CN1495183A - 作为抗寄生虫药的对郝青酰胺 - Google Patents

作为抗寄生虫药的对郝青酰胺

Info

Publication number
CN1495183A
CN1495183A CNA03158991XA CN03158991A CN1495183A CN 1495183 A CN1495183 A CN 1495183A CN A03158991X A CNA03158991X A CN A03158991XA CN 03158991 A CN03158991 A CN 03158991A CN 1495183 A CN1495183 A CN 1495183A
Authority
CN
China
Prior art keywords
marcfortines
alpha
compound
formula
mixture
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CNA03158991XA
Other languages
English (en)
Other versions
CN1277830C (zh
Inventor
Bh
B·H·李
M·F·科洛斯尔
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Zoetis Services LLC
Original Assignee
Pharmacia and Upjohn Co
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Family has litigation
First worldwide family litigation filed litigation Critical https://patents.darts-ip.com/?family=21695455&utm_source=google_patent&utm_medium=platform_link&utm_campaign=public_patent_search&patent=CN1495183(A) "Global patent litigation dataset” by Darts-ip is licensed under a Creative Commons Attribution 4.0 International License.
Application filed by Pharmacia and Upjohn Co filed Critical Pharmacia and Upjohn Co
Publication of CN1495183A publication Critical patent/CN1495183A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN1277830C publication Critical patent/CN1277830C/zh
Anticipated expiration legal-status Critical
Expired - Lifetime legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A01—AGRICULTURE; FORESTRY; ANIMAL HUSBANDRY; HUNTING; TRAPPING; FISHING
    • A01N—PRESERVATION OF BODIES OF HUMANS OR ANIMALS OR PLANTS OR PARTS THEREOF; BIOCIDES, e.g. AS DISINFECTANTS, AS PESTICIDES OR AS HERBICIDES; PEST REPELLANTS OR ATTRACTANTS; PLANT GROWTH REGULATORS
    • A01N43/00—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds
    • A01N43/90—Biocides, pest repellants or attractants, or plant growth regulators containing heterocyclic compounds having two or more relevant hetero rings, condensed among themselves or with a common carbocyclic ring system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/10—Anthelmintics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P33/00—Antiparasitic agents
    • A61P33/14—Ectoparasiticides, e.g. scabicides
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D491/00—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00
    • C07D491/22—Heterocyclic compounds containing in the condensed ring system both one or more rings having oxygen atoms as the only ring hetero atoms and one or more rings having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by groups C07D451/00 - C07D459/00, C07D463/00, C07D477/00 or C07D489/00 in which the condensed system contains four or more hetero rings

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Tropical Medicine & Parasitology (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Agronomy & Crop Science (AREA)
  • Environmental Sciences (AREA)
  • Plant Pathology (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Dentistry (AREA)
  • Wood Science & Technology (AREA)
  • Zoology (AREA)
  • Pest Control & Pesticides (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)
  • Percussion Or Vibration Massage (AREA)
  • Epoxy Compounds (AREA)
  • Agricultural Chemicals And Associated Chemicals (AREA)

Abstract

本发明涉及用作抗寄生虫药的各种取代的马可氟汀和对郝青酰胺。

Description

作为抗寄生虫药的对郝青酰胺
本申请是申请日为1996年6月26日的中国专利申请96195723.9的分案申请，原申请的发明名称为“作为抗寄生虫药的马可氟汀和对郝青酰胺”。
本发明涉及用作抗寄生虫药的取代的马可氟汀(marcfortines)和对郝青酰胺。
马可氟汀是已知化合物，如马可氟汀A，见《化学学会化学通讯杂志》(Journal of the Chemical Society Chemical Communications)，601-602(1980)，及马可氟汀B和C，见《四面体通讯》(TetrahadronLetters)，22，1977-1980(1981)。这些化合物属于娄格法尔特氏青霉真菌代谢物。马可氟汀的结构与已知化合物对郝青酰胺有关。
对郝青酰胺公开于《四面体通讯》(Tetrahadron Letters)，22，135-136(1981)和《抗生素杂志》(Journal of Antibiotics)，44，492-497(1991)。美国专利4,866,060和4,923,867公开了马可氟汀A，B和C及其某些衍生物在治疗和预防动物寄生虫病方面的用途。
WO 92/22555(1992年12月23日公布)一般性地描述了马可氟汀或对郝青酰胺衍生物(即14位被甲基或甲基和羟基取代的部分式(III))，但没有描述如何制备这种14-甲基-14-羟基马可氟汀化合物。
《抗生素杂志》(Journal of Antibiotics)，43，1380-1386(1990)公开了有如下结构的对郝青酰胺A：
Figure A0315899100041
马可氟汀A有如下结构：
马可氟汀B有如下结构：
Figure A0315899100051
马可氟汀C有如下结构：
马可氟汀D有如下结构：
Figure A0315899100053
WO 91/09961(1991年7月11日公布)公开了多种马可氟汀或对郝青酰胺衍生物及其12a-N-氧化物，以及特别是从Sp.青霉(Penicillium SP.)IMI 332995制备VM 29919(对郝青酰胺)和VM 55596(对郝青酰胺的12a-N-氧化物)。
美国专利4,873,247公开了对郝青酰胺衍生物和用于制备对郝青酰胺的查尔斯氏青霉MF5123菌株(ATCC 20841)。美国专利4,978,656(以及EP 390532-A和EP 301742-A)公开了对郝青酰胺的多种合成衍生物，以及由查尔斯氏青霉MF 5123(ATCC 20841)制备对郝青酰胺。
国际公开WO 92/22555(1992年12约23日公布)一般性地公开了14α-羟基马可氟汀化合物和用14-羟基-14-甲基马可氟汀化合物制备抗寄生虫药物的方法。但是，该文献没有提供任何制备14α-羟基马可氟汀化合物或14α-羟基-14β-甲基马可氟汀化合物的方法。
国际公开WO 94/29319公开了多种14-取代的马可氟汀及其衍生物。
其中n1是0的15-烷基-14-羟基化合物(III)是已知的，见国际公开WO 94/29319。
本发明公开了其中n1为1-3的式(III)15-烷基-14-羟基化合物，N-氧化物及其可药用盐。
本发明还公开了其中n2为0-3的式(VIII)氟化合物及其N-氧化物和可药用盐。
本发明还公开了其中n1为0-3的式(X)15-烷基-16-羟基化合物及其N-氧化物和可药用盐。
本发明还公开了其中n1为0-3的式(XIII)对郝青酰胺B化合物及其N-氧化物和可药用盐。
本发明还公开了14，15-二氢-16-氧对郝青酰胺B。
本发明还公开了其中R14是-H或C1-C4烷基且R15是-H或C1-C4烷基的式(XXI)2-脱氧-15-烷基化合物及其N-氧化物和可药用盐。
本发明还公开了2-脱氧马可氟汀A的式(XXIII)2-脱氧化合物及其可药用盐。
本发明还公开了式(XXV)14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺化合物及其N-氧化物和可药用盐。
本发明还公开了下列化合物：15α-乙基-14α-羟基-17-氧马可氟汀A，14α-羟基-15α-乙烯基-17-氧马可氟汀A，14α-羟基-15α-(1′，2′-二羟乙基)-17-氧马可氟汀A，14α-羟基-15α-羟甲基-17-氧马可氟汀A，15α-氟甲基-14α-羟基-17-氧马可氟汀A，14，15-二氢-15-甲基马可氟汀A，14α-羟基-16，17-二氧-15α-甲基马可氟汀A，14α-羟基-16-氧-15α-甲基对郝青酰胺B，16，17-二氧马可氟汀A，16-氧对郝青酰胺B，14α-羟基-15α-甲基-17-氧马可氟汀。
本发明还公开了1，2-脱氢化合物(XXIX)。
本发明还公开了2-烷基-2-脱氧化合物(XXXI)。
本申请要求保护的化合物是用本领域技术人员已知的方法由本领域技术人员已知的起始原料制备或很容易从用本领域技术人员已知的方法制备的已知化合物制备。可用已知化学和已知起始原料以新的途径制备本发明新化合物。
反应路线A公开了制备15-烷基-14-羟基化合物(III)的优选方法。起始原料14-羟基-α，β-不饱和化合物(I)是已知的，见国际公开WO 94/29319。14-羟基-α，β-不饱和化合物(I)可以通过与烷基化剂如格利雅试剂或烷基铜酸盐反应转化成相应的15-烷基-17-氧化合物(II)；优选的烷基化剂是其中n1为0-3且X0是卤素的CH3-(CH2)n1-Mg-X0格利雅试剂。优选n1是1和X0是-Br。优选的方法是将14-羟基-α，β-不饱和化合物(I)与乙基溴化镁和碘化铜(I)在标准1，4-加成条件下反应，制成15-烷基-17-氧化合物(II)。然后，用本领域技术人员已知的方法将，例如，用甲硼烷-二甲基硫化物复合物或其它还原剂如甲硼烷-THF复合物或氢化铝锂，将羰基还原成亚烷基部分。用甲硼烷-二甲基硫化物还原是优选的。对于15-烷基-14-羟基化合物(III)，优选n1是1。其中n1是0的15-烷基-14-羟基化合物(III)是已知的，见国际公开WO 94/29319。
反应路线B公开了制备式(VIII)氟化合物的方法。采用类似于反应路线A中烷基化14-羟基-α，β-不饱和化合物(I)格利雅加成反应，但用其中n2为0-3的CH2＝CH-(CH2)n2-Mg-X0/碘化铜代替CH3-(CH2)n1-Mg-X0(反应路线A)，将起始原料14-羟基-α，β-不饱和化合物(I)转化成相应的不饱和化合物(IV)。然后，通过与氧化剂如四氧化锇(催化的)和4-甲基吗啉N-氧化物反应氧化C15侧链不饱和部分的双键将不饱和化合物(IV)转化成相应的二羟基化合物(V)；优选的氧化剂是四氧化锇和4-甲基吗啉N-氧化物。然后，通过氧化反应及随后的还原反应将二羟基化合物(V)转化成相应的羟基烷基化合物(VI)。优选的氧化剂是高碘酸钠，还原剂是硼氢化钠。通过与氟化剂如四丁基氟化铵和对甲苯磺酰氟反应将羟基烷基化合物(VI)转化成相应的氟-氧化合物(VII)。用已知方法，优选用甲硼烷-四氢呋喃复合物将氟-氧化合物(VII)的内环双键还原，得到所要的氟化合物(VIII)。对于氟化合物(VIII)，优选n2是1。
反应路线C公开了制备15-烷基-16-羟基化合物(X)的方法。首先用已知方法除去14-羟基，得到14，15-脱氢功能团，用二乙氨基三氟化硫(DAST)得到Δ14-15-烷基化合物(IX)。通过用羟基化剂，优选二氧化硒，在惰性溶剂如对-二噁烷中回流，羟基化Δ14-15-烷基化合物(IX)，得到所要的15-烷基-16-羟基化合物(X)。对于15-烷基-16-羟基化合物(X)，优选n1是0。
反应路线D公开了制备15-烷基对郝青酰胺B化合物(XIII)的方法。通过在催化剂如钯炭存在下与氧反应将起始化合物(III)15-烷基-14-羟基氧化成相应的15-烷基-16，16-二氧马可氟汀A化合物(XI)。然后，通过用过酸，优选间氯过苯甲酸处理，将15-烷基-16，17-二氧马可氟汀A化合物(XI)的6员二氧环还原成5员环，制成15-烷基-16-氧对郝青酰胺B化合物(XII)。然后，用还原剂，优选氢化铝锂/氯化铵，除去15-烷基-16-氧对郝青酰胺B化合物(XII)的16-氧基。对于15-烷基对郝青酰胺B化合物(XIII)，优选n1是0。
反应路线E公开了用实施例13和14的方法制备多种氧代化合物如16，17-二氧马可氟汀A(XV)，16-氧对郝青酰胺B(XVI)和14，15-脱氢-16-氧对郝青酰胺B(XVII)的方法。
反应路线F公开了由其中R14是-H或C1-C4烷基且R15是-H或C1-C4烷基的14-羟基-α，β-不饱和酮(XVIII)开始制备2-脱氧-14-羟基化合物(XXI)的方法。在溴化锂存在下通过与适当锂试剂R15-Li的反应，将14-羟基-α，β-不饱和酰胺(XVIII)的Δ15-双键还原，得到14-羟基-17-氧化合物(XIX)。如果需要，在该反应期间可以烷基化C15-位。接着，用甲硼烷-二甲基硫化物复合物(如前面反应路线A所述)将14-羟基-17-氧化合物(XIX)的17-氧基还原，见实施例15。该还原反应制成14-羟基化合物(XX)以及2-和17-羰基均被还原的化合物，即所要的2-脱氧-14-羟基化合物(XXI)。
反应路线G公开了制备2-脱氧化合物(XXIII)的方法，见实施例16。
反应路线H公开了制备相应的14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺B(XXV)的方法。
或者优选用下面反应路线O方法以40-70％产率制备2-脱氧马可氟汀(XXIII)，14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺B和14-羟基马可氟汀A(XXV)衍生物。反应路线O公开了将酰胺(XXVI)与适当氯甲酸烷基酯或酐衍生物反应，经过氢化钾或氢化钠处理，制成相应的酰亚胺(XXVII)，再用硼氢化钠还原，得到相应的2-羟基化合物(XXVIII)的方法。在酰亚胺(XXVII)中N-1位的氮必须被保护(见式XXVII的R17)，因为直到C-2羰基的还原反应之后，这一点是本领域技术人员已知的。优选的保护基包括苯基，4-硝基苯基和叔丁基芴基甲基。然后，用各种本领域技术人员已知的方法将2-羟基化合物(XXVIII)脱保护，得到相应的1，2-脱氢化合物(XXIX)，可以用硼氢化钠将其还原，以40-70％的总产率得到相应的2-脱氧马可氟汀(XXIII)，14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺B和14-羟基马可氟汀A(XXV)。如果R17是叔丁基，得到2-脱氧马可氟汀(XXIII)，14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺B和14-羟基马可氟汀A(XXV)的捷径是将酰亚胺(XXVII)与硼氢化钠在甘醇二甲醚或二甘醇二甲醚回流进行反应。
通过1，2-脱氢马可氟汀A(XXIX)与本领域技术人员已知的适当烷基锂试剂反应可以得到相应的2-烷基-2-脱氧paraquamide A(XXXI)。
抗寄生虫化合物指并包括15-烷基-14羟基化合物(III)，氟化合物(VIII)，15-烷基-16羟基化合物(X)，15-烷基对郝青酰胺B(XIII)，2-脱氧-14-羟基化合物(XXI)，2-脱氧marcfortine(XXIII)，14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺B和14-羟基马可氟汀A(XXV)，14，15-脱氢-16-氧对郝青酰胺B(XVII)，1，2-脱氢化合物(XXIX)和2-烷基-2脱氧化合物(XXXI)，及其可能存在的N-氧化物和可药用盐。
抗寄生虫化合物是胺和与足够强的酸反应形成的酸加成盐。可药用盐包括无机酸和有机酸形成的盐。可药用盐优选用相应的游离胺，因为它们能产生水溶性和结晶性更好的化合物。优选的可药用盐包括下列酸形成的盐：甲磺酸，盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸，苯甲酸，柠檬酸，酒石酸，富马酸，马来酸，CH3-(CH2)n-COOH，其中n是0-4，HOOC-(CH2)n-COOH，其中n定义如上。
抗寄生虫化合物是胺，而且本领域技术人员都知道。将它们与过酸如间氯过苯甲酸反应可以得到相应的12a-N-氧化物。
本发明抗寄生虫化合物是具有意想不到的抗内原性和外原性寄生虫，特别是能够引起人类，动物和植物多种寄生虫病的蠕虫和节肢动物效果的抗寄生虫药。
寄生虫病既可以由内原性寄生虫也可以由外原性寄生虫引起。内原性寄生虫是生活在宿主体内，即生活在器官(如胃，肺，心，肠等)内或仅在皮肤下的寄生虫。外原性寄生虫是生活在宿主表面但仍从宿主吸取养分的寄生虫。
内原性寄生虫病一般指由于宿主被已知为寄生虫的蠕虫感染而引发的蠕虫病。由于家畜如猪，绵羊，马，牛，山羊，狗，猫和家禽感染蠕虫病使蠕虫病成为流行的和严重的世界范围的经济问题。这些传染病中许多是由称为线虫的虫子引起的，线虫可以引起全世界多种动物疾病。这些疾病常常是严重的并且可以导致感染的动物死亡。使动物感染上述疾病的最常见的线虫属有血矛线虫属，毛圆线虫属，胃线虫属，细颈线虫属，古柏线虫属，蛔虫属，仰口线虫属，结节线虫属，夏柏线虫属，鞭虫属，圆线虫属，毛滴虫属(Trichonema)，网尾线虫属，毛细线虫属，(鸡)异刺线虫属(Heterakis)，弓蛔虫属，禽蛔虫属，光尾线虫属，钩口线虫属，钩虫属，弓蛔线虫属和副蛔虫属。许多寄生虫是种类特殊的(只感染一个宿主)，而且大部分在动物体内有一个优选的感染部位。例如，血矛线虫属和胃线虫属主要感染胃部，而细颈线虫属和古柏线虫属则主要进攻肠道。其它寄生虫更喜欢居住在心，眼，肺，血管等部位，还有一些是皮下寄生虫。蠕虫病可以导致虚弱，体重减轻，贫血，肠道损坏，营养不良和其它器官的损坏。如果不对这些疾病进行治疗将导致动物死亡。
被外原性寄生虫节肢动物如蜱，螨，虱，厩螫蝇，hornflies，丽蝇，蚤等感染也是一个严重的问题。被这些寄生虫感染会导致血液流失，皮肤损伤，并干扰正常的饮食习惯，进而造成体重减轻。这些传染病还会导致一些可能致命的严重疾病如脑炎，微粒孢子虫病，猪痘等的传播。
动物可能同时被几种寄生虫感染，因为一种寄生虫感染会削弱动物使它更容易被第二种寄生虫感染。因此，在治疗这些疾病时特别优选具有广谱活性的化合物。抗寄生虫化合物对这些疾病具有意想不到的高活性，而且对狗身上的恶丝虫属，啮齿动物身上的Nematospiroides和管状线虫属，叮咬昆虫和迁移双翅目的幼虫如牛身上的皮蝇属和马身上的胃蝇属均有活性。
抗寄生虫化合物也被用于抗引起人体寄生虫病的内原性和外原性寄生虫。感染人的内原性寄生虫的实例包括胃肠道寄生虫种属，如钩口线虫属，板口线虫属，蛔虫属，类圆线虫属，毛线虫属，毛细线虫属，鞭虫属，蛲虫属等。其它感染人体的内原性寄生虫可在血液或其它器官中找到。这些寄生虫的实例有丝虫，如吴策线虫属(Wucheria)，布鲁丝虫属，盘尾丝虫属等，以及肠外部位的肠虫，如类圆线虫属和毛线虫属。寄生于人体的外原性寄生虫包括节肢动物如蜱，蚤，螨，虱等，而且，对于家畜，这些寄生虫感染会导致严重甚至致命疾病的传播。抗寄生虫化合物对这些内原性和外原性寄生虫具有活性，此外，对困扰人类的叮咬昆虫和其它双翅目害虫也有活性。抗寄生虫化合物口服或非肠道给药的剂量率为0.05-20mg/kg动物体重。
抗寄生虫化合物还可用于抗常见的家庭害虫如蠊属(蟑螂)，Tineola sp.(织物蛾)，Attagenus sp.(地毯甲虫)，Musca domestica(家蝇)，和抗Solenopsis Invicta(进口火蚁)。
抗寄生虫化合物还可用于抗农业害虫如蚜虫(Acyrthiosiphon sp.)，蝗虫和棉铃象鼻虫，以及抗危害贮存谷物的昆虫害虫如拟谷盗属(Tribolium sp.)和抗生活在植物组织上的未成熟阶段的昆虫。抗寄生虫化合物还被用作线虫杀虫剂，用于控制对农业起重要作用的土壤线虫。
对于用作动物抗寄生虫药抗寄生虫化合物既可以内部给药如口服或注射，也可以制成液体浸液或洗发液进行表面给药。
对于口服给药，抗寄生虫化合物可以胶囊剂，片剂或浸液块形式，或将它们混合在动物饲料中给药。胶囊剂，片剂和浸液块中含有活性成分，并配合适当的载体如淀粉，滑石，硬脂酸镁或磷酸二钙。这些单剂可采用熟悉的方法将活性成分与合适的惰性成分细粉，包括稀释剂，填充剂，崩解剂，悬浮剂和/或粘结剂混合，制成均匀混合溶液或悬浮液。惰性成分是不会与抗寄生虫化合物发生反应并且对所要治疗的动物无毒的成分。合适的惰性成分包括淀粉，乳糖，滑石，硬脂酸镁，植物胶和油等。取决于诸多因素，如所要治疗动物的身体大小和种类以及传染病的类型和严重程度，这些制剂中活性和非活性成分的用量变化范围很大。活性成分也可以作为饲料添加剂通过简单地将抗寄生虫化合物与饲料混合或将该化合物施于饲料表面进行给药。或者将活性成分与惰性载体混合，然后将所得组合物与饲料混合或直接喂给动物。合适的惰性载体包括谷类食物，柑橘类食物，发酵的残渣，粗大豆渣，干稻谷等。可以采用熟悉的方法通过研磨，搅拌，碾碎或翻滚将活性成分与这些惰性载体混合，使组合物最终含有0.001-5.0wt％活性成分。
也可以通过注射由溶解于惰性液体载体中的活性成分构成的制剂进行非肠道给药。可以是肌肉内，反刍内(intraruminal)，气管内或皮下注射。注射剂由与适当惰性液体载体混合的活性成分构成。可接受的液体载体包括植物油如花生油，棉籽油，芝麻油等，以及有机溶剂如solketal，甲醛缩甘油(glycerol formal)等。或者，也可以使用水性非肠道制剂。植物油是优选的液体载体。优选将活性成分溶解于或悬浮于液体载体中制成这种制剂，使制剂最终含有0.005-20wt％活性成分。
抗寄生虫化合物的表面应用可以通过使用含有抗寄生虫化合物的水溶液或水性悬浮液的液体浸液或洗发液实现。这些制剂通常含有悬浮剂如膨润土，正常情况下还含有防沫剂。可接受的制剂含有0.005-20wt％活性成分。优选的制剂含有0.5-5wt％抗寄生虫化合物。
抗寄生虫化合物主要被用作抗寄生虫药，用来治疗和/或预防家畜如牛，绵羊，马，狗，猫，山羊，猪和家禽的蠕虫病。它们还被用于预防和治疗这些动物由外原性寄生虫如蜱，螨，虱，蚤等引起的寄生虫传染病。它们对治疗人类寄生虫传染病也有效。在治疗这些传染病时抗寄生虫化合物可以单独使用，或者与其它抗寄生虫化合物或与其它无关抗寄生虫药结合使用。获得最佳效果所要求的抗寄生虫化合物的剂量取决于几个因素如动物种类和身体大小，传染病的类型和严重程度，给药方法和具体所用的抗寄生虫化合物。口服抗寄生虫化合物的剂量为每公斤动物体重0.005-50mg，可以是单剂或在几天内分几次给药，一般都可以得到较好的效果。一种抗寄生虫化合物单剂通常可以极好地控制感染，但重复剂量可以抵御再感染或具有不寻常耐久性的寄生虫种类。对动物使用的抗寄生虫化合物给药技术是兽医领域技术人员已知的。
抗寄生虫化合物还可被用于抵御在田里或储藏室里危害农作物的农业害虫。抗寄生虫化合物可被制成喷雾剂，粉剂，乳液等用于生长的植物或收获的作物。以这种方式应用抗寄生虫化合物的技术是农业领域技术人员已知的。
给药的准确剂量和频率取决于具体所用的抗寄生虫化合物，所要治疗的具体病症，所要治疗病症的严重程度，具体患者的年龄，体重，一般身体条件，其它可以用于每个患者的医疗方法是本领域技术人员已知的，并且可以通过测量患者的血液水平或抗寄生虫化合物在血液中的浓度和/或患者对所要治疗的具体病症的反应更精确地确定。
下面对用于整个文件包括说明书和权利要求书的术语作出定义和解释。
                  I.结构式的约定和变量的定义
在说明书和权利要求书中代表各种化合物或分子片断的化学结构式除了表示定义的结构性质之外可以含有可变的取代基。这些可变的取代基用一个字母或一个带数字下标的字母表示，例如，“Z1”或“Ri”，其中“i”是整数。这些可变取代基既可以是一价的也可以是二价的，即它们代表一个被一个或两个化学键连接到该结构式上的基团。例如，如果基团Z1连接在结构式CH3-C(Z1)H中，它将代表一个二价变量。如果基团Ri和Rj连接在结构式CH3-CH2-C(Ri)(Rj)-H中，则Ri和Rj将代表一价取代基变量。如果化学结构式是画成直线形式，如上所示，则圆括号中的取代基变量键连到紧挨着圆括号中取代基变量左边的原子上。如果有两个或多个连续的取代基变量包括在圆括号中，则每个连续的取代基变量键连到前面紧挨着的没有包括在圆括号中的原子上。即，在上面结构式中Ri和Rj键连到前面的碳原子上。还有，对于任何具有由数个碳原子建立的系统的分子而言，如甾族化合物，这些碳原子用Ci表示，其中“i”为对应于碳原子数的整数。例如，C6代表甾族化合物核的6位和碳原子数，如同本领域技术人员在甾族化合物化学中所用的传统表示法。同样，术语“R6”代表在C6位的取代基变量(一价或二价)。
直线形式表示的化学结构式或其片断代表直链中的原子。符号“-”代表链中两个原子之间的键。因此，CH3-O-CH2-CH(Ri)-CH3代表2-取代的-1-甲氧基丙烷化合物。用类似的方式符号“＝”代表一个双键，如CH2＝C(Ri)-O-CH3，及符号“≡”代表一个三键，如HC≡C-CH(Ri)-CH2-CH3。羰基可用两种方式表示：-CO-或-C(＝0)-，为了简单起见前者是优选的。
环化合物或分子段的化学结构式也可以表示成直线形式。因此，化合物4-氯-2-甲基吡啶可以表示成直线形式N*＝C(CH3)-CH＝CCl-CH＝C*H，其中约定用星号(*)标记的原子彼此相连从而形成一个环。同样，环形分子段4-(乙基)-1-哌嗪基可用-N*-(CH2)2-N(C2H5)-CH2-C*H2代表。
这里任何化合物的刚性环结构定义为连到刚性环状化合物的每一个碳原子的取代基相对于环平面是定向的。对于有两个连到作为环系统一部分的碳原子上的取代基的饱和化合物-C(X1)(X2)-，两个取代基既可以在环的轴向位置，也可以在赤道位置，而且在轴向/赤道位置之间变换。但是，两个取代基相对于环的位置和它们之间的位置固定不变。当一个取代基此时躺在环平面(赤道)上而不是在平面之上或之下(轴向)时，另一个取代基总是在它之上。在表示这种化合物的化学结构式中在另一个取代基(X2)“之下”的取代基(X1)将被视为是α构型，并且被用破折线或点划线，即用符号“-”或“…”连到碳原子上。连到“上”(X2)的对应的取代基(X1)被视为是β构型，并且被用连续线连到碳原子上。
当取代基变量是二价的时，价键可以是在一起的或分开的，或以变量定义的形式存在。例如，用-C(＝Ri)-表示的连在碳原子上的变量Ri可以是二价的并被定义为氧代，进而形成羰基-CO-，或是定义为两个分开连接的一价取代基变量α-Ri-j和β-Ri-k。当二价变量Ri被定义为是两个一价取代基变量组成的时，约定用“α-Ri-j：β-Ri-k”或其变化形式定义二价变量。在这种情况下α-Ri-j和β-Ri-k连到同一个碳原子上，得到-C(α-Ri-j)(β-Ri-k)-。例如，当二价变量R6，-C(＝R6)-，被定义为是两个一价取代基变量组成的时，两个一价取代基变量为α-R6-1：β-R6-2，…α-R6-9：β-R6-10等，得到-C(α-R6-1)(β-R6-2)-，…-C(α-R6-9)(β-R6-10)-等。同样，对于二价变量R11，-C(＝R11)-，两个一价取代基变量为α-R11-1：β-R11-2。对于环形取代基(因为其分开的α和β取向不存在，例如，由于环中存在碳原子双键)，以及对于键连到不是环之一部分的碳原子上的取代基，上述约定依然成立，但去掉符号α和β。
正如一个二价变量可以被定义为两个分开的一价取代基变量，两个分开的一价取代基变量也可以被定义在一起形成一个二价变量。例如，在结构式-C1(Ri)H-C2(Rj)H-中(其中C1和C2分别任意定义第一和第二碳原子)，Ri和Rj可以被定义为在一起形成(1)C1和C2之间第二个键，或(2)一个二价基团如氧杂(-O-)。因此，该结构式描述了一个环氧化物。当Ri和Rj在一起形成一个更复杂的本体如-X-Y-基团时，该本体的取向是上式中的C1键连到X，C2键连到Y。因此，根据约定，上述“…Ri和Rj一起形成-CH2-CH2-O-CO-…”表示一个其中羰基键连到C2上的内酯。但是，如果表述为“…Ri和Rj一起形成-CO-O-CH2-CH2-…”，则表示一个其中羰基键连到C1上的内酯。
取代基变量中的碳原子采用两种表示方式之一。一种方法是在变量全名前加一个前缀，如“C1-C4”，其中“1”和“4”是代表变量中最小和最大碳原子数的整数。前缀和变量之间用一个空格分开。例如，“C1-C4烷基”代表有1-4个碳原子的烷基(除非给出相反的说明，否则，包括它们的异构体)。如果只给出一个前缀，该前缀表示所定义的变量的全部碳原子数量。因此，C2-C4烷氧羰基描述的是其中n为0，1或2的-CH3-(CH2)n-O-CO-基团。若采用第二种方法，表达式中每部分碳原子量用圆括号内的“Ci-Cj”和紧随其后(没有空格)的所要定义的表达式部分分开表示。采用这种任选的约定，(C1-C3)烷氧羰基与C2-C4烷氧羰基有相同的涵义，因为“C1-C3”只指烷氧基的碳原子量。类似地，C2-C6烷氧基烷基和(C1-C3)烷氧基(C1-C3)烷基都是定义含有2-6个碳原子的烷氧基烷基，所不同的是前者允许烷氧基或烷基部分单独可含有4或5个碳原子，而后者限制这两种基团最多各含有3个碳原子。
当权利要求中含有相当复杂的(环形)取代基时，在命名/表述短语结尾处具体取代基将加以注明(用圆括号)，它将对应于某一个反应路线中相同的命名/表述，该反应路线将建立该具体取代基的化学结构式。
                    II.定义
抗寄生虫化合物指并包括
15-烷基-14-羟基化合物(III)，
氟化合物(VIII)，
15-烷基-16-羟基化合物(X)，
15-烷基对郝青酰胺B化合物(XIII)，
2-脱氧-14-羟基化合物(XXI)，
2-脱氧化合物(XXIII)，
14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺化合物(XXV)，
14，15-脱氢-16-氧对郝青酰胺B化合物(XVII)，
1，2-脱氢化合物(XXIX)及
2-烷基-2-脱氧化合物(XXXI)
及其可能存在的N-氧化物和可药用盐。
所有温度为摄氏度。
THF指四氢呋喃。
盐水指饱和氯化钠水溶液。
色谱(柱和快速色谱)指用(载体，洗脱剂)进行化合物纯化/分离的方法。可以理解为适当的馏分被沉积和浓缩成所要的化合物。
NMR指核(质子)磁共振谱，化学位移用来报告自四甲基甲硅烷的低磁场中的ppm(δ)。
MS指质谱，表示为m/e，mz或质量/电荷量。[M+H]+指母体的阳离子加上一个氢原子。EI指电子冲击。CI指化学离子化。FAB指快原子轰击。
HRMS指高分辨率质谱。
药物上可接受的(可药用的)指对于组合物，制剂，稳定性，患者可接受性和生物利用度，从药物学/毒性学观点来看对患者是可接受的，从物理/化学的观点来看对药物化学家也是可接受的性质和/或物质。
可药用阴离子盐包括下列酸形成的盐：甲磺酸，盐酸，氢溴酸，硫酸，磷酸，硝酸，苯甲酸，柠檬酸，酒石酸，甲酸，马来酸，CH3-(CH2)n-COOH，其中n为0-4，HOOC-(CH2)n-COOH，其中n定义如上。
如果使用溶剂对，溶剂的比例用体积/体积(v/v)表示。
如果用到固体在溶剂中的溶解性，固体与溶剂之比用重量/体积(wt/v)表示。
                            实施例
不用进一步详细描述，相信本领域技术人员都可以用上述方法最大限度地实现本发明。下面实施例将详细地描述如何制备本发明各种化合物和/或运用本发明方法。这些实施例仅仅应被看作是对本发明的解释而非以任何方式限制上面所公开内容。本领域技术人员将很快认识到这些方法的适当变化形式，无论是反应物还是反应条件和技术。
方法1马可氟汀A的制备和分离
                  接种发酵方法：
接种发酵是用储存在液氮中隔离的青霉属UC 7780(NRRL 18887)的琼脂塞培养。融化三个塞子并用作培养液。GS-7由葡萄糖和棉籽粉(以Traders Protein，Procter & Gamble Oilseed Products Co.，Memphis，TN，U.S.A.的Pharmamedia商标出售)组成。未不补充的(Unsupplemented)自来水水化培养基，并用氢氧化铵调节培养基至pH 7.2。将培养基分散到无涡流的封闭系统烧瓶中，每个1000mL烧瓶放入300mL，并在121℃高压灭菌30分钟。每个装有300mL GS-7培养基的封闭烧瓶用3个青霉属UC7780(NRRL 18887)的琼脂塞培养，并在22℃在旋转振动器上以250rpm振动36小时。
                 第二次接种发酵方法：
将成熟的接种培养物以0.3％接种率作为第二次培养基的培养液。第二次培养基由25g葡萄糖一水合物(以C.P.C.International的Cerelose商标出售)，329.8mg MgCl2·6H2O，11.4mg MnSO4·H2O，3.2mgFeSO4·7H2O，1.8mg Na2MoO4·2H2O，367.6mg CaCl2·2H2O，84.2mgNaCl，5.8mg KCl，0.1mg ZnSO4·7H2O，0.1mg CoCl2·6H2O，3.1mgCuSO4·5H2O和每升反渗透级水含0.5mL硅氧烷的消泡剂(以SAG-471Antifoam商标出售)的混合物组成。将补足到200升的第二次接种培养基的介质组分在反渗透级水中水化，并在250L发酵器中补充到190升体积。配制后用NH4OH调节培养基的pH至7.2，然后将培养基在121℃灭菌30分钟。将装在两个封闭烧瓶中的成熟的第一批发酵培养物以0.3％接种率用作培养液。将第二批接种培养物在22℃，125slm充气，5psig本底压力，及250rpm下进行培养36小时。
                      制备发酵方法：
要制备的培养基由50g蜂蜜，16g鱼食(以Menhaden Select Fish Meal商标出售)，10g酵母提取物(以Fidco商标出售)，329.8mg MgCl2·6H2O，11.4mg MnSO4·H2O，3.29mg FeSO4·7H2O，1.8mg Na2MoO4·2H2O，367.6mgCaCl2·2H2O，84.2mg NaCl，5.8mg KCl，0.1mg ZnSO4·7H2O，0.1mgCoCl2·6H2O，3.1mg CuSO4·5H2O和每升反渗透级水含0.5mL硅氧烷的防沫剂(以SAG-471 Antifoam商标出售)的混合物组成。
将补足到5,000升的培养基在反渗透级水中水化，并在5,000L发酵器中补充到4,700升体积。配制后用KOH调节培养基的pH至7.0，然后将培养基在123℃灭菌30分钟。将成熟的第二批接种培养物以1.0％接种率用作培养液。将该培养物在22℃，2,500slm充气，5psig本底压力，及250rpm下进行培养96小时。
                      马可氟汀A的分离：
将4,900L体积发酵物经过高切割力搅拌器收集到收集容器中。转移之后加入4％wt./v硅藻土和1/2体积二氯甲烷，然后用压滤器过滤收集的溶液。滤饼用10％体积二氯甲烷洗涤两次。
滗析所得滤液除去水相。然后浓缩剩下的富集产物二氯甲烷相至44L体积。浓缩物用20％9L体积浓二氯甲烷和硅藻土在滤器上抛光。
采用硅胶色谱和结晶法进一步纯化53L抛光的浓缩物，从其它成分中分离出马可氟汀A。
在色谱纯化之前将抛光的浓缩物分成大致相等的四等份。每份在新装配的由25kg干燥硅胶(床体积59L)制成的9″直径的柱上进行色谱分离。装好的柱用120L10％丙酮的二氯甲烷，120L 20％丙酮的二氯甲烷，120L 30％丙酮的二氯甲烷，160L 40％丙酮的二氯甲烷和130L收集30和40％洗脱液作为20L馏分的丙酮洗脱。用TLC监视洗脱过程，例如，用含有6％异丙醇和0.3％氢氧化铵的二氯甲烷溶剂系统展开Whatmaan LK6DF硅胶板。马可氟汀A的馏分(含有少量马可氟汀D，它与D共色谱)在丙酮中结晶。减压浓缩适量馏分(40-100L)至约5L体积。然后将溶液(或清浆液)输送到旋转蒸发器，并继续减压浓缩。浓缩过程中加入几份1L丙酮直到二氯甲烷全部被置换(替代)。将所得丙酮浆液(约1L体积)冷藏过夜。收集马可氟汀A晶体，用少量冷丙酮洗涤几次，然后真空干燥。这种晶体可能含有百分之几的马可氟汀D杂质。重复从二氯甲烷/丙酮(代替上述二氯甲烷)重结晶，得到纯马可氟汀A。
                  马可氟汀D的分离：
将4,900L体积发酵物经过高切割力搅拌器收集到收集容器中。转移之后加入4％wt./v硅藻土和1/2体积二氯甲烷，然后用压滤器过滤收集的溶液。滤饼用10％体积二氯甲烷洗涤两次。
滗析所得滤液除去水相。然后浓缩剩下的富集产物二氯甲烷相至44L体积。浓缩物用20％9L体积浓二氯甲烷和硅藻土在滤器上抛光。
采用硅胶色谱和结晶法进一步纯化53L抛光的浓缩物，从其它成分中分离出马可氟汀A。
在色谱纯化之前将抛光的浓缩物分成大致相等的四等份。每份在新装配的由25kg干燥硅胶(床体积59L)制成的9″直径的柱上进行色谱分离。装好的柱用120L 10％丙酮的二氯甲烷，120L 20％丙酮的二氯甲烷，120L 30％丙酮的二氯甲烷，160L 40％丙酮的二氯甲烷和130L收集30和40％洗脱液作为20L馏分的丙酮洗脱。用TLC监视洗脱过程，例如，用含有6％异丙醇和0.3％氢氧化铵的二氯甲烷溶剂系统展开Whatmaan LK6DF硅胶板。浓缩含马可氟汀D的马可氟汀A馏分。将1克这种物质溶解于甲酸(20mL，93％)，并在20-25℃放置16h。减压除去挥发性成分后，剩余物经硅胶色谱纯化(1∶20 MeOH∶CH2Cl2)，得到马可氟汀D(100mg)为白色固体。用NMR谱仪和质谱测定产物的结构。HRMS(FAB)M/Z[M+H]，C28H35N3O3+H计算值：462.2756；实测值：462.2739。方法1A马可氟汀A和C的制备和分离
                初级接种发酵的方法：
接种发酵是用储存在液氮中隔离的青霉属UC 7780(NRRL 18887)的琼脂塞培养。融化三个塞子并用作100mL GS-7培养基的培养液。GS-7由葡萄糖和棉籽粉(以Traders Protein，Procter & Gamble OilseedProducts Co.，Memphis，TN，U.S.A.的Pharmamedia商标出售)以25g/L浓度加到自来水中形成的。配制后用NH4OH调节GS-7至pH 7.2。将培养基以100mL体积在500mL无涡流发酵烧瓶中高压灭菌30分钟。将灭菌GS-7按上述方法培养，并在23℃以250rpm振动35-58小时。
                制备发酵方法(振动器烧瓶)：
将成熟的接种培养物以1％接种率作为制备培养基的培养液。制备的培养基由45g葡萄糖，25g酶消化酪蛋白(以Sheffield Products，Norwich，N.Y.，U.S.A.的Peptonized Milk Nutrient商标出售)，每升自来水含2.5g酵母提取物(以Difco Laboratories，Detroit，MI的BACTO YeastExtract Code：0127商标出售)的混合物组成。配制后用氢氧化钾调节制备培养基的pH至7.0，然后将100mL体积培养基在500mL无涡流发酵烧瓶中高压灭菌30分钟。将灭菌的制备培养基按上述方法培养，并在21℃以250rpm振动7-14天。
                  制备发酵方法(Labraferm罐)：
将成熟的接种培养物以0.5％接种率作为灭菌制备培养基的培养液。制备培养基如上所示。用KOH将pH调至7.0后将10L这种培养基在12LLabraferm中高压灭菌90分钟。以0.5％接种率在罐中培养，并在20℃以250rpm搅拌5-9天。空气流速保持在10-15L/分钟。
                   马可氟汀A和C的分离：
将整个发酵肉汤(35L)以低速在常用的Waring Blender中浸渍，然后与等体积二氯甲烷掺合。将混合物冷藏过夜，然后进行离心以打破乳液。抽出生成的清澈二氯甲烷相，然后减压蒸发。将剩余物(37.4g)的二氯甲烷浓溶液装到用二氯甲烷装的硅胶(1kg)浆柱上。该柱用二氯甲烷中递增丙酮浓度(10％，20％，30％，40％和50％丙酮)的洗脱液洗脱。用TLC监视馏分，蒸发适当的馏分并从丙酮结晶，得到马可氟汀A和马可氟汀C。方法1B马可氟汀A和C的制备和分离
                    接种发酵的方法：
接种发酵是用储存在液氮中隔离的青霉属UC 7780(NRRL 18887)的琼脂塞培养。融化三个塞子并用作100mL GS-7培养基的培养液。GS-7由葡萄糖和棉籽粉(以Traders Protein，Procter & Gamble OilseedProducts Co.，Memphis，TN，U.S.A.的Pharmamedia商标出售)以25g/L浓度加到自来水中形成的。配制后用NH4OH调节GS-7至pH 7.2。将培养基以100mL体积在500mL无涡流发酵烧瓶中高压灭菌30分钟。将灭菌GS-7按上述方法培养，并在23℃以250rpm振动35-58小时。
            制备发酵方法(振动器烧瓶)：
将成熟的接种培养物以1％接种率作为制备培养基的培养液。制备培养基由20g葡萄糖，15mL甘油，20g棉籽粉(以Traders Protein，Procter &Gamble Oilseed Products Co.，Memphis，TN，U.S.A.的Pharmamedia商标出售)，10g大豆肉和每升自来水含3g K2HPO4的混合物组成。配制后用氢氧化钾调节制备培养基的pH至6.8，然后将100mL体积培养基在500mL无涡流发酵烧瓶中高压灭菌30分钟。将灭菌的制备培养基按上述方法培养，并在21℃以250rpm振动7-14天。
              制备发酵方法(Labraferm罐)：
将成熟的接种培养物以0.5％接种率作为灭菌制备培养基的培养液。制备培养基如上所示。用KOH将pH调至7.0后将10L这种培养基在12LLabraferm(New Brunswick Scientific Co.，Inc.)中高压灭菌90分钟。以0.5％接种率在罐中培养，并在20℃以250rpm搅拌5-9天。空气流速保持在10-15L/分钟。
                 马可氟汀A和C的分离：
将整个发酵肉汤(35L)以低速在广泛使用的Waring Blender中浸渍，然后与等体积二氯甲烷掺合。将混合物冷藏过夜，然后进行离心以打破乳液。抽出生成的清澈二氯甲烷相，然后减压蒸发。将剩余物(37.4g)的二氯甲烷浓溶液装到用二氯甲烷装的硅胶(1kg)浆柱上。该柱用二氯甲烷中递增丙酮浓度(10％，20％，30％，40％和50％丙酮)的洗脱液洗脱。用TLC监视馏分，蒸发适当的馏分并从丙酮结晶，得到马可氟汀A和马可氟汀C。
                 合成14-取代的马可氟汀
用碘化氰处理马可氟汀A(反应路线I，式1a)制成16α-碘-17β-氰基马可氟汀A和16β-碘-17α-氰基马可氟汀A混合物(式5)，该混合物可用硅胶色谱分离。用氢氧化钾的甲醇溶液将该混合物脱碘化氢。得到16，17-脱氢-17-氰基马可氟汀A(式6)，用二氧化硒可将其氧化成17-酮马可氟汀A(式7)。通过硒化16位(苯基二氯氧化硒和LDA)，接着用过氧化氢氧化硒中间体，在C15和C16之间引入一个双键。随后除去苯基硒酸，得到15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式8)。该化合物是合成14α-羟基马可氟汀A(式10)的关键中间体，可以用两种不同的合成途径将其转化成式10化合物。
在第一种方法中，用双(三甲基甲硅烷基)氨化钾和2-苯基磺酰基-3-苯基氧杂氮丙啶(oxaziridine)对原料的14位的烯丙基氧化是通过氧化16位完成的，得到所需的14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a)和14，15-脱氢-16-羟基-17-酮马可氟汀A(式9b)的混合物。两种产物用硅胶色谱分离。用于THF中的氢化铝锂将式9a还原成14α-羟基马可氟汀A(式10)，即本发明公开的标题化合物。或者，用二氧化硒的二噁烷氧化式8化合物(反应路线J)，得到14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a)和15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(式11)的2∶1混合物。它们可用硅胶色谱分离。每一种化合物分别被转化成14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式12a)：用三乙基硼氢化锂还原15，16-双键得到式9a化合物；用硼氢化锂还原羰基的14位得到式11化合物。对于后一种情况还制成等量14β-羟基-17-酮马可氟汀A(式12b)，可通过色谱法将其除去。用甲硼烷-四氢呋喃(THF)复合物还原式12a化合物，得到14α-羟基马可氟汀A(式10)。
用三乙基硼氢化锂将14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(反应路线K，式9a)还原成14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式12a)。经过Swern氧化反应用草酰氯和DMSO将其转化成14，17-二酮马可氟汀A(式13)。在Grignard反应中用甲基溴化镁处理制成14α-羟基-14β-甲基-17-酮马可氟汀A(式14a)和14β-羟基-14α-甲基-17-酮马可氟汀A(式14b)的混合物，然后经硅胶色谱分离。产物的比例取决于所用溶剂：用二氯甲烷，得到6∶1的比例；用THF，得到＞50∶1的比例。式13a化合物用氢化铝锂还原，得到14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(式15)。
将14α-羟基马可氟汀A(反应路线L，式10)进行Swern氧化反应，得到14-酮马可氟汀A(式16)。将其用硼氢化钠还原成14-β-羟基马可氟汀A(式17)。在Grignard反应中用乙基溴化镁处理14-酮马可氟汀A(式16)，制成14α-羟基-14-乙基马可氟汀A(式19)。用间-氯过氧基苯甲酸处理14α-羟基马可氟汀A(式10)，制成14α-羟基马可氟汀AN-氧化物(式18)。可以采用脱羟基反应由14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A制备14β-甲基马可氟汀A。即，在碱存在下用氯硫羰甲酸苯酯处理14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A。该14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A硫羰甲酸酯衍生物用三正丁基氢化锡还原成14β-甲基马可氟汀A。
或者，可以由马可氟汀A(反应路线M)合成14α-羟基马可氟汀A。用碳酸氢钠和碘的四氢呋喃水溶液处理马可氟汀A，制成17-酮马可氟汀A(式7)。可用LDA和二硫二苯将其二亚氧硫基化，得到16-二硫代苯基-17-酮马可氟汀A(反应路线M，式20)，从马可氟汀A算起产率为60％。用间-氯过氧苯甲酸将其氧化，制成16-硫代苯基-16-亚硫酰基(sulfoxy)苯基-17-酮马可氟汀A(式21)，在回流甲苯中除去溶剂，生成15，16-脱氢-16-硫代苯基-17-酮马可氟汀A(式22)。接着，用间-氯过氧苯甲酸处理，制成15，16-脱氢-16-亚硫酰基苯基-17-酮马可氟汀A(式23)。用二乙胺的甲醇对其进行重排，制成15，16-脱氢-14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式9a)。
可用15，16-脱氢-14α-羟基-17-酮马可氟汀A(反应路线N，式9a)合成14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(反应路线N，式35)。即，可用甲基溴化镁或二甲基铜锂处理15，16-脱氢-14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式9a)，制成15α-甲基-14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式34)。用甲硼烷-二甲亚砜复合物将其还原，制成15α-甲基-14α-羟基马可氟汀A(式35)。经过Swern氧化反应用草酰氯和DMSO将15α-甲基-14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式34)转化成15α-甲基-14，17-二酮马可氟汀A(式36)。在Grignard反应中用甲基溴化镁处理制成15α-甲基-14α-羟基-14β-甲基-17-酮马可氟汀A(式37)。用甲硼烷-二甲亚砜复合物将其还原，制成15α-甲基-14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(式38)。
上述方法可用于制备14-取代的马可氟汀B，C和D衍生物。制备例1非对映体混合物形式的16-碘-17-氰基马可氟汀A(式5)
将固体碘化氰(11.7g，76.5mmol)加到马可氟汀A(10.5g，22mmol)的CHCl3(150mL)溶液中，并将反应混合物加热回流直到消耗掉全部马可氟汀A(约5h)。将所得黑色溶液冷却到20-25℃，用CH2Cl2(100mL)稀释，先后用饱和NaHCO3和Na2SO3溶液洗涤。分离有机相，用MgSO4干燥，浓缩至干。对所得粗固体进行硅胶色谱分离(3∶2，EtOAc∶己烷)，得到16-碘-17-氰基马可氟汀A(12.5g，90％)为白色粉末状固体。产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
制备例2 16，17-脱氢-17-氰基马可氟汀A(式6)
将16-碘-17-氰基马可氟汀A(9.5g，15mmol)溶解于MeOH(150mL)，并加入KOH水溶液(45％，3mL)。将反应混合物在20-25℃搅拌2h。加水，过滤收集产生的白色沉淀，并用水洗涤，真空干燥过夜，得到16，17-脱氢-17-氰基马可氟汀A(6.6g，75％)为白色粉末。产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
MS(FAB)M/Z[M+H]：501。
制备例3 17-酮马可氟汀A(式7)
将二氧化硒(2.9g，26mmol)加到16，17-脱氢-17-氰基马可氟汀A(6.0g，10mmol)的95％EtOH(100mL)溶液中，并将反应混合物在20-25℃搅拌2h。加入饱和NaHCO3(100mL)淬灭反应。用CH2Cl2(2×200mL)萃取所得混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)并浓缩，得到7g粗产物。该产物经硅胶色谱纯化(EtOAc)，得到17-酮马可氟汀A(3.6g，75％)为白色固体。产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H33N3O5+H，计算值：492.2498；实测值：492.2478。
或者，更优选地，标题混合物可用对-甲苯磺酸合成。即，将对-甲苯磺酸一水合物(1g)加到16，17-脱氢-17-氰基马可氟汀A(10g)的95％MeOH(50mL)溶液中，并将反应混合物在20-25℃搅拌1h。在混合物中加入三乙胺(2mL)，蒸发除去溶剂。剩余物用10％饱和碳酸钠水溶液(100mL)研制，滤出固体并干燥，得到标题化合物为固体(90％产率)。产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
制备例4 15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式8)
用正丁基锂(1.6M，9.9mL，15.4mmol)的己烷溶液和二异丙胺(2.2mL，15.7mmol)制成二异丙基氨化锂溶液。用无水四氢呋喃(THF，20mL)稀释，并冷却到-78℃。滴加17-酮马可氟汀A(2.0g，4.1mmol)的无水THF(20mL)溶液，让反应混合物经过1h升温至-40℃。再将混合物冷却到-78℃，并滴加苯基氯化硒(19mg，5.2mmol)的THF(10mL)。5min后用饱和NaHCO3(100mL)淬灭反应，CH2Cl2萃取，干燥(MgSO4)并浓缩，得到黄色固体，无需进一步纯化即可使用。将该物质溶解于THF(150mL)，并在0℃用H2O2(30％，1.5mL)处理。撤去冷却浴，将混合物在20-25℃搅拌30分钟。加入NaOH(1N，100mL)淬灭反应。用CH2Cl2(2×200mL)萃取混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)并浓缩，得到粗产物。该产物经硅胶色谱纯化(EtOAc)，得到15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(1.3g，65％)为白色固体。产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]，分析C28H31N3O5+H，计算值：490.2342；实测值：490.2345。
制备例5 14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a)，用氧氮丙啶化学
在-78℃将双(三甲基甲硅烷基)氨化钾的甲苯(0.5M，1mL，0.5mmol)溶液滴加到15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(66mg，0.14mmol)的THF(2mL)溶液中。让所得浅黄色浑浊溶液经过1小时升温至-40℃。再将反应混合物冷却到-78℃，搅拌15分钟，然后滴加2-苯基磺酰基-3-苯基氧氮丙啶(42mg，0.16mmol)的THF(2mL)溶液。搅拌5分钟后加入NaHCO3淬灭反应。用CH2Cl2(2×25mL)萃取混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)并浓缩，得到粗产物。该产物经制备性薄层色谱纯化(硅胶，EtOAc)，得到14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(8mg，12％)为白色固体。产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H31N3O6+H，计算值：506.2291；实测值：506.2280。
还可以从薄层中得到14，15-脱氢-16-羟基-17-酮马可氟汀A(14mg，20％)，其结构可用核磁共振谱测定。
制备例6 14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a)，15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(式11)和14，15-脱氢-16，17-二酮马可氟汀A(式24)，用二氧化硒
将15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(1.29g，2.6mmol)溶解于对-二噁烷(30mL)，并用二氧化硒(390mg)处理。将混合物回流1小时，真空蒸发溶剂。剩余物用二氯甲烷(30mL)研制并过滤。浓缩滤液，剩余物进行硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶EtOAc)，得到14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(430mg，32％)为固体。由该色谱分离还得到15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(式11，212mg，16％)，并由该色谱分离得到14，15-脱氢-16，17-二酮马可氟汀A(式24，106mg，8％)。这些产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
制备例7 15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(式11)
将14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(60mg，式9a)溶解于二氯甲烷(10mL)，并用二氧化锰(60mg)处理。将混合物在20-25℃搅拌1小时并浓缩。剩余物在硅胶上进行制备性薄层色谱分离(50％二氯甲烷的EtOAc)，得到15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(式11，35mg，60％)。这些产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
制备例8 14α-羟基马可氟汀A(式10)
将14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(20mg，0.040mmol)溶解于THF(5mL)，并在0℃用氢化铝锂(1M，0.11mL，0.11mmol)的THF溶液处理。在0℃搅拌混合物0.5h之后加入NaHCO3(10％)。用CH2Cl2(2×10mL)萃取混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)并减压除去溶剂。剩余物在硅胶上进行制备性薄层色谱纯化(10％MeOH的EtOAc)，得到标题化合物。
HRMS(FAB，M/Z)[M+H]分析C28H35N3O5+H，计算值：494.2655；实测值：494.2653。
制备例9 14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式12a)
将14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a，50mg，0.1mmol)溶解于THF(5mL)，并在-78℃用三乙基硼氢化锂的THF(1M，0.7mL)溶液处理。将混合物在-78℃搅拌0.5小时。加入MeOH(1mL)淬灭反应，并浓缩混合物。将所得固体进行硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶CH2Cl2)，得到14α-羟基-17-酮马可氟汀A(43mg，86％)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H33N3O6+H，计算值：508.2447；实测值：508.2437。
制备例10由15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(式11)制备14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式12a)
将15，16-脱氢-14，17-二酮马可氟汀A(470mg，0.93mmol)溶解于THF，并在室温用硼氢化锂的THF(1M，2mL)溶液处理。搅拌混合物2小时后加入NaHCO3(10％)。用CH2Cl2(2×20mL)萃取混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)，并蒸发溶剂。剩余物中含有很容易用硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶EtOAc)的两种差向异构体的混合物：14α-羟基-17-酮马可氟汀A(90mg，19％)和14β-羟基-17-酮马可氟汀A(94mg，20％)。两种产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
制备例11由14α-羟基-17-酮马可氟汀A(式12a)制备14α-羟基马可氟汀A(式10)
将14α-羟基-17-酮马可氟汀A(413mg，0.81mmol)溶解于THF(20mL)，并在0℃用甲硼烷-THF复合物的THF(1M，2.43mL)溶液处理。将混合物搅拌2.25小时。搅拌混合物0.5小时后加入MeOH(3mL)。蒸发溶剂后剩余物经硅胶色谱分离(1∶16，MeOH∶EtOAc)，得到14α-羟基马可氟汀A(250mg，基于回收的起始原料产率为92％)和14α-羟基-17-酮马可氟汀A(基于起始原料，140mg，34％)。
制备例12 14，17-二酮马可氟汀A(式13)
在-78℃用二甲亚砜(45μL)处理草酰氯(40μL)的无水CH2Cl2(5mL)溶液。在-78℃搅拌混合物1小时。滴加14α-羟基-17-酮马可氟汀A(27mg)的CH2Cl2(2mL)。在-78℃搅拌反应混合物20分钟。将三乙胺(0.3mL)加到反应混合物中，并在20分钟内升至室温。将混合物在10％Na2CO3(10mL)和CH2Cl2(10mL)之间分配。干燥(MgSO4)有机相并浓缩。剩余物经硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶CH2Cl2)，得到14，17-二酮马可氟汀A(22mg，80％)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H31N3O6+H，计算值：506.2291；实测值：506.2280。
制备例13  14α-羟基-14β-甲基-17-酮马可氟汀A(式14a)
在-78℃用甲基溴化镁(3M，0.16mL，0.48mmol)的Et2O溶液处理-78℃的14，17-二酮马可氟汀A(16mg，0.032mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液。在-78℃搅拌混合物0.5小时。加入10％Na2CO3(几滴)淬灭反应。混合物用CH2Cl2(10mL)稀释，干燥(MgSO4)和浓缩。剩余物经硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶CH2Cl2)，得到14α-羟基-14β-甲基-17-酮马可氟汀A(8mg，50％，Rf＝0.25)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C29H35N3O6+H，计算值：522.2604；实测值：522.2620。
经过色谱分离还得到14β-羟基-14α-甲基-17-酮马可氟汀A(1.2mg，7％，Rf＝0.4)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C29H35N3O6+H，计算值：522.2604；实测值：522.2630。
如果反应溶剂用THF代替CH2Cl2，则所得产物的比值将从6∶1增加到大于50∶1，产率增加到80％。
制备例14  14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(式15)
在0℃用氢化铝锂(1M，0.03mL，0.03mmol)的THF溶液处理14α-羟基-14β-甲基-17-酮马可氟汀A(5mg，0.01mmol)的THF(5mL)溶液。在0℃搅拌混合物0.5小时后加入NaHCO3(10％)。用CH2Cl2(2×5mL)萃取混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)并蒸发溶剂。剩余物经在硅胶上进行制备性薄层色谱分离(1∶20，MeOH∶CH2Cl2)，得到14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(2mg，40％)。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C29H37N3O5+H，计算值：508.2811；实测值：508.2816。
制备例15 14-酮马可氟汀A(式16)
在-78℃用DMSO(170μL)处理草酰氯(150μL)的无水CH2Cl2(20mL)溶液。在-78℃搅拌混合物1小时。滴加14α-羟基马可氟汀A(110mg)的CH2Cl2(5mL)溶液，在-78℃搅拌反应混合物20分钟。将三乙胺(1mL)加到反应混合物中，并在20分钟内升至室温。将混合物在10％Na2CO3(20mL)和CH2Cl2(20mL)之间分配。干燥(MgSO4)有机相并浓缩。剩余物经硅胶色谱分离(1∶25，MeOH∶CH2Cl2)，得到14-酮马可氟汀A(82mg，75％)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H33N3O5+H，计算值：492.2498；实测值：492.2510。
制备例16 14β-羟基马可氟汀A(式17)
在0℃用硼氢化钠(5mg)处理14-酮马可氟汀A(10mg)的MeOH(2mL)溶液。在0℃搅拌混合物0.5小时后加入NaHCO3(10％)溶液。混合物用CH2Cl2(2×10mL)萃取。合并萃取液。干燥(MgSO4)并蒸发溶剂。剩余物在硅胶上进行制备性薄层色谱分离(1∶16 MeOH∶EtOAc)，得到14β-羟基马可氟汀A(5mg，50％)。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H35N3O5+H，计算值：494.2655；实测值：494.2653。
制备例17 14α-羟基马可氟汀A N-氧化物(式18)
在0℃用间-氯过氧苯甲酸(15mg)处理14α-羟基马可氟汀A(15mg)的CH2Cl2(3mL)溶液。在0℃搅拌混合物0.5小时后用三乙胺(30μL)处理并浓缩。剩余物在硅胶上进行制备性薄层色谱分离(1∶8，MeOH∶CH2Cl2)，得到14α-羟基马可氟汀A N-氧化物(12mg，80％)。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H35N3O6+H，计算值：510.2604；实测值：510.2615。
制备例18  14α-羟基-14β-乙基马可氟汀A(式19)
在-78℃用乙基溴化镁(3M，0.15mL，0.45mmol)的Et2O溶液处理-78℃的14-酮马可氟汀A(25mg，0.05mmol)的THF(5mL)溶液。在-78℃搅拌所得混合物0.5小时。允许用20分钟时间让反应混合物升至室温。加入10％Na2CO3(几滴)淬灭反应。混合物用CH2Cl2(10mL)稀释，干燥(MgSO4)和浓缩。剩余物经硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶CH2Cl2)，得到14α-羟基-14β-乙基马可氟汀A(10mg，45％)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C30H39N3O5+H，计算值：522.2968；实测值：522.2983。
制备例19由14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A制备14β-甲基马可氟汀A
在-78℃将双(三甲基甲硅烷基)氨化钾的甲苯(0.5M，1mL，0.5mmol)溶液滴加到14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(66mg，0.14mmol)的THF(2mL)溶液中。让所得浅黄色浑浊溶液经过1小时升温至-40℃。再将反应混合物冷却到-78℃，搅拌15分钟，然后滴加氯硫羰甲酸苯酯(0.094mL，0.7mmol)的THF(2mL)溶液。10分钟后撤掉干冰浴。继续反应3小时后加入NaHCO3淬灭反应。用CH2Cl2(2×25mL)萃取混合物。合并萃取液，干燥(MgSO4)并浓缩，得到粗产物。该产物经制备性薄层色谱纯化(硅胶，EtOAc)，得到14α-O-苯氧基硫代羰基-14β-甲基马可氟汀A。
在14α-O-苯氧基硫代羰基-14β-甲基马可氟汀A(64mg，0.1mmol)的甲苯(5mL)溶液中先后加入AIBN(3.3mg)和三丁基氢化锡(54μL，0.2mmol)。将混合物回流3小时。蒸发溶剂后剩余物经制备性薄层色谱纯化(硅胶，EtOAc)，得到14β-甲基马可氟汀A。该产物的结构可用核磁共振谱和质谱测定。
制备例20 17-酮马可氟汀A(式7)的另一种合成方法
用1小时在回流状态的马可氟汀A(65g，0.136mol)和碳酸氢钠(137g，1.63mol)的四氢呋喃(THF，2L)和水(1.25L)中滴加碘(206g，0.81mol)的THF(1.25L)。(或者，混合物可以在室温搅拌16小时。)将其缓慢(2.5小时)冷却至室温后用饱和硫代硫酸钠(Na2S2O3，1.5L)淬灭反应。用乙酸乙酯萃取(2×1L)。合并的有机相用饱和硫代硫酸钠(1L)洗涤，干燥(MgSO4)，过滤，蒸发并在真空炉(65℃)中干燥过夜，得到62g粗17
-酮马可氟汀A(式7)为黄色固体。
1H NMR(300
MHz，CDCl3)：δ7.68(s，1H)，6.80(d，1H)，6.70(d，1H)，6.32(d，1H)，4.90(d，1H)，3.75(q，2H)，3.23(t，1H)，3.09(s，3H)，2.80(d，1H)，2.65(d，1H)，2.49-2.21(m，2H)，2.08(d，1H).1.98-1.45(m，5H)，1.46(s，3H)，1.44(s，3H)，1.09(s，3H)，0.90(s，3H).
或者，用IC1(氯化碘)代替碘。
制备例21 16-二硫代苯基-17-酮马可氟汀A(式20)
将粗17-酮马可氟汀A(5g，10.2mmol)通过在-78℃的THF(150mL)中的套管加到LDA溶液中，LDA溶液是通过将n-BuLi(1.6M，24.8mL，0.04mol)滴加到0℃的二异丙胺(5.7mL，0.041mol)的THF(100mL)中制成的。允许用1小时时间将反应混合物缓慢升至-50℃，然后用苯基二硫化物(4.4g，0.02mol)处理所得浑浊的红棕色混合物。立即用饱和碳酸氢钠溶液(100mL)淬灭反应，并用二氯甲烷(CH2Cl2，300mL)萃取。干燥(MgSO4)有机相，浓缩(8g)，并在硅胶上进行色谱分离(120g，60％乙酸乙酯/己烷作洗脱剂)，得到标题混合物为米白色固体(4.4g，从马可氟汀A算起产率为61％)。
FAB-MS 708(M++H)；1H NMR(300MHz，CDCl3)δ 7.74(8，1H)，7.71(d，2H)，7.64(d，2H)，7.45-7.30(m，6H)，6.81(d，1H)，6.72(d，1H)，6.32(d，1H)，4.91(d，1H)，3.70(q，2H)，3.16(t，1H)，3.01(s，3H)，2.75(d，1H)，2.53(dt，1H)，2.35(dt，1H)，2.15-1.50(m，5H)，1.47(s，3H)，1.45(s，3H)，1.06(s，3H)，0.82(s，3H).
制备例22  16-硫代苯基-16-亚硫酰基(sulfoxy)苯基-17-酮马可氟汀A(式21)
在-78℃氮气中用15分钟时间向16-二硫代苯基-17-酮马可氟汀A(10g，14mmol)的CH2Cl2(250mL)中滴加间-氯过氧苯甲酸(m-CPBA，60％，4.2g，15.5mmol)的CH2Cl2(200mL)。立即用饱和硫代硫酸钠(200mL)淬灭反应，用NaHCO3(200mL)稀释，并用CH2Cl2(200mL)萃取。干燥(MgSO4)，接着减压浓缩，得到11g粗16-硫代苯基-16-亚硫酰基苯基-17-酮马可氟汀A(式21)。
1H NMR
(300MHz，CDCl3)δ 8.0-7.29(m，11H)，6.80(d，1H)，6.70(d，1H)，6.31(d，1H)，4.90(d，1H)3.68(d，1H)，3.41(d，1H)，3.14(t，1H)，3.07(s，3H)，2.82(dt，1H)，2.80-2.65(m，2H)，2.16(dt，1H)，2.05-1.1(m，4H)，1.47(s，3H)，1.43(s，3H)，0.96(s，3H)，0.83(s，3H).
制备例23  16-硫代苯基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式22)
将16-硫代苯基-16-亚硫酰基苯基-17-酮马可氟汀A(式21，11g)在甲苯(250mL)中回流45分钟。冷却到室温，用饱和碳酸氢钠(300mL)稀释，并用EtOAc(300mL)萃取。干燥(MgSO4)有机相并浓缩，得到10.6g粗16-硫代苯基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式22)。
FAB-MS 598(M++
H)；HRMS M/Z(M++H，C34H35N3O5S+H1)，calc.598.2376，obsd.598.2387.1HNMR(300 MHz，CDCl3)8.18(s.1H)，7.55-7.45(m，2H)，7.29-7.45(m，3H)，6.83(d，1H)，6.70(d，1H)，6.34(d，1H)，5.92(dt，1H)，4.91(d，1H)，3.87(q，2H)，3.30(dd，1H)，3.21(t，1H)，3.08(s，3H)，2.80(d，1H)，2.35(dd，1H)，2.10(d，1H)，2.03(dd，1H)，1.78(dd，1H)，1.46(s，3H)，1.44(s，3H)，1.11(s，3H)，0.88(s，3H).
制备例24  16-亚硫酰基苯基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式23)
在-78℃的粗16-硫代苯基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式22，10.6g)的二氯甲烷(300mL)中滴加m-CPBA(64％，2.8g)的CH2Cl2(125mL)。用饱和硫代硫酸钠(300mL)和饱和碳酸氢钠(300mL)淬灭反应，然后用二氯甲烷(300mL)萃取。干燥(MgSO4)有机相，过滤并浓缩，得到13g粗16-亚硫酰基苯基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式23)。
1H NMR(300MHz，CDCl3)7.75-7.3(m，5H)，6.81(s，1H)，6.75-6.6(m，2H)，6.31(d，1H)，4.90(d，1H)，3.78-3.58(m，2H)，3.22(t，1H)，2.98(s，3H)，2.88-2.45(m，2H)，2.12-1.55(m，5H)，1.46(s，3H)，1.44(s，3H)，1.12(s，3H)，0.88(s，3H).
制备例25  14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a)
在粗16-亚硫酰基苯基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式23，13g)的无水MeOH(10/1，300mL)中加入二乙胺(15mL)。回流0.5小时后将反应混合物冷却到室温。用水(450mL)稀释，然后用CH2Cl2(500mL)萃取。干燥(MgSO4)，然后浓缩，经硅胶色谱纯化(130g，30％丙酮/CH2Cl2为洗脱剂)，得到14α-羟基-15，16-脱氢-17-酮马可氟汀A(式9a，3.6g，从16-二硫代苯基-17-酮马可氟汀A算起产率为50％)为白色固体。
制备例26  14α-羟基-14β-乙烯基马可氟汀A(式30)
用-78℃的乙烯基溴化镁(1M，4.0mL，4mmol)的THF处理-78℃的14-酮马可氟汀A(200mg，0.4mmol)的THF(5mL)溶液。将所得混合物在-78℃搅拌2小时，然后升至室温。在室温搅拌2小时后加入10％Na2CO3(3mL)淬灭反应。混合物用CH2Cl2(30mL)稀释，用饱和氯化铵溶液洗涤，干燥(MgSO4)并浓缩。剩余物经硅胶色谱纯化(6∶4，己烷∶丙酮)，得到14α-羟基-14β-乙烯基马可氟汀A(120mg，60％，Rf＝0.45)为白色固体。1H NMR
(300MHz，CDCl3)δ 7.86(s，NH)，6.78 & 6.67(d，J＝8.1Hz，C4-H & C5-H)，6.32(d，J＝7.7Hz，C24-H)，6.58(dd，J＝17.4，10.9Hz，1H，vinyl)，5.43(d，J＝17.4Hz，1H，乙烯基)，5.18(d，J＝10.9Hz，1H，乙烯基)，4.89(d，J＝7.7Hz，C25-H)，3.7(br，1H)，3.11(s，3H，N-Me)，2.95(t，1H，C20-H)，2.8-1.5(m，12H)，1.44(s，6H，C27-H & C28-H)，1.08(s，3H)，0.82(s，3H).MS(FAB)M/Z[M+H]：520
制备例27  14α-羟基-14β-甲基马可氟汀AN-氧化物(式32)
于0℃用间-氯过氧苯甲酸(20mg)处理14α-羟基马可氟汀A(30mg)的CH2Cl2(3mL)溶液。搅拌混合物0.5小时后将其在5％碳酸氢钠水溶液(10mL)和二氯甲烷(20mL)之间分配。分离各相，水相用二氯甲烷(10mL)萃取。合并的萃取液用硫酸镁干燥，过滤，并在0℃真空蒸发。用三乙胺处理并浓缩，得到标题化合物为固体(20mg)。
1H NMR(300MHz，CD3OD)δ 6.91 & 6.70(d，J＝8.1Hz，C4-H & C5-H)，6.36(d，J＝7.7Hz，C24-H)，4.91(d，J＝7.7Hz，C25-H)，4.08 & 3.76(AB q，J＝12.9Hz，2H，C12-H)，3.5-3.1(m，4H)，3.12(s，3H，N-Me)，2.8-1.6(m，7H)，1.46 & 1.44(2s，6H，C27-H&C28-H)，1.50(s，3H，C14-Me)，1.20(s，3H)，0.93(s，3H).
制备例28  14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(式35)
将14α-羟基-15α-甲基-17-酮马可氟汀A(90mg，0.18mmol)溶解于THF(10mL)，并用0℃甲硼烷-二甲亚砜复合物(12M，0.18mL)处理。在0℃搅拌混合物2小时后加入MeOH(0.4mL)，并继续搅拌1小时。蒸发溶剂后剩余物进行硅胶色谱分离(30∶70，丙酮∶二氯甲烷)，得到14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(20mg)为固体。
1H NMR(300MHz，
CDCl3)δ8.39(s，NH)，6.79 &6.70(d，J＝8.1Hz，C4-H&C5-H，(d，J＝7.7Hz，C24-H)，4.91(d，J＝7.7Hz，C25-H)，3.81(br，1H，C14-H，3.67(d，1H，J＝11.7HzC12-H)，3.03(t，1H，C20-H)，3.11(s，3H，N-Me)，2.68 & 1.86(d，2H，J＝15.7Hz，C10-H)，2.7-1.2(m，8H)，1.44(2s，6H，C27-H & C28-H)，1.02(d，3H，J＝6.8Hz，C15-Me)，1.11(s，3H)，0.85(s，3H).HRMS(FAB)M/Z[M+H]计算值：C29H37N3O5+H：508.2811；实测值：508.2840.
制备例29  14，17-二酮-15α-甲基马可氟汀A(式36)
在-78℃用DMSO(45μL)处理草酰氯(40μL)的无水CH2Cl2(5mL)溶液。在-78℃搅拌混合物1小时。滴加14α-羟基-15α-甲基-17-酮马可氟汀A(27mg)的CH2Cl2(2mL)溶液。在-78℃搅拌反应混合物20分钟。将三乙胺(0.3mL)加到反应混合物中，并在20分钟内将其升至室温。将混合物在10％Na2CO3(10mL)和CH2Cl2(10mL)之间分配。干燥(MgSO4)有机相并浓缩。剩余物经硅胶色谱分离(1∶20，MeOH∶CH2Cl2)，得到14，17-二酮马可氟汀A(22mg，80％)为白色固体。该产物的结构可用NMR谱仪和质谱测定。
HRMS(FAB)M/Z[M+H]分析C28H31N3O6+H，计算值：506.2291；实测值：506.2280。
制备例3014α-羟基-14β-甲基-15α-甲基-17-酮马可氟汀A(式37)
在-78℃用甲基溴化镁(3M，0.2mL，0.6mmol)的Et2O溶液处理-78℃的14，17-二酮-15α-甲基马可氟汀A(25mg，0.05mmol)的CH2Cl2(5mL)溶液。在-78℃搅拌所得混合物0.5小时。加入10％Na2CO3(几滴)淬灭反应。混合物用CH2Cl2(10mL)稀释，干燥(MgSO4)和浓缩。剩余物经硅胶色谱分离(1∶25，MeOH∶CH2Cl2)，得到14α-羟基-14β-甲基-15α-甲基-17-酮马可氟汀A(16mg，62％)为白色固体。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ8.13(s，1H)，6.78(d，1H)，6.70(d，1H)，6.33(d，1H)，4.91(d，1H)，3.75(q，2H)，3.16(t，1H)，3.05(s，3H)，2.78(d，1H)，2.68-2.57(m，1H)，2.42-2.0(m，6H)，1.64(s，3H)，1.45(s，3H)，1.44(s，3H)，1.11(s，3H)，1.04(d，3H)，0.92(d，3H).
制备例31  14α-羟基-14β-甲基-15α-甲基马可氟汀A(式38)
将14α-羟基-14β-甲基-15α-甲基-17-酮马可氟汀A(15mg，0.028mmol)溶解于THF(10mL)，并于0℃用甲硼烷-二甲亚砜复合物(10M，0.02mL)处理。在0℃搅拌混合物2小时后加入MeOH(0.4mL)，并继续搅拌1小时。蒸发溶剂后剩余物进行硅胶色谱分离(30∶70，丙酮∶二氯甲烷)，得到14α-羟基-14β-甲基-15α-甲基马可氟汀A(4mg，29％)为固体。
1H NMR(300MHz，CDCl3)δ7.82(s，1H)，6.79(d，1H)，6.67(d，1H)，6.33(d，1H)，4.90(d，1H)，3.65(d，1H)，3.09(s，3H)，2.98(t，1H)，2.69(d，1H)，2.60-2.22(m，7H)，2.06(dd，1H)，1.87(d，1H)，1.85-1.75(m，1H)，1.44(s，6H)，1.43(s，3H)，1.10(s，3H)，0.94(d，3H)，0.86(s，3H).
实施例1 15α-乙基-14α-羟基-17-氧马可氟汀A(II)
在0℃向碘化铜(I)(0.18g，0.95mmol)的THF(10mL)中滴加乙基溴化镁(1M于THF，2mL，2mmol)。在0℃搅拌0.25h后滴加0℃的14α-羟基-15，16-脱氢-17-氧马可氟汀A(I，0.1g，0.2mmol)。1小时后用氯化铵(饱和的，25mL)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(2×25mL)萃取。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到剩余物。将剩余物进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷4/96)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.75，6.80，6.70，6.32，4.91，4.66，3.75，3.20，3.06，2.79，2.09，2.40-1.50，1.48，1.44，1.11，1.02和0.90δ；MS(FAB，M/Z)[M+H]＝536.
实施例2 15α-乙基-14α-羟基马可氟汀A(III)
将15α-乙基-14α-羟基-17-氧马可氟汀A(I，实施例1，40mg，0.075mmol)溶解于THF(5mL)，并在0℃用甲硼烷-二甲亚砜复合物(10M，0.08mL，0.8mmol)处理。将混合物在0℃搅拌1小时，然后用甲醇(0.2mL)淬灭反应，并在20-25℃搅拌0.25小时。除去溶剂后得到剩余物。将剩余物进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷4/96)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.85，6.80，6.67，6.33，4.90，3.92，3.67，3.10，3.01，2.69，1.87，2.65-1.20，1.45，1.44，1.12，0.97和0.88δ；HRMS(FAB，M/Z)[M+H]  计算值：C30H39N3O5+H＝522.2968，实测值：＝522.2958.
实施例3 14α-羟基-15α-乙烯基-17-氧马可氟汀A(IV)
基本上沿用实施例1方法，但用乙烯基溴化镁(1M于THF，39.5mL，0.04mol)代替乙基溴化镁，得到标题化合物。
NMR(400MHz，
CDCl3)7.69，6.80，6.71，6.32，4.91，6.11-5.95，5.32-5.20，4.50，3.21，3.08，3.07-3.0，2.80，2.10，2.66，2.32，2.20-1.80，1.46，1.44，1.11和0.89δ.
实施例4 14α-羟基-15α-(1′，2′-二羟基乙基)-17-氧马可氟汀A(V)
将四氧化锇的2-甲基-2-丙醇(2.5/97.5，1.9mL)溶液，4-甲基吗啉N-氧化物(1.9g，0.016mol)和14α-羟基-15α-乙烯基-17-氧马可氟汀A(IV，实施例3，1.9g，0.0035mol)合并，并在20-25℃的丙酮/水(9/1，100mL)中搅拌6小时。将反应混合物在水(200mL)和二氯甲烷(250mL)之间分配。有机相用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到剩余物。将剩余物进行色谱纯化(硅胶：甲醇/二氯甲烷10/90)，得到标题化合物。HRMS(FAB，M/Z)[M+H]分析C30H37N3O8+H，计算值：568.2659；实测值：568.2670。
实施例5 14α-羟基-15α-羟甲基-17-氧马可氟汀A(VI)向0℃的14α-羟基-15α-(1′，2′-二羟基乙基)-17-氧马可氟汀A(V，实施例4，1g，1.8mmol)的乙醇(100mL)中滴加过碘酸钠(0.68g于40mL水中)。在0℃搅拌10分钟后加入硼氢化钠，并在0℃继续搅拌所得混合物10分钟。用盐水(150mL)淬灭反应，用二氯甲烷(200mL)萃取。有机相用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到剩余物。将剩余物进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷5/95)，得到标题化合物。
NMR(400
MHz，CDCl3)7.73，6.81，6.71，6.32，4.92，4.72，4.06，3.83，3.76，3.21，3.06，2.90-2.30，2.80，2.10，2.22，2.01，1.46，1.44，1.12和0.89δ；MS(FAB，M/Z)[M+H]＝538.
实施例6 15α-氟甲基-14α-羟基-17-氧马可氟汀A(VII)
将14α-羟基-15α-羟甲基-17-氧马可氟汀A(VI，实施例5，0.06g，0.1mmol)，四丁基氟化铵(1M于THF，0.66mL，0.66mmol)和对-甲苯磺酰氟(0.075g，0.43mmol)合并，并在THF(10mL)中回流0.5h。将混合物冷却并浓缩。将浓缩物进行色谱纯化(硅胶)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.93，6.80，6.70，6.32，4.90，4.80-4.50，4.67，3.75，3.21，3.06，2.78，2.15，2.70-1.50，1.46，1.44，1.12和0.89δ.
实施例7 15α-氟甲基-14α-羟基马可氟汀A(VII)
将15α-氟甲基-14α-羟基-17-氧马可氟汀A(VII，实施例6，15mg，0.027mmol)溶解于THF(5mL)，并在0℃用甲硼烷-四氢呋喃复合物(1M于THF，0.15mL，0.15mmol)处理。将混合物在0℃搅拌1.5h，然后用甲醇(0.75mL)淬灭反应，并在20-25℃搅拌0.25h。除去溶剂后得到剩余物。将剩余物进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷5/95)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.57，6.80，6.68，6.33，4.90，4.75-4.30，4.09，4.80，3.50，3.12，3.05，2.70，1.88，2.80-1.40，1.45，1.44，1.12和0.86δ；HRMS(FAB，M/Z)[M+H]计算值 C29H36FN3O5+H＝526.2717，实测值＝526.2727.
实施例8 14，15-脱氢-15-甲基马可氟汀A(IX)
在20-25℃将二乙氨基三氟化硫(DAST，0.15mL，1.1mmol)滴加到溶解于二氯甲烷(15mL)的14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(III，n1＝0，0.2g，0.39mmol)中。搅拌5分钟后将反应混合物在水(25mL)和二氯甲烷(25mL)之间分配。用硫酸镁干燥有机相，过滤，减压浓缩，剩余物经色谱纯化(硅胶)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.67，6.81，6.68，6.33，4.90，5.46，3.66，3.14，3.10，2.70，1.88，2.75-2.54，2.30，1.92，1.78，1.46，1.44，1.12和 0.86δ.
实施例9 14，15-脱氢-16α-羟基-15-甲基马可氟汀A(X)
将二氧化硒(8mg，0.07mmol)和14，15-脱氢-15-甲基马可氟汀A(IX，实施例8，30mg，0.06mmol)在对-二噁烷中回流1.5小时。减压浓缩之后进行色谱纯化(硅胶)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.60，6.81，6.69，6.32，4.90，5.55，3.75，2.53，3.67，3.14，3.10，2.88-2.70，2.30，1.90，1.95-1.50，1.46，1.45，1.11，和0.87δ；MS(FAB，M/Z)[M+H]＝506.
实施例10  14α-羟基-16，17-二氧-15α-甲基马可氟汀A(XI)
将14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(III，100mg)溶解于二噁烷/水(3/1，20mL)，并用钯炭(10％，1g)处理。将所得混合物置于氧气中(用气球)，并在20-25℃搅拌16小时。滤除催化剂后将溶液在碳酸氢钠水溶液(10％)和二氯甲烷之间分配。分离有机相，硫酸镁干燥并浓缩。浓缩物进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷5/95)。收集适当的馏分，得到浓缩的四种化合物：
(1)14α-羟基-16，17-二氧-15α-甲基马可氟汀A，NMR(400MHz，CDCl3)8.35，
6.82，6.71，6.32，4.90，4.53，3.90，3.76，3.4-3.3，3.26，3.00，2.80，2.14，2.20，1.98，1.45，1.43，1.31，1.12 and 0.86δ；HRMS(FAB，M/Z)[M+H]计算值C2H3N3O7+H＝536.2397，实测值＝536.2392；
(2)14α-羟基-16-氧-15α-甲基对郝青酰胺B，
NMR(400MHz，CDCl3)7.81，6.82，6.72，6.33，4.91，4.94，3.73，3.53，3.4-3.3，3.26，3.06，2.82，2.04，2.9-2.8，1.9-2.1，1.46，1.44，1.27，1.11和0.88δ；HRMS(FAB，M/Z)[M+H]  计算值：C28H33N3O6+H＝508.2447，
实测值＝508.2453，
(3)14α-羟基-17-氧-15α-甲基马可氟汀A，
NMR(400MHz，CDCl3)7.89，6.80，6.71，6.32，4.91，4.35，3.65，3.20，3.06，2.79，2.09，1.9-2.5，1.46，1.44，1.13，1.12和0.88δ；
(4)14α-羟基-16-羟基-17-氧-15α-甲基马可氟汀A，HRMS(FAB，M/Z)[M+H]分析C29H35N3O7+H，计算值：538.2553；实测值：538.2544。
实施例11  14α-羟基-16-氧-15α-甲基对郝青酰胺B(XII)
将14α-羟基-16，17-二氧-15α-甲基马可氟汀A(XI，实施例10)溶解于二氯甲烷(5mL)，并用间-氯过苯甲酸(65％纯，30mg)处理。将所得混合物在20-25℃搅拌1.5小时。混合物在二氯甲烷(20mL)和碳酸钾(10％水溶液，20mL)之间分配。分离有机相，硫酸镁干燥并浓缩。浓缩物进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷5/95)，得到标题化合物。
NMR(400 MHz，CDCl3)NMR(400 MHz，CDCl3)7.81，6.82，6.72，6.33，4.91，4.94，3.73，3.53，3.4-3.3，3.26，3.06，2.82，2.04，2.9-2.8，1.9-2.1，1.46，1.44，1.27，1.11和0.88δ.
实施例12 14α-羟基-15α-甲基对郝青酰胺B(XIII)
在-60℃用氯化铝(15mg，3批)处理氢化铝锂(1M的THF溶液，0.21mL)的THF(10mL)。搅拌混合物使温度升至-25℃，然后缓慢加入14α-羟基-16-氧-15α-甲基对郝青酰胺B(XII，实施例11，20mg，2mL，在THF中)。将混合物在-25℃搅拌20分钟。先后在混合物中加入甲醇(0.8mL)和氰基硼氢化钠(50mg)。将所得混合物升至20-25℃并浓缩。浓缩物在二氯甲烷(20mL)和碳酸钾(10％水溶液，20mL)之间分配。分离有机相，硫酸镁干燥并浓缩。浓缩物进行色谱纯化(硅胶；丙酮/己烷40/60)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.56，6.82，6.69，6.32，4.90，4.42，3.64，2.62，3.08，3.04，2.9-1.5，1.46，1.45，1.12，1.08 and 0.86δ；HRMS(FAB，M/Z)[M+H]  计算值
C28H35N3O5+H＝494.2662，实测值＝494.2655.
实施例13  16，17-二氧马可氟汀A(XV)，16-氧对郝青酰胺B(XVI)，15-羟基-16-氧对郝青酰胺B，15，16-二氧对郝青酰胺B
将马可氟汀A(XIV，1.1g，2.3mmol)溶解于二噁烷/水(3/1，150mL)，并用钯炭(10％，10g)处理。将所得混合物置于氧气中(用气球)，并在20-25℃搅拌48小时。滤除催化剂后将所得混合物在二氯甲烷和水之间分配。分离有机相，硫酸镁干燥，过滤并减压蒸发，得到剩余物。将剩余物进行色谱纯化(硅胶；丙酮/二氯甲烷30/70)，得到：
(1)16，17-二氧马可氟汀A，
NMR(400MHz，CDCl3)7.69，6.81，6.74，6.32，4.92，3.95，3.80，3.32，3.15，3.14-2.70，2.19-1.86，1.47，1.45，1.12和0.88δ；
(2)16-氧对郝青酰胺B，NMR(400MHz，CDCl3)7.81，6.80，6.71，6.32，4.91，3.74，3.52，3.29，3.08，3.0-2.85，2.80，2.00，2.55-2.49，2.08-1.75，1.46，1.44，1.10和0.88δ；HRMS(FAB，M/Z[M+H])计算值：C27H31N3O5+H＝478.2342，实测值＝478.2384；
(3)15-羟基-16-氧对郝青酰胺B，NMR表明是非对映体，HRMS(FAB，M/Z)[M+H]分析C27H31N3O6+H，计算值：494.2291；实测值：494.2292。
(4)15，16-二氧对郝青酰胺B，NMR(400MHz，CDCl3)7.60，6.83，6.74，6.32，4.92，4.12，3.84-3.70，3.46，3.14，2.89，2.13，2.50，2.25，1.95，1.47，1.45，1.11和0.90δ；HRMS(FAB M/Z[M+H])计算值：C27H29N3O6+H＝492.2134，
实测值＝492.2141.
实施例14  14，15-脱氢-16-氧对郝青酰胺B(XVII)
将用正丁基锂(1.6M于己烷，1.2mmol，0.78mL)制备的二异丙基氨化锂和二异丙胺(1.3mmol，0.17mL)的THF(4mL)混合物冷却到-60℃。滴加16-氧对郝青酰胺B(XVI，实施例13，0.15g，0.3mmol)的THF(1.5mL)混合物，并用0.25小时将反应混合物升至-20℃。滴加苯基二氯氧化硒(0.075g，0.39mmol)的THF(1mL)，5分钟后用饱和碳酸氢钠(20mL)淬灭。用二氯甲烷(30mL)萃取反应混合物，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到固体，它无需进一步纯化即可使用。将该物质溶解于THF(8mL)，并在0℃用过氧化氢(30％，0.12mL)处理。撤掉冷却浴，在20-25℃搅拦反应混合物0.25小时。用氢氧化钠(1N，10mL)淬灭反应，二氯甲烷(30mL)萃取，硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，经色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷5/95)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.78，7.36，6.25，6.81，6.70，6.32，4.91，3.96，3.60，3.36，3.09，2.88，2.09，2.36，1.56，1.46，1.45，1.06和0.88δ；HRMS(FAB，M/Z)[M+H]计算值：C27H29N3O5+H＝476.2185，实测值：＝476.2195.
实施例15 14α-羟基-15α-甲基-2-脱氧马可氟汀A(XXI)
在0℃向14α-羟基-15α-甲基-17-氧马可氟汀A(XIX，21g，0.04mol)的THF(1.3L)中滴加甲硼烷-二甲亚砜复合物(12M，40mL，0.48mol)。将所得混合物在0℃搅拌2.5小时，然后慢慢滴加甲醇(50mL)淬灭反应。减压除去溶剂，得到剩余物。将其进行色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷3/97)，得到14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A和14α-羟基-15α-甲基-2-脱氧马可氟汀A。NMR(400MHz，CDCl3)δ 6.66，6.40，6.29，4.79，3.92，3.41，3.78，3.55，2.92，2.62，2.35，2.25，2.26，2.15，2.10-1.40，1.40，1.04，1.02，0.89，0.91；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值：C29H39N3O4+H＝494.3019，
实测值＝494.3208.
实施例16 2-脱氧马可氟汀A(XXIII)
在0℃向马可氟汀A(XXII，0.16g，0.335mmol)的THF(25mL)中滴加铝烷-N，N-二甲基乙胺复合物(0.5M，2.6mL，13.4mmol)。将所得混合物在0℃搅拌1小时，然后慢慢滴加甲醇(5mL)淬灭反应。减压除去溶剂，得到剩余物。将其进行色谱纯化(硅胶；丙酮/二氯甲烷30/70)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)δ6.67，6.40，6.29，4.79，3.91，3.40，3.57，2.36，2.95，2.30-2.05，1.95-1.25，1.39，0.88，0.85；CMR(CDCl3，100MHz)δ175.40，146.26，143.77，139.74，137.06，126.78，120.11，114.88，114.19，79.67，63.66，61.13，61.05，60.74，56.23，54.68，45.77，41.92，32.15，31.94，31.83，30.30，26.28，26.19，23.38，21.13，19.75；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值C28H37N3O3+H＝464.2913，实测值＝464.2929.
实施例17 C-2-脱氧对郝青酰胺A
在20-25℃的氮气下向对郝青酰胺A(0.05g，0.1mmol)的四氢呋喃(THF，6mL)中滴加铝烷-N，N-二甲胺复合物(0.5M于甲苯，2mL，1mmol)。将所得混合物搅拌0.5小时，然后用甲醇(1mL)淬灭反应。减压浓缩混合物，得到剩余物。将其进行色谱纯化(硅胶；丙酮/二氯甲烷30/70)，得到标题化合物。
NMR(400 MHz，
CDCl3)6.69，6.30，4.80，3.94，3.51，3.39，3.19，2.92，2.53，2.38-2.12，2.08，1.95-1.74，1.65，1.43，0.92 & 0.89δ；HRMS(FAB，M/Z[M+H]计算值：C28H37N3O4+H＝480.2862，实测值＝480.2869.
实施例18  N(1)-苯氧羰基马可氟汀A(XXVII)
将马可氟汀A(XXVI，2.4g，5.0mmol)的THF(120mL)和氢化钾(35wt％，0.7g，6.2mmol)在20-25℃搅拌1小时。加入氯甲酸苯酯(1.2mL，9.6mmol)。将混合物搅拌0.5小时，用碳酸钾溶液(10％，50mL)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(150mL)萃取。有机相用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。剩余物用乙醚/己烷研制，滤出沉淀并收集，干燥后得到标题化合物为固体。NMR(400MHzCDCl3)0.89，1.08，1.2-3.0，1.45，1.49，3.06，3.69，4.83，6.26，6.89和7.2-7.5δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值C35H39N3O6+H+＝598.2917，实测值＝598.2919.
实施例19  N(1)-叔丁氧羰基马可氟汀A(XXVII)
将马可氟汀A(XXVI)的THF/二氯甲烷(50mL/50mL)和氢化钾(35wt％，0.62g，5.5mmol)在20-25℃搅拌1小时。加入二碳酸二叔丁酯(3.4g，15.6mmol)。将混合物搅拌0.5小时，用碳酸钾溶液(10％，50mL)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(150mL)萃取。分离有机相，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。浓缩物用乙醚/己烷研制，滤出沉淀并收集，干燥后得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.83，1.05，1.2-3.0，1.46，1.53，1.59，3.12，3.67，4.85，6.28；和6.82δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]cal计算值for C35H43N3O6C+H+＝578.3230，实测值d＝578.3230.
实施例20 N(1)-4′-硝基苯氧羰基马可氟汀A(XXVII)基本上沿用实施例18和19的方法，但使用氯甲酸4-硝基苯酯(423mg，2.1mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.89，1.08，1.2-3.0，1.45，1.49，3.06，3.69，4.83，6.26，6.92，7.50和8.33δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值C35H38N4O8+H+＝643.2767，实测值＝643.2766.
实施例21 N(1)-9′-芴基甲基氧羰基马可氟汀A(XXVII)基本上沿用实施例18-20的方法，但使用氯甲酸9′-芴基甲酯(1.6g，6mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.78，7.66，7.42，6.89，6.20，4.82，4.70-4.60，4.39，3.16，2.85，1.45 and 1.43δ；MS(FAB，m/z)[M+H]＝700.
实施例22  N(1)-叔丁氧羰基对郝青酰胺A(XXVII)
将对郝青酰胺A(XXV，70mg，0.14mmol)的THF(10mL)和氢化钾(35wt％，0.062g，0.55mmol)在20-25℃搅拌2小时。加入二碳酸二叔丁酯(86mg，0.42mmol)。将混合物搅拌0.5小时，用10％碳酸钾溶液(50mL)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(150mL)萃取。有机相用硫酸镁干燥，过滤并浓缩。浓缩物用制备性薄层色谱纯化(甲醇/二氯甲烷，5/95)，得到标题化合物。
NMR(400 MHz，CDCl3)0.89，1.02，1.42，1.46，1.59，1.63，1.2-3.3，3.06，3.69，4.83，6.26和6.80δ.
实施例23  N(1)-4′-硝基苯氧羰基对郝青酰胺A(XXVII)基本上沿用实施例22的方法，但使用氯甲酸4-硝基苯酯(814mg，4.2mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.85，0.94，1.2-3.9，1.40，1.47，3.02，4.79，5.85，6.18，6.88，7.35和8.29δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值C35H38N4O9+H+＝659.2717，实测值＝659.2732.
实施例24  N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(XXVII)
将14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(XXVI，n＝2，R14＝Me，R15＝H，R16＝OH，0.188g，0.37mmol)的THF(30mL)和氢化钠(60wt％，0.075g，1.875mmol)在20-25℃搅拌2小时。加入氯甲酸4-硝基苯酯(150mg，0.74mmol)。将混合物搅拌0.5小时，用pH 7的缓冲溶液(15mL)淬灭反应，然后用乙酸乙酯(50mL)萃取。分离有机相，用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.92，1.07，1.2-3.0，1.44，1.47，1.48，3.13，3.67，4.87，6.25，6.92，7.50和8.35δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值C36H42N4O9+H+＝673.2873，实测值＝673.2866.
实施例25  N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(XXVII)
基本上沿用实施例18-24的方法，但使用14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(XXVI，n＝2，R14＝H，R15＝Me，R16＝OH，1.98g，3.9mmol)和氯甲酸4-硝基苯酯(150mg，0.74mmol)，得到标题化合物。NMR(400MHz，CDCl3)0.92，1.02，1.09，1.2-3.0，1.44，1.47，3.14，3.68，3.95，4.87，6.24，6.92，7.50和8.34δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值 C36H40N4O9+H+＝673.2873，实测值＝673.2866.
实施例26  N(1)-苯氧羰基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII)
将N(1)-苯氧羰基马可氟汀A(实施例18，2.4g，4.0mmol)溶解于甲醇(100mL)，并在0℃用硼氢化钠(540mg)处理15min。用碳酸钾(10％，100mL)淬灭反应。干燥所得沉淀，得到标题化合物。NMR(400MHz，CDCl3)0.85，0.92，1.3-2.7，1.37，1.48，3.06，3.18，3.43，3.61，4.75，5.87，6.28，6.84和7.2-7.5δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]计算值C35H41N3O6+H+＝600.3073，
实施例27  N(1)-4′-硝基苯氧羰基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII)
基本上沿用实施例26的方法，并使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基马可氟汀A(实施例20，0.5g，0.78mmol)，得到标题化合物。NMR(400MHz，CDCl3)0.82，0.89，1.3-2.7，1.39，1.47，3.06，3.18，3.59，4.78，5.85，6.20，6.84，7.36和8.28δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H]
计算值 C35H40N4O8+H+＝645.2924，实测值＝649.2925.
实施例28  N(1)-9′-芴基甲氧羰基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII)
基本上沿用实施例26的方法，但使用N(1)-9′-芴基甲氧羰基马可氟汀A(实施例21，30mg，0.043mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)7.88-7.20，6.72，6.64，6.38，4.76，4.28，3.01，2.85和2.60δ.
实施例29  N(1)-4′-硝基苯氧羰基-2α-羟基-2-脱氧对郝青酰胺A(XXVIII)
基本上沿用实施例26的方法，但使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基对郝青酰胺A(实施例23，1.0g，1.52mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.85，0.93，1.3-2.7，1.40，1.47，1.63，3.02，3.2-3.6，4.79，5.85，6.18，6.88，7.35和8.28δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H] 计算值 C35H40N4O9+H+＝661.2873，实测值＝
实施例30  N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-14β-甲基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII)
基本上沿用实施例26的方法，但使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(实施例24，180mg，0.27mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.85，0.91，1.3-2.7，1.40，1.45，1.48，3.09，3.1-3.7，4.79，5.88，6.21，6.87，7.36和8.29δ；HRMS(FAB，m/z)[M+H] 计算值C36H42N4O9+H+＝675.3030，实测值＝675.3031.
实施例31 N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-15α-甲基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII)
基本上沿用实施例26的方法，但使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(实施例25，2g，2.97mmol)，得到标题化合物。
NMR(400，MHz，CDCl3)0.85，0.92，1.01，1.3-2.7，1.39，1.48，3.05，3.1-3.7，4.79，5.86，6.19，6.87，7.36和8.29，0.92，1.01，1.3-2.7，1.39，1.48，3.05，3.1-3.7，4.79，C36H42N4O9；675.3030实测值＝675.3036.
实施例32 1，2-脱氧马可氟汀A(XXIX)
方法A：
将N(1)-苯氧羰基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII，实施例26，1g，1.67mmol)溶解于甘醇二甲醚(15mL)，并用氢氧化钠(1N，20mL)处理。将混合物回流1-2小时。将混合物冷却到20-25℃后加入碳酸钾(10％，60mL)。收集产生的沉淀并干燥，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.67，1.25，1.3-2.7，1.44，1.47，3.04，3.70，4.91，6.48，6.95和8.18δ；HRMS(FAB M/Z)[M+H]
计算值：C28H35N3O3+H+＝462.2756，实测值＝462.2762.
方法B：
将N(1)-4′-硝基苯氧羰基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII，实施例27，50mg，0.08mmol)溶解于甘醇二甲醚(1mL)，并用氢氧化钠(1N，1mL)处理。将混合物在20-25℃搅拌1小时。加入碳酸钾(10％，5mL)后用乙酸乙酯(20mL)萃取。分离有机相，用硫酸镁干燥并浓缩，得到标题化合物。
方法C：
在20-25℃向N(1)-9′-芴基甲氧羰基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII，实施例28，30mg，0.043mmol)的DMF(3mL)中滴加四甲基氟化铵(1.0M的THF，0.04mL，0.04mmol)。搅拌10分钟后用碳酸钾(10％，30mL)淬灭反应，并用乙酸乙酯(30mL)萃取。有机相萃取液用硫酸镁干燥，过滤并浓缩，所得剩余物经色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷，5/95)，得到标题化合物。
实施例33 1，2-脱氧对郝青酰胺A(XXIX)
基本上沿用实施例32方法A和B的方法，但使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基-2α-羟基-2-脱氧对郝青酰胺A(XXVIII，实施例29，880mg，1.33mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.69，1.22，1.3-2.7，1.43，1.45，1.66，2.97，3.22，3.62，4.90，6.29，6.94和8.13δ；HRMS(FAB M/Z)[M+H]计算值C28H35N3O4+H+＝478.2705，实测值＝478.2717.
实施例34 1，2-脱氢-14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(XXIX)基本上沿用实施例32方法A和B的方法，但使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-15α-甲基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII，实施例31，150mg，0.22mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.68，1.21，1.3-2.7，1.44，1.46，1.47，3.05，3.65，4.91，6.46，6.93，和8.19δ.
实施例35  1，2-脱氢-14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(XXIX)基本上沿用实施例32方法A和B的方法，但使用N(1)-4′-硝基苯氧羰基-14α-羟基-15α-甲基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXVIII，实施例31，2g，2.96mmol)，得到标题化合物。NMR(400MHz，CDCl3)0.69，1.04，1.24，1.3-2.7，1.45，1.47，3.02，3.69，3.85，4.92，6.48，6.95和8.19δ.
实施例36  2-脱氧马可氟汀A(XXIV)
方法A：
将1，2-脱氧马可氟汀A(XXIV，实施例32，220mg，0.48mmol)溶解于甲醇(10mL)，并在0℃用硼氢化钠(30mg)处理15分钟。用碳酸钾(10％，20mL)淬灭反应。干燥所得沉淀，得到标题化合物。NMR(400MHz)与实施例16相同。
方法B：
将N(1)-叔丁氧羰基马可氟汀A(XXVII，实施例19，100mg，0.17mmol)溶解于二甘醇二甲醚(5mL)，并在20-25℃用硼氢化钠(20mg)处理。将混合物加热回流0.5小时。将混合物冷却到20-25℃后加入碳酸钾(10％，10mL)。干燥所得沉淀，得到标题化合物。
实施例37  2-脱氧对郝青酰胺A(XXX)
方法A：
将1，2-脱氢对郝青酰胺A(XXIX，实施例33，1.5g，3.14mmol)溶解于甲醇(30mL)，并在0℃用硼氢化钠(250mg)处理15分钟。用碳酸钾(10％，60mL)淬灭反应，并用乙酸乙酯(100mL)萃取。用硫酸镁干燥有机萃取液，过滤并浓缩。所得剩余物经色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷，5/95)，得到标题化合物。NMR(400MHz)与实施例17相同。
方法B：
将N(1)-叔丁氧羰基对郝青酰胺A(XXVII，实施例22，30mg，0.05mmol)溶解于甘醇二甲醚(2mL)，并在20-25℃用硼氢化钠(20mg)处理。将混合物加热回流4小时。将混合物冷却到20-25℃后加入碳酸钾(10％，5mL)，并用乙酸乙酯(10mL)萃取。用硫酸镁干燥有机相，过滤并浓缩。所得剩余物经色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷，5/95)，得到标题化合物。
方法C：
在氮气中向对郝青酰胺A(XXVI，1g，2mmol)的THF(从二苯酮和金属钾蒸馏得到，40mL)中一次加入氢化钠(60％的油，0.24g，6mmol)。将所得反应混合物在20-25℃搅拌0.75小时，冷却到0℃后一次加入氯甲酸9-芴基甲酯(0.8g，3mmol)。5分钟后用磷酸盐缓冲液(pH＝7，从EM Science购买，40mL)淬灭反应，用水(40mL)稀释，乙酸乙酯萃取(2×50mL)。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到粗N(1)-9′-芴基甲氧羰基对郝青酰胺A(XXVII，1.4g，2mmol)。将其溶解于甲醇并冷却到0℃，一次加入硼氢化钠(0.3g，7.9mmol)。10分钟后用碳酸氢钠(饱和的，100mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到粗N(1)-9′-芴基甲氧羰基-2α-羟基-2-脱氧对郝青酰胺A(XXVIII，1.4g，2mmol)。在20-25℃将其溶解于THF(50mL)，用四甲基氟化铵(1.0M的THF，8mL，8mmol)处理。搅拌0.5小时后用水(50mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，得到1，2-脱氧对郝青酰胺A(XXIX，0.96g，2mmol)。在0℃将该化合物溶解于甲醇，一次加入硼氢化钠(0.5g，13mmol)。10分钟后用碳酸氢钠(饱和的，100mL)淬灭反应，用乙酸乙酯萃取(2×50mL)。合并的有机萃取液用硫酸镁干燥，过滤并减压浓缩，色谱纯化(硅胶；丙酮/二氯甲烷，30/70)后得到标题化合物。
实施例38  2-脱氧-14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(XXX)基本上沿用实施例36方法A的方法，但使用1，2-脱氢-14α-羟基-14β-甲基马可氟汀A(XXIX，实施例34，50mg，1mmol)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.86，0.90，1.3-2.7，1.42，1.46，2.94，3.40，3.52，3.93，4.79，6.29，6.39和6.66δ；HRMS(FAB M/Z)[M+H]计算值 C29H39N3O4+H+＝494.3018，实测值＝494.3018.
实施例39  2-脱氧-14α-羟基-15α-甲基-2α-羟基-2-脱氧马可氟汀A(XXX)
基本上沿用实施例37方法A的方法，但使用1，2-脱氢-14α-羟基-15α-甲基马可氟汀A(XXIX，实施例35，1.0g，2.0mmol)，得到标题化合物。NMR(400MHz)与实施例15相同。
实施例40  2β-甲基-2-脱氧马可氟汀A(XXXI)
将1，2-脱氢马可氟汀A(XXIX，实施例32，42mg，0.09mmol)溶解于THF(10mL)，并在-78℃用甲基锂(溴化锂复合物，1.5M的乙醚，0.06mL)处理15分钟。将混合物升至20-25℃，用碳酸钾(10％，5mL)淬灭反应，并用乙酸乙酯(20mL)萃取。用硫酸镁干燥有机萃取液，过滤并浓缩。所得剩余物经色谱纯化(硅胶；甲醇/二氯甲烷，5/95)，得到标题化合物。
NMR(400MHz，CDCl3)0.81，0.92，1.17，1.3-2.7，1.41，1.43，3.02，3.63，3.95，4.79，6.29，6.38和6.63δ；HRMS(FAB M/Z)[M+H] 计算值：C29H39N3O3+H+＝478.3069，实测值＝478.3083.
    反应路线A
Figure A0315899100501
    反应路线B
Figure A0315899100511
    反应路线B-续
    反应路线C
    反应路线D
    反应路线E
Figure A0315899100551
    反应路线F
    反应路线G
Figure A0315899100571
    反应路线H
    反应路线I
    反应路线J
    反应路线K
    反应路线L
Figure A0315899100621
    反应路线M
Figure A0315899100631
    反应路线N
Figure A0315899100641
    反应路线O
Figure A0315899100651

Claims (9)

1.式(XIII)对郝青酰胺B化合物及其N-氧化物和可药用盐，
Figure A0315899100021
其中n1为0-3。
2.权利要求1的式(XIII)对郝青酰胺B化合物，其中n1是0。
3.14，15-脱氢-16-氧对郝青酰胺B。
4.式(XXV)14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺B化合物及其N-氧化物和可药用盐，
其中n为1或2；R14为-H或C1-C4烷基；R15为-H或C1-C4烷基。
5.权利要求4的式(XXV)14-羟基-2-脱氧对郝青酰胺化合物是C-2-脱氧对郝青酰胺A。
6.下列化合物：14α-羟基-16-氧-15α-甲基对郝青酰胺B，16-氧对郝青酰胺B(XVI)。
7.式(XXIX)1，2-脱氢化合物及其N-氧化物和可药用盐，
Figure A0315899100023
其中n为1；R14为-H或C1-C4烷基；R15为-H或C1-C4烷基；R16为H，-OH。
8.权利要求7的式(XXIX)1，2-脱氢化合物是：1，2-脱氢对郝青酰胺A。
9.式(XXXI)2-烷基-2-脱氧化合物及其N-氧化物和可药用盐，
其中n为1；R14为-H或C1-C4烷基；R15为-H或C1-C4烷基；R16为H，-OH；
R18为C1-C4烷基。
CNB03158991XA 1995-07-21 1996-06-26 作为抗寄生虫药的对郝青酰胺 Expired - Lifetime CN1277830C (zh)

Applications Claiming Priority (2)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US132495P 1995-07-21 1995-07-21
US60/001,324 1995-07-21

Related Parent Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN96195723A Division CN1125824C (zh) 1995-07-21 1996-06-26 作为抗寄生虫药的马可氟汀

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN1495183A true CN1495183A (zh) 2004-05-12
CN1277830C CN1277830C (zh) 2006-10-04

Family

ID=21695455

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CNB03158991XA Expired - Lifetime CN1277830C (zh) 1995-07-21 1996-06-26 作为抗寄生虫药的对郝青酰胺
CN96195723A Expired - Fee Related CN1125824C (zh) 1995-07-21 1996-06-26 作为抗寄生虫药的马可氟汀

Family Applications After (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN96195723A Expired - Fee Related CN1125824C (zh) 1995-07-21 1996-06-26 作为抗寄生虫药的马可氟汀

Country Status (31)

Country Link
US (2) US5703078A (zh)
EP (3) EP1400523A3 (zh)
JP (2) JP4122447B2 (zh)
KR (1) KR100428335B1 (zh)
CN (2) CN1277830C (zh)
AR (10) AR003466A1 (zh)
AT (1) ATE311390T1 (zh)
AU (1) AU699644B2 (zh)
BR (7) BR9609812B8 (zh)
CA (1) CA2225813C (zh)
CO (1) CO4750664A1 (zh)
CZ (1) CZ296008B6 (zh)
DE (1) DE69635524T2 (zh)
DK (2) DK0871631T3 (zh)
ES (2) ES2249783T3 (zh)
FI (2) FI115912B (zh)
HK (2) HK1017883A1 (zh)
HU (1) HU226296B1 (zh)
ID (1) ID30373A (zh)
MX (1) MX9800625A (zh)
MY (1) MY113806A (zh)
NO (1) NO324287B1 (zh)
NZ (1) NZ311952A (zh)
PL (1) PL185007B1 (zh)
PT (1) PT1489082E (zh)
RU (1) RU2162090C2 (zh)
SI (1) SI0871631T1 (zh)
SK (2) SK285248B6 (zh)
TW (1) TW334436B (zh)
WO (1) WO1997003988A1 (zh)
ZA (1) ZA965908B (zh)

Families Citing this family (44)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
ZA976761B (en) * 1996-09-09 1999-01-29 Upjohn Co 25 Methylene and 24,25-epoxy marcfortines and paraherquamides
WO1998021211A1 (en) * 1996-11-15 1998-05-22 Pharmacia & Upjohn Company 1- and 2-substituted marcfortines and paraherquamides as antiparasitic agents
PE20011289A1 (es) * 2000-04-07 2001-12-21 Upjohn Co Composiciones antihelminticas que comprenden lactonas macrociclicas y espirodioxepinoindoles
ME03409B (me) 2008-11-14 2020-01-20 Merial Inc ENANTIOMERNO OBOGAĆENA PARAZITICIDALNA JEDINJENJA ARILOAZOL-2-il CIJANOETILAMINO
EP2364147A2 (en) 2008-11-19 2011-09-14 Merial Limited Compositions comprising 1-arylpyrazole alone or in combination with formamidine for the treatment of parasitic infection
ES2537424T3 (es) 2008-12-04 2015-06-08 Merial Limited Derivados de dímeros de avermectina y de milbemicina
EP2314292A1 (en) 2009-10-20 2011-04-27 Novartis AG Endoparasiticidal compositions
CA2782902C (en) 2009-12-04 2017-10-17 Merial Limited Pesticidal bis-organosulfur compounds
EP2512467A1 (en) 2009-12-17 2012-10-24 Merial Limited Compositions comprising macrocyclic lactone compounds and spirodioxepinoindoles
WO2011075591A1 (en) 2009-12-17 2011-06-23 Merial Limited Anti parasitic dihydroazole compounds and compositions comprising same
UA108641C2 (uk) 2010-04-02 2015-05-25 Паразитицидна композиція, яка містить чотири активних агенти, та спосіб її застосування
CA2818563C (en) 2010-11-16 2019-11-12 Merial Limited Monensin derivatives for the treatment and prevention of protozoal infections.
WO2013003168A1 (en) 2011-06-27 2013-01-03 Merial Limited Novel insect-repellent coumarin derivatives, syntheses, and methods of use
US8946270B2 (en) 2011-06-27 2015-02-03 Merial Limited Amido-pyridyl ether compounds and compositions and their use against parasites
HUE052594T2 (hu) 2011-09-12 2021-05-28 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Izoxazolint tartalmazó parazita-ellenes készítmények, ezek elõállítása és alkalmazása
US20130079394A1 (en) 2011-09-23 2013-03-28 Cnrs (Centre National Recherche Scientifique) Indirect modeling of new repellent molecules active against insects, acarids, and other arthropods
MX368738B (es) 2011-11-17 2019-10-14 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Composiciones que comprenden un aril pirazol y un imidazol sustituido, metodos y usos de las mismas.
PT2785719T (pt) 2011-12-02 2018-02-08 Merial Inc Formulações injetáveis de moxidectina de ação prolongada e novas formas cristalinas de moxidectina
PL232463B1 (pl) 2012-02-06 2019-06-28 Merial Inc Miękka, nadająca się do żucia kompozycja weterynaryjna do leczenia i/lub zapobiegania infekcji lub inwazji pasożytniczej u zwierzęcia oraz jej zastosowanie
JO3626B1 (ar) 2012-02-23 2020-08-27 Merial Inc تركيبات موضعية تحتوي على فيبرونيل و بيرميثرين و طرق استخدامها
UA115981C2 (uk) 2012-04-20 2018-01-25 Меріал, Інк. Паразитицидні композиції, що містять похідні бензимідазолу, способи їх одержання та застосування
JP5737255B2 (ja) * 2012-09-27 2015-06-17 ダイキン工業株式会社 チオノカルボン酸エステルの製造方法
NZ723198A (en) 2012-11-20 2018-11-30 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Anthelmintic compounds and compositions and methods of using thereof
EP3063144B1 (en) 2013-11-01 2021-09-08 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Antiparasitic and pesticidal isoxazoline compounds
NZ726251A (en) 2014-04-17 2017-11-24 Merial Inc Use of malononitrile compounds for protecting animals from parasites
AU2015264336B2 (en) 2014-05-19 2018-08-30 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Anthelmintic compounds
ES2895826T3 (es) 2014-06-19 2022-02-22 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Composiciones parasiticidas que comprenden derivados de indol, procedimientos y usos de las mismas
WO2016069983A1 (en) 2014-10-31 2016-05-06 Merial, Inc. Parasiticidal composition comprising fipronil
UY36570A (es) 2015-02-26 2016-10-31 Merial Inc Formulaciones inyectables de acción prolongada que comprenden un agente activo isoxazolina, métodos y usos de las mismas
PT3298027T (pt) 2015-05-20 2022-01-26 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc Compostos depsipéptidos antelmínticos
UY37137A (es) 2016-02-24 2017-09-29 Merial Inc Compuestos antiparasitarios de isoxazolina, formulaciones inyectables de acción prolongada que los comprenden, métodos y usos de los mismos
WO2018039508A1 (en) 2016-08-25 2018-03-01 Merial, Inc. Method for reducing unwanted effects in parasiticidal treatments
EP3525590A1 (en) 2016-10-14 2019-08-21 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Pesticidal and parasiticidal vinyl isoxazoline compounds
BR112019009977A2 (pt) 2016-11-16 2019-08-27 Boehringer Ingelheim Animal Health Usa Inc compostos depsipeptídicos anti-helmínticos
WO2019036407A1 (en) 2017-08-14 2019-02-21 Merial, Inc. PYRAZOLE-ISOXAZOLINE COMPOUNDS WITH PESTICIDE AND PARASITICIDE ACTIVITY
US11583545B2 (en) 2018-02-08 2023-02-21 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Parasiticidal compositions comprising eprinomectin and praziquantel, methods and uses thereof
US20220048903A1 (en) 2018-07-09 2022-02-17 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Anthelminthic Heterocyclic Compounds
WO2020112374A1 (en) 2018-11-20 2020-06-04 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Indazolylcyanoethylamino compound, compositions of same, method of making, and methods of using thereof
BR112021016196A2 (pt) 2019-03-01 2021-10-05 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Composições injetáveis de clorsulon, métodos e usos das mesmas
CA3133100A1 (en) 2019-03-19 2020-09-24 Boehringer Ingelheim Animal Health USA Inc. Anthelmintic aza-benzothiophene and aza-benzofuran compounds
JP2023528822A (ja) 2020-05-29 2023-07-06 ベーリンガー インゲルハイム アニマル ヘルス ユーエスエイ インコーポレイテッド 駆虫性複素環式化合物
CN111748503B (zh) * 2020-08-04 2021-12-14 华中农业大学 一种深海独岛枝芽胞杆菌培养基和剂型
AU2021410052A1 (en) 2020-12-21 2023-08-03 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Parasiticidal collar comprising isoxazoline compounds
US20230312207A1 (en) 2022-02-17 2023-10-05 Boehringer Ingelheim Vetmedica Gmbh Method and system for providing a fluid product mailer

Family Cites Families (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US5075307A (en) * 1987-07-28 1991-12-24 Merck & Co., Inc. Paraherquamide and dihydroparaherquamide as antihelminthic agents
US4873247A (en) * 1987-11-27 1989-10-10 Goegelman Robert T Derivatives of paraherquamide isolated from a fermentation broth active as antiparasitic agents
US4978656A (en) * 1988-08-12 1990-12-18 Merck & Co., Inc. Synthetic derivatives of paraherquamide
US4866060A (en) * 1988-08-19 1989-09-12 Merck & Co., Inc. Use of the natural product marcfortines as antiparasitic agents
US4923867A (en) * 1988-08-24 1990-05-08 Merck & Co., Inc. Synthetic marcfortine derivatives useful as antiparasitic agents
NZ233043A (en) * 1989-03-30 1992-09-25 Merck & Co Inc Anthelmintic heterocyclic compounds prepared by action of cunninghamella blakesleeana on (dihydro)paraherquamide
IE904606A1 (en) * 1989-12-21 1991-07-03 Beecham Group Plc Novel products
GB9014194D0 (en) * 1990-06-26 1990-08-15 Pfizer Ltd Antiparasitic agents
WO1992022555A1 (en) * 1991-06-17 1992-12-23 Beecham Group Plc Paraherquamide derivatives, precursor thereof, processes for their preparation, microorganism used and their use as antiparasitic agents
TW410227B (en) * 1993-06-16 2000-11-01 Upjohn Co 14-substituted marcfortines and derivatives useful as antiparasitic agents

Also Published As

Publication number Publication date
JP4122447B2 (ja) 2008-07-23
CN1125824C (zh) 2003-10-29
FI115912B (fi) 2005-08-15
EP1489082B1 (en) 2013-11-20
HK1017883A1 (en) 1999-12-03
AR003466A1 (es) 1998-08-05
BR9612975B8 (pt) 2014-10-29
AU6337396A (en) 1997-02-18
NO980255D0 (no) 1998-01-20
AU699644B2 (en) 1998-12-10
DE69635524T2 (de) 2006-07-06
CN1277830C (zh) 2006-10-04
SK284833B6 (sk) 2005-12-01
BR9609812A (pt) 1999-03-02
PL185007B1 (pl) 2003-01-31
BR9612972B8 (pt) 2014-10-29
NZ311952A (en) 1999-03-29
US5750695A (en) 1998-05-12
RU2162090C2 (ru) 2001-01-20
MX9800625A (es) 1998-04-30
AR038432A2 (es) 2005-01-12
US5703078A (en) 1997-12-30
WO1997003988A1 (en) 1997-02-06
CO4750664A1 (es) 1999-03-31
ES2439569T3 (es) 2014-01-23
FI118471B (fi) 2007-11-30
JPH11509550A (ja) 1999-08-24
AR038427A2 (es) 2005-01-12
EP0871631B1 (en) 2005-11-30
DE69635524D1 (de) 2006-01-05
FI980112A (fi) 1998-01-20
EP1489082A1 (en) 2004-12-22
BR9612973B8 (pt) 2014-10-29
SI0871631T1 (sl) 2006-04-30
HUP9802221A2 (hu) 1999-02-01
CZ11098A3 (cs) 1998-06-17
BR9612963B8 (pt) 2014-10-29
HUP9802221A3 (en) 2000-05-29
CA2225813A1 (en) 1997-02-06
EP1400523A3 (en) 2004-04-07
FI20050238A (fi) 2005-03-04
PT1489082E (pt) 2013-12-23
AR038428A2 (es) 2005-01-12
JP2008007516A (ja) 2008-01-17
AR038430A2 (es) 2005-01-12
PL324574A1 (en) 1998-06-08
AR038429A2 (es) 2005-01-12
BR9612974B8 (pt) 2014-10-29
CZ296008B6 (cs) 2005-12-14
BR9609812B8 (pt) 2014-10-29
ZA965908B (en) 1997-01-12
KR100428335B1 (ko) 2004-06-16
HU226296B1 (hu) 2008-08-28
EP0871631A1 (en) 1998-10-21
SK5498A3 (en) 1998-08-05
DK0871631T3 (da) 2006-03-13
MY113806A (en) 2002-05-31
ATE311390T1 (de) 2005-12-15
AR038434A2 (es) 2005-01-12
AR038431A2 (es) 2005-01-12
CA2225813C (en) 2008-02-26
TW334436B (en) 1998-06-21
AR052907A1 (es) 2007-04-11
NO324287B1 (no) 2007-09-17
FI980112A0 (fi) 1998-01-20
BR9612944B8 (pt) 2014-10-29
DK1489082T3 (da) 2013-12-09
NO980255L (no) 1998-03-20
AR038433A2 (es) 2005-01-12
SK285248B6 (sk) 2006-09-07
HK1061242A1 (en) 2004-09-10
ES2249783T3 (es) 2006-04-01
EP1400523A2 (en) 2004-03-24
ID30373A (id) 1997-01-23
CN1191537A (zh) 1998-08-26

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN1277830C (zh) 作为抗寄生虫药的对郝青酰胺
CN1059672C (zh) 1,2,4－二唑衍生物
CN87107938A (zh) 3-吡咯烷基硫代-1-氮杂双环[3，2，0]庚-2-烯-2-甲酸化合物及其制备方法
CN85109491A (zh) 生产防治动植物内、外寄生虫的13β-梅耳拜霉素衍生物的方法
CN1210518A (zh) 芳基吡唑杀虫剂
CN1023858C (zh) 含大环内酯化合物的杀虫剂组合物及其制法
CN1018456B (zh) 13-卤代米尔贝霉素衍生物的制备方法
CN1300289A (zh) 新的三尖杉烷衍生物及其制备方法
CN1346362A (zh) 除虫菌素衍生物
CN1608075A (zh) 在4″－位具有氨基磺酰氧基取代基的齐墩螨素b1衍生物
CN86106579A (zh) 烷基磺酸酯衍生物的制备及其作为杀虫剂，杀螨剂或杀线虫剂的应用
CN86101035A (zh) 制备控制动物和植物寄生虫的13β-烷基密比霉素衍生物的方法
CN86105901A (zh) 农药化合物
CN87106598A (zh) 保护植物免受病害的方法
CN1053446C (zh) 新的thiomarinol衍生物及其制备方法
CN1044936A (zh) 3-乙烯基-2，2-二甲基环丙烷羧酸的一些新的氟代衍生物，其制备方法，其作为农药的用途和含该衍生物的组合物
CN1113238A (zh) 取代的吡唑啉衍生物
CN1030790A (zh) 有抗生作用的ksb-1939化合物、其制法及含有这类化合物的杀虫剂
CN1247607C (zh) 13－取代的米尔螨素衍生物,它们的制备方法及其杀昆虫和其它有害动物的用途
CN1501917A (zh) 杀虫剂用化合物、杀螨剂用化合物及其使用和制备方法
CN1086513A (zh) 取代的2-芳基吡咯
CN1036198C (zh) 呋喃并苯并吡喃衍生物、它们的制备方法及含这些化合物作为活性组分的除草剂
CN1058266C (zh) 用作抗寄生物药的14－取代马地霉素和衍生物及应用
CN1033798A (zh) 新的亚胺酯杀虫剂
CN1047403C (zh) 大环内酯抗菌素的制备方法

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
REG Reference to a national code

Ref country code: HK

Ref legal event code: DE

Ref document number: 1061242

Country of ref document: HK

C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant
ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: PAH

Free format text: FORMER OWNER: UPJOHN CO.

Effective date: 20130619

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
C56 Change in the name or address of the patentee

Owner name: ZOETIS PU CO., LTD.

Free format text: FORMER NAME: PAH

CP01 Change in the name or title of a patent holder

Address after: American New Jersey

Patentee after: Zoetis Services LLC

Address before: American New Jersey

Patentee before: PAHPU LLC

Address after: Michigan

Patentee after: PHARMACIA & UPJOHN CO.,LLC

Address before: Michigan

Patentee before: PHARMACIA & UPJOHN Co.

TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20130619

Address after: American New Jersey

Patentee after: PAHPU LLC

Address before: Michigan

Patentee before: PHARMACIA & UPJOHN CO.,LLC

ASS Succession or assignment of patent right

Owner name: SHUOTENG SERVICE LLC

Free format text: FORMER OWNER: ZOETIS PU CO., LTD.

Effective date: 20150730

C41 Transfer of patent application or patent right or utility model
TR01 Transfer of patent right

Effective date of registration: 20150730

Address after: New jersey, USA

Patentee after: Zoetis Services LLC

Address before: American New Jersey

Patentee before: Zoetis Services LLC

CX01 Expiry of patent term

Granted publication date: 20061004

EXPY Termination of patent right or utility model