TW202003036A - 穩定水性抗-tau抗體調配物 - Google Patents

Abstract

本發明提供包括高濃度之ABBV-8E12之穩定水性緩衝組合物，例如包含濃度約100 mg/ml之ABBV-8E12、至少一種緩衝劑、賦形劑、表面活性劑及視情況抗氧化劑之穩定水性緩衝組合物。

Description

穩定水性抗-TAU抗體調配物

本發明概言之係關於穩定水性抗-tau抗體調配物，包含具有高蛋白質濃度之ABBV-8E12抗-tau抗體之穩定水性調配物。

Tau蛋白病變通常具有不可溶過度磷酸化tau蛋白在腦中之累積。超過20種不同神經退化性病症之特徵在於某種程度之神經原纖維退化且可歸類為tau蛋白病變(Williams 2006)。原型tau蛋白病變(例如進行性核上性麻痺(PSP)及皮質基底核退化(CBD))之特徵在於tau內含物成為唯一或主要之中樞神經系統病灶。原型tau蛋白病變與在其他神經病理學特徵(如在阿茲海默氏病(Alzheimer's Disease，AD)中發現之類澱粉β (Aβ)斑或在帕金森氏病(Parkinson's Disease，PD)中發現之路易氏體(Lewy dodies))存在下發現tau聚集物之其他tau蛋白病變不同。在該等非原型tau蛋白病變中，更無法確定tau病況是否代表原發性疾病驅動力或其是否繼發於其他蛋白質錯誤摺疊及神經退化。

存在充分實驗證據及生物原理以支持tau免疫療法策略作為抵抗神經退化之tau病況之方式。首先，tau通常係高度可溶性、天然非摺疊細胞內蛋白質，因此細胞外抗體不可能影響tau之正常功能。第二，在人類及轉基因小鼠tau蛋白病變模型中，tau病況之負荷與進行性神經元功能障礙、突觸損失及功能衰退相關。第三，在病理學條件下，tau變得錯誤摺疊且聚集至由病理學tau原纖維構成之神經元內神經原纖維纏結(NFT)中。在人類tau蛋白病變中，此病況以疾病特異性模式自一個腦區域進展至另一個區域。實驗數據表明，tau聚集物可自細胞擴散至細胞以誘導腦中之進一步tau聚集及tau病況擴散。此數據表明，在一個細胞中產生之聚集物釋放至細胞外空間中且可促進相鄰或所連接細胞中之聚集。最後，已證實，抗-tau抗體可預防或減緩攜載tau之突變人類形式之小鼠之腦中tau病況的進展。抗-tau抗體已闡述於(例如)美國專利申請案公開案第2017/0058024號及美國專利第2015/0183855號中，該等專利之全部揭示內容之全部內容皆以引用方式併入本文中。ABBV-8E12亦稱為C2N-8E12，其係人類化單株抗-tau抗體。

通常，基於蛋白質之醫藥產品需要以高濃度調配以達成治療效能。在治療應用中期望高度濃縮之蛋白質調配物，此乃因該等調配物容許劑量具有較小體積以限制患者不適性，且可更經濟地包裝及儲存。然而，高蛋白質濃度調配物之研發呈現許多難題，包含製造、穩定性、分析及(尤其對於治療性蛋白質而言)遞送之難題。舉例而言，關於蛋白質之聚集、不溶性及降解之困難通常隨著調配物中之蛋白質濃度之升高而增加(綜述可參見Shire, S. J.等人，J. Pharm. Sci., 93, 1390 (2004))。在較低添加劑或蛋白質濃度下提供有益效應之添加劑可引起先前未見之負效應。高濃度蛋白質調配物之產生可引起關於乳光、聚集及沈澱之重大問題。除潛在標準蛋白質聚集及微粒形成外，可發生可逆自締合，此可增加使得藉由注射進行之遞送複雜化之黏度或其他性質。高黏度亦可使得藉由過濾方式來製造高蛋白質濃縮物變複雜。

因此，醫藥蛋白質調配物通常謹慎平衡成分及濃度以增強蛋白質穩定性及治療需求，同時限制任何不利副效應。

隨著蛋白質及其他生物大分子作為藥物分子獲得更大關注，用於遞送該等分子之調配物變為重要問題。儘管用於治療應用之蛋白質之大規模製造已取得革命性進展，但該等藥劑在身體中之有效及便利遞送因其固有物理化學及生物性質而仍係重大難題，該等固有物理化學及生物性質包含較差生物膜滲透、較大分子大小、短血漿半衰期、自締合、物理及化學不穩定性、聚集、吸附及免疫原性。

因此，仍需要之高濃度穩定水性抗-tau抗體調配物，包含高濃度穩定水性ABBV-8E12調配物。

在實施例中，本發明提供包括濃度約為100 mg/ml之抗體之穩定水性緩衝組合物。在實施例中，抗體包括：可變重鏈，其包括SEQ ID NO: 6之CDR1序列、SEQ ID NO:7之CDR2序列及SEQ ID NO: 8之CDR3序列；及可變輕鏈，其包括SEQ ID NO:2之CDR1序列、SEQ ID NO: 3之CDR2序列及SEQ ID NO: 4之CDR3序列。在實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之輕鏈及含有SEQ ID NO: 10中所述之胺基酸序列之重鏈。在實施例中，抗體係ABBV-8E12。在實施例中，組合物進一步包括至少一種緩衝劑、賦形劑、表面活性劑及視情況抗氧化劑。在實施例中，緩衝劑係選自由以下組成之群：組胺酸緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑及琥珀酸鹽緩衝劑。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯，例如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，賦形劑可為鹽(例如NaCl)、多元醇(例如甘露醇、山梨醇或海藻糖)或糖(例如蔗糖、葡萄糖或右旋糖)。在實施例中，pH為約5至約7。在實施例中，組合物在室溫下之黏度小於約20 mPas，例如小於10 mPas或小於5 mPas。

在實施例中，本發明提供含有濃度約為100 mg/ml之ABBV-8E12之穩定水性緩衝組合物。在實施例中，組合物進一步含有至少一種緩衝劑及表面活性劑。組合物亦可含有至少一種賦形劑及/或抗氧化劑。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，賦形劑可為鹽(例如NaCl)、多元醇(例如山梨醇)或糖(例如蔗糖)。在實施例中，抗氧化劑可為胺基酸，例如甲硫胺酸。在實施例中，緩衝劑係選自由以下組成之群：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性緩衝組合物，其包括濃度約為100 mg/ml之ABBV-8E12、組胺酸、聚山梨醇酯、賦形劑及視情況抗氧化劑。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性緩衝組合物，其含有濃度約為100 mg/ml之ABBV-8E12、組胺酸、蔗糖及聚山梨醇酯。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。

相關申請案交叉參考

本申請案主張2018年3月23日提出申請之美國臨時申請案第62/647,615號之權益，該申請案之整個揭示內容之全部內容以引用方式併入本文中。

高濃度蛋白質調配物之製備可引起關於乳光及穩定性之問題。在長期性儲存包括高蛋白質濃度(例如100 mg/ml)之ABBV-8E12之水性醫藥組合物時，ABBV-8E12之活性可因聚集及/或降解而發生損失或降低。本發明提供具有高蛋白質濃度(例如100 mg/ml)且容許長期儲存ABBV-8E12之ABBV-8E12之水性調配物，從而ABBV-8E12在儲存過程中較為穩定且呈液體或冷凍狀態。如下文所論述及本發明實例中所展示，本發明之水性調配物克服了穩定性及濁度之問題以提供ABBV-8E12之穩定高濃度調配物。所提供調配物無需任何額外步驟(例如再水合)。

現詳細闡述本發明之各個實施例。如說明及整個申請專利範圍中所使用，除非上下文明外另確指示，否則「一個(a、an)」及「該(the)」之含義包含複數個指示物。同樣，如說明及整個申請專利範圍中所使用，除非上下文另外明確指示，否則在「在……中(in)」之意義包含「在……中(in)」及「在……上(on)」。另外，本發明中所用之一些術語更具體定義於下文中。

術語「水性調配物」係指其中溶劑係水之溶液。

本文所用之術語「抗體」係指免疫球蛋白分子，其包括藉由二硫鍵相互連結之4條多肽鏈：兩條重(H)鏈及兩條輕(L)鏈。每一重鏈包括重鏈可變區(「HCVR」或「VH」)及重鏈恆定區。重鏈恆定區包括三個結構域(CH1、CH2及CH3)。每一輕鏈包括輕鏈可變區(「LCVR」或「VL」)及輕鏈恆定區。輕鏈恆定區包括一個結構域(CL)。VH及VL區可進一步細分成超變區(稱為互補決定區(CDR))及更保守之區(稱為框架區(FR))，二者間雜排列。每一VH及VL由三個CDR及四個FR構成，其自胺基-末端至羧基-末端按下列順序佈置：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在實施例中，調配物含有如WO2016/201434 (其整個揭示內容之全部內容以引用方式併入本文中)中所述之胺基酸序列之抗體。

術語「ABBV-8E12」與術語「C2N-8E12」同義，且係指人類化重組IgG4抗人類tau抗體，其包括重鏈(VH)區及輕鏈(VL)區且具有如圖1及圖2中所述之胺基酸序列。ABBV-8E12包括如SEQ ID NO: 2、3及4中分別所述之LCDR1、LCDR2及LCDR3及如SEQ ID NO: 6、7及8中所述之HCDR1、HCDR2及HCDR3。ABBV-8E12包括如SEQ ID NO: 1中所述之輕鏈可變區及如SEQ ID NO: 5中所述之重鏈可變區。ABBV-8E12包括含有SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之輕鏈及含有SEQ ID NO: 10中所述之胺基酸序列之重鏈。

出於本發明目的，「ABBV-8E12」亦涵蓋在胺基酸結構(包含胺基酸之添加、缺失及/或取代)或醣基化性質方面具有並不顯著影響多肽功能之微小修飾之ABBV-8E12。

術語「經分離抗體」係指實質上不含具有不同抗原特異性之其他抗體的抗體(舉例而言，特異性結合tau之經分離抗體實質上不含特異性結合除tau外之抗原之抗體)。另外，經分離抗體實質上可不含其他細胞材料及/或化學物質。

術語「甘胺酸」係指密碼子係GGT、GGC、GGA及GGG之胺基酸。

術語「精胺酸」係指密碼子係CCU、CCC、CCA及CCG之α-胺基酸。

術語「丙胺酸」係指密碼子係GCT、GCC、GCA及GCG之胺基酸。

術語「甲硫胺酸」係指密碼子係ATG之胺基酸。

術語「麩胺酸鹽」係指密碼子係GAA及GAG之胺基酸。

術語「糖」係指單醣、二醣及多醣。糖之實例包含(但不限於)蔗糖、葡萄糖、右旋糖及其他糖。

術語「多元醇」係指含有多個羥基之醇。多元醇之實例包含(但不限於)甘露醇、山梨醇及其他多元醇。

術語「金屬離子」係指具有淨正電荷或負電荷之金屬原子。出於本發明目的，術語「金屬離子」亦包含金屬離子源，包含(但不限於)金屬鹽。

術語「長期儲存」或「長期穩定性」應理解為意指，醫藥組合物可儲存至少三個月(亦即三個月或更長)，例如大於6個月(6個月或更長)或一年以上或兩年以上。長期儲存亦理解為意指，以液體或冷凍形式儲存醫藥組合物。亦預計，組合物可冷凍及解凍一次以上。

關於長期儲存之術語「穩定」應理解為意指，相對於開始儲存時之組合物活性，醫藥組合物內之ABBV-8E12並不失去大於20%或更佳地15%或10%或5%之其活性。

術語「實質上不含」意指，不存在物質，或僅存在不對組合物性質具有任何實質性影響之最小痕量物質。若提及並無某一物質之量，則其應理解為「無可檢測量」。

術語「哺乳動物」包含(但不限於)人類。

術語「醫藥上可接受之載劑」係指任一習用類型之無毒固體、半固體或液體填充劑、稀釋劑、囊封材料、調配輔助劑或賦形劑。醫藥上可接受之載劑在所採用劑量及濃度下對接受者無毒且與調配物之其他成分相容。

術語「組合物」係指通常含有載劑(例如醫藥上可接受之載劑或在業內習用且適於投與個體以應用於治療、診斷或預防目的之賦形劑)之混合物。其可包含細胞培養物，其中多肽或多核苷酸存在於細胞或培養基中。舉例而言，用於經口投與之組合物可形成溶液、懸浮液、錠劑、丸劑、膠囊、持續釋放調配物、口服沖洗劑或粉劑。

術語「醫藥組合物」及「調配物」可互換使用。

術語「治療」係指用於哺乳動物疾病之任何治療劑之投與或施用，且包含抑制疾病，阻止其發生，減輕疾病(例如藉由引起消退，或恢復或修復損失、失去或缺陷功能；或刺激無效過程)。該術語包含獲得期望之藥理學及/或生理學效應，涵蓋哺乳動物之病理學病狀或病症之任何治療。該效應可為預防，自完全或部分地預防病症或其症狀而言，及/或可為治療，自部分或完全治癒病症及/或可歸因於該病症之不良效應而言。其包含(1)預防該病症發生或復發於可能易患該病症但尚無症狀之個體中，(2)抑制該病症，例如阻止其發生，(3)停止或終止該病症或至少其相關症狀，從而宿主不再罹患該病症或其症狀，例如引起該病症或其症狀消退，例如藉由恢復或修復損失、失去或缺陷功能，或刺激無效過程，或(4)減輕、緩解或改善該病症或其相關症狀，其中改善係以廣泛意義用於指至少減小諸如發炎、疼痛及/或腫瘤大小等參數之量值。

術語「疾病」係指需要醫學介入或期望醫學介入之任何病狀、感染、病症或症候群。該醫學介入可包含治療、診斷及/或預防。

術語「治療有效量」係指在投與活個體時對活個體達成期望效應之量。舉例而言，投與活個體之本發明抗體之有效量係預防及/或治療tau蛋白病變(tauopathy)(例如阿茲海默氏病或進行性核上性麻痺)之量。精確量將取決於治療目的，且可由熟習此項技術者使用已知技術確定。如業內所知，可能需要對於全身性與局部遞送、年齡、體重、一般健康、性別、飲食、投與時間、藥物相互作用及病狀之嚴重程度進行調節，且熟習此項技術者可使用常規實驗確定。

術語「tau蛋白病變」係指特徵在於過度磷酸化tau蛋白累積於腦中之神經退化性疾病。tau蛋白病變包含例如阿茲海默氏病或進行性核上性麻痺。

實施例

本發明實施例更詳細地闡釋於下文中。

本發明組合物包括ABBV-8E12。如上文所論述，ABBV-8E12 (亦稱為C2N-8E12)係特異性結合人類tau之人類化重組IgG4抗體。ABBV-8E12已闡述於(例如) WO2016/201434中，該案件之整個揭示內容之全部內容以引用方式併入本文中。可(例如)藉由業內已知之適宜方法來製備本發明之適於儲存之ABBV-8E12。可藉由任一適宜標準方法來純化ABBV-8E12。在ABBV-8E12產生於細胞內時，可(例如)藉由離心或超濾來去除微粒碎屑。在ABBV-8E12分泌至培養基中時，可首先使用標準多肽濃度過濾器濃縮來自該等表現系統之上清液。亦可添加蛋白酶抑制劑以抑制蛋白質水解，且可包含抗生素以預防微生物之生長。

可使用(例如)羥磷灰石層析、凝膠電泳、透析、親和力層析及其他適宜純化技術之任一組合來純化ABBV-8E12，該等其他適宜純化技術包含(但不限於)蛋白質A層析、離子交換管柱上分級分離、乙醇沈澱、反相HPLC、二氧化矽上層析、肝素SEPHAROSET®上層析、陰離子或陽離子交換樹脂層析(例如聚天門冬胺酸管柱)、層析聚焦、CDS-PAGE及硫酸銨沈澱。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括：抗體，該抗體包括含有SEQ ID NO: 6之CDR1序列、SEQ ID NO:7之CDR2序列及SEQ ID NO: 8之CDR3序列之可變重鏈；及含有SEQ ID NO:2之CDR1序列、SEQ ID NO: 3之CDR2序列及SEQ ID NO: 4之CDR3序列之可變輕鏈；表面活性劑；緩衝劑；視情況賦形劑；及視情況抗氧化劑，其中抗體之濃度約為100 mg/ml。在實施例中，抗體包括如SEQ ID NO: 1中所述之輕鏈可變區及如SEQ ID NO: 5中所述之重鏈可變區。在實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之輕鏈及含有SEQ ID NO: 10中所述之胺基酸序列之重鏈。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括ABBV-8E12、表面活性劑、緩衝劑、視情況賦形劑及視情況抗氧化劑，其中ABBV-8E12之濃度約為100 mg/mL。在包括緩衝劑之本發明實施例中，緩衝劑可選自乙酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄糖酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、組胺酸、酒石酸鹽、馬來酸鹽、己二酸、乳酸或參羥甲基胺基甲烷(tris)。在實施例中，緩衝劑係組胺酸、磷酸鹽或琥珀酸鹽。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。

在實施例中，緩衝劑係以約5 mM至約50 mM、例如約10 mM至約40 mM或約20 mM至約30 mM或約25 mM之濃度存在。

在實施例中，組合物之pH為約5至約7，例如約5.5至約6.5或約6.1。

本發明組合物在高蛋白質濃度(例如約100 mg/mL)較為穩定，同時在室溫(例如約20℃至約25℃)維持適於注射(例如經由針或其他適宜裝置注射)之黏度。在實施例中，組合物在室溫(例如約20℃至約25℃)維持適於經由在27號(gauge)至31號範圍內(例如28至31號，或29至31號，或29號大小)之針或其他適宜裝置注射之黏度。在實施例中，本發明組合物在室溫(例如20-25℃)於約100 mg/mL之ABBV-8E12濃度之黏度小於20 mPas，例如約1 mPas至約20 mPas或約1 mPas至約15 mPas或約1 mPas至約10 mPas。在實施例中，本發明組合物在室溫(例如20-25℃)於約100 mg/mL之ABBV-8E12濃度之黏度小於10 mPas，例如約1 mPas至約10 mPas或約1 mPas至約8 mPas或約1 mPas至約5 mPas。在實施例中，本發明組合物在室溫(例如20-25℃)於約100 mg/mL之ABBV-8E12濃度具有小於5 mPas之黏度。在實施例中，本發明組合物具有約4.5 mPas之黏度。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括：抗體，該抗體包括分別如SEQ ID NO: 2、3及4中所述之LCDR1、LCDR2及LCDR3及如SEQ ID NO: 6、7及8中所述之HCDR1、HCDR2及HCDR3；表面活性劑；緩衝劑；視情況賦形劑；及視情況抗氧化劑，其中抗體之濃度約為100 mg/ml，且其中組合物在室溫下具有小於約20 mPas之黏度。在實施例中，抗體包括如SEQ ID NO: 1中所述之輕鏈可變區及如SEQ ID NO: 5中所述之重鏈可變區。在實施例中，抗體包括含有SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之輕鏈及含有SEQ ID NO: 10中所述之胺基酸序列之重鏈。在實施例中，抗體係ABBV-8E12。在實施例中，室溫下之黏度小於約10 mPas。在實施例中，室溫下之黏度小於約5 mPas。

在實施例中，表面活性劑係以約0.1 mg/mL至約10 mg/mL (例如約0.3 mg/mL至約5 mg/mL或約0.5 mg/mL至約1.5 mg/mL或約1 mg/mL)之量存在。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯表面活性劑。舉例而言，在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。

在實施例中，調配組合物包括至少一種其他賦形劑。在實施例中，至少一種其他賦形劑係穩定劑。在實施例中，至少一種其他賦形劑係選自由以下組成之群：鹽、糖或多元醇。

在實施例中，至少一種其他賦形劑係鹽(例如氯化鈉)。在實施例中，鹽係以約3 mg/ml至約20 mg/ml (例如約5 mg/ml至約10 mg/ml或約8mg/ml至約10 mg/ml或約8 mg/ml)之量存在。

在實施例中，至少一種其他賦形劑係多元醇。在實施例中，多元醇係糖醇，例如甘露醇、山梨醇或海藻糖。在實施例中，多元醇係以約30 mg/ml至約50 mg/ml或約35 mg/ml至約45 mg/ml或約38 mg/ml至約43 mg/ml或約42 mg/ml之量存在。

在實施例中，至少一種其他賦形劑係糖。在實施例中，糖係選自由以下組成之群：蔗糖、葡萄糖或右旋糖。在實施例中，糖係以約50 mg/ml至約100 mg/ml (例如約60 mg/ml至約90 mg/ml或約70 mg/ml至約80 mg/ml或約75 mg/ml)之量存在。

在實施例中，調配物可含有抗氧化劑。在實施例中，抗氧化劑係胺基酸。在實施例中，胺基酸係選自由以下組成之群：甘胺酸、丙胺酸、麩胺酸鹽、精胺酸及甲硫胺酸。在實施例中，胺基酸係選自由以下組成之群：甘胺酸、精胺酸及甲硫胺酸。在實施例中，胺基酸係甲硫胺酸。在實施例中，抗氧化劑係以約5 mM至約15 mM或約8 mM至約12 mM或約10 mM之量存在。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽；表面活性劑；賦形劑；及視情況抗氧化劑。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯，且在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，賦形劑係選自由以下組成之群：鹽、多元醇或糖。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽；表面活性劑，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及選自由以下組成之群之賦形劑：鹽、多元醇或糖。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；組胺酸；聚山梨醇酯；視情況賦形劑；及視情況抗氧化劑。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。在實施例中，賦形劑係選自由以下組成之群：鹽、多元醇或糖。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽，其濃度約為5 mM至50 mM；表面活性劑，其濃度為1 mg/mL至10 mg/mL，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及選自由以下組成之群之賦形劑：鹽、多元醇或糖。在實施例中，聚山梨醇酯係選自由聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80組成之群。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。在實施例中，賦形劑係蔗糖。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽；表面活性劑，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及選自由以下組成之群之賦形劑：氯化鈉、山梨醇及蔗糖。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。在實施例中，賦形劑係蔗糖。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽，其濃度約為5 mM至50 mM；表面活性劑，其濃度為1 mg/ml至10 mg/ml，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及選自由以下組成之群之賦形劑：氯化鈉、山梨醇及蔗糖。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，賦形劑係蔗糖。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽；表面活性劑，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及鹽。在實施例中，鹽係氯化鈉。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。舉例而言，在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽，其濃度約為5 mM至50 mM；表面活性劑，其濃度為1 mg/ml至10 mg/ml，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及鹽，其濃度為約3 mg/ml至約20 mg/ml。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；組胺酸；聚山梨醇酯；及氯化鈉。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽；表面活性劑，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及多元醇。在實施例中，多元醇係甘露醇、山梨醇或海藻糖。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽，其濃度約為5 mM至50 mM；表面活性劑，其濃度為1 mg/mL至10 mg/mL，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及多元醇，其濃度為約30 mg/ml至約50 mg/ml。

舉例而言，在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12、組胺酸、聚山梨醇酯及山梨醇。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽；表面活性劑，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及糖。在實施例中，糖係蔗糖、葡萄糖或右旋糖。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。舉例而言，在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；選自由以下組成之群之緩衝劑：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽，其濃度為約5 mM至50 mM；表面活性劑，其濃度為1 mg/mL至10 mg/mL，其中表面活性劑係聚山梨醇酯；及糖，其濃度為約50 mg/ml至約100 mg/ml。

舉例而言，在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括濃度約為100 mg/mL之ABBV-8E12；組胺酸；聚山梨醇酯；及蔗糖。在實施例中，聚山梨醇酯係選自由聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80組成之群。在實施例中，聚山梨醇酯係PS80。在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥調配物，其包括：ABBV-8E12，其濃度約為100 mg/mL；組胺酸，其濃度為約5 mM至50 mM；聚山梨醇酯80，其濃度為1 mg/ml至10 mg/ml；及蔗糖，其濃度為約50 mg/ml至約100 mg/ml。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性醫藥組合物，其包括ABBV-8E12、表面活性劑、緩衝劑系統(包括至少兩種緩衝劑)及視情況抗氧化劑，其中ABBV-8E12之濃度約為100 mg/ml。在實施例中，緩衝劑可選自兩種或更多種(例如)以下緩衝劑之組合：乙酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄糖酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、組胺酸、酒石酸鹽、馬來酸鹽、己二酸、乳酸或參羥甲基胺基甲烷(tris)。在實施例中，緩衝劑系統係檸檬酸鹽-磷酸鹽緩衝劑系統。

在包括緩衝劑或緩衝劑組合之前述實施例中，緩衝劑可以約5 mM至約50 mM (例如約10 mM至約40 mM或約20 mM至約30 mM或約25 mM)之濃度存在。在包括緩衝劑或緩衝劑組合之前述實施例中，緩衝劑可選自由以下組成之群：乙酸鹽、檸檬酸鹽、葡萄糖酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、組胺酸、酒石酸鹽、馬來酸鹽、己二酸、乳酸或參羥甲基胺基甲烷(tris)。

在前述實施例中，組合物之pH可為約5至約7，例如約5.5至約6.5或約6.1。

在前述實施例中，表面活性劑可以約0.1 mg/mL至約10 mg/mL (例如約0.3 mg/mL至約5 mg/mL或約0.5 mg/mL至約1.5 mg/mL或約1 mg/mL)之量存在。在前述實施例中，表面活性劑可為聚山梨醇酯。在實施例中，聚山梨醇酯可為聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯可為聚山梨醇酯80。

在前述實施例中，組合物可包括至少一種其他賦形劑。在前述實施例中，賦形劑可為穩定劑。在前述實施例中，至少一種其他賦形劑係選自由以下組成之群：鹽、糖或多元醇。在前述實施例中，至少一種其他賦形劑可為鹽，且鹽可以約3 mg/ml至約20 mg/ml (例如約5 mg/ml至約10 mg/ml或約8 mg/ml至約10 mg/ml或約8 mg/ml)之量存在。在前述實施例中，至少一種其他賦形劑可為多元醇，且多元醇可以約30 mg/ml至約50 mg/ml或約35 mg/ml至約45 mg/ml或約38 mg/ml至約43 mg/ml或約42 mg/ml之量存在。在至少一種其他賦形劑係多元醇之前述實施例中，多元醇可為糖醇，例如甘露醇、山梨醇或海藻糖。在前述實施例中，至少一種其他賦形劑可為糖，其中糖可以約50 mg/ml至約100 mg/ml (例如約60 mg/ml至約90 mg/ml或約70 mg/ml至約80 mg/ml或約75 mg/ml)之量存在。在至少一種其他賦形劑係糖之前述實施例中，糖可選自由以下組成之群：蔗糖、葡萄糖或右旋糖。在實施例中，糖係蔗糖。在前述實施例中，組合物可包括抗氧化劑。在前述實施例中，抗氧化劑可為胺基酸。在實施例中，胺基酸係選自由以下組成之群：甘胺酸、精胺酸及甲硫胺酸。在實施例中，胺基酸係甲硫胺酸。在前述實施例中，抗氧化劑可以約5 mM至約15 mM或約8 mM至約12 mM或約10 mM之量存在。

在實施例中，根據前述實施例中之任一者之穩定水性調配物提供於容器中。在實施例中，容器係玻璃小瓶。在實施例中，容器係聚碳酸酯小瓶。在實施例中，容器係可(例如)由聚氯乙烯或聚烯烴製得之袋，例如靜脈內滴注(IV)袋。在實施例中，容器係注射裝置，例如微型輸注器或注射器。在實施例中，可使用(例如)鹽水溶液稀釋本發明組合物。在實施例中，可使用鹽水溶液在容器內稀釋組合物。

在前述實施例中之任一者中，ABBV-8E12可為包括含有SEQ ID NO: 9之輕鏈及含有SEQ ID NO: 10之重鏈之抗體。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性緩衝組合物，包括濃度約100 mg/ml之抗體，其中該抗體包括可變重鏈，其包括SEQ ID NO: 6之CDR1序列、SEQ ID NO:7之CDR2序列及SEQ ID NO: 8之CDR3序列；及可變輕鏈，其包括SEQ ID NO:2之CDR1序列、SEQ ID NO: 3之CDR2序列及SEQ ID NO: 4之CDR3序列；至少一種緩衝劑；賦形劑；表面活性劑；及視情況抗氧化劑。在實施例中，抗體包括含有如SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之輕鏈及含有如SEQ ID NO: 10中所述之胺基酸序列之重鏈。在實施例中，緩衝劑係選自由以下組成之群：組胺酸緩衝劑、磷酸鹽緩衝劑及琥珀酸鹽緩衝劑。在實施例中，緩衝劑係組胺酸。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在實施例中，表面活性劑係聚山梨醇酯80。在實施例中，組合物包括選自由以下組成之群之賦形劑：鹽、糖及多元醇。在實施例中，賦形劑係鹽(例如氯化鈉)。在實施例中，賦形劑係多元醇，例如選自由以下組成之群之多元醇：甘露醇、山梨醇及海藻糖。在實施例中，賦形劑係糖，例如選自由以下組成之群之糖：蔗糖、葡萄糖及右旋糖。在實施例中，糖係蔗糖。在實施例中，組合物之pH為約5至約7，例如約5.5至約6.5，或約6.1。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性緩衝組合物，其包括：抗體，其包括SEQ ID NO: 9之輕鏈及SEQ ID NO: 10之重鏈，其中抗體之濃度約為100 mg/ml；組胺酸；聚山梨醇酯；賦形劑；及視情況抗氧化劑。在實施例中，賦形劑係濃度約3 mg/ml至約20 mg/ml之鹽(例如NaCl)。在實施例中，賦形劑係濃度約30 mg/ml至約50 mg/ml之多元醇，例如選自由以下組成之群之多元醇：甘露醇、山梨醇及海藻糖。在實施例中，賦形劑係濃度約50 mg/ml至約100 mg/ml之糖，例如選自由以下組成之群之糖：蔗糖、右旋糖及葡萄糖。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在實施例中，聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80。在實施例中，聚山梨醇酯係以0.1 mg/ml至約10 mg/ml之濃度存在。

在實施例中，本發明提供一種穩定水性緩衝組合物，其包括：抗體，其包括SEQ ID NO: 9之輕鏈及SEQ ID NO: 10之重鏈，其中抗體之濃度約為100 mg/ml；組胺酸；蔗糖；及聚山梨醇酯。在實施例中，組胺酸係以約5 mM至約50 mM之濃度存在；蔗糖係以約50 mg/ml至約100 mg/ml之濃度存在；及聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80且係以約0.1 mg/ml至約10 mg/ml (例如約0.1 mg/ml至約1 mg/ml)之濃度存在。

在下列實例中進一步闡釋本發明，該等實例不應解釋為進一步限制。實例 1 ： 調配物篩選研究

實施大規模調配物篩選研究以評估100 mg/ml蛋白質濃度之ABBV-8E12之調配物之穩定性。該研究在25 mM組胺酸、磷酸鹽或琥珀酸鹽緩衝劑中且在水中評估調配物。亦檢驗作為可能表面活性劑之聚山梨醇酯20及聚山梨醇酯80，且檢驗作為可能等滲劑之蔗糖、山梨醇及氯化鈉。亦檢驗作為可能抗氧化劑之甲硫胺酸。在每一調配物中，添加0.1%疊氮化鈉作為防腐劑。

使用於50 mM組胺酸及86 mg/ml蔗糖中且調配於pH 6.08下之ABBV-8E12作為原料藥物質。經由以下方式來製備試樣：在25 mM檸檬酸鈉-磷酸鹽緩衝劑中實施7倍體積交換滲濾/超濾且隨後在pH 6.1下於三種不同緩衝劑系統(組胺酸、磷酸鹽、琥珀酸鹽)及WFI中實施滲濾。將該等試樣之蛋白質含量調節至120 mg/ml並無菌過濾。藉由混合蛋白質溶液、賦形劑儲備溶液及疊氮化鈉(0.1%，作為防腐劑)至目標濃度為100 mg/ml在96孔板中手動混合調配物，如表1中所述。表 1 ： 96 孔板中之調配物研究

藉由4個冷凍/解凍循環來對試樣施加應力，振盪，並在三個不同溫度(5℃、25℃及40℃)下培育最長12週，如下文更詳細地所論述。

分析區塊1：冷凍-解凍條件

在分析區塊1 (冷凍-解凍應力)中，在-80℃下冷凍試樣。然後在室溫下解凍冷凍試樣直至所有冰皆已解凍為止。針對每一試樣重複冷凍/解凍循環三次(總共4個冷凍/解凍循環)。

分析區塊2：機械應力

在分析區塊1後，在分析區塊2中藉由將試樣在20℃下於1200 rpm振盪三天來施加機械應力。

分析區塊3：溫度

在分析區塊2後，將試樣等分至3 × 384孔板中(如表2中所述)以在5℃、25℃及40℃下儲存。將試樣在40℃下儲存一週，在25℃及40℃下儲存三週，且在5℃及25℃下儲存12週。更具體而言，在第7天取出在40℃下儲存一週之試樣；在第21天取出在25℃下儲存三週之試樣；在第24天取出在40℃下儲存三週之試樣；在75天之後取出在5℃及25℃下儲存12週之試樣。來自預定取出點之任何偏差可視為非關鍵性。表 2 ： 384 孔板中之調配物研究

濁度(澄清度及乳光)

使用Tecan infinite M1000 Pro讀板儀且使用下列濁度計算來量測每一分析區塊(冷凍/解凍、機械應力、5℃、25℃及40℃下溫度)之在700 nm、900 nm及975 nm下之吸光度值。用於將吸收轉化成濁度單位(NTU)之數學模型係基於福爾馬肼(formazin)濁度標準。簡言之，藉由自Abs975值減去Abs900值且除以該兩個波長在1 cm路徑長度下之差值來記錄每一孔之填充高度：

藉由減去96孔板(0.036)或384孔板(0.038)之板特異性值來正規化Abs700值：(Abs700 –板特異性正規化因子)。藉由使正規化Abs700值除以所計算填充高度，將Abs700值針對其填充高度正規化(Abs700norm/填充高度)。使此正規化Abs700值乘以1248可得到每一孔之具體NTU值：(Abs700norm * 1248)。將數據報告為計算NTU，但基於讀板儀之吸光度量測及散射濁度測定使用不同檢測方法，且由此不可能與直接與散射濁度單位建立關聯。

96孔板中之ABBV-8E12調配物(表1)在冷凍/解凍後及在冷凍/解凍及機械應力後之濁度展示於下表3中且陳述於圖3A及B中。施加機械應力可產生較高濁度，尤其對於不使用聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80調配之試樣而言(亦即第8行及第9行中之試樣)。如圖3B及表3中所展示，大部分不使用聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80調配之試樣在施加機械應力之後之濁度值＞200NTU。表 3 ： 分析區塊 1 ( 冷凍 / 解凍 ) 及分析區塊 2 ( 機械應力 ) 濁度 ， 以計算 NTU 形式表示

在溫度儲存(5℃、25℃、40℃)表2中之384孔板中調配物(根據等滲劑及緩衝劑來分類含聚山梨醇酯試樣)之後之ABBV-8E12調配物濁度展示於圖4及表4中。如圖4及表4中所展示，調配於25 mM組胺酸及磷酸鹽緩衝劑中之試樣展示低於琥珀酸鹽或WFI之濁度。另外，含有NaCl之試樣具有最低濁度值，而不含穩定劑(「無」)之試樣具有最高濁度值。表 4 ：分析區塊 3 ( 溫度 ) 濁度 ( 計算 NTU)

統計學分析揭示，在溫度儲存之前濁度形成之主要效應係應力、緩衝劑類型及表面活性劑，如圖5中所展示，此提供了在施加冷凍/解凍及機械應力之後之濁度主要效應圖。經由施加機械應力可增加濁度，不含表面活性劑之試樣最為明顯。調配於組胺酸緩衝劑中之試樣一般而言具有最低濁度。

在溫度儲存之後，如圖4中所展示，濁度增加之主要效應係緩衝劑及等滲劑類型亦及表面活性劑類型。

粒徑篩析– UHPLC (SE-UHPLC)：單體、聚集物、片段

使用100 mg/ml ABBV-8E12試樣實施SE-UHPLC。為檢測可逆聚集物，使用WFI將試樣稀釋至1 mg/ml並藉由SE-UHPLC在40%/75% RH下培育8小時之後進行分析。可逆聚集物之分析並不實施於時間T0。

圖6展示如藉由SE-UHPLC所量測之所有ABBV-8E12試樣之單體含量。調配於組胺酸緩衝劑中之試樣展示最高單體含量，隨後係調配於磷酸鹽或琥珀酸鹽緩衝劑或水中之試樣。單體損失主要導致形成聚集物，如圖7中所展示。

粒徑篩析– UHPLC：可逆聚集

在儲存於5℃、25℃及40℃之後之所量測可逆聚集低於1.6%，如圖8中所展示。僅一種在40℃下調配於磷酸鹽緩衝劑(含有蔗糖、甲硫胺酸及聚山梨醇酯80)中21天之試樣發生偏離。

ABBV-8E12之調配組合物

結果指示組胺酸作為緩衝劑系統之穩定效應。與磷酸鹽、琥珀酸鹽緩衝劑或注射用水(WFI，無緩衝劑)相比，含組胺酸試樣在幾乎所有應力條件下皆維持較高含量之單體。

濁度數據明確展示，在機械應力期間需要表面活性劑來維持調配物之膠質穩定性。PS20及PS80皆係適宜表面活性劑。

實例2 ：ABBV-8E12 調配物之長期儲存

使用來自長期條件(-70℃/-80℃)及實時條件(5℃)之數據比較100 mg/mL ABBV-8E12調配物之穩定性與20 mg/mL ABBV-8E12調配物之穩定性。表 5 ：用於長期儲存評價之調配物

將包括調配物A (20 mg/ml ABBV-8E12)之批次(亦即調配物A-1)與包括調配物B (100 mg/mL ABBV-8E12)之兩個批次(亦即調配物B-1及B-2)進行比較。本文所呈現之數據證實，具有顯著較高蛋白質濃度之100 mg/ml調配物在所報告儲存時段內顯示與20 mg/ml調配物相當之穩定性。

粒徑篩析層析根據流體動力學半徑來分離分子。固定相由具有界定孔徑之凝膠樣顆粒組成。大於該等孔隙之分子首先洗脫，而小於固定相之該等孔隙之分子需要較長時間遷移穿過管柱且由此稍後洗脫。在214 nm下實施檢測且將雜質(高分子量物質及低分子量物質)測定為相對面積(以面積-%形式)。

CE-SDS使用毛細管凝膠電泳–十二烷基硫酸鈉(CE-SDS)測定純度。在CE-SDS中，將試樣稀釋於SDS試樣緩衝劑中且以電動力學方式注射於填充有含有0.2% SDS之可更換SDS凝膠緩衝劑之未塗覆(未處理)裸熔融二氧化矽毛細管上。試樣蛋白與SDS形成具有相同電荷/尺寸比之複合物以容許根據大小進行分離，其中較小蛋白質之遷移快於較大蛋白質(或較早洗脫)。在還原條件及非還原條件下實施分析。峰檢測係基於214 nm下之UV吸光度且基於相對面積百分比來量化。表 6 ： ABBV-8E12 調配物之長期儲存 ( 蛋白質含量 ， SE-HPLC)

- =未測試； n/a =不存在表 7 ： ABBV-8E12 調配物之長期儲存 (CE-SDS-R)

- =未測試； n/a =不存在表 8 ： ABBV-8E12 調配物之長期儲存 (CE-SDS-NR, pH)

- =未測試； n/a =不存在表 9 ： ABBV-8E12 調配物之長期儲存 ( 澄清度、色彩 )

調配物A及調配物B批次之更詳述對比展示澄清度、色彩、蛋白質含量及pH之差異。該等差異主要源於之配方差異，且主要係增加之蛋白質濃度。已觀察到，所有儲存於5℃下之三個批次之HMW皆略有增加(SE-HPLC)。該等HMW變化較小且在可比性準則內。所有長期穩定性(-70℃/-80℃)及實時穩定性(5℃)數據皆在釋放及穩定性準則內。因此，本文所呈現之數據證實，100 mg/ml調配物儘管具有顯著較高之蛋白質濃度，但其在所報告儲存時段但與20 mg/ml調配物相比顯示可比性。

實例3 ：ABBV-8E12 調配物之性質

量測調配物B-1之濃度、pH、密度(g/cm³ )、黏度(mPas)及滲透壓。在20℃下測定密度及黏度。結果呈現於表10中。表 10 ：在彙集之後量測之 B1 性質

* 在20℃下測定值。

實例 4 ： ABBV-8E12 調配物之長期穩定性

下列實例闡述檢驗具有100mg/mL ABBV-8E12濃度之調配物與具有20 mg/ml ABBV-8E12濃度之調配物相比之長期儲存穩定性的研究。兩種調配物之組成闡述於表11中。表 11 ：用於長期穩定性評價之調配物

在4℃、25℃及40℃下比較一個調配物A批次(A2)與三個調配物B批次(B3、B4、B5)。特定而言，在長期儲存之前及在1個月(25℃、40℃)、3個月(4℃、25℃、40℃)、6個月(4℃、25℃)、9個月(4℃)及12個月(4℃)之後測試調配物A2。在長期儲存之前及在1個月(4℃、25℃、40℃)、3個月(4℃、25℃、40℃)、6個月(4℃、25℃)及9個月(4℃)之後測試調配物B3、B4及B5。

試樣之SEC結果展示於圖9A-C及10A-C中。圖9A-9C展示4個ABBV-8E12試樣之單體含量；特定而言，圖9A展示4℃下之SEC主峰數據，圖9B展示25℃下之SEC主峰數據，且圖9C展示40℃下之SEC主峰數據。圖10A-10C展示如藉由SEC所量測之高分子量(HMW)聚集物；特定而言，圖10A展示4℃下之SEC HMW峰，圖10B展示25℃下之SEC HMW峰數據，且圖10C展示40℃下之SEC HMW峰數據。毛細管凝膠電泳提供還原性(CE R)及非還原性(CE NR)蛋白質之自動化分析(根據大小)以測定蛋白質純度及/或異質性。CE分析之結果展示於圖11A-C (CE還原性純度%)及12A-C (CE非還原性主峰%)中。

長期穩定性實驗之結果展示，100 mg/ml ABBV-8E12調配物在進行長期儲存時較為穩定。

應理解，上述詳細說明及隨附實例僅具有闡釋性且不應視為對本發明範圍之限制，本發明範圍僅由隨附申請專利範圍及其等效內容來界定。對於熟習此項技術者而言，所揭示實施例之各種改變及修改應係顯而易見的。可在不背離本發明之精神及範圍情況下達成該等改變及修改，其包含(但不限於)與本發明之化學結構、取代基、衍生物、中間體、合成、調配及/或使用方法相關之彼等改變及修改。出於各種目的，本文所引用之所有出版物、專利及專利申請案之全部內容皆以引用方式併入本文中。

圖1展示鼠類HJ8.5抗-tau抗體之可變區序列以及針對重鏈及輕鏈中之每一者之4條人類化變體序列(4條VH序列及4條VL/VK序列)。加下劃線處為CDR序列，且來自原始小鼠序列之框架變化以粗體表示。

圖2展示針對重鏈及輕鏈中之每一者之人類化可變區及恆定區序列之序列(4條VH序列及4條VL/VK序列)。將可變重鏈移植至含有S241P鉸鏈穩定突變之人類IgG4之恆定重鏈中。

圖3展示以100 mg/ml調配之ABBV-8E12試樣在冷凍/解凍應力後(圖3A)及在冷凍/解凍及機械應力後(圖3B)之濁度。施加機械應力可產生較高濁度，尤其對於不使用聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80調配之試樣而言。

圖4展示使用聚山梨醇酯調配之100 mg/ml ABBV-8E12試樣在5℃、25℃及40℃之溫度下儲存後之濁度。在組胺酸及磷酸鹽緩衝劑中調配之試樣展示最低濁度，使用NaCl調配之試樣亦如此。

圖5展示在施加冷凍/解凍及機械應力之後濁度之主要效應圖。經由施加機械應力可增加濁度，尤其對於不含表面活性劑之試樣而言。

圖6展示如藉由SE-UHPLC所量測之所有ABBV-8E12試樣之單體含量。在組胺酸緩衝劑中調配之試樣展示最高單體含量。

圖7展示如藉由SE-UHPLC所量測之高分子量聚集物。

圖8展示如藉由UHPLC所量測之經量測可逆聚集。

圖9A-C展示各種ABBV-8E12調配物關於長期穩定性分析之SEC單體%數據，如藉由4℃ (圖9A)、25℃ (圖9B)及40℃ (圖9C)下之SEC主峰數據所展示。

圖10A-C展示各種ABBV-8E12調配物關於長期穩定性分析之SEC聚集物(高分子量) %，如藉由4℃ (圖10A)、25℃ (圖10B)及40℃ (圖10C)下之SEC HMW峰數據所展示。

圖11A-C展示ABBV-8E12調配物之4℃培育試樣(圖15A)、25℃培育試樣(圖15B)及40℃培育試樣(圖15C)關於長期穩定性分析之CE還原性純度%數據。

圖12A-C展示ABBV-8E12調配物之4℃培育試樣(圖16A)、25℃培育試樣(圖16B)及40℃培育試樣(圖16C)關於長期穩定性分析之CE非還原性主峰%數據。

Claims (20)

1. 一種穩定水性緩衝組合物，其包括： 抗體，濃度為約100 mg/ml，其中該抗體包括：可變重鏈，其包括 SEQ ID NO: 6之CDR1序列、SEQ ID NO:7之CDR2序列及SEQ ID NO: 8之CDR3序列；及可變輕鏈，其包括SEQ ID NO:2之CDR1序列、SEQ ID NO: 3之CDR2序列及SEQ ID NO: 4之CDR3序列； 至少一種緩衝劑； 賦形劑； 表面活性劑；及 視情況抗氧化劑。
2. 如請求項1之組合物，其中該抗體包括含有如SEQ ID NO: 9中所述之胺基酸序列之輕鏈及含有如SEQ ID NO: 10中所述之胺基酸序列之重鏈。
3. 如前述請求項中任一項之組合物，其中該緩衝劑係選自由以下組成之群：組胺酸、磷酸鹽及琥珀酸鹽緩衝劑。
4. 如請求項3之組合物，其中該緩衝劑係組胺酸。
5. 如前述請求項中任一項之組合物，其中該表面活性劑係聚山梨醇酯。
6. 如請求項5之組合物，其中該表面活性劑係聚山梨醇酯80。
7. 如前述請求項中任一項之組合物，其中該組合物包括選自由以下組成之群之賦形劑：鹽、糖及多元醇。
8. 如請求項7之組合物，其中該賦形劑係氯化鈉。
9. 如請求項7之組合物，其中該賦形劑係選自由以下組成之群之多元醇：甘露醇、山梨醇及海藻糖。
10. 如請求項7之組合物，其中該賦形劑係選自由以下組成之群之糖：蔗糖、葡萄糖及右旋糖。
11. 如前述請求項中任一項之組合物，其中pH為約5至約7。
12. 一種穩定水性緩衝組合物，其包括： 抗體，其包括SEQ ID NO: 9之輕鏈及SEQ ID NO: 10之重鏈，其中該抗體之濃度為約100 mg/ml； 組胺酸； 聚山梨醇酯； 賦形劑；及 視情況抗氧化劑。
13. 如請求項12之組合物，其中該賦形劑係濃度約3 mg/ml至約20 mg/ml之鹽。
14. 如請求項13之組合物，其中該鹽係氯化鈉。
15. 如請求項12之組合物，其中該賦形劑係濃度約30 mg/ml至約50 mg/ml之選自由以下組成之群之多元醇：甘露醇、山梨醇及海藻糖。
16. 如請求項12之組合物，其中該賦形劑係濃度約50 mg/ml至約100 mg/ml之選自由以下組成之群之糖：蔗糖、右旋糖及葡萄糖。
17. 如請求項12至16之組合物，其中該聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。
18. 如請求項17之組合物，其中該聚山梨醇酯係以0.1 mg/mL至約10 mg/ml之濃度存在。
19. 一種穩定水性緩衝組合物，其包括： 抗體，其包括SEQ ID NO: 9之輕鏈及SEQ ID NO: 10之重鏈，其中該抗體之濃度為約100 mg/ml； 組胺酸； 蔗糖；及 聚山梨醇酯。
20. 如請求項19之組合物，其中 組胺酸係以約5 mM至約50 mM之濃度存在； 蔗糖係以約50 mg/ml至約100 mg/ml之濃度存在；及 該聚山梨醇酯係聚山梨醇酯80且係以約0.1 mg/ml至約10 mg/ml之濃度存在。

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