JPS6023679B2 - ロドマイシン群抗生物質とその製造法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は、ロドマィシン群に属する新規なアントラサイ
クリノン・グリコシド誘導体及びそれらの製造法に関し
、更に詳しくは、構造式１式中Ｒ，は水素原子又は水酸
基を表わし、Ｒ２は水素藤子又は次式の糖鎖、一○ーロ
ドサミンー２−デオキシフコースーシネルロース残基を
表わし、Ｒ３は水酸基又はカルボメトキシ基（一ＣＯＯ
ＣＨ３）又は糖鎖、一〇ーロドサミンー２−デオキシフ
コースーシネルロース残基又は次式の糠鎖、一○ーロド
サミンー２ーデオキシフコースーロデイノース残基を表
わし、Ｒ４は水酸基又は水素原子を表わす。

で示される、アントラサイクリノン・グリコシドの新誘
導体並びにそれらの製造法に関する。本発明者らは、漣
化学療法剤として広く臨床的に用いられているアドリア
マイシン、ダウノマイシンの副作用を軽減し、制塵活性
を更に増強した有用なアントラサィクリン類抗生物質を
微生物変換により製造すべく研究を重ねた結果、アクラ
シノマィシン生産菌（袴公階５１一３４９１５特公開昭
５３一４４５５５特願昭５２一６０９０８）例えば、ス
トレプトミセス・ガリラェウスＭＡ１４４ＭＩ徴工研菌
寄第２４５５号又はそれらの変異株が、例えばご−ロド
マイシノン（ごーｒｈｏｄｏｍｙｃｌｎｏｎｅ）、ごー
イソロドマイシ／ン（ご一ｉｓｏｒｈｏｄｏｍｙｃｍｏ
ｎｅ）、ｙーロドマイシノン（ｙ−ｒｈｏｄｏｍｙｃｌ
肌ｎｅ）、８ーロドマイシノン（８−ｒｈｏｄｏｍｙｃ
ｌｎｏｎｅ）又は３−ピロマィシノン（８一ｐのｍｍｙ
ｃｌｎｏｎｅ）等のアグリコン類を基質として新規なロ
ドマイシン群抗生物質を生成することを見出した。本発
明の出発物質は次の構造式（Ｄ） で表わされる生物学的に不活性な、上記のアグリコソ類
である。

すなわち例えば本式のＲ，、Ｒ′２、Ｒ３が次の如き基
で表わされるロドマィシノン類が用いられる。Ｒ・
髭 Ｒら Ｒ４ｏ−
ロドマイシノン ー日 −ＯＨ
−ＣＯＯＣＨ３ −ＯＨｏ−イソロドマイシノン
−ＯＨ −ＯＨ −ＣＯＯＣＨ３
−ＯＨクーロドマイシノン 一日 −
ＯＨ −ＯＨ −ＯＨｒーロドマイシノ
ン 一日 −日 −ＯＨ
−ＯＨクービロマイシノン −ＯＨ −
ＯＨ −ＯＨ 一日なお、基質として用い
られるのは現在のところ例として上記の８種類のアグリ
コン類が分離製造されて用いられるが、微生物反応の基
質特異性から類似構造の新アグリコン類が将来分離製造
されれば使用可能であり、さらにロドマィシノソ類のみ
ならず、アクラビノン、６ーピロマイシノン、１０ーデ
カルボメトキシ・アクラビノン、４ーメトキシ・アクラ
ビノン等の類似構造を有するアグリコン類がブレカーサ
ーとして使用され、新規なアントラサイクリン・グリコ
シド類を製造し得ることが可能である。上記のァグリコ
ン類はそれぞれ該当するアントラサィクリン・グリコシ
ド類例えばアクラシノマィシンＡ、アクラシノマイシン
Ｂ（特公昭５１一３４９１５号）ＭＡ１４４−○，、Ｇ
２、Ｌ、Ｎ．、Ｓ，、Ｓ２、Ｕ，、Ｕ２（特許公開昭５
３一４４５５５号）ＭＡ１４４−Ｙ（特磯昭５２一６０
９０８号）等を加水分解するか、又はそれらの生成塔地
中から分離した製品を使用することができる。

又、本発明に用いられる菌体は例えばストレプトミセス
・ガリラエウス（Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ雛ｌｉｌａ
ｅｕｓ）ＭＡ１４４一Ｍ，（徴工研菌寄第２４５５号）
の如き、アクラシノマィシン生産菌自身か、これらを電
離放射線ば、８、ｙ線、Ｘ線や紫外線等の物理的譲導源
あるいはＮＴＧ等またはジェポキシブタン等の化学的誘
導源により変異処理し、得られた変異株を用いて行うこ
とができる。

例えば一例としてアクラシノマィシン生産菌として知ら
れているストレプトミセス・ガリラエウスＭＡ１４４一
Ｍ，徴工研菌寄第２４５５号に由来する変異株ＫＥ−３
０３徴工研菌寄第４８０８号等が有利に用いられる。先
ず該変異株の取得の一例を記載すれば、上記親株のＹＳ
斜面培地上の培養から胞子を採取して超音波処理後、Ｎ
−メチル−Ｎ′ーニトロ−Ｎ−ニトロソグアニジン（Ｎ
ＴＧ）の最終濃度１０００ｙタ′の‘にて処理した後、
集菌しＹＳ寒天培地にて培養したコロニーを種母培養後
、生産培地にて培養して得られた菌体の溶剤抽出液の分
光光度計測定により黄色色素生産性を測定して、アント
ラサイクリン非生産性コロニーを選択し、さらに該選択
株を振濠培養して培養液にアクラビノン溶液を添加して
培養を続けアクラシノマィシンＡの生成を確認し該選択
株のグリコシド生成能を検して目的とする変異株を選択
分離した。このようにして変異、分離、選択、育成した
変異株の一つのストレプトミセス・ガリラェウス、ＫＥ
−３０３朱の菌学的性状を下記に記載するが、親株ＭＡ
１４４一Ｍ，と比較すると基中菌糸の色が多少異なる他
は分類学上、全く差異を認め驚く、生理学的にアントラ
サィクリン系色素の生産能を欠いた変異株と言える。

従って、本変異株は本発明に用いることの出来る変異株
の１つを例示したに過ぎず、アクラシノマイシン生産菌
に由来するアントラサィクリン系色素の生産能を欠き、
かつ供与したアグリコソからグリコシド生成館を有する
変異株のすべてが、本発明に使用出来る。次に該ＫＥ−
３０３珠の菌学的性状を記載する。

１ 形態 ＫＥ−３０３％ま顕微鏡下で良く分枝した基中菌糸より
、銅状〜ラセン形成を有する気菌糸を伸長し、鼠生枝は
みとめられない。

成熟した胞子類は１の固以上の胞子の連鎖をみとめ、胞
子の大きさは０．４〜０．８×０．８〜１．６ミクロン
位で、胞子の表面は平滑である。２ 各種培地における
生育状態 色の記載について〔 〕内に示す標準はコンテイナー・
コーポレーション・オプ・アメリカのカラー・／・ーモ
ニイ・マニュアル（Ｃｏｎｔａｉｎｅｒ Ｃｏｒｐｏｒ
ａｔｉｏｎｏｆ ＡｍｅｒｉｃａのＣｏｌｏｒｈａｒｍ
ｏｎｙｍａｎｕａｌ）を用いた。

【１１ シュクロ−ス・硝酸塩寒天塔地（２７０培養）
発育は白色〜うす黄〔２ｄｂ〕、気菌糸は着生せず、溶
解性色素もみとめられない。

‘２） グルコース・アスパラギン寒天塔地（２７００
培養）発育はうす黄〔１鼠〕〜黄緑〔・きＣ〕、明るい
灰色〔ｄ〕の気菌糸を着生し、溶解性色素もみとめられ
ない。

‘３１ グリセリン・アスパラギン寒天培地（ＩＳＰ−
培地５、２７０培養）淡黄緑色〔ｌｃｂ〕〜明るい灰味
を帯びたオリ‐ブ色〔・菱〕の発育比黄味灰色〜明るい
灰〔幻ｃ〕の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられ
ない。

‘４）スターチ・無機塩寒天培地（ＩＳＰ−培地４、２
７０培養〕うす黄〔ｌｂａ〕〜うす黄緑〔ｌｃｂ〕の発
育上に明るい灰〔ａｅ、ＣｏｖｅｎＧｒａｙ〕〜灰〔ａ
〕の気菌糸を着生し、溶解性色素はみとめられない。

【５１ チロシン寒天塔地（ＩＳＰ−培地７、２７０培
養〕茶灰味黄褐〔３鞍〕〜茶灰〔準ｉ〕の発育上［，に
、うす灰色の気菌糸をお〈れてわずかに着生し、溶解性
色素は黒を呈する。

■ 栄養寒天培地（２７０培養） 発育は灰黄味〔＄ｃ〕、黄味がかった灰 〔２ｄｃ〕〜うす灰〔ｄ〕の気菌糸を着生し、溶解性色
素は茶色を呈する。

｛７｝ イースト・麦芽寒天塔地（ＩＳＰ−渚地２、′
２７０培養）対オー′−ブ茶〔微〕〜う横綱裏 ｅｃ〕の発育上に、明るい灰〔乳ｅ、ＳｉｌｖｅｒＧｒ
ａｙ〜３ｉｈ、技ｉｇｅＧｒａｙ〕の気菌糸を着生し、
溶解性色素は生成しないか、僅かに茶色を帯びる。

（糊 オートミール寒天培地（ＩＳＰ−培地３、２７℃
培養）うす黄〔２ｄｂ〕〜灰黄〔＊ｃ〕の発育上に黄味
灰〔２ｄｃ〕〜明るい灰〔ｄ〕の気菌糸を着生し、溶解
性色素は褐色を帯びる。

３ 生理的性質 ｍ 生育温度範囲 マルトース・イースト・エキストラクト寒天（マルトー
ス１．０％、酵母エキス（オリエンタル）０．４％、糸
寒天３．５％、ｐＨ６．０）を用いて２０００、２４ｏ
ｏ、２７００、３０つ０、３７０、５０ｑｏの各温度で
実験の結果、５０午０を除いてそのいずれの温度でも生
育するが、最適温度は２７℃〜３７℃付近と思われる。

■ ゼラチンの液化（１５％単純ゼラチン、２０ｏｏ培
養；グルコース・ベブトン・ゼラチン、２７℃培養）単
純ゼラチンの場合、培養後１４日目頃から液化がみられ
、その作用は弱い方である。

グルコース・ベプトン・ゼラチンの場合は、培養後７日
目頃より液化が始まり、その作用は弱い方〜中等度であ
る。‘３｝ スターチの加水分解（スターチ・無水塩寒
天２７ｑ０培養）培養後５日目頃からわずかに水解・性
がみられるが、その作用は弱い方である。

【４１ 脱脂牛乳の凝固・ベプトン化（脱脂牛乳、３７
０培養）培養後５日目頃よりべプトン化が始まり、１７
日目頃にはほぼ完了し、その作用は中等度〜強い方であ
る。

凝固はみられない。【５｝ メラニン様色素の生成（ト
リプトン・イースト・ブロス・ｌｓｐ−培地１；べプト
ン・イースト・鉄寒天、ｌｓｐ−堵地６：チロシン寒天
、ｌｓｐ−培地７、何れも２７０培養）トリプトン・イ
ースト・フロス、ベプト ン・イースト・鉄寒天及びチロシン寒天のいずれの培地
にもメラニン様色素の生成がみとめられる。

‘６１ 炭素源の利用性（プリドハム・ゴツトリーブ寒
天、ｌｓｐ−培地９、２７０培養）Ｌ−アラビノース、
○ーキシロース、グルコース、Ｄーフラクトース、シユ
クロース、イノシトール、Ｌ−ラムノ−ス、ラフイノー
スを利用してよく発育し、０−マンニトールは利用しな
い。

【７｝ リンゴ酸石灰の溶解（リンゴ酸石灰寒天、２７
０培養）リンゴ酸石灰の溶解をみとめ、その作用は強い
方である。

（８｝ 硝酸塩の還元反応（１．０％硝酸ソーダ含有べ
プトン水、ＩＳＰ−培地８、２７０培養）陽性である。

以上、本発明に使用する変異株は、ストレプトミセス・
ガリラェゥスＫＥ３０３として、工業技術院微生物工業
技術研究所に寄託され、徴工研菌寄第４８０３号を得て
いる。本発明の培養は、アントラサィクリン系色素の生
産能を欠き、かつ、供与したアントラサィクリノンから
、グリコシド形成能を有する変異株を用いるほかは、通
常のストレプトミセス属の微生物の培養と同様で、培養
基中の炭素源としてはグルコース、グリセリン、殿粉、
デキストリン、シュクロース、マルトース、油脂類を用
い、窒素源としては大豆粉、棉実粕、肉エキス、ベプト
ン、乾燥酵母、酵母エキス、コーンスチープリカーなど
の有機物並びに硫安、硝酸ソーダ、塩化アンモニウム等
の無機物を用い、さらに必要に応じて食塩、塩化カリウ
ム、りん酸、マグネシウム塩、重金属塩等の他、ビタミ
ン類等の徴量物質を添加する。

培養は一般の抗生物質の生産と同じく、好気的液体深部
培養法が通しており、２０００〜３８００で培養され、
通常は２５〜３２０が望ましく用いられる。

次にその培養の具体例を述べる。本菌株の培養はまず種
母塔地として寒天斜面培養塔地（酵母エキス０．３％、
可溶性殿粉１．０％、寒天１．５％、ｐＨ７．０）で６
〜７℃で保存された菌株を例えば殿粉、グルコース、有
機窒素源、無機塩類から成る通常の液体培地へ接種し、
２５〜３汐０にて１〜２日間振顔培養して種母を調製す
る。

次に通常の液体培地例えば麻糖、グルコース、大豆粉、
無機塩類より成る培地へ、上記の種母を１〜３％接種し
、２５〜３２０にて２４〜７幼時間振縄培養を行い、対
数増殖期に達した培養へ基質として例えばｙ−ロドマィ
シノン、Ｂーロドマイシノン、ごーロドマイシノン、８
−ピロマイシノン又はごーイソロドマイシノン等のアン
トラサィクリノンを１０〜２００仏夕／地の濃度で添加
し、更に、１２〜７幼時間培養を続けて微生物変換を完
結させる。

培養液は菌体と炉液に分離し、菌体より色素を柚出、精
製を行う。抽出には通常、アセトン、クロロフオルム、
メタノール、トルェン、酸性緩衝液等が用いられる。精
製にはＳｅｐｈａｄｅｘＬＨ−２０（架橋デキストラン
ゲル（ｃｒｏｓｓ−ｌｉｎｋｅｄｄｅｘｔｒａｎ史ｌ
ｓ）ＰｈａｒｍａｃｉａＦｉｎｅＣｈｅｍｉｃａｌＡＢ
社製）、ＣＭ−ｃｅｌｌ山ｏｓｅ（カルボキシ メチル
セルロースＢｒｏ肌社製）の如きゲル炉過、イオン交換
クロマトグラフィー シリカゲル等を用いた吸着クロマ
トグラフィー等が有利に用いられる。得られた化合物は
夫々の紫外、可視光線吸収スペクトル（以下ＵＶ）、赤
外線吸収スペクトル（ＩＲ）及び、１０ｍＭ比高分解能
プロトン及びＣ−１針菱磁気共鳴スペクトル（ＰＭＲ及
びＣＭＲ）及びマススべクトル分析、更に酸加水分解に
よりアグリコン部分、糖部分の部分分解物を得てこれら
のスペクトル分析によって構造を下記の如く決定した。
例えばご−ロドマィシンを基質とした場合、構造式山に
示したご−ロドマィシンＲＤＣが得られた。ご−ィソロ
ドマィシノンからは構造式ＷのごーイソロドマイシンＲ
ＤＣが、８ーロドマイシノンからは３ーロドマィシンＲ
ＤＣ（構造式Ｖ）、ｙーロドマイシノンからはｙーロド
マイシンＲＤＣ（構造式Ｗ）及びｙーロドマィシンＲＤ
Ｒｓ（構造式肌）、８ーピロマィシノンからは８−ピロ
マィシンＲＤＣ（構造式側）がそれぞれ得られた。本発
明で得られた上記の構造式を有する化合物は遊離の塩基
又は無毒性の塩としても得られる。遊離の塩基は公知の
造塩の方法によって無毒性の酸、硫酸、塩酸、臭酸、硝
酸、りん酸、酢酸、プロピオン酸、マレィン酸、オレイ
ン酸、パルミチン酸、くえん酸、こはく酸、酒石酸、フ
マール酸、グルタミン酸、パントテン酸、ラウリルスル
ホン酸、メタンスルホン酸、ナフタレンスルホン酸等と
の付加塩として回収され、その治療効果は遊離塩と実質
的に均しい効果を有する。（これらの回収された付加塩
は分離、精製してアントラサィクリングリコシド抗生物
質に用いられる方法で処方される）すなわち遊離塩基を
適当な溶媒中で上記の無毒性の酸と反応させて凍結乾燥
法か又は該当の塩が僅かしか溶けない溶媒を用いて沈殿
して回収する。これらの酸付加塩は又塩基性の物質で中
和して遊離塩基に変えることもできるし、毒性のある塩
も中和した後で上記の無毒性の塩に変えることもできる
。

以下に本発明の化合物の理化学的性状を述べる。

※シリカゲル薄層（キーゼルクール ６０ＰＦ２５４メ
ルク社製）溶媒 ■ クロロホルム：メタノール（１０
：１ 容積比）■クロロホルム：メタノール：ギ酸（１
００：１０：１同上）■ ベンゼン：酢酸エチル：メタ
ノール：ギ酸：水（５：５：１：１：０．３ 同上）次
に本発明による化学物質の有用性について述べる。

本発明の化合物はマウス白血病培養細胞 （Ｌ１２１０）の増殖及び核酸合成を顕著に抑制する。

例えば２０％仔牛血清を含むＲＰＭＩ１６４０培地（ロ
ースウェルパーク研究所ＩＭＯ）へＬ１２１増細胞を５
×１びケ／奴‘接種し、同時に本発明の化合物を０．１
及び０．５ｗ夕／叫の濃度で添加し、３７ｑ０にて炭酸
ガス培養器中で培養し対照区に対する５．０％増殖阻害
濃度を求めた。更に上記のＬ１２１０者義細砲を１０％
仔牛血清を含むＲＰＭＩ１６４位者地へ５×１ぴケノの
‘となるように懸濁し、３７℃にて炭酸ガス培養器中で
１〜２時間前培養を行った後、本発明の化合物を種々の
濃度で添加し、１５分後に更に１４Ｃーウリジン（０．
０５一Ｃｉ／の【）及び１℃ーチミジン（０．０５仏Ｃ
ｉ／の‘）を添加し、３７０にて６０分間培養した。反
応液へ１０％トリクロル酢酸溶液を添加し、反応を停止
すると同時に、酸不落物を沈殿させ、１０〜５％トリク
ロル酢酸にて更に３回洗浄した後ギ酸に溶解し、酸不落
物中の放射活性を測定し対照区に対する放射能の取込み
率から５０％取込み阻害濃度を求めた。次表に結果を示
す。以上の結果から、本発明の物質は例えば６−ｏドマ
イシンＲＤＣ、ごーイソロドマイシンＲＤＣ、６−ロド
マィシンＲＤＣの如く、マウス白血病細胞の増殖を極め
て低濃度で死滅させ、又ごーィソロドマイシンＲＤＣ及
びごーロドマイシンＲＤＣはＲＮＡ合成を特異的に阻害
する特徴をもち制癌剤として有用できる性質を有してい
る。

次に後記実施例に於て用いるアグリコン類の調製を参考
例として掲る。参考例 基質に使用するアグリコン類の調製 本発明に用いた基質アグリコンは以下の如くにして調製
することができる。

ロゼオルピシンＡ及びＢの生産菌である公知菌アクチノ
ミチセス・ロゼ オ ビ オ ラ セ ン ス （ Ａ
ｃｔｉｎｏｍｙｃｅｓｒｏｓｅｏｖｉｌａｃｅ瓜）ＩＦ
Ｏ１３０８１菌を０．３％酵母エキス及び１％可溶性デ
ンプン、ｐＨ７．０からなる種母塔地（１００の【／５
００の‘三角フラスコ）で３日間振盤培養し、これを４
％蕪糖、２．５％大豆粉、０．１％酵母エキス、０．２
５％食塩、０．３２％炭酸カルシウム、０．０００５％
ＣｕＳ０４・７比○、０．０００５％ＭｎＣ１２・４Ｑ
Ｏ及び０．０００５％ＺｎＳ０４・７４０、ｐＨ７．４
から成る発酵培地５０の‘を分圧殺菌した５００泌三角
フラスコの２５０本に１奴ずつ接種し、ロータリーシェ
ーカー（２１仇ｐｍ）上、２８午０で５日間振濠培養す
る。得られた発酵ブロスは遠心操作により菌体と上蒲に
分け、菌体は２そのアセトンで抽出し、濃縮、１そのク
ロ。ホルムで再抽出する。上情は、２そのクロロホルム
で抽出し、菌体からの抽出物と混合し濃縮乾固し粗物質
を得る。これを７０机上のメタノールに溶解し、遠心操
作により不溶物を除去し、その上清をセフアデツクスＬ
Ｈ−２０カラム（前出、ぐ４．０×４．０伽）にかけメ
タノールで溶出、最初に流出するグリコシド画分と次い
で溶出されるアグリコン画分に分ける。グリコシド画分
は濃縮乾団後２００の‘の０．刈塩酸を加え、８５ｑｏ
で１時間加熱し加水分解する。これを総量５００机‘の
クロロホルムで抽出、濃縮乾固しｙーロドマイシノン、
８ーロドマイシノン及び８ーピロマイシノンを含む粗ア
グリコン物質を得る。これを調製用薄層（６０ＰＦ２５
４、メルク社）にスポット、クロロホルム：メタノール
（２０：１）の溶媒系で展開し、Ｒｆ値０．５３を示す
ｙーロドマィシノン、Ｒｆ値０．４４を示す８−ロドマ
ィシノン、Ｒｆ値０．３４を示す８−ピロマィシノン部
分をそれぞれかきとり、クロロホルム：メタノール（５
：１）鷹液で溶出、濃縮乾固し、メタノール漆出による
セフアデックスＬＨ−２０カラム（０２．５弧×５０弧
）で最終精製を行い、１３０の９のｙーロドマイシノン
、６８雌の３−ロドマィシノン及び４３の９の３ーロド
マィシノンを取得した。

一方、最初のセフアデツクスＬＨ−２０カラムクロマト
で分取されたアグリコン画分を濃縮乾固後、調製用薄層
（前出）にスポツトし、ベンゼン：アセトン：ギ酸（１
００：２０：１）の溶媒系で展開、Ｒｆ値０．７５を示
すごーロドマィシノン及びＲｆ値０．７０を示す・一ィ
ソロドマィシノン部分をかきとり、それぞれクロロホル
ム：メタノール混液（５：１）で溶出し、濃縮乾固し前
述の如くセフアデツクスＬＨ−２０カラムで精製し、２
８の９のどーロドマイシノン及び３２ｍｐのどーイソロ
ドマイシノンを取得した。得られたアグリコン等は、元
素分析、ＵＶ吸収、赤外吸収、マス吸収及びＮＭＲスベ
クトラム等の機器分析で同定すると共に、文献値との照
合、標準品との薄層クロマト上での比較検討により確認
した。なお参考文献としてはどーロドマイシノン、３ー
ロドマイシノン及びご−イソロドマィシノンに関しては
〔Ｃｈｅｍ．氏ｒ ｌｏｏ、３５７８〜３５８７（１９
６７）〕を、ｙーロドマイシノンに関しては〔Ｔｅｔｒ
ａｈｅｄｒｏｎ（Ｌｏｎｄｏｎ）１９、３９５〜４００
（１９６３）〕を参照した。一方、３−ピロマィシノン
は以下の物理化学的性状を有する新規なアントラサイク
リノンである。８−ピロマィシノンの物理化学的性質：
ｍ．ｐ．１９３〜１９が０ 分子量 総６（Ｎねｓｓ） 元素分析：Ｃ２虹，８０９ Ｃ日○ 計算値（％） ６２．１８４．７０３３．１３実験値
６２．０２４．８２３３．４１紫外可視吸収スペ
クトル叱るＭｅ。

Ｈｎの（Ｅ協）：２３３（１１７３）・２５６（５７９
）、２９０（２１２）、４９１（３５９）、５１１ｓ（
２８２）、５２＄（２３０）入９０％Ｍｅ。

Ｈ−０．１ＮＨＣ１ｍａＸｎの（Ｅ協）：２３３（１３
１５）、２５６（６７２＞、２９０く２４３＞、４９１
（３８９）、５１瓜（３１１）、５２＄（２４７）入９
０％Ｍｅ。Ｈ−０．１ＮＮａ。ＨｍａＸｎの（母孫）：
２３５（１０５３）、２９瓜（２０５）、５１１（３５
８）、５９＄（２７６）ＩＲ（ＫＢｒ）肌‐１：３４０
０・２９００・１５９５・１４４０・１２８０、１２２
０ＮＥｓｓｓｐｅｃｔｒｍｍ：３８６（Ｍ＋）、３６８
（Ｍ＋一日２０）ＰＭＲｓｐｅｃｔｒｍｍ（１００ＨＺ
、ＣＤＣ１３）：一柳：１．０４、ｔ、ＣＨ２一ＣＨ３
：１．７５、ｑ、Ｊ＝７ＨＺ、ＣＨ２‐ＣＨ３；２．１
３、ｄ、Ｊ＝５ＨＺ、ＣＨ２−８：４．７４、ｓ、ＣＨ
−７ ＆ ＣＨ−１０：７．９５、ｓ、ＣＨ−１１；７
．３５ ｓ、ＣＨ一２ ＆ ＣＨ−３；ｈｙｄｒｏ鱒ｎ
ｂｏｎｄｅｄ ｐｈｅｎｏｌｊｃ ｈｙｄｒｏ
Ｘｙｌｓ（１２．１、１２．７ ＆ １２．９）以下に
本発明の実施例を示す。

実施例 １ １．５可溶性殿粉、グルコース１％、大豆粉１％、酵母
エキス０．１％、食塩０．３％、りん酸二カリウム０．
１％、硫酸マグネシウム（ＭｇＳ０４・７日２０）０．
１％、硫酸鋼（ＣｕＳ０４・斑２０）０．００７％、硫
酸鉄（ＦｅＳ０４・７ＱＯ）０．００１％、塩化マンガ
ン（ＭｎＣ１２・４日２０）０．０００８％、硫酸亜鉛
（ＺｎＳ０４・７４０）０．０００２％、ｐＨ７．４か
ら成る培地、１００の‘を分狂殺菌した５００泌三角フ
ラスコへ、Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓｇａｌｉｌａｅｕ
ｓＫＥ３０３株の斜面寒天培養から１白金耳ずつ接種し
、２８００にて４報時間、ロータリーシェーカー上で振
濠培養を行い種母を作成した。

次いで上記培地組成中、大豆粉を３％増量した発酵生産
培地５０の‘を分狂殺菌した５００地三角フラスコ１５
００本へ、上記種母培養を１の【ずつ接種し、２８℃に
てロータリーシェーカー（２１びｐｍ）上で２餌時間振
濠培養を行った。

１５００本のフラスコを３００本ずつ５群に分け、第１
群のフラスコへはごーロドマイシノンの５００山夕／私
メタノール溶液をフラスコ当り２の‘添加（最終基質濃
度：２０山タ′の【）した。

同様に、ご−ィソロドマイシノン、８−ロドマイシノン
、ｙーロドマイシノン、８ーピロマィシノン溶液を各群
に添加し、更に２４時間培養を継続した。各群毎に培養
液を集め、遠０分離によって菌体を取得し、夫々の生成
物は２そのアセトンで２回繰返し抽出した。

アセトン抽出液を１／３に減圧濃縮した後、約１そのク
ロロホルムで色素を再抽出し、濃縮乾固させた。この粗
変換物を５０の‘のメタノールに溶解、不溶物を遠心分
離によって除去した後、上蒲をセフアデツクスＬＨ一２
０カラム（４０×３．５肌）に加え、メタノールで熔出
した。

最初の色素区分を分取し、膿縦乾固した後、少量のクロ
ロホルムに溶解し、プレパラティブシリカゲル薄層（キ
ーゼルグール６岬Ｆ２５４、 メルク社製）上に加え、
クロロホルム−メタ／ール混液（２０：１）にて展開し
た。変換生成物の主バンドをかきとり、クロロホルムー
メタノール（５：１）で溶出し、濃縮乾固して、赤色の
粗標品を得た。本標品を１０肌のトルェンに溶解し、２
ｍＭ ＥＤＴＡを含む１０舷の０．１Ｍ酢酸緩衝液（ｐ
Ｈ３．０）と混合振糧し、酸性水層へ、変換生成物を転
落させた。水層をＩＮＮａＯＨでｐＨ７．０に調節した
後、再びクロロホルムで抽出を行い、三硝で乾燥させて
から少量に減圧濃縮した。濃縮液へｎーヘキサンを添加
し、赤色沈殿を生ぜしめ、炉過後、アプテルデシケータ
ー中で真空乾燥して純品を得た。各群の培養液を同じ操
作により処理、精製を行い、ごーロドマイ−シンＲＤＣ
５７の９、ごーイソロドマイシンＲＤＣ２７の９、Ｂー
ロドマイシンＲＤＣ４８の９、ｙーロドマイシンＲＤＣ
１８の９、ｙーロドマイシンＲＤＲｓｌ４の９、８−ピ
ロマィシンＲＤＣ２４の９が得られた。

【図面の簡単な説明】

第１〜第６図は本発明のロドサミン群抗生物質ごーロド
マイシンＲＤＣ、ごーイソロドマイシンＲＤＣ、Ｂ−ロ
ドマイシンＲＤＣ、ｙーロドマイシンＲＤＣ、ｙーロド
マイシンＲＤＲｓ及びＰーピロマィシンＲＤＣの紫外部
可視部吸収スペクトル（Ａは、０‐ＩＮ ＨＣＩ−９０
％メタノール、Ｂは○‐ＩＮＮａＯＨ−９０％メタノー
ル及びＮは中性９０％メタ／ールのスペクトル）、第７
〜第１２図はそれぞれ上記の順のＩＲスペクトル（ＫＢ
ｒタブレット）及び第１３図〜第１８図はそれぞれ上記
の順のＰＭ旧スペクトル図（ＣＤＣ１３）。 図 船 図 Ｎ 船 図 の 球 図 寸 球 図 山 船 第６図 第１３図 図 ト 船 図 〇 舷 図 〇 船 図 〇 船 図 Ｆ 燕 図 Ｎ 沫 第１４図 第１５図 第１６図 第１７図 図 め 船

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 次の一般式（I） ▲数式、化学式、表等があります▼ ただし、式中、Ｒ＿１、Ｒ＿２、Ｒ＿３、Ｒ＿４の組合
   せはそれぞれ水素原子、 ▲数式、化学式、表等があります▼ カルボ メトキシ基、水酸基 又は、 水酸基、 ▲数式、化学式、表等があります▼ カルボ メトキシ基、水酸基又は、 水素原子、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 水酸 基、水酸基又は、 水素原子、水素原子、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 水酸基又 は、水素原子、水素原子、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 水酸基又 は、水酸基、 ▲数式、化学式、表等があります▼ 水酸 基、水素原子を表わす、 で示されるロドマイシン群抗生物質の新規誘導体ε−ロ
   ドマイシンＲＤＣ、ε−イソロドマイシンＲＤＣ、β−
   ロドマイシンＲＤＣ、γ−ロドマイシンＲＤＣ、γ−ロ
   ドマイシンＲＤＲｓまたはβ−ピロマイシンＲＤＣただ
   し、上式中Ｒはロドサミン、Ｄは２−デオキシフコース
   、ＣはシネルロースおよびＲｓはロデイノースのそれぞ
   れ糖残基を示す。 またはそれらの酸付加塩。 ２ ストレプトミセス属に属し、次の構造式（II）▲数
   式、化学式、表等があります▼ ただし式中Ｒ＿１Ｒ′＿２Ｒ′＿３Ｒ＿４σ−ロドマイ
   シノン−Ｈ−ＯＨ−ＣＯＯＣＨ＿３−ＯＨσ−イソロド
   マイシノン−ＯＨ−ＯＨ−ＣＯＯＣＨ＿３−ＯＨβ−ロ
   ドマイシノン−Ｈ−ＯＨ−ＯＨ−ＯＨγ−ロドマイシノ
   ン−Ｈ−Ｈ−ＯＨ−ＯＨβ−ピロマイシノン−ＯＨ−Ｏ
   Ｈ−ＯＨ−Ｈで示される、ロドマイシン・アグリコン類
   をそれぞれε−ロドマイシンＲＤＣ、ε−イソロドマイ
   シンＲＤＣ、β−ロドマイシンＲＤＣ、γ−ロドマイシ
   ンＲＤＣ、γ−ロドマイシンＲＤＲｓ又はβ−ピロマイ
   シノンＲＤＣただし上式中Ｒはロドサミン、Ｄは２−デ
   オキシフコース、Ｃはシネルロース、およびＲｓはロデ
   イノースのそれぞれ糖残基を示す。 に変換する能力を有する微生物の培養液中へ、前記ロド
   マイシノン・アグリコン類を添加し、微生物変換により
   一般式（I）で示されるロドマイシン群抗生物質に変換
   するか、またはそれらを造塩反応によつて造塩する、新
   規ロドマイシン群抗生物質又はそれらの酸付加塩の製造
   法。