DE945407C - Verfahren zur Gewinnung und Reindarstellung von Bacitracin - Google Patents
Verfahren zur Gewinnung und Reindarstellung von BacitracinInfo
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Description
AUSGEGEBEN AM 5. JULI 1956
P 14140 IVa/ 30 h
Die Erfindung bezieht sich auf ein Verfahren zur Gewinnung und Reinigung des Antibiotikums Bacitracin,
das aus einer Kombination von Verfahrensstufen besteht und'ein Bacitracin besonders hoher
Qualität und Beständigkeit liefert.
Zur Gewinnung des wertvollen Antibiotikums Bacitracin sind bereits viele Verfahren angewendet worden,
wie z. B. die Fällung mit Gerbsäure oder Pikrinsäure oder die Lösungsmittelextraktion mit polaren organischen
Lösungsmitteln und andere Verfahren.
Es wurde nun gefunden, daß durch die Kombination von zwei Verfahrensstufen in bestimmter Reihenfolge
die Isolierung eines Bacitracin von besonders hoher Reinheit und Beständigkeit erreicht wird. Ein Vergleich
des nach diesem neuen Verfahren erhaltenen Produkts mit den nach anderen Verfahren hergestellten
Stoffen und mit den im Handel erhältlichen Bacitracinproben hat seine Überlegenheit ergeben.
Darüber hinaus hat sich gezeigt, daß das nach dem vorliegenden, verhältnismäßig einfachen Verfahren
hergestellte Produkt oft wesentlich reiner ist als die Stoffe) die durch langwierige Laboratoriumsverfahren
zur Isolierung des Antibiotikums in höchster Reinheit zwecks Untersuchung der chemischen Struktur und
der Eigenschaften hergestellt wurden.
Das Verfahren nach der Erfindung besteht darin, d.aß man das Bacitracin mit einem löslichen Molybdatsalz
aus der unreinen wäßrigen Lösung ausfällt, das Bacitracin anschließend aus der Fällung bei einem
leicht sauren bis leicht basischen pH-Wert von minde-
stens etwa 5 extrahiert und das Bacitracin dann mit einem teilweise mit Wasser mischbaren polaren organischen
Lösungsmittel, vorzugsweise Butanol, extrahiert. Das gereinigte Bacitracin kann dann aus dem
Lösungsmittelextrakt, beispielsweise durch Extraktion mit Wasser, gewonnen werden. Die wäßrige
Lösung kann, vorzugsweise aus dem gefrorenen Zustand, getrocknet werden, oder sie kann auch für
viele Zwecke als reiner wäßriger Extrakt verwendet werden.
Wenn das erfindungsgemäße Verfahren nach der folgenden Beschreibung durchgeführt wird, erhält
man ein Produkt mit einer nach einem Standard-Bacitracinprüfungsverfahren festgestellten Wirksamkeit
von 65 bis 80 Einheiten pro mg. Durch sorgfältiges Arbeiten erhält man ein Material, das im allgemeinen
eine Wirksamkeit von über 70 Einheiten pro mg besitzt. Die höchste Bacitracinwirksamkeit,
von der bisher in der wissenschaftlichen Literatur berichtet wurde und die unter Verwendung eines Verfahrens
mit Ausfällung und wiederholter Lösungsmittelextraktion erreicht wurde, betrug 66 Einheiten
pro mg (Craig u. a., Journal of Biological Chemistry, Bd. 199, S. 259 bis 266 [1952]). Im Handel erhältliche
Bacitracinproben wurden auf ihre Beständigkeit bei erhöhten Temperaturen in trockenem Zustand untersucht.
Vergleiche der Beständigkeit haben gezeigt, daß das nach dem erfindungsgemäßen Verfahren erhaltene
Produkt weit überlegen ist. Bei der Durchführung des Verfahrens wird die unreine wäßrige Lösung, z. B. eine Bacitracingärflüssigkeit,
filtriert, um verschiedene Feststoffe zu entfernen. Im Falle der Gärflüssigkeit wird dies vorzugsweise
bei einem sauren pH-Wert und unter Zugabe einer Filtrierhilfe durchgeführt, um ein klares Filtrat
zu erhalten. Gärflüssigkeiten, die mindestens etwa 20 Einheiten Bacitracin je ecm enthalten, sind sehr
geeignet, und die Sauerstellung auf einen pH-Wert von etwa 1,5 bis etwa 3 hat sich als zufriedenstellend erwiesen.
Schwefelsäure wird gegenüber anderen Säuren bevorzugt, es kann aber jede Mineralsäure verwendet
werden.
Die Ausfällung des Bacitracins aus einer unreinen wäßrigen Lösung wird bei einem sauren pH-Wert, vorzugsweise
zwischen etwa 1,5 und etwa 4 durchgeführt. Wie gefunden wurde, ist es am zweckmäßigsten, den
pH-Wert der filtrierten Bacitracinlösung von dem stärker sauren Wert auf einen pH-Wert von mindestens
5 einzustellen, bevor das wasserlösliche Molybdat zugesetzt wird. Alkalien, wie z. B. Ammoniumhydroxyd,
Natriumhydroxyd, Natriumcarbonati Kaliumhydroxyd usw., sind hierzu geeignet. Der pH-Wert
wird dann langsam erneut auf etwa 1,5 bis 4 eingestellt. Für diese Einstellung ist Schwefelsäure gut geeignet.
.55 Gleichfalls verwendbar sind Salzsäure, Bromwasserstoffsäure und Phosphorsäure. Die Einhaltung dieser
Reihenfolge der Arbeitsgänge begünstigt die Bildung einer grobkörnigeren Form des gefällten Bacitracinmolybdats,
die sich leichter abfiltrieren läßt. Es ist jedoch nicht erforderlich, daß die Zugabe des Molybdats
bei einem höheren pH-Wert erfolgt und sich eine Sauerstellung anschließt. Von den wasserlöslichen
Molybdaten hat sich Ammoniummolybdat für die Verwendung in dem erfindungsgemäßen Verfahren als
sehr gut geeignet erwiesen. Andere Salze, wie z. B. die Kalium-, Lithium- und Natriumsalze, sind jedoch
gleichfalls geeignet. Wenn der feste Stoff in Gegenwärt
einer Filtrierhilfe abfiltriert wird, so wird dadurch ein schnelles und vollständiges Arbeiten erreicht.
Der ausgefällte Komplex des Bacitracinmolybdats wird in Wasser bei einem pH-Wert von mindestens
5 behandelt, um eine klare Lösung des Bacitracins zu erhalten und das Molybdän auszufällen. Diese Verfahrensstufe
kann mit Alkalimetallhydroxyden, Erdalkalimetallhydroxyden und wasserlöslichen organisehen
Basen durchgeführt werden. Ammoniumhydroxyd ist jedoch für diesen Zweck besonders geeignet.
Zu den geeigneten Verbindungen gehören Natrium-, Kalium- und Lithiumhydroxyde, -carbonate und
-bicarbonate, Bariumhydroxyd, Calciumhydroxyd, Trimethylamin, Triäthylamin, Triäthanolamin usw.
Nachdem das Bacitracin sich gelöst hat und die unlösliche Molybdänverbindung ausgefallen ist, wird
diese unter Verwendung einer geeigneten Menge einer Filtrierhilfe abfiltriert und so ein klares Filtrat erhalten.
Das Filtrat kann in einer Konzentration von bis zu 400 Einheiten je ecm erhalten werden, wenn ein
geeignetes Volumen Flüssigkeit verwendet wird. Der feste Stoff kann gewaschen oder erneut mit Wasser
aufgeschlämmt werden, um das Bacitracin im wesent- go liehen vollständig aus ihm zu entfernen.
Das aus dieser Verfahrensstufe erhaltene wäßrige Filtrat kann mittels eines polaren organischen Lösungsmittels,
das mit Wasser teilweise mischbar ist, vorzugsweise Butanol (Pentanole, Hexanole, Benzylalkohol
und Phenole sind gleichfalls geeignet), bei einem pH-Wert zwischen etwa 6 und 8,5 extrahiert
werden. Dieser pH-Wert wird Vorzugsweise mit einem Alkalimetallhydroxyd, wie z. B. Natrium- oder Kaliumhydroxyd,
eingestellt. Der Lösungsmittelextrakt ioo kann dann mit Wasser in Gegenwart, einer Säure, beispielsweise
Salzsäure, Bromwasserstoffsäure, Schwefelsäure und Phosphorsäuren, erneut extrahiert werden.
Durch Einstellung des pH-Wertes dieser Lösung (auf
etwa5bisy), die am zweckmäßigsten durch Einwirkung eines basischen Ionenaustauscherharzes auf die Lösung
bewirkt wird, entsteht eine hochgradig gereinigte wäßrige Lösung des Bacitracins, die aus dem gefrorenen
Zustand getrocknet werden kann und ein trockenes Produkt besonders hoher Wirksamkeit und" Be- ιισ
ständigkeit ergibt.
Es wurde gefunden, daß sowohl die Menge des verwendeten Molybdate als auch der pH-Wert der Fällung
bei der Durchführung des erfindungsgemäßen Verfahrens innerhalb gewisser Grenzen verändert werden
kann. Bei bestimmten pH-Werten und Molybdat-.mengen
werden jedoch maximale Ausbeuten erhalten. In der folgenden Tabelle sind die Ergebnisse aufgeführt,
die durch die Fällung einer filtrierten Bacitracinbrühe unter Standardbedingungen mit einer feststehenden
Menge Ammoniummolybdat bei unterschiedlichen pH-Werten erhalten wurden. In diesem
Fall wurden ioo ecm filtrierte Bacitracinbrühe. mit
1,04 g Ammoniummolybdat nach dem vorstehend beschriebenen Verfahren behandelt. Die anfängliche
Wirksamkeit der Brühe betrug 130 Einheiten je ecm.
In der ersten Spalte der Tabelle ist der pH-Wert angegeben,
bei dem die verschiedenen Versuche durchgeführt wurden. In der zweiten Spalte ist die Anzahl
der Bacitracineinheiten angegeben, die in der Gärflüssigkeit ungefällt zurückblieben, und in der dritten
Spalte ist der Prozentsatz des nach diesem Verfahren ausgefällten Antibiotikums angegeben.
PH-Wert
3.8
3.5
2,15
1,8
3.5
2,15
1,8
Verbrauchte
Einheiten, je ecm
Einheiten, je ecm
ι
ι
ι
Ausgefällt
40.5
71,6
100,0
100,0
Wie vorstehend angegeben, verursacht auch die Menge des für die Ausfällung verwendeten Molybdats
Veränderungen in der Wirksamkeit des Verfahrens. Im allgemeinen ist es vorzuziehen, mindestens etwa
150 mg Molybdat (in Form von Ammoniummolybdat) je 100 ecm filtrierter unreiner wäßriger Bacitracinlösung
zu verwenden. In der nachfolgenden Tabelle sind die Ergebnisse einer Versuchsreihe aufgeführt,
bei der die filtrierte Gärflüssigkeit mit einem Gehalt von 96 Einheiten je ecm mit unterschiedlichen Mengen
Ammoniummolybdat bei einem pH-Wert von 2 gefällt wurde.
Gewicht | Verbrauchter Gehalt | Ausgefällt 0/ /0 |
des zugesetzten Ammonmm- molybdats in mg/100 ecm |
der wäßrigen Gärflüssigkeit in Einheiten/ccm |
O |
66,7 | 96,0 | 20,8 |
133.O | 75.0 | 98,0 |
266,0 | 2,0 | 89.7 |
333.0 | 10,0 | 98,7 ■ |
466,0 | 1,2 | 100,0 |
533,0 | 1,0 | |
Vergleichbare Mengen der anderen wasserlöslichen Molybdate haben ähnliche Ergebnisse.
Es wurde festgestellt, daß das durch Molybdat aus unreinen wäßrigen Lösungen ausgefällte Bacitracin
durch Behandlung der Fällung mit Wasser und einem Alkali, vorzugsweise Ammoniumhydroxyd, gewonnen
werden kann. Es wurden jedoch auch viele andere alkalische Mittel mehr oder weniger wirksam für die
Gewinnung des Bacitracin aus derartigen Fällungen angewendet. Im allgemeinen kann das Verfahren mit
Wasser oder Butanol durchgeführt werden, und viele andere alkalische Mittel, wie z. B. Ammoniumhydroxyd,
Triäthylamin, Calciumhydroxyd und Natriumhydroxyd, können angewendet werden. Die Gegenwart
gewisser Salze, wie z. B. Calciumchlorid oder Triäthylaminsulfat, begünstigt in gewissem Ausmaß
die Löslichmachung des Antibiotikums. Wie vorstehend erwähnt, ist es oft erwünscht, die feste Molybdatfällung
aus der Bacitracinlösung abzufiltrieren und den festen Stoff dann erneut zu extrahieren, um die
maximale Gewinnung des wertvollen Antibiotikums sicherzustellen. In der folgenden Tabelle sind die
Wirksamkeiten der verschiedenen Kombinationen von Reagentien für dieses Extraktionsverfahren miteinander
verglichen.
Gewinnungsmedium
Butanol-Triäthylamin-Calciumchlorid
Wasser-Calciumchlorid-Calciumhydroxyd,
pH-Wert 7 bis 8
pH-Wert 7 bis 8
Wasser-n-Butanol-Calciumhydroxyd
n-Butanol-Ammoniak
n-Butanol-Triäthylamin-Triäthylaminsulfat
Wasser-Calciumchlorid-Calciumhydroxyd
PH-Wert 6 bis 7
PH-Wert 6 bis 7
Wasser-Calciumchlorid-Calciumhydroxyd
pH-Wert 8 bis 10
pH-Wert 8 bis 10
Wasser-Natriumhydroxyd
Wasser-Calciumchlorid-Calciumhydroxyd
pH-Wert 5,5
pH-Wert 5,5
Wasser-Ammoniumhydroxyd-pH-Wert 6,3
Anzahl der Aufschläm- mungen
2 2
Ausbeute (aus der
Gärflüssigkeit)
86,5
74.2
50,7 6l,5
53,6 27,6
40,8 58,8
46,7 85,5
Es wurde gefunden, daß die Verwendung von Ammoniumhydroxyd mit Wasser am zweckmäßigsten
ist, die anderen Mittel haben sich jedoch auch als wirksam erwiesen.
Bei der Extraktion des Antibiotikums aus seinem Molybdatkomplex ist zur Erzielung maximaler Reinheit
eine gewisse Sorgfalt erforderlich. Es ist wesentlich, daß hierbei die wäßrigen Extrakte oder Lösungsmittelextrakte
zur Entfernung sämtlicher suspendierten Stoffe sorgfältig geklärt werden, um die Herstellung
von Bacitracin höchster Reinheit sicherzustellen. Die gereinigte wäßrige Lösung des Bacitracins kann mit
Ammoniumoxalat und einem Ferrocyanid behandelt werden, um sämtliche Spuren von Calcium und
Schwermetallen zu entfernen. Wenn in den vorangehenden Verfahrensstufen sorgf ältig.gearbeitet wurde,
sind diese Verunreinigungen im allgemeinen nur in begrenztem Ausmaß anwesend. Wenn zwei Extraktionsstufen
mit dem teilweise wassermischbaren polaren organischen Lösungsmittel angewendet werden,
kann es ratsam sein, diese Behandlung der wäßrigen Lösung vor der zuletzt erfolgenden Butanolextraktion
vorzunehmen. Der Zusatz eines Entfernungsmittels für mehrwertige Metalle zur wäßrigen Lösung vor der
letzten Extraktion mit Butanol hat ebenfalls Vorteile.
Er hilft, die Extraktion von Spuren von Verunreinigungen an mehrwertigen Metallen in das Lösungsmittel
zu verhindern und verhindert so das Auftreten dieser Stoffe in dem Produkt.
In einigen Fällen hat es sich als zweckmäßig erwiesen, die gereinigten wäßrigen Konzentrate des Bacitracins
mit Kohle zu behandeln, um im Endprodukt noch
vorhandene farbige Verunreinigungen zu entfernen Diese farbigen Verunreinigungen beeinträchtigen jedoch
die Qualität des fertigen Produktes nicht ernstlich und brauchen zur Erzielung eines brauchbaren
Produktes hoher Qualität nicht entfernt zu werden." Es wurde festgestellt, daß die rasche Durchführung
der verschiedenen Verfahrensstufen zu einem gewissen Ausmaß die Gewinnung eines Materials höchster
Qualität sicherstellt. Dies betrifft besonders die Verfahrensstufen, bei denen das Bacitracin mit dem
Molybdän zusammenkommt. Wenn der. Molybdatkomplex des Bacitracins zur Gewinnung des Bacitracins
behandelt wird, ist es ratsam, das Gemisch so bald wie möglich zu filtrieren, da ein langes Abstellen
zur Folge haben kann, daß die Filtrierung schwieriger wird.
Es ist zu beachten, daß das Verfahren eine besondere
Kombination von Verfahrensstufen darstellt, nämlich eine Molybdatfällung und eine Butanolextraktion, die
zur Herstellung eines Bacitracins hoher Qualität und hoher Beständigkeit überraschend wirksam sind. Es
wurde so ein Stoff mit einer bei bisherigen experimentellen Arbeiten, geschweige denn industriellen Arbeiten,
unerreichten Qualität erhalten. Die Kombination der Verfahrensstufen ergibt dieses einzigartige Produkt.
Kombinationen anderer bekannter Verfahrensstufen zur Gewinnung von Bacitracin wurden mit dem
vorliegenden Verfahren verglichen, wobei jedoch keine dieser Kombinationen ein Produkt gleicher
Qualität ergab.
In der folgenden Tabelle ist die Beständigkeit von Bacitracinproben angegeben, die bei erhöhten Temperaturen
in trockenem Zustand 64 und 14 Tage lang aufbewahrt wurden. In gleichmäßigen Abständen
wurden Proben entnommen und ihre Wirksamkeiten festgestellt. Hieraus wurde eine Halbwertszeit der
Bacitracinprobe unter bestimmten Bedingungen errechnet. Bei den Proben 1 und 2 handelt es sich um
erfindungsgemäß hergestellte Stoffe, bei den Proben 3 bis 6 um typische im Handel erhältliche Bacitracinproben.
Probe | Anfängliche | Halbwertszeit | Halbwertszeit |
Nr. | Wirksamkeit Einheiten je mg |
bei 35 bis 37° | bei 55 bis 57° |
I | 78,1 | 293 Tage | 26 Tage |
.2 | 78,O | 346 - | 31 - |
3 | 55,7 | 104 - | 15 - |
4 | 6l,0 | I03 - | 14 - |
5 | 56,0 | 129 | 18 - |
6 | 57.0 | 134 - | 23 - |
Es ist zu beachten, daß diese Halbwertszeiten unter der Annahme berechnet wurden, daß es sich bei der
Zersetzung um eine Reaktion erster Ordnung handelt. Diese Zahlen verdeutlichen die sehr stark verbesserte
Beständigkeit des nach dem erfindungsgemäßen Verfahren
hergestellten Produktes, verglichen mit den im Handel erhältlichen Stoffen.
Das folgende Beispiel dient zur Erläuterung der Erfindung, das jedoch nicht als die einzige Ausführungsform
anzusehen ist.
Bacitracmfiüssigkeit mit einem Gehalt von 32,5 Einheiten
je ecm wurde mit Schwefelsäure auf einen pH-Wert von 2,6 eingestellt. 60 g Diatomeenerde
wurde als Filtrierhilfe pro Liter Flüssigkeit zugesetzt. Das Gemisch wurde auf einem Porzellanfilter filtriert
und mit Wasser gewaschen, so daß das Volumen des Filtrats 25% größer war als das ursprüngliche Volumen
der Flüssigkeit. Die Wirksamkeit des Filtrats betrug 28,3 Einheiten je ecm. Sie wurde mit einer
2Oprozentigen wäßrigen Natriumhydroxydlösung auf einen pH-Wert von 5,2 eingestellt. Auf 401 des Filtrats
wurden 50 g Diatomeenerde als Filtrierhilfe zugesetzt. Das Gemisch wurde gerührt, und 100 g Ammoniummolybdat
wurden allmählich zugesetzt. Nach 30 Minuten weiteren Rührens wurde der pH-Wert des Gemischs
mit 5oprozentiger Schwefelsäure langsam auf 2,5 eingestellt. Das Gemisch wurde weitere 30 Minuten
lang gerührt und dann durch ein Porzellanfilter filtriert, der zuvor mit Diatomeenerde bedeckt worden
war. Insgesamt wurden 180 g Filtrierhilfe verwendet. Das Filtrat wurde verworfen.
Das feste Produkt auf dem Porzellanfilter wurde in 1900 ecm Wasser suspendiert und das Gemisch
wurde mit 3oprozentigem wäßrigem Ammoniumhydroxyd behandelt, bis ein stabiler pH-Wert von go
6,8 erhalten wurde. Die Lösung wurde von dem Feststoff abzentrifugiert. Die geklärte Flüssigkeit hatte
ein Volumen von 1850 ecm und hatte eine Wirksamkeit von 345 Einheiten Bacitracin je ecm. Das feste
Material wurde in 1400 ecm Wasser erneut suspendiert,
mehrere Minuten lang gerührt und mittels weiteren 10 g Filtrierhilfe filtriert. Insgesamt wurden 1445 ecm
Filtrat erhalten, welches 132,5 Einheiten Antibioticum je ecm enthielt. Die beiden wäßrigen Lösungen wurden
vereinigt und mit einer 2oprozentigen Natriumhydroxydlösung auf einen pH-Wert von 7,8 eingestellt. Die
Lösung wurde mit 366 ecm Butanol gesättigt und dann fünfmal mit jeweils 600 ecm mit wassergesättigtem
Butanol extrahiert. Die vereinigten Lösungsmittelextrakte, die ein Gesamtvolumen von 3027 ecm hatten,
enthielten 155 Einheiten Antibiotikum je ecm. Die erschöpfte wäßrige Lösung wurde verworfen. Die
vereinigten Butanolextrakte wurden mit 600 ecm Wasser gerührt, und das Gemisch wurde mit Schwefelsäure
auf einen pH-Wert von 3 eingestellt. DieExtraktion
mit Wasser wurde fünfmal wiederholt. Die wäßrigen Extrakte wurden dann vereinigt und ergaben
3789 ecm Lösung, die 100 Einheiten Antibiotikum
je ecm enthielt. Das Butanol wurde verworfen.
Der konzentrierte wäßrige Extrakt des gereinigten Bacitracins wurde derart auf einen pH-Wert von 6,2
eingestellt, daß die Lösung mit einem starken basischen Ionenaustauscherharz in Hydroxylform zusammengebracht
wurde. Die Lösung wurde dann unter Vakuum auf 452 ecm Lösung mit einem Gehalt von
Einheiten je ecm konzentriert. Der Lösung wurden 2 g Ammoniumoxalat und 1,5 g Kaliumferrocyanid
zugesetzt. Es bildete sich eine leichte trübe Fällung. 27 ecm einer wäßrigen Lösung von Äthylendiamin-tetraessigsäure,
wurde als Abscheidungsmittel
zugesetzt, und der pH-Wert wurde mit einer 2oprozentigen
Natriumhydroxydlösung auf 7,8 eingestellt. Die Lösung wurde mit 55,5 ecm Butanol gesättigt
und dann siebenmal mit jeweils 100 ecm mit Wasser gesättigtem Butanol extrahiert. Die vereinigten Lösungsmittelextrakte
wurden mit einem gleichen Volumen Wasser behandelt, und der pH-Wert wurde mit
einem sauren Ionenaustauscherharz in der Wasserstoff orm auf 6,2 eingestellt. Das zweiphasige Gemisch
ίο wurde unter Vakuum auf 210 ecm konzentriert und
dann in gefrorenem Zustand getrocknet, wobei 3,2 g hochgradig reines Bacitracin mit 78 Einheiten je mg
erhalten wurden. Es zeigte sich, daß dieses Material für die Verwendung in pharmazeutischen Präparaten
iS außerordentlich zufriedenstellend war und infolge
seiner erhöhten Beständigkeit und hohen Wirksamkeit deutliche Vorteile aufwies.
Claims (5)
- PATENTANSPRÜCHE: 20i. Verfahren zur Gewinnung und Reindarstellung von Bacitracin, dadurch gekennzeichnet, daß man in wäßriger Lösung befindliches Bacitracin mit einem löslichen Molybdat umsetzt, das Bacitracinmolybdat in Wasser auf einen pH-Wert von mindestens etwa 5 einstellt, das wäßrige Konzentrat des Bacitracins abtrennt und die Bacitracinlösung bei einem leicht alkalischen pH-Wert, vorzugsweise zwischen etwa 6 bis etwa 8,5, mit einem polaren organischen Lösungsmittel extrahiert.
- 2. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Bacitracin mit Molybdat bei einem pH-Wert von etwa 1,5 bis etwa 4 ausgefällt wird.
- 3. Verfahren nach Anspruch 1, dadurch gekennzeichnet, daß Bacitracin mit Butanol bei einem pH-Wert von etwa 7,5 bis etwa 8,5 extrahiert wird.
- 4. Verfahren nach Anspruch 3, dadurch gekennzeichnet, daß der Butanolextrakt mit Wasser bei einem sauren pH-Wert unter Bildung eines reinen wäßrigen Konzentrats des Bacitracins erneut extrahiert wird.
- 5. Verfahren nach einem der vorstehenden' Ansprüche, dadurch gekennzeichnet, daß als Molybdat Ammoniummolybdat verwendet wird.609 544 6.
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