NO157147B - Fremgangsmaate for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat. - Google Patents
Fremgangsmaate for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat. Download PDFInfo
- Publication number
- NO157147B NO157147B NO821551A NO821551A NO157147B NO 157147 B NO157147 B NO 157147B NO 821551 A NO821551 A NO 821551A NO 821551 A NO821551 A NO 821551A NO 157147 B NO157147 B NO 157147B
- Authority
- NO
- Norway
- Prior art keywords
- methanol
- chondroitin
- procedure
- stated
- polysulphate
- Prior art date
Links
- DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N chondroitin Chemical compound CC(O)=N[C@@H]1[C@H](O)O[C@H](CO)[C@H](O)[C@@H]1OC1[C@H](O)[C@H](O)C=C(C(O)=O)O1 DLGJWSVWTWEWBJ-HGGSSLSASA-N 0.000 title claims abstract description 72
- 229920002567 Chondroitin Polymers 0.000 title claims abstract description 71
- 238000000034 method Methods 0.000 title claims abstract description 40
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 title abstract description 4
- OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N Methanol Chemical compound OC OKKJLVBELUTLKV-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 174
- KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N Peracetic acid Chemical compound CC(=O)OO KFSLWBXXFJQRDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 32
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 claims abstract description 25
- OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N Carbon Chemical compound [C] OKTJSMMVPCPJKN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 238000000108 ultra-filtration Methods 0.000 claims abstract description 14
- 238000005194 fractionation Methods 0.000 claims abstract description 4
- 150000003839 salts Chemical class 0.000 claims description 21
- MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N Hydrogen peroxide Chemical compound OO MHAJPDPJQMAIIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 18
- 239000000463 material Substances 0.000 claims description 16
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 16
- 239000012528 membrane Substances 0.000 claims description 14
- XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N Iron Chemical class [Fe] XEEYBQQBJWHFJM-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 10
- 230000007717 exclusion Effects 0.000 claims description 10
- 229910001385 heavy metal Inorganic materials 0.000 claims description 10
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims description 7
- 239000008139 complexing agent Substances 0.000 claims description 6
- PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N Manganese Chemical class [Mn] PWHULOQIROXLJO-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910017052 cobalt Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000010941 cobalt Chemical class 0.000 claims description 5
- GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N cobalt atom Chemical class [Co] GUTLYIVDDKVIGB-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 5
- 229910052742 iron Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 229910052748 manganese Inorganic materials 0.000 claims description 5
- 239000011572 manganese Chemical class 0.000 claims description 5
- 230000001590 oxidative effect Effects 0.000 claims description 5
- RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N Copper Chemical class [Cu] RYGMFSIKBFXOCR-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims description 4
- 229910052802 copper Inorganic materials 0.000 claims description 4
- 239000010949 copper Chemical class 0.000 claims description 4
- 229910052720 vanadium Chemical class 0.000 claims description 4
- 238000010306 acid treatment Methods 0.000 claims description 3
- 238000004519 manufacturing process Methods 0.000 claims description 3
- 239000012429 reaction media Substances 0.000 claims description 3
- HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L sodium disulfite Chemical compound [Na+].[Na+].[O-]S(=O)S([O-])(=O)=O HRZFUMHJMZEROT-UHFFFAOYSA-L 0.000 claims description 3
- 235000010262 sodium metabisulphite Nutrition 0.000 claims description 3
- 238000005341 cation exchange Methods 0.000 claims description 2
- LEONUFNNVUYDNQ-UHFFFAOYSA-N vanadium atom Chemical class [V] LEONUFNNVUYDNQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims 1
- 150000001768 cations Chemical class 0.000 abstract description 5
- 241000282472 Canis lupus familiaris Species 0.000 abstract description 4
- 241000282326 Felis catus Species 0.000 abstract description 3
- 230000007059 acute toxicity Effects 0.000 abstract description 3
- 231100000403 acute toxicity Toxicity 0.000 abstract description 3
- 241000700157 Rattus norvegicus Species 0.000 abstract description 2
- 239000000243 solution Substances 0.000 description 36
- FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M sodium chloride Inorganic materials [Na+].[Cl-] FAPWRFPIFSIZLT-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 35
- HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M Sodium hydroxide Chemical compound [OH-].[Na+] HEMHJVSKTPXQMS-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 27
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 22
- 239000011780 sodium chloride Substances 0.000 description 18
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 description 15
- 239000000047 product Substances 0.000 description 14
- 238000003756 stirring Methods 0.000 description 11
- 238000006243 chemical reaction Methods 0.000 description 9
- 238000002347 injection Methods 0.000 description 8
- 239000007924 injection Substances 0.000 description 8
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 description 8
- 239000006228 supernatant Substances 0.000 description 8
- 239000000126 substance Substances 0.000 description 7
- 239000002253 acid Substances 0.000 description 6
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 6
- -1 however Substances 0.000 description 6
- 239000013067 intermediate product Substances 0.000 description 6
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 description 5
- 238000004061 bleaching Methods 0.000 description 5
- 230000035484 reaction time Effects 0.000 description 5
- IAJILQKETJEXLJ-KLVWXMOXSA-N (2s,3r,4r,5r)-2,3,4,5-tetrahydroxy-6-oxohexanoic acid Chemical compound O=C[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-KLVWXMOXSA-N 0.000 description 4
- IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N Galacturonsaeure Natural products O=CC(O)C(O)C(O)C(O)C(O)=O IAJILQKETJEXLJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 4
- 230000002378 acidificating effect Effects 0.000 description 4
- 238000005115 demineralization Methods 0.000 description 4
- 230000002328 demineralizing effect Effects 0.000 description 4
- 239000003814 drug Substances 0.000 description 4
- 230000000694 effects Effects 0.000 description 4
- 150000002500 ions Chemical class 0.000 description 4
- 230000001225 therapeutic effect Effects 0.000 description 4
- QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N Acetic acid Chemical compound CC(O)=O QTBSBXVTEAMEQO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M Potassium hydroxide Chemical compound [OH-].[K+] KWYUFKZDYYNOTN-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 3
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 3
- 229920002301 cellulose acetate Polymers 0.000 description 3
- 239000012467 final product Substances 0.000 description 3
- 229910052751 metal Inorganic materials 0.000 description 3
- 239000002184 metal Substances 0.000 description 3
- 239000000725 suspension Substances 0.000 description 3
- GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N vanadium Chemical class [V]#[V] GPPXJZIENCGNKB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 3
- KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 1-Octanol Chemical compound CCCCCCCCO KBPLFHHGFOOTCA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 2-Amino-2-Deoxy-Hexose Chemical compound NC1C(O)OC(CO)C(O)C1O MSWZFWKMSRAUBD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N Atomic nitrogen Chemical compound N#N IJGRMHOSHXDMSA-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229920001287 Chondroitin sulfate Polymers 0.000 description 2
- KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N EDTA Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O KCXVZYZYPLLWCC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M Ilexoside XXIX Chemical compound C[C@@H]1CC[C@@]2(CC[C@@]3(C(=CC[C@H]4[C@]3(CC[C@@H]5[C@@]4(CC[C@@H](C5(C)C)OS(=O)(=O)[O-])C)C)[C@@H]2[C@]1(C)O)C)C(=O)O[C@H]6[C@@H]([C@H]([C@@H]([C@H](O6)CO)O)O)O.[Na+] DGAQECJNVWCQMB-PUAWFVPOSA-M 0.000 description 2
- KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N Isopropanol Chemical compound CC(C)O KFZMGEQAYNKOFK-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N N,N-bis{2-[bis(carboxymethyl)amino]ethyl}glycine Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CCN(CC(=O)O)CCN(CC(O)=O)CC(O)=O QPCDCPDFJACHGM-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000011785 NMRI mouse Methods 0.000 description 2
- WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M Potassium chloride Chemical compound [Cl-].[K+] WCUXLLCKKVVCTQ-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N Pyridine Chemical compound C1=CC=NC=C1 JUJWROOIHBZHMG-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N Tetrahydrofuran Chemical compound C1CCOC1 WYURNTSHIVDZCO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229910052783 alkali metal Inorganic materials 0.000 description 2
- 239000003146 anticoagulant agent Substances 0.000 description 2
- 229920001429 chelating resin Polymers 0.000 description 2
- 150000001875 compounds Chemical class 0.000 description 2
- 239000000356 contaminant Substances 0.000 description 2
- 238000001816 cooling Methods 0.000 description 2
- 238000001035 drying Methods 0.000 description 2
- 229960001484 edetic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000012535 impurity Substances 0.000 description 2
- 239000003456 ion exchange resin Substances 0.000 description 2
- 229920003303 ion-exchange polymer Polymers 0.000 description 2
- 231100000636 lethal dose Toxicity 0.000 description 2
- MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N nitrilotriacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)CC(O)=O MGFYIUFZLHCRTH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 229960003330 pentetic acid Drugs 0.000 description 2
- 239000012466 permeate Substances 0.000 description 2
- SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M potassium acetate Chemical compound [K+].CC([O-])=O SCVFZCLFOSHCOH-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 2
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 description 2
- 230000000717 retained effect Effects 0.000 description 2
- 239000007858 starting material Substances 0.000 description 2
- NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 1,2-bis(ethenyl)benzene;1-ethenyl-2-ethylbenzene;styrene Chemical compound C=CC1=CC=CC=C1.CCC1=CC=CC=C1C=C.C=CC1=CC=CC=C1C=C NWUYHJFMYQTDRP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 1,4-Dioxane Chemical compound C1COCCO1 RYHBNJHYFVUHQT-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 1-[6-[4-(5-chloro-6-methyl-1H-indazol-4-yl)-5-methyl-3-(1-methylindazol-5-yl)pyrazol-1-yl]-2-azaspiro[3.3]heptan-2-yl]prop-2-en-1-one Chemical compound ClC=1C(=C2C=NNC2=CC=1C)C=1C(=NN(C=1C)C1CC2(CN(C2)C(C=C)=O)C1)C=1C=C2C=NN(C2=CC=1)C AZUYLZMQTIKGSC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- HZZOUWBMMWVPTR-UHFFFAOYSA-N 2-[[6-[bis(carboxymethyl)amino]-1,4-dioxocan-6-yl]-(carboxymethyl)amino]acetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C1(N(CC(O)=O)CC(O)=O)CCOCCOC1 HZZOUWBMMWVPTR-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 5-bromo-2-(trifluoromethoxy)pyridine Chemical compound FC(F)(F)OC1=CC=C(Br)C=N1 SQDAZGGFXASXDW-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- FCKYPQBAHLOOJQ-UHFFFAOYSA-N Cyclohexane-1,2-diaminetetraacetic acid Chemical compound OC(=O)CN(CC(O)=O)C1CCCCC1N(CC(O)=O)CC(O)=O FCKYPQBAHLOOJQ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010051055 Deep vein thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 241000699666 Mus <mouse, genus> Species 0.000 description 1
- 239000004952 Polyamide Substances 0.000 description 1
- 241000700159 Rattus Species 0.000 description 1
- NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N Sulfur Chemical compound [S] NINIDFKCEFEMDL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010047249 Venous thrombosis Diseases 0.000 description 1
- 239000002156 adsorbate Substances 0.000 description 1
- 150000007933 aliphatic carboxylic acids Chemical class 0.000 description 1
- 150000008044 alkali metal hydroxides Chemical class 0.000 description 1
- 230000002456 anti-arthritic effect Effects 0.000 description 1
- 230000000879 anti-atherosclerotic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002322 anti-exudative effect Effects 0.000 description 1
- 230000003110 anti-inflammatory effect Effects 0.000 description 1
- 230000002402 anti-lipaemic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002155 anti-virotic effect Effects 0.000 description 1
- 229940127219 anticoagulant drug Drugs 0.000 description 1
- 238000010923 batch production Methods 0.000 description 1
- 239000002981 blocking agent Substances 0.000 description 1
- 230000037396 body weight Effects 0.000 description 1
- 238000009835 boiling Methods 0.000 description 1
- 238000005119 centrifugation Methods 0.000 description 1
- 239000003610 charcoal Substances 0.000 description 1
- 239000002738 chelating agent Substances 0.000 description 1
- 239000003153 chemical reaction reagent Substances 0.000 description 1
- 239000003795 chemical substances by application Substances 0.000 description 1
- 229940059329 chondroitin sulfate Drugs 0.000 description 1
- 238000004140 cleaning Methods 0.000 description 1
- GFHNAMRJFCEERV-UHFFFAOYSA-L cobalt chloride hexahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.O.[Cl-].[Cl-].[Co+2] GFHNAMRJFCEERV-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L copper(II) sulfate pentahydrate Chemical compound O.O.O.O.O.[Cu+2].[O-]S([O-])(=O)=O JZCCFEFSEZPSOG-UHFFFAOYSA-L 0.000 description 1
- 238000000354 decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000002474 experimental method Methods 0.000 description 1
- 239000000284 extract Substances 0.000 description 1
- 238000005562 fading Methods 0.000 description 1
- 239000010419 fine particle Substances 0.000 description 1
- 239000012530 fluid Substances 0.000 description 1
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 description 1
- 238000001990 intravenous administration Methods 0.000 description 1
- 238000005342 ion exchange Methods 0.000 description 1
- KGNKJLSLHCPWOB-UHFFFAOYSA-N iresin Natural products CC1(CO)C(O)CCC2(C)C3COC(=O)C3=CCC12 KGNKJLSLHCPWOB-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002955 isolation Methods 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 231100000053 low toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 229910021645 metal ion Inorganic materials 0.000 description 1
- 150000002739 metals Chemical class 0.000 description 1
- 150000007522 mineralic acids Chemical class 0.000 description 1
- 238000002156 mixing Methods 0.000 description 1
- 229910052757 nitrogen Inorganic materials 0.000 description 1
- 238000006864 oxidative decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 238000004806 packaging method and process Methods 0.000 description 1
- 150000004965 peroxy acids Chemical class 0.000 description 1
- 229920001467 poly(styrenesulfonates) Polymers 0.000 description 1
- 229920002492 poly(sulfone) Polymers 0.000 description 1
- 229920002647 polyamide Polymers 0.000 description 1
- 239000011148 porous material Substances 0.000 description 1
- 235000011056 potassium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000001103 potassium chloride Substances 0.000 description 1
- 235000011164 potassium chloride Nutrition 0.000 description 1
- 239000000843 powder Substances 0.000 description 1
- 230000001376 precipitating effect Effects 0.000 description 1
- UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N pyridine Natural products COC1=CC=CN=C1 UMJSCPRVCHMLSP-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 239000011541 reaction mixture Substances 0.000 description 1
- 229910052708 sodium Inorganic materials 0.000 description 1
- 235000015424 sodium Nutrition 0.000 description 1
- 239000001632 sodium acetate Substances 0.000 description 1
- 235000017281 sodium acetate Nutrition 0.000 description 1
- 239000002904 solvent Substances 0.000 description 1
- 238000011146 sterile filtration Methods 0.000 description 1
- 230000001954 sterilising effect Effects 0.000 description 1
- 238000004659 sterilization and disinfection Methods 0.000 description 1
- 230000019635 sulfation Effects 0.000 description 1
- 238000005670 sulfation reaction Methods 0.000 description 1
- 229910052717 sulfur Inorganic materials 0.000 description 1
- 239000011593 sulfur Substances 0.000 description 1
- XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N sulfurochloridic acid Chemical compound OS(Cl)(=O)=O XTHPWXDJESJLNJ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N tetrahydrofuran Natural products C=1C=COC=1 YLQBMQCUIZJEEH-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 238000002560 therapeutic procedure Methods 0.000 description 1
- 230000002537 thrombolytic effect Effects 0.000 description 1
- 230000002471 thromboprophylactic effect Effects 0.000 description 1
- 231100000419 toxicity Toxicity 0.000 description 1
- 230000001988 toxicity Effects 0.000 description 1
- 238000005199 ultracentrifugation Methods 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
- A61K31/70—Carbohydrates; Sugars; Derivatives thereof
- A61K31/715—Polysaccharides, i.e. having more than five saccharide radicals attached to each other by glycosidic linkages; Derivatives thereof, e.g. ethers, esters
-
- C—CHEMISTRY; METALLURGY
- C08—ORGANIC MACROMOLECULAR COMPOUNDS; THEIR PREPARATION OR CHEMICAL WORKING-UP; COMPOSITIONS BASED THEREON
- C08B—POLYSACCHARIDES; DERIVATIVES THEREOF
- C08B37/00—Preparation of polysaccharides not provided for in groups C08B1/00 - C08B35/00; Derivatives thereof
- C08B37/006—Heteroglycans, i.e. polysaccharides having more than one sugar residue in the main chain in either alternating or less regular sequence; Gellans; Succinoglycans; Arabinogalactans; Tragacanth or gum tragacanth or traganth from Astragalus; Gum Karaya from Sterculia urens; Gum Ghatti from Anogeissus latifolia; Derivatives thereof
- C08B37/0063—Glycosaminoglycans or mucopolysaccharides, e.g. keratan sulfate; Derivatives thereof, e.g. fucoidan
- C08B37/0069—Chondroitin-4-sulfate, i.e. chondroitin sulfate A; Dermatan sulfate, i.e. chondroitin sulfate B or beta-heparin; Chondroitin-6-sulfate, i.e. chondroitin sulfate C; Derivatives thereof
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Molecular Biology (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Biochemistry (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Public Health (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Dermatology (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- Materials Engineering (AREA)
- Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
- Polymers & Plastics (AREA)
- Organic Chemistry (AREA)
- Polysaccharides And Polysaccharide Derivatives (AREA)
- Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
Abstract
Fremgangsmåte for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat som erat. A rå chondroitin-polysulfat depolymeriseres oksydativt, B det depolymeriserte chondroitin-polysulfat blekes, om nødvendig,. med pereddiksyre,. C produktet oppnådd etter A eller B underkastes en eller to utfellinger med metanol og/eller ultrafiltrering for molekylvekt-fraksjonering,. D produktet oppnådd etter C demineraliseres, om nødvendig, med kation-vekslere og. E produktet oppnådd etter C eller D avfarves, om nødvendig, med aktivt kull.Chondroitin-polysulfat som kan fremstilles etter ovennevnte prosess.Chondroitin-polysulfat med en akutt toksisitet () som ved intravenøs administrering er >3.500 mg/kg i NMRI mus, >3.000 mg/kg i Wistar rotter, >1.000 mg/kg i katt og >1.000 mg/kg i hund.Farmasøytisk preparat for human- og veterinær-medisin som erat det inneholder et chondroitin-polysulfat fremstillet etter ovennevnte prosess eller et chondroitin-polysulfat med de ovenfor nevnte karakteristika.
Description
Såvel fremstilling av chondroitin polysulfat, spesielt sulfatering av chondroitin sulfat, som de forskjellige måter å behandle rå chondroitin polysulfat produkter på for å rense dem, er tidligere beskrevet (S. Bergstrøm, Hoppe-Seyler's Z. f. physiol. Chemie 238, 163; 1936 - Chargaff, F.W. Bancroft
J. biol. Chem. 1 15, 149, 155; 193.6 - Husemann et al. Z. Ges. Exp. Med. 114, 722; 1945 - J. Piper Acta Pharm. Toxicol. 2,
317; 1946 - P. Karrer, H. Koenig, E. Usteri, Heiv. chim.
acta 26, 1296; 1 943 - Tysk patentskrift .870.094 - Tysk patentskrift 935.843 - Tysk patentskrift 968.752 - Tysk utlegnings-skrift 1.618.857 - U.S. patentskrift 3.454.560 og Østtysk, patentskrift 136.572). Ingen av disse fremgangsmåter fører imidlertid til et tilfredsstillende produkt.
Toksisiteten som på tross av tekniske fremskritt fremdeles er for høy, og andre ulemper ved tidligere chondroitin polysulfat-produkter, forbyr risikofri terapeutisk anvendelse av disse forbindelser som injeksjon.
Hensikten med foreliggende oppfinnelse har derfor vært
å oppnå, på en økonomisk fordelaktig måte, et chondroitin polysulfat av høy renhet hvor de negative sider av kjente produkter er redusert til et minimum. Et slikt chondroitin polysulfat skulle kunne benyttes terapeutisk etter én "hvilken som helst administrasjonsmåte både innen human og veterinær-medisinen.
Dette er oppnådd gjennom en fremgangsmåte hvor det essensielle fremgår av arten og rekkefølgen av følgende prosesstrinn: oksydativ depolymerisering av rått chondroitin-polysulfat av tidligere kjent kvalitet, eventuell bleking med pereddiksyre, isolering av en fraksjon med en gjennomsnittlig molekylar-vekt på 5.000-15.000 ved utfelling med metanol og/eller, ultrafiltrering, eventuelt demineralisering på ionevekslere og behandling med aktivt kull, om nødvendig.
Oppfinnelsén angår således en fremgangsmåte for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat, som er karakterisert ved at
a) rått chondroitin-polysulfat depolymeriseres oksydativt,
b) det depolymeriserte chondroitin-polysulfatet blekes,
om nødvendig, med pereddiksyre,
c) fra produktet som erholdes fra trinn a eller b isoleres en bestemt fraksjon med hensyn på molekylvekten ved å
fjerne materialet med høyere molekylvekt ved metanolutfelling under anvendelse av 25-45 % metanol av blandingens hele volum eller ultrafiltrering under anvendelse av en filtreringsmembran med en ekskluderingsgrense på minst 6000, og skille materialet som fører til fraksjonen fra materialet med lavere molekylvekt med en andre metanolutfelling under anvendelse av 60-85 % metanol av blandingens hele volum, eller med en andre ultrafiltrering under anvendelse av et filtreringsmedium med en ekskluderingsgrense på
maksimalt 8000,
d) produktene som erholdes etter c demineraliseres, om nødvendig, med kationbytter, og e) produktene som oppnås etter c og d avfarges, om nødvendig, med aktivt kull.
Kjente fremgangsmåter, f.eks. som beskrevet i ovennevnte referanser, kan benyttes for å oppnå det rå chondroitin polysulfat som utgjør utgangsmaterialet. Uten å begrense oppfinnelsen til denne, eller en av de nevnte fremgangsmåter for fremstilling av rå chondroitin polysulfat, er det mulig å gå ut fra et produkt oppnådd ved sulfatering av chondroitin-sulfat med pyridin og klorsulfonsyre. Chondroitin-polysulfat av vidt varierende farvenyanser kan benyttes. Det er også mulig å bruke høy-molekylære chondroitin-polysulfater fra trinn C ifølge foreliggende fremgangsmåte.
For regulering av pH-verdien i fremgangsmåten som skal beskrives, kan følgende reagenser benyttes: uorganiske syrer som f.eks. saltsyre, og lavere alifatiske karboksylsyrer eller persyrer, f.eks. eddiksyre eller pereddiksyre, og alkalier som alkalimetallhydroksydløsninger, f.eks. •• . natriumhydroksyd eller kaliumhydroksyd. De enkelte prosesstrinn utføres fortrinnsvis under normaltrykk. Om intet annet er angitt, er prosentdata i den etterfølgende tekst "vekt/volum" data. I foreliggende fremgangsmåte er metanol presipiterings-midlet for mellomprodukter og sluttproduktet. Andre organiske væsker som er blandbare med vann, f.eks. etanol, isopropanol, aceton, tetrahydrofuran og dioksan, er imidlertid også egnet. Mellomproduktene fra de enkelte prosesstrinn behøver ikke nødvendigvis isoleres som tørre substanser. Det er også mulig å benytte løsningsmiddel-fuktige masser uten tørring. Salter i konsentrasjonsområdet 0,1-10%, fortrinnsvis 0,5-5%, kan med fordel tilsettes under utfelling av chondroitin polysulfåtene med vann-blandbare løsningsmidler. Natrium- eller kalium-klorid og natrium- eller kalium-acetat er spesielt egnede salter.
Betingelsene for prosessens trinn A til E, som er mer utførlig omtalt i det følgende, kan varieres betydelig. De nedenfor angitte parametere for de enkelte trinn, er således ikke å forstå som obligatoriske, men som en fordelaktig utførelsesform.
Chondroitin-polysulfat kan depolymeriseres med hydrogenperoksyd i fravær av tungmetaller. Depolymeriseringstrinnet kan utføres i vandig løsning under følgende betingelser: konsentrasjonen av det rå chondroitin-polysulfat kan være 2-35%, fortrinnsvis 10-20%. Hydrogenperoksydkonsentrasjonen
i reaksjonsmediet kan være 0,3-15%, fortrinnsvis 1-5%. Reaksjonstemperaturen kan være 20-100°C, fortrinnsvis 50-100°C. Reaksjonstiden strekker seg fra 10 minutter til 24 timer, fortrinnsvis fra 30 til 200 minutter. pH kan eventuelt holdes konstant mellom 3 og 9, fortrinnsvis mellom 4,5 og. 7.
Tilstedeværende tungmetaller kan blokkeres med kompleks-dannere som nitrilotrieddiksyre, etylendinitrilotetraeddiksyre, 1,2-cykloheksylen-dinitrilotetraeddiksyre, dietylentriamin-pentaeddiksyre, 3,6-dioksa-oktametylendinitrilotetraeddiksyre eller blandinger av disse eller deres alkalimetallsalter. Konsentrasjonen av komplekseringsmidlet holdes mellom 0,001 og 0,5%, fortrinnsvis mellom 0,005 og 0,15% i reaksjonsmediet. Etter endt reaksjon, kan produktet utfelles med et metanol-overskudd og isoleres etter tilsetning av et alkalimetallsalt etter eventuell avkjøling. .
Depolymeriseringen av chondroitinrpolysulf at me<*>d'"hydrogen-peroksyd kan også utføres i nærvær av tungmetallsalter under spesielt milde betingelser. Depolymeriseringen utføres f.eks.
på følgende måte: konsentrasjonen av det rå chondroitin-polysulfat kan være 2-35%, fortrinnsvis 15-30%. Konsentrasjonen av hydrogenperoksyd i reaksjonsløsningen kan være 0,5-15%, fortrinnsvis 1-5%. Reaksjonstemperaturen kan ligge i området fra
-10° til +80°C, fortrinnsvis fra 0° til 30°C. Reaksjonstiden kan strekke seg fra 5 minutter til 24 timer, fortrinnsvis fra 30
til 500 minutter.
pH kan være mellom 3 og 8, fortrinnsvis 4,5-7,5. Tungmetallsalter som har vist seg egnet, er uorganiske og organiske salter av jern, kobolt, kobber, mangan og vanadium. Saltmetallene har fortrinnsvis følgende valenser: jern og kobolt: di- og tri-valent, kobber: mono- og di-valent, mangan: di-, tri-, tetra-, heksa- og hepta-valent, og vanadium: di- og penta-valent. Metall-saltkonsentrasjonen reguleres til mellom 0,001 og 0,5%, for-
trinnsvis mellom 0,05 og 0,2%. Etter nedbrytningen reguleres pH-verdien til området fra 5 til 14, fortrinnsvis fra 6 til 10, hvorpå det depolymeriserte pr.odukt isoleres ved utfelling med metanol.
Det oksydative depolymeriseringstrinn kan utføres ved oksydativ nedbrytning av choridroifein-ipé^ys.ulfiå.t méd jperéddiksyre i nærvær av visse tungmetallsalter med samme resultat som ved ovennevnte fremgangsmåter. Følgende betingelser har vist seg fordelaktige for gjennomføring av reaksjonen: konsentrasjonen av rå chondroitin-polysulfat kan være 5-35%, fortrinnsvis 10-25%. Konsentrasjonen av pereddiksyre i reaksjonsløsningen kan være 0,1-7%, fortrinnsvis 0,5-2%. Konsentrasjonen av tung-metallsaltet kan ligge i området fra 0,001 til 0,5%, fortrinnsvis 0,005 til 0,2%. Reaksjonstemperaturen kan være -10° til +90°C, fortrinnsvis 0-30°C. Reaksjonstiden kan variere fra 5 minutter til 24 timer, fortrinnsvis fra 15 til 500 minutter. pH-verdien kan være 2-12, fortrinnsvis 3-8.
Reaksjonen skjer med akseptabel hastighet f.eks. med uorganiske eller organiske salter av følgende tungmetaller: jern, kobolt, kobber, mangan og vanadium. Med hensyn til metallenes valens, gjelder det samme som for depolymerisering med hydrogenperoksyd. Det kan være gunstig å stanse *depolymeriseringen ved hjelp av et chelateringsmiddel som f.eks. etylendinitrilotetraeddiksyre eller andre metallblokkerende midler, spesielt når det er tale om relativt korte reaksjons-tider. Det depolymeriserte chondroitin-polysulfat kan utfelles med metanol., om nødvendig etter tilsetning av et nøytralt salt og regulering av pH til 3-1.4, fortrinnsvis 6-10.
Rå chondroitin-polysulfater som kan variere betydelig
med hensyn til renhet og farve, kan benyttes i foreliggende .prosess. På tross av at depolymeriseringen fører til betydelig lysere farve, kan det være nødvendig å inkludere et bleketrinn før videre behandling. Blekingen utføres med pereddiksyre. Følgende betingelser har vist seg fordelaktige: pH-verdien kan variere fra 2,5 til 14, fortrinnsvis fra 3 til 11. Pereddiksyre-konsentrasjonen kan være' 0,1-10%, fortrinnsvis 1-5%. Konsentrasjonen av rå chondroitin-polysulfat kan være 2^-40%, fortrinnsvis 5-25%. Reaksjonen utføres i temperaturområdet 0-100°C,
fortrinnsvis 15-70°C. Reaksjonstiden kan være mellom 1
minutt og 96 timer, fortrinnsvis mellom 1 og 24 timer.
L henhold til en foretrukket utførelsesform, kan pereddiksyrebehandlingen inkorporeres i den påfølgende molekylare fraksjoneringsprosess. Som nevnt, kan pereddiksyrebehandlingen også sløyfes.
Molekylvektområdet fra 5.000 til 15.000 ut-
fraksjoneres fra det oppnådde produkt etter bleke- eller depolymeriserings-trinnet ved utfelling med metanol ved forskjellige konsentrasjoner.
I dette trinn kan det depolymeriserte, eventuelt blekede, chondroitin-polysulfat behandles i vandig løsning med metanol 1 nærvær av et nøytralsalt på følgende måte (den første utfelling med metanol): konsentrasjonen av det depolymeriserte chondroitin-polysulfat i den vandige løsning kan være 5-30%, fortrinnsvis 5-20%. pH-verdien kan ligge i området fra 2 til 10, fortrinnsvis fra 3,0 til 7,5. Nøytralsalt-innholdet kan være 9,5-10%,. fortrinnsvis 1-5%. Et foretrukket nøytral-salt er natriumklorid. Temperaturen kan være fra 0 til 50°C, fortrinnsvis fra 15 til 30°C. Metanolkonsentrasjonen kan være 25-45 volumprosent, fortrinnsvis 30-40 volumprosent, i forhold til det totalt behandlede medium. Høymolekylare og høyt sulfaterte chondroitin-polysulfattraksjoner presipiteres sammen med forurensninger, og kan tas ut ved filtrering eller sentrifugering.
Den metanolholdige løsning som blir igjen,justeres til en metanolkonsentrasjon på 60-85 volumprosent, fortrinnsvis
75-80 volumprosent, i forhold til hele behandlingsmediet,.ved ytterligere tilsetning av metanol (2. utfelling med metanol), hvorved et chondroitin-polysulfat-presipitat som de meget lavmolekylære og lav-sulfaterte komponenter kan fjernes fra., oppnås sammen med forurensninger. Disse komponenter utfelles ikke.
Hele fraksjoneringsprosessen med metanol, eller deler av denne, kan erstattes av ultrafiltrering. Det er f.eks. mulig
å gjenvinne den samme førstefraksjon som beskrevet ovenfor, ved ultrafiltrering av vandige løsninger av depolymerisert chondroitin-polysulfat med membraner med en eksklusjonsgrense på 6.000 og mer (f.eks. membraner av celluloseacetat, polyamid
eller polysulfon). Konsentrasjonen av chondroitin-polysulfat-løsningen kan være 1-10%, fortrinnsvis 1-5%. pH-verdien av løsningen kan være 2-14, fortrinnsvis 5-10. Permeatet kan befris fra lavmolekylare chondroitin-polysulfat-komponenter ved utfelling med metanol som beskrevet ovenfor.
'Denne' effekt kan også oppnås ved en påfølgende annen ultrafiltrering gjennom membraner med en eksklusjonsgrense på 8.000 og lavere. Konsentrasjonen av chondroitin-polysulfat-løsningen kan være 1-10%, fortrinnsvis 1-5%. pH-verdien av løsningen kan være 2-14, fortrinnsvis 5-10.
De eksklusjonsgrenser som er oppgitt av produsentene av ultrafiltreringsmembraner for substanser med en.viss molekylar-vekt, gjelder i de fleste tilfelle ikke for chondroitin-polysulfater. Egende membraner for hvert enkelt tilfelle må derfor bestemmes eksperimentelt, men erfaring viser at de ligger innenfor de angitte områder.
Fjerningen av salter, eventuelt tungmetallioner og forurensninger oppnås ved behandling med en kation-veksler. Metallionene bindes til ioneveksler-harpiksen i den protonerte form, og den fri mukopolysaccarid-polysv.ovelsyre havner over i filtratet eller eluatet. Behandlingen kan utføres ved . temperaturer fra 0 til 50°C, fortrinnsvis ved romtemperatur. Den kan utføres som batch-prosess ved å røre inn kation-veksleren, eller ved kontinuerlig eller diskontinuerlig kolonneteknikk. Egnede ionevekslerresiner er sterkt sure
H •» II II
produkter som f.eks., Lewatit S 100, Dowex X 50 eller "Amberlite" IR 120 i protonert form.
Batch-metoden foretas i vandig løsning med chondroitin-polysulf atkonsentras joner på 2-20%, spesielt 5-15%. Mengden av ioneveksler-iresin kan utgjøre 2-10 volumdeler, spesielt 3-8 volumdeler pr en vektdel chondroitin-polysulfat-tørrsubstans. Fjerningen av salter kan også utføres under de samme betingelser ved å helle ionevekslerne over i kolonner.
Det sterkt sure filtrat eller eluat fra demineraliserings-trinnet utsettes deretter for presipitering ved tilsetning av 2,5-6 volumdeler, fortrinnsvis 3-4 volumdeler, metanol i nærvær av 0,5-5% av et nøytralsalt, spesielt 0,5-3% natriumklorid. Under utfellingen fra et surt medium forblir fri svovelsyre og lavmolekylære chondroitin-polysulfatkomponenter, samt forurensninger i løsning. Etter at den utfelte chondroitin-polysvovelsyre. er fraskilt, kan den enten represipiteres fra nøytral løsning eller benyttes direkte i det påfølgende prosesstrinn mens den enda er metanol-fuktig.
Demineraliseringen kan sløyfes dersom det er foretatt ult,rafiltrering gjennom ultrafiltreringsmembraner med lav eksklusjonsgrense (2. ultrafiltrering), idet det da oppnådde materiale behandles videre.
For å oppnå lysere farve og en spesielt god farve-stabilitet under varmesteriliseringen av det rene chondroitin-polysulfat, kan demineraliseringen etterfølges av et ytterligere rensetrinn.
Behandling av chondroitin-polysulfatløsninger med aktivt kull og fullstendig fjerning av adsorbatet, fører til en chondroitin-polysulfatløsning, hvorfra produktet etter juster-ing av pH, utfelles med metanol i nærvær av et nøytralsalt. Konsentrasjonen av den vandige chondroitin-polysulfatløsning som skal behandles, er 5-25%, spesielt 10-20%. pH-verdien av denne er 4-10, spesielt 5-8. Aktivt kull i mengder på 0,1-3 vektdeler pr vektdel chondroitin-polysulfat benyttes. Temperaturen kan være 20-100°C. Behandlingstiden er 10-180 minutter'..
Aktivkullet fraskilles, gjerne ved finfiltrering-gjennom
et membranfilter, for å oppnå en fullstendig .kullfri løsning. pH-verdien justeres til 6-10, spesielt 7-8, og sluttproduktet utfelles med metanol i nærvær av et nøytralsalt, f.eks. natriumklorid i en konsentrasjon på:• 0,5-5%, spesielt 1-2%. Slutt-konsentrasjonen av metanol reguleres til 60-85 volumprosent, fortrinnsvis 75-80 volumprosent. Eksempler på egnede aktive kullkvaliteter er Brilonit normal (Lurgi), rent aktivt kull, katalog nr. 2183 (Merck) , rent aktivt kull, pulver,, katalog nr. 18003 (Riedel de Haen). Hvorvidt bleking med aktivt kull skal foretas avhenger av det chondroitin-polysulfat som benyttes som utgangsmateriale.
Det kan være fordelaktig å foreta utfellingen av det rensede chondroitin-polysulfat med metanol i nærvær av et kompleksdannende middel og/eller natriumpyrosulfitt. Dette er spesielt gunstig i forbindelse med sluttproduktet, idet det da oppnås injeksjonsløsninger som inneholder chondroitin-polysulfat og er lagringsdyktige uten blakking og med bare ubetydelig mørkere farvenyanse. Eksempler på egnede kompleksdannende midler er nitrilotrieddiksyre, etylendinitrilotetraeddiksyre, 1,2-cykloheksylendinitrilotetraeddik-syre, dietylentriamin-pentaeddiksyre og 3,6-dioksa-oktametylendinitrilotetraeddiksyre i konsentrasjoner på 0,01-0,5%. Konsentrasjoner på 0,05-0,35% er foretrukket. Konsentrasjonen av natriumpyrosulfitt som kan benyttes under utfellingen med metanol, kan være 0,01-0,5%.
Det beskrevne chondroitin-polysulfat er av terapeutisk betydning innen human- og veterinær-medisinen. Substansen har antikoagulerende, trombolytiske, tromboprofylaktiske (spesielt ved dype, venøse tromboser), anti-atherosklerotiske, anti-lipemiske, anti-inflammatoriske, anti-eksudative, anti-artritiske og virus-statiske virkninger.
En karakteristisk ny substans som kjennetegnes ved en forbausende lav toksisitet, oppnås ved den spesielle fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen.
Oppfinnelsen angår således også et chondroitin-polysulfat med en akutt toksisitet som ved intravenøs administrering tilsvarer en letaldose på >3.500 mg/kg i NMRI mus, >3.000 mg/kg i Wistar rotter og >1.000 mg/kg i katter og hunder. Et foretrukket produkt i henhold til oppfinnelsen har en akutt toksisitet tilsvarende en letaldose ved intravenøs administrering på >4.000 mg/kg i NMRI mus, >3.500 mg/kg i -Wistar rotter, >1.500 mg/kg i katter og >1.000 mg/kg i hunder.
Chondroitin-polysulf a ter med LE)^ (mus, i. v.) på kun
1,000 mg/kg er hittil kjent fra litteraturen. Fremgangsmåten i henhold til oppfinnelsen muliggjør således fremstilling av chondroitin-polysulfat med et betraktelig bredere terapeutisk område.
Chondroitin-polysulfatet fremstillet i henhold til oppfinnelsen, oppviser følgende parametre:
nitrogen: 1,65 - 2,00%
svovel: 12,5-14,5%
heksuron syre: 0,98 - 1,22 mmol/g
héksosamin: 0,96 - 1,24 mmol/g
Forsøk har vist at en enkelt dosering av 20-250 mg, spesielt 30-150 mg pr individualdose å 0,2-2,0 ml, spesielt 0,2-1,0 ml har en terapeutisk og vel tolerabel virkning innen human medisinen. Daglige doser opp til 500 mg viser seg fordelaktige terapeutisk. Injeksjonen kan skje intramuskulært, intra-artikulært, subkutant eller intravenøst selv om man ikke er bundet utelukkende til disse in jeks jonsmåter.. Terapeutisk egnede løsninger av den virksomme forbindelse kan pakkes, f.eks. i ampuller, bruksklare sprøyter, perforerbare flasker, ampuller for injeksjons-pistoler og annen emballasje egnet for injeksjon. Andre administrasjonsmåter er peroral, perkutan, rektal, sublingval eller bukkal administrering. Den foretrukne dosering tilsvarer doseringen ved injeksjon. Chondroitin-polysulfatet oppnådd i henhold til oppfinnelsen er også egnet innen veterinærmedisinen hvor det også har de beskrevne virkninger. Daglig dosering for hunder er 0,1-5 mg/kg kroppsvekt, fortrinnsvis 0,5-1,5 mg/kg, i et volum på 0,1-10 ml, spesielt 0,5-1,0 ml. Hos hest har f.eks. daglige enkeltdoser på 100-1,000 mg, fortrinnsvis 150-500 mg,
i 0,1-20 ml, spesielt 1-5 ml vist seg egnet. Chondroitin polysulfatet kan herunder administreres som i human terapien.
Følgende måte ble benyttet for bestemmelse av den
midlere molekylvekt:
En 20 mg prøve ble kromatografert i 2 M natriumklorid-løsning på en Biogel P 10 kolonne (50 g; H = 100 cm, 0=2 cm). Chondroitin-polysulfatet påvises i de samlede 10 ml fraksjoner ved heksuronsyrebestemmelse etter metoden beskrevet av Z. Dische: J. Biol. Chem. 167, 189 (1947) modifisert av
J. D. Gregory: Arch. Biochem. Bipphys. É59, 1 57 (1960). Chondroitin-polysulfat-fraksjoner hvor molekylvekten er fast-slått ved ultrasentrifugering benyttes som referanser. Den midlere molekylvekt beregnes fra det eluatvolum hvor 50% av den totale heksuronsyremengde ifølge kromatogrammet er eluert.
Eksempel 1a (Trinn A)
7,5 kg rått chondroitin-polysulfat (som kan oppnås etter tysk patentskrift 870.094) løses i 75 liter varmt vann og tilsettes 2,25 kg natriumklorid og 2 ml oktan-1-ol. En løsning av 75 g etylendinitrilotétraeddiksyre i 750 ml 1N natriumhydroksyd tilsettes deretter. Blandingen oppvarmes til 95°C og tilsettes under omrøring 7,5 liter 30% hydrogenperoksyd. Temperaturen holdes mellom 90 og 95°C i 100 minutter, hvorpå blandingen raskt avkjøles til romtemperatur.
1,5 kg natriumklorid løses i reaksjonsblandingen og tilsettes 360 liter metanol under omrøring, hvorpå den klare supernatant dekanteres av etter 30 minutter og presipitatet frafiltreres under sug. Det frafUtrerte materiale vaskes med metanol og tørkes ved temperaturer under 60°C. Herved oppnås ca. 7 kg depolymerisert chondroitin-polysulfat.
Eksempel 1b (Trinn A)
7,5 kg rått .chondroitin-polysulfat løses i 22,5 liter vann og tilsettes 1,5 kg natriumklorid og deretter en løsning av 37,5 g kobber-(II)-sulfat-pentahydrat i 750 ml vann. 3 liter 30% hydrogenperoksyd tilsettes under kjøling, hvorpå blandingen holdes ved 25°C i 5 timer. Ved hjelp av 30% natriumhydroksydløsning reguleres pH til 10,5, hvorpå utfelling foretas ved tilsetning av 132 liter metanol under omrøring. Supernatanten dekanteres av og presipitatet frafiltreres under sug. Det frafiltrerte materiale vaskes med metanol og tørkes ved temperaturer under 60°C. Ca. 6,8 kg
depolymerisert chondroitin-polysulfat oppnås.
Eksempel 1c (Trinn A)
9 kg rått chondroitin-polysulfat løses i 45 liter vann og tilsettes en løsning av 8,57 g kobolt-(II)-klorid-heksahydrat i 1 liter vann og deretter vann opp til 67 liter. 1,35 liter 40% pereddiksyre tilsettes ved romtemperatur i løpet av 2 timer under kontinuerlig omrøring. En løsning av 27 g dinatrium-etylendinitrilotetra-acetat-dihydrat i 1 liter vann blir deretter tilsatt. pH reguleres nå til 11 med 30% natrium-hydroksydløsning, hvorpå 2,2 kg natriumklorid tilsettes og utfelling foretas ved omrøring med 290 liter metanol. Etter 1 time dekanteres supernatanten av, hvorpå presipitatet frafiltreres under sug og materialet på filteret vaskes med metanol og tørkes ved temperaturer under 60°C. Herved oppnås ca. 8,4 kg depolymerisert chondroitin-polysulfat.
Eksempel 2 (Trinn B)
8,0 kg depolymerisert chondroitin-polysulfat løses i 74 liter vann og løsningen blandes med 2 liter 40% pereddiksyre. pH-verdien reguleres til 8 med 30% natriumhydroksyd ,o.g blandingen henstilles i 24 timer ved romtemperatur. 0,4* k'g natriumklorid løses i blandingen og utfelling foretas med 320 liter metanol. Presipitatet frafiltreres, vaskes med metanol og tørkes. Ca. 7,9 kg farveløst materiale oppnås.
Eksempel 3a (Trinn C)
6,3 kg depolymerisert chondroitin-polysulfat løses i
27,1 liter varmt vann, tilsettes 3,15 liter 40% pereddiksyre
og omrøres, hvorpå blandingen henstilles i 4 timer. 45,4 liter vann tilsettes, hvorpå 2,1 kg natriumklorid løses i blandingen og pH-verdien reguleres til 10,5 med 30% natriumhydroksyd. For å oppnå en metanolkonsentrasjon på 36,5 volumprosent i blandingen, innrøres 0,5748 liter metanol pr liter løsning, d.v.s. i dette tilfelle 48,6 liter metanol. Presipiterings-blandingen henstilles over natten, hvorpå supernatanten av-dekanteires og det halvflytende presipitat f rasentrif ugeres. Den klare supernatant som i dette tilfelle utgjør 28,5 liter,
omrøres med 2,175 liter metanol pr liter løsning, d.v.s.
279,5 liter metanol, slik at det oppnås en endelig metanol-konsentras jon på 80 volumprosent. Presipitatet får anledning til sedimentering i 1 time, hvorpå supernatanten avdekanteres og den gjenværende suspensjon frafiltreres under sug. Presipitatet vaskes med metanol og tørkes ved temperaturer under 60°C. Ca. 5,6 kg mellomprodukt oppnås.
Eksempel 3b (Trinn C)
2 kg depolymerisert chondroitin-polysulfat løses i 200 liter vann og løsningen filtreres gjennom et sterilt, filter og blir deretter ultrafiltrert under et trykk på 2,8 bar ved 32°C ved hjelp av en ultrafiltrasjons-presse (membranareal: 2,25 m <2>, eksklusjonsgrense angitt for celluloseacetatmembranen: molekylvekt 15.000). Løsningen pumpes rundt med en strømnings-hastighet på 6,5 m 3/time. Når volumet av tilbakeholdt materiale er ca. 20 liter, ultrafiltreres dette 3 ganger etter innblanding av 50 liter vann hver gang.
De samlede permeater ultrafiltreres deretter gjennom en celluloseacetatmembran med en angitt molekylvekt-eksklusjonsgrense på 6.000, men for øvrig under de.samme betingelser som ovenfor. Det tilbakeholdte materiale konsentreres ned til en konsentrasjon på 10%, tilsettes natriumklorid opptil en konsentrasjon på 0,5%, hvorpå pH-verdien reguleres til 7,5 og utfelling foretas med 4 volumdeler metanol under omrøring. Etter frafiltrering under sug, blir presipitatet vasket og tørket. Det resulterende mellomprodukt utgjør 1,78 kg:
Eksempel 4a (Trinn D)
5,4 kg av mellomproduktet fra prosesstrinn 3 løses i
54 liter vann, hvorpå 21,6 liter sterkt sur kation-veksler (f.eks. Lewatit S 100) i protonert form røres inn og omrøres ved romtemperatur i 1 time. Kation-veksleren frafiltreres under sug og renses med to 8,1 liters porsjoner vann, og filtratene kombineres. 2,19 kg natriumklorid tilsettes til filtratet og utfelling foretas under omrøring med 292 liter metanol. Etter henstand over natten, avdekanteres supernatanten og den gjenværende suspensjon filtreres under sug; hvorpå det
frafUtrerte materiale vaskes grundig med metanol. Presipitatet løses i 43,2 liter vann, pH -reguleres til 7,5 med 30% natriumhydroksyd, tilsettes 700 g natriumklorid og utfelles under omrøring med 139,2 liter metanol. Den klare supernatant avdekanteres og den gjenværende suspensjon filtreres gjennom et undertrykks-filter, hvorpå materialet på filteret vaskes med metanol. Etter tørking oppnås 3,6 kg demineralisert chondroitin-polysulfat.
Eksempel 4b (Trinn D)
9 kg av mellomproduktet oppnådd etter prosesstrinnet, eller det fortsatt metanol-fuktige presipitat fra dette trinn, løses i vann slik at det oppnås 90 liter løsning. Løsningen sendes gjennom en ione-vekslersøyle fylt med 36 liter kation-veksler Amberlite IR 120 på H+ form. Forholdet mellom fyllhøyde og diameter er f.eks. ca. 2,5:1. Etter at løsningen har rent gjennom, renses kolonnen med 33,3 liter vann. 3,7 kg natriumklorid tilsettes til de samlede substansholdige filtrater, og utfelling foretas ved tilsetning av 492 liter metanol. Presipitatet frafiltreres under sug og vaskes med metanol, hvorpå det fremdeles løsningsmiddel-fuktige presipitat løses i pyrogen-fritt vann til et totalvolum på 72 liter. 1,15 kg natriumklorid tilsettes, pH-verdien reguleres til 7,5 med 30% natriumhydroksyd, hvorpå utfelling skjer ved tilsetning av 219 liter metanol. Presipitatet frafiltreres med sug, vaskes med metanol og tørkes. Ca. 6 kg demineralisert chondroitin-polysulfat oppnås.
Eksempel 5 (Trinn E)
20 kg demineralisert chondroitin-polysulfat løses i 190 liter pyrogen-fritt vann. Løsningen oppvarmes til 90°C og tilsettes 40 kg aktivt kull (Riedel de Haen nr. 18003) . Temperaturen holdes ved 90°C i 60 minutter, hvoretter blandingen filtreres i varm tilstand ved bruk av trykkfilter. Kull-residuet vaskes to ganger med 4 0 liters porsjoner pyrogen-fritt vann og filtratene slåes sammen. 3 kg natriumklorid og 660 g dinatrium-etylendinitrilotetra-acetat-dihydrat tilsettes. pH-verdien reguleres til 7,5. Blandingen filtreres deretter gjennom et vasket membranfilter (porediameter: 0,2 ^um). Den fullstendig klare løsning underkastes utfelling under omrøring med 720 liter metanol. Presipitatet frafiltreres med sug, vaskes med metanol og tørkes ved temperaturer under 50°C. Herved oppnås ca. 18 kg farveløst, fin-partiklet, rent, injiserbart chondroitin polysulfat. Kjemisk analyse ga følgende verdier: N: 1,77%
S: 12,96%
heksuronsyre: 1,08 mmol/g
heksosamin: 1,12 mmol/g
Eksempel 6 (Fremstilling av en injeksjonsløsning)
3,25 kg beregnet på basis av vannfritt materiale, rent chondroitin-polysulfat og 0,325 kg natriumklorid løses under omrøring i ca. 50 liter aqua pro iniectabilia, og løsningen fylles opp til 65 liter. Etter regulering av pH-verdien til 8,4 med 1N,natriumhydroksyd og steril filtrering gjennom et membranfilter, fylles løsningen over i ampuller under sterile betingelser etter kjent teknikk. De forseglede ampuller utsettes for varmebehandling i kokende vannbad i 60 minutter.
Claims (9)
1. Fremgangsmåte ved fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat, karakterisert ved at a) rått chondroitin-polysulfat depolymeriseres oksydativt, b) det depolymeriserte chondroitin-polysulfatet blekes, om nødvendig,.med pereddiksyre, c) fra produktet som erholdes fra trinn a eller b isoleres en bestemt fraksjon med hensyn på molekylvekten ved å fjerne materialet med høyere molekylvekt ved metanolutfelling under anvendelse av 25-45 % metanol av blandingens hele volum eller ultrafiltrering under anvendelse av en filtreringsmembran med en ekskluderingsgrense på minst 6.000, og skille materialet som hører til fraksjonen fra materialet med lavere molekylvekt med en andre metanolutfelling under anvendelse av 60-85 % metanol av blandingens hele volum, eller med en andre ultrafiltrering under anvendelse av et filtreringsmedium med en ekskluderingsgrense på maksimalt 8000, d) produktene som erholdes etter c demineraliseres, om nødvendig, med kationbytter, og e) produktene som oppnås etter c og d avfarges, om nødvendig, med aktivt kull.
2. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,
karakterisert ved at den oksydative depolymer-iseringr A utføres med hydrogenperoksyd uten nærvær av tungmetaller .
3. Fremgangsmåte som angitt i krav 2,
karakterisert ved at den utføres i nærvær av et kompleksdannende middel.
4. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,
karakterisert ved at den oksydative depolymerisering A utføres med hydrogenperoksyd i nærvær av salter av jern, kobolt, kobber, mangan og/eller vanadium.
5. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,
karakterisert ved at den oksydative depolymerisering A utføres med pereddiksyre i nærvær av salter av jern, kobolt og/eller mangan.
6. Fremgangsmåte som angitt i kravene 4 og 5/ karakterisert ved at konsentrasjonen<c>av tungme1:allsaltene i reaks jonsmediet holdes mellom 0,001 og 0,5% (vekt/volum).
7. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,
karakterisert ved at pereddiksyrebehandlingen B inkorporeres i molekylar-fraksjoneringsprosessén C.
8. Fremgangsmåte som angitt i krav 1,
karakterisert ved at det rene chondroitin-polysulfat utfelles med metanol i nærvær av 0,01-0,5 % av et kompleksdannende middel.
9. Fremgangsmåte som angitt i kravene 1 og 8, karakterisert ved at det rensede . chondroitin-polysulfat utfelles med metanol i nærvær av 0,01-0,5 % natriumpyrosulfitt.
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| DE3118588A DE3118588C2 (de) | 1981-05-11 | 1981-05-11 | Verfahren zur Herstellung eines injizierbaren hochreinen Chondroitinpolysulfates, hiernach erhältliches Produkt und pharmazeutische Zusammensetzung |
Publications (3)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| NO821551L NO821551L (no) | 1982-11-12 |
| NO157147B true NO157147B (no) | 1987-10-19 |
| NO157147C NO157147C (no) | 1988-01-27 |
Family
ID=6131969
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| NO821551A NO157147C (no) | 1981-05-11 | 1982-05-11 | Fremgangsmaate for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat. |
Country Status (19)
| Country | Link |
|---|---|
| US (1) | US4524066A (no) |
| JP (1) | JPS57192401A (no) |
| AT (1) | AT387225B (no) |
| AU (1) | AU552545B2 (no) |
| BE (1) | BE893097A (no) |
| CA (1) | CA1207758A (no) |
| CH (1) | CH650788A5 (no) |
| DE (1) | DE3118588C2 (no) |
| DK (1) | DK160317C (no) |
| FI (1) | FI70416C (no) |
| FR (1) | FR2505185B1 (no) |
| GB (1) | GB2098232B (no) |
| IE (1) | IE53633B1 (no) |
| IL (1) | IL65743A (no) |
| IT (1) | IT1157939B (no) |
| LU (1) | LU84143A1 (no) |
| NL (1) | NL186638C (no) |
| NO (1) | NO157147C (no) |
| SE (1) | SE458118B (no) |
Families Citing this family (20)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE3244214A1 (de) * | 1982-11-30 | 1984-05-30 | B. Braun Melsungen Ag, 3508 Melsungen | Verfahren zur reinigung und fraktionierung von heparin |
| US4623539A (en) * | 1983-02-04 | 1986-11-18 | Tunc Deger C | Nutrient barrier polysaccharide compositions and method of use |
| FR2572731B1 (fr) * | 1984-11-07 | 1987-03-06 | Sanofi Sa | Nouveaux sulfates de xylanes de bas poids moleculaires, leur procede de preparation et leur activite antithrombotique et hypolipemiante par voie orale |
| IT1214609B (it) * | 1985-05-17 | 1990-01-18 | Opocrin Spa | Esosaminoglicani solfati depolimerizzati ad attivita'antitrombotica, fibrinolitica, antinfiammatoria, loro procedimento di preparazione e composizioni farmaceutiche che li contengono. |
| DE3854604T2 (de) * | 1987-03-19 | 1996-03-28 | Arthropharm Pty Ltd | Antientzündungsmittel und zusammensetzungen. |
| US5668116A (en) * | 1987-03-19 | 1997-09-16 | Anthropharm Pty. Limited | Anti-inflammatory compounds and compositions |
| ES2087907T3 (es) * | 1989-02-06 | 1996-08-01 | Taiho Pharmaceutical Co Ltd | Nuevo polisacarido sulfatado, sales farmaceuticamente aceptables del mismo, procedimiento para prepararlos y medicamento que los contiene como ingrediente activo. |
| US5519010A (en) * | 1989-02-06 | 1996-05-21 | Taiho Pharmaceutical Co., Ltd. | Sulfated polysaccharide, pharmaceutically acceptable salt thereof, process for preparing same and medicament containing same as effective component |
| US5141928B1 (en) * | 1989-12-20 | 1995-11-14 | Brujo Inc | Ophthalmic medication |
| JPH05279381A (ja) * | 1991-09-13 | 1993-10-26 | Dainippon Ink & Chem Inc | 硫酸化オリゴ糖芳香族配糖体 |
| IT1256236B (it) * | 1992-12-23 | 1995-11-29 | Mediolanum Farmaceutici Srl | Oligosaccaridi aventi attivita' biologica e procedimento per la loro preparazione di glicosaminoglicani |
| US5591724A (en) * | 1995-02-14 | 1997-01-07 | Bioniche Inc. | Method for treating the urinary bladder and associated structures using hyaluronic acid |
| US5880108A (en) * | 1995-02-14 | 1999-03-09 | Bioniche, Inc. | Method for treating the internal urinary bladder and associated structures using hyaluronic acid |
| IN181358B (no) * | 1995-02-14 | 1998-05-30 | Bioniche Inc | |
| WO2000056298A2 (en) * | 1999-03-19 | 2000-09-28 | Luitpold Pharmaceuticals, Inc. | Treatment of lyme disease with polysulfated glycosaminoglycan formulations |
| ATE427953T1 (de) * | 2003-02-27 | 2009-04-15 | Glaxo Group Ltd | Fondaparinux- natrium zusammenstellung von hoher reinheit |
| JP4679138B2 (ja) * | 2004-12-24 | 2011-04-27 | 株式会社日本バリアフリー | 高純度化されたムコ多糖類の製造方法 |
| FR2969618B1 (fr) * | 2010-12-28 | 2014-05-16 | Pf Medicament | Procede de preparation de chondroitine sulfate de sodium |
| RU2677330C2 (ru) * | 2015-11-20 | 2019-01-16 | Закрытое Акционерное Общество "Фармфирма "Сотекс" | Способ приготовления инъекционной формы препарата хондроитина сульфата |
| US12059430B2 (en) | 2022-09-29 | 2024-08-13 | Adora Animal Health Corporation | Storage stable formulations of sulfated glycosaminoglycans and fragments derived therefrom for the treatment of pain and other medical conditions |
Family Cites Families (12)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| DE136572C (no) * | 1902-12-05 | |||
| DE870094C (de) * | 1950-10-17 | 1953-03-09 | Geigy Ag J R | Verfahren zur Herstellung von Polyschwefelsaeureestern des Chondroitins |
| DE935843C (de) * | 1951-07-12 | 1955-12-01 | Hoffmann La Roche | Verfahren zur Herstellung eines blutgerinnungshemmenden Mittels |
| US2767167A (en) * | 1953-07-06 | 1956-10-16 | Gen Mills Inc | Process of reducing the viscosity of gums |
| DE968752C (de) * | 1954-01-29 | 1958-03-27 | Hoffmann La Roche | Verfahren zur Herstellung von Chondroitinpolyschwefelsaeureestern |
| US2803558A (en) * | 1956-06-27 | 1957-08-20 | Commw Color & Chemical Co | Method of treating adhesive gums |
| US2959583A (en) * | 1959-01-23 | 1960-11-08 | Warner Lambert Pharmaceutical | Method of purifying sulfated polysaccharides |
| US3175942A (en) * | 1962-03-13 | 1965-03-30 | Evans Medical Ltd | Gastro-intestinal therapeutic |
| US3174904A (en) * | 1963-03-25 | 1965-03-23 | Rexall Drug Chemical | Method of purifying sulfated carbohydrates |
| US3405120A (en) * | 1966-01-27 | 1968-10-08 | Green Cross Corp | Low molecular chondroitin sulfate and method for manufacturing the same |
| US3454560A (en) * | 1966-03-01 | 1969-07-08 | Seikagaku Kogyo Co Ltd | Process for the production of chondroitin polysulfate |
| BE857389A (fr) * | 1977-08-02 | 1977-12-01 | Marbex Finance Ltd | Procede de preparation de chondroitines-sulfates de metaux alcalins et alcalino-terreux d'un poids moleculaire de 3000 a 6000 |
-
1981
- 1981-05-11 DE DE3118588A patent/DE3118588C2/de not_active Expired
-
1982
- 1982-04-29 US US06/373,226 patent/US4524066A/en not_active Expired - Lifetime
- 1982-05-06 BE BE0/208024A patent/BE893097A/fr not_active IP Right Cessation
- 1982-05-07 NL NLAANVRAGE8201873,A patent/NL186638C/xx not_active IP Right Cessation
- 1982-05-10 JP JP57076774A patent/JPS57192401A/ja active Granted
- 1982-05-10 CA CA000402613A patent/CA1207758A/en not_active Expired
- 1982-05-11 CH CH2919/82A patent/CH650788A5/de not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 GB GB8213536A patent/GB2098232B/en not_active Expired
- 1982-05-11 AU AU83573/82A patent/AU552545B2/en not_active Expired
- 1982-05-11 IT IT21189/82A patent/IT1157939B/it active Protection Beyond IP Right Term
- 1982-05-11 AT AT0184282A patent/AT387225B/de not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 FR FR8208182A patent/FR2505185B1/fr not_active Expired
- 1982-05-11 SE SE8202947A patent/SE458118B/sv not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 IL IL65743A patent/IL65743A/xx not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 IE IE1127/82A patent/IE53633B1/en not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 DK DK211882A patent/DK160317C/da not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 NO NO821551A patent/NO157147C/no not_active IP Right Cessation
- 1982-05-11 LU LU84143A patent/LU84143A1/fr unknown
- 1982-05-11 FI FI821651A patent/FI70416C/fi not_active IP Right Cessation
Also Published As
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| NO157147B (no) | Fremgangsmaate for fremstilling av et injiserbart chondroitin-polysulfat. | |
| EP0265865B1 (de) | Blutersatzmittel | |
| DE69534749T2 (de) | Herstellung von thrombin therapeutischer qualitätsstufe | |
| SK5272002A3 (en) | Novel oligosaccharides, preparation method and pharmaceutical compositions containing same | |
| KR102591794B1 (ko) | 폴리황산펜토산의 제조 방법 | |
| NO125096B (no) | ||
| US20200062867A1 (en) | Pentosan polysulfate, pharmaceutical composition, and anticoagulant | |
| JP2022180509A (ja) | ポリ硫酸ペントサン及びポリ硫酸ペントサンの製造方法 | |
| DE69329371T2 (de) | Verfahren zur Reinigung von Faktor VIII-von willebrand Faktor (FVIII:C-FVW) Komplex aus menschlichem Plasma | |
| US5164377A (en) | Sulphated glycosaminoglycuronan with antithrombotic activity | |
| DE3244214A1 (de) | Verfahren zur reinigung und fraktionierung von heparin | |
| CN116284499B (zh) | 一种羊源低分子肝素钠的制备方法 | |
| CN117946294B (zh) | 一种节能环保依诺肝素钠的制备方法 | |
| JPH10191940A (ja) | モズク抽出物の品質改良法およびモズク抽出物 | |
| KR20220147996A (ko) | 고순도 헤파린나트륨의 제조방법 | |
| DD266504A1 (de) | Verfahren zur separation und isolierung von cu tief 2 zn tief 2-superoxid-dismutase aus erythrozyten von vertebraten | |
| ITMI930736A1 (it) | Derivato epossidico dell'eparano solfato |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| MK1K | Patent expired |
Free format text: EXPIRED IN MAY 2002 |