CN112004827A - 稳定的水性抗tau抗体调配物 - Google Patents

稳定的水性抗tau抗体调配物 Download PDF

Info

Publication number
CN112004827A
CN112004827A CN201980027530.6A CN201980027530A CN112004827A CN 112004827 A CN112004827 A CN 112004827A CN 201980027530 A CN201980027530 A CN 201980027530A CN 112004827 A CN112004827 A CN 112004827A
Authority
CN
China
Prior art keywords
polysorbate
composition
concentration
seq
abbv
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201980027530.6A
Other languages
English (en)
Inventor
J·昂斯滕伯格
K·阿彭策勒
M·许尔斯迈尔
K·卡勒塔
T·迈尔
C·里德
C·林
K·谢克尔-特奥巴尔德
M·西德勒
A·维尔贝尔茨
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
AbbVie Deutschland GmbH and Co KG
Original Assignee
AbbVie Deutschland GmbH and Co KG
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by AbbVie Deutschland GmbH and Co KG filed Critical AbbVie Deutschland GmbH and Co KG
Publication of CN112004827A publication Critical patent/CN112004827A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K39/00—Medicinal preparations containing antigens or antibodies
    • A61K39/395—Antibodies; Immunoglobulins; Immune serum, e.g. antilymphocytic serum
    • A61K39/39591—Stabilisation, fragmentation
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/22—Heterocyclic compounds, e.g. ascorbic acid, tocopherol or pyrrolidones
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K47/00—Medicinal preparations characterised by the non-active ingredients used, e.g. carriers or inert additives; Targeting or modifying agents chemically bound to the active ingredient
    • A61K47/06—Organic compounds, e.g. natural or synthetic hydrocarbons, polyolefins, mineral oil, petrolatum or ozokerite
    • A61K47/26—Carbohydrates, e.g. sugar alcohols, amino sugars, nucleic acids, mono-, di- or oligo-saccharides; Derivatives thereof, e.g. polysorbates, sorbitan fatty acid esters or glycyrrhizin
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K16/00—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies
    • C07K16/18—Immunoglobulins [IGs], e.g. monoclonal or polyclonal antibodies against material from animals or humans
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2317/00—Immunoglobulins specific features
    • C07K2317/20—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin
    • C07K2317/24—Immunoglobulins specific features characterized by taxonomic origin containing regions, domains or residues from different species, e.g. chimeric, humanized or veneered

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Oil, Petroleum & Natural Gas (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Medicinal Preparation (AREA)
  • Medicines Containing Antibodies Or Antigens For Use As Internal Diagnostic Agents (AREA)

Abstract

本公开提供了包括高浓度的ABBV‑8E12的稳定的水性缓冲组合物，如包含浓度为约100mg/ml的ABBV‑8E12、至少一种缓冲液、赋形剂、表面活性剂以及任选地抗氧化剂的稳定的水性缓冲组合物。

Description

稳定的水性抗TAU抗体调配物
相关申请的交叉引用
本申请要求于2018年3月23日提交的美国临时申请第62/647,615号的权益，所述美国临时申请的全部公开内容通过引用整体并入本文。
技术领域
本公开总体上涉及稳定的水性抗tau抗体调配物，包含具有高蛋白质浓度的ABBV-8E12抗tau抗体的稳定水性调配物。
背景技术
tau病(tauopathy)的共同之处是在脑中累积不可溶的过度磷酸化的tau蛋白。超过二十种不同的神经退行性病症的特征在于某种程度的神经原纤维变性并且可以被分类为tau病(Williams 2006)。如进行性核上性麻痹(PSP)和皮质基底节变性(CBD)等原型tau病的特征在于tau包涵体是唯一或主要的中枢神经系统损伤。原型tau病不同于其它tau病，其中在其它神经病理学特征的存在下发现tau聚集体，如在阿尔茨海默氏病(Alzheimer′sDisease)(AD)中发现的淀粉样β(Aβ)斑块或在帕金森氏病(Parkinson′s Disease)(PD)中发现的路易体。在这些非原型tau病中，更不确定的是tau病理学是代表原发性疾病驱动还是继发于其它蛋白质错误折叠和神经变性。
存在强大的实验证据和生物学基本原理来支持tau免疫疗法策略作为抵抗神经变性中的tau病理学的方法。首先，tau通常是高度可溶的、天然未折叠的并且处于胞内的蛋白，因此胞外抗体不太可能影响tau的正常功能。第二，tau病理学的负担与tau病的人和转基因小鼠模型中的进行性神经元功能障碍、突触丧失以及功能下降相关。第三，在病理学条件下，tau变得错误折叠并且聚集成由病理学tau原纤维构成的神经元内神经原纤维缠结(NFT)。在人tau病中，这种病理学以疾病特异性模式从一个脑区进展到另一个脑区。实验数据表明，tau聚集体可以在细胞之间扩散以诱导进一步的tau聚集以及脑中的tau病理学的扩散。这个数据表明，在一个细胞中产生的聚集体被释放到胞外空间中，并且可以促进在邻近或连接的细胞中的聚集。最后，已经证明抗tau抗体可以预防或减慢携带突变的人形式tau的小鼠脑中的tau病理学的进展。已经在例如美国专利申请公开第2017/0058024号和美国专利第2015/0183855号中描述了抗tau抗体，所述美国专利申请公开和美国专利的全部公开内容通过引用整体并入本文。ABBV-8E12，也称为C2N-8E12，是一种人源化单克隆抗tau抗体。
通常，基于蛋白质的药物产品需要以高浓度进行调配以获得治疗功效。高度浓缩的蛋白质调配物对于治疗用途是令人期望的，因为所述调配物允许具有更小体积的剂量，从而限制患者的不适，并且更经济地包装和储存。然而，高蛋白质浓度调配物的开发提出了许多挑战，包含制造、稳定性、分析性，并且尤其是对于治疗性蛋白质而言，递送挑战。例如，随着调配物中蛋白质浓度的升高，蛋白质的聚集、不溶性和降解的难度通常会增加(对于综述，参见Shire，S.J.等人，《药物科学杂志(J.Pharm.Sci.)》93，1390(2004))。先前看不见的负面作用可能是由在添加剂或蛋白质的较低浓度下提供有益作用的添加剂引起的。高浓度蛋白调配物的生产可能导致乳光、聚集和沉淀的显著问题。除了标准的蛋白质聚集和颗粒形成的潜力之外，可能发生可逆的自缔合，这可能导致粘度增加或使通过注射的递送复杂化的其它性质。高粘度还可能使通过过滤方法制造高蛋白质浓度复杂化。
因此，药物蛋白质调配物通常仔细地使成分和浓度平衡以增强蛋白质稳定性和治疗要求，同时限制任何负面副作用。
随着蛋白质和其它生物大分子作为药物分子越来越受到人们的关注，用于递送此类分子的调配物正成为重要的问题。尽管在大规模制造用于治疗用途的蛋白质方面取得革命性的进展，但是这些试剂在体内的有效且方便的递送仍然是主要的挑战，这是由于所述试剂固有的物理化学和生物学性质，包含通过生物膜的渗透差、分子大小大、血浆半衰期短、自缔合、物理和化学不稳定性、聚集、吸附以及免疫原性。
因此，仍然需要高浓度的稳定的水性抗tau抗体调配物，包含高浓度的稳定的水性ABBV-8E12调配物。
发明内容
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其包括浓度为约100mg/ml的抗体。在实施例中，所述抗体包括可变重链和可变轻链，所述可变重链包括SEQ ID NO：6的CDR1序列、SEQ ID NO：7的CDR2序列和SEQ ID NO：8的CDR3序列；所述可变轻链包括SEQID NO：2的CDR1序列、SEQ ID NO：3的CDR2序列和SEQ ID NO：4的CDR3序列。在实施例中，所述抗体包括：轻链和重链，所述轻链包括SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列；所述重链包括SEQID NO：10所示的氨基酸序列。在实施例中，所述抗体是ABBV-8E12。在实施例中，所述组合物进一步包括至少一种缓冲液、赋形剂、表面活性剂以及任选地抗氧化剂。在实施例中，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐缓冲液组成的组。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯，如聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述赋形剂可以是盐(如NaCl)、多元醇(如甘露醇、山梨醇或海藻糖)或糖(如蔗糖、葡萄糖或右旋糖)。在实施例中，pH为约5到约7。在实施例中，所述组合物在室温下的粘度小于约20mPas，如小于10mPas或小于5mPas。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其含有浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12。在实施例中，所述组合物进一步含有至少一种缓冲液和表面活性剂。所述组合物还可以含有至少一种赋形剂和/或抗氧化剂。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述赋形剂可以是盐(如NaCl)、多元醇(如山梨醇)或糖(如蔗糖)。在实施例中，所述抗氧化剂可以是氨基酸，如甲硫氨酸。在实施例中，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12、组氨酸、聚山梨醇酯、赋形剂以及任选地抗氧化剂。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其含有浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12、组氨酸、蔗糖以及聚山梨醇酯。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。
附图说明
图1示出了鼠HJ8.5抗tau抗体的可变区序列，以及每个重链和轻链的4个人源化变体序列(4个VH和4个VL/VK序列)。CDR序列加下划线，并且来自原始小鼠序列的框架变化以粗体表示。
图2示出了每个重链和轻链的人源化可变区和恒定区序列的序列(4个VH和4个VL/VK序列)。可变重链被接枝到含有S241P铰链稳定突变的人IgG4的恒定重链。
图3示出了在冷冻/解冻应力(图3A)之后以及在冷冻/解冻和机械应力(图3B)之后以100mg/ml调配的ABBV-8E12样品的浊度。施加机械应力导致更高的浊度，尤其是对于没有聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80调配的样品。
图4示出了在5℃、25℃和40℃下温度储存之后用聚山梨醇酯调配的100mg/mlABBV-8E12样品的浊度。在组氨酸和磷酸盐缓冲液中调配的样品显示出最低的混浊度，这与用NaCl调配的样品一样。
图5示出了在施加冷冻/解冻和机械应力之后的浊度的主效应曲线图。浊度通过施加机械应力而增加，尤其是对于没有表面活性剂的样品。
图6示出了如通过SE-UHPLC测量的所有ABBV-8E12样品的单体含量。在组氨酸缓冲液中调配的样品显示最高的单体含量。
图7示出了如通过SE-UHPLC测量的高分子量聚集体。
图8示出了所测量的可逆聚集，如通过UHPLC测量的。
图9A-C示出了各种ABBV-8E12调配物在长期稳定性分析中的SEC％单体数据，如通过在4℃(图9A)、25℃(图9B)和40℃(图9C)下的SEC主峰数据所示。
图10A-C示出了各种ABBV-8E12调配物在长期稳定性分析中的SEC％聚集体(高分子量)，如通过在4℃(图10A)、25℃(图10B)和40℃(图10C)的SEC HMW峰数据所示。
图11A-C示出了ABBV-8E12调配物的4℃温育样品(图15A)、25℃温育样品(图15B)以及40℃温育样品(图15C)在长期稳定性分析中的CE还原％纯度数据。
图12A-C示出了ABBV-8E12调配物的4℃温育样品(图16A)、25℃温育样品(图16B)和40℃温育样品(图16C)在长期稳定性分析中的CE非还原％主数据。
具体实施方式
高浓度蛋白调配物的制备可能导致乳光和稳定性的问题。当包括高蛋白质浓度(例如，100mg/ml)的ABBV-8E12的水性药物组合物长期储存时，ABBV-8E12的活性可能由于聚集和/或降解而丧失或降低。本公开提供了高蛋白质浓度(例如，100mg/ml)的ABBV-8E12的水性调配物，所述水性调配物允许ABBV-8E12的长期储存，使得ABBV-8E12在储存过程中是稳定的，呈液体或冷冻状态。如下文所讨论的并且在本公开的实例中所示的，本公开的水性调配物克服了稳定性和浊度的问题，以提供ABBV-8E12的稳定的高浓度调配物。所提供的调配物不需要任何另外的步骤，如再水化。
现在详细描述本公开的各个实施例。如在说明书和整个权利要求书中所使用的，“一个(a)”、“一种(an)”和“所述(the)”的含义包含复数指示物，除非上下文另外清楚地指明。而且，如在说明书和整个权利要求书中所使用的，“在……中(in)”的含义包含“在……中”和“在……上(on)”，除非上下文另外清楚地指明。另外，下文更具体地定义了本公开中所使用的一些术语。
术语“水性调配物”是指其中溶剂是水的溶液。
如本文所使用的，术语“抗体”是指包含通过二硫键互相连接的四个多肽链、两个重(H)链和两个轻(L)链的免疫球蛋白分子。每个重链包含重链可变区(“HCVR”或“VH”)和重链恒定区。重链恒定区包含三个结构域(CH1、CH2和CH3)。每个轻链包含轻链可变区(“LCVR”或“VL”)和轻链恒定区。轻链恒定区包含一个结构域(CL)。VH区和VL区可以被进一步细分为穿插有更保守的被称作框架区(FR)的区的被称作互补决定区(CDR)的超变区。每个VH和VL由按照以下顺序从氨基末端到羧基末端布置的三个CDR和四个FR构成：FR1、CDR1、FR2、CDR2、FR3、CDR3、FR4。在实施例中，调配物含有具有如WO2016/201434所示的氨基酸序列的抗体，所述文献的全部公开内容特此通过引用整体并入本文。
术语“ABBV-8E12”与术语“C2N-8E12”同义，并且是指人源化重组IgG4抗人tau抗体，其包括具有如图1和图2所示的氨基酸序列的重链(VH)区和轻链(VL)区。ABBV-8E12分别包括如SEQ ID NO：2、3和4所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以及如SEQ ID NO：6、7和8所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3。ABBV-8E12包括如SEQ ID NO：1所示的轻链可变区和如SEQ ID NO：5所示的重链可变区。ABBV-8E12包括轻链，所述轻链包括SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列；以及重链，所述重链包括SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。
出于本公开的目的，“ABBV-8E12”还涵盖在氨基酸结构(包含氨基酸的添加、缺失和/或取代)或糖基化性质中具有不显著影响多肽的功能的微小修饰的ABBV-8E12。
术语“分离的抗体”是指基本上不含具有不同抗原特异性的其它抗体的抗体(例如，特异性结合tau的分离的抗体基本上不含特异性结合除了tau之外的抗原的抗体)。此外，分离的抗体可以基本上不含其它细胞材料和/或化学品。
术语“甘氨酸”是指其密码子是GGT、GGC、GGA和GGG的氨基酸。
术语“精氨酸”是指其密码子是CCU、CCC、CCA是CCG的α-氨基酸。
术语“丙氨酸”是指其密码子是GCT、GCC、GCA、和GCG的氨基酸。
术语“甲硫氨酸”是指其密码子是ATG的氨基酸。
术语“谷氨酸”是指其密码子是GAA和GAG的氨基酸。
术语“糖”是指单糖、二糖和多糖。糖的实例包含但不限于蔗糖、葡萄糖、右旋糖等。
术语“多元醇”是指含有多个羟基基团的醇。多元醇的实例包含但不限于甘露醇、山梨醇等。
术语“金属离子”是指具有净正或负电荷的金属原子。出于本公开的目的，术语“金属离子”还包含金属离子源，包含但不限于金属盐。
术语“长期储存”或“长期稳定性”应理解为是指药物组合物可以储存至少三个月(即，三个月或更长)，如超过六个月(六个月或更长)或超过一年或超过两年。长期储存还应理解为是指药物组合物以液体形式储存或冷冻。还考虑到组合物可以被冷冻和解冻超过一次。
关于长期储存，术语“稳定的”应理解为是指相对于储存开始时组合物的活性，药物组合物内的ABBV-8E12的活性不丧失超过20％或更优选地15％或10％或5％。
术语“基本上不含”是指不存在物质，或仅存在最少量的痕量物质，其对组合物的性质不具有任何实质性影响。如果提及没有物质的量，则应理解为“没有可检测的量”。
术语“哺乳动物”包含但不限于人。
术语“药学上可接受的载剂”是指任何常规类型的无毒固体、半固体或液体填料、稀释剂、包封材料、调配物助剂或赋形剂。药学上可接受的载剂在所采用的剂量和浓度下对接受者是无毒的，并且与调配物的其它成分相容。
术语“组合物”是指通常含有载剂的混合物，所述载剂如是本领域中常规的并且出于治疗、诊断或预防目的适合于向受试者施用的药学上可接受的载剂或赋形剂。其可以包含其中多肽或多核苷酸存在于细胞或培养基中的细胞培养物。例如，用于口服施用的组合物可以形成溶液、悬浮液、片剂、丸剂、胶囊、持续释放调配物、口服漂洗剂或粉末。
术语“药物组合物”和“调配物”可互换使用。
术语“治疗”是指针对哺乳动物的疾病的疗法的任何施用或应用并且包含抑制疾病、阻止其发展、减轻疾病，例如通过引起消退或恢复或修复丧失、缺失或缺陷的功能；或刺激低效的过程。所述术语包含获得所期望的药理学和/或生理学效应，涵盖哺乳动物中的病理学病状或病症的任何治疗。就完全或部分预防病症或其症状而言，所述效应可以是预防性的，和/或就部分或完全治愈病症和/或可归因于病症的副作用而言可以是治疗性的。其包含(1)预防病症在可能易患所述病症但尚未有症状的受试者中发生或复发，(2)抑制病症，例如阻止其发展，(3)停止或终止病症或至少其相关症状，使得宿主不再患有所述病症或其症状，如引起所述病症或其症状的消退，例如通过恢复或修复丧失、缺失或缺陷的功能或刺激低效的过程，或(4)减轻、缓解或改善病症或与其相关的症状，其中改善在广义上用于指至少参数幅度的降低，例如炎症、疼痛和/或肿瘤大小。
术语“疾病”是指需要医学干预或期望医学干预的任何病状、感染、病症或综合征。这种医学干预可以包含治疗、诊断和/或预防。
术语“治疗有效量”是指当向活受试者施用时，对所述活受试者实现所期望的效应的量。例如，用于向活受试者施用的本公开的抗体的有效量是预防和/或治疗tau病(如阿尔茨海默氏病或进行性核上性麻痹)的量。精确的量将取决于治疗的目的，并且将由本领域技术人员使用已知技术来确定。如本领域已知的，可能有必要对全身与局部递送、年龄、体重、总体健康状况、性别、饮食、施用时间、药物相互作用以及病状的严重性进行调整，并且所述调整将可由本领域的技术人员通过常规实验来确定。
术语“tau病”是指神经退行性疾病，其特征在于在脑中累积过度磷酸化的tau蛋白。Tau病包含例如阿尔茨海默氏病或进行性核上性麻痹。
实施例
下文更加详细解释了本公开的实施例。
本公开的组合物包括ABBV-8E12。如上文所讨论的，ABBV-8E12(也称为C2N-8E12)是特异性结合人tau的人源化重组IgG4抗体。已经例如在WO2016/201434中描述了ABBV-8E12，所述文献的全部公开内容通过引用整体并入本文。适合于在本公开中储存的ABBV-8E12可以例如通过本领域已知的适合的方法来制备。ABBV-8E12的纯化可以通过任何适合的标准方法进行。当在胞内产生ABBV-8E12时，颗粒碎片可以例如通过离心或超滤来去除。当ABBV-8E12分泌到培养基中时，可以首先使用标准多肽浓缩过滤器浓缩来自此类表达系统的上清液。还可以添加蛋白酶抑制剂以抑制蛋白水解，并且可以包含抗生素以防止微生物的生长。
ABBV-8E12可以使用例如羟磷灰石色谱法、凝胶电泳、透析、亲和色谱法以及其它适合的纯化技术的任何组合来纯化，包含但不限于蛋白A色谱法、在离子交换柱上进行分级、乙醇沉淀、反相HPLC、在二氧化硅上进行色谱法、在肝素
Figure BDA0002737258440000091
上进行色谱法、阴离子或阳离子交换树脂色谱法(如聚天冬氨酸柱)、色谱聚焦、CDS-PAGE以及硫酸铵沉淀。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括：抗体，所述抗体包括可变重链和可变轻链，所述可变重链包括SEQ ID NO：6的CDR1序列、SEQ ID NO：7的CDR2序列和SEQ ID NO：8的CDR3序列；所述可变轻链包括SEQ ID NO：2的CDR1序列、SEQ IDNO：3的CDR2序列和SEQ ID NO：4的CDR3序列；表面活性剂；缓冲液；任选地赋形剂；以及任选地抗氧化剂，其中所述抗体的浓度为约100mg/ml。在实施例中，所述抗体包括如SEQ ID NO：1所示的轻链可变区和如SEQ ID NO：5所示的重链可变区。在实施例中，所述抗体包括：轻链和重链，所述轻链包括SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列；所述重链包括SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括ABBV-8E12、表面活性剂、缓冲液、任选地赋形剂以及任选地抗氧化剂，其中ABBV-8E12的浓度为约100mg/mL。在包括缓冲液的本公开的实施例中，所述缓冲液可以选自乙酸盐、柠檬酸盐、葡萄糖酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、组氨酸、酒石酸盐、马来酸盐、己二酸、乳酸或三羟甲基氨基甲烷(tris)。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸、磷酸盐或琥珀酸盐。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。
在实施例中，所述缓冲液以约5mM到约50mM，如约10mM到约40mM或约20mM到约30mM或约25mM的浓度存在。
在实施例中，所述组合物的pH为约5到约7，如约5.5到约6.5或约6.1。
本公开的组合物在高蛋白质浓度(例如，约100mg/mL)下是稳定的，同时保持适合于注射的粘度，如在室温(例如，约20℃到约25℃)下通过针头或其它适合的装置注射。在实施例中，当在室温(如约20℃到约25℃)下时，所述组合物保持适合于通过针头或其它适合的装置注射的粘度，所述针头或其它适合的装置大小范围为27号到31号，如28号到31号或29号到31号或29号。在实施例中，本公开的组合物在室温(例如，20℃-25℃)下在约100mg/mL的ABBV-8E12浓度下的粘度小于20mPas，如约1mPas到约20mPas或约1mPas到约15mPas或约1mPas到约10mPas。在实施例中，对于约100mg/mL的ABBV-8E12浓度来说，本公开的组合物在室温(例如，20℃-25℃)下的粘度小于10mPas，如约1mPas到约10mPas或约1mPas到约8mPas或约1mPas到约5mPas。在实施例中，对于约100mg/mL的ABBV-8E12浓度来说，本公开的组合物在室温(例如，20℃-25℃)下的粘度小于5mPas。在实施例中，本公开的组合物的粘度为约4.5mPas。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括：抗体，所述抗体包括如SEQ ID NO：2、3和4所示的LCDR1、LCDR2和LCDR3，以及如SEQ ID NO：6、7和8所示的HCDR1、HCDR2和HCDR3；表面活性剂；缓冲液；任选地赋形剂；以及任选地抗氧化剂，其中所述抗体的浓度为约100mg/ml，并且其中所述组合物在室温下的粘度小于约20mPas。在实施例中，所述抗体包括如SEQ ID NO：1所示的轻链可变区和如SEQ ID NO：5所示的重链可变区。在实施例中，所述抗体包括：轻链和重链，所述轻链包括SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列；所述重链包括SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。在实施例中，所述抗体是ABBV-8E12。在实施例中，所述粘度在室温下小于约10mPas。在实施例中，所述粘度在室温下小于约5mPas。
在实施例中，所述表面活性剂以约0.1mg/mL到约10mg/mL，如约0.3mg/mL到约5mg/mL或约0.5mg/mL到约1.5mg/mL或约1mg/mL的量存在。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯表面活性剂。例如，在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。
在实施例中，所述调配物组合物包括至少一种另外的赋形剂。在实施例中，所述至少一种另外的赋形剂是稳定剂。在实施例中，所述至少一种另外的赋形剂选自由盐、糖或多元醇组成的组。
在实施例中，所述至少一种另外的赋形剂是盐，如氯化钠。在实施例中，所述盐以约3mg/ml到约20mg/ml，如约5mg/ml到约10mg/ml或约8到约10mg/ml或约8mg/ml的量存在。
在实施例中，所述至少一种另外的赋形剂是多元醇。在实施例中，所述多元醇是糖醇，如甘露醇、山梨醇或海藻糖。在实施例中，所述多元醇以约30mg/ml到约50mg/ml或约35mg/ml到约45mg/ml或约38mg/ml到约43mg/ml或约42mg/ml的量存在。
在实施例中，所述至少一种另外的赋形剂是糖。在实施例中，所述糖选自由蔗糖、葡萄糖或右旋糖组成的组。在实施例中，所述糖以约50mg/ml到约100mg/ml，如约60mg/ml到约90mg/ml或约70mg/ml到约80mg/ml或约75mg/ml的量存在。
在实施例中，所述调配物可以含有抗氧化剂。在实施例中，所述抗氧化剂是氨基酸。在实施例中，所述氨基酸选自由以下组成的组：甘氨酸、丙氨酸、谷氨酸、精氨酸和甲硫氨酸。在实施例中，所述氨基酸选自由甘氨酸、精氨酸和甲硫氨酸组成的组。在实施例中，所述氨基酸是甲硫氨酸。在实施例中，所述抗氧化剂以约5mM到约15mM或约8mM到约12mM或约10mM的量存在。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括浓度为约100mg/mL的ABBV-8E12；缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；表面活性剂；赋形剂；以及任选地抗氧化剂。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯，并且在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述赋形剂选自由盐、多元醇或糖组成的组。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括浓度为约100mg/mL的ABBV-8E12；缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及赋形剂，所述赋形剂选自由盐、多元醇或糖组成的组。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；组氨酸；聚山梨醇酯；任选地赋形剂，以及任选地抗氧化剂。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述赋形剂选自由盐、多元醇或糖组成的组。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括浓度为约100mg/mL的ABBV-8E12；浓度为约5mM到50mM的缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；浓度为1mg/mL到10mg/mL的表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及赋形剂，所述赋形剂选自由盐、多元醇或糖组成的组。在实施例中，所述聚山梨醇酯选自由聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80组成的组。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。在实施例中，所述赋形剂是蔗糖。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及赋形剂，所述赋形剂选自由氯化钠、山梨醇和蔗糖组成的组。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。在实施例中，所述赋形剂是蔗糖。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；浓度为约5mM到50mM的缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；浓度为1mg/ml到10mg/ml的表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及赋形剂，所述赋形剂选自由氯化钠、山梨醇和蔗糖组成的组。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述赋形剂是蔗糖。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及盐。在实施例中，所述盐是氯化钠。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。例如，在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；浓度为约5mM到50mM的缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；浓度为1mg/ml到10mg/ml的表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及浓度为约3mg/ml到约20mg/ml的盐。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；组氨酸；聚山梨醇酯；以及氯化钠。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及多元醇。在实施例中，所述多元醇是甘露醇、山梨醇或海藻糖。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；浓度为约5mM到50mM的缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；浓度为1mg/mL到10mg/mL的表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及浓度为约30mg/ml到约50mg/ml的多元醇。
例如，在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12、组氨酸、聚山梨醇酯和山梨醇。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80，在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及糖。在实施例中，所述糖是蔗糖、葡萄糖或右旋糖。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。例如，在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；浓度为约5mM到50mM的缓冲液，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐组成的组；浓度为1mg/mL到10mg/mL的表面活性剂，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯；以及浓度为约50mg/ml到约100mg/ml的糖。
例如，在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；组氨酸；聚山梨醇酯和蔗糖。在实施例中，所述聚山梨醇酯选自由聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80组成的组。在实施例中，所述聚山梨醇酯是PS80。在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物调配物，其包括浓度为约100mg/ml的ABBV-8E12；浓度为约5mM到50mM的组氨酸；浓度为1mg/ml到10mg/ml的聚山梨醇酯80；以及浓度为约50mg/ml到约100mg/ml的蔗糖。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性药物组合物，其包括ABBV-8E12、表面活性剂、包括至少两种缓冲液的缓冲系统以及任选的抗氧化剂，其中ABBV-8E12的浓度为约100mg/ml。在实施例中，所述缓冲液可以选自两种或更多种缓冲液的组合，如乙酸盐、柠檬酸盐、葡萄糖酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、组氨酸、酒石酸盐、马来酸盐、己二酸、乳酸或三羟甲基氨基甲烷(tris)。在实施例中，所述缓冲系统是柠檬酸盐-磷酸盐缓冲系统。
在包括缓冲液或缓冲液组合的上述实施例中，所述缓冲液可以以约5mM到约50mM，如约10mM到约40mM或约20mM到约30mM或约25mM的浓度存在。在包括缓冲液或缓冲液组合的上述实施例中，所述缓冲液可以选自由以下组成的组：乙酸盐、柠檬酸盐、葡萄糖酸盐、磷酸盐、琥珀酸盐、组氨酸、酒石酸盐、马来酸盐、己二酸、乳酸或三羟甲基氨基甲烷(tris)。
在上述实施例中，所述组合物的pH可以为约5到约7，如约5.5到约6.5或约6.1。
在上述实施例中，所述表面活性剂可以以约0.1mg/mL到约10mg/mL，如约0.3mg/mL到约5mg/mL或约0.5mg/mL到约1.5mg/mL或约1mg/mL的量存在。在上述实施例中，所述表面活性剂可以是聚山梨醇酯。在实施例中，所述聚山梨醇酯可以是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述聚山梨醇酯可以是聚山梨醇酯80。
在上述实施例中，所述组合物可以包括至少一种另外的赋形剂。在上述实施例中，所述赋形剂可以是稳定剂。在上述实施例中，所述至少一种另外的赋形剂选自由盐、糖或多元醇组成的组。在上述实施例中，所述至少一种另外的赋形剂可以是盐，并且所述盐可以以约3mg/ml到约20mg/ml，如约5mg/ml到约10mg/ml或约8mg/ml到约10mg/ml或约8mg/ml的量存在。在上述实施例中，所述至少一种另外的赋形剂可以是多元醇，并且所述多元醇可以以约30mg/ml到约50mg/ml或约35mg/ml到约45mg/ml或约38mg/ml到约43mg/ml或约42mg/ml的量存在。在其中所述至少一种另外的赋形剂是多元醇的上述实施例中，所述多元醇可以是糖醇，如甘露醇、山梨醇或海藻糖。在上述实施例中，所述至少一种另外的赋形剂可以是糖，其中所述糖可以以约50mg/ml到约100mg/ml，如约60mg/ml到约90mg/ml或约70mg/ml到约80mg/ml或约75mg/ml的量存在。在其中所述至少一种另外的赋形剂是糖的上述实施例中，所述糖可以选自由蔗糖、葡萄糖或右旋糖组成的组。在实施例中，所述糖是蔗糖。在上述实施例中，所述组合物可以包括抗氧化剂。在上述实施例中，所述抗氧化剂可以是氨基酸。在实施例中，所述氨基酸选自由甘氨酸、精氨酸和甲硫氨酸组成的组。在实施例中，所述氨基酸是甲硫氨酸。在上述实施例中，所述抗氧化剂可以以约5mM到约15mM或约8mM到约12mM或约10mM的量存在。
在实施例中，根据上述实施例中任一项所述的稳定的水性调配物被提供在容器中。在实施例中，所述容器是玻璃小瓶。在实施例中，所述容器是聚碳酸酯小瓶。在实施例中，所述容器是袋子，如静脉内滴注(IV)袋子，所述袋子可以例如由聚氯乙烯或聚烯烃制成。在实施例中，所述容器是注射装置，如微型注入器(microinfuser)或注射器。在实施例中，根据本公开所述的组合物可以用例如盐溶液稀释。在实施例中，所述组合物可以在容器内用盐溶液稀释。
在任何上述实施例中，ABBV-8E12可以是抗体，所述抗体包括包含SEQ ID NO：9的轻链以及包含SEQ ID NO：10的重链。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其包括浓度为约100mg/ml的抗体，其中所述抗体包括可变重链和可变轻链，所述可变重链包括SEQ ID NO：6的CDR1序列、SEQ ID NO：7的CDR2序列和SEQ ID NO：8的CDR3序列；所述可变轻链包括SEQ ID NO：2的CDR1序列、SEQ ID NO：3的CDR2序列和SEQ ID NO：4的CDR3序列；至少一种缓冲液；赋形剂；表面活性剂；以及任选地抗氧化剂。在实施例中，所述抗体包括：轻链和重链，所述轻链包括如SEQ ID NO：9所示的氨基酸序列；所述重链包括如SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。在实施例中，所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐缓冲液组成的组。在实施例中，所述缓冲液是组氨酸。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80。在实施例中，所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述组合物包括选自由盐、糖和多元醇组成的组的赋形剂。在实施例中，所述赋形剂是盐，如氯化钠。在实施例中，所述赋形剂是多元醇，如选自由甘露醇、山梨醇和海藻糖组成的组的多元醇。在实施例中，所述赋形剂是糖，如选自由蔗糖、葡萄糖和右旋糖组成的组的糖。在实施例中，所述糖是蔗糖。在实施例中，所述组合物的pH为约5到约7，如约5.5到约6.5或约6.1。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其包括抗体，所述抗体包括SEQ ID NO：9的轻链和SEQ ID NO：10的重链，其中所述抗体的浓度为约100mg/ml；组氨酸；聚山梨醇酯；赋形剂；以及任选地抗氧化剂。在实施例中，所述赋形剂是浓度为约3mg/ml到约20mg/ml的盐，如NaCl。在实施例中，所述赋形剂是浓度为约30mg/ml到约50mg/ml的多元醇，如选自由甘露醇、山梨醇和海藻糖组成的组的多元醇。在实施例中，所述赋形剂是浓度为约50mg/ml到约100mg/ml的糖，如选自由蔗糖、右旋糖和葡萄糖组成的组的糖。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。在实施例中，所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80。在实施例中，所述聚山梨醇酯以0.1mg/ml到约10mg/ml的浓度存在。
在实施例中，本公开提供了一种稳定的水性缓冲组合物，其包括抗体，所述抗体包括SEQ ID NO：9的轻链和SEQ ID NO：10的重链，其中所述抗体的浓度为约100mg/ml；组氨酸；蔗糖；以及聚山梨醇酯。在实施例中，组氨酸以约5mM到约50mM的浓度存在；蔗糖以约50mg/ml到约100mg/ml的浓度存在；并且所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80并且以约0.1mg/ml到约10mg/ml的浓度存在，如约0.1到约1mg/ml。
在以下实例中进一步说明了本发明，但是这些实例不应被解释为进一步的限制。
实例1：调配物筛选研究
进行大规模调配物筛选研究以评估ABBV-8E12在100mg/ml蛋白质浓度下的调配物的稳定性。研究评估了在25mM组氨酸、磷酸盐或琥珀酸盐缓冲液中以及在水中的调配物。所述研究还检查了聚山梨醇酯20和聚山梨醇酯80作为可能的表面活性剂，并且检查了蔗糖、山梨醇以及氯化钠作为可能的等渗剂。还检查甲硫氨酸作为可能的抗氧化剂。在每个调配物中，添加0.1％叠氮化钠作为防腐剂。
将在pH为6.08下调配的含ABBV-8E12的50mM组氨酸和86mg/ml蔗糖用作原料药。通过在25mM柠檬酸钠-磷酸盐缓冲液中7倍体积交换渗滤/超滤并且随后在pH为6.1下在三种不同的缓冲系统(组氨酸、磷酸盐、琥珀酸盐)和WFI中进行渗滤来制备样品。将这些样品的蛋白质含量调节到120mg/ml并无菌过滤。通过将蛋白质溶液、赋形剂储备溶液和叠氮化钠(0.1％作为防腐剂)混合到100mg/ml的目标浓度，将调配物手动复合到96孔板中，如表1中所示。
表1：在96孔板中的调配物研究
Figure BDA0002737258440000191
Figure BDA0002737258440000201
Figure BDA0002737258440000211
Figure BDA0002737258440000221
通过四个冷冻/解冻循环、振荡以及在三个不同温度(5℃、25℃和40℃)下温育至多12周来使样品受激，如以下更详细地讨论的。
分析块1：冷冻-解冻条件
在分析块1(冷冻-解冻应力)中，将样品在-80℃下冷冻。然后将经冷冻样品在室温下解冻，直到所有冰已经解冻。对于每个样品，将冷冻/解冻循环重复三次(总共四个冷冻/解冻循环)。
分析块2：机械应力
在分析块1之后，通过在20℃下以1200rpm振荡样品持续三天，在分析区块2中施加机械应力。
分析块3：温度
在分析块2之后，将样品等分到如表2所示的3x384孔板中，以用于在5℃、25℃和40℃下储存。将样品在40℃下储存一周，在25℃和40℃下储存三周并且在5℃和25℃下储存12周。更具体地，在40℃下储存一周的样品在7天时取出；在25℃下储存三周的样品在21天时取出；在40℃下储存三周的样品在24天时取出；在5℃和25℃下储存12周的样品在75天后取出。与预定义拉点的任何偏差均被认为是非关键的。
表2：在384孔板中的调配物研究
Figure BDA0002737258440000231
Figure BDA0002737258440000241
浊度(澄清度和乳光)
使用Tecan infinite M1000Pro读板仪测量每个分析块(冷冻/解冻、机械应力，在5℃、25℃和40℃下的温)在700、900和975nm处的吸光度值，并且用于以下浊度计算。用于将吸收转化为浊度单位(NTU)的数学模型基于福尔马肼浊度标准(formazin turbiditystandards)。简言之，通过从Abs975值减去Abs900值，除以这两个波长在1cm路径长度处的差来记录每个孔的填充高度：
Figure BDA0002737258440000242
通过减去96孔(0.036)或384孔板(0.038)的板特异性值来归一化Abs700值：(Abs700-板特异性归一化因子)。通过将归一化Abs700值除以填充高度计算值，针对其填充高度(Abs700norm/填充高度)对Abs700值进行归一化。将这个归一化Abs700值与1248相乘得到每个孔的具体NTU值：(Abs700norm*1248)。将数据报告为NTU计算值，但是基于读板仪的吸光度测量和比浊法浊度测定(nephelometic turbidity determination)使用不同的检测方法，并且因此不可能与比浊法浊度单位的直接相关。
在冷冻/解冻之后以及在冷冻/解冻和机械应力之后，ABBV-8E12调配物在96孔板(表1)中的浊度示出于下表3中并且在图3A和B所示。机械应力的施加导致更高的浊度，尤其是对于不具有聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80调配的样品(即，第8列和第9列中的样品)。如图3B和表3所示，不具有聚山梨醇酯20或聚山梨醇酯80调配的大多数样品在施加机械应力后具有>200NTU的浊度值。
表3：NTU计算值中的分析块1(冷冻/解冻)浊度和分析块2(机械应力)浊度
Figure BDA0002737258440000251
Figure BDA0002737258440000261
在表2中的384孔板中的调配物的温度储存(5℃、25℃、40℃)之后的ABBV-8E12调配物(通过等渗剂和缓冲液分选的含聚山梨醇酯的样品)的浊度示出于图4和表4中。如图4和表4所示，与琥珀酸盐或WFI相比，在25mM组氨酸和磷酸盐缓冲液中调配的样品显示处更低的浊度。进一步地，含有NaCl的样品具有最低的浊度值，而不具有稳定剂(“无”)的样品具有最高的浊度值。
表4：分析块3(温度)浊度(NTU计算值)
Figure BDA0002737258440000271
Figure BDA0002737258440000281
统计分析揭示，在温度储存之前浊度形成的主效应是应力、缓冲液类型和表面活性剂，如图5所示，其提供了施加冷冻/解冻和机械应力之后浊度的主效应曲线图。浊度通过施加机械应力而增加，对于不具有表面活性剂的样品最显著。在组氨酸缓冲液中调配的样品通常具有最低的浊度。
在温度储存之后，如图4所示，浊度增加的主效应是缓冲液和等渗剂类型，而且还有表面活性剂类型。
尺寸排阻-UHPLC(SE-UHPLC)：单体、聚集体、片段
用100mg/ml ABBV-8E12样品进行SE-UHPLC。为了检测可逆的聚集体，将样品用WFI稀释到1mg/ml并且在40％/75％RH下温育8小时之后通过SE-UHPLC进行分析。在时间T0时不进行可逆聚集的分析。
图6示出了如通过SE-UHPLC测量的所有ABBV-8E12样品的单体含量。在组氨酸缓冲液中调配的样品显示出最高的单体含量，随后是在磷酸盐或琥珀酸盐缓冲液或水中调配的样品。单体丧失主要导致聚集体的形成，如图7所示。
尺寸排阻-UHPLC：可逆聚集
在5℃、25℃和40℃下储存之后，所测量的可逆聚集低于1.6％，如图8所示。在40℃下，在磷酸盐缓冲液(含有蔗糖、甲硫氨酸和聚山梨醇酯80)中调配21天的仅一个样品发生偏离。
ABBV-8E12的调配物组合物
结果指示组氨酸作为缓冲系统的稳定作用。与磷酸盐、琥珀酸盐缓冲液或注射用水(WFI，无缓冲液)相比，含有组氨酸的样品在几乎所有应力条件下保持较高水平的单体。
浊度数据清楚地显示，在机械应力期间需要表面活性剂来保持调配物的胶体稳定性。PS20和PS80两者均是适合的表面活性剂。
实例2：ABBV-8E12调配物的长期储存
使用来自长期条件(-70℃/-80℃)和实时条件(5℃)的数据，将100mg/mL的ABBV-8E12调配物的稳定性与20mg/mL的ABBV-8E12调配物的稳定性进行比较。
表5：用于长期储存评估的调配物
Figure BDA0002737258440000291
将包括调配物A(20mg/ml的ABBV-8E12)，即调配物A-1的批次与包括调配物B(100mg/mL的ABBV-8E12)，即调配物B-1和B-2的两个批次进行比较。此处所呈现的数据证明，与20mg/ml调配物相比，具有显著更高蛋白质浓度的100mg/ml调配物在所报告的储存时间段内证明了相当的稳定性。
尺寸排阻色谱法根据分子的流体动力学半径分离所述分子。固定相由具有所定义孔径的凝胶状颗粒组成。大于这些孔的分子首先洗脱，而小于固定相的这些孔的分子需要更长的时间迁移通过色谱柱，并且因此稍后洗脱。在214nm处进行检测，并且将杂质(高分子量物种和低分子量物种)确定为以面积％计的相对面积。
CE-SDS使用毛细管凝胶电泳-十二烷基硫酸钠(CE-SDS)来测定纯度。在CE-SDS中，将样品在SDS样品缓冲液中进行稀释，并且电动注射到未经涂覆的(未经处理的)裸露的熔融二氧化硅毛细管上，所述裸露的熔融二氧化硅毛细管填充有含有0.2％SDS的可替换的SDS凝胶缓冲液。样品蛋白质与SDS形成具有相同电荷与大小比率的复合物，从而允许按大小进行分离，其中较小的蛋白质比较大的蛋白质迁移更快(或洗脱更早)。在还原和非还原条件下进行测定。峰检测基于214nm处的UV吸光度，并且定量基于相对面积百分比。
表6：ABBV-8E12调配物(蛋白质含量，SE-HPLC)的长期储存
Figure BDA0002737258440000311
-＝未测试；n/a＝不可用
表7：ABBV-8E12调配物(CE-SDS-R)的长期储存
Figure BDA0002737258440000321
-＝未测试；n/a＝不可用
表8：ABBV-8E12调配物(CE-SDS-NR，pH)的长期储存
Figure BDA0002737258440000322
-＝未测试；n/a＝不可用
表9：ABBV-8E12调配物(澄清度，颜色)的长期储存
Figure BDA0002737258440000331
调配物A和调配物B批次的更详细比较显示出澄清度、颜色、蛋白质含量和pH的差异。这些差异主要是由于调配物的差异，主要是蛋白质浓度增加。对于在5℃下储存的所有三个批次，均已经观察到HMW(SE-HPLC)略有增加。HMW的这些变化很小并且处于可比性标准内。所有长期稳定性(-70℃/-80℃)和实时稳定性(5℃)数据均处于释放和稳定性标准内。因此，此处所呈现的数据证明，与20mg/ml调配物相比，100mg/ml调配物虽然具有显著更高蛋白质浓度，但在所报告的储存时间段内证明了可比性。
实例3：ABBV-8E12调配物的性质
测量调配物B-1的浓度、pH、密度(g/cm3)、粘度(mPas)以及同渗重摩。在20℃下测定密度和粘度。结果呈现在表10中。
表10：池化之后测量的B1性质
参数 值
浓度(g/L) 104
pH 6.15
密度*(g/cm<sup>3</sup>) 1.06
粘度*(mPas) 4.48
同渗重摩(mOsmol/kg) 319
＊在20℃下测定值。
实例4：ABBV-8E12调配物的长期稳定性
以下实例描述了检查ABBV-8E12浓度为100mg/mL的调配物与ABBV-8E12浓度为20mg/ml的调配物相比的长期储存稳定性的研究。这两种调配物的组合物描述于表11中。
表11：用于长期稳定性评估的调配物
Figure BDA0002737258440000341
在4℃、25℃下以及在40℃下，将调配物A的一个批次(A2)与调配物B的三个批次(B3、B4、B5)进行比较。具体地，在长期储存之前并且在1个月(25℃、40℃)、3个月(4℃、25℃、40℃)、6个月(4℃、25℃)、9个月(4℃)以及12个月(4℃)之后对调配物A2进行测试。在长期储存之前并且在1个月(4℃、25℃、40℃)、3个月(4℃、25℃、40℃)、6个月(4℃、25℃)以及9个月(4℃)之后对调配物B3、B4和B5进行测试。
样品的SEC结果示出于图9A-C和10A-C中。图9A-9C示出了四个ABBV-8E12样品的单体含量；具体地，图9A示出了在4℃下的SEC主峰数据，图9B示出了在25℃下的SEC主峰数据，并且图9C示出了在40℃下的SEC主峰数据。图10A-10C示出了如通过SEC测量的高分子量(HMW)聚集体；具体地，图10A示出了在4℃下的SEC HMW峰，图10B示出了在25℃下的SEC HMW峰数据，并且图10C示出了在40℃下的SEC HMW峰数据。
毛细管凝胶电泳按大小提供了还原(CE R)和非还原(CE NR)蛋白的自动化分析，以测定蛋白质纯度和/或异质性。CE分析的结果示出于图11A-C(CE还原％纯度)和图12A-C(CE非还原％主)中。
长期稳定性实验的结果显示，ABBV-8E12的100mg/ml调配物在经受长期储存时是稳定的。
应当理解，上述详细描述和随附实例仅仅是说明性的，并且不应被视为对本公开的范围的限制，本公开的范围仅由所附权利要求书及其等效物限定。对公开的实施例的各种改变和修改对本领域技术人员将是显而易见的。在不偏离其精神或范围的情况下，可以进行此类改变和修改，包含但不限于与本公开的化学结构、取代基、衍生物、中间体、合成、调配物和/或使用方法相关的那些改变和修改。本文引用的所有出版物、专利和专利申请出于所有目的特此通过引用整体并入。
Figure BDA0002737258440000361
Figure IDA0002737258490000011
Figure IDA0002737258490000021
Figure IDA0002737258490000031
Figure IDA0002737258490000041
Figure IDA0002737258490000051
Figure IDA0002737258490000061

Claims (20)

1.一种稳定的水性缓冲组合物，其包括：
浓度为约100mg/ml的抗体，其中所述抗体包括可变重链和可变轻链，所述可变重链包括SEQ ID NO：6的CDR1序列、SEQ ID NO：7的CDR2序列和SEQ ID NO：8的CDR3序列；所述可变轻链包括SEQ ID NO：2的CDR1序列、SEQ ID NO：3的CDR2序列和SEQ ID NO：4的CDR3序列；
至少一种缓冲液；
赋形剂；
表面活性剂；以及
任选地抗氧化剂。
2.根据权利要求1所述的组合物，其中所述抗体包括：轻链和重链，所述轻链包括如SEQID NO：9所示的氨基酸序列；所述重链包括如SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列。
3.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述缓冲液选自由组氨酸、磷酸盐和琥珀酸盐缓冲液组成的组。
4.根据权利要求3所述的组合物，其中所述缓冲液是组氨酸。
5.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯。
6.根据权利要求5所述的组合物，其中所述表面活性剂是聚山梨醇酯80。
7.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中所述组合物包括选自由盐、糖和多元醇组成的组的赋形剂。
8.根据权利要求7所述的组合物，其中所述赋形剂是氯化钠。
9.根据权利要求7所述的组合物，其中所述赋形剂是选自由甘露醇、山梨醇和海藻糖组成的组的多元醇。
10.根据权利要求7所述的组合物，其中所述赋形剂是选自由蔗糖、葡萄糖和右旋糖组成的组的糖。
11.根据前述权利要求中任一项所述的组合物，其中pH为约5到约7。
12.一种稳定的水性缓冲组合物，其包括：
抗体，所述抗体包括SEQ ID NO：9的轻链和SEQ ID NO：10的重链，其中所述抗体的浓度为约100mg/ml；
组氨酸；
聚山梨醇酯；
赋形剂；以及
任选地抗氧化剂。
13.根据权利要求12所述的组合物，其中所述赋形剂是浓度为约3mg/ml到约20mg/ml的盐。
14.根据权利要求13所述的组合物，其中所述盐是氯化钠。
15.根据权利要求12所述的组合物，其中所述赋形剂是浓度为约30mg/ml到约50mg/ml的多元醇，所述多元醇选自由甘露醇、山梨醇和海藻糖组成的组。
16.根据权利要求12所述的组合物，其中所述赋形剂是浓度为约50mg/ml到约100mg/ml的糖，所述糖选自由蔗糖、右旋糖和葡萄糖组成的组。
17.根据权利要求12到16所述的组合物，其中所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80或聚山梨醇酯20。
18.根据权利要求17所述的组合物，其中所述聚山梨醇酯以0.1mg/ml到约10mg/ml的浓度存在。
19.一种稳定的水性缓冲组合物，其包括：
抗体，所述抗体包括SEQ ID NO：9的轻链和SEQ ID NO：10的重链，其中所述抗体的浓度为约100mg/ml；
组氨酸；
蔗糖；以及
聚山梨醇酯。
20.根据权利要求19所述的组合物，其中
组氨酸以约5mM到约50mM的浓度存在；
蔗糖以约50mg/ml到约100mg/ml的浓度存在；并且
所述聚山梨醇酯是聚山梨醇酯80并且以约0.1mg/ml到约10mg/ml的浓度存在。
CN201980027530.6A 2018-03-23 2019-03-22 稳定的水性抗tau抗体调配物 Pending CN112004827A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201862647615P 2018-03-23 2018-03-23
US62/647615 2018-03-23
PCT/EP2019/057343 WO2019180261A1 (en) 2018-03-23 2019-03-22 Stable aqueous anti-tau antibody formulations

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN112004827A true CN112004827A (zh) 2020-11-27

Family

ID=65991783

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201980027530.6A Pending CN112004827A (zh) 2018-03-23 2019-03-22 稳定的水性抗tau抗体调配物

Country Status (12)

Country Link
US (1) US20210023216A1 (zh)
EP (1) EP3768706A1 (zh)
JP (1) JP2021519268A (zh)
CN (1) CN112004827A (zh)
AR (1) AR117407A1 (zh)
AU (1) AU2019237252A1 (zh)
BR (1) BR112020019065A2 (zh)
CA (1) CA3094934A1 (zh)
MX (1) MX2020009935A (zh)
TW (1) TW202003036A (zh)
UY (1) UY38153A (zh)
WO (1) WO2019180261A1 (zh)

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2970453B1 (en) 2013-03-13 2019-12-04 Prothena Biosciences Limited Tau immunotherapy
WO2017191559A1 (en) 2016-05-02 2017-11-09 Prothena Biosciences Limited Tau immunotherapy
CU24537B1 (es) 2016-05-02 2021-07-02 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos monoclonales que compiten por unirse a tau humano con el anticuerpo 3d6
IL270375B1 (en) 2017-05-02 2024-08-01 Prothena Biosciences Ltd Antibodies that recognize tau
CU20210073A7 (es) 2019-03-03 2022-04-07 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que se unen dentro de la región de unión a microtúbulos de tau definida por cdrs

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102458469A (zh) * 2009-05-04 2012-05-16 艾博特生物技术有限公司 人抗TNF-α抗体的稳定高蛋白质浓度制剂
WO2015200806A2 (en) * 2014-06-27 2015-12-30 C2N Diagnostics Llc Humanized anti-tau antibodies
WO2016201434A2 (en) * 2015-06-12 2016-12-15 C2N Diagnostics, Llc Stable formulations of humanized anti-tau antibody
CN106999581A (zh) * 2014-11-07 2017-08-01 诺华股份有限公司 含有高浓度抗vegf抗体的稳定蛋白质溶液剂型
WO2017194646A1 (en) * 2016-05-12 2017-11-16 Ucb Biopharma Sprl Pharmaceutical composition

Family Cites Families (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
SG11201408626YA (en) 2012-07-03 2015-03-30 Univ Washington Antibodies to tau

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102458469A (zh) * 2009-05-04 2012-05-16 艾博特生物技术有限公司 人抗TNF-α抗体的稳定高蛋白质浓度制剂
WO2015200806A2 (en) * 2014-06-27 2015-12-30 C2N Diagnostics Llc Humanized anti-tau antibodies
CN106999581A (zh) * 2014-11-07 2017-08-01 诺华股份有限公司 含有高浓度抗vegf抗体的稳定蛋白质溶液剂型
WO2016201434A2 (en) * 2015-06-12 2016-12-15 C2N Diagnostics, Llc Stable formulations of humanized anti-tau antibody
WO2017194646A1 (en) * 2016-05-12 2017-11-16 Ucb Biopharma Sprl Pharmaceutical composition

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
WARNE NW: "Development of high concentration protein biopharmaceuticals: the use of platform approaches in formulation development", 《EUR J PHARM BIOPHARM》, vol. 78, no. 2, pages 208 - 212, XP055534222, DOI: 10.1016/j.ejpb.2011.03.004 *

Also Published As

Publication number Publication date
WO2019180261A1 (en) 2019-09-26
EP3768706A1 (en) 2021-01-27
TW202003036A (zh) 2020-01-16
US20210023216A1 (en) 2021-01-28
AU2019237252A1 (en) 2020-10-22
AR117407A1 (es) 2021-08-04
BR112020019065A2 (pt) 2020-12-29
UY38153A (es) 2019-10-31
JP2021519268A (ja) 2021-08-10
MX2020009935A (es) 2021-01-08
CA3094934A1 (en) 2019-09-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN112004827A (zh) 稳定的水性抗tau抗体调配物
US10980884B2 (en) Stable aqueous etanercept composition
US10772960B2 (en) Stable aqueous formulations of adalimumab
KR102229274B1 (ko) 안정한 액체 약제학적 제제
CA3097123A1 (en) Buffered formulations of bevacizumab for use of treating diseases
EP4252777A2 (en) High concentration anti-ass protofibril antibody formulations and methods of use thereof
WO2020173431A2 (zh) 包含抗cd47抗体的制剂及其制备方法和用途
US10485869B2 (en) Etanercept formulations stabilized with meglumine
US20210188996A1 (en) Formulations of anti-cd38 antibodies for subcutaneous administration
JP2024527517A (ja) 抗ｐｄ１抗体製剤
TW202222345A (zh) 包含抗ｔｉｇｉｔ／ｐｄ－１雙特異性抗體的製劑及其製備方法和用途
US20230348530A1 (en) An improved process of storing and preparing the protein
TW202340249A (zh) 生物活性降低之抗體變體
TW202200203A (zh) 包含抗IL-23p19抗體的製劑、其製備方法和用途
CA3235650A1 (en) Aqueous formulations of an anti-cd22 antibody and uses thereof

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
WD01 Invention patent application deemed withdrawn after publication

Application publication date: 20201127