NO834765L - Fremgangsmaate for rensing av antra-cyclinon-glukosider ved adsorpsjon paa harpikser - Google Patents
Fremgangsmaate for rensing av antra-cyclinon-glukosider ved adsorpsjon paa harpikserInfo
- Publication number
- NO834765L NO834765L NO834765A NO834765A NO834765L NO 834765 L NO834765 L NO 834765L NO 834765 A NO834765 A NO 834765A NO 834765 A NO834765 A NO 834765A NO 834765 L NO834765 L NO 834765L
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- resin
- adsorption
- purification
- water
- product
- Prior art date
Links
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims description 17
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 title claims description 13
- 238000000746 purification Methods 0.000 title claims description 12
- 229930182478 glucoside Natural products 0.000 title 1
- 150000008131 glucosides Chemical class 0.000 title 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 claims description 26
- 239000011347 resin Substances 0.000 claims description 26
- 239000012535 impurity Substances 0.000 claims description 25
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 22
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 22
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 17
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 12
- 229930182470 glycoside Natural products 0.000 claims description 5
- 150000002338 glycosides Chemical class 0.000 claims description 5
- 229920002134 Carboxymethyl cellulose Polymers 0.000 claims description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 claims description 4
- 239000001768 carboxy methyl cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 235000010948 carboxy methyl cellulose Nutrition 0.000 claims description 4
- 239000008112 carboxymethyl-cellulose Substances 0.000 claims description 4
- 238000010828 elution Methods 0.000 claims description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 claims description 4
- 238000003795 desorption Methods 0.000 claims description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 2
- 239000012043 crude product Substances 0.000 claims description 2
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 claims description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 claims 1
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims 1
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims 1
- 239000002798 polar solvent Substances 0.000 claims 1
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 26
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 19
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 15
- AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N Doxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-TZSSRYMLSA-N 0.000 description 10
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 229960004679 doxorubicin Drugs 0.000 description 5
- AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 4'-epidoxorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O1 AOJJSUZBOXZQNB-VTZDEGQISA-N 0.000 description 4
- XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N Idarubicin Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-TZNDIEGXSA-N 0.000 description 4
- XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N Idarubicin Natural products C1C(N)C(O)C(C)OC1OC1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2CC(O)(C(C)=O)C1 XDXDZDZNSLXDNA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M Sodium acetate Chemical compound [Na+].CC([O-])=O VMHLLURERBWHNL-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 4
- 229960000975 daunorubicin Drugs 0.000 description 4
- STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N daunorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(C)=O)[C@H]1C[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O1 STQGQHZAVUOBTE-VGBVRHCVSA-N 0.000 description 4
- ITSGNOIFAJAQHJ-BMFNZSJVSA-N esorubicin Chemical compound O([C@H]1C[C@@](O)(CC=2C(O)=C3C(=O)C=4C=CC=C(C=4C(=O)C3=C(O)C=21)OC)C(=O)CO)[C@H]1C[C@H](N)C[C@H](C)O1 ITSGNOIFAJAQHJ-BMFNZSJVSA-N 0.000 description 4
- 229960000908 idarubicin Drugs 0.000 description 4
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 4
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 4
- STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 7-Cyan-hept-2t-en-4,6-diinsaeure Natural products C1=2C(O)=C3C(=O)C=4C(OC)=CC=CC=4C(=O)C3=C(O)C=2CC(O)(C(C)=O)CC1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 STQGQHZAVUOBTE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 3
- XVXGYZFARCOVHS-BINOZUKVSA-N (7s,9s)-7-[(2r,4s,5s,6s)-4-amino-5-hydroxy-6-methyloxan-2-yl]oxy-6,9,11-trihydroxy-9-(2-hydroxyacetyl)-8,10-dihydro-7h-tetracene-5,12-dione Chemical compound C1[C@H](N)[C@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1C2=C(O)C(C(=O)C3=CC=CC=C3C3=O)=C3C(O)=C2C[C@@](O)(C(=O)CO)C1 XVXGYZFARCOVHS-BINOZUKVSA-N 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000004280 Sodium formate Substances 0.000 description 2
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 2
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 2
- 230000008030 elimination Effects 0.000 description 2
- 238000003379 elimination reaction Methods 0.000 description 2
- 229960001904 epirubicin Drugs 0.000 description 2
- 239000002245 particle Substances 0.000 description 2
- HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M sodium formate Chemical compound [Na+].[O-]C=O HLBBKKJFGFRGMU-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 235000019254 sodium formate Nutrition 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- 238000005406 washing Methods 0.000 description 2
- 229920002684 Sepharose Polymers 0.000 description 1
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 1
- 230000000259 anti-tumor effect Effects 0.000 description 1
- 239000013043 chemical agent Substances 0.000 description 1
- 239000007795 chemical reaction product Substances 0.000 description 1
- 238000011097 chromatography purification Methods 0.000 description 1
- 238000012790 confirmation Methods 0.000 description 1
- 238000007796 conventional method Methods 0.000 description 1
- 238000000605 extraction Methods 0.000 description 1
- 238000012262 fermentative production Methods 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 1
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 1
- GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N methanol;hydrate Chemical compound O.OC GBMDVOWEEQVZKZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 1
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000003960 organic solvent Substances 0.000 description 1
- 229920000642 polymer Polymers 0.000 description 1
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011121 sodium hydroxide Nutrition 0.000 description 1
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 231100000925 very toxic Toxicity 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P19/00—Preparation of compounds containing saccharide radicals
- C12P19/44—Preparation of O-glycosides, e.g. glucosides
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C07—ORGANIC CHEMISTRY
- C07H—SUGARS; DERIVATIVES THEREOF; NUCLEOSIDES; NUCLEOTIDES; NUCLEIC ACIDS
- C07H15/00—Compounds containing hydrocarbon or substituted hydrocarbon radicals directly attached to hetero atoms of saccharide radicals
- C07H15/20—Carbocyclic rings
- C07H15/24—Condensed ring systems having three or more rings
- C07H15/252—Naphthacene radicals, e.g. daunomycins, adriamycins
Landscapes
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Zoology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Microbiology (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Saccharide Compounds (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
Description
Foreliggende oppfinnelse angår en fremgangsmåte for rensing av antracyklinon-glykosider ved selektiv adsorbsjon på harpikser.
Ønsket om å ha en meget spesifik metode for bruk til opp-nåelse av nevnte glykosider i i det vesentlige ren form, kommer hovedsakelig fra de fermentative produksjonsprosesser og de syntetiske fremstillingsprosesser der mengden organiske og uorganiske urenheter i råproduktet er spesielt høyt,
og i middel utgjør fra 12 til 25%.
De konvensjonelle metoder som til nu har vært benyttet i kjente renseteknikker og som har omfattet ekstrahering av råproduktet med klorerte oppløsningsmidler og deretter ut-vasking med buffere, førte imidlertid til et sluttprodukt der urenhetsandelen, selv om den vesentlig grad ble redu-sert, lå innen området mellom 4,5 og 5,0%.
Selv om den generelt har vært ansett som aksepterbar, har nevnte renhetsstandard, tatt i betraktning den spesielle sensivitet ved behandling av kjemiske midler med glykosi-disk molekyl, stimulert interessen for forskning rettet mot en forbedret rensemetode som muliggjør å oppnå et i det vesentlige rent sluttprodukt. Tatt i betraktning den spesielle bruk av antracyklinon-glykosider i klinisk prak-sis som anti-tumulært middel og sideproblemene ved dosering og giftighet, er den optimale eliminering av urenheter, generelt meget giftige sådanne, en evident bekreftelse på foreliggende oppfinnelses anvendelsesmuligheter.
Oppfinnelsen som tillater å oppnå et sluttprodukt som inneholder urenheter i en maksimal mengde på 2%, er generelt basert på en prosess som gjennomfører adsorbsjon av råproduktet på forskjellige typer harpikser i sur omgivelse (pH 3-5), og etterfølgende eluering med vann eller blandinger av vann og et molart oppløsningsmiddel. Mere spesielt medfø-rer fremgangsmåten ifølge oppfinnelsen en fase hvori lett sure, vandige midler som inneholder vannoppløselige oppløste stoffer adsorberes på harpiksen som dispergert i partiklene, slik som granuler eller kuler, og et etterfølgende trinn med deadsorbsjon av stoffene som er adsorbert i den første fase.
Den adsorberende harpiks kan være inneholdt i en egnet behol-der som i det vesentlige har formen at et tårn eller en kolonne, hensiktsmessig fylt med harpikspartikler. Avhengig av typen urenheter i råproduktet, kan eluatet som oppnås ved deadsorbsjon fra en første type harpiks, hensiktsmessig suksessivt adsorberes på en harpiks av en annen type enn den fra hvilken den elueres ved kjente metoder.
I den foreliggende kromatografiske rensemetode, anvendte man adsorbsjonsharpikser av polymer- og ionebyttetypen, eller av karboksymetylcellulose-typen, det riktige valg,
den egnede sekvens ved bruk av de forskjellige typer harpiks i henhold til råproduktet som skulle renses, den lette sure omgivelse under adsorbsjonen, tillot å oppnå en høy grad av renhet i sluttproduktet, eliminering av anvendelsen av klorerte organiske oppløsningsmidler, og utmerkede utbytter under rensingen.
De følgende eksempler skal kun illustrere oppfinnelsen.
Eksempel 1.
Rensing av 4- demetoksy- daunorubicin.
i 15.0 g 4-demetoksy-daunorbicin i rå tilstand og med en titer på 70,2% og således med et urenhetsinnhold på ca. 18%, opp-løses i 3,6 liter av en oppløsning og 0,5% natriumacetat. Oppløsningen, bragt til en pH-verdi på 4,7 ved tilsetning
av eddiksyre, adsorberes på 400 ml "Amberlite XAD2" fra Rohm og Haas, i en kolonne med en diameter på 2,5 cm. Produktet vaskes med 1000 ml vann og elueres deretter med en blanding av vann og metanol i et vektforhold på 5:1. Som
et første eluat samles 2000 ml oppløsning inneholdende aglukoner og forskjellige urenheter.
Elueringen fortsettes med en blanding av vann-metanol i
et volumforhold på 1:1, og det samles en fraksjon på 4500 ml: i oppløsning inneholder dette eluat nevnte 4-derr.etoksy-daunorubicin samråen med 10% urenheter.
Eluatet bringes til en pH-verdi på 2,8 ved tilsetning av saltsyre og vakuumkonsentreres til et volum på 1500 ml. Ved tilsetning av natriumacetat til den konsentrerte oppløs-ning, bringes pH-verdien til 4,0, og den lett sure oppløsning adsorberes på 150 ml "CM Cepharose Cl 6B" fra Pharmacia, inneholdt i en kolonne med en diameter på 2,5 cm og ved en strømningshastighet på 150 ml pr. time. Etter ferdig adsorbsjon blir kolonnen først vasket med 450 ml vann og deretter eluert med 0,3% saltsyre. Det første 800 ml eluat inneholdende 18% urenheter, bringes til en pH-verdi på 4,7 ved tilsetning av natriumacetat, og oppsamles for tilbake-føring til oppløsningen av uren 4-demetoksy-daunorubicin som skulle adsorberes på "Amberlite XAD2" i det første rense-trinn .
Det deretter følgende eluat på 3500 ml og inneholdende ren
, 4-demetoksy-daunorubicin, konsentreres under vakuum til
et volum på 50 ml. Det tilsettes 250 ml aceton, det opp-nådde precipitat filtreres av, vaskes med aceton og tørkes. Med et utbytte på 52%, beregnet på opprinnelig råprodukt,
4-demetoksy-daunorubicin, oppnåd med en titer på 97% og
I et urenhetsinnhold på mindre enn 3%.
Eksempel 2.
Rensing av daunorubicin.
i
15.0 g klorert daunorubicin med en titer på 74,2% som sådan og et urenhetsinnhold på 8,5%, oppløses i 4500 ml vann.
Oppløsningen bringes til pH 5,0 ved tilsetning av natriumacetat og adsorbert på 400 ml "S112" Kastell harpiks eller på "Amberlite ER180" fra Rohm og Haas, inneholdt i kolonner med en diameter på 2,5 cm. ved en strømningshastighet på
600 ml/time (1,5 b/v).
Produktet vaskes med 1000 ml oppløsning av 1% natriumklorid og elueres deretter med en blanding av vann-etancl i et volumforhold på 1:1.
Tetfraksjonene på 400 ml inneholdende aglukonene i oppløsning fjernes og elueringen fortsettes ved oppsamling igjen av 260 ml eluat inneholdende ren daunorubicin. pH-verdien justeres til 2,5 ved tilsetning av fortynnet saltsyre, aceton tilsettes, og produktet tillates å krystallisere ved en temperatur av +5°C i 6 timer. Produktet filtreres, vaskes med aceton og vakuumtørkes i 12 timer.
Med et utbytte på 80%, beregnet på råproduktet, oppnås det et daunorubicin med de følgende karakteristika, bestemt ved HPLC: titer 97%; urenhetsinnhold 2,6%.
Eksempel 3.
Rensing av 4-demetoksy-doksorubicin.
2000 ml vandig oppløsning inneholdende 10,4 g 4-demetoksy-doksorubicin med et urenhetsinnhold på 14% absorberes på 50 ml "ER180" fra Rohm og Haas, inneholdt i en kolonne med en diameter på 2,5 cm med en strømningshastighet pl 250 ml/time. Eluatet, partielt renset ved selektiv adsorbsjon av urenhetene, adsorberes deretter på 200 ml "CM Sepharose Cl 6B" fra Pharmacia. Produktet elueres med en blanding
av 50 deler metanol, 50 deler vann og 0,015 deler konsentrert saltsyre, kassering av tetfraksjonene (ca. 800 ml) inneholdende aglukoner og andre urenheter. Deretter samles 200 ml eluat inneholdende rent stoff, og i dette konsentreres
til 6 ml under vakuum. Ved omrøring i 3 timer, tilsettes 300 ml aceton. Precipitatet filtreres, vaskes med aceton og tørkes. Med et utbytte på 58,2% av det teoretiske, oppnås 6,5 g ren 4-demetoksy-doksc-rubicin med et urenhetsinnhold på 3%.
Eksempel 4.
Rensing av 4'- desoksy- doksorubicin.
Ved bruk av 15,0 g 4'-desoksy-doksorubicin med en titer
på 69,2% og med et innhold av organiske urenheter på 12% såvel som en urenhet av mineralske salter på 12%, oppløses i 2000 ml vann og adsorberes på 300 ml "CM Cephadex C25" harpiks med en strømningshastighet på 600 ml/time. Etter ferdig adsorbsjon, blir oppløsningen eluert med 0,3% saltsyre og man opp en fraksjon på 6500 ml inneholdende 4'-desoksy-doksorubicin.
Eluatet, bragt til en pH-verdi på 3,8 ved tilsetning av
en oppløsning av natriumhydrat, adsorberes på 200 ml "S112 Kastel" harpiks ved en strømningshastighet på 400 ml/time. Produktet vaskes med 600 ml vann og elueres deretter med metanol, surgjort til pH 2,0 ved hjelp av saltsyre.
600 ml ytterligere eluat oppnås, dette vakuum konsentreres til 60 ml. Under omrøring blir den konsentrerte oppløsning langsomt helt i 600 ml aceton. Precipitatet som dannes filtreres av, vaskes med aceton og tørkes.
Med en utbytte på 61% av det teoretiske, oppnås 4'-desoksy-doksorubicin med en titer på 95,8% og et urenhetsinnhold på 4,2%.
Eksempel 5.
Rensing av 4'- epidoksorubicin.
15,0 g uren 4<1->epidoksorubicin med en titer på 75,9% og et urenhetsinndhold på 15% oppløses i 4000 ml vann.
Oppløsningen bringes til en pK-verdi på 4,8 ved tilsetning av natriumformeat og absorberes på 400 ml "Amberlite IRC 724" harpiks inneholdt i en kolonne med en diameter på 2,5 cm ved en strømningshastighet på 1600 ml/time (4 b.v.).
Kolonnen vaskes med 800 ml vann og elueres deretter med
en blanding civ 9 5 deler metanol, 5 deler vann og 0,015 deler saltsyre. 4000 ml eluat oppsamles med 4<1->epidoksorubicin fremdeles inneholdende 10% urenheter, samt 1500 ml haleeluat med hovedsakelig urenhetsinnhold.
Kjerneeluatet konsentreres til 1500 ml, bringes til pH 4,8 ved tilsetning av natriumformeat, og absorberes på 250 ml "Carbokxymetylcellulose Wathman" harpiks, inneholdt, i en kolonne med diameter 2,5 cm ved en strømningshastighet på 500 ml/time (2 b.v.).
Ved ferdig absorbsjon, vaskes produktet med en blanding
av 99,3 deler etanol, 0,7 deler vann og 0,015 deler konsentrert saltsyre, og elueres deretter med er. blanding av 90 deler etanol, 10 deler vann og 0,05 deler konsentrert saltsyre, hvorved man oppnås 3200 rr.l kjerneeluat.
Eluatet konsentreres under vakuum ti] 60 ml og produktet felles ut ved tilsetning av 300 ml aceton.
Man oppnår 6,9 g 4'-epidoksorubicin med en titer på 91,2% og et urenhetsinnhold på 3%. Utbytte = 55,3%.
Eksempel 6.
Rensing av doksorubicin.
(a) 70 g doksorubicin oppløses i 28 1 vann, pH-verdien bringes til 3,7-4,5 ved tilsetning av buffer og oppløsningen absorberes på 2 1 "S112 Kastell" harpiks i en kolonne med diameter 6 cm. Produktet elueres med en blanding av 35 liter vann og 15 liter metanol.
Eluatet i en mengde av 40 liter vakuumkonsentreres til 0,5 liter og produktet krystalliseres ved tilsetning av en blanding av 1 liter etanol og 4,5 liter aceton under omrøring ved +5°C i 3 timer.
Produktet filtreres, vaskes med 0,0 1 aceton (?) og vakuum-tørkes ved +40°C i 5 timer.
Man oppnår 56,0 g monorenset doksorubicin. (I).
(b) 80,0 g monorenset doksorubicin (I), oppnådd under (a) ovenfor, oppløses i 24 liter vann og bringes til pH
4,0 ved tilsetning av buffer.
Oppløsningen adsorberes på en kolonne med diameter 12 cm,
og inneholdende 1,6 liter "Carboksymetylcellulose Wathman" harpiks.
Kolonneavløpet fjernes.
Etter vasking med 3,2 liter vann, elueres produktet med
55 liter vann bragt til en pH-verdi på 2,5 ved tilsetning av saltsyre. 46 liter eluat oppsamles og vakuumkonsentrereres til et volum av 0,6 liter, og produktet tillates å krystallisere ved forsiktig tilsetning av en blanding av isopropanol og
aceton i forholdet 1:3.
Produktet filtreres, vaskes med 1 liter aceton og tørkes ved 40°C i 4 timer.
Man oppnår 65 g doksorubicin med en titer på 98,5% og et urenhetsinnhold på 1,5%.
Claims (7)
1. Fremgangsmåte for rensing av antracyklinon-glykosider, karakterisert ved * at rensingen gjennomføres ved selektiv adsorbsjon på harpikser av den vandige oppløsning av råproduktet.
2. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at oppløsningen som inneholder råproduktet som skal renses, bringes til en pH-verdi innen området 3-5 før adsorbsjon på harpiksen.
3. Fremgangsmåte ifølge krav 3, karakterisert ved at harpiksen som benyttes for adsorbsjon, velges blant gruppen omfattende polymere og ione-bytte-adsorberende harpikser eller karboksymetylcellulose.
4. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at harpiksadsorbsjonen av oppløs-ningen som inneholder råproduktet som skal renses, utføres ved bruk av kun en type harpiks eller, avhengig av arten av urenheter, på forskjellige typer harpikser som benyttes i en egnet valgt sekvens.
5. Fremgangsmåte ifølge krav ^ karakterisert ved at det rensede stoff deadsorberes fra harpiksen.
6. Fremgangsmåte ifølge krav 5, karakterisert ved at deadsorbsjonen av renset stoff fra harpiksen gjennomføres ved eluering ved hjelp av lett surt vann eller en blanding av vann og et polart oppløsnings-middel.
7. Fremgangsmåte ifølge krav 1, karakterisert ved at rensingen ved selektiv adsorbsjon på harpikser benyttes både for antracyklinon-glykosider oppnådd ved fermentering og for tilsvarende synteseforbindelser.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| IT24939/82A IT1155446B (it) | 1982-12-23 | 1982-12-23 | Procedimento per la purificazione di glucosidi antraciclinonici mediante adsobimento selettivo su resine |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO834765L true NO834765L (no) | 1984-06-25 |
Family
ID=11215200
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO834765A NO834765L (no) | 1982-12-23 | 1983-12-22 | Fremgangsmaate for rensing av antra-cyclinon-glukosider ved adsorpsjon paa harpikser |
Country Status (30)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4861870A (no) |
| JP (2) | JPS59118797A (no) |
| KR (1) | KR900008743B1 (no) |
| AT (1) | AT383601B (no) |
| AU (1) | AU570935B2 (no) |
| BE (1) | BE898506A (no) |
| CA (1) | CA1204738A (no) |
| CH (1) | CH657623A5 (no) |
| CS (1) | CS258114B2 (no) |
| DE (1) | DE3345445C2 (no) |
| DK (1) | DK594083A (no) |
| ES (1) | ES8504758A1 (no) |
| FI (1) | FI834650A (no) |
| FR (1) | FR2538394B1 (no) |
| GB (1) | GB2133005B (no) |
| GR (1) | GR79135B (no) |
| HK (1) | HK74887A (no) |
| HU (1) | HU197917B (no) |
| IE (1) | IE56678B1 (no) |
| IL (1) | IL70500A (no) |
| IT (1) | IT1155446B (no) |
| NL (1) | NL193108C (no) |
| NO (1) | NO834765L (no) |
| NZ (1) | NZ206605A (no) |
| PT (1) | PT77883B (no) |
| SE (1) | SE8307134L (no) |
| SG (1) | SG34587G (no) |
| SU (6) | SU1440350A3 (no) |
| YU (1) | YU247183A (no) |
| ZA (1) | ZA839564B (no) |
Families Citing this family (29)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| US5977082A (en) * | 1985-08-02 | 1999-11-02 | Pharmacia & Upjohn Company | Injectable ready-to-use solutions containing an antitumor anthracycline glycoside |
| US5124317A (en) | 1985-08-02 | 1992-06-23 | Farmitalia Carlo Erba S.P.A. | Injectable ready-to-use solutions containing an antitumor anthracycline glycoside |
| DK356087A (da) * | 1987-07-09 | 1989-01-10 | Biogal Gyogyszergyar | Fremgangsmaade til isolering af et antibiotikum |
| US5188945A (en) * | 1991-09-09 | 1993-02-23 | American Cyanamid Company | Recovery process for antibiotics ll-e19020 alpha and beta |
| US5437861A (en) * | 1993-03-16 | 1995-08-01 | Applied Immune Sciences, Inc. | Removal of selected factors from whole blood or its components; and prevention and treatment of septic shock syndrome |
| DE19521419C2 (de) * | 1995-06-14 | 1997-11-27 | Plasma Applikation Mbh Ges | Verdampfereinheit zur Verdampfung von Materialien im elektrischen Vakuumbogen |
| JP3900241B2 (ja) * | 1997-08-28 | 2007-04-04 | メルシャン株式会社 | ダウノマイシンの精製方法 |
| DE69842005D1 (de) * | 1997-12-05 | 2010-12-30 | Mercian Corp | Kristallines anthracyclin antibiotikum und seine herstellung |
| KR100274787B1 (ko) * | 1998-05-08 | 2003-10-22 | 보령제약 주식회사 | 독소루비신및이의염산염의제조정제방법 |
| DE69922681T2 (de) | 1998-10-16 | 2005-05-25 | Mercian Corp. | Kristallisation von doxorubicin-hydrochlorid |
| KR100351718B1 (ko) * | 1999-11-02 | 2002-09-11 | 보령제약 주식회사 | 4'-에피-독소루비신의 정제방법 |
| EP1638509B1 (en) * | 2003-07-02 | 2015-12-30 | Solux Corporation | Thermally stable crystalline epirubicin hydrochloride and method of making the same |
| US20090099346A1 (en) * | 2003-07-02 | 2009-04-16 | Victor Matvienko | Thermally stable crystalline epirubicin hydrochloride |
| TW200510719A (en) * | 2003-08-06 | 2005-03-16 | Pharmacia Italia Spa | Method for detecting contaminants in pharmaceutical products |
| US7388083B2 (en) * | 2005-03-07 | 2008-06-17 | Solux Corporation | Epimerization of 4′-C bond and modification of 14-CH3-(CO)-fragment in anthracyclin antibiotics |
| US9035032B2 (en) * | 2005-12-13 | 2015-05-19 | Solux Corporation | Method for preparing 4-demethyldaunorubicin |
| US8802830B2 (en) * | 2005-12-20 | 2014-08-12 | Solux Corporation | Synthesis of epirubicin from 13-dihydrodaunorubicine |
| US8357785B2 (en) * | 2008-01-08 | 2013-01-22 | Solux Corporation | Method of aralkylation of 4′-hydroxyl group of anthracylins |
| US8173621B2 (en) | 2008-06-11 | 2012-05-08 | Gilead Pharmasset Llc | Nucleoside cyclicphosphates |
| TW201031675A (en) | 2008-12-23 | 2010-09-01 | Pharmasset Inc | Synthesis of purine nucleosides |
| EP2376514A2 (en) | 2008-12-23 | 2011-10-19 | Pharmasset, Inc. | Nucleoside analogs |
| EP2376088B1 (en) | 2008-12-23 | 2017-02-22 | Gilead Pharmasset LLC | 6-O-Substituted-2-amino-purine nucleoside phosphoramidates |
| EP2301943B1 (en) | 2009-09-08 | 2014-01-08 | Heraeus Precious Metals GmbH & Co. KG | Crystallization of epidaunorubicin x HCI |
| UY33311A (es) | 2010-03-31 | 2011-10-31 | Pharmasset Inc | Fosforamidatos de nucleosidos |
| CN102120750B (zh) * | 2011-01-30 | 2013-04-03 | 山东新时代药业有限公司 | 一种盐酸表柔比星的纯化方法 |
| DE102011103751A1 (de) | 2011-05-31 | 2012-12-06 | Heraeus Precious Metals Gmbh & Co. Kg | Kristallisierung von Epirubicinhydrochlorid |
| CN103087124B (zh) * | 2012-11-21 | 2016-01-13 | 浙江海正药业股份有限公司 | 一种制备阿霉素的方法 |
| EP2778171A1 (en) | 2013-03-15 | 2014-09-17 | Synbias Pharma Ltd. | Crystalline monohydrate of epirubicin hydrochloride |
| CN108350015A (zh) * | 2015-11-05 | 2018-07-31 | 浙江海正药业股份有限公司 | 一种表柔比星或其盐酸盐的分离纯化方法 |
Family Cites Families (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| GB1003383A (no) * | ||||
| US2960437A (en) * | 1954-09-03 | 1960-11-15 | Pfizer & Co C | Ion exchange purification of basic antibiotics |
| US2827417A (en) * | 1954-09-03 | 1958-03-18 | Pfizer & Co C | Ion exchange purification of basic antibiotics |
| US2793978A (en) * | 1955-06-27 | 1957-05-28 | Olin Mathieson | Ion exchange purification of neomycin |
| US3221008A (en) * | 1962-01-30 | 1965-11-30 | Merck & Co Inc | Ion exchange process for the recovery of ionic organic substances |
| FR1533151A (fr) * | 1962-05-18 | 1968-07-19 | Rhone Poulenc Sa | Nouvel antibiotique et sa préparation |
| FR1527892A (fr) * | 1967-03-15 | 1968-06-07 | Rhone Poulenc Sa | Nouveau procédé de préparation de l'antibiotique 13057 r.p. |
| FR1593235A (no) * | 1968-11-18 | 1970-05-25 | ||
| JPS4944347A (no) * | 1972-09-01 | 1974-04-26 | ||
| US3882195A (en) * | 1973-05-16 | 1975-05-06 | Air Prod & Chem | Pre-emulsification-delayed initiation suspension pearl polymerization process |
| JPS5134915B2 (no) * | 1974-07-27 | 1976-09-29 | ||
| AU519670B2 (en) * | 1975-01-22 | 1981-12-17 | Farmitalia Carlo Erba S.R.L. | Optically active daunosaminyl derivatives of anthracyclin- /nes |
| NL7602342A (nl) * | 1975-03-13 | 1976-09-15 | Rhone Poulenc Ind | Naftaceenderivaat met antibiotische activiteit. |
| US4029548A (en) * | 1976-05-07 | 1977-06-14 | The Upjohn Company | Process for producing antibiotics U-50,147 and U-51,738 |
| IT1098212B (it) * | 1978-05-09 | 1985-09-07 | Farmaceutici Italia | Antracioline antitumorali sostituite |
| JPS5543012A (en) * | 1978-09-20 | 1980-03-26 | Sanraku Inc | Novel anthracycline derivatine and its preparation |
| JPS6023679B2 (ja) * | 1979-07-13 | 1985-06-08 | メルシャン株式会社 | ロドマイシン群抗生物質とその製造法 |
| JPS5750994A (en) * | 1980-09-12 | 1982-03-25 | Microbial Chem Res Found | Novel antibiotic mf266 substance and its preparation |
| JPS57159496A (en) * | 1981-03-28 | 1982-10-01 | Sanraku Inc | Preparation of adriamycin |
| IT1210476B (it) * | 1981-05-28 | 1989-09-14 | Erba Farmitalia | Antracicline. |
-
1982
- 1982-12-23 IT IT24939/82A patent/IT1155446B/it active
-
1983
- 1983-12-15 DE DE3345445A patent/DE3345445C2/de not_active Expired - Lifetime
- 1983-12-15 AU AU22455/83A patent/AU570935B2/en not_active Expired
- 1983-12-15 NL NL8304327A patent/NL193108C/nl not_active IP Right Cessation
- 1983-12-16 SU SU833674607A patent/SU1440350A3/ru active
- 1983-12-16 CA CA000443557A patent/CA1204738A/en not_active Expired
- 1983-12-16 NZ NZ206605A patent/NZ206605A/en unknown
- 1983-12-16 GB GB08333511A patent/GB2133005B/en not_active Expired
- 1983-12-16 AT AT0440083A patent/AT383601B/de not_active IP Right Cessation
- 1983-12-16 FI FI834650A patent/FI834650A/fi not_active Application Discontinuation
- 1983-12-20 GR GR73292A patent/GR79135B/el unknown
- 1983-12-20 IL IL70500A patent/IL70500A/xx not_active IP Right Cessation
- 1983-12-20 ES ES528226A patent/ES8504758A1/es not_active Expired
- 1983-12-20 FR FR8320378A patent/FR2538394B1/fr not_active Expired
- 1983-12-20 YU YU02471/83A patent/YU247183A/xx unknown
- 1983-12-20 BE BE0/212079A patent/BE898506A/fr not_active IP Right Cessation
- 1983-12-20 CH CH6767/83A patent/CH657623A5/it not_active IP Right Cessation
- 1983-12-22 CS CS839802A patent/CS258114B2/cs unknown
- 1983-12-22 PT PT77883A patent/PT77883B/pt unknown
- 1983-12-22 KR KR1019830006090A patent/KR900008743B1/ko not_active IP Right Cessation
- 1983-12-22 HU HU834427A patent/HU197917B/hu unknown
- 1983-12-22 ZA ZA839564A patent/ZA839564B/xx unknown
- 1983-12-22 SE SE8307134A patent/SE8307134L/xx not_active Application Discontinuation
- 1983-12-22 NO NO834765A patent/NO834765L/no unknown
- 1983-12-22 JP JP58241118A patent/JPS59118797A/ja active Granted
- 1983-12-22 DK DK594083A patent/DK594083A/da not_active Application Discontinuation
- 1983-12-23 IE IE3060/83A patent/IE56678B1/en not_active IP Right Cessation
-
1987
- 1987-01-14 SU SU874028798A patent/SU1447287A3/ru active
- 1987-01-14 SU SU874028799A patent/SU1450747A3/ru active
- 1987-01-20 SU SU874028832A patent/SU1470197A3/ru active
- 1987-01-20 SU SU874028823A patent/SU1450748A3/ru active
- 1987-01-23 SU SU874028858A patent/SU1575943A3/ru active
- 1987-02-02 US US07/009,550 patent/US4861870A/en not_active Expired - Lifetime
- 1987-04-14 SG SG345/87A patent/SG34587G/en unknown
- 1987-10-15 HK HK748/87A patent/HK74887A/xx not_active IP Right Cessation
-
1994
- 1994-11-30 JP JP6296499A patent/JP2749272B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO834765L (no) | Fremgangsmaate for rensing av antra-cyclinon-glukosider ved adsorpsjon paa harpikser | |
| GB2168980A (en) | Producing rhamnose | |
| CN1974586A (zh) | 氨基糖苷类抗生素的大孔吸附树脂富集纯化方法 | |
| JP2003534349A (ja) | （ｓｓ，ｒｓ）−ｓ−アデノシル−ｌ−メチオニンの薬剤として許容される塩の調製方法 | |
| US2960437A (en) | Ion exchange purification of basic antibiotics | |
| US4584399A (en) | Purification of L-phenylalanine | |
| US2827417A (en) | Ion exchange purification of basic antibiotics | |
| EP0158148B1 (en) | Lactulose purification process | |
| JPS5852999B2 (ja) | ステビオサイドノセイセイホウ | |
| CA1242710A (en) | Crystalline maltopentaose and process for producing the same | |
| KR920000102B1 (ko) | 안트라시클리논 글리코시드의 정제방법 | |
| JP2834807B2 (ja) | 精製ラクチュロースの製造法 | |
| JPS628118B2 (no) | ||
| US3118908A (en) | Process for extracting gibberellins from fermentation liquids | |
| US2992164A (en) | Ion exchange separation of gramicidin and tyrothricin | |
| JPS5942862A (ja) | ステビア甘味物質の精製方法 | |
| CN1323746A (zh) | 一种以氰钴胺为前体制备羟钴胺盐的方法 | |
| WO1998026085A1 (fr) | Procedes de fabrication de vancomycine | |
| JPS6257637B2 (no) | ||
| IZUMIYA | STUDIES ON THE INDUSTRIAL PRODUCTION OF FLAVIN-ADENINE DINUCLEOTIDE II. PURIFICATION OF FLAVIN-ADENINE DINUCLEOTIDE USING ION-EXCHANGE RESINS | |
| JPH0352448B2 (no) | ||
| DINUCLEOTIDE | STUDIES ON THE INDUSTRIAL PRODUCTION OF FLAVIN-ADENINE DINUCLEOTIDE | |
| HU180541B (en) | Further developped process for the isolation of l-tryptophan from aqeous solutions | |
| HU209799B (en) | Process for producing neomycin-sulfate | |
| NO117914B (no) |