FI77690C - Foerfarande foer framstaellning av en antibiot, aad 216-komplex med mikroben kibdelosporangium aridum shearer gen. nov., sp. nov. atcc 39323. - Google Patents
Foerfarande foer framstaellning av en antibiot, aad 216-komplex med mikroben kibdelosporangium aridum shearer gen. nov., sp. nov. atcc 39323. Download PDFInfo
- Publication number
- FI77690C FI77690C FI842807A FI842807A FI77690C FI 77690 C FI77690 C FI 77690C FI 842807 A FI842807 A FI 842807A FI 842807 A FI842807 A FI 842807A FI 77690 C FI77690 C FI 77690C
- Authority
- FI
- Finland
- Prior art keywords
- aad
- complex
- nov
- staph
- growth
- Prior art date
Links
- 241000203796 Kibdelosporangium aridum Species 0.000 title abstract description 24
- ZHRODENVJFUAFN-PNKCYDOPSA-N aad 216 Chemical compound CCC(=O)N[C@H]1C(O)O[C@H](C(O)=O)[C@@H](O)[C@@H]1O.N1C(=O)C(NC(C(NC)C=2C=C(O3)C(O)=CC=2)=O)C(O)C(C=C2Cl)=CC=C2OC(C=2O)=CC4=CC=2OC(C(=C2)Cl)=C(Cl)C=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C5C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C5NC(=O)C4NC(=O)C1C1=CC3=CC(O)=C1Cl ZHRODENVJFUAFN-PNKCYDOPSA-N 0.000 claims abstract description 71
- 238000000855 fermentation Methods 0.000 claims abstract description 25
- 230000004151 fermentation Effects 0.000 claims abstract description 25
- 239000003242 anti bacterial agent Substances 0.000 claims abstract description 23
- 230000003115 biocidal effect Effects 0.000 claims abstract description 19
- 238000000034 method Methods 0.000 claims description 23
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 16
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 11
- 229910052799 carbon Inorganic materials 0.000 claims description 11
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 claims description 8
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 6
- 239000002253 acid Substances 0.000 claims description 5
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 claims description 5
- 239000012736 aqueous medium Substances 0.000 claims description 3
- 238000012258 culturing Methods 0.000 claims description 3
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 claims 1
- 230000012010 growth Effects 0.000 abstract description 28
- 229940088710 antibiotic agent Drugs 0.000 abstract description 18
- 244000005700 microbiome Species 0.000 abstract description 10
- 230000000975 bioactive effect Effects 0.000 abstract description 7
- 230000000694 effects Effects 0.000 abstract description 6
- 235000015097 nutrients Nutrition 0.000 abstract description 5
- WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N Acetonitrile Chemical compound CC#N WEVYAHXRMPXWCK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 102
- 239000000203 mixture Substances 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 27
- 229920001817 Agar Polymers 0.000 description 25
- 239000008272 agar Substances 0.000 description 25
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 21
- 238000004128 high performance liquid chromatography Methods 0.000 description 20
- 229910001868 water Inorganic materials 0.000 description 20
- 239000002609 medium Substances 0.000 description 18
- 241001465754 Metazoa Species 0.000 description 16
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 15
- RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N Diethyl ether Chemical compound CCOCC RTZKZFJDLAIYFH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 14
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 13
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 241000287828 Gallus gallus Species 0.000 description 12
- ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N N,N-Dimethylformamide Chemical compound CN(C)C=O ZMXDDKWLCZADIW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 12
- 240000008042 Zea mays Species 0.000 description 12
- 235000002017 Zea mays subsp mays Nutrition 0.000 description 12
- 239000013078 crystal Substances 0.000 description 12
- 239000000049 pigment Substances 0.000 description 12
- MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N vancomycin Chemical class O([C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C2C=C3C=C1OC1=CC=C(C=C1Cl)[C@@H](O)[C@H](C(N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H]1C(=O)N[C@H](C(N[C@@H](C3=CC(O)=CC(O)=C3C=3C(O)=CC=C1C=3)C(O)=O)=O)[C@H](O)C1=CC=C(C(=C1)Cl)O2)=O)NC(=O)[C@@H](CC(C)C)NC)[C@H]1C[C@](C)(N)[C@H](O)[C@H](C)O1 MYPYJXKWCTUITO-LYRMYLQWSA-N 0.000 description 12
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M Sodium chloride Chemical compound [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 10
- 108010059993 Vancomycin Proteins 0.000 description 10
- 235000013330 chicken meat Nutrition 0.000 description 10
- 239000002054 inoculum Substances 0.000 description 10
- 229960003165 vancomycin Drugs 0.000 description 10
- MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N vancomycin Natural products O1C(C(=C2)Cl)=CC=C2C(O)C(C(NC(C2=CC(O)=CC(O)=C2C=2C(O)=CC=C3C=2)C(O)=O)=O)NC(=O)C3NC(=O)C2NC(=O)C(CC(N)=O)NC(=O)C(NC(=O)C(CC(C)C)NC)C(O)C(C=C3Cl)=CC=C3OC3=CC2=CC1=C3OC1OC(CO)C(O)C(O)C1OC1CC(C)(N)C(O)C(C)O1 MYPYJXKWCTUITO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 10
- 230000009105 vegetative growth Effects 0.000 description 10
- 238000000338 in vitro Methods 0.000 description 9
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 8
- 241000282887 Suidae Species 0.000 description 8
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 description 8
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 8
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 description 8
- 238000003359 percent control normalization Methods 0.000 description 8
- IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M potassium bromide Chemical compound [K+].[Br-] IOLCXVTUBQKXJR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 8
- WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N Glucose Natural products OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-GASJEMHNSA-N 0.000 description 7
- 235000005824 Zea mays ssp. parviglumis Nutrition 0.000 description 7
- 238000003556 assay Methods 0.000 description 7
- 235000005822 corn Nutrition 0.000 description 7
- 235000005911 diet Nutrition 0.000 description 7
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 7
- 235000012054 meals Nutrition 0.000 description 7
- 239000008363 phosphate buffer Substances 0.000 description 7
- 239000007787 solid Substances 0.000 description 7
- 241000193163 Clostridioides difficile Species 0.000 description 6
- KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N Lysine Natural products NCCCCC(N)C(O)=O KDXKERNSBIXSRK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 235000019764 Soybean Meal Nutrition 0.000 description 6
- XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N Urea Chemical compound NC(N)=O XSQUKJJJFZCRTK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 6
- 230000037213 diet Effects 0.000 description 6
- 239000008103 glucose Substances 0.000 description 6
- 239000000463 material Substances 0.000 description 6
- 239000004455 soybean meal Substances 0.000 description 6
- 235000013343 vitamin Nutrition 0.000 description 6
- 239000011782 vitamin Substances 0.000 description 6
- 229940088594 vitamin Drugs 0.000 description 6
- 229930003231 vitamin Natural products 0.000 description 6
- VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L Calcium carbonate Chemical compound [Ca+2].[O-]C([O-])=O VTYYLEPIZMXCLO-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 5
- IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N Dimethylsulphoxide Chemical compound CS(C)=O IAZDPXIOMUYVGZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N L-glutamic acid Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-VKHMYHEASA-N 0.000 description 5
- 235000016383 Zea mays subsp huehuetenangensis Nutrition 0.000 description 5
- SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N beta-D-Pyranose-Lyxose Natural products OC1COC(O)C(O)C1O SRBFZHDQGSBBOR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 5
- 239000000872 buffer Substances 0.000 description 5
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 5
- 235000013305 food Nutrition 0.000 description 5
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 5
- 235000009973 maize Nutrition 0.000 description 5
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 5
- 235000018102 proteins Nutrition 0.000 description 5
- 102000004169 proteins and genes Human genes 0.000 description 5
- 108090000623 proteins and genes Proteins 0.000 description 5
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 5
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 5
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 5
- 239000005720 sucrose Substances 0.000 description 5
- 150000003722 vitamin derivatives Chemical class 0.000 description 5
- FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 13-cis retinol Natural products OCC=C(C)C=CC=C(C)C=CC1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 241000186361 Actinobacteria <class> Species 0.000 description 4
- CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N Carbon dioxide Chemical compound O=C=O CURLTUGMZLYLDI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N D-mannopyranose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-QTVWNMPRSA-N 0.000 description 4
- GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N Lactose Natural products OC[C@H]1O[C@@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)C(O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QKKXKWKRSA-N 0.000 description 4
- XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M Propionate Chemical compound CCC([O-])=O XBDQKXXYIPTUBI-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 4
- 229930006000 Sucrose Natural products 0.000 description 4
- CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N Sucrose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 CZMRCDWAGMRECN-UGDNZRGBSA-N 0.000 description 4
- FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N Vitamin A Natural products OC/C=C(/C)\C=C\C=C(\C)/C=C/C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-BOOMUCAASA-N 0.000 description 4
- 238000010521 absorption reaction Methods 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 238000005273 aeration Methods 0.000 description 4
- 150000001338 aliphatic hydrocarbons Chemical class 0.000 description 4
- FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N all-trans-retinol Chemical compound OC\C=C(/C)\C=C\C=C(/C)\C=C\C1=C(C)CCCC1(C)C FPIPGXGPPPQFEQ-OVSJKPMPSA-N 0.000 description 4
- POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N allantoin Chemical compound NC(=O)NC1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 235000013365 dairy product Nutrition 0.000 description 4
- 239000008367 deionised water Substances 0.000 description 4
- 229910021641 deionized water Inorganic materials 0.000 description 4
- 229960001760 dimethyl sulfoxide Drugs 0.000 description 4
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 4
- 239000001257 hydrogen Substances 0.000 description 4
- 229910052739 hydrogen Inorganic materials 0.000 description 4
- 125000004435 hydrogen atom Chemical class [H]* 0.000 description 4
- 238000011534 incubation Methods 0.000 description 4
- 239000004615 ingredient Substances 0.000 description 4
- 230000005764 inhibitory process Effects 0.000 description 4
- 239000008101 lactose Substances 0.000 description 4
- 235000013372 meat Nutrition 0.000 description 4
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 4
- 235000013379 molasses Nutrition 0.000 description 4
- FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N ninhydrin Chemical compound C1=CC=C2C(=O)C(O)(O)C(=O)C2=C1 FEMOMIGRRWSMCU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N periodic acid Chemical compound OI(=O)(=O)=O KHIWWQKSHDUIBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 244000144977 poultry Species 0.000 description 4
- 235000013594 poultry meat Nutrition 0.000 description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 description 4
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 4
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 4
- 238000001228 spectrum Methods 0.000 description 4
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 4
- 239000000758 substrate Substances 0.000 description 4
- 238000002211 ultraviolet spectrum Methods 0.000 description 4
- 235000019155 vitamin A Nutrition 0.000 description 4
- 239000011719 vitamin A Substances 0.000 description 4
- 229940045997 vitamin a Drugs 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M Acetate Chemical compound CC([O-])=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 235000007319 Avena orientalis Nutrition 0.000 description 3
- 244000075850 Avena orientalis Species 0.000 description 3
- ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N Chlorine atom Chemical compound [Cl] ZAMOUSCENKQFHK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 241000193468 Clostridium perfringens Species 0.000 description 3
- PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N Glycerine Chemical compound OCC(O)CO PEDCQBHIVMGVHV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 240000004658 Medicago sativa Species 0.000 description 3
- 235000017587 Medicago sativa ssp. sativa Nutrition 0.000 description 3
- 229910002651 NO3 Inorganic materials 0.000 description 3
- NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N Nitrate Chemical compound [O-][N+]([O-])=O NHNBFGGVMKEFGY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 229910019142 PO4 Inorganic materials 0.000 description 3
- 241000286209 Phasianidae Species 0.000 description 3
- OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N Phosphorus Chemical compound [P] OAICVXFJPJFONN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N Ribose Natural products OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-LMVFSUKVSA-N 0.000 description 3
- 108010081391 Ristocetin Proteins 0.000 description 3
- 229920002472 Starch Polymers 0.000 description 3
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- 238000000862 absorption spectrum Methods 0.000 description 3
- 238000004458 analytical method Methods 0.000 description 3
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 3
- PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N arabinose Natural products OCC(O)C(O)C(O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N beta-D-glucose Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-VFUOTHLCSA-N 0.000 description 3
- 239000004202 carbamide Substances 0.000 description 3
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 3
- BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N chembl1095986 Chemical compound C1[C@@H](N)[C@@H](O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]([C@H]1C(N[C@H](C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2NC(=O)[C@@H]3C=4C=C(C(=C(O)C=4)C)OC=4C(O)=CC=C(C=4)[C@@H](N)C(=O)N[C@@H](C(=O)N3)[C@H](O)C=3C=CC(O4)=CC=3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1)=CC=C1OC1=C(O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO[C@@H]5[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](C)O5)O)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)C4=CC2=C1 BGTFCAQCKWKTRL-YDEUACAXSA-N 0.000 description 3
- 239000000460 chlorine Substances 0.000 description 3
- 229910052801 chlorine Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000011033 desalting Methods 0.000 description 3
- 238000010265 fast atom bombardment Methods 0.000 description 3
- 230000007062 hydrolysis Effects 0.000 description 3
- 238000006460 hydrolysis reaction Methods 0.000 description 3
- 230000002401 inhibitory effect Effects 0.000 description 3
- 238000011081 inoculation Methods 0.000 description 3
- 229910052500 inorganic mineral Inorganic materials 0.000 description 3
- 230000014759 maintenance of location Effects 0.000 description 3
- 238000001819 mass spectrum Methods 0.000 description 3
- 235000010755 mineral Nutrition 0.000 description 3
- 239000011707 mineral Substances 0.000 description 3
- NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K phosphate Chemical compound [O-]P([O-])([O-])=O NBIIXXVUZAFLBC-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 3
- 239000010452 phosphate Substances 0.000 description 3
- 239000011574 phosphorus Substances 0.000 description 3
- 229910052698 phosphorus Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 3
- 230000002829 reductive effect Effects 0.000 description 3
- 229950004257 ristocetin Drugs 0.000 description 3
- 235000012424 soybean oil Nutrition 0.000 description 3
- 239000003549 soybean oil Substances 0.000 description 3
- 241000894007 species Species 0.000 description 3
- 239000008107 starch Substances 0.000 description 3
- 235000019698 starch Nutrition 0.000 description 3
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 3
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 3
- 238000004809 thin layer chromatography Methods 0.000 description 3
- 238000005303 weighing Methods 0.000 description 3
- WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N (+)-Galactose Chemical compound OC[C@H]1OC(O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-SVZMEOIVSA-N 0.000 description 2
- MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N (2r,3r)-2,3-bis[(4-hydroxy-3-methoxyphenyl)methyl]butane-1,4-diol;(2r,3r,4s,5s,6r)-6-(hydroxymethyl)oxane-2,3,4,5-tetrol Chemical compound OC[C@H]1O[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O.C1=C(O)C(OC)=CC(C[C@@H](CO)[C@H](CO)CC=2C=C(OC)C(O)=CC=2)=C1 MJYQFWSXKFLTAY-OVEQLNGDSA-N 0.000 description 2
- OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 100676-05-9 Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OCC1C(O)C(O)C(O)C(OC2C(OC(O)C(O)C2O)CO)O1 OWEGMIWEEQEYGQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 2,6-diaminopimelic acid Chemical compound OC(=O)C(N)CCCC(N)C(O)=O GMKMEZVLHJARHF-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 2-amino-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound N[C@H]1C(O)O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@@H]1O MSWZFWKMSRAUBD-IVMDWMLBSA-N 0.000 description 2
- 239000001763 2-hydroxyethyl(trimethyl)azanium Substances 0.000 description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 3-Methylbutanoic acid Natural products CC(C)CC([O-])=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 9H-xanthine Chemical compound O=C1NC(=O)NC2=C1NC=N2 LRFVTYWOQMYALW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N Allantoin Natural products NC(=O)N[C@@H]1NC(=O)NC1=O POJWUDADGALRAB-PVQJCKRUSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N Alpha-Lactose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)O[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-XLOQQCSPSA-N 0.000 description 2
- 239000004184 Avoparcin Substances 0.000 description 2
- 235000014469 Bacillus subtilis Nutrition 0.000 description 2
- 241000606124 Bacteroides fragilis Species 0.000 description 2
- 208000031462 Bovine Mastitis Diseases 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M Butyrate Chemical compound CCCC([O-])=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N Butyric acid Natural products CCCC(O)=O FERIUCNNQQJTOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 235000019743 Choline chloride Nutrition 0.000 description 2
- FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N D-Mannitol Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-KVTDHHQDSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N D-mannomethylose Natural products CC1OC(O)C(O)C(O)C1O SHZGCJCMOBCMKK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N D-ribopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-SOOFDHNKSA-N 0.000 description 2
- 241000588724 Escherichia coli Species 0.000 description 2
- 235000019733 Fish meal Nutrition 0.000 description 2
- RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N Fructose Chemical compound OC[C@H]1O[C@](O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-ARQDHWQXSA-N 0.000 description 2
- 101000993347 Gallus gallus Ciliary neurotrophic factor Proteins 0.000 description 2
- JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N L-lactic acid Chemical compound C[C@H](O)C(O)=O JVTAAEKCZFNVCJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 2
- SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N L-rhamnopyranose Chemical compound C[C@@H]1OC(O)[C@H](O)[C@H](O)[C@H]1O SHZGCJCMOBCMKK-JFNONXLTSA-N 0.000 description 2
- PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N L-rhamnose Natural products CC(O)C(O)C(O)C(O)C=O PNNNRSAQSRJVSB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N L-tyrosine Chemical compound OC(=O)[C@@H](N)CC1=CC=C(O)C=C1 OUYCCCASQSFEME-QMMMGPOBSA-N 0.000 description 2
- 241000186779 Listeria monocytogenes Species 0.000 description 2
- 239000004472 Lysine Substances 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N Maltose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@@H](CO)OC(O)[C@H](O)[C@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-PICCSMPSSA-N 0.000 description 2
- XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N Melanin Chemical compound O=C1C(=O)C(C2=CNC3=C(C(C(=O)C4=C32)=O)C)=C2C4=CNC2=C1C XUMBMVFBXHLACL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N Methicillin Chemical compound COC1=CC=CC(OC)=C1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2[C@@H](C(O)=O)C(C)(C)S[C@@H]21 RJQXTJLFIWVMTO-TYNCELHUSA-N 0.000 description 2
- MVTQIFVKRXBCHS-SMMNFGSLSA-N N-[(3S,6S,12R,15S,16R,19S,22S)-3-benzyl-12-ethyl-4,16-dimethyl-2,5,11,14,18,21,24-heptaoxo-19-phenyl-17-oxa-1,4,10,13,20-pentazatricyclo[20.4.0.06,10]hexacosan-15-yl]-3-hydroxypyridine-2-carboxamide (10R,11R,12E,17E,19E,21S)-21-hydroxy-11,19-dimethyl-10-propan-2-yl-9,26-dioxa-3,15,28-triazatricyclo[23.2.1.03,7]octacosa-1(27),6,12,17,19,25(28)-hexaene-2,8,14,23-tetrone Chemical compound CC(C)[C@H]1OC(=O)C2=CCCN2C(=O)c2coc(CC(=O)C[C@H](O)\C=C(/C)\C=C\CNC(=O)\C=C\[C@H]1C)n2.CC[C@H]1NC(=O)[C@@H](NC(=O)c2ncccc2O)[C@@H](C)OC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H]2CC(=O)CCN2C(=O)[C@H](Cc2ccccc2)N(C)C(=O)[C@@H]2CCCN2C1=O)c1ccccc1 MVTQIFVKRXBCHS-SMMNFGSLSA-N 0.000 description 2
- QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N N-benzoylglycine Chemical compound OC(=O)CNC(=O)C1=CC=CC=C1 QIAFMBKCNZACKA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N Nisin Chemical compound N1C(=O)[C@@H](CC(C)C)NC(=O)C(=C)NC(=O)[C@@H]([C@H](C)CC)NC(=O)[C@@H](NC(=O)C(=C/C)/NC(=O)[C@H](N)[C@H](C)CC)CSC[C@@H]1C(=O)N[C@@H]1C(=O)N2CCC[C@@H]2C(=O)NCC(=O)N[C@@H](C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(NCC(=O)N[C@H](C)C(=O)N[C@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)NCC(=O)N[C@H](CS[C@@H]2C)C(=O)N[C@H](CC(N)=O)C(=O)N[C@H](CCSC)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(=O)N[C@@H]2C(N[C@H](C)C(=O)N[C@@H]3C(=O)N[C@@H](C(N[C@H](CC=4NC=NC=4)C(=O)N[C@H](CS[C@@H]3C)C(=O)N[C@H](CO)C(=O)N[C@H]([C@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=3NC=NC=3)C(=O)N[C@H](C(C)C)C(=O)NC(=C)C(=O)N[C@H](CCCCN)C(O)=O)=O)CS[C@@H]2C)=O)=O)CS[C@@H]1C NVNLLIYOARQCIX-MSHCCFNRSA-N 0.000 description 2
- 108010053775 Nisin Proteins 0.000 description 2
- 241000283973 Oryctolagus cuniculus Species 0.000 description 2
- 240000004808 Saccharomyces cerevisiae Species 0.000 description 2
- 241000607132 Salmonella enterica subsp. enterica serovar Gallinarum Species 0.000 description 2
- MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N Testostosterone Chemical compound O=C1CC[C@]2(C)[C@H]3CC[C@](C)([C@H](CC4)O)[C@@H]4[C@@H]3CCC2=C1 MUMGGOZAMZWBJJ-DYKIIFRCSA-N 0.000 description 2
- XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N Zinc monoxide Chemical compound [Zn]=O XLOMVQKBTHCTTD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 108010020588 actaplanin Proteins 0.000 description 2
- BDNDRNLSLGGULA-UHFFFAOYSA-N actaplanin Chemical compound C=1C2=CC=C(O)C=1C1=C(OC3C(C(O)C(O)C(CO)O3)O)C=C(O)C=C1C(C(=O)OC)NC(=O)C1NC(=O)C2NC(=O)C2NC(=O)C(C=3C=C(C(=C(O)C=3)C)OC=3C(O)=CC=C(C=3)C(N)C(=O)N3)NC(=O)C3CC(C=C3)=CC=C3OC(C=3OC4C(C(O)C(O)C(CO)O4)O)=CC2=CC=3OC(C(=C2)Cl)=CC=C2C1OC1CC(N)C(O)C(C)O1 BDNDRNLSLGGULA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229950002379 actaplanin Drugs 0.000 description 2
- 229960000458 allantoin Drugs 0.000 description 2
- 235000001014 amino acid Nutrition 0.000 description 2
- 229940024606 amino acid Drugs 0.000 description 2
- 150000001413 amino acids Chemical class 0.000 description 2
- 230000000844 anti-bacterial effect Effects 0.000 description 2
- PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N arabinose Chemical compound OC[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C=O PYMYPHUHKUWMLA-WDCZJNDASA-N 0.000 description 2
- 235000019377 avoparcin Nutrition 0.000 description 2
- 108010053278 avoparcin Proteins 0.000 description 2
- JWFVWARSGMYXRN-HTQQBIQNSA-N avoparcin Chemical compound O([C@H]1[C@H](C(N[C@H](C(=O)N[C@H]2C(=O)N[C@H]3C(=O)N[C@H](C(N[C@H](C4=CC(O)=CC(O)=C4C=4C(O)=CC=C3C=4)C(O)=O)=O)CC3=C(O[C@@H]4O[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](N)C4)C=C(C(=C3)Cl)OC=3C=C2C=C(C=3O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O[C@@H]2O[C@@H](C)[C@H](O)[C@H](N)C2)OC2=CC=C1C=C2)C=1C=CC(O)=CC=1)=O)NC(=O)[C@@H](NC)C=1C=CC(O[C@H]2[C@@H]([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](C)O2)O)=CC=1)[C@@H]1O[C@@H](CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O JWFVWARSGMYXRN-HTQQBIQNSA-N 0.000 description 2
- 229950001335 avoparcin Drugs 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N beta-D-galactosamine Natural products NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N beta-maltose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O[C@H]2[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O[C@@H]2CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O GUBGYTABKSRVRQ-QUYVBRFLSA-N 0.000 description 2
- 229940036811 bone meal Drugs 0.000 description 2
- 239000002374 bone meal Substances 0.000 description 2
- 239000007853 buffer solution Substances 0.000 description 2
- 239000001506 calcium phosphate Substances 0.000 description 2
- 239000001569 carbon dioxide Substances 0.000 description 2
- 229910002092 carbon dioxide Inorganic materials 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004534 cecum Anatomy 0.000 description 2
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 2
- SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M choline chloride Chemical compound [Cl-].C[N+](C)(C)CCO SGMZJAMFUVOLNK-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 229960003178 choline chloride Drugs 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- 239000008121 dextrose Substances 0.000 description 2
- 235000014113 dietary fatty acids Nutrition 0.000 description 2
- 210000002257 embryonic structure Anatomy 0.000 description 2
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 2
- 229930195729 fatty acid Natural products 0.000 description 2
- 239000000194 fatty acid Substances 0.000 description 2
- 150000004665 fatty acids Chemical class 0.000 description 2
- 239000004467 fishmeal Substances 0.000 description 2
- 235000004426 flaxseed Nutrition 0.000 description 2
- 235000013312 flour Nutrition 0.000 description 2
- 235000012631 food intake Nutrition 0.000 description 2
- 230000037406 food intake Effects 0.000 description 2
- 229930182830 galactose Natural products 0.000 description 2
- 239000011521 glass Substances 0.000 description 2
- 229960002442 glucosamine Drugs 0.000 description 2
- 125000002791 glucosyl group Chemical group C1([C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O1)CO)* 0.000 description 2
- 239000001963 growth medium Substances 0.000 description 2
- UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N guanine Chemical compound O=C1NC(N)=NC2=C1N=CN2 UYTPUPDQBNUYGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N hypoxanthine Chemical compound O=C1NC=NC2=C1NC=N2 FDGQSTZJBFJUBT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000001727 in vivo Methods 0.000 description 2
- 208000015181 infectious disease Diseases 0.000 description 2
- 230000000968 intestinal effect Effects 0.000 description 2
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N iron Substances [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N isobutyric acid Chemical compound CC(C)C(O)=O KQNPFQTWMSNSAP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010829 isocratic elution Methods 0.000 description 2
- GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N isovaleric acid Chemical compound CC(C)CC(O)=O GWYFCOCPABKNJV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003085 meticillin Drugs 0.000 description 2
- 235000013336 milk Nutrition 0.000 description 2
- 239000008267 milk Substances 0.000 description 2
- 210000004080 milk Anatomy 0.000 description 2
- 239000004309 nisin Substances 0.000 description 2
- 235000010297 nisin Nutrition 0.000 description 2
- 231100000252 nontoxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000003000 nontoxic effect Effects 0.000 description 2
- 235000016709 nutrition Nutrition 0.000 description 2
- 239000002420 orchard Substances 0.000 description 2
- 239000008188 pellet Substances 0.000 description 2
- 150000003904 phospholipids Chemical class 0.000 description 2
- BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N propan-1-ol Chemical compound CCCO BDERNNFJNOPAEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000010992 reflux Methods 0.000 description 2
- 210000004767 rumen Anatomy 0.000 description 2
- 238000005070 sampling Methods 0.000 description 2
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 2
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 2
- UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N streptomycin Chemical compound CN[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](CO)O[C@H]1O[C@@H]1[C@](C=O)(O)[C@H](C)O[C@H]1O[C@@H]1[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@@H](NC(N)=N)[C@H](O)[C@H]1O UCSJYZPVAKXKNQ-HZYVHMACSA-N 0.000 description 2
- 239000013589 supplement Substances 0.000 description 2
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 2
- BJNLLBUOHPVGFT-QRZIFLFXSA-N teichomycin Chemical compound CCCCCCCCCC(=O)N[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)OC=2C(=CC(=CC=2)[C@@H](O[C@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)NC(C)=O)[C@H]2C(N[C@H](C3=CC(O)=CC(O[C@@H]4[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)=C3C=3C(O)=CC=C(C=3)[C@@H](NC3=O)C(=O)N2)C(O)=O)=O)Cl)=C(OC=2C(=CC(C[C@H](C(N4)=O)NC(=O)[C@H](N)C=5C=C(O6)C(O)=CC=5)=CC=2)Cl)C=C1[C@H]3NC(=O)[C@@H]4C1=CC6=CC(O)=C1 BJNLLBUOHPVGFT-QRZIFLFXSA-N 0.000 description 2
- 231100000331 toxic Toxicity 0.000 description 2
- 230000002588 toxic effect Effects 0.000 description 2
- 229940070710 valerate Drugs 0.000 description 2
- NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N valeric acid Chemical compound CCCCC(O)=O NQPDZGIKBAWPEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 239000003643 water by type Substances 0.000 description 2
- HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N α-D-glucopyranosyl-α-D-glucopyranoside Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(O)C(O)C(O)C(CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N (2s)-2,4-diamino-4-oxobutanoic acid;propane-1,2,3-triol Chemical compound OCC(O)CO.OC(=O)[C@@H](N)CC(N)=O UQZSVIGPZAULMV-DKWTVANSSA-N 0.000 description 1
- WPJRFCZKZXBUNI-JKUQZMGJSA-N (3r,4r,5s)-3-amino-4,5-dihydroxyhexanal Chemical compound C[C@H](O)[C@H](O)[C@H](N)CC=O WPJRFCZKZXBUNI-JKUQZMGJSA-N 0.000 description 1
- IJSNCWAAHIVVGJ-XVMARJQXSA-N (3s,4s,5s)-3-amino-4,5-dihydroxy-3-methylhexanal Chemical compound C[C@H](O)[C@@H](O)[C@@](C)(N)CC=O IJSNCWAAHIVVGJ-XVMARJQXSA-N 0.000 description 1
- KJBONRGCLLBWCJ-UHFFFAOYSA-N 2-(tert-butylamino)-1-(7-ethyl-1-benzofuran-2-yl)ethanol;hydron;chloride Chemical compound Cl.CCC1=CC=CC2=C1OC(C(O)CNC(C)(C)C)=C2 KJBONRGCLLBWCJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-PGYHGBPZSA-N 2-amino-3-O-[(R)-1-carboxyethyl]-2-deoxy-D-glucopyranose Chemical compound OC(=O)[C@@H](C)O[C@@H]1[C@@H](N)C(O)O[C@H](CO)[C@H]1O MSFSPUZXLOGKHJ-PGYHGBPZSA-N 0.000 description 1
- 208000004998 Abdominal Pain Diseases 0.000 description 1
- 229930024421 Adenine Natural products 0.000 description 1
- GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N Adenine Chemical compound NC1=NC=NC2=C1N=CN2 GFFGJBXGBJISGV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N Aesculin Natural products OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1Oc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O PLXMOAALOJOTIY-FPTXNFDTSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N Ammonia Chemical compound N QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O Ammonium Chemical compound [NH4+] QGZKDVFQNNGYKY-UHFFFAOYSA-O 0.000 description 1
- 235000019737 Animal fat Nutrition 0.000 description 1
- 235000017060 Arachis glabrata Nutrition 0.000 description 1
- 244000105624 Arachis hypogaea Species 0.000 description 1
- 235000010777 Arachis hypogaea Nutrition 0.000 description 1
- 235000018262 Arachis monticola Nutrition 0.000 description 1
- 108010001478 Bacitracin Proteins 0.000 description 1
- 241000219310 Beta vulgaris subsp. vulgaris Species 0.000 description 1
- 241000283690 Bos taurus Species 0.000 description 1
- 241000273930 Brevoortia tyrannus Species 0.000 description 1
- CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M Bromide Chemical compound [Br-] CPELXLSAUQHCOX-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229910000906 Bronze Inorganic materials 0.000 description 1
- 102100021943 C-C motif chemokine 2 Human genes 0.000 description 1
- 101710155857 C-C motif chemokine 2 Proteins 0.000 description 1
- 102100034871 C-C motif chemokine 8 Human genes 0.000 description 1
- 101710155833 C-C motif chemokine 8 Proteins 0.000 description 1
- 101100283604 Caenorhabditis elegans pigk-1 gene Proteins 0.000 description 1
- OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N Calcium Chemical compound [Ca] OYPRJOBELJOOCE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BCZXFFBUYPCTSJ-UHFFFAOYSA-L Calcium propionate Chemical compound [Ca+2].CCC([O-])=O.CCC([O-])=O BCZXFFBUYPCTSJ-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L Carbonate Chemical compound [O-]C([O-])=O BVKZGUZCCUSVTD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 102000016938 Catalase Human genes 0.000 description 1
- 108010053835 Catalase Proteins 0.000 description 1
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M Chloride anion Chemical compound [Cl-] VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N Cichoriin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1)c1c(O)cc2c(OC(=O)C=C2)c1 WNBCMONIPIJTSB-BGNCJLHMSA-N 0.000 description 1
- KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K Citrate Chemical compound [O-]C(=O)CC(O)(CC([O-])=O)C([O-])=O KRKNYBCHXYNGOX-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 208000002881 Colic Diseases 0.000 description 1
- RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N D-Fructose Natural products OC[C@H]1OC(O)(CO)[C@@H](O)[C@@H]1O RFSUNEUAIZKAJO-VRPWFDPXSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N D-Glucitol Natural products OC[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-FSIIMWSLSA-N 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N D-glucitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-JGWLITMVSA-N 0.000 description 1
- SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N D-xylopyranose Chemical compound O[C@@H]1COC(O)[C@H](O)[C@H]1O SRBFZHDQGSBBOR-IOVATXLUSA-N 0.000 description 1
- 239000004470 DL Methionine Substances 0.000 description 1
- 229920001353 Dextrin Polymers 0.000 description 1
- 239000004375 Dextrin Substances 0.000 description 1
- FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N Dextrotartaric acid Chemical compound OC(=O)[C@H](O)[C@@H](O)C(O)=O FEWJPZIEWOKRBE-JCYAYHJZSA-N 0.000 description 1
- 235000019739 Dicalciumphosphate Nutrition 0.000 description 1
- RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N Dihydrogen sulfide Chemical compound S RWSOTUBLDIXVET-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 102000016942 Elastin Human genes 0.000 description 1
- 108010014258 Elastin Proteins 0.000 description 1
- 241000588697 Enterobacter cloacae Species 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N Erythritol Natural products OCC(O)C(O)CO UNXHWFMMPAWVPI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M Formate Chemical compound [O-]C=O BDAGIHXWWSANSR-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 229930091371 Fructose Natural products 0.000 description 1
- 239000005715 Fructose Substances 0.000 description 1
- 241000605986 Fusobacterium nucleatum Species 0.000 description 1
- 108010010803 Gelatin Proteins 0.000 description 1
- 229930182566 Gentamicin Natural products 0.000 description 1
- CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N Gentamicin Chemical compound O1[C@H](C(C)NC)CC[C@@H](N)[C@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](NC)[C@@](C)(O)CO2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N CEAZRRDELHUEMR-URQXQFDESA-N 0.000 description 1
- WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N Glutamic acid Natural products OC(=O)C(N)CCC(O)=O WHUUTDBJXJRKMK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N Glycerophosphorylethanolamin Natural products NCCOP(O)(=O)OCC(O)CO JZNWSCPGTDBMEW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 244000068988 Glycine max Species 0.000 description 1
- 235000010469 Glycine max Nutrition 0.000 description 1
- 229920002527 Glycogen Polymers 0.000 description 1
- 235000007340 Hordeum vulgare Nutrition 0.000 description 1
- 240000005979 Hordeum vulgare Species 0.000 description 1
- UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N Hypoxanthine nucleoside Natural products OC1C(O)C(CO)OC1N1C(NC=NC2=O)=C2N=C1 UGQMRVRMYYASKQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 1
- 229920001202 Inulin Polymers 0.000 description 1
- 241000203790 Kibdelosporangium Species 0.000 description 1
- LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N L-(-)-Sorbose Chemical compound OCC1(O)OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O LKDRXBCSQODPBY-AMVSKUEXSA-N 0.000 description 1
- QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N L-alanine Chemical compound C[C@H](N)C(O)=O QNAYBMKLOCPYGJ-REOHCLBHSA-N 0.000 description 1
- JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M Lactate Chemical compound CC(O)C([O-])=O JVTAAEKCZFNVCJ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 241000283986 Lepus Species 0.000 description 1
- OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N Lincomycin Natural products CN1CC(CCC)CC1C(=O)NC(C(C)O)C1C(O)C(O)C(O)C(SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000019735 Meat-and-bone meal Nutrition 0.000 description 1
- UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N Metaphosphoric acid Chemical compound OP(=O)=O UEZVMMHDMIWARA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588772 Morganella morganii Species 0.000 description 1
- 102000016943 Muramidase Human genes 0.000 description 1
- 108010014251 Muramidase Proteins 0.000 description 1
- MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N Muraminsaeure Natural products OC(=O)C(C)OC1C(N)C(O)OC(CO)C1O MSFSPUZXLOGKHJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000699670 Mus sp. Species 0.000 description 1
- 108010062010 N-Acetylmuramoyl-L-alanine Amidase Proteins 0.000 description 1
- LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N N-Butanol Chemical compound CCCCO LRHPLDYGYMQRHN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M Nitrite anion Chemical compound [O-]N=O IOVCWXUNBOPUCH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- YJQPYGGHQPGBLI-UHFFFAOYSA-N Novobiocin Natural products O1C(C)(C)C(OC)C(OC(N)=O)C(O)C1OC1=CC=C(C(O)=C(NC(=O)C=2C=C(CC=C(C)C)C(O)=CC=2)C(=O)O2)C2=C1C YJQPYGGHQPGBLI-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000237502 Ostreidae Species 0.000 description 1
- MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N Oxalic acid Chemical compound OC(=O)C(O)=O MUBZPKHOEPUJKR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004100 Oxytetracycline Substances 0.000 description 1
- 241001494479 Pecora Species 0.000 description 1
- 229930182555 Penicillin Natural products 0.000 description 1
- JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N Penicillin G Chemical compound N([C@H]1[C@H]2SC([C@@H](N2C1=O)C(O)=O)(C)C)C(=O)CC1=CC=CC=C1 JGSARLDLIJGVTE-MBNYWOFBSA-N 0.000 description 1
- 239000001888 Peptone Substances 0.000 description 1
- 108010080698 Peptones Proteins 0.000 description 1
- 102000004160 Phosphoric Monoester Hydrolases Human genes 0.000 description 1
- 108090000608 Phosphoric Monoester Hydrolases Proteins 0.000 description 1
- 241000364051 Pima Species 0.000 description 1
- ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N Potassium Chemical compound [K] ZLMJMSJWJFRBEC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000588770 Proteus mirabilis Species 0.000 description 1
- 241000589517 Pseudomonas aeruginosa Species 0.000 description 1
- LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M Pyruvate Chemical compound CC(=O)C([O-])=O LCTONWCANYUPML-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N Raffinose Natural products O(C[C@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O[C@@]2(CO)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O1)[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-RMMQSMQOSA-N 0.000 description 1
- 241000282849 Ruminantia Species 0.000 description 1
- 241000827384 Sheareria Species 0.000 description 1
- VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N Silicium dioxide Chemical compound O=[Si]=O VYPSYNLAJGMNEJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021536 Sugar beet Nutrition 0.000 description 1
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L Sulfate Chemical compound [O-]S([O-])(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 239000004098 Tetracycline Substances 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N Trehalose Natural products O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-WSWWMNSNSA-N 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N UNPD196149 Natural products OC1C(O)C(CO)OC1(CO)OC1C(O)C(O)C(O)C(COC2C(C(O)C(O)C(CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OIJZDPGKNVKVBL-UHFFFAOYSA-N Vancosamine Natural products CC1OC(O)CC(C)(N)C1O OIJZDPGKNVKVBL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000004188 Virginiamycin Substances 0.000 description 1
- 108010080702 Virginiamycin Proteins 0.000 description 1
- 229930003270 Vitamin B Natural products 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N Vitamin D2 Natural products C1CCC2(C)C(C(C)C=CC(C)C(C)C)CCC2C1=CC=C1CC(O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000005862 Whey Substances 0.000 description 1
- 102000007544 Whey Proteins Human genes 0.000 description 1
- 108010046377 Whey Proteins Proteins 0.000 description 1
- 150000007513 acids Chemical class 0.000 description 1
- FHIABUHDBXFQIT-JSNQUVIDSA-N actinoidin Chemical compound O1[C@@H](C)[C@H](OC)[C@@H](N)C[C@@H]1OC(C1C(NC(C2=CC(O)=CC(O[C@@H]3[C@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)=C2C=2C(O)=CC=C(C=2)C(NC(=O)C2NC(=O)C(CC=3C=CC=CC=3)NC(=O)C(NC(=O)C(N)C=3C=CC(O)=CC=3)C(O)C=3C=CC(O4)=CC=3)C(=O)N1)C(O)=O)=O)C(C=C1Cl)=CC=C1OC1=C(O[C@H]3[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O3)O[C@@H]3O[C@@H](C)[C@H](O)[C@@H](N)C3)C4=CC2=C1 FHIABUHDBXFQIT-JSNQUVIDSA-N 0.000 description 1
- 108700031667 actinoidins Proteins 0.000 description 1
- 230000006978 adaptation Effects 0.000 description 1
- 239000000654 additive Substances 0.000 description 1
- 229960000643 adenine Drugs 0.000 description 1
- 238000001042 affinity chromatography Methods 0.000 description 1
- 238000002814 agar dilution Methods 0.000 description 1
- 238000013019 agitation Methods 0.000 description 1
- 235000004279 alanine Nutrition 0.000 description 1
- HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N alpha,alpha-trehalose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 HDTRYLNUVZCQOY-LIZSDCNHSA-N 0.000 description 1
- HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N alpha-D-Furanose-Ribose Natural products OCC1OC(O)C(O)C1O HMFHBZSHGGEWLO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N alpha-D-galactose Chemical compound OC[C@H]1O[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H]1O WQZGKKKJIJFFOK-PHYPRBDBSA-N 0.000 description 1
- 230000000845 anti-microbial effect Effects 0.000 description 1
- 239000006286 aqueous extract Substances 0.000 description 1
- 239000008346 aqueous phase Substances 0.000 description 1
- 230000001174 ascending effect Effects 0.000 description 1
- 229960003071 bacitracin Drugs 0.000 description 1
- 229930184125 bacitracin Natural products 0.000 description 1
- CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N bacitracin A Chemical compound C1SC([C@@H](N)[C@@H](C)CC)=N[C@@H]1C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@H](CCC(O)=O)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H]1C(=O)N[C@H](CCCN)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@H](CC=2C=CC=CC=2)C(=O)N[C@@H](CC=2N=CNC=2)C(=O)N[C@H](CC(O)=O)C(=O)N[C@@H](CC(N)=O)C(=O)NCCCC1 CLKOFPXJLQSYAH-ABRJDSQDSA-N 0.000 description 1
- 230000001580 bacterial effect Effects 0.000 description 1
- 235000015278 beef Nutrition 0.000 description 1
- 239000007613 bennett's agar Substances 0.000 description 1
- WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N benzoic acid Chemical compound OC(=O)C1=CC=CC=C1 WPYMKLBDIGXBTP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N beta-melibiose Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O[C@@H]1OC[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)O1 DLRVVLDZNNYCBX-ZZFZYMBESA-N 0.000 description 1
- 230000004071 biological effect Effects 0.000 description 1
- 239000010974 bronze Substances 0.000 description 1
- 244000309464 bull Species 0.000 description 1
- 235000001465 calcium Nutrition 0.000 description 1
- 239000011575 calcium Substances 0.000 description 1
- 229910052791 calcium Inorganic materials 0.000 description 1
- 229910000019 calcium carbonate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000010216 calcium carbonate Nutrition 0.000 description 1
- 229910000389 calcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000011010 calcium phosphates Nutrition 0.000 description 1
- 239000004330 calcium propionate Substances 0.000 description 1
- 235000010331 calcium propionate Nutrition 0.000 description 1
- 229940041514 candida albicans extract Drugs 0.000 description 1
- 239000002775 capsule Substances 0.000 description 1
- 150000001720 carbohydrates Chemical class 0.000 description 1
- 235000014633 carbohydrates Nutrition 0.000 description 1
- 239000005018 casein Substances 0.000 description 1
- BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N casein, tech. Chemical compound NCCCCC(C(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CC(C)C)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(C(C)O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=O)N=C(O)C(COP(O)(O)=O)N=C(O)C(CCC(O)=N)N=C(O)C(N)CC1=CC=CC=C1 BECPQYXYKAMYBN-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000021240 caseins Nutrition 0.000 description 1
- 229960000603 cefalotin Drugs 0.000 description 1
- 230000001413 cellular effect Effects 0.000 description 1
- 239000001913 cellulose Substances 0.000 description 1
- 229920002678 cellulose Polymers 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- VUFGUVLLDPOSBC-XRZFDKQNSA-M cephalothin sodium Chemical compound [Na+].N([C@H]1[C@@H]2N(C1=O)C(=C(CS2)COC(=O)C)C([O-])=O)C(=O)CC1=CC=CS1 VUFGUVLLDPOSBC-XRZFDKQNSA-M 0.000 description 1
- CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N chlorotetracycline Natural products C1=CC(Cl)=C2C(O)(C)C3CC4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N chlortetracycline Chemical compound C1=CC(Cl)=C2[C@](O)(C)[C@H]3C[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O CYDMQBQPVICBEU-XRNKAMNCSA-N 0.000 description 1
- 229960001231 choline Drugs 0.000 description 1
- OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N choline Chemical compound C[N+](C)(C)CCO OEYIOHPDSNJKLS-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960002227 clindamycin Drugs 0.000 description 1
- KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N clindamycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@H](C)Cl)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 KDLRVYVGXIQJDK-AWPVFWJPSA-N 0.000 description 1
- 239000003086 colorant Substances 0.000 description 1
- 239000012141 concentrate Substances 0.000 description 1
- 235000008504 concentrate Nutrition 0.000 description 1
- KUNSUQLRTQLHQQ-UHFFFAOYSA-N copper tin Chemical compound [Cu].[Sn] KUNSUQLRTQLHQQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000002285 corn oil Substances 0.000 description 1
- 235000005687 corn oil Nutrition 0.000 description 1
- 235000019425 dextrin Nutrition 0.000 description 1
- NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K dicalcium phosphate Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O NEFBYIFKOOEVPA-UHFFFAOYSA-K 0.000 description 1
- 229910000390 dicalcium phosphate Inorganic materials 0.000 description 1
- 229940038472 dicalcium phosphate Drugs 0.000 description 1
- 230000000378 dietary effect Effects 0.000 description 1
- 235000018823 dietary intake Nutrition 0.000 description 1
- 238000009792 diffusion process Methods 0.000 description 1
- 210000002249 digestive system Anatomy 0.000 description 1
- FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N diphosphatidyl glycerol Natural products OP(O)(=O)OCC(OP(O)(O)=O)COP(O)(O)=O FRKBLBQTSTUKOV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000006073 displacement reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 description 1
- 239000003937 drug carrier Substances 0.000 description 1
- QYDYPVFESGNLHU-UHFFFAOYSA-N elaidic acid methyl ester Natural products CCCCCCCCC=CCCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229920002549 elastin Polymers 0.000 description 1
- 238000010828 elution Methods 0.000 description 1
- 239000000839 emulsion Substances 0.000 description 1
- 230000007613 environmental effect Effects 0.000 description 1
- 229960002061 ergocalciferol Drugs 0.000 description 1
- UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N erythritol Chemical compound OC[C@H](O)[C@H](O)CO UNXHWFMMPAWVPI-ZXZARUISSA-N 0.000 description 1
- XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N esculin Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC(C(=C1)O)=CC2=C1OC(=O)C=C2 XHCADAYNFIFUHF-TVKJYDDYSA-N 0.000 description 1
- 229940093496 esculin Drugs 0.000 description 1
- AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N esculin Natural products OC1OC(COc2cc3C=CC(=O)Oc3cc2O)C(O)C(O)C1O AWRMZKLXZLNBBK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 description 1
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 238000002143 fast-atom bombardment mass spectrum Methods 0.000 description 1
- 239000003925 fat Substances 0.000 description 1
- 235000019197 fats Nutrition 0.000 description 1
- 238000001914 filtration Methods 0.000 description 1
- 235000012041 food component Nutrition 0.000 description 1
- 238000004108 freeze drying Methods 0.000 description 1
- FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N galactitol Chemical compound OC[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)CO FBPFZTCFMRRESA-GUCUJZIJSA-N 0.000 description 1
- 238000004817 gas chromatography Methods 0.000 description 1
- 239000000499 gel Substances 0.000 description 1
- 239000008273 gelatin Substances 0.000 description 1
- 229920000159 gelatin Polymers 0.000 description 1
- 235000019322 gelatine Nutrition 0.000 description 1
- 235000011852 gelatine desserts Nutrition 0.000 description 1
- 235000013922 glutamic acid Nutrition 0.000 description 1
- 239000004220 glutamic acid Substances 0.000 description 1
- 229940096919 glycogen Drugs 0.000 description 1
- 239000008187 granular material Substances 0.000 description 1
- 238000000227 grinding Methods 0.000 description 1
- 239000007952 growth promoter Substances 0.000 description 1
- 239000010903 husk Substances 0.000 description 1
- 229910000037 hydrogen sulfide Inorganic materials 0.000 description 1
- 208000021267 infertility disease Diseases 0.000 description 1
- 238000002329 infrared spectrum Methods 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N inositol Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O CDAISMWEOUEBRE-GPIVLXJGSA-N 0.000 description 1
- 238000007912 intraperitoneal administration Methods 0.000 description 1
- 229940029339 inulin Drugs 0.000 description 1
- JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N inulin Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)OC[C@]1(OC[C@]2(OC[C@]3(OC[C@]4(OC[C@]5(OC[C@]6(OC[C@]7(OC[C@]8(OC[C@]9(OC[C@]%10(OC[C@]%11(OC[C@]%12(OC[C@]%13(OC[C@]%14(OC[C@]%15(OC[C@]%16(OC[C@]%17(OC[C@]%18(OC[C@]%19(OC[C@]%20(OC[C@]%21(OC[C@]%22(OC[C@]%23(OC[C@]%24(OC[C@]%25(OC[C@]%26(OC[C@]%27(OC[C@]%28(OC[C@]%29(OC[C@]%30(OC[C@]%31(OC[C@]%32(OC[C@]%33(OC[C@]%34(OC[C@]%35(OC[C@]%36(O[C@@H]%37[C@@H]([C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O%37)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%36)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%35)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%34)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%33)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%32)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%31)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%30)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%29)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%28)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%27)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%26)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%25)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%24)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%23)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%22)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%21)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%20)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%19)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%18)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%17)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%16)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%15)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%14)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%13)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%12)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%11)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O%10)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O9)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O8)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O7)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O6)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O5)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O4)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O3)O)[C@H]([C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1 JYJIGFIDKWBXDU-MNNPPOADSA-N 0.000 description 1
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 1
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000011031 large-scale manufacturing process Methods 0.000 description 1
- 235000021374 legumes Nutrition 0.000 description 1
- 230000000670 limiting effect Effects 0.000 description 1
- OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N lincomycin Chemical compound CN1C[C@H](CCC)C[C@H]1C(=O)N[C@H]([C@@H](C)O)[C@@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H](SC)O1 OJMMVQQUTAEWLP-KIDUDLJLSA-N 0.000 description 1
- 229960005287 lincomycin Drugs 0.000 description 1
- 239000000944 linseed oil Substances 0.000 description 1
- 235000021388 linseed oil Nutrition 0.000 description 1
- 239000004325 lysozyme Substances 0.000 description 1
- 235000010335 lysozyme Nutrition 0.000 description 1
- 229960000274 lysozyme Drugs 0.000 description 1
- 229940049920 malate Drugs 0.000 description 1
- BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N malic acid Chemical compound OC(=O)C(O)CC(O)=O BJEPYKJPYRNKOW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011702 manganese sulphate Substances 0.000 description 1
- 235000007079 manganese sulphate Nutrition 0.000 description 1
- SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L manganese(II) sulfate Chemical compound [Mn+2].[O-]S([O-])(=O)=O SQQMAOCOWKFBNP-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000010355 mannitol Nutrition 0.000 description 1
- AEUKDPKXTPNBNY-XEYRWQBLSA-N mcp 2 Chemical compound C([C@@H](C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)NCC(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H]([C@@H](C)CC)C(=O)N[C@@H](CC=1NC=NC=1)C(=O)N1[C@@H](CCC1)C(=O)N[C@@H](CC(C)C)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CS)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(=O)N[C@@H](CCCNC(N)=N)C(O)=O)NC(=O)CNC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCC(O)=O)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H]1N(CCC1)C(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](CC(C)C)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CCCNC(N)=N)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@H](C)NC(=O)[C@H](CS)NC(=O)[C@@H](NC(=O)[C@@H](N)C(C)C)C(C)C)C1=CC=CC=C1 AEUKDPKXTPNBNY-XEYRWQBLSA-N 0.000 description 1
- 235000013622 meat product Nutrition 0.000 description 1
- 229930182817 methionine Natural products 0.000 description 1
- 235000006109 methionine Nutrition 0.000 description 1
- FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N methionine Chemical compound CSCCC(N)C(O)=O FFEARJCKVFRZRR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HOVAGTYPODGVJG-ZFYZTMLRSA-N methyl alpha-D-glucopyranoside Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H]1O HOVAGTYPODGVJG-ZFYZTMLRSA-N 0.000 description 1
- HOVAGTYPODGVJG-VEIUFWFVSA-N methyl alpha-D-mannoside Chemical compound CO[C@H]1O[C@H](CO)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H]1O HOVAGTYPODGVJG-VEIUFWFVSA-N 0.000 description 1
- QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N methyl oleate Chemical compound CCCCCCCC\C=C/CCCCCCCC(=O)OC QYDYPVFESGNLHU-KHPPLWFESA-N 0.000 description 1
- 229940073769 methyl oleate Drugs 0.000 description 1
- 238000007392 microtiter assay Methods 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000011206 morphological examination Methods 0.000 description 1
- 229960002950 novobiocin Drugs 0.000 description 1
- YJQPYGGHQPGBLI-KGSXXDOSSA-N novobiocin Chemical compound O1C(C)(C)[C@H](OC)[C@@H](OC(N)=O)[C@@H](O)[C@@H]1OC1=CC=C(C(O)=C(NC(=O)C=2C=C(CC=C(C)C)C(O)=CC=2)C(=O)O2)C2=C1C YJQPYGGHQPGBLI-KGSXXDOSSA-N 0.000 description 1
- 239000006916 nutrient agar Substances 0.000 description 1
- 235000014571 nuts Nutrition 0.000 description 1
- 229960000625 oxytetracycline Drugs 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N oxytetracycline Chemical compound C1=CC=C2[C@](O)(C)[C@H]3[C@H](O)[C@H]4[C@H](N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)[C@@]4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-PXOLEDIWSA-N 0.000 description 1
- 235000019366 oxytetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 235000020636 oyster Nutrition 0.000 description 1
- 238000007911 parenteral administration Methods 0.000 description 1
- 238000005192 partition Methods 0.000 description 1
- 235000020232 peanut Nutrition 0.000 description 1
- 229940049954 penicillin Drugs 0.000 description 1
- 235000019319 peptone Nutrition 0.000 description 1
- 239000003208 petroleum Substances 0.000 description 1
- 239000012071 phase Substances 0.000 description 1
- 150000008104 phosphatidylethanolamines Chemical class 0.000 description 1
- -1 phosphatidylinositol mannosides Chemical class 0.000 description 1
- 150000003905 phosphatidylinositols Chemical class 0.000 description 1
- 239000006187 pill Substances 0.000 description 1
- 239000013641 positive control Substances 0.000 description 1
- 239000011591 potassium Substances 0.000 description 1
- 229910052700 potassium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001737 promoting effect Effects 0.000 description 1
- MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N raffinose Chemical compound O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@@]1(CO)O[C@@H]1[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO[C@@H]2[C@@H]([C@@H](O)[C@@H](O)[C@@H](CO)O2)O)O1 MUPFEKGTMRGPLJ-ZQSKZDJDSA-N 0.000 description 1
- 230000000384 rearing effect Effects 0.000 description 1
- 238000004007 reversed phase HPLC Methods 0.000 description 1
- 230000002441 reversible effect Effects 0.000 description 1
- JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N rifampicin Chemical compound O([C@](C1=O)(C)O/C=C/[C@@H]([C@H]([C@@H](OC(C)=O)[C@H](C)[C@H](O)[C@H](C)[C@@H](O)[C@@H](C)\C=C\C=C(C)/C(=O)NC=2C(O)=C3C([O-])=C4C)C)OC)C4=C1C3=C(O)C=2\C=N\N1CC[NH+](C)CC1 JQXXHWHPUNPDRT-WLSIYKJHSA-N 0.000 description 1
- 229960001225 rifampicin Drugs 0.000 description 1
- CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N scyllo-inosotol Natural products OC1C(O)C(O)C(O)C(O)C1O CDAISMWEOUEBRE-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 230000035945 sensitivity Effects 0.000 description 1
- 239000011734 sodium Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000012064 sodium phosphate buffer Substances 0.000 description 1
- XOIQMTLWECTKJL-FBZUZRIGSA-M sodium;(2s,3r,4s)-4-[(2s,5r,7s,8r,9s)-2-[(2r,5s)-5-ethyl-5-[(2r,3s,5r)-5-[(2s,3s,5r,6r)-6-hydroxy-6-(hydroxymethyl)-3,5-dimethyloxan-2-yl]-3-methyloxolan-2-yl]oxolan-2-yl]-7-hydroxy-2,8-dimethyl-1,10-dioxaspiro[4.5]decan-9-yl]-3-methoxy-2-methylpentanoate Chemical compound [Na+].C([C@@](O1)(C)[C@H]2CC[C@@](O2)(CC)[C@H]2[C@H](C[C@@H](O2)[C@@H]2[C@H](C[C@@H](C)[C@](O)(CO)O2)C)C)C[C@@]21C[C@H](O)[C@@H](C)[C@@H]([C@@H](C)[C@@H](OC)[C@H](C)C([O-])=O)O2 XOIQMTLWECTKJL-FBZUZRIGSA-M 0.000 description 1
- 239000002594 sorbent Substances 0.000 description 1
- 229960002920 sorbitol Drugs 0.000 description 1
- 239000008174 sterile solution Substances 0.000 description 1
- 239000008223 sterile water Substances 0.000 description 1
- 229960005322 streptomycin Drugs 0.000 description 1
- KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L succinate(2-) Chemical compound [O-]C(=O)CCC([O-])=O KDYFGRWQOYBRFD-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 235000000346 sugar Nutrition 0.000 description 1
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 1
- 230000000153 supplemental effect Effects 0.000 description 1
- 230000009469 supplementation Effects 0.000 description 1
- 239000006188 syrup Substances 0.000 description 1
- 235000020357 syrup Nutrition 0.000 description 1
- 239000003826 tablet Substances 0.000 description 1
- 229940095064 tartrate Drugs 0.000 description 1
- 230000002123 temporal effect Effects 0.000 description 1
- IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N terramycin dehydrate Natural products C1=CC=C2C(O)(C)C3C(O)C4C(N(C)C)C(O)=C(C(N)=O)C(=O)C4(O)C(O)=C3C(=O)C2=C1O IWVCMVBTMGNXQD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 229960003604 testosterone Drugs 0.000 description 1
- 229960002180 tetracycline Drugs 0.000 description 1
- 235000019364 tetracycline Nutrition 0.000 description 1
- 229930101283 tetracycline Natural products 0.000 description 1
- 150000003522 tetracyclines Chemical class 0.000 description 1
- 229960000707 tobramycin Drugs 0.000 description 1
- NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N tobramycin Chemical compound N[C@@H]1C[C@H](O)[C@@H](CN)O[C@@H]1O[C@H]1[C@H](O)[C@@H](O[C@@H]2[C@@H]([C@@H](N)[C@H](O)[C@@H](CO)O2)O)[C@H](N)C[C@@H]1N NLVFBUXFDBBNBW-PBSUHMDJSA-N 0.000 description 1
- 235000013619 trace mineral Nutrition 0.000 description 1
- 239000011573 trace mineral Substances 0.000 description 1
- QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H tricalcium bis(phosphate) Chemical compound [Ca+2].[Ca+2].[Ca+2].[O-]P([O-])([O-])=O.[O-]P([O-])([O-])=O QORWJWZARLRLPR-UHFFFAOYSA-H 0.000 description 1
- 229960004441 tyrosine Drugs 0.000 description 1
- 235000019373 virginiamycin Nutrition 0.000 description 1
- 229960003842 virginiamycin Drugs 0.000 description 1
- 235000019156 vitamin B Nutrition 0.000 description 1
- 239000011720 vitamin B Substances 0.000 description 1
- MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N vitamin D2 Chemical compound C1(/[C@@H]2CC[C@@H]([C@]2(CCC1)C)[C@H](C)/C=C/[C@H](C)C(C)C)=C\C=C1\C[C@@H](O)CCC1=C MECHNRXZTMCUDQ-RKHKHRCZSA-N 0.000 description 1
- 235000001892 vitamin D2 Nutrition 0.000 description 1
- 239000011653 vitamin D2 Substances 0.000 description 1
- 239000002699 waste material Substances 0.000 description 1
- 235000015099 wheat brans Nutrition 0.000 description 1
- 229940075420 xanthine Drugs 0.000 description 1
- 239000012138 yeast extract Substances 0.000 description 1
- 239000011787 zinc oxide Substances 0.000 description 1
Classifications
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N1/00—Microorganisms, e.g. protozoa; Compositions thereof; Processes of propagating, maintaining or preserving microorganisms or compositions thereof; Processes of preparing or isolating a composition containing a microorganism; Culture media therefor
- C12N1/20—Bacteria; Culture media therefor
- C12N1/205—Bacterial isolates
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
- C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P31/00—Antiinfectives, i.e. antibiotics, antiseptics, chemotherapeutics
- A61P31/04—Antibacterial agents
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
- A61P5/00—Drugs for disorders of the endocrine system
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12P—FERMENTATION OR ENZYME-USING PROCESSES TO SYNTHESISE A DESIRED CHEMICAL COMPOUND OR COMPOSITION OR TO SEPARATE OPTICAL ISOMERS FROM A RACEMIC MIXTURE
- C12P1/00—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes
- C12P1/06—Preparation of compounds or compositions, not provided for in groups C12P3/00 - C12P39/00, by using microorganisms or enzymes by using actinomycetales
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
- C12R—INDEXING SCHEME ASSOCIATED WITH SUBCLASSES C12C - C12Q, RELATING TO MICROORGANISMS
- C12R2001/00—Microorganisms ; Processes using microorganisms
- C12R2001/01—Bacteria or Actinomycetales ; using bacteria or Actinomycetales
- C12R2001/04—Actinomyces
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Zoology (AREA)
- Wood Science & Technology (AREA)
- Genetics & Genomics (AREA)
- Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- General Engineering & Computer Science (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Biomedical Technology (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- General Chemical & Material Sciences (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Mycology (AREA)
- Virology (AREA)
- Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
- Diabetes (AREA)
- Plant Pathology (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Endocrinology (AREA)
- Biophysics (AREA)
- Physics & Mathematics (AREA)
- Oncology (AREA)
- Communicable Diseases (AREA)
- Medicines Containing Material From Animals Or Micro-Organisms (AREA)
- Compounds Of Unknown Constitution (AREA)
- Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
- Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)
- Fodder In General (AREA)
- Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)
Description
1 77690
Menetelmä antibiootin AAD 216-kompleksin valmistamiseksi Kibdeloeporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov.
ATCC 39323-mikrobilla Tämä keksintö koskee uusia vankomysiiniluokan antibiootteja sekä niiden tuottamista ja eristämistä. Keksintö koskee myös uutta mikro-organismia, Kibdeloeporangium aridum Shearer, gen. nov., sp. nov. SK&P-AAD 216 (ATCC 39323). Täsmällisemmin, tämä keksintö koskee antibioottia, jota tässä nimitetään AAD 216-kompleksiksi. Tätä kompleksia tuotetaan viljelemällä K. aridumia vesipitoisella ravintoalustalla, joka sisältää assimilointikelpoisia typpi- ja hiililähteitä, submerssivil-jelynä aerobisissa olosuhteissa, kunnes mainittu mikro-organismi on tuottanut riittävän määrän AAD 216-kompleksia mainitulla alustalla, ja kerätään AAD 216-kompleksi viljelys-alustasta .
Tällä keksinnöllä saadaan aikaan myös AAD 216-kompleksin uusia bioaktiivisia komponentteja; AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C, jotka valmistetaan erottamala ja eristämällä yksittäiet antibioottiyhdistest AAD 216-kompleksista kromatografisin keinoin. Antibiootti AAD 216-kompleksi ja sen pääasialliset bioaktiiviset komponentit; AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C omaavat kaikki antibakteriaalista aktiivisuutta. AAD 216-kompleksi, AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C ovat myös hyödyllisiä käytettyinä eläinten terveydenhoidossa, kuten kasvun edistämisessä ja naudan mastitikeen hoidossa.
Seuraavassa keksinnön yksityiskohtaisessa kuvauksessa on esitetty taulukot 1-7: 2 77690
Taulukko 1: Ohutkerroakromatografiän Rf-arvot B. eubtilieta vastaan AAD 216A:lle, AAD 216B:lle ja AAD 216C:lle verrattuna tunnettuihin antibiootteihin.
Taulukko 2: AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n retentioajat käänteisfaaeikorkeapainenestekromatografiässä verrattuna tunnettuihin antibiootteihin.
Taulukot 3-7: AAD 216-komplekein, rikastetun AAD 216-komplek-sin, AAD 216A:n, AAD 216B:n, AAD 216C:n ja vankomysiinin in vitro minimi-inhibitiokonsentraation (MIC) tulokset määritettynä useille mikro-organismeille käyttäen standardi mikro-tiitterianalyysimenetelmiä.
Taulukot Θ-10: AAD 216-kompleksin ja sen komponenttien AAD 216A:n AAD 216B:n ja AAD 216C:n kasvua edistävä aktiivisuus.
Uusia antibiootteja, AAD 216-kompleksia ja sen pääasiallisia bioaktiivisia komponentteja; AAD 216A:ta, AAD 216B:tä ja AAD 216C:tä, tuotetaan fermentoimalla uutta mikro-organismia Kib-delosprorangium aridum Sheareria gen. nov., sp. nov. SK&F-AAD 216. Edellä mainittu mikro-organismi oli eristetty maa-näytteestä, joka oli kerätty autiomaa-alueelta Pima Countysta Arizonasta. Biologisesti puhdas mikro-organismin kanta on säilytetty American Type Culture Collectioniin, Rockvilleen, Marylandiin tyyppikantana talletusnumerolla ATCC 39323.
Il 3 77690 AAD 216-kompleksilla tarkoitetaan yksittäisten antibioottien seosta, jotka on tuotettu fermentoimalla K. aridumia. Yksittäisten tai osatekijä-antibioottien suhteet ja niiden esiintyminen AAD 216-kompleksissa vaihtelevat riippuen fer-mentaatioprosessin olosuhteista. AAD 216-kompleksi voidaan eristää fermentaatioalustasta selkeyttämällä koko fermentaa-tioliemi suodattamalla ja seostamalla epäpuhdas AAD 216-kompleksi suolahapolla pH 3:ssa 0-10°C:ssa. Tämän jälkeen sakka liuotetaan veteen säätämällä pH noin 6:sta 8:aan ja liuos kaadetaan hartsikolonniin, josta se eluoidaan vesipitoisella metanolilla. Saatu eluentti lyofilisoidaan, jolloin saadaan AAD 216-kompleksi, josta kromatografisesti tuotetaan rikastettua AAD 216-kompleksia. Tyypillisesti, rikastettu AAD 216-kompleksi sisältää 40-80 painoprosenttia AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n seosta.
Rikastetulla AAD 216-kompleksilla noin pH 6 :ssa, joka sisältää HPLC-analyysin mukaan 29 paino-% AAD216A:ta, 10paino-%AAD 216B:tä ja 10 paino-% AAD 216C:tä, on seuraavat ominaispiirteet: a) vaalea valko-keltäinen kiinteä aine, joka hajoaa 300-350° C:ssa.
b) likimääräinen alkuainesisältö 53,22 % hiiltä, 6,14 %, vetyä, 3,73 % typpeä ja 0,28 % tuhkaa.
c) infrapunaspektri kaliumbromidissa, joka antaa piikkejä seuraavilla aaltoluvuilla (cm’^): 3400, 2920, 1660, 1600, 1510, 1460, 1430, 1390, 1320, 1240, 1150, 1060 ja 1020.
d) ultraviolettispektri asetonitriili:vesi (1:1)-seoksessa, joka antaa absorptiomaksimin 280 nm:ssa neutraaleissa ja hap-pamissa olosuhteissa jolloin = 43,9 ja 301 nm:ssa alkaa- lisissa olosuhteissa jolloin = 56,8.
e) positiivinen reaktio perjodaatilla ja negatiivinen reaktio ninhydriinillä.
f) liukenee veteen, metanoliin, dimetyylisulfoksidiin ja dimetyyliformamidiin ja liukenematon etanoliin, asetonitrii-liin, asetoniin, dietyylieetteriin ja alifaattisiin hiilivetyihin.
4 77690
Yksittäiset puhtaat antibioottikomponentit, AAD 216A, AAD 216B ja 216C, voidaan eristää AAD 216-kompleksista käyttäen prepa-ratiivista korkeapainenestekromatografiaa (HPLC). Tyypillisesti, AAD 216-kompleksi kromatografioidaan askelgradienttieluu-tiolla 20-28-prosenttisella asetonitriilillä 0,1 N:ssa fosfaattipuskurissa pH 6:ssa. Sopivat fraktiot, jotka määrätään analyyttisellä HPLC:llä, yhdistetään ja suolat poistetaan hartsikolonnissa ja lyofilisoinnin jälkeen saadaan halutut yksittäiset antibioottikomponentit puhtaana AAD 216A:na, AAD 216B:nä ja AAD 216C:nä.
AAD 216A-antibiootilla on noin pH 6:ssa seuraavat ominaisuus-piirteet: a) vaalea valko-keltainen kiinteä aine, joka hajoaa 300-350°C:ssa.
b) empiirinen kaava C8iH82N8^30C14 c) likimääräinen alkuainesisältö 48,20 % hiiltä, 5,01 % vetyä, 5,21 % typpeä, 6,43 % klooria, ei rikkiä tai orgaanista fosforia, kun vesipitoisuus oli 10,80 %.
d) infrapuna-absorptiospektri kaiiumbromidissa,joka antaa __ 1 piikkejä seuraavilla aaltoluvuilla (cm ): 3400, 2920, 1660, 1600, 1510, 1460, 1430, 1390, 1320, 1300, 1240, 1150, 1060 ja 1020.
e) nopea atomipommitus-(FAB)-massaspektri M+H:lla 1787:ssä (suurin ryhmittymä).
f) ultraviolettispektri asetonitriili:vesi (1:1)-seoksessa, joka antaa absorptiomaksimin 280 nmsssä neutraaleissa ja happamissa olosuhteissa jolloin E^% = 51 ja 301 nmrssä aikalisissä olosuhteissa jolloin E1% = 73.
g) hiilimagneettiresonanssispektri 90,56 MHzillä CD-j0D:D20 (1:9):ssä pH 8,5:ssä, joka antaa seuraavat kemialliset siirtymät ppmtinä suhteessa TMS-standardiin: 177,7, 177,5, 175,5, 174,6, 171,5, 170,8, 170,4, 170,2, 169,1, 161,8, 158,6, 157,9, 155,1 , 155,0, 152,5, 151,9, 151 ,6, 150,7, 146,0, 144,3, 141,7, 138,8, 138.3, 136,0, 134,6, 134,5, 133,7, 130,8, 129,8, 129,4, 128,9, 128,6, 127.4, 127,0, 126,2, 125,6, 125,1 , 122,7, 122,3, 120,9, 119,6, 118,3, 116,4, 110.5, 109,6, 108,3, 104,2, 103,3, 103,1, 100,7, 98,1, 78,4, 5 77690 74.4, 73,9, 73,3, 72,0, 71,6, 71,3, 70,7, 67,3, 65,6, 63,6,62,3 61.6, 60,2, 56,8, 56,3, 55,8, 54,9, 37,2, 32,7, 32,2, 29,8, 29.6, 29,5, 26,2, 23,0 ja 14,5.
h) spesifinen rotaatio “66° (C = 0,3 H^Oissa) .
i) positiivinen reaktio perjodaatilla ja negatiivinen reaktio ninhydriinillä.
j) liukenee veteen, metanoliin, dimetyylisulfoksidiin, dime-tyyliformamidiin ja ei liukene etanoliin, asetonitriiliin, asetoniin, dietyylieetteriin eikä alifaattisiin hiilivetyihin.
k) pK -arvot asetonitriili:vesi (3:7) seoksessa seuraavat: a 3,0, 4,9, 7,4, 8,4, 10,0 ja 10,3 pKa~arvoja 10,3 yläpuolelta ei ole määritetty.
AAD 216B-antibiootilla on noin pH 6:ssa seuraavat ominaispiirteet: a) vaalea valko-keltainen kiinteä aine, joka hajoaa 300-350°C:ssa.
b) empiirinen kaava CQ2H84N8°30C14 c) likimääräinen alkuainesisältö 49,67 % hiiltä, 5,07 % vetyä, 5,19 % typpeä, 6,17 % klooria, ei rikkiä eikä orgaanista fosforia, kun vesipitoisuus on 10,8 %.
d) infrapuna-absorptiospektri kaliumbromidissa, joka antaa -1 piikkejä seuraavilla aaltoluvuilla (cm ): 3400, 2920, 1660, 1600, 1510, 1460, 1430, 1390, 1300, 1240, 1150, 1060 ja 1020.
e) nopea atomipommitus-(FAB)-massaspektri M+H:lla 1801:ssä (suurin ryhmittymä).
f) ultraviolettispektri asetonitriili:vesi (1:1)-seoksessa, joka antaa absorptiomaksimin 280 nmsssä neutraaleissa ja happamissa olosuhteissa jolloin = 55 ja 301 nmrssä aikalisissä olosuhteissa jolloin = 72,5.
g) hiilimagneettiresonanssispektri 90,56 MHz:llä 00^00^20 (1:9):ssä pH 8,5:ssä, joka antaa seuraavat kemialliset siirtymät ppm:inä suhteessa TMS-standardiin: 177,9, 177,4, 175,6, 174.4, 171,6, 170,9, 170,5, 170,4, 169,3, 162,4, 158,7, 158,1, 155,2, 155,0, 152,6, 151,3, 150,7, 146,0, 144,3, 141,3,138,8,138,3, 136,1, 134,7, 133,6, 130,7, 129,9, 129,8, 129,4, 129,0, 128,7, 127,7, 127,5, 127,0, 126,3, 125,7, 124,7, 122,8, 122,3,120,9,119,9, 119.6, 118,4, 116,7, 110,5, 109,6, 108,5, 104,2, 103,3, 103,1 6 77690 100.6, 98,1, 78,5, 74,4, 73,9, 73,4, 72,1, 71,7, 71,2, 70,8, 67,3, 65,5, 63,7, 62,3, 61,6, 60,3, 56,8, 56,2, 55,9, 55,0, 39.6, 37,3, 32,7, 30,2, 30,0, 29,7, 28,4, 27,8, 26,3 ja 23,3.
h) spesifinen rotaatio [aj -59° (C = 1,0 H20:ssa).
i) positiivinen reaktio perjodaatilla ja negatiivinen reaktio ninhydriinillä.
j) liukenee veteen, metanoliin, dimetyylisulfoksidiin, dime-tyyliformamidiin ja liukenematon etanoliin, asetonitriiliin, asetoniin, dietyylieetteriin ja alifaattisiin hiilivetyihin.
k) pK -arvot asetonitriili:vesi (3:7)-seoksessa seuraavat: a 3,0, 4,5, 7,5, 8,5 ja 9,5 pK -arvoja 9,7:n yläpuolella ei ä ole määritetty.
AAD 216C:llä on noin pH 6:ssa seuraavat ominaispiirteet: a) vaalea valko-keltäinen kiinteä aine, joka hajoaa 300-350°C:ssa.
b) empiirinen kaava Cgg H86N8°30C14 c) likimääräinen alkuainesisältö 47,89 % hiiltä, 5,09 % vetyä, 4,95 % typpeä, 6,39 % klooria, 3,69 % tuhkaa, ei rikkiä eikä orgaanista fosforia, kun vesipitoisuus oli 8,2 %.
d) infrapuna-absorptiospektri kaliumbromidissa, joka antaa piikkejä seuraavilla aaltoluvuilla (cm ): 3400, 2920, 1660, 1505, 1430, 1390, 1295, 1240, 1150, 1060 ja 1020.
e) nopea atomipommitus-(FAB)-massaspektri M+H:lla 18l5:ssä (suurin ryhmittymä).
f) ultraviolettispekti asetonitriili:vesi (1:1)-seoksessa, joka antaa absorptiomaksimin 280 nm:ssä neutraaleissa ja hap-pamissa olosuhteissa jolloin = 51 ja 3 01 nm:ssä alka- sissa olosuhteissa jolloin E^ = 75.
g) hiilimagneettiresonanssispektri 90,56 MHz:llä CDg0D:D20 (1:9):ssä pH 8,5:ssä, joka antaa seuraavat kemialliset siirtymät ppm:inä käyttäen TMS:ää sisäisenä standardina: 177,9, 177.2, 175,7, 173,6, 171,5, 170,8, 170,6, 170,2, 169,3, 158,6, 157.8, 155,2, 154,9, 152,7, 151,9, 150,9, 146,0, 144,3, 141,3, 138.8, 138,4, 136,0, 134,9, 134,7, 133,8, 130,8, 129,9, 129,8, 129.3, 1 29,1 , 127,7, 1 27,5, 127,0, 126,4, 125,3, 122,7, 121,0, 119,7, 118.3, 116,1, 110,4, 109,6, 108,1, 104,1, 103,2, 101,5, 98,0,
II
7 77690 78.6, 74,6, 73,9, 73,4, 72,1, 71,7, 71,3, 70,3, 67,3, 65,1, 63.7, 62,5, 61,6, 60,3, 56,8, 56,3, 55,3, 54,9, 39,7, 37,4, 32,6, 32,3, 30,5, 30,4, 30,2, 29,9, 28,6, 28,1, 26,4, 23,4 ja 22,0.
h) spesifinen rotaatio = -50,6 (C = 0,6 Η20:βββ).
i) positiivinen reaktio perjodaatilla ja negatiivinen reaktio ninhydriinillä.
j) liukenee veteen, metanoliin, dimetyylisulfoksidiin, dime-tyyliformamidiin ja liukenematon etanoliin, asetonitriiliin, asetoniin, dietyylieetteriin ja alifaattisiin hiilivetyihin. k> pKa-arvot asetonitriili:vesi (3:7)-seoksessa seuraavat: 3,0, 4,2, 7,2, 8,2, 9,9 ja 10,3. pKa~arvoja 10,3:n yläpuolella ei määritetty.
AAD 216-kompleksin ja sen pääasiallisten bioaktiivisten komponenttien, AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n, uutuus vahvistettiin vertaamalla tunnettujen vankomysiini/ristosetiini-antibioottiluokan jäsenten kanssa. Erityisesti, ohutkerros-kromatografiällä B. subtilista vastaan saatuja Rf-arvoja AAD 216A:lle, AAD 216B:lle ja AAD 216C:lle verrattiin tunnettuihin antibiootteihin, kuten taulukossa 1 on alla esitetty.
8 77690
Taulukko 1.
TLC (Avicel)
AB C
A-35512B 0,14 0,25 0, 0,15 A-477 0,51 0,30, 0,40 0, 0,20 0,67, 0,78
Aktaplaniini 0,16 0,06 0,11
Aktinoidiinit A 0,04 0,18, 0,43 0,05 ja B 0,24
Avoparsiini 0,15 0,13 0,07 LL-AM-374 0,08 0,17 0,05
Ristosetiini 0,1 0, 0,10 0,04
Teikomysiini A-2 0,34 0,12, 0,33, 0,77 0,47
Vankomysiini 0,17 0, 0,35 0,1, 0,6 AAD 216A 0,35 0,33 0,83 AAD 216B 0,38 0,35 0,83 AAD 216C 0,44 0,34 0,82 1. Rf-arvot; määritys: B. subtilis-aktiivuus.
Alleviivattu arvo on pääasiallinen aktiivinen komponentti.
A. nBu0H:H0Ac:H20 (4:1:5) B. nPrOH:Petrolieetteri: kons. NH^OH (4:1:2) C. nPr0H:H20 (6:4)
Lisäksi, AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n retentioaikoja käänteisfaasikorkeapainenestekromatografiässä verrattiin ja havaittiin poikkeavan tunnettujen antibioottien vastaavista arvoista, kuten taulukossa 2 on esitetty.
9 77690
Taulukko 2
Retentioaika, min.
Antibiootit Systeemi A^ Systeemi B ^ AAD 216A 15,3 14,5 AAD 216B 15,9 15,2 AAD 216C 17,2 16,1 A 35512B 5,2+ 6,1+ A 477 11,7+ 8,9+
Aktaplaniini 6,3+ 7,5+
Aktinoidiini A/B 5,5 + 8,1+
Avoparsiini 5,8+ 7,6+ LL-AM-374 5,1+ 6,8+
Ristosetiini 3,6 5,4
Teikomysiini A-2 13,6+ 13,8+
Vankomysiini 6,0 7,4 +pääasiallinen komponentti multikomponenttiseoksessa (a) HPLC-systeemi A: kolonni: Ultrasphere ODS, 5 mikronia, 4,6 x 150 mm liuotin: 7-34 % asetonitriiliä (7 % 1 min ajan, sitten nousu 34 %:iin yli 13 min ajaksi ja pidetään 34 %:ssa) pH 3,2:ssa, 0,1 M fosfaatti.
virtaus: 1,5 ml/min. määritys: uv 220 nm (b) HPLC-systeemi B: kolonni: Ultrasphere ODS, 5 mikronia, 4,6x150 mm liuotin: 5-35 % asetonitriili (5 % 1 min ajan, sitten nousu 35 %:iin yli 13 min ajaksi ja pidetään 35 %:ssa) pH 6,0:ssa, 0,025 M fosfaatti.
. . virtaus: 1,5 ml/min.
määritys: uv 220 nm AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n täydellinen hydrolyysi, erikseen, 6 N suolahapossa refluksoiden 18 tuntia ei tuottanut tavallisia aminohappoja, jotka voitiin määrittää yleisellä aminohappoanalyysillä. Aktinoidiinihapon, joka on yleinen vankomysiiniluokan antibiootti, läsnäolo vahvistettiin 10 77690 hydrolyysituotteista korkeapainenestekromatografiällä ja FAB-massaspektrillä verrattaessa luetettavaan näytteeseen. Lisäksi, AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n hydrolyysi, erikseen, 1 N suolahapossa refluksoiden 4 tuntia tuotti mannoosia, mutta ei ristosaminia, glukosaminia tai vankosaminia.
Mikro-organismi
Kibdelosporangium aridumin SK&F-AAD 216 (ATCC 39323) varasto-kantaa säilytettiin laihalla peruna-porkkana- tai kaurahiutale-agarilla. Morfologisia tarkasteluja tehtiin vesiagar-, laihoilla peruna-porkkana-agar-, kaurahiutaleager- ja maauuteagarmaljoilla. Siirroste biokemiallisia ja fysiologisia määrityksiä varten valmistettiin lisäämällä jäädytettyjen kasvua edistävien viljelmä-pullojen sisältö glukoosi-hiivauutelientä sisältävään pulloon, joka asetettiin ravistelijaan (250 kierr./min) 28°C:een kolmesta kuuteen päivään. Viljelmä kerättiin sentrifugoimalla ja pestiin kolme kertaa steriilillä tislatulla vedellä. Inkubointi-lämpötila biokemiallisissa ja fysiologisissa määrityksissä oli 28°C. Tuloksia luettiin useita kertoja 21 päivään saakka malja-kasvatuksille. Useimmat koeputkikasvatukset luettiin useita kertoja 28 päivään saakka. Kuitenkin, urean, allantoiinin ja hippuraatin hajotusmääritykset, kuten myös nitraattien pelkis-tysmääritykset luettiin kuuden viikon ajan.
K. aridumin herkkyyttä antibiooteille tutkittiin asettamalla BBL-herkkyyslevyjä ravintoagarmaljoille, joille oli siirros-tettu K. aridumia levittämällä. Estovyöhykkeiden läpimitat mitattiin viikon inkuboinnin jälkeen 28°C:ssa.
Morfologia. K. aridum on säikeinen organismi, joka muodostaa kahta erilaista myseeliä: (1) substraattimyseeliä, joka tunkeutuu agariin ja muodostaa tiiviin kerroksen agarin pinnalle, ja (2) ilmamyseeliä, jolla on conidia-ketjuja ja/tai itiö-pesäkemäisiä rakenteita. Liikkuvia elementtejä ei havaittu ilma- eikä substraattimyseelissä. Monilla alustoilla K. aridum tuottaa tyypillisiä kiteitä agariin.
Il n 77690
Substraattimyseeli. K. aridum tottaa hyvin kehittynyttä substraattimyseeliä, joka voi hajota palasiksi ilman paikaltaan siirtämistä. Pitkä haaroittunut hyyfi on jakautunut väliseinillä ja on noin 0,4-1,0 m läpimitaltaan. Substraatti-myseelissä on erikoistunutta rakennetta, joka koostuu tavallisesta varresta säteittäin lähtevästä hankahaaraisesta väliseinillä jakautuneesta hyyfistöstä.
Ilmamyseeli. K. aridumin ilmamyseeli tuottaa sauvanmuotoisia pehmeäseinäisiä itiöketjuja, joiden pituus vaihtelee (0,4 pm x 0,8 pm-2,8 pm) . Nämä itiöketjut ovat yleensä hyvin pitkiä, yhdessä ketjussa on yli 50 itiötä, mutta yleensä löytyy myös 10 tai vähemmän itiöitä käsittäviä ketjuja. Itiöketjut voivat syntyä hyyfin kärkeen tai muodostaa lyhyitä sivuketjuja.
Useimmilla alustoilla K. aridumin ilmamyseeli tuottaa myös itiöpesäkemäisiä rakenteita. Nämä voivat syntyä hyyfin kärkeen tai muodostaa lyhyitä sivuketjuja. Itiöpesäkkeen kaltaisia rakenteita ja itiöketjuja voi syntyä samaan ilmahyy-fistöön. Kypsinä nämä itiöpesäkkeen kaltaiset rakenteet ovat pyöreitä, suunnilleen 9-22 pm läpimitaltaan ja koostuvat väliseinällisestä haaroittuneesta hyyfistöstä, joka on sulkeutunut amorfisen väliaineen sisään ja ympäröity selvällä seinämällä. Kun nämä itiöpesäkkeen kaltaiset rakenteet laitetaan agarille, itävät ne heti tuottaen yhden tai useamman alkion.
Kemotaksonomia. Puhdistetut K. aridumin soluseinämävalmisteet, jotka analysoitiin Beckerin menetelmällä (Becker et ai. Appi. Microbiol. 12, 421-23 (1964)), sisälsivät 2,6-diaminopimeliini-hapon meso-isomeeriä, alaniinia, glutamiinihappoa, glukosami-nia ja muramiinihappoa sekä galaktoosia ja pieniä määriä arabinoosia.
Kokonaisten solujen hydrolysaatit, jotka analysoitiin
Lechevalierin menetelmällä (Lechevalier, M.P., J. Lab. Clin.
Med. 71 , 934-44 (1968)), sisälsivät galaktoosia, glukoosia, 12 77690 mannoosia, riboosia, ramnoosia ja arabinoosia; pieniä määriä maduroosia voi myös olla läsnä. Solu-uutteissa, joiden lipi-dirakenne analysoitiin Lechevalierin menetelmällä (Lechevalier et ai., Can. J. Microbiol. 19, 965-72 (1973)), ei havaittu minkään tyyppisiä mykoliinihappoja. Löytyneet fosfolipidit olivat fosfatidyylietanoliamiini, fosfatidyylimetyylietanoliamiini, difosfatidyyliglyseroli, fosfatidyyli-inositoli ja fosfatidyyli-inositolimannosidit. Täten K. aridumin soluseinä on tyyppiä IV, jonka kokonaissolusokerirakenne on maduroosihitusia sisältävää tyyppiä A (Lechevalier et ai., Int. J. Syst. Bacteriol. 20, 435-43 (1970)) ja fosfolipidirakenne tyyppiä PII sisältäen fos-fatidyylimetyylietanoliamiini, (Lechevalier et ai., Biochem.
System. Ecol. 5, 249-60 (1977)).
Fysiologisia ja biokemiallisia erityispiirteitä K. aridum on gram-positiivinen ja acid-fast-negatiivinen.
Kasvua ei tapahdu anaerobisissa olosuhteissa. Kasvun lämpötila-alue on 15-42°C, lievää kasvua tapahtuu 45°C:ssa. Kasvu 10°C:ssa on vaihtelevaa. Kasvua ei tapahdu 50°C:ssa. Rikki-vetyä muodostuu. Maito peptonisoituu. Gelatiini hydrolysoituu ja nesteytyy. Nitraatti ei pelkisty nitriitiksi. Melaniini-pigmenttejä syntyy. Kaseiini, L-tyrosiini, hypoksantiini, guaniini, elastiini ja testosteroni hydrolysoituvat, mutta adeniini, ksantiini ja selluloosa (Avicel) eivät. Katalaasia ja fosfataasia muodostuu. Urea, eskuliini ja hippuraatti hajoavat; allantoiinin hajoamismääritykset ovat heikosti positiivisia. 8 % NaCl:ssa ei tapahdu kasvua, 5-7 % NaCl:ssa kasvu on vaihtelevaa. Kasvua ei tapahdu lysotsyymiliemessä. Happoa muodostuu L-arabinoosista, D-sellobroosista, dekstrii-nistä, dekstroosista, D-fruktoosista, glyserolista, glyko-geenista, D-galaktoosista, i-inositolista, laktoosista, D-mannitolista, D-mannoosista, a-metyyli-D-glukosidista, a-metyyli-D-mannosidista, melibioosista, D-meletsitoosista, raffinoosista, ramnoosista, D-riboosista, sakkaroosista, trehaloosista, D-ksyloosista ja maltoosista. Happoa ei muodostu dulsitolista, i-erytritolista, inuliinista, D-sorbito-lista tai L-sorboosista. K. aridum käyttää sitraattia, 13 77690 malaattia, sukkinaattia, oksalaattia, laktaattia, asetaattia, pyruvaattia, propionaattia ja formaattia, mutta ei bentsoaat-tia eikä tartraattia.
Herkkyys antibiooteille. Diffuusiomenetelmällä testattaessa K. aridum oli resistentti kiekolle, johon oli imeytetty genta-mysiiniä (10 yg), tobramysiiniä (10 yg) , streptomysiiniä (10 yg), vankomysiiniä (30 yg), penisilliiniä (10 yksikköä), basitrasiinia (2 yksikköä), linkomysiiniä (2 yg), klindamy-siiniä (2 yg) ja kefalotiiniä (30 yg). Klooritetrasykliini (5 yg) aiheutti 18 mm estovyöhykkeet, tetrasykliini (5 yg) 11-12 mm vyöhykkeet, rifampiini (5 yg) 11-15 mm vyöhykkeet, novobiosiini (5 yg) 27-28 mm vyöhykkeet. Kaikki estovyöhykkeet sisälsivät ainakin muutamia resistenttejä pesäkkeitä.
K. aridumin kuvaus kasvatettaessa erilaisilla alustoilla Kaikkia viljelmiä inkuboitiin 28°C:ssa suljetuilla petrimaljoilla ja tarkkailtiin jaksottain 21 päivään asti. Viljelmien värit valittiin vertaamalla joko ISCC-NBS Centroid Color-karttojen tai Dictionary of Color-kirjan (Maerz, A. ja M.R. Paul 2. painos New York, McGraw Hill Book Co., Inc. (1950) väriliuskoihin.
Hiivauute-mallasuuteagar. Kasvu erinomaista; vegetatiivinen kasvu harmaan keltaruskeaa; ilmamyseeliä ei yhtään tai harvakseen, valkoista, itiöketjuja ja itiöpesäkkeen kaltaista rakennetta havaittavissa; keltaruskeaa liukenevaa pigmenttiä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
Kaurahiutaleagar. Kasvu hyvää; vegetatiivinen kasvu vaaleasta keltaisenruskeaan; ilmamyseeliä harvakseen, valkoista, paljon itiöketjuja ja itiöpesäkkeiden kaltaisia rakenteita läsnä; ei liukenevaa pigmenttiä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
Glyseroli-asparagiiniagar. Kasvu tyydyttävästä hyvään; vegetatiivinen kasvu vaaleankeltaisenruskeaa; ilmamyseeliä har- it 77690 vakseen tai kohtalaisesti, valkoista, joitain itiöketjuja, mutta muutamia tai tuskin ollenkaan itiöpesäkkeiden kaltaisia rakenteita havaittavissa; vaaleaa, harmahtavaa, keltaisenruskeaa, liukenevaa pigmenttiä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
Epäorgaanisia suoloja sisältävä tärkkelysagar. Kasvu hyvää; vegetatiivinen kasvu vaaleasta keltaisenruskeaan; ilmamysee-liä harvakseen, valkoista, itiöketjuja ja itiöpesäkkeen kaltaisia rakenteita läsnä; ei liukenevaa pigmenttiä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
Czapek-sakkaroosiagar. Kasvu hyvää; vegetatiivinen kasvu vaaleasta keltaisenruskeaan; ilmamyseeliä harvakseen, valkoista, itiöketjuja ja itiöpesäkkeiden kaltaisia rakenteita läsnä; vaaleanharmaankeltäisistä vaaleankeltaisenruskeisiin olevia liukenevia pigmenttejä läsnä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
Bennettin agar. Kasvu hyvästä erinomaiseen; vegetatiivinen kasvu harmaankeltaisenruskeaa; ilmamyseeliä ei lainkaan tai harvakseen, valkoista, itiöketjuja ja itiöpesäkkeen kaltaista rakennetta läsnä; keltaisenruskeaa liukenevaa pigmenttiä; ei kiteitä agarissa.
Ravintoagar. Kasvu tyydyttävästä hyvään; vegetatiivinen kasvu keltaisenruskeaa; ilmamyseeliä harvakseen tai kohtalaisesti, valkoista, muutamia itiöketjuja ja muutamia itiöpesäkkeen kaltaisia rakenteita läsnä; keltaisenruskeaa liukenevaa pigmenttiä; tyypillisiä kiteitä vaihtelevasti agarissa.
Laiha peruna-porkkana-agar. Kasvu tyydyttävää, melko litteää; vegetatiivinen kasvu vaaleasta keltaisenruskeaan; ilmamyseeliä harvakseen tai kohtalaisesti, valkoista, paljon itiöketjuja ja itiöpesäkkeen kaltaista rakennetta läsnä; ei liukenevaa pigmenttiä; ei kiteitä agarissa.
is 77690
Peptoni-hiivauute-rauta-agar. Kasvu hyvää; vegetatiivinen kasvu pronssin ruskeaa (Maerz & Paul 16C9); ei ilmamyseeliä? tummanruskehtavan mustaa liukenevaa pigmenttiä; ei kiteitä agarissa.
Tärkkelys-kaseiini-nitraattiagar. Kasvu hyvää; vegetatiivinen myseeli vaaleasta keltaisenruskeaan; ilmamyseeliä harvakseen, valkoista, itiöketjuja ja itiöpesäkkeen kaltaista rakennetta läsnä; vaaleankeltaruskeaa liukenevaa pigmenttiä vaihtelevasti läsnä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
Hiivauute-glukoosiagar. Kasvu hyvästä erinomaiseen; vegetatiivinen kasvu tummankeltaisenruskeasta harmaankeltaisenrus-keaan; ilmamyseeliä ei havaittavissa, alle 400X, itiöketjuja harvakseen mutta ei itiöpesäkkeen kaltaista rakennetta; tummankeltaisenruskeaa liukenevaa pigmenttiä; tyypillisiä kiteitä agarissa.
K. aridumin kuvauksen vertaaminen Bergey's Manual of Determinative Bacteriologyn, Approved List of Bacterial Names'in ja muiden uusimpien taksonomisen kirjallisuuden luettelemiin kuvauksiin aktinomykeeteistä osoittaa, että K. aridum eroaa merkittävästi aikaisemmin kuvatuista aktinomykeettien lajeista eikä sitä voida sijoittaa mihinkään aikaisemmin kuvattuun aktinomykeettien sukuun. Mikäli itiöitä on läsnä muissa aktinomykeettien suvuissa, ovat ne oikeita itiörak-kuloita; kypsinä ne sisältävät aplanosporeja tai zoospore-ja, jotka lopulta vapautuvat itiöpesäkkeen seinämän hajotessa tai revetessä. Huolimatta ekstensiivisestä tarkkailusta ja käsittelystä, ei itiöiden vapautumista K. aridumin itiö-pesäkkeiden kaltaisista rakenteista ole koskaan havaittu.
Kun K. aridumin itiöpesäkkeiden kaltaisia rakenteita laitetaan agarille, itävät ne tuottaen yhden tai useamman alkion suoraan itiöpesäkkeen kaltaisesta rakenteesta.
ie 77690
Tyyppiviljelmä ATCC 39323 on tässä kuvattu uuden Kibdelos-porangium aridum-suvun lajina, (tulee sanoista kibdelos, kr. adj., väärä, kaksiselitteinen; spora, kr. n., siemen; angium, kr. n., astia); spesifinen epiteetti, aridum, (aridus, lat. adj., kuiva, hedelmätön) viittaa autiomaan maaperään, josta kanta eristettiin.
AAD 216-kompleksin valmistaminen AAD 216-kompleksia voidaan tuottaa viljelemällä Kibdelospor-angium-kantaa, jolla on tieteen tunnetuin menetelmin saadut ATCC 39323:n, sen aktiivisen mutantin tai sen derivaatan erityispiirteet, submerssikasvatuksena aerobisissa olosuhteissa vesipitoisella ravintoalustalla. Organismi kasvaa ravintoalustalla, joka sisältää assimilointikelpoisen hiili-lähteen, kuten assimiloituvan hiilihydraatin. Esimerkkejä sopivista hiililähteistä ovat sakkaroosi, laktoosi, maltoosi, mannoosi, fruktoosi, glukoosi ja liukeneva tärkkelys. Ravintoalustan tulisi myös sisältää assimilointikelpoinen typpi-lähde, kuten kalajauho, peptoni, soijapapujauho, maapähkinä-jauho, pellavansiemenjauho tai maissinliuotusvesi. Epäorgaanisia ravintosuoloja voidaan myös lisätä alustaan. Tällaisina suoloina voidaan käyttää mitä tahansa tavallista suolaa, joka pystyy tuottamaan liuokseen natrium-, kalium-, ammonium-i, kalsium-, fosfaattia, sulfaatti-, kloridi-, bromidi-, nitraatti-, karbonaatti- tai vastaavia ioneja.
AAD 216-kompleksin tuottamiseen voidaan vaikuttaa kaikilla lämpötiloilla, jotka osaltaan vaikuttavat organismin tyydyttävään kasvuun, eli 15-42°C, ja tuottaminen tapahtuu sopivasti noin 25-28°C lämpötilassa.
Tavallisesti kasvualusta on neutraali, mutta täsmällinen pH voi vaihdella 5,0:n ja 9,0:n välillä riippuen käytetystä spesifisestä alustasta.
Fermentaatio voidaan suorittaa Erlenmayer-pulloissa tai laboratorio- tai tehdasfermenttoreissa, vaihtelevassa kapasiteetissa. Kun käytetään säiliöfermentaatiota, on suotavaa
II
17 77690 valmistaa kasvua edistävä siirroste ravintoliemeen siirros-tantalla pieni määrä viljelyalustaa organismin vegetatiivi-soluilla. Kun täten on saatu siirroste, siirretään se aseptisesti fermenttorissaolevaan alustaan suuressa mittakaavassa tapahtuvaa antibioottien tuottamista varten. Alusta, jota käytetään kasvua edistävään siirrosteeseen voi olla samaa kuin suuremmassa fermentoinnissa käytettävä, vaikkakin myös muita ravintoalustoja voidaan käyttää.
Steriiliä ilmaa puhalletaan kasvualustan läpi, kuten aerobisissa submerssiviljelyissä on tapana. Sekoitus voidaan järjestää fermentaatioteollisuudessa yleisesti tunnetuilla sekoittimilla.
Yleisesti, kompleksin optimituotto saavutetaan 144-186tunnin inku-bointijakson jälkeen sekoitusastia- tai säiliöfermenttorissa. Fermentaation kulkua voidaan seurata analyyttisellä HPLC:llä.
Muodostunut AAD 216-kompleksi sisältää uudet bioaktiiviset komponentit tai itsenäiset antibioottiosatekijät, AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C, jotka voidaan eristää kuten yllä on kuvattu.
Biologinen aktiivisuus AAD 216-kompleksin, rikastetun AAD 216-kompleksin, AAD 216A:n, AAD 216B:n, AAD 216C:n ja vankomysiinin in vitro minimi in-hibitoiva konsentraatio (MIC) määritettiin useille mikro-organismeille käyttäen standardi mikrotiitterianalyysimenetelmää. Tulokset on esitetty seuraavissa taulukoissa 3-7.
18 77690
Antimikrobiaalinen spektri
Taulukko 3
Testiorganismi MIC pg/ml AAD AAD AAD AAD Vankcrry si ini 216 216 216 216
kompleksi ABC
Staph, aureus HH127 6.3 3.1 3.1 3.1 1.6
Staph, aureus SK&F 910 12.5 3.1 3.1 3.1 1.6
Strep, faecilis HH34358 1.6 0.4 0.4 0.8 3.1
Proteus mirabilis SK&F 444 >100 >100 >100 >100 100 E. coli 12140 (SK&F 809) >100 >100 >100 >100 100
Kleb. pneumoniae >100 >100 >100 >100 >100 4200 (SK&F 798)
Pseudomonas aeruginosa >100 >100 >100 >100 >100 HH63
Sterratia marcesens >100 >100 >100 >100 >100 ATOC 13880
Proteus morgani SK&F 179 >100 >100 >100 >100 >100
Providencia SK&F 276 >100 >100 >100 >100 >100
Enterobacter cloacae >100 >100 >100 >100 >100 HH31254
Salmonella gallinarum >100 >100 >100 >100 25 BC595
Staph, epidermidis 25 6.3 6.3 6.3 1.6 SK&F 2479
Listeria monocytogenes 3.1 0.8 0.4 ^0.4 1.6 SK&F 2255
Staph, epidermidis SK&F 651 100 50 25 25 1.6 19 77690
Taulukko 4 (Metisilliini sensitiivinen)
Testiorganismi mtc ηπ/ιηΐ AAD AAD AAD AAD _ Vanko- 216 216 216 216 nysiini
Karpleksi A B__C_
Staph, aureus HH127 12,5 1,6-3,13,1 3,1 1,6
Staph, aureus SK&F 674 12,5 3,1-6,3 6,3 12,5 1,6
Staph, aureus SK&F 910 12,5, 3,1 6,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 1761 12,5 3,1 3,1 3,1 1,6
Staph, aureus SK&F 2593 25 6,3 6,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2666 12 5 3.,1 3 /1 6/3 1/6
Staph, aureus SK&F 2677 25 6,3 3,1 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2678 25 6,3 6,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2680 12 ,5 3 ,1-6 ,3 6 ,3 6,3 1 ,6
Staph, aureus SK&F 2682 25 3,1-6,3 6,3 3,1 1,6
Staph, aureus SK&F 2736 25 3,1-6,3 6,3 6,3 · 1,6
Staph, aureus SK&F 2776 50 12,5 6,3 12,5 1,6
Staph, aureus SK&F 2777 12,5 3,1 3,1 3,1 0,8
Staph, aureus SK&F 2613 6 ,3 1 ,6 1,6 1,6 1,6
Staph, aureus SK&F 2615 12 ,5 3 ,1-6 ,3 6 ,3 6,3 3 ,1
Taulukko 5 (Metisilliini resistentti)
Testiorganismi MIC pg/ml -- AAD AAD AAD AAD Vanko- 216 216 216 216 nysiini
Koipieksi A B__C
Staph, aureus SK&F 675 50 12,5 6,3 12,5 1,6
Staph, aureus SK&F 2612 12,5 6,3 3,1 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2614 6 ,3 3 ,1 3 ,1 3,1 1,6
Staph, aureus SK&F 2616 25 6,3-12,5 6,3 6,3 0
Staph, aureus SK&F 2620 25 6,3 12,5 12,5 3,1
Staph, aureus SK&F 2621 25 6,3 6,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2594 25 6,3-12,5 6,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2589 25 6 ,3-12 ,5 6 ,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2590 25 6,3-12,5 3,1 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2591 25 6,3 6,3 6,3 1,6
Staph, aureus SK&F 2592 50 6,3 12,5 12,5 3,1
Staph, aureus SK&F 2595 25 6,3-12,5 6,3 6,3 vl,6
Staph, aureus SK&F 2596 25 6,3-12,5 6,3 6,3 3,1
Staph, aureus SK&F 2597 25 6 ,3-12 ,5 6 ,3 12,5 3 ,1 20 7 7 6 9 0
Taulukko 6 (Anaerobit)
Testiorganismi MIC yg/ml AAD AAD AAD AAD Vanko- 216 216 216 216 nysiini
Kcmpleksi A B C
Bacteroides fragilis >32 32 32 32 32 ATCC 25285 B. fragilis H145 >32 16 16 8 32 L·. fragilis SK&F 3060 >32 32 16 16 32
Ek loeochii SK&F 3087 >32 8-16 16 4 32 B. thetaiotamicron >32 >32 32 32 32 SK&F 3089
Fusobacterium nucleatum>32 32 32 32 32 ATCC 25586
Clostridium perfringens<0,016 £0, 016 0,125^0,016 0,5 MCP-1 C. perfringens MCP-2 ^0,016 ^0, 016 0 ,125^0,016 0,5 C. perfringens 0,25 0, 031-0, 063 0 ,125 0 ,125 1,0 ATCC 19408
Clostridium difficile 1,0 0,25 0,25 0,5 2 SK&F 3062 C. difficile SK&F 3065 1,0 0,5 0,25 0,5 4 C. difficile SK&F 3091 <0,016 0, 125-0 ,25 0 ,25 0 ,031 2 C. difficile SK&F 3092 1,0 0 ,125 0,25 0 ,25 2 C. difficile SK&F 3096 1, 0 0 ,25 2 0,25 2 C. difficile SK&F 3098 <.0,016 <^0 ,016 2 0 ,031 2
Taulukko 7
Testiorganismi MIC ucr/ml
Rikastettu Vanko- ___ AAD 2Ί6 kompleksi AAD 216A irysiini
Staph, aureus HH 127 b ,3 -—3^1
Staph, aureus SK&F 910 ^6 ,3 3 3, i
Staph, aureus 209P 1,6 15 15
Staph, aureus 100 10q >100 209P-Mutant
Staph, aureus SK&F 674 6,3 3,1 1,6
Staph, aureus 'v-lOO 'ν,ΙΟΟ >100 SK&F 674-P6 Mutant
Staph, aureus SK&F 675 12,5 12,5 3,1
Staph, epidermidis SK&F 2479 25 25 63 21 77690
Testiorganismi · MIC pg/ml
Rikastettu Vanko- AAD 216-kompleksi AAD 216A mysiini Staph, epidermidis SK&F 2683 100 100 6/3
Staph, epidermidis SK&F 651 100 100 6, 3
Staph, epidermidis SK&F 2265 100 100 6,3
Strep, faecalis HH 34358 0/4 1/6 6/3
Strep, faecalis SK&F 657 0/4 0/8 3/1
Listeria monocytogenes 0/8 1/S 3/1 SK&F 2255 E. coli 12140 (SK&F 809) >100 >100 >100
Salmonella gallinarum >100 >100 >100 BC595 AAD 216A:n, AAD 216B:n, AAD 216C:n ja vankomysiinin in vivo aktiivisuus, mitattuna ED^Q-arvona, osoitettiin hoitamalla antibiooteilla intraperitoneaalista s.c. infektiota, joka oli aiheutettu hiirille 46,8 LD^^sn määrällä Staph, aureus HH 127:ää, 1 ja 5 tuntia infektioiden jälkeen. ED^-arvot olivat seuraavat: AAD 216A, 5,0 mg/kg; AAD 216B, 5,0 mg/kg; AAD 216C, 7,5 mg/kg; vankomysiini, 1,76 mg/kg.
Tämän keksinnön mukaiset antibioottiset yhdisteet, mukaan luettuna AAD 216-kompleksi ja sen pääasialliset bioaktiiviset komponentit: AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C sekä näiden seokset, osoittavat antibakteriaalista aktiivisuutta.
Näistä voidaan valmistaa farmaseuttisia yhdisteitä, jotka sisältävät ainakin yhtä yllä mainituista antibioottiyhdis-teistä sekä farmaseuttisesti hyväksyttävän kantajan. Yhdisteet voivat myös sisältää muita aktiivisia antibakteriaalisia aineita. Yhdisteet voidaan saattaa mihin tahansa farmaseuttiseen muotoon, joka sopii kyseessä olevaan antamisreittiin. Esimerkkejä tällaisista yhdisteistä ovat suun kautta annettavat kiinteät yhdisteet, kuten tabletit, kapselit, pillerit, jauheet ja granulaatit; suun kautta annettavat nestemäiset yhdisteet, kuten liuokset, suspensiot, siirapit ja eliksiirit; sekä parenteraalisesti annettavat valmisteet, kuten steriilit liuokset, suspensiot tai emulsiot.
22 7 7 6 9 0
Antibakteriaalisena aineena käytettäessä yhdisteet annetaan siten, että aktiivisen ainesosan konsentraatio on suurempi kuin tietyn hoidettavan organismin minimi inhibointikonsen-traatio.
AAD 216-kompleksin ja sen komponenttien; AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n, aktiivisuus osoitettiin in vitro kaikenkaikkiaan 58 naudan mastitis-isolaattia vastaan käyttäen konventionaälista agarlaimennusmenetelmää minimi inhibointi-konsentraatioiden (MIC) määräämiseksi. MIC:t AAD 216-komp-leksille, AAD 216A:lle, AAD 216B:lle ja AAD 216C:lle vaih-telivat välillä 0,25 ja yli 128 yg/ml, 0,13 ja yli 128 yg/ml, 0,06 ja yli 128 yg/ml sekä 0,06 ja yli 128 yg/ml, vastaavasti. Vertailuna, vankomysiinin MIC:t samalle mikro-organismille vaihtelevat välillä 0,25 ja yli 128 yg/ml.
Kasvua edistävä aktiivisuus- AAD 216-kompleksin ja sen komponenttien; AAD 216A:n ja AAD 216B:n ja AAD 216C:n, kasvua edistävä aktiivisuus määritettiin siassa in vitro-menetelmällä, jotta voitiin ennustaa käyttökelpoisuus yksimahaisille eläimille, kuten sialle ja siipikarjalle: pötsissä in vitro-menetelmällä, jotta voitiin ennustaa käyttökelpoisuus lihan ja maitovalmisteiden tuottajille sekä lampaille ja in vivo-menetelmällä kananpojalle kasvuvaikutuksen toteamiseksi.
In vitro-menetelmä sialle:
Kuohittu Yorksire-urossika varustetaan kirurgisesti joko suolikanyylillä, joka asetetaan 15 cm:n päähän suoli-ceco-colic-liittymästä, tai cecal-kanyylillä, joka asetetaan apexin ja cecumin alun puoliväliin. Eläintä syötetään 4 kertaa päivässä, rajoittaen 30 kg painavan eläimen ottama energia 4,5 %:iin painosta tai 100 kg painavan eläimen 2,5 %:iin painosta. Sian kasvuannos on:
II
23 77690 (% W/W) (kg/ton)
Puolikarkeaksi jauhettu kuorimaton maissi 70,60 640
Soijapapujauho, 44 % 22,00 200
Vedetön sinimailasjauho, 17 % 4,50 41
Kalsiumpropionaatti 0,15 1
Vitamiini/mineraalisekoitus 2,75 25
Materiaalin näytteenottokanyylin välityksellä alkaa 150-180 min ensimmäisen aamusyötön jälkeen ja jatkuu sen jälkeen 30-120 min välein, riippuen tarvittavan materiaalin määrästä. Näytettä säilytetään murskatussa jäässä, ei alle 5°C, ja sitä kaasutetaan jatkuvasti hiilidioksidilla. Kerätty materiaali suodatetaan. Suodosta käytetään siirrosteena testi-ja kontrollinäytteiden inkuboinneissa. Kaasutettua siirros-tetta, 2,25 ml, laitetaan 10 seen kaasutettuun koeputkeen, jotka jokainen sisältävät 0,75 ml ravintoliuosta ja 0,5 mg jokaista testiyhdistettä. Samanaikaisesti testiyhdistekoe-putkien kanssa inkuboidaan neljä sokeakoe-kontrolliputkea 5 tuntia 37°C:ssa sekoittaen. Lisäksi otetaan neljä tapettua putkea, joita ei inkuboida.
Jokaiseen putkeen lisätään 0,60 ml 25 %:sta metafosforihap-poliuosta, jonka jälkeen putkia säilytetään -4°C:ssa kunnes analyysi suoritetaan. Näytteet sulatetaan ja sentrifugoidaan 25 min ja 20000 kierr./min. Supernatantti dekantoidaan, valmistetaan näytteeksi kaasukromatografiaa ja automaattista analyysiä varten. Tulokset syötetään tietokoneeseen, jotta lopuksi saadaan arvoja, joilla sokeakokeen arvo on 100 %. Virginia-mysiiniä ja vankomysiiniä käytetään positiivisina kontrolleina. Tulokset on esitetty taulukossa 8.
24 7 7 6 9 0
Taulukko 8 VFA* LYS* GLU* LAC* (% Kontrolli) (% Kontrolli) (% Kontrolli) (% Kontrolli)
Yhdiste (ppm)
Virginianrysiini (166,57) 93 163 197 81 (16.67) 130 127 191 76 (1/67) 248 82 182 70
Vankcrtr/siini (166.67) 250 48 190 64 (16.67) 280 42 189 59 (1.67) 92 83 100 99 AAD 216 -kanpleksi (666.67) ** 267 44 189 58 (166.67) 345 50 195 51 (66.67) 390 53 188 46 (16.67) 124 81 113 93 (6.67) 90 101 96 100
AAD 216A
(166.67) 326 63 187 58 - (16, 67) 379 50 191 47 (1.67) 101 94 97 99
AAD 216B
(166.67) 290 50 190 56 (16.67) 365 55 184 47 (1.67) 102 98 97 98
AAD 216C
(166, 67) 294 42 191 57 (16, 67) 398 53 188 45 (1, 67) 101 95 96 98 11 25 7 7 6 9 0 * VFA viittaa kaikkiin haihtuviin rasvahappoihin, nimittäin, asetaattiin, propionaatiin, isobutyraattiin, butyraattiin, isovaleraattiin ja valeraattiin. LYS on lysiini, GLU on glukoosi ja LAC on L-maitohappo.
** AAD 216-kompleksi sisältää 25 % AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n seosta.
In Vitro-menetelmä pötsille:
Protokolla pötsin in vitro-menetelmälle on analoginen sian in vitro-menetelmälle seuraavin muutoksin: (1) Nuori 400 kg:n härkä varustetaan kirurgisesti pötsika-nyylillä.
(2) Eläintä syötetään kerran päivässä seuraavalla annoksella:
Lopullinen ruoka % w/w
Pellavansiemenen kuoria 44,0
Rikottua maissia 22,0
Sinimailasheinää 1" 20,0
Pelletti-lisäys* 10,0
Nestemäistä melassia 4,0 100,0 *Pellettilisäys % w/w
Soijapapuöljyjauho (50 % proteiinia) 50,0
Puolikarkeaksi jauhettua maissia 32,5 D/Kalsiumfosfaattia 6,50
Tavallista suolaa 2,50
Jauhettua kalkkikiveä (Thomasville) 3,50
Ureaa 2,50
Vitamiini A & sekoitus** 2,50 100,00 **Vitamiini A & D^-sekoitus % w/w d ' -
Vitamiini A (30 000 IU/gm) 5,87
Vitamiini D2 (7 260 000 IU/kg) 0,50
Hienoksi jauhettua maissia 93,63 100,00 26 7 7 6 9 0 (3) VFA:n tuottaminen on kuvattu propionaatin tuottona prosentteina tuotetusta VFA:n kokonaismäärästä.
(4) Näytteenotto materiaalista kanyylin avulla tapahtuu 120 min syöttämisen jälkeen.
Tulokset on esitetty taulukossa 9.
77690 27
Taulukko 9 Propicnaat- VFA* LYS* GLU* tj- % (% Kontrolli) (% Kontrolli) (% Kontrolli) (% Kont-
Vankanysiini (50 ,0) 107 97 189 127 (5 ,0) 108 85 165 130 (0,5) 97 83 17 105
Avqparsiini (50.0) 113 97 141 132 (5.0) 105 85 166 121 (0,5) 103 96 116 106
Monensiin!natrium (50.0) 109 147 0 156 (5.0) 104 141 126 149 (0,5) 94 109 11 119 AAD 216 -kompleksi (200.0) ** 118 116 78 159 (50.0) ** 117 101 11 159 (20.0) ** 115 95 193 130 (2/0)** 101 92 60 102
AAD 216A
(50.0) 111 114 153 146 (5.0) 93 90 28 135 (0,5) 94 96 121 105
AAD 216B
(50.0) 111 124 20 148 (5.0) 121 107 0 141 (0,5) 100 103 45 103 28 7 76 9 0 * VFA viittaa kaikkiin haihtuviin rasvahappoihin, nimittäin asetaattiiin, propionaattiin, isobutyraattiin, butyraattiin, isovaleraattiin ja valeraattiin. LYS on lysiini ja GLU on glukoosi.
** AAD 216-kompleksi sisältää 25 % AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n seosta.
Kananpojan kasvun tarkastelu:
Yhden päivän broilerikananpoikia, jotka valittiin painon, terveyden ja sukupuolen mukaan, pidettiin ympäristötekijöiden suhteen kontrolloidussa huoneessa 27°C lämpötilassa ja 40 % kosteudessa. Kananpoikia syötetään ad libitum. Vettä tarjotaan ad libitum. Ilmastoon mukautumisperiodin aikana syötetään ruis- tai maissipohjaista ravintoa (päivät 1 ja 2), sitten yhdisteeseen sekoitettuna testi- tai kontrolliolosuh-teissa 3-17 päivinä. Jokaiseen testi- tai kontrolliryhmään käytetään joko 8 tarhallista (64 kananpoikaa) tai 16 tarhal-lista (128 kananpoikaa). Tulokset on esitetty taulukossa 10.
Perusruisdieetti
Ruokavalion osatekijät (% w/w) (kg /ton)
Jauhettu ruis (hienojauhatus) 54,4 494
Soijapapujauho (49 % proteiinia) 27 245
Liha- ja luujauho (50 % proteiinia) 10 91
Vedetön sinimailasjauho 1,25 11
Eläinrasva 4 36
Kuivattu hera (tai laktoosi) 1 9
Jauhettu kalkkikivi 0,67 6,1
Dikalsiumfosfaatti 0,50 5
Jodattu suola 0,23 2,1
Vitamiinisekoitus 0,175 *
Hivenmineraalisekoitus 0,25 2 DL metioniini (98 %) 0,45 4
Koliinikloridi (50 % vesiliuos) 0,150** 1 29 7 7 69 0 * Vitamiinisekoitus sekoitetaan ravintoon samalla kun testi-kemikaalit lisätään 87,5 g vitamiinisekoitusta/49 912,5 g perusravintoa.
** Koska koliini lisätään 50 %:na vesiliuoksena, dieetin prosenttimäärä kaksinkertaistuu.
Taulukko 10
Annos Toisto-----Paino------Syöttö/Lisäys- Kuolleita keir— _PPM to ja vrk 10 vrk 17 3-10 10-17 3-17 kanoja ---%:a kontrollista-----
Virginianysiini 10,0 8 103, 8 116 ,0 97,4 83,6 90, 4 2
Virginiainysi,1 ni 50,0 8 105,0 121 ,3 93,2 74,6 83, 2 1 AAD 216-kanpleksi40,0 8 107, 7 132 ,4 90,9 69,6 79, 6 2 AAD216-kcnpleksil60,0 8 106,1 117 ,1 91,0 80,1 85, 3 3 —Grammaa---Grarmoja/Grainma-
Kcntrolliruis 0,0 8 164, 2 280,4 1,577 2,815 2, 209 2
Historiallinen kontrolli 169,1 298 ,4 1,566 2,563 2,080
Keskihajonta tarhoissa - 3,71 % * AAD 216-kompleksi sisältää 25 % AAD 216A:n, AAD 216B:n ja AAD 216C:n seosta.
:Y. Tämän keksinnön ravinnon rakenne käsittää lihaa ja maitoa tuottavien eläinten normaalin ravintoannoksen täydennettynä sellaisella määrällä ryhmästä, AAD 216-kompleksi, AAD 216A, AAD 216B, AAD 216C tai näiden seokset, valittua aktiivista ainesosaa, joka tehokkaasti lisää eläinten kasvunopeutta ja ravinnon tehoa, mutta joka ei ole siinä määrin toksinen tai haitallinen, että eläimet vähentäisivät ravinnonottoa annoksista. Aktiivisen ainesosan määrä vaihtelee, kuten tie-detään, riippuen tekijöistä, kuten ainesosan hinta, eläimen laji ja koko, keksinnön mukaisen yhdisteen suhteellinen ak-tiivisuus tai perusravintona käytettävän ravintoannoksen tyyppi.
3o 7 7 6 9 0
Edustavat ravintoannokset sialle ja siipikarjalle ovat seu-raavat: Annos 18-45 kg painaville urossioille valmistetaan käyttäen seuraavaa valmistusohjetta:
Maissia, jauhettu 78,15 %
Soijapapuöljyjauho, 44 % 17,0 %
Lihajätteitä, 50 % 3,0 %
Osterinkuorimauste 0,4 %
Luujauho 0,5 %
Sinkkioksidi 0,01 %
Vitamiini A, B, B^2 ja D valinnainen -täydennys
Kananpoikien annos broilereille valmistetaan seuraavan kaavan mukaan:
Keltaista maissijauhoa 67,35 %
Soijapapuöljyjauhoa 24,00 %
Menhaden-kalajauhoa 6,00 % Höyrystettyä luujauhoa 1,00 %
Jauhettua kalkkikiveä 1,00 %
Jodattua suolaa 0,34 % 25 %:sta koliinikloridia 0,13 % *-.· B^ 2~vitamiinia 0,10 %
Manganeesisulfaattia 0,02 %
Vitamiiniseosta 0,06 %
Vasta vieroitetun sian ravintoa voidaan lisätä täydennykseksi tai lisäämään ruoan rasvaisuutta. Sika syö 0,9 kg:sta ravintoa päivässä (11 kg:n sika) 4 kg:aan päivässä (68 kg:n sika). Useimmiten annosten perustana on maissi, jota on täydennetty säilötyillä palkokasveilla, vehnänleseillä, kauroilla, ohralla, melassilla tai proteiineilla.
3i 77690
Siipikarjan ravinto käsittää aloitusannoksia, broileriannok-sia ja muninta-annoksia. Ravinto perustuu tavallisesti jauhetulle maissille, maissijauholle tai soijapapujauholle.
Usein broilerin annokset sisältävät korkeaenergisiä täyden-nysaineita, kuten lisättyjä rasvoja, proteiineja ja vitamiineja. Kalkkunoiden annokset ovat samanlaisia, mutta käsittävät ainoastaan aloitusannoksen ja kasvuannoksen. Kananpojat ja fasaanit syövät 13-130 g rehua päivässä, kalkkunat kaksi kertaa enemmän. Arvioitu ravinnonotto riippuu lihaa tuottavan eläimen painosta.
Ryhmästä, joka käsittää AAD 216-kompleksin, AAD 216A:n, AAD 216B:n, AAD 216C:n tai niiden seoksen, valitut aktiiviset ainesosat sekoitetaan tasaisesti näihin rehuannoksiin, jolloin saadaan täydennettyjä rehuja, jotka syötetään tavalliseen tapaan eli useimmiten ad libitum. Mukavasti tämä käy käyttämällä tuottajan valmistamaa formuloijille tai rehun-jakajille myytävää esisekoitusta tämän keksinnön mukaisesta täydentävästä kasvun edistäjästä, vaihtoehtoisesti ilman tai muiden tämän tieteensuunnan tuntemien lisäaineiden kanssa, kuten antelmintiini, typpilähde tai antibiootti, kuten virginiamysiini tai oksytetrasykliini. Ryhmästä, joka käsittää AAD 216-kompleksin, AAD 216A:n, AAD 216B:n, AAD 216C:n tai niiden seoksen, valittujen ainesosien konsentraa-tio esiseoksessa on tavallisesti 5-75 paino-% tai konsen-traatioltaan 100-2000 kertaa suurempi kuin konsentraatio lopullisessa rehuannoksessa. Esiseos voi olla nestemäistä tai kiinteää. Esiseoksessa käytettäviä väliaineita ovat maissiöljy, pellavansiemenöljy, melassi tai tislausjätteet, jolloin saadaan nestemäisiä esiseosvalmisteita. Kiinteisiin esiseosvalmisteisiin käytetään usein perustana sakkaroosia, . . laktoosia, maissijauhoa, jauhettua maissia, jauhoja, kal- siumkarbonaattia tai soijapapujauhoa. Esiseoskoostumus sekoitetaan sitten tasaisesti päärehun kanssa, joka syötetään kohde-eläimelle. Tässä käytettyyn termiin "rehukoostumukset" sisältyvät edellä mainitun kaltaiset esiseoskoostumukset.
32 77690
Ryhmästä, AAD 216-kompleksi, AAD 216A, AAD 216B, AAD 216C ja näiden seokset, valittujen aktiivisten ainesosien pitoisuus lopullisessa annoksessa ei ole toksinen mutta aktiivinen määrä, joka on valittu esimerkiksi väliltä noin 1-1000 osaa aktiivista ainetta painosta per miljoonasosaa koko rehua (ppm) tai noin 2-115 grammaa tonnia kohden. Edullisesti, myrkytön aktiivisen ainesosan määrä valitaan väliltä 10-50 ppm.
Tämän keksinnön mukainen menetelmä käsittää yksivatsaisten tai märehtijöiden, lihaa tai maitoa tuottavien eläinten, erityisesti liha- ja maitonautakarjän, lampaiden, sikojen ja siipikarjan ruokkimisen tehokkaalla kasvua edistävällä muttei toksisella määrällä aktiivista ainesosaa, joka on valittu AAD 216-kompleksin, AAD 216A:n, AAD 216B:n, AAD 216C:n ja näiden seokset käsittävästä ryhmästä. Muita yksi-vatsaisia eläimiä, joiden ruoansulatusjärjestelmälle on ominaista myöskin fermentaatio cecumissa tai cecumin kaltaisessa kammiossa, ovat jänikset ja hevoset.
Täydennetyt rehuannokset, joita yllä on kuvattu, annetaan eläimelle tunnetuilla menetelmillä. Ad libitum-ruokinta laitumella, tarhassa tai kasvatusaitauksessa on mukavin tapa eläimen kasvun ja maidontuotannon lisäämiseksi sekä operaation ruokintatehokkuuden lisäämiseksi.
Seuraavat esimerkit valaisevat kyseessä olevan keksinnön antibioottien tuottoa, eristämistä ja puhdistamista.
Seuraavissa esimerkeissä käytettyjen ravintoalustojen koostumukset on esitetty alla. Fermentaatioiden saannot määritettiin HPLCrllä verrattuna määrällisesti luotettaviin näytteisiin.
33 77690
Alustaa 13 (H) käytettiin SK&F-AAD 216:sta siirrosteen kasvattamisessa kaikissa kokeissa. Alustan 13H ainesosat ovat: tärkkelys 15 g/1, sakkaroosi 5 g/1, dekstroosi 5 g/1, HY-soija 7,5 g/1, maissinliotusvesi 5 g/1, K2HP04 1,5 g/1,
NaCl 0,5 g/1, CaCO^ 1,5 g/1 ja mineraali "S" 5 ml/1, pH säädetään 7,0 :ksi.
Mineraali"Sn koostumus on seuraava:
ZnS0417H20 2,8 g/1, Fe(NH4)2HCgH50? 2,7 g/1, CuS0415H20 0,125 g/1, MnS04-H20 1,0 g/1, CoCl216H20 0,1 g/1,
Na2B40?-H20 0,09 g/1 ja Na2Mo0412H20 0,05 g/1.
V-2-alustan ainesosat ovat: soijapapujauhoa 15 g/1, sokeri-juurikasmelassia 10 g/1, glukoosia 10 g/1, Estrasan 4:ää (metyylioleaatti) 10 g/1 ja NaCl 0,3 g/1, pH 7,2:ksi.
Esimerkki 1 Siirrosteen kasvatus
Koko kasvusto K. aridumin (ATCC 39323) vinopinnalta suspendoitiin 10 ml:aan steriiliä vettä ja siirrostettiin aseptisesti 4 l:n ilmastettuun pulloon, joka sisälsi 500 ml alusta 13 H:ta. Ravistelijassa tapahtuneen inkuboinnin jälkeen, 250 kierr./min, 280°C:ssa 3 päivää, valmista viljelmää käytettiin 14 l:n lasisen sylinterifer-menttorin siirrostamiseen (esimerkki 2), jossa valmistettiin toinen siirroste.
Esimerkki 2
Toinen siirrostevaihe 14 l:n lasinen sylinterifermenttori(New Brunswick Model 19), jossa oli 10 1 steriiliä alusta 13 H:ta siirrostettiin aseptisesti 500 ml:11a esimerkistä 1 saatua vegetatiivivil-jelmää. Fermentointi suoritettiin seuraavan taulukon mukaisin säädöin:
Sekoitus: 400 kierr./min 0-72 tuntia
Ilmastus: 0,4 v/v/m1 0-72 tuntia
Lämpötila: 28°C
v/v/m - ilman tilavuus per alustan tilavuus per minuutti « 77690
Viisi litraa saatua vegetatiiviviljelmää käytettiin 75 l:n fermenttorin siirrostamiseen (esimerkki 3), jossa valmistettiin kolmas siirroste.
Esimerkki 3
Kolmas siirrostevaihe 75 1:n fermentointi (Chemapec) suoritettiin samoin kuin esimerkissä 2. Viisi litraa esimerkin 2 vegetatiiviviljelmää käytettiin siirrostamaan 75 l:n fermenttori, joka sisälsi 50 1 alustaa 13H. Fermentointi suoritettiin seuraavan taulukon mukaisin säädöin:
Sekoitus: 250kierr./min 0-72 tuntia
Ilmastus: 0,4 v/v/m 0-72 tuntia
Lämpötila: 28°C
50 1 saatua vegetatiiviviljelmää käytettiin 750 l:n fermenttorin (esimerkki 4) siirrostamiseen halutun AAD 216-komplek-sin tuottamiseksi.
Esimerkki 4 AAD 216-kompleksin tuottaminen 750 l:n fermentointi (ABEC) suoritettiin samoin kuin esimerkissä 3. 50 1 esimerkin 3 vegetatiiviviljelmää käytettiin 750 l:n fermenttorin aseptiseen siirrostamiseen, joka sisälsi 600 1 alustaa V-2. Fermentointi suoritettiin seuraavan taulukon mukaisin säädöin:
Sekoitus: 120 kierr./min 0-168 tuntia
Ilmastus: 0,3 v/v/m 0-168 tuntia
Lämpötila: 26°C
Fermentointiliuos sisälsi AAD 216-kompleksia, joka oli koostunut itsenäisistä osatekijäantibiooteista seuraavasti: AAD 216A = 50 ug/ml, AAD 216B = 60,8 μg/ml ja AAD 216C = 43,5 pg/ml.
35 77690
Esimerkki 5 AAD 216-kompleksin tuottaminen 450 l:n fermentointi (Chemapec) suoritettiin samoin kuin esimerkissä 4. 30 1 esimerkin 3 mukaan tuotettua vegetatii-viviljelmää (kolmas siirrostevaihe) käytettiin 450 l:n fer-menttorin aseptiseen siirrostamiseen, joka sisälsi 300 1 alustaa V-2. Fermentointi suoritettiin seuraavasti:
Sekoitus: 1 20 kierr./min 0-168 tuntia
Ilmastus: 0,4-0,5 v/v/m
Lämpötila: 26°C
Fermentointiliuos sisälsi AAD 216-kompleksia, joka oli koostunut itsenäisistä osatekijäantibiootteista seuraavasti: AAD 216A = 46,2 pg/ml, AAD 216B = 75 ug/ml ja AAD 216C = 48 yg/ml.
Esimerkki 6 AAD 216-kompleksin eristäminen
Koko esimerkin 4 fermentointiliuos (600 1) selkeytettiin pyörivällä rumpusuodattimena (Komline-Sanderson, Laboratory Scale Model) käyttäen suodatinapuainetta (Hyflo Supercel, Johns-Manville Products Corp.) liuoksen omassa pH:ssa (pH
7,7-8,2). Liuoksen suodos (420 1) jäähdytettiin 4°C:een 100 l:n panoskäsittelynä kylmähauteeseen (metanoli/hiili-happojää) asetetussa astiassa. Jäähdytetty liuoksen suodos saostettiin sen jälkeen lisäämällä hitaasti konsentroitua suolahappoa, sekoittaen, pH 3,0:aan saakka. Muodostunut sakka erotettiin pyörivällä tyhjiösuodattajalla käyttäen suodatinapuainetta, kuten aikaisemmin kuvattiin. Suodatin-apuaine-tuote-sakkakakkua uutettiin sekoittamalla se de-ionisoituun veteen (55 1) ja säätämällä pH 7,0:aan 10 minuutiksi. Saatu vesipitoinen uute suodatettiin Whatman 4 suodatinpaperin läpi suodatinapu-aineen poistamiseksi. Täten saatu suodos ajettiin kahden XAD-7 hartsikolonnin (8,5 χ 110 cm) lävitse virtausnopeudella 0,5 til./tunti. Pestiin 8:11a tilavuudella deioni- 36 77690 soitua vettä, jonka jälkeen haluttu AAD 216-kompleksi otettiin talteen eluoimalla vesipitoisella metanolilla (50-100 %). Metanolipitoinen eluaatti, joka sisälsi halutun AAD 216-kom-pleksin konsentroitiin haihduttamalla käyttäen nousevatilmi-haihdutinta 35°C:ssa. Saatu vesipitoinen konsentraatti kylmäkuivatuin Virtis shelf-lyofilisaattorilla, jolloin saatiin 85,1 g AAD 216-kompleksia.
Tämä AAD 216-kompleksi kromatografioitiin Whatman Partisil® Prep 40 ODS-3 (1 kg)-kolonnilla Jobin Yvon Chromatospac-Prep 100-laitteella (askelgradientti 15-33 %:lla asetonitriili-0,1 M fosfaattipuskurilla pH 3,2), jolloin saatiin rikastettua AAD 216-kompleksia, joka analyyttisellä HPLC:llä analysoitaessa sisälsi 1,88 g AAD 216A:ta, 2,6 AAD 216B:tä ja 2,8 g AAD 216C:tä.
Esimerkki 7 AAD 216A;n, AAD 216B:n ja AAD 216C;n eristäminen Esimerkin 6 mukaisesti eristetty rikastettu AAD 216-kompleksi-näyte (38 g, josta ei ollut poistettu suoloja), joka sisälsi analyyttisellä HPLC:llä mitattuna 0,42 g AAD 216A:ta, 1,39 g AAD 216B:tä ja 0,08 g AAD 216C:tä, liuotettiin litraan 15 %:sta asetonitriiliä 0,1 M (pH 6) fosfaattipuskurissa ja pH säädettiin 6,3:ksi. Tätä liuosta ruiskutettiin Waters Prep 50C^ HPLC:hen, jossa oli kolonnina Whatman Partisil® 40 (ODS-3) (50 x 4,8 cm) virtausnopeutena 200 ml/minuutti. Tämän jälkeen kolonnia eluoitiin käyttäen seuraavaa gradi-enttia: (1) 20 % vesipitoinen asetonitriili- ja puskuri- liuos, kunnes polaarinen materiaali (ultraviolettidetektori 210 nmrssä) oli eluoitunut, (2) 24 % asetonitriili-puskuriliuos, kunnes AAD 216A oli eluoitunut, (3) 26 % asetonitriili-puskuriliuos, kunnes AAD 216B oli eluoitunut, (4) 28 % asetonitriili-puskuriliuos, kunnes AAD 216C oli eluoitunut ja (5) 50 % vesipitoinen asetonitriili.
3? 77690 HPLC-kolonnista eluoiduista sopivista fraktioista poistettiin suolat, kuten alla on kuvattu, jolloin saatiin puhtaat itsenäiset antibiootit: 0,25 g AAD 216A:ta, 1,05 g AAD 216B:tä ja 0,06 g AAD 216C:tä.
Suolojen poistamista varten HPLC:n sopivat fraktiot kerätään ja asetonitriili poistetaan alipaineessa. Saadut vesipitoiset näytteet lasketaan XAD-7-hartsikolonniin ja eluoidaan deionisoidulla vedellä kunnes ulosvirtaavan liuoksen kon-duktiivisuus on vähemmän kuin 25 mikro MH0:ta. Tämän jälkeen kolonnia eluoitiin vesipitoisella asetonitriilillä (40-60 %) ja eluentti lyofilisoitiin, jolloin saatiin halutut tuotteet.
Esimerkki 8
Rikastetun AAD 216-kompleksin eristäminen
10 gramman näyte AAD 216-kompleksia, joka oli eristetty esimerkin 6 XAD-7-menetelmän mukaisesti, ja joka sisälsi 0,69 g AAD 216A:ta, 0,23 g AAD 216B:tä, ja 0,21 g AAD 216C:tä (HPLC-analyysi), liuotettiin 17,5 % asetonitriili- ja 0,1 M
pH 6 fosfaattipuskuri liuokseen. Liuoksen pH säädettiin (S) 6,3:een ja tätä liuosta ruiskutettiin Waters Prep 500^-korkeapainenestekromatografiin, joka oli varustettu 50x4,8 cm:n kokoisella Whatman Partisil ®Prep 40 (ODS-3)-täyttei-sellä kolonnilla. Kolonnia eluoitiin 20 %:lla asetonitriili-puskuriliuoksella polaarisen materiaalin poistamiseksi ja tämän jälkeen eluoitiin 28 %:lla asetonitriili-puskuri-liuoksella, jolloin saatiin AAD 216-kompleksi asetonitrii-li-puskuriliuoksessa. Asetonitriili poistettiin eluentista alipaineessa ja saatu vesipitoinen liuos kaadettiin XAD-7-hartsikolonniin ja pestiin deionisoidulla vedellä, kunnes ulosvirtaavan luoksen konduktiivisuus oli vähemmän kuin 25 mikro MHOrta. Sitten kolonnia eluoitiin vesipitoisella asetonitriilillä (40-60 %) ja eluentti lyofilisoitiin, jolloin saatiin 2,05 g rikastettua AAD 216-kompleksia, joka sisälsi 0,59 g AAD 216A:ta, 0,20 g AAD 216B:tä ja 0,20 g AAD 216C:tä.
38 776 90
Esimerkki 9
Vaihtoehtoinen eristämismenetelmä
Vaihtoehtoisesti, AAD 216-kompleksi XAD-7-puhdistuksen jälkeen kromatografioitiin käyttäen hyväksi esimerkin 7 menetelmää saannon maksimoimiseksi, jolloin saatiin AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C suhteellisen puhtaina.
Neljästä erillisestä ajosta saatu AAD 216A (analyyttisellä HPLCtllä sisälsivät 3,9 g, 2,6 g ja 2,2 g AAD 216A:ta) yhdistettiin ja kromatografioitiin uudestaan samalla HPLC:llä isokraattisella eluoinnilla 22 %:lla asetonitriilillä ja 0,1 M pH 6 fosfaattipuskurilla, jolloin saatiin, suolojen poiston jälkeen, 4,6 g AAD 216A:ta keskeltä ajoa erittäin puhtaassa muodossa. Muut fraktiot uudelleenkierrätettiin lisäpuhdistusta varten.
Samoista neljästä erillisestä ajosta saatu AAD 216B (analyyttisellä HPLC:llä sisälsivät 2,5 g, 3,7 g, 3,7 g ja 1,4 g) yhdistettiin ja kromatografioitiin uudestaan samalla HPLCrllä isokraattisella eluoinnilla 26 %:lla asetonitriilillä ja 0,1 M pH 6 fosfaattipuskurilla, jolloin saatiin, suolojen poiston jälkeen, 2,7 g AAD 216B:tä keskeltä ajoa erittäin puhtaassa muodossa. Muut fraktiot uudelleenkierrätettiin lisäpuhdistusta \arten.
Esimerkki 10
Rikastetun AAD 216-kompleksin vaihtoehtoinen eristämismenetelmä
Esimerkin 6 mukaisesti eristetty AAD 216-kompleksi, joka sisälsi arviolta 720 mg AAD 216A:ta, AAD 216B:tä ja AAD 216C:tä, liuotettiin veteen (200 ml) ja suodatettiin. Suodos sekoitettiin 70 ml:aan affiniteettikromatografia-sorbenttia (Affi-Gel® 10-D ala-D ala, 633 mg D ala-D ala) 0,02 M pH 7,0 natriumfosfaattipuskurissa (katso Cuatrecasas et ai., Biochemistry, voi. 11, no. 12, ss. 2291-2298 (1972) yleisen menetelmän osalta) ja varovasti sekoitettiin 1/2 tuntia.
Seos kaadettiin kolonniin ja vesifaasi eluoitiin pois.
39 77690
Kolonnia pestiin: 0,02 M pH 7,0 fosfaattipuskuri (2 x 250 ml), 0,5 M NH4OAc pH 7,8 (2 x 250 ml), H20 (250 ml), 0,1 M pH 7,8 NH^OAc (250 ml), H20 (250 ml), 40 % vesipitoinen asetonit-riili (70 ml), 40 % vesipitoinen asetonitriili (1400 ml) ja 30 % asetonitriili 0,4 M NaHCO^issa (2 x 250 ml). 1400 ml:nen 40 % vesipitoinen asetonitriilifraktio lyofilisoitiin, jolloin saatiin 607 mg rikastettua AAD 216-kompleksia, joka sisälsi 224 mg AAD 216A:ta, 133 mg AAD 216B:tä ja 158 mg AAD 216C:tä.
Claims (4)
1. Menetelmä antibiootin, AAD 216-komplekein, valmista-mieekei, tunnettu siitä, että viljellään mikrobia Kibdelo-eporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov. ATCC 39323 tai sen jälkeläisiä vesipitoisella ravintoalustalla, joka sisältää assimilointikelpoisia typpi- ja hiililähteitä submerssi-viljelynä aerobisissa olosuhteissa, kunnes riittävä määrä AAD 216-kompleksia on syntynyt ja eristetään täten tuotettu AAD 216-kompleksi.
2. Patenttivaatimuksen 1 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että AAD 216-kompleksi eristetään fermentointi1iuok-sesta selkeyttämällä koko sitä sisältävä fermentointi1iemi ja saostetaan kompleksi tästä selkeytetystä liuoksesta hapolla.
3. Patenttivaatimuksen 2 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että antibioottikomponentit AAD 216A, AAD 216B ja AAD 216C erotetaan kromatografisesti AAD 216-kompleksista.
4. Patenttivaatimuksen 3 mukainen menetelmä, tunnettu siitä, että antibioottikomponentit puhdistetaan suoloista, jolloin saadaan puhdasta AAD 216A:ta, AAD 216B:tä ja AAD 216C:ta.
Applications Claiming Priority (2)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
US51351383 | 1983-07-13 | ||
US06/513,513 US4548974A (en) | 1983-07-13 | 1983-07-13 | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum shearer |
Publications (4)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
FI842807A0 FI842807A0 (fi) | 1984-07-12 |
FI842807A FI842807A (fi) | 1985-01-14 |
FI77690B FI77690B (fi) | 1988-12-30 |
FI77690C true FI77690C (fi) | 1989-04-10 |
Family
ID=24043597
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
FI842807A FI77690C (fi) | 1983-07-13 | 1984-07-12 | Foerfarande foer framstaellning av en antibiot, aad 216-komplex med mikroben kibdelosporangium aridum shearer gen. nov., sp. nov. atcc 39323. |
Country Status (23)
Country | Link |
---|---|
US (1) | US4548974A (fi) |
EP (1) | EP0132118B1 (fi) |
JP (5) | JPH0695941B2 (fi) |
KR (1) | KR850001284A (fi) |
AT (1) | ATE47142T1 (fi) |
AU (1) | AU587565B2 (fi) |
CA (1) | CA1210721A (fi) |
DE (1) | DE3480092D1 (fi) |
DK (1) | DK163001C (fi) |
DZ (1) | DZ658A1 (fi) |
ES (1) | ES8505723A1 (fi) |
FI (1) | FI77690C (fi) |
GR (1) | GR81517B (fi) |
HK (1) | HK50193A (fi) |
HU (1) | HU193213B (fi) |
IE (1) | IE57727B1 (fi) |
IL (1) | IL72369A (fi) |
NO (1) | NO158814C (fi) |
NZ (1) | NZ208849A (fi) |
PH (1) | PH22062A (fi) |
PT (1) | PT78877B (fi) |
ZA (1) | ZA845336B (fi) |
ZW (1) | ZW10784A1 (fi) |
Families Citing this family (12)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4548974A (en) * | 1983-07-13 | 1985-10-22 | Smithkline Beckman Corporation | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum shearer |
DE3683972D1 (de) | 1985-06-20 | 1992-04-02 | Smithkline Beecham Corp | Vancomycintyp-antibiotika. |
US4694069A (en) * | 1985-09-30 | 1987-09-15 | Smithkline Beckman Corporation | Kibdelosporangium aridum SK&F-AAD-609 |
US4797280A (en) * | 1986-06-10 | 1989-01-10 | Smithkline Beckman Corporation | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov. ATCC 39323 |
US4742045A (en) * | 1986-07-30 | 1988-05-03 | Smithkline Beckman Corporation | Glycopeptide antibiotics |
MX9204281A (es) * | 1991-07-24 | 1993-04-01 | Smithkline Beecham Corp | Composiciones alimenticias antibioticas y metodo para mejorar la eficiencia alimenticia y promover el crecimiento en animales monogastricos |
KR0179447B1 (ko) * | 1996-12-10 | 1999-02-01 | 황춘근 | 골프공 |
KR0179448B1 (ko) * | 1996-12-26 | 1999-02-01 | 황춘근 | 골프공 |
US6787040B2 (en) * | 2000-05-16 | 2004-09-07 | Immunocept, L.L.C. | Method and system for colloid exchange therapy |
AU2003900927A0 (en) * | 2003-02-28 | 2003-03-13 | Biodiem Ltd | Growth promotion method |
ES2368236B1 (es) * | 2009-12-23 | 2012-09-26 | Merck Sharp & Dohme Corp. | Agentes antibacterianos. |
CN104830815B (zh) * | 2015-06-02 | 2018-02-23 | 江南大学 | 一种采用全细胞转化高效生产α‑苯丙酮酸的方法 |
Family Cites Families (6)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
US4083964A (en) * | 1976-05-24 | 1978-04-11 | Eli Lilly And Company | Antibiotic A-35512 for increasing feed utilization efficiency in an animal |
US4378348A (en) * | 1979-12-28 | 1983-03-29 | Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. | OA-7653 Substance |
US4322406A (en) * | 1980-12-18 | 1982-03-30 | Eli Lilly And Company | Antibiotic A-4696 factors B1, B2, B3, C1a, C3 and E1 |
US4521335A (en) * | 1983-07-13 | 1985-06-04 | Smithkline Beckman Corporation | Aglycone and pseudo-aglycones of the AAD 216 antibiotics |
US4667024A (en) * | 1983-07-13 | 1987-05-19 | Smithkline Beckman Corporation | Process for the preparation of purified vancomycin class antibiotics |
US4548974A (en) * | 1983-07-13 | 1985-10-22 | Smithkline Beckman Corporation | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum shearer |
-
1983
- 1983-07-13 US US06/513,513 patent/US4548974A/en not_active Expired - Fee Related
-
1984
- 1984-07-05 PH PH30923A patent/PH22062A/en unknown
- 1984-07-09 GR GR75243A patent/GR81517B/el unknown
- 1984-07-09 ZW ZW107/84A patent/ZW10784A1/xx unknown
- 1984-07-09 AU AU30408/84A patent/AU587565B2/en not_active Ceased
- 1984-07-09 CA CA000458407A patent/CA1210721A/en not_active Expired
- 1984-07-10 IE IE1760/84A patent/IE57727B1/en not_active IP Right Cessation
- 1984-07-10 NZ NZ208849A patent/NZ208849A/en unknown
- 1984-07-10 IL IL72369A patent/IL72369A/xx not_active IP Right Cessation
- 1984-07-10 DK DK338784A patent/DK163001C/da not_active IP Right Cessation
- 1984-07-10 DZ DZ847220A patent/DZ658A1/fr active
- 1984-07-10 PT PT78877A patent/PT78877B/pt not_active IP Right Cessation
- 1984-07-11 DE DE8484304735T patent/DE3480092D1/de not_active Expired
- 1984-07-11 ZA ZA845336A patent/ZA845336B/xx unknown
- 1984-07-11 EP EP84304735A patent/EP0132118B1/en not_active Expired
- 1984-07-11 AT AT84304735T patent/ATE47142T1/de not_active IP Right Cessation
- 1984-07-12 ES ES534248A patent/ES8505723A1/es not_active Expired
- 1984-07-12 NO NO842863A patent/NO158814C/no unknown
- 1984-07-12 JP JP59145866A patent/JPH0695941B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1984-07-12 KR KR1019840004085A patent/KR850001284A/ko not_active Application Discontinuation
- 1984-07-12 HU HU842726A patent/HU193213B/hu not_active IP Right Cessation
- 1984-07-12 FI FI842807A patent/FI77690C/fi not_active IP Right Cessation
-
1993
- 1993-05-20 HK HK501/93A patent/HK50193A/xx not_active IP Right Cessation
- 1993-06-30 JP JP5161302A patent/JPH08835B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1993-12-27 JP JP5331312A patent/JP2603047B2/ja not_active Expired - Lifetime
-
1995
- 1995-06-14 JP JP7147301A patent/JP2594778B2/ja not_active Expired - Lifetime
- 1995-06-14 JP JP7147299A patent/JP2594777B2/ja not_active Expired - Lifetime
Also Published As
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
JP2551550B2 (ja) | 抗生物質aad216のアグリコンおよびシウドアグリコン | |
US4582822A (en) | Antibiotic A80190, pharmaceutical compositions containing same and method of use | |
FI77690C (fi) | Foerfarande foer framstaellning av en antibiot, aad 216-komplex med mikroben kibdelosporangium aridum shearer gen. nov., sp. nov. atcc 39323. | |
US4918054A (en) | Antibiotics called `chloropolysporins B and C`, a process for their preparation, and their therapeutic and veterinary use | |
US4694069A (en) | Kibdelosporangium aridum SK&F-AAD-609 | |
KR960012063B1 (ko) | 글리콜펩티드 항생물질 pa-45052 및 그의 제조방법 | |
US4683201A (en) | Antibiotic A80190-producing Actinomadura oligospora and process | |
US4742045A (en) | Glycopeptide antibiotics | |
US4672036A (en) | Pure cultures of Kibdelsporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov. ATCC 39323 and mutants thereof | |
EP0211490B1 (en) | Antibiotics of the vancomycin-class | |
US5407917A (en) | Compositions and methods for the enhancement of performance in meat-producing animals and for the treatment and control of disease therein | |
EP0255299A2 (en) | Glycopeptide antibiotics | |
US4797280A (en) | Antibiotics produced by Kibdelosporangium aridum Shearer gen. nov., sp. nov. ATCC 39323 | |
US5213797A (en) | A80407 antibiotics | |
US4996148A (en) | A80407 antibiotics | |
EP0255256A2 (en) | Antibiotics produced by actinomadura parvosata | |
CS228936B2 (cs) | Předběžné, respektive doplňkové krmivo pra vytvoření krmivá pro hospodářská zvířata, zvláště přežvýkavco |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
PC | Transfer of assignment of patent |
Owner name: PFIZER INC. |
|
MM | Patent lapsed | ||
MM | Patent lapsed |
Owner name: PFIZER INC. |