EP3234088A1 - Flüssige tensidzusammensetzung mit spezieller tensidkombination und enzym - Google Patents

Flüssige tensidzusammensetzung mit spezieller tensidkombination und enzym

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EP3234088A1
EP3234088A1 EP15790151.3A EP15790151A EP3234088A1 EP 3234088 A1 EP3234088 A1 EP 3234088A1 EP 15790151 A EP15790151 A EP 15790151A EP 3234088 A1 EP3234088 A1 EP 3234088A1
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EP
European Patent Office
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amino acid
protease
surfactant composition
composition according
enzyme
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EP15790151.3A
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EP3234088B1 (de
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Martina Seiler
Dieter Nickel
Sonja SAHNER
Christian RAMM
Timothy O'connell
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Henkel AG and Co KGaA
Original Assignee
Henkel AG and Co KGaA
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Publication date
Application filed by Henkel AG and Co KGaA filed Critical Henkel AG and Co KGaA
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    • C11D—DETERGENT COMPOSITIONS; USE OF SINGLE SUBSTANCES AS DETERGENTS; SOAP OR SOAP-MAKING; RESIN SOAPS; RECOVERY OF GLYCEROL
    • C11D1/00—Detergent compositions based essentially on surface-active compounds; Use of these compounds as a detergent
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    • C11D1/12—Sulfonic acids or sulfuric acid esters; Salts thereof
    • C11D1/22—Sulfonic acids or sulfuric acid esters; Salts thereof derived from aromatic compounds
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C11D3/00—Other compounding ingredients of detergent compositions covered in group C11D1/00
    • C11D3/16—Organic compounds
    • C11D3/38—Products with no well-defined composition, e.g. natural products
    • C11D3/386—Preparations containing enzymes, e.g. protease or amylase
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
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    • C11D1/12—Sulfonic acids or sulfuric acid esters; Salts thereof
    • C11D1/29—Sulfates of polyoxyalkylene ethers

Definitions

  • the present invention relates to the cleaning of textiles, as well as the provision of liquid compositions for this purpose.
  • liquid detergents are provided in a sufficient amount for several wash loads in storage containers. To carry out a washing process, the consumer removes the necessary for a wash dose of liquid detergent from this
  • the necessary dose is usually determined by measuring the liquid detergent in a measuring cup and then transferred, for example, in the dosing drawer of a washing machine, or placed together with the measuring cup directly into the washing drum of the washing machine.
  • liquid surfactant compositions suitable for the liquid detergents should be easily metered.
  • the liquid surfactant compositions should have a suitable rheology. Too thin compositions are perceived by consumers as more powerful. The reaction of this consumer perception must not lead to too viscous compositions, otherwise the residual emptying of the reservoir is insufficient.
  • the active substances contained in the liquid surfactant composition should also be incorporated in a storage-stable manner and retain the activity via storage.
  • compositions containing alkylbenzenesulfonate anionic surfactant, a specific combination of ethoxylated alkyl sulfates and nonionic surfactant, each in particular amounts and proportions provides a liquid surfactant composition having acceptable rheology and excellent activity of active ingredients incorporated therein, such as enzyme Dimensions guaranteed.
  • liquid surfactant compositions which contain 0.5 to 12% by weight of sodium carbonate, 5 to 35% by weight of a surfactant mixture, in each case based on the total weight of the surfactant mixture
  • Cio-16-alkyl-0- (CH 2 CH 2 0) 7-S03M, 15-55 wt .-% of a compound of formula Cio-16-alkyl-0- (CH2 CH20) 3 -H and
  • a first object of the invention is a liquid surfactant composition containing, based on the total weight of the composition
  • R is a Ci2-is-alkyl group
  • n is a number from 2 to 3 and M is a monovalent cation
  • R 2 is a Ci2-is-alkyl group
  • m is a number from 7 to 8 and M 'is a monovalent cation
  • Range limits are not included. Number ranges defined from one range limit to another range limit include the range limits.
  • Monovalent cations have a charge of 1.
  • composition of the invention is liquid at 25 ° C and 1013 mbar.
  • the surfactant composition according to the invention necessarily contains 2.0 to 8.5% by weight of C 9 -C 20 -alkylbenzenesulfonate, preferably cio-cis-alkylbenzenesulfonate, more preferably C 10 -C 13 -alkylbenzenesulfonate.
  • alkyl is preferably a linear or branched unsubstituted alkyl radical
  • Such highly preferred surfactants a) are selected from linear or branched alkylbenzenesulfonates of the formula a
  • liquid surfactant composition according to the invention necessarily contains a
  • R-O- (CH 2 CH 2 O) n -SO 3 M wherein R is a C 12-18 alkyl group, n is 2 or 3 and M is a monovalent cation stands. It is a Ci2-Ci8-alkyl sulfate with the monovalent counterion M and 2 or 3 moles of ethylene oxide per mole of Ci2-Ci8-alkyl group.
  • n is 2.
  • M is Na + , K + , ⁇ - ⁇ 2 ⁇ 2 ⁇ 3 + , (HO-CH 2 CH 2 ) 3NH + , most preferably Na + .
  • the liquid surfactant composition of the present invention contains a total of from 10.0 to 18.0 weight percent R-O- (CH 2 CH 2 O) 2-SO 3 Na where R is a C 12-18 alkyl group, especially dodecyl.
  • liquid surfactant composition according to the invention necessarily contains a
  • R 2 -O- (CH 2 CH 2 O) m -SO 3 M ' wherein R 2 is a C 12-18 alkyl group, m is 7 or 8 and M' is a monovalent cation is. It is a Ci2-Ci8-alkyl sulfate with the monovalent counterion M and 7 or 8 moles of ethylene oxide per mole of Ci2-Ci8-alkyl group.
  • m is 7. More preferably M 'is Na + , K + , ⁇ - ⁇ 2 ⁇ 2 ⁇ 3 + , (HO-CH 2 CH 2 ) 3NH + , most preferably Na + .
  • the liquid surfactant composition of the present invention contains a total of from 1.0 to 6.0% by weight of R 2 -O- (CH 2 CH 2 O) 7 -SO 3 Na, wherein R 2 is a C 12-18 alkyl group, especially for dodecyl stands.
  • compositions additionally contain soap (s) as anionic surfactant.
  • soap s
  • Soaps are the water-soluble sodium or potassium salts of the saturated and unsaturated fatty acids having from 10 to 20 carbon atoms, the rosin acids of rosin (yellow rosin soaps) and naphthenic acids which are used as solid or semi-solid mixtures mainly for washing and cleaning purposes.
  • Carbon atoms, in particular having 12 to 18 carbon atoms, according to the invention are preferred soaps.
  • Particularly preferred compositions are characterized
  • the surfactant composition according to the invention necessarily contains 2.0 to 10.0% by weight, preferably 2.5 to 7.5% by weight, more preferably 4.0 to 6.0% by weight, of nonionic surfactant.
  • compositions contain at least one nonionic surfactant from the group of fatty alcohol ethoxylates, since these surfactants are also at low
  • Washing temperatures provide high-performance compositions and have excellent cold stability in the case of liquid preparations.
  • compositions additionally contain at least one nonionic surfactant of the formula
  • R 2 is a linear or branched, substituted or unsubstituted alkyl
  • AO for an ethylene oxide (EO) or propylene oxide (PO) grouping
  • n stands for integers from 1 to 50.
  • R 2 is a linear or branched, substituted or unsubstituted alkyl, aryl or alkylaryl radical, preferably a linear, unsubstituted alkyl radical, particularly preferably a fatty alcohol radical.
  • Preferred radicals R 2 are selected from decyl, undecyl, dodecyl, tridecyl, tetradecyl, pentadecyl, hexadecyl, Heptadecyl, octadecyl, nonadecyl, eicosyl and mixtures thereof, with the even number of carbon atoms being preferred.
  • radicals R 2 are derived from C 12-18 fatty alcohols, for example coconut oil fatty alcohol, tallow fatty alcohol, lauryl, myristyl, cetyl or stearyl alcohol or C 10 C 20 oxo alcohols.
  • AO represents an ethylene oxide (EO) or propylene oxide (PO) moiety, preferably an ethylene oxide moiety.
  • EO ethylene oxide
  • PO propylene oxide
  • m is an integer from 1 to 50, preferably from 1 to 20 and especially from 2 to 10. Most preferably, m is the numbers 2, 3, 4, 5, 6, 7 or 8.
  • compositions contain as nonionic surfactant, based on the total amount of the compositions, 2.0 to 10% by weight, preferably 2.5 to 7.5% by weight, more preferably 4.0 to 6.0% by weight.
  • Surfactant composition the weight ratio of the surfactant component a) to
  • Surfactant composition the weight ratio of the surfactant component a) to
  • Surfactant composition the weight ratio of the surfactant component a) to
  • liquid surfactant compositions contain based on the total weight of the composition a) a total amount of 2.0 to 8.5 wt .-% Cio-Ci5-alkyl benzene sulfonate (especially C10-C13 alkyl benzene sulfonate sodium), and
  • R is a Ci2-is-alkyl group and M is a monovalent cation (especially Na + ), and
  • R 2 is a Ci2-is-alkyl group and M 'is a monovalent cation (especially Na + ), and
  • At least one enzyme in particular at least one protease, again the proteases identified below being preferably suitable (vide infra), again preferably one or more of the surfactant weight ratios a) to b), a) to c) or a ) to d) respectively with respect to this embodiment.
  • composition according to the invention necessarily contains water as a solvent. It is inventively preferred, based on the weight of the composition, water in a total amount of 20 to 80 wt .-%, in particular from 30 to 70 wt .-%, most preferably from 40 to 60 wt .-%, use.
  • inventive liquid composition may be added organic solvents.
  • Organic solvents are liquid, dissolve at 20 ° C to at least 1 g in 100 g of distilled water and have at least one covalent bond between carbon and hydrogen in the molecule. It is essential according to the invention, based on the weight of
  • Composition amino-free organic solvents in a total amount of 0 to 10 wt .-%, in particular from 0 to 7.5 wt .-%, use.
  • Suitable amino-free organic solvents include mono- or polyhydric alcohols or glycol ethers, provided that they are miscible with water in the specified concentration range.
  • the amino-group-free organic solvents are preferably selected from ethanol, n-propanol, i-propanol, butanols, glycol, propanediol, butanediol, methylpropanediol, glycerol, diglycol, propyldiglycol, butyldiglycol, hexyleneglycol, ethylene glycol methyl ether, ethylene glycol ethyl ether,
  • Propylene glycol propyl ether dipropylene glycol monomethyl ether, dipropylene glycol monoethyl ether, methoxytriglycol, ethoxytriglycol, butoxytriglycol, 1-butoxyethoxy-2-propanol, 3-methyl-3-methoxybutanol, propylene glycol t-butyl ether, di-n-octyl ether and mixtures of two or more of these aforementioned solvents ,
  • the inventive Composition optionally contains an amino groups-free C2 to C4 alcohol having 1 to 3 hydroxyl groups, in particular ethanol and / or glycerol and / or 1, 2-propanediol.
  • composition of the invention necessarily contains at least one enzyme.
  • Variant is at the level of proteins the term corresponding to "mutant” at the level of the nucleic acids.
  • the precursor or parent molecules may be wild-type enzymes, that is, those obtainable from natural sources. They may also be enzymes which in themselves already represent variants, that is to say to the
  • Wildtype molecules have already been altered. These include, for example, point mutants, those with changes in the amino acid sequence, multiple positions or longer contiguous regions, or else hybrid molecules composed of complementary sections of various wild-type enzymes.
  • Amino acid substitutions are substitutions of one amino acid for another
  • position 320 substitution means that a variant has a different amino acid in the position that has the position 320 in the sequence of a reference protein. Usually, such substitutions occur at the DNA level via mutations
  • R320K means that the reference enzyme at position 320 has the amino acid arginine, while the variant under consideration has the amino acid lysine at the homologizable position.
  • 320K means that any that is, a normally given amino acid at a position corresponding to position 320 is usually replaced with a lysine which is in this molecule in the present molecule.
  • R320K, L means that the amino acid arginine is in position 320 is replaced by lysine or leucine.
  • R320X means that the amino acid arginine at position 320 is replaced with an essentially any other amino acid.
  • amino acid substitutions according to the invention designated by the present application are not limited to being the only substitutions in which the variant in question differs from the wild-type molecule. It is known in the art that the beneficial properties of single point mutations can complement each other. Thus, embodiments of the present invention include all variants which, in addition to other exchanges with the wild-type molecule, also comprise the exchanges according to the invention. Furthermore, it does not matter in principle in which order the relevant amino acid substitutions have been made, that is, whether a corresponding point mutant
  • the enzyme contains at least one protease.
  • a protease is an enzyme that cleaves peptide bonds by hydrolysis.
  • Each of the enzymes from class E.C. 3.4 falls within the scope of the invention (including each of the thirteen subclasses below).
  • the EC number corresponds to the Enzyme Nomenclature 1992 of NC-IUBMB, Academic Press, San Diego, Calif., Including supplements 1 to 5, published in Eur. J. Biochem. 1994, 223, 1-5; Eur. J. Biochem. 1995, 232, 1-6; Eur. J. Biochem. 1996, 237, 1-5; Eur. J. Biochem. 1997, 250, 1-6; and Eur. J. Biochem. 1999, 264, 610-650.
  • Subtilase names a subgroup of serine proteases.
  • the serine proteases or serine peptidases are a subset of the proteases that have serine in the active site of the enzyme that forms a covalent adduct with the substrate.
  • the subtilases and the subtilases (and the subtilases)
  • Serine proteases are characterized by having two more amino acid residues in the active site besides said serine with histidine and aspartame.
  • the subtilases can be divided into 6 subclasses, namely the subtilisin family, the thermitase family, the proteinase K family, the family of lantibiotic peptidases, the kexin family, and the pyrolysin family.
  • the proteases preferably excluded from the compositions according to the invention or preferably contained in reduced amounts are endopeptidases (EC 3.4.21).
  • proteolytic activity is present according to the invention if the enzyme has proteolytic activity (EC 3.4).
  • protease activity types are known: the three main types are:
  • the protease activity can be determined by the method described in Tenside, Vol. 7 (1970), pp. 125-132. It is accordingly stated in PE (protease units).
  • the protease activity of an enzyme can be determined according to customary standard methods, in particular using BSA as substrate (bovine albumin) and / or with the AAPF method.
  • Advantages of the use of this protease thus arise in particular with regard to the washing performance and / or the stability.
  • a surfactant composition comprising as an enzyme at least one protease comprising an amino acid sequence corresponding to that shown in SEQ ID NO. 1 amino acid sequence is identical over at least 70% of their total length and in the count according to SEQ ID NO. 1, the amino acid substitution R99E or R99D in combination with at least two others
  • protease Having amino acid substitutions selected from the group consisting of S3T, V4I and V199I.
  • Said protease is described in the document WO 2013/060621, as well as the method for the production of said protease, comprising the introduction of a
  • Amino acid substitutions selected from the group consisting of S3T, V4I and V199I, in the count according to SEQ ID NO. 1 into an initial protease corresponding to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 indicated amino acid sequence over the total length of which is at least 70% identical.
  • a preferred protease within the meaning of the present patent application therefore comprises both the protease as such and a protease produced by a method according to the invention. All statements on the protease therefore relate both to the protease as a substance and to the corresponding processes, in particular production processes of the protease.
  • nucleic acids coding for these proteases, proteases or nucleic acids containing non-human host cells according to the invention and / or the protease production processes comprising the proteases according to the invention or the preparation process for proteases according to the invention are liquid
  • a modification according to the invention of position 99 namely an alteration R99E or R99D, in connection with a change to at least two of the positions 3, 4 and 199, namely S3T, V4I or V199I, in a protease which has an amino acid sequence as shown in SEQ ID NO. 1 amino acid sequence indicated at least 70% identical amino acid sequence, preferably causes an improved cleaning performance of this modified protease in detergents and cleaners on at least one protease-sensitive soiling.
  • Proteases according to the invention consequently enable an improved removal of at least one, preferably of several protease-sensitive stains on textiles and / or hard surfaces, for example crockery.
  • Particularly advantageous cleaning performances show preferred embodiments according to the invention
  • Preferred embodiments of said surfactant compositions with said preferred soil-specific protease achieve the advantageous cleaning performances at low temperatures between 10 ° C and 60 ° C, between 15 ° C and 50 ° C and between 20 ° C and 40 ° C. Consequently, particularly preferred embodiments of said
  • compositions provided with said preferred soil-specific protease whose cleaning performance targeted with regard to a soiling or more
  • Stains of similar type, in particular at temperatures of at most 25 ° C, particularly preferably at temperatures of at most 20 ° C is advantageous.
  • the spot focus of preferred embodiments of proteases of the invention is blood-borne
  • Surfactant composition preferably used proteases on a particular stability in detergents or cleaners, for example to surfactants and / or bleaches and / or to temperature influences, in particular to high temperatures, for example between 50 and 65 ° C, especially 60 ° C, and / or acidic or alkaline conditions and / or to pH changes and / or to denaturing or oxidizing agents and / or to proteolytic degradation and / or to a change in the redox ratios.
  • Such advantageous embodiments of proteases according to the invention consequently enable improved wash results on protease-sensitive soiling in a wide temperature range.
  • cleaning performance is understood to mean the whitening performance of one or more stains, in particular laundry or dishes.
  • both the washing or cleaning agent which comprises the protease or the washing or cleaning liquor formed by this agent, and the protease itself have a respective cleaning performance.
  • the cleaning performance of the enzyme thus contributes to the cleaning performance of the agent or the washing or cleaning liquor formed by the agent.
  • the cleaning performance is preferably determined as indicated below.
  • the said protease which can preferably be used according to the invention also has a proteolytic activity, that is to say it is capable of hydrolysing peptide bonds of a polypeptide or protein, in particular in a washing or cleaning agent.
  • a preferred protease according to the invention is therefore an enzyme which catalyzes the hydrolysis of peptide bonds and thereby is able to cleave peptides or proteins.
  • the protease preferred according to the invention is preferably a mature protease, ie the catalytically active molecule without signal and / or propeptide (s). Unless otherwise stated, the sequences given refer to each mature enzyme.
  • the protease comprises an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO.
  • Figure 1 has the amino acid substitution R99E in combination with at least two other amino acid substitutions selected from the group consisting of S3T, V4I and V199I.
  • the protease comprises an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO.
  • Figure 1 has the amino acid substitution R99D in combination with at least two other amino acid substitutions selected from the group consisting of S3T, V4I and V199I.
  • proteases according to the invention are:
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO. 1 the
  • Amino acid substitution R99E in combination with the amino acid substitutions S3T and V4I, in particular a protease according to SEQ ID NO. 1 with the amino acid substitutions S3T, V4I and R99E.
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97, 5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO. 1 the
  • Amino acid substitution R99E in combination with the amino acid substitutions S3T and V199I, in particular a protease according to SEQ ID NO. 1 with the amino acid substitutions S3T, R99E and V199I.
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO. 1 the
  • Amino acid substitution R99E in combination with the amino acid substitutions V4I and V199I, in particular a protease according to SEQ ID NO. 1 with the amino acid substitutions V4I, R99E and V199I.
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO. 1 the
  • Amino acid substitution R99D in combination with the amino acid substitutions S3T and V4I, in particular a protease according to SEQ ID NO. 1 with the amino acid substitutions S3T, V4I and R99D.
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO. 1 the
  • Amino acid substitution R99D in combination with the amino acid substitutions S3T and V199I, in particular a protease according to SEQ ID NO. 1 with the amino acid substitutions S3T, R99D and V199I.
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5% and 98.8%, and in the count according to SEQ ID NO. 1 the
  • proteases according to the invention are characterized in that they have the amino acid substitution R99E or R99D in combination with the three further amino acid substitutions S3T, V4I and V199I.
  • the following proteases are very particularly preferred in this regard:
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% and 98.5%, and in the count according to SEQ ID NO.
  • the protease of SEQ ID NO. 2 is a protease which can be used very particularly preferably in the surfactant composition according to the invention.
  • a protease comprising an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 1 at least 71%, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81%, 82%, 83%, 84%, of their total length. 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98% and 98.5%, and in the count according to SEQ ID NO.
  • proteases as described above which are furthermore located at position 21 1 in the count according to SEQ ID NO. 1 have the amino acid leucine (L).
  • sequence comparison is based on the BLAST algorithm established and commonly used in the prior art (see, for example, Altschul, SF, Gish, W., Miller, W., Myers, EW & Lipman, DJ. (1990) "Basic local alignment search Biol. 215: 403-410; and Altschul, Stephan F., Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Hheng Zhang, Webb Miller, and David J.
  • Lipman (1997): "Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs"; Nucleic Acids Res., 25, pp.3389-3402) and is in principle accomplished by similar sequences of nucleotides or amino acids in the nucleic acid or amino acid sequences of each other be assigned. A tabular assignment of the respective positions is referred to as alignment.
  • Another algorithm available in the prior art is the FASTA algorithm. Sequence comparisons (alignments), in particular multiple sequence comparisons, are created with computer programs.
  • Identity and / or homology information can be made about whole polypeptides or genes or only over individual regions. Homologous or identical regions of different nucleic acid or amino acid sequences are therefore defined by matches in the sequences. Such areas often have identical functions. They can be small and comprise only a few nucleotides or amino acids. Often, such small regions exert essential functions for the overall activity of the protein. It may therefore be useful to relate sequence matches only to individual, possibly small areas. Unless otherwise indicated, identity or homology information in the present application, however, refers to the total length of the particular nucleic acid or amino acid sequence indicated.
  • the protease is characterized in that its purification performance corresponds at least to that of a protease which comprises an amino acid sequence which corresponds to the amino acid sequence shown in SEQ ID NO. 2 corresponds to the amino acid sequence indicated, and / or at least corresponds to that of a protease, the one
  • Amino acid sequence comprising the in SEQ ID NO. 3 corresponds to the amino acid sequence, wherein the cleaning performance is determined in a washing system, the
  • Blood on cotton Product No. 1 1 1 available from the company Eidgenössische Material- und Anlagentician (EMPA) Test materials AG, St. Gallen, Switzerland, determined by measuring the Whiteness of the washed textiles, the washing process for 70 minutes at a temperature of 40 ° C and the water has a water hardness between 15.5 and 16.5 ° (German hardness).
  • the concentration of the protease in the detergent intended for this washing system is from 0.001-0, 1 wt .-%, preferably from 0.01 to 0.06 wt .-%, based on active protein.
  • liquid surfactant compositions according to the invention contain as enzyme at least one enzyme selected from ⁇ -amylase, cellulase, mannanase, lipase, pectate lyase.
  • the enzymes contained in a composition according to the invention can be adsorbed to carriers and / or embedded in encapsulating substances in order to protect them against premature inactivation.
  • compositions according to the invention may be added to the resulting enzymes in any form known in the art. These include in particular by
  • the enzymes can also be encapsulated, for example by
  • a, preferably natural polymer or in the form of capsules for example those in which the enzymes are entrapped as in a solidified gel, or in those of the core-shell type, in which an enzyme-containing core with a Water, air and / or chemical impermeable protective layer is coated.
  • further active ingredients for example stabilizers, emulsifiers, pigments, bleaches or dyes, may additionally be applied.
  • Such capsules are prepared by methods known per se, for example by shaking or
  • Roll granulation or applied in fluid-bed processes are advantageously, such granules, for example by applying polymeric film-forming agent, low in dust and storage stable due to the coating.
  • the liquid surfactant compositions preferably additionally contain at least one cellulase.
  • a cellulase is an enzyme.
  • synonymous terms may be used, especially endoglucanase, endo-1,4-beta-glucanase, carboxymethylcellulase, endo-1,4-beta-D-glucanase, beta-1,4-glucanase, beta-1,4-endoglucan hydrolase , Celludextrinase or Avicelase.
  • Crucial for determining whether an enzyme is a cellulase according to the invention is its ability to hydrolyze 1, 4-.beta.-D-glucosidic bonds in cellulose.
  • Cellulases (endoglucanases, EG) which can be synthesized according to the invention comprise, for example, the fungal cellulase preparation rich in endoglucanase (EG) or its derivatives Further developments by the company Novozymes under the trade name
  • Celluzyme® is offered. Endolase® and Carezyme®, also available from Novozymes, are based on the 50 kD EG or 43 kD EG from Humicola insolens DSM 1800. Further commercial products of this company are Cellusoft®, Renozyme® and Celluclean®. Continue to be used, for example
  • Ecostone® and Biotouch® which are based at least in part on the 20 kD EG from Melanocarpus.
  • Other cellulases from AB Enzymes are Econase® and Ecopulp®.
  • Other suitable cellulases are from Bacillus sp. CBS 670.93 and CBS 669.93, those derived from Bacillus sp. CBS 670.93 is available from the company Danisco / Genencor under the trade name Puradax®.
  • Other usable commercial products of the company Danisco / Genencor are "Genencor detergent cellulase L" and lndiAge®Neutra.
  • variants of these enzymes obtainable by point mutations can be used according to the invention.
  • Particularly preferred cellulases are Thielavia terrestris cellulase variants disclosed in International Publication WO 98/12307, cellulases from Melanocarpus, in particular Melanocarpus albomyces disclosed in International Publication WO 97/14804, EGIII-type cellulases from Trichoderma reesei in European Patent Application EP 1 305 432 or variants obtainable therefrom, in particular those disclosed in European Patent Applications EP 1240525 and EP 1305432, as well as cellulases disclosed in International Publication Nos. WO 1992006165, WO 96/29397 and WO 02/099091.
  • the respective disclosure is therefore expressly referred to, or the disclosure content of which in this respect is therefore expressly included in the present patent application.
  • compositions according to the invention are characterized in that as additional cellulase at least one cellulase from Melanocarpus sp. or Myriococcum sp. 20K cellulase or those having homology in excess of 80% (more preferably greater than 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90%) , 5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5 %, 97%, 97.5%, 98%, 98.5%, 99.0%, 99.1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99, 6%, 99.7%, 99.8%, 99.9%).
  • K20 cellulase is preferably used in amounts such that a composition of the present invention has a cellulolytic activity of from 1 NCU / g to 500 NCU / g (determinable by the hydrolysis of 1 wt% carboxymethylcellulose at 50 ° C and neutral pH and determination of the reducing Sugar by dinitrosalicylic acid as described by MJ Bailey, et al., Enzyme Microb., Technol., 3: 153 (1981); 1 NCU defines the amount of enzyme which produces reducing sugars in an amount corresponding to 1 nmol of glucose per second), in particular 2 NCU / g to 400 NCU / g and more preferably from 6 NCU / g to 200 NCU / g.
  • the composition according to the invention may optionally contain further cellulases.
  • a composition according to the invention preferably contains from 0.001 mg to 0.5 mg, in particular from 0.02 mg to 0.3 mg, of cellulolytic protein per gram of the total
  • the protein concentration can be determined by known methods, for example the bicinchonic acid method (BCA method, Pierce Chemical Co., Rockford, IL) or the biuret method (Gornall AG, CS Bardawill and MM David, J. Biol. Chem. 177, 751-766, 1948).
  • BCA method Pierce Chemical Co., Rockford, IL
  • biuret method Garnall AG, CS Bardawill and MM David, J. Biol. Chem. 177, 751-766, 1948.
  • first cellulase from Melanocarpus sp. or Myriococcum sp. 20K cellulase or those having homology in excess of 80% (more preferably greater than 81%, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90%) , 5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94.5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5 %, 97%, 97.5%, 98%, 98.5%, 99.0%, 99, 1%, 99.2%, 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99, 6%, 99.7%, 99.8%, 99.9%) have at least one more of the first cellulase
  • Surfactant compositions additionally contain at least one lipase.
  • Lipase enzymes preferred according to the invention are selected from at least one enzyme of the group which is formed from triacylglycerol lipase (E.C 3.1 .1.3) and lipoprotein lipase (E.C 3.1.1.34) and monoglyceride lipase (E.C. 3.1.1.23).
  • compositions according to the invention are used in particular for this purpose.
  • lipases which are active in the alkaline medium are used in particular for this purpose.
  • the lipase preferably contained in a composition according to the invention is naturally present in a microorganism of the species Thermomyces lanuginosus or Rhizopus oryzae or Mucor javanicus or derived from the aforementioned naturally occurring lipases by mutagenesis.
  • the compositions according to the invention comprise at least one lipase naturally present in a microorganism of the species Thermomyces lanuginosus or naturally occurring in the above-mentioned
  • Thermomyces lanuginosus lipases derived by mutagenesis Thermomyces lanuginosus lipases derived by mutagenesis.
  • the lipase is a separate enzyme of the microorganism.
  • the lipase can thus be expressed in the microorganism from a nucleic acid sequence which is part of the chromosomal DNA of the microorganism in its wild-type form. It or the coding for them nucleic acid sequence is therefore present in the wild-type form of the microorganism and / or may be from the wild-type form of the
  • Microorganism can be isolated from this. In contrast, one would not be
  • Nucleic acid sequence was introduced by genetic engineering methods into the microorganism targeted, so that the microorganism would have been enriched to the lipase or the coding for them nucleic acid sequence.
  • a lipase naturally present in a microorganism of the species Thermomyces lanuginosus or Rhizopus oryzae or Mucor javanicus may well have been produced recombinantly from another organism.
  • the fungus Thermomyces lanuginosus (also known as Humicola lanuginosa) belongs to the class of Eurotiomycetes (subclass Eurotiomycetidae), herein to the order of the Eurotiales and herein to the family Trichocomaceae and the genus Thermomyces.
  • the fungus Rhizopus oryzae belongs to the class of Zygomycetes (subclass Incertae sedis), herein to the order Mucorales and here again to the family Mucoraceae and the genus Rhizopus.
  • the fungus Mucor javanicus also belongs to the class of Zygomycetes (subclass Incertae sedis), herein to the order Mucorales and here again to the family Mucoraceae, then herein to the genus Mucor.
  • the names Thermomyces lanuginosus, Rhizopus oryzae and Mucor javanicus are biological
  • Preferred lipases according to the invention are the lipase enzymes obtainable from the company Amano Pharmaceuticals under the names Lipase M-AP10®, Lipase LE® and Lipase F® (also Lipase JV®).
  • the Lipase F® is naturally present in Rhizopus oryzae.
  • the lipase M-AP10® is naturally present in Mucor javanicus.
  • compositions of a most preferred embodiment of the invention contain at least one lipase selected from at least one or more polypeptides having an amino acid sequence that is at least 90% (and more preferably at least 81%, 82%, 83%, 84%, 85%) %, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90.5%, 91%, 91, 5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94 , 5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5%, 99.0%, 99.1%, 99.2% , 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99.6%, 99.7%, 99.8%, 99.9%) is identical to the wild type lipase from strain DSM 4109 Thermomyces lanuginosus. It is again preferred if, starting from said wild-type lipase from strain DSM 4109, at least the amino acid change N233R is present.
  • lipases derived from the wild-type lipase from the strain DSM 4109 are preferably usable according to the invention, which are selected from at least one lipase enzyme according to at least one of
  • compositions of the invention at least one lipase derived from the wild-type lipase of strain DSM 4109 in which at least one substitution of an electrically neutral or negatively charged amino acid by a positively charged amino acid has taken place from said wild-type lipase.
  • the charge is determined in water at pH 10.
  • Negative amino acids in the sense of the invention are E, D, Y and C.
  • Positively charged amino acids in the sense of the invention are R, K and H, in particular R and K.
  • Neutral amino acid in the sense of the invention are G, A, V, L, I. , P, F, W, S, T, M, N, Q and C when C forms a disulfide bond.
  • a most preferred lipase is commercially available under the trade name Lipex® from the company Novozymes (Denmark) and can advantageously be used in the cleaning compositions according to the invention.
  • Particularly preferred here is the lipase Lipex® 100 L (ex Novozymes A / S, Denmark).
  • Preferred compositions are characterized in that, based on the total weight of the composition, said Lipase enzyme from Lipex® 100 L in a total amount of 0.01 to 1.0% by weight, in particular 0.02 to 0.1% by weight. %, is included.
  • compositions of the invention may additionally contain at least one mannanase as enzyme.
  • mannanase as enzyme.
  • One in the composition of the invention (especially in a Mannanase contained within the scope of its mannanase activity catalyses the hydrolysis of 1, 4-beta-D-mannosidic bonds in mannans, galactomannans, glucomannans and galactoglucomannans according to the present invention as preferred washing and cleaning agents for textiles).
  • Said mannanase enzymes according to the invention are named according to enzyme nomenclature as E.C. Classified 3.2.1.78.
  • the mannanase activity of a polypeptide or enzyme can according to literature
  • Test methods are determined.
  • a test solution is placed in 4 mm diameter holes of an agar plate containing 0.2% by weight of AZGL galactomannan (carob), i.
  • compositions according to the invention include, for example, the mannanase, which is marketed under the name Mannaway® by the company Novozymes.
  • WO 99/64619 discloses examples of high total surfactant liquid protease-containing detergent compositions of at least 20% by weight which additionally comprise mannanase enzyme.
  • compositions according to the invention contain, based on the total weight of the composition, mannanase in a total amount of from 0.01 to 1.0% by weight, in particular from 0.02 to 0.1% by weight.
  • Mannanase polypeptides from strains of the Thermoanaerobacter group, such as Caldicellulosiruptor are preferably suitable according to the invention. Also useful in the invention are mannanase polypeptides of the fungi Humicola or Scytalidium, in particular the species Humicola insolens or Scytalidium thermophilum.
  • the mannanase enzyme compositions according to the invention comprise at least one mannanase polypeptide from Gram-positive alkalophilic strains of Bacillus, in particular selected from at least one member of the group from Bacillus subtilis, Bacillus lentus, Bacillus clausii, Bacillus agaradhaerens, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis, Bacillus cheniformis, and Bacillus sp., more preferably selected from at least one member of the group from Bacillus sp.
  • a preferred mannanase of the invention is selected from at least one member of the group that is formed
  • polypeptides comprising an amino acid sequence which is at least 90% (more preferably at least 90.5%, 91%, 91.5%, 92%, 92.5%, 93%, 93.5%, 94%, 94%) , 5%, 95%, 95.5%, 96%, 96.5%, 97%, 97.5%, 98%, 98.5%, 99.0%, 99, 1%, 99.2% , 99.3%, 99.4%, 99.5%, 99.6%, 99.7% or 99.8%) Sequence identity to the polypeptide according to SEQ ID No.1 (cf.
  • polypeptides which are a fragment of (i).
  • said preferred mannanase in a total amount of 0.01 to 1, 0 wt .-%, in particular from 0.02 to 0, 1 wt .-%, each based on the total weight of the composition in the The composition of the invention is included.
  • the liquid surfactant composition of the invention contains, in addition to the preferred protease of the alkaline protease type from Bacillus lentus DSM 5483 or, in addition to the sufficiently similar protease (in terms of sequence identity), which has several of these changes in combination, additionally at least one ⁇ -amylase , ⁇ -Amylases (E.C. 3.2.1 .1) hydrolyze internal ⁇ -1, 4-glycosidic bonds of starch and starch-like polymers as an enzyme.
  • This ⁇ -amylase activity is measured, for example, according to the applications WO 97/03160 A1 and GB 1296839 in KNU (Kilo Novo Units). This is 1 KNU for the amount of enzyme, the 5.25 g of starch (available from Merck, Darmstadt, Germany) per hour at 37 ° C, pH 5.6 and in the presence of 0.0043 M
  • An alternative activity determination method is the so-called DNS method, which is described, for example, in the application WO 02/10356 A2. Thereafter, the oligosaccharides, disaccharides and glucose units released by the enzyme in the hydrolysis of starch are accompanied by oxidation of the reducing ends
  • Dinitrosalic acid detected.
  • the activity is obtained in ⁇ reducing sugars (based on maltose) per min and ml; This results in activity values in TAU.
  • the same enzyme can be determined by various methods, with the respective
  • Conversion factors may vary depending on the enzyme and thus must be determined by a standard. As an approximation one can calculate that 1 KNU corresponds to approx. 50 TAU. Another activity determination method is measurement using the Quick-Start ® test kit from Abbott, Abott Park, Illinois, USA.
  • Surfactant compositions is the cleaning of textiles. Because washing and cleaning agents for textiles predominantly have alkaline pH values, in particular a-amylases which are active in the alkaline medium are used for this purpose. Such are from microorganisms, that is Fungi or bacteria, especially those of the genera Aspergillus and Bacillus produced and secreted. Based on these natural enzymes, there is still a near-term
  • Examples of these are the ⁇ -amylases from Bacillus licheniformis, from B. amyloliquefaciens and from B. stearothermophilus, as well as their further developments improved for use in detergents or cleaners.
  • the enzyme from B. licheniformis is available from Novozymes under the name Termamyl ® and from Genencor under the name Purastar® ® ST.
  • ⁇ -amylases from other organisms are further developments available under the trade names Fungamyl.RTM ® by Novozymes of ⁇ -amylase from Aspergillus niger and A. oryzae.
  • Fungamyl.RTM ® Novozymes of ⁇ -amylase from Aspergillus niger and A. oryzae.
  • Another commercial product is, for example, the amylase LT®.
  • WO 96/23873 A1 describes in part several different point mutations in a total of more than 30 different positions in four different wild-type amylases and claims those for all amylases with at least 80% identity to one of these four; they are said to have altered enzymatic properties in terms of thermal stability, oxidation stability and calcium dependence.
  • the application WO 00/60060 A2 also names a plurality of possible amino acid substitutions in 10 different positions on the ⁇ -amylases from two different microorganisms and claims such for all amylases with a homology of at least 96% identity to them.
  • WO 01/66712 A2 finally, refers to 31 different, in part with the aforementioned identical amino acid positions that have been mutated in one of the two mentioned in the application WO 00/60060 A2 ⁇ -amylases.
  • WO 96/23873 A1 concretely suggests the possibility of substituting an M in position 9 according to the count of AA560 for an L in the abovementioned ⁇ -amylases, in position 202 M for L and in positions 182 and 183 ( or 183 and 184) to delete lying amino acids.
  • WO 00/60060 A2 discloses, inter alia, specifically the
  • Amino acid variation N 195X (that is, in principle against any other amino acid).
  • WO 01/66712 A2 discloses, inter alia, the amino acid variants R1 18K, G186X (including in particular the not relevant here G186R exchange), N299X (including in particular the not relevant here replacement N299A), R320K, E345R and R458K.
  • the liquid surfactant composition of the invention additionally contains at least one ⁇ -amylase , which has a higher activity at temperatures between 10 and 20 ° C, as the amylase with the trade name "Stainzyme 12 L" from Novozymes.
  • compositions preferred according to the invention comprise ⁇ -amylase in a total amount of 0.01 to 1.0% by weight, in particular 0.02 to 0.1% by weight.
  • liquid surfactant composition additionally contains at least one polyalkoxylated polyamine.
  • the polyalkoxylated polyamine in the context of the present invention and its individual aspects is a polymer having an N-atom-containing backbone which carries polyalkoxy groups on the N atoms.
  • the polyamine has at the ends (terminus and / or side chains) primary amino functions and internally preferably both secondary and tertiary amino functions; if appropriate, it may also have only secondary amino functions on the inside, so that the result is not a branched-chain but a linear polyamine.
  • the ratio of primary to secondary amino groups in the polyamine is preferably in the range from 1: 0.5 to 1: 1.5, in particular in the range from 1: 0.7 to 1: 1.
  • the ratio of primary to tertiary amino groups in the polyamine is preferably in the range from 1: 0.2 to 1: 1, in particular in the range from 1: 0.5 to 1: 0.8.
  • the polyamine has an average molecular weight in the range of 500 g / mol to 50,000 g / mol, in particular from 550 g / mol to 5000 g / mol.
  • the N atoms in the polyamine are separated from one another by alkylene groups, preferably by alkylene groups having 2 to 12 C atoms, in particular 2 to 6 C atoms, wherein not all alkylene groups must have the same C atom number. Particularly preferred are ethylene groups, 1, 2-propylene groups, 1, 3-propylene groups, and their
  • PEI polyethyleneimine
  • the primary amino functions in the polyamine can carry 1 or 2 polyalkoxy groups and the secondary amino functions 1 polyalkoxy group, although not every amino function must be alkoxy group-substituted.
  • the average number of alkoxy groups per The primary and secondary amino function in the polyalkoxylated polyamine is preferably 1 to 100, in particular 5 to 50.
  • the alkoxy groups in the polyalkoxylated polyamine are preferably polypropoxy groups which are bonded directly to N atoms, and / or polyethoxy groups which are attached to existing propoxy and bound to N atoms, which do not carry propoxy groups.
  • Polyethoxylated polyamines are obtained by reacting polyamines with ethylene oxide (EO for short).
  • EO ethylene oxide
  • the polyalkoxylated polyamines containing ethoxy and propoxy groups are preferably accessible by reaction of polyamines with propylene oxide (abbreviated to PO) and subsequent reaction with ethylene oxide.
  • PO propylene oxide
  • the average number of propoxy groups per primary and secondary amino function in the polyalkoxylated polyamine is preferably 1 to 40, in particular 5 to 20,
  • the average number of ethoxy groups per primary and secondary amino function in the polyalkoxylated polyamine is preferably 10 to 60, especially 15 to 30.
  • the terminal OH function polyalkoxy substituents in the polyalkoxylated polyamine may be partially or completely etherified with a C 1 -C 10, in particular C 1 -C 3, alkyl group.
  • Polyalkoxylated polyamines which are particularly preferred according to the invention can be selected from polyamine reacted with 45EO per primary and secondary amino function, PEI's reacted with 43EO per primary and secondary amino function, PEI's reacted with 15EO + 5PO per primary and secondary amino function, PEI's reacted with 15PO + 30EO per primary and secondary amino function secondary amino function, PEI's reacted with 5PO + 39.5EO per primary and secondary amino function, PEI's reacted with 5PO + 15EO per primary and secondary amino function, PEI's reacted with 10PO + 35EO per primary and secondary amino function, PEI's reacted with 15PO + 30EO per primary and secondary amino function secondary amino function and PEI's reacted with 15PO + 5EO per primary and secondary amino function.
  • a most preferred alkoxylated polyamine is PEI containing 10 to 20 nitrogen atoms reacted with 20 units of EO per primary or secondary amino function of the polyamine.
  • a further preferred subject of the invention is the use of polyalkoxylated
  • Polyamines obtainable by reaction of polyamines with ethylene oxide and
  • propylene oxide Be with ethylene oxide and propylene oxide
  • the proportion of propylene oxide in the total amount of the alkylene oxide is preferably 2 mol% to 18 mol%, especially 8 mol% to 15 mol%.
  • the liquid composition based on the total weight thereof, preferably contains polyalkoxylated polyamines in a total amount of from 0.1 to 10% by weight, in particular from 0.5 to 5.0% by weight.
  • the liquid surfactant compositions according to the invention may contain further ingredients which further improve the performance and / or aesthetic properties of the detergent.
  • the composition according to the invention preferably additionally contains one or more substances from the group of bleaches, complexing agents, builders, electrolytes, pH regulators, perfumes, perfume carriers, fluorescers, dyes, hydrotropes, foam inhibitors, silicone oils, polymeric thickeners, antiredeposition agents,
  • Anti-shrinkage agents include color transfer inhibitors, antimicrobial agents, germicides, fungicides, antioxidants, preservatives, corrosion inhibitors, antistatic agents, bittering agents, ironing aids, repellents and impregnating agents, swelling and anti-slip agents, plasticizing components and UV absorbers.
  • a polymeric thickener is understood according to the invention to mean a polymeric compound which has an average molar mass (weight average M w ) of more than 1500 g / mol and which, in an amount of 0.1 wt
  • composition increased.
  • a polymeric thickener apply according to the invention
  • polyacrylates include polyacrylate or polymethacrylate thickeners, such as, for example, the high molecular weight homopolymers of acrylic acid crosslinked with a polyalkenyl polyether, in particular an allyl ether of sucrose, pentaerythritol or propylene (INCI name according to the International Dictionary of Cosmetic Ingredients, The Cosmetic, Vol. Toiletry and Fragrance Association (CTFA): Carbomer), also known as
  • Carboxyvinyl polymers Such polyacrylic acids are i.a. from the company 3V Sigma under the trade name Polygel®, e.g. Polygel DA, and from the company Noveon under the trade name Polygel®, e.g. Polygel DA, and from the company Noveon under the trade name Polygel®, e.g. Polygel DA, and from the company Noveon under the trade name Polygel®, e.g. Polygel DA, and from the company Noveon under the
  • Carbopol® available, eg Carbopol 940 (molecular weight about 4,000,000), Carbopol 941 (molecular weight about 1 250,000) or Carbopol 934 (molecular weight about 3,000,000).
  • acrylic acid copolymers are included: (i) Copolymers of two or more monomers from the group of acrylic acid, methacrylic acid and their simple ester, preferably formed with C 1-4 -alkanols (INCI acrylates copolymer), for example the copolymers of Methacrylic acid, butyl acrylate and methyl methacrylate (CAS designation according to Chemical Abstracts Service: 25035-69-2) or of butyl acrylate and methyl methacrylate (CAS 25852-37-3) belong and, for example, the company Rohm & Haas under the trade names Aculyn® and Acusol® as well as from the company Degussa (Goldschmidt) under the trade name Tego® polymer, eg the ani
  • the liquid composition based on the total weight of the composition, comprises polymeric thickeners in a total amount of from 0 to 0.1% by weight, in particular from 0 to 0.05% by weight, more preferably from 0 to 0.01 Wt .-% contains. Most preferably, the composition is free of polymeric
  • a bleaching agent can serve all substances that destroy or absorb dyes by oxidation, reduction or adsorption and thereby discolor materials. These include, among others, hypohalite-containing bleach, hydrogen peroxide, perborate, percarbonate,
  • Peroxoacetic acid diperoxoazelaic acid, diperoxododecanedioic acid and oxidative enzyme systems.
  • Suitable builders which may be present in the composition according to the invention are in particular silicates, aluminum silicates (in particular zeolites), carbonates, salts of organic di- and polycarboxylic acids and mixtures of these substances.
  • Organic builders which may be present in the composition according to the invention are, for example, the polycarboxylic acids which can be used in the form of their sodium salts, polycarboxylic acids meaning those carboxylic acids which carry more than one acid function.
  • polycarboxylic acids meaning those carboxylic acids which carry more than one acid function.
  • these are citric acid, adipic acid, succinic acid, glutaric acid, malic acid, tartaric acid, maleic acid, fumaric acid, sugar acids, aminocarboxylic acids, and mixtures of these.
  • Preferred salts are the salts of polycarboxylic acids such as
  • Citric acid Citric acid, adipic acid, succinic acid, glutaric acid, tartaric acid, sugar acids and
  • polymeric polycarboxylates are suitable. These are, for example, the alkali metal salts of polyacrylic acid or polymethacrylic acid, for example, those having a molecular weight of 600 to 750,000 g / mol.
  • Suitable polymers are, in particular, polyacrylates, which preferably have a molecular weight of from 1, 000 to 15, 000 g / mol. Because of their superior solubility, the short-chain polyacrylates, which have molecular weights of from 1,000 to 10,000 g / mol, and particularly preferably from 1,000 to 5,000 g / mol, may again be preferred from this group. Also suitable are copolymeric polycarboxylates, in particular those of acrylic acid with methacrylic acid and of acrylic acid or methacrylic acid with maleic acid. To improve the water solubility, the polymers may also contain allylsulfonic acids, such as allyloxybenzenesulfonic acid and methallylsulfonic acid, as a monomer.
  • Soluble builders such as, for example, citric acid, or acrylic polymers having a molar mass of from 1,000 to 5,000 g / mol are preferably used in the liquid compositions according to the invention.
  • a second subject of the invention is the use of a liquid surfactant composition of the first subject of the invention in a process for textile laundering.
  • a third object of the invention is a process for textile washing, comprising the
  • a wash liquor is at least the total amount of the components used under (i) and (iii).
  • Processes for textile cleaning are generally distinguished by the fact that various cleaning-active substances are applied to the items to be cleaned and washed off after the contact time, or that the items to be cleaned are treated in any other way with a composition of the first subject of the invention or a solution of this composition. It is preferred according to the invention if, as part of a pretreatment of textiles, first at selected parts of the textile at least part of said liquid composition is applied directly and then after a contact time (preferably 30 to 300 seconds) the at least one solvent from step (ii ), the rest of the textiles from step (iii) and optionally the remainder of said liquid composition to provide the wash liquor.
  • a contact time preferably 30 to 300 seconds
  • washing liquor is supplied with the at least one solvent of the process according to the invention, then it is preferred according to the invention to combine one part by volume of the said liquid composition with 5 to 3000 parts by volume of the at least one solvent.
  • liquid detergent composition was prepared by mixing:
  • the detergents had acceptable rheology, were storage stable (no phase separation or turbidity), and the protease had high activity even after storage.

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Abstract

Flüssige Tensidzusammensetzungen, enthaltend bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung a) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 8,5 Gew.-% C9-C20-Alkylbenzolsulfonat, und b) eine Gesamtmenge von 10,0 bis 18,0 Gew.-% R1-O-(CH2CH2O)n-SO3M, worin R1 für eine C12-18-Alkylgruppe steht, n für eine Zahl von 2 bis 3 steht und M für ein einwertiges Kation steht, und c) eine Gesamtmenge von 1,0 bis 6,0 Gew.-% R2-O-(CH2CH2O)m-SO3M', worin R2 für eine C12-18-Alkylgruppe steht, m für eine Zahl von 7 bis 8 steht und M' für ein einwertiges Kation steht, und d) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 10,0 Gew.-% nichtionisches Tensid, und e) Wasser, und f) mindestens ein Enzym, besitzen eine für den Verbraucher akzeptable Rheologie, sind lagerstabil und ideal zur Stabilisierung von Enzymen, wie insbesondere Proteasen, geeignet.

Description

„Flüssige Tensidzusammensetzung mit spezieller Tensidkombination und Enzym"
Die vorliegende Erfindung betrifft die Reinigung von Textilien, sowie die Bereitstellung flüssiger Zusammensetzungen für diesen Zweck.
Üblicherweise werden Flüssigwaschmittel in einer für mehrere Waschladungen ausreichenden Menge in Vorratsbehältern bereitgestellt. Zur Durchführung eines Waschvorganges entnimmt der Verbraucher die für einen Waschgang notwendige Dosis Flüssigwaschmittel aus diesem
Vorratsbehälter. Die notwendige Dosis wird meistens durch Abmessen des Flüssigwaschmittels in einem Messbecher ermittelt und anschließend beispielsweise in die Dosierschublade einer Waschmaschine umgefüllt, oder gemeinsam mit dem Messbecher direkt in die Waschtrommel der Waschmaschine gegeben.
Die für die Flüssigwaschmittel geeigneten flüssigen Tensidzusammensetzungen sollen leicht dosierbar sein. Zu diesem Zweck sollen die flüssigen Tensidzusammensetzungen eine geeignete Rheologie besitzen. Zu dünnflüssige Zusammensetzungen werden vom Verbraucher als leistungsstärker wahrgenommen. Die Reaktion dieser Verbraucherwahrnehmung darf nicht in zu dickflüssige Zusammensetzungen münden, da ansonsten die Restentleerung der Vorratsbehälter unzureichend ist.
Die in der flüssigen Tensidzusammensetzung enthaltenen Aktivstoffe, wie insbesondere Enzyme, sollen zudem lagerstabil eingearbeitet sein und die Aktivität über die Lagerung beibehalten.
Es wurde gefunden, dass eine Zusammensetzung, enthaltend Alkylbenzolsulfonat-Aniontensid, eine spezielle Kombination ethoxylierter Alkylsulfate und nichtionisches Tensid jeweils in speziellen Mengen und Mengenverhältnissen eine flüssige Tensidzusammensetzung liefert, die eine akzeptable Rheologie besitzt und die Aktivität darin eingearbeiteter Aktivstoffe, wie insbesondere Enzym, in hervorragendem Maße gewährleistet.
In der Druckschrift CA 2 243 007 C werden flüssige Tensidzusammensetzungen beschrieben, die 0.5 bis 12 Gew.-% Natriumcarbonat, 5 bis 35 Gew.-% einer Tensidmischung, enthaltend jeweils bezogen auf das Gesamtgewicht der Tensidmischung
i) 15-55 Gew.-% einer Verbindung der Formel Cio-16-Alkyl-0-(CH2CH20)3-S03M,
ii) 15-55 Gew.-% Cio-16-Alkyl-0-(CH2CH20)7-S03M, 15-55 Gew.-% einer Verbindung der Formel Cio-16-Alkyl-0-(CH2CH20)3-H und
iii) 15-55 Gew.-% einer Verbindung der Formel Cio-16-Alkyl-0-(CH2CH20)7-H sowie
iv) 0.5-15 Gew.-% einer amphoteren Tensids,
enthalten. Ein erster Gegenstand der Erfindung ist eine flüssige Tensidzusammensetzung, enthaltend bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung
a) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 8,5 Gew.-% C9-C2o-Alkylbenzolsulfonat, und
b) eine Gesamtmenge von 10,0 bis 18,0 Gew.-% R -0-(CH2CH20)n-S03M
worin R für eine Ci2-is-Alkylgruppe steht, n für eine Zahl von 2 bis 3 steht und M für ein einwertiges Kation steht, und
c) eine Gesamtmenge von 1 ,0 bis 6,0 Gew.-% R2-0-(CH2CH20)m-S03M'
worin R2 für eine Ci2-is-Alkylgruppe steht, m für eine Zahl von 7 bis 8 steht und M' für ein einwertiges Kation steht, und
d) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 10,0 Gew.-% nichtionisches Tensid, und
e) Wasser, und
f) mindestens ein Enzym.
Im Sinne der Erfindung gilt für die Definition eines Zahlenbereichs, welcher„zwischen" zwei Bereichsgrenzen liegen soll, dem allgemeinen Sprachgebrauch folgend, dass die die
Bereichsgrenzen nicht mit eingeschlossen sind . Zahlenbereiche, die von einer Bereichsgrenze bis zu einer anderen Bereichsgrenze definiert sind, schließen die Bereichsgrenzen mit ein.
Alle Mengenangaben aus a), b) und c) werden mit Natrium als Gegenion bzw. einwertiges Kation M und M' berechnet. Bei Einsatz von einwertigen Kationen M oder M' die von Natrium verschieden sind, ist die Gewichtsmenge daher entsprechend auf Natrium als einwertiges Kation umzurechnen.
Einwertige Kationen haben eine Ladungszahl von 1 .
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung ist bei 25°C und 1013 mbar flüssig.
Die erfindungsgemäße Tensidzusammensetzung enthält zwingend 2,0 bis 8,5 Gew.-% C9-C20- Alkylbenzolsulfonat, bevorzugt Cio-Cis-Alkylbenzolsulfonat, besonders bevorzugt C10-C13- Alkylbenzolsulfonat.
Bei den Alkylbenzolsulfonattensiden steht„Alkyl" vorzugsweise für einen linearen oder verzweigten unsubstituierten Alkylrest. Solche äußerst bevorzugten Tenside a) sind ausgewählt aus linearen oder verzweigten Alkylbenzolsulfonaten der Formel a
(a), in der R' und R" zusammen 8 bis 19, vorzugsweise 9 bis 14 und insbesondere 9 bis 12 C-Atome enthalten und X+ für ein einwertiges Kation, insbesondere für Na+, K+, HO-ChhCI-hNI- *, (HO- CH2CH2)3NH+. Ein ganz besonders bevorzugter Vertreter lässt sich durch die Formel a-1 beschreiben:
Am bevorzugtesten ist der Einsatz von einer Gesamtmenge von 2,0 bis 8,0 Gew.-% C10-C13- Alkylbenzolsulfonat Natriumsalz. Am aller bevorzugtesten ist der Einsatz von einer Gesamtmenge von 2,0 bis 8,0 Gew.-% Ci2-Alkylbenzolsulfonat Natriumsalz.
Ferner enthält die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung zwingend eine
Gesamtmenge von 10,0 bis 18,0 Gew.-% R -0-(CH2CH20)n-S03M, worin R für eine C 12-18- Alkylgruppe steht, n für 2 oder 3 steht und M für ein einwertiges Kation steht. Dabei handelt es sich um ein Ci2-Ci8-Alkylsulfat mit dem einwertigen Gegenion M und 2 oder 3 Mol Ethylenoxid pro Mol Ci2-Ci8-Alkylgruppe.
Besonders bevorzugt steht n für 2.
Besonders bevorzugt steht M für Na+, K+, ΗΟ-ΟΗ2ΟΗ2ΝΗ3 +, (HO-CH2CH2)3NH+, ganz besonders bevorzugt für Na+.
Am bevorzugtesten enthält die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung eine Gesamtmenge von 10,0 bis 18,0 Gew.-% R -0-(CH2CH20)2-S03Na, worin R für eine C12-18- Alkylgruppe, insbesondere für Dodecyl, steht.
Ferner enthält die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung zwingend eine
Gesamtmenge von 1 ,0 bis 6,0 Gew.-% R2-0-(CH2CH20)m-S03M', worin R2 für eine C12-18- Alkylgruppe steht, m für 7 oder 8 steht und M' für ein einwertiges Kation steht. Dabei handelt es sich um ein Ci2-Ci8-Alkylsulfat mit dem einwertigen Gegenion M und 7 oder 8 Mol Ethylenoxid pro Mol Ci2-Ci8-Alkylgruppe.
Besonders bevorzugt steht m für 7. Besonders bevorzugt steht M' für Na+, K+, ΗΟ-ΟΗ2ΟΗ2ΝΗ3 +, (HO-CH2CH2)3NH+, ganz besonders bevorzugt für Na+.
Am bevorzugtesten enthält die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung eine Gesamtmenge von 1 ,0 bis 6,0 Gew.-% R2-0-(CH2CH20)7-S03Na, worin R2 für eine C12-18- Alkylgruppe, insbesondere für Dodecyl, steht.
Es hat sich für die Kaltwaschleistung als vorteilhaft erwiesen, wenn die Zusammensetzungen als anionisches Tensid zusätzlich Seife(n) enthalten. Seifen sind die wasserlöslichen Natrium- oder Kaliumsalze der gesättigten und ungesättigten Fettsäuren mit 10 bis 20 Kohlenstoffatomen, der Harzsäuren des Kolophoniums (gelbe Harzseifen) und der Naphthensäuren, die als feste oder halbfeste Gemische in der Hauptsache für Wasch- und Reinigungszwecke verwendet werden. Natrium- oder Kaliumsalze der gesättigten und ungesättigten Fettsäuren mit 10 bis 20
Kohlenstoffatomen, insbesondere mit 12 bis 18 Kohlenstoffatomen, sind gemäß Erfindung bevorzugte Seifen. Besonders bevorzugte Zusammensetzungen sind dabei dadurch
gekennzeichnet, dass sie - bezogen auf ihr Gewicht - 0, 1 bis 15 Gew.-%, besonders bevorzugt 0,2 bis 12,0 Gew.-%, ganz besonders bevorzugt 0,3 bis 10,0 Gew.-% Seife(n) enthalten.
Die erfindungsgemäße Tensidzusammensetzung enthält zwingend 2,0 bis 10,0 Gew.-%, vorzugsweise 2,5 bis 7,5 Gew.-%, weiter bevorzugt 4,0 bis 6,0 Gew.-%, nichtionisches Tensid.
Mit besonderem Vorzug enthalten die Zusammensetzungen mindestens ein nichtionisches Tensid aus der Gruppe der Fettalkoholethoxylate, da diese Tenside auch bei niedrigen
Waschtemperaturen leistungsstarke Zusammensetzungen ergeben und im Falle flüssiger Zubereitungen exzellente Kältestabilität aufweisen.
Demnach enthalten bevorzugte Zusammensetzungen zusätzlich mindestens ein nichtionisches Tensid der Formel
R2-0-(AO)m-H,
in der
R2 für einen linearen oder verzweigten, substituierten oder unsubstituierten Alkyl-,
Aryl- oder Alkylarylrest,
AO für eine Ethylenoxid- (EO) oder Propylenoxid- (PO) Gruppierung,
m für ganze Zahlen von 1 bis 50 stehen.
In der vorstehend genannten Formel steht R2 für einen linearen oder verzweigten, substituierten oder unsubstituierten Alkyl-, Aryl- oder Alkylarylrest, vorzugsweise für einen linearen, unsubstituierten Alkylrest, besonders bevorzugt für einen Fettalkoholrest. Bevorzugte Reste R2 sind ausgewählt aus Decyl-, Undecyl-, Dodecyl-, Tridecyl-, Tetradecyl, Pentadecyl-, Hexadecyl-, Heptadecyl-, Octadecyl-, Nonadecyl-, Eicosylresten und deren Mischungen, wobei die Vertreter mit gerader Anzahl an C-Atomen bevorzugt sind. Besonders bevorzugte Reste R2 sind abgeleitet von Ci2-Ci8-Fettalkoholen, beispielsweise von Kokosfettalkohol, Talgfettalkohol, Lauryl-, Myristyl-, Cetyl- oder Stearylalkohol oder von Cio-C2o-Oxoalkoholen.
AO steht für eine Ethylenoxid- (EO) oder Propylenoxid- (PO) Gruppierung, vorzugsweise für eine Ethylenoxidgruppierung. Der Index m steht für eine ganze Zahl von 1 bis 50, vorzugsweise von 1 bis 20 und insbesondere von 2 bis 10. Ganz besonders bevorzugt steht m für die Zahlen 2, 3, 4, 5, 6, 7 oder 8.
Zusammenfassend sind besonders bevorzugte Tenside ausgewählt aus Fettalkoholethoxylaten der Formel C-1 mit k = 1 1 bis 19, m = 2, 3, 4, 5, 6, 7 oder 8. Ganz besonders bevorzugte Vertreter sind C12-18 Fettalkohole mit 7 Einheiten Ethylenoxid (k = 1 1-17, m = 7 in Formel C-1 ).
Ganz besonders bevorzugte Zusammensetzungen enthalten als nichtionisches Tensid bezogen auf die Gesamtmenge der Zusammensetzungen 2,0 bis 10 Gew.-%, vorzugsweise 2,5 bis 7,5 Gew.-%, weiter bevorzugt 4,0 bis 6,0 Gew.-% Fettalkoholethoxylat(e) (insbesondere der Formel (C-1 ), wiederum bevorzugt mit k = 1 1-17, m = 7).
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn in der erfindungsgemäßen flüssigen
Tensidzusammensetzung das Gewichtsverhältnis der Tensidkomponente a) zur
Tensidkomponente b) 1 :9 bis 1 :2, bevorzugt 1 :6 bis 1 :3, besonders bevorzugt 1 :5 bis 1 :3, beträgt.
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn in der erfindungsgemäßen flüssigen
Tensidzusammensetzung das Gewichtsverhältnis der Tensidkomponente a) zur
Tensidkomponente c) 2:1 bis 1 :2, bevorzugt 2: 1 bis 1 : 1 , besonders bevorzugt 1.5:1 bis 1 :1 beträgt.
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn in der erfindungsgemäßen flüssigen
Tensidzusammensetzung das Gewichtsverhältnis der Tensidkomponente a) zur
Tensidkomponente d) 2: 1 bis 1 :5, bevorzugt 1.5: 1 bis 1 :3, besonders bevorzugt 1 :1 bis1 :2, beträgt.
Ganz besonders bevorzugte flüssige Tensidzusammensetzungen enthalten bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung a) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 8,5 Gew.-% Cio-Ci5-Alkylbenzolsulfonat (insbesondere C10-C13- Alkylbenzolsulfonat Natrium), und
b) eine Gesamtmenge von 10,0 bis 18,0 Gew.-% R -0-(CH2CH20)2-S03M
worin R für eine Ci2-is-Alkylgruppe steht und M für ein einwertiges Kation (insbesondere Na+) steht, und
c) eine Gesamtmenge von 1 ,0 bis 6,0 Gew.-% R2-0-(CH2CH20)7-S03M'
worin R2 für eine Ci2-is-Alkylgruppe steht und M' für ein einwertiges Kation (insbesondere Na+) steht , und
d) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 10,0 Gew.-% Fettalkoholethoxylat (insbesondere gemäß obiger Formel (C-1 ), wiederum bevorzugt mit k = 1 1-17, m = 7) als nichtionisches Tensid, und e) Wasser, und
f) mindestens ein Enzym (insbesondere mindestens eine Protease, wobei wiederum die nachfolgend als bevorzugt gekennzeichneten Proteasen bevorzugt geeignet sind (vide infra). Dabei ist es wiederum bevorzugt eine oder mehrere der Tensidgewichtsverhältnisse a) zu b), a) zu c) oder a) zu d) jeweils mit Bezug auf diese Ausführungsform anzuwenden.
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung enthält als ein Lösemittel zwingend Wasser. Dabei ist es erfindungsgemäß bevorzugt, bezogen auf das Gewicht der Zusammensetzung Wasser in einer Gesamtmenge von 20 bis 80 Gew.-%, insbesondere von 30 bis 70 Gew.-%, ganz besonders bevorzugt von 40 bis 60 Gew.-%, einzusetzen.
Neben den erfindungsgemäß zwingend vorhandenen Komponenten können der
erfindungsgemäßen flüssigen Zusammensetzung organische Lösemittel zugesetzt werden.
Organische Lösemittel sind flüssig, lösen sich bei 20°C zu mindestens 1 g in 100 g destilliertem Wasser und weisen im Molekül mindestens eine kovalente Bindung zwischen Kohlenstoff und Wasserstoff auf. Es ist erfindungsgemäß wesentlich, bezogen auf das Gewicht der
Zusammensetzung aminogruppen-freie organische Lösemittel in einer Gesamtmenge von 0 bis 10 Gew.-%, insbesondere von 0 bis 7,5 Gew.-%, einzusetzen. Geeignete Aminogruppen-freie organische Lösemittel umfassen ein- oder mehrwertige Alkohole oder Glykolether, sofern sie im angegebenen Konzentrationsbereich mit Wasser mischbar sind. Vorzugsweise werden die aminogruppen-freien organischen Lösemittel ausgewählt aus Ethanol, n-Propanol, i-Propanol, Butanolen, Glykol, Propandiol, Butandiol, Methylpropandiol, Glycerin, Diglykol, Propyldiglycol, Butyldiglykol, Hexylenglycol, Ethylenglykolmethylether, Ethylenglykolethylether,
Ethylenglykolpropylether, Ethylenglykolmono-n-butylether, Diethylenglykolmethylether,
Diethylenglykolethylether, Propylenglykolmethylether, Propylenglykolethylether,
Propylenglykolpropylether, Dipropylenglykolmonomethylether, Dipropylenglykolmonoethylether, Methoxytriglykol, Ethoxytriglykol, Butoxytriglykol, 1-Butoxyethoxy-2-propanol, 3-Methyl-3- methoxybutanol, Propylen-glykol-t-butylether, Di-n-octylether sowie aus Mischungen zweier oder mehrerer dieser vorgenannten Lösemittel. Es ist allerdings bevorzugt, dass die erfindungsgemäße Zusammensetzung optional einen Aminogruppen-freien C2 bis C4-Alkohol mit 1 bis 3 Hydroxylgruppen, insbesondere Ethanol und/oder Glycerin und/oder 1 ,2-Propandiol, enthält.
Die erfindungsgemäße Zusammensetzung enthält zwingend mindestens ein Enzym.
„Variante" ist auf der Ebene der Proteine der zu„Mutante" entsprechende Begriff auf der Ebene der Nukleinsäuren. Bei den Vorgänger- oder Ausgangsmolekülen kann es sich um Wildtypenzyme handeln, das heißt solche, die aus natürlichen Quellen erhältlich sind. Es kann sich auch um Enzyme handeln, die an sich bereits Varianten darstellen, das heißt gegenüber den
Wildtypmolekülen bereits verändert worden sind. Darunter sind beispielsweise Punktmutanten, solche mit Änderungen der Aminosäuresequenz, über mehrere Positionen oder längere zusammenhängende Bereiche, oder auch Hybridmoleküle zu verstehen, die aus einander ergänzenden Abschnitten verschiedener Wildtyp Enzyme zusammengesetzt sind.
Unter Aminosäureaustauschen sind Substitutionen einer Aminosäure gegen eine andere
Aminosäure zu verstehen. Erfindungsgemäß werden solche Substitutionen unter Bezeichnung der Positionen, in der der Austausch erfolgt, gegebenenfalls kombiniert mit den betreffenden
Aminosäuren im international gebräuchlichen Einbuchstabencode angegeben.„Austausch in Position 320" bedeutet beispielsweise, dass eine Variante in der Position, die in der Sequenz eines Referenzproteins die Position 320 aufweist, eine andere Aminosäure aufweist. Üblicherweise werden solche Austausche auf der DNA-Ebene über Mutationen einzelner Basenpaare durchgeführt (siehe oben).„R320K" bedeutet beispielsweise, dass das Referenzenzym an der Position 320 die Aminosäure Arginin aufweist, während die betrachtete Variante an der hiermit homologisierbaren Position über die Aminosäure Lysin verfügt.„320K" bedeutet, dass jede beliebige, das heißt in der Regel eine natürlicherweise vorgegebene Aminosäure an einer Position, die der Position 320 entspricht, gegen ein Lysin ersetzt ist, welches sich im vorliegenden Molekül eben an dieser Stelle befindet.„R320K, L" bedeutet, dass die Aminosäure Arginin in Position 320 gegen Lysin oder Leucin ersetzt ist. Und„R320X" bedeutet, dass die Aminosäure Arginin in Position 320 gegen eine prinzipiell beliebige andere Aminosäure ersetzt ist.
Grundsätzlich sind die mit der vorliegenden Anmeldung bezeichneten erfindungsgemäßen Aminosäureaustausche nicht darauf beschränkt, dass sie die einzigen Austausche sind, in denen sich die betreffende Variante von dem Wildtypmolekül unterscheidet. Es ist im Stand der Technik bekannt, dass sich die vorteilhaften Eigenschaften einzelner Punktmutationen einander ergänzen können. Somit umfassen Ausführungsformen der vorliegenden Erfindung alle Varianten, die neben anderen Austauschen gegenüber dem Wildtypmolekül auch die erfindungsgemäßen Austausche aufweisen. Ferner spielt es prinzipiell keine Rolle, in welcher Reihenfolge die betreffenden Aminosäureaustausche vorgenommen worden sind, das heißt ob eine entsprechende Punktmutante
erfindungsgemäß weiterentwickelt wird oder zunächst beispielsweise aus einem Wildtypmolekül eine erfindungsgemäße Variante erzeugt wird, die entsprechend anderer im Stand der Technik zu findender Lehren weiterentwickelt wird. Es können auch gleichzeitig in einem Mutageneseansatz mehrere Austausche vorgenommen werden, etwa erfindungsgemäße und andere zusammen.
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn als Enzym mindestens eine Protease enthalten ist. Eine Protease ist ein Enzym, das Peptidbindungen mittels Hydrolyse spaltet. Jedes der Enzyme aus der Klasse E.C. 3.4 fällt erfindungsgemäß darunter (umfassend jede der darunterfallenden dreizehn Unterklassen). Die EC-Nummer entspricht der Enzyme Nomenklatur 1992 der NC-IUBMB, Academic Press, San Diego, California, eingeschlossen der Ergänzungen 1 bis 5, publiziert in Eur. J. Biochem. 1994, 223, 1-5; Eur. J. Biochem. 1995, 232, 1 -6; Eur. J. Biochem. 1996, 237, 1-5; Eur. J. Biochem. 1997, 250, 1-6; and Eur. J. Biochem. 1999, 264, 610-650.
Subtilase benennt eine Untergruppe der Serinproteasen. Die Serinproteasen oder Serinpeptidasen sind eine Untergruppe der Proteasen, die Serin im aktiven Zentrums des Enzyms besitzen, das ein kovalentes Addukt mit dem Substrat bildet. Weiterhin sind die Subtilasen (und die
Serineproteasen) dadurch charakterisiert, dass sie neben besagtem Serin mit Histidin und Aspartam zwei weitere Aminosäurereste im aktiven Zentrum aufweisen. Die Subtilasen können in 6 Unterklassen, nämlich die Subtilisin Familie, die Thermitase Familie, die Proteinase K Familie, die Familie der lantibiotischen Peptidasen, die Kexin Familie und die Pyrolysin Familie. Die als Bestandteil der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen bevorzugt ausgenommenen oder bevorzugt in reduzierten Mengen enthaltenen Proteasen sind Endopeptidasen (EC 3.4.21 ).
"Proteaseaktivität" liegt erfindungsgemäß vor, wenn das Enzym proteolytische Aktivität besitzt (EC 3.4). Verschiedenartige Proteaseaktivitäts-Typen sind bekannt: Die drei Haupttypen sind:
Trypsin-artig, wobei eine Spaltung des Amidesubstrates nach den Aminosäuren Arg oder Lys bei P1 erfolgt; Chymotrypsin-artig, wobei eine Spaltung nach einer der hydrophoben Aminosäuren bei P1 erfolgt; und Elastase-artig, wobei eine Spaltung des Amidsubstrates nach Ala bei P1 erfolgt.
Die Proteaseaktivität kann nach der in Tenside, Band 7 (1970), S. 125-132 beschriebenen Methode ermittelt werden. Sie wird dementsprechend in PE (Protease-Einheiten) angegeben. Die Proteaseaktivität eines Enzyms lässt sich gemäß gängigen Standardmethoden, wie insbesondere unter Einsatz von BSA als Substrat (Rinderalbumin) und/oder mit der AAPF-Methode.
Überraschenderweise wurde festgestellt, dass eine Protease vom Typ der alkalischen Protease aus Bacillus lentus DSM 5483 oder eine hierzu hinreichend ähnliche Protease (bezogen auf die Sequenzidentität), die mehrere dieser Veränderungen in Kombination aufweist, besonders für den Einsatz in der erfindungsgemäßen flüssigen Tensidzusammensetzung geeignet und darin vorteilhafterweise verbessert stabilisiert wird. Vorteile des Einsatzes dieser Protease ergeben sich somit insbesondere hinsichtlich der Waschleistung und/oder der Stabilität.
Eine besonders bevorzugte Ausführungsform der Erfindung ist besagte flüssige
Tensidzusammensetzung, enthaltend als Enzym mindestens eine Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 70% identisch ist und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99E oder R99D in Kombination mit mindestens zwei weiteren
Aminosäuresubstitutionen aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus S3T, V4I und V199I. Besagte Protease wird in der Druckschrift WO 2013/060621 beschrieben, sowie das Verfahren zur Herstellung besagter Protease, umfassend das Einbringen einer
Aminosäuresubstitution R99E oder R99D in Kombination mit mindestens zwei weiteren
Aminosäuresubstitutionen, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus S3T, V4I und V199I, in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 in eine Ausgangsprotease, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 70% identisch ist.
Eine bevorzugte Protease im Sinne der vorliegenden Patentanmeldung umfasst daher sowohl die Protease als solche als auch eine mit einem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellte Protease. Alle Ausführungen zur Protease beziehen sich daher sowohl auf die Protease als Stoff wie auch auf die entsprechenden Verfahren, insbesondere Herstellungsverfahren der Protease.
Als weitere Erfindungsgegenstände sind mit den erfindungsgemäß bevorzugten Proteasen beziehungsweise den Herstellungsverfahren für erfindungsgemäße Proteasen für diese Proteasen codierende Nukleinsäuren, erfindungsgemäße Proteasen oder Nukleinsäuren enthaltende nicht menschliche Wirtszellen sowie erfindungsgemäße Proteasen umfassende flüssige
Tensidzusammensetzungen, Wasch- und Reinigungsverfahren verbunden.
Eine erfindungsgemäße Veränderung der Position 99, nämlich eine Veränderung R99E oder R99D, in Verbindung mit einer Veränderung an mindestens zwei der Positionen 3, 4 und 199, nämlich S3T, V4I oder V199I, in einer Protease, die eine zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz zu mindestens 70% identische Aminosäuresequenz umfasst, bewirkt vorzugsweise eine verbesserte Reinigungsleistung dieser veränderten Protease in Wasch- und Reinigungsmitteln an mindestens einer protease-sensitiven Anschmutzung. Dies gilt für die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung insbesondere bei einem Einsatz bei niedrigen Temperaturen von bis zu 10°C. Erfindungsgemäße Proteasen ermöglichen folglich eine verbesserte Entfernung von mindestens einer, bevorzugt von mehreren protease-sensitiven Anschmutzungen auf Textilien und/oder harten Oberflächen, beispielsweise Geschirr. Besonders vorteilhafte Reinigungsleistungen zeigen bevorzugte Ausführungsformen erfindungsgemäßer Proteasen an Blut-haltigen Anschmutzungen, beispielsweise an den Anschmutzungen Blut auf Baumwolle: Produkt Nr. 1 1 1 erhältlich von der Firma Eidgenössische Material- und Prüfanstalt (EMPA) Testmaterialien AG, St. Gallen, Schweiz;
Milch-Ruß auf Baumwolle (wfk - Cleaning Technology Institute e.V., Krefeld, Deutschland);
Blut-Milch/Tusche auf Baumwolle: Produkt Nr. C-05 erhältlich von CFT (Center For Testmaterials) B.V. Viaardingen, Niederlande.
Bevorzugte Ausführungsformen der besagten Tensidzusammensetzungen mit besagter bevorzugter schmutzspezifischer Protease erzielen die vorteilhaften Reinigungsleistungen bei niedrigen Temperaturen zwischen 10°C und 60°C, zwischen 15°C und 50°C und zwischen 20°C und 40°C. Folglich werden besonders bevorzugte Ausführungsformen der besagten
Tensidzusammensetzungen mit besagter bevorzugter schmutzspezifischer Protease bereitgestellt, deren Reinigungsleistung gezielt im Hinblick auf eine Anschmutzung oder auf mehrere
Anschmutzungen ähnlichen Typs, insbesondere bei Temperaturen von höchstens 25°C, besonders bevorzugt bei Temperaturen von höchstens 20°C vorteilhaft ist. Folglich ist der Fleckenfokus bevorzugter Ausführungsformen erfindungsgemäßer Proteasen hinsichtlich Blut-haltigen
Anschmutzungen verbessert.
Ferner verfügen bevorzugte Ausführungsformen der in der erfindungsgemäßen
Tensidzusammensetzung bevorzugt eingesetzten Proteasen über eine besondere Stabilität in Wasch- oder Reinigungsmitteln, beispielsweise gegenüber Tensiden und/oder Bleichmitteln und/oder gegenüber Temperatureinflüssen, insbesondere gegenüber hohen Temperaturen, beispielsweise zwischen 50 und 65°C, insbesondere 60°C, und/oder gegenüber sauren oder alkalischen Bedingungen und/oder gegenüber pH-Wert-Änderungen und/oder gegenüber denaturierenden oder oxidierenden Agentien und/oder gegenüber proteolytischem Abbau und/oder gegenüber einer Veränderung der Redox-Verhältnisse. Solche vorteilhaften Ausführungsformen erfindungsgemäßer Proteasen ermöglichen folglich verbesserte Waschergebnisse an protease- sensitiven Anschmutzungen in einem weiten Temperaturbereich.
Unter Reinigungsleistung wird im Rahmen der Erfindung die Aufhellungsleistung an einer oder mehreren Anschmutzungen, insbesondere auf Wäsche oder Geschirr, verstanden. Im Rahmen der Erfindung weist sowohl das Wasch- oder Reinigungsmittel, welches die Protease umfasst beziehungsweise die durch dieses Mittel gebildete Wasch- oder Reinigungsflotte, als auch die Protease selbst eine jeweilige Reinigungsleistung auf. Die Reinigungsleistung des Enzyms trägt somit zur Reinigungsleistung des Mittels beziehungsweise der durch das Mittel gebildeten Waschoder Reinigungsflotte bei. Die Reinigungsleistung wird bevorzugt ermittelt wie weiter unten angegeben. Auch die besagte erfindungsgemäß bevorzugt einsetzbare Protease weist eine proteolytische Aktivität auf, das heißt, sie ist zur Hydrolyse von Peptidbindungen eines Polypeptids oder Proteins befähigt, insbesondere in einem Wasch- oder Reinigungsmittel. Eine erfindungsgemäß bevorzugte Protease ist daher ein Enzym, welches die Hydrolyse von Peptidbindungen katalysiert und dadurch in der Lage ist, Peptide oder Proteine zu spalten. Ferner handelt es sich bei der erfindungsgemäß bevorzugten Protease vorzugsweise um eine reife (mature) Protease, d.h. um das katalytisch aktive Molekül ohne Signal- und/oder Propeptid(e). Soweit nicht anders angegeben beziehen sich auch die angegebenen Sequenzen auf jeweils reife Enzyme.
In einer weiteren Ausführungsform der Erfindung umfasst die Protease eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99E in Kombination mit mindestens zwei weiteren Aminosäuresubstitutionen aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus S3T, V4I und V199I.
In einer weiteren Ausführungsform der Erfindung umfasst die Protease eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99D in Kombination mit mindestens zwei weiteren Aminosäuresubstitutionen aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus S3T, V4I und V199I.
Besonders bevorzugte erfindungsgemäße Proteasen sind:
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die
Aminosäuresubstitution R99E in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T und V4I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I und R99E.
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die
Aminosäuresubstitution R99E in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, R99E und V199I.
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die
Aminosäuresubstitution R99E in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen V4I und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen V4I, R99E und V199I.
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die
Aminosäuresubstitution R99D in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T und V4I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I und R99D.
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die
Aminosäuresubstitution R99D in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, R99D und V199I.
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5% und 98,8% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die
Aminosäuresubstitution R99D in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen V4I und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen V4I, R99D und V199I. Weitere besonders bevorzugte Ausführungsformen erfindungsgemäßer Proteasen zeichnen sich dadurch aus, dass sie die Aminosäuresubstitution R99E oder R99D in Kombination mit den drei weiteren Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I und V199I aufweisen. Insbesondere folgende Proteasen sind diesbezüglich ganz besonders bevorzugt:
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98% und 98,5% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99E in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I, R99E und V199I. Eine derartige Protease in SEQ ID NO. 2 angegeben. Die Protease der SEQ ID NO.2 ist eine in der erfindungsgemäßen Tensidzusammensetzung ganz besonders bevorzugt einsetzbare Protease.
Protease umfassend eine Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98% und 98,5% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99D in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I, R99D und V199I. Eine derartige Protease ist in SEQ ID NO. 3 angegeben.
Weitere besonders bevorzugte Proteasen sind Proteasen wie vorstehend beschrieben, die ferner an Position 21 1 in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäure Leucin (L) aufweisen.
Die Bestimmung der Identität von Nukleinsäure- oder Aminosäuresequenzen erfolgt durch einen Sequenzvergleich. Dieser Sequenzvergleich basiert auf dem im Stand der Technik etablierten und üblicherweise genutzten BLAST-Algorithmus (vgl. beispielsweise Altschul, S.F., Gish, W., Miller, W., Myers, E.W. & Lipman, DJ. (1990) "Basic local alignment search tool." J. Mol. Biol. 215:403- 410, und Altschul, Stephan F., Thomas L. Madden, Alejandro A. Schaffer, Jinghui Zhang, Hheng Zhang, Webb Miller, and David J. Lipman (1997): "Gapped BLAST and PSI-BLAST: a new generation of protein database search programs"; Nucleic Acids Res., 25, S.3389-3402) und geschieht prinzipiell dadurch, dass ähnliche Abfolgen von Nukleotiden oder Aminosäuren in den Nukleinsäure- oder Aminosäuresequenzen einander zugeordnet werden. Eine tabellarische Zuordnung der betreffenden Positionen wird als Alignment bezeichnet. Ein weiterer im Stand der Technik verfügbarer Algorithmus ist der FASTA-Algorithmus. Sequenzvergleiche (Alignments), insbesondere multiple Sequenzvergleiche, werden mit Computerprogrammen erstellt. Häufig genutzt werden beispielsweise die Clustal-Serie (vgl. beispielsweise Chenna et al. (2003): Multiple sequence alignment with the Clustal series of programs. Nucleic Acid Research 31 , 3497-3500), T- Coffee (vgl. beispielsweise Notredame et al. (2000): T-Coffee: A novel method for multiple sequence alignments. J. Mol. Biol. 302, 205-217) oder Programme, die auf diesen Programmen beziehungsweise Algorithmen basieren. In der vorliegenden Patentanmeldung wurden alle Sequenzvergleiche (Alignments) mit dem Computer-Programm Vector NTI® Suite 10.3 (Invitrogen Corporation, 1600 Faraday Avenue, Carlsbad, Kalifornien, USA) mit den vorgegebenen
Standard parametern erstellt, dessen AlignX-Modul für die Sequenzvergleiche auf ClustalW basiert.
Solch ein Vergleich erlaubt auch eine Aussage über die Ähnlichkeit der verglichenen Sequenzen zueinander. Sie wird üblicherweise in Prozent Identität, das heißt dem Anteil der identischen Nukleotide oder Aminosäurereste an denselben oder in einem Alignment einander entsprechenden Positionen angegeben. Der weiter gefasste Begriff der Homologie bezieht bei Aminosäuresequenzen konservierte Aminosäure-Austausche in die Betrachtung mit ein, also Aminosäuren mit ähnlicher chemischer Aktivität, da diese innerhalb des Proteins meist ähnliche chemische
Aktivitäten ausüben. Daher kann die Ähnlichkeit der verglichenen Sequenzen auch Prozent Homologie oder Prozent Ähnlichkeit angegeben sein. Identitäts- und/oder Homologieangaben können über ganze Polypeptide oder Gene oder nur über einzelne Bereiche getroffen werden. Homologe oder identische Bereiche von verschiedenen Nukleinsäure- oder Aminosäuresequenzen sind daher durch Übereinstimmungen in den Sequenzen definiert. Solche Bereiche weisen oftmals identische Funktionen auf. Sie können klein sein und nur wenige Nukleotide oder Aminosäuren umfassen. Oftmals üben solche kleinen Bereiche für die Gesamtaktivität des Proteins essentielle Funktionen aus. Es kann daher sinnvoll sein, Sequenzübereinstimmungen nur auf einzelne, gegebenenfalls kleine Bereiche zu beziehen. Soweit nicht anders angegeben beziehen sich Identitäts- oder Homologieangaben in der vorliegenden Anmeldung aber auf die Gesamtlänge der jeweils angegebenen Nukleinsäure- oder Aminosäuresäuresequenz.
In einer ganz besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung ist die Protease dadurch gekennzeichnet, dass ihre Reinigungsleistung mindestens derjenigen einer Protease entspricht, die eine Aminosäuresequenz umfasst, die der in SEQ ID NO. 2 angegebenen Aminosäuresequenz entspricht, und/oder mindestens derjenigen einer Protease entspricht, die eine
Aminosäuresequenz umfasst, die der in SEQ ID NO. 3 angegebenen Aminosäuresequenz entspricht, wobei die Reinigungsleistung in einem Waschsystem bestimmt wird, das ein
Waschmittel in einer Dosierung zwischen 4,5 und 7,0 Gramm pro Liter Waschflotte sowie die Protease enthält, wobei die zu vergleichenden Proteasen konzentrationsgleich (bezogen auf aktives Protein) eingesetzt sind und die Reinigungsleistung gegenüber einer Blut-Anschmutzung auf Baumwolle, insbesondere gegenüber der Anschmutzung
Blut auf Baumwolle: Produkt Nr. 1 1 1 erhältlich von der Firma Eidgenössische Material- und Prüfanstalt (EMPA) Testmaterialien AG, St. Gallen, Schweiz, bestimmt wird durch Messung des Weißheitsgrades der gewaschenen Textilien, der Waschvorgang für 70 Minuten bei einer Temperatur von 40°C erfolgt und das Wasser eine Wasserhärte zwischen 15,5 und 16,5° (deutsche Härte) aufweist. Die Konzentration der Protease in dem für dieses Waschsystem bestimmten Waschmittel beträgt von 0,001-0, 1 Gew.-%, vorzugsweise von 0,01 bis 0,06 Gew.-%, bezogen auf aktives Protein.
Die erfindungsgemäßen flüssigen Tensidzusammensetzungen (bevorzugt zusätzlich zur Protease) enthalten als Enzym mindestens ein Enzym, ausgewählt aus a-Amylase, Cellulase, Mannanase, Lipase, Pectatlyase.
Im allgemeinen können die in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung enthaltenen Enzyme an Trägerstoffe adsorbiert und/oder in Hüllsubstanzen eingebettet sein, um sie gegen vorzeitige Inaktivierung zu schützen.
Erfindungsgemäße Zusammensetzungen können die erhaltenen Enzyme in jeder nach dem Stand der Technik etablierten Form zugesetzt werden. Hierzu gehören insbesondere die durch
Granulation, Extrusion oder Lyophilisierung erhaltenen festen Präparationen, vorteilhafterweise möglichst konzentriert, wasserarm und/oder mit Stabilisatoren versetzt. In einer alternativen Darreichungsform können die Enzyme auch verkapselt werden, beispielsweise durch
Sprühtrocknung oder Extrusion der Enzymlösung zusammen mit einem, vorzugsweise natürlichen Polymer oder in Form von Kapseln, beispielsweise solchen, bei denen die Enzyme wie in einem erstarrten Gel eingeschlossen sind, oder in solchen vom Kern-Schale-Typ, bei dem ein enzymhaltiger Kern mit einer Wasser-, Luft- und/oder Chemikalien-undurchlässigen Schutzschicht überzogen ist. In aufgelagerten Schichten können zusätzlich weitere Wirkstoffe, beispielsweise Stabilisatoren, Emulgatoren, Pigmente, Bleich- oder Farbstoffe aufgebracht werden. Derartige Kapseln werden nach an sich bekannten Methoden, beispielsweise durch Schüttel- oder
Rollgranulation oder in Fluid-bed-Prozessen aufgebracht. Vorteilhafterweise sind derartige Granulate, beispielsweise durch Aufbringen polymerer Filmbildner, staubarm und aufgrund der Beschichtung lagerstabil.
Die flüssigen Tensidzusammensetzungen enthalten bevorzugt zusätzlich mindestens eine Cellulase. Eine Cellulase ist ein Enzym. Für Cellulasen können synonyme Begriffe verwendet werden, insbesondere Endoglucanase, Endo-1 ,4-beta-Glucanase, Carboxymethylcellulase, Endo- 1 ,4-beta-D-Glucanase, beta-1 ,4-Glucanase, beta-1 ,4-Endoglucanhydrolase, Celludextrinase oder Avicelase. Entscheidend dafür, ob ein Enzym eine Cellulase im Sinne der Erfindung ist, ist deren Fähigkeit zur Hydrolyse von 1 ,4-ß-D-glucosidischen Bindungen in Cellulose.
Erfindungsgemäß konfektionierbare Cellulasen (Endoglucanasen, EG) umfassen beispielsweise die pilzliche, Endoglucanase(EG)-reiche Cellulase-Präparation beziehungsweise deren Weiterentwicklungen, die von dem Unternehmen Novozymes unter dem Handelsnamen
Celluzyme® angeboten wird. Die ebenfalls von dem Unternehmen Novozymes erhältlichen Produkte Endolase® und Carezyme® basieren auf der 50 kD-EG, beziehungsweise der 43 kD-EG aus Humicola insolens DSM 1800. Weitere einsetzbare Handelsprodukte dieses Unternehmens sind Cellusoft®, Renozyme® und Celluclean®. Weiterhin einsetzbar sind beispielsweise
Cellulasen, die von dem Unternehmen AB Enzymes, Finnland, unter den Handelsnamen
Ecostone® und Biotouch® erhältlich sind, und die zumindest zum Teil auf der 20 kD-EG aus Melanocarpus basieren. Weitere Cellulasen von dem Unternehmen AB Enzymes sind Econase® und Ecopulp®. Weitere geeignete Cellulasen sind aus Bacillus sp. CBS 670.93 und CBS 669.93, wobei die aus Bacillus sp. CBS 670.93 von dem Unternehmen Danisco/Genencor unter dem Handelsnamen Puradax® erhältlich ist. Weitere verwendbare Handelsprodukte des Unternehmens Danisco/Genencor sind„Genencor detergent cellulase L" und lndiAge®Neutra.
Auch durch Punktmutationen erhältliche Varianten dieser Enzyme können erfindungsgemäß eingesetzt werden. Besonders bevorzugte Cellulasen sind Thielavia terrestris Cellulasevarianten, die in der internationalen Offenlegungsschrift WO 98/12307 offenbart sind, Cellulasen aus Melanocarpus, insbesondere Melanocarpus albomyces, die in der internationalen Offenlegungsschrift WO 97/14804 offenbart sind, Cellulasen vom EGIII-Typ aus Trichoderma reesei, die in der europäischen Patentanmeldung EP 1 305 432 offenbart sind bzw. hieraus erhältliche Varianten, insbesondere diejenigen, die offenbart sind in den europäischen Patentanmeldungen EP 1240525 und EP 1305432, sowie Cellulasen, die offenbart sind in den internationalen Offenlegungsschriften WO 1992006165, WO 96/29397 und WO 02/099091 . Auf deren jeweilige Offenbarung wird daher ausdrücklich verwiesen bzw. deren diesbezüglicher Offenbarungsgehalt wird daher ausdrücklich in die vorliegende Patentanmeldung mit einbezogen.
Erfindungsgemäß besonders bevorzugte Zusammensetzungen sind dadurch gekennzeichnet, dass als zusätzliche Cellulase mindestens eine Cellulase aus Melanocarpus sp. oder Myriococcum sp. erhältlicher 20K-Cellulase oder solcher, die eine Homologie von über 80% (zunehmend bevorzugt von über 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99,0%, 99,1 %, 99,2%, 99,3%, 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8%, 99,9%) dazu aufweist.
Die aus Melanocarpus sp. oder Myriococcum sp. erhältliche 20K-Cellulase ist aus der
internationalen Patentanmeldung WO 97/14804 bekannt. Sie besitzt wie dort beschrieben ein Molekulargewicht von etwa 20 kDa und weist bei 50 °C im pH-Bereich von 4 bis 9 mindestens 80% ihrer maximalen Aktivität auf, wobei noch fast 50% der maximalen Aktivität bei pH 10 erhalten bleiben. Sie kann, wie ebenfalls dort beschrieben, aus Melanocarpus albomyces isoliert und in gentechnisch hergestellten Trichoderma reseei-Transformanten produziert werden. Im Sinne der vorliegenden Erfindung brauchbar sind auch Cellulasen, die eine Homologie von über 80%
(zunehmend bevorzugt von über 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99,0%, 99, 1 %, 99,2%, 99,3%, 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8%, 99,9%) zur 20K- Cellulase aufweisen.
K20-Cellulase wird vorzugsweise in solchen Mengen verwendet, dass eine erfindungsgemäße Zusammensetzung eine cellulolytische Aktivität von 1 NCU/g bis 500 NCU/g (bestimmbar durch die Hydrolyse von 1 -gewichtsprozentiger Carboxymethylcellulose bei 50 °C und neutralem pH und Bestimmung der dabei freigesetzten reduzierenden Zucker mittels Dinitrosalicylsäure, wie von M.J.Bailey et al. in Enzyme Microb. Technol. 3: 153 (1981 ) beschrieben; 1 NCU definiert die Enzymmenge, die reduzierenden Zucker in einer Menge erzeugt, die 1 nmol Glukose pro Sekunde entspricht), insbesondere von 2 NCU/g bis 400 NCU/g und besonders bevorzugt von 6 NCU/g bis 200 NCU/g aufweist. Daneben kann die erfindungsgemäße Zusammensetzung gegebenenfalls noch weitere Cellulasen enthalten.
Eine erfindungsgemäße Zusammensetzung enthält vorzugsweise 0,001 mg bis 0,5 mg, insbesondere 0,02 mg bis 0,3 mg an cellulolytischem Protein pro Gramm der gesamten
Zusammensetzung. Die Proteinkonzentration kann mit Hilfe bekannter Methoden, zum Beispiel dem Bicinchonsäure-Verfahren (BCA- Verfahren, Pierce Chemical Co., Rockford, IL) oder dem Biuret-Verfahren (A.G. Gornall, CS. Bardawill und M.M. David, J. Biol. Chem. 177, 751-766, 1948) bestimmt werden.
Es ist erfindungsgemäß wiederum besonders bevorzugt, zusätzlich zu mindestens einer ersten Cellulase aus Melanocarpus sp. oder Myriococcum sp. erhältlicher 20K-Cellulase oder solcher, die eine Homologie von über 80% (zunehmend bevorzugt von über 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99,0%, 99, 1 %, 99,2%, 99,3%, 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8%, 99,9%) dazu aufweist mindestens eine weitere von der ersten Cellulase
verschiedene zweite Cellulase einzusetzen.
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn die erfindungsgemäßen flüssigen
Tensidzusammensetzungen zusätzlich mindestens eine Lipase enthalten. Erfindungsgemäß bevorzugte Lipase-Enzyme werden ausgewählt aus mindestens einem Enzym der Gruppe, die gebildet wird aus Triacylglycerol-Lipase (E.C 3.1 .1.3) und Lipoprotein-Lipase (E.C 3.1.1.34) und Monoglycerid-Lipase (E.C. 3.1.1 .23).
Das erfindungsgemäß bevorzugte Einsatzgebiet der erfindungsgemäßen Zusammensetzungen ist die Reinigung von Textilien. Weil Wasch- und Reinigungsmittel für Textilien überwiegend alkalische pH-Werte aufweisen, werden hierfür insbesondere Lipasen eingesetzt, die im alkalischen Medium aktiv sind. Ferner ist die in einer erfindungsgemäßen Zusammensetzung bevorzugt enthaltene Lipase natürlicherweise in einem Mikroorganismus der Art Thermomyces lanuginosus oder Rhizopus oryzae oder Mucor javanicus vorhanden oder von vorgenannten natürlicherweise vorhandenen Lipasen per Mutagenese abgeleitet. Besonders bevorzugt enthalten die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen mindestens eine Lipase, die natürlicherweise in einem Mikroorganismus der Art Thermomyces lanuginosus vorhanden oder sich von vorgenannten natürlicherweise in
Thermomyces lanuginosus vorhandenen Lipasen per Mutagenese ableitet.
Natürlicherweise vorhanden bedeutet in diesem Zusammenhang, dass die Lipase ein eigenes Enzym des Mikroorganismus ist. Die Lipase kann folglich in dem Mikroorganismus von einer Nukleinsäuresequenz exprimiert werden, die Teil der chromosomalen DNA des Mikroorganismus in seiner Wildtyp-Form ist. Sie bzw. die für sie codierende Nukleinsäuresequenz ist folglich in der Wildtyp-Form des Mikroorganismus vorhanden und/oder kann aus der Wildtyp-Form des
Mikroorganismus aus diesem isoliert werden. Im Gegensatz hierzu wäre eine nicht
natürlicherweise in dem Mikroorganismus vorhandene Lipase bzw. die für sie codierende
Nukleinsäuresequenz mit Hilfe gentechnischer Verfahren in den Mikroorganismus gezielt eingebracht worden, so dass der Mikroorganismus um die Lipase bzw. die für sie codierende Nukleinsäuresequenz bereichert worden wäre. Jedoch kann eine Lipase, die natürlicherweise in einem Mikroorganismus der Art Thermomyces lanuginosus oder Rhizopus oryzae oder Mucor javanicus vorhanden ist, aber durchaus rekombinant von einem anderen Organismus hergestellt worden sein.
Der Pilz Thermomyces lanuginosus (auch bekannt unter Humicola lanuginosa) zählt zur Klasse der Eurotiomycetes (Unterklasse Eurotiomycetidae), hierin zur Ordnung der Eurotiales und hierin zur Familie Trichocomaceae und der Gattung Thermomyces. Der Pilz Rhizopus oryzae zählt zur Klasse der Zygomyceten (Unterklasse Incertae sedis), hierin zur Ordnung Mucorales und hierin wiederum zur Familie Mucoraceae und der Gattung Rhizopus. Der Pilz Mucor javanicus zählt ebenfalls zur Klasse der Zygomyceten (Unterklasse Incertae sedis), hierin zur Ordnung Mucorales und hierin wiederum zur Familie Mucoraceae, hierin dann zur Gattung Mucor. Die Bezeichnungen Thermomyces lanuginosus, Rhizopus oryzae und Mucor javanicus sind die biologischen
Artbezeichnungen innerhalb der jeweiligen Gattung.
Erfindungsgemäß bevorzugte Lipasen sind die von dem Unternehmen Amano Pharmaceuticals unter den Bezeichnungen Lipase M-AP10®, Lipase LE® und Lipase F® (auch Lipase JV®) erhältlichen Lipaseenzyme. Die Lipase F® ist beispielsweise natürlicherweise in Rhizopus oryzae vorhanden. Die Lipase M-AP10® ist beispielsweise natürlicherweise in Mucor javanicus vorhanden. Zusammensetzungen einer ganz besonders bevorzugten Ausführungsform der Erfindung enthalten mindestens eine Lipase, die ausgewählt wird aus mindestens einem oder mehreren Polypeptiden mit einer Aminosäuresequenz, die zu mindestens 90% (und zunehmend bevorzugt zu mindestens 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99,0%, 99,1 %, 99,2%, 99,3%, 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7%, 99,8%, 99,9%) zur Wildtyp Lipase aus dem Stamm DSM 4109 Thermomyces lanuginosus identisch ist. Dabei ist es erneut bevorzugt, wenn ausgehend von besagter Wildtyp Lipase aus dem Stamm DSM 4109 zumindest die Aminosäureänderung N233R vorliegt.
Es sind im Rahmen einer weiteren Ausführungsform insbesondere solche Lipasen abgeleitet von der Wildtyp Lipase aus dem Stamm DSM 4109 erfindungsgemäß bevorzugt verwendbar, die ausgewählt werden aus mindestens einem Lipase-Enzym gemäß mindestens einem der
Ansprüche 1 bis 13 der Druckschrift WO 00/60063 A1. Auf die Offenbarung Druckschrift WO 00/60063 A1 wird ausdrücklich vollumfänglich Bezug genommen.
Besonders bevorzugt wird in den Zusammensetzungen der Erfindung mindestens eine Lipase eingesetzt, die abgeleitet ist von der Wildtyp Lipase aus dem Stamm DSM 4109 und in der ausgehend von besagter Wildtyp Lipase mindestens eine Substitution einer elektrisch neutralen oder negativ geladenen Aminosäure durch eine positiv geladene Aminosäure erfolgte. Die Ladung wird in Wasser bei pH 10 bestimmt. Negative Aminosäuren im Sinne der Erfindung sind E, D, Y und C. Positiv geladene Aminosäuren im Sinne der Erfindung sind R, K und H, insbesondere R und K. Neutrale Aminosäure im Sinne der Erfindung sind G, A, V, L, I, P, F, W, S, T, M, N, Q und C, wenn C eine Disulfidbrücke ausbildet.
Im Rahmen dieser Ausführungsform der Erfindung ist es erneut bevorzugt, wenn ausgehend von der Wildtyp Lipase aus dem Stamm DSM 4109 mindestens einen der folgenden
Aminosäureaustausche in den Positionen D96L, T213R und/oder N233R, besonders bevorzugt T213R und N233R, vorliegt.
Eine höchst bevorzugte Lipase ist kommerziell unter dem Handelsnamen Lipex® von dem Unternehmen Novozymes (Dänemark) zu beziehen und vorteilhaft in den erfindungsgemäßen Reinigungszusammensetzungen einsetzbar. Besonders bevorzugt ist hierbei die Lipase Lipex® 100 L (ex Novozymes A/S, Dänemark). Bevorzugte Zusammensetzungen sind dadurch gekennzeichnet, dass bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung besagtes Lipase- Enzym aus Lipex® 100 L in einer Gesamtmenge von 0,01 bis 1 ,0 Gew.-%, insbesondere von 0,02 bis 0,1 Gew.-%, enthalten ist.
Die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen können als Enzym zusätzlich mindestens eine Mannanase enthalten. Eine in der erfindungsgemäßen Zusammensetzung (insbesondere in einem erfindungsgemäß bevorzugten Wasch- und Reinigungsmittel für Textilien) enthaltene Mannanase katalysiert im Rahmen ihrer Mannanase-Aktivität die Hydrolyse von 1 ,4-beta-D-mannosidischen Bindungen in Mannanen, Galactomannanen, Glucomannanen und Galactoglucomannanen.
Besagte erfindungsgemäße Mannanase-Enzyme werden gemäß Enzym Nomenklatur als E.C. 3.2.1.78 klassifiziert.
Die Mannanase-Aktivität eines Polypeptids bzw. Enzyms kann gemäß literaturbekannten
Testmethoden bestimmt werden. Dabei wird beispielsweise eine Testlösung in Löcher mit 4 mm Durchmesser einer Agarplatte, enthaltend 0.2 Gew.-% AZGL Galactomannan (carob), i.e. Substrat für das endo-1 ,4-beta-D-Mannanase Essay, erhältlich unter Katalognummer l-AZGMA der Firma Megazyme (http://www.megazyme.com), eingebracht.
Geeignete erfindungsgemäße Zusammensetzungen enthalten beispielsweise die Mannanase, die unter dem Namen Mannaway® von der Firma Novozymes vermarktet wird.
Mannanase-Enzyme wurden in zahlreichen Bacillus Organismen identifiziert:
WO 99/64619 offenbart Beispiele für flüssige, proteasehaltige Waschmittelzusammensetzungen mit hohem Gesamttensidgehalt von mindestens 20 Gew.-%, die zusätzlich Mannanase-Enzym umfassen.
Bevorzugterweise enthalten die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung Mannanase in einer Gesamtmenge von 0,01 bis 1 ,0 Gew.- %, insbesondere von 0,02 bis 0,1 Gew.-%.
Mannanase-Polypeptide aus Stämmen der Thermoanaerobacter Gruppe, wie Caldicellulosiruptor, sind erfindungsgemäß bevorzugt geeignet. Gleichfalls im Rahmen der Erfindung einsetzbar sind Mannanase-Polypeptide der Pilze Humicola oder Scytalidium, insbesondere der Species Humicola insolens oder Scytalidium thermophilum.
Es ist erfindungsgemäß besonders bevorzugt, wenn die erfindungsgemäßen Zusammensetzungen als Mannanase-Enzym mindestens ein Mannanase-Polypeptid aus gram-positiven alkalophilen Stämmen von Bacillus, insbesondere ausgewählt aus mindestens einem Vertreter der Gruppe aus Bacillus subtilis, Bacillus lentus, Bacillus clausii, Bacillus agaradhaerens, Bacillus brevis, Bacillus stearothermophilus, Bacillus alkalophilus, Bacillus amyloliquefaciens, Bacillus coagulans, Bacillus circulans, Bacillus lautus, Bacillus thuringiensis, Bacillus cheniformis, and Bacillus sp., besonders bevorzugt ausgewählt aus mindestens einem Vertreter der Gruppe aus Bacillus sp. 1633, Bacillus sp. AAI12, Bacillus clausii, Bacillus agaradhaerens and Bacillus licheniformis. Eine bevorzugte erfindungsgemäße Mannanase wird ausgewählt aus mindestens einem Vertreter aus der Gruppe, die gebildet wird aus
i) Polypeptiden, die eine Aminosäuresequenz umfassen, die mindestens 90% (zunehmend bevorzugt mindestens 90,5% , 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98%, 98,5%, 99,0%, 99, 1 %, 99,2%, 99,3% , 99,4%, 99,5%, 99,6%, 99,7% oder 99,8%) Sequenzidentität zu dem Polypeptid gemäß SEQ ID No.1 (vgl.
Sequenzprotokoll), und
ii) Polypeptiden, die ein Fragment von (i) sind .
Dabei ist es wiederum bevorzugt, wenn besagte bevorzugte Mannanase in einer Gesamtmenge von 0,01 bis 1 ,0 Gew.-% , insbesondere von 0,02 bis 0, 1 Gew.-%, jeweils bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung , in der erfindungsgemäßen Zusammensetzung enthalten ist.
Besonders bevorzugt, enthält die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung neben der bevorzugten Protease vom Typ der alkalischen Protease aus Bacillus lentus DSM 5483 oder neben der hierzu hinreichend ähnlichen Protease (bezogen auf die Sequenzidentität), die mehrere dieser Veränderungen in Kombination aufweist, zusätzlich mindestens eine a-Amylase. α-Amylasen (E.C. 3.2.1 .1 ) hydrolysieren als Enzym interne a-1 ,4-glycosidische Bindungen von Stärke und stärkeähnlichen Polymeren. Diese α-Amylase-Aktivität wird beispielsweise den Anmeldungen WO 97/03160 A1 und GB 1296839 zufolge in KNU (Kilo Novo Units) gemessen. Dabei steht 1 KNU für die Enzymmenge, die 5,25 g Stärke (erhältlich von der Fa. Merck, Darmstadt, Deutschland) pro Stunde bei 37°C, pH 5,6 und in Gegenwart von 0,0043 M
Calciumionen hydrolysiert. Eine alternative Aktivitäts-Bestimmungsmethode ist die sogenannte DNS-Methode, die beispielsweise in der Anmeldung WO 02/10356 A2 beschrieben wird. Danach werden die durch das Enzym bei der Hydrolyse von Stärke freigesetzten Oligosaccharide, Disaccharide und Glucoseeinheiten durch Oxidation der reduzierenden Enden mit
Dinitrosalicysäure (DNS) nachgewiesen. Die Aktivität wird in μιηοΙ reduzierende Zucker (bezogen auf Maltose) pro min und ml erhalten; hierdurch ergeben sich Aktivitätswerte in TAU. Dasselbe Enzym kann über verschiedene Methoden bestimmt werden, wobei die jeweiligen
Umrechungsfaktoren je nach Enzym variieren können und somit anhand eines Standards festgelegt werden müssen. Näherungsweise kann man kalkulieren, daß 1 KNU ca. 50 TAU entspricht. Eine weitere Aktivitätsbestimmungsmethode ist die Messung mithilfe des Quick-Start®- Testkits der Fa. Abbott, Abott Park, Illinois, USA.
Ein erfindungsgemäß bevorzugte Einsatzgebiet der erfindungsgemäßen flüssigen
Tensidzusammensetzungen ist die Reinigung von Textilien. Weil Wasch- und Reinigungsmittel für Textilien überwiegend alkalische pH-Werte aufweisen, werden hierfür insbesondere a-Amylasen eingesetzt, die im alkalischen Medium aktiv sind. Solche werden von Mikroorganismen, das heißt Pilzen oder Bakterien, vor allem denen der Gattungen Aspergillus und Bacillus produziert und sekretiert. Ausgehend von diesen natürlichen Enzymen steht weiterhin eine nahezu
unüberschaubare Fülle von Varianten zur Verfügung , die über Mutagenese abgeleitet worden sind und je nach Einsatzgebiet spezifische Vorteile aufweisen.
Beispiele hierfür sind die α-Amylasen aus Bacillus licheniformis, aus B. amyloliquefaciens und aus B. stearothermophilus sowie deren für den Einsatz in Wasch- oder Reinigungsmitteln verbesserte Weiterentwicklungen. Das Enzym aus B. licheniformis ist von der Firma Novozymes unter dem Namen Termamyl® und von der Firma Genencor unter dem Namen Purastar®ST erhältlich.
Weiterentwicklungsprodukte dieser α-Amylase sind von der Firma Novozymes unter den
Handelsnamen Duramyl® und Termamyl®ultra, von der Firma Genencor unter dem Namen Purastar®OxAm und von der Firma Daiwa Seiko Inc., Tokyo, Japan, als Keistase® erhältlich. Die a- Amylase von B. amyloliquefaciens wird von der Firma Novozymes unter dem Namen BAN® vertrieben, und abgeleitete Varianten von der α-Amylase aus B. stearothermophilus unter den Namen BSG® und Novamyl®, ebenfalls von der Firma Novozymes.
Beispiele für α-Amylasen aus anderen Organismen sind die unter den Handelsnamen Fungamyl® von der Firma Novozymes erhältlichen Weiterentwicklungen der α-Amylase aus Aspergillus niger und A. oryzae. Ein weiteres Handelsprodukt ist beispielsweise die Amylase-LT®.
Zum Stand der Technik gehören unter anderem die drei Patentanmeldungen WO 96/23873 A1 , WO 00/60060 A2 und WO 01/66712 A2, die von der Fa. Novozymes angemeldet worden sind . WO 96/23873 A1 beschreibt zum Teil mehrere verschiedene Punktmutationen in insgesamt mehr als 30 verschiedenen Positionen in vier verschiedenen Wildtypamylasen und beansprucht solche für alle Amylasen mit mindestens 80% Identität zu einer dieser vier; sie sollen geänderte enzymatische Eigenschaften hinsichtlich der Thermostabilität, der Oxidationsstabilität und der Calciumabhängigkeit aufweisen. Die Anmeldung WO 00/60060 A2 benennt ebenfalls eine Vielzahl an möglichen Aminosäureaustauschen in 10 verschiedenen Positionen an den α-Amylasen aus zwei verschiedenen Mikroorganismen und beansprucht solche für alle Amylasen mit einer Homologie von mindestens 96% Identität zu diesen. WO 01/66712 A2, schließlich, bezeichnet 31 verschiedene, zum Teil mit den zuvor genannten identische Aminosäurepositionen, die in einer der beiden in der Anmeldung WO 00/60060 A2 genannten α-Amylasen mutiert worden sind .
Aus WO 96/23873 A1 geht beispielsweise konkret die Möglichkeit hervor, in den genannten a- Amylasen ein M in Position 9 gemäß der Zählung von AA560 gegen ein L zu ersetzen, in Position 202 M gegen L und die in den Positionen 182 und 183 (beziehungsweise 183 und 184) liegenden Aminosäuren zu deletieren. WO 00/60060 A2 offenbart unter anderem konkret die
Aminosäurevariation N 195X (das heißt prinzipiell gegen jede andere Aminosäure). WO 01/66712 A2 offenbart unter anderem die Aminosäurevariationen R1 18K, G186X (darunter insbesondere den hier nicht relevanten Austausch G186R), N299X (darunter insbesondere den hier nicht relevanten Austausch N299A), R320K, E345R und R458K.
Ganz besonders bevorzugt, enthält die erfindungsgemäße flüssige Tensidzusammensetzung neben der bevorzugten Protease vom Typ der alkalischen Protease aus Bacillus lentus DSM 5483 oder eine hierzu hinreichend ähnliche Protease (bezogen auf die Sequenzidentität), die mehrere dieser Veränderungen in Kombination aufweist, zusätzlich mindestens eine α-Amylase, die bei Temperaturen zwischen 10 und 20°C eine höhere Aktivität aufweist, als die Amylase mit dem Handelsnamen„Stainzyme 12 L" der Firma Novozymes.
Erfindungsgemäß bevorzugte Zusammensetzungen enthalten α-Amylase in einer Gesamtmenge von 0,01 bis 1 ,0 Gew.-%, insbesondere von 0,02 bis 0,1 Gew.-%.
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn die flüssige Tensidzusammensetzung zusätzlich mindestens ein polyalkoxyliertes Polyamin enthält.
Bei dem polyalkoxylierten Polyamin im Rahmen der vorliegenden Erfindung und deren einzelner Aspekte handelt es sich um ein Polymer mit einem N-Atom-haltigen Rückgrat, das an den N- Atomen Polyalkoxygruppen trägt. Das Polyamin weist an den Enden (Terminus und/oder Seitenketten) primäre Aminofunktionen und im Inneren vorzugsweise sowohl sekundäre als auch tertiäre Aminofunktionen auf; gegebenenfalls kann es im Inneren auch lediglich sekundäre Aminofunktionen aufweisen, so dass sich nicht ein verzweigtkettiges, sondern ein lineares Polyamin ergibt. Das Verhältnis von primären zu sekundären Aminogruppen im Polyamin liegt vorzugsweise im Bereich von 1 :0,5 bis 1 :1 ,5, insbesondere im Bereich von 1 :0,7 bis 1 :1 . Das Verhältnis von primären zu tertiären Aminogruppen im Polyamin liegt vorzugsweise im Bereich von 1 :0,2 bis 1 : 1 , insbesondere im Bereich von 1 :0,5 bis 1 :0,8. Vorzugsweise weist das Polyamin eine mittlere Molmasse im Bereich von 500 g/mol bis 50000 g/mol, insbesondere von 550 g/mol bis 5000 g/mol auf. Die N-Atome im Polyamin sind durch Alkylengruppen, vorzugsweise durch Alkylengruppen mit 2 bis 12 C-Atomen, insbesondere 2 bis 6 C-Atomen, voneinander getrennt, wobei nicht sämtliche Alkylengruppen die gleiche C-Atomzahl aufweisen müssen. Besonders bevorzugt sind Ethylengruppen, 1 ,2-Propylengruppen, 1 ,3-Propylengruppen, und deren
Mischungen. Polyamine, die Ethylengruppen als besagte Alkylengruppe tragen, werden auch als Polyethylenimin oder PEI bezeichnet. PEI ist ein erfindungsgemäß besonders bevorzugtes Polymer mit N-Atom-haltigem Rückgrat.
Die primären Aminofunktionen im Polyamin können 1 oder 2 Polyalkoxygruppen und die sekundären Aminofunktionen 1 Polyalkoxygruppe tragen, wobei nicht jede Aminofunktion Alkoxygruppen-substituiert sein muss. Die durchschnittliche Anzahl von Alkoxygruppen pro primärer und sekundärer Aminofunktion im polyalkoxylierten Polyamin beträgt vorzugsweise 1 bis 100, insbesondere 5 bis 50. Bei den Alkoxygruppen im polyalkoxylierten Polyamin handelt es sich vorzugsweise um Polypropoxygruppen, die direkt an N-Atome gebunden sind, und/oder um Polyethoxygruppen, die an ggf. vorhandene Propoxyreste und an N-Atome gebunden sind, welche keine Propoxygruppen tragen.
Polyethoxylierte Polyamine werden durch Umsetzung von Polyaminen mit Ethylenoxid (kurz: EO) erhalten. Die polyalkoxylierten Polyamine, die Ethoxy- und Propoxy-Gruppen enthalten, sind bevorzugt durch Umsetzung von Polyaminen mit Propylenoxid (kurz: PO) und nachfolgender Umsetzung mit Ethylenoxid zugänglich.
Die durchschnittliche Anzahl von Propoxygruppen pro primärer und sekundärer Aminofunktion im polyalkoxylierten Polyamin beträgt vorzugsweise 1 bis 40, insbesondere 5 bis 20,
Die durchschnittliche Anzahl von Ethoxygruppen pro primärer und sekundärer Aminofunktion im polyalkoxylierten Polyamin beträgt vorzugsweise 10 bis 60, insbesondere 15 bis 30.
Gewunschtenfalls kann die endständige OH-Funktion Polyalkoxysubstituenten im polyalkoxylierten Polyamin teilweise oder vollständig mit einer Ci - C10, insbesondere C1-C3- Alkylgruppe verethert sein.
Erfindungsgemäß besonders bevorzugte polyalkoxylierte Polyamine können ausgewählt sein aus Polyamin umgesetzt mit 45EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 43EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 15EO + 5PO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 15PO + 30EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 5PO + 39,5EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 5PO + 15EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 10PO + 35EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion, PEI's umgesetzt mit 15PO + 30EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion und PEI's umgesetzt mit 15PO + 5EO pro primärer und sekundärer Aminofunktion. Ein ganz besonders bevorzugtes alkoxyliertes Polyamin ist PEI mit einem Gehalt von 10 bis 20 Stickstoffatomen umgesetzt mit 20 Einheiten EO pro primärer oder sekundärer Aminofunktion des Polyamins.
Ein weiterhin bevorzugter Gegenstand der Erfindung ist der Einsatz von polyalkoxylierten
Polyaminen, die erhältlich sind durch Umsetzung von Polyaminen mit Ethylenoxid und
gegebenenfalls zusätzlich Propylenoxid. Werden mit Ethylenoxid und Propylenoxyd
polyalkyoxylierte Polyamine eingesetzt, beträgt der Anteil an Propylenoxid an der Gesamtmenge des Alkylenoxids bevorzugt 2 Mol-% bis 18 Mol-%, insbesondere 8 Mol-% bis 15 Mol-%. Die flüssige Zusammensetzung enthält bezogen auf deren Gesamtgewicht polyalkoxylierte Polyamine bevorzugt in einer Gesamtmenge von 0, 1 bis 10 Gew.-%, insbesondere von 0,5 bis 5,0 Gew.-%.
Zusätzlich zu den erfindungsgemäßen Inhaltsstoffen können die erfindungsgemäßen flüssigen Tensidzusammensetzungen weitere Inhaltsstoffe enthalten, die die anwendungstechnischen und/oder ästhetischen Eigenschaften des Waschmittels weiter verbessern. Im Rahmen der vorliegenden Erfindung enthält die erfindungsgemäße Zusammensetzung vorzugsweise zusätzlich einen oder mehrere Stoffe aus der Gruppe der Bleichmittel, Komplexbildner, Gerüststoffe, Elektrolyte, pH-Stellmittel, Parfüme, Parfümträger, Fluoreszenzmittel, Farbstoffe, Hydrotrope, Schauminhibitoren, Silikonöle, polymere Verdickungsmittel, Antiredepositionsmittel,
Einlaufverhinderer, Knitterschutzmittel, Farbübertragungsinhibitoren, antimikrobiellen Wirkstoffe, Germizide, Fungizide, Antioxidantien, Konservierungsmittel, Korrosionsinhibitoren, Antistatika, Bittermittel, Bügelhilfsmittel, Phobier- und Imprägniermittel, Quell- und Schiebefestmittel, weichmachenden Komponenten sowie UV-Absorber.
Unter einem polymeren Verdickungsmittel wird erfindungsgemäß eine polymere Verbindung verstanden, die eine mittlere Molmasse (Gewichtsmittel Mw) von mehr als 1500 g/mol besitzt und die in einer Einsatzmenge von 0, 1 Gew.-% die Viskosität der erfindungsgemäßen
Zusammensetzung erhöht. Als polymeres Verdickungsmittel gelten erfindungsgemäß
insbesondere Polyacrylate. Zu den Polyacrylaten zählen Polyacrylat- oder Polymethacrylat- Verdickern, wie beispielsweise die hochmolekularen mit einem Polyalkenylpolyether, insbesondere einem Allylether von Saccharose, Pentaerythrit oder Propylen, vernetzten Homopolymere der Acrylsäure (INCI- Bezeichnung gemäß„International Dictionary of Cosmetic Ingredients" der„The Cosmetic, Toiletry and Fragrance Association (CTFA)": Carbomer), die auch als
Carboxyvinylpolymere bezeichnet werden. Solche Polyacrylsäuren sind u.a. von der Fa. 3V Sigma unter dem Handelsnamen Polygel®, z.B. Polygel DA, und von der Fa. Noveon unter dem
Handelsnamen Carbopol® erhältlich, z.B. Carbopol 940 (Molekulargewicht ca. 4.000.000), Carbopol 941 (Molekulargewicht ca. 1 . 250.000) oder Carbopol 934 (Molekulargewicht ca. 3. 000.000). Weiterhin fallen darunter folgende Acrylsäure-Copolymere: (i) Copolymere von zwei oder mehr Monomeren aus der Gruppe der Acrylsäure, Methacrylsäure und ihrer einfachen, vorzugsweise mit Ci-4-Alkanolen gebildeten, Ester (INCI Acrylates Copolymer), zu denen etwa die Copolymere von Methacrylsäure, Butylacrylat und Methylmethacrylat (CAS-Bezeichnung gemäß Chemical Abstracts Service: 25035-69-2) oder von Butylacrylat und Methylmethacrylat (CAS 25852-37-3) gehören und die beispielsweise von der Fa. Rohm & Haas unter den Handelsnamen Aculyn® und Acusol® sowie von der Firma Degussa (Goldschmidt) unter dem Handelsnamen Tego® Polymer erhältlich sind, z.B. die anionischen nicht-assoziativen Polymere Aculyn 22, Aculyn 28, Aculyn 33 (vernetzt), Acusol 810, Acusol 823 und Acusol 830 (CAS 25852-37-3); (ii) vernetzte hochmolekulare Acrylsäure-Copolymere, zu denen etwa die mit einem Allylether der Saccharose oder des Pentaerythrits vernetzten Copolymere von Οο-30-Alkylacrylaten mit einem oder mehreren Monomeren aus der Gruppe der Acrylsäure, Methacrylsäure und ihrer einfachen, vorzugsweise mit Ci-4-Alkanolen gebildeten, Ester (INCI Acrylates/C 10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer) gehören und die beispielsweise von der Fa. Noveon unter dem Handelsnamen Carbopol® erhältlich sind, z.B. das hydrophobierte Carbopol ETD 2623 und Carbopol 1382 (INCI Acrylates/C 10-30 Alkyl Acrylate Crosspolymer) sowie Carbopol Aqua 30 (früher Carbopol EX 473).
Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn die flüssige Zusammensetzung bezogen auf das Gesamtgewicht der Zusammensetzung polymere Verdickungsmittel in einer Gesamtmenge von 0 bis 0,1 Gew.-% insbesondere von 0 bis 0,05 Gew.-%, besonders bevorzugt von 0 bis 0,01 Gew.-% enthält. Ganz besonders bevorzugt ist die Zusammensetzung frei von polymeren
Verdickungsmitteln.
Als Bleichmittel können alle Stoffe dienen, die durch Oxidation, Reduktion oder Adsorption Farbstoffe zerstören bzw. aufnehmen und dadurch Materialien entfärben. Dazu gehören unter anderem hypohalogenithaltige Bleichmittel, Wasserstoffperoxid, Perborat, Percarbonat,
Peroxoessigsäure, Diperoxoazelainsäure, Diperoxododecandisäure und oxidative Enzymsysteme.
Als Gerüststoffe, die in der erfindungsgemäßen Zusammensetzung enthalten sein können, sind insbesondere Silikate, Aluminiumsilikate (insbesondere Zeolithe), Carbonate, Salze organischer Di- und Polycarbonsäuren sowie Mischungen dieser Stoffe zu nennen.
Organische Gerüststoffe, welche in der erfindungsgemäßen Zusammensetzung vorhanden sein können, sind beispielsweise die in Form ihrer Natriumsalze einsetzbaren Polycarbonsäuren, wobei unter Polycarbonsäuren solche Carbonsäuren verstanden werden, die mehr als eine Säurefunktion tragen. Beispielsweise sind dies Citronensäure, Adipinsäure, Bernsteinsäure, Glutarsäure, Äpfelsäure, Weinsäure, Maleinsäure, Fumarsäure, Zuckersäuren, Aminocarbonsäuren, sowie Mischungen aus diesen. Bevorzugte Salze sind die Salze der Polycarbonsäuren wie
Citronensäure, Adipinsäure, Bernsteinsäure, Glutarsäure, Weinsäure, Zuckersäuren und
Mischungen aus diesen.
Als Gerüststoffe sind weiter polymere Polycarboxylate geeignet. Dies sind beispielsweise die Alkalimetallsalze der Polyacrylsäure oder der Polymethacrylsäure, zum Beispiel solche mit einer relativen Molekülmasse von 600 bis 750.000 g / mol.
Geeignete Polymere sind insbesondere Polyacrylate, die bevorzugt eine Molekülmasse von 1 .000 bis 15.000 g / mol aufweisen. Aufgrund ihrer überlegenen Löslichkeit können aus dieser Gruppe wiederum die kurzkettigen Polyacrylate, die Molmassen von 1.000 bis 10.000 g / mol, und besonders bevorzugt von 1.000 bis 5.000 g / mol, aufweisen, bevorzugt sein. Geeignet sind weiterhin copolymere Polycarboxylate, insbesondere solche der Acrylsäure mit Methacrylsäure und der Acrylsäure oder Methacrylsäure mit Maleinsäure. Zur Verbesserung der Wasserlöslichkeit können die Polymere auch Allylsulfonsäuren, wie Allyloxybenzolsulfonsäure und Methallylsulfonsäure, als Monomer enthalten.
In den erfindungsgemäßen flüssigen Zusammensetzungen werden bevorzugt lösliche Gerüststoffe, wie beispielsweise Citronensäure, oder Acrylpolymere mit einer Molmasse von 1.000 bis 5.000 g / mol eingesetzt.
Ein zweiter Erfindungsgegenstand ist die Verwendung einer flüssigen Tensidzusammensetzung des ersten Erfindungsgegenstandes in einem Verfahren zur Textilwäsche.
Ein dritter Gegenstand der Erfindung ist ein Verfahren zur Textilwäsche, umfassend die
Bereitstellung einer Waschflotte durch
(i) Dosierung einer flüssigen Tensidzusammensetzung des ersten Erfindungsgegenstandes,
(ii) Vermischen dieser Dosis in mindestens ein Lösemittel, insbesondere Wasser, und
(iii) in Kontaktbringen der resultierenden Mischung mit mindestens einem Textil.
Eine Waschflotte ist erfindungsgemäß zumindest die Gesamtmenge der unter (i) und (iii) eingesetzten Komponenten.
Verfahren zur Textilreinigung zeichnen sich im allgemeinen dadurch aus, dass in mehreren Verfahrensschritten verschiedene reinigungsaktive Substanzen auf das Reinigungsgut aufgebracht und nach der Einwirkzeit abgewaschen werden, oder dass das Reinigungsgut in sonstiger Weise mit einer Zusammensetzung des ersten Erfindungsgegenstandes oder einer Lösung dieser Zusammensetzung behandelt wird. Es ist erfindungsgemäß bevorzugt, wenn im Rahmen einer Vorbehandlung von Textilien zunächst auf ausgewählte beschmutze Stellen des Textils zumindest ein Teil der besagten flüssigen Zusammensetzung direkt aufgetragen wird und anschließend nach einer Einwirkzeit (von bevorzugt 30 bis 300 Sekunden) das mindestens eine Lösemittel aus Schritt (ii), der Rest der Textilien aus Schritt (iii) und gegebenenfalls der Rest der besagten flüssigen Zusammensetzung unter Bereitstellung der Waschflotte kombiniert werden.
Wird der Waschflotte das mindestens eine Lösemittel des erfindungsgemäßen Verfahrens zugeführt, so ist es erfindungsgemäß bevorzugt, einen Volumenteil der besagten flüssigen Zusammensetzung mit 5 bis 3000 Volumenteilen des mindestens einen Lösemittels zu kombinieren. Beispiele
Folgende flüssige Waschmittelzusammensetzung wurde hergestellt durch Mischen von:
Die Waschmittel wiesen eine akzeptable Rheologie auf, waren lagerstabil (keine Phasentrennung oder Trübung) und die Protease wies auch nach der Lagerung eine hohe Aktivität auf.

Claims

Patentansprüche
1. Flüssige Tensidzusammensetzung, enthaltend bezogen auf das Gesamtgewicht der
Zusammensetzung
a) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 8,5 Gew.-% C9-C2o-Alkylbenzolsulfonat, und
b) eine Gesamtmenge von 10,0 bis 18,0 Gew.-% R -0-(CH2CH20)n-S03M
worin R für eine Ci2-is-Alkylgruppe steht, n für eine Zahl von 2 bis 3 steht und M für ein einwertiges Kation steht, und
c) eine Gesamtmenge von 1 ,0 bis 6,0 Gew.-% R2-0-(CH2CH20)m-S03M'
worin R2 für eine Ci2-is-Alkylgruppe steht, m für eine Zahl von 7 bis 8 steht und M' für ein einwertiges Kation steht, und
d) eine Gesamtmenge von 2,0 bis 10,0 Gew.-% nichtionisches Tensid, und
e) Wasser, und
f) mindestens ein Enzym.
2. Flüssige Tensidzusammensetzung, nach Anspruch 1 , dadurch gekennzeichnet, dass das alkylbenzolsulfonat Cio-Cis-Alkylbenzolsulfonat, bevorzugt Cio-Ci3-Alkylbenzolsulfonat, ist.
3. Flüssige Tensidzusammensetzung, nach einem der Ansprüche 1 oder 2, dadurch
gekennzeichnet, dass die Alkylbenzolsulfonate a) aus einer oder mehrerer Verbindungen der
Formel a,
in der R' und R" zusammen 8 bis 19, vorzugsweise 9 bis 14 und insbesondere 9 bis 12 C- Atome enthalten und X+ für ein einwertiges Kation steht, insbesondere für Na+, K+, HO-
CH2CH2NH3+, (HO-CH2CH2)3NH+.
4. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 3, dadurch
gekennzeichnet, dass n = 2 ist.
5. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 4, dadurch
gekennzeichnet, dass M = Na+ ist.
6. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 5, dadurch
gekennzeichnet, dass m = 7 ist.
7. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 6, dadurch gekennzeichnet, dass M' = Na+ ist.
8. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 7, dadurch
gekennzeichnet, dass als nichtionisches Tensid 2,0 bis 10 Gew.-%, vorzugsweise 2,5 bis 7,5 Gew.-%, weiter bevorzugt 4,0 bis 6,0 Gew.-% Fettalkoholethoxylat(e) enthalten ist.
9. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 8, dadurch
gekennzeichnet, dass als Enzym mindestens eine Protease enthalten ist.
10. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 9, dadurch
gekennzeichnet, dass als Enzym mindestens eine Protease vom Typ der alkalischen Protease aus Bacillus lentus DSM 5483 oder eine hierzu hinreichend ähnliche Protease (bezogen auf die Sequenzidentität), die mehrere dieser Veränderungen in Kombination aufweist, enthalten ist.
1 1. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 10, dadurch
gekennzeichnet, dass als Enzym mindestens eine Protease umfassend eine
Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 70% identisch ist und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99E oder R99D in Kombination mit mindestens zwei weiteren Aminosäuresubstitutionen aufweist, die ausgewählt sind aus der Gruppe bestehend aus S3T, V4I und V199I.
12. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 1 1 , dadurch
gekennzeichnet, dass als Enzym mindestens eine Protease umfassend eine
Aminosäuresequenz, die zu der in SEQ ID NO. 1 angegebenen Aminosäuresequenz über deren Gesamtlänge zu mindestens 71 %, 72%, 73%, 74%, 75%, 76%, 77%, 78%, 79%, 80%, 81 %, 82%, 83%, 84%, 85%, 86%, 87%, 88%, 89%, 90%, 90,5%, 91 %, 91 ,5%, 92%, 92,5%, 93%, 93,5%, 94%, 94,5%, 95%, 95,5%, 96%, 96,5%, 97%, 97,5%, 98% und 98,5% identisch ist, und in der Zählung gemäß SEQ ID NO. 1 die Aminosäuresubstitution R99E in Kombination mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I und V199I aufweist, insbesondere eine Protease gemäß SEQ ID NO. 1 mit den Aminosäuresubstitutionen S3T, V4I, R99E und V199I, enthalten ist.
13. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 12, dadurch
gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis der Tensidkomponente a) zur
Tensidkomponente b) 1 :9 bis 1 :2, bevorzugt 1 :6 bis 1 :3, besonders bevorzugt 1 :5 bis 1 :3, beträgt.
14. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 13, dadurch gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis der Tensidkomponente a) zur
Tensidkomponente c)2:1 bis 1:2, bevorzugt 2:1 bis 1:1, besonders bevorzugt 1.5:1 bis 1:1 beträgt.
15. Flüssige Tensidzusammensetzung nach einem der Ansprüche 1 bis 14, dadurch
gekennzeichnet, dass das Gewichtsverhältnis der Tensidkomponente a) zur
Tensidkomponente d) 2:1 bis 1:5, bevorzugt 1.5:1 bis 1:3, besonders bevorzugt 1:1 bis1:2, beträgt.
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