ES2824576T3

ES2824576T3 - Compuestos y composiciones para inhibir la actividad de SHP2

Info

Publication number: ES2824576T3
Application number: ES16731665T
Authority: ES
Inventors: Zhuoliang Chen; Jorge Garcia Fortanet; Matthew J Lamarche; Martin Sendzik; Tamez, Jr; Bing Yu
Original assignee: Novartis AG
Current assignee: Novartis AG
Priority date: 2015-06-19
Filing date: 2016-06-15
Publication date: 2021-05-12
Anticipated expiration: 2036-06-15
Also published as: US10308660B2; JP6878316B2; EP3310771A1; JP2021130662A; CN107787323A; CN107787323B; US20180251471A1; JP7146016B2; JP2018517746A; EP3310771B1; WO2016203405A1

Abstract

Un compuesto de formula I: **(Ver fórmula)** en que: X1 se selecciona de N y CH; X2 es CR3b; X3 se selecciona de S y un enlace; Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrogeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi; Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrogeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrogeno, amino, halo, alquilo C1-3, -NH(cicloalquilo C3-5), alcoxi C1-3 e hidroxi; R1 se selecciona de hidrogeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 halosustituido, alquil C1-2-hidroxi y ciano; R2 se selecciona de hidrogeno y halo; R3a se selecciona de hidrogeno, metilo y alquilo C1-2 halosustituido; R3b se selecciona de hidrogeno, metilo y amino; R4a y R4b cada uno se selecciona independientemente de hidrogeno, hidroxi y fluoro; con la condicion de que R4a y R4b no pueden ser ambos OH; con la condicion de que R4a y R4b no pueden ser OH y F simultaneamente; R5a se selecciona de amino y aminometilo; R5b se selecciona de OH, amino, fluoro, alquilo C1-6, metoxicarbonilo, cicloalquil C3-6-alquilo C1-3, alquilo C1-3 hidroxisustituido, alquilo C1-3 alcoxi C1-2-sustituido y un anillo heteroarilo de 5 a 6 miembros que contiene de 1 a 4 heteroatomos seleccionados de O, S y N; en el que dicho alquilo C1-6 o alquilo C1-3 alcoxi C1-2-sustituido de R5b esta sin sustituir o sustituido con 1-3 atomos de fluor; con la condicion de que si R5a es amino, R5b no puede ser OH, amino o fluoro; o R5a y R5b, junto con el atomo de carbono al que R5a y R5b estan unidos, forman un grupo seleccionado de: **(Ver fórmula)** en el que *C representa el atomo de carbono al que R5a y R5b estan unidos; R10 es amino; R11a se selecciona de hidrogeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo; R11b se selecciona de fluoro, metilo e hidrogeno; con la condicion de que R11a y R11b no pueden ser ambos OH y fluoro simultaneamente; R11c se selecciona de hidrogeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo; R12 se selecciona de hidrogeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3; R13 se selecciona de hidrogeno, halo y alquilo C1-3; R14 se selecciona de hidrogeno y fluoro; con la condicion de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultaneamente; R15 se selecciona de hidrogeno y fluoro; y R6a y R6b cada uno se selecciona independientemente de hidrogeno, hidroxi y fluoro; con la condicion de que R6a y R6b no pueden ser ambos OH; con la condicion de que R6a y R6b no pueden ser ambos OH y fluoro simultaneamente; o las sales farmaceuticamente aceptables de los mismos; con la condicion de que un compuesto de formula I no incluya un compuesto seleccionado de:**Tabla**

Description

DESCRIPCIÓN

Compuestos y composiciones para inhibir la actividad de SHP2

ANTECEDENTES

CAMPO DE LA INVENCIÓN

La presente invención se refiere a compuestos que pueden inhibir la actividad de SHP2. La invención proporciona además un proceso para la preparación de compuestos de la invención, preparaciones farmacéuticas que comprenden dichos compuestos y compuestos y composiciones para su uso en el tratamiento de enfermedades o trastornos asociados con la actividad aberrante de SHP2.

ANTECEDENTES DE LA INVENCIÓN

La fosfatasa de homología a Src de tipo 2 (SHP2) es una proteína tirosina fosfatasa no receptora codificada por el gen PTPN11 que participa en múltiples funciones celulares incluyendo la proliferación, diferenciación, mantenimiento del ciclo celular y migración. SHP2 está implicada en la señalización a través de las rutas de Ras-cinasa de proteína activada por mitógenos, JAK-STAT o fosfoinositol 3-cinasa-AKT.

SHP2 tiene dos dominios de homología a Src de tipo 2 en el extremo N (N-SH2 y C-SH2), un dominio catalítico (PTP) y una cola en el extremo C. Los dos dominios s H2 controlan la localización subcelular y la regulación funcional de SHP2. La molécula existe en una conformación inactiva, autoinhibida estabilizada por una red de unión que implica restos de ambos dominios N-SH2 y PTP. La estimulación por, por ejemplo, citocinas o factores de crecimiento da lugar a exposición del sitio catalítico, que provoca activación enzimática de SHP2.

Se han identificado mutaciones en el gen PTPN11 y posteriormente en SHP2 en varias enfermedades humanas, tales como el síndrome de Noonan, síndrome Leopard, leucemias mielomonocíticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda y cánceres de mama, pulmón y colon. SHP2, por lo tanto, representa una diana muy atractiva para el desarrollo de terapias novedosas para el tratamiento de diversas enfermedades. Los compuestos de la presente invención cumplen la necesidad de moléculas pequeñas que inhiban la actividad de SHP2.

El documento WO 2010/121212 describe derivados de indolina como inhibidores de SHP-2 para el tratamiento del cáncer.

SUMARIO DE LA INVENCIÓN

En un aspecto, la presente invención proporciona compuestos, o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, de fórmula I:

X 1 se selecciona de N y CH; X2 es CR³b; X3 se selecciona de S y un enlace; Y 1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi; Y2 se selecciona de N y CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C^1-3-alcoxi C1-3, arilo C⁶-10 y aril C6-10- alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, -NH(cicloalquilo C3-5), alcoxi C1-3 e hidroxi; R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 halosustituido, alquil C1-2-hidroxi y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno y halo; R³a se selecciona de hidrógeno, metilo y alquilo C1-2 halosustituido; R³b se selecciona de hidrógeno, metilo y amino; R⁴a y R⁴b cada uno se selecciona independientemente de hidrógeno, hidroxi y fluoro; con la condición de que R⁴a y R⁴b no pueden ser ambos OH; con la condición de que R⁴a y R⁴b no pueden ser OH y F simultáneamente; R⁵a se selecciona de amino y aminometilo; R⁵b se selecciona de OH, amino, fluoro, alquilo C i ^-6, metoxicarbonilo, cicloalquil C^3-6-alquilo C1-3, alquilo C1-3 hidroxisustituido, alquilo C1-3 alcoxi C1-2-sustituido y un anillo heteroarilo de 5 a 6 miembros que contiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, S y N; en el que dicho alquilo C1-6 o alquilo C1-3 alcoxi C1-2-sustituido de R⁵b está sin sustituir o sustituido con 1-3 átomos de flúor; con la condición de que si R⁵a es amino, R⁵b no puede ser OH, amino o fluoro; o R⁵a y R⁵b, junto con el átomo de carbono al que R⁵a y R⁵b están unidos, forman un grupo seleccionado de:

en el que *C representa el átomo de carbono al que R⁵a y R⁵b están unidos; R10 es amino; Rua se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3e hidroximetilo; Rm se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; con la condición de que Rua y R ub no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; Ruc se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo; R12 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3; R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; R14 se selecciona de hidrógeno y fluoro; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; R15 se selecciona de hidrógeno y fluoro; y R⁶a y R⁶b cada uno se selecciona independientemente de hidrógeno, hidroxi y fluoro; con la condición de que R⁶a y R⁶b no pueden ser ambos OH; con la condición de que R⁶a y R⁶b no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; con la condición de que un compuesto de fórmula I no incluya un compuesto seleccionado de:

En un segundo aspecto, la presente invención proporciona una composición farmacéutica que contiene un compuesto de fórmula I; o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en mezcla con uno o más excipientes adecuados.

[0008] En un tercer aspecto, la presente invención proporciona compuestos para su uso en el tratamiento de una enfermedad en un animal en que la modulación de la actividad de SHP2 puede prevenir, inhibir o mejorar la patología y/o sintomatología de las enfermedades, que comprende administrar al animal una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo.

[0009] En un cuarto aspecto, la presente invención proporciona compuestos para su uso en el tratamiento de una enfermedad en un animal en que la modulación de la actividad de SHP2 puede prevenir, inhibir o mejorar la patología y/o sintomatología de las enfermedades, que comprende administrar al animal una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación simultánea o secuencial con un agente terapéutico antineoplásico.

[0010] La divulgación también proporciona un proceso para preparar compuestos de fórmula I, y las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

Definiciones

Los términos generales usados anteriormente en este documento y a continuación en este documento preferiblemente tienen, dentro del contexto de esta divulgación, los siguientes significados, salvo que se indique otra cosa, donde términos más generales independientemente donde se usen, independientemente entre sí, pueden remplazarse por definiciones más específicas o permanecer, definiendo de este modo realizaciones más detalladas de la invención:

"Alquilo" se refiere a un resto hidrocarbonado totalmente saturado ramificado o no ramificado que tiene hasta 20 átomos de carbono. Salvo que se proporcione de otro modo, alquilo se refiere a restos hidrocarbonados que tienen de 1 a 7 átomos de carbono (alquilo C1-7), o de 1 a 4 átomos de carbono (alquilo C1-4). Ejemplos representativos de alquilo incluyen, aunque sin limitación, metilo, etilo, n-propilo, /so-propilo, n-butilo, sec-butilo, /so-butilo, ferc-butilo, n-pentilo, isopentilo, neopentilo, n-hexilo, 3-metilhexilo, 2,2-dimetilpentilo, 2,3-dimetilpentilo, n-heptilo, n-octilo, n-nonilo, n-decilo y similares. Un alquilo sustituido es un grupo alquilo que contiene uno o más, tal como uno, dos o tres sustituyentes seleccionados de halógeno, hidroxi o grupos alcoxi. Alquilo halosustituido y alcoxi halosustituido, pueden ser de cadena lineal o estar ramificados e incluyen, metoxi, etoxi, difluorometilo, trifluorometilo, pentafluoroetilo, difluorometoxi, trifluorometoxi y similares.

"Arilo" significa un conjunto anular aromático monocíclico o bicíclico condensado que contiene de seis a diez átomos de carbono en el anillo. Por ejemplo, un arilo puede ser fenilo o naftilo, preferiblemente fenilo. "Arileno" significa un radical divalente derivado de un grupo arilo.

"Heteroarilo" es como se define para arilo anteriormente donde uno o más de los miembros del anillo son un heteroátomo. Por ejemplo, heteroarilo C5-10 tiene un mínimo de 5 miembros como se indica por los átomos de carbono, pero estos átomos de carbono pueden remplazarse con un heteroátomo. Por consiguiente, heteroarilo C5-10 incluye piridilo, indolilo, indazolilo, quinoxalinilo, quinolinilo, benzofuranilo, benzopiranilo, benzotiopiranilo, benzo[1,3]dioxol, imidazolilo, benzoimidazolilo, pirimidinilo, furanilo, oxazolilo, isoxazolilo, triazolilo, tetrazolilo, pirazolilo, tienilo, etc.

"Cicloalquilo" significa un conjunto anular monocíclico, bicíclico condensado o policíclico con puente, saturado o parcialmente insaturado, que contiene el número indicado de átomos en el anillo. Por ejemplo, cicloalquilo C3-10 incluye ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, ciclohexilo, ciclohexenilo, etc.

"Heterocicloalquilo" significa cicloalquilo, como se define en esta solicitud, con la condición de que uno o más de los carbonos del anillo indicados estén remplazados con un resto seleccionado de -O-, -N=, -NR-, -C(O)-, -S-, -S(O)- o -S(O)2-, en el que R es hidrógeno, alquilo C1-4 o un grupo protector de nitrógeno. Por ejemplo, heterocicloalquilo C3-8, como se usa en esta solicitud para describir compuestos de la invención, incluye morfolino, pirrolidinilo, pirrolidinil-2-ona, piperazinilo, piperidinilo, piperidinilona, 1,4-dioxa-8-aza-espiro[4.5]dec-8-ilo, tiomorfolino, sulfanomorfolino, sulfonomorfolino, etc.

"Halógeno" (o "halo") representa preferiblemente cloro o fluoro, pero también puede ser bromo o yodo.

"SHP2" significa "fosfatasa de homología a Src de tipo 2" y también se conoce como SH-PTP2, SH-PTP3, Syp, PTP1D, PTP2C, SAP-2 o PTPN11.

[0019] Cánceres que albergan "mutaciones de PTPN11" incluyen, aunque sin limitación: N58Y; D61Y,

V; E69K; A72V, T, D; E76G, Q, K (ALL); G60A; D61Y; E69V; F71K; A72V; T73I; E76G, K; R289G; G503V (AML);

G60R, D61Y, V, N; Y62D; E69K; A72T, V; T73I; E76K, V, G, A, Q; E139D; G503A, R; Q506P (JMML); G60V; D61V;

E69K; F71L; A72V; E76A (MDS); Y63C (CMML); Y62C; E69K; T507K (neuroblastoma); V46L; N58S; E76V (cáncer pulmonar); R138Q (melanoma); E76G (cáncer de colon).

Los compuestos de fórmula I pueden tener diferentes isómeros. Por ejemplo, cualquier átomo de carbono asimétrico puede estar presente en la configuración (R), (S) o (R,S), preferiblemente en la configuración (R) sustituyentes en un doble enlace o especialmente en un anillo pueden estar presentes en forma cis (= Z) o trans (=

E). Los compuestos, por tanto, pueden estar presentes como mezclas de isómeros o preferiblemente como isómeros puros, preferiblemente como diastereoisómeros puros o enantiómeros puros.

Cuando se usa la forma plural (por ejemplo, compuestos, sales), esta incluye el singular (por ejemplo, un compuesto individual, una sal individual). "Un compuesto" no excluye que esté presente (por ejemplo, en una formulación farmacéutica) más de un compuesto de fórmula I (o una sal del mismo), representando el "un" o "una" simplemente el artículo indefinido. "Un(a)" puede interpretarse, por tanto, preferiblemente como "uno(a) o más", menos preferiblemente de forma alternativa como "uno(a)".

La presente invención también incluye todas las variaciones isotópicas adecuadas de los compuestos de la invención, o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos. Una variación isotópica de un compuesto de la invención o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo se define como una en que al menos un átomo se remplaza por un átomo que tiene el mismo número atómico, pero una masa atómica diferente de la masa atómica que suele encontrarse en la naturaleza. Ejemplos de isótopos que pueden incorporarse en los compuestos de la invención y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos incluyen, aunque sin limitación, isótopos de hidrógeno, carbono, nitrógeno y oxígeno tales como ²H, ³H, ¹¹C, ¹³C, ¹⁴C, ¹⁵N, ¹⁷O, ¹⁸O, ³⁵S, ¹⁸F, ³⁶Cl y ¹²³I. isotópicas de los compuestos de la invención y sales farmacéuticamente aceptables de los mismos, por ejemplo, aquellas en que se incorpora un isótopo radioactivo tal como ³H o ¹⁴C son útiles en los estudios de distribución en los tejidos del fármaco y/o el sustrato. En ejemplos particulares, se pueden usar los isótopos ³H y ¹⁴C por su facilidad de preparación y detectabilidad. En otros ejemplos, la sustitución con isótopos tales como ²H puede ofrecer determinadas ventajas terapéuticas que son el resultado de una mayor estabilidad metabólica, tal como el aumento de la semivida in vivo o la reducción de las necesidades de dosificación. Generalmente se pueden preparar variaciones isotópicas de los compuestos de la invención o sales farmacéuticamente aceptables de los mismos mediante procedimientos convencionales usando variaciones isotópicas apropiadas de reactivos adecuados.

Descripción de realizaciones preferidas

La presente invención se refiere a compuestos que pueden inhibir la actividad de SHP2. En un aspecto de la invención, con respecto a compuestos de fórmula I, son compuestos de fórmula la:

en que: X3 se selecciona de S; Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y c R8; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi

C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C^1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de N y CR9; en

el que Rg se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi; Ri se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido; R2 se selecciona de hidrógeno y cloro; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R10 es amino; y Ruc se selecciona de hidrógeno y alquilo C1-3; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En un aspecto adicional de la invención: Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, halo y amino; Y2 se selecciona de N y CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2, ciclopropilo, ciclopentilo, ciclopentilmetoxi, alcoxi C1-2 halosustituido, fenilo, metoxietoxi, tetrahidro-2H-piran-4-ilo, fenoxi y benzoxi; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alcoxi C1-2, ciclopropilo, trifluorometilo, trifluorometilsulfanilo, isopropilo e hidroxi; R1 se selecciona de hidrógeno, halo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo C1-2 y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno, fluoro y cloro; R⁴a es hidrógeno; R⁶b es hidrógeno; R10 es amino; y Ruc se selecciona de hidrógeno, metilo y etilo; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En un aspecto adicional de la invención son compuestos, o una sal farmacéuticamente aceptable de los mismos, seleccionados de:

en que: X3 se selecciona de un enlace; Yi es CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, cloro y fluoro; Y2 es CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C^1-3-alcoxi C1-3, arilo C⁶y aril C⁶-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro y metilo; R1 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro; R2 se selecciona de hidrógeno; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R10 es amino; y Ruc se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula Ib:

en que: X3 se selecciona de S; Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y c R8; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C^1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi; R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido y alcoxi C1-2 halosustituido; R2 se selecciona de hidrógeno y halo; R³a se selecciona de hidrógeno y metilo; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁵b se selecciona de alquilo C1-6; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En un aspecto adicional de la invención: Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, halo y amino; Y2 se selecciona de N y CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, ciano, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 y alcoxi C1-2 halosustituido; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alcoxi C1-2 e hidroxi; R1 se selecciona de halo, trifluorometilo, trifluorometoxi, alquilo C1-2, nitro, hidroxi y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno, fluoro y cloro; R³a se selecciona de hidrógeno y metilo; R⁴a es hidrógeno; R⁶b es hidrógeno; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula Ib:

en que: X3 se selecciona de un enlace; Y 1 es CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, cloro y fluoro; Y2 es CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C^1-3-alcoxi C1-3, arilo C⁶y aril C⁶-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro y metilo; R1 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro; R2 se selecciona de hidrógeno; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R ⁵b se selecciona de alquilo Ci-a; R ⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula Ic:

en que: X1 se selecciona de N y CH; X3 se selecciona de S; Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y C R ⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C ^3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C ^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C ^1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi; R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido; R2 se selecciona de hidrógeno y halo; R³a se selecciona de hidrógeno y metilo; R³b se selecciona de hidrógeno y metilo; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁵b se selecciona de alquilo C ^ ; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro.

En un aspecto adicional de la invención son compuestos en que: Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, halo y amino; Y2 se selecciona de N y C R ⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, ciano, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 y alcoxi C1-2 halosustituido; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alcoxi C1-2 e hidroxi; R1 se selecciona de halo, trifluorometilo, alquilo C1-2 y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno, fluoro y cloro; R3 se selecciona de hidrógeno y metilo; R⁴a es hidrógeno; R⁶b es hidrógeno; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

en que: X i se selecciona de N y CH; X3 se selecciona de S; Y i se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C^1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C^1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi; R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 halosustituido y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno y halo; R³a se selecciona de hidrógeno, metilo y alquilo C1-2 halosustituido; R³b se selecciona de hidrógeno, metilo y amino; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R10 es amino; Rua se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo; Rub se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; con la condición de que Rua y Rub no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; R12 se selecciona de hidrogeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3; R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; R14 se selecciona de hidrógeno y fluoro; R15 se selecciona de hidrógeno y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

En otro aspecto de la invención son compuestos de fórmula Id:

en que: X1 se selecciona de N y CH; X3 se selecciona de un enlace; Y1 es CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, cloro y fluoro; Y2 es CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil Ci-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi Ci-3-alcoxi C1-3, arilo C⁶y aril C⁶-alcoxi C0-1; Y3 se selecciona de CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro y metilo; Ri se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro; R2 se selecciona de hidrógeno; R³a se selecciona de metilo; R³b se selecciona de amino; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R10 es amino; Riia se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo; Riib se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; con la condición de que Riia y Riib no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; Ri2 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo Ci-3, alquilo Ci-3 halosustituido, alcoxi Ci-3 halosustituido y alcoxi Ci ^-3; Ri ³se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo Ci ^-3; con la condición de que Ri2 y Ri ³no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; Ri ⁴se selecciona de hidrógeno y fluoro; Ri ⁵se selecciona de hidrógeno y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

en que: X i se selecciona de N y CH; Y i se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, halo y amino; Y2 se selecciona de N y CR⁸; en el que R⁸se selecciona de hidrógeno, halo, amino, ciano, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 y alcoxi C1-3 halosustituido; Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alcoxi C1-3 e hidroxi; R1 se selecciona de halo, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 halosustituido, alquilo C1-2 y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno y halo; R³a se selecciona de hidrógeno y metilo; R³b se selecciona de hidrógeno y metilo; R⁴a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R⁶b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R10 es amino; Rua se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo; Rub se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; Ruc se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo; R12 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3; R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

La fosfatasa de homología a Src de tipo 2 (SHP2) es una proteína tirosina fosfatasa codificada por el gen PTPN11 que participa en múltiples funciones celulares incluyendo la proliferación, diferenciación, mantenimiento del ciclo celular y migración. SHP2 está implicada en la señalización a través de las rutas de Ras-cinasa de proteína activada por mitógenos, JAK-STAT o fosfoinositol 3-cinasa-AKT. SHP2 media la activación de las MAP cinasas Erk1 y Erk2 (Erk1/2, Erk) mediante tirosinacinasas receptoras tales como ErbBI, ErbB2 y c-Met.

SHP2 tiene dos dominios de homología a Src de tipo 2 en el extremo N (N-SH2 y C-SH2), un dominio catalítico (PTP) y una cola en el extremo C. Los dos dominios s H2 controlan la localización subcelular y la regulación funcional de SHP2. La molécula existe en una conformación inactiva, que inhibe su propia actividad mediante una red de unión que implica restos de ambos dominios N-SH2 y PTP. En respuesta a la estimulación por el factor de crecimiento, SHP2 se une a sitios de tirosina fosforilada específicos en proteínas de acoplamiento tales como Gab1 y Gab2 a través de sus dominios SH2. Esto induce un cambio conformacional que provoca la activación de SHP2.

Se han identificado mutaciones en PTPN11 en varias enfermedades humanas, tales como el síndrome de Noonan, síndrome Leopard, leucemias mielomonocíticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda y cánceres de mama, pulmón y colon. SHP2 es una molécula de señalización posterior importante para una diversidad de tirosina cinasas receptoras, incluyendo los receptores del factor de crecimiento derivado de plaquetas (PDGF-R), factor de crecimiento de fibroblastos (FGF-R) y factor de crecimiento epidérmico (EGF-R). SHP2 también es una molécula de señalización posterior importante para la activación de la ruta de la cinasa de proteína activada por mitógenos (MAP) que puede dar lugar a transformación celular, un requisito previo para el desarrollo de cáncer. La atenuación de SHP2 inhibía significativamente el crecimiento celular de líneas celulares de cáncer de pulmón con mutación de SHP2 o traslocaciones de EML4/ALK, así como cánceres esofágicos y cánceres de mama con EGFR amplificado. SHP2 también se activa con posterioridad a oncogenes en el carcinoma gástrico, linfoma de células grandes anaplásico y glioblastoma.

Síndrome de Noonan (NS, por sus siglas en inglés) y síndrome Leopard (LS, por sus siglas en inglés) - Las mutaciones de PTPN11 causan LS (múltiples lentigos, anomalías en la conducción electrocardiográfica, hipertelorismo ocular, estenosis pulmonar, anomalías genitales, retraso del crecimiento, hipoacusia neurosensorial) y NS (anomalías congénitas que incluyen cardiopatías, anomalías craneofaciales y talla baja). Ambos trastornos forman parte de una familia de síndromes autosómicos dominantes causados por mutaciones en la línea germinal en componentes de la vía de la cinasa de proteína activada por mitógenos RAS/RAF/MEK/ERK, necesarios para un crecimiento y diferenciación normales de las células. La regulación anómala de esta ruta tiene efectos importantes, particularmente en el desarrollo cardiaco, que dan como resultado diversas anomalías, que incluyen defectos valvuloseptales y/o cardiomiopatía hipertrófica (HCM, por sus siglas en inglés). Se ha determinado que las perturbaciones de la ruta de señalización de MAPK son esenciales para estos trastornos y en los seres humanos se han identificado varios genes candidatos a lo largo de esta ruta que incluyen mutaciones en KRAS, NRAS, SOS1, RAF1, BRAF, MEK1, MEK2, SHOC2 y CBL. El gen mutado con mayor frecuencia en NS y LS es PTPN11. Se encuentran mutaciones de la línea germinal en PTPN11 (SHP2) en ~50 % de los casos con NS y casi todos los pacientes con LS que comparten determinadas características con NS. Para NS, las sustituciones Y62D e Y63C en la proteína son en gran medida invariables y se encuentran entre las mutaciones más habituales. Estas dos mutaciones afectan a la conformación catalíticamente inactiva de SHP2 sin perturbar la unión de la fosfatasa a sus compañeros de señalización fosforilados.

Leucemias mielomonocíticas juveniles (JMML, por sus siglas en inglés) - se producen mutaciones somáticas en PTPN11 (SHP2) en aproximadamente un 35 % de los pacientes con JMML, un trastorno mieloproliferativo infantil (MPD, por sus siglas en inglés). Estas mutaciones de ganancia funcional son normalmente mutaciones puntuales en el dominio N-SH2 o en el dominio de fosfatasa, que evitan la autoinhibición entre el dominio catalítico y el dominio N-SH2, lo que provoca la actividad de SHP2.

Leucemia mieloide aguada - Se han identificado mutaciones de PTPN11 en: ~10 % de leucemias agudas pediátricas, tal como síndrome mielodisplásico (MDS); ~7 % de leucemia linfoblástica aguda de linfocitos B (B-ALL); y ~4 % de leucemia mieloide aguda (AML).

Las mutaciones de NS y leucemia causan cambios en aminoácidos ubicados en la superficie de contacto formada por los dominios N-SH2 y PTP en la conformación de SHP2 autoinhibida, alterando la interacción intramolecular inhibidora, que da lugar a hiperactividad del dominio catalítico.

SHP2 actúa como regulador positivo en la señalización de tirosina cinasa receptora (RTK). Los cánceres que contienen alteraciones de RTK (EGFRamp, Her2amp, FGFRamp, Metamp, RTK traslocada/activada, es decir ALK, BCR/Ab L) incluyen cáncer esofágico, de mama, pulmonar, de colon, gástrico, glioma, de cabeza y cuello.

El cáncer esofágico (o cáncer de esófago) es una neoplasia maligna del esófago. Hay varios subtipos, principalmente el cáncer escamocelular (<50 %) y el adenocarcinoma. Hay una alta tasa de expresión de RTK en el adenocarcinoma esofágico y el cáncer escamocelular. Un inhibidor de SHP2 de la invención se puede emplear, por lo tanto, para estrategias de tratamiento innovadoras.

El cáncer de mama es uno de los principales tipos de cáncer y una de las principales causas de muerte en mujeres, donde las pacientes desarrollan resistencia a los fármacos actuales. Hay cuatro subtipos principales de cánceres de mama incluyendo luminal A, luminal B, de tipo Her2 y triple negativo/de tipo basal. El cáncer de mama triple negativo (TNBC) es un cáncer de mama agresivo que carece de tratamiento dirigido específico. El receptor I del factor de crecimiento epidérmico (EGFR) ha surgido como diana prometedora en TNBC. La inhibición de Her2, así como EGFR mediante SHP2 puede ser un tratamiento prometedor en cáncer de mama.

En el cáncer pulmonar, NSCLC actualmente es una causa principal de mortalidad relacionada con cáncer, representando aproximadamente un 85 % de los cánceres pulmonares (predominantemente adenocarcinomas y carcinomas escamocelulares). Aunque la quimioterapia citotóxica sigue siendo una parte importante del tratamiento, las terapias dirigidas basadas en alteraciones genéticas tales como EGFR y ALK en el tumor tienen mayor probabilidad de beneficiarse de un tratamiento dirigido.

Cáncer de colon - se sabe que de aproximadamente un 30 % a un 50 % de los tumores colorrectales tienen KRAS mutado (anómalo), y se producen mutaciones de BRAF en un 10 a un 15 % de los cánceres colorrectales. Para un subconjunto de pacientes en cuyos tumores colorrectales se ha demostrado que sobreexpresan EGFR, estos pacientes muestran una respuesta clínica favorable a tratamiento anti-EGFR.

El cáncer gástrico es uno de los tipos de cáncer más frecuentes. En la técnica hay constancia de la expresión anómala de tirosinacinasas, tal como refleja la fosforilación anómala de tirosina en células de cáncer gástrico. Tres tirosinacinasas receptoras, c-met (receptor de HGF), el receptor 2 de FGF y erbB2/neu se amplifican frecuentemente en los carcinomas gástricos. Por tanto, la subversión de diferentes rutas de señalización puede contribuir a la evolución de diferentes tipos de cánceres gástricos.

El neuroblastoma es un tumor pediátrico del sistema nervioso simpático en desarrollo, que representa aproximadamente el 8 % de los cánceres infantiles. Se ha propuesto que las alteraciones genómicas del gen de la cinasa de linfoma anaplásico (ALK) contribuyen a la patogenia del neuroblastoma.

Carcinoma escamocelular de cabeza y cuello (SCCHN). Altos niveles de expresión de EGFR están correlacionados con un mal pronóstico y resistencia a radioterapia en una diversidad de cánceres, principalmente en carcinoma escamocelular de cabeza y cuello (SCCHN). El bloqueo de la señalización de EGFR provoca la inhibición de la estimulación del receptor, la proliferación celular y una reducción de la agresividad y las metástasis. El EGFR es, por lo tanto, una diana principal para una nueva terapia antineoplásica en SCCHN.

La presente invención se refiere a compuestos que pueden inhibir la actividad de SHP2. La invención proporciona además un proceso para la preparación de compuestos de la invención y preparados farmacéuticos que comprenden tales compuestos. Otro aspecto de la presente invención se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de trastornos mediados por SHP2, que comprende la etapa de administrar a un paciente que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I como se define en el sumario de la invención.

Dichos trastornos mediados por SHP2 son cánceres seleccionados de, aunque sin limitación: JMML; AML; MDS; B-ALL; neuroblastoma; cáncer esofágico; cáncer de mama; cáncer pulmonar; cáncer de colon; cáncer gástrico, cáncer de cabeza y cuello.

Los compuestos de la presente invención también pueden ser útiles en el tratamiento de otras enfermedades o afecciones relacionadas con la actividad anómala de SHP2. Por tanto, como aspecto adicional, la invención se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de un trastorno seleccionado de: NS; LS; JMML; AML; MDS; B-ALL; neuroblastoma; cáncer esofágico; cáncer de mama; cáncer pulmonar; cáncer de colon; cáncer gástrico; cáncer de cabeza y cuello.

Un inhibidor de SHP2 de la presente invención puede combinarse fructíferamente con otro compuesto farmacológicamente activo, o con dos o más compuestos farmacológicamente activos diferentes, particularmente en el tratamiento del cáncer. Por ejemplo, un compuesto de fórmula (I), o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, como se define anteriormente, puede administrarse simultáneamente, secuencialmente o por separado, en combinación con uno o más agentes seleccionados de quimioterápicos, por ejemplo, inhibidores de la mitosis tal como un taxano, un alcaloide de la vinca, paclitaxel, docetaxel, vincristina, vinblastina, vinorelbina o vinflunina y otros antineoplásicos, por ejemplo, cisplatino, 5-fluorouracilo o 5-fluoro-2-4(1H,3H)-pirimidindiona (5FU), flutamida o gemcitabina.

Dichas combinaciones pueden ofrecer ventajas significativas en tratamiento, incluyendo actividad sinérgica.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a los compuestos mencionados anteriormente para su uso en tratamiento, en el que dicho compuesto se administra por vía parenteral.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a los compuestos mencionados anteriormente para su uso en tratamiento, en el que dicho compuesto se administra por vía intramuscular, intravenosa, subcutánea, oral, pulmonar, intratecal, tópica o intranasal.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a los compuestos mencionados anteriormente para su uso en tratamiento, en el que dicho compuesto se administra de forma sistémica.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a los compuestos mencionados anteriormente para su uso en tratamiento, en el que dicho paciente es un mamífero.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a los compuestos mencionados anteriormente para su uso en tratamiento, en el que dicho paciente es un primate.

En determinadas realizaciones, la presente invención se refiere a los compuestos mencionados anteriormente para su uso en tratamiento, en el que dicho paciente es un ser humano.

En otro aspecto, la presente invención se refiere a compuestos para su uso en el tratamiento de trastornos mediados por SHP2, que comprende la etapa de: administrar a un paciente que lo necesita una cantidad terapéuticamente eficaz de un agente quimioterápico en combinación con una cantidad terapéuticamente eficaz de un compuesto de fórmula I como se define en el sumario de la invención.

Composiciones farmacéuticas

En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos descritos anteriormente, formulados conjuntamente con uno o más vehículos (aditivos) y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Como se describe en detalle a continuación, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden formular especialmente para su administración en forma sólida o líquida, incluidas las adaptadas para lo siguiente: (1) administración oral, por ejemplo, pociones (soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas), comprimidos, por ejemplo, los destinados a la absorción yugal, sublingual y sistémica, inyecciones intravenosas rápidas, polvos, gránulos, pastas para la aplicación en la lengua; (2) administración parenteral, por ejemplo, mediante inyección subcutánea, intramuscular, intravenosa o epidural como, por ejemplo, una solución o suspensión estéril, o formulación de liberación mantenida; (3) aplicación tópica, por ejemplo, como una crema, pomada o un parche de liberación controlada o espray aplicado a la piel; (4) por vía intravaginal o intrarrectal, por ejemplo, como un óvulo vaginal, crema o espuma; (5) por vía sublingual; (6) por vía ocular; (7) por vía transdérmica; (8) por vía nasal; (9) por vía pulmonar; o (10) por vía intratecal.

La frase "cantidad terapéuticamente eficaz", como se usa en este documento significa aquella cantidad de un compuesto, material o composición que comprende un compuesto de la presente invención que es eficaz para producir algún efecto terapéutico deseado en al menos una subpoblación de células en un animal con una relación riesgo/beneficio razonable aplicable a cualquier tratamiento médico.

La frase "farmacéuticamente aceptable" se emplea en este documento para referirse a aquellos compuestos, materiales, composiciones y/o formas farmacéuticas que son, según el juicio médico razonable, adecuados para su uso en contacto con los tejidos de los seres humanos y los animales sin provocar una excesiva toxicidad, irritación, respuesta alérgica u otro problema o complicación, y acordes con una relación riesgo/beneficio razonable.

La frase "vehículo farmacéuticamente aceptable", como se usa en este documento, significa un material, composición o vehículo farmacéuticamente aceptable, tal como un relleno, diluyente, excipiente, auxiliar de fabricación (por ejemplo, lubricante, talco, estearato de magnesio, calcio o cinc, o ácido esteárico) o material encapsulante disolvente líquido o sólido, que participa en el traslado o transporte del compuesto en cuestión desde un órgano o una parte del cuerpo a otro órgano o parte del cuerpo. Cada vehículo debe ser "aceptable" en el sentido de que sea compatible con los otros ingredientes de la formulación y no perjudicial para el paciente. Algunos ejemplos de materiales que pueden servir como vehículos farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) glúcidos, tales como lactosa, glucosa y sacarosa; (2) almidones, tales como almidón de maíz y almidón de patata; (3) celulosa y sus derivados, tales como carboximetilcelulosa de sodio, etilcelulosa y acetato de celulosa; (4) tragacanto en polvo; (5) malta; (6) gelatina; (7) talco; (8) excipientes, tales como manteca de cacao y ceras para supositorios; (9) aceites, tales como aceite de cacahuete, aceite de semilla de algodón, aceite de cártamo, aceite de sésamo, aceite de oliva, aceite de maíz y aceite de soja; (10) glicoles, tales como propilenglicol; (11) polioles, tales como glicerina, sorbitol, manitol y polietilenglicol; (12) ésteres, tales como oleato de etilo y laurato de etilo; (13) agar; (14) agentes tamponantes, tales como hidróxido de magnesio e hidróxido de aluminio; (15) ácido algínico; (16) agua apirógena; (17) solución salina isotónica; (18) solución de Ringer; (19) alcohol etílico; (20) soluciones de pH tamponado; (21) poliésteres, policarbonatos y/o polianhídridos; y (22) otras sustancias atóxicas compatibles empleadas en formulaciones farmacéuticas.

Como se expone anteriormente, determinadas realizaciones de los compuestos de la presente pueden contener un grupo funcional básico, tal como amino o alquilamino y, por tanto, pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con ácidos farmacéuticamente aceptables. A este respecto, el término "sales farmacéuticamente aceptables" se refiere a las sales de adición de ácidos inorgánicos y orgánicos, relativamente atóxicas de compuestos de la presente invención. Estas sales se pueden preparar in situ en el vehículo de administración o el proceso de fabricación de la forma farmacéutica, o bien por separado, haciendo reaccionar un compuesto purificado de la invención en su forma de base libre con un ácido orgánico o inorgánico adecuado, y aislando la sal formada de este modo durante la purificación posterior. Las sales representativas incluyen las sales de bromhidrato, clorhidrato, sulfato, bisulfato, fosfato, nitrato, acetato, valerato, oleato, palmitato, estearato, laurato, benzoato, lactato, fosfato, tosilato, citrato, maleato, fumarato, succinato, tartrato, naftilato, mesilato, glucoheptonato, lactobionato y laurilsulfonato, y similares. (Véase, por ejemplo, Berge et al. (1977) "Pharmaceutical Salts", J. Pharm. Sci. 66:1-19).

Las sales farmacéuticamente aceptables de los compuestos en cuestión incluyen las sales atóxicas convencionales o sales de amonio cuaternario de los compuestos, por ejemplo, de ácidos orgánicos o inorgánicos atóxicos. Por ejemplo, tales sales atóxicas convencionales incluyen aquellas derivadas de ácidos inorgánicos tales como clorhídrico, bromhídrico, sulfúrico, sulfámico, fosfórico, nítrico y similares; y las sales preparadas a partir de ácidos orgánicos tales como acético, propiónico, succínico, glicólico, esteárico, láctico, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, palmítico, maleico, hidroximaleico, fenilacético, glutámico, benzoico, salicílico, sulfanílico, 2-acetoxibenzoico, fumárico, toluenosulfónico, metanosulfónico, etanodisulfónico, oxálico, isotiónico y similares.

En otros casos, los compuestos de la presente invención pueden contener uno o más grupos funcionales ácidos y, por tanto, pueden formar sales farmacéuticamente aceptables con bases farmacéuticamente aceptables. El término "sales farmacéuticamente aceptables", en estos casos, se refiere a las sales de adición de bases inorgánicas y orgánicas relativamente atóxicas de compuestos de la presente invención. Estas sales se pueden preparar asimismo in situ en el vehículo de administración o el proceso de fabricación de la forma farmacéutica, o haciendo reaccionar por separado el compuesto purificado en su forma de ácido libre con una base adecuada, tal como el hidróxido, carbonato o bicarbonato de un catión metálico farmacéuticamente aceptable, con amoniaco, o con una amina primaria, secundaria o terciaria farmacéuticamente aceptable. Las sales de metales alcalinos o alcalinotérreos representativas incluyen las sales de litio, sodio, potasio, calcio, magnesio y aluminio, y similares. Las aminas orgánicas representativas útiles para la formación de sales de adición de base incluyen etilamina, dietilamina, etilendiamina, etanolamina, dietanolamina, piperazina y similares. (Véase, por ejemplo, Berge et al., supra)

También pueden estar presentes en las composiciones humectantes, emulsionantes y lubricantes, tales como laurilsulfato de sodio y estearato de magnesio, así como colorantes, agentes de liberación, agentes de recubrimiento, edulcorantes, saborizantes y aromatizantes, conservantes y antioxidantes.

Los ejemplos de antioxidantes farmacéuticamente aceptables incluyen: (1) antioxidantes hidrosolubles, tales como ácido ascórbico, clorhidrato de cisteína, bisulfato de sodio, metabisulfito de sodio, sulfito de sodio y similares; (2) antioxidantes liposolubles, tales como palmitato de ascorbilo, butilhidroxianisol (BHA), butilhidroxitolueno (BHT), lecitina, galato de propilo, alfa-tocoferol, y similares; y (3) quelantes de metales, tales como ácido cítrico, ácido etilendiaminatetraacético (EDTA), sorbitol, ácido tartárico, ácido fosfórico y similares.

Las formulaciones de la presente invención incluyen las adecuadas para la administración oral, nasal, tópica (que incluye yugal y sublingual), rectal, vaginal y/o parenteral. Las formulaciones se pueden presentar de forma conveniente en forma farmacéutica unitaria y se pueden preparar por cualesquiera métodos conocidos en la técnica farmacéutica. La cantidad de principio activo que se puede combinar con un material transportador para producir una forma farmacéutica individual variará dependiendo del hospedador que se esté tratando, el modo particular de administración. La cantidad de principio activo que se puede combinar con un material transportador para producir una forma farmacéutica individual será generalmente la cantidad del compuesto que produce un efecto terapéutico. Generalmente, de un cien por ciento, esta cantidad variará de aproximadamente un 0,1 por ciento a aproximadamente un noventa y nueve por ciento de principio activo, preferiblemente de aproximadamente un 5 por ciento a aproximadamente un 70 por ciento, con la mayor preferencia de aproximadamente un 10 por ciento a aproximadamente un 30 por ciento.

En determinadas realizaciones, una formulación de la presente invención contiene un excipiente seleccionado del grupo que consiste en ciclodextrinas, celulosas, liposomas, formadores de micelas, por ejemplo, ácidos biliares, y vehículos poliméricos, tales como poliésteres y polianhídridos; y un compuesto de la presente invención. En determinadas realizaciones, una formulación mencionada anteriormente hace que un compuesto de la presente invención esté biodisponible por vía oral.

Los métodos de preparación de estas formulaciones o composiciones incluyen la etapa de asociar un compuesto de la presente invención con el vehículo y, opcionalmente, uno o más ingredientes accesorios. En general, las formulaciones se preparan asociando uniforme e íntimamente un compuesto de la presente invención con vehículo líquidos, o vehículos sólidos finamente divididos, o ambos, y entonces, en caso necesario, dando forma al producto.

Las formulaciones de la invención adecuadas para la administración oral pueden estar en forma de cápsulas, sellos, píldoras, comprimidos, pastillas para chupar (usando una base con sabor, generalmente sacarosa y goma arábiga o tragacanto), polvos, granulados, o como una solución o una suspensión en un líquido acuoso o no acuoso, o como una emulsión de aceite en agua o de agua en aceite, o como un elixir o jarabe, o como pastillas (usando una base inerte, tal como gelatina y glicerina, o sacarosa y goma arábiga) y/o como enjuagues bucales, y similares, conteniendo, cada una, una cantidad predeterminada de un compuesto de la presente invención como principio activo. Un compuesto de la presente invención también se puede administrar como una inyección intravenosa rápida, electuario o pasta.

En las formas farmacéuticas sólidas de la invención para la administración oral (cápsulas, comprimidos, píldoras, grageas, polvos, gránulos, trociscos y similares), el principio activo se mezcla con uno o más vehículos farmacéuticamente aceptables, tales como citrato de sodio o fosfato dicálcico, y/o cualquiera de los siguientes: (1) rellenos o expansores, tales como almidones, lactosa, sacarosa, glucosa, manitol y/o ácido silícico; (2) aglutinantes, tales como, por ejemplo, carboximetilcelulosa, alginatos, gelatina, polivinilpirrolidona, sacarosa y/o goma arábiga; (3) humectantes, tales como glicerol; (4) agentes disgregantes, tales como agar-agar, carbonato de calcio, almidón de patata o tapioca, ácido algínico, ciertos silicatos y carbonato de sodio; (5) agentes retardantes de la disolución, tales como parafina; (6) aceleradores de la absorción, tales como compuestos de amonio cuaternario y tensioactivos, tales como poloxámero y laurilsulfato de sodio; (7) agentes humectantes, tales como, por ejemplo, alcohol cetílico, monoestearato de glicerol y tensioactivos no iónicos; (8) absorbentes, tales como caolín y arcilla bentonítica; (9) lubricantes, tales como talco, estearato de calcio, estearato de magnesio, polietilenglicoles sólidos, laurilsulfato de sodio, estearato de cinc, estearato de sodio, ácido esteárico y mezclas de los mismos; (10) agentes colorantes; y (11) agentes de liberación controlada tales como crospovidona o etilcelulosa. En el caso de las cápsulas, los comprimidos y las píldoras, las composiciones farmacéuticas también pueden comprender agentes tamponantes. También se pueden emplear composiciones sólidas de un tipo similar como rellenos en cápsulas con cubierta de gelatina blanda y dura usando excipientes tales como lactosa o azúcares de la leche, así como polietilenglicoles de alto peso molecular y similares.

Un comprimido se puede fabricar por compresión o moldeo, opcionalmente con uno o más ingredientes accesorios. Los comprimidos fabricados por compresión se pueden preparar usando aglutinante (por ejemplo, gelatina o hidroxipropilmetilcelulosa), lubricante, diluyente inerte, conservante, disgregante (por ejemplo, glicolato de almidón sódico o carboximetilcelulosa sódica reticulada), tensioactivo o dispersante. Los comprimidos moldeados se pueden fabricar moldeando en una máquina adecuada una mezcla del compuesto en polvo humedecido con un diluyente líquido inerte.

Los comprimidos y otras formas farmacéuticas sólidas de las composiciones farmacéuticas de la presente invención, tales como grageas, cápsulas, píldoras y granulados, opcionalmente, se pueden ranurar o preparar con recubrimientos y cubiertas, tales como recubrimientos entéricos y otros recubrimientos bien conocidos en el área de la formulación farmacéutica. También se pueden formular de modo que proporcionen una liberación lenta o controlada de su principio activo usando, por ejemplo, hidroxipropilmetilcelulosa en proporciones variables para proporcionar el perfil de liberación deseado, otras matrices poliméricas, liposomas y/o microesferas. Se pueden formular para la liberación rápida, por ejemplo, liofilizadas. Se pueden esterilizar, por ejemplo, por filtración a través de un filtro que retenga bacterias, o incorporando agentes esterilizantes en forma de composiciones sólidas estériles que se pueden disolver en agua estéril o algún otro medio inyectable estéril justo antes de su uso. Estas composiciones también pueden contener opcionalmente agentes opacificantes y pueden tener una composición tal que liberen el principio o principios activos únicamente, o preferiblemente, en una parte determinada del tubo gastrointestinal, opcionalmente, de una forma retardada. Ejemplos de composiciones de inclusión que se pueden usar comprenden sustancias poliméricas y ceras. El principio activo también puede estar en forma microencapsulada, si procede, con uno o más de los excipientes descritos anteriormente.

Las formas farmacéuticas líquidas para la administración oral de los compuestos de la invención incluyen emulsiones, microemulsiones, soluciones, suspensiones, jarabes y elixires farmacéuticamente aceptables. Además del principio activo, las formas farmacéuticas líquidas pueden contener diluyentes inertes usados habitualmente en la técnica, tales como, por ejemplo, agua u otros disolventes, agentes solubilizantes y emulsionantes, tales como alcohol etílico, alcohol isopropílico, carbonato de etilo, acetato de etilo, alcohol bencílico, benzoato de bencilo, propilenglicol, 1,3-butilenglicol, aceites (en particular, aceites de semilla de algodón, cacahuete, maíz, germen de trigo, oliva, ricino y sésamo), glicerol, alcohol tetrahidrofurílico, polietilenglicoles y ésteres de ácidos grasos de sorbitán, y mezclas de los mismos.

Aparte de diluyentes inertes, las composiciones orales también pueden incluir adyuvantes tales como agentes humectantes, agentes emulsionantes y de suspensión, agentes edulcorantes, saborizantes, colorantes, aromatizantes y conservantes.

Las suspensiones, además de los compuestos activos, pueden contener agentes de suspensión como, por ejemplo, alcoholes isoestearílicos etoxilados, ésteres polioxietilenados de sorbitol y sorbitán, celulosa microcristalina, metahidróxido de aluminio, bentonita, agar-agar y tragacanto, y mezclas de los mismos.

Las formulaciones de las composiciones farmacéuticas de la invención para administración rectal o vaginal se pueden presentar como un supositorio u óvulo vaginal, que se puede preparar mezclando uno o más compuestos de la invención con uno o más excipientes o vehículos no irritantes adecuados que comprenden, por ejemplo, manteca de cacao, polietilenglicol, una cera para supositorios o un salicilato y, que sea sólido a temperatura ambiente, pero líquido a la temperatura corporal y, por lo tanto, se fundirá en el recto o la cavidad vaginal y liberará el compuesto activo.

Las formulaciones de la presente invención que son adecuadas para la administración vaginal también incluyen óvulos vaginales, tampones, cremas, geles, pastas, espumas o formulaciones en espray que contienen vehículos tales como los que se sabe en la técnica que son apropiados.

Las formas farmacéuticas para la administración tópica o transdérmica de un compuesto de esta invención incluyen polvos, espráis, pomadas, pastas, cremas, lociones, geles, disoluciones, parches e inhalantes. El compuesto activo se puede mezclar en condiciones estériles con un vehículo farmacéuticamente aceptable y con cualesquiera conservantes, tampones o propulsores que se puedan requerir.

Las pomadas, pastas, cremas y geles pueden contener, además de un compuesto activo de esta invención, excipientes, tales como grasas animales y vegetales, aceites, ceras, parafinas, almidón, tragacanto, derivados de celulosa, polietilenglicoles, siliconas, bentonitas, ácido silícico, talco y óxido de cinc, o mezclas de los mismos.

Los polvos y espráis pueden contener, además de un compuesto de esta invención, excipientes tales como lactosa, talco, ácido silícico, hidróxido de aluminio, silicatos de calcio y polvo de poliamida, o mezclas de estas sustancias. Los espráis pueden contener adicionalmente propulsores habituales, tales como clorofluorohidrocarburos e hidrocarburos volátiles no sustituidos, tales como butano y propano.

Los parches transdérmicos tienen la ventaja añadida de proporcionar un suministro controlado de un compuesto de la presente invención al cuerpo. Tales formas farmacéuticas se pueden preparar disolviendo o dispersando el compuesto en el medio apropiado. También se pueden usar potenciadores de la absorción para aumentar el flujo del compuesto a través de la piel. La velocidad de tal flujo se puede controlar ya sea proporcionando una membrana que controle la velocidad o dispersando el compuesto en una matriz polimérica o gel.

También se contemplan dentro del alcance de esta invención formulaciones oftálmicas, soluciones, polvos, pomadas oftálmicas y similares.

Las composiciones farmacéuticas de esta invención adecuadas para la administración parenteral comprenden uno o más compuestos de la invención en combinación con una o más soluciones, dispersiones, suspensiones o emulsiones estériles, isotónicas, acuosas o no acuosas, farmacéuticamente aceptables, o polvos estériles que se pueden reconstituir en soluciones o dispersiones inyectables estériles justo antes de su uso, que pueden contener glúcidos, alcoholes, antioxidantes, tampones, bacteriostáticos, solutos que hacen que la formulación sea isotónica con la sangre del destinatario, o agentes de suspensión o espesantes.

Los ejemplos de vehículos acuosos y no acuosos adecuados que se pueden emplear en las composiciones farmacéuticas de la invención incluyen agua, etanol, polioles (tales como glicerol, propilenglicol, polietilenglicol y similares) y mezclas adecuadas de los mismos, aceites vegetales, tales como aceite de oliva, y ésteres orgánicos inyectables, tales como oleato de etilo. Se puede mantener una fluidez apropiada, por ejemplo, mediante el uso de materiales de recubrimiento, tales como lecitina, mediante el mantenimiento del tamaño de partícula requerido en el caso de dispersiones y mediante el uso de tensioactivos.

Estas composiciones también pueden contener adyuvantes tales como conservantes, agentes humectantes, agentes emulsionantes y agentes dispersantes. La prevención de la acción de microorganismos sobre los compuestos en cuestión se puede asegurar mediante la inclusión de diversos agentes antibacterianos y antifúngicos, por ejemplo, parabeno, clorobutanol, fenol ácido sórbico y similares. También puede ser deseable incluir en las composiciones agentes isotónicos, tales como glúcidos, cloruro de sodio y similares. Además, la absorción prolongada de la forma farmacéutica inyectable se puede lograr mediante la inclusión de agentes que retarden la absorción, tales como monoestearato de aluminio y gelatina.

En algunos casos, con el fin de prolongar el efecto de un fármaco, es deseable ralentizar la absorción del fármaco a partir de la inyección subcutánea o intramuscular. Esto se puede lograr mediante el uso de una suspensión líquida de material cristalino o amorfo que tenga baja solubilidad en agua. La velocidad de absorción del fármaco depende entonces de su velocidad de disolución que, a su vez, puede depender del tamaño del cristal y la forma cristalina. Como alternativa, la absorción retardada de un fármaco administrado por vía parenteral se consigue disolviendo o suspendiendo el fármaco en un vehículo oleoso.

Las formas inyectables de liberación lenta se preparan formando matrices de microencapsulación de los compuestos en cuestión en polímeros biodegradables tales como poliláctido-poliglicólido. Dependiendo de la relación de fármaco respecto a polímero, y la naturaleza del polímero particular empleado, se puede controlar la velocidad de liberación del fármaco. Ejemplos de otros polímeros biodegradables incluyen poli(ortoésteres) y poli(anhídridos). También se preparan formulaciones inyectables de liberación lenta por atrapamiento del fármaco en liposomas o microemulsiones que son compatibles con el tejido corporal.

Cuando los compuestos de la presente invención se administran como productos farmacéuticos, a los seres humanos y los animales, estos se pueden administrar per se o como una composición farmacéutica que contenga, por ejemplo, de un 0,1 a un 99 % (más preferiblemente, de un 10 a un 30 %) de principio activo en combinación con un vehículo farmacéuticamente aceptable.

Los preparados de la presente invención se pueden administrar por vía oral, parenteral, tópica o rectal. Se administran, evidentemente, en formas adecuadas para cada vía de administración. Por ejemplo, se administran en forma de cápsulas o comprimidos, por inyección, inhalación, colirio, pomada, supositorio, etc., administración por inyección, infusión o inhalación; tópica mediante una loción o pomada; y rectal mediante supositorios. Se prefieren las administraciones orales.

Las frases "administración parenteral" y "administrado por vía parenteral", como se usan en este documento, significan modos de administración distintos de la administración enteral y tópica, habitualmente por inyección e incluye, sin limitación, la inyección e infusión intravenosa, intramuscular, intraarterial, intratecal, intracapsular, intraorbitaria, intracardiaca, intradérmica, intraperitoneal, transtraqueal, subcutánea, subcuticular, intraarticular, subcapsular, subaracnoidea, intrarraquídea e intraesternal.

Las frases "administración sistémica", "administrado por vía sistémica", "administración periférica" y "administrado periféricamente", como se usan en este documento, significan la administración de un compuesto, fármaco u otro material que no sea directamente en el sistema nervioso central, de modo que entra en el sistema del paciente y, por tanto, está sujeto al metabolismo y otros procesos similares, por ejemplo, la administración subcutánea.

Estos compuestos se pueden administrar a los seres humanos y otros animales para su terapia por cualquier vía de administración adecuada, que incluye por vía oral, nasal, como mediante, por ejemplo, un espray, por vía rectal, intravaginal, parenteral, intracisternal y tópica, como mediante polvos, pomadas o gotas, que incluye por vía yugal y sublingual.

Independientemente de la vía de administración seleccionada, los compuestos de la presente invención, que se pueden usar en una forma hidratada adecuada, y/o las composiciones farmacéuticas de la presente invención, se formulan en formas farmacéuticas farmacéuticamente aceptables por métodos convencionales conocidos por los expertos en la materia.

Los niveles de dosificación reales de los principios activos en las composiciones farmacéuticas de esta invención pueden variarse para obtener una cantidad del principio activo que sea eficaz para conseguir la respuesta terapéutica deseada para un paciente, composición y modo de administración particulares, sin que sean tóxicos para el paciente.

El nivel de dosificación seleccionado dependerá de una diversidad de factores que incluyen la actividad del compuesto particular de la presente invención empleado, o su éster, sal o amida, la vía de administración, el momento de administración, la velocidad de excreción o el metabolismo del compuesto particular que se esté empleando, la velocidad y el grado de absorción, la duración del tratamiento, otros fármacos, compuestos y/o materiales usados en combinación con el compuesto particular empleado, la edad, el sexo, el peso, la afección, el estado general de salud y los antecedentes médicos del paciente que se esté tratando, y factores similares muy conocidos en los campos médicos.

Un médico o veterinario con experiencia en el técnica puede determinar fácilmente y prescribir la cantidad eficaz de la composición farmacéutica necesaria. Por ejemplo, el médico o el veterinario podría comenzar con dosis de los compuestos de la invención empleados en la composición farmacéutica en niveles menores que los necesarios para conseguir el efecto terapéutico deseado y aumentar la dosificación gradualmente hasta que se consiga el efecto deseado.

En general, una dosis diaria adecuada de un compuesto de la invención será la cantidad del compuesto que sea la dosis más baja eficaz para producir un efecto terapéutico. Una dosis eficaz de este tipo generalmente dependerá de los factores descritos anteriormente. Generalmente, las dosis oral, intravenosa, intracerebroventricular y subcutánea de los compuestos de esta invención para un paciente, cuando se usan para los efectos analgésicos indicados, variarán de aproximadamente 0,0001 a aproximadamente 100 mg por kilogramo de peso corporal al día.

Si se desea, la dosis diaria eficaz del compuesto activo se puede administrar como dos, tres, cuatro, cinco, seis o más subdosis administradas por separado en intervalos apropiados a lo largo del día, opcionalmente, en formas farmacéuticas unitarias. La dosificación preferida es una administración al día.

Aunque es posible que un compuesto de la presente invención se administre en solitario, es preferible administrar el compuesto como una formulación (composición) farmacéutica.

Los compuestos de acuerdo con la invención se pueden formular para su administración de cualquier manera conveniente para su uso en seres humanos o medicina veterinaria, por analogía con otros productos farmacéuticos.

En otro aspecto, la presente invención proporciona composiciones farmacéuticamente aceptables que comprenden una cantidad terapéuticamente eficaz de uno o más de los compuestos en cuestión, como se describe anteriormente, formulados junto con uno o más vehículos (aditivos) y/o diluyentes farmacéuticamente aceptables. Como se describe en detalle a continuación, las composiciones farmacéuticas de la presente invención se pueden formular especialmente para su administración en forma sólida o líquida, incluidas las adaptadas para lo siguiente: (1) administración oral, por ejemplo, pócimas (soluciones o suspensiones acuosas o no acuosas), comprimidos, inyecciones intravenosas rápidas, polvos, granulados, pastas para la aplicación en la lengua; (2 ) administración parenteral, por ejemplo, mediante inyección subcutánea, intramuscular o intravenosa, por ejemplo, una solución o suspensión estéril; (3) aplicación tópica, por ejemplo, como una crema, pomada o espray aplicado a la piel, los pulmones o las membranas mucosas; o (4) por vía intravaginal o intrarrectal, por ejemplo, como un óvulo vaginal, crema o espuma; (5) por vía sublingual o yugal; (6 ) por vía ocular; (7) por vía transdérmica; o (8 ) por vía nasal.

Se pretende que el término "tratamiento" abarque también la profilaxis, terapia y cura.

El paciente que recibe este tratamiento es cualquier animal que lo necesite, que incluye primates, en particular seres humanos, y otros mamíferos tales como equinos, vacunos, porcinos y ovinos; y aves de corral y animales domésticos en general.

El compuesto de la invención se puede administrar tal cual o en mezclas con vehículos farmacéuticamente aceptables y también se puede administrar junto con agentes antimicrobianos tales como penicilinas, cefalosporinas, aminoglucósidos y glucopéptidos. La politerapia incluye, por tanto, la administración secuencial, simultánea y separada del compuesto activo de manera que los efectos terapéuticos del primer compuesto administrado no hayan desaparecido por completo cuando se administre el siguiente.

La tecnología de microemulsión puede mejorar la biodisponibilidad de algunos agentes farmacéuticos lipófilos (insolubles en agua). Ejemplos incluyen Trimetrine (Dordunoo, S. K., et al., Drug Development and Industrial Pharmacy, 17(12), 1685-1713, 1991 y REV 5901 (Sheen, P. C., et al., J Pharm Sci 80(7), 712-714, 1991). Entre otras cosas, la microemulsión proporciona una mayor biodisponibilidad preferiblemente dirigiendo la absorción al sistema linfático en lugar de al sistema circulatorio, lo que omite el paso por el hígado, y evita la destrucción de los compuestos en la circulación hepatobiliar.

Aunque todos los vehículos anfífilos adecuados están contemplados, los vehículos actualmente preferidos son en general aquellos que tienen el estado de generalmente reconocidos como seguros (GRAS), y que pueden tanto solubilizar el compuesto de la presente invención como microemulsionarlo en una fase posterior cuando la solución entra en contacto con una fase acuosa compleja (tal como una encontrada en el tubo gastrointestinal humano).

Generalmente, los ingredientes anfífilos que satisfacen estos requisitos tienen valores de HLB (equilibrio hidrófilolipófilo) de 2-20, y sus estructuras contienen radicales alifáticos de cadena lineal en el intervalo de C-6 a C-20. Son ejemplos los glicéridos grasos de polietileno glicolizado y los polietilenglicoles.

Se contemplan particularmente vehículos anfífilos disponibles en el mercado, incluyendo Labrafil Labrasol de la serie Gelucire, o Lauroglicol (todos fabricados y distribuidos por Gattefosse Corporation, Saint Priest, Francia), PEG-monooleato, PEG-dioleato, PEG-monolaurato y dilaurato, Lecitina, Polisorbato 80, etc. (producidos y distribuidos por varias empresas en EE. UU. y todo el mundo).

Son polímeros hidrófilos adecuados para su uso en la presente invención aquellos que son fácilmente solubles en agua, que pueden estar unidos covalentemente a lípidos formadores de vesículas, y que se toleran in vivo sin efectos tóxicos (es decir, son biocompatibles). Los polímeros adecuados incluyen polietilenglicol (PEG), ácido poliláctico (también denominado poliláctido), ácido poliglicólico (también denominado poliglicólido), un copolímero de ácido poliláctico-poliglicólico y poli(alcohol vinílico). Los polímeros preferidos son los que tienen un peso molecular de aproximadamente 100 o 120 dalton hasta aproximadamente 5000 o 10 000 dalton, y más preferiblemente de aproximadamente 300 dalton a aproximadamente 5000 dalton. En una realización particularmente preferida, el polímero es polietilenglicol que tiene un peso molecular de aproximadamente 100 a aproximadamente 5000 dalton, y más preferiblemente que tiene un peso molecular de aproximadamente 300 a aproximadamente 5000 dalton. En una realización particularmente preferida, el polímero es polietilenglicol de 750 dalton (PEG(750)). Los polímeros también se pueden definir por el número de monómeros que contienen; una realización preferida de la presente invención utiliza polímeros de al menos aproximadamente tres monómeros, consistiendo dichos polímeros de PEG en tres monómeros (aproximadamente 150 dalton).

Otros polímeros hidrófilos que pueden ser adecuados para su uso en la presente invención incluyen polivinilpirrolidona, polimetoxazolina, polietiloxazolina, polihidroxipropilmetacrilamida, polimetacrilamida, polidimetilacrilamida y celulosas derivatizadas tales como hidroximetilcelulosa o hidroxietilcelulosa.

En determinadas realizaciones, una formulación de la presente invención comprende un polímero biocompatible seleccionado del grupo que consiste en poliamidas, policarbonatos, polialquilenos, polímeros de ésteres acrílicos y metacrílicos, polímeros de polivinilo, poliglicólidos, polisiloxanos, poliuretanos y copolímeros de los mismos, celulosas, polipropileno, polietilenos, poliestireno, polímeros de ácido láctico y ácido glicólico, polianhídridos, poli(orto)ésteres, poli(ácido bútico), poli(ácido valérico), poli(láctido-co-caprolactona), polisacáridos, proteínas, poli(ácidos hialurónicos), policianoacrilatos, y combinaciones, mezclas o copolímeros de los mismos.

Las ciclodextrinas son oligosacáridos cíclicos, que consisten en 6 , 7 u 8 unidades de glucosa, designadas por la letra griega alfa, beta o gamma, respectivamente. Se desconoce la existencia de ciclodextrinas con menos de seis unidades de glucosa. Las unidades de glucosa están unidas por enlaces alfa-1,4-glucosídicos. Como consecuencia de la conformación en silla de las unidades glucídicas, todos los grupos hidroxilo secundarios (en C-2, C-3) están ubicados en un lado del anillo, mientras que todos los grupos hidroxilo primarios en C-6 están ubicados en el otro lado. Como resultado, las caras externas son hidrófilas, lo que hace que las ciclodextrinas sean solubles en agua. Por el contrario, las cavidades de las ciclodextrinas son hidrófobas, dado que están revestidas por el hidrógeno de los átomos C-3 y C-5, y por los oxígenos de tipo éter. Estas matrices permiten la formación de complejos con diversos compuestos relativamente hidrófobos que incluyen, por ejemplo, compuestos esteroideos tales como 17.beta-estradiol (véase, por ejemplo, van Uden et al., Plant Cell Tiss. Org. Cult. 38:1-3-113 (1994)). La formación de complejos tiene lugar por interacciones de Van der Waals y por la formación de enlaces de hidrógeno. Para una revisión general de la química de las ciclodextrinas, véase, Wenz, Angew. Chem. Int. Ed. Engl., 33:803-822 (1994).

Las propiedades fisicoquímicas de los derivados de ciclodextrina dependen en gran medida del tipo y el grado de sustitución. Por ejemplo, su solubilidad en agua varía de insoluble (por ejemplo, triacetil-beta-ciclodextrina) a un 147 % soluble (p/v) (G-2-beta-ciclodextrina). Además, son solubles en muchos disolventes orgánicos. Las propiedades de las ciclodextrinas permiten controlar la solubilidad de los distintos componentes de la formulación al aumentar o disminuir su solubilidad.

Se han descrito numerosas ciclodextrinas y métodos para su preparación. Por ejemplo, Parmeter (I), et al. (patente de Estados Unidos n.° 3453259) y Gramera, et al. (patente de Estados Unidos n.° 3459731) describieron ciclodextrinas electroneutras. Otros derivados incluyen ciclodextrinas con propiedades catiónicas [Parmeter (II), patente de Estados Unidos n.° 3453257], ciclodextrinas reticuladas insolubles (Solms, patente de Estados Unidos n.° 3420788), y ciclodextrinas con propiedades aniónicas [Parmeter (III), patente de Estados Unidos n.° 3426011]. Entre los derivados de ciclodextrina con propiedades aniónicas, se han agregado a la ciclodextrina precursora ácidos carboxílicos, ácidos fosforosos, ácidos fosfinosos, ácidos fosfónicos, ácidos fosfóricos, ácidos tiofosfónicos, ácidos tiosulfínicos y ácidos sulfónicos [véase, Parmeter (III), supra]. Además, se han descrito derivados de éter sulfoalquílico de ciclodextrina por Stella, et al. (patente de Estados Unidos n.° 5134127).

Los liposomas consisten en al menos una membrana de bicapa lipídica que encierra un compartimento interno acuoso. Los liposomas se pueden caracterizar por el tipo de membrana y por el tamaño. Las vesículas unilaminares pequeñas (SUV) tienen una única membrana y generalmente un diámetro que varía entre 0,02 y 0,05 |jm; las vesículas unilaminares grandes (LUVS) tienen un diámetro generalmente mayor de 0,05 jm . Las vesículas oligolaminares grandes y las vesículas multilaminares tienen múltiples capas de membrana, generalmente concéntricas, y habitualmente con un diámetro mayor de 0,1 jm . Los liposomas con varias membranas no concéntricas, es decir, varias vesículas más pequeñas contenidas dentro de una vesícula más grande, se denominan vesículas multivesiculares.

Son adecuadas formulaciones que comprenden liposomas que contienen un compuesto de la presente invención, donde la membrana del liposoma se formula para proporcionar un liposoma con capacidad de transporte aumentada. Como alternativa, o adicionalmente, el compuesto de la presente invención puede estar contenido o adsorbido en la bicapa liposómica del liposoma. El compuesto de la presente invención puede formar un agregado con un tensioactivo lipídico y ser transportado dentro del espacio interno del liposoma; en estos casos, la membrana liposómica está formulada para resistir los efectos perturbadores del agregado de principio activo-tensioactivo.

De acuerdo con una realización de la presente invención, la bicapa lipídica de un liposoma contiene lípidos derivatizados con polietilenglicol (PEG), de modo que las cadenas de PEG se extienden desde la superficie interna de la bicapa lipídica al espacio interior encapsulado por el liposoma y se extienden desde el exterior de la bicapa lipídica al entorno circundante.

Los principios activos contenidos dentro de los liposomas de la presente invención están en forma solubilizada. Los agregados de tensioactivo y principio activo (tales como emulsiones o micelas que contienen el principio activo de interés) pueden estar atrapados dentro del espacio interior de los liposomas de acuerdo con la presente invención. Un tensioactivo actúa dispersando y solubilizando el principio activo, y se puede seleccionar de cualquier tensioactivo alifático, cicloalifático o aromático adecuado incluyendo, aunque sin limitación, lisofosfatidilcolinas (LPC) biocompatibles de longitudes variables de cadena (por ejemplo, de aproximadamente C.sub.14 a aproximadamente C.sub.20). Los lípidos derivatizados con polímeros tales como los PEG-lípidos también se pueden utilizar para la formación de micelas puesto que actuarán inhibiendo la fusión de micela/membrana, y puesto que la adición de un polímero a moléculas de tensioactivo disminuye la CMC del tensioactivo y favorece la formación de micelas. Se prefieren tensioactivos con valores de CMC en el intervalo micromolar; tensioactivos de CMC mayor se pueden utilizar para preparar micelas atrapadas dentro de liposomas de la presente invención, sin embargo, los monómeros de tensioactivos micelares podrían afectar a la estabilidad de la bicapa liposómica y serían un factor al diseñar un liposoma de una estabilidad deseada.

Los liposomas se pueden preparar por cualquiera de una diversidad de técnicas que son conocidas en la técnica. Véanse, por ejemplo, la patente de Estados Unidos n.° 4235871; las solicitudes PCT publicadas WO 96/14057; New RRC, Liposomes: A practical approach, IRL Press, Oxford (1990), páginas 33-104; Lasic DD, Liposomes from physics to applications, Elsevier Science Publishers BV, Ámsterdam, 1993.

Por ejemplo, los liposomas se pueden preparar difundiendo un lípido derivatizado con un polímero hidrófilo en liposomas preformados, tal como exponiendo los liposomas preformados a micelas compuestas por polímeros injertados en lípidos, a las concentraciones de lípidos correspondientes al porcentaje molar final de los lípidos derivatizados que sea el deseado en el liposoma. Los liposomas que contienen un polímero hidrófilo también se pueden formar por técnicas de homogeneización, hidratación en el campo lipídico o extrusión, que son conocidas en la técnica.

Los liposomas se preparan para que tengan tamaños sustancialmente homogéneos en un intervalo de tamaño seleccionado. Un método de dimensionamiento eficaz consiste en la extrusión de una suspensión acuosa de los liposomas a través de una serie de membranas de policarbonato que tienen un tamaño de poro uniforme seleccionado; el tamaño de los poros de la membrana corresponderá a grandes rasgos a los tamaños más grandes de los liposomas producidos por extrusión a través de la membrana. Véase, por ejemplo, la patente de Estados Unidos n.° 4737323 (12 de abril de 1988).

Las características de liberación de una formulación de la presente invención dependen del material encapsulante, la concentración del fármaco encapsulado y la presencia de modificadores de la liberación. Por ejemplo, la liberación se puede manipular para que sea dependiente del pH, por ejemplo, usando un recubrimiento sensible al pH que libere solamente a un pH bajo, como en el estómago, o un pH mayor, como en el intestino. Se puede usar un recubrimiento entérico para evitar que se produzca la liberación hasta después de pasar por el estómago. Se pueden usar varios recubrimientos o mezclas de cianamida encapsuladas en diferentes materiales para obtener una liberación inicial en el estómago, seguida de la liberación posterior en el intestino. La liberación también se puede manipular mediante la inclusión de sales o agentes formadores de poros, lo que puede aumentar la absorción de agua o la liberación del fármaco por difusión desde la cápsula. También se pueden usar excipientes que modifican la solubilidad del fármaco para controlar la velocidad de liberación. También se pueden incorporar agentes que aumenten la degradación de la matriz o la liberación desde la matriz. Se pueden añadir al fármaco, añadir como una fase diferente (es decir, como partículas) o se pueden codisolver en la fase polimérica dependiendo del compuesto. En todos los casos, la cantidad debe ser entre un 0,1 y un treinta por ciento (p/p de polímero). Los tipos de potenciadores de la degradación incluyen sales inorgánicas tales como sulfato de amonio y cloruro de amonio, ácidos orgánicos tales como ácido cítrico, ácido benzoico y ácido ascórbico, bases inorgánicas tales como carbonato de sodio, carbonato de potasio, carbonato de calcio, carbonato de cinc e hidróxido de cinc, y bases orgánicas tales como sulfato de protamina, espermina, colina, etanolamina, dietanolamina y trietanolamina, y tensioactivos tales como Tween® y Pluronic®. Los agentes formadores de poros que agregan microestructura a las matrices (es decir, compuestos solubles en agua tales como sales inorgánicas y glúcidos) se añaden como partículas. El intervalo debe ser de entre un uno y un treinta por ciento (p/p de polímero).

La absorción también se puede manipular mediante la alteración del tiempo de permanencia de las partículas en el intestino. Esto se puede lograr, por ejemplo, recubriendo la partícula con, o seleccionando como el material encapsulante, un polímero adhesivo a la mucosa. Ejemplos incluyen la mayoría de los polímeros con grupos carboxilo libres, tales como quitosano, celulosas, y especialmente poliacrilatos (como se usa en este documento, poliacrilatos se refiere a los polímeros que incluyen grupos acrilato y grupos acrilato modificados tales como cianoacrilatos y metacrilatos).

Combinaciones farmacéuticas

[0135] La invención se refiere especialmente a un compuesto de fórmula I (o a una composición farmacéutica que contiene un compuesto de fórmula I) para su uso en el tratamiento de una o más de las enfermedades mencionadas en este documento; en el que la respuesta al tratamiento es beneficiosa como se demuestra, por ejemplo, por la eliminación parcial o total de uno o más de los síntomas de la enfermedad hasta la cura o remisión completa.

[0136] Un compuesto de fórmula (I) también se puede usar en combinación con los siguientes compuestos y conjugados de anticuerpo-fármaco:

Inhibidores de BCR-ABL: Imatinib (Gleevec®); clorhidrato de Inilotinib; Nilotinib (Tasigna®); Dasatinib (BMS-345825); Bosutinib (SKI-606); Ponatinib (AP24534); Bafetinib (INNO406); Danusertib (PHA-739358), AT9283 (CAS 1133385 83-7); Saracatinib (AZD0530); y N-[2-[(1S,4£)-6-[[4-(ciclobutilamino)-5-(trifluorometil)-2-pirimidinil]amino]-1,2,3,4-tetrahidronaftalen-1,4-imin-9-il]-2-oxoetil]-acetamida (Pf -03814735, CAS 942487-16-3).

[0137] Inhibidores de ALK: PF-2341066 (XALKORI®; crizotinib); 5-cloro-N4-(2-(isopropilsulfonil)fenil)-N2-(2-metoxi-4-(4-(4-metilpiperazin-1-il)piperidin-1-il)fenil)pirimidin-2,4-diamina; GSK1838705A; y Ch 5424802.

[0138] Inhibidores de BRAF: Vemurafanib (PLX4032); y Dabrafenib.

[0139] Inhibidores de FLT3 - malato de sunitinib (vendido con el nombre comercial Sutent® por Pfizer); PKC412 (midostaurina); tanutinib, sorafenib, sunitinib, midostaurina, lestaurtinib, KW-2449, quizartinib (AC220 ) y crenolanib.

[0140] Inhibidores de MEK - trametinib.

[0141] Inhibidores del receptor del factor de crecimiento del endotelio vascular (VEGF): bevacizumab (vendido con el nombre comercial Avastin® por Genentech/Roche), axitinib, (N-metil-2-[[3-[(£)-2-piridin-2-iletenil]-1H-indazol-6-il]sulfanil]benzamida, conocida también como AG013736 y descrita en la publicación PCT n.° WO 01/002369), Alaninato de Brivanib (2-aminopropanoato de (S)-((£)-1-(4-(4-fluoro-2-metil-1H-indol-5-iloxi)-5-metilpirrolo[2,1-f][1,2,4]triazin-6-iloxi)propan-2-ilo), conocido también como BMS-582664), motesanib (N-(2,3-dihidro-3,3-dimetil-1H-indol-6-il)-2-[(4-piridinilmetil)amino]-3-piridincarboxamida y descrita en la publicación PCT n.° WO 02/066470), pasireotida (conocida también como SOM230 y descrita en la publicación PCT n.° WO 02/010192), sorafenib (vendido con el nombre comercial Nexavar®);

inhibidores del receptor de HER2: trastuzumab (vendido con el nombre comercia1Herceptin® por Genentech/Roche), neratinib (también conocido como HKI-272, (2£)-N-[4-[[3-cloro-4-[(piridin-2-il)metoxi]fenil]amino]-3-ciano-7-etoxiquinolin-6-il]-4-(dimetilamino)but-2-enamida, y descrito en la publicación PCT n.° WO 05/028443), lapatinib o ditosilato de lapatinib (vendido con el nombre comercial Tykerb® por GlaxoSmithKline); Trastuzumab emtansina (en los Estados Unidos, ado-trastuzumab emtansina, nombre comercial Kadcyla) - un conjugado de anticuerpo-fármaco que consiste en el anticuerpo monoclonal trastuzumab (Herceptin) unido al agente citotóxico mertansina (DM1); anticuerpos contra CD20: rituximab (vendido con el nombre comercial Riuxan® y MabThera® por Genentech/Roche), tositumomab (vendido con los nombres comerciales Bexxar® por GlaxoSmithKline), ofatumumab (vendido con el nombre comercial Arzerra® por GlaxoSmithKline);

inhibidores de tirosina cinasa: clorhidrato de erlotinib (vendido con el nombre comercial Tarceva® por Genentech/Roche), Linifanib (W-[4-(3-amino-1H-indazol-4-il)fenil]-W-(2-fluoro-5-metilfenil)urea, conocida también como ABT 869, disponible en Genentech), malato de sunitinib (vendido con el nombre comercial Sutent® por Pfizer), bosutinib (4-[(2,4-didoro-5-metoxifenil)amino]-6-metoxi-7-[3-(4-metilpiperazin-1-il)propoxi]quinolin-3-carbonitrilo, también conocido como SKI-606, y descrito en la patente de Estados Unidos n.° 6780996), dasatinib (vendido con el nombre comercial Sprycel® por Bristol-Myers Squibb), armala (conocida también como pazopanib, vendida con el nombre comercial Votrient® por GlaxoSmithKline), imatinib y mesilato de imatinib (vendidos con los nombres comerciales Gilvec® y Gleevec® por Novartis);

inhibidores de la síntesis de ADN: capecitabina (vendida con el nombre comercial Xeloda® por Roche), clorhidrato de gemcitabina (vendido con el nombre comercial Gemzar® por Eli Lilly and Company), nelarabina ((2R,3S,4R,5R)-2-(2-amino-6-metoxi-purin-9-il)-5-(hidroximetil)oxolan-3,4-diol, vendido con los nombres comerciales Arranon® y Atriance® por GlaxoSmithKline);

agentes antineoplásicos: oxaliplatino (vendido con el nombre comercial Eloxatin® por Sanofi-Aventis y descrito en la patente de Estados Unidos n.° 4169846);

inhibidores del receptor del factor de crecimiento epidérmico (EGFR): gefitnib (vendido con el nombre comercial Iressa®), W-[4-[(3-cloro-4-fluorofenil)amino]-7-[[(3''S")-tetrahidro-3-furanil]oxi]-6-quinazolinil]-4(dimetilamino)-2-butenamida, vendido con el nombre comercial Tovok® por Boehringer Ingelheim), cetuximab (vendido con el nombre comercial Erbitux® por Bristol-Myers Squibb), panitumumab (vendido con el nombre comercial Vectibix® por Amgen); inhibidores de la dimerización de HER: pertuzumab (vendido con el nombre comercial Omnitarg®, por Genentech); moduladores del factor estimulador de colonias de granulocitos (G-CSF) humano: filgrastim (vendido con el nombre comercial Neupogen® por Amgen);

inmunomoduladores: afutuzumab (disponible en Roche®), pegfilgrastim (vendido con el nombre comercial Neulasta® por Amgen), lenalidomida (conocida también como CC-50l3, vendido con el nombre comercial Revlimid®), talidomida (vendida con el nombre comercial Thalomid®);

inhibidores de CD40: dacetuzumab (conocido también como SGN-40 o huS2C6, disponible en Seattle Genetics, Inc); agonistas del receptor proapoptótico (PARA): dulanermin (conocido también como AMG-951, disponible en Amgen/Genentech);

antagonistas de Hedgehog: 2-cloro-N-[4-cloro-3-(2-piridinil)fenil]-4-(metilsulfonil)-benzamida (conocida también como GDC-0449 y descrita en la publicación PCT n.° WO 06/028958);

inhibidores de PI3K: 4-[2-(1H-indazol-4-il)-6-[[4-(metilsulfonil)piperazin-1-il]metil]tieno[3,2-d]pirimidin-4-il]morfolina (conocida también como GDC 0941 y descrito en las publicaciones PCT n.° w O 09/036082 y w O 09/055730), 2-metil-2-[4-[3-metil-2-oxo-8-(quinolin-3-il)-2,3-dihidroimidazo[4,5-c]quinolin-1-il]fenil]propionitrilo (conocido también como BEZ 235 o NVP-BEZ 235, y descrito en la publicación PCT n.° WO 06/122806);

inhibidores de la fosfolipasa A2: anagrelida (vendida con el nombre comercial Agrylin®);

inhibidores de BCL-2: 4-[4-[[2-(4-clorofenil)-5,5-dimetiM-ciclohexen-1-il]metil]-1-piperazinil]-N-[[4-[[(1R)-3-(4-morfolinil)-1-[(feniltio)metil]propil]amino]-3-[(trifluorometil)sulfonil]fenil]sulfonil]benzamida (conocida también como ABT-263 y descrita en la Publicación de PCT N.° WO 09/155386);

inhibidores de la cinasa cinasa de proteína activada por mitógenos (MEK): XL-518 (n.° Cas 1029872-29-4, disponible en ACC Corp.);

inhibidores de la aromatasa: exemestano (vendido con el nombre comercial Aromasin® por Pfizer), letrozol (vendido con el nombre comercial Femara® por Novartis), anastrozol (vendido con el nombre comercial Arimidex®); inhibidores de la topoisomerasa I: irinotecán (vendido con el nombre comercial Camptosar® por Pfizer), clorhidrato de topotecán (vendido con el nombre comercial Hycamtin® por GlaxoSmithKline);

inhibidores de topoisomerasa II: etopósido (conocido también como VP-16 y fosfato de etopósido, vendido con los nombres comerciales Toposar®, VePesid® y Etopophos®), tenipósido (también conocido como VM-26, vendido con el nombre comercial Vumon®);

inhibidores de mTOR: temsirólimus (vendido con el nombre comercial Torisel® por Pfizer), ridaforólimus (conocido anteriormente como deferólimus, dimetilfosfinato de (1R,2R,4S)-4-[(2R)-2-[(1R,9S,12S,15R,16£,18R,19R,21R,23S,24£,26£,28Z,30S,32S,35R)-1,18-dihidroxi-19,30-dimetoxi-15,17,21,23,29,35-hexametil-2,3,10,14,20-pentaoxo-11,36-dioxa-4-azatriciclo[30.3.1.049]hexatriaconta-16,24,26,28-tetraen-12-il]propil]-2-metoxiciclohexilo, también conocido como AP23573 y MK8669, y descrito en la publicación PCT n.° WO 03/064383), everólimus (vendido con el nombre comercial Afinitor® por Novartis);

inhibidores de la reabsorción de hueso osteoclástico: ácido 1-hidroxi-2 -imidazol-1-il-fosfonoetil-fosfónico monohidrato (vendido con el nombre comercial Zometa® por Novartis);

conjugados de anticuerpo contra CD33 y fármaco: gemtuzumab ozogamicina (vendido con el nombre comercial Mylotarg® por Pfizer/Wyeth);

conjugados de anticuerpo contra CD22 y fármaco: inotuzumab ozogamicina (denominado también CMC-544 y WAY-207294, disponible en Hangzhou Sage Chemical Co., Ltd.);

conjugados de anticuerpo contra CD20 y fármaco: ibritumomab tiuxetán (vendido con el nombre comercial Zevalin®); análogos de somatostatina: octreotida (conocida también como acetato de octreotida, vendido con los nombres comerciales Sandostatin® y Sandostatin LAR®);

interleucina-11 (IL-11) sintética: oprelvecina (vendida con el nombre comercial Neumega® por Pfizer/Wyeth); eritropoyetina sintética: darbepoetina alfa (vendida con el nombre comercial Aranesp® por Amgen);

inhibidores del receptor activador del factor nuclear k B (RANK): denosumab (vendido con el nombre comercial Prolia® por Amgen);

pepticuerpos miméticos de trombopoyetina: romiplostim (vendido con el nombre comercial Nplate® por Amgen; estimuladores del crecimiento celular: palifermina (vendida con el nombre comercial Kepivance® por Amgen); anticuerpos antirreceptor del factor insulínico de crecimiento 1 (IGF-1R): figitumumab (conocido también como CP-751,871, disponible en ACC Corp), robatumumab (n.° CAS 934235-44-6);

anticuerpos anti-CS1: elotuzumab (HuLuc63, n.° Ca s 915296-00-3);

anticuerpos contra CD52: alemtuzumab (vendido con el nombre comercial Campath®);

inhibidores de CTLA-4: tremelimumab (anticuerpo monoclonal IgG2 disponible en Pfizer, conocido anteriormente como ticilimumab, CP-675,206), ipilimumab (anticuerpo contra CTLA-4, conocido también como MDX-010, n.° CAS 477202-00-9);

inhibidores de la histona desacetilasa (HDI): voninostat (vendido con el nombre comercial Zolinza® por Merck); agentes alquilantes: temozolomida (vendido con los nombres comerciales Temodar® y Temodal® por Schering-Plough/Merck), dactinomicina (conocida también como actinomicina-D y vendida con el nombre comercial Cosmegen®), melfalán (conocido también como L-PAM, L-sarcolisina y mostaza de fenilalanina, vendido con el nombre comercial Alkeran®), altretamina (conocida también como hexametilmelamina (HMM), vendida con el nombre comercial Hexalen®), carmustina (vendida con el nombre comercial BiCNU®), bendamustina (vendida con el nombre comercial Treanda®), busulfán (vendido con los nombres comerciales Busulfex® y Myleran®), carboplatino (vendido con el nombre comercial Paraplatin®), lomustina (conocida también como CCNU, vendida con el nombre comercial CeeNU®), cisplatino (conocido también como CDDP, vendido con los nombres comerciales Platinol® y Platinol®-AQ), clorambucilo (vendido con el nombre comercial Leukeran®), ciclofosfamida (vendida con los nombres comerciales Cytoxan® y Neosar®), dacarbazina (conocida también como DTIC, DIC e imidazol carboxamida, vendida con el nombre comercial DTIC-Dome®), altretamina (conocida también como hexametilmelamina (HMM) vendida con el nombre comercial Hexalen®), ifosfamida (vendida con el nombre comercial Ifex®), procarbazina (vendida con el nombre comercial Matulane®), mecloretamina (conocida también como mostaza de nitrógeno, mustina y clorhidrato de mecloroetamina, vendida con el nombre comercial Mustargen®), estreptozocina (vendida con el nombre comercial Zanosar®), tiotepa (conocida también como tiofosfoamida, TESPA y TSPA, vendida con el nombre comercial Tioplex®);

modificadores de la respuesta biológica: bacilo de Calmette-Guérin (vendido con los nombres comerciales theraCys® y TICE® BCG), denileucina diftitox (vendido con el nombre comercial Ontak®);

antibióticos antitumorales: doxorrubicina (vendido con los nombres comerciales Adriamycin® y Rubex®), bleomicina (vendido con el nombre comercial lenoxane®), daunorrubicina (conocida también como clorhidrato de dauorrubicina, daunomicina y clorhidrato de rubidomicina, vendido con el nombre comercial Cerubidine®), daunorrubicina liposómica (liposoma de citrato de daunorrubicina, vendido con el nombre comercial DaunoXome®), mitoxantrona (conocida también como DHAD, vendida con el nombre comercial Novantrone®), epirrubicina (vendida con el nombre comercial Ellence™), idarrubicina (vendida con los nombres comerciales Idamycin®, Idamycin PFS®), mitomicina C (vendida con el nombre comercial Mutamycin®);

agentes antimicrotúbulos: estramustina (vendida con el nombre comercial Emcyl®);

inhibidores de catepsina K: odanacatib (conocido también como MK-0822, N-(1-cianociclopropil)-4-fluoro-N2-{(1S)-2,2,2-trifluoro-1-[4'-(metilsulfonil)bifenil-4-il]etil}-Ueucinamida, disponible en Lanzhou Chon Chemicals, ACC Corp. y ChemieTek, y descrito en la publicación PCT n.° WO 03/075836);

análogos de epotilona B: ixabepilona (vendida con el nombre comercial Lxempra® por Bristol-Myers Squibb); inhibidores de la proteína de choque térmico (HSP): tanespimicina (17-alilamino-17-demetoxigeldanamicina, conocida también como k Os -953 y 17-AAG, disponible en SIGMA, y descrita en la patente de Estados Unidos n.° 4261989); agonistas de TpoR: eltrombopag (vendido con los nombres comerciales Promacta® y Revolade® por GlaxoSmithKline);

agentes antimitóticos: docetaxel (vendido con el nombre comercial Taxotere® por Sanofi-Aventis);

inhibidores de corticoesteroides: aminoglutetimida (vendido con el nombre comercial Cytadren®); antiandrogénicos: nilutamida (vendida con los nombres comerciales Nilandron® y Anandron®), bicalutamida (vendida con el nombre comercial Casodex®), flutamida (vendida con el nombre comercial Fulexin™);

andrógenos: fluoximesterona (vendida con el nombre comercial Halotestin®);

inhibidores del proteasoma: bortezomib (vendido con el nombre comercial Velcade®);

inhibidores de CDK1: alvocidib (conocido también como flovopirdol o HMR-1275, 2-(2-clorofenil)-5,7-dihidroxi-8-[(3S,4R)-3-hidroxi-1-metil-4-piperidinil]-4-cromenona, y descrito en la patente de Estados Unidos n.° 5621002); agonistas del receptor de la hormona liberadora de gonadotropina (GnRH): leuprolida o acetato de leuprolida (vendido con los nombres comerciales Viadure® por Bayer AG, Eligard® por Sanofi-Aventis y Lupron® por Abbott Lab); agentes antineoplásicos de taxano: cabazitaxel (1-hidroxi-7p,10p-dimetoxi-9-oxo-5p,20-epoxitax-11-eno-2a,4,13atriil-4-acetato-2-benzoato-13-[(2R,3S)-3-{[(ferc-butoxi)carbonil]amino}-2-hidroxi-3-fenilpropanoato), larotaxel (benzoato de (2a,35,4a,5p,7a,10p,13a)-4,10-bis(acetiloxi)-13-({(2R,3S)-3-[(ferc-butoxicarbonil)amino]-2-hidroxi-3-fenilpropanoil}oxi)-1-hidroxi-9-oxo-5,20-epoxi-7,19-ciclotax-11-en-2-ilo);

agonistas del receptor de 5HT1a: xaliprodeno (conocido también como SR57746, 1-[2-(2-naftil)etil]-4-[3-(trifluorometil)fenil]-1,2,3,6-tetrahidropiridina y descrito en la patente de Estados Unidos n.° 5266573);

vacunas de HPC: Cervarix® vendido por GlaxoSmithKline, Gardasil® vendido por Merck;

agentes quelantes de hierro: deferasinox (vendido con el nombre comercial Exjade® por Novartis); antimetabolitos: claribina (2-clorodesoxiadenosina, vendida con el nombre comercial leustatin®), 5-fluorouracilo (vendido con el nombre comercial Adrucil®), 6 -tioguanina (vendida con el nombre comercial Purinethol®), pemetrexed (vendido con el nombre comercial Alimta®), citarabina (conocida también como arabinosilcitosina (Ara-C), vendida con el nombre comercial Cytosar-U®), citarabina liposómica (conocida también como Ara-C liposómica, vendida con el nombre comercial DepoCyt™), decitabina (vendida con el nombre comercial Dacogen®), hidroxiurea (vendida con los nombres comerciales Hydrea®, Droxia™ y Mylocel™), fludarabina (vendida con el nombre comercial Fludara®), floxuridina (vendida con el nombre comercial FUDR®), cladribina (conocida también como 2-clorodesoxiadenosina (2-CdA) vendida con el nombre comercial Leustatin™), metotrexato (conocido también como ametopterina, metotrexato sodio (MTX), vendido con los nombres comerciales Rheumatrex® y Trexall™), pentostatina (vendida con el nombre comercial Nipent®);

bisfosfonatos: pamidronato (vendido con el nombre comercial Aredia®), ácido zoledrónico (vendido con el nombre comercial Zometa®);

agentes desmetilantes: 5-azacitidina (vendida con el nombre comercial Vidaza®), decitabina (vendida con el nombre comercial Dacogen®);

alcaloides vegetales: paclitaxel unido a proteína (vendido con el nombre comercial Abraxane®), vinblastina (conocida también como sulfato de vinblastina, vincaleucoblastina y VLB, vendida con los nombres comerciales Alkaban-AQ® y Velban®), vincristina (conocida también como sulfato de vincristina, LCR y VCR, vendida con los nombres comerciales Oncovin® y Vincasar Pfs®), vinorelbina (vendida con el nombre comercial Navelbine®), paclitaxel (vendido con los nombres comerciales Taxol y Onxal™);

retinoides: alitretinoína (vendida con el nombre comercial Panretin®), tretinoína (ácido holo-trans retinoico, también conocido como ATRA, vendido con el nombre comercial Vesanoid®), isotretinoína (ácido 13-c/s-retinoico, vendido con los nombres comerciales Accutane®, Amnesteem®, Claravis®, Clarus®, Decutan®, Isotane®, Izotech®, Oratane®, Isotret® y Sotret®), bexaroteno (vendido con el nombre comercial Targretin®);

glucocorticoesteroides: hidrocortisona (conocida también como cortisona, succinato sódico de hidrocortisona, fosfato sódico de hidrocortisona, y vendida con los nombres comerciales Ala-Cort®, fosfato de hidrocortisona, Solu-Cortef®, Hydrocort Acetate® y Lanacort®), dexametazona ((8S,9R,10S,11S,13S,14S,16R,17R)-9-fluoro-11,17-dih¡drox¡-17-(2-hidroxiacetil)-10,13,16-trimetil-6,7,8,9,10,11,12,13,14,15,16,17-dodecahidro-3H-ciclopenta[a]fenantren-3-ona), prednisolona (vendida con los nombres comerciales Delta-Cortel®, Orapred®, Pediapred® y Prelone®), prednisona (vendida con los nombres comerciales Deltasone®, Liquid Red®, Meticorten® y Orasone®), metilprednisolona (conocida también como 6 -metilprednisolona, acetato de metilprednisolona, succinato sódico de metilprednisolona, vendida con los nombres comerciales Duralone®, Medralone®, Medrol®, M-Prednisol® y Solu-Medrol®); citocinas: interleucina-2 (conocida también como aldesleucina e IL-2, vendida con el nombre comercial Proleukin®), interleucina-11 (conocida también como oprevelcina, vendida con el nombre comercial Neumega®), alfa interferón alfa (también conocido como IFN-alfa, vendido con los nombres comerciales Intron® A y Roferon-A®);

reguladores por disminución del receptor de estrógenos: fulvestrant (vendido con el nombre comercial Faslodex®); antiestrogénicos: tamoxifeno (vendido con el nombre comercial Novaldex®);

toremifeno (vendido con el nombre comercial Fareston®);

moduladores selectivos del receptor de estrógenos (SERM): raloxifeno (vendido con el nombre comercial Evista®); agonistas de la hormona liberadora de hormona luteinizante (LHRH): goserelina (vendida con el nombre comercial Zoladex®);

progesteronas: megestrol (conocido también como acetato de megestrol, vendido con el nombre comercial Megace®); agentes citotóxicos variados: trióxido de arsénico (vendido con el nombre comercial Trisenox®), asparaginasa (conocida también como L-asparaginasa, L-asparaginasa de Erw/n/a, vendida con los nombres comerciales Elspar® y Kidrolase®).

Un compuesto de fórmula (I) también puede usarse en combinación con las siguientes terapias complementarias: fármacos contra las náuseas: antagonistas del receptor de NK-1: casopitant (vendido con los nombres comerciales Rezonic® y Zunrisa® por GlaxoSmithKline); y

agentes citoprotectores: amifostina (vendida con el nombre comercial Ethyol®), leucovorina (conocida también como leucovorina de calcio, factor de c/trovorum y ácido folínico).

Procesos para preparar compuestos de la invención

La presente invención también incluye procesos para la preparación de compuestos de la invención. En las reacciones descritas, puede ser necesario proteger los grupos funcionales reactivos, por ejemplo, grupos hidroxi, amino, imino, tio o carboxi, en el lugar que se quiere que se encuentren en el producto final, para evitar su participación no deseada en las reacciones. Se pueden usar grupos protectores convencionales de acuerdo con la práctica convencional, por ejemplo, véase T.W. Greene y P. G. M. Wuts en "Protective Groups in Organic Chemistry", John Wiley and Sons, 1991.

Los compuestos de fórmula I, donde X3 es S, pueden prepararse procediendo como en el siguiente esquema de reacción I:

Esquema de reacción I:

en que X i, X2, Y i, Y2, Y3, R i, R2, R³a, R³b, R⁴a, R⁴b, R⁵a, R⁵b, R⁶a y R⁶b son como se definen por el sumario de la invención y Q es un grupo saliente tal como yoduro o similares. Los compuestos de fórmula I pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula ²con un compuesto de fórmula ³en presencia de un disolvente adecuado (tal como dioxano o similares), un ligando metálico adecuado (tal como TM EDA o similares), un haluro metálico adecuado (tal como Cu(I)I o similares) y una sal adecuada (tal como K3PO4 o similares). La reacción transcurre en un intervalo de temperatura de aproximadamente ⁸⁰°C a aproximadamente ¹⁴⁰°C y puede tardar de aproximadamente ¹hora a aproximadamente ²⁴horas en finalizar.

Como alternativa, los compuestos de fórmula I pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula ²con un compuesto de fórmula ³en presencia de un disolvente adecuado (tal como DMF o similares), un agente de acoplamiento adecuado (tal como C u T C o similares) y una sal adecuada (tal como carbonato de potasio o similares). La reacción transcurre en un intervalo de temperatura de aproximadamente ⁸⁰°C a aproximadamente ¹⁴⁰°C y puede tardar de aproximadamente ¹hora a aproximadamente ²⁴horas en finalizar.

Como alternativa, los compuestos de fórmula I, donde X3 es S, pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula ²con un compuesto de fórmula ³en presencia de un disolvente adecuado (tal como dioxano o similares), un haluro metálico adecuado (tal como Cu(I)I o similares), una base adecuada (tal como carbonato de cesio o similares) y un ligando adecuado (tal como ¹,¹⁰-fenantrolina o similares). La reacción transcurre en un intervalo de temperatura de aproximadamente ⁸⁰°C a aproximadamente ¹⁴⁰°C y puede tardar de aproximadamente ¹hora a aproximadamente ²⁴horas en finalizar.

Esquem a de reacción II:

en que X1, X2, Y1, Y2, Y3, R1, R2, R³a, R³b, R⁴a, R⁴b, R⁵a, R⁵b, R⁶a y R⁶b son como se definen por el sumario de la invención y Q es un grupo saliente tal como yoduro o similares. Los compuestos de fórmula I pueden prepararse haciendo reaccionar un compuesto de fórmula ⁴con un compuesto de fórmula ⁵en presencia de un disolvente adecuado (tal como MeCN, DMF o similares), un agente de acoplamiento adecuado (tal como BO P-C l, BOP o similares) y un catalizador adecuado (tal como DBU o similares). La reacción transcurre en un intervalo de temperatura de aproximadamente 80 °C a aproximadamente 140 °C y puede tardar de aproximadamente 1 hora a aproximadamente 24 horas en finalizar.

Pueden encontrarse ejemplos detallados de la síntesis de compuestos de fórmula I en los ejemplos, infra.

Procesos adicionales para preparar compuestos de la invención

Un compuesto de la invención se puede preparar como una sal de adición de ácido farmacéuticamente aceptable haciendo reaccionar la forma de base libre del compuesto con un ácido inorgánico u orgánico farmacéuticamente aceptable. Como alternativa, una sal de adición de base farmacéuticamente aceptable de un compuesto de la invención se puede preparar haciendo reaccionar la forma de ácido libre del compuesto con una base inorgánica u orgánica farmacéuticamente aceptable.

Los compuestos de fórmula I también se pueden modificar agregándoles grupos funcionales apropiados para mejorar propiedades biológicas selectivas. Las modificaciones de este tipo son conocidas en el técnica e incluyen las que aumentan la penetración en un sistema biológico dado (por ejemplo, sangre, sistema linfático, sistema nervioso central, testículos), aumentan la biodisponibilidad, aumentan la solubilidad para permitir la administración parenteral (por ejemplo, inyección, infusión), alteran el metabolismo y/o alteran la velocidad de secreción. Ejemplos de este tipo de modificaciones incluyen, aunque sin limitación, esterificación, por ejemplo, con polietilenglicoles, derivatización con sustituyentes pivaloiloxi o ácidos grasos, conversión en carbamatos, hidroxilación de anillos aromáticos y sustitución con heteroátomos en anillos aromáticos.

Como alternativa, las formas salinas de los compuestos de la invención se pueden preparar usando sales de los materiales de partida o los intermedios. En vista de la estrecha relación entre los compuestos de fórmula I novedosos en forma libre y aquellos en forma de sus sales, incluyendo las sales que se pueden usar como intermedios, por ejemplo, en la purificación o identificación de los compuestos novedosos, cualquier referencia a los compuestos o a un compuesto de fórmula I anteriormente y a partir de ahora en este documento se debe entender que hace referencia al compuesto en forma libre y/o también a una o más sales del mismo, según sea apropiado y conveniente, así como a uno o más solvatos, por ejemplo, hidratos.

Las sales se forman, por ejemplo, como sales de adición de ácido, preferiblemente con ácidos orgánicos o inorgánicos, a partir de compuestos de fórmula I con un átomo de nitrógeno básico, especialmente las sales farmacéuticamente aceptables. Ácidos inorgánicos adecuados son, por ejemplo, ácidos hidrácidos tales como ácido clorhídrico, ácido sulfúrico o ácido fosfórico. Ácidos orgánicos adecuados son, por ejemplo, ácido carboxílico, fosfónico, sulfónico o sulfámico, por ejemplo, ácido acético, ácido propiónico, ácido octanoico, ácido decanoico, ácido dodecanoico, ácido glicólico, ácido láctico, ácido fumárico, ácido succínico, ácido malónico, ácido adípico, ácido pimélico, ácido subérico, ácido azelaico, ácido málico, ácido tartárico, ácido cítrico, aminoácidos tales como ácido glutámico o ácido aspártico, ácido maleico, ácido hidroximaleico, ácido metilmaleico, ácido ciclohexanocarboxílico, ácido adamantanocarboxílico, ácido benzoico, ácido salicílico, ácido 4-aminosalicílico, ácido ftálico, ácido fenilacético, ácido mandélico, ácido cinámico, ácido metano- o etanosulfónico, ácido 2 -hidroxietanosulfónico, ácido etano-1 ,2 -disulfónico, ácido bencenosulfónico, ácido 4-toluenosulfónico, ácido 2-naftalenosulfónico, ácido 1,5-naftaleno-disulfónico, ácido 2- o 3-metilbencenosulfónico, ácido metilsulfúrico, ácido etilsulfúrico, ácido dodecilsulfúrico, ácido N-ciclohexilsulfámico, ácido N-metil-, N-etil- o N-propil-sulfámico, u otros ácidos orgánicos protónicos, tales como ácido ascórbico.

Con fines de aislamiento o purificación, también es posible usar sales que no sean farmacéuticamente aceptables, por ejemplo, picratos o percloratos. Para uso terapéutico, se emplean únicamente sales farmacéuticamente aceptables o compuestos libres (cuando corresponda en forma de preparados farmacéuticos) y, por lo tanto, estos son preferidos.

Las formas de ácido libre o base libre de los compuestos de la invención se pueden preparar a partir de la sal de adición de base o la sal de adición de ácido correspondiente, respectivamente. Por ejemplo, un compuesto de la invención en forma de sal de adición de ácido se puede convertir en la base libre correspondiente tratándolo con una base adecuada (por ejemplo, disolución de hidróxido de amonio, hidróxido de sodio y similares). Un compuesto de la invención en forma de sal de adición de base se puede convertir en el ácido libre correspondiente tratándolo con un ácido adecuado (por ejemplo, ácido clorhídrico, etc.).

Se pueden preparar compuestos de la invención en forma no oxidada a partir de N-óxidos de compuestos de la invención tratándolos con un agente reductor (por ejemplo, azufre, dióxido de azufre, trifenilfosfina, borohidruro de litio, borohidruro de sodio, tricloruro de fósforo, tribromuro o similares) en un disolvente orgánico inerte adecuado (por ejemplo, MeCN, etanol, dioxano acuoso o similares) a 0 hasta 80 °C.

Se pueden preparar derivados profármaco de los compuestos de la invención mediante métodos conocidos por los expertos en la materia (por ejemplo, para más detalles véase Saulnier et al.(1994), Bioorganic and Medicinal Chemistry Letters, Vol. 4, pág. 1985). Por ejemplo, se pueden preparar profármacos apropiados haciendo reaccionar un compuesto sin derivatizar de la invención con un agente carbamilante adecuado (por ejemplo, 1,1-aciloxialquilcarbanodoridato, carbonato de para-nitrofenilo o similares).

Pueden prepararse derivados protegidos de los compuestos de la invención por medios conocidos por los expertos en la materia. Puede encontrarse una descripción detallada de técnicas aplicables a la creación de grupos protectores y su eliminación en T. W. Greene, "Protecting Groups in Organic Chemistry", 3.a edición, John Wiley and Sons, Inc., 1999.

Los compuestos de la presente invención se pueden preparar convenientemente, o formar durante el proceso de la invención, como solvatos (por ejemplo, hidratos). Se pueden preparar hidratos de los compuestos de la presente invención convenientemente por recristalización de una mezcla de disolventes acuosos/orgánicos, usando disolventes orgánicos tales como dioxina, tetrahidrofurano o metanol.

Se pueden preparar compuestos de la invención como sus estereoisómeros individuales haciendo reaccionar una mezcla racémica del compuesto con un agente de resolución ópticamente activo para formar un par de compuestos diastereoisoméricos, separando los diastereoisómeros y recuperando los enantiómeros ópticamente puros. Aunque la resolución de los enantiómeros se puede llevar a cabo usando derivados diastereoisoméricos covalentes de los compuestos de la invención, se prefieren los complejos disociables (por ejemplo, sales diastereoisoméricas cristalinas). Los diastereoisómeros tienen diferentes propiedades físicas (por ejemplo, puntos de fusión, puntos de ebullición, solubilidades, reactividad, etc.) y se pueden separar fácilmente aprovechando estas diferencias. Los diastereoisómeros se pueden separar por cromatografía o preferiblemente por técnicas de separación/resolución basadas en las diferencias de solubilidad. Después, el enantiómero ópticamente puro se recupera, junto con el agente de resolución, por cualquier medio práctico que no provoque racemización. Se puede encontrar una descripción más detallada de las técnicas aplicables para la resolución de estereoisómeros de los compuestos de su mezcla racémica en Jean Jacques Andre Collet, Samuel H. Wilen, "Enantiomers, Racemates and Resolutions", John Wiley and Sons Sons, Inc., 1981.

En resumen, los compuestos de fórmula I se pueden preparar mediante un proceso, que implica:

(a) lo de los esquemas de reacción I y II; y

(b) opcionalmente convertir un compuesto de la invención en una sal farmacéuticamente aceptable;

(c) opcionalmente convertir una forma salina de un compuesto de la invención en una forma no salina;

(d) opcionalmente convertir una forma no oxidada de un compuesto de la invención en un N-óxido farmacéuticamente aceptable;

(e) opcionalmente convertir una forma de N-óxido de un compuesto de la invención en su forma no oxidada;

(f) opcionalmente resolver un isómero individual de un compuesto de la invención de una mezcla de isómeros;

(g) opcionalmente convertir un compuesto no derivatizado de la invención en un derivado profármaco farmacéuticamente aceptable; y

(h) opcionalmente convertir un derivado profármaco de un compuesto de la invención en su forma no derivatizada.

Siempre y cuando la producción de los materiales de partida no se describa particularmente, los compuestos son conocidos o se pueden preparar de forma análoga a métodos conocidos en la técnica o como se divulgan en los ejemplos a continuación en este documento.

Un experto en la materia apreciará que las transformaciones anteriores son solamente representativas de métodos para la preparación de los compuestos de la presente invención, y que se pueden usar de forma similar otros métodos muy conocidos.

Ejemplos

Los siguientes ejemplos e intermedios sirven para ilustrar la invención. Algunas abreviaturas usadas en los ejemplos son las siguientes: ácido acético (AcOH); MeCN (MeCN); trietilamina (TEA); tetrahidrofurano (THF); acuoso (ac.); saturado (sat.); atmósfera (atm.); 2,2'-bis-difenilfosfanil-[1,1']binaftalenilo (BINAP); 4-dimetilaminopiridina (DMAP); ferc-butoxicarbonilo (Boc); 1,1-carbonildiimidazol (CDI); dicarbonato de di-ferc-butilo (Boc2O); hexafluorofosfato de benzotriazol-1-il-oxi-tris-(dimetilamino)-fosfonio (BOP); diclorometano (DCM); éter dietílico (EtaO); ácido ptoluenosulfónico (PTSA); acetato de etilo (EtOAc); etanol (EtOH); bis(trimetilsilil)amida de litio (LHMd S); azodicarboxilato de diisopropilo (DIAD); N,N-diisopropil-etilamina (DIEA o DIPEA); N,N-dimetilformamida (DMF); dimetilsulfóxido (DMSO); difenilfosforil azida (DPPA); hora(s) (h); hexafluorofosfato de 2-(1H-7-azabenzotriazol-1-il)1,1,3,3-tetrametiluronio (HATU); cromatografía de líquidos de alto rendimiento (HPLC); alcohol isopropílico (IPA); hidruro de litio y aluminio (LAH); cromatografía de líquidos acoplada con espectrometría de masas (LCMS); diisopropilamida de litio (LDA); metanol (MeOH); mililitro(s) (ml); minuto(s) (min); microondas (MW); bis(trimetilsilil)amida de sodio (NHMDS); n-butil-litio (n-BuLi); 1,1-bis(difenilfosfino)-ferrocenodicloropaladio (II) (PdCl2(dppf)); tris(dibencilidenoacetona)dipaladio (0) (Pd²(dba)³); diclorobis(trifenilfosfina)paladio (II) (PdCl²(PPh³)²); temperatura ambiente (TA); fluoruro de tetra-n-butilamonio (TBAF); cloruro de terc-butildimetilsililo (TBSCl); ácido trifluoroacético (TFA); tetrahidrofurano (THF); cromatografía en capa fina (TLC); tiempo de retención (Tr); (S)-(-)-2,2'-bis(di-p-tolilfosfino)-1,1'-binaftilo ((S)-ToIBInA p ); y 4,5-bis(difenilfosfino)-9,9-dimetilxanteno (XantPhos).

Intermedio S-1

2-am¡no-3-clorop¡rid¡n-4-t¡olato de sodio

[01621

Etapa a: A una solución de 3-cloro-4-yodopiridin-2-amina (1,0 g, 3,93 mmol), XantPhos (136 mg, 0,236 mmol) y Pd(OAc)2 (44 mg, 0,196 mmol) en dioxano (13 ml) se le añadió 3-mercaptopropanoato de metilo (479 |jl, 4,32 mmol) seguido de la adición de DIPEA (1,37 ml, 7,86 mmol) a TA y en atmósfera de N2. La solución resultante se agitó durante 2 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (25 ml). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 3-((2-amino-3-cloropiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (970 mg, 3,93 mmol). MS m/z 247,1 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 3-((2-amino-3-cloropiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (1,04 g, 4,22 mmol) en THF (14 ml) se le añadió a TA y en atmósfera de N2 etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 1,65 ml, 4,43 mmol) a TA y en atmósfera de N2. Después de agitar vigorosamente durante 40 min a TA, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (30 ml) y se sonicó durante 5 min. El sólido resultante formado se retiró por filtración seguido de lavado con DCM (5 ml), y se secó a presión reducida para dar 2-amino-3-cloropiridin-4-tiolato de sodio (770 mg, 4,22 mmol). ¹H RMN (400 MHz, Metanol-d⁴) 5 ppm 7,23 (d, J=5,56 Hz, 1 H), 6,82 (d, J=5,56 Hz, 1 H).

Los siguientes intermedios de la tabla 1 se prepararon usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el correspondiente yoduro de arilo o bromuro de arilo.

Tabla 1

Intermedio S-2

2- (trifluorometoxi)p¡ ridi n-3-tiol

[01641

Etapa a: A una solución a -78 °C de 2-(tr¡fluorometox¡)p¡r¡d¡n-3-ol (0,75 g, 4,19 mmol) y Et³N (1,17 ml, 8,38 mmol) en DCM (15 ml) se le añadió anhídrido trifluorometanosulfónico (1 M en DCM, 6,28 ml, 6,28 mmol). La solución resultante se agitó durante 30 min a -78 °C. La mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente con solución sat. ac. de NaHCO³(25 ml) y la mezcla resultante se extrajo con DCM (2 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar trifluorometanosulfonato de 2-(trifluorometoxi)pi ridi n-3-ilo (1,25 g, 4,02 mmol). MS m/z 312,0 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de trifluorometanosulfonato de 2-(tr¡fluorometox¡)p¡r¡d¡n-3-¡lo (1,25 g, 4,02 mmol), XantPhos (139 mg, 0,241 mmol) y Pd(OAc)2 (45 mg, 0,201 mmol) en dioxano (10 ml) se le añadió 3-mercaptopropanoato de metilo (489 pl, 4,42 mmol) seguido de la adición de DIPEA (1,4 ml, 8,03 mmol) a TA y en atmósfera de N2. La solución resultante se agitó durante 2 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (25 ml). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, gradiente de un 0 a un 25 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((2-(tr¡fluorometox¡)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)propanoato de metilo (1,025 g, 3,64 mmol). MS m/z 282,1 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de 3-((2-(tr¡fluorometox¡)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)propanoato de metilo (1,025 g, 3,64 mmol) en THF (12 ml) se le añadió a TA y en atmósfera de N2 etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 1,43 ml, 3,83 mmol). Después de agitar vigorosamente durante 40 min a TA, la mezcla de reacción se diluyó con DCM (40 ml) y se sonicó durante 5 min. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se suspendió en DCM y se vertió en un embudo de separación que contenía NH⁴Cl sat. ac. La fase orgánica se separó y la fase acuosa se extrajo con DCM (2 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. La fase acuosa se acidificó con HCl ac. 1 N y se extrajo con DCM (3 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 2-(tr¡fluorometox¡)p¡r¡d¡n-3-tiol en bruto (711 mg, 3,64 mmol). MS m/z 194,1 (M-H)-.

Intermedio S-3

3- cloro-2-(p¡rrol¡d¡n-1-¡l)p¡ridin-4-tiolato de sodio

f01651

Etapa a: Una solución de 3-doro-2-fluoro-4-yodopiridina (2,0 g, 7,77 mmol) y pirrolidina (1,93 ml, 23,31 mmol) en DMSO (10 ml) se agitó a 70 °C durante 30 min. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla resultante se vertió en un embudo de separación que contenía NH⁴Cl sat. ac. y se extrajo con Et2O (5 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se secaron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 3-cloro-4-yodo-2-(pirrolidin-1-il)piridina (1,66 g, 5,38 mmol). MS m/z 309,0 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 3-cloro-4-yodo-2-(pirrolidin-1-il)piridina (1,66 g, 5,38 mmol), XantPhos (187 mg, 0,323 mmol) y Pd(OAc)2 (60 mg, 0,269 mmol) en dioxano (11 ml) se le añadió 3-mercaptopropanoato de metilo (655 pl, 5,92 mmol) seguido de la adición de DIPEA (1,88 ml, 10,76 mmol) a TA y en atmósfera de N2. La solución resultante se agitó durante 2 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (25 ml). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((3-cloro-2-(pirrolidin-1-il)piridin-4-il)tio)propanoato de metilo (1,62 g, 5,38 mmol). MS m/z 301,2 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de 3-((3-cloro-2-(pirrolidin-1-il)piridin-4-il)tio)propanoato de metilo (1,62 g, 5,38 mmol) en THF (20 ml) se le añadió etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 2,39 ml, 6,39 mmol a TA y en atmósfera de N2. Después de agitar vigorosamente durante 40 min a TA, la reacción se diluyó con DCM (40 ml) y se sonicó durante 5 min. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se usó sin purificación adicional. MS m/z 215,1 (M-H)-.

Los siguientes intermedios de la tabla 2 se prepararon usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el correspondiente yoduro de arilo.

Tabla 2

Intermedio S-4

3-amino-2-(tr¡fluoromet¡l)bencenot¡ol

[01671

Etapa a: Una mezcla de 3-fluoro-2-(trifluorometil)anilina (2,21 g, 12,35 mmol), CS2CO3 (12,08 g, 37,1 mmol) y 2-metilpropano-2-tiol (4,18 ml, 37,1 mmol) en DMF (25 ml) se agitó durante 18 h a 130 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía H2O (50 ml) y se extrajo con EtOAc (100 ml). La fase orgánica se lavó con H2O (2 x 25 ml) y salmuera (2 x 25 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 3-(ferc-butiltio)-2-(trifluorometil)anilina (3,08 mg, 12,35 mmol). MS m/z 250,1 (M+H)+.

Etapa b: Una solución de 3-(ferc-butiltio)-2-(trifluorometil)anilina (7,19 g, 31,3 mmol) en HCl conc. (308 ml) se agitó durante 2 h a 85 °C. Después de enfriarla hasta TA, se condujo una corriente de N2 a través de la solución durante 16 h. Los volátiles se eliminaron a presión reducida, el sólido resultante se retiró por filtración, se lavó con heptano y se secó al vacío para dar 3-amino-2-(trifluorometil)bencenotiol (7,19 g, 31,3 mmol). MS m/z 194,0 (M+H)+.

Intermedio S-5

3-cloro-2-c¡cloprop¡lp¡rid¡n-4-t¡olato de sodio

f01681

Etapa a: A una mezcla de 2,3-dicloro-4-yodopiridina (1,0 g, 3,65 mmol), XantPhos (127 mg, 0,219 mmol) y Pd(OAc)2 (41 mg, 0,183 mmol) en dioxano (7 ml) se le añadió 3-mercaptopropanoato de metilo (445 pl, 4,02 mmol) seguido de la adición de DIPEA (1,28 ml, 7,3 mmol) a TA y en atmósfera de N2. La solución resultante se agitó durante 4,5 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (25 ml). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 10 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((2,3-dicloropiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (965 mg, 5,38 mmol). MS m/z 266,1 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 3-((2,3-dicloropiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (800 mg, 3,19 mmol), n-BuPAd2 (86 mg, 0,240 mmol), Pd(OAc)2 (36 mg, 0,160 mmol), Cs2cO a (3,12 g, 9,58 mmol) y ciclopropiltrifluoroborato de potasio (709 mg, 4,79 mmol) en tolueno:H2O (10:1; 13 ml) se agitó durante 4,5 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NH⁴Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 10 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((3-cloro-2-ciclopropilpiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (380 mg, 1,398 mmol). MS m/z 272,1 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de 3-((3-cloro-2-ciclopropilpiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (380 mg, 1,398 mmol) en THF (5 ml) se le añadió etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 0,548 ml, 1,468 mmol) a TA y en atmósfera de N2. Después de agitar vigorosamente durante 30 min a TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 3-cloro-2-ciclopropilpiridin-4-tiolato de sodio (290 mg, 1,398 mmol) que se usó sin purificación adicional. MS m/z 186,1 (M+H)+.

Intermedio S-6

6-am¡no-2.3-diclorop¡r¡d¡n-4-t¡ol

f01691

Etapa a: A una solución a 0 °C de 5,6-dicloropiridin-2-amina (2,445 g, 15 mmol) en THF (60 ml) se le añadió LiHMDS (1 M en THF, 33,0 ml, 33,0 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó durante 10 min a 0 °C. Se añadió Boc2O (3,60 g, 16,5 mmol) en THF (20 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 15 min a esta temperatura. La mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA y se llevó hasta pH 4 usando HCl ac. 1 N. La capa acuosa se separó y se extrajo con EtOAc (2 x 20 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con NaHCO³sat. ac., se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar (5,6-dicloropiridin-2-il)carbamato de ferc-butilo (3,12 g, 11,86 mmol). MS m/z 207,8 (M+H-fBu)+.

Etapa b: A una solución a -78 °C de diisopropilamina (3,25 ml, 22,80 mmol) en THF (20 ml) se le añadió n-BuLi (2,5 M en hexanos, 9,12 ml, 22,80 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó durante 1 h a -78 °C. Se añadió (5,6-dicloropiridin-2-il)carbamato de ferc-butilo (3,0 g, 11,40 mmol) en THF (20 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 2 h a -78 °C. Se añadió I2 (3,04 g, 11,97 mmol) en THF (20 ml) y la mezcla se agitó durante 30 min -78 °C. Después de calentarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente con H2O y se extrajo con EtOAc (2 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con Na²S²O³sat. ac. y salmuera, se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar (5,6-dicloro-4-yodopiridin-2-il)carbamato de ferc-butilo (3,33 g, 4,792 mmol). MS m/z 332,8 (M+H-fBu)+.

Etapa c: A una solución de (5,6-dicloro-4-yodopiridin-2-il)carbamato de ferc-butilo (1,0 g, 2,57 mmol), XantPhos (89 mg, 0,154 mmol) y Pd(OAc)2 (29 mg, 0,129 mmol) en dioxano (10 ml) se le añadió 3-mercaptopropanoato de metilo (313 pl, 2,83 mmol) seguido de la adición de DIPEA (0,9 ml, 5,14 mmol) a TA y en atmósfera de N2. La solución resultante se agitó durante 2 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (20 ml) y se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (25 ml). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 25 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((6-((ferc-butoxicarbonil)amino)-2,3-dicloropiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (668 mg, 1,752 mmol). MS m/z 325,1 (M+H-fBu)+.

Etapa d: Una solución de 3-((6-((ferc-butoxicarbonil)amino)-2,3-dicloropiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (668 mg, 1,75 mmol) y TFA (1,35 ml) en DCM (10 ml) se agitó durante 1 h a TA. Después de este tiempo, los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 6-amino-2,3-dicloropiridin-4-tiol (342 mg, 1,75 mmol), que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 194,6 (M+H)+.

Intermedio S-7

3-(tr¡fluorometil)p¡r¡d¡n-4-t¡olato de sodio

roi7oi

Etapa a: Una solución de 4-cloro-3-(trifluorometil)piridina (535 mg, 2,95 mmol), carbonato de potasio (407 mg, 2,95 mmol) y 3-mercaptopropanoato de metilo (0,343 ml, 3,09 mmol) en DMF (8 ml) se agitó durante 1 h a TA. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (60 ml), se lavó con H2O (3 x 60 ml), se secó sobre MgSO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida para dar 3-((3-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)propanoato de metilo (710 mg, 2,68 mmol) como un aceite transparente. MS m/z 266,1 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 3-((3-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)propanoato de metilo (710 mg, 2,68 mmol) en THF (5,4 ml) se le añadió etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 1,01 ml, 2,94 mmol) a TA y en atmósfera de N2. Después de agitar vigorosamente durante 1 h a TA se añadió etóxido de sodio adicional (21 % en peso en EtOH, 0,25 ml, 0,44 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a TA. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se suspendió en DCM (3 ml). La suspensión se filtró y se secó a presión reducida para dar 3-(trifluorometil)piridin-4-tiolato de sodio (216 mg, 1,074 mmol) como un sólido castaño. MS m/z 180,1 (M+2H-Na)+.

Intermedio S-8

3-cloro-2-metilp¡ridin-4-tiolato de sodio

[01711

Etapa a: Una solución de 3,4-didoro-2-metilpiridina (3,05 g, 18,83 mmol), carbonato de potasio (2,73 g, 19,77 mmol) y 3-mercaptopropanoato de metilo (2,19 ml, 19,8 mmol) en DMF (25 ml) se agitó durante 4 h a TA. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (125 ml), se lavó con H2O (3 x 100 ml), se secó sobre MgSO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna sobre gel de sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) proporcionando 3-((3-cloro-2-metilpiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (1,07 g). MS m/z 246,0 (M+H)+. ¹H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 6 ppm 8,27 (d, J=5,27 Hz, 1 H), 6,97 (d, J=5,27 Hz, 1 H), 3,71-3,82 (m, 3 H), 3,26 (t, J=7,53 Hz, 2 H), 2,78 (t, J=7,53 Hz, 2 H), 2,63 (s, 3 H).

Etapa b: A una solución de 3-((3-cloro-2-metilpiridin-4-il)tio)propanoato de metilo (1,07 g, 4,35 mmol) en THF (9 ml) se le añadió etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 1,8 ml, 4,82 mmol) a TA y en atmósfera de N2. Después de agitar vigorosamente durante 1 h, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se suspendió en DCM (20 ml). El precipitado se retiró por filtración y se secó a presión reducida para dar 3-cloro-2-metilpiridin-4-tiolato de sodio como un polvo blanco (850 mg) como un sólido blanco. MS m/z 160,0 (M+H-Na)+. ¹H RMN (400 MHz, DMSO-de) 6 ppm 7,36 (d, J=5,31 Hz, 1 H), 6,97 (d, J=5,31 Hz, 1 H), 2,30 (s, 3 H).

Intermedio S-9

2-metox¡-3-(tr¡fluorometil)p¡r¡d¡n-4-t¡olato de sodio

r01721

Etapa a: A una solución a -78 °C de diisopropilamina (0,966 ml, 6,77 mmol) en THF (20 ml) se le añadió n-BuLi (1,6 M en hexanos, 4,23 ml, 6,77 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se agitó durante 5 min a -78 °C. Se añadió una solución de 2-metoxi-3-(trifluorometil)piridina (1,2 g, 6,77 mmol) en THF (10 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 2 h a -78 °C. Se añadió I2 (1,72 g, 6,77 mmol) en THF (5 ml) a -78 °C y la mezcla resultante se dejó calentar hasta TA en 30 min y se agitó adicionalmente a esta temperatura durante 30 min. Los volátiles se eliminaron a presión reducida, el residuo se disolvió en Et2O (200 ml). La capa orgánica se lavó secuencialmente con Na²S²O³sat. ac. (200 ml), NH⁴Cl sat. ac. (200 ml) y NaHCO³sat. ac. (200 ml), se secó sobre MgSO⁴, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 25 % de EtOAc/heptano) para dar 4-yodo-2-metoxi-3-(trifluorometil)piridina (540 mg, 1,354 mmol). MS m/z 304,0 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 4-yodo-2-metoxi-3-(trifluorometil)piridina (540 mg, 1,354 mmol), XantPhos (63 mg, 0,108 mmol) y Pd(OAc)2 (12 mg, 0,054 mmol) en dioxano (1,5 ml) se le añadió 3-mercaptopropanoato de metilo (158 |jl, 1,422 mmol) seguido de la adición de DIPEA (0,47 ml, 2,71 mmol) a TA y en atmósfera de N2. La solución resultante se agitó durante 30 min a 105 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (10 ml) y se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (15 ml). Los filtrados combinados se concentraron y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((2-metoxi-3-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)propanoato de metilo (344 mg, 1,165 mmol). MS m/z 296,1 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de 3-((2-metoxi-3-(trifluorometil)piridin-4-il)tio)propanoato de metilo (340 mg, 1,151 mmol) en THF (2,3 ml) se le añadió etóxido de sodio (21 % en peso en EtOH, 0,52 ml, 1,382 mmol) a TA y en atmósfera de N2. Después de agitar vigorosamente durante 30 min a TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se suspendió en DCM (10 ml). La suspensión resultante se filtró y se secó a presión reducida para dar 3-cloro-2-metilpiridin-4-tiolato (850 mg, 4,31 mmol) como un sólido blanco. Ms m/z 210 ,0 (M+H)+.

Intermedio S-10

2-(tr¡fluorometil)p¡r¡d¡n-3-t¡ol

r01731

Etapa a: A una solución de 3-bromo-2-(trifluorometil)piridina (1,0 g, 4,42 mmol), XantPhos (256 mg, 0,442 mmol), Pd²(dba)³(203 mg, 0,221 mmol) en dioxano (12 ml) en atm. de nitrógeno se le añadió 2-etilhexil-3-mercaptopropanoato (1,1 ml, 4,87 mmol) a TA seguido de la adición de DIPEA (1,55 ml, 8,85 mmol). La mezcla resultante se irradió en un reactor de MW durante 1 h a 110 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (25 ml). Los filtrados combinados se concentraron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)propanoato de 2-etilhexilo (1,41 g, 3,88 mmol). MS m/z 364,0 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)propanoato de 2-etilhexilo (1,0 g, 2,75 mmol) en THF (8 ml) se le añadió a -78 °C y en atm. de N2 ferc-butóxido de potasio (1 M en THF, 8,25 ml, 8,25 mmol). Después de agitar vigorosamente a -78 °C durante 20 min, la reacción se interrumpió con K2CO3 (2 M en H2O, 0,5 ml) y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se vertió en un embudo de separación que contenía K2CO3 (2 M en H2O, 30 ml). La mezcla se extrajo con Et2O (2 x 20 ml), la fase ac. se acidificó con HCl 6 N hasta pH 4 y la suspensión turbia resultante se extrajo con CHCb/IPA (9/1; 3 x 20 ml) para dar 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (380 mg, 2,12 mmol). MS m/z 180,0 (M+H)+.

Intermedio S-11

3-amino-2-clorobencenotiol

[01741

Etapa a: Una suspensión de 2-metilpropano-2-tiol (137 ml, 1216 mmol), 2-cloro-3-fluoroanilina (63,2 g, 437 mmol) y carbonato de cesio (283 g, 868 mmol) en DMF (650 ml) se agitó durante 16 h a 120 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (500 ml), se lavó con H2O y salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida para dar 3-(ferc-butiltio)-2-cloroanilina (111,2 g, 423 mmol). MS m/z 216,1 (M+H)+.

Etapa b: Una suspensión de 3-(ferc-butiltio)-2-cloroanilina (53 g, 246 mmol) y HCl conc. (700 ml) se agitó vigorosamente durante 8 h a 45 °C y durante 16 h a TA. Después de enfriarla hasta 0 °C, la suspensión se filtró, los sólidos se lavaron con HCl conc. (100 ml) y hexano (3 x 100 ml) y se secó a presión reducida para dar sal de cloruro de hidrógeno de 3-amino-2-clorobencenotiol (42 g, 214 mmol). Ms m/z 159,6 (M+H)+.

Intermedio B-1

4-fenilp¡perid¡n-4-am¡na

f01751

Etapa a: Una suspensión de W-(1-bencil-4-fenilpiperidin-4-il)acetamida (400 mg, 1,3 mmol) y Pd/C (10 % en peso, 138 mg) en MeOH se agitó vigorosamente durante 16 h en atmósfera de hidrógeno. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se disolvió en EtOAc y se lavó con NaHCO3 sat. ac. y salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida para dar W-(4-fenilpiperidin-4-il)acetamida que se llevó a la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa b: Una suspensión de N-(4-fen¡lpiperidm-4-¡l)acetam¡da (150 mg, 0,69 mmol) y LiOH 4 N (2,1 ml, 8,40 mmol) en MeOH/dioxano (1/1, 4 ml) se agitó durante 16 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida y la fase ac. restante se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para dar 4-fen¡lp¡perid¡n-4-amina como un aceite incoloro que se usó sin purificación adicional.

Intermedio B-2

(^-(pirazin^-iOpiperídin^-iDmetiDcarbamato de (ere-butilo

[01761

Etapa a: A una suspensión de hidruro de sodio (al 60 % en aceite de vaselina, 1,90 g, 47,7 mmol) en DMF (30 ml) se le añadió a 0 °C 2-(p¡raz¡n-2-¡l)aceton¡tr¡lo (1,90 g, 15,90 mmol) en DMF (5 ml) gota a gota en 10 min. La mezcla resultante se agitó 30 min a 0 °C. Se añadió N-bencil^-cloro-N-^-cloroetiOetanamina (4,7 g, 17,5 mmol) en DMF (5 ml) a 0 °C, la mezcla resultante se agitó durante 15 min a 0 °C y durante 16 h a 90 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con NaHCO³sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron, se concentraron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por trituración con hexano para dar 1-benc¡l-4-(p¡raz¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-4-carbon¡tr¡lo (1,60 g, 5,76 mmol).

Etapa b: A una solución de 1-benc¡l-4-(p¡raz¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-4-carbon¡tr¡lo (1,50 g, 5,39 mmol) en NH3 (7 N en MeOH, 50 ml) se le añadió níquel Raney (50 % en agua, 750 mg) a TA. La suspensión resultante se agitó vigorosamente en atm. de hidrógeno (413,7 kPa (60 psi)) a TA hasta que se consumió el material de partida (~16 h). La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con MeOH (50 ml). Los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar (1-benc¡l-4-(p¡raz¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)metanam¡na (1,20 g, 4,25 mmol), que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 319 (M+H)+.

Etapa c: Una solución de (1-benc¡l-4-(p¡raz¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)metanam¡na (1,20 g, 4,25 mmol), Et³N (1,17 ml, 8,51 mmol) y Boc2O (1,95 ml, 8,51 mmol) en DCM (50 ml) se agitó durante 2 h a TA. La reacción se diluyó con H2O y se extrajo con DCM (3 x 25 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-benc¡l-4-(p¡raz¡n-2-¡l)p¡peridin-4-il)metil)carbamato de (ere-butilo (1,30 g, 3,40 mmol). MS m/z 383 (M+H)+.

Etapa d: Una suspensión de ((1-benc¡l-4-(p¡raz¡n-2-¡l)p¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de (ere-butilo (1,50 g, 3,93 mmol) y Pd(OH)2 (20 % sobre carbono, 600 mg, 50 % de humedad) en MeOH (20 ml) se agitó vigorosamente en atm. de hidrógeno (344,7 kPa ((50 psi)) durante 3 h a TA. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con MeOH (50 ml). Los volátiles se eliminaron a presión reducida y para dar (^-(p irazin^-i^piperid in^-il)metil)carbamato de (ere-butilo (1,10 g, 3,76 mmol), que se usó sin purificación adicional. MS m/z 283 (M+H)+.

Los siguientes intermedios de la tabla 3 se prepararon usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando los correspondientes acetonitrilos heteroaromáticos disponibles en el mercado.

Tabla 3

Intermedio B-3

((4-¡sobut¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de (ere-butilo

[01781

Etapa a: A una soluc¡ón de LHMDS (1 M en THF, 16,45 ml, 16,45 mmol) se le añad¡ó una soluc¡ón de 1-benc¡lp¡per¡d¡n-4-carbon¡tr¡lo (1,50 g, 7,49 mmol) en THF (37,4 ml) a -78 °C. La soluc¡ón amar¡lla resultante se ag¡tó durante 1 h a -78 °C. Se añad¡ó 1-yodo-2-met¡lpropano (5,60 ml, 48,7 mmol) y la mezcla de reacc¡ón se dejó calentar hasta TA y la ag¡tac¡ón se cont¡nuó durante 3 días. Se añad¡ó NH4Cl ac. saturado (~30 ml) a 0 °C y la mezcla se extrajo con EtOAc. La fase orgán¡ca se lavó con agua (50 ml) y salmuera (50 ml). Cada capa ac. se extrajo con EtOAc y las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre Na2SO4, se f¡ltraron y se concentraron a pres¡ón reduc¡da para dar 1-benc¡l-4-¡sobut¡lp¡per¡d¡n-4-carbon¡tr¡lo en bruto (2,54 g) como un ace¡te amar¡llo, que se usó d¡rectamente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. MS m/z 257,3 (M+H)+.

Etapa b: Una soluc¡ón de 1-benc¡l-4-¡sobut¡lp¡per¡d¡n-4-carbon¡tr¡lo en bruto (2,48 g), Boc2O (6,33 g, 29,0 mmol) y cloruro de níquel(II) h¡drato (1,15 g, 4,84 mmol) en MeOH (38,7 ml) se ag¡tó durante 15 m¡n a TA. Se añad¡ó boroh¡druro de sod¡o (2,56 g, 67,7 mmol) a 0 °C en porc¡ones y la ag¡tac¡ón se cont¡nuó durante 18 h a TA. Se añad¡ó boroh¡druro de sod¡o ad¡c¡onal (2,56 g, 67,7 mmol) a 0 °C y la mezcla resultante se ag¡tó durante 18 h a 35 °C. Después de enfr¡ar hasta TA, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da, el res¡duo resultante se suspend¡ó en DCM (100 ml) y se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te. El f¡ltrado se concentró a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-benc¡l-4-¡sobut¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de (ere-but¡lo (482 mg, 1,34 mmol) como un ace¡te ¡ncoloro. MS m/z 361,4 (M+H)+.

Etapa c: Una suspens¡ón de ((1-benc¡l-4-¡sobut¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de (ere-but¡lo (482 mg, 1,34 mmol) y Pd/C (10 % en peso, 142 mg) en MeOH (6,7 ml) se ag¡tó v¡gorosamente durante 18 h en atmósfera de h¡drógeno. La mezcla se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te segu¡do de lavado con MeOH y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da para dar ((4-¡sobut¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de (ere-but¡lo (338 mg, 1,25 mmol) que se usó d¡rectamente s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. MS m/z 271,3 (M+H)+.

Los s¡gu¡entes compuestos se s¡ntet¡zaron usando el proced¡m¡ento anter¡or o mod¡f¡cac¡ones al proced¡m¡ento anter¡or usando el correspondente yodoalcano.

Tabla 4

Intermedio B-4

frans-((3-h¡drox¡-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo racém¡co

roi8oi

Etapa a: A una solución de hidruro de litio (0,118 g, 14,8 mmol) en THF (20 ml) se le añadió cianohidrina de acetona (1,4 ml, 14,8 mmol) a 0 °C. La mezcla de reacción resultante se agitó durante 2 h a TA. Los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar un sólido blanco. A una solución de este sólido en THF (60 ml) se le añadió 3-bencil-6-metil-7-oxa-3-azabiciclo[4.1.0]heptano (2,0 g, 9,85 mmol) gota a gota a TA. La solución se calentó durante 14 h a reflujo. Después de enfriar hasta Ta , se añadió agua (10 ml) y la mezcla resultante se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 20 % de EtOAc/heptano) para obtener trans-1-bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-carbonitrilo racémico (0,70 g, 3,0 mmol). ¹H RMN (400 MHz, DMSO-da) 5 ppm 7,36-7,22 (m, 5 H), 5,25 (d, J=6,0 Hz, 1 H), 3,70-3,67 (m, 1 H), 3,49 (dd, J=13,2, 10.4 Hz, 2 H), 2,37 (m, 3 H), 1,88-1,74 (m, 2 H), 1,25 (s, 3 H). MS m/z 231,2 (M+H)+.

Etapa b: Una suspensión de trans-1 -bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-carbonitrilo racémico (1,3 g, 5,6 mmol) y níquel Raney (50 % en agua, 600 mg) en amoniaco (7 N en EtOH; 80 ml) se agitó vigorosamente en atm. de hidrógeno (globo) durante 6 h a TA. La mezcla se filtró a través de Celite en atmósfera de N2 y se lavó con MeOH. Los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar trans-4-(aminometil)-1-bencil-4-metilpiperidin-3-ol (1 ,6 g, 4,79 mmol) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 235,2 (M+H)+.

Etapa c: Una solución de trans-4-(aminometil)-1-bencil-4-metilpiperidin-3-ol (1,6 g, 4,79 mmol), Boc2O (2,84 ml, 12.4 mmol) y NaHCO³(0,935 g, 11,1 mmol) en CHCb (70 ml) se agitó durante 14 h a TA. La mezcla se diluyó con DCM y se lavó con agua enfriada en hielo y salmuera, se secó sobre Na²SO⁴, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 5 % de MeOH/DCM) para dar trans-(1-bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo racémico (1,1 g, 3,3 mmol). MS m/z 335,3 (M+H)+.

Etapa d: Una suspensión de trans-((1-bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo racémico (1,1 g, 3,3 mmol) y Pd(OH)2 (20 % sobre carbón; 0,250 g) en MeOH (60 ml) se agitó vigorosamente en atm. de hidrógeno (globo) durante 6 h a TA. La mezcla resultante se filtró a través de Celite, se lavó con MeOH y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró en hexano (10 ml) y éter dietílico (2 ml) para dar trans-((3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo racémico (0,70 g, 2,87 mmol) como un polvo blanco. ¹H RMN (400 MHz, Metanol-^) 5 ppm 3,42 (dd, J=9,9, 4,4 Hz, 1 H), 3,12 (d, J=13,9 Hz, 1 H), 2,94-2,84 (m, 2 H), 2,82-2,68 (m, 2 H), 2,62 (dd, J=12,5, 10,0 Hz, 1 H), 1,44 (s, 9 H), 1,41-1,30 (m, 2 H), 0,91 (s, 3 H). MS m/z 245,1 (M+H)+.

Intermedio B-5

c;'s-((3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo racémico

Í01811

Etapa a: Una solución de trans-1-bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-carbonitrilo racémico (2,0 g, 8,70 mmol), trifenilfosfina (3,41 g, 13,0 mmol) y DIAD (2,63 g, 13,0 mmol) en Th F (30 ml) se agitó durante 10 min a 0 °C. Se añadió ácido 4-nitrobenzoico (2,18 g, 13,0 mmol) en porciones y la mezcla resultante se agitó durante 16 h a TA. La mezcla se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc. Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se trituró con MeOH para dar 4 nitrobenzoato de c/'s-1-bencil-4-ciano-4-metilpiperidin-3-ilo racémico (1,5 g, 3,96 mmol) que se usó sin purificación adicional. MS m/z 380 (M+H)+.

Etapa b: Una solución de 4-nitrobenzoato de c/s-1-bencil-4-ciano-4-metilpiperidin-3-ilo racémico (1,5 g, 3,96 mmol) y carbonato de potasio (1,07 g, 7,92 mmol) en MeOH (20 ml) se agitó vigorosamente durante 10 min a 0 °C y durante 1 h a TA. Los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con agua y se extrajo con EtOAc (3 x). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 15 % de EtOAc/heptano) para dar c/s-1 -bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-carbonitrilo racémico (0,8 g, 3,5 mmol). 1H RMN (400 MHz, CDCla) ó ppm 7,36-7,26 (m, 5 H), 3,99 (d, J=12,4 Hz, 1 H), 3,67 (d, J=12,8, 1 H), 3,60-3,51 (m, 2 H), 3,11-3,07 (m, 2 H), 2,76-2,69 (m, 2 H), 2,24 (dd, J=12,8, 6,0 Hz, 1 H), 1,87-1,80 (m, 1 H), 1,54 (s, 3 H). MS m/z 231 (M+H)+.

Etapa c: Una suspensión de c/s-1 -bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-carbonitrilo (800 mg, 3,5 mmol) y níquel Raney (50 % en agua, 700 mg) en amoniaco (7 N en EtOH; 20 ml) se agitó vigorosamente en atm. de hidrógeno (globo) durante 16 h a TA. La mezcla se filtró a través de Celite en atm. de N2 y se aclaró con MeOH. Los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar c/s-4-(aminometil)-1-bencil-4-metilpiperidin-3-ol racémico (700 mg, 3,0 mmol) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 235,2 (M+H)+.

Etapa d: Una solución de c/'s-4-(aminometil)-1-bencil-4-metilpiperidin-3-ol (700 mg, 3,0 mmol), Boc2O (1,1 ml, 2,99 mmol) y Et3N (860 |jl, 5,98 mmol) en DCM (10 ml) se agitó durante 2 h a TA. La mezcla se diluyó con DCM y se lavó con agua enfriada en hielo y salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar c/'s-(1-bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo racémico (700 mg, 2,10 mmol) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 335 (M+H)+.

Etapa e: Una suspensión de c/s-(1-bencil-3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo racémico (700 mg, 2,1 mmol) y Pd (10 % sobre carbón; 300 mg) en MeOH (20 ml) se agitó vigorosamente en atm. de hidrógeno (globo) durante 5 h a TA. La mezcla resultante se filtró a través de Celite, se lavó con MeOH y se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeoH/DCM) para dar c/s-((3-hidroxi-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo racémico (200 mg, 0,8 mmol) como un polvo blanco. 1H RMN (400 MHz, M etano l^) ó ppm 3,73-3,67 (m, 1 H), 3,59 (dd, J=11,1, 7,7 Hz, 1 H), 3,15-2,99 (m, 4 H), 1,90 (m, 1 H), 1,62 (m, 1 H), 1,47 (m, 1 H), 1,44 (s, 9 H), 0,96 (s, 3 H). MS m/z 245 (M+H)+.

Intermedios B-6

1-(1.1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-2.2-d¡fluoro-8-azaespiro[4.51decano-8-carbox¡lato de ferc-butilo racémico

r0182 l

Etapa a: A una solución de NHMDS (1 M en THF, 8 ,68 ml, 8,68 mmol) se le añadió una solución de 1-oxo-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-butilo (2,0 g, 7,89 mmol) en THF (5 ml) a -78 °C. Después de agitar durante 30 min a esta temperatura, se añadió una solución de W-fluorobencenosulfonamida (2,49 g, 7,89 mmol) en THF (10 ml). Después de agitar durante 3 h a -78 °C, la mezcla se diluyó con NaHCO³sat. ac. (100 ml) y se extrajo con DCM (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na²SO⁴, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 25 % de EtOAc/heptano) para dar 2-fluoro-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo racémico (351 mg, 1,29 mmol)MS m/z 272,1 (M+H)+, y 2,2-difluoro-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo que coeluyó con el material de partida. Las fracciones combinadas que contenían difluorocetona se purificaron por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 5 % de MeOH/DCM) para dar 2,2-difluoro-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (573 mg, 1,98 mmol). MS m/z 290,1 (M+H)+.

Etapa b: Una solución de 2,2-difluoro-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (220 mg, 0,76 mmol), 2-metilpropano-2-sulfinamida racémica (184 mg, 1,52 mmol) y etóxido de titanio(IV) (0,640 ml, 3,0 mmol) en THF (4 ml) se agitó durante 30 min a 90 °C. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió borohidruro de litio (33 mg, 1,5 mmol) en una porción. Después de agitar durante 30 min, la mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de MeOH. Los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con salmuera y se extrajo con EtOAc (4 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 10 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 1-(1,1-dimetiletilsulfinamino)-2,2-difluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo racémico como un polvo blanco (190 mg, 0,48 mmol). MS m/z 395,2 (M+H)+.

Intermedios B-7

1-((ffl-1,1-dimetiletilsulfinamino)-2-fluoro-8-azaespiro[4.51decano-8-carboxilato de ferc-butilo

[0183]

Una solución de 2-fluoro-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo racémico (78 mg, 0,28 mmol), etóxido de titanio(IV) (235 pl, 1,1 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (68 mg, 0,56 mmol) en THF (1,5 ml) se agitó durante 1 h a 90 °C. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió borohidruro de litio (12 mg, 0,56 mmol) en una porción. Después de agitar durante 30 min, la mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de MeOH. Los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con salmuera y se extrajo con EtOAc (4 x 10 ml), las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-2-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (mezcla de isómeros, 64 mg, 0,17 mmol). MS m/z 377,3 (M+H)+.

Intermedios B-8

1-oxo-8-azaesp¡ro[4.51dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo

[0185]

Etapa a: Una mezcla de 4-formilpiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (35,0 g, 164 mmol), ferc-butóxido de litio (15,77 g, 197 mmol) y alilbromuro (11,54 ml, 189 mmol) en DMF (328 ml) se agitó durante 1 h a 0 °C. La mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NH⁴Cl sat. ac./ H2O (1/1, 500 ml) y se extrajo con Et2O (5 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 25 % de EtOAc/heptano) para dar 4-alil-4-formilpiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (24 g, 95 mmol) como un aceite incoloro. ¹H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 9,52 (s, 1 H), 5,53-5,76 (m, 1 H), 4,96-5,19 (m, 2 H), 3,80 (s a, 2 H), 2,97 (t, J=11,49 Hz, 2 H), 2,26 (d, J=7,33 Hz, 2 H), 1,95 (dt, J=13,71, 3,13 Hz, 2 H), 1,38-1,58 (m, 11 H).

Etapa b: A una solución de 4-alil-4-formilpiperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (24 g, 95 mmol) en THF (300 ml) en atm. de N2 se le añadió bromuro de vinil magnesio (1 M en THF, 118 ml, 118 mmol) a -78 °C. La mezcla resultante se dejó calentar hasta TA en 1 h. La mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NH⁴Cl sat. ac. (250 ml) y se extrajo con EtOAc (4 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 4-alil-4-(1-hidroxialil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (26,7 g, 95 mmol) como un aceite incoloro que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 9,52 (s, 1 H), 5,56-5,75 (m, 1 H), 5,05-5,18 (m, 2 H), 3,80 (s a., 2 H), 2,97 (t, J=11,49 Hz, 2 H), 2,26 (d, J=7,33 Hz, 2 H), 1,96 (dt, J=13,83, 3,06 Hz, 2 H), 1,49-1,60 (m, 2 H), 1,41-1,49 (m, 9 H).

Etapa c: Una mezcla de 4-alil-4-(1-hidroxialil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (26,7 g, 95 mmol) y peryodinano de Dess-Martin (44,3 g, 105 mmol) en DCM (380 ml) se agitó durante 1 h a TA. La mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NaHCO3 sat. ac./Na2SO3 (1/1, 300 ml) y se extrajo con DCM (4 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para proporcionar un sólido blanco. Este sólido se suspendió en heptano (250 ml) y se sonicó durante 5 min. La suspensión blanca se filtró a través de una capa de Celite y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 4-acriloil-4-alilpi peridin-1-carboxilato de ferc-butilo (26,5 g, 95 mmol) como un aceite amarillo que se usó en la siguiente reacción sin purificación adicional. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 6,81 (dd, J=16,93, 10,36 Hz, 1 H), 6,40 (dd, J=16,80, 1,89 Hz, 1 H), 5,71 (dd, J=10,36, 2,02 Hz, 1 H), 5,46-5,66 (m, 1 H), 4,91-5,14 (m, 2 H), 3,78 (s a., 2 H), 2,96 (s a, 2 H), 2,25-2,39 (m, 2 H), 1,97-2,15 (m, 2 H), 1,37-1,57 (m, 11 H).

Etapa d: A una solución de 4-acriloil-4-alilpiperidin-1 -carboxilato de ferc-butilo (26,5 g, 95 mmol) en tolueno (desgasificado, 850 ml) se le añadió catalizador de Grubbs II (2,02 g, 2,38 mmol) en tolueno (desgasificado, 100 ml). La mezcla resultante se agitó durante 45 min a 85 °C. El disolvente se eliminó a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar 1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo (20,76 g, 83 mmol) como un sólido pardo. Una solución de este compuesto y DDQ (565 mg, 2,49 mmol) en tolueno (540 ml) se agitó durante 15 min a Ta . La solución roja brillante resultante se filtró a través de una capa de Celite. Se añadió carbón vegetal (200 g) al filtrado y la suspensión resultante se agitó durante 2 h a TA. La mezcla se filtró a través de una capa de Celite y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar ferc-butil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato (15,6 g, 62,3 mmol) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 7,63-7,74 (m, 1 H), 6,20 (dt, J=5,81,2,15 Hz, 1 H), 3,99-4,25 (m, 2 H), 2,92 (t, J=11,62 Hz, 2 H), 2,63 (s, 2 H), 1,72-1,86 (m, 2 H), 1,49 (s, 9 H), 1,29 (d, J=12,88 Hz, 2 H).

Intermedio B-9

1-((ffl-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-metil-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R3ffl-bencilo

Í01861

Etapa a: A una suspensión de 1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo (4,2 g, 16,71 mmol) y Cul (6,37 g, 33,4 mmol) en Et2O (100 ml) en atm. de N2 se le añadió MeLi (1,6 M en THF, 31,3 ml, 50,1 mmol) a 0 °C. Después de agitar durante 90 min a 0 °C, la mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo (4,23 g, 15,82 mmol) como un aceite incoloro. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 3,89-4,00 (m, 1 H), 3,83 (d, J=13,39 Hz, 1 H), 3,11 (ddd, J=13,64, 10,36, 3,28 Hz, 1 H), 2,99 (ddd, J=13,58, 10,42, 3,54 Hz, 1 H), 2,47-2,59 (m, 1 H), 2,19-2,36 (m, 2 H), 1,74-1,97 (m, 2 H), 1,50-1,65 (m, 2 H), 1,48 (s, 9 H), 1,33-1,44 (m, 2 H), 1,17 (d, J=6,32 Hz, 3 H).

Etapa b: Una mezcla de 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo (4,23 g, 15,82 mmol) y TFA (17 ml) en DCM (80 ml) se agitó durante 30 min a Ta . Los volátiles se eliminaron a presión reducida. Una mezcla del residuo resultante, DIPEA (13,82 ml, 79 mmol) y cloroformiato de bencilo (3,39 ml, 23,73 mmol) se agitó durante 16 h a TA. La mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con DCM (3 x 25 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (4,58 g, 15,20 mmol) como un aceite amarillo claro. MS m/z 302,2 (M+H)+.

Etapa c: El 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (4,58 g, 15,20 mmol) se purificó adicionalmente por SFC quiral de la siguiente manera: columna: IA 21 x 250 mm, caudal: 70 g por minuto, fase móvil: 45 % (9/1 de EtOH/MeCN) en CO2, detección: UV a 220 nm para dar 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-bencilo (2,02 g, 6,70 mmol) Tr: 2,0 min; y 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (S)-bencilo (2,11 g, 7,0 mmol), Tr: 3,6 min.

Etapa d: Una solución de 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-bencilo (2,02 g, 6,70 mmol), etóxido de titanio(IV) (5,62 ml, 26,8 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1,625 g, 13,4 mmol) en THF (67 ml) se agitó durante 16 h a 65 °C. La mezcla se enfrió hasta -78 °C, se añadió MeOH (12 ml) seguido de borohidruro de litio (0,438 g, 20,11 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 16 h a -78 °C hasta TA. Se añadió NH⁴Cl saturado ac. lentamente para inactivar el exceso de borohidruro seguido de la adición de EtOAc (100 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 15 min y después se filtró a través de una capa de Celite. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 5 a un 90 % de EtOAc/heptano) para dar 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-metil-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3R)-bencilo (1,94 g, 4,77 mmol) como un sólido blanco. MS m/z 407,3 (M+H)+.

Se sintetizó 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-metil-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3S)-bencilo usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (S)-bencilo como material de partida.

Intermedio B-10

3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato) de (1R,3R)-tercbutilo

r01881

Etapa a: Una mezcla de CuCl (142 mg, 1,432 mmol), (S)-TolBINAP (972 mg, 1,432 mmol) y terc-butóxido de sodio (138 mg, 1,432 mmol) en THF (60 ml) se agitó durante 30 min a TA. Se añadió bis(pinacolato)diborano (13,34 g, 52,5 mmol) en THF (20 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 10 min a TA. Se añadió 1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de terc-butilo (12,0 g, 47,7 mmol) en THF (50 ml) seguido de MeOH (3,9 ml, 95 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 16 h a TA. Se añadió H2O (150 ml) seguido de perborato de sodio (36,7 g, 239 mmol) y la mezcla resultante se agitó vigorosamente a TA durante 1 h. La suspensión verde resultante se filtró a través de una capa de Celite, se vertió en un embudo de separación que contenía NaHCO³sat. ac./Na²SO³(1/1, 300 ml) y se extrajo con EtOAc (4 x 40 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 3-hidroxi-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-terc-butilo en bruto. La determinación enantiomérica de esta mezcla muestra un 90 % ee (Tr(S): 1,59 min, Tr(R): 1,80 min; SFC quiral; columna: IA 4,6 x 100 mm, caudal: 70 g por minuto, fase móvil: 5-55 % de MeOH en CO2, detección: UV a 220 nm). Una mezcla de 3-hidroxi-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-terc-butilo en bruto (47,7 mmol), imidazol (4,87 g, 71,6 mmol) y TBSCl (8,99 g, 59,6 mmol) en DMF (120 ml) se agitó durante 16 h a TA. La mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NH⁴Cl sat. ac./H2O (1/1, 250 ml) y se extrajo con Et2O (5 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO⁴, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-terc-butilo (13,115 g, 34,2 mmol) como un aceite incoloro que solidificó después de un periodo de reposo.

Etapa b: Una solución de 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-terc-butilo (8,0 g, 20,86 mmol), etóxido de titanio(IV) (17,49 ml, 83,0 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (5,06 g, 41,7 mmol) en THF (100 ml) se agitó durante 16 h a 65 °C. Después de enfriar hasta -78 °C, se añadió MeOH (15 ml) seguido de borohidruro de litio (1,363 g, 62,6 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 16 h a -78 °C. Se añadió NH4Cl saturado ac. lentamente para inactivar el exceso de borohidruro seguido de la adición de EtOAc (100 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 15 min y después se filtró a través de una capa de Celite. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 3-((terc-butildimetilsilil)oxi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-8 azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3R)-ferc-but¡lo (5,3 g, 10,84 mmol) como un sólido blanco. MS m/z 489,3 (M+H)+ y 389,3 (M+H-Boc)+.

Intermedio B-11

1-((ffl-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R3ffl-terc-but¡lo

Í01891

Una mezcla de 3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-ferc-but¡lo (3,84 g, 7,86 mmol) y TBAF (1 M en THF; 8,64 ml, 8,64 mmol) en THF (40 ml) se ag¡tó durante 30 m¡n a TA. Los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 10 % de MeOH/DcM) para dar 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-ferc-but¡lo (2,94 g, 7,86 mmol). MS m/z 375,3 (M+H)+.

Intermedio B-12

1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3S)-terc-but¡lo

ro i9 n

Etapa a: A una soluc¡ón de 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-ferc-but¡lo (3,0 g, 8,01 mmol), tr¡fen¡lfosf¡na (4,2 g, 16,02 mmol) y ác¡do ¡soqu¡nol¡n-1-carboxíl¡co (4,16 g, 24,03 mmol) en Th F (80 ml) se le añad¡ó DIAD (3,1 ml, 16,02 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó durante 1 h a TA. La reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc (50 ml), se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te, se vert¡ó en un embudo de separac¡ón que contenía NaHCO3 sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 4 % de MeOH/DCM) para dar ¡soqu¡nol¡n-1-carbox¡lato de (2S,4R)-8-(fercbutox¡carbon¡l)-4-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-8-azaesp¡ro[4.5]decan-2-¡lo (3,65 g, 6,89 mmol) como un sól¡do naranja. MS m/z 530,3 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de ¡soqu¡nol¡n-1-carbox¡lato de (2S,4R)-8-(ferc-butox¡carbon¡l)-4-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-8-azaesp¡ro[4.5]decan-2-¡lo (3,65 g, 6,89 mmol) e h¡dróx¡do de l¡t¡o (2,95 g, 68,9 mmol) en THF/H2O (1/1, 70 ml) se ag¡tó durante 2 h a TA. La mezcla se vert¡ó en un embudo de separac¡ón que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3S)-ferc-but¡lo (2,35 g, 6,27 mmol) como un sól¡do blanco. MS m/z 275,2 (M+H-Boc)+.

Intermedio B-13

1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-metox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3S)-terc-but¡lo

f01921

Una mezcla de 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3S)-ferc-but¡lo (500 mg, 1,335 mmol), óx¡do de plata(I) (340 mg, 1,468 mmol) y yodometano (0,25 ml, 4,0 mmol) en DCM (5 ml) se ag¡tó (proteg¡do de la luz) durante 24 h a TA y 24 h a 45 °C. Después de enfr¡arla hasta TA, la mezcla se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 5 % de MeOH/DCM) para dar 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-metox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3S)-ferc-but¡lo (248 mg, 0,638 mmol). MS m/z 289,2 (M+H-Boc)+.

Se s¡ntet¡zó 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-metox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-ferc-but¡lo usando el proced¡m¡ento anter¡or o mod¡f¡cac¡ones al proced¡m¡ento anter¡or usando 1-((R)-1 ,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-ferc-but¡lo como mater¡al de part¡da.

Intermedio B-14

1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-3.3-d¡fluoro-8-azaesp¡ro[4.51decano-8-carbox¡lato de terc-but¡lo racém¡co

r0195l

Etapa a: Una mezcla de 3-((ferc-but¡ld¡met¡ls¡l¡l)ox¡)-1-(1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-but¡lo (365 mg, 0,746 mmol) y HCl (4 M en d¡oxano, 1,86 ml, 7,46 mmol) en MeOH (4 ml) se ag ¡tó durante 1 h a 40 °C. Después de enfr¡ar hasta TA, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da para dar 4-am¡no-8-azaesp¡ro[4.5]decan-2-ol en bruto como un sól¡do blanco. MS m/z 171,1 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 4-am¡no-8-azaesp¡ro[4.5]decan-2-ol en bruto, DIPEA (2,6 ml, 14,92 mmol) y Boc2O (407 mg, 1,865 mmol) en THF (15 ml) se ag¡tó durante 16 h a TA. La mezcla se vert¡ó en un embudo de separac¡ón que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con Et2O (5 x 10 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4, se f¡ ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 10 a un 80 % de EtOAc/heptano) para dar 1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-but¡lo (275 mg, 0,742 mmol). MS m/z 271,3 (M+H-Boc)+.

Etapa c: Una mezcla de 1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-but¡lo (275 mg, 0,742 mmol) y peryod¡nano de Dess-Mart¡n (472 mg, 1,113 mmol) en DCM (7,5 ml) se ag¡tó durante 2 h a 0 °C. La mezcla se vert¡ó en un embudo de separac¡ón que contenía NaHCO3 sat. ac. y se extrajo con DCM (3 x 10 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 5 a un 75 % de EtOAc/heptano) para dar 1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-3-oxo-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-but¡lo (135 mg, 0,366 mmol). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 6 ppm 4,57 (d, J=9,09 Hz, 1 H), 4,16 (d, J=8,08 Hz, 1 H), 3,89-4,08 (m, 2 H), 2,77-2,93 (m, 2 H), 2,71 (dd, J=18,95, 8,08 Hz, 1 H), 2,50 (d, J=18,19 Hz, 1 H), 2,07-2,24 (m, 2 H), 1,76 (td, J=12,82, 4,67 Hz, 1 H), 1,58-1,70 (m, 1 H), 1,42-1,53 (m, 18 H), 1,25-1,38 (m, 1 H).

Etapa d: Una mezcla de 1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-3-oxo-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-but¡lo (95 mg, 0,258 mmol) y DeoxoFluor (190 pl, 1,031 mmol) en DCM (1 ml) se ag¡tó durante 48 h a 50 °C. La mezcla se vert¡ó en un embudo de separac¡ón que contenía NaHCO3 sat. ac./h¡elo y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4, se f¡ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar 1-((fercbutox¡carbon¡l)am¡no)-3,3-d¡fluoro-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-but¡lo (52 mg, 0,133 mmol). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 6 ppm 4,55 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 3,78-4,02 (m, 3 H), 2,64-2,86 (m, 2 H), 2,38-2,59 (m, 1 H), 2,10-2,32 (m, 1 H), 1,79-2,10 (m, 2 H), 1,58 (cd, J=12,72, 3,79 Hz, 1 H), 1,27-1,52 (m, 21 H).

Se sintetizó 1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3,3-difluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-ferc-butilo usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el 3-((ferc-butildimetilsilil)oxi)-1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3R)-ferc-butilo quiralmente puro como material de partida.

Intermedio B-15

1-((ft)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R3S)-terc-butilo

r0197l

Una mezcla de 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-hidroxi-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3R)-ferc-butilo (400 mg, 1,068 mmol) y DAST (1 M en DCM, 1,87 ml, 1,87 mmol) en Dc M (8,5 ml) se agitó durante 90 min a 0 °C. La mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de NaHCO3 sat. ac. (5 ml). Después de agitar durante 10 min a 0 °C, las fases se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2 x 5 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3S)-ferc-butilo que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 277,2 (M+H-Boc)+.

Intermedio B-16

1-((ft)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R3ft)-terc-butilo

r0199l

Una mezcla de 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-hidroxi-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3S)-ferc-butilo (200 mg, 0,534 mmol) y DAST (1 M en DCM, 934 pl, 0,934 mmol) en DCM (5 ml) se agitó durante 90 min a 0 °C. La mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de NaHCO3 sat. ac. (5 ml). Después de agitar durante 10 min a TA, las fases se separaron y la capa ac. se extrajo con DCM (2 x 5 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-fluoro-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3R)-ferc-butilo que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 277,2 (M+H-Boc)+.

Intermedio B-17

4-oxo-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decano-8-carbox¡lato de tere-butilo

r0201i

Siguiendo los procedimientos de Dirat et al., documento WO2004/078750, 16 de septiembre de 2004, se preparó 4-hidroxi-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de tere-butilo a partir de 4-etil piperidin-1,4-dicarboxilato de 1-terebutilo en cuatro etapas. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 6 ppm 4,13 (dd, J=10,1, 4,6 Hz, 1 H), 4,03 (dd, J=4,6, 2,0 Hz, 1 H), 3,78-3,71 (m, 2 H), 3,69 (d, J=8,6 Hz, 1 H), 3,67-3,58 (m, 2 H), 3,29 (m, 1 H), 3,16 (m, 1 H), 1,78 (m, 2 H), 1,58 (m, 1 H), 1,50 (m, 2 H), 1,47 (s, 9 H). MS m/z 258,1 (M-H)+.

Una solución de 4-hidroxi-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de tere-butilo (544 mg, 2,11 mmol) y peryodinano de Dess-Martin (1,39 g, 3,17 mmol) en DCM (10 ml) se agitó durante 2 h a 0 °C. Se añadió NaHCo3 saturado ac./Na2S2O3 (1/1, 10 ml), la fase orgánica se separó y la fase ac. se extrajo con DCM (3 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de tere-butilo (470 mg, 1,84 mmol) como un aceite incoloro que cristalizó después de un periodo de reposo. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 6 ppm 4,08 (s, 2 H), 4,05 (s, 2 H), 3,88 (dt, J=13,7, 4,9 Hz, 2 H), 3,12 (ddd, J=13,6, 9,8, 3,6 Hz, 2 H), 1,75 (ddd, J=13,9, 9,7, 4,2 Hz, 2 H), 1,58-1,51 (m, 2 H), 1,48 (s, 9 H). MS m/z 256,2 (M+H)+.

Intermedio B-18

4-((ft)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-2-oxa-8-azaespiro[4.51decano-8-carboxilato de (S)-terc-butilo

r02041

Una solución de 4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de tere-butilo (220 mg, 0,86 mmol), etóxido de titanio(IV) (725 pl, 3,45 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (209 mg, 1,72 mmol) en THF (4 ml) se agitó durante 1 h a 90 °C. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió borohidruro de litio (23 mg, 1,06 mmol). Después de agitar durante 30 min, la mezcla de reacción se inactivó mediante la adición de MeOH. Los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se diluyó con salmuera y se extrajo con EtOAc (4 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (S)-tere-butilo (170 mg, 0,47 mmol). MS m/z 361,1 (M+H)+.

Los siguientes compuestos de la tabla 5 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando la correspondiente cetona y sulfonamida.

Tabla 5

Intermedio B-19 y B-20

4-((R)-1.1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (3S.4S)-ferc-butilo y 4-((R)-1.1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (3R.4S)-ferc-butilo

102071

Etapa a: A una solución de 4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (2.47 g. 9.67 mmol) en THF (24 ml) se le añadió LHMDS (1 M en THF. 9.67 ml. 9.67 mmol) a -78 °C. Después de agitar la mezcla durante 30 minutos a esta temperatura. se añadió yodometano (0.605 ml. 9.67 mmol) en t Hf (10 ml). La mezcla resultante se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y NaHCO³sat. ac. La capa orgánica se lavó con salmuera. se secó sobre Na²SO⁴. se filtró y se concentró a presión reducida. El aceite pardo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 20 % de EtOAc/heptano) para dar 3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (318 mg. 1.18 mmol). MS m/z 270.2 (M+H)+.

Etapa b: Una solución de 3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-butilo (318 mg. 1.18 mmol). etóxido de titanio(IV) (990 pl. 4.72 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (286 mg. 2.361 mmol) en THF (4 ml) se agitó durante 90 min a 90 °C. Después de enfriar hasta 0 °C. se añadió borohidruro de litio (65.3 mg.

3.00 mmol) en una porción y la mezcla resultante se agitó durante 16 h a TA. Se añadió NH⁴Cl saturado ac. lentamente para inactivar el exceso de borohidruro seguido de la adición de EtOAc (25 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 15 min y después se filtró a través de una capa de Celite. La fase orgánica se lavó con NaHCO³sat. ac. y salmuera. se secó sobre Na²SO⁴. se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar 4-((R)-1.1-d¡met¡let¡lsulfinam¡no)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (4S)-ferc-butilo (88 mg. 0.235 mmol). MS m/z 375.2 (M+H)+.

Etapa c: Los diastereoisómeros se separaron por SFC quiral. Columna: LUXC430 x 250 mm. caudal: 80 g por minuto. fase móvil: 20 % de MeOH en CO2. detección: 210 nm para dar 4-((R)-1.1-dimet¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3R.4S)-ferc-butilo Tr = 4.0 min; y 4-((R)-1.1-dimet¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3S.4S)-ferc-butilo Tr= 4.55 min.

Preparación alternativa de 4-((R)-1.1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (3S.4S)-ferc-butilo:

Etapa a: A una solución a -10 °C de diisopropilamina (23.4 ml. 166 mmol) en THF (220 ml) se le añadió gota a gota n-BuL¡ (2.5 M en hexano. 64.1 ml. 160 mmol). Después de agitar durante 30 min a esta temperatura. se añadió gota a gota 4-etil-piperidin-1.4-dicarboxilato de 1-ferc-butilo (27.5 g. 107 mmol) en THF (50 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 30 min a 0 °C. Se añadió (S)-2-((ferc-butild¡met¡lsil¡l)ox¡)propanal (20.47 ml. 102 mmol) y la mezcla se agitó durante 1 h a 0 °C y 1 h a TA. La reacción se diluyó con NaHcO³sat. ac./H2O (1:4. 125 ml). se añadió EtOAc (50 ml) y las fases se separaron. La fase ac. se extrajo adicionalmente con EtOAc (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na²SO⁴. se filtraron y el disolvente se eliminó a presión reducida. El residuo resultante se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 346.4 (M+H-Boc)+.

Etapa b: A una solución de 4-etil 4-((2S)-2-((ferc-butildimetilsilil)oxi)-1-hidroxipropil)piperidin-1,4-dicarboxilato de 1-ferc-butilo en bruto (95 g, 214 mmol) en THF (600 ml) se le añadió en porciones borohidruro de litio (7,0 g, 321 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 16 h a TA. Después de enfriar hasta 0 °C, se añadió NaHCO3 sat. ac./H2O (1/2, 150 ml) y la mezcla resultante se agitó vigorosamente hasta que no se observó evolución gaseosa. Se añadió EtOAc (100 ml), la mezcla se filtró, las fases se separaron y la fase ac. se extrajo adicionalmente con EtOAc (3 x 50 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar 4-((2S)-2-((ferc-butildimetilsilil)oxi)-1-hidroxipropil)-4-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (64,8 g, 161 mmol) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa c: Una solución de 4-((2S)-2-((ferc-butildimetilsilil)oxi)-1-hidroxipropil)-4-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (64,8 g, 161 mmol) y TBa F (1 M en THF, 242 ml, 242 mmol) en THF (500 ml) se agitó durante 2 h a TA. Se añadió NaHCO3 saturado ac./H2O (1:2, 150 ml), las fases se separaron y la fase ac. se extrajo adicionalmente con EtOAc (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 20 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar 4-((2S)-1,2-dihidroxipropil)-4-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (39,25 g, 136 mmol) como un aceite incoloro semisólido.

Etapa d: A una suspensión a 0 °C de NaH (10,60 g, 424 mmol) en THF (600 ml) se le añadió gota a gota una solución de 4-((2S)-1,2-dihidroxipropil)-4-(2-hidroxietil)piperidin-1-carboxilato de ferc-butilo (35,06 g, 121 mmol) y cloruro de 4-toluenosulfonilo (23,1 g, 121 mmol) en THF (200 ml). La mezcla resultante se agitó durante 1 h a 0 °C. Se añadió NH⁴Cl saturado ac. (~5 ml) lentamente a -20 °C y la reacción se agitó vigorosamente hasta que no se observó evolución gaseosa. En este punto, se añadió NH4Ó sat. ac. (100 ml) seguido de salmuera (100 ml) y la mezcla se extrajo con EtOAc (3 x 100 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y el disolvente se eliminó a presión reducida para dar 4-hidroxi-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3S)-ferc-butilo (32,19 g, 119 mmol) que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 171,1 (M-Boc)\

Etapa e: Una solución de 4-hidroxi-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3S)-ferc-butilo (32,19 g, 119 mmol) y peryodinano de Dess-Martin (67,4 g, 154 mmol) en d Cm (300 ml) se agitó durante 2 h a 0 °C. La mezcla se calentó hasta TA y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar 3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3S)-ferc-butilo (27,68 g, 92 mmol) como aceite amarillo pálido. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 4,09 (d, J=9,60 Hz, 1 H), 3,66-3,86 (m, 4 H), 3,03 (ddd, J=13,77, 9,73, 3,79 Hz, 1 H), 2,90 (ddd, J=13,64, 10,23, 3,41 Hz, 1 H), 1,68 (ddd, J=13,83, 9,92, 4,29 Hz, 1 H), 1,41-1,59 (m, 2 H), 1,30-1,40 (m, 10 H), 1,20-1,25 (m, 3 H).

Etapa f: Una solución de 3-metil-4-oxo-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3S)-ferc-butilo (22,52 g mg, 84 mmol), etóxido de titanio(IV) (70,1 ml, 334 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (21 g, 173 mmol) en THF (300 ml) se agitó durante 21 h a 90 °C. Después de enfriarla hasta -4 °C, se añadió MeOH (30 ml), seguido de adición gota a gota (manteniendo la temperatura de la reacción por debajo de 2 °C) de borohidruro de litio (1,82 g, 84 mmol) y la mezcla resultante se agitó durante 1 h a -4 °C. Se añadió lentamente NH4Cl saturado ac. para inactivar el exceso de borohidruro (semisólido) seguido de la adición de EtOAc (500 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 15 min a TA y después se filtró a través de una capa de Celite seguido de lavado con EtOAc (500 ml). Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8 -carboxilato de (3S,4S)-ferc-butilo como una mezcla diastereoisomérica 95:5 (diastereoisómero minoritario 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3R,4S)-ferc-butilo).

Etapa g: Los diastereoisómeros se separaron por SFC quiral. Columna: LC-430 x 250 mm, caudal: 100 g por minuto, fase móvil: 30 % de MeOH en CO2, detección: 225 nm, Tr: 0,95 min (diastereoisómero minoritario Tr: 0,55 min) para dar 4-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (3S,4S)-ferc-butilo (19 g, 50,68 mmol). MS m/z 375,2. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 4,24-4,16 (m, 1 H), 4,03-3,94 (m, 1 H), 3,91 3,85 (m, 1 H), 3,84-3,78 (m, 1 H), 3,64 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 3,50-3,42 (m, 1 H), 3,32 (d, J=10,1 Hz, 1 H), 2,99-2,85 (m, 2 H), 1,82 (td, J=18,1, 15,1,7,7 Hz, 2 H), 1,62-1,53 (m, 1 H), 1,53-1,47 (m, 1 H), 1,46 (s, 9 H), 1,22 (d, J=6,4 Hz, 3 H).

Los siguientes compuestos de la tabla 6 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando los correspondientes yodoalcanos.

Tabla 6

Etapa a: A una solución de 1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (2,2 g, 8,68 mmol) en THF (24 ml) se le añadió LHMDS (1 M en THF, 8,68 ml, 8,68 mmol) a 0-5 °C. Después de agitar la mezcla durante 30 min a esta temperatura, se añadió yodometano (0,543 ml, 8,68 mmol). La mezcla resultante se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 2 h adicionales. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc y NaHCO3 sat. ac. La fase orgánica se lavó con salmuera, se secó sobre Na2SO4, se filtró y se concentró a presión reducida. El aceite pardo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 25 % de EtOAc/heptano) para dar 2-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo racémico (1,3 g, 4,86 mmol). MS m/z 268,1. (M+H)+.

Etapa b: Una solución de 2-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo racémico (267 mg, 0,999 mmol), etóxido de titanio(IV) (837 pl, 3,99 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (242 mg, 1,997 mmol) en THF (10 ml) se agitó durante 24 h a 85 °C. Después de enfriar hasta -78 °C, se añadió MeOH (12 ml) seguido de borohidruro de litio (65,3 mg, 3,00 mmol). La mezcla resultante se agitó a -78 °C a TA durante 16 h. Se añadió lentamente NH4Cl saturado ac. para inactivar el exceso de borohidruro seguido de la adición de EtOAc (100 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 15 min y después se filtró a través de una capa de Celite. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 60 % de EtoAc/heptano (que contenía un 0,25 % de Et3N)) para dar 1-((R)-1,1-dimetiletilsulfinamino)-2-metil-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R)-ferc-butilo (92 mg, 0,247 mmol). Ms m/z 373,1 (M+H)+.

Intermedio B-22

1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-2.3-d¡h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.51decano-8-carbox¡lato de (1S,2S.3S)-ferc-butilo racémico

ro 2 in

Etapa a: A una mezcla de 1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo (2 g, 7,96 mmol) y cloruro de cerio(IN) heptahidrato (3,26 g, 8,75 mmol) se le añadió MeOH (60 ml) y THF (20 ml) en atmósfera de N2. La mezcla resultante se agitó a TA durante 1 h y se enfrió hasta 0 °C, se añadió borohidruro de sodio (0,60 g, 15,9 mmol). La mezcla de reacción se agitó a 0 °C durante 1 h y después se vertió en NaOH 1 N (75 ml). La mezcla se extrajo con Et2O (3 x 50 ml), los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 10 a un 60 % de EtOAc/heptano que contenía un 0,25 % de NEt3) para dar 1-hidroxi-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo racémico (2,01 g, 7,93 mmol) como un aceite naranja. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 5,99-5,94 (m, 1 H), 5,89-5,83 (m, 1 H), 4,32 (s, 1 H), 3,79-3,65 (m, 2 H), 3,29-3,12 (m, 2 H), 2,36-2,27 (m, 1 H), 2,26-2,15 (m, 1 H), 1,81-1,71 (m, 1 H), 1,55 1,50 (m, 2 H), 1,49 (s, 9 H), 1,43-1,36 (m, 1 H). MS m/z 276,2 (M+Na)+.

Etapa b: A una solución de 1-hidroxi-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de ferc-butilo racémico (1,63 g, 6,43 mmol) en DCM (64 ml) se le añadió secuencialmente hidroperóxido de ferc-butilo (solución 5,5 M en decano, 1,4 ml, 7,72 mmol) y acetilacetonato de vanadilo (156 mg, 0,643 mmol) a 0 °C en atmósfera de N2. La mezcla de reacción se agitó durante 20 min a 0 °C y durante 15 h a TA. La mezcla de reacción se vertió en Na2SO3 sat. ac. (50 ml) y se extrajo con DCM (3 x 25 ml). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 10 a un 60 % de EtOAc/heptano que contenía un 0,25 % de NEt3) para dar 2-hidroxi-6-oxaespiro[biciclo[3.1.0]hexano-3,4'-piperidin]-1'-carboxilato de (1R,2R,5S)-ferc-butilo racémico (805 mg, diastereoisómero único). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 3,92-3,78 (m, 3 H), 3,65 (t, J=2,27 Hz, 1 H), 3,56 (t, J=2,27 Hz, 1 H), 2,99-2,82 (m, 2 H), 2,22 (d, J=14,65 Hz, 1 H), 1,78 (s a., 1 H), 1,70-1,58 (m, 3 H), 1,47-1,40 (m, 10 H). MS m/z 170,1 (M+H-Boc)+.

Etapa c: A una solución de 2-hidroxi-6-oxaespiro[biciclo[3.1.0]hexano-3,4'-piperidin]-1'-carboxilato de (1R,2R,5S)-fercbutilo racémico (805 mg, 2,99 mmol), trifenilfosfina (1,57 g, 5,98 mmol) y di-ferc-butil-iminodicarboxilato (1,30 g, 5,98 mmol) en THF (15 ml) en atmósfera de nitrógeno se le añadió lentamente DIAD (1,16 ml, 5,98 mmol) a 0 °C. La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 5 min, se agitó a TA durante 10 min y después se calentó hasta 40 °C durante 15 h. La mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (25 ml), se vertió en NH4Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Los extractos combinados se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc que contenía un 0,25 % de NEt3/heptano que contenía un 0,25 % de NEt3) para dar 2-((di-ferc-butoxicarbonil)amino)-6-oxaespiro[biciclo[3.1.0]hexano-3,4'-piperidin]-1'-carboxilato de (1R,2S,5S)-ferc-butilo racémico (480 mg; diastereoisómero único). MS m/z 491,3 (M+Na)+.

Etapa d: A una solución de 2-((di-ferc-butoxicarbonil)amino)-6-oxaespiro[biciclo[3.1.0]hexano-3,4'-piperidin]-1'-carboxilato de (1R,2S,5S)-ferc-butilo racémico (346 mg) en CHCb (4 ml) se le añadió HOAc (0,2 ml). La mezcla de reacción se agitó durante 5 h a TA, se concentró a presión reducida para dar (3aS,6S,6aS)-N, N'-bis-(ferc-butilcarbonil)-6-hidroxitetrahidroespiro[ciclopenta[d]oxazol-4,4'-piperidin]-2(5H)-ona racémica en bruto (295 mg; diastereoisómero único) como un aceite transparente. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 4,74 (dd, J=7,45, 1,39 Hz, 1 H), 4,48 (s a, 1 H), 4,42 (d, J=7,33 Hz, 1 H), 4,04 (s a., 2 H), 2,78 (s a., 2 H), 2,03-1,99 (m, 2 H), 1,93-1,79 (m, 3 H), 1,66-1,58 (m, 1 H), 1,56 (s, 9 H), 1,46 (s, 9 H). MS m/z 435,2 (M+Na)+.

Etapa e: A una solución de (3aS,6S,6aS)-N,N'-bis-(ferc-butilcarbonil)-6-hidroxitetrahidroespiro[ciclopenta[d]oxazol-4,4'-piperidin]-2(5H)-ona racémica en bruto (125 mg) en MeOH (1,5 ml) se le añadió Cs2CO3 (20 mg, 0,06 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 5 h a TA. La mezcla se diluyó con EtOAc (10 ml) y NH4Cl sat. ac./agua (1:1, 10 ml). La capa ac. separada se extrajo con EtOAc (2 x 10 ml). Los extractos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por SFC (Princetone 2-EP 20 x 150 mm 5 um, CO2/MeOH 80 g/min 120 bar) para dar 1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-2,3-dihidroxi-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1S,2S,3S)-ferc-butilo racémico (44 mg, diastereoisómero único) como un aceite transparente. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 5,02 (d, J=9,35 Hz, 1 H), 4,17-4,10 (m, 1 H), 4,04 (s a, 1 H), 3,96 (s a, 3 H), 2,83 (d, J=12,13 Hz, 2 H), 2,22-2,10 (m, 1 H), 1,98 (s a, 2 H), 1,76 (td, J=12,88, 4,55 Hz, 1 H), 1,64-1,52 (m, 1 H), 1,46 (s, 9 H), 1,45 (s, 9 H). MS m/z 409,3 (M+Na)+.

Intermedios B-23

((1R.3R)-3-(trifluoromet¡l)-8-azaesp¡ro[4.51decan-1-¡l)carbamato de ferc-butilo

Í02121

Etapa a: A una solución de 1-oxo-8-azaespiro[4.5]dec-2-eno-8-carboxilato de bencilo (3,05 g, 10,7 mmol) en THF (40 ml) se le añadió trimetil(trifluorometil)silano (2 M en THF, 6,41 ml) y TBAF (1 M en THF, 0,214 ml) a 0 °C, y la mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 1,5 h. La mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente con HCl ac. 2 M (10 ml) y se agitó a 0 °C durante 1 h. La solución se diluyó adicionalmente con NH4Cl sat. ac. (50 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 1-oxo-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo como un aceite incoloro (2,22 g, 6,25 mmol). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 7,45-7,31 (m, 5 H), 5,16 (s, 2 H), 3,84 (dd, J=8,9, 5,1 Hz, 1 H), 3,30 (ddd, J=13,5, 9,5, 3,4 Hz, 1 H), 3,21 (ddd, J=13,5, 9,8, 3,6 Hz, 1 H), 3,03-2,87 (m, 1 H), 2,66 (ddd, J=18,8, 8,4, 1,5 Hz, 1 H), 2,46 (dd, J=18,9, 10,7 Hz, 1 H), 2,38-2,25 (m, 1 H), 1,97-1,79 (m, 2 H), 1,70-1,58 (m, 1 H), 1,54 (m, 3 H).

19F RMN (376 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm -72,08 (d, J=8,0 Hz). 13C RMN (101 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 215,93, 155,18, 136,67, 128,53, 128,07, 127,93, 125,74 (c, J=263 Hz), 67,24, 47,96, 40,35, 39,86, 37,30, 32,77 (c, J=29 Hz), 33,77 (c, J=3 Hz), 31,89, 31,10.

Etapa b: Una mezcla de 1-oxo-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (2,22 g, 6,25 mmol), (R)-ferc-butanosulfinamida (1,514 g, 12,50 mmol) y tetraetoxititanio (5,70 g, 5,24 ml, 25 mmol) en THF (50 ml) se calentó hasta 80 °C durante 16 h. La mezcla de reacción se enfrió hasta -78 °C, después se añadieron MeOH (10 ml) y borohidruro de litio (0,408 g, 18,74 mmol). La mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA durante 3 h. La mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente en NH4Cl sat. ac. (50 ml). La mezcla heterogénea resultante se filtró a través de Celite, se lavó con EtOAc. Las capas del filtrado se separaron y la capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida proporcionando (1R)-1-(((R)-ferc-butilosulfinil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo en bruto como un sólido blanco que se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. EM: m/z 461,3 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de (1R)-1-(((R)-ferc-butilosulfinil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo en bruto (2,88 g, 6,25 mmol) en MeOH (25 ml) se le añadió HCl (4 M en dioxano, 3,13 ml). La solución resultante se agitó a temperatura ambiente durante 1 h. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo resultante se secó a presión reducida durante 2 h. El residuo se disolvió en CH2Cl2 y se añadieron DIPEA (5,57 ml, 31,3 mmol) y di-ferc-butildicarbonato (2,05 g, 9,4 mmol). La mezcla resultante se agitó a temperatura ambiente durante 72 h. La mezcla de reacción se diluyó con NH4Cl sat. ac. (50 ml) y se extrajo con CH2O 2 (3 x 25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar (1R,3R)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (0,90 g, 1,97 mmol) como un sólido blanco, junto con 1,47 g de una mezcla de (1R,3R)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo y (1R,3S)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo. La mezcla se purificó adicionalmente por SFC preparativa (columna: IB 21 x 250 mm, 10 % de codisolvente IPA) para producir (1R,3R)-1-((fercbutoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (0,60 g, 1,32 mmol) [1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 7,34-7,20 (m, 5 H), 5,06 (s, 2 H), 4,39 (d, J=9,6 Hz, 1 H), 3,96-3,75 (m, 3 H), 2,99 (t, J=11,0 Hz, 2 H), 2,65 (dc, J=18,3, 9,1 Hz, 1 H), 2,24 (dt, J=15,3, 8,3 Hz, 1 H), 1,77 (dd, J=13,9, 9,7 Hz, 1 H), 1,66 (dd, J=13,9, 8,4 Hz, 1 H), 1,60-1,41 (m, 3 H), 1,39 (s, 9 H), 1,31-1,16 (m, 2 H)] y (1R,3S)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (0,50 g, 1,09 mmol) [1H RMN (400 MHz, Cloroformod) 5 ppm 7,44-7,30 (m, 5 H), 5,15 (s, 2 H), 4,36 (d, J=9,1 Hz, 1 H), 4,24-4,01 (m, 2 H), 3,88 (c, J=8,7 Hz, 1 H), 2,91 (dd, J=29,7, 16,1 Hz, 2 H), 2,72 (ddt, J=14,6, 9,7, 5,0 Hz, 1 H), 2,30-2,11 (m, 2 H), 1,77-1,60 (m, 2 H), 1,46 (m, 12 H), 1,27-1,15 (m, 1 H)].

Etapa d: Una mezcla de (1R,3R)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (0,90 g, 1,97 mmol) y Pd/C (10 % en peso, 200 mg) en EtOH (40 ml) se hidrogenó durante 2 h en atmósfera de H2 (globo). La mezcla se roció con nitrógeno durante 5 min, después se filtró a través de Celite, se aclaró con EtOH. El filtrado se concentró a presión reducida y se secó a presión reducida para dar ((1R,3R)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-il)carbamato de ferc-butilo en bruto (625 mg, 1,94 mmol) como una espuma blanca, que se usó directamente sin purificación. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 4,54 (d, J=9,7 Hz, 1 h ), 3,84 (c, J=8,8 Hz, 1 H), 3,00 (tt, J=12,1,4,0 Hz, 2 H), 2,79-2,63 (m, 3 H), 2,28 (ddd, J=13,5, 8,8, 6,8 Hz, 1 H), 2,19 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 1,80 (cd, J=14,0, 9,1 Hz, 2 H), 1,63 (cd, J=9,0, 3,4 Hz, 2 H), 1,47 (m, 12 H). 19F RMN (376 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm -71,42 (d, J=9,6 Hz).

Se preparó ((1R,3S)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-il)carbamato de ferc-butilo (355 mg, 1,09 mmol) a partir de (1R,3S)-1-((ferc-butoxicarbonil)amino)-3-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (0,50 g, 1,09 mmol) siguiendo el procedimiento anterior. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 4,45 (d, J=9,3 Hz, 1 H), 3,80 (c, J=9,2 Hz, 1 H), 3,15-2,96 (m, 2 H), 2,79 (t, J=11,9 Hz, 1 H), 2,67 (tt, J=13,8, 6,9 Hz, 2 H), 2,17 (dd, J=13,7, 9,1 Hz, 2 H), 1,73 (td, J=13,2, 4,3 Hz, 1 H), 1,68-1,56 (m, 1 H), 1,54-1,31 (m, 12 H), 1,26-1,13 (m, 1 H), 0,84 (d, J=4,6 Hz, 1 H).

Intermedio B-24

((1S.3R)-2.2-d¡fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.51decan-1-¡l)carbamato de ferc-butilo

Í02141

Etapa a: A una solución a -78 °C de LiHMDS (1 M en THF, 3,7 ml, 3,7 mmol) en THF (15 ml) se le añadió gota a gota (R)-3-met¡M-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (1,0 g, 3,32 mmol) en THF (5 ml). Después de agitar durante 30 min a -78 °C, se añadió N-fluoro-N-fenilsulfoni^bencenosulfonamida (1,15 g, 3,65 mmol) en THF (5 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 30 min a esta temperatura. Después de calentarla hasta TA, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NaHCO3 sat. ac. (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar (3R)-2-fluoro-3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (1,05 g, 3,32 mmol). MS m/z 320.2 (M+H)+.

Etapa b: A una solución a -78 °C de LiHMDS (1 M en THF, 3,45 ml, 3,45 mmol) en THF (15 ml) se le añadió (3R)-2-fluoro-3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (1,0 g, 3,13 mmol) en THF (5 ml). Después de agitar durante 30 min a -78 °C, se añadió W-fluoro-W-(fenilsulfonil)bencenosulfonamida (1,086 g, 3,44 mmol) en THF (5 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 1 h a esta temperatura. Después de calentarla hasta TA, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NaHCO3 sat. ac. (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar (R ^^-d ifluoro^-m etiM -oxo^-azaesp iro^^decano^-carboxila to de bencilo (1,17 g, 3,32 mmol). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 7,30-7,48 (m, 5 H), 5,16 (s, 2 H), 3,75-3,99 (m, 2 H), 3,32-3,44 (m, 1 H), 3,28 (ddd, J=13,52, 9,47, 3,54 Hz, 1 H), 2,25-2,47 (m, 1 H), 2,17 (ddd, J=13,20, 7,52, 2,78 Hz, 1 H), 1,72-1,92 (m, 2 H), 1,42-1,62 (m, 2 H), 1,24 (dd, J=7,33, 0,76 Hz, 3 H). 19F RMN (376 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm -119,79 (d a., J=277,64 Hz, 1 F), -123,89 (d, J=271,90 Hz, 1 F).

Etapa c: Una solución de (R ^^-d ifluoro^-m etiM -oxo^-azaesp iro^^decano^-carboxila to de bencilo (1,17 g, 3,32 mmol), etóxido de titanio(IV) (2,91 ml, 13,87 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (841 mg, 6,94 mmol) en THF (35 ml) se agitó durante 4 h a 60 °C. Después de enfriar hasta -78 °C, se añadió MeOH (3,5 ml) seguido de borohidruro de litio (0,227 g, 10,40 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 2 h a -78 °C hasta TA. Se añadió lentamente NH4Cl sat. ac. seguido de la adición de EtOAc (100 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 5 min y después se filtró a través de una capa de Celite. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar (1S,3R)-1-(((RHerc-butilsulfiniOamino^^-difluoro^-metil^-azaespiro^^decano^-carboxilato de bencilo (700 mg, 1,582 mmol) como un diastereoisómero único. MS m/z 443,3 (M+H)+.

Etapa d: A una solución de (1 S,3R)-1-(((R)-ferc-but¡lsulf¡n¡l)am¡no)-2,2-d¡fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (700 mg, 1,582 mmol) en MeOH (10 ml) se le añadió HCl (4 M en dioxano, 3,95 ml, 15,82 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 30 min a 45 °C. Después de enfriar hasta TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida. Una solución de este residuo, Boc2O (432 mg, 1,977 mmol) y DIPEA (2,76 ml, 15,82 mmol) en THF (20 ml) se agitó durante 16 h a TA. La mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar (1S,3R)-1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-2,2-d¡fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (645 mg, 1,471 mmol). MS m/z 383,3 (M+H-fBu)+.

Etapa e: Una suspensión de Pd/C (10 % en peso, 78 mg) en MeOH (10 ml) se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 (globo) durante 5 min. Se añadió (1S,3R)-1-((ferc-butox¡carbon¡l)am¡no)-2,2-d¡fluoro-3-met¡l-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (645 mg, 1,471 mmol) en MeOH (10 ml) y la suspensión resultante se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite, la capa se lavó con DCM y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar ((1 S,3R)-2,2-difluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5]decan-1-il)carbamato de ferc-butilo (448 mg, 1,471 mmol) que se usó sin purificación adicional. MS m/z 305.3 (M+H)+.

Intermedio B-25

((1R2S.3ffl-2-fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5ldecan-1-il)carbamato de tere-butilo (A) y ((1S.2R.3R)-2-fluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5ldecan-1-N)carbamato de tere-butilo (B);

(mezcla de A:B = 4:1)

r02151

Etapa a: A una solución a -78 °C de LiHMDS (1 M en THF. 7.31 ml. 7.31 mmol) en THF (30 ml) se le añadió gota a gota (R)-3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (2.0 g. 6.64 mmol) en THF (10 ml). Después de agitar durante 30 min a -78 °C. se añadió W-fluoro-W-(fenilsulfonil)bencenosulfonamida (2.3 g. 7.30 mmol) en THF (10 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 30 min a esta temperatura. Después de calentarla hasta TA. la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NaHCO3 sat. ac. (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4. se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 40 % de EtOAc/heptano) para dar una mezcla 4:1 de los diastereoisómeros (2S.3R)-2-fluoro-3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (prineipal) y pR ^R ^-fluoro^-m etiM -oxo^-azaesp iro^^ldecano^-carboxila to de bencilo (minoritario) (1.81 g. 5.67 mmol). Esta mezcla diastereoisomérica se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 320.2 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de la mezcla 4:1 de los diastereoisómeros (2S.3R)-2-fluoro-3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (prineipal) y (2R.3R)-2-fluoro-3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (minoritario) (1.95 g. 6.11 mmol). etóxido de titanio(IV) (5.12 ml. 24.42 mmol) y (R)-2-metilpropano-2-sulfinamida (1.48 g. 12.21 mmol) en THF (35 ml) se agitó durante 4 h a 60 °C. Después de enfriar hasta -78 °C. se añadió MeOH (3.5 ml) seguido de borohidruro de litio (0.399 g. 18.32 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 2 h a -78 °C hasta TA. Se añadió lentamente NH4Cl sat. ac. para inactivar el exceso de borohidruro seguido de la adición de EtOAc (100 ml). La mezcla resultante se agitó vigorosamente durante 5 min y después se filtró a través de una capa de Celite. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar una mezcla 4:1 de (1R.2S.3R)-1-(((R^tere-butilsulfiniOamino^-fluoro^-metil^-azaespiro^^ldecano^-carboxilato de bencilo y (1S.2R.3R)-1-(((R)-ttere-butilsulfinil)amino)-2-fluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (2.05 g. 4.83 mmol). Esta mezcla diastereoisomérica se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 443.3 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de una mezcla 4:1 de (1R.2S.3R)-1-(((R)-tere-but¡lsulf¡n¡l)am¡no)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo y (1 S,2R,3R)-1-(((R)-tere-but¡lsulf¡n¡l)am¡no)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (2.05 mg. 4.83 mmol) en MeOH (20 ml) se le añadió HCl (4 M en dioxano. 12 ml. 48.0 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 30 min a 45 °C. Después de enfriar hasta TA. los volátiles se eliminaron a presión reducida. Una mezcla de este residuo. Boc2O (1.32 g. 6.04 mmol). y DIPEA (8.43 ml.

48.3 mmol) en THF (40 ml) se agitó durante 1 h a TA. La mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (3 x 25 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4. se filtraron. los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar una mezcla 4:1 de (1R.2S.3R)-1-((terebutoxicarbonil)amino)-2-fluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo y (1S.2R.3R)-1-((ttere-butoxicarboniOamino^-fluoro^-metil^-azaespiro^^ldecano^-carboxilato de bencilo (1.51 g. 3.59 mmol). Esta mezcla diastereoisomérica se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 383.3 (M+H-tBu)+.

Etapa d: Una suspensión de Pd/C (10 % en peso. 78 mg) en MeOH (10 ml) se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 (globo) durante 5 min. La mezcla 4:1 de (1R.2S.3R)-1-((tere-butox¡carbon¡l)am¡no)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo y (1S,2R,3R)-1-((tere-butox¡carbon¡l)am¡no)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaespiro[4.5ldecano-8-carboxilato de bencilo (1.50 g. 3.57 mmol) en MeOH (10 ml) se añadió y la suspensión resultante se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite. la capa se lavó con DCM y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar una mezcla 4:1 de ((1R,2S,3R)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decan-1-¡l)carbamato de tere-butilo y ((1S.2R.3R)-2-fluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5ldecan-1-il)carbamato de tere-butilo (1.07 g. 3.74 mmol). Esta mezcla diastereoisomérica se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional. MS m/z 305.3 (M+H)+.

Intermedio B-26

2-((1 S.2S.3R)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decan-1-¡l)¡so¡ndol¡n-1.3-d¡ona

r0216 l

Etapa a: A una soluc¡ón de 2-fluoro-3-met¡l-1-oxo-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (2S.3R)-benc¡lo (1.89 g.

5.92 mmol; cont¡ene un 40 % de (2R.3R)-2-fluoro-3-met¡l-1-oxo-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato) en THF/MeOH (9:1 20 ml) se le añad¡ó L¡BH4 (2 M en Th F. 11.84 ml. 23.67 mmol) a -78 °C. La mezcla resultante se ag¡tó a -78 °C durante 30 m¡n. A la soluc¡ón se le añad¡ó lentamente NH4Cl sat. ac. y la mezcla se dejó calentar hasta TA. La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x). las fases orgán¡cas comb¡nadas se lavaron con salmuera. se secaron sobre MgSO4. se f¡ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo resultante se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar 2-fluoro-1-h¡drox¡-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R.2S.3R)-benc¡lo (970 mg. 3.02 mmol). MS m/z 322.2 (M+H)+. 1H RMN (400 MHz. M etano l^) 87.37 7.28 (m. 5 H). 5.10 (s. 2 H). 4.47 (dt. J=54.4. 4.7 Hz. 1 H). 3.86 (d. J=12.9 Hz. 2 H). 3.65 (dd. J=18.0. 4.7 Hz. 1 H).

3.20-3.03 (m. 2 H). 2.39-2.21 (m. 1 H). 2.20-2.10 (m. 1 H). 1.75-1.60 (m. 2 H). 1.45 (d. J=13.4 Hz. 1 H). 1.29 (d. J=13.1 Hz.1 H). 1.08 (d. J=7.1 Hz. 3 H). 0.96 (dd. J=13.3. 8.5 Hz. 1 H).

Etapa b: A una soluc¡ón de (1R.2S.3R)-2-fluoro-1-h¡drox¡-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de benc¡lo (1.03 g. 3.20 mmol). tr¡fen¡lfosf¡na (1.68 g. 6.41 mmol) y ftal¡m¡da (0.943 g. 6.41 mmol) en THF (20 ml) se le añad¡ó DIAD (1.25 ml. 6.41 mmol) gota a gota. La mezcla resultante se ag¡tó durante 16 h a 55 °C. Después de enfr¡arla hasta TA. la mezcla de reacc¡ón se vert¡ó en un embudo de separac¡ón que contenía NH4Cl sat. ac. y se extrajo con EtOAc (5 x 10 ml). Las fases orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre MgSO4. se f¡ltraron y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar (1S.2S.3R)-1-(1.3-d¡oxo¡so¡ndol¡n-2-¡l)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de benc¡lo (2.3 g. ~50 % puro basado en la absorc¡ón UV). Este mater¡al se usó en la s¡gu¡ente etapa s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. MS m/z 451.2 (M+H)+.

Etapa c: Una suspens¡ón de Pd/C (10 % en peso. 170 mg) en MeOH (15 ml) se ag¡tó v¡gorosamente en atmósfera de H2 (globo) durante 5 m¡n. Después. se añad¡ó (1S.2S.3R)-1-(1.3-d¡oxo¡so¡ndol¡n-2-¡l)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de benc¡lo (50 % puro basado en la absorc¡ón UV. 3.20 mmol) en MeOH (15 ml) y la suspens¡ón resultante se ag¡tó v¡gorosamente en atmósfera de H2 durante 2.5 h. La mezcla de reacc¡ón se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te. la capa se lavó con DCM y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da para dar 2-((1S.2S.3R)-2-fluoro-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decan-1-¡l)¡so¡ndol¡n-1.3-d¡ona (294 mg. 0.929 mmol). MS m/z 317.2 (M+H)+.

Intermedio B-27

1-((R)-1.1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡do)-2-(h¡drox¡met¡l)-8-azaesp¡ro[4.5ldecano-8-carbox¡lato de terc-but¡lo

r0217l

Etapa a: S¡gu¡endo el proced¡m¡ento de "Suna. E. et al.. (J. Org. Chem. 2014. 79. 3715-3724). se añad¡eron THF (8 ml). MeOH (0.811 ml. 20 mmol) y paraformaldehído (660 mg. 22 mmol) a un rec¡p¡ente de pres¡ón de paredes gruesas y la mezcla de reacc¡ón se calentó a 100 °C durante 70 m¡n. La mezcla de reacc¡ón se dejó enfr¡ar hasta TA. Después de la refr¡gerac¡ón hasta TA. se formó un prec¡p¡tado en el fondo del rec¡p¡ente. Se añad¡ó THF ad¡c¡onal (1,2 ml) para ajustar la concentración del metoximetanol a una solución 2 M en THF. Se asumió rendimiento cuantitativo, basado en que el MeOH es el reactivo limitante.

Etapa b: Un matraz que contenía 1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (238 g, 939 mmol) se cargó con (£)-(+)-2-metil-2-propanosulfinamida (171 g, 1409 mmol) en atmósfera de N2. Se añadió etóxido de titanio(IV) (985 ml, 4,70 mol) y la mezcla entonces se calentó hasta 105 °C durante 4 h. La manta calefactora se retiró y la mezcla se transfirió en vacío, con una corriente de N2, con EtOAc (6 l) mediante una sonda de tubos de FEP hasta un matraz de 10 l, de 4 bocas equipado con un agitar suspendido mecánico y un embudo de adición de 250 ml con un adaptador de entrada de N2 que se enfrió en un baño de agua fría. Se añadió agua (288 ml) gota a gota mediante el embudo de adición durante 30-45 min, provocando la precipitación de un gran volumen de sales de color amarillo claro. La suspensión se envejeció durante 15 minutos con el baño, retirado antes de filtrar la mezcla completa a través de Celite, lavando con EtOAc (2 x 1 l). El filtrado entonces se lavó con agua (3 x 1 l) y se concentró a presión reducida. Tras la concentración y retroadición de heptano (2 l), se retiró el agua por destilación azeótropa, que dio lugar a la precipitación de una película blanca y turbia de sales en la pared interior del matraz. La mezcla de color pardo claro se filtró a través de un embudo de vidrio sinterizado mediano (aclarado con EtOAc y heptano). El filtrado se concentró adicionalmente hasta que se eliminó la mayoría del EtOAc, y se añadió heptano adicional (1 l). La mezcla se concentró adicionalmente a presión reducida para producir un precipitado, y se añadió heptano adicional (500 ml) para mantener la mezcla móvil. La mezcla se agitó a TA, después se enfrió con un baño de hielo antes de aislar los sólidos por filtración al vacío. El sólido se lavó tres veces con heptano enfriado en hielo. El sólido se secó a presión reducida para dar 1-((terc-butilsulfinil)imino)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (£,£)-ferc-butilo como un sólido cremoso (408,9 g, 66,7 % de rendimiento). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 3,93 (m, 2 H), 3,05 (m, 3 H), 2,71 (dt, J=19,6, 7,2 Hz, 1 H), 1,96-1,71 (m, 6 H), 1,49 (s, 9 H), 1,42 (m, 2 H), 1,27 (s, 9 H).

Etapa c: A una solución de 1-((ferc-butilsulfinil)imino)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (£,£)-ferc-butilo (1,95 g, 5,47 mmol) en THF (27,3 ml) se le añadió lentamente Líh Md S (1 M en THF, 6,02 ml) en atmósfera de N2 a -78 °C y la mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 10 min. Se añadió metoximetanol (2 M en THF, 9,57 ml) gota a gota durante ~10 min, la mezcla de reacción se dejó calentar hasta 0 °C y la agitación se continuó a esta temperatura durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente con NH4Cl sat. ac. (20 ml) y se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) proporcionando 1-(((£)-ferc-butilsulfinil)imino)-2-(hidroximetil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (£)-ferc-butilo (1,14 g) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 4,90 (t, J=5,1 Hz, 1 H), 3,83 (dd, J=14,1, 8,5 Hz, 2 H), 3,67 (dt, J=9,5, 4,5 Hz, 1 H), 3,39 (td, J=9,7, 4,7 Hz, 1 H), 3,16 (dt, J=9,0, 5,8 Hz, 1 H), 2,84 (d, J=60,4 Hz, 2 H), 2,08-1,85 (m, 2 H), 1,84-1,62 (m, 2 H), 1,62-1,49 (m, 1 H), 1,39 (s, 12 H), 1,13 (s, 9 H).

Etapa d: A una solución de 1-(((£)-ferc-butilsulfinil)imino)-2-(hidroximetil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (£)-ferc-butilo (1,025 g, 2,65 mmol) en THF (12 ml) y MeOH (1,2 ml) se le añadió LiBH4 (87 mg, 3,98 mmol) en atmósfera de N2 y a -78 °C. La mezcla de reacción se agitó a -78 °C durante 5 min y después se dejó calentar hasta temperatura ambiente. La mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente con NaHCOa sat. ac. (5 ml) y se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4 y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, gradiente de un 0 a un 20 % de MeOH/DCM) proporcionando 1-((£)-1,1-dimetiletilsulfinamido)-2-(hidroximetil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (778 mg) como un sólido blanco. La RMN de 1H (400 MHz, DMSO-d6) indicó la presencia de señal de NH de diagnóstico en la amina a 4,98 ppm (d, J=10,4 Hz, 1 H).

Intermedio B-28

(2R3S)-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-amina

f02181

Etapa a: A una solución a -78 °C de 3-metil-1-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (S)-bencilo (2,1 g, 6,97 mmol) en THF (30 ml) se le añadió LiHMDS (1 M en THF, 8,36 ml, 8,36 mmol), y la mezcla de reacción se agitó durante 30 min a -78 °C. Se añadió clorotrietilsilano (1,23 ml, 7,32 mmol) y la mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 18 h a esta temperatura. La mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. (125 ml) y se extrajo con heptano (3 x 125 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar 3-metil-1-((trietilsilil)oxi)-8-azaespiro[4.5]dec-1-eno-8-carboxilato de (S)-bencilo (2,78 g, 6,69 mmol) como un aceite transparente. MS m/z 416,3 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 3-metil-1-((trietilsilil)oxi)-8-azaespiro[4.5]dec-1-eno-8-carboxilato de (S)-bencilo (2,14 g, 5.15 mmol), 1-trifluorometil-1,2-benciodoxol-3-(1H)-ona al 60 % en peso, que contiene un 40 % en peso de Celatom® FW-80 como aditivo (Togni's II, 4,07 g, 7,72 mmol) y Cu(I)SCN (63 mg, 0,5l5 mmol) en DMF (43 ml) se agitó durante 3 días a 50 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con Et2O, se filtró y la capa de filtro se lavó con Et2O (150 ml). La capa orgánica se lavó con NaHCO3 sat. ac. (2 x 150 ml), se secó sobre MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar 3-metil-1-oxo-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (2R,3S)-bencilo (1,52 g, 4,12 mmol) como un aceite transparente. 1H RMN (400 MHz, cloroformo-d) 5 ppm 7,30-7,45 (m, 5 H), 5.15 (s, 2 H),4,00 (dt, J=13,36, 4,99 Hz, 1 H), 3,79 (dt, J=13,49, 4,93 Hz, 1 H), 3,26-3,39 (m, 1 H), 3,20 (ddd, J=13,49, 9,72, 3,64 Hz, 1 H), 2,55-2,70 (m, 1 H), 2,42-2,55 (m, 1 H), 2,29 (dd, J=13,30, 6,53 Hz, 1 H), 1,81-1,92 (m, 1 H), 1,65 (ddd, J=13,49, 9,47, 3,89 Hz, 1 H), 1,45-1,58 (m, 1 H), 1,38 (d a., J=12,30 Hz, 2 H), 1,32 (d, J=6,27 Hz, 3 H). 19F RMN (376 MHz) 5 ppm -66,32 (d a., J=7,76 Hz). MS m/z 370,2 (M+H)+.

Etapa c: Una mezcla de clorhidrato de O-metilhidroxilamina (2,896 g, 34,7 mmol), 3-metil-1-oxo-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (2R,3S)-bencilo (854 mg, 2,312 mmol) y piridina (3,74 ml, 46,2 mmol) en EtOH (7,5 ml) se agitó durante 18 h a 90 °C. Después de enfriar hasta TA, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía H2O (60 ml) y CuSO4 sat. ac. (60 ml) y se extrajo con Et2O (3 x 120 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) para dar una mezcla de los dos estereoisómeros E/Z de 1-(metoxiimino)-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (2R,3S)-bencilo (750 mg, 1,882 mmol) como un aceite transparente. MS m/z 399,1 (M+H)+.

Etapa d: Una suspensión de Pd/C (10 % en peso, 68,8 mg) en MeOH (2 ml) se agitó vigorosamente a TA en atmósfera de H2 (globo) durante 5 min. A esta suspensión se le añadió una solución de los isómeros E/Z de 1-(metoxiimino)-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (2R,3S)-bencilo (515 mg, 1,293 mmol) en MeOH (4 ml), y la mezcla resultante se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 durante 30 min. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite, se lavó con DCM (70 ml). El filtrado se concentró a presión reducida para dar la mezcla de los isómeros E/Z de (2R,3S)-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-ona O-metil oxima (351 mg, 1,275 mmol) como un aceite transparente. MS m/z 265,1 (M+H)+.

Etapa e: Una solución de una mezcla de los isómeros E/Z de (2R,3S)-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-ona O-metil oxima (210 mg, 0,795 mmol), Et3N (0,886 ml, 6,36 mmol) y BnBr (0,378 ml, 3,18 mmol) en MeCN (1,5 ml) se agitó durante 1,5 h a TA. La mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía H2O (25 ml) y NH4Cl sat. ac. (25 ml) y se extrajo con DCM (3 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar una mezcla de los isómeros E/Z de (2R,3S)-8-bencil-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-ona O-metil oxima (219 mg, 0,618 mmol) como un aceite transparente. MS m/z 355,2 (M+H)+.

Etapa f: A una solución a 0 °C de los isómeros E/Z de (2R,3S)-8-bencil-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-ona O-metil oxima (150 mg, 0,423 mmol) en THF (1 ml) se le añadió complejo de BH3-THF (1 M en THF, 6,35 ml, 6,35 mmol) gota a gota y la mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA durante 10 min, se calentó hasta 80 °C y se agitó durante 24 h a esta temperatura. Después de enfriarla hasta 0 °C, la mezcla de reacción se diluyó cuidadosamente con H2O (5 ml). Después de que se detuviera la evolución gaseosa (5 min), la mezcla de reacción se dejó calentar hasta TA, se añadió NaOH ac. (2 M, 3 ml, 6 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante 2 h a 80 °C. La mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía NaOH ac. (1 M, 20 ml) y se extrajo con DCM (3 x 20 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por HPLC (elución de gradiente de un 45-70 % de acetonitrilo en agua, modificador NH4OH 5 mM) para dar una mezcla de los epímeros de (2R,3S)-8-bencil-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-amina (81 mg, 0,248 mmol) como un aceite naranja. MS m/z 327,1 (M+H)+.

Etapa g: A una solución de los epímeros de (2R,3S)-8-bencil-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-amina (90,6 mg, 0,278 mmol) en MeOH (2 ml) en atmósfera de nitrógeno se le añadió Pd/C (10 % en peso, 59,1 mg, 0,056 mmol). La mezcla de reacción se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 (globo) durante 26 h. La mezcla de reacción se diluyó con DCM, se filtró sobre Celite y la capa se lavó con DCM (100 ml). Los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar una mezcla de los epímeros de (2R,3S)-3-metil-2-(trifluorometil)-8-azaespiro[4.5]decan-1-amina (68 mg, 0,276 mmol) como un aceite pardo. MS m/z 237,2 (M+H)+.

Intermedio B-29

clorhidrato de 2.8-diazaesp¡ror4.51dec-1-en-1-amina

[02191

Etapa a: A una solución de 2-oxo-1,8-diazaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de ferc-butilo (300 mg, 1,180 mmol) en DCM (3 ml) a TA se le añadió pentasulfuro de fósforo (110 mg, 0,495 mmol) seguido de hexametildisiloxano (2,26 ml, 10,6 mmol). La reacción se agitó durante 3 h a TA, después se diluyó con EtOAc y se filtró a través de Celite. El filtrado se concentró a presión reducida. El producto en bruto se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 80 % de EtOAc/heptano) dando 1-t¡oxo-2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de ferc-butilo (0,290 g, 1,07 mmol) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, DMSO-de) 5 ppm 10,39 (s, 1 H), 3,66 (dt, J=13,6, 4,9 Hz, 2 H), 3,09 (s, 2 H), 2,78 (t, J=7,8 Hz, 2 H), 1,95 (t, J=7,8 Hz, 2 H), 1,57 (dd, J=6,6, 4,8 Hz, 4 H), 1,39 (s, 9 H). MS m/z 271 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 1-t¡oxo-2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato (100 mg, 0,370 mmol) en THF (3 ml) se le añadió gota a gota yodometano (0,231 ml, 3,70 mmol). La solución resultante se agitó durante 16 h a TA. La mezcla de reacción se volvió lentamente más amarilla y produjo un precipitado amarillo claro después de agitación durante el tiempo de reacción asignado. La mezcla de reacción se concentró y se secó al vacío dando un sólido amarillo. El sólido amarillo se recogió en MeOH (2 ml), se trató con amoniaco (solución 7 M en MeOH, 3 ml) y se calentó en un tubo cerrado herméticamente durante 8 h hasta 100 °C. La reacción se enfrió hasta TA y se concentró a presión reducida proporcionando un sólido que se sonicó con MeCN y se filtró. El filtrado se concentró a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 30 % de MeOH/DCM) proporcionando 1-amino-2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]dec-1-eno-8-carbox¡lato de ferc-butilo (87 mg, 0,343 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 9,38 (s, 1 H), 8,81 (d, J=25,2 Hz, 2 H), 3,98 (s, 2 H), 3,55 (t, J=7,0 Hz, 2 H), 2,82 (s, 2 H), 2,12 (t, J=7,1 Hz, 2 H), 1,74 (td, J=12,9, 4,7 Hz, 2 H), 1,57 (d, J=12,7 Hz, 2H), 1,41 (s, 9 H). MS m/z 254 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de 1-am¡no-2,8-d¡azaesp¡ro[4.5]dec-1-eno-8-carbox¡lato de ferc-butilo (86 mg, 0,339 mmol) en DCM (3 ml) se le añadió HCl (solución 4 M en dioxano, 0,5 ml, 2,0 mmol) a TA y la reacción se agitó durante 16 h. La mezcla de reacción se concentró y el residuo se trituró en MeCN y se filtró dando 2,8-diazaespiro[4.5]dec-1-en-1-amina (57,7 mg, 0,254 mmol) como un sólido castaño. 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 5 ppm 9,64 (s, 1 H), 9,39-9,23 (m, 1 H), 9,15 (s, 1 H), 9,07 (s, 1 H), 8,70 (d, J=12,5 Hz, 1 H), 3,54 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 3,32 (d, J=13,3 Hz, 2 H), 3,05 2,88 (m, 2 H), 2,18 (t, J=6,9 Hz, 2 H), 2,01 (td, J=13,7, 4,3 Hz, 2 H), 1,80 (d, J=13,8 Hz, 2 H). MS m/z 154 (M+H)+.

Intermedio B-30

^R M -am ino^-m etil^-azaesp iroR ^decan^-o l

r02201

Etapa a: Una mezcla de sal diclorhidrato de (2R,4R)-4-amino-8-azaespiro[4.5]decan-2-ol (623 mg, 2,56 mmol), Na2CO3 (1,36 g, 12,80 mmol) y cloroformiato de bencilo (1,05 g, 6,14 mmol) en H2O (5 ml) se agitó vigorosamente durante 30 min a TA. Se añadió THF (0,5 ml) y la mezcla resultante se agitó durante 18 h a TA. La mezcla se diluyó con agua y DCM. La capa ac. separada se extrajo con DCM (2 x 10 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ^(((bencilox^carboni^am ino^-hidroxi^-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3R)-bencilo (940 mg, 2,14 mmol) como una espuma blanca. MS m/z 439,3 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 1-(((benc¡lox¡)carbon¡l)am¡no)-3-h¡drox¡-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-bencilo (440 mg, 1,003 mmol) y peryodinano de Dess-Martin (638 mg, 1,505 mmol) en DCM (6 ml) se agitó durante 1 h a 0 °C y durante 18 h a TA. La mezcla de reacción se diluyó con NaHCO3 sat. ac./Na2S2O3 (1:1, 25 ml). La fase ac. separada se extrajo con DCM (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 70 % de EtOAc/heptano) para dar 1-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-bencilo (415 mg, 0,951 mmol) como una espuma blanca. MS m/z 437,2 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de MeLi (1,2 M en THF, 2,61 ml, 3,13 mmol) en THF (15 ml) se le añadió gota a gota 1-(((benciloxi)carbonil)amino)-3-oxo-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de (R)-bencilo (415 mg, 0,951 mmol) en THF (5 ml) a -30 hasta -40 °C. La mezcla resultante se agitó durante 20 min a -30 hasta -40 °C. La mezcla se diluyó con NaHSO4 (solución al 10 % en H2O) y EtOAc, y se dejó calentar hasta TA en agitación vigorosa. La mezcla se vertió en un embudo de separación que contenía NaHCOa sat. ac. y las fases se separaron. La fase ac. se extrajo adicionalmente con EtOAc (15 ml), las fases orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. Una solución del residuo resultante (313 mg), Na2CO3 (498 mg, 4,70 mmol) y cloroformiato de bencilo (295 mg, 1,729 mmol) en agua (10 ml) y THF (1 ml) se agitó vigorosamente durante 3 días a TA. La mezcla se diluyó con EtOAc y la fase ac. separada se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se concentraron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar dos diastereoisómeros: diastereoisómero A (112 mg, 0,25 mmol) como un semisólido incoloroMS m/z 453,3 (M+H)+, y diastereoisómero B (45 mg, 0,010 mmol) como una espuma blanca, MS m/z 453,3 (M+H)+.

Etapa d: Una mezcla de diastereoisómero A (50 mg, 0,11 mmol) y Pd/C (10 % en peso; 12 mg, 0,011 mmol) en MeOH (8 ml) se agitó vigorosamente en atmósfera de hidrógeno durante 2 h. Se añadió Celite y la mezcla se filtró a través de una capa de Celite, seguido de lavado con DCM. El filtrado se concentró a presión reducida para dar (4R)-4-amino-2-metil-8-azaespiro[4.5]decan-2-ol como un sólido incoloro que se usó sin purificación adicional. MS m/z 185,2 (M+H)+.

El correspondiente estereoisómero se sintetizó usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el diastereoisómero B como material de partida.

Intermedio B-31

2-((1S,2S,3ffl-2-fluoro-3-metil-8-azaesp¡ ro[4.51decan-1-il)¡so¡ndol¡n-1.3-d¡ona

f02221

Etapa a: A una solución de (1R,2S,3R)-2-fluoro-1-hidroxi-3-metil-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (760 mg, 2,365 mmol) en THF (16,5 ml) se le añadió trifenilfosfina (744 mg, 2,85 mmol) y DIAD (0,557 ml, 2,84 mmol). La mezcla resultante se agitó a 0 °C durante 20 min y se añadió fosforazidato de difenilo (0,787 ml, 3,55 mmol). La mezcla de reacción se calentó hasta TA y se agitó durante 18 h a esta temperatura. La mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía EtOAc (30 ml) y la fase orgánica se lavó con NH4Cl sat. ac. y salmuera. Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo resultante se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar (1S,2S,3R)-1-azido-2-fluoro-3-metil-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de bencilo (432 mg, 1,247 mmol). MS m/z 347,2 (M+H)+. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 7,43-7,31 (m, 5 H), 5,15 (s, 2 H), 4,48 (dt, J=54,4, 7,5 Hz, 1 H), 3,93 (s, 2 H), 3,61 (dd, J=16,1, 6,9 Hz, 1 H), 3,13-2,95 (m, 2 H), 2,31-2,13 (m, 1 H), 1,96 (dd, J=13,1, 9,3 Hz, 1 H), 1,81-1,64 (m, 2 H), 1,47 (s, 1 H), 1,32-1,19 (m, 2 H), 1,16 (d, J=6,7 Hz, 3 H).

Etapa b: Una suspensión de Pd/C (al 10 % en peso, 65 mg) y (1S,2S,3R)-1-azido-2-fluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5]decano-8-carboxilato de bencilo (423 mg, 1,221 mmol) en EtOH (12,2 ml) se agitó vigorosamente en atmósfera de H2 (globo) durante 16 h. La mezcla de reacción se filtró a través de una capa de Celite y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar (1 S,2S,3R)-2-fluoro-3-metil-8-azaespiro[4.5]decan-1-am¡na en bruto (235 mg, 0,966 mmol) que se usó sin purificación adicional. MS m/z 317,2 (M+H)+. 1H Rm N (400 MHz, Cloroformo-d) 5 ppm 4,15 (dt, J=55,5, 8,1 Hz, 1 H), 2,95 (dt, J=12,5, 3,7 Hz, 2 H), 2,87 (dd, J=16,6, 8,0 Hz, 1 H), 2,74 (tdd, J=12,4, 7,3, 2,8 Hz, 2 H), 2,19-2,02 (m, 1 H), 1,95 (dd, J=13,4, 8,4 Hz, 1 H), 1,71-1,48 (m, 4 H), 1,34-1,23 (m, 3 H), 1,18-1,09 (m, 4 H).

Intermedio B-32

sal del ácido trifluoroacético de (1S.2S.3S)-1-amino-8-azaespiro[4.51decano-2.3-diol racémico

r02231

A una solución de 1-((terc-butoxicarbonil)amino)-2.3-dihidroxi-8-azaespiro[4.51decano-8-carboxilato de (1S.2S.3S)-terc-butilo racémico (21 mg, 0.054 mmol) en DCM (1 ml) se le añadió ácido trifluoroacético (0.1 ml, 1.298 mmol) y la mezcla se agitó durante 30 min a 30 °C. Los volátiles se eliminaron a presión reducida para producir sal del ácido trifluoroacético de (1S.2S.3S)-1-amino-8-azaespiro[4.51decano-2.3-diol racémico en bruto (diastereoisómero único) como un aceite transparente que se usó directamente sin purificación adicional. MS m/z 187.1 (M+H)+.

Intermedio B-33

(3S.4S)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-4-am¡na

r02251

A 4-((R)-1.1-dimetil etilsulfinamino)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.51decano-8-carboxilato de (3S.4S)-terc-butilo (9.4 g.

25.1 mmol) en MeOH (200 ml) en atm. de N2 se le añadió lentamente HCl (solución 4 M en dioxano. 35 ml. 140 mmol). La mezcla de reacción se calentó durante 40 min a 50 °C y la agitación se continuó en un flujo de N2 durante 18 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo se diluyó con MeOH y MeCN. y se concentró a presión reducida. El residuo se trituró en MeCN con sonicación. La filtración de los sólidos y el secado en alto vacío proporcionaron sal clorhidrato de (3S.4S)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.51decan-4-amina como un polvo blanco.

La sal clorhidrato de (3R.4R)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.51decan-4-amina se preparó siguiendo los procedimientos que se describen para la sal clorhidrato de (3S.4S)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.51decan-4-amina partiendo de (R)-2-((terc-butildimetilsilil)oxi)propanal y usando (S)-terc-butilsulfinamida.

Intermedio B-34

(R)-2-metil-N-((R)-8-azaespiro[4.51decan-1-il)propano-2-sulfinamida

r02281

A una solución en agitación de 1-((R)-1.1-dimetiletilsulfinamino)-8-azaespiro[4.51decano-8-carboxilato de (R)-terc-butilo (1 g. 2.79 mmol) en dioxano (14 ml) en refrigeración con baño de hielo se le añadió lentamente ácido sulfúrico (0.623 ml. 11.2 mmol). La mezcla de reacción se agitó durante 1 h a TA y se diluyó con NaOH ac. hasta pH=12. La mezcla se extrajo con DCM (3 x 30 ml). Las capas orgánicas combinadas se pasaron a través de un separador de fases para la retirada del agua residual y se concentraron a presión reducida proporcionando (R)-2-metil-W-((R)-8-azaespiro[4.51decan-1-il)propano-2-sulfinamida en bruto (642 mg) que se usó directamente sin purificación adicional.

Intermedio B-35

í1R3ffl-3-metil-8-azaesp¡ror4.5ldecan-1-amina

[02301

Una mezcla de 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R,3R)-bencilo (182 mg, 0,448 mmol) y HCl (solución 4 M en dioxano, 6,7 ml) en MeOH (2,5 ml) en atm. de nitrógeno se irradió durante 23 h a 140 °C en el MW. La mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se suspendió en Et2O (10 ml). La solución transparente se eliminó y los sólidos restantes se secaron a presión reducida proporcionando sal clorhidrato de (1R,3R)-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decan-1-am¡na en bruto (126 mg) como un sólido cremoso gris.

Se sintetizó diclorhidrato de (1R,3S)-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decan-1-am¡na usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando 1-((R)-1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-3-met¡l-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carboxilato de (1R,3S)-bencilo como material de partida.

Intermedio B-36

(R)-8-azaespi ro[4.5]decan-1-amina

[02331

A una solución de 1-(1,1-d¡met¡let¡lsulf¡nam¡no)-8-azaesp¡ro[4.5]decano-8-carbox¡lato de (1R)-ferc-butilo (4,66 g, 13 mmol) en MeOH (10 ml) se le añadió HCl (4 M en dioxano, 32,5 ml, 130 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h a 50 °C. Los volátiles se eliminaron a presión reducida, el residuo se suspendió en tolueno (5 ml) y Et2O (10 ml) y la mezcla se concentró a presión reducida proporcionando sal clorhidrato de (R)-8-azaespiro[4.5]decan-1-amina en bruto que se usó directamente sin purificación adicional. MS m/z 155,1 (M+H)+.

Los siguientes compuestos de la tabla 7 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando las correspondientes aminas protegidas.

Tabla 7

Intermedio R-1

((1-(4-am¡no-5-vodo-1-met¡l-6-oxo-16-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de tere-butilo r02361

Etapa a: Una mezcla de 6-am¡no-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-2,4(1H,3H)-d¡ona (1,0 g, 7,09 mmol), ((4-metilpiper¡d¡n-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (1,78 g, 7,79 mmol), BOP (6,27 g, 14,17 mmol) y DBU (5,34 ml, 35,4 mmol) en DMF (15 ml) se agitó durante 2 h a TA. La mezcla resultante se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. (25 ml), agua (25 ml) y se extrajo con Et2O (3 x 15 ml) y DCM (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar ((1-(4-amino-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (3,6 g; impuro) como un sólido amarillo claro. MS m/z 351,9 (M+H)+. Este compuesto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa b: Una mezcla de ((1-(4-amino-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo en bruto (teórico 7,09 mmol) y NIS (1,76 g, 7,80 mmol) en DMF (14 ml) se agitó durante 1 h a TA. La mezcla resultante se vertió en un embudo de separación que contenía Na2S2O3 sat. ac. (25 ml), NH4Cl sat. ac. (25 ml) y agua (25 ml) y se extrajo con EtOAc (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar ((1-(4-amino-5-yodo-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo impuro (2,54 g). MS m/z 478,2 (M+H)+. Este compuesto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Intermedio R-2

((3S,4S)-8-(4-amino-5-vodo-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo

r02371

Etapa a: Una mezcla de 6-amino-3-metilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (1 g, 7,09 mmol), (3S,4S)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-amina (1,81 g, 7,44 mmol), BOP (6,27 g, 14,17 mmol) y DBU (7,48 ml, 49,6 mmol) en DMF (15 ml) se agitó durante 60 h a TA. La mezcla resultante se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 2-12 % de MeCN en agua, modificador NH4OH 5 mM) para dar 6-amino-2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-3-metilpirimidin-4(3H)-ona (2,08 g, 7,09 mmol). MS m/z 294,3 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 6-amino-2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-3-metilpirimidin-4(3H)-ona (2,08 g, 7,09 mmol), Boc2O (1,55 g, 7,09 mmol) y DIPEA (2,5 ml, 14,18 mmol) en DMF (14 ml) se agitó durante 1 h a TA. La mezcla resultante se vertió en un embudo de separación que contenía NH4Cl sat. ac. (75 ml) y se extrajo con DCM (3 x 15 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar ((3S,4S)-8-(4-amino-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo (2,79 g, 7,09 mmol). MS m/z 394,4 (M+H)+. Este compuesto se usó en la siguiente etapa sin purificación adicional.

Etapa c: Una mezcla de ((3S,4S)-8-(4-amino-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo (2,79 g, 7,09 mmol) y NIS (1,76 g, 7,80 mmol) en DMF (14 ml) se agitó durante 1 h a TA. La mezcla resultante se vertió en un embudo de separación que contenía Na2S2O3 sat. ac. (25 ml), NH4Cl sat. ac. (25 ml) y agua (25 ml) y se extrajo con DCM (3 x 20 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 5 % de MeOH/DCM) para dar ((3S,4S)-8-(4-amino-5-yodo-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo (1,51 g, 2,91 mmol). MS m/z 521,0 (M+H)+.

Los siguientes compuestos de la tabla 8 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando los materiales de partida e intermedios correspondientes:

Ċ

Tabla 8

Intermedio R-3

((1-(5-vodo-1-met¡l-6-oxo-1.6-d¡h¡drop¡r¡m¡din-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de tere-butilo

r02391

Etapa a: Una mezcla de 2,4-dicloro-5-yodopir¡iTi¡d¡na (1 g, 3,64 mmol) y NaOH ac. (2 M, 2,73 ml, 5,46 mmol) en THF (4 ml) se agitó durante 90 h a TA. La mezcla se acidificó hasta pH 1 usando HCl ac. (1 M). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). La capa orgánica combinada se trató con MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 % a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 2-cloro-5-yodop¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (195 mg, 0,760 mmol) como un sólido amarillo claro. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 8 ppm 8,46 (s, 1 H). MS m/z 256,7 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 2-cloro-5-yodop¡r¡mid¡n-4(3H)-ona (1 g, 3,90 mmol) en DMF (39 ml) se le añadió gota a gota LDA (2,5 M en THF/heptano/etilbenceno, 2,92 ml, 5,85 mmol) a 0 °C. La mezcla se agitó a 0 °C durante 5 min. Se añadió yoduro de metilo (364 pl, 5,85 mmol) y la mezcla se dejó calentar hasta TA y se agitó a esta temperatura durante 18 h. La mezcla se diluyó cuidadosamente con agua (20 ml). La capa acuosa se extrajo con EtOAc (2 x). La capa orgánica combinada se lavó con NH4Cl sat. ac. (2 x) seguido de salmuera. La capa orgánica se trató con MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El material residual se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 20 a un 70 % de EtOAc/heptano) para dar 2-cloro-5-yodo-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (663 mg) como un sólido pardo claro. 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 8,33 (s, 1 H), 3,58 (s, 3 H). MS m/z 270,8 (M+H)+.

Etapa c: Una solución de 2-cloro-4-((-3-cloropiraz¡n-4-¡l)tio)an¡l¡na (77,1 mg, 0,285 mmol), ((4-met¡lpiper¡d¡n-4-¡l)metil)carbamato de tere-butilo (78 mg, 0,342 mmol) y DIPEA (0,149 ml, 0,855 mmol) en DMF (1 ml) se calentó en un baño de aceite durante 2 h a 120 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc, se lavó con agua y salmuera, se secó sobre MgSO4, se filtró y se concentró a presión reducida. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y se eliminó a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(5-yodo-1 -metil-6-oxo-1.6-d¡h¡drop¡r¡T¡d¡n-2-¡l)-4-Tet¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)metil)carbamato de tere-butilo (76,9 mg) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 8 ppm 8,17 (s, 1 H), 4,68 (s, 1 H), 3,54 (s, 3 H), 3,48-3,39 (m, 2 H), 3,35-3,22 (m, 2 H), 1,71-1,57 (m, 2 H), 1,57-1,39 (m, 11 H), 1,34 1,21 (m, 2 H), 1,03 (s, 3 H). MS m/z 463,0 (M+H)+.

Intermedio R-4

((1-(5-bromo-4-metox¡p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lpiper¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de tere-butilo

r02401

Una mezcla de 5-bromo-2-cloro-4-metoxipir¡m¡d¡na (200 mg, 0,895 mmol) y ((4-metilp¡per¡din-4-¡l)met¡l)carbamato de tere-butilo (225 mg, 0,985 mmol) en Dm So (3 ml) y DIPEA (1,49 ml) en atmósfera de N2 se calentó hasta 120 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta TA, se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó con salmuera (50 ml). La capa acuosa separada se extrajo con EtOAc (50 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida proporcionando ((1-(5-bromo-4-metoxipirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo en bruto (424 mg) como un sólido pardo anaranjado, que se usó directamente sin purificación adicional. MS m/z 417,2 (M+H)+.

Intermedio R-5

((1-(5-yodo-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo

r02411

Etapa a: Una mezcla de 6-cloropiridin-2(1 H)-ona (500 mg, 3,86 mmol), K2CO3 (800 mg, 5,79 mmol) y yoduro de metilo (0,360 ml, 5,79 mmol) en EtOH (11,6 ml) se agitó durante 18 h a 70 °C. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se suspendió en agua. La capa ac. se extrajo con EtOAc (2 x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 6-cloro-1 -metilpiridin-2(1 H)-ona (472 mg, 3,29 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 7,39 (dd, J=9,2, 7,3 Hz, 1 H), 6,49 (dd, J=7,3, 1,2 Hz, 1 H), 6,41 (dd, J=9,2, 1,1 Hz, 1 H), 3,55 (s, 3 H). MS m/z 144,0 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 6-cloro-1-metilpiridin-2(1H)-ona (55 mg, 0,383 mmol), DIPEA (200 pl, 1,15 mmol) y ((4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (96 mg, 0,421 mmol) en DMF (1 ml) se irradió en un reactor de microondas durante 2 h a 140 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc. La capa orgánica se lavó con NH4Cl sat. ac. (2 x) seguido de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((4-metil-1-(1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il)piperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (53 mg, 0,158 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 6 ppm 7,33 (dd, J=8,9, 7,4 Hz, 1 H), 6,94 (t, J=6,3 Hz, 1 H), 6,10-6,04 (m, 1 H), 3,35 (s, 3 H), 2,95-2,85 (m, 4 H), 2,77 (s, 2 H), 1,56-1,47 (m, 2 H), 1,42-1,30 (m, 11 H), 0,89 (s, 3 H). MS m/z 336,6 (M+H)+

Etapa c: A una solución de ((4-metil-1-(1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il)piperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (53 mg, 0,158 mmol) y NIS (41,2 mg, 0,174 mmol) en THF (2 ml) se agitó durante 18 h a TA. La mezcla se diluyó con EtOAc. La capa orgánica se lavó dos veces con Na2S2O3 sat. ac.:NH4Cl sat. ac. (1:1) seguido de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(5-yodo-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropiridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (34,4 mg, 0,075 mmol). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 6 ppm 7,79 (d, J=7,8 Hz, 1 H), 5,57 (d, J=7,9 Hz, 1 H), 4,64 (s, 1 H), 3,50 (s, 3 H), 3,42 (s, 1 H), 3,09 2,97 (m, 2 H), 2,96-2,85 (m, 2 H), 2,84-2,70 (m, 2 H), 1,62-1,50 (m, 2 H), 1,46-1,30 (m, 11 H), 0,92 (s, 3 H). MS m/z 462,0 (M+H)+.

Intermedio R-6

((1-(5-vodo-4-((4-metoxibencil)oxi)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo

r02421

Etapa a: A una solución de 2-doro-4-((4-metoxibencil)oxi)pirimidina (118 mg, 0,519 mmol), preparada de acuerdo con los métodos del documento WO2011022440, en DMF (50 ml) se le añadió ((4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo (130 mg, 0,519 mmol). La reacción se agitó durante 48 h y se diluyó en EtOAc:agua (1:1, 100 ml). La mezcla se extrajo con EtOAc (3 x) y los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera (3 x), se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para producir ((1-(4-((4-metoxibencil)oxi)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo en bruto, como un aceite amarillo (202 mg) que se usó sin purificación adicional. MS m/z 443 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de ((1-(4-((4-metoxibencil)oxi)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo en bruto (718 mg) en MeCN (50 ml) se le añadió NIS (365 mg, 1,62 mmol) en una porción a TA. La reacción parecía de color naranja, se le añadió Na2S2O3 sat. ac. (5 ml) y la reacción se concentró hasta una solución transparente. La mezcla se diluyó con DCM (100 ml) y Na2S2O3 sat. ac. (100 ml). La capa ac. separada se extrajo con DCM (3 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida para dar ((1-(5-yodo-4-((4-metoxibencil)oxi)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo (800 mg, 1,41 mmol) como una espuma blanca. MS m/z 569 (M+H)+.

Intermedio R-7

((3S.4S)-8-(5-bromo-1.4-d¡met¡l-6-oxo-1.6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-4-il)carbamato de ferc-butilo

r02431

Etapa a: A una mezcla de 3,6-dimetilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (0,5 g, 3,57 mmol) en AcOH (15 ml) se le añadió gota a gota bromo (0,230 ml, 4,46 mmol). La mezcla se agitó durante 1 h a TA. La mezcla de reacción se diluyó con NaS2O3 sat. ac. (5 ml), se agitó vigorosamente durante 5 min y se diluyó adicionalmente con NaOH ac. 0,1 M (10 ml) y se agitó durante 15 min. La mezcla se extrajo con DCM (4 x) y las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se retiraron por filtración y se concentraron a presión reducida. El residuo se suspendió en tolueno (3 ml) y la mezcla se concentró y se secó a presión reducida proporcionando 5-bromo-3,6-dimetilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona en bruto (720 mg) como un sólido blanco que se usó directamente sin purificación adicional. MS m/z 221,0 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 5-bromo-3,6-dimetilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (0,3 g, 1,37 mmol), sal bis-clorhidrato de (3S,4S)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-amina (0,350 g, 1,438 mmol) y BOP (1,212 g, 2,74 mmol) en DMF (3 ml) se agitó durante ~10 min en atmósfera de N2. Se añadió DBU (1,445 ml, 9,59 mmol) y la mezcla de reacción se agitó durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con agua (3 ml) y ~3/4 de los componentes volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se diluyó con salmuera y EtOAc y la capa ac. separada se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre Na2SO4, se retiraron por filtración y se concentraron a presión reducida proporcionando 2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-5-bromo-3,6-dimetilpirimidin-4(3H)-ona en bruto (1,0 g) que se usó directamente sin purificación adicional. MS m/z 373,2 (M+H)+.

Etapa c: A una solución de 2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-5-bromo-3,6-dimetilpmm¡dm-4(3H)-ona en bruto (509 mg, 1,37 mmol) en DMF (5 ml) se le añadió Boc2Ü (0,35 ml, 1,51 mmol) y DIPEA (0,526 ml, 3,01 mmol). La mezcla se agitó a TA y en atmósfera de N2 durante una noche. La mezcla de reacción se diluyó con NaHCÜ3 sat. ac. y EtOAc. La capa ac. separada se extrajo con EtOAc. Las capas orgánicas combinadas se lavaron con agua y salmuera, se secaron sobre Na2SÜ4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice, gradiente de un 10 a un 100 % de EtOAc/heptano) proporcionando ((3S,4S)-8-(5-bromo-1,4-d¡met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo (200 mg) como un sólido esponjoso blanco. MS m/z 473,2 (M+H)+.

Intermedio L-1

6-am¡no-5-((2.3-d¡clorofen¡l)t¡o)-3-met¡lp¡ rím id in^^dH ^H Vdiona

[02441

Etapa a: Una mezcla de 6-am¡no-3-met¡lp¡rim¡d¡n-2,4(1H,3H)-d¡ona (1,0 g, 7,09 mmol) y NBS (1,58 g, 8,86 mmol) en DMF (5 ml) se agitó durante 16 h a TA. La mezcla resultante se diluyó con agua (20 ml) y el sólido formado se filtró seguido de lavado con agua (2 x 5 ml), para dar 6-am¡no-5-bromo-3-met¡lp¡rim¡d¡n-2,4(1H,3H)-d¡ona (1,1 g, 5,0 mmol) como un sólido blanquecino. MS m/z 222,1 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 6-am¡no-5-bromo-3-met¡lpmm¡d¡n-2,4(1H,3H)-d¡ona (200 mg, 0,909 mmol), 2,3-diclorobencenotiol (326 mg, 1,818 mmol), Cu(I)I (34,6 mg, 0,182 mmol), TMEdA (55 pl, 0,364 mmol) y K3PO4 (579 mg, 2,73 mmol) en dioxano (2 ml) se agitó durante 20 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 5-20 % de MeCN en agua, modificador NH4OH 5 mM) para dar 6-am¡no-5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-2,4(1H,3H)-d¡ona (120,0 mg, 0,377 mmol) como un sólido blanco. MS m/z 318,2 (M+H)+.

El siguiente intermedio de la tabla 9 se preparó usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el correspondiente tiol:

Tabla 9

Intermedio L-2

6-am¡no-5-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)-3-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-2.4(1H.3H)-d¡ona

f02461

Etapa a: Una mezcla de 6-aminouracilo (1,0 g, 7,87 mmol) y sulfato de amonio (52 mg, 0,393 mmol) en hexametildisilazano (5 ml) se agitó durante 16 h a 130 °C. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta TA, el precipitado se retiró por filtración y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se disolvió en tolueno (10 ml) y se añadió SEMCl (2,1 ml, 11,80 mmol). La mezcla resultante se agitó durante 90 min a TA. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 15 % de MeOH/DCM) para dar 6-amino-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona (720 mg, 2,80 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-cfe) 8 ppm 10,44 (s, 1 H), 6,32 (s a, 2 H), 5,10 (s, 2 H), 4,57 (d, J=2,02 Hz, 1 H), 3,42-3,60 (m, 2 H), 0,79-0,91 (m, 2 H), 0,00 (m, 9 H).

Etapa b: Una mezcla de 6-amino-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona (720 mg, 2,80 mmol) y NBS (747 mg, 4,20 mmol) en DMF (5 ml) se agitó durante 16 h a t A. La mezcla resultante se diluyó con agua (20 ml) y el sólido formado se retiró por filtración seguido de lavado con agua (2 x 10 ml), para dar 6-amino-5-bromo-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona (941 mg, 2,80 mmol). MS m/z 336,1 (M+H)+.

Etapa c: Una mezcla de 6-amino-5-bromo-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)-pirimidin-2,4(1H,3H)-diona (941 mg, 2,80 mmol), Cu(I)I (57 mg, 0,297 mmol), TMEDA (90 pl, 0,595 mmol) y K3PO4 (947 mg, 4,46 mmol) en dioxano (5 ml) se agitó durante 14 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 6-amino-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)-3-((2-(trimetilsilil)etoxi)metil)pirimidin-2,4(1H,3H)-diona (400 mg, 0,921 mmol). 1H Rm N (400 MHz, DMSo-cfe) 8 ppm 10,98 (s, 1 H), 8,47 (dd, J=4,29, 1,01 Hz, 1 H), 7,45-7,65 (m, 2 H), 6,91 (s a, 2 H), 5,18 (s, 2 H), 3,42-3,71 (m, 2 H), 0,75-1,01 (m, 2 H), -0,02-0,02 (m, 9 H). 19F RMN (376 MHz, DMSO-d6) 8 ppm -63,48.

Intermedio L-3

2-cloro-5-((2.3-d¡clorofenil)t¡o)-4-metox¡p¡r¡m¡d¡na

r02471

Etapa a: Una mezcla de 6-cloro-3-yodo-2-metoxipiridina (100 mg, 0,371 mmol), 2,3-diclorobencenotiol (100 mg, 0,557 mmol), 1,10-fenantrolina (26,7 mg, 0,148 mmol), Cu(I)I (14,1 mg, 0,074 mmol) y Cs2CO3 (242 mg, 0,742 mmol) en dioxano (3 ml) se agitó durante 1 h a 100 °C. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta TA y se diluyó con EtOAc y se filtró a través de una capa de Celite. La capa orgánica se lavó con NH4Cl sat. ac. La capa orgánica se secó sobre MgSO4, se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar 2-cloro-5-((2,3-diclorofenil)tio)-4-metoxipirimidina (81,6 mg, 0,255 mmol). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d6) 8 ppm 7,75 (d, J=7,9 Hz, 1 H), 7,56 (dd, J=8,0, 1,4 Hz, 1 H), 7,30 (t, J=8,0 Hz, 1 H), 7,22 (s, 1 H), 6,94 (dd, J=8,0, 1,2 Hz, 1 H), 3,89 (s, 3 H). MS m/z 322,0 (M+H)+.

Intermedio L-4

4-amino-6-fluoro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)piridin-2(1H)-ona

[02491

Etapa a: A una solución a 0 °C de 4-amino-6-fluoropiridin-2(1H)-ona (490 mg, 3,83 mmol) en AcOH (19 ml) se le añadió NIS (818 mg, 3,63 mmol). La mezcla de reacción consolidada, se dejó calentar hasta TA y se agitó durante 1 h. Los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se transfirió a un embudo de separación que contenía Na2S2O3 sat. ac. (15 ml), NH4Cl sat. ac. (15 ml) y agua (15 ml). La mezcla se extrajo con Et2O (4 x 50 ml) y los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 5 % de MeOH/DCM) para dar 4-amino-6-fluoro-3-yodopiridin-2 (1H)-ona (54 mg, 0,213 mmol) como un sólido blanco. MS m/z 255,0 (M+H)+.

Etapa b: Una mezcla de 4-amino-6-fluoro-3-yodopiridin-2(1H)-ona (40 mg, 0,157 mmol), 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (33,9 mg, 0,189 mmol), TMEDA (9,51 |jl, 0 ,063 mmol), K3PO4 (66,9 mg, 0,315 mmol) y Cu(I)I (6,00 mg, 0,031 mmol) en dioxano (0,5 ml) se agitó durante 90 min a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla se diluyó con EtOAc (2 ml), se agitó 5 min y se filtró a través de una capa de Celite. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 70 % de EtOAc/heptano seguido de gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 4-amino-6-fluoro-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)piridin-2(1H)-ona (22 mg, 0,072 mmol) como un sólido amarillo. MS m/z 306,0 (M+H)+.

Intermedio L-5

4-amino-6-fluoro-1-metil-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)piridin-2(1H)-ona

[02501

Etapa a: Una suspensión de 4-amino-6-fluoropiridin-2(1H)-ona (570 mg, 4,45 mmol), K2CO3 (922 mg, 6,67 mmol) y Mel (278 jl, 4,45 mmol) en EtOH (15 ml) se agitó durante 15 h a 70 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se filtró y se aclaró con EtOH. El filtrado se suspendió en agua (40 ml) y se extrajo con EtOAc (2 x 40 ml) y trifluoroetanol (al 10 % en DCM, 8 x 40 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 10 % de MeOH/DCM) para dar 4-amino-6-fluoro-1-metilpiridin-2(1H)-ona (356 mg, 2,51 mmol) como un sólido blanco. MS m/z 142,8 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de 4-amino-6-fluoro-1-metilpiridin-2(1H)-ona (356 mg, 2,505 mmol) en AcOH (8 ml) se le añadió una solución de NIS (552 mg, 2,455) en DMF (2 ml) durante 30 min mediante una bomba de jeringa, y la mezcla resultante se agitó a TA durante 20 min adicionales. Los volátiles se eliminaron a presión reducida, el residuo se disolvió en Et2O y se vertió en un embudo de separación que contenía Na2S2O3 sat. ac. (15 ml), NH4Cl sat. ac. (15 ml) y agua (15 ml), y se extrajo con Et2O (8 x 50 ml). Los extractos orgánicos combinados se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 20 a un 70 % de EtOAc/heptano) para dar 4-amino-6-fluoro-3-yodo-1-metilpiridin-2(1H)-ona (80 % pura, 345 mg). MS m/z 268,8 (M+H)+.

Etapa c: Una mezcla de 4-amino-6-fluoro-3-yodo-1-metilpiridin-2(1H)-ona (340 mg, véase anteriormente), 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (227 mg, 1,269 mmol), Tm EDA (0,061 ml, 0,406 mmol), K3PO4 (431 mg, 2,03 mmol) y Cu(l)l (38,7 mg, 0,203 mmol) en dioxano (3,4 ml) se agitó durante 1,5 h a 100 °C. Se añadieron Cu(l)l (38,7 mg, 0,203 mmol) y TMEDA (61 jl, 0,406 mmol) adicionales y la mezcla de reacción se agitó durante 2,5 h a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA, la mezcla de reacción se diluyó con EtOAc (10 ml), se agitó 5 min, se filtró a través de una capa de Celite y se lavó con EtOAc. Los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por cromatografía en sílice (de un 0 a un 80 % de EtOAc/heptano) para dar 4-amino-6-fluoro-1-metil-3-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)piridin-2(1H)-ona (81 mg, 0,254 mmol) como un sólido blanco. MS m/z 320,1 (M+H)+.

Intermedio L-6

2-cloro-5-(2.3-diclorofenil)-4-metoxipirimidina

r02511

Una suspensión de 5-bromo-2-cloro-4-metoxipirimidina (200 mg. 0.895 mmol). ácido (2,3-diclorofenil)borónico (171 mg. 0.895 mmol). aducto de PdCh(dppf) CH2Cl2 (73.1 mg. 0.090 mmol) y K2CO3 (495 mg. 3.58 mmol) en THF (7.46 ml) y agua (1.49 ml) se desgasificó con una corriente de N2 durante 5 min. se calentó hasta 50 °C durante 1.5 h. La mezcla de reacción se repartió entre EtOAc (100 ml) y agua (50 ml). La capa orgánica separada se lavó con salmuera (50 ml). se secó sobre Na2SO4. se filtró y se concentró a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en columna (gel de sílice. gradiente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) proporcionando 2-cloro-5-(2.3-diclorofenil)-4-metoxipirimidina (17 mg) como un sólido blanco. MS m/z 289.1 (M+H)+.

Ejemplo 1

6-amino-2-((3S.4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.51decan-8-il)-3-metil-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-4(3H)-ona

r02531

Una mezcla de ((3S.4S)-8-(4-amino-5-yodo-1-metil-6-oxo-1.6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de ferc-butilo (42 mg. 0.081 mmol). 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (22 mg.

0.121 mmol). Cu(I)I (3.1 mg. 0.016 mmol). TMEDA (5 |jl. 0.032 mmol) y K3PO4 (51 mg. 0.243 mmol) en dioxano (0.5 ml) se agitó durante 90 min a 100 °C. Después de enfriarla hasta TA. la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía K2CO3 ac. (2 M. 2 ml) y se extrajo con DCM (3 x 5 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4. se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (5 ml) y se añadió TFA (1 ml). Después de agitar durante 20 min a t A. los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 15-40 % de MeCN en agua. modificador NH4OH 5 mM) para dar 6-amino-2-((3S.4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-3-metil-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-4(3H)-ona (20.0 mg) como un sólido blanco.

Ejemplo 2

6-amino-2-(4-(aminometil)-4-metilpiperidin-1-il)-5-((2.3-diclorofenil)tio)-3-metilpirimidin-4(3H)-ona

[02551

[0256] Una mezcla de 6-amino-5-((2,3-diclorofenil)tio)-3-metilpirimidin-2,4(1H,3H)-diona (60 mg, 0,189 mmol), ((4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo (64,6 mg, 0,283 mmol), BOP (250 mg, 0,566 mmol), y DBU (142 mI, 0,943 mmol) en DMF (2 ml) se agitó durante 2 h a TA. La mezcla resultante se vertió en un embudo de separación que contenía agua y se extrajo con EtOAc (3 x 5 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (5 ml) y se añadió TFA (1 ml). Después de agitar durante 10 min a TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 35-60 % de MeCN en agua, modificador NH4OH 5 mM) para dar 6-amino-2-(4-(aminometil)-4-metilpiperidin-1-il)-5-((2,3-diclorofenil)tio)-3-metilpirimidin-4(3H)-ona (20,0 mg) como un sólido blanco. Los siguientes compuestos de la tabla 10 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el correspondiente intermedio de tiol y yodo-pirimidinona:

Tabla 10

Ejemplo 67

6-amino-2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiror4.5]decan-8-il)-5-((3-cloro-2-metilpiridin-4-il)tio)-3-metilpirimidin-4(3H)-ona

T02581

Una mezcla de ((3S,4S)-8-(4-amino-5-yodo-1-metil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo (145 mg, 0,279 mmol), 3-cloro-2-metilpiridin-4-tiolato de sodio (101 mg, 0,558 mmol), Cu(I)I (10,6 mg, 0,056 mmol), TMEDA (17 |jl, 0,112 mmol) y K3PO4 (178 mg, 0,838 mmol) en dioxano desgasificado (1 ml) en atmósfera de N2 se agitó durante 90 min a 100 °C. Después de enfriarla hasta t A, la mezcla de reacción se vertió en un embudo de separación que contenía K2CO3 ac. (2 M, 30 ml) y se extrajo con DCM (3 x 30 ml). Las fases orgánicas combinadas se secaron sobre MgSO4, se filtraron y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se disolvió en DCM (5 ml) y se añadió TFA (1 ml). Después de agitar durante 90 min a TA, los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 10 30 % de MeCN en agua, modificador NH4OH 5 mM) para dar 6-amino-2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-5-((3-cloro-2-metilpiridin-4-il)tio)-3-metilpirimidin-4(3H)-ona (36,1 mg) como un sólido blanco.

Los siguientes compuestos de la tabla 11 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el correspondiente intermedio de tiol y yodo-pirimidinona:

Tabla 11

Ejemplo 88

4-am¡no-6-((3S,4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-8-¡l)-3-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡d¡n-2(1H)-ona

r026 1 l

Una soluc¡ón de 4-am¡no-6-fluoro-3-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡d¡n-2(1H)-ona (22 mg, 0,072 mmol) y (3S,4S)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-4-am¡na (21 mg, 0,086 mmol) en DIPEA (0,2 ml) y Dm SO (0,1 ml) se ag¡tó durante 5 h a 100 °C. Después de enfr¡ar hasta TA, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 45-70 % de MeCN en agua, mod¡f¡cador NH4OH 5 mM) para dar 4-am¡no-6-((3S,4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)-3-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡d¡n-2(1H)-ona (6,1 mg) como un sól¡do blanco. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) ó ppm 8,27-8,37 (m, 1 H), 7,48 (d, J=7,58 Hz, 1 H), 7,41 (dd, J=8,21, 4,42 Hz, 1 H), 5,40 (s, 1 H), 4,22 (dd, J=6,44, 4,93 Hz, 1 H), 3,83 (d, J=8,84 Hz, 1 H), 3,68 (d, J=8,84 Hz, 1 H), 3,53 (td, J=11,68, 5,94 Hz, 2 H), 3,03-3,20 (m, 2 H), 3,01 (d, J=4,80 Hz, 1 H), 1,77-1,92 (m, 2 H), 1,59-1,74 (m, 2 H), 1,22 (d, J=6,32 Hz, 3 H). HRMS m/z calculado para C20H25F3N5O2S (M+H)+ 456,1676, encontrado 456,1623. IC5ü=0,042 |jM.

Ejemplo 89

4-am¡no-6-((3S.4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-8-¡l)-1-met¡l-3-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡d¡n-2(1H)-ona

r0263l

Una solución de 4-am¡no-6-fluoro-1-met¡l-3-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡d¡n-2(1H)-ona (80 mg, 0,251 mmol) y (3S,4S)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-amina (73,1 mg, 0,086 mmol) en DIPEA (0,45 ml) y DMSO (0,15 ml) se ag¡tó durante 20 h a 100 °C. Después de enfr¡ar hasta TA, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 45-70 % de MeCN en agua, mod¡f¡cador TFA al 0,1 %) para dar la 4-am¡no-6-((3S,4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decan-8-¡l)-1-met¡l-3-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡d¡n-2(1H)-ona (84,8 mg) como su sal de TFA como un ace¡te naranja. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 8 ppm 8,33 (dd, J=4,04, 2,02 Hz, 1 H), 7,33-7,43 (m, 2 H), 5,71 (s, 1 H), 4,23-4,36 (m, 1 H), 3,95 (d, J=9,09 Hz, 1 H), 3,84 (d, J=9,09 Hz, 1 H), 3,47 (d a, J=2,78 Hz, 1 H), 3,46 (s, 3 H), 3,15-3,26 (m, 2 H), 2,60-2,86 (m, 2 H), 1,88-2,02 (m, 3 H), 1,76 (d a, J= 12,13 Hz, 1 H), 1,32 (d, J=6,57 Hz, 3 H). HRMS m/z calculado para C21H27F3N5O2S (M+H)+ 470,1832, encontrado 470,1826. IC50=0,429 |j M.

Ejemplo 90

6-am¡no-2-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-5-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona

r02651

Etapa a: A una mezcla de 6-am¡no-5-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)-3-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)p¡r¡m¡d¡n-2,4(1 H,3H)-d¡ona (200 mg, 0,460 mmol), BOP-Cl (152 mg, 0,598 mmol) y ((4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de ferc-but¡lo (158 mg, 0,690 mmol) en MeCN (5 ml) se le añad¡ó DBU (210 jl). La mezcla resultante se ag¡tó durante 2 h a 100 °C. Después de enfr¡ar hasta TA, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(4-am¡no-6-oxo-5-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo (32 mg). 1H RMN (400 MHz, Cloroformo-d) 8 ppm 8,39 (d, J=4,04 Hz, 1 H), 7,58 (d, J=8,08 Hz, 1 H), 7,29 (dd, J=8,08, 4,55 Hz, 1 H), 5,22 (s, 2 H), 4,67 (t, J=6,06 Hz, 1 H), 4,12 (c, J=7,16 Hz, 1 H), 3,87 (t, J=8,08 Hz, 2 H), 3,62-3,77 (m, 2 H), 3,37 (t, J=9,98 Hz, 2 H), 3,09 (d, J=6,57 Hz, 2 H), 2,05 (s, 2 H), 1,57 (ddd, J=13,33, 9,54, 3,41 Hz, 2 H), 1,37-1,51 (m, 12 H), 1,26 (t, J=7,07 Hz, 3 H), 1,00 (s, 3 H), 0,84-0,97 (m, 3 H), 0,02 (s a, 9 H).

Etapa b: A una soluc¡ón de ((1-(4-am¡no-6-oxo-5-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)-1-((2-(tr¡met¡ls¡l¡l)etox¡)met¡l)-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo (32 mg, 0,050 mmol) en DCM (2 ml) se le añad¡ó TFA (0,5 ml) y la mezcla resultante se ag¡tó durante 30 m¡n a 50 °C. Después de enfr¡ar hasta TA, los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se d¡solv¡ó en MeOH (2 ml) y se añad¡ó et¡lend¡am¡na (50 mg, 0,75 mmol). La mezcla resultante se ag¡tó durante 16 h a TA. Los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 15-40 % de MeCN en agua, mod¡f¡cador NH4OH 5 mM) para dar 6-am¡no-2-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-5-((2-(tr¡fluoromet¡l)p¡r¡d¡n-3-¡l)t¡o)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (4,1 mg, 9,69 jm ol) como un sól¡do blanco. 1H RMN (400 MHz, Metanol-d4) 8 ppm 8,33 (d, J=3,79 Hz, 1 H), 7,56 (d, J=8,08 Hz, 1 H), 7,43 (dd, J=8,08, 4,55 Hz, 1 H), 3,96 (dt, J=13,77, 4,74 Hz, 2 H), 3,39-3,52 (m, 2 H), 2,52-2,62 (m, 2 H), 1,54 (ddd, J=13,71, 9,92, 4,17 Hz, 2 H), 1,39-1,49 (m, 3 H), 1,04 - 1,13 (m, 2 H). 19F RMN (376 MHz, Metanol-d4) 8 ppm -66,39. HRMS calculado para C17H22F3N6OS (M+H)+ 415,1519, encontrado 415,1528. IC50=0,066 j M.

Ejemplo 91

r02661

Etapa a: A una solución de ((1-(5-yodo-4-((4-metoxibencil)oxi)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo (198 mg, 0,348 mmol) en DMF (2 ml) se le añadió K2CO3 (96 mg, 0,697 mmol), 1-tiofeno-2-carboxilato de cobre (27 mg, 0,139 mmol) y 2-(trifluorometil)piridin-3-tiol (90 mg, 491 mmol). La mezcla se irradió en el reactor de microondas durante 30 min a 120 °C. La reacción se vertió en agua (100 ml) y la mezcla se extrajo con DCM (4 x). Los extractos orgánicos combinados se lavaron con salmuera, se secaron sobre MgSO4, se filtraron y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 50 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(4-((4-metoxibencil)oxi)-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo (110 mg) como un aceite transparente. MS m/z 620 (M+H)+.

Etapa b: A una solución de ((1-(4-((4-metoxibencil)oxi)-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de ferc-butilo (60 mg, 0,097 mmol) en DCM (2 ml) se le añadió TFA (2 ml). La reacción se agitó a durante 30 min a TA y se concentró a presión reducida. El material residual se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 10-30 % de MeCN en agua, modificador TFA al 0,1 %) para dar 2-(4-(aminometil)-4-metilpiperidin-1-il)-5-((2-(trifluorometil)piridin-3-il)tio)pirimidin-4(3H)-ona (50,0 mg, 0,125 mmol).

Los siguientes compuestos de la tabla 12 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando el correspondiente intermedio protegido de amina y tiol:

Tabla 12

Ejemplo 98

2-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona

r02681

Etapa a: Una mezcla de ((1-(5-yodo-1-met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de ferc-but¡lo (76,9 mg, 0,166 mmol), 2,3-d¡clorobencenot¡ol (44,7 mg, 0,249 mmol), 1,10-fenantrol¡na (12,0 mg, 0,067 mmol), Cu(I)I (6,3 mg, 0,033 mmol) y CS2CO3 (108 mg, 0,333 mmol) en d¡oxano (3 ml) se ag¡tó durante 1 h a 100 °C. Después de enfr¡arla hasta TA, la reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc y se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te. La capa orgán¡ca se lavó con NH4Cl sat. ac. (2 x) segu¡do de salmuera. La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4, se f¡ltró y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-1-met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo. MS m/z 513,0 (M+H)+

Etapa b: Una mezcla de ((1-(5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-1-met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de ferc-but¡lo en DCM (3 ml) y TFA (1 ml) se ag¡tó durante 1 h a TA. Los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 15-40 % de MeCN en agua, mod¡f¡cador TFA al 0,1 %) para dar 2-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (sal de TFA, 36 mg).

Los s¡gu¡entes compuestos de la tabla 13 se s¡ntet¡zaron usando el proced¡m¡ento anter¡or o mod¡f¡cac¡ones al proced¡m¡ento anter¡or usando el correspond¡ente ¡ntermed¡o de t¡ol y yodo-p¡r¡m¡d¡nona:

Tabla 13

Ejemplo 116

6-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-1-met¡lp¡r¡d¡n-2(1H)-ona

r02701

Etapa a: Una mezcla de ((1-(5-yodo-1-met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo (34,4 mg, 0,075 mmol), 2,3-d¡clorobencenot¡ol (20 mg, 0,112 mmol), 1,10-fenantrol¡na (5,4 mg, 0,030 mmol), Cu(I)I (2,8 mg, 0,015 mmol) y Cs2CO3 (48,6 mg, 0,149 mmol) en d¡oxano (3 ml) se ag¡tó durante 1 h a 100 °C. Después de enfr¡arla hasta TA, la reacc¡ón se d¡luyó con EtOAc y se f¡ltró a través de una capa de Cel¡te. La capa orgán¡ca se lavó con NH4Cl sat. ac. (2 x) segu¡do de salmuera. La capa orgán¡ca se secó sobre MgSO4, se f¡ltró y los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en síl¡ce (grad¡ente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-1-met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo. MS m/z 512,0 (M+H)+

Etapa b: Una mezcla de ((1-(5-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-1-met¡l-6-oxo-1,6-d¡h¡drop¡r¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo (véase anter¡ormente) en DCM (3 ml) y TFA (1 ml) se ag¡tó durante 1 h a TA. Los volát¡les se el¡m¡naron a pres¡ón reduc¡da y el res¡duo se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 15-40 % de MeCN en agua, mod¡f¡cador TFA al 0,1 %) para dar 6-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-3-((2,3-d¡clorofen¡l)t¡o)-1-met¡lp¡r¡d¡n-2(1H)-ona (sal de TFA, 5 mg).

Los s¡gu¡entes compuestos de la tabla 14 se s¡ntet¡zaron usando el proced¡m¡ento anter¡or o mod¡f¡cac¡ones al proced¡m¡ento anter¡or usando los mater¡ales de part¡da e ¡ntermed¡os correspond¡entes:

Tabla 14

Ejemplo 118

6-(4-(aminometil)-4-metilpiperidin-1-il)-3-((2.3-diclorofenil)tio)piridin-2(1H)-ona

TO2721

Etapa a: Una mezcla de 2-cloro-5-((2,3-diclorofenil)tio)-4-metoxipirimidina (81.6 mg. 0.255 mmol). DIPEA (89 mI.

0.509 mmol) y ((4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (69.7 mg. 0.305 mmol) en DMF (1 ml) se irradió en un reactor de microondas durante 2 h a 140 °C. Después de enfriarla hasta TA. la mezcla se diluyó con EtOAc. La capa orgánica se lavó con NH4Cl sat. ac. (2 x) seguido de salmuera. La capa orgánica se secó sobre MgSO4. se filtró y los volátiles se eliminaron a presión reducida. El residuo se purificó por cromatografía en sílice (gradiente de un 0 a un 100 % de EtOAc/heptano) para dar ((1-(5-((2.3-diclorofenil)tio)-6-metoxipiridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (26.1 mg) como un sólido blanco. 1H RMN (400 MHz. Metanol-d4) 5 ppm 7.53 (d. J=8.4 Hz. 1 H). 7.21 (dd. J=8.0. 1.4 Hz. 1 H). 7.04 (t. J=8.0 Hz. 1 H). 6.51 (dd. J=8.1. 1.3 Hz. 1 H). 6.38 (d. J=8.5 Hz. 1 H).

3.96-3.87 (m. 2 H). 3.82 (s. 3 H). 3.49-3.39 (m. 4 H). 3.01 (d. J=5.3 Hz. 2 H). 1.59-1.47 (m. 3 H). 1.44 (s. 9 H). 1.42 1.33 (m. 2 H). 1.00 (s. 3 H). MS m/z 512.1 (M+H)+.

Etapa b: Una solución de ((1-(5-((2.3-diclorofenil)tio)-6-metoxipiridin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de terebutilo (26.1 mg. 0.051 mmol) y BBr3 (1 M en Dc M. 0.153 ml. 0.153 mmol) en d CM (2 ml) se agitó durante 1 h a 0 °C. Los volátiles se eliminaron a presión reducida para dar ((1-(5-((2.3-diclorofenil)tio)-4-metoxipirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (26.1 mg. 0.051 mmol). Ms m/z 412.1 (M+H)+.

Etapa c: Una mezcla de ((1-(5-((2.3-diclorofenil)tio)-4-metoxipirimidin-2-il)-4-metilpiperidin-4-il)metil)carbamato de tere-butilo (26.1 mg. 0.051 mmol) y HCl (4 M en dioxano. 2 ml. 8 mmol) se agitó durante 20 h a 90 °C. Después de enfriar hasta TA. los volátiles se eliminaron a presión reducida y el residuo se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 15-40 % de MeCN en agua. modificador TFA al 0.1 %) para dar 2-(4-(aminometil)-4-metilpiperidin-1-il)-5-((2.3-diclorofenil)tio)pirimidin-4(3H)-ona (sal de TFA. 13.0 mg).

Los siguientes compuestos de la tabla 15 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando los materiales de partida e intermedios correspondientes:

Tabla 15 ________________________________________ _______________________________________________ | Ejemplo | Compuesto | Caracterización | CI50 (mM

Ejemplo 121

-((2-amino-3-cloropi r¡d¡n-4-¡l)t¡o)-2-((3S.4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-8-¡l)-3,6-d¡met¡lp¡ rimidin-4(3H)-ona

[02741

Etapa a: A una mezcla de ((3S,4S)-8-(5-bromo-1,4-dimetil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo (130 mg, 0,276 mmol), K3PO4 (176 mg, 0,827 mmol), 2-amino-3-cloropiridin-4-tiolato de sodio (76 mg, 0,414 mmol) y Cu(I)I (10,50 mg, 0,055 mmol) en DMF en atmósfera de N2 en vial de microondas se le añadió TMEDA (0,017 ml, 0,110 mmol). La mezcla de reacción se irradió en un microondas a 150 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se diluyó con agua/EtOAc y se extrajo con EtOAc (2 x) y DCM (2 x). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4, se retiraron por filtración y se concentraron a presión reducida. El residuo se purificó por TLC preparativa (gel de sílice, 1 mm, DCM/MeOH = 95/5) proporcionando ((3S,4S)-8-(5-((2-amino-3-cloropiridin-4-il)tio)-1,4-dimetil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo. MS m/z 551,3 (M+H)+.

Etapa b: Se disolvió/suspendió ((3S,4S)-8-(5-((2-amino-3-cloropiridin-4-il)tio)-1,4-dimetil-6-oxo-1,6-dihidropirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-il)carbamato de tere-butilo en DCM (3 ml) y se añadió TFA (0,5 ml). La mezcla se agitó durante ~20 min y se concentró a presión reducida. Al residuo se le añadió MeCN (que contenía un 5 % de agua) y NaHCO3 sólido. La mezcla se agitó vigorosamente durante 5 min y se filtró a través de un filtro de jeringa (2 Mm). El filtrado se concentró a presión reducida y se purificó por TLC preparativa (gel de sílice, 1 mm, DCM/MeOH = 90:10). La band de sílice se lavó con DCM/MeOH y el filtrado se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en MeCN, se filtró a través de un filtro de jeringa (2 Mm) y se liofilizó proporcionando 5-((2-amino-3-cloropiridin-4-il)tio)-2-((3S,4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-3,6-dimetilpirimidin-4(3H)-ona (3,6 mg).

Los siguientes compuestos de la tabla 16 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando los materiales de partida e intermedios correspondientes:

Tabla 16

Ejemplo 123

6-am¡no-2-((3S.4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-8-¡l)-5-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona

r02761

Etapa a: A una mezcla de ác¡do (3-cloro-4-metox¡fen¡l)borón¡co (41.0 mg. 0.241 mmol). CS2CO3 (182 mg. 0.558 mmol) y Pd(PPh3)4 (16.69 mg. 0.014 mmol) en tolueno (1 ml) se le añad¡ó en atmósfera de N2 una soluc¡ón de ((3S.4S)-8-(4-am¡no-5-yodo-1-met¡l-6-oxo-1.6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-4-¡l)carbamato de terc-but¡lo (50 mg. 0.096 mmol) en EtOH (1 ml). La mezcla se ¡rrad¡ó en un reactor de m¡croondas durante 30 m¡n a 100 °C. La mezcla de reacc¡ón se d¡luyó con agua y EtOAc. La capa ac. separada se extrajo con EtOAc (2 x) y las capas orgán¡cas comb¡nadas se secaron sobre Na2SO4. se ret¡raron por f¡ltrac¡ón y se concentraron a pres¡ón reduc¡da proporc¡onando ((3S.4S)-8-(4-am¡no-5-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-1-met¡l-6-oxo-1.6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decan-4-¡l)carbamato de terc-but¡lo en bruto (83 mg) como un sól¡do pardo que se usó d¡rectamente en la s¡gu¡ente reacc¡ón s¡n pur¡f¡cac¡ón ad¡c¡onal. MS m/z 518.3 (M+H)+.

Etapa b: A ((3S.4S)-8-(4-am¡no-5-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-1-met¡l-6-oxo-1.6-d¡h¡drop¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.5]decan-4-¡l)carbamato de terc-but¡lo en bruto (83 mg) en DCM (1 ml) en atmósfera de N2 se le añad¡ó TFA (1 ml). La mezcla se ag¡tó durante 1 h. se d¡luyó con tolueno (1 ml) y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en MeOH y se bas¡f¡có con NH3 (7 M en MeOH) y la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en MeCN/agua (2/1). se f¡ltró a través de un f¡ltro de jer¡nga (0.2 |jm) y se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 25-50 % de MeCN en agua. mod¡f¡cador NH4OH 5 mM) proporc¡onando 6-am¡no-2-((3S.4S)-4-am¡no-3-met¡l-2-oxa-8-azaesp¡ro[4.51decan-8-¡l)-5-(3-cloro-4-met¡lfen¡l)-3-met¡lp¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona (19 mg) como un sól¡do blanco.

Los s¡gu¡entes compuestos de la tabla 17 se s¡ntet¡zaron usando el proced¡m¡ento anter¡or o mod¡f¡cac¡ones al proced¡m¡ento anter¡or usando los mater¡ales de part¡da e ¡ntermed¡os correspond¡entes:

Tabla 17

Ejemplo 198

-(4-(am¡nomet¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-1-¡l)-5-(2.3-d¡clorofen¡l)p¡r¡m¡d¡n-4(3H)-ona

T02781

Etapa a: Una suspens¡ón de ((1-(5-bromo-4-metox¡p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de ferc-but¡lo (105 mg. 0.225 mmol). ác¡do (2.3-d¡clorofen¡l)borón¡co (42.9 mg. 0.225 mmol). aducto de PdCh(dppf) CH2Cl2 (18.4 mg.

0.023 mmol) y K2CO3 (124 mg. 0.900 mmol) en THF (1.88 ml) y agua (0.375 ml) se desgas¡f¡có con una comente de N2 durante 5 m¡n. se calentó hasta 50 °C durante 4 h. La mezcla de reacc¡ón se repart¡ó entre EtOAc (100 ml) y agua (50 ml). La capa orgán¡ca separada se lavó con salmuera (50 ml). se secó sobre Na2SO4. se f¡ltró y se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se pur¡f¡có por cromatografía en columna (gel de síl¡ce. grad¡ente de un 0 a un 30 % de EtOAc/heptano) proporc¡onando ((1-(5-(2.3-d¡clorofen¡l)-4-metox¡p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de ferc-but¡lo (17 mg) como un sól¡do ¡ncoloro. MS m/z 481.3 (M+H).

Etapa b: Se d¡solv¡ó ((1-(5-(2.3-d¡clorofen¡l)-4-metox¡p¡r¡m¡d¡n-2-¡l)-4-met¡lp¡per¡d¡n-4-¡l)met¡l)carbamato de terc-but¡lo (17 mg. 0.028 mmol) en HBr (33 % en AcOH. 0.4 ml) y la mezcla se ag¡tó a 90 °C durante 1 h. La mezcla de reacc¡ón se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en MeOH y se bas¡f¡có con NH3 (7 M en MeOH) y la mezcla se concentró a pres¡ón reduc¡da. El res¡duo se d¡solv¡ó en MeCN/agua (2:1). se f¡ltró a través de un f¡ltro de jer¡nga (0.2 |jm) y se pur¡f¡có por HPLC (eluc¡ón en grad¡ente de un 15-40 % de MeCN en agua. mod¡f¡cador NH4OH 5 mM) proporcionando 2-(4-(aminometil)-4-metilpiperidin-1-il)-5-(2.3-diclorofenil)pirimidin-4(3H)-ona (6 mg) como un sólido blanco.

Ejemplo 199

2-((3S.4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.51decan-8-il)-5-(2.3-diclorofenil)pirimidin-4(3H)-ona

f02791

Etapa a: Una mezcla de 2-cloro-5-(2,3-diclorofenil)-4-metoxipirimidina (55 mg. 0.177 mmol) y sal bis-clorhidrato de (35.45) -3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-amina (47.3 mg. 0.194 mmol) en DMSO (1.18 ml) y DIPEA (0.59 ml) en atmósfera de N2 se calentó hasta 120 °C durante 2 h. La mezcla de reacción se dejó enfriar hasta TA. se diluyó con EtOAc (50 ml) y se lavó con salmuera (25 ml). La capa ac. separada se extrajo con EtOAc (25 ml). Las capas orgánicas combinadas se secaron sobre Na2SO4. se filtraron y se concentraron a presión reducida proporcionando (35.45) -8-(5-(2.3-diclorofenil)-4-metoxipirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-amina en bruto (67 mg) como un sólido pardo anaranjado. que se usó directamente sin purificación adicional. MS m/z 423.2 (M+H)+.

Etapa b: Se disolvió (3S.4S)-8-(5-(2.3-diclorofenil)-4-metoxipirimidin-2-il)-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-4-amina (67 mg. 0.158 mmol) en HBr (33 % en AcOH. 1 ml) y la mezcla se agitó a 90 °C durante 1 h. La mezcla de reacción se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en MeOH y se basificó con NH3 (7 M en MeOH) y la mezcla se concentró a presión reducida. El residuo se disolvió en MeCN/agua (2:1). se filtró a través de un filtro de jeringa (0.2 ym) y se purificó por HPLC (elución en gradiente de un 10-30 % de MeCN en agua. modificador NH4OH 5 mM) proporcionando 2-((3S.4S)-4-amino-3-metil-2-oxa-8-azaespiro[4.5]decan-8-il)-5-(2.3-diclorofenil)pirimidin-4(3H)-ona (20 mg) como un sólido blanco.

Los siguientes compuestos de la tabla 18 se sintetizaron usando el procedimiento anterior o modificaciones al procedimiento anterior usando los materiales de partida e intermedios correspondientes:

Tabla 18

Ensayos

Los compuestos de la invención se evaluaron para determinar su capacidad de inhibir selectivamente la actividad de SHP2. Las propiedades inhibidoras de los compuestos de la invención descritos en este documento se pueden corroborar estudiándolos en uno cualquiera de los siguientes ensayos.

Ensayo de inhibición alostérica de SHP2

SHP2 se activa alostéricamente a través de la unión de péptidos bis-tirosil-fosforilados a sus dominios de homología a Src de tipo 2 (SH2). La última etapa de activación da lugar a la liberación de la superficie de contacto autoinhibidora de SHP2, que a su vez hace que la proteína tirosina fosfatasa (PTP) de SHP2 se active y esté disponible para el reconocimiento del sustrato y la catálisis de la reacción. La actividad catalítica de SHP2 se controló usando el sustrato sustitutivo DiFMUP en un formato de ensayo de fluorescencia rápido.

Más específicamente, las reacciones de fosfatasa se realizaron a temperatura ambiente en placa de poliestireno negra de 384 pocillos, de fondo redondo, de reborde bajo, con superficie sin unión (Corning, n.° cat. 3575) usando un volumen de reacción final de 25 pl y las siguientes condiciones del amortiguador de pH del ensayo: HEPES 60 mM, pH 7,2, NaCl 75 mM, KCl 75 mM, EDTA 1 mM, P-20 al 0,05 %, DTT 5 mM.

La inhibición de SHP2 por compuestos de la invención (concentraciones que varían de 0,003 - 100 pM) se controló usando un ensayo en que se incubaba 0,5 nM de s Hp2 con 0,5 pM de péptido IRS1_pY1172(dPEG8)pY1222 (secuencia: H2N-LN(pY)IDLDLV(dPEG8)LST(pY)ASINFQK-amida) (SEQ ID NO: 1). Después de 30-60 minutos de incubación a 25 °C, el sustrato sustituto DiFMUP (Invitrogen, n.° cat. D6567) se añadió a la reacción y se incubó a 25 °C durante 30 minutos. La reacción entonces se diluyó cuidadosamente mediante la adición de 5 pl de una solución 160 pM de bpV(Phen) (Enzo Life Sciences n.° cat. ALX-270-204). La señal de fluorescencia se controló usando un lector de microplaca (Envision, Perki-Elmer) usando longitudes de onda de excitación y emisión de 340 nm y 450 nm, respectivamente. Las curvas de respuesta a la dosis de inhibidor se analizaron usando un ajuste a la curva de regresión de CI50 normalizada con normalización basada en el control. Los resultados de CI50 para los compuestos de la invención se muestran en los ejemplos y las tablas 10 a 18, anteriores.

Ensayo celular de p-ERK

Ensayo celular de p-ERK usando el kit de fosfo-ERK 1/2 AlphaScreen® SureFire™ (PerkinElmer): se cultivaron células KYSE-520 (30000 células/pocillo) en cultivo en placa de 96 pocillos durante una noche y se trataron con inhibidores de Shp2 a concentraciones de 20, 6,6, 2,2, 0,74, 0,24,0,08, 0,027 pM durante 2 h a 37 °C. Las incubaciones se terminaron mediante la adición de 30 pl de tampón de lisis (PerkinElmer) suministrado con el kit de ensayo de cinasa regulada por señal extracelular de fosforilación (pERK) SureFire (PerkinElmer). Las muestras se procesaron de acuerdo con las instrucciones del fabricante. La señal de fluorescencia de pERK se midió por duplicado usando un lector de múltiples marcadores 2101 (Perkin Elmer Envision). El porcentaje de inhibición se normalizó mediante la señal de ERK total y se comparó con el control de vehículo DMSO.

Ensayo de formación de colonias y ensayo de proliferación celular

Se sembraron células KYSE-520 (1500 células/pocillo) en placas de 24 pocilios en 300 |jl de medio (RPMI-1640 que contenía FBS al 10 %, Lonza). Para el tratamiento con fármaco, se añadieron compuestos de la invención a diversas concentraciones (20, 10, 5, 2,5, 1,25 jM ) 24 horas y 5 días después de la siembra en placa de las células. En el día 11, las colonias se tiñeron con violeta de genciana al 0,2 % (MP Biomedicals) y posteriormente se disolvieron en AcOH al 20 % para la cuantificación usando un lector Spectramax (Thermo Scientific). En el ensayo de proliferación celular, se sembraron células (1500 células/pocillo) en placas de 96 pocillos en 100 j l de medio (RPMI-1640 que contenía FBS al 10 %, Lonza). En el día 6, se añadieron 50 j l de reactivo Celltiter-Glo (Promega), y se determinó la señal luminiscente de acuerdo con las instrucciones del proveedor (Promega).

Claims

REIVINDICACIONES

1. Un compuesto de fórmula I:

Xi se selecciona de N y CH;

X2 es CR3b;

X3 se selecciona de S y un enlace;

Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi;

Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, -NH(cicloalquilo C3-5), alcoxi C1-3 e hidroxi;

R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 halosustituido, alquil C1-2-hidroxi y ciano; R2 se selecciona de hidrógeno y halo;

R3a se selecciona de hidrógeno, metilo y alquilo C1-2 halosustituido;

R3b se selecciona de hidrógeno, metilo y amino;

R4a y R4b cada uno se selecciona independientemente de hidrógeno, hidroxi y fluoro; con la condición de que R4a y R4b no pueden ser ambos OH; con la condición de que R4a y R4b no pueden ser OH y F simultáneamente;

R5a se selecciona de amino y aminometilo;

R5b se selecciona de OH, amino, fluoro, alquilo C1-6, metoxicarbonilo, cicloalquil C3-6-alquilo C1-3, alquilo C1-3 hidroxisustituido, alquilo C1-3 alcoxi C1-2-sustituido y un anillo heteroarilo de 5 a 6 miembros que contiene de 1 a 4 heteroátomos seleccionados de O, S y N; en el que dicho alquilo C1-6 o alquilo C1-3 alcoxi C1-2-sustituido de R5b está sin sustituir o sustituido con 1-3 átomos de flúor; con la condición de que si R5a es amino, R5b no puede ser OH, amino o fluoro; o R5a y R5b, junto con el átomo de carbono al que R5a y R5b están unidos, forman un grupo seleccionado de:

en el que *C representa el átomo de carbono al que R5a y R5b están unidos; R10 es amino; Rua se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo; Rub se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; con la condición de que Rua y Rub no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; Ruc se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo; R12 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3; R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; R14 se selecciona de hidrógeno y fluoro; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; R15 se selecciona de hidrógeno y fluoro; y

R6a y R6b cada uno se selecciona independientemente de hidrógeno, hidroxi y fluoro; con la condición de que R6a y R6b no pueden ser ambos OH; con la condición de que R6a y R6b no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos; con la condición de que un compuesto de fórmula I no

2. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Ia:

en que:

X3 se selecciona de S;

Y1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi;

R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido;

R2 se selecciona de hidrógeno y cloro;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R10 es amino; y

R11c se selecciona de hidrógeno y alquilo C1-3; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

3. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Ia:

en que:

X3 se selecciona de un enlace;

Yi es CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, cloro y fluoro;

Y2 es CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6 y aril C6-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro y metilo;

R1 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro;

R2 se selecciona de hidrógeno;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R10 es amino; y

Rnc se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

4. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Ib:

en que:

X3 se selecciona de S;

Y 1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3;

Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi;

R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido;

R2 se selecciona de hidrógeno y halo;

R3a se selecciona de hidrógeno y metilo;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R5b se selecciona de alquilo C1-6;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

5. El compuesto de la reivindicación 4, en que:

Y 1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, halo y amino;

Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, ciano, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 y alcoxi C1-2 halosustituido;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alcoxi C1-2 e hidroxi;

R1 se selecciona de halo y trifluorometilo;

R2 se selecciona de hidrógeno, fluoro y cloro;

R3 se selecciona de hidrógeno y metilo;

R4a es hidrógeno;

R5b es metilo;

R6b es hidrógeno; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

6. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Ib:

en que:

X3 se selecciona de un enlace;

Y 1 es CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, cloro y fluoro;

Y2 es CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6 y aril C6-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro y metilo;

R1 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro;

R2 se selecciona de hidrógeno;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R5b es alquilo C1-6;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

7. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Ic:

en que:

X 1 se selecciona de N y CH;

X3 se selecciona de S;

Y 1 se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi;

R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido y alcoxi C1-2 halosustituido;

R2 se selecciona de hidrógeno y halo;

R3a se selecciona de hidrógeno y metilo;

R3b se selecciona de hidrógeno y metilo;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R5b se selecciona de alquilo C1-6;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro.

8. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Id:

en que:

Xi se selecciona de N y CH;

X3 se selecciona de S;

Yi se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3; Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6-10 y aril C6-10-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alquilo C1-3, alcoxi C1-3 e hidroxi;

R1 se selecciona de hidrógeno, halo, alquilo C1-2 halosustituido y ciano;

R2 se selecciona de hidrógeno y halo;

R3a se selecciona de hidrógeno, metilo y alquilo C1-2 halosustituido;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R i0 es amino;

R11a se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo;

R11 b se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; con la condición de que Rua y Rub no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente;

R12 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi Ci-3;

R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente;

R14 se selecciona de hidrógeno y fluoro;

R15 se selecciona de hidrógeno y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

9. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Id:

Xi se selecciona de N y CH;

X3 se selecciona de un enlace;

Y1 es CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, cloro y fluoro;

Y2 es CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, dimetilamino, ciano, cicloalquilo C3-6, alquilo C1-4, alquilo C1-3 halosustituido, alquil C1-3-sulfanilo halosustituido, alcoxi C1-3, alcoxi C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3-alcoxi C1-3, arilo C6 y aril C6-alcoxi C0-1;

Y3 se selecciona de CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro y metilo;

R1 se selecciona de hidrógeno, cloro, fluoro;

R2 se selecciona de hidrógeno;

R3a se selecciona de metilo;

R3b se selecciona de amino;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R i0 es amino;

R11a se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo;

R11 b se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno; con la condición de que Rua y Rub no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente;

R12 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3;

R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente;

R14 se elige entre hidrógeno y fluoro;

R15 se selecciona de hidrógeno y fluoro; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

10. El compuesto de la reivindicación 1 de fórmula Ie:

en que:

Xi se selecciona de N y CH;

Yi se selecciona de N y CR7; en el que R7 se selecciona de hidrógeno, halo y amino;

Y2 se selecciona de N y CR8; en el que R8 se selecciona de hidrógeno, halo, amino, ciano, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 y alcoxi C1-3 halosustituido;

Y3 se selecciona de N y CR9; en el que R9 se selecciona de hidrógeno, amino, halo, alcoxi C1-3 e hidroxi;

R1 se selecciona de halo, alquilo C1-2 halosustituido, alcoxi C1-2 halosustituido, alquilo C1-2 y ciano;

R2 se selecciona de hidrógeno y halo;

R3a se selecciona de hidrógeno y metilo;

R3b se selecciona de hidrógeno y metilo;

R4a se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro; R6b se selecciona de hidrógeno, hidroxi y fluoro;

R10 es amino;

R11a se selecciona de hidrógeno, hidroxi, fluoro, alquilo C1-3 e hidroximetilo;

R11b se selecciona de fluoro, metilo e hidrógeno;

Rnc se selecciona de hidrógeno, alquilo C1-3 e hidroximetilo;

R12 se selecciona de hidrógeno, halo, hidroxi, alquilo C1-3, alquilo C1-3 halosustituido, alcoxi C1-3 halosustituido y alcoxi C1-3;

R13 se selecciona de hidrógeno, halo y alquilo C1-3; con la condición de que R12 y R13 no pueden ser ambos OH y fluoro simultáneamente; o las sales farmacéuticamente aceptables de los mismos.

13. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso como medicamento.

14. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, para su uso en el tratamiento profiláctico o terapéutico de una enfermedad o trastorno seleccionado de síndrome de Noonan, síndrome Leopard, leucemias mielomonocíticas juveniles, neuroblastoma, melanoma, leucemia mieloide aguda, cáncer de mama, cáncer esofágico, cáncer pulmonar, cáncer de colon, cáncer de cabeza, neuroblastoma, carcinoma escamocelular de cabeza y cuello, carcinoma gástrico, linfoma de células grandes anaplásico y glioblastoma.

15. Un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en combinación con un agente terapéutico antineoplásico.

16. Una composición farmacéutica que comprende un compuesto de cualquiera de las reivindicaciones 1 a 12, o una sal farmacéuticamente aceptable del mismo, en mezcla con uno o más excipientes adecuados.