SK161095A3 - Chemical compounds having pde-iv inhibition activity - Google Patents

Description

Nové chemické látky s PDE-IV inhibičným pôsobením

Oblasť Techniky

Vynález sa týka purínových derivátov, spôsobov ich prípravy, farmaceutických zmesí, ktoré ich obsahujú a ich medicínskeho použitia. Zvlášť sa vynález týka 3-substituovaných a 3,8 disubstituovaných 6-aminopurínových derivátov

- s bronchiálno-relaxačným a tracheálno-relaxačným pôsobením a/alebo protizápalovým pôsobením. Vynález sa tiež týka tioik zoguanínových a ditioxantínových prekurzorových látok týchto purínových derivátov, farmaceutických zmesí, ktoré ich obsahujú a ich medicínskeho použitia.

Doterajší stav techniky f

Cyklickým nukleotidovým fosfodiesterázam (PDEs) bola venovaná značná pozornosť ako molekulovým terčom pre antiastmatické reagenty. Cyklický 3’,5’-adenozínmonofosfát (cAMP) a cyklický 3’,5’-guanozínmonofosfát (cGMP) sú známe pomocné prenášače, ktoré sprostredkujú funkčné odozvy buniek na početné hormóny, neurotransmitery a autokoidy. Inhibícia fôsfodiesterázy a následný vzrast vnútrobunkového adenozínového 3’,5’-cyklického monofosfátu (cAMP) alebo guanozínového , 3’,5’- cyklického monofosfátu (cGMP) v kľúčových bunkách pri patofyziológii astmy by mohla spôsobiť najmenej dva terapeujticky významné účinky. Je to relaxácia hladkého svalstva

F (spôsobujúca rozšírenie priedušiek) a protizápalové pôsobenie .

Stalo sa známym, že existujú početné rozličné PDE izoenzýmy, ktoré sa líšia svojou bunkovou distribúciou. Boli syntetizované rôzne inhibítory so značným stupňom selektivity pre niektorý izoenzým.

Vzťah štruktúra-aktivita (SAR) selektívnych izoenzýmových inhibítorov sa podrobne diskutoval napríklad v článku Theodora J. Torphyho a spol., Novel Phosphodiesterases In2 hibitors For The Therapy of Asthma, Drug News & Prospectives, 6(4) máj 1993, strany 203 až 214. PDE enzýmy sa môžu zoskupil; do piatich alebo viacerých skupín podľa ich špecificity na hydrolýzu cAMP alebo cGMP, ich citlivosti na reguláciu vápnikom, kalmodulínom alebo cGMP a ich špecifickej inhibície rôznymi látkami. PDE I je stimulovaný Ca²⁺/kalmodulínom. PDE II je stimulovaný cGMP a našiel sa v srdci a nadobličkách. PDE III inhibuje cGMP a má pozitívnu inotropnú aktivitu. PDE IV je cAMP špecifický a má aktivitu na uvoľnenie dýchacích ciest, protizápalovú aktivitu a antidepresívnu aktivitu. PDE V sa javí ako dôležitý pre reguláciu obsahu cGMP vo vaskulárnom hladkom svalstve a teda PDE V inhibítory môžu mať kardiovaskulárnu aktivitu.

Zatiaľ čo existujú látky odvodené z početných štúdií

I vzťahu štruktúry a aktivity, ktoré poskytujú PDE III inhibíciu, počet štrukturálnych tried PDE IV inhibítorov je relatívne obmedzený.

Už bolo skôr ukázané, že 3,8-disubstituované 6-tioxantínové deriváty, ako sú opísané v EP-A-0256692, vykazujú zvýšenú bronchodilatačnú a protizápalovú aktivitu v porovnaní so zodpovedajúcimi xantínovými derivátmi. Premena týchto 6-tioxantínových derivátov na zodpovedajúce izoguaníny podstatne znižuje bronchodilatačnú a protizápalovú aktivitu v niektorých testoch.

PDE IV (a možno PDE V) je prítomný vo všetkých hlavných zápalových bunkách pri astme, zahrňujúc eozinofily, neutrofily, T-lymfocyty, makrofágy a endotelové bunky. Inhibíca spôsobuje zníženie bunkovej aktivity a uvoľňuje bunky hladkého svalstva v priedušnici a prieduškách. Z druhej strany, inhibícia PDE III, ktorý je prítomný v myokarde, spôsobuje vzrast v sile aj rýchlosti srdcových sťahov. To sú neželané vedľajšie účinky protizápalového reagentu. Teofilín, neselektívny PDE inhibítor, inhibuje aj PDE III aj PDE IV, čím spôsobuje aj požadované antiastmatické účinky aj neželanú kardiovaskulárnu stimuláciu. Pri týchto známych rozdieloch medzi PDE izozýmami je zrejmá možnosť sprievodného protizá3 palového a bronchodilatačného pôsobenia bez mnohých vedľajších účinkov spojených s teofilínovou terapiou. Zvýšený výskyt chorobnosti a úmrtnosti na astmu v mnohých západných kraj inách počas posledného desaťročia sústredil klinický dôraz na zápalovú povahu tejto choroby a úžitok z inhalovaných steroidov. Najvýhodnejší by bol vývoj reagentov, ktoré majú aj bronchodilatačné aj protizápalové vlastnosti. Zdá sa, že selektívne PDE IV inhibítory by mali byť účinnejšie, s menšími vedľajšími účinkami než teofilín. Táto hypotéza sa klinicky potvrdila. Preto boli urobené pokusy nájsť nové látky, ktoré majú selektívnejšiu a zlepšenú PDE IV inhibíciu.

Prihlasovatelia tohto vynálezu prekvapivo zistili, že analogická premena 3 a 3,8-disubstituovaných tiohypoxantínov, ktoré samotné obvykle vykazujú malú, ak vôbec nejakú, PDE IV inhibičnú aktivitu, na zodpovedajúce purínové deriváty poskytne látky s PDE IV inhibičnou aktivitou porovnateľnou alebo v niektorých prípadoch s väčšou, ako 6-tioxantínové deriváty z EP-A-0256692.

Iná príprava 3-metyl-6-dimetylamino-3H-purínu, 3-benzyl-6-metylamino-3H-purínu a 3-benzyl-6-izopropylamino-3Hpurínu je opísaná v J. Org. Chem., 55, 5761 - 5766 (1990). Nie je opísaná biologická aktivita týchto látok.

Podstata vynálezu

Podľa toho je primárnym predmetom tohto vynálezu poskytnúť nové látky, ktoré sú účinnými PDE IV inhibítormi.

Ďalším predmetom tohto vynálezu je poskytnúť nové látky, ktoré pôsobia ako účinné PDE IV inhibítory s nižšou PDE III inhibíciou.

Ďalším predmetom tohto vynálezu je poskytnúť metódu syntézy nových látok podľa tohto vynálezu.

Ďalším predmetom tohto vynálezu je poskytnúť metódu liečenia pacientov, ktorí potrebujú PDE IV inhibíciu.

Ďalším predmetom tohto vynálezu je poskytnúť metódu liečenia cicavcov trpiacim chorobným stavom vybratým zo skupiny astmy, alergií, zápalu, depresie, demencie a chorobných stavov spojených s abnormálne vysokými fyziologickými hladinami cytokinu(ov), ako napríklad nádorového nekrotického faktora.

S vyššie uvedenými a ostatnými predmetmi sa tento vynález čiastočne týka novej skupiny 3-substituovaných a 3,8disubstituovaných 6-aminopurínových derivátov s bronchodilatačnou a/alebo protizápalovou aktivitou.

Vynález teda poskytuje látku so vzorcom (I)

(D kde r3 , R<5a _a r8 _s£ rovnaké alebo rôzne a predstavujú H alebo C-^ galkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =NOCONH2> alebo =0; C^gcykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, haloalkylom, =N0H, =N0C0NH2, alebo =0;

C^gcykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s jednou alebo viacerými OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH2, alebo =0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s jedným alebo viacerými substituentami z halogénu, NH2, a'lkylamino skupiny, dialkylamino skupiny, C^_g acylamino skupiny, C^.g alkylsulfonylamino skupiny, voliteľne substituovanej karbamylom, OH, alkoxylom, C^_g cykloalkoxylom, C=N0H, C=N0C0NH2, C^.g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl (0^4), heterocyklyl; heterocyklyla'lkyl (0^_4) ; heteroaryl; a heteroaralkyl;

R^b predstavuje H alebo R^^a, alebo spolu r6\ N a R^^a vytvárajú Cg_g členný kruh obsahujúci od jedného do troch dusíkových atómov, od nula do dvoch kyslíkových atómov, od nula do dvoch atómov síry, voliteľne substituovaný s alkoxylom, C0₂H, C0NH₂, =NOH, =NOCONH₂, =0;

a kde aryl je fenyl alebo naftyl, heterocyklyl je 5, 6, alebo 7 členný kruh zahrňujúci od jedného do troch atómov dusíka, jeden alebo dva kyslíkové atómy, nula až dva atómy síry, a môže byť substituovaný ako na aryle, na uhlíkoch alebo dusíkoch tohto kruhu;

alebo jeho farmaceutický prijateľná soľ za predpokladu, že R³ je benzylová skupina, R^^a je metylová alebo izopropylová skupina a R^b je vodíkový atóm alebo R³, R^^a a R^b _sú metylové skupiny, R° je iná ako atóm vodíka.

O

V niektorých výhodných uskutočneniach R predstavuje C-^_g alkyl, C₂_y cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar (C-£_ ₄) alkylovú skupinu; heteroaryl alebo heteroar(Ci_₄)alkyl;

R^^a predstavuje C^_g alkyl, C37 cykloalkyl, C4_g cykloalkylalkyl, aryl, ar(C^_4)alkylovú skupinu, alebo heterocyklyl (0^4) alkylovú skupinu; R^³- predstavuje vodíkový atóm alebo C-^_g alkyl, C22 cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar(C^_4)alkylovú skupinu; alebo -NRb^aRbb spolu tvoria 5-členný alebo 6-členný kruh, ktorý voliteľne

O obsahuje jeden alebo viac dodatočných heteroatómov; a R predstavuje vodíkový atóm alebo C^_g alkyl, Cg_y cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl, ar(C^_₄)alkyl, pyridyl alebo pyridyl (C-£_ 4) alkylovú skupinu.

Ako sa pre účely tohto vynálezu používa, môže alkylová skupina alebo C-£_₄ alkylová skupina z ar(C-£_4)alkylu, alebo heterocyklo(C-£_4) alkylovej skupiny, mať priamy alebo rozvetvený reťazec a môže byť substituovaná alebo nesubstituovaná.

C|_g alkylová skupina je výhodne alkylová skupina a napríklad metyl, etyl, n-propyl, izo-propyl, n-butyl, izo-butyl alebo izo-pentyl. Vhodné substituenty zahrňujú hydroxyl, alkoxyl (napríklad metoxyl alebo etoxyl), halogén (napríklad fluór, chlór alebo bróm) a haloalkyl (napríklad trifluorometyl).

cykloalkylová skupina alebo cykloalkylová skupina z C₄_g cykloalkylalkylovej skupiny môže byť výhodne cyklobutylová, cyklopropylová alebo cyklopentylová skupina, ale výhodne je to cyklopropyl alebo cyklopentyl. C₄_g cykloalkylalkylová skupina môže byf cyklopropylmetyl, cyklobutylmetyl, cyklopentylmetyl, cyklohexy lmety’l alebo cykloheptylme. tyl, ale výhodne je to cyklopropylmetyl alebo cyklopentylmetyl. Cykloalkylová alebo cykloalkylalkylová skupina môže byf * substituovaná alebo nesubstituovaná. Vhodné substituenty zahrňujú hydroxyl, alkoxyl (napríklad metoxyl alebo etoxyl), halogén (napríklad fluór, chlór alebo bróm) a haloalkyl (napríklad trifluorometyl).

Heteroarylová skupina alebo heteroarylová skupina z heteroar(C^_4)alkylovéj skupiny je výhodne pyridyl. Heteroarylová skupina môže byf nesubstituovaná alebo substituovaná, napríklad C^_₄ alkylovou skupinou (ako napríklad metylom) alebo elektróny-odfahujúcim substituentom, ako je napríklad halogénový atóm (napríklad fluór alebo chlór), nitro alebo trifluorometylová skupina dodávajúca elektróny, ako napríklad alkoxyl alebo cykloalkoxyl. Ar (C-j, _₄) alkylová skupina je výhodne benzyl alebo substituovaný benzyl.

Heterocyklická skupina z heterocyklo(C^_₄)alkylovéj skupiny môže vhodne obsahovaf jeden alebo viaceré heteroatómy, ako napríklad kyslík alebo dusík, a vhodne je to morfolinylová skupina.

Ak -NR^a-R^b spolu tvorí 5-členný alebo 6-členný kruh, ktorý obsahuje dodatočný heteroatóm, je týmto heteroatómom výhodne dusík alebo kyslík. Kruh tvorený -NR^a-R^b môže byf nesubstituovaný alebo substituovaný, napríklad C-^4 alkylovou skupinou (ako je napríklad metyl alebo etyl) alebo halogénovým atómom (ako je napríklad fluór alebo chlór) a môže obsahovať jednu alebo viaceré jednotky nenasýtenia. -NR^a-R^b _môže byf vhodne substituovaný alebo nesubstituovaný morfolínový alebo piperazínový kruh.

V jednej výhodnej triede látok so vzorcom (I) predstai a/*

- 7 vuj e R^ C^_g (výhodne C^j) alkylovú skupinu, zvlášť propyl, ar (C-£ _4) alkylovú skupinu, ako je napríklad substituovaný alebo nesubstituovaný benzyl alebo ϋ^_γ cykloalkylovú skupinu, zvlášť cyklopropylmetyl.

V ďalšej výhodnej triede látok so vzorcom (I) predstavuje R^^a C-£_g alkylovú skupinu, ako je napríklad metyl alebo etyl. predstavuje vhodne vodíkový atóm.

V ďalšej výhodnej triede látok so vzorcom (I) predstavuje R^^a heteroaryl (C-j^ 4)alkylovú skupinu, ako je napríklad 4-pyridylmetylová skupina.

V ďalšej výhodnej triede látok so vzorcom (I) predstavuje r8 vodíkový atóm, Cg_y cykloalkylovú skupinu, zvlášť cyklopropyl, alebo C^_g alkylovú skupinu, zvlášť izopropyl.

Pojem nižší alkyl je definovaný pre účely tohto vynálezu ako radikál s priamym alebo rozvetveným reťazcom, ktorý má od 1 do 5 uhlíkových atómov. Podobne pojem alkoxy1 je definovaný pre účely tohto vynálezu ako RO, kde R je radikál s priamym alebo rozvetveným alebo cyklickým reťazcom, ktorý má od 1 do 6 uhlíkových atómov.

Výhodné adenínové látky podľa tohto vynálezu zahrňujú: 3-benzyl-6-etylamino-3H-purín; 6-etylamino-3-hexyl-3H-purín; 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6-etylamino-3H-purín; 6cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purín; 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)- 6-etylamino-8-izopropyl-3H-purín; 8-cyklopro-pyl-3-propyl-6-(4-pyridylmetylamino)-3H-purín; 6-cyklopen-tylamino-3 -(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)- 8-izopropyl-3H-purín; 3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino8-izopropyl -3H-purín; 3- (4-ch'lórbenzyl) -6-cyklopentylamino8-cyklopropyl-3H-pu.rín; 3- (3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl) -6-etylamino-3H-pu.rín; 3-benzyl-6-etylamino-8- (l-metyletyl)-3H-purín; 3-etyl-6-cyklopentyIamino-8-cyklopropyl3H-purín; 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-(3-metylbutyl)-3H-purín ; 3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-purín;

8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6-etylamino-3H-purín; 3-etyl-6-etylamino-8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3H-purín; 3 - butyl-8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-purin; 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-propyl-3H-purín; 3-etyl-6-cyklopentyl ow

- 8 amino-8 -izopropyl-3H-purín; 6-amino-8-cyklopropyl-3-propyl3H-purín; 8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3-propyl- 3H-purín; 6-cyklopentylamino-8-izopropyl-3-propyl-3H-purín; 6-(3cyklopentyloxy-4-metoxybenzylamino)-8-cyklopropyl-3-propyl3H-purín; 6-butylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purín; 3cyklopropy’lmetyl- 8 - izopropyl-6-etylamino-3H-purin; 8-cyklopropyl-3-etyl-6-propylamino-3H-purín; 6-cyklohexylamino-8izopropyl-3-propyl-3H-purín; 3,8-dietyl-6-morfolíno-3H-purín; a ich farmaceutický prijateľné soli.

V niektorých výhodných uskutočneniach vynálezu, je adenínová látka vybratá z 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)6-etylamino-3H-purinu (PDE IV = 2,15 μΜ); 3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-8-izopropyl-3H-purínu (PDE IV Ι^θ =1,13μΜ); 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-6-etylamino-8-izopropyl3H-purínu (PDE IV Ι^θ = 0,32 μΜ) ; a ich farmaceutický prijateľných solí .

Vynález sa tiež týka tioizoguanínových látok, ktoré sú prekurzormi adenínových látok opísaných vyššie. Okrem ich úlohy ako prekurzorových látok, bolo prekvapivo zistené, že tieto látkyjtiež majú významnú PDE IV inhibičnú aktivitu.

Vynález je preto čiastočne zameraný na látku so vzorcom (II): !

(II) kde r3, p6a, RÓb _a r8 _s£ rovnaké alebo rôzne a predstavujú rovnaké skupiny ako skôr uvedené skupiny vzhľadom na látku (I) uvedenú vyššie.

Výhodné tioizoguanínové látky podľa tohto vynálezu za-'-V..· λ. Ο·.·<ό-’.<ιÚÍ.'<iÄ*ÍkáXM5

- 9 hrňuj ú 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-2H-purín-2-tión (PDE IV Ι^θ = 7,41 μΜ) ; 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-etyl-2H-purín-2-tión (PDE IV I^q = 0,19 μΜ) ; (zvlášť výhodný) 8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-6-(4-pyridylmetylamino)-2H-purín-2-tión (PDE IV 1^0 = 0,41 μΜ); a ich farmaceutický prijateľné soli.

Vynález sa tiež týka 2,6-ditioxantínových látok, ktoré sú prekurzormi tioizoguanínových látok opísaných vyššie. Okrem ich úlohy ako prekurzorových látok, bolo prekvapivo zistené, že tieto látky tiež majú významnú PDE IV inhibičnú aktivitu .

Vynález je preto čiastočne zameraný na látku so vzorcom (III) :

(III) kde

R² a R® sú rovnaké alebo rôzne a predstavujú rovnaké skupiny ako skôr uvedené skupiny vzhľadom na látku (I) uvedenú vyššie.

Výhodné ditioxantínové látky podľa tohto vynálezu zahrňuj ú 3-benzyl-3,7-dihydro-8 -(l-metyletyl)-1H-purín-2,6-ditión (PDE IV = 3,40 μΜ); 3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-lH-purín-2,6-ditión (PDE IV - 3,03 μΜ);

-(4-chlórbenzyl)- 8 -izopropyl-3,7-dihydro-1H-purín-2,6 -ditión (PDE IV I5O ^{= 2}’⁴θ μΜ); 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-3,7-dihydro-1H-purín-2,6-ditión (PDE IV = 2,27 μΜ) ;

3- (3-cykIopentyloxy-4-metoxybenzyl) -3,7-dihydro-8-.izopropyľ lH-purín-2,6-ditión (PDE IV - 0,80 μΜ) ; a ich .farmaceutický prijateľné soli.

- 10 Vhodné farmaceutický prijateľné soli sú soli konvenčné známe v tomto odbore a zahrňujú napríklad kyslé adičné soli tvorené s anorganickými kyselinami, ako sú napríklad hydrochloridy, fosfáty a sulfáty a s organickými kyselinami, ako sú napríklad vínany, maleináty, fumaráty a jantarany.

adenínových látkach podlá tohto vynálezu, ako aj o ich tioizoguanínových a 2,6-ditioxantínových prekurzoroch, sa teraz preukázalo, že majú PDE IV inhibičnú aktivitu, pomocou štandardných laboratórnych testov, ako napríklad sú enzýmová analýza, skúška s tracheálnym hladkým svalstvom morčaťa, testy edému PAF pokožky a edému ucha myši kyselinou arachidovou a množením lymfocytov. Tieto látky môžu tiež nájsť použitie pri liečení iných chorobných stavov ľudí a iných cicavcov, ako je napríklad liečenie chorobných stavov spojených s fyziologicky škodlivým prebytkom tumorového nekrotického faktora (TNF). TNF aktivuje monocyty, makrofágy a T-lymfocyty. Táto aktivácia je zahrnutá v rozvoji infekcie vírusom ľudskej imunitnej nedostatočnosti (HIV) a iných chorobných stavov týkajúcich sa tvorby TNF a iných cytokínov ovplyvňovaných TNF.

Podľa toho je tento vynález tiež zameraný na poskytnutie látky podľa tohto vynálezu alebo jej farmaceutický prijateľnej soli pre použitie v medicíne, zvlášť na liečenie stavov, pri ktorých je indikovaný PDE IV inhibičný účinok (napríklad chronická choroba priechodnosti dýchacích ciest).

Vynález ďalej poskytuje výrobu látok podľa tohto vynálezu alebo ich farmaceutický prijateľných solí na výrobu liekov na liečenie stavov, pri ktorých sa indikuje PDE IV inhibičný účinok.

V ďalšom aspekte vynález poskytuje metódu na liečenie stavov, pri ktorých sa indikuje bronchodilatačný alebo protizápalový reagent, zahrňujúc podávanie farmaceutický účinného množstva jednej alebo viacerých látok podľa tohto vynálezu alebo ich farmaceuticky prijateľných solí.

Aktívna zložka je výhodne prítomná ako farmaceutický prípravok, vhodne vo forme jednotkovej dávky.

Podľa ďalšieho aspektu vynález poskytuje farmaceutickú ^>:<Γ>._Λ

- 11 zmes obsahujúcu najmenej jednu látku so vzorcom (I) alebo jej farmaceutický prijateľnú soľ, upravenú na podávanie nejakým vhodným spôsobom. Farmaceutické zmesi podľa tohto vynálezu môžu byť vhodne upravené konvenčným spôsobom spolu s jedným alebo viacerými farmaceutický prijateľnými nosičmi alebo excipientami.

Látky podľa tohto vynálezu môžu byť vhodne upravené v dávkových formách pre orálne a parenterálne podávanie, alebo pre podávanie inhaláciou.

Pre orálne podávanie vhodné dávkové formy zahrňujú tuhé dávkové formy, ako napríklad tablety a kapsuly, ktoré môžu byť pripravené konvenčnými farmaceutickými prostriedkami s farmaceutický prijateľnými excipientami, ako sú napríklad spojivá (napríklad škrob alebo hydroxypropylmetylcelulóza), mastiace reagenty (ako napríklad stearát horečnatý alebo mastenec), sladiace reagenty alebo mastiace reagenty. Kvapalné dávkové formy, ktoré sa môžu použiť zahrňujú roztoky, sirupy alebo suspenzie, ktoré sa môžu pripraviť konvenčnými prostriedkami s farmaceutický prijateľnými adjuvansami, ako napríklad so zvlhčovacími reagentami, suspendujúcimi reagentami, emulziíikačnými reagentami a ochucujúcimi a parfumujúcimi reagentami.

Pre parenterálne podávanie môžu mať látky podlá tohto vynálezu vhodne formu sterilných vodných alebo nevodných roztokov, suspenzií alebo emulzií, ktoré môžu obsahovať stabilizujúce suspendujúce alebo dispergujúce reagenty. Zmesi tiež môžu byť vo forme tuhých zmesí ako napríklad práškov, ktoré sa môžu rekonštituovať pred použitím s vhodným vehikulom, ako je napríklad sterilná voda alebo iné sterilné inI jektovatelné médium.

Pre podávanie inhaláciou sa aktívna zložka môže dodávať ako aerosol alebo rozprašovač. Aktívna zložka môže byť prítomná ako tuhá látka, suspenzia alebo roztok.

Okrem toho, ak látky podľa tohto vynálezu sú včlenené do orálnych dávkových foriem, predpokladá sa, že takéto dávkové formy môžu poskytnúť okamžité uvoľnenie látky v gastroíntestinálnom trakte, alebo alternatívne môžu poskytnúť ria- 12 dené a/alebo trvalé uvoľňovanie cez gastrointestiná'lny trakt. Široký rozsah riadených prípravkov a/alebo prípravkov s pomalým uvoľňovaním je dobre známy odborníkom v tejto oblasti a sú určené pre použitie v spojení s prípravkami podľa tohto vynálezu. Riadené a/alebo pomalé uvoľňovanie sa môže poskytnúť napríklad potiahnutím orálnej dávkovej .formy, alebo včlenením látky(látok) podľa tohto vynálezu do riadenej a/alebo pomaly pôsobiacej matrice.

Špecifické príklady farmaceutický prijateľných nosičov a excipientov, ktoré sa môžu použiť na prípravu orálnych dávkových foriem, sú opísané v Handbook of Pharmaceutical Excipients, American Pharmaceutical Association (1986), včlenenom v tomto dokumente odkazom. Techniky a zmesi na prípravu tuhých dávkových foriem sú opísané v Pharmaceutical Dosage Forms: Tablets (Lieberman, Lachman Schwartz, editori) druhé vydanie, publikované Marcel Dekker, Inc., včlenenom v tomto dokumnte odkazom. Techniky a zmesi na prípravu tabliet (stláčaných alebo lisovaných), kapsúl (tvrdej a mäkkej želatíny) a dražé sú tiež opísané v Remnington’s Pharmaaceutical Sciences, Arthur Oxol, editor), 1553 - 1593 (1980), včlenenom v tomto dokumente odkazom. Techniky a zmesi na prípravu kvapalných dávkových foriem sú opísané v Pharmaceutical Dosage Forms: Disperse Systems, (Lieberman, Rieger a Banker, editori) publikovanom Marcel Dekker, Inc., včlenenom v tomto dokumente odkazom.

Dávka látok podľa tohto vynálezu je závislá, medzi iným, od postihnutia, ktoré sa má liečiť, závažnosti symptómov, spôsobu podávania, frekvencie dávkového intervalu, prítomnosti nepriaznivých vedľajších účinkov a zvláštnosti použitej látky.

Dávka podanej aktívnej j zložky bude závisieť od zvláštnosti použitej látky, stavu pacienta, frekvencie a spôsobu podávania a stavu, ktorý sa má liečiť. Látky podľa tohto vynálezu sa vhodne môžu podávať jedenkrát alebo viackrát za deň, napríklad 1 až 4 krát. Navrhovaná dávka látok podľa tohto vynálezu je 1 až 10 mg/kg hmotnosti tela, výhodne 100 mg až 1000 mg za deň.

^e«^ssaaaiíÄažtBWgäS&.

Podľa iného aspektu vynálezu látky so vzorcom (I) a ich .farmaceutický prijateľné soli sa môžu pripraviť nasledujúcimi metódami, v ktorých R³, R^6a, R⁶¹? a R⁸ sú definované pre vzorec (I), ak nie je naznačené inak.

Podľa jedného všeobecného procesu (A) látky so vzorcom (I) sa môžu pripraviť reagovaním látky so vzorcom (IV)

(IV) s látkou so vzorcom (V):

R^6aR^6bNH (V)

Reakcie látky (IV) s látkou (V) sa môže vhodne uskutočniť v prítomnosti alebo v neprítomnosti vhodného reakčného prostredia a pri teplote od 0 do 150 ’C, výhodne pri 150 “C. Vhodné rozpúšťadlá zahrňujú vodu, alkohol (napríklad etanol) a uhlovodíky (napríklad benzén).

Látky so vzorcom (IV) samotné sa môžu pripraviť tionáciou zodpovedajúcich 6-oxolátok, napríklad opracovaním s pentasulfidom fosforečným v pyridíne. Tionácia sa vhodne robí opracovaním suspenzie 6-oxolátky v pyridíne s 20 % molovým prebytkom pentasulfidu fosforečného.

Zodpovedajúce 6-oxolátky sa zase môžu pripraviť zo zodpovedajúcich 2-tioxantínových derivátov podľa metód známych v tomto odbore (pozri napríklad Árch Pharm, 244, 11 - 20 (1906) a J. Org. Chem., 27, 2478 - 2491 (1962)).

Podľa iného všeobecného procesu (B) sa látky so vzorcom (I) môžu pripraviť z látok so vzorcom (II):

- 14 -V'^hŕWtfw¹·

redukciou za použitia vhodného redukujúceho reagentu. Redukcia sa môže vhodne uskutočnil v prítomnosti kovu, ako je napríklad Raneyov nikel. Redukcia sa môže výhodne uskutočnil vo vhodnom rozpúšťadle, ako je napríklad alkohol (napríklad etanol), uhľovodík (napríklad benzén) alebo voda, a pri vhodnej teplote. Vo zvláštnom uskutočnení sa Raneyov nikel môže pripravil in situ zo zliatiny nikel/hliník a silnej zá-. sady, ako je napríklad hydroxid sodný.

Látky so vzorcom (II) samotné sa môžu pripravil so zodpovedajúcich 2,6-ditioxantínových derivátov so vzorcom (III):

R ³ (III) reakciou s amínom R^^aR^^NH podľa metódy z procesu (A) uvedeného vyššie.

Látky so vzorcom (III) samotné sa môžu pripravil so zodpovedajúcich 2-tioxantínových derivátov tionáciou, napríklad opracovaním s pentasulfidom fosforečným v pyridíne. 2-tioxantínové látky sú známe látky alebo sa môžu pripravil z ľahko získateľných východiskových materiálov konvenčnými metódami.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Nasledujúce príklady ilustrujú rôzne aspekty tohto vynálezu a nie sú zostavené na ohraničenie nárokov akýmkoľvek spôsobom.

Príklad 1

3,8-dietyl-6-morfolíno-3H-purín (i) 3,8-dietyl-hypoxantín

3,8-dietyl-2-tioxantín (18,9 g) sa rozpustil v 370 ml 2 mol/1 NaOH. Po častiach sa počas 1,5 hodiny pri 65 °C pridala zliatina nikel/hliník (75,6 g) (1,4 mol Al a 0,6 mol Ni) . Po ďalšej 0,5 hodine pri 65 až 70 “C sa reakčný produkt prefiltroval, premyl s 200 ml 1 mol/1 NaOH a filtrát sa neutralizoval so 183 ml 5 mol/1 HCI na pH 7. Vytvorený hydroxid hlinitý sa odfiltroval, filtrát sa skoncentroval do sucha, zvyšok sa suspendoval v 500 ml absolútneho etanolu pri 90 ’C a nerozpustný NaCl sa odfiltroval a premyl. Filtrát sa skoncentroval dosucha, rozpustil v 200 ml chloroformu, filtroval a skoncentroval znova dosucha. Zvyšok sa kryštalizoval zo 150 ml etanolu a poskytol 3,8-di-etyl-hypoxantín (12,68 g) s t.t. (sublimácia pri 220 °C) 305 až 307 °C s rozkladom.

(ii) 3,8-diety'l-6-tiohypoxantín

Produkt zo stupňa (i) (8,65 g) a pentasulfid fosforečný (12,0 g) sa refluxovali v 150 ml pyridínu počas 1 hodiny. Po ochladení sa po kvapkách pridalo 59,4 ml 2 mol/1 NaOH. Tuhá látka sa odfiltrovala a premyla s vodou. Filtrát sa skoncentroval za vákua dosucha a zvyšok sa suspendoval do 200 m’l vody a oddelil. Filtrát sa trikrát extrahoval so 600 ml chloroformu. Zvyšok z organickej fázy sa spojil s oddelenou tuhou látkou (celkovo 6,08 g), rozpustil v 500 ml chloroformu a prefiltroval cez 24 g silikagélu. Frakcie 2 a 3 eluova- 16 li 4,63 g surového produktu, ktorý sa kryštalizoval zo 120 ml metanolu a poskytol 3,8-dietyl-6-t.iohypoxantín (3,58 g) s t.t. (sublimácia pri 210 °C) 250 až 270 °C s rozkladom.

Druhý odber poskytol 0,58 g.

Elementárna analýza:

% vypočítané C 51,90 H 5,81 N 26,90 S 15,40 % nájdené C 51,76 H 6,01 N 26,82 S 15,64 (iii) 3,8-dietyl-6-morfolíno-3H-purín

Produkt zo stupňa (ii) (52 mg) v 5 ml morfolínu sa refluxoval počas 21 hodín. Odparenie za vákua poskytlo 65 mg surového 3,8-dietyl-6-morfolíno-3H-purínu.

Príklad 2

3,8-dietyl-6-morfolíno-3H-purín (i) 3,8-dietyl-2,6-ditioxantín

19,14 g 3,8-dietyl-2-tioxantínu a 22,75 g pentasulfidu fosforečného sa refluxovalo v 280 ml pyridínu počas 4,5 hodiny. Po ochladení na laboratórnu teplotu sa pridalo 113 ml 2 mol/1 NaOH počas 15 minút za prudkého premiešavania a chladenia. Suspenzia sa filtrovala, premyla pyridínom a skoncentrovala za vákua. Zvyšok sa suspendoval v 150 ml vody a skoncentroval na odstránenie pyridínu. Suspenzia vo vode a oddelenie tuhej látky poskytlo surový produkt, ktorý sa rozpustil v 150 ml 1 mol/1 NaOH, opracoval dvoma podielmi 0,5 g aktívneho uhlia a filtroval. Filtrát sa pomaly okyslil s 38 ml 5 mol/1 HC1 na pH 3 a tuhá látka sa oddelila. Usušený surový produkt (19,85 g) sa suspendoval v 400 ml 2-propanolu pri 95 °C. Po ochladení na laboratórnu teplotu sa tuhá látka (17,62 g) oddelila a premyla.

(ii) 3,8-dietyl-3,7-dihydro-6-morf olíno-2H-purín-2-t:i.ón

Produkt zo stupňa (i) (14,42 g) sa refluxoval v 78,4 ml (900 mmol) morfolínu počas 30 hodín. Po ochladení na laboratórnu teplotu sa reakčný produkt suspendoval v 100 ml acetó- 17 nu a produkt z názvu tohto odstavca sa oddelil a premyl.

Teplota topenia 3,8-dietyl-3,7-dihydro-6-morfolíno-2H-

purin-2-tiónu: 295 až 298	’C (s rozkladom).
Elementárna analýza;
% vypočítané C 53,22	H 6,53	N 23,87	S	10,93
% nájdené C 53,01	H 6,77	N 23,82	S	10,97

(iii) 3,8-dietyl-6-morfolíno-3H-purín

Produkt zo stupňa (ii) (7,34 g) sa rozpustil v 150 ml 2 mol/1 NaOH. Pridala sa zliatina Ni-Al 50 % (22,95 g) (425 mmol Al a 196 mmol Ni) počas 1,25 hodiny pri 65 ’C. Po ďalšej 1,5 hodine pri 65 až 70 ’C sa pridalo dodatočných 15 ml 10 mol/1 NaOH a po častiach 11,48 g zliatiny Ni-Al 50 %. Po ďalšej 0,5 hodine pri 65 až 70 ’C sa reakčný produkt ponechal stál počas noci. Pridal sa dichlórmetán (100 ml), suspenzia sa prefiltrovala a nikel sa premyl dichlórmetánom (200 ml) a vodou (100 ml). Organická fáza sa oddelila, premyla dvakrát vodou a skoncentrovala. Zvyšok sa rozotrel v 50 ml petroléteru a poskytol látku z názvu tohto príkladu ako tuhú látku (5,40 g) t.t. 103 až 107 ’C.

Elementárna analýza:

% vypočítané C 59,75 H 7,33 % nájdené C 59,64 H 7,55

N 26,80 N 26,35

HC1 soľ kryštalizovaná z acetónu mala t.t. 145 ’C) 220 až 222 ’C.

(sublimácia pri

Príklad 3

8-cyklopropyl-3-etyl-6-etylamino-3H-purín (i) 8-cyklopropyl-3-etýl-6-etylamino-3,7-d.ihydro-2Hpurín-2-tión

8-cyklopropyl-3-etyl-2,6-ditioxantín (20,19 g) pripravený podľa metódy z Príkladu 2 (i) a 70 % hmotnostných etylamínu vo vode (320 ml 4,0 mol/1) sa nadávkovali do 450 ml

- 18 tlakového reaktora a zahrievali na 150 °C počas 6 hodín. Reakčný roztok sa ochladil na laboratórnu teplotu, opracoval dvoma podielmi (0,2 g) aktívneho uhlia, prefiltroval a odparil dosucha. Zvyšok sa rozotrel v metanole (300 ml), skoncentroval na asi 200 ml a tuhá látka sa oddelila (16,48 g), t.t. 265 °C s rozkladom.

(ii) 8-cyklopropyl-3-etyl-6-etylamino-3H-purín Produkt zo stupňa (i) (11,85 g) sa rozpustil v 2 mol/1 »

NaOH (270 ml) a 10 mol/1 NaOH (27 ml) a zahrieval na 65 °C. Počas 1,25 hodiny sa pridala 50 % zliatina Ni-Al (518 mmol Ni a 1125 mmol Al) (60,8 g) za prudkého premiešavania pri 65 až 70 ’C. Po ďalšej 0,75 hodine pri tej istej teplote sa reakčná zmes ochladila na laboratórnu teplotu a opracovala s chloroformom (400 ml). Nikel sa odfiltroval a premyl s 350 ml chloroformu a 150 ml vody. Filtrát sa oddelil a chloroformová vrstva sa odparila dosucha. Zvyšok (19,64 g) sa rozpustil v acetóne (100 ml), opracoval s dvoma podielmi aktívneho uhlia (0,15 g), opracoval s dietyléterom (6,10 g), t.t. 80 až 96 Rekryštalizovaná vzorka z 105 °C • Elementárna analýza:

% vypočítané C 60,25 ⁴ % nájdené C 60,52 * (z rozdielu)

HC1 soľ kryštalizovala zo zmesi metanol-acetónu s t.t. 183 až 191 ’C.

Príklad 4

A. 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3-etyl-6-etylamino3H-purín hydrochlorid

B. 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3-etyl-6-etylamino3H-purín prefiltroval a odparil. Zvyšok sa (100 ml) a kryštály sa oddelili C. Druhý odber poskytol 1,25 g. diizopropyléteru mala t.t. 103 až

H 7,54 H 7,46

2,93 0 2,92*

N 29,28 N 29,10

- 19 (i) 3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzylalkohol

Do roztoku 48,70 g (220 mmol) 3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzaldehydu v 250 ml metanolu sa po častiach v priebehu 10 minút pri 15 až 22 °C za chladenia pridalo 8,57 g (220 mmol) 97 % hydridu boritého. Po ďalších 20 minútach sa raetanol odstránil za vákua, zvyšok sa vybral do 10 ml vody a 300 ml éteru. Éterová fáza sa odparila dosucha: 48,5 g (99,2 %) kvapalného benzylalkoholu.

(ii) 3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl kyanid

K roztoku 40,00 g (180 mmol) benzylalkoholu v 530 ml dichlórmetánu sa v priebehu 5 minút pridalo 32,7 ml (450 mmol) tionylchloridu. Roztok sa odparil za vákua dosucha, čo sa opakovalo po pridaní toluénu: 46,30 g (106,9 %) surového benzylchloridu, ktorý sa rozpustil v 230 ml dimetylformamidu a opracoval s 23,50 g (360 mmol) kyanidu draselného. Zmes sa zahrievala počas 4 hodín na 50 až 55 °C. Soľ sa odfiltrovala a filtrát sa odparil za vákua dosucha, čo sa opakovalo po pridaní vody, zvyšok sa vybral do éteru a extrahoval s 1 mol/1 NaOH. Éterová fáza sa odparila dosucha a poskytla 41,20 g (99,0 %) surového benzylkyanidu.

(iii) (3-cyklopentyloxy-4-metoxy-fenyl)acetylchlorid

42,2 g (180 mmol) benzylkyanidu sa refluxovalo v 410 ml % etanolu, 106 ml vody a 180 ml 10 mol/1 NaOH počas 20 hodín. Etanol sa odstránil za vákua, roztok sa zriedil na 800 ml s vodou, opracoval dvakrát s 2 g aktívneho uhlia, prefiltroval a okyslil so 185 ml 10 mol/1 HC1. Pomaly kryštalizujúca kyselina sa oddelila a sušila pri 30 °C: 42,2 g (92,9 %) kyseliny. 1,51 g (2,3 %) bolo extrahovateľné z filtrátu éterom. Obe časti (173 mmol) sa spojili a refluxovali v 500 ml dichlórmetánu a 31,4 ml (433 mmol) tionylchloridu počas 1,5 hodiny. Roztok sa dvakrát opracoval s 2 g aktívneho uhlia, prefiltroval a odparil dosucha. Toto sa dvakrát opakovalo s malým množstvom toluénu: 48,70 g (>100 %) surového acetylchloridu ako červenkavá kvapalina.

(iv) 8- (3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-3-etyl-2-tioxantin

10,02 g (45 mmol) 5,6-diamino-l-etyl-2-tíouracilhydrochloridu sa rozpustilo v 200 ml pyridínu, opracovalo s 6,05 g (57 mmol) uhličitanu sodného a 15,5 g (56 mmol) produktu z Príkladu 4 (iii) rozpusteného v 25 ml éteru sa pridalo v priebehu 10 minút pri 5 až 10 °C. Po 1,5 hodine pri laboratórnej teplote sa tuhá látka odfiltrovala a filtrát sa odparil za vákua do sucha. Zvyšok sa rozpustil v 100 ml 2 mol/1 NaOH a 200 ml vody a refluxoval. V priebehu 1 hodiny sa oddestilovalo 70 ml. Roztok sa prefiltroval a neutralizoval na pH 7,5 s 52 ml 5 mol/1 HC1. Tuhá látka sa oddelila a sušila: 14,37 g (79,7 %) surového 2-tioxantínu (z vody sa získalo 4,2 g kyseliny fenyloctovej), ktorý sa suspendoval v 250 ml horúceho metanolu a znova oddelil: 10,68 g (59,3 %) čisteného tioxantínu, ktorý sa rozpustil v 100 ml 1 mol/1 NaOH a prefiltroval. Filtrát sa okyslil na pH 6 a tuhá látka sa oddelila: 8,82 g (48,9 %) 2-tioxantínu s t.t. (260 °C) 280 až 310 °C s rozkladom.

(v) 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3-etyl-2,6-ditioxantín

8,41 g (21 mmol) 2-tioxantínu sa refluxovalo s 5,6 g (25,2 mmol) pentasulfidu fosforečného v 80 ml pyridínu. Po

5,5 hodinách sa pridalo 27,7 ml (55,4 mmol) 2 mol/1 NaOH pri 5 až 10 °C. Tuhá látka sa odfiltrovala a premyla s pyridínom. Filtrát sa odparil za vákua dosucha, zvyšok sa suspendoval v 200 ml vody s malým množstvom tetrahydrofuránu (THF) na kryštalizáciu, suspenzia sa skoncentrovala a tuhá látka sa pri pH 8 oddelila a premyla. Opätovné rozpustenie v 100 ml 0,5 mol/1 NaOH, opracovanie s aktívnym uhlím (20 %) , filtrácia a okyslenie na pH 6 poskytli tuhý surový ditioxantín 7,84 g (89,6 %). Kryštalizácia s chloroformu a suspendovanie v horúcom metanole poskytli 5,31 g (60,7 %) ditioxantínu s t.t. 241 až 243 ’C. Kryštalizačné kvapaliny sa spojili (2,36 g) a prefiltrovali s chloroformom cez 60 g silikagélu v kolóne: 1,73 g (19,8 %) sa izolovalo v druhom

- 21 výťažku.

(vi) 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-3-etyl-6etylamino-3,7-dihydro-2H-purín-2-tión

6,67 g (16 mmol)ditioxantínu a 52 ml 70 % etylamínu vo vode sa zahrievalo na 150 °C v tlakovom reaktore (1,725 MPa) počas 12 hodín pod dusíkom. Roztok sa opracoval aktívnym uhlím (5%) , prefiltroval a odparil za vákua dosucha. Zvyšok sa suspendoval vo vode, okyslil s 1 mol/1 HC1 na pH 4 a neutralizoval na pH 8 s hydrogénuhličitanom sodným. Tuhá látka sa oddelila, premyla a vysušila, čím poskytla 6,66 g (97,4 %) surového tioizoguanínu.

(vii) A. 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3-etyl6-etylamino-3H-purín hydrochlorid a B. 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3-etyl6-etylamino-3H-purín

6,41 g (15 mmol) surového tioizoguanínu a 9,70 g (165 mmol) neutrálneho Raneyovho niklu sa refluxovalo v 70 ml

1-propanolu počas 3 hodín. Nikel sa odfiltroval a filtrát sa odparil za vákua dosucha. Zvyšok (5,86 g/98,8 %) sa rozpustil v chloroforme a extrahoval viacnásobne s 1 mol/1 NaOH. Roztok NaOH sa okyslil s 5 mol/1 HC1 na pH 4 a neutralizoval s hydrogénuhličitanom sodným na pH 7,5. Zrazil sa olej, ktorý pomaly kryštalizoval a oddelila sa tuhá látka: 0,49 g 8- (3-cyk'lopentyloxy-4-metoxybenzyl) -3-etyl-6-etylamino-3Hpurínu s t.t. 172 až 174 “C. Chloroformový roztok sa odparil dosucha: 3,76 g (63,4 %) surového 3H-purínu, ktorý sa rozpustil v 30 ml metanolu a opracoval s 1 mol/1 metanolového HC'l. Roztok sa odparil za vákua dosucha a zvyšok kryštalizoval zo zmesi acetón-etylacetát: 3,66 g (56,5 %) 8-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3-etyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu s t.t. 169 až 171 °C.

Elementárna analýza pre CooH^gClN^Oo

Vypočítané C 61,17 H 7,0 N 16,21

Nájdené C 61,09 H 6,77 N 16,18

- 22 Príklad 5

3- (3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl) -6-etylamino-8-izopropyl3H-purín hydrochlorid (i) 3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzaldehyd

77,70 g (500 mmol) izovanilínu a 69,40 g (600 mmol) 97 % terc.butoxidu draselného (t-BuOK) sa rozpustilo v 800 ml 1-propanolu, 69,0 ml (630 mmol), a roztok sa refluxoval. Po 3 hodinách sa pridalo ďalších 9,25 g (80 mmol) ΐ-BuOK pri 80 °C a suspenzia sa refluxovala počas ďalších 3 hodín. Tuhá látka sa odfiltrovala a filtrát sa odparil za vákua dosucha. Zvyšok sa rozpustil v éteri a extrahoval s 1 mol/1 NaOH. Éterová fáza sa odparila dosucha: izolovalo sa 85,40 g (77,5 %) cyklopentyloxybenzaldehydu.

(ii) 3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzaldehyd-oxím

85,4 g (388 mmol) 3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzaldehydu sa rozpustilo v 350 ml 94 % etanolu a pridalo sa v priebehu 10 minút pri 15 až 20 °C do roztoku 29,7 g (427 mmol) hydroxylamóniumchloridu a 52,8 g (388 mmol) trihydrátu octanu sodného (3 H₂0) v 230 ml vody. Po 2 hodinách sa etanol odstránil za vákua, zvyšok sa opracoval s 16,3 g (194 mmol) hydrogénuhličitanu sodného, kým neprestala tvorba C0₂ a extrahoval sa éterom. Odparenie éterovej fázy poskytlo 91,0 g (9.9,7 %) oxímu ako zmes 2 izomérov.

(iii) 3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzylamín

73,5 g (320 mmol) oxímu, 80 ml metanolu, 55 g kvaplného amoniaku a 18,5 g neutrálneho Raneyovho niklu sa umiestnilo do 450 ml tlakového reaktora. Pridal sa plynný vodík do tlaku 8,28 MPa a celok sa zahrial na 75 až 80 °C, keď tlak klesol na 4,14 MPa, pridal sa znova plynný vodík do 8,28 MPa. Po 4 hodinách tlak dosiahol 7,45 MPa a

Nikel sa odfiltroval a premyl metanolom.

dosucha, rozpustil v éteri a extrahoval s 1 mol/1 NaOH. Éterová fáza sa odparila dosucha: 68,9 g (97,3 %) benzylarnínu.

zostal konštantný. Filtrát sa odparil (iv) 3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl-izotiokyanát

82.3 g (372 rnmol) benzylamínu sa rozpustilo v 10 ml toluénu a pridalo pri 15 až 20 ⁰ C (za chladenia) v priebehu 20 minút ku emulzii 22,5 ml (372 rnmol) sírouhlíka a 14,88 g (372 rnmol) NaOH v 52 ml vody. Reakčná zmes sa zahriala na 75 až 80 °C počas 1 hodiny a ochladila na 40 °C. V priebehu 15 minút sa pridalo pri 40 až 45 °C 35,4 ml (372 rnmol) etylchlórmravčanu. Emulzia sa upravila na pH 8 pomocou 2 mol/1 NaOH a zahrievala na 55 až 60 °C, uvoľňovanie plynu prestalo po asi 10 hodinách udržovania pH na hodnote 8 s 2 mol/1 NaOH (celkovo asi 8 ml). Organická vrstva sa oddelila a rozpúšťadlo sa odparilo: 96,3 g (98,3 %) benzylizotiokyanátu.

(v) 1-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-2-tiomočovina

96.3 g (366 rnmol) benzylizotiokyanátu sa rozpustilo v 100 ml THF a opracovalo so 44,2 ml (732 rnmol) 32 % roztoku amoniaku. Po 0,5 hodine pri 40 až 45 °C sa pridalo 300 ml vody a THF sa odstránil za vákua. Gumová suspenzia sa opracovala s 200 ml éteru, kryštály sa oddelili a premyli vodou a éterom. Suspendovanie v 30 ml dichlórmetánu a oddelenie poskytlo 65,77 g (64,2 %) benzyl-2-tiomočoviny s t.t. 144 až 145 °C.

(vi) 6-amino-l-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-2tiouracil

29,65 g (256 rnmol) 97 % t-BuOK sa rozpustilo v 240 ml

2-propanolu. 65,33 g (233 rnmol) 2-tiomočoviny a 25,3 ml (238 rnmol) etylkyanoacetátu sa pridalo pri 80 °C. Po 30 minútach refluxu sa vytvoril roztok a po 4,5 hodine sa pridalo ďalších 2,96 g (25,6 rnmol) t-BuOK a 4,97 ml (46,6 rnmol) etylkyanoacetátu. Po 22 hodinách refluxovania sa tuhá látka oddelila, spojila sa so zvyškom filtrátu, rozpustila sa vil vody a zrážala sa s asi 50 ml 5 mol/1 HCI (pH 3 až 4). Tuhá látka sa oddelila, premyla, sušila, rekryštalizovala suspendovaním vil refluxujúceho acetónu, skoncentrovala na asi 300 ml a oddelila pri 23 °C: 80,65 g (85,7 %) uracilu obsahujúceho 1 ekvivalent acetónu, t.t. 225 až 227 'C.

(vii) 6-amino-l- (3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl) -5nitrózo-2-tiouracil

I

68,9 g (170 mmol) uracilu sa rozpustilo v 650 ml kyseliny octovej, na odstránenie acetónu sa oddestilovalo 100 ml za vákua a pri 65 až 70 °C sa pridalo v priebehu 10 minút

43,4 ml (174 mmol) roztoku 4 mol/1 dusitanu sodného. Po ďalších 5 minútach sa suspenzia ochladila na 30 °C a zriedila s 1,7 1 vody. Tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila:

64,08 g (100 %) nitrózouracilu, ktorý sa rozpustil v 330 ml 1 mol/1 NaOH a 300 ml vody, prefiltroval a okyslil s 5 mol/1 HC1 na pH 2, pridali sa 2 1 vody, aby sa udržal v suspenzii. Tuhá látka sa oddelila a premyla, suspendovala v 60 ml metanolu a znova oddelila: 54,2 g (84,7 %) nitrózouracilu .

(viii) 1-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-5,6-diamino-2-tiouracil

15,06 g (40 mmol) nitrózouracilu sa suspendovalo v 300 ml THF a hydrogenovalo plynným vodíkom a 6 g neutrálneho Raneyovho niklu počas 2,5 hodiny, keď sa zachytávanie vodíka prerušilo. Po 1 hodine sa všetko rozpustilo a potom sa vytvorila nová zrazenina, ktorá sa rozpustila v zmesi dichlórmetánu a metanolu. Nikel sa odfiltroval a filtrát sa odparil za vákua dosucha: 13,96 g (96,3 %) surového diaminouracilu.

(ix) 6-amino-l-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-5izobutyrylamino-2-tiouracil

Dvojfázový roztok 15,01 g (41,4 mmol) diaminouracilu, 180 ml THF, 150 ml vody, 6,96 g (82,8 mmol) hydrogénuhličitanu sodného a 10,52 ml (62,1 mmol) anhydridu kyseliny ízomaslovej sa zahrialo na 55 °C pod dusíkom počas 1 hodiny. THF sa odparil za vákua a zvyšok sa zriedil s 200 ml vody (pH 8). Tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila: 16,25 g (90,7 %) izobutyrylaminouracilu.

(x) 3- (3-cyklopenty'loxy-4-metoxy-benzyl) -8-izop.ropyl-2tioxantín

- 25 17,81 g (41,2 mmol) izobutyrylaminouracilu sa refluxovalo 0,75 hodiny v 120 ml 1 mol/1 NaOH a 80 ml vody. Roztok sa opracoval dvakrát s 0,5 g aktívneho uhlia, prefiltroval, okyslil s 5 mol/1 HC1 a upravil na pH 7 až 8 roztokom hydrogénuhličitanu sodného. Tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila: 15,31 g (89,6 %) 2-tioxantínu s t.t. 270 až 276 °C (s rozkladom).

(xi) 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)- 8-izopropyl2,6-ditioxantín

15,17 g (36,6 mmol) 2-tioxantínu a 9,76 g (43,9 mmol) pentasulfidu fosforečného sa refluxovalo pod dusíkom v 140 ml pyridínu počas 5,5 hodiny. Pri 5 až 10 °C sa po kvapkách pridalo 48,3 ml (96,6 mmol) 2 mol/1 NaOH. Tuhá látka sa odfiltrovala a premyla pyridínom. Filtrát sa odparil za vákua dosucha a opracoval s 300 ml vody. Suspenzia sa upravila na pH 7 s roztokom₍hydrogénuhličitanu sodného a tuhá látka sa oddelila, premyla, rozpustila v 200 ml roztoku 0,5 mol/1 NaOH, opracovala dvakrát s 1,6 g aktívneho uhlia, prefiltrovala, okyslila s 5 mol/1 HC1 a neutralizovala roztokom hydrogénuhličitanu sodného na pH 7. Tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila: 14,64 g (92,9 %) surového ditioxantínu, ktorý sa rozpustil v 400 ml dichlórmetánu a prefiltroval cez 60 g silikagélu v kolóne. Rozpúšťadlo sa odparilo a zvyšok sa suspendoval v 20 ml 100 % etanolu a oddelil: 14,34 g (82,2 %) ditioxantínu s t.t. 204 až 206 °C (obsahujúci 1 mol EtOH).

(xii) 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-3,7-dihydro6-etylamino-8-izopropyl-2H-purín-2-tión

6,20 g (13 mmol) ditioxantínu a 42 ml 70 % etylamínu vo vode sa umiestnilo do 450 ml tlakového reaktora a zahrievalo na 150 °C (1,656 MPa) počas 12 hodín. Roztok sa prefiltroval a odparil dosucha. Zvyšok sa suspendoval vo vode, okyslil s 1 mol/1 HC1 na pH 3, a neutralizoval s roztokom hydrogénuhličitanu sodného na pH 7 až 8. Tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila: 5,48 g (95,5 %) tioizoguanínu s t.t. 72 až °C.

(xiii) 3- (3-cyklopenty'loxy-4-metoxy-benzyl) -6-etylamino-8-izopropyl-3H-purín hydrochlorid 5,43 g (12,3 mmol) tioizoguanínu a 7,9 g neutrálneho

Raneyovho niklu sa refluxovalo v 60 ml 1-propanolu počas

4,5 hodiny. Nikel sa odfiltroval a filtrát sa odparil za vákua dosucha: 4,90 g (97,2 %) surového purínu, ktorý sa rozpustil v 20 ml chloroformu, extrahoval s 1 mol/1 NaOH a prefiltroval cez 30 g silikagélu v kolóne. Rozpúšťadlo sa odparilo, zvyšok sa rozpustil v 25 ml metanolu, opracoval s 11 ml metanolového roztoku 1 mol/1 HC1 a odparil dosucha. Zvyšok sa suspendoval v 80 ml etylacetátu a oddelil: 3,49 g (63,6 %) 3H-purín hydrochloridu s t.t. 202 až 212 °C.

Elementárna analýza pre

Vypočítané C 61,94

Nájdené C 62,17

-23-32^^5-2 H 7,23 H 7,02

N 15,70 N 15,66

7,17 0 7,30

Príklad 6

3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid (i) 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-2-tioxantín 14,62 g (40 mmol) 1-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)5,6-diamino-2-tiouracilu sa rozpustilo v 200 ml kyseliny mravčej. Roztok sa skoncentroval za vákua pri laboratórnej teplote na odstránenie vody. Pridalo sa 50 ml kyseliny mravčej a postup sa opakoval. Po celkovo 1 hodine sa roztok kyseliny mravčej skoncentroval na 30 ml pri 25 °C a zriedil s 300 ml vody. Kryštály sa oddelili, premyli a sušili: 1.3,48 g (86,3 %) surového 5-formamidu (t.t. 210 až 230 °C), ktorý sa refluxoval v 86 ml 1 mol/1 NaOH počas 15 minút. Kalný roztok sa opracoval dvakrát s 0,6 g aktívneho uhlia, prefiltroval, okyslil s 5 mol/1 HC1 na pH 2 a neutralizoval na pH 6,5. Amorfná tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila pri 60 °C: 11,93 g (80,1 %) surového 2-tioxantínu, ktorý sa

- 27 rozpustil v 150 ml THF, opracoval s aktívnym uhlím (5%), pref iltroval, skoncentroval na 40 ml a zriedil s 250 ml etanolu. Po skoncentrovaní na 120 ml sa vytvorená tuhá látka oddelila, premyla a sušila: 9,21 g (61,9 %) 2-tioxantínu s t.t. 254 až 265 °C.

Elementárna analýza pre —18—20—4—3—

Vypočítané C 58,05 H 5,41 N 15,04 0 12,89

Nájdené C 58,13 H 5,41 N 14,93 0 13,11 (ii) 3- (3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-2,6-ditioxantín 8.94 g (24 mmol) 2-tioxantínu a 6,40 g (28,8 mmol) pentasulfidu fosforečného sa refluxovalo pod dusíkom v 96 ml pyridínu počas 1,5 hodiny. Pri 5 až 10 °C sa pridalo 31,7 ml (63,4 mmol) 2 mol/1 NaOH za chladenia a zmes sa zriedila s 30 ml pyridínu. Tuhá látka sa odfiltrovala a filtrát sa odparil za vákua dosucha. Zvyšok sa suspendoval v 30 ml vody a tuhá látka sa oddelila, rozpustila v 160 ml 0,5 mol/1 NaOH, prefiltrovala, opracovala s aktívnym uhlím (20 %) , znova pref iltrovala, okyslila s 5 mol/1 HC1 na pH 5, tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila: 9,03 g (96,9 %) surového ditioxantínu. Produkt sa rozpustil v 400 ml chloroformu a prefiltroval cez 30 g silikagélu v kolóne. Rozpúšťadlo sa odparilo za vákua, zvyšok sa rozpustil v 50 ml THF, prefiltroval , skoncentroval na 30 ml, zriedil s 200 ml etanolu, znova skoncentroval na 150 ml a tuhá látka sa oddelila, premyla a sušila: 8,65 g (92,8 %) ditioxantínu s t.t. 215 až

218 °C

Elementárna analýza pre s 0,25 mol/1 etanolu a 0,5 mol/1 vody

Vypočítané C 54,32 H 5,54 N 13,70 0 10,76

Nájdené C 54,67 H 5,32 N 13,80 0 10,20

(.iii) 3- (3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl) -3,7-dihyd.ro6 - etylamino - 2H-pu.r in - 2-tión

4,66 g (12 mmol) ditioxantínu a 48,3 ml (60 mmol) 70 % etylamínu vo vode sa zahrievalo na! 150 °C v 450 ml tlakovom reaktore pod N₂ počas 12 hodín (1,656 MPa). Roztok sa opracoval aktívnym uhlím (5 %), prefiltroval a odparil dosucha.

Zvyšok sa vybral do 100 ml vody, okyslil s 1 mol/1 HC1 na pH 3, a neutralizoval s roztokom hydrogénuhličitanu sodného na pH 7, a tuhá látka sa oddelila: 4^,43 g (92,5 %) surového tioizoguanínu s t.t. 99 až 103 °C. j j

(iy) 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxy-benzyl)-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid . 4,39 g (11 mmol) tioizoguanínu a 7,10 g (121 mmol) neutrálneho Raneyovho niklu sa refluxovalo v 50 ml 1-propanolu počas 4,5 hodiny. Nikel sa odfiltroval a filtrát sa odparil dosucha. Zvyšok (3,79 g/93,8 %) sa rozpustil v 20 ml chloroformu a 0,4 ml metanolu a prefiltroval cez 24 g silikagélu v kolóne tiež s 2 % metanolom. Spojené frakcie sa premyli s 1 mol/1 NaOH a organická fáza sa odparila dosucha. Zvyšok (2,69 g/66,6 %) sa rozpustil v 30 ml dichlórmetánu a 0,6 ml metanolu a znova prefiltroval cez 30 g silikagélu. Celkovo sa izolovalo 1,86 g (46,0 %) 3H-purínu, ktorý sa rozpustil v 20 ml metanolu, opracoval s 5,4 ml metanolového roztoku 1 mol/1 HC1 a odparil za vákua dosucha. Kryštalizácia a rekryštalizácia z dichlórmetánu a etylacetátu poskytli 1,75 g (39,4 %) 3H-purín hydrochloridu s t.t. 170 až 185 °C.

«

Elementárna analýza pre -C₂oH₂6C1N₅0₂ . Vypočítané C 59,47 H 6,49 N 17,34 0 7,92

Nájdené C 59,72 H 6,44 N 17,25 0 8,24

Príklad 7

8-cyklopropyl-6- (4-pyridylmetylamino) -3-propyl-3H-purín dihydrochlorid (i) 8-cyklopropyl-3 -propyl-2,6-ditioxantín V 5 I 3 hrdlovej banke vybavenej mechanickým miešadlom a chladičom so sušiacou rúrkou sa umiestnilo 2,2 1 pyridínu a 8-cyklopropyl-3-propyl-2-tioxantín (220 g, 0,88 mol). Do

- 29 zmesi sa pridal pentasulfid fosforečný (236 g, 1,06 mol) a zmes sa zahrievala pod refluxom počas 5 hodín a uložila sa na noc pri laboratórnej teplote. Reakčná zmes sa ochladila na 5 až 10 °C a počas 1,5 hodinového premiešavania sa pridal mol/1 vodný hydroxid sodný (770 ml). Premiešavanie pokračovalo počas 30 minút po odstránení chladiaceho kúpeľa a zrazený produkt sa oddelil filtráciou s odsávaním. Filtračný koláč sa premyl následne s pyridínom (300 ml) a štyrmi 300 ml podielmi tetrahydrofuránu. Rozpúšťadlo sa odparilo za vákua a tuhý zvyšok sa premiešaval s vodou (750 ml) , prefiltroval a premyl s vodou. Surový produkt sa rozpustil v 1,7 1 1 mol/1 hydroxidu sodného a premiešaval s 15 g Darco G-60. Aktívne uhlie sa odfiltrovalo a opracovanie sa opakovalo s čerstvou porciou aktívneho uhlia . Roztok sa okyslil na pH 1,5 s 6 mol/1 kyselinou chlorovodíkovou a oddelila sa bledožltá zrazenina. Tuhá látka sa opäť rozpustila v 1,7 1 1 mol/1 hydroxidu sodného a opracovala postupne s dvoma podielmi aktívneho uhlia, ako je uvedené vyššie. Roztok sa okyslil a zrazenina sa oddelila a premyla s vodou. Po sušení do konštantnej hmotnosti pri 54 °C za vákua sa získalo 128 g (56 %) látky z názvu tohto odstavca, t.t. nad 245 °C.

(ii) 8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(4-pyridylmetylamino)2H-purín-2-tión

5,33 g (20 mmol) 8-cyklopropyl-3-n-propyl-2,6-ditioxantínu a 21,3 ml (200 mmol) 95 % 4-pikolylamínu sa zahrievalo pod argónom na 150 až 155 “C. Po 14 hodinách sa ochladený roztok vylial do 100 ml vody, okyslil s 19 ml 10 mol/1 HC1 a 1 mol/1 HC1 na pH 6, kde sa tvorila oranžovo sfarbená guma. Zmes sa neutralizovala s hydrogénuhličitanom sodným na pH 7. Po čase guma skryštalizova'la a tuhá látka sa oddelila a premyla. Zvyšok sa suspendoval v acetóne a kryštály sa oddelili: 3,92 g (57,6 %) surového produktu. Filtrát sa odparil dosucha, rozpustil v 40 ml 0,5 mol/1 NaOH, extrahoval krát dichlórmetánom a znova okyslil s 5 mol/1 HC1 na pH 6. Znova sa počas 48 hodín kryštalizovala guma a zmes sa neutralizovala na pH 7 s hydrogénuhličitanom sodným a oddelila

HC1, opracoval s 250 mg utralizoval so 7,5 ml 2 sa tuhá látka: 1,75 g (25,7 %) surového produktu. Obe časti sa rozpustili v 30 ml dichlórmetánu a prefiltrovali cez 30 g silikagélu v kolóne. 150 mg (2,8 %) východiskového materiálu sa získalo najprv, potom sa 5,04 g (74,0 %) produktu získalo s 5 % metanolom, ktorý sa rozpustil v 32 ml 1 mol/1 aktívneho uhlia, prefiltroval a nemol/1 NaOH a roztokom hydrogénuhličitanu sodného na pH 7 až 8. Vodná fáza sa dekantovala od gumy a táto sa premyla s vodou a kryštalizovala z acetónu: 4,08 g (59,9 %) tioizoguanínu s t.t. 204 až 210 °C s rozkladom .

(iii) 8-cyklopropyl-6-(4-pyridylmetylamino)-3-propyl3H-purín dihydrochlorid

3,06 g (9 mmol) tioizoguanínu a 5,8 g neutrálneho Raneyovho niklu sa refluxovalo pod argónom v 1-propanole počas 4 hodín. Nikel sa odfiltroval a premyl s metanolom. Filtrát sa odparil dosucha, zvyšok sa rozpustil v 20 ml dichlórmetánu, roztok sa extrahoval s 1 mol/1 NaOH a odparil dosucha: 2,43 g (87,4 %) surového purínu, ktorý sa rozpustil v 20 ml metanolu, opracoval sa so 17 ml metanolovej 1 mol/1 HC1 a znova odparil dosucha. Kryštalizácia z izopropanolu poskytuje 1,09 g (36,3 %) dihydrochloridu purínu s t.t. 157 až 165 C.

Príklad 8

6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purín hydrochlorid (i) 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-2H-purín-2-tión

5,33 g (20 mmol) 8-cyklopropyl-3-n-propyl-2,6-ditioxantínu a 42 ml cyklopentylamínu sa zahrievalo v 450 ml tlakovom reaktore na 150 °C (345 kPa) s vylúčením vzduchu. Po 20 hodinách sa roztok preniesol s metanolom do banky s okrúhlym dnom a odparil za vákua dosucha. Zvyšok sa opracoval so 60 ml vody a 5 mol/1 HC1 na získanie pH 2. Suspenzia sa neutralizovala s hydrogénuhličitanom na pH 7, tuhá látka sa oddelila, premyla, sušila, suspendovala v refluxujúcom acetóne a znova oddelila: 5,98 g tioizoguanínu s t.t. 274 až 276 °C (s rozkladom).

(ii) 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3-n-propyl-3H-purín hydrochlorid

4,49 g (14,1 mmol) tioizoguanínu a 9,2 g neutrálneho Raneyovho niklu sa refluxovalo v 45 ml 1-propanolu počas 5 hodín. Nikel sa odfiltroval a filtrát sa odparil dosucha. Zvyšok (> 100 %) sa rozpustil v 30 ml metanolu, opracoval sa so 16,9 ml metanolového roztoku 1 mol/1 HC1 a odparil dosucha. Zvyšok sa rozpustil v dichlórmetáne, opracoval s 0,12 g aktívneho uhlia, prefiltroval, skoncentroval, zriedil acetónom a zostávajúci dichlórmetán sa odstránil destiláciou. Kryštály sa oddelili: 4,18 g (92,3 %) hydrochloridu purínu s t.t. 218 až 221 C.

Elementárna analýza pre C^ g H ₂ 4 CÍN g . M, hm . 321.86

Vypočítané C 59,71 H 7,52 N 21,76 Cl 11,01

Nájdené C 59,82 H 7,40 ¹ N 21,76 Cl 11,02

Cl - je z diferencie

Príklad 9 - Tioizoguanínové deriváty

Podľa skôr uvedených metód sa syntetizovali nasledujúce tioizoguanínové deriváty podľa tohto vynálezu. Chemické názvy a teploty topenia sú uvedené nižšie v Tabulke 1

- 32 Tabuľka 1

Tioizoguaníny
Látka	t.t. (’C)
3,8-dietyl-3,7-dihydro-6-morfolíno2H-2-tiopurin-2-ón	295- 298 (rozkl.)
3-(cyklopropylmetyl-3,7-dihydro-8-izo- propyl-6-propylamino-2-tio-2H- purin-2-ón	208 - 210
3,7-dihydro-6-etylamino-3-hexyl-2-tio2H-purin-2-ón	235 - 237
3,7-dihydro-3-hexyl-6-metylamino-2tio-2H-purin-2-ón	217 - 219
3-benzyl-3,7-dihydro-6-metylamino-2tio-2H-purin-2-ón	253 - 255
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-etylamino3-(3-metylbutyl)-2-tio-2H-purin-2-ón	250 - 254
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-etyl-6-propylamino-2-tio-2H-purin-2-ón	270 - 272
3-butyl-3,7-dihydro-6-etylamino-2-tio2H-purin-2-ón	(220) 246 - 248
3-butyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6etylamino-2-tio-2H-purin-2-ón	226 - 228
6-etylamino-3,7-dihydro-3-propyl-2-tio2H-purin-2-ón	247 251
8-cyklopropyl-6-etylamino-3,7-dihydro-3propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	238 - 239
8-cyklopropy1-3 -cyklopropylmety1-6 -etylamino-3,7-dihydro-2-tio-2H-purin-2-ón	247 - 249
3-benzyl-6-etylamino-3,7-dihydro-2tio-2H-purin-2-ón	254 - 257
8 -cyklop.ropyl- 6 -cyklopropylamino- 3-propyl- 3,7-dihydro-2-tio-2H-purin-2-ón hydrochlorid	208 - 226 rozkl.
3-((2-metyl)butyl)-6-(2-(piperazin-lyl) etylamino) -3,7-dihydro-2-t.io-2H-purin-2-ón

pokračovanie Tabuľky 1

1 3-cyklohexylmetyl-3,7-dihydrb-6-etylamino-2-tio-2H-purin-2-ón 1	295 - 300
i 3-benzyl-6-etylamino-3,7-dihýdro-8-' (1-metylety1)-2-tio-2H-purin-2-ón
3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-etylamino-2-tio-2H-purin-2-ón	278 - 282
6-benzylamino-8-(cyklopropyl)~3,7-dihydro-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón hydrochlorid	180 - 185
8-(cyklopropyl)-3,7-dihydro-6-hexylamino-3-(propyl)-2-tio-2H-purin?2-ón hydrochlorid	170 - 190
6-butylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro3-(propyl)-2-tio-2H-purin-2-ón	231 - 233
6-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(2-hydroxyetylamino)-2-tio-2H-purin-2-ón	188 - 192
6-amino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	220 - 265
6-cyklopentylamino-3-etyl-3,7-dihydro-8izopropyl-2-tio-2H-purin-2-ón1	301 - 304
6-cyklohexylamino-3,7-dihydro-8izopropyl-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	303 rozkl.
6-cyklopentylamino-3,7-dihydro-8izopropyl-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	295 rozkl.
6-cyklopehtylamino-3-etyl-8-cyklopropyl3,7-dihyd.ro-2-tio-2H-purin-2-ón	245 rozkl.
3-(4-chlórbenzyl)-6-cyklopentylamino3,7-dihydro-8-izopropyl-2-tio-2H-purin2 - ón	244 - 248
6-cyklopentylamino-3-(3-cyklopentyl-4metoxybenzyl)-3,7-dihydro-8-izopropyl-2tio-2H-purin-2-ón	230 - 235
3-(2-chlórbenzyl)-6-cyklopentylamino3,7-dihydro-8-izopropyl-2-tio-2H-purin2-ón
8-cyklop.ropyl-3,7-dihydro-6- (3-pentyl) 3-p.ropyl-2-tio-2H-purin-2-ón	220 rozkl.

pokračovanie Tabuľky 1

6-etyl-8-izopropy1-3,7-dihydro-3-(4pyridylmetyl) -2-tio-2H-pur.in-2-ón

238 - 240

Príklad 10 i

Elementárna analýza tioizoguanínových iderivátov ' í

A. Elementárna analýza 6-butylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-2H-purin-2-tiónu:

Vypočítané Náj dené

C 58,98 H 7,59

C 58,99 H 7,52

N 22,93 N 22,92

B. 3-(cyklopropylmetyl)-3,7 amino-2H-purin-2-tiónu:

Teplota topenia: 208 Elementárna analýza:

Vypočítané C 62,26

Nájdené C 62,34 dihydr o- 8 - izopropy1 - 6 - pr opy ’l í '¹ 1 ' ' r

210 °C !

H 8,01 N 24,20

H 8,06 N 23,89

Príklad 11 j

PDE IV inhibícia tioizoguanínovými látkami

PDE IV inhibičná aktivita niektorých vyššie uvedených tioizoguanínových látok sa určila pomocqu postupov uvedených nižšie. Výsledky sú uvedené v Tabuľke 2.1

Spôsob izolácie fosfodiesterázového enzýmu typu IV , Bentleyom, R.G., Pharmacol. 150:85,

PDE typu IV sa izoloval z hladkého hovädzieho tracheálneho svalstva podobným postupom, ako bol skôr opísaný Silverom, P.J., Hamelom, L.T., Perroneom, M.E.

Bushoverom, C.R., Evansom, D.B.: Eur. J.

1988.(1). Stručne, hladké svalstvo z hovädzej trachey sa rozsekalo a homogenizovalo pomocou polytirónu v 10 objemoch extrakčného pufra obsahujúceho 10 mmol/1 Tris-acetátu (pH 7,5), 2 mmol/1 chloridu horečnatého, 1 mmol/1 ditiotreitolu •I

- 35 I i

a 2000 jednotiek/ml aprotinírip.

t ·

I

Tento a všetky nasledujúce postupy sa uskutočňovali pri θ| až 4 °C. Homogenát sa opracoval ultrazvukom a centrifugovat pri 48000 g počas 30 minút. Výsledný supernatant sa aplikoval na DEAE Trisacryl M kolónu.

vopred uvedenú do rovnováhy , si octanom. sodným a ditiotreito'í ' lom. Po aplikácii vzorky sa'jj kolóna premyla zmesou octan sodný/ditiotreito'l, po čom sa rôzne formy PDE eluovali z kolóny použitím lineárneho gradientu Tris-HCl/NaCl. Frakcie obsahujúce PDE typ IV sa oddelili, dialyzovali a skoncentroi vali na 14 % pôvodného objemu. Skoncentrované frakcie sa zriedili na 50 % etylénglykolom a uložili¹ pri -20 °C.

i i

Meranie aktivity PDE typu IV, <

i 15

Enzýmová aktivita sa hodnotila meraním hydrolýzy [^JH]-cyklického AMP, ako je opísanej Thompsonom, V.J:, Teraskim, V.L., Epstainom, P.N. , Stradaom’J,S. J . : Adv. Cyclic Nucleotide Res. 10:69, 1979. Koncentrácia (cyklického AMP poúžitá v tejI to skúške bola 0,2 pmol/l, čo aproximuje hodnotu K_m. Koncentrácia proteinu sa upraví tak, | aby zabezpečila, že sa počas inkubačnej periódy nehydrolyzuj'p viac ako 15 % hmotnostných voľného substrátu.

Všetky testované látky sa rozpustili v dimetylsulfoxide (konečná koncentrácia 2,5 % hmojtnostného). Táto koncentrácia dimetylsulfoxidu inhibuje aktivitu enzýmu približne o 10 %.

Tabuľka 2

Tioizoguaníny - biologické údi	de
Meno		Vypočítané IC50 PDE IV
3-(cyklopropylmetyl)-3,7-dihyc metyletyl)-6-propylamino-2-tic purin-2-όη hydrochlorid	ro-8-(1>-2H-	23,95
8-cyklopropyl-3-etyl-6-etylamijno-3,7dihydro-2-tio-2H-purin-2-ón	13,65
8-cyklopropyl-3-etyl-6-propyla 2-1 i o-2H-puri n- 2-ón	1 únino-	8,48

Eňtawŕ ri.rs-wíiacĽrtÍH<ť<.{SK pokračovanie Tabuľky 2 ·- 36 . I

3-butyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-etylamino-2-tio-2H-purin-2-ón	34,86
3-benzyl-6-etylamino-3,7-dihydro-8(1-metylety1)-2-tio-2H-purin-2-ón	28,37
3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-3,7-di- hydro-6-etylamino-2-tio-2H-purin-2-ón 1	15,20
6- 1 rc cí	benzylamino-8-(cyklopropyl)-3,7-dihyd>-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón hydroílorid	33,60
8- P3	cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-6-(4ridylmetylamino)- 2-tio-2H-purin-2-ón	0,41
6- h> ci	cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7-didro-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón hydroílorid	7,41
6-butylamino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	24,48
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-6-(2-hydroxyetylamino)-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	53,80
6-amino-8-cyklopropyl-3,7-dihydro3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	39,42
3-etyl-6-cyklopentylamino-3,7-dihydro-8-izopropyl-2-tio-2H-purin-2-ón	9,40
6-cyklopentylamino-3,7-dihydro-8-izopropy’l-3-propyl-2-tio-2H-purin-2-ón	45,10
3-etyl-6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl3,7-dihyd.ro-2-tio-2H-purin-2-ón	0,19
3-(4-chlórbenzyl)- 6-cyklopentylamino-3,7dihydro-8 -izopropyl-2-tio-2H-purin-2-ón	114,50

Príklad 12 - Adenínové deriváty

Podľa metódy uvedenej vyššie v Príkladoch sa podobne pripravili nasledujúce látky z vhodných východiskových materiálov. Všetky teploty sú v C, ak nie je uvedené inak.

Údaje sú poskytnuté nižšie v Tabuľke 3

Tabuľka 3

Adeníny
Látka	t.t.
6-etylamino-3-hexyl-3H-purín hydrochlorid	190 - 195
3-hexyl-6-metylamino-3H-purín	142 - 143
8-cyklopropyl-6-etylamino-3-(3-metylbutyl) - 3H-pu.rín hydrochlorid	188 - 190
8-cyklopropyl-3-etyl-6-propylamino-3Hpurín hydrochlorid	186 - 188
8-cyklopropyl-3-etyl-6-metylamino-3H- purín	143 - 145
3-butyl~6-etylamino-3H-purín	127 - 129
3-butyl-8-cyklopropyl-6-etylamino3H-purín	182 - 184
6-etylamino-3-propyl-3H-purín	157 - 159
8-cyklopropyl-6-propylamino-3-propyl3H-purín hydrochlorid	193 - 195
8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6etylamino-3H-purín hydrochlorid	195 - 197
3-benzyl-6-etylamino-3H-purín	187 - 188
8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3propyl-3H-purín hydrochlorid	200 - 210
3-(2-metylbutyl-6-(2-piperazin-l-yl)etylamino-3H-purín	144 - 145
3 -cyklohexyImety1-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid	258 - 265
3-benzyl-6-ety'lamino-8- (l-metyletyl) 3H-purín hydrochlorid	199 - 200
3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-6-etylamino- 3H-purín hydrochlorid	192 - 193
3-cyklopropylmety'1-8-.izopropyl - 6-etylamino - 3H-purín	96 - 99
3-etyl-8-izopropyl-6-benzylamino-3H- purín	141 - 142

.-C.OC>ť-<xľSľXX>ťX-ffl

- 38 pokračovanie Tabuľky 3

3-etyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid	194 - 195
3-etyl-8-cyklopentyl-6-benzylamino-3Hpurín hydrochlorid	179 - 182
3-etyl-8 -cyklopentyl-6-etylamino-3Hpurín hydrochlorid	212 - 214
3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-3Hpurín
3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-3Hpurín hydrochlorid	251 - 254
3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-8izopropyl-3H-purín
3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-8izopropyl-3H-purín hydrochlorid	215 - 217
6-benzylamino-8-cyklopropyl-3-propyl- 3H-purín	153 - 155
8-cyklopropyl-6-hexylamino-3-propyl3H-purín hydrochlorid	137 - 138
8-cyklopropyl-3-propyl-6-(4-pyridylmetylamino)-3H-purín dihydrochlorid	185 - 208
6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purín hydrochlorid	273 - 276
6 -butylamino-8-cyklopropyl- 3 propyl-3H-purín hydrochlorid	171 - 173
8-cyklopropyl-6-(2-hydroxyetylamino)-3propyl-3H-purín	217 - 219
6 -(3 -cyklopentyloxy-4-metoxybenzylamino)- 8 -cyklopropyl-3-propyl-3H-purín hydrochlorid
6-amino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purín	188 - 190
3-etyl-6-cyklopentylamino8 -izopropyl-3H-purín hydrochlorid	183 - 184
6-cyklohexylamino-8 -izopropyl-3-propyl3H-purín hydrochlorid	202 - 203
6 -cyklopentylamino-8 -izopropyl-3 -propyl3H-purín hydrochlorid	207 - 210

„Of.-'M.

- 39 pokračovanie Tabuľky 3

3-etyl-6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl3H-purín hydrochlorid	205 - 208
3- (4-chló.rbenzyl) -6-cyklopentylamino-8cyklopropyl-3H-purín hydrochlorid	269 - 273
6-cyklopentylamino-3-(3-cyklopentyloxy4-metoxybenzyl)-8-izopropyl-3H-purín hydrochlorid	193 - 195
3-(2-chlórbenzyl)-6-cyklopentylamino-8izopropyl-3H-purín hydrochlorid	207 - 208
8-cyklopropyl-6-dietylamino-3-propyl3H-purín hydrochlorid	173 - 179
8-cyklopropyl-6-(3-pentylamino)-3-propyl-3H-purín hydrochlorid	187 - 189
6-etylamino-8-izopropyl-3-(4-pyridylmetyl)-3H-purín dihydrochlorid	240 - 246

Príklad 13

Elementárna analýza adenínov

Urobila sa elementárna analýza niektorých látok uvedených vyššie v tabuľkách. Výsledky sú poskytnuté nižšie.

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-3-etyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu 99 % + 1 % hmotnostné (H₂0; HC1)

Vypočítané Náj dené

C 53,29 C 52,97

H 6,80 H 7,01

N 25,90 N 26,01

0,53 0 0,34

Elementárna analýza 6-etylamino-3-hexyl-3H-pu.rín hydrochloridu

N 24,68 Cl 12,49

N 24,50 Cl 12,71

H 7,81

H 8,05

C 55,02

C 55,33

Vypočítané

Náj dené itóÄaesíSisäaiaäisasaSiia

-·- 40 Elementárna analýza 3-hexyl-6-metylamino-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané Náj dené

C 53,43 C 53,70

H 7,47 H 7,81

N 25,96 N 25,92

Cl 13,14 Cl 13,18

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-(3-metylbutyl)-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané Náj dené

C 58,15 C 58,12

H 7,81 H 8,01

N 22,60 N 22,65

Cl 11,44 Cl 11,46

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-3-etyl-6-propylamino-3Hpurín hydrochloridu

Vypočítané Náj dené

C 55,41 C 55,74

H 7,15 H 7,06

N 24,85 N 25,08

Cl 12,58 Cl 12,71

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-3-etyl-6-metylamino-3Hpurínu

Vypočítané Náj dené

C 60,81 C 60,58

H 6,96 H 7,02

N 32,23 N 32,67

Elementárna analýza 3-butyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané Náj dené

C 51,65 C 51,74

H 7,09 H 7,06

N 27,38 N 27,62

Cl 13,88 Cl 13,93

Elementárna analýza 3-butyl-8-cyklopropyl-6-ety'lamino-3Hpurín hydrochloridu, t.t. 194 - 196 °C

Cl 11,98 Cl 12,03

H 7,49

H 6,98

N 23,67

N 23,97

C 56,83

C 56,91

Vypočítané

Náj dené

Elementárna analýza 6-etylamino-3-propyl-3H-purínu (98 % + 2 % hmotnostné vody

Vypočítané Náj dené

C 57,35 H 7,44

C 57,68 H 7,22

N 33,44 N 33,29

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-propyl-3Hpurín hydrochloridu

Vypočítané C 55,41 H 7,15 N 24,85 C1 12,58

Nájdené C 55,45 H 7,13 N 24,96 C1 12,71

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6etylamino-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané C 57,23 H 6,87 N 23,84 C1 12,07

Nájdené C 57,49 H 6,88 N 23,59 C1 12,49

Elementárna analýza 3-benzyl-6-etylamino-3H-purínu

Vypočítané C 66,39 H 5,97 N 27,65

Nájdené C 66,58 H 5,63 N 27,80

Elementárna analýza 8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3-propyl-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané C 57,23 H 6,86 N 23,84 C1 12,07

Nájdené C 57,30 H 6,90 N 23,77 C1 12,16

Elementárna analýza 3-cyklohexylmetyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu

N 23,67 N 23,65

C1 11,98 C1 12,05

H 7,50

H 7,54

C 56,84

C 56,82

Vypočítané

Náj dené

Elementárna analýza 3-benzyl-6-etylamino-8-(1-metyletyl)3H-purín hydrochloridu

Vypočítané C 61,52 H 6,68 N 21,10 CI 10,68

Nájdené C 61,52 H 6,59 N 21,18 CI 10,60

Elementárna analýza 3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané C 60,79 H 7,80 N 20,85 CI 10,56

Nájdené C 60,55 H 7,48 N 20,85 CI 11,34

Elementárna analýza 3-cyklopropylmetyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purínu

Vypočítané C 64,84 H 8,16 N 27,00

Nájdené ' C 64,42 H 7,86 N 26,87

Elementárna analýza 6-benzylamino-3-etyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purínu

Vypočítané C 69,12 H 7,17 N 23,71

Nájdené C 69,27 H 7,44 N 23,60

Elementárna analýza 3-etyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu

Vypočítané C 53,43 H 7,47 N 25,96

Nájdené C 53,62 H 7,66 N 25,34

Elementárna analýza 6-benzylamino-8-cyklopentyl-3-etyl-3Hpurín hydrochloridu

H 6,76

H 6,54

N 19,57

N 19,51

C 63,78

C 63,55

Vypočítané

Náj dené

- 43 Elementárna analýza 8-cyklopentyl-3-etyl-6-etylamino-3H-purín hydrochloridu |

Vypočítané Náj dené

C 56,84 H 7,50

C 56,54 H 7,37

N 23,67 N 23,63

Príklad 14

Inhibícia PDE

IV adenínovými látkami

PDE IV inhibičný účinok niektorých vyššie uvedených látok sa skúšal skôr opísanými metódami. Výsledky sú uvedené nižšie v Tabulke 4.

Tabuľka 4

Výsledky PDE IV
Látka	vypoč. PDE IV IC50 (gmol/l)
3-etyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid	52,17
3-etyl-8-cyklopenty1-6-benzylamino-3Hpurín hydrochlorid	62,44
3-etyl-8-cyklopentyl-6-etylamino-3Hpurín hydrochlorid	28,34
3-cyklohexylmety1- 6-etylamino-3H-purín hydrochlorid	32,95
3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid	3,78
8-cyklopropyl-6-etylamino-3 -(3-metylbutyl)-3H-purín hydrochlorid	2,45
8-cyklopropyl-3-etyl-6-propylamino-3Hpurín hydrochlorid	15,67
8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6etylamino-3H-purín hydrochlorid	4,11
3-hexy'l - 6 - met y lamino - 3H-purín hydrochlorid	34,15
3-cyk'lopropylmetyl-8-izopropyl-6-etylam i no- 3 H-p ur í n hyd r och1ori d	12,66

- 44 pokračovanie Tabuľky 4

3-etyl-8-izopropyl-6-benzylamino3H-purín hydrochlorid	28,94
3-butyl-6-etylamino-3H-purín hydrochlorid	66,41
3- butyl- 8-cyklopropy1- 6-etylamino3H-purín hydrochlorid	5,99
8-cyklopropyl-6-etylamino-3-propyl3H-purín hydrochlorid	6,31
8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3propyl-3H-purín hydrochlorid	7,90
3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-6etylamino-8-izopropyl-3H-purín hydrochlorid	0,32
3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-3Hpurín hydrochlorid	37,75
3- etyl-6-etylamino-8-((3-cyklopentyloxy- 4- metoxy)benzyl)-3H-purín hydrochlorid	4,52

Príklad 15

Pripravili sa a analyzovali ditioxantínové deriváty podľa tohto vynálezu. Výsledky sú uvedené nižšie v Tabuľke 5.

Tabuľka 5

Ditioxantíny
Látka	t.t.	IC50 PDE IV
3,7-dihydro-3-etyl-2,6-ditiolH-purín-2,6-dión	275-276
3,7-dihyd.ro-3-propyl-2,6-ditio1H-purín-2,6-dión	294-297
.3,7-dihydro-8-etyl-3-propyl-2,6ditio-lH-purín-2,6 -dión	266-267
3-butyl-3,7-dihydro-2,6-ditiolH-purín-2,6- dión	249-251
3-butyl-3,7-dihydro-8-etyl-2,6-	251- 252

«ŕjautoooa^-^^wifw^

- 45 pokračovanie Tabuľky 5

ditio-lH-purín-2,6-dión
3,7-dihydro-3,8-dietyl-2,6-ditiolH-purín-2,6-dión J	260-261
3-benzyl-3,7-dihydro-2,6-ditiolH-purín-2,6-dión i	298-303	38,49
3,7-dihydro-3-hexyl-2,6-ditiolH-purín-2,6-dión	222-224
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-(3metylbutyl)-2,6-ditio-lH-purín2,6-dión j		6,31
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-etyl2, ó-ditio-lH-purín-2,6-dión		6,18
3, 7-dihydro-3-(2-metylbutyl)-2,6ditio-lH-purín-2,6-dión	263-264
3-butyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión		9,43
3-cyklopropylmetyl-3,7-dihydro2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión	276-278
8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión		64,49
8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl3,7-dihydro-2,6-ditio-lH-purín2,6-dión		2,27
3-butyl-3,7-dihydro-8-(1-metýletyl)2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión		5,93
3-cyklohexylmetyl-3,7-dihydró2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión	292-294
3-benzyl-3,7-dihydro-8-(l-metyletyl)-2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión		3,40
3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl3,7-dihydro-2,6-ditio-lH-purín2,6-dión		3,03
3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)3,7-dihydro-8-izopropyl-2,6-ditio1H-purín-2,6-dión	204-206	0,60
3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)3,7-dihydro-2,6 -ditio-ΙΗ-purín-2,6dión	215-218	16,16

- 46 pokračovanie Tabuľky 5

3-(4-chlórbenzyl)-8-izopropyl- 3,7-dihydro-2,6-ditio-lH-purín-2,6- dión	242-243	2,40
3-etyl-3,7-dihydro-8-izopropyl-2,6ditio-lH-purín-2,6-dión	248-250	4,10
3,7-dihydro-8-izopropyl-3-propyl-2,6ditio-lH-purín-2,6-dión	203	3,50 1 1
3-(2-chlórbenzyl)- 3,7-dihydro-8izopropyl-2,6-ditio-lH-purín-2,6dión <	244-246	7,7i
8-izopropyl-3-(4-pyridylmetyl)2,6-ditio-lH-purín-2,6-dión	310-315

Príklad 16 - Farmakologické testy

Izolovaná trachea morčaťa

Testovaná látka sa rozpustila v dimetylsulfoxide. Izolované tracheálne svaly morčaťa sa umiestnili v kúpeli obsahujúcom Krebsov roztok udržiavaný pri 37 °C a prebublávaný karbogenom (zmes 95 % hmotnostných C^, 5 % hmotnostných CO₂).

Zmeny napätia sa zaznamenávali izometricky pomocou prevodníkov sily vytlačenia v spojení s potenciometrickým zapisovačom .

Schopnosť testovaných látok uvoľňovať svaly dýchacích ciest sa skúmala pomocou konštrukcie kriviek kumulatívneho koncentračného účinku. Každá koncentrácia testovanej látky sa uviedla do rovnováhy s tkanivom počas 5 minút pred tým ako sa urobil koncentračný prírastok (desaťnásobný).

Na každom tkanive sa testovaná látka porovnávala s teofilínom ako štandardom.

- 47 Látka Aktivita in vitro teofilín 1

8-cyklopropyl-3-etyl-6-etylamino-3H-purín 43,7 6-etylamino-3-hexyl-3H-purín 25,6

3-benzyl-6-etylamino-3H-purín 18,5

Príklad 17

Štúdie in vivo (i) Študoval sa účinok testovaných látok v modeli bronchiálnej hyperresponzivity (BHR) a bunková infiltrácia u morčaťa vyvolaná ovalbumínom (pozri napríklad Morley a spol., Agents and Actions, Supplement, 1988, 23, 187).

Testovaná látka sa podávala v dávkach 0,5 a 1,0 mg/kg/deň subkutánne počas 7 dní osmotickou minipumpou. Teofilín a salbutamol s koncentráciou 1 mg/kg/deň sa použili ako štandardy. Pre každé zviera sa konštruovali krivky odozvy na histamín (1 až 50 gg/kg).

Obrázok 1 a 2 ukazujú získané výsledky.

(ii) Postup senzibilizácie a stimulácei: Samcovi morčaťa Dunkin Hartléy (Charles River) (200 až 250 g) sa injektovali i. p. ovalbumín (OVA) (0,5 ml/zviera; 20 gg OVA v A1(OH)₃ (vlhký gél)); tento prípravok tvoril injektovateľnú stabilnú suspenziu obsahujúcu prebytok A1(OH)₃. Kontrolným zvieratám sa injektovalo 0,5 ml A1(OH)₃ samotného. Po čase 18 až 21 dní sa zvieratá exponovali aerosolom OVA (100 gg/ml) počas 1 hodiny v expozičnej komore.

(iii) Bronchoalveolárne vymývanie: Zvieratá sa anestetizovali 24 hodín po expozícii aerosolom s uretánom (25 % w/v, Ί ml/kg, i.p.) a kanylovali tracheou. Bronchoalveolárne vymývanie (BAL) sa vykonalo nakvapkaním 5 ml sterilného soľného roztoku do pľúc cez tracheálnu kanylu a kvapalina sa ihneď odstránila. Kvapalina sa reinjektovala a postup sa &&£·;

- 48 opakoval celkovo 5 krát. Tento postup viedol k 40 až 60 % výťažku BAL kvapaliny z pľúc morčaťa. Celkové sčítanie buniek sa uskutočnilo vo výslednej BAL tekutine pomocou zlepšeného Neubauerovho Hemocytometra. Cytospinové prípravky sa pripravili pomocou Shadonovej Cytospin 2 centrifúgy. Dve kvapky BAL tekutiny sa pridali do každej cytospinovej nádobky a centrifugovali sa počas 1 minúty pri 1300 ot./min.. Preparáty sa fixovali v acetóne a vyfarbovali·hemotoxylínom a karbolovým chromotropom podľa metódy opísanej Lendrumom (Lendrum 1944), diferenčné sčítania buniek sa uskutočnili na každom preparáte sčítaním 200 buniek náhodne, bunkové typy sa klasifikovali ako neutrofilné, eozínofilné a mononukleárne bunky, podľa štandardných morfologických kritérií. Bunky sa sčítali naslepo. Výsledky sa vyjadrili ako počet neutrofilných, eozinofilných a mononukleárnych buniek na ml BAL tekutiny. Zostávajúca BAL tekutina sa centrifugovala (10 minút, 1000 g) a výsledné bunky a supernatant bez buniek sa rozdelili na podiely a zmrazili pre neskoršie skúšky. Látky sa solubilizovali v DMSO alebo soľnom roztoku podávanom iritraperitoreálne v dávke 5 mg/kg jednu hodinu pred ovalbumínovou stimuláciou. Výsledky sú uvedené nižšie v Tabuľke 6.

Tabuľka 6

Látka	N	Dávka mg/kg i.p.	% eozinofilných v BAL x±se	% inhibície
DMSO vehikulum	9	—	32±6	—
3-(3-cyklopentyloxy-4metoxybenzyl) -3,7 -dihydro8 -izopropyl2,6-dit.io-lHpurín-2,6 dión	6	5	17±3	47 %
Soľné vehikulum	14		33±3

- 49 pokračovanie Tabuľky 6

8-cyklopropyl-6-etylamino-3-(3metylbutyl)3H-purín hydrochlorid	7	5	16±4	52 %
3-(3-cyklopentyloxy-4metoxybenzyl)6-etylamino8-izopropyl3H-purín hydrochlorid	7	5	12±4	64 %

Zatiaľ čo vynález je ilustrovaný z hľadiska výroby a použitia určitej látky, je zrejmé, že je možné urobiť zmeny a modifikácie vynálezu bez toho, aby sa opustil duch a rozsah vynálezu.

Claims (8)

PATENTOVÉ NÁROKY

1/2

8 -cyklopropyl-3-ety1-6-etylamino-3H-purín t* dávkti histamínu [pg/kg]

1. Látka so vzorcom (I) (I) kde

O

R predstavuje C₂_g alkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; C^g cykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =NOCONH₂, alebo =0; C^_g cykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =NOCONH₂, alebo =0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s halogénom, NH₂, alkylamino skupinou, dialkylamino skupinou, voliteľne substituovaným karbamylom, OH, alkoxylom,

Cg_g cykloalkoxylom, C=NOH, C=N0C0NH₂, C-^g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl , heterocyklyl; heterocyklylalkyl (C44); heteroaryl; a heteroaralkyl

RÓa p_recj_stavuje C^g alkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; Cg_g cykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; C^_g cykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s halogénom, NH₂, alkylamino skupinou, dialkylamino skupinou, voliteľne substituovaným karbamylom, OH, C₁₆ alkoxylom, ^t^'ŕíta'Ži'jtó.^iííiU^i^iisilíií-Ä

- 51 Cg_g cykloalkoxylom, C=NOH, C=NOCONH₂, C-_L_g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl (C^_₄), heterocyklyl; heterocyklylalkyl (C^_₄) ; heteroaryl; a heteroaralkyl (C-£_₄) ;

O

R predstavuje H alebo Cj_g alkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =NOCONH₂, alebo =0; Cg g cykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =N0H, =NOCONH₂, alebo =0; C₄_g cykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s OH, alkoxylom, halogénom, =N0H, =N0C0NH₂, alebo =0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s halogénom, NH₂, alkylamino skupinou, dialkylamino skupinou, voliteľne substituovaným karbamylom, OH, Ci_6 alkoxylom, Cg_g cyk’Loalkoxylom, C=NOH, C=N0C0NH₂, C-^g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl (C^_₄), heterocyklyl; heterocyklylalkyl (C},₄) ; heteroaryl; a heteroaralkyl (C!_₄);

R^b predstavuje H alebo R^^a, alebo spolu R^b, n a R^³· vytvárajú Cg_g členný kruh obsahujúci od jedného do troch dusíkových atómov, od nula do dvoch kyslíkových atómov, od nula do dvoch atómov síry, voliteľne substituovaný s hydroxylom, alkoxylom, CO₂H, C0NH₂, =N0H, =N0C0NH₂, =0;

a kde aryl je fenyl alebo naftyl, heterocyklyl je 5, 6, alebo 7 členný kruh zahrňujúci od jedného do troch atómov dusíka, jeden alebo dva kyslíkové atómy, nula až dva atómy síry a môže byť substituovaný, ako na aryle, na uhlíkoch alebo dusíkoch tohto kruhu;

alebo jeho farmaceutický prijateľná sol za predpokladu, že je nesubstituovaná benzylová skupina, R^^a je metylová

O alebo izopropylová skupina a je vodíkový atóm alebo R ,

R^^a a R^b _sú metylové skupiny, R& je iná ako atóm vodíka.

g

2/2

Obr.. 2

2. Látka podľa nároku 1, kde R predstavuje C_2-g alkyl, Cg_7 cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar(C^_₄)alkylovú skupinu; heteroarylovú alebo beteroar (C-^_₄) alkylovú skupinu; R^³ predstavuje C^_g alkyl, ^3.7 cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, *íís&A-«L&ť>.

- 52 aryl, heteroaryl a heteroaralkyl, ar (C-^^) alkylovú skupinu, alebo heterocyklyl (C^ 4)alkylovú skupinu; R^b predstavuje vodíkový atóm alebo C-^g alkyl, Cg_₇ cykloalkyl, C₄__g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar(C^^)alkylovú skupinu; alebo -NR^a-R^b spolu tvoria 5-členný alebo 6-členný kruh, ktorý voliteľne obsahuje jeden alebo viac dodatočných heteroatómov; a R° predstavuje vodíkový atóm alebo C^_g alkyl, C₃₇ cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl, ar (C-^_₄) alkyl, pyridyl alebo pyridyl (C-£_₄)alkylovú skupinu.

□

3. Látka podľa nároku 2, kde R predstavuje C2_g alkylovú skupinu, aryl, ar(C₁₄) alkylovú skupinu, C₃_₇ cykloalkylovú skupinu, heteroarylovú alebo heteroar(C^_₄)alkylovú skupinu.

4. Látka podľa nároku 2, kde R^^a predstavuje C^_g alkylovú skupinu, benzylovií alebo pikolylovú skupinu a R^b predstavuje vodíkový atóm.

O

5. Látka podlá nároku 2, kde R predstavuje vodíkový atóm.

O

6-etylamino-3-hexyl-3H-purínu; 3-hexyl-6-metylamino-3H-purínu; 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-(3-metylbutyl)-3H-purínu;

- 53 8-cyklopropyl-3-etyl-6-propylamino-3H-purínu; 8-cyklop.ropyl3 -ety1-6-metylamino-3H-purínu; 3- butyl-6-etylamino-3H-purínu; 3-butyl-8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-purínu; 6-etylamino-3-propyl-3H-purínu; 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-propyl3H-purínu; 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6-etylamino-3Hpurínu; 3-benzyl-6-etylamino-.3H-purínu; 8-cyklopropyl-6cyklopropylamino-3-propyl-3H-purínu; 3-(2-metylbutyl)-6-(2(piperazin-l-yl)etylamino)-3H-purín; 3-cyklohexylmetyl-6etylamino-3H-purínu; 3-benzyl-6-etylamino-8-(l-metyletyl)3H-purín; 3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-6-etyl-amino-3Hpurínu; 3-cyklopropylmetyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purínu; 3-etyl-8-izopropyl-6-benzylamino-3H-purínu; 3-etyl-8izopropy1-6-etylamino-3H-purínu; 3-etyl-8-cyklopentyl-6benzylamino-3H-purínu; 3-etyl-8-cyklopentyl-6-etylamino-3Hpurínu; 3-(4-chlórbenzyl)-6-etylamino-3H-purínu; 3-(2chlórbenzyl)-6-etylamino-3H-purínu; 3-(2-chlórbenzyl)-6etylamino-8-izopropyl-3H-purínu; 6-benzylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purínu; 8-cyklopropyl-6-hexylamino-3-propyl3H-purínu; ^c^kloprogyl·^^^-^^ ^í^-purj.nu^, 6 - cyklopenty lamino- 8 - cyklopr opy 1 - 3 - propyl - 3H- purínu; 6-butylamino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purínu; 8-cyklopropyl-6-(2-hydroxyetylamino)-3-propyl-3H-purínu; 6-(3cyklopentyloxy-4-metoxybenzylamino)-8-cyklopropyl-3-propyl3H-purínu; 6-amino-8-cyklopropyl-3-propyl-3H-purínu; 3-etyl6 -cyklopentylamino-8-izopropy1-3H-purínu; 6-cyklohexylamino8-izopropy1-3-propyl-3H-purínu; 6-cyklopentylamino-8-izopropyl- 3-propyl-3H-purínu; 3-etyl-6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl- 3H-purínu; 3- (4-chlórbenzyl) -6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl- 3H- purínu ; 6-cyklopentylamino-3 -(3-cyklopentyloxy4-metoxybenzyl)- 8-izopropyl-3H-purínu; 3-(2-chlórbenzyl)-6cyklopentylamino-8 -izopropyl-3H-purínu; 8-cyklopropyl-6-dietylamino-3-propyl-3H-purín hydrochloridu; 8-cyklopropyl-ó(3-pentylamino)- 3-propyl-3H-purín hydrochloridu; 6 -etylamino-8-izopropyl-3-(4-pyridylmetyl)-3H-purínu; 3-etyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purínu; 3-etyl-8 -cyklopenty1-6 -benzylam.i.no-3H-purínu; 3 - etyl-8 - cyklopentyl-6 - etylamino-3H-purínu ; 3-cyklohexylmetyl-6-etylamino-3H-purínu; 3-cyklohexylmetyl- 54 8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-purínu; 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-(3-metylbutyl)-3H-purínu; 8-cyklopropyl-3-etyl-6propylamino-3H-purínu; 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl-6propylamino-3H-purínu; 3-hexyl-6-metylamino-3H-purínu; 3cyklopropylmetyl-8-izopropyl-6-etylamino-3H-purínu; 3-etyl8 -izopropyl-6-benzylamino-3H-purínu; 3-butyl-6-etylamino-3Hpurínu; 3-butyl-8-cyklopropyl-6-etylamino-3H-pu.rínu; 8-cyklopropyl-6-etylamino-3-propyl-3H-purin; 8-cyklopropyl-6-cyklopropylamino-3-propyl-3H-purin; 3-(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-6-etylamino-8-izopropyl-3H-purínu; a 3-etyl- 6etylamino-8 -(3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-3H-purínu.

?

11. Látka podľa nároku 10, je vybratá zo skupiny pozostávajúcej z 3-(3cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-6-etylamino-3H-purínu; 3-(4chlórbenzyl) -6-etylamino-8-izopropyl-3H-purínu; i/3- (3-cyklopentyloxy-4-metoxybenzyl)-6-etylamino-Jš -izopropyl-3H-purínu;

ich farmaceutický prijateľných solí.

12. Látka podľa nároku 3, kde predstavuje Cj_<j alkylovú skupinu.

13. Látka podľa nároku 4, kde Rg_a predstavuje etyl alebo 4-pikolyl a R^ predstavuje vodíkový atóm.

14. Látka podľa nároku 12, kde R^ predstavuje propyl.

15. Látka podľa nároku 3, kde R^ predstavuje substituovaný alebo nesubstituovaný benzyl.

16. Látka podľa nároku 3, kde R^ predstavuje cyklopropylmetyl .

17. Látka so vzorcom (II):

kde r3 , R^a _{a r}8 _s£ rovnaké alebo rôzne a predstavujú H alebo C-^g alkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; Cj_g cykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =N0H, =N0C0NH₂, alebo =0; C^_g cykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s OH, alkoxylom, halogénom, =N0H, =N0C0NH₂, alebo -0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s halogénom, NH₂, alkylamino skupinou, dialkylamino skupinou, voliteľne substituovaným karbamylom, OH, alkoxylom, Cgg cykloalkoxylom, C=N0H, C=NOCONH₂, C^_g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl (C₁_₄), heterocykly!; heterocyklylalkyl (C1-4) : heteroaryl; a heteroaralkyl (C4 4) ;

RÓb p_recj_st_avuje H alebo R^^a, alebo spolu R^b, n _a R^a vytvárajú Cg_g členný kruh obsahujúci od jedného do troch dusíkových atómov, od nula do dvoch kyslíkových atómov, od nula do dvoch atómov síry, alkoxy1, C0₂H, CONH₂, =N0H, =N0C0NH₂, =0; a kde aryl je fenyl alebo naftyl, heterocykly! je 5, 6 alebo 7 členný kruh zahrňujúci od jedného do troch atómov dusíka, a jeden alebo dva kyslíkové atómy, nula až dva atómy síry, a môže byť substituovaný ako na aryle na uhlíkoch alebo dusíkoch tohto kruhu; alebo jeho farmaceutický prijateľná sol za predpokladu, ze R je vodík alebo metyl o a R nie je vodík.

T

18. Látka podlá nároku 17, kde R predstavuje C^_g al- 56 kyl, C^_y cykloalkyl, C^g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar(C^_4)alkylovú skupinu; heteroarylovú alebo heteroar(C₁_₄)alkylovú skupinu; R^6a predstavuje C_lg alkyl, C₂_7 cykloalkyl, C_4g cykloalkylalkyl, aryl, ar(C^_₄)alkyl, heteroaryl alebo heteroar(C₁₄)-alky- lovú skupinu, alebo heterocyklyl (Cj-4)alkylovú skupinu, heteroaryl alebo heteroar (C-£_4) alkylovú skupinu; predstavuje vodíkový atóm alebo Cj_g alkyl, cykloalkyl, C4__g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar(0^.4)alkylovú skupinu; alebo -NR^^aR^^b spolu tvoria 5-členný alebo 6-členný kruh, ktorý voliteľne I o obsahuje jeden alebo viac dodatočných heteroatómov; a R° predstavuje vodíkový atóm alebo Cj_g alkyl, C_g_y cykloalkyl,

C4__g cykloalkylalkyl, aryl, ar(C^_₄)alkyl, pyridyl alebo pyridyl (C-£_₄) alkylovú skupinu.

Q

19. Látka podľa nároku 18, kde R predstavuje C^_g alkylovú skupinu, aryl, ar(C₁_4) alkylovú skupinu; C_g_y cykloalkylovú skupinu, C₄_g cykloalkylovú skupinu, heteroarylovú alebo heteroar (^ci-4.) - alkylovú skupinu.

20. Látka podľa nároku kýlovú skupinu, benzylovú predstavuje vodíkový atóm.

21. Látka podľa nároku atóm.

22. Látka podľa nároku kloalkylovú skupinu.

23. Látka podľa nároku pylovú skupinu.

24. Látka podľa nároku kýlovú skupinu.

25. Látka podľa nároku

18. kde R^^a predstavuje C^_g alalebo pikolylovú skupinu a

I o

18, kde R predstavuje vodíkový

O

18, kde R predstavuje cyO

22, kde R° predstavuje cyk'loproO

18, kde R predstavuje C-^g alO

24, kde R predstavuje izopropy57 lovú skupinu.

a

26. Látka podľa nároku 19, kde R·³ predstavuje alkylovú skupinu.

27. Látka podľa nároku 20, kde R^^a predstavuje 4-pikolyl a R^b predstavuje vodíkový atóm.

28 . Látka podlá nároku 19, kde R³ predstavuj e propyl. 29 . Látka podľa nároku 19 , kde R³ predstavuj e substitu- ovaný alebo nesubstituovaný benzyl. 30 . Látka podľa nároku 19, kde R³ predstavuj e cyklopro- pylmetyl. 31. Látka podľa nároku 17 je vybratá

z 8-cyklopropyl-3,7-dihydro-3-propyl-6-(4-pyridylmetylamino) -2H-purín-2-tiónu; 6-cyklopentylamino-8-cyklopropyl-3,7dihydro-3-etyl-2H-purín-2-tiónu; a ich farmaceutický prijateľných solí .

32. Látka so vzorcom (III):

S

R ³ (III) kde ? r^ntäf^í'V·· ··»' ' ----~^^-»í«seieaäa8a8asasffiäK«ffifô ¹ ,- ' . - ;. ; .- ·.'

- 58 a

R^J predstavuje C₂_g alkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; C^_g cykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; C₄_g cykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s halogénom, NH₂, alkylamino skupinou, dialkylamino skupinou, voliteľne substituovaným karbamylom, OH, alkoxylom,

C₂_8 cykloalkoxylom, C=NOH, C=NOCONH₂, C^_g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl (C^_₄), heterocyklyl; heterocyklylalkyl (C-^_₄) ; heteroaryl; a heteroaralkyl (C-^_₄) ;

R® predstavuje H alebo C^_g alkyl, ktorý je nerozvetvený alebo rozvetvený a nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =NOH, =N0C0NH₂, alebo =0; Cg_g cykloalkyl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s OH, alkoxylom, halogénom, =N0H, =N0C0NH₂, alebo =0; C^_g cykloalkylalkyl, kde cykloalkylová časť je nesubstituovaná alebo substituovaná s OH, alkoxylom, halogénom, =N0H, =N0C0NH₂, alebo =0; aryl, ktorý je nesubstituovaný alebo substituovaný s halogénom, NH₂, alkylamino skupinou, dialkylamino skupinou, voliteľne substituovaným karbamylom, OH,

C-£_g alkoxylom, Cj_g cykloalkoxylom, C=NOH, C=N0C0NH₂, C^_g alkylom, fenylom alebo benzylom; aralkyl (C^_₄), heterocyklyl; heterocyklylalkyl (C₄_₄); heteroaryl; a heteroaralkyl (^cl_4)·

Q

33. Látka podľa nároku 32, kde R predstavuje C₂_g alkyl, cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl alebo ar(C^_₄)alkylovú skupinu; heteroarylovú alebo

O heteroar (C-£_₄) alkylovú skupinu; a R predstavuje vodíkový atóm alebo C-^g alkyl, C-j_₂ cykloalkyl, C₄_g cykloalkylalkyl, aryl, ar(C^_₄)alkyl, pyridyl alebo pyridyl(C^_₄)alkylovú skupinu.

, Q

34. Látka podlá nároku 33, kde R predstavuje C2_g alkylovú skupinu, aryl, ar(C-^_₄) alkylovú skupinu; C₃_y cykloalkylovú skupinu, gcykloalkylalkylovú skupinu, heteroarylovú alebo hetero- ar (C-^ ^) alkylovú skupinu.

35. Látka podlá nároku atóm.

36. Látka podľa nároku kloalkylovú skupinu.

37. Látka podľa nároku pylovú skupinu.

i

38. Látka podľa nároku kýlovú skupinu.

39. Látka podľa nároku lovú skupinu.

40. Látka podľa nároku kýlovú skupinu.

41. Látka podlá nároku

42. Látka podlá nároku ovaný alebo nesubstituovaný

43. Látka podľa nároku pylmety'l.

44. Látka podľa

O

32, kde R predstavuje vodíkový

O

32, kde R predstavuje Cgy cyO

36, kde R predstavuje cyklopro32, kde R® predstavuje C-^g alO

38, kde R predstavuje izopropy-3

32, kde R predstavuje alO

40, kde R predstavuje propyl.

O

34, kde R predstavuje substitubenzyl.

-i

34, kde R predstavuje cyklopronároku 32 je vybratá z 3 -benzyl-3,7-dihydro-8-(1-metylety1)-1H-purín-2,6 -ditiónu; 3-cyklohexylmetyl-8-cyklopropyl-3,7-dihydro-lH-purín-2,6dit iónu ; 3 - (4-chlórbenzyl) - 8 - .izopropyl- 3,7 - dihydro - 2,6ditio-lH-purín-2,6-diónu; 8-cyklopropyl-3-cyklopropylmetyl3,7 -dihydro-1H-purín-2,6-ditiónu; 3-(3-cyk-lopentyloxy-4metoxybenzyl)- 3,7-dihydro-8-izopropyl-1H-pu-rín-2,6-ditiónu;

a ich farmaceutický prijateľných solí.

45. Metóda na uskutočnenie selektívnej PDE IV inhibície u pacientov, ktorí to vyžadujú, vyznačujúca sa tým, že zahrňuje podávanie účinného množstva látky podľa nárokov 1 až 44.

46. Farmaceutická zmes vyznačujúca sa tým, že obsahuje látku s chemickou štruktúrou uvedenou v nárokoch 1 až 44.

47. Metóda na liečenie cicavcov trpiacich chorobným stavom vybratým zo skupiny pozostávajúcej z astmy, alergií, zápalov, depresie, atopických chorôb, nádchy, demencie a chorobných stavov spojených s abnormálne vysokými fyziologickými hladinami cytokínu, vyznačujúca sa tým, že zahrňuje podávanie účinného množstva látky podľa nárokov 1 až 44 týmto cicavcom.

48. Spôsob prípravy látok podľa čujúci sa tým, že zahrňuj e vzorcom (IV) nároku 1 v y z n a reagovanie látky so

S

R ³ (IV) s látkou so vzorcom (V):

R^6aR^6bNH (V) v prítomnosti alebo v neprítomnosti vhodného reakčného prostredia a pri teplote od asi 0 do asi 150 °C.

49. Spôsob podľa nároku 48 vyznačujúci sa tým, že rozpúšťadlo pre reakciu je vybraté zo skupiny pozostávajúcej z vody, alkoholu alebo uhľovodíkov.

50. Spôsob podľa nároku 48 vyznačujúci sa sa t ý m, že látky so vzorcom (IV) sa pripravujú tionáciou zodpovedajúcich 6-oxo látok.

51. Spôsob podlá nároku 50 vyznačujúci sa tým, že tionácia sa robí opracovaním suspenzie 6-oxo látky v pyridíne s 20 % molovým prebytkom pentasulfidu fosforečného .

52. Spôsob prípravy látok podlá nároku 1 v y z n a čujúci sa tým, že zahrňuje redukciu látok so vzorcom (II) alebo ich izomérov:

(II) za použitia vhodného redukujúceho reagentu.

53. Spôsob podľa nároku 52 vyznačujúci sa tým, že redukcia sa uskutočňuje vo vhodnom rozpúšťadle vybratom z alkoholu, uhľovodíka alebo vody.

54. Spôsob podlá nároku 52 vyznačujúci sa t ý m, že .Látky so vzorcom (II) sa pripravia so zodpovedajú- 62 cich 2,6-ditioxantínových derivátov so vzorcom (III):

(III) reakciou s amínom Rb^aR^^NH podľa metódy z nároku 48.

55. Spôsob podľa nároku 52 vyznačujúci sa tým, že látky so vzorcom (III) sa pripravia so zodpovedajúcich 2-tioxantínových derivátov tionáciou.

Obr. 1

6. Látka podľa nároku 2, kde R° predstavuje C₄_g cykloalkylalkylovú skupinu alebo C₃₇ cykloalkylovú skupinu.

O

7. Látka podľa nároku 6, kde R predstavuje cyklopropylovú skupinu.

O

8. Látka podľa nároku 2, kde R predstavuje C^_g alkylovú skupinu.

O

9. Látka podľa nároku 8, kde R° predstavuje izopropylovú skupinu.

10. Látka podľa nároku 1 je vybratá z

8-etylamino-3-hexyl-3H-purín dávka histamínu [jig/kg]