BRPI0806245B1 - Compostos de fórmula i e seus usos - Google Patents

Abstract

COMPOSTO DE FÓRMULA I, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA, USO DE COMPOSTO E MÉTODO DE TRATAMENTO OU PREVENÇÃO DO CÂNCER . A presente invenção se refere aos compostos de fórmula (I): e sais farmaceuticamente aceitáveis, estereoisômeros ou tautômeros do mesmo que são inibidores da poli(ADP-ribose) polimerase (PARP) e assim útil para o tratamento do câncer, doenças inflamatórias, lesões de reperfusão, condições isquêmicas, derrame, insuficiência renal, doenças cardiovasculares, doenças vasculares diferentes das doenças cardiovasculares, diabetes, doenças neurodegenerativas, infecção retroviral, dano retinal, senescência da pele e dano da pele induzido por UV, e como quimiossintetizantes e/ou radiossintetizantes para o tratamento contra o câncer.

Description

[001] A presente invenção se refere aos indazóis substituídos por amida que são inibidores da enzima Poli(ADP-ribose) Polimerase (PARP), conhecida previamente como poli(ADP-ribose)sintase e poli(ADP- ribosil)transferase. Os compostos da presente invenção são úteis como monoterapias em tumores com defeitos específicos em caminhos de reparo de DNA e como intensificadores de determinados agentes de dano de DNA tais como agentes anticancerígenos e radioterapia. Além disso, os compostos da presente invenção são úteis para reduzir a necrose da célula (em derrames e infarto miocárdico), sub-regular inflamação e lesão do tecido, tratamento de infecções retrovirais e proteção contra a toxicidade da quimioterapia.

[002] A poli(ADP-ribose) polimerase (PARP) constitui uma super família de dezoito proteínas contendo domínios catalíticos de PARP (Bioessays (2004) 26:1148). Estas proteínas incluem PARP- 1, PARP-2, PARP-3, tanquirase-1, tanquirase-2, vaultPARP e TiPARP. A PARP-1, membro fundador, consiste em três domínios principais: um domínio de ligação ao DNA (DBD) amino (N)-terminal contendo dois dedos de zinco, o domínio de automodificação, e um domínio catalítico carbóxi (C)-terminal.

[003] As PARP são enzimas nucleares e citoplásmicas que clivam o NAD+ em nicotinamida e ADP-ribose para formar polímeros ADP-ribose ramificados e longos nas proteínas alvo, incluindo as topoisomerases, as histonas e as próprias PARP (Biochem. Biophys. Res. Commun. (1998) 245:110).

[004] A Poli(ADP-ribosil)ação tem sido comprometida com diversos processos biológicos, incluindo o reparo de DNA, a transcrição do gene, a progressão do ciclo da célula, a morte de célula, as funções da cromatina e a estabilidade genômica.

[005] A atividade catalítica da PARP-1 e PARP-2 foi mostrada para ser estimulada prontamente por rupturas das cadeias de DNA (ver Pharmacological Research (2005) 52:25-33). Em resposta ao dano do DNA, a PARP-1 se liga à pedaços de DNA únicos e duplos. Sob condições fisiológicas normais há uma atividade mínima de PARP, entretanto, com o dano do DNA uma ativação imediata da atividade de PARP de até 500 vezes ocorre. Tanto a PARP-1 quanto a PARP-2 detectam interrupções das cadeias de DNA atuando como os sensores de pedaço, fornecendo sinais rápidos para interromper a transcrição e recrutando as enzimas exigidas para o reparo do DNA no sítio de dano. Já que a radioterapia e muitas abordagens quimioterapêuticas para a terapia do câncer atuam induzindo o dano do DNA, inibidores de PARP são úteis como quimio- e radiosensibilizadores para o tratamento contra o câncer. Os inibidores de PARP foram relatados como eficazes em células tumorais hipóxicas de rádio sensibilização (U.S. 5.032.617, U.S. 5.215.738 e U.S. 5.041.653).

[006] A maioria dos efeitos biológicos da PARP se refere a este processo de poli (ADP-ribosil)ação que influencia as propriedades e a função das proteínas alvo; aos oligómero de PAR que, quando clivados a partir das proteínas poli(ADP-ribosil)adas, conferem efeitos celulares distintos; a associação física de PARP com as proteínas nucleares para formar complexos funcionais; e a redução do nível celular de seu substrato NAD+ (Nature Review (2005) 4:421- 440).

[007] Além do envolvimento no reparo do DNA, a PARP também pode atuar como um mediador da morte da célula. Sua ativação excessiva em condições patológicas tais como isquemia e lesão de reperfusão pode conduzir à depleção substancial do NAD+ interceliular, que pode conduzir ao prejuízo de diversos caminhos metabólicos dependentes do NAD+ e resultar na morte da célula (ver Pharmacological Research (2005) 52:44- 59). Em conseqüência da ativação da PARP, os níveis de NAD+ declinam significativamente. A ativação extensiva da PARP leva à depleção severa do NAD+ nas células que sofrem de dano massivo do DNA. O meia-vida curta da poli(ADP-ribose) conduz a uma taxa de rotatividade rápida, como uma vez que a poli(ADP-ribose) é formada, ela é degradada rapidamente pela poli(ADP-ribose) glicohidrolase constitutivamente ativa (PARG). A PARP e PARG formam um ciclo que converte uma grande quantidade de NAD+ em ADP-ribose, causando uma queda do NAD+ e ATP para menos de 20% do nível normal. Tal cenário é especialmente prejudicial durante a isquemia quando a privação do oxigênio já tiver comprometido drásticamente a produção de energia celular. A produção subseqüente do radical livre durante a reperfusão é assumida como sendo a causa principal do dano de tecido. A parte da queda de ATP, que é tipicamente em muitos órgãos durante a isquemia e a reperfusão, poderia estar ligada à depleção devido à rotatividade da poli(ADP-ribose). Assim, espera-se que a inibição de PARP preserve o nível de energia celular potencializando desse modo a sobrevivência de tecidos isquêmicos após o insulto. Compostos que são inibidores de PARP são conseqüentemente úteis para tratar as condições que resultam da morte da célula mediada pela PARP, incluindo condições neurológicas tais como o derrame, traumatismo e mal de Parkinson.

[008] Os inibidores da PARP foram demonstrados como sendo úteis para a matança específica dos tumores deficinentes em BRCA-1 e BRCA-2 (Nature (2005) 434:913-916 e 917-921; e Cancer Biology & Therapy (2005) 4:934-936).

[009] Tem sido mostrado que os inibidores da PARP melhoram a eficácia de drogas anticancerígenas (Pharmacological Research (2005) 52:25-33), incluindo compostos de platina tais como a cisplatina e carboplatina (Cancer Chemother Pharmacol (1993) 33:157-162 e Moi Cancer Ther (2003) 2:371-382). Mostrou-se que os inibidores de PARP aumentam a atividade antitumoral dos inibidores da topoisomerase I tais como Irinotecan e Topotecan (Mo/ Cancer Ther (2003) 2:371382; e Clin Cancer Res (2000) 6:2860-2867) e o isto foi demonstrado em modelos in vivo (J. Natl Cancer lnst (2004) 96:56-67).

[0010] Tem sido mostrado que os inibidores de PARP restauram a susceptibilidade aos efeitos citotóxicos e antiproliferativos da temozolomida (TMZ) (ver Curr Med Chem (2002) 9:1285-1301 e Med Chem Rev Online (2004) 1:144150). Isto foi demonstrado em um número de modelos in vitro (Br J Cancer (1995) 72:849-856; Br J Cancer (1996) 74:1 030-1 036; Mol Pharmacol (1997) 52:249-258; Leukemia (1999) 13:901-909; Gila (2002) 40:44-54; e Clin Cancer Res (2000) 6:2860-2867 e (2004) 10:881-889) e modelos in vivo (Blood (2002) 99:2241-2244; Clin Cancer Res (2003) 9:5370-5379 e JNatl Cancer lnst (2004) 96:56-67). Também foi mostrado que os inibidores de PAPR previnem a aparência de necrose induzida pelos agentes de metilação de N3-adenina seletivos tais como MeOSO2(CH)2- lexitropsina (Me-Lex) (Pharmacological Research (2005) 52:2533).

[0011] Tem sido mostrado que os inibidores de PARP atuam como sensibilizadores da radiação. Os inibidores de PARP têm sido relatados como sendo eficazes na radiosensibilização em células do tumor (hipóxica) e eficazes previnindo que as células do tumor se recuperem do potencial letal (Br. J. Cancer (1984) 49(Suppl. VI):34-42; and Int. J. Radiat. Bioi. (1999) 75:91-100) e sub-letal (Clin. Oncol. (2004) 16(1):29-39) dano do DNA após a terapia de radiação, presumivelmente por sua habilidade de impedir a rejunção das cadeias de DNA quebradas e afetando diversos caminhos da sinalização de dano do DNA.

[0012] Os inibidores de PARP também foram mostrados como sendo úteis para tratar doenças miocárdicas agudas e crônicas (ver Pharmacological Research (2005) 52:34- 43). Por exemplo, demonstrou-se que as únicas injeções de inibidores de PARP reduziram o tamanho do infarto causado pela isquemia e pela reperfusão do coração ou do músculo esqueletal em coelhos. Nestes estudos, em uma única injeção da 3-amina-benzamida (10 mg/kg), ou um minuto antes da oclusão ou um minuto antes da reperfusão, causou reduções similares no tamanho do infarto no coração (32-42%) enquanto 1,5- dihidroxisoquinolina (1 mg/kg), outro inibidor de PARP, reduziu o tamanho do infarto por um grau comparável (38-48%). Estes resultados tornam razoável supor que os inibidores de PARP poderiam salvar previamente o coração isquêmico ou lesão de reperfusão do tecido do músculo esqueletal (PNAS (1997) 94:679-683). Os resultados similares também foram relatados em porcos (Eur. J. Pharmacol. (1998) 359:143-150 e Ann. Thorac. Surg. (2002) 73:575-581) e em cães (Shock. (2004) 21:426-32).

[0013] Os inibidores de PARP foram demonstrados como sendo úteis para tratar determinadas doenças vasculares, choque séptico, lesão isquêmico e a neurotoxicidade (Biochim. Biophys. Acta (1989) 1014:1-7; J. Clin. Invest. (1997) 100:723-735). Dano do DNA radical de oxigênio que conduz à quebas da cadeia de DNA, que são reconhecidas subseqüentemente por PARP, é um fator de contribuição principal para tais estados da doença como mostrados pelos estudos do inibidor de PARP (J Neurosci. Res. (1994) 39:38-46 e PNAS (1996) 93:46884692). A PARP também foi demonstrada desempenhando um papel na patogênese de choque hemorrágico (PNAS (2000) 97:10203-10208).

[0014] Os inibidores de PARP foram demonstrados como sendo úteis para o tratamento de doenças da inflamação (ver Pharmacological Research (2005) 52:72-82 e 83-92).

[0015] Também se demonstrou que a infecção retroviral eficiente das células mamíferas é bloqueada pela inibição da atividade da PARP. Tal inibição de infecções do vetor retroviral recombinantes foi mostrada ocorrendo em vários tipos diferentes de célula (J. Virology (1996) 70(6):3992-4000). Os inibidores de PARP foram desenvolvidos assim para o uso em terapias anti-virais e no tratamento contra o câncer (WO 91/18591).

[0016] Experiências in vitro e in vivo demonstraram que os inibidores de PARP podem ser usados para o tratamento ou prevenção de doenças auto- imunes tais como a diabetes tipo I e complicações diabéticas (Pharmacological Research (2005) 52:60-71).

[0017] A inibição da PARP foi especulada como o atraso do início das características de envelhecimento em fibroblastos humanos (Biochem. Biophys. Res. Comm. (1994) 201 (2):665-672 e Pharmacological Research (2005) 52:9399). Isto pode ser relacionado ao papel que a PARP desempanha no controle da função do telômero (Gen. Nature, (1999) 23 (1):76-80).

[0018] A grande maioria dos inibidores de PARP até agora interage com o domínio de ligação da nicotinamida da enzima e comporta-se como inibidores competitivos no que diz respeito a NAD+ (Expert Opin Ther. Patents (2004) 14:1531-1551). Os análogos estruturais da nicotinamida, tais como a benzamida e os derivados estavam entre os primeiros compostos a serem investigados como inibidores de PARP. Entretanto, estas moléculas têm uma atividade inibitória fraca e possuem outros efeitos não relacionados à inibição da PARP. Assim, há a necessidade de fornecer inibidores da enzima PARP potentes.

[0019] Os inibidores de PARP estruturalmente relacionados foram descritos previamente. O WO 1999/59973 descreve os anéis de benzeno substituídos por amida fundidos em anéis heteroaromáticos de 5 membros; W02001/85687 descreve indóis substituídos por amida; WO 1997/04771, WO 2000/26192, WO 2000/32579, WO 2000/64878, WO 2000/68206, WO 2001/21615, WO 2002/068407, WO 2003/106430 e WO 2004/096793 descrevem benzoimidazóis substituídos por amida; WO 2000/29384 descreve benzoimidazóis e indóis substituídos por amida; e o EP 0879820 descreve benzoxazóis substituídos por amida.

[0020] Agora surprisingly descobriu-se que os indazóis substituídos por amida da presente invenção exibem perticularmente altos níveis de inibição da atividade da poli(ADP-ribose)polimerase (PARP). Assim os compostos da presente invenção são particularmente úteis como inibidores de PARP-1 e/ou PARP-2. Eles também mostraram particularmente bons níveis de atividade celular, demonstrando bons efeitos antiproliferativos em BRCA1 e linhagem celular deficiente em BRCA2.

[0021] A presente invenção fornece compostos de fórmula 1:

onde: R1 é hidrogênio ou flúor; e R2 é hidrogênio ou flúor; ou sais farmaceuticamente aceitáveis, estereoisômeros ou tautômeros do mesmo.

[0022] Em uma modalidade, R1 é hidrogênio.

[0023] Em outra modalidade R1 é flúor.

[0024] Em uma modalidade R2 é hidrogênio.

[0025] Em outra modalidade R2 é flúor.

[0026] Em uma modalidade R1 é hidrogênio e R2 é hidrogênio ou flúor.

[0027] Em outra modalidade R1 é flúor e R2 é hidrogênio ou flúor.

[0028] Em outra modalidade R1 é hidrogênio e R2 é hidrogênio.

[0029] Em outra modalidade R1 é hidrogênio e R2 é flúor.

[0030] Em outra modalidade R1 é flúor e R2 é flúor.

[0031] Em outra modalidade R1 é hidrogênio ou flúor e R2 é hidrogênio.

[0032] Em outra modalidade R1 é hidrogênio ou flúor e R2 é flúor.

[0033] A presente invenção também fornece compostos de fórmula II:

onde R1 e R2 são como definidos acima; ou sais farmaceuticamente aceitáveis, estereoisômeros ou tautômeros do mesmo.

[0034] A presente invenção também fornece compostos de fórmula III:

onde R1 e R2 são como definidos acima; ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou tautômeros do mesmo.

[0035] A presente invenção também fornece compostos de fórmula IV:

onde R1 e R2 são como definidos acima; ou sais farmaceuticamente aceitáveis ou tautômeros do mesmo.

[0036] As identidades preferidas com referência às fórmulas II, III e IV são como definidas previamente para a fórmula I mutatis mutandis.

[0037] A presente invenção também inclui dentro de seu escopo N- óxidos dos compostos da fórmula I acima. Geralmente, tais N-óxidos podem ser formados em qualquer átomo disponível de nitrogênio. Os N-óxidos podem ser formados por meios convencionais, tais como a reação do composto de fórmula I com oxona na presença da alumina molhada.

[0038] A presente invenção inclui dentro de seu escopo pró-drogas dos compostos da fórmula I acima. Geralmente, tais pró-drogas serão derivados funcionais dos compostos da fórmula I que são prontamente convertíveis in vivo no composto exigido de fórmula I. Procedimentos convencionais para a seleção e a preparação de derivados de pró-droga apropriados são descritos, por exemplo, no "Design of Prodrogs", ed. H. Bundgaard, Elsevier, 1985.

[0039] Uma pró-droga pode ser um derivado farmacológicamente inativo de uma substância biologicamente ativa (a "pró-droga mãe" ou "molácula mãe") que exige a transformação dentro do corpo a fim de liberar a droga ativa, e que melhorou propriedades de liberação sobre a molécula da droga mãe. A transformação in vivo pode ser, por exemplo, como o resultado de algum processo metabólico, tal como a hidrólise química ou enzimática de um éster carboxílico, fosfórico ou de sulfato, ou a redução ou oxidação de uma funcionalidade suscetível.

[0040] A presente invenção inclui no seu escopo solvatos dos compostos de fórmula I e sais do mesmo, por exemplo, hidratos.

[0041] Os compostos da presente invenção podem ter centros assimétricos, eixos quirais, e planos quirais (corno descrito em: E.L. Eliel e S.H. Wilen, Stereochemistty of Carbon Compounds, John Wiley & Sons, New York, 1994, páginas 1119-1190), e ocorrem como racematos, misturas racêmicas, e como diastereômeros individuais, com todos os isômeros e misturas possíveis do mesmo, incluindo isômeros óticos, todos tais estereoisômeros que estão sendo incluídos na presente invenção. Além disso, os compostos descritos aqui podem existir como tautômeros e ambas as formas tautomeróicas são destinadas a serem abrangidas pelo escopo da invenção, mesmo que somente uma estrutura tautomeróica seja descrita.

[0042] Os compostos podem existir em diferentes formas isoméricas, que são abrangidas pela presente invenção.

[0043] Os compostos podem existir em um número de formas polimórficas diferentes.

[0044] Como usado aqui, C1_6 alquila representa um grupo de hidrocarboneto alifático saturado ramificado, de cadeia reta e cíclico contendo 1, 2, 3, 4, 5 ou 6 átomos de carbono. Por exemplo, "C1_6alquila" inclui especificamente metila, etila, n-propila, i-propila, n-butila, t-butila, i-butila, pentila, hexila, ciclopropila, ciclobutila, ciclopentila e ciclohexila e assim por diante. Os grupos de alquila preferidos são metila e etila.

[0045] Os compostos particulares dentro do escopo da presente invenção são: 3-{4-[7-(Aminocarbonila)-2H-indazol-2-il]fenila} cloreto de piperidíneo; 2-{4-[(3R)-Piperidin-3-il]fenila}-2H-indazol-7-carboxamida; 2- {4-[(3S )-Piperid in-3-il]fenila}-2H-indazol-7-carboxamida; 3-{4[7- (Aminocarbonila)-5-flúor-2H-indazol-2-illfenila} trifluoracetato de piperidíneo 5-Flúor-2-(3-flúor-4-piperidin-3-ilfenila)-2H-indazol-7- trifluoracetato de carboxamida; 3-{4-[7-(Aminocarbonila)-2H-indazol-2- il]fenila} trifluoracetato de piperidíneo; 5-Flúor-2-(4-piperidin-3-ilfenila)-2H- indazol-7-carboxamida; (3S)-3-{4[7-(Aminocarbonila)-2H-indazol-2- infenila} cloreto de piperidíneo; (3R)-3-{4[7-(Aminocarbonila)-2H-indazol- 2-illfenila} cloreto de piperidíneo (R)-5-Flúor-2-(4-piperid in-3-ilfenila)-2H- indazol-7-carboxamida; (S )-5-Flúor-2-(4-piperidin-3-ilfen ila)-2 H-indazol-7- carboxamida; (R)-5-Flijor-2-{3-flijor-4-piperidin-3-ilfenila}-2H-indazol-7- carboxamida; (S)- 5-Flúor-2-{3-flúor-4-piperidin-3-ilfenila}-2H-indazol-7- carboxamida; e sais farmaceuticamente aceitáveis, bases livres ou tautômeros do mesmo. Estereoisômeros do mesmo destes compostos também é fornecido.

[0046] Um composto particular da presente invenção é: 3-{4-[7- (Aminocarbonila)-2H-indazol-2-il]fenila} cloreto de piperidíneo; ou bases livres ou tautômeros farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. Estereoisômeros deste composto também são fornecidos.

[0047] Um composto particular da presente invenção é: 2-{4-[(3R)-Piperid in-3-il]fenila}-2 H-indazol-7-carboxamida; ou um sal farmaceuticamente aceitável, base livre ou tautômero do mesmo. Estereoisômeros destes compostos também são fornecidos.

[0048] Um composto particular da presente invenção é: 2-{4-[(3S)-Piperid in-3-il]fenila}-2H-indazol-7-carboxamida; ou um sal farmaceuticamente aceitável, bases livres ou tautômero do mesmo. Estereoisômeros deste composto também são fornecidos.

[0049] Um composto particular da presente invenção é: 3-{4-[7-(Aminocarbonila)-5-flúor-2H-indazol-2-il]fenila) trifluoracetato de piperidíneo; ou uma base livre ou tautõmero farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[0050] Estereoisômeros deste composto também são fornecidos.

[0051] Um composto particular da presente invenção é: 5-Flúor-2-(3-flUor-4-piperidin-3-ilfenila)-2H-indazol-7- trifluoracetato de carboxamida; ou uma base livre ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo. Estereoisômeros deste composto também são fornecidos.

[0052] Um composto particular da presente invenção é: (3S)-3-{447-(aminocarbonila)-2H-indazol-2- infenil}metilbenzenossulfonato de 4-piperidíneo; ou uma base livre ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo. Estereoisômeros deste composto também são fornecidos.

[0053] É incluída na presente invenção a base livre dos compostos de fórmula I, assim como os sais e os estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis do mesmo. Os compostos da presente invenção podem ser protonados nos átomos de N de uma amina e/ou de um N contendo a porção do heterociclo para formar um sal. O termo "base livre"; se refere aos compostos de amina na forma de não-sal. Os sais farmaceuticamente aceitáveis abangidos não somente incluem os sais exemplificados para os compostos específicos descritos aqui, mas também todos os sais farmaceuticamente aceitáveis típicos de forma livre dos compostos de Fórmula I. A forma livre dos compostos de sal específicos descritos pode ser isolada usando técnicas conhecidas no estado da técnica. Por exemplo, a forma livre pode ser regenerada tratando o sal com uma solução de base aquosa diluída apropriada tal como o NaOH, carbonato de potássio, amônia e bicarbonato de sódio aquosos diluídos. As formas livres podem diferir das suas formas respectivas de sal em determinadas propriedades físicas, tais como solubilidade em solventes polares, mas os sais de ácido e de base são de outra maneira farmaceuticamente equivalentes à suas formas livres respectivas para as finalidades da invenção.

[0054] Os sais farmaceuticamente aceitáveis dos presentes compostos podem ser sintetizados a partir dos compostos desta invenção que contêm uma porção básica ou ácida por métodos químicos convencionais. Geralmente, os sais dos compostos básicos são preparados pela cromatografia de troca iônica ou reagindo a base livre com as quantidades estequiométricas ou com um excesso do ácido inorgânico ou orgânico formador de sal desejado em um solvente apropriado ou por várias combinações de solventes. Similarmente, os sais dos compostos ácidos são formados por reações com a base inorgânica ou orgânica apropriada.

[0055] Assim, os sais farmaceuticamente aceitáveis dos compostos desta invenção incluem os sais não-tóxicos convencionais dos compostos desta invenção como formados pela reação de um presente composto básico com um ácido inorgânico, orgânico ou ácido polimérico. Por exemplo, os sais não-tóxicos convencionais incluem aqueles derivados dos ácidos inorgânicos tais como clorídrico, hidrobrômico, hidroiódico, sulfúrico, sulfuroso, sulfâmico, fosfórico, fosforoso, nítrico e semelhantes, assim como os sais preparados a partir dos ácidos orgânicos tais como acético, propiônico, succínico, glicólico, esteárico, lático, málico, tartárico, cítrico, ascórbico, pamóico, maléfico, hidroximaléico, feniacético, glutâmico, benzóico, salicílico, sulfanílico, 2-acetóxi-benzóico, fumárico, toluenessulfônico, metanossulfônico, etano dissulfônico, oxálico, isetiônico, palmítico, glucônico, ascórbico, feniacético, aspártico, cinâmino, pirúvico, etanossulfônico, etano, dissulfônico, valérico, trifluoracético e semelhantes. Os exemplos dos sais poliméricos apropriados incluem aqueles derivados dos ácidos poliméricos tais como o ácido tânico, carboximetil celulose. Preferivelmente, um sal farmaceuticamente aceitável desta invenção contém 1 equivalente de um composto de fórmula (I) e 1, 2 ou 3 equivalentes de um ácido inorgânico ou orgânico. Em uma modalidade um sal farmaceuticamente aceitável desta invenção contám 2 equivalentes de um composto de fórmula (I) e 1 equivalente de um ácido inorgânico ou orgânico. Mais particularmente, os sais farmaceuticamente aceitáveis desta invenção são os sais de trifluoracetato, de cloreto ou de tosilato. Mais particularmente, os sais farmaceuticamente aceitáveis desta invenção são sais de trifluoracetato ou de cloreto. Em uma modalidade o sal é trifluoracetato. Em outra modalidade o sal é cloreto. Em outra modalidade o sal é tosilato.

[0056] O termo ácido toluenossulfônico pode ser usado alternadamente com 4-metilbenzeno ácido sulfônico, e os sulfonatos de tolueno também podem ser referidos como sais de tosilato.

[0057] Quando o composto da presente invenção for ácido, "sais farmaceuticamente aceitáveis" apropriados se referem aos sais preparados de formas farmaceuticamente aceitáveis de bases não-tóxicas incluindo bases inorgânicas e bases orgânicas. Os sais derivados das bases inorgânicas incluem os sais de alumínio, de amônio, de cálcio, de cobre, férrico, ferroso, de Rio, de magnésio, mangânicos, manganosos, de potássio, de sódio, de zinco e semelhantes. Particularmente preferidos são os sais de amónio, de cálcio, de magnésio, de potássio e de sódio. Os sais derivados das bases não- tóxicas orgânicas farmaceuticamente aceitáveis incluem sais de aminas primárias, secundárias e terciárias, aminas substituídas incluindo as aminas substituídas ocorrendo naturalmente, aminas cíclicas e resinas de troca iônica básicas, tais como a arginina, lisina, cafeína, betaína, colina, N,N1- dibenziletilenodiamina, etilamina, dietilamina, 2-dietilaminoetanol, 2- dimetilaminaetanol, etanolamina, dietanolamina, etilenodiamina, N- etilmorfolina, N-etilpiperidina, glucamina, glucosamina, histidina, hidrabamina, isopropilamina, lisina, metilglucamina, morfolina, piperazina, piperidina, resinas de poliamina, procaína, purina, teobromina, trietilamina, tripropilamina de trimetilamina, trometamina, diciclohexilamina, butilamina, benzilamina, fenibenzilamina, trometamina e semelhantes.

[0058] A preparação dos sais farmaceuticamente aceitáveis descritos acima e de outros sais farmaceuticamente aceitáveis típicos é descrita mais inteiramente por Berg et al. (1977) J Pharm. Sci, "Pharmaceutical Salts", 66:1-19.

[0059] Também notar-se-á que os compostos da presente invenção são sais ou zwiteríons potencialmente internos, já que sob condições fisiológicas uma pporção ácida desprotonada no composto, tal como um grupo carboxila, pode ser aniônica, e esta carga eletrônica pôde então ser balanceada internamente contra a carga catiônica de uma porção básica protonada ou alquilada, tal como um átomo de nitrogênio quaternário.

[0060] Os compostos da invenção podem ser usados em um método de tratamento do corpo humano ou animal pela terapia.

[0061] A invenção fornece compostos para o uso no tratamento ou prevenção das condições que podem ser melhoradas pela inibição da poli(ADP-ribose) polimerase (PARP) (ver, por exemplo, Nature Review Drug Discovery (2005) 4:421-440).

[0062] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção das condições que podem ser melhoradas pela inibição da poli(ADP-ribose) polimerase (PARP).

[0063] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção das condições que podem ser melhoradas pela inibição da poli(ADPribose) polimerase (PARP), tal método compreende a administração a um paciente com necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0064] Os inibidores de PARP da presente invenção são úteis para o tratamento das doenças específicas em WO 2005/082368.

[0065] Os compostos da invenção são úteis para o tratamento de doenças inflamatórias, incluindo condições resultantes da rejeição do transplante de órgão, como; as doenças inflamatórias crônicas das juntas, incluindo a artrite, artrite reumatóide, osteoartrite e doença dos ossos associadas com a reabsorção do osso aumentada; doenças inflamatórias do intestino tais como ileíte, colite ulcerosa, síndrome de Barrett, e doença de Crohn; doenças inflamatórias do pulmão tais como a asma, a síndrome de aflição respiratória adulta, e a doença crônica obstrutiva de via aérea; doenças inflamatórias do olho incluindo a distrofia córnea, tracoma, oncocercíase, uveite, oftalmite simpática e endoftalmite; doenças inflamatórias crônicas da gengiva, incluindo a gengivite e periodontite; tuberculose; lepra; doenças inflamatórias do rim incluindo complicações urêmicas, glomerulonefrite e nefrose; doenças inflamatórias da pele incluindo a esclerodermatite, psoríase e eczema; doenças inflamatórias do sistema nervoso central, incluindo doenças demielinantes crônicas do sistema nervoso, esclerose múltipla, neurodegeneração relacionada à AIDS e mal de Alzheimer, meningite infecciosa, encefalomielite, mal de Parkinson, doença de Huntington, esclerose lateral amiotrófica e encefalite virai ou auto-imune; complicações diabéticas, incluindo, mas não limitadas a, vasculite do complexo imune, lúpus eritematoso sistêmico (SLE); doenças inflamatórias do coração tais como a cardiomiopatia, doença cardíaca isquêmica, hipercolesterolemia, e aterosclerose; assim como as várias outras doenças que podem ter os componentes inflamatórios significativos, incluindo a pré-eclampsia, a insuficiência do fígado crônica, traumatismo do cérebro e da medula espinal e a síndrome da disfunção de múltiplos órgãos (MODS) (falência de múltiplos órgãos (MOF)). A doença inflamatória pode também ser uma inflamação sistêmica do corpo, exemplificada pelo choque gram-positivo ou gram- negativo, choque hemorrágico ou anafilático, ou choque induzido pela quimioterapia do câncer em resposta às citocinas pró-inflamatórias, por exemplo, choque associado com as citocinas pró-inflamatórias. Tal choque pode ser induzido, por exemplo, por um agente quimioterapêutico que é administrado como um tratamento para o câncer.

[0066] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para tratar ou prevenir doenças inflamatórias.

[0067] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção das doenças inflamatórias, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0068] Os compostos da presente invenção também podem ser úteis no tratamento ou prevenção das lesões de reperfusão, resultantes dos episódios que ocorrem naturalmente e durante um procedimento cirúrgico, tal como a lesão de reperfusão intestinal; lesão de reperfusão miocárdica; lesão de reperfusão resultante da cirurgia de desvio cardiopulmonar, da cirurgia de reparo do aneurisma aórtico, da cirurgia de endarterectomia carotídea, ou de choque hemorrágico; e lesão de reoxigenação resultante do transplante de órgãos tais como o coração, pulmão, fígado, rim, pâncreas, intestino e córnea.

[0069] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção das lesões de reperfusão.

[0070] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção das lesões de reperfusão, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0071] Os compostos da presente invenção também podem ser úteis no tratamento ou prevenção das condições isquêmicas, incluindo aquelas que resultam do transplante de órgão, tal como a angina estável, angina instável, isquemia miocárdica, isquemia hepática, isquemia da artéria mesentérica, isquemia intestinal, isquemia crítica de membro, isquemia crítica crônica de membro, isquemia cerebral, isquemia cardíaca aguda, doença isquêmica renal, doença isquêmica do fígado, desordem retina) isquêmica, choque séptico, e uma doença isquêmica do sistema nervoso central, tal como o derrame ou a isquemia cerebral.

[0072] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção das condições isquêmicas.

[0073] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção das condições isquêmicas, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0074] A presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção do derrame.

[0075] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção do derrame, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0076] Os compostos da presente invenção também podem ser úteis para o tratamento ou prevenção da insuficiência renal crônica ou aguda.

[0077] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da insuficiência renal.

[0078] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção da insuficiência renal, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0079] Os compostos da presente invenção também podem ser úteis para o tratamento ou prevenção de doenças vasculares diferentes das doenças cardiovasculares, tais como a oclusão arterial periférica, obliteranos de tromboangite, doença e fenômeno de Reynaud, acrocianose, eritromelalgia, trombose venosa, veias varicosas, fístula arteriovenosa, limfedema e lipedema.

[0080] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de doenças vasculares diferentes das doenças cardiovasculares.

[0081] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção de doenças vasculares diferentes das doenças cardiovasculares, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0082] Os compostos da presente invenção também podem ser úteis para o tratamento ou prevenção de doenças cardiovasculares tais como a insuficiência cardíaca crônica, aterosclerose, insuficiência cardíaca congestiva, choque circulatório, cardiomiopatia, transplante cardíaco, infarto do miocárdio, uma arritmia cardíaca, tal como a fibrilação atrial, taquicardia supraventricular, palpitação atrial, e taquicardia atrial paroxística.

[0083] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula 1 para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de doenças cardiovasculares.

[0084] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção das doenças cardiovasculares, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula 1 ou uma composição compreendendo um composto de fórmula 1.

[0085] Os compostos desta invenção também podem ser úteis para o tratamento e a prevenção da diabetes mellitus, incluindo a diabetes tipo I (Diabetes Mellitus Insulino dependente), tipo II (Diabetes Não Insulino- dependente), diabetes gestacional, diabetes auto-imune, insulinopatias, diabetes devido à doença pancreática, diabetes associada à outras doenças da glândula endócrina (tais como síndrome de Cushing, acromegalia, feocromocitoma, glucagonoma, aldosteronismo primário ou somatostatinoma), síndrome da resistência à insulina Tipo A, síndrome da resistência à insulina tipo B, diabetes lipoatrófica, e diabetes induzida por toxinas. Os compostos desta invenção também podem ser úteis para o tratamento ou prevenção de complicações diabéticas, tais como a catarata diabética, glaucoma, retinopatia, nefropatia, (tais microaluminúria e nefropatia diabética progressiva), polineuropatia, gangrena dos pés, doença arterial coronária aterosclerótica, doença arterial periférica, coma hiperglicêmico hiperosmolar não cetótico, mononeuropatias, neuropatia autonômica, úlceras do pé, problemas das juntas, e complicação da membrana mucosa ou da pele (tal como uma infecção, mancha na canela, infecção candidal ou necrobiose lipoídica diabeticorum, obesidade), hiperlipidemia, hipertensão, síndrome da resistência à insulina, doença da artéria coronária, retinopatia, neuropatia diabética, polineuropatia, mononeuropatias, neuropatia autonômica, úlcera do pé, problema de junta, infecção fúngica, infecção bacteriana, e cardiomiopatia.

[0086] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula 1 para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção da diabetes.

[0087] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção da diabetes, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula 1 ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0088] Os compostos desta invenção também podem ser úteis para o tratamento ou prevenção do câncer incluindo tumores sólidos tais como o fibrossarcoma, mixossarcoma, lipossarcoma, condrossarcoma, sarcoma osteogênico, cordoma, angiossarcoma, endotélio-sarcoma, linfangiossarcoma, sarcoma do linfangioendotélio, sinovioma, mesotelioma, tumor de Ewing, leiomiossarcoma, rabdomiossarcoma, câncer do cólon, câncer colo-retal, câncer renal, câncer pancreático, câncer dos ossos, câncer de mama, câncer ovariano, câncer de próstata, câncer esofágico, câncer de estômago, câncer oral, câncer nasal, câncer de garganta, carcinoma de célula escamosa, carcinoma de célula basal, adenocarcinoma, carcinoma da glândula de suor, carcinoma da glândula sebácea, carcinoma papilar, adenocarcinomas papilares, cistadenocarcinoma, carcinoma medular, carcinoma broncogênico, carcinoma da célula renal, hepatoma, carcinoma de duto biliar, coriocarcinoma, seminoma, carcinoma embrional, tumor de Wilms, câncer cervical, câncer uterino, câncer testicular, carcinoma de pequena célula do pulmão, carcinoma da bexiga, câncer pulmonar, carcinoma epitelial, câncer de pele, melanoma, neuroblastoma e retinoblastoma; cânceres transportados pelo sangue tais como a leucemia linfoblástica aguda ("ALL"), leucemia linfoblástica aguda da célula B, leucemia de célula T linfoblástica aguda, leucemia mielóide aguda ("AML"), leucemia promielocítica aguda ("APL"), leucemia monoblástica aguda, leucemia eritroleucêmica aguda, leucemia megacarioblástica aguda, leucemia mielomonocítica aguda, leucemia não- linfocítica aguda, leucemia não diferenciada aguda, leucemia mielocítica crônica ("CML"), leucemia linfocítica crônica ("CLL"), leucemia de célula cabeluda e mieloma múltiplo; leucemia agudas e crônicas tais como leucemia linfoblástica, mielogenosa, linfocítica, mielocítica; Linfomas tais como doença de Hodgkin, linfoma não-Hodgkin, mieloma múltiplo, macroglobulinemia de Waldenstrom, doença de cadeia pesada e Policitemia vera; cânceres do CNS e do cérebro tais como a glioma, astrocitoma pilocítico, astrocitoma, astrocitoma anaplástico, glioblastoma multiforme, meduloblastoma, craniofaringioma, ependimoma, pinealoma, hemangioblastoma, neuroma acústico, oligodendroglioma, meningioma, schwanoma vestibular, adenoma, tumor cerebral metastático, meningioma, tumor espinal e meduloblastoma.

[0089] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção do câncer.

[0090] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção do câncer, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[0091] Os compostos da presente invenção também podem ser usados para o tratamento do câncer que é deficiente na atividade de reparo do DSB DNA dependente da Recombinação de Homólogos (HR) (ver WO 2006/021801).

[0092] O caminho de reparo do DSB DNA dependente da HR repara quebras duplas dos filamentos (DSBs) no DNA através dos mecanismos homólogos para reformar uma hélice contínua do DNA (Nat. Genet. (2001) 27(3): 247-254). Os componentes do caminho de reparo de DSB DNA dependente da HR incluem, mas não são limitado a, ATM (NM-000051), RAD51 (NM-002875), RAD51 L1 (NM-002877), RAD51 C (NM-002876), RAD51L3 (NM-002878), DMC1 (NM-007068), XRCC2 (NM7005431), XRCC3 (NM-005432), RAD52 (NM-002879), RAD54L (NM-003579), RAD54B (NM-012415), BRCA-1 (NM-007295), BRCA-2 (NM-000059), RAD50 (NM-005732), MREI 1A (NM-005590), NBS1 (NM-002485), ADPRT (PARP-1), ADPRTL2, (PARP02) CTPS, RPA, RPA1, RPA2, RPA3, XPD,ERCC1, XPF, MMS19, RAD51, RAD51p, RAD51C, RAD51D,DMC1, XRCCR, XRCC3, BRCA1, BRCA2, RAD52, RAD54, RAD50,MRE11, NB51, WRN, BLMKU70, RU80, ATM, ATRCHK1, CHK2, FANCA, FANCB, FANCC, FANCD1, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCG, FANCC, FANCD1, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCG, RAD1 e RAD9. Outras proteínas envolvidas no caminho de reparo do DSB DNA dependente da HR incluem fatores reguladores tais como EMSY (Cell (2003)115:523- 535).

[0093] Um câncer que é deficiente no reparo de DSB DNA dependente da HR pode compreender ou consistir em uma ou várias células cancerosas que tem uma habilidade reduzida ou revogada de reparar as DSBs DNA através desse caminho, em relação às células normais, isto é, a atividade do caminho de reparo de DSB DNA dependente da HR pode ser reduzida ou abolida em uma ou várias células cancerosas.

[0094] A atividade de um ou vários componentes do caminho de reparo do DSB DNA dependente da HR pode ser abolida em uma ou várias células cancerosas de um indivíduo que está com um câncer que é deficiente no reparo de DSB DNA dependente da HR. Os componentes do caminho de reparo do DSB DNA dependente da HR são bem caracterizados na técnica (ver, por exemplo, Science (2001) 291:1284-1289) e incluem os componentes listados acima.

[0095] A presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de um câncer que é deficiente na atividade de reparo do DSB DNA dependente da HR.

[0096] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção de um câncer que é deficiente na atividade de reparo do DSB DNA dependente da HR, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I

[0097] Em uma modalidade as células cancerosas são deficientes na atividade de reparo do DSB DNA dependente da HR de um ou vários fenótopos selecionados de ATM (NM-000051), RAD51 (NM-002875), RAD51 L1 (NM-002877), RAD51 C (NM-002876), RAD51L3 (NM- 002878), DMC1 (NM-007068), XRCC2 (NM7005431), XRCC3 (NM- 005432), RAD52 (NM-002879), RAD54L (NM-003579), RAD54B (NM- 012415), BRCA-1 (NM-007295), BRCA-2 (NM-000059), RAD5O (NM- 005732), MREI IA (NM-005590), NBS1 (NM-002485)), ADPRT (PARP-1), ADPRTL2, (PARP02) CTPS, RPA, RPA1, RP A2, RPA3, XPD,ERCC1, XPF, MMS19, RAD51, RAD51p, RAD51C, RAD51D, DMC1, XRCCR, XRCC3, BRCA1, BRCA2, RAD52, RAD54, RAD50.MRE11, NB51, WRN, BLMKU70, RU80, ATM, ATRCHK1, CHK2, FANCA, FANCB, FANCC, FANCD1, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCG, FANCC, FANCDI, FANCD2, FANCE, FANCF, FANCG, RAD1 e RAD9.

[0098] Em outra modalidade, as células cancerosas têm um BRCA1 e/ou um fenótipo deficiente de BRCA2. As células cancerosas com este fenótipo podem ser deficientes em BRCA1 e/ou em BRCA2, isto é, a expressão e/ou atividade de BRCA1 e/ou de BRCA2 podem ser reduzidas ou abolidas nas células cancerosas, por exemplo, por meio da mutação ou do polimorfismo na codificação do ácido nucléico, ou por meio da amplificação, mutação ou polimorfismo em um gene que codifica um fator regulador, por exemplo, o gene EMSY que codifica um fator regulador de BRCA2 (Cell (2003) 115:523-535).

[0099] BRCA-1 e BRC A-2 são os supressores de tumor conhecidos cujos alelos tipo selvagem são perdidos freqüentemente nos tumores de veículos heterozigóticos (Oncogene,(2002) 21 (58): 8981-93; Trends Mol Med,(2002) 8(12): 571-6). A associação das mutações de BRCA-1 e/ou BRCA-2 com câncer da mama foi bem caracterizada (Exp Clin Cancer Res.,(2002) 21(3 Suppl):9-12). A amplificação do gene EMSY, que codifica um fator de ligação de BRCA-2, é conhecida também por ser associada ao câncer de mama e ovariano. Os veículos das mutações em BRCA-1 e/ou em BRCA-2 estão também em risco elevado de câncer do ovário, próstata e pâncreas. A detecção da variação em BRCA-1 e em BRCA-2 é conhecida na técnica e é descrita, por exemplo, na EP 699 754, EP 705 903, Genet. Test (1992) 1:75- 83; Cancer Treat Res.(2002) 107:29-59; Neoplasm(2003) 50(4): 246-50; Ceska Gynekol(2003) 68(1):11-16). A determinação da amplificação do fator de ligação BRCA-2 EMSY é descrita em Cell 115:523-535. Os inibidores de PARP foram demonstrados como sendo úteis para a matança específica dos tumores deficientes em BRCA-1 e BRCA-2 (Nature(2005) 434:913-916 e 917-920).

[00100] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção dos tumores deficientes em BRCA-1 ou BRCA-2.

[00101] A presente invenção também fornece um método para o tratamento ou prevenção dos tumores deficientes em BRCA-1 ou BRCA-2, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[00102] Em uma modalidade, os inibidores de PARP da presente podem ser usados na terapia profilática para a eliminação de células deficientes em BRCA2 (ver, Cancer Res. (2005) 65:10145).

[00103] Os compostos desta invenção podem ser úteis para o tratamento ou prevenção de doenças neurodeoenerativas, incluindo, neurodegeneração relacionada à expansão de poliglutamina, doença de Huntington, doença de Kennedy, ataxia espinocerebelar, atrofia dentatorubral- palidoluisiana (DRPLA), neurodegeneração relacionada à agregação de proteína, doença de Machado-Joseph, mal de Alzheimer, mal de Parkinson, esclerose lateral amiotrófica, encefalopatia espongiforme, doença relacionada ao príon e esclerose múltipla (MS).

[00104] Assim, a presente invenção fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para tratar ou impedir doenças neurodegenerativas.

[00105] A presente invenção também fornece um método de tratamento ou prevenção das doenças neurodegenerativas, tal método compreende a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I.

[00106] Os compostos da presente invenção também podem ser úteis para o tratamento ou prevenção da infecção retroviral (US. 5652260), dano retina) (Curr. Eye Res. (2004), 29:403), senescência da pele e dano da pele induzido por Uv (US 5589483 e Biochem. Pharmacol. (2002) 63:921).

[00107] Os compostos da invenção são úteis para o tratamento ou prevenção do envelhecimento prematuro e para adiamento do início da disfunção celular relativa à idade (Pharmacological Research (2005) 52:9399).

[00108] Os compostos desta invenção podem ser administrados aos mamíferos, preferivelmente seres humanos, sozinhos ou em combinação com veículos farmaceuticamente aceitáveis, excipientes, diluentes, adjuvantes, enchimentos, tampões, estabilizadores, preservativos, lubrificantes, em uma composição farmacêutica, de acordo com a prática farmacêutica padrão.

[00109] Os compostos desta invenção não podem ser administrados a um sujeito por qualquer rota da administração conveniente, seja sistematicamente/perifericamente ou no sítio de ação desejada, incluindo, mas não limitada a, oral (por exemplo, por ingestão); tópica (incluindo, por exemplo, transdérmica, intranasal, ocular, oral e sublingual); pulmonar (por exemplo, pela inalação ou pela terapia de insuflação usando, por exemplo, um aerossol, por exemplo, através da boca ou do nariz); retal; vaginal; parenteral, (por exemplo, por injeção, incluindo subcutânea, intradérmica, intramuscular, intravenosa, intra-arterial, intracardíaca, intratecal, intraespinal, intracapsular, subcapsular, intraorbital, intraperitoneal, intratraqueal, subcuticular, intraarticular, subaracnóide, e intra-esternal); e pelo implante de um depósito (por exemplo, subcutaneamente ou intramuscularmente).

[00110] O sujeito pode ser um eucariota, animal, animal vertebrado, mamífero, roedor (por exemplo, uma cobaia, hamster, camundongo, rato), murino (por exemplo, um rato), canino (por exemplo, um cão), felino (por exemplo, um gato), eqüino (por exemplo, um cavalo), primata, simiano (por exemplo, um macaco ou símio), um macaco (por exemplo, sagüi, babuíno), símio (por exemplo, gorila, chimpanzé, orangotango, gibão), ou um ser humano.

[00111] A invenção também fornece as composições farmacêuticas que compreendem um ou vários compostos desta invenção e um veículo farmaceuticamente aceitável. As composições farmacêuticas contendo o ingrediente ativo podem estar em uma forma apropriada para o uso oral, por exemplo, como comprimidos, troches, losangos, suspensões aquosas ou oleosas, pós ou grânulos dispersíveis, emulsões, cápsulas duras ou macias, xaropes ou elixires. As composições destinadas para o uso oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método conhecido na técnica para a fabricação de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou vários agentes selecionados do grupo consistindo em agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes de preservação a fim de fornecer preparações farmacêuticas refinadas e saborosas. Os comprimidos contêm o ingrediente ativo na mistura com excipientes farmaceuticamente aceitáveis não-tóxicos que são apropriados para a fabricação dos comprimidos. Estes excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes, tais como o carbonato de cálcio, carbonato de sódio, lactose, fosfato de cálcio ou fosfato de sódio; agentes de granulação e desintegração, por exemplo, celulose microcristalina, croscarmelose de sódio, amido de milho, ou ácido algínico; agentes de ligação, por exemplo, amido, gelatina, polivinil-pirrolidona ou acácia, e agentes de lubrificação, por exemplo, estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser sem revestimento ou podem ser revestidos pelas técnicas conhecidas para mascarar o gosto desagradável da droga ou para atrasar a desintegração e a absorção no aparelho gastrointestinal e para fornecer desse modo uma ação sustentada durante um período mais longo. Por exemplo, um material de mascaramento de gosto solúvel em água tal como a hidroxipropil- metilcelulose ou hidroxipropilcelulose, ou um material de atraso do tempo tal como a etil celulose, acetato butirato de celulose podem ser empregados.

[00112] As formulações para o uso oral também podem ser apresentadas como cápsulas de gelatina duras onde o ingrediente ativo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, carbonato de cálcio, fosfato de cálcio ou caulim, ou como cápsulas de gelatina macias onde o ingrediente ativo é misturado com veículo solúvel em água tal como o polietilenoglicol ou um meio de óleo, por exemplo, óleo de amendoim, parafina líquida, ou óleo de oliva.

[00113] As suspensões aquosas contêm o material ativo na mistura com os excipientes apropriados para a fabricação de suspensões aquosas. Tais excipientes são agentes de suspensão, por exemplo, carboximetilcelulose de sódio, metilcelulose, hidroxipropilmetil-celulose, alginato de sódio, polivinil- pirrolidona, goma de tragacanto e goma de acácia; os agentes da dispersão ou umectantes podem ser um fosfatídeo de ocorrência natural, por exemplo, lecitina, ou produtos de condensação de um óxido de alquileno com ácidos graxos, por exemplo, estearato de polioxietileno, ou produtos de condensação do óxido de etileno com alcoóis alifáticos de cadeia longa, por exemplo, heptadecaetilenoxicetanol, ou produtos de condensação do óxido de etileno com os ésteres parciais derivados dos ácidos graxos e um hexitol tal como monooleato de polioxietileno sorbitano, ou produtos de condensação do óxido de etileno com os ésteres parciais derivados dos ácidos graxos e dos anidridos de hexitol, por exemplo, monooleato de polietileno sorbitano. As suspensões aquosas também podem conter um ou vários preservativos, por exemplo, etila, ou p-hidroxibenzoato de n-propila, um ou vários agentes corantes, um ou vários agentes aromatizantes, e um ou vários agentes edulcorantes, tais como a sucrose, sacarina ou aspartame.

[00114] As suspensões oleosas podem ser formuladas suspendendo o ingrediente ativo em um óleo vegetal, por exemplo, óleo do amendoim, óleo de oliva, óleo de sésamo ou óleo de coco, ou em óleo mineral tal como a parafina líquida. As suspensões oleosas podem conter um agente de espessamento, por exemplo, cera de abelha, parafina dura ou álcool cetílico. Os agentes edulcorantes tais como aqueles determinados acima, e os agentes aromatizantes podem ser adicionados para fornecer uma preparação oral saborosa. Estas composições podem ser preservadas pela adição de um antioxidante tal como o hidroxianisol butilado ou alfa-tocoferol.

[00115] Os pós e grânulos dispersíveis apropriados para a preparação de uma suspensão aquosa pela adição de água fornecem o ingrediente ativo na mistura com um agente de dispersão ou umectante, agente de suspensão e um ou vários preservativos. Os agentes de dispersão ou umectantes e os agentes de suspensão apropriados são exemplificados por aqueles já mencionados acima. Excipientes adicionais, por exemplo, agentes edulcorantes, aromatizantes e corantes, também podem estar presentes. Estas composições podem ser preservadas pela adição de um antioxidante tal como o ácido ascórbico.

[00116] As composições farmacêuticas da invenção também podem estar sob a forma de emulsões óleo em água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, por exemplo, óleo de oliva ou óleo de amendoim, ou um óleo mineral, por exemplo, parafina líquida ou misturas destes. Os agentes emulsificantes apropriados podem ser fosfatídeos de ocorrência natural, por exemplo, lecitina do feijão de soja, e ésteres ou ésteres parciais derivados dos ácidos graxos e dos anidridos de hexitol, por exemplo, monooleato sorbitano, e dos produtos de condensação dos ésteres parciais referidos com óxido de etileno, por exemplo, monooleato de polioxietileno sorbitano. As emulsões também podem conter agentes edulcorantes, aromatizantes, preservativos e antioxidantes.

[00117] Os xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes, por exemplo, glicerol, propileno glicol, sorbitol ou sucrose. Tais formulações também podem conter um emoliente, preservativo, agentes aromatizantes e corantes e antioxidante.

[00118] As composições farmacêuticas podem estar sob a forma de soluções aquosas injetáveis estéreis. Entre os veículos e os solventes aceitáveis que podem ser empregados estão a água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotônica.

[00119] A preparação do injetável estéril também pode ser uma microemulsão óleo em água injetável estéril onde o ingrediente ativo é dissolvido na fase oleosa. Por exemplo, o ingrediente ativo pode primeiramente ser dissolvido em uma mistura de óleo de feijão de soja e lecitina. A solução de óleo então introduzida em uma mistura de água e glicerol e processada para formar uma microemulação.

[00120] As soluções ou microemulsões injetáveis podem ser introduzidas no fluxo sanguíneo de um paciente pela injeção de bolo local. Alternativamente, pode ser vantajoso administrar a solução ou a microemulsão de modo a manter uma concentração de circulação constante do presente composto. A fim de manter tal concentração constante, um dispositivo de liberação intravenosa contínua pode ser utilizado. Um exemplo de tal dispositivo é a bomba intravenosa de modelo 5400 da Deltec CADD- PLUSTM

[00121] As composições farmacêuticas podem estar sob a forma de uma suspensão aquosa ou oleaginosa injetável estéril para a administração intramuscular e subcutânea. Esta suspensão pode ser formulada de acordo com a técnica conhecida usando aqueles agentes de dispersão ou umectante e agentes de suspensão apropriados que foram mencionados acima. A preparação injetável estéril também pode ser uma solução injetável estéril ou uma suspensão em um diluente ou solvente aceitável parenteralmente não- tóxico, por exemplo, como uma solução no 1,3-butanediol. Além disso, os óleos estéreis, fixos são empregados convencionalmente como um solvente ou meio de suspensão. Para esta finalidade qualquer óleo fixo insípido pode ser empregado incluindo mono ou diglicerídeos sintéticos. Além disso, ácidos graxos tais como o ácido oléico, encontram uso na preparação dos injetáveis.

[00122] Os compostos de fórmula I podem também ser administrados sob a forma de supositórios para a administração retal da droga. Estas composições podem ser preparadas misturando a droga com um excipiente não-irritante apropriado que seja sólido em temperaturas normais, mas líquido na temperatura retal e derreterá conseqüentemente no reto para liberar a droga. Tais materiais incluem a manteiga de cacau, a gelatina glicerinada, óleos vegetais hidrogenados, misturas de polietileno glicóis de vários pesos moleculares e ésteres de ácidos graxos de polietileno glicol.

[00123] Para o uso tópico, cremes, pomadas, geléias, soluções ou suspensões, etc., contendo o composto de fórmula I são empregados. (Para as finalidades desta aplicação, o tratamento tópico incluirá lavagens bucais e gargarejos.)

[00124] Os compostos para a presente invenção podem ser administrados na forma intranasal através do uso tópico de veículos e dispositivos intranasais de liberação apropriados, ou através das rotas transdérmicas, usando aquelas formas de adesivos de pele transdérmicos conhecidos por aqueles versados na técnica. Para ser administrado sob a forma de um sistema de liberação transdérmica, a administração da dosagem, naturalmente, será contínua ao invés de intermitente durante todo o regime de dosagem. Os compostos da presente invenção também podem ser liberados como um supositório empregando bases tais como a manteiga de cacau, a gelatina glicerinada, óleos vegetais hidrogenados, misturas de polietileno glicóis de vários pesos moleculares e ésteres de ácido graxo de polietileno glicol.

[00125] Quando um composto de acordo com esta invenção é administrado a um sujeito, o nível de dosagem selecionado dependerá de uma variedade de fatores incluindo, mas não limitado a, atividade do composto particular, severidade dos sintomas individuais, rota de administração, tempo de administração, taxa de excreção do composto, duração do tratamento, outras drogas, compostos, e/ou materiais usados em combinação, e a idade, sexo, peso, condição, saúde geral, e a história médica anterior do paciente. A quantidade do composto e a rota de administração estarão finalmente na decisão do médico, embora geralmente a dosagem seja para atingir as concentrações locais no sítio da ação que consegue o efeito desejado sem causar mal substancial ou efeitos colaterais deletérios.

[00126] A administração in vivo pode ser efetuada em uma dose, continuamente ou intermitentemente (por exemplo, em doses divididas em intervalos apropriados) durante todo o curso do tratamento. Os métodos de determinação dos meios e dosagem de administração mais eficazes são conhecidos por aqueles versados na técnica e variarão com a formulação usada para a terapia, a finalidade da terapia, a célula alvo sendo tratada, e o sujeito sendo tratado. Administrações únicas ou múltiplas podem ser realizadas com o nível e o padrão da dose sendo selecionados pelo médico do tratamento.

[00127] Geralmente, uma dose apropriada do composto ativo está na escala de cerca de 100 pg a aproximadamente 250 mg por quilograma do peso do corpo do sujeito por dia. Onde o composto ativo é um sal, éster, pró-droga, ou semelhantes, a quantidade administrada é calculada com base no composto principal e assim o peso real a ser usado é aumentado proporcionalmente.

[00128] Os presentes compostos também são úteis em combinação com agentes anti-cancerígenos ou agentes quimioterapêuticos.

[00129] Os compostos desta invenção podem ser úteis como quimio- e radiosensibilizadores para o tratamento do câncer. Eles são úteis para o tratamento de mamíferos que já passaram anteriormente ou estão em tratamento contra o câncer atualmente. Tais tratamentos prévios incluem quimioterapia anterior, terapia de radiação, cirurgia ou imunoterapia, tais como vacinas de câncer.

[00130] Assim, a presente invenção fornece uma combinação de um composto de fórmula I e um agente anti-cancerígeno para administração simultânea, separada ou seqüencial.

[00131] A presente invenção também fornece uma combinação de um composto de fórmula I, terapia de radiação e outro agente quimioterapêutico para a administração simultânea, separada ou seqüencial.

[00132] A presente invenção também fornece um composto de fórmula I para o uso na fabricação de um medicamento para o uso como um adjunto na terapia do câncer ou para potencialização das células tumorais pela combinação com a radiação ionizante ou agentes quimioterapêuticos.

[00133] A presente invenção também fornece o uso de um composto de fórmula I na fabricação de um medicamento para o uso como um adjunto na terapia do câncer ou potencialização das células tumorais pela combinação com a radiação ionizante e outros agentes quimioterapêuticos. Os compostos também podem ser usados em combinação com a radiação ionizante e outros agentes quimioterapêuticos.

[00134] A presente invenção também fornece um método de quimioterapia ou radioterapia, tal método compreendendo a administração a um paciente na necessidade do mesmo de uma quantidade eficaz de um composto de fórmula I ou uma composição compreendendo um composto de fórmula I em combinação com a radiação ionizante ou agentes quimioterapêuticos. Os compostos também podem ser administrados em combinação com a radiação ionizante e outros agentes quimioterapêuticos.

[00135] Na terapia da combinação, os compostos desta invenção podem ser administrados antes de (por exemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48, horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas, ou 12 semanas antes), simultaneamente com, ou subseqüente a (por exemplo, 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 45 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 6 horas, 12 horas, 24 horas, 48 horas, 72 horas, 96 horas, 1 semana, 2 semanas, 3 semanas, 4 semanas, 5 semanas, 6 semanas, 8 semanas, ou 12 semanas depois) a administração do outro agente anticancerígeno a um sujeito na necessidade do mesmo. Em várias modalidas os presentes compostos e outro agente anticancerígeno são administrados com 1 minuto de distância, 10 minutos de distância, 30 minutos de distância, menos de uma hora de distância, 1 hora a 2 horas de distância, 2 a 3 horas de distância, 3 a 4 horas de distância, 4 a 5 horas de distância, 5 a 6 horas de distância, 6 a 7 horas de distância, 7 a 8 horas de distância, 8 a 9 horas de distância, 9 a 10 horas de distância, 10 a 11 horas de distância, 11 a 12 horas de distância, não mais de 24 horas de distância, ou não mais que 48 horas de distância.

[00136] Os compostos desta invenção e outro agente anticancerígeno podem atuar aditivamente ou sinergisticamente. Uma combinação sinergística dos presentes compostos e outro agente anticancerígeno pode permitir o uso de dosagens mais baixas de um ou ambos destes agentes e/ou dosagens menos freqüentes de um ou ambos os presentes compostos e outros agentes anticancerígenos e/ou administrar os agentes menos freqüentemente pode reduzir qualquer toxicidade associada com a administração dos agentes a um sujeito sem reduzir a eficácia dos agentes no tratamento do câncer. Além disso, um efeito sinergístico pode resultar na melhoria da eficácia destes agentes no tratamento do câncer e/ou na redução de quaisquer efeitos colaterais adversos ou não desejados associados com o uso de um ou outro agente sozinho.

[00137] Os exemplos de agentes cancerígenos ou agentes quimioterapêuticos para o uso em combinação com os compostos da presente invenção podem ser encontrados em Cancer Principies and Practice of Oncology por V.T. Devita e S. Hellman (editores), 6a edição (15 de fevereiro de 2001), Lippincott Williams & Wilkins Publishers. Uma pessoa versada na técnica poderia distinguir quais combinações de agentes seriam úteis baseado nas características particulares das drogas e câncer envolvidos. Tais agentes anticancerígenos incluem, mas não são limitados aos seguintes: inibidores de HDAC, moduladores do receptor do estrogênio, moduladores do receptor do androgênio, moduladores do receptor retinóide, agentes citotóxicos/citostáticos, agentes antiproliferativos, inibidores da transferase da prenil-proteína, inibidores da reductase HMG-CoA, inibidores da protease HIV, inibidores da transcriptase reversa e outros inibidores de angiogênese, inibidores da proliferação de célula e sinalização de sobrevivência, agentes de indução de apoptose e os agentes que interferem com os pontos de verificação do ciclo da célula. Os presentes compostos são particularmente úteis quando co-administrados com a terapia de radiação.

[00138] Exemplos de "Inibidores de HDAC"; incluem o ácido hidroxâmico suberoilanilida (SAHA), LAQ824, LBH589, PXD101, MS275, FK228, ácido valpróico, ácido butírico e CI-994.

[00139] "Moduladores do receptor de estrogênio"; se refere aos compostos que interferem com ou inibem a ligação do estrogênio ao receptor, não obstante o mecanismo. Os exemplos dos moduladores do receptor de estrogênio incluem, mas não são limitados a, tamoxifeno, raloxifeno, idoxifeno, LY353381, LY117081, toremifeno, fulvestrante, 4-[7-(2,2-dimetil- 1-oxopropóxi-4-metil-21412-(1-piperidinipetóxi]fenilal-2H-1-benzopiran-3- ill-fenila-2,2-dimetilpropanoato, 4,4'-dihidroxibenzofenona-2,4-dinitrofenila- hidrazona, e SH646.

[00140] "Moduladores do receptor de androgênio" se refere aos compostos que interferem ou inibem a ligação dos androgênios ao receptor, não obstante o mecanismo. Os exemplos dos moduladores do receptor de androgênio incluem a finasterida e outros inibidores da 5a-reductase, nilutamida, flutamida, bicalutamida, liarozol, e acetato de abiraterona.

[00141] "Moduladores do receptor retinóide" se refere aos compostos que interferem ou inibem a ligação dos retinóides ao receptor, não obstante o mecanismo. Os exemplos de tais moduladores do receptor de retinóide incluem o bexaroteno, tretinoína, ácido 13-cis-retinóico, ácido 9-cis-retinóico, a-difluormetilornitina, ILX23-7553, trans-N-(4'-hidroxifenila) retinamida, e N-4-carboxifenila retinamida.

[00142] "Agentes citotóxicos/citostáticos" se refere aos compostos que causam a morte da célula ou inibem a proliferação da célula primeiramente interferindo diretamente com o funcionamento da célula ou inibindo ou interferindo com a mitose da célula, incluindo agentes alquilantes, fatores de necrose de tumor, intercaladores, compostos ativáveis por hipoxia, inibidores de microtúbulo/agentes estabilizadores de microtúbulo, inibidores das cinesinas mitóticas, inibidores das cinases envolvidas na progressão mitótica, anti-metabólitos, modificadores de resposta biológica; agentes terapêuticos hormonais/anti-hormonais, fatores de crescimento hematopoiéticos, agentes terapêuticos direcionados do anticorpo monoclonal, inibidores da topoisomerase, inibidores do proteassoma e inibidores da ubiquitina ligase.

[00143] Os exemplos de agentes citotóxicos incluem, mas não são limitados a, ciclofosfamida, carmustina de clorambucil (BCNU), lomustina (CCNU), busulfano, treosulfano, sertenef, caquectina, ifosfamida, tasonermina, lonidamina, carboplatina, altretamina, prednimustina, dibromodulcitol, ranimustina, fotemustina, nedaplatina, aroplatina, oxaliplatina, temozolomida, meti) metanosulfonato, procarbazina, dacarbazina, heptaplatina, estramustina, tosilato de improsulfano, trofosfamida, nimustina, cloreto de dibrospidio, pumitepa, lobaplatina, satraplatina, profirornicina, cisplatina, irofulveno, dexifosfamida, cis- aminadicloro(2-metil-piridina)platina, benzilguanina, glufosfamida, GPX100, (trans, trans, trans)-bis-mu-(hexano-1,6-diamina)- mu4diamina- platina(Il)]bis[diamina(cloro)platina(Il)]tetracloreto, diarizidinilespermina, trióxido de arsênio, 1-(11-dodecilamino-10- hidroxiundecil)-3,7-dimetilxantina, zorubicina, idarubicina, daunorubicina, bisantreno, mitoxantrona, pirarubicina, pinafida, valrubicina, amrubicina, doxorubicina, epirubicina, pirarubicina, antineoplaston, 3'-deamino-3'- morfolino-13-deoxo-10-hidroxicarminomicina, annamicina, galarubicina, elinafida, MEN 10755 e 4-demetóxi-3-deamino-3-aziridini1-4-metilsulfonil- daunorubicina (ver WO 00/50032). Exemplos adicionais incluem inibidores da cinase Raf (tais como Bay43-9006) e inibidores de mTOR (tais como Wyeth's CCI-779 de Ariad AP23573). Exemplos adicionais são inibidores de P13K (por exemplo, LY294002).

[00144] Em uma modalidade os compostos desta invenção podem ser usados em combinação com agentes alquilantes.

[00145] Os exemplos de agentes alquilantes incluem, mas não são limitados a, mostardas de nitrogênio: ciclofosfamida, ifosfamida, trofosfamida e clorambucil; nitrosouréias: carmustina (BCNU) e lomustina (CCNU); alquilssulfonatos: busulfano e treosulfano; triazenos: dacarbazina, procarbazina e temozolamida; complexos contendo platina: cisplatina, carboplatina, aroplatina e oxaliplatina.

[00146] Em uma modalidade, o agente alquilante é dacarbazina. A dacarbazina pode ser administrada a um sujeito em dosagens que variam de aproximadamente 150 mg/m2 (da área de superfície corporal de um sujeito) a aproximadamente 250 mg/m2. Em outra modalidade, a dacarbazina é administrada intravenosamente a um sujeito uma vez por dia por cinco dias consecutivos em uma dose que varia de aproximadamente 150 mg/m2 a aproximadamente 250 mg/m2.

[00147] Em uma modalidade, o agente alquilante é procarbazina. A procarbazina pode ser administrada a um sujeito em dosagens que variam de aproximadamente 50 mg/m2 (da área de superfície corporal de um sujeito) a aproximadamente 100mg/m2. Em outra modalidade, a procarbazina é administrada intravenosamente a um sujeito uma vez por dia por cinco dias consecutivos em uma dose que varia de aproximadamente 50 mg/m2 a aproximadamente 100 mg/m2.

[00148] Em uma modalidade, o agente alquilante é temozoloamida. A temozoloamida pode ser administrada a um sujeito em dosagens que variam de aproximadamente 150 mg/m2 (da área da superfície corporal de um sujeito) a aproximadamente 200 mg/m2. Em outra modalidade, a temozolomida é administrada oralmente a um animal uma vez por dia por cinco dias consecutivos em uma dose que varia de aproximadamente 150 mg/m2 a aproximadamente 200 mg/m2.

[00149] Os exemplos de agentes antimitóticos incluem: alocolchicina, halicondrina B, colchicina, derivado de colchicina, doistatina 10, maitansina, rizoxina, tiocoichicina e tritil cisteína.

[00150] Um exemplo de um composto ativável de hypoxia é tirapazamina.

[00151] Os exemplos de inibidores do proteassoma incluem, mas não são limitados a lactacistina, bortezomib, epoxomicina e aldeídos de peptídeos tais como MG 132, MG 115 e PSI.

[00152] Os exemplos de inibidores de microtúbulo/agentes estabilizadores de microtúbulo incluem o paclitaxel, sulfato de vindesina, vincristina, vinblastina, vinorelbina, 3',4'-didehidro-4'-deoxi-8'- norvincaleucoblastina, docetaxol, rizoxina, dolastatina, isetionato de mivobulina, auristatina, cemadotina, RPR 109881, BMS184476, vinflunina, criptoficina, 2,3,4,5,6-pentafluor-N-(3-fluor-4-metoxifenila) benzeno sulfonamida, anidrovinblastina, N,N-dimetil-L-valil-L-valil-N-metil-L-valil- L-prolil-L-prolina-t-butilamida, TDX258, as epotilonas (ver, por exemplo, a PAT. US. n°. 6.284.781 e 6.288.237) e BMS 188797.

[00153] Alguns exemplos dos inibidores de topoisomerase são topotecano, hicaptamina, irinotecano, rubitecano, exatecano, gimetecano, diflomotecano, silil-camptotecinas, 9-aminocamptotecina, camptotecina, crisnatol, mitomicina C,6- etoxipropionil-3',4'-O-exo-benzilideno- chartreusina, 9-metóxi-N,N-dimetil-5- nitropirazolo[3,4,5-kl]acridina-2-(6H) propanamina, 1-amino-9-etil-5-fluor-2,3- dihidro-9-hidroxi-4-metil-1H, 12H- benzo[de]pirano[31,41:b,7]- indolizino[1,2b]quinolina-10,13(9H, 15H)diona, lurtotecano, 7-[2-(N-isopropilamino) etil]-(20S)camptotecina, BNP1350, BNPI 1100, BN 80915, BN 80942, fosfato de etoposida, teniposida, sobuzoxano, 2'-dímetilamino-2'-deoxi-etoposida, GL331, N-[2- (dimetilamino)etil]-9-hidroxi-5,6-dimetil-6H-pirido[4,3-b]carbazol-1- carboxamida, asulacrina, (5a,5aB,8aa,9b)-942-[N42-(dimetilamino)etil]-N- metilaminoletil]-544- hidroxi-3,5-dimetoxifenill-5,5a,6,8,8a,9- hexohidrofuro(3',4':6,7)nafto(2,3-d)-1,3-dioxol-6-ona,2,3-(metilenodioxi)-5- metil-7-hidroxi-8-metoxibenzo[c]-fenantridinio, 6,9-bis[(2- aminoetil)amino]benzo[g]isoguinolina-5,10-diona, 5-(3- aminopropilamino)- 7,10-dihidroxi-2-(2-hidroxietilaminometil)-6H-pirazolo[4,5,1- de]acridin-6- ona, N4142-(dietilamino)etilamino]-7-metoxi-9-oxo-9H-tioxanten- 4- ilmetiliformamida, N-(2-(dimetilarnino)etipacridina-4-carboxamida, 6[(2- (dimetilamino)etillamino]-3-hidroxi-7H-indeno[2,1-c]quinolin-7-ona, e dimesna; inibidores de non-camptotecin topoisomerase-1 tais como indolocarbazóis; e dual topoisomerase-1 e II inibidores tais como benzofenazinas, XR20 115761MLN 576 e benzopiridoindóis.

[00154] Em uma modalidade, o inibidor de topoisomerase é irinotecano. Irinotecano pode ser administrado a um sujeito em dosagens que variam de aproximadamente 50 mg/m2 (da área da superfície corporal de um sujeito) a aproximadamente 150 mg/m2. Em outra modalidade, irinotecano é administrado intravenosamente a um sujeito uma vez por dia por cinco dias consecutivos em uma dose que varia aproximadamente de 50mg/m2 a aproximadamente 150mg/m2 nos 1-5 dias, então outra vez intravenosamente uma vez por dia por cinco dias consecutivos nos dias 28-32 em uma dose que varia de aproximadamente 50mg/m2 a aproximadamente 150mg/m2, então outra vez intravenosamente uma vez por dia por cinco dias consecutivos nos dias 55-59 em uma dose que varia de aproximadamente 50mg/m2 a aproximadamente 150mg/m2.

[00155] Exemplos dos inibidores das cinesinas mitóticas, e em particular da cinesina mitótica humana KSP, são descritos nas publicações de PCT WO 01/30768, WO 01/98278, WO 02/056880, WO 03/050.064, WO 03/050.122, WO 03/049.527, WO 03/049.679, WO 03/049.678, WO 03/039460, WO 03/079973, WO 03/099211, WO 2004/039774, WO 03/105855, WO 03/106417, WO 2004/087050, WO 2004/058700, WO 2004/058148 e WO 2004/037171 e pedidos US. 2004/132830 e 2004/132719. Em uma modalidade os inibidores das cinesinas mitóticas incluem, mas não são limitados aos inibidores de KSP, inibidores de MKLP1, inibidores de CENP-E, inibidores de MCAK, inibidores de Kif14, inibidores de Mphosphl e inibidores de Rab6-KIFL.

[00156] "Inibidores das cinases envolvidas na progressão mitótica"; incluem, mas não são limitados a, inibidores da cinase Aurora, inibidores da cinase polo-like (PLK) (em particular inibidores da PLK-1), inibidores do bub-1 e inibidores do bub-R1.

[00157] "Agentes antiproliferativos" incluem oligonucleotídeos de RNA e DNA anti-sentido tais como G3139, ODN698, RVASKRAS, GEM231, e INX3001, e antimetabólitos tais como a enocitabina, carmofur, tegafur, pentostatina, doxifluridina, trimetrexato, fludarabina, capecitabina, galocitabina, ocfosfato de citarabina, hidrato de sódio de fosteabina, raltitrexedo, paltitrexido, emitefur, tiazofurina, decitabina, nolatrexedo, pemetrexedo, nelzarabina, 2'-deoxi-2'-metilidenecitidina, 2'-fluormetileno-2'- deoxicitidina, N-[5-(2,3-dihidro-benzofuril) sulfonin-N'-(3,4- diclorofenipurea, N6-14-deoxi- 44N242(E),4(E)- tetradecadienoinglicilaminoR-glicero-B-L-mano- heptopiranosinadenina, aplidina, ecteinascidina, troxacitabina, 4-[2-amino-4- oxo-4,6,7,8-tetrahidro-3H- pirimidino[5,4-b][1,4]tiazin-6-i1-(S)-eti11-2,5- tienoil-L-ácido glutãmico, aminopterina, 5-flurouracil, alanosina, 11-acetil-8- (carbamoiloximetil)-4-formil-6-metoxi-14-oxa-1,11- diazatetraciclo(7.4.1.0.0)-tetradeca-2,4,6-trien-9-il éster de ácido acético, swainsonina, lometrexol, dexrazoxano, metioninase, 2'-ciano-2'-deoxi-N4- palmitoil-1-6-D-arabino furanosil citosina e 3 aminopiridina-2-carboxaldeído tiosemicarbazona.

[00158] Os exemplos de agentes terapêuticos direcionados ao anticorpo monoclonal incluem aqueles agentes terapêuticos que têm agentes citotóxicos ou radioisótopos unidos a uma célula cancerosa específica ou anticorpo monoclonal específico de célula alvo. Os exemplos incluem Bexxar.

[00159] Os "inibidores da reductase de HMG-CoA" se referem aos inibidores da reductase de 3-hidroxi-3-metilglutaril-CoA. Os exemplos dos inibidores da reductase HMG-CoA que podem ser usados incluem mas não são limitados à lovastatina (MEVACOR®; ver PAT. US. n°. 4.231.938, 4.294.926 e 4.319.039), simvastatina (ZOCOR®; ver PAT. US. n°. 4.444.784, 4.820.850 e 4.916.239), pravastatina (PRAVACHOL®; ver PAT. US. n°. 4.346.227, 4.537.859, 4.410.629, 5.030.447 e 5.180.589), fluvastatina (LESCOL®; ver PAT. US. n°. 5.354.772, 4.911.165, 4.929.437, 5.189.164, 5.118.853, 5.290.946 e 5.356.896) e atorvastatina (LIPITOR®; ver PAT. US. n°. 5,273,995, 4,681,893, 5,489,691 e 5,342,952). As fórmulas estruturais destes e inibidores adicionais da reductase de HMG-CoA que podem ser usados nos presentes métodos são descritas na página 87 de M. Yalpani, "Cholesterol Lowering Drugs", Chemistry and Industry, pp. 8589 (5 de fevereiro de 1996) e Pat US. n°. 4.782.084 e 4.885.314. O termo inibidor de reductase HMG-CoA como usado aqui inclui todas as formas farmaceuticamente aceitáveis da lactona e do ácido aberto (isto é, onde o anel de lactona é aberto para formar o ácido livre) assim como formas de sal e éster dos compostos que têm a atividade inibitória da reductase HMG-CoA, e conseqüentemente o uso de tais formas de sais, ésteres, ácido abertos e lactona é incluído dentro do escopo desta invenção.

[00160] "Inibidor da transferase da prenil-proteína" se refere a um composto que inibe qualquer uma ou qualquer combinação das enzimas do transferase da prenil-proteína, incluindo a transferase da farnesil-proteína (FPTase), tipo I da transferase da geranilgeranil-proteína (GGPTase-I), e tipo II da transferase da geranilgeranil-proteína (GGPTase-II, também chamado Rab GGPTase).

[00161] Os exemplos de inibidores da transferase da prenil-proteína podem ser encontrados nas seguintes publicações e patentes: WO 96/30343, WO 97/18813, WO 97/21701, WO 97/23478, WO 97/38665, WO 98/28980, WO 98/29119, WO 95/32987, PAT. US. n°. 5.420.245, PAT. US. n°. 5.523.430, PAT. US. n°. 5.532.359, PAT. US. n°. 5.510.510, PAT. US. n°. 5.589.485, PAT. US. n°. 5.602.098, Publ. Patente Européia O 618 221, Publ. de Patente Européia O 675 112, Publ. de Patente Européia 0 604 181, Publ. de Patente Européia O 696 593, WO 94/19357, WO 95/08542, WO 95/11917, WO 95/12612, WO 95/12572, WO 95/10514, PAT. US. n°. 5.661.152, WO 95/10515, WO 95/10516, WO 95/24612, WO 95/34535, WO 95/25086, WO 96/05529, WO 96/06138, WO 96/06193, WO 96/16443, WO 96/21701, WO 96/21456, WO 96/22278, WO 96/24611, WO 96/24612, WO 96/05168, WO 96/05169, WO 96/00736, PAT. US. n°. 5.571.792, WO 96/17861, WO 96/33159, WO 96/34850, WO 96/34851, WO 96/30017, WO 96/30018, WO 96/30362, WO 96/30363, WO 96/31111, WO 96/31477, WO 96/31478, WO 96/31501, WO 97/00252, WO 97/03047, WO 97/03050, WO 97/04785, WO 97/02920, WO 97/17070, WO 97/23478, WO 97/26246, WO 97/30053, WO 97/44350, WO 98/02436, e PAT. US. n°. 5.532.359. Para um exemplo do papel de um inibidor da transferase da prenil-proteína na angiogênese ver European J. Cancer (1999), 35(9):1394-1401.

[00162] "Inibidores da angiogênese" se referem aos compostos que inibem a formação de vasos sanguíneos novos, não obstante o mecanismo. Os exemplos dos inibidores de angiogênese incluem, mas não são limitados a, inibidores da cinase tirosina, tais como inibidores dos receptores da cinase tirosina Flt-I (VEGFRI) e Flk-1/KDR (VEGFR2), inibidores epidérmicos- derivados, fibroblasto-derivados, ou plaqueta derivada de fatores de crescimento, inibidores de MMP (matriz metaloprotease), bloqueadores da integrina, interferon-a, interleucin-12, polisulfate de pentosano, inibidores cicloxigenase, incluindo anti-inflamatórios não-esteroidais (NSAIDs) como aspirina e ibuprofeno assim como os inibidores cicloxi-genase-2 seletivos como a celecoxiba e rofecoxiba (PNAS (1992) 89:7384; JNCI (1982) 69:475; Arch. Opthalmol. (1990) 108:573; Anat. Rec. (1994) 238:68; FEBS Letters (1995) 372:83; Clin, Orthop.(\995) 313:76; J Mol. Endocrinol. (1996) 16:107; Jpn. J. Pharmacol. (1997) 75:105; Cancer Res .{1991) 57:1625 (1997); Cell (1998) 93:705; Int'. J. Mol. Med. (1998) 2:715; J Biol. Chem. (1999) 274:9116)), anti-inflamatórios esteroidais (tais como corticosteróide, mineralocorticáides, dexametasona, prednisona, prednisolona, metilpred, betametasona), carboxiamidotriazol, combretastatina A-4, esqualamina, 6-0- cloroacetil-carbonil-)fumagilol, talidomida, angiostatina, troponin-1, antagonistas da angiotensina II (ver J. Lab. Clin. Med. (1985) 105:141-145), e anticorpos ao VEGF (ver Nature Biothecnology (1999) 17:963-968; Kim et al. (1993) 362:841844; WO 00/44777; e WO 00/61186).

[00163] Outros agentes terapêuticos que modulam ou inibem a angiogênese e também podem ser usados em combinação com os compostos da presente invenção incluem os agentes que modulam ou inibem a coagulação e sistemas de fibrinólise (ver a revisão em Clin. Chem. La. Med. (2000) 38:679-692). Os exemplos de tais agentes que modulam ou inibem a coagulação e caminhos de fibrinólise incluem, mas não são limitados a, heparina (ver Thromb. Haemost. (1998) 80:10-23), heparina de pesos moleculares baixos e inibidores da carboxipeptidase U (também conhecidos como inibidor da fibrinólise ativável da trombina ativa [TAFIa]) (ver Thrombosis Res. (2001) 101:329-354). Os inibidores TAFIa foram descritos na publicação de PCT WO 03/013.526 e US. número de série 60/349.925 (depositado em 18 de janeiro de 2002).

[00164] "Agentes que interferem com os pontos de verificação ciclo da célula" se referem aos compostos que inibem as cinases da proteína que transduz sinais dos pontos de verificação do ciclo da célula, sensibilizando desse modo a célula cancerosa aos agentes prejudiciais do DNA. Tais agentes incluem inibidores de ATR, ATM, o Chk1 e cinases Chk2 e cdk e os inibidores da cinase cdc e são exemplificados especificamente pela 7- hidroxistaurosporina, estaurosporina, flavopiridol, CYC202 (Ciclacel) e BMS-387032.

[00165] "Inibidores da proliferação da célula e caminhos de sinalização de sobrevivência" se referem aos agentes farmacêuticos que inibem os receptores da superfície da célula e cascatas de transdução dos sinais a jusante daqueles receptores de superfície. Tais agentes incluem inibidores dos inibidores EGFR (por exemplo, gefitinib e erlotinib), inibidores ERB-2 (por exemplo, trastuzumab), inibidores IGFR (por exemplo, aqueles descritos em WO 03/059951), inibidores dos receptores de citocina, inibidores do MET, inibidores de PI3K (por exemplo, LY294002), cinases de serine/treonina (incluindo mas não limitadas aos inibidores de Akt tais como os descritos em (WO 03/086404, WO 03/086403, WO 03/086394, WO 03/086279, WO 02/083675, WO 02/083139, WO 02/083140 e WO 02/083138), inibidores da cinase Raf (por exemplo, BAY-43-9006), inibidores de MEK (por exemplo, CI-1040 e de PD 098059) e inibidores de mTOR (por exemplo, Wyeth CCI779 e Ariad AP23573). Tais agentes incluem compostos inibidores de pequenas molécula e antagonistas do anticorpo.

[00166] "Agentes indutores de apoptose" incluem ativadores dos membros da família do receptor TNF (incluindo os receptores TRAIL).

[00167] Em uma modalidade os compostos da presente invenção são úteis para tratar o câncer em combinação com um ou vários, particularmente um, dois ou três agentes selecionados da temozolomida, cisplatina, carboplatina, oxaliplatina, irinotecano e topotecano.

[00168] Um composto da presente invenção também pode ser útil para tratar o câncer em combinação qualquer um ou vários dos seguintes agentes terapêuticos: abarelix (Plenaxis depot®); aldesleucina (Prokine®); Aldesleucina (Proleukin®); Alemtuzumab (Campath®); alitretinoína (Panretin®); alopurinol (Ziloprim®); altretamina (Hexalen®); amifostina (Ethyol®); anastrozol (Arimidex®); trióxido de arsênio (Trisenox®); asparaginase (Elspar®); azacitidina (Vidaza®); bevacuzimab (Avastin®); cápsulas de bexaroteno (Targretin®); gel de bexaroteno (Targretin®); bleomicina (Blenoxane0); bortezomib (Velcade®); busulfano intravenoso (Busulfex®); busulfano oral (Mileran®); calusterona (Methosarb®); capecitabina (Xeloda®); carboplatina (Paraplatin®); carmustina (BCNU®, BiCNU®); carmustina (Gliadel®); carmustina com implante de Polifeprosano 20 (Gliadel Wafer®); celecoxib (Celebrex®); cetuximab (Erbitux®); clorambucil (Leukeran®); cisplatina (Platinol®); cladribina (Leustatin®, 2- CdA®); clofarabina (Clolar®); ciclofosfamida (Cytoxan®, Neosar®); ciclofosfamida (Cytoxan Injection0); ciclofosfamida (Cytoxan Tablet0); citarabina (Cytosar-U®); citarabina lipossomal (DepoCyt0); dacarbazina (DTIC-Dome®); dactinomicina, actinomicina D (Cosmegen®); Darbepoetina alfa (Aranesp®); daunorubicina lipossomal (DanuoXome®); daunorubicina, daunomicina (Daunorubicin®); daunorubicina, daunomicina (Cerubidine®); Denileucina Diftitox (Ontak®); dexrazoxano (Zinecard0); docetaxel (Taxotere0); doxorubicina (Adriamycin PFS®); doxorubicina (Adriamycin0, Rubex®); doxorubicina (Adriamycin PFS Injection0); doxorubicina lipossomal (Doxi10); propionato de dromostanolona (Dromostanolone()); propionato de dromostanolona (Masterone Injection0); solução de Elliott (Elliott's B Solution0); epirubicina (Ellence0); Epoetina alfa (epogen0); erlotinib (Tarceva®); estramustina (Emcyt®); etoposida fosfato (Etopophos0); etoposida, VP-16 (Vepesid0); exemestano (Aromasin®); Filgrastim (Neupogen®); floxuridina (intra-arterial) (FUDR®); fludarabina (Fludara®); fluoruracila, 5-FU (Adrucil()); fulvestrante (Faslodex®); gefitinib (Iressa()); gemcitabina (Gemzar0); gemtuzumab ozogamicina (Milotarg®); acetato de goserelina (Zoladex Implant0); acetato de goserelina (Zoladex®); acetato de histrelina (Histrelin implant0); hidroxiuréia (Hydrea®); Ibritumomab Tiuxetano (Zevalin0); idarubicina (Idamycina0); ifosfamida (IFEX®); mesilato de imatinib (Gleevec0); interferon alfa 2a (Roferon A®); Interferon alfa-2b (Intron AC)); irinotecano (Camptosar®); lenalidomida (Revlimid0); letrozol (Femara0); leucovorina (Wellcovorin®, Leucovorin0); Acetato de Leuprolida (Eligard®); levamisol (Ergamisol0); lomustina, CCNU (CeeBU®); mecloretamina, mostarda de nitrogênio (Mustargen0); acetato de megestrol (Megace0); melfalan, L-PAM (Alkeran®); mercaptopurina, 6-MP (Purinethol0); mesna (Mesnex0); mesna (Mesnex tabs®); metotrexato (Methotrexate0); metoxsaleno (Uvadex0); mitomicina C (Mutamycin0); mitotano (Lysodren()); mitoxantrona (Novantrone®); fenpropionato de nandrolona (Durabolin-50®); nelarabina (Arranon®); Nofetumomab (Verluma®); Oprelvecina (Neumega®); oxaliplatina (Eloxatin®); paclitaxel (Paxene0); paclitaxel (Taxa()); partículas ligadas à proteína do paclitaxel (Abraxane0); palifermina (Kepivance0); pamidronato (Aredia0); pegademase (Adagen (Pegademase Bovine)®); pegaspargase (Oncaspar0); Pegfilgrastim (Neulasta®); pemetrexedo dissódio (Alimta0); pentostatina (Nipent0); pipobromano (Vercyte0); plicamicina, mitramicina (Mithracin®); porfimer do sódio (Photofrin()); procarbazina (Matulane0); quinacrina (Atabrine®); Rasburicase (Elitek0); Rituximab (Rituxan0); sargramostim (Leucinae0); Sargramostim (Prokine0); sorafenib (Nexavar0); estreptozocina (Zanosar0); maleato de sunitinib (Sutent®); talco (Sclerosol0); tamoxifeno (Nolvadex0); temozolomida (Temodar0); teniposida, VM-26 (Vumon®); testolactona (Teslac0); tioguanina, 6-TG (Thioguanine0); tiotepa (Thioplex0); topotecano (Hycamtin®); toremifeno (Fareston0); Tositumomab (Bexxar()); Tositumomab/I-131 Tositumomab (Bexxar()); Trastuzumab (Herceptin0); tretinoina, ATRA

[00169] (Vesanoid®); Mostarda de Uracila (Uracil Mustard Capsules®); valrubicina (Vaistar®); vinblastina (Velban®); vincristina (Oncovin®); vinorelbina (Navelbine®); vorinostato (Zolinza®); zoledronato (Zometa®); nilotinib (Tasigna®) e dasatinib (Sprycel®).

[00170] A invenção também abrange combinações com os NSAID's que são os inibidores de COX-2 seletivos. Para as finalidades desta especificação NSAID's que são inibidores de COX-2 seletivos são definidos como aqueles que possuem uma especificidade para inibir o COX-2 sobre COX-1 de pelo menos 100 vezes se medido pela proporção de IC50 para COX-2 sobre IC50 para COX-1 avaliada pela célula ou por ensaios microssomais. Tais compostos incluem, mas não são limitados àqueles descritos na PAT. US. 5.474.995, PAT. US. 5.861.419, PAT. US. 6.001.843, PAT. US. 6.020.343, PAT. US. 5.409.944, Pat US. 5.436.265, PAT. US. 5.536.752, PAT. US. 5.550.142, PAT. US. 5.604.260, U.S. 5.698.584, PAT. US. 5.710.140, WO 94/15932, PAT. US. 5.344.991, PAT. US. 5.134.142, PAT. US. 5.380.738, PAT. US. 5.393.790, PAT. US. 5.466.823, PAT. US. 5.633.272, e PAT. US. 5.932.598, que são incorporados por este meio por referência.

[00171] Os inibidores de COX-2 que são particularmente úteis no presente método de tratamento são 5-cloro-3-(4-metilsulfonil)feni1-2-(2- metil-5-piridinil)piridina; ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00172] Os compostos que foram descritos como inibidores específicos de COX-2 e que são, conseqüentemente, úteis na presente invenção incluem, mas não são limitados a: parecoxib, CELEBREX® e BEXTRA® ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.

[00173] Outros exemplos de inibidores da angiogênese incluem, mas não são limitados a, endostatina, ucraina, ranpirnase, IM862, 5-metoxi-442- metil-3-(3-metil-2-butenil)oxiranil]-1-oxaspiro[2,5]oct-6- il(cloroacetil)carbamato, acetildinanalina, 5-amino-14[(3,5-dicloro-4-(4- clorobenzoil)feninmetil]-1H-1,2,3- triazol-4-carboxamida, CM101, esqualamina, combretastatina, RPI4610, NX31838, fosfato de manopentaose sulfatado, 7,7-(carbonila-bis[imino-N-metil-4,2-pirrolocarbonilaimino[N- metil-4,2-pirron-carbonilimino]-bis-(1,3-disulfonato de naftaleno), e 3-[(2,4- dimetilpirrol-5-il)metileno]-2-indolinona (SU5416).

[00174] Como usado acima, "bloqueadores de integrina" se referem aos compostos que seletivamente antagonizam, inibem ou neutralizam a ligação de um ligante fisiológico à integrina avr33, aos compostos que seletivamente antagonizam, inibem ou neutralizam a ligação de um ligante fisiológico à integrina a„,[35, aos compostos que antagonizam, inibem ou neutralizam a ligação de um ligante fisiológico à integrina av[33 e à integrina a,[35, e aos compostos que antagonizam, inibem ou neutralizam a atividade das integrinas particulares expressas em células endoteliais capilares. O termo também se refere aos antagonistas das integrinas avi36, a438, a.101, a231, a5Pi, 06[31 e a684. O termo também se refere aos antagonistas de qualquer combinação das integrinas av33, av135, a4136, av38, a131, a2131, a531, a631 e ad34.

[00175] Alguns exemplos específicos de inibidores da tirosina cinase incluem N-(trifluorometilfenil)-5-metilisoxazol-4-carboxamida, 3-[(2,4- dimetilpirrol-5- il)metilidenil)indolin-2-ona, 17-(alilamino)-17- demetoxigeldanamicina, 4-(3-cloro-4-fluorofenilamino)-7-metoxi-643-(4- morfolinil)propoxiliquinazolina, N-(3-etinilfeniI)-6,7-bis(2-metoxietoxi)-4- quinazolinamina, BIBX1382, 2,3,9,10,11,12-hexahidro-10-(hid roximetil)-10- hid roxi-9-metil-9,12-epoxy-1H-diindolo[1,2,3-fg :3',2',1'- kl]pirrolo[3,4- i][1,6]benzodiazocin-1-ona, SH268, genisteína, STI571, CEP2563, 4- (3- clorofenilamino)-[2,3-d]sulfonato de pirimidinemetano, 4-(3-bromo- 4- hidroxifenil)amino-6,7-dimetoxiquinazolina, 4-(4'-hidroxifenil)amino- 6,7- dimetoxiquinazolina, SU6668, STI571A, N-4-clorofeniI-4-(4- piridilmetil)-1-ftalazinamina, e EMD 121974.

[00176] Em uma incorporação, os compostos da presente invenção atual são úteis para o tratamento ou prevenção da aparência de necrose induzida por agentes de metilação de N3-adenina seletivos tais como MeOSO2(CH2)-lexitropsina (Me-Lex).

[00177] As combinações com os compostos diferentes dos compostos anticancerígenos também são abrangidas nos presentes métodos. Por exemplo, combinações dos compostos reivindicados com os agonistas PPAR- y (isto é, PPAR-gama) e agonistas PPAR-õ (isto é, PPAR-delta) são úteis no tratamento de determinados malignidades. PPAR-y e PPAR-õ são os receptores y e õ ativados pelo proliferator da peroxissoma nuclear. A expressão PPAR-y em células endoteliais e sua participação na angiogênese foram relatadas na literatura (ver J Cardiovasc. Pharmacol. (1998) 31:909913; J Biol. Chem. (1999) 274:9116-9121; Invest. Ophthalmol Vis. ScL (2000) 41:2309-2317). Mais recentemente, os agonistas PPAR-y foram mostrados por inibir a resposta angiogênica para VEGF in vitro; tanto a troglitazona e o maleato de rosiglitazona inibem o desenvolvimento da neovascularização retina) nos camundongos. (Arch. Ophthamol. (2001) 119:709 - 717). Os exemplos dos agonistas PPAR-y e agonistas PPAR-y/a incluem, mas não são limitados a, tiazolidinedionas (tais como DRF2725, CS-011, troglitazona, rosiglitazona, e pioglitazona), fenofibrato, gemfibrozil, clofibrato, GW2570, SB219994, AR-H039242, JTT-501, MCC-555, GW2331, GW409544, NN2344, KRP297, NP0110, DRF4158, NN622, G1262570, PNU 182716, DRF552926, 2-[(5,7-d ipropil-3-trifluormetil-1,2-benzisoxazol-6-il)oxi]-ácido 2-metilpropiônico (descrito em USSN 09/782.856), e 2(R)-7-(3-(2-cloro-4-(4- fluorfenoxi)fenoxi)propoxi)-2-etilcromano-2- ácido carboxílico (descrito em USSN 60/235.708 e 60/244.697).

[00178] Outra modalidade da presente invenção é o uso dos compostos presentemente descritos em combinação com agentes anti-virais tais como os análogos do nucleosídeo incluindo ganciclovir para o tratamento do câncer. Ver WO 98/04290.

[00179] Outra modalidade da presente invenção é o uso dos compostos presentemente descritos em combinação com a terapia de gene para o tratamento do câncer. Para uma vista geral das estratégias genéticas para tratar o câncer ver Hall et. al (Am J Hum Genet (1997) 61:785-789) e Kufe et ai (Cancer Medicine, 5a Ed, pp 876-889, BC Decker, Hamilton 2000). A terapia de gene pode ser usada para liberar qualquer gene supressor de tumor. Os exemplos de tais genes incluem, mas não são limitados a, p53, que pode ser liberado através da transferência de gene mediada por vírus recombinante (ver PAT. US. n°. 6.069.134, por exemplo), um antagonista uPA/uPAR ("Adenovirus-Mediated Delivery of a uPA/uPAR Antagonist Suppresses Angiogenesis-Dependent Tumor Growth and Dissemination in Mice," Gene Therapy, August (1998) 5(8):1105-13), e interferon gama (J immunol.(2000) 164:217-222).

[00180] Os compostos da presente invenção também podem ser administrados em combinação com um inibidor de resistência a multidroga inerente (MDR), em particular MDR associado com os altos níveis de expressão das proteínas do transportador. Tais inibidores MDR incluem inibidores da p-glicoproteína (PGP), como LY335979, XR9576, 0C144-093, R101922, VX853, verapamil e PSC833 (valspodar).

[00181] Um composto da presente invenção pode ser empregado conjuntamente com agentes anti-eméticos para tratar a náusea ou emese, incluindo emese aguda, retardada, fase atrasada, e antecipatória, que pode ser resultado do uso de um composto da presente invenção, sozinho ou com terapia de radiação. Para a prevenção ou tratamento da emese, um composto da presente invenção pode ser usado conjuntamente com outros agentes anti- eméticos, especialmente antagonistas do receptor neurocinina-1, antagonistas do receptor 5HT3, tais como o ondansetron, granisetron, tropisetron, e zatisetron, agonistas do receptor GABAS, como baclofeno, um corticosteráide tal como Decadron (dexametasona), Kenalog, Aristocort, Nasalide, Preferid, Benecorten ou outros tais como os descritos nas Patentes US 2.789.118, 2.990.401, 3.048.581, 3.126.375, 3.929.768, 3.996.359, 3.928.326 e 3.749.712, um antidopaminérgico, tal como as fenotiazinas (por exemplo, proclorperazina, flufenazina, tioridazina e mesoridazina), metoclopramida ou dronabinol. Em uma modalidade, um agente anti-emese selecionado de um antagonista do receptor neurocinina-1, um antagonista do receptor 5HT3 e uni corticosteróide é administrado como um adjuvante para o tratamento ou prevenção da emese que pode resultar a partir da administração dos presentes compostos.

[00182] Os antagonistas do receptor neurocinina-1 de uso conjuntamente com os compostos da presente invenção são descritos inteiramente, por exemplo, nas Pat. US 5.162.339, 5.232.929, 5.242.930, 5.373.003, 5.387.595, 5.459.270, 5.494.926, 5.496.833, 5.637.699, 5.719.147; Publicações de Patente Européia nOS. EP 0360390, 0394989, 0428434, 0429366, 0430771, O 436334, 0443132, 0482539, 0498069, 0499313, 0512901, 0512902, 0514273, 0514 274, 0514275, 0514276, 0515681, 0517589, 0520555, 0522808, 0528495, 0532456, O 533 280, O 536 817, O 545 478, O 558 156, O 577 394, O 585 913.0 590 152, O 599 538, O 610 793, O 634 402, O 686 629, O 693 489, O 694 535, O 699 655, O 699 674, O 707 006, O 708 101, O 709 375, 0 709 376, O 714 891, O 723 959, 0 733 632 e O 776 893; Publicações de Patente Internacional PCT nOS. WO 90/05525, 90/05729, 91/09844, 91/18899, 92/01688, 92/06079, 92/12151, 92/15585, 92/17449, 92/20661, 92/20676, 92/21677, 92/22569, 93/00330, 93/00331, 93/01159, 93/01165, 93/01169, 93/01170, 93/06099, 93/09116, 93/10073, 93/14084, 93/14113, 93/18023, 93/19064, 93/21155, 93/21181, 93/23380, 93/24465, 94/00440, 94/01402, 94/02461, 94/02595, 94/03429, 94/03445, 94/04494, 94/04496, 94/05625, 94/07843, 94/08997, 94/10165, 94/10167, 94/10168, 94/10170, 94/11368, 94/13639, 94/13663, 94/14767, 94/15903, 94/19320, 94/19323, 94/20500, 94/26735, 94/26740, 94/29309, 95/02595, 95/04040, 95/04042, 95/06645, 95/07886, 95/07908, 95/08549, 95/11880, 95/14017, 95/15311, 95/16679, 95/17382, 95/18124, 95/18129, 95/19344, 95/20575, 95/21819, 95/22525, 95/23798, 95/26338, 95/28418, 95/30674, 95/30687, 95/33744, 96/05181, 96/05193, 96/05203, 96/06094, 96/07649, 96/10562, 96/16939, 96/18643, 96/20197, 96/21661, 96/29304, 96/29317, 96/29326, 96/29328, 96/31214, 96/32385, 96/37489, 97/01553, 97/01554, 97/03066, 97/08144, 97/14671, 97/17362, 97/18206, 97/19084, 97/19942 e 97/21702; e nas Publicações de Patente Britânicas nos. 2 266 529, 2 268 931, 2 269 170, 2 269 590, 2 271 774, 2 292 144, 2 293 168, 2 293 169, e 2 302 689. A preparação de tais compostos é descrita inteiramente nas patentes e publicações acima mencionadas, que são incorporadas aqui por referência.

[00183] Em uma modalidade, o antagonista do receptor neurocinina-1 para o uso conjuntamente com os compostos da presente invenção é selecionado de: 2-(R)-(1-(R)-(3,5-bis(trifluormetil)fenipetoxi)-3-(S)-(4- fluorfeni1)-4-(3-(5-oxo-1H,4H-1,2 ,4-triazolo)metil)morfolina, ou sais farmaceuticamente aceitáveis do mesmo, que é descrito na Pat. US 5.719.147.

[00184] Um composto da presente invenção também pode ser administrado com um agente útil no tratamento da anemia. Tal agente de tratamento da anemia é, por exemplo, um ativador do receptor de eritropoiese contínua (tal como a epoetina alfa).

[00185] Um composto da presente invenção também pode ser administrado com um agente útil no tratamento da neutropenia. Tal agente de tratamento da neutropenia é, por exemplo, um fator de crescimento hematopoiético que regula a produção e a função dos neutrófilos tais como um fator de estimulação da colônia de granulócito humano, (G-CSF). Os exemplos de um G-CSF incluem a filgrastima.

[00186] Um composto da presente invenção também pode ser administrado com uma droga de intensificação imunológica, tal como o levamisol, isoprinosina e Zadaxin.

[00187] Um composto da presente invenção também pode ser útil para tratar ou prevenir o câncer, incluindo o câncer de osso, em combinação com os bisfosfonatos (compreendidos por incluir bisfosfonatos, difosfonatos, ácidos bisfosfônicos e ácidos difosfônicos). Exemplos dos bisfosfonatos incluem, mas não são limitados a: etidronato (Didronel), pamidronato (Aredia), alendronato (Fosamax), risedronato (Actonel), zoledronato (Zometa), ibandronato (Boniva), incadronato ou cimadronato, clodronato, EB-1053, minodronato, neridronato, piridronato e tiludronato incluindo todo e qualquer sal farmaceuticamente aceitável, derivados, hidratos e misturas dos mesmos.

[00188] Assim, o escopo da presente invenção abrange o uso dos compostos reivindicados em combinação com a radiação ionizante e/ou em combinação com um segundo composto selecionado de: inibidores HDAC, modulador do receptor de estrogênio, modulador do receptor de androgênio, modulador do receptor retinóide, agente citotóxico/citostático, agente antiproliferativo, inibidor da transferase prenil-proteína, inibidor da reductase HMG-CoA, inibidor da angiogênese, agonista PPAR-y, agonista PPAR-õ, agente anti-viral, inibidor da resistência inerente à multidroga, agente anti- emético, agente útil no tratamento da anemia, agente útil no tratamento da neutropenia, droga de intensificação imunológica, inibidor da proliferação de célula e da sinalização de sobrevivência, agente que interfere no ponto de verificação do ciclo da célula, um agente indutor da apoptose e bisfosfonato.

[00189] termo "administração" e variações do mesmo (por exemplo, "administrando" um composto) em referência a um composto da invenção significam a introdução de composto ou pró-droga do composto no sistema do animal na necessidade de tratamento. Quando um composto da invenção ou pró-droga do mesmo for fornecido em combinação com um ou vários outros agentes ativos (por exemplo, um agente citotóxico, etc.), "administração" e suas variações são, cada uma, compreendidas por incluir a introdução simultânea e seqüencial do composto ou pró-droga do mesmo e outros agentes.

[00190] Como usado aqui, o termo "composição" é destinado a abranger um produto que compreende os ingredientes específicos em quantidades específicas, assim como qualquer produto que resultar, diretamente ou indiretamente, da combinação dos ingredientes específicos nas quantidades específicas.

[00191] termo "quantidade terapeuticamente eficaz" como usado aqui significa a quantidade do composto ou agente farmacêutico ativo que elicia a resposta biológica ou medicinal em um tecido, sistema, animal ou humano que estejam sendo investigados por um pesquisador, veterinário, médico ou outro clínico.

[00192] termo "tratamento" se refere ao tratamento de um mamífero afligido por uma condição patológica e se refere a um efeito que alivia a condição matando as células cancerígenas, mas também um efeito que conduz à inibição do progresso da condição, e inclui uma redução na taxa de progresso, parada na taxa de progresso, melhora da condição, e cura da condição. O tratamento como uma medida profilática (isto é, profilaxia) também é incluído.

[00193] termo "farmaceuticamente aceitável" como usado aqui se refere aos compostos, materiais, composições e/ou formas de dosagem que estão, dentro do espaço do julgamento médico sadio, apropriado para o uso em contato com os tecidos de um sujeito (por exemplo, ser humano) sem toxicidade excessiva, irritação, resposta alérgica, ou outro problema ou complicação, proporcionais com uma proporção razoável de risco/benefício. Cada veículo, excipiente, etc. devem também ser "aceitável" no sentido de ser compatível com os outros ingredientes da formulação.

[00194] O termo "adjunto" se refere ao uso dos compostos conjuntamente com meios terapêuticos conhecidos. Tais meios incluem regimes citotóxico de drogas e/ou radiação ionizante como usados no tratamento de tipos diferentes de câncer. Em particular, os compostos ativos são conhecidos por potencializar as ações de um número de tratamentos de quimioterapia de câncer, que incluem a classe topoisomerase de venenos (por exemplo, topotecano, irinotecano, rubitecano), a maioria dos agentes alquilantes conhecidos (por exemplo, DTIC, temozolamida) e as drogas a base de platina (por exemplo, carboplatina, cisplatina) usadas no tratamento do câncer.

[00195] Também é incluído no espaço das reivindicações um método de tratamento do câncer que compreende a administração de uma quantidade terapêutica eficaz de um composto de fórmula I em combinação com a terapia de radiação e/ou em combinação com um composto selecionado de: inibidores HDAC, modulador do receptor de estrogênio, modulador do receptor de androgênio, modulador do receptor retinóide, agente citotóxico/citostático, agente antiproliferativo, inibidor da transferase prenil- proteína, inibidor da reductase HMG-CoA, inibidor da angiogênese, agonista PPAR-y, agonista PPAR-õ, agente anti-viral, inibidor de resistência inerente da multidroga, agente anti-emético, agente útil no tratamento da anemia, agente útil no tratamento da neutropenia, droga de melhoramento imunológico, inibidor da proliferação da célula e da sinalização de sobrevivência, agente que interfere no ponto de verificação do ciclo da célula, agente indutor da apoptose e bisfosfonato.

[00196] Estes e outros aspectos da invenção serão aparentes a partir dos ensinamentos contidos aqui.

Abreviações usadas na descrição da química e nos Exemplos seguintes:

[00197] AcCI (cloreto de acetila); (BzO)2 (peróxido de benzoíla); Cbz- Cl (benzilcloroformato); DCM (diclorometano); DIPEA (di-iso- propiletilamina); DMF (dimetilformamida); DMSO (sulfóxido de dimetila); eq. (equivalente); ES (eletrospray); EtOAc (acetato de etila); EtOH (etanol); peneiras moi. (peneiras moleculares); HATU [0-(7-azabenzotriazol-1-i1)- N,N,N',N'-tetrametilurõnio hexafluor-fosfato]; MeCN (acetonitrila); MeOH (metanol); MS (espectrometria de massa); MW (microonda); NBS (N- bromosuccinimida); NMMO (N-metilmorfolina-N-óxido); NMR (ressonância magnética nuclear); Pcol (pressão da coluna); iPrOH (isopropanol); RT (temperatura ambiente); sat. aq. (saturado aquoso); Si02 (gel de sílica); e THF (tetrahidrofurano). t-BuOH (tert-butanol); KOAc (acetato de potássio); MW Microonda; IST ISOLUTE® SPE coluna SCX (Tecnologia de Sorvente Internacional ISOLUTE® resina de troca catiônica em coluna de Extração de Fase Sólida); SFC (cromatografia fluida supercrítica); TBTU 0-(1H- benzotriazol-1-i1)-N,N,N',N1-tetrafluorborato de tetrametilurônio; e Tcol (temperatura da coluna). CDCI3 (clorofórmio deuterado); TLC (cromatografia de camada fina) e TFA (ácido trifluroacético).

[00198] Os compostos de fórmula I podem ser preparados pela reação de um composto de fórmula IA com amônia:

onde R1 e R2 são como definido acima e Rx é Ci_salquila, tal como metila. A reação é realizada geralmente usando uma solução aquosa de NH3 em um solvente tal como THF aproximadamente a 70°C, em um recipiente de reação selado (com cuidado). Alternativamente, uma base tal como NaOH ou KOH pode ser adicionada à hidrólise do éster ao ácido carboxílico correspondente (Rx é hidrogênio), seguido pela adição de NH3 na presença dos agentes de acoplamento tais como HATU ou TBTU e DIPEA em um solvente tal como DMF, a reação sendo realizada aproximadamente na temperatura ambiente. Alternativamente, o ácido carboxílico pode ser ativado para formar um anidrido misturado, por exemplo, usando Boc2O, e então reagido com o bicarbonato de amônio, geralmente em um solvente tal como a piridina. Alternativamente, o éster pode ser convertido nos compostos de fórmula IA usando a amônia em um solvente tal como MeOH aproximadamente a 120°C, por exemplo em uma MW.

[00199] O átomo de nitrogênio no anel de piperidina nos compostos de fórmula IA pode ser protegido durante a síntese acima, por exemplo, por Boc.

[00200] Os compostos de fórmula IA podem ser preparados reagindo um composto de fórmula IB com uma azida:

onde R1, R2 e Rx são como definidos acima. Um azida tal como NaN3 pode ser usada, geralmente em um solvente como DMF a cerca de 90°C a 140°C. Um aditivo tal como 2,6 lutidina também pode ser usado. A reação pode ser realizada sob uma atmosfera de nitrogênio.

[00201] Os compostos de fórmula IB podem ser preparados pela condensação de um composto de fórmula IC com um composto de fórmula ID:

onde R1, R2 e Rx são como definidos acima e L1 é um grupo de saída tal como nitro ou halogênio, por exemplo flúor. Os métodos incluem a condensação na presença de um agente de desidratação tal como MgSO4 ou peneiras moleculares ou aquecimento em um solvente de álcool tal como o etanol no refluxo. A reação pode ser realizada sob uma atmosfera de nitrogênio.

[00202] Os compostos de fórmula IC podem ser preparados oxidando um composto de fórmula IE com um agente de oxidação tal como NMMO:

onde R1, Rx e L1 são corno definidos acima e L2 é um grupo de saída tal como o halogênio, por exemplo bromo, geralmente em um solvente tal como MeCN aproximadamente na temperatura ambiente. A reação pode ser realizada sob uma atmosfera de nitrogênio.

[00203] Os compostos de fórmula IE onde L2 é bromo podem ser preparados oxidando um composto de fórmula IF com um agente de bromação tal como NBS na presença de um iniciador radical tal como o peróxido de benzoíla:

onde R1, Rx e L1 são como definidos acima, geralmente em um solvente tal como o CCI4 no refluxo. A reação pode ser realizada sob uma atmosfera de nitrogênio.

[00204] Compostos de fórmula IF onde L1 é flúor podem ser preparados pela diazonização de um composto de fórmula IG:

onde R1 e Rx são como definidos acima, seguido pela decomposição do sal de diazônio intermediário. Por exemplo, a diazonização pode ser realizada usando o tetrafluorborato de nitrosio em um solvente tal como DCM aproximadamente a 0°C. O sal correspondente de tetrafluorborato de diazônio pode então ser isolado e subseqüentemente decomposto em temperaturas elevadas ao derivado correspondente do fluorobenzeno (cuidado), como pelo aquecimento a 160°C em um solvente tal como o diclorobenzeno.

[00205] Compostos de fórmula IF onde L1 é nitro podem ser preparados pela nitração de um composto de fórmula IH:

onde R1 é como definido acima, seguido pela esterificação. A reação de nitração pode ser realizada na presença de um nitrato tal como o nitrato de potássio e um ácido tal como o ácido sulfúrico aproximadamente na temperatura ambiente. A etapa de esterificação pode ser realizada sob condições padrão, como pela reação com um haleto de alquila de fórmula Rx- X onde X é um halogênio tal como o iodo, na presença de uma base tal como o carbonato de césio e em um solvente tal como DMF aproximadamente na temperatura ambiente. Um álcool de fórmula Rx-OH também pode ser usado junto com um catalisador ácido, tal como o HCI gerado in situ a partir de AcCl/MeOH, no refluxo. O composto desejado da fórmula IF pode então ser obtida pela hidrogenação do composto nitro para a anilina correspondente usando o hidrogênio e um catalisador tal como o paládio no carbono, tipicamente em um solvente alcoólico tal como MeOH.

[00206] Alternativamente, os compostos da fórmula I podem ser preparados reduzindo um composto de fórmula IJ:

onde R1 e R2 são como definidos acima. A redução pode ser realizada em uma reação de Fowler usando um cloreto de acila tal como CBz- CI e um agente redutor tal como NaBH4. A hidrogenação sobre o paládio no carbono termina a reação e remove o grupo de proteção CBz.

[00207] Os compostos de fórmula IJ podem ser preparados reticulando um composto de fórmula IK com ácido 3-piridinilborônico de fórmula IL:

onde R1, R2 e L2 são como definidos acima. A reação é realizada geralmente sob condições de acoplamento de Suzuki tais como utilizando catalisadores tais como Pd2(dba)3 e tri(tert-butil)fosfina junto com uma base tal como o carbonato de sódio e os solventes tais como DMF e água aproximadamente a 90°C.

[00208] Os compostos de fórmula IK podem ser preparados pela condensação de um composto de fórmula IM com um composto de fórmula IN:

onde R1, R2 e L2 são como definidos acima e L3 é um grupo de saída tal como o halogênio, por exemplo flúor, geralmente em um solvente tal como DMF aproximadamente a 180°C em urna MW. Uma base tal como K2CO3 também pode ser adicionada.

[00209] Os compostos de fórmula IM podem ser preparados reagindo um composto de fórmula 10:

onde R1 e Rx são como definidos acima, com uma base tal como KOH ou NaOH aproximadamente a temperatura ambiente para hidrolisar o éster no ácido carboxílico correspondente (Rx é hidrogênio), seguido pela adição de NH3 na presença dos agentes de acoplamento tais como HATU, DIPEA e TBTU em um solvente tal como DMF, a reação sendo realizada aproximadamente a temperatura ambiente.

[00210] Os compostos de fórmula 10 podem ser preparados a partir do composto de fórmula IG pela acetilação do grupo anilina com reagentes tais como o cloreto de acetila em um solvente tal como 1,2-DCE aproximadamente a 55°C. A ciclização para o indazol desejado pode então ser realizada pelo tratamento com nitrito de sódio no ácido, por exemplo, ácido clorídrico concentrado, geralmente na presença de um co-solvente tal como o tolueno e a água aproximadamente a 0°C.

[00211] Onde a síntese dos intermediários e dos materiais de partida não for descrita, estes compostos estão disponíveis no comércio ou podem ser feitos de compostos disponíveis no comércio por métodos padrão ou pela extensão da síntese acima, dos esquemas e exemplos aqui.

[00212] Os compostos de fórmula I podem ser convertidos em outros compostos de fórmula I por métodos conhecidos ou pelos métodos descritos na síntese acima, nos esquemas e exemplos aqui.

[00213] Durante qualquer das seqüências sintéticas descritas aqui podem ser necessárias e/ou desejáveis para proteger grupos sensíveis ou reativos em qualquer molécula referida. Isto pode ser conseguido por meio dos grupos de proteção convencionais, tais como aqueles descritos em Protecting Groups in Organic Synthesis, 3rd Edition, Greene, T. W. e Wuts, P. G. M.; Wiley lnterscience, 1999 and Kocienski, P. J. Protecting Groups, Thieme, 1994. Os grupos de proteção podem ser removidos em um estágio subseqüente conveniente usando os métodos conhecidos na técnica, por exemplo, quando o grupo de proteção Boc(tert-butoxicarbonila) ou benzilcarbonila está presente, este pode ser removido pela adição de solventes tais como TFA, DCM e/ou MeCN aproximadamente a temperatura ambiente. O composto também pode ser hidrogenado usando métodos padrão, tais como o tratamento com um catalisador

[00214] tal como Pd/C, em um solvente tal como metanol sob uma atmosfera de hidrogênio. EtOAc na presença de HCI e 1,4-dioxano também pode ser adicionado para remover o grupo de proteção Boc ou benzilcarbonila, aproximadamente na temperatura ambiente.

[00215] Os compostos desta invenção foram preparados de acordo com os seguintes esquemas. Todas as variáveis dentro das fórmulas são como definidas acima.

[00216] Quando os compostos da presente invenção têm centros quirais, os enantiômeros podem ser separados das misturas racêmicas pelos métodos de separação padrão tais como a utilização de SFC, HPLC quiral ou resolução com ácidos quirais. A separação pode ser realizada em qualquer etapa do processo para fazer os compostos de fórmula I. Assim, a separação pode ser realizada na etapa final, ou alternativamente os intermediários podem ser separados e então enantiômeros particulares utilizados nas reações subseqüentes para produzir os produtos desejados.

Esquema 1

[00217] Um procedimento para sintetizar derivados daqueles compostos desta invenção é mostrado no esquema 1, pelo qual os 2H-indazóis substituídos são preparados usando uma rota sintética similar àquela descrita em WO 2005/066136. Depois da conversão inicial do derivado ácido 2-nitro- 3-metil-benzóico no éster correspondente, a bromação radical do grupo metila usando reagentes como N-bromosuccinimida e peróxido de benzoila produz o derivado brometo de benzila chave. A oxidação deste brometo benzílico para o benzaldeído correspondente pode ser, por exemplo, usando o N- metilmorfolina-N-óxido e peneiras moleculares. Depois da condensação do aldeído com uma amina, o fechamento do anel pode ser realizado tratando o intermediário chave com azida de sódio em temperatura elevada para introduzir o átomo final de nitrogênio e a extrusão resultante do nitrogênio para fornecer o anel de indazol. Uma base tal como a lutidina também pode ser adicionada a esta reação. A conversão final do éster em amida primária produz os derivados desejados. Isto pode ser realizado tanto pelo aquecimento do éster em uma solução de amônia ou pela conversão no ácido carboxílico correspondente e então acoplamento do amido.

Esquema 2

[00218] Uma variação dos esquemas 1 é mostrada abaixo no esquema 2 e permite a introdução de substituíntes nos núcleos de indazol. Quando os derivados do ácido nitrobenzóico exigidos não estiverem disponíveis comercilamente, eles podem ser preparados com a nitração dos derivados do ácido benzóico correspondentes, por exemplo, usando o nitrato de potássio no ácido sulfúrico concentrado. As manipulações sintéticas como descritas acima permitem a formação da anilina correspondente que pode tanto ser ciclizada para o indazol primeiramente pela acetificação do indazol quanto pela ciclização com nitrito de sódio em ácido HCI concentrado a 0°C. Alternativamente, a anilina pode ser diazonizada com tetrafluorborato de nitrosio e o sal de tetrafluorborato de diazônio correspondente decomposto em temperaturas elevadas no derivado de dilfluorbenzeno correspondente por uma reação de Schiemann (cuidado). Depois da seqüência sintética como descrita no esquema 1 permite a oxidação do grupo metila benzílico para o aldeído correspondente e elaboração dos derivados de indazol desejados pelo acoplamento com uma (hetero)anilida e pela ciclização com azida de sódio.

Esquema 3

[00219] Um procedimento alternativo envolve a funcionalização do indazol em um estágio posterior segundo as indicações do esquema 3. Aqui o éster de indazol é primeiramente convertido em carboxamida correspondente e depois sujeito à substituição aromática nucleofílica do brometo de flúor(hetero)aromático apropriado. Isto permite a preparação de um derivado do brometo que pode ser reticulando sob condições de acoplamento de Suzuki, por exemplo, usando tri(tert-butil)fosfina e Pd2(dba)3 como catalisadores na presença de uma base, tal como o carbonato de sódio. A conversão à porção de piperidina desejada é realizada então por uma reação de Fowler usando um cloreto de acila, tal como o CBz-CI e um agente redutor tal como NaBH4. A reação de hidrogenação final pode produzir os derivados de piperidina correspondentes.

Ensaios PARP-1 SPA

[00220] Os compostos exemplificados descritos aqui foram testados neste ensaio e um valor 1050 de menos de 5pM foi encontrado, particularmente de menos de 50nM.

Reaqentes de Trabalho

[00221] Tampão do ensaio: 100 mM de Tris pH 8, 4 mM de MgCl2, 4 mM de Espermina, 200 mM de KCI, 0,04% Nonidet P-40.

[00222] Mistura da enzima: tampão do ensaio (12,5 ul), 100 mM DTT (0,5 ul), PARP-I (5 nM, Trevigen 4668-500-01), H20 (para 35 ul).

[00223] Mistura Nicotinamida-adenina dinucleotídeo (NAD)/DNA: [3H-NADJ (250 uCi/ml, 0,4 ul, Perkin-Elmer NET-443H), NAD (1,5 mM, 0,05 ul, SIGMA N-1511), NAD Biotinilado (250 uM, 0,03 ul, Trevigen 4670500-01), timus de bezerro ativado (1mg/ml, 0,05u1, Amersham Biosciences 27-4575), H20 (para 10u1).

[00224] Mistura de revelação: gotas de Estreptavidina SPA (5mg/ml, Amersham Biosciences RPNQ 0007) dissolvidas em 500 mM de EDTA.

Projeto experimental

[00225] A reação é executada em microplaca de 96 poços com um volume final de 50 uL/poço. Adicione 5u1 5%DMSO/solução do composto, adiciona a mistura da enzima (35u1), inicie a reação adicionando a mistura de NAD/DNA (10uL) e incube-a por 2 horas a RT. Pare a reação adicionando a mistura de revelação (25 ul) e incube por 15 minutos a RT. Meça usando um instrumento Packard TOP COUNT.

Ensaio de Proliferação em BRCA-1 silenciou células HeLa. Abreviações:

[00226] IMDM (Meio Dulbecco Modificado Por Iscove); RPMI (meio Roswell Park Memorial Institute); MOI (multiplicidade de infecção); GFP (proteína fluorescente verde); PBS (solução salina tamponada com fosfato); FCS (soro fetal de bezerro); e DMEM (Meio de Earle Modificado por Dulbecco).

[00227] Os compostos da presente invenção também foram testados em um ensaio anti-proliferativo no par casado BRCA1wt e BRCA1-(shRNA) células HeLa. O ensaio mostra que os inibidores PARP podem mostrar a seletividade com inibição do crescimento das células deficientes em BRCA. Os compostos mostraram CC5o menor que 5 pM em células deficientes em BRCA1 e maior que 10 vezes a seletividade sobre as células proficientes em BRCA.

[00228] O ensaio é baseado na habilidade das células vivas converterem uma tintura redox (resazurina) em um produto final fluorescente (resofurina). A quantidade de resofurina produzida é diretamente proporcional ao número de células.

Linhagens Celulares:

[00229] HELA SHBRCAL-GFP - Estas são células HeLa transduzidas em um MOI de 100 com um Lentivírus contendo um shRNA contra BRCA-1 e um cassete de expressão para GFP. O silenciamento de BRCA-1 é mais de 80% como avaliado pela análise de Taqman e as células estévelmente expressam GFP.

[00230] HELA THM-GFP - Estas são células HeLa transduzidas em um MOI de 100 com um vetor de controle que não expressa nenhum shRNA.

Protocolo

[00231] Semear 300 células/poço em placas de visualização preta de 96 poços em 90p1 Meio de cultura *: - Incubar 4 horas a 37°C, 5% CO2 Adicionar 1 Oul/poço de 10X o composto (5% DMSO em H20) Incubar por 168 horas a 37°C, 5% CO2 Adicionar 10p1 da solução de Celltiter azul (Promega, G8081) pré-diluída em PBS1x Incubar a mistura por 45' a 37°C, 5% CO2 - Incubar 15' a RT no escuro Ler a placa no fluorímetro ex: 550 nm; em: 590 nm *Meio de Cultura: DMEM (GIBCO, 41966-029), 10% FCS (GIBCO, 10106-169), 0,1mg/m1 Penicilina-Estreptomicina (GIBCO, 15140114), 2mM L-Glutamina (n!Pen, 3042190)

Ensaio de Proliferação em linhagens de células es em BRCA.

[00232] Os compostos da presente invenção foram demonstrados também por inibir naturalmente a proliferação das linhagens celulares deficinetes naturalmente em BRCA-1 (MDA-MB-436) e BRCA-2 (CAPAN- I) com CC50 menor que 5 micromolar.

Ensaio de Proliferação

[00233] As células são semeadas em uma placa de 96 poços em 700 células/poço em 100u1 do meio/poço apropriado*. No dia seguinte, diluições em série do composto são adicionadas em um volume final de 200 pl/poço. Cada diluição é analisada em triplicatas.

[00234] Seis dias depois, a viabilidade da célula é estimada usando o Ensaio de Viabilidade de Célula CellTiter-Blue de acordo com as instruções do fabricante (Promega). As placas são lidas no leitor de microplaca Fusion Alfa (Packard Bioscience).

[00235] Para linhagens celulares de baixa-proliferação (isto é, CAPAN-I), a proliferação é analisada 14 dias após a adição dos compostos e mudança de meio uma vez no dia 7 (170 pl do meio por poço são aspirados e substituídos com 170 p1 do meio fresco contendo os compostos).

[00236] *Meio de cultura: MDA-MB-436: RPM! (GIBCO), 10 % FBS (5% CO2) CAPAN-I: IMDM (GIBCO), 20 % FBS (5% CO2)

[00237] Os compostos testados em um modelo de oncologia in vivo mostraram um nível significativo de atividade.

EXEMPLO PREPARATIVO EXEMPLO A 2-Fenila-2H-indazol-7-carboxamida (A6) Etapa 1: Metila 3-metil-2-nitrobenzoato (A1)

[00238] A uma suspensão do ácido 3 metil-2-nitro-benzóico (1,0 eq.) em MeOH (0,4 M) a 0°C foi adicionado gota a gota AcCI (3,0 eq.). A mistura de reação foi agitada por 20 h no refluxo. O solvente foi reduzido a vácuo e o resíduo foi dissolvido em EtOAc e lavado diversas vezes com solução sat. aq. de NaHCO3, salmoura e seco (Na2SO4). A evaporação do solvente produziu (A1) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, CDCI3, 300K) õ 7,86 (1H, d, J = 7,5 Hz), 7,537,42 (2H, m), 3,89 (3H, s), 2,36 (3H, s). MS (ES) C9H9N04 exige: 195, encontrado: 218 (M±Na)+.

Etapa 2: Metila 3-(bromometila)-2-nitrobenzoato (A2)

[00239] Uma mistura de (A1) (1,0 eq.), (6z0)2 (0,06 eq.) e NBS (1,18 eq.) em CCI4 (0,2 M no que diz respeito ao Al) foi aquecida no refluxo sob a atmosfera de N2 por 12 horas. A mistura foi resfriada à RT, diluída com DCM, concentrada sob pressão reduzida enquanto carregamento a seco em Si02. O resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna flash em Si02 usando 10:90 EtOAc/éter de Petróleo para produzir o (A2) desejado como um sólido branco. 1H NMR (400MHz, CDCI3, 300K) s5 7,93 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,72 (1H, d, J = 7,7 Hz), 7,57 (1H, t, J = 7,7 Hz), 4,43 (2H, s), 3,88 (3H, s). MS (ES) C9H8BrN04 exige: 273:275, encontrado: 242:244 (M-Me0)+, 227:229 (M-NO2)+.

Etapa 3: Metila 3 formil-2-nitrobenzoato (A3)

[00240] À uma mistura de (A2) (1,0 eq.) e 4A peneiras mol. (15 g) em MeCN (0,2M) a RT foi adicionado NMMO (2,0 eq.) e a mistura da reação foi agitada por 1,5 hora sob a atmosfera de N2. Então, a mistura foi diluída com EtOAc, filtrada e o filtrado foi lavado com H20, 1N HCI, salmoura e seco (Na2SO4). A evaporação do solvente produziu (A3) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, CDCI3, 300K) i5 9,96 (1H, s), 8,26 (1H, d, J= 7.9 Hz), 8,18 (1H, d, J = 7,9 Hz), 7,77 (1H, t, J = 7,9 Hz), 3,93 (3H, s). MS (ES) C9H7N05 exige: 209, encontrado: 208 (M-H)-.

Etapa 4: Benzoato de metila 2 nitro-3-[(fenilimina)metil] (A4)

[00241] Uma mistura de (A3) (1,0 eq.) e anilina (1,05 eq.) em EtOH (0,2 M) foi agitada no refluxo sob a atmosfera de N2 por 2 h até o TLC revelar a conclusão da reação (hexano/EtOAc = 75:25). A evaporação do solvente produziu (A4) como um sólido branco que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. 1H NMR (400MHz, CDCI3, 300K) 6 8,51 (1H, d, J = 7,3 Hz), 8,41 (1H, s), 8,11 (1H, d, J = 7,8 Hz), 7,67 (1H, t, J = 7,8 Hz), 7,43 (2H, t, J = 7,8 Hz), 7,31 (1H, t, J = 7,3 Hz), 7,16 (2H, d, J = 7,8 Hz), 3,94 (3H, s).

Etapa 5: Metila 2-fenil-2H-indazol-7-carboxilato (A5)

[00242] Uma mistura de (A4) (1,0 eq.) e NaN3 (1,05 eq.) em DMF seco (0,3 M) foi agitada a 90°C durante a noite sob a atmosfera de N2. O bruto foi reduzido a vácuo e o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna flash em sílica usando um gradiente de Et0Aciéter de Petróleo de 10:90 à 40:60 para produzir o (A5) desejado como um óleo marrom. 1H NMR (400MHz, CDCI3, 300K) ó 8,50 (1H, s), 8,12 (1H, d, J = 7,0 Hz), 7,96-7,90 (3H, m), 7,49 (2H, t, J = 7,6 Hz), 7,38 (1H, t, J = 7,4 Hz), 7,15 (1H, t, J = 7,4 Hz), 4,03 (3H, s). MS (ES) C151-112N202 exige: 252, encontrado: 253 (M+H)+.

Etapa 6: 2-Fenil-2H-indazol-7-carboxamida (A6)

[00243] O éster (A5) foi aquecido em uma mistura de THF e solução aq. de 32% de NH3 a 70°C durante a noite em um tubo selado. Os solventes foram reduzidos a vácuo e o resíduo foi purificado pela cromatografia de coluna flash em sílica usando um gradiente de EtOAc/éter de Petróleo de 30:70 à 50:50 para produzir o (A6) desejado como o sólido branco. 1H NMR (400MHz, DMSO, 300K) ó 9,33 (1H, s), 8,56 (1H, bs), 8,16 (2H, d, J = 7,9 Hz), 8,08-8,00 (2H, m), 7,88 (1H, BS), 7,63 (2H, t, J = 7,7 Hz), 7,50 (1H, t, 7,4 Hz), 7,27 (1H, t, J = 7,9 Hz). MS (ES) C141-111N30 exige: 237, encontrado: 238 (M+H)+.

EXEMPLOS REPRESENTATIVOS EXEMPLO 1 3-{4-F7-(Aminocarbonilaa)-2H-indazol-2-illfenila}cloreto de piperidíneo (B4) Etapa 1: tertl-butila 344-({43-(metoxicarbonila)-2-nitrofenila]metileno} amina) fenila] piperidina-1-carboxilato (B1)

[00244] foi preparado depois do procedimento geral relatado para a etapa 4 do Exemplo Preparativo A usando A3 e tert-butila 3-(4- aminofenila)piperidina-1-carboxilato até que o TLC revele a conclusão da reação (éter de Petróleo:EtOAc = 4:1) e foi usado na etapa seguinte sem purificação mais adicional.

Etapa 2: Metila 2-{441-(tert-butoxicarbonila)piperin-3il]fenila}-2H- indazol-7-carboxilato (B2)

[00245] foi preparado depois do procedimento geral relatado para etapa 5 do Exemplo Preparativo A e o bruto foi purificado pela cromatografia flash de coluna em sílica usando um gradiente de 20-40% de EtOAc/éter de Petróleo para produzir o (B2) desejado como um sólido amarelo. 'H NMR (400 MHz, CDCI3, 300K) E, 8,51 (1H, s), 8,13 (1H, d, J = 7,1 Hz), 7,95 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,91 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,39 (2H, d, J = 8,4 Hz), 7,18 (1H, t, J = 7,2 Hz), 4,30-4,10 (2H, m), 4,00 (3H, s), 2,85- 2,70 (3H, m), 2,11-2,03 (1H, m), 1,83-1,75 (1H, m), 1,73-1,53 (2H, m sobreposto ao sinal de H20), 1,48 (9H, s). MS (ES) C25H29N304 exige: 435, encontrado: 436 (M+H)4.

Etapa 3: tert-Butila 3-(4-[7-(aminocarbonila)-2H-indazol-2-il]fenila} piperidina-1- carboxilato (B3)

[00246] (B2) foi aquecido em 7N NH3 em MeOH (0,1 M) em um tubo selado por 2 dias a 60°C. Os solventes foram reduzidos a vácuo e o produto bruto foi purificado por trituração com Et20 para produzir o (B3) desejado como um sólido amarelo. 1R NMR (400 MHz, CDCI3, 300K) ó 9,04 (1H, br. s), 8,51 (1H, s), 8,31 (1H, d, J = 6,8 Hz), 7,91 (1H, d, J = 8,3 Hz), 7,84 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,42 (2H, d, J = 8,2 Hz), 7,31-7,22 (1H, m sobreposto ao sinal de CDCI3), 5,95 (1H, br. s), 4,40-4,05 (2H, m), 2,90-2,70 (3H, m), 2,15-2,00 (1H, m), 1,85-1,75 (1H, m), 1,75-1,50 (2H, m sobreposto ao sinal de H20), 1,48 (9H, s). MS (ES) C24H28N403 exige: 420, encontrado: 421 (M+H)+.

Etapa 4: 3-{4 [7-(Aminocarbonila)-2H-indazol-2-il]fenila} cloreto de piperidíneo (B4)

[00247] A uma solução agitada de (B3) (1,0 eq) em EtOAc (0,2M) 4N Ha/solução de 1,4-dioxano (10,0 eq) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada à RT por 3h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o produto bruto foi purificado pela trituração com Et20 para produzir o (B4) desejado como um sólido amarelo. 'R NMR (400 MHz, DMSO-d6, 300K) Es 9,32 (1H, s), 9,12 (1H, br. s), 8,87 (1H, br. s), 8,55 (1H, br. s), 8,13 (2H, d, J =8,6 Hz), 8,06 (1H, J = 7,0 Hz), 8,02 (1H, d, J = 8,4 Hz), 7,89 (1H, br. s), 7,55 (2H, d, J = 8,6 Hz), 7,27 (1H, dd, J = 8,4, 7,0 Hz), 3,43-3,27 (2H, m), 3,17-3,03 (2H, m), 3,00-2,85 (1H, m), 2,00-1,70 (4H, m). MS (ES) Ci91- 12iCIN40 exige: 320, encontrado: 321 (M+H)+..

EXEMPLO 2 2444(3R)-Piperidin-3-illfenila-2H-indazol-7-carboxamida (Cl) & 244- 1(3S)-Piperidin-3-ilifenila)-2H-indazol-7-carboxamida (C2)

[00248] Exemplo 1, B4 foi separado por SFC quiral (coluna: Chiralpak AS-H, 1 X25 mm, fluxo: 10 ml/min, Twi: 35°C, Ped: 100 bar, modificador: 55% (1PrOH + 4% Et2NH)), usando CO2 como eluente supercrítico, fornecendo ambos enantiômeros puros.

[00249] O primeiro enantiômero eluído (Cl), tempo de retenção (SFC): 4,80 min, foi obtido como um pó branco. . 'R NMR (400MHz, DMSO-d6, 300K) 6 9,28 (s, 1H), 8,57 (br. s, 1H), 8,06 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 8,04 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,88 (br. s, 1H), 7,49 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,27 (dd, 1H, J = 8,4, 7,2 Hz), 3,08-2,94 (m, 2H), 2,772,67 (m, 1H), 2,64-2,52 (m, 1H), 1,98-1,90 (m, 1H), 1,75-1,47 (m, 4H). MS (ES) C19H2oN40 requires: 320, found: 321 (M+H)+. A base livre foi convertida a (3R)-3-{4-[7-(aminocarbonila)-2H- indazol-2-iljfenila}cloreto de piperidineo e a rotação ótica medida: [a]20D=133,3 (c 0,15, MeOH).

[00250] O segundo enantiômero eluído (C2), tempo de retenção (SFC): 6,51 min, foi obtido como um pó branco. 'H NMR (400MHz, DMSO-d6, 300K) E, 9,28 (s, 1H), 8,57 (br. s, 1H), 8,06 (d, 2H, J = 7,2 Hz), 8,04 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,88 (br. s, 1H), 7,49 (d, 2H, J = 8,4 Hz), 7,27 (dd, 1H, J = 8,4, 7,2 Hz), 3,08-2,94 (m, 2H), 2,772,67 (m, 1H), 2,64-2,52 (m, 1H), 1,98-1,90 (m, 1H), 1,75-1,47 (m, 4H). MS (ES) Ci9H20N40 exige: 320, encontrado: 321 (M+H)+. A base livre foi convertida a (3S)-3-{4-[7-(aminocarbonila)-2H- indazol-2-infenila}cloreto de piperidineo e a rotação ótica medida: parop=-137,9 (c 0,145, MeOH).

EXEMPLO 3 34447-Aminocarbonila)-5-flúor-2H-indazol-2-infenilaltrifluoracetato de piperidíneo (D4) Etapa 1: Metil-S-flitor-1H-indazol-7-carboxilato (Dl)

[00251] A uma solução do Exemplo 4, E3 (1,0 eq.) em 1,2- dicloroetano (0,1 M) foi adicionado AcCI (5 eq.) e aquecida a 55°C por 2h. Mais tarde, o solvente foi removido sob pressão reduzida. O sólido branco foi dissolvido em tolueno/água (5/1, 0,1 M). A solução foi resfriada a 0°C e o HCI (10 eq., 37%) foi adicionado. Então lentamente e em porções de NaNO2 (10 eq.) foi adicionado e a mistura foi agitado por 3h a 0°C. A fase orgânica foi lavada com água (3x), seca sobre MgSO4 e o solvente foi removido sob pressão reduzida.

[00252] A solução amarela em tolueno (0,1 M) foi aquecida então por 2 h a 90°C. A evaporação do tolueno produziu o produto desejado como um sólido vermelho. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 300K) õ 13,37 (1H, s), 8,23 (1H, s), 7,63 (1H, dd, J = 8,6 Hz, J = 2,5 Hz), 7,48 (1H, dd, J = 8,6 Hz, J = 2,5 Hz), 3,66 (3H, s). MS (ES+) C9H7FN202 exige: 194, encontrado: 195 (M+H)+.

Etapa 2: 5-FICior-1H-indazol-7-carboxamida (D2)

[00253] (D1) foi dissolvido em dioxano/água (1/1, 0,1 M) e o KOH (1,5 eq.) foi adicionado. Após a agitação por 12 h a RT os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O sólido branco foi usado sem purificação para o acoplamento subseqüente.

[00254] O ácido carboxílico foi dissolvido em DMF (0,1 M) e TBTU (1,5 eq.) foi adicionado a 0°C. Após 15 min DIPEA (2,0 eq.) e amônia (3,0 eq., 0,5 M em dioxano) foram adicionados e a mistura foi agitada por 36h a RT. O EtOAc foi adicionado e a fase orgânica foi lavada com solução de NaHCO3 sat. aq. (3x) e salmoura (2x). A fase orgânica foi seca e evaporada sob pressão reduzida. O bruto foi purificado pela cromatografia flash usando 1-20% MeOH/DCM para produzir (D2) como um sólido branco. MS(ES+) C8H6FN30 exige: 179, encontrado: 180 (M+H)+.

Etapa 3: 2-(4-Bromofenila)-5-flúor-2H-indazol-7-carboxamida (D3)

[00255] A uma solução de D2 (1,0 eq) em DMF (0,2 M) K2CO3 (1,3 eq) e 4-bromofluorbenzeno (10,0 eq) foram adicionados e a mistura da reação foi aquecida sob condições de MW a 180°C por 20 min. A mistura da reação foi resfriada à RT e diluída com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com salmoura; seca (Na2SO4). A evaporação do solvente produziu (D3) que foi purificado pela cromatografia no gel de sílica eluindo com 50-70% EtOAc/éter de Petróleo para obter o composto de título como um pá amarelo. 'H NMR (400 MHz, DMSO-d6, 300K) s5 9,34 (1H, s), 8,50 (1H, br. s), 8,17 (2H, d, J = 9,0 Hz), 8,03 (1H, br. s), 7,90-7,80 (4H, m). MS (ES+) Ci14H9BrFN30 exige: 334/336, encontrado: 335/337 (M4-1-1)+.

Etapa 4: 5-Flúor-2-(4-piridin-3-ilfenila)-2H-indazol-7-carboxamida (D4)

[00256] Uma mistura de (D3) (1,0 eq) e ácido piridina-3-borônico (1,3 eq) em DMF (1,0 M) junto com a solução de 2N Na2CO3 (2,0 eq) foi degaseificada com um fluxo de Ar por 30 min. tBu3PH+ BF4 (0,05 eq) e Pd2 (dba)3 (0,05 eq) foram adicionados e a mistura da reação foi aquecida a 90°C por 48h. A mistura foi resfriada à RT, o DCM foi adicionado e a fase orgânica foi lavada com solução de NaHCO3 aq. sat., salmoura, seca (Na2SO4). A solução foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado pela cromatografia no gel de sílica eluindo com 50-90% EtOAc/éter de Petróleo depois com 10%MeOH/DCM para obter o composto de título como um pó amarelo. 'R NMR (400 MHz, DMSO-d6, 300K) $5 9,40 (1H, s), 9,01 (1H, d, J = 1,6 Hz), 8,63 (1H, dd, J = 4,8, 1,6 Hz), 8,57 (1H, br. s), 8,32 (2H, d, J = 8,8 Hz), 8,20 (1H, d, J = 7,8 Hz), 8,10 (1H, br. s), 8,01 (2H, d, J = 8,8 Hz), 7,88-7,82 (2H, m), 7,54 (1H, dd, J = 7,8, 4,8 Hz). MS (ES) Ci9Hi3FN40 exige: 332, encontrado: 333 (M+1-1+).

Etapa 5: Benzila 3-{447-(aminocarbonila)-5-flúor-2H-indazol-2- il]fenila)piperidina-1-carboxilato (D5)

[00257] A uma solução agitada de (D4) em MeOH seco (0,2 M), NaBH4 (1,2 eq) foi adicionado e então gota a gota Cbz-CI (1,2 eq) a -65°C. A reação foi permitida a alcançar RT 0/N, e resfriada bruscamente então com H20. O MeOH foi concentrado sob pressão reduzida e EtOAc foi adicionado. A fase orgânica foi lavada com solução de NaHCO3 aq. sat., seca (Na2SO4). A evaporação do solvente produziu (D5) que foi usado na etapa seguinte sem purificação adicional. MS (ES) C27H26FN403 exige: 472, encontrado: 473 (M-i-H+).

Etapa 6: 3-{447-(Aminocarbonila)-5-flúor-2H-indazol-2- il]fenila}trifluoracetato de piperidíneo (D6)

[00258] A uma solução de (D5) (1,0 eq) em MeOH (0,2 M) Pd/C 10% (0,05 eq.) e HCI (1,0 eq) foi adicionado e a mistura da reação foi agitada sob a atmosfera de H2 (1 atm) por 48h. Então, a mistura foi filtrada através da Celite e o solvente foi removido sob vácuo produzindo (D6) que foi purificado pela RP-HPLC de fase reversa (coluna: C18), usando H20 (0,1% TFA) e MeCN (0,1% TFA) como eluente, as frações desejadas foram liofilizadas para produzir o composto intitulado (D6) como um pó branco. as eluents, the desired fractions were lyophilized to afford the titled compound (D6) as a white powder. 1H NMR (400MHz, CD3CN, 300K) 6 9,28 (1H, s), 8,89 (1H, br. s), 8,60-8,50 (2H, m), 8,13 (2H, d, J = 8,6 Hz), 8,09 (1H, br. s), 7,90-7,70 (2H, m), 7,54 (2H, d, J = 8,6 Hz), 3,40-3,30 (2H, m), 3,20-2,80 (3H, m), 2,00-1,90 (2H, m), 1,80-1,70 (2H, m), MS (ES) C19H19FN40 exige: 338, encontrado: 339 (M+H+).

EXEMPLO 4 5-FILior-2-(3-flúor-4-piperidin-3-ilfenila)-2H-indazol-7-trifluoracetato de carboxamida (E6) Etapa 1: 5-Flúor-3-metila-2- ácido nitrobenzóico (El)

[00259] A uma solução de 3-flúor-5- ácido metilbenzóico (1,0 eq.) em H2SO4 conc. foi adicionado lentamente KNO3 (1,1 eq.) a 0°C. A mistura foi agitada a RT por 1h e então derramada lentamente na água congelada. Após a agitação até que o gelo derreta completamente, a precipitação branca foi filtrada, lavada com água fria e seca sob pressão reduzida. O sólido branco foi usado sem purificação adicional para a etapa seguinte. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 300K) 6 14,08 (1H, br. s), 7,65 (2H, m), 2,30 (3H, s).

Etapa 2: Metil-5-fitior-3-metil-2-nitrobenzoato (E2)

[00260] A uma solução de (El) e ao carbonato de césio (1,5 eq.) em DMF (0,25 M) a RT foi adicionado iodeto de metila (1,0 eq.). Depois que a mistura foi agitada por 18h, a salmoura foi adicionada e a mistura foi extraída com EtOAc. A fase orgânica foi seca (Na2SO4) e concentrada sob pressão reduzida. O sólido amarelo foi usado na etapa seguinte sem purificação. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 300K) 6 7,63 (2H, m), 3,83 (3H, s), 2,29 (3H, s).

Etapa 3: Metil-2-amina-5-flúor-3-metilbenzoato (E3)

[00261] Uma mistura de (E2) (1,0 eq.) e Pd/C (10% p/p) em MeOH (0,25 M) foi agitada por 3 dias a RT sob atmosfera de H2 (1 atm). A mistura foi filtrada com Celite® e o solvente foi evaporado então sob pressão reduzida. O sólido branco foi usado sem purificação adicional na etapa subseqüente. 1H NMR (400 MHz, DMSO, 300K) 6 7,29 (1H, dd, J = 9,5 Hz, J = 3,0 Hz), 7,12 (1H, dd, J = 9,5 Hz, J = 3,0 Hz), 6,36 (2H, br. s), 3,78 (3H, s), 2,11 (3H, s).

Etapa 4: Metil 2,5-d ifiLlor-3-metil benzoato (E4)

[00262] A uma solução de (E3) (1,0 eq.) em DCM seco (0,4 M) a 0°C foi adicionado tetrafluorborato de nitrosônio (1,3 eq.) em porções. Depois de 1h a 0°C o diclorobenzeno seco (120 eq.) foi adicionado e a reação foi aquecida lentamente a 160°C enquanto o DCM foi destilado. Após 3 horas, a mistura foi resfriada à RT, o EtOAc foi adicionado e a fase orgânica foi lavada com salmoura (2x). Após a secagem sobre MgSO4, os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O bruto foi purificado pela cromatografia flash usando 1-10% EtOAc/éter de Petróleo para produzir (E4) como um óleo amarelo. 1H NMR (400 MHz, CDCI3, 300K) õ 7,42 (1H, m), 7,06 (1H, m), 3,92 (3H, s), 2,30 (3H, d, J = 2,3 Hz).

Etapa 5: Metil 2,5-difluor-3-formilbenzoato (E5)

[00263] (E5) foi preparado a partir do E4 depois do procedimento geral relatado no Exemplo Preparativo A etapas 2 e 3. O bruto foi purificado pela cromatografia flash 1-20% EtOAc/éter de petróleo para produzir um sólido branco. 1H NMR (300 MHz, DMSO, 300K) õ 10,19 (1H, d, J = 2,4 Hz), 7,98 (1H, m), 7,86 (1H, m), 3,89 (3H, s). MS (ES+) C9H6F203 exige: 200, encontrado: 201 (M+H)+.

Etapa 6: 5-FlUor-2-(3-flUor-4-piperidin-3-ilfenila)-2H-indazol- 7-triflUoracetato de carboxamida (E6)

[00264] (E5) foi convertido no indazol correspondente usando tert- butil 3-(4-amino-2-flúorfenila)piperidina-1-carboxilato depois do procedimento geral relatado no Exemplo Preparativo A etapas 4 e 5.

[00265] O metil 24441 -(tert-butoxicarbonila)piperidin-3-i1]-3- fluorfenila}-5-flimr-2H- indazol-7-carboxilato resultante foi convertido ainda na carboxamida correspondente pelo tratamento com KOH (1,3 eq.) em dioxano/água (0,1 M) por 12h a RT. Os solventes foram removidos sob pressão reduzida. O ácido carboxílico foi dissolvido em DMF (0,1 M) e TBTU (1,5 eq.) foi adicionado. Após 15 min DIPEA (2,0 eq.) e amônia (3,0 eq., 0,5 M em THF) foram adicionados e a solução foi agitada por 36h. A mistura foi diluída com o EtOAc e a fase orgânica foi lavada então com solução de NaHCO3 aq. sat. e salmoura. Após a evaporação do solvente o resíduo foi usado na etapa seguinte sem purificação.

[00266] Para a desproteção do bruto foi dissolvido em TFA/DCM (0,1 M) e agitado por 3h a RT. A evaporação do solvente produziu um resíduo que foi purificado pela HPLC de fase reversa (coluna: C18) para produzir o composto intitulado (E6). 'R NMR (400 MHz, DMSO, 300K) õ 9,34 (1H, s), 8,90 (1H, m), 8,61 (1H, m), 8,49 (1H, s), 8,18 (1H, dd, J = 11,6 Hz, 2,0 Hz), 8,05 (2H, m), 7,81 (2H, m), 7,63 (1H, m), 3,34 (3H, m), 3,13 (1H, m), 2,94 (1H, m), 1,95-1,76 (4H, m). MS (ES+) C19H18F2N40 exige: 356, encontrado: 357 (M+H)+.

EXEMPLO 5 (3S)-3-{4f7-(Aminocarbonila)-2H-indazol-2-illfenila} piperidíneo 4- metilbenzenossulfonato (F4) Etapa 1: tert-butil(3S)-3-[4-({(IE)-[3-(metoxicarbonila)-2-nitrofenila] metileno}amina)fenila] piperidina-1-carboxilato (F1)

[00267] (F1) foi preparado a partir do A3 e tert-butil (3S)-3-(4- aminofenila) piperidina-1-carboxilato (preparado pela re-solução de 3-(4- aminofenila)-piperidina com 2 equivalentes do ácido tartárico L-Dibenzoila em MeOH e subseqüente proteção Boc) como descrito no Exemplo 1, B1.

Etapa 2: 2-{4-PS)-1-(tert-butoxicarbonila)piperidin-3-il]fenila}-2H- indazol-7-ácido carboxílico (F2)

[00268] (F1) (1 eq) e azida de sódio (1 eq) foi transformado em pasta em DMF (0,25M), inertizado, e adicionado com 2,6-lutidina (1,0 eq). A mistura foi aquecida a uma temperatura interna de 110°C por 20 horas. A solução marrom resultante foi resfriada a 20°C e THF e solução aquosa de LiCI a 25% em peso adicionada. As fases foram separadas, e o orgânico lavado três vezes adicionais com solução aquosa LiCI a 25% em peso. 2,0M NaOH (10 eq) foi adicionado à solução orgânica acima e a mistura foi aquecida a 35°C por 20 horas antes de resfriar a 20°C e as fases foram separadas. A camada orgânica foi lavada com uma mistura de 2,0M de ácido HCI e salmoura e as camadas foram separadas, a camada orgânica foi lavada ainda com salmoura e concentrada para produzir (F2) que não foi purificado adicionalmente.

Etapa 3: tert-butil(3S)-{4-[7-(aminocarbonila)-2H-indazol-2-il]fenila} piperidina-1-carboxilato (F3)

[00269] O F2 foi dissolvido em DCM (0.35M) e di tert-butil carbonato (1,3 eq) e a piridina (1,0 eq) foi adicionada a RT. Após 30 minutos o bicarbonato de amônio (1,3 eq) foi adicionado e a agitação continuou por 20 horas. 1M HCI (5 mL/g) foi adicionado e as fases separadas, a camada orgânica foi lavada duas vezes com água e concentrada a um volume baixo. O composto bruto (F3) foi filtrado através de uma almofada de sílica e cristalizado então a partir do metil tert-butil éter.

Etapa 4: (3S)-(4(7-(Aminocarbonila)-2H-indazol-2-ilifenila}piperidíneo 4- metilbenzenossulfonato (F4)

[00270] O F3 foi dissolvido em THF (0,15M) e a água adicionada (5% comparado a THF). O monohidrato de ácido para-Tolueno sulfônico (2,2 eq) foi adicionado e a mistura aquecida a 66°C e foi agitada durante a noite. Após resfriar o sal sólido desejado foi isolado pela filtragem e confirmado para ser um monohidrato (F4). 1H NMR (400 MHz, DMSO, 300K) $5 9,34 (1H, s); 9,20 (1H, broad s), 8,58 (1H, s), 8,14 (2H, d, J=8,8 Hz), 8,05 (2H, ddd, J=1,2, 7,2, 16,8 Hz), 7,93 (1H, s), 7,52 (4H, dd, J=8,8, 16,8 Hz), 7,27 (1H, dd, J=6,8, 8,0 Hz), 7,13 (2H, d, J=8 Hz), 3,48 (3H, m), 3,10 (2H, m), 2,90 (1H, m); 2,30 (3H, s), 1,89 (2H, m), 1,75 (2H, m).

[00271] Os seguintes exemplos foram preparados de acordo com os métodos dos exemplos precedentes:

Claims (16)

1. Composto, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula I:

em que: R1 é hidrogênio ou flúor; e R2 é hidrogênio ou flúor; ou seus sais, estereoisômeros ou tautômeros farmaceuticamente aceitáveis.

2. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula II:

em que R1 e R2 são conforme definidos na reivindicação 1; ou seus sais, estereoisômeros ou tautômeros farmaceuticamente aceitáveis.

3. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula III:

em que R1 e R2 são conforme definidos na reivindicação 1; ou seus sais ou tautômeros farmaceuticamente aceitáveis.

4. Composto de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que apresenta a fórmula IV:

em que R1 e R2 são conforme definidos na reivindicação 1; ou seus sais ou tautômeros farmaceuticamente aceitáveis.

5. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações anteriores, caracterizado pelo fato de que R1 é hidrogênio e R2 é hidrogênio ou flúor.

6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pelo fato de que é selecionado a partir de: 2- (4-piperidin-3-ilfenil) -2H-indazol-7-carboxamida; 2- {4 - [(3R) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7-carboxamida; 2- {4 - [(3S) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2- (4-piperidin-3-ilfenil) -2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2- {4 - [(3S) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2- {4 - [(3R) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2- (3-fluoro-4-piperidin-3-ilfenil) -2H-indazol-7-carboxamida; 5-fluoro-2- {3-fluoro-4 - [(3R) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7- carboxamida; 5-fluoro-2- {3-fluoro-4 - [(3S) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7- carboxamida; e seus sais, tautômeros ou estereoisômeros farmaceuticamente aceitáveis.

7. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de ser: 2- (4-piperidin-3-ilfenil) -2H-indazol-7-carboxamida; ou um seu sal ou tautômero farmaceuticamente aceitável.

8. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de ser: 2- {4 - [(3R) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7-carboxamida; ou um seu sal ou tautômero farmaceuticamente aceitável.

9. Composto, de acordo com a reivindicação 6, caracterizado pelo fato de ser: 2- {4 - [(3S) -piperidin-3-il] fenil} -2H-indazol-7-carboxamida; ou um seu sal ou tautômero farmaceuticamente aceitável.

10. Composição farmacêutica, caracterizada pelo fato de que compreende um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal, tautômero ou estereoisômero farmaceuticamente aceitável do mesmo em associação com um carreador farmaceuticamente aceitável.

11. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal, estereoisômero ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo e um agente anticâncer, caracterizado pelo fato de ser para administração simultânea, separada ou sequencial.

12. Composto, de acordo com qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal, estereoisômero ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para uso em terapia.

13. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal, estereoisômero ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de condições que podem ser melhoradas pela inibição de poli (ADP -ribose) polimerase (PARP).

14. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal, estereoisômero ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser na fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção de câncer, doenças inflamatórias, lesões de reperfusão, condições isquêmicas, acidente vascular cerebral , insuficiência renal, doenças cardiovasculares, doenças vasculares outras que não doenças cardiovasculares, diabetes, doenças neurodegenerativas, infecção retroviral, dano retinal ou senescência da pele e dano cutâneo induzido por UV.

15. Uso de um composto, como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 9, ou um sal, estereoisômero ou tautômero farmaceuticamente aceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para a fabricação de um medicamento para o tratamento ou prevenção do câncer.

16. Uso, de acordo com a reivindicação 15, caracterizado pelo fato de que o câncer é um câncer que é deficiente em atividade de reparo de DNA DSB dependente de Recombinação Homóloga (HR).