NO318786B1

NO318786B1 - Pyrrolo(2,3-d)pyrimidinforbindelser samt anvendelse derav og farmasoytisk sammensetning

Info

Publication number: NO318786B1
Application number: NO20006454A
Authority: NO
Inventors: Todd Andrew Blumenkopf; Matthew Frank Brown; Mark Edward Flanagan; Paul Steven Changelian
Original assignee: Pfizer Prod Inc
Priority date: 1998-06-19
Filing date: 2000-12-18
Publication date: 2005-05-09
Also published as: NO20006454D0; JP3497823B2; AU758427B2; CN1305479A; PL345118A1; KR100452054B1; ATE270673T1; GT199900091A; HN1999000083A; EP1087971B1; JP2002518394A; HRP20000886A2; ID27595A; HK1036800A1; YU79700A; DE69918552D1; OA11571A; EA006034B1; CA2335186A1; HUP0103472A2

Description

Foreliggende oppfinnelse vedrører pyrrolo(2,3-d)pyrimidinforbindelser samt anvendelse derav og farmasøytisk sammensetning.

Foreliggende oppfinnelse ved rører følgelig pyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelser som er inhibitorer av protein tyrosin kinaser, så som enzymet Janus kinase 3 (også referert til nedenfor som JAK3) og som følgelig er nyttig terapi som immun suppresive midler for organtransplantater, lupus, multippel sklerose, reumatoid artritt, psoriasis, type I diabetes og komplikasjoner ved diabetes, canser, astma, atopisk dermatitt, autoimmune tyroid forstyrrelser, ulcerativ kolitt, Chrons sykdom, Alzheimers sykdom, leukemi og andre indikasjoner hvor immunsuppresjon vil være ønskelig.

JAK3 er et medlem av Janus familien av protein tyrosin kinaser. Til tross for at de andre medlemmene av denne familien blir uttrykt av omtrent alle vev er JAK3 ekspresjonen begrenset av hematopoetiske celler. Dette er i samsvar med den vesentlige rollen ved signalisering gjennom reseptorer for IL-2, IL-4, IL-7, IL-9 og IL-15 ved ikke-kovalent assosiasjon med JAK3 med gammakjeden som er felles for disse flerkjedereseptorene. XSCID pasientpopulasjoner er blitt identifisert med sterkt reduserte nivåer av JAK3 protein eller med genetiske defekter i forhold til felles gammakjede og dette tyder på at immunsuppresjonen er et resultat av signalblokkering gjennom JAK3 reaksjonsveien. Dyrestudier har foreslått at JAK3 ikke bare spiller en kritisk rolle i B og T lymfocytt modning, men at JAK3 er konstitutivt nødvendig for å opprettholde T-celle funksjonen. Modulering av immunaktiviteten gjennom denne nye mekanismen kan vise seg å være nyttig for behandling av T-celle proliferative forstyrrelser så som transplantat avstøtning og autoimmune sykdommer.

Foreliggende oppfinnelse vedrører en forbindelse ifølge formelen

eller farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvori

R<1> er en gruppe ifølge formelen

m er 0,1, 2 eller 3;

n er 0,1, 2 eller 3;

X er CR7R8, oksygen eller NR<6>;

B og D er hver CR<7>R8;

A og E er hver CR<7>R8; og

R<6> er valgt fra gruppen bestående av hydrogen og (CrCeJalkyl;

R<7> og R<8> er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-C6)alkyl, hydroksy, karboksy, ((Ci-C6)alkyl)2amino, (Ci-C6)acylamino, (Cr C6)acyl(Ci-C6)alkylamino, (CrCe)alkoksyacyl, ((Ci-Ce) alkyl)2aminoacyl, aminoacyl, trifluormetyl, (C6-Cio)aryl, (C6-Cio)aryl(Ci-C6)alkyl, hydroksy(Ci-C6)alkyl, (d-CeJalkoksyfCi-CeJalkyl, R13CO(Ci-Ce)alkyl, hvor R<13> er R<20>O eller R20R2<1>N hvori

R20 og R2<1> er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-C6)alkyl,

R<2> og R<3> er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, halogen, cyano, nitro, (C2-C6)alkenyl, (C2-C6)alkynyl, og (Ci-C6)alkyl hvor alkylgruppen er eventuelt substituert med en til tre grupper valgt fra (C6-Cio)aryl; eller R<2> og R<3> er hver uavhengig (Cs-Cgjheteroaryl eller (Ce-C^Jaryl hvor heteroaryl og arylgrupper er eventuelt substituert med en til tre halogen, (Ci-CeJ-alkyl, trifluormetyl, amino, amino(Ci-C6)alkyl,

(CrC6)alkylamino(Ci-C6)alkyl, hydroksy(Ci-C6)alkyl, (Ci-C6)alkoksy, (Ci-C6)alkoksykarbonyl, (Ci-C6)alkylsulfonylamino;

med den forutsetningen at når R2 og R<3> er hver uavhengig hydrogen eller (CrC6)-alkyl, kan R<1> ikke være usubstituert piperidinyl;

med den forutsetningen at når R2 og R3 er hver hydrogen, kan R<1> ikke være usubstituert morfolinyl eller pyrrodinyl; og

med den forutsetningen at når R2 og R3 er hver hydrogen R<1> kan R<1> ikke være piperazinyl.

Foreliggende oppfinnelse vedrører også farmasøytisk akseptable syreaddisjonsalter av forbindelser ifølge formel I. Syrer som blir anvendt for å fremstille farmasøytisk akseptable syreaddisjonsalter av ovennevnte baseforbindelser ifølge denne oppfinnelsen er de som danner ikke-toksiske syreaddisjonsalter, dvs. salter inneholdende farmakologisk akseptable anioner så som hydroklorid, hydrobromid, hydroioid, nitrat, sulfat, bisulfat, fosfat, fosfatsyre, acetat, Eaktat, sitrat, sitratsyre, tartrat, bitartrat, suksinat, maleat, fumarat, glukonat, sakkarat, benzoat, metan-sulfonat, etansulfonat, benzensulfonat, p-toulensulfat og pamoat, [dvs. 1,1'-metylen-bis-(2-hydroksy-3-naftoat)] salter.

Oppfinnelsen vedrører også baseaddisjonsalter ifølge formel I. Kjemiske baser som kan bli anvendt som reagenser for å danne farmasøytisk akseptable basesalter av forbindelsene ifølge formel I som er sure av natur, er de som danner ikke-toksiske basesalter med slike forbindelser. Slike ikke-toksiske basesalter innbefatter, men er ikke begrenset til, de som er avledet fra slike farmakologisk akseptable kationer så som alkali metall kationer (for eksempel kalium og natrium) og jordalkaliske metallkationer (for eksempel kalsium og magnesium), ammonium eller vannoppløselige amintilsetningssalter, så som N-metylglukamin-(meglumin) og lavere alkanolammonium og andre basesalter av farmasøytisk akseptable organiske aminer.

Betegnelsen "alkyl" som anvendt heri, angir dersom ikke annet er angitt, mettede enverdige hydrokarbonrester med lineære, forgrenede eller sykliske grupper eller kombinasjoner derav.

Betegnelsen "alkoksy" som anvendt heri, innbefatter O-alkyl grupper hvori "alkyl" er som definert ovenfor.

Betegnelsen "halogen" som anvendt heri angir dersom ikke annet er angitt fluor, klor, brom eller jod.

Forbindelser ifølge oppfinnelsen kan inneholde dobbeltbindinger. Når slike bindinger er tilstede, eksisterer forbindelsene ifølge oppfinnelsen som cis- og trans konfigurasjoner og som blandinger derav.

Dersom ikke annet er angitt kan alkyl og alkenyl gruppene referert til heri, samt alkylgruppene til andre grupper referert til heri (for eksempel alkoksy), være lineære eller forgrenede, og de kan også være sykliske (for eksempel syklopropyl, syklobutyl, syklopentyl, sykloheksyl eller sykloheptyl) eller være lineære eller forgrenede og inneholde sykliske grupper. Dersom ikke annet er angitt innbefatter halogen fluor, klor, brom og jod.

Forbindelser ifølge formel (I) kan bli administrert i en farmasøytisk akseptabel form enten alene eller i kombinasjon med en eller flere ytterligere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med antiinflammatoriske midler. Disse midlene kan innbefatte, men er ikke begrenset til, syklosporin A (for eksempel Sandimmune® eller Neoral®, rapamycin, FK-506 (tacrolimus), leflunomid, deoksyspergualin, mykofenolat (for eksmepel Cellcept®), azatioprin (for eksempel Imuran®), daclizumab (for eksempel Zenapax®). OKT3 (for eksempel Orthoclone®), AtGam, aspirin, acetaminofen, ibuprofen, naproksen, piroksikam og inflammatoriske steroider (for eksempel prednisolon eller deksametason). Disse midlene kan bli administrert som del av den samme eller atskilte doseringsformer via samme eller forskjellige administreringsveier, og ifølge samme eller forskjellige administreringsskjemaer ifølge standard farmasøytisk praksis.

Forbindelsene ifølge oppfinnelsen innbefatter alle konfigurasjoner av isomerene (for eksempel cis og trans isomerene) og alle optiske isomerer av forbindelsene ifølge formel I (for eksempel enantiomerer og diastereomerer) samt racemiske, diastereomere og andre blandinger av slike isomerer. Denne oppfinnelsen innbefatter også alle rotamerer av forbindelsene ifølge formel I samt scelemiske blandinger.

Foretrukne forbindelser ifølge formel I innbefatter de hvori R<2> og R<3> hver er uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-Ce)alkyl, (C5-Cgjheteroaryl eller (C6-Ci0)aryl.

Spesifikke foretrukne forbindelser ifølge formel I innbefatter følgende: 5-fluor-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin;

2-[1-(5-m-tolyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-piperidin-4-yl]-etanol;

5-(3-metyl-3H-imidazol-4-yl)-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin;

S-tl-metyl-IH-imidazoW-ylH-piperidin-l-yl^H-pyiTolop.S-dlpyrimidin;

5-(2-metyl-pyridin-4-yl)-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin;

5-klor-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin;

5-etynyl-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin;

4-piperidin-1 -yl-5-m-tolyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; og 4-(3,3-dimetyl-piperidin-1-yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin.

eller en farmasøytisk akseptabelt salt derav.

Foreliggende oppfinnelse vedrører også en farmasøytisk sammensetning for (a) behandling eller forebygging av en forstyrrelse eller tilstand valgt fra organ transplantatavstøtning, lu pus, multippel sklerose, reumatoid artritt, psoriasis, type 1 diabetes og komplikasjoner ved diabetes, cancer, astma, atopisk dermatitt, autoimmune tyroidforstyrrelser, ulcerativ kolitt, Chrons sykdom, Alzheimers sykdom, leukemi og andre autoimmune sykdommer eller (b) inhibisjon av protein tyrosin kinaser eller Janus kinase 3 (JAK3) i et pattedyr, inkludert et menneske, kjennetegnet ved at den omfatter en mengde av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, alene eller i kombinasjon med en eller flere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med anti-inflammatoriske midler, effektiv ved slike forstyrrelser eller tilstander og en farmasøytisk akseptabel bærer.

Foreliggende forbindelse vedrører også anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav alene eller i kombinasjon med et eller flere ytterligere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med anti-inflammatoriske midler, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for inhibering av protein tyrosin kinase eller Janus kinase 3 (JAK3) i et pattedyr, inkludert et menneske.

Foreliggende oppfinnelse vedrører også anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, alene eller i kombinasjon med et eller flere ytterligere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med anti-inflammatoriske midler, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling eller forebygging av en forstyrrelse eller tilstand valgt fra organ transplantatavstøtning, lupus, multippel sklerose, reumatoid artritt, psoriasis, type 1 diabetes og komplikasjoner ved diabetes, cancer, astma, atopisk dermatitt, autoimmune tyroidforstyrrelser, ulcerativ kolitt, Chrons sykdom, Alzheimers sykdom, leukemi og andre autoimmune sykdommer i et pattedyr, inkludert et menneske.

Følgende reaksjonsskjemaer illustrerer fremstilling av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse. Dersom ikke annet angitt er R<1>, R2, R<3> og R<9> i reaksjonsskjemaene og diskusjonen som følger som definert ovenfor.

I reaksjon 1 ifølge skjema 1 blir 4-klorpyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XVII omdannet til tilsvarende fobindelse ifølge formel XVI hvori R er benzensulfonyl eller benzyl, ved behandling av XVII med benzensulfonylklorid, benzylklorid eller benzylbromid i nærvær av en base, så som natriumhydrid eller kaliumkarbonat, og et polart aprotisk løsningsmiddel, så som dimetylformamid eller tetrahydrofuran. Reaksjonsblandingen blir omrørt ved en temperatur mellom omtrent 0°C til omtrent 70°C, fortrinnsvis omtrent 30°C, i en tidsperiode på mellom omtrent 1 time til omtrent 3 timer, fortrinnsvis omtrent 2 timer.

I reaksjon 2 ifølge skjema 1 blir 4-klorpyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XVI omdannet til tilsvarende 4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelse ifølge formel XV ved kobling av XVI, med en forbindelse ifølge formel R<1>H. Reaksjonen blir utført i et alkoholholdig løsningsmiddel, så som tert-butanol, metanol eller etanol eller andre organiske løsningsmidler med høyt kokepunkt, så som dimetylformamid, 1,4-dioksan eller 1,2-dikloretan ved en temperatur på mellom omtrent 60°C til omtrent 120°C, fortrinnsvis omtrent 80°C. Typiske reaksjonstider er mellom omtrent 2 timer til omtrent 48 timer, fortrinnsvis omtrent 16 timer.

I reaksjonsskjema 3 ifølge skjema 1 blir fjerning av beskyttelsesgruppen fra forbindelsen ifølge formel XV, hvori R er benzensulfonyl, for å tilveiebringe tilsvarende forbindelse ifølge formel I, utført ved behandling av XV med en alkali base så som natriumhydroksid eller kaliumhydroksid i et alkoholholdig løsningsmiddel, så som metanol eller etanol, eller blandede løsningsmidler, så som alkohol/tetrahydrofuran eller alkohol/vann. Reaksjonen blir utført ved romtemperatur i en tidsperiode på mellom omtrent 15 minutter til omtrent 1 time, fortrinnsvis 30 minutter. Fjerning av beskyttelsesgruppen fra forbindelsen ifølge formel XV, hvori R er benzyl, blir utført ved behandling av XV med natrium i ammoniakk ved en temperatur på omtrent -78°C i en tidsperiode på mellom omtrent 15 minutter til omtrent 1 time.

I reaksjon 1 ifølge skjema 2 blir 4-klorpyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen i følge formel XXI, hvori R er hydrogen eller benzensulfonat, omdannet til 4-klor-5-halo-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XX, hvori Y er klor, brom eller jod ved omsetning av XXI med N-klorsuksinimid, N-bromsuksinimid eller N-jod-suksinimid. Reaksjonsblandingen blir oppvarmet til tilbakeløp, i kloroform, i en tidsperiode på mellom omtrent 1 time til omtrent 3 timer, fortrinnsvis omtrent 1 time. Alternativt blir i reaksjon 1 ifølge skjema 2 4-klorpyrrolo[2,3-d]pyrimidin ifølge formel XXI, hvori R er hydrogen, omdannet til tilsvarende 4-klor-5-nitro-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin ifølge formel XX, hvori Y er nitro, ved omsetning av XXI med salpetersyre i svovelsyre ved en temperatur mellom omtrent -10°C tii omtrent 10°C, fortrinnsvis omtrent 0°C, i en tidsperiode på mellom omtrent 5 minutter til omtrent 15 minutter, fortrinnsvis omtrent 10 minutter. Forbindelsen ifølge formel XXI, hvori Y er nitro, blir omdannet til tilsvarende 4-klor-5-aminopyrrolo[2,3-d]-pyrimidin ifølge formel XX, hvori Y er amino, ved omsetning av XXI under forskjellige betingelser kjent for fagfolk innenfor dette området så som palladium hydrogenolyse eller tinn(IV)klorid og hydroklorid og saltsyre.

I reaksjon 2 ifølge skjema 2 blir 4-klor-5-halopyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XX, hvori R er hydrogen, omdannet til tilsvarende forbindelse ifølge formel XIX, hvori R2 er (Ci-Cs)alkyl eller benzyl, ved behandling av XX med N-butyllitium ved en temperatur på omtrent -78°C, og omsetning av dianion mellomproduktet dannet på denne måten med et alkylhalid eller benzylhalid ved en temperatur mellom omtrent -78°C til romtemperatur, fortrinnsvis romtemperatur. Alternativt blir dianionet dannet på denne måten omsatt med molekylært oksygen for å danne tilsvarende 4-klor-5-hydroksypyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelse ifølge formel XIX, hvori R<2> er hydroksy. Forbindelsen følge formel XX, hvori Y er brom eller jod og R er benzensulfonat, blir omdannet til forbindelsen ifølge formel XIX, hvori R2 er (C6-Ci2)aryl eller vinyl, ved behandling av XX med N-butyllitium, ved en temperatur på omtrent -78°C, etterfulgt av tilsetning av sinkklorid, ved en temperatur på omtrent -78°C. Tilsvarende organosink mellomprodukt dannet på denne måten bli omsatt med aryljodid eller vinyljodid i nærvær av en katalytisk mengde palladium. Reaksjonsblandingen blir omrørt ved en temperatur mellom omtrent 50°C til omtrent 80°C, fortrinnsvis omtrent 70°C, i en tidsperiode på mellom omtrent 1 time til omtrent 3 timer, fortrinnsvis omtrent 1 time.

I reaksjon 3 i følge skjema 2 blir forbindelsen ifølge formel XIX omdannet til tilsvarende forbindelse ifølge formel XVI ved behandling av XIX med N-butyllitium, litium diisopropylamin eller natriumhydrid, ved en temperatur på omtrent -78°C, i nærvær av et polart aprotisk løsningsmiddel, så som tetrahydrofuran. Det anioniske mellomproduktet dannet på denne måten, blir videre omsatt med (a) alkylhalid eller benzylhalid, ved en temperatur mellom omtrent -78°C til rom-temperatur, fortrinnsvis -78°C, når R3 er alkyl eller benzyl; (b) et aldehyd eller keton, ved en temperatur mellom omtrent -78°C til romtemperatur, fortrinnsvis -78°C, når R<3> er alkoksy; og (c) sinkklorid, ved en temperatur mellom omtrent -78°C til rom temperatur, fortrinnsvis -78°C, og tilsvarende organsink mellom-produkt dannet på denne måten blir omsatt med aryljodid eller vinyljodid i nærvær av en katalytisk mengde palladium. Resulterende reaksjonsblanding blir omrørt ved en temperatur mellom omtrent 50°C til omtrent 80°C, fortrinnsvis omtrent 70°C, i en tidsperiode på mellom omtrent 1 time til omtrent 3 timer, fortrinnsvis omtrent 1 time. Alternativt blir anionet dannet på denne måten omsatt med molekylært oksygen for å danne tilsvarende 4-klor-6-hydroksypyrrolo[2,3-d]-pyrimidin forbindelse ifølge formel XVI, hvori R<3> er hydroksy.

I reaksjon 1 ifølge skjema 3 blir 4-klorpyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XXI omdannet til tilsvarende forbindelse ifølge formel XXII, ifølge prosedyren beskrevet ovenfor i reaksjon 3 ifølge skjema 2.

I reaksjon 2 ifølge skjema 3 blir forbindelsen ifølge formel XXII omdannet til tilsvarende forbindelse ifølge formel XVI, ifølge prosedyrene beskrevet ovenfor i reaksjonene 1 og 2 ifølge skjema 3.

I reaksjon 1 ifølge skjema 4 blir 4-klorpyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XX omdannet til tilsvarende 4-aminopyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelse ifølge formel XXIV, ifølge prosedyren beskrevet ovenfor i skjema i reaksjon 2 i skjema 1.

I reaksjon 2 ifølge skjema 4 blir 4-amino-5-halopyrrolo[2,3-d]pyrimidin forbindelsen ifølge formel XXIV, hvori R er benzensulfonat og Z er brom eller jod, omdannet til tilsvarende forbindelse ifølge formel XXIII ved omsetning av XXVI med (a) arylborsyre, når R<2> er aryl, i et aprotisk løsningsmiddel, så som tetrahydrofuran eller dioksan, i nærvær av en katalytisk mengde palladium (0) ved en temperatur mellom omtrent 50°C til omtrent 100°C, fortrinnsvis omtrent 70°C, i en tidsperiode mellom omtrent 2 timer til omtrent 48 timer, fortrinnsvis omtrent 12 timer; (b) alkyner, når R<2> er alkynyl, i nærvær av en katalytisk mengde kobber (I) iodid og palladium (0), og et polart løsningsmiddel så som dimetylformamid, ved romtemperatur, i en tidsperiode på mellom omtrent 1 time til omtrent 5 timer, fortrinnsvis omtrent 3 timer; og (c) alkener eller styrener, når R2 er vinyl eller styrenyl, i nærvær av en katalytisk mengde palladium i dimetylformamid, dioksan eller tetrahydrofuran, ved en temperatur mellom omtrent 80°C til omtrent 100°C, fortrinnsvis omtrent 100°C, i en tidsperiode på mellom omtrent 2 timer til omtrent 48 timer, fortrinnsvis omtrent 48 timer.

I reaksjon 3 ifølge skjema 4 blir forbindelsen ifølge formel XXIII omdannet til tilsvarende forbindelse ifølge formel XV, ifølge prosedyren beskrevet ovenfor i reaksjon 3 ifølge skjema 2.

Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som er basiske av natur har evne til å danne en rekke forskjellige salter med forskjellige uorganiske og organiske syrer. Til tross for at slike salter må være farmasøytisk akseptable for administre-ring til dyr er det ofte ønskelig i praksis å innledningsvis isolere forbindelsen ifølge foreliggende oppfinnelse fra reaksjonsblandingen som et farmasøytisk uaksep-tabelt salt og deretter omdanne sistnevnte tilbake til fri baseforbindelse ved behandling med et alkalisk reagens og deretter omdanne sistnevnte frie base til et farmasøytisk akseptabelt syreaddisjonssalt. Syreaddisjonssaltene ifølge base-forbindelsene ifølge denne oppfinnelsen, blir lett fremstilt ved behandling av baseforbindelsen med en vesentlig ekvivalent mengde av valgt mineral eller organisk syre i et vandig løsningsmiddelmedium eller i et egnet organisk løsnings-middel så som metanol eller etanol. Ved forsiktig avdampning av løsningsmiddelet blir ønsket fast salt lett oppnådd. Ønsket syresalt kan også bli presipitert fra en løsning av den frie basen i et organisk løsningsmiddel ved tilsetning til løsningen en hensiktsmessig mineral eller organisk syre.

Forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse som er sure av natur har evne til å danne basesalter med forskjellige farmakologiske akseptable kationer. Eksempler på slike salter innbefatter alkalimetall eller jordalkaliske metallsalter, og spesielt, natrium og kaliumsalter. Disse saltene blir alle fremstilt ved konvensjonelle teknikker. Kjemiske baser som blir anvendt som reagenser for å fremstille farmasøytisk akseptable basesalter ifølge oppfinnelsen er de som danner ikke-toksiske basesalter med sure forbindelser ifølge foreliggende oppfinnelse. Slike ikke-toksiske basesalter innbefatter de som er avledet fra slike farmakologisk akseptable kationer som natrium, kalium, kalsium og magnesium osv. Disse saltene kan lett bli dannet ved behandling av tilsvarende sure forbindelser med en vandig løsning inneholdende ønskede farmakologiske akseptable kationer, og deretter avdampning av den resulterende løsningen tiltørret, fortrinnsvis under redusert trykk. Alternativt kan de også bli fremstilt ved blanding av lavere alkanolløsninger av de sure forbindelsene og ønsket alkalimetall alkoksid sammen, og deretter avdampe den resulterende løsningen til tørrhet på samme måte som før. I et hvert tilfelle blir støkiometriske mengder av reagensene fortrinnsvis anvendt for å forsikre fullstendig reaksjon og maksimale utbytter av ønsket sluttprodukt.

Sammensetningene ifølge foreliggende oppfinnelse kan bli formulert på konvensjonell måte ved anvendelse av en eller flere farmasøytisk akseptable bærere. De aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan dermed bli formulert for oral, bukal, intranasal, paraenteral (for eksempel intravenøs, intramuskulær eller subkutan) eller rektal administrering eller i en form egnet for administrering ved innåndning eller inhalering. De aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også bli formulert for vedvarende frigjøring.

For oral administrering kan de farmasøytiske sammensetningene være i form

av for eksempel tabletter eller kapsler fremstilt ved konvensjonelle midler med farma-søytisk akseptable eksipienter så som bindemidler (for eksempel pregelatinisert maisstivelse, polyvinylpyrrolidon eller hydroksypropyl metylcellulose); fyllstoff (for eksempel laktose, mikrokrystallinsk cellulose eller kalsiumfosfat); smøremidler (for eksempel magnesiumstearat, talk eller silika); oppløsningsmidler (for eksempel potetstivelse eller natrium stivelse glykolat);

eller fuktmidler (for eksempel natrium lauryl sulfat). Tablettene kan bli belagt ifølge metoder som er velkjente innenfor fagområdet. Flytende preparater for oral administrering kan for eksempel være i form av løsninger, siruper eller suspensjoner, eller de kan bli presentert som et tørt produkt for gjenopprettning med vann eller annet egnet bærer før bruk. Slike flytende preparater kan bli dannet ved konvensjonelle midler med farmasøytisk akseptable additiver, så som suspenderingsmidler (for eksempel sorbitolsirup, metylcellulose eller hydrogenerte spiselige fettstoffer); emulgeringsmidler (for eksempel lecitin eller akasi); ikke-vandige bærere (for eksempel mandelolje, oljeholdige estere eller etylalkohol); og konserveirngsmidler (for eksempel metyl eller propyl p-hydroksybenzoater eller sorbinsyre).

For bukal administrering kan sammensetningen være i form av tabletter eller

piller formulert på konvensjonell måte.

De aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan bli formulert for parenteral administrering ved injeksjon, inkludert ved anvendelse av konvensjonelle kateteriseringsteknikker eller infusjon. Formuleringer for injeksjon kan bli presentert i enhetsdoseirngsform, for eksempel, i ampuller eller i flere-dose-beholdere med tilsatt konserveringsmiddel. Sammensetningene kan være i form av suspensjoner, løsninger eller emulsjoner i oljeholdige eller vandige bærere, og kan inneholde formuleringsmidler så som suspenderingsmidler, stabiliserings-midler og/eller dispergeringsmidler. Alternativt kan det aktive ingredienset være i pulverform for gjenoppretning med en egnet bærer, for eksempel, sterilt pyrogen-fritt vann før bruk.

De aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsen kan også bli formulert i rektale sammensetninger så som suppositorier eller retensjons enemaer, for eksempel inneholdende konvensjonelle suppositoriebaser så som kakaosmør eller glycerider.

For intranasal administrering eller administrering ved inhalering, blir de aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsene hensiktsmessig levert i form av en løsning eller suspensjon fra en pumpespraybeholder som blir presset eller pumpet av pasienten, eller som en aerosolspray presentasjon fra en trykkbelastet beholder eller en forstøver, ved anvendelse av et egnet drivmiddel, for eksempel diklordifluormetan, triklorfluormetan, diklortetrafiuoretan, karbondioksid eller annen egnet gass. Når det gjelder trykkbelastet aerosol kan doseringsenheten bli bestemt ved å tilveiebringe en ventil for å levere en oppmålt mengde. Den trykkbelastede beholderen eller forstøveren kan inneholde en løsning eller suspensjon av den aktive forbindelsen. Kapsler og beholdere (dannet for eksempel fra gelatin) for anvendelse i en inhalator eller insuflator kan bli formulert inneholdende en pulverformig blanding av en forbindelse ifølge oppfinnelsen og en egnet pulverbase så som iaktose eller stivelse.

En foreslått dose av de aktive forbindelsene ifølge oppfinnelsen for oral, parenteral eller bukal administrering til et gjennomsnittelig voksent menneske for behandling av tilstander referert til ovenfor (for eksempel astma) er 0,1 til tOOOmg av det aktive ingredienset pr enhetsdose som kan for eksempel bli administrert 1 til 4 ganger pr dag.

Aerosolformuleringer for behandling av tilstander referert til ovenfor (for eksempel reumatoid artritt) i gjennomsnittelig voksent menneske blir fortrinnsvis arrangert slik at hver oppmålte dose eller "trykk" av aerosol inneholder 20 fj.g til 1000 \ xg av forbindelsen ifølge oppfinnelsen. Den totale daglige dosen med en aerosol vil være innenfor området 0,1 mg til 1000 mg. Administreringen kan foregå flere ganger daglig, for eksempel 2, 3, 4 eller 8 ganger, ved for eksempel 1, 2 eller 3 doser hver gang.

En forbindelse ifølge formel (I) administrert i en farmasøytisk akseptabel form enten alene eller i kombinasjon med en eller flere ytterligere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med antiinflammatoriske midler, midler som kan innbefatte, men er ikke begrenset til syklosporin A (for eksempel Sandimmune® eller Neoral®, rapamycin, FK-506 (tacrolimus), leflunomide, deoksypergualin, mykofenolat (for eksempel Cellcept®, azatioprin (for eksempel Imuran®), daclizumab (for eksempel Zenapax®), OKT3 (for eksempel Orthocolone®), AtGam, aspirin, aktaminofen, ibuprofen, naproksen, piroksikam og antiinflammatoriske steroider, for eksempel prednisolon eller deksametason); og slike midler kan bli administrert som del av de samme eller separate doseringsformer, via samme eller forskjellige administreringsvei, og ifølge samme eller forskjellige administreringsskjemaer ifølge standard farmasøytisk praksis.

FK506 (Tacrolimus) blir gitt oralt ved 0,10-0,15 mg/kg kroppsvekt, hver 12. time, i løpet av de første 48 timene postoperativt. Dosen blir registrert ved serum Tacrolimus utbyttenivåer.

Syklosporin A (Sandimmunoral eller intravenøs formulering eller neoral, oralløsning eller kapsler) blir gitt oralt med 5 mg/kg kroppsvekt, hver 12. time i løpet av 48 timer postoperativt. Dosen blir registrert ved blod syklosporin A utbyttenivåer.

De aktive midlene kan bli formulert for vedvarende levering ifølge metoder som er velkjente for fagfolk innenfor dette området. Eksempler på slike formuleringer finne i US patentene 3,538,214, 4,060,598, 4,173,626, 3,119,742 og 3,492,397.

Evnen som forbindelsene ifølge formel I eller deres farmasøytisk akseptable salter har når det gjelder å inhibere Janus kinase 3, og følgelig, demonstrere deres effektivitet for behandling av forstyrrelser eller tilstander kjennetegnet ved Janus kinase 3, er vist i følgende in vitro analysetester.

Biologisk analyse

JAK3 ( JH1:GST) enzymatisk analyse

JAK3 kinase analysen anvender et protein uttrykt i bakulo virus-infiserte SF9 celler (et fusjonsprotein av GST og den katalytiske domenen til human JAK3) renset ved affinitetskromatografi på glutation-sefarose. Substratet for reaksjonen er poly-glutaminsyre-tyrosin (PGT (4:1), sigma katalog # P0275), belagt på Nunc Maxi Sorp plater med 100 (ag/ml over natt ved 37°C. Morgenen etter belegging blir platene vasket tre ganger og JAK3 blir tilsatt til brønnene inneholdende 100 \ i\ kinasebuffer (50mM HEPES, pH 7.3,125 mM NaCI, 24 mM MgC12) + 0,2 uM ATP + 1 mM Na ortovanadate.) Reaksjonen forløper i 30 minutter ved romtemperatur og platene blir vasket ytterligere 3 ganger. Nivået av fosforylert tyrosin i en gitt brønn blir kvantifisert ved standard ELISA analyse ved anvendelse av et anti-fosfotyrosin antistoff (ICN PY20, eat. #69-151-1).

DND 39/ H- 4 cellulær analyse JAK3 kinase inhibitorer

DND 39/IL-4 analysen er konstruert for å finne inhibitorer av JAK3 kinase aktivitet som vil være kandidater for immunsuppresiv og/eller allergi. Analysen anvender en B-cellelinje betegnet DND39 som har hatt luciferase genet drevet av kimlinje IgE promoter stabilt integrert i et av kromosomene. Når disse cellene blir stimulert med IL-4, fosforylerer kinase JAK3, som er assosiert med IL-4 reseptoren, signaloverføreren STAT6. STAT6 bindes deretter til kimlinje IgE promoteren og begynner transkripsjon av luciferase genet. Luciferase blir målt i et lysat fra disse cellene ved anvendelse av Promega luciferase analyse reagenssystem.

Anmerkning: DND39 cellene blir dyrket i RPMI 1640 supplementert med 10% varmeinaktivert FCS, 2 mM L-glutamin og 100 enheter/ml pen./strep. Cellene bli opprettholdt fra 1x10<5> til 1x10<6> celler/ml. Splitt til 1x10<5> på fredag, og cellene vil på mandag være ved omtrent 1x10<6>. Deretter splitt 1:2 i løpet av uken som oppbevarer 200 ml i en flaske etter behov.

3x10<5> DND39 cellene blir sådd ut i 100 ul RPMI 1640 supplementert med 1% varme inaktivert FC2, 2 mM L-glutamin og 100 enheter/ml Pen/Step i en 96 brønn Vee bunnet plate (Nunc). Forbindelsene blir fortynnet i serie 1:2 i DMSO begynnende med 4 mM til 1,9 uM. I en 96 brønn polypropylenskål og som skifter tupper ved hver fortynning. Deretter blir 5 ul av hver fortynning tilsatt til 500 ul RPMI/1% serum i en 96 rør rekke. 125 ul av forbindelsesfortynninger blir tilsatt til cellene og inkubert ved 37°C, 5% C02 i en time. Etter en time blir 25 ul 25 ng/ml IL-4 tilsatt til cellene og blandet. Sluttkonsentrasjon av IL-4 er 2,5

ng/ml og sluttkonsentrasjon av forbindelsen er fra 20 uM til 156 nM. Cellene blir deretter inkubert over natt i 16-18 timer. Platen blir deretter inkubert ved 2500-3000 RPM i en bordplatesentrifuge i 5 minutter. Kultursupernatanten bli forsiktig fjernet ved utsuging med en 8 brønn maifold. 100 ul PBS med kalsium og magnesium blir tilsatt til de pelleterte cellene. Cellene blir resuspendert i PBS og overført til en Packard white OptiPlate. 100 ul packards LucLite reagens blir tilsatt til brønnene i OptiPlate.

Følgende eksempler illustrerer fremstilling av forbindelsene ifølge foreliggende oppfinnelse, men er ikke begrenset til detaljene deri. Smeltepunkter er ukorrigerte. NMR data er rapportert i deler per million (5) og blir referert til deuterium lokk signal fra prøveløsningsmiddelet (deuteriokloroform dersom ikke annet er angitt). Forskjellige reagenser ble anvendt uten ytterligere rensing. THF referert til tetrahydrofuran. DMF refererer til N,N-dimetylformamid. Lav oppløsning massespektere (LRMS) ble registrert på enten en Hewlett Packard 5989® ved anvendelse av kjemisk ionisering (ammonium), eller Fisons (eller mikro masse) atmosfærisk trykk kjemisk ionisering (APCI) plattform som anvender en 50/50 blanding av acetonitril/vann med 0,1% maursyre som ioniseringsmiddel. Rom eller omgivelsestemperatur refererer til 20-25°C.

EKSEMPEL 1

Svkloheksvl- metvl- f7H- pvrrolor2, 3- dlpyrimidin- 4- vl)- amin

METODE A

Svkloheksvl- metvl- f7H- pvrrolor2, 3- d1pvrirnidin- 4- vl- amin

En blanding av 200 mg (1,30 mmol) 4-klor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (fremstilt ifølge metoden til Davoll, J. Am. Chem. Soc, (1960), 82,131), ble produktet fra metode A (589 mg/5,21 mmol) og 3 ml tert-butanol omrørt i et forseglet rør ved 100°C i 24 timer. Reaksjonsblandingen ble tilsatt til vann, surgjort til pH 1 med

1N saltsyre (aq), vasket to ganger med dietyleter (eter) og gjort basisk til pH 14 med 1N natriumhydroksid (NaOH). Resulterende presipitat ble filtrert og tørket i vakuum for å oppnå 263 mg (88%) av tittelforbindelsen, smp. 177-180°C. <1>H

NMR (400 MHz, CDCI3): 6 1,11-1,22 (m, 1H), 1,43-1,63 (m, 4H), 1,73 (brd, 1H, J = 13,3 Hz), 1,83-1,90 (m, 4 H), 3,23 (s, 3H), 4,69 (br, 1H), 6,53 (d, 1H, J = 3,5 Hz), 7,03 (d, 1H, J = 3,5 Hz), 8,30 (s, 1H), 10,6 (br, 1H). LRMS: 231 (M+1). Tittelforbindelsene ifølge eksemplene 2-51 ble fremstilt ifølge en fremgangsmåte analog med den som er beskrevet i eksempel 1.

EKSEMPEL 2

9-( 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin- 4- vn- 2, 3. 4. 4a, 9. 9a- heksahvdro- 1H- karbazol

EKSEMPEL 3

4-( 2. 6- dimetvl- morfolin- 4- vn- 7H- pvrrolof2. 3- dlpvrimidin 2,6-dimetylmorfolin. LRMS: 233,3.

EKSEMPEL 4

4- morfolin- 4- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin

4-morfolin. LRMS: 205.

EKSEMPEL 5

4-( 2. 5- dimetvl- pvrrolidin- 1- vl)- 7H- pvrrolof2. 3- dlpyrimidin 2,5-dimetylpyrrolidin. Smeltepunkt: 227-229°C; LRMS: 216,3.

EKSEMPEL 6

4- f4- benzvl- piperidin- 1- vl)- 7H- pyrrolor2. 3- dlpvrimidin 4-benzytpiperidin. Smeltepunkt: 188-190°C; LRMS 292,4.

EKSEMPEL 7

4- fenyl- 1- f7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vn- piperidin- 4- ol 4-fenylpipeirdin-4-ol. Smeltepunkt: 201-202°C; LRMS: 294,4.

EKSEMPEL 8

1 - f1 - f7H- pvrrolor2. 3- d1pvrimidin- 4- vn- piperidin- 4- vl1- 1. 3- dihvdro benzoimidazol- 2- one

piperidin-4-yl-1,3-dihydrobenzoimidazol. Smeltepunkt: 182-184°C; LRMS: 334,4.

EKSEMPEL 9

1- fenvl- 8-( 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin- 4- vn- 1. 3. 8- triaza- spiror4l51dekan- 4-one

1- fenyl-1,3,8-triaza-spiro[4,5]dekan-4-one. Smeltepunkt: 232-234°C.

EKSEMPEL 10

4-( 3- metvl- piperidin- 1- vl)- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin 3-metylpiperidin. Smeltepunkt: 176-178°C; LRMS: 217,1.

EKSEMPEL 11

4- f3. 5- metvl- piperidin- 1- vn- 7H- pvrrolor2, 3- d1pyrimidin 3,5-dimetylpiperidin. Smeltepunkt: 258-260°C; LRMS: 231.

EKSEMPEL 12

4-( 2- metvl- piperidin- 1- vn- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin 2- metyl-piperidin. Smeltepunkt: 144-146°C; LRMS: 217,1.

EKSEMPEL 13

4- f2- etvl- piperidin- 1- vl)- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin 2-etylpiperidin. Smeltepunkt: 112-114°C; LRMS: 231.

EKSEMPEL 14 M- f7H- pvrrolor213- dlpvrimidin- 4- vH- piperidin- 2- vnmetanol piperidin-2-yl-metanol. Smeltepunkt: 135-136°C; LRMS: 232,9.

EKSEMPEL 15

1-( 7H- pvrrolor2, 3- dlpvrimidin- 4- vl)- piperidin- 3- karboksvlsvre dietylamid piperidin-3-karboksylsyre dietylamid. LRMS: 302,1.

EKSEMPEL 16

2- ri- f7H- pvrrolo[ 2. 3- dlpyrimidin- 4- vn- piperidin- 2- vll- etanol piperidin-2-yl-etanol. Smeltepunkt: 139-140°C.

EKSEMPEL 17

4- azocan- 1- vl- 7H- pyrrolof2. 3- dlPvrimidin

azapan. Smeltepunkt: 225-226°C; LRMS: 231,3.

EKSEMPEL 18

1- f7H- pvrrolof2. 3- dlpvrimidin- 4- vl)- piperidin- 3- karboksvlsvreamid piperidin-3-karboksylsyreamid. Smeltepunkt: 283-285°C.

EKSEMPEL 19

Dimetvl- ri- f7H- pvrrolor2. 3- d1pvrimidin- 4- vl)- pyrrolidin- 3- vn- amin Dimetylpyrrolidin-3-yl-amin. Smeltepunkt: 210-212°C; LRMS: 232,2.

EKSEMPEL 20

N- etvl- N- f1-( 7H- pvrrolor2, 3- dlpvrimidin- 4- vn- pvrrolidin- 3- vn- acetamid N-etylpyrrolidin-3-yl-acetamid. Smeltepunkt: 197-199°C; LRMS: 274,3.

EKSEMPEL 21 4- f2- metoksvmetvl- pvrrolidin- 1- vn- 7H- pvrrolof2l3- dlpvrimidin 2-metoksymetylpyrrolidin. Smeltepunkt: 134-135°C; LRMS: 233,2.

EKSEMPEL 22 ri- f7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- Yl)- pyrrolidin- 2- vn- metanol Pyrrolidin-2-yl-metanol. Smeltepunkt: 188-189°C; LRMS: 219,3.

EKSEMPEL 23 N- ri-( 7H- pvrrolor2, 3- dlpvrimidin- 4- vO- pvrrolidin- 3- vn- acetamid Pyrrolidin-3-yl-acetamid. Smeltepunkt: 260-261 °C; LRMS; 246,3.

EKSEMPEL 24 4- f2- propyl- piperidin- 1- vl)- 7H- pvrrolof2. 3- dlpyrimidin Propylpiperidin. Smeltepunkt: 106 -107°C; LRMS; 245,3.

EKSEMPEL 25 4- f4- metvl- p} perazin- 1- vl)- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin 4-metylpiperasin. Smeltepunkt: 141-142°C.

EKSEMPEL 26 4- piperazin- 1- yl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin Piperazin. Smeltepunkt: 164-166°C.

EKSEMPEL 27 4- azepan- 1- yl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin Azapan. Smeltepunkt: 210°C; LRMS: 217,3.

EKSEMPEL 28 1- f7H- pyrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vl)- pvrrolidin- 3- ol Pyrrolidin-3-ol. Smeltepunkt: 220-225°C; LRMS: 205,2.

EKSEMPEL 29

ri- f7H- pvrrolor2, 3- d'| pvrimidin^ 4- vh- piperidin- 3- vl1- metanol Piperidin-3-yl-metanot. Smeltepunkt: 161,5-163,5°C; LRMS: 234,3.

EKSEMPEL 30

1-( 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vh- piperidin- 4- karboksvlsvreetvlester Piperidin-4-karboksylsyreetylester. Smeltepunkt: 139-141°C; LRMS 275,3.

EKSEMPEL 31

1- f7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin- 4- vh- piperidin- 3- karboksvlsvreetvlester Piperidin-3-karboksylsyre etylester. Smeltepunkt: 139,5-141,5°C; LRMS: 275,3.

EKSEMPEL 32

2- ri-( 7H- pyrrolor2. 3- dlpvrimidin- 4- vh- piperidin- 4- vn- etanol Piperidin-4-yl-etanol. Smeltepunkt: 129-131 °C; LRMS: 265,3.

EKSEMPEL 33

4- f4- fenvl- piperidin- 1- vl)- 7H- pyrrolor2. 3- dlPvrimidin 4-fenylpiperidin. Smeltepunkt: 195<C>C; LRMS: 279.

EKSEMPEL 34

4- f4- trifluormetvl- piperidin- 1- vh- 7H- pvrrolor2. 3- dlPvrimidin 4-trifluormetylpiperidin. Smeltepunkt: 198°C; LRMS: 271.

EKSEMPEL 35

4- r4- f3- fenvl- propvl)- piperidin- 1- vn- 7H- pyrrolor2, 3- dlPvrimidrn 4-(3-fenylpropyl)piperidin. Smeltepunkt: 134°C; LRMS: 321.

EKSEMPEL 36

4-( 3. 3- dimetvl- piperidin- 1- vh- 7H- pvrrolor2. 3- dlPvrimidin 3,3-dimetylpiperidin. Smeltepunkt: 204°C; LRMS: 231.

EKSEMPEL 37

1- f7H- pvrrolor2, 3- dlpyrimidin- 4- vl)- piperidin- 3- karboksvlsvre Piperidin-3-karboksylsyre. Smeltepunkt: 159-160°C; LRMS: 307,3.

EKSEMPEL 38 1 -metvl-1 0- oksa- 4- aza- trisvklor5. 2. 1. 0% 2. 6& ldekan 1 -metyl-4-(7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-10-oksa-4-aza-trisyklo[5.2.1 ]dekan. Smeltepunkt: 251-252°C; LRMS: 271,3.

EKSEMPEL 39

1- f5- klor- 7H- pvrrolof2. 3- d1pyrimidin- 4- vn- dekahvdro- quinolin Dekahydroquinolin. Smeltepunkt: 190-192X; LRMS: 291,8.

EKSEMPEL 40

3- ri- f7H- pvrrolor2, 3- d1pvrimidin- 4- vl)- piperidin- 3- vn- propionsvre etvlester Piperidin-3-yl-propionsyre etylester. Smeltepunkt: 101-103°C; LRMS: 303,4.

EKSEMPEL 41

3- ri- f7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vl)- piperidin- 3- vll- propionsvre Piperidin-3-yl-propionsyre. Smeltepunkt: 217-219°C; LRMS: 275,3.

EKSEMPEL 42

1- f7H- pyrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vh- piperidin- 3- ol Piperidin-3-ol. Smeltepunkt: 152-154°C; LRMS: 219,3.

EKSEMPEL 43

3- ri- f7H- Pyrrolor2. 3- d1pvrimidin- 4- vn- piperidin- 3- propionamid Piperidin-3-yl-propionamid. Smeltepunkt: 212-214X; LRMS: 274,3.

EKSEMPEL 44

4- f2. 6- dimetvl- piperidin- 1- vl>- 7H- pvrrolor2. 3- d1- pvridin

2,6-dimetylpiperidin. LRMS: 231.

EKSEMPEL 45

2- ri- f7H- pvrrolor2. 3- d1pvrimidin- 4- vn- piperidin- 3- vll- propan- 2- ol Piperidin-3-yl-propan-2-ol. Smeltepunkt: 182,8-183,6°C; LRMS: 261.

EKSEMPEL 46

2- ri-( 7H- pyrrolor2. 3- d1pvrimidin- 4- vl)- piperidin- 4- vH- propan- 2- ol Piperidin^-yl-propan-2-ol. Smeltepunkt: 170,1-171,3°C; LRMS: 261.

EKSEMPEL 47

4- metvl- 1- f7H- pyrrolo[ 2. 3- dlpvrimidin- 4- vl)- piperidin- 4- ol 4-metylpiperidin4-ol. Smeltepunkt: 163,8-165,1 °C; LRMS: 233,1.

EKSEMPEL 48

3- metvl- 8- f7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin- 4- vh- 8- aza- bisvklor3. 2. noktan- 3- ol 3-metyl-8-aza-bisyklo[3.2.1]oktan-3-ol. Smeltepunkt: 142,1-143,6°C; LRMS: 259,1.

EKSEMPEL 49 2- ri- f7H- pvirolor2. 3- dlpvrimidin- 4- v1)- pviTolidin- 2- vn- propan- 2- ol Pyrrolidin-2-yl-propan-2-ol. Smeltepunkt: 173 dek; LRMS: 247,1.

EKSEMPEL 50

3- metvl- 1- f7H- pvrrolor2. 3- d1pvrimidin- 4- vh- pyrTolidin- 3- ol 3-metylpyrrolidin-3-ol. LRMS: 219.

EKSEMPEL 51

4- Pvrazol- 1- vl- 7H- pyrrolor2. 3- dlpvrimidin

Pyrazol. LRMS: 186,2.

EKSEMPEL 52

Svkloheksvl- metvl- f6- fenvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin- 4- vl)- amin Sykloheksylmetylamin.

METODE B

7- benzensulfonvl- 4- klor- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin

I en flamme-tørket flaske under nitrogen ble 780 mg 60% natriumhydrid (19,5 mmol) i mineralolje tilsatt til 30 ml dimetylformamid (DMF) og resulterende blandning ble avkjølt til 0°C. En løsning av 2,0 g (13,0 mmol) 4-klor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin i 10 ml DMF ble sakte tilsatt i løpet av en periode på 5 minutter. Reaksjonen ble omrørt ved 10 minutter hvorpå dannelse av hydrogen (H2) opphørte. Benzensulfonylklorid (1,7 ml/13,0 mmol) ble tilsatt og reaksjonen ble varmet til romtemperatur og omrørt i en time. Vann ble tilsatt og resulterende presipitat ble filtrert og tørket i vakuum for å oppnå 3,4 gram (89%) av tittelforbindelsen som et krystallinsk faststoff, smp. 163-167°C.

METODE C

7- benzensulfonvl- 4- klor- 6- fenvl- 7H- pvrrolor213- dlpyrimidin

I en flamme-tørket flaske under nitrogen ble 0,53 ml (3,79 mmol) diisopropylamin oppløst i 5 ml tetrahydrofuran (THF) og løsningen avkjølt til -78°C. n-butyllitium (3,75 mmol som en 2,5 M løsning i heksaner) ble tilsatt og den resulterende blandingen ble brakt til 0°C ved kontinuerlig omrøring i 10 minutter. Reaksjonsblandingen ble på ny avkjølt til -78°C og til denne blandingen ble det tilsatt en løsning av 1,0 gram (3,40 mmol) av produktet fra metode B i 10 ml THF over en periode på 10 min. Reaksjonsblandingen bie omrørt i en time ved -78°C hvorpå 8,2 ml (4,10 mmol) av en 0,5 M løsning av sinkklorid i THF ble tilsatt og reaksjonsblandingen ble brakt til romtemperatur og omrørt i 1 time. lodobenzen (0,46 ml/4,11 mmol) og en suspensjon av 197 mg tetrakis (trifenylfosfin) palladium i 2 ml THF ble tilsatt. Resulterende blanding ble omrørt ved tilbakeløp i 3 timer, avkjølt til romtemperatur og fordelt mellom diklormetan og vann. Det vandige laget ble surgjort med 1 N HCI og ekstrahert to ganger med diklormetan. Diklormetanlagene ble kombinert, vasket med 1 N HCI og saltvann, tørket over magnesiumsulfat (MgS04), filtrert og konsentrert i vakuum for å oppnå tittelforbindelsen. LRMS: 370,372 (M + 2).

METODE D

4- klor- 6- fenvl- 7H- pvrrolor2. 3- d1pyrimidin

Produktet fra metode C ble løst opp i 10 ml THF og til denne løsningen ble det tilsatt 5,0 ml metanol og 1,0 gram NaOH. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 15 minutter, konsentrert i vakuum og fordelt mellom en mettet vandig løsning ammoniumklorid (NH4CI) og etylacetat. Resulterende vandige lag ble ekstrahert to ganger med etylacetat. Etylacetat lagene ble kombinert, vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og konsentrert i vakuum. Råproduktet ble renset ved silika-gel kromatografi (1:5 etyl-acetat/heksan) for å oppnå 0,59 gram (76%) av tittelforbindelsen som et svakt gult fast stoff, smp. 145°C (dek.). LRMS: 230, 232 (M + 2).

METODE E

Svkloheksvl- metvl- f6- fenvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vh- amin Produktet fra metode D (50 mg / 0,218 mmol) ble omsatt med 0,12 ml N-metylsykloheksylamin (0,920 mmol) som beskrevet i metode A. Reaksjonsblandingen ble konsentrert i vakuum, metanol ble tilsatt og det resulterende presipitatet ble filtrert for å tilveiebringe 7 mg (10%) av tittelforbindelsen som et gult faststoff. <1>H NMR (400MHz, CDCI3)5:1,18-1,25 (m, 1H), 1,47-1,66 (m, 4H), 1,75-1,90 (m, 5H), 3,30 (s, 3H). 4,74 (br, 1H), 6.79 (s, 1H), 7,32-7,36 (m, 1H), 7,47-7,51 (m, 2H), 7,77 (d, 2H, J=7,9 Hz), 8,33 (s, 1H). LRMS: 307 (M + 1).

Tittelforbindelsene ifølge eksemplene 53-58 ble fremstilt ifølge en metode analog med den som er beskrevet i eksempel 52.

EKSEMPEL 53

1-( 6- fenvl- 7H- pvrrolo[ 2. 3- dlpyrimidin- 4- vl)- dekahvdro- quinolin Dekahydroquinolin. LRMS: 333,4.

EKSEMPEL 54

4-( 2- etyl- piperidin- 1- vn- 6- fenvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin 2-etylpiperidin. LRMS: 307,4.

EKSEMPEL 55

4-( 3. 3- dimeWl- piperidin- 1- vh- 6- fenvl- 7H- pvrrolor2. 3- d1pvrimidin 3,3-dimetylpiperidin. LRMS: 307,4.

EKSEMPEL 56

6- fénvl- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2, 3- dlPViimidin

Piperidin. LRMS: 279,4.

EKSEMPEL 57

4- piperidin- 1- vl- 6- thiofen- 3- vl- 7H- pvrrolof2. 3- dlpvrimidin Piperidin. LRMS: 285,4.

EKSEMPEL 58

4- piperidin- 1- vl- 6- thiofen- 2- vl- 7H- pyrrolor2. 3- d1pvrimidin Piperidin. LRMS: 285,4.

EKSEMPEL 59

Svkloheksvl- metvM6- metvl- 7H- pyrrolo[ 2. 3- dlpvrimidin- 4- vl)- amin Sykloheksylmetylamin.

METODE F

7- benzensulfonvl- 4- klor- 6- metvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin

Til en flamme-tørket flaske under N2 ble det tilsatt 0,57 ml (4,07 mmol) diisopropylamin og 0,5 ml tørr THF. Løsningen ble avkjøt til -78°C og 1,63 ml (4,08 mmol) av en 2,5 M løsning av n-butyllitium i heksaner ble tilsatt. Resulterende blanding ble brakt til 0°C og omrørt i 10 minutter. Etter avkjøling av blandingen igjen til -78°C ble en løsning av 1,0 g (3,40 mmol) av råprodukt fra metode C i 10 ml tørr THF tilsatt over en periode på 10 minutter. Den resulterende blandingen ble omrørt i 1 time hvorpå 0,28 ml (4,50 mmol) iodometan ble tilsatt. Reaksjonsblandingen ble omrørt i 2 timer, stoppet med en mettet løsning NH4CI og varmet til romtemperatur. Blandningen ble omrørt i 5 minutter, fortynnet med vann og ekstrahert 3 ganger med etylacetat. Kombinerte ekstrakter ble vasket med saltvann, tørket over MgS04, filtrert og avdampet i vakuum for å oppnå tittelforbindelsen LRMS: 308, 310 (M+2).

METODE G

4- klor- 6- metvl- 7H- pvrrolor2, 3- d1pyrimidin

Produktet fra metode F ble avbeskyttet som beskrevet i metode E. Råproduktet ble renset ved triturering med heksaner og diklormetan for å oppnå 250 mg (44%) av tittelforbindelsen som et gult faststoff. Smp 205°c dek. LRMS: 168, 170 (M+2).

METODE H

Svkloheksvl- metvl- f6- metvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vh- amin Produktet fra metode G (50 mg/0,298 mmol) ble omsatt med 100 mg (0,883 mmol) N-metylsykloheksylamin som beskrevet i metode A. Reaksjonsblandingen ble opparbeidet som i metode A med unntakelse av at etylacetat ble anvendt isteden for eter. Tittelforbindelsen (42 mg, 58% utbytte) ble oppnådd som et hvitt faststoff. Smp 221°C dek. <1>H NMR (400MHz, CDCI3) 8: 1,15-1,25 (m, 1H), 1,43-1,62 (m, 4H), 1,73 (br s, 1H, J= 13,7 Hz), 1,82-1,90 (m, 4H), 2,41 (d, 3H, J=0,8 Hz), 3,21 (s, 3H)4,63 (br s, 1H), 6,20 (s, 1H), 8,22 (s, 1H), 10,1 (brs, 1H). LRMS: 245 (M+1).

Tittelforbindelsen ifølge eksempel 60 ble fremstilt ved en metode analog med den som er beskrevet i eksempel 59.

EKSEMPEL 60

6- metvl" 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolof2, 3- d1pyrimidin

Piperidin. LRMS: 217,3.

EKSEMPEL 61

5- klor- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin

METODE I

4. 5- diklor- 7H- pvrrolof2. 3- dlpyrimidin

4-klor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (154 mg, 1,0 mmol) ble suspendert i 6,0 ml tørr diklormetan i en flamme-tørket flaske og til denne blandingen ble det tilsatt N-klorsuksinimid (147 mg, 1,1 mmol) i en porsjon. Den resulterende blandingen

ble omrørt ved rom temperatur i 18 timer, hvorpå løsningsmiddelet ble fjernet under redusert trykk. Resten ble triturert med vann og isolert ved filtrering for tilveiebringing av 137 mg (72%) av tittelforbindelsen som et grått faststoff. Smp 224-227°C (dek). LRMS: 188 8M+1).

METODE J

5- klor- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolof2. 3- dlPvrimidin

Produktet fra metode I (57 mg, 0,3 mmol) ble suspendert i 3,0 ml tert-butanol

og til denne løsningen ble det tilsatt piperidin (90 ul, 0,9 mmol) og resulterende system ble oppvarmet ved tilbakeløp i 1 time. Rekasjonsblandingen ble avkjølt ved romtemperatur og vann ble tilsatt (4,0 ml). Løsningen ble justert til pH 1

med 1 N HCI og deretter vasket med eter. Det vandige laget ble fjernet og justert til pH 12 med 2 N NaOH. Løsningen ble deretter ekstrahert 2 x 15 ml med diklormetan og kombinerte organiske stoffer vasket med vann, deretter saltvann og tørket over MgS04. Avdampning av løsningsmiddelet ga 45 mg av et gult faststoff som ble renset ved silika-gel kromatografi (3:1

etylacetat/heksaner) for tilveiebringing av 23 mg (32%) av tittelforbindelsen som et lysegult faststoff. Smp 170-172°C. <1>H NMR (400 MHz, CDCI3) 8: 1,67-1,74

(m, 6H), 3,65-3,67 (m, 4H), 7,10 (s, 1H), 8,31 (s, 1H). LRMS: 237 (M+1).

Tittelforbindelsene ifølge eksemplene 62-63 ble fremstilt ifølge en metode

analog med den som er beskrevet i eksempel 61.

EKSEMPEL 62

5- klor- 4- foktahvdro- indol- 1- vn- 7H- pvFTolof2. 3- d1pvrimidin Oktahydroindol. Smneltepunkt: 193°C; LRMS: 277,8.

EKSEMPEL 63

1- f5- klor- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 4- vn- dekahvdro- quinolin Dekahydroquinolin. Smeltepunkt: 190-192°C; LRMS: 291,8.

EKSEMPEL 64

5- fenyl- 4- piperidin- 1- vl- pvrrolo[ 2. 3- dlpyrimidin

METODE K

5- brom- 4- klor- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin

Til en omrørt løsning av 4-klor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (30 g/0,02 mol) oppløst i 75 ml kloroform ble det tilsatt 3,5 gram (0,02 mol) N-bromsuksinamid og resulterende blanding tilbakestrømmet i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur ble presipitatet fjernet ved filtrering og tørket under redusert trykk for tilveiebringing av 4,1 gram (89%) av tittelforbindelsen. <1>H NMR (400 MHz) (CDCI3) 8: 7,93 (d, 1H, J= 2,8 Hz), 8,60 (s, 1H).

METODE L

7- benzensulfonvl- 5- brom- 4- klor- 7H- pyrrolor2, 3- d1pvrimidin

Til en oppslemming av produktet fra metode K (4,1 g/0,018 mol) i DMF (15 ml) og avkjølt til 0°C ble det tilsatt 1,0 g (0,025 mol) 60% natriumhydrid i mineralolje, og resulterende blandning ble omrørt ved 0°C i 15 minutter. Benzensulfonylklorid (3,2 gl 0,018 mol) ble tilsatt, reaksjonsblandingen ble varmet til romtemperatur og omrørt i 2 timer. Vann ble tilsatt (15ml) og resulterende faststoff ble fjernet ved filtrering og tørket i vakuum for tilveiebringing av 5,9 gram (89%) av tittelforbindelsen.

METODE M

7- benzensulfonvl- 5- brom- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2, 3- d1pyrimidin En blandning av 2,0 gram (5,37 mmol) av produktet fra metode L og 1,1 gram (13,4 mmol) piperidin i 10 ml tert-butanol ble oppvarmet med omrøring ved 60°C i 2 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble reaksjonsblandingen fordelt mellom diklormetan (25 ml) og vann (25 ml). Diklormetanlaget ble tørket over natriumsulfat (Na2S04) og konsentrert til tørrhet i vakuum for tilveiebringing av 2,2 gram (97%) av tittelforbindelsen. <1>H NMR (400 MHz) (CDCI3) 6: 1,63-1,72 (m, 6H), 3,54-3,57 (m, 4H), 7,53 (t, 2H, J= 2,0 Hz), 7,60 (s, 1H), 7,61 (t, 1H, J=2,0 Hz), 8,17-8,20 (m, 2H), 8,43 (s, 1H). LRMS: 422,7, 420,7 (M+1).

METODE N

5- fenvl- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2, 3- dlpyrimidin

Til en omrørt løsning av produktet fra metode M (100 mg/0,237 mmol) i 1,0 ml dioksan ble det tilsatt 32 mg (0,261 mmol) fenylborsyre og 75 mg (0,356 mmol) tribasisk kaliumfosfat etterfulgt av 7 mg (0,006 mmol) tetrakis(trifenylfosfin) palladium. Resulterende blanding ble avgasset med nitrogen og omrørt ved 100°C i 48 timer. Etter avkjøling til romtemperatur ble 1,0 ml metanol tilsatt etterfulgt av 50 mg NaOH og den nye blandingen ble omrørt ved romtemperatur i 1 time. Den resulterende blandningen ble deretter fordelt mellom diklormetan og vann, diklormetanlaget ble tørket over MgS04 og konsentrert til tørrhet i vakuum. Råproduktet ble renset ved silika-gel kromatografi (2:1 etylacetat/heksaner) som ga 13 mg (20%) av tittelforbindelsen. <1>H NMR (400 MHz) (CDCI3) 6: 1,33-1,34 (m, 4H), 1,43-1,44 (m, 2H), 3,26-3,28 (m, 4H), 7,12 (s, 1H), 7,27 (t, 1H, J= 7,2 Hz), 7,38 (t, 2H, J= 8,0 Hz), 7,45 (d, 2H, J=0,8 Hz), 8,42 (s, 1H). LRMS: 279,2 (M+1).

Tittelforbindelsene ifølge eksemplene 65-77 ble fremstilt ifølge en metode analog med den som er beskrevet i eksempel 64.

EKSEMPEL 65

5- fklor- 4- fluor- fenvlM- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlPvrimimdin Piperidin. LRMS: 331,8.

EKSEMPEL 66

5- f4- fluor- fenyl)- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin Piperidin. LRMS: 297.

EKSEMPEL 67

5-( 4- klor- fenvn- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin Piperidin. LRMS: 313.

EKSEMPEL 68

5-( 3. 5- bis- trifluormetvl- fenvn- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pyrrolor2. 3- d1pvrimidin

Piperidin. LRMS: 415,4.

EKSEMPEL 69

4- piperidin- 1- vl- 5- o- tolvl- 7H- pvrrolor2, 3- dlpvrimidin Piperidin. LRMS: 293,4.

EKSEMPEL 70

4- piperidin- 1- vl- 5- p- tolvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin Piperidin. LRMS: 293,4.

EKSEMPEL 71

5- f4- metoksv- fenvh- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin Piperidin. LRMS: 309,4.

EKSEMPEL 72

4- piperidin- 1- vl- 5- f3- trifluormetvl- fenvl)- 7H- pvrrolor2. 3- d1pyrimidin Piperidin. LRMS: 347,4.

EKSEMPEL 73

5- f3- klor- fenvl)- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin Piperidin. LRMS: 427,8.

EKSEMPEL 74

3-( 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin- 5- vl) benzosvre etvlester Piperidin. LRMS: 465,4.

EKSEMPEL 75

2r3- f4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrimidin- 5- vl)- fenvn- propan- 2- ol Piperidin. LRMS: 451,4.

EKSEMPEL 76

4- f2- metvl- piperidin- 1- vn- 5- m- tolvl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin 2-metylpiperidin. LRMS: 307,2.

EKSEMPEL 77

4- azepan- 1- vl- 5- m- tolvl- 7H- pvrolor2, 3- dlpyrimidin

Azepan. LRMS: 307,2.

EKSEMPEL 78

METODE O

4- piperidin- 1- yl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpvrirnidin- 5- karbonitril

Til en omrørt løsning av 4-klor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin-5-karbonitril {54mg/0,3mmol), fremstilt ifølge metoden til Townsend, et al., J. Am. Chem. Soc, 1969, 91, 2102) suspendert i 3,0 ml tert-butanol, ble det tilsatt piperidin (59 ul/0,60 mmol). Den resulterende blandingen ble deretter oppvarmet ved tilbakeløp i 2,5 timer og etter avkjøling til romtemperatur ble den overført til en skilletrakt og fortynnet med eter (20 ml). Løsningen ble ekstrahert 2 x 10 ml med 1N HCI, kombinerte vandige lag ble justert til pH 7 med 2N kaliumhydroksid (KOH) løsning som dannet et presipitat som ble samlet ved filtrering, vasket med vann og tørket under redusert trykk for å tilveiebringe 29 mg (42%) av tittelforbindelsen som et fargeløst faststoff. Smp 209-211°C; <1>H NMR (400 MHz) (aceton-d6) 8: 1,72-1,74 (m, 6H), 3,72-3,79 (m, 4H), 8,12 (s, 1H), 8,29 (s, 1H). LRMS: 228 (M+1).

EKSEMPEL 79

5- etvnvl- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pyrrolor2. 3- dlpyrimidin

METODE P

4- klor- 5- iod- 7H- pyrrolo[ 2. 3- dlpyrimidin

Til en omrørt løsning av 4-klor-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin (30g/0,02 mol) oppløst i 80 ml kloroform, ble det tilsatt 4,5 gram (0,02 mol) N-iodsuksinimid og den resulterende blandingen ble oppvarmet ved tilbakeløp i 1 time. Etter avkjøling til romtemperatur ble presipitatet fjernet ved filtrering og tørket under redusert trykk for tilveiebringing av 4,6 gram (82%) av tittelforbindelsen.

METODE Q

7- benzensulfonyl- 4- klor- 5- iod- 7H- pvrrolor2. 3- cnpvrimidin Tittelforbindelsen ble fremstilt som tidligere beskrevet i metode L ved anvendelse av produktet fra metode O for tilveiebringing av 5,4 gram (80%) av materialet. LRMS: 419,6 (M+1), 279,7.

METODE R

7- benzensulfonvl- 5- iod- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolo[ 2. 3- dlpyrimidin Tittelforbindelsen ble fremtilt ifølge prosedyren beskrevet i metode M ved anvendelse av produktet fra metode Q for å produsere tittelforbindelsen. LRMS: 469 (M+1), 329,1.

METODE S

7- benzensulfonyl- 4- piperidin- 1- vl- 5- trietvlsilanvletvnvl- 7H- pyrrolor2. 3-dlpyrimidin

Til en flamme-tørket flaske under nitrogen ble det tilsatt 211 mg (0,5 mmol) av produktet fra metode R, 19 mg (0,1 mmol) kobber (I) iodid og 58 mg (0,05 mmol) tetrakis(trifenylfosfin)palladium. Til denne blandingen ble det tilsatt 0,14 ml (1,0 mmol) trietylamin og 0,27 ml (1,5 mmol) trietylsilylacetylen som en løsning i 1,5 ml tørr DMF. Resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 3 timer hvorpå 5,0 ml vann ble tilsatt og blandingen ekstrahert med etylacetat. Etylacetatekstraktet ble tørket over MgS04 og konsentrert i vakuum. Resulterende råprodukt ble deretter renset ved silika-gel kromatografi (7:1 heksaner/etylacetat) for tilveiebringing av 194 mg (89%) av tittelforbindelsen. LRMS: 481 (M+1), 341.

METODE T

5- etvnvl- 4- piperidin- 1- vl- 7H- pvrrolor2. 3- dlpyrimidin

Til en omrørt løsning av produktet fra metode S (194 mg/0,40 mmol) oppløst i 2,0 ml tørr THF ble det dråpevis tilsatt 0,4 ml (0,4 mmol) av en 1 M løsning av tetrabutylammoniumfluorid i THF. Resulterende blanding ble omrørt ved romtemperatur i 10 minutter, og overført til en metanolløsning (3,0 ml) inneholdende 1 gram KOH, den nye blandingen omrørt i romtemperatur i 15 minutter og konsentrert i vakuum. Resten ble fordelt mellom vann og etylacetat, etylacetatlaget ble vasket med vann og saltvann, tørket over MgS04 og konsentrert til tørrhet i vakuum. Råproduktet ble renset ved silika-gel kromatografi (2:1 etyl acetat/heksaner) for tilveiebringing av 72mg (64%) av tittelforbindelsen som et hvitt krystallinsk faststoff. Smp 179-181 °C. <1>H NMR

(400 MHz) (CDCI3) d: 1,72 (br s, 6H), 3,20 (s, 1H), 3,82-3,83 (m, 4H), 7,47 (s,

1H), 8,35 (s, 1H). LRMS: 227 (M+1).

Claims

1. Forbindelse, karakterisert ved at den har formelen eller farmasøytisk akseptabelt salt derav, hvori R<1> er en gruppe ifølge formelen m erO, 1, 2 eller 3; n er 0,1, 2 eller 3; X er CR7R8, oksygen eller NR<6>; B og D er hver CR<7>R8; A og E er hver CR<7>R8; og R<6> er valgt fra gruppen bestående av hydrogen og (CrC6)alkyl; R7 og R<8> er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (Ci-Ce)alkyl, hydroksy, karboksy, ((CrCeJalkyl^amino, (Ci-C6)acylamino, (Ci-CeJacyKCrCeJalkylamino, (Ci-Cejalkoksyacyl, ((Ci-Ce) alkyl)2aminoacyl, aminoacyl, trifluormetyl, (C6-Cio)aryl, (C6-C10)aryl(Ci-C6)alkyl, hydroksy(Cr C6)alkyl, (CrC6)alkoksy(CrC6)alkyl, R^COfd-CeJalkyl, hvor R<13> er R<20>O eller R<20>R<21>N hvori R<2>0 og R2<1> er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (d-C6)alkyl, R2 og R<3> er hver uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, halogen, cyano, nitro, (C2-Ce)alkenyl, (C2-C6)alkynyl, og (Ci-Ce)alkyl hvor alkylgruppen er eventuelt substituert med en til tre grupper valgt fra (Ce-Cio)aryl; eller R2 og R<3> er hver uavhengig (C5-C9)heteroaryl eller (Ce-Cio)aryl hvor heteroaryl og arylgrupper er eventuelt substituert med en til tre halogen, (Ci-C6)-alkyl, trifluormetyl, amino, amino(Ci-C6)alkyl, (CrCeJalkylaminotd-CeJalkyl, hydroksy(CrC6)alkyl, (Ci-C6)alkoksy, (CrC6)alkoksykarbonyl, (Ci-C6)alkylsulfonylamino; med den forutsetningen at når R2 og R<3> er hver uavhengig hydrogen eller (CrC6)-alkyl, kan R<1> ikke være usubstituert piperidinyl; med den forutsetningen at når R2 og R<3> er hver hydrogen, kan R<1> ikke være usubstituert morfolinyl eller pyrrodinyl; og med den forutsetningen at når R<2> og R<3> er hver hydrogen, kan R<1> ikke være piperazinyl.

2. Forbindelse ifølge krav 1, karakterisert ved at R<2> og R<3> hver er uavhengig valgt fra gruppen bestående av hydrogen, (CrC6)alkyl, (C5-Csjheteroaryl eller {Ce-Ciojaryl.

3. Forbindelse, karakterisert ved at den er valgt f ra gruppen bestående av 5-fluor-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; 2-[1-(5-m-tolyl-7H-pyrrblo[2,3-d]pyrimidin-4-yl)-piperidin-4-yl]-etanol; 5-(3-metyl-3H-imidazol-4-yl)-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; 5-(1 -metyl-1 H-imidazol-4-yl)-4-piperidin-1 -yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; 5-{2-metyl-pyridin-4-yl)-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; 5-klor-4-piperidin-1-yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; 5-etynyl-4-piperidin-1 -yl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; 4-piperidin-1 -yl-5-m-tolyl-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin; og 4-(3,3-dimetyl-piperidin-1 -yl)-7H-pyrrolo[2,3-d]pyrimidin. eller en farmasøytisk akseptabelt salt derav.

4. Farmasøytisk sammensetning for (a) behandling eller forebygging av en forstyrrelse eller tilstand valgt fra organ transplantatavstøtning, lupus, multippel sklerose, reumatoid artritt, psoriasis, type 1 diabetes og komplikasjoner ved diabetes, cancer, astma, atopisk dermatitt, autoimmune tyroidforstyrrelser, ulcerativ kolitt, Chrons sykdom, Alzheimers sykdom, leukemi og andre autoimmune sykdommer eller (b) inhibisjon av protein tyrosin kinaser eller Janus kinase 3 (JAK3) i et pattedyr, inkludert et menneske, karakterisert ved at den omfatter en mengde av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, alene eller i kombinasjon med en eller flere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med anti-inflammatoriske midler, effektiv ved slike forstyrrelser eller tilstander og en farmasøytisk akseptabel bærer.

5. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav alene eller i kombinasjon med et eller flere ytterligere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med anti-inflammatoriske midler, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for inhibering av protein tyrosin kinase eller Janus kinase 3 (JAK3) i et pattedyr, inkludert et menneske.

6. Anvendelse av en forbindelse ifølge krav 1 eller et farmasøytisk akseptabelt salt derav, alene eller i kombinasjon med et eller flere ytterligere midler som modulerer immunsystemet til et pattedyr eller med anti-inflammatoriske midler, for fremstilling av et farmasøytisk preparat for behandling eller forebygging av en forstyrrelse eller tilstand valgt fra organ transplantatavstøtning, lupus, multippel sklerose, reumatoid artritt, psoriasis, type 1 diabetes og komplikasjoner ved diabetes, cancer, astma, atopisk dermatitt, autoimmune tyroidforstyrrelser, ulcerativ kolitt, Chrons sykdom, Alzheimers sykdom, leukemi og andre autoimmune sykdommer i et pattedyr, inkludert et menneske.