CN104815331A - 使用微球和非离子型造影剂的组合物和方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及使用微球通过递药和/或治疗性栓化来治疗疾病和病症以及治疗疼痛，尤其是肿瘤相关性疼痛的组合物和方法，所述疾病和病症包括癌症和各种其它血管发生依赖性疾病、血管功能障碍、动静脉畸形(AVM)、出血过程。更具体地，本发明涉及包含非离子型造影剂的微球、包括这些微球的组合物、以及制备和使用这些组合物进行栓化治疗的方法。本发明还涉及使用可检测的微球进行靶向递药的组合物和方法，不考虑是否还需要栓化。

Description

使用微球和非离子型造影剂的组合物和方法

本申请是国际申请PCT/EP2006/004334，国际申请日2006年5月9日，中国国家阶段申请号200680024919.8的发明专利申请的分案申请。

相关申请的交叉参考

本申请要求2005年5月9日提交的美国临时申请系列60/679,348号的优先权，该文献被全部纳入本文作为参考。

发明领域

本发明涉及使用微球通过药物递送和/或治疗性栓化来治疗疾病和病症，包括癌症和各种其它血管发生依赖性疾病、血管功能障碍、动静脉畸形(AVM)和出血过程，以及治疗疼痛，尤其是肿瘤相关性疼痛的组合物和方法。更具体地，本发明涉及包含非离子型造影剂的微球、包括这些微球的组合物、以及制备和使用这些组合物进行递药和/或栓化治疗的方法。此外，本发明涉及使用可检测的微球进行靶向递药的组合物和方法，不考虑是否需要栓化。

发明背景

治疗性血管堵塞(栓化)是用于原位治疗某些病理学症状的技术，涉及将栓化材料注射到相关血管内。例如，通过向滋养肿瘤的血管注射栓化材料故意阻塞该血管。在肿瘤的情况下值得注意的是，血管堵塞可抑制疼痛、限制手术干涉的血液损失以随后栓化、或者甚至导致肿瘤坏死并避免手术。

在血管畸形如AVM或动静脉瘘的情况下，血管堵塞可使血液流入将被正常化的组织内，帮助手术并限制出血危险。在出血过程中，血管堵塞可减少流动，这样可促进动脉开口结瘢。

栓化能够用于治疗子宫纤维瘤、产后和/或剖宫产术后出血、术后阴道出血、预防和/或治疗来自异位妊娠的出血、在子宫肌瘤切除术前的预防和处于高出血危险的产科患者，例如具有前置胎盘、侵入性胎盘、和孪生死胎的那些患者。栓化还能够用于停止失控的出血，或者在手术之前或手术过程中减缓出血，并用于将内渗物密封到动脉瘤囊中。每种上述疾病或病症均包含在本发明的范围内。

此外，根据所治疗的病理学状况，递药和/或治疗性栓化能够临时和永久地进行。

通常通过导管进行栓化，从而可能将颗粒堵塞剂(栓子)置于循环系统内。为了精确定位，需要一些可视控制。因此，希望使用通过添加造影剂而适于标记的栓化材料。为了减少导管的干扰，固体栓化材料比液体栓化材料更优选，因为液体栓化材料能够附着到导管上。已经使用微球作为被动栓化的合适固体材料，即在体内机械地堵塞具体的血管或位置。

微球的其它优点是它们作为试剂用于递药或主动栓化治疗的潜能。在递药时，微球被用作药物/治疗药或活性剂的载体，然后在期望的体内位置处从微球中释放所述药物/治疗药或活性剂，不考虑是否需要机械阻塞。在主动栓化治疗中，微球具有双重功能：机械阻塞(栓化)和高度局部化、原位地递送治疗药。这种药剂能够用于，例如与化疗药或放疗药一起使用治疗肿瘤。这种类型的区域性治疗能够将治疗局限在肿瘤位置上。因此能够减少对健康组织的潜在位置影响和损伤，尤其当使用细胞毒性化疗药或放疗药时。区域性施用药物/药剂(通过主动栓化或递药)具有提高靶组织的峰药物浓度的额外优点。这不仅有利于施用化疗药或放疗药，而且有利于施用例如化疗药或疼痛缓解药。

然而，已经发现装载到微球上的造影剂类型可改变微球的性质，例如减少可膨胀材料的可膨胀性、减少负载额外组分如药物的容量、或降低通过导管注射的适当性。因此，提供适合栓化的微球是有益的，该微球不仅被标记，而且还能够吸附或以其它方式运载药物。类似地，本发明的微球可用于将药物或其它治疗药递送到具体细胞、组织或器官。

因此，证明需要进一步开发包括造影剂、药物、和/或另一种治疗药的微球，所述微球任选地能够膨胀至大于其初始尺寸的尺寸。因此，本发明的目的是提供对药物负载和/或递送具有优良容量的包含造影剂的微球。本发明的另一个目的是提供具有优良膨胀性质的包含造影剂的微球。本发明的又一个目的是提供具有水凝胶样行为的包含造影剂的微球。所述包含造影剂的微球能够适合主动栓化治疗和/或递药，尤其是用于治疗血管发生依赖性疾病和/或减轻肿瘤相关性疼痛。

发明概述

在治疗中，通常希望使用这样的微球，其在施用过程中可以被医师看见，并且包含以低浓度缓慢释放的药物，从而使与药物相关的副作用最小化。缓慢释放对期望的治疗是足够的，因为微球已经位于药物将要被递送的位置或靶上。此外，所述微球应该具有优良的负载容量，即微球能够在造影剂存在时负载最大量的药物。

最适合用于主动栓化和/或递药的微球是基于亲水聚合物的，例如包括羟基和/或胺基的亲水聚合物。在一些实施方案中，能够使用具有带正电荷的基团或带负电荷的基团或两者的聚合物或共聚物。

所述微球可以包括聚合物或共聚物，例如聚乙烯醇(PVA)，PVA基聚合物，PVA共聚物，或由基于丙烯酸、丙烯酰胺、丙烯酸酯的单体制备的聚合物或共聚物，即丙烯酸酯和/或其衍生物，例如甲基丙烯酰胺、甲基丙烯酸酯、甲基丙烯酸等。所述聚合物和/或共聚物可以是交联的或未交联的。

在使用丙烯酰胺的实施方案中，可以将氨基官能团质子化，以产生带正电荷的基团。在使用丙烯酸的实施方案中，可以通过将酸官能团去质子化来产生带负电荷的基团。在使用丙烯酸酯的实施方案中，能够通过水解酯基团来产生离子化基团。还能够通过使用合适的交联剂来产生离子化基团，在这种情况下所得聚合物或共聚物是交联的。所述微球还能够具有下文所述的一种或多种或全部性质。

在某些实施方案中，待递送的药物是水溶性的。在具体实施方案中，药物为盐的形式，例如选自盐酸盐、氯化钾、氯化铵、硫酸钠或硫酸钾的盐。此外，所述药物可以具有发明详述中所述的一种或多种或全部性质。

本发明的目的是提供适合主动栓化治疗和/或递药的微球，该微球包括：(a)一种或多种亲水聚合物或离子型聚合物，和(b)药物，如盐形式的药物，其中该微球具有期望的缓释药物性质，在某些实施方案中，在造影剂存在时具有优良的药物负载容量，并且在将微球施用至其靶时可以被医师看到。

用于上述体系的合适造影剂是非离子型造影剂。所述造影剂可以具有发明详述中所述的一种或多种或全部性质。

在一个实施方案中，本发明提供了使用微球作为载体，将药物、疫苗、多核苷酸、多肽、抗体、多糖、和/或诊断剂或成像剂递送至哺乳动物的组合物和方法。在最优选的实施方案中，本发明提供了包括非离子型造影剂的微球，用于递送至少一种药物、造影剂或其组合。

在一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)包括PVA的可生物相容的聚合材料，和(b)非离子型造影剂；其中微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，并且膨胀前的直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所述非离子型造影剂选自X-射线、计算机化断层显像(CT)、顺磁或超顺磁造影剂，在一些实施方案中，所述造影剂包含碘。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)包括PVA的可生物相容的聚合材料，(b)非离子型造影剂，和/或(c)药物，其中所述微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，并且膨胀前的直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所述非离子型造影剂选自X-射线、CT、顺磁或超顺磁造影剂，在一些实施方案中，所述造影剂包含碘。

在又一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包括：(a)适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(i)包括PVA的可生物相容的聚合材料，(ii)非离子型造影剂，和(iii)药物，其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm；和(b)药学上可接受的液体。在一些实施方案中，所述非离子型造影剂选自X-射线、CT、顺磁或超顺磁造影剂，在一些实施方案中，所述造影剂包含碘。

在另一个实施方案中，本发明提供了药物组合物，该药物组合物包括：(a)适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(i)包括PVA的可生物相容的聚合材料，(ii)非离子型造影剂，和(iii)药物，其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm；和(b)药学上可接受的液体。在一些实施方案中，所述非离子型造影剂选自X-射线、CT、顺磁或超顺磁造影剂，在一些实施方案中，所述造影剂包含碘。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)未交联的PVA，(b)非离子型造影剂，和(c)药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所述药物是化疗药或疼痛缓解药。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)未交联的PVA，(b)非离子型X-射线造影剂，和(c)药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)未交联的PVA，(b)非离子型造影剂，和(c)选自多柔比星、顺铂、丝裂霉素C、他莫昔芬和紫杉醇的药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)交联的PVA，(b)非离子型造影剂，和(c)选自多柔比星、顺铂、丝裂霉素C、他莫昔芬和紫杉醇的药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)交联的PVA，(b)非离子型X-射线造影剂，和(c)药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)交联的PVA，(b)非离子型造影剂，和(c)选自多柔比星、顺铂、丝裂霉素C、他莫昔芬和紫杉醇的药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)聚乙烯醇-丙烯酸共聚物，(b)非离子型造影剂，和(c)药物，例如化疗药或疼痛缓解药；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所述微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的。在某些实施方案中，所述聚合物是高吸水性聚合物。在具体实施方案中，所述聚乙烯醇-丙烯酸共聚物是乙烯醇和丙烯酸酯共聚物，例如丙烯酸钠聚合物。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)聚乙烯醇-丙烯酸共聚物，(b)非离子型X-射线造影剂，和(c)药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所述微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的。在某些实施方案中，所述聚合物是高吸水性聚合物。在具体实施方案中，所述聚乙烯醇-丙烯酸共聚物是乙烯醇和丙烯酸酯共聚物，例如丙烯酸钠聚合物。

在另一个实施方案中，本发明提供了适合栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)聚乙烯醇-丙烯酸共聚物，(b)非离子型造影剂，和(c)选自多柔比星、顺铂、丝裂霉素C、他莫昔芬和紫杉醇的药物；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所要这微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的。在某些实施方案中，所述聚合物是高吸水性聚合物。在具体实施方案中，所述聚乙烯醇-丙烯酸共聚物是乙烯醇和丙烯酸酯共聚物，例如丙烯酸钠聚合物。

在另一个实施方案中，本发明提供了基本上为球形的微球，所述微球包括：(a)聚乙烯醇-丙烯酸共聚物，(b)选自碘帕醇(Isovue^TM)、碘克沙醇(Visipaque^TM)、碘海醇(Omnipaque^TM)、碘普胺(Ultravist^TM)和碘佛醇(Optiray^TM)的非离子型造影剂，和(c)药物如化疗药；优选药物选自多柔比星、顺铂、丝裂霉素C、他莫昔芬和紫杉醇；其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm。在一些实施方案中，所述微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的。在某些实施方案中，所述聚合物是高吸水性聚合物。在具体实施方案中，所述聚乙烯醇-丙烯酸共聚物是乙烯醇和丙烯酸酯共聚物，例如丙烯酸钠聚合物。

在还一个实施方案中，本发明提供了包括上述微球和可药用液体的可注射药物组合物。

在还一个实施方案中，本发明提供了制备药物组合物的方法，该药物组合物包括：(a)适合主动栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(i)包括PVA的可生物相容的聚合材料，(ii)非离子型造影剂，其中所述微球具有均匀的尺寸，直径为约10μm至约1000μm；和(b)药学上可接受的液体。该方法包括使直径为约10μm至约1000μm的微球与含有在药学上可接受的液体中的非离子型造影剂的溶液接触。在某些实施方案中，所述微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，在膨胀前的直径为10μm至1000μm。可以将所述微球任选地灭菌，例如通过照射(例如γ-或β-照射)灭菌。

在另一个实施方案中，本发明提供了制备药物组合物的方法，该药物组合物包括：(a)适合主动栓化和/或递药的基本上为球形的微球，所述微球包括：(i)包括PVA的可生物相容的聚合材料，(ii)非离子型造影剂，和(iii)药物；其中所述微球例如在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，具有均匀的尺寸，并且直径为约10μm至约1000μm；和(b)药学上可接受的液体。该方法包括：(a)使直径为约10μm至约1000μm的微球与非离子型造影剂在药学上可接受的液体中的溶液接触，该溶液包含饱和所述微球所必需量的约10％至约90％的造影剂，和(b)添加药物在可药用溶液中的溶液，直到微球饱和。可以将所述微球任选地灭菌，例如通过照射(例如γ-或β-照射)灭菌。

在另一个实施方案中，本发明提供了制备包含微球的可注射药物组合物的方法，所述方法包括：(a)使直径为10μm至1000μm的可膨胀性微球与药物的溶液接触，该微球包含含有聚乙烯醇的可生物相容聚合材料，该溶液包含饱和所述微球所必需量的约10％至约90％的药物，和(b)添加非离子型造影剂在可药用溶液中的溶液，直到微球饱和。然后可以将微球任选地灭菌，例如通过照射(例如γ-或β-照射)灭菌。

在另一个实施方案中，提供了在哺乳动物体内进行主动栓化的方法，该方法包括向哺乳动物施用本发明的微球或本发明的药物组合物。

在另一个实施方案中，提供了在哺乳动物体内进行主动栓化的方法，该方法包括向具有血管发生依赖性疾病的哺乳动物施用本发明的微球或本发明的药物组合物。

在另一个实施方案中，提供了向哺乳动物递药、进行或不进行栓化的方法，该方法包括向哺乳动物施用本发明的微球或本发明的药物组合物。

在另一个实施方案中，提供了向哺乳动物递药、进行或不进行栓化的方法，该方法包括向具有血管发生依赖性疾病的哺乳动物施用本发明的微球或本发明的药物组合物。

在另一个实施方案中，提供了向哺乳动物递药、进行或不进行栓化的方法，该方法包括向具有肿瘤或其它癌症形式的哺乳动物施用本发明的微球或本发明的药物组合物。在某些实施方案中，在肿瘤或其它癌症形式的位置处局部施用所述微球或药物组合物，例如直接进入肿瘤块中。

在其它实施方案中，提供了治疗哺乳动物体内的肿瘤或其它癌症的方法，该方法包括向具有肿瘤或其它癌症形式的哺乳动物施用本发明的微球或本发明的药物组合物。在某些实施方案中，将所述微球或药物组合物局部施用到肿瘤或其它癌症形式的位置处，或直接进入肿瘤或其它癌症形式的位置内。在一些实施方案中，通过局部递药治疗肿瘤或其它癌症形式。在其它实施方案中，通过局部递药和栓化的组合来治疗肿瘤或其它癌症形式。

在本发明的另一个方面，提供了治疗肿瘤切除位置的方法，该方法包括在切除后向肿瘤的切除边缘施用本发明的微球或本发明的药物组合物，从而在该位置处抑制癌症的局部复发和新血管的形成。

其它方面，提供了将非肿瘤源性、血管发生依赖性疾病中的血管栓化的方法，该方法包括向血管递送本发明的微球或药物组合物，从而有效地堵塞血管。

在其它方面，提供了治疗器官的新血管疾病的方法，该方法包括向有需要的患者递送本发明的微球或本发明的药物组合物，从而抑制新血管的形成。

在其它方面，提供了治疗肿瘤相关性疼痛的方法，该方法包括向有需要的患者递送本发明的微球或本发明的药物组合物。在一些实施方案中，通过单独使用本发明的微球递药或与栓化组合来治疗疼痛。

通过参考下列详述和附图，本发明的这些和其它方面将变得清楚。此外，下列各种参考文献均被全部纳入本文作为参考。

发明详述

为了清楚地公开而非限制，将本发明的详述分成下列的部分。

定义

在用于本文时，“微球”指被制成各种尺寸的形体的聚合物或聚合物的组合。微球可以是任何形状，尽管它们通常基本上为球形。在某些实施方案中，当单独或者作为可注射溶液的形式时，微球是无菌的。可以通过本领域已知的任何技术将微球灭菌，例如通过照射，例如γ-或β-照射灭菌。在一些实施方案中，在小于1000倍的放大倍率下，微球的表面显得光滑。本发明的微球可以包含本文描述和定义的其它材料。

在用于本文时，“基本上为球形”通常指接近完美球体的形状，完美球体定义为代表最低外表面面积的体积。具体地，本发明的“基本上为球形”指当观察微球的任何截面时，主要直径与次要直径之间的差异小于20％、小于10％或小于5％，这取决于所用的实施方案。

在用于本文时，术语“约”或“大约”指在给定值或范围的20％以内、优选10％以内、更优选5％以内(或1％或更小)。

在用于本文时，本发明的“细胞粘附促进剂”指如下任意材料：由于其存在或与微球的结合，而促进或增强细胞对微球表面的粘着性。这些材料通常为通过共价键或以互穿聚合方式与微球表面结合的蛋白质。

在用于本文时，本发明的“治疗药”指对血管发生依赖性疾病的过程提供治疗作用或对血管发生依赖性疾病提供生物学或生理学响应的任何物质。治疗药的例子是预防或减少与血管发生依赖性疾病相关的炎症作用的抗炎药。

在用于本文时，“亲水相互作用”指基本可以与水结合、吸收水和/或溶于水的分子或分子的部分。这可以导致可逆凝胶的膨胀和/或可逆凝胶的形成。

在用于本文时，“疏水相互作用”指基本不与水结合、不吸收水和/或不溶于水的分子或分子的部分。

在用于本文时，“可膨胀的”微球指这样的微球：在某些条件下，例如在与水性液体或生理流体接触时，其尺寸能扩大，并仍然保留基本上相同的形状。在某些实施方案中，可膨胀的微球可以扩大至其原始尺寸的约15倍，或扩大至其原始体积的约64倍。在某些实施方案中，在与盐水(0.9％氯化钠溶液)接触后，可膨胀的微球扩大至其原始尺寸的约4倍或其原始体积的64倍。在一些实施方案中，“可膨胀的”微球指具有吸水能力的微球。例如，在某些实施方案中，可膨胀微球的吸水率为至少约750g/g。通过控制因素如微球悬浮于其中的溶剂和用于制备微球的具体聚合物，能够控制膨胀的程度。在某些实施方案中，调整交联程度，在其它实施方案中，没有调整交联，或者不存在交联。这种性质使得微球可通过例如18至30规格或更小的针头注射，并仍然能够在注射位置被扩大和固定，并具有足够的尺寸以避免或减少被哺乳动物的淋巴系统或免疫系统消除的可能。

在用于本文时，“高吸水性聚合物”指这样的聚合物：当吸收水时，其能吸收至少5％重量的水，或者能够将其干重增加至其原始重量的约20倍。在一些实施方案中，微球是“超吸水性聚合物”，超吸水性聚合物能够吸收其初始重量的高至约300倍、高至约400倍、高至约500倍、高至约600倍、高至约700倍或高至约750倍或更多的生理流体。例如，在室温(25℃)和大气压力下，1g干燥微球能够吸收高至约300g、高至约400g、高至约500g、高至约600g、高至约700g或高至约750g或更多的去离子水。

在某些实施方案中，本发明的微球能够包括“亲水性”粒子。在用于本文时，术语“亲水性”指粒子能够溶于水或水性溶液、吸收水或水性溶液或易于与水或水性溶液混合。

在用于本文时，“可注射的”指能够通过注射器、导管、针头或用于注射或输注液体介质内的微球的其它手段施用、递送或运载至体内。

在用于本文时，“治疗”指通过施用一种或多种治疗(包括但不限于施用本发明的微球)，来减少或改善给定疾病的进程、严重性和/或持续时间。在某些实施方案中，该术语指减少与一种或多种疾病或状况相关的疼痛。

在用于本文时，“施用”指通过注射或以其它手段将存在于体外的物质(例如本发明的抗体)物理递送至患者体内的行为，例如但不限于通过肺(例如吸入)、粘膜(例如鼻内)、皮内、静脉内、肌内递送和/或本文所述或本领域已知的任何其它物理递送方法。当治疗疾病或其症状时，治疗(例如本发明的微球)的施用通常发生在疾病或其病症发生之后。当预防疾病或其症状时，治疗(例如本发明的微球)的施用通常发生在疾病或其症状发生之前。

在用于本文时，术语“有效量”指足够减少和/或改善给定疾病和/或其相关症状的严重性和/或持续时间的治疗(例如本发明的微球或组合物)的量。

在用于本文时，术语“宿主”指动物，优选哺乳动物，最优选人。

在用于本文时，术语“婴儿”指年龄小于24个月，优选小于16个月、小于12个月、小于6个月、小于3个月、小于2个月或小于1个月的人。

在用于本文时，术语“联合”在施用其它治疗的上下文中指使用多于一种治疗。使用术语“联合”不会限制将治疗施用至具有感染的个体的顺序。可以在将第二治疗施用至曾患有给定疾病、正患有给定疾病或易患有给定疾病的个体之前(例如1分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周)、同时、或者之后(例如1分钟、15分钟、30分钟、45分钟、1小时、2小时、4小时、6小时、12小时、24小时、48小时、72小时、96小时、1周、2周、3周、4周、5周、6周、8周或12周)施用第一治疗。任何额外的治疗可以以任何顺序与其它额外治疗一起施用。在某些实施方案中，可以将本发明的微球与一种或多种治疗(例如同时施用以预防、治疗、控制和/或改善给定的疾病或该疾病涉及的其它症状的非本发明微球的治疗)联合施用。能够与本发明微球联合施用的治疗的非限制性例子包括止痛药、麻醉药、抗生素或免疫调节剂，或美国药典(U.S.Pharmacopoeia)和/或医师用药参考(Physician’s Desk reference)所列的任何其它药剂。

在用于本文时，术语“控制”指个体获自治疗(例如本发明的微球)的有益作用，该有益作用不会导致感染治愈。在某些实施方案中，给个体施用一种或多种治疗，以“控制”给定的疾病或该疾病所涉及的一种或多种症状，从而防止该疾病的进化或恶化。

在用于本文时，术语“药学上可接受的”指被联邦或州政府的规则机构批准、或列于美国药典、欧洲药典或其它公认药典中用于动物、更具体为人的。

在用于本文时，术语“预防”指总体或部分地抑制给定的疾病；在个体体内总体或部分地抑制给定疾病或其相关症状的疾病进程的发展或发生；总体或部分地抑制给定疾病或其相关症状的进程。

在用于本文时，术语“个体”和“患者”互换使用。在用于本文时，个体优选为哺乳动物，例如非灵长类(例如牛、猪、马、猫、狗、大鼠等)和灵长类(例如猴子和人)，最优选人。在一些实施方案中，个体为婴儿、儿童、成年人或老年个体。

在用于本文时，术语“治疗”指能够用于控制、治疗和/或改善给定疾病或其相关症状的任何方案、方法和/或药剂。在某些实施方案中，术语“治疗”指用于控制或治疗给定疾病或其相关症状的生物学治疗、支持性治疗、和/或本领域技术人员已知的其它治疗，例如医务人员。

微球

在某些实施方案中，可通过荧光检查看到本发明的微球。也就是说，在一些实施方案中，微球负载有、结合有、或以其它方式包含合适的造影剂，例如非离子型造影剂。在一些实施方案中，本发明的微球可以通过荧光检查看到，并且包括药物。一个所述实施方案是基本上为球形的包含PVA的可膨胀微球，其包含非离子型造影剂和抗癌药。另一个实施方案是基本上为球形的包含PVA的可膨胀微球，其包含非离子型造影剂和化疗药或疼痛缓解药。

在某些实施方案中，用于本发明的微球是可生物相容的、亲水的、基本上为球形和无毒的，并且包括至少一种聚合物。在一些实施方案中，所述聚合物为亲水聚合物。在具体实施方案中，所述聚合物是高吸水性或超吸水性聚合物。在一些实施方案中，干燥形式的微球在接触或以其它方式暴露于液体如水、盐水溶液、缓冲液或生理流体时是可膨胀的。

在某些实施方案中，微球可通过18规格或更小的针头注射，并且不能被免疫系统或淋巴系统消除。在一些实施方案中，聚合物涂有促进细胞粘附的试剂。在具体实施方案中，将活细胞附着到微球上，从而在微球上面或内部形成多层细胞，该层可联接周围的组织并能增强珠子的长期稳定性。

微球在悬浮时是稳定的，这允许对微球进行配制并贮存在悬浮液中，并用不同的液体注射。更具体地，微球的亲水性允许将它们置于悬浮液中，尤其是无菌和高热(无热原)可注射溶液的形式中，同时避免形成聚集物或者粘附到贮存容器和植入装置如导管、注射器、针头等的壁上。

本发明的微球能够通过例如注射而植入机体的各个位置。用于本发明的聚合材料对组织和细胞是无毒的，并且是可生物相容的，即通常不会引起炎症。一旦植入期望的位置，微球能够保持它们的总体形状和位置。本发明的微球是可压缩的，在具体实施方案中，能够通过18规格或更小的针头注射。

可通过两个步骤获得这些性质。首先，通过使用适当的溶剂、盐浓度和pH水平并确定饱和时微球的最终尺寸，可以小心地控制注射前的微球尺寸。在已经确定最终尺寸和获得饱和必需的液体量后，可以调整注射前的微球，以使得它们保留其原始尺寸，或者通过与溶剂接触而膨胀至一定程度。膨胀取决于所用的溶剂，包括pH和溶剂的离子强度。控制注射前的膨胀，从而易于通过18规格或更小的针头(例如30规格)注射微球。第二，在注射并与注射位置处的组织接触后，微球能够进一步膨胀至预定尺寸或保留其注射前的尺寸，上述每种尺寸都将允许将微球固定在注射位置。在某些实施方案中，微球还获得了栓化效果。通过所用的具体微球、被治疗缺陷的性质和位置、以及用于膨胀的溶剂，能够确定注射前的膨胀程度和因此注射后的膨胀程度。

用于本发明的微球是柔性的，从而它们能够容易地进入并通过注射装置和小的导管，而不会被永久改变，但微球还可耐受在植入过程之中和之后产生的肌肉收缩压力。微球还是热稳定的，这允许容易方便地灭菌、和在室温下、冷冻或冻结贮存。

在某些实施方案中，微球基本上为球形，也就是说它们具有接近完美球体的形状，完美球体定义为代表最低外表面面积的体积。在一些实施方案中，在小于1000倍的放大倍率下，微球的表面显得光滑。

微球可以在药学上可接受的液体如水、缓冲溶液、盐水、体液、水性盐溶液中膨胀。在一些实施方案中，当在室温(25℃)下用液体如去离子水饱和时，干燥微球可膨胀至干燥微球直径的约2倍、约5倍或约10倍。

在某些实施方案中，干燥微球是高吸水性聚合物和/或超吸水性聚合物。在用于本文时，“超吸水物”指在室温(25℃)和常压下，1g干燥微球能够吸收高至约300g、高至约500g或高至约700g去离子水。

在某些实施方案中，微球具有均匀的尺寸。这意味着个体微球之间的直径差异为约0μm至约100μm、约0μm至约50μm或约0μm至约25μm。在一些实施方案中，微球的直径差异为100μm或更小、约50μm或更小、约25μm或更小、约10μm或更小或约5μm或更小。

在干燥形式下，即在膨胀前，本发明个体微球的直径范围能够为约10μm至约1000μm、约10μm至约400μm、约50μm至约100μm、约100μm至约150μm、约150μm至约200μm或约100μm至约400μm。在用于本文时，“干燥的”微球指包含小于约10％、小于约7％、小于约5％(例如约4％-5％)、小于约3％或小于约1％液体如水的微球。干燥的微球可以为粉末的形式。在一些实施方案中，微球在膨胀前的直径为约40μm至约1000μm、约40μm至约400μm、约50μm至约300μm、约50μm至约200μm、约70μm至约120μm、约10μm至约400μm、约10μm至约200μm、约10μm至约120μm、约10μm至约50μm、约53μm至约106μm、约106μm至约150μm、约150μm至约212μm、约200μm至约250μm、约212μm至约250μm、约250μm至约300μm、约300μm至约350μm、约350μm至约400μm、约400μm至约450μm、或约450μm至约500μm。

最优选地，微球群中大于68％的微球直径为平均直径±20％、平均直径±10％、或平均直径±5％。在一个实施方案中，微球群中大于75％的微球直径为平均直径±20％、平均直径±10％、或平均直径±5％。例如，在一个实施方案中，微球直径为约200μm至约250μm或约212μm至约250μm。在某些实施方案中，微球的平均直径为225μm，在一些实施方案中，群中75％的微球直径范围为225μm平均直径±10％(即225μm±22.5μm)。

在具体实施方案中，干燥微球在与药学上可接受的液体接触时膨胀。在它们的膨胀或部分膨胀形式中(即当微球不再为干燥粉末，而作为悬浮液或水凝胶的形式时)，微球的直径范围能够为约40μm至约2000μm、约200μm至约2000μm、约500μm至约1500μm、或约1000μm至约1500μm。可以通过例如显微镜确定微球的直径。还能够通过本领域技术人员已知的许多方法如激光系统确定微球的直径。在一些实施方案中，干燥微球膨胀至膨胀前干燥微球直径的约2倍、约3倍、约4倍、约5倍或约6倍。因此，在一些实施方案中，膨胀微球的直径可以为本文别处公开的干燥微球直径或其直径范围内的任一直径的约2倍至约6倍。

本发明的一个方面提供了微球，该微球包含：(a)聚合材料，(b)非离子型造影剂，和(c)药物如盐形式的药物。在某些实施方案中，聚合材料包括选自聚乙烯醇、聚丙烯酰胺或聚丙烯酸酯的聚合物或共聚物。优选地，聚合材料还包括带电基团，如带正电荷或带负电荷的基团，所述基团可以例如作为共聚物的官能团或交联单元存在，或者可以通过聚合物的化学修饰而引入。离子型基团可以是带正电荷的基团、带负电荷的基团或两者。在某些实施方案中，离子型基团可以是质子化的氨基或去质子化的羧酸基团(例如水解的酯基团)。

本发明的聚合材料包括但不限于丙烯酸聚合物或共聚物、聚丙烯酰胺聚合物或共聚物、或聚乙酸乙烯酯聚合物或共聚物。聚合材料还可以包含聚乳酸聚合物或共聚物、聚酸酐聚合物或共聚物、聚丙烯腈聚合物或共聚物、多糖聚合物或共聚物、及其混合物。

在一些实施方案中，聚合材料包括PVA。更优选地，聚合材料包括PVA共聚物。聚合材料还可以包括聚丙烯酸酯聚合物或共聚物。在某些实施方案中，聚合材料为PVA-聚丙烯酸酯共聚物。在其它实施方案中，聚合材料是PVA-丙烯酸钠共聚物。

另一种合适的聚合物是丙烯酸聚合物或共聚物。还一种合适的材料是丙烯酰胺聚合物或共聚物。

聚合材料可以包括一种或多种聚合物、一种或多种聚合物混合物、共聚物、共聚物混合物、或聚合物-共聚物混合物。

在某些实施方案中，聚合材料是基本亲水的。这意味着微球包含至少一种亲水聚合物或共聚物，但它还可以包括疏水聚合物或共聚物，只要微球的整体性质是基本亲水而不是疏水的。在一些实施方案中，亲水聚合物是包含-OH和/或-NH₂基团的聚合物。在其它实施方案中，亲水聚合物包含离子型基团。

聚合材料可以包含的合适聚合物为聚乙烯醇、聚丙烯酸酯、聚丙烯酰胺、聚丙烯腈、聚乙酸乙烯酯、或聚乙烯醇缩醛。

本发明的聚合物是包含聚乙烯醇或聚乙酸乙烯酯单元和丙烯酰胺基团的聚合物。

本发明的另一种聚合物是在其质子化或去质子化的包含抗衡离子的形式中包含聚乙烯醇或聚乙酸乙烯酯单元和丙烯酸的聚合物。

在一个实施方案中，聚丙烯酸酯是水解的聚丙烯酸酯。聚丙烯酸酯的例子为但不限于聚丙烯酸钠、聚丙烯酸钾、聚丙烯酸铵或其混合物。

聚合物材料如PVA可以是交联的或未交联的。

在一些实施方案中，当使用包括PVA-聚丙烯酸酯共聚物的聚合材料时，PVA单元与聚丙烯酸酯单元的比率为约2比8(约2:8)到约8比2(约8:2)。在一些实施方案中，丙烯酸酯部分与乙烯醇部分的比率为约2比8到约8比2，例如在丙烯酸钠和乙烯醇共聚物中。

当PVA被交联时，聚合材料可以包括约0.5％重量至20％重量的交联剂。交联剂的量可以为聚合物单元的约0％至约5％、约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约40％、约50％、约60％、约70％、约80％或约90％或更高。

在一些实施方案中，微球包括约1％重量至约95％重量聚乙烯醇。在某些实施方案中，微球所含的聚乙烯醇的量选自1％重量、约5％重量、约10％重量、约15％重量、约20％重量、约25％重量、约30％重量、约35％重量、约40％重量、约45％重量、约50％重量、约55％重量、约60％重量、约65％重量、约70％重量、约75％重量、约80％重量、约85％重量、约90％重量和约95％重量。

在一些实施方案中，用于制备PVA共聚物的亲水丙烯酸单元选自丙烯酰胺及其衍生物、甲基丙烯酰胺及其衍生物、丙烯酸酯和/或甲基丙烯酰羟基甲酯。在一些实施方案中，所得共聚物是皂化的。

可以通过在合成聚合材料时使用双官能或多官能的单体来进行交联。或者，还能够在合成聚合物后对其进行交联，例如通过用醛如戊二醛、甲醛等处理聚合物(例如PVA)。能够用于制备交联共聚物的双官能单体的例子包括但不限于单官能或双官能的丙烯酰胺，例如N,N'-亚甲基-双丙烯酰胺、N',N'-二烯丙基丙烯酰胺或乙二醛-双丙烯酰胺。

在一些实施方案中，本发明的微球包括非离子型造影剂。造影剂可以被负载到微球上、与微球结合、被微球吸附或以其它方法包含在微球之内或微球之上。或者，造影剂是微球的载体溶液。优选地，将造影剂负载到微球内。在其它实施方案中，微球不包括造影剂如非离子型造影剂。

本发明的非离子型造影剂可以是X-射线、CT、MRT造影剂或其组合。造影剂可以是顺磁或超顺磁的。在一些实施方案中，本发明的造影剂为X-射线造影剂(也称为荧光检查剂或不透射线)或CT造影剂。在某些实施方案中，造影剂包含碘。非离子型造影剂可以是单体、二聚的或多聚的。

本发明的非离子型造影剂的例子为但不限于：甲泛葡胺、碘帕醇(Isovue^TM或Iopamiron^TM)、碘克沙醇(Visipaque^TM)、碘海醇(Omnipaque^TM)、碘普胺(Ultravist^TM)、碘比醇、碘美普尔、碘喷托、碘必乐、碘昔兰、碘曲仑、钆双胺、钆特醇、碘十醇、碘佛醇(Optiray^TM)或其组合。在某些实施方案中，造影剂不是碘帕醇。在其它实施方案中，微球包括碘帕醇、至少一种其它的非离子型造影剂、和/或至少一种药物。在具体实施方案中，能够使用的非离子型造影剂为碘克沙醇、碘海醇、碘普胺和碘佛醇。在另一个实施方案中，非离子型造影剂为钆双胺或钆特醇。

可以通过首先合成由聚合材料组成的微球来制备本发明的微球。所述微球的例子提供于例如EP 1 128 816 B1；WO 01/72281；JP 6-56676、JP 54-37994；和美国专利4,320,040号和4,367,323号，这些文献被纳入本文作为参考。

可以通过悬浮聚合、逐滴聚合或本领域已知的任何其它方法来制备微球。所选的微球制备模式通常将取决于期望的性质，例如所得微球的微球直径和化学组成。本发明的微球能够通过本领域描述的标准聚合方法制备(参见例如E.Boschetti,Microspheres for Biochromatography and Biomedical Applications.Part I,Preparationof Microbeads,In:Microspheres,Microencapsulation and Liposomes.John Wiley&Sons,Arshady R.编，vol.2，第171-189页(1999)，该文献被纳入本文作为参考)。在一些实施方案中，从单体的水溶液开始制备微球，并任选地包含细胞粘附剂如胶原或明胶(明胶是变性的胶原)。然后将溶液与水不混溶性溶剂混合，以产生小滴的悬浮液，然后通过合适的催化剂来聚合单体，以将悬浮液转变为固体凝胶。然后通过过滤或离心收集微球，洗涤并任选地灭菌。由于乳液聚合或悬浮聚合从分散的小滴开始，所以在聚合后将获得球形微球。搅拌速度决定形成的小滴的大小。因此，可以通过聚合过程中使用的搅拌速度来控制所得微球的尺寸。在某些实施方案中，搅拌速度范围为约100RPM至约250RPM，例如约100RPM、约125RPM、约150RPM<约200RPM、约225RPM或约250RPM。

通过在亲和色谱法中以术语“配体固定”指示的公知化学偶合程序，可以将细胞粘附促进剂或标记剂任选地引入到微球上面或内部。另一种引入方法是在构成微球的凝胶网络内扩散，然后通过沉淀或化学交联将扩散的分子截留在原位。

还能够通过本领域如法国专利2,378,808、美国专利5,648,100、5,635,215和4,480,044所述的标准聚合方法获得本发明的微球，上述每个文献均被纳入本文作为参考。通常，在约0℃至约100℃和约40℃至约60℃的温度下，在聚合反应引发剂的存在下，在溶液中进行单体的聚合。

有益地在氧化还原体系中选择聚合引发剂。

还能够使用碱金属过硫酸盐与N,N,N',N'-四甲基乙二胺的组合或与二甲基氨基丙腈、有机过氧化物如过氧化苯甲酰或2,2'-偶氮-双异丁腈的组合。本领域技术人员可使所用的引发剂数量适应单体的数量和所追求的聚合速率。可以进行本体聚合、乳液聚合或悬浮聚合。

在本体聚合的情况下，包含不同溶解成分的水溶液和引发剂在均匀的介质中进行聚合。这使得可能获得水凝胶块，然后例如通过筛网将水凝胶块分离成微球。

在具体实施方案中，制备方法是乳液聚合或悬浮聚合，这使得可能直接获得具有期望尺寸的球形微球。例如，任选地在乳化剂的存在下，可以通过搅拌将包含不同溶解成分(例如不同的单体和任选的细胞粘附剂)的水溶液与水不混溶性液体有机相混合。可以调整搅拌速率，从而在有机相中获得水相乳液，以形成具有期望直径的小滴。然后可以通过添加引发剂开始聚合。聚合可能伴有放热反应，然后可以在其发展后测量反应介质的温度。

在一些实施方案中，可能使用植物油或矿物油、某些石油蒸馏产物、氯化烃、或这些不同溶液的混合物作为有机相。

此外，当聚合引发剂包括几种组分(氧化还原体系)时，可能在乳化前向水相中添加其中的一种组分。

然后可以通过冷却、倾析和过滤回收由此获得的微球。然后可以通过尺寸分类，例如通过使用具有具体尺寸的网或筛子将微球分离，并洗涤以消除任何痕量的次要产物。

聚合阶段后面可以是使细胞粘附剂形成网状的阶段，和当在合成后通过接枝使得微球可识别的情况下，可能的标记试剂阶段。

然后可以任选地使微球与包含造影剂如非离子型造影剂的溶液接触。如果微球还要负载药物，则造影剂的负载没有进行至完全饱和的程度。为了这个目的，首先确定微球能够吸收的液体量。然后用被包含造影剂的溶液完全饱和所必需的溶液量的约10％重量、约20％重量、约30％重量、约40％重量、约50％重量或约60％重量、高至约70％重量或约80％重量饱和干燥微球。然后可以用包括一种或多种药物或其它药剂的溶液将微球负载至部分或完全饱和。或者，可以首先用药物溶液将微球负载至部分或完全饱和，随后(或同时)负载造影剂。

如本文别处所述，可能只对必需完全饱和的一部分溶液进行负载，并允许在微球预期植入、注射或以其它方式施用的组织位置内完全饱和(膨胀)。

因此，能够通过下述方法，在施用药物溶液之前、同时或之后施用已经负载了药物的微球、或者还未负载或只部分负载了药物的微球。当微球和药物例如被同时、分别或按顺序施用时，包括(a)微球、(b)造影剂和(c)一种或多种药物的试剂盒也是预期的。

在具体实施方案中，用约4ml至约12ml、优选约5ml至约10ml盐水溶液(0.9％wt NaCl)负载100mg本发明的干燥微球。

通常，可以以每100mg干燥微球约1mg至约800mg、约10mg至约400mg或约20mg至约300mg药物来负载本发明的微球。

通常，可以以每100g干燥微球约100mg至约1500mg碘的造影剂如非离子型造影剂(例如包含碘的造影剂)来负载微球。

可以用包含碘的造影剂，以每毫克微球约100mg至约1500mg碘和每100mg干燥微球1至约800mg、约10至约400mg、约20mg至约300mg药物来负载微球。

可以通过将待负载材料的已知溶液添加到已知量(例如100mg)的干燥微球中来确定负载量。添加溶液直到达到饱和，即直到形成上清液。然后分离上清液并分析负载材料的量。然后从用于负载的总量中减去该量，以得到负载在微球上的材料量。

药物组合物

本发明还涉及包括任何上述微球和药学上可接受的液体或其它可生物相容的载体的药物组合物。组合物可以是悬浮液、水凝胶或乳液的形式。组合物还可以是所述微球在所述液体内的悬浮液。在一些实施方案中，组合物是无菌的。

药学上可接受的液体可以是但不限于盐水、缓冲溶液、水、等张溶液、生物流体或其混合物。液体还可以是盐溶液，优选含有选自钠、钾、钙、镁、铁、锌、和铵的阳离子，例如约0.01M至约5M的阳离子。

组合物可以包括约10％重量至约90％重量的微球和约10％重量至约90％重量的液体(或其它可生物相容的载体)。组合物还可以包括约10％重量至约50％重量的微球和约50％重量至约90％重量的液体(或其它可生物相容的载体)。

在一些实施方案中，可生物相容的载体是水基溶液、水性有机溶液、有机溶液、非水性溶液、或其混合物。在某些实施方案中，可生物相容的载体包括含有阳离子，例如钠、钾、钙、镁、铁、锌、铵及其混合物的盐，例如约0.01M至约5M的阳离子。

负载到微球上面或内部的化合物可能由于生理过程而在体内释放。负载到微球上的药物或其它药剂的释放可能受到pH和盐浓度的影响。例如，通过在微球周围的环境中建立pH变化或改变离子强度，可以加速药物释放。例如，多柔比星的药物释放在约7.5的pH下比在约5.3的pH下释放得更缓慢。本领域技术人员可以容易地确定所述最佳释药条件。

在一些实施方案中，药物在特定的小时数、天数或周数内释放。在一个实施方案中，在特定的时间段后，例如在约3小时、约6小时、约12小时、约18小时后，或在约1天、约2天、约3天、约4天、约5天、约6天后，或在约1周、约2周、约3周、约4周、约5周、约6周、约7周、约8周、约9周、或约10或更长时间后，从微球中释放了约10％、约15％、约20％、约25％、约30％、约35％、约40％、约45％、约50％、约55％、约60％、约65％、约70％、约75％、约80％、约85％、约90％、约95％或约100％药物。释药性质将部分取决于所用具体药物的性质，但可由本领域技术人员容易地确定。

在一些实施方案中，药物在特定的天数或周数内从微球中释放。在一个实施方案中，在约72小时的时间段内、在约96小时的时间段内、在一周的时间段内、在两周的时间段内、或在四周的时间段内，释放了大于约1％但小于约5％的药物。

在另一个实施方案中，在约72小时的时间段内、在约96小时的时间段内、在一周的时间段内、在两周的时间段内、和在四周的时间段内，释放了大于约1％但小于约15％的药物。

在还一个实施方案中，在约72小时的时间段内、在约96小时的时间段内、在一周的时间段内、在两周的时间段内、和在四周的时间段内，释放了大于约1％但小于约20％的药物。

在还一个实施方案中，在约72小时的时间段内、在约96小时的时间段内、在一周的时间段内、在两周的时间段内、和在四周的时间段内，释放了大于约1％但小于约25％的药物。

在还一个实施方案中，在约72小时的时间段内、在约96小时的时间段内、在一周的时间段内、在两周的时间段内、和在四周的时间段内，释放了大于约1％但小于约30％的药物。

可以在0.9％盐水(NaCl溶液)的存在下，在室温(25℃)和搅拌下，在体外测量上述释放。实施例5描述了典型的释放测量法。

治疗方法

本发明提供了适合治疗肿瘤或其它癌症、非肿瘤源性血管发生依赖性疾病、或疼痛，如涉及肿瘤或其它癌症的存在的疼痛的组合物和方法。所述癌症包括但不限于：肝癌、卵巢癌、乳腺癌、肾癌、肺癌、胰腺癌、甲状腺癌、前列腺癌、子宫癌、皮肤癌、头颈肿瘤、乳腺肿瘤和卡波西肉瘤、以及膀胱癌的浅表形式。所述治疗方法可以是局部(或全身)递送由载药微球释放的药物的单独结果或与微球的栓化作用(“主动栓化”)的组合结果。在某些实施方案中，将本发明的载药微球施用至血管以外的位置特异性区域(例如直接进入肿瘤块)，没有发生血管栓化。

然而，除了癌症外，还可以用本发明的微球或药物组合物治疗许多以血管的异常生长为特征的其它非肿瘤源性血管发生依赖性疾病。所述非肿瘤源性血管发生依赖性疾病的代表性例子包括但不限于肥厚性瘢痕和瘢痕疙瘩、过度增生性糖尿病性视网膜病、类风湿性关节炎、动静脉畸形、动脉粥样硬化性斑块、延迟的伤口愈合、血友病性关节、不连接骨折、奥-韦综合征、牛皮癣、化脓性肉芽肿、硬皮病、沙眼、月经过多和血管粘连。

类似地，本发明的微球和组合物可以用于将药物递送至有需要的各种细胞、组织或器官。例如，所述微球和组合物可以用于治疗肿瘤或癌症、炎性疾病或涉及炎症的其它疾病、或其症状。

应该理解，适合用本发明的微球进行被动栓化、主动栓化或递药的患者包括人和动物，优选人，包括男性和女性婴儿、儿童和成年人，包括老年人。处于肝细胞疾病如肝炎或肝癌的危险中、或目前患有所述疾病的患者是特别优选的患者群，例如年龄为18至75岁的高加索或亚洲(例如包括但不限于具有日本血统的人)人患者。在一些实施方案中，患者年龄为25-75、25-50、50-75或18-25岁。在一个实施方案中，患者年龄小于18岁(例如年龄为1-5、5-10、10-15、15-18岁)。在另一个实施方案中，患者年龄大于75岁。

在一些实施方案中，本发明的微球用于治疗、控制或预防患者体内的肝细胞疾病。在一个实施方案中，患者为Child-Pugh A类。在另一个实施方案中，患者为Child-Pugh B类。在还一个实施方案中，患者为Child-Pugh C类。Child-Pugh分类在本领域中是公知的，参见例如Child和Turcotte(1964)Surgery and portalhypertension,In:The liver and portal hypertension(Edited by:Child CG).Philadelphia,Saunders 1964,50-64；该文献后来由Pugh等，Transection of theesophagus in bleeding oesophageal varices(1973)Br.J.Surg.60:648-652修改。在一些实施方案中，患者感染有丙型肝炎病毒。

本发明的微球和药物组合物能够用于被动栓化治疗和主动栓化治疗。该微球还能够被用作具有或不具有栓化作用的递送体系，例如作为递药体系。

微球可以包含造影剂如非离子型造影剂、和至少一种(例如一种、两种、三种、四种或更多)药物或其它药剂。所述药物可以是抗肿瘤药、抗血管发生药、抗真菌药、抗病毒药、抗炎药、抗菌药、细胞毒性药、化疗药或疼痛缓解药和/或抗组胺药中的任何一种或多种。药物可以是例如激素、甾体、维生素、细胞因子、趋化因子、生长因子、白介素、酶、抗过敏药、循环药、抗结核药、抗心绞痛药、抗原生动物药、抗风湿药、麻醉药、强心苷药、镇静药、局麻药、全麻药及其组合中的任何一种或多种。当用于治疗疼痛时，本发明的微球优选负载疼痛缓解药。

在一个实施方案中，微球包括抗血管发生药或抗肿瘤药。在另一个实施方案中，微球包括化疗药或疼痛缓解药。在一些实施方案中，微球包括一种或多种抗肿瘤药和一种或多种化疗药或疼痛缓解药。

抗血管发生药或抗肿瘤药的例子包括但不限于：烷化剂、氮芥、抗代谢药、促性腺激素释放激素拮抗药、雄激素、抗雄激素、抗雌激素、雌激素、及其组合。具体例子包括但不限于：放线菌素D、阿地白介素、阿仑单抗、阿利维A酸、别嘌醇、六甲蜜胺、氨磷汀、氨鲁米特、两性霉素B、安吖啶、阿那曲唑、安丝菌素、阿拉伯腺嘌呤、三氧化二砷、天冬酰胺酶、欧文氏菌属天冬酰胺酶、活BCG、苯甲酰胺、贝伐单抗、贝沙罗汀、博来霉素、3-溴丙酮酸盐、白消安、卡普睾酮、卡培他滨、卡铂、卡折来新、卡莫司汀、塞来考昔、苯丁酸氮芥、顺铂、克拉屈滨、环磷酰胺、阿糖胞苷、阿拉伯糖苷胞嘧啶、达卡巴嗪、放线菌素D、阿法达贝泊汀、柔红霉素、道诺霉素、地尼白介素-毒素连接物、右雷佐生、地塞米松、多西他赛、多柔比星、屈他雄酮、表柔比星、阿法依泊汀、雌莫司汀、雌莫司汀、依托泊苷、VP-16、依西美坦、非格司亭、氟尿苷、氟达拉滨、5-氟尿嘧啶(5-FU)、氟他胺、氟维司群、demcitabine、吉西他滨、吉姆单抗、醋酸戈舍瑞林、羟基脲、替伊莫单抗、伊达比星、异环磷磷酰胺、伊马替尼、干扰素(例如干扰素α-2a、干扰素α-2b)、伊立替康、来曲唑、亚叶酸、亮丙立德、洛莫司汀、meciorthamine、甲地孕酮、美法仑(例如PAM、L-PAM或苯丙氨酸氮芥)、巯嘌呤、巯基聚赖氨酸、美钠、甲磺酸盐、甲氨蝶呤、甲氧沙林、普卡霉素、丝裂霉素、米托坦、米托蒽醌、苯丙酸南诺龙、诺瓦得士、奥普瑞白介素、奥沙利铂、紫杉醇、帕米膦酸钠、培加酶、培门冬酶、PEG化非格司亭、喷司他丁、哌泊溴烷、普卡霉素、卟吩姆钠、丙卡巴肼、米帕林、雷替曲塞、拉布立酶、核苷、利妥昔单抗、沙格司亭、螺铂、链佐星、他莫昔芬、替加氟-尿嘧啶、替莫唑胺、替尼泊苷、睾内酯、硫鸟嘌呤、塞替派、组织型纤溶酶原激活物、托泊替康、托瑞米芬、托西莫单抗、曲妥单抗、曲奥舒凡、维A酸、曲洛司坦、戊柔比星、长春碱、长春新碱、长春地辛、长春瑞滨、唑来膦酸、其盐、或其混合物。

在一些实施方案中，铂化合物为螺铂、顺铂、或卡铂。在具体实施方案中，药物为顺铂、丝裂霉素、紫杉醇、他莫昔芬、多柔比星、他莫昔芬或其混合物。

其它抗血管发生药或抗肿瘤药包括但不限于：AGM-1470(TNP-470)，血管静止甾体，血管生长抑制素，抗avβ3抗体，抗bFGF抗体，抗IL-1抗体，抗TNF-α抗体，抗VEGF抗体，金诺芬，硫唑嘌呤，BB-94和BB-2516，碱性FGF可溶性受体，羧基酰氨基-三唑(CAI)，软骨来源的抑制剂(CDI)，壳多糖，氯喹，CM 101，可的松/肝素，可的松/透明质烷，脱氧皮甾醇/肝素，CT-2584，环磷酰胺，环胞菌素A，地塞米松，双氯芬酸/透明质烷，嗜酸性粒细胞主要基础蛋白，纤维结合蛋白肽，胶质瘤来源的血管发生抑制因子(GD-AIF)，GM 1474，氯化金，硫代苹果酸金，肝素酶，透明质烷(高分子量和低分子量种类)，氢化可的松β-环糊精，布洛芬，吲哚美辛，干扰素-α，干扰素γ可诱导的蛋白质10，干扰素-γ，IL-1，IL-2，IL-4，IL-12，昆布氨酸，左旋咪唑，利诺胺，LM609，martmastat(BB-2516)，甲羟孕酮，密都锭，二甲胺四环素，氧化氮，奥曲肽(生长抑素类似物)，D-青霉胺，戊聚糖多聚硫酸盐，胎盘多育曲霉素相关性蛋白质，胎盘RNA酶抑制剂，纤维蛋白酶原激活因子抑制物(PAI)，血小板因子-4(PF4)，泼尼松龙，催乳素(16-kDa片段)，多育曲霉素相关性蛋白质，前列腺素合成酶抑制剂，鱼精蛋白，类视色素，生长抑素，P物质，苏的明，SU101，替可加兰钠(05-4152)，四氢可的索-sthrombospondins(TSP)，金属蛋白酶的组织抑制剂(TIMP 1、2、3)，沙利度胺，3-氨基沙利度胺，3-羟基沙利度胺，沙利度胺、3-氨基沙利度胺、3-羟基沙利度胺的代谢物或水解产物，维生素A和玻璃体液。在另一个优选实施方案中，抗血管发生药选自沙利度胺，3-氨基沙利度胺，3-羟基沙利度胺和沙利度胺、3-氨基沙利度胺、3-羟基沙利度胺的代谢物或水解产物。在优选实施方案中，抗血管发生药为沙利度胺。上述抗血管发生药公开于美国专利5,593,990、5,629,327和5,712,291；Norrby,APMIS,1997,105:417-437；O'Reilly,Investigational New Drugs,1997,15:5-13；和J.Nat'l Cancer Instil,1996,88(12):786-788，这些文献的内容被纳入本文作为参考。

疼痛缓解药的例子为但不限于止痛药或抗炎药，例如非甾类抗炎药(NSAID)、布洛芬、酮洛芬、右酮洛芬、苯托沙敏、氯苯那敏、呋洛芬、万络、西乐葆、托西莫单抗、萘丁美酮、阿司匹林、可待因、磷酸可待因、对乙酰氨基酚、扑热息痛、赛罗卡因、和萘普生。

在一些实施方案中，疼痛缓解药为阿片。通常由于阿片类的有效止痛或疼痛缓解性质而开阿片处方。落入该类的化合物包括麻醉药，例如吗啡、可待因和相关药物。阿片类的其它例子包括羟考酮、右丙氧芬、氢可酮、氢吗啡酮和哌替啶。

下面非限制性地列出了本发明的微球能够被用作它们的具有或不具有栓化作用的递送体系的其它化合物、药物或其它药剂。

血液产品：

血液产品包括例如但不限于红细胞生成素、胃肠道外的铁、氯化高铁血红素和血卟啉及其衍生物。

生物响应调节剂：

生物响应调节剂包括例如但不限于：胞壁酰二肽、胞壁酰三肽、淋巴因子(例如细胞内霉素，例如脂多糖、巨噬细胞激活因子)、细菌的亚单位(例如分枝杆菌、棒状杆菌)、合成肽、N-乙酰基-胞壁酰-L-丙氨酰基-二谷氨酸、和前列腺素。

抗真菌药：

抗真菌药包括例如但不限于：酮康唑、制霉菌素、灰黄霉素、氟胞嘧啶(5-fc)、咪康唑、两性霉素B、蓖麻蛋白、和β-内酰胺抗生素(例如磺胺泽辛)。

激素和甾体：

激素和甾体包括例如但不限于：生长激素、促黑素细胞激素、促肾上腺皮质激素、地塞米松、醋酸地塞米松、地塞米松磷酸钠、可的松、醋酸可的松、氢化可的松、醋酸氢化可的松、环戊丙酸氢化可的松、氢化可的松磷酸钠、氢化可的松琥珀酸钠、泼尼松、泼尼松龙、醋酸泼尼松龙、泼尼松龙磷酸钠、泼尼松龙叔丁乙酯、泼尼松龙三甲基乙酯、曲安西龙、曲安奈德、己曲安奈德、醋酸曲安西龙、甲泼尼龙、醋酸甲泼尼龙、琥钠甲泼尼龙、氟尼缩松、二丙酸倍氯米松、倍他米松磷酸钠、倍他米松、vetamethasone磷酸二钠、vetamethasone磷酸钠、醋酸倍他米松、倍他米松磷酸二钠、醋酸氯泼尼松、皮质酮、去氧皮质酮、醋酸去氧皮质酮、匹伐酸去氧皮质酮、去羟米松、雌二醇、氟氢可的松、醋酸氟氢可的松、醋酸二氯松、氟氢可的松、氟米龙、氟泼尼松、帕拉米松、醋酸帕拉米松、雄酮、氟甲睾酮、醛固酮、美雄酮、甲雄烯二醇、甲睾酮、诺乙雄龙、睾酮、庚酸睾酮、丙酸睾酮、去氢马烯雄酮、马烯雄酮、雌二醇苯甲酸酯、雌二醇二丙酸酯、雌三醇、雌酮、苯甲酸雌酮、乙酸孕烯诺龙、醋酸阿那孕酮、醋酸氯地孕酮、醋酸氟孕酮、羟甲基黄体酮、醋酸羟甲基黄体酮、羟孕酮、醋酸羟孕酮、己酸羟孕酮、醋酸美仑孕酮、甲基诺龙、孕烯诺龙、黄体酮、炔雌醇、美雌醇、地美炔酮、炔孕酮、双醋炔诺醇、炔诺酮、醋酸炔诺酮、诺塞甾酮、氟轻松、氟氢缩松、氟尼缩松、氢化可的松琥珀酸钠、琥钠甲泼尼龙、泼尼松龙磷酸钠、曲安奈德、羟二酮钠螺内酯、氧雄龙、羟甲烯龙、prometholone、环戊丙酸睾酮、苯乙酸睾酮、环丙酸雌二醇、和异炔诺酮。

维生素：

维生素包括例如但不限于：维生素B12、维A酸、类视色素及其衍生物，例如维生素A棕榈酸酯、α-生育酚、萘醌、维生素D3、叶酸和四氢叶酸盐。

肽和肽类似物：

肽和肽类似物包括例如但不限于：锰超氧化物歧化酶，组织型纤溶酶原激活物(t-PA)，谷胱甘肽，胰岛素，多巴胺，包含RGD、AGD、RGE、KGD、KGE或KQAGDV(对GPEXma受体具有亲和力的肽)的肽配体，阿片肽、脑啡肽、内啡肽及其类似物，人绒毛膜促性腺激素(HCG)，促肾上腺皮质激素释放因子(CRF)，缩胆囊素及其类似物，缓激肽及其类似物和促进剂和抑制剂，弹性蛋白，血管升压素，胃蛋白酶，胰高血糖素，P物质，整联蛋白，卡托普利，依那普利，赖诺普利和其它ACE抑制剂，促肾上腺皮质激素(ACTH)，催产素，降钙素，IgG或其片段，IgA或其片段，IgM或其片段，效应细胞蛋白酶受体(所有亚型)的配体，凝血酶，链激酶，尿激酶，t-PA及所有活性片段或类似物，蛋白激酶C及其结合配体，干扰素(α-IFN，β-IFN，γ-IFN)，集落刺激因子(CSF)，粒细胞集落刺激因子(GCSF)，粒细胞巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)，肿瘤坏死因子(TNF)，神经生长因子(NGF)，血小板来源的生长因子，淋巴毒素，表皮生长因子，成纤维细胞生长因子，血管内皮细胞生长因子，红细胞生成素，转化生长因子，制癌蛋白M，白介素(IL-1、IL-2、IL-3、IL-4、IL-5、IL-6、IL-7、IL-8、IL-9、IL-10、IL-11、IL-12、IL-13、IL-14、IL-15、IL-16、IL-17、IL-18、IL-19、IL-20等)，金属蛋白激酶配体，胶原酶及其激动剂和拮抗剂。

抗体：

抗体包括例如但不限于基本上纯化的抗体或其片段，包括非人抗体或其片段。在各种实施方案中，基本上纯化的抗体或其片段能够为人、非人、嵌合和/或人源化的抗体。所述非人抗体可以是山羊、小鼠、绵羊、马、鸡、兔或大鼠抗体。或者，本发明的非人抗体可以是嵌合和/或人源化的抗体。完全的人抗体用于治疗人患者是特别合意的。嵌合抗体是其中不同部分源自不同动物种类的分子，例如具有源自鼠单克隆抗体(mAb)的可变区域和人免疫球蛋白稳定区域的那些抗体(Cabilly等人，美国专利4,816,567；和Boss等人，美国专利4,816,397，这些文献被全部纳入本文作为参考)。此外，非人抗体可以是多克隆抗体或单克隆抗体。用于本发明微球的任何抗体均能够共轭至治疗部分或可检测的物质。能够与本发明的抗体共轭的可检测物质的非限制性例子为酶、辅基、荧光材料、发光材料、生物发光材料、和放射活性材料。在用于本文时，术语“单克隆抗体”或“单克隆抗体组合物”指只包含一种能够与特定抗原决定部位发生免疫反应的抗原结合位置的抗体分子群。通过用本发明的多肽作为免疫原使合适的个体免疫能够如上所所述制备多克隆抗体。优选的多克隆抗体组合物是这样的组合物：其中所选的抗体用于对抗一种或多种多肽，例如要用本发明的组合物治疗的肿瘤的癌细胞表面受体。

抗有丝分裂因子：

抗有丝分裂因子包括但不限于：雌莫司汀及其磷酸化衍生物、雌莫司汀-磷酸盐、多柔比星、amphethinile、考布他汀A4、和秋水仙碱。

疫苗：

疫苗包括例如但不限于：肺炎球菌疫苗，脊髓灰质炎疫苗，炭疽疫苗，结核杆菌(BCG)疫苗，甲型肝炎疫苗，霍乱疫苗，脑膜炎球菌A、C、Y疫苗，W135疫苗，鼠疫疫苗，狂犬病(人双倍体)疫苗，黄热病疫苗，流行性乙型脑炎疫苗，伤寒(苯酚和热杀灭的)疫苗，乙型肝炎疫苗，diptheria疫苗，破伤风疫苗，百日咳疫苗，H流感b型疫苗，脊髓灰质炎疫苗，麻疹疫苗，腮腺炎疫苗，风疹疫苗，水痘疫苗，肺炎链球菌Ty(活突变细菌)疫苗，Vi(Vi荚膜多糖)疫苗，DT(类霉素)疫苗，Td(类霉素)疫苗，aP(灭活细菌抗原/accelular(DtaP))疫苗，Hib(细菌多糖-蛋白质共轭物)疫苗，乙型肝炎病毒(灭活血清来源的病毒抗原/重组抗原)疫苗，流感疫苗，轮状病毒疫苗，呼吸道合胞体病毒(RSV)疫苗，人星状病毒疫苗，轮状病毒疫苗，人流感A和B病毒疫苗，甲型肝炎病毒疫苗，减活副流感病毒3型疫苗，肠道病毒疫苗，逆转录病毒疫苗，和细小核糖核酸病毒疫苗。

抗过敏药：

抗过敏药包括例如但不限于amelexanox。

抗凝血药：

抗凝血药包括例如但不限于苯丙香豆素和肝素。

循环药：

循环药包括例如但不限于普萘洛尔。

抗结核药：

抗结核药包括例如但不限于对氨基水杨酸、异烟肼、硫酸卷曲霉素、环丝氨酸、盐酸乙胺丁醇、乙硫异烟胺、吡嗪酰胺、利福平、和硫酸链霉素。

抗病毒药：

抗病毒药包括例如但不限于：阿昔洛韦、金刚烷胺、叠氮胸苷(AZT或齐多夫定)、利巴韦林、和一水合阿糖胞苷(阿糖腺苷、ara-A)。

抗心绞痛药：

抗心绞痛药包括例如但不限于：地尔硫卓、硝苯地平、维拉帕米、丁四硝酯、二硝酸异山梨酯、硝酸甘油(三硝酸甘油酯)、和戊四硝酯。

抗生素：

抗生素包括例如：氨苯砜、氯霉素、新霉素、头孢克洛、头孢羟氨苄、头孢氨苄、头孢拉定、红霉素、克林霉素、林可霉素、阿莫西林、氨苄西林、巴氨西林、羧苄西林、双氯西林、环青霉素、picloxacillin、海他西林、甲氧西林、萘夫西林、苯唑西林、青霉素G、青霉素V、替卡西林、利福平、和四环素。

抗炎药和止痛药：

抗炎药和止痛药包括例如：二氟尼柳、布洛芬、吲呐美辛、甲氯芬那酸盐、甲芬那酸、萘普生、羟布宗、保泰松、吡罗昔康、舒林酸、托美丁、阿司匹林和水杨酸盐。

抗原生动物药：

抗原生动物药包括例如但不限于：氯喹、甲硝哒唑、羟氯喹、奎宁、和锑酸葡胺。

抗类风湿药：

抗类风湿药包括例如但不限于青霉胺。

麻醉药：

麻醉药包括例如但不限于：鸦片樟脑酊和阿片类，例如可待因、海洛因、美沙酮、吗啡和阿片。

强心苷药：

强心苷药包括例如但不限于：去乙酰毛花苷、洋地黄毒苷、地高辛、毛地黄苷和毛地黄。

神经肌肉阻断药：

神经肌肉阻断药包括例如但不限于：甲磺酸阿曲库铵、戈拉碘铵、己芴溴铵、碘二甲箭毒、泮库溴铵、氯化琥珀胆碱(氯化琥珀胆碱)、氯筒箭毒碱、和维库溴铵。

镇静药(催眠药)：

镇静药包括例如但不限于：异戊巴比妥、异戊巴比妥钠、阿普比妥、仲丁比妥钠、水合氯醛、乙氯维诺、炔己蚁胺、盐酸氟西泮、格鲁米特、盐酸左美丙嗪、甲乙哌酮、盐酸咪达唑仑、副醛、戊巴比妥、戊巴比妥钠、苯巴比妥钠、司可巴比妥钠、他布比妥、替马西泮、和三唑仑。

局麻药：

局麻药包括例如但不限于：盐酸布比卡因、盐酸氯普鲁卡因、盐酸依替卡因、盐酸利多卡因、盐酸甲哌卡因、盐酸普鲁卡因、和盐酸丁卡因。

全麻药：

全麻药包括例如但不限于：氟哌利多、依托咪酯、枸橼酸芬太尼-氟哌利多、盐酸氯胺酮、美索比妥钠、和硫喷妥钠。

放射活性粒子或离子：

放射活性粒子或离子包括例如但不限于：锶、铼、钇、锝和钴。

细胞粘附促进剂。

在一些实施方案中，微球可能包括细胞粘附促进剂。本领域公知的各种类型的细胞粘附促进剂均可用于本发明。具体地，细胞粘附促进剂可以选自胶原、明胶、葡糖胺基聚糖、纤维结合蛋白、卵磷脂、聚阳离子(例如聚赖氨酸、壳聚糖等)、或任何其它天然或合成的生物细胞粘附剂。优选地，细胞粘附促进剂以约0.1至约1g/ml所停留微球的量存在于微球或其它固体基质中。

本发明的靶向方面还可降低用于治疗的剂量，因为治疗位置处的有效浓度在体内保持不被稀释。要施用至患者的本发明药物或药剂的量取决于例如所用的具体药物或药剂，药物/药剂被施用的方法，和患者的年龄、性别、体重和身体状况。通常，以小剂量开始治疗，然后可以以小的增量提高剂量，直到在获得期望的效果。此外，本领域技术人员可以依赖参考资料，例如由Medical Economics Companyat Montvale,NJ出版的医师用药参考(Physician’s Desk Reference)，以确定具体药物/药剂的适当量，并因此可以使用本发明的方法将该剂量或更低或更高的剂量应用至患者。根据本发明，为了例如治疗患者的状况(即疾病状态、疾病、病症等)，将前药递送至患者(例如在患者的一个区域内)。可以如上所述使用前药，或者可以将前药加入到其它实施方案如乳液中。

预期用本发明的组合物和方法治疗的疾病包括例如但不限于：涉及肝、肾的肿瘤、急性成淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、尤因肉瘤、妊娠滋养层肉瘤、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、弥漫性大细胞性淋巴瘤、滤泡性混合性淋巴瘤、成淋巴细胞淋巴瘤、横纹肌肉瘤、睾丸癌、维尔姆斯瘤、肛门癌、膀胱癌、乳腺癌、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞源性白血病、多毛细胞白血病、头颈癌、脑膜瘤、神经纤维瘤、血管纤维瘤、肺(小细胞)癌、多发性骨髓瘤、非霍奇金淋巴瘤、滤泡淋巴瘤、卵巢癌、脑瘤(星形细胞瘤)、宫颈癌、结肠直肠癌、肝细胞癌、人大肝细胞癌、卡波西肉瘤、肺(非小细胞)癌、黑素瘤、胰腺癌、前列腺癌、软组织肉瘤、乳腺癌、结肠直肠癌(II阶段)、骨瘤、骨源性肉瘤、卵巢癌、子宫纤维瘤、睾丸癌、或其组合。

可以以至少三种主要方式利用本发明的栓化治疗和/或药物递送，以帮助控制或治疗肿瘤：(1)决定性的肿瘤治疗(通常为良性)；(2)用于术前栓化；和(3)用于治标性栓化。简言之，有时可以只用栓化治疗来成功地治疗良性肿瘤。所述肿瘤的例子包括血管源性简单肿瘤(例如血管瘤)、内分泌肿瘤如副甲状腺腺瘤、和良性骨瘤。

对于其它肿瘤(例如肾腺癌)，为了减少手术的血液损失、缩短手术的持续时间、和减少由于手术操纵肿瘤所致的存活恶性细胞分散的危险，可以在手术切除前几小时或几天使用术前栓化和/或递药。可以成功地栓化许多肿瘤，和/或可以在术前递送许多药物，包括例如鼻咽瘤、颈静脉球瘤、脑膜瘤、化学感受器瘤、和迷走神经神经瘤。

应该明白，可以使用本发明的方法和组合物，例如通过栓化和/或递药来治疗各种肿瘤。简言之，通常将肿瘤分成两类：良性和恶性。在良性肿瘤中，细胞保留其分化特征，不会以完全失控的方式分裂。此外，肿瘤是局部和非转移性的。在恶性肿瘤中，细胞变得未分化，不会响应身体的生长和激素信号，并以失控的方式繁殖；肿瘤是侵略性的并能传播至遥远的位置(转移)。

在本发明的一个方面，可以利用本发明的组合物和方法，通过栓化治疗和/或递药来治疗肝的转移(次发性肿瘤)。简言之，可以通过股动脉或臂动脉插入导管，通过在荧光检查的指导下操纵导管通过动脉系统，使导管前进到肝动脉中。导管能够前进到允许完全阻断供应肿瘤的血管所必需的遥远肝动脉树中，同时保留尽可能多的供应正常结构的动脉分枝。在某些实施方案中，这将是肝动脉的部分分枝，但可能将需要阻断远离胃和十二脂肠动脉源的整个肝动脉，或者甚至多个独立的动脉，这取决于肿瘤的程度及其个体血液供应。一旦获得了期望的导管位置，就可以如下栓化动脉：通过动脉导管注射抗血管发生治疗组合物，直到组合物流入要被阻断终止的动脉内，优选甚至在观察约5分钟后栓化。可以如下证实动脉的堵塞：通过导管注射不透射线的造影剂，并通过荧光检查或X-射线膜证明前面填充有造影剂的血管不再包含造影剂。可以对要堵塞的每个供应动脉重复相同的程序。

在本发明的另一个方面，可以在手术过程中使用主动治疗性栓化疗法来除去肿瘤或血管块或癌性器官。此外，本发明的另一方面涉及使用主动治疗性栓化疗法预防或改善转移瘤。

如上所述，良性和恶性肿瘤两者均是本发明组合物和方法的靶。良性肝瘤的代表性例子包括肝细胞腺瘤、海绵状血管瘤和局灶性结节性增生。还可以治疗其它更稀少并且通常不具有临床指征的良性肿瘤。这些肿瘤包括胆管腺瘤、胆管囊腺瘤、纤维瘤、脂肪瘤、平滑肌瘤、间皮瘤、畸胎瘤、粘液瘤、和再生性结节性增生。

通常将恶性肝瘤再分成两类：原发性和次发性。原发性肿瘤直接来自发现它们的组织。因此，原发性肝瘤最初源自构成肝细胞的细胞(例如肝细胞和胆细胞)。可以通过动脉栓化治疗的原发性肝恶性病的代表性例子包括肝细胞癌、胆管癌、血管肉瘤、囊腺癌、鳞状细胞癌、和成肝细胞瘤。

次发性肿瘤或转移瘤是源自身体别处但随后传播到遥远器官的肿瘤。转移的普通途径是直接生长到邻近结构内、通过血管或淋巴系统传播、以及沿着组织平面和身体空间(腹膜液、脑脊髓液等)发展。次发性肝瘤是癌症患者中最常见的死亡原因之一，到目前为止是肝瘤的最普通形式。尽管最终任何恶性病均可能转移至肝，但最可能传播至肝的肿瘤包括：胃、结肠和胰腺的癌症；黑素瘤；肺、口咽和膀胱的肿瘤；霍奇金和非霍奇金淋巴瘤；胸、卵巢和前列腺的肿瘤。每一种上述原发性肿瘤均具有可通过动脉栓化治疗的许多不同肿瘤类型(例如但不限于，据报道有超过32种不同类型的卵巢癌)。

施用方法

可以通过向有需要的哺乳动物施用治疗有效量的本发明微球或药物组合物来治疗或预防上述疾病或病症。微球可以以其完全膨胀的状态施用，或者还可以以部分膨胀的状态施用。

通常通过注射进行施用。在某些实施方案中，通过导管施用微球。在其它实施方案中，使用连接至注射器的针头注射微球。在一些实施方案中，将微球施用到血管内。在其它实施方案中，直接施用到作用位置，例如进入肿瘤块、或进入需要所述治疗的细胞、器官或组织中。可以施用已经载有药物的本发明微球。在其它实施方案中，将微球与药物溶液组合施用，其中在施用微球之前、同时或之后施用药物溶液。

当施用时，微球或药物组合物适合注射。在具体实施方案中，微球或包括微球的组合物是无菌的。

试剂盒

本发明还涉及包括一个或多个容器的药物包装和试剂盒，所述容器填充有上述本发明组合物的一种或多种成分。试剂盒可以包括微球、造影剂、和包含一种或多种药物的溶液，其中一种、两种、三种或多种组分可以处于一个、两个、三个或多个小瓶内。伴随所述容器的可以是符合政府机构规定形式的注意事项，规定药品或生物产品的制备、使用或销售，反应产品的制造、使用或销售机构批准用于患者(例如人或其它哺乳动物)服用。本文所述的任何测定或方法的试剂均可以被包括作为试剂盒的组分。

在一个试剂盒形式中，本发明的微球在一个小瓶内存在于可生理相容的液体溶液中。在另一个试剂盒形式中，可以在一个小瓶内提供干燥形式的本发明微球，可以在第二和/或任选的第三小瓶内提供药物溶液和造影剂。在某些实施方案中，包括造影剂的微球存在于一个小瓶内，药物溶液存在于另一个小瓶内。在这种形式中，可以在施用之前或施用之时将两个小瓶的内容物混合到一起。在其它实施方案中，在一个小瓶内，以干燥形式提供包括造影剂和药物的微球。然后可以在施用前将粉末悬浮在合适的液体中，或者提供第二小瓶，该小瓶包含可注射的溶液，在施用之前或施用之时将两个小瓶的内容物合并。

最后，在另一个试剂盒形式中，本发明的微球存在于一个小瓶中，第二小瓶包含含有造影剂的可药用溶液。第一小瓶内的微球可以预先负载药物，或者药物溶液可以任选地存在于第三小瓶中。然后例如在施用之前或施用之时，可以将微球与药物溶液和/或造影剂混合到一起。

通过说明而非限制的方式提供下列实施例。

实施例1-微球的制备

将作为聚合引发剂的半克过氧化苯甲酰添加到60g乙酸乙烯酯和40g丙烯酸甲酯中。将它们分散到300ml水中，该水包含作为分散稳定剂的3g部分皂化的聚乙烯醇和10g NaCl。在65℃进行悬浮聚合6小时。在除去溶剂后，在冻干机中将聚合物干燥24小时。将20克干燥粉末悬浮在包含200g甲醇和10g水的皂化流体中。然后通过将反应保持在10℃，滴加40ml 10N NaOH溶液，然后在30℃将反应进行24小时。在完成皂化反应后，用甲醇洗涤反应产物，然后在干燥后获得15.8g球形干燥皂化产物，粒径为约50μm至约240μm。然后筛选产物并校准到例如约50μm增量，以得到几个尺寸范围，例如约50μm-100μm、约100μm-150μm、约150μm-210μm。然后可以将经筛选的产物冻干。

实施例2-含非离子型造影剂的微球的制备

将按上述实施例1获得的100mg干燥微球添加到10ml碘克沙醇溶液中(例如Visipaque^TM,Nycomed,320mg碘/ml)，剩余约1ml上清液。

可以通过例如照射将(湿)微球灭菌，然后备用。或者，可以将微球冻干并贮存。

实施例3-含有非离子型造影剂的载药微球的制备

向在实施例1中获得的100mg微球中添加5ml多柔比星溶液(例如Adriamycin^TM，2mg/ml)，溶液被完全吸收。然后添加5ml碘克沙醇溶液(例如Visipaque^TM,Amersham,320mg/ml碘)。剩余约1ml清澈的上清液。

可以任选地将微球灭菌并用于注射到患者体内。

实施例4-含有造影剂的载药微球的制备

为了比较包含非离子型造影介质的含PVA载药微球相对于离子型造影介质的含PVA载药微球的膨胀性、压缩性和负载容量，可以进行下列实验。尽管该实验使用离子型造影剂，但还使用非离子型造影剂进行了平行实验(参见例如实施例5)。

向在实施例1中获得的100微克微球中添加5ml多柔比星溶液(例如Adriamycin^TM，2mg/ml)，溶液被完全吸收。然后添加5ml碘克沙酸盐(例如),Mallinckrodt，320mg/ml碘)溶液。上清液显示多柔比星溶液为红色，这说明在添加离子型造影剂后，多柔比星从微球中渗漏。

相对于非离子型造影剂，在离子型造影剂存在时的载药微球比较结果显示，与包括离子型造影剂的含PVA微球相比，包括非离子型造影剂的含PVA微球具有提高的负载容量。例如，在一些情况下，微球加人血清(例如5ml)和离子型造影剂(50/50)导致约3.9的膨胀率，而具有非离子型造影剂的相同混合物导致约4.8的膨胀率(123％)。

实施例5-比较药物释放

可以如下进行典型的释放实验：

将盐酸多柔比星溶液(50mg盐酸多柔比星的5ml盐水溶液，来自HaoruiPharma Chem,Inc.)添加到按实施例1所述制备的100mg干燥微球中。使用尺寸范围为50μm至100μm的微球。在25分钟后，添加5ml造影剂。在独立的实验中使用两种不同的造影剂：Hexabrix(离子型造影剂)和Visipaque(非离子型造影剂)。然后将微球悬浮液转移到10ml透析膜(MW 100,000)中，而不除去上清液，将透析膜密封。

将透析膜安装在填充有450ml盐水溶液(0.9％wt.NaCl)和50ml甲醇的分级圆筒中。向圆筒中添加搅拌棒，搅拌速度设置为低。在不同的时间间隔内采集150μl样品，检测多柔比星的浓度。通过HPLC(Waters,Interchrom column Uptisphere，在480nm处进行UV检测)测量样品中多柔比星的浓度。

实验显示，在约72小时后，从载有非离子型造影剂的微球中释放了约0.8％wt原始存在的多柔比星，而从包含离子型造影剂的微球中释放了3.0％的多柔比星。

上述本发明的实施方案仅用于示例，本领域技术人员将意识到，或者使用常规实验就能够确定本文所述具体程序的许多等价物。认为所有这些等价物均处于本发明的范围内，并由下列权利要求所覆盖。此外，在用于本说明书和权利要求书时，除非内容另有清楚地说明，单数形式不定冠词和定冠词包括复数形式。因此，例如，指示“药物”包括两种或多种所述药物的混合物，指示“微球”包括两种或多种所述微球的混合物，等等。此外，普通技术人员将意识到，为了解释和主张，必须以一些具体顺序列出操作顺序，但本发明预期所述具体顺序以外的各种变化。

本文所述的所有参考文献的内容均据此纳入本文作为参考。

其它实施方案包含在下列权利要求内。

Claims (25)

1.一种制备适合主动栓化和/或递药的药物组合物的方法，包括：

获得基本上为球形的微球，所述微球是由步骤中包括将乙酸乙烯酯与丙烯酸甲酯单体聚合的方法制得的，所述基本上为球形的微球在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，并且膨胀前的直径约为10μm至2000μm；

所述微球与非离子型造影剂接触；

给微球加载至少一种药物。

2.如权利要求1所述的方法，所述微球的制做方法还包括皂化步骤。

3.如权利要求1所述的方法，所述微球包含乙烯醇与丙烯酸钠的共聚物。

4.如权利要求1所述的方法，所述微球是交联的。

5.如权利要求1所述的方法，所述微球能够吸收至少5重量％水。

6.如权利要求1所述的方法，所述微球在注射到患者体内之前膨胀。

7.如权利要求1所述的方法，所述微球在注射到患者体内之后膨胀。

8.如权利要求1所述的方法，所述药物选自：顺铂、丝裂霉素、紫杉醇、多柔比星、他莫昔芬，或它们的混合物。

9.如权利要求1所述的方法，所述非离子型造影剂选自：X-射线造影剂，CT造影剂，顺磁或超顺磁造影剂。

10.如权利要求1所述的方法，所述非离子型造影剂含碘。

11.如权利要求1所述的方法，所述非离子型造影剂选自以下至少其一：甲泛葡胺、碘帕醇、碘克沙醇、碘海醇、碘普胺、碘比醇、碘美普尔、碘喷托、碘必乐、碘昔兰、碘曲仑、碘十醇、碘佛醇，以及它们的组合。

12.如权利要求1所述的方法，所述微球膨胀前的直径约为10μm至1000μm。

13.一种制备适合主动栓化和/或递药的药物组合物的方法，包括：

制备基本上为球形的微球，所述制备包括将乙酸乙烯酯与丙烯酸甲酯单体聚合，所述基本上为球形的微球在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，并且膨胀前的直径约为10μm至2000μm；

所述微球与非离子型造影剂接触；

给微球加载至少一种药物。

14.如权利要求13所述的方法，制备所述基本上为球形的微球还包括皂化步骤。

15.如权利要求13所述的方法，所述微球包含乙烯醇与丙烯酸钠的共聚物。

16.如权利要求13所述的方法，所述药物是顺铂、丝裂霉素、紫杉醇、多柔比星、他莫昔芬，或它们的混合物。

17.如权利要求13所述的方法，所述非离子型造影剂选自以下至少其一：甲泛葡胺、碘帕醇、碘克沙醇、碘海醇、碘普胺、碘比醇、碘美普尔、碘喷托、碘必乐、碘昔兰、碘曲仑、碘十醇、碘佛醇，以及它们的组合。

18.一种适合主动栓化和/或递药的基本上为球形的微球，包含：

非离子型造影剂；

至少一种药物；和

生物相容性聚合材料，该材料是由步骤中包括将乙酸乙烯酯与丙烯酸甲酯单体聚合的方法形成的；

所述基本上为球形的微球在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，并且膨胀前的直径约为10μm至2000μm。

19.如权利要求18所述的微球，形成所述生物相容性聚合材料的方法还包括皂化步骤。

20.如权利要求18所述的微球，所述微球包含乙烯醇与丙烯酸钠的共聚物。

21.如权利要求18所述的微球，所述药物是顺铂、丝裂霉素、紫杉醇、多柔比星、他莫昔芬，或它们的混合物。

22.如权利要求18所述的微球，所述非离子型造影剂选自以下至少其一：甲泛葡胺、碘帕醇、碘克沙醇、碘海醇、碘普胺、碘比醇、碘美普尔、碘喷托、碘必乐、碘昔兰、碘曲仑、碘十醇、碘佛醇，以及它们的组合。

23.一种适合主动栓化和/或递药的基本上为球形的微球，包含：

非离子型造影剂；

至少一种药物；和

生物相容性聚合材料，该聚合材料包含以下结构的乙烯醇与丙烯酸钠的共聚物：

其中，x和y是大于0的整数；

所述基本上为球形的微球在药学上可接受的溶液中是可膨胀的，并且膨胀前的直径约为10μm至2000μm。

24.如权利要求23所述的微球，所述药物是顺铂、丝裂霉素、紫杉醇、多柔比星、他莫昔芬，或它们的混合物。

25.如权利要求23所述的微球，所述非离子型造影剂选自以下至少其一：甲泛葡胺、碘帕醇、碘克沙醇、碘海醇、碘普胺、碘比醇、碘美普尔、碘喷托、碘必乐、碘昔兰、碘曲仑、碘十醇、碘佛醇，以及它们的组合。