CZ342595A3 - Purine derivatives, process of their preparation and pharmaceutical compositions containing thereof - Google Patents

Description

-P.urinové..(ie.r.i.v.á.t-y-,_. způsobuje jich ^výroby -a- f-OTTnkcrotické prostředky s jejich obsahem

Předložený vynález se vztahuje na purinové deriváty, postupy jejich přípravy, farmaceutické prostředky je obsahující a na jejich medicínské použití. Vynález se zvláště vztahuje na 3-substituované a 3,8-disubstituované 6-aminopurinové deriváty vykazující bronchiálni a tracheální relaxační a/nebo protizánětlivóu aktivitu. Vynález se také vztahuje na isoguaninové a dithioxanthinové prekurzory sloučenin těchto purinových derivátů, farmaceutické prostředky je obsahující a jejich medicínské použití.

Fosfodiesterázy cyklického nukleotidu (PDE) se^-staly předmětem značné-pozornosti -jako molekulární cíle pro antiasthmatická agens. Cyklický 3 3* aáenosinmonofosfát (cAMP) a cyklický 33* guanosinmonofosfát (cGMP) jsou známé sekundární ,,mediátory( messengers), které zprostředkovávají funkční odpovědi buněk k velkému množstí hormonů, neuropřenášečů a autokoidú. V pathofýziologii asthmatu by mohly být důsledkem inhibice fosfodies££áz a tím i následného zvýšení koncentrací nitrobuněčného cAMP nebo cGMP v klíčových buňkách, j nejméně dva therapeuticky významné efekty.

Důsledkem jsou relaxace hladkého svalstva(resultující v .bronchodilataci) a protizénětlivá aktivita, V současné době je již známo, že v této ____________oblasti existují mnohočetné, rozdílné isoenzymy PDE_, které se liší ve svém rozložení do buněk· Byla již .synthetizována řada inhibitorů, vykazujících pozoruhodný stupeň/selektivity pro jeden nebo jiný isoenzym.

Relace struktura-aktivita u inhibitorů vyka..... zujících selektivitu vůči isoenzymům byly podrobně diskutovány na př. v článku autora Theodora J.Torphyho se sp.: ,,Npvel phosphodiesterases inhibitors for the therapy of asthma · Drug News and PPospectives, (4),May/1993/, strany 203 až 214.

Enzymy PDE mohou být seskupeny do 5 příbuzen- ~ ských souborů na základě jejich specifity k hydrolýze cAMP nebo cGMP, jejich citlivosti k regulaci kalcia, calmodulinu nebo cGMP a jejich selektivní inhibici různými, sloučeninami.

PDE I je stimulována s Ca⁺⁺/calmodulinem.

' PDE II je stimulována s cGMP a byla zjištěna v srdci a nadledvinkácn.

PDE III je inhibována s cGMPa vykazuje pozitivní, inotropní aktivitu.

PDE IV je specifická vůči cAMP a vykazuje relaxační působení na dýchací cesty, protizánětlivou a antidepresivní aktivitu.

PDE V je zřejmě důležitá při regulaci obsahu cGMP ve vaskulárních hladkých svalech a inhibitory PDE V by mohly tedy vykazovat kardiovaskulární aktivitu.

Vzhledem ktomu, že v této ohlssti existují sloučeniny, odvozené na základě poznatků řady studií vztahů struktury a aktivity, které vykazují inhibiční působení vůči PDE III, je počet strukturálních skupin inhibitorů PDE IV relativně omezený.

Již v minulosti bylo prokázáno, že 3,6-disubstituované deriváty 6-thioxanthinu, popsané v Evropské patentové- -přihlášce ΈΡ-Α-0256692, vykazují ve srov-nání a příslušnými xanthinovými deriváty zvýšenou

isoguaniny podstatně redukuje bronchodilatační a protizánětlivou aktivitu.

PDE IV ( a možná i PDE V) je při asthmatu přítomna ve všech významnějších zánětlivých buňkách, včetně eosinofilů, neutrofilů, T-lymfocytů, makro* fágů a buněk endothelu.

Inhibice PDE IV potlačuje regulaci buněčné aktivace a uvolňuje buňky hladkého svalstva v trachei a bronchách. Naopak ale inhibice PDE III, která je přítomna v myokardu, zvyšuje jak sílu, tak i rychlost srdeční kontraktility, což jsou pro protizánětlivá agens nežádoucí vedlejší efekty.

Theofyllin, neselektivní inhibitor PDE, inhibuje jak PDE III, tak PDE IV. Tato inhibice se projevuje u obou enzymů žádoucím antiasthmatickým účinkem a nežádoucí kardiovaskulární stimulací.

Při těchto dobře známých rozdílech mezi isoenzymy PDE, naskýtá se zřejmě možnost pro současné protizánětlivé a bronchodilatační působení při absenci četných vedlejších účinků, spojených s therapií theofyllinem.

Vzhledem ku zvýšenému výskytu mortality a morbidity v důsledku onemocnění asthmetem v Západních zemích v posledních 10 letech, bylo zaměřeno klinické úsilí na zánětlivý mechanismus této choroby a příznivé účinky inhalačně aplikovaných steroidů.

Vývoj agens, které vykazuje jek bronchodilatační, tak protizánětlivé vlastnosti, by byl nanejvýš prospěšný. Zdá se, že selektivní inhibitory PDE IV by mohly být při menším výskytu vedlejších účinků mnohem účinější než theofyllin. Klinické poznatky

- 4 --------tuto~hypothěšu “potvrsujzCáT byly proto už' realizo--------vány pokusy o nalezení nových látek, vykazujících mnohem selektivnější a dokonalejší inhibici PDE IV.

Je překvapující, že současní vynálezci zjistili, Se analogická transformace 3- a 3,8-di.substituovaných thiohypoxanthinů, které samotné vykazují jen. malou, případně žádnou aktivitu, na příslušné pu--r-inové-deriváty^pOskytují sloučeniny,kterévykazují aktivitu srovnetelnou , nebo v některých případech větší, než 6-thioxanthinové deriváty, uvedené v Evropské patentové přihlášce EP-A-0256692.

Příprava 3-methyl-6-dimethylamino-3H-purinúJ

,... ...-3-benzy 1-6-me t hylamíno-3-purinu a ~3 -be nzy 1-6 -i so- * , pr opy l-aminn-3H-purinu,-byla-publikována-v odborném⁼ časopise J.Org.Chem.,55,5761 - 5766(1990).

Žádná biologická aktivita nebyle u těchto sloučenin zjištěna, a primárním cílem předloženého vynálezu jsou tedy nové sloučeniny, které jsou účin.. nými -inhibitory-PDE IV. - --.......-..... ........—-----Dalším cílem předloženého vynálezu jsou nové sloučeniny, které působí jako účinné inhibitory PDE IV s nižší inhibiční aktivitou vůči PDE III.

Jiným dalším cílem předloženého vynálezu jsou synthetické postupy nových sloučenin, uvederiých v tomto vynálezu.

Jiným dalším cílem předloženého vynálezu jsou léčebné postupy u pacientů, vyžadující inhibici PDE IV.

Jiným dalším cílem předloženého vynálezu jsou . léčebné- -postupy u- ssvcú -t-rpících chorobnými stavy,' souvisejících se skupinou onemocnění, zahrnujících asthma, allergie, zánětlivé procesy, deprese,demence' a chorobné stavy, souvisejícími s abnormálně vysokými fyziologickými hladinami cytokinut cytokinů),jako

- 5 — --je-na-př-íklad, tumorový_ nekro ti zující. f a kt ortTNF) · ---------- —

V souladu a výše uvedenými a dalšími cíly,vzta-------huje se. předložený vynález z části na novou skupinu

3-subatituovaných a 3,8- disubstituovaných 6-aminopurinových derivátů, vykazujících bronchodilatační e/nebo protizánětlivou aktivitu» ;s$ ,-Hj •;řPodstata vynálezu

Předložený vynález zahrnuje tedy purinové deriváty následujícího vzorce (I),

ve kterém,

Hp a Rg jsou shodné nebo odlišné a každý představuje vodík nebo alkylovou skupinu a 1 až 8 atomy uhlíku, která je nerozvětvená nebo rozvětvená a nesubatituovaná nebo substituovaná s hydroxylovou skupinou; alkoxylovou skupinou*, CO^ skupinouj =NOH skupinou; =N0CQÍÍH₂ skupinou nebo s = o;

cykloalkylovou skupinu se 3 až 8 atomy uhlíku,která je nesubstituovaná nebo substituovaná s hydroxylovou skupinou; alkoxylovou skupinou,halogenem; haloalkylovou akupinou ; CO₂H skupinou, =KOE

- 7 skupinou J =NOCONHg skupinou nebo a -OJ cykloalky laiky lovou skupinu se 4 až 8 atomy uhlíku, ve které cvkloalkylový podíl je ne substituován nebo substituován s jednou nebo více hydroxylovými skupinamiJ^elkomylovou skupinouj CQgH skupinou J =NOH skupinouj =NQCONHg skupinou nebo s =0 J aryíovou skupinu, která je nesubstituována nebo substituována s jedním nebo více atomy chloruj NHg skupinouj slkylaminovou skupinou J dialkylaminovou skupinouj amidovou skupinouj alkylamidovou skupinou 3 1 a2 8 atomy uhlíku dialkylamidovou OH skupinu s 1 až 3 atomy uhlíkuj alkoxylovou skupinuj C=NOH skupinu J C=NOCONHg skupinuj alkylovou skupinu s 1 až 3 atomy uhlíkuj fenylovou skupinu nebo benzylovou skupinuj aryialkyiovoú skupinu s 4 až 4- atomy uhlíkuj, heteror cyklylovou skupinuj heterocyklylalkylovou skupinu s 2 až 4 atomy uhlíku a heteróarylovou skupinu.

Rgb představuje vodík nebo Rg_aínebo společně R^» ^a které tvoří kruh se 3 až 8 atomy uhlíku; obsahující 1 až 3 atomy dusíku, žádný nebo až 2 atomy kyslíku; žádný nebo až 2 atomy síry;popřípadě substituovaný r

alkoxylovou skupinouj COgH skupinouj CONHg skupinouj =N0H. skupinouj =NOCONHg skupinou, s = OJ a kde aryl je feny 1~nebo nafty 1J- hetero_cy.kly 1_je_pěti_-, ši©a11i ne-_________________ bo sedmičlenný touh obsahující jeden nebo až 3 atomy dusíkuj jeden nebo až 2 atomy kyslíkuj Žádný nebo až 2 atomy síry a může být substituován na uhlíkových nebo dusíkových atomech tohoto arylového touhu» nebo farmaceuticky pMjatelnou aůl z nich připravenou,za předpokladu, že ;

- benzylová skupina

Hg_a= methylová nebo isopropylová skupina a vodíkový atom nebo R_?

Rg_a a jsou methylové skupiny, = jiný, než vodíkový atom.

v určitých výhodných začleněných složkách,

R^ představuje alkylovou skupinu*s 1 až 8 atomy uhlíkuj cykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíkuj cykloalkylaiky* lovou skupinu se 4 až 8 atomy uhlíkuj aryl nebo arylalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku t

/ i ^E6a Představuje alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíkuj c.ykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlákuj cykloalkylalkylovou skupinu se 4 až 8 atomy uhlíkuj aryl J arylalkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíkuj nebo heterocykly 1-aIkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku

- 9 představuje----------------------------- ” ~ vodíkový atom nebo alkylovou skupinu 3 1 až 8 atomy uhlíku} cykloalkylovou skupinu se 3 až- 7-atomy uhlíku} cykloalkylalkylovou skupinu se 4 až 8 atomy uhlíku} aryl nebo aryl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku nebo tvoří společně pětičleaný nebo Šestičlenný kruh, a tento kruh volitelně obsahuje jeden nebo více přidátných heteroatomů} a

Εθ představuje vodíkový atom nebo alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku} cykloalkylovou skupinu se 3 až 7 atomy uhlíku} cykloalkylalkylovou skupinu se 4 až 8 atomy uhlíku} aryl } aryl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku} pyridylovou nebo pyridyl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy uhlíku.

Pro účely předloženého vynálezu zde použitá alkylová skupina s 1 až 8 atomy uhlíku nebo alkylový podíl s 1 až 4 atomy uhlíku aryl-alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku nebo heterocyklo-alkylová skupina s 1 až 4 atomy uhlíku, může být s nerozvětvěným a nebo rozvětveným řetězcem a může být substituovaná nebo nesubstituovaná.

alkylové skupiny s 1 až 8 atomy uhlíku je výhodná alkylová skupina a 1 až 4 atomy uhlíku, jako na příklad methyl-} ethyl-} n-propyl-} isopropyl-} n-butyl- nebo isobutyl-.

- 10 -------------------Vhodnými“'subs ti tuenty jsou- hydroxy lová 3kupi--------na; alkoxylová skupina ( na příklad methoxy- nebo ethoxy- skupina); halogen ( na příklad fluor, chlor nebo brom) a haloalkylová skupina ( na příklad trifluormethylová skupina).

Z cykloalkylové skupiny se 3 nebo 7 atomy uhlí- -—ku-nebo-cykloalkylového^pod-ÍTu-cykloalkylalkylOvé-— skupiny se 4 až 8 atomy uhlíku, může být výhodná?;?, cyklobutylová, cyklohexylová nebo cyklopentylová skupina, ale výhodnější je cyklopropylová nebo eyklopentylová skupina.

. · fr. · ir .... —”

Cykloalkylaikylová skupina se . 4 až 8 atomy, uhlíku, může být cyklobutylmethyl , cyklopentylmethyi; cyklohexylmethyl nebo cykloheptylmethyl, ale výhodný je cyklopropylmethyl nebo cyklopentylmethyl.

Cykloalkylové nebo cykloalkylaikylová skupina^ může být substituována nebo nesubstituována, - - Vhodnými substituenty jsou hydroxylová skupina; alkoxylové skupiny { na příklad methoxylová nebo ethoxylová skupina); halogen ( na příklad fluor,chlor nebo brom) a haloalkylová skupina ( na příklad trifluormethylová skupina), »

Výhodnou arylovou akupinou nebo arylovým podílem ary1-alkylové skupiny s 1 nebo 4 atomy uhlíku, je fenyl, Arylový podíl může být^ubstituovaný nebo substituovaný, na příklad alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy, uhlíku( jako na. příklad. methyl-)-.; nebo elektrony přijímajícím substituentem, jako na příklad halogenový atom ( na příklad fluor nebo chlor); nitroskupinou nebo trifluormethylovou skupinou poskytující | elektrony, jako je na příklad alkoxylová nebo cykloalkoxylová skupina.

----- —Výhodná ary1-a1 kýlová akupina a 1 až„ 4_a_tony-_____uhlíku je benzylová nebo substituovaná benzylové sku- P^lna·

Je vhodné, když heterocyklický podíl heterocyklo-alkylové skupiny s 1 až 4 atomy uhlíku může obsahovat jeden nebo více heteroatomů, jako na příklad kyslík nebo dusík a příhodná je i morfolinová skupina.

Kde -NR^R^ tvoří pětičlenný nebo Šestičlenný kruh obsahující přídavný heteroatom, je výhodným heteroatomem dusík nebo kyslík.

Kruh tvořený s být buá ^ne3ubsti*· tuovaný nebo substituovaný, na příklad : a alkylovou skupinou s 1 až 4 atomy uhlíku( jakou je na příklad methylová nebo ethylová skupina) nebo halogenovým atomem ( jakým je na příklad fluor nebo. chlor) a může obsahovat jednu nebo více nenasycených jednotek. Příhodně může být -®g_a®g^ substituován nebo nesubstituován s morfolinovým nebo piperazinovým kruhem.

V jedné z výhodných skupin sloučenin dle vzorce (i) představuje

R^ = alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku( výhodně s 1 až 5 atomy uhlíku);

zvláStě výhodná je propylová skupina; aryl-alkylová skupin^ s 1 až 4 atomy uhlíku, jako na příklad substituovaný nebo nesubstituovaný benzyl nebo cykloalkylová skulina se 3 až 7 atomy uhlíku;

zvláStě výhodná je cyklopropylmethylová skupina.

V dalSí výhodné skupině sloučenin dle vzorce (I) představuje

Rg_a - alkylovou skupinu s 1 až 8 atomy uhlíku,jako

- 12 -----je ..na.,příklad,...methylová, nebo-ethylová-skupina·,-------J

Rgb představuje příhodně vodíkovýmatom,

V další výhodné skupině sloučenin dle vzorce (I) představuje

Eg_a = heteroaryl-alkylovou skupinu s 1 až 4 atomy -uhlíku,jakojena^_ příkladA-pýridylmethylováskupina,

V další výhodné skupině sloučenin dle vzorce (I) představuje

Rg '= atom vódíkuj cykloaliylovou skupinu se 3 až 7 a torny uhlíku;zvláště výhodná je ‘cyklopr.opylová ₍nebo alkylová skupině s.l až 8 atomy uhlíku, zejména isopropylová skupina, Výraz „nižší alkyl” je určen pro účely předloženého vynálezu pro nerožvětvený nebo rozvětvený řetězec radikálů, majících od jednoho do pěti atomů uhlí ku.

Podobně i výraz ,,alkoxyl” je určen pro účely předloženého vynálezu, pro RO, kde

R = nerožvětvený nebo rozvětvený/nebo cyklický řetězec -radikálu, mající od 1 do 6 atomů uhlíku.

Výhodné adeninové sloučeniny týkající se vynáleiu, zahrnují:

=bsnsyl-=6=e-thy-l-ami-no-3n-puria J * 6-e thy Iami'no-3hexyl-3H-purinJ 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmethyl6-ethylamino-3H-purinJ 6-cyklopentyl-8-cyklopropyl3-propyl-3H-purinJ 3- (3- cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-6-ethylamino-8-isopropyl-3H-purinJ 8-cyklo- 13 propyr-3-přó^I-6-^-T4-pýridýl-methy lamino )-3H- ~pu---------—„— rin 6- c.yklopentylamino-3-(3-cyklopentyloxy-4methoxybenzyl)-8-isopropyl-3H-purin J 3-(4- chlorbenzyl)-6-ethylamiňo-8-isopropyl-3H-purin ζ 3-(4chlorbenzyl)-6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3H·purin ; 3-í3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-6ethylamino-3H-purin J 3-benzyl-6-ethylamino-8-(1- :_;'ó , methylethyl)-3H-purin ; 3-ethy1-6-cyklopentylamino -8-cyklopropyl-3H-putin ; 8-cyklopropyl-6-ethylamino-3-(3-methylbutyl)-3H-purin ; 3-cyklohexylmetftyl-8-cyklópropyl-6-ethylamino-3H-purin *_t 8cy klopropy 1-3-cy klopropy lme thyl-6-e thylamino-3Hpurin ; 3-ethyl-6-ethylamino-8-(( 3-cyklopentyloxý-4-methoxy )benzyl)-3H-purin J 3-butyl-S-cykloprop.yl-6-ethylamino-3H-purin J 8-cyklopropyl-6ethylamino-3*propyl-3H-purin J 3-ethyl-6-cykloJ pentyl-amino-8-isopropyl-3H-purin ,J 6-amino-8cyklopropyl-3-propyl-3H-purin J 8-cyklopropyl-6

-cyklopropylamino-3-propyl-3Sl·- purin ; 6-cyklopentylamino-8-isopropyl-3-propyl-3H-purin J 6- ^ř ( 3- cyklopentyloxy-4-,me thoxybenzy lamino )-8cyklopropyl-3-propyl-3H-purin J 3-benzyl-6-methylamino-3H-purin J 6-butylamino-8-cyklopropyl-3propyl-3H-purin J 3-cyklopropylmethyl-8-Í3opropyΙό -e thy lamino-3H-purin; 8-cyklopropyl-3-ethyl-6propylamino-3H-purin J 6-cyklohexylamino-8-isopropyl-3-propyl-3H-purin J 3,8-diethyl-6-morfolin-3H - purin a jejich farmaceuticky přijatelné sole,

V určitých výhodných členech je adenihová sloučenina vybrána ze

3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-6-ethylamino

-3H-purinu ( PDE IV Ι^θ = 2,15/UÍÍ )J

- 14 ~3- (4—chlor benzy 1 )--6 -e thylaminq-8-i sopropy1-3H-_________ purinu ( PDE IV Ι^θ = 1,13 ^uM);

3- (3-cyklopentyloxy-4-me thoxybenzy1) -6-e thylamino8-isopropyl-3H-purinu ( PDE ΙΨΙ^θ.= 0,32/uM )J a ( zvláStě výhodného) 6-cyklopentyl-S-cyklopropyl-3-propyl-3H-purinu“”HPDE“lV“!^q=“07032uMŤÍ a

jejich farmaceuticky přijatelných solí.

-Předložený-vynález se vztahuje také na isoguanino_vé sloučeniny. které jsou prekurzory-adenincvých,-výše popsaných sloučenin.

Navíc, kromě jejich role jako prekurzorú sloučenin, bylo překvapivě zjištěno, že tyto sloučeniny vykazují také signifikantní inhibiční aktivitu vůči PDE IV, - ........- .....

Předložený vynález je tedy cílen z části na sloučeninu dle vzorce (li),

- 15 W· ve - kterém ,---------------------------------;-------------- ·—-“|SS

H_o = S7 slík nebo síra

4_ a ..... · '.......

Rp ^%a » ®6b ⁸ 3^{3ou 3t9}3ⁿé ^nebo odlišné a představují stejné skupiny, které jsou už uvedeny a vysvětleny z hlediska sloučeniny dle vzorce (I), uvedené výše.

Výhodné isoguaninové sloučeniny zahrnují dle předloženého vynálezu r

6- cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihy<£ro-3propyl-2-thio-2H-purin-2-on ( PDE IV = 7,41yuM)J

8-cyklopropy 1-3,7-dihydro-6-(2-hydrox^tlíylamino) 2- thio-2H- purin-2-on (ΡΠΕ IV I^_Q = 4,48/UÍF )J ( zvláště výhodný) 8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(4py ridy lme tliy lami no) -2- thi o- 2H-puri n-2-on ( PSE IVI₅₀ = 0,41/UM

......... T · · va jejich farmaceuticky přijatelné sole.

Předložený vynález se také vztahuje na sloučeniny 2,6-dithioxanthinu, které jsou prekurzory adenihových sloučenin, popsaných výše.

Navic, kromě jejich role jako překurzorů sloučenin, bylo překvapivě zjištěno, že tyto sloučeniny vykazují také signifikantní inhibiční aktivitu vůči PDE ΙΨ.

- 16 -------Předložený^- vynález je tudíž~z části - cílen -na—_____________ sloučeninu dle vzorce ( III ),

ve kterém, a Rg jsou stejné nebo odliSné a představují stejné skupiny j9ko ty, které jsou už uvedeny a vysvětleny z hlediska sloučeniny (I), uvedené výše.

Výhodné dithioxanthinové sloučeniny zahrnují dle předloženého vynálezu:

3-benzyl- 3,7- dihydro-8-(1-methyle thyl)-2,6-dithio1H-purin-2,6-dion (P2E IV Ι^θ = 3,40 /UKT);

3-cyklohexylmethyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydno-2,6-. áiťnio-iH-purán-Ž/b-dióh'' ÍPDE IV Ι^θ - 3,03/®;

3-(4-chlorbenzyl)-8-Í3opropyl-3,7-dihydro-2,6-dith|o3,7-purin-2,6-dion ( ΡΠΕ IV Ι^θ:= 2,40/Uff )!

- 17 -8-cy-k-lopropyl-3-cyklopropylme thyl-3,7-dih;rdro-2 ,j5l_______

-dithio-1H-purin-2,6-dion ( PDE IV Ι^θ = 2,27/uM )J

3- {3-cyklopéntyloxy-4-methoxybenzyl)-3y7- dihydro-8- isopropyl-2,6-dithio-1H-purin-2,6-dion ( PDE IV I₅₀ = 0,\80/UM )*, ( zvláště výhodný) 8-cyklopropyl-3,7~dihydro-1,3diethyl-2,6-dithio-1H-purin-2,6-dion ( PDE IV I_5Q - 0,42 /UM);

jejich farmaceuticky přijatelné sole.

Vhodné, farmaceuticky přijatelné sole, jsou takové, které jsou běžně známé v odborných kruzích a zahrnují na příklad kyselé adiční sole tvořené z anorganických kyselin, jako jsou na příklad hydrochloridy, fosfáty a sulfáty a

z organických kyselin, jako jsou na příklad tartaráty, maleáty, fumaráty a sukcináty.

adeninových sloučeninách, zahrnutých do předloženého vynálezu, stejně jako o jejich isoguaninových a 2,6-dithioxanthinových prekurzorech, bylo v současné době prokázáno, že vykazují inhibiční aktivitu vůči PDE IV při použití standardních laboratorních testů, j8kó jsou na příklad analysy enzymů J metody používající hladké svaly trachei morčat a test s aktivačním faktorem destiček (PAF) kožního edému a těst arachidonové kyseliny ušního edému myší a proliferace lymfocytů.

...:_________Tyto výše jmenované sloučeniny mohou být také _ použity při léčbě ostatních chorobných stavů u lidí a ostatních savců, jako na příklad při léčbě chorobných stavů spojených se škodlivým fyziologickým nad® bytkem tumorového nekrotizují^^sktoru (TNF), který aktivuje monocyty, makrofágy a T-lymfocyty.

- -Tato aktivace ovlivňuje-výboj infekcí-HIV (-humen immunodeficiency virus = virus lidského ímmunodeficitu) a další chorobné stavy, související s produkcí tkáňového nekrotizujícího faktoru (TNF) a ostat® nich cytokinů, modulovaných s TNF.

Z těchto aspektů je také předložený vynález _ cílen na získání sloučeniny^ zahrnut.é^do, vynálezuj.nebo_______ z_ní připravené farmaceuticky přijatelné sole, urče- . né pro použití, v medicíně, zejména pro léčbu stavů, u kterých je indikován inhibiční efekt PDE IV ( na příklad chronická obstruktivní onemocnění dýchacích cest).

*/

Λ —

......... Vynález dále uvádí přípravy/ sloučenin zahrnu- tých do předloženého .vynálezu nebo farmaceuticky přijatelných solí z nich připravených a. tedy pro přípravu léčivj určených pro therapii chorobných stavů, u kterých je indikováno inhibiční působení ne PDE IV _e

Z dalšího aspektu zahrnuje vynález také léčebné postupy u chorobných stavů, kde jsou indikována bronchodilatační nebo protizánětlivé agens, zahrnující rovněž aplikaci farmaceuticky účinných množství jedné nebo.více sloučenin, zahrnutých do předloženého vynálezu, nebo farmaceuticky přijatelných solí, z nich připravených.

Účinná složka je výhodně používána ve formě farmaceutických přípravků, příhodně v aplikační lékové formě jednotlivých dávek.

- 19 - --------Z-hledisek-dalšího aspektu,^zahrnuje--vynález__________ farmaceutické kompoziční přípravky, obsahující ala- spon jednu složku dle vzorce (i) a nebo její farmaceuticky přijatelnou sůl ,zpracované pro aplikaci v lékové formě nějakým vhodným postupem.

Farmaceutické kompoziční přípravky zahrnuté do vynálezu , mohou být vhodně připraveny konvenčními postupy, za použití jednoho nebo více farmaceuticky přijatelných nosičů, nebo pomocných přísad.

Farmaceutické prostředky zahrnuté do vynálezu, mohou být vhodně připraveny v lékové formě pro orální nebo parenterální aplikaci, nebo inhalační aplikaci.

Vhodná léková forma pro orální aplikaci zahrnuje pevné lékové formy, jako na příklad tablety a kapsle,které mohou být připraveny běžnými farmaceutickými postupy, za použití farmaceuticky přijatelných pomocných přísad, jako jsou pojidla( na příklad škrob nebo hydroxypropylmethylcelulosa), klouzadla ( na příklad magnesiumstearát nebo talek), sladidla nebo zvlhčovadla................

tekuté lékové formy, které mohou být použity, zahrnují roztoky, sirupy nebo suspenze,které mohou být připraveny běžnými postupy, za použití farmaceuticky přijatelných pomocných agens, jako jsou smáčedla, tvorbu suspenzí podporujících agens, emulgátory a chutová a vonná korigencia.

Prostředky určené k parenterální aplikaci,zahrnuté do předloženého vynálezu, se mohou běžně vyskytovat ve formě sterilních vodných nebo nevodných roztoků, suspenzí nebo emulzí, které mohou obsahovat stabilizační, suspenzní nebo disperzní agens.

·.

-Kompoziční- lékové.. přípravky „mohou být ztaké. ve f oř-------^:mě pevných složek, na příklad prášku, které mohou být před použitím převedeny do roztoku a vhodným vehikulem, jako je na příklad sterilní voda nebo jiné sterilní injekční prostředí.

Pro Inhalčni aplikaci, může být aktivní složka aplikována prostřednictvím aerosolu nebo nebulizéru.

Aktivní složka může být přítomna bud v pevné formě, nebo suspenzi, nebo v roztoku.

Kromě toho, v případě, kdy účinné složky za, hrnuté do .předloženého vynálezu*, *jsou^zpracovény do ‘' orálních lékovýchořem, =lze .předpokládat-,-že z* ta-^{: :} kových lékových forem se účinná složka uvolňuje do gastrointestinálního traktu bezprostředně, nebo alternativně ji lze připravit ve formě lékové formy s řízeným a/nebo zpomaleným uvolňováním,.při průchodu““ gastrointestinálním-traktem; ------- -- -—·

V odborných kruzích je příprava širokého spektra lékových forem s řízeným a/nebo zpomaleným uvolňováním dobře známa a jsou uvažovány pro použití, vztahující se na lékové formy, zahrnuté do předloženého vynálezu.

Řízené a/nebo zpomalené uvolňování účinné složky může být zajištěno'na příklad obdukcí orální lékové formy nebo zabudováním účinné složky( složek), zahrnutých do vynálezu, do matrice umožňující řízené a/nebo zpomalené uvolňování.

Specifické příklady farmaceuticky přijatelných

Λ , nosičů a pomocných složek, které mohou být použity pro přípravu orálních lékových forem, jsou popsány v publikaci Handbook of Pharmacsutical Excipients;

___________American Pharmaceutical Astsociaition (198.6 ).._e_..j.ao.u__________ uváděné v odkazech předloženého vynálezu.

Technické postupy a kompozice pro přípravu pevných orálních lékových forem jsou popsány v publikaci Fharmecsutical Dosage Forma: Tableta(Lieberman_r Lachman a Schwartz, vydavatelé); druhé vydání, nakladatel firma Marcel Dekker lne., a jsou uvedeny v odkazech předloženého vynálezu.

Technické postupy a kompozice pro přípravu tablet ( lisovaných a tvarovaných)/ kapali ( tvrdých a měkkých želatinových ) a pilulek,, jsou popsány v publikaci Remingtoná Pharmaceutical Sciences; ( Arthur Oxol, vydavatel); 1553 - 1593 (1980), uvedených v odkazech předloženého vynálezu.

technické postupy a kompozice pro přípravu · tekutých orálních lékových forem jaou popsány v publikaci Pharmaceutical Dosage Forma: Disperse Systems;. .(.Lieberman, Rie.ger a Bankéř, vydavatelé); χ nakladatel firma Marcel Dekker lne,; uvedené v odkazech předloženého vynálezu.

Dávka sloučenin zahrnutých do předloženého vynálezu je závislá na chorobě, která má být léčena, závažnosti symptomů, způsobu aplikace, frekvencích intervalů při aplikaci, výskytu nežádoucích vedlejších účinků a zejména (kromě dalších aspektů), na použit^wfarmaceut.prostředku.

Dávka aplikované účinné složky bude záviset zejména na použitém farmaceutickém prostředku,stavu pacienta, frekvencích intervalů a způsobu aplikace_z a chorobném stavu, který mé být léčen.

- 22 __________Farmaceutické -prostředky4-zahrnuté do předloženého vynálezu, mohou být běžně aplikovány jednorázově nebo vícekráte, na příklad 1x až 4x denně.

Navrhovaná dávka sloučenin uvedených v předloženém vynálezu je 1,0 mg až 10,0 mg/kg hmotnosti, výhodně 100 mg až 1000 mg denně.

Z hledisek dalších aspektů, sloučeniny dle vzorce (I), zahrnuté do předloženého vynálezu, a jejich farmaceuticky přijatelné sole, mohou být připraveny následujícími postupy, ve kterých ^3» ®6b ^a ^8 ^^30u definovány, pokud není uvede₀ no jinak, dle vzorce (i).

V souladu s jedním obecným postupem (A'), mohou být sloučeniny dle vzorce (I) připraveny reakcí sloučeniny následujícího vzorce (IV)_Z !>*.♦· .

(IV) se sloučeninou vzorce (V) :

- 23 --------------------------R₆._AeNH-. -------------------------.(V±.__

Reakce sloučeniny (IV) se sloučeninou (V),mů-že být úspěšně provedena za přítomnosti nebo absence vhodného reakčního media a při teplotě v rozmezí od O°GL do 100,°C, výhodně při teplotě místnosti.

Vhodnými rozpouštědly jsou voda,alkohol( na příklad ethanol); uhlovodíky ( na příklad benzen) a halogenované uhlovodíky ( na příklad dichlormethan).

Sloučeniny dle vzorce (IV) mohou být sami o sobě připraveny thioniací příslušných β-oxo sloučenin, na příklad reakcí s oxidem fosforečným v pyridinu.

Thioniací je vhodné provádět rea$cj?^j-oxo-sloučeniny v pyridinu s molárním přebytkem oxidu fosforečného.

Příslušné 6-oxo-slouČeniny mohou být naopak připraveny z příslušných 2-thioxanthinových derivátů, dle postupů známých v odborných kruzích ( viz na (.příklad publikace Arch,Pharm, ,244,11-20(1906)* J.Org.Chem., 2-5,148. - 149í 19.60). a J.Org.Chem.;27,

2478 - 2491, (1962).

Dle jiného obecného postupu (B), mohou být ze sloučeniny dle vzorce (i), připraveny sloučeniny dle vzorce (II), uvedeného na další straně 24J redukcí, za použití vhodného reakčního agens.

¹ 1

Redukce může být běžně provedena katalyticky, na příklad při použití vodíku za přítomnosti kovového katalyzátoru, na příklad Raneyova niklu.

Redukce může být úspěšně provedena ve vhodném rozpouštědle^ ha“příklad 'v alkoholu ( na příklad ethanol) J uhlovodíku ( na příklad benzen) nebo ve vodě, a za vhodné teploty, běžně při teplotě místnosti.

(II)

V rámci specifické.operace může být připra^ ven Raney nikl in šitu ze slitiny nikl/hliník a silné báze, jakou je na příklad hydroxid sodný.

Alternativně může být redukce provedena za použití alkalického kovu, jaým je na příklad sodík, v tekutém amoniaku, nebo hydrazinu za přítomnosti báze.

Sloučeniny dle vzorce (XI) mohou připraveny z příslušných- derivátů dle vzorce (XII), být samy o sobě £ 4 4+1*4 -____ uvedeného na další straně 25, reakcí s aminem ^gg^g^NH , dle postupu (A), popsaného výše.

Naopak, sloučeniny dle vzorce (III) mohou být připraveny z příslušných derivátů 2-thioxanthinu thioniací, na příklad reakcí s oxidem fosforečným v pyridinu*· . ·

Sloučeniny 2-thioxanthinu, jsou sloučeniny známé, nebo mohou být připraveny běžnými postupy z hotových, snadno dostupných, výchozích materiálů*

Následující příklady demonstrují různé aspekty předloženého vynálezu a nejsou chápány tak, že by jakýmkoliv způsobem patentové nároky limitovaly.

Příklad 1

Příprava 3,8-diethyl-6-morfolin-3H-purinu

S tupé η I,

Příprava 3,8-diethyl-hypoxanthinu

- — t » .

Ku 18,9 g 3,8-diethyl-2-thioxanthinu, rozpuštěného ve 370,0 ml 2N roztoku hydroxidu sodného, bylo přidáno během 1,5 hodiny po částech 75,6 g slitiny niklu a hliníku ( 1,4M hliníku a 0,6M niklu) při teplotě 65 °C. Po další 0,5 hodině, kdy bíjla reakcní směs udržována při teplotě 65-7O^uC, byl reakční produkt odfiltrován, promyt s 200,0 ml IN roztoku hydroxidu sodného a. filtrát byl zneutralizován se 183,0 ml kyseliny chlorovodíkové 'í5JO*ín9_pir 7,0.

VznikV hydroxid hlinitý byl odfiltrován, filtrát byl zahuštěn do sucha a zbytek byl nasuspendován při teplotě 90°0 do 500,0 ml absolutního ethanolu, a nerozpustný chlorid sodný byl odfiltrován a promyt.

Po zahuštění filtrátu do sucha^byl zbytek rozpuštěn ve 200,0 ml chloroformu, zfiltrován a opět zahuštěn do sucha.

Zbytek byl překrystalizován ze 150,0 ml ethanolu a bylo získáno 12,68 g Žádaného 3,8- diethylhypoxanthinu.

Teplota tání: ( sublimace při teplotě 220°C),

305 - 3O7°C za rozkladu.

Příprava 3,3-diethyl-6-thiohypoxanthinu

Produkt, získaný ve Stupni I (8,65 g\ a oxid fosforečný ( 12,0 g), byly zahřívány za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 1,0 hodiny ve 150,0 ml pyridinu. P6í ochlazení bylo k reakční směsi přidáno po kapkách 59,4 ml 2N roztoku hydroxidu sodného a vzniklá pevná látka byla odfiItrovánaVpromyta s vodou.

Po zahuštění filtrátu za vakua k suchu byl zbytek nasuspendován do 200,0 ml vody s izolován. Filtrát byl vytřepán 3x se 600,0 ml chloroformu a zbytek z organické fáze byl spojen s izolovaným pevným zbytkem ( celková hmotnost 6,08 g), rozpuštěn v 500,0 ml chloroformu a zfiltrován přes 24,0 & silikagelu.

Po eluci bylo z frakce 2 a 3 získáno 4,63 g surového produktu, který byl překrystalizován ze 120,0 ml methanolu.

Bylo získáno 3,58 g 3,8-ďiethyl-6-thióhypoxanthinu.

Teplota tání: ( sublimace při teplotě 21O°C),

250 - 270°C za rozkladu

Z druhého podílu bylo získáno dalších 0,58 g.

Elementární analysa:

Vypočteno : C 51,90 H 5,81 N 26,9 S 15,40 % Nalezeno : C 51,76 H 6,01 N 26,82 S 15,64 %

Příprava 3,8-diethyl-6-morfolin-3H-purinu

Produkt, získaný ve Stupni II (52,0 mg), byl zahříván zs refluxu pod zpětným chladičem v 5,0 ml morfolinu-po dobu 21,0 hodin.

_Po zahuštěni směsi za vakua bylo získáno 65,0 mg surového 3,8-die thyl-6-morfolin-3H-purinu.

Příklad 2

HWl * •'«W· tí * v * »mn' i· . JI. i w

Příprava 3,8-diethyl-6-morfolin-3H-purinu

S t u p e ň I

Příprava 3,έ-diethy1-2,6-dithioxanthinu ř

Směs 19,4 g 3,8-diethyl-2-thioxanthinu a 22,75 g oxidu fosfoftáného ve 280,0 ml pyridinu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 4,5 hodiny. Po ochlazení na teplotu místnosti, bylo za intenzivního míchání a chlazení přidáno během 15 minut 113,0 ml 2N roztoku hydroxidu sodného. Vzniklá suspenze byla zfiltrována , promyta pyridinem a zs vakua byla zahuštěna.

Zbytek byl nasuspendován do 150,0 ml vody a zahuštěn s cílem odstraněni pyridinu. Suspenze ve vodě poskytla po izolaci pevný surový produkt, který byl rozpuštěn ve 150,0 ml 1N roztoku hydroxidu sodného a poté byl zpracován se dvěma podíly aktivního uhlí a poté byl roztok zfiltrován.

- 29 ______Filtrát byl pomalu okyselen se 38,0 ml _____ seliny chlorovodíkové na pH 3,0 a pevná látka byla izolována. Vysušený surový produkt (19,85 g) byl při teplotě 95°C nasuspendován ďo 400,Ό ml 2-propanolu. '.

Po ochlazení na teplotu místnosti bylo po izolaci a promytí získáno 17,62 g pevné látky.

Stupeň II

Příprava 3,S-diethyl-3,7-dihydro-6-morfolin-2-thio2H-purin-2-onu

Produkt získaný ve Stupni I (14,42 g) byl zahříván za réfluxu pod zpětným chladičem v 78,4 ml ( 900 mmolu) morfolinu po dobu 30 hodin. Po ochlazení na.teplotu místnosti byl reakční produkt nasuspendován do 100,0 ml acetonu a po izolaci a promytí bylo získáno 16,49 g Žádaného, v nadpise uvedeného produktu.

Stupeň III

Příprava 3 jS-diethyl-č-morfolin-^H- purinu

Produkt, získaný ve Stupni II (7,34 g), byl rozpuštěn ve 150,0 ml 2N roztoku hydroxidu sodného a poté bylo přidáno během 1,25 hodiny při teplotě 65°C 22,95 g 50#ní slitiny nikl-hliník (425 mmolu hliníku a 196 mmolu niklu).Po další 1,5 hodině bylo přidáno při teplotě 65 - 70°G dalších 15,0 ml ION roztoku hydroxidu sodného a po částech 11,48 g 50%ní slitiny nikl-hliník.Po další 0,5 hodině, kdy byla teplota reakční směsi udržována v rozmezí 65 — 70°C, byl reakční produkt ponechán v klidu přes

- 30 noc..

Toté by lo přidáno Ί 00 ,O~ml ďi čhlorme tháňú, šuspenze byla zfiltrována a nikl byl promyt ae 200,0 ml dichlormethanu a 100,0 ml vody.

Poté byla organická fáze oddělena, promyta 2x s vodou a zahuštěna. Zbytek byl mechanicky zpracován a vyjmut a 50,0 ml petroletheru.

Bylo získáno 5,40 g žádaného, v nadpise uvedenTéhó produktu, ve formě pěvně^látky, · ” ířeplota tání : 103 - 107°C

Elementární analysa :

Vypočteno:* c’59',75 H 7,33 N.26,80 %

Nalezeno ' : 0559^64'^TT 7,55 N 26,35 % ’’

Sůl ve formě hydrochloridu^krystalizovaná z acetonu^ měla teplotu tání: (sublimace 145°C), 220 - 222°CPříklad 3

Příprava 8-cyklopropy1-3-ethy1-6-ethylamino-3H-purinu

S t u p e η I

Příprava 8-cyklopropy1-3-ethy1-6-ethylamino-3,7dihydro-2-thio-2H-purin-2-onu

Dle postupu, popsaného v Příkladu 2, Stupeň I, připravený 8-cyklopropyí-3-ethyl-2,6-dithioxanthin ( 20,19 g) a 320,0 ml 70&ního ethvlaminu ve vodě ( 4,0M ), bylo předloženo do tlakové nádoby(autokláv) a reakční směs bylá zahřívána při teplotě 150°C po 'dobu 6,0 hodin. Obsah auiokiávňbyl450 '31.--------Poté byla reakční směs ochlazena na teplotu místnosti, zpracována se dvěma, podíly (0,2 g) aktivního uhlí, zfiltrována a odpařena do sucha.

Zbytek byl mechanicky zpracován se 300,0 ml ethanolu, objem byl zahuštěn na cca 200,0 ml a pevná látka byla izolována.

Bylo získáno 16,48 g žádaného, v nadpise uve- . děného produktu.

Teplota tání : 265°C ( za rozkladu )

S t u p e η II

Příprava 6-cyklopropyl-3-ethyl-6-ethylamino-3Hpurinu

Produkt, získaný v předcházejícím Stupni I ( H,85^?g), byl rozpuštěn ve 2N roztoku hydroxidu sodného (-270 -ml) a ION roztoku, hydroxidu.sodného ( 27,0 ml) a směs byla zahřáta na teplotu 65°C.

V průběhu 1,25 hodiny bylo za intenzivního míchání přidáno při teplotě 65-7O°C 60,3 g 50%ní slitiny nikl-hliníkí 518 mmolu niklu a í,125mmolu hliníku) a po další 0,75 hodině, kdy byla.reakční směs udržována při stejném tepelném rozmezí 65-7O°C, byla směs ochlazena na teplotu místnosti a zpracována se 400,0 ml chloroformu.

Nikl byl odfiltrován a promyt se 350,0 ml chloroformu a 150,0 ml vody. Po rozdělení filtrátu byla chloroformové fáze odpařena do sucha a zbytek ( 19,64 g) byl rozpuštěn ve 100,0 ml acetonu,zpracován se 2 podíly (0,15 g) aktivního uhlí,zfiltrován

-32 . .----—*_a_.odpařen.___________ _

Získaný zbytek byl zpracován se 100,0 ml diethyletheru a byla izolována krystalická látka(6,10

Teplota tání : SO - 96°C

Ze -druhého podílu-bylo- získáno dalších 1,25 g.

bo Ještě jednou překrystalizovaný vzorek z diisopropyl- ⁴ etheru měl teplotu tání: 103 - 105°C i

Elementární analysa při obsahu 3,3% vody:

Vypočteno-:^-C.60,25· H-7,54 -Ν.^29-,·28 <0-2,93 ·*%--<- - »·~ Nalezeno _.: „_C .60.52 H 7.4.6 . N..29.10 O 2- Q2⁺/%— +/ - z rozdílu

Sůl ve formě hydrochloridu, krystalizovaná ze směsi methanolraceton, ..měla. teplotu- tání-: . 183 — 191°C - ......------ -··· Příklad 4

A. Příprava 8-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)3-ethyl-6-ethylamino-3H-purinu hydrochloridu

B. Příprava 8-(3-cyklopentyloxy-4-hydroxybenzyl)3-ethyl-ó-ethylamino-3H - purinu

Stupeňl

Příprava 3-cyklopě ntyloxy-4-me thoxy-be nzylalkoholu.

- 33 ---------- -------- -------------K roztoku 48,70 g .(2.2.0 mmolu) .3-scyklopěntyloxy.. ....

4-methoxybenzaldehydu ve 250,0 ml methanolu, bylo přidáno v průběhu 10,0 minut po Částech 8,57 g (220 mmolu) 97%ního tetrahydrobóritanu Sodného za chlazený v teplotním rozmezí 15 - 22°C.

Po dalších 20 minutách b.yl methanol za vakua odstraněn a zbytek byl vyjmut do .10,0 ml vody a 300,0 ml etheru.

Etherová fáze byla odpařena do sucha.

Bylo získáno 48,5 g ( 99,2%) benzylakoholu v tekuté formě.

Stupeň II

Příprava 3-cyklopentyloxy-4-methoxy-ben2ylkyanidu

K roztoku 40,0 g (180 mmolu) benzylakoholu ve 530,0 ml dichlormethanu, bylo během 5 minut přidáno 32,7 ml (450 mmolu) thionylchloridu. Vzniklý roztok byl za vakua odpařen do sucha a tato operace byla opakována ještě po přidání toluenu'. '

Bylo získáno 46,30 g (106,9%) surového benzy1chloridu, který byl rozpuštěn ve 230,0 ml díethylformamidu a reagován s 23,50 g ( 360 mmolu) kyanidu draselného. Reakční směs byla poté zahřívána po dobu 4,0 hodin při teplotě 5O-55°C, *' Po odfiltrování sole byl filtrát za vakua odpařen do sucha a tato operace byla opakována ještě jedi nou po přidání vody. Zbytek byl vyjmut do etheru a vytřepán s 1N roztokem hydroxidu sodného.

Po odpaření etherové fáze do sucha bylo získáno 41,20 g (99,0%) surového benzylkyanidu.

S tup e ň—III—-— ..______________> .

Příprava (3-cyklopentyloxy-4-methoxy-fenyl)-acetyl· chloridu

Ve směsi 410,0 ml 94%ního ethanolu; 106,0 ml

....... ' vody -a-180,0 ml 1ΌΝ roztoku hydroxidu sodného, bylo _ zahříváno za ref.luxu^pod zpětným^ch-ladigem-4P_TQ2-g(180 mmolu) benzylakyanidu po dobu 20,0 hodin.

Po odstranění ethanolu za vakua, byl roztok zředěn s vodou na 800 ml a dvakrát zpracován se 2,0g aktivního uhlí, zfiltrován a poté okyselen se 185 ml ION kyseliny chlorovodíkové. . . „x - Pomalu krystalu jící kyselina _Lbyla^ izolována a vysušena při teplotě 30°C,

Bylo získáno 42,20 g (92,9%) kyseliny.

etheru bylo možno vyextrahovat ještě 1,51 g (2,3%) zmíněné kyseliny.

Oba podíly byly spojeny, (173 mmolu) a. zahří-B., ......, vány za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 1,5 hodiny ve směsi 500,0 ml dichlormethanu a 31,4 ml .( 433 mmolu) thionylchloridu.

Poté byl roztok zpracován 2x se 2,0 g aktivního uhlí, zfiltrován a odpařen do sucha,· Tato operace*· » bxla opakována ještě 2x s malým množstvím toluenu.

Bylo získáno 48,7 g ( } 100%) surového acětyl- chloridu, ve formě červenavě zbarvené kapaliny,

S t u 5 e_n IV _ ..........------ ------Příprava 8-(3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzyl)-3ethyl-2-thioxantKinu ,

- 35 --------y_e-200,0-ml-pyřidimrbyTo' rozpuštěno-10,02»-----2.

(45 mmolu) 5,6-diamino-1-ethyl-2-thiouracilu.hydrochloridUja tato směs byla reagována se 6,05 g(57 mmolu) uhličitanu sodného a 15,5 g (56 molu) produktu, připraveného v rámci Příkladu 4, Stupen III, rozpuštěného ve 25,0 ml etheru,a přidaného k reakční směsi během 10 minut při teplotě 5 - 10°C.

Po 1,5 hodině stání při teplotě místnosti byl pevný produkt odfiltrován a filtrát byl za vakua odpařen do sucha.

Zbytek byl rozpuštěn ve 100,0 ml 2N roztoku hydroxidu sodného a 200,0 ml vody a zahřát k refluxu pod zpětným chladičem a během 1,0 hodiny bylo z reakční směsi 70 ml oddestilováno. Roztok byl zfiltrován a zneutralizován na pH 7,5 s 52 ml 5N kyseliny chlorovodíkové.

Pevná zbytek byl izolován a vysušen.

J^ylo získáno 14,73 g (79,7%) surového 2-thioxanthinu ( z vody bylo získáno zpět 4,2 g kyseliny fenyloctové), který byl nasuspendován do 250,0 ml horkéhomethanolu a opat izolován.

Bylo získáno 10,68 g (59,3%) přečištěného 24. thioxanthinu, který byl rozpuštěn ve 100,0 ml 1N roztoku hydroxidu sodného a zfiltrován. Filtrát byl okyselen na pH 6,0 a pevná látka byla izolována.

Bylo získáno 8,82 g ( 48,9%) 2-thioxanthinu. Teplota tání : (26O°C), 280 -310°C za rozkladu

Stupeň VPříprava 8-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-3ethyl-2,6-dithioxanthinu

- 36 ν8070Πη1~ pyridinu by lo zahříváno za -refluxu¹-----pod zpětným chladičem 8,41 g ( 21 mmolu) 2-thioxanthi nu se 5,60 g (25,2 mmolu) oxidu fosforečného. Po 5,5 hodinách bylo k reakční směsi přidáno při teplotě 5 - 10°C 27,7 ml (55,4 mmolu) 2N roztoku hydroxidu sodného. Pevná látka byla odfiltrována a promyta s pyridinem. Filtrát byl za vakua odpařen do sucha a z byt e k-byl-na s.uspe nd ován-d o—200-,0-ml —vodyys—při da ným malým množstvím tetrahydrofuranujpro snazší krystalizaci. Suspenze byla poté zahuštěna a pevná látka byla při pH 8,0 izolována a promyta.

Po opětném rozpuštění ve 100,0 ml 0,5N roztoku hydroxidu sodného, zpracování 3 aktivní m^ uhlím ή 20%), filtraci a okyselení na pH 6,0, byl získán surový dithioxonthin (7,24 g/£9,6% ) ,ve formě pevné látky.

Krystalizací z chloroformu a nasuspendováníí^do horkého methanolu, bylo získáno 5,31 g (60,7%) dithio xanthinu.

Teplota tání : 241 - 243°C

Matečné louhy byly spojeny (2,36 g) a zfiltrovány s chloroformem přes sloupec se 60,0 g silikagelu.

Bylo získáno 1,73 g (19,8%) žádaného, v nadpise uvedeného produktu, ve formě druhého podílu.

Stupen VI rvjť.j'____— o f -> --.t.l —4...Ί Λ _ rvipj-u vu o-\j-<yh.iu^ubjrxwitf —t— _*» ..V. Λ w. «...Ί ) _ T _

-Uic ViXUAJf —UUiiAi;/ x / —□—

I —6—a f.hvl ami nn.

Směs 6,67 g ( 16 mmolu) dichlorxanthinu a 52,0 ml 70%ního ethylaminu ve vodě byla v atmosféře dusíku

- 37 ' 2'ahrívána ns -15Ό-0 -v -tlakové—nád obě- (—autok-1ár)”při-tlaku 1,75 MPa po dobu 12,0 hodin. Poté byl roztok

--------—-_________zpracován.g .aktivní.nuuhlím„(5%),__zfiltrován a za vakua byl zahuštěn do sucha.

Zbytek byl nasuapendován do vody, okyselen s 1N kyselinou chlorovodíkovou na pH 4,0 a zneutralizován poté na pH 8,0 s hydrogenuhličitaném sodným. Pevné látka byla izolována, promyta a vysušena.

Bylo získáno 6,66 g (97,4%) surového thioisoguaninu.

Stupeň VII

A. Příprava S-(3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzyl)3-ethyl-6-ethylamino-3H-purinu. hydrochloridu

Směs 6,41 g (15 mmolu) surového thioisoguaninu a 9,70 g (165 mmolu) neutrálního Raneyova niklu, byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem v 70,0 ml 1-propanolu po dobu 3,0 hodin. Poté byl nikl odfiltrován a filtrát byl za vakua odpařen do sucha.

Zbytek (5,86 g/98,8%) byl rozpuštění v originální verzi patentu nedefinovaném množství)chloroformu, ze kterého byla( zřejmě) oddělena( opět nedefinovaná část roztoku), která byla za vakua odpařena do sucha a zbytek (3,76 g/63,4%) ve formě surového 3H-purinu, byl rozpuštěn ve 30,0 ml methanolu a reagován 3 10,0 ml 1N methanolického chlorovodíku.

Poté byl roztok za vakua odpařen do sucha a zbytek byl překrystalizován ze směsi aceton-ethylacetát.

Bylo získáno 3,66 g (56,5%) 8-(cyklopentyloxy4-methoxybenzyl)-3-ethyl-6-ethylamino-3H-purinu. hydrochloridu.

.-í.e.plo.te _tání_:_________16 9.. - 171?.C___________________

Elementární analysa pro sumární vzorec C₂₂H₃oC1H₅°₂:

Vypočteno : C 61,17 H 7,00 N 16,21 %

Nalezeno : C 61,09 H 6,77 N 16,18 %

B. Příprava 8-( 3-cykropentyloxy-4-hyčroxyhenzyl)3-ethyl-6-ethylamino-3H-purinu

Postupem popsaným výše a použitým v prvé fázi tohoto Stupně VII k přípravě 5,86 g (98,8%) zbytku, rozpuštěného v ( nedefinovaném-množství) chlore-, formu, byla oddělena ( zřejmě opět nedefinovaná část roztoku) , která byla důkladně vytřepána'do 1N roztoku hydroxidu.sodného. Tento roztok byl okyselen s 5N kyselinou chlorovodíkovou na pH 4,0 a zneutralizován s hydrogenuhličitanem sodným na pH 7,5.

Sraženina ve formě olejovíté kapaliny, která pomalu krystalizovala, byla ve formě pevné látky izolovali».

Bylo získáno 0,49 g 8-(3-c,yklopentyloxy-4hydroxybenzyl)-3-ethyl-6-ethylamino-3-purinu.

* * i

Teplota tání : 172 - 173°C p ř í k 1. a d 5

Příprava 3-(3-cyklopentyloxy-4-me thoxybenzyl)-6ethylamino-8-isopropyl-3H-purinu. hydrochloridu

- 3:9 -S--t—tt—p- e--ň—-I-----------_ _______________________________

Příprava 3-cyklopentyloxy-4-methoxy^benzáldehydu

Roztok 77,70 » (500 mmolu) isovanilinu a 69,40 g (600 mmolu) 97%ního terc«rbutoxidu draselného, rozpuštěného v 800,0 ml 1-isopropanolu (69,0 ml/

630 mmolu), byl zahříván za refluxu pod zpětným jí..-.: chladičem. Po 3,0 hodinách bylo při teplotě 80°C přidáno dalších 9,25 g (80 mmolu) terc_T-butoxidu draselného a vzniklá suspenze byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem další 3,0 hodiny.Pevná látka byla odfiltrována a filtrát byl za vakua odpařen do sucha.

Zbytek byl rozpuštěn v etheru a vytřepán s IN roztokem hydroxidu sodného.Stherová fáze byla poté odpařena do sucha.

Bylo izolováno 85,40 g (77,5%) 3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzaldehydu.

S t u p e ň II '

Příprava 3-cyklopentyloxy-4-me thoxy-benzaldehydoximu

Ve 350,0 ml 94%ního ethanolu bylo rozpuštěno 85,4 g (388 mmolu) 3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzaldehydu a vzniklý roztok byl přidán během 10 minut při teplotě 15 - 20°C k roztoku 29,7 g (427 mmolu) hydroxylamoniumchloridu a 52,8 g (388 mmolu) acetátu sodného trihydrátu (3^0)/ve 230,0 ml vody.

Po 2,0 hodinách byl ethanol z reakční smě3Í za vakua odstraněn a zbytek byl zpracováván se 16,3 g ( 194 mmolu) hydrogenuhličitanu sodného tak dlouho

- 40 ---------dokud neustal _vývo oxidu uhličitého,· a-poté--byl------zbytek vytřepán do etheru.

Po odpařeni etherové fáze bylo získáno 91,0 g ( 99,7%) oximů ve formě směsi 2 isomerů.

Stupeň III

Příprava 3-cyklopentyloxy-4-me thoxy-benzylaminu

Směs 73,5 g (320 mmolu) oximuj 80,0 ml methanolu * 55,0 g tekutého amoniaku a 18,5 g neutrálního Raneyova nikluybyla předložena do tlakového reaktoru ( autokláv) o obsahu 450 ml. Poté byl autoklav naplněn plynným vodíkem a natlakován na 8,4 MFa a obsah autoklávu byl zahříván na 75-80°C. Po poklesu tlaku na 4,2 MPa byl autokláv opět natlakován plynným vodíkem na 3,4 MPa. Po 4,0 hodinách dosáhl tlak v autoklávu hodnoty 7,56 MPa a zůstal konstantní. Nikl byl odfiltrován a promyt methanolem. Poté byl filtrát odpařen do sucha, zbytek byl rozpuštěn v etheru a vytřepán s IN roztokem hydroxidu sodného. Etherová fáze byla odpařena do sucha.

Bylo zí3káno 68,9 g (97,3%) benzylaminu.

Stupeň IV

Příprava 3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzy1-isothikyanátu __ ____

V 10,0 ml toluenu bylo rozpuštěno 82,3 g (372 mmolu) benzylaminu a tento roztok byl přidán během 20 minut při teplotě 15-2O°C ( za chlazení) k emulzi 22,5 ml ( 372 mmolu) sulfidu uhličitého a

- 41 ------------14,38 -g -i-—37 2-mmolu j hydroxidusodného-ve -52,0- -ml.;', vody.

- --------------------Poté -by-la-re akční. .směs...zahřívána .po . dobu__l,O hodiny na teplotu 75-8O°C a následně byla ochlazena najteplotu 40°C. Poté bylo během 15 minut přidáno při teplotě 4O-45°C 35,4 ml ( 372 mmolu) ethylchlorformiátu. U vzniklé emulze byloV^praveno^H na cca 8,0 a emulze byla zahřívána ha teplotu 55-6O°C, Vývoj plynu ustal asi po 10,0 hodinách, kdy pH reak· ční směsi bylo udržováno na pH 8,0 s 2N roztokem · hydroxidu sodného( celková spotřeba cca 8,0 ml)..

Organická fáze byla izolována a rozpouštědlo bylo odpařeno.

Bylo získáno 96,3 g (98,3$) -benzylisothiokyanátu.

Stupeň V

Příprava 1-Í3-c,yklopentyloxy-4-methoxy-benzyl)-2thiomočoviny

Roztok, připravený rozpuštěním 96,3 g (366 mmolu) benzylisothiokyanátu ve 100,0 ml tetrahydrofuranu,byl reagován se 44,2 ml (732 mmolu) 32$ního roztoku amoniaku. Po 0,5 hodině, kdy teplota reakční směsi byla udržována na 40-45°C, bylo přidáno 300 ml vody a tetrahydrofuran byl za vakua odstraněn. Suspenze gumovité konzistence byla zpracována se 200,0 ml etheru a krystaly byly izolovány a promyty s vodou a s etherem.

Ze suspenze ve 30,0 ml methylenchloridu bylo po izolaci získáno 65,77 g ( 64,2$) benzyl-2-thiomočoviny.

- 42 -Teplota—tání_:_144._-_.145_°C_____ _________________

S t u p e ň VI

Příprava 6-amino-1-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl-2-thiouracilu

K roztoku, připravenému rozpuštěním 29,65 g ( 256 mmolu) 97%ního terc.-butoxidu draselného ve 240,0 ml 2-propanolu, bylo přidáno při teplotě 80°C 65,33 g ( 233 mmolu) 2-thiomočoviny a 25,3 ml (238 mmolu) ethylky^nacetátu. Po .30 minutách^ahřívání reakční směsi za refluxu pod zpětným chladičem,přeŠla reakční směs do formy roztoku, ku kterému bylo po 4,5 hodinách přidáno dalších 2,96 g (25,6 mmolu) terc.-butoxidu draselného a 4,97 ml (46,6 mmolu) ethyIkyanacetátu.

w

Po 22 hodinách, kdy byla reakční směs zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem, byla pevná látka izolována, spojena se zbytkem z filtrátu a rozpuštěna v 1 litru vody a poté byla vysrážena s cca 50 ml 5N kyseliny chlorovodíkové ( pH 3,0 —4,0)·

Pevná látka byla izolována, promyta,vysušena, překrystalizována ve formě suspenze za refluxu pod zpětným chladičem z.1,0 litru acetonu, a po zahuštění na cca 300,0 ml byl produkt izolován při teplotě 23°C.

Bylo získáno 80,65 g (85,7%) uracilu, obsahujícího 1 ekvivalent acetonů.___________________________

Teplota tání : 225- 227°C

- 43 Stupeň Vil ----------Pří pra va -6--amino—1- (-3-cy klopě ntyloxy_r4-me thoxybenzyl)-5-nitroso-2-thiouracilu

Po rozpuštění 68,9 g (170 mmolu) uracilu ve 650,0 ml kyseliny octové, bylo za účelem odstranění acetonu oddéstilováno z tohoto roztoku 100 ml (za vakua) a poté bylo během 10 minut přidáno při teplotě 65-7O°C 43,4 ml (174 mmolu) 4N roztoku dusitanu sodného. Pq dalších 5 minutách byla vzniklá suspenze ochlazena na teplotu 30°G a zředěna s 1,7 litry vody.

Pevná látka byla izolována, promyta a vysušena.

Bylo získáno 64,08 g ( 100%) nitrosouracilu, který, bvl rozpuštěn ve 330 ml IN roztoku hydroxidu sodného a 300,0 ml vody, roztok byl zfiltrován a filtrát byl okyselen s 5N kyselinou chlorovodíkovou na pH 2,0, t

které bylo udržováno ,aby látka zůstala v suspenzi ještě po přidání 2,0 litrů vody.

Pevná látka byla izolována a pr omyta a poté opět násuspendována v 60,0.ml methanolu a opět izolována.

Bylo získáno 54,2 g ( 84,7%) nitrosouracilu.

Stupeň VIII

Příprava 1-(3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzyl)5,6-diamino-2-thiouracilu

Po nasuspendovéní 15,06 g ( 40 mmolu) nitrosouracilu ve 300,0 ml tetrahydrofuranu,byl tento produkt hydrogenován s plynným vodíkem za přítomnosti 6,0 g Ráneyova niklu ( neutrální),po dobu 2·,5 hodiny, kdy ustala i spotřeba vodíku.

- 44 p₀-X_tQ“hodině bylo vše rozpuštěno a poté~’se utvořila nová sraženina, která byla rozpuštěna ve směsi methylenchloridu a methanolu.Nikl b.yl odfiltrován a filtrát byl odpařen za vakua do sucha.

Bylo získáno 13,96 g (96,3¾) surového dlaminouracilu.

Stupen IX

Příprava ó-amino-l-ÍJ-cyklopentyloxy-ý^methoxybenzyl)-5-isobutyryl-amino-2-thiouracilu

Dvoufázový roztok 15,01 g (41,4 mmolu) aiaminouracilu}.130,0 ml tetrahydrofuranu} 150,0 ml vody} 6,96 g ( 32,8 mmůlu) hydrogenuhličitanu sodného a 10,52 ml (62,1 mmolu) anhydridu kyseliny isomáselné, + *>1 3 Λ + X ζζθΡ ** O + Λ rt v^pxuvc y j v v a vuiud evo a ·' 11 Q * ** Λ * *3 UU.Í3XA.U p.U dobu 1,0 hodiny.Poté byl tetrahydrofuran za vakua odpařen a zbytek byl naředěn s 200,0 ml vody (pH 8,0).

Pevná látka byla izolována, promyta a vysušena. Bylo získáno 16,25 g ( 90,7¾) isobutyrylaminouracilu.

S t u p e η X

Příprava 3-(3-cyklopěntyloxy-4-methoxy-benzy1)-8isopropyl-2-thioxanthinu

......^—Vě^- smě si^-! 2070 ml“ rN^-řožtókuHy3roiri'd'u“šodřréHb a 30,0 ml vody, bylo zahříváno za refluxu pod zpětným chladičem 17,81 g ( 41,2 mmolu) iaobutyrylaminouracir lu po dobu 0,75 hodiny. Poté byl roztok zpracován 2x s 0,5 g aktivního uhlí,zfiltrován, okyselen 3 5N

- 45 ky3_elinou_._chlor_o.vodíkpvpu. Poté bylo pH roztoku upraveno a roztokem hydrogenuhličitanu sodného na pH 7,0 - 8,0.

Pevná látka byla izolována*, pronyte’V vysušena, Sylo získáno 15,31 g ( 89,6%) 2-thioxanthinu.

Teplota tání i 270 - 276°C ( za rozkladu )

S t u p e ň XI

Příprava 3- (3-c.7klopentyloxy-4-me thoxy-benzy1)-8iaopropy1-2,6-dithioxanthinu

Směs 15,17 g (36,6 mmolu) 2-thioxanthinu a 9,76 g (43,9 mmolu) oxidu fosforečného, b.yla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem v atmosféře dusíku se 140,0 ml pyridinu po:dobu 5,5 hodiny a poté bylo při teplotě 5 - 1O°C přidáno po kapkách 48,3 ml C 96,6 mmolu) 2N roztoku hydroxidu sodného.

Pevná látka byla odfiltrována a promyta s pyridinem. Filtrát byl’ža vakua'odpařen'do suchá a ' zpracován se 300,0 ml vody. Poté bylo pH vzniklé suspenze upraveno s roztokem hydrogenuhličitanu sodného na pH 7,0 a pevná látka byla izolována, promyta a po rozpuštění ve δΟΟ,Ο ml 0,5N roztoku hydroxidu sodného byla zpracována 2x s 1,6 g aktivního uhlí, poté zfiltrována, okyselena s 5N kyselinou chlorovodíkovou a zneutralizována s roztokem hydrogenuhličitanu sodného na pH 7,0. Pevná látka byla izolována,promyta a vysušena.

fcylo získáno 14,64 g (92,9%) surového dithioxanthinu, který byl rozpuštěn ve 400,0 ml methylenchloridu a zfiltrován přes sloupec se 60 g.silikagelu. Rozpouštědlo bylo odpařeno a zbytek byl nasus....... ” 46 - ' ~ .................

-penci o v án d o 20.,0 m1 10 0%n í h o _.e tha n o lua-p o t é -iz o-í---------lován.

. Bylo získáno 14,34 g (82,2%) dithioxanthinu, obsahujícího 1 mol ethgiiolu.

Teplota tání : 204 - 206°C

Stupeň XII

Příprava 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzyl)-6e thy 1-3,7-dihydro-S-i sopr opy 1-2-thio-2H-purin-2-onu

Směs .6.20 <...( 12.mmolu) dithioxanthinu a 42.0 ml 70%ního ethylaminu ve vodý byla předložena do tlakového reaktoru ( autokláv) o obsahu 450 ml a poté byla zahřívána na teplotu 150°C ( 1,68 MPa)po dobu·.

hodin.Poté byl roztok zfiltrován a odpařen do ,,sucha.. Zbytek na suspendován., do vody, okyselena.,

1N kyselinou chlorovodíkovou na pH 3,0 a poté byl , zneutralizován s roztokem hydrogenuhličitanu sodného na pH 7,0 - 8,0.

Pevná látka byla izolována, promyta a vysušena. Bylo získáno 5,48 g ( 95,5%) thioisoguaninu.

Teplota tání 72 - 77°C

Stupeň XIII

Příprava 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-6ethylamino-8-isopropyl-3H-purinu, hydrochloridu

Směs 5,43 g ( 12,3 mmolu) thioisoguaninu a 7,9 g neutrálního Raneyova niklu byla zahřívána za

- 47 ___________ref luxu.pod, zpět ným- chla d i čem—V-čQ_t0. ml_.1 -propanolu po dobu 4,5 hodiny. Po odfiltrování niklu a odpaření _ filtrátu. za_ vakua _k suchu bylo získáno 4,90 g { 97,2% ) surového purinu,který byl rozpuštěn ve 20,0 ml chloroformu, vytřepán s IN roztokem hydroxidu sodného a zfiltrován přes slpupec se 30 g silikagelu.

Po odpaření rozpouštědla byl zbytek rozpuštěn ve 25,0 ml methanolu, reagován s 11,0 ml methanolického IN chlorovodíku e po odpaření získaný zbytek byl nasuapendován do 80,0 ml ethylacetátu a izolován.

Bylo získáno 3,49 g (63,6%) 3H-purinu.hydrochloridu.

Teplota tání : 202 - 212°C ...

Elementární analysa pro sumární

Vypočteno : G 61,94 H 7,23 Nalezeno : C 62,17 H 7,02

Příklad 6

Příprava 3-C 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)6-ethylamino-3H-purinu. hydrochloridu vzorec ^^H^CIN^O^:

N 15,70 0 7,17 % N 15,66 0-7,30 %

S t u p e η I

Příprava 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-2thioxanthinu

Po rozpuštění 14,62 g (40 mmolu) 1-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-5,6-diamino-2-thiouracilu

- 48 ------ve -200-,-0-Jnl /kyseliny mravenčí _t byl vzniklý roztok zahuštěn za vakua při teplotě místnosti^za účelem odstranění vody. Po přidání 50,0 ml kyseliny mravenčí byla celá operace znovu opakována. Po úplné 1,0 hodině byl roztok kyseliny mravenčí zahuštěn na 30,0 ml při teplotě 25°C a zředěn s 300,0 ml vody.

Krystaly byly izolovány, promyty a vysušeny.

____Bylo získáno 13,48 g ( 86,3%) surovéhoJ-formamidu ( teplota, tání = 210 - 23O°C ), který byl zahříván za refluxu pod zpětným chladičem v 86,0 ml 1N roztoku hydroxidu sodného po dobu 15 minut.

Zakalený roztok byl zpracován & 3 0,6 g aktivního uhlí, zfiltrován, okyselen s 5N kyselinou chlorovodíkovou na pH 2,0 a poté zneutralizován na pH 6,5.

Amorfní pevná látka byla izolována, promyta a vysušena při teplotě 60°C.

Bylo získáno 11,93 & (80,1%) surového 2-thioxanthinu, který byl rozpuštěn ve 150,0 ml tetrahydrofuranu , zpracován s aktivním uhlím (5%),zfiltrován a zahuštěn na 40,0 ml a poté zředěn s 250 ml ethanolu_e po zahuštění na 120,0 ml byla vzniklá pevná látka izolována, promyta a vysušena.

Bylo získáno 9,21 g (61,9%) 2-thioxanthinu.

Teplota tání : 254 - 265°C

Elementární analysa pro sumární

Vypočteno : 0 58,05 H 5,41 Nalezeno : C 58,13 H 5,41

Stupeň II vzorec ^ci8^H20^N4°3^S:

N 15,04 0 12,89 % N 14,93 0 13,11 %

- 49 :Př.ipra.va_3j^(3-cyklopentyloxy-4-methgxy-b.enzy.I)-2_>.6____

- dithioxanthinu

Směs 8,94 g (24 mmolu? 2-thioxanthinu a· 6,4Ó g (28,8 mmolu) oxidu fosforečného byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem v 96,0 ml pyridinu v atmosféře dusíku po dobu 1,5 hodiny. Poté bylo přičáno_z za chlazení, při teplotě 5-10°C_z31,7 ml (63,4 mmolu )

2N roztoku hydroxidu sodného a reakční směs byla zředěna přídavkem 30,0 ml pyridinu.Vzniklá pevná látka byla odfiltrována a- filtrát byl za vakua odpařen-do. sucha,Zbytek byl nasuspendován do 30,0 ml vody a pevná látka byla izolována,' rozpuštěna ve 160 ml 0,5 N roztoku hydroxidu sodného , zfiltrována, zpracována s aktivním uhlím (20%), opět zfiltrována, okyselena s 5N kyselinou chlorovodíkovou na pH 5,0, pevná látka byla izolována, promyta a vysušena.

Bylo získáno 9,03 g (96,9%) surového dithioxanthinu, který byl rozpuštěn-ve 400.,0 ml chloroformu a zfiltrován přes sloupec se 30 g silikagelu.

Po odstranění rozpouštědla za vakua byl zbytek rozpuštěn v 50,0 ml tetrahydrofuranu, zfiltrován,zahuštěn na 30,0 ml, 2ředěn 3e 200 ml ethanolu, opět zahuštěn na 150 ml a pevné látka byla izolována,promyta a vysušena.

Bylo získáno 8,65 g (92,8%) dithioxanthinu . Teplota tání : 215 - 218°C

Elementární analysa pro sumární vzorec ^C18^H20^N4°2^S2 látky s obsahem 0,25 M ethanolu a 0,5M vody.

Vypočteno : C 54,32 H 5,54 N 13,70 0 10,76 % Nalezeno : 054,57 H 5,32 N 13,30 0.10,20%

- 50 Stupen III

Příprava 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxy-benzyl)3,7 - dihydro-2-thio-2H-purin-2-onu

Směs 4,66 g (12 mmolu) dithioxanthinu a 48,3 ml ( 60 mmolu) 70%ního ethylaminu ve vodě,byla zahřívána na teplotu 150°C v tlakovém reaktoru(auÍoklav7Yv atmosféře dusíku,za tlaku 1,68 MPa,po dobu Ϊ2 hodin.

Poté byl roztok zpracován s aktivním uhlím(5%), zfiltrován a odpařen do sucha.Zbytek byl vyjmut do 100,0 ml vody, okyselen s IN kyselinou chlorovodíkovou na pH 3,0,· a zneutralizován s hydrogenuhličitaném sodným ňa pH 7,0,' a pevná látka byla poté izolována, .

* bylo zÍ3káno 4,43 g í 92,5%) surového thioisoguaninu.

teplota tání : .99 - 103°C

Jf

S t u p e ň IV příprava 3-( cyklopentyloxy-4-methoxy-benzvl)-6ethylamino-3H-purinu . hydrochloridu

Směs 4,39 g ( 11 mmolu) thioisoguaninu a 7,10 g ( 121 mmolu) neutrálního Raneyova niklu byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem v 50,0 ml

1-propanolu po dobu 4,5 hodiny. Nikl byl poté odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha. Zbytek(3,79 g/

93,8%) byl rozpuštěn ve 2070^-mlčchloroformu a~074~ml methanolu a tento roztok byl zfiltrován přes sloupec se 24 g silikagelu také s 2%ním methanolem.

Spojené frakce byly promyty s 1N roztokem hydroxidu sodného a organická fáze byla odpařena do sucha.

- 51 —:—Zby-te-k—(-2-,-69- ζ/6 6., 6 %_ L_by.l r o z puf t ě n ve _ 30, Θ___ ml dichlormethanu a 0,60 ml methanolu a opět přefiltrován přes 30 g silikagelu.

Bylo izolováno celkem 1,36 g (46,0%) 3H-purinu, který byl rozpuštěn ve 20,0 ml methanolu, reagován s 5,4 ml 1N methanolického chlorovodíku a za vakua odpařen do sucha.

Krystalizací a rekrystalizaci z dichlormethanu a ethylacetátu bylo získáno 1,75 $ (39,4%) 3^purinu. hydrochloridu..

Teplota tání : 170 - 185°C (?)

Elementární, analysa pro sumární vzorec ^c20^26^1.^5^2¹

Vypočteno : C 59,47 3 6,49 -N 17,34 0 7,92 % Nalezeno : 059,72 H 6,44 N 17,25 08,24*

I

Příklad 7

Příprava 8-cyklopropyl-6-(4-pyridylme thyl-amin<^3-propyl-3H-purinu. dihydrochloridu

S t u p e η I

Příprava 8-cyklopropyl-3-propyl-2,6-dithioxanthinu

Do tříhrdlé baňky o obsahu 5,0 litrů, opatřené mechanickým míchadlem a kondenzátorem Se sušící rourkou, bylo předloženo 2,20 litrů pyridinu a 220,Og (0,88 molu) S-cyklopropyl-3-propyl-2-thio-6-oxo-xanthinu. K této směsi bylo přidáno 236 g (1,06 molu)

- 52 oxidu fosforečného a tato ...reakční. směs-byla...zahří-_______ vána za refluxu pod zpětným chladičem po dobu 5,0 hodin a poté ponechána v klidu přes nopři teplotě místnpsti.

Poté byla reakční směs ochlazena na teplotu 5 - 10°C a během 1,5 hodiny bylo přidáno za míchání 770,0 ml 3N vodného roztoku hydroxidu sodného. Míchání 'pokračovalo j e š, tě .30, .minuty po. _ oda tranění_ chledící.„_. lázně a vy3rážený produkt byl izolován pomocí filtra» ce za odsávání. .

Filtrační koláč byl poté intenzivně promyt se 300,0 ml pyridinu a 4 podíly á 300,0 ml tetrahydrofuranu. Pevná látka byla poté rozmíchána s vodou ( 750 ml), zfiltrována a promyta vodou. Surový produkt byl rozpuštěn v 1,7 litru 1N roztoku hydroxidu sodného a ^rozmíchán s 15 g Darco-G-60. Toto aktivní uhlí bylo odfiltrováno a uvedená operace byla opakována s novou Čerstvou porcí aktivního uhlí. Roztok bylokyše ln s 6N kyselinou chlorovodíkovou na pH 1,5 a slabě žlutě zbarvená sraženina byla izolována.

Poté byl pevný zbytek-opět rozpuštěn v 1,7 litru 1Η roztoku hydroxidu sodného a intenzivně zpracován se dvěma podíly aktivního uhlí postupem, popsaným výše. Po okyselení roztoku byla sraženina izolována a promyta s vodou.

Po vysušení do konstatní hmotnosti za vakua při teplotě 54°C|bylo získáno 126,0 g (56%)/v nadpise uvedené, Žádané sloučeniny.

Teplota tání j_ _ nad 245°C _ ____________________________L

Stupeň II

- 53 Pří pravé _8-_cyklopropy 1-3 ,7-^-dih.ydrO-6- (4-pyridvlmethylamino-3-propyl-2-thio-2H-purin-2-onu

Směs 5,33 g (20 mmolu) 8-cyklopropyl-3-n-propyí -2,6-dithioxanthinu a 21,3 ml (200 mmolu) 95%ního 4-pikoly laminuj byla zahřívána v prostředí argonu na 15O-155°C. Po 14 hodinách byLjiochlaZený roztok nalit do 100,0 ml vody, okyselen s 19,0 ml ION kyseliny chlorovodíkové a IN kyselinou chlorovodíkovou na pH 6,0, přičemž vznikla oranžově zbarvená látka gumovité konzistence. Při neutralizaci na pH 7,0 s hydrogenuhličitatem sodným gumovitá látka krystalizovala a pevný produkt byl izolován a promyt,

Sbýtekíbyl nasuspendován do acetonu a krystaly byly izolovány.

Bylo získáno 3,92 g (57,6%) surového produktu.Filtrát byl odpařen do sucha, zbytek byl rozpuštěn ve 40,0 ml 0,5N roztoku.hydroxidu sodného, . vytřepán 4x s methylenchloridem a opět okyselen s 5N kyselinou chlorovodíkovou na pH 6,0,

Opět během 48 hodin vykrystalizovala látka gumovité konzistence, šměs byla zneutraližována’na pH 7,0 s hydrogenuhličitanem sodným a pevná látka byla izolována.

Bylo získáno 1,75 g (25,7%) surového produktu. Oba podíly byly rozpuštěny ve 30,0 ml methylenchloridu a zfiltrovány přes sloupec s 30,0 g silikagelu. Nejdříve bylo získáno 150 mg.(2,8%) výchozího materiálu, poté 5,04 g (74,0%) žádaného produktu elucí s 5%ním methsnólem. Produkt byl rozpuštěn ve 32 ml IN kyseliny chlorovodíkové, zpracován s 250 mg aktivního uhlí,zfiltrován a zneutralizován se 2NcróřtóTni-hydr.oxidu-sodnéhn::a roztokem hydrogenuhličitanu sodného na pH 7,0-8,0.

Vodná fáze byla dekantována z gumovité látky,

-54 která_byla.promy ta 3 vodou a krystalizována-z acer tonu.

Eylo získáno 4,08 g (59,9%) thioisoguaninu.

Teplota tání : 204 - 210°C ( za rozkladu).

Stupeň III____ _

Příprava 8-cyklopropyl-6-(4-pyridýlmethylamino)3-propyl-3H-purinu. dihydrochloridu

Směs 3,06 g ( 9,0 mmolu) thioisoguaninu a 5,8 g neutrálního Raneyova niklu byla zahřívána za refluxu pod zpětných chladičem v l-propanoiu po dobu 4,0 hodin. Poté byl nikl odfiltrován a promyt s methanolem. Filtrát byl odpařen do sucha a zbytek, byl rozpuštěn ve 20,0 ml methylenchloridu a vzniklý roztok byl vytřepán s 1N roztokem hydroxidu sodného a odpařen do sucha.

Bylo získáno 2,43 g (87,4%) surového purinu, který byl rozpuštěn ve 20,0 ml methanolu, reagován s 17,0 ml methanolického chlorovodíku a opět odpařen do sucha.

Krystslizscí z isopropaholu bylo získáno 1,09 g ( 36,3%) purinu dihydrochloridu.

Teplota tání : 157 - 165°C příklad 8

- 55 Příprava 6-cyklopent,ylamino-8-cyklopropyl-3-propyl -3H-purinu. hydrochloridu

Stupeň I

Příprava 6-cyklopentyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro3-propyl-2-thio-2H-purin-2-onu

Směs 5,33 g (' 20 mmolu) 8-cyklopropyl-3-npropyl-2,6-dithíoxanthinu a 42,0 ml cyklopentylaminu byla zahřívána za vyloučení vzduchu v tlakovém reaktoru ( autokláv) n obsahu 450 ml^najteplotu 150°C (0,3.5 MPa.). Po 20 hodinách byl roztok pomocí methanolu převeden do kulaté baňky ( s kulatým dnem) a za vakua byl odpařen do sucha. Zbytek byl překrystalizován z acetonu.

9ylo získáno. 1,07 .g „(15,1) thioisoguaninu. hydrochloridu o teplotě tání = 196 .- 198°C.

Matečný louh byl rozpuštěn v methylenchloridu, vytřepán s roztokem hydrogenuhličitanu sodného a přefiltrován přes sloupec se 45 g silikagelu.'

Prvý nepolární podíl (0,54 g) byl odstraněn a zbytek poskytl 4,63 g ( 72,9%) surového isoguaninujve formě látky gumovité konzistence.

S t u p e ň II

Příprava 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3-npropyl-3H-puřinu. hydrochloridu

Směs 4,49 g (14,1 mmolu) thioisoguaninu a 9,2 g neutrálního Raneyova niklu byla zahřívána za refluxu pod zpětným chladičem ve 45 ml 1-isopropanolu po

.............- 56 -.........

dobu 5,0 hodin. P_oté byl nikl_odfiltrován a filtrát byl odpařen do sucha. Zbytek ( 100%) byl rozpuštěn ve 30,0 ml methanolu, reagován s 16,9 ml 1N roztokem methanolického chlorovodíku a odpařen do sucha.

Zbytek b.yl rozpuštěn v methylenchloridu, zpracován se 0,12 g aktivního uhlí,zfiltrován, zahuštěn,zředěn acetonem a zbývající methylenchlorid byl odstraněn destilací.

Krystaly byly izolovány a bylo získáno 1,04 g ( 22,9%) purinu.hydrochloridu.

Teplota tání : 218 - 221°C

Z druhého podílu bylo získáno 0,61 g( 13,4%).

(?)

Elementární analysa sumárního vzorce

321,86 89% + 11%CH₂C1₂

Vypočteno : C 54,70 H 6,95 N 19,37 Cl 18,98ť % Nalezeno : C 54,84 . H 6,71 N 19,05 Cl 19,4<) %

Příklad 9

Isoguaninové deriváty

Dle postupů, popsaných výše, byly synthetizo vány následující isoguaninové deriváty, zahrnuté do vynálezu.

______ Chemické názvy a teploty tání jsou uvedeny v Tabulce č.l, publikované dále.

- 57 ______T a b u 1 k a 1 i soguaniny

Sloučenina

3,3-diethyl-3 _ř7-dihydro-6-morfolin2H-2-thio-purxn-2-on

3-( cyklopropylmethy1)-3,7-dihydro-8isopropyl-(T-methyl/-6-propylamino-2thio-2H-purin-2-on

3.7- dihydro-6 -e thylamino-3-hě^l-2thio-2H-purin-2-on .

3.7- dihydro-3-hexyl-ó-methylamino-2thio-2H-purin-2-on

3-benzyl-3-, 7-dihydro-6-methy lamino2-thio-2H-purin-2-on

8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-ethylamino -3-( 3 -me t hy lbu ty 1) - 2 - thi o - 2 H- pur i n- 2 oň

8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-ethy1-6propylamino-2-thio-2H-purin-2-on

3zhutyl-3,7-dihydro-6-athylamíno-2thi o-2H-purin-2-on

3-butyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro6-ethylamino-2-thio-2H-purin-2-on

6-e thylamino-3,7-dihydro-3-propy1-2thio-2H-puri^-2-on

8-cyklopropy1-6-ethylamino-3,7γ dihydro-3-propyl-2-thio-2H-purin-2-on

Teplota tání ( °C )

295 - 298 ( rozklad)

208 - 210

235 - 237

217 - 219

253 - 255

250 - 254

270 - 272 (220 )

246 - 248

226 - 228

247 - 251

238 - 239

- 58 Pokračování Tabulky 1

Sloučenina

8-cyklopropyl-3-cyklopropy line thy 1-6e thylammo-3,7-dihydro-2-thio-2Hpurin-2-on '3-benzyl-6-ethylamino-3 jT-dihydro-T- thio-2H-purin-2-on

8-cýklopropyl-6-cyklopropylamino-3propyl-3,7-dihydro-2-thio-2H-purin2-on. hydrochlorid 'iur -MU-. - ·. τ i . ·. —v - - Λ- · Jh3-( (2-me thyl )butyl) )'-6- (2-(piperazin1- yl)ethylaraino)-3,7-dihyáro-2-thio2H-pur.in-2-on

3-cyklohexylmethyl-3_í7-dihydro-6e t hy la mi no- 2 -1 hi o - 2H- pur i n- 2 - on

3-benzyl-6-ethylamino-3,7-dihydro-3(1-methylethyl)-2-thio-2H-purin-2-on

3-cyklohexylmethyl-8-cyklopropyl-3,7dihydro-6-ethylamino-2-thio-2H-purm2- on

6-benzylamino-8-(cyklopropyl)-3,7dihydro-3-(propyl) -\-2-thio-2H-purin2-on. hydrochlorid

8-(cyklopropyl)-3,7-dihydro-6hexylamÍno-3-ípropyl)-2-thio-2H-purin2-on. hydrochlorid

6-butylamino-8-cyklopropy1-3,7-dihydro -3-propyl-2-thio-2H-puri'n-2-on

6-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(2-hydroxyethylaminp)-2-thio-2H-purin-2-on

Teplota tání ( °C.)

247 - 249

254 - 257 - 208 - 226 (rozklad) twn W > fai .-w 4VŤ1

295 - 300j

278 - 282

180 - 185 '.

170 - 190

231 - 233.

188 - 192

—Pokračování -Tabulky- 1~ - ------- S..1. o u č e n.i.n a	teplota tání
	( °C )
6-amino-S-cyklopropyl-3,7-dihydro- . 3-propyl-2-thio-2H-purin-2-on	220 - 265
6-cyklopentylamino-3-ethyl-3,7- dihydro-S-iaopropyl-2-thio-2H-purin-F 2-on	301 - 304
6-cyklohexylamino-3,7-ďihydro-8Í3opropyl-3-propyl-2-thio-2H-purin2-on	303 ( rozklad	)
6-cyklopentylamino-3,7-dihydro-8isopropy1-3-propy1-2-thio-2H-purin* 2-on	295 ( rozklad	)
6-cyklopentylamino-3-ethy1-8c.yklopropy 1-3,7-dihydro-2-thio-2Hpurin-2-on	245 ( rozklad	)
3-(4-chlorbenzyl)-6-cyklopentylamino3,7-dihydro-8-isopropyl-2-thio-2Hpurin-2-on .....	244 - 248	...... . . .
6-cyklopentylamino-3-(3-cyklopentyl- 4-methoxybenzyl)-3,7-dihydro-8- isopropyl-2-thio-2H-purin-2-on	.230 - 235
3-(2-chlorbenzyl)-6-cyklopentylamino3,7-dihydro-8-iaopropýl-2-thio-purin2-on	-
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(3-pentyl)-3-propyl-2-thio-2H-purin-2-on	220 ( rozklad	)
6-e thy1-8-i soprooyl-3,7-dih.ydro-3(4-pyridylmethyl)-2-thio-2H-purin-2 J J	238 - 240

- 60 p-ř-í-k-1-a d. . .10.

Elementární analysa isoguaninových derivátů

A. 3,8 - diethyl-3,7-dihydro-6-morfolin-2-2-thiopurin-2-on

Teplota taní ': 295 · - 29S°C ( za * rozkladu ) -- >

Elementární analysa:

Vypočteno : C 53,22 H 6,53 W 23,87 S 10,93 % Ňalezeno : C 53,01 H 6,77 M 23,82 S 10,97 %

B. 3-(cyklopropylmethyl)-3,7- dihydro-8-isopropyl6-propylamino-2-thio-2H-purin-2-on ►

Teplota tání': 208 - 210°C

Elementární analysa:

Vypočteno : C 62,26 H 8,01 N 24,20 %

Nalezeno : C 62,34 H 8,06 N 23,89 %

Přikladli

Inhibice PDE IV s isoguaninovými sloučeninami______

Inhibiční aktivita některých předcházejících .PDE IV.

isoguaninových sloučenirTÝbýTa stanovena dle postupů, uvedených dále.

Výsledky jsou uvedeny v následující Tabulce 2? publikané na dalších stranách.

- 61 Fosfodiesteráza typu IT______________________________

Záznam o izolaci enzymu

--- ---Fosfodiestráza- typu IV-(--PDE-IV-) -je izolována -------z hovězího hladkého avalu trachei za použiti podobného postupu, který byl už dříve popsán v odborném Časopise Eur.J.Pharmacol.; 150:85; 1988(1); autoři: Silver P.J. J Hamel L.T.J Perrone M.H.J Bentley R.

G.; Bushover C.R.; Evans D.B.

Stručně řečeno, hladký sval z hovězí trachei je nakrájen a homogenizován za použití polytronu v 10 objemech extrakčního pufru, obsahujícího 10 mM Tris-acetátu (pH 7,50); 2 wM chloridu horečnatého;

mlí dithiothreitolu a 2.000 jednotek/ml aprotininu.

Tento a věechňy následující postupy jsou prováděny v tepelném rozmezí 0 až 4°C,

Homogenát je sonikován ( působení ultrazvuku) a poté centrifugován po dobu 30 minut při 48.000 x g.

Výsledný supernatant je aplikován na sloupec a DEAE' Trisakrylem M, předtím ekvilibrovaném ( uvedeném do rovnováhy ) s acetátem sodným a dithiothreitolsm. ..........

po aplikaci vzorku je sloupec promýván se směsí acetát sodný/dithiothreitol a poté jsou ze sloupce eluovány různé formy PDE za použití lineárního TrisHCl/NaCl gradientu.

Frakce obsahující PDE typu IV jsou izolovány,dialyzovány a zahuštěny na 14%· původního objemu.

Zahuštěné frakce jsou naředěny na 50% s ethylenglykolem a uskladněny při teplotě minus 2O°C,

- 62 M®-t®^L_®^-tiy.ity_.PDE__ty_pu...LV____________________

Enzymatická aktivita je zjišťována hodnocením 3 hydrolýzy / H/«cyklického AMP, jak popisují Thompson W.J. J Teraski W.L.J Epstein P.N. J Strada S.J.J v odborném časopise Adv.Cyclic Nucleotide Pes., 10:69, 1979.

Koncentrace cyklického AMP, použitá při tomto postupu, je 0,2 ^uM 7 která'se blíží hodnotě K^,

Koncentrace proteinu je upravena tak,aby bylo zajištěno, Že v průběhu inkubace nebude hydrolyzováno více než 15% substrátu, který je k dispozici.

Všechny testované sloučeniny jsou rozpuštěny v dimethylsulfoxidu ( finální koncentrace je '2,5%). Tato koncentrace dimethylsulfoxidu innibuje enzymatickou aktivitu přibližně o 10%.

Tabulka 2

Isoguaniny- biologické údaje

Název	Vypočtená IC50 PDE IV
3-( cyklopropylme thy 1)-3,7-dihydro -8-(1-me thy 1-e thy1)-6-propylamino2H-purin-2-on. hydrochlorid	23,95
8-cyklopropyl-3-ethyl-6-ethylamino3,7-dihydro-2-thio-2H-purin-2-on'	13,65
8-cyklopropyl-3-ethyl-6-propylamino- 2-thio-2H-purin-2-on	8,48

- 63 Pokra.čo_v_ání_.Tabulky__2 _ ______

Iaoguaniny- biologické údaje

Název

Vypočtená IC50 PDE IV

3-butyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydroT 34,86

6-$thylamino-2-thio-2E-purin-2-on

3-benzy1-6-e thylamino-3,7-dihydro- 28,37

8-(1-me thylethyl)-2-thio-2H-purin2-On.

3-cyklohexyImethy1-8-cyklopropyl3,7-dihydro-6-ethylamino-2-thio2H-purin-2-on

6-benzylamino-S-(cyklopropy1)-3,7dihydro-3-(propyl)-2-thio-2H-purin2-on. hydrochlorid

8-cyklopropyl-?3,7-dihydro-3-propyl6-(4-pyridylme thylamino)-2-thio-2Hpurin-2-on ó-cyklopentylamino-8-cyklopropyl3 ,-7-dihydro-3-prapyl-2-thio-2Hpurin-2-οη. hydrochlorid

6-butylamino-8-cyklopropyl-3,7dihydro-3-propyl-2-thio-2H-purin2-on

8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(2hy dr oxy e thy la mi no) - 2 - thi o - 2 H- pur i n2-on

15,20

33,60

0,41

7,4¹

24,48

4,48

6-amino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3 39,42

-propyl-2-thio-2H-purin-2-on

3r® thyl-ó-cyklopentylamino-3,7- 9,40 dihydro-8-isopropy¹-2-thio-2Hpurin-2-on

- 64 .Pokr_a.Č.o.v.án.í_.-Tabulky—2----—---------------------------__

I s o g u a n i-ng -biologické údaje

Název

Vypočtená IC50 PDE IV

6-cyklopentylamino-3,7-dihydro-8 45,10

-isopropyl-3-propyl-2-thio-2H-purin

3-eth.yl-6-cyklopentylamino-8-cyklo- 0,19 propy1-3,7-dihydiro-2-thio-2H-purin2-on

f.

3,- (4-chlorbenzyl) -6-cyklopentylamino- M 4,50

3,7-dihydró-8-Í3opřopýr-2-thio-2Hnnpin^-rtn ******** *·· — - .. . _jr

P ř· í klad 12 -· .... .

Adeninové deriváty

Postupem, popsaným v předcházejících Příkladech, uvedených výše, byly podobně připraveny náiádující sloučeniny z příslušných výchozích materiálů.

Pokud není uvedeno jinak, jsou všechny teploty uváděny v °C.

'Výsledky ‘jsou ujedeny v následující Tabulce 3. =

- 65 _T____a__b.__u__1___k__a· _3_____

A d e n i n y

Sloučenina	Teplota tání
6-ethylamino-3-hexyl-3H-purin. hydrochlorid.	190 - 195
3-hexyl-6-methylamino-3H-purin	142 - 143
3-feenzyl-6-methylamino-3H-purin	142 - 143
8-cyklopropy1-6-e thylamino-3-(3methylbutyl)-3H-purin.hydrochlorid	188 - 190
8-cyklopropyl-3-ethyl-6-propylamino3H-purin. hydrochlorid	186 - 188
8-cyklopropy1-3-e thy1-ó-me thylamino3H-purin	143 - 145
3-buty 1-6-e· thylamino-3H-purin	127 - 129
3-buty1-8-cyklopropy1-6-ethylamino3H-purin	132 - 184
6-ethylamino-3-propyl-3H-purin	157 - 159
8-cyklopropy1-6-ethylamino-3-propyl3H-purin. hydrochlorid	193 - 195
8-cyklopropyl-3-cyklopropylmethyl-6ethylamíno-3H-purin. hydrochlorid	195 - 197
3-benzyl-ó-e thylaniino-3H-purin	187 - 188
8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3propyl-3H-purin. hydrochlorid	200' - 210

3-((2-methyl)butyl))-6-(2-piperazin- 144 - 145

1-yl)ethylamino)-3H-purin

- 66 -Pokračování_____Tabulky 3

A d e n i n y

Sloučenina

3-cyklohexylmethy1-6-ethylamino-3H-purin* ...hydrochlorid. ₇ .........

3-benzyl-6-ethylamino-8-(1-methylethyl)-3H-purin.hydrochlorid

3-cyklohexylmethyl-S-cyklopropyl-6ethylamino-3H-pu±in. hydrochlorid

3-cyklopropylmethyl-8-Í3opropyl=6= ethylatnino-3H-purin

3-e thyl-8-isopropyl-6-benzylaniino3H-purin

3-ethyl-8-isopropyl-6-ethylamino-3H -puriri. hydrochlorid

3-ethyl-8-cyklopentyl-6-benzylamino3H-purin-? hydrochlorid

3-ethyl-3-cyklopentyl-6-benzylamino3H-purin, hydrochlorid

3-(4-chlorbenzyl)-6-e thylamino-3purin

3-(4-chlorbenzyl)-6-e thylamino-3Hpurin. hydrochlorid ’3 - (4-chlorbenzyl) -6-e thylamino-8isopropyl-3H-purin

3- (4-chlorbenzyl )-6-e thylamino-8·* ieopropyl-3H-purin. hydrochlorid

Teplota tání:

258 - 265

199 - 200

192 - 193

·. I-Ifa ,Μ- ·*

- 96 - 99 .

141 - 142 .194 - 195' . .

179 - 182

212 - 214

251 - 254

215 - 217

- 67 ----Pokračování __T_a b.ulky___3________

A d e η i n y

Sloučenina

6-benz.ylamino-8-cyklopropyl-3-propyl

-3H-purin

8-cyklopropyl-6-hexylamino-3-propyl3H-purin. hydrochlorid

8-cyklopropyl-3-propyl-6-(4pyridylmethylamino)-3H-purin. dihydrochlorid

6-cyklopentyl-8-cyklopropy1-3-propyl3H-purin. hydrochlorid

6-butylamino-8-cyklopropyl-3-propyl3H-purin. hydrochlorid

8-cyklopropy1-6-(2-hydroxyethy1amino)-3-propyl-3H-purin

6-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl- ⁴ amino)-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purin. hydrochlorid

6-araino-8-cyklopropyl-3-propyl-3Hpurizt

3-ethyl-6-cyklopentylemino-8-Í3opropyl3H-purin. hydrochlorid

6-cyklohexylamino-8-Í3opropyl-3-propyl3H- purin, hydrochlorid

6-cyklopentylamino-8-isopropyl-3-propyl 3H-purin. hydrochlorid

Teplota tání:

•1 •206-- 23σ

273 - 276

171 - 173

183 - 184

202 - 203

207 - 210

- 68 . Pokr.a čo-vání—Tabulky —3 ---A d e n i n. y

Sloučenina	Teplota tání
3-ethyl-6-cyklopentylamino-8.cyklo.propy.l-3.H-purin .hydrochlorid	205 - 208 · - JJ*.. . .. - -
3-(4-chlorbenzyl)-6-cyklopentylamino -8-cyklopropyl-3H’purin. hydrochlorid	269 - 273
6-cy klopen ty lamino-3-(3-077 klopě ntyloiey -4-methoxybenzyl)-8-isopropaopy1-3Hpurin. hydrochlorid	-
3-(2-chlorbenzyl)-ó-cyklopentylamino8-isopropyl-3H-purin. hydrochlorid.	207 - 208
S-cyklopropyl-6-diethylamino-3propyl-3H-purin. hydrochlorid	173 - 179..·
8-cyklopropyl-6-(3-pentylamino)-3propyl-3H-purin. hydrochlorid	187 - 189
6-ethylamino-8-isopropy1-3-(4pyridylme thy1)-3H-purin, dihydrochlorid	240 - 246

Příklad 13

Elementární analysa adeninů

Elementární analysa byla provedena u některých sloučenin uvedených ve výše publikovaných Tabulkách. Výsledky jsou uvedeny dále.

.. Tementární—a na1-vs a.......... _ . ...
č-ethylamino-3-hezyl-3H-purinu
Teprota-tání--:-'· · IES- - -194-°C- --	—		— -	*-------- ------
Vypočteno : C 55,02 E 7,81	N	24,68	Cl	12,43 %
Nalezeno : C 55,33 H 8,05	N	24,50	Cl	12,71 %

Elementární analyse

3-hexyl-6-methyl-9mino-3E-purinu, hydrochloridu

Teplota tání : 190 -	195°C
Vypočteno C 53,43	H 7,47 N	25,96	Cl 13,14 %
Nale.zeno : C 53,70	H 7,81 M	25,92	Cl 13,18ě
Elementární analysa
3-benzyl-6-methylsmino-	3H-purinu. hydroch	loridu
Teplota tání : 220 -	236°C
Vypočteno : C 56,63	E 5,12 N	25,40	Cl 12,86 %
Nalezeno : C 56,84	H 7,81 N	25,92	Cl 13,18 %

Elementární analysa

8-cyklopropyi-ó-e thyl-amino-3-O-Giethylbutyl )-3Hpurinu.* hydrochloridu

Vypočteno :	C	58,15	H	7,81	N	22,60	Cl	11,44 %
Nalezeno :	C	58,12	H	8,01	N	22,65	Cl	11,46 %

Elementární analysa 8-cyklopropyl-3-9thyl-6-propylamino-3H-purinu.
hydrochloridu Vypočteno: C 55,41 H 7,15 Nalezeno : Č 55,74 H 7,06	N 24,85 N 25,08	Cl Cl	12,58 12,71 . 2
			·. t

- 70 τ.....

Elementární analy s a______________________________

8-cyklopropyl-3-ethyl-6-methylamino-3H-purinu

Vypočteno : Nelezeno :

C 60,81 K 6,96 N 32,23 % C 60,53 H 7,02 N 32,67 %

Elementární analysa

3-butyl-6-e thy lamino-3K-purinu.hydrochloridu

Teplota tání	•	221 -	227°C
Vypočteno :	c	51,65	H 7,09	N	27,38	Cl	13,88¾
Nalezeno :	c	51,74	H 7,06	N	27,62	Cl	13,93%
Elementární'	analysa *			-- —		i ,Γ .. W -

3-butyi-S-c.vkIopropyi-ó-ethylamino-3E-purinu.

hydrochloridu

Teplota tání : 194 - 19č°C

Vypočteno : C 56,£3 H 7,49 N 23,67 Cl 11,93' % Nalezeno : C 56,91 E6,98 N 23.,97 Cl ? .%

Elementární analysa

6-ethylamino-3-prcpyl-3K-purinu 98% + 2% vody

Vypočteno : C 57,35 H- 7,44 N 33,44 %

Nalezeno : C, 57,68 H 7.,22 N 33,29 .

Elementární analysa

8-cyklopropyl-ó-ethylamino-3-propyI-3K-purinu. hydrochloridu

Vypočteno : C 55,41 H 7,15 Nalezeno : C 55,45 H 7,13

N 24,85 N 24,96'

Cl 12,38 %

Cl 12,71 %

- 71 .Elementární-analysa__________

8-cy klopropy1-3-cyklopropylme thy1-6-e thy 1 s mi no- 3 Hpurinu. hydrochloridu

Vypočteno : C 57,23”’H 6,87' N'23,S4 ' Cl 12-,07-%

Nalezeno : C 57,49 H 6,SS N 23,59 Cl 12,49 %

Elementární analysa

-be nzy 1-6 - e thy la mi no- 3 H-puri nu

Vypočteno

Nalezeno

C 66,39 E 5,97 N 27,65 % C 66,58 H 5,63 N 27,80 %

Elementární analysa £-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3-pro?.yl-3Kpurinu.*hydrochloridu

Vypočteno		E 6	pč J —'	N	23,64	Γ>Ί υΐ	12,07	&
Nalezeno	o 57,30	V έ -i	/50	N	23,77	Cl	12,16	a /0

Elementární anoiy3s

3-cykloprop.yl-6-s thylamino-3H-purinu.hydrochloridu

Vypočteno : 0-56,84- H 7,50 .N .23,67 . C1_11,96 % Nalezeno : C 56,52 H 7,54 N 23,65 Cl 12,05 %

Elementární analysa

3-benzyl-6-ethylamino-8-( 1-methyle thy l)-3H-puri-nu. hydrochloridu

Vypočteno Na lezeno

Elementární

C 61,52 analysa

H' 6,68 E 6,59

N 21,10 N 21,18

Cl 10,68 Cl 10,60

3-cyklohexylmethyÍ-8-cyklopropyíme thyl-6-ethylamino 3H-purinu. hydrochloridu

Nalezeno .q_j___C 6O,79__ _ ^H 7,20

5T

Al

C 60,55 H 7,48 N 20,5;

Cl 10,56 % ¢1.11-,34 % elementární analysa

3-cyklo?ropylmethyl-8-i?opropyl-8-ethč.^rianino-3Hpurinu. hydrochloridu

Vypočteno : 0 64,84 H 5,16 N 27,00 %

..Nalezeno- : —C-64-,42—H-7-,86-—N 26,8-7 ·% —

Elementární analysa

3-e thyl-S-i sopropy 1-6-e th.ylamino-2H-purinu, hydrochloridu

Vypočteno *: Nalezeno :

C- 69,12 *> £ C- O v > 1 i. f

7,r tj η » λ Λ ί .

N’23,71 %

1Τ ·· >-* *> r · ;

elementární analysa

3-e thy1-3-i s opr opy1-6-e thylami no-3H-purinu. hydrochloridu

Vypočteno C 53,53 H 7,47 N 25,96 % Nalezeno : C 53,52 H 7,66 N 25,34 %

Elementární analysa

3-ethyl-8-cvklopentyl-6-benzylamino-3H-purinu.

hydrochloridu

Vypočteno

Nalezeno

63,78 H 6,76 N 19,57 % C 63,55 H 6,54 N 19,51 %

Elementární analysa

-----------------5-«'thiyl--6-c-yki'Opentyl-ó'-e'thylVmÍ'hd^3'H^puři'nú7 hydrochloridu

Vypočteno : C 56,84 H 7,50 N 23,67 % Nalezeno : C .56,54 H 7,37 N 23,63' %

- 73 ^—Šleme n tár uf “analysa “ ·

3,5- disthyl-3,7-dihydro-6-morfolin-2-thio-2H-purin-2-onu_________________,_____________ _ ______

Vypočteno : 0 53,22 H 6,53 N 23,87 ? 10,93 y Nalezeno : 053,01 H 6,77 M'23,32 ? 10,97 *

Elementární analysa

3-( cyklopropylmethyl)-3,7-dihydro-8-isopropyl-6propylamino-2-thio-2H-purin-2-onu

Vypočteno : C'62,26' H’S,01 —N- 24-,20- %-

Nalezeno : C 62,34 H 5,06 N 23,59 % *

Elementární' analysa ' ' ~.....- .....

6-cyklopěntylamino-5-cvklopropy1-3_r7-dihydro-3propyl-2-thio-2H-purin-2-onu.hydrochloridu

Vypočteno : 0 54,30	H 6,34	N	19,79	%
Nalezeno : C 54,42	H 6,73	N	19,57	%
Elementární analysa
6-butyÍ’a'minó-’8'-čy klOprO'py'1-3,72-thio-2H-purin-2-onu	dihy	d-ro—3-	pro pyl-
Vypočteno : C 53,98	’ H 7,59	N	52,93	27
Nalezeno : 0 58,99	Ή 7,52	N	22,92	%

• Elementární analyse

8-cyklopropyl.3-ethyl-6-ethylamino-3-purinu. hydrochloridu. 89% * 1% HCL ⁺ 7

Vypočteno

Nalezeno

53*29 C 52,97

H*6,8O N: 25,00 0 0,53 % H 7,01 N 26,01 , 0 0,34 %

Příklad 14

Inhibice PDE IV 3 adeninovými sloučeninami

Inhibiční účinek někxerých sloučenin uvedených výše, vůči PDE IV, byl testován popsaných výše.

Výsledky jsou uvedeny v Tabulce 4, uvedené dále.

T. a b _; u 1 k a 4

Výsledky PDE IV

1 n 11 p η 1 n 3 Vv^očtené PTE IV

IČ5O (_zuií ).

3-ethyl-5-isopropyl-6-exhylanino-3H-· 52,17 —

Durin. hydrochlorid • «y

3-ethyl-S-cyklopentyl-č-benzvlamino- 62,44

3H-purin.hydrochlorid

3-ethyl-ó-cyklopentyl-6- 9hylamino-3H 25,34

-purin, hydrochlorid

3-cyklohexylmethyl-6-ethylamino-3E- 32,95 .purin. hydrochlorid

3-cyklohexylmethyl-S-cyklopropyl-6- 3,7c ethylamino-3H-purin, hydrochlorid

8-cyklopropyl-6-ethylamino-3-(3- 2,45 methylbutyl)-3H-purin.hvdrochlorid

S-cyklopropyl-3-ethyl-6-propylamino-3H 15,67

- purin, hydrochlorid____

8-cyklopropyl-3-cyklopropylnie thyl-6- 4,11 e thylamino-3H-purin. hydrochlorid

3-hexyl-6-methylamino-3H-purin. 34,15 hydrochlorid

- 75 Pokračovaní Ts

Sloučenina ’ vypočtená -PDE--TV...........

IC5O ( /UM )

3-benzyl-o-methylamino-3H-purin. 9,40 hydrochlorid

3-cyklopropylmethyl-S-isopropyl-6- 12,66 ethylamino-3H-purin. hydrochlorid

3-ethyl-S-isopropyl-6-benzylamino-3H- 2S,94 purin. hydrochlorid .· -

3-butyl-ó-ethylamino-3H-purin. 66,41 hydrochlorid

3-butyi-S-cýklopropyl-6-ethylamino-3H- 5,99 . .

purin. hydrochlorid

S-cyklopropyl-č-ethylamino-3-propyl- 6,31 jK-purin. hydrochlorid .

S-cyklopropyl-ó-cyklopropylamino-3- 7,90 propyl-3K-purin.hydrochlorid

3-(3-c.yklopentyloxy-4-nie thoxybenzyl)- 0,32

..6-ethyla;nino-c-isopropyl-3K-purin.

hydrochlorid

3-(4-chlorbenzyl)-b-ethylaaino-3S- 37,75 purin. hydrochlorid

3-ethyl-6-ethyla®ino-S-((3-cyklopentyl- 4,52 oxy-4-methoxy)benzyl)-3K-purin.hydrochlorid

Příklad 15

Deriváty dithioxanthinu, zahrnuté do předloženého vynálezu, byly vyrobeny a analysovány.

Výsledky jsou uvedeny v dále publikované Tabulce 5.

-76 _______________-T~ -3-—b-—u —1---k—3--5τ

D i t h i o x	s n	+ ’n	iny
S'_l o u S s n i n a		r* 1 * i— -L· J „O tůní:	IC50 PDH 17
i .^-dihydro-S-ethyl-^.ó- _..... ‘di thi o-TH-purin-2,ě-dion	...,....27-5	.,-276-	-	.
3,7-dihydro-3-propyl-2,6dithio-1H-purin-2,6-dion	294	- 297	-
3,7-dihydEO-8-ethyl-3-propyl -2,6-dithio-1H-purin-2,6-dion	266	- 267	-
3-butyl-3,7-dihydro-2,ód i thi o=1H- p ur i n- 2, č - d i on	243	- 251	-
3-butyl-3,7-dihydro-S-ethylr 2,6 -di thi o-1H- pur i n- 2,6 -d i on	251	- 2?2	-
3,7-dihydro-3,S-dietbyl-2,6dithio-1R-purin-2,6-dion	260	- 261	-
3ybenzyl-3,7-diriydro-2,6dithio-1H-purin-2,6-di on	29S	- 503	. 38,45
3ř7-dihydro-3-hexyl-2ř6dithio-1H-purin-2,6-dion	222	- 224	-	-
3,7-dihydr0-1,3,8-triethyl2,6-dithio-1H-purin-2,6-dion		-	-
8-cyklopropyl-3.,7-dihydro-1,3 -diethy1-2,6-dithio-lH-purin2,6-dion		-	0,42

8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3- * 6,31 (3-me thylbutyl)-2,6-dithio-1Hpurin-2,6-dion ________________-——

8-cyklopropy1-3,7-dihydro-3e thy 1-2*6-di thio-1H-purin-2,6dion	-	6,16
2,7-dihydro-3-(2-me thylbutyl12,6-dithio-lH-purin-2,č-dion	-	-

- 77 Pokračování Tabulky 5--------------Sloučenina 'lepíóťa tání:

IC5O PDE IV

3-butyl-8-cyklopropyl-3,7- - 9,43 dihydr.o-2,6-di thio-1 H-purin2.6- dion

3-cyklonropylmethy1-3,7-dihydro

2.6- dithio-1H-purin-2,6-dion

S-cyklopropyl-3_ř7-dihydro-3- - 64,49 propy1-2,6-di thio-1H-purin-2,6dion

S-cyklopropyl-j-cyklopropylmethy-l - 2 27

-3,7-dihydro-2,6-dithio-1H-purin- ¹

2,o-dion

3-butyl-3,7-dih.ydro-3-((1-methyl) - 5 93 ethyl)-?,o-dithío-ifí-purin-2,6-dion ' *

3-cyklohexylmethy1-3,7-dihydro2,6-dithio-lH-puriu-2,6-dion

3-benzyl-3,7-dihydro-8-(1-methyl- - 3,40 ethýl')-2,'6-dithio-1 H-purin-2 _f6- .

dion

3-cyklohexylmethyl-8-cyklopropyl3,7-dihydro-2,6-dithio-1H-purin2.6- dion

3- í j-c. vklopentyloxy-4-me thoxybenzyl)-3,7-dihydro-8-isopropyl2.6- di thi o-1H-purin-2,6-di on

3-(3-cyklopent.yloxy-4-methoxybenzyl)-3,7-dihydro-2,6-dithio1H-purin-2,6-dion

3-(4-c$lorbenzyl)-8-Í3opropyl)3.7- dihydro-2,6r-dithio-3,7-purin2.6- dion

3-e thy1-3,7-dihydro-8-i aopropyl2.6- dithio-1H-purin-2,6-on : 3,03

204-206.0,60

215-218 16,16

242-243 2,40

248-250 4,10 —Pokračování Tabulky

Slouč e nins eplots IC50 tání: PDE '3,7-dihydró-8-isopropyI-3 203

-propy1-2,č-dithio-1H-purin2,6-on

3-(2-chlorbenzyl)-3,7-dihydro- 244 - 24č

8-isopropyl-2,ó-dithio-1H-purin

-2,6-dion

S-isopropyl-3-(4-pyridylmethyl) -310 - 315 -2,6-dithioxanthin

3,50

7,74

Farmakologické zkoušky

Příklad 16

..Izolovaná trachea morčete . > . .

Zkoumaná látka byla rozpuštěna v dimethylsulfoxidu. Izolovaný sval průdušnice morčetebyl upevněn, v lázni s Krebsovým roztokem s teplotou 37,5 °C, lázní.byla probublávána směs 95- % kyslíku a 5 % oxidu uhličitého. ' '.

Změny napětí svalu byly zaznamenávány isometricky při použití převaděčů, spojených s pisátky přes pocenciometr. Schopnost zkoumaných látek uvolnit svaly dýchacích cest byla zkoumána pomocí účinků kumulativních koncen--t-r-acú-.—K-a-žd-á—k-sn-s-e-n-t-raoe—z-k-oum-a-né—1-á-t'ky-by-l-a—pon-e-ch-árTa’— 5 minut k dosažení rovnovážného stavu s.tkání a teprve potom byla koncentrace zvýšena (na. desetinásobek). '

Při každém pokusu byla zkoumaná látka srovnávána s účinností theofyllinu jako standardní látky.

s-loučenfaa ú č-fnno-s t- - -i-n- v-i-fe-p©--thepfyl_l_in^ 1

8-cyklopropy1-3-eťnyl-6-ethylamino-3H-purin 43,7

6-ethylamino-3-hexyl-3H-purin 25,6 t

3-benzyl-6-ethylamin-3H-purin 18,5

Příklad 17

Zkoušky in .vivo

i) 'Byla sledována účinnost zkoumaných.látek na. modelu hypersensitivn.ích průdušek (BHR) a při buněčné infiltraci, vyvolané vaječným albuminem u morčete metodou podle publikace Horley a další, Agents and Actions, Supplemet, 1988,

23, 187.

Zkoumaná látka byla podána v dávce 0,5 a 1,0 mg/kg/den podk©žne--v průběhu. 7 dnů dsmotickým miníčerpadlem. Jako standardní látky byly použity theofyllin a salbutamol v koncentraci 1 mg/kg/den. Pro každé morče byla zkonstruována křivka závislosti odpovědi na histamin v dávce 1 až 50 mikrogramů/kg.

Získané výsledky jsou znázorněny na obr. 1 a 2.

ii) Sensitizace a podání látek k vyvolání nežádoucího stavu

Morčecí samci kmene Dunkin Hartley (Charles River) s hmotností 200 až 250 g byli vystaveni působení vaječného albuminu, který byl podán intraperitoneálně v dávce 0,5 ml/zvíře (OVA), bylo podáno 20 miknogramů OVA ve vlhkém gelu hydroxidu hlinitého. Vznikla stálá suspenze s obsahem

-. 80 -přebytku hydroxidu hlinitého, ktFřou^býŮ^mÓžnF podávat injekčním způsobem. Kontrolním zvířatům bylo podáno pouze 0,5 ml hydroxidu hlinitého. Po době 18 až 21 dnů byla zvířata vystavena působení OVA ve formě aerosolu (100 mikrogramů/ml) na dobu 1 hodiny v uzavřené komoře.

iii) Promytí průdušek a plicn.ích_sklípků .....

hodin po působení aerosolu byla zvířata anesterizována urethanem, byla užita dávka 7 ml/kg intraperitonéálně, podán byl roztok s obsahem 25 g urethanu/100 ml a do průdušnice byla zavedena kanyla. Promytí (BAL) bylo uskutečněno vstřiknutím 5 ml sterilního fyziologického roztoku chloridu sodného do plic tracheální kanylou a kapalina byla okamžitě opět odstraněna. Tatáž kapalina byla uvedeným způsobem použita celkem 5x. Bylo získáno 40 až 50 % kapaliny z plic morčete: Ve výsledné kapalině byly spočítány všechny buňky při použití zlepšeného Neubauerova haemocytometru. Přípravky cytospin byly připraveny při užití odstředivky Shandon Cytospin 2. Dvě kapky kapaliny BAL byly přidány do každé nádobky cystospin a vzorky byly odstředěny 1 minutu při 1300 otáčkách. Pak byl materiál fixován acetonem a barven haematoxylinem a dalším barvivém způsobem podle Lendruma (1944) a byly zjištěny diferenciální počty buněk tak, že bylo na každém vzorku náhodně spočítáno vždy 200 buněk a buněčný materiál byl klasifikován jako neutrofilní, eosinofilní nebo mononukleární buňky běžným způsobem. Buněčný materiál byl vyhodnocen tak, aby nebylo známo, o který vzorek běží. Výsledky byly vyjádřeny počtem neutrofilních, eosinofilních a mononukleárních buněk na 1 ml kapaliny. BAL. Výsledná kapalina byla odstředěna 10 minut při 1000 g a výsledné buňky a bezbunečný supernatant byly zmrazený po jednotlivých podílech pro další zkoušky. Sloučeniny byly podávány v roztoku v DMSO nebo ve fyziologickém roztoku chloridu sodného íntraperitoneálne v dávce 5 mg/kg hodinu před působením vaječného albuminu. Výsledky jsou uvedeny v následující tabulce 6. ............ —-

T a	b u	1 k a	6
sloučenina	N	dávka	% eosinofilů	inhibic
		mg/kg	v BAL, x+se	%
		ip
pouze DMSO	9	—	32±6	—
3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzy 1)-3,7-dihydro-8-isopropyl- -2,6-dithio-lH-purin- -2,6-dion	6	5	17 + 3	47
pouze fyziologický r.	14	--	33±3	--
8-cyklopropy1-5-ethy1- amino-3-í 3-methylbutyl)-
-3H-purinhydrochlorid	7	5	16 + 4	52
3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-6Tethylamino-8-isopropy1-3H- -purinhydrochlorid	7	5	12 + 2	64

Vynález byl popsán v souvislosti s použitím určitých látek, je však zřejmé, že by bylo možno uskutečnit ještě další modifikace a provedení, rovněž spadající do rozsahu vynálezu.

Zastupuje

Ty . , - ' 3J. '^! Dr. ZDENKA KOREJZOVA

Claims (3)

1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, heterocykiický zbytek, heterocyklylalkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části a heteroaryl, ^Rób znamená, atom vodíku nebo skupinu ve významu Rg_a nebo:

spolu tvoří skupiny ve významu R„. , N a kruh o oc

3 až 8 atomech uhlíku, obsahující 1 až 3 atomy dusíku,

O až 2 atomy kyslíku, O až 2 atomy síry, alkoxyskupinu, karboxyskupinu nebo některou ze skupin C0MH₃, CONK,, =NOK, =NOCONK₂, =0, přičemž aryl znamená fenyl nebo nafty!, heterocyklickým zbytkem je 5, 6 nebo 7-členný kruh, obsahující 1 až 3 atomy dusíku, O až 2 atomy kyslíku, O až 2 atomy síry, popřípadě substituovaný stejně jako arylový zbytek na atomech, kyslíku nebo dusíku, jakoz i farmac eu ticky přijatelné._s.odi—těch-ts-s-i-oučeη±η-,-----za předpokladu, že v případě, že R^ znamená benzyl, R_g znamená methyl nebo isopropy! a Rg._Q atom vodíku nebo znamenají R.,, Rg_a a R-, methylové skupiny, má Ρ.θ odlišný význam od atomu vodíku, jako meziprodukty pro výrobu purinových derivátů obecného vzorce I, pcdle nároku i.

18. Sloučeniny podle nároku 17, obecného vzorce II, v nichž R, znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloO alkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, cykloalkylalky! o 4 až 8 atomech uhlíku, aryl nebo aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části, R-_a znamená alkyl o 1 az 3 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, cyklcaikylalkyl o 4 až

8 atomech uhlíku,'' aryl, aralkyl- o -V až -4--a-tomee-h--uhlíku- -v ... ------alkylové části nebo heterocyklylalkyi o 1 až 4 atomech uhlíku v alky Love části, Rg._Q znamená atom vodíku, alkyl o 1 až

8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 az 7 atomech, uhlíku, cyklo-, alkylalkyl o 4 až 3. atomech uhlíku, aryl nebo aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku nebo tvoří skuoina -NR- sooleČně oa oo

5- nebo 6-členný kruh, popřípadě obsahující jeden nebo větší počet dalších heteroatomů a Rg znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, cykloalkylalky! c 4 až 3 atomech uhlíku, aryl, aralkyl o 1 až-4 atomech. uhlíku,. pyridyl nebo pyridylalkyl o 1 až 4 atomech uhlíku.

19. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 18,v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové Částí nebo cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku.

20. Sloučeniny podle nároku 13, v nichž R. znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku a Rg^ znamená atom vodíku.

»

21. Sloučeniny podle nároku 18, v nichž Rg znamená atom vodíku.

22. Sloučeniny podle nároku 13, v nichž R_ znamená

O cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku.

.-9023. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 22, v nichž Rg znamená cyklopropyl.

24. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 18, v nichž Rg znamená alkyl-o 1 až 8 atomech uhlíku.

25. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 24, 'v “nichž' Rg zhamená isopropyl. ’ λ

26. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 19, v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku.

... . a, ... .y . ^- — V “ Μ-.-ΊΤΊΊΜ ~ ¹ » VI* <. J » ' 27. -Sloučeniny obecného vzorce II-podle nároku 18, v nichž R znamená methyl nebo ethyl a R^, znamená atom O d O 0 vodíku.

28. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 18, v nichž Rg znamená propyl.

29. Sloučeniny obecného vzorce Ilpodle nároku 18, v nichž Rg znamená substituovaný nebo nesubstituovaný benzyl.

30. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 18, v nichž;Rg znamená cyklopropylmethyl.

31. Sloučeniny obecného vzorce II podle nároku 18 ze skupiny 8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(4-pyridyLmethyl- ^# amino)-2-thio-2H-purin-2-on, 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-2-thio-2H-purin-2-on, 8-cyklo- * p'r'opy r^377^dThy dro-6 -(2-hydro xye thýlam i no)-2-1 h i o-2H-p u ri n-2-on, ajejich soli, přijatelné z farmaceutického hlediska.

32. Sloučeniny obecného vzorce III τ šiti ,·¹ kde stejně’ hěbo’“ruzhě 'zríáměňajT'a'ťom vodíku-rehc-alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, s přímým nebo rozvětveným řetězcem, nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskuoino-u, aikoxyskup.inou,. karboxys.kupinou, _ skupinou =NGH, sMOCONrý nebo =0, dále .cykioalkyl o 3 až 3 atomech uhlíku, popřípadě substituovaný hydroxyskuplnou, alkcxyskupinou, karboxyskupinou, skupinou sMOH, sNGCGDířý nebo =0, cykioalkyl alkyl o £ až 3 atomech uhlíku s cykloalkylovou částí, popřípadě substi8’ tuovanou hydroxyskuplnou, alkoxyskupincu, karboxyskupincu, skupinou =MGH, _=HGCGNK2 nebo =0, aryi, nesubstítuovaný nebo substituovaný atomem chloru, ami.nosku pinou, alkylamihoskupincu, dialkylaminoskupinou, amídoskupinou nebo alkylamidoskupinou o 1 až 3 atomech, uhlíku v alkylová části, dále dialkylamidohydroxyskupinu o 1 az 3 atomech uhlíku v alkylová části, aikoxy skupinu, skupinu C=NOH, CsNOCONH^. alkyl o i až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo benzyl , dále aralkyl o i až 4 atomech uhlíku v alkylové části, heterocykiic ký zbytek, heterocykiylalkyl o i až 4 atomech uhlíku v alkylové části a heteroaryl,

- 92 33--.--Sl'Oučeniny · ob-ecného'vžořce”'III, podle nároku~32T~ v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, >. cykloalky lalkyl o 4 až 8 atomech uhlíku, aryl nebo aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části a R_g znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhLíku, cykloalky lalkyl o 4 až 8 atomech uhlíku, aryl, aralkyl o 1 až ^ atomech .uhlíku v .alkylové části, ,pyridyl nebo pyridylal-kyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části.

34J Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové,části„nebo.cykloalkyl. o 3 až 7 atomech uhlíku.

35. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, v nichž R_g znamená atom vodíku.

36. Sloučeniny obecného vzorce .III podle nároku 32, v nichž R_g znamená cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku.

37. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, v nichž Rg'znamená cyklopropýl.

38. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32 v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku.

39. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, v nichž Rg znamená isopropyl.

40.Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, , v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 4 atomech uhlíku.

41. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, v nichž Rg znamená propyl.

_g.]-_0L1-£-_e- _η· £-_n-y -0 og c ne ho vzorce 'm^paďte—n-á-roku~32-_ř____ v nichž R^ znamená nesubstituovaný nebo substituovaný ben.zyl

43. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, v nichž Rg znamená cyklopropylmethy1. .

44. Sloučeniny obecného vzorce III podle nároku 32, ze skupiny 3-benzyl-3,7-dihydro-8-(1-methylethyl)-2,6-dithio-lH-purin-2,6-dion, 3-cyklohexylmethyI-8-cyklopropy1 -3,7-dihydro-2,6-dithio-lH-purin-2,6-dion, 3-(4-chlorbenzyl) -8-isopropyl-3, 7-dihyďrb-2','6-'dl'ťh'ió-3', 7-puri-n--2 , &- -dion, 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmethyl-3,7-dihydro-2,6-dithio-^;lH-purin-2,6-dion, 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxyberízýl) -3', 7-dihydro-8-isopropyl-2,6-d.ithio-lH-purin-2,6-dion, 8-cyklopropy1-3,7-dihydro-i,3-diethyl-2,6-dithio-lH-purin-2,S-dion, a soli těchto sloučenin, přijatelné z farmaceutického hlediska.

45. Způseh selektivní inhibice PDE IV, vyznačujíc y s e t í m , že se nemocným podává účinné -množstvíderivátu podle nároku 1 až 44.

46. Farmaceutický prostředek, vyznačuj i o 1 se t í m , že jako svou účinnou složku obsahuje deriváty podle nároků 1 až 44.

47. Způsob léčení saVců trpících chorbami ze skupiny asthma, alergie, záněty, deprese, atopické onemocnění, rýma, demence a stavy ^/spojené se zvýšenou koncentrací cytokinú, vyznač í c.í se t í ni , že'se podává účinné množství derivátů podle nároků 1 až 44.

*

Λ

4^J. Způsob výroby purinových derivátů obecného vzorce I podle nároku 1, v y z n a č u j í c í se tím, že se uvede do reakce purinový derivát obecného vzorce IV (IV) kde Rg a Rg mají význam, uvedený v nároku 1, se sloučeninou obecného vzorce V

R_ň .R„. NH 5a· oo (V) kde obecné symboly mají význam uvedené v nároku 1, v přítomnosti nebo v nepřítomnosti reakčního prostředí při teplotě v rozmezí 0 až 100 °C., ' . - - 4y, Způsob podle nároku 4^_f, vyznačuj ící se t í m , že se reakční rozpouštědlo volí ze skupiny voda, alkoholy, uhlovodíky a halogenované uhlovodíky.· tt ^6. Způsob podle nároku .4^, vyznačující se t í m , že se sloučeniny obecného vzorce II připraví thionací odpovídajících 6-oxosloučenin.

^7 54. Způsob podle nároku 50, vyznačující s e t i m , že s_e_t.h.ionac-.e—usku-teČní—t-akp—ž-e-se^_n’a^—su’spenzi 6-oxosloučeniny v pyridinu působí molárním přebytkem sirníku fosforečného.

Způsob výroby peřinových derivátů obecného vzorcť I podle nároku 1,vyznačující se tím, že^- se redukují sloučeniny'obecného vzorce ÍI vhodným redukčním činidlem.

1 až 4. atomech uhlťku v aTkyIdvé^_'Čáš't'i7 'heterocykl ic----—·ký zbytek, heterocyklylalkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové části a heteroaryl,

6b znamená atom vodíku nebo skupinu ve významu R^_a nebo spolu tvoří skupiny ve významu Rg^, N -a Rg_a kruh o 3 až 8 atomech uhlíku, obsahující 1 až 3 atomy dusíku,

.. CL.až 2. atomy ky_slíku, Ό až 2 atomy sí ry, . alkoxyskupinu, karboxyskup inu nebo některou ze skupin COŇH^

CONH

1. Purinové deriváty obecného vzorce I

03,00 kde .

R„, a 3 . stejné nebo různé znamenají atom vodíku nebo alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, s přímým nebo rozvětveným řetězcem, nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou, alkoxyskupinou, karboxyskupinou, skupinou =NOH, =NOCONH₂ nebo =0, dále cykloalkyl o 3 až 8 atomech uhlíku, popřípadě substituovaný hydroxyskupinou, alkoxyskupinou, karboxyskupinou, skupinou =NOK, sNOCONH^ nebo =0, cykloalkylalkyi o 4 až 8 atomech uhlíku s cykloalkylovou částí, popřípadě substi_tuovanou hydroxyskupinou, alkoxyskubinou, karb.oxysku-_ pinou, skupinou =NOH, =NOCONH₂ nebo =0, ary1, nesubstituovaný nebo substituovaný atomem chloru, aminoskupinou, alkylamincskupinou, dialkylaminoskupinou, ami doskupinou nebo alkylamidoskupinou o 1 až 8 atomech uhlíku v alkylové části, dále dialkylamidohydroxyskupínu o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, alkoxy83 skupinu, skupinu C=NOK, CsNOCONH^, alkyl o 1 až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo benzyl , dále aralkyl o

2. v nichž R- znamená methylneoo ethyl a znamená atom oa co — vodíku;· ---------------------- ..........._______ »[

14. Purinové deriváty obecného vzorce I, podle nároku 2, v nichž R- znamená propyl.

15. Purinové deriváty obecného vzorce 1, podle nároku 2, v nichž znamená substituovaný nebo nesubstituovaný benzyl.

16. Purinové deriváty obecného vzorce I, podle nároku 2, v nichž R^ znamená cyklopropylmethy1. .

17. Sloučeniny obecného vzorce II kde

R₂ znamená arom kyslíku nebo síry.

R- a R , .stejné-nebo různé znamenají atom vodíku nebe w O <2. O alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, s přímým nebo rozvětveným řetězcem, nesubstituovaný nebo substituovaný hydroxyskupinou, alkoxyskucinou, karboxyskupinou, skupinou =JIQK, sNOCONH^ nebo =0, dále cykloalkyl o

--88 3jaž 8 atomech_uh.l.í2<u.,_ popřípadě substituovaný hydro-— xyskupinou, alkoxyskupinou, karbaxyskupinou, skupinou =NOK, ^NOCONKj nebo =0, cykioaikylaLkyi o 4 až 8 ato.mech uhlíku s cykloalkylovou částí, popřípadě substituovanou hydroxyskupinou, alkoxyskupinou, karboxyskupinou, skupinou =NQK, =N0C0NK₂ nebo =0, aryl, nesubstituovaný nebo substituovaný.atomem chloru, aminoskuplnou, alky lamina skup lnou, dialkylaminpskup.inou, ami- doškuplnou nebo alkylamidoskupinou o i až 8‘atomech uhlíku v alkylové části, dále dialkylamidohydroxyskupinu o 1 až 3 atomech uhlíku v alkylové části, alkoxyskupinu, skupinu C=NOK, CsNOCONKj, alkyl o. I až 3 atomech uhlíku, fenyl nebo benzyl , dále aralkyl O’

2-,—v--n-i-c-frž—R-_q -znamená—atkyl^-o^-d^-a'ž '8 a'ťoméch uhlíku.

O

9. Purinové deriváty obecného vzorce Z podle nároku 7, v nichž Ηθ znamená isopropylovou skupinu.

10.· Purinové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1, ze_skupiny_ 6-ethylamino-3-hexyl-3H-purin, 3-hexyl-6-methylamino-3H-purin, 3-benzyl-6-methylamino-3H-purin, 8-cyklopropy1-6-ethylamino-3-(3-methylbutyl)-3H-purin,

8-cyklopropy1-3-ethy1-6-propylamino-3H-purín, 8-cyklopropy1-3-ethyl-6-methylamino-3H-purin, 3-buty1-5-ethylamino-3H-purin, 3-butyl-8-cyklopropyl-6-ethylamino-3H-purin,

6-ethylamino-3-p ropyl-3H-purin, 8-cyklopropy1-6-ethylamino-3-propyl-3H-purin, 8-cyklopropy1-3-cyklopropylmethy1-6-ěthylámíňó-’3'H-purín'; ' '3-b'enzy'l-6-e’thylam-i-nO-3H-pu-ri-n-,- -8-· - - -cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3-propyl-3H-purin, 3-((2-methyl)buty1-6-(2-p iperazin-l-yl)ethylamino)-3H-purin,

3-cyklohexylmethyl-6-ethylamino-3H-purin, 3-benzy1-6-ethylamino-8-(1-methylethyl)-3H-purin, 3-cyklohexylmethyl-8-cyklopropy1-6-ethylamino-3H-purin, 3-cyklcpropylmethyl-8-isopropy1-6-ethylamino-3H-purin, 3-ethyl-8-isopropyl-6-bénzylamino-3H-purin, 3-ethyl-8-isopropyl-5-ethylamino-3H-purin, 3-ethy1-8-cyklopen ty1-6-benzylamino-3H-purin,

3-ethy1-8-cyklopenty1-6-ethylamino-3H-purin, 3-(4-chlorbenzyl)-6-ethylamino-3H-purin, 3-(4-chlorbenzy1)-6-ethylamino-3H-purin, 3-(4-chlorbenzy1)-5-ethylamino-3-isopropýl-3H-purin, 6-benzylamino-8-cyklopropy1-3-propyl-3H-purin,

8-cyklopropy1-6-hexylamino-3-propyl-3H-purin, 8-cyklopropyl-3-propy1-6-(4-pyridylmethylamino)-3H-purin, 6-cyklopentyl-8-cyklopropyl-3-propyL-3H-purin, 6-butylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purin, 8-cyklopropy1-6-(2-hydroxyethylamino)-3-propyl-3H-purin, 6-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzylamino)-8-cyklopropy1-3-propyl-3H-purin, 6-amino-S-cyklopropyl-3-propyl-3H-purin, 3-ethy1-5-cyklopentylamino-8-isopropy1-3K-purin, 6-cyklohexyLamino-8-isopropy1-3-propyl-3H-purin,

6-cyklopentylamino-8-isopropy1-3-propyl-3H-purin, 3-ethyl-6-cyklopenty1amino-8-cyklopropyl-3H-purin, 3-(4-chlorbenzyl)-6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3H-purin, 6-cyklopentylamino-3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-8- isopropy1- .

-86 -3H-puriri, 3-{2-chlorbenzyl)-o-cyklopentylamino-8-isopropy1-3H-purin, 8-cyklopropy1-6-diethylamino-3-propyl-3H-purinhydrochlorid, 3-cyklopropyl-6-(3-pentylamino)-3-propyl-3H-purinhydrochlorid, 6-ethylamino-8-isopropyl-3-{4-pyridy1methyl)-3H-purin, 3-ethyl-8-isopropyl-6-ethylamino-3H-purin,

3-ethy1-8-cyklopentyl-6-benzylamino-3H-purin, 3-ethy1-8-cyklopenťyl-6-ethylamino-3H-purin, 3-cyklohexylmethyl-6-ethylamino-3H-purin, 3-cyklohexylmethyl-3-cyklopropyl-6- ' ?

-ethylamino-3H-purin, 8.-cyklopropyl-6-ethylamino-3-{ 3-methylbutyl)-3H-purin, 8-cyklopropyl-3-ethyl-6-propy1- s amino-3H-purin, 8-cyklopropy1-3-cyklopropylmethy1-6-ethy1amino-3H-purin, 3-hexyl-6-methylamino-3H-purin, 3-benzyl-6-methylamino-3H-purin, 3-cyklopropylmethyl-8-isopropyl-6-ethylamino-3H-purin, 3-ethyl-8-isopropyl-6-benzylamino-3H-purin, 3-butyl-6-ethylamino-3H-purin, 3-butyl-8-cyklopropyl-6-ethylamino-3H-purin, 3-cykl op ropy 1-6-ethyl amino-3-propyl-3H-purin, 8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3-propyl-3H-purin, 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzylj-6-ethylamino-8-isopropyl-3H-purin, 3-(4-chlorbenzyl)-6- , -ethylamino-3H-purin a 3-ethyl-6-ethylamíno-8-((3-cyklopentyloxy-4-methoxy)benzyl)-3H-purin.

11. Purinové deriváty obecného vzorce I podle· nároku 1, ze skupiny 3-( 3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzyl)-6-ethylamino-3H-purin, 3-(4-chlorbenzyl)-5-ethylamino-3-isopropyl-3H-purin, 3-(3-cyklopentyloxy-4-methoxybenzy1)-6-ethylamino-S-isopropyl-3H-purin, 6-cyklopentyl-8-cyklopropyl- “

-3-propyl-3H-purin, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto látek. ·

12. Purinové deriváty obecného vzorce I podle nároku 3, v nichž R^ znamená alky-l o 1 až 4 atomech uhlíku.

—-.-----:----—l-5~—Pu-r inové—der iváty-obecného-vrorce—t-pod-le-nároku.

2, v nichž R_c znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku a R,., o a . _oo znamená atom vodíku.

3. Purinové deriváty obecného vzorce Z podle nároku 2, v nichž R_o znamená atom vodíku.

O

6. Purinové deriváty obecného vzorce Z podle nároku 2, v nichž Rg znamená cykloalkyl o 3’ až 7 atomech uhlíku.

7. Purinové deriváty obecného vzorce I podle nároku 2, v nichž Rg znamená cyklopropyl.

8. Purinové deriváty obecného vzorce Z podle nároku

2. Purinové deriváty obecného vzorce I podle nároku 1, v nichž R_q znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 4 až 8 atomech uhlíku, aryl nebo aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové Části, Rg_a znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, cykloalkylalky1 o 4 až '8 atomech uhlíku, aryl, aralkyl o 1 až 4 atomech uhlíku v alkylové Části nebo heterocyklylalkyl o 1 až 4 atomech- uhlíku v alkylové části, Rg^ znamená atom vodíku,'alkyl o 1 až

- 84-8'^foměčlT~QhTlT<irr“cyi<róáTÍ<yT’o 3 až 7 atomech uh 1 íl<u~~Čyí<Γδ^ alkylalkyl o 4 až 8 atomech uhlíku, aryl něco aralkyl o. 1 až 4 .atomech uhlíku nebo tvoří skupina -NRg_R_gb společně 5- nebo 6-čLenný kruh, popřípadě obsahující jeden nebo větší počet dalších heteroatomů a Rg znamená atom vodíku, alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, cykloalkyl o 3 až 7 atomech uhlíku, cykloalkylalkyl o 4 až 8 atomech uhlíku, aryl,. aralkyl o Važ ^atomech uhlíků, pyridyl“hebčTpyridylaiky 1 o 1 až 4 atomech uhlíku.

3. Purinové deriváty obecného vzorce I podle nároku 2, v nichž Rg znamená alkyl o 1 až 8 atomech uhlíku, aralkyl o 1 -až 4 atomech uhlíku v alkylové Části nebo cykloalkyl o 3 až 7 sternech uhlík u v cykloalkylové časti

4. Purinové deriváty obecného vzorce I podle nároku

2’ =NOH, =NOCONH₂, =0, přičemž aryl znamená fenyl nebo naftyl, heterocyklickým zbytkem je 5, 6 nebo 7-členný kruh, obsahující 1 až 3 atomy dusíku, 0 až 2 atomy kyslíku·, 0 až 2 atomy síry, popřípadě substituovaný stejně jako arylový zbytek na atomech kyslíku nebo dusíku, jakož i farmaceuticky přijatelné soli těchto sloučenin, • za předp.ok.ladu, že v případě, že R_ znamená benzyl, R„ známená methyl nebo isopropyl a R^ atom vodíku nebo znamenají'

Rg, Rg_a a Rgb methylově skupiny, má Rg odlišný význam od atomu vodíku.

$3. Způsob podle nároku 5^, vyznačující, se t í m , že se uskuteční katalytická redukce.

r?

Způsob podle nároku 5-2, vyznačující se t í m , že se redukce provádí ve vhodném rozpouštědle ze skupiny alkohol·, uhlovodík-a voda-........... .............

yT' . Způsob podle nároku 52, vyznačující se t í m , že se redukce provádí při použití alkalického kovu v kapalném amoniaku nebo hydrazinu v přítomností baze.

ro

Způsob podle nároku 52, vyznačuj íc í se t í m , že se sloučeniny obecného vzorce II. připravují z odpovídajících 2,6-dithioxanthinových derivátů obecného vzorce III ·

( ΙΙΣ) reakci těchto látek s aminem obecného vzorce R R NH , ’ oa- 6b způsobem podle nároku 46.

Šzf;

se tím připravené thi onač i.

Způsob podlenároku 52, vyznač uj í ^c. J.

, ze se užijí sloučeniny obecného vzorce ΙΙΣ z odpovídajícího 2-thioxanthinového derivátu