JPH07242685A - ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 - Google Patents
ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法Info
- Publication number
- JPH07242685A JPH07242685A JP32491594A JP32491594A JPH07242685A JP H07242685 A JPH07242685 A JP H07242685A JP 32491594 A JP32491594 A JP 32491594A JP 32491594 A JP32491594 A JP 32491594A JP H07242685 A JPH07242685 A JP H07242685A
- Authority
- JP
- Japan
- Prior art keywords
- hydrate
- ap4a
- solution
- water content
- diadenosine tetraphosphate
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Landscapes
- Saccharide Compounds (AREA)
Abstract
(57)【要約】
【構成】 ジアデノシン四リン酸を含有する溶液からジ
アデノシン四リン酸水和物を製造するに際し、溶液のエ
タノール濃度が５０容量％以下の条件下でジアデノシン
四リン酸水和物を晶析させることを特徴とするジアデノ
シン四リン酸の製造方法。 【効果】 時間が経過しても含水率の安定したジアデノ
シン四リン酸水和物の結晶を得ることができる。
アデノシン四リン酸水和物を製造するに際し、溶液のエ
タノール濃度が５０容量％以下の条件下でジアデノシン
四リン酸水和物を晶析させることを特徴とするジアデノ
シン四リン酸の製造方法。 【効果】 時間が経過しても含水率の安定したジアデノ
シン四リン酸水和物の結晶を得ることができる。
Description
【０００１】
【産業上の利用分野】本発明は、ジアデノシン四リン酸
（以下、Ａｐ４Ａと略称する。）水和物の製造方法に関
するものである。さらに詳しくは、Ａｐ４Ａを含有する
溶液から含水率の安定したＡｐ４Ａ水和物の結晶を得る
方法に関するものである。
（以下、Ａｐ４Ａと略称する。）水和物の製造方法に関
するものである。さらに詳しくは、Ａｐ４Ａを含有する
溶液から含水率の安定したＡｐ４Ａ水和物の結晶を得る
方法に関するものである。
【０００２】
【従来の技術】Ａｐ４Ａは、ＤＮＡ合成に対する作用、
血液凝固に関する作用、血管に対する作用〔クリニヒ・
ボッフェンシュリフト(Klinische Wochenschrift) 誌6
7,317-327(1989) 誌〕等、様々な生理作用を有し、医
薬品及び医薬品原料としての利用が期待されている物質
である。
血液凝固に関する作用、血管に対する作用〔クリニヒ・
ボッフェンシュリフト(Klinische Wochenschrift) 誌6
7,317-327(1989) 誌〕等、様々な生理作用を有し、医
薬品及び医薬品原料としての利用が期待されている物質
である。
【０００３】このＡｐ４Ａは、主に２分子のアデノシン
ポリリン酸を酵素により縮合させる反応により製造され
るが、Ａｐ４Ａの反応液は未反応のアデノシンポリリン
酸〔アデノシン一リン酸(AMP) 、アデノシン二リン酸(A
DP) 、アデノシン三リン酸(ATP) 等〕及び酵素に由来す
る蛋白質等の不純物を含有するため、陰イオン交換樹脂
等を用いた精製が行われている。しかし、医薬品として
適格性を有するＡｐ４Ａを製造するには、この反応液か
ら何らかの方法により固体のＡｐ４Ａを得ることが必要
不可欠である。
ポリリン酸を酵素により縮合させる反応により製造され
るが、Ａｐ４Ａの反応液は未反応のアデノシンポリリン
酸〔アデノシン一リン酸(AMP) 、アデノシン二リン酸(A
DP) 、アデノシン三リン酸(ATP) 等〕及び酵素に由来す
る蛋白質等の不純物を含有するため、陰イオン交換樹脂
等を用いた精製が行われている。しかし、医薬品として
適格性を有するＡｐ４Ａを製造するには、この反応液か
ら何らかの方法により固体のＡｐ４Ａを得ることが必要
不可欠である。
【０００４】
【発明が解決しようとする課題】従来より、固体のＡｐ
４Ａを得る方法としては、Ａｐ４Ａを含有する溶液のエ
タノール濃度を７５％（以下、特に指定のない場合容量
％を示す。）にしてＡｐ４Ａを沈澱化させて粉末のＡｐ
４Ａ水和物を得る方法が用いられていた。しかし、この
方法で得られた粉末のＡｐ４Ａ水和物は、時間とともに
含水率が変動していくため、医薬品として利用するには
十分でなかった。
４Ａを得る方法としては、Ａｐ４Ａを含有する溶液のエ
タノール濃度を７５％（以下、特に指定のない場合容量
％を示す。）にしてＡｐ４Ａを沈澱化させて粉末のＡｐ
４Ａ水和物を得る方法が用いられていた。しかし、この
方法で得られた粉末のＡｐ４Ａ水和物は、時間とともに
含水率が変動していくため、医薬品として利用するには
十分でなかった。
【０００５】本発明は、このような従来技術の欠点を解
消し、含水率の安定したＡｐ４Ａ水和物の製造方法を提
供することを目的とするものである。
消し、含水率の安定したＡｐ４Ａ水和物の製造方法を提
供することを目的とするものである。
【０００６】
【課題を解決するための手段】本発明者らは、このよう
な課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、Ａｐ４
Ａを含有する溶液のエタノール濃度が５０％以下の条件
下でＡｐ４Ａ水和物を晶析させることにより、含水率の
安定したＡｐ４Ａ水和物を得ることが可能であるという
ことを見い出し、本発明に到達した。
な課題を解決するために鋭意研究を重ねた結果、Ａｐ４
Ａを含有する溶液のエタノール濃度が５０％以下の条件
下でＡｐ４Ａ水和物を晶析させることにより、含水率の
安定したＡｐ４Ａ水和物を得ることが可能であるという
ことを見い出し、本発明に到達した。
【０００７】すなわち、本発明は、Ａｐ４Ａを含有する
溶液からＡｐ４Ａ水和物を製造するに際し、溶液のエタ
ノール濃度が５０％以下の条件下でＡｐ４Ａ水和物を晶
析させることを特徴とするＡｐ４Ａ水和物の製造方法を
要旨とするものである。
溶液からＡｐ４Ａ水和物を製造するに際し、溶液のエタ
ノール濃度が５０％以下の条件下でＡｐ４Ａ水和物を晶
析させることを特徴とするＡｐ４Ａ水和物の製造方法を
要旨とするものである。
【０００８】以下、本発明を詳細に説明する。まず、本
発明ではＡｐ４Ａを含有する溶液を得ることが必要であ
る。そのための方法としては、アミノアシルｔＲＮＡ合
成酵素を用い、ＡＴＰ又はその誘導体とアミノ酸を反応
させて合成する方法〔モレキュラー・アンド・セルラー
・バイオケミストリー(Mol.Cell.Biochem.),52,3-11 (1
983)〕等の周知の方法が挙げられる。
発明ではＡｐ４Ａを含有する溶液を得ることが必要であ
る。そのための方法としては、アミノアシルｔＲＮＡ合
成酵素を用い、ＡＴＰ又はその誘導体とアミノ酸を反応
させて合成する方法〔モレキュラー・アンド・セルラー
・バイオケミストリー(Mol.Cell.Biochem.),52,3-11 (1
983)〕等の周知の方法が挙げられる。
【０００９】ここで用いるアミノアシルｔＲＮＡ合成酵
素としては、Ａｐ４Ａを合成する能力を有しているもの
であればいかなるものでもよいが、例えば、大腸菌由来
のリジルｔＲＮＡ合成酵素、ヒスチジルｔＲＮＡ合成酵
素、フェニルアラニルｔＲＮＡ合成酵素、酵母由来のリ
ジルｔＲＮＡ合成酵素、ヒスチジルｔＲＮＡ合成酵素、
フザリウム由来のフェニルアラニルｔＲＮＡ合成酵素、
バチルス ステアロサーモフィルス等の耐熱性細菌由来
のイソロイシルｔＲＮＡ合成酵素、羊肝細胞由来のイソ
ロイシルｔＲＮＡ合成酵素等が挙げられる。また、アミ
ノ酸としては、例えば、チロシン、アラニン、ロイシ
ン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、リ
ジン、セリン、バリン、アスパラギン、アスパラギン
酸、グリシン、グルタミン、グルタミン酸、システイ
ン、トレオニン、トリプトファン、ヒスチジン、プロリ
ン、アルギニン等のα−アミノ酸が挙げられ、Ｌ体、Ｄ
体のいずれでもよい。このとき、アミノアシルｔＲＮＡ
合成酵素は、アミノ酸に特異性の有るものが用いられ、
例えば、ロイシンに特異性のあるものとしては、ロイシ
ンｔＲＮＡ合成酵素が用いられる。
素としては、Ａｐ４Ａを合成する能力を有しているもの
であればいかなるものでもよいが、例えば、大腸菌由来
のリジルｔＲＮＡ合成酵素、ヒスチジルｔＲＮＡ合成酵
素、フェニルアラニルｔＲＮＡ合成酵素、酵母由来のリ
ジルｔＲＮＡ合成酵素、ヒスチジルｔＲＮＡ合成酵素、
フザリウム由来のフェニルアラニルｔＲＮＡ合成酵素、
バチルス ステアロサーモフィルス等の耐熱性細菌由来
のイソロイシルｔＲＮＡ合成酵素、羊肝細胞由来のイソ
ロイシルｔＲＮＡ合成酵素等が挙げられる。また、アミ
ノ酸としては、例えば、チロシン、アラニン、ロイシ
ン、イソロイシン、フェニルアラニン、メチオニン、リ
ジン、セリン、バリン、アスパラギン、アスパラギン
酸、グリシン、グルタミン、グルタミン酸、システイ
ン、トレオニン、トリプトファン、ヒスチジン、プロリ
ン、アルギニン等のα−アミノ酸が挙げられ、Ｌ体、Ｄ
体のいずれでもよい。このとき、アミノアシルｔＲＮＡ
合成酵素は、アミノ酸に特異性の有るものが用いられ、
例えば、ロイシンに特異性のあるものとしては、ロイシ
ンｔＲＮＡ合成酵素が用いられる。
【００１０】上記のような方法で得られた反応液には、
反応生成物であるＡｐ４Ａの他に未反応のＡＭＰ，ＡＤ
Ｐ，ＡＴＰ等が含まれているため、陰イオン交換樹脂等
を用いて精製することが好ましい。このとき使用する樹
脂としては、例えば、ダイアイオンＷＡシリーズ（三菱
化学株式会社製）、ダウエックスＷＧＲシリーズ（室町
化学工業株式会社製）、セファデックスシリーズ（ファ
ルマシア社製）等が挙げられ、これらの樹脂を充填した
カラムに反応液を通液し、吸着させた後、溶媒の塩濃度
勾配を用いて溶出させることにより、精製することがで
きる〔ジャーナル・オブ・オーガニックケミストリー
（J.Org.Chem.)30,3381-3387(1965)参照。〕。
反応生成物であるＡｐ４Ａの他に未反応のＡＭＰ，ＡＤ
Ｐ，ＡＴＰ等が含まれているため、陰イオン交換樹脂等
を用いて精製することが好ましい。このとき使用する樹
脂としては、例えば、ダイアイオンＷＡシリーズ（三菱
化学株式会社製）、ダウエックスＷＧＲシリーズ（室町
化学工業株式会社製）、セファデックスシリーズ（ファ
ルマシア社製）等が挙げられ、これらの樹脂を充填した
カラムに反応液を通液し、吸着させた後、溶媒の塩濃度
勾配を用いて溶出させることにより、精製することがで
きる〔ジャーナル・オブ・オーガニックケミストリー
（J.Org.Chem.)30,3381-3387(1965)参照。〕。
【００１１】本発明で用いられるＡｐ４Ａを含有する溶
液としては、上記の精製溶液を濃縮させた溶液及び従来
法により一度粉末化させたＡｐ４Ａ水和物を水等に溶解
した濃厚溶液を用いることができる。特に、濃縮した溶
液を使用すると、エタノールの使用量が少量で済むので
好ましい。
液としては、上記の精製溶液を濃縮させた溶液及び従来
法により一度粉末化させたＡｐ４Ａ水和物を水等に溶解
した濃厚溶液を用いることができる。特に、濃縮した溶
液を使用すると、エタノールの使用量が少量で済むので
好ましい。
【００１２】濃縮したＡｐ４Ａを含有する溶液を用いる
場合は、精製されたＡｐ４Ａを含有する溶液を３０〜５
０℃、好ましくは４０〜４５℃に加温しながらＡｐ４Ａ
の濃度を４０重量％以上、好ましくは６０重量％以上に
減圧濃縮し、そこへこの溶液と同温程度に加温したエタ
ノールをエタノール濃度が５０％以下となるように加え
る。このとき、溶液のエタノール濃度としては、５０％
以下であることが必要であり、特に１０〜３０％が好ま
しく、さらに好ましくは２０％程度である。このとき、
溶液のエタノール濃度が５０％を超えると、得られるＡ
ｐ４Ａ水和物の含水率が安定しない。次に、溶液が均一
となるようによく撹拌した後、室温程度、好ましくは２
０℃付近まで徐々に放冷させると、Ａｐ４Ａ水和物が晶
析する。
場合は、精製されたＡｐ４Ａを含有する溶液を３０〜５
０℃、好ましくは４０〜４５℃に加温しながらＡｐ４Ａ
の濃度を４０重量％以上、好ましくは６０重量％以上に
減圧濃縮し、そこへこの溶液と同温程度に加温したエタ
ノールをエタノール濃度が５０％以下となるように加え
る。このとき、溶液のエタノール濃度としては、５０％
以下であることが必要であり、特に１０〜３０％が好ま
しく、さらに好ましくは２０％程度である。このとき、
溶液のエタノール濃度が５０％を超えると、得られるＡ
ｐ４Ａ水和物の含水率が安定しない。次に、溶液が均一
となるようによく撹拌した後、室温程度、好ましくは２
０℃付近まで徐々に放冷させると、Ａｐ４Ａ水和物が晶
析する。
【００１３】濃厚溶液を用いる場合は、エタノールと水
との混合溶媒に、粉末のＡｐ４Ａ水和物をＡｐ４Ａの濃
度が３０重量％以上、好ましくは５０〜６０重量％とな
るように３０〜５０℃、好ましくは４０〜４５℃で加温
溶解すればよい。このとき、溶液のエタノール濃度とし
ては、５０％以下であることが必要であり、特に１０〜
３０％が好ましく、さらに好ましくは２０％程度であ
る。このとき、溶液のエタノールの濃度が５０％を超え
ると、得られるＡｐ４Ａの含水率が安定しない。次に、
溶液が均一になるようによく撹拌した後、室温程度、好
ましくは２０℃付近まで徐々に放冷させると、Ａｐ４Ａ
水和物が晶析する。
との混合溶媒に、粉末のＡｐ４Ａ水和物をＡｐ４Ａの濃
度が３０重量％以上、好ましくは５０〜６０重量％とな
るように３０〜５０℃、好ましくは４０〜４５℃で加温
溶解すればよい。このとき、溶液のエタノール濃度とし
ては、５０％以下であることが必要であり、特に１０〜
３０％が好ましく、さらに好ましくは２０％程度であ
る。このとき、溶液のエタノールの濃度が５０％を超え
ると、得られるＡｐ４Ａの含水率が安定しない。次に、
溶液が均一になるようによく撹拌した後、室温程度、好
ましくは２０℃付近まで徐々に放冷させると、Ａｐ４Ａ
水和物が晶析する。
【００１４】以上のような方法で得られた晶析溶液を、
ろ過し、さらに乾燥させることによりＡｐ４Ａ水和物の
結晶を得ることができる。
ろ過し、さらに乾燥させることによりＡｐ４Ａ水和物の
結晶を得ることができる。
【００１５】
【実施例】次に、本発明を実施例により具体的に説明す
る。 参考例１ 先ず、プロシーディング・オブ・ザ・ナショナル・アカ
デミー・オブ・サイエンシス(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)
86,8275-8279(1989)誌に記載されているように、１５ｍ
ＭのＡＴＰ、３０ｍＭの塩化マグネシウム、３ｍＭの塩
化亜鉛及び３ｍＭのイソロイシンを含む１００ｍＭのト
リス塩酸緩衝液（ｐＨ７．８）に、イソロイシルｔＲＮ
Ａを加えて反応を行い、Ａｐ４Ａの反応液を得た。ここ
で用いたイソロイシルｔＲＮＡはフェブス・レターズ(F
EBSletters)185,162-164(1985)誌に記載されているよう
に、イソロイシルｔＲＮＡ合成酵素をセルフクローニン
グした大腸菌N4830-1/pSI10(FERM P-13907号）を、除核
酸などの前処理を行い、ＤＥＡＥ−セファロース、ヒド
ロキシアパタイトカラムクロマトグラフィーで精製する
ことにより、電気泳動的にほぼ単一となったイソロイシ
ルｔＲＮＡ合成酵素を得た。この反応液を、ダイアイオ
ンＷＡ１０（三菱化学株式会社製）を充填したカラムに
通液し、このカラムを０．１５ＭのＮａＣｌ水溶液（ｐ
Ｈ２．５）で十分に洗浄した後、１ＭのＮａＣｌ水溶液
（ｐＨ７．０）で溶出させた。
る。 参考例１ 先ず、プロシーディング・オブ・ザ・ナショナル・アカ
デミー・オブ・サイエンシス(Proc.Natl.Acad.Sci.USA)
86,8275-8279(1989)誌に記載されているように、１５ｍ
ＭのＡＴＰ、３０ｍＭの塩化マグネシウム、３ｍＭの塩
化亜鉛及び３ｍＭのイソロイシンを含む１００ｍＭのト
リス塩酸緩衝液（ｐＨ７．８）に、イソロイシルｔＲＮ
Ａを加えて反応を行い、Ａｐ４Ａの反応液を得た。ここ
で用いたイソロイシルｔＲＮＡはフェブス・レターズ(F
EBSletters)185,162-164(1985)誌に記載されているよう
に、イソロイシルｔＲＮＡ合成酵素をセルフクローニン
グした大腸菌N4830-1/pSI10(FERM P-13907号）を、除核
酸などの前処理を行い、ＤＥＡＥ−セファロース、ヒド
ロキシアパタイトカラムクロマトグラフィーで精製する
ことにより、電気泳動的にほぼ単一となったイソロイシ
ルｔＲＮＡ合成酵素を得た。この反応液を、ダイアイオ
ンＷＡ１０（三菱化学株式会社製）を充填したカラムに
通液し、このカラムを０．１５ＭのＮａＣｌ水溶液（ｐ
Ｈ２．５）で十分に洗浄した後、１ＭのＮａＣｌ水溶液
（ｐＨ７．０）で溶出させた。
【００１６】参考例２ 参考例１に示した方法で得られたＡｐ４Ａ反応液を、脱
塩濃縮してＡｐ４Ａの濃度を約５重量％程度まで濃縮し
た後、５０℃程度に加温した等量のエタノールに溶解さ
せ、さらにエタノールを加えエタノール濃度が約７５％
となるようにした。この溶液を徐々に放冷し、Ａｐ４Ａ
水和物を沈澱化させた。この沈澱液からＡｐ４Ａ水和物
をろ取し、真空乾燥させて、乾ケークとなったＡｐ４Ａ
水和物を得た。この乾ケークＡｐ４Ａ水和物を粉砕し、
粉末のＡｐ４Ａ水和物を得た。
塩濃縮してＡｐ４Ａの濃度を約５重量％程度まで濃縮し
た後、５０℃程度に加温した等量のエタノールに溶解さ
せ、さらにエタノールを加えエタノール濃度が約７５％
となるようにした。この溶液を徐々に放冷し、Ａｐ４Ａ
水和物を沈澱化させた。この沈澱液からＡｐ４Ａ水和物
をろ取し、真空乾燥させて、乾ケークとなったＡｐ４Ａ
水和物を得た。この乾ケークＡｐ４Ａ水和物を粉砕し、
粉末のＡｐ４Ａ水和物を得た。
【００１７】実施例１ 参考例１に示した方法で得られた反応液（４．６重量％
Ａｐ４Ａ溶液）１５０ミリリットルを４０℃に加温しな
がら、およそ１５倍に濃縮し、エタノールを２．５ミリ
リットル加えた。Ａｐ４Ａ水和物の濃度が５０重量％と
なるように、さらに２０％エタノール水溶液を１．３ミ
リリットル加え、溶液のエタノール濃度を２０％とした
後、三日間放置してＡｐ４Ａ水和物の結晶を得た。この
結晶をろ取し、乾燥した後、カール・フィシャー法自動
水分測定装置（三菱化学株式会社製）を用いてＡｐ４Ａ
水和物の含水率を測定した。その結果を表１に示す。
Ａｐ４Ａ溶液）１５０ミリリットルを４０℃に加温しな
がら、およそ１５倍に濃縮し、エタノールを２．５ミリ
リットル加えた。Ａｐ４Ａ水和物の濃度が５０重量％と
なるように、さらに２０％エタノール水溶液を１．３ミ
リリットル加え、溶液のエタノール濃度を２０％とした
後、三日間放置してＡｐ４Ａ水和物の結晶を得た。この
結晶をろ取し、乾燥した後、カール・フィシャー法自動
水分測定装置（三菱化学株式会社製）を用いてＡｐ４Ａ
水和物の含水率を測定した。その結果を表１に示す。
【００１８】
【表１】
【００１９】表１に示したように、充分に乾燥を行った
時点での含水率が１８．５７％となっている。このこと
から、１１〜１２水和物が得られたことがわかる。さら
に以下に示す環境にＡｐ４Ａ水和物（含水率１８．５
７）を放置し、その含水率の経時変化を調べた。硫酸と
水で湿度を４７（○）、５８（●）、６７（□）、７５
％（■）に調節したデシゲータ内に約１ｇのＡｐ４Ａ水
和物（含水率１８．５７％）を放置し、重量の経時変化
を測定した。なお、放置後の含水率は、重量の増減分よ
り算出した。その結果を図１に示す。図１は本発明のＡ
ｐ４Ａ水和物の含水率の経時変化を示す図であり、縦軸
に含水率を、横軸に経過時間を示している。
時点での含水率が１８．５７％となっている。このこと
から、１１〜１２水和物が得られたことがわかる。さら
に以下に示す環境にＡｐ４Ａ水和物（含水率１８．５
７）を放置し、その含水率の経時変化を調べた。硫酸と
水で湿度を４７（○）、５８（●）、６７（□）、７５
％（■）に調節したデシゲータ内に約１ｇのＡｐ４Ａ水
和物（含水率１８．５７％）を放置し、重量の経時変化
を測定した。なお、放置後の含水率は、重量の増減分よ
り算出した。その結果を図１に示す。図１は本発明のＡ
ｐ４Ａ水和物の含水率の経時変化を示す図であり、縦軸
に含水率を、横軸に経過時間を示している。
【００２０】図１に示したように、Ａｐ４Ａ水和物は結
晶の状態では、含水率はほとんど変化せず、安定である
ことがわかる。
晶の状態では、含水率はほとんど変化せず、安定である
ことがわかる。
【００２１】比較例１ 参考例２の方法で得られた粉末のＡｐ４Ａ水和物（含水
率８．６５％）を実施例１と同様の環境に放置し、その
含水率の経時変化を調べた。その結果を図２に示す。図
２は粉末のＡｐ４水和物の含水率の経時変化を示す図で
あり、縦軸に含水率を、横軸に経過時間を示している。
率８．６５％）を実施例１と同様の環境に放置し、その
含水率の経時変化を調べた。その結果を図２に示す。図
２は粉末のＡｐ４水和物の含水率の経時変化を示す図で
あり、縦軸に含水率を、横軸に経過時間を示している。
【００２２】図２に示したように、Ａｐ４Ａ水和物は粉
末の状態では時間が経つに伴い含水率が高くなり、含水
率が変動していることがわかる。
末の状態では時間が経つに伴い含水率が高くなり、含水
率が変動していることがわかる。
【００２３】実施例２ ２０％エタノール水溶液２０ミリリットルに、参考例２
で得られた粉末のＡｐ４Ａ水和物を、Ａｐ４Ａ水和物の
濃度が５０及び６０重量％となるようにそれぞれ１０及
び１２ｇ添加し、４０℃に加温しながら溶解した。この
溶液を三日間放置した後、晶析したＡｐ４Ａ水和物の結
晶をろ取した。この結晶を様々な条件で乾燥した後、含
水率を測定した。その結果を表２に示す。
で得られた粉末のＡｐ４Ａ水和物を、Ａｐ４Ａ水和物の
濃度が５０及び６０重量％となるようにそれぞれ１０及
び１２ｇ添加し、４０℃に加温しながら溶解した。この
溶液を三日間放置した後、晶析したＡｐ４Ａ水和物の結
晶をろ取した。この結晶を様々な条件で乾燥した後、含
水率を測定した。その結果を表２に示す。
【００２４】
【表２】
【００２５】表２に示したように、充分に乾燥を行った
時点での含水率がそれぞれ１６〜１８％となっている。
このことから、１０〜１１水和物が得られたことがわか
る。さらに、実施例１と同様にしてそれぞれの含水率の
経時変化を調べたところ、実施例１と同様の結果が得ら
れた。
時点での含水率がそれぞれ１６〜１８％となっている。
このことから、１０〜１１水和物が得られたことがわか
る。さらに、実施例１と同様にしてそれぞれの含水率の
経時変化を調べたところ、実施例１と同様の結果が得ら
れた。
【００２６】実施例３ ２０％エタノール水溶液に、Ａｐ４Ａ水和物の濃度が５
０重量％となるように参考例２の方法で得られた粉末の
Ａｐ４Ａ水和物１．５ｋｇを加え４０℃にて加温溶解し
て最終容量が３リットルとなるようにした。この溶液を
ろ過にて浮遊物等を取り除いた後、三日間放置してＡｐ
４Ａ水和物の結晶を得た。この結晶をろ取し三日間風乾
した後、含水率を測定した。その結果を表３に示す。
０重量％となるように参考例２の方法で得られた粉末の
Ａｐ４Ａ水和物１．５ｋｇを加え４０℃にて加温溶解し
て最終容量が３リットルとなるようにした。この溶液を
ろ過にて浮遊物等を取り除いた後、三日間放置してＡｐ
４Ａ水和物の結晶を得た。この結晶をろ取し三日間風乾
した後、含水率を測定した。その結果を表３に示す。
【００２７】
【表３】
【００２８】表３に示したように、充分に乾燥を行った
時点での含水率が１９．１％となっている。このことか
ら、１２水和物が得られたことがわかる。さらに実施例
１と同様にして含水率の経時変化を調べたところ、実施
例１と同様の結果が得られた。
時点での含水率が１９．１％となっている。このことか
ら、１２水和物が得られたことがわかる。さらに実施例
１と同様にして含水率の経時変化を調べたところ、実施
例１と同様の結果が得られた。
【００２９】
【発明の効果】本発明によれば、時間が経過しても含水
率の安定したＡｐ４Ａ水和物の結晶が操作性良く得られ
るので、医薬品の原料として好適に用いられる。
率の安定したＡｐ４Ａ水和物の結晶が操作性良く得られ
るので、医薬品の原料として好適に用いられる。
【図１】本発明の方法で得られたＡｐ４Ａ水和物の含水
率の経時変化を示す図である。
率の経時変化を示す図である。
【図２】従来の方法で得られたＡｐ４Ａ水和物の含水率
の経時変化を示す図である。
の経時変化を示す図である。
───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (72)発明者 中島 宏 京都府宇治市宇治小桜23番地 ユニチカ株 式会社中央研究所内 (72)発明者 尾崎 雅弘 東京都八王子市小宮町51番地 富士レビオ 株式会社医薬研究所内 (72)発明者 渡辺 大一 東京都八王子市小宮町51番地 富士レビオ 株式会社医薬研究所内
Claims (1)
- 【請求項１】 ジアデノシン四リン酸を含有する溶液か
らジアデノシン四リン酸水和物を製造するに際し、溶液
のエタノール濃度が５０容量％以下の条件下でジアデノ
シン四リン酸水和物を晶析させることを特徴とするジア
デノシン四リン酸水和物の製造方法。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP32491594A JPH07242685A (ja) | 1994-01-12 | 1994-12-27 | ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| JP6-14872 | 1994-01-12 | ||
| JP1487294 | 1994-01-12 | ||
| JP32491594A JPH07242685A (ja) | 1994-01-12 | 1994-12-27 | ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| JPH07242685A true JPH07242685A (ja) | 1995-09-19 |
Family
ID=26350899
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| JP32491594A Pending JPH07242685A (ja) | 1994-01-12 | 1994-12-27 | ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| JP (1) | JPH07242685A (ja) |
Cited By (5)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0721955A3 (ja) * | 1995-01-11 | 1996-08-07 | Unitika Ltd | |
| WO2001002416A1 (fr) * | 1999-06-30 | 2001-01-11 | Yamasa Corporation | Cristaux dinucleotidiques |
| US6548658B2 (en) * | 1997-07-25 | 2003-04-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di-(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| US6872710B2 (en) | 1997-07-25 | 2005-03-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| US7223744B2 (en) | 1997-02-10 | 2007-05-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof |
-
1994
- 1994-12-27 JP JP32491594A patent/JPH07242685A/ja active Pending
Cited By (11)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| EP0721955A3 (ja) * | 1995-01-11 | 1996-08-07 | Unitika Ltd | |
| US5663322A (en) * | 1995-01-11 | 1997-09-02 | Unitika Ltd. | Diadenosine tetraphosphate tetrasodium salt dodecahydrate crystals and process for preparation |
| US7223744B2 (en) | 1997-02-10 | 2007-05-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Pharmaceutical formulation comprising dinucleoside polyphosphates and salts thereof |
| US6548658B2 (en) * | 1997-07-25 | 2003-04-15 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di-(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| US6872710B2 (en) | 1997-07-25 | 2005-03-29 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′)-tetraphosphate and salts thereof |
| US7132410B2 (en) | 1997-07-25 | 2006-11-07 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′-)tetraphosphate and salts thereof |
| US7528119B2 (en) | 1997-07-25 | 2009-05-05 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′-)tetraphosphate and salts thereof |
| US7939510B2 (en) | 1997-07-25 | 2011-05-10 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Di(uridine 5′-)tetraphosphate and salts thereof |
| WO2001002416A1 (fr) * | 1999-06-30 | 2001-01-11 | Yamasa Corporation | Cristaux dinucleotidiques |
| US6617444B1 (en) * | 1999-06-30 | 2003-09-09 | Yamasa Corporation | Dinucleotide tetraphosphate crystals |
| CZ303172B6 (cs) * | 1999-06-30 | 2012-05-09 | Inspire Pharmaceuticals, Inc. | Krystalická forma P1-(2'-deoxycytidin-5'-)P4-(uridin-5'-)tetrafosfátu |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| US4606854A (en) | Method of preparing α-L-aspartyl-L-phenylalanine methyl ester and its hydrochloride | |
| US3755295A (en) | 1-(2-amino-2-deoxy-{62 -d-ribofuranosyl) pyrimidines and derivatives thereof | |
| CN112225761A (zh) | 一种嘧啶并三氮唑及其合成方法 | |
| CN107573402A (zh) | 一种谷胱甘肽的合成方法 | |
| JPH07242685A (ja) | ジアデノシン四リン酸水和物の製造方法 | |
| JP3824894B2 (ja) | Ｐ１，ｐ４−ジ（ウリジン５’−）テトラホスフェート又はその塩の製造法 | |
| US4886749A (en) | Process for producing diadenosine tetraphosphate and derivatives thereof | |
| HUE028918T2 (en) | Effective peptide couplings and their use in the synthesis and isolation of cyclopenta (G) quinazoline trinodium salt | |
| US4801579A (en) | Novel cystine compounds, their preparation and use | |
| Fujita et al. | The stereospecific synthesis of threo-γ-hydroxyhomo-l-arginine from Lathyrus species | |
| CN109824534B (zh) | 一种n-烷酰基美金刚的合成方法 | |
| JP3487939B2 (ja) | ジアデノシン４リン酸４ナトリウム塩１２水和物結晶 | |
| US3040017A (en) | Octapeptides | |
| JPH029800B2 (ja) | ||
| JPS62126163A (ja) | 新規な光学活性アルキルチオニンスルホキシイミン及びその製造法 | |
| JPS58146539A (ja) | ペプチド又はペプチド誘導体の合成法 | |
| JP6980206B2 (ja) | 標識タンパク質の製造方法、標識ペプチドの製造方法、及びキット | |
| JPS60246362A (ja) | α−アミノ酸ヒドラジドの製造方法 | |
| JP3964809B2 (ja) | ジヌクレオチドの製造法 | |
| JP3135649B2 (ja) | ジアデノシンポリリン酸の製造方法 | |
| JP3325433B2 (ja) | Ｓ−フェニル−ｌ−システイン塩酸塩の製造法 | |
| JPH09103298A (ja) | ４−ハロゲノグルタミン酸のラセミ分割方法 | |
| JPH0751085A (ja) | ジアデノシン四リン酸の製造方法 | |
| JPS6037994A (ja) | ペプチド又はペプチド誘導体の合成法 | |
| JPH0532027B2 (ja) |