JPS6393798A - グリコペプチド抗生物質 - Google Patents

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 産業上の利用分野 本発明はバンコマイシン群の新規グリコペプチド抗生物
質に関する。特に本発明は抗生物質Ａ８２８４６、その
各個の成分Ａ８２８４６Ａ、Ａ８２８４６ＢおよびＡ８
２８４６Ｃ，並びに新規微生物菌株の培養による上記抗
生物質の製造に関する。

従来技術 現在多くの有益な抗生物質を入手することができるが、
人間の医薬用の改良された抗生物質を見いだすことの必
要性はなお続いている。たとえばバンコマイシンは商業
的に成功した抗生物質であって多くの生命を救った。し
かしバンコマイシンは、たとえば聴覚毒性および腎毒性
のような問題の原因となることもある。従って、バンコ
マイシンと同様の活性を有し、改善された薬物動態学的
性質、またはより副作用が少ない抗生物質が要請されで
いる。

発明の構成と効果 本発明によれば、同化しうる炭素源、窒素源および無機
塩源を含む培地中、ノカルジア・オリエンタリス（Ｎｏ
ｃａｒｄｉａ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　）　ＮＲＲＬＩ
８０９８、ＮＲＲＬ１８０９９またはＮＲＲＬＩ８１０
０を液中好気的に発酵させることにより。

大なる価値を有するグリコペプチド抗生物質を製造する
ことができることが見いだされた。本発明者らはこれら
のグリコペプチド抗生物質を任意にＡ８２８４６および
その各成分としで命名した。

抗生物質Ａ８２８４６は構造的にバンコマイシンに類似
するが、ダラム陽性菌に対する試験管内および生体内活
性、並びＥこバンコマイシンの半減期より非常に長い半
減期に起因する薬物動態学的性質が改良されたものであ
る。

Ａ８２８４６成分は本質的に次の物理的および分光学的
性質を有する。

Ａ８２８４６Ａの特性ニー 分子量：１５５６ 実験式：Ｃ７３Ｈ８９Ｎ１００２６Ｃ′ＦＡＢ−ＭＳ　
（チオグリセロール）：（Ｍ＋１）測定値１５５７．５
８０３、 計算値Ｃ７３Ｈ９ＯＮ１００２６ＣＩ！＝　１５５７．
５７１６（図４参照） ＵＶ（水〕λ　　：　２８１　ｎｍ（ｅ　５，０５２　
）。

ａＸ 基線から３００　ｎｍシフト ＩＲ（ＫＢｒ）：１７１６．１６５５．１６１１゜１５
８６．１５５２，１５０４．１４１０．１３４０．１３
１０％　１２３０．１２１２，１１３２．１０６６．１
０２８．１０１５ＣＩ１１−１　（図１参照）ＮＭＲ〔
（ＣＤ３）２ＳＯ〕二　図７参照ｐＫａ　（水）：４．
７，９．５、および（６６％ＤＭＦ）５．５．６．８．
７．９．９．４．１２．３（見掛けの分子量１５４２） Ａ８２８４６Ｂの特性ニー 分子量：１５９０ 実験式”７３Ｈ８８ＮｌＯｏ２６”２ ＦＡＢ−ＭＳ（チオグリセロール）：（Ｍ＋１）測定値
１５９１．５３１５゜ 計算値Ｃ７３Ｈ８９Ｎ１００２６Ｃ／２−１５９１．５
３２７（図５参照） ＵＶ（水）λ　　：　２８０　ｎｍ　（ｇ５，１９２　
）　。

ａＸ 基線から３００　ｎｍシフト ＩＲ（ＫＢｒ）：１６５６，１５８６，１５６２゜１５
０４．１４０３．１２６４．１２３０、１１３５、　１
１０５．　１０６５．　１０２３、１０１０１８ＣＩ”
（図２参照） ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＳＯ３：図８参照ｐＫａ　（水）
：４．６５．９．５ Ａ８２８４６Ｃの特性ニー 分子量：１５２２ 実験式：Ｃ７３Ｃ７３Ｈ９ＯＮ１０ ｏ２６ＦＡＢ−チオグリセロール）：　（Ｍ＋Ｎａ）測
定値１５４５．５９９８ 計算値Ｃ７３Ｈ（）ＯＮ１００２６Ｎａ＝　１５４５．
５９２５（図６参照） ＵＶ（水）λ　　　：　２８０ｎｍ（Ｃ５，１９８）。

ａｘ 基線から３００　ｎｍシフト ＩＲ（ＫＢｒ）：　３６００−３００４　（広い）、２
９９９．２９９１，２９５０，１６８７→１６ＳＯ（広
い）、１５８５．１５７０．１５０９．１５０３．１４
５３．１４４９．１４０２．１２１２．１１３０．１１
０２，１０６０，１０３２．１０１４ＣＩ＋−”Ｃ図３
参照） ＮＭＲ（（ＣＤ３）２ＳＯ）：図９参照ｐＫａ　（水）
：４．６．９．４ ６Ｎ塩酸による加水分解後のＡ８２８４６Ａ、Ａ８２８
４６ＢおよびＡ８２８４６Ｃのアミノ酸分析の結果は、
アスパラギン酸ならびに微量のグリシンに符合する２個
の広いピークの存在を示した。この２個のピークはアク
チノイジン性（ａｃｔｉｎｏｉｄｉｎｉｃ　）およびノ
（ンコマイシン性（ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎｉｃ　）　　
アミノ酸にの２個は、）（ノコマイシン類のグリコペプ
チド類中に存在する）に対応するものと考えられる。

相対ＮＭＲ研究により、Ａ８２８４６Ａ、Ａ８２８４６
ＢおよびＡ８２８４６Ｃがそれぞれ次の新規アミノ糖４
−ｅｐｉ−パンコサミン（３−メチル−アコサミン）を
含むことが見いだされた：Ａ８２８４６Ａの分子式はバ
ンコマイシンの分子式（Ｃ６６Ｈ７５Ｎ９０２４Ｃｊ２
）の塩素原子が１個少す＜、追加的１こバンコサミン型
アミノ糖（Ｃ７Ｈ□４ＮＯ２）要素が多い分子式に対応
する。

Ａ８２８４６Ｂの分子式は、水素原子１個が塩素原子１
個で置換されたＡ８２８４６Ａの分子式に対応する。

Ａ８２８４６Ｃの分子式は、塩素原子が水素で置換され
たＡ８２８４６Ａの分子式に対応する。

Ａ８２８４６成分は、一般的組成のバンコマイシン分子
に似でいるｈξ主として塩素含量が異なり、追加的にパ
ンコサミン組成を有する部分単位１個が存在することで
異なる新規グリコペプチド類の構造を有するものと考え
られる。

Ａ８２８４６成分は次の構造式を有すると考えられる： Ａ８２８４６Ａ：Ｘ≠ＨＹ＝ＣＩ Ａ８２８４６Ｂ：Ｘ＝ＣＩ　　Ｙ＝ＣＩＡ８２８４６Ｃ
：Ｘ＝ＨＹ＝Ｈ Ａ８２８４６化合物の糖成分の完全配置はまだ決定され
でいない。

Ａ８２８４６およびその各個の成分Ａ８２８４６Ａ、Ａ
８２８４６ＢおよびＡ８２８４６Ｃは。

これを反応させて種々の塩を形成させることができる。

これらの塩型抗生物質はすべで本発明の一部である。こ
れらのＡ８２８４６塩は、たとえばＡ８２８４６を分離
および精製するのに有用である。加つるに塩類は水に対
しで改良された溶解性を有する。

Ａ８２８４６塩は標準的塩製造法により製せられる。た
とえばＡ８２８４６を適当な酸で中和して酸付加塩を形
成させることができる。

酸付加塩は特に有用である。代表的に適当な塩は、有礪
酸または無銭酸の双方たとえば硫酸、塩酸、リン酸、酢
酸、コハク酸、クエン酸、乳酸、マレイン酸、フマル酸
、コール酸、パモン酸、粘液酸、Ｄ−グルタミン酸、ｄ
−ショウノウ酸、ゲルタール酸、グリコール酸、フタル
酸、酒石酸。

ギ酸、ラウリン酸、ステアリン酸、サリチル酸、メタン
スルホン酸、ベンゼンスルホン酸、ソルビン酸、ピクリ
ン酸、安息香酸、桂皮酸および同様の酸などのような酸
との標準的反応により形成される塩を包含する。

薬理的に許容される酸付加塩は、本発明の特に好ましい
塩類である。

抗生物質Ａ８２８４６は、適当な培地中％液中好気的条
件下にノカルジア・オリエンタリスのへ８２８４６産生
菌株を、実質的抗生物質活性が生成するまで培養するこ
とにより製造することができる。この抗生物質を、この
技術分野で理解される種々の分離および精製方法で回収
することができる。

また本発明はノカルジア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８
０９８．ノカルジア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８０９
９．ノカルジア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８１００ま
たはこれらの菌株のＡ８２８４６産生突然変異菌株、変
異菌株もしくは遺伝え 子組斐株（ｒｅｃｏｍｂｉｎａｎｔ　）から選ばれた生
物学的に純粋な培養菌株に関する。これらの微生物は、
抗生物質Ａ８２８４６を産生するので有用である。以下
便宜上、ＮＲＲＬ１８０９８菌株を培養菌株Ａ８２８４
６．ＮＲＲＬ１８０９９菌株を培養菌株Ａ８２８４６．
１およびＮＲＲＬＩ　８１００菌株を培養菌株Ａ８２８
４６．２と呼称する。培養菌株Ａ８２８４６はハイチ（
Ｈａｉｔｉ）　　の土壌試料から単離された。培養菌株
Ａ８２８４６．１は化学的突然変異誘導（ｃｈｅｍｉｃ
ａｌ　ｍｕｔａｇｅｎｅｓｉｓ　）により得られた菌株
、培養菌株Ａ８２８４６．２は培養菌株Ａ８２８４６か
ら単離された自然的変異菌株である。

培養菌株Ａ８２８４６、Ａ８２８４６．１およびＡ８２
８４６．２は、米国イリノイ州６１６０４ペオリア、ノ
ース・ユニバーシティ・ストリート１８１５在米国農務
省農業研究部ミドウェスト・ニアリア・ノーザン・リー
ジョナル・リサーチ・センター（Ｍｉｄｗｅｓｔ　Ａｒ
ｅａ　Ｎｏｒｔｈｅｒｎ　ＲｅｇｉｏｎａｌＲｅｓｅａ
ｒｃｈ　Ｃｅｎｔｅｒ　）に、１９８６年８月８日寄託
し、そのストック・カルチニア・コレクションの一部を
構成する。これらの培養菌株は、受理番号ＮＲＲＬ１８
０９８（Ａ８２８４６、親菌株）、ＮＲＲＬ１８０９９
（Ａ８２８４６．１％突然変異菌株）およびＮＲＲＬ１
８１００（Ａ８２８４６゜２、変異種菌株）とじで公的
に入手することができる。

培養菌株Ａ８２８４６．Ａ８２８４６．１およびＡ８２
８４６．２の分類学上の（ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　）研究
はリリー研究所（Ｌｉ　Ｉｌｙ　Ｒｅ５ｅａｒｃｈＬａ
ｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ　）　　のフレデリック・ピー・
メルフ（Ｆｒｅｄｅｒｉｃｋ　Ｐ、　Ｍｅｒｔｚ　）が
行なった。この研究に基づき、新規微生物を、ノカルジ
ア・オリエンタリス（Ｐｉｔｔｅｎｇｅｒ　　ａｎｄ　
Ｂｒｉｇｈａｍ　１９５６　）プリダム・アンド・ライ
オンズ（Ｐｒｉｄｈａｍ　ａｎｄＬｙｏｎｓ　）　　１
９６９年タイプ・ストレイン：ＡＴＣＣ１９７９５菌株
としで分類された〔ピツテンガー（Ｒ，Ｃ，Ｐｉｔｔｅ
ｎｇｅｒ　）およびブリガム（Ｒ，Ｂ、　Ｂｒｉｇｈａ
ｍ　）　＠ストレプトミセス・オリエンタリスｎ、ｓｐ
、、　　ザ・ソース・オブ・バンコマイシン（Ｓｔｒｅ
ｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　ｎ、　ｓｐ
、。

ｔｈｅ　５ｏｕｒｃｅ　ｏｆ　Ｖａｎｃｏｍｙｃｉｎ　
）”　　アンチバイオテックス・アンド・ケモセラビイ
（Ａｎｔ　１ｂｉｏｔ　１ｃｓａｎｄ　Ｃｈｅｍｏｔｈ
ｅｒａｐｙ　）第６巻６４２〜６４７頁（１９５６年）
〕。この分類は、下記文献に記載の研究所の直接的比較
と実験１こ基づくものである。

〔ハーキース・マニュアル・オブ・デターミネイテブ・
バクテリオロジイ（Ｂｅｒｇｅｙ’　ｓ　　Ｍａｎｕａ
　１ｏｆ　Ｄｅｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒ
ｉｏｌｏｇｙ　）第８版。

ブチャナン（Ｒ，Ｅ、　Ｂｕｃｈａｎａｎ　）　　およ
びギボンズ（Ｎ、Ｅ、　Ｇｉｂｂｏｎｓ　）編、ザ・ウ
ィリアムズ・アンドゥイルキンズ・カンパニー（Ｔｈｅ
Ｗｉｌｌｉａｍｓ　　ａｎｄ　Ｗｉｌｋｉｎｓ　Ｃｏ、
（バルチモア。

１９７４年）刊： グッドフエロウ（Ｍ、　Ｇｏｏｄｆｅｌｌｏｗ　）およ
びシャール（Ｋ、Ｐ、　５ｃｈａａｌ　）著１アイデン
テフイケイション・メゾズ・フォア・ノカルジア・アク
チノマデユラ・アンド・ロドコックス（Ｉｄｅｎｔｉ−
ｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　　ｆｏｒ　Ｎｏｃ
ａｒｄｉａ、Ａｃｔｉｎｏ　−ｍａｄｕｒａ　ａｎｄ　
Ｒｈｏｄｏｃｏｃｃｕｓ　）　＝　（アイデンテフイケ
イション・メゾズ・フォア・ミクロバイオロジスツ（Ｉ
ｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ　Ｍｅｔｈｏｄｓ　　ｆｏ
ｒＭｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｉｓｔｓ　）第２版、スキナ
ー（Ｆ、Ａ。

５ｋｉｎｎｅｒ　）およびラブロック（Ｄ、　Ｗ、　Ｌ
ｏｖｅｌｏｃｋ）編、ソサエティ・フォア・アプライド
・バクテリオロジイ・テクニカル・シリーズ（５ｏｃｉ
ｅｔｙｆｏｒ　Ａｐｐｌｉｅｄ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏ
ｇｙ　ＴｅｃｈｎｉｃａｌＳｅｒｉｅｓ　）　＆　１４
、アカデミツク・　プレス社（Ａｃａｄｅｍｉｃ　Ｐｒ
ｅｓｓ、　　Ｉｎｃ、　）、　　ニューヨーク１９７９
年刊、２６１頁））； ゴルドン（Ｒ，Ｅ、　Ｇｏｒｄｏｎ　）、バーネット（
Ｄ。

Ａ、　Ｂａｒｎｅｔｔ　）、　ハンダーハン（Ｊ、　Ｅ
、　Ｈａｎｄ−ｅｒｈａｎ　）およびパンダ（Ｃ，Ｈ，
Ｐａｎｇ　）　　著５ノヵルジア・コエリアカ、ノカル
ジア・アウトトロピカ・アンド・ザ・ノカルジン・スト
レイン（Ｎｏｃａｒｄｉａ　　ｃｏｅｌｉａｃａ、　Ｎ
ｏｃａｒｄｉａ　ａｕｔｏｔｒｓｐｈ−ｉｃａ　＊　ａ
ｎｄ　ｔｈｅ　Ｎｏｃａｒｄｉｎ　５ｔｒａｉｎ）”イ
ンターナショナル・ジャーナル・オン・システマテカル
・バクテリオロジイ（Ｉｎｔ、　Ｊ、　５ｙｓｔ、　Ｂ
ａｃｔ。

ｅｒｉｏｌ、　）第２４（１）巻５４〜６３頁（１９７
４年）： ゴルドン（Ｒ，Ｅ、　Ｇｏｒｄｏｎ　）　、　　ミシラ
（Ｓ、Ｋ。

Ｍｉｓｈｒａ）およびバーネット（Ｄ、　Ａ、　Ｂａｒ
ｎｅｔｔ　）著１サム・ビッツ・アンド・ピーセス・オ
ン・ザ・ジーナス・ノカルジア：ノヵルジア・カルネア
、ノカルジア・ワクシニイ、ノカルジア・トランスバレ
ンシス、ノカルジア・オリエンタリスおよびノカルジア
・アエロコロニケネス（Ｓｏｍｅ　Ｂｉｔｓａｎｄ　Ｐ
ｉｅｃｅｓ　ｏｆ　ｔｈｅ　Ｇｅｎｕｓ　Ｎｏｃａｒｄ
ｉａ　：　Ｎ。

Ｃａｒｎｅａｌ　Ｎ、　ｖａｃｃｉｎｉｉ、　Ｎ、　ｔ
ｒａｎｓｖａｌｅｎｓｉｓ。

Ｎ、　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ、　ａｎｄ　Ｎ、　ａｅｒ
ｏｃｏｌｏｎｉｇｅｎｅｓ）”ジャーナル・オン・ゼネ
ラル・ミクロバイオロジイ（Ｊ、　Ｇｅｎ、　Ｍｉｃｒ
ｏｂｉｏｌ、　）第１０９巻６９〜７８頁（１９７８年
）； ミシラ（Ｓ、　Ｊ、　Ｍｉｓｈｒａ　）　、　ゴルドン
（Ｒ，Ｅ。

Ｇｏｒｄｏｎ　）およびバーネット（Ｄ、　Ａ、　Ｂａ
ｒｎｅｔｔ　）著１アイデンテフイケイション・オン・
ノカルジアエ・アンド・ストレプトミセス・オン・メゾ
カル・インポータンス（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃａｔｉｏｎ
　ｏｆＮｏｃａｒｄｉａｅ　ａｎｄ　　Ｓｔｒｅｐｔｏ
ｍｙｃｅｓ　ｏｆ　ＭｅｄｉｃａｌＩｍｐｏｒｔａｎｃ
ｅ　）”　ジャーナル◆オン・クリニカル・ミクロバイ
オロジイ（Ｊ、　Ｃｌ１ｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌ、）
第１１　（６）巻７２８〜７３６頁（１９８０年）；モ
ルダルスキ（Ｈ，Ｍｏｒｄａｒｓｋａ　）　　およびモ
ルダルスキ（Ｍ、　Ｍｏｒｄａｒｓｋｉ　）　　著１ケ
モタキソノミク・キャラクターズ・アンド・クラシフイ
ケイション・オン・サム・ノカルジオホルム・バクテリ
ア（Ｃｈｅｍｏｔａｘｏｎｏｍｉｃ　Ｃｈａｒａｃｔｅ
ｒｓ　ａｎｄＣｌａｓｓｉｆｉｃａｔｉｏｎ　　ｏｆ　
　Ｓｏｍｅ　　ＮｏｃａｒｄｉｏｆｏｒｍＢａｃｔｅｒ
ｉａ）”　ジャーナル・オン・ゼネラル・ミクロバイオ
ロジイ（Ｊ、　Ｇｅｎ、　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ　
）第７１巻７７〜８６頁（１９７２年）：およびジップ
（Ｒ８５ｈｉｎｏｂｕ　）　　およびカワト（Ｍ。

Ｋａｗａｔｏ　）　”オン・ストレプトミセス・アエロ
コロニゲネスｎｏｖ、　ｓｐ、ホーミング・ザ・セカン
ダリイ・コロニーズ・オン・ザ・エアリアル・マイセリ
ア（Ｏｎ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ａｅｒｏｃｏｌ
ｏｎｉｇｅｎｅｓｎｏｖ、　ｓｐ、、　Ｆｏｒｍｉｎｇ
　ｔｈｅ　５ｅｃｏｎｄａｒｙＣｏｌｏｎｉｅｓ　ｏｎ
　ｔｈｅ　Ａｅｒｉａｌ　　Ｍｙｃｅｌｉａ　）”　ボ
タニカル・マガジン・トウキヨウ（Ｂａｔ、　Ｍａｇ。

Ｔｏｋｙｏ　）第７３巻２１３〜２１６頁（１９６０年
）〕 分類方法 ストレプトミセス属に属する種の特性検定のため、以下
１こ述べる方法は、ザ・インターナショナル・ストレプ
トミセス・プロジェクト（ｔｈｅＩｎｔｅｒｎａｔｉｏ
ｎａｌ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　Ｐｒｏｊｅｃｔ（
ＩＳＰ））　　により推奨される方法〔シャーリング（
Ｅ、Ｂ、　Ｓｈｉｒｌｉｎｇ　）およびゴツトリーブ（
Ｄ。

Ｇｏｔｔｌｉｅｂ　）著１メソズ・フォア・キャラクタ
リゼイション・オン・ストレプトミセス・スピーシス（
Ｍｅｔｈｏｄｓ　ｆｏｒ　Ｃｈａｒａｃｔｅｒｉｚａｔ
ｉｏｎ　ｏｆＳｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　５ｐｅｃｉｅ
ｓ　）”インターナショナル・ジャーナル・オン・シス
テマチック・バクテリオロジイ（Ｉｎｔ、　Ｊ、　５ｙ
ｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ、　）第１巻３１３〜３４
０頁（１９６６年）〕、ノカルジア属の種の分類特性は
、ゴルドン、バーネット。

ハンダーハンおよびバング（Ｇｏｒｄｏｎ、　Ｂａｒｎ
ｅｔｔ。

Ｈａｎｄｅｒｈａｎ　ａｎｄ　Ｐａｎｇ）　　（上記文
献〕により推奨される方法である。

形態学的特性は、光学顕微鏡を用いて研究を行なった。

胞子表面外観を研究するため走査電子顕微鏡（ＳＥＭ）
を用いた。

リファムピンおよびリゾチームに対する抵抗性は、ゴル
ドンにより推奨される方法により測定した〔ゴルドン（
Ｒ，Ｅ、　Ｇｏｒｄｏｎ　）およびパーネット（Ｄ、　
Ａ、　Ｂａｒｎｅｔｔ　）　著１リジスタンＸ０．／−
・リファムピン・アンド・リゾチーム・オン・ストレイ
ンズ・オン・サム・スピーシズ・オン・ミクロバクテリ
ウム・アンド・ノカルジア・アズ・ア・タキソノミツク
・ツール（Ｒｅ５ｉｓｔａｎｃｅ　ｔ。

Ｒｉｆａｍｐｉｎ　ａｎｄ　　Ｌｙｓｏｚｙｍｅ　ｏｆ
　５ｔｒａｉｎｓ　ｏｆＳｏｍｅ　　５ｐｅｃｉｅｓ　
ｏｆ　Ｍｙｃｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｎｄＮｏｃａｒ
ｄｉａ　ａｓ　ａ　Ｔａｘｏｎｏｍｉｃ　Ｔｏｏｌ　）
”インターナショナル・ジャーナル・オン・システマチ
ック・バクテリオロジイ（Ｉｎｔ、　Ｊ、　５ｙｓｔ、
　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ。

）第２７（３）巻１７６〜１７８頁（１９７７年）〕。

色名を指定するため、Ｉ　５ＣＣ−ＮＢＳセントロイド
・カラー・チャート（Ｃｅｎｔｒｏｉｄ　Ｃｏ１ｏｒＣ
ｈａｒｔｓ　）　・　標準試料Ａ２１０６　（ワシント
ンＤ。

Ｃ９米国商務省標準局（Ｎａｔｉｏｎａｌ　Ｂｕｒｅａ
ｕ　ｏｆＳｔａｎｄａｒｄｓ　）　（１９５８年））、
およびカラー・ハーモニイ・マニュアル（Ｃｏ１ｏｒ　
ＨａｒｍｏｎｙＭａｎｕａｌ）第４版（イリノイ州シカ
ゴ在コンテナー・コーポレイション・オン・アメリカ（
ＣｏｎｔａｉｎｅｒＣｏｒｐｏｒａｔｉｏｎ　ｏｆ　Ａ
ｍｅｒｉｃａ　）　（１９５８年））を用いた。

メラノイド色素産生（ｃｈｒｏｍｏｇｅｎｉｃｉｔｙ　
）は、ＩＳＰ　　Ａｌ（１−リプトン−酵母エキス液）
％　ｌ５ＰＡ６（ペプトン−酵母エキス鉄寒天）および
ｌ５ＰＡ７（チロシン寒天）培地を用いで決定した。

細胞全体の加水分解物中のジアミノピメリン酸（ＤＡＰ
）の異性体および炭水化物は、ベラカーら〔ベラカー（
Ｂ、　Ｂｅｃｋｅｒ　）、　レチェノ（リアー（Ｍ、　
Ｐ、　Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ　）、ゴルドン（Ｒ，Ｅ
。

Ｇｏｒｄｏｎ　）およびレチェバリアー（）（、Ａ、　
Ｌｅｃｈｅ−ｖａｌｉｅｒ）著”ラピッドΦデフアレン
ジエイジョン・ビトウイン・ノカルジア・アンド・スト
レプトミセス・パイ・ペーパー・クロマトグラフィー・
オン・ホール−セル・ハイドロリセーツ（Ｒａｐｉｄ　
Ｄｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　ｂｅｔｗｅｅｎ　Ｎ
ｏｃａｒｄｉａａｎｄ　Ｓｔｒｅｐｔｏｍｙｃｅｓ　ｂ
ｙ　Ｐａｐｅｒ　Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａｐｈｙｏｆ　
Ｗｈｏｌｅ−ｃｅｌｌ　Ｈｙｄｒｏｌｙｓａｔｅｓ　）
”　アプライド・ミクロバイオロジー（Ａｐｐｌ、　Ｍ
ｉｃｒｏｂｉｏｌ　）第１２巻４２１〜４２３頁（１９
６４年）〕およびレチェバリアー〔レチェバリアー（Ｍ
、Ｐ。

Ｌｅｃｈｅｖａｌｉｅｒ　）　　”アイデンテフイケイ
ション・オン・エアロビック・アクチノミセテス・オン
・クリ二カメレ・インポータンス（Ｉｄｅｎｔｉｆｉｃ
ａｔｉｏｎｏｆ　Ａｅｒｏｂｉｃ　Ａｃｔｔｎｏｍｙｃ
ｅｔｅｓ　ｏｆ　Ｃ１ｉｎｉｃａｌＩＣ１１ｎｉｃａｌ
Ｉ　）　”ジャーナル−オン・ラホラトリイ・アンド・
クリニカル・メゾシン（Ｊ、　Ｌａｂ。

Ｃｌ１ｎ、　Ｍｅｄ、　）第７１巻９３４〜９４４頁（
１９６８年）〕のクロマトグラフィにより確定した。

ミコール酸は、マンニキン記載の技術に基づく方法によ
り試験した〔マンニキン（Ｄ、　Ｅ、Ｍｉｎｎｉ　−ｋ
ｉｎ）、ハッチンソン（１，Ｇ、　Ｈｕｔｃｈｉｎｓｏ
ｎ　）およびカルシコツト（Ａ、　Ｂ、　Ｃａ１ｄｉｃ
ｏｔｔ　）著１シンレイヤー・クロマトグラフィ・オン
・メタノリセーツ・オン・ミコリフ・アシド−コンテイ
ニング・バクテリア（Ｔｈ１ｎ−Ｌａｙｅｒ　Ｃｈｒｏ
ｍａｔｏ　−ｇｒａｐｈｙ　ｏｆ　Ｍｅｔｈａｎｏｌｙ
ｓａｔｅｓ　ｏｆ　ＭｙｃｏｌｉｃＡｃｉｄ　−Ｃｏｎ
ｔａｉｎｉｎｇ　Ｂａｃｔｅｒｉａ　）″ジャーナル・
オン・クロマトグラフィ（Ｊ、Ｃｈｒｏｍａｔｏｇｒａ
ｐｈｙ）第１８８巻２２１〜２３３頁（１９８０年）〕
。

ホスファターゼおよびウレアーゼはブラゼビク記載の方
法により試験したしプラゼビク（Ｄ、　Ｊ。

Ｂｌａｚｅｖｉｃ　）　　およびエデラー（Ｇ、　Ｍ、
　Ｅｄｅｒｅｒ　）著１プリンシプルス・オン・バイオ
ケミカル・テスラ・イン・ダイアグノスチク・ミクロバ
イオロジイ（Ｐｒ１ｎｃｉｐｌｅｓ　ｏｆ　Ｂｉｏｃｈ
ｅｍｉｃａｌ　Ｔｅ５ｔｓｉｎ　Ｄｉａｇｎｏｓｔｉｃ
　Ｍｉｃｒｏｂｉｏｌｏｇｙ）”ジョン・ウイリイ・ア
ンド・サンズ社（Ｊｏｈｎ　Ｗｉｌｅｙ　ａｎｄ５ｏｎ
ｓ、　Ｉｎｃ、　）　　ニューヨーク１９Ａ５年刊％１
３６頁〕。プロテイナーゼ活性を測定するため、ゼラチ
ン液化法を用リーな。

抗生物質１こ対する抵抗性は、ｌ５ＰＡ２寒天プレート
に接種し、そのプレート上、抗生物質感受性ディスクの
パッド法により測定した。

殿粉加水分解は、ｌ５ＰＡ４（無機塩−殿粉）寒天プレ
ート上、殿粉の存在をヨウ素で試験することにより測定
した（ブラゼビクおよびエデラー上掲参照）。

ヒップレート加水分解は、ヒップレートの加水分解をす
みやかに検出するバクト分別ディスク（Ｂａｃｔｏ　Ｄ
ｉｆｆｅｒｅｎｔｉａｔｉｏｎ　Ｄｉｓｋｓ　）を使用
することにより測定した。

培養特性 培養菌株Ａ８２８４６およびＡ８２８４６．２は、使用
するすべでの複合および限定培地によく発育する。これ
らの培養菌株はほとんどの培地上で気中菌糸体を産生ず
る。気生胞子塊の色は培地により白色または灰色である
。多くの培地上で特有の可溶性褐色色素を産生じ、裏面
は褐色ないし黄色味を帯びた白色である。

また培養菌株Ａ８２８４６．１はすべでの培地上で発育
するが、その発育は親菌株に比しでそれ程豊富ではない
。Ａ８２８４６．１はまれに気中菌糸体を産生ずる。産
生じたその菌糸体の色は白色である。数種の培地に時折
、目立たない淡褐色の可溶性色素を産生じ、裏面は褐色
ないし黄色味を帯びた白色である。

培養菌株Ａ８２８４６、Ａ８２８４６．１およびＡ８２
８４６．２の培養特性を表１に要約する。培養菌株Ａ８
２８４６とＡ８２８４６．２は、数種の培養特性だけが
異なるが、非常番こ類似しでいる。

この類似性の故に、またＡ８２８４６．２はＡ８２８４
６の自然変異種であるから、更に比較は行なわなかった
。

形態学的特性 培養菌株Ａ８２８４６．Ａ８２８４６．１およびＡ８２
８４６．２は、広範な基底菌糸体（ｓｕｂｓｔｒａｔｅ
ｍｙｃｅｌｉｕｍ　）　　を産生ずる。個別の菌糸は長
鎖状の分生子を形成しでくもの巣状の外観を有し、バー
ギイス・マニュアル・オン・デタミネイテブ・バクテリ
オロジイ（Ｂｅｒｇｅｙ’ｓ　Ｍａｎｕａｌ　ｏｆＤｅ
ｔｅｒｍｉｎａｔｉｖｅ　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌｏｇｙ、
前掲）における非ストレプトミセテスの特性としで分類
される。

すべでの培養菌株においで、胞子表面外観は平滑で円筒
状である。胞子の大きさはＡ８２８４６が１．２〜１．
３Ｘ０．４〜０．５μＭ％Ａ８２８４６．１が１，４〜
２．２Ｘ０．３〜０．４μＭである。

液中振盪条件下に発育させたとき、Ａ８２８４６は最少
の断片を現わし、Ａ８２８４６．１は広範に断片を現わ
し、Ａ８２８４６は中程度の断片を現わす。

生理学的特性 培養菌株Ａ８２８４６およびＡ８２８４６．１は、アラ
ビノース、セロビオース、デキストラン、フルクトース
、ガラクトース、グルコース、α−メチル−Ｄ−グルコ
シド、グリセロール、イノシトール、ラクトース、マル
トース、マンニトール、マンノース、メリビオース、ラ
ムノース、リボース、シュクロース、トレハロースおよ
びキシロースから酸を生成するが、アドニトール、セル
ロース、ズルシトール、エリスリトール、イヌリン、ソ
ルビトールおよびキシリトールから酸を生成しす（１゜
またＡ８２８４６はエタノール、グリコーゲン、メレチ
トース、ラフィノースおよびサリシンから酸を生成する
が、Ａ８２８４６．１は生成しない。双方の培養菌株は
アセテート、シトレート、ラクテート、マレート、オキ
サレート、プロピオネート、ピルベートおよびスクシネ
ートを利用するが、ベンゾエート、ムケートおよびター
トレートを利用しない。培養菌株Ａ８２８４６．１はブ
チレートを利用するがＡ３４８４６は利用しない。

Ａ８２８４６およびＡ８２８４６．１はカゼイン。

ヒポキサンチン、チロシン、尿素およびＤＮＡを分解す
るがアデニン、リンゴ酸カルシウムマタハキサンチンを
分解しない。双方の培養菌株は殿粉を加水分解するが、
エスクリンまたはヒップレート、還元ナイトレート、液
化ゼラチンを加水分解しない。５０℃で８時間生き残り
、カタラーゼ。

硫化水素およびホスファターゼを産生ずる。

培養菌株Ａ８２８４６およびＡ８２８４６．１は、同一
の抗生物質抵抗パターンを有する。これらは、バシトラ
シン（１０単位）、セファロチン（３０μｇ）、ゼンタ
マイシン（１０μｇ）、リンコマイシン（２μｇ）、オ
レアンドマイシン（１５μｇ）ペニシリンＧ（１０単位
〕、ストレプトマイシン（１０μｇ）、バンコマイシン
（３０μｇ）、トブラマイシン（１０μｇ）％エリスロ
マイシン（１５μｇ）、ナリジキシン酸（３０μｇ）、
ポリミキシンＢ（３００単位）、トリメトプリム（５μ
ｇ）およびスルファジアジン（３００μｇ）に対しで抵
抗性を有し、ネオマイシン（３０μｇ）、リファムピン
（５μｇ〕、テトラサイクリン（３０μｇ）、クロラム
フエコール（３０μｇ）、ノボビオシン（３０μｇ）お
よびマンデルアミン（３μｇ）に対して感受性を有する
。

Ａ８２８４６およびＡ８２８４６．１はそれぞれダラム
染色される（＋）が、抗酸性染色されない。

Ａ８２８４６はメンノイド色素を産生ずるが、八８２８
４６．１は産生じない。

細胞壁の分析 Ａ８２８４６の加水分解した全細胞は、ジアミノピメリ
ン酸のメン異性体およびその糖類、アラビノースおよび
ガラクトースを含む。この培養菌株は、ベラカー（Ｂｅ
ｃｋｅｒ　）ら（前掲）によるタイプ■細胞壁を有する
。糖パターンはタイプＡである（レツチャバリャー（Ｌ
ｅｃｈａｖａｌｉｅｒ　）前掲〕。この培養菌株はミコ
ール酸（ＬＣＮ−Ａ）を産生じない。

菌株Ａ８２８４６の同定 菌株Ａ８２８４６の化学分類学的特性および一般的培養
特性は、そのノヵルジア（Ｎｏｃａｒｄｉａ　）属トレ
ビサン（Ｔｒｅｖｉｓａｎ　）　１８８９　ヘの帰属に
矛盾しナイ〔スカーフア（Ｖ、　Ｂ、Ｄ　Ｓｋｅｒｍａ
ｎ　）。

マクガバン（Ｖ、　ＭｃＧｏｗａｎ　）　　およびスニ
ース（Ｐ、Ｈ，Ａ、　５ｎｅａｔｈ　）編１アブルーブ
ト・リスッ・オン・バクチリアル・ネームス（Ａｐｐｒ
ｏｖｅｄＬｉｓｔｓ　ｏｆ　Ｂａｃｔｅｒｉａｌ　Ｎａ
ｍｅｓ）”インターナショナル・ジャーナル・オン・シ
ズテマテカル・バクテリオロジイ（Ｉｎｔ、　Ｊ、　５
ｙｓｔ、　Ｂａｃｔｅｒｉｏｌ。

）第３０巻２２５〜４２０頁（１９８０年）〕。

ノカルジアに属する１４種〔ゴルドン（Ｇｏｒｄｏｎ　
）　、　　ミシュラ（Ｍｉｓｈｒａ　）およびバーネッ
ト（Ｂａｒｎｅｔｔ　）　　により公表（前掲）されて
いる〕およびリリー・カルチュア・コレクション（Ｌｉ
　ｆｌｙ　　ｃｕｌｔｕｒｅ　ｃｏｌｌｅｃｔｉｏｎ　
）　　から得られた５種の菌株の特性から、類似性係数
（５１ｍ１ｌａｒｉｔｙｃｏｅｆｆｉｃｉｅｎｔｓ　）
　　を計算した。ジャカード係数（ｃｏｅｆｆｉｃｉｅ
ｎｔ　　ｏｆ　　Ｊａｃｃａｒｄ　（スニース（Ｐ。

Ｈ，Ａ、　５ｎｅａｔｈ　）著１ジ・アプリケイジョン
・オン・コンピューターズ・ツウ・タキソノミイ（Ｔｈ
ｅ　　Ａｐｐｌｉｃａｔｉｏｎ　ｏｆ　　Ｃｏｍｐｕｔ
ｅｒｓ　　ｔ。

Ｔａｘｏｎｏｍｙ　）”ジャーナル・オン・ゼネラル・
ミクロバイオロジイ（Ｊ、　　Ｇｅｎ、　　Ｍｉｃｒｏ
ｂｉｏｌ−）第１７巻２０１頁（１９５７年）参照〕、
および単純符合係数（ｓｉｍｐｌｅ　ｍａｔｃｈｉｎｇ
　　ｃｏｅｆｆｉ　−ｃｉｅｎｔ　）　　（ソヵル（Ｒ
−Ｒ，５ｏｋａ！　）およびミチナー（Ｃ，Ｄ、　Ｍｉ
ｃｈｅｎｅｒ　）著１ア・スタテステヵル・メソド・フ
ォア・エバリュエーテング・システマテク・リレーショ
ンシップス（Ａ　５ｔａｔｉｓｔｉ　−ｃａｌ　　Ｍｅ
ｔｈｏｄ　　ｆｏｒ　　Ｅｖａｌｕａｔｉｎｇ　Ｓｙｓ
ｔｅｍａｔｉｃＲｅｌａｔｉｏｎｓｈｉｐｓ　）”キャ
ンザス・ユニバーシティ・サイエンス・プリテン（Ｋａ
ｎ、　　Ｕｎｉｖ、　Ｓｃｉ。

Ｂｕｌｌ、）第３８巻１４０９頁（１９５８年）参照〕
を用いた。これらの比較結果を表■に示す。

表１１：Ａ８２８４６および他のノカルジア属（Ｎｏｃ
ａｒｄｉａ　）　ｌこ属する１９種の類似性係数Ａ８２
８４６　　　　　　　　　　１００　１００Ｎ、アエロ
コロニゲネス　　　　　　　　　　　８４　　７６Ｎ、
アエロコロ＝ゲネス（Ａ４２１２５）　　　　８３　　
　７８Ｎ、オリエンタリス（Ｍ４３−０５８６５）　　
　　７８　　　７２Ｎ、オリエンタリス（Ａ５１５６８
．１）　　　　　　７８　　　　７２表■（つづき） Ｎ、オリエンタリス　　　　　　　　　　　７５６８Ｎ
、　オリエンタリス（ＭＳ−１８２１５）　　　　７３
　　６６Ｎ、　オリエンタリス（ＭＳ−１８２６０）　
　　　　７３　　６６Ｎ、　マジュラエ　　　　　　　
　　　　　　　　　　７３　６３Ｎ、ヒルスタ　　　　
　　　　　　　　　　６２６ＯＮ、アウトトロピカ　　
　　　　　　　　６２５３Ｎ、ダツソンビレイ　　　　
　　　　　　６２５ＯＮ、アマラエ　　　　　　　　　
　　　６２４６Ｎ、ブラシリエンシス　　　　　　　　
　５６４３Ｎ、バクシンシ　　　　　　　　　　　５６
４３Ｎ、　　）ランスバレンシス　　　　　　　　４８
３８Ｎ、カビアエ　　　　　　　　　　　　　４８３２
Ｎ、ペレテイエリ　　　　　　　　　　　　４８２４Ｎ
、アステロイデス　　　　　　　　　　４６２３注）米
括弧内の数字はリリー・カルチュア・コレクションから
の菌株を表わす。

注）Ｎ、アエロコロニゲネス（Ｎ、　ａｅｒｏｃｏｌｏ
ｎｉ　−ｇｅｎｅｓ　）　ｂ　Ｎ−オリエンタリス（Ｎ
−ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ）、Ｎ、マジュラエ（Ｎ、　ｍ
ａｄｕｒａｅ　）　＊　　Ｎ、ヒルスタ（Ｎ、　ｈｉｒ
ｓｕｔａ　）、　Ｎ、アウトトロピカ（Ｎ。

ａｕｔｏｔｒｏｐｈｉｃａ　）、　Ｎ、　　ダツソンビ
レイ（Ｎ。

ｄａｓｓｏｎｖｉｌｌｅｉ　）、Ｎ、アマラエ（Ｎ、　
ａｍａｒａｅ　）、Ｎ、ブラシリエンシス（Ｎ、　ｂｒ
ａｓｉｌｉｅｎｓｉｓ　）　。

Ｎ、バクシンシ（Ｎ、　ｖａｃｃｉｎｃｉ　）　、　　
Ｎ、　　トランスバレンシス（Ｎ、　　ｔｒａｎｓｖａ
ｌｅｎｓｉｓ　）、　Ｎ、カビアエ（Ｎ、　ｃａｖｉａ
ｅ　）、　Ｎ、ペレテイエリ（Ｎ。

ｐｅｌｌｅｔｉｅｒｉ）、Ｎ、　アステロイデス（Ｎ。

ａｓｔｅｒｏｉｄｅｓ　）、Ｎ、カルネア（Ｎ、　ｃａ
ｒｎｅａ）。

Ｎ、マジュラエはアクチノマジュラ（Ａｃｔｉｎｏ−ｍ
ａｄｕｒａ　）属に移されたので、これは考察から除外
した。Ｎ、アエロコロニゲネスおよびＮ、オリエンタリ
スの２種は、良好な類似性係数を有する。

Ａ８２８４６とこれら２種の実験室的比較を行なった。

比較結果を表■に示す。

表Ｉ［Ｉ：Ａ８２８４６／ｊらびにＮ、オリエンタリス
（表中、　Ｎ、ｏｒｉ、と記載）およびＮ、アエロコロ
ニゲネス（表中、Ｎ、ａｅｒ、と記載）培養物０の特性
項目　　　　Ａ８２８４６　Ｎ、ｏｒｉ　Ｎ、ａｅｒ。

気生菌糸の産生　　　　　＋　　＋　　＋気生色白　　
　　　　　　　＋　　　千　　十分朱子の産生　　　　
　　＋　　　＋　　＋胞子表面平滑　　　　　　　＋　
　　＋　　＋胞子形状円筒形　　　　　＋　　十　　−
可溶性色素の産生　　　　＋　　−− グラム（＋）　　　　　　　　＋　　　＋　　　＋抗酸
性　　　　　　　　　　−−− 断片発現　　　　　　　　　＋　　　＋　　＋カタラー
ゼの産生　　　　　＋　　　＋　　＋加水分解：エスク
リン　　　　　　＋　　＋：ヒツプレート　　−　　　
−− ：殿粉　　　　　　＋　　＋　　＋ ：　リンゴ酸カルシウム　−　　　　＋　　　＋ナイト
レートを還元　　　　　　　　　＋　　　　＋　　　　
−表■　（つづき） 分解：アデニン　　　　　　　　　−　　　　−−分解
：カゼイン　　　　　　　　＋　　　＋　　＋：ピポキ
サンチン　　　　　　＋　　　　＋　　＋：チロシン　
　　　　　　　　＋　　　　＋　　＋：尿素　　　　　
　　　　　＋　　　＋　　＋：キサンチン　　　　　　
　　−　　　　−−ゼラチン液化　　　　　　　　　　
＋　　　　十　　−ホスファターゼの産生　　　　　＋
　　　　十　　＋５０℃、８時間で生存　　　　　十　
　　　＋　　−アドニトールから酸の生成　　　　　　
　　＋　　　−アラビノース　　／Ｉ　　　　　　　＋
　　　　＋　　　→−セロビオース　　〃＋＋十 エリスリトール　７／　　　　　　　　−＋　　　　−
グルコース　　　Ｉ／＋＋＋ α−Ｍｅ−グルコシドーＩ　　　　　　　　十　　　　
　＋　　　−グリセロール　　　　〃十＋＋ イノシト−！し　　　−Ｉ　　　　　　　　　＋　　　
　　十　　　＋ラクトース　　　　　　　　　　　　　
　士　　　　＋　　　十表■（つづき） マルトースから酸の生成　　　　　＋　　　　＋、＋マ
ンニトール　　　Ｉ／＋＋＋ マンノース　　　　　　　　　　　　　　＋　　　　＋
　　　　＋メレチトース　　　Ｉ　　　　　　　　＋　
　　　　−−メリビオース　　　＝　　　　　　　　　
＋　　　　　−十ラフイノース　　　Ｉ　　　　　　　
　＋　　　　　−−ラムノース　　　　　　　　　　　
　　−ト　　　　＋　　　＋ソルビトール　　　〃−−
− トレハロース　　　　Ｉ〆　　　　　　　　　＋　　　
　　＋　　　　＋キシロース　　　　　　　　　　　　
　＋　　　　＋　　　　＋コントール　　　　　　　　
　　　−−−ベンゾエートを利用　　　　　　　　−−
−シトレート　　　　　〃＋＋＋ ムケート　　　　　・・−ｍ− スクシネート　　　Ｉ〆　　　　　　　　＋　　　　＋
　　　＋タータレート　　　−ｔ　　　　　　　　−−
−コントロール　　　　　　　　　　−−−抵抗性： 表■（つづき） バシトラシン（１０単位）十−− セファロチン（３０μｆ）　　　　　　　　十　　　十
　　　　＋ゲンタマイシン（１０μダ）＋−− リンコマイシン（２μＦ）＋＋＋ ネオマイシン（３０μｙ）　　　　　　−−−オレアン
ドマイシン（１５μｆ）　　　　＋　　　　−−ペニシ
リンＧ　（１０単位）＋＋＋ リフアンピン　（５μｙ）　　　　　　−−−ストレプ
トマイシン　（１０μｙ）　　　＋　　　　十　　　　
−テトラサイクリン（３０μｇ）　　　　　−−−トブ
ラマイシン　（１０μｇ）　　　　　＋　　　　十　　
　　−バンコマイシン　（３０μｙ）　　　　　十　　
　＋　　　　　−クロラムフェニコール（３０μｙ＞−
−−−エリスロマイシン（１５μｙ）　　　　＋　　　
　−−ナリジクス酸　（３０μｇ）　　　　　　＋　　
　　＋　　　　−ノボビオシン　（３０μｙ）　　　　
　−＋　　　　　−ポリミキシンＢ　（３００単位）＋
＋＋ａ）＋＝菌株がその特性を有する；−＝菌株がその
特性を有しない。

多数の単位特性を用いて再度、類似性係数を計算した。

その結果を表■に要約する。

表ＩＶ：Ａ８２８４６％ノカルジア・オリエンタリスお
よびノカルジア・アエロコロニゲネスノ類似性係数 Ａ　８２８４６　　　　　　　　　　１００　１００Ｎ
、オリエンタリス　　　　　　　　　　８１　　７６Ｎ
、オリエンタリスもＮ、アエロコロニケネスもその細胞
壁中にミコール酸が存在しない。ゴルドン（前掲）は、
Ｎ、オリエンタリストＮ、アエロコロニゲネスの区別を
助けるための鍵となる要点とじて３つの特性を述べでい
る。ゴルドンの要点の比較結￥■１こ示す。

表Ｖ：Ａ８２８４６．ノカルジア・オリエンタリスおよ
びノカルジア・アエロコロニゲネスノ要点特性の比較 Ａ８２８４６　　　　’　　　　　　　＋　　　　＋Ｎ
、オリエンタリス　　　　　　　＋　　　　十　　　　
　−Ｎ、アエロコロニゲネス　　　　−−＋Ａ８２８４
６は、他のいずれのノカルジア菌株の要点特性きも完全
に一致しな０が、Ａ８２８４６は、培養特性およびＮ、
オリエンタリスとの高い類似性係数の点で％　Ｎ、オリ
エンタリスへの近似性がより大である。またＡ８２８４
６は、これがグリコペプチド抗生物質を産生すると（１
う点でＮ、オリエンタリスｌこ似てむする。それ故Ａ８
２８４６は、ノカルジア・オリエンタリス（ピツテンガ
ー・アンド・ブリガム（Ｐｉｔｔｅｎｇｅｒ　ａｎｄＢ
ｒｉｇｈａｍ　）　１９５６　）　　プリダム・アンド
・リオンズ（Ｐｒｉｄｈａｍ　ａｎｄ　Ｌｙｏｎｓ、　
）　　１９６９の菌株としで分類される。Ｎ、オリエン
タリスは、アブルーブト・リスツ・オン・バクチリアル
・ネームス（前掲）中に認知されてｏするので、確実な
根拠で公表された種である。

菌 培養株Ａ８２８４６．１は、菌株Ａ８２８４６の△ 化学的に誘導された突然変異菌株である。Ａ８２８４６
．１がＡ８２８４６と異なる特性を表■に示す。

表ＶＩ：Ａ８２８４６とＡ８２８４６．１の間の差異の
比較 断片　　　　　　最少　豊富 コロニーの大きさ　　　　　　７ｍｍ　　　　５ｍｍコ
ロニーの表面　　　　　　硬　　　　　軟気性菌糸　　
　　　　　　　　豊富　　　　微量裏面の色　　　　　
　　　　暗褐色　　　淡褐色可溶性色素　　　　　　　
　　　十　　　　　−エタノールから酸の生成　　　　
　＋　　　　　　−グリコーゲン　　　・Ｉ　　　　　
　　＋　　　　　　　−メレチトース　　　　Ｉ−＋− ラフィノース　　　Ｉ／＋− サリシン　　　　　　　　　　　　　　　十　　　　　
　　−α−Ｍｅ−グルコシドを利用　　　　十　　　　
　　−グリコーゲン　　　　−Ｉ　　　　　　　　　　
＋　　　　　　　　　−メレチトール　　　Ｉ！＋− ソルボース　　　　〃＋− ブチレート　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
　　　＋またＡ８２８４６．１は、その産生ずる抗生物
質活性の量においで、Ａ８２８４６と異なる。これらの
菌株の間の他の最も明らかな差異は、Ａ８２８４６と異
なりＡ３２８４ａｌが気生菌糸体と明確な可溶性色素を
産生じな（１ことである。

培養菌株Ａ８２８４６．２は培養菌株Ａ８２８４６の自
然変異種である。それ故Ａ８２８４６．２の同定された
特性は、Ａ８２８４６のそれと本質的に同様である。Ａ
８２８４６とＡ８２８４６．２の間の主要な差異は、振
盪フラスコ中で発育させたとき、Ａ８２８４６．２培養
菌株はＡ８２８４６培養菌株より有意に多量の抗生物質
Ａ８２８４６を生産することである。

他の微生物の場合と同様に、本発明のＡ８２８４６生産
菌株、ノカルジア・オリエンタリス（Ｎｏｃａｒｄｉａ
　　ｏｒｉｅｎｔａｌｉｓ　）　　菌株ＮＲＲＬ１８０
９８、ＮＲＲＬ１８０９９およびＮＲＲＬ１８１００の
特性は、変異種に従属する。それ故これらぐ 突然変異種および変異種は、この技術分野における公知
方法Ｅこより得ることができる。たとえば変異種は自然
的選択により得ることができ、突然変異種は１種々の公
知の物理的および化学的突然変異誘導物（ｍｕｔａｇｅ
ｎ　）　、たとえば紫外線、Ｘ線。

ガンマ線およびＮ−メチル−Ｎ′−ニトロ−Ｎ−ニトロ
ソグアニジンのような化学的突然変異誘導物で処理する
ことにより得ることができる。

擾 られた方法を用ｌ／１ノカルジア・オリエンタリス菌株
を形質転換することにより開発することができる。ノカ
ルジア属とストレプトミセス属は類似しで（するので、
ストレプトミセス用に開発された形質転換法および組換
えベクターを、ノカルジア属菌株の形質転換にも使用す
ることができる。遺伝え 子組換技術を用（、ｌることにより、ノカルジア・オ△ リエンタリスが生産する抗生物質に加え、これらの菌株
を形質転換して多くの遺伝子産物を発現させることがで
きる。たとえばノカルジア・オリエンタリス菌株が通常
、感受性を有する抗生物質に対する抵抗性を付与する組
換えベクターを用１で該菌株を形質転換することができ
る。かくで得られた形質転換体は、Ａ８２８４６抗生物
質自体ばかりでなく、形質転換された細胞野生型からの
選択を可能にする抵抗性付与酵素をも生産する。更に同
様の技術を用（１、この菌株を処理して内生的抗生物質
生合成遺伝子の多くのコピーを導入し。

より多くの抗生物質収量を得るように改良することがで
きる。Ａ８２８４６生産特性を保持するノカルジア・オ
リエンタリス菌株ＮＲＲＬ１８０９８、ＮＲＲＬ１８０
９９およびＮＲＲＬ１８１００の後代（子孫）菌すなわ
ちその自然のまたは誘導された変異種、突然変異種なら
びに遺伝子組換え種は、本発明の一部を構成する。

ノカルジア、オリエンタリス培養菌株を発育１こ使用す
る培地は、多くの培地の０１ずれかであることができる
。しかし生産上の経済性、最適収量および生産、単離の
容易さのため、ある種の培地が好ましく１゜このように
たとえば大規模発酵における好ましｏ１炭水化物源は、
グルコースおよびポテトデキストリンであるが、リボー
ス、キシロース。

フルクトース、ガラクトース、マンノース、マンニトー
ル、可溶性殿粉なども使用することができる。

好ましく１窒素源は、酵素加水分解カゼインおよびミー
トペプトン類であるが、酵母エキス、酸加水分解カゼイ
ン、牛肉エキス、魚粉、肝臓粉その他も使用することが
できる。

培地中に配合することができる栄養無機塩類中、亜鉛、
ナトリウム、マグネシウム、カルシウム、アンモニウム
、クロリド、カーボネート、サルフェート、ニトレート
などのイオンを供与することができる通常の可溶性塩を
包含する。

また微生物の生長および発育のために必要な必須微量元
素を培地中に含有させるべきである。かかる微量元素は
、微生物の生長需要に適合するのに充分量で培地の他の
成分中に不純物とじて通常存在する。もし発泡が問題で
あるならば、ポリプロピレングリコールのような消泡剤
少量（すなわち０．２　ｍＱ／　Ｌ　）を、大規模発酵
培地中に加えでもよＱｌ。

Ａ８２８４６抗生物質の実質的量の生産のため、タンク
の液中好気的発酵が好ましく１゜少量の抗生物質は振盪
フラスコ培養により得ることができる。

大型タンクに胞子型の微生物を接種することに通常付随
する抗生物質生産における時間の遅れ（タイムラグ）の
故に、栄養接種物を用１７するのが好ましい。栄養接種
物は、少容量の培地に胞子形微生物または菌糸体断片を
接種し、微生物の新鮮で活性を有する生長培養物を得る
ことにより製造することができる。次（１でこの栄養接
種物を大型タンクに移す。栄養接種物培地は、より大型
の発酵のため１こ使用する培地と同様であってよＱ）が
、他の培地も適当である。

Ａ８２８４６抗生物質は、Ａ８２８４６産生菌を約２３
〜３７℃で生長させるとき生産される。

Ａ８２８４６生産のための最適温度は約３０〜３１℃で
あると考えられる。

液中好気的培養工程で通常行なわれで（するように、培
地を常套のタービン羽根車で攪拌する間、底部から容器
内に滅菌空気を吹込む。従来採用されでθまた条件下の
発淋における最大酸素吸収量は約０．２ｍＭ／Ｌ／分を
越えでいなかった。一般的には通気速度および攪拌速度
は、溶解した酸素濃度を、飽和の５０％またはそれ以上
に保持するの１こ充分にするべきである。

Ａ８２８４６抗生物質の製造は、抗生物質に感受性を有
することで知られた微生物に対する抗生物質活性を監視
するため、発酵の間、発酵液試料を試験することにより
製造を継続する。有用な供試微生物はバチルス・スブテ
イリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓｓｕｂｔｉｌｉｓ）ＡＴＣＣ
６６３３である。生物試験法は寒天−くぼみ板（ａｇａ
ｒ−ｗｅｌｌ　ｐｌａｔｅ）　　試験により行なうのが
好都合である。

液中好気的発酵条件下に製造を行ない、この技術分野に
おいで用しする方法により発酵培地からへ８２８４６抗
生物質を回収することができる。Ａ８２８４６産生微生
物の発酵の間、生成した抗生物質活性は、菌糸体および
発酵液の双方中に存在する。それ故、初めにｐＨ１０，
５１こ調節して菌糸体からＡ８２８４６を分飛し、培地
をと過しで菌糸体塊から発酵液を分離することにより、
Ａ８２８４６の最大量の回収を達成することができる。

漏逸した発酵液から、種々の方法によりＡ８２８４６を
回収することができる。好ましＱ１方法は。

漏逸した発酵液をｐＨ約７に調節し、これを陽イオン交
換樹脂、たとえばダウエックス（Ｄｏｗａｘ　）ＸＦ５
−４３２７８、ダウエックス−５０またはアンバーライ
ト（Ａｍｂｅｒｌｉｔｅ　）　　Ｉ　Ｒ−１２０に吸収
させる方法を包含する。たとえば希水酸化アンモニウム
溶液のような適当な溶媒を用ｌ／１．上記樹脂から活性
物質を溶離する。この活性分画を減圧Ｆに濃縮し、マク
ロレテイキュラー樹脂たとえばダイアイオン（Ｄｉａｉ
ｏｎ　）　ＨＰ−２０およびアンバーライトＸＡＤ−４
に吸着させ、水：イソプロパノール（９５：５）（１％
酢酸含有）のような適当な溶媒で溶難しでＡ８２８４６
を得る。

また活性物質を、水ニアセトニトリルまたは水：メタノ
ール混合物（少量の酸含有）で溶離することもできる。

Ａ８２８４６を同様の方法により、その各個の成分Ａ８
２８４６Ａ％Ａ８２８４６ＢおよびＡ８２８４６Ｃに分
離することができる。好ましむ１分離方法は、逆相シリ
カゲル（Ｃ１８またはＣ８）クロマトグラフィを包含す
る。

またＡ８２８４６源としての培地成分および菌糸体を含
む培地固体を、抽出または分離することなく好ましくは
水を除（また後、使用することができる。たとえばＡ８
２８４６を製造後、全発醇液を凍結乾燥、ドラム乾燥ま
たは共沸蒸留しで乾燥することができる。次（１で乾燥
発酵液はこれをたとえば直接飼料プレミックス中に混合
する。

Ａ８２８４６抗生物質は、グラム陽性病原菌に対して試
験管内または生体内的Ｅこすぐれた活性を有する。これ
らの抗生物質の特に予想外の特質は。

長い血清半減期である。たとえばラットに静脈内投与し
たとき、バンコマイシンは４５分の血清半減期を有する
が、Ａ８２８４６ＡおよびＡ８２８４６Ｂはそれぞれ２
．２時間の半減期を有する。

Ａ８２８４６抗生物質がある種の細菌を抑制する最小抑
制濃度（ＭＩＣ’ｓ）を表■および■ｉこ示す。表■お
よび■中のＭＩＣ’ｓは標準寒天希釈試験法で試験した
。

表■・注）スタフイロコックス・アウレウス（Ｓｔａｐ
ｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　　ａｕｒｅｕｓ　）　、スタフ
イロコックス・エビデルミデス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏ
ｃｃｕｓｅｐｉｄｅｒｍｉｄｉｓ　）、　　ストレプト
コックス・ピオゲネス（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　
ｐｙｏｇｅｎｅｓ　）、ストレプトコックス・プノイモ
ニアエ（Ｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓｐｎｅｕｍｏｎｉ
ａｅ　）、ヘモフィルス・インフルエンザエ（Ｈａｅｍ
ｏｐｈｉｌｕｓ　　１ｎｆｌｕｅｎｚａｅ　）、　エシ
ェリヒア・コリー（Ｅｓｃｈｅｒｉｃｈｉａ　ｃｏｌｉ
　）、　　タレブシエラ・プノイモニアエ（Ｋｌｅｂｓ
ｉｅｌｌａｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　）　ｓ　　プソイド
モナス・アエｌレギノサ（Ｐｓｅｕｄｏｍｏｎａｓ　ａ
ｅｒｕｇｉｎｏｓａ　）　。

表〜■・注）ストレプトコックス・サリバリス（Ｓｔｒ
ｅｐｔｏ　ｃｏｃｃｕｓ　　５ａｌｉｖａｒｉｓ　）、
　　ストレプトコックス・サングイス（Ｓ、　ｓａｎｇ
ｕｉｓ　ｌストレプトコックス・ムタンス（Ｓ、　ｍｕ
ｔａｎｓ　）。

Ａ８２８４６化合物の抗菌活性の重要な側面は、その嫌
気性菌に対する活性である。この活性を表■に示す。表
■は標準寒天−希釈試験法で試験した種々の嫌気性菌に
対するＡ８２８４６ＡおよびＡ８２８４６Ｂの活性を要
約したものである。

２４時間熟成後、終末点と解釈した。

表■注）Ｃ，デイフイシレ（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　
ｄｉｆｆｉｃｉｌｅ）、Ｃ，ベルフリンゲンス（Ｃｌｏ
ｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｐｅｒｆｒｉｎｇｅｎｓ）、Ｃ，セ
プチクム（Ｃｌｏｓｔｒｉｄｉｕｍ　ｓｅｐｔｉｃｕｍ
）、Ｅ、アエロファシェンス（Ｅｕｂａｃｔｅｒｉｕｍ
　ａｅｒｏｆａｃｉｅｎｓ　）、Ｐ。

アサッカロリテイクス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ａｓ
ａｃｃｈａｒｏ　−１ｙｔｉｃｕｓ　）、Ｐ、プレボテ
イ（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｒｅｖｏｔｉ　）、Ｐ
、パリアビリス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｖａｒｉａ
ｂｉｌｉｓ）、Ｐ、コンステララス（Ｐｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ｃｏｎｓｔｅｌｌａｔｕｓ　）、Ｐ、マグヌス
（Ｐｅｐｆｏｃｏｃｃｕｓ　ｍａｇｎｕｓ　）、Ｐ、ア
ナエロビウス（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ
　ａｎａｅｒｏｂｉｕｓ　）、Ｐ、インテルメデイウス
（Ｐｅｐｔｏｓｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｉｎｔｅｒ
ｍｅｄｉｕｓ　）、Ｐ、アクネス（Ｐｒｏｐｉｏｎｉｂ
ａｃｔｅｒｉｕｍ　ａｃｎｅｓ　）。

表■（つづき〕注） Ｂ、フラギリス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｆｒａｇｉ
ｌｉｓ　、）、Ｂ、テタイオタオミクロン（Ｂａｃｔｅ
ｒｏｉｄｅｓ　ｔｈｅｔａｉｏｔａｏｍｔｃｒｏｎう、
Ｂ、メラニ／ゲニクス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｍｅ
ｌａｎｉｎｏ−ｇｅｎｉｃｕｓ　）、Ｂ、プルガテイス
（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｖｕｌｇａｔｉｓ）、Ｂ、
コロデンス（Ｂａｃｔｅｒｏｉｄｅｓ　ｃｏｒｒｏｄｅ
ｎｓ　）、Ｆ、シムビオスム（Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉ
ｕｍ　ｓｙｍｂｉｏｓｕｍ　）、Ｆ、ネタロフォルム（
Ｆｕｓｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｎｅｃｒｏｐｈｏｒｕｍ
　）。

またＡ８２８４６抗生物質は、実験動物に実験的に誘導
した感染に対する生体内抗菌活性を示す。実験的に供試
微生物に感染させたマウスに試験化合物を２回投与した
とき、観察された活性をＥＤ５ｏ値として測定した〔供
試動物５０％を保護する有効投与量ＣＭＱ／ｋＱ）：ウ
オレン・ウィック（Ｗａｒｒｅｎ　Ｗｉｃｋ　）　　ら
著ジャーナル・オン・バタテリオロジイ（Ｊ、　Ｂａｃ
ｔｅｒｉｏｌ、　）第８１巻２３３〜２３５頁（１９６
１年）〕。例示する化合物について観察されたＥＤ５ｏ
値を表Ｘに示す。

Ｓ、アウレウス　Ｓ、ピオゲネス　Ｓ、フンイモニアエ
Ａ８２８４６Ａ　　　　Ｏ，１９０，１９０，１７Ａ８
２８４６Ｂ　　　　Ｏ，１９０，２００，１８Ａ８２８
４６Ｃ２，１８２，７１５，８７注）ａ）■／ｋｇｘ２
；感染後、１および４時間マウスに対する皮下投与量。

Ｓ、アウレウス（Ｓｔａｐｈｙｌｏｃｏｃｃｕｓ　　ａ
ｕｒｅｕｓ）、Ｓ、ピオゲネス（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃ
ｃｕｓ　ｐｙｏｇｅｎｅｓ　）、Ｓ、プノイモニアエ（
５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｐｎｅｕｍｏｎｉａｅ　
）。

抗菌活性の重要な一側面において、Ａ８２８４６抗生物
質は腎孟賢察の処置のために有用である。たとえばＡ８
２８４６ＡおよびＡ８２８４６Ｂは、ラットの腎孟腎炎
の罹患を実験的に減少させて保護すること蚤こおいてバ
ンコマイシンより有効である。この試験は、米国特許第
４，２０８，４０３号に開示されたような方法を用いて
行なわれる。

観察結果を表■に要約する。

表ＸＩ：ラットの腎孟腎炎減少試験におけるＡ８２８４
６Ａ　　　１０　　　　　８８　　　１００〃５　　　
　　　　７５　　　　　　　８８＃　　　　　　　　　
２　　　　　　　６３　　　　　　１０ＯＡ８２８４６
Ｂ　　　１０　　　　１００　　　１００〃　　　　　
　　　５　　　　　　１００　　　　　　１００〆／　
　　　　２　　　　５０　　　８８バンコマイシン　　
　１０　　　　　　　６３　　　　　１００〃５　　　
　　　　３８　　　　　　８８注）ａ）皮下投与による
１日当り２回６日間の投与量。

またＡ８２８４６抗生物質は心内膜炎に有用である。た
とえばＡ８２８４６ＡおよびＢは、実験的にカテーテル
を挿入して心内膜炎に罹患させたラットを処置すること
においてバンコマイシンと同様な効果を有する。この試
験において、ラットの右頚動脈にプラスチックカテーテ
ルを挿入し、これを右心室中に到達させて確実に固定す
ることによりラットの実験準備をする。動物を２日間安
静に保った後、供試微生物：ストレプトコックス・フェ
カリス（５ｔｒｅｐｔｏｃｏｃｃｕｓ　ｆａｅｃａｌｉ
ｓ　）　Ｘ−６６を静脈注射する。微生物力価は約５　
Ｘ　１０８／　ｍＬ、注射量は０．５　ｍＬである。

活性化合物を、感染１５分前および１２時間間隔で１４
日間、全２８回皮下投与する。治療後、動物を２日間保
持した後、心臓を切除して均質にし、希釈し、トリブチ
カーゼ大豆寒天上に板状に延ばす。計数前、板状物を４
８時間熟成する。

実験結果を表■に示す。

表ｘＩ［：ラット心内膜炎試験　におけるＡ８２８４６
ＡおよびＢの活性 Ａ８２８４６Ａ　　　２０　　　．１００　　　　１０
０Ａ８２８４６Ｂ　　　２０　　　　１００　　　１０
０バンコマイシン　　２０　　　　　　１００　　　　
　１００注）ａ）カテーテルを用い、ストレプトコック
ス・フェカリスＸ−６６で誘発させた心内膜炎試験。

ｂ）１２時間間隔で１４日間皮下注射。

ｃ）４１ｏｇドロップでき性となった動物の％。

Ａ８２８４６抗生物質の薬物製剤もまた本発明の一部で
ある。それ故この抗生物質好ましくはその薬理学的に許
容される塩類型を、菌類感染症の治療的または予防的処
置のため、経口的もしくは非経口的投与剤形に製剤する
ことができる。たとえば活性化合物を、通常の薬学的担
体または賦形剤と混合し、錠剤、カプセル剤、エリキシ
ル剤、懸濁液、シロップ剤、ウエーファスなどの細形で
使用することができる。

Ａ３２８２４抗生物質を含有する薬剤組成物は、これに
活性化合物約０．１〜９０重量％、より一般的には約１
０〜３０重量％を含有せしめる。かかる組成物は、これ
に通常の担体および賦形剤たとえばコーンスターチまた
はゼラチン、ラクトース、シュクロース、微結晶セルロ
ース、カオリン、マンニトール、リン酸二カルシウム、
塩化ナトリウムおよびアルギン酸を含有せしめることが
できる。本発明組成物に通常使用する崩壊剤は、クロス
カルメロース（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓｅ　）ナト
リウム、微結晶セルロース、コーンスターチ　／）−１
Ｊコール酸ナトリウム殿粉およびアルギン酸を包含する
。

包含することができる錠剤混合組成物は、アラビアゴム
、メチルセルロース、カルボキシメチルセルロースナト
リウム、ポリビニルピロリドン（Ｐｏｖｉｄｏｎｅ　）
　、ヒドロキシプロピルメチルセルロース、シュクロー
ス、殿粉およびエチルセルロースを包含する。

使用することができる滑沢剤は、ステアリン酸マグネシ
ウムまたは他のステアリン酸金属塩、ステアリン酸、液
状シリコーン、タルク、ワックス、油脂類およびコロイ
ド状シリカを包含する。

々バーミント、冬緑油、チェリー香料その他のような香
料を使用することができる。

投与剤型を外観上より美的にし、薬物の識別を助けるた
め、着色剤を加えるのが好ましいこともある。

静脈内＜ＩＶ）使用のため、水溶性型抗生物質を、通常
用いる静脈注射用液体に溶解し、注射により投与するこ
とができる。たとえば生理的食塩水、リンゲル液または
５％デキストロース溶液のような液体を使用することが
できる。

筋肉内投与用製剤として、化合物の適当な可溶性塩たと
えば塩酸塩の滅菌調製物を、注射用水、生理的食塩水ま
たは５％グルコース溶液のような薬学的希釈剤に溶解し
て投与することができる。

水性基質または薬学的に許容される油性基質たとえばオ
レイン酸エチルのような長鎖脂肪酸エステル中の）ｖ濁
液として、活性化合物の適当な不溶性剤型を製剤し、投
与することができる。

経口的用途のため、抗生物質の適当な塩型たとえば塩酸
塩を、蒸留水または脱イオン水中に調製した滅菌製剤は
特に有用であろう また、本発明の抗生物質の単位投与剤型は、適当な滅菌
希釈剤中、抗生物質好ましくはその塩の溶液を密閉して
封入したアンプルであることができる。単位投与剤中の
抗生物質の濃度は、抗生物質の特定の細形、その溶解性
および医師の所望する投与剤形に依存してたとえば約１
〜５０％の範囲で変えることができる。

更に上記以外の観点から、本発明は動物の感染症、特）
こグラム陽性菌番こ起因する感染症を処置する方法を提
供する。動物は微生物に感受性を有するか、または感染
するかいずれかであることができる。処置方法は当該目
的のために有効なＡ８２８４６抗生物質の量を動物に投
与することから成る。一般にＡ８２８４６抗生物質の有
効量は、約０．５〜１００Ｉｎｑ／ｋＱの投与量である
。好ましい投与量は活性化合物約１〜６ｏｍｑ／ｈｑで
ある。成人１人１日当り典型的投与量は約５０■〜約１
．０ｙである。

この方法の実施において、抗生物質を１日当り１個また
は１日当り複数個の細形で投与することができる。養生
処置は長期間、たとえば数日間または１〜６週間に渡る
投与が必要なこともある。

単位投与量または投与総量は、感染の症状および重篤度
、患者の年令および一般的健康度、患者の抗生物質に対
する耐性、ならびに感染症に含まれる１種ないし複数種
の微生物のような因子に依存する。

処置方法を実施するのに好都合な方法は抗生物質を静脈
注射（ＩＶ　１ｎｆｕｓｉｏｎ　）により投与すること
である。この方法において、抗生物質の適当な可溶性塩
の滅菌組成物を、５％デキストロース溶液のような生理
的液体中に配合し、得られた溶液をゆっくり静脈（■）
注射する。また静脈注射のピギーバック法（ｐｉｇｇｙ
−ｂａｃｋ　ｍｅｔｈｏｄ　）を採用してもよい。

他の実施態様において、本発明は（１）家禽、豚、羊お
よび牛のような動物の飼料利用効率を高める方法、（２
）家禽、豚、羊および牛のような動物の肉生産を上げる
ための生長促進法および（３）反別動物の乳汁分泌にお
ける乳生産増強方法に関する。飼料利用効率を高め、生
長を促進するため、Ａ８２８４６抗生物質を、全飼料ト
ン当り約２〜２００ｙの量で適当な飼料に配合して経口
的に投与する。肉牛のために、たとえば約１２〜３００
０ａ＋９／頭／日の割合が適当である。反別動物の乳汁
分泌における乳生産増強のための経口投与量を示せば、
１日当り約０．０４〜１６Ｍｇ／ｋｑ（体重）（または
約２５〜５０００”９／動物／日）である。

かかる観点において本発明化合物を、農業上許容される
担体を含む動物飼料プレミックス型として正規に販売す
ることができる。

本発明の実施をより完全に説明するため、以下実施例を
列挙する。

実施例ｌ Ａ８２８４６ＨＰＬＣ試験法ニー Ａ８２８４６成分のため次の分析的ＨＰＬＣ系は有用で
ある。

１、陽イオン交換樹脂カラム カラム支持：ゾルパラクンζＣＸ（４，６ｘ１５Ｑ　１
８Ｍ　）、系：傾斜溶離、Ａ：Ｂ（４：１）−Ａ：Ｂ（
１：９）、５分中、１５分間保つ。

Ａ＝ＭｅＯＨ：０．ＩＭ−ＮａＨ２ＰＯ４（１：　９　
）、Ｂ＝ＭｅＯＨ：０．９Ｍ−ＮａＨ２ＰＯ４（１：　
９　）流速：１．ＯｍＬ／分、検出：２２５ｎｍＵＶ保
持時間：儂度に依存するが、概略、へ８２８４６Ｃ＝６
．６分、Ａ８２８４６Ｂ＝８．９分、Ａ８２８４６Ａ＝
９．５分。

２、逆相カラム 米 カラム支持：ゾルパックス０ＤＳ（４，６×１５０朋）
、系：傾斜溶離、１％（ＮＨ４）Ｈ２ＰＯ４：ＣＨ３Ｃ
Ｎ、　　（９５：５　）→（１：１）、２０分中。

流速：１．０ｍＬ／分、検出：２２５ｎｍＵＶ保持時間
：Ａ８２８４６Ａ＝７．３分、へ８２８４６Ｃ＝７．６
分、Ａ８２８４６Ｂ＝８．０分。

注）米ゾルパックス（Ｚｏｒｂａｘ　）はＥ、１．　　
デュポン・ド・ナムール社（ｄｕＰｏｎｔ　ｄｅ　Ｎｅ
ｍｏｕｒｓ　　Ｃｏ。

、Ｉｎｃ、）（プラウエア州１９８９８ウイルミントン
ノの製品。

実施例２ 培養菌株Ａ８２８４６を用いる抗生物質Ａ８２８４６の
製造ニー Ａ、培養菌株Ａ８２８４６の振盪フラスコ発酵ニー培養
菌株／カルシア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８０９８（
凍結乾燥したペレットまたは液体窒素に保持した懸濁液
のいずれかとして〕を使用し、次の組成を有する種菌培
地に接種する。

種菌培地の組成ニ ゲルコース１．０％；可溶性殿粉２．０％；酵母エキス
０．５％；カゼイン７の酵素加水分解物０．５％；炭酸
カルシウム０．１％；脱イオン水金ｆｆ１ｌｆｆになる
量。

滅菌前、培地を水酸化ナトリウムでｐＨ７，５に調節。

注）米ＮＺアミンＡ（シェフイールド・ケミカ／Ｌ’−
カンパニー　（５ｈｅｆｆｉｅｌｄ　Ｃｈｅｍｉｃａｌ
　Ｃｏ、　（Ｎ　Ｙ、／−ウイッチノラ。

種菌培地に２．５％寒天を加えて斜面培地および平板培
地を調製する。接種した斜面培地を３０℃で約１０〜１
４日間インキュベートする。熟成した斜面培養物を滅菌
器具でかき削って胞子を解き離し、菌糸体マットを除き
浸漬する。解き離して一 第１段階の種菌培地５０　ｍＬに接種する。

接種した第１段階の培地を、２５０　ｍＬエルレンマイ
ヤーフラスコ中、２インチ（５，０８α〕旋回、回転数
２５０．　ｒｐｍのシェーカー上、３０℃で約２４〜４
８時間熟成する。

上記熟成した第１段階の培地（０，５ｍｌ、〕を用い、
次の組成を有する生産培地５０　ｍＬに接種する。

生産培地の組成ニ ゲルコース２．５％；大豆粉１．５％；ポテトデキスト
リン３．０％１炭酸カルシウム０．２５％；廃糖蜜０．
３％；酸加水分解カゼイン　０．５％；脱イオン水、全
量ｌｅとなる量。

（滅菌前、水酸化ナトリウムでｐＨ７，５に調節）注）
米ハイーケース（Ｈｙ−Ｃａｓｅ）（シェフイールド・
ケミカル・カンパニーノ 接種した生産培地を、２５０　ｍＬ広ロエルレンマイヤ
ーフラスコ中、２インチ、２５Ｏｒｐｍの回転シェーカ
ー上、３０℃で４〜５日間熟成する。

Ｂ、培養菌株のタンク発酵ニー 大容量の接種材料を製造するため、前記Ａ項に記載のよ
うに製造した第１段階の熟成培地１０ｍＬを用い、第１
段階の培地の組成と同一の組成を有する第２段階の生長
培地４００　ｍＬに接種する。

この第２段階の栄養培地を、２−Ｌ広ロエルレンマイヤ
ーフラスコ中、２インチ旋回、回転数２５Ｏｒｐｍのシ
ェーカー上、３０℃で約４８時間熟成する。

熟成して得られた第２段階の栄養培地１０１００Ｏを用
い、前記Ａ項に記載のように製造した滅菌生産培地（た
だしＰ−２０００消泡剤０．３ｇ／Ｌを加える）１００
１に接種する。接種した生産培地を、撹拌中の１６５Ｌ
発酵タンク中、３０℃で９０〜１００時間発酵させる。

撹拌（８０ｒｐｍうしている容器中の空気流を、溶解酸
素濃度（空気の飽和の５０％以上月こ保持するよう調節
する。

Ｃ０培養菌株Ａ８２８４６の別のタンク発酵ニー栄養培
地の適当口を用い、１６００ガロン（４５３６−Ｌ）発
酵タンク中、生産培地約１２００ガロンに接種する。

実施例３ 培養菌株Ａ８２８４６．１を用いる抗生物質Ａ８２８４
６の製造： ／カルシア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８０９９（凍結
乾燥したペレットまたは液体窒素中に保持した懸濁液の
いずれかとして）を、実施例２に記載の方法（但し生産
培地は次の組成を有する）により培養する。

成分ニ ゲルコース１．０％；ポテトデキストリン２．０％；ペ
プトン７１．０％；炭酸カルシウム０．２％；廃糖蜜２
．０％；脱イオン水を加えて全ｆｆ１ｌｎ。

ｐＨを調節しない。　注９　バタトーペプトン（Ｂａｃ
ｔｏ−ｐｅｐｔｏｎｅ　　（ディフコ・ラボラトリーズ
（Ｄｉｆｃｏ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒｉｅｓ　）　）。

実施例４ 培養菌株Ａ８２８４６．２を用いる抗生物質Ａ８２８４
６の製造ニー 培養菌株ノカルジア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８１０
０（凍結乾燥ペレットまたは液体窒素中に保持した懸濁
液のいずれかとして〕を、実施例２に記載の方法（ただ
し用いた酸加水分解カゼインはアミカーゼ（Ａｍ１ｃａ
ｓｅ　、　　シェフイールド・ケミカル・カンパニー〕
である）により、培養する。

実施例５ 粗Ａ８２８４６の製造ニー 実施例２のＣ項記載のように製造された１６００ガロン
発酵容器から得られた発酵液４２００Ｌを、５Ｎ水酸化
ナトリウムでｐＨ１０，５に調節し、３％セライト５４
５　（濾過助剤うを加える。混合物をフィルタープレス
に通して濾過し、プレスを水洗する。涙液と洗液（４２
００Ｌ）を合して５Ｎ塩酸≠（または硫酸）でｐＨ７に
調節し、ダウエックス−Ｘ　Ｆ　Ｓ　−４３２７８（Ｎ
Ｈ４＋）樹脂カラム（Ｆ液２０　ＯＬ／樹脂１０Ｌ）に
適用する。

このカラムを流速７５０ｍＬ／分で溶離する。各分画を
バチルス・スブチリス（Ｂａｃｉｌｌｕｓ　５ｕｂｓｔ
ｉｌｉｓ）による生物試験法またはＨＰＬＣのいずれか
で試験する。

カラムを５カラム容量の水で洗い、残部１００Ｌ分画を
集める。

５カラム容量の０．０５Ｎ水酸化アンモニウムで樹脂か
ら活性物質を溶離し、２５Ｌ分画を集める。Ａ８２８４
６を含む分画を合して減圧下、約３ＯＬ容に濃縮する。

この溶液を、水中ダイアイオン（Ｄｉａｉｏｎ　）　Ｈ
Ｐ　−２０樹脂の１０Ｌカラムに適用する。このカラム
を、流速３００ｍＬ／分の下に３カラム容量の水で洗う
。沈水を捨てる。、１．０％酢酸を含有する水：イソプ
ロパノール（９５：５）溶液を用い、流速１００ｔｎＬ
／分でカラムから活性物質を溶離し、４Ｌ分画を集め、
生物試験法およびＨＰＬＣで試験する。Ａ８２８４６（
＃６−１４）含有分画を合して減圧下に濃縮し、凍結乾
燥して３５６ｙの粗Ａ８２８４６を得る。

実施例６ Ａ８２８４６ＡおよびＡ８２８４６Ｂの単離ニーＡ、濃
厚なＡ８２８４６ＡおよびＡ８２８４６Ｂの分離ニー 実施例５で製せられたＡ８２８４６　（３０／）を水５
００　ｍＬに溶解し、１％リン酸二水素アンモニウム中
加圧して平衡にしたシリカゲルＬＰ−１／Ｃ１８の３０
Ｌステンレススチールカラムに適用する。１％リン酸二
水素アンモニウム６ｏＬから１％リン酸二水素アンモニ
ウム含有の水ニアセトニトリル（８８：１２）６０Ｌの
傾斜溶離剤を用い、流速２５０〜３００ｍＬ／分（最大
圧力６００　ｐｓｉ　）で、カラムを展開し、４Ｌ分画
を集め、２５４ｎｍのＵＶ検出器を用いて溶出液を監視
する。各分画を分析的ＨＰＬＣで試験する。Ａ８２８４
６Ａに富む分画に６〜９）とＡ８２８４６Ｂに富む分画
（＝１０〜１７）それぞれを合し、減圧Ｆにａ縮する。

Ｂ、Ａ　８２８４６　Ａの精製ニー 前記Ａ項記載のように処理した１回の操作３０ｙの２回
分から得られたＡ８２８４６Ａに富む濃厚物を、ダイア
イオンＨＰ−２０ＳＳの１７５０ｍＬカラム上で脱塩、
水洗し、０．５％酢酸含有の水：イソプ口パ／−ル（９
５：５）で溶離し、分析的ＨＰＬＣにより試験する。Ａ
８２８４６Ａを含む分画を合して濃縮し、凍結乾燥して
八８２８４６Ａに富む生成物７．４ｙを得る。

Ａ８２８４６Ａｌこ富む生成物７．２ｇを水に溶解し、
１％リン酸二水素アンモニウム中シリカゲルＬ　Ｐ　−
１／　Ｃ１８のプレパラテブＨＰＬＣカラムに適用する
。１％リン酸二水素アンモニウムかう１％リン酸二水素
アンモニウム：アセトニトリル（９：１）の傾斜溶離剤
を用いてカラムを展開し、分析的ＨＰＬＣによる溶出液
を２５４　ｎｍで監視しながら流速４８　ｍＬ　／分で
溶離する。最初の１ＯＬを溶離した後、５００　ｍＬ分
画を集める。

Ａ８２８４６Ａを含む分画（＝４〜１０）およびＡ８２
８４６Ｂを含む分画（＝１２〜２０）それぞれを合し、
減圧下に濃縮する。３回の操作で得られたＡ８２８４６
Ａの濃厚物を合し、ダイアイオンＨＰ−２０ＳＳの１７
５０　ｍＬカラムに適用して溶液を脱塩する。カラムを
水洗し、０．５％酢酸含有の水：イソブ口パ／−ルＣ９
５：５）Ｔ：溶離する。ＨＰＬＣで溶出液を監視する。

Ａ８２８４６Ａを含む分画を合して濃縮し、凍結乾燥し
て純品Ａ８２８４６Ａ７．９．ｐを得る。

ＫＢｒディスク中Ａ８２８４６ＡのＩＲスペクトルを図
１；チオグリセロール中Ａ８２８４６Ａ（７）ＦＡＢ−
ＭＳを図４；ブラッカー（Ｂｒｕｋｅｒ　）　Ａ　Ｍ５
００分光計（ＨＤ○抑制）を用いて（メチルスルホキシ
トン−ｄ６中（６０℃ン、Ａ８２８４６Ａ塩酸塩のＮＭ
Ｒスペクトルを図７に示す。

Ｃ，Ａ　８２８４６　Ｂの精製ニー 前記８項記載のようにプレパラテイブＨＰＬＣの操作３
回でＡ８２８４６ＡとＡ８２８４６Ｂを分離して得られ
たＡ８２８４６Ｂに富んだ分画を合し、ダイアイオンＨ
Ｐ−２０ＳＳの１７５０ｍＬｍシカラム上塩し、水洗し
て０．５％酢酸含有の水：イソプロパ／−ル（９５：５
）で溶離する。溶出液をＨＰＬＣで監視し、このＡ８２
８４６Ｂ分画を合して減圧下に濃縮し、凍結乾燥してＡ
８２８４６Ｂ純品８．８ｇを得る。

ＫＢｒディスク中Ａ８２８４６ＢのＩＲ７，ベクトルを
図２；チオグリセロール中Ａ８２８４６ＢのＦＡＢ−Ｍ
Ｓを図５；ブラッカー（Ｂｒｕｋｅｒ　）　ＡＭ５００
分光計を用いて（メチルスルホキシドノーｄ６中（６０
℃）、Ａ８２８４６Ｂ酢酸塩のＮＭＲスペクトルを図８
に示す。

Ｄ、脱塩ニー ダイアイオンＨＰ−２０樹脂を用い、０．１％酢酸含有
のメタノール：水（４：１）で溶離し、脱塩することも
できる。

実施例７ Ａ８２８４６Ｃの単離ニー Ａ、Ａ　８２８４６の分離ニー 実施例２・Ｂ項のように処理した１６５Ｌ発酵４回から
得られた発酵液４６１Ｌを、５Ｎ水酸化ナトリウムでｐ
Ｈ１０゜５に調節し、３％１１イフロ・スーパーセル（
Ｈｙｆｌｏ　　５ｕｐｅｒｃｅｌ　）　濾過助剤で濾過
する。涙液４３０Ｌを５Ｎ塩酸でｐＨ７に調節し、ダウ
エックス（Ｄｏｗｅｘ　）−Ｘ　Ｆ　Ｓ　−４３２７８
（ＮＨ４”）樹脂を含むカラムに適用する。カラムを水
５０Ｌで洗い、０．０５Ｎ水酸化アンモニウム５０Ｌで
活性物質を溶離し、４Ｌ分画を集める。

溶出液を生物試験法で監視する。活性分画（＃１〜７）
を合して減圧下、約１７００　ｍＬ容に濃縮し、凍結乾
燥して粗Ａ８２８４６（２８３，９，１を得る。

Ｂ、Ａ８２８４６Ａ、ＢおよびＣの分離ニー前記Ａ項で
得られた粗Ａ８２８４６（１１）を水に溶解し、１％リ
ン酸二水素アンモニウム中、シリカゲ／ｌ／　Ｌ　Ｐ　
−１／　Ｃ１８樹脂２１１０　ｍＬ金含有２″×４５″
ステンレススチール製プレパラテブＨＰＬＣカラムに適
用する。１％リン酸二水素アンモニウムから１％リン酸
アンモニウムニアセトニｌ−ＩＪル（９２：８）の傾斜
溶離剤を用い、流速７０ｍＬ／分でカラムを展開し、４
００　ｍＬ分画を集め、２５４　ｎｍのＵＶで監視する
。

Ａ８２８４６Ａを含む分画（＝１１〜１４）を合してプ
ール１とし１Ａ８２８４６ｃを含む分画（：！１６〜２
０）を合してプール２とし、Ａ８２８４６Ｂを含む分画
（＝２１〜２５）を合してプール３とする。

Ｃ，Ａ　８２８４６　Ｃの精製ニー 塩 プール２を約２００　ｍＬ容に濃縮し、ｈマるため、ダ
イアイオンＨＰ−２０樹脂１８００　ｍＬ金含有７）７
Ｘ４１１１グラスカラムに適用する。、０．１％酢酸含
有のメタノール：水Ｃ４：１）を用い、流速２５ｍＬ／
分で活性物質を溶離し、ＩＬ分画を集める。Ｃ含有分画
（＃９〜１２）を合して減圧下）こ濃縮し、凍結乾燥し
て半精製Ａ８２８４６Ｃ（６６２，２■）を得る。

シリカゲ／ｌ／Ｌ　Ｐ　−１／　ＣＨ３（４５０ｍＬ　
）含有の１″×４８″　　スチールカラム上、１％リン
酸二水素アンモニウムから１％リン酸二水素アンモニウ
ム：アセトニトリル（９２：８）の傾斜溶離剤を用い、
流速１１　ｍＬ　／分で逆相ＨＰＬＣ操作を反復し、２
ＳｍＬ分画を集め、２５４　ｎｍで監視することにより
、上記半精製Ａ８２８４６Ｃ（５０゜０屑９）を更に精
製する。Ａ８２８４６Ｃ含有分画（２１６９〜２１０）
を合し、ＨＰ−２０樹脂を含む５Ｘ４５ｃｘグラスカラ
ム上で脱塩する。このカラムを０．１％酢酸含有メタノ
ール／水（４：１）で溶離し、１００　ｍＬ分画を集め
、分析的ＨＰＬＣ上、２２５　ｎｍのＵＶを用いて溶離
を続ける。Ａ８２８４６Ｃを含む分画（＝５〜１１）を
合して減圧下に濃縮し、凍結乾燥してＡ８２８４６Ｃ（
１２７，３Ｊｉ！ｌを得る。

Ａ８２８４６Ａを含むプール１およびＡ８２８４６Ｂを
含むプール３を上記Ａ８２８４６Ｃの精製と同様の方法
で精製し、更にＡ８２８４６ＡおよびＡ８２８４６Ｂ純
品を得る。

Ｄ、更にＡ８２８４６Ｃの精製ニー 下記プレパラテブクロマトグラフイ操作によりＡ８２８
４６Ｃ（７０１１１９）を更に精製する。

カラム：ゾルパックス５ＣＸ（９，２ｘ２５０ｓｒｍう
陽イオン交換 移動相：１０％メタ／−ル含有の０．１５　Ｍ　ＩＪン
酸二水素す）　ＩＪウム緩衝液から出発して１０％メタ
ン−ル含有の０．９　Ｍ　ＩＪン酸二水素す）　ＩＪウ
ム緩衝液に到る線型傾斜溶離剤（６分間移動、５分間保
持、緩衝液に対して無調節ノ 流速：６．ＯｍＬ／分 検出：　２８０　ｎｍのＵＶ 負荷：６．０１９／水中注入 ピーク検出機構を備えた自動フラクションコレクター（
Ｇ１１ｓｏｎ　　２０　Ｉ　Ｃ）を用いてＡ８２８４６
０を集める。移動相をミリポア・ウォーターズ（Ｍｉｌ
ｌｉｐｏｒｅ　Ｗａｔｅｒｓ　）　Ｍ　６００傾斜溶離
ＨＰＬＣ系で供給し、試料溶液を日立（Ｈｉｔａｃｈｉ
　）オートサンプラーにより注入する。

Ａ８２８４６Ｃを含む分画を合して３０ｍＬ容に濃縮し
、ＨＰ−２０カラム（５０ｍＬ　）に適用する。カラム
を水洗し、０．５％酢酸含有の水：イソプロパノール（
９５：５）で溶離し、２　Ｓ　ｍＬ分画を集める。Ａ８
２８４６Ｃ含有分画（＃９〜１４）を合して濃縮し、凍
結乾燥してＡ８２８４６Ｃ純品３７ＪＩ！１７を得る。

ＫＢｒディスク中Ａ８２８４６ＣのＩＲスペクトルを図
３；チオグリセロール中Ａ８２８４６ＣのＦＡＢ−ＭＳ
を図６；およびブラッカーＡＭ５０Ｏ分光計（ＨＰＯ抑
制う上、（メチルスルホキト）−ｄ６中（６０℃〕、Ａ
８２８４６Ｃ酢酸塩のＮＭＲスペクトルを図９に示ス。

実施例８ Ａ８２８４６塩の製造ニー 操作：それぞれの場合において、Ａ８２８４６成分（１
００■）を脱イオン水（１０ｍＬ月こ溶解する。この溶
液を０．５Ｎ酸（塩酸、硫酸およびリン酸うでｐＨ約３
に調節する。溶液を凍結乾燥して相当の塩型化合物を得
る。もしｐＨ３より非常に低く（すなわちｐＨ２）なれ
ば成分の品質が低下することに注意することが重要であ
る。

塩酸塩　　　９３．８　　　　８８．１硫酸塩　　　９
２．５　　　　７５．４リン酸塩　　１１０．８　　　
１０５．７実施例９ Ａ８２８４６Ａ錠剤の製造ニー 下記成分と量によりＡ８２８４６Ａ含有錠剤を製造する
。

成分： Ａ８２８４６Ａリン酸塩２８２．９■；微結晶セルロー
ス１０１．１１３９ｉクロスカルメロース・ナトリウム
１２．０■；プロピトン１２．０！Ｒ９ｉステアリン酸
マグネシウムａ、ｏ！ｎ９ｉステアリン酸４．ＯＮ＋９
゜純水０．１６ｍＬ０ 注うクロスカルメロース（ｃｒｏｓｃａｒｍｅｌｌｏｓ
ｅ　）　　；プロピトン（ｐｒｏｖｉｄｏｎｅ　）。

Ａ　８２８４６　Ａ　ＩＪン酸塩、微結晶セルロースの
一部およびクロスカルメロース・ナトリウムの一部を適
当な容器に入れ、均質になるまで混和する。プロピトン
の水溶液を製し、このプロピトン溶液を上記粉末混合物
に加える。得られた混合物を顆粒化し、必要に応じて計
測し、乾燥する。この屹煙混合物に微結晶セルロース残
部とクロスカルメロース・ナトリウム残部を加え、混和
する。ステアリン酸マグネシウムとステアリン酸を加え
、この混合物を混和し、得られた粉末を圧縮して錠剤を
製造する。

実施例１０ Ａ８２８４６Ｂカプセル剤の製造ニー 下記成分と量によりＡ８２８４６Ｂ含有カプセル剤を製
造する。

成分： Ａ８２８４６Ｂ塩酸塩２６２．２■；流動性コーンスタ
ーチ粉末１３７．７■；シリコーン液体３５０センチス
トロークス２．７■；コーンスターチ１４７．１■。

Ａ８２８４６Ｂ塩酸塩、流動性コーンスターチ粉末、シ
リコーン液体３５０センチストロークスおよびスターチ
粉末を適当なミキサー中、均質になるまで混和する。適
当なサイズの硬質ゼラチンカプセルに充填する。

実施例１１ Ａ８２８４６Ａ懸濁薬の製造ニー 結晶化または沈殿により、Ａ８２８４６Ａの滅菌不溶性
型薬剤を製造する。粉砕または篩別けして懸濁薬に適す
る粒形の大きさにする。下記賦形剤中ニＡ　８２８４６
　Ａヲ！１ｇ１ｍすルう成分： レシチン１％；クエン酸ナトリウム２％；プロピルパラ
ベン０．０１５％：注射用水、所望の容量になる量。

懸濁液をばらで、またはバイアルに充填するか、もしく
はバイアル中のＡ８２８４６Ａに上記賦形剤を即席的に
加えることにより懸濁薬を製造する。

【図面の簡単な説明】

第１図、第２図および第３図は各々Ａ８２８４６Ａ、Ａ
８２８４６ＢおよびＡ８２８４６ＣのＫＢｒ法によるＩ
Ｒスペクトルを、第４図、第５図および第６図は各々Ａ
８２８４６Ａ、Ａ８２８４６ＢおよびＡ８２８４６Ｃの
ＦＡＢ−質量スペクトルを、並びに第７図、第８図およ
び第９図は各々Ａ８２８４６Ａ、Ａ８２８４６Ｂおよび
Ａ８２８４６ＣのＮＭＲスペクトルを示している。 特許出願人　イーライ・リリー・アンド・カンパニー 代　理　人　弁理士　青白　葆（外１名）逍過早　７ぐ
−Ｃント 違邂苧パー’！　＞　ト 逢　＠　≦〜≧・　ンぐ−２−／ト 相　りＶ　鬼度

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １、同化しうる炭素源、窒素源および無機塩源を含む培
   地中、ノカルジア・オリエンタリスＮＲＲＬ１８０９８
   、ＮＲＲＬ１８０９９またはＮＲＲＬ１８１００を液中
   好気的発酵させることにより製造することができるグリ
   コペプチド抗生物質。 ２、特許請求の範囲第１項記載の抗生物質Ａ８２８４６
   またはその薬理学的に許容される塩類。 ３、特許請求の範囲第１項記載の抗生物質Ａ８２８４６
   Ａまたはその薬理学的に許容される塩類。 ４、特許請求の範囲第１項記載の抗生物質Ａ８２８４６
   Ｂまたはその薬理学的に許容される塩類。 ５、特許請求の範囲第１項記載の抗生物質Ａ８２８４６
   Ｃまたはその薬理学的に許容される塩類。 ６、適当な培地中、液中好気的条件下に実質的量の抗生
   物質活性が生産されるまでノカルジア・オリエンタリス
   ＮＲＲＬ１８０９８、１８０９９または１８１００また
   はそのＡ８２８４６産生後代菌を培養することにより製
   造される抗生物質Ａ８２８４６。 ７、適当な培地中、液中好気的条件下に実質的量の抗生
   物質活性が生産されるまでノカルジア・オリエンタリス
   ＮＲＲＬ１８０９８、１８０９９または１８１００また
   はそのＡ８２８４６Ａ産生後代菌を培養することにより
   製造される抗生物質Ａ８２８４６Ａ。 ８、適当な培地中、液中好気的条件下に実質的量の抗生
   物質活性が生産されるまでノカルジア・オリエンタリス
   ＮＲＲＬ１８０９８、１８０９９または１８１００また
   はそのＡ８２８４６Ｂ産生後代菌を培養することにより
   製造される抗生物質Ａ８２８４６Ｂ。 ９、同化しうる炭素源、窒素源および無機塩源を含む培
   地中、液中好気的発酵条件下にノカルジア・オリエンタ
   リスＮＲＲＬ１８０９８、ＮＲＲＬ１８０９９またはＮ
   ＲＲＬ１８１００またはそのＡ８２８４６産生後代菌を
   培養し、必要に応じて発酵培地から抗生物質を分離し、
   および／または該抗生物質が塩型でないならばこの抗生
   物質を塩にすることを特徴とする抗生物質Ａ８２８４６
   、Ａ８２８４６Ａ、Ａ８２８４６ＢまたはＡ８２８４６
   Ｃの製造法。 １０、ノカルジア・オリエンタリス菌株ＮＲＲＬ１８０
   ９８、ＮＲＲＬ１８０９９およびＮＲＲＬ１８１００ま
   たはそのＡ８２８４６産生後代菌から選択された生物学
   的に純粋な培養物。 １１、活性成分として前記第１〜８項のいずれかに記載
   の化合物を、そのための薬理学的に許容される担体１種
   もしくはそれ以上と組合わせて含有せしめた薬剤。 １２、活性成分として前記第１〜８項のいずれかに記載
   の化合物を、そのための農学的に許容される担体１種も
   しくはそれ以上と組合わせて含有せしめた動物用飼料プ
   レミックス。