JPS63309192A - 効率的な分泌のための乳腺に出される蛋白におけるｄｎａ配列 - Google Patents

効率的な分泌のための乳腺に出される蛋白におけるｄｎａ配列

Info

Publication number
JPS63309192A
JPS63309192A JP63034933A JP3493388A JPS63309192A JP S63309192 A JPS63309192 A JP S63309192A JP 63034933 A JP63034933 A JP 63034933A JP 3493388 A JP3493388 A JP 3493388A JP S63309192 A JPS63309192 A JP S63309192A
Authority
JP
Japan
Prior art keywords
sequence
gene
casein
recombinant dna
gene complex
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
JP63034933A
Other languages
English (en)
Other versions
JP2863789B2 (ja
Inventor
ジェフリー　エム．ローゼン
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Baylor College of Medicine
Original Assignee
Baylor College of Medicine
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Baylor College of Medicine filed Critical Baylor College of Medicine
Publication of JPS63309192A publication Critical patent/JPS63309192A/ja
Application granted granted Critical
Publication of JP2863789B2 publication Critical patent/JP2863789B2/ja
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/027—New or modified breeds of vertebrates
    • A01K67/0275—Genetically modified vertebrates, e.g. transgenic
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K67/00—Rearing or breeding animals, not otherwise provided for; New or modified breeds of animals
    • A01K67/02—Breeding vertebrates
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C9/00—Milk preparations; Milk powder or milk powder preparations
    • A23C9/20—Dietetic milk products not covered by groups A23C9/12 - A23C9/18
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K14/00—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • C07K14/435—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans
    • C07K14/46—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates
    • C07K14/47—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals
    • C07K14/4701—Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from animals; from humans from vertebrates from mammals not used
    • C07K14/4732—Casein
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/63—Introduction of foreign genetic material using vectors; Vectors; Use of hosts therefor; Regulation of expression
    • C12N15/79—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts
    • C12N15/85—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells
    • C12N15/8509—Vectors or expression systems specially adapted for eukaryotic hosts for animal cells for producing genetically modified animals, e.g. transgenic
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N15/00—Mutation or genetic engineering; DNA or RNA concerning genetic engineering, vectors, e.g. plasmids, or their isolation, preparation or purification; Use of hosts therefor
    • C12N15/09—Recombinant DNA-technology
    • C12N15/87—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation
    • C12N15/89—Introduction of foreign genetic material using processes not otherwise provided for, e.g. co-transformation using microinjection
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/10—Transferases (2.)
    • C12N9/1025—Acyltransferases (2.3)
    • C12N9/1029—Acyltransferases (2.3) transferring groups other than amino-acyl groups (2.3.1)
    • C12N9/1033—Chloramphenicol O-acetyltransferase (2.3.1.28)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/05—Animals comprising random inserted nucleic acids (transgenic)
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2217/00—Genetically modified animals
    • A01K2217/20—Animal model comprising regulated expression system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A01K2227/105—Murine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2227/00—Animals characterised by species
    • A01K2227/10—Mammal
    • A01K2227/108—Swine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01K—ANIMAL HUSBANDRY; AVICULTURE; APICULTURE; PISCICULTURE; FISHING; REARING OR BREEDING ANIMALS, NOT OTHERWISE PROVIDED FOR; NEW BREEDS OF ANIMALS
    • A01K2267/00—Animals characterised by purpose
    • A01K2267/01—Animal expressing industrially exogenous proteins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23C—DAIRY PRODUCTS, e.g. MILK, BUTTER OR CHEESE; MILK OR CHEESE SUBSTITUTES; MAKING THEREOF
    • A23C2230/00—Aspects relating to animal feed or genotype
    • A23C2230/05—Milk or milk products from transgenic animals
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/01—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif
    • C07K2319/02—Fusion polypeptide containing a localisation/targetting motif containing a signal sequence
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07K—PEPTIDES
    • C07K2319/00—Fusion polypeptide
    • C07K2319/61—Fusion polypeptide containing an enzyme fusion for detection (lacZ, luciferase)
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/008—Vector systems having a special element relevant for transcription cell type or tissue specific enhancer/promoter combination
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/42—Vector systems having a special element relevant for transcription being an intron or intervening sequence for splicing and/or stability of RNA
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N2830/00—Vector systems having a special element relevant for transcription
    • C12N2830/80—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates
    • C12N2830/85—Vector systems having a special element relevant for transcription from vertebrates mammalian

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Genetics & Genomics (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • General Engineering & Computer Science (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Molecular Biology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Biophysics (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Physics & Mathematics (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Biodiversity & Conservation Biology (AREA)
  • Animal Husbandry (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Preparation Of Compounds By Using Micro-Organisms (AREA)
  • Micro-Organisms Or Cultivation Processes Thereof (AREA)

Abstract

(57)【要約】本公報は電子出願前の出願データであるた
め要約のデータは記録されません。

Description

【発明の詳細な説明】 本発明はその乳に外来の化合物を分泌する遺伝子導入（
ｔｒａｎｓｇｅｎｉｃ）された哺乳動物と、薬学、医学
、食料、農産物、ガン研究などの分野に有用な化合物を
含む改良された乳を分泌する遺伝子導入された哺乳動物
を作る方法に関する。
見豆立ｉ見 カゼインは主要な乳蛋白であり、通常乳分泌期の間に合
成され、乳腺にのみ分泌される。カゼインの遺伝子の最
初の詳細な性格付けは本発明者の研究室でなされた〔ニ
ー・リー（Ｙｕ−Ｌｅｅ）等、Ｎｕｃ、　Ａｃ１ｄｓ　
Ｒｅｓ、、第１４巻、１８３３〜１９０２頁（１９８６
年）〕。
その紹介以来、ＤＮＡを受精した一個の細胞である胚（
ｅｍｂｒｙｏ）の前核に微小注入することが多くの遺伝
子をマウスの染色体に転入するのに使われてきた〔ゴー
トン（Ｇｏｒｄｏｎ）等、匡。
Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、ＵＳＡ　！第７７巻、７
３８０〜７３８４頁（１９８０年）；パルミターとプリ
ンスター（Ｐａｌｍｉｔｅｒａｎｄ　Ｂｒ１ｎｓｔｅｒ
）、Ｃｅ１ｌ第１ｌ巻、３４３〜３４５頁（１９８５年
）；パルミターとプリンスター（Ｐａｌｍｉｔｅｒ　ａ
ｎｄＢｒｉｎｓｔｅｒ）、Ａｎｎ、Ｒｅｖ、Ｇｅｎｅｔ
、　＋第２０巻、４６５〜４９９頁（１９８６年）〕、
この技術は遺伝子の発現と制御に関する特定のヌクレオ
チド配列の研究や家畜類の改良のための実用に有用であ
る。遺伝子導入されたヒツジやブタがいま作られている
〔ハマー（Ｈａｍｍｅｒ）等、　Ｎａｔｕｒｓα７−第
３１５巻、３４３〜３４５頁（１９８５年）〕。家畜で
の研究が進んでいる〔クレーマー（Ｋｒａｅｍｅｒ）等
、「ウシとヒツジにおける遺伝子移入」パンバリ報告、
Ｎｏ、２０．２２１〜２２７頁（１９８５年）〕。
農業における実用的な遺伝子導入動物を作るためには外
来の遺伝子を宿主動物の染色体に組みこみその子孫に移
していかねばならない、適当な組織で発現しなければな
らない。またその発現が高率で、また正常なあるいは人
為的な制御機構を受ける。導入される遺伝子の発現の組
織特異性はラットのエステラーゼＩ遺伝子、ＩｇＬ鎖及
びＨ鎖の遺伝子、ラットのミオシンし鎖遺伝子及びマウ
ス／ヒトβ−グロビン遺伝子などのいくつかの遺伝子に
ついて報告されている〔スウィフト（Ｓｗｉｆｔ）等、
廁旦、第３８巻、６３９〜６４６頁（１９８４年〕、ス
トーブ（Ｓｔｏｒｂ）等、Ｎａｔｕｒｅ（Ｌ。
Ｉ旦０−１第３１０巻、２３８〜２４１頁（１９８４年
）；グロスシェルドル（Ｇｒｏｓｓｃｈｅｌｄ　ｌ　）
等、堕旦、第４１巻、８８５〜８９７頁（１９８４年）
；シャニー（Ｓｈａｎｉ）Ｎａｔｕｒｅ　（Ｌヅ世旦０
−第３１４巻、２８３〜２８６頁（１９８５年）；チャ
ダ（Ｃｈａｄａ）等、Ｎａｔｕｒｅ　Ｌｏｎｄｏｎ−第
３１４巻、３７７〜３８０頁（１９８５年）〕。組織特
異的な発現を司どる要素は完全には解明されていない、
ＭＭＴＶプロモーターとマウスのメタロチオネイン・プ
ロモーターでの研究による証拠が５　’　−ｆｌａｎｋ
ｉｎｇ　Ｄ　Ｎ　ＡにおけるＤＮＡ配列が重要であるこ
とを示唆している〔スチュアート（Ｓｔｅｗａｒｔ）等
、Ｎｕｃ、Ａｃ１ｄｓＲｅｓ、、第１２巻、３８９５〜
３９０６頁（１９８４年）及びパルミターとプリンスタ
ー（Ｐａｌｍｉｔｅｒ　ａｎｄ　Ｂｒ１ｎｓｔｅｒ）、
堕旦、第４１巻、３４３〜３４５頁（１９８５年）〕。
この問題に対する鍵は遺伝子導入動物と細胞培養系の相
方の研究から生じはじめている。
５′−側のＤＮＡにある特定のエンハンサ−配列一時に
は翻訳開始点よりはるか上流に位置している−とプロモ
ータ自身の中あるいはそれに近いところの配列が組織特
異的な遺伝子発現に関与していることは明らかである。
遺伝子導入されたマウスの遺伝子発現はβ−グロビン、
エステラーゼ、α−フェトプロティン、α−Ａ−クリス
タリンやインスリンなどの場合では相同遺伝子からの５
′−側ＤＮＡまたは３′−側ＤＮＡを含めることによっ
て適当な組織に向けられてきた〔マグラム（Ｍａｇｒａ
ｍ）等、Ｎａｔｕｒｅ　Ｌｏｎｄｏｎ、第３１５巻、３
３８〜３４０頁（１９８５年）；オーニッッ（Ｏｒｎｉ
ｔｚ）等、損■旦Ｐα旦ヅ世旦Ｏ−１第３１３巻、６０
０〜６０２頁（１９８５年）；クラムララフ（Ｋｒｕｍ
ｌａｕｆ）等ｌＭｏ１．Ｃｅ１ｌ。
焦心Ｉユ、第５巻、１６３９〜１６４８頁（１９８５年
）；オーバービーク（Ｏｖｅｒｂｅｅｋ）等、Ｐｒｏｃ
、Ｎａｔｌ、Ａｃａｄ、Ｓｃｉ、　。
μｓ込、第８２巻、７８１５〜７８１９頁（１９８５年
）＝ハナハン（ｌ（ａｎａｈａｎ）、Ｎａｔｕｒｅ　Ｌ
ｏｎｄｏｎ−１第３１５巻、１１５〜１２１頁（１９８
５年）〕。
インスリンの遺伝子は最も精力的に解析されている。ラ
ットのインスリンＩ遺伝子はハムスターのインスリノー
マ（ＨＩＴ）細胞において標識遺伝子の発現をＢＨＫ細
胞と比べると−１０３から−１３３の間のエンハンサ−
領域とプロモータ領域自体の両方を必要としている〔ニ
ドランド（Ｅｄｌｕｎｄ）等、　５ｃｉｅｎｃｅ、第２
３０巻、９１２〜９１６頁（１９８５年）〕、さらにラ
ットのインスリンＩＴｆｉ伝子は遺伝子導入マウスの膵
臓のβ−細胞にＳＶ４０のオンコジーンを発現させるの
に５３０ｂρの５′−側配列を必要としている〔ハナハ
ン（Ｈａｎａｈａｎ）、匣見庄１μ犯世旦Ｏ−１第３１
５巻；１１５〜１２１頁（１９８５年〕〕。
細菌のクロラムフェニコールアセチルトランスフェラー
ゼ（ＣＡＴ）遺伝子の発現にはネズミのα−Ａ−クリス
タリンの−３６４から＋４５までのＤＮＡ断片にＣＡＴ
遺伝子をコードしている配列を結合することによって眼
のレンズに向けられてきた〔オーバービーク（Ｏｖｅｒ
ｂｅｅｋ）等、旦ロ巧ユ顕ぢ」且岐」劇工互針、第８２
巻、７８１５〜７８１９頁（１９８５年）〕。
特定の遺伝子を乳腺に向けさせる能力が効果的な蛋白合
成と分泌をもたらし窮極にはバイオテクノロジーや薬学
、医薬、食品科学やガン研究の分野に影響を与えること
になろう０例えば、多くの発現ベクターがバクテリアや
酵母で効果的に蛋白を合成するために開発されているも
のの、これら蛋白を正しく加工できないために多くの場
合、これらの蛋白の生物活性は損われている。哺乳動物
細胞培養系の開発がもう一つの戦略を提供するがこのよ
うな細胞培養の費用のために実現しにくい。乳腺は１日
当り何グラムの蛋白を合成、分泌するための非常に効率
のよい生体のモデルを提供している。哺乳動物の一生の
中の授乳期の間分泌を続ける。加えて、乳腺は蛋白の分
解燐酸化、糖鎖修飾などに必要な翻訳後の修飾系をもっ
ている。それ故、このやり方を使うと、生物的に重要な
分子を効率的に合成し分泌することが可能となろう。例
えば、蛋白、ホルモン、成長因子、薬剤、脂質、炭水化
物などが合成され分泌され、医薬品の新しい道具を提供
する。この方法論はまた乳腺液（＝ミルク）の蛋白、糖
質、脂質の組成を変え、また静菌剤を含ませることによ
ってその組成を操作する方法を提供している。この変換
は農業や食糧工学の科学に重大な変化を示すだろう、さ
らに、オンコジーン（ｏｎｃｏｇｅｎｅ）　（発がん遺
伝子のこと）を乳腺に集める能力はそれが乳腺上皮細胞
の形質転換の基本的メカニズムを解析するためのモデル
を提供するために基礎的な乳癌研究を可能にするだろう
。生物体外（ｊｎ　ｖｉｔｒｏ）での細胞培養系を用い
たのではこの方法論は利用できない。
本発明は乳腺に遺伝子の発現をおこさせるばかりでなく
授乳期にこれら蛋白を効率的に分泌するのに使われる方
法を提供している。
＾更勿ｌ稔 本発明の対象は生物学的に活性のある作用物を乳の中に
合成させる組換えＤＮＡ遺伝子複合体である。
本発明のもう一つの対象はその乳腺に生物的に活性のあ
る作用物を分泌する遺伝子導入哺乳動物を開発すること
である。
本発明のさらにもう一つの対象は医薬品□、ガン研究、
農業、食料生産に使われる改良された乳を分泌する遺伝
子導入動物を開発することである。
本発明の別の対象は自分自身を再生産する遺伝子導入動
物を開発することである。
かくして上記の目的を成就するのに、本発明の一面に従
って、プロモーター配列、エンハンサ−配列、シグナル
ペプチド配列及び生物活性物をコードしている遺伝子に
由来するコード配列を含んでいる組換えられたＤＮＡ遺
伝子複合体を内容として提供している。プロモーター配
列、エンハンサ−配列、シグナルペプチド配列は少くと
も一つの乳腺特異的遺伝子から由来し、乳腺にそのコー
ドしている配列の発現を可能にしている。このコード配
列は生物学的に活性な作用物をコードしている遺伝子か
ら選択される。
本発明のもう一つの一面は、コード配列５′と３′末端
の夫々に接合して５′の非翻訳ｍＲＮＡ配列と３′非翻
訳ｍＲＮＡ配列をさらに含めた上記の組換えＤＮＡ遺伝
子複合体を開発することである。５′と３′につけた配
列は組換えＤＮＡ遺伝子複合体によって合成されるメツ
センジャーＲＮＡの安定性を増加する。
本発明のもう一つの局面は組換えＤＮＡ遺伝子複合物を
含む胚芽系統（ｇｅｒｍ　１ｉｎｅ）をもった乳腺にペ
プチドを合成するための遺伝子導入哺乳動物を本件の内
容として一発することである。
この胚芽系統はその次の世代に移行しうるちのである。
遺伝子導入哺乳動物のもう一つの面はどんな哺乳動物で
もよいということである。望ましい例はヒト以外の哺乳
動物である。
本発明のもう一つの面は、組換えＤＮＡ遺伝子複合物を
哺乳動物の胚系統に挿入する段階を含む少くとも一つの
特定の遺伝子のペプチドの合成を乳腺に向けさせる方法
である。その他の内容は分化成長して個体となる環境下
で胚を成長させる方法を含んでいる。さらに内容は胚の
系統の中に遺伝子の複合物を安定にとり込ませる段階を
含んでいる。またそのコードしている配列の発現を哺乳
動物からとった乳腺組織や乳で検査するステップを含ん
でいる。さらにまた遺伝子複合体に適当な機能をもたせ
ることを確立するステップを含んでいる。
本発明の付加的な意図は乳腺特異的遺伝子から選ばれた
プロモータ配列、エンハンサ−配列、シグナルペプチド
配列及び生物学的に活性の作用物をコードしている遺伝
子からのコード配列を結合するステップを含む乳腺特異
的遺伝子複合物を構成する方法である。実施例ではさら
に５′−の非翻訳ｍ　ＲＮ　Ａと３′−の非翻訳ｍＲＮ
Ａ配列を結合するステップも含んでいる。
もう一つの本発明の意図によれば、組換えＤＮＡ複合物
を構築し哺乳動物の卵子の系統（胚芽系統）にこの遺伝
子複合物を挿入し、その胚を成熟するまで成育させ、そ
の生物学的に活性のある作用物のための遺伝子複合物を
もつ哺乳動物によって作られる乳を検定するステップを
含む乳腺に生物活性物を合成する方法を提供している。
本発明のもう一つの意図は静菌的なコード配列を哺乳動
物の胚の卵子系統（胚芽系統）に含ませた組換えＤＮＡ
遺伝子複合体を挿入するステップを含む乳の細菌汚染を
防ぐ方法である本発明の別の意図はオンコジーンを含む
組換えＤＮＡ遺伝子複合体を哺乳動物の胚の卵子系統に
挿入するステップを含む哺乳動物のガンの機構を検討し
、その結果として生ずるガン性の組織の発生を解析する
方法である。
この発現の別の意図するところは本孔を分泌する遺伝子
導入した哺乳動物の系統株を開発することである。本孔
は自然にある化合物の濃度を変えたり、外来の化合物を
含ませることができる。外来の化合物は薬剤、ホルモン
、ペプチド、蛋白、脂質、炭水化物、抗菌剤などであり
うる。これら外来の化合物は細菌、動物あるいはヒトの
染色体から由来する遺伝子から合成され机 本発明のもう一つの意図は本孔を乳製品の製造に用いる
ステップを含む乳製品の生産を可能にする過程である。
本発明のもう一つの別の意図は遺伝子導入された哺乳動
物から作られる本孔を含む食料品である。
その他の目的、特徴及び利点はこの発明の実施例につい
て以下に記載しているものから明らかであろう。
実施例の詳細な記゛１ 本件の構成として本発明の一例はプロモータ、エンハン
サ−、シグナルペプチド及びコードしている配列を含む
組換えＤＮＡ遺伝子複合物である。この組み合わせにお
いてプロモータ、エンハンサ−、シグナルペプチド配列
は乳腺に特異的な遺伝子から由来し、コード配列は生物
的に活性な作用物に対するコードをもっている。
乳腺に特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合物を構成させる
通常の方法はプロモータ、エンハンサ−、シグナルペプ
チド及びコード配列を一緒に結合させることを含んでい
る。第１図Ａは本発明の一例を示しており、エンハンサ
−配列（Ｅ）とともにプロモータ配列遺伝子（Ｐ）を両
側面について配列で結合していることが示されている。
これらの配列は通常孔組織にのみ特異的に発現される遺
伝子から由来される。例えば、これらの配列はα−カゼ
イン、β−カゼイン、γ−カゼイン、に−カゼイン、α
−ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリン、ホエーの
酸性蛋白などをコードしている遺伝子から得ることがで
きる。
それから、プロモーターエンハンサ−複合物はシグナル
ペプチドのエクソン配列に結合されている。乳腺に特異
的ないろいろなシグナルペプチドエクソンが利用できる
。シグナルペプチドのエクソンは効率のよい転位、認識
、除去、乳への蛋白の分泌などに役立っている。蛋白、
炭水化物、ペプチド、脂質などが−たび乳に分泌される
と標準的な分離法がその成分を精製するために使われる
。シグナルペプチドは翻訳後の修飾を可能にするけれど
も、いくつかの合成される分子のもっている特徴が乳へ
の分泌を妨げることもあろう、従って、乳組織を集めて
、関心のある分子を組織から精製しなければならない。
乳組織を集めることは問題の化合物を継続して生産する
ことを妨げるし、組織から成分を分離することは乳から
分離するよりも困難な方法であるので上記のアプローチ
に満足できるものでない。特定の実施例でα−１β−１
及びγ−カゼイン遺伝子のエクソン■とホエーの酸性蛋
白遺伝子のエクソン■が使われている。
問題としている遺伝子のコード領域（ｃＤＮＡ）がイン
トロン配列によってプロモーターエンハンサーーシグナ
ルペプチド複合物に接続されている。コード領域はどん
な遺伝子でもあるいは一つの分子をコードしている遺伝
子の一部でもよい。それには遺伝子のイントロン領域エ
クソン領域を含んでいてもよい１例えば、蛋白、乳蛋白
、脂質、炭水化物、ホルモン、バクテリアの生産物（薬
剤や抗生物質）、抗体、抗原、酵素などをコードしてい
る遺伝子がプロモーターエンハンサーーシグナル複合物
に結合される。
望ましい実施例では、コード配列はα−カゼイン、β−
カゼイン、γ−カゼイン、Ｘ−カゼイン、α−ラクトア
ルブミン、β−ラクトグロブリン、ホエーの酸性蛋白、
ホルモン、薬剤、蛋白。
脂質、炭水化物、成長ホルモン、クロラムフェニコール
、アセチルトランスフェラーゼ、抗菌物質などから成る
群から選ばれた生物的に活性のある作爾物をコードして
いる遺伝子から選ばれている。実施例では乳腺特異的な
遺伝子はα−カゼイン、β−カゼイン、γ−カゼイン、
に−カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラクトグロ
ブリン、ホエー酸性蛋白の群から選択されている。
その他の例ではプロモータ配列、エンハンサ−配列、シ
グナルペプチド配列を生み出すのに同じ遺伝子が使われ
ている。別の特定の具体例ではβ−カゼイン遺伝子のプ
ロモータ、エンハンサ−、シグナルペプチド配列とβ−
カゼイン遺伝子またはクロラムフェニコールアセチルト
ランスフェラーゼ遺伝子のコード配列とが使われている
。
本件を構成するものとしてのもう一つの具体例では第１
図Ｂに示された組換えＤＮＡ遺伝子である。この例はプ
ロモーターエンハンサー−シグナル複合体に結合した遺
伝子のコード領域に連結したメツセンジャーＲＮＡ（ｍ
ＲＮＡ）の５′−非翻訳配列（ｕｎｔｒａｎｓｌａｔｅ
ｄ　５ｅｑｕｅｎｃｅ）（５’−ＵＴ）と３′−非翻訳
配列（３’　−ＵＴ）を含んでいる。非翻訳ｍＲＮＡ配
列はイントロンによって連結される。これらの翻訳され
ないｍＲＮＡ配列は転写されｍＲＮＡに結合される。こ
れらの非翻訳領域はコード領域のｍＲＮＡを迅速な分解
から保護するのに役立っている。ｍＲＮＡの寿命の長い
自然にある遺伝子はこれらの非翻訳領域のよい候補者と
なる。これらを構築するのに使われる非翻訳領域の例は
β−カゼイン、β−グロビン、ビテロゲニンのｍＲＮＡ
の非翻訳ｍＲＮＡ配列が含まれる。β−カゼイン遺伝子
配列が好ましい例を提供している。
エンハンサー−プロモーターシグナルペプチド配列と、
エンハンサーープロモーター５′−非翻訳ｍＲＮＡ配列
−シグナルベプチド−３′−非翻訳ｍＲＮＡ配列の構成
がベクターにくみこまれる。そこで必要なときにいろい
ろなｃＤＮＡがくみこまれることができる。ｃＤＮＡは
カセットのようなもので乳中に化合物を特別に分泌する
ように設計されたＤＮＡ配列に挿入される。かくして多
種のくみ換えＤＮＡ遺伝子複合体が容易に形成される。
−たびくみ換えＤＮＡ遺伝子複合体（外来遺伝子複合体
）が作られると、非翻訳配列があってもなくても、それ
は宿主哺乳動物の染色体（卵子系統）の中にくみ込まれ
る。卵子系統の中に外来の遺伝子複合体をくみ込むこと
は本件の構成として遺伝子導入動物を創造する。さらに
卵子系統へのくみこみは子孫へ外来の遺伝子複合体を移
送させる。かくして、外来遺伝子をもっだ哺乳動物の系
統が維持される。外来の遺伝子複合体はどの哺乳動物の
染色体にも含ませられる。−例ではヒト以外の哺乳動物
が使われている。
哺乳動物の胚の卵子系統に組換えＤＮＡ遺伝子複合物を
挿入することによって生物活性のある作用物の合成も乳
腺で行わせることができる。
もう一つの具体例には哺乳動物に胚を分化成長させる適
当な環境の中へ胚を挿入するステップが含まれている。
哺乳動物が生後、外来遺伝子複合体の宿主染色体への安
定な組み込みができるようにするために染色体をスクリ
ーニングする付加的なステップが行われる。哺乳動物が
成人に達した後、乳分連線について外来遺伝子複合体の
ｍＲＮＡまたは分子合成が乳腺で起っているかどうかを
確める検査がされる。このステップは組換え遺伝子複合
体が正しく機能するかどうかを確めるために使われる。
組みこまれる外来遺伝子の特性に応じているいろなスク
リーニング法が使用される。スクリーニング法にはプロ
ーグ解析、ｍＲＮＡ解析、酵素分析、細菌検査、抗体ス
クリーニング、蛋白、炭水化物、脂質分析などが含まれ
る。
具体的な一例では外来の遺伝子複合体が、単一細胞の時
期に哺乳動物の卵子系統に挿入される。もしこの組み込
みが単一細胞時期に行われれば外来遺伝子複合体に対す
るプローグがどの細胞を調べるために利用できようがも
し組み込みが発生のより遅い時期に起これば検査すべき
組織は組み込みが行われた細胞系統から発達してきたも
のに限られる。注入された卵母細胞（ｏｏｃｙｔｅ）は
それから同じ卵子系統をもった宿主動物の卵管の中に挿
入される。
来遺伝子複合　の　　例 ７．２ｋｂのラットβ−カゼイン遺伝子を含む３４゜４
ｋｂの領域の染色体ＤＮＡが特徴づけられている。ジョ
ーンズ（Ｊｏｎｅｓ）等、Ｊ、　Ｂｉｏｌ、　Ｃｈｅｍ
、。
第２６０巻、７０４２−７０５０頁（１９８５年）の記
載を参考に取上げる。遺伝子全体と５′−側面のＤＮＡ
の１．３または２．３ｋｂのいずれかを単一のファージ
クローンからＫｐｎＩ−Ｂａｎ＋ＨＩまたはＢａｍＨＩ
−ＢａｍＨＩ分解のいずれかによって分離しサブクロー
ン化した〔ジョーンズ（Ｊｏｎｅｓ）等、Ｊ、　Ｂｉｏ
ｌ。
Ｃｈｅｍ、　、第２６０巻、７０４２−７０５０頁（１
９８５年）〕。この構成物はさらに１　ｋ　ｂ　（Ｋｐ
ｎｌ−ＢａｍＨＩの場合）または５　ｋ　ｂ（Ｂ　ａｍ
ＨＩ　−Ｂ　ａｍＨＩの場合）のλＤＮＡを含んでいる
。第２図はｌｋｂの５′側面ＤＮＡとｌｋｂのλＤＮＡ
を伴うβ−カゼイン遺伝子を含むＫｐｎＩ−ＢａｍＨＩ
消化断片を示している。一方、ファージＢ１２がらのＢ
ａｍＨＩ−３ａ１２１断片をファージＢ９９がらの５ａ
ｆｉ　Ｉ−ＢａｍＨＩ断片に連結することによって原核
性のＤＮＡのない１４．６ｋｂのＢａｍＨＩ−ＢａｍＨ
Ｉ断片が分離される。この構成は７ｋｂの５′−側面Ｄ
ＮＡ、全遺伝子及び４００ｂＰ（７）３’−側面配列を
含んでいる。
組換えＤＮＡ遺伝子複合体の例はマウスの乳腺腫瘍ウィ
ルスの長い末端のくり返し構造からのグルココルチコイ
ド応答因子（ＧＲＥ）を含んでいる。これは乳腺特異的
なエンハンサ−配列へ５′を挿入されている。この付加
は適当な制限酵素リンカ−をっけ加えることによって可
能になる。ＧＲＥは隣り合った遺伝子にグルココルチコ
イド誘導能を授けることのできる３４０ｂＰ断片を生む
ために、ＸｈｏＩＩで消化することによってプラスミド
ｐＴＫ２Ａ１から作られる〔ゴドウスキー等（Ｇｏｄｏ
ｗｓｋｉ　ｅｔ　ａｌ、）Ｎａｔｕｒｅ、第３２５巻、
３６５−３６８頁（１９８７年））、ＧＲＥは授乳の期
間存在するグルココルチコイドの量が増加することによ
って隣りの遺伝子をさらに１０〜２０倍誘導させる。
遺伝子導入したマウスで効率的な組織特異的な発現を引
き出すために使われる組換えＤＮＡ遺伝子複合体の一例
は７ｋｂの５′−側面のＤＮＡを含み原核性のベクター
配列を欠いているラットのβ−カゼイン遺伝子の全体で
ある。カゼイン遺伝子の大きなそして複雑な性質は複数
の部位で遺伝子を分解することなしにλＤＮＡ配列に作
用しうる制限酵素分解部位を残していない。かくして、
ＫｐｎＩ−ＢａｍＨＩ断片からλ配列の除去にはＢａＱ
３１による消化とそれに続くサブクローニングとＤＮＡ
の配列決定が必要である。マニアティス等（Ｍａｎｉａ
ｔｉｓ　ｅｔ　ａｌ）、Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ　Ｃｌｏｎ
ｉｎｇ　：　Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒ　　Ｍａｎｕａｌ
、コールドスプリングハーバ−出版２０１−２０９頁（
１９８２年）の記載を参考に取り上げる。さらに、全遺
伝子とその大きな側面に位置する配列が組織特異的な制
御にとって重要である。
β−カゼイン−ＣＡＴ融合遺伝子を使ってもう一つの組
換えＤＮＡ遺伝子複合体が作られた。
ビスビー、ローゼン（Ｂｉｓｂｅｅ　ａｎｄ　Ｒｏｓｅ
ｎ）分子及び細胞生物学に関するＵＣＬＡシンポジウム
「転写制御（Ｔｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌ　Ｃｏｎ
ｔｒｏｌ）Ｊ（１９８６年）この記述を参考とする。こ
の構成物は２．３ｋｂまでの５′−側面ＤＮＡを含んで
いる。これは独特なＮｄｅＩとＢａｍＨＩ部位を使って
ベクターＤＮＡから都合よく作り出される。そのベクタ
ーＤＮＡを含まない直鎖状の断片が使われている。
β−カゼイン−ＣＡＴ複合体の別の構成はカゼイン−Ｃ
ＡＴ融合遺伝子の構成に使われるＸｂａＩリンカ−へさ
らに５′−側面配列は結合されている。
７ｋｂの５′−側面ＤＮＡにはほんのわずかしかＸｂａ
Ｉ部位が存在しないのでＢａｍＨＩ−Ｘｂａ工（部分分
解）断片は失われる上流の配列を含んで生成されている
。遺伝子の中に組織特異的なエンハンサ−配列が存在す
るときの組換えＤＮＡ遺伝子複合体を作るもう一つの方
法は遺伝子から切り出される制限酵素断片を分析し、適
当なリンカ−でベクターの中へクローニングすることに
よってエンハンサ−配列を検索することである。ＣＡＴ
の場合にはベクターはＳｖ工ＣＡＴベクターである。ゴ
ーマン等（Ｇｏｒｍａｎ　ｅｔ　ａｌ）　Ｍｏ１．　Ｃ
ｅ１１．　Ｂｉｏｌ、、第２巻、１０４４−１０５１（
１９８２年）この記述を参考に供する。このベクターは
ＳＶ４０からの構成的プロモーターを含んでいるがＳＶ
４０のエンハンサ−配列を欠いている。それ故これはい
ろいろなりＮＡ断片のプロモーターに依存しないエンハ
ンサ−活性を検索するのに有用である。さらに５１１ｂ
ｐの５′−側面ＤＮＡしか含まないβ−カゼイン−ＣＡ
Ｔ構造が利用しうる。遺伝子導入マウスにおいて再配列
されていない転移された遺伝子のコピーとラットのβ−
カゼインとＣＡＴが発現について解析されるう 発現を乳腺に向けこれらの蛋白を授乳の間に効率的に分
泌させるために、シグナルペプチドを複合体に結合しな
ければならない、−例はＣＡＴのところに６３ｂｐのカ
ゼインシグナルペプチドのエクソン配列を結合させるも
のである。
そのカゼインのためのシグナルペプチドは哺乳動物の発
生の間十分に保たれていることが示されている。ユーリ
ー等（Ｙｕ−Ｌｅｅ　ｅｔ　ａｌ、）　Ｎｕｃ。
Ａｃ１ｄｓ、　Ｒｅｓ、、第１４巻、１８３３−１９０
２頁（１９８６年）にありその記載は参考に提供される
上で論議した他のシグナルペプチドが使用できるけれど
、乳腺に効率的に分泌させるために高度に保たれる配列
を使うことが有利である。外来の分泌性蛋白をコードし
ているＤＮＡを制御を受けた分泌細胞の中に移入される
のは分泌小胞に入る蛋白の種類に特異性があることが示
されている。
［ケリー（にｅｌｌｙ）、５ｃｉｅｎｃｅ、第２３０巻
、２５−３２頁（１９８５年）〕この記載は参考にされ
る。例えば、β−カゼイン遺伝子の第２エクソン（エク
ソン■）を含む）ｉ　ｉｎｄ　ｍ断片が分離される。　
ＨｉｎｄＩ１１部位は成熟したカゼインの＋２アミノ酸
に対する１４ｂｐの３′とエクソン■の開始点に対する
５４８ｂｐの５′である〔ジョーンズ等（Ｊｏｎｅｓ　
ｅｔ　ａｌ）ムＢｉｏ１．Ｃｈｅｍ、　、第２６０巻、
７０４２−７０５０頁（１９８５年）〕。
＋２アミノ酸に対するＡＴＧ３’　のところで終止コド
ンを脱落させるためＢａＱ３１消化を行いＨｉｎｄＩＩ
Ｉリンカ−を挿入している。この断片は５Ｖ２ＣＡＴベ
クターのＨｉｎｄ１ｍ部位に挿入される。ゴーマン等（
Ｇｏｒ＋＋＋ａｎ　ｅｔ　ａｌ）、　Ｍｏ１．　Ｃｅ１
ｌ。
狐がよ、第２巻、１０４４−１０５１頁（１９８２年）
とローゼン等（Ｒｏｓｅｎ　ｅｔ　ａｌ）　ｒ膜の受容
体と細胞制御（Ｍｅｍｂｒａｎｅ　Ｒｅｃｅｐｔｏｒｓ
　ａｎｄ　Ｃｅ１ｌｕｌａｒ　Ｒｅｇｕｌａｔｉｏｎ）
Ｊ＋エクソンＲ，リス＠（Ａｌａｎ、　Ｒ，Ｌｉ５ｓ）
ニューヨーク、３８５−３９６頁（１９８５年）の記載
があり、参考に供される。
もう一つのアプローチは独特な制限酵素リンカ−を含む
４５ｂＰのオリゴヌクレオチドを直接合成することであ
る。これはβ−カゼイン−ＣＡＴベクターのＨｉｎｄｌ
Ｉ［部位に直接結合される。
よりよい効率と正確性のために分解するところの配列を
コントロールできるのでオリゴヌクレオチドによるアプ
ローチは望ましい。
構成されるあるいは合成されるベクターがＣＯＭＭＡ（
Ｄ細胞の中に移入され、モしてＣＡＴが効率的に発現さ
れる。ビスビー、ローゼン（Ｂｉｓｂｅｅ　ａｎｄ　Ｒ
ｏｓｅｎ）　：分子及び細胞生物学に関するＵＣＬＡシ
ンポジウムｒＴｒａｎｓｃｒｉｐｔｉｏｎａｌＣｏｎｔ
ｒｏｌＪ　（１９８６年）、この構造はＣＡＴのアミノ
末端に融合された付加的な１４個のアミノ酸を含むＣＡ
Ｔ融合蛋白となりあとでシグナルペプチドの分解が起こ
る。
もう一つの具体例ではカゼインのシグナルペプチド−Ｃ
ＡＴ構造に組織特異的な発現を引き出すために必要な予
め決められたシス作動性の制御配列が上記の例示した構
成に結合される。
これはＡｃｃＩと５ｐｈＩを使って上の構成がらＳＶ４
０７２ｂ　ｐのエンハンサ−を削除（これは本質的にＳ
ｖ工ＣＡＴベクターを生ずる）シ、乳腺特異的なエンハ
ンサ−断片を挿入することによるかまたは、カゼイン特
異的プロモーター、エクソンＩ、イントロンＡ及びエク
ソン■を含む断片を産生ずるために−３３０ｂ　ｐのと
ころの上流のＨｉｎｄＩＩ［部位での部分的なＨｉｎｄ
ＩＩ［消化を使うことによって完成される。どちらの場
合も反核性のベクター配列を欠いた直鎖状のＤＮＡ断片
が遺伝子導入マウスを産むのに使われている。
ＣＡＴ活性は培地（＝乳）、細胞質や組織の抽出物での
酵素的分析を含むいろいろな方法や、ドツトプロット法
を使った免疫学的方法によって定量できる。
カゼインのシグナルペプチド配列は特に分泌が例えば内
在的な疎水性のような多くの要因に左右されるので全ゆ
る蛋白の分泌に向けられるには十分でないだろう。かく
して、他のシグナルペプチドやまたは側につく領域につ
いて変更することが分泌のために必要であろう。成長ホ
ルモンや組織プラスミノーゲン活性化因子のような通常
は分泌される蛋白のもっているシグナルペプチドがカゼ
インのシグナルペプチドの代りに含められる。またその
他には膜に蛋白をつなぎとめるのに関わるカルボキシ末
端のアミノ酸は離脱させねばならないだろう。
例示の構造が信頼に足ることは制限酵素によるマツピン
グと１）ＮＡ配列決定によって確められる。
遺伝子導入された晴　　　の産 遺伝子導入した哺乳動物は宿主の染色体に外来のＤＮＡ
配列をとり込ませる過程によって作り出される。この方
法は胚を集めること、ＤＮＡをその胚に注入すること、
その生き残った胚を代理の母親に移し、その子孫を外来
の遺伝子がくみこまれ発現しているかどうかを検索する
ことから成り立っている。遺伝子導入された哺乳動物は
薬物を生産するために哺乳動物に挿入されたバクテリア
の遺伝子、乳に生物学的化合物をｇ単位の量で生産する
ために非ヒト晴乳動物に挿入されたヒトの遺伝子、酪農
の動物にとり込まれたヒトの成長因子、マウスにとり込
まれたラットのＤＮＡ、酪農用動物にとり込まれたラッ
トまたはウシのＤＮＡ、及びウシに挿入されたヤギ、ヒ
ツジまたはブタの乳蛋白をコードしているＤＮＡなどを
含ませることができる。
特定の具体例では、哺乳動物の胚の卵子系統にくみ換え
ＤＮＡ遺伝子複合体を挿入することによって、乳中の有
害汚染菌を防ぐ方法を含んでいる。別の具体例ではオン
コジーンを含むくみ換えＤＮＡ遺伝子複合体を哺乳動物
の胚の卵子系統の中に挿入することを含んでいる。この
できた遺伝子導入された哺乳動物を検定し、ガン組織の
発生の機構を解析できる。この方法も、家畜からとった
乳を生産にとり入れることによって酪農産物を作ること
を可能にしている。この市販孔は生物活性のある作用物
を含めることができ、食料、薬品、化粧品、ホルモン、
炭水化物、脂肪、アミノ酸、蛋白などの多種の生産物を
生み出すのに使うことができる。
う・・トの　−カゼインのマウスへの取り°み久１じ【
鯉 １、胚の採集 １個の細胞である胚はゴナドトロピン投与で過度排卵に
された雌のマウスの卵管を水で洗い出すことによって採
取される。ゴナドトロピン管理は系統によってかわるが
本質的には妊娠しているウマの血清（ＰＭＳ）のゴナド
トロピンの腹腔内（ｉ、ｐ）投与した後、ヒトに絨毛膜
ゴナドトロピン（ｈＣＧ）をｉｐ投与することによって
いる。最終のゴナドトロピン投与後、雌マウスは雄と交
尾される。
雌マウスはｈＣＧ投与後、約１８〜２０時間で屠殺され
、卵管を洗滌され１細胞の胚が注入のために準備される
。
特別の具体例では、約１４〜１８ｇのＩＣＲ系雌系中マ
ウス５ＩＵ（国際単位）のＰＭＳ、次いで約４８時間後
に約５ＩＵのｈＣＧ投与される。若い未成熟のマウスの
方が年上いた動物よりも過度排卵によく応答する。しか
しながらどれを使ってもよい、雄の８６マウスが交尾に
使われる。
２、胚の注入 胚を一滴の培養液の中におく〔フィン （Ｑｕｉｎｎ）、　Ｊ、　Ｒｅｐｒｏｄ、　Ｆｅｒｔ、
　、第６６巻、１６１−１６８頁（１９８２年）を参考
として取上げる〕、そして５μｇ／ｍＱのサイトカラシ
ンＢを加えておく、培地はパラフィン油で覆われ、その
胚はホフマン光学系を使った倒立型顕微鏡で観察される
。ラットのβ−カゼイン遺伝子複合体の注入は支持用マ
イクロピペットで一細胞胚を固定してβ−カゼイン遺伝
子複合体を細くひっばった注入用マイクロピペットによ
って雄の前核に注入することによって達せられる。
マイクロピペットを通しての液の流れのコントロールは
テフロン管でマイクロピペットにストールティングマイ
クロメーター・シリンジにつなぐことで行われる。全体
をパラフィン油で満たし、注入のための陽圧をかけまた
胚を微妙なコントロールの下で注入できるよう固定する
ための陽圧にできるようにしている。
注入されるラットのβ−カゼイン遺伝子複合体は１０ｍ
Ｍのトリス（ｐＨ７，５）と０．２５ｍＭのＥＤＴＡの
溶液中に約２ｎｇ／μＱの濃度に溶解される。プリンス
ター等（（Ｂｒｉｎｓｔｅｒ　ｅｔ　ａｌ）、ヒ匹工基
店しユ９も」Ｉユ勲針、第８２巻、４４３８−４４４２
頁（１９８５年）〕の記載を参考とする。約１〜２ｐｆ
ｌのβ−カゼイン遺伝子複合体溶液を前核に注入する。
注入後の胚の生存は正常な形態上の外観をしているかど
うかで判定される。
ムーＪ箋１４隻 マイクロインジェクションに生き残った胚をＨＴ６培地
におき、６〜８週齢の雌マウスの卵管に移す準備をする
。受容側のマウスはＰＭＳをｉｐ投与された後ｈＣＧを
与えられ、精管切断された雄マウスとともに置かれる。
マイクロインジェクトされる胚を受入れるたすけとする
ためにゴナドトロピン投与と交尾は供与側のマウスのス
ケジュールに一致される。
一例では約２０〜２２ｇのＩＣＲ系雌系中マウス２ＩＵ
のＰＭＳ、次いで４８時間後に２ＩＵのｈＣＧのｉｐ投
与を行った。精管切断された雄と一緒にされた後、腟栓
をもった雌を受容動物として用いた。受容雌マウスは麻
酔され、卵管を背側切開で露出し、細くひいたパスツー
ルピペットを使って卵管の釆を通して胚を置く、卵管を
腹腔に戻して傷口を閉じる。
胚転移の成功は転移後約１９〜２１日でマウスが誕生す
ることで判定される。マイクロインジェクションの成功
はマウスの尾の生検試料から採取されたＤＮＡをサザン
ハイプリダイゼーション解析によって評価される。
細菌のＣＡＴのマウスへの組み′みの １、　胚の採取−ラットのβ−カゼインの例と同じ方法
による。
２、胚の注入 バクテリアのＣＡＴ遺伝子複合体が単−細胞胚の雄前核
に注入される以外はラットのβ−カゼインの例と同じ方
法がとられる。注入されるバクテリアのＣＡＴ遺伝子複
合体は１０鱈のトリス（ｐＨ７，５）と０．２５ｍＭ　
　Ｅ　Ｄ　Ｔ　Ａの溶液に約２ｎｇ／μＱの濃度で溶解
される。バクテリアのＣＡＴ遺伝子複合体液の約１〜２
ｐＱが前核に注入される。注入後の胚の生存は正常な形
態上の外観で判定される。
３、…二藍蔓 β−カゼイン遺伝子複合体の場合と同じ方法が用いられ
る。胚の転移の成功は転移後約１９〜２１日でマウスが
生まれるかどうかで判定される。バクテリアのＣＡＴの
マイクロインジェクションの成功はマウスの尾の生検試
料からとったＤＮＡのサザンハイプリダイゼーション解
析によって評価される。
胚の採取と注入方法は既述のとおりである。
ハマー等（Ｈａｍｍｅｒ　ｅｔ　ａｌ）　Ｎａｔｕｒｅ
　Ｌｏｎｄｏｎ　、第３１５巻３４３−３４５頁（１９
８５年）、クレーマー等（Ｋｒａｅｍｅｒ　ａｔ　ａｌ
）、　ｒウシ、ヒツジにおける遺伝子転移」パンベリー
レポート、１１月２０日、２２１−２２７頁（１９８５
年）の記載を参考にする。マウスとウシ、ヒツジ、ブタ
との大きな違いは、前核の観察の際にウシ、ヒツジ、ブ
タでは卵子がはっきりしないことである。みえるように
するには約３分間約１５，０００ｇで遠心分離すること
で可能となる。
この遠沈法は細胞質を層状にし、原核と核を位相差顕微
鏡でみえるようにする。
小さな組織検体をＳＥＴ緩衝液（１５０ｍＭＮａＣＱ、
２０ｍＭトリス、１ｍＭ　Ｎａ、ＥＤＴＡ、ｐＨ７，８
）中で３７℃、１晩ブリンクマン・ポリトロンによって
ホモゲナイズし、フェノール、フェノール／クロロホル
ム／イソアミルアルコール及びクロロホルム／イソアミ
ルアルコールで抽出する。ＤＮＡはエタノール沈殿或い
は糸状にまきつけること（ｓｐｏｏｌｉｎｇ）で回収さ
れる。ＤＮＡ濃度は特殊な蛍光法で定量される。ラバル
カとペイゲン（Ｌａｂａｒｃａ　ａｎｄＰａｉｇｅｎ）
　Ａｎａｌ、Ｂｉｏｃｈｅｍ、第１０２巻、３４４−３
５２頁（１９８０年）の記載を参考とする。マウスでは
尾の１〜２ｃｍを切りとって分析される。
２、サザン法とＤＮＡドツトプロット　析はしめにそう
と思われる遺伝子導入動物がサザンプロット法（Ｓｏｕ
ｔｈｅｒｎ　ｂｌｏｔｔｉｎｇ）によって転移された遺
伝子の存在が検索される。
外来のＤＮＡを供給する対照生物、対照の宿主及び転移
された宿主からの染色体ＤＮＡｌ０μｇが制限エンドヌ
クレアーゼで消化され。
アガロースゲル電気泳動で分離され、壬トロセルロース
に転写され、そして特有の遺伝子プローブとハイブリダ
イズされる。
例えば、ラットのβ−カゼイン遺伝子がマウスにとり込
まれる場合には１．９ＫｂのＥｃｏＲ■遺伝子プローブ
が使われる。β−カゼインくみこみの状況は例えばＫｐ
ｎＩとＢａｍＨＩのような他の制限エンドヌクレアーゼ
でＤＮＡを消化し、１．９Ｋｂ断片で２．８Ｋｂの５’
−ＥｃｏＲｒ断片と同様検定される。転移した遺伝子の
コピー数はラットの染色体ＤＮＡ標準物を使ったＤＮＡ
ドツトプロット法によって定量される（第３図）、カフ
ァトス等（Ｋａｆａｔｏｓ　ｅｔ　ａｌ）Ｎｕｃｌ、　
Ａｃ１ｄ　Ｒｅｓ、、第７巻、　１５４１−１５５３頁
（１９７９年）の記載を参考とする。
授乳期の哺乳動物を麻酔し、乳腺組織の生検試料を採り
、グアニジンチオシアネート−ＣｓＣＱ法でＲＮＡ抽出
にかける。チャーブウィン等（Ｃｈｉｒｇｗｉｎ　ｅｔ
　ａｌ）　Ｂｉｏｃｈｅｍｉｓｔｒｙ。
第１８巻、５２９４−５２９９頁（１９７９年）の記載
を参考とする。生検試料と対照組織からの乳腺のＲＮＡ
をグリオキサール−アガロースゲル電気泳動で分離しニ
トロセルロースまたはナイロンの膜に転写し、ｃＲＮＡ
のリボプローブとハイブリダイズする。ジン等（Ｚｉｎ
ｎ　ｅｔ　ａｌ、）、Ｃ旦υ２．、第３４巻、８６５−
８７９頁（１９８３年）の記載を参考とする。
例えば、遺伝子導入マウスを麻酔し、第４乳腺をとり出
し、ＲＮＡ抽出にかける。ラットのβ−カゼイン遺伝子
のｍＲＮＡをラットの３’−ｃＲＮＡリボプローブとハ
イブリダイズすることによってニトロセルロース上で、
検出された（第７図）。
４、　　ＲＮアーゼと８１ヌクレアーゼによるマ・・ピ
ング 導入された外来の遺伝子複合体が正しく開始停止される
かどうかはＲＮアーゼと８１ヌクレアーゼでのマツピン
グによって決められる。
例えば、ラットのβ−カゼイン遺伝子のＲＮアーゼマツ
ピングでは、５′側面、第１エクソン及びイントロンＡ
の部分をカバーする８００ｂＰのリボプローブかジン等
（Ｚｉｎｎ　ｅｔ　ａｌ、。
旦ｅｌＬ第３４巻、８６５−８７９頁１９８３年）の方
法に従ってＲＮＡ試料とハイブリダイズされ、ＲＮＮア
ーゼ上ＲＮアーゼＴ１による消化が行われる。残った断
片を８％ポリアクリルアミド／尿素の系のシーフェンシ
ングゲル上で解析される。
例えば、ラットのβ−カゼイン遺伝子の８１ヌクレアー
ゼマツピングにおいては２つの異なるプローブが使われ
る（第５図）。第１のプローブはポリヌクレオチドキナ
ーゼによって３′末端に標識したＰＶＵ■−ＮｃＯ■断
片である。第２のプローブはＤＮＡポリメラーゼＩのク
レノー断片によって３′末端に標識されたエクソン■の
３′末端をカバーしているＮｅｏ　Ｉ　−ＥｃｏＲＩ染
色体断片である。ＲＮＡはこれらのプローブとハイブリ
ダイズされ、Ｓ１ヌクレアーゼで消化され５％ポリアク
リルアミド／尿素ゲルで分析される〔マニアテイス等（
Ｍａｎｉａｔｉｓ　ａｔ　ａｌ）　Ｍｏ１ｅｃｕｌａｒ
　Ｃ１ｏｎｉｎ　　：Ａ　Ｌａｂｏｒａｔｏｒ　　Ｍａ
ｎｕａｌ、　２０７−２０９頁（１９８２年）〕。
組みこまれた外来の遺伝子には夫々特殊なプローブが必
要であろう。
５、　　ＣＡＴの酵　　　　び　　、 ＣＡＴ酵素活性は１４Ｃ−クロラムフェニコールをその
アセチル誘導体に変換することによって測定される〔ゴ
ーマン等（Ｇｏｒｍａｎ　ｅｔ　ａｌ）　Ｍｏｌ、工Ｃ
ｅ１１．　Ｂｉｏｌ、＋第２巻、１０４４−１０５１頁
（１９１１２年）〕。
その結果は試験された組織または細胞のＤＮＡまたは蛋
白含量の函数として表わされる。またある場合にはＤＮ
Ａドツトプロット法で定量されたくみこまれたＣＡＴ遺
伝子のコピー数当りで表わされる。乳中のＣＡＴ活性は
蛋白ｍｇ当りで表わされる。またはポリクローナルまた
はモノクローナル抗体を使ったりウェスタンドツトプロ
ット法を使ってＣＡＴ蛋白を測定できる。
この技術に通じた者はこの蛋白またはその活性を検出す
るその他の方法が利用できることを認識しよう。細胞培
養でのＣＡＴ分泌の測定はインスリン（約５μｇ／ｉｎ
）、ハイドロコーチシン（約１μｇ　／　ｍＱ　）、プ
ロラクチン（約１μｇ／ｍＱ）を含む５％ウシ胎児血清
中に浮かせたＩ型コラーゲンゲル上に７２時間生育させ
た若い継代のＣＯＭＭＡ−ＩＤ細胞をゲルからはがして
用いられる。この条件下では、β−カゼインのｍＲＮＡ
は授乳期の組織にみられるレベルの５〜１０％である。
ローゼン等（（Ｒｏｓｅｎ　ｅｔ　ａｌ）　Ａｎｎａｌ
ｓ　Ｎ、　Ｙ。
Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、＋第４７８巻、６３−７６頁（１
９８６年）〕の記載を参考とする。比較しうる条件下で
カゼインは浮遊させたコラーゲンゲル上に生育させたマ
ウス乳腺細胞の初代培養細胞から効率よく分泌される。
り一等（（Ｌｅｅ　ｅｔ　ａｌ）　Ｐｒｏｃ、　Ｎａｔ
ｌ、　Ａｃａｄ、　Ｓｃｉ、　ＵＳＡ、第８２巻、　１
４１９−１４２３頁（１９８５年）〕の記載を参考とす
る。
ラットβ−カゼインのマウスへのとり゛みの■ β−カゼイン構成の解析での大きな困難はホルモンで制
御されるカゼイン遺伝子の発現を示す細胞系統がクロー
ン化されていないことである。初代培養細胞でのカゼイ
ン遺伝子の発現は細胞同志及び細胞−基質間の相互作用
によっている〔レビンとストックゾール（Ｌｅｖｉｎｅ
　ａｎｄＳｔｏｃｋｄａｌｅ）　Ｊ、Ｃｅ１１．　Ｂｉ
ｏｌ、、第１００巻、１４１５頁（１９８５年）、り一
等（Ｌｅｅ　ｅｔ　ａｌ）　Ｐｒｏｃ、Ｎａｔｌ、Ａｃ
ａｄ。
鎧ムエ１針、第８２巻、１４１９−１４２３頁（１９８
５年）〕。
カゼインもホエーの酸性蛋白（ｖａｐ）もその遺伝子発
現は移植培養系での無血清培地ではホルモンによって制
御されるがＷＡＰ遺伝子の発現については用いられる培
養条件によらず初代培養あるいは細胞系統においてはみ
られない〔ホンプス等（Ｈｏｂｂｓ　ｅｔ　ａｌ）　Ｊ
、Ｂｉｏｌ、Ｃｈｅｍ、、第２５７巻、３５９８−３６
０５頁〕。かくして遺伝子導入マウスは乳腺においてシ
ス作動性ＤＮＡ配列の機能的役割を解析するための別の
ｉｎ　ｖｉｖｏの系を提供している。
Ｋｐｎ　Ｉ　−ＢａｍＨＩ断片を使っていくつかの遺伝
子導入マウスが生産された（第２図、第３図）。
ラットのβ−カゼイン遺伝子の移入と発現は染色体ＤＮ
Ａをブロッティングした上で１．９ｋｂのＥｃｏＲＩプ
ローブを用いて分析された。このプローブの特異性はラ
ットのプローブと１０ＫｂのマウスＤＮＡのＥｃｏＲＩ
断片との間でごく弱い交差ハイブリダイゼーションしか
みられないことによって示される。３段階の濃度のラッ
トの染色体ＤＮＡ、マウスのＤＮＡ、異なるＦｏマウス
から分離した４種のＤＮＡが第３図に示されている。マ
ウス１１．２は期待される１、９Ｋｂの断片を含んでい
た。さらに詳細に分析すると、はゾ４コピーの再配列さ
れていない全体のＫｐｎＩ−ＢａｍＨＩ断片が１１．２
マウスに存在していることが示された。くみこまれたラ
ットβ−カゼイン遺伝子の移入は第４図に総括されてい
るように一連のＦｌ、Ｆ２マウスでの尻尾でプロット法
を行って分析された。Ｆ１世代では２２の中１１が一つ
の部位でのくみこみを示唆する変化をうけていないコピ
ー数の遺伝子を受けついでいた。陽性のＦエマウスの中
２匹はホモ接合体を確立するために交配された。Ｆ２世
代のうちで９匹の中８匹は陽性で、データは二九らマウ
スのいくつかはホモ接合体であることが示唆している。
授乳中のマウスから乳腺の生検を行った。マウス１１．
２−２．４を層殺し、その他の組織もカゼイン遺伝子発
現について分析した。はじめにラットのβ−カゼインｍ
ＲＮＡの３′−非コード領域から合成したＳＰ６リボプ
ローブを使ってＲＮＡブロッティングが行われた。正し
い大きさのｍＲＮＡ　（１，１Ｋｂ）の発現が１１．２
−２．０及び−２，４マウスからとった授乳性のＲＮＡ
にＲＮＡプロットがＩＩされた。肝や脳からとったＲＮ
Ａでは発現はみられず、腎からのＲＮＡでも殆んど検出
できる兆候はみられなかった。ラットとマウスのβ−カ
ゼインｍＲＮＡの大きさは同一であるのでラットβ−カ
ゼインｍＲＮＡの３′−非コード領域を使った特異的な
Ｓ１ヌクレア一ゼ分解性試験を開発した。このプローブ
は検出されたβ−カゼインのｍＲＮＡの発現が転移され
たラットの遺伝子によるもので、内在性のマウスの遺伝
子によるものでないことを確めるために使われた。
予め特有のＮｃｏ１部位で標識された一本鎖の４４８Ｎ
４プローブを調製した。成熟したｒｎＲＮＡからの保護
で２８ＯＮＴの断片が生産される。もし前駆ｍＲＮＡが
作られなければ１４４ＮＴ断片ができる。第５図に示さ
れるように、授乳しているラットの乳腺からとったＲＮ
Ａ１μｇは２８ＯＮＴの主要バンドと１４４ＮＴの弱い
バンドを示す。
遺伝子導入マウス１１．２−２．０と−２，４の２匹に
２８ＯＮＴが分泌されている兆候がみられるが１４４Ｎ
Ｔにはもっと濃いバンドがみられる。ＲＮＡは夫々５０
μｇ分析にかけられた。対照及び陰性の遺伝子導入マウ
スのいずれもそれから分離したあるいはｔ−ＲＮＡを使
っても授乳期ＲＮＡの存在はみられなかった。
腎から抽出されたＲＮＡではもっと長時間おくことで２
８ＯＮＴのうすい存在の兆候がみられたが肝からはみら
れなかった。これらの結果は移入されたラットのβ−カ
ゼイン遺伝子は授乳中の乳腺に選択的に発現されるが内
在性のマウスの遺伝子よりもずっと低いレベルであるこ
とを示している。ＲＮ、アーゼと８１分解性実験はラッ
トβ−カゼイン遺伝子の転写が正しく開始され加工され
るかどうかを調べるのに使われる。
組織特異的な導入遺伝子の発現の程度について原核生物
性のベクター配列が阻害的な効果があると報告されてお
りまた、その遺伝子に対してさらに５′或いは３′に位
置しているエンハンサ−配列がある可能性があるために
、３．５Ｋｂの５′側に隣り合うＤ　Ｎ　Ａと３．ＯＫ
ｂの３′側にあるＤＮＡを伴うラットのβ−カゼインの
全遺伝子を含みベクター配列のない染色体のクローンを
単離し、遺伝子導入マウスの造成に使った。第６図に示
されているように、期待される１、９ＫｂのＥｃｏＲＩ
　　ＤＮＡ断片は５匹のマウスに示されている（他の３
匹の陽性のマウスは示されていない）、３匹の雌のＦｏ
マウスの授乳時の乳腺の生検試料からＲＮＡを抽出し、
特異的なＲＮ、アーゼの分解性試験を使って第７図に示
されるようにカゼイン遺伝子の発現を解析した。
３匹のマウスの中１匹はラットのβ−カゼイン導入遺伝
子を発現した（第７図、第Ｆ列）、このマウスはコント
ロールラットの授乳期のＲＮＡ試料にもみられる予期ど
おりの４５ＯＮＴの分解されない断片を示した（第７図
、第３列）。
Ｆ工世代の試験では８匹のＦＯ遺伝子導入された雌の中
７匹はその子孫に外来の遺伝子複合体を伝播していた。
これらの結果は遺伝子導入されたマウスでラットのβ−
カゼイン遺伝子が移入され発現することを示している。
効果的な組織特異的な遺伝子発現を引き出すために５′
−または３′側の配列を付加することによって発現の程
度を増やしつる。５′側にある配列がＣＡＰ部位の最初
の数百ｂｐ上流に保持されていることがみられたとして
も、このことがこの領域をはずれる他の配列が組織特異
的な発現と制御に重要な役割をもつということを妨げる
ものでない。このことは大多数の遺伝子でそうではない
のに、一方、マウスのα−フェトプロティン遺伝子の５
〜７Ｋｂ上流の配列は遺伝子導入マウスにおいて効率的
な組織特異的な発現に必要であることが観察されている
〔ハマー等（Ｈａｎ＋＋＋＋ｅｒ　ｅｔ　ａｌ、）Ｓｃ
ｉｅｎｃｅ、２３５巻、５３−５８頁（１９８７年〕〕
。
ＣＡＴ＜み゛みの ｐＳＶｏＣＡＴ発現ベクターはバクテリアの酵素クロラ
ムフェニコール・アセチルトランスフェラーゼをコード
して遺伝子を含んでいる。
特定の遺伝子配列による遺伝子の発現の促進と昂揚は真
核細胞には全くバックグラウンドのない非常に鋭敏な酵
素的試験であるＣＡＴ活性を測定することによって容易
に調べることができる。一連のβ−及びγ−カゼインー
ＣＡＴ融合遺伝子が構築されている（第８図）、これら
はホルモン的に制御されたプロモータ活性についている
いな乳腺細胞系統や初代培養細胞で調べられている〔ビ
スビーとローイン（Ｂｉｓｂｅｅ　ａｎｄＲｏｓｅｎ）
　ｒ分子及び細胞生物学に関するＵＣＬＡシンポジウム
−転写の制御Ｊ（１９８６年）〕、遺伝子導入された動
物でカゼイン−ＣＡＴ融合遺伝子を使うことは組織特異
性のプロモータとエンハンサ−の機能についての迅速で
敏感な測定法を提供している。
この技術に精通する者は乳腺と乳の中に蛋白を分泌する
ためにこの他の外来遺伝子複合体系を使えることを認識
するだろう。ここには公表のために本発明の具体的な実
施例が与えられているが、この分野の技術に通じるもの
にとって本発明の精神の中に包含され付記する特許請求
の範囲で示されている中での変化やそれ以外の利用がで
きるであろう。
【図面の簡単な説明】
第１図Ａは組換ＤＮＡ遺伝子複合物を示す。 Ｅはエンハンサ−配列、Ｐはプロモータ配列を表わして
いる。シグナルペプチドは組織に特異的な配列を表わす
、ｃＤＮＡは合成された特定の遺伝子を表わしている。 細い線（−）は側面につながる配列を表わし、太線（−
）はイントロン配列を表わしている。 第１図Ｂはもう一つの別の組換えＤＮＡ遺伝子複合物を
示す、記号は同じであるが５’　ＵＴは５′の非翻訳ｍ
ＲＮＡ、３’　ＵＴが３′の非翻訳ｍＲＮＡを表わして
いることが追加されている。 第２図は移入されたラットのβ−カゼイン遺伝子の構造
を示す、このものはＢ１４プラスミドでＡＴＣＣ寄託番
号４０４２０号として寄託されている０図は約１．３ｋ
ｂの５′側面につながるＤＮＡとｌｋｂのλＤＮＡを伴
う全遺伝子を含んでいる。この構造は単一のファージク
ローンから−４ｖ」−ＢＡＭ　　ＨＩによる消化によっ
て分離されサブクローン化された。染色体ＤＮＡを解析
するために使われる１、９ｋｂのＥｅｏＲＩプローブも
示されている。 第３図はラットのβ−カゼインの遺伝子導入マウスへの
移入に関するものであり、マウスの胚に挿入した後１．
９ｋ　ｂのに肌１−　Ｂ　ａｎ　ＨＩ　断片の解析を示
す、ラットやマウスのＤＮＡが対照として使われている
。 第４図は遺伝子導入マウス１１．２におけるラットのβ
−カゼイン遺伝子の限定された系図である。Ｏは雌を口
は雄を表わす、黒くぬりつぶした記号はラットのβ−カ
ゼイン遺伝子を含むマウスを示す、尻尾の試料のＤＮＡ
プロット（転写）をＦｌ及びＦ２世代のマウスについて
行った。 第５図は遺伝子導入したマウスにおけるβ−カゼイン遺
伝子の発現に関するものであり、肝、脳、腎からとった
ＲＮＡ分離物についてＲＮＡ転写の結果を示している。 ラットのβ−カゼインのｍＲＮＡの３′−非コード領域
を使った特異的なＳ１ヌクレアーゼ防護測定法がラット
とマウスのｍＲＮＡを区別するのに使われた。 第６図はラットのβ−カゼイン遺伝子の遺伝子導入マウ
スへの移入に関するものである。ラットのβ−カゼイン
遺伝子全体と３．５ｋｂの５′側に連なるＤＮＡと３．
０ｋｂの３′側のＤＮＡを含む染色体クローンをマウス
の胚に挿入した。 ５匹のマウスがいくつかの数のコピー数をもった転移遺
伝子（ｔｒａｎｓｇｅｎｅ）のあることを示している。 第７図は遺伝子導入したマウスからとった乳腺ＲＮＡの
リボヌクレアーゼによる分解性試験に関するものである
。３匹の雌のＦ０マウスから生検試料として得た授乳期
の乳組織からＲＮＡを抽出した。ラットのβ−カゼイン
の転移遺伝子が発現していることはりボヌクレアーゼに
よる分解性試験を使ってＲＮＡにおいて検出された。文
字は次のようなことを表わしている；すなわち、Ａ列（
プローブだけ）、Ｂ列（ラットの授乳期中のＲＮＡ０．
５μｇ）、Ｃ列（注入されていない対照からとった授乳
期のＲＮＡ５０μｇ）、Ｄ、Ｅ、Ｆ列（ＰＪｈ性の遺伝
子導入マウスからとったＲＮＡ５０μｇ）、Ｇ列（ｔＲ
ＮＡの５０μｇ）。 第８図はカゼイン−ＣＡＴ融合遺伝子の構成。 ＰＳＶｏＣＡＴ発現ベクターの構造を示す、２．３ｋｂ
の５′側面ＤＮＡとある場合には５′−非翻訳エクソン
Ｉとこれらの遺伝子のインドロンＡの一部を含んでいる
４つのβ−カゼイン−ＣＡＴ融合遺伝子と１つのγ−カ
ゼインーＣＡＴ融合遺伝子が示されている。図中ＣＡＴ
プラスミドβ−５１１／＋５３５は、ＡＴＣＣ寄託番号
４０４２１号として、又、β−２３００／　＋　５３５
は、ＡＴＣＣ寄託番号４０４１９号として、それぞれ寄
託されている。 数字の相対的でカゼインのｍＲＮＡのＣＡＰ部位を＋１
としている。構成遺伝子配列はエクソンを黒色でイント
ロンを白色で示されている。 Ａ９入りくもラア）β・カビインｌイＵり瀬結し〜〜−
＾χＯＮ人 二二コイン）ロン 閣閣■工２ソン ８）８息ｍａｌ Ｋ）Ｋｐｎ　Ｉ ＲＩ　ＥｃｏＲＩ Ｆｉｇ、２ 図面の浄書（内容に変更なし） 〜　　　　　　　　　− ヒ　　　　　　　　匡 ＰＶＬＪ　Ｉｆ Ｕ □井＃解断片 図面の浄Ｃ（内容に変更なし） ＴＴＴＡＡＡＴ 昭和６３年６月３０日 昭和６３年特許願第３４９３３号 ２、発明の名称 ３、補正をする者 事件との関係　特許出願人 住　所　アメリカ合衆国、　７７０３０　　テキサス。 ヒユーストン、ベイラー　プラザ １番地 名　称　ベイラー　カレッジ　イブ　メデイシン代表者
　サムエル　ニス、クロッカー ４、代理人 東京都千代田区麹町４丁目５番地（〒１０２）５、補正
指令の日付 昭和６３年５月３１日 ６、　補正の対象 （１）　　明細書の「図面の簡単な説明」の欄（２）　
　図面（第３〜８図） ７、補正の内容 （１）明細書第５９頁第８行「第３図はラット」の記載
を「第３図は生物の形態を表わす写真であり、ラット」
と補正する。 （２）同書同頁第１９行「第５図は遺伝子」の記載を「
第５図は生物の形態を表わす写真であり。 遺伝子」と補正する。 （３）同書第６０頁第６行「第６図はラット」の記載を
「第６図は生物の形態を表わす写真であり、ラット」と
補正する。 （４）同書同頁第１４行「第７図は遺伝子」の記載を「
第７図は生物の形態を表わす写真であり、遺伝子」と補
正する。 （５）　　図面第３〜８図の浄書（内容に変更なし。）
を提出する。 ８、　添付書類の目録

Claims (1)

  1. 【特許請求の範囲】 １、構成内容として（ａ）プロモータ配列、（ｂ）エン
    ハンサー配列、（ｃ）シグナルペプチド配列及び（ｄ）
    生物活性のある作用物をコードしている遺伝子から由来
    するコード配列、を含み、そのプロモータ配列、エンハ
    ンサー配列、シグナルペプチド配列が少くとも１つの乳
    腺特異的な遺伝子に由来し、乳腺においてそのコード配
    列の発現を可能にする組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ２、少くとも１つの乳腺に特異的な遺伝子がα−カゼイ
    ン、β−カゼイン、γ−カゼイン、κ−カゼイン、α−
    ラクトアルブミン、β−ラクトグロブリン、ホエー酸性
    蛋白をコードしている遺伝子からなる群から選ばれる特
    許請求の範囲第１項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ３、プロモータ配列、エンハンサー配列及びシグナルペ
    プチド配列が同一遺伝子に由来するものである特許請求
    の範囲第１項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ４、プロモータ配列、エンハンサー配列及びシグナルペ
    プチド配列がβ−カゼイン遺伝子である特許請求の範囲
    第３項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ５、コード配列がホルモン、薬物、蛋白、脂質、炭水化
    物、成長因子、抗菌物質から成る群から得られる特許請
    求の範囲第１項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ６、コード配列がα−カゼイン、β−カゼイン、γ−カ
    ゼイン、κ−カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラ
    クトグロブリン、ホエー酸性蛋白及びクロラムフェニコ
    ールアセチル系トランスフェラーゼをコードしている遺
    伝子から成る群に由来する特許請求の範囲第１項記載の
    組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ７、コード配列がクロラムフェニコールアセチルトラン
    スフェラーゼをコードしてる遺伝子に由来する特許請求
    の範囲第６項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 ８、コード配列がβ−カゼインをコードしている遺伝子
    に由来する特許請求の範囲第６項記載の組換えＤＮＡ遺
    伝子複合体。 ９、グルココルチコイド応答性の要素をさらに含む特許
    請求の範囲第１項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 １０、構成内容として特許請求の範囲１項記載の組換え
    ＤＮＡ遺伝子複合体を含む胚芽系統をもち、その胚芽系
    統が次の世代に移行できる乳腺に生物学的作用物を合成
    するための遺伝子導入された哺乳動物。 １１、遺伝子導入される哺乳動物がヒトでない特許請求
    の範囲第１０項記載の遺伝子導入された哺乳動物。 １２、（ａ）５′−非翻訳ｍＲＮＡ配列と（ｂ）３′−
    非翻訳ｍＲＮＡ配列をさらに含み、その５′−非翻訳ｍ
    ＲＮＡ配列と３′−非翻訳ｍＲＮＡ配列が夫々コード配
    列の５′末端と３′末端についている特許請求の範囲第
    １項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 １３、５′−非翻訳ｍＲＮＡ配列と３′−非翻訳ｍＲＮ
    Ａ配列がβ−グロビン、β−カゼイン及びビテロゲニン
    から成る非翻訳ｍＲＮＡの群に由来する特許請求の範囲
    第１２項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 １４、５′−非翻訳ｍＲＮＡ配列と３′−非翻訳ｍＲＮ
    Ａ配列がβ−カゼイン遺伝子に由来する特許請求の範囲
    第１３項記載の組換えＤＮＡ遺伝子複合体。 １５、グルココルチコイド応答性の要素をさらに含んで
    いる特許請求の範囲第１２項記載の組換えＤＮＡ遺伝子
    複合体。 １６、構成内容として特許請求の範囲第１２項記載の組
    換えＤＮＡ遺伝子複合体を含む胚芽系統でその胚芽系統
    が次の世代に移行することのできる乳腺で生物活性のあ
    る作用物を合成するための遺伝子導入された哺乳動物。 １７、組換えＤＮＡ遺伝子複合体を哺乳動物の胚の胚芽
    系統の中に挿入するステップを含めて、少くとも一つの
    特定の遺伝子の生物活性のある作用物の合成を乳腺にさ
    し向ける方法。 １８、該胚を分化、成長させて哺乳動物にまでにするよ
    うな環境において成長させるステップをさらに含む特許
    請求の範囲第１７項記載の方法。 １９、コード配列の発現について哺乳動物の乳腺組織と
    乳を検査するステップをさらに含 む特許請求の範囲第１７項記載の方法。 ２０、該遺伝子複合体を該胚芽系統に安定に取りこませ
    るステップをさらに含む特許請求の範囲第１７項記載の
    方法。 ２１、遺伝子複合体の適切な機能を確立するステップを
    さらに含む特許請求の範囲第１７項記載の方法。 ２２、プロモータ配列、エンハンサー配列、シグナルペ
    プチド配列が乳腺に特異的な遺伝子から選ばれ、コード
    配列が生物活性のある作用物をコードしている遺伝子で
    あるようなプロモータ配列、エンハンサー配列、シグナ
    ルペプチド配列及びコード配列を結合するステップを含
    む乳腺に特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合体を構築する
    方法。 ２３、プロモータ配列、エンハンサー配列、シグナルペ
    プチド配列がα−カゼイン、β−カゼイン、γ−カゼイ
    ン、κ−カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラクト
    グロブリン、ホエー酸性蛋白から成る群から選ばれる特
    許請求の範囲第２２項記載の乳腺に特異的な組換えＤＮ
    Ａ遺伝子複合体を構築する方法。 ２４、プロモータ配列、エンハンサー配列、シグナルペ
    プチド配列がβ−カゼイン配列に由来し、そのシグナル
    ペプチド配列が合成されたペプチドを乳腺の乳の中へ分
    泌させることのできるものである特許請求の範囲第２３
    項記載の乳腺に特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合体を構
    築する方法。 ２５、コード配列がホルモン、薬剤、蛋白、脂質、炭水
    化物、抗菌物質をコードしている遺伝子からなる群に由
    来するものである特許請求の範囲第２４項記載の乳腺に
    特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合体を構築する方法。 ２６、コード配列がクロラムフェニールアセチルトラン
    スフェラーゼ、α−カゼイン、β−カゼイン、γ−カゼ
    イン、κ−カゼイン、α−ラクトアルブミン、β−ラク
    トグロブリン、ホエー酸性蛋白をコードしている遺伝子
    から成る群に由来するものである特許請求の範囲第２４
    項記載の乳腺に特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合体を構
    築する方法。 ２７、コード配列がクロラムフェニコールアセチルトラ
    ンスフェラーゼの遺伝子からとられる特許請求の範囲第
    ２６項記載の乳腺に特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合体
    を構築する方法。 ２８、コード配列がβ−カゼインの遺伝子からとられる
    特許請求の範囲第２６項記載の乳腺に特異的な組換えＤ
    ＮＡ遺伝子複合体を構築する方法。 ２９、５′−非翻訳ｍＲＮＡ配列と３′−非翻訳ｍＲＮ
    Ａ配列を遺伝子複合体に結合するもう一つのステップを
    含み、その５′−非翻訳ｍＲＮＡと３′−非翻訳ｍＲＮ
    Ａがそのコード配列の５′−及び３′−末端の夫々に接
    続されているような特許請求の範囲第２２項記載の乳腺
    に特異的な組換えＤＮＡ遺伝子複合体を構築する方法。 ３０、乳腺に特異的な遺伝子に由来するプロモータ配列
    、エンハンサー配列、シグナルペプチド配列と生物活性
    のある作用物をコードしている配列とを含む組換えＤＮ
    Ａ遺伝子複合体を構築し； その遺伝子複合体を哺乳動物の胚の胚芽系 統に挿入し； その胚を成熟するまで成長させ； その生物活性のある作用物のための遺伝子 複合体をもった哺乳動物によって作られた乳を検査する 各ステップを含む乳腺で生物活性のある作用物を合成す
    る方法。 ３１、哺乳動物の胚の胚芽系統に組換えＤＮＡ遺伝子複
    合体を挿入するステップを含む乳の有害微生物の繁殖を
    抑える方法。 ３２、遺伝子複合体が抗菌物質をコードしている遺伝子
    に由来するコード配列を含んでいる特許請求の範囲第３
    １項記載の乳の有害微生物の繁殖を抑える方法。 ３３、オンコジーンを含む組換えＤＮＡ遺伝子複合体を
    哺乳動物の胚の胚芽系統に挿入し； その結果生じるガン性組織の発生を機構的 に解析するステップを含む乳腺ガンの機構を解明する方
    法。 ３４、遺伝子導入した哺乳動物から作られた商業用の乳
    を酪農加工物の生産に取り入れるステップを含む酪農生
    産物の生産を可能にする方法。 ３５、遺伝子導入した哺乳動物から作られた商業用乳を
    含む食品。 ３６、遺伝子導入した哺乳動物からの商業用乳製品を含
    む酪農産物。 ３７、遺伝子導入した哺乳動物から作られる商業用乳か
    ら分離される生物学的に活性のある作用物。
JP63034933A 1987-02-17 1988-02-17 効率的な分泌のための乳腺に出される蛋白におけるｄｎａ配列 Expired - Lifetime JP2863789B2 (ja)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US1495287A 1987-02-17 1987-02-17
US014952 1987-02-17

Publications (2)

Publication Number Publication Date
JPS63309192A true JPS63309192A (ja) 1988-12-16
JP2863789B2 JP2863789B2 (ja) 1999-03-03

Family

ID=21768746

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
JP63034933A Expired - Lifetime JP2863789B2 (ja) 1987-02-17 1988-02-17 効率的な分泌のための乳腺に出される蛋白におけるｄｎａ配列

Country Status (5)

Country Link
US (3) US5304489A (ja)
EP (2) EP0832981A1 (ja)
JP (1) JP2863789B2 (ja)
AU (2) AU618524B2 (ja)
CA (1) CA1321764C (ja)

Cited By (18)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02500798A (ja) * 1987-06-23 1990-03-22 ファーミング　ビーブイ ミルクにおける蛋白の発現
WO2007119796A1 (ja) 2006-04-14 2007-10-25 Medical And Biological Laboratories Co., Ltd. エフェクター機能を有するポリペプチド変異体
WO2008038613A1 (fr) 2006-09-25 2008-04-03 Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. Procédé de production de dipeptide
EP1908773A2 (en) 2002-12-26 2008-04-09 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing dipeptides
EP1914244A2 (en) 1999-04-09 2008-04-23 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method of modulating the activity of functional immune molecules
WO2008090960A1 (ja) 2007-01-24 2008-07-31 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. ガングリオシドgm2に特異的に結合する遺伝子組換え抗体組成物
WO2008090959A1 (ja) 2007-01-24 2008-07-31 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. エフェクター活性が増強された遺伝子組換え抗体組成物
EP1975175A2 (en) 1998-06-02 2008-10-01 Nihon University IgA nephropathy-related DNA
WO2009054435A1 (ja) 2007-10-24 2009-04-30 Otsuka Chemical Co., Ltd. 増強されたエフェクター機能を有するポリペプチド
WO2010018847A1 (ja) 2008-08-13 2010-02-18 協和発酵キリン株式会社 遺伝子組換えプロテインs組成物
WO2010041715A1 (ja) 2008-10-09 2010-04-15 協和メデックス株式会社 新規フルクトシルペプチドオキシダーゼ
JP2010162035A (ja) * 2002-07-03 2010-07-29 A2 Corp Ltd 生乳の脂肪酸の組成を変える方法
EP2314686A1 (en) 2000-10-06 2011-04-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Cells producing antibody compositions
WO2011108502A1 (ja) 2010-03-02 2011-09-09 協和発酵キリン株式会社 改変抗体組成物
WO2014054804A1 (ja) 2012-10-05 2014-04-10 協和発酵キリン株式会社 ヘテロダイマータンパク質組成物
WO2015005258A1 (ja) 2013-07-09 2015-01-15 協和メデックス株式会社 糖化ヘキサペプチドオキシダーゼとその利用
WO2020067541A1 (ja) 2018-09-28 2020-04-02 協和キリン株式会社 抗体組成物
WO2021201236A1 (ja) 2020-04-01 2021-10-07 協和キリン株式会社 抗体組成物

Families Citing this family (360)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE122007000007I2 (de) 1986-04-09 2010-12-30 Genzyme Corp Genetisch transformierte Tiere, die ein gewünschtes Protein in Milch absondern
EP0365591A4 (en) * 1987-06-16 1992-01-22 Edison Animal Biotechnology Center Dietary and hormonal regulation of expression of exogenous genes in transgenic animals under control of the promoter of the gene for phosphoenolpyruvate carboxykinase
US5750172A (en) * 1987-06-23 1998-05-12 Pharming B.V. Transgenic non human mammal milk
FR2627779B1 (fr) * 1988-02-26 1991-03-15 Sodima Union Coop Agricoles Procede d'epaississement d'un produit du type lait fermente, notamment de yaourt et nouveau polysaccharide utile pour la mise en oeuvre de ce procede
US5662896A (en) 1988-03-21 1997-09-02 Chiron Viagene, Inc. Compositions and methods for cancer immunotherapy
US6133029A (en) 1988-03-21 2000-10-17 Chiron Corporation Replication defective viral vectors for infecting human cells
US5997859A (en) * 1988-03-21 1999-12-07 Chiron Corporation Method for treating a metastatic carcinoma using a conditionally lethal gene
US6569679B1 (en) 1988-03-21 2003-05-27 Chiron Corporation Producer cell that generates adenoviral vectors encoding a cytokine and a conditionally lethal gene
US5716826A (en) * 1988-03-21 1998-02-10 Chiron Viagene, Inc. Recombinant retroviruses
US6020015A (en) 1988-09-22 2000-02-01 Gaull; Gerald E. Infant formula compositions and nutrition containing genetically engineered human milk proteins
US5650503A (en) * 1988-11-11 1997-07-22 Ppl Therapeutics (Scotland) Limited Genetic construct of which protein coding DNA comprises introns and is designed for protein production in transgenic animals
GB8826446D0 (en) * 1988-11-11 1988-12-14 Agricultural & Food Res Peptide production
ATE219519T1 (de) * 1989-01-23 2002-07-15 Chiron Corp Rekombinanttherapien für infektionen und hyperproliferative störungen
FR2646438B1 (fr) 1989-03-20 2007-11-02 Pasteur Institut Procede de remplacement specifique d'une copie d'un gene present dans le genome receveur par l'integration d'un gene different de celui ou se fait l'integration
US5464764A (en) * 1989-08-22 1995-11-07 University Of Utah Research Foundation Positive-negative selection methods and vectors
US6689610B1 (en) 1989-08-22 2004-02-10 University Of Utah Research Foundation Cells and non-human organisms containing predetermined genomic modifications and positive-negative selection methods and vectors for making same
DE69033911D1 (de) * 1989-10-24 2002-03-14 Chiron Corp System zur freisetzung von infektiösen proteinen
US5633076A (en) * 1989-12-01 1997-05-27 Pharming Bv Method of producing a transgenic bovine or transgenic bovine embryo
JPH04365487A (ja) * 1990-04-11 1992-12-17 Consortium Elektrochem Ind Gmbh 組換ｄｎａ−構造体、組換ベクター、トランスゲン動物の乳からの蛋白質の取得法、トランスゲン動物の製法及びトランスゲン動物の乳
US6262336B1 (en) 1991-01-11 2001-07-17 American Red Cross Expression of a heterologous protein C in mammary tissue of transgenic animals using a long whey acidic protein promoter
US5965789A (en) * 1991-01-11 1999-10-12 American Red Cross Engineering protein posttranslational modification by PACE/furin in transgenic non-human mammals
US5831141A (en) * 1991-01-11 1998-11-03 United States Of America As Represented By The Department Of Health And Human Services Expression of a heterologous polypeptide in mammary tissue of transgenic non-human mammals using a long whey acidic protein promoter
CA2099562C (en) * 1991-01-11 2010-04-20 William N. Drohan Expression of active human protein c in mammary tissue of transgenic animals
US6984772B1 (en) 1994-02-18 2006-01-10 Virginia Tech Intellectual Properties, Inc. Transgenic non-human mammals producing fibrinogen in their milk
FR2677652B1 (fr) * 1991-06-12 2005-05-27 Agronomique Inst Nat Rech Procede de preparation d'une proteine d'interet dans le lait d'un animal transgenique, produit obtenu et cellule eucaryote utilisee.
US5965788A (en) * 1992-06-12 1999-10-12 Institut National De La Recherche Agronomique Transgenic non-human mammal comprising a rabbit WAP promoter
US6268545B1 (en) 1991-06-12 2001-07-31 Institut National De La Recherche Agronomique Transgenic non-human mammal comprising a rabbit WAP promoter, uses thereof, and a DNA construct comprising the rabbit WAP promoter
WO1993004171A1 (en) * 1991-08-19 1993-03-04 Symbicom Aktiebolag Human beta-casein, process for producing it and use thereof
US6448469B1 (en) * 1991-10-02 2002-09-10 Genzyme Corporation Production of membrane proteins in the milk of transgenic nonhuman mammals
US5298422A (en) * 1991-11-06 1994-03-29 Baylor College Of Medicine Myogenic vector systems
JPH07506720A (ja) * 1992-01-07 1995-07-27 アテナ　ニューロサイエンシーズ，　インコーポレイテッド アルツハイマー病のトランスジェニック動物モデル
DK8892D0 (da) 1992-01-23 1992-01-23 Symbicom Ab Humant proteingen
US5667839A (en) * 1993-01-28 1997-09-16 Collagen Corporation Human recombinant collagen in the milk of transgenic animals
US5856178A (en) * 1993-08-30 1999-01-05 Utah State University DNA cassettes for expression of lytic peptides in mammalian cells and transgenic organisms containing same
RU2025487C1 (ru) * 1993-10-18 1994-12-30 Товарищество с ограниченной ответственностью "БиоПрогресс" Способ направленной генетической трансформации молочной железы животного и устройство для введения генетического материала в молочный проток молочной железы животного
AU1257495A (en) 1993-11-18 1995-06-06 Chiron Corporation Compositions and methods for utilizing conditionally lethal genes
US5827690A (en) * 1993-12-20 1998-10-27 Genzyme Transgenics Corporatiion Transgenic production of antibodies in milk
US5639940A (en) * 1994-03-03 1997-06-17 Pharmaceutical Proteins Ltd. Production of fibrinogen in transgenic animals
US5750176A (en) * 1994-03-09 1998-05-12 Abbott Laboratories Transgenic non-human mammal milk comprising 2'-fucosyl-lactose
EP0750671A1 (en) * 1994-03-09 1997-01-02 Abbott Laboratories Transgenic animals producing oligosaccharides and glycoconjugates
US6204431B1 (en) 1994-03-09 2001-03-20 Abbott Laboratories Transgenic non-human mammals expressing heterologous glycosyltransferase DNA sequences produce oligosaccharides and glycoproteins in their milk
NZ279676A (en) * 1994-03-09 1998-04-27 Abbott Lab Humanized milk produced by non-human transgenic mammal transformed with a heterologous gene coding for human enzyme producing human oligosaccharides and glycoconjugates
US5888814A (en) * 1994-06-06 1999-03-30 Chiron Corporation Recombinant host cells encoding TNF proteins
US6713662B1 (en) * 1994-07-27 2004-03-30 Pharming Intellectual Property B.V. Production of collagen in the milk of transgenic mammals
US5888774A (en) * 1994-12-19 1999-03-30 Cangene Corporation Recombinant DNA molecules and expression vectors for erythropoietin
US5780009A (en) * 1995-01-20 1998-07-14 Nexia Biotechnologies, Inc. Direct gene transfer into the ruminant mammary gland
GB9509461D0 (en) * 1995-05-10 1995-07-05 Immunova DNA molecules and constructs and their use in the treatment of mastitis
US6717031B2 (en) 1995-06-07 2004-04-06 Kate Dora Games Method for selecting a transgenic mouse model of alzheimer's disease
US6118045A (en) * 1995-08-02 2000-09-12 Pharming B.V. Lysosomal proteins produced in the milk of transgenic animals
US5763415A (en) * 1995-08-03 1998-06-09 John Hopkins University School Of Medicine Destruction of the epithelium of an exocrine gland in the prophylactic and therapeutic treatment of cancer
US5837534A (en) * 1995-11-14 1998-11-17 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Smooth muscle 22α promoter, gene transfer vectors containing the same, and method of use of the same to target gene expression in arterial smooth muscle cells
US5907080A (en) * 1995-11-30 1999-05-25 Nexia Biotechnologies, Inc. Method for development of transgenic dwarf goats
IT1277964B1 (it) * 1995-12-27 1997-11-12 Biosistema Di Pier Luigi Spara Prodotto derivato da latte, sostanzialmente esente da betacaseina di mammifero non umano e relativo uso
US20030033617A1 (en) 1996-04-10 2003-02-13 Gyula Hadlaczky Artificial chromosomes, uses thereof and methods for preparing artificial chromosomes
US6077697A (en) 1996-04-10 2000-06-20 Chromos Molecular Systems, Inc. Artificial chromosomes, uses thereof and methods for preparing artificial chromosomes
DE69724428T3 (de) * 1996-06-07 2009-07-23 Poniard Pharmaceuticals, Inc., Seattle Humanisierte antikörper die an das gleiche antigen wie antikörper nr-lu-13 binden und deren verwendung in "pretargeting" verfahren
JP2001505405A (ja) * 1996-07-24 2001-04-24 ユニバーシティ・オブ・メリーランド ブチロフィリン遺伝子プロモータおよびその利用
CA2264630C (en) 1996-09-06 2006-12-12 Pall Corporation Shear separation method and system
US5773290A (en) * 1996-10-07 1998-06-30 Wisconsin Alumni Research Foundation Mammary gland-specific promoters
AU5775798A (en) * 1996-12-31 1998-07-31 Nexia Biotechnologies, Inc. Beta-galactosidase with reversibly inactive lactase activity
EP1522591A3 (en) * 1997-02-25 2005-08-17 GTC Biotherapeutics, Inc. Transgenically produced non-secreted proteins
EP0973934A4 (en) * 1997-02-25 2003-02-05 Genzyme Transgenics Corp NON-SECRETED PROTEINS PRODUCED TRANSGENICALLY
US5968809A (en) * 1997-04-11 1999-10-19 Abbot Laboratories Methods and compositions for synthesis of long chain poly-unsaturated fatty acids
GB9715064D0 (en) * 1997-07-17 1997-09-24 Ppl Therapeutics Scotland Ltd Protein expression
US6222029B1 (en) * 1997-08-01 2001-04-24 Genset 5′ ESTs for secreted proteins expressed in brain
CA2296287A1 (en) * 1997-08-01 1999-02-11 Genset 5' ests for secreted proteins expressed in prostate
DE69835777T2 (de) * 1997-08-01 2007-09-06 Serono Genetics Institute S.A. 5' EST's für sekretierte Proteine, die in verschiedenen Geweben exprimiert werden
US20030027257A1 (en) * 1997-08-21 2003-02-06 University Technologies International, Inc. Sequences for improving the efficiency of secretion of non-secreted protein from mammalian and insect cells
US6037150A (en) * 1997-08-21 2000-03-14 University Technologies International Inc. Insect sequences for improving the efficiency of secretion of non-secreted proteins in eukaryotic cells
GB9718908D0 (en) 1997-09-05 1997-11-12 Rowett Research Services Limit Proteins
US20040019923A1 (en) * 1997-10-16 2004-01-29 Ivarie Robert D. Exogenous proteins expressed in avians and their eggs
US7129390B2 (en) 1997-10-16 2006-10-31 Avigenics, Inc Poultry Derived Glycosylated Interferon Alpha 2b
ES2357495T3 (es) * 1997-10-16 2011-04-27 University Of Georgia Research Foundation, Inc. Aves transgénicas y producción de proteína.
US8563803B2 (en) * 1997-10-16 2013-10-22 Synageva Biopharma Corp. Method of making protein in an egg of a transgenic chicken
US20090074718A1 (en) * 1997-10-16 2009-03-19 Ivarie Robert D Avian derived erythropoietin
US7511120B2 (en) * 1997-10-16 2009-03-31 Synageva Biopharma Corp. Glycosylated G-CSF obtained from a transgenic chicken
OA11520A (en) * 1997-10-20 2004-02-09 Genzyme Transgenics Corp Novel modified MSP-1 nucleic acid sequences and methods for increasing mRNA levels and protein expression in cell systems.
US7964192B1 (en) 1997-12-02 2011-06-21 Janssen Alzheimer Immunotherapy Prevention and treatment of amyloidgenic disease
US7179892B2 (en) 2000-12-06 2007-02-20 Neuralab Limited Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US7157615B2 (en) 1998-03-17 2007-01-02 Nexia Biotechnologies, Inc. Production of biofilaments in transgenic animals
US6733997B1 (en) * 1998-10-30 2004-05-11 National University Of Singapore Isolated nucleic acids encoding a secretory signal for expression and secretion of heterologous recombinant proteins
ATE410506T1 (de) * 1998-12-07 2008-10-15 Genzyme Corp Behandlung der pompeschen krankheit
US6719973B1 (en) * 1998-12-24 2004-04-13 National University Of Singapore Recombinant proteins and peptides for endotoxin biosensors, endotoxin removal, and anti-microbial and anti-endotoxin therapeutics
UA81216C2 (en) 1999-06-01 2007-12-25 Prevention and treatment of amyloid disease
US6183803B1 (en) 1999-06-11 2001-02-06 Biosante Pharmaceuticals, Inc. Method for processing milk
US6770468B1 (en) 1999-09-14 2004-08-03 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Phosphodiester-α-GlcNAcase of the lysosomal targeting pathway
US6537785B1 (en) 1999-09-14 2003-03-25 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Methods of treating lysosomal storage diseases
WO2001019846A1 (en) * 1999-09-17 2001-03-22 Genzyme Transgenics Corporation Transgenically produced fusion proteins
WO2001035735A1 (en) * 1999-11-19 2001-05-25 Hematech, Llc Production of ungulates, preferably bovines that produce human immunoglobulins
US7414170B2 (en) * 1999-11-19 2008-08-19 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Transgenic bovines capable of human antibody production
US7820878B2 (en) * 1999-11-19 2010-10-26 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Production of ungulates, preferably bovines that produce human immunoglobulins
US7074983B2 (en) * 1999-11-19 2006-07-11 Kirin Beer Kabushiki Kaisha Transgenic bovine comprising human immunoglobulin loci and producing human immunoglobulin
US7288390B2 (en) 2000-08-07 2007-10-30 Centocor, Inc. Anti-dual integrin antibodies, compositions, methods and uses
UA81743C2 (uk) 2000-08-07 2008-02-11 Центокор, Инк. МОНОКЛОНАЛЬНЕ АНТИТІЛО ЛЮДИНИ, ЩО СПЕЦИФІЧНО ЗВ'ЯЗУЄТЬСЯ З ФАКТОРОМ НЕКРОЗУ ПУХЛИН АЛЬФА (ФНПα), ФАРМАЦЕВТИЧНА КОМПОЗИЦІЯ, ЩО ЙОГО МІСТИТЬ, ТА СПОСІБ ЛІКУВАННЯ РЕВМАТОЇДНОГО АРТРИТУ
US6902734B2 (en) 2000-08-07 2005-06-07 Centocor, Inc. Anti-IL-12 antibodies and compositions thereof
WO2002014473A2 (en) * 2000-08-15 2002-02-21 Board Of Trustees Of The University Of Illinois Animals expressing exogenous igf-i in their milk
EP2253703A1 (en) 2000-09-13 2010-11-24 Novo Nordisk Health Care AG Human coagulation factor VII variants
TWI255272B (en) 2000-12-06 2006-05-21 Guriq Basi Humanized antibodies that recognize beta amyloid peptide
US20020142397A1 (en) * 2000-12-22 2002-10-03 Philippe Collas Methods for altering cell fate
ES2390425T3 (es) 2000-12-22 2012-11-12 MAX-PLANCK-Gesellschaft zur Förderung der Wissenschaften e.V. Uso de moléculas de orientación repulsivas (RGM) y sus moduladores
EP1356035B1 (en) 2000-12-22 2011-03-16 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Methods for cloning non-human mammals using reprogrammed donor chromatin or donor cells
US7491534B2 (en) 2000-12-22 2009-02-17 Kirin Holdings Kabushiki Kaisha Methods for altering cell fate to generate T-cells specific for an antigen of interest
IL157842A0 (en) 2001-03-22 2004-03-28 Novo Nordisk Healthcare Ag Coagulation factor vii derivatives
US6867189B2 (en) * 2001-07-26 2005-03-15 Genset S.A. Use of adipsin/complement factor D in the treatment of metabolic related disorders
EP1432794B1 (en) 2001-09-27 2011-11-09 Novo Nordisk Health Care AG Human coagulation factor vii polypeptides
US7291721B2 (en) 2001-11-14 2007-11-06 Centocor, Inc. Anti-IL-6 antibodies, compositions, methods and uses
CA2468733C (en) 2001-11-30 2013-06-11 Biogen Idec Ma Inc. Antibodies against monocyte chemotactic proteins
US20060253913A1 (en) * 2001-12-21 2006-11-09 Yue-Jin Huang Production of hSA-linked butyrylcholinesterases in transgenic mammals
WO2003054182A2 (en) * 2001-12-21 2003-07-03 Nexia Biotechnologies, Inc. Production of butyrylcholinesterases in transgenic mammals
US6905856B2 (en) 2001-12-21 2005-06-14 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Soluble GlcNAc phosphotransferase
US6800472B2 (en) 2001-12-21 2004-10-05 Genzyme Glycobiology Research Institute, Inc. Expression of lysosomal hydrolase in cells expressing pro-N-acetylglucosamine-1-phosphodiester α-N-acetyl glucosimanidase
AU2003202297C1 (en) 2002-01-25 2006-05-18 G2 Therapies Ltd Anti-C5aR antibodies and uses thereof
AR038568A1 (es) 2002-02-20 2005-01-19 Hoffmann La Roche Anticuerpos anti-a beta y su uso
IL163725A0 (en) 2002-02-25 2005-12-18 Elan Pharm Inc Administration of agents for the treatment of inflammation
US20040172667A1 (en) 2002-06-26 2004-09-02 Cooper Richard K. Administration of transposon-based vectors to reproductive organs
US20040235011A1 (en) * 2002-06-26 2004-11-25 Cooper Richard K. Production of multimeric proteins
US7527966B2 (en) * 2002-06-26 2009-05-05 Transgenrx, Inc. Gene regulation in transgenic animals using a transposon-based vector
EP1545608A4 (en) 2002-06-28 2006-09-13 Centocor Inc CH1-DELETED MAMMED MUICETIC BODIES, COMPOSITIONS, METHODS AND APPLICATIONS
TW200509968A (en) 2002-11-01 2005-03-16 Elan Pharm Inc Prevention and treatment of synucleinopathic disease
US8506959B2 (en) 2002-11-01 2013-08-13 Neotope Biosciences Limited Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
AU2003290689A1 (en) * 2002-11-08 2004-06-03 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Transgenic ungulates having reduced prion protein activity and uses thereof
US20040210953A1 (en) * 2003-01-09 2004-10-21 Murray James D. Lysozyme transgenic ungulates
US20040231010A1 (en) * 2003-01-09 2004-11-18 Murray James D. Lysozyme transgenic ungulates
US7803362B2 (en) * 2003-01-24 2010-09-28 Synageva Biopharma Corp. Glycosylated interferon alpha
MXPA05007823A (es) 2003-01-24 2005-10-18 Elan Pharm Inc Composicion y tratamiento de enfermedades desmielizantes y paralisis por administracion de agentes remielinizantes.
EP3103869A1 (en) 2003-03-18 2016-12-14 Novo Nordisk Health Care AG Method for the production of factor vii polypeptides
TWI353991B (en) 2003-05-06 2011-12-11 Syntonix Pharmaceuticals Inc Immunoglobulin chimeric monomer-dimer hybrids
US9708410B2 (en) 2003-05-30 2017-07-18 Janssen Biotech, Inc. Anti-tissue factor antibodies and compositions
GB0314856D0 (en) 2003-06-25 2003-07-30 Unitargeting Res As Protein expression system
ES2381110T3 (es) 2003-09-09 2012-05-23 Novo Nordisk Health Care Ag Polipéptidos de factor VII de coagulación
UA89481C2 (uk) 2003-09-30 2010-02-10 Центокор, Инк. Еритропоетинові міметичні шарнірно-серцевинні міметитіла людини, композиції, способи та застосування
US8071364B2 (en) 2003-12-24 2011-12-06 Transgenrx, Inc. Gene therapy using transposon-based vectors
JP2008537873A (ja) * 2004-03-31 2008-10-02 セントカー・インコーポレーテツド ヒトｇｌｐ−１ミメティボディ、組成物、方法および用途
US7420099B2 (en) * 2004-04-22 2008-09-02 Kirin Holdings Kabushiki Kaisha Transgenic animals and uses thereof
EA013752B1 (ru) 2004-08-09 2010-06-30 Элан Фармасьютикалз, Инк. Предупреждение и лечение синуклеинопатических и амилоидогенных заболеваний
US7393662B2 (en) * 2004-09-03 2008-07-01 Centocor, Inc. Human EPO mimetic hinge core mimetibodies, compositions, methods and uses
EA200700751A1 (ru) 2004-10-05 2008-06-30 Элан Фарма Интернэшнл Лимитед Способы и композиции для улучшения продуцирования рекомбинантного белка
CA2583017A1 (en) * 2004-10-13 2006-04-20 Ablynx N.V. Single domain camelide anti-amyloid beta antibodies and polypeptides comprising the same for the treatment and diagnosis of degenerative neural diseases such as alzheimer's disease
WO2006088950A2 (en) 2005-02-14 2006-08-24 University Of Iowa Research Foundation Methods and reagents for treatment and diagnosis of age-related macular degeneration
DK1866339T3 (da) 2005-03-25 2013-09-02 Gitr Inc GTR-bindende molekyler og anvendelser heraf
PE20061324A1 (es) 2005-04-29 2007-01-15 Centocor Inc Anticuerpos anti-il-6, composiciones, metodos y usos
US8901281B2 (en) * 2005-06-17 2014-12-02 Merck Sharp & Dohme Corp. ILT3 binding molecules and uses therefor
US20070056050A1 (en) * 2005-06-29 2007-03-08 Clokie Cameron M L PRODUCTION OF BONE MORPHOGENIC PROTEINS (BMPs) IN TRANSGENIC MAMMALS
CA2613818C (en) 2005-06-30 2013-08-27 Centocor, Inc. Anti-il-23 antibodies, compositions, methods and uses
EP1926817A2 (en) 2005-09-14 2008-06-04 Novo Nordisk Health Care AG Human coagulation factor vii polypeptides
JP2009510002A (ja) * 2005-09-30 2009-03-12 アボット ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング ウント コンパニー コマンディトゲゼルシャフト 反発誘導分子（ｒｇｍ）タンパク質ファミリーのタンパク質の結合ドメイン、及びその機能的断片、及びそれらの使用
EA035459B1 (ru) 2005-12-29 2020-06-19 Сентокор, Инк. Антитело против il-23p19
IL173104A0 (en) 2006-01-12 2006-06-11 Yeda Res & Dev Siva and ubiquintination
EP1991268A4 (en) 2006-03-03 2009-08-26 Univ Southern California POLYMORPHISMS OF THE GENES OF THE PATH OF ANGIOGENESIS FOR CHOICE OF THERAPY
WO2007108990A2 (en) 2006-03-13 2007-09-27 Liat Mintz Use of ghrelin splice variant for treating cachexia and/or anorexia and/or anorexia-cachexia and/or malnutrition and/or lipodystrophy and/or muscle wasting and/or appetite stimulation
US7812127B2 (en) 2006-03-17 2010-10-12 Synageva Biopharma Corp. Glycosylated human G-CSF
CA2648035A1 (en) * 2006-03-31 2007-10-11 Centocor, Inc. Human epo mimetic hinge core mimetibodies, compositions, methods and uses for preventing or treating glucose intolerance related conditions or renal disease associated anemia
EP2029799B1 (en) 2006-04-20 2012-08-22 Becton, Dickinson and Company Thermostable proteins and methods of making and using thereof
EP2041180B8 (en) * 2006-06-19 2014-03-05 Liquidating Trust Ilt3 binding molecules and uses therefor
US20090208480A1 (en) * 2006-08-04 2009-08-20 Yue Huang Long half-life recombinant butyrylcholinesterase
CA2660156A1 (en) * 2006-08-22 2008-02-28 G2 Inflammation Pty Ltd Anti-c5ar antibodies with improved properties
BRPI0719250A2 (pt) * 2006-10-12 2015-06-16 Wyeth Corp Métodos e composições com opalescência reduzida.
US20090105462A1 (en) * 2006-11-09 2009-04-23 Ivarie Robert D Glycosylated erythropoietin
UY30820A1 (es) * 2006-12-21 2008-07-03 Centocor Inc Uso de agonistas del receptor de glp-1 de accion prolongada para mejorar la sensibilidad a la insulina y los perfiles lipidicos
WO2008083169A2 (en) * 2006-12-26 2008-07-10 The Johns Hopkins University Compositions and methods for the treatment of immunologic disorders
EP2124998B8 (en) * 2006-12-27 2015-05-06 The Johns Hopkins University Methods for detecting inflammation and auto-immune diseases
US7989173B2 (en) * 2006-12-27 2011-08-02 The Johns Hopkins University Detection and diagnosis of inflammatory disorders
US20090142342A1 (en) * 2006-12-27 2009-06-04 Johns Hopkins University B7-h4 receptor agonist compositions and methods for treating inflammation and auto-immune diseases
WO2008088861A2 (en) * 2007-01-18 2008-07-24 University Of Southern California Gene polymorphisms predictive for dual tki therapy
EP2126071A4 (en) 2007-01-26 2010-12-08 Synageva Biopharma Corp TRANSGENEXPRESSION IN BIRDS
DK3067066T3 (da) 2007-02-23 2019-05-20 Prothena Biosciences Ltd Forebyggelse og behandling af synukleinopatisk og amyloidogenisk sygdom
EP3067066B1 (en) 2007-02-23 2019-03-27 Prothena Biosciences Limited Prevention and treatment of synucleinopathic and amyloidogenic disease
FR2915398B1 (fr) * 2007-04-25 2012-12-28 Lab Francais Du Fractionnement "ensemble de moyens pour le traitement d'une pathologie maligne, d'une maladie auto-immune ou d'une maladie infectieuse"
CN101801413A (zh) 2007-07-12 2010-08-11 托勒克斯股份有限公司 采用gitr结合分子的联合疗法
US20100205680A1 (en) * 2007-08-08 2010-08-12 Jin Hoi Kim Mammary gland- specific human erytheropoietin expression vector, transgenic animal and method for producing human erythropoietin using same
EP2030980A1 (en) * 2007-08-28 2009-03-04 AM-Pharma B.V. Mutants of lactoferrin
EP2033971A1 (de) * 2007-09-06 2009-03-11 Abbott GmbH & Co. KG Bone Morphogenetic Protein (BMP)-bindende Domänen von Proteinen der Repulsive Guidance Molecule (RGM) Proteinfamilie und funktionale Fragmente davon sowie deren Verwendung
BRPI0816837B1 (pt) 2007-09-28 2022-10-18 Portola Pharmaceuticals, Inc Composições farmacêuticas, polipeptídeo isolado de duas cadeias e uso de uma composição farmacêutica
WO2009055656A2 (en) 2007-10-26 2009-04-30 Centocor, Inc. Vectors, host cells, and methods of production and uses
US20090169549A1 (en) * 2007-12-19 2009-07-02 The Board Of Regents Of The University Of Texas System Conformational isomers of alpha-synuclein, antibodies thereto and methods of their manufacture and use
KR20100117120A (ko) 2008-02-20 2010-11-02 지투 인플레메이션 피티와이 엘티디 인간화된 항-Ｃ5ａＲ 항체
US8962803B2 (en) * 2008-02-29 2015-02-24 AbbVie Deutschland GmbH & Co. KG Antibodies against the RGM A protein and uses thereof
EP3173424A1 (en) 2008-05-02 2017-05-31 Novartis Ag Improved fibronectin-based binding molecules and uses thereof
PL2307457T5 (pl) 2008-06-25 2022-12-27 Novartis Ag Stabilne i rozpuszczalne przeciwciała hamujące tnf
SI2307458T1 (en) 2008-06-25 2018-08-31 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Humanization of rabbit antibodies using a universal antibody framework
AU2008359017B2 (en) * 2008-06-30 2013-01-17 Cho-A Pharm Co., Ltd. A gene of porcine beta-casein, a promoter of the same and the use thereof
US9738694B2 (en) * 2008-06-30 2017-08-22 Cho-A Pharm. Co., Ltd. Gene of porcine alpha-s1 casein, a promoter of the same and use thereof
CA2733642A1 (en) 2008-08-14 2010-02-18 Cephalon Australia Pty Ltd Anti-il-12/il-23 antibodies
WO2010033854A2 (en) 2008-09-19 2010-03-25 Synageva Biopharma Corp. Avian derived fusion proteins
US9150880B2 (en) 2008-09-25 2015-10-06 Proteovec Holding, L.L.C. Vectors for production of antibodies
WO2010036978A2 (en) 2008-09-25 2010-04-01 Transgenrx, Inc. Novel vectors for production of growth hormone
MX2011006516A (es) 2008-12-17 2011-08-04 Genentech Inc Terapia de combinacion de virus de hepatitis c.
ES2607935T3 (es) 2009-03-30 2017-04-04 Portola Pharmaceuticals, Inc. Antídotos para inhibidores del factor Xa y procedimientos de uso de los mismos
WO2010118360A1 (en) 2009-04-09 2010-10-14 The Board Of Supervisors Of Louisiana State University And Agricultural And Mechanical College Production of proteins using transposon-based vectors
US8399624B1 (en) 2009-06-25 2013-03-19 Esbatech, An Alcon Biomedical Research Unit Llc Acceptor framework for CDR grafting
CA2767858C (en) 2009-07-15 2019-02-12 Portola Pharmaceuticals, Inc. Unit dose formulation of antidotes for factor xa inhibitors and methods of using the same
WO2011006982A2 (en) 2009-07-17 2011-01-20 Rigshospitalet Inhibitors of complement activation
CN102741279A (zh) 2009-08-31 2012-10-17 艾普利穆恩公司 B7-h4融合蛋白和其使用方法
WO2011051327A2 (en) 2009-10-30 2011-05-05 Novartis Ag Small antibody-like single chain proteins
WO2011051466A1 (en) 2009-11-02 2011-05-05 Novartis Ag Anti-idiotypic fibronectin-based binding molecules and uses thereof
JP5951498B2 (ja) * 2009-12-08 2016-07-13 アッヴィ・ドイチュラント・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コー・カー・ゲー 網膜神経線維層変性の治療に使用するためのｒｇｍａタンパク質に対するモノクローナル抗体
EP2516664B1 (en) 2009-12-21 2015-07-22 Pharmathene Inc. Recombinant butyrylcholinesterases and truncates thereof
CN105001334A (zh) 2010-02-10 2015-10-28 伊缪诺金公司 Cd20抗体及其用途
CA2791841C (en) 2010-03-05 2023-01-03 Rigshospitalet Chimeric inhibitor molecules of complement activation
JP6029581B2 (ja) 2010-06-19 2016-11-24 メモリアル スローン−ケタリング キャンサー センター 抗ｇｄ２抗体
WO2012006635A1 (en) 2010-07-09 2012-01-12 Biogen Idec Hemophilia Inc. Processable single chain molecules and polypeptides made using same
AU2011310887A1 (en) 2010-09-29 2013-05-02 Universite De Liege Combination of an agonistic anti-CD40 monoclonal antibody or a CD40 ligand and inactivated or attenuated bacteria for use in the treatment and/or prevention of mastitis
AR083495A1 (es) 2010-10-22 2013-02-27 Esbatech Alcon Biomed Res Unit Anticuerpos estables y solubles
EP2658970B1 (en) 2010-12-31 2016-09-28 Bioatla LLC Express humanization of antibodies
ES2693647T3 (es) 2011-06-06 2018-12-13 Novo Nordisk A/S Anticuerpos terapéuticos
US9738707B2 (en) 2011-07-15 2017-08-22 Biogen Ma Inc. Heterodimeric Fc regions, binding molecules comprising same, and methods relating thereto
US20150064163A1 (en) 2011-09-02 2015-03-05 Lifenet Health BMP Peptides & Methods of Use
JP6336397B2 (ja) 2011-12-14 2018-06-06 アッヴィ・ドイチュラント・ゲー・エム・ベー・ハー・ウント・コー・カー・ゲー 鉄関連障害を診断および治療するための組成物および方法
CN107459576A (zh) 2011-12-14 2017-12-12 艾伯维德国有限责任两合公司 用于诊断和治疗铁相关病症的组合物和方法
WO2013106577A2 (en) 2012-01-10 2013-07-18 Biogen Idec Ma Inc. Enhancement of transport of therapeutic molecules across the blood brain barrier
NZ625403A (en) 2012-01-27 2016-03-31 Abbvie Inc Composition and method for diagnosis and treatment of diseases associated with neurite degeneration
EP2812024B1 (en) 2012-02-09 2018-04-11 Var2 Pharmaceuticals ApS Targeting of chondroitin sulfate glycans
CN104394880B (zh) 2012-03-16 2020-08-28 大学保健网络 用于调节toso活性的方法和组合物
JP5868549B2 (ja) 2012-05-24 2016-02-24 マウントゲイト グループ リミテッド 狂犬病感染の予防および治療に関する組成物および方法
US10202595B2 (en) 2012-06-08 2019-02-12 Bioverativ Therapeutics Inc. Chimeric clotting factors
UA118441C2 (uk) 2012-10-08 2019-01-25 Протена Біосаєнсиз Лімітед Антитіло, що розпізнає альфа-синуклеїн
EP2906693A1 (en) 2012-10-15 2015-08-19 Novo Nordisk Health Care AG Coagulation factor vii polypeptides
CN105263319A (zh) 2013-02-13 2016-01-20 法国化学与生物科技实验室 具有经修饰的糖基化的蛋白及其生产方法
BR112015019341A2 (pt) 2013-02-13 2017-08-22 Lab Francais Du Fractionnement Anticorpo anti-tnf-alfa, composição que compreende o anticorpo, método para produzir uma população de anticorpos, células epiteliais da glândula mamária, mamífero não humano transgênico, e, composição de anticorpo anti-tnf monoclonal
EP2956478A1 (en) 2013-02-15 2015-12-23 ESBATech - a Novartis Company LLC Acceptor framework for cdr grafting
HRP20231183T1 (hr) 2013-02-15 2024-01-05 Bioverativ Therapeutics Inc. Optimizirani gen faktora viii
JP2016506752A (ja) 2013-02-20 2016-03-07 エスバテック − ア ノバルティスカンパニー エルエルシー Ｃｄｒグラフトのためのアクセプターフレームワーク
WO2014130922A1 (en) 2013-02-25 2014-08-28 Trustees Of Boston University Compositions and methods for treating fungal infections
TWI683666B (zh) 2013-03-15 2020-02-01 美商百歐維拉提夫治療公司 因子ｉｘ多肽調配物
US9469686B2 (en) 2013-03-15 2016-10-18 Abbott Laboratories Anti-GP73 monoclonal antibodies and methods of obtaining the same
JP6482525B2 (ja) 2013-03-15 2019-03-13 メモリアル スローン ケタリング キャンサー センター 高親和性抗ｇｄ２抗体
WO2014197885A2 (en) 2013-06-07 2014-12-11 Duke University Inhibitors of complement factor h
EP3016683B1 (en) 2013-07-05 2020-06-24 University of Washington through its Center for Commercialization Soluble mic neutralizing monoclonal antibody for treating cancer
WO2015004633A1 (en) 2013-07-12 2015-01-15 Neotope Biosciences Limited Antibodies that recognize islet-amyloid polypeptide (iapp)
WO2015004632A1 (en) 2013-07-12 2015-01-15 Neotope Biosciences Limited Antibodies that recognize iapp
CN104630177A (zh) * 2013-11-08 2015-05-20 中国农业大学 一种利用人丁酰胆碱酯酶迷你基因在乳腺中表达重组人丁酰胆碱脂酶的方法
CN106661107B (zh) 2013-12-24 2021-12-24 杨森制药公司 抗vista抗体及片段
US9119832B2 (en) 2014-02-05 2015-09-01 The Regents Of The University Of California Methods of treating mild brain injury
KR20160122756A (ko) 2014-02-07 2016-10-24 메디뮨 엘엘씨 인간 페리오스틴을 검출하기 위한 신규 검정법
AU2015225867B2 (en) 2014-03-07 2020-02-06 University Health Network Methods and compositions for modifying the immune response
US10059761B2 (en) 2014-03-12 2018-08-28 Prothena Biosciences Limited Anti-Laminin4 antibodies specific for LG4-5
CA2938931A1 (en) 2014-03-12 2015-09-17 Prothena Biosciences Limited Anti-laminin4 antibodies specific for lg1-3
CA2944402A1 (en) 2014-04-08 2015-10-15 Prothena Biosciences Limited Blood-brain barrier shuttles containing antibodies recognizing alpha-synuclein
US11008561B2 (en) 2014-06-30 2021-05-18 Bioverativ Therapeutics Inc. Optimized factor IX gene
JP2017525760A (ja) 2014-08-15 2017-09-07 ジェネクシン・インコーポレイテッドＧｅｎｅｘｉｎｅ， Ｉｎｃ． 子宮頸癌を処置する方法
US20170246259A1 (en) 2014-09-10 2017-08-31 Georgetown University Compositions and Methods of Using Interleukin-4 Induced Gene 1 (IL-4I1)
SG11201702606TA (en) 2014-10-03 2017-04-27 Massachusetts Inst Technology Antibodies that bind ebola glycoprotein and uses thereof
MA40835A (fr) 2014-10-23 2017-08-29 Biogen Ma Inc Anticorps anti-gpiib/iiia et leurs utilisations
MA40861A (fr) 2014-10-31 2017-09-05 Biogen Ma Inc Anticorps anti-glycoprotéines iib/iiia
TWI781507B (zh) 2015-01-28 2022-10-21 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI718122B (zh) 2015-01-28 2021-02-11 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
TWI769570B (zh) 2015-01-28 2022-07-01 愛爾蘭商普羅佘納生物科技有限公司 抗甲狀腺素運送蛋白抗體
MX2017011822A (es) 2015-03-17 2017-12-07 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Anticuerpos anti-muc16 y sus usos.
DK3313882T3 (da) 2015-06-24 2020-05-11 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-VISTA antistoffer og fragmenter
US10287338B2 (en) 2015-07-10 2019-05-14 Miran NERSISSIAN Factor VIII protein compositions and methods of treating of hemophilia A
AU2016303688B2 (en) 2015-07-31 2023-06-15 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Peptides and antibodies for the removal of biofilms
UA126016C2 (uk) 2015-08-03 2022-08-03 Біовератів Терапеутікс Інк. Злитий білок фактора іх
DK3341725T3 (da) 2015-08-25 2021-09-06 Prothena Biosciences Ltd Fremgangsmåder til detektering af phosphoryleret alpha-synuklein
EP3365027B1 (en) 2015-10-14 2022-03-30 Research Institute at Nationwide Children's Hospital Hu specific antibodies and their use in inhibiting biofilm
US20170121385A1 (en) 2015-10-28 2017-05-04 Oxeia Biopharmaceuticals, Inc. Methods of treating neurodegenerative conditions
EP3411478B1 (en) 2016-02-01 2022-06-08 Bioverativ Therapeutics Inc. Optimized factor viii genes
US10465003B2 (en) 2016-02-05 2019-11-05 Janssen Biotech, Inc. Anti-TNF antibodies, compositions, methods and use for the treatment or prevention of type 1 diabetes
CA3014013A1 (en) 2016-02-12 2017-08-17 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-vista (b7h5) antibodies
EA201892190A1 (ru) 2016-03-29 2019-04-30 Янссен Байотек, Инк. Лечение псориаза антителом к ил-12 и/или ил-23 с возрастанием интервала между введениями дозы
WO2017175058A1 (en) 2016-04-07 2017-10-12 Janssen Pharmaceutica Nv Anti-vista antibodies and fragments, uses thereof, and methods of identifying same
CU24538B1 (es) 2016-05-02 2021-08-06 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos monoclonales que compiten por unirse a tau humano con el anticuerpo 16g7
CU24537B1 (es) 2016-05-02 2021-07-02 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos monoclonales que compiten por unirse a tau humano con el anticuerpo 3d6
JP7016470B2 (ja) 2016-07-02 2022-02-07 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
WO2018007922A2 (en) 2016-07-02 2018-01-11 Prothena Biosciences Limited Anti-transthyretin antibodies
JP7017013B2 (ja) 2016-07-02 2022-02-08 プロセナ バイオサイエンシーズ リミテッド 抗トランスサイレチン抗体
DK3482210T3 (da) 2016-07-06 2021-07-12 Prothena Biosciences Ltd Assay til detektering af totalt og s129-phosphoryleret alpha-synuklein
CA3037961A1 (en) 2016-09-30 2018-04-05 Janssen Biotech, Inc. Safe and effective method of treating psoriasis with anti-il23 specific antibody
BR112019006706A2 (pt) 2016-10-03 2019-06-25 Abbott Lab métodos melhorados para avaliar o estado de gfap em amostras de paciente
MY191894A (en) 2016-10-13 2022-07-18 Nat Univ Singapore Antibodies that bind zika virus envelope protein and uses thereof
KR20190078648A (ko) 2016-11-16 2019-07-04 얀센 바이오테크 인코포레이티드 항-il23 특이적 항체로 건선을 치료하는 방법
CN110177878B (zh) 2016-12-29 2023-11-03 Asc治疗公司 转基因动物和生物生产方法
WO2018129078A1 (en) 2017-01-04 2018-07-12 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Dnabii vaccines and antibodies with enhanced activity
US12098188B2 (en) 2017-01-04 2024-09-24 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Antibody fragments for the treatment of biofilm-related disorders
EP3574012A1 (en) 2017-01-27 2019-12-04 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Bispecific her2 and cd3 binding molecules
JP2020506916A (ja) 2017-01-30 2020-03-05 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 活動性乾癬性関節炎の治療のための抗ｔｎｆ抗体、組成物、及び方法
KR20190112763A (ko) 2017-01-31 2019-10-07 바이오버라티브 테라퓨틱스 인크. 인자 ix 융합 단백질 및 이의 제조 및 사용 방법
CA3052578A1 (en) 2017-02-07 2018-08-16 Janssen Biotech, Inc. Anti-tnf antibodies, compositions, and methods for the treatment of active ankylosing spondylitis
CA3056088A1 (en) 2017-03-15 2018-09-20 Research Institute At Nationwide Children's Hospital Composition and methods for disruption of bacterial biofilms without accompanying inflammation
JP7346300B2 (ja) 2017-03-23 2023-09-19 アボット・ラボラトリーズ 早期バイオマーカーであるユビキチンカルボキシ末端ヒドロラーゼｌ１を使用する、ヒト対象における外傷性脳損傷の程度の診断及び決定の一助となるための方法
EP3610268A1 (en) 2017-04-15 2020-02-19 Abbott Laboratories Methods for aiding in the hyperacute diagnosis and determination of traumatic brain injury in a human subject using early biomarkers
CN110603449A (zh) 2017-04-28 2019-12-20 雅培实验室 用同一人受试者的至少两种样品的早期生物标记物帮助超急性诊断确定创伤性脑损伤的方法
IL270375B1 (en) 2017-05-02 2024-08-01 Prothena Biosciences Ltd Antibodies that recognize tau
US10865238B1 (en) 2017-05-05 2020-12-15 Duke University Complement factor H antibodies
CA3078725A1 (en) 2017-05-25 2018-11-29 Abbott Laboratories Methods for aiding in the determination of whether to perform imaging on a human subject who has sustained or may have sustained an injury to the head using early biomarkers
AU2018275236A1 (en) 2017-05-30 2019-10-31 Abbott Laboratories Methods for aiding in diagnosing and evaluating a mild traumatic brain injury in a human subject using cardiac troponin I
EP3649474A1 (en) 2017-07-03 2020-05-13 Abbott Laboratories Improved methods for measuring ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 levels in blood
TW201922780A (zh) 2017-09-25 2019-06-16 美商健生生物科技公司 以抗ｉｌ１２／ｉｌ２３抗體治療狼瘡之安全且有效之方法
WO2019094595A2 (en) 2017-11-09 2019-05-16 Pinteon Therapeutics Inc. Methods and compositions for the generation and use of humanized conformation-specific phosphorylated tau antibodies
BR112019028254A2 (pt) 2017-12-09 2020-07-14 Abbott Laboratories métodos para ajudar no diagnóstico e avaliação de um paciente que sofreu uma lesão ortopédica e que sofreu ou pode ter sofrido uma lesão na cabeça, tal como uma lesão cerebral traumática (lct) leve, usando a proteína ácida fibrilar glial (gfap) e/ou a hidrolase carbóxi-terminal da ubiquitina l1 (uch-l1)
CN110892266A (zh) 2017-12-09 2020-03-17 雅培实验室 使用gfap和uch-l1的组合辅助诊断和评价人类受试者中创伤性脑损伤的方法
EP3732489A1 (en) 2017-12-29 2020-11-04 Abbott Laboratories Novel biomarkers and methods for diagnosing and evaluating traumatic brain injury
WO2019150309A1 (en) 2018-02-02 2019-08-08 Hammack Scott Modulators of gpr68 and uses thereof for treating and preventing diseases
MX2020009265A (es) 2018-03-05 2020-10-01 Janssen Biotech Inc Metodos para tratar la enfermedad de crohn con un anticuerpo especifico anti-il23.
KR20200130711A (ko) 2018-03-12 2020-11-19 메모리얼 슬로안 케터링 캔서 센터 이중특이적 결합제 및 이의 용도
EP3788377A1 (en) 2018-05-04 2021-03-10 Abbott Laboratories Hbv diagnostic, prognostic, and therapeutic methods and products
US20190345245A1 (en) 2018-05-11 2019-11-14 Janssen Biotech, Inc. Methods of Treating Crohn's Disease with Anti-IL23 Specific Antibody
TW202016144A (zh) 2018-06-21 2020-05-01 日商第一三共股份有限公司 包括cd3抗原結合片段之組成物及其用途
CN112789504A (zh) 2018-07-13 2021-05-11 瓦克特诊断有限责任公司 使用重组疟疾蛋白var2csa分离胎儿来源的循环细胞
US20200025776A1 (en) 2018-07-18 2020-01-23 Janssen Biotech, Inc. Sustained Response Predictors After Treatment With Anti-IL23 Specific Antibody
US11548938B2 (en) 2018-08-21 2023-01-10 Quidel Corporation DbpA antibodies and uses thereof
AU2019346134C1 (en) 2018-09-24 2024-06-20 Janssen Biotech, Inc. Safe and effective method of treating ulcerative colitis with anti-il12/il23 antibody
MX2021003867A (es) 2018-10-04 2021-09-08 Georg August Univ Goettingen Stiftung Oeffentlichen Rechts Univsmedizin Anticuerpo monoclonal beta amiloide anti-n-truncado humanizado.
CN112771074A (zh) 2018-10-05 2021-05-07 国家儿童医院研究所 用于酶促破坏细菌生物膜的组合物和方法
AU2019383017A1 (en) 2018-11-20 2021-06-03 Janssen Biotech, Inc. Safe and effective method of treating psoriasis with anti-IL-23 specific antibody
CR20210272A (es) 2018-11-26 2021-07-14 Forty Seven Inc Anticuerpos humanizados contra c-kit
GB201820006D0 (en) 2018-12-07 2019-01-23 Lifearc Humanised anti-IL17BR antibody
US20200197517A1 (en) 2018-12-18 2020-06-25 Janssen Biotech, Inc. Safe and Effective Method of Treating Lupus with Anti-IL12/IL23 Antibody
US20220153827A1 (en) 2019-01-15 2022-05-19 Janssen Biotech, Inc. Anti-TNF Antibody Compositions and Methods for the Treatment of Juvenile Idiopathic Arthritis
EA202192038A1 (ru) 2019-01-23 2021-10-05 Янссен Байотек, Инк. Композиции антител к фно для применения в способах лечения псориатического артрита
CU20210073A7 (es) 2019-03-03 2022-04-07 Prothena Biosciences Ltd Anticuerpos que se unen dentro de la región de unión a microtúbulos de tau definida por cdrs
EP3938400A4 (en) 2019-03-11 2022-11-23 Memorial Sloan Kettering Cancer Center CD22 ANTIBODIES AND METHODS OF USE THEREOF
CA3133388A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 Janssen Biotech, Inc. Methods for producing anti-tnf antibody compositions
WO2020183270A1 (en) 2019-03-14 2020-09-17 Janssen Biotech, Inc. Methods for producing anti-tnf antibody compositions
EP3938384A4 (en) 2019-03-14 2022-12-28 Janssen Biotech, Inc. METHODS OF MANUFACTURING FOR PRODUCING ANTI-IL12/IL23 ANTIBODY COMPOSITIONS
EP3938390A1 (en) 2019-03-14 2022-01-19 Janssen Biotech, Inc. Manufacturing methods for producing anti-tnf antibody compositions
KR20210141583A (ko) 2019-03-18 2021-11-23 얀센 바이오테크 인코포레이티드 항-il-12/il-23 항체를 사용한 소아 대상의 건선 치료 방법
CA3138241A1 (en) 2019-05-23 2020-11-26 Janssen Biotech, Inc. Method of treating inflammatory bowel disease with a combination therapy of antibodies to il-23 and tnf alpha
CN113939531A (zh) 2019-06-03 2022-01-14 詹森生物科技公司 用于治疗银屑病关节炎的抗tnf抗体组合物和方法
AU2020288404A1 (en) 2019-06-03 2022-02-03 Janssen Biotech, Inc. Anti-TNF antibodies, compositions, and methods for the treatment of active Ankylosing Spondylitis
CN114401986A (zh) 2019-07-08 2022-04-26 国家儿童医院研究所 破坏生物膜的抗体组合物
WO2021028752A1 (en) 2019-08-15 2021-02-18 Janssen Biotech, Inc. Anti-tfn antibodies for treating type i diabetes
JP2023507083A (ja) 2019-12-19 2023-02-21 クイデル コーポレーション モノクローナル抗体融合物
EP4136459A1 (en) 2020-04-13 2023-02-22 Abbott Laboratories Methods, complexes and kits for detecting or determining an amount of a ss-coronavirus antibody in a sample
WO2021215896A1 (en) 2020-04-24 2021-10-28 Genexine, Inc. Method for treating cervical cancer
JP2023533458A (ja) 2020-06-24 2023-08-03 プロシーナ バイオサイエンシーズ リミテッド ソルチリンを認識する抗体
US20220043000A1 (en) 2020-08-04 2022-02-10 Abbott Laboratories Methods and kits for detecting sars-cov-2 protein in a sample
WO2022119841A1 (en) 2020-12-01 2022-06-09 Abbott Laboratories Use of one or more biomarkers to determine traumatic brain injury (tbi) in a subject having received a head computerized tomography scan that is negative for a tbi
WO2023102384A1 (en) 2021-11-30 2023-06-08 Abbott Laboratories Use of one or more biomarkers to determine traumatic brain injury (tbi) in a subject having received a head computerized tomography scan that is negative for a tbi
WO2022147147A1 (en) 2020-12-30 2022-07-07 Abbott Laboratories Methods for determining sars-cov-2 antigen and anti-sars-cov-2 antibody in a sample
JP2024503658A (ja) 2021-01-13 2024-01-26 メモリアル スローン－ケタリング キャンサー センター 抗ｄｌｌ３抗体－薬物コンジュゲート
WO2022153194A1 (en) 2021-01-13 2022-07-21 Memorial Sloan Kettering Cancer Center Antibody-pyrrolobenzodiazepine derivative conjugate
WO2022190034A1 (en) 2021-03-12 2022-09-15 Janssen Biotech, Inc. Method of treating psoriatic arthritis patients with inadequate response to tnf therapy with anti-il23 specific antibody
US20220298236A1 (en) 2021-03-12 2022-09-22 Janssen Biotech, Inc. Safe and Effective Method of Treating Psoriatic Arthritis with Anti-IL23 Specific Antibody
GB202105110D0 (en) 2021-04-09 2021-05-26 Cancer Research Tech Ltd Anti-CD73 antibodies
BR112023024169A2 (pt) 2021-05-18 2024-02-06 Abbott Lab Métodos para avaliar lesão cerebral em um indivíduo pediátrico
MX2023013788A (es) 2021-05-20 2024-02-13 Janssen Biotech Inc Método para tratar la enfermedad inflamatoria del intestino con una terapia de combinación de anticuerpos para il-23 y tnf alfa.
JP2024521476A (ja) 2021-06-14 2024-05-31 アボット・ラボラトリーズ 音響エネルギー、電磁エネルギー、過圧波及び／又は爆風により引き起こされる脳損傷の診断法又は診断の一助となる方法
JP2024526315A (ja) 2021-07-09 2024-07-17 ヤンセン バイオテツク，インコーポレーテツド 抗ｔｎｆ抗体組成物を製造するための製造方法
EP4367136A1 (en) 2021-07-09 2024-05-15 Janssen Biotech, Inc. Manufacturing methods for producing anti-tnf antibody compositions
AU2022306973A1 (en) 2021-07-09 2024-02-22 Janssen Biotech, Inc. Manufacturing methods for producing anti-il12/il23 antibody compositions
EP4359794A1 (en) 2021-07-13 2024-05-01 Keystone Bio, Inc. Diagnostics for porphyromonas gingivalis
JP2024534124A (ja) 2021-08-23 2024-09-18 バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド 逆位末端反復配列によるクローズドエンドｄｎａの作製
JP2024532262A (ja) 2021-08-23 2024-09-05 バイオベラティブ セラピューティクス インコーポレイテッド 最適化第ｖｉｉｉ因子遺伝子
EP4392783A1 (en) 2021-08-27 2024-07-03 Abbott Laboratories Methods for detecting immunoglobulin g, subclass 4 (igg4) in a biological sample
CN118715440A (zh) 2021-08-31 2024-09-27 雅培实验室 诊断脑损伤的方法和系统
AU2022339759A1 (en) 2021-08-31 2024-03-07 Abbott Laboratories Methods and systems of diagnosing brain injury
WO2023056331A1 (en) 2021-09-30 2023-04-06 Bioverativ Therapeutics Inc. Nucleic acids encoding factor viii polypeptides with reduced immunogenicity
AU2022354059A1 (en) 2021-09-30 2024-03-28 Abbott Laboratories Methods and systems of diagnosing brain injury
EP4423126A1 (en) 2021-10-29 2024-09-04 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating crohn's disease with anti-il23 specific antibody
CA3238377A1 (en) 2021-11-15 2023-05-19 Janssen Biotech, Inc. Methods of treating crohn's disease with anti-il23 specific antibody
US20230159633A1 (en) 2021-11-23 2023-05-25 Janssen Biotech, Inc. Method of Treating Ulcerative Colitis with Anti-IL23 Specific Antibody
EP4448179A1 (en) 2021-12-17 2024-10-23 Abbott Laboratories Systems and methods for determining uch-l1, gfap, and other biomarkers in blood samples
AU2023216317A1 (en) 2022-02-04 2024-09-05 Abbott Laboratories Lateral flow methods, assays, and devices for detecting the presence or measuring the amount of ubiquitin carboxy-terminal hydrolase l1 and/or glial fibrillary acidic protein in a sample
US20230312703A1 (en) 2022-03-30 2023-10-05 Janssen Biotech, Inc. Method of Treating Psoriasis with IL-23 Specific Antibody
US20230374122A1 (en) 2022-05-18 2023-11-23 Janssen Biotech, Inc. Method for Evaluating and Treating Psoriatic Arthritis with IL23 Antibody
WO2024006876A1 (en) 2022-06-29 2024-01-04 Abbott Laboratories Magnetic point-of-care systems and assays for determining gfap in biological samples
WO2024059708A1 (en) 2022-09-15 2024-03-21 Abbott Laboratories Biomarkers and methods for differentiating between mild and supermild traumatic brain injury
WO2024059692A1 (en) 2022-09-15 2024-03-21 Abbott Laboratories Hbv diagnostic, prognostic, and therapeutic methods and products
US20240199734A1 (en) 2022-11-22 2024-06-20 Janssen Biotech, Inc. Method of Treating Ulcerative Colitis with Anti-IL23 Specific Antibody
WO2024211475A1 (en) 2023-04-04 2024-10-10 Abbott Laboratories Use of biomarkers to determine whether a subject has sustained, may have sustained or is suspected of sustaining a subacute acquired brain injury (abi)

Family Cites Families (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4736866B1 (en) * 1984-06-22 1988-04-12 Transgenic non-human mammals
DE122007000007I2 (de) * 1986-04-09 2010-12-30 Genzyme Corp Genetisch transformierte Tiere, die ein gewünschtes Protein in Milch absondern
GB8615942D0 (en) * 1986-06-30 1986-08-06 Animal & Food Research Council Peptide production
WO1988001648A1 (en) * 1986-08-28 1988-03-10 Immunex Corporation Expression of heterologous proteins by transgenic lactating mammals
US4873316A (en) * 1987-06-23 1989-10-10 Biogen, Inc. Isolation of exogenous recombinant proteins from the milk of transgenic mammals

Cited By (30)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPH02500798A (ja) * 1987-06-23 1990-03-22 ファーミング　ビーブイ ミルクにおける蛋白の発現
EP1975175A2 (en) 1998-06-02 2008-10-01 Nihon University IgA nephropathy-related DNA
EP2077275A2 (en) 1998-06-02 2009-07-08 Nihon University IgA nephropathy-related DNA
EP2264166A2 (en) 1999-04-09 2010-12-22 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2270149A2 (en) 1999-04-09 2011-01-05 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP1914244A2 (en) 1999-04-09 2008-04-23 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Method of modulating the activity of functional immune molecules
EP2278003A2 (en) 1999-04-09 2011-01-26 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2275541A2 (en) 1999-04-09 2011-01-19 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2275540A2 (en) 1999-04-09 2011-01-19 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2270150A2 (en) 1999-04-09 2011-01-05 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2270147A2 (en) 1999-04-09 2011-01-05 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2270148A2 (en) 1999-04-09 2011-01-05 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Method for controlling the activity of immunologically functional molecule
EP2314686A1 (en) 2000-10-06 2011-04-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Cells producing antibody compositions
EP3263702A1 (en) 2000-10-06 2018-01-03 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Cells producing antibody compositions
EP2314685A1 (en) 2000-10-06 2011-04-27 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. Cells producing antibody compositions
JP2010162035A (ja) * 2002-07-03 2010-07-29 A2 Corp Ltd 生乳の脂肪酸の組成を変える方法
EP1908773A2 (en) 2002-12-26 2008-04-09 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing dipeptides
EP1983059A2 (en) 2002-12-26 2008-10-22 Kyowa Hakko Kogyo Co., Ltd. Process for producing dipeptides
WO2007119796A1 (ja) 2006-04-14 2007-10-25 Medical And Biological Laboratories Co., Ltd. エフェクター機能を有するポリペプチド変異体
WO2008038613A1 (fr) 2006-09-25 2008-04-03 Kyowa Hakko Bio Co., Ltd. Procédé de production de dipeptide
WO2008090959A1 (ja) 2007-01-24 2008-07-31 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. エフェクター活性が増強された遺伝子組換え抗体組成物
WO2008090960A1 (ja) 2007-01-24 2008-07-31 Kyowa Hakko Kirin Co., Ltd. ガングリオシドgm2に特異的に結合する遺伝子組換え抗体組成物
WO2009054435A1 (ja) 2007-10-24 2009-04-30 Otsuka Chemical Co., Ltd. 増強されたエフェクター機能を有するポリペプチド
WO2010018847A1 (ja) 2008-08-13 2010-02-18 協和発酵キリン株式会社 遺伝子組換えプロテインs組成物
WO2010041715A1 (ja) 2008-10-09 2010-04-15 協和メデックス株式会社 新規フルクトシルペプチドオキシダーゼ
WO2011108502A1 (ja) 2010-03-02 2011-09-09 協和発酵キリン株式会社 改変抗体組成物
WO2014054804A1 (ja) 2012-10-05 2014-04-10 協和発酵キリン株式会社 ヘテロダイマータンパク質組成物
WO2015005258A1 (ja) 2013-07-09 2015-01-15 協和メデックス株式会社 糖化ヘキサペプチドオキシダーゼとその利用
WO2020067541A1 (ja) 2018-09-28 2020-04-02 協和キリン株式会社 抗体組成物
WO2021201236A1 (ja) 2020-04-01 2021-10-07 協和キリン株式会社 抗体組成物

Also Published As

Publication number Publication date
AU1941092A (en) 1992-09-24
EP0279582A3 (en) 1989-10-18
US5565362A (en) 1996-10-15
AU618524B2 (en) 1992-01-02
US5994616A (en) 1999-11-30
EP0279582A2 (en) 1988-08-24
EP0832981A1 (en) 1998-04-01
US5304489A (en) 1994-04-19
AU1178488A (en) 1988-08-18
JP2863789B2 (ja) 1999-03-03
CA1321764C (en) 1993-08-31
AU661696B2 (en) 1995-08-03

Similar Documents

Publication Publication Date Title
JPS63309192A (ja) 効率的な分泌のための乳腺に出される蛋白におけるｄｎａ配列
US7956238B2 (en) Porcine pancreatic amylase gene promoter and transgenic pigs expressing heterologous digestive enzymes
US5545808A (en) Transgenic salmonid fish expressing exogenous salmonid growth hormone
Lira et al. An upstream region of the mouse ZP3 gene directs expression of firefly luciferase specifically to growing oocytes in transgenic mice.
CA2093659C (en) Dna sequence encoding bovine .alpha.-lactalbumin and methods of use
EP0665883A1 (en) Tetracycline repressor-mediated binary regulation system for control of gene expression in transgenic animals
US5648243A (en) Human serum albumin expression construct
US5583009A (en) Method of preparing recombinant proteins in transgenic animals containing metallothionein gene elements that bestow tissue-independent copy number-dependent, position-indepedent gene expression
JP2001501482A (ja) トランスジェニック魚による組換えペプチドの製造
Wilmut et al. Production of pharmaceutical proteins in milk
JP2001513336A (ja) トランスジェニック動物の生産における「マリーナ」トランスポザンの使用
US20050268350A1 (en) Identification and purification of higher order transcription complexes from transgenic non-human animals
AU700224B2 (en) Alpha-lactalbumin gene constructs
US6410723B1 (en) VDUP1 promoter and methods of use thereof
US20040266711A1 (en) DNA sequences to target proteins to the mammary gland for efficient secretion
JPH03244332A (ja) 遺伝子移入動物及びその作製方法
US5852224A (en) α-lactalbumin gene constructs
JP2707466B2 (ja) 遺伝子導入非ヒト動物
Nguyen et al. Red Fluorescent Protein Expression in Transgenic Founder of Angelfish (Pterophyllum sp) Driven by Zebrafish Myosin Light Chain 2 Promoter
JP2005512568A (ja) 精嚢組織特異的プロモーター及びその利用
EP1636383A1 (en) Composition for screening anti-hypertension drug comprising mammal tctp gene or its protein product, and method for screening anti-hypertension drug using said composition
JP2005211079A (ja) ｍＣ２６遺伝子発現制御領域を用いてトランスジェニック動物乳腺において物質を生産する新規製造法
Fine Expression of Escherichia coli beta-galactosidase in transgenic mice: An approach to cell lineage analysis
MXPA98004115A (en) Purification of more elevated order transcription compositions from transgenic animals no huma
JP2004298196A (ja) ｍＣ２６遺伝子発現制御領域を用いてトランスジェニック動物乳腺において物質を生産する新規製造法

Legal Events

Date Code Title Description
R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

R250 Receipt of annual fees

Free format text: JAPANESE INTERMEDIATE CODE: R250

FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081218

Year of fee payment: 10

EXPY Cancellation because of completion of term
FPAY Renewal fee payment (event date is renewal date of database)

Free format text: PAYMENT UNTIL: 20081218

Year of fee payment: 10