ES2695242T3 - Compuestos de N-heteroarilo sustituido por N-azaespirocicloalcano y composiciones para inhibir la actividad de SHP2 - Google Patents

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Zhuoliang Chen
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Jorge Garcia Fortanet
Rajesh Karki
Mitsunori Kato
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Lawrence Blas Perez
Troy Douglas Smith
Sarah Williams
John William Giraldes
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Abstract

Un compuesto de la fórmula I:**Fórmula** en la que: p se selecciona a partir de 0 y 1; q se selecciona a partir de 0 y 1; Y1 se selecciona a partir de CH y N; Y2 se selecciona a partir de CR6 y N; R1 es -XR1a; en donde R1a se selecciona a partir de arilo de 6 a 10 átomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, cicloalquenilo de 3 a 8 átomos de carbono y un grupo heteroarilo de 5 a 9 miembros que contiene de 1 a 4 heteroátomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, C(O), O y S; en donde este arilo o heteroarilo de R1a está sustituido con 1 a 5 grupos R9 independientemente seleccionados a partir de halógeno, amino, hidroxilo, N3, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, dimetil-amino, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por amino, -C(O)OR10 y -NHC(O)R10; y X se selecciona a partir de un enlace, S(O)m, O, C(O), COR11, CR10aR10b, NR11; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; cada R10a y R10b se selecciona independientemente a partir de halógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; y R11 se selecciona a partir de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R2a y R2b se seleccionan independientemente a partir de hidrógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-amino; R3a y R3b se seleccionan independientemente a partir de halógeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-amino; R4a y R4b se seleccionan independientemente a partir de hidrógeno, halógeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-amino; R5a y R5b se seleccionan independientemente a partir de hidrógeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 átomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono-amino; en donde cualesquiera dos grupos seleccionados a partir de R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5b y R7 pueden formar un anillo de 5 a 6 miembros insaturado o parcialmente saturado; R6 se selecciona a partir de hidrógeno, halógeno, ciano, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono, amino-carbonilo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por halógeno, alcoxilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por halógeno, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 átomos de carbono sustituido por amino, -S(O)1-2R6a, -C(S)R6a, -C(O)NR6aR6b, -C(NH)NR6aR6b y -NR6aC(O)R6b; en donde R6a y R6b se seleccionan independientemente a partir de hidrógeno y alquilo de 1 a 4 átomos de carbono; R7 y R8 junto con el átomo de carbono con el que están ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente de 1 a 3 heteroátomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, C(O), O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos seleccionados independientemente a partir de amino, hidroxilo, metoxilo, halógeno, metilo, metil-amino e isobutiriloxilo; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

Description

DESCRIPCION
Compuestos de N-heteroarilo sustituido por N-azaespirocicloalcano y composiciones para inhibir la actividad de SHP2.
Antecedentes
Campo de la invencion
La presente invencion se refiere a los compuestos capaces de inhibir la actividad de SHP2. La invencion proporciona ademas un proceso para la preparacion de los compuestos de la invencion, las preparaciones farmaceuticas que comprenden tales compuestos y que usan tales compuestos y composiciones en el manejo de las enfermedades o los trastornos asociados con la actividad aberrante de SHP2.
Antecedentes de la invencion
La fosfatasa de homologia con Src 2 (SHP2) es una fosfatasa de tirosina no receptora de las proteinas codificada por el gen PTPN11 que contribuye a multiples funciones celulares, incluyendo proliferacion, diferenciacion, mantenimiento del ciclo celular y migracion. La SHP2 esta involucrada en la senalizacion a traves de las sendas de quinasa de proteina activada por mitogeno Ras, de JAK-STAT, o de quinasa de fosfoinositol 3-AKT.
SHP2 tiene dos dominios de homologia con Src 2 N-terminales (N-SH2 y C-SH2), un dominio catalitico (PTP), y una cola C-terminal. Los dos dominios SH2 controlan la localizacion subcelular y la regulacion funcional de SHP2. La molecula existe en una conformacion inactiva auto-inhibida estabilizada por una red de enlace que involucra residuos a partir de ambos dominios N-SH2 y PTP. La estimulacion mediante, por ejemplo, citoquinas o factores de crecimiento, conduce a la exposicion del sitio catalitico, lo cual da como resultado la activacion enzimatica de SHP2. Se han identificado mutaciones en el gen PTPN11 y subsiguientemente en SHP2 en varias enfermedades humanas, tales como sindrome de Noonan, sindrome de Leopard, leucemias mielomonociticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda, y canceres de mama, pulmon y colon. La SHP2, por consiguiente, representa un objetivo altamente atractivo para el desarrollo de terapias novedosas para el tratamiento de diferentes enfermedades. Los compuestos de la presente invencion satisfacen la necesidad de moleculas pequenas para inhibir la actividad de SHP2.
Resumen de la invencion
En un aspecto, la presente invencion proporciona compuestos de la formula I:
Figure imgf000002_0001
_ y N; Y 2 se selecciona a partir de CR6 y N; R1 es -XR 1a; en donde R1a se selecciona a partir de arilo de 6 a 10 atomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, cicloalquenilo de 3 a 8 atomos de carbono y un grupo heteroarilo de 5 a 9 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, C(O), O y S; en donde este arilo o heteroarilo de R1a esta sustituido con 1 a 5 grupos R9 independientemente seleccionados a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, dimetil-amino, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino, -C(O)OR10 y -NHC (O)R10; y X se selecciona a partir de un enlace, S(O)m, O, C(O), COR11, CR10aR10b, NR11; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; cada R10a y R10b se selecciona independientemente a partir de halogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; y R11 se selecciona a partir de hidrogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; R2a y R2b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; R3a y R3b se seleccionan independientemente a partir de halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; R4a y R4b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; R5a y R5b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; en donde cualesquiera dos grupos seleccionados a partir de R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5b y R7 pueden formar un anillo de 5 a 6 miembros insaturado o parcialmente saturado; R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, ciano, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino-carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino, -S(O)1-2 R6a, -C(S)R6a, -C(O)NR6aR6b, -C(NH) NR6aR6b y -NR6aC(O)R6b; en donde R6a y R6b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente de 1 a 3 heteroatomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, C(O), O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos independientemente seleccionados a partir de amino, hidroxilo, metoxilo, halogeno, metilo, metil-amino e isobutiriloxilo, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
En un segundo aspecto, la presente invencion proporciona una composicion farmaceutica, la cual contiene un compuesto de la formula I; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, en mezcla con uno o mas excipientes adecuados.
En un tercer aspecto, la presente invencion proporciona un compuesto de formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de una enfermedad en un animal en el que la modulacion de la actividad de SHP2 pueda prevenir, inhibir, o disminuir la patologia y/o sintomatologia de la enfermedad, en donde el compuesto de formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo se administra al animal, en una cantidad terapeuticamente efectiva.
En un cuarto aspecto, la presente invencion proporciona un compuesto de formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de una enfermedad en un animal en donde la modulacion de la actividad de SHP2 pueda prevenir, inhibir, o disminuir la patologia y/o sintomatologia de la enfermedad, en donde el compuesto de formula I, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo se administra al animal, en una cantidad terapeuticamente efectiva, en una combinacion simultanea o en secuencia con un producto terapeutico contra el cancer.
Definiciones
Los terminos generales utilizados anteriormente en la presente y mas adelante en la presente, de preferencia tienen, dentro del contexto de esta divulgacion, los siguientes significados, a menos que se indique de otra manera, en donde los terminos mas generales siempre que se utilicen, independientemente unos de otros, pueden ser reemplazados por definiciones mas especificas o, por consiguiente, siguen definiendo realizaciones mas detalladas de la invencion:
“Alquilo” se refiere a una fraccion de hidrocarburo completamente saturado ramificado o no ramificado que tiene hasta 20 atomos de carbono. A menos que se disponga de otra manera, alquilo se refiere a las fracciones de hidrocarburo que tienen de 1 a 7 atomos de carbono (alquilo-Cw), o de 1 a 4 atomos de carbono (alquilo-C1-4). Los ejemplos representativos de alquilo incluyen, pero no se limitan a, metilo, etilo, propilo normal, iso-propilo, butilo normal, butilo secundario, iso-butilo, butilo terciario, pentilo normal, iso-pentilo, neopentilo, hexilo normal, 3-metilhexilo, 2,2-dimetil-pentilo, 2,3-dimetil-pentilo, heptilo normal, octilo normal, nonilo normal, decilo normal, y similares. Un alquilo sustituido es un grupo alquilo que contiene uno o mas, tal como uno, dos o tres sustituyentes seleccionados a partir de los grupos halogeno, hidroxilo, o alcoxilo. Alquilo sustituido por halogeno y alcoxilo sustituido por halogeno, pueden ser de de cadena recta o ramificada e incluyen metoxilo, etoxilo, difluoro-metilo, trifluoro-metilo, pentafluoro-etilo, difluoro-metoxilo, trifluoro-metoxilo, y similares.
“Arilo" significa un ensamble de anillo aromatico monociclico o biciclico fusionado que contiene de seis a diez atomos de carbono del anillo. Por ejemplo, arilo puede ser fenilo o naftilo, de preferencia fenilo. “Arileno” significa un radical divalente derivado a partir de un grupo arilo.
Heteroarilo" es como se define para arilo anteriormente, en donde uno o mas de los miembros del anillo es un heteroatomo. Por ejemplo, heteroarilo de 5 a 10 atomos de carbono es de un minimo de 5 miembros como sea indicado por los atomos de carbono, pero que estos atomos de carbono pueden ser reemplazados por un heteroatomo. En consecuencia, heteroarilo de 5 a 10 atomos de carbono incluye piridilo, indolilo, indazolilo, quinoxalinilo, quinolinilo, benzo-furanilo, benzo-piranilo, benzo-tiopiranilo, benzo-[1,3]-dioxol, imidazolilo, benzoimidazolilo, pirimidinilo, furanilo, oxazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, tienilo, etc.
"Cicloalquilo” significa un ensamble de anillos monociclico, biciclico fusionado, o policiclico puenteado, saturado o parcialmente insaturado, que contiene el numero de atomos del anillo indicado. Por ejemplo, cicloalquilo de 3 a 10 atomos de carbono incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, etc.
“Heterocicloalquilo” significa cicloalquilo, como se define en esta solicitud, con la condicion de que uno o mas de los atomos de carbono del anillo indicados, son reemplazados por una fraccion seleccionada a partir de -O-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O)- o -S(O)2-, en donde R es hidrogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, o un grupo protector de nitrogeno. Por ejemplo, heterocicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, como se utiliza en esta solicitud para describir los compuestos de la invencion, incluye morfolino, pirrolidinilo, pirrolidinil-2-ona, piperazinilo, piperidinilo, piperidinilona, 1,4-dioxa-8-aza-espiro-[4.5]-dec-8-ilo, tiomorfolino, sulfano-morfolino, sulfono-morfolino, etc.
"Halogeno" (o halo) de preferencia representa cloro o fluor, pero tambien puede ser bromo o yodo.
“SHP2” significa “fosfatasa de homologia con Src 2” y tambien es conocida como SH-PTP2, SH-PTP3, Syp, PTP1D, PTP2C, SAP-2 o PTPN11.
Los canceres que alojan “mutaciones de PTPN11” incluyen, pero no se limitan a: N58Y; D61Y, V; E69K; A72V, T, D; E76G, Q, K (ALL); G60A; D61Y; E69V; F71K; A72V; T73I; E76G, K; R289G; G503V (AML); G60R, D61Y, V, N; Y62D; E69K; A72T, V; T73I; E76K, V, G, A, Q; E139D; G503A, R; Q506P (JMML); G60V; D61V; E69K; F71L; A72V; E76A (MDS); Y63C (CMML); Y62C; E69K; T507K (neuroblastoma); V46L; N58S; E76V (cancer de pulmon); R138Q (melanoma); E76G (cancer de colon).
Los compuestos de la formula I pueden tener diferentes formas isomericas. Por ejemplo, cualquier atomo de carbono asimetrico puede estar presente en la configuracion (R), (S), o (R,S), de preferencia en la configuracion (R) o (S). Los sustituyentes en un doble enlace o en especial en un anillo, pueden estar presentes en la forma cis (= Z-) o trans (= E-). Los compuestos, por lo tanto, pueden estar presentes como mezclas de isomeros o de preferencia como los isomeros puros, de preferencia como los diaestereomeros puros o los enantiomeros puros.
Cuando se utiliza la forma plural (por ejemplo, compuestos, sales), esta incluye al singular (por ejemplo, un solo compuesto, una sola sal). “Un compuesto” no excluye que este presente (por ejemplo, en una formulacion farmaceutica) mas de un compuesto de la formula I (o de una sal del mismo), representando el "un" meramente el articulo indefinido.
Siempre que se mencione un compuesto o los compuestos de la formula I, esto tambien pretende incluir ademas los N-oxidos de estos compuestos y/o los tautomeros de los mismos.
El termino ”y/o un N-oxido del mismo, un tautomero del mismo, y/o una sal (de preferencia farmaceuticamente aceptable) del mismo” en especial significa que un compuesto de la formula I puede estar presente como tal o en mezcla con su N-oxido, como el tautomero (por ejemplo, debido al tautomerismo de ceto-enol, lactama-lactima, amida-acido imidico, o enamina-imina) o en mezcla con su tautomero (por ejemplo, reaccion de equivalencia causada por su tautomero), o como una sal del compuesto de la formula I y/o cualquiera de estas formas o las mezclas de dos o mas de estas formas.
Para los siguientes compuestos, el grupo NH2 unido al anillo de pirazina es critico para la potencia. El analisis de la estructura cristalografica muestra el grupo NH2 en una interaccion intramolecular con el grupo carbonilo de esqueleto del residuo de SHP2 E250:
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La presente invencion tambien incluye todas las variaciones isotopicas adecuadas de los compuestos de la invencion, o de las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos. Una variacion isotopica de un compuesto de la invencion, o de una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, se define como una en donde cuando menos un atomo es reemplazado por un atomo que tenga el mismo numero atomico pero una masa atomica diferente de la masa atomica usualmente encontrada en la naturaleza. Los ejemplos de los isotopos que se pueden incorporar en los compuestos de la invencion y en las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, incluyen, pero no se limitan a, los isotopos de hidrogeno, carbono, nitrogeno y oxigeno, tales como 2H, 3H, 11C, 13C, 14C, 15N, 17O, 18O, 35S, 18F, 36Cl y 123I. Ciertas variaciones isotopicas de los compuestos de la invencion y de las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, por ejemplo, aquellas en donde se incorpora un isotopo radioactivo, tal como 3H o 14C, son utiles en los estudios de distribucion de farmacos y/o de sustratos en el tejido. En los ejemplos particulares, se pueden utilizar los isotopos de 3H y 14C por su facilidad de preparacion y detectabilidad. En otros ejemplos, la sustitucion con isotopos, tales como 2H, puede proporcionar ciertas ventajas terapeuticas que resultan de la mayor estabilidad metabolica, tal como una mayor vida media in vivo o requerimientos de dosificacion reducida. Las variaciones isotopicas de los compuestos de la invencion o de las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos se pueden preparar en terminos generales mediante los procedimientos convencionales utilizando las variaciones isotopicas apropiadas de los reactivos adecuados. Por ejemplo, un compuesto de la invencion puede existir en una forma deuterada como se muestra a continuacion:
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Descripcion de las realizaciones preferidas
La presente invencion se refiere a los compuestos capaces de inhibir la actividad de SHP2. En un aspecto de la invencion, con respecto a los compuestos de la formula I, -XR 1a es -SR 1a y se selecciona a partir de:
Figure imgf000006_0001
En otro aspecto de la invencion, -XR ia es -SR ia y se selecciona a partir de:
Figure imgf000006_0002
En un aspecto de la invencion, se proporciona un compuesto, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, seleccionado de:
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Ċ
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En otro aspecto, con respecto a los compuestos de la formula I, estan los compuestos de la formula la:
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en donde: n se selecciona a partir de 1,2, 3 y 4; p se selecciona a partir de 0 y 1; q se selecciona a partir de 0 y 1; Yi se selecciona a partir de CH y N; Y2 se selecciona a partir de CR6 y N; Y4 se selecciona independientemente a partir de N, C(O), y CR9; en donde solamente un Y4 es C(O); R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, metilo y amino-carbonilo; R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos seleccionados independientemente a partir de amino, halogeno, hidroxilo, amino-metilo y metil-amino, o
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 5 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente de 1 a 2 heteroatomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, O, C(O), y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs esta sustituido con 1 a 3 grupos independientemente seleccionados a partir de amino, hidroxilo, metoxilo, halogeno, metilo, metil-amino e isobutiriloxilo; o R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 5 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O, C(O), y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 4 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O, C(O), y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metilamino;
R9 se selecciona a partir de halogeno, amino, dimetil-amino, hidroxilo, N3, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, -C(O)OR10 y -NHC(O)R10; R10 se selecciona a partir de hidrogeno, fenilo y naftilo; en donde el fenilo de R10 esta insustituido o sustituido con metoxilo; o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
En un aspecto adicional de la invencion estan los compuestos, o las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, seleccionados a partir de:
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En otro aspecto de la invencion estan los compuestos de la formula II:
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en donde: p se selecciona a partir de 0 y 1; q se selecciona a partir de 0 y 1; Yi se selecciona a partir de CH y N; Y2 se selecciona a partir de CR6 y N; R1 se selecciona a partir de arilo de 6 a 10 atomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, cicloalquenilo de 3 a 8 atomos de carbono y un grupo heteroarilo de 5 a 9 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos seleccionados a partir de N, O y S; en donde este arilo o heteroarilo de R1a esta sustituido con 1 a 5 grupos R9 independientemente seleccionados a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino, -C(O)OR10 y -NHC (O)R10; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; cada R10a y R10b se selecciona independientemente a partir de halogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; y R11 se selecciona a partir de hidrogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; R2a y R2b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; R3a y R3b se seleccionan independientemente a partir de halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; R4a y R4b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; R5a y R5b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino; en donde cualesquiera dos grupos seleccionados a partir de R2a, R3a, R4, R5, R6a y Rza pueden formar un anillo de 5 a 6 miembros insaturado o parcialmente insaturado; R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, ciano, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino-carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino; R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 puede estar insustituido o sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
En un aspecto adicional de la invencion estan los compuestos de la formula Ila:
Figure imgf000016_0001
en donde: n se selecciona a partir de 1,2, 3 y 4; p se selecciona a partir de 0 y 1; q se selecciona a partir de 0 y 1; Yi se selecciona a partir de CH y N; Y2 se selecciona a partir de CR6 y N; Y4 se selecciona a partir de N y CR9; R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, metilo y amino-carbonilo;
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 puede estar insustituido o sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo saturado de 5 miembros que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo saturado de 6 miembros que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo saturado de 4 miembros que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 esta sustituido con amino,
R9 se selecciona a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, -C(O)OR10 y -NHC(O)R10; R10 se selecciona a partir de hidrogeno, fenilo y naftilo; en donde el fenilo de R10 esta insustituido o sustituido con metoxilo; o una sal farmaceuticamente aceptable de los mismos.
En un aspecto adicional de la invencion estan los compuestos, o las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos, seleccionados a partir de:
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En otro aspecto de la invencion esta un compuesto, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, seleccionado a partir de
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En un aspecto adicional de la invencion esta un compuesto, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, seleccionado de:
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Figure imgf000025_0005
En un aspecto adicional de la invencion esta un compuesto que es
Figure imgf000025_0001
una sal farmaceuticamente aceptable del mismo,
o un compuesto que es:
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o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo,
o un compuesto que es:
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o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo,
o un compuesto que es:
Figure imgf000025_0004
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo,
o un compuesto que es:
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o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
Farmacologfa y Utilidad
La fosfatasa de homologfa con Src 2 (SHP2) es una fosfatasa de tirosina de las protefnas codificada por el gen PTPN11 que contribuye a multiples funciones celulares, incluyendo proliferacion, diferenciacion, mantenimiento del ciclo celular y migracion. La SHP2 esta involucrada en la senalizacion a traves de las sendas de la quinasa de protefna activada por mitogeno Ras, de JAK-STAT, o de la quinasa de fosfoinositol 3-AKT. La SHP2 media activacion de las quinasas MAP Erkl y Erk2 (Erkl/2, Erk) mediante las quinasas de tirosina receptoras, tales como ErbBl, ErbB2 y c-Met.
La SHP2 tiene dos dominios de homologfa con Src 2 N-terminales (N-SH2 y C-SH2), un dominio catalftico (PTP), y una cola C-terminal. Los dos dominios SH2 controlan la localizacion subcelular y la regulacion funcional de SHP2. La molecula existe en una conformacion inactiva, inhibiendo su propia actividad por medio de una red de enlace que involucra residuos a partir de ambos dominios N-SH2 y PTP. En respuesta al factor de estimulacion del crecimiento, la SHP2 se enlaza a los sitios fosforilados con tirosina especfficos sobre las protefnas de atraque tales como Gab1 y Gab2 por medio de sus dominios SH2. Esto induce un cambio de conformacion que da como resultado la activacion de SHP2.
Se han identificado mutaciones en PTPN11 en varias enfermedades humanas, tales como sfndrome de Noonan, sfndrome de Leopard, leucemias mielomonocfticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda, y canceres de mama, pulmon y colon. SHP2 es una molecula de senalizacion importante corriente abajo para una variedad de quinasas de tirosina receptoras, incluyendo los receptores del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF-R), del factor de crecimiento de fibroblastos (FGF-R), y del factor de crecimiento epidermico (EGF-R). SHP2 tambien es una molecula de senalizacion importante corriente abajo para la activacion de la senda de quinasa de protefna activada por mitogeno (MAP), la cual puede conducir a la transformacion celular, un requisito previo para el desarrollo de cancer. La eliminacion genetica de SHP2 inhibio significativamente el crecimiento celular de las lfneas celulares de cancer de pulmon con mutacion de SHP2 o translocalizaciones de EML4/ALK, asf como los canceres de mama y los canceres esofagicos amplificados por el receptor del factor de crecimiento epidermico (EGFR). La SHP2 tambien se activa corriente abajo de los oncogenes en el carcinoma gastrico, linfoma macrocelular anaplasico y glioblastoma.
Sfndrome de Noonan (NS) y Sfndrome de Leopard (LS) - las mutaciones de PTPN11 provocan LS (multiples lentigenes, anormalidades de la conduccion electrocardiografica, hipertelorismo ocular, estenosis pulmonar, genitalia anormal, retardacion de crecimiento, sordera neurosensorial), y NS (anomalfas congenitas incluyendo defectos cardfacos, anormalidades craneofaciales y estatura corta). Ambos trastornos son parte de una familia de sfndromes dominantes autosomicos causados por mutaciones de la lfnea germinal en los componentes de la senda de quinasa de protefna activadora de mitogeno RAS/RAF/MEK/ERK, requeridos para el crecimiento y la diferenciacion celular normal. La regulacion aberrante de esta senda tiene profundos efectos, en particular sobre el desarrollo cardfaco, que da como resultado diversas anormalidades, incluyendo defectos valvuloseptales y/o cardiomiopatfa hipertrofica (HCM). Las perturbaciones de la senda de senalizacion de MAPK han sido establecidas como centrales para estos trastornos y se han identificado varios genes candidatos a lo largo de esta senda en los seres humanos, incluyendo mutaciones en KRAS, NRAS, SOS1, RAF1, BRAF, MEK1, MEK2, SHOC2, y CBL. El gen mas comunmente mutado en NS y LS es PTPN11. Las mutaciones de la lfnea germinal en PTPN11 (SHP2) se encuentran en aproximadamente el 50 por ciento de los casos con NS y casi todos los pacientes con LS que comparten ciertas caracterfsticas con NS. Para NS, las sustituciones Y62D e Y63C en la protefna son en gran parte invariantes y estan entre las mutaciones mas comunes. Ambas de estas mutaciones afectan a la conformacion catalfticamente inactiva de SHP2 sin perturbar el enlace de la fosfatasa a sus componentes de senalizacion fosforilados.
Leucemias mielomonocfticas juveniles (JMML) - Las mutaciones somaticas en PTPN11 (SHP2) se presentan en aproximadamente el 35 por ciento de los pacientes con JMML, un trastorno mieloproliferativo infantil (MPD). Estas mutaciones de ganancia de funcion son tfpicamente mutaciones puntuales en el dominio N-SH2 o en el dominio de fosfatasa, que impiden la auto-inhibicion entre el dominio catalftico y el dominio N-SH2, lo cual da como resultado la actividad de SHP2.
Leucemia mieloide aguda - Las mutaciones de PTPN11 se han identificado en: aproximadamente el 10 por ciento de las leucemias agudas pediatricas, tales como sindrome mielodisplasico (MDS); aproximadamente el 7 por ciento de leucemia linfoblastica aguda de celulas-B (B-ALL); y aproximadamente el 4 por ciento de leucemia mieloide aguda (AML).
Las mutaciones de NS y leucemia provocan cambios en los aminoacidos localizados en la interfase formada por los dominios N-SH2 y PTP en la conformacion de SHP2 auto-inhibida, alterando la interaccion intramolecular inhibidora, y conduciendo a la hiperactividad del dominio catalitico.
La SHP2 actua como un regulador positivo en la senalizacion de la quinasa de tirosina receptora (RTK). Los canceres que contienen alteraciones de RTK (EGFRamp, Her2amp, FGFRamp, Metamp, RTK translocalizada/activada, es decir, ALK, BCR/ABL) incluyen Los canceres esofagico, de mama, pulmon, colon, gastrico, glioma, de cabeza y cuello.
El cancer esofagico es una malignidad del esofago. Hay diversos subtipos, primordialmente cancer de celulas escamosas (<50 por ciento) y adenocarcinoma. Hay un alto indice de expresion de RTK en el adenocarcinoma esofagico y en el cancer de celulas escamosas. Por consiguiente, se puede emplear un inhibidor de SPH2 de la invencion para las estrategias de tratamiento innovadoras.
El cancer de mama es un importante tipo de cancer y una causa primordial de muerte en las mujeres, en donde las pacientes desarrollan resistencia a los farmacos actuales. Hay cuatro mayores subtipos de canceres de mama, incluyendo luminal A, luminal B, tipo Her2, y triple negativo/tipo basal. El cancer de mama triple negativo (TNBC) es un agresivo cancer de mama que carece de una terapia dirigida especifica. El receptor del factor de crecimiento epidermico I (EGFR) emergio como un objetivo prometedor en el cancer de mama triple negativo (TNBC). La inhibicion de Her2 asi como del receptor del factor de crecimiento epidermico I (EGFR) por medio de SHP2 puede ser una terapia prometedora en el cancer de mama.
El cancer de pulmon - NSCLC (cancer pulmonar no microcelular) es actualmente una importante causa de mortalidad relacionada con cancer. Contando por aproximadamente el 85 por ciento de los canceres pulmonares (predominantemente adenocarcinomas y carcinomas de celulas escamosas). Aunque la quimioterapia citotoxica sigue siendo una parte importante del tratamiento, las terapias dirigidas basadas en alteraciones geneticas, tales como EGFR y ALK en el tumor tienen mas probabilidades de beneficiarse de una terapia dirigida.
Cancer de colon - Se sabe que de aproximadamente el 30 % al 50 % de los tumores colo-rectales tienen un KRAS mutado (anormal), y se presentan mutaciones de BRAF en el 10 al 15 % de los canceres colo-rectales. Para un subconjunto de pacientes cuyos tumores colo-rectales han demostrado que sobre-expresan los receptores del factor de crecimiento epidermico (EGFR), estos pacientes exhiben una respuesta clinica favorable a la terapia anti-EGFR. El cancer gastrico es uno de los tipos de cancer mas prevalecientes. Se conoce en la materia la expresion aberrante de las quinasas de tirosina, como es reflejado por la fosforilacion de tirosina aberrante en las celulas de cancer gastrico. Tres quinasas de tirosina receptoras, c-met (receptor de HGF), receptor de FGF 2, y erbB2/neu, con frecuencia se amplifican en los carcinomas gastricos. Por consiguiente, la subversion de diferentes sendas de senales puede contribuir al progreso de diferentes tipos de canceres gastricos.
El neuroblastoma es un tumor pediatrico del sistema nervioso simpatico en desarrollo, contando por aproximadamente el 8 % de los canceres infantiles. Se ha postulado que las alteraciones genomicas del gen de quinasa de linfoma anaplasico (ALK) contribuyen a la patogenesis del neuroblastoma.
Carcinoma de cabeza y cuello de celulas escamosas (SCCHN). Los altos niveles de expresion de los receptores del factor de crecimiento epidermico (EGFR) estan correlacionados con un mal pronostico y con la resistencia a la terapia de radiacion en una variedad de canceres, en su mayor parte en el carcinoma de cabeza y cuello de celulas escamosas (SCCHN). El bloqueo de la senalizacion de los receptores del factor de crecimiento epidermico (EGFR) da como resultado la inhibicion de la estimulacion del receptor, la proliferacion celular, y una invasividad y metastasis reducidas. Los receptores del factor de crecimiento epidermico (EGFR), por consiguiente, son un objetivo primario para la nueva terapia contra el cancer en el carcinoma de cabeza y cuello de celulas escamosas (SCCHN).
La presente invencion se refiere a los compuestos capaces de inhibir la actividad de SHP2. La invencion proporciona ademas un proceso para la preparacion de los compuestos de la invencion y las preparaciones farmaceuticas que comprenden estos compuestos. Otro aspecto de la presente invencion se refiere a un metodo para el tratamiento de los trastornos mediados por SHP2, el cual comprende el paso de administrar a un paciente que lo necesite, una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la formula I como se define en el Resumen de la invencion.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde los trastornos mediados por SHP2 son los canceres seleccionados a partir de, pero no limitandose a: JMML; leucemia mieloblastica aguda (AML); MDS; B-ALL; neuroblastoma; esofagico; cancer de mama; cancer de pulmon; cancer de colon; cancer gastrico, cancer de cabeza y cuello, o en donde la enfermedad o trastorno mediado por la actividad de SHP2 se selecciona de Sindrome de Noonan, Sindrome de Leopard, Leucemias mielomonociticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda, cancer de mama, cancer de esofago, cancer de pulmon, cancer de colon, cancer de cabeza, neuroblastoma, carcinoma de celulas escamosas de la cabeza y cuello, carcinoma gastrico, linfoma anaplasico de celulas grandes y glioblastoma.
Los compuestos de la presente invencion tambien pueden ser utiles en el tratamiento de otras enfermedades o condiciones relacionadas con la actividad aberrante de SHP2. Por consiguiente, como un aspecto adicional, la invencion se refiere a un metodo para el tratamiento de un trastorno seleccionado a partir de: NS; LS; JMML; leucemia mieloblastica aguda (AML); MDS; B-ALL; neuroblastoma; esofagico; cancer de mama; cancer de pulmon; cancer de colon; cancer gastrico; cancer de cabeza y cuello.
Un inhibidor de SPH2 de la presente invencion se puede combinar utilmente con otro compuesto farmacologicamente activo, o con dos o mas compuestos farmacologicamente activos diferentes, en particular en el tratamiento de cancer. Por ejemplo, un compuesto de la formula (I), o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente, se puede administrar de una manera simultanea, en secuencia o por separado, en combinacion con uno o mas agentes seleccionados a partir de agentes de quimioterapia, por ejemplo, inhibidores mitoticos, tales como un taxano, un alcaloide vinca, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, vinorelbina o vinflunina, y otros agentes contra el cancer, por ejemplo, cisplatina, 5-fluoro-uracilo o 5-fluoro-2,4-(1H,3H)-pirimidinadiona (5FU), flutamida o gemcitabina. Por lo tanto, la invencion proporciona una combinacion de un inhibidor de SHP2 de la presente invencion y uno o mas compuestos farmaceuticamente activos, en particular en donde el otro compuesto o compuestos farmaceuticamente activos son para uso en el tratamiento del cancer, y mas particularmente en donde el otro compuesto o compuestos farmaceuticamente activos se seleccionan de un alcaloide vinca, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, vinorelbina, vinflunina, cisplatino, 5-fluorouracilo, 5-fluoro-2-4 (1H, 3H)-pirimidinadina (5FU), flutamida y gemcitabina.
Estas combinaciones pueden ofrecer ventajas significativas, incluyendo una actividad sinergica, en terapia.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde el compuesto mencionado se administra parenteralmente.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde el compuesto mencionado se administra intramuscularmente, intravenosamente, subcutaneamente, oralmente, pulmonarmente, intratecalmente, topicamente o intranasalmente.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde el compuesto mencionado se administra sistemicamente.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde el paciente es un mamifero.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde el paciente es un primate.
En ciertas realizaciones, la presente invencion se refiere al metodo anteriormente mencionado, en donde el paciente es un ser humano.
En otro aspecto, la presente invencion se refiere a un metodo para el tratamiento de un trastorno mediado por SHP2, el cual comprende el paso de: administrar a un paciente que lo necesite, una cantidad terapeuticamente efectiva de un agente quimioterapeutico en combinacion con una cantidad terapeuticamente efectiva de un compuesto de la formula I como se define en el Resumen de la invencion.
Composiciones Farmaceuticas
En otro aspecto, la presente invencion proporciona composiciones farmaceuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapeuticamente efectiva de uno o mas de los compuestos descritos anteriormente, formulado junto con uno o mas vehiculos (aditivos) y/o diluyentes farmaceuticamente aceptables. Como se describe con detalle mas adelante, las composiciones farmaceuticas de la presente invencion se pueden formular especialmente para su administracion en forma solida o liquida, incluyendo aquellas adecuadas para las siguientes: (1) administracion oral, por ejemplo, purgas (soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas), tabletas, por ejemplo, aquellas destinadas para absorcion bucal, sublingual, y sistemica, bolos, polvos, granulos, pastas para su aplicacion a la lengua; (2) administracion parenteral, por ejemplo, mediante inyeccion subcutanea, intramuscular, intravenosa o epidural como, por ejemplo, una solucion o suspension esteril, o una formulacion de liberacion sostenida; (3) aplicacion topica, por ejemplo, como una crema, unguento, o un parche de liberacion controlada o una aspersion aplicada a la piel; (4) intravaginalmente o intra-rectalmente, por ejemplo, como u pesario, crema o espuma; (5) sublingualmente; (6) ocularmente; (7) transdermicamente; (8) nasalmente; (9) pulmonarmente; o (10) intratecalmente.
La expresion "cantidad terapeuticamente efectiva", como se utiliza en la presente, significa la cantidad de un compuesto, material, o de una composicion que comprende un compuesto de la presente invencion, la cual es efectiva para producir algun efecto terapeutico deseado en cuando menos una subpoblacion de las celulas en un animal, en una proporcion razonable de beneficio/riesgo aplicable a cualquier tratamiento medico.
La expresion "farmaceuticamente aceptable" se emplea en la presente para referirse a los compuestos, materiales, composiciones, y/o formas de dosificacion que, dentro del alcance de un buen juicio medico, son adecuados para utilizarse en contacto con los tejidos de los seres humanos y animales sin una excesiva toxicidad, irritacion, respuesta alergica, u otro problema o complicacion, de una manera conmensurada con una proporcion razonable de beneficio/riesgo.
La expresion "vehiculo farmaceuticamente aceptable", como se utiliza en la presente, significa un material, composicion o vehiculo farmaceuticamente aceptable, tal como un relleno liquido o solido, diluyente, excipiente, auxiliar de elaboracion (por ejemplo, lubricante, talco, magnesio, calcio o estearato de zinc, o acido estearico), o material encapsulante de solvente, involucrado en la portacion o el transporte del compuesto objeto desde un organo o una porcion del cuerpo, hasta otro organo u otra porcion del cuerpo. Cada vehiculo debe ser "aceptable" en el sentido de que sea compatible con los otros ingredientes de la formulacion y no perjudicial para el paciente. Algunos ejemplos de los materiales que pueden servir como vehiculos farmaceuticamente aceptables incluyen: (1) azucares, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; (2) almidones, tales como almidon de maiz y almidon de papa; (3) celulosa y sus derivados, tales como carboxi-metil-celulosa de sodio, etil-celulosa y acetato de celulosa; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; (9) aceites, tales como aceite de cacahuate, aceite de semilla de algodon, aceite de azafran, aceite de ajonjoli, aceite de oliva, aceite de maiz y aceite de semilla de soya; (10) glicoles, tales como propilenglicol; (11) polioles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; (12) esteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agentes reguladores, tales como hidroxido de magnesio e hidroxido de aluminio; (15) acido alginico; (16) agua sin pirogeno; (17) solucion salina isotonica; (18) solucion de Ringer; (19) alcohol etilico; (20) soluciones reguladoras del pH; (21) poliesteres, policarbonatos y/o polianhidridos; y (22) otras sustancias no toxicas compatibles empleadas en las formulaciones farmaceuticas.
Como se estipula anteriormente, ciertas realizaciones de los presentes compuestos pueden contener un grupo funcional basico, tal como amino, o alquil-amino, y, por consiguiente, son capaces de formar sales farmaceuticamente aceptables con acidos farmaceuticamente aceptables. El termino "sales farmaceuticamente aceptables" con respecto a esto, se refiere a las sales de adicion de acido inorganicas y organicas relativamente no toxicas de los compuestos de la presente invencion. Estas sales se pueden preparar in situ en el vehiculo de administracion, o en el proceso de elaboracion de la forma de dosificacion, o mediante la reaccion por separado de un compuesto purificado de la invencion en su forma de base libre con un acido organico o inorganico adecuado, y aislar la sal formada de esta manera durante la purificacion subsiguiente. Las sales representativas incluyen las sales de bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato, y lauril-sulfonato, y similares. (Vease, por ejemplo, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66: 1-19).
Las sales farmaceuticamente aceptables de los compuestos objeto incluyen las sales no toxicas convencionales o las sales de amonio cuaternario de los compuestos, por ejemplo, a partir de los acidos organicos o inorganicos no toxicos. Por ejemplo, estas sales no toxicas convencionales incluyen aquellas derivadas a partir de acidos inorganicos, tales como clorhidrato, bromhidrico, sulfurico, sulfamico, fosforico, nitrico, y similares; y las sales preparadas a partir de acidos organicos, tales como acetico, propionico, succinico, glicolico, estearico, lactico, malico, tartarico, citrico, ascorbico, palmitico, maleico, hidroximaleico, fenil-acetico, glutamico, benzoico, saliciclico, sulfanilico, 2-acetoxi-benzoico, fumarico, toluen-sulfonico, metan-sulfonico, etan-disulfonico, oxalico, isotionico, y similares.
En otros casos, los compuestos de la presente invencion pueden contener uno o mas grupos acidos funcionales y, por consiguiente, son capaces de formar sales farmaceuticamente aceptables con bases farmaceuticamente aceptables. El termino "sales farmaceuticamente aceptables" en estas instancias se refiere a las sales de adicion de base inorganicas y organicas relativamente no toxicas de los compuestos de la presente invencion. Estas sales se pueden preparar de la misma manera in situ en el vehiculo de administracion o en el proceso de elaboracion de la forma de dosificacion, o mediante la reaccion por separado del compuesto purificado en su forma de acido libre con una base adecuada, tal como el hidroxido, carbonato o bicarbonato de un cation de metal farmaceuticamente aceptable, con amoniaco, o con una amina organica primaria, secundaria o terciaria farmaceuticamente aceptable.
Las sales alcalinas o alcalinoterreas representativas incluyen las sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio, y aluminio, y similares. Las aminas organicas representativas utiles para la formacion de las sales de adicion de base incluyen etil-amina, dietil-amina, etilen-diamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina, y similares. (Vease, por ejemplo, Berge et al., supra)
Tambien pueden estar presentes en las composiciones los agentes humectantes, emulsionantes y lubricantes, tales como lauril-sulfato de sodio y estearato de magnesio, asi como los agentes colorantes, agentes de liberacion, agentes de recubrimiento, agentes edulcorantes, saborizantes y perfumantes, conservantes y antioxidantes.
Los ejemplos de los antioxidantes farmaceuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes solubles en agua, tales como acido ascorbico, clorhidrato de cisteina, bisulfato de sodio, metabisulfito de sodio, sulfito de sodio, y similares; (2) antioxidantes solubles en aceite, tales como palmitato de ascorbilo, hidroxianisol butilado (BHA), hidroxi-tolueno butilado (BHT), lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol, y similares; y (3) agentes quelantes de metales, tales como acido citrico, acido etilen-diamina-tetra-acetico (EDTA), sorbitol, acido tartarico, acido fosforico, y similares.
Las formulaciones de la presente invencion incluyen aquellas adecuadas para administracion oral, nasal, topica (incluyendo bucal y sublingual), rectal, vaginal y/o parenteral. Las formulaciones se pueden presentar, de una manera conveniente, en una forma de dosificacion unitaria, y se pueden preparar mediante cualesquiera metodos bien conocidos en la materia de la farmacia. La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con un material portador para producir una sola forma de dosificacion variara dependiendo del huesped que sea tratado y del modo particular de administracion. La cantidad de ingrediente activo que se puede combinar con un material portador para producir una sola forma de dosificacion, en terminos generales, sera la cantidad del compuesto que produzca un efecto terapeutico. En terminos generales, del cien %, esta cantidad estara en el intervalo de aproximadamente el 0.1 por ciento a aproximadamente el noventa y nueve por ciento de ingrediente activo, de preferencia de aproximadamente el 5 por ciento a aproximadamente el 70 por ciento, mas preferiblemente de aproximadamente el 10 por ciento a aproximadamente el 30 por ciento.
En ciertas realizaciones, una formulacion de la presente invencion comprende un excipiente seleccionado a partir del grupo que consiste en ciclodextrinas, celulosas, liposomas, agentes formadores de micelios, por ejemplo, acidos biliares, y vehiculos polimericos, por ejemplo, poliesteres y polianhidridos; y un compuesto de la presente invencion. En ciertas realizaciones, una formulacion anteriormente mencionada hace que un compuesto de la presente invencion sea oralmente biodisponible.
Los metodos para la preparacion de estas formulaciones o composiciones incluyen el paso de poner en asociacion un compuesto de la presente invencion con el vehiculo y, opcionalmente, uno o mas ingredientes auxiliares. En general, las formulaciones se preparan poniendo en asociacion de una manera uniforme e intima un compuesto de la presente invencion con los vehiculos liquidos, o con los vehiculos solidos finamente divididos, o con ambos, y entonces, si es necesario, se configura el producto.
Las formulaciones de la invencion adecuadas para su administracion oral pueden estar en la forma de capsulas, pastillas, pildoras, tabletas, grageas (utilizando una base saborizada, usualmente sacarosa y acacia o tragacanto), polvos, granulos, o como una solucion, suspension o dispersion solida en un liquido acuoso o no acuoso, o como una emulsion liquida de aceite en agua o de agua en aceite, o como un elixir o jarabe, o como pastillas (utilizando una base inerte, tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y acacia) y/o como enjuagues bucales y similares, cada uno conteniendo una cantidad previamente determinada de un compuesto de la presente invencion, como un ingrediente activo. Un compuesto de la presente invencion tambien se puede administrar como un bolo, electuario o pasta.
En las formas de dosificacion solidas de la invencion, para su administracion oral (capsulas, tabletas, pildoras, grageas, polvos, granulos, trociscos, y similares), el ingrediente activo se mezcla con uno o mas vehiculos farmaceuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o difosfato de calcio, y/o cualquiera de los siguientes: (1) rellenos o extensores, tal como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol, y/o acido silicico; (2) aglutinantes, tales como, por ejemplo, carboxi-metil-celulosa, alginatos, gelatina, polivinil-pirrolidona, sacarosa y/o acacia; (3) humectantes, tales como glicerol; (4) agentes desintegrantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidon de papa o de tapioca, acido alginico, ciertos silicatos, y carbonato de sodio; (5) agentes retardantes de solucion, tales como parafina; (6) aceleradores de absorcion, tales como compuestos de amonio cuaternario, y tensoactivos, tales como poloxamero y lauril-sulfato de sodio; (7) agentes humectantes, tales como, por ejemplo, alcohol cetilico, monoestearato de glicerol, y tensoactivos no ionicos; (8) absorbentes, tales como caolin y arcilla de bentonita; (9) lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles solidos, lauril-sulfato de sodio, estearato de zinc, estearato de sodio, acido estearico, y mezclas de los mismos; (10) agentes colorantes; y (11) agentes de liberacion controlada, tales como crospovidona o etil-celulosa. En el caso de las capsulas, tabletas y pildoras, las composiciones farmaceuticas tambien pueden comprender agentes reguladores. Las composiciones solidas de un tipo similar tambien se pueden emplear como rellenos en las capsulas de gelatina de cubierta blanda y dura utilizando excipientes tales como lactosa o azucares de leche, asi como polietilenglicoles de alto peso molecular, y similares.
Una tableta se puede hacer mediante compresion o moldeo, opcionalmente con uno o mas ingredientes auxiliares. Las tabletas comprimidas se pueden preparar utilizando un aglutinante (por ejemplo, gelatina o hidroxi-metilcelulosa), diluyente inerte, conservador, desintegrante (por ejemplo, glicolato de almidon de sodio o carboxi-metilcelulosa de sodio reticulada), agente de actividad superficial o de dispersion. Las tabletas moldeadas se pueden hacer mediante el moldeo, en una maquina adecuada, de una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente liquido inerte.
Las tabletas, y otras formas de dosificacion solidas de las composiciones farmaceuticas de la presente invencion, tales como grageas, capsulas, pildoras, y granulos, opcionalmente se pueden marcar o preparar con recubrimientos y cubiertas, tales como recubrimientos hemisfericos y otros recubrimientos bien conocidos en la tecnica de la formulacion farmaceutica. Tambien se pueden formular para proporcionar una liberacion lenta o controlada del ingrediente activo en las mismas, utilizando, por ejemplo, hidroxi-propil-metil-celulosa en diferentes proporciones para proporcionar el perfil de liberacion deseado, otras matrices polimericas, liposomas y/o microesferas. Se pueden formular para liberacion rapida, por ejemplo, se pueden secar por congelacion. Se pueden esterilizar, por ejemplo, mediante filtracion a traves de un filtro de retencion de bacterias, o mediante la incorporacion de agentes esterilizantes en la forma de composiciones solidas esteriles que se pueden disolver en agua esteril, o en algun otro medio inyectable esteril inmediatamente antes de usarse. Estas composiciones tambien pueden contener opcionalmente agentes opacificantes, y pueden ser de una composicion tal que liberen los ingredientes activos solamente, o preferencialmente, en cierta porcion del tracto gastrointestinal, opcionalmente en una forma retardada. Los ejemplos de las composiciones de empotramiento que se pueden utilizar incluyen sustancias polimericas y ceras. El ingrediente activo tambien puede estar en una forma microencapsulada, si es apropiado, con uno o mas excipientes anteriormente descritos.
Las formas de dosificacion liquidas para administracion oral de los compuestos de la invencion incluyen emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes, y elixires farmaceuticamente aceptables. En adicion al ingrediente activo, las formas de dosificacion liquidas pueden contener diluyentes inertes comunmente utilizados en este campo, tales como, por ejemplo, agua u otros solventes, agentes solubilizantes y emulsionantes, tales como alcohol etilico, alcohol isopropilico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencilico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilen-glicol, aceites (en particular, aceites de semilla de algodon, de cacahuate, de maiz, de germen, de oliva, de ricino, y de ajonjoli), glicerol, alcohol tetrahidrofurilico, polietilen-glicoles y esteres de acidos grasos de sorbitan, y mezclas de los mismos.
Ademas de los diluyentes inertes, las composiciones orales tambien pueden incluir adyuvantes, tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y de suspension, agentes edulcorantes, saborizantes, colorantes, perfumantes, y conservantes.
Las suspensiones, en adicion a los compuestos activos, pueden contener agentes de suspension, como por ejemplo, alcoholes isoestearilicos etoxilados, esteres de sorbitol y de sorbitan de polioxietileno, celulosa microcristalina, metahidroxido de aluminio, bentonita, agar-agar, y tragacanto, y mezclas de los mismos.
Las formulaciones de las composiciones farmaceuticas de la invencion para administracion rectal o vaginal se pueden presentar como un supositorio, el cual se puede preparar mediante la mezcla de uno o mas compuestos de la invencion con uno o mas excipientes o vehiculos no irritantes adecuados que comprenden, por ejemplo, manteca de cacao, polietilen-glicol, una cera para supositorios o un salicilato, y que sean solidos a temperatura ambiente, pero liquidos a la temperatura corporal, y por consiguiente, que se fundan en el recto o en la cavidad vaginal y liberen el compuesto activo.
Las formulaciones de la presente invencion que son adecuadas para administracion vaginal tambien incluyen pesarios, tampones, cremas, geles, pastas, espumas, o formulaciones en aerosol que contengan los vehiculos que son conocidos en la materia como apropiados.
Las formas de dosificacion para la administracion topica o transdermica de un compuesto de esta invencion incluyen polvos, aerosoles, unguentos, pastas, cremas, lociones, geles, soluciones, parches, e inhalantes. El compuesto activo se puede mezclar bajo condiciones esteriles con un vehiculo farmaceuticamente aceptable, y con cualesquiera conservantes, reguladores del pH, o propelentes que se puedan requerir.
Los unguentos, pastas, cremas, y geles pueden contener, en adicion a un compuesto activo de esta invencion, excipientes, tales como grasas animales y vegetales, aceites, ceras, parafinas, almidon, tragacanto, derivados de celulosa, polietilen-glicoles, siliconas, bentonitas, acido silicico, talco, y oxido de zinc, o mezclas de los mismos. Los polvos y aerosoles pueden contener, en adicion a un compuesto de esta invencion, excipientes tales como lactosa, talco, acido silicico, hidroxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas sustancias. Los aerosoles pueden contener adicionalmente los propelentes acostumbrados, tales como cloro-fluorohidrocarburos, e hidrocarburos insustituidos volatiles, tales como butano y propano.
Los parches transdermicos tienen la ventaja adicional de proporcionar un suministro controlado de un compuesto de la presente invencion al cuerpo. Estas formas de dosificacion se pueden hacer mediante la disolucion o dispersion del compuesto en el medio apropiado. Tambien se pueden utilizar potenciadores de absorcion para aumentar el flujo del compuesto a traves de la piel. La velocidad de este flujo se puede controlar ya sea proporcionando una membrana de control de velocidad, o bien dispersando el compuesto activo en una matriz polimerica o en un gel. Las formulaciones oftalmicas, los unguentos, los polvos, soluciones, y similares, tambien se contemplan dentro del alcance de esta invencion.
Las composiciones farmaceuticas de esta invencion adecuadas para administracion parenteral comprenden uno o mas compuestos de la invencion en combinacion con una o mas soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones acuosas o no acuosas isotonicas esteriles farmaceuticamente aceptables, o polvos esteriles que se puedan reconstituir hasta soluciones o dispersiones inyectables esteriles justo antes de usarse, las cuales pueden contener azucares, alcoholes, antioxidantes, reguladores del pH, bacteriostaticos, solutos que hagan a la formulacion isotonica con la sangre del receptor pretendido, o agentes de suspension o espesantes.
Los ejemplos de los vehiculos acuosos y no acuosos adecuados que se pueden emplear en las composiciones farmaceuticas de la invencion incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol, y similares), y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva, y esteres organicos inyectables, tales como oleato de etilo. Se puede mantener la fluidez apropiada, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento, tales como lecitina, mediante el mantenimiento del tamano de particula requerido en el caso de las dispersiones, y mediante el uso de tensoactivos.
Estas composiciones tambien pueden contener adyuvantes, tales como conservantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes, y agentes de dispersion. Se puede asegurar la prevencion de la accion de los microorganismos sobre los presentes compuestos mediante la inclusion de diferentes agentes antibacterianos y antifungicos, por ejemplo, parabeno, cloro-butanol, acido sorbico de fenol, y similares. Tambien puede ser deseable incluir agentes isotonicos, tales como azucares, cloruro de sodio, y similares, en las composiciones. En adicion, se puede provocar una absorcion prolongada de la forma farmaceutica inyectable mediante la inclusion de agentes que demoren la absorcion, tales como monoestearato de aluminio y gelatina.
En algunos casos, con el objeto de prolongar el efecto de un farmaco, es deseable hacer mas lenta la absorcion del farmaco a partir de la inyeccion subcutanea o intramuscular. Esto se puede llevar a cabo mediante el uso de una suspension liquida de un material cristalino o amorfo que tenga una pobre solubilidad en agua. La velocidad de absorcion del farmaco depende entonces de su velocidad de disolucion, la cual, a su vez, puede depender del tamano del cristal y de la forma cristalina. De una manera alternativa, se lleva a cabo la absorcion demorada de una forma de farmaco parenteralmente administrada mediante la disolucion o suspension del farmaco en un vehiculo oleoso.
Las formas de deposito inyectable se hacen mediante la formacion de matrices microencapsuladas de los presentes compuestos en polimeros biodegradables, tales como polilactido-poliglicolido. Dependiendo de la proporcion del farmaco al polimero, y de la naturaleza del polimero particular empleado, se puede controlar la velocidad de liberacion del farmaco. Los ejemplos de otros polimeros biodegradables incluyen poli-(orto-esteres) y poli-(anhidridos). Las formulaciones inyectables de deposito tambien se preparan mediante el atrape del farmaco en liposomas o microemulsiones que sean compatibles con el tejido corporal.
Cuando los compuestos de la presente invencion se administran como productos farmaceuticos a seres humanos y animales, se pueden dar por si mismos o como una composicion farmaceutica que contenga, por ejemplo, del 0.1 al 99 % (mas preferiblemente, del 10 al 30 %) del ingrediente activo en combinacion con un vehiculo farmaceuticamente aceptable.
Las preparaciones de la presente invencion se pueden dar oralmente, parenteralmente, topicamente, o rectalmente. Desde luego, se dan en las formas adecuadas para cada via de administracion. Por ejemplo, se administran en tabletas o en la forma de capsulas, mediante inyeccion, inhalacion, locion para los ojos, unguento, supositorio, etc., administracion mediante inyeccion, infusion o inhalacion; administracion topica mediante locion o unguento; y administracion rectal mediante supositorios. Se prefiere la administracion oral.
Las expresiones "administracion parenteral" y "administrado parenteralmente", como se utilizan en la presente, significan los modos de administracion diferentes de la administracion enteral y topica, usualmente mediante inyeccion, e incluyen, sin limitacion, la inyeccion e infusion intravenosa, intramuscular, intra-arterial, intratecal, intracapsular, intraorbital, intracardiaca, intradermica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutanea, subcuticular, intra­ articular, subcapsular, subaracnoidea, intraespinal, e intraesternal.
Las expresiones "administracion sistemica", "administrado sistemicamente", "administracion periferica", y "administrado perifericamente", como se utilizan en la presente, significan la administracion de un compuesto, farmaco, u otro material, diferente de hacerlo directamente en el sistema nervioso central, de tal manera que entre al sistema del paciente y, por lo tanto, se someta al metabolismo y a otros procesos similares, por ejemplo, la administracion subcutanea.
Estos compuestos se pueden administrar a seres humanos y a otros animales para terapia mediante cualquier via de administracion adecuada, incluyendo oralmente, nasalmente, como por ejemplo, mediante un aerosol, rectalmente, intravaginalmente, parenteralmente, intracisternalmente, y topicamente, mediante polvos, unguentos o gotas, incluyendo bucalmente y sublingualmente.
Independientemente de la via de administracion seleccionada, los compuestos de la presente invencion, los cuales se pueden utilizar en una forma hidratada adecuada, y/o las composiciones farmaceuticas de la presente invencion, se formulan en formas de dosificacion farmaceuticamente aceptables mediante los metodos convencionales conocidos por los expertos en este campo.
Los niveles de dosificacion reales de los ingredientes activos en las composiciones farmaceuticas de esta invencion se pueden variar para obtener una cantidad del ingrediente activo que sea efectiva para lograr la respuesta terapeutica deseada para un paciente, composicion, y modo de administracion particulares, sin que sean toxicos para el paciente.
El nivel de dosificacion seleccionado dependera de una variedad de factores, incluyendo la actividad del compuesto particular de la presente invencion empleado, o del ester, sal, o amida del mismo, la via de administracion, el tiempo de administracion, la velocidad de excrecion o el metabolismo del compuesto particular empleado, la velocidad y el grado de absorcion, la duracion del tratamiento, otros farmacos, compuestos, y/o materiales utilizados en combinacion con el compuesto particular empleado, la edad, el sexo, el peso, la condicion, la salud general y la historia medica previa del paciente que se este tratando, y factores similares bien conocidos en el ambito medico. Un medico o veterinario que tenga una experiencia ordinaria en la materia puede determinar facilmente y prescribir la cantidad efectiva de la composicion farmaceutica requerida. Por ejemplo, el medico o veterinario podria iniciar con dosis de los compuestos de la invencion empleados en la composicion farmaceutica en niveles mas bajos que los requeridos, con el objeto de lograr el efecto terapeutico deseado, y aumentar gradualmente la dosificacion hasta que se logre el efecto deseado.
En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la invencion sera la cantidad del compuesto que sea la dosis mas baja efectiva para producir un efecto terapeutico. Esta dosis efectiva dependera en general de los factores descritos anteriormente. En terminos generales, las dosis oral, intravenosa, intracerebro-ventricular y subcutanea de los compuestos de esta invencion para un paciente, cuando se utilicen para los efectos analgesicos indicados, estaran en el intervalo de aproximadamente 0.0001 a aproximadamente 100 miligramos por kilogramo de peso corporal al dia.
Si se desea, la dosis diaria efectiva del compuesto activo se puede administrar como dos, tres, cuatro, cinco, seis o mas sub-dosis administradas por separado a intervalos apropiados a traves de todo el dia, opcionalmente, en formas de dosificacion unitaria. La dosificacion preferida es una administracion al dia.
Aunque es posible que un compuesto de la presente invencion se administre solo, es preferible administrar el compuesto como una formulacion (composicion) farmaceutica.
Los compuestos de acuerdo con la invencion se pueden formular para su administracion en cualquier forma conveniente para utilizarse en medicina humana o veterinaria, por analogia con otros productos farmaceuticos. En otro aspecto, la presente invencion proporciona composiciones farmaceuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapeuticamente efectiva de uno o mas de los presentes compuestos, como se describe anteriormente, formulados junto con uno o mas vehiculos (aditivos) y/o diluyentes farmaceuticamente aceptables. Como se describe con detalle mas adelante, las composiciones farmaceuticas de la presente invencion se pueden formular especialmente para su administracion en forma solida o liquida, incluyendo aquellas adaptadas para las siguientes: (1) administracion oral, por ejemplo, liquidos (soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas), tabletas, bolos, polvos, granulos, pastas para su aplicacion a la lengua; (2) administracion parenteral, por ejemplo, mediante inyeccion subcutanea, intramuscular o intravenosa como, por ejemplo, una solucion o suspension esteril; (3) aplicacion topica, por ejemplo, como una crema, unguento o aspersion aplicada a la piel, pulmones, o membranas mucosas; o (4) intravaginalmente o intra-rectalmente, por ejemplo, como un pesario, crema o espuma; (5) sublingualmente o bucalmente; (6) ocularmente; (7) transdermicamente; u (8) nasalmente.
El termino "tratamiento" pretende abarcar tambien la profilaxis, terapia y curacion.
El paciente que reciba este tratamiento es cualquier animal que lo necesite, incluyendo primates, en particular, los seres humanos, y otros mamfferos, tales como equinos, reses, cerdos y ovejas; y aves de corral y mascotas en general.
El compuesto de la invencion se puede administrar como tal o en mezclas con vehfculos farmaceuticamente aceptables y tambien se puede administrar en conjunto con agentes antimicrobianos, tales como penicilinas, cefalosporinas, aminoglicosidos y glicopeptidos. La terapia conjunta, por consiguiente, incluye la administracion en secuencia, simultanea y separada del compuesto activo de una manera en que no desaparezcan enteramente los efectos terapeuticos del primer compuesto administrado cuando se administre el siguiente.
La tecnologfa de microemulsion puede mejorar la biodisponibilidad de algunos agentes farmaceuticos lipofflicos (insolubles en agua). Los ejemplos incluyen Trimetrina (Dordunoo, S. K. et al., Drug Development and Industrial Pharmacy, 17(12), 1685-1713, 1991 y REV 5901 (Sheen, P. C., et al., J Pharm Sci 80(7), 712-714, 1991). Entre otras cosas, la microemulsion proporciona una mejor biodisponibilidad al dirigir preferencialmente la absorcion hacia el sistema linfatico en lugar del sistema circulatorio, desviandose de esta manera del hfgado, y previniendo la destruccion de los compuestos en la circulacion hepatobiliar.
Aunque se contemplan todos los vehfculos anfifflicos adecuados, los vehfculos actualmente preferidos son en terminos generales aquellos que tengan el estado de generalmente reconocidos como seguros (GRAS), y que puedan tanto solubilizar el compuesto de la presente invencion como microemulsionarlo en una etapa posterior cuando la solucion entre en contacto con una fase de agua compleja (tal como una encontrada en el tracto gastro­ intestinal humano). Usualmente, los ingredientes anfifflicos que satisfacen estos requerimientos tienen valores de HLB (balance hidrofflico a lipofflico) de 2 a 20, y sus estructuras contienen radicales alifaticos de cadena recta en el intervalo de 6 a 20 atomos de carbono. Los ejemplos son los gliceridos grasos polietilenglicolizados y los polietilenglicoles.
Se contemplan en particular los vehfculos anfifflicos comercialmente disponibles, incluyendo la serie Gelucire, Labrafil, Labrasol, o Lauroglicol (todos elaborados y distribuidos por Gattefosse Corporation, Saint Priest, Francia), mono-oleato de PEG, di-oleato de PEG, mono-laurato y di-laurato de PEG, Lecitina, Polisorbato 80, etc. (producidos y distribuidos por un numero de companfas en EUA y en todo el mundo).
Los polfmeros hidrofflicos adecuados para utilizarse en la presente invencion son aquellos que sean facilmente solubles en agua, que se puedan unir de una manera covalente a un lfpido formador de vesfculas, y que sea tolerados in vivo sin efectos toxicos (es decir, que sean biocompatibles). Los polfmeros adecuados incluyen polietilenglicol (PEG), acido polilactico (tambien denominado como polilactido), acido poliglicolico (tambien denominado como poliglicolido), un copolfmero de acido polilactico-poliglicolico, y poli-alcohol vinflico. Los polfmeros preferidos son aquellos que tienen un peso molecular de aproximadamente 100 o 120 Daltones hasta aproximadamente 5,000 o 10,000 Daltones, y de una manera mas preferible de aproximadamente 300 Daltones a aproximadamente 5,000 Daltones. En una realizacion particularmente preferida, el polfmero es polietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 100 a aproximadamente 5,000 Daltones, y de una manera mas preferible que tiene un peso molecular de aproximadamente 300 a aproximadamente 5,000 Daltones. En una realizacion particularmente preferida, el polfmero es polietilenglicol de 750 Daltones (PEG(750)). Los polfmeros tambien se pueden definir por el numero de monomeros en los mismos; una realizacion preferida de la presente invencion utiliza polfmeros de cuando menos aproximadamente 3 monomeros, tales como polfmeros de PEG consistentes en tres monomeros (de aproximadamente 150 Daltones).
Otros polfmeros hidrofflicos que pueden ser adecuados para utilizarse en la presente invencion incluyen polivinilpirrolidona, poli-metoxazolina, poli-etil-oxazolina, poli-hidroxi-propil-metacrilamida, poli-metacrilamida, poli-dimetilacrilamida, y las celulosas derivadas, tales como hidroxi-metil-celulosa o hidroxi-etil-celulosa.
En ciertas realizaciones, la formulacion de la presente invencion comprende un polfmero biocompatible seleccionado a partir del grupo que consiste en poliamidas, policarbonatos, polialquilenos, polfmeros de esteres acrflicos y metacrflicos, polfmeros de polivinilo, poliglicolidos, polisiloxanos, poliuretanos y copolfmeros de los mismos, celulosas, polipropileno, polietilenos, poliestireno, polfmeros de acido lactico y acido glicolico, polianhfdridos, poli(orto)esteres, poli(acido butflico), poli-(acido valerico), poli-(lactido-co-caprolactona), polisacaridos, protefnas, poli-acidos hialuronicos, poli-ciano-acrilatos, y mezclas o copolfmeros de los mismos.
Las ciclodextrinas son oligosacaridos cfclicos, consistentes en 6, 7, u 8 unidades de glucosa, designadas por las letras griegas alfa, beta, o gamma, respectivamente. No se sabe que existan ciclodextrinas con menos de 6 unidades de glucosa. Las unidades de glucosa estan enlazadas mediante enlaces alfa-1,4-glucosfdicos. Como una consecuencia de la conformacion de la cadena de las unidades de azucar, todos los grupos hidroxilo secundario (en C-2, C-3) se localizan sobre un lado del anillo, mientras que todos los grupos hidroxilo primario en C-6 estan situados sobre el otro lado. Como un resultado, las caras externas son hidrofflicas, haciendo que las ciclodextrinas sean solubles en agua. En contraste, las cavidades de las ciclodextrinas son hidrofobicas, debido a que estan revestidas por el hidrogeno de los atomos C-3 y C-5, y por los oxfgenos tipo eter. Estas matrices permiten formar complejos con una variedad de compuestos relativamente hidrofobicos, incluyendo, por ejemplo, compuestos esteroideos, tales como 17.beta.-estradiol (ver, por ejemplo, van Uden et al., Plant Cell Tiss. Org. Cult. 38:1-3-113 (1994)). La formacion de complejo tiene lugar mediante interacciones de Van der Waals, y mediante la formacion del enlace de hidrogeno. Para una revision general de la quimica de las ciclodextrinas, ver Wenz, Agnew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:803-822 (1994).
Las propiedades fisicoquimicas de los derivados de ciclodextrina dependen mucho de la clase y del grado de sustitucion. Por ejemplo, su solubilidad en agua esta en el intervalo desde insoluble (por ejemplo, triacetil-betaciclodextrina) hasta 147 % soluble (peso/volumen) (G-2-beta-ciclodextrina). En adicion, son solubles en muchos solventes organicos. Las propiedades de las ciclodextrinas hacen posible controlar la solubilidad de diferentes componentes de la formulacion mediante el aumento o la disminucion de su solubilidad.
Se han descrito numerosas ciclodextrinas y los metodos para su preparacion. Por ejemplo, Parmeter (I) et al. (Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 3,453,259), y Gramera et al. (Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 3,459,731), describieron las ciclodextrinas electroneutras. Otros derivados incluyen las ciclodextrinas con propiedades cationicas [Parmeter (II), Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 3,453,257], las ciclodextrinas reticuladas insolubles (Sohms, Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 3,420,788), y las ciclodextrina con propiedades anionicas [Parmeter (III), Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 3,426,011]. Entre los derivados de ciclodextrina con propiedades anionicas, se han adjuntado a la ciclodextrina progenitora los acidos carboxilicos, acidos fosforosos, acidos fosfinosos, acidos fosfonicos, acidos fosforicos, acidos tiofosfonicos, acidos tiosulfinicos, y acidos sulfonicos [ver Parmeter (III), supra]. Adicionalmente, los derivados de sulfoalquil-eter-ciclodextrina han sido descritos por Stella et al. (Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 5,134,217).
Los liposomas consisten en cuando menos una membrana de bicapa de lipido que encierra a un compartimiento interno acuoso. Los liposomas se pueden caracterizar por el tipo de membrana y por el tamano. Las vesiculas unilamelares pequenas (SUVs) tienen una sola membrana, y tipicamente estan en el intervalo de entre 0.02 y 0.05 micras de diametro; las vesiculas unilamelares grandes (LUVs) son tipicamente mayores de 0.05 micras. Las vesiculas grandes oligolamelares y las vesiculas multilamelares tienen multiples capas de membrana, normalmente concentricas, y son tipicamente mayores de 0.1 micras. Los liposomas con varias membranas no concentricas, es decir, varias vesiculas mas pequenas contenidas dentro de una vesicula mas grande, se denominan como vesiculas multivesiculares.
Un aspecto de la presente invencion se refiere a las formulaciones que comprenden liposomas, las cuales contienen un compuesto de la presente invencion, en donde la membrana del liposoma se formula para proporcionar a un liposoma una mayor capacidad portadora. De una manera alternativa o en adicion, el compuesto de la presente invencion puede estar contenido dentro, o adsorbido sobre, la bicapa del liposoma. El compuesto de la presente invencion se puede acumular con un tensoactivo de lipido, y puede ser portado dentro del espacio interno del liposoma; en estos casos, la membrana del liposoma se formula para resistir los efectos alteradores del aglomerado de agente activo-tensoactivo.
De acuerdo con una realizacion de la presente invencion, la bicapa de lipido de un liposoma contiene lipidos derivados con polietilenglicol (PEG), de tal manera que la cadena de PEG se extiende desde la superficie interna de la bicapa de lipido hacia el espacio interno encapsulado por el liposoma, y se extiende desde el exterior de la bicapa de lipido hasta el medio ambiente circundante.
Los agentes activos contenidos dentro de los liposomas de la presente invencion estan en una forma solubilizada. Los agregados de tensoactivo y agente activo (tales como emulsiones o micelios que contengan al agente activo de interes) se pueden atrapar dentro del espacio interno de los liposomas de acuerdo con la presente invencion. Un tensoactivo actua para dispersar y solubilizar al agente activo, y se puede seleccionar a partir de cualquier tensoactivo alifatico, cicloalifatico o aromatico adecuado, incluyendo, pero no limitandose a, las lisofosfatidil-colinas (LPCS) biocompatibles de diferentes longitudes de cadena (por ejemplo, de aproximadamente 14 atomos de carbono a aproximadamente 20 atomos de carbono). Tambien se pueden utilizar lipidos derivados de polimero, tales como lipidos de PEG, para la formacion de los micelios, debido a que actuaran para inhibir la fusion del micelio/membrana, y debido a que la adicion de un polimero a las moleculas de tensoactivo reduce la CMC del tensoactivo y ayuda a la formacion del micelio. Se prefieren los tensoactivos con CMCs en el intervalo micromolar; se pueden utilizar tensoactivos con CMC mas alta para preparar los micelios atrapados dentro de los liposomas de la presente invencion; sin embargo, los monomeros del tensoactivo de micelios podrian afectar a la estabilidad de la bicapa del liposoma, y serian un factor en el diseno de un liposoma de una estabilidad deseada.
Los liposomas de conformidad con la presente invencion se pueden preparar mediante cualquiera de una variedad de tecnicas conocidas en este campo. Ver, por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 4,235,871; Solicitud del TCP Publicada Numero WO 96/14057; New RRC, Liposomes: A practical approach, IRL Press, Oxford (1990), paginas 33-104; Lasic DD, Liposomes from physics to applications, Elsevier Science Publishers BV, Amsterdam, 1993.
Por ejemplo, los liposomas de la presente invencion se pueden preparar mediante la difusion de un lipido derivado con un polimero hidrofilico en los liposomas preformados, tal como mediante la exposicion de los liposomas preformados a los micelios compuestos de polimeros injertados con lipido, en concentraciones de lipido correspondientes al porcentaje molar final del lipido derivado que se desee en el liposoma. Tambien se pueden formar liposomas que contengan un polimero hidrofilico mediante homogeneizacion, hidratacion de campo de lipido, o tecnicas de extrusion, como se conocen en este campo.
En un aspecto de la presente invencion, los liposomas se preparan para tener tamanos sustancialmente homogeneos en un intervalo de tamanos seleccionado. Un metodo de dimensionamiento efectivo involucra extruir una suspension acuosa de los liposomas a traves de una serie de membranas de policarbonato que tengan un tamano de poros uniforme seleccionado; el tamano de poros de la membrana corresponded aproximadamente con los tamanos mas grandes de los liposomas producidos mediante la extrusion a traves de esa membrana. Ver, por ejemplo, Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 4,737,323 (12 de abril de 1988).
Las caracteristicas de liberacion de una formulacion de la presente invencion dependen del material encapsulante, de la concentracion del farmaco encapsulado, y de la presencia de modificadores de liberacion. Por ejemplo, la liberacion se puede manipular para ser dependiente del pH, por ejemplo utilizando un recubrimiento sensible al pH que se libere solamente en un bajo pH, como en el estomago, o en un pH mas alto, como en el intestino. Se puede utilizar un recubrimiento enterico para evitar que ocurra la liberacion hasta despues de pasar a traves del estomago. Se pueden utilizar multiples recubrimientos o mezclas de cianamida encapsulada en diferentes materiales para obtener una liberacion inicial en el estomago, seguida por una liberacion posterior en el intestino. La liberacion tambien se puede manipular mediante la inclusion de sales o agentes formadores de poros, los cuales pueden aumentar la absorcion de agua o la liberacion del farmaco mediante difusion desde la capsula. Tambien se pueden utilizar excipientes que modifiquen la solubilidad del farmaco para controlar la velocidad de liberacion. Tambien se pueden incorporar agentes que mejoren la degradacion de la matriz o la liberacion desde la matriz. Se pueden agregar al farmaco, se pueden agregar como una fase separada (es decir, como particulados), o se pueden co­ disolver en la fase polimerica dependiendo del compuesto. En todos los casos, la cantidad debe ser de entre el 0.1 y el 30 por ciento (peso/peso de polimero). Los tipos de mejoradores de la degradacion incluyen las sales inorganicas, tales como sulfato de amonio y cloruro de amonio, los acidos organicos tales como acido citrico, acido benzoico, y acido ascorbico; las bases inorganicas tales como carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de calcio, carbonato de zinc, e hidroxido de zinc; y las bases organicas, tales como sulfato de protamina, espermina, colina, etanolamina, dietanolamina, y trietanolamina; y los tensoactivos, tales como Tween® y Pluronic®. Los agentes formadores de poros que agregan microestructura a las matrices (es decir, compuestos solubles en agua tales como sales inorganicas y azucares) se agregan como particulados. El intervalo debe estar entre el 1 y el 30 por ciento (peso/peso de polimero).
La absorcion tambien se puede manipular mediante la alteracion del tiempo de residencia de las particulas en el intestino. Esto se puede lograr, por ejemplo, recubriendo la particula con, o seleccionando como el material encapsulante, un polimero adhesivo mucoso. Los ejemplos incluyen la mayoria de los polimeros con grupos carboxilo libres, tales como quitosano, celulosas, y en especial poliacrilatos (como se utilizan en la presente, los poliacrilatos se refieren a los polimeros que incluyen grupos acrilato y grupos acrilato modificados, tales como cianoacrilatos y metacrilatos).
Combinaciones Farmaceuticas
La invencion se refiere en especial al uso de un compuesto de la formula I (o de una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de la formula I) en el tratamiento de una o mas de las enfermedades mencionadas en la presente; en donde la respuesta al tratamiento es benefica, como se demuestra, por ejemplo, por la eliminacion parcial o completa de uno o mas de los sintomas de la enfermedad hasta llevar a cabo la curacion o la remision. Un compuesto de la formula (I) tambien se puede utilizar en combinacion con los siguientes compuestos y conjugados de anticuerpo-farmaco:
Inhibidores de BCR-ABL: Imatinib (Gleevec®); clorhidrato de Inilotinib; Nilotinib (Tasigna®); Dasatinib (BMS-345825); Bosutinib (SKI-606); Ponatinib (AP24534); Bafetinib (INNO406); Danusertib (PHA-739358), AT9283 (CAS 1133385-83-7); Saracatinib (AZD0530); y N-[2-[(1S,4R)-6-[[4-(ciclobutil-amino)-5-(trifluoro-metil)-2-pirimidinil]-amino]-1,2,3,4-tetrahidro-naftalen-1,4-imin-9-il]-2-oxo-etil]-acetamida (PF-03814735, CAS 942487-16-3); y LGX818.
Inhibidores de ALK: PF-2341066 (XALKORI®; crizotinib); 5-cloro-N4-(2-(isopropil-sulfonil)-fenil)-N2-(2-metoxi-4-(4-(4-metil-piperazin-1 -il)-piperidin-1 -il)-fenil)-pirimidin-2,4-diamina; GSK1838705A; y CH5424802.
Inhibidores de BRAF: Vemurafanib (PLX4032); y Dabrafenib.
FLT3 inhibidores - malato de sunitinib (vendido bajo el nombre comercial Sutent® por Pfizer); PKC412 (midostaurina); tanutinib, sorafenib, sunitinib, midostaurina, lestaurtinib, KW-2449, quizartinib (AC220), y crenolanib. Inhibidores de MEK - trametinib.
Inhibidores de los receptores del factor de crecimiento endotelial vascular (VEGF): Bevacizumab (vendido bajo la marca comercial registrada Avastin® por Genentech/Roche), axitinib, (N-metil-2-[[3-[(E)-2-piridin-2-il-etenil]-1H-indazol-6-il]-sulfanil]-benzamida, tambien conocida como AG013736, y descrita en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 01/002369), alaninato de Brivanib ((S)((R)-2-amino-propanoato de 1-(4-(4-fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloxi)-5-metil-pirrolo-[2,1-f][1,2,4]-triazin-6-iloxi)-propan-2-ilo), tambien conocido como BMS-582664), motesanib (N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2-[(4-piridinil-metil)-amino]-3-piridin-carboxamida, y descrita en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 02/066470), pasireotida (tambien conocida como SOM230, y descrita en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 02/010192), sorafenib (vendido bajo el nombre comercial Nexavar®); Inhibidores del receptor de HER2: Trastuzumab (vendido bajo la marca comercial registrada Herceptin® por Genentech/Roche), neratinib (tambien conocido como HKI-272, (2E)-N-[4-[[3-cloro-4-[(piridin-2-il)-metoxi]-fenil]-amino]-3-ciano-7-etoxi-quinolin-6-il]-4-(dimetil-amino)-but-2-enamida, y descrita la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 05/028443), lapatinib o ditosilato de lapatinib (vendido bajo la marca comercial registrada Tykerb® por GlaxoSmithKline); Trastuzumab emtansina (en los Estados Unidos, ado-trastuzumab emtansina, nombre comercial Kadcyla) - un conjugado de anticuerpo-farmaco que consiste en el anticuerpo monoclonal trastuzumab (Herceptin) enlazado al agente citotoxico mertansina (DM1);
Anticuerpos CD20: Rituximab (vendido bajo las marcas comerciales registradas Riuxan® y MabThera® por Genentech/Roche), tositumomab (vendido bajo las marcas comerciales registradas Bexxar® por GlaxoSmithKline), ofatumumab (vendido bajo la marca comercial registrada Arzerra® por GlaxoSmithKline);
Inhibidores de quinasa de tirosina: clorhidrato de erlotinib (vendido bajo la marca comercial registrada Tarceva® por Genentech/Roche), Linifanib (N-[4-(3-amino-1H-indazol-4-il)-fenil]-N'-(2-fluoro-5-metil-fenil)-urea, tambien conocida como ABT 869, disponible en Genentech), malato de sunitinib (vendido bajo el nombre comercial Sutent® por Pfizer), bosutinib (4-[(2,4-dicloro-5-metoxi-fenil)-amino]-6-metoxi-7-[3-(4-metil-piperazin-1-il)-propoxi]-quinolin-3-carbonitrilo, tambien conocido como SKI-606, y descrito en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 6,780,996), dasatinib (vendido bajo el nombre comercial Sprycel® por Bristol-Myers Squibb), armala (tambien conocida como pazopanib, vendido bajo el nombre comercial Votrient® por GlaxoSmithKline), imatinib y mesilato de Imatinib (vendidos bajo los nombres comerciales Glivec® y Gleevec® por Novartis);
Inhibidores de la sintesis del ADN: Capecitabina (vendida bajo la marca comercial registrada Xeloda® por Roche), clorhidrato de gemcitabina (vendida bajo la marca comercial registrada Gemzar® por Eli Lilly and Company), nelarabina ((2R,3S,4R,5R)-2-(2-amino-6-metoxi-purin-9-il)-5-(hidroxi-metil)-oxolano-3,4-diol, vendido bajo los nombres comerciales Arranon® y Atriance® por GlaxoSmithKline);
Agentes antineoplasicos: oxaliplatina (vendida bajo el nombre comercial Eloxatin® por Sanofi-Aventis y descrita en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 4,169,846);
Inhibidores de los receptores del factor de crecimiento epidermico (EGFR): Gefitnib (vendido bajo el nombre comercial Iressa®), N-[4-[(3-cloro-4-fluoro-fenil)-amino]-7-[[(3''S'')-tetra-hidro-3-furanil]-oxi]-6-quinazolinil]-4-(dimetilamino)-2-butenamida, vendida bajo el nombre comercial Tovok® por Boehringer Ingelheim), cetuximab (vendido bajo el nombre comercial Erbitux® por Bristol-Myers Squibb), panitumumab (vendido bajo el nombre comercial Vectibix® por Amgen);
Inhibidores de la dimerizacion de HER: Pertuzumab (vendido bajo la marca comercial registrada Omnitarg® por Genentech);
Moduladores del factor estimulante de colonias de granulocitos (G-CSF) humano: Filgrastim (vendido bajo el nombre comercial Neupogen® por Amgen);
Inmunomoduladores: Afutuzumab (disponibles en Roche®), pegfilgrastim (vendido bajo el nombre comercial Neulasta® por Amgen), lenalidomida (tambien conocida como CC-5013, vendida bajo el nombre comercial Revlimid®), talidomida (vendida bajo el nombre comercial Thalomid®);
Inhibidores de CD40: Dacetuzumab (tambien conocido como SGN-40 o huS2C6, disponibles en Seattle Genetics, Inc);
Agonistas de los receptores pro-apoptoticos (PARAs): Dulanermina (tambien conocida como AMG-951, disponible en Amgen/Genentech);
Antagonistas de Hedgehog: 2-cloro-N-[4-cloro-3-(2-piridinil)-fenil]-4-(metil-sulfonil)-benzamida (tambien conocida como GDC-0449, y descrita en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 06/028958);
Inhibidores de PI3K: 4-[2-(1 H-indazol-4-il)-6-[[4-(metil-sulfonil)-piperazin-1 -il]-metil]-tieno-[3,2-d]-pirimidin-4-il]-morfolina (tambien conocida como GDC 0941 y descrita en las Publicaciones Internacionales del TCP Numeros WO 09/036082 y WO 09/055730), 2-metil-2-[4-[3-metil-2-oxo-8-(quinolin-3-il)-2,3-di-hidro-imidazo-[4,5-c]-quinolin-1-il]-fenil]-propionitrilo (tambien conocido como BEZ 235 o NVP-BEZ 235, y descrito en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 06/122806);
Inhibidores de Fosfolipasa A2: Anagrelida (vendida bajo el nombre comercial Agrylin®);
Inhibidores de BCL-2: 4-[4-[[2-(4-cloro-fenil)-5,5-dimetil-1 -ciclohexen-1 -il]-metil]-1 -piperazinil]-N-[[4-[[(1 R)-3-(4-morfolinil)-1-[(tiofenil)-metil]-propil]-amino]-3-[(trifluoro-metil)-sulfonil]-fenil]-sulfonil]-benzamida (tambien conocida como ABT-263 y descrita en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 09/155386);
Inhibidores de quinasa de la quinasa activada por mitogeno de las proteinas: XL-518 (Cas No. 1029872-29-4, disponible en ACC Corp.);
Inhibidores de aromatasa: Exemestano (vendido bajo la marca comercial registrada Aromasin® por Pfizer), letrozol (vendido bajo el nombre comercial Femara® por Novartis), anastrozol (vendido bajo el nombre comercial Arimidax®);
Inhibidores de topoisomerasa I: Irinotecano (vendido bajo la marca comercial registrada Camptosar® por Pfizer), clorhidrato de topotecano (vendido bajo el nombre comercial Hycamtin® por GlaxoSmithKline);
Inhibidores de topoisomerasa II: etoposida (tambien conocida como VP-16 y fosfato de etoposida, vendido bajo los nombres comerciales Toposar®, VePesid® y Etopophos®), teniposida (tambien conocida como VM-26, vendida bajo el nombre comercial Vumon®);
Inhibidores de mTOR: Temsirolimus (vendido bajo el nombre comercial Torisel® por Pfizer), ridaforolimus (formalmente conocido como deferolimus, dimetil-fosfinato de (1 R,2R,4S)-4-[(2R)-2-[(1 R,9S,12S,15R,16E,18R,19R,21 R,23S,24E,26E,28Z,30S, 32S,35R)-1,18-di-hidroxi-19,30-dimetoxi-15,17,21,23,29,35-hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo-11,36-dioxa-4-aza-triciclo-[30.3.1.049]-hexatriaconta-16,24,26,28-tetraen-12-il]-propil]-2-metoxi-ciclohexilo, tambien conocido como AP23573 y MK8669, y descrito en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 03/064383), everolimus (vendido bajo el nombre comercial Afinitor® por Novartis);
Inhibidores de la resorcion osea osteoclastica: monohidrato de acido 1-hidroxi-2-imidazol-1-il-fosfono-etil)-fosfonico (vendido bajo el nombre comercial Zometa® por Novartis);
Conjugados de anticuerpo-farmaco CD33: Gemtuzumab ozogamicina (vendida bajo el nombre comercial Mylotarg® por Pfizer/Wyeth);
Conjugados de anticuerpo-farmaco CD22: Inotuzumab ozogamicina (tambien referida como CMC-544 y WAY-207294, disponibles en Hangzhou Sage Chemical Co., Ltd.);
Conjugados de anticuerpo-farmaco CD20: Ibritumomab tiuxetano (vendido bajo el nombre comercial Zevalin®); Analogos de somatostatina: octreotida (tambien conocida como acetato de octreotida, vendido bajo los nombres comerciales Sandostatin® y Sandostatin LAR®);
Interleucina-11 (IL-11) sintetica: oprelvequina (vendida bajo el nombre comercial Neumega® por Pfizer/Wyeth); Eritropoietina sintetica: Darbepoetina alfa (vendida bajo el nombre comercial Aranesp® por Amgen);
Inhibidores del activador del receptor para el factor nuclear k B (RANK),: Denosumab (vendido bajo el nombre comercial Prolia® por Amgen);
Pepticuerpos mimeticos de trombopoietina: Romiplostim (vendido bajo el nombre comercial Nplate® por Amgen; Estimulantes del crecimiento celular: Palifermin (vendido bajo el nombre comercial Kepivance® por Amgen);
Anticuerpos anti-receptores del factor de crecimiento tipo insulina-1 (IGF-1R): Figitumumab (tambien conocido como CP-751,871, disponible en ACC Corp), robatumumab (CAS No. 934235-44-6);
Anticuerpos anti-CS1: Elotuzumab (HuLuc63, CAS No. 915296-00-3);
Anticuerpos CD52: Alemtuzumab (vendido bajo el nombre comercial Campath®);
Inhibidores de CTLA-4: Tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible en Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675,206), ipilimumab (anticuerpo CTLA-4, tambien conocido como MDX-010, CAS No.
477202-00-9);
Inhibidores de PD1: Nivolumab (tambien referido en la presente como MDX-1106, MDX-1106-04, ONO-4538, BMS0936558, CAS Registro No: 946414-94-4) como se da a conocer, por ejemplo, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero US 8,008,449, y que tiene una secuencia dada a conocer en la misma (o una secuencia sustancialmente identica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia que tiene cuando menos el 85 por ciento, el 90 por ciento, el 95 por ciento de identidad o mas con la secuencia especificada en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 8,008,449); Pembrolizumab (tambien referido en la presente como Lambrolizumab, MK-3475, MK03475, SCH-900475 o KEYTRUDA), como se da a conocer, por ejemplo, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero US 8,354,509 y en la Publicacion Internacional Numero WO 2009/114335, y que tiene una secuencia dada a conocer en las mismas (o una secuencia sustancialmente identica o similar a las mismas, por ejemplo, una secuencia que tiene cuando menos el 85 por ciento, el 90 por ciento, el 95 por ciento de identidad o mas con la secuencia especificada en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero US 8,354,509 y en la Publicacion Internacional Numero WO2009/ 114335); una inmunoadhesina (por ejemplo, una inmunoadhesina que comprende una porcion de enlace extracelular o a PD-1 de PD-Ll o PD-L2 fusionado con una region constante (por ejemplo, una region Fc de una secuencia de inmunoglobulina); Pidilizumab (CT-011; Cure Tech) es un anticuerpo monoclonal IgG1k humanizado que se enlaza a PD1 (Pidilizumab y otros anticuerpos monoclonales anti-PD-1 humanizados se dan a conocer en la Publicacion Internacional Numero WO2009/101611); y AMP-224 (B7-DCIg; Amplimmune), como se da a conocer en las Publicaciones Internacionales Numeros WO2010/027827 y WO2011/066342), es un receptor soluble de fusion de PD-L2 Fc que bloquea la interaccion entre PD1 y B7-H1; otros inhibidores de PD-1, por ejemplo, los anticuerpos anti-PD1 que se dan a conocer en las Patentes de los Estados Unidos de Norteamerica Numeros US 8,609,089, US 2010028330, y/o US 20120114649.
Inhibidores de PDL1: MSB0010718C (tambien referido como A09-246-2; Merck Serono) es un anticuerpo monoclonal que se enlaza a PD-L1 y se da a conocer, por ejemplo, en la Publicacion Internacional Numero WO 2013/0179174, (y que tiene una secuencia sustancialmente identica o similar a la misma, por ejemplo, una secuencia que tiene cuando menos el 85 por ciento, el 90 por ciento, el 95 por ciento de identidad o mas alta a la secuencia especificada en la Publicacion Internacional Numero WO 2013/0179174); y el antagonista de enlace anti-PD-Ll seleccionado a partir de YW243.55.S70, MPDL3280A (Genetech/Roche), es un anticuerpo monoclonal IgG1 humano con el Fc optimizado que se enlaza a PD-L1 (MDPL3280A y otros anticuerpos monoclonales humanos para PD-L1 se dan a conocer en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 7,943,743 y en la Publicacion de Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 20120039906); MEDI-4736, MSB-0010718^ o MDX-1105 (MDX-1105, tambien conocido como BMS-936559, es un anticuerpo anti-PD-Ll descrito en la Publicacion Internacional Numero WO2007/005874; el anticuerpo YW243.55.S70 es un anticuerpo anti-PD-Ll descrito en la Publicacion Internacional Numero WO 2010/077634);
Inhibidores de LAG-3: BMS-986016 (tambien referido como BMS986016; Bristol-Myers Squibb) es un anticuerpo monoclonal que se enlaza a LAG-3. BMS-986016 y otros anticuerpos anti-LAG-3 humanizados se dan a conocer en La Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero US 2011/0150892, y en las Publicaciones Internacionales Numeros WO2010/019570 y WO2014/008218;
Agonistas de GITR: los agonistas de GITR de ejemplo incluyen, por ejemplo., proteinas de fusion de GITR y anticuerpos anti-GITR (por ejemplo, anticuerpos anti-GITR bivalentes), tales como, una proteina de fusion de GITR descrita en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 6,111,090, en la Patente Europea Numero: 090505B1, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 8,586,023, en las Publicaciones Internacionales del TCP Numeros: WO 2010/003118 y 2011/ 090754, o un anticuerpo anti-GITR descrito, por ejemplo, en Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 7,025,962, en la Patente Europea Numero: 1947183B1, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 7,812,135, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 8,388,967, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 8,591,886, en la Patente Europea Numero: Ep 1866339, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 2011/028683, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 2013/039954, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO2005/007190, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 2007/133822, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO2005/055808, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 99/40196, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 2001/03720, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO99/20758, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO2006/083289, en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 2005/115451, en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero: 7,618,632, y en la Publicacion Internacional del TCP Numero: WO 2011/051726.
Inhibidores de desacetilasa de histona (HDI): Voninostato (vendido bajo el nombre comercial Zolinza® por Merck). Los anticuerpos anti-CTLA4 incluyen Tremelimumab (IgG2 anticuerpo monoclonal disponible en Pfizer, anteriormente conocido como ticilimumab, CP-675,206); y Ipilimumab (anticuerpo de CTLA-4, tambien conocido como MDX-010, CAS No. 477202-00-9).
Anticuerpo anti-TIM-3 o el fragmento de enlace al antigeno del mismo.
Agentes alquilantes: Temozolomida (vendida bajo los nombres comerciales Temodar® y Temodal® por Schering-Plough/Merck), dactinomicina (tambien conocida como actinomicina-D y vendida bajo el nombre comercial Cosmegen®), melfalano (tambien conocido como L-PAM, L-sarcolisina, y mostaza de fenilalanina, vendida bajo el nombre comercial Alkeran®), altretamina (tambien conocida como hexametil-melamina (HMM), vendida bajo el nombre comercial Hexalen®), carmustina (vendida bajo el nombre comercial BiCNU®), bendamustina (vendida bajo el nombre comercial Treanda®), busulfano (vendido bajo los nombres comerciales Busulfex® y Myleran®), carboplatina (vendida bajo el nombre comercial Paraplatin®), lomustina (tambien conocida como CCNU, vendida bajo el nombre comercial CeeNU®), cisplatina (tambien conocida como CDDP, vendida bajo los nombres comerciales Platinol® y Platinol®-AQ), clorambucil (vendido bajo el nombre comercial Leukeran®), ciclofosfamida (vendida bajo los nombres comerciales Cytoxan® y Neosar®), dacarbazina (tambien conocida como DTIC, DIC e imidazol-carboxamida, vendida bajo el nombre comercial DTIC-Dome®), altretamina (tambien conocida como hexametil-melamina (HMM) vendida bajo el nombre comercial Hexalen®), ifosfamida (vendida bajo el nombre comercial Ifex®), procarbazina (vendida bajo el nombre comercial Matulane®), mecloretamina (tambien conocida como mostaza de nitrogeno, mustina y clorhidrato de mecloro-etamina, vendido bajo el nombre comercial Mustargen®), estreptozocina (vendida bajo el nombre comercial Zanosar®), tiotepa (tambien conocida como tiofosfamida, TESPA y TSPA, vendida bajo el nombre comercial Thioplex®;
Modificadores de la respuesta biologica: bacilo calmette-guerin (vendido bajo los nombres comerciales theraCys® y TICE® BCG), denileucina diftitox (vendida bajo el nombre comercial Ontak®);
Antibioticos anti-tumorales: doxorrubicina (vendida bajo los nombres comerciales Adriamycin® y Rubex®), bleomicina (vendida bajo el nombre comercial lenoxane®), daunorrubicina (tambien conocida como clorhidrato de daunorrubicina, daunomicina, y clorhidrato de rubidomicina, vendido bajo el nombre comercial Cerubidina®), daunorrubicina liposomal (liposoma de citrato de daunorrubicina, vendido bajo el nombre comercial Daunoxome®), mitoxantrona (tambien conocida como DHAD, vendida bajo el nombre comercial Novantrone®), epirrubicina (vendida bajo el nombre comercial EllenceMR), idarrubicina (vendida bajo los nombres comerciales Idamycin®, Idamycin PFS®), mitomicina C (vendida bajo el nombre comercial Mutamycin®);
Agentes contra microtubulos: Estramustina (vendida bajo el nombre comercial Emcyl®);
Inhibidores de catepsina K: Odanacatib (tambien conocido como MK-0822, N-(1-ciano-ciclopropil)-4-fluoro-N2-{(1S)-2,2,2-trifluoro-1-[4'-(metil-sulfonil)-bifenil-4-il]-etil}-L-leucinamida, disponible en Lanzhou Chon Chemicals, ACC Corp., y ChemieTek, y descrito en la Publicacion Internacional del TCP Numero WO 03/ 075836);
Analogos de epotilona B: Ixabepilona (vendida bajo el nombre comercial Lxempra® por Bristol-Myers Squibb);
Inhibidores de proteina de choque por calor (HSP): Tanespimicina (17-alil-amino-17-desmetoxi-geldanamicina, tambien conocida como KOS-953 y 17-AAG, disponible en SIGMA, y descrita en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 4,261,989);
Agonistas de TpoR: Eltrombopag (vendido bajo los nombres comerciales Promacta® y Revolade® por GlaxoSmithKline);
Agentes anti-mitoticos: Docetaxel (vendido bajo el nombre comercial Taxotere® por Sanofi-Aventis);
Inhibidores de esteroides suprarrenales: amino-glutetimida (vendida bajo el nombre comercial Cytadren®);
Anti-androgenos: Nilutamida (vendida bajo los nombres comerciales Nilandron® y Anandron®), bicalutamida (vendida bajo el nombre comercial Casodex®), flutamida (vendida bajo el nombre comercial FulexinMR);
Androgenos: Fluoximesterona (vendida bajo el nombre comercial Halotestin®);
Inhibidores de proteasoma: Bortezomib (vendido bajo el nombre comercial Velcade®);
Inhibidores de CDK1: Alvocidib (tambien conocido como flovopirdol o HMR-1275, 2-(2-cloro-fenil)-5,7-dihidroxi-8-[(3S,4R)-3-hidroxi-1-metil-4-piperidinil]-4-cromenona, y descrita en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 5,621,002);
Agonistas de los receptores de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH): Leuprolida o acetato de leuprolida (vendido bajo los nombres comerciales Viadure® por Bayer AG, Eligard® por Sanofi-Aventis y Lupron® por Abbott Lab);
Agentes anti-neoplasicos de taxano: Cabazitaxel (1-hidroxi-7B,10B-dimetoxi-9-oxo-5B,20-epoxitax-11-ene-2a,4,13atriil-4-acetato-2-benzoato-13-[(2R,3S)-3-{[(terbutoxi)-carbonil]-amino}-2-hidroxi-3-fenil-propanoato), larotaxel (benzoato de (2a,3^,4a,5B, 7a,10B,13a)-4,10-bis-(acetiloxi)-13-({(2R,3S)-3-[(terbutoxi-carbonil)-amino]-2-hidroxi-3-fenil-propanoil}-oxi)-1-hidroxi-9-oxo-5,20-epoxi-7,19-ciclotax-11-en-2-ilo);
Agonistas del receptor 5HT1a: Xaliprodeno (tambien conocido como SR57746, 1-[2-(2-naftil)-etil]-4-[3-(trifluorometil)-fenil]-1,2,3,6-tetrahidro-piridina, y descrita en la Patente de los Estados Unidos de Norteamerica Numero 5,266,573);
Vacunas de HPC: Cervarix® vendido por GlaxoSmithKline, Gardasil® vendido por Merck;
Agentes quelantes de hierro: Deferasinox (vendido bajo el nombre comercial Exjade® por Novartis);
Anti-metabolitos: Claribina (2-cloro-desoxi-adenosina, vendida bajo el nombre comercial leustatin®), 5-fluoro-uracilo (vendido bajo el nombre comercial Adrucil®), 6-tioguanina (vendida bajo el nombre comercial Purinathol®), pemetrexed (vendido bajo el nombre comercial Alimta®), citarabina (tambien conocida como arabinosil-citosina (Ara-C), vendida bajo el nombre comercial Cytosar-U®), citarabina liposomal (tambien conocida como Ara-C Liposomal, vendida bajo el nombre comercial DepoCytMR), decitabina (vendida bajo el nombre comercial Dacogen®), hidroxiurea (vendida bajo los nombres comerciales Hidrea®, DroxiaMR y MylocelMR), fludarabina (vendida bajo el nombre comercial Fludara®), floxuridina (vendida bajo el nombre comercial FUDR®), cladribina (tambien conocida como 2-cloro-desoxi-adenosina (2-CdA) vendida bajo el nombre comercial LeustatinMR), metotrexato (tambien conocido como ametopterina, metotrexato-sodio (MTX), vendido bajo los nombres comerciales Rheumatrex® y TrexallMR), pentostatina (vendida bajo el nombre comercial Nipent®);
Bisfosfonatos: Pamidronato (vendido bajo el nombre comercial Aredia®), acido zoledronico (vendido bajo el nombre comercial Zometa®);
Agentes desmetilantes: 5-azacitidina (vendida bajo el nombre comercial Vidaza®), decitabina (vendida bajo el nombre comercial Dacogen®);
Alcaloides de plantas: Paclitaxel enlazado a proteina (vendido bajo el nombre comercial Abraxane®), vinblastina (tambien conocida como sulfato de vinblastina, vincaleucoblastina y VLB, vendida bajo los nombres comerciales Alkaban-AQ® y Velban®), vincristina (tambien conocida como sulfato de vincristina, LCR, y VCR, vendida bajo los nombres comerciales Oncovin® y Vincasar Pfs®), vinorelbina (vendida bajo el nombre comercial Navelbine®), paclitaxel (vendido bajo los nombres comerciales Taxol y OnxalMR);
Retinoides: Alitretinoina (vendida bajo el nombre comercial Panretin®), tretinoina (acido retinoico todo trans, tambien conocido como ATRA, vendido bajo el nombre comercial Vesanoid®), Isotretinoina (acido 13-cis-retinoico, vendido bajo los nombres comerciales Accutane®, Amnesteem®, Claravis®, Clarus®, Decutan®, Isotane®, Izotech®, Oratane®, Isotret®, y Sotret®), bexaroteno (vendido bajo el nombre comercial Targretin®);
Glucocorticosteroides: Hidrocortisona (tambien conocida como cortisona, hidrocortisona succinato de sodio, fosfato de sodio de hidrocortisona, y vendida bajo los nombres comerciales Ala-Cort®, Fosfato de Hidrocortisona, Solu-Cortef®, Hydrocort Acetate® y Lanacort®), dexametazona ((8S,9R,10S,11S,13S, 14S,16R,17R)-9-fluoro-11,17-dihidroxi-17-(2-hidroxi-acetil)-10,13,16-trimetil-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-3H-ciclopenta-[a]-fenantren-3-ona), prednisolona (vendida bajo los nombres comerciales Delta-Cortel®, Orapred®, Pediapred® y Prelone®), prednisona (vendida bajo los nombres comerciales Deltasone®, Liquid Red®, Meticorten® y Orasone®), metil-prednisolona (tambien conocida como 6-metil-prednisolona, Acetato de Metil-prednisolona, Succinato de Sodio de Metil-prednisolona, vendido bajo los nombres comerciales Duralone®, Medralone®, Medrol®, M-Prednisol® y Solu-Medrol®);
Citoquinas: Interleucina-2 (tambien conocida como aldesleucina e IL-2, vendida bajo el nombre comercial Proleukin®), interleucina-11 (tambien conocida como Oprevelkin, vendida bajo el nombre comercial Neumega®), interferon alfa (tambien conocido como IFN-alfa, vendido bajo los nombres comerciales Intron® A, y Roferon-A®); Sub-reguladores de los receptores de estrogenos: Fulvestrant (vendido bajo el nombre comercial Faslodex®); Anti-estrogenos: tamoxifeno (vendido bajo el nombre comercial Novaldex®);
Toremifeno (vendido bajo el nombre comercial Fareston®);
Moduladores selectivos de los receptores de estrogeno (SERMs): Raloxifeno (vendido bajo el nombre comercial Evista®);
Agonistas de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH): Goserelina (vendida bajo el nombre comercial Zoladex®);
Progesteronas: megestrol (tambien conocido como acetato de megestrol, vendido bajo el nombre comercial Megace®);
Agentes citotoxicos varios: Trioxido arsenico (vendido bajo el nombre comercial Trisenox®), asparaginasa (tambien conocida como L-asparaginasa, L-asparaginasa Erwinia, vendida bajo los nombres comerciales Elspar® y Kidrolase®);
Un compuesto de la formula (I) tambien se puede utilizar en combinacion con las siguientes terapias aunadas: Farmacos contra la nausea: Antagonistas del receptor NK-1: Casopitant (vendido bajo los nombres comerciales Rezonic® y Zunrisa® por GlaxoSmithKline); y
Agentes citoprotectores: Amifostina (vendida bajo el nombre comercial Ethyol®), leucovorina (tambien conocida como leucovorina-calcio, factor citrovorum y acido folinico).
Inhibidores del punto de verificacion inmunitario: En una realizacion, las terapias de combinacion que se dan a conocer en la presente incluyen un inhibidor de una molecula inhibidora de una molecula del punto de verificacion inmunitario. El termino "puntos de verificacion inmunitarios" se refiere a un grupo de moleculas sobre la superficie celular de las celulas-T CD4 y CD8. Estas moleculas pueden servir efectivamente como "frenos" para sub-modular o inhibir una respuesta inmunitaria anti-tumoral. Las moleculas del punto de verificacion inmunitario incluyen, pero no se limitan a, Muerte Programada 1 (PD-1), Antigeno de Linfocitos-T Citotoxico 4 (CTLA-4), B7H1, B7H4, OX-40, CD137, CD40, y LAG3, los cuales inhiben directamente las celulas inmunes. Los agentes inmunoterapeuticos que pueden actuar como inhibidores del punto de verificacion inmunitario utiles en los metodos de la presente invencion incluyen, pero no se limitan a, los inhibidores de PD-L1, PD-L2, CTLA4, TIM3, LAG3, VISTA, bTlA, TIGIT, LAIR1, CD160, 2B4 y/o TGFR beta. La inhibicion de una molecula inhibidora se puede llevar a cabo mediante la inhibicion al nivel del ADN, del ARN o de la proteina. En algunas realizaciones, se puede utilizar un acido nucleico inhibidor (por ejemplo, un dsARN, siARN o shARN), para inhibir la expresion de una molecula inhibidora. En otras realizaciones, el inhibidor de una senal inhibidora es un polipeptido, por ejemplo, un ligando soluble, o un anticuerpo o el fragmento de enlace al antigeno del mismo, que se enlaza a la molecula inhibidora.
En ciertas realizaciones, las moleculas anti-PD-1 descritas en la presente se administran en combinacion con uno o mas inhibidores diferentes de PD-1, PD-L1 y/o PD-L2 conocidos en la materia. El antagonista puede ser un anticuerpo, un fragmento de enlace al antigeno del mismo, una inmunoadhesina, una proteina de fusion, o un oligopeptido.
En ciertas realizaciones, las terapias de combinacion que se dan a conocer en la presente incluyen un modulador de una molecula co-estimulante o una molecula inhibidora, por ejemplo, un ligando o receptor co-inhibidor.
En una realizacion, el modulador co-estimulante, por ejemplo, el agonista, de una molecula co-estimulante, se selecciona a partir de un agonista (por ejemplo, un anticuerpo agonista o el fragmento de enlace al antigeno del mismo, o una fusion soluble) de OX40, CD2, CD27, CDS, ICAM-1, LFA-1 (CD11a/CD18), ICOS (CD278), 4-1BB (CD137), GITR, CD30, CD40, BAFFR, HVEM, CD7, luz, NKG2C, SLAMF7, NKp80, CD160, B7-H3 o de un ligando CD83.
En otra realizacion, las terapias de combinacion que se dan a conocer en la presente incluyen una molecula coestimulante, por ejemplo, un agonista asociado con una senal positiva que incluye un dominio co-estimulante de CD28, CD27, ICOS y GITR.
En una realizacion, la molecula del anticuerpo anti-PD-1 se administra despues del tratamiento, por ejemplo, despues del tratamiento de un melanoma, con un anticuerpo anti-CTLA4 (por ejemplo, ipilimumab) con o sin un inhibidor de BRAF (por ejemplo, vemurafenib o dabrafenib). Las dosis de ejemplo que se pueden utilizar incluyen una dosis de la molecula de anticuerpo anti-PD-1 de aproximadamente 1 a 10 miligramos/kilogramo, por ejemplo, de 3 miligramos/kilogramo, y una dosis de un anticuerpo anti-CTLA-4, por ejemplo, ipilimumab, de aproximadamente 3 miligramos/ kilogramo.
En otra realizacion, la molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 se administra en combinacion con un anticuerpo anti-LAG-3 o un fragmento de enlace al antfgeno del mismo. En otra realizacion, la molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 se administra en combinacion con un anticuerpo anti-TIM-3 o con el fragmento de enlace al antfgeno del mismo. En todavfa otras realizaciones, la molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 se administra en combinacion con un anticuerpo anti-LAG-3 y un anticuerpo anti-TIM, o los fragmentos de enlace al antfgeno de los mismos. La combinacion de los anticuerpos mencionados en la presente, se pueden administrar por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados, o se pueden enlazar, por ejemplo, como una molecula de anticuerpo biespecffica o triespecffica. En una realizacion, se administra un anticuerpo biespecffico que incluye una molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 y un anticuerpo anti-TIM-3 o anti-LAG-3, o un fragmento de enlace al antfgeno de los mismos. En ciertas realizaciones, la combinacion de anticuerpos mencionados en la presente se utiliza para tratar un cancer, por ejemplo, un cancer como se describe en la presente (por ejemplo, un tumor solido). La eficacia de las combinaciones anteriormente mencionadas se puede probar en modelos animales conocidos en la materia. Por ejemplo, los modelos animales para probar el efecto sinergico de los anti-PD-1 y anti-LAG-3 se describen, por ejemplo, en Woo et al. (2012) Cancer Res. 72(4): 917-27).
En algunas realizaciones, la terapia de combinacion que se da a conocer en la presente (por ejemplo, una molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1, sola o en combinacion con otro inmunomodulador (por ejemplo, una molecula de anticuerpo anti-LAG-3 o anti-TIM-3). En una realizacion, la molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 se administra en combinacion con un anticuerpo anti-LAG-3 o un fragmento de enlace al antfgeno del mismo. En otra realizacion, la molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 se administra en combinacion con un anticuerpo anti-TIM-3 o el fragmento de enlace al antfgeno del mismo. En todavfa otras realizaciones, la molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 se administra en combinacion con un anticuerpo anti-LAG-3 y un anticuerpo anti-TIM, o los fragmentos de enlace al antfgeno de los mismos. La combinacion de anticuerpos mencionados en la presente, se pueden administrar por separado, por ejemplo, como anticuerpos separados, o se pueden enlazar, por ejemplo, como una molecula de anticuerpo biespecffica o triespecffica. En una realizacion, se administra un anticuerpo biespecffico que incluye una molecula de anticuerpo anti-PD-1 o PD-L1 y un anticuerpo anti-TIM-3 o anti-LAG-3, o un fragmento de enlace al antfgeno de los mismos. En ciertas realizaciones, la combinacion de anticuerpos mencionados en la presente se utiliza para tratar un cancer, por ejemplo, un cancer como se describe en la presente (por ejemplo, un tumor solido). La eficacia de las combinaciones anteriormente mencionadas se puede probar en modelos animales conocidos en la materia. Por ejemplo, los modelos animales para probar el efecto sinergico de los anti-PD-1 y anti­ LAG-3 se describen, por ejemplo, en Woo et al. (2012) Cancer Res. 72(4): 917-27).
En ciertas realizaciones, la molecula de anticuerpo esta en la forma de una molecula de anticuerpo biespecffica o multiespecffica. En una realizacion, la molecula de anticuerpo biespecffica tiene una primera especificidad de enlace con PD-1 o PD-L1 y una segunda especificidad de enlace, por ejemplo, una segunda especificidad de enlace con TIM-3, LAG-3, o PD-L2. En una realizacion, la molecula de anticuerpo biespecffica se enlaza a PD-1 o PD-L1 y TIM-3. En otra realizacion, la molecula de anticuerpo biespecffica se enlaza a PD-1 o PD-L1 y LAG-3. En otra realizacion, la molecula de anticuerpo biespecffica se enlaza a PD-1 o PD-L1. En todavfa otra realizacion, la molecula de anticuerpo biespecffica se enlaza a PD-1 y PD-L2. En otra realizacion, la molecula de anticuerpo biespecffica se enlaza a TIM-3 y LAG-3. Cualquier combinacion de las moleculas anteriormente mencionadas se puede convertir en una molecula de anticuerpo multiespecffica, por ejemplo, un anticuerpo triespecffico que incluye una primera especificidad de enlace con PD-1 o PD-1, y una segunda y una tercera especificidades de enlace con dos o mas de: TIM-3, LAG-3, o PD-L2.
Procesos para la elaboracion de los compuestos de la invencion
La presente invencion tambien incluye procesos para la preparacion de los compuestos de la invencion. En las reacciones descritas, puede ser necesario proteger a los grupos funcionales reactivos, por ejemplo, los grupos hidroxilo, amino, imino, tio, o carboxilo, en donde se deseen estos en el producto final, para evitar su participacion indeseada en las reacciones. Se pueden utilizar los grupos protectores convencionales de acuerdo con la practica estandar, por ejemplo, vease T.W. Greene y P. G. M. Wuts en “Protective Groups in Organic Chemistry”, John Wiley and Sons, 1991.
Los compuestos de la formula I se pueden preparar procediendo como en el siguiente esquema de reaccion I:
Esquema de reaccion I
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en donde p, q, Yi, Y2 , R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5b, R7 y Rs son como se definen para la formula I en el Resumen de la invencion, Q es un halogeno (como bromo) o un tiol, boronato o estanato que reacciona con un halogeno sobre el compuesto 5, y X es un grupo reactivo que reacciona con Q (tal como un boronato, estanano, alcohol, tiol, halogeno, y similares). El compuesto 4 se puede preparar mediante la reaccion del compuesto 2 con el compuesto 3 a traves de una reaccion bajo condiciones acidas o basicas adecuadas en la presencia o en ausencia de un metal de transicion bajo temperatura ambiente, o bajo condiciones termicas o de microondas. De una manera alternativa, el halogeno del compuesto 2 puede ser reemplazado por otros halogenos o grupos activadores adecuados, tales como triflatos, mesilatos, tosilatos, nonaflatos, boronatos, organo-estananos, organo-sililos, organo-zincs, litio, magnesio, y similares.
Un compuesto de la formula I se puede preparar mediante la reaccion del compuesto 4 con un companero de acoplamiento adecuado (por ejemplo, el compuesto 5) dependiendo de X. Por ejemplo, el compuesto 5 se muestra en el esquema de reaccion I como un grupo fenilo sustituido enlazado por medio de X. De una manera alternativa, el compuesto 5 podria ser alcohol arilico, tioarilo, boronato de arilo, estanato de arilo, alcohol heteroarilico, aril-tiol, heteroaril-tiol, boronato de arilo, aril-estanano, olefina, u otros metales de arilo o metales de heteroarilo, y similares. Los componentes de acoplamiento tambien pueden estar sustituidos. Esta reaccion se puede conducir bajo condiciones acidas o basicas adecuadas, en la presencia o en ausencia de un metal de transicion, tal como paladio, bajo temperatura ambiente, o bajo condiciones termicas o de microondas. Se pueden utilizar otros halogenos o grupos activadores adecuados (por ejemplo, triflatos, mesilatos, tosilatos, y nonaflatos) en lugar de Br para estas transformaciones.
De una manera alternativa, los componentes de acoplamiento se podrian invertir, y el compuesto 2 se puede derivar hasta un estanano, boronato, organo-zinc, organo-litio, organo-magnesio, organo-silicio, organo-cuprato, y se puede acoplar con un haluro de arilo, haluro de heteroarilo, olefina o un grupo funcional reactivo adecuado (por ejemplo, triflatos, mesilatos, tosilatos y nonaflatos), y similares.
Estas reacciones se pueden conducir en el orden descrito o en un orden inverso, bajo una variedad de solventes, temperaturas, presiones, y bajo atmosferas adecuadas. Las reacciones se pueden conducir bajo condiciones de acido, base, y/o metal de transicion.
Los ejemplos detallados de la sintesis de los compuestos de la formula I se pueden encontrar en los Ejemplos que se encuentran mas adelante.
Procesos adicionales para la elaboracion de los compuestos de la invencion
Un compuesto de la invencion se puede preparar como una sal de adicion de acido farmaceuticamente aceptable, mediante la reaccion de la forma de base libre del compuesto con un acido inorganico u organico farmaceuticamente aceptable. De una manera alternativa, se puede preparar una sal de adicion de base farmaceuticamente aceptable de un compuesto de la invencion mediante la reaccion de la forma del acido libre del compuesto con una base inorganica u organica farmaceuticamente aceptable.
Los compuestos de la formula (I) tambien se pueden modificar adjuntando las funcionalidades apropiadas para mejorar las propiedades biologicas selectivas. Las modificaciones de esta clase se conocen en la tecnica, e incluyen aquellas que aumentan la penetracion en un sistema biologico dado (por ejemplo, sangre, sistema linfatico, sistema nervioso central, testiculos), aumentan la biodisponibilidad, aumentan la solubilidad para permitir la administracion parenteral (por ejemplo, inyeccion, infusion), alteran el metabolismo y/o alteran la velocidad de secrecion. Los ejemplos de este tipo de modificaciones incluyen, pero no se limitan a, esterificacion, por ejemplo, con polietilenglicoles, derivacion con pivaloiloxilo o sustituyentes de acidos grasos, conversion hasta carbamatos, hidroxilacion de anillos aromaticos, y sustitucion de heteroatomos en anillos aromaticos. Siempre que se mencionen los compuestos de la formula (I) y/o los N-oxidos, tautomeros y/o las sales de los mismos (de preferencia farmaceuticamente aceptables), estos comprenden las formulas modificadas, mientras que, de preferencia, se refieren a las moleculas de la formula (I), sus N-oxidos, tautomeros y/o sales.
De una manera alternativa, las formas de sal de los compuestos de la invencion se pueden preparar utilizando sales de los materiales de partida o intermediarios. En vista de la estrecha relacion entre los compuestos novedosos de la formula (I) en forma libre y aquellos en la forma de sus sales, incluyendo las sales que se pueden utilizar como intermediarios, por ejemplo, en la purificacion o identificacion de los compuestos novedosos, cualquier referencia a los compuestos o un compuesto de la formula (I) anteriormente en la presente y posteriormente en la presente, se debe entender para referirse al compuesto en forma libre y/o tambien a una o mas sales de los mismos, como sea apropiado y conveniente, asi como a uno o mas solvatos, por ejemplo, hidratos.
Las sales se forman, por ejemplo, como las sales de adicion de acido, de preferencia con acidos organicos o inorganicos, a partir de los compuestos de la formula (I), con un atomo de nitrogeno basico, en especial las sales farmaceuticamente aceptables. Los acidos inorganicos adecuados son, por ejemplo, los acidos de halogeno, tales como acido clorhidrico, acido sulfurico, o acido fosforico. Los acidos organicos adecuados son, por ejemplo, los acidos carboxilicos, fosfonicos, sulfonicos o sulfamicos, por ejemplo, el acido acetico, acido propionico, acido octanoico, acido decanoico, acido dodecanoico, acido glicolico, acido lactico, acido fumarico, acido succinico, acido malonico, acido adipico, acido pimelico, acido suberico, acido azelaico, acido malico, acido tartarico, acido citrico, aminoacidos, tales como acido glutamico o acido aspartico, acido maleico, acido hidroxi-maleico, acido metilmaleico, acido ciclo-hexan-carboxilico, acido adamantan-carboxilico, acido benzoico, acido salicilico, acido 4-aminosaliciclico, acido ftalico, acido fenil-acetico, acido mandelico, acido cinamico, acido metan- o etan-sulfonico, acido 2-hidroxi-etan-sulfonico, acido etan-1,2-disulfonico, acido bencen-sulfonico, acido 4-toluen-sulfonico, acido 2-naftalensulfonico, acido 1,5-naftalen-disulfonico, acido 2- o 3-metil-bencen-sulfonico, acido metil-sulfurico, acido etil-sulfurico, acido dodecil-sulfurico, acido N-ciclohexil-sulfamico, acido N-metil-, N-etil- o N-propil-sulfamico, u otros acidos protonicos organicos, tales como acido ascorbico.
Para los propositos de aislamiento o purificacion, tambien es posible utilizar sales farmaceuticamente inaceptables, por ejemplo, picratos o percloratos. Para uso terapeutico, solamente se emplean las sales farmaceuticamente aceptables o los compuestos libres (donde sea aplicable, en la forma de preparaciones farmaceuticas) y, por consiguiente, estas son las preferidas.
Las formas de acido libre o de base libre de los compuestos de la invencion se pueden preparar a partir de la forma de sal de adicion de base o de sal de adicion de acido correspondiente, respectivamente. Por ejemplo, un compuesto de la invencion en una forma de sal de adicion de acido se puede convertir hasta la base libre correspondiente mediante el tratamiento con una base adecuada (por ejemplo, una solucion de hidroxido de amonio, hidroxido de sodio, y similares). Un compuesto de la invencion, en una forma de sal de adicion de base se puede convertir hasta el acido libre correspondiente mediante el tratamiento con un acido adecuado (por ejemplo, acido clorhidrico, etc.).
Los compuestos de la invencion, en una forma no oxidada, se pueden preparar a partir de los N-oxidos de los compuestos de la invencion, mediante el tratamiento con un agente reductor (por ejemplo, azufre, dioxido de azufre, trifenil-fosfina, borohidruro de litio, borohidruro de sodio, tricloruro de fosforo, tribromuro, o similares), en un solvente organico inerte adecuado (por ejemplo, acetonitrilo, etanol, dioxano acuoso, o similares) de 0°C a 80°C.
Los derivados de pro-farmaco de los compuestos de la invencion se pueden preparar mediante los metodos conocidos por aquellos de una experiencia ordinaria en la materia (por ejemplo, para mayores detalles, vease Saulnier et al. (1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Volumen 4, pagina 1985). Por ejemplo, los profarmacos apropiados se pueden preparar mediante la reaccion de un compuesto no derivado de la invencion con un agente carbamilante adecuado (por ejemplo, 1,1-aciloxi-alquil-carbano-cloridato, carbonato de para-nitro-fenilo, o similares).
Los derivados protegidos de los compuestos de la invencion se pueden hacer por medios conocidos por aquellos de una experiencia ordinaria en este campo. Se puede encontrar una descripcion detallada de las tecnicas aplicables a la creacion de los grupos protectores y su remocion en T. W. Greene, “Protecting Groups in Organic Chemistry”, 3a Edicion, John Wiley and Sons, Inc., 1999.
Los compuestos de la presente invencion convenientemente se pueden preparar, o formar, durante el proceso de la invencion, como solvatos (por ejemplo, hidratos). Los hidratos de los compuestos de la presente invencion convenientemente se pueden preparar mediante recristalizacion a partir de una mezcla de solventes acuosos/organicos, utilizando solventes organicos, tales como dioxina, tetrahidrofurano (THF) o metanol.
Los compuestos de la invencion se pueden preparar como sus estereoisomeros individuales mediante la reaccion de una mezcla racemica del compuesto con un agente de resolucion opticamente activo para formar un par de compuestos diaestereoisomericos, se separan los diaestereomeros, y se recuperan los enantiomeros opticamente puros. Aunque la resolucion de los enantiomeros se puede llevar a cabo utilizando derivados diaestereomericos covalentes de los compuestos de la invencion, se prefieren los complejos disociables (por ejemplo, las sales diaestereomericas cristalinas). Los diaestereomeros tienen distintas propiedades fisicas (por ejemplo, puntos de fusion, puntos de ebullicion, solubilidades, reactividad, etc.), y se pueden separar facilmente aprovechando estas diferencias. Los diaestereomeros se pueden separar mediante cromatografia, o de preferencia, mediante las tecnicas de separacion/resolucion basadas en las diferencias en la solubilidad. Entonces se recupera el enantiomero opticamente puro, junto con el agente de resolucion, por cualquier medio practico que no de como resultado la racemizacion. Se puede encontrar una descripcion mas detallada de las tecnicas aplicables a la resolucion de estereoisomeros de los compuestos a partir de su mezcla racemica en Jean Jacques, Andre Collet, Samue1H. Wilen, “Enantiomers, Racemates and Resolutions”, John Wiley And Sons, Inc., 1981.
En resumen, los compuestos de la formula I se pueden elaborar mediante un proceso que involucra:
(a) aquel del esquema de reaccion I; y
(b) opcionalmente convertir un compuesto de la invencion, en una sal farmaceuticamente aceptable;
(c) opcionalmente convertir una forma de sal de un compuesto de la invencion hasta una forma no de sal; (d) opcionalmente convertir una forma no oxidada de un compuesto de la invencion hasta un N-oxido farmaceuticamente aceptable;
(e) opcionalmente convertir una forma de N-oxido de un compuesto de la invencion hasta su forma no oxidada; (f) opcionalmente resolver un isomero individual de un compuesto de la invencion a partir de una mezcla de isomeros;
(g) opcionalmente convertir un compuesto no derivado de la invencion hasta un derivado de pro-farmaco farmaceuticamente aceptable; y
(h) opcionalmente convertir un derivado de pro-farmaco de un compuesto de la invencion hasta su forma no derivada.
Hasta donde no se describa particularmente la produccion de los materiales de partida, los compuestos son conocidos o se pueden preparar de una manera analoga a los metodos conocidos en la tecnica, o como se da a conocer en los Ejemplos posteriormente en la presente.
Un experto en la materia apreciara que las transformaciones anteriores son solamente representativas de los metodos para la preparacion de los compuestos de la presente invencion, y que se pueden emplear similarmente otros metodos bien conocidos.
Ejemplos
Los siguientes ejemplos e intermediarios sirven para ilustrar la invencion sin limitar su alcance. Algunas las abreviaturas utilizadas en los Ejemplos son como sigue: acido acetico (AcOH); trietil-amina (TEA); tetrahidrofurano (THF); acuoso (aq); atmosfera (atm.); 2,2'-bis-difenil-fosfanil-[1,1']-binaftalenilo (BINAP); 4-dimetil-amino-piridina (DMAP); terbutoxi-carbonilo (Boc); 1,1-carbonil-di-imidazol (CDI); dicarbonato de diterbutilo (BOC2O); hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-(dimetil-amino)-fosfonio (BOP); dicloro-metano (DCM); dietil-eter (Et2O); acido p-toluen-sulfonico (PTSA); acetato de etilo (EtOAc); etanol (EtOH); bis-(trimetil-silil)-amida de litio (LHMDS); azodicarboxilato de di-isopropilo (DIAD); N,N-di-isopropil-etil-amina (DIEA o DIPEA); N,N-dimetil-formamida (DMF); sulfoxido de dimetilo (dMsO); difenil-fosforil-azida (DPPA); hora(s) (h); hexafluoro-fosfato de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)-1,1,3,3-tetrametil-uronio (HATU); cromatografia de liquidos de alto rendimiento (HPLC); hidruro de litio y aluminio (LAH); cromatografia de liquidos acoplada con espectrometria de masas (LCMS); di-isopropilamida de litio (LDA); metanol (MeOH); mililitro(s) (mL); minuto(s) (min); microondas (MW); n-butil-litio (n-BuLi); 1,1-bis-(difenil-fosfino)-ferroceno-dicloro-paladio(II) (PdCl2 (dppf)); tris-(dibenciliden-acetona)-dipaladio(0) (Pd2 (dba)3); diclorobis-(trifenil-fosfina)-paladio(II) (PdCl2(PPh3)2); temperatura ambiente (RT); acido trifluoro-acetico (TFA); tetrahidrofurano (THF); cromatografia de capa delgada (TLC); tiempo de retencion (tR); y 4,5-bis-(difenil-fosfino)-9,9-dimetil-xanteno (XantPhos).
Intermediario 1
6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000047_0001
Paso a: A una solucion de 3-bromo-2-(trifluoro-metil)-piridina (1.0 gramo, 4.42 milimoles), XantPhos (256 miligramos, 0.442 milimoles), Pd2(dba)3 (203 miligramos, 0.221 milimoles) en dioxano (12 mililitros), se le agrego (a temperatura ambiente, y bajo N2) 3-mercapto-propanoato de 2-etil-hexilo (1.1 mililitros, 4.87 milimoles), seguido por la adicion de di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1.55 mililitros, 8.85 milimoles). La solucion resultante se agito en un reactor de microondas durante 1 hora a 110°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (25 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 30 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-propanoato de 2-etil-hexilo (1.41 gramos, 3.88 milimoles). MS m/z 364.0 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de 3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-propanoato de 2-etil-hexilo (1.0 gramo, 2.75 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (8 mililitros), se le agrego, a -78°C y bajo N2 , terbutoxido de potasio (1 M en tetrahidrofurano (THF), 8.25 mililitros, 8.25 milimoles). Despues de agitar vigorosamente a -78°C durante 20 minutos, la reaccion se apago con K2CO3 acuoso (2 M, 500 microlitros), y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se vertio en un embudo de separacion que contenia K2CO3 acuoso (2 M, 30 mililitros), y se extrajo con Et2O (20 mililitros, 2 veces). La fase acuosa se acidifico con HCl 6 M hasta un pH de 4 y la suspension nebulosa resultante se extrajo con CHCkIPA (9:1; 20 mililitros, 3 veces), para dar el 2-(trifluoro-metil)-piridin-3-tiol (380 miligramos, 2.12 milimoles). MS m/z 180.0 (M+H)+.
Paso c: A una solucion de 2-(trifluoro-metil)-piridin-3-tiol (285 miligramos, 1.591 milimoles), 3-bromo-6-cloro-pirazin-2-amina (414 miligramos, 1.988 milimoles), XantPhos (101 miligramos, 0.175 milimoles), y Pd2(dba)3 (72.8 miligramos, 0.08 milimoles) en dioxano (2 mililitros), se le agrego (a temperatura ambiente, y bajo N2) di-isopropil-etilamina (DIPEA) (556 microlitros, 3.18 milimoles). La solucion resultante se agito en un reactor de microondas durante 1.5 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se diluyo con EtOAc, y se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (25 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 30 por ciento de EtOAc/heptano), para dar la 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (1.41 gramos, 3.88 milimoles). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8.64 (dd, J = 4.55, 1.26 Hz, 1 H), 7.90 (s, 1 H), 7.82 (dd, J = 8.08, 0.76 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J = 8.08, 4.80 Hz, 1 H); 19F RMN (376 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm -64.34 (s, 1 F). MS m/z 307.1 (M+H)+.
Intermediario 2
6-(4-amino-4-metil-piperidin-1-il)-3-(2,3-dicloro-fenil)-pirazin-2-amina
Figure imgf000047_0002
Una suspension de 3-bromo-6-cloro-pirazin-2-amina (1.2 gramos, 5.76 milimoles), acido (2,3-dichlofenil)-boronico (1.1 gramos, 5.76 milimoles), fosfato de potasio (3.67 gramos, 17.27 milimoles), y aducto de PdCL(dppf)-DCM (235 miligramos, 0.288 milimoles) en MeCN:H2O (9:1, 15 mililitros, desgasificado) se agito en un reactor de microondas durante 4 horas a 120°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (25 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 30 por ciento de EtOAc/heptano), para dar la 6-(4-amino-4-metil-piperidin-1-il)-3-(2,3-dicloro-fenil)-pirazin-2-amina (633 miligramos, 2.306 milimoles). MS m/z 276.4 (M+H)+.
Intermediario 3
6-cloro-3-((2,3-dicloro-fenil)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000048_0001
Una mezcla de 3-bromo-6-cloro-pirazin-2-amina (5.0 gramos, 23.99 milimoles), 2,3-dicloro-bencenotiol (6.44 gramos, 36.0 milimoles), yoduro de cobre(I) (914 miligramos, 4.80 milimoles), fosfato de potasio (10.18 gramos, 48.0 milimoles), y 1,10-fenantrolina (1.73 miligramos, 9.59 milimoles) en dioxano (50 mililitros, desgasificado) se agito durante 16 horas a 85°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se diluyo con EtOAc, y se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (50 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 25 por ciento de dicloro-metano (DCM)/tolueno), para dar la 6-cloro-3-((2,3-dicloro-fenil)-tio)-pirazin-2-amina (3.7 gramos, 12.07 milimoles). MS m/z 306.0 (M+H)+.
Intermediario 4
(R), y (S)-2-(7-azaespiro-[3.5]-nonan-1 -il)-isoindolina-1,3-diona
Figure imgf000048_0002
Paso a: Una suspension de 1-amino-7-azaespiro-[3.5]-nonan-7-carboxilato de terbutilo (250 miligramos, 1.04 milimoles), anhidrido ftalico (193 miligramos, 1.3 milimoles), tamices moleculares activados (3 angstroms, 250 miligramos), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (545 microlitros, 3.12 milimoles) en tolueno (4 mililitros) se agito durante 16 horas a 105°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (10 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 5 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-(1,3-dioxo-isoindolin-2-il)-7-azaespiro-[3.5]-nonan-7-carboxilato de terbutilo (233 miligramos, 0.629 milimoles). MS m/z 370.4 (M+H)+.
Paso b: Una solucion de 1-(1,3-dioxo-isoindolin-2-il)-7-azaespiro-[3.5]-nonan-7-carboxilato de terbutilo (233 miligramos, 0.629 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 800 microlitros, 3.21 milimoles) en dioxano (5 mililitros) se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron en el evaporador giratorio para dar la sal de HCl del compuesto del titulo (195 miligramos, 0.636 milimoles). MS m/z 270.3 (M+H)+.
Paso c: La purificacion de SFC quiral se llevo a cabo bajo las siguientes condiciones; columna: Celulosa LUX-2 21x250 milimetros, velocidad de flujo: 75 gramos por minuto, fase movil: 50 por ciento de metanol y NH4OH 10 mM en CO2 , deteccion: 220 nanometros UV para obtener dos picos Rt (P1)= 3.6 minutos (enantiomero R); Rt (P2)= 7.4 minutos (enantiomero S).
Intermediario 5
2-(1,1-dioxido-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona
Figure imgf000049_0001
Paso a: Una solucion de 1, 1 -dioxido del acido 8-(terbutoxi-carbonil)-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-carboxilico (preparado a partir de 4-oxo-piperidin-1-carboxilato de terbutilo en 4 pasos como se describe en Carreira et al., Org Lett., 2011, 13, 6134-6136; 2.00 gramos, 6.00 milimoles), fosforazidato de difenilo (2.0 gramos, 7.26 milimoles), y Et3N (1.0 mililitros, 7.26 milimoles) en tolueno (37 mililitros) se agito durante 1.5 horas a 115°C. Se agrego alcohol bencilico (1.50 mililitros, 14.52 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 16 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 saturado acuoso (30 mililitros), y se extrajo con EtOAc (20 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 10 al 90 por ciento de EtOAc/heptano), para dar 1,1-dioxico de 4-(((benciloxi)-carbonil)-amino)-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (1.57 g.
3.58 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 339.4 (M+H)+.
Paso b: Una suspension de 1,1-dioxico de 4-(((benciloxi)-carbonil)-amino)-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (570 miligramos. 1.30 milimoles), y Pd/C (al 10 por ciento sobre carbon, 138 miligramos) en tetrahidrofurano (THF) (8 mililitros) se agito vigorosamente bajo una atmosfera de H2 durante 16 horas. La reaccion se filtro a traves de un tapon de Celite seguido por lavado con EtOAc (20 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar el 1,1 -dioxido de 4-amino-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo el cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso c: Una suspension de 1, 1 -dioxido de 4-amino-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (415 miligramos, 1.363 milimoles), anhidrido ftalico (252 miligramos, 1.704 milimoles), y tamices moleculares activados (3 angstroms, 500 miligramos) en tolueno (7 mililitros) se agito vigorosamente durante 16 horas a 115°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (10 mililitros), y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de MeOH/DCM), para dar el 1, 1 -dioxido de 4-(1,3-dioxoisoindolin-2-il)-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (385 miligramos, 0.886 milimoles) como una espuma blanca. MS m/z 433.1 (M-H)-.
Paso d: Una solucion de 1, 1 -dioxido de 4-(1,3-dioxo-isoindolin-2-il)-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (385 miligramos, 0.886 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 2.22 mililitros, 8.86 milimoles) en dioxano (4 mililitros) se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con dioxano (20 mililitros), y se filtro, para dar la 2-(1,1-dioxido-1-tia-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona (sal de HCl, 328 miligramos, 0.884 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 335.4 (M+H)+.
Intermediario 6
(R)-2-metil-N-((S)-7-azaespiro-[3.5]-nonan-1-il)-propan-2-sulfinamida
Figure imgf000049_0002
Paso a: Una solucion de 1-oxo-7-azaespiro-[3.5]-nonan-7-carboxilato de terbutilo (5.24 gramos, 21.9 milimoles), isopropoxido de titanio(IV) (16.2 mililitros, 54.7 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (3.45 gramos, 28.5 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (99 mililitros) se agito durante 12 horas a 65°C. Despues de enfriarse a -78°C, se agrego metanol (9.9 mililitros), seguido por borohidruro de litio (1.43 gramos, 65.7 milimoles). La mezcla resultante se agito a -78°C durante 3 horas y a temperatura ambiente durante 1 hora. Se agrego metanol, lentamente para apagar el exceso de borohidruro seguido por la adicion de salmuera. La mezcla resultante se agito durante 15 minutos, y entonces se filtro a traves de Celite. La mezcla acuosa se extrajo con EtOAc (20 mililitros, 3 veces). Las fases organicas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano, para dar (S)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-7-azaespiro-[3.5]-nonan-7-carboxilato de terbutilo (4.79 gramos, 13.90 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 345.3 (M+H)+.
Paso b: Una solucion de (S)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-7-azaespiro-[3.5]-nonan-7-carboxilato de terbutilo (0.4 gramos, 1.16 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (450 microlitros, 5.81 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (3.5 mililitros) se agito durante 30 minutos a 40°C. Se agrego Na2CO3 saturado acuoso hasta un pH 11 y la mezcla acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (15 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (R)-2-metil-N-((S)-7-azaespiro-[3.5]-nonan-1-il)-propan-2-sulfinamida (237 miligramos, 0.97 milimoles), como un solido blanco. mS m/z 245.5 (M+H)+.
Intermediario 7
N-(4-metoxi-bencil)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1 -amina
Figure imgf000050_0001
Paso a: A una solucion de 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (1.8 gramos, 7.11 milimoles), y (4-metoxi-fenil)-metanamina (1.07 gramos, 7.82 milimoles) en dicloro-etano (7 mililitros), se le agrego cianoborohidruro de sodio (2.23 gramos, 35.5 milimoles) en porciones y se agito a temperatura ambiente durante 65 horas. La mezcla se diluyo con una solucion acuosa saturada de bicarbonato de sodio (10 mililitros), y se extrajo con EtOAc (20 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera y se concentraron. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 2 por ciento de MeOH/DCM, Et3N al 0.25 por ciento modificado, seguido por gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-((4-metoxi-bencil)-amino)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (1.1 gramos, 2.94 milimoles), como una cera incolora. MS m/z 375.3 (M+H)+.
Paso b: Una solucion de 1-((4-metoxi-bencil)-amino)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (1.1 gramos, 2.94 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (2 mililitros) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) se agito durante 15 minutos a 0°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se diluyo con NaHCO3 acuoso (10 mililitros), y se extrajo con EtOAc (10 mililitros, 4 veces), para dar la N-(4-metoxi-bencil)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-amina (0.8 gramos, 2.92 milimoles), como un aceite incoloro. MS m/z 275.2 (M+H)+.
La N-(4-metoxi-bencil)-3-azaespiro-[5.5]-undecan-7-amina se obtuvo siguiendo el procedimiento anterior empezando a partir de 7-oxo-3-azaespiro-[5.5]-undecan-3-carboxilato de terbutilo.
Intermediario 8
N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000050_0002
Paso a: A una solucion de 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (1.15 gramos, 4.54 milimoles), y (R)-1-(4-metoxi-fenil)-etanamina (961 miligramos, 6.36 milimoles) en dicloro-etano (3 mililitros), se le agrego cianoborohidruro de sodio en porciones y se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con una solucion acuosa saturada de bicarbonato de sodio (5 mililitros), y se extrajo con EtOAc (10 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera y se concentraron. El residuo resultante que contenia una mezcla 9:1 de diaestereomeros se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 20 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (diaestereomero mayor; 431 miligramos, 1.11 milimoles) puro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 6 ppm 7.18-7.24 (m, 2 H), 6.81-6.86 (m, 2 H), 3.76 (d, J = 13.64 Hz, 1 H), 3.72 (s, 3 H), 3.64-3.70 (m, 2 H), 2.65-2.92 (m, 2 H), 2.05-2.14 (m, 1 H), 1.80-1.91 (m, 1 H), 1.65-1.75 (m, 1 H), 1.42-1.60 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.28-1.35 (m, 1 H), 1.20 (d, J = 6.57 Hz, 3 H), 1.09-1.17 (m, 2 H), 0.80 (d, J = 11.37 Hz, 1 H). MS m/z 389.6 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de 1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (diaestereomero mayor; 431 miligramos, 1.11 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros), se le agrego acido trifluoro-acetico (TFA) (2 mililitros), y se agito durante 10 minutos a temperatura ambiente. La reaccion se concentro con otra adicion de DCM, entonces se diluyo con NaHCO3 acuoso saturado, y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (20 mililitros, 3 veces). Se lavaron los organicos con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron, y se concentraron, para dar la N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1 -amina. iH RMN (400 MHz, METANOL-d4) 67.25 (d, J = 8.6 Hz, 2 H), 6.87 (d, J = 8.7 Hz, 2 H), 3.85-3.78 (m, 1 H), 3.78 (s, 3 H), 3.35 (m, 1 H), 3.28 (m, 1 H), 3.03 (m, 2 H), 2.63 (dd, J = 9.6, 7.3 Hz, 1 H), 2.06-1.85 (m, 2 H), 1.83-1.69 (m, 2 H), 1.62 (m, 1 H), 1.54-1.38 (m, 4 H), 1.33 (d, J = 6.6 Hz, 3 H), 1.31 -1.23 (m, 1 H). MS m/z 289.5 (M+H)+.
Intermediario 9
N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-1 -oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-amina
Figure imgf000051_0001
Paso a: A una solucion de 4-oxo-1-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (preparado a partir de 4-oxo-piperidin-1-carboxilato de terbutilo en 3 pasos como se describe en Carreira et al., Org Lett., 2013, 15, 4766­ 4769; 200 miligramos, 0.78 milimoles), y (R)-1-(4-metoxi-fenil)-etanamina (474 miligramos, 3.13 milimoles) en dicloro-etano (1 mililitro), se le agrego ciano-borohidruro de sodio en porciones (393 miligramos, 3.13 milimoles). La reaccion resultante se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. Se agrego borohidruro de litio (34 miligramos, 1.6 milimoles), y la mezcla se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con metanol (2 mililitros), y los volatiles se removieron bajo presion reducida (dos tiempos). Se agrego NaHCO3 saturado acuoso (5 mililitros), y la mezcla se extrajo con dicloro-metano (DCM) (20 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. La mezcla 9:1 resultante de diaestereomeros se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 4-(((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-1-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (65 miligramos, 0.17 milimoles) diaestereomericamente puro. Diaestereomero mayor: iH RMN (400 MHz, CDCL) 6 ppm 7.15 (d, J = 8.6 Hz, 2 H), 6.79 (d, J = 8.6 Hz, 2 H), 3.96-3.76 (m, 2 H), 3.77-3.66 (m, 5 H), 3.60 (t, J = 8.1 Hz, 1 H), 2.98 (m, 2 H), 2.76 (t, J = 7.8 Hz, 1 H), 1.95 (m, 1 H), 1.67-1.41 (m, 4 H), 1.40 (s, 9 H), 1.33 (d, J = 3.1 Hz, 1 H), 1.21 (d, J = 6.5 Hz, 3 H), 1.08-0.92 (m, 1 H). MS m/z 391.6 (M+H)+.
Paso b: Una solucion de 4-(((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-1 -oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (diaestereomero mayor, 65 miligramos, 0.17 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (2 mililitros) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) se agitaron durante 10 minutos a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, se diluyeron con NaHCO3 saturado acuoso (5 mililitros), y se extrajeron con dicloro-metano (DCM) (20 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-1-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-amina (40 miligramos, 0.13 milimoles), la cual se utilizo sin mayor purificacion. MS m/z 291.5 (M+H)+.
Intermediario 10
3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina
Figure imgf000052_0001
Paso a: La 2,3-dicloro-4-yodopiridina comercialmente disponible se convirtio en 3-cloro-4-yodopiridin-2-amina mediante un procedimiento a, como se describe en Marie et al., Moleculas, 2012, 17,10683-10707.
Paso b: A una solucion de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (100 miligramos, 0.619 milimoles), 3-cloro-4-yodopiridin-2-amina (315 miligramos, 1.238 milimoles), XantPhos (35.8 miligramos, 0.062 milimoles), y Pd2(dba)3 (28.3 miligramos, 0.03 milimoles) en dioxano (3 mililitros), se le agrego (a temperatura ambiente, y bajo N2) di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (324 microlitros, 1.856 milimoles). La solucion resultante se agito en un reactor de microondas durante 2.5 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se diluyo con EtOAc, y se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (10 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 5 por ciento de MeOH/DCM), para dar la 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (1.41 gramos, 3.88 milimoles). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.88 (s, 1 H), 7.68 (d, J = 5.56 Hz, 1 H), 6.06 (d, J = 5.56 Hz, 1 H), 1.35-1.43 (m, 2 H). MS m/z 288.2 (M+H)+.
Intermediario 11
3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol
Figure imgf000052_0002
Paso a: Una solucion de 3-bromo-6-cloro-pirazin-2-amina (4.95 gramos, 23.74 milimoles) en dioxano (119 mililitros) se rocio con nitrogeno durante 10 minutos. Entonces, se agregaron 2-etil-hexilo 3-mercapto-propanoato (3.79 mililitros, 24.92 milimoles), Xantphos (1.37 gramos, 2.37 milimoles), Pd2(dba)3 (1.08 gramos, 1.19 milimoles), y diisopropil-etil-amina (DIPEA) (8.29 mililitros, 47.5 milimoles). La mezcla resultante se agito a 105°C durante 24 horas, y la mezcla de reaccion se filtro a traves de Celite y se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano), para proporcionar el 3-((3-amino-5-cloropirazin-2-il)-tio)-propanoato de 2-etil-hexilo (6.24 gramos, 18.04 milimoles), como un aceite color amarillo. iH RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7.82 (s, 1 H), 4.93 (br. s., 2 H), 4.14-3.96 (m, 2 H), 3.47 (t, J = 6.9 Hz, 2 H), 2.78 (t, J = 6.9 Hz, 2 H), 1.67-1.51 (m, 1 H), 1.44-1.20 (m, 8 H), 0.90 (t, J = 7.4 Hz, 6 H). MS m/z 346.0 (M+H)+. Paso b: A una solucion de 3-((3-amino-5-cloro-pirazin-2-il)-tio)-propanoato de 2-etil-hexilo (2.3 gramos, 6.65 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (33 mililitros) a -78°C, se le agrego terbutoxido de potasio (1 M en tetrahidrofurano (THF), 19.95 mililitros, 19.95 milimoles), y la mezcla resultante se agito a -78°C durante 1 hora. Se agrego metanol (20 mililitros), y la mezcla resultante se concentro. El producto crudo se disolvio en MeOH, se filtro, y se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 5 al 20 por ciento, acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), para proporcionar el 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (sal de TFA: 1.3 gramos, 4.72 milimoles), como un solido amarillo. MS m/z 162.0 (M+H)+.
Intermediario 12
6-cloro-3-((3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000053_0001
Una solucion de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (sal de TFA: 0.158 gramos, 0.978 milimoles) en dioxano (4.9 mililitros) se rocio con nitrogeno durante 10 minutos. Entonces, se agregaron 3-cloro-4-yodopiridina (0.468 gramos, 1.955 milimoles), Xantphos (0.057 gramos, 0.098 milimoles), Pd2(dba)3 (0.045 gramos, 0.049 milimoles), y di-isopropil-etilamina (DIPEA) (0.512 mililitros, 2.93 milimoles). La mezcla resultante se agito a 105°C durante 10 horas, se filtro a traves de Celite y se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano; heptano que contenia 2 por ciento de Et3N), para proporcionar la 6-cloro-3-((3-cloropiridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (75 miligramos, 0.274 milimoles), como un solido blanco. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8.46 (s, 1 H), 8.22 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 6.68 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 5.17 (br. s., 2 H). MS m/z 273.0 (M+H)+.
Intermediario 13
6-cloro-3-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000053_0002
Una solucion de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (sal de TFA: 0.2 gramos, 1.238 milimoles) en dioxano (6.2 mililitros) se rocio con nitrogeno durante 10 minutos. Entonces, se agregaron 2-cloro-3-yodopiridina (0.593 gramos, 2.475 milimoles), Xantphos (0.072 gramos, 0.124 milimoles), Pd2(dba)3 (0.057 gramos, 0.062 milimoles), y di-isopropil-etilamina (DIPEA) (0.65 mililitros, 3.71 milimoles). La mezcla resultante se agito a 105°C durante 10 horas, se filtro a traves de Celite y se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano, que contenia 2 por ciento de Et3N), para proporcionar la 6-cloro-3-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (95 miligramos, 0.348 milimoles), como un solido blanco. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8.28-8.38 (m, 1 H), 7.91 (s, 1 H), 7.51-7.59 (m, 1 H), 7.22 (dd, J = 7.9, 4.6 Hz, 1 H), 5.25 (br. s., 2 H). MS m/z 273.0 (M+H)+.
Intermediario 14
6-cloro-3-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000053_0003
Una solucion de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (sal de TFA: 0.50 gramos, 1.814 milimoles) en dioxano (90 mililitros) se desgasifico con nitrogeno durante 10 minutos. Entonces, se agregaron 2,3-dicloro-4-yodopiridina (0.0.99 gramos, 3.63 milimoles), Xantphos (0.105 gramos, 0.181 milimoles), Pd2(dba)3 (0.083 gramos, 0.091 milimoles), y diisopropil-etil-amina (DIPEA) (0.95 mililitros, 5.44 milimoles). La mezcla resultante se agito a 105°C durante 10 horas, se filtro a traves de Celite y se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de EtOAc/DCM). iH RMN (400 MHz, DMsO-d6) 5 ppm 8.13 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.30 (br. s, 2 H), 6.83 (d, J = 5.3 Hz, 1 H). MS m/z 306.9 (M+H)+.
Intermediario 15
6-cloro-3-((3-cloro-2-fluoro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000054_0001
Una solucion de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (sal de TFA: 50 miligramos, 0.181 milimoles) en dioxano (1.8 mililitros) se rocio con nitrogeno durante 10 minutos. Entonces, se agregaron 3-cloro-2-fluro-4-yodopiridina (0.140 gramos, 0.544 milimoles), Xantphos (11 miligramos, 0.018 milimoles), Pd2(dba)3 (8 miligramos, 0.009 milimoles), y diisopropil-etil-amina (DIPEA) (95 microlitros, 0.544 milimoles). La mezcla resultante se agito a 100°C durante 10 horas, se filtro a traves de Celite, y se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano; heptano que contenia 2 por ciento Et3N), para proporcionar la 6-cloro-3-((3-cloro-2-fluoro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (41 miligramos, 0.137 milimoles), como un solido blanco. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8.06 (s, 1 H), 7.91 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 6.63 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 5.30 (br. s, 2 H). MS m/z 291.0 (M+H)+.
Intermediario 17
2-(2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona
Figure imgf000054_0002
Siguiendo los procedimientos de Dirat et al., PCT Int. Appl., 20044078750, 16 de septiembre 2004, se preparo 4-hidroxi-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo. iH RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 4.13 (dd, J = 10.1,4.6 Hz, 1 H), 4.03 (dd, J = 4.6, 2.0 Hz, 1 H), 3.78-3.71 (m, 2 H), 3.69 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 3.67-3.58 (m, 2 H), 3.29 (m, 1 H), 3.16 (m, 1 H), 1.78 (m, 2 H), 1.58 (m, 1 H), 1.50 (m, 2 H), 1.47 (s, 9 H). MS m/z 258.1 (M-H)+ a partir de 1 -terbutilo 4-etil-piperidin-1,4-dicarboxilato en cuatro pasos, entonces se convirtio en 2-(2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona en dos pasos como sigue.
Paso a: A una solucion de 4-hidroxi-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (306 miligramos, 1.19 milimoles), ftalimida (262 miligramos, 1.78 milimoles), y trifenil-fosfina (468 miligramos, 1.78 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (10 mililitros), se le agrego aza-dicarboxilato de di-isopropilo (0.374 mililitros, 1.78 milimoles), y se agito 16 horas. Se concentra y se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de acetato de etilo/heptano) para obtener 4-(1,3-dioxo-isoindolin-2-il)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo racemico (190 miligramos, 0.49 milimoles). iH RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 57.88 (dd, J = 5.4, 3.0 Hz, 2 H), 7.77 (dd, J = 5.5, 3.0 Hz, 2 H), 4.65 (dd, J = 8.7, 5.6 Hz, 1 H), 4.40 (dd, J = 9.5, 5.6 Hz, 1 H), 4.26 (t, J = 9.0 Hz, 1 H), 4.08 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.98 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.84 (m, 1 H), 3.58 (m, 1 H), 3.20 (m, 1 H), 2.94 (m, 1 H), 1.73 (m, 2 H), 1.56 (s, 9 H), 1.42-1.36 (m, 2 H).
Paso b: A una solucion de 4-(1,3-dioxo-isoindolin-2-il)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo racemico (190 miligramos, 0.49 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (3 mililitros), se le agrego acido trifluoro-acetico (TFA) (1 mililitro). Se concentro con otra adicion de dicloro-metano (DCM), luego acetonitrilo para obtener la 2-(2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona como una sal de acido trifluoro-acetico (TFA) (cuantitativo). MS m/z 287.0 (M+H)+. Utilizado sin mayor caracterizacion.
Intermediario 18
2-cloro-3-mercapto-benzamida
Figure imgf000055_0001
Paso a: Una mezcla de 2-cloro-3-fluoro-benzonitrilo (3.15 gramos, 20.25 milimoles), 2-metil-propan-2-tiol (2.283 mililitros, 20.25 milimoles), y Cs2CO3 (6.598 gramos, 20.25 milimoles) en N,N-dimetil-formamida (DMF) (DMF) (100 mililitros) se agito durante 48 horas a 22°C. La mezcla de reaccion se diluyo con agua (200 mililitros), y EtOAc (300 mililitros). La capa de EtOAc se lavo con agua (300 mililitros, 3 veces), salmuera (100 mililitros, 3 veces), se seco sobre Na2SO4 , se filtro, y se concentro. El residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente: 45 a 70 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar el 3-(terbutil-tio)-2-cloro-benzonitrilo (1.33 gramos, 5.89 milimoles). MS m/z 226.1 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de 3-(terbutil-tio)-2-cloro-benzonitrilo (217 miligramos, 0.961 milimoles), y NaOH (1 N, 2.88 mililitros, 2.88 milimoles) en metanol (MeOH) (11 mililitros) se irradio en un reactor de microondas durante 35 minutos a 90°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se concentro y se disolvio en metanol (MeOH). El solido se filtro, y el filtrado se concentro hasta casi la sequedad y se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente: 25 a 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la 3-(terbutil-tio)-2-cloro-benzamida (93.6 miligramos, 0.384 milimoles). MS m/z 244 (M+H)+.
Paso c: Una mezcla de 3-(terbutil-tio)-2-cloro-benzamida (190 miligramos, 0.779 milimoles), y HCl concentrado (2.36 mililitros, 78 milimoles), se agito durante 45 minutos a 85°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se concentro hasta sequedad, para proporcionar la 2-cloro-3-mercapto-benzamida cruda (sal de HCl: 156 miligramos, 0.651 milimoles). MS m/z 188 (M+H)+.
Intermediario 19
2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona
Figure imgf000055_0002
La 2-(2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona acoplada a la sal de acido trifluoro-acetico (TFA) con 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (151 miligramos, 0.492 milimoles), utilizada en los procedimientos estandares descritos anteriormente, se diluyo con dicloro-metano (DCM), y se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 60 por ciento de acetato de etilo/heptano) para obtener la 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona (0.140 gramos, 0.178 milimoles). MS m/z 557.1 (M+H)+. La purificacion de SFC quiral se llevo a cabo como sigue; columna: OJ-H 21x250mm, velocidad de flujo: 80 gramos por minuto, fase movil: 45 por ciento de metanol y NH4OH 5 mM en CO2, deteccion: recoleccion desencadenada por la masa para obtener enantiomeros solos pico 1 (P1), Rt: 2.77 minutos. MS m/z 557.1 (M+H)+, y pico 2 (P2), Rt: 3.91 minutos. MS m/z 557.2 (M+H)+. La desproteccion de la ftalimida se llevo a cabo en cada enantiomero por separado si mayor caracterizacion.
Intermediario 20
3-cloro-4-yodo-N,N-dimetil-piridin-2-amina
Figure imgf000056_0001
Una solucion de 3-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina (0.26 gramos, 1.01 milimoles), y dimetil-amina (2 M en tetrahidrofurano (THF), 1.5 mililitros, 3.03 milimoles) en sulfoxido de dimetilo (DMSO) (3.4 mililitros) se agito a durante 2 horas a 70°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, se agrego agua y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases organicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron con Na2SO4, se filtraron, y se concentraron bajo presion reducida, para dar la 3-cloro-4-yodo-N,N-dimetil-piridin-2-amina (0.26 gramos, 0.922 milimoles), como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CLOR0FORMO-d) 5 ppm 7.75 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.33 (d, J = 5.0 Hz, 1 H), 3.00 (s, 6 H). MS m/z 282.9 (M+H)+.
Intermediario 21
3-cloro-4-yodo-2-metoxi-piridina
Figure imgf000056_0002
Una solucion de 3-cloro-2-fluoro-4-yodopiridina (150 miligramos, 0.571 milimoles), y NaOMe (0.5 M en MeOH, 3.4 mililitros, 1.71 milimoles) en sulfoxido de dimetilo (DMSO) (1.9 mililitros) se agito a durante 1 hora a 70°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, se agrego agua y la mezcla acuosa se extrajo con EtOAc. Las fases organicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4 , se filtraron, y se concentraron bajo presion reducida, para dar la 3-cloro-4-yodo-2-metoxi-piridina (123 miligramos, 0.456 milimoles), como un aceite incoloro. iH RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 7.81 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.55 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 3.92 (s, 3 H). MS m/z 269.9 (M+H)+.
Intermediario 22
6-cloro-3-((3-(trifluoro-metil)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000056_0003
Una mezcla de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (750 miligramos, 4.09 milimoles), 4-bromo-3-(trifluoro-metil)-piridina (1.63 gramos, 5.31 milimoles), Xantphos (236 miligramos, 0.409 milimoles), Pd2(dba)3 (187 miligramos, 0.204 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (2.14 mililitros, 12.26 milimoles) en dioxano (desgasificado, 50 mililitros) se agito durante 16 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (25 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/DCM), para dar la 6-cloro-3-((3-(trifluoro-metil)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (722 mili-gramos, 2.35 milimoles), como un solido amarillo claro. MS m/z 307.0 (M+H)+.
Los siguientes compuestos se sintetizaron utilizando el procedimiento anterior o las modificaciones al procedimiento anterior utilizando el yodo- o bromo-piridilo correspondiente y tiolato.
Tabla 1
Figure imgf000057_0003
Intermediario 23
6-cloro-3-((3-cloro-piridazin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000057_0001
Una mezcla de 3-amino-5-cloro-pirazin-2-tiol (100 miligramos, 0.545 milimoles), 3,4-dicholoropiridazina (81 miligramos, 0.545 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.142 mililitros, 0.817 milimoles) en MeCN (5.5 mililitros) se agito durante 12 horas a 50°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, el precipitado se recolecto mediante filtracion al vacio, para dar la 6-cloro-3-((3-cloro-piridazin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (101 miligramos, 0.368 milimoles), como un solido color cafe. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8.90 (d, J = 5.4 Hz, 1 H), 7.95 (s, 1 H), 7.31 (s, 2 H), 7.15 (d, J = 5.3 Hz, 1 H). MS m/z 274.1 (M+H)+.
Intermediario 24
1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000057_0002
Paso a: Una mezcla de 4-formil-piperidin-1-carboxilato de terbutilo (35.0 gramos, 164 milimoles), terbutoxido de litio (15.77 gramos, 197 milimoles), y bromuro de alilo (11.54 mililitros, 189 milimoles) en N,N-dimetil-formamida (DMF) (DMF) (328 mililitros) se agito durante 1 hora a 0°C. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl:H2O saturado acuoso (1:1, 500 mililitros), y se extrajo con Et2O (50 mililitros, 5 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 25 por ciento de EtOAc/heptano), para dar 4-alil-4-formil-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (24 gramos, 95 milimoles), como un aceite incoloro. iH RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 9.52 (s, 1 H), 5.53-5.76 (m, 1 H), 4.96-5.19 (m, 2 H), 3.80 (br. s., 2 H), 2.97 (t, J = 11.49 Hz, 2 H), 2.26 (d, J = 7.33 Hz, 2 H), 1.95 (dt, J = 13.71,3.13 Hz, 2 H), 1.38-1.58 (m, 11 H).
Paso b: A una solucion de 4-alil-4-formil-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (24 gramos, 95 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (300 mililitros), se le agrego (a -78°C y bajo N2) bromuro de vinil-magnesio (1 M en tetrahidrofurano (THF), 118 mililitros, 118 milimoles). La solucion resultante se calento lentamente hasta la temperatura ambiente en 1 hora. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl saturado acuoso (250 mililitros), y se extrajo con EtOAc (50 mililitros, 4 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar 4-alil-4-(1 -hidroxi-alil)-piperidin-1-carboxilato de terbutilo (26.7 gramos, 95 milimoles), como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 9.52 (s, 1 H), 5.56-5.75 (m, 1 H), 5.05-5.18 (m, 2 H), 3.80 (br. s., 2 H), 2.97 (t, J = 11.49 Hz, 2 H), 2.26 (d, J = 7.33 Hz, 2 H), 1.96 (dt, J = 13.83, 3.06 Hz, 2 H), 1.49-1.60 (m, 2 H), 1.41-1.49 (m, 9 H). Este compuesto se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso c: Una mezcla de 4-alil-4-(1 -hidroxi-alil)-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (26.7 gramos, 95 milimoles), y peryodinano Dess-Martin (44.3 gramos, 105 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (380 mililitros) se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3:Na2SO3 saturado acuoso (1:1, 300 mililitros), y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (50 mililitros, 4 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para proporcionar un solido blanco. Este solido se suspendio en heptano (250 mililitros), y se sonico durante 5 minutos. La suspension blanca se filtro a traves de un cojin de Celite y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar el 4-acriloil-4-alil-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (26.5 gramos, 95 milimoles), como un aceite amarillo. iH RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 6.81 (dd, J = 16.93, 10.36 Hz, 1 H), 6.40 (dd, J = 16.80, 1.89 Hz, 1 H), 5.71 (dd, J = 10.36, 2.02 Hz, 1 H), 5.46-5.66 (m, 1 H), 4.91-5.14 (m, 2 H), 3.78 (br. s., 2 H), 2.96 (br. s., 2 H), 2.25-2.39 (m, 2 H), 1.97-2.15 (m, 2 H), 1.37-1.57 (m, 11 H). Este compuesto se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso d: A una solucion de 4-acriloil-4-alil-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (26.5 gramos, 95 milimoles) en tolueno (desgasificado, 850 mililitros), se le agrego catalizador de Grubbs II (2.02 gramos, 2.38 milimoles) en tolueno (desgasificado, 100 mililitros). La mezcla resultante se agito durante 45 minutos a 85°C. El solvente se removio bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (20.76 gramos, 83 milimoles), como un solido color cafe. Una solucion de este compuesto y DDQ (565 miligramos, 2.49 milimoles) en tolueno (540 mililitros) se agito durante 15 minutos a temperatura ambiente. La solucion rojo brillante resultante se filtro a traves de un cojin de Celite. Se agrego carbon (200 gramos), y la suspension resultante se agito durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se filtro a traves de un cojin de Celite y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (15.6 gramos, 62.3 milimoles), como un solido blanco. iH RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 7.63-7.74 (m, 1 H), 6.20 (dt, J = 5.81, 2.15 Hz, 1 H), 3.99-4.25 (m, 2 H), 2.92 (t, J = 11.62 Hz, 2 H), 2.63 (s, 2 H), 1.72-1.86 (m, 2 H), 1.49 (s, 9 H), 1.29 (d, J = 12.88 Hz, 2 H).
Intermediario 25
1 -(1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000058_0001
Paso a: A una suspension de 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (4.2 gramos, 16.71 milimoles), y Cul (6.37 gramos, 33.4 milimoles) en Et2O (100 mililitros), se le agrego (a 0°C y bajo N2) MeLi (1.6 M en tetrahidrofurano (THF), 31.3 mililitros, 50.1 milimoles). Despues de agitar durante 90 minutos a 0°C, la mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl saturado acuoso y se extrajo con EtOAc (15 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (4.23 gramos, 15.82 milimoles), como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 3.89-4.00 (m, 1 H), 3.83 (d, J = 13.39 Hz, 1 H), 3.11 (ddd, J = 13.64, 10.36, 3.28 Hz, 1 H), 2.99 (ddd, J = 13.58, 10.42, 3.54 Hz, 1 H), 2.47-2.59 (m, 1 H), 2.19-2.36 (m, 2 H), 1.74-1.97 (m, 2 H), 1.50-1.65 (m, 2 H), 1.48 (s, 9 H), 1.33-1.44 (m, 2 H), 1.17 (d, J = 6.32 Hz, 3 H).
Paso b: Una solucion de 3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (502 miligramos, 1.878 milimoles), etoxido de titanio(IV) (1.57 mililitros, 7.51 milimoles), y 2-metil-propan-2-sulfinamida (455 miligramos, 3.76 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (12.5 mililitros) se agito durante 16 horas a 65°C. Despues de enfriarse a 0°C, se agrego metanol (3 mililitros), seguido por borohidruro de litio (123 miligramos, 5.63 milimoles). La mezcla resultante se agito a 0°C durante 1 hora. Se agrego NH4Cl saturado acuoso lentamente para apagar el exceso de borohidruro seguido por la adicion de EtOAc (30 mililitros). La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 15 minutos, y entonces se filtro a traves de un cojin de Celite. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 75 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-(1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (463 miligramos, 1.243 milimoles), como un solido blanco.
Intermediarios 26a/b
(1R,3S)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo y (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo
Figure imgf000059_0001
Paso a: Una mezcla de 3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (4.23 gramos, 15.82 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (17 mililitros) en dicloro-metano (DCM) (80 mililitros) se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida. Una mezcla del residuo resultante, di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (13.82 mililitros, 79 milimoles), y cloroformato de bencilo (3.39 mililitros, 23.73 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (80 mililitros) se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl saturado acuoso y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (25 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (4.58 gramos, 15.20 milimoles) como un aceite amarillo claro. MS m/z 302.2 (M+H)+.
Paso b: El 3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (4.58 gramos, 15.20 milimoles) se purifico adicionalmente mediante SFC quiral como sigue: columna: IA 21 x 250 mm, velocidad de flujo: 70 gramos por minuto, fase movil: 45 por ciento (9:1 EtOH:MeCN) en CO2, deteccion: 220 nanometros UV para dar el (R)-3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (2.02 gramos, 6.70 milimoles), Rt: 2.0 minutos; y el (S)-3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (2.11 gramos, 7.0 milimoles), Rt: 3.6 minutos.
Paso c: Una solucion de (R)-3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (2.02 gramos, 6.70 milimoles), etoxido de titanio(IV) (5.62 mililitros, 26.8 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (1.625 gramos, 13.4 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (67 mililitros) se agito durante 16 horas a 65°C. Despues de enfriarse a -78°C, se agrego metanol (12 mililitros), seguido por borohidruro de litio (0.438 gramos, 20.11 milimoles). La mezcla resultante se agito durante 16 horas a -78°C a temperatura ambiente. Se agrego NH4Cl saturado acuoso lentamente para apagar el exceso de borohidruro seguido por la adicion de EtOAc (100 mililitros). La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 15 minutos, y entonces se filtro a traves de un cojin de Celite. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 5 al 90 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (1.94 gramos, 4.77 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 407.3 (M+H)+.
Paso c (a partir de enantiomero): El mismo procedimiento se siguio empezando a partir del (S)-3-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo para dar el (1R,3S)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo.
Intermediario 27
(1 R,3R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000060_0001
Paso a: Una mezcla de CuCl (142 miligramos, 1.432 milimoles), (S)-TolBINAP (972 miligramos, 1.432 milimoles), y terbutoxido de sodio (138 miligramos, 1.432 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (60 mililitros) se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. Se agrego B2pin2 (13.34 gramos, 52.5 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (20 mililitros), y la mezcla resultante se agito durante 10 minutos a temperatura ambiente. Se agrego 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-dec-2-ene-8-carboxilato de terbutilo (12.0 gramos, 47.7 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (50 mililitros), seguido por metanol (3.9 mililitros, 95 milimoles). La mezcla resultante se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. Se agrego H2O (150 mililitros), seguida por sodio perborato (36.7 gramos, 239 milimoles), y la mezcla resultante se agito vigorosamente durante 1 hora a temperatura ambiente. La suspension verde resultante se filtro a traves de un cojin de Celite, se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 saturado acuoso: Na2SO3 saturado acuoso (1:1,300 mililitros), y se extrajo con EtOAc (40 mililitros, 4 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar el (R)-3-hidroxi-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo crudo. La determinacion enantiomerica de esta mezcla muestra 90 por ciento de exceso enantiomerico (ee) (Rt(S): 1.59 minutos, Rt(R): 1.80 minutos; SFC quiral; columna: IA 4.6 x 100 milimetros, velocidad de flujo: 70 gramos por minuto, fase movil: 5-55 por ciento de metanol en CO2, deteccion: 220 nanometros UV).
Una mezcla de (R)-3-hidroxi-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo crudo (teorico: 47.7 milimoles), imidazol (4.87 gramos, 71.6 milimoles), y TBSCl (8.99 gramos, 59.6 milimoles) en N,N-dimetil-formamida (DMF) (DMF) (120 mililitros) se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl:H2O saturado acuoso (1:1, 250 mililitros), y se extrajo con Et2O (50 mililitros, 5 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 30 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (13.115 gramos, 34.2 milimoles) como un aceite incoloro que se solidifico despues de reposar.
Paso b: Una solucion de (R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo ( 8 gramos, 20.86 milimoles), etoxido de titanio(IV) (17.49 mililitros, 83.0 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (5.06 gramos, 41.7 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (100 mililitros) se agito durante 16 horas a 65°C. Despues de enfriarse a -78°C, se agrego metanol (15 mililitros), seguido por borohidruro de litio (1.363 gramos, 62.6 milimoles). La mezcla resultante se agito durante 16 horas a -78°C. Se agrego NH4Cl saturado acuoso lentamente para apagar el exceso de borohidruro seguido por la adicion de EtOAc (100 mililitros). La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 15 minutos, y entonces se filtro a traves de un cojin de Celite. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (1 R,3R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1 -((R)-1,1 -dimetil-etil-sulfinamido)-8 -azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (5.3 gramos, 10.84 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 489.3 (M+H)+.
Intermediario 28
(1 R,3S)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000061_0001
Paso a: Una mezcla de (1R,3R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8 -carboxilato de terbutilo (3.84 gramos, 7.86 milimoles), y TBAf (1 M en tetrahidrofurano (THF); 8.64 mililitros, 8.64 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (40 mililitros) se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de MeOH/DCM), para dar el (1 R,3R)-1 -((R)-1 ,1 -dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (2.94 gramos, 7.86 milimoles). MS m/z 375.3 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (3.0 gramos, 8.01 milimoles), trifenil-fosfina (4.2 gramos, 16.02 milimoles), y acido isoquinolin-1-carboxilico (4.16 gramos, 24.03 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (80 mililitros), se le agrego DIAD (3.1 mililitros, 16.02 milimoles). La mezcla resultante se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. La reaccion se diluyo con EtOAc (50 mililitros), se filtro a traves de un cojin de Celite, se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 saturado acuoso y se extrajo con EtOAc (25 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 4 por ciento de MeOH/DCM), para dar el (2S,4R)-isoquinolin-1-carboxilato de 8-(terbutoxi-carbonil)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-azaespiro-[4.5]-decan-2-ilo (3.65 gramos, 6.89 milimoles) como un solido anaranjado. MS m/z 530.3 (M+H)+.
Paso c: Una mezcla de (2S,4R)-isoquinolin-1-carboxilato de 8-(terbutoxi-carbonil)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-azaespiro-[4.5]-decan-2-ilo (3.65 gramos, 6.89 milimoles), e hidroxido de litio (2.95 gramos, 68.9 milimoles) en THF:H2O (1:1, 70 mililitros) se agito durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl saturado acuoso y se extrajo con EtOAc (15 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de MeOH/DCM), para dar el (1R,3S)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (2.35 gramos, 6.27 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 275.2 (M+H-Boc)+.
Intermediario 29
(1 R,3S)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-(isobutiriloxi)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000061_0002
A una solucion de (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (200 miligramos, 0.534 milimoles), trifenil-fosfina (280 miligramos, 1.068 milimoles), y acido isobutirico (146 microlitros, 1.602 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (5 mililitros), se le agrego DIAD (208 microlitros, 1.068 milimoles). La mezcla resultante se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. La reaccion se diluyo con EtOAc (50 mililitros), se filtro a traves de un cojin de Celite, se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 saturado acuoso, y se extrajo con EtOAc (10 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 7 por ciento de MeOH/DCM), para dar el (1 R,3S)-1 -((R)-1,1 -dimetil-etilsulfinamido)-3-(isobutiriloxi)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (237 miligramos, 0.534 milimoles). MS m/z 345.3 (M+H-Boc)+.
Intermediarios 30a/b/c
(1 R,3R)-1 -((R)-N,2-dimetil-propan-2-il-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo, (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metoxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo, y (1R,3R)-1-((R)-N,2-dimetil-propan-2-il-sulfinamido)-3-metoxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000062_0001
Una mezcla de (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (142 miligramos, 0.378 milimoles), y NaH (dispersion al 60 por ciento en aceite mineral, 19 miligramos, 0.473 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) se agito durante 20 minutos a 0°C. Se agrego yodo-metano (47 microlitros, 0.756 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 4 horas a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar el (1 R,3R)-1 -((R)-N,2-dimetil-propan-2-il-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (15.0 miligramos, 0.039 milimoles). MS m/z 289.2 (M+H-Boc)+; (1 R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metoxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo. MS m/z 289.2 (M+H-Boc)+; y (1R,3R)-1-((R)-N,2-dimetil-propan-2-il-sulfinamido)-3-metoxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8 -carboxilato de terbutilo. MS m/z 303.2 (M+H-Boc)+.
Intermediario 31
(1 R,3S)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metoxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000062_0004
Figure imgf000062_0002
Una mezcla de (1 R,3S)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (500 miligramos, 1.335 milimoles), oxido de plata(I) (340 miligramos, 1.468 milimoles), y yodo-metano (250 microlitros, 4.0 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (5 mililitros) se agito (protegido de la luz) durante 24 horas a temperatura ambiente y 24 horas a 45°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla se filtro a traves de un cojin de Celite, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 5 por ciento de MeOH/DCM), para dar el (1 R,3S)-1 -((R)-1,1 -dimetil-etilsulfinamido)-3-metoxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (248 miligramos, 0.638 milimoles). MS m/z 289.2 (M+H-Boc)+.
Intermediario 32
1 -((terbutoxi-carbonil)-amino)-3,3-difluoro-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo racemico
Figure imgf000062_0003
Paso a: Una mezcla de 3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-(1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (365 miligramos, 0.746 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 1.86 mililitros, 7.46 milimoles) en metanol (MeOH) (4 mililitros) se agito durante 1 hora a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar un solido blanco. MS m/z 171.1 (M+H)+. Una mezcla de este residuo, di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (2.6 mililitros, 14.92 milimoles), y B0 C2O (407 miligramos, 1.865 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (15 mililitros) se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NH4Cl saturado acuoso y se extrajo con Et2O (10 mililitros, 5 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 10 al 80 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (275 miligramos, 0.742 milimoles). MS m/z 271.3 (M+H-Boc)+.
Paso b: Una mezcla de 1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (275 miligramos, 0.742 milimoles), y peryodinano Dess-Martin (472 miligramos, 1.113 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (7.5 mililitros) se agito durante 2 horas a 0°C. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 saturado acuoso, y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (10 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4 , se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 5 al 75 por ciento de EtOAc/heptano), para dar 1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-3-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (135 miligramos, 0.366 milimoles). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 4.57 (d, J = 9.09 Hz, 1 H), 4.16 (d, J = 8.08 Hz, 1 H), 3.89­ 4.08 (m, 2 H), 2.77-2.93 (m, 2 H), 2.71 (dd, J = 18.95, 8.08 Hz, 1 H), 2.50 (d, J = 18.19 Hz, 1 H), 2.07-2.24 (m, 2 H), 1.76 (td, J = 12.82, 4.67 Hz, 1 H), 1.58-1.70 (m, 1 H), 1.42-1.53 (m, 18 H), 1.25-1.38 (m, 1 H).
Paso c: Una mezcla de 1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-3-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (95 miligramos, 0.258 milimoles), y desoxo-fluor (190 microlitros, 1.031 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (1 mililitro) se agito durante 48 horas a 50°C. La mezcla se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 saturado acuoso/hielo y se extrajo con EtOAc (5 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 30 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-3,3-difluoro-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (52 miligramos, 0.133 milimoles). 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 4.55 (d, J = 9.35 Hz, 1 H), 3.78-4.02 (m, 3 H), 2.64-2.86 (m, 2 H), 2.38-2.59 (m, 1 H), 2.10 a 2.32 (m, 1 H), 1.79-2.10 (m, 2 H), 1.58 (qd, J = 12.72, 3.79 Hz, 1 H), 1.27-1.52 (m, 21 H).
Los siguientes compuestos se sintetizaron utilizando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando el (1 R,3R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-azaespiro-[4.5]-decan-8 -carboxilato de terbutilo quiralmente puro como el material de partida.
Tabla 2
Figure imgf000063_0002
Intermediario 33
1 -amino-2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1 -en-3-ona
Figure imgf000063_0001
oc oc oc 1
Boc
Paso a: Una solucion de di-isopropil-amina (0.320 mililitros, 2.245 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (4 mililitros) se enfrio a -78°C, y se trato con n-butil-litio (1.3 mililitros, 2.080 milimoles) entonces se agito durante 5 minutos a 78°C, y se calento a 0°C dando una solucion de LDA para utilizarse subsiguientemente. A una solucion a -78°C de 4-cianopiperidin-1-carboxilato de terbutilo (153 miligramos, 0.728 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (10 mililitros), se le agrego la solucion preparada de LDA (2.8 mililitros) por goteo y la mezcla resultante se agito durante 10 minutos a -78°C, luego durante 10 minutos a -10°C. La reaccion se volvio a enfriar a -78°C y se agrego por goteo una solucion de alil-Br (80 microlitros, 0.924 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (2 mililitros). La mezcla de reaccion resultante se agito durante 1 hora a temperatura ambiente, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El acuoso se extrajo con EtOAc, las fases organicas combinadas se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron bajo presion reducida. El residuo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 4-alil-4-cianopiperidin-1-carboxilato de terbutilo (40 miligramos, 0.16 milimoles), como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 5.99-5.70 (m, 1 H), 5.23 (q, J = 1.1 Hz, 1 H), 5.20 (dtd, J = 3.3, 2.1, 1.1 Hz, 1 H), 3.96 (d, J = 13.7 Hz, 2 H), 2.86 (s, 2 H), 2.36 (dt, J = 7.5, 1.3 Hz, 2 H), 1.84 (dq, J = 13.7, 2.6 Hz, 2 H), 1.40 (s, 11 H).
Paso b: Una solucion de 4-alil-4-cianopiperidin-1-carboxilato de terbutilo (22 miligramos, 0.088 milimoles) en diclorometano (DCM) (1.5 mililitros), y NaOH (2.5 M en MeOH, 0.176 mililitros, 0.439 milimoles) se aireo con ozono (aireador de difusion) a -78°C durante 30 minutos. La reaccion se purgo con oxigeno entonces se dividio entre agua y dicloro-metano (DCM). Las fases se separaron, la organica se recolecto y la acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (5 mililitros, 2 veces). Las fases organicas combinadas se concentraron bajo presion reducida. El residuo resultante se absorbio en metanol (MeOH), y se agito durante 24 horas a 65°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 70 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 4-ciano-4-(2-metoxi-2-oxoetil)-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (21 miligramos, 0.074 milimoles), como un aceite incoloro. iH RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 4.14 (s, 2 H), 3.75 (s, 3 H), 3.08 (t, J = 12.9 Hz, 2 H), 2.62 (s, 2 H), 2.15-2.02 (m, 2 H), 1.59-1.48 (m, 2 H), 1.46 (s, 9 H). TLC (50 por ciento de EtOAc/heptano (tenido w/KMnO4), Rf = 0.5).
Paso c: Una solucion de 4-ciano-4-(2-metoxi-2-oxo-etil)-piperidin-1-carboxilato de terbutilo (287 miligramos, 1.017 milimoles), y NH3 (7 N en MeOH, 3.0 mililitros, 21.00 milimoles) en metanol (MeOH) (5 mililitros) se agito en un tubo sellado durante 48 horas a 120°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar un solido blanco. El solido se trituro con EtOAc, y se filtro, para dar el 1-amino-3-oxo-2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-ene-8-carboxilato de terbutilo (157 miligramos, 0.587 milimoles), como un solido blanco. iH RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8.44 (s, 1 H), 8.02 (s, 1 H), 3.98 (d, J = 13.3 Hz, 2 H), 2.71 (s, 2 H), 2.34 (s, 2 H), 1.81 (td, J = 12.9, 4.6 Hz, 2 H), 1.49-1.30 (m, 11 H). MS m/z 268 (M+H)+.
Intermediarios 34a/b
2-fluoro-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo racemico y 2,2-difluoro-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8 -carboxilato de terbutilo
Figure imgf000064_0001
A una solucion a -78°C de NaHMDS (1 M en tetrahidrofurano (THF), 8 . 68 mililitros, 8 . 6 8 milimoles), se le agrego una solucion de 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (2.0 gramos, 7.89 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (5 mililitros). Despues de agitar durante 30 minutos a esta temperatura, se agrego una solucion de N-fluorobencen-sulfonamida (2.49 gramos, 7.89 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (10 mililitros). Despues de 3 horas agitando a -78°C, se diluyo con NaHCO3 saturado acuoso (100 mililitros), y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (100 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 25 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 2-fluoro-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo racemico (351 miligramos, 1.29 milimoles). MS m/z 272.1 (M+H)+ y difluoro-cetona la cual se co-eluye con el material de partida. Las fracciones co-eluidas combinadas de difluoro-cetona/partida se volvieron a purificar mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 5 por ciento de MeOH/DCM), para dar el 2,2-difluoro-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (573 miligramos, 1.98 milimoles). Ms m/z 290.1 (M+H)+.
Intermediario 35
(S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000065_0001
Paso a: Una solucion de 4-hidroxi-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (544 miligramos, 2.11 milimoles), y peryodinano Dess-Martin (1.39 gramos, 3.17 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (10 mililitros) se agito durante 2 horas a 0°C. Se agrego NaHCO3 saturado acuoso:Na2S2O3 saturado acuoso (1:1, 10 mililitros), la fase organica se separo y la fase acuosa se extrajo con dicloro-metano (DCM) (10 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (470 miligramos, 1.84 milimoles), como un aceite incoloro, el cual se cristalizo al reposar. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 4.08 (s, 2 H), 4.05 (s, 2 H), 3.88 (dt, J = 13.7, 4.9 Hz, 2 H), 3.12 (ddd, J = 13.6, 9.8, 3.6 Hz, 2 H), 1.75 (ddd, J = 13.9, 9.7, 4.2 Hz, 2 H), 1.58­ 1.51 (m, 2 H), 1.48 (s, 9 H). MS m/z 256.2 (M+H)+.
Paso b: Una solucion de 4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (220 miligramos, 0.86 milimoles), etoxido de titanio(IV) (725 microlitros, 3.45 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (209 miligramos, 1.72 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (4 mililitros) se agito durante 1 hora a 90°C. Despues de enfriarse a 0°C, se agrego borohidruro de litio (23 miligramos, 1.06 milimoles). Despues de agitar durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se apago mediante la adicion de metanol. Los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se diluyo con salmuera y se extrajo con EtOAc (10 mililitros, 4 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (170 miligramos, 0.47 milimoles). MS m/z 361.1 (M+H)+.
Los siguientes compuestos se sintetizaron utilizando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando la cetona y sulfonamida correspondientes.
Tabla 3
Figure imgf000065_0002
Intermediario 36
(1 R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000066_0001
Paso a: A una solucion de 1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (2.2 gramos, 8.68 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (24 mililitros), se le agrego LiHMDS (1 M en tetrahidrofurano (THF), 8.68 mililitros, 8.68 milimoles) de 0 a 5°C. Despues de agitar la mezcla durante 30 minutos a esta temperatura, se agrego yodo-metano (0.543 mililitros, 8.68 milimoles). La mezcla resultante se dejo calentar a temperatura ambiente, y se agito durante 2 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc, y se apago con NaHCCfe saturado acuoso. La fase organica se lavo con salmuera, se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro bajo presion reducida. El aceite color cafe resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 25 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 2-metil-1 -oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato terbutilo (1.3 gramos, 4.86 milimoles). MS m/z 268.1. (M+H)+.
Paso b: Una solucion de 2-metil-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (267 miligramos, 0.999 milimoles), etoxido de titanio(IV) (837 microlitros, 3.99 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (242 miligramos, 1.997 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (10 mililitros) se agito durante 24 horas a 85°C. Despues de enfriarse a -78°C, se agrego metanol (12 mililitros), seguido por borohidruro de litio (65.3 miligramos, 3.00 milimoles). La mezcla resultante se agito a -78°C a temperatura ambiente durante 16 horas. Se agrego NH4Cl saturado acuoso lentamente para apagar el exceso de borohidruro seguido por la adicion de EtOAc (100 mililitros). La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 15 minutos, y entonces se filtro a traves de un cojin de Celite. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 60 por ciento de EtOAc/heptano(que contenia 0.25 por ciento de Et3N)), para dar el (1 R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (92 miligramos, 0.247 milimoles). MS m/z 373.1 (M+H)+.
Intermediarios 37a/b
(3S,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato terbutilo y (3R,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato terbutilo
Figure imgf000066_0002
Paso a: A una solucion de 4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (2.47 gramos, 9.67 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (24 mililitros), se le agrego LiHMDS (1 M en tetrahidrofurano (THF), 9.67 mililitros, 9.67 milimoles) a -78°C. Despues de agitar la mezcla durante 30 minutos a esta temperatura, se agrego yodo-metano (0.605 mililitros, 9.67 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (10 mililitros). La mezcla resultante se dejo calentar a temperatura ambiente, y se agito durante 1 hora. La mezcla de reaccion se diluyo con EtOAc, y se apago con NaHCO3 saturado acuoso. La fase organica se lavo con salmuera, se seco sobre Na2SO4, se filtro, y se concentro bajo presion reducida. El aceite color cafe resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 20 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (318 miligramos, 1.181 milimoles). MS m/z 270.2. (M+H)+.
Paso b: Una solucion de 3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (318 miligramos, 1.181 milimoles), etoxido de titanio(IV) (990 microlitros, 4.72 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (286 miligramos, 2.361 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (4 mililitros) se agito durante 90 minutos a 90°C. Despues de enfriarse a 0°C, se agrego en una porcion borohidruro de litio (65.3 miligramos, 3.00 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. Se agrego lentamente NH4Cl saturado acuoso para apagar el exceso de borohidruro seguido por la adicion de EtOAc (25 mililitros). La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 15 minutos, y entonces se filtro a traves de un cojin de Celite. La fase organica se lavo con NaHCO3 saturado acuoso, salmuera, se seco sobre Na2SO4, se filtro, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (88 miligramos, 0.235 milimoles). MS m/z 375.2 (M+H)+.
Paso c: Los diaestereomeros se separaron mediante cromatografia de fluidos super-criticos (SFC) quiral como sigue: columna: LUXC430 x 250 mm, velocidad de flujo: 80 gramos por minuto, fase movil: metanol al 20 por ciento en CO2 , deteccion: 210 nanometros para dar el (3R,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo , Rt = 4.0 minutos; y el (3S,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo , Rt = 4.55 minutos.
Intermediario 38
(3S,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo
Figure imgf000067_0001
Paso a: A una solucion a -10°C de di-isopropil-amina (23.4 mililitros, 166 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (220 mililitros), se le agrego nBuLi (2.5 M en hexano, 64.1 mililitros, 160 milimoles) por goteo. Despues de agitar durante 30 minutos a esta temperatura, se agrego 4-etil-piperidin-1,4-dicarboxilato de 1 -terbutilo (27.5 gramos, 107 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (50 mililitros), por goteo y la mezcla resultante se agito durante 30 minutos a 0°C. Se agrego (S)-2-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-propanal (20.47 mililitros, 102 milimoles), y la mezcla se agito durante 1 hora a 0°C y 1 hora a temperatura ambiente. La reaccion se diluyo con NaHCO3 saturado acuoso:H2O (1:4, 125 mililitros), se agrego EtOAc (50 mililitros), y las fases se separaron. La fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (100 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y el solvente se removio bajo presion reducida. El residuo resultante se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 346.4 (M+H-Boc)+.
Paso b: A una solucion de 4-etilo 4-((2S)-2-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1 -hidroxi-propil)-piperidin-1,4-dicarboxilato de 1-terbutilo crudo (95 gramos, 214 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (600 mililitros), se le agrego en porciones LiBH4 (7.0 gramos, 321 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. Despues de enfriarse a 0°C, se agrego NaHCO3 saturado acuoso:H2O (1:2, 150 mililitros), y la mezcla resultante se agito vigorosamente hasta que no se observo mas burbujeo. Se agrego EtOAc (100 mililitros), la mezcla se filtro, las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (50 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar el 4-((2S)-2-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-hidroxi-propil)-4-(2-hidroxi-etil)-piperidin-1-carboxilato de terbutilo (64.8 gramos, 161 milimoles), el cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso c: Una solucion de 4-((2S)-2-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1-hidroxi-propil)-4-(2-hidroxi-etil)-piperidin-1-carboxilato de terbutilo (64.8 gramos, 161 milimoles), y TBAF (1 M en tetrahidrofurano (THF), 242 mililitros, 242 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (500 mililitros) se agito durante 2 horas a temperatura ambiente. Se agregaron NaHCO3 saturado acuoso:H2O (1:2, 150 mililitros), las fases se separaron, y la fase acuosa se extrajo adicionalmente con EtOAc (100 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 20 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 4-((2S)-1,2-dihidroxipropil)-4-(2-hidroxi-etil)-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (39.25 gramos, 136 milimoles), como un aceite semi-solido incoloro.
Paso d: A una suspension de NaH a 0°C (10.60 gramos, 424 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (600 mililitros), se le agrego por goteo una solucion de 4-((2S)-1,2-dihidroxi-propil)-4-(2-hidroxi-etil)-piperidin-1 -carboxilato de terbutilo (35.06 gramos, 121 milimoles), y TsCl (23.10 gramos, 121 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (200 mililitros). La mezcla resultante se agito durante 1 hora a 0°C. Se agrego lentamente NH4Cl saturado acuoso (~5 mililitros), a -20°C, y la reaccion se agito vigorosamente hasta que no se observo mas burbujeo. En este punto, se agrego NH4Cl saturado acuoso (100 mililitros), seguido por salmuera (100 mililitros), y la mezcla se extrajo con EtOAc (100 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y el solvente se removio bajo presion reducida, para dar el (3S)-4-hidroxi-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (32.19 gramos, 119 milimoles), el cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 171.1 (M-Boc)-.
Paso e: Una solucion de (3S)-4-hidroxi-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (32.19 gramos, 119 milimoles), y peryodinano Dess-Martin (67.4 gramos, 154 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (300 mililitros) se agito durante 2 horas a 0°C. Despues de calentar a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 40 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (S)-3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (27.68 gramos, 92 milimoles), como un aceite amarillo palido. 1H RMN (400 m Hz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 4.09 (d, J = 9.60 Hz, 1 H), 3.66-3.86 (m, 4 H), 3.03 (ddd, J = 13.77, 9.73, 3.79 Hz, 1 H), 2.90 (ddd, J = 13.64, 10.23, 3.41 Hz, 1 H), 1.68 (ddd, J = 13.83, 9.92, 4.29 Hz, 1 H), 1.41 -1.59 (m, 2 H), 1.30-1.40 (m, 10 H), 1.20-1.25 (m, 3 H).
Paso f: Una solucion de (3S)-3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (22.52 gramos miligramos, 84 milimoles), etoxido de titanio(IV) (70.1 mililitros, 334 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (21 gramos, 173 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (300 mililitros) se agito durante 21 horas a 90°C. Despues de enfriarse a -4°C, se agrego metanol (30 mililitros), seguido por la adicion por goteo (manteniendo temperatura de la reaccion debajo de 2°C) de borohidruro de litio (1.82 gramos, 84 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 1 hora a -4°C. Se agrego lentamente NH4Cl saturado acuoso para apagar el exceso de borohidruro (formado como tipo de gelatina), seguido por la adicion de EtOAc (500 mililitros). La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 15 minutos a temperatura ambiente, y entonces se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con EtOAc (500 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (3S,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo como una mezcla diaestereomerica 95:5 (diaestereomero menor (3R,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo).
Paso g: Los diaestereomeros se separaron mediante cromatografia de fluidos super-criticos (SFC) quiral como sigue: columna: LC-430 x 250 mm, velocidad de flujo: 100 gramos por minuto, fase movil: 30 por ciento de metanol en CO2 , deteccion: 225 nanometros, Rt: 0.95 minutos (diaestereomero menor Rt: 0.55 minutos), para dar el (3S,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (19 gramos, 50.68 milimoles). MS m/z 375.2.
Intermediario 39
(4R)-4-amino-2-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-2-ol
Figure imgf000069_0001
Paso a: Una mezcla de sal de diclorhidrato de (2R,4R)-4-amino-8-azaespiro-[4.5]-decan-2-ol (623 miligramos, 2.56 milimoles), Na2CO3 (1357 miligramos, 12.80 milimoles), y CbzCl (1048 miligramos, 6.14 milimoles) en H2O (5 mililitros) se agito vigorosamente durante 30 minutos a temperatura ambiente. Se agrego tetrahidrofurano (THF) (0.5 mililitros), y la mezcla resultante se agito durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con agua y dicloro-metano (DCM). La fase acuosa separada se extrajo con dicloro-metano (DCM) (10 mililitros, 2 veces). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentra bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (1R,3R)-1-(((benciloxi)-carbonil)-amino)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (940 miligramos, 2.14 milimoles) como una espuma blanca. MS m/z 439.3 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de (1R,3R)-1-(((benciloxi)-carbonil)-amino)-3-hidroxi-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (440 miligramos, 1.003 milimoles), y peryodinano Dess-Martin (638 miligramos, 1.505 milimoles) en diclorometano (DCM) (6 mililitros) se agito durante 1 hora a 0°C y durante 18 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se diluyo con NaHCO3 saturado acuoso:Na2S2O3 saturado acuoso (1:1, 25 mililitros). La fase acuosa separada se extrajo con dicloro-metano (DCM) (15 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, y se concentra bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 70 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el (R)-1-(((benciloxi)-carbonil)-amino)-3-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (415 miligramos, 0.951 milimoles) como una espuma blanca. MS m/z 437.2 (M+H)+.
Paso c: A una solucion de MeLi (1.2 M en tetrahidrofurano (THF), 2.61 mililitros, 3.13 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (15 mililitros), se le agrego por goteo (R)-1-(((benciloxi)-carbonil)-amino)-3-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (415 miligramos, 0.951 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (5 mililitros) de -30°C a -40°C. La mezcla resultante se agito durante 20 minutos de -30°C a -40°C. La mezcla se diluyo con NaHSO4 (solucion al 10 por ciento en H2O), se diluyo con EtOAc, y se dejo calentar a temperatura ambiente bajo agitacion vigorosa. La mezcla se diluyo con NaHCO3 saturado acuoso y la fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (15 mililitros, 1 vez). Las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentra bajo presion reducida. Una solucion del residuo resultante (313 miligramos), Na2CO3 (498 miligramos, 4.70 milimoles), y CbzCl (295 miligramos, 1.729 milimoles) en agua (10 mililitros), y tetrahidrofurano (THF) (1 mililitro) se agito vigorosamente durante 3 dias a temperatura ambiente. La mezcla se diluyo con EtOAc, y la fase acuosa separada se extrajo con EtOAc (15 mililitros, 3 veces). Las fases organicas combinadas se concentraron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar dos diaestereomeros: diaestereomero A (112 miligramos, 0.25 milimoles), como un semisolido incoloro, MS m/z 453.3 (M+H)+ and diaestereomero B (45 miligramos, 0.010 milimoles) como una espuma/solido blanco, MS m/z 453.3 (M+H)+.
Paso d: Una mezcla de diaestereomero A (50 miligramos, 0.11 milimoles), y Pd/C (10 por ciento en peso; 12 miligramos, 0.011 milimoles) en metanol (MeOH) (8 mililitros) se agito vigorosamente bajo una atmosfera de hidrogeno durante 2 horas. Se agrego Celite y la mezcla se filtro a traves de un cojin de Celite seguido por lavado con dicloro-metano (DCM). El filtrado se concentro bajo presion reducida, para dar el (4R)-4-amino-2-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-2-ol como un solido incoloro el cual se utilizo sin mayor purificacion. MS m/z 185.2 (M+H)+.
Intermediario 40
1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1 R,3S)-te/t-butilo
Figure imgf000070_0001
Una mezcla de 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1 R,3R)-te/t-butilo (400 mg, 1.068 mmol) y DAST (1 M en DCM, 1.87 mL, 1.87 mmol) en DCM (8.5 mL) se agito durante 90 min a 0 °C. La mezcla de reaccion se detuvo mediante la adicion de NaHCO3 saturado acuoso (5 mL). Despues de agitar durante 10 min a 0 °C, las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 5 mL). LAs fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volatiles se eliminaron bajo presion reducida para dar 1 -((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1 R,3S)-te/t-butilo que se uso en la siguiente etapa sin puificacion adicional. MS m/z 277.2 (M+H-Boc)+.
Intermediario 41
1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1 R,3R)-te/t-butilo
Figure imgf000070_0002
Una mezcla de 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-hidroxi-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1 R,3S)-te/t-butilo (200 mg, 0.534 mmol) y DAST (1 M en DCM, 934 gL, 0.934 mmol) en DCM (5 mL) se agito durante 90 min a 0 °C. La mezcla de reaccion se detuvo mediante la adicion de NaHCO3 saturado acuoso (5 mL). Despues de agitar durante 10 min a RT, las fases se separaron y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 5 mL). LAs fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volatiles se eliminaron bajo presion reducida para dar 1 -((R)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1 R,3R)-te/t-butilo que se uso en la siguiente etapa sin puificacion adicional. MS m/z 277.2 (M+H-Boc)+.
Intermediario 42
3-((6-amino-2,3-dicloropiridin-4-il)tio)-6-cloropirazin-2-amina
Figure imgf000070_0003
Paso a: A una solucion de 5,6-dicloropiridin-2-amina (590 mg, 3,62 mmol) en THF (5 ml) se agrego LiHMDS (1 M en THF, 7,96 ml, 7,96 mmol) a 0 ° C. La reaccion se agito durante 10 minutos a 0°C y luego se anadio una solucion de Boc2O (869 mg, 3,98 mmol) en THF (5 ml) a la mezcla de reaccion. La solucion resultante se agito durante 15 minutos a 0°C y luego se llevo a pH 4 mediante la adicion de HCl 1M. La solucion se diluyo con EtOAc, se lavo con una solucion de NaHCO3 saturado acuoso, salmuera, se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro a presion reducida. El residuo resultante se purifico por cromatograffa de silica (0 a 40% de EtOAc/heptano) para dar (5,6­ dicloropiridin-2-il)carbamato de tert-butilo. (790 mg, 3.00 mmol). 1H RmN (400 MHz, CLOROfOrmO-o) 5 ppm 7.86 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.70 (d, J=8.7 Hz, 1 H), 7.20 (br s, 1 H), 1.51 (s, 9 H). MS m /z232.9 (M+H-®u)+.
Paso b: A una solucion de diisopropilamina (1 ml, 7,07 mmol) en THF (5 ml) se anadio n-BuLi (2,5 M en hexanos, 2,83 ml, 7,07 mmol) a -78 ° C y la solucion resultante se agito durante 1 h a esta temperatura. Se anadio (5,6-dicloropiridin-2-il) carbamato de terT-butilo (930 mg, 3,53 mmol) en THF (5 ml) a -78 ° C. Despues de agitar a esta temperatura durante 2 h, se anadio yodo (987 mg, 3,89 mmol) en THF (5 ml) y la mezcla resultante se agito durante 30 minutos a -78 ° C. Despues de calentar a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se diluyo con agua y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las fases organicas combinadas se lavaron con una solucion de NaHCO3 saturado acuoso, salmuera, se seco sobre Na2SO4, se filtro y se concentro bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico por cromatografia de silica (0 a 40% de EtOAc / heptano) para dar (5,6-dicloro-4-yodopiridin-2-il) carbamato de tert-butilo. (813 mg, 2.09 mmol). 1H RMN (400 MHz, ClOrOfOrMO -D) 5 ppm 8.45 (s, 1 H), 7.12 (s, 1 H), 1.52 (s, 9 H). MS m/z 332.9 (M+H-fBu)+.
Paso c: una mezcla de (5,6-dicloro-4-yodopiridin-2-il) carbamato de tert-butilo (610 mg, 1,57 mmol), sodio 3-amino-5-cloropirazina-2-tiolato (302 mg, 1,65 mmol), Pd2 (dba)3 (72 mg, 0.08 mmol), Xantphos (91 mg, 0.16 mmol) y DIPEA (0.55 mL, 3.14 mmol) en dioxano (7.8 mL) se agito durante 8 horas a 110 °C. Despues de enfriar hasta temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se filtro a traves de una capa de Celite y los compuestos volatiles se eliminaron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico por cromatografia de silica (0 a 40% de EtOAc/heptano) para dar (4-((3-amino-5-cloropirazin-2-il) tio)-5,6-dicloropiridin-2-il)carbamato de tert-butilo (470 mg, 1.11 mmol). 1H Rm N (400 MHz, DMSO) 5 ppm 10.24 (s, 1 H), 7.96 (s, 1 H), 7.31 (br s, 2 H), 7.16 (s, 1 H), 1.38 (s, 9 H). MS m/z 321.9 (M+H-Boc)+.
Paso d: Una mezcla de (4-((3-amino-5-cloropirazin-2-il) tio)-5,6-dicloropiridin-2-il)carbamato de tert-butilo (470 mg, 1,11 mmol) y HCl ( 4 M en dioxano, 5,56 ml, 22,24 mmol) se agito durante 1 hora a temperatura ambiente. Los compuestos volatiles se eliminaron bajo presion reducida para dar dihidrocloruro de 3- ((6-amino-2,3-dicloropiridin-4-il)tio)-6-cloropirazin-2-amina (411 mg, 1,04 mmol) que se uso sin purificacion adcional. MS m/z324.0 (M+H)+.
Ejemplo 1
(S), y (R) 6-(4-(amino-metil)-4-metil-piperidin-1 -il)-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina
Figure imgf000071_0001
Paso a: Una solucion de 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (200 miligramos, 0.652 milimoles), y N-(4-metoxi-bencil)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-amina (358 miligramos, 1.304 milimoles) en di-isopropiletil-amina (DIPEA) (3 mililitros) se agito durante 60 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se disolvio en acido trifluoro-acetico (TFA) (3 mililitros), y la solucion se agito en un reactor de microondas durante 1 hora a 160°C and durante 15 minutos a 180°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la 6-(4-(aminometil)-4-metil-piperidin-1-il)-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (73 miligramos, 0.482 milimoles; 83 por ciento puro basandose en HRMS). 19 miligramos de este compuesto se purificaron adicionalmente mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), para dar el compuesto del titulo puro (9.5 miligramos). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8.29 (dd, J = 4.42, 1.39 Hz, 1 H), 7.48 (s, 1 H), 7.19-7.41 (m, 2 H), 4.06-4.26 (m, 2 H), 2.89-3.14 (m, 2 H), 2.71 (t, J = 7.33 Hz, 1 H), 1.86-2.00 (m, 1 H), 1.73-1.84 (m, 1 H), 1.43-1.72 (m, 5 H), 1.27-1.42 (m, 2 H), 1.17-1.27 (m, 1 H). 19F RMN (376 MHz, METANOL<U) 5 ppm -66.45 (s). HRMS calculado para C19H24N6 F3S (M+H)+ 425.1735, encontrado 425.1753. IC50 es 0.023 pM.
Paso b: La purificacion de SFC quiral del compuesto anterior del titulo se llevo a cabo como sigue; columna: ID 21x250 mm, velocidad de flujo: 75 gramos por minuto, fase movil: 35 por ciento de metanol y NH4OH 10 mM en CO2 , deteccion: 270 nanometros UV para obtener el enantiomero solo Rt (P1)= 4.9 minutos; IC50 es 0.011 pM y Rt (P2)= 6.4 minutos; IC50 es 0.167 pM.
Los siguientes los compuestos de la formula I, como se identifican en la Tabla 4, se hicieron utilizando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando el derivado de tiopirazin-2-amina y la amina protegida correspondientes.
Tabla 4
Figure imgf000072_0001
Figure imgf000073_0002
Ejemplo 8
(R), y (S)-2-(6-amino-5-((2,3-dicIoro-feniI)-tio)-pirazin-2-iI)-2-azaespiro-[3.3]-heptan-5-amina
Figure imgf000073_0001
Paso a: Una soIucion de 6-cIoro-3-((2,3-dicIoro-feniI)-tio)-pirazin-2-amina (140 miIigramos, 0.457 miIimoIes), y 2-azaespiro-[3.3]-heptan-5-iI-carbamato de terbutiIo (saI de HCI, 125 miIigramos, 0.502 miIimoIes) en di-isopropiI-etiI-amina (DlPEA) (1 miIiIitro) se agito durante 24 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, Ios voIatiIes se removieron bajo presion reducida. EI residuo resuItante se disoIvio en dicIoro-metano (DCM) (5 miIiIitros), se agrego acido trifIuoro-acetico (TFA) (0.5 miIiIitros), y Ia mezcIa resuItante se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. Los voIatiIes se removieron bajo presion reducida, y eI residuo resuItante se purifico mediante HPLC (eIucion en gradiente deI 25 aI 50 por ciento de acetonitriIo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar Ia 2-(6-amino-5-((2,3-dicIoro-feniI)-tio)-pirazin-2-iI)-2-azaespiro-[3.3]-heptan-5-amina (75 miIigramos, 0.186 miIimoIes). iH RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.31 (dd, J = 8.03, 1.51 Hz, 1 H), 7.18 (s, 1 H), 7.11 (t, J = 8.03 Hz, 1 H), 6.60 (dd, J = 8.03, 1.51 Hz, 1 H), 4.45 (d, J = 8.78 Hz, 1 H), 4.03 (d, J = 9.03 Hz, 1 H), 3.96 (d, J = 9.03 Hz, 1 H), 3.90 (d, J = 8.78 Hz, 1 H), 3.34-3.39 (parciaImente sobrepuesto con soIvente, m, 1 h ), 2.12-2.25 (m, 1 H), 1.90 a 2.11 (m, 2 H), 1.52-1.67 (m, 1 H). HRMS caIcuIado para C16H18CI2N5S (M+H)+ 382.0660, encontrado 382.0585. IC50 es 5.36 pM.
Paso b: 2-(6-amino-5-((2,3-dicIoro-feniI)-tio)-pirazin-2-iI)-2-azaespiro-[3.3]-heptan-5-amina (53.9 miIigramos, 0.141 miIimoIes) se purifico adicionaImente mediante SFC quiraI; coIumna: OJ-H 21x250 mm, veIocidad de fIujo: 80 gramos por minuto, fase moviI: 26 por ciento de metanoI y NH4OH 10 mM en CO2 , deteccion: 269 nanometros UV para obtener eI enantiomero soIo Rt (P1)= 3.7 minutos; IC50 es 17.49 pM y Rt (P2)= 4.7 minutos.; IC50 es 3.31 pM.
Los siguientes compuestos de Ia formuIa I, como se identifican en Ia TabIa 5, se hicieron utiIizando eI procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando el derivado de pirazin-2-amina y la amina protegida correspondientes.
Tabla 5
Figure imgf000074_0001
Figure imgf000075_0001
Figure imgf000076_0002
Ejemplo 14
7-(6-amino-5-((2,3-dicloro-fenil)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-amina
Figure imgf000076_0001
Una solucion de 6-cloro-3-((2,3-dicloro-fenil)-tio)-pirazin-2-amina (140 miligramos, 0.457 milimoles), y 2-(7-azaespiro-[3.5]-nonan-1-il)-isoindolina-1,3-diona (sal de HCl, 154 miligramos, 0.502 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1 mililitro) se agito durante 16 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida. Una solucion del residuo resultante e hidrato de hidrazina (29 microlitros, 0.602 milimoles) en THF:MeOH (1:1, 1 mililitro) se agito durante 16 horas a 55°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 35 al 60 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar el compuesto del titulo (78 miligramos, 0.502 milimoles). 1H RMN (400 MHz, METANOL<U) 5 ppm 7.59 (s, 1 H), 7.31 (dd, J = 8.03, 1.51 Hz, 1 H), 7.12 (t, J = 8.03 Hz, 1 H), 6.62 (dd, J = 8.03, 1.51 Hz, 1 H), 4.37 (d, J = 13.55 Hz, 1 H), 4.26 (d, J = 13.55 Hz, 1 H), 3.24-3.30 (parcialmente traslapado con solvente, m, 1 H), 3.07-3.20 (m, 1 H), 2.923.06 (m, 1 H), 2.26-2.39 (m, 1 H), 1.87-2.07 (m, 2 H), 1.57-1.87 (m, 4 H), 1.34-1.42 (m, 1 H). HRMS calculada para C18H22Cl2N5S (M+H)+ 410.0973, encontrada 410.1018; (racemico). La 1C50 es de 0.056 pM.
La purificacion mediante SFC quiral del compuesto del titulo anterior se llevo a cabo como sigue; columna: AD-H 21 x 250 milimetros, velocidad de flujo: 80 gramos por minuto, fase movil: metanol al 46 por ciento y NH4OH 10 mM en CO2, deteccion: 274 nanometros UV para obtener el unico enantiomero Rt (P1) = 4.0 minutos y Rt (P2) = 5.5 minutos. (P1 (enantiomero S (determinado mediante rayos-X)); la IC50 es de 0.019 pM; (P2 (enantiomero R)); la IC50 es de 0.414 pM.
Los siguientes compuestos de la formula I, como se identifican en la Tabla 6, se hicieron empleando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando el derivado de pirazin-2-amina correspondiente y la amina protegida por ftalamida.
Tabla 6
Figure imgf000077_0001
Figure imgf000078_0001
Ejemplo 20
(S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-amina
Figure imgf000079_0001
Paso a: Una mezcla de 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (230 miligramos, 0.750 milimoles), y (R)-2-metil-N-((S)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-il)-propan-2-sulfinamida (238 miligramos, 0.975 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (3.7 mililitros), se agito durante 10 horas a 105°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 5 al 70 por ciento de EtOAc/heptano), para dar la (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (172 miligramos, 0.334 milimoles), como un solido blanco. MS m/z 515.2 (M+H)+.
Paso b: Una solucion de (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (142 miligramos, 0.376 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 414 microlitros, 1.66 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (1.4 mililitros), se agito durante 20 minutos a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, se agrego HCl (1 M en H2O), y la mezcla acuosa resultante se extrajo con dicloro-metano (DCM). La fase acuosa se basifico con NH4OH (al 28 por ciento en H2O) hasta un pH de 12, y se extrajo con diclorometano (DCM) (20 mililitros, 3 veces). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (S)-7-(6-amino-5-((2-(trifluorometil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-amina (93 miligramos, 0.227 milimoles). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8.40-8.53 (m, 1 H), 7.61-7.69 (m, 1 H), 7.55 (dd, J = 8.0, 4.5 Hz, 1 H), 7.29 (d, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.19 (s, 2 H), 4.11-4.24 (m, 1 H), 3.99-4.06 (m, 1 H), 3.06-3.20 (m, 2 H), 2.90-3.06 (m, 2 H), 1.50-1.74 (m, 4 H), 1.33-1.49 (m, 2 H). HRMS calculada para C18H21F3N6S (M+H)+ 411.1566, encontrada 411.1579. La IC50 es 0.038 pM.
Ejemplo 21
(S)-5-amino-3-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carboxamida
Figure imgf000079_0002
Paso a: A una solucion de 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (1.2 gramos, 2.119 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (30 mililitros), se le agrego, a 0°C, NBS (745 miligramos, 4.19 milimoles) en una porcion. La mezcla resultante se agito vigorosamente durante 30 minutos a 0°C, y durante 1 hora a temperatura ambiente. La solucion transparente se apago con agua, y se extrajo con dicloro-metano (DCM). Las capas organicas combinadas subsiguientemente se lavaron con agua, salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar la 5-bromo-6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (938 miligramos, 2.51 milimoles). MS m/z 387.2 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de 5-bromo-6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (750 miligramos, 1.945 mili-moles), y cianuro de cobre(I) (348 miligramos, 3.89 milimoles) en N,N-dimetil-formamida (DMF) (7 mililitros), se agito durante 14 horas a 120°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con metanol (50 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para proporcionar el 5-amino-3-cloro-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carbonitrilo (301 miligramos, 0.907 milimoles). MS m/z 332.3 (M+H)+.
Paso c: Una mezcla de 5-amino-3-cloro-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carbonitrilo (52 miligramos, 0.157 milimoles), y (S)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (90 miligramos, 0.314 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.246 mililitros), se agito durante 1 hora a 135°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para proporcionar el 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carbonitrilo (77 miligramos, 0.132 milimoles). MS m/z 584.5 (M+H)+.
Paso d: Una mezcla de 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carbonitrilo (77 miligramos, 0.132 milimoles), y NaOH (1 M in H2O, 1.451 mililitros, 1.451 milimoles) en metanol (MeOH) (3.5 mililitros), se agito en un reactor de microondas durante 35 minutos a 110°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carboxamida (79 miligramos, 0.132 milimoles), la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 602.5 (M+H)+.
Paso e: Una solucion de 5-amino-3-((S)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carboxamida (79 miligramos, 0.132 milimoles) en acido trifluoro-acetico (TFA) (1.2 mililitros, 15.76 milimoles), se agito en un reactor de microondas a 100°C hasta que ya no quedo nada de material de partida (3 horas, monitoreado mediante LCMS). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (S)-5-amino-3-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((2-(trifluorometil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-carboxamida (18.8 miligramos, 0.039 milimoles). 1H rMn (400 MHz, MetAnOL<U) 5 ppm 8.43 (dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.57 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1 H), 7.46 (dd, J = 8.2, 4.5 Hz, 1 H), 3.92-3.88 (m, 2 H), 3.20-3.08 (m, 2 H), 2.77 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 2.04-1.96 (m, 1 H), 1.829-1.82 (m, 1 H), 1.78-1.61 (m, 4 H), 1.53 (ddd, J = 12.3, 9.2, 5.7 Hz, 1 H), 1.43 (ddd, J = 9.8, 4.9, 2.0 Hz, 1 H), 1.39-1.32 (m, 1 H), 1.30-1.23 (m, 1 H). HRMS calculada para C20H25F3N7OS (M+H)+ 468.1715, encontrada 468.1761; IC50 es 0.010 pM.
Los siguientes los compuestos de la formula I, como se identifican en la Tabla 7, se hicieron empleando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando la amina correspondiente y el metodo de desproteccion de amina.
Tabla 7
Figure imgf000080_0001
Ejemplo 23
(S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-1,2,4-triazin-3-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000081_0001
Paso a: Una mezcla de 3-cloro-1,2,4-triazin-5-amina (70 miligramos, 0.536 milimoles), (S)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (247 miligramos, 0.644 milimoles), y N-metil-morfolina (177 microlitros, 1.609 milimoles) en MeCN (1 mililitro), y NMP (0.1 mililitros), se irradio en un reactor de microondas durante 45 minutos a 90°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, el residuo resultante se purifico directamente mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 5 por ciento de MeOH/DCM), para proporcionar la (S)-8-(5-amino-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina, la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 383.5 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (S)-8-(5-amino-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (194 miligramos, 0.507 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (8 mililitros) se le agrego, a 0°C, NBS (97 miligramos, 0.543 milimoles) en una porcion. Despues de agitar durante 20 minutos a 0°C, la solucion transparente se apago con unas cuantas gotas de Na2CO3 acuoso y se extrajo con dicloro-metano (DCM). La capa organica combinada se seco sobre MgSO4, se filtro, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar la (S)-8-(5-amino-6-bromo-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1 -amina (77.9 miligramos, 0.169 milimoles). mS m/z 463.4 (M+H)+.
Paso c: Una mezcla de la (S)-8-(5-amino-6-bromo-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (54.1 miligramos, 0.117 milimoles), 2-(trifluoro-metil)-piridin-3-tiol (21 miligramos, 0.117 milimoles), XantPhos (7.46 miligramos, 0.013 milimoles), Pd2(dba)3 (5.37 miligramos, 0.0058 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.041 mililitros, 0.234 milimoles) en dioxano (1 mililitro), se agito en un reactor de microondas durante 1.5 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con EtOAc (10 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (65 miligramos, 0.116 milimoles). MS m/z 560.5 (M+H)+.
Paso d: Una solucion de la (S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-1,2,4-triazin-3-il)-N-((R)-1 -(4-metoxifenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (65 miligramos, 0.116 milimoles) en acido trifluoro-acetico (TFA) (1.253 mililitros, 16.26 milimoles), se agito a 100°C hasta que ya no quedo nada de material de partida (1.5 horas, monitoreado mediante LC/MS), los volatiles se removieron bajo presion reducida, el residuo resultante se diluyo con agua, y se extrajo con Et2O (10 mililitros, 3 veces). La capa acuosa se basifico a un pH de 12 utilizando NH4OH (al 28 por ciento en agua), y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (10 mililitros, 3 veces). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (S)-8-(5-amino-6-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-1,2,4-triazin-3-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (14.5 miligramos, 0.032 milimoles). 1H rMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8.50-8.45 (m, 1 H), 7.60-7.54 (m, 1 H), 7.53-7.46 (m, 1 H), 4.64-4.50 (m, 2 H), 3.22-3.09 (m, 2 H), 2.88 (t, J = 7.3 Hz, 1 H), 2.11 -2.00 (m, 1 H), 1.94-1.86 (m, 1 H), 1.84-1.74 (m, 1 H), 1.74-1.63 (m, 3 H), 1.59-1.46 (m, 2 H), 1.45-1.39 (m, 1 H), 1.39-1.31 (m, 1 H). HRMS calculada para C18H23F3N7S (M+H)+ 426.1688, encontrada 426.1667. La IC50 es de 0.290 gM.
Ejemplo 24
(S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirimidin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000082_0001
Paso a: Una mezcla de 2-(trifluoro-metil)-piridin-3-tiol (150 miligramos, 0.837 milimoles), 2-cloro-5-yodo-pirimidin-4-amina (267 miligramos, 1.047 milimoles), XantPhos (53.3 miligramos, 0.092 milimoles), Pd2(dba)3 (38.3 miligramos, 0.042 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.292 mililitros, 1.674 milimoles) en dioxano (1 mililitro), se agito en un reactor de microondas durante 1.5 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con EtOAc (10 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la 2-cloro-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirimidin-4-amina (141 miligramos, 0.460 milimoles). MS m/z 307.4 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de 2-cloro-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirimidin-4-amina (70 miligramos, 0.228 milimoles), y (S)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (105 miligramos, 0.274 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.359 mililitros), se agito en un reactor de microondas durante 1.5 horas a 135°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirimidin-2-il)-N-((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-amina (128 mili-gramos, 0.228 milimoles). MS m/z 559.5 (M+H)+.
Paso c: Una solucion de (S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirimidin-2-il)-N-((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (128 miligramos, 0.229 milimoles) en acido trifluoro-acetico (TFA) (2.471 mililitros, 32.1 milimoles), se agito a 100°C hasta que ya no quedo nada de material de partida (1.5 horas, monitoreado mediante LCMS), los volatiles se removieron bajo presion reducida, el residuo resultante se diluyo con agua, y se extrajo entonces con Et2O (10 mililitros, 3 veces). La capa acuosa se basifico a un pH de 12 utilizando NH4OH (al 28 por ciento en agua), y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (10 mililitros, 3 veces). Las capas organicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 35 al 60 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (S)-8-(4-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirimidin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (32 miligramos, 0.072 milimoles). 1H rMn (400 MHz, METANoL-d4) 5 ppm 8.41-8.35 (m, 1 H), 8.00 (s, 1 H), 7.47-7.43 (m, 2 H), 4.66-4.45 (m, 2 H), 3.18-3.06 (m, 2 H), 2.81 (t, J = 7.3 Hz, 1 H), 2.09-1.97 (m, 1 H), 1.94-1.86 (m, 1 H), 1.81 -1.72 (m, 1 H), 1.69-1.62 (m, 2 H), 1.59-1.53 (m, 2 H), 1.49-1.44 (m, 1 H), 1.40-1.35 (m, 1 H), 1.33-1.25 (m, 1 H). HRMS calculada para C19H24F3N6S (M+H)+ 425.1735, encontrada 425.1741; IC50 es 2.78 pM.
Ejemplo 25
(R)-5-amino-3-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((3-cloro-2-(trifluoro-metil)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-carboxamida
Figure imgf000082_0002
Paso a: Una solucion de 5-amino-3-cloro-pirazin-2-carbonitrilo (1.55 gramos, 10.0 milimoles), y (R)-N-((R)-1-(4 metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (2.88 gramos, 10.0 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (10 microlitros), y NMP (5 mililitros), se agito durante 16 horas a 110°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla de reaccion se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCCfe acuoso y se extrajo con EtOAc. Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 5 por ciento de MeCH/DCM), para dar el 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-carbonitrilo (2.74 gramos, 6.74 milimoles). Ms m/z 407.3 (M+H)+.
Paso b: (Nota: Esta reaccion se ejecuto en 4 lotes de 500 miligramos cada uno). Una solucion de 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-carbonitrilo (500 miligramos, 1.23 milimoles) en metanol (MeCH) (8 mililitros), y NaCH (2.5 M en H2O, 5 mililitros, 12.3 milimoles), se agito en un reactor de microondas durante 90 minutos a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la mezcla resultante se purifico mediante HPLC (gradiente del 35 al 60 por ciento de acetonitrilo/agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-carboxamida (160 miligramos/reaccion, 640 mili-gramos en total, 1.51 milimoles). MS m/z 425.3 (M+H)+.
Paso c: Una solucion de 5-amino-3-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2- carboxamida (615 miligramos, 1.45 milimoles) en acido trifluoro-acetico (TFA) (11 mililitros) se agito durante 1 hora a 100°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida. Una solucion del residuo resultante, di-isopropil-etilamina (DIPEA) (1.2 mililitros, 6.89 milimoles), y Boc2O (330 miligramos, 1.516 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (15 mililitros) se agito durante 2 horas a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 1 al 10 por ciento de MeCH/DCM), para dar el (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (538 miligramos, 1.378 milimoles). MS m/z 391.0 (M+H)+.
Paso d: Una solucion de (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (538 miligramos, 1.378 milimoles), y NBS (270 miligramos, 1.516 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (5 mililitros), se agito durante 20 minutos a 0°C. La mezcla de reaccion se apago con metanol (2 mililitros), y se agito durante 20 minutos a temperatura ambiente. La mezcla resultante se vertio en un embudo de separacion que contenia NaHCO3 acuoso. y se extrajo con dicloro-metano (DCM). Las fases organicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar el (R)-(8-(6-amino-5-bromo-3-carbamoil-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (627 miligramos, 1.336 milimoles). MS m/z 471.2 (M+H)+.
Paso e: A una solucion de (R)-(8-(6-amino-5-bromo-3-carbamoil-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (627 miligramos, 1.336 milimoles), XantPhos (77 miligramos, 0.134 milimoles), y Pd2(dba)3 (61.2 miligramos, 0.067 milimoles) en dioxano (3 mililitros), se le agrego (a temperatura ambiente, y bajo N2) 3-mercapto-propanoato de 2-etil-hexilo (334 microlitros, 1.469 milimoles), seguido por la adicion de di-isopropiletil-amina (DIPEA) (467 microlitros, 2.67 milimoles). La solucion resultante se agito en un reactor de microondas durante 1 hora a 90°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con EtOAc (5 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de MeCH/DCM), para dar el 3- ((3-amino-5-((R)-1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-carbamoil-pirazin-2-il)-tio)-propanoato de 2-etil-hexilo (574 mili-gramos, 0.946 milimoles). MS m/z 607.4 (M+H)+.
Paso f: A una solucion de 3-((3-amino-5-((R)-1-((terbutoxi-carbonil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-carbamoil-pirazin-2-il)-tio)-propanoato de 2-etil-hexilo (574 miligramos, 0.946 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (3 mililitros), se le agrego (a -78°C y bajo N2) terbutoxido de potasio (1 M en tetrahidrofurano (THF), 2.84 mililitros, 2.84 milimoles). Despues de agitar vigorosamente a -78°C durante 10 minutos, la reaccion se apago con K2CO3 acuoso (2 M, 500 microlitros), y los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante HPLC (gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo/agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar el (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-5-mercaptopirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (280 miligramos, 0.663 milimoles). MS m/z 423.4 (M+H)+.
Paso g: A una solucion de (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-5-mercaptopirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (88 miligramos, 0.208 milimoles), 3-cloro-4-yodo-2-(trifluoro-metil)-piridina (80 miligramos, 0.260 milimoles), XantPhos (12.1 miligramos, 0.021 milimoles), y Pd2(dba)3 (9.6 miligramos, 0.01 milimoles) en dioxano (0.5 mililitros), se le agrego (a temperatura ambiente, y bajo N2) di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (110 microlitros, 0.625 milimoles). La solucion resultante se agito en un reactor de microondas durante 1 hora a 90°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se diluyo con EtOAc, y se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con EtOAc (5 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron y se secaron al vacio. Una solucion del residuo resultante en dicloro-metano (DCM) (1 mililitro), y acido trifluoro-acetico (TFA) (400 microlitros) se agito durante 10 minutos a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (R)-5-amino-3-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-6-((3-cloro-2(trifluoro-metil)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-carboxamida (60 mili-gramos, 0.120 milimoles). 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8.18 (d, J = 5.05 Hz, 1 H). 6.85 (d, J = 5.31 Hz, 1 H). 3.87 (t, J = 13.89 Hz, 2 H). 2.98-3.14 (m, 2 H), 2.72 (t, J = 7.33 Hz, 1 H). 1.86-2.02 (m, 1 H). 1.73-1.81 (m, 1 H). 1.43-1.72 (m, 5 H). 1.17-1.41 (m, 3 H). 19F RMN (376 MHz, METANOL<U) 5 ppm -67.22 (s, 1 F). HRMS calculada para C20H24ClF3N7OS (M+H)+ 502.1404, encontrada 502.1398. La IC 50 es 0.058 pM.
Ejemplo 26
(R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000084_0001
Una mezcla de 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (67 miligramos, 0.233 milimoles), y (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (120 mili-gramos, 0.465 milimoles) en di-isopropiletil-amina (DIPEA) (2 mili-litros), se agito durante 5 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida. Una solucion del residuo resultante en dioxano (5 mililitros), y HCl (4 M en dioxano, 1 mililitro), se agito durante 1 hora a 40°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH 4 OH 5 mM). El residuo resultante se purifico adicionalmente mediante cromatografia de fluidos super-criticos (SFC) (Princeton DEAP 20 x 150 milimetros, velocidad de flujo: 80 gramos por minuto, fase movil: del 20 al 40 por ciento de metanol en CO 2 dentro de 5.7 minutos, recoleccion desencadenada por la masa, temperatura del horno de 40°C, retro-presion de 120 bar), para dar la (R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (23 miligramos, 0.057 milimoles). iH RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.50-7.64 (m, 2 H), 5.91 (d, J = 5.77 Hz, 1 H), 4.26 (t, J = 13.18 Hz, 2 H), 3.03-3.20 (m, 2 H), 2.79 (t, J = 7.53 Hz, 1 H), 1.95-2.11 (m, 1 H), 1.83-1.95 (m, 1 H), 1.52-1.82 (m, 5 H), 1.37-1.52 (m, 2 H), 1.32 (dd, J = 13.30, 2.01 Hz, 1 H). HRMS calculada para C1sH25ClN7S (M+H)+ 406.1581, encontrada 406.1576. La 1C 50 es de 0.014 pM.
Los siguientes compuestos se sintetizaron empleando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando la amina protegida por amina correspondiente.
Tabla 8
Figure imgf000084_0002
Ejemplo 28
(R )-8-(6-am ino-5-((3-clo ro-p irid in-4-il)-tio )-p irazin-2-il)-8 -aza-espiro-[4.5]-decan-1-am ina
Figure imgf000085_0001
Paso a: A una suspension de 6-cloro-3-((3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (53 miligramos, 0.194 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (2 mililitros), se le agrego (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (65 mili-gramos, 0.252 milimoles). La mezcla resultante se agito a 90°C durante 10 horas y entonces se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano; EtOAc que contenia MeOH al 10 por ciento, heptano que contenia Et3N al 2 por ciento), para proporcionar la (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (40 mili-gramos, 0.081 milimoles), como un solido grisaceo. MS m/z 495.0 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (40 miligramos, 0.081 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (0.8 mililitros), se le agrego una solucion de HCl (4 M en dioxano, 101 microlitros, 0.404 milimoles), y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 1 hora. Se agrego una solucion acuosa de HCl (2 M, 2 mililitros), y la mezcla resultante se extrajo con dicloro-metano (DCM) (2 veces). La mezcla acuosa se basifico con hidroxido de amonio (al 28 por ciento en agua) hasta un pH = 12, y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (3 veces). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4, se filtraron, y se concentraron, para proporcionar la (R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (24 miligramos, 0.061 milimoles). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 ppm 8.49 (s, 1 H), 8.25 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 6.56 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 6.24 (s, 2 H), 4.07-4.26 (m, 2 H), 2.98-3.13 (m, 2 H), 2.70 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 1.11-1.94 (m, 10 H). HRMS calculada para C1bH24CINsS (M+H)+ 391.1472, encontrada 391.1480. La IC50 es de 0.023 pM.
Ejemplo 29
(R)-8-(6-amino-5-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000085_0002
Paso a: A una suspension de 6-cloro-3-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (85 miligramos, 0.311 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1.6 mililitros), se le agrego (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (105 mili-gramos, 0.405 milimoles). La mezcla resultante se agito a 90°C durante 10 horas y entonces se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano; EtOAc que contenia MeOH al 10 por ciento, heptano que contenia Et3N al 2 por ciento), para proporcionar la (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida (40 mili-gramos, 0.081 milimoles), como un solido grisaceo. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8.15 (dd, J = 4.5, 1.8 Hz, 1 H), 7.64 (s, 1 H), 7.01-7.18 (m, 2 H), 4.87 (br. s, 2 H), 4.24 (s, 2 H), 3.29-3.45 (m, 1 H), 3.20 (d, J = 5.8 Hz, 1 H) 2.98-3.13 (m, 2 H), 1.98-2.21 (m, 1 H), 1.36-1.94 (m, 9 H), 1.22 (s, 9 H). MS m/z 495.0 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (66 miligramos, 0.133 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros), se le agrego una solucion de HCl (4 M en dioxano, 167 microlitros, 0.667 milimoles), y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 1 hora. Se agrego una solucion acuosa de HCl (2 M, 2 mililitros), y la mezcla resultante se extrajo con dicloro-metano (DCM) (2 veces). La mezcla acuosa se basifico con hidroxido de amonio (al 28 por ciento en agua) hasta un pH = 12, y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (3 veces). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron con Na2SO4, se filtraron, y se concentraron, para proporcionar la (R)-8-(6-amino-5-((2-cloro-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (24 miligramos, 0.062 milimoles), como un solido bronceado. iH RmN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8.01 (dd, J = 4.8, 1.8 Hz, 1 H), 7.43-7.52 (m, 1 H), 7.12 (dd, J = 7.9, 4.6 Hz, 1 H), 7.00 (dd, J = 7.9, 1.6 Hz, 1 H), 4.11 -4.26 (m, 2 H), 2.96-3.10 (m, 2 H), 2.67-2.81 (m, 1 H), 1.06-2.05 (m, 10 H). HRMS calculada para C18H24CIN6S (M+H)+ 391.1472, encontrada 391.1470. La IC50 es 0.015 pM.
Ejemplo 30
(R)-8-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000086_0001
Paso a: A una suspension de 6-cloro-3-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (34 miligramos, 0.111 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.55 mililitros), se le agrego (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (37 miligramos, 0.144 milimoles). La mezcla resultante se agito a 90°C durante 10 horas y entonces se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano; EtOAc que contenia MeOH al 10 por ciento, heptano que contenia Et3N al 2 por ciento), para proporcionar la (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (33 mili-gramos, 0.062 milimoles), como un solido grisaceo. 1H RMN (400 MHz, CLOROFORMO-d) 5 ppm 8.02 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.66 (s, 1 H), 6.60 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 4.82 (s, 2 H), 4.21-4.34 (m, 2 H), 3.34-3.42 (m, 1 H), 3.20 (d, J = 5.8 Hz, 1 H), 2.99-3.15 (m, 2 H), 2.08-2.21 (m, 1 H), 1.26-1.97 (m, 9 H), 1.23 (s, 9 H). MS m/z 529.1 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (20 miligramos, 0.038 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (0.38 mililitros), se le agrego una solucion de HCl (4 M en dioxano, 47 microlitros, 0.189 milimoles), y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se concentro y se disolvio en metanol (MeOH). El producto crudo se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para proporcionar la (R)-8-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (7 miligramos, 0.016 milimoles), como un solido blanco. iH RMN (400 MHz, MeTa NOL<l ) 5 ppm 7.91-8.04 (m, 1 H), 7.52-7.65 (m, 1 H), 6.61 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 4.29 (t, J = 14.2 Hz, 2 H), 3.06-3.22 (m, 2 H), 2.88 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 1.21-2.17 (m, 10 H). HRMS calculada para C ^aC ^N aS (M+H)+ 425.1082, encontrada 425.1095. La IC50 es 0.003 pM.
Ejemplo 31
(S)-7-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-amina
Figure imgf000086_0002
Paso a: A una suspension de 6-cloro-3-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (54 miligramos, 0.176 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1.8 mililitros), se le agrego (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (86 mili-gramos, 0.351 milimoles). La mezcla resultante se agito a 90°C durante 10 horas y entonces se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano; EtOAc que contenia MeOH al 10 por ciento, heptano que contenia Et3N al 2 por ciento), para proporcionar la (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (52 mili-gramos, 0.102 milimoles), como un solido grisaceo. MS m/z 514.9 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (R)-N-((S)-7-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (20 miligramos, 0.039 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (0.38 mililitros), se le agrego una solucion de HCl (4 M en dioxano, 47 microlitros, 0.189 milimoles), y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se concentro y se disolvio en metanol (MeOH). El producto crudo se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para proporcionar la (S)-7-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-7-aza-espiro-[3.5]-nonan-1-amina (7 miligramos, 0.017 mili-moles), como un solido blanco. iH RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.89 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 7.50 (s, 1 H), 6.51 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 3.94-4.31 (m, 2 H), 2.76-3.11 (m, 3 H), 2.06-2.24 (m, 1 H), 1.36-1.82 (m, 7 h). HRmS calculada para C17H21Cl2NsS (M+H)+ 411.0925, encontrada 411.0938. La IC50 es 0.028 pM.
Ejemplo 32
(R)-8-(6-amino-5-((2,3-dicloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000087_0001
Paso a: A una suspension de 3-((3-amino-2-cloro-fenil)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (60 miligramos, 0.209 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1.5 mililitros), se le agrego (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (70 mili-gramos, 0.272 milimoles). La mezcla resultante se agito a 90°C durante 10 horas y entonces se concentro. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano; heptano que contenia Et3N al 2 por ciento), para proporcionar la (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-amino-2-cloro-fenil)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (31 miligramos, 0.061 milimoles), como un solido grisaceo. MS m/z 509.0 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-amino-2-cloro-fenil)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (31 miligramos, 0.061 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (0.6 mililitros), se le agrego una solucion de HCl (4 M en dioxano, 76 microlitros, 0.304 milimoles), y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 1 hora. Se agrego una solucion acuosa de HCl (2 M, 2 mililitros), y la mezcla resultante se extrajo con dicloro-metano (DCM) (2 veces). La mezcla acuosa se basifico con hidroxido de amonio (al 28 por ciento en agua) hasta un pH = 12, y se extrajo con dicloro-metano (DCM) (3 veces). Las capas organicas se combinaron, se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron, para proporcionar la (R)-8-(6-amino-5-((3-amino-2-cloro-fenil)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (18 miligramos, 0.042 milimoles), como un solido amarillo. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.40 (s, 1 H), 6.73 (t, J = 8.0 Hz, 1 H), 6.50 (dd, J = 8.1, 1.3 Hz, 1 H), 5.90 (dd, J = 7.8, 1.3 Hz, 1 H), 4.02-4.18 (m, 2 H), 3.21 (dt, J = 3.2, 1.5 Hz, 1 H), 2.98 (d, J = 11.4 Hz, 2 H), 2.67 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 1.04-2.02 (m, 10 H). HrMs calculada para C19H26ClN6S (M+H)+ 405.1628, encontrada 405.1639. La IC50 es 0.011 pM.
Ejemplo 33
(R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-fluoro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000087_0002
A una suspension de 6-cloro-3-((3-cloro-2-fluoro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (40 miligramos, 0.137 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.7 mililitros), se le agrego (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (71 miligramos, 0.0275 milimoles). La mezcla resultante se agito a 90°C durante 10 horas y entonces se concentro. El producto crudo se disolvio en dicloro-metano (DCM) (0.7 mililitros), se agrego una solucion de HCl (4 M en dioxano, 34 microlitros, 0.137 milimoles), y la mezcla resultante se agito a 40°C durante 1 hora. La mezcla de reaccion se concentro, y el producto crudo se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), para proporcionar la (R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-fluoro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (sal de acido trifluoro-acetico (TFA): 17 miligramos, 0.042 milimoles). 1H RMN (400 MHz, DMsO-d6) 5 ppm 7.94 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 7.79 (br. s., 3 H), 7.69 (br. s., 1 H), 6.51 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 6.34 (br. s., 2 H), 4.12-4.32 (m, 2 H), 2.99-3.24 (m, 3 H), 2.00 a 2.12 (m, 1 H), 1.30-1.90 (m, 9 H). HRMS calculada para C18H23CIFN6S (M+H)+ 409.1377, encontrada 409.1385. La IC50 es 0.005 pM.
Ejemplo 34
Figure imgf000088_0001
Paso a: A una solucion a temperatura ambiente de 2-oxo-1,8-diazaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (300 mili-gramos, 1.180 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (3 mililitros), se le agrego pentasulfuro de fosforo (110 miligramos, 0.495 milimoles), seguido por hexametil-disiloxano (2.256 mililitros, 10.62 milimoles). La reaccion se agito durante 3 horas a temperatura ambiente, y entonces se diluyo con EtOAc, y se filtro a traves de Celite. El filtrado se concentro bajo presion reducida. El producto crudo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 80 por ciento de EtOAc/heptano) dando el 1-tioxo-2,8-diazaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (0.290 gramos, 1.07 milimoles), como un solido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 510.39 (s, 1 H), 3.66 (dt, J = 13.6, 4.9 Hz, 2 H), 3.09 (s, 2 H), 2.78 (t, J = 7.8 Hz, 2 H), 1.95 (t, J = 7.8 Hz, 2 H), 1.57 (dd, J = 6.6, 4.8 Hz, 4 H), 1.39 (s, 9 H). MS m/z 271 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de 1-tioxo-2,8-diazaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato (100 miligramos, 0.370 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (3 mililitros), se le agrego por goteo yodo-metano (0.231 mililitros, 3.70 milimoles). La solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 16 horas. A traves de todo el transcurso de la reaccion, la mezcla lentamente llego a ser de un color mas amarillo, y dio como resultado un precipitado amarillo claro despues de agitar durante el tiempo de reaccion asignado. La mezcla de reaccion se concentro y se seco al vacio, dando un solido amarillo. El solido amarillo se absorbio en metanol (MeOH) (2 mililitros), y se trata con 7 M amoniaco en metanol (MeOH) (3 mililitros), y entonces se calento en un tubo sellado a 100°C durante 8 horas. La reaccion se enfrio hasta la temperatura ambiente, y se concentro bajo presion reducida, dando un solido que se sonico con acetonitrilo y se filtro. El filtrado se concentro, y el residuo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 30 por ciento de MeOH/DCM) dando el 1-amino-2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-ene-8-carboxilato de terbutilo (87 miligramos, 0.343 milimoles). iH RMN (400 MHz, DMSO-ds) 59.38 (s, 1 H), 8.81 (d, J = 25.2 Hz, 2 H), 3.98 (s, 2 H), 3.55 (t, J = 7.0 Hz, 2 H), 2.82 (s, 2 H), 2.12 (t, J = 7.1 Hz, 2 H), 1.74 (td, J = 12.9, 4.7 Hz, 2 H), 1.57 (d, J = 12.7 Hz, 2H), 1.41 (s, 9 H). MS m/z 254 (M+H)+.
Paso c: A una solucion del 1-amino-2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-ene-8-carboxilato de terbutilo (86 miligramos, 0.339 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (3 mililitros), se le agrego HCl en dioxano (4 M, 0.500 mililitros, 2.0 milimoles), a temperatura ambiente, y la reaccion se agito durante 16 horas. La mezcla de reaccion se concentro, y el residuo se trituro a partir de acetonitrilo y se filtro, dando la 2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-en-1-amina (57.7 miligramos, 0.254 milimoles), como un solido bronceado. iH RMN (400 MHz, DMSO-d6) 59.64 (s, 1 H), 9.39-9.23 (m, 1 H), 9.15 (s, 1 H), 9.07 (s, 1 H), 8.70 (d, J = 12.5 Hz, 1 H), 3.54 (t, J = 6.9 Hz, 2 H), 3.32 (d, J = 13.3 Hz, 2 H), 3.05-2.88 (m, 2 H), 2.18 (t, J = 6.9 Hz, 2 H), 2.01 (td, J = 13.7, 4.3 Hz, 2 H), 1.80 (d, J = 13.8 Hz, 2 H). MS m/z 154 (M+H)+.
Paso d: A una suspension de 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (250 miligramos, 0.815 milimoles), y 2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-en-1-amina (210 miligramos, 1.371 mili-moles) en N-metil-2-pirrolidinona (4 mililitros), se le agrego di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1.4 mililitros, 8.02 milimoles), y la reaccion se calento a 140°C durante 16 horas. La mezcla oscura resultante se enfrio hasta la temperatura ambiente, y se diluyo con EtOAc y agua. Las capas se dividieron y la capa organica se desecho. La capa acuosa se extrajo con una mezcla al 20 por ciento de isopropanol/cloroformo (30 mililitros, 2 veces), los materiales organicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron. El residuo crudo se purifico utilizando HPLC de preparacion (elucion en gradiente, del 5 al 40 por ciento de acetonitrilo (ACN) en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), y la mitad de las fracciones reservadas se liofilizaron, dando la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-en-1-amina (sal de acido trifluoro-acetico (TFA): 61.4 miligramos, 0.082 milimoles). Las fracciones restantes se combinaron y se neutralizaron mediante agitacion durante 10 minutos vigorosamente con NaHCO3 saturado al 50 por ciento. La solucion resultante se extrajo con una mezcla al 20 por ciento de isopropanol/cloroformo (30 mililitros, 3 veces), los materiales organicos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron, dando la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,8-diazaespiro-[4.5]-dec-1-en-1-amina (22 miligramos, 0.052 milimoles) como la base libre. iH RMN (400 MHz, DMSO-ds) 58.46 (d, J = 4.4 Hz, 1 H), 7.67 (s, 1 H), 7.55 (dd, J = 8.2, 4.5 Hz, 1 H), 7.31 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 6.19 (s, 2 H), 5.74 (s, 2 H), 4.40 (d, J = 13.4 Hz, 2 H), 3.43 - 3.34 (m, 2 H), 2.90 (t, J = 12.2 Hz, 2 H), 1.97-1.89 (m, 2 H), 1.83 (td, J = 13.0, 4.1 Hz, 2 H), 1.36 (d, J = 12.9 Hz, 2 H). MS m/z 424.1541 (M+H)+. La IC50 es de 0.032 mM
El siguiente compuesto se hizo utilizando la amina anterior y se acoplo empleando los procedimientos convencionales descritos en la presente.
Figure imgf000089_0002
Ejemplo 36
8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina racemica
Figure imgf000089_0001
La 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona racemica (40 miligramos, 0.072 milimoles) se disolvio en etanol (1 mililitro) en un frasco para microondas conico de 5 mililitros, se le agrego hidrato de hidrazina (0.070 mililitros, 1.44 milimoles), se tapo y se calento sobre un bano con perlas de aluminio a 90°C durante 2 horas. La suspension se filtro al vacio a traves de una membrana de PTFE de 0.45 micras, y se lavo con etanol. La purificacion mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), entonces se diluyo con EtOAc, y se lavo con bicarbonato acuoso saturado, y luego con salmuera. Se concentro, se diluyo con 1 mililitro de dicloro-metano (DCM) y, se le agrego HCl (100 microlitros, 4 M en dioxano) para obtener un precipitado. Se concentro para obtener la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina (sal de HCl: 1 miligramo, 0.002 milimoles). 1H rMn (400 m Hz, Metanol-d4) 58.43-8.39 (m, 1 H), 7.65 (s, 1 H), 7.46-7.39 (m, 2 H), 4.35-4.14 (m, 2 H), 3.98 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 3.90 (d, J = 9.2 Hz, 1 H), 3.58 (d, J = 5.3 Hz, 1 H), 3.29-3.12 (m, 3 H), 1.76 (m, 4 H). HrMS calculada para C18H22F3N6OS (M+H)+ 427.1528, encontrada 427.1537. La IC50 es de 0.07 mM.
Ejemplo 37
(R) y (S )-8-(6-am ino-5-((2-(trifluoro-m etil)-p irid in -3-il)-tio )-p irazin-2-il)-2-oxa-8-aza-esp iro-[4.5 ]-decan-4-am ina
Figure imgf000090_0001
Se disolvio el unico enantiomero P1, 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona (49 miligramos, 0.088 milimoles) en etanol (1 mililitro), en un frasco para microondas conico de 5 mililitros, se agrego hidrato de hidrazina (0.080 mililitros, 1.65 milimoles), se tapo y se calento sobre un bano con perlas de aluminio a 90°C durante 2 horas. La suspension se filtro al vacio a traves de una membrana de PTFE de 045 micras, y se lavo con etanol. La purificacion mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM) dio como resultado el aislamiento de la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina (13 miligramos, 0.029 milimoles). HPLC analitica quiral: LC-34.6 x 100 milimetros, 5 micras, fase movil: MeOH al 45 por ciento con amoniaco 10 mM, 5 mililitros / minuto, pico 1 (P1) del unico enantiomero, Rt: 0.88 minutos, >99 por ciento del unico enantiomero. 1H Rm N (400 MHz, Metanol-d4) 58.39 (dd, J = 4.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (m, 2 H), 4.21-4.07 (m, 3 H), 3.86 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 3.79 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 3.51 (dd, J = 9.0, 5.2 Hz, 1 H), 3.24 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 1.73 (m, 2 H), 1.59 (m, 1.8 Hz, 2 H). HRMS calculada para C18H22F3N6OS (M+H)+ 427.1528, encontrada 427.1542. La IC50 es de 0.025 pM.
Ejemplo 38
(R) y (S)- 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina
Figure imgf000090_0002
Se disolvio el unico enantiomero P2, 2-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-azaespiro-[4.5]-decan-4-il)-isoindolina-1,3-diona (42 miligramos, 0.075 milimoles) en etanol (1 mililitro) en un frasco para microondas conico de 5 mililitros, se agrego hidrato de hidrazina (0.080 mililitros, 1.65 milimoles), se tapo y se calento sobre un bano con perlas de aluminio a 90°C durante 2 horas. La suspension se filtro al vacio a traves de una membrana de PTFE de 045 micras y se lavo con etanol. La purificacion mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM) dio como resultado el aislamiento de la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina (13 miligramos, 0.029 milimoles). HPLC analitica quiral: LC-34.6 x 100 milimetros, 5 micras, fase movil: MeOH al 45 por ciento con amoniaco 10 mM, 5 mililitros / minuto, pico 2 (P2) del unico enantiomero, Rt: 1.33 minutos, >99 por ciento del unico enantiomero. iH Rm N (400 MHz, Metanol-d4) 58.39 (dd, J = 4.3, 1.6 Hz, 1 H), 7.60 (s, 1 H), 7.41 (m, 2 H), 4.21-4.07 (m, 3 H), 3.86 (d, J = 8.6 Hz, 1 H), 3.79 (d, J = 8.8 Hz, 1 H), 3.50 (dd, J = 9.0, 5.2 Hz, 1 H), 3.24 (m, 2 H), 3.15 (m, 1 H), 1.80-1.67 (m, 2 H), 1.64-1.50 (m, 2 H). HRMS calculada para C18H22F3N6OS (M+H)+ 427.1528, encontrada 427.1536. La IC50 es 0.983pM.
Ejemplo 39
(R )-6-am ino-2-(1-am ino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-5 -((2-(trifluoro-m etil)-p irid in -3-il)-tio)-n icotinam ida
Figure imgf000091_0001
Paso a: A una solucion de 2,6-dicloro-piridin-3-carboxamida (0.728 gramos, 3.81 milimoles) en 1-metil-pirrolidinona (7 mililitros), se le agregaron N-metil-morfolina (1.14 mililitros, 10.40 milimoles), y (R)-N-((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (1 gramo, 3.47 milimoles). La mezcla resultante se calento a 100°C bajo condiciones de reflujo durante 24 horas. La mezcla de reaccion se diluyo con acetato de etilo, se trato con bicarbonato de sodio concentrado, y se filtro. La capa organica se separo, se seco sobre sulfato de sodio, se filtro, y se concentro bajo presion reducida. El aceite color rojo oscuro resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de acetato de etilo/heptano que contenia trietil-amina al 0.25 por ciento), para proporcionar la 6-cloro-2-((R)-1 -(((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida (0.998 gramos, 2.25 milimoles). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 57.81 (d, J = 7.8 Hz, 1 H), 7.26 (d, J = 8.6 Hz, 2 H), 6.86 (m, 3 H), 3.82 (m, 1 H), 3.77 (s, 3 H), 3.75-3.63 (m, 2 H), 3.03 (m, 2 H), 2.59 (m, 1 H), 2.01-1.92 (m, 1 H), 1.88-1.52 (m, 5 H), 1.51-1.36 (m, 3 H), 1.32 (d, J = 6.5 Hz, 3 H), 1.25 (m, 2 H). MS m/z 442.9 (M+H)+.
Paso b: A una solucion de 6-cloro-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida (242 miligramos, 0.546 milimoles), en tolueno (11 mililitros), se le agregaron Pd2(dba)3 (97 miligramos, 0.169 milimoles), y (oxibis-(2,1-fenileno))-bis-(difenil-fosfina) (103 miligramos, 0.191 milimoles). La mezcla de reaccion se rocio con nitrogeno, y se agregaron benzofenona-imina (0.11 mililitros, 0.656 milimoles), y terbutoxido de potasio (0.710 mililitros, 1 M en tetrahidrofurano (THF), 0.710 milimoles) bajo nitrogeno. La mezcla de reaccion se calento a 80°C durante 2 horas, y la mezcla se dejo enfriar a temperatura ambiente, se filtro a traves de un cojin de Celite, y se lavo con acetato de etilo. El filtrado se concentro bajo presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de acetato de etilo/heptano), para proporcionar la 6-((d ifenilmetileno)amino)-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida (250 miligramos, 0.425 mili-moles). m S m/z 588.3 (M+H)+.
Paso c: A una suspension de 6-((difenil-metileno)amino)-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida (130 miligramos, 0.221 milimoles) en tetrahidro-furano (THF) (6 mililitros), se le agrego HCl (2 M, 0.1 mililitros, 0.200 milimoles), y la solucion resultante se agito a temperatura ambiente durante 30 minutos. La mezcla de reaccion se concentro bajo presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de acetato de etilo/heptano, que contiene trietil-amina al 0.25 por ciento), para proporcionar la 6-amino-2-((R)-1 -(((R)-1 -(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida (43 miligramos, 0.102 milimoles). m S m/z 424.1 (M+H)+.
Paso d: Una solucion de 6-amino-2-((R)-1-(((R)-1-(4-metoxi-fenil)-etil)-amino)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il) nicotinamida (199 miligramos, 0.470 milimoles) en acido trifluoro-acetico (TFA) (3 mililitros) se calento a 100°C durante 30 minutos. La mezcla se concentro bajo presion reducida, y el residuo se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. (R)-6-amino-2-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida. MS m/z 290.2 (M+H)+.
Paso e: A una solucion de (R)-6-amino-2-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-nicotinamida en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros), se le agregaron trietil-amina (0.196 mililitros, 1.410 milimoles), y dicarbonato de diterbutilo (113 miligramos, 0.517 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 2 horas a temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se concentro bajo presion reducida, y el residuo se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de acetato de etilo/heptano, que contenia trietil-amina al 0.25 por ciento), para proporcionar el (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-piridin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (147 miligramos, 0.377 milimoles). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 57.88 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 6.19 (d, J = 8.5 Hz, 1 H), 3.66 (t, J = 7.7 Hz, 1 H), 3.27-3.15 (m, 2 H), 2.98 (t, J = 12.4 Hz, 2 H), 2.05-1.94 (m, 1 H), 1.86-1.46 (m, 8 H), 1.45 (s, 9 H), 1.41 (d, J = 6.0 Hz, 1 H). MS m/z 390.3 (M+H)+.
Paso f: A una solucion del (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-piridin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (136 miligramos, 0.349 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (5 mililitros), enfriada sobre un bano de hielo, se le agrego N-yodo-succinimida (86 miligramos, 0.384 milimoles). La mezcla resultante se agito a 5°C durante 2 horas. La reaccion se apago mediante la adicion de 2 mililitros de metanol, y la mezcla se dejo calentar hasta la temperatura ambiente. Los solventes se removieron bajo presion reducida. El producto crudo se extrajo con diclorometano (DCM), y se lavo con salmuera. La capa organica se seco sobre sulfato de sodio, se filtro, y se concentro bajo presion reducida, para proporcionar el (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-5-yodopiridin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (170 miligramos, 0.330 milimoles), el cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 516.1 (M+H)+.
Paso g: A una solucion del (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-5-yodopiridin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (177 miligramos, 0.343 milimoles) en dioxano (10 mililitros), se le agregaron Pd2(dba)3 (31.4 miligramos, 0.034 milimoles), (9,9-dimetil-9H-xanten-4,5-di-il)-bis-(difenil-fosfina) (39.7 miligramos, 0.069 mili-moles), 2-(trifluorometil)-piridin-3-tiol (67.7 miligramos, 0.378 mili-moles), y N,N-di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.120 mililitros, 0.687 milimoles). La mezcla resultante se calento a 120°C durante 2 horas, y entonces se dejo enfriar hasta la temperatura ambiente. La mezcla de reaccion se diluyo con acetato de etilo, y se filtro a traves de un cojin corto de Celite. El filtrado se concentro bajo presion reducida, y se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de acetato de etilo/heptano, que contenia trietil-amina al 0.25 por ciento), para proporcionar el (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-piridin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (115 miligramos, 0.203 milimoles). MS m/z 567.2 (M+H)+.
Paso h: A una solucion del (R)-(8-(6-amino-3-carbamoil-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-piridin-2-il)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-il)-carbamato de terbutilo (110 mililitros, 0.194 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros), se le agrego acido trifluoro-acetico (TFA) (2 mililitros, 26 milimoles), y la mezcla resultante se dejo agitandose a temperatura ambiente durante 1 hora. Los solventes se removieron bajo presion reducida, y el residuo se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente: del 35 al 60 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para proporcionar la (R)-6-amino-2-(1 -amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-nicotinamida (40 miligramos, 0.084 milimoles). 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 58.38 (dd, J = 4.1, 1.9 Hz, 1 H), 7.93 (s, 1 H), 7.56-7.31 (m, 2 H), 3.77-3.55 (m, 2 H), 3.16-2.98 (m, 2 H), 2.82 (t, J = 7.4 Hz, 1 H), 2.03 (m, 1 H), 1.94-1.60 (m, 5 H), 1.60-1.20 (m, 4 H). 19F RMN (376 m Hz, Metanol<U) 5 -66.48. h RmS calculada para C21H26F3N6OS (M+H)+ 467.1841, encontrada 467.1837. La IC50 es de 0.118 pM.
Ejemplo 40
(R)-3-((3-amino-5-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-il)-tio)-2-cloro-benzamida
Figure imgf000093_0001
Paso a: Una mezcla de 2-cloro-3-mercapto-benzamida (sal de HCl, 145 miligramos, 0.647 milimoles), 3-bromo-6-cloro-pirazin-2-amina (299 miligramos, 1.436 milimoles), yoduro de cobre (I) (49.3 miligramos, 0.259 milimoles), fosfato de potasio (412 miligramos, 1.941 milimoles), y 1,10-fenantrolina (58.3 miligramos, 0.324 milimoles) en dioxano (5 mililitros, desgasificado), se agito en un reactor de microondas durante 4 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con EtOAc (50 mililitros). Los filtrados combinados se concentraron, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para proporcionar la 3-((3-amino-5-cloro-pirazin-2-il)-tio)-2-cloro-benzamida (140 miligramos, 0.444 mili-moles). MS m/z 315.0 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de 3-((3-amino-5-cloro-pirazin-2-il)-tio)-2-cloro-benzamida (130 miligramos, 0.412 milimoles), y (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (139 mili-gramos, 0.536 milimoles) en diisopropil-etil-amina (DIPEA) (0.648 mililitros), se agito en un reactor de microondas durante 14 horas a 95°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de metanol (MeOH)/diclorometano (DCM) conteniendo trietil-amina (TEA) al 0.25 por ciento), para proporcionar la 3-((3-amino-5-((R)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-il)-tio)-2-cloro-benzamida (65 miligramos, 0.121 milimoles). MS m/z 537.2 (M+H)+.
Paso c: La 3-((3-amino-5-((R)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-il)-tio)-2-cloro-benzamida (65 miligramos, 0.121 milimoles) se disolvio en HCl/dioxano (4 M, 0.121 mililitros, 0.484 milimoles), y se agito a 22°C hasta que ya no quedo nada de material de partida (1 hora, monitoreado mediante LCMS). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente: del 25 al 50 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la R)-3-((3-amino-5-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-il)-tio)-2-cloro-benzamida (25.5 miligramos, 0.058 milimoles). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 57.90 (s, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 7.62 (br. s., 1 H), 7.28-7.18 (m, 1 H), 7.18-7.09 (m, 1 H), 6.64 (dd, J = 1.6, 7.9 Hz, 1 H), 6.08 (s, 2 H), 4.18-4.07 (m, 2 H), 3.12-2.95 (m, 2 H), 2.74-2.64 (m, 1 H), 1.91-1.73 (m, 2 H), 1.66-1.47 (m, 4 H), 1.39-1.14 (m, 4 H). HRMS calculada para C20H26ClN6OS (M+H)+ 433.1577, encontrada 433.1598; IC50 es 0.016 pM.
Ejemplo 41
(2R,4R)-4-amino-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-2-ol
Figure imgf000093_0002
Paso a: Una mezcla de (1 R,3R)-3-((terbutil-dimetil-silil)-oxi)-1 -((R)-1,1 -dimetil-etil-sulfinamido)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (100 miligramos, 0.205 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 510 microlitros, 2.05 milimoles) en metanol (MeOH) (1 mililitro), se agito durante 1 hora a 40°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo blanco resultante se seco al vacio durante 1 hora. MS m/z 171.1 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de este residuo blanco y 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (65 miligramos, 0.226 milimoles) en DIPEA:NMP (2:1; 1.5 mililitros) se agito vigorosamente durante 40 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el producto crudo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 7.5 al 20 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico adicionalmente mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar el (2R,4R)-4-amino-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloropiridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-2-ol (44 mili-gramos, 0.102 milimoles), como un solido blanco.
1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.51-7.64 (m, 2 H), 5.92 (d, J = 5.56 Hz, 1 H), 4.16-4.39 (m, 3 H), 3.00-3.21 (m, 2 H), 2.80 (dd, J = 8.08, 7.07 Hz, 1 H), 2.33 (dt, J = 13.45, 6.79 Hz, 1 H), 1.95 (dd, J = 13.89, 7.58 Hz, 1 H), 1.83 (dd, J = 14.02, 4.17 Hz, 1 H), 1.61-1.74 (m, 3 H), 1.56 (ddd, J = 13.39, 8.08, 5.81 Hz, 1 H), 1.30 (d, J = 13.14 Hz, 1 H). HRMS calculada para C1sH25ClN7OS (M+H)+ 422.1557, encontrada 422.1569. La IC50 es 0.007 pM.
Los siguientes compuestos de la Tabla 9 se sintetizaron empleando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando la amina protegida correspondiente y el intermediario de cloro-pirazina.
Tabla 9
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Figure imgf000095_0001
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Ejemplo 68
(3R,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina
Figure imgf000102_0001
Paso a: Una mezcla de (3R,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (53 miligramos, 0.142 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 354 microlitros, 1.415 milimoles) en metanol (MeOH) (5 mililitros) se agito durante 1 hora a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (3R,4S)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina, la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 171.1 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de la (3R,4S)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina cruda, 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (35.5 miligramos, 0.123 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (193 microlitros, 1.11 milimoles) en sulfoxido de dimetilo (DMSO) (600 microlitros), se agito durante 16 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (3R,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina (13 mili-gramos, 0.030 milimoles). 1H Rm N (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.72-7.51 (m, 2 H), 5.92 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 4.31 (m, 2 H), 4.01-3.78 (m, 2 H), 3.58 (dq, J = 8.1,6.0 Hz, 1 H), 3.04 (m, 2 H), 2.48 (d, J = 8.1 Hz, 1 H), 1.75 (m, 2 H), 1.61-1.47 (m, 2 H), 1.31 (d, J = 6.1 Hz, 3 H). HRMS calculada para C1sH25ClN7OS (M+H)+ 422.1530, encontrada 422.1505. La IC50 es 0.010 pM.
Ejemplo 69
(3S,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina Paso a: Una mezcla de (3S,4S)-4-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (51 miligramos, 0.136 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 340 microlitros, 1.362 milimoles) en metanol (MeOH) (5 mililitros), se agito durante 1 hora a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (3S,4S)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina, la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 171.1 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de la (3S,4S)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina cruda, 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (35.5 miligramos, 0.123 milimoles), y di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (193 microlitros, 1.11 milimoles) en sulfoxido de dimetilo (DMSO) (600 microlitros), se agito durante 16 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (3S,4S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-aza-espiro-[4.5]-decan-4-amina (11 mili-gramos, 0.026 milimoles). 1H Rm N (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.67-7.47 (m, 2 H), 5.91 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 4.22 (qd, J = 6.4, 4.8 Hz, 1 H), 4.03 (ddt, J = 13.5, 8.9, 4.7 Hz, 2 H), 3.86 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 3.71 (d, J = 8.7 Hz, 1 H), 3.37 (td, J = 9.9, 4.9 Hz, 1 H), 3.29-3.23 (m, 1 H), 3.00 (d, J = 5.0 Hz, 1H) 1.91 -1.56 (m, 4 H), 1.21 (d, J = 6.4 Hz, 3 H). HRMS calculada para C ^sC lN /O S (M+H)+ 422.1530, encontrada 422.1514. La IC50 es 0.010 pM.
Ejemplo 70
(1 R,3R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000103_0001
Paso a: Una mezcla de (1R,3R)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (100 miligramos, 0.246 milimoles), y HCl (4 M en dioxano, 1.5 mililitros, 6.5 milimoles) en metanol (MeOH) (1.5 mililitros), se agito en un reactor de microondas durante 14 horas a 140°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la (1R,3R)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina, la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 169.2 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de la (1 R,3R)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina cruda (teorico: 0.246 milimoles), y 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (70.9 miligramos, 0.246 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1 mililitro), y sulfoxido de dimetilo (DMSO) (0.5 mililitros), se agito durante 2 horas a 130°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (1R,3R)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (23 miligramos, 0.055 mili-moles). iH RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.51-7.64 (m, 2 H), 5.91 (d, J = 5.31 Hz, 1 H), 4.18-4.37 (m, 2 H), 3.02-3.18 (m, 2 H), 2.82 (dd, J = 9.60, 6.32 Hz, 1 H), 2.09-2.20 (m, 1 H), 2.00 a 2.09 (m, 1 H), 1.91 -2.00 (m, 1 H), 1.58-1.74 (m, 2 H), 1.24-1.48 (m, 3 H), 1.09-1.20 (m, 1 H), 1.01 -1.09 (m, 3 H). HRMS calculada para C1gH27ClN/S (M+H)+ 420.1737, encontrada 420.1719. La IC50 es de 0.005 pM.
Ejemplo 71
(1 R,3S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000104_0001
Paso a: Una suspension de (1R,3S)-1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de bencilo (600 miligramos, 1.476 milimoles), y Pd(OH)2 (104 miligramos, 0.148 milimoles) en EtOAc:THF (1:2 75 mililitros), se agito vigorosamente bajo una atmosfera de H2 durante 48 horas. La mezcla de reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con metanol (50 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida. Una solucion del residuo resultante y HCl (4 M en dioxano, 1.0 mililitro, 4.0 milimoles), se agito durante 2 horas a 45°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida. Una suspension del residuo resultante y Pd/C (al 10 por ciento en carbon, 200 miligramos) en metanol (MeOH) (20 mililitros) se agito durante 2 horas bajo una atmosfera de H2 a 60 psi (4.2 kilogramos/cm2). La mezcla de reaccion se filtro a traves de un cojin de Celite, seguido por un lavado con metanol (50 mililitros). Los volatiles se removieron bajo presion reducida, para proporcionar la (1R,3S)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina, la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion. MS m/z 169.1 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de la (1R,3S)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina cruda (0.729 milimoles), y 3-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-6-cloro-pirazin-2-amina (150 miligramos, 0.521 mili-moles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (3.2 mililitros), y DMA (6 mililitros), se agito durante 14 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 10 al 30 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), para dar un solido crudo. Este solido crudo se purifico adicionalmente mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (1R,3S)-8-(6-amino-5-((2-amino-3-cloro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-3-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (80 miligramos, 0.189 mili-moles).
1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.65-7.49 (m, 2 H), 5.91 (d, J = 5.5 Hz, 1 H), 4.30 (ddt, J = 12.4, 9.7, 3.6 Hz, 2 H), 3.34 (s, 1 H), 3.19-2.95 (m, 1 H), 2.92-2.80 (m, 1 H), 2.34-2.16 (m, 2 H), 1.85-1.49 (m, 4 H), 1.41 (dq, J = 13.5, 2.7 Hz, 1 H), 1.30 (dq, J = 13.5, 2.6 Hz, 1 H), 1.13-0.92 (m, 4 H). HRMS calculada para C1gH27ClN/S (M+H)+ 420.1737, encontrada 420.1716. La IC50 es 0.005 pM.
Ejemplo 72
8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-1-oxa-3,8-diazaespiro-[4.5]-dec-2-en-2-amina
Figure imgf000104_0002
Paso a: Una solucion de 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (70 miligramos, 0.304 milimoles), ((4-hidroxi-piperidin-4-il)-metil)-carbamato de terbutilo (103 miligramos, 0.336 milimoles), y di-isopropiletil-amina (DlPEA) (2.0 mililitros, 11.45 milimoles) en NMP (1 mililitro), se agito durante 3 horas a 120°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, la reaccion se diluyo con EtOAc, la fase organica se lavo con agua, salmuera, se seco sobre Na2SO4, y los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar un residuo oleoso color cafe. Este residuo se absorbio en dicloro-metano (DCM) (5 mililitros), y se agrego HCl (4 M en dioxano; 760 microlitros, 3.04 milimoles) en dos porciones (la mitad al principio de la reaccion y la otra mitad 3 horas despues). La reaccion se agito durante un total de 4 horas. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se trituro con MeCN para dar un solido color cafe. El producto crudo resultante se convirtio en la base libre mediante su suspension en el 5 por ciento de metanol (MeOH)/dicloro-metano (DCM), y agregando NaHCO3 acuoso saturado. Las capas resultantes se separaron y la capa acuosa se extrajo nuevamente con el 5 por ciento de metanol (MeOH)/dicloro-metano (DCM). Las fases organicas combinadas se concentraron bajo presion reducida, para dar el 1-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-4-(amino-metil)-piperidin-4-ol (65 miligramos, 0.149 milimoles) como un solido grisaceo-bronceado. iH RMN (400 MHz, DMSO-d6) 5 ppm 8.47 (dd, J = 4.6, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.55 (dd, J = 8.3, 4.5 Hz, 1H) 7.32 (dd, J = 8.3, 1.4 Hz, 1 H), 4.04 (dt, J = 13.8, 4.2 Hz, 2 H), 3.38-3.28 (m, 2 H), 2.83 (s, 2 H), 1.70-1.48 (m, 4 H). MS m/z 401.2 (M+H)+
Paso b: Una solucion del 1-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-4-(amino-metil)-piperidin-4-ol (65 mili-gramos, 0.162 milimoles) en EtOH (3 mililitros) se trato en sucesion con bromuro de cianogeno (0.541 mililitros, 1.623 milimoles), seguido por NaHCO3 (68.2 miligramos, 0.812 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 16 horas a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-1-oxa-3,8-diazaespiro-[4.5]-dec-2-en-2-amina (12.5 miligramos, 0.029 milimoles). 1H RMN (400 MHz, DMsO-d6) 5 ppm 8.46 (dd, J = 4.5, 1.4 Hz, 1 H), 7.68 (s, 1 H), 7.55 (dd, J = 8.3, 4.6 Hz, 1 H), 7.31 (dd, J = 8.2, 1.5 Hz, 1 H), 6.22 (s, 2 H), 5.78 (s, 2 H), 3.94­ 3.73 (m, 2 H), 3.64-3.45 (m, 2 H), 3.36 (s, 2 H), 1.88-1.56 (m, 4 H). HRMS calculada para C17H19F3N7OS (M+H)+ 426.1318, encontrada 426.1296. La IC50 es de 0.193 pM.
Los siguientes compuestos de la Tabla 10 se sintetizaron empleando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando la amina protegida correspondiente y el intermediario de cloro-pirazina.
Tabla 10
Figure imgf000105_0002
Ejemplo 75
(R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-(dimetil-amino)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000105_0001
Paso a: Una mezcla de 6-bromo-3-((3-cloro-2-(dimetil-amino)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-amina (124 miligramos, 0.392 mili-moles), y (R)-2-metil-N-((R)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (111 miligramos, 0.431 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (2.6 mililitros) se agito durante 10 horas a 90°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de EtOAc (que contenia MeOH al 10 por ciento)/heptano (que contenia Et3N al 25 por ciento)), para dar la (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-(dimetil-amino)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (75 miligramos, 0.139 mili-moles). MS m/z 538.3 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla de la (R)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-(dimetil-amino)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (75 miligramos, 0.139 mili-moles), y HCl (4 M en dioxano, 174 microlitros, 0.697 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros), se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 35 al 60 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-(dimetil-amino)-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina (28 miligramos, 0.064 milimoles), como un solido blanco. 1H RmN (400 MHz, DMsO-d6) 5 ppm 7.85-7.92 (m, 1 H), 7.63 (s, 1 H), 6.16 (br. s, 2 H), 6.04-6.10 (m, 1 H), 4.06-4.23 (m, 2 H), 2.97-3.15 (m, 2 H), 2.87 (s, 6 H), 2.64-2.73 (m, 1 H), 1.11-1.97 (m, 10 H). HRMS calculada para C20H29ClN7S (M+H)+ 434.1894, encontrada 434.1883. La IC50 es 0.010 pM.
Los siguientes compuestos de la Tabla 11 se sintetizaron empleando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior utilizando la amina protegida correspondiente y el intermediario de cloro-pirazina.
Tabla 11
Figure imgf000106_0001
Figure imgf000107_0002
Ejemplo 81
(R)-4-((3-amino-5-(1-amino-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-il)-tio)-3-cloro-piridin-2(1 H)-ona
Figure imgf000107_0001
Una mezcla de (S)-N-((R)-8-(6-amino-5-((3-cloro-2-fluoro-piridin-4-il)-tio)-pirazin-2-il)-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (17 miligramos, 0.033 milimoles), hidroxido de litio (2 miligramos, 0.040 milimoles), y agua (0.07 mililitros) en sulfoxido de dimetilo (DMSO) (0.3 mililitros), se agito en un reactor de microondas durante 45 minutos a 90°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, se agrego metanol (0.5 mililitros), seguido por HCl (4 M en dioxano, 2.0 mililitros, 8.0 milimoles), y la mezcla resultante se agito durante 1 hora a 40°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 15 al 40 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de NH4OH 5 mM), para dar la (R)-4-((3-amino-5-(1-amino-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-il)-pirazin-2-il)-tio)-3-cloro-piridin-2(1H)-ona (5 miligramos, 0.012 milimoles), como un solido blanco. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 7.53-7.61 (m, 1 H), 7.19 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 5.72 (d, J = 7.1 Hz, 1 H), 4.26 (t, J = 13.1 Hz, 2 H), 3.06-3.20 (m, 2 H), 2.81 (t, J = 7.5 Hz, 1 H), 1.27-2.11 (m, 10 H). HRMS calculada para C1sH24ClN6OS (M+H)+ 407.1448, encontrada 407.1433. La IC50 es 0.020 pM.
Ejemplo 82
8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina racemica
Figure imgf000108_0001
Paso a: Una solucion del 2,2-difluoro-1-oxo-8-azaespiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (220 miligramos, 0.76 mili-moles), 2-metil-propan-2-sulfinamida racemica (184 miligramos, 1.52 milimoles), y etoxido de titanio(IV) (0.640 mililitros, 3.0 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (4 mililitros), se agito durante 30 minutos a 90°C. Despues de enfriarse a 0°C, se agrego borohidruro de litio (33 miligramos, 1.5 milimoles) en una porcion. Despues de agitar durante 30 minutos, la mezcla de reaccion se apago mediante la adicion de metanol. Los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se diluyo con salmuera, se extrajo con EtOAc (10 mililitros, 4 veces), las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 10 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-(1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo como un polvo blanco (190 miligramos, 0.48 milimoles). MS m/z 395.2 (M+H)+.
Paso b: Una solucion del 1-(1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (190 mili-gramos, 0.48 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (1 mililitro) en dicloro-metano (DCM) (4 mililitros) se agito durante 20 minutos a 0°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar la N-(2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida, la cual se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso c: Una solucion de la N-(2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (teorico: 0.48 mili-moles), y 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (148 miligramos, 0.480 milimoles) en diisopropil-etil-amina (DIPEA) (0.8 mililitros), se agito durante 1 hora a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 100 por ciento de EtOAc/heptano), para dar la N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (174 miligramos, 0.28 milimoles), como un polvo color naranja. Una porcion de este material se hizo progresar al Paso d, y el material restante se separo mediante cromatografia quiral (vease el Ejemplo 83).
Paso d: Una solucion de la N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (54 miligramos, 0.096 mili-moles), y HCl (4 M en dioxano, 0.239 mililitros, 0.96 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (1 mililitro), se agito durante 30 minutos a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida. Este residuo se trituro con MeCN para dar la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina racemica (sal de HCl, 38 miligramos, 0.075 milimoles), como un polvo bronceado palido. 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8.52-8.38 (m, 1 H), 7.71 (s, 1 H), 7.50-7.43 (m, 2 H), 4.44 (dd, J = 21.0, 14.2 Hz, 2 H), 3.67 (dd, J = 15.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.23-3.08 (m, 2 H), 2.47-2.34 (m, 2 H), 2.27 (dt, J = 14.6, 7.4 Hz, 1 H), 2.01-1.88 (m, 2 H), 1.75-1.54 (m, 3 H). HRMS calculada para C19H22F5N6S (M+H)+ 461.1547, encontrada 461.1540. La IC50 es 0.380 pM.
Ejemplo 83a/b
(R) y (S)-8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000109_0001
Paso a: La N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2,2-difluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (100 miligramos, 0.177 milimoles) se purifico adicionalmente mediante SFC quiral como sigue: columna: WHO-1 21 x 250 milimetros, velocidad de flujo: 80 gramos por minuto, fase movil: metanol al 45 por ciento y NH4OH 5 mM en CO2, deteccion: desencadenada por la masa para obtener los enantiomeros individuales; Rt (enantiomero R): 2.6 minutos (44 miligramos, 0.078 milimoles), y Rt (enantiomero S): 5.8 minutos (41 miligramos, 0.073 milimoles).
Paso b: Una mezcla del enantiomero puro y HCl (4 M en dioxano, 200 microlitros, 0.8 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mililitros) se agito durante 1 hora a 40°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se trituro con MeCN para dar los compuestos del titulo como sales de HCl:
Enantiomero (R): 1H RMN (400 MHz, METANOL-d4) 5 ppm 8.46 (dd, J = 3.7, 2.3 Hz, 1 H), 7.73 (s, 1 H), 7.53-7.45 (m, 2 H), 4.52-4.36 (m, 2 H), 3.68 (dd, J = 15.0, 11.2 Hz, 1 H), 3.24-3.09 (m, 2 H), 2.47-2.34 (m, 2 H), 2.32­ 2.21 (m, 1 H), 2.05-1.90 (m, 2 H), 1.74-1.55 (m, 3 H). 19F RMN (376 MHz, METANOL<U) 5 -66.19, -98.51 (d, J = 234.5 Hz), -101.83 (d, J = 234.6 Hz). HRMS calculada para C19H22F5N6S (M+H)+ 461.1547, encontrada 461.1540. La IC50 es de 0.882 pM.
Enantiomero (S): 1H RMN (400 MHz, METANOL<U) 5 ppm 8.50-8.41 (m, 1 H), 7.70 (s, 1 H), 7.47 (m, 2 H), 4.52-4.35 (m, 2 H), 3.67 (dd, J = 15.1, 11.2 Hz, 1 H), 3.24-3.05 (m, 2 H), 2.49-2.32 (m, 2 H), 2.31 -2.19 (m, 1 H), 2.02-1.88 (m, 2 H), 1.73-1.51 (m, 3 H). 19F RMN (376 MHz, METANOL<U) 5 -66.24, -98.47 (d, J = 234.4 Hz), -101.77 (d, J = 234.6 Hz). HRMS calculada para C19H22F5N6S (M+H)+ 461.1547, encontrada 461.1541. La IC50 es de 0.306 pM.
Ejemplo 84
8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-fluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000109_0002
Paso a: Una solucion del 2-fluoro-1-oxo-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo racemico (78 miligramos, 0.28 milimoles), etoxido de titanio(IV) (235 microlitros, 1.1 milimoles), y (R)-2-metil-propan-2-sulfinamida (68 miligramos, 0.56 milimoles) en tetrahidrofurano (THF) (1.5 mililitros), se agito durante 1 hora a 90°C. Despues de enfriarse a 0°C, se agrego borohidruro de litio (12 miligramos, 0.56 milimoles) en una porcion. Despues de agitar durante 30 minutos, la mezcla de reaccion se apago mediante la adicion de metanol. Los volatiles se removieron bajo presion reducida. El residuo resultante se diluyo con salmuera, se extrajo con EtOAc (10 mililitros, 4 veces), las fases organicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, y se concentraron bajo presion reducida. El residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 50 por ciento de EtOAc/heptano), para dar el 1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-fluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (64 miligramos, 0.17 milimoles). MS m/z 377.3 (M+H)+.
Paso b: Una mezcla del 1-((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-fluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (64 mili-gramos, 0.17 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (1 mililitro) en dicloro-metano (DCM) (4 mililitros), se agito durante 10 minutos a 0°C. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso c: Una mezcla del residuo anterior y 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (51 miligramos, 0.17 milimoles) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (0.3 mililitros), se agito durante 2 horas a 100°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante cromatografia en silice (gradiente del 0 al 10 por ciento de metanol (MeOH)/diclorometano (DCM) (que contenia Et3N al 0.25 por ciento)), para dar la N-(8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-fluoro-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida (41 mili-gramos, 0.075 milimoles). MS m/z 547.2 (M+H)+ como una mezcla de diaestereomeros. La purificacion adicional utilizando SFC quiral se llevo a cabo como sigue: columna: ID 21 x 250 milimetros, velocidad de flujo: 80 gramos por minuto, fase movil: iPrOH al 45 por ciento y NH4OH 10 mM en CO2 , deteccion: desencadenada por la masa para dar los enantiomeros individuales; Rt (P1) = 2.7 minutos (17 mili-gramos, 0.031 milimoles), y Rt (enant-P1) = 4.4 minutos (17 mili-gramos, 0.031 milimoles).
Paso d: Una solucion de cada isomero puro y HCl (4 M en dioxano, 100 microlitros, 0.4 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (0.1 mililitros) se agito durante 1 hora a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se trituro con MeCN, para dar los compuestos del titulo como sales de HCl.
Tabla 12
Figure imgf000110_0001
Ejemplo 86a/b
(1 R)-8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina
Figure imgf000111_0001
Paso a: Una solucion de (1 R)-1 -((R)-1,1-dimetil-etil-sulfinamido)-2-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-8-carboxilato de terbutilo (32 miligramos, 0.086 milimoles), y acido trifluoro-acetico (TFA) (0.2 mililitros, 2.60 milimoles) en diclorometano (DCM) (2 mililitros), se agito durante 30 minutos a temperatura ambiente. Los volatiles se removieron bajo presion reducida, para dar (R)-2-metil-N-((1R)-2-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida. MS m/z 273.0 (M+H)+. El producto crudo se utilizo en el siguiente paso sin mayor purificacion.
Paso b: Una mezcla de la (R)-2-metil-N-((1R)-2-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-propan-2-sulfinamida (23 miligramos, 0.084 milimoles), 6-cloro-3-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-amina (23 miligramos, 0.075 milimoles), y NMP (0.1 mililitros) en di-isopropil-etil-amina (DIPEA) (1 mililitro), se agito durante 6 horas a 115°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida para dar la (R)-N-((1 R)-8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metilpropan-2-sulfinamida como un aceite negro, el cual se utilizo en el siguiente paso sin purificacion.
Paso c: Una mezcla de la (R)-N-((1R)-8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-metil-8-azaespiro-[4.5]-decan-1-il)-2-metil-propan-2-sulfinamida, y HCl (4M en dioxano, 84 microlitros, 0.338 milimoles) en dicloro-metano (DCM) (2 mili-litros), se agito durante 1 hora a 40°C. Despues de enfriarse a temperatura ambiente, los volatiles se removieron bajo presion reducida, y el residuo resultante se purifico mediante HPLC (elucion en gradiente del 35 al 60 por ciento de acetonitrilo en agua, modificador de acido trifluoro-acetico (TFA) al 0.1 por ciento), para dar la 8-(6-amino-5-((2-(trifluoro-metil)-piridin-3-il)-tio)-pirazin-2-il)-2-metil-8-aza-espiro-[4.5]-decan-1-amina, sal de acido trifluoro-acetico (TFA). HRMS calculada para C20H26F3N6S 439.1892 (M+H)+, encontrada 439.1872. La IC50 es 0.0010 pM.
Paso d: Separacion quiral (vease la Tabla 13 para los detalles).
Tabla 13
Figure imgf000112_0001
Figure imgf000113_0001
Figure imgf000114_0001
Los siguientes ejemplos de la Tabla 14 se pueden hacer utilizando los metodos anteriores y los materiales de partida apropiados:
Ċ
Tabla 14
Figure imgf000115_0001
Figure imgf000116_0001
Ensayos
Los compuestos de la invencion se evaluaron para determinar su capacidad para inhibir selectivamente la actividad de SHP2. Las propiedades inhibidoras de los compuestos de la invencion descrita en la presente pueden ser evidenciadas mediante la prueba de cualquiera de los siguientes ensayos.
Ensayo de inhibicion aloesterica de SHP2
SHP2 se activa aloestericamente a traves del enlace de los peptidos bis-tirosil-fosforilados con sus dominios de Homologia con Src 2 (SH2). Este ultimo paso de activacion conduce a la liberacion de la interfase auto-inhibidora de SHP2, lo cual a su vez hace que se active la fosfatasa de tirosina de las proteinas (PTP) de SHP2 y que quede disponible para el reconocimiento del sustrato y la catalizacion de la reaccion. La actividad catalitica de SHP2 se monitoreo utilizando el sustrato subrogado DiFMUP en un formato de ensayo de fluorescencia rapido.
De una manera mas especifica, las reacciones de fosfatasa se llevaron a cabo a temperatura ambiente en una placa de poliestireno negra de 384 pozos, de fondo plano, de pestana baja, con superficie no enlazante (Corning, Cat # 3575), utilizando un volumen de reaccion final de 25 microlitros, y las siguientes condiciones del regulador de ensayo: HEPES 60 mM, pH de 7.2, NaCl 75 mM, KCl 75 mM, EDTA 1 mM, P-20 al 0.05 por ciento, DTT 5 mM. La inhibicion de SHP2 mediante los compuestos de la invencion (variando las concentraciones desde 0.003 hasta 100 pM) se monitoreo utilizando un ensayo en donde se incubo 0.5 nM de SHP2 con 0.5 micras del peptido IRS1_pY1172(dPEG8)pY1222 (secuencia: H2N-LN(pY)IDLDLV(dPEG8)LST(pY)ASINFQK-amida). Despues de 30 a 60 minutos de incubacion a 25°C, se agrego a la reaccion el sustrato subrogado DiFMUP (Invitrogen, cat # D6567), y se incubo a 25°C durante 30 minutos. La reaccion entonces se apago mediante la adicion de 5 microlitros de una solucion 160 pM de bpV(Fen) (Enzo Life Sciences cat # ALX-270-204). La senal de fluorescencia se monitoreo utilizando un lector de microplacas (Envision, Perkin-Elmer), utilizando longitudes de onda de excitacion y emision de 340 nanometros y 450 nanometros, respectivamente. Las curvas de respuesta a la dosis del inhibidor se analizaron utilizando el ajuste de curva de regresion de IC50 normalizada con la normalizacion basada en el control. Los resultados de IC50 para los compuestos de la invencion se muestran en los Ejemplos y en las Tablas 1 a 7, anteriormente.
Ensayo celular de p-ERK
Ensayo celular de p-ERK utilizando el Kit AlphaScreen® SureFireMR Phospho-ERK 1/2 (PerkinElmer): Se cultivaron celulas KYSE-520 (30,000 celulas/pozo) en una placa de cultivo de 96 pozos durante la noche, y se trataron con los inhibidores de SPH2 en concentraciones de 20, 6.6, 2.2, 0.74, 0.24,0.08, 0.027 pM durante 2 horas a 37°C. Las incubaciones se terminaron mediante la adicion de 30 microlitros de regulador de lisis (PerkinElmer) suministrado con el kit de ensayo de quinasa regulada por la senal fosfo-extracelular (pERK) SureFire (PerkinElmer). Las muestras se procesaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La senal de fluorescencia a partir de pERK se midio por duplicado utilizando un lector de multiples marcas 2101 (Perkin Elmer Envision). El porcentaje de inhibicion se normalizo mediante la senal total de ERK, y se comparo con el control de vehiculo de sulfoxido de dimetilo (DMSO).
Ensayo de formacion de colonias y ensayo de proliferacion celular
Las celulas KYSE-520 (1,500 celulas/pozo) se emplacaron en placas de 24 pozos en 300 microlitros del medio (RPMI-1640 que contenia suero bovino fetal al 10 por ciento, Lonza). Para el tratamiento con farmaco, se agregaron los compuestos de la invencion en diferentes concentraciones (20, 10, 5, 2.5, 1.25 pM) a las 24 horas y 5 dias despues del emplacado de las celulas. En el dia 11, las colonias se tineron con violeta cristal al 0.2 por ciento (MP Biomedicals), y subsiguientemente se disolvieron en acido acetico al 20 por ciento para la cuantificacion, utilizando un lector Spectramax (Thermo Scientific). En el ensayo de proliferacion celular, las celulas (1,500 celulas/pozo) se emplacaron en placas de 96 pozos en 100 microlitros del medio (RPMI-1640 que contenia suero bovino fetal al 10 por ciento, Lonza). En el dia 6, se agregaron 50 microlitros del reactivo Celltiter-Glo (Promega), y la senal luminiscente se determino de acuerdo con las instrucciones del proveedor (Promega).
Se entiende que los Ejemplos y realizaciones descritos en la presente son para propositos ilustrativos solamente y que seran sugeridas diferentes modificaciones o cambios a la luz de los mismos para las personas expertas en la materia, y se deben incluir dentro del espiritu y alcance de esta solicitud y dentro del alcance de las reivindicaciones adjuntas.

Claims (20)

REIVINDICACIONES
1. Un compuesto de la formula I:
Figure imgf000118_0001
en la que:
p se selecciona a partir de 0 y 1;
q se selecciona a partir de 0 y 1;
Y1 se selecciona a partir de CH y N;
Y2 se selecciona a partir de CR6 y N;
R1 es -XR 1a; en donde R1a se selecciona a partir de arilo de 6 a 10 atomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, cicloalquenilo de 3 a 8 atomos de carbono y un grupo heteroarilo de 5 a 9 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, C(O), O y S; en donde este arilo o heteroarilo de R1a esta sustituido con 1 a 5 grupos R9 independientemente seleccionados a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3 , alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, dimetil-amino, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino, -C(O)OR10 y -NHC(O)R10; y X se selecciona a partir de un enlace, S(O)m, O, C(O), COR11, CR10aR10b, NR11; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2;
cada R10a y R10b se selecciona independientemente a partir de halogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; y R11 se selecciona a partir de hidrogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono;
R2a y R2b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
R3a y R3b se seleccionan independientemente a partir de halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
R4a y R4b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
R5a y R5b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
en donde cualesquiera dos grupos seleccionados a partir de R2a, R2b, R3a, R3b, R4a, R4b, R5a, R5b y R7 pueden formar un anillo de 5 a 6 miembros insaturado o parcialmente saturado;
R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, ciano, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino-carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino, -S(O)1-2R6a, -C(S)R6a, -C(O)NR6aR6b, -C(NH)NR6aR6b y -NR6aC(O)R6b; en donde R6a y R6b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono; R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente de 1 a 3 heteroatomos o grupos independientemente seleccionados a partir de N, C(O), O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2;
en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos seleccionados independientemente a partir de amino, hidroxilo, metoxilo, halogeno, metilo, metil-amino e isobutiriloxilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
2. Un compuesto de formula I como se reivindica en la reivindicacion 1, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, seleccionado de:
Figure imgf000120_0001
Figure imgf000121_0002
3. Un compuesto de formula la:
Figure imgf000121_0001
en donde:
n se selecciona a partir de 1,2, 3 y 4;
p se selecciona a partir de 0 y 1;
q se selecciona a partir de 0 y 1;
Y1 se selecciona a partir de CH y N;
Y2 se selecciona a partir de CR6 y N;
cada Y4 se selecciona independientemente a partir de N, C(O), y CR9 ; en donde solamente un Y4 es C(O);
R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, metilo y amino-carbonilo;
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos independientemente seleccionados a partir de amino, halogeno, hidroxilo, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 5 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente 1 o 2 heteroatomoso o grupos seleccionados independientemente a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2;
en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos independientemente seleccionados a partir de amino, halogeno, hidroxilo, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 6 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomoso grupos seleccionados a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 4 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomoso grupos seleccionados a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino;
R9 se selecciona a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3 , dimetil-amino, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, -C(O)OR10 y -NHC(O)R10; R10 se selecciona a partir de hidrogeno, fenilo y naftilo; en donde el fenilo de R10 esta insustituido o sustituido con metoxilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
4. El compuesto de la reivindicacion 3, o la sal farmaceuticamente aceptable del mismo, seleccionado a partir de:
Figure imgf000122_0001
Figure imgf000123_0001
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Figure imgf000127_0002
5. El compuesto de la reivindicacion 1 de formula II:
Figure imgf000127_0001
en donde:
p se selecciona a partir de 0 y 1;
q se selecciona a partir de 0 y 1;
Y1 se selecciona a partir de CH y N;
Y2 se selecciona a partir de CR6 y N;
R1 se selecciona a partir de arilo de 6 a 10 atomos de carbono, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, cicloalquenilo de 3 a 8 atomos de carbono y un grupo heteroarilo de 5 a 9 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos seleccionados a partir de N, O y S; en donde este arilo o heteroarilo de R1a esta sustituido con 1 a 5 grupos R9 independientemente seleccionados a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3 , alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino,
R2a y R2b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
R3a y R3b se seleccionan independientemente a partir de halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
R4a y R4b se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, halogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
Rsa y Rsb se seleccionan independientemente a partir de hidrogeno, carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino, hidroxilo, cicloalquilo de 3 a 8 atomos de carbono, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono-amino;
en donde cualesquiera dos grupos seleccionados a partir de R2a, R3a, R4, Rs, R6a y R7a pueden formar un anillo de 5 a 6 miembros insaturado o parcialmente insaturado;
R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, ciano, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, amino-carbonilo, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por hidroxilo, y alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por amino;
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs puede estar insustituido o sustituido con 1 a 3 grupos independientemente seleccionados a partir de amino, halogeno, hidroxilo, amino-metilo y metil-amino; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
6. Un compuesto de formula Ila:
Figure imgf000128_0001
en donde:
n se selecciona a partir de 1,2, 3 y 4;
p se selecciona a partir de 0 y 1;
q se selecciona a partir de 0 y 1;
Y1 se selecciona a partir de CH y N;
Y2 se selecciona a partir de CR6 y N;
Y4 se selecciona a partir de N y CR9 ;
R6 se selecciona a partir de hidrogeno, halogeno, metilo y amino-carbonilo;
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 3 a 7 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente un heteroatomo seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs puede estar insustituido o sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y Rs junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 5 miembros saturado o parcialmente insaturado que puede contener opcionalmente 1 o 2 heteroatomoso grupos seleccionados independientemente a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2;
en donde el anillo saturado formado por R7 y Rs esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, aminometilo y metil-amino; o
12s
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 6 miembros saturado que puede contener opcionalmente un heteroatomoso grupos seleccionados a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 esta sustituido con un grupo seleccionado a partir de amino, amino-metilo y metil-amino; o
R7 y R8 junto con el atomo de carbono con el que estan ambos unidos, forman un anillo de 4 miembros saturado que puede contener opcionalmente un heteroatomoso seleccionado a partir de N, O y S(O)m; en donde m se selecciona a partir de 0, 1 y 2; en donde el anillo saturado formado por R7 y R8 esta sustituido con amino;
R9 se selecciona a partir de halogeno, amino, hidroxilo, N3 , alquilo de 1 a 4 atomos de carbono, alquilo de 1 a 4 atomos de carbono sustituido por halogeno, alcoxilo de 1 a 4 atomos de carbono, -C(O)OR10 y -NHC(O)R1o;
R10 se selecciona a partir de hidrogeno, fenilo y naftilo; en donde el fenilo de R10 esta insustituido o sustituido con metoxilo; o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
7. Un compuesto de la reivindicacion 6, o la sal farmaceuticamente aceptable del mismo, seleccionado a partir de:
Figure imgf000129_0001
8. Un compuesto selccionado a partir de:
Figure imgf000130_0001
Figure imgf000130_0002
Figure imgf000131_0001
Figure imgf000132_0001
Figure imgf000133_0001
Figure imgf000134_0001
Figure imgf000135_0001
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
9. Un compuesto seleccionado a partir de:
Figure imgf000135_0002
Figure imgf000136_0002
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
10. Un compuestro como se reivindica en la reivindicacion 4, que es:
Figure imgf000136_0001
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
11. Un compuestro como se reivindica en la reivindicacion 4, que es:
Figure imgf000137_0001
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
12. Un compuestro como se reivindica en la reivindicacion 4, que es:
Figure imgf000137_0002
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
13. Un compuestro como se reivindica en la reivindicacion 4, que es:
Figure imgf000137_0003
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
14. Un compuestro como se reivindica en la reivindicacion 4, que es:
Figure imgf000138_0001
o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo.
15. Una composicion farmaceutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, y al menos un vehfculo farmaceuticamente aceptable.
16. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, o una sal farmaceuticamente aceptable del mismo, para uso en el tratamiento de una enfermedad o trastorno que esta mediado por la actividad de SHP2.
17. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 14, para uso como se reivindica en la reivindicacion 16, en donde la enfermedad o trastorno mediado por la actividad de SHP2 se selecciona del Sfndrome de Noonan, el Sfndrome de Leopard, leucemias mielomonocfticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda, cancer de mama, cancer de esofago, cancer de pulmon, cancer de colon, cancer de cabeza, neuroblastoma, carcinoma de celulas escamosas de cabeza y cuello, carcinoma gastrico, linfoma anaplasico de celulas grandes y glioblastoma.
18. Una combinacion de un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1-14, y uno o mas compuestos farmaceuticamente activos.
19. Una combinacion de la reivindicacion 18, en donde el otro compuesto o compuestos farmaceuticamente activos son para uso en el tratamiento del cancer.
20. Una combinacion de la reivindicacion 18, en donde el otro compuesto o compuestos farmaceuticamente activos se seleccionan de un alcaloide vinca, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, vinorelbina, vinflunina, cisplatino, 5-fluorouracilo, 5-fluoro-2-4(1 H, 3H)-pirimidindiona (5FU), flutamida y gemcitabina.
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Families Citing this family (113)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US10357184B2 (en) * 2012-06-21 2019-07-23 Globus Medical, Inc. Surgical tool systems and method
US11466017B2 (en) 2011-03-10 2022-10-11 Board Of Regents, The University Of Texas System Heterocyclic inhibitors of PTPN11
ES2699351T3 (es) 2014-01-17 2019-02-08 Novartis Ag Derivados de 1-piridazin/triazin-3-il-piper(-azina)/idina/pirolidina y composiciones de las mismas para inhibir la actividad de SHP2
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
CN105899493B (zh) 2014-01-17 2019-03-29 诺华股份有限公司 用于抑制shp2活性的1-(三嗪-3-基/哒嗪-3-基)-哌(-嗪)啶衍生物及其组合物
JP2018509448A (ja) * 2015-03-25 2018-04-05 ノバルティス アーゲー 組合せ医薬
EP3310774B1 (en) * 2015-06-19 2020-04-29 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
EP3310771B1 (en) * 2015-06-19 2020-07-22 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
CN105503725B (zh) * 2015-12-30 2018-03-27 天津药明康德新药开发有限公司 一种叔丁基1‑羟基‑8‑氮杂螺烷[4,5]葵烷‑8‑羧酸酯的制备方法
CN109475531B (zh) * 2016-05-31 2021-08-17 得克萨斯州立大学董事会 Ptpn11的杂环抑制剂
US10858359B2 (en) * 2016-06-07 2020-12-08 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic ring derivatives useful as SHP2 inhibitors
BR112018075663A2 (pt) * 2016-06-14 2019-04-09 Novartis Ag compostos e composições para a inibição da atividade de shp2
CN109983001B (zh) * 2016-07-12 2023-04-04 锐新医药公司 作为变构shp2抑制剂的2,5-双取代型3-甲基吡嗪及2,5,6-三取代型3-甲基吡嗪
BR112019001923A2 (pt) 2016-08-01 2019-05-14 Aptinyx Inc. moduladores de nmda de espiro-lactama e métodos de sua utilização
PE20190500A1 (es) 2016-08-01 2019-04-10 Aptinyx Inc Moduladores del receptor nmda spiro-lactam y uso de los mismos
AU2017306152A1 (en) * 2016-08-01 2019-01-31 Aptinyx Inc. Spiro-lactam NMDA receptor modulators and uses thereof
EP3515916B1 (en) 2016-09-22 2023-06-07 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
TW201819386A (zh) 2016-10-24 2018-06-01 美商傳達治療有限公司 Shp2磷酸酶抑制劑及其使用方法
ES2964956T3 (es) * 2017-01-10 2024-04-10 Novartis Ag Combinación farmacéutica que comprende un inhibidor de ALK y un inhibidor de SHP2
TWI820013B (zh) 2017-01-23 2023-11-01 美商銳新醫藥公司 作為別構ｓｈｐ２抑制劑之雙環化合物
JP7240320B2 (ja) 2017-01-23 2023-03-15 レヴォリューション・メディスンズ，インコーポレイテッド アロステリックｓｈｐ２阻害剤としてのピリジン化合物
SG11201908820VA (en) * 2017-03-23 2019-10-30 Jacobio Pharmaceuticals Co Ltd Novel heterocyclic derivatives useful as shp2 inhibitors
US11591336B2 (en) 2017-05-26 2023-02-28 D. E. Shaw Research, Llc Substituted pyrazolo[3,4-b]pyrazines as SHP2 phosphatase inhibitors
US10690253B2 (en) * 2017-06-20 2020-06-23 Control Components, Inc. Multi-stage, multi-path rotary disc
KR20200051684A (ko) 2017-09-07 2020-05-13 레볼루션 메디슨즈, 인크. 암 치료를 위한 shp2 억제제 조성물 및 방법
US10435389B2 (en) 2017-09-11 2019-10-08 Krouzon Pharmaccuticals, Inc. Octahydrocyclopenta[c]pyrrole allosteric inhibitors of SHP2
WO2019067843A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Relay Therapeutics, Inc. PYRAZOLO [3,4-B] PYRAZINE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF PHOSPHATASE SHP2
EP3694848A1 (en) * 2017-10-12 2020-08-19 Revolution Medicines, Inc. Pyridine, pyrazine, and triazine compounds as allosteric shp2 inhibitors
TWI697490B (zh) * 2017-12-06 2020-07-01 大陸商北京加科思新藥研發有限公司 用於作為shp2抑制劑之新穎雜環衍生物
TW201927791A (zh) 2017-12-15 2019-07-16 美商銳新醫藥公司 作為變構shp2抑制劑的多環化合物
WO2019152454A1 (en) * 2018-01-30 2019-08-08 Research Development Foundation Shp2 inhibitors and methods of use thereof
JP7210599B2 (ja) 2018-01-31 2023-01-23 アプティニックス インコーポレイテッド スピロラクタム系ｎｍｄａ受容体修飾因子およびその使用
EP3753941B1 (en) 2018-02-13 2024-05-01 Shanghai Blueray Biopharma Co., Ltd. Pyrimidine-fused cyclic compound, preparation method therefor and application thereof
CN110156786B (zh) * 2018-02-13 2022-06-03 青煜医药研发(上海)有限公司 嘧啶并环化合物及其制备方法和应用
US20200392161A1 (en) 2018-02-21 2020-12-17 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
EP3759111A1 (en) 2018-03-02 2021-01-06 Otsuka Pharmaceutical Co., Ltd. Pharmaceutical compounds
EP3768680A1 (en) 2018-03-21 2021-01-27 Relay Therapeutics, Inc. Pyrazolo[3,4-b]pyrazine shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
MX2020009782A (es) 2018-03-21 2021-01-20 Relay Therapeutics Inc Inhibidores de la fosfatasa shp2 y métodos para su uso.
RU2020133727A (ru) 2018-03-21 2022-04-21 Сучжоу Пухе Биофарма Ко., Лтд. Ингибиторы shp2 и их применение
CA3096535A1 (en) * 2018-04-10 2019-10-17 Revolution Medicines, Inc. Shp2 inhibitor compositions, methods for treating cancer and methods for identifying a subject with shp2 mutations
AU2019262978B2 (en) 2018-05-01 2023-07-13 Revolution Medicines, Inc. C40-, C28-, and C-32-linked rapamycin analogs as mTOR inhibitors
MX2020011528A (es) * 2018-05-02 2021-02-09 Navire Pharma Inc Inhibidores heterociclicos sustituidos de ptpn11.
CN115721648A (zh) * 2018-05-09 2023-03-03 北京加科思新药研发有限公司 可用作shp2抑制剂的新型杂环衍生物
EP4356973A3 (en) 2018-08-10 2024-06-26 Navire Pharma, Inc. 6-(4-amino-3-methyl-2-oxa-8-azaspiro[4.5]decan-8-yl)-3-(2,3-dichlorophenyl)-2-methylpyrimidin-4(3h)-one derivatives and related compounds as ptpn11 (shp2) inhibitors for treating cancer
US20200115389A1 (en) 2018-09-18 2020-04-16 Nikang Therapeutics, Inc. Fused tricyclic ring derivatives as src homology-2 phosphatase inhibitors
CA3112322A1 (en) * 2018-09-29 2020-04-02 Novartis Ag Manufacture of compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
JP2022502385A (ja) 2018-09-29 2022-01-11 ノバルティス アーゲー Ｓｈｐ２の活性を阻害するための化合物の製造方法
WO2020072656A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Gilead Sciences, Inc. Imidozopyrimidine derivatives
TW202028183A (zh) * 2018-10-10 2020-08-01 大陸商江蘇豪森藥業集團有限公司 含氮雜芳類衍生物調節劑、其製備方法和應用
IL282179B1 (en) 2018-10-17 2024-06-01 Array Biopharma Inc Protein tyrosine phosphatase inhibitors
CN111138412B (zh) * 2018-11-06 2023-09-15 上海奕拓医药科技有限责任公司 一种螺芳环化合物及其应用
CN111153899B (zh) * 2018-11-08 2023-12-01 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 一种取代吡啶化合物、其制备方法和用途
MX2021006026A (es) 2018-11-30 2021-07-06 Tuojie Biotech Shanghai Co Ltd Pirimidina y derivado heterociclico de nitrogeno de cinco miembros, metodo de preparacion y usos medicos de los mismos.
EP3890716A4 (en) 2018-12-05 2022-12-21 Mirati Therapeutics, Inc. COMBINATION THERAPIES
WO2020156242A1 (zh) * 2019-01-31 2020-08-06 贝达药业股份有限公司 Shp2抑制剂及其应用
MX2021009563A (es) 2019-02-12 2021-09-08 Novartis Ag Combinacion farmaceutica que comprende tno155 y ribociclib.
EP3924053A1 (en) 2019-02-12 2021-12-22 Novartis AG Pharmaceutical combination comprising tno155 and a krasg12c inhibitor
BR112021015487A2 (pt) 2019-02-12 2021-10-05 Novartis Ag Combinação farmacêutica que compreende tno155 e um inibidor de pd-1
CN111647000B (zh) 2019-03-04 2021-10-12 勤浩医药（苏州）有限公司 吡嗪类衍生物及其在抑制shp2中的应用
JP2022524759A (ja) 2019-03-07 2022-05-10 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツング Ｓｈｐ２アンタゴニストとしてのカルボキサミド－ピリミジン誘導体
JP7284830B2 (ja) 2019-04-02 2023-05-31 アレイ バイオファーマ インコーポレイテッド タンパク質チロシンホスファターゼ阻害剤
CA3127475A1 (en) * 2019-04-08 2020-10-15 Merck Patent Gmbh Pyrimidinone derivatives as shp2 antagonists
CA3137458A1 (en) 2019-05-13 2020-11-19 Relay Therapeutics, Inc. Fgfr inhibitors and methods of use thereof
US20220380385A1 (en) 2019-06-28 2022-12-01 Tuojie Biotech(Shanghai) Co., Ltd. Pyrimidine five-membered nitrogen heterocyclic derivative, preparation method thereof and pharmaceutical use thereof
TWI817018B (zh) 2019-06-28 2023-10-01 美商艾瑞生藥股份有限公司 用於治療ｂｒａｆ相關的疾病和失調症之化合物
CN111704611B (zh) * 2019-07-25 2022-01-14 上海凌达生物医药有限公司 一类芳基螺环类shp2抑制剂化合物、制备方法和用途
CN112300160A (zh) * 2019-08-01 2021-02-02 上海奕拓医药科技有限责任公司 一种螺芳环化合物、其制备及应用
EP3772513A1 (en) 2019-08-09 2021-02-10 C.N.C.C.S. S.c.a.r.l. Collezione Nazionale Dei Composti Chimici e Centro Screening Shp2 inhibitors
MX2022003454A (es) 2019-09-24 2022-04-19 Relay Therapeutics Inc Inhibidores de fosfatasa shp2 y metodos para su fabricacion y uso.
MX2022005525A (es) 2019-11-08 2022-06-08 Revolution Medicines Inc Compuestos de heteroarilo bicíclicos y usos de estos.
CN114761394B (zh) * 2020-01-16 2024-03-29 浙江海正药业股份有限公司 吡啶或嘧啶类衍生物及其制备方法和用途
CN113135910A (zh) 2020-01-19 2021-07-20 北京诺诚健华医药科技有限公司 嘧啶-4(3h)-酮类杂环化合物、其制备方法及其在医药学上的应用
EP4110338A1 (en) 2020-02-28 2023-01-04 Novartis AG A triple pharmaceutical combination comprising dabrafenib, an erk inhibitor and a shp2 inhibitor
TW202144334A (zh) * 2020-04-03 2021-12-01 大陸商上海翰森生物醫藥科技有限公司 含氮雜芳類衍生物游離鹼的晶型
CN113493440A (zh) * 2020-04-03 2021-10-12 上海翰森生物医药科技有限公司 含氮杂芳类衍生物的盐及其晶型
WO2021218755A1 (zh) * 2020-04-30 2021-11-04 贝达药业股份有限公司 Shp2抑制剂及其组合物和应用
JP2023524789A (ja) 2020-05-08 2023-06-13 ノバルティス アーゲー Ｔｎｏ１５５及びナザルチニブを含む医薬組合せ
US20230218765A1 (en) * 2020-05-19 2023-07-13 The Regents Of The University Of Michigan Small molecule degraders of shp2 protein
WO2021247836A1 (en) 2020-06-03 2021-12-09 Board Of Regents, The University Of Texas System Methods for targeting shp-2 to overcome resistance
WO2021249057A1 (zh) * 2020-06-12 2021-12-16 石药集团中奇制药技术（石家庄）有限公司 杂环化合物及其用途
CN115916194A (zh) 2020-06-18 2023-04-04 锐新医药公司 用于延迟、预防和治疗针对ras抑制剂的获得性抗性的方法
CN115667239A (zh) 2020-06-22 2023-01-31 四川科伦博泰生物医药股份有限公司 取代吡嗪类化合物，包含其的药物组合物及其用途
WO2022006780A1 (en) * 2020-07-08 2022-01-13 Novartis Ag Manufacture of compounds and compositions for inhibiting activity of shp2
WO2022009098A1 (en) 2020-07-08 2022-01-13 Novartis Ag Manufacture of compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
US20230339882A1 (en) * 2020-07-24 2023-10-26 Betta Pharmaceuticals Co., Ltd. Shp2 inhibitor and composition and application thereof
MX2023002248A (es) 2020-09-03 2023-05-16 Revolution Medicines Inc Uso de inhibidores de sos1 para tratar neoplasias malignas con mutaciones de shp2.
JP2023541916A (ja) 2020-09-15 2023-10-04 レボリューション メディシンズ インコーポレイテッド がんの治療における、ｒａｓ阻害剤としてのインドール誘導体
WO2022063190A1 (zh) * 2020-09-23 2022-03-31 南京明德新药研发有限公司 吡嗪硫联苯基类化合物及其应用
EP4039685A1 (en) 2021-02-08 2022-08-10 Irbm S.P.A. Azabicyclic shp2 inhibitors
JP2024509243A (ja) * 2021-03-23 2024-02-29 上海海雁医薬科技有限公司 複素環置換ケトン類誘導体、その組成物および医薬における使用
TWI825637B (zh) 2021-03-31 2023-12-11 美商輝瑞股份有限公司 啶－１，６（２ｈ，７ｈ）－二酮
CN117083285A (zh) * 2021-03-31 2023-11-17 南京明德新药研发有限公司 一系列含Se的吡嗪类化合物及其应用
EP4067358A1 (en) 2021-04-02 2022-10-05 C.N.C.C.S. S.c.a.r.l. Collezione Nazionale Dei Composti Chimici e Centro Screening (s)-1-(5-((pyridin-3-yl)thio)pyrazin-2-yl)-4'h,6'h-spiro[piperidine-4,5'-pyrrolo[1,2-b]pyrazol]-4'-amine derivatives and similar compounds as shp2 inhibitors for the treatment of e.g. cancer
CN117500811A (zh) 2021-05-05 2024-02-02 锐新医药公司 共价ras抑制剂及其用途
KR20240017811A (ko) 2021-05-05 2024-02-08 레볼루션 메디슨즈, 인크. 암의 치료를 위한 ras 억제제
CA3217393A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Elena S. Koltun Ras inhibitors
WO2022234409A1 (en) 2021-05-05 2022-11-10 Novartis Ag Compounds and compositions for the treatment of mpnst
TW202313041A (zh) 2021-06-09 2023-04-01 瑞士商諾華公司 包含達拉菲尼、曲美替尼和shp2抑制劑之三重藥物組合
KR20240005899A (ko) 2021-06-09 2024-01-12 에프. 호프만-라 로슈 아게 암 치료를 위한 병용요법
EP4351582A1 (en) 2021-06-09 2024-04-17 F. Hoffmann-La Roche AG Combination of a particular braf inhibitor (paradox breaker) and a pd-1 axis binding antagonist for use in the treatment of cancer
TW202317100A (zh) 2021-06-23 2023-05-01 瑞士商諾華公司 包含ｋｒａｓ ｇ１２ｃ抑制劑的藥物組合及其用於治療癌症之用途
CN115594666B (zh) * 2021-07-07 2024-05-31 海创药业股份有限公司 一种磷酸酶降解剂的合成和应用
KR20240055778A (ko) 2021-09-01 2024-04-29 노파르티스 아게 Tead 억제제를 포함하는 제약 조합물 및 암의 치료를 위한 이의 용도
AR127308A1 (es) 2021-10-08 2024-01-10 Revolution Medicines Inc Inhibidores ras
CN118201615A (zh) 2021-11-04 2024-06-14 豪夫迈·罗氏有限公司 喹唑啉酮化合物用于治疗癌症的新用途
TW202342040A (zh) 2022-02-21 2023-11-01 瑞士商諾華公司 藥物配製物
CN114524772B (zh) * 2022-02-28 2023-07-11 中国药科大学 一种含杂环串联类化合物及其制备方法与应用
WO2023172940A1 (en) 2022-03-08 2023-09-14 Revolution Medicines, Inc. Methods for treating immune refractory lung cancer
WO2023240263A1 (en) 2022-06-10 2023-12-14 Revolution Medicines, Inc. Macrocyclic ras inhibitors
WO2024035830A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Relay Therapeutics, Inc. Solid forms of a cdk inhibitor
EP4345101A1 (en) 2022-09-29 2024-04-03 Irbm S.P.A. Azole derivatives as shp2 inhibitors
WO2024105610A1 (en) 2022-11-18 2024-05-23 Novartis Ag Pharmaceutical combinations and uses thereof
WO2024113194A1 (en) * 2022-11-30 2024-06-06 Canwell Biotech Limited Shp2 inhibitors, compositions and methods thereof

Family Cites Families (134)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CH445129A (fr) 1964-04-29 1967-10-15 Nestle Sa Procédé pour la préparation de composés d'inclusion à poids moléculaire élevé
US3459731A (en) 1966-12-16 1969-08-05 Corn Products Co Cyclodextrin polyethers and their production
US3453257A (en) 1967-02-13 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin with cationic properties
US3426011A (en) 1967-02-13 1969-02-04 Corn Products Co Cyclodextrins with anionic properties
US3453259A (en) 1967-03-22 1969-07-01 Corn Products Co Cyclodextrin polyol ethers and their oxidation products
JPS6041077B2 (ja) 1976-09-06 1985-09-13 喜徳 喜谷 １，２‐ジアミノシクロヘキサン異性体のシス白金（２）錯体
US4235871A (en) 1978-02-24 1980-11-25 Papahadjopoulos Demetrios P Method of encapsulating biologically active materials in lipid vesicles
US4261989A (en) 1979-02-19 1981-04-14 Kaken Chemical Co. Ltd. Geldanamycin derivatives and antitumor drug
EP0090505B1 (en) 1982-03-03 1990-08-08 Genentech, Inc. Human antithrombin iii, dna sequences therefor, expression vehicles and cloning vectors containing such sequences and cell cultures transformed thereby, a process for expressing human antithrombin iii, and pharmaceutical compositions comprising it
US4512991A (en) * 1982-12-27 1985-04-23 Merck & Co., Inc. 3-Acyl-2-amino-5-halo-6-(substituted)pyrazine antimicrobial compounds
FR2567518B1 (fr) 1984-07-11 1987-11-13 Sanofi Sa Nouveaux composes a noyau heterocyclique azote, leur preparation et les medicaments qui en contiennent
US4737323A (en) 1986-02-13 1988-04-12 Liposome Technology, Inc. Liposome extrusion method
EP0799617A3 (en) * 1986-02-24 1997-11-12 Mitsui Petrochemical Industries, Ltd. Therapeutic agent for neurological diseases
US5266573A (en) 1989-08-07 1993-11-30 Elf Sanofi Trifluoromethylphenyltetrahydropyridines for the treatment and/or prophylaxis of intestinal motility disorders
KR0166088B1 (ko) 1990-01-23 1999-01-15 . 수용해도가 증가된 시클로덱스트린 유도체 및 이의 용도
DK169008B1 (da) 1990-06-01 1994-07-25 Holec Lk A S Fremgangsmåde og skærm til afskærmning af en strømtransformer samt strømtransformer med en sådan afskærmning
GB9012316D0 (en) 1990-06-01 1990-07-18 Wellcome Found Pharmacologically active cns compounds
EP0647450A1 (en) 1993-09-09 1995-04-12 BEHRINGWERKE Aktiengesellschaft Improved prodrugs for enzyme mediated activation
IL115849A0 (en) 1994-11-03 1996-01-31 Merz & Co Gmbh & Co Tangential filtration preparation of liposomal drugs and liposome product thereof
US6111090A (en) 1996-08-16 2000-08-29 Schering Corporation Mammalian cell surface antigens; related reagents
DE69738749D1 (de) 1996-08-16 2008-07-17 Schering Corp Zelloberflächen-antigen aus säugetieren und verwandte reagenzien
MA26473A1 (fr) * 1997-03-01 2004-12-20 Glaxo Group Ltd Composes pharmacologiquement actifs.
EP1025228A4 (en) 1997-10-21 2002-09-18 Human Genome Sciences Inc HUMAN PROTEIN TR11, TR11SV1 AND TR11SV2 SIMILAR TO THE TUMOR NECROSIS FACTOR RECEPTOR
AU2591599A (en) 1998-02-09 1999-08-23 Genentech Inc. Novel tumor necrosis factor receptor homolog and nucleic acids encoding the same
AU4198400A (en) 1999-04-06 2000-10-23 Krenitsky Pharmaceuticals Inc. Neurotrophic thio substituted pyrimidines
PE20010306A1 (es) 1999-07-02 2001-03-29 Agouron Pharma Compuestos de indazol y composiciones farmaceuticas que los contienen utiles para la inhibicion de proteina kinasa
PT1196186E (pt) 1999-07-12 2008-02-14 Genentech Inc Promoção ou inibição da angiogénese e da cardiovascularização com homólogos de ligandos/receptores do factor de necrose tumoral.
GB0018891D0 (en) 2000-08-01 2000-09-20 Novartis Ag Organic compounds
JP4272338B2 (ja) 2000-09-22 2009-06-03 バイエル アクチェンゲゼルシャフト ピリジン誘導体
US6995162B2 (en) 2001-01-12 2006-02-07 Amgen Inc. Substituted alkylamine derivatives and methods of use
CA2463989C (en) 2001-10-17 2012-01-31 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Pyrimidine derivatives, pharmaceutical compositions containing these compounds, the use thereof and process for the preparation thereof
KR101004224B1 (ko) 2002-02-01 2010-12-27 어리어드 파마슈티칼스, 인코포레이티드 인 함유 화합물 및 이의 용도
RU2004126671A (ru) * 2002-02-06 2005-04-10 Вертекс Фармасьютикалз Инкорпорейтед (Us) Гетероарилсоединения, полезные в качестве ингибиторов gsk-3
ATE395911T1 (de) 2002-03-05 2008-06-15 Merck Frosst Canada Ltd Cathepsin-cystein-protease-hemmer
TWI275390B (en) 2002-04-30 2007-03-11 Wyeth Corp Process for the preparation of 7-substituted-3- quinolinecarbonitriles
ES2367430T3 (es) 2002-12-23 2011-11-03 Wyeth Llc Anticuerpos contra pd-1 y sus usos.
GB0300783D0 (en) 2003-01-14 2003-02-12 Btg Int Ltd Treatment of neurodegenerative conditions
AU2004218228A1 (en) 2003-03-07 2004-09-16 Merck Sharp & Dohme Limited Tetrahydropyran compounds as tachykinin antagonists
AU2004244626A1 (en) 2003-05-23 2004-12-09 The Government Of The United States Of America As Represented By The Secretary, Department Of Health And Human Services GITR ligand and GITR ligand-related molecules and antibodies and uses thereof
WO2005007190A1 (en) 2003-07-11 2005-01-27 Schering Corporation Agonists or antagonists of the clucocorticoid-induced tumour necrosis factor receptor (gitr) or its ligand for the treatment of immune disorders, infections and cancer
US7399865B2 (en) 2003-09-15 2008-07-15 Wyeth Protein tyrosine kinase enzyme inhibitors
WO2005055808A2 (en) 2003-12-02 2005-06-23 Genzyme Corporation Compositions and methods to diagnose and treat lung cancer
CA2562126A1 (en) 2004-04-01 2005-10-13 Astellas Pharma Inc. Pyrazine derivatives and pharmaceutical use thereof
AU2005249380C1 (en) * 2004-04-23 2012-09-20 Exelixis, Inc. Kinase modulators and methods of use
GB0409799D0 (en) 2004-04-30 2004-06-09 Isis Innovation Method of generating improved immune response
US20060002932A1 (en) 2004-06-04 2006-01-05 Duke University Methods and compositions for enhancement of immunity by in vivo depletion of immunosuppressive cell activity
EA017262B1 (ru) 2004-09-02 2012-11-30 Дженентек, Инк. Соединения 2-(2-галоген-4-аминофенил)пиридиновых ингибиторов передачи сигналов белком hedgehog (варианты), способ их получения, композиция и способы лечения рака и ингибирований ангиогенеза и сигнального пути hedgehog в клетках на их основе
KR20070095952A (ko) 2004-12-16 2007-10-01 버텍스 파마슈티칼스 인코포레이티드 염증성 질환, 증식성 질환 및 면역학적으로 매개된 질환치료용 Ｔｅｃ 계열 단백질 키나제의 억제제로서 유용한피리드-2-온
EP2343320B1 (en) 2005-03-25 2017-10-25 GITR, Inc. Anti-gitr antibodies and uses thereof
ES2427646T5 (es) 2005-05-09 2017-08-22 Ono Pharmaceutical Co., Ltd. Anticuerpos monoclonales humanos contra muerte programada 1 (PD1) y métodos para el tratamiento del cáncer mediante el uso de anticuerpos anti-PD-1 solos o combinados con otros agentes inmunoterapéuticos
GB0510390D0 (en) 2005-05-20 2005-06-29 Novartis Ag Organic compounds
MX2007015942A (es) 2005-07-01 2008-03-07 Medarex Inc Anticuerpos monoclonales humanos para ligandos 1 (pd-l1) de muerte programada.
EP1928862A1 (en) 2005-09-13 2008-06-11 Palau Pharma, S.A. 2-aminopyrimidine derivatives as modulators of the histamine h4 receptor activity
AR057579A1 (es) * 2005-11-23 2007-12-05 Merck & Co Inc Compuestos espirociclicos como inhibidores de histona de acetilasa (hdac)
WO2007133822A1 (en) 2006-01-19 2007-11-22 Genzyme Corporation Gitr antibodies for the treatment of cancer
US20100029941A1 (en) 2006-03-28 2010-02-04 Takeda Pharmaceutical Company Limited Preparation of (r)-3-aminopiperidine dihydrochloride
US7515405B2 (en) 2006-07-25 2009-04-07 Hewlett-Packard Development Company, L.P. Anti-rotation mechanism for an electronic device
WO2008055959A1 (en) 2006-11-09 2008-05-15 Galapagos N.V. Novel compounds useful for the treatment of degenerative & inflammatory diseases
AU2008216842A1 (en) 2007-02-12 2008-08-21 Merck Sharp & Dohme Corp. Piperidine derivatives
PE20090188A1 (es) * 2007-03-15 2009-03-20 Novartis Ag Compuestos heterociclicos como moduladores de la senda de hedgehog
RS53072B (en) 2007-06-18 2014-04-30 Merck Sharp & Dohme B.V. HUMAN RECEPTOR ANTIBODIES PROGRAMMED DEATH PD-1
JP5932217B2 (ja) 2007-07-12 2016-06-08 ジーアイティーアール， インコーポレイテッド Ｇｉｔｒ結合分子を使用する併用療法
US8247397B2 (en) 2007-09-12 2012-08-21 Genentech, Inc. Combinations of phosphoinositide 3-kinase inhibitor compounds and chemotherapeutic agents, and methods of use
JP5348725B2 (ja) 2007-10-25 2013-11-20 ジェネンテック， インコーポレイテッド チエノピリミジン化合物の製造方法
PT2242773T (pt) 2008-02-11 2017-09-15 Cure Tech Ltd Anticorpos monoclonais para o tratamento de tumores
EP2262837A4 (en) 2008-03-12 2011-04-06 Merck Sharp & Dohme PD-1 BINDING PROTEINS
WO2009131687A2 (en) 2008-04-22 2009-10-29 Portola Pharmaceuticals, Inc. Inhibitors of protein kinases
BRPI0915105A2 (pt) 2008-06-13 2019-09-24 Novartis Ag composto de 2,4'-biripidinila como inibidores da proteína cinase d úteis para o tratamento de ia insuficiência cardíaca e cancer
US8168784B2 (en) 2008-06-20 2012-05-01 Abbott Laboratories Processes to make apoptosis promoters
KR20110026481A (ko) 2008-06-20 2011-03-15 메타볼렉스, 인코포레이티드 아릴 ｇｐｒ１１９ 작동약 및 이의 용도
WO2009158571A1 (en) 2008-06-27 2009-12-30 Avila Therapeutics And Uses Thereof Heteroaryl compounds and uses thereof
GB0812031D0 (en) 2008-07-01 2008-08-06 7Tm Pharma As Thiazole derivatives
WO2010003118A1 (en) 2008-07-02 2010-01-07 Trubion Pharmaceuticals, Inc. Tgf-b antagonist multi-target binding proteins
WO2010011666A2 (en) 2008-07-21 2010-01-28 University Of South Florida Indoline scaffold shp-2 inhibitors and cancer treatment method
AR072999A1 (es) 2008-08-11 2010-10-06 Medarex Inc Anticuerpos humanos que se unen al gen 3 de activacion linfocitaria (lag-3) y los usos de estos
EP2328919A2 (en) 2008-08-25 2011-06-08 Amplimmune, Inc. Pd-i antagonists and methods for treating infectious disease
WO2010027423A2 (en) 2008-08-25 2010-03-11 Amplimmune, Inc. Compositions of pd-1 antagonists and methods of use
US8586023B2 (en) 2008-09-12 2013-11-19 Mie University Cell capable of expressing exogenous GITR ligand
WO2010048149A2 (en) 2008-10-20 2010-04-29 Kalypsys, Inc. Heterocyclic modulators of gpr119 for treatment of disease
MX2011004953A (es) * 2008-11-10 2011-12-14 Vertex Pharma Compuestos utiles como inhibidores de cinasa atr.
HUE034832T2 (hu) 2008-12-09 2021-12-28 Hoffmann La Roche Anti-PD-L1 antitestek és alkalmazásuk T-sejt-funkció fokozására
US20110306606A1 (en) 2008-12-10 2011-12-15 Jei Man Ryu Novel 2,6-substituted-3-nitropyridine derivative, method for preparing same, and pharmaceutical composition including same
FR2941696B1 (fr) 2009-02-05 2011-04-15 Sanofi Aventis Derives d'azaspiranyl-alkylcarbamates d'heterocycles a 5 chainons, leur preparation et leur application en therapeutique
US8741295B2 (en) 2009-02-09 2014-06-03 Universite De La Mediterranee PD-1 antibodies and PD-L1 antibodies and uses thereof
WO2010121212A2 (en) 2009-04-17 2010-10-21 H. Lee Moffit Cancer Center And Research Institute, Inc. Indoline scaffold shp-2 inhibitors and method of treating cancer
CA2771190C (en) 2009-08-17 2020-01-21 Memorial Sloan-Kettering Cancer Center Heat shock protein binding compounds, compositions, and methods for making and using same
EP2473531A4 (en) 2009-09-03 2013-05-01 Merck Sharp & Dohme ANTI-GITRANT ANTIBODIES
GB0919054D0 (en) 2009-10-30 2009-12-16 Isis Innovation Treatment of obesity
US8673913B2 (en) 2009-11-13 2014-03-18 Case Western Reserve University SHP-2 phosphatase inhibitor
US20130017199A1 (en) 2009-11-24 2013-01-17 AMPLIMMUNE ,Inc. a corporation Simultaneous inhibition of pd-l1/pd-l2
WO2011078143A1 (ja) 2009-12-22 2011-06-30 塩野義製薬株式会社 ピリミジン誘導体およびそれらを含有する医薬組成物
AU2010343057B2 (en) 2009-12-29 2017-02-23 Aptevo Research And Development Llc Heterodimer binding proteins and uses thereof
EP2589592B1 (en) 2010-06-30 2018-08-22 FUJIFILM Corporation Novel nicotinamide derivatives or salts thereof
AU2011279509A1 (en) 2010-07-13 2013-01-10 Merck Sharp & Dohme Corp. Spirocyclic compounds
JP5889895B2 (ja) 2010-07-29 2016-03-22 ライジェル ファーマシューティカルズ， インコーポレイテッド Ａｍｐｋ活性化複素環化合物およびその使用方法
WO2012027495A1 (en) * 2010-08-27 2012-03-01 University Of The Pacific Piperazinylpyrimidine analogues as protein kinase inhibitors
WO2012052948A1 (en) 2010-10-20 2012-04-26 Pfizer Inc. Pyridine- 2- derivatives as smoothened receptor modulators
MY172110A (en) 2010-12-13 2019-11-14 Array Biopharma Inc Substituted n-(1h-indazol-4-yl)imidazo[1,2-a]pyridine-3-carboxamide compounds as type iii receptor tyrosine kinase inhibitors
JP5727276B2 (ja) 2011-03-04 2015-06-03 協同油脂株式会社 グリース組成物及びグリース封入転がり軸受
EP2755958B9 (en) 2011-09-12 2018-02-28 Merck Patent GmbH Aminopyrimidine derivatives for use as modulators of kinase activity
WO2013039954A1 (en) 2011-09-14 2013-03-21 Sanofi Anti-gitr antibodies
JP6138813B2 (ja) 2011-11-28 2017-05-31 メルク パテント ゲゼルシャフト ミット ベシュレンクテル ハフツングＭｅｒｃｋ Ｐａｔｅｎｔ Ｇｅｓｅｌｌｓｃｈａｆｔ ｍｉｔ ｂｅｓｃｈｒａｅｎｋｔｅｒ Ｈａｆｔｕｎｇ 抗ｐｄ−ｌ１抗体及びその使用
WO2013096093A1 (en) 2011-12-21 2013-06-27 Merck Sharp & Dohme Corp. Compounds as dgat-1 inhibitors
EP2858994A1 (en) 2012-06-07 2015-04-15 F. Hoffmann-La Roche AG Pyrazolopyrimidone and pyrazolopyridone inhibitors of tankyrase
IN2014DN09346A (es) 2012-06-13 2015-07-17 Hoffmann La Roche
UY34887A (es) 2012-07-02 2013-12-31 Bristol Myers Squibb Company Una Corporacion Del Estado De Delaware Optimización de anticuerpos que se fijan al gen de activación de linfocitos 3 (lag-3) y sus usos
JP6099753B2 (ja) 2012-10-03 2017-03-22 アドビナス セラピューティクス リミテッド スピロ環化合物、その組成物及びその医薬応用
WO2014160521A1 (en) * 2013-03-15 2014-10-02 Blueprint Medicines Corporation Piperazine derivatives and their use as kit modulators
US10189859B2 (en) 2013-12-21 2019-01-29 Nektar Therapeutics Derivatives of 6-(2,3-dichlorophenyl)-1,2,4-triazin-5-amine
ES2699351T3 (es) 2014-01-17 2019-02-08 Novartis Ag Derivados de 1-piridazin/triazin-3-il-piper(-azina)/idina/pirolidina y composiciones de las mismas para inhibir la actividad de SHP2
JO3517B1 (ar) 2014-01-17 2020-07-05 Novartis Ag ان-ازاسبيرو الكان حلقي كبديل مركبات اريل-ان مغايرة وتركيبات لتثبيط نشاط shp2
CN105899493B (zh) 2014-01-17 2019-03-29 诺华股份有限公司 用于抑制shp2活性的1-(三嗪-3-基/哒嗪-3-基)-哌(-嗪)啶衍生物及其组合物
RS62874B1 (sr) 2014-05-01 2022-02-28 Celgene Quanticel Research Inc Inhibitori lizin specifične demetilaze-1
US10174032B2 (en) 2014-05-05 2019-01-08 Signalrx Pharmaceuticals, Inc. Heterocyclic compound classes for signaling modulation
EP3310774B1 (en) 2015-06-19 2020-04-29 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
US10975080B2 (en) 2015-06-19 2021-04-13 Novartis Ag Compounds and compositions for inhibiting the activity of SHP2
EP3310771B1 (en) 2015-06-19 2020-07-22 Novartis AG Compounds and compositions for inhibiting the activity of shp2
WO2017156397A1 (en) 2016-03-11 2017-09-14 Board Of Regents, The University Of Texas Sysytem Heterocyclic inhibitors of ptpn11
CN109475531B (zh) 2016-05-31 2021-08-17 得克萨斯州立大学董事会 Ptpn11的杂环抑制剂
US10858359B2 (en) 2016-06-07 2020-12-08 Jacobio Pharmaceuticals Co., Ltd. Heterocyclic ring derivatives useful as SHP2 inhibitors
CN109983001B (zh) 2016-07-12 2023-04-04 锐新医药公司 作为变构shp2抑制剂的2,5-双取代型3-甲基吡嗪及2,5,6-三取代型3-甲基吡嗪
EP3515916B1 (en) 2016-09-22 2023-06-07 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
TW201819386A (zh) 2016-10-24 2018-06-01 美商傳達治療有限公司 Shp2磷酸酶抑制劑及其使用方法
ES2964956T3 (es) 2017-01-10 2024-04-10 Novartis Ag Combinación farmacéutica que comprende un inhibidor de ALK y un inhibidor de SHP2
JP7240320B2 (ja) 2017-01-23 2023-03-15 レヴォリューション・メディスンズ，インコーポレイテッド アロステリックｓｈｐ２阻害剤としてのピリジン化合物
TWI820013B (zh) 2017-01-23 2023-11-01 美商銳新醫藥公司 作為別構ｓｈｐ２抑制劑之雙環化合物
SG11201908820VA (en) 2017-03-23 2019-10-30 Jacobio Pharmaceuticals Co Ltd Novel heterocyclic derivatives useful as shp2 inhibitors
KR20200051684A (ko) 2017-09-07 2020-05-13 레볼루션 메디슨즈, 인크. 암 치료를 위한 shp2 억제제 조성물 및 방법
WO2019067843A1 (en) 2017-09-29 2019-04-04 Relay Therapeutics, Inc. PYRAZOLO [3,4-B] PYRAZINE DERIVATIVES AS INHIBITORS OF PHOSPHATASE SHP2
EP3694848A1 (en) 2017-10-12 2020-08-19 Revolution Medicines, Inc. Pyridine, pyrazine, and triazine compounds as allosteric shp2 inhibitors
TW201927791A (zh) 2017-12-15 2019-07-16 美商銳新醫藥公司 作為變構shp2抑制劑的多環化合物
US20200392161A1 (en) 2018-02-21 2020-12-17 Relay Therapeutics, Inc. Shp2 phosphatase inhibitors and methods of use thereof
MX2020009782A (es) 2018-03-21 2021-01-20 Relay Therapeutics Inc Inhibidores de la fosfatasa shp2 y métodos para su uso.
CA3096535A1 (en) 2018-04-10 2019-10-17 Revolution Medicines, Inc. Shp2 inhibitor compositions, methods for treating cancer and methods for identifying a subject with shp2 mutations

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