PL202200B1 - Kryształy P¹- (2'-deoksycytydyno-5'-) -P⁴- (urydyno-5'-) czterofosforanu i sposób ich wytwarzania - Google Patents
Kryształy P¹- (2'-deoksycytydyno-5'-) -P⁴- (urydyno-5'-) czterofosforanu i sposób ich wytwarzaniaInfo
- Publication number
- PL202200B1 PL202200B1 PL352363A PL35236300A PL202200B1 PL 202200 B1 PL202200 B1 PL 202200B1 PL 352363 A PL352363 A PL 352363A PL 35236300 A PL35236300 A PL 35236300A PL 202200 B1 PL202200 B1 PL 202200B1
- Authority
- PL
- Poland
- Prior art keywords
- dcp4u
- crystals
- solution
- uridine
- salt
- Prior art date
Links
- 239000013078 crystal Substances 0.000 title claims abstract description 61
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 23
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 18
- YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H [oxido-[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl]oxyphosphoryl] phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract description 9
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims abstract description 7
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 30
- PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N UTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 22
- PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N uridine-triphosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 21
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 18
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 8
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 5
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims description 3
- CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 2'‐deoxycytidine Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-SHYZEUOFSA-N 0.000 claims 1
- CKTSBUTUHBMZGZ-UHFFFAOYSA-N Deoxycytidine Natural products O=C1N=C(N)C=CN1C1OC(CO)C(O)C1 CKTSBUTUHBMZGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 7
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 3
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 21
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 19
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N [chloro(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(Cl)OC1=CC=CC=C1 BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxycytosine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N uridine-5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N 0.000 description 12
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 10
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 10
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical class CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 7
- -1 acetonitrile Chemical class 0.000 description 7
- 239000002585 base Substances 0.000 description 7
- 238000001875 carbon-13 cross-polarisation magic angle spinning nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 7
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 7
- 150000004691 decahydrates Chemical class 0.000 description 7
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 7
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 5
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 5
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 5
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 5
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 4
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 4
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 4
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinon Chemical compound CN1CCN(C)C1=O CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BWZVCCNYKMEVEX-UHFFFAOYSA-N 2,4,6-Trimethylpyridine Chemical compound CC1=CC(C)=NC(C)=C1 BWZVCCNYKMEVEX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 2,4-Dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC(C)=C1 JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JDQNYWYMNFRKNQ-UHFFFAOYSA-N 3-ethyl-4-methylpyridine Chemical compound CCC1=CN=CC=C1C JDQNYWYMNFRKNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FKNQCJSGGFJEIZ-UHFFFAOYSA-N 4-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC=C1 FKNQCJSGGFJEIZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 2
- 206010009137 Chronic sinusitis Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000000033 Purinergic Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010080192 Purinergic Receptors Proteins 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 2
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 208000027157 chronic rhinosinusitis Diseases 0.000 description 2
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 2
- ASMQGLCHMVWBQR-UHFFFAOYSA-M diphenyl phosphate Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)([O-])OC1=CC=CC=C1 ASMQGLCHMVWBQR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 description 2
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 2
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 238000000926 separation method Methods 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical class CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004482 13C cross polarization magic angle spinning Methods 0.000 description 1
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-5-methylpyridine Natural products CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJIJYZSGABIPDP-UHFFFAOYSA-N 2-n,4-n-dimethylpyridine-2,4-diamine Chemical compound CNC1=CC=NC(NC)=C1 ZJIJYZSGABIPDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ITQTTZVARXURQS-UHFFFAOYSA-N 3-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CN=C1 ITQTTZVARXURQS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNCHDRLWPAKSII-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-2-methylpyridine Chemical compound CCC1=CC=NC(C)=C1 KNCHDRLWPAKSII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N Ammonia chloride Chemical compound [NH4+].[Cl-] NLXLAEXVIDQMFP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910002483 Cu Ka Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000007836 KH2PO4 Substances 0.000 description 1
- 102100028045 P2Y purinoceptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710096700 P2Y purinoceptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100028070 P2Y purinoceptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 108050009478 P2Y purinoceptor 4 Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N Zirconium Chemical compound [Zr] QCWXUUIWCKQGHC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000007605 air drying Methods 0.000 description 1
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000001342 alkaline earth metals Chemical class 0.000 description 1
- 235000019270 ammonium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000005557 antagonist Substances 0.000 description 1
- 239000011260 aqueous acid Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 238000004364 calculation method Methods 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000005384 cross polarization magic-angle spinning Methods 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N dibutylamine Chemical class CCCCNCCCC JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L dipotassium hydrogen phosphate Chemical compound [K+].[K+].OP([O-])([O-])=O ZPWVASYFFYYZEW-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019797 dipotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 238000009826 distribution Methods 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 230000005284 excitation Effects 0.000 description 1
- 230000002349 favourable effect Effects 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 159000000011 group IA salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- YUWFEBAXEOLKSG-UHFFFAOYSA-N hexamethylbenzene Chemical compound CC1=C(C)C(C)=C(C)C(C)=C1C YUWFEBAXEOLKSG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 150000004677 hydrates Chemical class 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000019796 monopotassium phosphate Nutrition 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- 238000000655 nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M potassium dihydrogen phosphate Chemical compound [K+].OP(O)([O-])=O GNSKLFRGEWLPPA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 description 1
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 1
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 1
- 230000001629 suppression Effects 0.000 description 1
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 238000001291 vacuum drying Methods 0.000 description 1
- 229910052726 zirconium Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
Abstract
Wynalazek dotyczy kryszta lów P 1 -(2'-deoksycytydyno-5'-)-P 4 -(urydyno-5'-)czterofosforanu (dCP4U) lub jego soli oraz sposobu wytwarzania tych kryszta lów. Kryszta ly dCP4U otrzymane sposobem we- d lug wynalazku maj a duza czystosc i stabilnosc oraz nie wykazuj a hydroskopijno sci w porównaniu z liofilizowanym produktem, przez co mog a by c bardziej u zyteczne jako surowiec do wytwarzania farmaceutyków. PL PL PL PL
Description
Opis wynalazku
Niniejszy wynalazek dotyczy kryształów związku P1-(2'-deoksycytydyno-5'-)-P4-(urydyno-5'-)czterofosforanu (dCP4U) lub jego farmaceutycznie dopuszczalnej soli (określanego dalej w skrócie jako „dCP4U”), związku który jest użyteczny jako składnik terapeutycznie aktywny przy leczeniu chronicznego zapalenia oskrzeli, zapalenia zatok i podobnych stanów oraz sposobu wytwarzania takich kryształów dCP4U.
Stan techniki
lub jego sól, jest selektywnym antagonistą receptora puryny P2Y2 i/lub receptora puryny P2Y4 i jest związkiem który powinien być wykorzystany jako środek terapeutyczny do leczenia chronicznego zapalenia oskrzeli, zapalenia zatok i podobnych stanów (patrz publikacja patentowa WO 98/34942).
Do tej pory nie udało się otrzymać dCP4U w postaci krystalicznej, jest on otrzymywany w postaci białego proszku (białego ciała stałego) jedynie przez liofilizowanie. Konwencjonalnie otrzymywane proszki dCP4U mają tak małą czystość jak 82% (mierzone metodą HPLC). Szczególnie trudno jest oddzielić urydyno-5'-trifosforan (UTP) służący jako materiał wyjściowy od związku dCP4U, a wysoko oczyszczony dCP4U jest wytwarzany tylko z dużymi trudnościami za pomocą konwencjonalnego stosowania chromatografii jonowymiennej (WO 98/34942).
Wyżej opisany biały proszek o małej czystości ma taką niekorzystną cechę jak higroskopijność. Dlatego wytwarzanie leku z dCP4U musi być prowadzone w specjalnym urządzeniu o dobrze regulowanej wilgotności. Nawet po wytworzeniu leku produkt musi być szczelnie zawijany. Ponadto ponieważ lek ma bardzo krótki okres ważności z powodu słabej stabilności proszkowego produktu to pożądane jest otrzymywanie wysoko oczyszczonych i stabilnych kryształów dCP4U.
Związek dCP4U syntetyzuje się z 2'-deoksycytydyno-5'-monofosforanu (dCMP) i UTP za pomocą środka aktywującego takiego jak dicykloheksylokarbodiimid (DCC). Jednak, konwencjonalny sposób daje małą wydajność syntezy, tj. tak małą jak w przybliżeniu 9% wagowych (Przykład 20 z publikacji patentowej WO 98/34942), i nie może nigdy służyć jako praktyczny sposób. Dlatego pożądane jest rozwijanie sposobu wytwarzania związku dCP4U z dużą wydajnością i na dużą skalę.
W świetle powyższego przedmiotem niniejszego wynalazku jest dostarczenie stabilnych kryształów dCP4U, które są użyteczne do wytwarzania leków. Innym przedmiotem wynalazku jest dostarczenie sposobu wytwarzania takich kryształów.
Ujawnienie wynalazku
Twórcy niniejszego wynalazku prowadzili intensywne badania nad sposobem stabilizacji dCP4U i stwierdzili, że dCP4U o czystości 95% lub większej można wytworzyć przez chromatografię anionowymienną w połączeniu z chromatografią z użyciem węgla aktywowanego (chromatografia na węglu aktywowanym), i że z takiego wysoko oczyszczonego związku dCP4U można wytwarzać kryształy dCP4U. Wykazano, że tak otrzymane kryształy dCP4U charakteryzują się czystością znacznie wyższą niż konwencjonalnie wytworzony proszek dCP4U, nie są higroskopijne i mają dużą trwałość.
Surowy dCP4U stosowany w niniejszym wynalazku może między innymi być wytworzony sposobem z wykorzystaniem niedrogiego związku urydyno-5'-monofosforanu (UMP) zamiast drogiego UTP, w którym dCP4U można skutecznie wytwarzać przez zastosowanie chlorofosforanu difenylu (DPC) i pirofosforanu (PPi).
Zgodnie z tym, niniejszy wynalazek dostarcza kryształów związku dCP4U.
Niniejszy wynalazek dostarcza również sposobu wytwarzania kryształów dCP4U, który to sposób obejmuje oczyszczanie surowego dCP4U przez chromatografię anionowymienną i chromatografię
PL 202 200 B1 na węglu aktywowanym oraz dodawanie hydrofilowego rozpuszczalnika organicznego do roztworu oczyszczonego dCP4U dla wytrącenia osadu dCP4U w postaci kryształów.
W niniejszym opisie zamieszczono również opis sposobu wytwarzania uż ytecznego w sposobie według wynalazku dCP4U, który to sposób obejmuje poddawanie reakcji UMP, dCMP, DPC i PPi.
Krótki opis rysunków
Figura 1 przedstawia fotografię kryształów krystalicznej postaci związku dCP4UX4Na (3,5 wodzian). Fotografię zrobiono przez mikroskop polaryzujący (powiększenie: x 440), gdzie 1 mm na obrazie odpowiada 25 μm.
Figura 2 przedstawia widmo dyfrakcji promieniami X krystalicznego związku dCP4UX4Na (3,5 wodzian).
Figura 3 przedstawia widmo dyfrakcji promieniami X krystalicznego związku dCP4UX4Na (dekawodzian).
Figura 4 przedstawia widmo dyfrakcji promieniami X białego proszku związku dCP4U (produktu liofilizowanego).
Figura 5 przedstawia widmo 13C-CPMAS-NMR krystalicznego związku dCP4UX4Na (3,5 wodzian).
Figura 6 przedstawia widmo 13C-CPMAS-NMR krystalicznego związku dCP4UX4Na (dekawodzian).
Figura 7 przedstawia widmo 13C-CPMAS-NMR białego proszku związku dCP4U (produktu liofilizowanego).
Najlepszy sposób realizacji wynalazku
Kryształy związku dCP4U według niniejszego wynalazku otrzymuje się przez oczyszczanie surowego dCP4U stosując specyficzne środki oraz dodawanie hydrofilowego organicznego rozpuszczalnika do roztworu oczyszczonego dCP4U dla wytrącania związku dCP4U w postaci kryształów. Niniejszy wynalazek zostanie dalej opisany w odniesieniu do (1) oczyszczania dCP4U i (2) krystalizacji dCP4U.
(1) Oczyszczanie dCP4U
Związek dCP4U może być oczyszczany przez chromatografię anionowymienną w połączeniu z chromatografią na węglu aktywowanym. Chociaż te dwie techniki chromatografii mogą być prowadzone w dowolnej kolejności to dla poprawy czystości dCP4U korzystnie chromatografia anionowymienna poprzedza chromatografię na węglu aktywowanym.
Jako anionowymienne żywice w wyżej opisanych technikach chromatografii mogą być stosowane żywica styrenowa lub akrylowa. Przykłady żywic, które mogą być stosowane obejmują silnie zasadowe żywice anionowymienne takie jak AMBERLITE IRA 402 (Rohm & Haas Co.), DIAION PA-312 i DIAION SA-11A (Mitsubishi Chemical Co. Ltd.), oraz słabo zasadowe żywice anionowymienne takie jak AMBERLITE IRA 67 (Rohm & Haas Co.) i DIAION WA-30 (Mitsubishi Chemical Co. Ltd.).
Węgiel aktywowany może być w postaci węgla aktywowanego w rodzaju stosowanych do chromatografii, który jest pokruszony lub ukształtowany w cząstki, i może obejmować handlowo dostępne produkty (np. Wako Pure Chemical Industries, Ltd. i Futamura Chemical Industries, Co. Ltd.).
Chromatografia może być prowadzona porcjami przy użyciu kolumny. W przypadku chromatografii kolumnowej jako eluent dla anionowymiennej chromatografii może być stosowany wodny roztwór kwasu lub jego mieszanina z solą o zwiększonej sile jonowej, taką jak chlorek sodu, a jako eluent w chromatografii na węglu aktywowanym może być stosowana woda lub wodny roztwór zasady takiej jak wodorotlenek sodu. Można przeprowadzić wstępne testy na małą skalę, aby dokładnie określić stężenie każdego eluenta w zakresie od 0,001M do 10M.
(2) Krystalizacja dCP4U
Związek dCP4U krystalizuje się przez dodanie hydrofilowego rozpuszczalnika organicznego do roztworu zawierającego oczyszczony jak wyżej związek dCP4U.
Przykłady hydrofilowych rozpuszczalników organicznych, które mogą być zastosowane obejmują alkohole mające sześć lub mniej atomów węgla, takie jak metanol i etanol; ketony takie jak aceton; etery takie jak dioksan; nitryle takie jak acetonitryl i amidy takie jak dimetyloformamid. Spośród nich szczególnie korzystne są alkohole, zwłaszcza etanol.
Dokładniej, roztwór oczyszczonego jak wyżej opisano związku dCP4U, albo zawiesina otrzymana przez zatężanie roztworu jest ewentualnie obrabiana tak, aby dostosować pH do zakresu 5-10, korzystnie 6-9 i do roztworu lub zawiesiny dodawany jest hydrofilowy rozpuszczalnik organiczny w temperaturze 60°C lub poniżej, korzystnie 20°C lub poniżej, dla wytrącenia substancji rozpuszczonej jako stabilnych kryształów dCP4U.
PL 202 200 B1
Tak otrzymane kryształy dCP4U według wynalazku zawierają dCP4U w ilości 95% lub więcej a UTP w ilości 3% lub mniejszej. Korzystnie kryształy dCP4U zawierają dCP4U w ilości 97% lub więcej, i UTP w ilości 2% lub mniej. Bardziej korzystnie kryształy dCP4U zawierają dCP4U w ilości 98% lub więcej, i UTP w ilości 1% lub mniej.
Tak wysoko oczyszczone kryształy dCP4U mogą być w postaci soli, wodzianu lub wodzianu soli. Przykłady soli obejmują farmaceutycznie dopuszczalne sole takie jak sole metali alkalicznych jak sole sodowe i sole potasowe; sole metali ziem alkalicznych takie jak sole wapnia i sole magnezu, oraz sole amonowe. Dla utworzenia soli związek dCP4U może być podstawiony 1-4 atomami metalu.
Wyżej wspomniane wodziany mogą zawierać 1-14 cząsteczek wody, które są przyłączone lub przywierają do jednej cząsteczki dCP4U a powyższe wodziany soli mogą zawierać 1-14 cząsteczek wody które są przyłączone lub przywierają do jednej cząsteczki soli metalu ziem alkalicznych dCP4U.
Ponadto kryształy związku dCP4U według wynalazku obejmują również ich tautomery.
Tak otrzymane kryształy dCP4U według wynalazku są ewentualnie suszone w konwencjonalny sposób taki jak suszenie pod zmniejszonym ciśnieniem, suszenie w przepływającym powietrzu lub suszenie przez ogrzewanie, następnie są umieszczane w pojemniku (np. butelce, torebce, puszcze, ampułce). Pakowanie w pojemnik może być prowadzone tak, że pojemnik jest otwierany, zamykany, uszczelniany przed dopływem powietrza lub zamykany. Warunki pakowania otwartego na dostęp powietrza nie są korzystne dla utrzymywania stabilności przechowywanych kryształów.
W sposobie wytwarzania dCP4U reakcji poddaje się UMP, dCMP, DPC i PPi.
Dokładniej sposób dostarczający surowego dCP4U obejmuje poddawanie reakcji UMP z DPC dla zsyntetyzowania difenylofosforanu UMP (UMP-DPP); dalsze poddawanie reakcji mieszaniny reakcyjnej zawierającej UMP-DPP z PPi dla utworzenia w mieszaninie UTP; i poddawanie reakcji tak utworzonego UTP, bez izolowania z mieszaniny reakcyjnej, ze związkiem dCMP w obecności DPC dla utworzenia docelowego dCP4U.
Podczas syntezy UMP-DPP z UMP rutynowo wytworzona sól trialkiloaminowa UMP (np. sól tributyloaminowa UMP) może być rozpuszczana w rozpuszczalniku. Przykłady rozpuszczalników obejmują amidy takie jak DMF i dimetyloacetamid (DMAC); cykliczne etery takie jak dioksan i tetrahydrofuran; ketony takie jak aceton; i dimetyloimidazolidinon, triamid heksametyloforowego kwasu, lub mieszaniny dwóch lub więcej z wymienionych. Następnie DPC i ewentualnie trialkiloamina są dodawane do roztworu i mieszaninę pozostawia się do przereagowania w temperaturze 10-50°C przez okres w przybliż eniu 30 minut do pię ciu godzin.
Związek PPi, który reaguje z UMP-DPP to korzystnie sole alkaliczne organicznych związków PPi. Przykłady takich soli obejmują sól heksyloaminową, sól dibutyloaminową, sól trietyloaminową i sól tributyloaminową.
W reakcji z UMP-DPP z alkaliczną solą organicznego PPi, alkaliczna sól organiczna PPi moż e być rozpuszczona w rozpuszczalniku. Przykłady takich rozpuszczalników obejmują amidy takie jak DMF, DMAC i formamid; cykliczne etery takie jak dioksan i tetrahydrofuran; ketony takie jak aceton; oraz dimetyloimidazolidinon, triamid heksametylofosforowego kwasu, dimetylosulfotlenek, acetonitryl lub mieszaniny dwóch lub więcej z nich. Następnie roztwór dodaje się do wytworzonego roztworu UMP-DPP, i mieszaninę pozostawia do przereagowania w temperaturze 10-50°C na w przybliżeniu 30 minut do pięciu godzin.
Reakcja między UMP-DPP a alkaliczną solą organiczną PPi może być prowadzona w obecności odpowiedniej zasady. Przykłady zasad obejmują zasady pirydynowe takie jak pirydyna, 2,6-lutydyna, 2,4-lutydyna, α-pikolina, β-pikolina, γ-pikolina, 2,4-dimetyloaminopirydyna, α-kolidyna, β-kolidyna, γ-kolidyna, przy czym szczególnie korzystna jest pirydyna. Zasadowy rozpuszczalnik środowiska reakcji jest również liczony jako zasady stosowane w niniejszym wynalazku. Stężenie zasady nie jest szczególnie ograniczone. Korzystnie zasada jest dodawana w ilości 6 ekwiwalentów lub więcej liczone na UMP, bardziej korzystnie 18 ekwiwalentów lub więcej.
Przez reakcję między UMP-DPP i solą alkaliczną organicznego PPi w mieszaninie reakcyjnej syntetyzowany jest UTP. Tak utworzony UTP i dCMP poddaje się reakcji w obecności DPC dla zsyntetyzowania dCP4U.
Chociaż dCMP jako taki może być dodawany do mieszaniny reakcyjnej to dCMP przekształca się na difenylofosforan dCMP (dCMP-DPP) w sposób podobny do stosowanego w przypadku UMP, a również można dodawać dCMP-DPP.
Reakcja dCP4U może być prowadzona przez dodanie do wyżej wspomnianego roztworu zsyntetyzowanego UTP związku DPC w ilości 1,1 równoważnika lub więcej, a dCMP lub dCMP-DPP
PL 202 200 B1 w ilości 0,5-1,5 równoważników liczone na ilość UMP zastosowaną jako surowiec, mieszaninę pozostawia się do przereagowania w temperaturze 10-50°C na w przybliżeniu 30 minut do pięciu godzin.
Tak otrzymany przykładowo dCP4U oczyszcza się i krystalizuje w wyżej wspomniany sposób dla otrzymania kryształów związku dCP4U według wynalazku.
P r z y k ł a d y
Niniejszy wynalazek zostanie opisany bardziej szczegółowo za pomocą przykładów, przy czym Przykład 2 przedstawia syntezę dCP4U z UMP lub jego soli i został zamieszczony w celach ilustracyjnych.
P r z y k ł a d 1 Wytwarzanie kryształów dCP4UX4Na (1) sposób z użyciem DCC dCP4U wytworzono rutynowym sposobem jak opisano w publikacji patentowej WO 98/34942 z użyciem UTP, dCMP i DCC. Reakcję prowadzono w skali 20 moli.
Tak otrzymany roztwór dCP4U rozcieńczono wodą aby dostosować całkowitą objętość do 1000 ml a rozcieńczony roztwór wprowadzano na kolumnę wyładowaną średnio zasadową anionowymienną żywicą (AMBERLITE IRA-67, produkt z firmy Rohm & Haas Co.). Wymywanie prowadzono przez kolejne stosowanie wody, 0,18M wodnego roztworu kwasu solnego, i 0,005M wodnego roztworu kwasu solnego zawierającego 0,5M chlorek sodowy, zebrane frakcje zawierały dCP4U.
Tak otrzymane frakcje związku dCP4U (4000 ml) wprowadzano na kolumnę wyładowaną aktywowanym węglem chromatograficznym (Taiko Granular Activated Charcoal SGP, produkt z firmy Futamura Chemical Industries Co., Ltd.) i dCP4U eluowano stosując 0,05M wodny roztwór wodorotlenku sodowego (8000 ml).
Tak otrzymane frakcje dCP4U połączono i zatężono do wytworzenia zawiesiny. Odczyn pH zawiesiny dostosowano do 6,0. Zawiesinę mieszano ze stopniowym dodawaniem etanolu, a otrzymaną zawiesinę następnie ochłodzono do temperatury 10°C z mieszaniem, co spowodowało wytrącenie kryształów związku dCP4UX4Na. Kryształy oddzielono otrzymując 8,9 g kryształów związku dCP4UX4Na. Oddzielone kryształy wysuszono pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze w przybliżeniu 60°C przez w przybliżeniu cztery godziny a potem poddano analizie instrumentalnej.
(2) sposób z użyciem DPC
Związek UTPX3Na (12,8 kg) rozpuszczono w wodzie (135 l), otrzymany roztwór wprowadzano na kolumnę wyładowaną kationowymienną żywicą (produkt z firmy Mitsubishi Chemical Co., Ltd.). Roztwór przepuszczono przez kolumnę i połączono frakcje eluowane przez wodę, a do połączonych roztworów dla zneutralizowania, z mieszaniem, stopniowo dodawano tributyloaminę (TBA; 13,6 kg). Roztwór zatężono i dodano formamid (10 kg). Otrzymany roztwór odwadniano przez gotowanie z dioksanem. Następnie odwodnioną substancję rozcieńczono pirydyną (11,6 kg) dla wytworzenia pirydynowego roztworu UTP.
Do drugiego zbiornika zawierającego metanol (18 l) dodano dCMP (7,5 kg). Z mieszaniem, stopniowo do roztworu dodano TBA (4,5 kg), roztwór ogrzano do temperatury 60°C. Po rozpuszczeniu składników roztwór zatężono do sucha. Suchą substancję następnie dalej suszono pod próżnią w temperaturze 75°C i rozkruszono. Rozkruszoną substancję (10,3 kg) zawieszono w dimetyloacetamidzie (DMAC) (16,7 kg) i do zawiesiny dodano difenylofosfochloridan (DPC) (4,4 kg), mieszaninę mieszano przez 10 minut. Następnie do mieszaniny dodano dalszą porcję TBA (10,8 kg) a otrzymaną mieszankę mieszano przez 30 minut dla wytworzenia roztworu dCMP-DPP.
Do tak przygotowanego roztworu dCMP-DPP z mieszaniem dodano pirydynowy roztwór UTP przygotowany jak wyżej opisano. Po zakończeniu dodawania mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez noc i reakcję zakończono przez dodanie dejonizowanej wody.
Do powyższej mieszaniny dodano 30% wodny roztwór wodorotlenku sodowego (31 l). Mieszaninę mieszano przez 30 minut a uwalniany TBA odprowadzano przez rozdzielanie. Do warstwy wodnej dodano 6 mol/l roztwór kwasu solnego dla dostosowania pH roztworu do w przybliżeniu 7. Roztwór zatężono przez usunięcie rozpuszczalnika, do zatężonego roztworu dodano taką samą objętość 95% etanolu. Otrzymaną mieszaninę pozostawiono na noc. Górną warstwę mieszaniny tj. warstwę etanolową usunięto przez odessanie a do otrzymanej kleistej pozostałości, dla jej rozpuszczenia dodano wodę. Pozostały rozpuszczalnik usunięto przez zatężanie.
Całkowitą objętość tak zsyntetyzowanego roztworu dostosowano do 2500 l i roztwór wprowadzano na kolumnę wyładowaną średnio zasadową anionowymienną żywicą (AMBERLITE IRA-97, produkt z firmy Rhome & Haas Co.). Wymywanie prowadzono kolejno wodą, 0,1 mol/l wodnym roztworem kwasu solnego i 0,005 mol/l wodnym roztworem kwasu solnego zawierającym 0,4 mol/l chlorku sodowego, zebrano frakcje zawierające dCP4U.
PL 202 200 B1
Tak otrzymane frakcje dCP4U (2100 l) wprowadzano na kolumnę wyładowaną aktywowanym węglem chromatograficznym (Taiko Granular Activated Carbon SGP, produkt z firmy Futamura Chemical Industries, Co., Ltd.) i dCP4U wymywano stosując 0,05 mol/l wodny roztwór wodorotlenku sodowego (1200 l).
Tak otrzymane frakcje połączono i zatężono. Wartość pH tak otrzymanego roztworu dostosowano na 7,5 za pomocą 30% wodnego roztworu wodorotlenku sodowego. Roztwór mieszano z jednoczesnym stopniowym dodawaniem 95% etanolu, co powodowało wytrącenie kryształów związku dCP4UX4Na. Kryształy wydzielono i wysuszono w temperaturze 60°C przez cztery godziny otrzymując 4,2 kg kryształów związku dCP4UX4Na (zawartość wody: 5,9%, wydajność wydzielania: 22%).
Właściwości fizyczne kryształów dCP4UX4Na
Kryształy związku dCP4UX4Na wytworzone sposobem (1) lub (2) według Przykładu 1 i biały proszek dCP4Ux4Na (produkt liofilizowany) wytworzony w taki sam sposób jak opisano w Przykładzie 20 w publikacji patentowej WO 98/34942 poddano analizie instrumentalnej. Kryształy porównywano z produktem liofilizowanym pod względem właściwości fizycznych.
(3) Analiza instrumentalna
1) Analiza czystości
Kryształy związku dCP4UX4Na otrzymane sposobem (1) lub (2) według Przykładu 1 i frakcje zawierające dCP4U po oczyszczaniu po każdej chromatografii poddawano analizie czystości za pomocą wysokosprawnej chromatografii cieczowej. Wyniki przedstawiono w Tabelach 1 i 2. Warunki prowadzenia wysokosprawnej chromatografii cieczowej podano poniżej. Kolumna: HITACHIGEL #3013-N (produkt Hitachi Keisokuki Service)
Eluent: 10% CH3CN, 0,18M NH4Cl, 0,03M KH2PO4, i 0,03M K2HPO4
Sposób wykrywania: detekcja UV przy 262 nm
T a b e l a 1 (sposób z DCC)
| zawartość dCP4U (%) | zawartość UTP (%) | |
| Mieszanina reakcyjna | 55,0 | 28,6 |
| Po chromatografii IE* | (-) | (-) |
| Po chromatografii AC* | 97,4 | 0,4 |
| Po krystalizacji | 98,3 | 0,4 |
(-) nie mierzalne,
*):IE - jonowymienna, AC - aktywowany węgiel
T a b e l a 2 (sposób z DPC)
| zawartość dCP4U (%) | zawartość UTP (%) | |
| Mieszanina reakcyjna | (-) | (-) |
| Po chromatografii IE* | 68,6 | 27,2 |
| Po chromatografii AC* | 92,8 | 1,5 |
| Po krystalizacji | 98,3 | 0,3 |
(-) nie mierzalne,
*):IE - jonowymienna, AC - aktywowany węgiel
2) Postać krystaliczna
Figura 1 przedstawia zdjęcie typowej postaci krystalicznej kryształów związku dCP4U4Na (wodzian 3,5).
3) Zawartość wody
Kryształy związku dCP4U4Na poddawano pomiarom zawartości wody metodą Karla Fischera. Stwierdzono, że kryształy związku dCP4U4Na są trwałe przy zawartości wody od 6,9 do 17,4% wagowych, zmieniającej się w zależności od stopnia wysuszenia. Wyniki obliczeń niezależnie pokazują, że 3,5-10 cząsteczek wody wiąże się lub przywiera do jednej cząsteczki dCP4U.
PL 202 200 B1
4) Temperatura topnienia
Kryształy związku dCP4UX4Na poddano pomiarowi temperatury topnienia w konwencjonalny sposób. Stwierdzono że temperatura topnienia wynosi 202-210°C. Temperatura topnienia liofilizowanego produktu wynosiła około 195-210°C.
5) Dyfrakcja promieniami X
Kryształy związku dCP4UX4Na poddano pomiarom dyfrakcji promieniami X stosując urządzenie do dyfrakcji promieniami X (Model: RINT2500V, produkt z firmy Rigaku Denki) w następujących warunkach (błąd pomiaru: +/-0,1°). Otrzymane widma dyfrakcji promieniami X i wartości pików dla wodzianu 3,5 dCP4U4Na przedstawiono odpowiednio na Figurze 2 i w Tabeli 3. Podobnie dane dla widma dyfrakcji promieniami X i wartości pików dekawodzianu dCP4UX4Na przedstawiono odpowiednio na Figurze 3 i w Tabeli 4. Ponadto widma dyfrakcji promieniami X i wartości pików liofilizowanego produktu przedstawiono na Figurze 4, dla porównania.
Warunki pomiaru rura do promieni X: Cu-Ka wyjście promieni X: 50 kV - 300 mA szybkość skanowania: 4,0°/minutę odstęp skanowania: 0,02° zakres pomiaru kąta: 2-40° szpara: DS-0,5°, RS-0,15 mm, SS-0,5°
Wstępna obróbka: mielenie w agatowym moździerzu
T a b e l a 3
Krystaliczny związek dCP4UX4Na wodzian 3,5
| Numer piku | 2Θ (°) | Względna intensywność (I/Io) |
| 1 | 6,18 | 39 |
| 2 | 8,82 | 38 |
| 3 | 11,50 | 27 |
| 4 | 12,32 | 79 |
| 5 | 13,76 | 39 |
| 6 | 14,44 | 83 |
| 8 | 16,34 | 29 |
| 9 | 16,84 | 34 |
| 10 | 17,68 | 100 |
| 11 | 19,02 | 81 |
| 12 | 19,72 | 36 |
| 13 | 20,86 | 35 |
| 14 | 22,28 | 78 |
| 15 | 23,54 | 47 |
| 16 | 25,04 | 42 |
T a b e l a 4
Krystaliczny związek dCP4UX4Na dekawodzian
| Numer piku | 2Θ (°) | Względna intensywność (I/Io) |
| 1 | 2 | 3 |
| 1 | 5,58 | 28 |
| 2 | 11,34 | 62 |
| 3 | 11,94 | 34 |
PL 202 200 B1 cd. tabeli 4
| 1 | 2 | 3 |
| 4 | 12,92 | 27 |
| 5 | 14,08 | 49 |
| 6 | 14,96 | 66 |
| 7 | 15,60 | 49 |
| 8 | 16,62 | 25 |
| 9 | 17,08 | 46 |
| 10 | 18,28 | 27 |
| 11 | 18,90 | 28 |
| 12 | 20,20 | 39 |
| 13 | 21,66 | 72 |
| 14 | 22,02 | 100 |
| 15 | 23,02 | 90 |
6) Higroskopijność
Kryształy związku dCP4UX4Na (dekawodzian) o zawartości wody w przybliżeniu 17,4% pozostawiono na dwa dni w następujących warunkach a), b) i c): a) 25°C i względna wilgotność 57%; b) 25°C i względna wilgotność 75%; oraz c) 25°C i względna wilgotność 93%. Nie zaobserwowano rozkładu lub zmiany wagi w powyższych trzech przypadkach. Kryształy wykazały, że są stabilne i nie higroskopijne. Ponadto takie same kryształy pozostawiono na siedem dni w następujących warunkach d): d) 40°C i wzglę dna wilgotność 75%. W tym przypadku nie zaobserwowano zmian.
W przeciwień stwie do tego, gdy liofilizowany produkt (począ tkowa zawartość wody: w przybliżeniu 1%) przechowywano przez dwa dni w następujących warunkach b) lub c): b) 25°C i względna wilgotność 75%, a c) 25°C i względna wilgotność 93%, to drugiego dnia przechowywania produkt oceniono jako stan mulisty z powodu rozpływania się pod wpływem wilgoci z powietrza.
7) Stabilność
Kryształy związku dCP4U4Na (dekawodzian) i liofilizowany produkt umieszczono oddzielnie w butelkach, które następnie zamknięto i pozostawiono na 13 dni w temperaturze 60°C (test przyspieszony). Nie zaobserwowano rozkładu kryształów. Przeciwnie do tego stwierdzono, że liofilizowany produkt uległ częściowemu rozkładowi, co potwierdzono stratą czystości produktu w przybliżeniu 2,2%.
7) widma NMR
Kryształy związku dCP4U4Na i liofilizowanego produktu oddzielnie wprowadzano do wykonanego z cyrkonu wirnika i mierzono odpowiednie widma 13C-CPMAS-NMR. Warunki pomiarów były następujące:
13C-CPMAS-NMR
1) urządzenie
2) sposób pomiaru
3) temperatura pomiaru
4) obserwowane jądro atomowe
5) częstotliwość pomiaru
6) szerokość impulsu wzbudzenia protonu
7) czas kontaktu
8) szerokość pomiaru
9) punkty pomiaru
10) punkty danych
11) czas powtarzania
12) standardowe przesunięcie chemiczne
13) szybkość obracania próbki
14) sumowanie
CMX-300 (produkt Chemagnetics) CPMAS (tłumienie pasm bocznych) pokojowa 13C
75,502 Mhz
4,5 μs
0,5 msek.
30,03 kHz
2048
16384
15,0 sek (Fig. 6 i 7)
60,0 sek (Fig. 5) heksametylobenzen (standard zewnętrzny 17,35 ppm) kHz 256 razy
PL 202 200 B1
Na Fig. 5 i w Tabeli 5 przedstawiono odpowiednio wyniki widma 13C-CPMAS-NMR dla krystalicznego związku dCP4UX4Na wodzianu 3,5 i dane dla pików. Na Fig. 6 i w Tabeli 6 przedstawiono odpowiednio wyniki widma 13C-CPMAS-NMR dla krystalicznego związku dCP4UX4Na dekawodzianu i dane dla pików. Na Fig. 7 i w Tabeli 7 przedstawiono odpowiednio wyniki widma 13C-CPMAS-NMR dla związku dCP4U w postaci białego proszku (produkt liofilizowany) i dane dla pików. Numery podane na Fig. 5 do 7 odnoszą się do odpowiednich numerów pików podanych w Tabelach 5 do 7.
T a b e l a 5
| Krystaliczny związek dCP4U^Na wodzian 3,5 (ppm) | |||
| (1)166,1 | (2)156,2 | (3)150,9 | (4)141,6 |
| (5)138,4 | (6)101,3 | (7)99,2 | (8)93,2 |
| (9)84,9 | (10)80,6 | (11)76,7 | (12)73,1 |
| (13)69,0 | (14)67,2 | (15)62,2 | (16)43,9 |
T a b e l a 6
Krystaliczny związek dCP4UANa dekawodzian (ppm)
| (1)167,4 | (2)157,8 | (3)151,6 | (4)139,0 |
| (5)117,9 | (6)102,6 | (7)99,3 | (8)93,3 |
| (9)90,1 | (10)87,3 | (11)80,6 | (12)77,2 |
| (13)75,0 | (14)73,9 | (15)72,0 | (16)67,0 |
| (17)63,1 | (18)60,4 | (19)42,0 | (20)40,8 |
T a b e l a 7
Biały proszek związku dCP4U (produkt liofilizowany) (ppm)
| (1)166,5 | (2)157,4 | (3)149,9 | (4)140,9 |
| (5)103,0 | (6)99,0 | (7)96,9 | (8)85,9 |
| (9)73,4 | (10)71,7 | (11)67,1 | (12)42,0 |
(13)39,3
P r z y k ł a d 2
Synteza dCP4U z UMP
Formamid (2,5 ml) i pirydynę (7,6 ml) dodano do odwodnionej soli trietyloaminowej (10 mmoli) pirofosforanu (TEA-PPi) a potem mieszaninę mieszano. W innym naczyniu umieszczono odwodnioną sól tributyloaminową urydyno-5'-monofosforanu (UMP-TBA) (10 mmoli), dodano DMAC (3,6 ml), dioksan (3,2 ml) i tributyloaminę (3,3 ml), wymieszano i do tego kroplami dodano DPC (2,3 ml). Mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez jedną godzinę dla utworzenia UMP-DPP, po czym dodano do wyżej opisanego, wcześniej przygotowanego, odwodnionego roztworu TEA-PPi. Mieszaninę reakcyjną mieszano w temperaturze pokojowej przez jedną godzinę z wytworzeniem UTP. Do soli tributyloaminowej 2'-deoksycytydyno-5'-monofosforanu (TBA-dCMP) (4,9 g, 10 mmoli) umieszczonej w innym naczyniu dodano DMAC (7,2 ml), dla wytworzenia zawiesiny, do której dodano DPC (2,2 ml, 1,1 równoważnik). Otrzymaną mieszaninę mieszano przez 40 minut i dodano do niej tributyloaminę (TBA) (9,5 ml). Kontynuowano mieszanie przez dalsze 20 minut, dla wytworzenia dCMP-DPP. Tak otrzymany roztwór dCMP-DPP dodano do wspomnianego, wcześniej przygotowanego, roztworu zsyntetyzowanego UTP, mieszaninę mieszano w temperaturze pokojowej przez 56 godzin. Reakcję zakończono przez dodanie wody, a wartość pH mieszaniny dostosowano na 11 przez dodanie 30% wodnego roztworu wodorotlenku sodowego. Po usunięciu rozpuszczalnika przez zatężanie, wartość pH dostosowano do 7,0 przez dodanie 6 moli/l kwasu solnego. Mieszaninę rozdzielano za pomocą octanu etylu. Warstwę wodną utworzoną przy rozdzielaniu poddano analizie HPLC (272 nm) potwierdzającej, że wydajność syntezy związku dCP4U wynosiła 37,7%.
PL 202 200 B1
Zastosowanie przemysłowe
Jak wyżej opisano kryształy związku dCP4U otrzymane zgodnie ze sposobem według wynalazku charakteryzują się dużą czystością i stabilnością i nie wykazują higroskopijności w porównaniu do liofilizowanego produktu, zatem mogą służyć jako użyteczny surowiec do wytwarzania leków.
Claims (10)
- Zastrzeżenia patentowe1. Kryształy P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu lub jego soli.
- 2. Kryształy P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu^4Na.
- 3. Kryształy według zastrz. 1 albo 2, o czystości co najmniej 95%.
- 4. Kryształy według zastrz. 1 albo 2, o czystości co najmniej 97% zawierające 2% lub mniej urydyno-5'-trifosforanu.
- 5. Kryształy według zastrz. 1 albo 2, o czystości co najmniej 97% zawierające 1% lub mniej urydyno-5'-trifosforanu.
- 6. Kryształy według dowolnego z zastrz. 1 do 5, w których 1-14 cząsteczek wody jest związane lub przywiera adhezyjnie do jednej cząsteczki P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu lub jego soli.
- 7. Kryształy według dowolnego z zastrz. 1 do 5, w których 3,5 cząsteczki wody jest związane lub przywiera adhezyjnie do jednej cząsteczki P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu lub jego soli.
- 8. Kryształy według dowolnego z zastrz. 1 do 5, w których 10 cząsteczek wody jest związane lub przywiera adhezyjnie do jednej cząsteczki P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu lub jego soli.
- 9. Sposób wytwarzania kryształów jak określone w zastrz. 1 obejmujący oczyszczanie surowego P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu przez chromatografię anionowymienną i chromatografię na węglu aktywowanym oraz dodawanie do otrzymanego roztworu z wytrącaniem P1-(2'-deoksycytydyno-5')-P4-(urydyno-5')czterofosforanu w postaci kryształów.
- 10. Sposób według zastrz. 9, w którym oczyszczanie obejmuje najpierw chromatografię anionowymienną a następnie chromatografię na węglu aktywowanym.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18495099 | 1999-06-30 | ||
| PCT/JP2000/004336 WO2001002416A1 (fr) | 1999-06-30 | 2000-06-30 | Cristaux dinucleotidiques |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| PL352363A1 PL352363A1 (en) | 2003-08-25 |
| PL202200B1 true PL202200B1 (pl) | 2009-06-30 |
Family
ID=16162200
Family Applications (2)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL352363A PL202200B1 (pl) | 1999-06-30 | 2000-06-30 | Kryształy P¹- (2'-deoksycytydyno-5'-) -P⁴- (urydyno-5'-) czterofosforanu i sposób ich wytwarzania |
| PL384307A PL202176B1 (pl) | 1999-06-30 | 2000-06-30 | Sposób wytwarzania P¹-(2'-deoksycytydyno-5')-P⁴-(urydyno-5')czterofosforanu |
Family Applications After (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| PL384307A PL202176B1 (pl) | 1999-06-30 | 2000-06-30 | Sposób wytwarzania P¹-(2'-deoksycytydyno-5')-P⁴-(urydyno-5')czterofosforanu |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6617444B1 (pl) |
| EP (2) | EP1362862B1 (pl) |
| JP (1) | JP3421666B2 (pl) |
| KR (1) | KR100593723B1 (pl) |
| CN (1) | CN1144811C (pl) |
| AT (2) | ATE255123T1 (pl) |
| AU (1) | AU767136B2 (pl) |
| BR (1) | BR0012205A (pl) |
| CA (1) | CA2376860C (pl) |
| CZ (1) | CZ303172B6 (pl) |
| DE (2) | DE60006814T2 (pl) |
| EA (1) | EA004707B1 (pl) |
| ES (2) | ES2245431T3 (pl) |
| HU (1) | HU229225B1 (pl) |
| IL (1) | IL147163A (pl) |
| MX (1) | MXPA02000035A (pl) |
| NO (1) | NO321169B1 (pl) |
| NZ (1) | NZ516301A (pl) |
| PL (2) | PL202200B1 (pl) |
| SK (1) | SK284178B6 (pl) |
| WO (1) | WO2001002416A1 (pl) |
| ZA (1) | ZA200110468B (pl) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7078391B2 (en) | 1997-02-10 | 2006-07-18 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating edematous retinal disorders |
| US7223744B2 (en) | 1997-02-10 | 2007-05-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof |
| US6818629B2 (en) | 1997-02-10 | 2004-11-16 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising P1-(2'-deoxycytidine 5'-)P4-(uridine 5'-) tetraphosphate |
| US6548658B2 (en) * | 1997-07-25 | 2003-04-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di-(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| US6872710B2 (en) | 1997-07-25 | 2005-03-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| PL202200B1 (pl) * | 1999-06-30 | 2009-06-30 | Yamasa Corp | Kryształy P¹- (2'-deoksycytydyno-5'-) -P⁴- (urydyno-5'-) czterofosforanu i sposób ich wytwarzania |
| US6867199B2 (en) | 2000-08-21 | 2005-03-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Dinucleoside polyphosphate compositions and their therapeutic use |
| US7161029B2 (en) * | 2003-12-17 | 2007-01-09 | Ajinomoto Co., Inc. | DiL-lysine monosulfate trihydrate crystal and method of making |
| CN100363376C (zh) * | 2006-06-12 | 2008-01-23 | 南京工业大学 | 一种5’-核苷三磷酸钠盐的结晶方法 |
| EP3323824A4 (en) * | 2015-06-29 | 2019-02-20 | Yamasa Corporation | PROCESS FOR STORING P1, P4-BIS (5'-URIDYL) -TETRAPHOSPHATE CRYSTALLS |
| HUE055280T2 (hu) * | 2016-10-25 | 2021-11-29 | Yamasa Corp | Eljárás P1, P4-di(uridin-5'-)tetrafoszfát tisztítására |
| CN111253456B (zh) * | 2020-03-13 | 2021-05-11 | 广东先强药业有限公司 | 一种地纽福索钠的制备方法 |
| CN111704637A (zh) * | 2020-06-28 | 2020-09-25 | 南京工业大学 | 一种采用膜蒸馏结晶精制核苷酸的方法 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07242685A (ja) * | 1994-01-12 | 1995-09-19 | Unitika Ltd | ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 |
| US5900407A (en) * | 1997-02-06 | 1999-05-04 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating dry eye disease with uridine triphosphates and related compounds |
| US5837861A (en) * | 1997-02-10 | 1998-11-17 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Dinucleotides and their use as modulators of mucociliary clearance and ciliary beat frequency |
| US6348589B1 (en) * | 1997-02-06 | 2002-02-19 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Certain dinucleotides and their use as modulators of mucociliary clearance and ciliary beat frequency |
| US6596725B2 (en) * | 1997-02-10 | 2003-07-22 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Use of certain dinucleotides to stimulate removal of fluid in retinal detachment and retinal edema |
| TW593331B (en) * | 1997-07-25 | 2004-06-21 | Inspire Pharmaceuticals Inc | Method for large-scale production of di(uridine 5')-tetraphosphate and salts thereof |
| DE69822482T2 (de) * | 1997-07-25 | 2005-03-03 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Salze von di(uridine 5'-tetraphosphate), verfahren zur herstellung und verwendungen davon |
| ATE232733T1 (de) * | 1998-05-22 | 2003-03-15 | Inspire Pharmaceuticals Inc | Therapeutische dinucleotide und deren derivate |
| AU747096C (en) * | 1998-10-02 | 2003-01-23 | Yamasa Corporation | Crystal of diuridine tetraphosphate or salt thereof and method for preparing the same, and method for producing said compound |
| WO2000039145A1 (en) * | 1998-12-23 | 2000-07-06 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Targeted gene transfer using g protein coupled receptors |
| PL202200B1 (pl) * | 1999-06-30 | 2009-06-30 | Yamasa Corp | Kryształy P¹- (2'-deoksycytydyno-5'-) -P⁴- (urydyno-5'-) czterofosforanu i sposób ich wytwarzania |
-
2000
- 2000-06-30 PL PL352363A patent/PL202200B1/pl unknown
- 2000-06-30 IL IL14716300A patent/IL147163A/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 EA EA200200109A patent/EA004707B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 JP JP2001507852A patent/JP3421666B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-30 KR KR1020017016184A patent/KR100593723B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 US US09/700,728 patent/US6617444B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 NZ NZ516301A patent/NZ516301A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 CN CNB008097356A patent/CN1144811C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-30 CZ CZ20014502A patent/CZ303172B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 DE DE60006814T patent/DE60006814T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 BR BR0012205-0A patent/BR0012205A/pt not_active Application Discontinuation
- 2000-06-30 EP EP03018399A patent/EP1362862B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 EP EP00942412A patent/EP1191032B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 AT AT00942412T patent/ATE255123T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 WO PCT/JP2000/004336 patent/WO2001002416A1/ja not_active Application Discontinuation
- 2000-06-30 ES ES03018399T patent/ES2245431T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 PL PL384307A patent/PL202176B1/pl unknown
- 2000-06-30 MX MXPA02000035A patent/MXPA02000035A/es active IP Right Grant
- 2000-06-30 ES ES00942412T patent/ES2211566T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 HU HU0201531A patent/HU229225B1/hu not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 DE DE60021629T patent/DE60021629T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 SK SK1870-2001A patent/SK284178B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 AU AU57067/00A patent/AU767136B2/en not_active Ceased
- 2000-06-30 CA CA002376860A patent/CA2376860C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-30 AT AT03018399T patent/ATE300551T1/de not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-12-20 ZA ZA200110468A patent/ZA200110468B/en unknown
- 2001-12-27 NO NO20016381A patent/NO321169B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| PL202200B1 (pl) | Kryształy P¹- (2'-deoksycytydyno-5'-) -P⁴- (urydyno-5'-) czterofosforanu i sposób ich wytwarzania | |
| EP1043329B1 (en) | Crystal of diuridine tetraphosphate or salt thereof and method for preparing the same, and method for producing said compound | |
| JP3964809B2 (ja) | ジヌクレオチドの製造法 | |
| ZA200102683B (en) | Crystal of diuridine tetraphosphate or salt thereof and method for preparing the same, and method for producing said compound. | |
| PL206867B1 (pl) | Sposób wytwarzania P1,P4-di(urydyno-5'-)czterofosforanu |