجسام المضادة 1635 مع 50 ميكروجرام/مل من تاو ,03011 بشري منقى أو سينوكلين نمط بري (بروتين غير ذي صلة بالموضوع) طوال الليل في 4 درجات مئوية. ثم تم تطبيق الأجسام المضادة على أنسجة وتم تنفيذ إجراء كيمياء هيستولوجيا مناعية كما هو مبين أعلاه. تحليل الصورة تم تصوير الشرائح إما بمجهر ‎«Olympus Nanozoome 2.0111 «Olympus BX61‏ أو نظام متحد ‎sll‏ طيفي ‎a Leica SPE‏ . تم جمع الصور في شكل ملفات ‎TIFF‏ ‏النتائج ‏كما هو مبين في جدول 9؛ أدناه؛ أظهر الجسم المضاد أحادي النسيلة فأري 1685 وكلا المتغيرين المؤنسنين تفاعلية على نسيج مرض الزهيمر؛ تلطيخ خيوط اللبد العصبي بوضوح؛ 0 تشابك ليفي عصبي (كروي الشكل في الغالب)؛ وبعض لويحات التهاب عصبي إيجابي ل تاو. تم حجز ‎lel‏ مرض ‎aud AD‏ 1685 إلى شىء ‎cooley‏ إلا أنه قد تم أيضاً اكتشاف تفاعلية في الأبيض. أظهر نسيج الضابط غير المريض؛ على ‎(add‏ تفاعلية خلفية منتشرة لكنها كانت سلبية لأي أمراض موجودة في نسيج ال ‎AD‏
— 5 9 — تم إجراء تجارب تصنيف مزدوجة مع إصدار وحيدة النسيلة الفأري ل 165 مع ) 1 ( كلا المتغيرين المونسنين» (2) أجسام مضادة متعرفة على تاو في حواتم مفسفرة متعددة»؛ و(3) نشوى بيتا لتوصيف ثاني للأمراض المتعرف عليها عن طريق متغيرات الأجسام المضادة. اتحدت موضعياً كلا 11685-11112 و11685-1710 مع الأجسام المضادة وحيدة النسيلة 1685 مع التطابق الكبير على الهياكل المرضية ‎AD‏ لييفي. أيضاً اكتشف 111685-11112 الأمراض التي تم إظهارها بغية التفاعلية المناعية لمختلف الحواتم تاو المفسفرة؛ بما في ذلك سيرين 2 « ثيريونين 205 ‎(ATS)‏ وسيرين 212 وثريونين 214 (27100)؛ وسيرين 396 (داخل الأجسام المضادة الملكية؛ 20111). ‎(daly‏ أظهر التصنيف المزدوج مع جسم مضاد بيتا نشوي الذي تعرف على تتابع الحمض الأميني طرف-11 (306؛ 1-5 ‎(an‏ و1685 تموضع مشترك 0 ضثئيل ‎fas‏ بين هياكل ‎AB‏ وهياكل تفاعلية مناعية ل 1685 على لويحات نشوية. عندما تم مقارنة التفاعلية المناعية 1685 بالجسم المضاد مضاد تاو أحادي النسيلة متاح تجارياً موصف جيداً ‎(Dako)‏ كلاهما مبقع بمرض ‎AD‏ لفيفي التي تضمنت لويحات عصبية إيجابية ل تاو خيوط لبد عصبي؛ والتشابكات الليفية العصبية. تم تقييم نوعية الجسم المضاد بامتصاصات مسبقة بمأشوب منقى تاو ,53011 ولوحظ 5 وجود تناقص في التلطيخ عندما تم امتصاص مسبق ل 1685 مع تاو ,03011 ؛ لكن لم يتأثر التلطيخ عندما تم امتصاص مسبق للأجسام المضادة مع بروتين غير ذي صلة (سينوكلين نوع بري) بنفس التركيزات المولارية. كان ‎3S‏ من قسمي الجسم المضاد الضابط 150 متماثل وإهمال الجسم المضاد الأولي سلبية للتلطيخ عبر جميع الأنسجة المختبرة. جدول 9 الأجسام المضادة 1635 المتصفة كيميائياً هيستولوجياً ‎Lelie‏ ‏الجسم نسيج ‎AD‏ ‏رقم الدفعة التركيز المضاد مبقع 5 فأري ‎NB-0174A‏ 1[ميكروجرام/م
— 6 9 — جدول 9 الأجسام المضادة 1635 المتصفة كيميائياً هيستولوجياً مناعياً 1 تخيلي 061512 نعم ميك ‎ef plas‏ ‎h16BS5-‏ : 1 ‎NB-0248‏ نعم 11112 ميك روجرام/مل ‎H16B5-‏ 1 011113 نعم ‎NID‏ ميك روجرام/مل جميع المنشورات ‎La)‏ في ذلك أرقام انضمام بنك الجينات؛ أرقام انضمام ‎UniProtKB/Swiss-Prot‏ ‏وما شابه ذلك)؛ تدخل براءات الاختراع وطلبات براءات الاختراع المذكورة في هذا الوصف هنا على سبيل المرجعية في مجملها لجميع الأغراض بالقدر نفسه كما لو تم على وجه التحديد وبشكل فردي الإشارة إلى كل منشور ‎ajar‏ وبراءة اختراع وطلب براءة اختراع مُراد دخولها على سبيل المرجعية 5 في مجملها لجميع الأغراض. في حال وجود أي تباين في تتابعات مرتبطة بأرقام انضمام ‎UniProtKB/Swiss-Prot sGenbank‏ وما شابه ذلك؛ يشير الطلب إلى تتابعات مرتبطة بأرقام الانضمام المذكورة اعتباراً من تاريخ نفاذ إيداع الطلب وهذا يعني أن تاريخ الإيداع الفعلي أو تاريخ سابق لحق أولوية طلب الذي يكشف عن رقم الانضمام ذات الصلة. يمكن استخدام أي ميزة؛ ‎shi‏ عنصر؛ تجسيم؛ أو جانب من جوانب الاختراع في توليفة مع أي من غيرها ما لم يذكر عن طريق التوضيح والمثال لأغراض الوضوح والفهم» وسوف يكون واضحاً أنه قد يتم مزاولة تغييرات وتعديلات معينة تقع في نطاق عناصر الحماية الملحقة. قائمة تتبعات 5 <110> سيبيرت ‎(in‏
دولان ؛ فيليب جيمس 111 ؛ ليو يوي؛ باربر؛ روبن <120>_المعالجة المناعية للبروتين البشري ‎TAU‏ ‏5 >130< 442367/057450 >140< بي سي تي/البراءة الامريكية 025044/2014 <141> 12-03-2014 ‎US 61/780,624 <150>‏ >151< 13-03-2013 ‎US 61/800,382 <150> 10‏ >151< 15-03-2013 >160< 34 >170< إصدار البراءة 3.5 >210< 1 >211< 441 ‎PRT <212>‏ >213< الانسان العاقل <400> 1
Met Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly 10 5 1
Thr Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His 25 20
Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Glu Ser Pro Leu 5 40 35
Gln Thr Pro Thr Glu Asp Gly Ser Glu Glu Pro Gly Ser Glu Thr Ser 60 55 50
Asp Ala Lys Ser Thr Pro Thr Ala Glu Asp Val Thr Ala Pro Leu Val 80 75 70 65 10
Asp Glu Gly Ala Pro Gly Lys Gln Ala Ala Ala Gln Pro His Thr Glu 95 90 85
Ile Pro Glu Gly Thr Thr Ala Glu Glu Ala Gly Ile Gly Asp Thr Pro 110 105 100
Ser Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val Thr Gln Ala Arg Met Val 15 125 120 115
Ser Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp Asp Lys Lys Ala Lys Gly 140 135 130
Ala Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro Arg Gly Ala Ala Pro Pro 160 155 150 145 20
Gly Gln Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg Ile Pro Ala Lys Thr Pro 175 170 165
Pro Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro Lys Ser Gly 190 185 180
Asp Arg Ser Gly Tyr Ser Ser Pro Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser 205 200 195
Arg Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro Pro Thr Arg Glu Pro Lys 5 220 215 210
Lys Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys Ser Pro Ser Ser Ala Lys 240 235 230 225
Ser Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met Pro Asp Leu Lys Asn Val 255 250 245 10
Lys Ser Lys lle Gly Ser Thr Glu Asn Leu Lys His Gln Pro Gly Gly 270 265 260
Gly Lys Val Gln Ile Ile Asn Lys Lys Leu Asp Leu Ser Asn Val Gln 285 280 275
Ser Lys Cys Gly Ser Lys Asp Asn Ile Lys His Val Pro Gly Gly Gly 15 300 295 290
Ser Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp Leu Ser Lys Val Thr Ser 320 315 310 305
Lys Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His Lys Pro Gly Gly Gly Gln 335 330 325 20
Val Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe Lys Asp Arg Val Gln Ser 350 345 340
Lys Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His Val Pro Gly Gly Gly Asn 365 360 355
Lys Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe Arg Glu Asn Ala Lys Ala 380 375 370
Lys Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr Lys Ser Pro Val Val Ser 5 400 395 390 385
Gly Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn Val Ser Ser Thr Gly Ser 415 410 405
Ile Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala Thr Leu Ala Asp Glu Val 430 425 420 10
Ser Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu 440 435 2 <210> 412 <211> 15
PRT <212> ‏الانسان العاقل‎ <213> 2 >400<
Met Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly 10 5 1 20
Thr Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His
25 20
Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Glu Ser Pro Leu 40 35
Gln Thr Pro Thr Glu Asp Gly Ser Glu Glu Pro Gly Ser Glu Thr Ser 60 55 50 5
Asp Ala Lys Ser Thr Pro Thr Ala Glu Ala Glu Glu Ala Gly Ile Gly 80 75 70 65
Asp Thr Pro Ser Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val Thr Gln Ala 95 90 85
Arg Met Val Ser Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp Asp Lys Lys 10 110 105 100
Ala Lys Gly Ala Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro Arg Gly Ala 125 120 115
Ala Pro Pro Gly Gln Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg Ile Pro Ala 140 135 130 15
Lys Thr Pro Pro Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro 160 155 150 145
Lys Ser Gly Asp Arg Ser Gly Tyr Ser Ser Pro Gly Ser Pro Gly Thr 175 170 165
Pro Gly Ser Arg Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro Pro Thr Arg 20 190 185 180
Glu Pro Lys Lys Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys Ser Pro Ser
205 200 195
Ser Ala Lys Ser Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met Pro Asp Leu 220 215 210
Lys Asn Val Lys Ser Lys Ile Gly Ser Thr Glu Asn Leu Lys His Gln 240 235 230 225 5
Pro Gly Gly Gly Lys Val Gln Ile Ile Asn Lys Lys Leu Asp Leu Ser 255 250 245
Asn Val Gln Ser Lys Cys Gly Ser Lys Asp Asn Ile Lys His Val Pro 270 265 260
Gly Gly Gly Ser Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp Leu Ser Lys 10 285 280 275
Val Thr Ser Lys Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His Lys Pro Gly 300 295 290
Gly Gly Gln Val Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe Lys Asp Arg 320 315 310 305 15
Val Gln Ser Lys Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His Val Pro Gly 335 330 325
Gly Gly Asn Lys Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe Arg Glu Asn 350 345 340
Ala Lys Ala Lys Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr Lys Ser Pro 20 365 360 355
Val Val Ser Gly Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn Val Ser Ser
380 375 370
Thr Gly Ser Ile Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala Thr Leu Ala 400 395 390 385
Asp Glu Val Ser Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu 410 405 5 3 <210> 383 <211>
PRT <212> ‏الانسان العاقل‎ <213> 0 3 >400<
Met Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly 10 5 1
Thr Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His 15 25 20
Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Ala Glu Glu Ala 40 35
Gly Ile Gly Asp Thr Pro Ser Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val 60 55 50 20
Thr Gln Ala Arg Met Val Ser Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp
80 75 70 65
Asp Lys Lys Ala Lys Gly Ala Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro 95 90 85
Arg Gly Ala Ala Pro Pro Gly Gln Lys Gly ‏على‎ Ala Asn Ala Thr Arg 110 105 100 5
Ile Pro Ala Lys Thr Pro Pro Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly 125 120 115
Glu Pro Pro Lys Ser Gly Asp Arg Ser Gly Tyr Ser Ser Pro Gly Ser 140 135 130
Pro Gly Thr Pro Gly Ser Arg Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro 10 160 155 150 145
Pro Thr Arg Glu Pro Lys Lys Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys 175 170 165
Ser Pro Ser Ser Ala Lys Ser Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met 190 185 180 15
Pro Asp Leu Lys Asn Val Lys Ser Lys Ile Gly Ser Thr Glu Asn Leu 205 200 195
Lys His Gln Pro Gly Gly Gly Lys Val Gln Ile Ile Asn Lys Lys Leu 220 215 210
Asp Leu Ser Asn Val Gln Ser Lys Cys Gly Ser Lys Asp Asn Ile Lys 20 240 235 230 225
His Val Pro Gly Gly Gly Ser Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp
255 250 245
Leu Ser Lys Val Thr Ser Lys Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His 270 265 260
Lys Pro Gly Gly Gly Gln Val Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe 285 280 275 5
Lys Asp Arg Val Gln Ser Lys Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His 300 295 290
Val Pro Gly Gly Gly Asn Lys Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe 320 315 310 305
Arg Glu Asn Ala Lys Ala Lys Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr 10 335 330 325
Lys Ser Pro Val Val Ser Gly Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn 350 345 340
Val Ser Ser Thr Gly Ser Ile Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala 365 360 355 15
Thr Leu Ala Asp Glu Val Ser Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu 380 375 370 4 <210> 410 <211> 20
PRT <212>
>213< الانسان العاقل <400> 4
Met Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly 10 5 1 5
Thr Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His 25 20
Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Glu Ser Pro Leu 40 35
Gln Thr Pro Thr Glu Asp Gly Ser Glu Glu Pro Gly Ser Glu Thr Ser 10 60 55 50
Asp Ala Lys Ser Thr Pro Thr Ala Glu Asp Val Thr Ala Pro Leu Val 80 75 70 65
Asp Glu Gly Ala Pro Gly Lys Gln Ala Ala Ala Gln Pro His Thr Glu 95 90 85 15
Ile Pro Glu Gly Thr Thr Ala Glu Glu Ala Gly Ile Gly Asp Thr Pro 110 105 100
Ser Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val Thr Gln Ala Arg Met Val 125 120 115
Ser Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp Asp Lys Lys Ala Lys Gly 20 140 135 130
Ala Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro Arg Gly Ala Ala Pro Pro
160 155 150 145
Gly Gln Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg Ile Pro Ala Lys Thr Pro 175 170 165
Pro Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro Lys Ser Gly 190 185 180 5
Asp Arg Ser Gly Tyr Ser Ser Pro Gly Ser Pro Gly Thr Pro Gly Ser 205 200 195
Arg Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro Pro Thr Arg Glu Pro Lys 220 215 210
Lys Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys Ser Pro Ser Ser Ala Lys 10 240 235 230 225
Ser Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met Pro Asp Leu Lys Asn Val 255 250 245
Lys Ser Lys lle Gly Ser Thr Glu Asn Leu Lys His Gln Pro Gly Gly 270 265 260 15
Gly Lys Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp Leu Ser Lys Val Thr 285 280 275
Ser Lys Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His Lys Pro Gly Gly Gly 300 295 290
Gln Val Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe Lys Asp Arg Val Gln 20 320 315 310 305
Ser Lys Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His Val Pro Gly Gly Gly
335 330 325
Asn Lys Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe Arg Glu Asn Ala Lys 350 345 340
Ala Lys Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr Lys Ser Pro Val Val 365 360 355 5
Ser Gly Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn Val Ser Ser Thr Gly 380 375 370
Ser Ile Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala Thr Leu Ala Asp Glu 400 395 390 385
Val Ser Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu 10 410 405 <210> 381 <211>
PRT <212> 15 ‏الانسان العاقل‎ <213> 5 >400<
Met Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly 10 5 1 20
Thr Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His
25 20
Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Glu Ser Pro Leu 40 35
Gln Thr Pro Thr Glu Asp Gly Ser Glu Glu Pro Gly Ser Glu Thr Ser 60 55 50 5
Asp Ala Lys Ser Thr Pro Thr Ala Glu Ala Glu Glu Ala Gly Ile Gly 80 75 70 65
Asp Thr Pro Ser Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val Thr Gln Ala 95 90 85
Arg Met Val Ser Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp Asp Lys Lys 10 110 105 100
Ala Lys Gly Ala Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro Arg Gly Ala 125 120 115
Ala Pro Pro Gly ‏مان‎ Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg Ile Pro Ala 140 135 130 15
Lys Thr Pro Pro Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly Glu Pro Pro 160 155 150 145
Lys Ser Gly Asp Arg Ser Gly Tyr Ser Ser Pro Gly Ser Pro Gly Thr 175 170 165
Pro Gly Ser Arg Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro Pro Thr Arg 20 190 185 180
Glu Pro Lys Lys Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys Ser Pro Ser
205 200 195
Ser Ala Lys Ser Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met Pro Asp Leu 220 215 210
Lys Asn Val Lys Ser Lys Ile Gly Ser Thr Glu Asn Leu Lys His Gln 240 235 230 225 5
Pro Gly Gly Gly Lys Val Gln Ile Val Tyr Lys Pro Val Asp Leu Ser 255 250 245
Lys Val Thr Ser Lys Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His His Lys Pro 270 265 260
Gly Gly Gly Gln Val Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp Phe Lys Asp 10 285 280 275
Arg Val Gln Ser Lys Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr His Val Pro 300 295 290
Gly Gly Gly Asn Lys Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr Phe Arg Glu 320 315 310 305 15
Asn Ala Lys Ala Lys Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val Tyr Lys Ser 335 330 325
Pro Val Val Ser Gly Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser Asn Val Ser 350 345 340
Ser Thr Gly Ser Ile Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu Ala Thr Leu 20 365 360 355
Ala Asp Glu Val Ser Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu
380 375 370 6 <210> 352 <211>
PRT <212> 5 ‏الانسان العاقل‎ <213> 6 >400<
Met Ala Glu Pro Arg Gln Glu Phe Glu Val Met Glu Asp His Ala Gly 10 5 1
Thr Tyr Gly Leu Gly Asp Arg Lys Asp Gln Gly Gly Tyr Thr Met His 10 25 20
Gln Asp Gln Glu Gly Asp Thr Asp Ala Gly Leu Lys Ala Glu Glu Ala 40 35
Gly Ile Gly Asp Thr Pro Ser Leu Glu Asp Glu Ala Ala Gly His Val 60 55 50 15
Thr Gln Ala Arg Met Val Ser Lys Ser Lys Asp Gly Thr Gly Ser Asp 80 75 70 65
Asp Lys Lys Ala Lys Gly Ala Asp Gly Lys Thr Lys Ile Ala Thr Pro 95 90 85
Arg Gly Ala Ala Pro Pro Gly Gln Lys Gly Gln Ala Asn Ala Thr Arg 20 110 105 100
Ile Pro Ala Lys Thr Pro Pro Ala Pro Lys Thr Pro Pro Ser Ser Gly 125 120 115
Glu Pro Pro Lys Ser Gly Asp Arg Ser Gly Tyr Ser Ser Pro Gly Ser 140 135 130
Pro Gly Thr Pro Gly Ser Arg Ser Arg Thr Pro Ser Leu Pro Thr Pro 5 160 155 150 145
Pro Thr Arg Glu Pro Lys Lys Val Ala Val Val Arg Thr Pro Pro Lys 175 170 165
Ser Pro Ser Ser Ala Lys Ser Arg Leu Gln Thr Ala Pro Val Pro Met 190 185 180 10
Pro Asp Leu Lys Asn Val Lys Ser Lys Ile Gly Ser Thr Glu Asn Leu 205 200 195
Lys His Gln Pro Gly Gly Gly Lys Val GIn Ile Val Tyr Lys Pro Val 220 215 210
Asp Leu Ser Lys Val Thr Ser Lys Cys Gly Ser Leu Gly Asn Ile His 15 240 235 230 225
His Lys Pro Gly Gly Gly Gln Val Glu Val Lys Ser Glu Lys Leu Asp 255 250 245
Phe Lys Asp Arg Val Gln Ser Lys Ile Gly Ser Leu Asp Asn Ile Thr 270 265 260 20
His Val Pro Gly Gly Gly Asn Lys Lys Ile Glu Thr His Lys Leu Thr 285 280 275
Phe Arg Glu Asn Ala Lys Ala Lys Thr Asp His Gly Ala Glu Ile Val 300 295 290
Tyr Lys Ser Pro Val Val Ser Gly Asp Thr Ser Pro Arg His Leu Ser 320 315 310 305
Asn Val Ser Ser Thr Gly Ser Ile Asp Met Val Asp Ser Pro Gln Leu 5 335 330 325
Ala Thr Leu Ala Asp Glu Val Ser Ala Ser Leu Ala Lys Gln Gly Leu 350 345 340 7 <210> 22 <211> 10 ‏الحمض النووي‎ <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< <220> ‏توليفه‎ <223> 7 <400> 15 ctaatacgac tcactatagg gc 22 8 <210> 26 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> | 0
<213> تسلسل أصطناعي >220< >223< توليفه >400< 8 ‎ctcaattttc ttgtccacct tggtge 26‏ >210< 9 >211< 26 >212< الحمض النووي 0 <213> تسلسل أصطناعي >220< >223< توليفه >400< 9 ‎ctcaagtttt ttgtccaccg tggtge 26 15‏ >~210< 10 >211< 225 ‎PRT <212>‏ <213> تسلسل أصطناعي
<220> ‏توليفه‎ >223< >400<
Met Asp Trp Val Trp Asn Leu Leu Phe Leu Met Ala Ala Ala Gln Ser 10 5 1 5
Ile Gln Ala Gln Ile Gln Leu Val Gln Ser Gly Pro Glu Leu Lys Lys 25 20
Pro Gly Glu Thr Val Lys Ile Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Pro Phe 40 35
Thr Tyr His Gly Met Asp Trp Val Lys Gln Ala Pro Trp Gly Gly Leu 10 60 55 50
Glu Trp Met Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala 80 75 70 65
Asp Asp Phe Lys Gly Arg Phe Ala Phe Ser Leu Glu Thr Ser Val Gly 95 90 85 15
Thr Ala Tyr Leu Gln Ile Asn Asn Leu Lys Asn Glu Asp Thr Ala Thr 110 105 100
Tyr Phe Cys Ala Arg Arg Arg Asp Phe Thr Met Asp Phe Trp Gly Gln 125 120 115
Gly Thr Ser Val Thr Val Ser Ser Ala Lys Thr Thr Pro Pro Ser Val 20 140 135 130
Tyr Pro Leu Ala Pro Gly Ser Ala Ala Gln Thr Asn Ser Met Val Thr
160 155 150 145
Leu Gly Cys Leu Val Lys Gly Tyr Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Thr 175 170 165
Trp Asn Ser Gly Ser Leu Ser Ser Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val 190 185 180 5
Leu Gln Ser Asp Leu Tyr Thr Leu Ser Ser Ser Val Thr Val Pro Ser 205 200 195
Ser Thr Trp Pro Ser Glu Thr Val Thr Cys Asn Val Ala His Pro Ala 220 215 210
Ser 10 225 11 <210> 5<211>
PRT <212> 15 ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< <220> ‏توليفه‎ <223> 11 <400>
Tyr His Gly Met Asp 20 1
12 <210> 17 <211>
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< 5 <220> ‏توليفه‎ >223< 12 <400>
Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe Lys 10 5 1 10
Gly 13 <210> 8 <211>
PRT <212> 15 ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< >220< ‏توليفه‎ >223< 13 <400>
Arg Arg Asp Phe Thr Met Asp Phe 20
14 <210> 118 >211<
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< 5 <220> ‏توليفه‎ <223> 14 <400>
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Arg Pro Gly Ala 10 5 1 10
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Ser Phe Thr Ser Tyr 25 20
Ala Val Asn Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Val 40 35
Gly Trp Ile Asn Thr Asn Thr Gly Asn Pro Thr Tyr Ala Gln Gly Phe 15 60 55 50
Thr Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 80 75 70 65
Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Ala Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys 95 90 85 20
Ala Arg Ala Arg Gly Gln Asn Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr
110 105 100
Thr Val Thr Val Ser Ser 115 <210> 117 <211> 5
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ >223< 15 <400> 0
Gln Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Ser Glu Leu Lys Lys Pro Gly Ala 15 10 5 1
Ser Val Lys Val Ser Cys Lys Ala Ser Gly Tyr Thr Phe Thr Tyr His 25 20
Gly Met Asp Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Gln Gly Leu Glu Trp Met 15 40 35
Gly Trp Ile Asn Thr Tyr Ser Gly Val Pro Thr Tyr Ala Asp Asp Phe 60 55 50
Lys Gly Arg Phe Val Phe Ser Leu Asp Thr Ser Val Ser Thr Ala Tyr 80 75 70 65 20
Leu Gln Ile Ser Ser Leu Lys Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Phe Cys
95 90 85
Ala Arg Arg Arg Asp Phe Thr Met Asp Phe Trp Gly Gln Gly Thr Thr 110 105 100
Val Thr Val Ser Ser 115 5 16 <210> 230 <211>
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> 0 ‏توليفه‎ >223< 16 <400>
Met Asp Ser Gln Ala Gln Val Leu Ile Leu Leu Leu Leu Trp Val Ser 10 5 1 15
Gly Thr Cys Gly Asn Ile Val Leu Ser Gln Ser Pro Ser Ser Leu Ala 25 20
Val Ser Pro Gly Glu Lys Val Thr Met Ser Cys Lys Ser Ser Gln Ser 40 35
Leu Leu Asn Ser Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln 20 60 55 50
Lys Pro Gly Gln Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg 80 75 70 65
Glu Ser Gly Val Pro Asp Arg Phe Thr Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp 95 90 85
Phe Thr Leu Thr Ile Ser Ser Val Gln Ala Glu Asp Leu Ala Val Tyr 5 110 105 100
Tyr Cys Lys Gln Ser Tyr Thr Leu Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Asn 125 120 115
Leu Glu Ile Lys Arg Ala Asp Ala Ala Pro Thr Val Ser Ile Phe Pro 140 135 130 10
Pro Ser Ser Glu Gln Leu Thr Ser Gly Gly Ala Ser Val Val Cys Phe 160 155 150 145
Leu Asn Asn Phe Tyr Pro Lys Asp Ile Asn Val Lys Trp Lys Ile Asp 175 170 165
Gly Ser Glu Arg Gln Asn Gly Val Leu Asn Ser Trp Thr Asp Gln Asp 15 190 185 180
Ser Lys Asp Ser Thr Tyr Ser Met Ser Ser Thr Leu Thr Leu Thr Lys 205 200 195
Asp Glu Tyr Glu Arg His Asn Ser Tyr Thr Cys Glu Ala Thr His Lys 220 215 210 20
Thr Ser Thr Ser Pro Ile 230 225
17 <210> 17 <211>
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< 5 <220> ‏توليفه‎ >223< 17 <400>
Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu 10 10 5 1
Ala 18 <210> 7 <211>
PRT <212> 15 ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< <220> ‏توليفه‎ >223< 18 <400>
Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser 20
19 <210> 8 >211<
PRT <212> 5 ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< <220> ‏توليفه‎ >223< 19 <400>
Lys Gln Ser Tyr Thr Leu Arg Thr 10 5 1 20 <210> 114 <211>
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> 5 <220> ‏توليفه‎ >223< 20 <400>
Asp Ile Val Met Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 10 5 1 20
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Val Leu Tyr Ser 25 20
Ser Asn Asn Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Tyr Gln Gln Lys Pro Gly Gln 40 35
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 5 60 55 50
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 80 75 70 65
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Gln Gln 95 90 85 10
Tyr Tyr Ser Thr Pro Gln Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile 110 105 100
Lys Arg 21 <210> 5 113 <211>
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 0 21 >400<
Asn Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 10 5 1
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 25 20
Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln 5 40 35
Pro Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 60 55 50
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 80 75 70 65 10
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln 95 90 85
Ser Tyr Thr Leu Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 110 105 100
Arg 15 22 <210> 113 <211>
PRT <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< | 0 <220>
‏توليفه‎ >223< 22 >400<
Asn Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 10 5 1
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 5 25 20
Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln 40 35
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 60 55 50 10
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 80 75 70 65
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln 95 90 85
Ser Tyr Thr Leu Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 15 110 105 100
Arg 23 <210> 113 <211>
PRT <212> 20 ‏تسلسل أصطناعي‎ <213>
<220> ‏توليفه‎ >223< 23 <400>
Asp Ile Val Leu Thr Gln Ser Pro Asp Ser Leu Ala Val Ser Leu Gly 15 10 5 1 5
Glu Arg Ala Thr Ile Asn Cys Lys Ser Ser Gln Ser Leu Leu Asn Ser 30 25 20
Arg Thr Arg Lys Asn Tyr Leu Ala Trp Phe Gln Gln Lys Pro Gly Gln 45 40 35
Ser Pro Lys Leu Leu Ile Tyr Trp Ala Ser Thr Arg Glu Ser Gly Val 10 60 55 50
Pro Asp Arg Phe Ser Gly Ser Gly Ser Gly Thr Asp Phe Thr Leu Thr 80 75 70 65
Ile Ser Ser Leu Gln Ala Glu Asp Val Ala Val Tyr Tyr Cys Lys Gln 95 90 85 15
Ser Tyr Thr Leu Arg Thr Phe Gly Gly Gly Thr Lys Val Glu Ile Lys 110 105 100
Arg 24 <210> <211> 0
PRT <212>
‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 24 <400>
Gly Tyr Pro Phe Thr Tyr His Gly Met Asp 5 5 1 <210> 351 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> 0 ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> >220< ‏توليفه‎ >223< 25 >400< caggtccagt tggtgcagtc tggatctgag ctgaagaage ctggagectc cgtcaaggtg 60 15 tcctgcaagg cttctgggta tcccttcaca taccatggaa tggactgggt gegtcaggct 120 cctggtcagg gtttagagtg gatggectgg ataaacacct actctggagt gccaacatat 180 gctgatgact tcaagggacg atttgtgttc tctttggaca cctetgtete tactgectat 240 ttgcagatct cttctctcaa agccgaggac acggecgtgt atttttgtge aagacggegt 300 gattttacaa tggacttctg gggtcaagga accaccgtga ccgtetecte a 351 20
26 <210> 339 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> 5 ‏توليفه‎ <223> 26 <400> aacatcgtgce tgacccagag ccecgatage ctggeegtga gectgggcga gagagecace 60 atcaactgca agagcagcca gagectgetg aacagcagga ccaggaagaa ctacctggec 120 tggttccage agaagecegg cecagececee aagetgetga tetactggge cageaccagg 180 10 gagagcggceg tgecegatag gttcagegge ageggeageg geacegattt caccetgace 240 atcagcagcc tgcaggecga ggatgtggcc gtgtactact gcaagcagag ctacaccctg 300 agaaccticg gcggcggeac caaggtggaa attaaacgt 339 27 <210> 15 339 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 0 27 <400> aacatcgtgce tgacccagag ccecgatage ctggeegtga gectgggcga gagagecace 60 atcaactgca agagcagcca gagectgetg aacagcagga ccaggaagaa ctacctggec 120 tggttccage agaageccgg ccagageccce aagetgetga tetactggge cageaccagg 180 gagagcggceg tgecegatag gttcagegge ageggeageg geacegattt caccetgace 240 atcagcagcc tgcaggecga ggatgtggcc gtgtactact gcaagcagag ctacaccctg 300 5 agaaccticg gcggcggeac caaggtggaa attaaacgt 339 28 <210> 339 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> 0 ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 28 <400> gacatcgtgce tgacccagag ccccgatage ctggeegtga gectgggega gagagecace 60 15 atcaactgca agagcagcca gagectgetg aacagcagga ccaggaagaa ctacctggec 120 tggttccage agaageccgg ccagageccce aagetgetga tetactggge cageaccagg 180 gagagcggceg tgecegatag gttcagegge ageggeageg geacegattt caccetgace 240 atcagcagcc tgcaggecga ggatgtggcc gtgtactact gcaagcagag ctacaccctg 300 agaaccttcg gecggeggeac caaggtggaa attaaacgt 339 20 29 <210> 330 <211>
PRT <212>
‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ >223< 29 >400<
Ala Ser Thr Lys Gly Pro Ser Val Phe Pro Leu Ala Pro Ser Ser Lys 5 10 5 1
Ser Thr Ser Gly Gly Thr Ala Ala Leu Gly Cys Leu Val Lys Asp Tyr 25 20
Phe Pro Glu Pro Val Thr Val Ser Trp Asn Ser Gly Ala Leu Thr Ser 40 35 10
Gly Val His Thr Phe Pro Ala Val Leu Gln Ser Ser Gly Leu Tyr Ser 60 55 50
Leu Ser Ser Val Val Thr Val Pro Ser Ser Ser Leu Gly Thr Gln Thr 80 75 70 65
Tyr Ile Cys Asn Val Asn His Lys Pro Ser Asn Thr Lys Val Asp Lys 15 95 90 85
Arg Val Glu Pro Lys Ser Cys Asp Lys Thr His Thr Cys Pro Pro Cys 110 105 100
Pro Ala Pro Glu Leu Leu Gly Gly Pro Ser Val Phe Leu Phe Pro Pro 125 120 115 20
Lys Pro Lys Asp Thr Leu Met lle Ser Arg Thr Pro Glu Val Thr Cys 140 135 130
Val Val Val Asp Val Ser His Glu Asp Pro Glu Val Lys Phe Asn Trp 160 155 150 145
Tyr Val Asp Gly Val Glu Val His Asn Val Lys Thr Lys Pro Arg Glu 25 175 170 165
Glu Gln Tyr Asn Ser Thr Tyr Arg Val Val Ser Val Leu Thr Val Leu 190 185 180
His Gln Asp Trp Leu Asn Gly Lys Glu Tyr Lys Cys Lys Val Ser Asn 205 200 195
Lys Ala Leu Pro Ala Pro Ile Glu Lys Thr Ile Ser Lys Ala Lys Gly 5 220 215 210
Gln Pro Arg Glu Pro Gln Val Tyr Thr Leu Pro Pro Ser Arg Glu Glu 240 235 230 225
Met Thr Lys Asn Gln Val Ser Leu Thr Cys Leu Val Lys Gly Phe Tyr 255 250 245 10
Pro Ser Asp lle Ala Val Glu Trp Glu Ser Asn Gly Gln Pro Glu Asn 270 265 260
Asn Tyr Lys Thr Thr Pro Pro Val Leu Asp Ser Asp Gly Ser Phe Phe 285 280 275
Leu Tyr Ser Lys Leu Thr Val Asp Lys Ser Arg Trp Gln Gln Gly Asn 15 300 295 290
Val Phe Ser Cys Ser Val Met His Glu Ala Leu His Asn His Tyr Thr 320 315 310 305
Gln Lys Ser Leu Ser Leu Ser Pro Gly Lys 330 325 20 <210> 990 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ >213< 5
<220> ‏توليفه‎ <223> <400> gctagcacca agggcccate ggtcttecec ctggeaccct cctccaagag cacctetggg 60 ggcacagegg ccctgggetg cctggtcaag gactacttce ccgaaccggt gacggtgtcg 120 5 tggaactcag gcgecctgac cageggegtg cacaccttec cggetgtect acagtectca 180 ggactctact ccctcageag cgtggtgace gtgecctcea geagettggg cacccagace 240 tacatctgca acgtgaatca caageccage aacaccaagg tggacaagaa agttgagecc 300 aaatcttgtg acaaaactca cacatgccca ccgtgeccag cacctgaact cctgggggga 360 cegteagtet tectetteee cccaaaacee aaggacacce teatgatete ceggacecct 420 10 gaggtcacat gcgtggtget ggacgtgage cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg 480 tacgtggacg gegtggaget gcataatgee aagacaaage cgegggagga geagtacaac 540 agcacgtacc gtgtggtcag cgtcctcacc gtcctgeace aggactggcet gaatggcaag 600 gagtacaagt gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagecc ccatcgagaa aaccatctec 660 aaagccaaag ggeageeceg agaaccacag gtgtacacce tgeeeccate ccgggaggag 720 15 atgaccaaga accaggtcag cctgacctgc ctggtcaaag gcttctatcc cagegacate 780 geegtggagt gggagageaa tgggcagecg gagaacaact acaagaccac gectcecgtg 840 ctggactceg acggctectt cttectctac agcaagetca ccgtggacaa gagecaggtgg 900 cagcagggga acgtcttctc atgctcegtg atgecatgagg ctctgecacaa ccactacacg 960 cagaagagcc teteectgte tecgggtaaa 990 20 31 <210> 1343 <211> ‏الحمض النووي‎ <212>
‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 31 <400> ggtgagtgga tecgeggecg ctaaactetg agggggtegg atgacgtggc cattetttge 60 5 ctaaagcatt gagtttactg caaggtcaga aaagcatgca aagccctcag aatggetgea 120 aagagctcca acaaaacaat ttagaacttt attaaggaat agggggaagc taggaagaaa 180 ctcaaaacat caagatttta aatacgcttc ttggtctcet tgctataatt atctgggata 240 agcatgctgt tttctgtctg tccctaacat gecetgtgat tatccgcaaa caacacacce 300 aagggcagaa ctttgttact taaacaccat cetgtttget tetttcetca gectecacca 360 10 agggcccatc ggtcttecece ctggeaccct cctccaagag cacctetggg ggcacagegg 420 ccetgggcetg cctggtcaag gactacttce ccgaaccggt gacggtgteg tggaactcag 480 gegecectgac cageggegtg cacaccttce cggetgtect acagtectca ggactctact 540 ccetcageag cgtggtgacce gtgeecteca geagettggg cacccagacc tacatetgea 600 acgtgaatca caagcccage aacaccaagg tggacaagag agttgagecc aaatcttgtg 660 15 acaaaactca cacatgccca ccgtgeecag cacctgaact cctgggggga ccgtcagtct 720 tcetcttcee cccaaaaccce aaggacacce teatgatcte ccggaccect gaggtcacat 780 gegtggtggt ggacgtgage cacgaagacc ctgaggtcaa gttcaactgg tacgtggacg 840 gegtggaget gecataatgec aagacaaage cgegggagga geagtacaac ageacgtace 900 gtgtggteag cgtecteace gteetgeace aggactgget gaatggcaag gagtacaagt 960 20 gcaaggtctc caacaaagcc ctcccagecc ccatcgagaa aaccatctcc aaagecaaag 1020 ggcageccecg agaaccacag gtgtacacgc tgeececate ccgggaggag atgaccaaga 1080 accaggteag cctgacctge ctggtcaaag gettctatee cagegacate geegtggagt 1140 gggagagcaa tgggcagceg gagaacaact acaagaccac gectcecgtg ctggactecg 1200 acggcleett cttectetat agcaagetea cegtggacaa gageaggtgg cageagggga 1260 25 acgtcttete atgeteegtg atgeatgagg ctetgeacaa ccactacacg cagaagagec 1320 tctcectgtc cecgggtaaa tga 1343 32 <210> 106 <211>
PRT <212> 5 ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 32 <400>
Thr Val Ala Ala Pro Ser Val Phe Ile Phe Pro Pro Ser Asp Glu Gln 10 10 5 1
Leu Lys Ser Gly Thr Ala Ser Val Val Cys Leu Leu Asn Asn Phe Tyr 25 20
Pro Arg Glu Ala Lys Val Gln Trp Lys Val Asp Asn Ala Leu Gln Ser 40 35 15
Gly Asn Ser Gln Glu Ser Val Thr Glu Gln Asp Ser Lys Asp Ser Thr 60 55 50
Tyr Ser Leu Ser Ser Thr Leu Thr Leu Ser Lys Ala Asp Tyr Glu Lys 80 75 70 65
His Lys Val Tyr Ala Cys Glu Val Thr His GIn Gly Leu Ser Ser Pro 20 95 90 85
Val Thr Lys Ser Phe Asn Arg Gly Glu Cys 105 100
33 <210> 318 <211> ‏الحمض النووي‎ <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> >220< 5 ‏توليفه‎ >223< 33 <400> acggtggctg caccatctgt cttcatcttc ccgccatctg atgagcagtt gaaatctgga 60 actgcctctg ttgtgtgect gectgaataac ttctatccca gagaggecaa agtacagtgg 120 aaggtggata acgcecteca atcgggtaac teccaggaga gtgtcacaga geaggacage 180 10 aaggacagca cctacagect cagcagcacc ctgacgetga gcaaagcaga ctacgagaaa 240 cacaaagtct acgectgega agtcacccat cagggectga getcgecegt cacaaagage 300 ttcaacaggg gagagtgt 318 34 <210> 671 <211> 15 ‏الحمض النووي‎ <212> ‏تسلسل أصطناعي‎ <213> <220> ‏توليفه‎ <223> 34 <400> 0 cgtgagtgga tccgeggecg ctaaactetg agggggatcgge atgacgtggce cattetttge 60 ctaaagcatt gagtttactg caaggtcaga aaagcatgca aagccctcag aatggetgea 120 aagagctcca acaaaacaat ttagaacttt attaaggaat agggggaagc taggaagaaa 180 ctcaaaacat caagatttta aatacgcttc ttggtctcet tgctataatt atctgggata 240 agcatgctgt tttctgtctg tccctaacat gecetgtgat tatccgcaaa caacacacce 300 aagggcagaa ctttgttact taaacaccat cctgtttgct tctttcctca ggaactgtgg 360 5 ctgcaccatc tgtcttcate ttcccgecat ctgatgagea gttgaaatcet ggaactgect 420 ctgttgtgtg cctgetgaat aacttctatc ccagagaggce caaagtacag tggaaggtgg 480 ataacgccct ccaatcgggt aactcccagg agagtgtcac agagcaggac agcaaggaca 540 gcacctacag cctcagcage accctgacge tgagcaaage agactacgag aaacacaaag 600 tctacgeetg cgaagtcace catcagggece tgagetegee cgtcacaaag agettcaaca 660 10 geggagagtg t 671

Claims (4)

عناصر الحماية
1. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ يشتمل على منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ تشتمل على ثلاثة من السلاسل التثقيلة ‎CDRs‏ ‏لتسلسل الحمض ‎١‏ لأميني ‎the amino acid sequence‏ المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 وتكون المنطقة المتغيرة الناضجة للسلسلة الثقيلة ‎the mature heavy chain variable region‏ 9690 على الأقل تتطابق للتسلسل المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 ومنطقة متغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة ‎mature light chain variable region‏ تشتمل على ثلاثة من السلاسل الخفيفة ‎CDRs‏ لسلسلة التتابع رقم: 22 يمكن ‎Jad‏ المواضع 136 و 143 بواسطة 7 و 5 على التوالي؛ وتكون المنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة ‎the mature light chain variable region‏ 9690 على الأقل مطابقة لسلسلة التتابع رقم: 22.
2. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر 1 والذي يكون نمط إسوي ‎IgG isotype‏ بشري.
3. جسم مضاد أحادي ‎monoclonal antibody Alu)‏ وفقاً لعنصر 2 حيث يكون النمط الإسوي ‎isotype 5‏ هو ‎JgG1‏
‏4. جسم مضاد أحادي التسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر 2؛ يحتوي على طفرة واحدة على الأقل فى المنطقة الثابتة.
0 5. جسم مضاد أحادي النتسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر 2 والذي يكون نمط إسوي ‎isotype‏ 1862 أو 4 بشري.
6. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 1؛ والذي يشتمل على 01 من سلسلة التتابع رقم: 11 أو سلسلة التتابع رقم: 24؛ ‎CDRH-2‏ من سلسلة التتابع رقم: 12و ‎CDRH-3‏ من سلسلة التتابع رقم: 3 و ‎CDR-L1‏ من سلسلة التتابع رقم: 7 ‎CDR-L2‏ ‏من سلسلة التتابع رقم: 18 و ‎CDR-L3‏ من سلسلة التتابع رقم: 19.
7. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 6< حيث يكون للمنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة الناضجة تسلسل الحمض الأمينى بنسبة 9699 على الأقل مطابق للتسلسل المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 والمنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة ‎the‏ ‎mature light chain variable region 5‏ لها تسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ محددة لسلسلة التتابع رقم : 2221 أو 23
8. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 6 حيث تنصهر المنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة الناضجة في منطقة ثابتة للسلسلة الثقيلة ‎heavy chain constant‏ ‎region 0‏ وتنصهر المنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة ‎the mature light chain variable‏ 0 في منطقة ثابتة للسلسلة الخفيفة.
9. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 8؛ حيث تكون المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة عبارة عن شكل متحور من المنطقة الثابتة للإنسان الطبيعى والتى قلت من ارتباطها ب ‎Fe gamma‏ بالنسبة للمنطقة الثابتة البشرية الطبيعية.
0. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 8؛ حيث تكون المنطقة الثابتة للسلسلة الثقيلة من النمط الإسوي ‎isotype‏ 1801. 0 11. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً للعنصر 6؛ ‎days‏ أن يتم شغل واحد على الأقل من المواضع ‎H91 3 H48 <H13‏ بواسطة كاء ‎Fg M‏ على التوالي؛ ودتم شغل واحد على الأقل من المواضع ‎Ld (Ll‏ 136 و143 بواسطة ‎LN‏ 17 و5؛ على التوالي.
2. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر 11؛ شربطة أن يتم شغل 5 المواضع 1113 1148 و1191 بواسطة ‎Fy MK‏ على التوالي؛ ‎aug‏ شغل اثنين على الأقل من المواضع 1.آ» 14؛ 136 و143 بواسطة ‎«Ss FL «N‏ على التوالي.
3. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر 12؛ شربطة أن يتم شغل المواضع 1113 1148 و1191 بواسطة ‎Fy MK‏ على التوالي؛ ‎aug‏ شغل ثلاثة على الأقل من المواضع 1.آ» 14» 1.36 و143 بواسطة ‎(LN‏ 1 و5؛ على التوالي.
14. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر 13؛ شربطة أن يتم شغل المواضع 1113 1148 و1191 بواسطة ‎(Fy MK‏ على التوالي؛ ويتم ‎dad‏ المواضع ‎(L4 (LI‏ 6 1435 بواسطة ‎(LN‏ "1 و5؛ على التوالي.
5. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 14؛ يشتمل على 0 منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ بها تطابق حمض أميني 5 على الأقل لتسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ مشفر بواسطة ‎SEQ ID‏ رقم: 25 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain variable region‏ بتطابق 5 على الأقل سلسلة التتابع رقم: 22. 5 16. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 14؛ والذي يشتمل على منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ لها على الأقل تسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ %96 تطابق لتسلسل الحمض الأميني المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain‏ ‎variable region‏ على الأقل 9696 تطابق لسلسلة التتابع رقم: 22.
7. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 14؛ والذي يشتمل على منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ لها على الأقل تسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ %97 تطابق لتسلسل الحمض الأميني المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain‏ ‎variable region 5‏ على الأقل 9697 تطابق لسلسلة التتابع رقم: 22.
‏8. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 14؛ والذي يشتمل على منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ لها على الأقل
تسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ %98 تطابق لتسلسل الحمض الأميني المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain‏ ‎variable region‏ 9698 على الأقل تطابق لسلسلة التتابع رقم: 22.
19. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 14؛ يشتمل على منطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ لها تسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ %99 على الأقل تطابق لتسلسل الحمض ‎١‏ لأميني ‎rill‏ لسلسلة التتابع رقم: 25 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain variable region‏ 7699 على الأقل مطابقة لسلسلة التتابع رقم: 22.
0. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقاً لعنصر الحماية 19 ‎Cua‏ يكون للمنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة الناضجة على الأقل تسلسل حمض أميني ‎amino acid sequence‏ 9 مطابق للتسلسل المشفر بواسطة سلسلة التتابع رقم: 25 والمنطقة المتغيرة للسلسلة الخفيفة الناضجة ‎the mature light chain variable region‏ لها تسلسل حمض أميني ‎amino acid‏ ‎sequence 15‏ مشفر بسلسلة التتابع رقم: 22
1. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقا لأي من عناصر الحماية 6 و 15؛ حيث يكون الجسم المضاد جزءِ من ‎Fab‏ ‏20 22. جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ وفقا لأي من عناصر الحماية 15-6 وفيه المنطقة المتغيرة للسلسلة الثقيلة الناضجة لها تسلسل الحمض الأمينى المشفر بواسطة تسلسل الحمض النووي لسلسلة التتابع رقم: 25.
3. بولي نيوكليوتيد ‎polynucleotide‏ يشتمل على حمض نووي ‎nucleic acid‏ يشفر السلاسل 5 الثقيلة و/ أو الخفيفة لجسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ كما هو موصوف في أي من عناصر الحماية 15-6 7 20و 19-16.
4. طريقة لأنسنة جسم مضاد أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ + تشتمل على: تحديد التتابعات للمناطق المتغيرة للسلسلة الخفيفة والثقيلة لجسم مضاد فأري؛ تخليق حمض نووي ‎nucleic acid‏ يقوم بترميز سلسلة ثقيلة مؤنسنة تشتمل على ‎CDRs‏ للسلسلة الثقيلة للجسم المضاد الفأري وحمض نووي ‎nucleic acid‏ يقوم بترميز سلسلة خفيفة مؤنسنة تشتمل على ‎CDRs‏ للسلسلة الخفيفة للجسم المضاد الفأري؛ و للتعبير عن الأحماض النووية ‎nucleic acids‏ في خلية مضيفة ‎host cell‏ لإنتاج جسم مضاد مؤنسن ‎chumanized antibody‏ حيث يتميز الجسم المضاد للفأر بمنطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ من سلسلة التتابع رقم: 10 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain variable region‏ من سلسلة التتابع رقم: 16.
5. طريقة ‎zy‏ جسم مضاد مؤنسن ‎humanized antibody‏ مخلط أو أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ مكسو ¢ تشتمل على: زراعة ‎WIA‏ متحولة بواسطة الأحماض النووية ‎nucleic acids‏ التي تقوم بترميز السلاسل الثقيلة والخفيفة للجسم المضاد؛ لكي تفرز الخلية الجسم المضاد؛ وتثقية الجسم المضاد من أوساط استنبات الخلية؛ حيث يكون الجسم المضاد عبارة عن 5 شكل مؤنسن؛ مخلط أو مكسو من جسم مضاد ‎lll‏ وفيها الجسم المضاد الفأري يتميز بمنطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة من سلسلة التتابع رقم: 10 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة من سلسلة التتابع رقم: 16.
6. طريقة لإنتاج خط خلية ‎cell line‏ ينتج جسم مضاد مؤنسن ‎chumanized antibody‏ مخلط أو 0 أحادي النسيلة ‎monoclonal antibody‏ مكسو؛ تشتمل على؛ إدخال ‎Jib‏ يقوم بترميز السلاسل الثقيلة والخفيفة للجسم المضاد وواصمة قابلة للانتقاء في خلايا؛ نشر الخلايا في ظروف لاختيار الخلايا التي تحتوي على عدد النسخ الزائد للناقل؛ ‎WIA Je‏ مفردة من الخلايا المختارة؛ ووضع الخلايا المستنسخة في بنك من خلية مفردة مختارة على أساس إنتاج الجسم المضاد؛ حيث يكون الجسم المضاد ‎Ble‏ عن شكل مؤنسن؛ مخلط أو مكسو من جسم مضاد للفأرء والذي يتميز 5 بمنطقة متغيرة لسلسلة ثقيلة ناضجة ‎mature heavy chain variable region‏ من سلسلة التتابع رقم: 0 ومنطقة متغيرة لسلسلة خفيفة ناضجة ‎mature light chain variable region‏ من سلسلة التتابع رقم: 16.
% ‏ل‎ 5 » i ; ov : ‏ا‎ ‎Ne Ty WE 07 0 ‏ل‎ ّ ‏ع اله ا ب بم + ا‎ . ‏ص‎ Pe 0 a 8 Lon ox, 8 ‏ا‎ > Fe 0" wt : i ‏مي‎ : E SRR RR sy RAEN AAA AY, ) : : RARER: 8 8 i 5 ‏الح‎ ‎i | Eo Co 3 f 2 5 3 : 3 & ¢ 3 3 + i ‏ا ا‎ ٍ ‏ا 0 التي حا‎ 5 x FOR Gd ox Gd 3 3 4 ARR Ce ‏ب ل 1 ا‎ N tT EEE... fc 8 1 ‏ا‎ ‏اللا 77 ال ااا أ اا‎ ‏ا 1 3 ا ل لوس‎ : bh PIU hoes 3 8 i ‏ااا‎ aan 0 1 ‏ب‎ ‎: TENOR Sees 3 F 8 : : 2 ERA [Ww R 3 x i ‏ل اللا أ‎ + i : 190s Te ‏ْم‎ i dE NA aa 2 f BEE { ْ I SE ‏ل ب ا‎ 1 ‏د الج 0 ا‎ 0: i 3 SET a 2 F ‏ا‎ ٍ La . 1 : 1 8 2 ‏مستا‎ . i 3 : ٍ 3 ٍ 1 a ‏لات ا ان‎ aT 2 : ‏ا لل ا‎ ‏ا ا يا ل ةا‎ 5 So ce Lok EE 1 3 8 3 ‏ا‎ Re wees ‏نمس‎ Aa : 3 a : Xo 0 0 Ee : 5 2 3 8 ES ES ET. 0 5 0 3 x ¥ 3 : 5 3 1 3 8 3 1 ‏ا‎ : 3 3 E 3 8 : ES 3 . 3 $ 3 2 Cu 3 3 5 3 3 » 2 8 8 0 i Fe 1: 8 ER - . FE SERIES PO, Bomoseen 5 7 Eg 0 % 0 ‏لي‎ i { 0 : 3 ‏تاق 5ج‎ ‏ض ؛ (تعبير سي‎ Cole fal dg 8 : ‏وا‎ COIR ‏مل‎ fal fy ‏ميكر‎ LY ‏ا مهاترو غرام) هل‎ :
Rad 8 Nr = pr “x Srey Res : ‏ع‎ i Te hi ٍ ‏الي‎ cn : Ea Es ‏ات‎ : SC : as TN 3 at + ‏ا‎ : FEO 2 8 ‏اس‎ R 3 we Ee wn ¥ Wa ‏د‎ Gomis B $F i AN Sma ¢ EI Eni 8 i E SEE § WL, i EE { Faw i 2 ‏ااا‎ SE 7 ‏لب‎ ER NR Hoe A fees SR ‏ا‎ ‎& 1 RR ER EE 3 Wy ‏ل 3 ال‎ 1 ‏ل م‎ x Sh ‏امد‎ SI ‏ا‎ ‎: vz a Ee : & # ER 8 BE = by ‏اح لا‎ 1 ¥ : hE i EE i : & ‏ب‎ : Ss 2 ‏العا‎ eh 2 ‏م الوا‎ LE ‏ا ا‎ 0 : 3 EE : de EEN 3 : TER TEE Y Ena H : ‏ا ا‎ EE i : EEE Ten : sn ERE ‏ل‎ ‎: wg 2 ‏ل‎ ne ‏ا‎ ‎ْ 4 : Ee : : hoi 9 i 3 1 wad arta A Eh RE EE SE AR NAN eh nS EE : Fe CAAA mn NNN I ‏العتو اا ملوت ل لمتول وله لملو2 لفل لول له لول متا ءئاله لاهزوا‎ & ! 1 ‏لمات‎ \ SRR 8 : ٍ ‏ل ا د‎ ‏ل ل ل ا ل ل ا ل الا : ال بن‎ ‏بجي‎ pe ‏ا + ال‎ 8 Ee ‏ب‎ Ea Same I RENE i BN ‏ل ا‎ a EE £0 i vd as a wh | uot Saw EE ‏لا‎ ‎§ I : 0 ‏ا م ا ل‎ ‏ا 3 م‎ DE aR 3 a : ‏م ا‎ a Te aH Te Te TTR TT a ‏ال‎ ‎TR El 8 } } i ln wee EEE OE fk Lo = BE EE Na a Vd Ye boo ANNAN ‏ا‎ ‎¥ : Sel ‏ذال ا‎ be 1 ‏ل ا > ب ال لت‎ > x i : A we NARs aa ‏ال‎ amg Bye 8 ‏ال اد‎ 0 ‏ل 0 ل ا ل ل 2 ال‎ bya 0 ‏ل ل الم‎ BN AEA NNR Se
CEE. ‏ل‎ as... ‏هي‎ ‎Tl i TERE Ga EI EY REE by TR wh F EEN rE or i] Fg 3 1 RRR a aaa A A RR A 1: & ‏ب‎ iS 8 0 I ‏ا‎ ee BN i 8# ‏ل‎ Shay aE i A ‏ا و و ل ع ات‎ i ss 6X NNN aE EE d SEVERE EE EE Wa . 885 Pron ‏ال ا ا 8 و ااا الى‎ FUL andi IEE a De ae. RRR NL RROD aE TE ‏ا اي‎ RAB ‏ا 8 8 ل‎ 8 : ‏اتام ا‎ pi SEE EE ETE 8 ‏ا ا‎ : EE a ‏ا‎ ‎Fe ‏ا الها انها‎ ‏لبخ ميد لحن اح ا‎ EY ‏يد‎
ا ا ا ا ل ا 0 ا 1 ‎Te 1 an‏ مو ‎i POE‏ ‎REA TE Re SEE ERR ia‏ اي 0 ب ‎Spd See Sm‏ ‎RIES Re fe EEE 2 Ea a Co 0‏ . ‎EE EE Ri sedi : a To ]‏ ل سس 1 ا اش ‎Se aR ii EE sa ge : 1‏ ال ال 8 : ب ‎fi fan We i ny go a‏ ٍ د ‎BE 1 1 HE wi Fr Eig a Fonte : R= aa ne‏ ‎Ne Lo ga EE ER SEE WH‏ ‎Tea Sars i‏ 0 ا ّي" ‎SEE SAR ;‏ 2 ا 5 ‎an oo Ea Sh Co‏ 0 ل 0 8 ‎fod ED Henan Sd SE SE‏ ‎LEE ME Le 2 so L Bi be CERRY . ; >‏ د 4 ا ا اتا ا واس لل ‎EET # a: SE a Ha a 3‏ ا ‎Po Tg‏ ‎Hoy $ 34 8 0 Ro BE 5 ib ee fis Tan 0 |‏ ‎Na DS a id i = wb i ae = aE : a 0 | x‏ ‎i a oe r |‏ ا اا 8 ‎Sod A Fed fie a 0" Piper mnie oo Se oo 0 ْ,/‏ ‎Ei Se Cod Bhs Fy 5 0 Ln hi Lo‏ _ ‎Sg 1 FE ERE ERR SR En Ra Bags Bs Re. a = :‏ ‎Bg | an a Re Bs SFE i LE hime i Le 8 1‏ ‎SLE : wigan HERS EE San Lo‏ 5 3 كيدي ‎ew 8‏ الل ‎ot de LEE SE Sn CEN‏ ‎net Co 5 i Ei a EEN 8‏ ‎Ee 5 : ge 0 in : : 5 8 8 ah 5 - SH 5 0 1 0 a 3 ِ | ٍ = | |‏ م : : ‎i‏ د ‎Tard pa LENE Soo‏ طقل ‎pansy EET‏ : ٍ ب 0 ا الا : ‎Wee - TR 091 saa BR: RR wi FREES‏ : ‎aS SE ys Ha aa Shaan apa Ea 8‏ 7 ‎CTE Tom Ee Tas i FEE an EE EER‏ : ‎NO PR CEES hs 1 BES RE aN : .‏ : ‎Tig Fe Come ca cq Ch ane sn Ha 8‏ : ‎es te = 7 0 4 - Ca a‏ %= : ‎$F SE fan SEE Some -‏ رع #* : ‎RENE SERA EN ra SE SE SRNR Sa :‏ ‎ls Ee :‏ اعت : ‎Ni i‏ ل ‎TERT RE REP Baty Ee‏ 3 وح 2 1 ‎TAY EL me‏ 3 ‎ama 1 rE Nas‏ 0 ذ حدس ‎fi Coa TEED‏ :
ض . ‎is EE‏ : ‎a ” — =‏ ض اا ايا ايخ : ‎fot 4 Wao Sila NL aaa a A ay‏ : 0 0 ل ‎SR BCS SEEN NE Naa La‏ ] ا ‎X DN NE SEEN Na Na S$ N‏ : : ‎Sa ™‏ ا ‎WN Gana NZ Na‏ 3 : ‎fo 0 8 ND Sa) NE |]‏ 23 : ‎NN a‏ ا ا 0" 2 6 ‎on Lo = Ny : 2‏ ض ‎i SRR AEE 1 RR SG: 1 Na 3%‏ : ٍ ا 8 ا حيط 1 8 ا ا ا" وخ ض ‎iF HOR Lien aa XB SN \ .‏ و : ‎ME Noa Le So -‏ : ‎RRA SS I NA NN RR a 3‏ ا 1 ‎a Uae Man . ‘‏ : ‎Co ame 4‏ 8 : ‎CRE Lo LE 4‏ : ‎Pie. La SEER Naan NS EN COR‏ ض ‎ss ele :‏ يم 8 يي : ‎UX aaa NT Na TER RE a 8 0‏ : ‎he‏ ا ال : ‎CHL . Lo . 3‏ : 8 ا ا ب" ‎EEE NER SSE Ne Ly‏ ا ‎EE aa Na DEAN .. RS R®‏ :5 4 » ب ‎h Daan * 8‏ 2 ا الع ‎NAR ENR La RE BOR‏ اخ ا 8 اا ‎RL NAN Nan Sn ER‏ ‎EE Se Sa fe EN‏ 5 ٍ ا اا 8 مج 1* ا ا ! ل ‎TRE Lee NN a‏ ‎es |‏ : ‎wo aa Nae Su Lo 0‏ ام ا ‎ee To RE No Lee‏ ‎Ma‏ 0 3 ‎RR ER Na Sala‏ ل 1 ‎a. Wa‏ ‎we Ne SHOE NE NE NY SN 0 SRA 8‏ ‎{nS Ea NRE Naa a 0‏ اخ . : اا 5 ‎Uae SN ER‏ ين اك ‎RS RR NAAN aN RR Na Nine an‏ ‎XX‏ ا ‎Ls‏ 3 ‎EEE x Naa HERE LL‏
‎y . Yaa SEE a Na Sa‏ ‎Che Ca‏ : 8 ا 8 ‎Eis Shia‏ ‎Sa‏ اد ا : ‎oa Na‏ ‎EN ERE a NE 8‏ اا 0 ‎Yona NR Va‏ ا ل 1 بايا ‎ih Dae SRR OE Naan RR Na :‏ 0 ‎NS a NE SE RR‏ 0 7 ‎Daas a Na .‏ . ‎hid a NE ERR EEA XE‏ ض ‎fa Ll aa a DEER‏ ‎fe 09 :‏ : ‎LL‏ ‎Yaa 3‏ ‎Sa AN‏ ‎TBR‏
الستتا اح ال الت ا لت ا ال ل اتح ا م ا ا ا ل ا ا ا ‎pd‏ 13 : : : ‎BE 5‏ 0 : 3 ل ما ‎ou 00 : =‏ الي ‎EY NI id i 1‏ ‎EE NEE: 3 YET 8 +3 pS‏ ‎Be §‏ 7 الا الى ام 0 ‎RK ER RB : 3‏ 1 ا ‎TE‏ 8 4 3 ا ‎iN‏ ما الا ‎Bie . SEAR IX TLE‏ 8 ا ال ال اال ‎ET wow eo ERLE S SER‏ 8 مك الا ا لان 1 طخ ا ا ل .-* الا اللي ا ان 8 الخ اا ‎TREE TE RSIS A‏ ل > ‎Re‏ ‏ااا اا الال 0 8 ‎YE‏ الا اا 5 اح ‎N CER NE N‏ 5 تا لذ ا ‎TORN RE‏ ا ‎INR. SEY 3‏ جد ‎k3 1 FRR co REN‏ ‎La HIE sR Shs»‏
3 .م ‎fs aR RE N‏ ‎Fo LN Shou NS : :‏ ‎RR SEY 5 : 3‏ ا ‎RRS TET 8‏ 3 : اج 20 ‎Tag 1 TE WH 3‏ ‎R AN : RY 23 Ss‏ ‎RE ge‏ :0 ل لج 2 ‎Ty : 3H 3 3 :‏ ‎y 25 #8 :‏ § : ‎N :‏ ل 5 2 : ‎i 3 i‏ يل 1 ‎BE‏ : ‎ny x J 3‏ > 3 ا ا : ‎Eo so ES £0 = 2‏ : 2 اا ا م ال لا 88 : ‎FE‏ : ‎FR 3‏ ا #8 ‎FEY REE SRE Re 8) Fo‏ : 3 مي ‎VLR Re‏ 8 الي 1“ 3 ‎Hy 3 Bn‏ 8# : حي 27 : ‎£m, ; : ER are $8 FEI EEE Nb A TE CE‏ : اله م 8 ا ‎FR‏ & ذا 0 ددن لماخ ‎a‏ الما لي ‎Lg B® foe‏ : ال 0050000007 : : ‎aL 2 8 > CE TR AR‏ : 8 اا ا ا ل ‎RRR SERRE‏ 1 لح ‎nnd on‏ : ال ا ااا ا ‎fe I Ca eo ERE‏ 8 2 : ااا 3 ‎FEN‏ 1 م ‎$y 0 : H 8 818 EE‏ : ‎Fo‏ ب ا ‎i Wn SE FR An Ny‏ 3 ا ‎ap | 5 0 RITES Ro.‏ 3 3 3 : ‎3X LE 5 ES 3 3‏ 5 : ‎RR xX RI + :‏ : ‎WR 3‏ 3 = ا : ب ‎SI 3 Xe‏ 1 3 1 با ‎IX‏ & 3 : : ل 33 ‎Tad oF‏ : : 33 + ا : 8 : ل لع . ‎i i‏ للحي مسحي ‎a‏ امم الم ‎Ge‏ : ‎d 3 8 5 :‏ 5 5 5 : ‎x CE HS‏ ل« 13 4 5 > 5 : ‎Bs‏ 8 : م 3 33 1 58 : ‎bs‏ 3 ‎x 2 > : » 33 ov 0 3 bs‏ 3 ‎i a « He 3 + TE w JX a :‏ لد ‎M > 3% BX Ta‏ + نَْ 58 8 ‎Ts Bs‏ المي : 3 > 2 7 ‎x‏ & : 2 9 ب 8 * > : . :
‎EE. SSE 01 2 1‏ #* اانا ‎LEY =‏ 9 ‎R ps :‏ ‎Ra 3‏ : : ‎N rr 5 BS‏ ‎pA‏ ا 3 ]2 ¥ : 5 الاي 8 ‎a By BE | By 8 ِ‏ = الح 5 1 3 تي ‎EET R 7 : 2‏ ال ‎Rn AA A‏ ااا ااا ااا ‎nn‏ ااا ا لا ااه ااا اي ل لت ا = ل ل ل ا ل لا ا ا ا ا ا ا ل ل ل بي ‎bs‏ :[ 1 + حب ‎By : i 5‏ ‎Ho 3 5‏ 81 ب ‎N Eh 3 5 J 8‏ ‎Sd 3 3 FEI 3 3 Bs‏ ‎CE ER ; HOW E> al 2‏ ‎vow 85 8‏ 3 3 ‎k 3 K 5 N et :‏ 3 ‎NRE ] 0-0 FE FEN :‏ ‎Eg Es Se. 3‏ 1 ب ‎XL : WE‏ 8 2 ‎RE FE as x SRI 1‏ من 8 ‎i 4 : 02 ER EOE BS $ Ee 3‏ ‎RENT bs‏ 1 : يح د 222 أ ‎JER‏ ا ‎RE‏ ‎EN‏ الا 3 0 ‎aE‏ ا ‎BEER‏ 0 & § ان ال ‎REE‏ ا ا * ‎Tay AAR RE RR EE‏ ‎RE SN 1 fae‏ ا ‎EER ER FREE‏ 3 الح ‎ok 3 RRR TR‏ 3 ‎pS 4 04 FE RS H‏ ‎om Ba REV RRR § ERR 6‏ 3 ‎BB g 1‏ & ا ل ‎by ER‏ ‎Fg 3‏ ا : 2 1 ‎TEES 3 BY‏ ¥ + © 1 3 2 ا ‎La ge‏ ‎I, 8 FREI . RY‏ ‎NERC 1 1 5 ٍ‏ 3 : و ا ‎Foi‏ ‎RE ay fa 3‏ اذ ال ‎RE‏ ‎Toa ¥ RET 1 3 5‏ ‎Bh: Tay 3 1 8‏ > ‎bs TEN § ; By‏ ل 3 3 5 0 3 ‎SS iy‏ ات 3 اج ع ¥ ‎RENE‏ ‎i : NI 3 fo 3‏ 03 ‎EE SR‏ ا 0 0 1 . 3 ‎ad 8‏ § 3 : ااال أ اناا 00 الح 3 ‎ET 3‏ ٍِ 0 8 ‎i Bi RES BOI PEER 3‏ 3 ‎Ae 8 uo‏ الج لا اح الو ‎ne.‏ با ال الي ) ]8 ‎TA‏ ‎YI BR ORE 8 BRS 8‏ يا ‎CRE‏ 3 ل ا ا يي 4 3 ©“ للخ للك ‎8a 2X x. a2 ¥ Bi Ne 5 FER k BROS EP Dey‏ + ال أ ‎go 8 2 ERE Ee EY IE BAER‏ ‎JR LE TRAN AR ® NE BR 3‏ ا الجا مجاا8 ‎bo EE‏ مي ا : 8 : 3 ‎A RE PR 2 RE by‏ 3 ا ‎RX 3 Sod‏ 52 | 0 ا ‎Ey Fash‏ مد ااي :1 اك ا 5 = ‎A 0 By 3‏ : اي 9 ّ 8 3 3 يي 3 ‎Voge‏ ‎HT Ry 3 8‏ ل 8 3 3 ل د 80 ‎by‏ ل 8 ‎He i‏ ما ‎pa: 5 1 .‏ اج جنر ‎RR RR‏ ميت ا 1 . : ‎oN‏ § ‎Daa 2 RRR oR X Ea Sx Ne RE i BS‏ % ¥ ‎Pin = 3 A = AW We > > ay 8 E 1:‏ ‎BE: 5 - afd EN : oo RE‏ ‎io pe xX > we N TE T ® i 8‏ ‎N + AF aay » & a AN 3‏ 5 الب 8 ‎ok‏ 3 ‎HENS. 3 © PE: iE IR 0 pr: 3‏ ‎FREE . N 8 BS‏ = = نا 5 ‎i i‏ ‎oe 3‏ > = تح ‎broad * Ye + pas 3d‏ 8 اقل ا 7 ‎a‏ اي حا ‎as ao 3 :‏ ‎Ede io 0‏ ‎ioe N‏ 3 3 3 3 ‎TR : 3‏ 3 ‎Re Se 3‏ 3 8 ‎RY‏ الجا يي ‎k DR‏ ‎K 0 - 5 shoe ¥ 3‏ ‎He 8 1 83 0‏ 0 ‎By‏ 85 ل ج ‎IO‏ - 1 8 : ب ‎le‏ . : + الات ‎Fr Rn a‏ حت اا كا اا تي الال ا اتا ات ا ا ا
ا ‎RR nr A‏ ل ل ل ‎Ba : Et SEAR : 5‏ = : تج ا ب : ‎E:‏ ‏+ : § ا ‎E 8‏ . 5 48 - 0 بها ‎i Hy . 3‏ ‎i : =‏ 8 ‎$n‏ : : : 8 ‎Ma 3‏ ¥ 3 7 اليج ا ‎BY : SN : : 8‏ : ل 2 ‎x : } : X 5‏ 0 3 2 ل ل ‎Tog RE E28 8‏ 3 + ل ‎Uh ial‏ . 81 ‎Lg Fo A‏ ‎CF 8‏ د اليد ال 5 ‎Sa ya 5‏ ا جر : لف ا ‎Fla §‏ ل ل ال 1 ‎NEN TORUS‏ ‎FE REE EY 3‏ ‎X 0 1 ٍ 3‏ 3 ‎PRES : 3. : 3 3‏ ‎$i 3 3 ¥‏ : ‎IR : | 3‏ : : 3 : الخ : ‎E bY‏ 0 ¥ : ‎Seo Cy 0 0‏ : & 3 ‎PE 0 x‏ :ل الا ب ‎N‏ ‎gos i 0‏ : ‎Tn 7 ’ 8 . SER &‏ : ‎I : pe 5 0‏ : ‎BER SEC FE x: BS‏ = 0 + ا : ‎Fu LL . LL IRE 3 SE‏ : ‎wid 8 3‏ . : 8 5 : ‎a)‏ 80 : ا ‎SPR:‏ 1 3 : ‎To Sea : 3‏ : ل ‎N a oy Le : & on a‏ صغم ‎dag 0 BX‏ : ‎OR RR oF‏ ل ا ل 3 : ‎hd 5 = x‏ ل 3 ‎RE‏ : 3 83 ا ‎i ame‏ : ‎BRIT NEI 2 8 £3‏ 8خ ‎FER i‏ : ل ‎iw sae i oe‏ ‎LE 3 0‏ § تي ‎ia‏ : ‎BR 3 . 4‏ 7 : ‎eee, { 1 . © 3‏ : ‎EE 1 oF‏ : $5 ‎S03‏ 3 . 3 ‎i oo]‏
‎N .. 8 EB 5 :‏ ‎FR 3‏ ا ل إْ السب العا ‎fos ad = a = 3‏ ‎i ¥ 2 : 3‏ + ل 5 ال ا 0 3 3 ‎ES 1‏ يخ ‎di‏ 8 0 ‎J 3 a 8‏ امح يدت ‎RAN‏ لاوما مت ا ‎bool A OE‏ 8 1 : 8 & ا ‎Re oR‏ ل اا ال ا ل ات ل ل 8 0 ‎pe Ee ’ . 5‏ ‎rl 5 “8 : :‏ ‎Rs 3 3‏ ‎os : :‏ 1 £5 ‎Ls 1 1‏ 3 3 = 8 ‎ES §‏ ال ‎Re x: +‏ ‎Ea : %‏ ‎re i 0# be‏ 7 3 3 3 اد ‎fF DR‏ ‎vod ial :‏ ‎Fv BE‏ 13 ‎WR 8‏ : 4 3 : ا ا ال ا : 3 1 ‎A B® REE |‏ ا ‎i > ET‏ ار ا ا ا 5 3 ‎fe 3 RRR 2 H‏ ‎Sa : 0‏ ال الا ‎SHEE NE: CI i‏ : 85 ‎i 0 5 3‏ 1 ا ‎i SE‏ الوح 3 ‎o HE . : 8 3‏ اجر 8 0 ل : 5 1 3 ‎ay: k : N‏ % ‎IO 2 : : 3‏ 58 8 ل ‎DEX‏ ‎R bs‏ 3 3 ‎H 5 BE 3 1 8 0‏ ‎SE . 8 ¥‏ . 5 ب ‎gi‏ ‎a 5‏ ا ا 7 ‎ke‏ ‏0 ل ‎ca DART‏ ا » 4 ‎SE 0 ST‏ 3 : ا 2 ال ‎NER‏ كا #8 الم 2 ‎i 4‏ ال الح ا #8 3 3 ‎oR 3‏ الح ااا هد 4920 ب 8 ‎x ERS‏ 3 ‎i‏ 0 ب" 12 ‎OR 0‏ 0 : ل : ‎be‏
‏. 8 & : 3 ‎Ho 3 1 ro 3 i 1 3‏ ‎BS‏ ® 3 88 3 ا : ‎lt‏ 3 7 ا اا ب د ‎a ie i‏ سس ‎fi‏ ا ا > ‎ER‏ ع ا ا اا 8 ٍ 5 3 لاا الا الى ححا ال ‎J‏ ‎CEL sey 3# : 7 x. : 3‏ ‎a Hos EE =‏ .= الاي د ليذ ‎ITE:‏ ‏3 : » اها ااا لالع ‎Te «LL‏ 33 00 > ا العلا لد اثلث اكيت 8 : ا 3 ¥ "م 0 ‎Pow‏ ‎Eh . . Lo %‏ : 8 ‎E B Lo 7 k 6‏ - 8 ‎YT gw or . 5‏ ا 8# ل :8 ‎a‏ 5 ا ا : 3 8 0 ا ‎Spey wi‏ ا ترا لوت ل ده اا ليت ال لا الت ال تلن ل ل 2 ge . { ‏ا‎ ee] 3 ‏لماه لالجو جم‎ . ; i EI i Co of 5 5" ‏ممح ا‎ SN TF dad 1 ‏ل‎ ‏سدع‎ 3 Ea ER SANSA : 3 ‏ا م ا‎ Get E i Ae SR CEN . E I: 2 ‏ا‎ x 0 ‏نا‎ REECE N 1 EE a0 SST 18 ‏ا 2 : يم‎ ‏ا 5 & ا‎ 8 i He LE pe SE 3 RAE SS pe: SE ‏اب ا‎ TE NTR SE RE 3 6 : Ng a 5 Se iE TR : CREE Nd Yoyo CURE HR Sa 1 & N FE YAR 0 SN +X ¥ 3 ThE AN 00 3 ". Si SE IRE 5 ‏ا‎ ‎3 aE whoa, ‏م‎ 0 ‏ل د‎ 5 SA 7 ‏ا‎ M00: ‏ا‎ hs 5 1 1 a] Y ) oo $ ‏م ا‎ EEA Wh As 3 = : SS ae SLE TA b ™ : Ta H 3 I. . . ‏ا‎ AD a RS Ny 5 ‏الى 1 : ا‎ 3 N : 1 ‏ل‎ 0 ‏اذا‎ ye Sanh rE ‏معان‎ ‎Loe SNE ‏ال‎ 7 15 Hd $n 2 1 x Mae TR % 5 E TFA nT BEE NRE SNE SER an RR BE JR Rs 1 2 So SEE bY ‏ا الاق‎ 3 Ne a a 3500 a Naa ‏ل‎ ‎0 ‏اا ل‎ Sp gle ET Ca ae Cd Eos J Soon EE ‏ا ام وعم‎ 3 Ee 4 ‏اا مم 8 ل ا ا‎ 8 3 3 : ‏ا 007 اا اي انك‎ 4 80 Eo 5 i
3 . . Ll Sa ie deg 1 Fe ‏الا‎ ‏ا‎ iE ‏الا‎ (EER ‏ااا‎ ; r og i TREY NNN ey ok Sa Ry 3 3 [RE i aaa SH ‏تق‎ Je 0 ki NE La gi Sn SE Ba REE SF a ite 3 $s Fe ‏طيا 000 انلخ‎ a ‏ا لجن‎ 3 BR “aaa Eo 3 07 ‏اللي ا‎ Tg tT ‏لاف‎ 0 8 1 i : Fats : Tn er LAE EE ow Ee ‏الت‎ Hae TUR Rie al ‏4خ د ا الت‎ MERE STR BRE Si 205 ‏لض طح 3 4 ا‎ NE Fi Gee oY ox EE ‏ا‎ : 8 ‏ل ا‎ REECE CER ad J ‏ا ا‎ ti Tine Ee pri ‏مسي‎ ss ‏اا ست‎ TELE A HE de ‏ا‎ ag fi dhe ‏وا ال‎ : 3 ei CSR EE EI RN ENE EERE AA CES ‏الاححا‎ Ce > NS SRE NORE RRR: rps ‏شيية‎ ne 1 ‏اا لوا الداع عر‎ SE re ‏الي‎ Sms Eh is a > ‏م ل ضور‎ EE SE : ERLE aR Sa Ln ‏الع 7 يات تم‎ iw : EE ed cris aE a ‏اا ا ل ا‎ 1 ‏ا ا‎ SLAY TI ERE et ‏مت‎ ‏مدا‎ : AUER gui 28 JTree SRA RE EE EAE NE AE Cena ‏اوس ا‎ 8 Fs NAAR YER BRE 3-8 Ea . REE Sadan = RA “3 I ‏د #* ا‎ NAA 8 ‏ا‎ : TI a 4 =f ENE DS NR YE EY - NAGE ‏ا‎ ‏وا‎ cs : 0 ‏ا‎ 8 33 & - Rae: SO ON § » io 3 FANT EI CC % i HSE ai 3 Pov aaa Ye 3 a A DE EERE . ) EY SN WOR Cw 8 ‏ا ب ا‎ 8 oF ERIS ERY roe gn ‏بيبا‎ © RE NEE 1 8 ١ FO a Bg 3 LE Sa REE 8 ‏للج سم‎ 0 © EE ED oa 1 Tm : ‏ا اا ال‎ BE Ng DF BR BR TRAE, a Se Bs 8 ‏ا‎ = FR Ta TT ‏و‎ + : oe Ne 8 oS Ch be LE ‏ل‎ Co NERY i $a 5 ‏م‎ Fhe HE Wo : Ee § ‏ا ا ا ؟‎ ks ; i 2 £ J So : iy a IE CF Poy fs Ula 5 ‏ل‎ i NL i 1 ‏اله‎ FT Jo oy i EG BT 3 2 22 law ; hee ‏اكات ل © اخ ا ال‎ 75 N & + 1: No ANY ‏ل‎ : NE 0 x 3 3 aaa SNORE RR ١ ‏ااا اق‎ FE 7 3 > RE NE 8 ‏كا الوا ا‎ i Na cE ّ + AEE ELENA 8 ‏ب الخ ال‎ 1 x Fay 207 8 8 3 + aaa 200 LEE ay Ri Oa 1 ‏ا‎
‎8 . Eo AAR 04 H 85 : % © ‏ان‎ Wg * i 0 Ce 3 : "91 ‏ا‎ Re ‏ل ا‎ ERE ‏ا‎ RISA 3 ELD + Se ‏ا الال‎ 3 1 > ‏ا‎ A ‏سه ل‎ EE i to 0 ‏"م ل‎ ‏ال ص ا‎ 1 TL OE 1 FEE i ae thw od ¥ - wn 4 1 ‏ال لج‎ £8 To Fee ‏ات اك اا صا ب‎ i ——— 5 1 ‏مم ما‎ Eo > ٌ ‏يت مادا‎ oa, 8 7 ‏ل‎ 2 FORE RES ‏ا‎ 3 ECE ER ‏متم ال ةا سور 8 : شاع‎ 5 8 Ss & : ea Ee ‏ا د مي‎ ‏يي ةمعن‎ ESS a Gee = oe ‏اللي‎ ‎ANN 8 ZRH a ab AR 8 ‏ل‎ Kr ‏يجح وجا ل‎ | 58 ‏ار بان لريب‎ in: ‏ال ا‎ po 3 SRE EAN ‏كاي‎ pd an no 1 ‏رطب عايج لاي ا‎ hs Ra = nin PASI g HE SH errand 8 ‏ا ا ل‎ a aay NA RNa SR AN PRAIA 1 DN Ae Bot RR CE Ea 1 ‏ب‎ . Sloan ‏ا ا‎ AN 8 ‏ا ال ال‎ ‏اا‎ 8 a SRE iin Cs Naa Sain SANE a NR EE We AEN HH Cae SA Sua oo Ne a : aan SEO SIR ZEN AR .. ESE SSE . NNN SE RY ae a ‏ل 0 ل‎ ‏ا اا ااا اا‎ SRR Eas OU 8 Sa AN Sama aS Aaa Snes RAE ER SAS ANS RE Ee SEAS EAN 5 Ne ESS REY . i Sea Sa ER Naan Soh aR SE Rs SE SRS FREY Seay NE Saas ‏اا‎ NES 1 A RN a a SE PN Sa ‏ا‎ ‎Ra RR 1 ERA Se NEAR RE 0 EES SRN No a ANE RN SR 2D Ne ON 3% ERAN SRR NASER 3 RETR 2) Na aay SN HENS Na SN 7 BORNE Sa AR ZN Sa ‏ا‎ Saas a SA aaa aay 3 AN RO ZONE Hoa RAR Soa SARE DE Ho a RAEN S DRE ORIEN TR Rae A 0 ‏ا‎ TEN ER ER : OR EER SN SNR ARR ‏ا‎ RAR RAR SE ARR SSAA NSS Sas WA 8 NE NA SRS NRE SNE YE Ne EY an SAS 8 SEEN TN Ca A) oa Naa A aa tal . 0 oo 5S Sane RY Si SES 0 CEN SR RI ‏اد‎ aa : SR SER a 8 ‏ل‎ 1 Sh) SA 3 SI HIRT ANE SE Le RUA ‏اا ا‎ + ‏ا يحض‎ AEE Sa 5 RAE 1 ‏ا‎ ‎LE WR ERNE NEAR HAUS ET EAA ORR AR 88 a 1 Tw - ENE Ri a DE ZAR: NV 3 wr ea TENE 7 id - ERNE REE YEA EE SERRE . SF NE EAS SANA Raa 8 TREES Waa a NE D SE Saad Sa iad ‏ا ل‎ Poa 8 NAS RE SR #8 8 RR AER 1 ‏امد‎ SENN NR SAN RE x . 3 ‏ا ا‎ Sri ...
4 E Duy Waa SNR aa 0 3 . ERR a Salvo hE Zi ERASER Fase ZANE La : nn RAE RS RA Sau oa NAN SRE hi Svar 0 ‏ل‎ 1 ogy AR RD ww 3 ‏الا‎ ‎" ‎“fe ‏ا‎ ‎ne ‎3 7 0 (0% Sg HR SX ‏وما لا ااا كر‎ rr A ‏با‎ AAS AAR EA Te Sd ‏بس لمج‎ rd ‏تاي ما با‎ eV ey 1 3 : ‏ا‎ 3 8 RY TER : 1 Ta & : 3 my v 3 ‏اا‎ 84 8 ‏ابح اا‎ > 3 La لا ‏اتات‎ 3 Tw TH Ny die Reel ! UE + ~ ‏الاي‎ SESS ‏ا الت ل‎ - H Fo) 2 Cp Ce Le 3 Be FR 5 v : PERE Ny ‏د‎ ¢ : 1 ‏ا‎ R ST 4 i ad 3S 2 3 : 5 TE “ % # ‏رد‎ i : ‏ا‎ i 5 ‏ا‎ a i 3 ‏ا ا‎ be TE ‏اي‎ OAR SR NE 3 ‏ا ل ا كل ني‎ EA RR 3 b 5 fos ‏ل ل لت 0 الا‎ RE Te 3 : + HER HS ER ER ARR ‏ال‎ SRE 3 0 ‏مح‎ 1 5 SRE Tn SR A 5 > ‏ا الات 3 & يي‎ RR RN : be: SEE EN TE ‏ايت ا لو ا لاما‎ i Gy neo ‏الام :8 ل ا ال ا الما الا الاي . ضفي‎ xR ES Fd RIT CRIN REN Re 5 & Ra ‏كاي ال‎ nn IR nT es i > 5 Fs FR ‏تتا سا‎ aE BR 83 3 ‏ال : > 1 3 ا مما‎ 8 x ER od ‏ا يه اي‎ TE RR 8 + ‏ال‎ I) En IT I RAR RE a ‏الج لم‎ 3 3 ‏اللا‎ Ra TEER) ERE CE aR a : TEN ‏ادي سي ل ا : خا 7 الي‎ 2 VRE 8 ‏م‎ ‎3 5 ‏ل ل ل ا ا‎ EC RRS PAR RN RAR RS 3 7 he Hy ‏ا‎ FREES EE ‏ات‎ 0 1 8 0 3 Yay 2 : 0 i wy A Sr 7 8 ‏ل‎ ‎AR ‏ل‎ HN : ST [3 ERO] FY RE ‏ب‎ 3 A 1 : ‏لي‎ ‎TTR TNE + ‏ااا ا ا ا ا اا بم‎ by 0 8 ‏ا‎ 7 Sa ‏ا‎ RT ¥ Fo} = LE : 0 ANE eT AN jl SE RR ‏ا‎ Ee EAR RR SS § po Sa i 7 ‏د ااا اا ا ا لا‎ x « 8 Tae 4 Bh i 3 ASE) 3 R 1 Ne H i 3 Ba 3 3 en at ES 8 ‏اد‎ ‎8 Eo i * 3 ol i EN . 3 Ape 0 ie ‏ب‎ 8 ٍْ 2 RRS EN x Th no hhh ‏ل ل ا ا‎ Se ad AAS SRD A ARS AR PAS ALS TASTE ASB EC) ‏مين‎ Bb . . cs x ST SS en ‏اجو لا‎ SEE : 3 3 no dy i ‏ا‎ : 3 i 25 : ‏ا ل ا‎ 3 RN FI ‏ا الخ‎ BER ‏ل‎ nih $ ‏حو‎ § LE RR Ra a ‏ال ا‎ H FA he ERR RR RS a 8 3 tS ’ 7 ‏م‎ ‏ال الوك‎ i i EN Ee SEA 8 H 2) ER : Sh 8 i aay 5 oe hey i ‏ل‎ FE 3 R 8 ‏ا الس ل ل ل‎ ei i ot Fay RN & by ER RR Le i : a 5 pk ‏ل ل ل او ا‎ EY ِ ‏حي‎ ‏دكا ا‎ #3 3 ER 2 PS Ay i a A ‏ال‎ 3 oy Sa ay Tae i Be on na ‏ل‎ : ¥ RET ES SE RN Ti 8 Te 8 ‏ال ا اا ا ال‎ by gl v Bie WE ET NE I ARR hn NR x " Rs ® ¥ 5 1 RR A RRR SE A 2 RB ‏يج‎ ‎08 ‏الح‎ fs 1 ‏ب ل‎ . By i ‏ل ا 0 3 7 حك‎ RR RRL = : Cie oo BY BT ETE RR ‏م‎ ES ‏حا‎ 8 RE ERR F 5 Soe 7 ‏انا ل الا ا 3 لي‎ saps ‏ال‎ 2 eis ‏طخ حمسي‎ J N 7 RE SR & ERS 3 bs 8 a i 3 1 ‏ب‎ 1 ¥ La HE 3 8 0 : gi HS 3 1 ‏الي ا‎ + Es i + 5 ‏حون‎ Noy ‏د‎ 2 i 1 ‏ب‎ . by 0 hd As ‏بر‎ 3 3 LE : ‏ا‎ ‎¢ ‏الا‎ oh Ch ‏ات داه‎ SE ee 3 >< ‏ا ل ان اح‎ i a Tan 7 x LG ERR PRE pS : ‏الخ ا‎ + pa TH WIL Sn i 3 Se RR ‏د‎ CENT ‏ا‎ 3 5 ‏ا‎ 3 SRE ER he 4 Pap 1 ‏برد‎ a 3 £3 8 : 3 1 Woy i WR Xd 3 3 bs 3 5 7 ّ 3 3 Cn 3 8 7 cu veer 3 3 er : EI PEE ean en fi RE ‏ا‎ VE ‏دي ا‎ SN ‏لما‎ RS ‏راس د جف‎ ie pe ERR a AN ‏لم‎ ‎2 cba] ns Sg bs 2 ‏د لد ل ا ا‎ : 8 “ ‏الفا الي‎ BS es oe ‏جل‎ ‎qe SEY “
لاله الهيلة السعودية الملضية الفكرية ا ‎Sued Authority for intallentual Property‏ ‎RE‏ .¥ + \ ا 0 § 8 ‎Ss o‏ + < م ‎SNE‏ اج > عي كي الج ‎TE I UN BE Ca‏ ‎a‏ ةا ‎ww‏ جيثة > ‎Ld Ed H Ed - 2 Ld‏ وذلك بشرط تسديد المقابل المالي السنوي للبراءة وعدم بطلانها ‎of‏ سقوطها لمخالفتها ع لأي من أحكام نظام براءات الاختراع والتصميمات التخطيطية للدارات المتكاملة والأصناف ع النباتية والنماذج الصناعية أو لائحته التنفيذية. ‎Ad‏ ‏صادرة عن + ب ب ‎٠.‏ ب الهيئة السعودية للملكية الفكرية > > > فهذا ص ب ‎101١‏ .| لريا ‎1*١ v=‏ ؛ المملكة | لعربية | لسعودية ‎SAIP@SAIP.GOV.SA‏
SA515361031A 2013-03-13 2015-09-10 المعالجة المناعية للبروتين البشري tau SA515361031B1 (ar)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361780624P 2013-03-13 2013-03-13
US201361800382P 2013-03-15 2013-03-15
PCT/US2014/025044 WO2014165271A2 (en) 2013-03-13 2014-03-12 Tau immunotherapy

Publications (1)

Publication Number Publication Date
SA515361031B1 true SA515361031B1 (ar) 2020-04-30

Family

ID=51659327

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
SA515361031A SA515361031B1 (ar) 2013-03-13 2015-09-10 المعالجة المناعية للبروتين البشري tau

Country Status (20)

Country Link
US (3) US10501531B2 (ar)
EP (2) EP3689904A1 (ar)
JP (2) JP6674888B2 (ar)
KR (1) KR102313513B1 (ar)
CN (1) CN105121465B (ar)
AU (2) AU2014248515B2 (ar)
BR (1) BR112015022260B1 (ar)
CA (1) CA2902026C (ar)
CU (1) CU24446B1 (ar)
EA (1) EA035943B1 (ar)
ES (1) ES2766762T3 (ar)
HK (1) HK1217337A1 (ar)
IL (1) IL241124B (ar)
MX (2) MX2015012225A (ar)
PE (1) PE20152004A1 (ar)
PH (1) PH12015501926A1 (ar)
SA (1) SA515361031B1 (ar)
SG (2) SG10201707855YA (ar)
WO (1) WO2014165271A2 (ar)
ZA (1) ZA201507464B (ar)

Families Citing this family (41)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201408626YA (en) 2012-07-03 2015-03-30 Univ Washington Antibodies to tau
WO2014165271A2 (en) 2013-03-13 2014-10-09 Neotope Biosciences Limited Tau immunotherapy
KR101791296B1 (ko) * 2014-04-17 2017-10-27 제주대학교 산학협력단 알츠하이머병 관련 돌연변이 유전자를 포함하는 발현 카세트, 벡터, 및 이를 이용하여 형질전환된 세포주
TWI664190B (zh) 2014-06-27 2019-07-01 美商Ｃ２Ｎ醫療診斷有限責任公司 人類化抗－ｔａｕ抗體
WO2016137950A1 (en) * 2015-02-24 2016-09-01 Rpeptide, Llc Anti-tau antibodies
TWI669314B (zh) 2015-02-26 2019-08-21 美國禮來大藥廠 針對ｔａｕ之抗體及其用途
MA41842A (fr) 2015-03-31 2018-02-06 Oblique Therapeutics Ab Nouveaux procédés de sélection d'épitope
PE20180317A1 (es) 2015-06-05 2018-02-09 Genentech Inc Anticuerpos anti-tau y metodos de uso
CA2991264C (en) 2015-07-06 2023-10-10 Ucb Biopharma Sprl Tau-binding antibodies
JO3711B1 (ar) 2015-07-13 2021-01-31 H Lundbeck As أجسام مضادة محددة لبروتين تاو وطرق استعمالها
WO2017191560A1 (en) * 2016-05-02 2017-11-09 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
MY197413A (en) * 2016-05-02 2023-06-16 Prothena Biosciences Ltd Antibodies recognizing tau
JP7170316B2 (ja) * 2016-05-02 2022-11-14 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド タウ免疫療法
CN109983001B (zh) 2016-07-12 2023-04-04 锐新医药公司 作为变构shp2抑制剂的2,5-双取代型3-甲基吡嗪及2,5,6-三取代型3-甲基吡嗪
CN116041504A (zh) 2016-07-12 2023-05-02 H.隆德贝克有限公司 特异性针对过度磷酸化τ蛋白的抗体及其使用方法
JOP20170154B1 (ar) * 2016-08-01 2023-03-28 Omeros Corp تركيبات وطرق لتثبيط masp-3 لعلاج أمراض واضطرابات مختلفة
US10988529B2 (en) 2016-08-09 2021-04-27 Eli Lilly And Company Combination therapy
CN117820467A (zh) 2016-12-07 2024-04-05 基因泰克公司 抗tau抗体和使用方法
KR102587130B1 (ko) 2016-12-07 2023-10-11 제넨테크, 인크. 항-타우 항체 및 이의 이용 방법
EP3565836A1 (en) 2017-01-04 2019-11-13 H. Lundbeck A/S Antibodies specific for hyperphosphorylated tau for the treatment of ocular diseases
TWI820013B (zh) 2017-01-23 2023-11-01 美商銳新醫藥公司 作為別構ｓｈｐ２抑制劑之雙環化合物
JP7240320B2 (ja) 2017-01-23 2023-03-15 レヴォリューション・メディスンズ，インコーポレイテッド アロステリックｓｈｐ２阻害剤としてのピリジン化合物
MA47499A (fr) 2017-02-17 2019-12-25 Denali Therapeutics Inc Anticorps anti-tau et leurs procédés d'utilisation
EP3601337A1 (en) 2017-03-28 2020-02-05 Genentech, Inc. Methods of treating neurodegenerative diseases
WO2018204546A2 (en) * 2017-05-02 2018-11-08 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
KR20200051684A (ko) 2017-09-07 2020-05-13 레볼루션 메디슨즈, 인크. 암 치료를 위한 shp2 억제제 조성물 및 방법
EP3694848A1 (en) 2017-10-12 2020-08-19 Revolution Medicines, Inc. Pyridine, pyrazine, and triazine compounds as allosteric shp2 inhibitors
US10829547B2 (en) 2017-10-16 2020-11-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anti-tau antibodies and uses thereof
AR113792A1 (es) 2017-10-25 2020-06-10 Janssen Pharmaceuticals Inc Composiciones de péptidos tau fosforilados y sus usos
TW201927791A (zh) 2017-12-15 2019-07-16 美商銳新醫藥公司 作為變構shp2抑制劑的多環化合物
WO2019207159A1 (en) * 2018-04-27 2019-10-31 Fondazione Ebri Rita Levi-Montalcini Antibody directed against a tau-derived neurotoxic peptide and uses thereof
JP2021530552A (ja) 2018-07-31 2021-11-11 イーライ リリー アンド カンパニー 併用療法
AU2020219374A1 (en) * 2019-02-08 2021-07-01 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
BR112021016947A2 (pt) 2019-03-03 2021-11-03 Prothena Biosciences Ltd Anticorpos que reconhecem tau
CA3148740A1 (en) 2019-08-06 2021-02-11 Aprinoia Therapeutics Limited Antibodies that bind to pathological tau species and uses thereof
TW202208409A (zh) 2020-05-19 2022-03-01 愛爾蘭商歐薩爾普羅席納有限公司 用於治療阿茲海默症之多抗原決定基疫苗
CN113254929B (zh) * 2021-05-21 2023-11-07 昆山翦统智能科技有限公司 一种企业远程智能服务的免疫计算与决策方法及系统
KR20240049296A (ko) 2021-08-27 2024-04-16 제넨테크, 인크. 타우 병증을 치료하는 방법
WO2023092004A1 (en) 2021-11-17 2023-05-25 Voyager Therapeutics, Inc. Compositions and methods for the treatment of tau-related disorders
WO2023178049A1 (en) 2022-03-14 2023-09-21 Genentech, Inc. Predicting neurodegenerative diseases based on speech analyses
WO2023250326A1 (en) 2022-06-21 2023-12-28 Genentech, Inc. Detecting longitudinal progression of alzheimer's disease (ad) based on speech analyses

Family Cites Families (159)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH652145A5 (de) 1982-01-22 1985-10-31 Sandoz Ag Verfahren zur in vitro-herstellung von hybridomen welche humane monoklonale antikoerper erzeugen.
US4634666A (en) 1984-01-06 1987-01-06 The Board Of Trustees Of The Leland Stanford Junior University Human-murine hybridoma fusion partner
US5208036A (en) 1985-01-07 1993-05-04 Syntex (U.S.A.) Inc. N-(ω, (ω-1)-dialkyloxy)- and N-(ω, (ω-1)-dialkenyloxy)-alk-1-yl-N,N,N-tetrasubstituted ammonium lipids and uses therefor
US5225539A (en) 1986-03-27 1993-07-06 Medical Research Council Recombinant altered antibodies and methods of making altered antibodies
DE3883899T3 (de) 1987-03-18 1999-04-22 Sb2 Inc Geänderte antikörper.
US5057540A (en) 1987-05-29 1991-10-15 Cambridge Biotech Corporation Saponin adjuvant
US4912094B1 (en) 1988-06-29 1994-02-15 Ribi Immunochem Research Inc. Modified lipopolysaccharides and process of preparation
US5530101A (en) 1988-12-28 1996-06-25 Protein Design Labs, Inc. Humanized immunoglobulins
US5859205A (en) 1989-12-21 1999-01-12 Celltech Limited Humanised antibodies
SG48759A1 (en) 1990-01-12 2002-07-23 Abgenix Inc Generation of xenogenic antibodies
US5279833A (en) 1990-04-04 1994-01-18 Yale University Liposomal transfection of nucleic acids into animal cells
US5264618A (en) 1990-04-19 1993-11-23 Vical, Inc. Cationic lipids for intracellular delivery of biologically active molecules
US5427908A (en) 1990-05-01 1995-06-27 Affymax Technologies N.V. Recombinant library screening methods
GB9015198D0 (en) 1990-07-10 1990-08-29 Brien Caroline J O Binding substance
ATE185601T1 (de) 1990-07-10 1999-10-15 Cambridge Antibody Tech Verfahren zur herstellung von spezifischen bindungspaargliedern
KR100272077B1 (ko) 1990-08-29 2000-11-15 젠팜인터내셔날,인코포레이티드 이종 항체를 생산할 수 있는 전이유전자를 가진 인간이외의 동물
US5661016A (en) 1990-08-29 1997-08-26 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5633425A (en) 1990-08-29 1997-05-27 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5874299A (en) 1990-08-29 1999-02-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5814318A (en) 1990-08-29 1998-09-29 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5789650A (en) 1990-08-29 1998-08-04 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5770429A (en) 1990-08-29 1998-06-23 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies
US5877397A (en) 1990-08-29 1999-03-02 Genpharm International Inc. Transgenic non-human animals capable of producing heterologous antibodies of various isotypes
US5545806A (en) 1990-08-29 1996-08-13 Genpharm International, Inc. Ransgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
US5625126A (en) 1990-08-29 1997-04-29 Genpharm International, Inc. Transgenic non-human animals for producing heterologous antibodies
DE69230142T2 (de) 1991-05-15 2000-03-09 Cambridge Antibody Tech Verfahren zur herstellung von spezifischen bindungspaargliedern
US5858657A (en) 1992-05-15 1999-01-12 Medical Research Council Methods for producing members of specific binding pairs
JP4124480B2 (ja) 1991-06-14 2008-07-23 ジェネンテック・インコーポレーテッド 免疫グロブリン変異体
US5283185A (en) 1991-08-28 1994-02-01 University Of Tennessee Research Corporation Method for delivering nucleic acids into cells
ES2136092T3 (es) 1991-09-23 1999-11-16 Medical Res Council Procedimientos para la produccion de anticuerpos humanizados.
EP0746609A4 (en) 1991-12-17 1997-12-17 Genpharm Int NON-HUMAN TRANSGENIC ANIMALS CAPABLE OF PRODUCING HETEROLOGOUS ANTIBODIES
US5733743A (en) 1992-03-24 1998-03-31 Cambridge Antibody Technology Limited Methods for producing members of specific binding pairs
DK1087013T3 (da) 1992-08-21 2009-05-11 Univ Bruxelles Immunoglobuliner uden lette kæder
US5674703A (en) 1992-12-02 1997-10-07 Woo; Savio L. C. Episomal vector systems and related methods
US5837242A (en) 1992-12-04 1998-11-17 Medical Research Council Multivalent and multispecific binding proteins, their manufacture and use
DE69318420T2 (de) 1992-12-14 1999-01-28 Innogenetics Nv Monoklonale antikörper gegen das mikrotubulusassoziierte tauprotein,hybridomen, die diese antikörper sezernieren, antigenerkennung durch diese monoklonalen antikörper und deren verwendung
PT735893E (pt) 1993-09-14 2009-03-06 Pharmexa Inc Péptidos que se ligam aos alelos pan dr para aumentar a resposta imunitária
US5914349A (en) 1994-01-10 1999-06-22 Teva Pharmaceutical Industries, Ltd. Compositions containing and methods of using 1-aminoindan and derivatives thereof and process for preparing optically active 1-aminoindan derivatives
US5505947A (en) 1994-05-27 1996-04-09 The University Of North Carolina At Chapel Hill Attenuating mutations in Venezuelan Equine Encephalitis virus
US5786464C1 (en) 1994-09-19 2012-04-24 Gen Hospital Corp Overexpression of mammalian and viral proteins
US7427392B1 (en) * 1994-11-14 2008-09-23 Elan Pharmaceuticals, Inc. Methods for aiding in the diagnosis of alzheimer's disease by measuring amyloid-β peptide (x-≧41) and tau
US7153510B1 (en) 1995-05-04 2006-12-26 Yale University Recombinant vesiculoviruses and their uses
DE19539493A1 (de) 1995-10-24 1997-04-30 Thomae Gmbh Dr K Starker homologer Promotor aus Hamster
US5834597A (en) 1996-05-20 1998-11-10 Protein Design Labs, Inc. Mutated nonactivating IgG2 domains and anti CD3 antibodies incorporating the same
US6114148C1 (en) 1996-09-20 2012-05-01 Gen Hospital Corp High level expression of proteins
AUPO390396A0 (en) 1996-11-29 1996-12-19 Csl Limited Novel promiscuous T helper cell epitopes
EP1005368B1 (en) 1997-03-10 2009-09-02 Ottawa Hospital Research Institute Use of nucleic acids containing unmethylated CpG dinucleotide in combination with alum as adjuvants
US5888809A (en) 1997-05-01 1999-03-30 Icos Corporation Hamster EF-1α transcriptional regulatory DNA
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
KR100483832B1 (ko) 1999-02-05 2005-04-20 삼성전자주식회사 영상 텍스쳐 기술자 추출 방법
AT500379B8 (de) 2001-02-02 2009-08-15 Axon Neuroscience Tau-proteine
EP2298809A3 (en) 2001-07-12 2012-02-15 FOOTE, Jefferson Super humanized antibodies
JP4393382B2 (ja) 2002-08-14 2010-01-06 三菱化学株式会社 中枢性タウ蛋白質特異的抗体
DK1567652T3 (da) 2002-11-29 2007-11-26 Boehringer Ingelheim Pharma Nye neomycin-phosphotransferasegener og fremgangsmåde til selektion af höjtproducerende rekombinante celler
US7847146B2 (en) * 2003-03-28 2010-12-07 Baylor College Of Medicine Model for neurodegenerative disorders
DE10338531A1 (de) 2003-08-19 2005-04-07 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Verfahren zur Reklonierung von Produktionszellen
US20050132424A1 (en) * 2003-10-21 2005-06-16 Envivo Pharmaceuticals, Inc. Transgenic flies expressing Abeta42-Dutch
EP1805222B1 (en) * 2004-10-01 2011-02-02 Max-Planck-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Antibodies directed to the mammalian eag1 ion channel protein
SI1820022T1 (sl) 2004-11-10 2009-10-31 Boehringer Ingelheim Pharma Uporaba pretočne citometrične analize za optimiziranje celičnih bančnih strategij za celice CHO
AU2005318171B2 (en) * 2004-12-20 2011-09-29 Crucell Holland B.V. Binding molecules capable of neutralizing West Nile virus and uses thereof
DE602005026706D1 (de) 2004-12-30 2011-04-14 Us Government Humanisierte col-1-antikörper mit substituierten resten am gerüst, und deren anwendung
AU2006287416A1 (en) * 2005-09-07 2007-03-15 Medimmune, Llc Toxin conjugated Eph receptor antibodies
US8012936B2 (en) * 2006-03-29 2011-09-06 New York University Tau fragments for immunotherapy
AU2007261584A1 (en) * 2006-06-16 2007-12-27 Envivo Pharmaceutical Inc. Transgenic flies expressing tau and amyloid precursor fragment
AU2007262666B2 (en) * 2006-06-22 2013-09-12 Walter And Eliza Hall Institute Of Medical Research Structure of the insulin receptor ectodomain
US20080124760A1 (en) 2006-07-26 2008-05-29 Barbara Enenkel Regulatory Nucleic Acid Elements
US20100216703A1 (en) * 2006-08-14 2010-08-26 The Regents Of The University Of California Inhibitors of PDE4 and Methods of Use
SG177168A1 (en) 2006-12-01 2012-01-30 Medarex Inc Human antibodies that bind cd22 and uses thereof
CA2678963C (en) 2007-02-23 2018-05-01 Elan Pharmaceuticals, Inc. Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
MY148472A (en) 2007-03-02 2013-04-30 Boehringer Ingelheim Pharma Improvement of protein production
EP2031064A1 (de) 2007-08-29 2009-03-04 Boehringer Ingelheim Pharma GmbH & Co. KG Verfahren zur Steigerung von Proteintitern
JP2009056790A (ja) 2007-09-03 2009-03-19 Takao Otogawa ファイル用ポケット
SG187477A1 (en) * 2007-09-26 2013-02-28 U3 Pharma Gmbh Heparin-binding epidermal growth factor-like growth factor antigen binding proteins
WO2011133919A1 (en) 2010-04-22 2011-10-27 Janssen Alzheimer Immunotherapy Use of tau to monitor immunotherapy
CA2705292C (en) * 2007-11-13 2016-06-21 Teva Biopharmaceuticals Usa, Inc. Humanized antibodies against tl1a
CR20170001A (es) 2008-04-28 2017-08-10 Genentech Inc Anticuerpos anti factor d humanizados
JP2010014691A (ja) * 2008-06-20 2010-01-21 Igaku Seibutsugaku Kenkyusho:Kk 腹水中のメソテリン及び／又は巨核球増強因子を検出するための方法、キット、試薬及び装置
EP2321351B1 (en) 2008-08-18 2017-11-01 Pfizer Inc. Antibodies to ccr2
US9605054B2 (en) 2009-02-23 2017-03-28 The Board Of Trustees Of The University Of Illinois Composition and method for treating a tauopathy
US8617554B2 (en) 2009-05-13 2013-12-31 Genzyme Corporation Anti-human CD52 immunoglobulins
EP2440234A4 (en) * 2009-06-10 2013-11-06 Univ New York IMMUNOLOGICAL TARGETING OF PATHOLOGICAL TAU PROTEINS
US20110045534A1 (en) 2009-08-20 2011-02-24 Cell Signaling Technology, Inc. Nucleic Acid Cassette For Producing Recombinant Antibodies
AU2010286501B2 (en) 2009-08-28 2015-06-11 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Antibodies that bind Tau oligomers
WO2011053565A2 (en) 2009-10-29 2011-05-05 Biomedical Sciences Research Centre "Alexander Fleming" Compositions and methods for detecting a tauopathy
TW201132353A (en) * 2009-12-18 2011-10-01 Amgen Inc WISE binding agents and epitopes
WO2011083881A1 (ja) 2010-01-08 2011-07-14 国立大学法人京都大学 タウオパチー治療用ワクチン
KR20130004579A (ko) 2010-02-23 2013-01-11 제넨테크, 인크. 종양의 진단 및 치료를 위한 조성물 및 방법
ES2684475T3 (es) 2010-04-15 2018-10-03 Abbvie Inc. Proteínas que se unen a beta amiloide
ITRM20100320A1 (it) * 2010-06-11 2011-12-11 Consiglio Nazionale Ricerche Metodo per la diagnostica e il trattamento delle taupatie
US20120023911A1 (en) 2010-07-28 2012-02-02 Gm Global Technology Operations, Inc. Detection of exhaust particulate filter substrate failure
US8940272B2 (en) * 2010-10-11 2015-01-27 University Of Zurich Human anti-tau antibodies
AR084210A1 (es) * 2010-12-08 2013-05-02 Abbott Lab PROTEINAS DE UNION AL TNF-a
CA2825791A1 (en) * 2011-02-07 2012-08-16 Neotope Biosciences Limited Apoe immunotherapy
EP2701743A4 (en) 2011-04-27 2015-08-19 Univ Northwestern SELECTIVE ANTIBODIES FOR TAU PATHOLOGICAL DIMERS AND PRE-FIBRILLARY TAU PATHOLOGICAL OLIGOMERS AND THEIR USE IN THE TREATMENT, DIAGNOSIS AND MONITORING OF TAUOPATHIES
GB201109238D0 (en) 2011-06-01 2011-07-13 Antitope Ltd Antibodies
GB201111361D0 (en) * 2011-07-04 2011-08-17 Nordic Bioscience As Biochemical markers for neurodegenerative conditions
GB201112056D0 (en) * 2011-07-14 2011-08-31 Univ Leuven Kath Antibodies
SG10201804809RA (en) * 2011-08-22 2018-07-30 Cnj Holdings Inc Clostridium difficile antibodies
EP2758433B1 (en) 2011-09-19 2017-10-18 Axon Neuroscience SE Protein-based therapy and diagnosis of tau-mediated pathology in alzheimer's disease
TW201326209A (zh) 2011-09-30 2013-07-01 Chugai Pharmaceutical Co Ltd 具有促進抗原清除之ＦｃＲｎ結合域的治療性抗原結合分子
US9540434B2 (en) 2011-10-07 2017-01-10 Ac Immune S.A. Phosphospecific antibodies recognising tau
KR102166083B1 (ko) 2012-03-28 2020-10-16 사노피 브라디키닌 b1 수용체 리간드에 대한 항체
MX356800B (es) 2012-04-05 2018-06-13 Ac Immune Sa Anticuerpo tau humanizado.
JP6174120B2 (ja) 2012-04-18 2017-08-02 イー・アイ・デュポン・ドウ・ヌムール・アンド・カンパニーＥ．Ｉ．Ｄｕ Ｐｏｎｔ Ｄｅ Ｎｅｍｏｕｒｓ Ａｎｄ Ｃｏｍｐａｎｙ 多層シート
DE102012211455A1 (de) 2012-07-02 2014-01-02 Wobben Properties Gmbh Handhabungsvorrichtung zum Handhaben einer Rotorblattform zum Fertigen eines Rotorblattes einer Windenergieanlage
SG11201408626YA (en) * 2012-07-03 2015-03-30 Univ Washington Antibodies to tau
PT2885010T (pt) 2012-08-16 2020-03-11 Ipierian Inc Métodos de tratamento de uma tauopatia
US20140056901A1 (en) 2012-08-21 2014-02-27 The Institute For Molecular Medicine Anti-tau antibodies and compositions for and methods of making and using in treatment, diagnosis and monitoring of tauopathies
JP6324974B2 (ja) 2012-10-12 2018-05-23 アリゾナ ボード オブ リージェンツ オン ビハーフ オブ アリゾナ ステート ユニバーシティ タウの毒性オリゴマー形態を特異的に認識する抗体ベースの試薬
US9200068B2 (en) 2012-12-18 2015-12-01 Regents Of The University Of Minnesota Compositions and methods related to tauopathy
KR102234324B1 (ko) 2012-12-21 2021-03-31 바이오젠 엠에이 인코포레이티드 인간 항-타우 항체
US8980270B2 (en) 2013-01-18 2015-03-17 Ipierian, Inc. Methods of treating a tauopathy
US9364191B2 (en) 2013-02-11 2016-06-14 University Of Rochester Method and apparatus of spectral differential phase-contrast cone-beam CT and hybrid cone-beam CT
WO2014165271A2 (en) 2013-03-13 2014-10-09 Neotope Biosciences Limited Tau immunotherapy
JP6448614B2 (ja) 2013-03-15 2019-01-09 ベス イスラエル デアコネス メディカル センター インコーポレイテッド コンフォメーション特異的抗体の発生および使用のための方法および組成物
US11761959B2 (en) 2013-03-15 2023-09-19 The Trustees Of The University Of Pennsylvania Blood biomarker that predicts persistent cognitive dysfunction after concussion
EP3705498A1 (en) 2013-08-22 2020-09-09 Acceleron Pharma Inc. Tgf-beta receptor type ii variants and uses thereof
EP3074420A2 (en) 2013-11-27 2016-10-05 Ipierian, Inc. Methods of treating a tauopathy
US20160333063A1 (en) 2013-12-13 2016-11-17 The General Hospital Corporation Soluble high molecular weight (hmw) tau species and applications thereof
PE20210107A1 (es) * 2013-12-17 2021-01-19 Genentech Inc Anticuerpos anti-cd3 y metodos de uso
US9629801B2 (en) 2014-01-10 2017-04-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Blood-brain barrier targeting antibodies
US20150253341A1 (en) 2014-02-10 2015-09-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Quantification of tau in biological samples by immunoaffinity enrichment and mass spectrometry
AU2015279089B2 (en) 2014-06-26 2021-01-28 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Antibodies and antigen-binding fragments that specifically bind to microtubule-associated protein tau
TWI664190B (zh) 2014-06-27 2019-07-01 美商Ｃ２Ｎ醫療診斷有限責任公司 人類化抗－ｔａｕ抗體
CA2966964A1 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Michal Novak Humanized tau antibodies in alzheimer's disease
CA2874083C (en) 2014-12-05 2024-01-02 Universite Laval Tdp-43-binding polypeptides useful for the treatment of neurodegenerative diseases
WO2016137950A1 (en) 2015-02-24 2016-09-01 Rpeptide, Llc Anti-tau antibodies
PE20180317A1 (es) 2015-06-05 2018-02-09 Genentech Inc Anticuerpos anti-tau y metodos de uso
US20200030445A1 (en) 2015-06-12 2020-01-30 C2N Diagnostics, Llc Stable formulations of humanized anti-tau antibody
CA2991264C (en) 2015-07-06 2023-10-10 Ucb Biopharma Sprl Tau-binding antibodies
JO3711B1 (ar) 2015-07-13 2021-01-31 H Lundbeck As أجسام مضادة محددة لبروتين تاو وطرق استعمالها
US11327080B2 (en) 2015-07-21 2022-05-10 BioArctic Neruoscience AB Method for treatment of traumatic brain injury targeting aggregated peptides
CN117069841A (zh) 2015-10-06 2023-11-17 艾利妥 抗trem2抗体及其使用方法
JP7170316B2 (ja) 2016-05-02 2022-11-14 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド タウ免疫療法
WO2017191560A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
MY197413A (en) 2016-05-02 2023-06-16 Prothena Biosciences Ltd Antibodies recognizing tau
WO2018085653A1 (en) 2016-11-04 2018-05-11 The Regents Of The University Of California Compositions targeting 3-repeat tau for the treatment of neurodegenerative disorders, and methods for making and using them
KR102587130B1 (ko) 2016-12-07 2023-10-11 제넨테크, 인크. 항-타우 항체 및 이의 이용 방법
CN117820467A (zh) 2016-12-07 2024-04-05 基因泰克公司 抗tau抗体和使用方法
MA47499A (fr) 2017-02-17 2019-12-25 Denali Therapeutics Inc Anticorps anti-tau et leurs procédés d'utilisation
CN110545844A (zh) 2017-02-21 2019-12-06 瑞美德生物医药科技有限公司 使用结合细胞毒性t淋巴细胞抗原-4(ctla-4)的抗体的癌症治疗
JOP20180021A1 (ar) 2017-03-16 2019-01-30 Janssen Biotech Inc الأجسام المضادة لتكتلات خيوط بروتين تاو (tau) الحلزونية المزدوجة واستخداماتها
EP3601337A1 (en) 2017-03-28 2020-02-05 Genentech, Inc. Methods of treating neurodegenerative diseases
JP7109467B2 (ja) 2017-03-28 2022-07-29 ヤンセン ファッシンズ アンド プリベンション ベーフェー タウに特異的に結合する結合分子
WO2018204546A2 (en) 2017-05-02 2018-11-08 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
MX2019015071A (es) 2017-06-16 2020-02-13 Bristol Myers Squibb Co Composiciones y metodos para tratar tauopatias.
US10829547B2 (en) 2017-10-16 2020-11-10 Eisai R&D Management Co., Ltd. Anti-tau antibodies and uses thereof
CN111587123A (zh) 2017-11-09 2020-08-25 品通治疗有限公司 用于生成和使用人源化构象特异性磷酸化的τ抗体的方法和组合物
AU2018380765A1 (en) 2017-12-04 2020-06-11 Janssen Vaccines & Prevention B.V. Binding molecules that specifically bind to tau
TW202003036A (zh) 2018-03-23 2020-01-16 德商艾伯維德國有限及兩合公司 穩定水性抗-tau抗體調配物
MX2020009991A (es) 2018-03-28 2020-10-14 Axon Neuroscience Se Metodos basados en anticuerpos para detectar y tratar la enfermedad de alzheimer.
WO2019207159A1 (en) 2018-04-27 2019-10-31 Fondazione Ebri Rita Levi-Montalcini Antibody directed against a tau-derived neurotoxic peptide and uses thereof
SG11202104549TA (en) 2018-11-08 2021-05-28 Prothena Biosciences Ltd Antibodies recognizing tau
CA3118818A1 (en) 2018-11-08 2020-05-14 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
EP3883602A4 (en) 2018-11-19 2023-04-12 The Board Of Regents Of The University Of Texas System TAU PEPTIDE ANTIGENS AND ANTIBODIES BINDING TO THEM FOR THE TREATMENT OF TAUOPATHIES
AU2020219374A1 (en) 2019-02-08 2021-07-01 Prothena Biosciences Limited Antibodies recognizing tau
BR112021016947A2 (pt) 2019-03-03 2021-11-03 Prothena Biosciences Ltd Anticorpos que reconhecem tau
US20220177558A1 (en) 2019-03-25 2022-06-09 INSERM (Institut National de la Santé et de la Recherche Médicale) Treatment of taupathy disorders by targeting new tau species
JP2022541539A (ja) 2019-07-15 2022-09-26 アデル，インコーポレーテッド 抗タウ抗体およびその使用

Also Published As

Publication number Publication date
CN105121465B (zh) 2020-09-08
CA2902026C (en) 2023-08-29
AU2019203976A1 (en) 2019-06-27
BR112015022260A8 (pt) 2018-01-23
WO2014165271A2 (en) 2014-10-09
ES2766762T3 (es) 2020-06-15
IL241124A0 (en) 2015-11-30
CN105121465A (zh) 2015-12-02
PE20152004A1 (es) 2016-02-07
JP7044399B2 (ja) 2022-03-30
EP3689904A1 (en) 2020-08-05
AU2014248515B2 (en) 2019-03-07
KR20150129736A (ko) 2015-11-20
WO2014165271A3 (en) 2014-12-24
PH12015501926A1 (en) 2016-01-04
EA035943B1 (ru) 2020-09-03
US10501531B2 (en) 2019-12-10
BR112015022260B1 (pt) 2023-05-16
EP2970453A2 (en) 2016-01-20
US20200123239A1 (en) 2020-04-23
KR102313513B1 (ko) 2021-10-15
US20160031976A1 (en) 2016-02-04
EA201591285A1 (ru) 2016-02-29
US20230340094A1 (en) 2023-10-26
US11643457B2 (en) 2023-05-09
ZA201507464B (en) 2017-07-26
EP2970453B1 (en) 2019-12-04
CU20150117A7 (es) 2016-07-29
NZ710786A (en) 2021-04-30
JP6674888B2 (ja) 2020-04-01
JP2016512551A (ja) 2016-04-28
AU2014248515A1 (en) 2015-08-20
IL241124B (en) 2020-02-27
AU2019203976B2 (en) 2021-05-27
HK1217337A1 (zh) 2017-01-06
BR112015022260A2 (pt) 2017-10-10
EP2970453A4 (en) 2016-12-07
SG11201506244VA (en) 2015-09-29
SG10201707855YA (en) 2017-10-30
JP2020109103A (ja) 2020-07-16
MX2020010040A (es) 2020-10-14
CA2902026A1 (en) 2014-10-09
MX2015012225A (es) 2016-01-08
CU24446B1 (es) 2019-10-04

Similar Documents

Publication Publication Date Title
AU2019203976B2 (en) TAU Immunotherapy
JP7405459B2 (ja) タウ免疫療法
JP2019525724A (ja) タウ認識抗体
JP2022520672A (ja) タウを認識する抗体
JP2022524588A (ja) タウ認識抗体
JP2019525728A (ja) タウ認識抗体
JP2020536532A (ja) 抗トランスサイレチン抗体
TW202216773A (zh) 識別分選蛋白(sortilin)的抗體
TW202342516A (zh) 識別分選蛋白的抗體