DE3118588C2 - Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren hochreinen Chondroitinpolysulfates, hiernach erhältliches Produkt und pharmazeutische Zusammensetzung - Google Patents

Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren hochreinen Chondroitinpolysulfates, hiernach erhältliches Produkt und pharmazeutische Zusammensetzung

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Abstract

Die Erfindung betrifft ein Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren Chondroitinpolysulfates, das dadurch gekennzeichnet ist, daß A) rohes Chondroitinpolysulfat oxidativ depolymerisiert, B) das depolymerisierte Chondroitinpolysulfat gegebenenfalls mit Peressigsäure gebleicht, C) das nach A) oder B) erhaltene Produkt durch ein oder zwei Methanolfällungen und/oder Ultrafiltrationen im Molekulargewicht fraktioniert, D) das nach C) erhaltene Produkt gegebenenfalls mit Kationenaustauschern entsalzt, E) das nach C) oder D) erhaltene Produkt gegebenenfalls mit Aktivkohle entfärbt wird. Die Erfindung betrifft weiterhin ein nach dem vorstehenden Verfahren herstellbares Chondroitinpolysulfat. Weiterer Gegenstand der Erfindung ist ein Chondroitinpolysulfat mit einer akuten Toxizität (LD ↓5 ↓0) bei intravenöser Verabreichung bei der NMRI Maus von > 3500 mg/kg, bei der Wistar Ratte von > 3000 mg/kg, bei der Katze von > 1000mg/kg und beim Hund von > 1000 mg/kg. Schließlich betrifft die Erfindung eine pharmazeutische Zusammensetzung für die Human- und Veterinärmedizin, gekennzeichnet durch den Gehalt an einem gemäß dem vorstehenden Verfahren herstellbaren Chondroitinpolysulfat oder einem Chondroitinpolysulfat mit den vorstehenden Merkmalen.

Description

Stickstoff: Schwefel: Hexuronsäure: Hexosamin:
1,65-2,00%
123-144% 0,98-1,22 mMol/g
0,96-1,24 mMol/g
14. Pharmazeutische Zusammensetzung für die Human- und Veterinärmedizin, gekennzeichnet durch den Gehalt an Chondroitinpolysulfat gemäß Anspruch 13 als Wirkstoff.
In dem Stand der Technik sind sowohl die Herstellung von Chondroitinpolysulfat, insbesondere die Sulfatierung von Chondroitinsulfat als auch verschiedene Behandlungsweisen von Chondroitinpolysulfat-Rohprodukten mit dem Ziel der Reinigung beschrieben worden (S. Bergström, Hoppe-Seyler's Z. f. physiol. Chemie 238, 163; 1936 - Chargaff, F. W. Bancroft J. biol. Chem. 115, 149, 155; 1936 - J. Piper Acta Pharm. Toxicol. 2, 317; 1946 - P. Karrer, H. Koenig, E. Usteri, HeIv. chim. acta 26, 1296; 1943 - DE-PS 8 70 094 - DE-PS 9 35 843 -DE-PS 9 68 752 - DE-OS 16 18 857 - US-PS 34 54 560 - DD-PS 1 36 572). Keine dieser Arbeitsweisen führt jedoch zu einem befriedigenden Produkt.
Die trotz technischer Fortschritte immer noch zu hohe Toxicität und andere Nachteile der Chondroitinpolysulfate nach dem Stand der Technik wie durch Verunreinigungen bedingte Unverträglichkeiten verbieten bis jetzt den risikofreien therapeutischen Einsatz dieser Stoffe als Injektion.
Ziel der Erfindung ist es daher, in wirtschaftlich vorteilhafter Weise zu einem hochreinen Chondroitinpolysulfat zu gelangen, bei dem die Nachteile bekannter Chondroitinpolysulfate auf ein Mindestmaß reduziert sind. Ein derartiges Chondroitinpolysulfat soll in der Therapie von Erkrankungen bei Mensch und Tier in jeder Applikationsart eingesetzt werden können. Das vorstehende Ziel wird durch ein Verfahren erreicht, dessen Wesen in der Art und Abfolge der nachstehenden Verfahrensschritte zu sehen ist:
Oxidative Depolymerisierung eines dem Stand der Technik entsprechenden rohen CLimdroitinpoIysulfates, gegebenenfalls Bleichen mit Peressigsäure, Gewinnung einer Fraktion mit mittlerem Molekulargewicht von 5000-15000 durch Fällung mit Methanol und/oder Ultrafiltration, gegebenenfalls Entsalzung mittels Ionenaustauscher und gegebenenfalls Behandlung mit Aktivkohle. Gegenstand der Erfindung ist somit ein Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren hochreinen Chondroitinpolysulfates, das dadurch gekenzeichnet ist daß man
A) rohes Chondroitinpolysulfat oxidativ depolymerisiert
B) gegebenenfalls das depolymerisierte Chondroitinpolysulfat mit Peressigsäure bleicht,
C) das nach A) oder B) erhaltene Produkt durch ein oder zwei Methanolfällungen zur Gewinnung einer Fraktion mit einem mittleren Molekulargewicht von etwa 5000 bis 15000 fraktioniert, wobei man die
erste Fraktionierung bei einer Konzentration zwischen 25 und 4* Vo|,-% Methanol und die zweite Fraktionierung bei einer Konzentration zwischen 60 und 85 Vo!.-% Methanol durchführt,
D) gegebenenfalls das nach C) erhaltene Produkt mit Kationenaustauschern entsalzt
E) gegebenenfalls das nach C) oder D) erhaltene Produkt mit Aktivkohle entfärbt wird und
F) das hochreine Produkt in Substanz gewinnt
10
Für die Gewinnung des als Ausgangsmaterial eingesetzten rohen Chondroitinpolysulfats kommenn die aus dem Stand der Technik bekannten Verfahren, beispielsweise wie sie in den vorstehend genannten Literaturstellen beschrieben sind, in Frage. Man kann, ohne daß die Erfindung hierauf oder auf eines der vorstehend genannten Verfahren zur Herstellung des rohen Chondroitinpolysulfates beschränkt ist, von einem Produkt ausgehen, das durch Sulfatierung von Chondroitinsulfat mit Pyridin und Chlorsulfonsäure erhalten wird. Es könen Chondroitinpo'.jisulfate sehr verschiedener Färbung verwendet werden. Auch hochmolekulare, aus der Stufe C des vorliegenden Verfahrens stammende Chondroitinpolysulfate können eingesetzt werden.
Bei dem im folgenden beschriebenen Verfahren kornmen zur pH-Wert-Einstellung folgende Reagenzien in Betracht: Säuren wie anorganische Säuren, z. B. Salzsäure, und niederaliphatische Carbonsäuren bzw. deren Persäuren, z. B. Essigsäure oder Peressigsäure, und Laugen wie Alkalihydroxidlösungen, z. B. Natronlauge oder Kalilauge. Die einzelnen Arbeitschritte des Verfahrens werden vorzugsweise bei Normaldruck ausgeführt Sofern nicht anders angegeben, sind im rügenden die Prozentangaben »Gew./Vol.w-Angcben. In dem vorliegenden Verfahren wird als Abscheidung? tiittel für Zwi- schenprodukte und Endprodukt Methanol angegeben. Gleichermaßen eignen sich auch andere mit Wasser mischbare organische Flüssigkeiten wie z. B. Ethanol, Isaopropanol, Aceton, Tetrahydrofuran, Dioxan. Die in den einzelnen Arbeitsschritten des Verfahrens erzeugten Zwischenprodukte müssen nicht unbedingt als Trokkensubstanzen isoliert werden. Man kann auch die lösungsmittelfeuchten Massen ohne Trocknen weiterverarbeiten. Bei der Ausfällung der Chondroitinpolysulfatstoffe mit wassermischbaren Lösungsmitteln setzt man zweckmäßig Salze in einem Konzentrationsbereich von 0,1 -10%, bevorzugt 0,5-5% zu. Als Salze eignen sich insbesondere Natrium- oder Kaliumchlorid und Natrium- oder Kaliumacetat.
Chondroitinpolysulfat läßt sich unter Ausschluß von Schwermetallen mit Wasserstoffperoxid depolymerisieren. Der Depolymerisier3chritt kann in wäßriger Lösung unter folgenden Bedingungen ausgeführt werden: Die Konzentration des rohen Chondroitinpolysulfats kann 2-35%, vorzugsweise 10-20% betragen. Die Konzentration von Wasserstoffperoxid im Reaktionsmedium kann 0,3—15, vorzugsweise 1—5% betragen. Die Reaktionstemperatur kann 20—100°C, vorzugsweise 50—100°C, betragen. Die Reaktionsdauer liegt im Bereich von 10 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise 30-200 Minuten. Der pH«Wert kann zwischen 3 und 9 konstant gehalten oder auch uneingestellt bleiben, bevorzugt arbeitet man zwischen pH 44 und 7.
Anwesende Schwermetalle lassen sich durch Komplexmittel wie Nitrilotrieessigsäure, Ethylendinitrilote- es traessigsäure, 1 i-Cyclohexylendinitrilotetraessigsäure, Diethylentriaminpentaessigsäure, 3,6-Dioxaoctamethylendinitrilotetraessigsäure oder deren Gemische bzw. deren AlkaJisalze maskieren. Die Konzentration des Komplexmittels im Reaktionsmedium hält man zwischen 0,00t und 0,5%, bevorzugt zwischen 0,005 und 0,15%. Nach Abschluß der Reaktion kann man das Reaktionsprodukt entweder ohne oder nach Abköhlqng nach Zusatz eines Alkalisalzes mit einem Oberschuß von Methanol ausfällen und gewinnen.
Die Depolymerisierung von Chondroitinpolysulfat mit Wasserstoffperoxid kann auch in Gegenwart von Schwermetallsalzen unter besonders schonenden Bedingungen durchgeführt werden. Man arbeitet z. B. wie folgt: Die Konzentration des rohen Chondroitinpolysulfats kann 2—35%, vorzugsweise 15—30% betragen. Die Konzentration von Wasserstoffperoxid in der Reakticnslösung kann 04-15%, vorzugsweise 1—5%, betragen. Die Reaktionstemperatur kann im Bereich von -100C bis +8O0C, vorzugsweise 00C bis 300C, liegen. Die Reaktionsdauer kann im Bereich von 5 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise 30—500 Minuten, liegen.
Der pH-Wert kann zwischen 3 und 8 liegen, bevorzugt zwischen 43 und 74- Als Schwermetallsalze bewähren sich anorganische und organische Salze von Eisen, Kobalt Kupfer, Mangan, Vanadium. Die Metalle dieser Salze liegen vorzugsweise in folgenden Wertigkeitsstufen vor:
Eisen und Cobalt:
zwei- und dreiwertig, Kupfer:
ein- und zweiwertig. Mangan:
zwei-, drei-, vier-, sechs- und siebenwertig. Vanadin:
zwei- und fünfwertig.
Die Konzentration an Metallsalz wird zwischen 0,001 und 03%, bevorzugt zwischen 0,05 und 0,2% eingestellt Nach dem Abbau stellt man den pH-Wert in den Bereich 5-14, bevorzugt 6-10, und gewinnt das Deopolymerisat durch Methanolfällung.
Mit dem gleichen Ergebnis wie die vorstehenden Methoden zur oxidativen Depolymerisierung von Chondroitinpolysulfat ist der Arbeitsschritt durch oxidativen Abbau von Chondroitinpolysulfat durch Peressigsäure in Gegenwart von gewissen Schwermetallsalzen auszuführen. Es wurden folgende Bedingungen gefunden, bei denen die Reaktion vorteilhaft realisiert werden kann: Die Konzentration des rohen Chondroitinpolysulfats kann 5-35%, vorzugsweise 10-25%, betragen. Die Konzentration der Peressigsäure in der Reaktionslösung kann 0,1—7%, vorzugsweise 04 — 2% betragen. Die Schwermetallsalzkonzentration kann in dem Bereich von 0,001 -04%. vorzugsweise 0,005-0,2%, liegen. Die Reaktionstemperatur kann - 1O0C bis +900C, vorzugsweise 00C-30° C, betragen. Die Reaktionsdauer kann im Bereich von 5 Minuten bis 24 Stunden, vorzugsweise 15-500 Minuten, liegen. Der pH-Wert kann 2—12, vorzugsweise 3 — 8, betragen.
Die Reaktion verläuft z. B. mit anorganischen oder organischen Salzen der folgenden Schwermetalle in guter Geschwindigkeit; Eisen, Kobalt, Kupfer, Mangan, Vanadium. Was die Wertigkeit der Metalle dieser Metallsalze anbelangt, gilt das Gleiche wie vorstehend für die Depolymerisierung mit Wasserstoffperoxid. Besonders bei kürzeren Reaktionszeiten kann das Abstoppen des Depolymerisiervorgangs durch einen Chelatbildner wie z. B. Ethylendinitrilotetraessigsäure oder andere Metallmaskierungsmittel angezeigt sein. Das depoly-
merisierte Chondroitinpolysulfat kann gegebenenfalls nach Zusatz eines Neutralsalzes und Einstellen des pH-Wertes in den Bereich 3-14, besonders 6-10, mit Methanol abgeschieden werden.
Für den Einsatz in dem vorliegenden Verfahren eignen sich rohe Chondroitinpolysulfate sehr verschiedener Reinheit und Färbung. Es kann nötig sein, daß trotz des die Farbe stark aufhellenden Depolymerisiervorgangs vor der Weiterverarbeitung ein Entfärbungsschritt bzv.. eine Bleiche eingefügt werden muß. Die Bleiche wird mit Peressigsäure durchgeführt Es wurden folgende vorteilhafte Bedingungen gefunden: Der pH-Bereich kann 2^ — 14, vorzugsweise 3—11, betragen. Die Peressigsäurekonzentration kann 0,1 —10%, bevorzugt 1—5%, betragen. Die Konzentration des rohen Chondroitinpolysulfats kann 2—40%, bevorzugt 5-25%, betragen. Die Reaktion wird in dem Temperaturbereich von 0-1000C, bevorzugt 15-70"C, durchgeführt. Die Reaktiondauer kann zwischen 1 Minute und 96 Stunden, insbesondere zwischen 1 und 24 Stunden betragen.
Entsprechend einer bevorzugten Ausführangsform kann die Peressigsäurebehandlung in das nachfolgende Molekülfraktionierungsverfahren einbezogen werden. Wie bereits vorstehend zum Ausdruck gebracht wurde, kann die Peressigsäurebehandlung auch ganz unterbleiben.
Aus dem nach der Bleiche bzw. Depolymerisierung erhaltenen Produkt fraktioniert man durch Methanolfällung bei verschiedenen Konzentrationen den Molekulargewichtsbereich von etwa5000—15 000 aus.
Hierzu kann man das depolymerisierte und gegebenenfalls gebleichte Chondroitinpolysulfat in wäßriger Lösung wie folgt mit Methanol in Gegenwart von Neutralsalz behandeln (1. Methanolfällung): Die Konzentration des depolymerisierten Chondroitinpolysulfats in der wäßrigen Lösung kann 5—30%, vorzugsweise 5-20%, betragen. Der pH-Wert kann im Bereich von 2—10, vorzugsweise 3,0 — 7,5, liegen. Der Neutralsalzgehalt kann 0,5-10%, bevorzugt 1-5%, betragen. Ein bevorzugtes Neutralsalz ist Natriumchlorid. Die Temperatur kann im Bereich von 0-500C, vorzugsweise 15-30°C, liegen. Die Methanolmengc beträgt 20-45 Vol.-%, bevorzugt 30-40 Vol.-%, bezogen auf das gesamte Behandlungsmedium. Hochmolekulare und hochsulfatierte Chondroitinpolysulfat-individuen fallen zusammen mit Verunreinigungen aus und können durch Filtration oder Zentrifugieren entfernt werden.
Die verbleibende methanolhaltige Lösung bringt man durch weiteren Methanolzusatz auf eine Methanolkonzentration von 60-85 Vol.-%, bevorzugt 75-80 Vol.-%, bezogen auf das gesamte Behandlungsmedium (2. Methanolfällung), und gewinnt so eine Chondroitinpolysulfat-Fällung, bei der die sehr niedermolekularen und niedersulfatierten Anteile zusammen mit Verunreinigungen entfernt sind; diese werden nicht ausgefällt.
Das Fraktionierungsverfahren mit Methanol kann teilweise oder ganz durch Ultrafiltration ersetzt werden. Zum Beispiel kann man durch Ultrafiltration von wäßrigen Lösungen depolymerisierten Chondroitinpolysulfats mit Membranen der Ausschlußgrenze von 6000 und darüber (z. B. aus Celluloseacetat, Polyamid oder PoIysulfon) dieselbe Vorfraktion wie oben beschrieben im Retentat zurückhalten. Hierbei kann die Konzentration der Chondroitinpolysulfatlösung 1-10%, bevorzugt 1-5%, betraget. Der pH-Wert der Lösung kann 2 - · 14, bevorzugt 5-10, betragen. Das Permeat kann wie oben erläutert durch Metlranolfällung von niedermolekularen Chondroitinpolysulfat-Anteilen befreit werden.
Dieser Effekt kann auch durch eine zweite nachgeschaltete Ultrafiltration mit Membranen der Ausschlußgrenze von 8000 und darunter erreicht werden. Hierbei kann die Konzentration der Chondroitinpolysulfatlösung 1 bis 10%, vorzugsweise 1 bis 5%, betragen. Der pH-Wert der Lösung kann 2 bis 14, vorzugsweise 5 bis 10, betragen.
Die von den Herstellern von Ultrafiltrationsmembranen angegebene Ausschlußgrenze für Substanzen eines bestimmten Molekulargewichtes ist für Chondroitinpolysulfate meistens nicht gültig. Die geeignete Membran muß deshalb im Einzelfall durch Versuch ermittelt werden, findet sich aber erfahrungsgemäß in den angegebenen Bereichen.
Die Entfernung von Salzen, gegebenenfalls Schwermetallionen und Verunreinigungen wird durch eine Kationenaustauscherbehandlung erreicht Die Metallionen werden von Austauscherharzen in der protonierten Form gebunden, die freie Mucopolysaccharidpolyschwefelsäure geht ins Filtrat hrw. Eluat Die Behandlung kann bei einer Temperatur von Q - 50° C, zweckmäßig bei Raumtemperatur erfolgen. Sie kann durch Einrühren des Kationenaustauschers im Batchverfahren oder in kontinuierlicher oder diskontinuierlicher Säulentechnik vorgenommen werden. Als Ionenaustauscherharze eignen sich stark saure Qualitäten wie z. B. Lewatit S 100, Dowex X 50, Amberlite IR 120 in der protonierten Form.
Man arbeitet in wäßriger Lösung im Batchverfahren mit Chondroitinpolysulfatkonzentrationen von 2 — 20%, besonders 5-15%. Die Menge des Ionenaustauscherharzes kann 2-10 Volumteile, besonders 3-8 Volumteile, bezogen auf 1 Gewichtsteil Trockensubstanz von Chondroitinpolysulfat, betragen. Unter denselben Bedingungen läßt sich auch mit in Kolonnen geschütteten Austauschern arbeiten.
Das stark sauer reagierende Filtrat bzw. Eluat aus dem Entsalzungsschritt fällt man in Gegenwart von 0,5-5% Neutralsalz, besonders 0,5-3% Natriumchlorid, mit 2,5 -6 Volumenteilen, bevorzugt 3-4 Volumenteilen, Methanol. Bei der Fällung aus saurem Milieu bleiben freie Schwefelsäure und niedermolekulare Anteile von Chondroitinpolysulfat und Verunreinigungen in Lösung. Nach Abtrennung der Chondroitinpolyschwefelsäure-Fällung kann man diese entweder aus neutraler Lösung umfallen oder direkt noch methanolfeucht für den folgenden Prozeßschritt weiterverwenden.
Die Entsalzung kann entfallen, wenn eine Ultrafiltration unter Verwendung einer Ultrafiltrationsmembran mit niedriger Ausschlußgrenze (2. Ultrafiltration) vorgenommen wurde, bei der das Retentat weiterverarbeitet wird.
Zur weiteren Aufhellung der Farbe und zum Erreichen einer besonders guten Farbstabilität beim Hitzesterilisieren dps reinen Chondroitinpolysulfates kann ein weiterer Reinigungsschritt nachgeschaltet werden.
Durch Behandlung von Chondroitinpolysulfatlösungen mit Aktivkohle und vollständiger Abtrennung des Adsorbates erhält man eine Chondroitinpolysulfatlösung, aus der das Produkt nach pH-Einstellung in Gegenwart eines Neutralsalzes mit Methanol ausgefällt wird. Die Konzentration der zu behandelnden wäßrigen Chondroitinpolysulfatlösung beträgt 5 - 25%, insbesonderr 10 - 20%. Ihr pH-Wert beträgt 4-10, insbesondere 5 - 8. Es werden 0,1 -3 Gewichtsteile Aktivkohle (bezogen auf ein Gewichtsteil Chondroitinpolysulfat) eingesetzt Die Temperatur kann 20- 1000C betragen. Die
Behandlungsdauer beträgt 10- 180 Minuten.
Die Aktivkohle trennt man ab. Anschließend empfiehlt sich eine Feinfiltration durch Membranfilter, um die Lösung völlig kohlefrei zu erhalten. Man stellt den pH-Wert auf 6-10, besonders 7-8 und fällt das End- 5 produkt in Gegenwart von Neutralsalz, z. B. Natriumchlorid in 0,5-5%, insbesondere I -2% Konzentration mit Methanol aus. Die Endkonzentration von Methanol wird auf 60-85 VoI.-%, bevorzugt 75-80 Vol.-% eingestellt. Geeignete Aktivkohlen sind zum Beispiel Brilo- 10 nit normal (Lurgi), Aktivkohle rein, Art. Nr. 2183 (Merck), Aktivkohle rein, Pulver, Art. Nr. 18003 (Riedel de Haen). Diese entfärben z. B. Methylenblaulösungen nach der Vorschrift des DAB 7 innerhalb 5 Minuten und weisen vorzugsweise mittlere Korngrößen (Naßsedi- 15 mentation nach Andreasen; W. Batel: Einführung in die Stickstoff:
Korngrößenmeßtechnik Springer-Verlag, 1971) von un- Schwefel:
ter 6 μπι auf; die Bestimmung der sauer oder alkalisch Hexuronsäure:
regierenden Verunreinigungen nach DAB 7 führt zu Hexosamin:
einem Verbrauch von meistens mehr als 0,1 ml 2η 0,1-n-Salzsäure. Ob mit Aktivkohle entfärbt wird, hängt von dem als Ausgangsmaterial verwendeten Chonroitinpolysulfatab.
Es kann zweckmäßig sein, die Abscheidung der gereinigten Chondroitinpolysulfate mit Methanol in Gegenwart eines Komplexmittels und/oder Natriumpyrosulfit vorzunehmen. Insbesondere bei dem Endprodukt ist diese Maßnahme angezeigt. Dadurch bleiben Injektionslösungen, die Chondroitinpolysulfat enthalten, beim Lagern frei von Trübungen und dunkeln nur un- j« merklich nach. Als Komplexmittel werden beispielsweise Nitrilotriessigsäure, Ethylendiamintetraessigsäure. 1,2-Cyclohexylendinitrilotetraessigsäure, Dicthylentriaminpentaessigsäure, 3,6-DioxaoctamethyIendinitrilotetraessigsäure in Konzentrationen von 0.01 -0.5% eingesetzt. Bevorzugt arbeitet man bei Konzentrationen von 0,05 — 0,35%. Die Konzentration des bei der Methanolfällung gegebenenfalls verwendeten Natriumpyrosulfits kann 0,01 -0,5% betragen.
Das beschriebene Chondroitinpolysulfat hat bei Mensch und Tier therapeutische Bedeutung. Die Substanz ist anticoagulämisch, thrombolytisch, thromboprophylaktisch (speziell auch auf die tiefen Venenthrombosen einwirkend), antitherosklerotisch, antilipämisch, antiinflammatorisch, antieexsudativ, antiarthrotisch und virustatisch wirksam.
Durch den besonderen Ablauf und die Art der Behandlungen des erfindungsgemäßen Verfahrens wird eine charakteristische neuartige Substanz gewonnen, die sich durch die überraschend geringe Toxicität auszeichnet.
Tabelle 1
Akute Toxicität
> 1000 mg/kg. Ein bevorzugtes erfindungsgemäß erhaltenes Produkt besitzt eine akute Toxicität entsprechend einer letalen Dosis bei intravenöser Verabreichung bei der NMRI Maus von >4000 mg/kg und bei der Wistar Ratte von >3500 mg/kg und bei der Katze von
> 1500 mg/kg, beim Hund von > 1000 mg/kg.
In der Literatur wurden bis jetzt Chondroitinpolysulfate mit einer LDm (Maus, i. v.) von nur 1000 mg/kg beschrieben. Das erfindungsgemäße Verfahren erlaubt somit die Herstellung von Chondroitinpolysulfat mit einer wesentlich größeren therapeutischen Breite.
Insbesondere weist das nach dem erfindungsgemäßen Verfahren hergestellte Chondroitinpolysulfat folgende Parameter auf:
1,65-2.00%
12.5-14,5%
0,98-1,22 mMol/g
0,96- 1.24 mMol/g
Tierart
Applikation LD5o/7d
NMRI Mäuse i.v. > 3500 mg/kg
Wistar Ratten i. v. > 3000 mg/kg
Katze i.v. > 1000 mg/kg
Hund i.v. > 1000 mg/kg
Das erfindungsgemäß erhältliche Chondroitinpolysulfat besitzt somit eine akute Toxicität entsprechend einer letalen Dosis bei intravenöser Verabreichung bei der NMRI Maus von > 3500 mg/kg und bei der Wistar Ratte von >3000 mg/kg, bei Katze und Hund von
55
60
65 Schließlich betrifft die Erfindung eine piiarmazeuti· sehe Zusammensetzung, die gekennzeichnet ist durch den Gehalt an einem nach dem erfindungsgemäßen Verfahren herstellbaren Chondroitinpolysulfat.
Versuche haben gezeigt, daß beim Menschen Einzeldosierungen zwischen 20 und 250 mg, besonders zwischen 30 und 150 mg pro Individuum in 0,2-2.0 ml, besonders 0.2 - 1,0 ml therapeutische Wirkung haben und gut vertragen werden. Tägliche Gaben von bis zu 500 mg erweisen sich als therapeutisch vorteilhaft. Die Injektion kann i. m., intraartikulär, s. c. oder i. v. durchgeführt werden, ohne den Arzt speziell nur auf diese Injektionsarten festzulegen. Die Abpackung von therapeutisch anwendbaren Lösungen des Wirkstoffes kann z. B. in Ampullen, Fertigspritzen, Durchstichflaschen, Phiolen für Spritzpistolen und anderen für die Injektion zweckmäßigen Primärpackmitteln erfolgen. Weitere Applikationsarten sind die perorale, percutane, rectale. sublinguale oder buccale Verabreichung. Die bevorzugte Dosierung entspricht derjenigen bei der Verabreichung durch Injektion.
Das erfindungsgemäß gewonnene Chondroitinpolysulfat eignet sich auch zur Anwendung in ucr Tiermedizin, bei der die beschriebenen Wirkungen angezeigt sind. Beim Hund beträgt die Dosierung zwischen 0,1 und 5 mg/kg Körpergewicht und Tag, bevorzugt 03 bis 1.5 mg/kg, in 0,1—10 ml Volumen, insbesondere in 0,5—1,0 ml. Beim Pferd beispielsweise bewähren sich tägliche Einzelgaben von 100-1000 mg, bevorzugt 150-500 mg in 0,1-20ml, besonders 1-5 ml. Das Chondroitinpolysulfat kann auf dieselbe Weise wie bf"m Menschen appliziert werden.
Zur Bestimmung des mittleren Molekulargewichts wurde die folgende Methode angewandt:
Man Chromatographien 20 mg Probe in 2 M Kochsalzlösung an einer Biogel P 10 Säule (50 g; H = 100 cm, 0 2 cm). In den gesammelten 10 ml Fraktionen detektiert man das Chondroitinpolysulfat durch Hexuronsäurebestimmung nach Z. Dische: J. Biol. Chem. 167, 189 (1947), modifiziert von J. D. Gregory: Arch. Biochem. Biophys. 89,157 (I960). Man eicht mit Chondroitinpolysulfat-Fraktionen, deren Molekulargewicht durch Ultrazentrifugation bestimmt wurde. Das mittlere Molekulargewicht berechnet man aus dem Auslaufvolumen, bei dem 50% der insgesamt im Chromatogramm gefundenen Hexuronsäure eiuiert sind.
Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung.
Beispiel la (StufeA)
7,5 kg rohes Chondroitinpolysulfat (erhältlich nach DE-PS 8 70 094) löst man in 75 Liter heißem Wasser, versetzt mit 2,25 kg Natriumchlorid und 2 ml Octanol-1. Man gibt nun eine Lösung von 75 g Ethylendinitrilotetraessigsäure in 750 ml 1 N Natronlauge zu. Man erhitzt die Mischung auf 95°C und rührt dann 7,5 Liter 30%ige Watserstoffperoxid-Lösung ein. Man hält die Temperatur 100 Minuten zwischen 90 und 950C und kühlt dann schnell auf Raumtemperatur ab.
Man löst in der Reaktionsmischung 1,5 kg Natriumchlorid, rührt 360 Liter Methanol ein, dekantiert nach 30 Minuten den klaren Überstand ab und saugt den Niederschlag auf einer Nutsche ab. Man wäscht mit Methanol und trocknet bei einer Temperatur unter 60°C. Man erhält etwa 7 kg depolymerisiertes Chondroitinpolysul f.it.
Beispiel Ib (Stufe A)
7,5 kg rohes Chondroitinpolysulfat löst man in 22,5 Liter Wasser, versetzt zuerst mit 1,5 kg Natriumchlorid, dann mit einer Lösung von 37,5 g Kupfer-ll-sulfat-pentahydrat in 750 ml Wassvr. Man setzt unter Kühlung 3 Liter 30%iges Wasserstoffperoxid zu und hält 5 Stunden bei 25° C. Danach stellt man mit 30°/oiger Natronlauge auf pH 10,5 ein, fällt unter Rühren mit 132 Liter Methanol, dekantiert den Überstand und nutscht den Niederschlag ab. Man wäscht mit Methanol und trocknet bei einer Temperatur unter 60°C. Man erhält etwa 6,8 kg depolymerisiertes Chondroitinpolysulfat.
Beispiel Ic (Stufe A)
9 kg rohes Chondroitinpolysulfat löst man in 45 Liter Wasser, versetzt mit einer Lösung von 8,57 g Kobald-II-chloridhexahydrat in 1 Liter Wasser und ergänzt mit Wasser auf 67 Liter. Unter ständigem Rühren bei Raumtemperatur f igt man innerhalb 2 Stunden 135 Liter 40%ige Per.ssigsäure zu. Anschließend gibt man eine Lösung von 27 g Ethylendinitrilotetraessigsäuredinatriumsalzdihydrat in 1 Liter Wasser zu. Man stellt nun mit 30%ider Natronlauge auf pH 11, setzt 2,2 kg Natriumchlorid zu und fällt unter Rühren mit 290 Liter Methanol. Nach einer Stunde dekantiert man, saugt den Niederschlag auf einer Nutsche ab, wäscht mit Methanol und trocknet bei einer Temperatur unter 60°C. Man erhält etwa 8,4 kg depolymerisiertes Chondroitinpolysulfat.
Beispiel 2 (Stufe B)
8,0 kg depolymerisiertes Chondroitinpolysulfat löst man in 74 Liter Wasser, vermischt mit 2 Liter 40% Peressigsäure, stellt den pH-Wert mit 30% Natronlauge auf 8 und läßt 24 Stunden bei Raumtemperatur stehen. Man löst in der Mischung 0,4 kg Natriumchlorid und fällt mit 320 Liter Methanol. Der Niederschlag wird abgenutscht, mit Methanol gewaschen und getrocknet Man erhält ca. 7,9 kg weißes Material.
Bieispiel 3a (StufeC)
6,3 kg depolymerisiertes Chondroitinpolysulfat löst man in 27,1 Liter heißem Wasser, setzt 3.15 Liter 40%ige Peressigsäure zu, vermischt und läßt 4 Stunden
• stehen. Danach gibt man 45,4 Liter Wasser zu, löst 2,1 kg Natriumchlorid und stellt den pH-Wert mit "Woiger Natronlauge auf 10,5. Dann rührt man je Liter Lösung 0,5748 Liter Methanol ein, um in der Mischung eine Methanolkonzentration von 36,5 Vol.-% zu erhalten, das sind z. B. 48,6 Liter Methanol. Man läßt die Fällung über Nacht stehen, dann dekantiert man und zentrifugiert den halbflüssigen Niederschlag ab. Den klaren Überstand, z. B. 128,5 Liter, verrührt man mit 2,175 Liter Methanol pro Liter Lösung, so daß eine Methanolendkonzentration von 80 Vol.-% erreicht wird, das sind z. B. 279,5 Liter Methanol. Die Fällung läßt man 1 Stunde absetzen, dekantiert und nutscht die Restsuspension ab. Den Niederschlag wäscht man mit Methanol und trocknet bei einer Temperatur unter 600C. Man erhält etwa 5,6 kg Zwischenprodukt.
Beispiel 3 b (Stufe C)
2 kg depolymerisiertes Chondroitinpolysulfat löst
2n man in AK) Liter wasser, nitriert durch ein Steriiiiiter und ultrafiltriert mit einem Druck von 2,8 bar bei 32° C unter Verwendung eines Platten-Ultrafiltrationsgerätes (Membranfläche 2,25 m2, angegebene Auschlußgrenze der Celluloseacetat-Membran bei Molekulargewicht 15000). Die Lösung pumpt man mit einer Durchflußrate von 6,5 mVStunde um. Wenn ein Volumen von ca. 20 Liter Retentat erhalten ist, ultrafiltriert man dieses 3mal nach Vermischen mit je 50 Liter Wasser.
Die gesammelten Permeate unterwirft man unter Verwendung einer Celluloseacetat-Membran mit der angegebenen Molekulargewichts-Ausschlußgrenze 6000, jedoch sonst gleichen Bedingungen wie oben der Ultrafiltration. Das Retentat engt man bis auf eine Konzentration von 10% ein, setzt Natriumchlorid bis zu einer Konzentration von 0,5% zu, stellt den pH-Wert auf 7,1J und fällt unter Rühren mit 4 Volumteilen Methanol. Nach Waschen des abgesaugten Niederschlags trocknet man. Das erhaltene Zwischenprodukt wiegt 1,78 kg.
Beispiel 4 a (Stufe D)
5,4 kg Zwischenprodukt aus Arbeitsschritt 3 löst man in 54 Liter Wasser und rührt 21,6 Liter stark sauren Kationenaustauscher (z. B. Lewatit S 100) in der protonierten Form ein und rührt 1 Stunde bei Raumtemperatur. Man nutscht ab, wäscht 2mal mit je 8,1 Liter Wasser nach und vereinigt die Filtrate. Das Filtrat versetzt man mit 2,19 kg Natriumchlorid und fällt unter Rühren mit 292 Liter Methanol. Den Fällungsansatz läßt man über nacht stehen, dann dekantiert man, nutscht die verbleibende Suspension ab und wäscht mit Methanol gut aus. Den Niederschlag löst man in 43,2 Liter Wasser, stellt den pH-Wert mit 30%iger Natronlauge auf 7,5, gibt 700 g Natriumchlorid zu und fällt unter Rühren mit 139,2
Liter Methanol. Den klaren Überstand heben man ab, die Restsuspension saugt man durch eine Nutsche und wäscht mit Methanol. Nach dem Trocknen erhält man 3,6 kg entsalztes Chondroitinpolysulfat
Beispiel 4 b (Stufe D)
9 kg des nach Arbeitsschritt 3 anfallenden Zwischenproduktes oder auch den noch methanolfeuchten Niederschlag aus diesem Arbeitsschritt löst man in soviel Wasser, daß man 90 Liter Lösung erhält Diese Lösung läßt man durch eine Ionenaustauschersäule laufen, die mit 36 Liter Kationenaustauscher Amberlite IR 120 in der H+-Form gefüllt ist Das Verhältnis Höhe der Sau-
lenfiillung zu Durchmesser liegt ζ. B. bei ca. 2,5. Wenn die Substanzlösung durchgelaufen ist, spült man mit 33,3 Liter Wasser nach. Die vereinigten substanzhaltigen Filtrate versetzt man mit 3,7 kg Natriumchlorid und bringt durch Zusatz von 492 Liter Methanol zur Ausfällung. Man saugt ab, wäscht mit Methanol und löst den noch lösungsmittelfeuchte)! Niederschlag mit pyrogenfreiem Wasser auf ein Gesamtvolumen von 72 Liter. Man gibt 1,15 kg Natriumchlorid zu, stellt den pH-Wert mit 30% Natronlauge auf 7,5 und fällt mit 219 Liter Methanol aus. Man nutscht ab, wäscht mit Methanol und trocknet. Es werden etwa 6 kg entsalztes Chondroitinpolysulfat gewonnen.
Beispiel 5 (Stufe E und l·')
20 kg entsalztes Chondroitinpolysulfat löst man in 190 Liter pyrogenfreiem Wasser. Die Lösung erhitzt man auf 90°C und gibt 40 kg Aktivkohle zu (Riedel de Haen Nr. 18003). Man hält die Temperatur 60 Minuten auf 90"C, fiiit iei i dann iiueii iieiu inii einem Dr uckiiiiei. Den Kohlerückstand wäscht man 2mal mit je 40 liter pyrogenfreiem Wasser und vereinigt die Filtrate. Man versetzt mit 3 kg Natriumchlorid und 660 g Ethylendinitrilotetraessigsäuredinatriumsalzdihydrat. Der pH-Wert wird auf 7,5 eingestellt. Dann filtriert man durch ein vorgewaschenes Membranfilter (Porenweite 0,2 μίτι).
Die ganz klare Lösung fällt man unter Rühren mit 720 Liter Methanol. Der Niederschlag wird mit der Nutsche abgesaugt, mit Methanol gewaschen und bei einer Temperatur unter 50°C getrocknet. Man erhält etwa 18 kg weißes, feinkörniges, reines, injizierbares Chondroitinpolysulfat. Die chemisch-analytische Untersuchung ergibt folgende Stoffwerle:
N
S
1,77 ro
12,96%
Hcxuronsäure:
Hexosamin:
1.08 mMol/g
1,12 mMol/g
B e is pi e I 6
(Herstellung einer Injektionslösung)
3,25 kg auf wasserfreie Substanz berechnetes reines Chondroitinpolysulfat und 0,325 kg Natriumchlorid löst
AJ man uiiici Ruinen in eiwa 50 Liier aqua pro imeciubiiia und ergänzt auf 65 Liter. Nach Einstellen des pH-Wertes auf 8,4 mit N Natronlauge und Sterilfiltration durch Membranfilter ampulliert man unter sterilen Kautelen in bekannter Weise. Die verschlossenen Ampullen werden 60 Minuten einer Hitzebe'.iandking im siedenden Wasserbad ausgesetzt.

Claims (1)

  1. Patentansprüche;
    I. Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren hochreinen Chondroitinpolysulfates, dadurch gekennzeichnet, daß man
    A) rohes Chondroitinpolysulfat oxidativ depolymerisiert,
    B) gegebenenfalls das depolymerisierte Chondroitinpolysulfat mit Peressigsäure bleicht,
    C) das nach A) oder B) erhaltene Produkt durch ein oder zwei Methanolfällungen zur Gewinnung einer Fraktion mit einem mittleren Molekulargewicht von etwa 5000 bis 15000 fraktioniert, wobei man die erste Fraktionierung bei einer Konzentration zwischen 25 und 45 VoL-% Methanoi und die zweite Fraktionierung bei einer Konzentration zwischen 60 und 85 VoL-% Methanol durchführt,
    D) gegebenenfalls das nach C) erhaltene Produkt mit Kationenaustauschern entsalzt,
    E) gegebenenfalls das nach C) oder D) erhaltene Produkt mit Aktivkohle entfärbt und
    F) das hochreine Produkt in Substanz gewinnt. 2s
    Z Verfahren nach Anspruch t, dadurch gekennzeichnet, daß man die oxidative Depolymerisierung A) durch Wasserstoffperoxid in Abwesenheit von Schwermetallen durchführt
    3. Verfahren nach Anspruch 2, dadurch gekennzeichnet, daß man in Gegenwart eines Komplexmittels arbeitet
    4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet daß man als Komplexmittel Ethylendinitri- lotetraessigsäure einsetzt
    5. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet daß man die oxidative Depolymerisierung A) mit Waserstoffperoxid in Anwesenheit von Eisen-, Kobalt-, Mangan- und/oder Vanadiumsalzen durchführt
    6. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichent daß man die oxidative Depolymerisierung A) mit Peressigsäure in Gegenwart von Eisen-, Kobalt- und/oder Mangansalzen durchführt
    7. Verfahren nach den Ansprüchen 5 und 6, dadurch gekennzeichnet, daß man die Konzentration der Schwermetallsalze im Reaktionsmedium zwischen 0,001 und 03% (Gew./ Vol.) hält
    8. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekenn- so zeichnet daß man die Peressigsäurebehandlung B) in das Molekülfraktionierungsverfahren Q einbezieht.
    9. Abänderung des Verfahrens nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß man bei der Stufe C) anstelle der ersten Methanolfraktionierung eine Ulinfiltration mit einer Membran der Ausschlußgrenze von mindestens 6000 vornimmt und/oder anstelle der zweiten Methanolfraktionierung eine Ultrafiltration mit einer Membran der Ausschlußgrenze von höchstens 8000 vornimmt
    10. Verfahren nach den Ansprüchen 1 oder 9, dadurch gekennzeichnet daß man das reine Chondroitinpolysulfat durch Methanol in Gegenwart von 0,01 -0^% eines Komplexmittels abscheidet
    I1. Verfahren nach Anspruch 10, dadurch gekennzeichnet, daß man als Komplexmittel Ethylendinitri· lotetraessigsäure einsetzt.
    12. Verfahren nach den Ansprüchen 1,9,10 und 11, dadurch gekennzeichnet, daß man das reine Chondroitinpolysulfat durch Methanol in Gegenwart von 0,01 -0,5% Natriumpyrosulfit abscheidet,
    13. Chondroitinpolysulfat, herstellbar nach den Ansprüchen 1 bis 12, mit folgenden Parametern
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US06/373,226 US4524066A (en) 1981-05-11 1982-04-29 Process for the preparation of injectable chondroitin polysulfate
BE0/208024A BE893097A (fr) 1981-05-11 1982-05-06 Procede de preparation d'un polysulfate de chondroitine injectable, produit obtenu par ce procede et compositions pharmaceutiques le contenant
NLAANVRAGE8201873,A NL186638C (nl) 1981-05-11 1982-05-07 Werkwijze voor het bereiden van een injecteerbaar chondroitine-polysulfaat, produkt verkrijgbaar met deze werkwijze alsmede een farmaceutisch preparaat.
CA000402613A CA1207758A (en) 1981-05-11 1982-05-10 Process for the preparation of an injectable chondroitin polysulfate, a product which can be obtained by this process and a pharmaceutical composition
JP57076774A JPS57192401A (en) 1981-05-11 1982-05-10 Injectable chondroitin polysulfate
FI821651A FI70416C (fi) 1981-05-11 1982-05-11 Foerfarande foer framstaellning av en injektabel chondroitin polysulfat
IT21189/82A IT1157939B (it) 1981-05-11 1982-05-11 Processo per la preparazione di un polisolfato di condroitina iniettabile, un prodotto che puo' essere ottenuto con questo processo e una composizione farmaceutica
IE1127/82A IE53633B1 (en) 1981-05-11 1982-05-11 Process for the preparation of an injectable chondroitin polysulfate a product which can be obtained by this process and a pharmaceutical composition
LU84143A LU84143A1 (fr) 1981-05-11 1982-05-11 Procede de preparation d'un polysulfate de chondroitine injectable,produit obtenu par ce procede et compositions pharmaceutiques le contenant
GB8213536A GB2098232B (en) 1981-05-11 1982-05-11 Injectable chondroitin polysulfate
NO821551A NO157147C (no) 1981-05-11 1982-05-11 Fremgangsmaate for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat.
AU83573/82A AU552545B2 (en) 1981-05-11 1982-05-11 Injectable chondroitin polysulphate
SE8202947A SE458118B (sv) 1981-05-11 1982-05-11 Foerfarande foer framstaellning av ett injicerbart kondroitinpolysulfat, en produkt som kan erhaallas genom detta foerfarande och en farmaceutisk komposition
IL65743A IL65743A (en) 1981-05-11 1982-05-11 Injectable chondroitin polysulfate,its preparation and pharmaceutical compositions containing it
CH2919/82A CH650788A5 (de) 1981-05-11 1982-05-11 Verfahren zur herstellung eines injizierbaren chondroitinpolysulfates, hiernach erhaeltliches produkt und dessen verwendung zur herstellung von pharmazeutischen zubereitungen.
FR8208182A FR2505185B1 (fr) 1981-05-11 1982-05-11 Procede de preparation d'un polysulfate de chondroitine injectable, produit obtenu par ce procede et compositions pharmaceutiques le contenant
AT0184282A AT387225B (de) 1981-05-11 1982-05-11 Verfahren zur herstellung eines injizierbaren chondroitinpolysulfates
DK211882A DK160317C (da) 1981-05-11 1982-05-11 Fremgangsmaade til fremstilling af et injicerbart chondroitinpolysulfat

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Families Citing this family (19)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3244214A1 (de) * 1982-11-30 1984-05-30 B. Braun Melsungen Ag, 3508 Melsungen Verfahren zur reinigung und fraktionierung von heparin
US4623539A (en) * 1983-02-04 1986-11-18 Tunc Deger C Nutrient barrier polysaccharide compositions and method of use
FR2572731B1 (fr) * 1984-11-07 1987-03-06 Sanofi Sa Nouveaux sulfates de xylanes de bas poids moleculaires, leur procede de preparation et leur activite antithrombotique et hypolipemiante par voie orale
IT1214609B (it) * 1985-05-17 1990-01-18 Opocrin Spa Esosaminoglicani solfati depolimerizzati ad attivita'antitrombotica, fibrinolitica, antinfiammatoria, loro procedimento di preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono.
US5668116A (en) * 1987-03-19 1997-09-16 Anthropharm Pty. Limited Anti-inflammatory compounds and compositions
ATE129254T1 (de) * 1987-03-19 1995-11-15 Arthropharm Pty Ltd Antientzündungsmittel und zusammensetzungen.
DK0408770T3 (da) * 1989-02-06 1996-10-07 Taiho Pharmaceutical Co Ltd Sulfateret polysaccharid, farmaceutisk acceptable salte heraf, fremstilling heraf og lægemiddel indeholdende samme som aktiv bestanddel
US5519010A (en) * 1989-02-06 1996-05-21 Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. Sulfated polysaccharide, pharmaceutically acceptable salt thereof, process for preparing same and medicament containing same as effective component
US5141928B1 (en) * 1989-12-20 1995-11-14 Brujo Inc Ophthalmic medication
JPH05279381A (ja) * 1991-09-13 1993-10-26 Dainippon Ink & Chem Inc 硫酸化オリゴ糖芳香族配糖体
IT1256236B (it) * 1992-12-23 1995-11-29 Mediolanum Farmaceutici Srl Oligosaccaridi aventi attivita' biologica e procedimento per la loro preparazione di glicosaminoglicani
US5880108A (en) * 1995-02-14 1999-03-09 Bioniche, Inc. Method for treating the internal urinary bladder and associated structures using hyaluronic acid
IN181358B (de) * 1995-02-14 1998-05-30 Bioniche Inc
US5591724A (en) * 1995-02-14 1997-01-07 Bioniche Inc. Method for treating the urinary bladder and associated structures using hyaluronic acid
WO2000056298A2 (en) * 1999-03-19 2000-09-28 Luitpold Pharmaceuticals, Inc. Treatment of lyme disease with polysulfated glycosaminoglycan formulations
ATE427953T1 (de) * 2003-02-27 2009-04-15 Glaxo Group Ltd Fondaparinux- natrium zusammenstellung von hoher reinheit
JP4679138B2 (ja) * 2004-12-24 2011-04-27 株式会社日本バリアフリー 高純度化されたムコ多糖類の製造方法
FR2969618B1 (fr) * 2010-12-28 2014-05-16 Pf Medicament Procede de preparation de chondroitine sulfate de sodium
RU2677330C2 (ru) * 2015-11-20 2019-01-16 Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" Способ приготовления инъекционной формы препарата хондроитина сульфата

Family Cites Families (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE136572C (de) * 1902-12-05
DE870094C (de) * 1950-10-17 1953-03-09 Geigy Ag J R Verfahren zur Herstellung von Polyschwefelsaeureestern des Chondroitins
DE935843C (de) * 1951-07-12 1955-12-01 Hoffmann La Roche Verfahren zur Herstellung eines blutgerinnungshemmenden Mittels
US2767167A (en) * 1953-07-06 1956-10-16 Gen Mills Inc Process of reducing the viscosity of gums
DE968752C (de) * 1954-01-29 1958-03-27 Hoffmann La Roche Verfahren zur Herstellung von Chondroitinpolyschwefelsaeureestern
US2803558A (en) * 1956-06-27 1957-08-20 Commw Color & Chemical Co Method of treating adhesive gums
US2959583A (en) * 1959-01-23 1960-11-08 Warner Lambert Pharmaceutical Method of purifying sulfated polysaccharides
US3175942A (en) * 1962-03-13 1965-03-30 Evans Medical Ltd Gastro-intestinal therapeutic
US3174904A (en) * 1963-03-25 1965-03-23 Rexall Drug Chemical Method of purifying sulfated carbohydrates
US3405120A (en) * 1966-01-27 1968-10-08 Green Cross Corp Low molecular chondroitin sulfate and method for manufacturing the same
US3454560A (en) * 1966-03-01 1969-07-08 Seikagaku Kogyo Co Ltd Process for the production of chondroitin polysulfate
BE857389A (fr) * 1977-08-02 1977-12-01 Marbex Finance Ltd Procede de preparation de chondroitines-sulfates de metaux alcalins et alcalino-terreux d'un poids moleculaire de 3000 a 6000

Also Published As

Publication number Publication date
FR2505185B1 (fr) 1986-02-28
IT1157939B (it) 1987-02-18
GB2098232B (en) 1985-02-13
CA1207758A (en) 1986-07-15
ATA184282A (de) 1988-05-15
NL186638B (nl) 1990-08-16
FI70416B (fi) 1986-03-27
DK160317B (da) 1991-02-25
NO157147B (no) 1987-10-19
IT8221189A0 (it) 1982-05-11
LU84143A1 (fr) 1982-09-13
JPS57192401A (en) 1982-11-26
DK160317C (da) 1991-08-05
NL8201873A (nl) 1982-12-01
AT387225B (de) 1988-12-27
AU552545B2 (en) 1986-06-05
AU8357382A (en) 1982-11-18
GB2098232A (en) 1982-11-17
DK211882A (da) 1982-11-12
US4524066A (en) 1985-06-18
IL65743A0 (en) 1982-08-31
IE821127L (en) 1982-11-11
IE53633B1 (en) 1989-01-04
NO157147C (no) 1988-01-27
JPH0261482B2 (de) 1990-12-20
FI70416C (fi) 1986-09-19
BE893097A (fr) 1982-08-30
SE8202947L (sv) 1982-11-12
FR2505185A1 (fr) 1982-11-12
SE8202947D0 (sv) 1982-05-11
IL65743A (en) 1985-09-29
FI821651A0 (fi) 1982-05-11
DE3118588A1 (de) 1982-12-02
CH650788A5 (de) 1985-08-15
SE458118B (sv) 1989-02-27
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