ES2878083T3

ES2878083T3 - Método para purificar P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato

Info

Publication number: ES2878083T3
Application number: ES17863832T
Authority: ES
Inventors: Yusuke Ohba; Tomoko Oyama; Fumitaka Kano; Asuka Uchino
Original assignee: Yamasa Corp
Current assignee: Yamasa Corp
Priority date: 2016-10-25
Filing date: 2017-10-24
Publication date: 2021-11-18
Anticipated expiration: 2037-10-24
Also published as: EP3546472A4; CA3039053A1; KR102259309B1; US20190233462A1; WO2018079503A1; JP6774663B2; US10815263B2; KR20190067162A; CA3039053C; EP3546472B1; CN109843901B; HUE055280T2; JPWO2018079503A1; EP3546472A1; CN109843901A

Abstract

Un método para purificar P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato mediante la eliminación de iones de hierro de una solución acuosa o solución de disolvente hidrófilo que contiene P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato e iones de hierro, que comprende (1) una etapa de purificación utilizando una columna empaquetada con resina quelante, y (2) una etapa de ajuste del pH de la solución después de dicha etapa de purificación utilizando la columna empaquetada con resina quelante a 5,5 o menos, y a continuación cristalización de P1,P4-di(uridina 5'-) tetrafosfato, o una etapa de tratamiento de la solución después de dicha etapa de purificación utilizando la columna empaquetada con resina quelante con carbón activado activado con cloruro de zinc.

Description

DESCRIPCIÓN

Método para purificar P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato

Campo de la invención

La presente invención se refiere a un método para eliminar iones de hierro de una solución acuosa o solución de disolvente hidrófilo que contiene P1,P4-di(uridina 5’-)tetrafosfato e iones de hierro, para reducir la concentración de iones de hierro.

Antecedentes de la invención

El P1,P4-di(uridina 5’-)tetrafosfato (en lo sucesivo denominado "UP4U") representado por la siguiente fórmula [I] o una sal del mismo se utiliza como agente terapéutico para el trastorno epitelial queratoconjuntival que acompaña al ojo seco. El compuesto también muestra un efecto de inducción de la expectoración y se espera que se desarrolle como un expectorante o un agente terapéutico para la neumonía.

Convencionalmente, los siguientes métodos se conocen como métodos para sintetizar UP4U.

(1) el método de reacción de uridina 5'-trifosfato cíclica preparada a partir de la condensación por deshidratación de uridina 5'-trifosfato (UTP), con uridina 5'-monofosfato (UMP) (Bibliografía No Relacionada con Patentes 1), y el método modificado del mismo (Bibliografía Relacionada con Patentes 1).

(2) el método de activación de ácido pirofosfórico con imidazol para sintetizar diimidazolil pirofosfato y condensación con UMP en un ambiente anhidro usando un solvente orgánico tal como dimetilformamida (DMF) (Bibliografía Relacionada con Patentes 2, Bibliografía No Relacionada con Patentes 2).

(3) el método de reacción de un compuesto activador de ácido fosfórico representado por la siguiente fórmula [Il] o [III] con un compuesto de ácido fosfórico seleccionado del grupo que consiste en UMP, UDP, UTP y un ácido pirofosfórico o una sal del mismo (excluyendo UTP libre) en agua o en un disolvente hidrófilo, en presencia de un ión metálico tal como un ión de hierro (II) y un ión de hierro (III) (Bibliografía Relacionada con Patentes 3)'. A

(En la fórmula [II], R representa un grupo uridilo que se une a la posición 5'; X representa un grupo heterocíclico; y n representa un número entero de 1 o 2.)

(En la fórmula [III], X representa un grupo heterocíclico seleccionado del grupo que consiste en un grupo imidazolilo, un grupo benzimidazolilo y un grupo 1,2,4-triazolilo).

Entre ellos, cuando se emplea el método (3), puede estar disponible la síntesis de UP4U con alto rendimiento, mientras que se evita la utilización de UTP libre no apta para la producción industrial en masa y la operación de deshidratación de la sal UTP. Además, este método es extremadamente adecuado para la síntesis industrial a gran escala de UP4U porque apenas produce subproductos y puede omitir una complicada etapa de deshidratación según el empleo de una reacción en condiciones hidrófilas.

Lista de citas

Bibliografía de Patentes

Bibliografía Relacionada con Patentes 1: WO 2008/012949 A

Bibliografía Relacionada con Patentes 2: WO 2008/024169 A

Bibliografía Relacionada con Patentes 3: WO 2014/103704 A

Bibliografía Relacionada con Patentes 4: WO 2000/020430 A

Bibliografía No relacionada con Patentes

Bibliografía No Relacionada con Patentes 1: Bioorg. & Medicinal Chemistry Letters, vol. 11, 157-160 (2001) Bibliografía No Relacionada con Patentes 2: Org. Biomol. Chem., 2011, Núm. 9, 730-738 (2011) Compendio de la invención

Problema técnico

UP4U es un compuesto que se utiliza como materia prima para productos farmacéuticos, por lo que se requiere un nivel extremadamente alto de gestión de impurezas. Por lo tanto, también es esencial mantener la concentración de iones metálicos en un grado suficientemente bajo. Por otro lado, por ejemplo, en el método de producción (3) anterior, dado que se añade un ión metálico tal como un ión de hierro (II) o un ión de hierro (III) a la solución de reacción como catalizador, los iones metálicos están contenidos en la solución de UP4U después de la finalización de la reacción. En tal caso, es necesario eliminar los iones metálicos en la etapa de purificación.

Convencionalmente, en cuanto a un método de purificación de UP4U, se conoce un método para producir cristales de UP4U o una sal del mismo, en donde el método se caracteriza por comprender una etapa de purificación de UP4U bruto o una sal del mismo mediante cromatografía de intercambio aniónico y cromatografía de carbón activado, una etapa de ajuste del pH del UP4U purificado o su solución salina de 6 a 9 según se desee, y una etapa de adición posterior de disolvente orgánico hidrófilo a una temperatura de 60°C o menos para precipitar de ese modo los cristales (Bibliografía Relacionada con Patentes 4). Sin embargo, la eficacia para la eliminación de metales de la solución de UP4U que contiene iones de hierro no se ha investigado.

Por otro lado, en cuanto a los métodos para eliminar los iones de hierro contenidos en una solución, por ejemplo, se utilizan como métodos habituales un método para formar un producto precipitado derivado de iones de hierro mediante el uso de ácido fosfórico o hidróxido de sodio y eliminar el producto precipitado, y un método para adsorber y eliminar los iones de hierro mediante el uso de una resina quelante o una resina de adsorción sintética. Sin embargo, como resultado del estudio, el autor de la presente invención ha descubierto que en el caso de reducir la concentración de iones de hierro de la solución de reacción de UP4U que contiene iones de hierro, la concentración de iones de hierro a veces no se puede reducir suficientemente por los métodos habituales descritos anteriormente, dependiendo de las condiciones.

Por lo tanto, un objeto de la presente invención es proporcionar un método para eliminar conveniente y de manera práctica el ión de hierro como método alternativo de purificación de UP4U.

Solución al problema

Como resultado de estudios exhaustivos para resolver los problemas anteriores, los autores de la presente invención han encontrado que los iones de hierro en la solución de reacción de UP4U se pueden eliminar suficientemente y la concentración de iones de hierro residuales se puede reducir a una concentración extremadamente baja de 10 ppm o menos, eliminando los iones de hierro de una solución acuosa o una solución de disolvente hidrófilo que contenga UP4U e iones de hierro mediante la combinación de una etapa de purificación en columna utilizando una resina quelante y cualquier etapa de cristalización a pH 5,5 o menos diferente de las condiciones de cristalización conocidas convencionalmente, o una etapa de tratamiento utilizando carbón activado activado con cloruro de zinc. Más específicamente, la presente invención proporciona los siguientes apartados [1] y [2].

[1] Un método para purificar P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato mediante la eliminación de iones de hierro de una solución acuosa o solución de disolvente hidrófilo que contiene P1,P4-di(uridina 5’-)tetrafosfato e iones de hierro, que incluye

(1) una etapa de purificación de la solución utilizando una columna empaquetada de resina quelante, y (2) una etapa de ajuste del pH de la solución después de dicha etapa de purificación utilizando la columna empaquetada de resina quelante a 5,5 o menos, y a continuación cristalización de P1,P4-di(uridina 5’-) tetrafosfato, o

una etapa de tratamiento de la solución después de dicha etapa de purificación utilizando la columna empaquetada de resina quelante con carbón activado activado con cloruro de zinc.

[2] El método de purificación según el apartado [1], en donde los iones de hierro son iones de hierro trivalentes.

Efectos ventajosos de la invención

Al emplear el método de purificación de la presente invención, es posible producir UP4U que tenga la misma calidad que UP4U producido por un método sin utilizar el catalizador, incluso si se utilizan iones de hierro como catalizador.

Breve descripción de los dibujos

La Figura 1 muestra las concentraciones de iones de hierro con respecto a UP4U en soluciones después del tratamiento de columna de resina quelante y posterior tratamiento utilizando varios tipos de columna de resina quelante.

La Figura 2 muestra las concentraciones de iones de hierro con respecto a UP4U en soluciones después del tratamiento de columna de resina quelante y posterior tratamiento con carbón activado.

Descripción de realizaciones

El método de la presente invención se refiere a un método para eliminar iones de hierro de una solución acuosa o solución de disolvente hidrófilo que contiene UP4U e iones de hierro, para reducir la concentración de iones de hierro.

La solución acuosa o la solución de disolvente hidrófilo que contiene UP4U e iones de hierro no están limitadas siempre que contengan UP4U e iones de hierro. Los ejemplos de las mismas incluyen una solución de reacción sintética obtenida mediante un método de producción que incluye hacer reaccionar (1) un compuesto activador de ácido fosfórico representado por la siguiente fórmula [II] o [III] con (2) un compuesto de ácido fosfórico seleccionado del grupo que consiste en UMP, UDP, UTP y un ácido pirofosfórico o una sal del mismo (excluyendo UTP libre) en agua o un disolvente orgánico hidrófilo, en presencia de (3) un ión metálico seleccionado del grupo que consiste en un ión de hierro (II) y un ión de hierro (III) (Bibliografía Relacionada con Patentes 3).

(En la fórmula [II], R1 representa un grupo uridilo que se une a la posición 5'-; X representa un grupo heterocíclico; y n representa un número entero de 1 o 2.)

O O

x -------- P-----o -------- P------X

HO HO

[III]

El "ión de hierro" de la presente invención se refiere a un ión convertido a partir de una sal de hierro en un ión metálico mediante la adición del mismo en agua o un disolvente orgánico hidrófilo. El tipo de sal puede incluir, por ejemplo, haluro, sal de ácido inorgánico y sal de ácido orgánico. Otros ejemplos específicos incluyen (i) cloruro ferroso, cloruro férrico y bromuro férrico como ejemplos de haluros, (ii) ácido sulfúrico, ácido nítrico y ácido perclórico como ejemplos de sales de ácidos inorgánicos y (iii) sales de ácidos orgánicos tales como trifluorometanosulfonatos, acetatos, trifluoroacetatos y citratos como ejemplos de sales de ácidos orgánicos. La sal puede ser una sal ferrosa o una sal férrica, es preferible una sal férrica y, entre ellas, es particularmente preferible el cloruro férrico. La sal que se vaya a utilizar puede ser un anhídrido o un hidrato.

En la solución de UP4U de la presente invención, el disolvente es agua o un disolvente orgánico hidrófilo. En cuanto al disolvente orgánico hidrófilo, se pueden utilizar alcoholes que tienen 6 o menos átomos de carbono tales como metanol y etanol, cetonas tales como acetona, éteres tales como dioxano, nitrilos tales como acetonitrilo, amidas tales como dimetilformamida.

La concentración de iones de hierro en la solución de UP4U es preferiblemente 10 ppm o más, más preferiblemente 60 ppm o más, y adicionalmente preferiblemente 60 ppm o más y 10% o menos, con respecto a UP4U. Asimismo, la concentración de UP4U en la solución de UP4U es preferiblemente de 0,01 a 10%, más preferiblemente de 0,1 a 5% y adicionalmente preferiblemente de 1 a 3%.

El método de la presente invención se refiere a un método para purificar UP4U que incluye, como etapas para eliminar los iones de hierro de la solución de UP4U, (1) una etapa de purificación de la solución utilizando una columna empaquetada con resina quelante, (2) una etapa de realización de cristalización a pH 5,5 o menos, o una etapa de realización de tratamiento con carbón activado activado con cloruro de zinc.

En la etapa de purificación de la columna (1) que utiliza la resina quelante, la purificación de la columna se puede realizar de acuerdo con un método habitual. El tipo de resina quelante que se utilizará puede incluir, por ejemplo, cualquiera seleccionada entre tipo ácido aminofosfórico, tipo ácido iminodiacético, tipo poliamina, tipo bispicolilamina y tipo isotiouronio. Entre ellos, se prefieren el tipo ácido aminofosfórico y el tipo ácido iminodiacético.

Los productos comercialmente disponibles de resina quelante incluyen IRC747 (grupo de ácido aminofosfórico tipo Na, fabricado por Organo Corporation), IRC748 (grupo de ácido iminodiacético tipo Na, fabricado por Organo Corporation), CR-11 (grupo de ácido iminodiacético tipo Na, fabricado por Mitsubishi Chemical Corporation), CR-20 (tipo libre de grupo poliamina, fabricado por Mitsubishi Chemical Corporation), OT-71 (grupo ácido iminodiacético tipo Na, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.), XMS-5612 (grupo ácido aminofosfórico tipo Na, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.), XMS-5418 (grupo bispicolilamina tipo SO4, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.), XMS-5413 (grupo isotiouronio tipo Cl, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.).

En la etapa (1), se hace pasar específicamente, una solución acuosa o una solución de disolvente orgánico hidrófilo de UP4U que contiene iones de hierro a través de una columna empaquetada con una resina quelante y se recoge la solución que ha pasado.

Por medio de la etapa de purificación de la columna que utiliza la resina quelante, se reduce la concentración de iones de hierro con respecto a UP4U en la solución de UP4U a 60 ppm o menos.

En la etapa de cristalización (2-1) de (2), las aguas madre de cristalización se ajustan primero a pH 5,5 o menos añadiendo un ácido tal como ácido clorhídrico, ácido fosfórico, ácido sulfúrico, ácido nítrico o ácido acético a la solución después del tratamiento (1), y se somete a cristalización. Aquí, el pH puede ser 5,5 o menos, y más preferiblemente 2,5 o más y 5,5 o menos. En la cristalización, por ejemplo, se añade el disolvente orgánico hidrófilo a la solución de UP4U y se agita hasta que la mezcla se vuelve turbia, se deja reposar y los cristales precipitados se recogen por filtración. Los ejemplos del disolvente orgánico hidrófilo incluyen alcoholes que tienen 6 o menos átomos de carbono tales como metanol y etanol, cetonas tales como acetona, éteres tales como dioxano, nitrilos tales como acetonitrilo, amidas tales como dimetilformamida, particularmente alcoholes y preferiblemente etanol. En este caso, para mejorar la eficacia de la cristalización, se puede añadir simultáneamente un cristal de siembra con el disolvente orgánico hidrófilo.

En la etapa de tratamiento (2-2) de (2) que utiliza carbón activado activado con cloruro de zinc, el tratamiento con carbón activado se puede realizar de acuerdo con un método habitual. En el método, se puede añadir carbón activado activado con cloruro de zinc a la solución después del tratamiento (1 ) y la mezcla se puede agitar durante aproximadamente 30 minutos a 20 horas, seguido de la eliminación del carbón activado por filtración.

El tipo de carbón activado utilizado en el método de la presente invención incluye, por ejemplo, carbón activado por vapor y activado químicamente, y entre ellos, el uso de carbón activado activado por cloruro de zinc es un rasgo característico de la presente invención. La materia prima de carbón activado se puede seleccionar entre, por ejemplo, madera, cáscara de coco y carbón. La forma se puede seleccionar, por ejemplo, entre polvo, forma triturada, granular, columnar, fibrosa y en forma de hoja. Los productos comercialmente disponibles de carbón activado activado con cloruro de zinc incluyen, por ejemplo, Tokusei Shirasagi M600 (fabricado por Osaka Gas Chemicals Co., Ltd.).

En el método de la presente invención, (1) la etapa de purificación de la columna que utiliza una resina quelante y (2) la etapa de cristalización en condiciones de pH 5,5 o menos o la etapa de tratamiento con carbón activado activado con cloruro de zinc se realizan al menos una vez en el orden (1), (2). Asimismo, además de las etapas (1) y (2) anteriores, el método de la presente invención puede incluir adicionalmente, por ejemplo, una etapa de realización de la purificación de la columna utilizando una columna de intercambio iónico, una etapa de realización de otro tratamiento con carbón activado, o una etapa de realización de cristalización de nuevo. Estas etapas se pueden realizar antes, después y entre las etapas (1) y (2).

Al realizar la purificación mediante el método de la presente invención, la concentración de hierro en la solución que contiene UP4U se puede reducir a una concentración extremadamente baja, por ejemplo, se puede ajustar a un valor extremadamente bajo de 10 ppm o menos de contenido de hierro con respecto a UP4U después del tratamiento. En el método de la presente invención, después de la purificación mediante la etapa de tratamiento con carbón activado activado con cloruro de zinc cuando se completa la etapa (2), se puede obtener UP4U con alta pureza realizando un tratamiento de cristalización según sea necesario. Como método de cristalización, por ejemplo, se puede utilizar un método conocido públicamente (Bibliografía Relacionada con Patentes 4).

Ejemplos

(Ejemplo de Referencia)

Se sintetizó UP4U de acuerdo con un método conocido (Bibliografía Relacionada con Patentes 3). Utilizando pirofosfato de diimidazolilo como compuesto activador de ácido fosfórico y UMP como compuesto de ácido fosfórico, se llevó a cabo la reacción de condensación utilizando agua como disolvente y cloruro férrico como catalizador. (Fórmula [III], X es un grupo imidazolilo).

O O

X--------P----O--------- P----- X

HO HO

[II!]

La solución después de la reacción de condensación se sometió a un tratamiento de columna empaquetada con resina quelante (IRC748, fabricada por Organo Corporation). La concentración de iones de hierro después del tratamiento con resina quelante fue de 40 ppm. Posteriormente, incluso cuando la cristalización se realizó de acuerdo con un método conocido, la concentración de iones de hierro no llegó a ser de 40 ppm o menos.

La concentración de iones de hierro se determinó siguiendo un método espectrométrico utilizando 1,10-fenantrolina de JIS K 0400-57-10. Los métodos de cuantificación específicos son los siguientes.

(1) Cargar un matraz aforado de 10 mL con una muestra y una solución patrón de hierro (Fe100) para preparar la curva de calibración. Preparar un matraz aforado de 10 mL que no cargue ninguna cantidad para los blancos.

(2) Añadir 400 ^L de una solución de HCl 6,0 M y 200 ^L de una solución de hidrocloruro de hidroxilamina al 10% a todos los matraces aforados y mezclar suficientemente la mezcla. A continuación, dejar reposar los matraces durante 30 minutos o más.

(3) Añadir 200 ^L de una solución de o-Fenantrolina al 0.5% y 1 mL de una solución de acetato de amonio al 50% y completar hasta 10 mL.

(4) Agitar bien y dejar reposar los matraces a temperatura ambiente durante 10 minutos o más. A continuación, medir la DO510 de cada solución.

(5) Preparar una curva de calibración a partir del valor de DO510 obtenido y determinar la concentración de iones de hierro en la muestra.

(Ejemplo 1) Evaluación de la combinación de tratamiento de columna de resina quelante y etapa de cristalización Como método para añadir un tratamiento de eliminación de hierro ("de-ironing") adicionalmente después del tratamiento de columna de resina quelante, se investigó el procedimiento para reducir la concentración de hierro cristalizando la solución de tratamiento quelante y separando únicamente el cristal.

La evaluación se realizó mediante la preparación de una solución de tratamiento simulada que contenía 38 ppm de hierro con respecto a UP4U. Específicamente, se disolvieron primero 480 g de UP4U en agua desionizada y el volumen de la solución se ajustó a 2 L. A continuación, se añadió una solución de cloruro de hierro (III) a la solución para ajustar el contenido de hierro con respecto a UP4U de 38 ppm. Se añadió ácido clorhídrico a la solución para ajustar el pH a 4,5, 5,0, 5, 5, 6,0, 6,5 y 7,0, y éstas se utilizaron como solución de tratamiento simulada.

Se agitaron 200 mL de cada solución de tratamiento simulada en un baño de agua a 25°C, a continuación se añadió etanol al 95% hasta que la mezcla se volvió turbia (aproximadamente 120 mL), a esto se le añadieron cristales de siembra de UP4U (25 mg) y la mezcla se agitó durante la noche. Después de confirmar que los cristales habían precipitado suficientemente, se añadieron a esto adicionalmente aproximadamente 40 ml de etanol del 95% y la mezcla se agitó. Los cristales y el sobrenadante se separaron por filtración. Los cristales obtenidos se disolvieron en 100 mL de agua desionizada y se midió el contenido de hierro.

Los resultados se muestran en la Tabla 1.

Tabla 1

Como se muestra en la tabla anterior, cuando se realizó el tratamiento de cristalización después del tratamiento con resina quelante, la concentración de hierro después de la cristalización de la solución de precristalización a pH 7,0 fue de 38 ppm, lo que sugiere que el hierro no se había eliminado. Mientras que la concentración de hierro después de la cristalización cuando cristalizó a pH 5,5 o menos fue de 10 ppm o menos, lo que sugiere que cuando la cristalización se realizó en condiciones de pH bajo de pH 5,5 o menos, la concentración de hierro se pudo reducir a una concentración muy baja.

(Ejemplo 2) Evaluación de la combinación del tratamiento en columna de resina quelante y otro tratamiento Como método para añadir un tratamiento de eliminación de hierro adicionalmente después del tratamiento en la columna de resina quelante, se evaluó el procedimiento para reducir la concentración de hierro cargando un adsorbente de hierro (varias resinas de columna quelantes o varios carbones activados) en la solución de tratamiento quelante inicial.

La evaluación se llevó a cabo preparando una solución de tratamiento simulada que contenía iones de hierro. En concreto, primero se disolvieron 480 g de UP4U en agua desionizada y el volumen de la solución se ajustó a 2 L. A continuación, se utilizó una al añadir una solución de cloruro de hierro (III) a la solución para crear un contenido de hierro con respecto a UP4U de 60 ppm como solución de tratamiento simulada.

Se midió una solución de tratamiento simulada ajustada a pH 2,0 y se cargó en 14 tubos de ensayo de 4,0 mL cada uno. Se pesaron y se cargaron 60 mg de resina quelante o carbón activado en polvo en la solución de tratamiento simulada en el tubo de ensayo y se agitó la mezcla. Veinte horas después del comienzo de la agitación, se tomó una muestra de 1 mLo más de la solución de tratamiento y se filtró con un filtro de membrana de 0,2 pm para eliminar la resina y el carbón activado. El contenido de hierro se midió utilizando 1 mL del producto filtrado.

Los tipos de resinas de columna quelantes utilizadas en la prueba son los siguientes; IRC747 (grupo de ácido aminofosfórico tipo Na, fabricado por Organo Corporation), IRC748 (grupo de ácido iminodiacético tipo Na, fabricado por Organo Corporation), CR-11 (grupo de ácido iminodiacético tipo Na, fabricado por Mitsubishi Chemical Corporation), CR-20 (grupo de poliamina tipo libre, fabricado por Mitsubishi Chemical Corporation), OT-71 (grupo de ácido iminodiacético tipo Na, fabricado por MUROMA^cHⁱCHEMICALS INC.), XMS-5612 (grupo de ácido aminofosfórico tipo Na, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.), XMS-5418 (grupo de bispicolilamina tipo SO4, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.), XMS-5413 (grupo de isotiouronio tipo Cl, fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.).

Además, los tipos de carbón activado son los siguientes; Shirasagi P (cáscara de coco/activación con vapor, Osaka Gas Chemical Co., Ltd.), Tokusei Shirasagi (madera/activación con cloruro de zinc, Osaka Gas Chemical Co., Ltd.), Shirasagi A (madera/activación con vapor, Osaka Gas Chemical Co ., Ltd.), FP-3 (material desconocido/ activación con vapor, fabricado por Osaka Gas Chemical Co., Ltd.), TAIKO K Tipo A (madera / método de activación desconocido, fabricado por Futamura Chemical Co., Ltd.).

Los resultados se muestran en las Tablas 2 y 3 y las Figs. 1 y 2.

Tabla 2

Tabla 3

Como se muestra en la FIG. 1 anterior, cuando se añadió una resina quelante adicional a la solución después del tratamiento con la columna de resina quelante, no se eliminó el hierro excepto mediante el uso de un grupo de ácido aminofosfórico tipo Na XMS-5612 (fabricado por MUROMACHI CHEMICALS INC.) o IRC747 (fabricado por Organo Corporation). Asimismo, incluso cuando se trató con una resina de grupo de ácido aminofosfórico tipo Na, la concentración de hierro después del tratamiento fue de 10 ppm o más.

Entretanto, como se muestra en la FIG. 2, cuando se aplicó un tratamiento con carbón activado a la solución después del tratamiento con columna de resina quelante, la concentración de hierro se redujo incluso cuando se utilizó carbón activado. En particular, en el caso de utilizar carbón activado activado con cloruro de zinc, la concentración de hierro después del tratamiento fue inferior a 10 ppm y la concentración de hierro se pudo reducir a una concentración muy baja.

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un método para purificar P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato mediante la eliminación de iones de hierro de una solución acuosa o solución de disolvente hidrófilo que contiene P1,P4-di(uridina 5'-)tetrafosfato e iones de hierro, que comprende

(1 ) una etapa de purificación utilizando una columna empaquetada con resina quelante, y

(2) una etapa de ajuste del pH de la solución después de dicha etapa de purificación utilizando la columna empaquetada con resina quelante a 5,5 o menos, y a continuación cristalización de P1,P4-di(uridina 5'-) tetrafosfato, o

una etapa de tratamiento de la solución después de dicha etapa de purificación utilizando la columna empaquetada con resina quelante con carbón activado activado con cloruro de zinc.

2. El método de purificación según la reivindicación 1, en donde los iones de hierro son iones de hierro trivalentes.