JP2016538860A5 - - Google Patents

Claims (20)

1. 親α−アミラーゼの変異体であって、前記変異体は、前記親α−アミラーゼにおける位置３３３に対応する位置に存在するアミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換を含み、前記変異体α−アミラーゼは、前記親α−アミラーゼと比較して、プロテアーゼによるβ−バレルの第７ストランドと第７ヘリックスを連結するループ中の開裂に対する感受性が低減し、配列番号３が位置の番号付けに使用される、変異体。
2. 開裂に対する前記感受性を更に低減するため、前記親α−アミラーゼにおける位置３３５に対応する位置に存在する前記アミノ酸残基の異なるアミノ酸残基への置換を更に含み、配列番号３が位置の番号付けに使用される、請求項１に記載の変異体。
3. 前記親α−アミラーゼが、位置３３３に対応する前記位置にグリシン又はグルタミン以外のアミノ酸残基を有する、請求項１又は２に記載の変異体。
4. 前記親α−アミラーゼが、位置３３３に対応する前記位置にスレオニンを有する、請求項１〜３のいずれか一項に記載の変異体。
5. 前記変異体α−アミラーゼが、位置３３３に対応する前記位置にグリシンへの置換を有する、請求項１〜４のいずれか一項に記載の変異体。
6. 前記親α−アミラーゼが、位置３３５に対応する前記位置にセリン以外のアミノ酸残基を有する、請求項１〜５のいずれか一項に記載の変異体。
7. 前記変異体α−アミラーゼが、位置３３５に対応する前記位置にセリンへの置換を有する、請求項２〜６のいずれか一項に記載の変異体。
8. 前記親に関連して、
   （ｉ）位置１７７、１７８、１７９、及び１８０に対応する位置における１つ又は２つ以上のアミノ酸残基の欠失、
   （ｉｉ）位置１８６に対応する位置に存在するアミノ酸残基の置換、
   （ｉｉｉ）位置４７２に対応する位置に存在するアミノ酸残基の置換、の突然変異のうち、１つ又は２つ以上を更に含み、
   前記変異体が、前記親と比較して洗剤組成物において増大した洗剤安定性及び／又は増大したクリーニング性能を有し、位置の番号付けは配列番号３を参照する、請求項１〜７のいずれか一項に記載の変異体。
9. 前記親に関連して、
   （ｉ）位置１７７、及び１７８に対応する位置におけるアミノ酸残基の欠失、
   （ｉｉ）位置１８６に対応する位置に存在するアミノ酸残基のプロリンへの置換、
   （ｉｉｉ）位置４７２に対応する位置に存在する前記アミノ酸残基のアルギニン又はリシンへの置換、の突然変異のうち、１つ又は２つ以上を更に含み、
   前記変異体が、前記親と比較して洗剤組成物において増大した洗剤安定性及び／又は増大したクリーニング性能を有し、前記位置の番号付けは配列番号３を参照する、請求項１〜８のいずれか一項に記載の変異体。
10. Ｎ１２５、Ｆ１５２、Ｎ２０５、及びＧ４７３からなる群から選択される位置における突然変異を更に含む、請求項１〜９のいずれか一項に記載の変異体。
11. 位置１７７、１７８、１７９、及び１８０に対応する位置における１つ又は２つ以上のアミノ酸残基の欠失を含み、
    （ｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｑ３３７Ｅ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｉｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｑ３３７Ｅ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｉｉｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｑ３３７Ｅ＋Ｇ４７２Ｒ＋Ｇ４７３Ｒ、
    （ｉｖ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｎ２０５Ｄ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｑ３３７Ｅ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｖ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｖｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｖｉｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｇ４７２Ｒ＋Ｇ４７３Ｒ、
    （ｖｉｉｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｎ２０５Ｄ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ａ３３５Ｓ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｉｘ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｘ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ｇ４７２Ｋ、
    （ｘｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ｇ４７２Ｒ＋Ｇ４７３Ｒ、及び
    （ｘｉｉ）Ｎ１２５Ｙ＋Ｆ１５２Ｗ＋Ｅ１８６Ｐ＋Ｎ２０５Ｄ＋Ｔ３３３Ｇ＋Ｇ４７２Ｋからなる群から選択される突然変異の組み合わせを更に含む、請求項１〜１０のいずれかに記載の変異体。
12. 前記親又は前記変異体が、配列番号３に対し少なくとも７０％、少なくとも８０％、又は少なくとも９０％のアミノ酸配列同一性を有するアミノ酸配列を有する、請求項１〜１０のいずれか一項に記載の変異体。
13. 請求項１〜１２のいずれか一項に記載のα−アミラーゼを含む組成物。
14. 界面活性剤を更に含む、請求項１３に記載の組成物。
15. 前記組成物が、洗濯洗剤、洗濯洗剤添加剤、又は手洗い用若しくは自動食器洗い洗剤である、請求項１３又は１４に記載の組成物。
16. プロテアーゼ、へミセルラーゼ、セルラーゼ、ペルオキシダーゼ、脂肪分解酵素、メタロ脂肪分解酵素、キシラナーゼ、リパーゼ、ホスホリパーゼ、エステラーゼ、ペルヒドラーゼ、クチナーゼ、ぺクチナーゼ、ペクチン酸リアーゼ、マンナーゼ、ケラチナーゼ、還元酵素、オキシダーゼ、フェノールオキシダーゼ、リポキシゲナーゼ、リグニナーゼ、プルラナーゼ、タンナーゼ、ペントサナーゼ、マラナーゼ、β−グルカナーゼ、アラビノシターゼ、ヒアルロニダーゼ、コンドロイチナーゼ、ラッカーゼ、メタロプロテイナーゼ、アマドリアーゼ、及びＰｃｕＡｍｙ１以外のα−アミラーゼからなる群から選択される１つ又は２つ以上の追加の酵素、又はそれらの変異体を更に含む、請求項１３〜１５のいずれか一項に記載の組成物。
17. 請求項１〜１２のいずれか一項に記載のポリペプチドをコードする組み換えポリヌクレオチド。
18. 配列番号１の前記ポリヌクレオチドに対し少なくとも８０％の核酸配列同一性を有するか、又は配列番号１の前記ポリヌクレオチドに相補的なポリヌクレオチドとストリンジェントな条件下でハイブリダイズする、請求項１７に記載のポリヌクレオチド。
19. 請求項１７又は１８に記載のポリヌクレオチドを含む発現ベクター。
20. 請求項１９に記載の前記発現ベクターを含む、宿主細胞。