JPS6012347B2 - 新規アミノ酸誘導体の製法 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】 本発明は新規なアミノ酸譲導体とこれを含有する医薬組
成物、並びにその製法に関する。

本発明の新規化合物は、下記の一般式（１）に相当する
。

一般式（１） 式中、 ＢＩは式−ＳＱＯＨまたは一ＯＰ０（ＯＨ）２の基であ
り、Ｒは水素または低級アルキルであり、 Ｒ２は水素またはカルボキシであり、 ｎは１または２であり、 ｔは１または２である。

本発明の新規化合物及びその塩の或るものは有用な薬剤
としての性質を有し、他のものは有用な生理学的または
薬剤の性質を有する化合物の製造における中間体として
使用できる。

生物学的活性に関して、本発明の新規化合物の中で著し
く有利なものは下記一般式（ＸＸＩＶ）のガンマ一Ｌ−
グルタミルタウリンである。

この化合物は“ＡＧＡＳ”（生物気圏−発生−適応 系
統 Ａｅｒｏｂｉｏｓｐｈｅｒｉｃａｌ − Ｗｎｅ
ｔｉｃａｌ −Ａｄａｐｔａｔｉｏｎａｌ−Ｓｙｓにｍ
）の損傷に直接的または間接的に関係した病利学的変化
に対して広範な治療及び予防効果を有する。ＡＧＡＳの
概念を説明するために、この系を構成する最も重要な組
織と器官を列挙する。

‘ａー 生体と生物生活圏として大気との境界を形成す
る生物学的界面（皮層その他の皮膚様構造、角膜及び結
膜、口腔及び咽頭腔、気道並びに腕）；‘ｂ｝ 骨格系
統並びに体肢（管骨及び海綿質骨、球関節、糟膜、骨格
筋組織）；‘ｃ｝ 地上（企ｒｒｅｓｔｒｉａｌ）イオ
ン平衡の調節に関係する器官（上皮を通る輸送系統、膜
紙及び賢小管）；‘ｄ｝ 固形食物の分解に必要な槽生
歯（歯床を伴ない、歯板によって固定されている）；川
地上聴覚、膿覚及び音形成器官。

本発明によって製造した化合物は上記系統の器官並びに
その組織に対して生物学的な好ましい治療作用を発揮す
る。

その上、さらにＡＧＡＳ系に関して本発明の化合物は次
の効果をも発揮する：放射線保護作用、創傷の癒合の促
進作用、全身メンセンカィマ（ｍｅｎｓｅｎｃｈｙｍａ
）活性作用、粘膜及び皮膚の感染及び汚染の高まる危険
に対する保護（湿った粘膜のリゾチーム製造、呼吸管の
有毛上皮の発育、等）、皮膚のウイルス性及び細菌性感
染に対する保護の向上。

地上生命の著しく高まったストレス作用（例、気象的及
び激しい日局変化、損傷の高まる危険）に対して、この
化合物は糖・性皮質性ステロイド群により譲超される末
梢組織の損傷（例、結合組織骨基質等の損傷）を同時に
防止することによって適応症候群を安定化する傾向があ
る。

免疫動的平衡の発達（自己及び非自己細胞の認識の向上
）。

本発明の化合物は、一部は直接的に、また一部はより通
性のビタミンＡ代射産物の製造によるビタミンＡ代射作
用の抑制を通して、その活性を発揮する。

この活性は、賢小警の２５−ヒドロキシコレカルシフエ
ロール−１”ｏ−ヒドロキシラーゼ（２５一ｈｙｄｒｏ
ｘｙ−ｃｈｏｌｅｃａｌｃｉｆｅｒｏ】一１一Ｑ−ｈｙ
ｄｒｏ奴１ａｓｅ）酵素に対して上皮小体ホルモンが引
き起すものと類似している。上記の事実は本発明の化合
物の広範かつ多様な生化学的、薬理学的及び治療学的活
性を説明する。■ ビタミンＡ特性の効果 （ａ’薬理学的及び生化学的効果 ラツトの軟骨、並びに鶏舷子の水晶体や肝及び肺組織中
へのラベルした硫酸塩の混入を促進する作用：ラットの
軟骨中へのラベルしたリンの混入を促進する作用；コン
ドロィチン硫酸の合成を促進する作用；創傷の癒合を有
利にする作用（ラットや犬にコルチソンを投与して議起
した創傷癒合の低下に対しても効果がある）；肥満細胞
の頚粒減少を増大させる作用；ラット及び鶏の実験的ビ
タミン不足または過多症の場合のビタミンＡ強化作用；
ラットのストレス潰湯の軽減作用、リゾチーム製造を増
大させる作用：痕跡性元素（ケイ素、銅、亜鉛、マンガ
ン、フッ素）の交替に影響する作用＄上皮生成を促進す
る作用；アルカリ性リン酸酵素の活性を増大させる作用
：ビタミンＡの局所作用によって誘起される嚢生成に対
して発揮する作用；与量−応答曲線の非常に平坦な走行
及び高い投与量での前兆徴候の変化；ゴルジ体を活性化
する作用：杯状細胞の生成を促進する作用：血清ビタミ
ンＡの濃度を増大させる作用。

‘ｂ｝ 臨床治療における使用 乾性角結膜炎；ショーグレン症候群：乾‘性鼻喉頭咽頭
炎；臭痴症；慢性気管支炎；シノフロンキティス（ｓｙ
ｎｏｂｒｏｎｃｈｉｔｉｓ）；すい豚線雛症；小児期の
フューモパシィ−（ｐｈｅｕｍｏｐａｔｈｙ）傾向；歯
周症；ウイルス性及び細菌性の感染に対する皮虜及び粘
膜の素因増大：コルチソン桔抗作用；粘膜の手術創傷及
び損傷：大勝びらん；掻洋症群：味覚及び喚覚障害。

曲 非ビタミンＡ特性の効果 ‘ａー 薬理学的及び生化学的効 一過性血糖低下作用；リン酸塩尿を減少させ、血清リン
酸塩量を増大させる作用；放射線保護作用；不活性動物
での迷路試験で標的到達を促進する作用；実験的なフッ
素沈着症及びカドミウム中毒を軽減する作用；実験的な
エジプト豆中毒症を軽減する作用；腎の環式アデノシン
ーリン酸排出を増大させる作用；肝チロジンアミノトラ
ンスフヱラーゼの酵素活性を増大させる作用。

（ｂ’臨床治療における使用 あまり重くない照射傷害；白斑；筋無力 症；精神高揚効果；退行老化状態及び記憶機能をよくす
る作用；ケロイド素因：強直形成脊椎症；減損に由来す
る運動器官の病気；硬化基底（ｓｃｌｅｒｏｔｉｃｆ肌
ｄｕｓ）；類でんぷん症；斑状硬化症；線縦のう胸性乳
腺症。

本発明の化合物による治療の継続期間は広い範囲内で異
なる。

化学的に純粋な活性物質を５メタの経口投与量で１日に
３回服用させせたところ、患者のある者は２週間後にも
う症状がなくなり（例、乾燥鼻膜頭咽頭炎）、別のある
病気の治療には１なし１し２ケ月を必要とし（例、歯周
症、ショーグレン症候群）、さらに別の病気の場合には
３ないし６ケ月の治療期間が必要である（例、強直形成
脊椎症）。本発明の化合物は人畜の治療に使用するため
の化粧または薬品組成物に転換することができる。

この組成物は、活性成分として本発明の化合物だけを含
有していてもよく、また他の生物学的活性物質をいつし
よに含有していてもよい。本発明の活性薬剤は体重ｌｋ
９につき５０なし、し５００ナ／グラムの投与量で１日
に３回服用させるのが好ましい。１錠は、生物学的に不
活性な担体（例、ラクトース、スターチ）及び通常の助
剤物質（例、ポリビニルピロリドン、ゼラチン、タルク
、ステアリン酸マグネシウム、超微粉シリカ等の造粒剤
及び滑剤）と混和した状態で本発明の活性成分を２なし
、し２０ムク、好ましくは約１０ムタ含有する。

この非常に低い投与量を考えると、錠剤中にこの活性物
質を均一に分散させるために、溶液状の活性成分を造粒
前の錠剤塊と混和し、混練機を使用して均質な混合物を
調製するのが好ましい。必要な有効投与適量が非常に低
いために、数兆個の錠剤を製造する場合でも、本発明の
活性成分を大きな実験室的規模の装置によって満足しう
る価格で製造することができる。この活性成分は安定な
のでト錠剤は長期間保存できる。デポー錠剤またはスパ
ンスールド（ｓｐａｍｕｌｅｄ）カプセルの場合の活性
成分含有量は１０なし、し３０〃夕である。任意に生物
学的に不活性な水溶性希釈剤と混和した状態でパウダー
アンプル中に本発明の活性成分を含有している注射用製
剤は、１アンプル当り５ないし１０ｒ夕の活性成分を含
有しているのが好ましい。非経口的適用は筋肉注射、皮
下注射または静脈内注射によるのがよい。所定濃度の本
発明の活性成分は組織や管壁を刺激しないので、点滴の
形態でも適用できる。坐薬は、この目的に使用できるカ
カオ・バターまは合成脂ロウ（例、ィムハウゼン・マス
、ＧＦＲ）を使用して２なし、し２０ムタ、好し〈は約
１０メタの活性成分含有量で調製できる。

通常の親水性または疎水性軟こう基材（例、コレステロ
ール、パラフイン、グリセリン、ラノリン、亜麻仁油「
等）で調製した皮膚病用または化粧用の軟こうは、活性
成分含有量が０．１ないし１．０山ク′夕でよい。

ェーロゾル製剤は活性成分を０．１なし、し１．０ムタ
／夕濃度で含有しているのがよい。

舌下錠は活性成分含量が１錠当り約１０ムタで、分解時
間は０．５ないし１時間である。持続効果を有する高分
子量のポリマーも調製でき、たとえば活性成分含量が１
なし、し５仏夕／夕の懸濁液の形態とすることができる
。

同様に、このポリマーまたは本発明の化合物の塩と高分
子量有機塩基（例、プロタミン、ヒストン）との混合物
から持続効果を有する注射用製剤を調製できる。この組
成物は１アンプル当り１０ないし２０仏夕の量の活性成
分を含有している。皮膚病用及び化粧用パウダーは活性
成分含有量が０．１ないし１ムタ／夕でよく、通常の担
体（例、タルク）を含有している。

眼科用に適用される点眼液並びに涙と混和性もしくは不
混和性の軟こうは活性成分含量が０．１なし、し１．０
仏夕／夕である。

小児科用に対しては最も好ましい投与適量は「体重ｌｋ
９につき活性成分０．３仏夕の割合である。

殺菌組成物はいずれも滅菌櫨過によって調製するのが好
ましい。本発明の化合物を含有する上記製剤の併用剤は
目的とする予防、治療または化粧効果を増大し、強化し
、または改良する。

主として次の併用補充成分が使用されよう。ビタミンＡ
、ビタミンＣ、ビタミンＥ、ビタミンＫ、根跡性元素、
コルチソンとその誘導体、プロゲステロン、甲状腺ホル
モン、ラジウム類似及び免液抑制作用の生成物、精神薬
剤（特に精神安定剤及びチモレプティックス、ｔｈｙｍ
ｏｌｅｐｔｉｃｓ）、有機ケイ素化合物、老人学的製剤
、経口糖尿病剤、消炎剤、抗ヒスタミン剤等。併用製剤
中の各成分の適量は一般にこれを単独で使用するときの
通常の治療適量と大体同じである。本発明の化合物は、
さらに治療及び栄養プレミツクスの添加剤としても使用
できる。

このような組成物に使用すると、この化合物は体重増加
量を増大させ、またビタミンＡ要求量を低下させ及び／
またはビタミンＡの吸収と代射を向上させる。この化合
物は痕跡性元素の吸収をよくし「 またその血液水準を
高める。飼料添加剤として使用する場合、これは体重ｌ
ｋ９当り１００なし、し３００ナノグラム、好ましくは
約２００ナノグラムの日毎経口量で動物に服用させるこ
とができる。これは、動物飼料と混合した場合、一般に
飼料ｌｋ９当り１なし・し２ムタの濃度（すなわち、１
なし、し２雌ノトンまたは０．００１なし、し０．００
２肌）に相当する。必要な濃度が非常に低いことを考慮
して、本発明の化合物はビタミンプレミックスとか他の
有用な飼料添加剤を含有するマイクロカプセルとかに混
和することもでき、また飲用水または秘める塩の添加剤
として投与することもできる。本発明の化合物または人
の治療に適用するのと同様な形態で獣医学用に使用する
こともできる（上皮形成、創傷癒合、骨折等）。一般式
（１）の化合物の共通の構造上の特徴は、Ｑ−置換ジカ
ルポン酸部位を含有し、そののーカルボキシル基が、ア
ルキル側鎖の中に他の置換基に加えての位置の強酸性基
を含有している第一級または第二級アミノ基にアミド結
合を介して結合していることである。

本発明によれば、一般式（１）の化合物およびその塩は
、一般式（０）の化合物のＱ−アミノ基およびＱ−カル
ボキシ基に結合している保護基を酸加水分解、アルカリ
加水分解、水添分解または酵素加水分解によって離脱し
、そして所望なら得られた化合物をその塩に変えること
により製造できる。

一般式（０）において、 パはヒドロキシ、アラルコキシ（当該アラルコキシ中の
アルキル残基は低級アルキルであり、そして、アリール
残基はメトキシまたはニトロで置換されていてもよい）
または一般式一ＮＨＣＮ２ＣＯＹ（ここでＹはヒドロキ
シまたは低級アルキルである）を表わし、Ｒ３は水素ま
たはアラルコキシカルポニル（当該アラルコキシカルボ
ニル中のアルキル残基は低級アルキルであり、アリール
残基はメトキシまたはニトロで置換されていてもよい）
を表わし、そしてＢ１、Ｒ、Ｒ２、ｎおよびｔはそれぞ
れ前記と同義である。

本発明方法にあっては、一般にＱーアミノ酸化合物のＱ
−アミノ酸および／またはＱーカルボニル基上の保護基
を離脱するための方法としてそれ自体知られた処理手段
および処理条件を駆使する酸加水分解、アルカリ加水分
解、水添分解または酵素加水分解により、一般式（０）
の出発化合物のＱーアミノ基上およびＱーカルボキシ基
上の保護基の両方を順次もしくは同時に離脱する。

Ｑーアミ／基上のェステル基の離脱は、酸加水分解、水
添分解によりまたは希水酸化アンモニウム溶液、ナトリ
ウム、ナトリウムアミドもしくはヒドラジンを用いて、
または酵素加水分解（好まきくはロイシンアミノベプチ
ターゼを使用）により行えるが、接触水添分解により、
またはトリフルオロ酢酸での処理もしくは非水媒体に溶
かしたハロゲン化水素たとえば臭化水素での処理により
行うのが有利である。Ｑーカルポキシ基上の保護基の離
脱は、酸加水分解、水添分解（接触水添分解がよい）、
アルカル加水分解または酵素加水分解によって行えるが
、この場合酸加水分解は非水媒体に溶かしたハロゲン化
水素好ましくは臭化水素でもつてもしくはトリフルオロ
酢酸での処理により行うのが有利であり、アルカリ加水
分解は水、アルコールおよび／またはアセトンの存在下
水酸化アルカリ好ましくは水酸化ナトリウムで行うのが
有利であり、そして酵素加水分解はロィシンベプチター
ゼを用いて行うのが有利である。

Ｑ−アミ／基上の保護基およびＱ−カルボキシ基上のェ
ステル基の同時離脱は、酸加水分解により有利には氷酢
酸一臭化水素で、アルコールに溶かした乾燥塩化水素で
もしくはトリフルオロ酢酸で、またはナトリウムもしく
はナトリウムアミドを用いたアルカリ加水分解により、
または水添分解有利には接触水添分籍によりパラジウム
活性炭の存在下で、または酵素加水分解により実施でき
る。

次に参考例および実施例を挙げて本発明方法を具体的に
説明するが、本発明はこれらに限定されるものではない
。

参考例 １ ４ｏ．８５夕（０．１１モル）の力ルボベンジルオキシ
−Ｌーグルタミン酸・Ｑ−ペンジルェステル（Ｌｉｅｂ
ｉｇｓＡ肌．６５５、２００／１９６２）を５００地の
アセトニトリルに溶解する。

空気中の湿気を排除してこの溶液を−１５ｏｏに冷去し
、１５．４泌（０．１１モル）のトリェチルアミンを凝
拝された溶液に添加し、その後１５．４の【（０．１１
モル）のクロロギ酸ィソブチルを添加する。この混合物
を−１５℃で４び分間縄拝し、その後２８の【（０．２
モル）のトリエチルアミンと１１．２６夕（０．０５モ
ル）のシスタミン・２塩酸塩と最後に２５０泌のアセト
ニトリルを加える。この混合物を一ｌｙＣで２時間、次
いで室温で４時間激しく蝿拝する。この反応混合物を３
０℃で真空蒸発する。

残笹を冷却と濃拝下に２００叫の氷一冷水と混合し、得
られた混合物を３５℃で真空蒸発する。残澄に２５０の
‘の水と５００肌【の酢酸エチルを加え、混合物を分離
ロートの中に入れる。酢酸エチル相を順に２５０Ｍの水
、２×２５０の‘の５％炭酸ナトリウム水溶液、２×２
５０泌のＩＮ塩酸そして２５０の‘の水で洗浄する。（
水性−アルカリ性洗液は塩酸で酸性化し、エーテルで抽
出すると約５夕の禾反応カルボベンジルオキシ一Ｌ−グ
ルタミン酸・Ｑーベンジルェステルが回収される。）酢
酸エチル溶液を無水硫酸ナトリウム上で乾燥し、真空下
３０ｏｏで蒸発乾固する。濃厚な油状残湾が得られ、こ
れは放置すると結晶化する。残湾を２５０羽の無水エー
テルと共にすりつぶし、結晶性物質を臆測しトこうして
得られた約４０〜４２夕の粗生成物をｌ００の‘の酢酸
エチルと１７０の【のエーテルから再結晶する。２９．
３夕のＮＯＮービス〔Ｎ−カルボベンジルオキシーガン
マー（Ｑ−ペンジル）一Ｚーグルタミル〕ーシスタミン
が得られる。

ｍ．ｐ．９１〜９ぞ○。分析 Ｃ４４日５Ｎ４０，ｏＳ
２（ＭＷ＝８５９．０５）計算値ＳＣ６１．５２％も日
５．８９％もＮ６．５２％もＳ７．４６％実測値字Ｃ６
０．８５％、日５．９１％もＮ６．６１％もＳ７．７２
％参考例 ２ ２５。

７７夕（０。

０３モル）のＮ。

Ｎ−ビスー〔Ｎ−力ルボベンジルオキシ−ｙ一（Ｑーベ
ンジル）−Ｌーグルタミル〕ーシスタミン（参考例１に
記載の方法で調製を７５机の氷酢酸に溶解する。この溶
液を氷格で冷却し「７５の‘の３０％過酸化水素と２２
５の‘の氷酢酸の新しく調製した混合物を１粉ごで滴下
乾燥する。その後、氷俗を取り除き「混合物を室温で４
時間鷹拝し、３０ｑｏで真空蒸発する。油状生成物を次
いでデシケーターに入れ「 まず五酸化リン上で次いで
固体水酸化カリウム上で乾燥する。２８．５夕の力ルボ
ベンジルオキシ−ｙ一（Ｑ−ペンジル）−Ｌ−グルタミ
ルタウリンが得られる。

この粗生成物は精製しないでｙ−Ｌ−グルタミルタウリ
ンの製造に使用できる。参考例 ３ ２６．３２夕（５５ミリモル）の力ルボベンジルオキシ
ーｙ−（Ｑーベンジル）一Ｌーグルタミルタウリン（参
考例２に記載の方法で調製）を５０の上の氷酢酸にとか
し、４モルの臭化水素を含有する５０の‘の氷酢酸を加
える。

激しい二酸化炭素の発生が起る。この混合物と室温で２
時間放置し、次いで３０℃で真空蒸発する。油状残澄を
１７０の‘の水にとかし、この溶液を５×７０の上のエ
ーテルで洗浄する。水性相を３５℃で真空蒸発すると「
２０．４２２のｙ−（Ｑ−ペンジル）−Ｌ−グルタミ
ルタウリンが得られる。この生成物は９０％エタノール
水から再結晶できる。Ｒｆ＝０．５３（ｎ−ブタノール
、ピリジン、氷酢酸及び水の１５：１０：３；１２混合
物中）；０．３９（ｎーブタノール、氷酢酸及び水の４
：１：１混合物中）。参考例 ４ ５２９双９（１．１ミリモル）の力ルボベンジルオキシ
−ｙ一（Ｑーベンジル）一Ｌ−グルタミルタウリン（参
考例２に記載の方法で調製）を５の‘のＩＮ水酸化カリ
ウム水溶液にとかし、この混合物を室温で４時間放置す
る。

この溶液を３×３の‘のエーテルで洗浄し、」Ｄｏｗｅ
ｘ５０×２樹脂を充填した１×２０弧のカラムに通しｔ
このカラムを水で港離する。５物上の溶出液を瓶築し
、真空下３５００で蒸発乾固する。

得られた粗製カルボベンジルオキシ−ｙ−Ｌ−グルタミ
ルタウリンをｐＨ６．５で櫨紙電気泳動法により精製す
る。相対移動能（ｒｅｌａｔｉｖｅｍｏｔｉｌｉｔｙ）
（システィン酸に対して）１．０ふＲｆ＝０．５７（餌
−ブタノール「ピリジンｈ氷酢酸及び水のを５きＸＯき
３三筋混合物中）。実施例 Ｘ ５。

７９２（１２。

ｉミリモル）の力ルボベンジルオキシ−ｙ−（食−ペン
ジル）−Ｚーグルタミルタウリン（参考例２に記載の方
法で調製）を１００の（のエタノールと２５私の水の混
合物中に溶解する。０．５夕の１０％パラジウム−炭素
担体触媒を添加しも混合物を振とう下で水素化する。

反応中にさらに触媒を２回（各０．２５多）混合物に添
加するのが有利である。水素の吸収が終ったら触媒を猿
別し〜櫨液を３０℃で真空蒸発し、油状残澄をデシケ−
夕‐で五酸化リン状で乾燥する。３．１夕のｙ−Ｌーグ
ルタミルタウリンが得られる。

この生成物は非常に水溶性が大きいが、アルコールには
不溶性である。これを最小限の量の水にとかし、この溶
液にアルコールを少しづつ添加することによってこれを
結晶化することができる。粗製結晶性物質は２０２〜２
０４ｑｏで溶融する。この生成物を８０％エタノールか
ら数回再結晶する。

２．０２夕（出発のＮ・Ｎ′−ビス−〔Ｎ−カルボベン
ジルオキシーッ−（Ｑ−ペンジル）−Ｌーグルタミル〕
−シスタミンに対して計算して６６％）の精製物が得ら
れる。

ｍ．ｐ．２１９〜２２０００。〔Ｑ〕色。：＋１４ｏ（
水、Ｃ＝１．０２）。猿紙電気泳動法での相対移動能（
システィン酸に対して）はｐＨ６．５で０．７３ ＰＨ
１．８で０．５３である。

Ｒｆ＝０．１９（ｎ−ブタノール、ピリジン、氷酢酸及
び水の１５：１０：３；１２尾合物中）。分析 Ｃ７日
，４Ｎ２０６ＳＭＷ＝２５４．７）計算値：Ｃ３３．０
７％、日５．５５％、ＮＩｌ．０２％、０３７．７５％
、ＳＩ２．６１％実測値：Ｃ３３１５％、日５７６％、
ＮＩＯ．９４％、０３７．５３％、ＳＩ２．１７％実施
例 ２ ２０．４２夕のｙ−（Ｑ−ペンジル）−Ｌ−グルタミル
タウリン（参考例３に記載の方法で調製）を１５０の‘
のＩＮ水酸化カリウム水溶液に溶解する。

この混合物を室温で４時間放置し、その後Ｄｏｗｅｘ５
０×２樹脂（Ｆｌｕｋａ、１００〜２００メッシュ、日
１サイクル）を充填した２×１００伽のカラムに通し、
カラムを水で溶機する。

洗浄工程の開始から３００の上の溶出液を橘集し、これ
を３５℃で真空蒸発する。油状残溝に８〜１０の‘の水
と約１００凧【のヱタノールを加えて結晶を析出させる
。結晶を渡別し、アルコールで洗浄し、乾燥する。１３
．７夕のｙ一Ｌーグルタミルタウリンが得られる。

この生成物を８０％エタノール水から再結晶する。９．
７９夕（Ｎ−Ｎ′ービスー〔Ｎーカルポベンジルオキシ
ーｙ−（Ｑーベンジル）−Ｌーグルタミル〕ーシステア
ミンから計算して７０％）の精製生成物が得られる。

実施例 ３ ５．４２９（１１ミリモル）の力ルボベンジルオキシー
Ｌーグルタミン酸・（Ｑ−ペンジル）ーッ−ｐ一ニトロ
フエニルエステル（Ｃｈｅｍ．段「，９６、２０４／１
９６３）を５０の土のピリジンに溶解する。

この溶液を０℃に冷却し、１．２５夕（１０ミリモル）
のタウリンを２０の‘の水にとかした溶液を激しい鷹洋
下に３び分で滴下添加する。その後３．０８の【（２２
ミリモル）のトリヱチルアミンを混合物に滴下添加し、
冷却と鯛枠を中止する。この混合物を室温で７幼時間放
置し、その後真空蒸発する。残澄を５０肌の水にとかし
、ＩＮ塩酸を黄色の着色が消失するまで溶液に添加する
。ｐ−ニトロフェノールを除去するために溶液を１０×
５０奴のエーテルで洗浄し、水性相を真空蒸発する。６
．９夕のカルボベンジルオキシ一ｙ−（以一ペンジル）
−Ｌ−グルタミルタウリン・トリエチルアンモニウム塩
が得られる。

この化合物を実施例１に記載したようにして接触水素化
し、その後溶媒を真空蒸発し、銭澄を最少量の水にとか
し、この溶液をＤｏｗｅｘ５０×２樹脂を充填した２×
４０伽のカラムに流す。樹脂カラムを水で溶離して、約
１２０の‘の溶出液を捕集し、これを３８０で真空蒸発
する。残澄を結晶化させ、生成物を実施例１のようにし
て精製する。１．７２夕（タウリンに対して計算して６
８％）のｙ一Ｌーグルタミルタウリンが得られる。

実施例 ４ 参考例４に記載の方法で得たカルポベンジルオキシ一ｙ
−Ｌーグルタミルタウリンを、４モルの臭化水素を含有
する２の【の氷酢酸に溶解する。

この混合物を室温で３０分間放置した後、３５３０で真
空蒸発する。残経をエーテルと共に数回つき砕き、エー
テル溶液を鏡捨する。この物質を実施例１に記載の方法
で再結晶するとｙ−Ｌ−グルタミルタウリンが得られる
。実施例 ５ ２５．４の９（０．１ミリモル）のｙ−Ｌ−グルタミル
タウリンを２の【の水にとかした溶液に１０の【の０．
０１Ｎ水酸化ナトリウム水溶液を加え、この混合物を３
５ｑｏで真空黍発乾団する。

白色の結晶性磯澄をデシケーターの中で五酸化リン上で
乾燥する。ｙ−Ｌ−グルタミルタウリンのモノナトリウ
ム塩が得られる。この生成物はメタノールとエタノール
にや）可溶性である。またこの生成物ははっきりした融
点がなく、約２００ｑ０で収縮しはじめ、約２５０℃で
炭化する。参考例 ５ ０．５モル１その塩化水素を含有する無水メタノール１
０机を７．５の９（３０マイクロモル）のッーＬ−グル
タミルタウリンに加え、この懸濁液を室温で２岬時間濃
伴する。

この生成物を降下ペーパークロマトグラフィーで純粋状
態として単離する。Ｒｆ＝０．２７（ｎ−ブタノール、
ピリジン、氷酢酸及び水の１５：１０：３：ＩＺ昆合物
中）；及び０．１４（ｎーブタノール、氷酢酸及び水の
４：１：１混合物中）。参考例 ６ メタノールの代りにエタノールを用いて参考例５の方法
をくり返す。

こうして対応するエチルェステル、すなわちｙ−（Ｑー
エチル）−Ｌーグルタミルタウリンが得られる。Ｒｆ＝
０．３７（ｎーブタノール、ピリジン、氷酢酸及び水の
１５：１０：３：１２混合物中）：及び０．２２（ｎ−
ブタノール、氷酢酸及び水の４：１：１混合物中）。参
考例 ７ ｏ．４８夕（１ミリモル）の力ルボベンジルオキシーＱ
−Ｌ−グルタミル−（ｙ−ｐーニトロフエニルエステル
）ーグリシンエチルエステル（ＡｃｔａＣｈｉｍ．Ａｃ
ａｄ．Ｓｃｉ．Ｈｕｎｇ．６蔓 ３７５／１９７０）を
６の【の酢酸エチルに溶解する。

この溶液を氷水で０℃に冷却し、０．０８夕（１ミリモ
ル）のシステアミンを１の‘のジメチルホルムアミＮこ
とかした溶液を加える。その後、０．１４の‘（１ミリ
モル）のトリェチルアミンをこの溶液に滴下添加する。
沈澱が徐々に分離いまじめる。この反応混合物を氷水中
、次いで室温に１日間放置する。混合物を酢酸エチルと
エーテルの１：１混合物で希釈し、沈澱を遠心分離し、
エーテルと酢酸エチルの４：１混合物で数回「最後にエ
ーテルで１回洗浄する。この沈澱を硫酸上で乾燥し「そ
の後順にＩＮ塩酸で３回、水で２回、飽和重炭酸ナトリ
ウム水溶液で２回、さらに水で２回洗浄し、硫酸上で真
空乾燥する。０．３５夕（８５％）のカルボベンジルオ
キシ−Ｑーグルタミルー（ｙ−システアミン）−グリシ
ンエチルェステルが得られる。

分析 Ｃ，汎２７０６Ｎ３Ｓとして 計算値：Ｃ２５．６％、日６．１％、Ｓ７．８％実測値
：Ｃ５３．４％、日６．５％「Ｓ７。

７％ＩＲスペクトル：固有吸収極大３３１０（ＮＨ入１
７４８（エステルカルポニル）、１６９０（Ｃ＝○、カ
ルボベンジルオキシ）及び１６５５（アミドカルボニル
）肌‐１。

１００雌のカルボベンジルオキシ−Ｑ−Ｌーグルタミル
ー（ｙーシステアミン）ーグリシンエチルェステルを２
泌の氷酢酸にとかし、０．５の‘の３０％過残化水素を
この溶液に添加する。

反応混合物を氷浴中に４時間放置する。反応の進行を電
気泳動で監視する。反応が終了したら、混合物を水で希
釈し、凍結乾燥する。０．１１夕の固体の泡状カルボベ
ンジルオキシ−Ｑ−Ｌーグルタミル（ｙ−タウリン）−
グリシンェチルェステルが得られる。

収率９５％。１００の夕のカルボベンジルオキシ一Ｑ一
Ｌ−グルタミル（ｙ−タウリン）−グリシンヱチルエス
テルを１の‘のトリフルオｏ酢酸と、１の‘の濃塩酸の
混合物にとかす。

この溶液を密封管の中で３９０に３時間保持する。得ら
れた溶液を真空蒸発し「残澄をエーテル及びｎ−へキサ
ンと共に数回つき砕き、最後に最度蒸発を行う。０．０
６夕（聡％）のＱ−Ｌーグルタミル−（ｙータウリン）
ーグリシンが白色の無定形物質として得られる。

電気泳動によるとこの生成物は均質であり、ニンヒドリ
ン反応は陽性である。分析 Ｃ９日，７Ｎ３０７Ｓ（Ｍ
Ｗ＝３１１．３）計算値：ＳＩＯ．３％実測層：ＳＩＯ
．０％ ＩＲスペクトル：固有吸収帯３１００（ブロード、Ｎ＆
＋）、３２００（ブロード、力ルボキシＯＨ）、１７３
０（力ルボキシカルボニル）、１６８０（アミドカルボ
ニル）、１５６０（アミドカルボキシ）、１２２０（強
、スルホン酸Ｓ＝０）及び１０４５（強、スルホン酸Ｓ
＝○）伽‐１。

上記物質２０の２を１の‘の鮒塩酸と混和し、この混合
物を密封管の中で１０５ｑｏに２独特間加熱する。

冷却後、溶液の試料を電気決動に付す。この試料はグル
タミン酸、グリシン及びタウリンを含有している。参考
例 ８ ｏ．４７夕（１ミリモル）の力ルボベンジルオキシ−Ｑ
一Ｌ−グルタミルー（ｙ−ｐーニドロフエニルエステル
）グリシンメチルエステルを６の上のピリジンに溶解す
る。

この溶液を氷俗で冷却し、０．１２５夕（１ミリモル）
のタウリンを２の‘の水にとかした溶液と次いで０．２
８の‘（２ミリモル）のトリェチルアミンとを添加する
。常に透明な溶液を得るように各反応剤は少しづっ添加
すべきである。反応混合物を室温に３日間放置し、その
後真空蒸発する。油状残澄をエーテル及び石油エーテル
と共につき砕き、真空下硫酸上で乾燥する。カルボベン
ジルオキシ一Ｑ一Ｌーグルタミルー（ｙータウリン）ー
グリシンメチルェステルが得られる。得られたカルボベ
ンジルオキシ−Ｑ一Ｌーグルタミル−（ｙータウリン）
ーグリシンエチルエステル１００の９を室温にいて氷酢
酸中のが臭化水素酸４泌で完全な溶解が起るまで（約３
０分間）処理する。

得られた透明な溶液を３０叫のエーテルに投入し、この
混合物を冷たい場所で１日間放置する。分離してきた物
質を遠０分離で取り出し、エーテルで数回洗浄し、真空
下で水酸化カリウム、硫酸及び五酸化リン上でそれぞれ
乾燥する。Ｑ−Ｌ−グルタミル−（ｙータウリン）−グ
リシンエチルェステル臭化水素酸塩が得られる。霞気泳
動では得られた生成物は実際上完全に純粋である。参考
例 ９参考例８により得られた塩を氷で冷却しながら２
の‘のＩＮ水酸化ナトリウム溶液と３時間処理する。

加水分解の進行は霧気泳動で監視する。反応混合物を１
０の‘のＤｏｗｅｘ５０イオン交換体（Ｈ＋型）で処理
し、凍結乾燥する。電気泳動によると、得られた物質は
なお不純物を含有している。この粗生成物を所望の純度
が達成されるまで水性エタノールから数回再結晶する。
４０雌（５９％）のＱ−Ｌ−グルタミルー（ｙ−タウリ
ン）ーグリシンが得られる。

ＩＲスペクトル：固有吸収帯３３１０（ＮＨ）、３１０
０（ブロード、ＮＨゞ）、１７３０（力ルボキシカルボ
ニル）、１６５０（アミドカルボニル）、１５７０（ア
ミドカルボニル）、１２２０（強、Ｓ＝○）及び１０４
５（強）弧‐１。

実施例 ６ １００雌のは一Ｌーグルタミルー（ｙ−タウリン）ーグ
リシン（参考例７または９に記載の方法で調製）を２５
の【の０．２Ｍ重炭酸アンモニウム緩衝液（ｐＨ８．５
）に溶解し、１のりの力ルポキシベプチターゼ（Ｓｅｗ
ａ、Ｈｅｉｄｅｒｂｅｒｇ）０．５の【の水にとかした
溶液を加える。

この混合物を３７０の陣温に２４時間保持し、その後凍
結乾燥する。乾いた残笹はｙ−Ｌーグルタミルタウリン
とグリシンを含有している。この混合物から鰭気泳敷ま
たはＤｂ船ｘ５０イオン交換体を使用したクロマトグラ
フィーでｙ一Ｌ一グルタミルータウリンだけを純粋な状
態で分離することができる。

実施例 ７ １．雌３夕（２．２ミリモル）の力ルボベンジルオキシ
ーＬーグルタミン酸・（Ｑ−ペンジル）−ｙ一Ｐ皿ニト
ロフエニルヱステルを６泌のピリジンー水２：１混合物
に溶解し、２７８Ｍｏ（２ーミリモル）のホモタウリン
と０．５９の‘（４．２ミリモル）のトリェチルアミン
をこの溶液に添加する。

得られた黄色溶液を室温で７独特間放置し、次いで真空
蒸発する。油状残糟を水にとかし、塩酸で中和し、Ｐ−
ニトロフェノールを除去するために連続式の抽出器で８
時間エーテル抽出を行う。水性相を真空蒸発すると、１
．６８夕のカルボベンジルオキシ一ｙ−（Ｑーベンジル
）−Ｌーグルタミルーホモタウリンが得られる。得られ
た生成物の全量を１０叫の５０％エタノール水にとかし
、０．３夕の１０％パラジウム一炭素坦体触媒を添加し
、この懸濁液に水素ガスを４時間バブルさせる。

その後触媒を濃別し、猿液を真空蒸発する。銭澄を１〜
２の‘の水にとかし、Ｄｏｗｅｘ５０×２樹脂（Ｈ＋サ
イクル）をつめた１×３５弧のカラムに通し、カラムを
水で溶離する。

５０の上の溶出液を補集し、この溶液を真空蒸発する。

４４０倣（８２％）のｙ−Ｌーグルタミルホモタウリン
が残澄として得られる。解６．５で行った猿紙電気泳動
によると、この粗生成物は少量の中性及び酸性不純物（
ホモタウリン及びグルタミン酸）を含有している。この
粗生成物は、たとえば櫨紙電気泳動で精製できる。ｐＨ
６．５と１．８で行った櫨紙電気泳敷では、この物質は
常にカソードの方へ移行する。

相対移動能の値（システィン酸に対してはそれぞれ０．
斑と０．５０である。Ｒｆ＝０．１９（ｎーブタノール
、ピリジン、氷酢酸及び水の１５：１０：３：１２昆合
物中）。実施例 ８１．０８３夕（２．２ミリモル）の
力ルポベンジルオキシ−Ｌーグルタミン酸・（ｑ−ペン
ジル）一ｙ−ｐ−ニトロフエニルエステルを２７８雌（
２ミリモル）のＮーメチルタウリンと実施例７記載の方
法で反応する。１．５９夕のカルボベンジルオキシ−ｙ
一（Ｑ−ペンジル）一ＬーグルタミルーＮ−メチルタウ
リンが得られる。

得られた生成物１．９夕を実施例７の後半に記載した方
法で接触水素化する。

４２３雌（７９％）のｙ一ＬーグルタミルーＮ−メチル
タワリンが得られる。

ｐＨ６．５と１．８で行われた猿紙電気泳動ではこの物
質は常にカソードの方へ移行する。

相対移動能の値（システィン酸に対して）はそれぞれ０
．鰯と０．４９である。Ｒｆ＝０．１６（ｎーブタノー
ル、ピリジン、氷酢酸及び水の１５：１０：３：１２尾
合物中）。実施例 ９２．８７夕（６．６ミリモル）の
カルポベンジルオキシ−Ｌーグルタミソ酸・（Ｑ−ペン
ジル）一ｙ−ｐ−ニトロフエニルエステルを２０地のピ
リジンにとかし、１．２５夕（６ミリモル）のＬーシス
テイン酸−水和物を１７の‘の水と１７の上のピリジン
の混合物にとかした溶液を加える。

この混合物に２．６の【（１８．６ミリモル）のトリェ
チルアミンを加え、反応混合物を室温に７幼時間放置す
る。この溶液を３℃で真空蒸発する。残澄を２０の上の
水にとかし、この溶液を濃塩酸で酸性化した後、１５×
１０の‘のエーテルで洗浄する。水性相を３５ｑｏで真
空蒸発する。力ルボベンジルオキシーｙ一（Ｑーベンジ
ル）一１−グルタミル−Ｌ−システィン酸が得られる。
得られた生成物を２０のの水にとかし、０．３夕の１０
％パラジウム−炭素担体触媒を添加し〜 この懸濁液に
水素を３時間バブルさせる。反応混合物を実施例７の後
半に記載したようにして処理してｙ−Ｌ−グルタミル−
１−システィン酸を得る。ｍ．ｐ．１８７０。渡紙電気
泳敷の相対移動能（システィン酸に対して）の値はｐＨ
６．５で１。２１ｔ ＰＨＩ。

８で０。

５４である。

実施例 １０ １。

ｏ８３多（２．２ミリモル）の力ルボベンジルオキシ−
１−グルタミン酸８（公一ベンジル）−ｙ−ｐ−ニトロ
フヱニルェステルピリジンと水の２：１混合物６の‘に
とかし、この溶液に２８２双９（２ミリモル）のコラミ
ンホスフェート（米国特許第２７３０５４２号）と０．
８７叫（６．２ミリモル）のトリェチルアミンを加える
。混合物を室温に７雛時間放置した後「真空蒸発する。
残湾を実施例７に記載したようにして処理する。１．２
５夕のカルボベンジルオキシ−ｙ−ＬＱーベンジル）一
１ーグルタミル−コラミンホスフェートが得られる。

得られた生成物１．２５夕を保護基を除去するために接
触水素化する。

水素化と反応混合物の処理は実施例７の後半と同様であ
る。４７０の９（９１％）のｙ−Ｌ−グルタミルーコラ
ミンホスフェートが得られる。

櫨別電気泳動によると「の物質は不純物として約１５な
いし２０％のコラミンホスフェートを含有している。こ
の粗生成物はたとえは電気泳動で精製できる。ＰＨ６．
５と１．８で行った櫨紙電気泳動ではこの物質は常にカ
ソードの方へ移行する。

相対移動館値（システイン酸に対して）はそれぞれ０．
７５と０．３６である。Ｒｆ＝０．１８（ｎ−プタノー
ル、ピリジン、氷酢酸及び水の１５：１０：３：１２混
合物中）。実施例 １１５２６の９（１．１ミリモル）
の力ルボベンジルオキシーＬ−アスパラギン酸。

（Ｑ−ペンジル）−８−ｐ−ニトロフエニルエステル（
Ｃｈｅｍ．Ｂｅｒ．９７、１７８９／１９６４）と５の
‘のピリジンに溶解する。この溶液を０℃に冷却し、１
２５雌（１ミリモル）のタウリンを２の‘の水にとかし
た溶液を少しづつ添加し、その後０．２８の｛（２ミリ
モル）のトリェチルアミンを加える。反応混合物を室温
に４８時間放置し「その後真空蒸発する。残澄を５の‘
の水にとかし、この溶液に黄色の着色が消えるまでＩＮ
塩酸を滴下添加する。ｐーニトロフヱノールを除去する
ために溶液を１０×５の‘のエーテルで洗浄しｔ水性相
を真空蒸発する。４７８職のカルボベンジルオキシ一８
−（磯一ペンジル）−Ｚ一アスパルチルタウリンが得ら
れる。

得られた生成物の全量を６のとの５０％エタノール水に
溶解し「 １００の９の１０％パラジウム−炭素担体触
媒を加える。

この懸濁液に水素を４時間バブルさせる。触媒を渡別し
、櫨液を真空蒸発する。残薄から実施例７の後半に記載
したよにしてトリェチルアミンを除去する。１７２雌（
７１％）の３−Ｌ−アスパルチルタウリンが得られる。

この生成物は不純物として少量のタゥリンを含有してお
り、これはたとえば電気泳動で除去できる。ＰＨ６．５
と１．８で行った猿紙電気泳動ではこの物質は常にカソ
ードの方へ移動する。相対移動能値（システィン酸に対
して）はそれぞれ０。７７と０．５８である。

Ｒｆ＝０．１６（ｎ−ブタノール、ピリジン「氷酢酸及
び水の１５：１０：３：１２混合物中）。実施例 １２
５２６の９（１．１ミリモル）の力ルポベンジルオキシ
ーＬ−アスパラギン酸・（Ｑ−ペンジル）−８−Ｐーニ
トロフェニルェステルを実施例１１のようにして１３９
の９（１ミリモル）のホモタウリンと反応させると、カ
ルボベンジルオキシ一８一（Ｑ−ペンジル）−１−アス
パルチルホモタゥリンが得られる。

生成物を実施例７の後半の記載の方法で接触水素化する
。

２０３の９の８−Ｌ−アスパルチルホモタウリンが得ら
れる。

収率８４％。ｐＨ６．５と１．８で行った濠紙電気泳動
ではこの物質は常にカソードの方へ移行する。

相対移動能値（システィン酸に対して）は０．７２と０
．５３。Ｒｆ＝０．１７（ｎ−ブタノール、ピリジン、
氷酢酸及び水の１５：１０：３：１２尾合物中）。実施
例 １３ カルポベンジルオキシ−Ｌ−アスパラギン酸・（Ｑーベ
ンジル）８−ｐ一ニトロフエニルエステルを実施例１０
のようにしてコラミンホスフヱートと反応させる。

カルボベンジルオキシ−８一（Ｑーベンジル）−Ｌ−ア
スパルチルコラミンホスフェートが得られる。得られた
物質を実施例７の後半の記載の方法で接触水素化して８
−Ｌ−アスパルチルコラミンホスフェートを得る。

ｐＨ６．５と１．８で行った櫨紙電気泳動ではこの物質
は常にカソードの方へ移行する。

相対移動能値（システィン酸に対して）は０．８１と０
．４０である。Ｒｆ＝０．１４（ｎ−ブタノールＬピリ
ジン、氷酢酸及び水の１５：１０：３：１２尾合物中）
。実施例 １４ 実施例１、２、３、４または６により得られる粗製ｙ−
Ｌーグルタミルタウリンは次のようにして再結晶により
精製できる。

精製物質３００の９を室温で５叫の乾燥ジメチルスルホ
キシドに燈拝しながら溶解する。この乳白色溶液を櫨過
し、櫨蓬を０．５泌の乾燥ジメチルスルホキシドで洗浄
する。櫨液と洗液をいつしよにし、５５の【の無水エタ
ノールを加える。混合物を室温に１２時間放置する。分
離した物質を渡別し、２．５地の無水エタノールで洗浄
し、一定重量になるまで五酸化リンの入った真空デシケ
ーターの中で乾燥する。２４０の９の結晶性シーＬ−グ
ルタミルタウリンが得られる（回収率８０％）。

上記方法で、エタノールの代りの同量の乾燥ジオキサン
、エーテルまたはアセトンを使用できる。

結晶性生成物の純度は常に同じである。ｍ．ｐ．（靴ｅ
ｔｉｕｓ）２１８〜２１９午０。薄層クロマトグラフィ
ーによるところの生成物は均質である。実施例 １５ 力ルボベンジルオキシ−ｙ−（Ｑーベンジル）一Ｌ−グ
ルタミルーコラミンをグルタミン酸ｙ−アミドの調製に
一般に適用できる方法によって調製する。

（ＡｃねＣｈｉｍ．Ａｃａｄ．Ｓｃｉ．Ｈ皿ｇ．６４、
２８５／１９７０）。得られた物質４．１４９を５０の
【の無水ピリジンにとかし、９夕のジフエニルホスホリ
ルクロリドを加える。この混合物を０℃に１２時間保持
し、その後８０泌のクロロホルムで希釈する。析出した
物質を渡別し、希塩酸、次いで水で洗浄し、最後に固体
水酸化カリウムの入ったデジケーターで乾燥する。得ら
れた物質を臭化水素の３．３Ｍ氷酢酸溶液１５Ｍにとか
す。この溶液を１５分間放置した後、３５℃で真空蒸発
する。残澄を固体水酸化カリウム上で乾燥する。乾た物
質を３０泌のＩＮ水酸化ナトリウム溶液にとかし、室温
で１時間放置した後、酢酸でｐＨ４に酸性化し、副生成
物（フェノールとペンジルアルコール）を除去するたに
３×３０の‘のエーテルで抽出する。水性相をＤｏｗｅ
ｘ５０イオン交換体（Ｈ＋サイクル）の入ったカラムに
通し、カラムを水で溶離する。溶出液を真空蒸発し、残
笹をアセトンと水の２：１混合物から再結晶する。０．
８夕のｙ一Ｌ−グルタミルーコラミンホスフェートが得
られる。

Claims (1)

1. 【特許請求の範囲】 １ 一般式（I） ▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、 Ｂ＾１は式−ＳＯ＿２ＯＨまたは−ＯＰＯ（ＯＨ）＿２
   の基であり、Ｒは水素または低級アルキルであり、 Ｒ＾２は水素またはカルボキシであり、 ｎは１または２であり、 ｔは１または２である〕 の化合物またはその塩を製造するにあたり、一般式（I
   I）▲数式、化学式、表等があります▼ 〔式中、 Ａ＾２はアラルコキシ（当該アラルコキシ中のアルキル
   残基は低級アルキルであり、そして、アリール残基はメ
   トキシまたはニトロで置換されていてもよい）または一
   般式−ＮＨＣＨ＿２ＣＯＹ（ここでＹはヒドロキシまた
   は低級アルコキシである）を表わし、Ｒ＾３はアラルコ
   キシカルボニル（当該アラルコキシカルボニル中のアル
   キル残基は低級アルキルであり、アリール残基はメトキ
   シまはニトロで置換されてもよい）を表わし、そしてＢ
   、Ｒ、Ｒ＾２、ｎおよびｔはそれぞれ前記と同義である
   〕の化合物のα−アミノ基およびα−カルボキシ基に結
   合した保護基を酸加水分解、アルカリ加水分解、水添加
   分解または酸素加水分解によって同時にまたは順次離脱
   し、そして所望なら得られた化合物をその塩に変えるこ
   とからなる方法。