CN117820467A - 抗tau抗体和使用方法 - Google Patents

抗tau抗体和使用方法 Download PDF

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CN117820467A CN202310678376.7A CN202310678376A CN117820467A CN 117820467 A CN117820467 A CN 117820467A CN 202310678376 A CN202310678376 A CN 202310678376A CN 117820467 A CN117820467 A CN 117820467A
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acid sequence
hvr
tau
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O·阿道夫森
K·R·威尔史密斯
M·范登布鲁格
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AC Immune SA
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Abstract

本发明提供抗Tau抗体和其使用方法。本发明提供结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau，并且其中所述抗体结合成熟人Tau的氨基酸19‑33、37‑44、37‑51、64‑78、73‑87、91‑105、109‑123、190‑204、421‑429或422‑429内的表位。本发明的抗体可用于：检测神经原纤维缠结、神经纤维网线或营养不良性神经炎；或，检测样本中的Tau。

Description

抗TAU抗体和使用方法
本申请是申请日为2017年12月06日、中国申请号为201780083393.9、发明名称为“抗TAU抗体和使用方法”的发明申请的分案申请。
相关申请的交叉参考
本申请要求2016年12月7日提交的美国临时申请第62/431,183号的优先权，其出于任何目的以全文引用的方式并入本文中。
发明领域
本发明涉及抗Tau抗体和其使用方法。
背景技术
神经原纤维缠结和神经纤维网线(NT)是阿兹海默氏病(Alzheimer's Disease；AD)的主要神经病理学标志。NT由已进行转译后修饰(包括磷酸化)的微管相关Tau蛋白构成，并且通过过磷酸化的Tau构象异构体的聚集而发展。AD与许多神经退化性tau蛋白病，尤其与某些类型的额颞叶型痴呆(FTD)共享此病理学。Tau蛋白似乎为AD和相关神经退化性tau蛋白病中认知丧失中的主要参与者。
靶向Tau蛋白的治疗方法极少，并且主要包含被认为使Tau磷酸化提高至病理性水平的激酶的抑制剂和阻断过磷酸化Tau蛋白的细胞质聚集的化合物。这些方法受到各种特异性和功效缺点影响。需要靶向已知或推测造成神经退化性病症的病理性蛋白质构象异构体的额外治疗剂。
发明内容
本发明提供抗Tau抗体和其使用方法。
在一些实施方案中，提供结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau。在一些实施方案中，抗体结合成熟人Tau的氨基酸2至24内的表位。在一些实施方案中，抗体是单克隆抗体。在一些实施方案中，抗体是人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。在一些实施方案中，抗体是结合人Tau的抗体片段。在一些实施方案中，所述人Tau包含SEQ ID NO:2的序列。
在一些实施方案中，抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；或
b)包含SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；
c)包含SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；
d)包含SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；
e)包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；
f)包含SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；
g)包含SEQ ID NO:653的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:655的氨基酸序列的HVR-H3；
h)包含SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；
i)包含SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；
j)包含SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；
k)包含SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；或
l)包含SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3；
b)包含SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3；
c)包含SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3；
d)包含SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3；
e)包含SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3；
f)包含SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3；
g)包含SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3；
h)包含SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3；
i)包含SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3；
j)包含SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3；
k)包含SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3；或
l)包含SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3；
b)包含SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3；
c)包含SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3；
d)包含SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3；
e)包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3；或
f)包含SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3
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h)包含SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3；
i)包含SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3；
j)包含SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3；
k)包含SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3；或
l)包含SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：
a)包含与SEQ ID NO:603具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
b)包含与SEQ ID NO:604具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
c)如(a)中的VH和如(b)中的VL；
d)包含与SEQ ID NO:611具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
e)包含与SEQ ID NO:612具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
f)如(d)中的VH和如(e)中的VL；
g)包含与SEQ ID NO:619具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
h)包含与SEQ ID NO:620具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
i)如(g)中的VH和如(h)中的VL；
j)包含与SEQ ID NO:627具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
k)包含与SEQ ID NO:628具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
l)如(j)中的VH和如(k)中的VL；
m)包含与SEQ ID NO:635具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
n)包含与SEQ ID NO:636具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
o)如(m)中的VH和如(n)中的VL；
p)包含与SEQ ID NO:643具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
q)包含与SEQ ID NO:644具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
r)如(p)中的VH和如(q)中的VL；
s)包含与SEQ ID NO:651具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
t)包含与SEQ ID NO:652具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
u)如(s)中的VH和如(t)中的VL；
v)包含与SEQ ID NO:659具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
w)包含与SEQ ID NO:660具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
x)如(v)中的VH和如(w)中的VL；
y)包含与SEQ ID NO:667具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
z)包含与SEQ ID NO:668具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
aa)如(y)中的VH和如(z)中的VL；
bb)包含与SEQ ID NO:675具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
cc)包含与SEQ ID NO:676具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
dd)如(bb)中的VH和如(cc)中的VL；
ee)包含与SEQ ID NO:683具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
ff)包含与SEQ ID NO:684具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
gg)如(ee)中的VH和如(ff)中的VL；或
hh)包含与SEQ ID NO:691具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
ii)包含与SEQ ID NO:692具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
jj)如(hh)中的VH和如(ii)中的VL。
在一些实施方案中，抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:603的序列的重链可变区(VH)；
b)包含SEQ ID NO:604的序列的轻链可变区(VL)；
c)如(a)中的VH和如(b)中的VL；
d)包含SEQ ID NO:611的序列的重链可变区(VH)；
e)包含SEQ ID NO:612的序列的轻链可变区(VL)；
f)如(d)中的VH和如(e)中的VL；
g)包含SEQ ID NO:619的序列的重链可变区(VH)；
h)包含SEQ ID NO:620的序列的轻链可变区(VL)；
i)如(g)中的VH和如(h)中的VL；
j)包含SEQ ID NO:627的序列的重链可变区(VH)；
k)包含SEQ ID NO:628的序列的轻链可变区(VL)；
l)如(j)中的VH和如(k)中的VL；
m)包含SEQ ID NO:635的序列的重链可变区(VH)；
n)包含SEQ ID NO:636的序列的轻链可变区(VL)；
o)如(m)中的VH和如(n)中的VL；
p)包含SEQ ID NO:643的序列的重链可变区(VH)；
q)包含SEQ ID NO:644的序列的轻链可变区(VL)；
r)如(p)中的VH和如(q)中的VL；
s)包含SEQ ID NO:651的序列的重链可变区(VH)；
t)包含SEQ ID NO:652的序列的轻链可变区(VL)；
u)如(s)中的VH和如(t)中的VL；
v)包含SEQ ID NO:659的序列的重链可变区(VH)；
w)包含SEQ ID NO:660的序列的轻链可变区(VL)；
x)如(v)中的VH和如(w)中的VL；
y)包含SEQ ID NO:667的序列的重链可变区(VH)；
z)包含SEQ ID NO:668的序列的轻链可变区(VL)；
aa)如(y)中的VH和如(z)中的VL；
bb)包含SEQ ID NO:675的序列的重链可变区(VH)；
cc)包含SEQ ID NO:676的序列的轻链可变区(VL)；
dd)如(bb)中的VH和如(cc)中的VL；
ee)包含SEQ ID NO:683的序列的重链可变区(VH)；
ff)包含SEQ ID NO:684的序列的轻链可变区(VL)；
gg)如(ee)中的VH和如(ff)中的VL；或
hh)包含SEQ ID NO:691的序列的重链可变区(VH)；
ii)包含SEQ ID NO:692的序列的轻链可变区(VL)；
jj)如(hh)中的VH和如(ii)中的VL。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:653的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:655的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含：含有SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:603的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:604的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:611的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:612的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:619的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:620的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:627的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:628的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:635的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:636的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:643的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:644的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:651的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:652的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:659的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:660的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:667的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:668的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:675的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:676的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:683的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:684的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:691的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:692的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，提供结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体结合成熟人Tau的氨基酸19-33、19-42、28-44、37-44、37-51、64-78、73-87、91-105、100-114、109-123、118-132、154-168、172-177、190-204、217-231、397-411、421-429或422-429内的表位。在一些实施方案中，提供结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体结合成熟人Tau的氨基酸37-44、64-78、73-87、91-105、190-204、421-429或422-429内的表位。
在一些实施方案中，提供结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体以小于400nM、小于100nM、小于75nM或小于50nM的KD结合单体Tau、磷酸化Tau、非磷酸化Tau和寡聚Tau中的每一者。在一些实施方案中，所述抗体结合食蟹猴Tau。
在一些实施方案中，提供一种分离的核酸，其中所述分离的核酸编码本文所描述的抗体。在一些实施方案中，提供一种宿主细胞，其中所述宿主细胞包含编码本文所描述的抗体的分离的核酸。在一些实施方案中，提供一种产生抗体的方法，其包括在适合于产生所述抗体的条件下培养宿主细胞。
在一些实施方案中，提供一种免疫缀合物，其中所述免疫缀合物包含本文所描述的分离的抗体和治疗剂。在一些实施方案中，提供一种经标记的抗体，其包含本文所描述的抗体和可检测标记。
在一些实施方案中，提供一种药物组合物，其包含本文所描述的分离的抗体和药学上可接受的载体。
在一些实施方案中，提供一种治疗Tau蛋白相关疾病的方法，其包括向患有Tau蛋白相关疾病的个体施用本文所描述的抗体或包含本文所描述的抗体的药物组合物。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病是tau蛋白病。在一些实施方案中，tau蛋白病是神经退化性tau蛋白病。在一些实施方案中，tau蛋白病选自阿兹海默氏病、肌肉萎缩性侧索硬化、帕金森氏病(Parkinson's disease)、库-贾氏病(Creutzfeldt-Jacob disease)、拳击员痴呆、唐氏综合症(Down's Syndrome)、格施谢三氏症(Gerstmann--Scheinkerdisease)、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病(Hallevorden-Spatz disease)、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病(Niemann-Pick disease type C)、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病(Pick's disease)、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，tau蛋白病是阿兹海默氏病或进行性核上麻痹。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病选自PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(Lewy body dementia，LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病(Guadeloupean Parkinsonism)、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病(Huntington’s disease)。
在一些实施方案中，提供一种在个体中保持或提高认知记忆能力或减缓记忆丧失的方法，其包括施用本文所描述的抗体或包含本文所描述的抗体的药物组合物。
在一些实施方案中，提供一种降低个体中Tau蛋白、非磷酸化Tau蛋白、磷酸化Tau蛋白或过磷酸化Tau蛋白的水平的方法，其包括施用本文所描述的抗体或包含本文所描述的抗体的药物组合物。
在一些实施方案中，提供本文所描述的分离的抗体以用作药剂。在一些实施方案中，提供本文所描述的分离的抗体以用于在个体中治疗tau蛋白病。在一些实施方案中，tau蛋白病是神经退化性tau蛋白病。在一些实施方案中，tau蛋白病选自阿兹海默氏病、肌肉萎缩性侧索硬化、帕金森氏病、库-贾氏病、拳击员痴呆、唐氏综合症、格施谢三氏症、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，tau蛋白病是阿兹海默氏病或进行性核上麻痹。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病选自PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病。
在一些实施方案中，提供本文所描述的分离的抗体以用于在个体中保持或提高认知记忆能力或减缓记忆丧失。在一些实施方案中，提供本文所描述的分离的抗体以用于降低个体中Tau蛋白、磷酸化Tau蛋白、非磷酸化Tau蛋白或过磷酸化Tau蛋白的水平。
在一些实施方案中，提供本文所描述的抗体的用途，其用于制造用于在个体中治疗Tau蛋白相关疾病的药剂。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病是tau蛋白病。在一些实施方案中，tau蛋白病是神经退化性tau蛋白病。在一些实施方案中，tau蛋白病选自阿兹海默氏病、肌肉萎缩性侧索硬化、帕金森氏病、库-贾氏病、拳击员痴呆、唐氏综合症、格施谢三氏症、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，tau蛋白病是阿兹海默氏病或进行性核上麻痹。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病选自PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病。
在一些实施方案中，提供本文所描述的抗体的用途，其用于制造用于在个体中保持或提高认知记忆能力或减缓记忆丧失的药剂。
在本文所描述的任一实施方案中，方法或用途可包括与至少一种额外疗法组合施用本文所描述的抗体。额外疗法的非限制性实例包括神经药物、皮质类固醇、抗生素、抗病毒剂和其它治疗剂。此类其它治疗剂包括(但不限于)其它抗Tau抗体、针对淀粉样蛋白-β的抗体、针对β-分泌酵素1(“BACE1”)的抗体和β-分泌酵素1的抑制剂。
在一些实施方案中，提供一种检测神经原纤维缠结、神经纤维网线或营养不良性神经炎的方法，其包括使样本与本文所描述的抗体接触。在一些实施方案中，提供检测样本中的Tau的方法，其包括使样本与本文所提供的抗体接触。
在一些实施方案中，提供预测受试者是否将对用治疗性抗Tau抗体治疗有响应的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。在一些此类实施方案中，如果在样本中检测到的Tau水平大于对照Tau水平，那么预测受试者对用治疗性抗Tau抗体治疗有响应。
在一些实施方案中，提供选择患者以供用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。在一些此类实施方案中，如果在样本中检测到的Tau水平大于对照Tau水平，那么选择受试者以供用治疗性抗Tau抗体治疗。
在一些实施方案中，提供监测用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自经历治疗的受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。在一些此类实施方案中，与在治疗期间在较早时间点或在开始治疗之前从受试者取得的第一样本中的Tau水平相比，在治疗期间在较晚时间点从受试者取得的第二样本中的Tau增加表明治疗有效。在一些实施方案中，检测抗Tau抗体不与治疗性抗Tau抗体竞争结合Tau。
在一些实施方案中，治疗性抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸2-24内的表位。在一些实施方案中，检测抗Tau抗体不与治疗性抗Tau抗体竞争结合Tau。在一些实施方案中，检测抗Tau抗体是选自表4或表31的抗体。在一些实施方案中，检测抗Tau抗体是本文所提供的抗体。在一些实施方案中，检测抗Tau抗体选自15C6-A7、63H3-D8、123E9-A1、64B9-F12、7A11C12、231G3F10、63H3-D8、64B9-F12和72E12-H9。在一些实施方案中，检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸37-44内的表位。
在一些实施方案中，提供选择患者以供用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。在一些实施方案中，如果在样本中检测到的2N同种型水平大于对照2N同种型水平，那么选择受试者以供用治疗性抗Tau抗体治疗。在一些实施方案中，如果在样本中检测到2N同种型，那么选择受试者以供用治疗性抗Tau抗体治疗。在一些实施方案中，提供监测具有tau蛋白病变的受试者的认知损伤的进展的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。在一些此类实施方案中，成熟人Tau的2N同种型的水平增加指示认知损伤的进展。在一些实施方案中，提供监测用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自经历治疗的受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。在一些实施方案中，成熟人Tau的2N同种型的水平降低表明治疗有效。在一些实施方案中，检测抗体结合成熟人Tau的氨基酸64-78、73-87、82-96、91-105、100-114、109-123、118-132、136-150、154-168、163-177、172-177、190-204、421-429或422-429内的表位。在一些实施方案中，检测抗体是选自表4或表31的抗体。在一些实施方案中，检测抗体结合氨基酸73-87、91-105、64-78、190-204、421-429或422-429内的表位。在一些实施方案中，检测抗体选自30A1C9、211G6-B6、77D1-D2、71H8-D6和307H3E8。在一些实施方案中，检测抗体结合64-78或109-123内的表位氨基酸。在一些实施方案中，检测抗体选自30D12-B5、49G10-F4和65B1-A2。
在一些实施方案中，样本是大脑样本、脑脊髓液样本或血液样本。
附图说明
图1A-图1F.使用ELISA将抗体结合过磷酸化Tau(pTau)的结合与结合非磷酸化Tau的结合相比较。结果以光学密度(O.D.)表示。
图2A-图2E.使用寡Tau和单Tau捕捉ELISA评估抗体与寡聚Tau的结合。结果以光学密度(O.D.)表示。
图3.使用蛋白质印迹(WB)测定，所测试的三种泛Tau抗体展示其结合来自阿兹海默氏病(AD)和匹配对照供体的脑裂解物中的可溶性Tau。使来自AD和对照脑裂解物的蛋白质提取物和六种重组人Tau同种型在SDS-PAGE和用三种泛Tau抗体(37D3-H9、94B2-C1和125B11-H3)进行印迹法的膜上运行。具有AD样本的色带标记为AD18、AD24和AD27，并且具有对照样本的色带标记为C25和C21。用六种重组人Tau同种型运行的色带标记为hTau序列梯。
图4A-图4C.使用Tau捕捉ELISA，泛Tau抗体展示其结合来自AD和匹配对照供体的脑裂解物中的可溶性Tau。展示三种泛Tau抗体37D3-H9、94B2-C1和125B11-H3的数据。结果以光学密度(O.D.)，平均值±SD，N＝2表示。
图5.展示37D3-H9以Fab形式(左图)和以IgG形式(右图)结合与Biacore芯片表面共价偶合的人Tau单体的传感图谱。已应用1:1结合模型，并且展示为重叠。x轴指示时间(单位＝秒)。y轴指示共振单位(RU)。
图6.展示hu37D3-H9.v5样本t＝0(左图)和t＝2周(右图)结合3.1、6.3、12.5、25、25、50和100nM的人Tau单体的重叠传感图谱。已应用1:1结合模型，并且还展示于此图中。x轴指示时间(单位＝秒)。y轴指示共振单位(RU)。
图7.hu37D3-H9.v5和hu37D3-H9.v5 N28D分别结合单体Tau(左图展示hu37D3-H9.v5且中间图展示hu37D3-H9.v5 N28D)和以1:1比率混合(右图)的结合。x轴指示时间(单位＝秒)。y轴指示共振单位(RU)。
图8A-图8D.针对潜在改良的稳定性筛选90种37D3-H9变体的亲和力、稳定性指数和序列。为了清楚起见，在各实验开始、中间和结束时运行的使用未应激对照抗体(hu37D3-H9.v5 hIgG1)所获得的值展示在表的两个部分中。
图9.展示轻链残基28-33(NGNTYF基元)的位置和残基28与33的相对位置的37D3-H9 Fv区的结构模型。应注意，在hu37D3.v28.A4中突变为Leu的残基33不邻近不稳定Asn-28残基。点线展示残基Asn-28与Tyr-32之间的氢键。使用MOE软件包(Chemical ComputingGroup)产生图。
图10展示在单次10mg/kg静脉内或腹膜内注射后，抗Tau抗体37D3-H9在小鼠中的药物代谢动力学。
图11展示在以1mg/kg的剂量单次IV快速注射后hu37D3.v28.A4hIgG4-S228P和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE在食蟹猴中的药物代谢动力学。
图12A-图12C.某些抗Tau抗体与Tau片段的结合。(A)展示某些抗Tau抗体与Tau片段1-15、10-24、19-33、28-42、37-51和46-60的结合。(B)抗体37D3-H9 mIgG2a与Tau片段10-44、10-24、2-24、2-34和全长Tau的结合。(C)抗体hu37D3-H9.v5 hIgG1与Tau片段10-44、10-24、2-24、2-34和全长Tau的结合。
图13A-图13B.在神经元-小神经胶质细胞共培养物中，效应功能对Tau毒性的影响。(A)在与各种抗体和寡聚Tau接触的共培养物中的MAP2片段化百分比。(B)与各种抗体和寡聚Tau接触的神经元(顶部图)和神经元-小神经胶质细胞共培养物(底部图)的图像。
图14.在施用抗tau 37D3-H9 WT IgG2a或抗tau 37D3-H9 DANG IgG2的小鼠的海马区中的pTau212/214水平。
图15.人与食蟹猴Tau序列的比较。指示针对抗体37D3-H9的表位。
图16展示在单次10mg/kg静脉内或腹膜内注射后，抗Tau抗体94B2-C1在小鼠中的药物代谢动力学。
图17展示在单次10mg/kg静脉内或腹膜内注射后，抗Tau抗体125B11-H3在小鼠中的药物代谢动力学。
图18展示hu37D3-H9.v1、hu37D3-H9.v39、hu37D3-H9.v40和hu37D3-H9.v41的κ1轻链可变区的比对。
图19A-图19B展示在以50mg/kg单次IV注射指定抗体后，食蟹猴中的血浆抗体浓度(A)和CSF抗体浓度(B)。
图20展示在以50mg/kg单次IV注射指定抗体后，食蟹猴中的血浆总Tau浓度和血浆抗体浓度。
图21A-图21D展示在以50mg/kg单次IV注射hu37D3.v28.A4hIgG4-S228P(A)和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE(B)后2天和10天时，食蟹猴大脑各个区中的抗体浓度；大脑中的平均抗体浓度(C)；大脑:血浆抗体浓度％(D)。
图22A-图22B展示以对数(A)和线性(B)标度绘制的，在以50mg/kg单次IV注射指定抗体后的各个时间点时食蟹猴大脑中的抗体浓度。
图23A-图23E展示在以50mg/kg单次IV注射指定抗体后的各个时间点时，在食蟹猴的海马区(A)、小脑(B)、额皮质(C)、CSF(D)和血浆(E)中的抗体浓度。
图24A-图24B展示在以50mg/kg单次IV注射指定抗体后，在食蟹猴中随时间变化的平均(A)和个别(B)血浆总Tau浓度。
图25展示某些抗体的Tau 0N/1N/2N同种型选择性，和用以产生各抗体的疫苗。分析Tau的跨越由外显子1至4编码的区的N端区中的抗体结合，以获得对于或针对人Tau同种型的正或负选择性。使用0N-、1N-和2N-Tau进行ELISA，以验证人Tau同种型结合选择性。
图26展示结合在Tau的N端区中的抗体的表位分组。将抗体分成五组(指示为I至V)，其中表位定位至残基37-51(组I)、64-78(组II)、73-87(组III)、82-96(组IV)或91-105(组VI)。所述表说明这些抗体的Tau同种型具正(+)和负(-)选择性。
具体实施方式
I.定义
出于本文的目的，“接受体人构架”是包含来源于如下文所定义的人免疫球蛋白构架或人共同构架的轻链可变域(VL)构架或重链可变域(VH)构架的氨基酸序列的构架。“来源于”人免疫球蛋白构架或人共同构架的接受体人构架可包含人免疫球蛋白构架或人共同构架的相同氨基酸序列，或其可含有氨基酸序列变化。在一些实施方案中，氨基酸变化的数目为10个或10个以下、9个或9个以下、8个或8个以下、7个或7个以下、6个或6个以下、5个或5个以下、4个或4个以下、3个或3个以下或2个或2个以下。在一些实施方案中，VL接受体人构架的序列与VL人免疫球蛋白构架序列或人共同构架序列相同。
“亲和力”是指分子(例如抗体)的单一结合位点与其结合搭配物(例如抗原)之间的非共价相互作用的总和的强度。除非另外指示，否则如本文所用，“结合亲和力”是指反映结合对(例如抗体与抗原)成员之间的1:1相互作用的固有结合亲和力。分子X对其搭配物Y的亲和力一般可由解离常数(KD)表示。可通过此项技术中已知的常用方法(包括本文所描述的那些方法)来测量亲和力。用于测量结合亲和力的特定说明性和例示性实施方案描述于下文中。
“亲和力成熟”抗体是指相较于在一或多个高变区(HVR)中不具有一或多个改变的亲本抗体，具有此类改变的抗体，所述改变使抗体对抗原的亲和力得到改良。
术语“抗Tau抗体”和“结合Tau的抗体”是指能够以足够亲和力结合Tau的抗体，使得所述抗体适用作靶向Tau的诊断剂和/或治疗剂。在一些实施方案中，如通过例如放射免疫测定(RIA)所测量，抗Tau抗体与无关的非Tau蛋白结合的程度小于所述抗体与Tau的结合的约10％。在某些实施方案中，结合Tau的抗体的解离常数(KD)≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如10-8M或10-8M以下，例如10-8M至10-13M，例如10-9M至10-13M)。在某些实施方案中，抗Tau抗体结合Tau的表位，所述表位在来自不同物种的Tau中具保守性。除非另外特别指示，否则如本文所用，术语“抗Tau抗体”和“结合Tau的抗体”是指结合单体Tau、寡聚Tau和/或磷酸化Tau的抗体。在一些此类实施方案中，抗Tau抗体以类似的亲和力，诸如以彼此相差不超过50倍的亲和力结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau。在一些实施方案中，结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau的抗体称为“泛Tau抗体”。
术语“抗体”在本文中以最广泛意义使用且涵盖各种抗体结构，包括(但不限于)单克隆抗体、多克隆抗体、多特异性抗体(例如双特异性抗体)和抗体片段，只要其展现所需抗原结合活性即可。
“抗体片段”是指除完整抗体之外的分子，其包含完整抗体中结合所述完整抗体所结合的抗原的部分。抗体片段的实例包括(但不限于)Fv、Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2；双功能抗体；直链抗体；单链抗体分子(例如scFv)；和由抗体片段形成的多特异性抗体。
与参考抗体“结合相同表位的抗体”是指在竞争测定中，阻断参考抗体与其抗原的结合达50％或50％以上的抗体，并且相反地，在竞争测定中，参考抗体阻断所述抗体与其抗原的结合达50％或50％以上。本文提供一种例示性竞争测定。
术语“嵌合”抗体是指重链和/或轻链的一部分来源于特定来源或物种，同时所述重链和/或轻链的其余部分来源于不同来源或物种的抗体。
抗体的“类别”是指其重链所具有的恒定域或恒定区的类型。存在五种主要类别的抗体：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，并且所述类别中的若干者可进一步分成子类(同型)，例如IgG1、IgG2、IgG3、IgG4、IgA1和IgA2。对应于不同类别的免疫球蛋白的重链恒定域分别称为α、δ、ε、γ和μ。
如本文所用的术语“细胞毒性剂”是指抑制或妨碍细胞功能和/或引起细胞死亡或破坏的物质。细胞毒性剂包括(但不限于)放射性同位素(例如At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素)；化学治疗剂或药物(例如甲氨喋呤(methotrexate)、阿德力霉素(adriamicin)、长春花生物碱(长春新碱(vincristine)、长春碱(vinblastine)、依托泊苷(etoposide))、多柔比星(doxorubicin)、美法仑(melphalan)、丝裂霉素C(mitomycin C)、苯丁酸氮芥(chlorambucil)、道诺霉素(daunorubicin)或其它插入剂)；生长抑制剂；酶和其片段，诸如溶核酶；抗生素；毒素，诸如小分子毒素或细菌、真菌、植物或动物来源的酶活性毒素，包括其片段和/或变体；以及以下所揭示的各种抗肿瘤剂或抗癌剂。
“效应功能”是指可归因于抗体的Fc区的那些生物活性，其随抗体同型变化。抗体效应功能的实例包括：C1q结合和补体依赖性细胞毒性(CDC)；Fc受体结合；抗体依赖性细胞介导的细胞毒性(ADCC)；吞噬作用；细胞表面受体(例如B细胞受体)的下调；和B细胞活化。
药剂(例如医药配制剂)的“有效量”是指以必要剂量和持续必要时间段有效实现所需治疗或预防结果的量。
本文的术语“Fc区”用于定义含有恒定区的至少一部分的免疫球蛋白重链C端区。所述术语包括原生序列Fc区和变体Fc区。在一些实施方案中，人IgG重链Fc区从Cys226或从Pro230延伸至重链的羧基端。然而，Fc区的C端赖氨酸(Lys447)可存在或可不存在。除非本文另外说明，否则Fc区或恒定区中氨基酸残基的编号是根据EU编号系统，还称为EU索引，如Kabat等,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版.公共卫生署(Public Health Service),美国国家卫生研究院(National Institutes of Health),Bethesda,MD,1991中所描述。
“构架”或“FR”是指除高变区(HVR)残基之外的可变域残基。可变域的FR一般由四个FR域组成：FR1、FR2、FR3和FR4。因此，HVR和FR序列一般以以下序列出现在VH(或VL)中：FR1-H1(L1)-FR2-H2(L2)-FR3-H3(L3)-FR4。
术语“全长抗体”、“完整抗体”和“全抗体”在本文中可互换使用且是指结构基本上类似于原生抗体结构或具有含有如本文所定义的Fc区的重链的抗体。
术语“宿主细胞”、“宿主细胞系”和“宿主细胞培养物”可互换使用且是指已引入外源核酸的细胞，包括此类细胞之后代。宿主细胞包括“转型体”和“转型细胞”，其包括原代转型细胞和来源于其的后代(不考虑继代次数)。后代的核酸含量与母细胞可能不完全相同，而是可能含有突变。本文包括具有与针对原始转型细胞所筛选或选择相同的功能或生物活性的突变后代。
“人抗体”是氨基酸序列对应于由人或人细胞产生或来源于利用人抗体谱系或其它人抗体编码序列的非人来源的抗体的氨基酸序列的抗体。人抗体的此定义特定排除包含非人抗原结合残基的人源化抗体。
术语“可变区”或“可变域”是指抗体结合抗原所涉及的抗体重链或轻链域。原生抗体的重链和轻链(分别为VH和VL)可变域一般具有类似的结构，其中各结构域均包含四个保守性构架区(FR)和三个高变区(HVR)。(参见例如Kindt等,Kuby Immunology,第6版,W.H.Freeman and Co.,第91页(2007)。)单一VH或VL域可足以赋予抗原结合特异性。此外，结合特定抗原的抗体可使用来自结合所述抗原的抗体的VH或VL域分离以分别筛选互补VL或VH域的文库。参见例如Portolano等,J.Immunol.150:880-887(1993)；Clarkson等,Nature 352:624-628(1991)。
“人共同构架”是表示所选人免疫球蛋白VL或VH构架序列中最常出现的氨基酸残基的构架。一般来说，人免疫球蛋白VL或VH序列选自可变域序列的子组。一般来说，序列子组为如Kabat等,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第五版,NIHPublication 91-3242,Bethesda MD(1991),第1-3卷中的子组。在一些实施方案中，对于VL，子组为如Kabat等,同前文献中的子组κI。在一些实施方案中，对于VH，子组为如Kabat等,同前文献中的子组III。
“人源化”抗体是指包含来自非人HVR的氨基酸残基和来自人FR的氨基酸残基的嵌合抗体。在某些实施方案中，人源化抗体将包含基本上全部至少一个且通常两个可变域，其中全部或基本上全部HVR(例如CDR)均对应于非人抗体的HVR，并且全部或基本上全部FR均对应于人抗体的FR。人源化抗体任选地可包含来源于人抗体的抗体恒定区的至少一部分。抗体(例如非人抗体)的“人源化形式”是指已经历人源化的抗体。
如本文所用的术语“高变区”或“HVR”是指抗体可变域中序列高变(“互补决定区”或“CDR”)和/或形成结构上定义的环(“高变环”)和/或含有抗原接触性残基(“抗原触点”)的每个区域。一般来说，抗体包含六个HVR：三个在VH(H1、H2、H3)中，并且三个在VL(L1、L2、L3)中。本文的例示性HVR包括：
(a)出现在氨基酸残基26-32(L1)、50-52(L2)、91-96(L3)、26-32(H1)、53-55(H2)和96-101(H3)处的高变环(Chothia和Lesk,J.Mol.Biol.196:901-917(1987))；
(b)出现在氨基酸残基24-34(L1)、50-56(L2)、89-97(L3)、31-35b(H1)、50-65(H2)和95-102(H3)处的CDR(Kabat等,Sequences of Proteins of Immunological Interest,第5版.公共卫生署,美国国家卫生研究院,Bethesda,MD(1991))；
(c)出现在氨基酸残基27c-36(L1)、46-55(L2)、89-96(L3)、30-35b(H1)、47-58(H2)和93-101(H3)处的抗原触点(MacCallum等J.Mol.Biol.262:732-745(1996))；和
(d)(a)、(b)和/或(c)的组合，包括HVR氨基酸残基46-56(L2)、47-56(L2)、48-56(L2)、49-56(L2)、26-35(H1)、26-35b(H1)、49-65(H2)、93-102(H3)和94-102(H3)。
除非另外指示，否则在本文中，根据Kabat等,同前文献对可变域中的HVR残基和其它残基(例如FR残基)进行编号。
“免疫缀合物”是与一或多个异源分子，包括(但不限于)细胞毒性剂缀合的抗体。
“个体”或“受试者”是哺乳动物。哺乳动物包括(但不限于)家养动物(例如牛、羊、猫、狗和马)、灵长类动物(例如人和非人灵长类动物，诸如猴)、家兔和啮齿动物(例如小鼠和大鼠)。在某些实施方案中，所述个体或受试者是人。
“分离的”抗体是已与其天然环境的组分分离的抗体。在一些实施方案中，抗体纯化达到大于95％或99％的纯度，如通过例如电泳(例如SDS-PAGE、等电聚焦(IEF)、毛细电泳法)或色谱(例如离子交换或逆相HPLC)所测定。用于评估抗体纯度的方法的综述参见例如Flatman等,J.Chromatogr.B 848:79-87(2007)。
“分离的”核酸是指已与其天然环境的组分分离的核酸分子。分离的核酸包括通常含有核酸分子的细胞中所含有的核酸分子，但所述核酸分子存在于染色体外或在不同于其天然染色体位置的染色体位置处。
“编码抗Tau抗体的分离的核酸”是指编码抗体重链和轻链(或其片段)的一或多种核酸分子，包括单一载体或相应载体中的此类核酸分子和存在于宿主细胞中的一或多个位置处的此类核酸分子。
如本文所用的术语“单克隆抗体”是指从基本上同质的抗体的群体获得的抗体，也就是，除可能的变异抗体(例如含有天然存在的突变或在产生单克隆抗体制剂期间出现的突变的抗体，此类变体一般以少量存在)以外，构成所述群体的个别抗体相同和/或结合相同表位。相比于通常包括针对不同决定子(表位)的不同抗体的多克隆抗体制剂，单克隆抗体制剂的各单克隆抗体是针对抗原上的单一决定子。因此，修饰语“单克隆”指示抗体的特征为从基本上同质的抗体群体获得，并且不应解释为需要通过任何特定方法产生所述抗体。举例来说，根据本发明使用的单克隆抗体可通过多种技术制得，包括(但不限于)融合瘤方法、重组DNA方法、噬菌体呈现方法和利用含有全部或部分人免疫球蛋白基因座的转殖基因动物的方法、用于制造本文所描述的单克隆抗体的此类方法和其它例示性方法。
“裸抗体”是指未与异源部分(例如，细胞毒性部分)或放射性标记缀合的抗体。裸抗体可以医药配制剂形式存在。
“原生抗体”是指具有不同结构的天然存在的免疫球蛋白分子。举例来说，原生IgG抗体是约150,000道尔顿(dalton)的杂四聚体糖蛋白，其由二硫键键结的两条相同轻链和两条相同重链构成。从N端至C端，各重链具有可变区(VH)，还称为可变重链域或重链可变域，继而为三个恒定域(CH1、CH2和CH3)。类似地，从N端至C端，各轻链具有可变区(VL)，还称为可变轻链域或轻链可变域，继而为恒定轻链(CL)域。抗体的轻链可基于其恒定域的氨基酸序列归为两种类型中的一种，称为卡帕(κ)和拉姆达(λ)。
术语“包装插页”用以指通常包括于治疗性产品的商业包装中的说明书，其含有关于与使用此类治疗性产品有关的适应症、用法、剂量、施用、组合疗法、禁忌症和/或警告的信息。
相对于参考多肽序列的“氨基酸序列同一性百分比(％)”定义为在比对参考多肽序列与候选序列且必要时引入间隙以实现最大序列同一性百分比之后，并且在不将保守性取代视为序列同一性的一部分的情况下，候选序列中与参考多肽序列中的氨基酸残基一致的氨基酸残基的百分比。用于确定氨基酸序列同一性百分比的目的的比对可以此项技术的技能范围内的各种方式实现，例如使用公开可获得的计算机软件，诸如BLAST、BLAST-2、ALIGN或Megalign(DNASTAR)软件。所属领域技术人员可确定用于比对序列的适当参数，包括在所比较序列的全长内实现最大比对所需要的任何算法。然而，出于本文的目的，使用序列比较计算机程序ALIGN-2产生氨基酸序列同一性％值。ALIGN-2序列比较计算机程序由Genentech,Inc.创作，并且源代码已随使用者文件一起提交于美国版权局(U.S.CopyrightOffice),Washington D.C.,20559，其在美国版权局以美国版权登记号TXU510087登记。ALIGN-2程序可公开获自Genentech,Inc.,South San Francisco,California，或可从源代码编写。ALIGN-2程序经编写可用于UNIX操作系统，包括数字UNIX V4.0D。所有序列比较参数均由ALIGN-2程序设定且不变化。
在采用ALIGN-2进行氨基酸序列比较的情形下，给定氨基酸序列A相对于、与或针对给定氨基酸序列B的氨基酸序列同一性％(或者，其可表述为相对于、与或针对给定氨基酸序列B具有或包含一定氨基酸序列同一性％的给定氨基酸序列A)如下计算：
100乘以分率X/Y
其中X为在A与B的程序比对中通过序列比对程序ALIGN-2评为一致匹配的氨基酸残基的数目，并且其中Y为B中的氨基酸残基的总数目。应了解，在氨基酸序列A的长度与氨基酸序列B的长度不相等的情况下，A相对于B的氨基酸序列同一性％与B相对于A的氨基酸序列同一性％将不相等。除非另外特定陈述，否则本文所用的所有氨基酸序列同一性％值是如前一段落中刚刚所描述使用ALIGN-2计算机程序获得。
术语“医药配制剂”是指所呈形式允许其中所含活性成分的生物活性有效发挥，并且不含对配制剂将施用的受试者具有不可接受毒性的额外组分的制剂。
“药学上可接受的载体”是指医药配制剂中除活性成分外的对受试者无毒的成分。药学上可接受的载体包括(但不限于)缓冲剂、赋形剂、稳定剂或防腐剂。
除非另外指示，否则如本文所用，术语“Tau”是指来自任何脊椎动物来源，包括哺乳动物，诸如灵长类动物(例如人)和啮齿动物(例如小鼠和大鼠)的任何原生Tau蛋白。所述术语涵盖“全长”未经处理的Tau以及由在所述细胞中处理产生的任何形式的Tau。所述术语还涵盖天然存在的Tau变体，例如剪接变体或对偶基因变体。
如本文所用，术语“pTau”是指其中丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基由蛋白激酶通过加成共价键结的磷酸根基团而磷酸化的Tau。在一些实施方案中，pTau在丝氨酸上或在苏氨酸残基上磷酸化。在一些实施方案中，pTau在位置409处的丝氨酸和/或位置404处的丝氨酸上磷酸化。在一些实施方案中，pTau在位置409处的丝氨酸上磷酸化。
如本文所用，术语“可溶性Tau”或“可溶性Tau蛋白”是指由以下组成的蛋白质：均完全溶解的Tau蛋白/肽单体或Tau样肽/蛋白质，或修饰或截短的Tau肽/蛋白质或Tau肽/蛋白质单体的其它衍生物和Tau蛋白寡聚物。“可溶性Tau”特别排除神经原纤维缠结(NFT)。
如本文所用，术语“不可溶Tau”是指多个聚集的Tau肽或蛋白质单体，或Tau样肽/蛋白质，或修饰或截短的Tau肽/蛋白质或Tau肽/蛋白质的其它衍生物，其形成活体外在水性介质中和活体内在哺乳动物或人体中(更特定来说在大脑中)不可溶的寡聚或聚合结构；但尤其是指多个聚集的Tau单体或修饰或截短的Tau肽/蛋白质或其衍生物，其分别在哺乳动物或人体中(更特定来说在大脑中)不可溶。特定来说，“不可溶Tau”包括神经原纤维缠结(NFT)。
如本文所用，术语“单体Tau”或“单Tau”或“Tau单体”是指在水性介质中完全溶解而无聚集复合物的Tau蛋白。
如本文所用，术语“聚集Tau”、“寡聚Tau”和“Tau寡聚物”是指多个聚集的Tau肽或蛋白质单体，或Tau样肽/蛋白质，或修饰或截短的Tau肽/蛋白质或Tau肽/蛋白质的其它衍生物，其形成活体外在水性介质中和活体内在哺乳动物或人体中(更特定来说在大脑中)不可溶或可溶的寡聚或聚合结构；但尤其是指多个聚集的Tau单体或修饰或截短的Tau肽/蛋白质或其衍生物，其分别在哺乳动物或人体中(更特定来说在大脑中)不可溶或可溶。
术语“pTau PHF”、“PHF”和“成对螺旋纤丝”在本文中同义地使用且是指以在电子显微镜检查上可见的160nm周期性缠绕成螺旋的纤丝对。宽度在10与22nm之间变化。PHF为阿兹海默氏病(AD)的神经原纤维缠结和神经纤维网线中的优势结构。PHF还可见于一些但并非所有的与神经炎斑块相关联的营养不良神经突。PHF的主要组分为过磷酸化形式的微管相关蛋白质tau。PHF可部分地由二硫键连接的反平行过磷酸化的Tau蛋白构成。PHF Tau可截去其C端20个氨基酸残基。PHF形成的潜在机制不确定，但Tau的过磷酸化可使其与微管分离，从而增加从其中可在神经元内侧形成PHF的可溶性Tau集合。
Tau的“2N同种型”是指Tau的包括外显子2和外显子3的同种型。
如本文所用，“治疗(treatment)”(和其语法变化形式，诸如“治疗(treat)”或“治疗(treating)”)是指临床介入以试图改变所治疗个体的自然病程，并且可为实现预防或在临床病理学病程中进行。所需治疗作用包括(但不限于)预防疾病发生或复发、缓解症状、减轻疾病的任何直接或间接病理性后果、预防癌转移、降低疾病进程速率、改善或缓和疾病病况和缓解或改善预后。在一些实施方案中，本发明的抗体用于延迟疾病发展或减慢疾病进程。
如本文所用的术语“早期阿兹海默氏病”或“早期AD”(例如“诊断为患有早期AD的患者”或“罹患早期AD的患者”)包括患有归因于AD的轻度认知障碍(诸如记忆缺损)的患者和具有AD生物标记物的患者，例如淀粉样蛋白阳性患者。
如本文所用的术语“轻度阿兹海默氏病”或“轻度AD”(例如“诊断为患有轻度AD的患者”)是指其特征在于MMSE评分为20至26的AD阶段。
如本文所用的术语“轻度至中度阿兹海默氏病”或“轻度至中度AD”涵盖轻度和中度AD两者，并且其特征在于MMSE评分为18至26。
如本文所用的术语“中度阿兹海默氏病”或“中度AD”(例如“诊断为患有中度AD的患者”)是指其特征在于MMSE评分为18至19的AD阶段。
术语“MMSE”是指小型精神状态检查(Mini Mental State Examination)，其提供介于1与30之间的评分。参见Folstein等,1975,J.Psychiatr.Res.12:189-98。26和26以下的评分一般视为指示缺损。相对于另一个具有较低评分的个体，MMSE上数值评分愈低，所测试的患者的缺损或障碍愈大。MMSE评分的增加可指示患者病状的改善，而MMSE评分的减少可指示患者病状的恶化。
如本文所用，术语“载体”是指一种核酸分子，其能够传播其所连接的另一种核酸分子。所述术语包括呈自我复制核酸结构的载体以及并入已引入其的宿主细胞的基因组中的载体。某些载体能够导引其可操作地连接的核酸的表达。此类载体在本文中称为“表达载体”。
II.组合物和方法
提供结合Tau的抗体。在一些实施方案中，本发明的抗体结合Tau，结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau。在一些实施方案中，本发明的抗体结合成熟人Tau的氨基酸2-24内的表位。在一些实施方案中，本发明的抗体结合Tau氨基酸2-24内的表位，并且结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau。在一些实施方案中，抗体结合具有序列AEPRQEFEVMEDHAGTYGLGDRK(SEQ ID NO:2)或由其组成的人Tau的表位。在一些实施方案中，抗体结合具有序列AEPRQEFDVMEDHAGTYGLGDRK(SEQ ID NO:4)或由其组成的食蟹猴Tau的表位。在一些实施方案中，抗体结合具有序列AEPRQEFEVMEDHAGTYGLGDRK(SEQ ID NO:2)或由其组成的人Tau的表位和具有序列AEPRQEFDVMEDHAGTYGLGDRK(SEQ ID NO:4)或由其组成的食蟹猴Tau的表位。在一些实施方案中，本发明的抗体结合成熟人Tau的氨基酸19-33、19-42、37-51、100-114、109-123、118-132或172-177内的表位。在一些实施方案中，本发明的抗体结合成熟人Tau的氨基酸37-44、64-78、73-87、91-105、190-204、421-429或422-429内的表位。在一些实施方案中，本发明的抗体结合成熟人Tau的氨基酸19-33、19-42、37-51、100-114、109-123、118-132或172-177内的表位，并且结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau。在一些实施方案中，本发明的抗体结合成熟人Tau的氨基酸37-44、64-78、73-87、91-105、190-204、421-429或422-429内的表位，并且结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau。
本发明的抗体适用于例如诊断或治疗神经退化性疾病。
A.例示性抗Tau抗体
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；或
b)包含SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；
c)包含SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；
d)包含SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；
e)包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；
f)包含SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；
g)包含SEQ ID NO:653的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:655的氨基酸序列的HVR-H3；
h)包含SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；
i)包含SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；
j)包含SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；
k)包含SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；或
l)包含SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3；
b)包含SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3；
c)包含SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3；
d)包含SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3；
e)包含SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3；
f)包含SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3；
g)包含SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3；
h)包含SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3；
i)包含SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3；
j)包含SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3；
k)包含SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3；或
l)包含SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3；
b)包含SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3；
c)包含SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3；
d)包含SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3；
e)包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3；
f)包含SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3；
g)包含SEQ ID NO:653的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:655的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3；
h)包含SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3；
i)包含SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3；
j)包含SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3；
k)包含SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3；或
l)包含SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；包含SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3；包含SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:12、22、282、292和342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:13、23、283、293和343的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含选自SEQ ID NO:14、24、284、294和344的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含选自SEQ ID NO:15、25、285、295、345和468至556的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含选自SEQ ID NO:16、26、286、296和346的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含选自SEQ ID NO:17、27、287、297和347的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:343的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:344的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:345的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:346的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:347的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:72和302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ IDNO:73和303的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含选自SEQ ID NO:74和304的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含选自SEQ ID NO:75和305的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含选自SEQ ID NO:76和306的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含选自SEQ ID NO:77和307的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:82、312、322和332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:83、313、323和333的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含选自SEQ ID NO:84、314、324和334的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含选自SEQ ID NO:85、315、325和335的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含选自SEQ ID NO:86、316、326和336的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含选自SEQ ID NO:87、317、327和337的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:63的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:64的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:66的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:67的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:83的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:84的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:85的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:86的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:87的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:95的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:96的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:97的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:107的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:117的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:126的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:127的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:134的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:135的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:137的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:146的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:147的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:154的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:157的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:167的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:177的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:187的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:192的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:193的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:194的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:195的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:196的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:197的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:202的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:203的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:204的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:205的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:206的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:207的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:212的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:213的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:214的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:215的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:216的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:217的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:222的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:223的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:224的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:225的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:226的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:227的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:232的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:233的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:234的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:235的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:236的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:237的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:242的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:243的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:244的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:245的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:246的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:247的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:252的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:253的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:254的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:255的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:256的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:257的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:262的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:263的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:264的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:265的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:266的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:267的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:272的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:273的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:274的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:275的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:276的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:277的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:282的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:283的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:284的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:285的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:287的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:292的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:296的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:297的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:303的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:304的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:305的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:306的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:307的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:312的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:313的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:314的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:315的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:316的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:317的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:322的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:323的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:324的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:325的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:326的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:327的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个、三个、四个、五个或六个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:333的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:334的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:335的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:336的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ IDNO:337的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:12、22、282、292和342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:13、23、283、293和343的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含选自SEQ ID NO:14、24、284、294和344的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:12、22、282、292和342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:13、23、283、293和343的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含选自SEQ ID NO:14、24、284、294和344的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:343的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:344的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:343的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:344的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:72和302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:73和303的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含选自SEQ ID NO:74和304的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:72和302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:73和303的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含选自SEQ ID NO:74和304的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:82、312、322和332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:83、313、323和333的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含选自SEQ ID NO:84、314、324和334的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:82、312、322和332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:83、313、323和333的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含选自SEQ ID NO:84、314、324和334的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:63的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:64的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:63的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:64的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:83的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:84的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:83的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:84的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:134的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:134的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:154的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:154的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:192的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:193的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:194的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:192的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:193的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:194的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:202的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:203的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:204的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:202的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:203的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:204的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:212的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:213的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:214的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:212的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:213的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:214的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:222的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:223的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:224的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:222的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:223的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:224的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:232的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:233的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:234的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:232的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:233的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:234的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:242的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:243的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:244的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:242的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:243的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:244的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:252的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:253的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:254的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:252的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:253的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:254的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:262的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:263的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:264的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:262的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:263的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:264的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:272的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:273的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:274的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:272的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:273的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:274的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:282的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:283的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:284的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:282的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:283的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:284的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:292的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:292的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:303的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:304的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:303的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:304的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:312的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:313的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:314的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:312的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:313的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:314的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:322的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:323的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:324的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:322的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:323的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:324的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:333的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:334的氨基酸序列的HVR-H3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:333的氨基酸序列的HVR-H2；和(c)包含SEQ ID NO:334的氨基酸序列的HVR-H3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:15、25、285、295、345和468至556的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含选自SEQ ID NO:16、26、286、296和346的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含选自SEQ ID NO:17、27、287、297和347的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:15、25、285、295、345和468至556的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含选自SEQ IDNO:16、26、286、296和346的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含选自SEQ ID NO:17、27、287、297和347的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:345的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:346的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:347的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:345的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:346的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:347的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:75和305的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含选自SEQ ID NO:76和306的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含选自SEQ ID NO:77和307的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:75和305的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含选自SEQ ID NO:76和306的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含选自SEQ ID NO:77和307的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含选自SEQ ID NO:85、315、325和335的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含选自SEQ ID NO:86、316、326和336的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含选自SEQ ID NO:87、317、327和337的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:85、315、325和335的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含选自SEQ ID NO:86、316、326和336的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含选自SEQ ID NO:87、317、327和337的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:66的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:67的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:66的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:67的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:85的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:86的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:87的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:85的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:86的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:87的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:95的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:96的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:97的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:95的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:96的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:97的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:117的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:117的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:126的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:127的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:126的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:127的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:135的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:135的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:146的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:147的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:146的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:147的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:187的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:187的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:195的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:196的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:197的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:195的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:196的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:197的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:205的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:206的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:207的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:205的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:206的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:207的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:215的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:216的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:217的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:215的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:216的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:217的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:225的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:226的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:227的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:225的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:226的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:227的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:235的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:236的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:237的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:235的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:236的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:237的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:245的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:246的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:247的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:245的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:246的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:247的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:255的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:256的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:257的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:255的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:256的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:257的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:265的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:266的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:267的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:265的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:266的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:267的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:275的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:276的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:277的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:275的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:276的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:277的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:285的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:287的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:285的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:287的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:296的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:297的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:296的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:297的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:305的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:306的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:307的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:305的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:306的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:307的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:315的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:316的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:317的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:315的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:316的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:317的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:325的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:326的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:327的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:325的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:326的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:327的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含至少一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ ID NO:335的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:336的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:337的氨基酸序列的HVR-L3。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:335的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:336的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:337的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:12、22、282、292和342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:13、23、283、293和343的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含选自SEQ ID NO:14、24、284、294和344的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含选自SEQ ID NO:15、25、285、295、345和468至556的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含选自SEQ IDNO:16、26、286、296和346的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含选自SEQ ID NO:17、27、287、297和347的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:342的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:343的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:344的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:345的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:346的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:347的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:72和302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:73和303的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含选自SEQ IDNO:74和304的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含选自SEQ ID NO:75和305的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含选自SEQ ID NO:76和306的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含选自SEQ ID NO:77和307的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含选自SEQ ID NO:82、312、322和332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含选自SEQ ID NO:83、313、323和333的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含选自SEQ ID NO:84、314、324和334的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含选自SEQ IDNO:85、315、325和335的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含选自SEQ ID NO:86、316、326和336的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含选自SEQ ID NO:87、317、327和337的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:32的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:33的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:34的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:35的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:36的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:37的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:42的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:43的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:44的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:45的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:46的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:47的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:52的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:53的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:54的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:55的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:56的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:57的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:62的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:63的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:64的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:65的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:66的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:67的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:72的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:73的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:74的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:75的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:76的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:77的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:82的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:83的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:84的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:85的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:86的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:87的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:92的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:93的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:94的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:95的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:96的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:97的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:102的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:103的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:104的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:105的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:106的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:107的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:112的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:113的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:114的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:115的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:116的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:117的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:122的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:123的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:124的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:125的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:126的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:127的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:132的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:133的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:134的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:135的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:136的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:137的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:142的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:143的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:144的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:145的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:146的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:147的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:152的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:153的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:154的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:155的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:156的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:157的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:162的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:163的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:164的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:165的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:166的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:167的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:172的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:173的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:174的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:175的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:176的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:177的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:182的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:183的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:184的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:185的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:186的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:187的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:192的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:193的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:194的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:195的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:196的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:197的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:202的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:203的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:204的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:205的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:206的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:207的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:212的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:213的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:214的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:215的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:216的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:217的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:222的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:223的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:224的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:225的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:226的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:227的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:232的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:233的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:234的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:235的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:236的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:237的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:242的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:243的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:244的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:245的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:246的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:247的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:252的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:253的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:254的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:255的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:256的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:257的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:262的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:263的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:264的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:265的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:266的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:267的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:272的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:273的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:274的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:275的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:276的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:277的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:282的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:283的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:284的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:285的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:286的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:287的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:292的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:293的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:294的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:295的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:296的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:297的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:302的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:303的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:304的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:305的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:306的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:307的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:312的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:313的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:314的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:315的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:316的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:317的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:322的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:323的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:324的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:325的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:326的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:327的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含(a)包含SEQ ID NO:332的氨基酸序列的HVR-H1；(b)包含SEQ ID NO:333的氨基酸序列的HVR-H2；(c)包含SEQ ID NO:334的氨基酸序列的HVR-H3；(d)包含SEQ ID NO:335的氨基酸序列的HVR-L1；(e)包含SEQ ID NO:336的氨基酸序列的HVR-L2；和(f)包含SEQ ID NO:337的氨基酸序列的HVR-L3。
在任一上述实施方案中，抗Tau抗体是人源化抗体。在一些实施方案中，抗Tau抗体包含如任一上述实施方案中的HVR且进一步包含接受体人构架，例如人免疫球蛋白构架或人共同构架。
在另一方面中，抗Tau抗体包含与SEQ ID NO:10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、603、611、619、627、635、643、651、659、667、675、683或691的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的重链可变域(VH)序列。在某些实施方案中，具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VH序列含有相对于参考序列的取代(例如保守性取代)、插入或缺失，但包含所述序列的抗Tau抗体保留与Tau缀合的能力。在某些实施方案中，在SEQ ID NO:10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、603、611、619、627、635、643、651、659、667、675、683或691中总计1至10个氨基酸已经取代、插入和/或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外侧的区中(也就是在FR中)。任选地，抗Tau抗体包含SEQ ID NO:10、20、30、40、50、60、70、80、90、100、110、120、130、140、150、160、170、180、190、200、210、220、230、240、250、260、270、280、290、300、310、320、330、340、603、611、619、627、635、643、651、659、667、675、683或691中的VH序列，包括所述序列的转译后修饰。在一个特定实施方案中，VH包含一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ IDNO:12、22、32、42、52、62、72、82、92、102、112、122、132、142、152、162、172、182、192、202、212、222、232、242、252、262、272、282、292、302、312、322、332、342、605、613、621、629、637、645、653、661、669、677、685或693的氨基酸序列的HVR-H1，(b)包含SEQ ID NO:13、23、33、43、53、63、73、83、93、100、113、123、133、143、153、163、173、183、193、203、213、223、233、243、253、263、273、283、293、303、313、323、333、343、606、614、622、630、638、646、654、662、670、678、686或694的氨基酸序列的HVR-H2，和(c)包含SEQ ID NO:14、24、34、44、54、64、74、84、94、104、114、124、134、144、154、164、174、184、194、204、214、224、234、244、254、264、274、284、294、304、314、324、334、344、607、615、623、631、638、647、655、663、671、679、687或695的氨基酸序列的HVR-H3。
在另一方面中，抗Tau抗体包含与SEQ ID NO:11、21、31、41、51、61、71、81、91、101、111、121、131、141、151、161、171、181、191、201、211、221、231、241、251、261、271、281、291、301、311、321、331、341、604、612、620、628、636、644、652、660、668、676、684或692的氨基酸序列具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％或100％序列同一性的轻链可变域(VL)序列。在某些实施方案中，具有至少90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％或99％同一性的VL序列含有相对于参考序列的取代(例如保守性取代)、插入或缺失，但包含所述序列的抗Tau抗体保留与Tau缀合的能力。在某些实施方案中，在SEQ ID NO:11、21、31、41、51、61、71、81、91、101、111、121、131、141、151、161、171、181、191、201、211、221、231、241、251、261、271、281、291、301、311、321、331、341、604、612、620、628、636、644、652、660、668、676、684或692中总计1至10个氨基酸已经取代、插入和/或缺失。在某些实施方案中，取代、插入或缺失发生在HVR外侧的区中(也就是在FR中)。任选地，抗Tau抗体包含SEQ ID NO:11、21、31、41、51、61、71、81、91、101、111、121、131、141、151、161、171、181、191、201、211、221、231、241、251、261、271、281、291、301、311、321、331、341、604、612、620、628、636、644、652、660、668、676、684或692中的VL序列，包括所述序列的转译后修饰。在一个特定实施方案中，VL包含一个、二个或三个选自以下的HVR：(a)包含SEQ IDNO:15、25、35、45、55、65、75、85、95、105、115、125、135、145、155、165、175、185、195、205、215、225、235、245、255、265、275、285、295、305、315、325、335、345、608、616、624、632、640、648、656、664、672、680、688或696的氨基酸序列的HVR-L1；(b)包含SEQ ID NO:16、26、36、46、56、66、76、86、96、106、116、126、136、146、156、166、176、186、196、206、216、226、236、246、266、266、276、286、296、306、316、326、336、346、609、617、625、633、641、649、657、665、673、681、689或697的氨基酸序列的HVR-L2；和(c)包含SEQ ID NO:17、27、37、47、57、67、77、87、97、107、117、127、137、147、157、167、177、187、197、207、217、227、237、247、267、277、277、287、297、307、317、327、337、347、610、618、626、634、642、650、658、666、674、682、690或698的氨基酸序列的HVR-L3。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含：
a)包含与SEQ ID NO:603具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
b)包含与SEQ ID NO:604具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
c)如(a)中的VH和如(b)中的VL；
d)包含与SEQ ID NO:611具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
e)包含与SEQ ID NO:612具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
f)如(d)中的VH和如(e)中的VL；
g)包含与SEQ ID NO:619具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
h)包含与SEQ ID NO:620具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
i)如(g)中的VH和如(h)中的VL；
j)包含与SEQ ID NO:627具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
k)包含与SEQ ID NO:628具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
l)如(j)中的VH和如(k)中的VL；
m)包含与SEQ ID NO:635具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
n)包含与SEQ ID NO:636具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
o)如(m)中的VH和如(n)中的VL；或
p)包含与SEQ ID NO:643具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
q)包含与SEQ ID NO:644具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
r)如(p)中的VH和如(q)中的VL；
s)包含与SEQ ID NO:651具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
t)包含与SEQ ID NO:652具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
u)如(s)中的VH和如(t)中的VL；
v)包含与SEQ ID NO:659具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
w)包含与SEQ ID NO:660具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
x)如(v)中的VH和如(w)中的VL；
y)包含与SEQ ID NO:667具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
z)包含与SEQ ID NO:668具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
aa)如(y)中的VH和如(z)中的VL；
bb)包含与SEQ ID NO:675具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
cc)包含与SEQ ID NO:676具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
dd)如(bb)中的VH和如(cc)中的VL；
ee)包含与SEQ ID NO:683具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
ff)包含与SEQ ID NO:684具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
gg)如(ee)中的VH和如(ff)中的VL；或
hh)包含与SEQ ID NO:691具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
ii)包含与SEQ ID NO:692具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
jj)如(hh)中的VH和如(ii)中的VL。
在一些实施方案中，抗Tau抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:603的序列的重链可变区(VH)；
b)包含SEQ ID NO:604的序列的轻链可变区(VL)；
c)如(a)中的VH和如(b)中的VL；
d)包含SEQ ID NO:611的序列的重链可变区(VH)；
e)包含SEQ ID NO:612的序列的轻链可变区(VL)；
f)如(d)中的VH和如(e)中的VL；
g)包含SEQ ID NO:619的序列的重链可变区(VH)；
h)包含SEQ ID NO:620的序列的轻链可变区(VL)；
i)如(g)中的VH和如(h)中的VL；
j)包含SEQ ID NO:627的序列的重链可变区(VH)；
k)包含SEQ ID NO:628的序列的轻链可变区(VL)；
l)如(j)中的VH和如(k)中的VL；
m)包含SEQ ID NO:635的序列的重链可变区(VH)；
n)包含SEQ ID NO:636的序列的轻链可变区(VL)；
o)如(m)中的VH和如(n)中的VL；或
p)包含SEQ ID NO:643的序列的重链可变区(VH)；
q)包含SEQ ID NO:644的序列的轻链可变区(VL)；
r)如(p)中的VH和如(q)中的VL；
s)包含SEQ ID NO:651的序列的重链可变区(VH)；
t)包含SEQ ID NO:652的序列的轻链可变区(VL)；
u)如(s)中的VH和如(t)中的VL；
v)包含SEQ ID NO:659的序列的重链可变区(VH)；
w)包含SEQ ID NO:660的序列的轻链可变区(VL)；
x)如(v)中的VH和如(w)中的VL；
y)包含SEQ ID NO:667的序列的重链可变区(VH)；
z)包含SEQ ID NO:668的序列的轻链可变区(VL)；
aa)如(y)中的VH和如(z)中的VL；
bb)包含SEQ ID NO:675的序列的重链可变区(VH)；
cc)包含SEQ ID NO:676的序列的轻链可变区(VL)；
dd)如(bb)中的VH和如(cc)中的VL；
ee)包含SEQ ID NO:683的序列的重链可变区(VH)；
ff)包含SEQ ID NO:684的序列的轻链可变区(VL)；
gg)如(ee)中的VH和如(ff)中的VL；或
hh)包含SEQ ID NO:691的序列的重链可变区(VH)；
ii)包含SEQ ID NO:692的序列的轻链可变区(VL)；
jj)如(hh)中的VH和如(ii)中的VL。
在另一方面中，提供一种抗Tau抗体，其中所述抗体包含如上文所提供的任一实施方案中的VH和如上文所提供的任一实施方案中的VL。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ ID NO:280和SEQ ID NO:281中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ ID NO:290和SEQ ID NO:291中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ ID NO:300和SEQ ID NO:301中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ IDNO:310和SEQ ID NO:311中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ ID NO:320和SEQ ID NO:321中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ ID NO:330和SEQ ID NO:331中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。在一些实施方案中，抗体包含分别在SEQ ID NO:340和SEQ ID NO:341中的VH和VL序列，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:603的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:604的氨基酸序列的轻链可变区，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:611的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:612的氨基酸序列的轻链可变区，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:619的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:620的氨基酸序列的轻链可变区，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:627的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:628的氨基酸序列的轻链可变区，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:635的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:636的氨基酸序列的轻链可变区，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:643的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:644的氨基酸序列的轻链可变区，包括那些序列的转译后修饰。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:651的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:652的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:659的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:660的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:667的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:668的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:675的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:676的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:683的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:684的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，抗体包含含有SEQ ID NO:691的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:692的氨基酸序列的轻链可变区。
在一些实施方案中，提供一种抗Tau抗体，其中所述抗体包含有包含SEQ ID NO:348或SEQ ID NO:602的氨基酸序列的重链和包含SEQ ID NO:349的氨基酸序列的轻链。在一些实施方案中，提供一种抗Tau抗体，其中所述抗体包含由SEQ ID NO:348或SEQ ID NO:602的氨基酸序列组成的重链和由SEQ ID NO:349的氨基酸序列组成的轻链。
在另一方面中，本发明提供一种与本文所提供的抗Tau抗体结合相同表位的抗体。举例来说，在某些实施方案中，提供与选自15C6-A7、63H3-D8、123E9-A1、64B9-F12、231G3F10、7A11C12、30A1C9、211G6-B6、77D1-D2、71H8-D6、307H3E8、63H3-D8、64B9-F12、72E12-H9、30D12-B5、49G10-F4和65B1-A2的抗体结合相同表位的抗体。在某些实施方案中，提供与选自15C6-A7、63H3-D8、123E9-A1、64B9-F12、231G3F10、30A1C9、211G6-B6、77D1-D2、71H8-D6、307H3E8、63H3-D8、64B9-F12、72E12-H9、30D12-B5、49G10-F4和65B1-A2的抗体结合相同的人Tau表位，但不与抗体hu37D3-H9.v28.A4竞争的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸2-24组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸7-24组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸7-20组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸10-24组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸7-21组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸8-22组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合Tau片段内由SEQ ID NO:2的氨基酸11-25组成的表位的抗体。在某些实施方案中，提供结合以下Tau片段中的一或多者或全部的抗体：2-24、7-24、7-20、10-24、7-21、8-22和11-25。在一些实施方案中，提供结合具有SEQ ID NO:593的序列的肽但不结合具有SEQ ID NO:596或SEQ ID NO:597的序列的肽的抗体。
在本发明的另一方面中，根据任一上述实施方案的抗Tau抗体是单克隆抗体，包括嵌合抗体、人源化抗体或人抗体。在一个实施方案中，抗Tau抗体是抗体片段，例如Fv、Fab、Fab'、scFv、双功能抗体或F(ab')2片段。在另一个实施方案中，抗体是全长抗体，例如完整IgG1或IgG4抗体或如本文所定义的其它抗体类别或同型。
在另一方面中，根据任一上述实施方案的抗Tau抗体可合并如以下部分1至7中所描述的单一或组合的特征中任一者。
1.抗体亲和力
在某些实施方案中，本文所提供的抗体的解离常数(KD)为≤1μM、≤100nM、≤10nM、≤1nM、≤0.1nM、≤0.01nM或≤0.001nM(例如10-8M或10-8M以下，例如10-8M至10-13M，例如10-9M至10-13M)。
在一些实施方案中，通过放射性标记的抗原结合测定(RIA)测量KD。在一些实施方案中，RIA用Fab型式的所关注抗体和其抗原进行。举例来说，Fab对抗原的溶液结合亲和力通过以下来测量：在未标记抗原的滴定系列存在下使Fab与最低浓度的(125I)标记抗原平衡，随后用经抗Fab抗体涂布的培养盘捕捉结合抗原(参见例如，Chen等,J.Mol.Biol.293:865-881(1999))。为了确立测定条件，将多孔培养盘(ThermoScientific)用含5μg/ml捕捉抗Fab抗体(Cappel Labs)的50mM碳酸钠(pH 9.6)涂布隔夜，并且随后在室温(大约23℃)下用含2％(w/v)牛血清白蛋白的PBS阻断两小时至五小时。在无吸附剂培养盘(Nunc#269620)中，将100pM或26pM[125I]抗原与所关注Fab(例如符合抗VEGF抗体Fab-12的评估，Presta等,Cancer Res.57:4593-4599(1997))的连续稀释液混合。随后孵育所关注Fab隔夜；然而，孵育可持续较长时间段(例如65小时)以确保达到平衡。此后，在室温下将混合物转移至捕捉培养盘中以用于孵育(例如持续一小时)。随后移除溶液，并且将培养盘用含0.1％聚山梨醇酯20(TWEEN-/>)的PBS洗涤八次。当培养盘已干燥时，添加150微升/孔的闪烁体(MICROSCINT-20TM；Packard)，并且在TOPCOUNTTMγ计数器(Packard)上对培养盘计数10分钟。选择提供小于或等于20％最大结合的各Fab的浓度用于竞争性结合测定。
根据另一个实施方案，使用表面等离子体共振测定来测量KD。举例来说，使用/>-2000或/>-3000(BIAcore,Inc.,Piscataway,NJ)的测定在25℃下用固定抗原CM5芯片以约10共振单位(RU)进行。在一些实施方案中，根据供货商的说明书，用N-乙基-N'-(3-二甲氨基丙基)-碳化二亚胺盐酸盐(EDC)和N-羟基丁二酰亚胺(NHS)来活化羧基甲基化葡聚糖生物传感器芯片(CM5，BIACORE,Inc.)。用10mM乙酸钠(pH4.8)将抗原稀释至5μg/ml(约0.2μM)，随后以5微升/分钟的流动速率注射以得到大约10共振单位(RU)的偶合蛋白质。在注射抗原后，注射1M乙醇胺以阻断未反应的基团。对于动力学测量，在25℃下，以大约25μl/min的流动速率注射Fab于含0.05％聚山梨醇酯20(TWEEN-20TM)界面活性剂的PBS(PBST)中的两倍连续稀释液(0.78nM至500nM)。使用简单的一比一朗格缪尔结合模型(one-to-one Langmuir binding model)(/>评估软件3.2版)，通过同时拟合缔合和解离传感图谱来计算缔合速率(kon)和解离速率(koff)。平衡解离常数(KD)以比率koff/kon来计算。参见例如，Chen等,J.Mol.Biol.293:865-881(1999)。如果通过上述表面等离子体共振测定确定的缔合速率超过106M-1 s-1，那么缔合速率可通过使用荧光淬灭技术来确定，所述技术在如光谱仪(诸如具有搅拌式光析槽的止流装备型分光亮度计(Aviv Instruments)或8000-系列SLM-AMINCOTM分光亮度计(ThermoSpectronic))中所测量的浓度增加的抗原存在下，在25℃下测量含20nM抗抗原抗体(Fab形式)的PBS(pH7.2)的荧光发射强度(激发＝295nm；发射＝340nm，16nm带通)的增加或减少。
2.抗体片段
在某些实施方案中，本文所提供的抗体是抗体片段。抗体片段包括(但不限于)Fab、Fab'、Fab'-SH、F(ab')2、Fv和scFv片段，和下文所描述的其它片段。关于某些抗体片段的综述，参见Hudson等,Nat.Med.9:129-134(2003)。关于scFv片段的综述，参见例如Pluckthün，The Pharmacology of Monoclonal Antibodies,第113卷,Rosenburg和Moore编,(Springer-Verlag,New York),第269-315页(1994)；还参见WO 93/16185；和美国专利第5,571,894号和5,587,458号。关于包含救助受体结合表位残基和具有延长的活体内半衰期的Fab和F(ab')2片段的论述，参见美国专利第5,869,046号。
双功能抗体是具有两个抗原结合位点的抗体片段，其可为二价或双特异性抗体片段。参见例如EP 404,097；WO 1993/01161；Hudson等,Nat.Med.9:129-134(2003)；和Hollinger等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 90:6444-6448(1993)。三功能抗体和四功能抗体还描述于Hudson等,Nat.Med.9:129-134(2003)中。
单域抗体是包含抗体的重链可变域全部或一部分或轻链可变域全部或一部分的抗体片段。在某些实施方案中，单域抗体是人单域抗体(Domantis,Inc.,Waltham,MA；参见例如美国专利第6,248,516B1号)。
抗体片段可通过各种技术制得，包括(但不限于)蛋白分解消化完整抗体以及通过重组宿主细胞(例如大肠杆菌(E.coli)或噬菌体)产生，如本文所描述。
3.嵌合和人源化抗体
在某些实施方案中，本文所提供的抗体是嵌合抗体。某些嵌合抗体描述于例如美国专利第4,816,567号；和Morrison等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,81:6851-6855(1984))中。在一个实例中，嵌合抗体包含非人可变区(例如，来源于小鼠、大鼠、仓鼠、兔或非人灵长类动物(诸如猴)的可变区)和人恒定区。在另一实例中，嵌合抗体是“类别转换”抗体，其中类别或子类别已从亲本抗体的类别或子类别改变。嵌合抗体包括其抗原结合片段。
在某些实施方案中，嵌合抗体是人源化抗体。通常，对非人抗体进行人源化以降低对人的免疫原性，同时保留亲本非人抗体的特异性和亲和力。一般来说，人源化抗体包含一或多个可变域，其中HVR，例如CDR(或其部分)来源于非人抗体，并且FR(或其部分)来源于人抗体序列。人源化抗体任选地还包含人恒定区的至少一部分。在一些实施方案中，人源化抗体中的一些FR残基经来自非人抗体(例如，HVR残基所来源的抗体)的相应残基取代以例如恢复或提高抗体特异性或亲和力。
人源化抗体和制造其的方法综述于例如Almagro和Fransson,Front.Biosci.13:1619-1633(2008)中，并且进一步描述于例如Riechmann等,Nature 332:323-329(1988)；Queen等,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 86:10029-10033(1989)；美国专利第5,821,337号、第7,527,791号、第6,982,321号和第7,087,409号；Kashmiri等,Methods 36:25-34(2005)(描述特异性决定区(SDR)移植)；Padlan,Mol.Immunol.28:489-498(1991)(描述“表面再塑”)；Dall'Acqua等,Methods 36:43-60(2005)(描述“FR改组”)；和Osbourn等,Methods 36:61-68(2005)和Klimka等,Br.J.Cancer,83:252-260(2000)(描述FR改组的“导引选择”方法)中。
可用于人源化的人构架区包括(但不限于)：使用“最优选拟合(best-fit)”法选择的构架区(参见例如Sims等,J.Immunol.151:2296(1993))；来源于具有轻链或重链可变区特定子组的人抗体的共同序列的构架区(参见例如Carter等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,89:4285(1992)；和Presta等,J.Immunol.,151:2623(1993))；人成熟(体细胞突变)构架区或人生殖是构架区(参见例如Almagro和Fransson,Front.Biosci.13:1619-1633(2008))；和来源于筛选FR文库的构架区(参见例如Baca等,J.Biol.Chem.272:10678-10684(1997)和Rosok等,J.Biol.Chem.271:22611-22618(1996))。
4.人抗体
在某些实施方案中，本文所提供的抗体是人抗体。可使用此项技术中已知的各种技术来产生人抗体。人抗体一般描述于van Dijk和van de Winkel,Curr.Opin.Pharmacol.5:368-74(2001)和Lonberg,Curr.Opin.Immunol.20:450-459(2008)中。
人抗体可通过向已经改造以响应于抗原攻击而产生完整人抗体或具有人可变区的完整抗体的转殖基因动物施用免疫原来制备。此类动物通常含有人免疫球蛋白基因座的全部或一部分，其置换内源性免疫球蛋白基因座，或存在于染色体外或随机整合至动物染色体中。在此类转殖基因小鼠中，内源性免疫球蛋白基因座一般已失活。关于从转殖基因动物获得人抗体的方法的综述，参见Lonberg,Nat.Biotech.23:1117-1125(2005)。还参见例如描述XENOMOUSETM技术的美国专利第6,075,181号和第6,150,584号；描述技术的美国专利第5,770,429号；描述K-/>技术的美国专利第7,041,870号；和描述/>技术的美国专利申请公开案第US 2007/0061900号。由此类动物产生的完整抗体的人可变区可进一步加以修饰，例如通过与不同人恒定区组合。
人抗体还可通过基于融合瘤的方法制得。已描述用于产生人单克隆抗体的人骨髓瘤和小鼠-人杂骨髓瘤细胞系。(参见例如Kozbor J.Immunol.,133:3001(1984)；Brodeur等,Monoclonal Antibody Production Techniques and Applications,第51-63页(Marcel Dekker,Inc.,New York,1987)；和Boerner等,J.Immunol.,147:86(1991)。)通过人B细胞融合瘤技术产生的人抗体还描述于Li等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,103:3557-3562(2006)中。其它方法包括例如美国专利第7,189,826号(描述从融合瘤细胞系产生单克隆人IgM抗体)和Ni,Xiandai Mianyixue,26(4):265-268(2006)(描述人-人融合瘤)中所描述的那些方法。人融合瘤技术(三源融合瘤技术(Trioma technology))还描述于Vollmers和Brandlein,Histology and Histopathology,20(3):927-937(2005)和Vollmers和Brandlein,Methods and Findings in Experimental and Clinical Pharmacology,27(3):185-91(2005)中。
人抗体还可通过分离选自人源噬菌体呈现文库的Fv克隆可变域序列产生。此类可变域序列可随后与所需人恒定域组合。下文描述用于从抗体文库选择人抗体的技术。
5.文库源抗体
本发明的抗体可通过针对具有所需活性的抗体筛选组合文库来分离。举例来说，此项技术中已知多种方法用于产生噬菌体呈现文库和针对具有所需结合特征的抗体筛选此类文库。此类方法综述于例如Hoogenboom等Methods in Molecular Biology 178:1-37(O'Brien等编,Human Press,Totowa,NJ,2001)中，并且进一步描述于例如McCafferty等,Nature 348:552-554；Clackson等,Nature 352:624-628(1991)；Marks等,J.Mol.Biol.222:581-597(1992)；Marks和Bradbury,Methods in Molecular Biology248:161-175(Lo编,Human Press,Totowa,NJ,2003)；Sidhu等,J.Mol.Biol.338(2):299-310(2004)；Lee等,J.Mol.Biol.340(5):1073-1093(2004)；Fellouse,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 101(34):12467-12472(2004)；和Lee等,J.Immunol.Methods284(1-2):119-132(2004)中。
在某些噬菌体呈现方法中，VH和VL基因的谱系分别通过聚合酶链反应(PCR)克隆且在噬菌体文库中随机重组，随后可如Winter等,Ann.Rev.Immunol.12:433-455(1994)中所描述，针对抗原结合噬菌体进行筛选。噬菌体通常以单链Fv(scFv)片段或Fab片段形式呈现抗体片段。来自免疫来源的文库提供抗免疫原的高亲和力抗体而无需构建融合瘤。或者，可克隆原始谱系(例如来自人)以提供针对广泛范围的非自体抗原以及自体抗原的单一抗体来源而无需任何免疫接种，如Griffiths等,EMBO J,12:725-734(1993)所描述。最终，原始文库还可以合成方式通过从干细胞克隆未经重排的V基因区段，并且使用含有随机序列以编码高度可变CDR3区和实现活体外重排的PCR引物来制得，如由Hoogenboom和Winter,J.Mol.Biol.,227:381-388(1992)所描述。描述人抗体噬菌体文库的专利公开案包括例如：美国专利第5,750,373号和美国专利公开案第2005/0079574号、第2005/0119455号、第2005/0266000号、第2007/0117126号、第2007/0160598号、第2007/0237764号、第2007/0292936号和第2009/0002360号。
从人抗体文库分离的抗体或抗体片段在本文中视为人抗体或人抗体片段。
6.多特异性抗体
在某些实施方案中，本文所提供的抗体是多特异性抗体，例如双特异性抗体。多特异性抗体是对至少两个不同位点具有结合特异性的单克隆抗体。在某些实施方案中，结合特异性中的一者是针对Tau且另一者是针对任何其它抗原。在某些实施方案中，结合特异性中的一者是针对Tau且另一者是针对淀粉样蛋白β。在某些实施方案中，双特异性抗体可结合Tau的两个不同表位。双特异性抗体还可用于使细胞毒性剂定位于表达Tau的细胞上。双特异性抗体可以全长抗体或抗体片段形式制备。
用于制造多特异性抗体的技术包括(但不限于)重组共表达具有不同特异性的两个免疫球蛋白重链-轻链对(参见Milstein和Cuello,Nature 305:537(1983))，WO 93/08829，和Traunecker等,EMBO J.10:3655(1991))，和“杵-臼(knob-in-hole)”工程改造(参见例如美国专利第5,731,168号)。多特异性抗体还可通过如下制造：用于制备抗体Fc-杂二聚分子的工程化静电导向效应(WO 2009/089004A1)；使两种或两种以上抗体或片段交联(参见例如美国专利第4,676,980号和Brennan等,Science,229:81(1985))；使用亮氨酸拉链产生双特异性抗体(参见例如Kostelny等,J.Immunol.,148(5):1547-1553(1992))；使用用于制造双特异性抗体片段的“双功能抗体”技术(参见例如Hollinger等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA,90:6444-6448(1993))；和使用单链Fv(sFv)二聚体(参见例如Gruber等,J.Immunol.,152:5368(1994))；和如例如Tutt等,J.Immunol.147:60(1991)中所描述制备三特异性抗体。
本文中还包括具有三个或三个以上功能性抗原结合位点的经工程改造的抗体，包括“章鱼抗体(Octopus antibodies)”(参见例如US 2006/0025576A1)。
本文的抗体或片段还包括“双效FAb”或“DAF”，其包含结合Tau以及另一个不同抗原的抗原结合位点(参见例如US 2008/0069820)。
7.抗体变体
在某些实施方案中，涵盖本文所提供的抗体的氨基酸序列变体。举例来说，可能需要改良抗体的结合亲和力和/或其它生物特性。抗体的氨基酸序列变体可通过将适当修饰引入至编码所述抗体的核苷酸序列中或通过肽合成来制备。此类修饰包括例如在抗体的氨基酸序列内的残基的缺失和/或插入和/或取代。可进行缺失、插入和取代的任何组合以获得最终构建体，其限制条件为最终构建体具有所需特征，例如抗原结合。
a)取代、插入和缺失变体
在某些实施方案中，提供具有一或多个氨基酸取代的抗体变体。用于取代型突变诱发的所关注位点包括HVR和FR。保守性取代展示于表1中“优选取代”标题下。更实质性变化提供于表1中标题“例示性取代”下，并且如下文参考氨基酸侧链类别进一步描述。氨基酸取代可引入至所关注抗体中，并且针对如下所需活性筛选产物：例如保留/改良的抗原结合、降低的免疫原性或改良的ADCC或CDC。
表1
氨基酸可根据共有侧链特性进行分组：
(1)疏水性：正亮氨酸、Met、Ala、Val、Leu、Ile；
(2)中性亲水性：Cys、Ser、Thr、Asn、Gln；
(3)酸性：Asp、Glu；
(4)碱性：His、Lys、Arg；
(5)影响链取向的残基：Gly、Pro；
(6)芳族：Trp、Tyr、Phe。
非保守性取代将必然伴有将这些类别中的一者的成员换成另一个类别。
一种类型的取代型变体涉及取代亲本抗体(例如人源化抗体或人抗体)的一或多个高变区残基。一般来说，选择用于进一步研究的所得变体相对于亲本抗体将在某些生物特性方面具有修饰(例如改良)(例如亲和力提高、免疫原性降低)和/或将基本上保留亲本抗体的某些生物特性。一种例示性取代型变体为亲和力成熟抗体，其可例如使用基于噬菌体呈现的亲和力成熟技术(诸如本文所描述的那些技术)便利地产生。简单地说，使一或多个HVR残基突变，并且在噬菌体上呈现变异抗体且针对特定生物活性(例如结合亲和力)进行筛选。
改变(例如取代)可在HVR中进行以例如改良抗体亲和力。此类改变可在HVR“热点”(也就是由在体细胞成熟过程期间经历高频率突变的密码子所编码的残基(参见例如Chowdhury,Methods Mol.Biol.207:179-196(2008))，和/或接触抗原的残基)中进行，其中测试所得变体VH或VL的结合亲和力。通过构建二级文库和从二级文库再选择来实现亲和力成熟已描述于Hoogenboom等Methods in Molecular Biology 178:1-37(O'Brien等编,Human Press,Totowa,NJ,(2001))。在亲和力成熟的一些实施方案中，通过多种方法(例如易错PCR、链改组或寡核苷酸引导的突变诱发)中的任一者将多样性引入至所选用于成熟的可变基因中。随后产生二级文库。随后筛选所述文库以鉴别具有所需亲和力的任何抗体变体。另一种引入多样性的方法涉及HVR引导方法，其中将若干HVR残基(例如，一次4-6个残基)随机分组。可特异性地鉴别抗原结合所涉及的HVR残基，例如使用丙氨酸扫描突变诱发或模型化来鉴别。特定来说，常常靶向CDR-H3和CDR-L3。
在某些实施方案中，取代、插入或缺失可发生在一或多个HVR内，只要此类改变不大体上降低抗体结合抗原的能力即可。举例来说，可在HVR中进行不大体上降低结合亲和力的保守性改变(例如，如本文所提供的保守性取代)。此类改变可例如在HVR中接触抗原的残基之外侧。在上文所提供的变体VH和VL序列的某些实施方案中，各HVR未改变或含有不超过一个、二个或三个氨基酸取代。
一种适用于鉴别突变诱发可靶向的抗体残基或区的方法称为“丙氨酸扫描突变诱发”，如Cunningham和Wells(1989)Science,244:1081-1085所描述。在此方法中，鉴别靶标残基的残基或群(例如带电残基，诸如arg、asp、his、lys和glu)且经中性或带负电氨基酸(例如丙氨酸或聚丙氨酸)置换以确定抗体与抗原的相互作用是否受影响。可在对初始取代展现功能敏感性的氨基酸位置处引入其它取代。或者或另外，利用抗原-抗体复合物的晶体结构来鉴别抗体与抗原之间的接触点。此类接触残基和邻近残基可作为取代候选物的靶标或排除在取代候选物之外。可筛选变体以确定其是否含有所需特性。
氨基酸序列插入包括长度介于一个残基至含有一百个或一百个以上残基的多肽范围内的氨基端和/或羧基端融合体，以及单个或多个氨基酸残基的序列内插入。末端插入的实例包括具有N端甲硫胺酰基残基的抗体。抗体分子的其它插入型变体包括抗体的N端或C端与酶(例如对于ADEPT来说)或延长抗体的血清半衰期的多肽的融合体。
b)糖基化变体
在某些实施方案中，对本文所提供的抗体进行改变以增加或降低抗体糖基化的程度。向抗体中添加糖基化位点或使抗体缺失糖基化位点可通过改变氨基酸序列以便产生或移除一或多个糖基化位点来便利地实现。
在抗体包含Fc区的情况下，可改变连接于其上的碳水化合物。由哺乳动物细胞产生的原生抗体通常包含分支链双触角寡糖，其一般通过N键连接于Fc区的CH2域的Asn297上。参见例如Wright等TIBTECH 15:26-32(1997)。寡糖可包括各种碳水化合物，例如甘露糖、N-乙酰基葡糖胺(GlcNAc)、半乳糖和唾液酸，以及连接于双触角寡糖结构的“主干”中的GlcNAc上的海藻糖。在一些实施方案中，可对本发明的抗体中的寡糖进行修饰以便产生具有某些改良的特性的抗体变体。
在一些实施方案中，提供具有缺乏连接(直接或间接)于Fc区上的海藻糖的碳水化合物结构的抗体变体。举例来说，此类抗体中的海藻糖的量可为1％至80％、1％至65％、5％至65％或20％至40％。海藻糖的量通过计算糖链内Asn297处的海藻糖相对于如通过MALDI-TOF质谱分析所测量的连接于Asn 297上的所有糖结构(例如复合、杂交和高甘露糖结构)的总和的平均量来确定，如例如WO 2008/077546中所描述。Asn297是指位于Fc区中约位置297处的天冬酰胺残基(Fc区残基的Eu编号)；然而，归因于抗体中微小序列变化，Asn297还可位于位置297的上游或下游约±3个氨基酸处，也就是位于位置294与300之间。此类海藻糖基化变体可具有改良的ADCC功能。参见例如美国专利公开案第US 2003/0157108号(Presta,L.)；第US 2004/0093621号(Kyowa Hakko Kogyo Co.,Ltd)。关于“脱海藻糖基化”或“缺乏海藻糖”抗体变体的公开案的实例包括：US 2003/0157108；WO 2000/61739；WO 2001/29246；US 2003/0115614；US 2002/0164328；US 2004/0093621；US 2004/0132140；US2004/0110704；US 2004/0110282；US 2004/0109865；WO 2003/085119；WO 2003/084570；WO2005/035586；WO 2005/035778；WO2005/053742；WO2002/031140；Okazaki等J.Mol.Biol.336:1239-1249(2004)；Yamane-Ohnuki等Biotech.Bioeng.87:614(2004)。能够产生脱海藻糖基化抗体的细胞系的实例包括缺乏蛋白质海藻糖基化的Lec13 CHO细胞(Ripka等,Arch.Biochem.Biophys.249:533-545(1986)；美国专利申请第US 2003/0157108A1号，Presta,L；和WO 2004/056312A1，Adams等，尤其实施例11)，和基因剔除细胞系，诸如α-1,6-海藻糖基转移酶基因(FUT8)基因剔除CHO细胞(参见例如Yamane-Ohnuki等,Biotech.Bioeng.87:614(2004)；Kanda,Y.等,Biotechnol.Bioeng.,94(4):680-688(2006)；和WO2003/085107)。
抗体变体进一步具有平分寡糖，例如其中连接于抗体的Fc区上的双触角寡糖通过GlcNAc平分。此类抗体变体可具有减少的海藻糖基化和/或改良的ADCC功能。此类抗体变体的实例描述于例如WO 2003/011878(Jean-Mairet等)；美国专利第6,602,684号(Umana等)；和US 2005/0123546(Umana等)。还提供寡糖中的至少一个半乳糖残基连接于Fc区上的抗体变体。此类抗体变体可具有改良的CDC功能。此类抗体变体描述于例如WO 1997/30087(Patel等)；WO1998/58964(Raju,S.)；和WO 1999/22764(Raju,S.)中。
c)Fc区变体
在某些实施方案中，可将一或多个氨基酸修饰引入至本文所提供的抗体的Fc区中，从而产生Fc区变体。Fc区变体可包含人Fc区序列(例如人IgG1、IgG2、IgG3或IgG4 Fc区)，其在一或多个氨基酸位置处包含氨基酸修饰(例如取代)。
在某些实施方案中，本发明涵盖具有一些而非所有效应功能的抗体变体，此使得所述抗体成为对于其中活体内抗体半衰期至关重要，而某些效应功能(诸如补体和ADCC)为不必要或有害的应用合乎需要的候选物。可进行活体外和/或活体内细胞毒性测定以确认CDC和/或ADCC活性的降低/消耗。举例来说，可进行Fc受体(FcR)结合测定以确保抗体缺乏FcγR结合(因此可能缺乏ADCC活性)，但保留FcRn结合能力。用于介导ADCC的原代细胞NK细胞仅表达FcγRIII，而单核细胞表达FcγRI、FcγRII和FcγRIII。FcR在造血细胞上的表达概述于Ravetch和Kinet,Annu.Rev.Immunol.9:457-492(1991)的第464页的表3中。用以评估所关注分子的ADCC活性的活体外测定的非限制性实例描述于美国专利第5,500,362号(参见例如Hellstrom,I.等Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 83:7059-7063(1986))和Hellstrom,I等,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 82:1499-1502(1985)；第5,821,337号(参见Bruggemann,M.等,J.Exp.Med.166:1351-1361(1987))中。或者，可采用非放射性测定方法(参见例如流动式细胞测量术的ACTITM非放射性细胞毒性测定(CellTechnology,Inc.Mountain View,CA)；和CytoTox非放射性细胞毒性测定(Promega,Madison,WI))。适用于此类测定的效应细胞包括周边血液单核细胞(PBMC)和天然杀手(NK)细胞。或者或另外，可活体内评估所关注分子的ADCC活性，例如在动物模型中，诸如Clynes等Proc.Nat'lAcad.Sci.USA 95:652-656(1998)中所揭示的动物模型。还可进行C1q结合测定以确认抗体不能结合C1q且因此缺乏CDC活性。参见例如WO 2006/029879和WO 2005/100402中的C1q和C3c结合ELISA。为了评估补体活化，可进行CDC测定(参见例如Gazzano-Santoro等,J.Immunol.Methods 202:163(1996)；Cragg,M.S.等,Blood 101:1045-1052(2003)；和Cragg,M.S.和M.J.Glennie,Blood 103:2738-2743(2004))。还可使用此项技术中已知的方法(参见例如Petkova,S.B.等,Int’l.Immunol.18(12):1759-1769(2006))进行FcRn结合和活体内清除率/半衰期测定。
效应功能减小的抗体包括具有Fc区残基238、265、269、270、297、327和329中的一或多者的取代的那些抗体(美国专利第6,737,056号)。此类Fc突变体包括具有氨基酸位置265、269、270、297和327中的两者或两者以上的取代的Fc突变体，包括残基265和297取代为丙氨酸的所谓“DANA”Fc突变体(美国专利第7,332,581号)。
描述具有改良或减弱的与FcR的结合的某些抗体变体。(参见例如美国专利第6,737,056号；WO 2004/056312和Shields等,J.Biol.Chem.9(2):6591-6604(2001))。
在某些实施方案中，抗体变体包含具有一或多个改良ADCC的氨基酸取代，例如Fc区的位置298、333和/或334处(残基的EU编号)的取代的Fc区。
在一些实施方案中，在Fc区中进行改变，引起C1q结合和/或补体依赖性细胞毒性(CDC)改变(也就是改良或减弱)，例如，如美国专利第6,194,551号、WO 99/51642和Idusogie等J.Immunol.164:4178-4184(2000)中所描述。
半衰期延长且与负责将母体IgG转移至胎儿的新生儿Fc受体(FcRn)(Guyer等,J.Immunol.117:587(1976)和Kim等,J.Immunol.24:249(1994))的结合改良的抗体描述于US 2005/0014934A1(Hinton等)中。那些抗体包含其中具有一或多个取代的Fc区，所述取代改良Fc区与FcRn的结合。此类Fc变体包括在以下Fc区残基中的一或多者处具有取代的那些变体：238、256、265、272、286、303、305、307、311、312、317、340、356、360、362、376、378、380、382、413、424或434，例如Fc区残基434的取代(美国专利第7,371,826号)。
关于Fc区变体的其它实例，还参见Duncan和Winter,Nature322:738-40(1988)；美国专利第5,648,260号；美国专利第5,624,821号；和WO 94/29351。
d)经半胱氨酸工程改造的抗体变体
在某些实施方案中，可能需要产生经半胱氨酸工程改造的抗体，例如“thioMAb”，其中抗体的一或多个残基被半胱氨酸残基取代。在特定实施方案中，被取代的残基存在于抗体的可达位点处。通过用半胱氨酸取代那些残基，反应性硫醇基从而定位于抗体的可达位点处且可用于使抗体与其它部分(诸如药物部分或连接体-药物部分)缀合以产生如本文中进一步描述的免疫缀合物。在某些实施方案中，以下残基中的任一或多者可经半胱氨酸取代：轻链的V205(Kabat编号)；重链的A118(EU编号)；和重链Fc区的S400(EU编号)。可如例如美国专利第7,521,541号中所描述产生经半胱氨酸工程改造的抗体。
e)抗体衍生物
在某些实施方案中，可对本文中所提供的抗体进行进一步修饰以含有此项技术中已知且可易于获得的额外非蛋白质部分。适合于抗体衍生作用的部分包括(但不限于)水可溶聚合物。水可溶聚合物的非限制性实例包括(但不限于)聚乙二醇(PEG)、乙二醇/丙二醇共聚物、羧甲基纤维素、葡聚糖、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚-1,3-二氧杂环戊烷、聚-1,3,6-三噁烷、乙烯/顺丁烯二酸酐共聚物、聚氨基酸(均聚物或无规共聚物)和葡聚糖或聚(n-乙烯吡咯烷酮)聚乙二醇、聚丙二醇均聚物、聚氧化丙烯/氧化乙烯共聚物、聚氧乙烯多元醇(例如，甘油)、聚乙烯醇和它们的混合物。聚乙二醇丙醛因其于水中的稳定性而可在制造中具有优势。聚合物可具有任何分子量，并且可为分支或未分支的。连接于抗体上的聚合物的数目可变化，并且如果连接一个以上聚合物，那么其可为相同或不同分子。一般来说，用于衍生作用的聚合物的数目和/或类型可基于包括(但不限于)待改良抗体的特殊特性或功能，抗体衍生物是否将用于指定条件下的疗法等考虑因素来确定。
在另一个实施方案中，提供抗体与可通过暴露于辐射中而选择性地加热的非蛋白质部分的缀合物。在一些实施方案中，非蛋白质部分为碳纳米管(Kam等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 102:11600-11605(2005))。辐射可具有任何波长，并且包括(但不限于)不损害普通细胞但将非蛋白质部分加热至杀死抗体-非蛋白质部分近侧的细胞的温度的波长。
B.重组方法和组合物
可使用例如如美国专利第4,816,567号中所描述的重组方法和组合物产生抗体。在一些实施方案中，提供一种编码本文所描述的抗Tau抗体的分离的核酸。此类核酸可编码包含抗体的VL的氨基酸序列和/或包含抗体的VH的氨基酸序列(例如抗体的轻链和/或重链)。在另一个实施方案中，提供一或多种包含此类核酸的载体(例如表达载体)。在另一个实施方案中，提供包含此类核酸的宿主细胞。在一个此类实施方案中，宿主细胞包含(例如已经以下转型)：(1)包含编码包含抗体VL的氨基酸序列和包含抗体VH的氨基酸序列的核酸的载体；或(2)包含编码包含抗体VL的氨基酸序列的核酸的第一载体和包含编码包含抗体VH的氨基酸序列的核酸的第二载体。在一些实施方案中，宿主细胞是真核细胞，例如中国仓鼠卵巢(CHO)细胞或淋巴细胞(例如Y0、NS0、Sp20细胞)。在一些实施方案中，提供一种制造抗Tau抗体的方法，其中所述方法包括在适合于表达抗体的条件下培养如上文所提供的包含编码所述抗体的核酸的宿主细胞，和任选地从所述宿主细胞(或宿主细胞培养基)回收所述抗体。
对于抗Tau抗体的重组产生，分离编码例如如上文所描述的抗体的核酸，并且将其插入至一或多种载体中以用于在宿主细胞中进一步克隆和/或表达。此类核酸可易于使用习知程序(例如，通过使用能够特异性地结合编码抗体重链和轻链的基因的寡核苷酸探针)分离和定序。
适合用于克隆或表达编码抗体的载体的宿主细胞包括本文所描述的原核或真核细胞。举例来说，抗体可于细菌中产生，在不需要糖基化和Fc效应功能时尤其如此。关于抗体片段和多肽在细菌中的表达，参见例如美国专利第5,648,237号、第5,789,199号和第5,840,523号。(还参见Charlton,Methods in Molecular Biology,第248卷(B.K.C.Lo编,Humana Press,Totowa,NJ,2003),第245-254页，其描述抗体片段在大肠杆菌中的表达。)在表达之后，可以可溶性级分从细菌细胞糊状物分离抗体且其可进一步经纯化。
除原核生物外，诸如丝状真菌或酵母的真核微生物是适合用于编码抗体的载体的克隆或表达宿主，包括糖基化路径已经“人源化”，从而使得所产生的抗体具有部分或完全人糖基化型态的真菌和酵母菌株。参见Gerngross,Nat.Biotech.22:1409-1414(2004)和Li等,Nat.Biotech.24:210-215(2006)。
适合用于表达糖基化抗体的宿主细胞还来源于多细胞生物体(无脊椎动物和脊椎动物)。无脊椎动物细胞的实例包括植物和昆虫细胞。已鉴别出众多可与昆虫细胞联合使用、尤其用于转染草地粘虫(Spodoptera frugiperda)细胞的杆状病毒株。
植物细胞培养物还可用作宿主。参见例如美国专利第5,959,177号、第6,040,498号、第6,420,548号、第7,125,978号和第6,417,429号(描述用于在转殖基因植物中产生抗体的PLANTIBODIESTM技术)。
脊椎动物细胞还可用作宿主。举例来说，适于在悬浮液中生长的哺乳动物细胞系可为适用的。适用哺乳动物宿主细胞系的其它实例是经SV40(COS-7)转型的猴肾CV1细胞系；人胚肾细胞系(如例如在Graham等,J.Gen Virol.36:59(1977)中所描述的293或293细胞)；幼仓鼠肾细胞(BHK)；小鼠塞特利氏细胞(mouse sertoli cell)(如例如在Mather,Biol.Reprod.23:243-251(1980)中所描述的TM4细胞)；猴肾细胞(CV1)；非洲绿猴肾细胞(VERO-76)；人子宫颈癌细胞(HELA)；犬肾细胞(MDCK)；布法罗大鼠肝细胞(buffalo ratliver cell)(BRL 3A)；人肺细胞(W138)；人肝细胞(Hep G2)；小鼠乳腺肿瘤(MMT 060562)；如例如在Mather等,Annals N.Y.Acad.Sci.383:44-68(1982)中所描述的TRI细胞；MRC 5细胞；和FS4细胞。其它适用哺乳动物宿主细胞系包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞，包括DHFR-CHO细胞(Urlaub等,Proc.Natl.Acad.Sci.USA 77:4216(1980))；和骨髓瘤细胞系，诸如Y0、NS0和Sp2/0。关于适合于产生抗体的某些哺乳动物宿主细胞系的综述，参见例如Yazaki和Wu,Methods in Molecular Biology,第248卷(B.K.C.Lo编,Humana Press,Totowa,NJ),第255-268页(2003)。
C.测定
可通过此项技术中已知的各种测定对本文所提供的抗Tau抗体针对其物理/化学特性和/或生物活性进行鉴别、筛选或表征。
1.结合测定和其它测定
在一个方面中，例如通过已知方法，诸如ELISA、蛋白质印迹法等测试本发明的抗体的抗原结合活性。
在另一方面中，可使用竞争测定来鉴别与本文所描述的抗体竞争结合Tau的抗体。在某些实施方案中，此类竞争抗体结合与15C6-A7、63H3-D8、64B9-F12、123E9-A1、7A11C12、231G3F10、30A1C9、211G6-B6、77D1-D2、71H8-D6、307H3E8、63H3-D8、64B9-F12、72E12-H9、30D12-B5、49G10-F4和65B1-A2所结合相同的表位(例如线性或组态表位)。在一些实施方案中，抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-51内的表位但不与抗体hu37D3-H9.v28.A4竞争。在一些实施方案中，抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位但不与抗体hu37D3-H9.v28.A4竞争。用于对抗体所结合的表位进行定位的详细例示性方法提供于Morris(1996)“Epitope Mapping Protocols”,于Methods inMolecular Biology第66卷(Humana Press,Totowa,NJ)中。
在例示性竞争测定中，在包含结合Tau的第一标记抗体(例如本文所描述的任何抗体，诸如hu37D3-H9.v28.A4)和正测试与所述第一抗体竞争结合Tau的能力的第二未标记抗体的溶液中孵育固定化Tau(诸如单体Tau)。第二抗体可存在于融合瘤上清液中。作为对照组，在包含第一标记抗体但无第二未标记抗体的溶液中孵育固定化Tau。在允许第一抗体结合Tau的条件下孵育之后，移除过量未结合抗体，并且测量与固定化Tau缔合的标记的量。如果测试样本中与固定化Tau缔合的标记的量相对于对照样本中大体上减少，那么其指示第二抗体与第一抗体竞争结合Tau。参见Harlow和Lane(1988)Antibodies:A LaboratoryManual第14章(Cold Spring Harbor Laboratory,Cold Spring Harbor,NY)。
2.活性测定
在一个方面中，提供用于鉴别具有生物活性的抗Tau(例如泛Tau)抗体的测定。生物活性可包括例如此类抗体与多种形式的Tau(例如单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau)的结合和降低Tau蛋白(例如，大脑中，例如大脑皮质和/或海马区中的总Tau、总可溶性Tau、可溶性非磷酸化Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶非磷酸化Tau、不可溶磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平。还提供在活体内和/或活体外具有此类生物活性的抗体。
在某些实施方案中，测试本发明的抗体的此类生物活性。举例来说，tau蛋白病的动物模型，诸如Tau转殖基因小鼠(例如P301L)可用于检测抗Tau抗体与大脑切片的结合，和例如与转殖基因小鼠大脑中神经原纤维缠结的结合。此外，tau蛋白病的动物模型，诸如Tau转殖基因小鼠(例如P301L)可用抗Tau抗体进行处理，并且此项技术中已知实验技术可用于评估此类治疗是否降低小鼠大脑中(例如大脑皮质和/或海马区中)Tau蛋白(例如总Tau、总可溶性Tau、可溶性磷酸化Tau、可溶性非磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、不可溶非磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平。
D.免疫缀合物
本发明还提供包含本文的抗Tau抗体与一或多种其它治疗剂或放射性同位素缀合的免疫缀合物。
在另一个实施方案中，免疫缀合物包含与放射性原子缀合以形成放射性缀合物的如本文所描述的抗体。多种放射性同位素可供用于产生放射性缀合物。实例包括At211、I131、I125、Y90、Re186、Re188、Sm153、Bi212、P32、Pb212和Lu的放射性同位素。当放射性缀合物用于检测时，其可包含用于闪烁摄影研究的放射性原子，例如tc99m或I123；或用于核磁共振(NMR)成像(还称为磁共振成像，mri)的自旋标记，例如碘-123、碘-131、铟-111、氟-19、碳-13、氮-15、氧-17、钆、锰或铁。
可使用多种双官能蛋白质偶合剂制得抗体的缀合物，所述双官能蛋白质偶合剂为诸如N-丁二酰亚胺基-3-(2-吡啶基二硫基)丙酸酯(SPDP)、丁二酰亚胺基-4-(N-顺丁烯二酰亚胺基甲基)环己烷-1-甲酸酯(SMCC)、亚胺基硫杂环戊烷(IT)、酰亚胺酯的双官能衍生物(诸如二亚胺代己二酸二甲酯盐酸盐)、活性酯(诸如二丁二酰亚胺基辛二酸酯)、醛(诸如戊二醛)、双叠氮基化合物(诸如双(对叠氮基苯甲酰基)己二胺)、双重氮衍生物(诸如双(对重氮苯甲酰基)-乙二胺)、二异氰酸酯(诸如甲苯2,6-二异氰酸酯)和双活性氟化合物(诸如1,5-二氟-2,4-二硝基苯)。举例来说，蓖麻毒素免疫毒素可如Vitetta等,Science 238:1098(1987)中所描述来制备。碳14标记的1-异硫氰基苯甲基-3-甲基二伸乙三胺五乙酸(MX-DTPA)是用于使放射性核苷酸与抗体缀合的例示性螯合剂。参见WO94/11026。连接体可为促进细胞毒性药物在细胞中释放的“可裂解连接体”。举例来说，可使用酸不稳定连接体、肽酶敏感性连接体、光不稳定连接体、二甲基连接体或含有二硫键的连接体(Chari等,Cancer Res.52:127-131(1992)；美国专利第5,208,020号)。
本文的免疫缀合物或ADC明确涵盖(但不限于)用交联试剂制备的此类缀合物，所述交联试剂包括(但不限于)BMPS、EMCS、GMBS、HBVS、LC-SMCC、MBS、MPBH、SBAP、SIA、SIAB、SMCC、SMPB、SMPH、磺基-EMCS、磺基-GMBS、磺基-KMUS、磺基-MBS、磺基-SIAB、磺基-SMCC和磺基-SMPB，和SVSB(丁二酰亚胺基-(4-乙烯基砜)苯甲酸酯)，所述交联试剂可商购(例如购自Pierce Biotechnology,Inc.,Rockford,IL.,U.S.A)。
E.用于诊断和检测的方法和组合物
在某些实施方案中，本文所提供的抗Tau抗体中的任一者适用于检测Tau在生物样本中的存在。如本文所用的术语“检测”涵盖定量或定性检测。在某些实施方案中，生物样本包含细胞或组织，诸如脑脊髓液、大脑细胞组织(例如大脑皮质或海马区)或血液。在一些实施方案中，生物样本是脑脊髓液。
在一些实施方案中，提供一种用于诊断或检测方法中的抗Tau抗体。在另一方面中，提供一种检测Tau在生物样本中的存在的方法。在某些实施方案中，所述方法包括使生物样本与如本文所描述的抗Tau抗体在允许抗Tau抗体结合Tau的条件下接触，和检测在抗Tau抗体与Tau之间是否形成复合物。此类方法可为活体外或活体内方法。此外，可将形成于抗Tau抗体与测试生物样本中的Tau之间的复合物与形成于对照生物样本(例如来自一或多个健康受试者的生物样本)中的复合物相比较。还可对形成于抗Tau抗体与测试生物样本中的Tau之间的复合物的量进行量化，并且将其与形成于对照生物样本(例如来自一或多个健康受试者的生物样本)中的复合物的量或与已知形成于健康受试者中的复合物的平均量相比较。
在一些实施方案中，使用抗Tau抗体来选择适于用抗Tau抗体治疗的受试者，例如其中Tau是用于患者选择的生物标记物。举例来说，在一些实施方案中，抗Tau(例如泛Tau)抗体用于检测受试者是否具有Tau蛋白疾病或病症，或受试者是否具有患Tau蛋白疾病或病症的高风险(或倾向)。
可使用本发明的抗体诊断的例示性疾病或病症包括Tau蛋白相关疾病或病症，和由神经原纤维缠结或神经纤维网线的形成造成或与其相关联的疾病或病症。在一些实施方案中，可使用本发明的抗体诊断的疾病或病症包括在认知功能的障碍或丧失中显现出的Tau蛋白相关疾病或病症，所述认知功能包括推理、形势判断、记忆能力、学习和/或特殊导航。特定来说，可使用本发明的抗体诊断的疾病或病症包括tau蛋白病，诸如神经退化性tau蛋白病。可使用本发明的抗体诊断的例示性疾病或病症包括(但不限于)阿兹海默氏病、库-贾氏病、拳击员痴呆、唐氏综合症、格施谢三氏症、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，可使用本发明的抗体诊断的病症为阿兹海默氏病(AD)。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病选自PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病。
在某些实施方案中，提供标记的抗Tau抗体。标记包括(但不限于)直接检测的标记或部分(诸如荧光、发色、电子致密、化学发光和放射性标记)，以及例如通过酶反应或分子相互作用间接检测的部分(诸如酶或配体)。例示性标记包括(但不限于)放射性同位素32P、14C、125I、3H和131I；荧光团，诸如稀土螯合物或荧光素和其衍生物；如罗丹明(rhodamine)和其衍生物；丹酰基(dansyl)；伞酮；荧光素酶，例如荧火虫荧光素酶和细菌荧光素酶(美国专利第4,737,456号)；荧光素；2,3-二氢酞嗪二酮；辣根过氧化酶(HRP)；碱性磷酸酶；β-半乳糖苷酶；葡糖淀粉酶；溶菌酶；糖氧化酶，例如葡萄糖氧化酶、半乳糖氧化酶和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶；杂环氧化酶，诸如尿酸酶和黄嘌呤氧化酶，其与采用过氧化氢使染料前驱物氧化的酶(诸如HRP、乳过氧化酶或微过氧化酶)偶合；生物素/抗生物素蛋白；自旋标记；噬菌体标记；稳定自由基和其类似标记。
在一些情况下，归因于Tau蛋白质的广泛片段化，检测Tau中间结构域(例如氨基酸159-224)的诊断测定可能不准确反映Tau的N端区的丰度。因此，在一些实施方案中，检测来自受试者的样本中的Tau的方法包括用结合Tau的N端区的抗体检测Tau。可能需要此类抗体，例如以更准确地测定来自受试者的样本中的Tau的N端区的丰度。在一些实施方案中，与检测Tau的中间结构域的现有Tau诊断剂相比之下，使用结合Tau的N端区的抗Tau抗体可允许更准确预测哪些患者可能对用结合Tau的N端区的抗Tau抗体治疗有响应。在一些实施方案中，用于检测的抗Tau抗体不与用于治疗的治疗性抗Tau抗体竞争。在一些此类实施方案中，用于检测的抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。通过使用用于检测的非竞争性抗体，在一些实施方案中，可进行治疗性抗体的靶标接合的更准确测量。
咸信Tau的2N同种型的水平可预测(1)纤维性CNS Tau病变的丰度，和(2)认知损伤的进展速率。因此，在一些实施方案中，结合Tau的2N同种型的抗Tau抗体可适用于监测疾病的进展和/或监测治疗。
F.医药配制剂
如本文所描述的抗Tau抗体的医药配制剂通过将具有所需纯度的此类抗体与一或多种任选地选用的药学上可接受的载体、稀释剂和/或赋形剂以冻干配制剂或水溶液的形式混合来制备(Remington's Pharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.编(1980))。药学上可接受的载体、稀释剂和赋形剂在所采用的剂量和浓度下一般对接受者无毒，并且包括(但不限于)：无菌水；缓冲剂，诸如磷酸盐、柠檬酸盐和其它有机酸；抗氧化剂，包括抗坏血酸和甲硫氨酸；防腐剂(诸如氯化十八烷基二甲基苯甲基铵；氯化六羟季铵；苯扎氯铵；苄索氯铵；苯酚、丁醇或苯甲醇；对羟基苯甲酸烷基酯，诸如对羟基苯甲酸甲酯或丙酯；儿茶酚；间苯二酚；环己醇；3-戊醇；和间甲酚)；低分子量(小于约10个残基)多肽；蛋白质，诸如血清白蛋白、明胶或免疫球蛋白；亲水性聚合物，诸如聚乙烯吡咯烷酮；氨基酸，诸如甘氨酸、谷酰胺、天冬酰胺、组氨酸、精氨酸或赖氨酸；单糖、双糖和其它碳水化合物，包括葡萄糖、甘露糖或糊精；螯合剂，诸如EDTA；糖，诸如蔗糖、甘露糖醇、海藻糖或山梨糖醇；成盐相对离子，诸如钠；金属复合物(例如Zn-蛋白质复合物)；和/或非离子型表面活性剂，诸如聚乙二醇(PEG)。本文的例示性药学上可接受的载体进一步包括间质药物分散剂，诸如可溶性中性活性玻尿酸酶糖蛋白(sHASEGP)，例如人可溶性PH-20玻尿酸酶糖蛋白，诸如rHuPH20(Baxter International,Inc.)。某些例示性sHASEGP(包括rHuPH20)和使用方法描述于美国专利公开案第2005/0260186号和第2006/0104968号中。在一个方面中，sHASEGP与一或多种额外葡萄糖胺聚糖酶(诸如软骨素酶)组合。
例示性冻干抗体配制剂描述于美国专利第6,267,958号中。水性抗体配制剂包括美国专利第6,171,586号和WO2006/044908中所描述的那些水性抗体配制剂，WO2006/044908中所描述的配制剂包括组氨酸-乙酸盐缓冲液。
本文的配制剂还可含有一种以上为所治疗的特定适应症所必需的活性成分，优选为具有不会对彼此产生不利影响的互补活性的那些活性成分。此类活性成分适合地以对预期目的有效的量组合存在。
活性成分可截留于微胶囊中，例如通过凝聚技术或通过界面聚合法所制备的微胶囊，例如分别为羟甲基纤维素或明胶微胶囊和聚(甲基丙烯酸甲酯)微胶囊；截留于胶态药物递送系统(例如脂质体、白蛋白微球体、微乳液、纳米粒子和纳米胶囊)中或巨乳液中。此类技术揭示于Remington's Pharmaceutical Sciences第16版,Osol,A.编(1980)中。
可制备持续释放制剂。持续释放制剂的适合实例包括含有抗体的固体疏水性聚合物的半渗透基质，所述基质呈成形物品形式，例如膜或微胶囊。
用于活体内施用的配制剂一般为无菌的。无菌性可容易地通过例如通过无菌过滤膜过滤来实现。
G.治疗方法和组合物
本文所提供的抗Tau抗体中的任一者可用于治疗方法中。
在一个方面中，提供一种抗Tau抗体，其用作药剂。在其它方面中，提供一种抗Tau抗体，其用于治疗Tau蛋白相关疾病或病症。在一些实施方案中，提供一种抗Tau抗体，其用于治疗由神经原纤维缠结或神经纤维网线的形成造成或与其相关联的疾病或病症。在特定实施方案中，提供一种抗Tau抗体，其用于治疗tau蛋白病，诸如神经退化性tau蛋白病。可用抗tau抗体治疗的例示性Tau蛋白相关疾病或病症包括(但不限于)阿兹海默氏病、肌肉萎缩性侧索硬化、帕金森氏病、库-贾氏病、拳击员痴呆、唐氏综合症、格施谢三氏症、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，可用抗tau抗体治疗的Tau蛋白相关疾病或症包括PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病。在一些实施方案中，本文提供用于治疗阿兹海默氏病(AD)的抗Tau抗体。在一些实施方案中，本文提供用于治疗中度AD、轻度至中度AD、轻度AD、早期AD或前驱性AD的抗Tau抗体。此外，可用抗Tau抗体治疗的Tau蛋白相关疾病或病症包括在认知功能的障碍或丧失中显现出的疾病或病症，所述认知功能诸如推理、形势判断、记忆能力、学习和/或特殊导航。在某些实施方案中，提供一种用于治疗方法中的抗Tau抗体。在某些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于治疗患有上文所描述的Tau相关疾病或病症中的任一者的个体的方法中，所述方法包括向所述个体施用有效量的所述抗Tau抗体。在一个此类实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种例如如下文所描述的额外治疗剂。
在一些实施方案中，本发明的抗体用于治疗MMSE评分介于20与30之间、介于20与26之间、介于24与30之间、介于21与26之间、介于22与26之间、介于22与28之间、介于23与26之间、介于24与26之间或介于25与26之间的个体。在一些实施方案中，患者的MMSE评分介于22与26之间。如本文所用，介于两个数字之间的MMSE评分包括范围各端点处的数字。举例来说，介于22与26之间的MMSE评分包括22和26的MMSE评分。
在一些实施方案中，本发明的抗体用于治疗‘tau阳性’个体，例如具有Tau蛋白相关病症中典型的大脑tau沉积物的患者，例如具有阳性Tau PET扫描的患者。
在其它实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于降低个体中Tau蛋白(总Tau、总可溶性Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平。举例来说，此类降低可发生在大脑中(例如在大脑皮质和/或海马区中)。在一些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于降低磷酸化Tau的水平。在一些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于降低不可溶Tau(例如不可溶磷酸化Tau)的水平。在一些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于降低过磷酸化Tau的水平。在一些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于降低大脑组织中(例如大脑皮质和/或海马区中)成对螺旋纤丝(例如含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平。在某些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于降低个体大脑中(例如大脑皮质和/或海马区中)Tau蛋白(例如总Tau、总可溶性Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平的方法中，所述方法包括向所述个体施用有效量的所述抗Tau抗体以降低Tau蛋白的水平。根据任一上述实施方案的“个体”是哺乳动物，优选为人。
在一些实施方案中，本发明提供一种抗Tau抗体，其用于调节个体大脑中(例如大脑皮质和/或海马区中)Tau蛋白(例如总Tau、总可溶性Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平。
在另一方面中，本发明提供抗Tau抗体的用途，其用于制造或制备药剂。在一些实施方案中，药剂用于治疗Tau蛋白相关疾病或病症。Tau蛋白相关疾病或病症可为由神经原纤维缠结或神经纤维网线的形成造成或与其相关联的疾病或病症。在特定实施方案中，药剂用于治疗tau蛋白病，诸如神经退化性tau蛋白病。在具体实施方案中，药剂用于治疗选自由以下组成的群组的疾病或病症：阿兹海默氏病(AD)、库-贾氏病、拳击员痴呆、唐氏综合症、格施谢三氏症、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，药剂用于治疗PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病。在一些实施方案中，药剂用于治疗AD。在特定实施方案中，药剂用于治疗在认知功能的障碍或丧失中显现出的Tau相关疾病或病症，所述认知功能诸如推理、形势判断、记忆能力、学习或特殊导航。在另一个实施方案中，药剂用于治疗上文所列疾病中的一者(例如tau蛋白病，诸如AD)的方法中，所述方法包括向患有此类疾病的个体施用有效量的所述药剂。在一个此类实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种例如如下文所描述的额外治疗剂。
在另一个实施方案中，药剂用于降低Tau蛋白(例如总Tau、总可溶性Tau、可溶性非磷酸化Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、不可溶非磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平。举例来说，Tau蛋白的此类降低可在个体的大脑中(例如大脑皮质和/或海马区中)或脑脊髓液中观测到。在一些实施方案中，药剂用于降低成对螺旋纤丝的水平。在另一个实施方案中，药剂用于降低个体中Tau蛋白(例如总Tau、总可溶性Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平的方法中，所述方法包括向所述个体施用有效量的所述药剂以降低Tau蛋白的水平。根据任一上述实施方案的“个体”是哺乳动物，优选为人。
在另一方面中，本发明提供一种用于治疗Tau蛋白相关疾病或病症的方法。可根据本文所提供的方法治疗的Tau蛋白相关疾病或病症包括由神经原纤维缠结或神经纤维网线的形成造成或与其相关联的疾病或病症。在特定实施方案中，本发明提供一种用于治疗tau蛋白病，诸如神经退化性tau蛋白病的方法。在具体实施方案中，本发明提供一种用于治疗选自由以下组成的群组的疾病或病症的方法：阿兹海默氏病、库-贾氏病、拳击员痴呆、唐氏综合症、格施谢三氏症、包涵体肌炎、朊病毒蛋白大脑淀粉样血管病、创伤性脑损伤、肌肉萎缩性侧索硬化/关岛型帕金森氏症-痴呆综合症、具有神经原纤维缠结的非关岛型运动神经元病、嗜银颗粒性痴呆、皮质基底核退化症、具有钙化的扩散性神经原纤维缠结、额颞叶型痴呆、具有染色体17相关帕金森氏症的额颞叶型痴呆、哈-斯二氏病、多发性系统萎缩症、C型尼-皮二氏病、苍白球-脑桥-黑质退化症、皮克病、进行性皮层下神经胶瘤病、进行性核上麻痹、亚急性硬化性全脑炎、仅缠结性痴呆(或缠结性主导型痴呆)、脑炎后帕金森氏症和肌紧张性营养不良。在一些实施方案中，提供治疗选自以下的Tau蛋白相关疾病的方法：PART(原发性年龄相关Tau蛋白病变)、缠结性主导型痴呆、亚急性硬化性全脑病变、慢性外伤性脑病变(CTE)、白质tau蛋白病变伴球状胶质包涵体、路易体痴呆(LBD)、轻度认知损伤(MCI)、青光眼、家族性英国痴呆、家族性丹麦痴呆、瓜地洛普帕金森病、脑铁积累的神经退化、SLC9A6相关的精神发育迟滞、多发性硬化、HIV相关的痴呆、老年心脏淀粉样变性和亨廷顿氏病。在一些实施方案中，本发明提供一种用于治疗阿兹海默氏病(AD)的方法。在特定实施方案中，本发明提供一种用于治疗在认知功能的障碍或丧失中显现出的Tau相关疾病或病症的方法，所述认知功能诸如推理、形势判断、记忆能力、学习或特殊导航。在一些实施方案中，所述方法包括向患有上文所描述的疾病或病症中的任一者的个体施用有效量的抗Tau抗体。在一个此类实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种例如如下文所描述的额外治疗剂。在一些实施方案中，所述方法包括向患有本文所描述的疾病中的一者的个体施用有效量的抗Tau抗体。在一个此类实施方案中，所述方法进一步包括向个体施用有效量的至少一种如下文所描述的额外治疗剂。根据任一上述实施方案的“个体”可为人。
在另一方面中，本发明提供一种用于降低个体中Tau蛋白(例如总Tau、总可溶性Tau、可溶性磷酸化Tau、总不可溶Tau、不可溶磷酸化Tau、过磷酸化Tau或含有过磷酸化Tau的成对螺旋纤丝)的水平的方法。举例来说，Tau蛋白水平的此类降低可在个体的大脑(例如大脑皮质和/或海马区)或脑脊髓液中观测到。在一些实施方案中，本发明提供一种用于降低成对螺旋纤丝的水平的方法。在一些实施方案中，所述方法包括向个体施用有效量的抗Tau抗体以降低Tau蛋白的水平。在一些实施方案中，“个体”是人。
在一些方面中，本发明提供一种用于减轻Tau蛋白相关疾病或病症的一或多种症状的方法；或用于减轻Tau蛋白相关疾病或病症(诸如本文所描述的疾病或病症中的任一者，例如AD)的一或多种症状的抗Tau抗体或包含抗Tau抗体的药剂。在一些方面中，本发明提供一种用于减少Tau蛋白相关疾病或病症的症状数目或降低其一或多种症状的严重性的方法；或用于减少Tau蛋白相关疾病或病症(诸如本文所描述的疾病或病症中的任一者，例如AD)的症状数目或降低其一或多种症状的严重性的抗Tau抗体或包含抗Tau抗体的药剂。在一个特定实施方案中，Tau蛋白相关疾病或病症的症状是认知障碍。在一个具体实施方案中，Tau蛋白相关疾病或病症的症状是学习和/或记忆障碍。在一个具体实施方案中，Tau蛋白相关疾病或病症的症状是长期记忆丧失。在一个具体实施方案中，Tau蛋白相关疾病或病症的症状是痴呆。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病或病症的症状是混乱、烦躁、攻击性、情绪波动或语言障碍。在一些实施方案中，Tau蛋白相关疾病或病症的症状是一或多种认知功能的障碍或丧失，所述认知功能诸如推理、形势判断记忆能力和/或学习。本文所提供的方法包括向个体(例如，其显示Tau蛋白相关疾病或病症的一或多种症状)施用一定量(例如治疗有效量)的抗Tau抗体。
在具体方面中，本发明提供一种用于保持或增加认知记忆能力或用于减缓与Tau蛋白相关疾病或病症相关联的记忆丧失的方法；或用于保持或增加认知记忆能力或用于减缓与Tau蛋白相关疾病或病症(诸如本文所描述的疾病或病症中的任一者，例如AD)相关联的记忆丧失的抗Tau抗体或包含抗Tau抗体的药剂。本文所提供的方法包括向个体(例如，其显示记忆丧失的一或多种症状或记忆能力降低)施用一定量(例如治疗有效量)的抗Tau抗体。
在一些方面中，本发明提供一种用于降低Tau蛋白相关疾病或病症的进程速率的方法；或用于降低Tau蛋白相关疾病或病症(诸如本文所描述的疾病或病症中的任一者，例如AD)的进程速率的抗Tau抗体或包含抗Tau抗体的药剂。本文所提供的方法包括向个体(例如，其显示Tau蛋白相关疾病或病症的一或多种症状)施用一定量(例如治疗有效量)的抗Tau抗体。
在一些方面中，本发明提供一种用于预防Tau蛋白相关疾病或病症发展的方法；或用于预防Tau蛋白相关疾病或病症(诸如本文所描述的疾病或病症中的任一者，例如AD)发展的抗Tau抗体或包含抗Tau抗体的药剂。本文所提供的方法包括向个体(例如，其具有患Tau蛋白相关疾病或病症的风险)施用一定量(例如治疗有效量)的抗Tau抗体。
在一些方面中，本发明提供一种用于延迟Tau蛋白相关疾病或病症发展的方法；或用于延迟Tau蛋白相关疾病或病症(诸如本文所描述的疾病或病症中的任一者，例如AD)发展的抗Tau抗体或包含抗Tau抗体的药剂。本文所提供的方法包括向个体(例如，其显示Tau蛋白相关疾病或病症的一或多种症状)施用一定量(例如治疗有效量)的抗Tau抗体。
在另一方面中，本发明提供包含本文所提供的抗Tau抗体中的任一者的医药配制剂，其例如用于任一上述治疗方法中。在一些实施方案中，医药配制剂包含本文所提供的抗Tau抗体中的任一者和药学上可接受的载体。在另一个实施方案中，医药配制剂包含本文所提供的抗Tau抗体中的任一者和至少一种例如如下文所描述的额外治疗剂。
本发明的抗体可单独或与其它药剂组合用于疗法中。举例来说，本发明的抗体可与至少一种额外治疗剂共施用。
举例来说，根据本发明的组合物可与包含额外治疗剂的其它组合物组合施用，所述额外治疗剂诸如生物学上活性物质或化合物，诸如在tau蛋白病和/或淀粉样变性(与阿兹海默氏病中所涉及的淀粉样蛋白或淀粉样蛋白样蛋白质(诸如淀粉样蛋白β蛋白质)相关联的一组疾病和病症)的药物治疗中所用的已知化合物。
一般来说，其它生物学上活性化合物可包括神经元传输增强剂；精神治疗药物；乙酰胆碱酯酶抑制剂；钙通道阻断剂；生物胺；苯二氮镇静剂；乙酰胆碱合成、储存或释放增强剂；乙酰胆碱突触后受体激动剂；单胺氧化酶-A或-B抑制剂；N-甲基-D-天冬氨酸酯谷氨酸酯受体拮抗剂；非类固醇消炎药物；抗氧化剂；血清素激导性受体拮抗剂或其它治疗剂。特定来说，生物学上活性剂或化合物可包含至少一种选自以下的化合物：针对氧化应激的化合物、抗凋亡化合物、金属螯合剂、DNA修复抑制剂(诸如哌仑西平(pirenzepine)和代谢物)、3-氨基-1-丙磺酸酸(3APS)、1,3-丙烷二磺酸酯(1,3PDS)、分泌酵素活化剂、β-和γ-分泌酵素抑制剂、tau蛋白、抗Tau抗体(包括(但不限于)WO2012049570、WO2014028777、WO2014165271、WO2014100600、WO2015200806、US8980270和US8980271中所揭示的抗体)、神经传递素、β-片层阻断剂(beta-sheet breaker)、消炎剂分子、“非典型抗精神病剂”(诸如氯氮平(clozapine)、齐拉西酮(ziprasidone)、利培酮(risperidone)、阿立哌唑(aripiprazole)或奥氮平(olanzapine))或胆碱酯酶抑制剂(ChEI)(诸如他克林(tacrine)、雷斯替明(rivastigmine)、多奈哌齐(donepezil)和/或加兰他敏(galantamine))和其它药物和营养补充品(诸如维生素B12、半胱氨酸、乙酰胆碱前驱物、卵磷脂、胆碱、银杏(Ginkgo biloba)、乙酰基-L-肉碱、艾地苯醌(idebenone)、丙戊茶碱(propentofylline)或黄嘌呤衍生物)，与根据本发明的结合肽(包括抗体，尤其单克隆抗体和其活性片段)一起，并且任选地包含药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或赋形剂，和用于疾病治疗的说明书。
在一些实施方案中，本发明的抗体可与神经药物组合施用。此类神经药物包括(但不限于)特异性结合选自以下的靶标的抗体或其它结合分子(包括(但不限于)小分子、肽、适体或其它蛋白质结合子)：β分泌酵素、早老素、淀粉样蛋白前驱蛋白或其部分、淀粉样蛋白β肽或其寡聚物或小纤维、死亡受体6(DR6)、高级糖基化终产物受体(RAGE)、帕金蛋白(parkin)和亨廷顿蛋白(huntingtin)；NMDA受体拮抗剂(也就是美金刚(memantine))、单胺消耗剂(也就是四苯纳嗪(tetrabenazine))；甲磺酰双氢麦角毒(ergoloid mesylate)；抗胆碱激导性抗帕金森病药剂(也就是丙环定(procyclidine)、苯海拉明(diphenhydramine)、苯海索(trihexylphenidyl)、苯扎托品(benztropine)、比哌立登(biperiden)和三己芬迪(trihexyphenidyl))；多巴胺激导性抗帕金森病药剂(也就是恩他卡朋(entacapone)、司来吉兰(selegiline)、普拉克索(pramipexole)、溴麦角环肽(bromocriptine)、罗替戈汀(rotigotine)、司来吉兰、罗匹尼洛(ropinirole)、雷沙吉兰(rasagiline)、阿朴吗啡(apomorphine)、卡比多巴(carbidopa)、左旋多巴(levodopa)、培高利特(pergolide)、托卡朋(tolcapone)和金刚胺)；四苯纳嗪；消炎剂(包括(但不限于)非类固醇消炎药物(也就是吲哚美辛(indomethicin)和上文所列的其它化合物)；激素(也就是雌激素、孕酮和亮丙瑞林(leuprolide))；维生素(也就是叶酸盐和烟碱酰胺)；地美波林(dimebolin)；高牛磺酸(homotaurine)(也就是3-氨基丙烷磺酸；3APS)；血清素受体活性调节剂(也就是扎利罗登(xaliproden))；干扰素和糖皮质激素或皮质类固醇。术语“皮质类固醇”包括(但不限于)氟替卡松(fluticasone)(包括丙酸氟替卡松(FP))、倍氯米松(beclometasone)、布地奈德(budesonide)、环索奈德(ciclesonide)、莫米松(mometasone)、氟尼缩松(flunisolide)、倍他米松(betamethasone)和曲安西龙(triamcinolone)。“可吸入皮质类固醇”意谓适合于通过吸入传递的皮质类固醇。例示性可吸入皮质类固醇为氟替卡松、二丙酸倍氯米松、布替耐德、糠酸莫米松、环索奈德、氟尼缩松和曲安奈德。
在一些实施方案中，一或多种抗淀粉样蛋白β(抗Aβ)抗体可与本文所提供的抗Tau抗体一起施用。此类抗Aβ抗体的非限制性实例包括克林珠单抗(crenezumab)、索拉珠单抗(solanezumab)、贝频珠单抗(bapineuzumab)、阿杜坎单抗(aducanumab)、甘特那单抗(gantenerumab)和BAN-2401(Biogen,Eisai Co.,Ltd.)。在一些实施方案中，一或多种β-淀粉样蛋白聚集抑制剂可与本文所提供的抗Tau抗体一起施用。非限制性例示性β-淀粉样蛋白聚集抑制剂包括ELND-005(还称作AZD-103或鲨肌醇)、特拉米特(tramiprosate)和PTI-80(Exebryl-；ProteoTech)。在一些实施方案中，一或多种BACE抑制剂可与本文所提供的抗Tau抗体一起施用。此类BACE抑制剂的非限制性实例包括E-2609(Biogen,Eisai Co.,Ltd.)、AZD3293(还称为LY3314814；AstraZeneca,Eli Lilly&Co.)、MK-8931(韦鲁贝沙(verubecestat))和JNJ-54861911(Janssen,Shionogi Pharma)。在一些实施方案中，一或多种Tau抑制剂可与本文所提供的抗Tau抗体一起施用。此类Tau抑制剂的非限制性实例包括亚甲蓝、LMTX(还称为隐色亚甲蓝或Trx-0237；TauRx Therapeutics Ltd.)、RemberTM(亚甲基蓝或氯化亚甲蓝[MTC]；Trx-0014；TauRx Therapeutics Ltd)、PBT2(PranaBiotechnology)和PTI-51-CH3(TauProTM；ProteoTech)。在一些实施方案中，一或多种其它抗Tau抗体可与本文所提供的抗Tau抗体一起施用。此类其它抗Tau抗体的非限制性实例包括BMS-986168(Bristol-Myers Squibb)和C2N-8E12(AbbVie,C2N Diagnostics,LLC)。在一些实施方案中，通用错误折叠抑制剂(诸如NPT088(NeuroPhage Pharmaceuticals))可与本文所提供的抗Tau抗体一起施用。
在一些实施方案中，根据本发明的组合物可包含烟碱酸或美金刚与根据本发明的嵌合抗体或人源化抗体(包括抗体，尤其单克隆抗体和其活性片段)一起，并且任选地包含药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或赋形剂。
在一些实施方案中，提供包含“非典型抗精神病剂”(诸如氯氮平、齐拉西酮、利培酮、阿立哌唑或奥氮平)与根据本发明的嵌合抗体或人源化抗体或其活性片段一起且任选地包含药学上可接受的载体和/或稀释剂和/或赋形剂的组合物，所述非典型抗精神病剂用于治疗阳性和阴性精神病性症状，包括幻觉、妄想、思维障碍(由明显不连贯、脱轨、离题显现)和古怪或杂乱行为，以及快感缺乏、情感冷漠(flattened affect)、神气呆滞和社交退缩。
除根据本发明的嵌合抗体或人源化抗体以外，可适合地用于组合物中的其它化合物为例如WO 2004/058258(尤其参见第16和17页)中所揭示的那些化合物，包括治疗药物靶标(第36-39页)、烷磺酸和烷醇磺酸(第39-51页)、胆碱酯酶抑制剂(第51-56页)、NMDA受体拮抗剂(第56-58页)、雌激素(第58-59页)、非类固醇消炎药物(第60-61页)、抗氧化剂(第61-62页)、过氧化体增殖剂活化受体(PPAR)激动剂(第63-67页)、胆固醇降低剂(第68-75页)、淀粉样蛋白抑制剂(第75-77页)、淀粉样蛋白形成抑制剂(第77-78页)、金属螯合剂(第78-79页)、抗精神病剂和抗抑郁剂(第80-82页)、营养补充品(第83-89页)和在大脑中增加生物学上活性物质的可获得性的化合物(参见第89-93页)和前药(第93和94页)，所述文件以引用的方式并入本文中，但尤其在上文所指示的页数提到的化合物。
上文所提到的此类组合疗法涵盖组合施用(其中两种或两种以上治疗剂包括在同一或单独配制剂中)和单独施用，在这种情况下，本发明抗体的施用可在施用额外治疗剂之前、同时和/或之后进行。在一些实施方案中，抗Tau抗体的施用和额外治疗剂的施用彼此在约一个月内；或在约一周、两周或三周内；或在约一天、两天、三天、四天、五天或六天内进行。
本发明的抗体(和任何额外治疗剂)可通过任何适合的手段施用，包括非经肠、肺内和鼻内施用，并且必要时对于局部治疗，包括病灶内施用。非经肠输注包括肌肉内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。部分地视施用的短期或长期性而定，可通过任何适合的途径(例如通过注射，诸如静脉内或皮下注射)给药。本文涵盖各种给药时程，包括(但不限于)单次施用或历经各个时间点多次施用、快速施用和脉冲式输注。
本发明的抗体将以与良好医疗实践一致的方式配制、给药和施用。在这种情形中考虑的因素包括所治疗的特定病症、所治疗的特定哺乳动物、个别患者的临床病状、病症起因、药剂传递位点、施用方法、施用时程和医学从业者已知的其它因素。抗体并非必须，而是任选地与一或多种当前用于预防或治疗所述病症的药剂一起配制。此类其它药剂的有效量视存在于配制剂中的抗体的量、病症或治疗的类型和上文所论述的其它因素而定。这些药剂一般以与本文所描述相同的剂量且用如本文所描述的施用途径使用，或以本文所描述的剂量的约1％至99％使用，或以凭经验/临床上确定为适当的任何剂量和任何途径使用。
为了预防或治疗疾病，本发明的抗体的适当剂量(当单独或与一或多种其它额外治疗剂组合使用时)将视待治疗疾病的类型、抗体的类型、疾病的严重程度和病程、是出于预防还是出于治疗目的施用抗体、先前疗法、患者的临床病史和对抗体的响应和主治医师的判断而定。一次性或历经一系列治疗向患者适当施用抗体。视疾病的类型和严重性而定，不论例如通过一或多次单独施用或通过连续输注，约1μg/kg至15mg/kg(例如0.1mg/kg-10mg/kg)抗体可为用于向患者施用的初始候选剂量。视上文所提到的因素而定，一种典型的日剂量可在约1μg/kg至100mg/kg的范围内或大于100mg/kg。对于历经数日或更长时间的重复施用时，视病状而定，一般将持续治疗至疾病症状发生所需抑制程度为止。抗体的一种例示性剂量将在约0.05mg/kg至约10mg/kg范围内。因此，可向患者施用约0.5mg/kg、2.0mg/kg、4.0mg/kg或10mg/kg(或其任何组合)的一或多种剂量。此类剂量可间歇地施用，例如每周或每三周施用一次(例如以使得患者接受约二至约二十或例如约六剂抗体)。可施用初始较高起始剂量，随后可施用一或多剂较低剂量。然而，其它给药方案可能适用。此疗法的进程易于通过习知技术和测定来监测。
应理解，任一上述配制剂或治疗方法均可使用本发明免疫缀合物来代替抗Tau抗体或外加在抗Tau抗体上来进行。
H.制品
在本发明的另一方面中，提供含有适用于治疗、预防和/或诊断上文所描述的病症的材料的制品。所述制品包含容器和在容器上或随容器附上的标签或药品说明书。适合的容器包括例如瓶子、小瓶、注射器、IV溶液袋等。容器可由多种材料(诸如玻璃或塑料)形成。容器容纳单独组合物或与有效治疗、预防和/或诊断病状的另一种组合物组合的组合物，并且可具有无菌接取口(例如容器可为具有可由皮下注射针刺穿的塞子的静脉内溶液袋或小瓶)。组合物中的至少一种活性剂为本发明的抗体。标签或药品说明书指示组合物用于治疗所选病状。此外，制品可包含(a)其中含有组合物的第一容器，其中所述组合物包含本发明的抗体；和(b)其中含有组合物的第二容器，其中所述组合物包含另一种细胞毒性剂或其它治疗剂。本发明的此实施方案中的制品可进一步包含指示组合物可用于治疗特定病状的药品说明书。或者或另外，所述制品可进一步包含第二(或第三)容器，其包含药学上可接受的缓冲液，诸如注射用抑菌水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液(Ringer's solution)和右旋糖溶液。其可进一步包括就商业和使用者观点来说所需的其它材料，包括其它缓冲剂、稀释剂、过滤器、针和注射器。
应理解，代替抗Tau抗体或除抗Tau抗体之外，上述制品中的任一者可包括本发明的免疫缀合物。
III.实施例
以下为本发明的方法和组合物的实施例。应理解，鉴于上文所提供的一般描述，可实施各种其它实施方案。
实施例1：产生用于免疫接种的Tau
产生单体重组Tau
将重组人Tau构建体，2N4R同功异型物(氨基酸2-441)与N端His标签融合以便于纯化和表征。参见例如图15。将融合构建体克隆至pET52b载体(Novagen)中，并且在大肠杆菌中表达。采集细胞，并且在4℃下在搅拌下在变性条件下使用7M氯化鈲使其溶胞。在40,000rpm下持续1小时使细胞碎片成球粒。通过镍亲和色谱(Ni Sepharose excel亲和树脂，GE Healthcare Life Sciences)，继而通过尺寸排阻色谱(Superdex 200树脂，GEHealthcare Life Sciences)在变性条件下分离重组的经His标记的蛋白质。通过将所回收的蛋白质透析至pH 6.8的20mM MES、50mM NaCl和1mM TCEP中来移除氯化鈲。随后使用TEV蛋白酶移除His标签，继而使用阳离子交换色谱(Mono S管柱，GE Healthcare LifeSciences)进行最终纯化以移除裂解的His标签。纯化缓冲液含有0.1％ Triton x-114(v/v)以移除内毒素。将经纯化的蛋白质交换至具有1mM TCEP的PBS中。通过SDS-PAGE和SEC-MALLS分析纯度和单体状态。通过质谱确认属性(Identity)。通过280nm处的UV吸收测定蛋白质浓度。如通过动力学鲎变形细胞溶胞液(LAL)测定所测定，最终产物不含内毒素(<0.5EU/mg)。
产生磷酸化Tau
使用由上文所描述的方法制备的Tau 2-441构建体产生磷酸化Tau。使用0.5μMPKA激酶(Life Technologies)对蛋白质构建体进行磷酸化，在其它残基当中，所述PKA激酶使丝氨酸409磷酸化。将反应混合物与1mM ATP、5mM MgCl2一起在室温下孵育72小时。通过质谱确认磷酸化。使用尺寸排阻色谱(Superdex 75，GE Healthcare Life Sciences)移除激酶。基本上如上文所描述分析所制备的磷酸化蛋白质的纯度、单体状态和内毒素水平。
单体Tau的活体外寡聚
使用单体Tau 2-441构建体产生寡聚Tau。首先将单体蛋白质交换至20mM N,N-双(2-羟乙基)-2-氨基乙烷磺酸(BES)、25mM NaCl(pH 7.4)中，继而在37℃下使用75μM二十碳四烯酸(Cayman Chemicals)和与蛋白质等摩尔浓度的18kDa肝素(Sigma Aldrich)进行寡聚持续3天。通过硫代黄素T荧光测定、动态光散射(DLS)和分析型尺寸排阻色谱确认寡聚。在一些情况下，寡聚Tau称为“寡Tau”。
实施例2：产生抗Tau抗体
方法
产生融合瘤
获得9周龄的雌性C57BL/6JOlaHsd(C57BL/6)和BALB/c OlaHsd(Balb/c)野生型小鼠(Harlan,USA)。获得6和9周龄的Tau基因剔除小鼠(B6.129-Mapttm1Hnd/J；The JacksonLaboratory,USA)。在12至15周龄开始疫苗接种。用寡聚人Tau对小鼠进行疫苗接种。在疫苗接种之前，将寡Tau与此研究中所用两种佐剂中的一者混合：50％v/v的Ribi佐剂系统(Ribi；Sigma-Aldrich,Switzerland)，或CpG单股合成DNA寡脱氧核苷酸(CpG；Microsynth,Switzerland)与氢氧化铝(Al；Brenntag,Switzerland)的组合。Ribi是在角鲨烯油、0.2％Tween-80和水中含有单磷酰基脂质A(从明尼苏达沙门氏菌(Salmonella minnesota)分离)和合成海藻糖双棒状霉菌酸酯(从结核杆菌(Tubercle bacillus)的索状因子(cordfactor)分离)的2％水包角鲨烯油乳液。
除了接受腹膜内(i.p.)和齿爪施用的组合的第D和G组之外，通过皮下注射(s.c.)对小鼠进行疫苗接种。向第D组的小鼠i.p.施用50μg寡Tau且以齿爪注射形式施用10μg寡Tau。向第G组的小鼠i.p.施用8μg寡Tau且以齿爪注射形式施用2μg寡Tau。参见表2。
对于含有CpG和Al(CpG/Al)作为佐剂的疫苗接种，各200μL注射含有60μg(30nmol)CpG、1mg Al和50μg寡Tau。对于所有研究组，在第0、14、35和56天对小鼠进行注射。用于骨髓瘤融合体(Nanotools,Germany)的小鼠另外用三次未添加佐剂的每日寡Tau补强注射(每次i.p.注射50μg)进行疫苗接种。
表2.小鼠和疫苗接种方案
在三次补强注射最后一次的后一天，对小鼠抽血和处死，并且使脾细胞与骨髓瘤细胞融合以得到产生抗体的融合瘤。
选择用于亚克隆的融合瘤
对于融合，将小鼠分成三个组用于总计10个融合(在一组中2个融合，在第二组中四个融合，并且在第三组中四个融合)，产生299个融合瘤。使用含血清的选择培养基使活融合瘤生长，并且随后如下文所描述，对于全长人Tau和寡Tau结合，使用ELISA测定选择用于亚克隆的最优选融合瘤。在限制稀释后，随后使最终融合瘤在无血清培养基中生长，并且从稳定群落收集培养基用于抗体筛选和选择。
ELISA筛选测定
从稳定融合瘤采集无血清上清液。随后通过ELISA测定筛选含有所关注抗体的上清液以表征抗体特性和选择用于进一步发育的抗体。ELISA测定用于测定以下：与全长人Tau(flTau；SignalChem,Canada)的结合；与过磷酸化flTau(Genentech,USA)的结合；与flTau寡聚制剂对比单体制剂的结合；与0N4R、1N4R和2N4R Tau同功异型物(rPeptide,USA)的结合；和与某些抗体Tau表位的结合。简单地说，用如表3中所示的靶标中的一者涂布96孔MaxiSorp ELISA培养盘(Nunc,Denmark)。
表3.用于ELISA筛选测定的靶标。
在4℃下在磷酸盐缓冲盐水(PBS)中进行涂布隔夜。用0.05％Tween-20/PBS充分洗涤培养盘，并且随后在37℃下用含1％牛血清白蛋白(BSA)的0.05％ Tween-20/PBS对其阻断1小时。随后以指定稀释度添加融合瘤上清液中所含有的抗体，并且在37℃下孵育2小时，其后如先前所描述洗涤培养盘。
对于间接ELISA，在37℃下以1/6000稀释度在0.05％ Tween-20/PBS中添加AP缀合的抗小鼠IgG二级抗体(Jackson ImmunoResearch Laboratories,United Kingdom)持续2小时。在最终洗涤之后，将培养盘与对硝基苯基磷酸二钠六水合物(pNPP；Sigma-Aldrich,Switzerland)磷酸酶底物溶液一起孵育，并且在405nm处使用ELISA培养盘读取器(Tecan,Switzerland)进行读取。结果表示为光学密度(O.D.)。
对于寡Tau和单Tau捕捉ELISA，以500倍稀释度将无血清无菌融合瘤上清液中所含有的抗体固定在经抗IgG涂布的培养盘上，继而孵育寡Tau或单Tau，其两者均通过AVI标签具有位点特异性生物素化作用。靶标孵育以5μg/mL开始，并且随后稀释8或16倍。抗生蛋白链菌素-HRP和ABTS底物用于在培养盘读取器(Tecan,Switzerland)中进行信号定量。结果表示为O.D.。
亲和力估算
使用Biacore T-100仪器(GE Healthcare,United Kingdom)通过表面等离子体共振估算无血清融合瘤上清液中未经纯化的抗体的亲和力。将抗体固定至抗IgG生物传感器芯片上，并且使用flTau(SignalChem,Canada)作为靶标被分析物。使用1:1朗格缪尔拟合模型进行动力学分析。
SDS-PAGE和蛋白质印迹测定
在蛋白质印迹法(WB)中使用来自三个AD供体和两个年龄匹配的非AD对照供体的脑裂解物(Tissue Solutions,United Kingdom)测试所选泛Tau抗体与人大脑中Tau的结合。加工裂解物以获得无清洁剂的可溶性Tau级分。将加工的裂解物装载至4％-12％bis-tris凝胶(Novex，Life Technologies,Switzerland)上且转移至Immobilon PVDF膜上，并且用所测试的抗体和IRDye 800CW山羊抗小鼠二级抗体(Li-Cor,USA)进行印迹法。
使用人脑裂解物或重组人Tau同功异型物的ELISA测定
为了评估所选抗体与AD和对照脑裂解物中未变性人Tau或与重组Tau同功异型物0N4R、1N4R和2N4R(rPeptide,USA)的结合，如上文所描述使来自融合瘤上清液的抗体或阴性和阳性对照抗体固定在96孔培养盘上。随后捕捉来自AD或年龄匹配对照受试者的可溶性人脑裂解物(400μg/mL蛋白质；均来自Tissue Solutions,United Kingdom)中的Tau或重组Tau同功异型物(1μg/mL)，并且使用多克隆兔泛Tau抗体(AbCam,United Kingdom)，继而使用Fc-γ片段特异性抗兔IgG-AP(Jackson ImmunoResearch,USA)进行检测。使用来自Tau基因剔除小鼠的脑裂解物作为阴性样本对照组。将培养盘与pNPP(Sigma-Aldrich)磷酸酶底物溶液一起孵育，并且在405nm处使用ELISA培养盘读取器(Tecan,Switzerland)进行读取。结果表示为光学密度(O.D.)。
抗体融合瘤的定序
将融合瘤细胞裂解物提供给Antitope(Antitope,United Kingdom)用于可变区基因定序。简单地说，使用用于鼠类信号序列的简并引物(degenerate primer)池与用于IgG可变重链(VH)、IgM VH链、Igκ可变轻链(KVL)和IgλVL链中的每一者的恒定区引物一起进行RT-PCR。使用一组对VH信号序列具有特异性的六个简并引物池(HA至HF)与IgM或IgG特异性恒定区引物一起对重链V区mRNA进行扩增。使用一组八个信号序列特异性简并引物池(对κ集群七个(KA至KG)和对λ集群一个(LA))与κ或λ恒定区引物一起对轻链V区mRNA进行扩增。对从成功扩增获得的PCR产物进行纯化，将其克隆至‘TA’克隆载体(pGEM-T Easy，Promega)中，转型至大肠杆菌中且对个别群落定序。用27个抗体融合瘤的序列确定抗体VH和VL区的核苷酸和氨基酸序列。
结果
选择用于亚克隆的融合瘤
最初分析从三轮融合中的每一者产生的融合瘤(来源于十个融合的总计299个融合瘤)与flTau的结合，并且另外分析所选融合瘤与pTau和寡聚Tau的结合。目标为选择与Tau和转译后修饰的Tau(诸如磷酸化或寡聚Tau)同等良好结合的抗体。为此，对融合瘤运行测定以选择最优选泛Tau特性。为了确定抗体结合区和特异性Tau表位，首先使用不同Tau片段，并且随后使用跨最长人Tau同功异型物的全部441个氨基酸(aa)序列的15聚重叠Tau肽文库来确定结合区。有意避免一组结合预定Tau区的抗体以便使与Tau的不同转译后修饰形式的结合和与人中存在的所有六种不同人Tau同种型的结合最大化。
三个融合系列导致产生133个亚克隆的稳定融合瘤，筛选其最优选泛Tau特性。不同筛选测定的组合用于减小对泛Tau抗体具有优选特性的抗体融合瘤的数目。为了比较flTau和pTau结合，对90个融合瘤进行分析，其中24个融合瘤的结果展示于图1A-图1F中。由于已使用Tau片段进行初始筛选以避免选择与Tau中已知具有高密度的在阿兹海默氏病(AD)和其它tau蛋白病中磷酸化的残基的区结合的抗体，故如由此ELISA所测定，大多数所测试的抗体以类似结合特性结合flTau和pTau。
在一些实施方案中，需要泛Tau抗体结合Tau的单体和寡聚形式两者而不强烈偏好其中一种。设置捕捉ELISA以测定抗体是否结合flTau的单体和寡聚形式两者。与以直接或间接ELISA形式(其中将靶标固定至ELISA培养盘上)运行时相比，以捕捉模式运行的ELISA优选地保护寡聚前Tau的寡聚物组态和单Tau的单体状态。
通过直接比较两种Tau形式与所有90种所测试的抗体的结合来运行各测定。已知偏好结合任一寡Tau或在两种Tau形式之间无区别的抗体在各测定中用作对照组。18个融合瘤的结果展示于图2A-图2E中。
由于可避免与具有高密度潜在pTau残基(Ser、Thr和Tyr)的区结合的抗体，所以定位表位对于选择具有良好泛Tau特性的抗体至关重要。与人Tau的所有六种同种型的结合还用作泛Tau抗体的选择标准。使用49种肽的文库以改良的精确度检验和确定最初选择的抗体的泛Tau表位，所述肽跨人Tau全长各自具有15个氨基酸(aa)，其中6个aa残基重叠且9个aa偏移。残基编号是基于人Tau的最长同功异型物(441个aa)。对比未结合所有肽，以较高1/10稀释度使用未经纯化的抗体以检验结合。从先前通过ELISA选择的112个融合瘤筛选抗体指示与20个不同Tau表位结合(表4)。
表4：针对抗体的Tau表位
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人Tau同种型选择性
分析具有定位至Tau的由外显子1至4编码的区的表位的抗体，以获得对三种人Tau同种型的正或负结合选择性。使用0N-、1N-和2N-Tau进行间接或夹心ELISA以验证人Tau同种型结合选择性(图25和图26)。如由所分配的表位所指示，结合残基37-51的抗体(12A10-E8、55E7-B12、55E7-F11和72E12-H9)对为1N-或2N-Tau的同种型具正选择性，而结合残基64-78(30D12-B5、30D12-F6、21C1-D8、21C1-G6、31A3-A4、31A3-A7、77D1-D2和77D1-E6)、73-87(30A1-C9和30A1-D11)、82-96(28F5-G8)或91-105(211G6-B6)的抗体对2N-Tau具正选择性。这些抗体中无一者结合0N-Tau。定位至所述区中的表位的所有其它抗体结合人Tau的所有三种同种型。
对于与flTau的亲和力测量，在Biacore仪器上使用SPR测量抗体，其中测定KD。通过将抗体固定在抗IgG芯片上且使用flTau作为靶标被分析物来进行Biacore亲和力测量。某些抗体的结果展示于表5中。在测量与flTau的亲和力的抗体中，47种抗体的亲和力优于20nM，其中35种抗体的KD低于5nM，其中抗体37D3-H9的KD(亲和力)是1nM。
表5：对flTau的亲和力
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为了检验所选抗体与人Tau的所有六种同种型的结合，用含有所有六种同种型的重组Tau序列梯运行SDS-PAGE，并且使用三种所选Tau抗体进行蛋白质印迹法(WB)。所有三种泛Tau抗体结合所有六种Tau同种型(图3)。此外，同时运行来自三个AD和两个年龄匹配对照组的大脑均质物以用于比较。正如预期且基于所定位的表位，在此测定中所测试的所有三种抗体均展示与所有六种Tau同种型的结合。在人AD与对照供体之间带图案中所观测到的差异可表示较大磷酸化和/或预期存在于AD受试者中的SDS稳定Tau聚集体。
另外在非变性ELISA捕捉测定中运行人阿兹海默氏病(AD)和对照样本以检验与人大脑中Tau的结合。以8倍稀释度运行针对来自两个AD和两个非AD年龄匹配对照受试者的可溶性Tau进行加工的样本裂解物，从而测试三种抗体(图4A-图4C)。
测定27个融合瘤的抗体可变链序列(Antitope,United Kingdom)。某些重链和轻链可变域和高变区(HVR)的蛋白质序列展示于序列表中。
实施例3：表征抗Tau抗体
通过基因合成和将所得DNA亚克隆至鼠类IgG2a(重链)和鼠类κ(轻链)哺乳动物表达载体中来构建抗体重链和轻链。通过瞬时共转染重链和轻链质粒来在CHO或293T细胞中表达抗体，并且用亲和树脂MabSelectSure(GE Healthcare Life Sciences)来纯化。在Biacore T200表面等离子体共振仪器上使用小鼠IgG捕捉试剂盒和S系列CM5芯片针对与Tau单体蛋白的结合筛选经纯化的重组抗体。使用10μl/min的流动速率，捕捉1μg/ml的浓度的以mIgG2a形式稀释于10mM HEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(操作缓冲液，HBSP)中的抗体持续30或45秒(抗体26C1、94B2-C1、52F6-F11.v1、52F6-F11.v2、11E10-B8、55E7-F11、125B11-H3、123E9-A1、30G1-B2、66F5-A1、89F4-A1、93A8-D2和126F11-G11)，或捕捉0.1μg/ml的浓度的抗体持续70或150秒(抗体19H6-F7、3A4-H4、54C1-H11和37D3-H9)。在25℃下使用30μl/min的流动速率和以下浓度监测Tau单体在HBSP中的结合：对于抗体26C1和94B2，16、31、63、125、125、250和500nM；对于抗体52F6-F11.v1和52F6-F11.v2，16、31、63、125、125、250、500和1000nM；对于抗体11E10-B8、55E7-F11和125B11-H3，6、19、56、56、167和500nM；对于抗体123E9-A1、30G1-B2、66F5-A1、89F4-A1、93A8-D2和126F11-G11，5、16、49、148、148、444、1333和4000nM；对于19H6-F7，0.4、1.6、6.3、2.5、100和400nM；和对于3A4-H4、54C1-H11和37D3-H9，0.2、0.8、4、4、20和100nM。监测缔合和解离时间分别持续180-480秒和300-600秒。归因于高亲和力(表6)和在CDR中不存在NXS/T糖基化基元而选择抗体37D3-H9用于进一步分析。
表6：鼠类抗体与人Tau单体的KD(nM)。所示数据表示1:1结合模型的输出。
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37D3-H9在结合Tau蛋白时展现亲合力
使用Biacore胺偶合试剂盒(GE Life Sciences)使人单体Tau蛋白与Biacore S系列CM5芯片共价偶合，使得以大约128RU的水平固定。使用单循环动力学实验模式监测Fab和IgG形式的37D3-H9的直接结合，其中五个缔合时间段各自为300s，并且抗体浓度为1、2、4、8和16nM(IgG)或5、10、20、40和80nM(Fab)。监测解离持续7200秒(Fab)或14400秒(IgG)。用1:1结合模型拟合数据来计算解离速率值。所计算的解离速率对37D3-H9 Fab为5.0×10-4且对37D3-H9 IgG为1.1×10-5，相差45倍。图5说明Fab(左图)和IgG(右图)解离速率的差异，指示37D3-H9 IgG展现亲合力。
实施例4：抗Tau抗体的人源化
通过将抗体CDR和所选可变区构架残基移植至人抗体共同构架上来使抗体37D3-H9人源化(Dennis,M.S.(2010).CDR repair:Anovel approach to antibodyhumanization.Current Trends in Monoclonal Antibody Development andManufacturing,S.J.Shire,W.Gombotz,K.Bechtold-Peters和J.Andya编(Springer,NewYork),第9-28页)。评估向共同VH3、Vκ2和Vκ1构架上的移植。重链移植物在位置49(Kabat编号系统)处包括鼠类残基。Vκ2移植物在构架位置2和4中包括鼠类残基。Vκ1移植物在构架位置2、4和43中包括鼠类残基。通过基因合成和亚克隆至人IgG1或IgG4和κ链哺乳动物表达载体中来构建人源化变体。通过将重链和轻链质粒共转染至CHO细胞中来表达抗体，并且用亲和树脂MabSelect Sure来纯化。使用Biacore人IgG捕捉试剂盒、S系列CM5芯片和BiacoreT200仪器针对与人Tau单体的亲和力筛选人源化变体。将抗体稀释至2μg/ml，并且在10μl/min下捕捉15秒。在30μl/min的流动速率下，监测100、33、11和3.7nM人Tau单体于10mMHEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween20(操作缓冲液，HBSP)中的缔合和解离分别持续180秒和600秒。对结果应用1:1结合模型(表7)。
表7：针对单体人Tau的人源化变体亲和力筛选
抗体变体 轻链构架 KD(nM)
hu37D3-H9.v1 κ1 4.1
hu37D3-H9.v2 κ1 5.6
hu37D3-H9.v3 κ1 8.8
hu37D3-H9.v4 κ1 8.2
hu37D3-H9.v5 κ2 1.9
hu37D3-H9.v6 κ2 3.5
hu37D3-H9.v7 κ2 27.0
hu37D3-H9.v8 κ2 10.2
hu37D3-H9.v9 κ2 13.2
hu37D3-H9.v10 κ2 14.3
hu37D3-H9.v11 κ2 74.8
hu37D3-H9.v12 κ2 21.6
hu37D3-H9.v13 κ2 9.0
hu37D3-H9.v14 κ2 10.8
hu37D3-H9.v15 κ2 19.0
hu37D3-H9.v16 κ2 27.2
hu37D3-H9.v17 κ2 8.1
hu37D3-H9.v18 κ2 13.4
hu37D3-H9.v19 κ2 55.7
hu37D3-H9.v20 κ2 36.9
hu37D3-H9.v21 κ2 38.1
hu37D3-H9.v22 κ2 36.6
hu37D3-H9.v23 κ2 81.1
hu37D3-H9.v24 κ2 56.6
通过表面等离子体共振在其它抗体浓度和较长缔合/解离时间的情况下进一步表征抗体变体hu37D3-H9.v1、hu37D3-H9.v2、hu37D3-H9.v5和hu37D3-H9.v6。用更宽范围的人Tau单体浓度(1.2、3.7、11.1、11.1、33.3、100nM)和增加的缔合时间段(300秒)和解离时间段(1200秒)分析这些变体。对结果应用1:1结合模型(表8)。
表8：通过表面等离子体共振详细分析所选变体与人Tau的结合动力学
抗体变体 轻链构架 KD(nM)
hu37D3-H9.v1 κ1 1.1nM，1.0nM
hu37D3-H9.v2 κ1 1.2nM
hu37D3-H9.v5 κ2 0.8nM
hu37D3-H9.v6 κ2 1.4nM
将YTE(M252Y/S254T/T256E)突变并入至某些IgG4抗体中。已描述新生Fc受体(FcRn)结合结构域突变(诸如M252Y、S254T和T256E(YTE))以增加FcRn结合且因此延长抗体半衰期。参见美国公开专利申请第2003/0190311号和Dall'Acqua等,J.Biol.Chem.281:23514-23524(2006)。
将抗体125B11-H3人源化至VH3和Vκ1共同构架上。重链移植物在位置78(Kabat编号系统)处包括鼠类残基。Vκ1移植物在构架位置43和87中包括鼠类残基。还将113F5-F7的轻链人源化至Vκ1构架上，其在构架位置43和87处具有额外鼠类残基。将人源化变体重链(125B11)和轻链(125B11和113F5-F7)以多组合形式共转染，并且在96孔板格中如上文所描述进行纯化。随后使用Biacore人IgG捕捉试剂盒、S系列CM5芯片和Biacore T200仪器针对与人Tau单体的亲和力筛选人源化变体。将抗体稀释至2μg/ml，并且在10μl/min下捕捉15秒。在40μl/min的流动速率下，监测0、100和500nM人Tau单体于HBSP中的缔合和解离分别持续180s和300s。对结果应用1:1结合模型(表9)。
表9：通过表面等离子体共振筛选125B11-H3和113F5-F7人源化变体
*与Tau单体的最小结合
NT，未测试。
基于亲和筛选选择变体hu125B11.v17(HC3+LC1)、hu125B11.v26(HC4+LC2)和hu125B11.v28(HC4+LC4)用于高分辨率动力学分析(表10)。将抗体94B2-C1人源化至VH1和Vκ2构架上。重链移植物在位置28、29、67、69、71和73(Kabat编号系统)处还包括鼠类残基。Vκ2移植物在构架位置2、36和46中还包括鼠类残基。表达八个重链和八个轻链的组合，如上文对于125B11所描述，通过表面等离子体共振(SPR)进行纯化和筛选。SPR筛选的结果展示于表11中。选择变体hu94B2.v105(重链变体94B2.HC1，轻链变体94B2.LC13)用于详细SPR表征(表11)。
表10：所选人源化抗Tau抗体变体的动力学数据
表11：通过表面等离子体共振筛选94B2人源化变体
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*n＝3次重复的平均值。
§观测到与Tau单体的最小结合。
NT，未测试。
实施例5：对人源化抗Tau抗体的稳定性分析
鉴别化学不稳定性
对抗体样本进行热应激以模拟在产物存放期内的稳定性。将样本缓冲交换至20mM乙酸盐缓冲液(pH 5.5)或磷酸盐缓冲液(pH 7.4)中，并且稀释至1mg/ml的浓度。使一毫升样本在40℃下经受应激持续2周，并且第二个样本储存在-70℃下作为对照组。随后两个样本均使用胰蛋白酶进行消化以产生肽，可使用液相色谱(LC)-质谱(MS)分析对所述肽进行分析。对于样本中的各肽，在MS中获得滞留时间(从LC)以及高分辨率精确质量和肽离子碎片化信息(氨基酸序列信息)。在±10ppm的窗口下，根据数据集，针对所关注的肽(原生和修饰的肽离子)获得所提取离子色谱图(XIC)且对峰进行积分以测定面积。通过将(修饰的肽的面积)除以(修饰的肽的面积加原生肽的面积)乘以100来计算各样本的相对修饰百分比。随后在对照(t＝0)样本与应激(t＝2周)样本之间比较这些相对百分比。所示百分比表示应激(t＝2周)值减去对照(t＝0)值。对抗体hu37D3-H9.v1和hu37D3-H9.v5的脱酰胺化分析导致观测到轻链CDR-1内的序列N28G29N30(Kabat编号)易于脱酰胺化。发现脱酰胺N28G29N30的增加对于hu37D3-H9.v1是16.5％且对于hu37D3-H9.v5是11％。
脱酰胺化对抗体与抗原的结合的影响
为评估N28脱酰胺化对与人Tau的亲和力的影响，需要获得N28脱酰胺化状态间隔较宽的两个样本。在40℃下将Hu37D3-H9.v5hIgG4.S228P以1mg/ml的浓度在磷酸盐缓冲盐水(pH 7.4)中孵育两周。使用LC-MS/MS测量N28G29基元的脱酰胺化。相对于t＝0未应激样本，t＝2周应激的样本的脱酰胺化增加43.1％。使用GE Biacore人IgG捕捉试剂盒和S系列CM5芯片通过表面等离子体共振(Biacore)分析应激和未应激的抗体的Tau结合。将hIgG在10mMHEPES(pH7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(操作缓冲液，HBSP)中稀释至2μg/ml，并且在10μl/min的流动速率下捕捉15秒(t0样本)或17秒(t2样本)。使用30μl/min的流动速率、300s缔合阶段和1800s解离阶段，收集以于HBSP中0、3.1、6.3、12.5、25、25、50和100nM的浓度注射的人Tau单体的动力学数据。在循环之间，以10μl/min使用3M氯化镁的30秒注射使表面再生。使用仪器默认参数(包括“RI”参数的局部拟合)用1:1结合模型拟合数据。图6和表12中所示的结果展现，尽管在此实验中，应激抗体以比未应激抗体大的水平固定，但Tau结合信号的量级(如由参数Rmax的量级表示)显著较低。在针对捕捉水平的差异对Rmax值进行标准化之后，应激(t＝2周)样本似乎展示是未应激样本总Tau结合能力的大约一半(由标准化的Rmax降低56％所指示)。所计算的亲和力似乎无变化：在此分析中，t＝0与t＝2周的样本之间的KD差异小于2％(对于t＝0和t＝2周，KD＝0.7nM)。结果与含有显著地减少的高亲和力抗体的群体的t＝2周样本一致。
表12：通过表面等离子体共振得到的应激和未应激hu37D3-H9.v5样本与单体Tau的相对结合
脱酰胺化对抗体与抗原的结合的影响和“标准化的Rmax”的计算
鉴于预期天冬酰胺脱酰胺化产生天冬氨酸和异天冬氨酸产物(Bischoff R.和Kolbe H.V.J.(1994).J.Chromat.5,662,第261-278页)，分析将N28置换为D28(变体hu37D3-H9.v5 N28D)对与人Tau单体的亲和力的影响。在25℃下使用Biacore T200仪器、GEBiacore人IgG捕捉试剂盒和CM5 S系列芯片评估亲和力。将hIgG在10mM HEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(操作缓冲液，HBSP)中稀释至2μg/ml，并且在10μl/min的流动速率下捕捉22秒。使用30μl/min的流动速率、300秒缔合阶段和600秒解离阶段，收集以于HBSP中0、6.3、12.5、25、25、50、100、200和400nM的浓度注射的人Tau单体的动力学数据。在循环之间，以10μl/min使用3M氯化镁的30秒注射使表面再生。用1:1结合模型拟合数据，并且使用动力学分析计算hu37D3-H9.v5和hu37D3-H9.v5.3(在本文中还称为hu37D3-H9.v5N28D)的亲和力。用于1:1拟合的参数包括“RI”参数的局部拟合的仪器默认参数。结果展示于图7和表13中。
与在相同条件下分析得到的hu37D3-H9.v5 KD计算值1.5×10-9M(平均值，n＝4次实验内测定)相比较，hu37D3-H9.v5 N28D变体的KD计算值为160×10-9M。因此，N28转化为D28造成亲和力减小>100倍。鉴于hu37D3-H9.v5 N28D变体的相对较低亲和力和相对较快动力学，我们推理，对N28和D28变体混合物的动力学分析将受较高亲和力群体控制，并且较低亲和力变体的存在可由标准化的Rmax的降低反映。为了验证此推理，将抗体变体hu37D3-H9.v5和hu37D3-H9.v5N28D的Tau结合概况与两种抗体等量混合在一起的Tau结合概况相比较。与单独hu37D3-H9.v5相比较，hu37D3-H9.v5与hu37D3-H9.v5N28D的1:1混合物引起标准化的Rmax降低45％(表13)。我们得出结论，标准化的Rmax在热应激后的变化可指示应激样本中高亲和力抗体群体减少。我们推理，标准化的Rmax的变化因此可用于筛选稳定性改良的hu37D3-H9的变体。
表13：在hu37D3-H9.v5的热应激后和在hu37D3-H9.v5与预期脱酰胺化产物hu37D3-H9.v5 N28D混合后所观测到的标准化的Rmax的变化
*标准化的Rmax＝Rmax(RU)/配体水平(RU)。参考抗体的标准化的Rmax＝0.33(四个实验内测定的平均值，标准偏差<0.01)。
抗体优化和选择
通过Biacore评估90种37D3-H9变体以比较其在经历或不经历两周40℃热应激时段的情况下的功能稳定性。变体包括N28G29N30T31基元的大多数单一突变、含有G29A突变的双重突变体、Asn-28和Tyr-32的双重突变(可在功能上将这些基团置换为氢键结的残基)以及残基2、4、33和93(作为存在于原始37D3-H9抗体或相应生殖是残基变体中的残基)的所有可能排列。另外，在残基1为Asp或Glu的情形下测试突变，其不影响Asn-28残基的亲和力或稳定性。
通过在96孔板格中瞬时转染Expi293细胞来表达抗体，并且在具有500μL MCA96头的Tecan freedom EVO 200液体处理系统上进行自动纯化。简单地说，使用定制填充有20μLMabSelect SuRe树脂的顶端管柱(Glygen Corp&GE Healthcare)捕捉1mL培养物中的IgG。在用1×PBS(pH 7.4)洗涤之后，将IgG溶离至160μL 50mM磷酸(pH3)中且用12μL 20×PBS(pH 11)中和。在0.1M NaOH中汽提MabSelect SuRe顶端管柱，并且用1×PBS(pH 7.4)再生以连续使用多达15次。使用Hamilton Star液体处理机器人将96孔板格中经纯化的抗体标准化至0.1mg/ml。将“应激前”样本保持在大约4℃下，并且在PCR机器中将“应激后”样本在40℃下孵育两周。通过用“应激前”和“应激后”抗体制剂运行表面等离子体共振动力学实验来比较变体的功能稳定性。使用由GE Biacore IgG捕捉试剂盒产生的人抗体捕捉CM5 S系列芯片和Biacore T200仪器来评估抗体。使用15秒注射时间和10μl/min流动速率使稀释至2μg/ml的抗体固定。使用40μl/min的流动速率，在25℃下监测与0nM、26.5nM和265nM的Tau单体的结合持续180秒缔合阶段，继而300秒解离阶段。使用多循环动力学模式在10mMHEPES(pH7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(HBSP)中运行样本。使用BIAevaluation软件分析数据，拟合1:1结合模型。所得亲和力(KD)值展示于图8A-图8D中。还使用以下基本原理计算稳定性指数：预期亲和力受损的抗体(归因于例如关键残基的脱酰胺化)对IgG捕捉水平(“配体水平”)贡献相等，但对所测量的Tau结合贡献较小，并且此将反映于来源于实验的Rmax值中。为了考虑所捕捉各抗体的量的变化，将Rmax针对抗体捕捉水平(如由“配体水平”，抗体捕捉期间固定化的反应单位所测量)进行标准化。因此，标准化的Rmax以Rmax实验值(单位＝RU)除以“配体水平”(表示在hIgG捕捉步骤期间所捕捉的RU的评估输出，单位＝RU)计算，并且稳定性指数在此处以标准化的Rmax(应激后)除以标准化的Rmax(应激前)计算。
通过瞬时转染CHO细胞来表达所选抗体，并且对其进行纯化。随后使用RCM胰蛋白酶肽定位，在DTT还原、IAA封端和pH 8.2消化的情况下，在1mg/ml下对抗体进行应激持续两周，并且通过LC-MS/MS分析脱酰胺化。结果(表14)展现，变体hu37D3-H9.v28.A4对N28G29N30基元上脱酰胺化的敏感性降低。hu37D3-H9.v28.A4的脱酰胺化降低出人意料，这是因为残基未定位于Asn-28残基紧邻区域中(图9)，并且不清楚F33L突变如何可使Asn-28稳定。
表14：hu37D3-H9.v28.A4变体在应激测试中对脱酰胺化的稳定性
实施例6：人源化抗Tau抗体选择和表征
抗体选择和表征：与人Tau蛋白的结合
在25℃下使用Biacore T200仪器、GE Biacore人IgG捕捉试剂盒和CM5 S系列芯片评估所选抗体的亲和力。将hIgG在10mM HEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(操作缓冲液，HBSP)中稀释至0.25μg/ml，并且在10μl/min的流动速率下捕捉150秒。使用30μl/min的流动速率、300秒缔合阶段和600秒解离阶段，收集以HBSP中0、0.4、1.2、3.7、11、11、33和100nM的浓度注射的人Tau单体的动力学数据。在循环之间，以10μl/min使用依序两次3M氯化镁的30秒注射使表面再生。将数据拟合1:1结合模型(表15)。
表15：所选人源化抗Tau抗体变体的动力学数据
抗体表征：以hIgG4.S228P.YTE形式与人Tau蛋白的结合
在25℃下使用Biacore T200仪器、GE Biacore人FAb捕捉试剂盒和CM5 S系列芯片评估亲和力。将hIgG在10mM HEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(操作缓冲液，HBSP)中稀释至0.5μg/ml，并且在10μl/min的流动速率下捕捉180秒。使用30μl/min的流动速率、300秒缔合阶段和600秒解离阶段，收集以HBSP中0、0.4、1.2、3.7、11、11、33和100nM的浓度注射的人Tau单体的动力学数据。在循环之间，使用依序两次10mM甘氨酸(pH 2.1)的60秒注射使表面再生。将数据拟合1:1结合模型。动力学数据展示于表16中。
表16：通过表面等离子体共振得到hu37D3-H9.v28.A4hIgG4.S228P.YTE与单体人Tau的结合动力学
抗体表征：与食蟹猴Tau蛋白的结合
在25℃下使用Biacore T200仪器、GE Biacore人IgG捕捉试剂盒和CM5 S系列芯片评估亲和力。将hIgG在10mM HEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％ Tween 20(操作缓冲液，HBSP)中稀释至2μg/ml，并且在10μl/min的流动速率下捕捉15秒。收集以介于1.2与100nM之间的最少五个不同非零浓度(其中具有一个重复浓度)注射的人Tau单体的动力学数据。使用30μl/min的流动速率、300秒缔合阶段和600秒解离阶段评估动力学。在循环之间，以10μl/min的流动速率进行3M氯化镁的30秒再生注射。将结果拟合1:1结合模型。动力学数据展示于表17中。
表17：人源化抗Tau抗体对单体食蟹猴Tau的亲和力
人源化抗体hu37D3.v28.A4和hu37D3.v28.F1还结合磷酸化Tau(pTau)。
实施例7：抗Tau抗体的药物代谢动力学
为了评估抗Tau 37D3-H9 mIgG2a抗体的活体内药物代谢动力学，向有意识的小鼠以10mg/kg的剂量将单次静脉内(IV)或腹膜内(IP)快速注射施用C57BL/6小鼠。在给药后至多28天的各个时间点时，收集血浆样本以测定抗Tau抗体浓度。
小鼠血浆中所给予的抗体的浓度用通用ELISA按以下来测量：使用小鼠抗muIgG2a抗体涂层，继而添加起始于1:100稀释度的血浆样本，并且结束于添加小鼠抗muIgG2a-生物素缀合物和随后添加用于检测的与辣根过氧化酶缀合的抗生蛋白链菌素。测定的标准曲线范围是1.56-200ng/mL，并且检测限是0.16μg/mL。低于此检测限的结果报告为小于可报告值(LTR)。
图10展示抗Tau 37D3-H9 mIgG2a的药物代谢动力学分析结果。抗Tau 37D3-H9mIgG2a在野生型C57BL/6小鼠中的暴露和清除率与同型对照抗体类似，其中清除率是6.31mL/天/kg。
为了评估抗Tau 94B2-C1 mIgG2a和抗tau 125B11-H3 mIgG2a的活体内药物代谢动力学，以10mg/kg的剂量向有意识的C57BL/6小鼠施用抗体的单次IP快速注射。在给药后至多28天的各个时间点时，收集血浆样本以测定抗Tau抗体浓度。
小鼠血浆中所给予的抗体的浓度用通用ELISA按以下来测量：使用小鼠抗muIgG2a抗体涂层，继而添加起始于1:100稀释度的血浆样本，并且结束于添加小鼠抗muIgG2a-生物素缀合物和随后添加用于检测的与辣根过氧化酶缀合的抗生蛋白链菌素。测定的标准曲线范围是0.78-100ng/mL，并且检测限是0.078μg/mL。浓度还用特异性ELISA按以下来测量：使用重组Tau作为涂层，继而添加起始于1:10稀释度的血浆样本，并且结束于添加用于检测的与辣根过氧化酶缀合的山羊抗mIgG2a。测定的标准曲线范围是0.078-10ng/mL，并且检测限是0.0008μg/mL。低于此检测限的结果报告为小于可报告值(LTR)。
那些实验的结果展示于图16和图17中。当使用通用测定来分析浓度时，抗Tau94B2 mIgG2a在野生型C57BL/6小鼠中的暴露和清除率与同型对照抗体类似，但当使用特异性测定来分析浓度时，其暴露较低且清除较快。参见图16。通过通用测定所测定的清除率是4.06mL/天/kg，并且通过特异性测定所测定的清除率是7.53mL/天/kg。这些结果表明抗体可随时间经历活体内变化，所述变化损害其识别其靶标的能力。不论何种测定产生浓度，抗Tau 125B11-H3 mIgG2a在野生型C57BL/6小鼠中的暴露和清除率与同型对照抗体类似。参见图17。通过通用测定所测定的清除率是4.96mL/天/kg，并且通过特异性测定所测定的清除率是4.90mL/天/kg。
表18展示抗Tau抗体37D3-H9、94B2-C1和125B11-H3在小鼠中的药物代谢动力学参数。
表18：抗Tau抗体的药物代谢动力学参数
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为了评估hu37D3.v28.A4 hIgG4.S228P和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE抗体的活体内药物代谢动力学，向有意识的猴以1mg/kg的剂量将单次IV快速注射施用食蟹猴(长尾猴(Macaca fascicularis))。在给药后至多49天的各个时间点时，收集血浆样本以测定抗Tau抗体浓度。
猴血浆中所给予的抗体的浓度用通用ELISA按以下来测量：使用绵羊抗人IgG抗体涂层，继而添加起始于1:100稀释度的血浆样本，并且结束于添加用于检测的与辣根过氧化酶缀合的山羊抗人IgG。测定的标准曲线范围是0.156-20ng/mL，并且检测限是0.02μg/mL。低于此检测限的结果报告为小于可报告值(LTR)。
图11展示hu37D3.v28.A4 hIgG4.S228P和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE的药物代谢动力学分析结果。在图11中，各组数据点表示一种动物，并且线表示抗体和测定组中所有动物的平均值。表19展示hu37D3.v28.A4 hIgG4.S228P和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE在食蟹猴中的药物代谢动力学参数。
表19：hu37D3.v28.A4 hIgG4.S228P和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE在食蟹猴中的药物代谢动力学参数
实施例8：抗Tau抗体的进一步表位表征
在比较37D3-H9与生物素化的Tau单体和生物素化肽(MAPT_10-24)后，还评估37D3-H9与其它生物素化肽的结合。在4℃下用在50mM碳酸钠缓冲液(pH 9.6)中稀释至2μg/ml的中性抗生物素蛋白涂布Nunc maxisorp 96孔微孔培养盘持续>12小时。所有后续孵育均在室温下进行。在涂布之后，用SuperblockTM(PBS)阻断缓冲液(Thermo FisherScientific)阻断培养盘两小时，随后用PBS、0.05％聚山梨醇酯20充分洗涤。随后将孔暴露于1μg/ml的生物素化的Tau肽(表20)或Avi标签生物素化的Tau单体中持续一小时，并且如先前洗涤。使用标准固相Fmoc化学合成各肽(参见例如Fmoc solid phase peptidesynthesis:A practical approach；Chan,W.C.,White,P.D.编；Oxford UniversityPress:New York,2000)。使在90％ SuperblockTM(PBS)阻断缓冲液中从500nM连续稀释至50pM的抗体37D3-H9 mIgG2a和hu37D3-H9.v5 hIgG1结合用生物素化的Tau涂布的孔持续90分钟。如先前洗涤各孔，并且用在SuperblockTM阻断缓冲液中1/1000稀释的过氧化酶结合二级抗体(Invitrogen/Life Technologies)检测结合的抗体(分别用兔抗小鼠IgG或山羊抗人IgG(H+L))。在20分钟之后，如先前洗涤各孔，并且用TMB微孔双组分底物(KPL)产生信号。通过添加1M磷酸来中止反应，并且用SpectraMax M2读盘仪来测量450nm处的吸光度。
表20：肽序列
所述实验的结果展示于图12A-图12C中。图12A展示指定抗体中的每一者对指定肽的结合。抗体37D3-H9和94B2-C1两者展示在所述实验中强结合片段10-24，并且抗体94B2-C1还展示强结合片段1-15。抗体19F8-C11和123E9-A1展示强结合片段19-33，而抗体89F4-A1展示强结合片段28-42和37-51。参见图12A。抗体37D3-H9mIgG2a和hu37D3-H9.v5 hIgG1两者展示强结合Tau片段2-24和2-34，并且弱结合片段10-24。参见图12B和图12C。这些结果表明，抗体37D3-H9 mIgG2a和hu37D3-H9.v5 hIgG1结合Tau中成熟蛋白氨基酸2-24内的表位。
在丙氨酸扫描取代实验中，发现突变Y18A和L20A消除鼠类抗体37D3-H9对Tau片段(片段2-21)的结合，表明抗体接触所述Tau残基。使用一系列15聚偏移肽，发现鼠类抗体37D3-H9展示类似结合片段9-23与片段10-24，并且还展示中度结合片段7-21、8-22和11-25。
实施例9：37D3-H9人源化抗体的基于细胞的表征
方法
原代海马区和小神经胶质细胞培养物和海马区-小神经胶质细胞共培养
由胚胎期第16-17天野生型C57BL/6N小鼠制备解离型原代海马区神经元。将细胞以25,000个细胞/孔接种至经PDL/层粘连蛋白涂布的8孔腔室载片(Biocoat，354688Corning)上。将细胞接种和维持在NbActiv4(BrainBits)中，并且一周两次置换一半培养基。在18次细胞分裂时，将重组tau和抗体施用于培养物中。
对于小神经胶质细胞培养，使来自产后第1 -2天C57BL/6N小鼠的皮质和海马区解离，并且在225mm2培养烧瓶中于含10％ FBS的DMEM中生长10-12天。轻轻地震荡培养烧瓶以使小神经胶质细胞解离，并且将含10％ FBS的DMEM中的细胞以30,000个细胞/孔再接种至经PDL/层粘连蛋白涂布的8孔腔室载片上以用于成像或以100,000个细胞/孔再接种至未涂布的48孔培养盘(3548，Corning)上以用于细胞介素测定。在接种之后4-5小时时，将细胞交换至无血清低葡萄糖DMEM中且维持隔夜，随后用重组tau和抗体处理。
海马区-小神经胶质细胞共培养物通过将从225mm2培养烧瓶解离的小神经胶质细胞再接种至8孔载片腔室中18DIV原代海马区神经元上来制备(每一孔12,500个小神经胶质细胞和25,000个神经元)。在小神经胶质细胞接种之后4小时，用重组tau和抗体处理共培养物。
重组tau和抗体的活体外处理
对于18DIV海马区培养物或海马区-小神经胶质细胞共培养物，在37℃下将重组人寡聚tau和抗体(以1:1比率各自500nM)或对照组在神经元培养基(来自1:1的18DIV海马区培养物:新鲜NbActiv4的条件培养基)中预孵育1小时，随后将其添加至细胞中。将细胞与tau抗体混合物或对照组一起在培养基中孵育72小时(海马区培养物)或48小时(海马区-小神经胶质细胞共培养物)。用PBS洗涤细胞三次，随后固定。
对于小神经胶质细胞培养，在37℃下将重组人寡聚tau和抗体或对照组以各自125nM(免疫细胞化学/成像)或各自250nM(细胞介素测定)在不存在血清的低葡萄糖DMEM中预孵育1小时，然后添加至细胞中。对于免疫细胞化学/成像，将细胞与tau抗体混合物或对照组一起孵育10分钟，并且用PBS洗涤三次，随后固定。对于细胞介素测定，将细胞与tau抗体混合物或对照组一起孵育24小时，并且收集各孔的培养基用于细胞介素测定。
免疫细胞化学、成像和量化
用含4％多聚甲醛的PBS使细胞固定15分钟，并且用含0.1％Triton X-100的PBS渗透10分钟。使用10％驴血清进行阻断，并且在4℃下将细胞与含一级抗体的PBS一起孵育隔夜，继而与针对驴中产生的适当物质的经Alexa荧光团标记的二级抗体(Invitrogen)一起孵育。所用一级抗体是抗tau(DAKO)、针对跨氨基酸11-24的人tau N端区开发的兔抗人tau、抗MAP2(ab5392，Abcam)和抗Iba-1(ab5076，Abcam)。用Prolong Gold DAPI(P36935，Invitrogen)和1号盖玻片安装载片。
用LSM780(Carl Zeiss,Inc.)使用Zen 2010软件(Carl Zeiss,Inc.)进行共焦荧光成像。对于海马区培养物和海马区-小神经胶质细胞共培养物的成像，使用PlanApochromat 20×/0.8M27物镜收集间隔0.98μm的5个z堆栈图像。对于MAP2片段化测定，产生最大强度z投射用于图像堆栈，并且使用Metamorph(Molecular Devices,Sunnyvale,CA)分析。使用中间滤波器和最邻近反卷积(deconvolution)以使噪音减少。使用神经突生长模块继而使用形态处理来分析神经突和细胞体长度。将小于15像素(6.225μm)的片段相对于总信号长度标准化以获得MAP2片段化的测量值。
用α-Plan Apochromat 100×/1.46M27物镜使小神经胶质细胞成像。用Image J(1.43u,64-bit,美国国家卫生研究院)进行细胞中重组tau吸收的量化。使用Iba-1信号作为参考人工地画出细胞区域的ROI。测量ROI的tau免疫响应性的面积和积分强度以获得相对于面积标准化的tau免疫响应性。所有分析均在不知道实验条件的情况下进行。
结果
实验的结果展示于图13A-13B中。如图13A中所示，具有充分效应功能的抗体没有针对神经元-小神经胶质细胞共培养物中的Tau毒性的保护性。图13B展示与寡聚Tau和抗体接触的神经元-小神经胶质细胞共培养物的图像(底部图)。缺乏效应功能的抗体37D3-H9hIgG4和hu37D3-H9 hIgG1(N297G)具有针对Tau毒性的保护性，而37D3-H9 hIgG1没有。
实施例10：施用37D3-H9 IgG2a或37D3-H9 IgG2a DANG的Tau Tg小鼠中Tau病变的剂量依赖性减少
在C57BL/6N(Charles River)背景上维持在Thy1启动子下表达人Tau P301L的转殖基因小鼠(Tau P301L-Tg)。将Tau P301L-Tg和野生型同窝小鼠分入处理组中，并且每周一次腹膜内(i.p.)给予30mg/kg IgG2a对照组(抗gp120)；3、10或30mg/kg抗tau 37D3-H9WT IgG2a；3、10或30mg/kg抗tau 37D3-H9 DANG IgG2a。DANG是指IgG2a中的D265A/N297G突变，其消除效应功能。在10mM组氨酸(pH 5.8)、6％蔗糖、0.02％ Tween 20中以10mg/ml的浓度制备所有抗体给药溶液。治疗在13周龄开始。活体内研究中的小鼠组为雄性，并且交错分为3个群体。另外，在3月龄时采集未进行任何处理的3只TauP301L-Tg小鼠以便确定在治疗起始时的基线病变水平。
为了采集组织，用2.5％三溴乙醇(每25g体重0.5ml)使小鼠麻醉，并且经心脏灌注PBS。采集大脑且平分。在4℃下将右半球固定在4％多聚甲醛中持续隔夜，随后转移至磷酸盐缓冲盐水中，然后进行处理以用于免疫组织化学。将左半球在冰上切割成更小，随后在-80℃下冷冻以用于生物化学分析。从所有小鼠获得尾部夹片以确认基因型。
使用块(NeuroScience Associates,Knoxville,TN)将半脑倍增包埋至明胶基质中，并且以25μm厚度冠向切片。在各块内，将大脑位置相对于基因型和处理随机。如先前所描述对个别小鼠半脑或/>块的自由漂浮切片进行染色(Le Pichon等,2013,PLoS One,8(4):e62342)，但用在PBS中洗涤代替在Tris缓冲盐水中洗涤且将一级抗体在4℃下孵育代替在室温下孵育。一级抗体是兔抗pTau212/214(内部产生；0.01μg/ml)。为了避免高背景染色，在亚型特异性的小鼠一级抗体的情况下，我们使用相应亚型特异性二级抗体(例如生物素化的抗小鼠IgG3，Bethyl A90-111B)。
使用Leica SCN400(Leica Microsystems；Buffalo Grove,IL)全载片扫描系统以200×放大率用0.5μm/像素的分辨率使免疫组织化学染色载片成像。在每只动物4个匹配的海马区水平上人工地画出关注区(ROI)，并且使用下文所描述的两个端点以自动化方式量化这些ROI中的染色量。所有图像分析均在不知道基因型和处理组的情况下进行。对于IHC染色定量的正像素区域分析，如先前所描述分析经抗体标记的大脑切片的数字图像(LePichon等,2013)。通过将总正像素相对于总ROI像素面积标准化来计算染色区域百分比。仅对于正像素区域，使用比尔-兰伯特定律(Beer-Lambert law)，吸光度＝-log(透射光强度/入射光强度)来计算积分强度。
所述实验的结果展示于图14中。施用抗tau 37D3-H9 WT IgG2a或抗tau 37D3-H9DANG IgG2a引起海马区中pTau212/214的剂量依赖性减少。
实施例11：人源化37D3-H9κ1变体
制造基于具有κ1轻链的hu37D3-H9.v1的人源化抗体且测试其N28稳定性。所测试三种变体的轻链可变区与hu37D3-H9.v1的比对展示于图18中。三种变体在轻链可变区中彼此不同：hu37D3.v39含有突变F33L，hu37D3.v40含有突变G29T，并且hu37D3.v41含有突变N30Q。
如下对抗体样本进行热应激。将样本缓冲交换至20mM乙酸组氨酸、240mM蔗糖(pH5.5)中，并且稀释至1mg/ml的浓度。使一毫升样本在40℃下经受应激持续2周，并且第二个样本储存在-70℃下作为对照组。随后两个样本均使用胰蛋白酶进行消化以产生肽，可使用液相色谱(LC)-质谱(MS)分析对所述肽进行分析。对于样本中的各肽，在MS中获得滞留时间(从LC)以及高分辨率精确质量和肽离子碎片化信息(氨基酸序列信息)。在±10ppm的窗口下，根据数据集，针对所关注的肽(原生和修饰的肽离子)获得所提取离子色谱图(XIC)且对峰进行积分以测定面积。通过将(修饰的肽的面积)除以(修饰的肽的面积加原生肽的面积)乘以100来计算各样本的相对修饰百分比。随后在对照(t＝0)样本与应激(t＝2周)样本之间比较这些相对百分比。所示百分比表示应激(t＝2周)值减去对照(t＝0)值。结果展示于表21中。结果展现，F33L突变有效减少κ1人源化轻链中的脱酰胺化。
表21-hu37D3-H9.v1变体在针对脱酰胺化的应激测试中的稳定性
在25℃下使用Biacore T200仪器、GE Biacore人FAb捕捉试剂盒和CM5 S系列芯片测量人源化抗体变体的亲和力。将抗体在HBSP(10mM HEPES(pH 7.4)、150mM NaCl、0.05％Tween 20)中稀释至1μg/ml，并且在10μl/min的流动速率下捕捉180秒。使用单循环动力学方法和30μl/min的流动速率收集在HBSP中以1.2、3.7、11、33和100nM注射的人Tau单体的动力学数据。注射各浓度的Tau单体持续3分钟的时段，并且监测解离持续十分钟。在循环之间，用依序两次10mM甘氨酸(pH 2.1)的一分钟注射使表面再生。使用BIAEvaluation软件将数据拟合1:1结合模型。各抗体均在实验内分析两次；表22中的数据展示为平均值±范围。
表22：hu37D3-H9.v1变体对单体Tau的亲和力
实施例12：hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P和hu37D3.v28.A4hIgG4-S228P.YTE在食蟹猴中的药物代谢动力学和药效学
为了评估hu37D3.v28.A4 hIgG4.S228P和hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE抗体的活体内药物代谢动力学和药效学，在第一阶段中以50mg/kg的剂量向每组中五只有意识的食蟹猴(长尾猴)施用单次IV快速注射。使用抗gD hIgG4作为对照组，其还以50mg/kg的剂量使用。在给药后至多35天的各个时间点时，收集血浆和CSF样本以测定抗Tau抗体浓度。在最终样本收集之后，使动物恢复63-64天，随后起始第二阶段。在第二阶段中，将来自第一阶段的15只动物加3只额外动物分成两组；向第一组(n＝9)施用抗体hu37D3.v28.A4hIgG4.S228P且向第二组(n＝9)施用hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE抗体，其均以50mg/kg施用。在给药后第2天和第10天时采集每组4或5只动物的大脑。
食蟹猴血浆、CSF和大脑均质物(下文所描述)中的人IgG4抗体用ELISA按以下来测量：使用绵羊抗人IgG猴吸附抗体涂层，继而添加起始于1:100稀释度的血浆样本、起始于1:20稀释度的CSF样本或起始于1:10稀释度的大脑均质物样本，并且结束于添加经猴吸附以用于检测的与辣根过氧化酶缀合的山羊抗人IgG抗体。使用3,3',5,5'-四甲基联苯胺显色，并且使用1M磷酸中和。在450/620nm处读取样本。测定的标准曲线范围是0.156-20ng/mL，并且检测限对于血浆是0.02μg/mL，对于CSF是0.003μg/mL，并且对于大脑均质物是0.002μg/mL。低于此浓度的结果报告为小于可报告值(LTR)。
药物代谢动力学分析的结果展示于图19A(血浆)和图19B(CSF)和表23和表24中。从分析排除疑似为抗治疗性抗体阳性(ATA+)的动物。这些数据展示，在hu37D3.v28.A4hIgG4.S228P的Fc区中引入YTE突变使抗体的周边和CSF清除率减缓约两倍。
表23：单次IV快速给药后的平均(±SD)血浆清除率和Cmax估算值
表24：单次IV快速给药后的平均(±SD)CSF Cmax估算值
抗体 Cmax(μg/mL)
抗gD hIgG4 1.39±0.751
hu37D3.v28.A4 hIgG4.S228P 0.910±0.552
hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE 2.51±1.93
如下测定注射后第2天和第10天时的大脑抗体浓度。对大脑组织进行称重，并且随后在含有cOmpleteTM、Mini、无EDTA蛋白酶抑制剂混合液片剂的含1％ NP-40的磷酸盐缓冲盐水中均质化。随后在4℃下将均质化的大脑样本旋转1小时，随后以14,000rpm旋转20分钟。分离上清液以用于如上文所描述通过ELISA进行大脑抗体测量。所述实验的结果展示于图21A-图21D中。抗体hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE在大脑中的浓度和抗体hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE的大脑:血浆浓度比率倾向于高于抗体hu37D3.v28.A4hIgG4.S228P。
还测定血浆中的药效学响应。使用电化学发光(ECL)免疫测定(RocheProfessional Diagnostics(RPD),Penzberg,Germany)来测定K2EDTA血浆中的总Tau浓度。对人CSF中总Tau的量化验证免疫测定，并且因为人与食蟹猴Tau之间的相似性，将/>免疫测定视为对CSF和血浆中食蟹猴Tau的测量可接受的。与磷酸化状态无关，所述测定捕获捕捉和检测人和食蟹猴Tau的氨基酸159-224(存在于所有已知同种型中的区)。所述测定的检测下限(LDL)是1.01pg/mL。所述测定耐受15.0mg/mL hu37D3.v28.A4hIgG4-S228P.YTE。
药效学分析的结果展示于图20中。在排除疑似为ATA+的动物和另一只缺少基线值的动物之后，每组存在3只动物。出乎意料地，在给药第一天内，在用YTE变体处理的动物中，血浆Tau水平上升至比用非YTE变体处理更大的程度。此外，由于在早期时间点处，变体之间的PK类似，所以这些结果无法由药物代谢动力学响应预测(图20)。在用YTE变体处理的动物中，更稳健的响应维持整个取样持续时间。
实施例13：hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE在食蟹猴大脑中的药物代谢动力学和药效学
为了评估大脑中的抗体药物代谢动力学，以50mg/kg的剂量向每组中十二只有意识的食蟹猴(长尾猴)施用hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE的单次IV快速注射。使用抗gDhIgG4作为对照组，其还以50mg/kg的剂量使用。在给药后至多42天的各个时间点时，收集血浆样本以测定抗Tau抗体浓度。另外，在至多42天的各个时间点时，杀死2只猴，并且测定大脑和CSF抗体浓度
基本上如实施例12中所描述测定抗体浓度。
图22A-图22B展示以对数(A)和线性(B)标度绘制的，在给药后各个时间点时食蟹猴大脑中的抗体浓度。表25展示大脑浓度参数。
表25：单次IV快速给药后的平均(±SD)大脑PK参数估算值
与抗gD相比较，hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE抗体在最终时间点时展示大脑浓度增加。
还测定大脑各区(包括海马区、小脑和额皮质)中的抗体浓度。图23A-图23C和表26至表28展示所述分析的结果。
表26：单次IV快速给药后的平均海马区PK参数估算值
表27：单次IV快速给药后的平均小脑PK参数估算值
表28：单次IV快速给药后的平均额皮质PK参数估算值
所述实验的结果展示在单次IV注射后将大脑的各个区暴露于抗体hu37D3.v28.A4hIgG4-S228P.YTE中。大脑中的整体暴露跨两组类似，然而，与血浆中的观测类似，与给予抗gD相比较，在最终时间点时，在给予抗体hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE的动物中，大脑中的抗体浓度增加约两倍。参见图23A-图23E。这些结果表明，在给予YTE抗体之后，在大脑中维持更高的最低(终末)浓度。
还测定随时间变化的CSF和血浆中的抗体浓度。图23D(CSF)和图23E(血浆)和表29和表30展示所述分析的结果。
表29：单次IV快速给药后的平均CSF PK参数估算值
表30：单次IV快速给药后的平均血浆PK参数估算值
再次，与血浆和大脑药物代谢动力学类似，与给予抗gD相比较，在最终时间点时，在给予抗体hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE的动物中，CSF和血浆中的抗体浓度增加约两倍。参见图23A-图23E。
使用从食蟹猴收集的血浆样本，评估在单次IV 50mg/kg给药后，抗体hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE和对照抗体的血浆药效学。使用实施例12中所论述的免疫测定对血浆Tau进行定量。
药效学分析的结果展示于图24A-图24B中。图24A展示相对于基线标准化的平均总血浆Tau浓度。图24B展示相对于基线标准化的研究中个别猴的总血浆Tau浓度。与实施例12中观测到的结果类似，施用抗体hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE引起显著增加的血浆Tau水平。虽然不打算受任何特定理论束缚，但所述数据表明hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE结合大脑中的Tau，并且因此，Tau从大脑清除至周边。这些结果与hu37D3.v28.A4 hIgG4-S228P.YTE在大脑中的靶标接合相符。
实施例14：用含有全长Tau蛋白作为抗原的脂质体疫苗对小鼠进行接种
使用具有全长人Tau-441(flTau,SignalChem,Canada)作为抗原的脂质体疫苗来产生抗体。简单来说，在60℃下将DMPC、DMPG脂质(两者由Lipoid AG,Switzerland制造)、胆固醇和单磷酰脂质A (两者由Avanti Polar Lipids,USA制造)以分别9:1:7:0.05的摩尔比溶解于EtOH中持续30min。另外制造相同批次，但不含用于补强接种的佐剂。通过孔径是0.08μm的聚碳酸酯华特曼过滤器(Whatman filter)挤出多层脂质体(EmulsiFlex-C5,Avestin,Germany)。将用作抗原的flTau蛋白在室温下以100:1的TCEP/蛋白质摩尔比用TCEP(Sigma-Aldrich,Switzerland)还原30min。在周围温度下以30:1的脂质/蛋白质摩尔比将flTau进一步偶合至DSPE-PEG(2000)顺丁烯二酰亚胺脂质(Avanti Polar Lipids)持续4h。在37℃下将偶合产物与预成形脂质体一起孵育15h。在PBS(pH7.4)中进一步对脂质体进行超滤和透滤，通过穿过0.2μm聚醚砜(PES)膜针筒过滤器进行无菌过滤，并且储存在5℃下直至施用。
对于接种，对雌性C57BL/6JOlaHsd(C57BL/6)野生型小鼠(Harlan,USA)进行抽血且制备肝素化血浆，并且然后在10周龄时开始用上文所描述的脂质体疫苗接种。在第0、5、8、21和35天通过皮下注射(s.c.)进行接种，在第14、28和35天用其它血液来进行。在融合之前，在第55、56和57天用不含佐剂的疫苗制剂对小鼠补强免疫三次。将小鼠处死并在第58天与骨髓瘤细胞进行融合。使用来自四个小鼠的脾细胞来进行融合，其中所用的细胞个别地来自两只小鼠且汇集从两只小鼠，用于总共三个分开的融合。对于筛选融合产物，使用基于Luminex珠粒的多路技术(Luminex,The Netherlands)进行1:8上清液稀释，用对IgG1、IgG2a、IgG2b、IgG2c和IgG3子类具特异性的抗小鼠IgG-Fc抗体(Jackson ImmunoResearch,USA)捕获IgG。结合缀合至flTau的珠粒且任选地结合以下Tau片段中的一者Tau50-391、Tau99-441、Tau151-421、Tau151-441或Tau231-441：(全部由SignalChem制造)识别183个命中物(hit)。通过限制对由对flTau且任选地为以上Tau片段中的一者的最优选结合剂的最初一轮筛选所选择的50种杂交瘤的稀释来进行亚克隆。在限制稀释之后，然后最终杂交瘤适合于不含血清的培养基，并且从稳定菌落收集培养基用于抗体筛选和选择。由此筛选识别出抗体211G6-B6、231G3F10和307H3E8。
图2E展示抗体231G3F10与单聚和寡聚Tau的结合。
大体上如实施例2中所描述进行表位定位。表31列出用于211G6-B6、231G3F10和307H3E8抗体的表位。表5展示抗体211G6-B6、231G3F10和307H3E8的KD值。
表31：用脂质体疫苗产生的抗体的表位定位
抗体 表位
211G6-B6 91-105(外显子3)
231G3F10 37-44
307H3E8 421-429、422-429
尽管出于清楚理解的目的，已借助于说明和实施例相当详细地描述前述本发明，但所述描述和实施例不应解释为限制本发明的范畴。本文所引用的所有专利和科学文献的揭示内容均以全文引用的方式明确并入。
序列表
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本公开涉及下述实施方案。
1.一种结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau，并且其中所述抗体结合成熟人Tau的氨基酸19-33、37-44、37-51、64-78、73-87、91-105、109-123、190-204、421-429或422-429内的表位。
2.如实施方案1所述的分离的抗体，其是单克隆抗体。
3.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其是小鼠抗体、人抗体、人源化抗体或嵌合抗体。
4.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其是结合人Tau的抗体片段。
5.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其中所述人Tau包含SEQ ID NO:2的序列。
6.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；和
包含SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；
b)包含SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；和
包含SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；
c)包含SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；
d)包含SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；
e)包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；
f)包含SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；
g)包含SEQ ID NO:653的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:655的氨基酸序列的HVR-H3；
h)包含SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；和包含SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；i)包含SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；和
包含SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；
j)包含SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；和
包含SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；
k)包含SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；和
包含SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；或
l)包含SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；和
包含SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3。
7.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：a)包含SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3；
b)包含SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3；
c)包含SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3；
d)包含SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3；
e)包含SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3；
f)包含SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3；
g)包含SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3；
h)包含SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3；i)包含SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；包含SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3；
j)包含SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3；
k)包含SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3；或
l)包含SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
8.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：a)包含SEQ ID NO:605的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:607的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3；
b)包含SEQ ID NO:613的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:615的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3；
c)包含SEQ ID NO:621的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:623的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3；
d)包含SEQ ID NO:629的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:631的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3；
e)包含SEQ ID NO:637的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:639的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3；
f)包含SEQ ID NO:645的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:647的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3；
g)包含SEQ ID NO:653的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:655的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3；
h)包含SEQ ID NO:661的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:663的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3；i)包含SEQ ID NO:669的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:671的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3；j)包含SEQ ID NO:677的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:679的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3；k)包含SEQ ID NO:685的氨基酸序列的HVR-H1；包含SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:687的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和包含SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3；或
l)包含SEQ ID NO:693的氨基酸序列的HVR-H1；
包含SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；
包含SEQ ID NO:695的氨基酸序列的HVR-H3；
包含SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；
包含SEQ ID NO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和
包含SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
9.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：
a)包含与SEQ ID NO:603具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
b)包含与SEQ ID NO:604具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
c)如(a)中的VH和如(b)中的VL；
d)包含与SEQ ID NO:611具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
e)包含与SEQ ID NO:612具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
f)如(d)中的VH和如(e)中的VL；
g)包含与SEQ ID NO:619具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
h)包含与SEQ ID NO:620具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
i)如(g)中的VH和如(h)中的VL；
j)包含与SEQ ID NO:627具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
k)包含与SEQ ID NO:628具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
l)如(j)中的VH和如(k)中的VL；
m)包含与SEQ ID NO:635具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
n)包含与SEQ ID NO:636具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
o)如(m)中的VH和如(n)中的VL；
p)包含与SEQ ID NO:643具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
q)包含与SEQ ID NO:644具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
r)如(p)中的VH和如(q)中的VL；
s)包含与SEQ ID NO:651具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
t)包含与SEQ ID NO:652具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
u)如(s)中的VH和如(t)中的VL；
v)包含与SEQ ID NO:659具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
w)包含与SEQ ID NO:660具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
x)如(v)中的VH和如(w)中的VL；
y)包含与SEQ ID NO:667具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
z)包含与SEQ ID NO:668具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
aa)如(y)中的VH和如(z)中的VL；
bb)包含与SEQ ID NO:675具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
cc)包含与SEQ ID NO:676具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
dd)如(bb)中的VH和如(cc)中的VL；
ee)包含与SEQ ID NO:683具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
ff)包含与SEQ ID NO:684具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
gg)如(ee)中的VH和如(ff)中的VL；或
hh)包含与SEQ ID NO:691具有至少95％同一性的序列的重链可变区(VH)；
ii)包含与SEQ ID NO:692具有至少95％同一性的序列的轻链可变区(VL)；
jj)如(hh)中的VH和如(ii)中的VL。
10.如前述实施方案中任一项所述的抗体，其中所述抗体包含：
a)包含SEQ ID NO:603的序列的重链可变区(VH)；
b)包含SEQ ID NO:604的序列的轻链可变区(VL)；
c)如(a)中的VH和如(b)中的VL；
d)包含SEQ ID NO:611的序列的重链可变区(VH)；
e)包含SEQ ID NO:612的序列的轻链可变区(VL)；
f)如(d)中的VH和如(e)中的VL；
g)包含SEQ ID NO:619的序列的重链可变区(VH)；
h)包含SEQ ID NO:620的序列的轻链可变区(VL)；
i)如(g)中的VH和如(h)中的VL；
j)包含SEQ ID NO:627的序列的重链可变区(VH)；
k)包含SEQ ID NO:628的序列的轻链可变区(VL)；
l)如(j)中的VH和如(k)中的VL；
m)包含SEQ ID NO:635的序列的重链可变区(VH)；
n)包含SEQ ID NO:636的序列的轻链可变区(VL)；
o)如(m)中的VH和如(n)中的VL；
p)包含SEQ ID NO:643的序列的重链可变区(VH)；
q)包含SEQ ID NO:644的序列的轻链可变区(VL)；
r)如(p)中的VH和如(q)中的VL；
s)包含SEQ ID NO:651的序列的重链可变区(VH)；
t)包含SEQ ID NO:652的序列的轻链可变区(VL)；
u)如(s)中的VH和如(t)中的VL；
v)包含SEQ ID NO:659的序列的重链可变区(VH)；
w)包含SEQ ID NO:660的序列的轻链可变区(VL)；
x)如(v)中的VH和如(w)中的VL；
y)包含SEQ ID NO:667的序列的重链可变区(VH)；
z)包含SEQ ID NO:668的序列的轻链可变区(VL)；
aa)如(y)中的VH和如(z)中的VL；
bb)包含SEQ ID NO:675的序列的重链可变区(VH)；
cc)包含SEQ ID NO:676的序列的轻链可变区(VL)；
dd)如(bb)中的VH和如(cc)中的VL；
ee)包含SEQ ID NO:683的序列的重链可变区(VH)；
ff)包含SEQ ID NO:684的序列的轻链可变区(VL)；
gg)如(ee)中的VH和如(ff)中的VL；或
hh)包含SEQ ID NO:691的序列的重链可变区(VH)；
ii)包含SEQ ID NO:692的序列的轻链可变区(VL)；
jj)如(hh)中的VH和如(ii)中的VL。
11.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:605的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:606的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:607的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:608的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:609的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:610的氨基酸序列的HVR-L3。
12.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:613的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:614的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:615的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:616的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:617的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:618的氨基酸序列的HVR-L3。
13.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:621的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:622的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:623的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:624的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:625的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:626的氨基酸序列的HVR-L3。
14.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:629的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:630的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:631的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:632的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:633的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:634的氨基酸序列的HVR-L3。
15.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:637的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:638的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:639的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:640的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:641的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:642的氨基酸序列的HVR-L3。
16.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:645的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:646的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:647的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:648的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:649的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:650的氨基酸序列的HVR-L3。
17.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:653的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:654的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:655的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:656的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:657的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:658的氨基酸序列的HVR-L3。
18.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:661的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:662的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:663的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:664的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:665的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:666的氨基酸序列的HVR-L3。
19.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:669的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:670的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:671的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:672的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:673的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:674的氨基酸序列的HVR-L3。
20.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:677的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:678的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:679的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:680的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:681的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:682的氨基酸序列的HVR-L3。
21.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:685的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:686的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:687的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:688的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:689的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:690的氨基酸序列的HVR-L3。
22.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含：含有SEQ IDNO:693的氨基酸序列的HVR-H1；含有SEQ ID NO:694的氨基酸序列的HVR-H2；含有SEQ IDNO:695的氨基酸序列的HVR-H3；含有SEQ ID NO:696的氨基酸序列的HVR-L1；含有SEQ IDNO:697的氨基酸序列的HVR-L2；和含有SEQ ID NO:698的氨基酸序列的HVR-L3。
23.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:603的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:604的氨基酸序列的轻链可变区。
24.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:611的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:612的氨基酸序列的轻链可变区。
25.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:619的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:620的氨基酸序列的轻链可变区。
26.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:627的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:628的氨基酸序列的轻链可变区。
27.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:635的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:636的氨基酸序列的轻链可变区。
28.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:643的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:644的氨基酸序列的轻链可变区。
29.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:651的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:652的氨基酸序列的轻链可变区。
30.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:659的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:660的氨基酸序列的轻链可变区。
31.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:667的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:668的氨基酸序列的轻链可变区。
32.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:675的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:676的氨基酸序列的轻链可变区。
33.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:683的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:684的氨基酸序列的轻链可变区。
34.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体包含含有SEQ IDNO:691的氨基酸序列的重链可变区和含有SEQ ID NO:692的氨基酸序列的轻链可变区。
35.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体是IgG1或IgG4抗体。
36.如实施方案35所述的分离的抗体，其中所述抗体是IgG4抗体。
37.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其是抗体片段。
38.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其中所述抗体以小于400nM、小于100nM、小于75nM或小于50nM的KD结合单体Tau、磷酸化Tau、非磷酸化Tau和寡聚Tau中的每一者。
39.如前述实施方案中任一项所述的分离的抗体，其结合食蟹猴Tau。
40.一种分离的核酸，其编码如前述实施方案中任一项所述的抗体。
41.一种宿主细胞，其包含如实施方案40所述的核酸。
42.一种产生抗体的方法，其包括在适合于产生所述抗体的条件下培养如实施方案41所述的宿主细胞。
43.一种免疫缀合物，其包含如实施方案1至39中任一项所述的分离的抗体和第二治疗剂。
44.一种经标记的抗体，其包含如实施方案1至39中任一项所述的抗体和可检测标记。
45.一种检测神经原纤维缠结、神经纤维网线或营养不良性神经炎的方法，其包括使样本与如实施方案1至39中任一项所述的抗体接触。
46.一种检测样本中的Tau的方法，其包括使所述样本与如实施方案1至39中任一项所述的抗体接触。
47.一种预测受试者是否将对用治疗性抗Tau抗体治疗有响应的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自所述受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。
48.如实施方案47所述的方法，其中如果在所述样本中检测到的Tau水平大于对照Tau水平，那么预测所述受试者对用治疗性抗Tau抗体治疗有响应。
49.一种选择患者以供用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。
50.如实施方案49所述的方法，其中如果在所述样本中检测到的Tau水平大于对照Tau水平，那么选择所述受试者以供用治疗性抗Tau抗体治疗。
51.一种监测用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自经历治疗的受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位。
52.如实施方案51所述的方法，其中与在治疗期间在较早时间点或在开始治疗之前从受试者取得的第一样本中的Tau水平相比，在治疗期间在较晚时间点从受试者取得的第二样本中的Tau增加表明所述治疗有效。
53.如实施方案47至52中任一项所述的方法，其中所述治疗性抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸2-24内的表位。
54.如实施方案47至53中任一项所述的方法，其中所述检测抗Tau抗体不与所述治疗性抗Tau抗体竞争结合Tau。
55.如实施方案47至54中任一项所述的方法，其中所述检测抗Tau抗体是选自表4或表31的抗体。
56.如实施方案47至55中任一项所述的方法，其中所述检测抗Tau抗体是如实施方案1至39中任一项的抗体。
57.如实施方案47至56中任一项所述的方法，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸37-44内的表位。
58.如实施方案47至57中任一项所述的方法，其中所述检测抗Tau抗体选自15C6-A7、123E9-A1、7A11C12、231G3F10、63H3-D8、64B9-F12和72E12-H9。
59.一种选择患者以供用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。
60.如实施方案59所述的方法，其中如果在所述样本中检测到的2N同种型的水平大于所述2N同种型的对照水平，那么选择所述受试者以供用治疗性抗Tau抗体治疗。
61.如实施方案59所述的方法，其中如果在所述样本中检测到所述2N同种型，那么选择所述受试者以供用治疗性抗Tau抗体治疗。
62.一种监测患有tau蛋白病的受试者的认知损伤的进展的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自所述受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。
63.如实施方案62所述的方法，其中成熟人Tau的2N同种型的水平增加指示认知损伤的进展。
64.一种监测用治疗性抗Tau抗体治疗的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自经历治疗的受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。
65.如实施方案64所述的方法，其中成熟人Tau的2N同种型的水平降低表明所述治疗有效。
66.如实施方案59至65中任一项所述的方法，其中所述检测抗体结合成熟人Tau的氨基酸64-78、73-87、82-96、91-105、100-114、109-123、118-132、136-150、154-168、163-177、172-177、190-204、421-429或422-429内的表位。
67.如实施方案59至66中任一项所述的方法，其中所述检测抗体是选自表4或表31的抗体。
68.如实施方案59至67中任一项所述的方法，其中所述检测抗体结合氨基酸73-87、91-105、64-78或190-204内的表位。
69.如实施方案59至68中任一项所述的方法，其中所述检测抗体选自30A1C9、211G6-B6、77D1-D2和71H8-D6。
70.如实施方案59至67中任一项所述的方法，其中所述检测抗体结合氨基酸64-78或109-123内的表位。
71.如实施方案59至67和70中任一项所述的方法，其中所述检测抗体选自30D12-B5、49G10-F4和65B1-A2。
72.如实施方案45至71中任一项所述的方法，其中所述样本是脑脊髓液样本或血液样本。

Claims (9)

1.一种结合人Tau的分离的抗体，其中所述抗体结合单体Tau、寡聚Tau、非磷酸化Tau和磷酸化Tau，并且其中所述抗体结合成熟人Tau的氨基酸19-33、37-44、37-51、64-78、73-87、91-105、109-123、190-204、421-429或422-429内的表位。
2.一种分离的核酸，其编码如权利要求1所述的抗体。
3.一种宿主细胞，其包含如权利要求2所述的核酸。
4.一种产生抗体的方法，其包括在适合于产生所述抗体的条件下培养如权利要求3所述的宿主细胞。
5.一种免疫缀合物，其包含如权利要求1所述的分离的抗体和第二治疗剂。
6.一种经标记的抗体，其包含如权利要求1所述的抗体和可检测标记。
7.一种检测神经原纤维缠结、神经纤维网线或营养不良性神经炎的方法，其包括使样本与如权利要求1所述的抗体接触。
8.一种检测样本中的Tau的方法，其包括使所述样本与如权利要求1所述的抗体接触。
9.一种方法，
(a).其用于预测受试者是否将对用治疗性抗Tau抗体治疗有响应的方法，其包括用检测抗Tau抗体检测来自所述受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位；
(b).其用于选择患者以供用治疗性抗Tau抗体治疗，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位；
(c).其用于监测用治疗性抗Tau抗体治疗，其包括用检测抗Tau抗体检测来自经历治疗的受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的氨基酸1-15、10-24、19-33、19-42、28-42、28-44、37-44或37-51内的表位；
(d).其用于一种选择患者以供用治疗性抗Tau抗体治疗，其包括用检测抗Tau抗体检测来自受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型；
(e).其用于监测患有tau蛋白病的受试者的认知损伤的进展，其包括用检测抗Tau抗体检测来自所述受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型；或
(f).其用于监测用治疗性抗Tau抗体治疗，其包括用检测抗Tau抗体检测来自经历治疗的受试者的样本中的Tau，其中所述检测抗Tau抗体结合成熟人Tau的2N同种型。
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