NO321169B1 - Dinukleotidkrystaller - Google Patents
Dinukleotidkrystaller Download PDFInfo
- Publication number
- NO321169B1 NO321169B1 NO20016381A NO20016381A NO321169B1 NO 321169 B1 NO321169 B1 NO 321169B1 NO 20016381 A NO20016381 A NO 20016381A NO 20016381 A NO20016381 A NO 20016381A NO 321169 B1 NO321169 B1 NO 321169B1
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- dcp4u
- crystals
- uridine
- deoxycytidine
- tetraphosphate
- Prior art date
Links
- 239000013078 crystal Substances 0.000 claims abstract description 63
- BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N [chloro(phenoxy)phosphoryl]oxybenzene Chemical compound C=1C=CC=CC=1OP(=O)(Cl)OC1=CC=CC=C1 BHIIGRBMZRSDRI-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 20
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims abstract description 16
- NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 2'-deoxycytosine 5'-monophosphate Chemical compound O=C1N=C(N)C=CN1[C@@H]1O[C@H](COP(O)(O)=O)[C@@H](O)C1 NCMVOABPESMRCP-SHYZEUOFSA-N 0.000 claims abstract description 15
- YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H [oxido-[oxido(phosphonatooxy)phosphoryl]oxyphosphoryl] phosphate Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O YDHWWBZFRZWVHO-UHFFFAOYSA-H 0.000 claims abstract description 11
- XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J diphosphate(4-) Chemical compound [O-]P([O-])(=O)OP([O-])([O-])=O XPPKVPWEQAFLFU-UHFFFAOYSA-J 0.000 claims abstract description 6
- 235000011180 diphosphates Nutrition 0.000 claims abstract description 4
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 26
- PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N UTP Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-XVFCMESISA-N 0.000 claims description 22
- PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N uridine-triphosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(=O)OP(O)(=O)OP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 PGAVKCOVUIYSFO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 21
- DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N Uridinemonophosphate Natural products OC1C(O)C(COP(O)(O)=O)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 17
- DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N uridine-5'-monophosphate Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](COP(O)(O)=O)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DJJCXFVJDGTHFX-ZAKLUEHWSA-N 0.000 claims description 14
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 13
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 claims description 12
- 238000004587 chromatography analysis Methods 0.000 claims description 10
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 claims description 8
- 238000005571 anion exchange chromatography Methods 0.000 claims description 7
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 claims description 6
- 238000000746 purification Methods 0.000 claims description 6
- 238000002955 isolation Methods 0.000 claims description 2
- DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N Uridine Chemical compound O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-XVFCMESISA-N 0.000 claims 4
- DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N beta-L-uridine Natural products O[C@H]1[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@@H]1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-PSQAKQOGSA-N 0.000 claims 2
- DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N uracil arabinoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(=O)NC(=O)C=C1 DRTQHJPVMGBUCF-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 2
- 229940045145 uridine Drugs 0.000 claims 2
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims 1
- 239000003814 drug Substances 0.000 abstract description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 abstract description 5
- 239000007858 starting material Substances 0.000 abstract description 4
- 229940079593 drug Drugs 0.000 abstract description 2
- 239000002994 raw material Substances 0.000 abstract description 2
- TXXYYOUBDOAQDT-UHFFFAOYSA-N 4-nitro-1-(phenylmethoxymethyl)imidazole Chemical compound C1=NC([N+](=O)[O-])=CN1COCC1=CC=CC=C1 TXXYYOUBDOAQDT-UHFFFAOYSA-N 0.000 abstract 3
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 43
- 239000000047 product Substances 0.000 description 25
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 18
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N tributylamine Chemical class CCCCN(CCCC)CCCC IMFACGCPASFAPR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 11
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 9
- 238000002441 X-ray diffraction Methods 0.000 description 8
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylacetamide Chemical compound CN(C)C(C)=O FXHOOIRPVKKKFG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000001160 cross-polarisation magic angle spinning nuclear magnetic resonance spectrum Methods 0.000 description 7
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 7
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N Formamide Chemical compound NC=O ZHNUHDYFZUAESO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 6
- -1 alkali metal salts Chemical class 0.000 description 6
- 239000002585 base Substances 0.000 description 6
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 6
- 239000002002 slurry Substances 0.000 description 6
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 6
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 5
- 239000003957 anion exchange resin Substances 0.000 description 5
- QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N Dicylcohexylcarbodiimide Chemical compound C1CCCCC1N=C=NC1CCCCC1 QOSSAOTZNIDXMA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 150000001447 alkali salts Chemical class 0.000 description 4
- 150000004691 decahydrates Chemical class 0.000 description 4
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 4
- 238000005259 measurement Methods 0.000 description 4
- 238000002844 melting Methods 0.000 description 4
- 230000008018 melting Effects 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 2,6-dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC(C)=N1 OISVCGZHLKNMSJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N Ethyl acetate Chemical compound CCOC(C)=O XEKOWRVHYACXOJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 150000001408 amides Chemical class 0.000 description 3
- 230000015572 biosynthetic process Effects 0.000 description 3
- 150000002576 ketones Chemical class 0.000 description 3
- 239000000463 material Substances 0.000 description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 3
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 3
- 238000003786 synthesis reaction Methods 0.000 description 3
- CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 1,3-Dimethyl-2-imidazolidinon Chemical compound CN1CCN(C)C1=O CYSGHNMQYZDMIA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 2,4-Dimethylpyridine Chemical compound CC1=CC=NC(C)=C1 JYYNAJVZFGKDEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 2-methylpyridine Chemical compound CC1=CC=CC=N1 BSKHPKMHTQYZBB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 206010006458 Bronchitis chronic Diseases 0.000 description 2
- 206010009137 Chronic sinusitis Diseases 0.000 description 2
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 102000000033 Purinergic Receptors Human genes 0.000 description 2
- 108010080192 Purinergic Receptors Proteins 0.000 description 2
- PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N Styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1 PPBRXRYQALVLMV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N Triethylamine Chemical class CCN(CC)CC ZMANZCXQSJIPKH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 150000001298 alcohols Chemical class 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 206010006451 bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 208000007451 chronic bronchitis Diseases 0.000 description 2
- 208000027157 chronic rhinosinusitis Diseases 0.000 description 2
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 2
- 238000002425 crystallisation Methods 0.000 description 2
- 230000008025 crystallization Effects 0.000 description 2
- 150000004292 cyclic ethers Chemical class 0.000 description 2
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 2
- GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N hexamethylphosphoric triamide Chemical compound CN(C)P(=O)(N(C)C)N(C)C GNOIPBMMFNIUFM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000000704 physical effect Effects 0.000 description 2
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 2
- 238000003860 storage Methods 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- 230000002194 synthesizing effect Effects 0.000 description 2
- 238000012360 testing method Methods 0.000 description 2
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229940124597 therapeutic agent Drugs 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 1-hexanamine Chemical class CCCCCCN BMVXCPBXGZKUPN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 2-methyl-5-methylpyridine Natural products CC1=CC=C(C)N=C1 XWKFPIODWVPXLX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- ZJIJYZSGABIPDP-UHFFFAOYSA-N 2-n,4-n-dimethylpyridine-2,4-diamine Chemical compound CNC1=CC=NC(NC)=C1 ZJIJYZSGABIPDP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WKGHUAZJNBXABN-UHFFFAOYSA-N 3-bromo-2-chloro-6-methyl-5-nitropyridine Chemical compound CC1=NC(Cl)=C(Br)C=C1[N+]([O-])=O WKGHUAZJNBXABN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- KNCHDRLWPAKSII-UHFFFAOYSA-N 4-ethyl-2-methylpyridine Chemical compound CCC1=CC=NC(C)=C1 KNCHDRLWPAKSII-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004925 Acrylic resin Substances 0.000 description 1
- 229920000178 Acrylic resin Polymers 0.000 description 1
- 229910002483 Cu Ka Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000005481 NMR spectroscopy Methods 0.000 description 1
- 102100028045 P2Y purinoceptor 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710096700 P2Y purinoceptor 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100028070 P2Y purinoceptor 4 Human genes 0.000 description 1
- 108050009478 P2Y purinoceptor 4 Proteins 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N UMP group Chemical group P(=O)(O)(O)OC[C@@H]1[C@H]([C@H]([C@@H](O1)N1C(=O)NC(=O)C=C1)O)O DJJCXFVJDGTHFX-XVFCMESISA-N 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 230000003213 activating effect Effects 0.000 description 1
- 239000008186 active pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 239000000556 agonist Substances 0.000 description 1
- 239000003513 alkali Substances 0.000 description 1
- 229910052784 alkaline earth metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000003863 ammonium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000003708 ampul Substances 0.000 description 1
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 1
- 125000004429 atom Chemical group 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 159000000007 calcium salts Chemical class 0.000 description 1
- 125000004432 carbon atom Chemical group C* 0.000 description 1
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 1
- 239000003729 cation exchange resin Substances 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 1
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 1
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000001514 detection method Methods 0.000 description 1
- 238000011161 development Methods 0.000 description 1
- JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N dibutylamine Chemical class CCCCNCCCC JQVDAXLFBXTEQA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229910000396 dipotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002170 ethers Chemical class 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 1
- 238000004255 ion exchange chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 159000000003 magnesium salts Chemical class 0.000 description 1
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 1
- 229910000402 monopotassium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000004570 mortar (masonry) Substances 0.000 description 1
- 238000006386 neutralization reaction Methods 0.000 description 1
- 150000002825 nitriles Chemical class 0.000 description 1
- RVTZCBVAJQQJTK-UHFFFAOYSA-N oxygen(2-);zirconium(4+) Chemical compound [O-2].[O-2].[Zr+4] RVTZCBVAJQQJTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 238000012856 packing Methods 0.000 description 1
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 1
- 239000008177 pharmaceutical agent Substances 0.000 description 1
- 159000000001 potassium salts Chemical class 0.000 description 1
- 238000002203 pretreatment Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 159000000000 sodium salts Chemical class 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 230000006641 stabilisation Effects 0.000 description 1
- 238000011105 stabilization Methods 0.000 description 1
- 125000005270 trialkylamine group Chemical group 0.000 description 1
- 238000000825 ultraviolet detection Methods 0.000 description 1
- 229910001928 zirconium oxide Inorganic materials 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H19/00—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof
- C07H19/02—Compounds containing a hetero ring sharing one ring hetero atom with a saccharide radical; Nucleosides; Mononucleotides; Anhydro-derivatives thereof sharing nitrogen
- C07H19/04—Heterocyclic radicals containing only nitrogen atoms as ring hetero atom
- C07H19/06—Pyrimidine radicals
- C07H19/10—Pyrimidine radicals with the saccharide radical esterified by phosphoric or polyphosphoric acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H21/00—Compounds containing two or more mononucleotide units having separate phosphate or polyphosphate groups linked by saccharide radicals of nucleoside groups, e.g. nucleic acids
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H1/00—Processes for the preparation of sugar derivatives
- C07H1/06—Separation; Purification
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Medicines That Contain Protein Lipid Enzymes And Other Medicines (AREA)
Abstract
Det beskrives krystaller av P1-(2-deoksycytidin-5'-)P4"(uridin-5-)tetrafosfat (dCP4U) eller et salt derav og en fremgangsmåte for fremstilling av krystallene. Det beskrives også en fremgangsmåte for fremstilling av dCP4Usom involverer omsetning av uridin-5-monofosfat (UMP),. 2'-deoksycytidin-5 -monofosfat (dCMP), difenylfosfokloridat (DPC) og pyrofosfat (PPi).Krystallene av dCP4U oppnådd gjennom den beskrevne fremgangsmåte har høy renhet og høy stabilitet og ingen hygroskopisitet sammenlignet med et frysetørket produkt, og kan således tjene som et egnet råmateriale for fremstilling av et legemiddel. Fremgangsmåten for fremstilling av dCP4U muliggjør bruk av billig UMP som utgangsmateriale og fører til høyt utbytte. Fremgangsmåten er således egnet for syntese av dCP4U i stor skala.
Description
Oppfinnelsesområde
Foreliggende oppfinnelse vedrører krystaller av P^-deoksycytidin- 5' -)P<4->
(uridin-5'-)tetrafosfat (dCP4U) eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav (heretter omtalt som "dCP4U") som er anvendelig som et terapeutisk middel mot kronisk bronkitt, sinusitt og lignende, en fremgangsmåte for fremstilling av krystallene samt en effektiv fremgangsmåte for fremstilling av dCP4U.
Teknikkens stand
dCP4U representert ved følgende formel (I):
eller et salt derav, er en selektiv agonist for P2Y2 purinreseptorer og/eller P2Y4 purinreseptorer og er en forbindelse som forventes utviklet som et terapeutisk middel mot kronisk bronkitt, sinusitt og lignende (se WO 98/34942).
Hittil har det ikke være mulig å oppnå dCP4U i krystallform, og dCP4U er bare blitt fremstillet i form av et hvitt pulver (hvitt faststoff) gjennom frysetørking. De konvensjonelt oppnådde pulverformede produktene av dCP4U har en renhet så lav som 82% (målt ved HPLC). Særlig er det vanskelig å fraskille uridin-5'-trifosfat (UTP) som tjener som utgangsmatertale for dCP4U, og sterkt renset dCP4U har bare latt seg fremstille, med betydelige vanskeligheter, gjennom konvensjonell ionebytter kromatografi (WO 98/34942).
Det overnevnte hvite pulver av lav renhet har ulemper, som f. eks, hygro skopisitet. Fremstillingen av et farmasøytisk middel fra dCP4U må derfor foretas i spesiatapparatur hvor fuktigheten omhyggelig overvåkes. Selv etter fremstillingen av midlet, må produktet pakkes tett. Siden det farmasøytiske midlet dessuten bare er virksomt over et kort tidsrom som følge av liten stabilitet av pulverproduktet, har det vært ønskelig å oppnå høyt rensede og stabile krystaller av dCP4U.
dCP4U syntetiseres fra 2'-deoksycytidin-5'- monofosfat (dCMP) og UTP ved bruk av et aktiveringsmiddel, som f. eks. dicykloheksylkarbodiimid (DCC). Konvensjonelle fremgangsmåter fører imidlertid til et meget lavt synteseutbytte; dvs. så lavt som ca. 9 vekt% (se Eksempel 20 i WO 98/34942) og kan aldri tjene som noen praktisk fremgangsmåte. Utvikling av en fremgangsmåte for fremstilling av dCP4U i høyt utbytte og i stor skala har følgelig også vært ønskelig.
I betraktning av dette, er et formål ved foreliggende oppfinnelse å tilveiebringe stabile krystaller av dCP4U som er egnet for fremstilling av medikamenter. Et annet formål ved oppfinnelsen, er å tilveiebringe en fremgangsmåte for fremstilling av krystallene. Ytterligere et formål med oppfinnelsen, er å tilveiebringe en effektiv fremgangsmåte egnet for storskala produksjon av dCP4U.
Beskrivelse av oppfinnelsen
Oppfinnerne har foretatt omfattende studier over stabiliseringen av dCP4U og funnet at dCP4U som har en renhet på 95% eller mer, kan fremstilles ved anionbytter kromatografi i kombinasjon med kromatografi på aktivkull (aktivkull-kromatografi) og at dCP4U-krystaller kan fremstilles fra slik høyrenset dCP4U. De derved oppnådde dCP4U-krystallene, har vist seg å ha en betydelig høyere renhet enn det konvensjonelt produserte dCP4U-pulver, ingen hygroskopisHet og høy stabilitet.
Oppfinnerne har også foretatt omfattende studier av fremgangsmåter for syntetisering av dCP4U ved å benytte bHlig uridin-5'-monofosfat (UMP) i stedet for kostbart UTP, og har funnet at dCP4U effektivt kan fremstilles ved bruk av difenylfosfokloridat (DPC) og et pyrofosfat (PPi). Foreliggende oppfinnelse er basert på disse funnene.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer således krystaller av dCP4U. Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en fremgangsmåte for fremstilling av krystaller av dCP4U, hvor fremgangsmåten omfatter rensing av rå dCP4U ved anionbytter kromatografi og aktivkull-kromatografi og tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning av renset dCP4U, for derved å utfelle dCP4U i form av krystaller.
Foreliggende oppfinnelse tilveiebringer også en fremgangsmåte for fremstilling av dCP4U som omfatter omsetning av UMP, dCMP, DPC og PPi.
Kort beskrivelse av tegningene
Fig. 1 er et fotografi som viser krystallformen av krystallinsk dCP4U-4Na-(3,5-hydrat). Fotografiet ble tatt under et polarisasjons-mikroskop (forstørrelse: x440), hvor 1 mm i bildet tilsvarer 25 um. Fig. 2 viser et røntgendrffraksjonsspektrum av krystallinsk dCP4U 4Na-(3,5-hydrat). Fig. 3 viser et røntgendiffraksjonsspektrum av krystallinsk dCP4U-4Na-(dekahydrat). Fig. 4 viser et røntgendiffraksjonsspektrum av hvitt pulverformet dCP4U (frysetørket produkt). Fig. 5 viser et <13>C-CPMAS-NMR-spektrum av krystallinsk dCP4U 4Na-(3,5-hydrat). Fig. 6 viser et <13>C-CPMAS-NMR-spektrum av krystallinsk dCP4U 4Na (dekahydrat). Fig. 7 viser et <13>C-CPMAS-NMR-spektrum av hvitt pulverformet dCP4U (fryse-tørket produkt).
Foretrukket utførelsesform av oppfinnelsen
Krystallene av dCP4U ifølge foreliggende oppfinnelse oppnås gjennom
rensing av rå dCP4U ved bruk av spesifikke hjelpemidler og tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning av renset dCP4U, for derved å utfelle dCP4U som krystaller. Foreliggende oppfinnelse vil nedenfor bli beskrevet med hensyn til
(1) rensing av dCP4U og (2) krystallisasjon av dCP4U.
(1) Rensing av dCP4U
dCP4U kan renses ved anionbytter kromatografi i kombinasjon med aktivkull-kromatografi. Selv om de to kromatograif-teknikkene kan foretas i vilkårlig rekke-følge, går anionbytter kromatografi fortrinnsvis forut for aktivkull-kromatografi for å forbedre renheten av dCP4U.
En styren- eller akryl-harpiks kan benyttes som anionbytter harpiks for overnevnte kromatograif-teknikker. Eksempler på harpikser som kan benyttes, er sterkt basiske anionbytter harpikser, så som AMBERLITE IRA 402 (Rohm & Haas Co.), DIAION PA-312 og DIAION SA-11A (Mitsubishi Chemical Co. Ltd.) og svakt basiske anionbytter harpikser, så som AMBERLITE IRA 67 (Rohm & Haas Co.) og DIAION WA-30 (Mitsubishi Chemical Co. Ltd.).
Aktivkullet kan ha form av aktivert kull av kromatografi-kvaiitet som er knust eller formet til partikler, og slike kan omfatte kommersielt tilgjengelige produkter (f.eks. fra Wako Pure Chemical Industries, Ltd. og Futamura Chemical Industries, Co. Ltd.).
Kromatografi kan foretas satsvis, ved bruk av en kolonne, etc. Når det foretas kolonne-kromatografi kan det benyttes en vandig sur løsning eller en blanding av en slik løsning med et salt som har høyere ionestyrke, så som natriumklorid, som eluent for anionbytter kromatografi; og vann eller en vandig løsning av et alkali, som f. eks. natriumhydroksyd, kan benyttes som eluent for aktivkull kolonnekromatograft. En forutgående test i liten skala kan foretas for å velge de riktige konsentrasjoner av hver eluent innen området 0,001 M til 10M.
(2) Krystallisasjon av dCP4U
dCP4U krystalliseres ved tilsetning av et hydrofilt organisk løsningsmiddel til en løsning som inneholder det således rensede dCP4U.
Eksempler på hydrofile organiske løsningsmidler som kan benyttes, er alkoholer som har seks eller færre karbonatomer, så som metanol og etanol; ketoner så som aceton; etere som dioksan; nitriler så som acetonitriler og amider så som dimetylformamid. Av disse foretrekkes særlig alkoholer, spesielt etanol.
Nærmere bestemt, behandles en løsning av det således rensede dCP4U, eller en oppslemming oppnådd gjennom konsentrering av løsningen, for å justere pH til 5-10, fortrinnsvis 6-9, hvorpå et hydrofilt organisk løsningsmiddel tilsettes til løsningen eller oppslemmingen ved 60°C eller lavere, fortrinnsvis 20°C eller lavere, for derved å utfelle det løste stoff som stabile dCP4U-krystaller.
De derved oppnådde dCP4U-krystallene ifølge foreliggende oppfinnelse, inneholder dCP4U i en mengde på 95% eller mer og UTP i en mengde på 3% eller mindre. Fortrinnsvis inneholder dCP4U-krystallene dCP4U i en mengde på 97% eller mer og UTP i en mengde på 2% eller mindre. Mer foretrukket inneholder dCP4U-krystallene, dCP4U i en mengde på 98% eller mer og UTP i en mengde på 1% eller mindre.
Slike dCP4U-krystaller av høy renhet kan foreligge i form av et salt, hydrat eller hydratsalt Eksempler på saltene er farmasøytisk akseptable salter, så som alkalimetailsalter, f.eks. natriumsalter og kaliumsalter; jordalkalimetallsalter som kalsiumsalter og magnesiumsalter; og ammoniumsalter. dCP4U kan være substituert med 1-4 metallatomer for å danne et salt.
Overnevnte hydrat kan omfatte 1-14 molekyler vann som er bundet til eller adhererer til et molekyl dCP4U, og overnevnte hydratsalt kan omfatte 1-14 molekyler vann som er bundet til eller adhererer til et molekyl av et alkalimetallsalt av dCP4U.
Videre inkluderer krystallene av dCP4U i henhold til foreliggende oppfinnelse også tautomerer derav.
De derved oppnådde dCP4U-krystallene, kan eventuelt tørkes etter en vanlig fremgangsmåte, så som tørking under redusert trykk, tørking under luftstrøm eller tørking ved oppvarming, og anbringes deretter i en beholder (f. eks. flaske, pose, boks, ampulle). Pakkingen i beholderen kan foretas slik at beholderen er åpen, lukket, lirfttett eller forseglet. Apen pakning med lufttilgang foretrekkes ikke, idet det er ønskelig å opprettholde lagringsstabilttet av krystallene.
Måten for fremstilling av dCP4U i henhold til foreliggende oppfinnelse omfatter omsetning av UMP, dCMP, DPC og PPi.
Nærmere bestemt omfatter fremgangsmåten omsetning av UMP med DPC for derved å syntetisere UMP-difenylfosfat (UMP-DPP); videre behandling av den UMP-DPP-holdige reaksjonsblanding med PPi for derved å danne UTP i blandingen; og omsetning av det derved dannede UTP, uten isolering fra reaksjonsblandingen, med dCMP i nærvær av DPC, for derved å danne det ønskede dCP4U.
Ved syntetisering av UMP-DPP fra UMP, kan et vanlig fremstillet UMP-trialkylaminsalt (f.eks. UMP-tributylaminsalt) løses i et løsningsmiddel. Eksempler på løsningsmidler, er amider så som DMF og dimetylacetamid (DMAC); cykliske etere som f. eks. dioksan og tetrahydrofuran; ketoner som aceton; og dimetylimidazolidinon, heksametylfosforsyretriamid eller en blanding av to eller flere av disse. Deretter tilsettes løsningen DPC og eventuelt trialkylamin, hvorpå blandingen får reagere ved 10-50°C i ca. 30 minutter til 5 timer.
De PPi som reagerer med UMP-DPP er fortrinnsvis PPi-organiske aikalisalter. Eksempler på slike salter er et heksylaminsalt, et dibutylaminsalt, et trietylaminsalt og et tributylaminsalt.
For reaksjonen av UMP-DPP med et PPi-organisk alkalisalt, kan det PPi-organiske alkalisalt løses i et løsningsmiddel Eksempler på slike løsningsmidler er amider, så som DMF, DMAC og formamid; cykliske etere så som dioksan og tetrahydrofuran; ketoner som aceton; og dimetylimidazolidinon, heksametylfosforsyretriamid, dimetylsulfoksyd, acetonitril eller en blanding av to eller flere av disse. Deretter tilsettes løsningen til den således syntetiserte UMP-DPP-løsning, hvoretter blandingen får reagere ved 10-50°C fira ca. 30 minutter opp til 5 timer.
Reaksjonen mellom UMP-DPP og PPi-organisk alkalisalt kan foretas i nærvær av en passende base. Eksempler på slike baser er pyridinbaser, så som pyridin, 2,6-lutidin, 2,4-lutidin, a-picolin, 6-picolin, v-picolin, 2,4-dimetylaminopyridin, a-kollidin, B-kollidin og y-kollidin, hvorav pyridin særlig er å foretrekke. Et basisk løsnings-middel for reaksjonen inngår også blant de baser som benyttes i henhold til foreliggende oppfinnelse. Konsentrasjonen av basen er ikke spesielt begrenset. Basen tilsettes fortrinnsvis i en mengde på 6 ekvivalenter eller mer i forhold til UMP, fortrinnsvis 18 ekvivalenter eller mer.
Gjennom reaksjonen mellom UMP-DPP og PPi-organisk alkalisalt, syntetiseres UTP i reaksjonsblandingen. Det derved dannede UTP og dCMP omsettes i nærvær av DPC for derved å syntetisere dCP4U.
Selv om dCMP kan tilsettes til reaksjonsblandingen som sådant, omdannes dCMP til dCMP-difenylfosfat (dCMP-DPP) på lignende måte som den benyttet for UMP, og dCMP-DPP kan også tilsettes.
Omsetningen av dCP4U kan foretas ved til overnevnte syntetiserte UTP-løsning å tilsette DPC i en mengde på 1,1 ekvivalenter eller mer, og dCMP eller dCMP-DPP i en mengde på 0,5-1,5 ekvivalenter i forhold til UMP benyttet som utgangsmateriale, og blandingen får reagere ved 10-50°C ca. 30 minutter opptil 5 timer.
Det derved oppnådde dCP4U renses og krystalliseres på overnevnte måte for derved å oppnå dCP4U-krystallene ifølge foreliggende oppfinnelse.
Eksempler
Foreliggende oppfinnelse vil nedenfor bli beskrevet mer detaljert gjennom eksempler, men som ikke er å oppfatte som begrensende for oppfinnelsen.
Eksempel 1 Fremstilling av dCP4U-4Na-krystaller
(1) Metode ved bruk av DCC
dCP4U ble fremstillet etter en rutinemessig metode beskrevet i WO 98/34942 ved å benytte UTP, dCMP og DCC. Reaksjonen ble foretatt i en skala på 20 mmol.
Den derved oppnådde dCP4U-løsning ble fortynnet med vann for å justere totalvolumet til 1000 ml_, og den fortynnede løsningen ble avsatt på en kolonne ladet med middels basisk anionbytter harpiks (AMBERLITEIRA-67, produkt fra Rohm & Haas Co.). Eluering ble foretatt suksessivt med vann, en 0,18M vandig saltsyre-løsning og en 0.005M vandig saltsyreløsning inneholdende 0,5M natriumklorid, hvorved det ble oppsamlet fraksjoner inneholdende dCP4U.
De derved oppnådde dCP4U-fraksjonene (4000 mL) ble avsatt på en kolonne påfylt kull av kromatografi-kvalitet (Taiko Granular Activated Charcoal SGP; produkt fra Futamura Chemical Industries, Co., Ltd.), og dCP4U ble eluert ved å benytte 0.05M vandig natriumhydroksyd-løsning (8000 mL).
De derved oppnådde fraksjoner av dCP4U ble kombinert og konsentrert til en oppslemming. Oppslemmingens pH ble justert til 6,0. Oppslemmingen ble omrørt mens etanol gradvis ble tilsatt og den resulterende oppslemming ble avkjølt videre til 10°C under omrøring, hvorved dCP4U-4Na-krystaller utfeltes. Krystallene ble fraskilt og førte til et utbytte på 8,9 g dCP4U-4Na-krystaller. De isolerte krystallene ble tørket under redusert trykk ved ca. 60°C i ca. 4 timer og deretter underkastet instrumentelle analyser.
(2) Metode ved bruk av DPC
UTP-3Na (12,8 kg) ble løst i vann (135 L), og den resulterende løsning ble avsatt på en kolonne påfylt kationbytter harpiks (produkt fra Mitsubishi Chemical Co. Ltd.). Løsningen som hadde passert kolonnen og fraksjoner som var eluert med vann ble kombinert, og gradvis tilsatt tributylamin (TBA; 13,6 kg) under omrøring for å oppnå nøytralisering. Løsningen ble konsentrert og tilsatt formamid (10 kg). Den resulterende løsning ble dyhydratisert ved koking med dioksan. Deretter ble det dehydratiserte materialet fortynnet med pyridin (11,6 kg) for derved fremstille en pyridinløsning av UTP.
Til en annen tank inneholdende metanol (18 L), ble det tilsatt dCMP (7,5 kg). Under omrøring ble det deretter gradvis tilsatt TBA (4,5 kg) hvorpå løsningen ble oppvarmet til 60°C. Etter at ingrediensene var oppløst, ble løsningen konsentrert til tørrhet Det tørkede materialet ble tørket videre under vakuum ved 75°C og knust. Det knuste materialet (10,3 kg) ble suspendert i dimetylacetamid (DMAC) (16,7 kg), og tilsatt difenylfosfokloridat (DPC) (4,4, kg), hvoretter blandingen ble omrørt i 10 minutter. Deretter ble blandingen tilsatt ytterligere TBA (10,8 kg) og den resulterende blanding omrørt i 30 minutter for derved å gi en dCMP-DPP-løsning.
Til den således fremstilte dCMP-DPP-løsning ble pyridinløsningen av UTP, som var fremstillet på den ovenfor angitte måte, tilsatt under omrøring. Etter fullført tilsetning ble blandingen omrørt ved romtemperatur over natten og reaksjonen deretter avbrutt ved tilsetning av deionisert vann.
Blandingen ovenfor ble tilsatt en 30% vandig natriumhydroksyd-løsning
(31 L). Blandingen ble omrørt i 30 minutter og frigjort TBA ble fjernet ved ekstraksjon. En 6 mol/L saltsyreløsning ble tilsatt til det vandige lag for å justere løsningens pH til ca. 7. Løsningen ble konsentrert ved fjerning av løsningsmidlet og et like stort volum 95% etanol tilsatt til den konsentrerte løsningen. Den resulterende blandingen fikk stå over natten. Blandingens øvre lag, dvs. et etanollag, ble fjernet ved avsugning, og til det resulterende klebrige bunnfall ble det tilsatt vann for å løse bunnfallet. Det gjenværende løsningsmiddel ble deretter fjernet ved konsentrering av løsningsmidlet.
Totalvolumet av den derved syntetiserte dCP4U-løsning, ble justert til 2500 L og løsningen avsatt på en kolonne fylt med middels basisk anionbytter harpiks (AMBERLITEIRA-97, produkt fra Rohm & Haas Co.). Eluering ble foretatt suksessivt med vann, en 0,1 mol/L vandig saltsyreløsning og en 0,005 mol/L vandig saltsyre-løsning inneholdende 0,4 mol/L natriumklorid, hvorved fraksjoner inneholdende dCP4U ble oppsamlet.
De derved oppnådde dCP4U-fraksjonene (2100 L) ble avsatt på en kolonne fylt med aktivkull av kromatografi-kvalitet (Taiko Granular Activated Carbon SGP, produkt fira Futamura Chemical Industries, Co., Ltd.) og dCP4U ble eluert ved bruk av en 0,05 mol/L vandig natriumhydroksyd-løsning (1200 L).
De derved oppnådde fraksjonene ble kombinert og konsentrert. pH av den resulterende løsning ble justert til 7,5 ved bruk av en 30% vandig natriumhydroksyd-løsning. Løsningen ble omrørt under gradvis tilsetning av 95% etanol, hvorved dCP4U-4Na-krystaller ble utfelt. Krystallene ble fraskilt og tørket ved 60°C i 4 timer lor derved å gi 4,2 kg dCP4U-4Na-krystaller (vanninnhold: 5,9%, isolert utbytte: 22%).
Fysikalske egenskaper av dCP4U-4Na-krystaller.
dCP4U 4Na-krystallene fremstillet under (1) eller (2) i Eksempel 1 og hvitt pulver av dCP4U 4Na (frysetørket produkt), som var fremstillet på samme måte som beskrevet i Eksempel 20 i WO 98/34942, ble underkastet instrumentell analyse. Krystallene ble sammenlignet med det frysetørkede produkt med hensyn til fysikalske egenskaper.
(3) Instrumentell analyse
1) Analyse av renhet
dCP4U-4Na-krystallene oppnådd under (1) og (2) i Eksempel 1, og dCP4U-fraksjoner etter hver kromatografisk rensing, ble underkastet analyse på renhet ved hjelp av HPLC (high performance liquid chromatography). Resultatene er vist i Tabell 1 og 2. HPLC-betingelsene er beskrevet nedenfor.
Kolonne: HITACHIGEL #3013-N (produkt fra Hitachi Keisokuki Service) Eluent: 10% CH3CN, 0.18M NH4CI, 0.03M KH2P04, og 0.03M K2HP04 Påvisningsmetode: UV påvisning ved 262 nm
2) Krystallform
Fig. 1 viser et fotografi av en typisk krystallform av dCP4U-4Na-(3,5-hydrat)-krystaller.
3) Vanninnhold
Vanninnholdet av dCP4U-4Na-krystallene ble målt etter Karl Fischer-metoden. dCP4U 4Na-krystallene viste seg å være stabilisert med et vanninnhold fira 6,9 til 17,4 vekt%, som varierte med graden av tørking. Beregningene viser at 3,5-10 vannmolekyler tilsynelatende binder eller adhererer til ett dCP4U-molekyl.
4) Smeltepunkt
Smeltepunktet av dCP4U 4Na-krystallene ble målt etter en konvensjonell metode. Smeltepunktet var 202-210°C. Smeltepunktet av det frysetørkede produkt var ca. 195-210°C.
5) Røntgendiffraksjon
Krystallene av dCP4U 4Na ble underkastet røntgendiffraksjonsanalyse ved hjelp av et røntgendiffraktometer (Modell: RINT2500V; produkt fra Rigaku Oenki) under følgende betingelser (målefeil: ±0,1°). Oet derved oppnådde røntgen-diffraksjonsspektrum og data for toppene av dCP4U-4Na-3,5-hydrat, er vist henholdsvis i Fig. 2 og Tabell 3. Tilsvarende er røntgendiffraksjonsspekteret og data for toppene av dCP4U-4Na-dekahydrat vist henholdsvis i Fig. 3 og Tabell 4. Dessuten er røntgendiffraksjonsspekteret av det fysetørkede produkt vist som referanse i Fig. 4.
(Målebetingelser)
Røntgenrør: Cu-Ka
Røntgen-utgangseflekt: 50 kV-300 mA
Skann-hastighet: 4,0°/minutt
Skann-intervall: 0,02°
vlnkelmålingsområde: 2-40°
Spalte: DS - 0,5°, RS - 0,15 mm, SS - 0,5°
Forbehandling: Oppmaling med agatmorter
6) Hygroskopisitet
dCP4U-4Na-krystaller (dekahydrat) med et vanninnhold på ca. 17,4% fikk stå i 2 dager under følgende betingelser a), b) og c): a) 25°C og en relativ fuktighet på 57%; b) 25°C og en relativ fuktighet på 75%; og c) 25°C og en relativ fuktighet på 93%. Ingen nedbrytning elter vektendring ble observert i de tre tilfellene. Krystallene har vist seg å være stabile og ikke hygroskopiske. Dessuten fikk de samme krystallene stå i 7 dager under følgende krevende betingelser d): d) 40°C og en relativ fuktighet på 75%. Ingen endring ble observert i dette tilfellet.
Når imidlertid det frysetørkede produktet (opprinnelig vanninnhold: ca. 1 %) ble lagret i 2 døgn under følgende betingelser b) eller c): b) 25°C og en relativ fuktighet på 75% og c) 25°C og en relativ fuktighet på 93%, antok produktet på den andre lagringsdag, en sørpeaktig tilstand som følge av gradvis tiltagende vanninnhold.
7) Stabilitet
dCP4U-4Na-krystaller (dekahydrat) og et frysetørket produkt ble individuelt anbragt i flasker, som så ble forseglet og oppbevart i 13 dager ved 60°C (aksellerert test). Det ble ikke observert dekomponering av krystallene. Derimot ble det fryse-tørkede produkt funnet delvis dekomponert, hvilket viste seg gjennom et renhetstap i produktet på ca. 2,2%.
7) NMR
Hver av dCP4U-4Na-krystallene og det frysetørkede produkt ble anbragt direkte i en rotor av zirkonium-oksyd, og det tilsvarende <13>C-CPMAS-NMR-spektrum ble tatt opp.
Målebetingelsene er beskrevet nedenfor.
Fig. 5 og Tabell 5 viser et <13>C-CPMAS-NMR-spektrum av henholdsvis krystallinsk dCP4U 4Na-3,5-hydrat og toppdata. Fig. 6 og Tabell 6 viser et <t3>C-CPMAS-NMR-spektrum av henholdsvis krystallinsk dCP4U-4Na-dekahydrat og toppdata. Fig. 7 og Tabell 7 viser et <13>C-CPMAS-NMR-spektrum av henholdsvis krystallinsk dCP4U i form av hvitt pulver (frysetørket produkt) og toppdata. Tallene i
Fig. 5 til 7 refererer seg til det tilsvarende toppnummer i Tabell 5 til 7.
Eksempel 2: Syntese av dCP4U fra UMP
Formamid (2,5 mL) og pyridin (7,6 mL) ble tilsatt til et dehydratisert trietylaminsalt (10 mmol) av pyrofosfat (TEA-PPi), etterfulgt av omrøring av den resulterende blanding. Til et dehydratisert tributylaminsalt av uridin-5'-monofosfat (UMP-TBA) (10 mmol) anbrakt i en annen beholder, ble det under omrøring tilsatt DMAC (3,6 mL), dioksan (3,2 mL) og tributylamin (3,3 mL) som så dråpevis ble tilsatt DPC (2,3 mL). Blandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time for å danne UMP-DPP, som ble tilsatt til ovennevnte dehydratiserte løsning av TEA-PPi fremstilt på forhånd. Reaksjonsblandingen ble omrørt ved romtemperatur i én time under dannelse av UTP. DMAC (7,2 mL) ble tilsatt til et tributylaminsalt av 2-deoksycytidin-5'-monofosfat (TBA-dCMP) (4,9 g, 10 mmol) anbrakt i en annen beholder, for derved å danne en suspensjon, hvorpå DPC (2,2 mL, 1,1 ekv.) ble tilsatt til suspensjonen. Den resulterende blanding ble omrørt i 40 minutter og deretter tilsatt tributylamin (TBA) (9,5 mL). Omrøringen ble fortsatt i 20 minutter for å danne dCMP-DPP. Den derved oppnådde dCMP-DPP-løsning ble tilsatt til ovennevnte tidligere syntetiserte UTP-løsning, og blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 56 timer. Reaksjonen ble avbrutt ved tilsetning av vann, og pH av reaksjonsblandingen ble justert til 11 ved tilsetning av en 30% vandig natriumhydroksydløsning. Etter at løsningsmidlet var fjernet ved konsentrering, ble pH justert til 7,0 ved tilsetning av 6 molar saltsyre. Blandingen ble ekstrahert med etylacetat, Det vandige lag ble
Industriell anvendbarhet
Som beskrevet ovenfor har krystallene av dCP4U oppnådd i henhold til foreliggende oppfinnelse, høy renhet og høy stabilitet og ingen hygroskopisitet sammenlignet med et frysetørket produkt, og kan således tjene som et egnet råmateriale for fremstilling av et legemiddel.
Fremgangsmåten for fremstilling av dCP4U i henhold til foreliggende oppfinnelse, muliggjør bruk av billig UMP som utgangsmateriale og fører til høyt utbytte. Fremgangsmåten er således egnet for syntese av dCP4U i stor skala.
Claims (12)
1. Krystaller, karakterisert ved at de er krystaller av P1-(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5')tetrafosfat eller et salt derav.
2. Krystaller, karakterisert ved at de er krystaller av P1-(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5')tetrafosfat'4Na.
3. Krystaller ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at de har en renhet på minst 95%.
4. Krystaller ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved a t de har en renhet på minst 97% og inneholder 2% eller mindre uridin-5'-trifosfat.
5. Krystaller ifølge krav 1 eller 2, karakterisert ved at de har en renhet på minst 98% og inneholder 1 % eller mindre uridin-5'-trifosfat.
6. Fremgangsmåte for fremstilling av krystaller ifølge krav 1, karakterisert ved at den omfatter at rå P<1->(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5'-)tetrafosfat underkastes en renseprosess omfattende anionbytter-kromatografi og aktivkull-kromatografi, hvorpå den resulterende løsning av renset P<1->(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5,-)tetrafosfat, tilsettes et hydrofilt organisk løsningsmiddel, for derved å bevirke presipitasjon av P<1->(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5'-)tetrafosfat i form av krystaller.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 6, karakterisert ved at rense-prosessen omfatter at anionbytter-kromatografi foretas først og deretter aktivkull-kromatografi.
8. Fremgangsmåte for fremstilling av P1 -{2'-deoksycytidin-5'-)P4-(uridin-5'-)tetrafosfat (dCP4U), karakterisert ved at den omfatter omsetning av uridin-5'-monofosfat (UMP), 2'-deoksycytidin-5'-monofosfat (dCMP), difenyl-fosforkloridat (DPC) og et pyrofosfat (PPi).
9. Fremgangsmåte ifølge krav 8, karakterisert ved at den omfatter omsetning av UMP og DPC for å syntetisere UMP-difenylfosfat (UMP-DPP) i et første trinn; deretter behandling av den UMP-DPP-holdige reaksjonsblanding med PPi for derved å danne uridin-5'-trifosfat (UTP) i blandingen; og omsetning av det således dannede UTP, uten isolering fra reaksjonsblandingen, med dCMP i nærvær av DPC, for derved å gi dCP4U.
10. Krystaller ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 5, karakterisert ved at 1-14 vannmolekyler binder eller adhererer til ett molekyl av P<1->(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav.
11. Krystaller ifølge et hvilket som helst av kravene 1 til 5, karakterisert ved at 3,5 vannmolekyler binder eller adhererer til ett molekyl av P<1->(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5'-)tetrafosfat eller et salt derav.
12. Krystaller ifølge et hvilket som heist av kravene 1 til 5, karakterisert vedat 10 vannmolekyler binder eller adhererer til ett molekyl av P<1->(2'-deoksycytidin-5'-)P<4->(uridin-5,-)tetrafosfat eller et salt derav.
Applications Claiming Priority (2)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP18495099 | 1999-06-30 | ||
| PCT/JP2000/004336 WO2001002416A1 (fr) | 1999-06-30 | 2000-06-30 | Cristaux dinucleotidiques |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO20016381D0 NO20016381D0 (no) | 2001-12-27 |
| NO20016381L NO20016381L (no) | 2002-02-28 |
| NO321169B1 true NO321169B1 (no) | 2006-03-27 |
Family
ID=16162200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO20016381A NO321169B1 (no) | 1999-06-30 | 2001-12-27 | Dinukleotidkrystaller |
Country Status (22)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US6617444B1 (no) |
| EP (2) | EP1191032B1 (no) |
| JP (1) | JP3421666B2 (no) |
| KR (1) | KR100593723B1 (no) |
| CN (1) | CN1144811C (no) |
| AT (2) | ATE300551T1 (no) |
| AU (1) | AU767136B2 (no) |
| BR (1) | BR0012205A (no) |
| CA (1) | CA2376860C (no) |
| CZ (1) | CZ303172B6 (no) |
| DE (2) | DE60006814T2 (no) |
| EA (1) | EA004707B1 (no) |
| ES (2) | ES2211566T3 (no) |
| HU (1) | HU229225B1 (no) |
| IL (1) | IL147163A (no) |
| MX (1) | MXPA02000035A (no) |
| NO (1) | NO321169B1 (no) |
| NZ (1) | NZ516301A (no) |
| PL (2) | PL202200B1 (no) |
| SK (1) | SK284178B6 (no) |
| WO (1) | WO2001002416A1 (no) |
| ZA (1) | ZA200110468B (no) |
Families Citing this family (13)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US7223744B2 (en) | 1997-02-10 | 2007-05-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof |
| US7078391B2 (en) | 1997-02-10 | 2006-07-18 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating edematous retinal disorders |
| US6818629B2 (en) | 1997-02-10 | 2004-11-16 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising P1-(2'-deoxycytidine 5'-)P4-(uridine 5'-) tetraphosphate |
| US6548658B2 (en) * | 1997-07-25 | 2003-04-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di-(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| US6872710B2 (en) | 1997-07-25 | 2005-03-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| SK284178B6 (sk) * | 1999-06-30 | 2004-10-05 | Yamasa Corporation | Kryštalická forma P1-(2'-deoxycytidín-5'-)P4-(uridín-5'- )tetrafosfátu a spôsob ich prípravy |
| US6867199B2 (en) | 2000-08-21 | 2005-03-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Dinucleoside polyphosphate compositions and their therapeutic use |
| US7161029B2 (en) * | 2003-12-17 | 2007-01-09 | Ajinomoto Co., Inc. | DiL-lysine monosulfate trihydrate crystal and method of making |
| CN100363376C (zh) * | 2006-06-12 | 2008-01-23 | 南京工业大学 | 一种5’-核苷三磷酸钠盐的结晶方法 |
| JPWO2017002827A1 (ja) * | 2015-06-29 | 2018-04-26 | ヤマサ醤油株式会社 | Ｐ１，ｐ４−ビス（５’−ウリジル）テトラホスフェート結晶の保管方法 |
| CN109843901B (zh) * | 2016-10-25 | 2022-04-26 | Yamasa 酱油株式会社 | P1,p4-二(尿苷5’-)四磷酸的纯化方法 |
| CN111253456B (zh) * | 2020-03-13 | 2021-05-11 | 广东先强药业有限公司 | 一种地纽福索钠的制备方法 |
| CN111704637A (zh) * | 2020-06-28 | 2020-09-25 | 南京工业大学 | 一种采用膜蒸馏结晶精制核苷酸的方法 |
Family Cites Families (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| JPH07242685A (ja) * | 1994-01-12 | 1995-09-19 | Unitika Ltd | ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 |
| US5837861A (en) * | 1997-02-10 | 1998-11-17 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Dinucleotides and their use as modulators of mucociliary clearance and ciliary beat frequency |
| US5900407A (en) * | 1997-02-06 | 1999-05-04 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Method of treating dry eye disease with uridine triphosphates and related compounds |
| CN1262556C (zh) * | 1997-02-06 | 2006-07-05 | 印斯拜尔药品股份有限公司 | 特定的二核苷酸和它们作为粘膜纤毛清除和纤毛颤动频率调节剂的应用 |
| US6596725B2 (en) * | 1997-02-10 | 2003-07-22 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Use of certain dinucleotides to stimulate removal of fluid in retinal detachment and retinal edema |
| TW593331B (en) * | 1997-07-25 | 2004-06-21 | Inspire Pharmaceuticals Inc | Method for large-scale production of di(uridine 5')-tetraphosphate and salts thereof |
| DK1012154T3 (da) * | 1997-07-25 | 2004-07-26 | Inspire Pharmaceuticals Inc | Salte af di(uridin-5'-tetraphosphat), fremgangsmåde til fremstilling og anvendelser deraf |
| WO1999061012A2 (en) * | 1998-05-22 | 1999-12-02 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Therapeutic dinucleotide and derivatives |
| SK283729B6 (sk) * | 1998-10-02 | 2003-12-02 | Yamasa Corporation | Kryštály P1, P4-di(uridín-5')-tetrafosfátu alebo kryštály jeho soli, spôsob ich výroby, kryštály tetrasodnej soli P1, P4-di(uridín-5')-tetrafosfátu a kryštály jej hydrátov |
| WO2000039145A1 (en) * | 1998-12-23 | 2000-07-06 | The University Of North Carolina At Chapel Hill | Targeted gene transfer using g protein coupled receptors |
| SK284178B6 (sk) * | 1999-06-30 | 2004-10-05 | Yamasa Corporation | Kryštalická forma P1-(2'-deoxycytidín-5'-)P4-(uridín-5'- )tetrafosfátu a spôsob ich prípravy |
-
2000
- 2000-06-30 SK SK1870-2001A patent/SK284178B6/sk not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 MX MXPA02000035A patent/MXPA02000035A/es active IP Right Grant
- 2000-06-30 WO PCT/JP2000/004336 patent/WO2001002416A1/ja not_active Application Discontinuation
- 2000-06-30 AT AT03018399T patent/ATE300551T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 US US09/700,728 patent/US6617444B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 PL PL352363A patent/PL202200B1/pl unknown
- 2000-06-30 ES ES00942412T patent/ES2211566T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 NZ NZ516301A patent/NZ516301A/en not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 DE DE60006814T patent/DE60006814T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 JP JP2001507852A patent/JP3421666B2/ja not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-30 EP EP00942412A patent/EP1191032B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 BR BR0012205-0A patent/BR0012205A/pt not_active Application Discontinuation
- 2000-06-30 CZ CZ20014502A patent/CZ303172B6/cs not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 CA CA002376860A patent/CA2376860C/en not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-30 IL IL14716300A patent/IL147163A/xx not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 PL PL384307A patent/PL202176B1/pl unknown
- 2000-06-30 CN CNB008097356A patent/CN1144811C/zh not_active Expired - Fee Related
- 2000-06-30 EP EP03018399A patent/EP1362862B1/en not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 AT AT00942412T patent/ATE255123T1/de not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 DE DE60021629T patent/DE60021629T2/de not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 ES ES03018399T patent/ES2245431T3/es not_active Expired - Lifetime
- 2000-06-30 EA EA200200109A patent/EA004707B1/ru not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 KR KR1020017016184A patent/KR100593723B1/ko not_active IP Right Cessation
- 2000-06-30 AU AU57067/00A patent/AU767136B2/en not_active Ceased
- 2000-06-30 HU HU0201531A patent/HU229225B1/hu not_active IP Right Cessation
-
2001
- 2001-12-20 ZA ZA200110468A patent/ZA200110468B/en unknown
- 2001-12-27 NO NO20016381A patent/NO321169B1/no not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO321169B1 (no) | Dinukleotidkrystaller | |
| KR100475008B1 (ko) | 디우리딘 테트라포스페이트 또는 그의 염의 결정 및 그의제조법, 그리고 그 화합물의 제조법 | |
| FI95267B (fi) | Menetelmä terapeuttisesti käyttökelpoisen N-asetyylineuraminaattitrihydraatin valmistamiseksi | |
| ZA200102683B (en) | Crystal of diuridine tetraphosphate or salt thereof and method for preparing the same, and method for producing said compound. | |
| JP3964809B2 (ja) | ジヌクレオチドの製造法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| CHAD | Change of the owner's name or address (par. 44 patent law, par. patentforskriften) |
Owner name: MERCK SHARP & DOHME CORP, US |
|
| MM1K | Lapsed by not paying the annual fees |