ES2603979T3 - Polipéptidos con actividad lipásica y polinucleótidos que codifican los mismos - Google Patents

Polipéptidos con actividad lipásica y polinucleótidos que codifican los mismos Download PDF

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Jesper Vind
Jürgen Carsten Franz KNÖTZEL
Kim Borch
Allan Svendsen
Thomas Hoenger Callisen
Debbie Yaver
Mads Eskelund Bjoernvad
Peter Kamp Hansen
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    • C12—BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
    • C12N—MICROORGANISMS OR ENZYMES; COMPOSITIONS THEREOF; PROPAGATING, PRESERVING, OR MAINTAINING MICROORGANISMS; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING; CULTURE MEDIA
    • C12N9/00—Enzymes; Proenzymes; Compositions thereof; Processes for preparing, activating, inhibiting, separating or purifying enzymes
    • C12N9/14—Hydrolases (3)
    • C12N9/16—Hydrolases (3) acting on ester bonds (3.1)
    • C12N9/18—Carboxylic ester hydrolases (3.1.1)
    • C12N9/20—Triglyceride splitting, e.g. by means of lipase

Abstract

Polipéptido con actividad lipásica, que es al menos un 80 % idéntico a SEC ID N.º: 2 y es un polipéptido: a) con al menos uno de: i) una actividad lipásica (LU) relativa a la absorbancia a 280 nm (A280) inferior a 500 LU/A280, donde una unidad de LU (1 LU) se define como la cantidad de enzimas capaz de liberar 1 micro mol de ácido butírico por minuto a 30 °C a pH 7 y la absorbancia del polipéptido se mide a 280 nm; ii) un riesgo de rendimiento de olor (R) inferior a 0.5, donde R se calcula como la proporción entre la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido y la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido de referencia, después de que ambos valores se han corregido en cuanto a la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada no polipeptídica donde el polipéptido de referencia es la parte madura de SEC ID n.º: 2 con las sustituciones T231 R+N233R o iii) un factor riesgo beneficio (BR) de al menos 1.8, donde BR se define como el rendimiento de lavado medio (RPavg) dividido con el riesgo de rendimiento de olor (R) donde RPavg indica el rendimiento relativo 15 medio en comparación con el polipéptido de referencia de mediciones hechas a 0.5 mg ep/L; y b) que comprende alteraciones de los aminoácidos en las posiciones T231 R +N233R +1255A +P256K y al menos uno de: i) S58A +V60S +A150G +L227G; o ii) E210V/G; estas posiciones son correspondientes a SEC ID n.º: 2.

Description

DESCRIPCIÓN
Polipéptidos con actividad lipásica y polinucleótidos que codifican los mismos
Campo de la invención 5
[0001] La presente invención se refiere a variantes de lipasa con un efecto de lavado mejorado para la generación de olor y a un método para prepararlas.
Particularmente se refiere a variantes de la lipasa Thermomyces lanuginosus.
10
Antecedentes de la invención
[0002] Las lipasas son útiles, por ejemplo, como enzimas de detergente para eliminar manchas de lípido o grasas de ropa y otros tejidos, y como aditivos para masa para pan y otros productos horneados.
Así, una lipasa derivada de Thermomyces lanuginosus (sinónimo Humicola lanuginosa, EP 258068 y EP 305216) se 15 vende para el detergente usado bajo el nombre de Lipolase® (producto de Novozymes A/S).
La WO 0060063 describe variantes de la lipasa T. lanuginosus con un rendimiento de primer lavado particularmente bueno en una solución de detergente.
Las WO 9704079, WO 9707202 y WO 0032758 también revelan variantes de la lipasa T. lanuginosus.
20
[0003] En algunas aplicaciones, es de interés minimizar la formación de ácidos grasos de cadena corta generadores de olor.
Así, se sabe que detergentes de lavandería con lipasas pueden dejar a veces olores residuales fijados en tela manchada de leche (EP 430315).
El documento WO 02062973 divulga variantes de lipasa donde la generación de olor ha sido reducida por la unión 25 de una extensión C-terminal.
La recientemente publicada WO 07087508 divulga variantes de lipasa donde la generación de olor ha sido reducida por la introducción de mutaciones en una o más regiones identificadas en una lipasa madre.
La WO 07087503 describe polipéptidos con actividad lipásica y que además tienen un RP de al menos 0.8 y un BR de al menos 1.1 en las condiciones de prueba dadas en la especificación. 30
Resumen de la invención
[0004] En un primer aspecto, la invención se refiere a un polipéptido con actividad lipásica, que es al menos un 80 % idéntico a SEC ID n.º: 2 y es un polipéptido: (a) con al menos una de: (i) una actividad lipásica (LU) relativa a la 35 absorbancia a 280 nm (A280) inferior a 500 LU/A280, donde una unidad de LU (1 LU) se define como la cantidad de enzima capaz de liberar 1 micro mol de ácido butírico por minuto a 30°C a pH 7, y la absorbancia del polipéptido se mide a 280 nm (ii) un riesgo de rendimiento de olor (R) por debajo de 0.5, donde R se calcula como la proporción entre la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido y la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido de referencia, después ambos valores han sido 40 corregidos para la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada no polipeptídica donde el polipéptido de referencia es la parte madura de SEC ID n.º: 2 con las sustituciones T231 R+N233R o (iii) un factor riesgo beneficio (BR) de al menos 1.8, donde BR se define como la media de rendimiento de lavado (RPavg) dividida con el riesgo de rendimiento de olor (R) donde RPavg indica la media de rendimiento relativo en comparación con el polipéptido de referencia de mediciones hechas a 0.5 mg ep/L; y (b) que comprende alteraciones de los aminoácidos 45 en las posiciones T231 R +N233R +1255A +P256K y al menos uno de: (i) S58A +V60S +A150G +L227G; o (ii) E210V/G; cuyas posiciones son correspondientes a SEC ID n.º: 2.
[0005] En otros aspectos, la invención se refiere a un polinucleótido aislado que codifica el polipéptido con actividad lipásica, un constructo de ácido nucleico que comprende el polinucleótido, un vector de expresión recombinante que 50 comprende el constructo de ácido nucleico, y una célula huésped transformada que comprende el constructo de ácido nucleico o el vector de expresión recombinante.
[0006] En otro aspecto, la invención se refiere a un método de preparación del polipéptido que incluye las etapas: (a) cultivo de la célula huésped transformada que comprende la construcción de ácido nucleico o el vector de expresión 55 recombinante que comprende el polipéptido bajo condiciones conductivas para la producción del polipéptido; y (b) recuperación del polipéptido.
[0007] En otro aspecto, la invención se refiere a una formulación que comprende el polipéptido.
60
[0008] En otro aspecto, la invención se refiere a un método de reducción de formación de ácidos grasos de cadena corta generadores de olor durante hidrólisis lípidica utilzando el polipéptido.
Breve descripción de las figuras
65
[0009] La Figura 1 muestra el alineamiento de lipasas.
Listados de secuencias
[0010]
5
SEC ID n.º: 1 muestra la lipasa que codifica la secuencia de ADN de Thermomyces lanoginosus.
SEC ID n.º: 2 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Thermomyces lanoginosus.
SEC ID n.º: 3 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Absidia reflexa.
SEC ID n.º: 4 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Absidia corimbifera.
SEC ID n.º: 5 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Rhizomucor miehei. 10
SEC ID n.º: 6 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Rhizopus oryzae.
SEC ID n.º: 7 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus niger.
SEC ID n.º: 8 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus tubingensis.
SEC ID n.º: 9 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Fusarium oxysporrum.
SEC ID n.º: 10 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Fusarium heterosporum. 15
SEC ID n.º: 11 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus oryzae.
SEC ID n.º: 12 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Penicillium camemberti.
SEC ID n.º: 13 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus foetidus.
SEC ID n.º: 14 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus niger.
SEC ID n.º: 15 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Aspergillus oryzae. 20
SEC ID n.º: 16 muestra la secuencia de aminoácidos de una lipasa de Landerina penisapora.
Descripción detallada de la invención
[0011] El uso de lipasas para eliminar manchas de lípido y grasa se conoce en la técnica donde las actividades de 25 lipasas que suponen liberar lípidos de cadena corta libres, tal como por ejemplo ácido butírico se asocian a un olor indeseable.
La hidrólisis del sustrato de la tributirina produce la liberación de ácido butírico.
Sorprendentemente, se ha descubierto que los polipéptidos de la presente invención tienen una actividad específica baja, medida como LU/A280 con respecto a la tributirina a pH neutro cf. ejemplo 2 y tabla 3. 30
[0012] El factor riesgo beneficio (BR) se calcula por la división del rendimiento de (lavado) relativo (beneficio, RP) con el riesgo de rendimiento de olor (riesgo, R).
El rendimiento de lavado se puede medir por un ensayo de tensión mecánica automatizado (AMSA) cf. ejemplo 3 y la generación de olor se puede medir directamente por cromatografía de gases, cf. ejemplo 4 y tabla 3. 35
Un olor reducido afecta al BR y puede conducir a un aumento de BR.
Además, se ha descubierto que los polipéptidos de la presente invención tienen una generación de olor reducida y un BR aumentado sobre las lipasas conocidas en la técnica cf. ejemplo 5 y tabla 3.
[0013] Actividad lipásica (LU): el término "actividad lipásica" como se usa aquí implica una actividad de hidrolasa de 40 éster carboxílico que cataliza la hidrólisis de triacilglicerol bajo la formación de diacilglicerol y un carboxilato.
Con motivo de la presente invención, la actividad lipásica se determina según el procedimiento siguiente: un sustrato para lipasa se prepara mediante una emulsión de tributirina (tributirato de glicerina) usando goma arábiga como emulsionante.
La hidrólisis de tributirina a 30 °C a pH 7 o 9 se sigue en un experimento de valoración del pH estadístico. 45
Una unidad de actividad lipásica (1 LU) se define como la cantidad de enzima capaz de liberar 1 micro mol de ácido butírico por minuto a 30 °C, pH 7.
[0014] Riesgo de rendimiento de olor (R): el término "riesgo de rendimiento de olor" como se usa aquí implica la proporción entre la cantidad de ácido butírico liberado de una muestra lavada de polipéptido y la cantidad de ácido 50 butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido de referencia, después ambos valores han sido corregidos para la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada no polipeptídica.
[0015] Rendimiento relativo (RP): el término "rendimiento relativo" como se usa aquí implica el rendimiento de lavado del polipéptido en comparación con el rendimiento de lavado de un polipéptido de referencia. 55
Con motivo de la presente invención, rendimiento relativo se determina según el procedimiento descrito en el ejemplo 3.
[0016] Polipéptido de referencia: el término "polipéptido de referencia", "enzima de referencia" o "lipasa de referencia" como se utiliza en este caso significa la parte madura de SEC ID n.º: 2 con las sustituciones T231R 60 +N233R.
[0017] Factor riesgo beneficio (BR): el término "factor riesgo beneficio" como se usa aquí significa el rendimiento relativo medio (RPavg) comparado con el riesgo de rendimiento de olor (R) y tiene la fórmula siguiente: BR = RPavg / R. 65
Nomenclatura para modificaciones de aminoácido
[0018] Al describir variantes de lipasa según la invención, la nomenclatura siguiente se usa para facilidad de referencia:
5
Aminoácido(s) original(es):posición(es):aminoácido(s) sustituido
[0019] Según esta nomenclatura, para el caso de la sustitución de ácido glutámico para glicina en la posición 195 se muestra como G195E.
Una deleción de glicina en la misma posición se muestra como G195* y la inserción de un residuo de aminoácido 10 adicional tal como lisina se muestra como G195GK.
Donde una lipasa específica contiene una "deleción" en comparación con otras lipasas y una inserción está hecha en tal posición, esta se indica como *36D para la inserción de un ácido aspártico en la posición 36.
[0020] Las mutaciones múltiples se separan por sumas, es decir: R170Y+G195E, mutaciones representantes en 15 posiciones 170 y 195 tirosina de substitución y ácido glutámico para arginina y glicina, respectivamente.
[0021] X231 indica el aminoácido en un polipéptido progenitor que corresponde con la posición 231, cuando se applica el procedimiento de alineamiento descrito.
X231R indica que el aminoácido se sustituye con R. 20
Para SEC ID n.º: 2 X es T y X231 R así indica una sustitución de T en la posición 231 con R.
Donde el aminoácido en una posición (por ejemplo 231) se puede sustituir por otro aminoácido seleccionado a partir de un grupo de aminoácidos, por ejemplo el grupo que consiste en R, P e Y, este será indicado por X231R/P/Y.
[0022] En cualquier caso, se utiliza la carta única de IUPAC aceptada o abreviatura de aminoácido de carta triple. 25
[0023] Identidad: el término "identidad" como se usa aquí implica que la relación entre secuencias de dos aminoácidos entre dos secuencias de nucleótidos se descride mediante el parámetro de "identidad".
[0024] Para fines de la presente invención, el alineamiento de dos secuencias de aminoácidos se determina usando 30 el programa de Needle desde el paquete EMBOSS (http://EMBOSS.ORG) versión 2.8.0.
El programa de Needle implementa el algoritmo de alineamiento global descrito en Needleman, S. B. y Wunsch, C.D. (1970) J. Mol. Biol. 48,443-453.
La sustitución matricial usada es BLOSUM62, la penalización de abertura del espacio es 10 y penalización por extensión de espacio es 0.5. 35
[0025] El grado de identidad entre una secuencia de aminoácidos de la presente invención ("secuencia de invención"; por ejemplo aminoácidos 1 a 269 de SEC ID n.º: 2) y una secuencia de aminoácidos diferente ("diferente") se calcula como el número de coincidencias exactas en un alineamiento de las dos secuencias, dividido por la longitud de la "secuencia de invención" o la longitud de la "secuencia diferente", cualquiera que sea la más 40 corta.
El resultado se expresa en identidad en porcentaje.
[0026] Se produce una correspondencia exacta cuando la "secuencia de invención" y la "secuencia externa" tienen residuos de aminoácidos idénticos en las mismas posiciones del recubrimiento. 45
La longitud de una secuencia es el número de residuos de aminoácidos en la secuencia (por ejemplo, la longitud de SEC ID n.º: 2 son 269).
[0027] El procedimiento anterior se puede utilizar para el cálculo de identidad al igual que de homología y para el alineamiento. 50
En el contexto de la homología de la presente invención y el alineamiento han sido calculados como se describe abajo.
Homología y alineamiento
55
[0028] Para fines de la presente invención, el grado de homología se puede determinar adecuadamente mediante programas informáticos conocidos en la técnica, tal como espacio proporcionado en el embalaje de programa GCG (Program Manual for the Wisconsin Package, Version 8, August 1994, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711) (Needleman, S.B. y Wunsch, C.D., (1970), Journal of Molecular Biology, 48,443-45), usando espacio con los ajustes siguientes para la comparación de secuencia polipeptídica: penalización por 60 creación de espacio de 3.0 y penalización por extensión de espacio de 0.1.
[0029] En la presente invención, las posiciones correspondientes (u homólogas) en las secuencias de lipasa de Absidia reflexa, Absidia corimbefera, Rhizomucor miehei, delemar Rhizopus, Aspergillus niger, Aspergillus tubigensis, Fusarium oxysporum, Fusarium heterosporum, Aspergillus oryzea, Penicilium camembertii, Aspergillus 65 foetidus, Aspergillus niger, Thermomyces lanoginosus (sinónimo: Humicola lanuginosa) y Landerina penisapora se
definen por el alineamiento mostrado en la figura 1.
[0030] Para encontrar las posiciones homólogas en las secuencias de lipasa no mostradas en el alineamiento, la secuencia de interés se alinea a las secuencias mostradas en la figura 1.
La nueva secuencia se alinea al alineamiento actual en la figura 1 usando el alineamiento del espacio a la secuencia 5 más homóloga encontrada por el programa de espacio.
Se proporciona espacio en el embalaje de programa GCG (Program Manual for the Wisconsin Package, Version 8, August 1994, Genetics Computer Group, 575 Science Drive, Madison, Wisconsin, USA 53711) (Needleman, S.B. and Wunsch, C.D., (1970), Journal of Molecular Biology, 48, 443-45).
Los ajustes siguientes se usan para la comparación de secuencia polipeptídica: penalización de creación de espacio 10 de 3.0 y penalización por extensión de espacio de 0.1.
Fuentes de polipéptidos con actividad lipásica
[0031] Cualquier polipéptido adecuado puede ser utilizado. 15
En algunas formas de realización, el polipéptido puede ser un polipéptido fúngico.
[0032] El polipéptido puede ser un polipéptido de levadura originado de géneros tales como una Candida, Kluyveromyces, Pichia, Saccharomyces, Schizosaccharomyces o Yarrowia; o más preferiblemente un polipéptido fúngico filamentoso originado de géneros tales como un Acremonium, Aspergillus, Aureobasidium, Cryptococcus, 20 Filobasidium, Fusarium, Humicola, Magnaporte, Mucor, Micelioptora, Neocallimastix, Neurospora, Paecilomices, Penicillium, Piromices, Schizofilum, Talaromyces, Termoascus, Thielavia, Tolipocladium, Thermomyces o Trichoderma.
[0033] El polipéptido puede además ser un Saccharomyces carlsbergensis, Saccharomyces cerevisiae, 25 Saccharomyces diastaticus, Saccharomyces douglasii, Saccharomyces kluyveri, Saccharomyces norbensis o un polipéptido de Saccharomyces oviformis con actividad lipásica.
[0034] Alternativamente, el polipéptido es un Aspergillu aculeatus, Aspergillus awamori, Aspergillus fumigatus, Aspergillus foetidus, Aspergillus japonicus, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Aspergillus 30 turbigensis, Fusarium bactridioides, Fusarium cerealis, Fusarium crookwellense, Fusarium culmorum, Fusarium graminearum, Fusarium graminum, Fusarium heterosporum, Fusarium negundi, Fusarium oxysporum, Fusarium reticulatum, Fusarium roseum, Fusarium sambucinum, Fusarium sarcochroum, Fusarium sporotrichioides, Fusarium sulphureum, Fusarium, torulosum Fusarium trichothecioides, Fusarium venenatum, Humicola insolens, Thermomyces lanoginosus (sinónimo: Humicola lanuginosa), Mucor miehei, Micelioptora termófila, Neurospora 35 crassa, Penicillium purpurogenum, Trichoderma harzianum, Trichoderma koningii, Trichoderma longibrachiatum, Trichoderma reesei o polipéptido de Trichoderma viride.
[0035] En algunas formas de realización la invención se refiere a un polipéptido que es una lipasa de Thermomyces.
40
[0036] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un polipéptido que es una lipasa de Thermomyce lanuginosus.
[0037] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un polipéptido, donde el polipéptido es al menos 50 %, al menos 60 %, al menos 70 %, al menos 80 %, al menos 85 %, al menos 90 %, al menos 95 %, al menos 96 45 %, al menos 97 %, al menos 98 %, al menos 99 % o 100 % idéntico a SEC ID n.º: 2.
Identificación de alteraciones en polipéptidos con actividad lipásica
[0038] Las posiciones referidas abajo son las posiciones de los residuos de aminoácidos en SEC ID n.º: 2. 50
El procedimiento descrito en el párrafo "Homología y alineamiento" se utiliza para encontrar la posición correspondiente u homóloga del residuo de aminoácido en una lipasa diferente.
[0039] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un primer polipéptido con actividad lipásica donde dicho polipéptido es un polipéptido con al menos uno de: (a) una actividad lipásica (LU) relativa a la absorbancia a 55 280 nm (A280) de menos del 500, menos del 450, menos del 400, menos del 350, menos del 300, menos del 250, menos del 200, menos del 150, menos del 100 o menos del 50 LU/A280, donde una unidad de LU (1 LU) se define como la cantidad de enzima capaz de liberar 1 micro mol de ácido butírico por minuto a 30°C a pH 7 y la absorbancia del polipéptido se mide a 280 nm (b) un riesgo de rendimiento de olor (R) menor de 0.5, menor de 0.4, menor de 0.3, menor de 0.2, menor de 0.1 o menor de 0.05, donde R se calcula como la proporción entre el ácido 60 butírico de cantidad liberada a partir de una muestra lavada de polipéptido y la cantidad de ácido butírico liberada a partir de una muestra lavada de polipéptido de referencia, después ambos valores han sido corregidos para la cantidad de ácido butírico liberada a partir de una muestra lavada no polipeptídica; o (c) un factor riesgo beneficio (BR) de al menos 1.8, al menos 1.9, al menos 2.0, al menos 2.5, al menos 3.0, al menos 4.0, al menos 5.0 o al menos 6.0 donde BR se define como la media el rendimiento de lavado (RPavg) dividida con el riesgo de rendimiento 65 de olor (R).
[0040] En algunas formas de realización, la invención se refiere al primer polipéptido donde dicho polipéptido comprende alteraciones de los aminoácidos en las posiciones T231 R +N233R +1255A +P256K y al menos uno de (a) S58A +V60S +A150G +L227G; o (b) E210V/G; cuyas posiciones son correspondientes a SEC ID n.º: 2.
5
[0041] En algunas formas de realización, la invención se refiere al primer polipéptido que comprende además al menos una de la alteración del aminoácido en las posiciones I86V o T143S.
[0042] En algunas formas de realización, la invención se refiere al primer polipéptido, donde el polipéptido comprende al menos otra alteración seleccionada a partir de una sustitución, una deleción o una adición de al 10 menos un aminoácido en una posición que corresponde a la posición E1; D27; N33; S83; G91; N94; K98; E99; D102; D111; G163; I202; E210; S216; L259 o L269 de SEC ID nº 2.
[0043] En algunas formas de realización, la invención se refiere al primer polipéptido, donde al menos una alteración es seleccionada desde el grupo consistente en: E1N/*, D27N, N33Q, S83T, G91N, N94R, K98I, E99K, D102A, 15 D111N, G163K, I202L, E210A, S216P, L259F o L269APIA de SEC ID n.º: 2.
[0044] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un segundo polipéptido que comprende alteraciones de los aminoácidos en las posiciones T231 R +N233R +1255A +P256K y al menos uno de: (a) S58A +V60S +A150G +L227G; o (b) E210V/G; cuyas posiciones son correspondientes a SEC ID n.º: 2. 20
[0045] En algunas formas de realización, la invención se refiere al segundo polipéptido que comprende además al menos una de las alteraciones del aminoácido en las posiciones I86V o T143S.
[0046] En algunas formas de realización, la invención se refiere al segundo polipéptido, donde el polipéptido 25 comprende al menos otra alteración seleccionada a partir de una sustitución, una deleción o una adición de al menos un aminoácido en una posición que corresponde con la posición E1; D27; N33; S83; G91; N94; K98; E99; D102; D111; G163; I202; E210; S216; L259 o L269 de SEC ID nº 2.
[0047] En algunas formas de realización, la invención se refiere al segundo polipéptido, donde al menos una 30 alteración es seleccionada del grupo que consiste en: E1N/*, D27N, N33Q, S83T, G91N, N94R, K981; E99K, D102A, D111N, G163K, 1202L, E210A, S216P, L259F o L269APIA de SEC ID n.º: 2.
[0048] En algunas formas de realización, la invención se refiere al primer polipéptido, donde dicho polipéptido comprende alteraciones seleccionadas del grupo que consiste en: (a) T231 R +N233R +L269APIA; (b) S58T +V60K 35 +A150G +T231R +N2331 +D234G; (c) S58T +V60K + I86V + D102A + A150G + L227G + T231R + N233R + P256K; (d) S58N +V60S +186P +T231R +N233R +P256S; (e) S58N +V60S +186S +L227G +T231R +N233R +P256S; y (f) S58N +V60S +186T +L227G +T231 R +N233R +P256L.
[0049] En algunas formas de realización, la invención se refiere al primer o el segundo polipéptido, donde dicho 40 polipéptido comprende alteraciones seleccionadas del grupo que consiste en: (a) S58A +V60S + S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (b) S58A +V60S + I86V +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (c) S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (d) S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +G163K +S216P +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (e) E1* +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (f) S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G 45 +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (g) E1N +S58A +V60S + I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K +L259F; (h) S58A +V60S + 186V +K98I +E99K +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (i) N33Q +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (j) E1* +S58A +V60S + I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (k) E1N +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +I255A 50 +P256K; (I) D27N +S58A +V60S + I86V +G91N +N94R +D111N +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (m) E1N +S58A +V60S + I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +E210A +S216P +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (n) A150G +E210V +T231R +N233R +I255A +P256K; (o) I202L +E210G +T231R +N233R +I255A +P256K; (p) E1N +A18K +V60K +I86V +A150G +E210A +L227G +T231 R +N233R +P256K; (q) E1L +D27K +V60K +I86V +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +P256K; (r) E1N +S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R 55 +N233R +I255A +P256K; (s) E1N +S58T +V60K +I86V +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; (t) E1N +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K +D102A +T143S +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K; y (u) S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K.
Tabla 1: alteraciones que pueden comprender los polipéptidos 60
Polipéptido
Mutaciones en SEQ ID N.º: 2
1
T231 R +N233R +L269APIA
2
S58T +V60K +A150G +T231R +N233I +D234G
3
S58T +V60K + 186V + D102A + A150G + L227G + T231R + N233R + P256K
4
S58N +V60S +I86P +T231 R +N233R +P256S
5
S58N +V60S +I86S +L227G +T231 R +N233R +P256S
6
S58N +V60S +I86T +L227G +T231 R +N233R +P256L
7
S58A +V60S + S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
8
S58A +V60S + 186V +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K
9
S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K
10
S58A +V60S + 186V +T143S +A150G +G163K +S216P +L227G +T231R +N233R
+I255A +P256K
11
E1* +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
12
S58A +V60S + 186V +K98I +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
13
E1N, S58A, V60S, I86V, K98I, E99K, T143S, A150G, L227G, T231R, N233R, I255A, P256K, L259F
14
S58A, V60S, 186V, K98I, E99K, D102A, T143S, A150G, L227G, T231R, N233R, I255A, P256K
15
N33Q, S58A, V60S, I86V, T143S, A150G, L227G, T231R, N233R, I255A, P256K
16
E1* +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K, T143S +A150G +L227G +T231R+N233R +I255A +P256K
17
E1N +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
18
D27N +S58A +V60S +186V +G91 N +N94R +D111N +T143S +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K
19
E1N +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +E210A +S216P +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K
20
A150G +E210V +T231 R +N233R +I255A +P256K
21
I202L +E210G +T231R +N233R +I255A +P256K
22
E1N +A18K +V60K +I86V +A150G +E210A +L227G +T231R +N233R +P256K
23
E1L +D27K +V60K +I86V +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +P256K
24
E1N +S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
25
E1N +S58T +V60K +I86V +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
26
E1N +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K +D102A +T143S +A150G +S216P +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K
27
S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K
[0050] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un primer polipéptido, donde dicho polipéptido comprende alteraciones seleccionadas del grupo que consiste en: (a) T231 R +N233R +L269APIA; (b) S58T +V60K
+A150G +T231R +N233I +D234G; (c) S58T +V60K + I86V + D102A + A150G + L227G + T231R + N233R + P256K; (d) S58N +V60S +I86P +T231R +N233R +P256S; (e) S58N +V60S +I86S +L227G +T231R +N233R +P256S; y (f) S58N +V60S +I86T +L227G +T231 R +N233R +P256L.
[0051] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un primer o un segundo polipéptido, donde dicho 5 polipéptido comprende alteraciones seleccionadas del grupo que consiste en: (a) S58A +V60S + S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (b) S58A +V60S + I86V +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (c) S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (d) S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +G163K +S216P +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (e) E1* +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (f) S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G 10 +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (g) E1N +S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K +L259F; (h) S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (i) N33Q +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (j) E1* +S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (k) E1N +S58A +V60S +186V +K981 +E99K +T143S +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +1255A 15 +P256K; (I) D27N +S58A +V60S + I86V +G91N +N94R +D111N +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (m) E1N +S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G +E210A +S216P +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (n) A150G +E210V +T231R +N233R +1255A +P256K; (o) I202L +E210G +T231R +N233R +1255A +P256K; (p) E1N +A18K +V60K +186V +A150G +E210A +L227G +T231R +N233R +P256K; (q) E1L +D27K +V60K +186V +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +P256K; (r) E1N +S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R 20 +N233R +1255A +P256K; (s) E1N +S58T +V60K +186V +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; (t) E1N +S58A +V60S +186V +K981 +E99K +D102A +T143S +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; y (u) S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K.
Polinucleótidos, vector de expresión, célula huésped, producción de polipéptidos 25
[0052] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un polinucleótido aislado que codifica el polipéptido.
Tales polinucleótidos pueden hibridar bajo condiciones de astringencia muy bajas, condiciones de astringencia preferiblemente bajas, más preferiblemente condiciones de astringencia media, más preferiblemente condiciones de 30 astringencia medio altas, aún más preferiblemente condiciones de astringencia altas y de la forma más preferible condiciones de astringencia muy altas con nucleótidos (i) 178 a 660 de SEC ID n.º: 1, (ii) la secuencia de ADNc contenida en nucleótidos 178 a 660 de SEC ID n.º: 1, (iii) una subsecuencia de (i) o (ii), o (iv) una cadena complementaria de (i); (ii), o (iii) (J. Sambrook, E.F. Fritsch, and T. Maniatus, 1989, Molecular Cloning, A Laboratory Manual, 2d edición, Cold Spring Harbor, New York). 35
Una subsecuencia de SEC ID n.º: 1 contiene al menos 100 nucleótidos contiguos o preferiblemente al menos 200 nucleótidos contiguos.
Además, la subsecuencia puede codificar un fragmento de polipéptido que tiene actividad lipásica.
[0053] Para sondas largas de al menos 100 nucleótidos en longitud, las condiciones de astringencia muy bajas a 40 muy altas se definen como prehibridación e hibridación a 42°C en 5X SSPE, 0,3 % SDS, 200 ug/ml ADN de esperma de salmón cortado y desnaturalizado y bien un 25 % de formamida para astringencias muy bajas y bajas, un 35 % de formamida para astringencias medias y medio altas o bien un 50 % de formamida para astringencias altas y muy altas, seguidas de procedimientos de hibridación estándar Southern durante 12 a 24 horas óptimamente.
45
[0054] Para sondas largas de al menos 100 nucleótidos en longitud, el material portador se lava finalmente tres veces por cada 15 minutos utilizando 2X SSC, 0.2 % SDS preferiblemente al menos a 45 °C (astringencia muy baja), más preferiblemente al menos a 50 °C (astringencia baja), más preferiblemente al menos a 55 °C (astringencia media), más preferiblemente al menos a 60 °C (astringencia medio alta), aún más preferiblemente al menos a 65 °C (astringencia alta) y de la forma más preferible al menos a 70 °C (astringencia muy alta). 50
[0055] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un constructo de ácido nucleico que comprende el polinucleótido operacionalmente vinculado a al menos una secuencia de control que dirige la producción del polipéptido en un huésped de expresión.
55
[0056] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un vector de expresión recombinante que comprende el constructo de ácido nucleico.
[0057] En algunas formas de realización, la invención se refiere a una célula huésped transformada que comprende el constructo de ácido nucleico o el vector de expresión recombinante. 60
[0058] El polinucleótido aislado que codifica el polinucleótido, el constructo de ácido nucleico que comprende el polinucleótido, el vector de expresión recombinante que comprende el constructo de ácidos nucleicos y la célula huésped transformada que comprende el constructo de ácido nucleico o el vector de expresión recombinante todos se pueden obtener por métodos conocidos en la técnica. 65
[0059] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un método de preparación del polipéptido que incluye las etapas: (a) cultivo de la célula huésped transformada que comprende el constructo de ácido nucleico o el vector de expresión recombinante que comprende el constructo de ácido de nucleótido conductivo bajo condiciones conductoras para la producción del polipéptido; y (b) recuperación del polipéptido.
El método se puede practicar según los principios conocidos en la técnica. 5
Usos
[0060] Enzimas de la presente invención pueden ser utilizadas, incluso de uso industrial para eliminar la materia grasa. 10
[0061] En algunas formas de realización, la invención se refiere a una formulación que comprende el polipéptido.
En otras formas de realización, la invención se refiere a una formulación, donde dicha formulación puede ser una formulación sólida o líquida.
El polipéptido se puede utilizar en una formulación sólida al igual que en una líquida. 15
[0062] En algunas formas de realización, la invención se refiere a un método de reducción de la formación de ácidos grasos de cadena corta generadores de olor durante hidrólisis lípidica, utilzando el polipéptido.
Ejemplos 20
[0063] Posteriormente, la presente invención se describe mediante los ejemplos siguientes que no deberían ser interpretados como limitación del ámbito de la invención.
[0064] Productos químicos usados como tampones y sustratos fueron productos comerciales de al menos calidad 25 reactiva.
Ejemplo 1 - Producción de variantes de lipasa
[0065] Un plásmido que contiene el gen que codifica del polipéptido se construye y se transforma en una célula 30 huésped adecuada, usando métodos estándar de la técnica.
[0066] La fermentación se realiza como una fermentación por lote alimentado, utilizando una temperatura media constante de 34 °C y un volumen de inicio de 1.2 litros.
El pH inicial del medio se fija a 6.5. 35
Una vez el pH ha aumentado a 7.0 este valor se mantiene a través de la adición de 10 % H3PO4.
El nivel de oxígeno disuelto en el medio se controla variando el índice de agitación y utilizando un índice de aireación fijo de 1.0 de aire de litro por medio de litro por minuto.
El nivel de adición de alimentación se mantiene a un nivel constante durante toda la fase de lote alimentado.
40
[0067] El medio de lote contiene jarabe de maltosa como fuente de carbono, urea y extracto de levadura como fuente de nitrógeno y una mezcla de trazas de metales y sales.
La alimentación adicionada continuamente durante la fase de lote alimentado contiene jarabe de maltosa como fuente de carbono mientras que el extracto de levadura y urea se añade para asegurar un suministro de nitrógeno suficiente. 45
[0068] La purificación del polipéptido se puede realizar usando métodos estándar conocidos en la técnica, por ejemplo, por la filtración del sobrenadante de fermentación y la posterior cromatografía hidrofóbica y cromatografía de intercambio de iones, por ejemplo, como se describe en EP 0 851 913 EP, ejemplo 3.
50
Ejemplo 2 - Unidad de actividad de lipasa (LU) con respecto a la absorbancia a 280 nm (LU/A280)
[0069] La actividad de la lipasa (LU) se determina como se ha descrito anteriormente en la sección de Actividad lipásica.
La absorbancia de la lipasa a 280 nm se mide (A280). 55
La actividad específica de un polipéptido se puede expresar como la proporción de LU/A280.
[0070] La LU/A280 relativa se calcula como la LU/A280 del polipéptido dividido por la LU/A280 de una enzima de referencia.
En el contexto de la presente invención, la enzima de referencia es la lipasa de SEC ID N.º: 2 con las sustituciones 60 T231 R +N233R.
Ejemplo 3 - Cálculo del rendimiento relativo (RP) de datos obtenidos del ensayo de tensión mecánica automatizada (AMSA)
65
[0071] Los polipéptidos de la presente invención son evaluados utilizando el ensayo de tensión mecánica automática
(AMSA).
Con el AMSA se puede examinar el rendimiento de lavado de una gran cantidad de soluciones de enzima de detergente de volumen pequeño.
La placa AMSA tiene un número de ranuras para las soluciones de prueba y una tapa que comprime firmemente la muestra textil que se va a lavar frente a todas las aberturas de ranura. 5
Durante el tiempo de lavado, la placa, las soluciones de prueba, el textil y la tapa se agitan enérgicamente para llevar la solución de prueba en contacto con el textil y aplicar la tensión mecánica.
Para otra descripción ver la WO 02/42740 especialmente el párrafo "Special method embodiments" en las páginas 23-24.
Los contenedores, que contienen la solución de prueba de detergente, consisten en agujeros cilíndricos (6 mm 10 diámetro, 10 mm profundidad) en una lámina metálica.
El tejido manchado (material de prueba) se extiende sobre la lámina metálica y se usa como una tapa y sella en los contenedores.
Otra lámina metálica se extiende sobre el tejido manchado para evitar cualquier vertido de cada contenedor.
Las dos placas metálicas con el tejido manchado vibran arriba y abajo a una frecuencia de 30 Hz con una amplitud 15 de 2 mm.
Tabla 2: las condiciones experimentales para AMSA
Ingrediente % peso
Sulfato de éter de alquilo de sodio (Surfac LC70) 12.0
Alquilbencenosulfonato (LAS) 7.0
Jabón de sebo/coco 80/20 3.2
Alcohol etoxilato (Neodol 23-9) 2.4
Solución de prueba
Solución de prueba alquilo óxido de dimetilamina (Empigen OB) 2.0
Ácido cítrico (sodio) 2.8
Hidróxido sódico 1.6
Glicerina 2.3
Monoetanolamina 2.7
Monopropilenglicol (MPG) 4.7
Agua 59.2
Volumen de solución de prueba
160 micro I
pH
Como es (≈8.3), ajustado con hidróxido sódico y ácido cítrico
Tiempo de lavado
20 minutos
Temperatura
30 °C
Dureza del agua
6 °dH
Proporción de Ca2+/Mg2+/NaHCO3: 2:1:4.5
Concentración enzimática en la solución de prueba
0.125, 0.25, 0.50, 0.50 mg ep / I
Secado
Rendimiento: después del lavado de las piezas textiles (crema de café de cúrcuma) se enjuagan inmediatamente en agua corriente y se secan al aire a 85 °C en 5 min.
Olor: después del lavado de las piezas textiles (crema de cúrcuma) se enjuagan inmediatamente en agua corriente y se secan a temperatura ambiente (20 °C) durante 2 horas
Material de prueba
Muestra de crema de cúrcuma o muestra de crema de café de cúrcuma como se describe abajo (EMPA221 usado como algodón textil obtenido de EMPA St. Gallen, Lerchfeldstrasse 5, CH-9014 St. Gallen, Switzerland)
[0072] Muestras de crema de cúcuma y muestras de crema de café de cúrcuma fueron preparadas mediante la 20 mezcla de 5g de cúrcuma (Santa Maria, Denmark) con 100g de crema (38 % de grasa, Aria, Denamark) y 100g de crema de café (9 % grasa, Aria, Dinamarca) a 50 °C, respectivamente.
La mezcla se dejó a esta temperatura durante aproximadamente 20 minutos y se filtro (50 °C) para eliminar cualquier partícula no disuelta.
La mezcla fue enfriada a 20 °C y las muestras de algodón tejido, EMPA221, fueron sumergidas en la mezcla de 25 crema de cúcuma y después se dejaron secar a temperatura ambiente durante la noche y se congelaron hasta su uso.
La preparación de muestras de crema de cúcuma se describe en la WO 06125437.
[0073] El rendimiento del polipéptido fue medido como la luminosidad del color de las muestras textiles lavadas con 30 ese polipéptido específico.
La luminosidad también se puede expresar como la intensidad de la luz reflejada desde la muestra textil cuando se ilumina con luz blanca.
Cuando el textil se mancha, la intensidad de la luz reflejada es inferior que la de un textil limpio.
Por lo tanto, la intensidad de la luz reflejada se puede utilizar para medir el rendimiento de lavado de una variante 35
polipeptídica.
[0074] Las mediciones de color se realizaron con un escáner de superficie plana profesional (PFU DL2400pro), que se utiliza para capturar una imagen de las muestras textiles lavadas.
Los sondeos se realizaron con una resolución de 200 dpi y con una profundidad de color de emisión de 24 bits. 5
Para obtener resultados precisos, el escáner se calibró frecuentemente con un objetivo Kodak reflectante IT8.
[0075] Para extraer un valor para la intensidad de luz desde las imágenes escaneadas, se usó una aplicación de software diseñada especial (analizador de vector de color de Novozymes).
El programa recupera los valores de píxel de 24 bit desde la imagen y los convierte en valores para rojo, (RGB) 10 verde y azul.
El valor de intensidad (Int) se calcula añadiendo los valores de RGB juntos como vectores y luego tomando la longitud del vector resultante:
15
[0076] El rendimiento de lavado (P) de los polipéptidos fue calculado conforme a la fórmula:
20
donde Int(v) es el valor de intensidad de luz de superficie textil lavada con enzima e Int(r) es el valor de intensidad de luz de superficie textil lavada sin enzima.
[0077] Se da una puntuación de rendimiento relativo como el resultado del AMSA lavado conforme a la definición: puntuaciones de rendimiento relativas (RP) están sumando los rendimientos (P) del polipéptido evaluado frente al 25 polipéptido de referencia:
RP = P(polipéptido de prueba) / P(polipéptido de referencia).
[0078] RPavg indica la media de rendimiento relativo en comparación con el polipéptido de referencia de mediciones 30 hecho a 0.5 mg ep/l.
[0079] Se considera un polipéptido para exponer un rendimiento de lavado mejorado, si este se lleva a cabo mejor que la referencia.
En el contexto de la presente invención, la enzima de referencia es la lipasa de SEC ID N.º: 2 con las sustituciones 35 T231 R + N233R.
Ejemplo 4 - Cálculo de factor de riesgo (R) de mediciones de cromatógrafía de gases de microextracción en fase sólida.
40
[0080] La liberación de ácido butírico desde las muestras lavadas de lipasa se midieron por cromatografía de gases de microextracción en fase sólida (SPME-GC) utilizando el método siguiente.
Cuatro piezas de tejidos (5 mm de diámetro), lavadas en la solución específica en la tabla 2 que contienen 0.5 mg/l de lipasa, fueron transferidas a un frasco de cromatógrafo de gases (GC).
Las muestras fueron incubadas a 30 °C durante 24 h y posteriormente calentadas a 140 °C durante 30 min y 45 almacenadas a 20 °C - 25 °C durante al menos 4 h antes del análisis.
El análisis se realizó en un Varian 3800 GC equipado con una columna Stabilwax- DA w/Integra-Guard (30 m, 0.32 mm ID y 0.25 micro-m df) y una fibra Carboxen de PDMS MEFS (85 micro-m).
Se realizó un muestreo de cada frasco GC a 50 °C durante 8 min con la fibra de MEFS en el espacio de cabeza sobre las piezas textiles y los compuestos probados fueron inyectados posteriormente sobre la columna 50 (temperatura del inyector = 250 °C).
Flujo de columna = 2 ml Helium/min.
Gradiente de temperatura de horno de columna: 0 min = 50°C, 2 min = 50°C, 6 min 45 s = 240°C, 11 min 45 s = 240 °C.
Se realizó la detección utilizando un detector de ionización de llama (FID) y el tiempo de retención para el ácido 55 butírico se identificó utilizando un estándar auténtico.
[0081] El riesgo de rendimiento de olor (R) de un polipéptido es la proporción entre la cantidad de ácido butírico liberado (área de valor máximo) a partir de una muestra lavada de polipéptido y la cantidad de ácido butírico liberado (área de valor máximo) a partir de una muestra lavada de polipéptido de referencia, después de que ambos valores 60 se hayan corregido en cuanto a la cantidad de ácido butírico liberado (área de valor máximo) a partir de una muestra
lavada no polipeptídica (blanca).
El polipéptido de referencia es el polipéptido de SEC ID n.º: 2 con las sustituciones T231 R + N233R.
El riesgo de rendimiento de olor (R) del polipéptido se calcula de acuerdo con la fórmula de abajo:
Olor = ácido butírico medido (área de valor máximo) liberado desde la superficie textil. 5
10
[0082] Se considera un polipéptido para mostrar un olor reducido en comparación con la referencia si el factor R es inferior a 1.
Ejemplo 5 - Factor riesgo beneficio (BR).
15
[0083] El factor riesgo beneficio que describe el rendimiento de lavado en comparación con el riesgo reducido para olor se define así como:
20
[0084] Se considera una variante para mostrar el rendimiento de lavado mejorado y el olor reducido, si el factor BR es superior a 1.
Tabla 3: Actividad específica (LU/A280), riesgo de rendimiento de olor (R) y factor riesgo beneficio (BR) para algunos polipéptidos de la invención 25
Polipéptido
Mutaciones en SEQ ID N.º: 2 LU/A280 Ej.2 R Ej.4 BR Ej.5
REF
T231 R +N233R 4760 1.00 1.00
1
T231 R +N233R +L269APIA 127 0.19 2.77
2
S58T +V60K +A150G +T231R +N233I +D234G 1287 0.51 2.02
3
S58T +V60K + 186V + D102A + A150G + L227G + T231 R + N233R + P256K 358 0.44 2.04
4
S58N +V60S +I86P +T231 R +N233R +P256S ND 0.5 2
5
S58N +V60S +I86S +L227G +T231 R +N233R +P256S ND 0.2 2.82
6
S58N +V60S +I86T +L227G +T231 R +N233R +P256L 1576 0.34 2.11
7
S58A +V60S + S83T +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K 141 0.12 2.88
8
S58A +V60S + 186V +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K 479 0.20 3.04
9
S58A +V60S + 186V +T143S +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K 232 0.06 6.20
10
S58A +V60S + 186V +T143S +A150G +G163K +S216P +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K 208 0.09 4.54
11
E1* +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K 273 0.27 2.87
12
S58A +V60S + 186V +K98I +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A 143 0.20 3.12
+P256K
13
E1N, S58A, V60S, I86V, K98I, E99K, T143S, A150G, L227G, T231R, N233R, I255A, P256K, L259F ND 0.10 5.20
14
S58A, V60S, 186V, K98I, E99K, D102A, T143S, A150G, L227G, T231R, N233R, I255A, P256K 15 0.16 3.87
15
N33Q, S58A, V60S, I86V, T143S, A150G, L227G, T231 R, N233R, 394 0.09 6.55

Claims (19)

  1. REIVINDICACIONES
    1. Polipéptido con actividad lipásica, que es al menos un 80 % idéntico a SEC ID N.º: 2 y es un polipéptido:
    a) con al menos uno de:
    i) una actividad lipásica (LU) relativa a la absorbancia a 280 nm (A280) inferior a 500 LU/A280, donde una 5 unidad de LU (1 LU) se define como la cantidad de enzimas capaz de liberar 1 micro mol de ácido butírico por minuto a 30 °C a pH 7 y la absorbancia del polipéptido se mide a 280 nm;
    ii) un riesgo de rendimiento de olor (R) inferior a 0.5, donde R se calcula como la proporción entre la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido y la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada de polipéptido de referencia, después de que ambos 10 valores se han corregido en cuanto a la cantidad de ácido butírico liberado a partir de una muestra lavada no polipeptídica donde el polipéptido de referencia es la parte madura de SEC ID n.º: 2 con las sustituciones T231 R+N233R o
    iii) un factor riesgo beneficio (BR) de al menos 1.8, donde BR se define como el rendimiento de lavado medio (RPavg) dividido con el riesgo de rendimiento de olor (R) donde RPavg indica el rendimiento relativo 15 medio en comparación con el polipéptido de referencia de mediciones hechas a 0.5 mg ep/L; y
    b) que comprende alteraciones de los aminoácidos en las posiciones T231 R +N233R +1255A +P256K y al menos uno de:
    i) S58A +V60S +A150G +L227G; o
    ii) E210V/G; 20
    estas posiciones son correspondientes a SEC ID n.º: 2.
  2. 2. Polipéptido, según la reivindicación 1, que comprende además al menos una de la alteración del aminoácido en las posiciones I86V o T143S.
    25
  3. 3. Polipéptido, según cualquiera de las reivindicaciones 1-2, donde el polipéptido comprende al menos otra alteración seleccionada a partir de una sustitución, una deleción o una adición de al menos un aminoácido en una posición que corresponde con la posición E1; D27; N33; S83; G91; N94; K98; E99; D102; D111; G163; I202; E210; S216; L259 o L269 de SEC ID N.º: 2.
    30
  4. 4. Polipéptido, según la reivindicación 3, donde al menos una alteración se selecciona del grupo que consiste en: E1N/*, D27N, N33Q, S83T, G91N, N94R, K98I, E99K, D102A, D111N, G163K, I202L, E210A, S216P, L259F o L269APIA de SEC ID n.º: 2.
  5. 5. Polipéptido, según la reivindicación 1, donde dicho polipéptido comprende alteraciones seleccionadas del grupo 35 que consiste en:
    a) T231 R +N233R +L269APIA;
    b) S58T +V60K +A150G +T231 R +N2331 +D234G;
    c) S58T +V60K + I86V + D102A + A150G + L227G + T231 R + N233R + P256K;
    d) S58N +V60S +186P +T231 R +N233R +P256S; 40
    e) S58N +V60S +186S +L227G +T231 R +N233R +P256S; y
    f) S58N +V60S +186T +L227G +T231 R +N233R +P256L.
  6. 6. Polipéptido, según la reivindicación 1, donde dicho polipéptido comprende alteraciones seleccionadas del grupo que consiste en: 45
    a) S58A +V60S + I83T +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K;
    b) S58A +V60S + I86V +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K;
    c) S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K;
    d) S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +G163K +S216P +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K;
    e) E1* +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; 50
    f) S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K;
    g) E1N +S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K +L259F;
    h) S58A +V60S + I86V +K981 +E99K +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K;
    i) N33Q +S58A +V60S + I86V +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +1255A +P256K; 55
    j) E1* +S58A +V60S + I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K;
    k) E1N +S58A +V60S + I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +S216P +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K;
    l) D27N +S58A +V60S + I86V +G91N +N94R +D111N +T143S +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K; 60
    m) E1N +S58A +V60S + I86V +K98I +E99K +T143S +A150G +E210A +S216P +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K;
    n) A150G +E210V +T231 R +N233R +I255A +P256K;
    o) I202L +E210G +T231R +N233R +I255A +P256K;
    p) E1N +A18K +V60K +I86V +A150G +E210A +L227G +T231 R +N233R +P256K; 65
    q) E1L +D27K +V60K +I86V +A150G +S216P +L227G +T231R +N233R +P256K;
    r) E1N +S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K;
    s) E1N +S58T +V60K +I86V +D102A +T143S +A150G +L227G +T231R +N233R +I255A +P256K;
    t) E1N +S58A +V60S +I86V +K98I +E99K +D102A +T143S +A150G +S216P +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K; y
    u) S58A +V60S +S83T +A150G +L227G +T231 R +N233R +I255A +P256K. 5
  7. 7. Polipéptido, según cualquiera de las reivindicaciones anteriores, donde dicho polipéptido es un polipéptido fúngico o un polipéptido de levadura.
  8. 8. Polipéptido, según la reivindicación 6, donde el polipéptido de levadura se origina de géneros Candida, 10 Kluyveromyces, Pichia, Saccharomyces, Schizosaccharomyces o Yarrowia.
  9. 9. Polipéptido, según la reivindicación 7, donde el Saccharomyces es Saccharomyces carlsbergensis, Saccharomyces cerevisiae, Saccharomyces diastaticus, Saccharomyces douglasii, Saccharomyces kluyveri, Saccharomyces norbensis o Saccharomyces oviformis. 15
  10. 10. Polipéptido, según la reivindicación 6, donde el polipéptido es un polipéptido fúngico filamentoso originado de géneros Acremonium, Aspergillus, Aureobasidium, Cryptococcus, Filobasidium, Fusarium, Humicola, Magnaporte, Mucor, Myceliophthora, Neocallimastix, Neurospora, Paecilomices, Penicillium, Piromices, Schizofilum, Talaromyces, Termoascus, Thielavia, Tolipocladium, Thermomyces o Trichoderma. 20
  11. 11. Polipéptido, según la reivindicación 9, donde el polipéptido fúngico filamentoso es un Aspergillus aculeatus, Aspergillus awamori, Aspergillus fumigatus, Aspergillus foetidus, Aspergillus japonicus, Aspergillus nidulans, Aspergillus niger, Aspergillus oryzae, Aspergillus turbigensis, Fusarium bactridioides, Fusarium cerealis, Fusarium crookwellense, Fusarium culmorum, Fusarium graminearum, Fusarium graminum, Fusarium heterosporum, Fusarium 25 negundi, Fusarium oxysporum, Fusarium reticulatum, Fusarium roseum, Fusarium sambucinum, Fusarium sarcochroum, Fusarium sporotrichioides, Fusarium sulphureum, Fusarium, torulosum, Fusarium trichothecioides, Fusarium venenatum, Humicola insolens, Thermomyces lanuginosus (sinónimo: Humicola lanuginosa), Mucor miehei, Myceliophthora thermophila, Neurospora crassa, Penicillium purpurogenum, Trichoderma harzianum, Trichoderma koningii, Trichoderma longibrachiatum, Trichoderma reesei o polipéptido Trichoderma viride. 30
  12. 12. Polinucleótido aislado que codifica el polipéptido, según cualquiera de las reivindicaciones 1-11.
  13. 13. Constructo de ácidos nucleicos que comprende el polinucleótido, según la reivindicación 12, vinculado operacionalmente al menos a una secuencia de control que dirige la producción del polipéptido en un huésped de 35 expresión.
  14. 14. Vector de expresión recombinante que comprende el constructo de ácidos nucleicos, según la reivindicación 13.
  15. 15. Célula huésped transformada que comprende el constructo de ácidos nucleicos, según la reivindicación 13, o el 40 vector de expresión recombinante, según la reivindicación 14.
  16. 16. Método de la preparación del polipéptido, según cualquiera de las reivindicaciones 1-11, que incluye las etapas:
    a) cultivo de la célula huésped transformada que comprende el constructo de ácido nucleico o el vector de expresión recombinante, que comprende el polipéptido bajo condiciones conductoras para la producción del 45 polipéptido; y
    b) recuperación del polipéptido.
  17. 17. Formulación que comprende el polipéptido, según cualquiera de las reivindicaciones 1-11.
    50
  18. 18. Formulación, según la reivindicación 17, donde dicha formulación puede ser una formulación sólida o líquida.
  19. 19. Método de reducción de la formación de ácidos grasos de cadena corta generadores de olor durante la hidrólisis lípidica, utilzando los polipéptidos de las reivindicaciones 1-11.
    55
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Families Citing this family (275)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101990573B (zh) * 2008-02-29 2014-01-22 诺维信公司 具有改进的稳定性的脂肪分解酶变体及编码该变体的多核苷酸
EP2343310A1 (en) 2010-01-08 2011-07-13 Novozymes A/S Serine hydrolase formulation
CN102906251B (zh) 2010-04-26 2016-11-16 诺维信公司 酶颗粒剂
US10829721B2 (en) 2011-06-20 2020-11-10 Novozymes A/S Particulate composition
CN103620029B (zh) 2011-06-24 2017-06-09 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽和编码它们的多核苷酸
KR101956895B1 (ko) 2011-07-01 2019-03-12 노보자임스 에이/에스 안정화된 서브틸리신 조성물
US20140228274A1 (en) 2011-07-01 2014-08-14 Novozymes A/S Liquid Detergent Composition
EP2732018B1 (en) 2011-07-12 2017-01-04 Novozymes A/S Storage-stable enzyme granules
WO2013024021A1 (en) 2011-08-15 2013-02-21 Novozymes A/S Polypeptides having cellulase activity and polynucleotides encoding same
ES2628190T3 (es) 2011-09-22 2017-08-02 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de proteasa y polinucleótidos que codifican los mismos
CN107090445A (zh) 2011-11-25 2017-08-25 诺维信公司 具有溶菌酶活性的多肽和编码所述多肽的多核苷酸
WO2013076269A1 (en) 2011-11-25 2013-05-30 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
MX2014007446A (es) 2011-12-20 2014-08-01 Novozymes As Variantes de subtilasa y polinucleotidos que las codifican.
EP2607468A1 (en) 2011-12-20 2013-06-26 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
CN110777016A (zh) 2011-12-29 2020-02-11 诺维信公司 具有脂肪酶变体的洗涤剂组合物
EP2807254B1 (en) 2012-01-26 2017-08-02 Novozymes A/S Use of polypeptides having protease activity in animal feed and detergents
CN104114698A (zh) 2012-02-17 2014-10-22 诺维信公司 枯草杆菌蛋白酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP2628785B1 (en) 2012-02-17 2016-05-18 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising subtilase variants
EP2823026A1 (en) 2012-03-07 2015-01-14 Novozymes A/S Detergent composition and substitution of optical brighteners in detergent compositions
US10087401B2 (en) 2012-03-16 2018-10-02 Monosol, Llc Water soluble compositions incorporating enzymes, and method of making same
US20150291922A1 (en) 2012-03-29 2015-10-15 Novozymes A/S Use of Enzymes For Preparing Water Soluble Films
WO2013149858A1 (en) 2012-04-02 2013-10-10 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
US9394092B2 (en) 2012-04-16 2016-07-19 Monosol, Llc Powdered pouch and method of making same
AR090971A1 (es) 2012-05-07 2014-12-17 Novozymes As Polipeptidos que tienen actividad de degradacion de xantano y polinucleotidos que los codifican
JP2015525248A (ja) 2012-05-16 2015-09-03 ノボザイムス アクティーゼルスカブ リパーゼを含む組成物およびその使用方法
EP2861749A1 (en) 2012-06-19 2015-04-22 Novozymes Bioag A/S Enzymatic reduction of hydroperoxides
MX364390B (es) 2012-06-20 2019-04-25 Novozymes As Uso de polipeptidos que tienen actividad proteasa en alimentos para animales y detergentes.
EP2875179B1 (en) 2012-07-18 2018-02-21 Novozymes A/S Method of treating polyester textile
BR112015001046B1 (pt) 2012-08-16 2022-06-14 Novozymes A/S Método para tratar um produto têxtil
EP2914611B1 (en) 2012-11-01 2018-08-29 Novozymes A/S Method for removal of dna
EP3556836A1 (en) 2012-12-07 2019-10-23 Novozymes A/S Preventing adhesion of bacteria
WO2014090940A1 (en) 2012-12-14 2014-06-19 Novozymes A/S Removal of skin-derived body soils
ES2655032T3 (es) 2012-12-21 2018-02-16 Novozymes A/S Polipéptidos que poseen actividad proteasa y polinucleótidos que los codifican
EP3321360A3 (en) 2013-01-03 2018-06-06 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
US20160024440A1 (en) 2013-03-14 2016-01-28 Novozymes A/S Enzyme and Inhibitor Containing Water-Soluble Films
MX360759B (es) 2013-03-21 2018-11-15 Novozymes As Polipeptidos con actividades lipasa y polinucleotidos que los codifican.
CN105164147B (zh) 2013-04-23 2020-03-03 诺维信公司 具有稳定的枯草杆菌蛋白酶的液体自动餐具清洗洗涤剂组合物
EP3461881A1 (en) 2013-05-03 2019-04-03 Novozymes A/S Microencapsulation of detergent enzymes
CN105209612A (zh) 2013-05-14 2015-12-30 诺维信公司 洗涤剂组合物
EP2997143A1 (en) 2013-05-17 2016-03-23 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
EP3786269A1 (en) 2013-06-06 2021-03-03 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
WO2014207227A1 (en) 2013-06-27 2014-12-31 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3013955A1 (en) 2013-06-27 2016-05-04 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US20160152925A1 (en) 2013-07-04 2016-06-02 Novozymes A/S Polypeptides Having Anti-Redeposition Effect and Polynucleotides Encoding Same
EP3019603A1 (en) 2013-07-09 2016-05-18 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
EP2832853A1 (en) 2013-07-29 2015-02-04 Henkel AG&Co. KGAA Detergent composition comprising protease variants
CN117904081A (zh) 2013-07-29 2024-04-19 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
EP3027747B1 (en) 2013-07-29 2018-02-07 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
WO2015049370A1 (en) 2013-10-03 2015-04-09 Novozymes A/S Detergent composition and use of detergent composition
EP3074509B1 (en) 2013-11-29 2019-03-06 Novozymes A/S Peroxygenase variants
EP3453757B1 (en) 2013-12-20 2020-06-17 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
WO2015109972A1 (en) 2014-01-22 2015-07-30 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
EP3114272A1 (en) 2014-03-05 2017-01-11 Novozymes A/S Compositions and methods for improving properties of cellulosic textile materials with xyloglucan endotransglycosylase
WO2015134729A1 (en) 2014-03-05 2015-09-11 Novozymes A/S Compositions and methods for improving properties of non-cellulosic textile materials with xyloglucan endotransglycosylase
US10155935B2 (en) 2014-03-12 2018-12-18 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
US20170015950A1 (en) 2014-04-01 2017-01-19 Novozymes A/S Polypeptides having alpha amylase activity
US10131863B2 (en) 2014-04-11 2018-11-20 Novozymes A/S Detergent composition
EP3131921B1 (en) 2014-04-15 2020-06-10 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
CN106459937A (zh) 2014-05-27 2017-02-22 诺维信公司 用于产生脂肪酶的方法
EP3760713A3 (en) 2014-05-27 2021-03-31 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
US20170121695A1 (en) 2014-06-12 2017-05-04 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
CN106471110A (zh) 2014-07-03 2017-03-01 诺维信公司 改进的非蛋白酶类酶稳定化
CN106661566A (zh) 2014-07-04 2017-05-10 诺维信公司 枯草杆菌酶变体以及编码它们的多核苷酸
EP3739029A1 (en) 2014-07-04 2020-11-18 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
CN104293744B (zh) * 2014-08-19 2017-04-12 浙江工业大学 来源于嗜热踝节菌的脂肪酶突变体及应用
WO2016079110A2 (en) 2014-11-19 2016-05-26 Novozymes A/S Use of enzyme for cleaning
US10287562B2 (en) 2014-11-20 2019-05-14 Novoszymes A/S Alicyclobacillus variants and polynucleotides encoding same
EP3227444B1 (en) 2014-12-04 2020-02-12 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
MX2017007103A (es) 2014-12-05 2017-08-24 Novozymes As Variantes de lipasa y polinucleotidos que las codifican.
EP3234121A1 (en) 2014-12-15 2017-10-25 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
US20180000076A1 (en) 2014-12-16 2018-01-04 Novozymes A/S Polypeptides Having N-Acetyl Glucosamine Oxidase Activity
US10400230B2 (en) 2014-12-19 2019-09-03 Novozymes A/S Protease variants and polynucleotides encoding same
CN107002061A (zh) 2014-12-19 2017-08-01 诺维信公司 蛋白酶变体以及对其进行编码的多核苷酸
EP3280818A2 (en) 2015-04-07 2018-02-14 Novozymes A/S Methods for selecting enzymes having lipase activity
EP3280800A1 (en) 2015-04-10 2018-02-14 Novozymes A/S Detergent composition
CN107567489A (zh) 2015-04-10 2018-01-09 诺维信公司 衣物洗涤方法，dna酶和洗涤剂组合物的用途
WO2016184944A1 (en) 2015-05-19 2016-11-24 Novozymes A/S Odor reduction
ES2670044T3 (es) 2015-06-04 2018-05-29 The Procter & Gamble Company Composición detergente líquida para lavado de vajillas a mano
EP3287513A1 (en) 2015-06-04 2018-02-28 The Procter & Gamble Company Hand dishwashing liquid detergent composition
WO2016202739A1 (en) 2015-06-16 2016-12-22 Novozymes A/S Polypeptides with lipase activity and polynucleotides encoding same
CN107922095A (zh) 2015-06-17 2018-04-17 诺维信公司 容器
US11162089B2 (en) 2015-06-18 2021-11-02 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
EP3106508B1 (en) 2015-06-18 2019-11-20 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising subtilase variants
WO2016135351A1 (en) 2015-06-30 2016-09-01 Novozymes A/S Laundry detergent composition, method for washing and use of composition
CA2987160C (en) 2015-07-01 2022-12-13 Novozymes A/S Methods of reducing odor
CN107969136B (zh) 2015-07-06 2021-12-21 诺维信公司 脂肪酶变体以及编码它们的多核苷酸
ES2794837T3 (es) 2015-09-17 2020-11-19 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones detergentes que comprenden polipéptidos que tienen actividad degradante de xantano
CN108350443B (zh) 2015-09-17 2022-06-28 诺维信公司 具有黄原胶降解活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
WO2017060493A1 (en) 2015-10-07 2017-04-13 Novozymes A/S Polypeptides
CN108291215A (zh) 2015-10-14 2018-07-17 诺维信公司 具有蛋白酶活性的多肽以及编码它们的多核苷酸
BR112018007474A2 (pt) 2015-10-14 2018-10-30 Novozymes A/S ?limpeza de membranas de filtração de água?
EP4324919A2 (en) 2015-10-14 2024-02-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
MX2018004683A (es) 2015-10-28 2018-07-06 Novozymes As Composicion detergente que comprende variantes de amilasa y proteasa.
EP3380608A1 (en) 2015-11-24 2018-10-03 Novozymes A/S Polypeptides having protease activity and polynucleotides encoding same
WO2017093318A1 (en) 2015-12-01 2017-06-08 Novozymes A/S Methods for producing lipases
US20190002819A1 (en) 2015-12-28 2019-01-03 Novozymes Bioag A/S Heat priming of bacterial spores
BR112018069220A2 (pt) 2016-03-23 2019-01-22 Novozymes As uso de polipeptídeo que tem atividade de dnase para tratamento de tecidos
WO2017174769A2 (en) 2016-04-08 2017-10-12 Novozymes A/S Detergent compositions and uses of the same
WO2017186943A1 (en) 2016-04-29 2017-11-02 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
WO2017210188A1 (en) 2016-05-31 2017-12-07 Novozymes A/S Stabilized liquid peroxide compositions
CA3024276A1 (en) 2016-06-03 2017-12-07 Novozymes A/S Subtilase variants and polynucleotides encoding same
US11001787B2 (en) 2016-06-23 2021-05-11 Novozymes A/S Use of enzymes, composition and method for removing soil
WO2018001959A1 (en) 2016-06-30 2018-01-04 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising surfactant and lipase variant
WO2018002261A1 (en) 2016-07-01 2018-01-04 Novozymes A/S Detergent compositions
WO2018007573A1 (en) 2016-07-08 2018-01-11 Novozymes A/S Detergent compositions with galactanase
WO2018011276A1 (en) 2016-07-13 2018-01-18 The Procter & Gamble Company Bacillus cibi dnase variants and uses thereof
EP4357453A2 (en) 2016-07-18 2024-04-24 Novozymes A/S Lipase variants, polynucleotides encoding same and the use thereof
PL3284805T3 (pl) 2016-08-17 2020-07-13 The Procter & Gamble Company Kompozycja czyszcząca zawierająca enzymy
WO2018037062A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
EP3504331A1 (en) 2016-08-24 2019-07-03 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising xanthan lyase variants i
CA3032248A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Novozymes A/S Xanthan lyase variants and polynucleotides encoding same
WO2018037065A1 (en) 2016-08-24 2018-03-01 Henkel Ag & Co. Kgaa Detergent composition comprising gh9 endoglucanase variants i
US20190284647A1 (en) 2016-09-29 2019-09-19 Novozymes A/S Spore Containing Granule
WO2018060216A1 (en) 2016-09-29 2018-04-05 Novozymes A/S Use of enzyme for washing, method for washing and warewashing composition
EP3532592A1 (en) 2016-10-25 2019-09-04 Novozymes A/S Detergent compositions
EP3535377B1 (en) 2016-11-01 2022-02-09 Novozymes A/S Multi-core granules
RU2019120191A (ru) 2016-12-01 2021-01-11 Басф Се Стабилизация ферментов в композициях
WO2018108865A1 (en) 2016-12-12 2018-06-21 Novozymes A/S Use of polypeptides
CN110651039A (zh) 2017-03-31 2020-01-03 诺维信公司 具有rna酶活性的多肽
WO2018177938A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
WO2018177936A1 (en) 2017-03-31 2018-10-04 Novozymes A/S Polypeptides having dnase activity
US20200109352A1 (en) 2017-04-04 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptide compositions and uses thereof
CN110651029B (zh) 2017-04-04 2022-02-15 诺维信公司 糖基水解酶
WO2018185150A1 (en) 2017-04-04 2018-10-11 Novozymes A/S Polypeptides
EP3385362A1 (en) 2017-04-05 2018-10-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent compositions comprising fungal mannanases
ES2728758T3 (es) 2017-04-05 2019-10-28 Henkel Ag & Co Kgaa Composiciones de detergente que comprenden mananasas bacterianas
BR112019020960A2 (pt) 2017-04-06 2020-05-05 Novozymes As composições de limpeza e seus usos
WO2018184818A1 (en) 2017-04-06 2018-10-11 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
US10968416B2 (en) 2017-04-06 2021-04-06 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
CA3058520A1 (en) 2017-04-06 2018-10-11 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3478811B1 (en) 2017-04-06 2019-10-16 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3607043A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3607042A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
EP3607044A1 (en) 2017-04-06 2020-02-12 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2018202846A1 (en) 2017-05-05 2018-11-08 Novozymes A/S Compositions comprising lipase and sulfite
WO2018206535A1 (en) 2017-05-08 2018-11-15 Novozymes A/S Carbohydrate-binding domain and polynucleotides encoding the same
EP3401385A1 (en) 2017-05-08 2018-11-14 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising polypeptide comprising carbohydrate-binding domain
EP3645692A1 (en) 2017-06-30 2020-05-06 Novozymes A/S Enzyme slurry composition
WO2019038060A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Henkel Ag & Co. Kgaa DETERGENT COMPOSITION COMPRISING XANTHANE LYASE II VARIANTS
WO2019038057A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Novozymes A/S VARIANTS OF XANTHANE LYASE AND POLYNUCLEOTIDES ENCODING THE SAME
EP3673058A1 (en) 2017-08-24 2020-07-01 Novozymes A/S Gh9 endoglucanase variants and polynucleotides encoding same
WO2019038059A1 (en) 2017-08-24 2019-02-28 Henkel Ag & Co. Kgaa DETERGENT COMPOSITIONS COMPRISING GH9 ENDOGLUCANASE VARIANTS II
CN111247235A (zh) 2017-09-20 2020-06-05 诺维信公司 酶改善吸水性和/或白度的用途
US11414814B2 (en) 2017-09-22 2022-08-16 Novozymes A/S Polypeptides
US11332725B2 (en) * 2017-09-27 2022-05-17 Novozymes A/S Lipase variants and microcapsule compositions comprising such lipase variants
CN111108195A (zh) 2017-09-27 2020-05-05 宝洁公司 包含脂肪酶的洗涤剂组合物
WO2019076800A1 (en) 2017-10-16 2019-04-25 Novozymes A/S CLEANING COMPOSITIONS AND USES THEREOF
CN111448302A (zh) 2017-10-16 2020-07-24 诺维信公司 低粉化颗粒
US20200318037A1 (en) 2017-10-16 2020-10-08 Novozymes A/S Low dusting granules
EP3701016A1 (en) 2017-10-27 2020-09-02 Novozymes A/S Dnase variants
HUE057471T2 (hu) 2017-10-27 2022-05-28 Procter & Gamble Polipeptid-variánsokat tartalmazó mosószerkészítmények
CN111479919A (zh) 2017-11-01 2020-07-31 诺维信公司 多肽以及包含此类多肽的组合物
CN111527190A (zh) 2017-11-01 2020-08-11 诺维信公司 多肽以及包含此类多肽的组合物
DE102017125559A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine ii enthalten
DE102017125558A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine i enthalten
WO2019086532A1 (en) 2017-11-01 2019-05-09 Novozymes A/S Methods for cleaning medical devices
DE102017125560A1 (de) 2017-11-01 2019-05-02 Henkel Ag & Co. Kgaa Reinigungszusammensetzungen, die dispersine iii enthalten
CN111417707A (zh) 2017-11-29 2020-07-14 巴斯夫欧洲公司 储存稳定的酶制剂、其制备和应用
US11725197B2 (en) 2017-12-04 2023-08-15 Novozymes A/S Lipase variants and polynucleotides encoding same
BR112020012133A2 (pt) 2017-12-20 2020-11-24 Basf Se formulação para lavagem de roupa, usos de componentes, de pelo menos um composto da fórmula geral (i), de uma mistura de tensoativo, de pelo menos uma lipase de triacilglicerol fúngica, e, métodos para remover depósitos de gordura, para reduzir a redeposição de compostos gordurosos em artigo têxtil e para limpar artigos têxteis
EP3749761A1 (en) 2018-02-08 2020-12-16 Novozymes A/S Lipases, lipase variants and compositions thereof
US20210071156A1 (en) 2018-02-08 2021-03-11 Novozymes A/S Lipase Variants and Compositions Thereof
EP3755793A1 (en) 2018-02-23 2020-12-30 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants
CN111770788B (zh) 2018-03-13 2023-07-25 诺维信公司 使用氨基糖低聚物进行微囊化
WO2019180111A1 (en) 2018-03-23 2019-09-26 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
CN112262207B (zh) 2018-04-17 2024-01-23 诺维信公司 洗涤剂组合物中包含碳水化合物结合活性的多肽及其在减少纺织品或织物中的褶皱的用途
BR112020021115A2 (pt) 2018-04-19 2021-02-17 Basf Se composição, uso de uma composição, poliol de poliéteramina ramificada, e, processo para produzir polióis de poliéteramina ramificada
CN112272701A (zh) 2018-04-19 2021-01-26 诺维信公司 稳定化的纤维素酶变体
EP3781680A1 (en) 2018-04-19 2021-02-24 Novozymes A/S Stabilized cellulase variants
WO2019238761A1 (en) 2018-06-15 2019-12-19 Basf Se Water soluble multilayer films containing wash active chemicals and enzymes
EP3814472A1 (en) 2018-06-28 2021-05-05 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
EP3814489A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
EP3814473A1 (en) 2018-06-29 2021-05-05 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
WO2020007863A1 (en) 2018-07-02 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020007875A1 (en) 2018-07-03 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
US20210253981A1 (en) 2018-07-06 2021-08-19 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020008024A1 (en) 2018-07-06 2020-01-09 Novozymes A/S Cleaning compositions and uses thereof
WO2020030623A1 (en) 2018-08-10 2020-02-13 Basf Se Packaging unit comprising a detergent composition containing an enzyme and at least one chelating agent
CN110923215B (zh) * 2018-09-19 2021-08-10 江苏师范大学 一种生产米黑根毛霉脂肪酶mRML酶粉的方法
US20210340466A1 (en) 2018-10-01 2021-11-04 Novozymes A/S Detergent compositions and uses thereof
WO2020070209A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition
WO2020070014A1 (en) 2018-10-02 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning composition comprising anionic surfactant and a polypeptide having rnase activity
CN112969775A (zh) 2018-10-02 2021-06-15 诺维信公司 清洁组合物
WO2020070199A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Novozymes A/S Polypeptides having alpha-mannan degrading activity and polynucleotides encoding same
WO2020070249A1 (en) 2018-10-03 2020-04-09 Novozymes A/S Cleaning compositions
BR112021005412A2 (pt) 2018-10-05 2021-06-15 Basf Se preparação de enzima, processo para fabricar uma preparação de enzima estável, métodos para reduzir a perda da atividade proteolítica, para preparação de uma formulação detergente, para remover manchas e para aumentar a estabilidade na armazenagem de uma formulação detergente líquida, usos de um composto e da preparação de enzima, e, formulação detergente
CN112805376A (zh) 2018-10-05 2021-05-14 巴斯夫欧洲公司 在液体中稳定水解酶的化合物
CN112805377A (zh) 2018-10-05 2021-05-14 巴斯夫欧洲公司 在液体中稳定淀粉酶的化合物
EP3677676A1 (en) 2019-01-03 2020-07-08 Basf Se Compounds stabilizing amylases in liquids
CN112996894A (zh) 2018-10-11 2021-06-18 诺维信公司 清洁组合物及其用途
EP3647398A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins v
EP3647397A1 (en) 2018-10-31 2020-05-06 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions containing dispersins iv
WO2020104231A1 (en) 2018-11-19 2020-05-28 Basf Se Powders and granules containing a chelating agent and an enzyme
CN113302270A (zh) 2018-12-03 2021-08-24 诺维信公司 低pH粉末洗涤剂组合物
WO2020114968A1 (en) 2018-12-03 2020-06-11 Novozymes A/S Powder detergent compositions
WO2020127775A1 (en) 2018-12-21 2020-06-25 Novozymes A/S Detergent pouch comprising metalloproteases
CN113366103A (zh) 2018-12-21 2021-09-07 诺维信公司 具有肽聚糖降解活性的多肽以及编码其的多核苷酸
EP3702452A1 (en) 2019-03-01 2020-09-02 Novozymes A/S Detergent compositions comprising two proteases
CN113544246A (zh) 2019-03-08 2021-10-22 巴斯夫欧洲公司 阳离子表面活性剂及其在洗衣用洗涤剂组合物中的用途
EP3942032A1 (en) 2019-03-21 2022-01-26 Novozymes A/S Alpha-amylase variants and polynucleotides encoding same
US20220169953A1 (en) 2019-04-03 2022-06-02 Novozymes A/S Polypeptides having beta-glucanase activity, polynucleotides encoding same and uses thereof in cleaning and detergent compositions
WO2020207944A1 (en) 2019-04-10 2020-10-15 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20220186151A1 (en) 2019-04-12 2022-06-16 Novozymes A/S Stabilized glycoside hydrolase variants
WO2020229480A1 (en) 2019-05-14 2020-11-19 Basf Se Compounds stabilizing hydrolases in liquids
CN111117981B (zh) * 2019-05-31 2021-07-13 江南大学 一种脂肪酶突变体及其在去污方面的应用
JP2022538360A (ja) 2019-07-01 2022-09-01 ビーエーエスエフ ソシエタス・ヨーロピア 酵素を安定化するためのペプチドアセタール
EP3994255A1 (en) 2019-07-02 2022-05-11 Novozymes A/S Lipase variants and compositions thereof
EP3997202A1 (en) 2019-07-12 2022-05-18 Novozymes A/S Enzymatic emulsions for detergents
CN114787329A (zh) 2019-08-27 2022-07-22 诺维信公司 洗涤剂组合物
WO2021037878A1 (en) 2019-08-27 2021-03-04 Novozymes A/S Composition comprising a lipase
EP4031644A1 (en) 2019-09-19 2022-07-27 Novozymes A/S Detergent composition
US20220340843A1 (en) 2019-10-03 2022-10-27 Novozymes A/S Polypeptides comprising at least two carbohydrate binding domains
BR112022006082A2 (pt) 2019-10-18 2022-06-21 Basf Se Preparação enzimática, formulação de detergente, e, uso de pelo menos um diol
WO2021105336A1 (en) 2019-11-29 2021-06-03 Basf Se Compositions comprising polymer and enzyme
WO2021115912A1 (en) 2019-12-09 2021-06-17 Basf Se Formulations comprising a hydrophobically modified polyethyleneimine and one or more enzymes
US20220411773A1 (en) 2019-12-20 2022-12-29 Novozymes A/S Polypeptides having proteolytic activity and use thereof
WO2021122121A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning compositions comprising dispersins ix
WO2021122120A2 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning compositions comprising dispersins viii
WO2021122118A1 (en) 2019-12-20 2021-06-24 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning compositions comprising dispersins vi
AU2020410142A1 (en) 2019-12-20 2022-08-18 Henkel Ag & Co. Kgaa Cleaning composition coprising a dispersin and a carbohydrase
CN114929848A (zh) 2019-12-20 2022-08-19 诺维信公司 稳定的液体无硼酶组合物
EP3892708A1 (en) 2020-04-06 2021-10-13 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions comprising dispersin variants
EP4133066A1 (en) 2020-04-08 2023-02-15 Novozymes A/S Carbohydrate binding module variants
US20230167384A1 (en) 2020-04-21 2023-06-01 Novozymes A/S Cleaning compositions comprising polypeptides having fructan degrading activity
EP3907271A1 (en) 2020-05-07 2021-11-10 Novozymes A/S Cleaning composition, use and method of cleaning
US20230212548A1 (en) 2020-05-26 2023-07-06 Novozymes A/S Subtilase variants and compositions comprising same
WO2021254824A1 (en) 2020-06-18 2021-12-23 Basf Se Compositions and their use
EP4172298A1 (en) 2020-06-24 2023-05-03 Novozymes A/S Use of cellulases for removing dust mite from textile
EP3936593A1 (en) 2020-07-08 2022-01-12 Henkel AG & Co. KGaA Cleaning compositions and uses thereof
WO2022008416A1 (en) 2020-07-09 2022-01-13 Basf Se Compositions and their applications
WO2022008732A1 (en) 2020-07-10 2022-01-13 Basf Se Enhancing the activity of antimicrobial preservatives
EP4189051B1 (en) 2020-07-27 2024-02-28 Unilever IP Holdings B.V. Use of an enzyme and surfactant for inhibiting microorganisms
WO2022043321A2 (en) 2020-08-25 2022-03-03 Novozymes A/S Variants of a family 44 xyloglucanase
MX2023002095A (es) 2020-08-28 2023-03-15 Novozymes As Variantes de proteasa con solubilidad mejorada.
BR112023005128A2 (pt) 2020-09-22 2023-04-25 Basf Se Composição, composição de detergente, método para prover uma composição de detergente com estabilidade e/ou desempenho de lavagem melhorados, e, uso de uma composição
CN116507725A (zh) 2020-10-07 2023-07-28 诺维信公司 α-淀粉酶变体
WO2022083949A1 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Basf Se Compositions and their use
WO2022084303A2 (en) 2020-10-20 2022-04-28 Novozymes A/S Use of polypeptides having dnase activity
EP4237525A1 (en) 2020-10-28 2023-09-06 Novozymes A/S Use of lipoxygenase
BR112023008326A2 (pt) 2020-10-29 2023-12-12 Novozymes As Variantes de lipase e composições compreendendo tais variantes de lipase
CN116670261A (zh) 2020-11-13 2023-08-29 诺维信公司 包含脂肪酶的洗涤剂组合物
WO2022106404A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of proteases
WO2022106400A1 (en) 2020-11-18 2022-05-27 Novozymes A/S Combination of immunochemically different proteases
EP4032966A1 (en) 2021-01-22 2022-07-27 Novozymes A/S Liquid enzyme composition with sulfite scavenger
WO2022162043A1 (en) 2021-01-28 2022-08-04 Novozymes A/S Lipase with low malodor generation
EP4039806A1 (en) 2021-02-04 2022-08-10 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising xanthan lyase and endoglucanase variants with im-proved stability
EP4291625A1 (en) 2021-02-12 2023-12-20 Novozymes A/S Stabilized biological detergents
CN116829709A (zh) 2021-02-12 2023-09-29 诺维信公司 α-淀粉酶变体
JP2024508766A (ja) 2021-02-22 2024-02-28 ベーアーエスエフ・エスエー アミラーゼバリアント
EP4047088A1 (en) 2021-02-22 2022-08-24 Basf Se Amylase variants
EP4305146A1 (en) 2021-03-12 2024-01-17 Novozymes A/S Polypeptide variants
EP4060036A1 (en) 2021-03-15 2022-09-21 Novozymes A/S Polypeptide variants
US20240060061A1 (en) 2021-03-15 2024-02-22 Novozymes A/S Dnase variants
EP4314222A1 (en) 2021-03-26 2024-02-07 Novozymes A/S Detergent composition with reduced polymer content
EP4359518A1 (en) 2021-06-23 2024-05-01 Novozymes A/S Alpha-amylase polypeptides
WO2023061827A1 (en) 2021-10-13 2023-04-20 Basf Se Compositions comprising polymers, polymers, and their use
WO2023088777A1 (en) 2021-11-22 2023-05-25 Basf Se Compositions comprising polymers, polymers, and their use
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WO2023117980A1 (en) 2021-12-21 2023-06-29 Basf Se Environmental attributes for plastic additives
EP4206309A1 (en) 2021-12-30 2023-07-05 Novozymes A/S Protein particles with improved whiteness
WO2023148086A1 (en) 2022-02-04 2023-08-10 Basf Se Compositions comprising polymers, polymers, and their use
EP4234664A1 (en) 2022-02-24 2023-08-30 Evonik Operations GmbH Composition comprising glucolipids and enzymes
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WO2023225459A2 (en) 2022-05-14 2023-11-23 Novozymes A/S Compositions and methods for preventing, treating, supressing and/or eliminating phytopathogenic infestations and infections
DE102022205591A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205593A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
DE102022205588A1 (de) 2022-06-01 2023-12-07 Henkel Ag & Co. Kgaa Wasch- und reinigungsmittel mit verbesserter enzymstabilität
WO2023247664A2 (en) 2022-06-24 2023-12-28 Novozymes A/S Lipase variants and compositions comprising such lipase variants
WO2024033134A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Enzyme compositions comprising protease, mannanase, and/or cellulase
WO2024033135A2 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Amylase variants
WO2024033136A1 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Amylase variants
WO2024033133A2 (en) 2022-08-11 2024-02-15 Basf Se Enzyme compositions comprising an amylase
EP4324900A1 (en) 2022-08-17 2024-02-21 Henkel AG & Co. KGaA Detergent composition comprising enzymes

Family Cites Families (16)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US4810414A (en) 1986-08-29 1989-03-07 Novo Industri A/S Enzymatic detergent additive
EP0305216B1 (en) 1987-08-28 1995-08-02 Novo Nordisk A/S Recombinant Humicola lipase and process for the production of recombinant humicola lipases
GB8921995D0 (en) 1989-09-29 1989-11-15 Unilever Plc Perfumed laundry detergents
JP4307549B2 (ja) 1995-07-14 2009-08-05 ノボザイムス アクティーゼルスカブ 脂肪分解活性を有する修飾された酵素
ATE267248T1 (de) 1995-08-11 2004-06-15 Novozymes As Neuartige lipolytische enzyme
EP1131416B1 (en) 1998-11-27 2009-09-02 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variants
US7312062B2 (en) * 1998-11-27 2007-12-25 Novozymes A/S Lipolytic enzyme variants
WO2000060063A1 (en) 1999-03-31 2000-10-12 Novozymes A/S Lipase variant
EP1340063B1 (en) 2000-11-27 2012-10-17 Novozymes A/S Automated mechanical stress assay for screening cleaning ingredients
US20040152180A1 (en) * 2001-01-10 2004-08-05 Steffan Minning Lipolytic enzyme variant
ES2323947T3 (es) 2001-01-10 2009-07-28 Novozymes A/S Variante de enzima lipolitica.
CA2432329C (en) 2001-02-07 2012-04-10 Novozymes A/S Lipase variants
WO2004018660A2 (en) * 2002-08-19 2004-03-04 Dsm Ip Assets B.V. Novel lipases and uses thereof
US8101376B2 (en) 2005-05-27 2012-01-24 Novozymes A/S Swatch for testing the washing performance of an enzyme
ES2628940T3 (es) 2006-01-23 2017-08-04 Novozymes A/S Variantes de lipasa
ES2601327T3 (es) 2006-01-23 2017-02-14 Novozymes A/S Polipéptidos con actividad de lipasa y polinucleótidos que codifican los mismos

Also Published As

Publication number Publication date
EP2250259B1 (en) 2016-08-31
CN101960008B (zh) 2016-04-13
AR070490A1 (es) 2010-04-07
JP2011512808A (ja) 2011-04-28
WO2009109500A8 (en) 2010-10-14
WO2009109500A1 (en) 2009-09-11
CA2715829C (en) 2017-05-23
CA2715829A1 (en) 2009-09-11
EP2250259A1 (en) 2010-11-17
US20090221033A1 (en) 2009-09-03
CN101960008A (zh) 2011-01-26
JP5650543B2 (ja) 2015-01-07
US7919298B2 (en) 2011-04-05
MX2010009072A (es) 2010-09-24

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