EA016079B1 - Амидзамещенные индазолы в качестве ингибиторов поли(adp-рибоза)полимеразы (parp) - Google Patents

Abstract

Настоящее изобретение относится к соединениям формулы (I) и к их фармацевтически приемлемым солям, стереоизомерам или таутомерам, которые являются ингибиторами поли(ADP-рибоза)полимеразы (PARP) и полезны, таким образом, при лечении рака, воспалительных заболеваний, реперфузионных повреждений, ишемических состояний, инсульта, почечной недостаточности, сердечно-сосудистых заболеваний, сосудистых заболеваний, иных чем сердечно-сосудистые, диабета, нейродегенеративных заболеваний, ретровирусной инфекции, повреждения сетчатки или старения кожи и УФ индуцируемого повреждения кожи, и в качестве химио- и/или радиосенсибилизаторов для лечения рака.

Description

Настоящее изобретение относится к амидзамещенным индазолам, которые являются ингибиторами фермента поли(ЛПР-рибоза)полимеразы (РАКР), ранее известного как поли(АОР-рибоза)синтаза и поли(АОР-рибозил)трансфераза. Соединения настоящего изобретения полезны в качестве монотерапевтических средств при опухолях со специфическими дефектами в ДНК-репарационных путях и в качестве усилителей некоторых ДНК-повреждающих агентов, таких как противораковые агенты, и при радиотерапии. Далее, соединения настоящего изобретения полезны для снижения некроза клеток (при инсульте и инфаркте миокарда), уменьшения воспаления и повреждения тканей, лечения ретровирусных инфекций и защиты от токсичных эффектов химиотерапии.

Поли(АОР-рибоза)полимераза (РАКР) составляет сверхсемейство восемнадцати белков, содержащих РАКР каталитические домены (Вюеккаук (2004), 26:1148). Данное семейство белков включает РАКР-1, РАКР-2, РАКР-3, танкиразу-1, танкиразу-2, уаиИРАКР и Т1РАКР. РАКР-1, основной член семейства состоит из трех главных доменов: амино (Ы)-концевого ДНК-связывающего домена (ΌΒΌ), содержащего два цинковых пальца, автомодификационного домена и карбокси (С)-концевого каталитического домена.

РАКР являются ядерными и эндоплазматическими ферментами, которые расщепляют ΝΑΌ⁺ на никотинамид и АЭР-рибозу, образуя длинные и разветвленные АЭР-рибозные полимеры в целевых белках, включая топоизомеразы, гистоны и сам РАКР (Вюсйет. Вюрйук. Кек. Соттип. (1998), 245:1-10).

Поли(АЭР-рибозилирование) вовлечено в несколько биологических процессов, включающих репарацию ДНК, генную транскрипцию, развитие клеточного цикла, гибель клеток, хроматиновые функции и геномную стабильность.

Было показано, что каталитическая активность РАКР-1 и РАКР-2 быстро стимулируется разрывами ДНК нити (см. Р11агтасо1ощса1 Кекеатсй (2005), 52:25-33). В ответ на ДНК повреждение РАКР-1 связывается с однонитиевым и двунитиевым разрывами ДНК. В нормальных физиологических условиях имеется минимальная активность РАКР, однако после повреждения ДНК происходит немедленная активация РАКР вплоть до 500-кратной. Как РАКР-1, так и РАКР-2 обнаруживают разрывы ДНК нити, действуя как сенсоры разрывов, давая быстрые сигналы остановки транскрипции и задействуя ферменты, требуемые для репарации ДНК в месте повреждения. Поскольку радиотерапия и многие химиотерапевтические подходы к терапии рака основаны на индуцировании повреждения ДНК, ингибиторы РАКР являются полезными в качестве химио- и радиосенсибилизаторов для лечения рака. Сообщалось, что ингибиторы РАКР являются эффективными в радиосенсибилизации гипоксических опухолевых клеток (патенты США 5032617, 5215738 и 5041653).

Большинство биологических эффектов РАКР относится к данному процессу поли(АЭРрибозилирования), который влияет на свойства и функцию целевых белков; к РАК олигомерам, которые, при отщеплении от поли(АЭР-рибозилированных) белков, вызывают различные эффекты в клетках; физической ассоциации РАКР с ядерными белками, с образованием функциональных комплексов и к понижению клеточного уровня их субстрата ΝΛΌ' (Ыа1иге Кеу1ете (2005), 4:421-440).

Помимо того, что она вовлечена в репарацию ДНК, РАКР также может действовать как медиатор гибели клеток. Его избыточная активация в таких патологических состояниях, как ишемия и реперфузионное повреждение, может приводить в результате к существенному истощению межклеточного NΛ^⁺, что может привести к нарушению нескольких NΛ^⁺ зависимых метаболических путей и в результате к гибели клеток (см. Р11агтасо1ощса1 Кекеатсй (2005), 52:44-59). В результате активации РАКР уровни NΛ^⁺ значительно снижаются. Обширная активация РАКР ведет к сильному истощению NΛ^⁺ в клетках, страдающих от массивного повреждения ДНК. Короткий период полураспада поли(АОР-рибозы) приводит в результате к быстрой скорости обращения, так как, как только образуется поли(АЭР-рибоза), она быстро разлагается под действием конститутивно активной поли(АЭР-рибоза)гликогидролазы (РАКО). РАКР и РАКО образуют цикл, который превращает огромное количество NΛ^⁺ в АЭР-рибозу, вызывая падение уровня NΛ^⁺ и АТР до менее чем 20% нормального уровня. Такой сценарий особенно вреден во время ишемии, когда недостаток кислорода уже отрицательно сказывается на выходе клеточной энергии. Предполагается, что последующее продуцирование свободных радикалов во время реперфузии является главной причиной повреждения тканей. Часть падения уровня АТР, которое является типичным во многих органах во время ишемии и реперфузии, может быть связана с истощением уровня NΛ^⁺ вследствие оборота поли(АЭР-рибозы). Таким образом, ожидается, что ингибирование РАКР сохранит уровень клеточной энергии, способствуя, тем самым, выживанию ишемических тканей после инсульта. Следовательно, соединения, которые являются ингибиторами РАКР, полезны при лечении состояний, которые являются результатом РАКР опосредуемой гибели клеток, включая неврологические состояния, такие как инсульт, травма и болезнь Паркинсона.

Было продемонстрировано, что ингибиторы РАКР являются полезными для специфичного уничтожения опухолей с дефицитом ВКСА-1 и ВКСА-2 (№11иге (2005), 434:913-916 и 917-921 и Сапсег Вю1о§у & Тйетару (2005), 4:934-936).

- 1 016079

Было показано, что ингибиторы РАКР усиливают эффективность противораковых лекарственных препаратов (Рйаттасо1од1са1 Кекеагсй (2005), 52:25-33), включая соединения платины, такие как цисплатин и карбоплатин (Сапсег Сйето1йет Рйагтасо1 (1993), 33:157-162 и Мо1. Сапсег Тйег. (2003), 2:371-382). Было показано, что ингибиторы РАКР увеличивают противоопухолевую активность ингибиторов топоизомеразы I, таких как иринотекан и топотекан (Мо1. Сапсег Тйег. (2003), 2:371-382 и Сйп. Сапсег Кек. (2000), 6:2860-2867), и это было продемонстрировано на ш у1уо моделях (1. №111. Сапсег 1пк1. (2004), 96:56-67).

Было показано, что ингибиторы РАКР восстанавливают восприимчивость к цитотоксическим антипролиферативным действиям темозоломида (ΤΜΖ) (см. Сшт. Мей. Сйет. (2002), 9:1285-1301 и Мей. Сйет. Кеу. Опйпе (2004), 1:144-150). Это было продемонстрировано на ряде ш уйто моделей [Вг. 1. Сапсег (1995), 72:849-856; Вг. 1. Сапсег (1996), 74:1030-1036; Мо1. Рйагтасо1. (1997), 52:249-258; Ьеикет1а (1999), 13:901-909; 611а (2002), 40:44-54 и Сйп. Сапсег Кек. (2000), 6:2860-2867 и (2004), 10:881889) и т у1уо моделях (В1оой (2002), 99:2241-2244; Сйп. Сапсег Кек. (2003), 9:5370-5379 и 1. №·Η1. Сапсег 1пк1. (2004), 96:56-67). Было показано, что ингибиторы РАКР предотвращают появление некроза, вызываемого селективными Ы3-аденинметилирующими агентами, такими как МеО8О₂(СН₂)-лекситропсин (Ме-Ьех) (Рйаттасо1од1са1 Кекеагсй (2005), 52:25-33).

Было показано, что ингибиторы РАКР действуют как сенсибилизаторы радиации. Сообщалось, что ингибиторы РАКР являются эффективными в радиосенсибилизации (гипоксических) опухолевых клеток и эффективными в предотвращении выздоровления опухолевых клеток от потенциально летального [Вг. 1. Сапсег (1984), 49 (8ирр1. VI), 34-42 и 1п1. 1. Кай1а!. Вюй (1999), 75:91-100) и сублетального (Сйп. Опсо1. (2004), 16(1):29-39) повреждения ДНК после лечения облучением, предположительно под влиянием их способности предотвращать повторное соединение разрыва ДНК нити и повреждения некоторых сигнальных путей повреждения ДНК.

Было показано, что ингибиторы РАКР являются полезными при лечении острых и хронических заболеваний миокарда (см. Рйаттасо1од1са1 Кекеагсй (2005), 52:34-43). Например, было продемонстрировано, что разовые инъекции ингибиторов РАКР снижают размер инфаркта, вызываемого ишемией и реперфузией сердечной или скелетной мышцы у кроликов. В данных исследованиях одна инъекция 3-аминобензамида (10 мг/кг) за 1 мин до окклюзии или за 1 мин до реперфузии вызывает аналогичные снижения размера инфаркта в сердце (32-42%), тогда как 1,5-дигидроксиизохинолин (1 мг/кг), еще один ингибитор РАКР, снижает размер инфаркта в сравнимой степени (38-48%). Данные результаты делают обоснованным предположение, что ингибиторы РАКР могут заранее не допустить ишемического сердца или реперфузионного повреждения скелетной мышечной ткани (РЫА8 (1997), 94:679-683). Сообщалось также об аналогичных находках на свиньях (Еиг. 1. Рйагтасо1. (1998), 359:143150 и Апп. Тйогас. 8ш§. (2002), 73:575-581? и на собаках (8йоск. (2004), 21:426-32).

Было продемонстрировано, что ингибиторы РАКР являются полезными при лечении некоторых сосудистых заболеваний, септического шока, ишемического повреждения и нейротоксичности (ВюсЫт. Вюрйук. Ас1а (1989), 1014:1-7; 1. Сйп. 1пуек1. (1997), 100: 723-735). Кислородное радикальное повреждение ДНК, которое ведет к разрывам нитей в ДНК, которые впоследствии распознаются с помощью РАКР, является главным фактором, способствующим таким болезненным состояниям, как показано исследованиями ингибитора РАКР (1. Ыеигоксйт Кек. (1994), 39:38-46 и РЫА8 (1996), 93:4688-4692). Было продемонстрировано также, что РАКР играет роль в патогенезе геморрагического шока (РЫА8 (2000), 97:10203-10208).

Было продемонстрировано, что ингибиторы РАКР являются полезными при лечении воспалительных заболеваний (см. Рйаттасо1од1са1 Кекеагсй (2005), 52:72-82 и 83-92).

Было также продемонстрировано, что эффективная ретровирусная инфекция клеток млекопитающих блокируется ингибированием активности РАКР. Было показано, что такое ингибирование инфекций рекомбинантного ретровирусного вектора происходит в многочисленных типах клеток (1. ^то1о§у, (1996), 70(6), 3992-4000). Таким образом, ингибиторы РАКР были разработаны для применения в антивирусной терапии и при лечении рака (\УО 91/18591).

Эксперименты ш уйго и ш у1уо продемонстрировали, что ингибиторы РАКР могут применяться при лечении или предотвращении аутоиммунных заболеваний, таких как диабет типа I и диабетические осложнения (Рйаттасо1од1са1 Кекеагсй (2005), 52:60-71).

Были предположения, что ингибирование РАКР задерживает наступление признаков старения в фибробластах человека (Вюсйет. Вюрйук. Кек. Сотт. (1994), 201(2):665-672 и Рйагтасо1од1са1 Кекеагсй (2005), 52:93-99). Это может быть связано с той ролью, которую РАКР играет при контроле теломерных функций (Ыа!иге 6еп. (1999), 23(1):76-80).

Подавляющее большинство ингибиторов РАКР, известных до настоящего времени, взаимодействуют с никотинамидсвязывающим доменом фермента и ведут себя как конкурентные ингибиторы по отношению к ЫАЭ⁺ (Ехрей Орт. Тйег. Ра1еп1к (2004), 14:1531-1551). Структурные аналоги никотинамида, такие как бензамид и производные, были среди первых соединений, исследуемых в качестве ингибиторов РАКР. Однако данные молекулы обладают слабой ингибирующей активностью и оказывают другие действия, не связанные с ингибированием РАКР. Таким образом, существует потребность в разра

- 2 016079 ботке сильных ингибиторов РАКР фермента.

Структурно родственные ингибиторы РЛКР были ранее описаны. В АО 1999/59973 описаны амидзамещенные бензольные кольца, конденсированные с 5-членными гетероароматическими кольцами; в АО 2001/85687 описаны амидзамещенные индолы; в АО 1997/04771, АО 2000/26192, АО 2000/32579, АО 2000/64878, АО 2000/68206, АО 2001/21615, АО 2002/068407, АО 2003/106430 и АО 2004/096793 раскрыты амидзамещенные бензоимидазолы; в АО 2000/29384 раскрыты амидзамещенные бензоимидазолы и индолы и в ЕР 0879820 раскрыты амидзамещенные бензоксазолы.

В настоящее время на удивление обнаружено, что амидзамещенные индазолы настоящего изобретения проявляют особенно высокие уровни ингибирования активности поли(ЛОР-рибоза)полимеразы (РАКР). Таким образом, соединения настоящего изобретения являются особенно полезными в качестве ингибиторов РАКР-1 и/или РАКР-2. Они показывают также особенно хорошие уровни клеточной активности, демонстрируя хорошие антипролиферативные эффекты в клеточных линиях с дефицитом ВКСА-1 и ВКСА-2.

Настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I)

О) где К¹ представляет водород или фтор;

К² представляет водород или фтор;

или их фармацевтически приемлемые соли, стереоизомеры или таутомеры.

В одном варианте осуществления К¹ представляет водород.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет фтор.

В еще одном варианте осуществления К² представляет водород.

В еще одном варианте осуществления К² представляет фтор.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет водород и К² представляет водород или фтор.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет фтор и К² представляет водород или фтор.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет водород и К² представляет водород.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет водород и К² представляет фтор.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет фтор и К² представляет фтор.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет водород или фтор и К² представляет водо род.

В еще одном варианте осуществления К¹ представляет водород или фтор и К² представляет фтор. Настоящее изобретение также предоставляет соединения формулы (II)

где К¹ и К² имеют значения, определенные выше;

или их фармацевтически приемлемые соли, стереоизомеры или таутомеры. Настоящее изобретение также предоставляет соединения формулы (III)

где К¹ и К² имеют значения, определенные выше; или их фармацевтически приемлемые соли или таутомеры.

Настоящее изобретение также предоставляет соединения формулы (IV)

(IV) где К¹ и К² имеют значения, определенные выше; или их фармацевтически приемлемые соли или таутомеры.

- 3 016079

Предпочтительные радикалы в отношении формул (ΙΙ)-(ΐν) имеют значения, определенные выше для формулы (I) ши1а118 ти1аий18.

В объем настоящего изобретения также включены Ν-оксиды соединений формулы (I). Обычно такие Ν-оксиды могут образовываться на любом доступном атоме азота. Ν-оксиды могут образовываться общепринятыми средствами, такими как реакция соединения формулы (I) с оксоном в присутствии влажного оксида алюминия.

В объем настоящего изобретения также включены пролекарства соединений формулы (I). Обычно такие пролекарства являются функциональными производными соединений формулы (I), которые способны свободно превращаться ίη νίνο в требуемое соединение формулы (I). Общепринятые способы выбора и получения подходящих пролекарственных производных описаны, например, в Оемдп οί Ргойгидк, ей. Н. Випйдаагй, ЕБс^зсг. 1985.

Пролекарством может быть фармакологически неактивное производное биологически активного вещества (исходное лекарство или исходная молекула), которое требует преобразования в организме для высвобождения активного лекарственного средства и которое имеет улучшенные свойства доставки по сравнению с исходной молекулой лекарственного средства. Преобразование ίη νίνο может быть, например, результатом некоторого метаболического процесса, такого как химический или ферментный гидролиз карбонового, фосфорного или сульфатного эфира, или восстановление или окисление чувствительной функциональной группы.

Настоящее изобретение включает сольваты соединений формулы (I) и их соли, например гидраты.

Соединения настоящего изобретения могут иметь асимметрические центры, хиральные оси и хиральные плоскости (как описано у Е.Ь. ЕПе1 апй 8.Н. ^йеп, в 81егеос11е1Ш51гу οί СагЬоп Сотроипйк, Ιοίιη \Уйеу & 8оп§, Νον Уогк, 1994, р. 1119-1190) и существуют как рацематы, рацемические смеси и индивидуальные диастереомеры, со всеми возможными изомерами и их смесями, включая оптические изомеры, при этом все такие стереоизомеры включены в объем настоящего изобретения. В дополнение, соединения, описанные в данном описании, могут существовать в виде таутомеров и имеется в виду, что обе таутомерные формы охватываются объемом изобретения, даже если изображена только одна таутомерная структура.

Соединения могут существовать в различных изомерных формах, все из которых охватываются настоящим изобретением.

Соединения могут существовать в виде ряда различных полиморфных форм.

Как использовано в данном описании, С1_-балкил представляет разветвленную, линейную и циклическую насыщенную алифатическую углеводородную группу, содержащую 1, 2, 3, 4, 5 или 6 атомов углерода. Например, С_£-6алкил, в частности, включает метил, этил, н-пропил, изопропил, н-бутил, трет-бутил, изобутил, пентил, гексил, циклопропил, циклобутил, циклопентил и циклогексил и т.д. Предпочтительными алкильными группами являются метил и этил.

Конкретными соединениями в объеме настоящего изобретения являются: 3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидинийхлорид; 2-{4-[(3В)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамид; 2-{4-[(38)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамид;

трифторацетат 3-{4-[7-(аминокарбонил)-5-фтор-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния; трифторацетат 5-фтор-2-(3-фтор-4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида; трифторацетат 3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния; 5-фтор-2-(4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамид;

(38)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидинийхлорид; (3В)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидинийхлорид; (В)-5-фтор-2-(4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамид; (8)-5-фтор-2-(4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамид; (В)-5-фтор-2-{3-фтор-4-пиперидин-3 -илфенил}-2Н-индазол-7-карбоксамид;

(8)-5-фтор-2-{3-фтор-4-пиперидин-3-илфенил}-2Н-индазол-7-карбоксамид и их фармацевтически приемлемые соли, свободные основания или таутомеры.

Предоставляются также стереоизомеры данных соединений.

Конкретным соединением настоящего изобретения является 3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол2-ил]фенил}пиперидинийхлорид или его фармацевтически приемлемые свободные основания или таутомеры. Предоставляются также стереоизомеры данного соединения.

Конкретным соединением настоящего изобретения является 2-{4-[(3В)-пиперидин-3-ил]фенил }-2Ниндазол-7-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль, свободное основание или таутомер. Предоставляются также стереоизомеры данного соединения.

Конкретным соединением настоящего изобретения является 2-{4-[(38)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Ниндазол-7-карбоксамид или его фармацевтически приемлемая соль, свободное основание или таутомер. Предоставляются также стереоизомеры данного соединения.

- 4 016079

Конкретным соединением настоящего изобретения является трифторацетат 3-{4-[7(аминокарбонил)-5-фтор-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния или его фармацевтически приемлемое свободное основание или таутомер. Предоставляются также стереоизомеры данного соединения.

Конкретным соединением настоящего изобретения является трифторацетат 5-фтор-2-(3-фтор-4пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида или его фармацевтически приемлемое свободное основание или таутомер. Предоставляются также стереоизомеры данного соединения.

Конкретным соединением настоящего изобретения является 4-метилбензолсульфонат (38)-3-{4-[7(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния или его фармацевтически приемлемое свободное основание или таутомер. Предоставляются также стереоизомеры данного соединения.

В данное изобретение включено свободное основание соединений формулы (I), а также его фармацевтически приемлемые соли и стереоизомеры. Соединения настоящего изобретения могут быть протонированы по атому(атомам) N амина и/или N содержащего гетероциклического фрагмента с образованием соли. Термин свободное основание относится к аминным соединениям в несолевой форме. Входящие в объем изобретения фармацевтически приемлемые соли включают не только соли, приведенные в качестве примеров конкретных соединений, описанных в данном описании, но и все типичные фармацевтически приемлемые соли свободной формы соединений формулы (I). Свободная форма конкретной соли соединений, описанных в данном описании, может быть выделена с использованием известных в данной области методов. Например, свободная форма может быть регенерирована путем обработки соли разбавленным водным раствором подходящего основания, таким как разбавленный водный №1ОН. карбонат калия, аммиак и бикарбонат натрия. Свободные формы могут несколько отличаться от их соответствующих солевых форм по их некоторым физическим свойствам, таким как растворимость в полярных растворителях, но для целей изобретения соли кислот и оснований в иных отношениях фармацевтически эквивалентны их соответствующим свободным формам.

Фармацевтически приемлемые соли данных соединений могут быть синтезированы из соединений данного изобретения, которые содержат основный или кислотный фрагмент, с помощью общепринятых химических способов. Обычно соли основных соединений получают или путем ионообменной хроматографии, или взаимодействия свободного основания со стехиометрическими количествами или с избытком желаемой солеобразующей неорганической или органической кислоты в подходящем растворителе или различных комбинациях растворителей. Аналогичным образом, соли кислотных соединений могут быть образованы взаимодействием с соответствующим неорганическим или органическим основанием.

Таким образом, фармацевтически приемлемые соли соединений данного изобретения включают нетоксичные соли соединений данного изобретения, полученные путем взаимодействия основного рассматриваемого соединения с неорганической, органической кислотой или полимерной кислотой. Например, общепринятые нетоксичные соли включают соли, полученные из неорганических кислот, таких как хлористо-водородная, бромисто-водородная, йодисто-водородная, серная, сернистая, сульфаминовая, фосфорная, фосфористая, азотная и аналогичные, а также соли, полученные из органических кислот, таких как уксусная, пропионовая, янтарная, гликолевая, стеариновая, молочная, яблочная, винная, лимонная, аскорбиновая, памовая, малеиновая, гидроксималеиновая, фенилуксусная, глутаминовая, бензойная, салициловая, сульфаниловая, 2-ацетоксибензойная, фумаровая, толуолсульфоновая, метансульфоновая, этандисульфоновая, щавелевая, изетионовая, пальмитиновая, глюконовая, аскорбиновая, фенилуксусная, аспарагиновая, коричная, пировиноградная, этансульфоновая, этандисульфоновая, валериановая, трифторуксусная и аналогичные. Примеры подходящих полимерных солей включают соли, полученные из полимерных кислот, таких как дубильная кислота, карбоксиметилцеллюлоза. Предпочтительно фармацевтически приемлемая соль данного изобретения содержит 1 экв. соединения формулы (I) и 1, 2 или 3 экв. неорганической или органической кислоты. В одном варианте осуществления фармацевтически приемлемая соль данного изобретения содержит 2 экв. соединения формулы (I) и 1 экв. неорганической или органической кислоты. Более конкретно, фармацевтически приемлемыми солями данного изобретения являются трифторацетатная, хлоридная или тозилатная соли. Более конкретно, фармацевтически приемлемыми солями данного изобретения являются трифторацетат или хлорид. В одном варианте осуществления солью является трифторацетат. В еще одном варианте осуществления солью является хлорид. В еще одном варианте осуществления солью является тозилат.

Термин толуолсульфоновая кислота может использоваться взаимозаменяемо с 4-метилбензолсульфоновой кислотой, и толуолсульфонаты также могут называться тозилатами.

Когда соединение настоящего изобретения является кислотным, подходящие фармацевтически приемлемые соли относятся к солям, полученным из фармацевтически приемлемых нетоксичных оснований, включая неорганические и органические основания. Соли, полученные из неорганических оснований, включают соли алюминия, аммония, кальция, меди, железа [3], железа [2], лития, магния, марганцовистые соли, соли марганца, калия, натрия, цинка и аналогичные. Особенно предпочтительными являются соли аммония, кальция, магния, калия и натрия. Соли, полученные из фармацевтически приемлемых органических нетоксичных оснований, включают соли первичных, вторичных и третичных аминов, замещенных аминов, включая природные замещенные амины, циклические амины и основные ионообменные смолы, такие как соли аргинина, лизина, бетаина, кофеина, холина,

- 5 016079

М,№-дибензилэтилендиамина, этиламина, диэтиламина, 2-диэтиламиноэтанола, 2-диметиламиноэтанола, этаноламина, диэтаноламина, этилендиамина, Ν-этилморфолина, Ν-этилпиперидина, глюкамина, глюкозамина, гистидина, гидрабамина, изопропиламина, лизина, метилглюкамина, морфолина, пиперазина, пиперидина, полиаминовых смол, прокаина, пуринов, теобромина, триэтиламина, триметиламина, трипропиламина, трометамина, дициклогексиламина, бутиламина, бензиламина, фенилбензиламина, трометамина и аналогичные.

Получение фармацевтически приемлемых солей, описанных выше, и других типичных фармацевтически приемлемых солей более подробно описано Вегд с1 а1. (1977) в 1. Рйагт. 8сг, РйагтасеиИса1 8а115, 66:1-19.

Также следует отметить, что соединения настоящего изобретения являются потенциально внутренними солями или цвиттерионами, поскольку в физиологических условиях депротонируемый кислотный фрагмент в соединении, такой как карбоксильная группа, может быть анионным, и данный электронный заряд может затем уравновешиваться изнутри против катионного заряда протонированного или алкилированного основного фрагмента, такого как четвертичный атом азота.

Соединения изобретения могут использоваться в способе лечения людей или животных с помощью терапии.

Изобретение предоставляет соединения для применения при лечении или предотвращении состояний, которые могут облегчаться ингибированием поли(АОР-рибоза)полимеразы (РАКР) (см., например, №1иге Кеу1е\\· Эгид П15соуегу (2005), 4:421-440).

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственных средств для лечения или предотвращения состояний, которые могут облегчаться за счет ингибирования поли(АЭР-рибоза)полимеразы (РАКР).

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения состояний, которые могут облегчаться ингибированием поли(АОР-рибоза)полимеразы (РАКР), который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Ингибиторы (РАКР) настоящего изобретения полезны при лечении заболеваний, конкретно указанных в АО 2005/082368.

Соединения изобретения полезны при лечении воспалительных заболеваний, включающих состояния, являющиеся результатом отторжения органа-трансплантата, таких как хронические воспалительные заболевания суставов, включая артрит, ревматоидный артрит, остеоартрит и заболевания костей, связанные с повышенной костной резорбцией; воспалительные заболевания кишечника, такие как илеит, язвенный колит, синдром Баррета и болезнь Крона: воспалительные заболевания легких, такие как астма, синдром респираторного дистресса взрослых и хроническая обструктивная болезнь дыхательных путей; воспалительные заболевания глаз, включая дистрофию роговицы, трахому, онхоцеркоз, увеит, симпатикофтальмит и эндофтальмит; хронические воспалительные заболевания десны, включающие гингивит и периодонтит; туберкулез; лепра; воспалительные заболевания почек, включающие уремические осложнения, гломерулонефрит и нефроз; воспалительные заболевания кожи, включающие склеродерматит, псориаз и экзему; воспалительные заболевания центральной нервной системы, включающие хронические демиелинирующие заболевания нервной системы, рассеянный склероз, связанную со СПИД нейродегенерацию и болезнь Альцгеймера, инфекционный менингит, энцефаломиелит, болезнь Паркинсона, болезнь Хангтингтона, амиотрофический боковой склероз и вирусный или аутоиммунный энцефалит; диабетические осложнения, включающие, но не ограниченные ими, иммунный сложный васкулит, системную красную волчанку (8ЬЕ); воспалительные заболевания сердца, такие как кардиомиопатия, ишемическая болезнь сердца, гиперхолестеринемия и атеросклероз; а также многочисленные другие заболевания, которые могут иметь значительные воспалительные компоненты, включая преэклампсию, хроническую печеночную недостаточность, травму головного и спинного мозга и синдром множественной дисфункции органов (ΜΟΌ8) (множественная недостаточность органов (МОЕ)).

Воспалительным заболеванием может быть также системное воспаление организма, примером которого является грамположительный или грамотрицательный шок, геморрагический или анафилактический удар, или шок, вызываемый химиотерапией рака в ответ на провоспалительные цитокины, например шок, связанный с провоспалительными цитокинами. Такой шок может быть вызван, например, химиотерапевтическим агентом, который вводится в качестве лечебного средства от рака.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственных средств для лечения или предотвращения воспалительных заболеваний.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения воспалительных заболеваний, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения могут быть также полезны при лечении и предотвращении реперфузионных повреждений, являющихся результатом естественно случающихся эпизодов или событий, и во время хирургических процедур, таких как реперфузионное повреждение кишечного тракта; миокардиальное реперфузионное повреждение; реперфузионное повреждение, являющееся результатом кар

- 6 016079 диопульмонарной операции с искусственным кровообращением, восстановительной операции аневризмы аорты, операции каротидной эндартерэктомии или геморрагического шока; и реоксогенационное повреждение, являющееся результатом трансплантации органов, таких как сердце, легкие, печень, почки, поджелудочная железа, кишечник и роговица.

Таким образом, настоящее изобретение представляет соединения формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения реперфузионных повреждений.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения реперфузионных повреждений, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения также могут быть полезны при лечении или предотвращении ишемических состояний, включающих состояния, являющиеся результатом трансплантации органов, таких как стабильная ангина, нестабильная ангина, ишемия миокарда, гепатическая ишемия, мезентериальная артериальная ишемия, ишемия кишечного тракта, критическая ишемия конечностей, хроническая критическая ишемия конечностей, церебральная ишемия, острая сердечная ишемия, ишемическая болезнь почек, ишемическая болезнь печени, ишемическое расстройство сетчатки, септический шок и ишемическая болезнь центральной нервной системы, такая как тромбоз или кровоизлияние (или эмболия) или церебральная ишемия.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения ишемических состояний.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения ишемических состояний, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения удара.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения удара, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения могут быть также полезны при лечении или предотвращении хронической или острой почечной недостаточности.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения почечной недостаточности.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения почечной недостаточности, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения могут быть также полезны при лечении или предотвращении сосудистых заболеваний, иных чем сердечно-сосудистые заболевания, таких как закупорка периферических артерий, облитерирующий тромбоангит, болезнь и феномен Рейнода, акроцианоз, эритромелалгия, венозный тромбоз, варикозные вены, артериовенозная фистула, лимфодема и жировой отек.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения сосудистых заболеваний, иных чем сердечно-сосудистые заболевания.

Настоящее изобретение предоставляет также способ лечения или предотвращения сосудистых заболеваний, иных чем сердечно-сосудистые заболевания, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения могут быть также полезны при лечении или предотвращении сердечно-сосудистых заболеваний, таких как хроническая сердечная недостаточность, атеросклероз, застойная сердечная недостаточность, циркуляторный шок, кардиомиопатия, пересадка сердца, инфаркт миокарда и сердечная аритмия, такая как атриальная фибрилляция, суправентрикулярная тахикардия, частые регулярные сокращения предсердий и пароксизмальная атриальная тахикардия.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения сердечно-сосудистых заболеваний.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения сердечнососудистых заболеваний, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения также могут быть полезны при лечении и предотвращении сахарного диабета, включая диабет типа I (инсулинзависимый сахарный диабет), диабет типа II (инсулиннезависимый сахарный диабет), диабет, связанный с беременностью, аутоиммунный диабет, инсулинопатию, диабет вследствие болезни поджелудочной железы, диабет, связанный с другими болезнями эндокринной системы (такими как синдром Кашинга (СикЫпд), акромегалия, феохромоцитома, глюкагонома, первичный альдостеронизм или соматостатинома), синдром инсулинорезистентности типа А, синдром инсу- 7 016079 линорезистентности типа В, липатрофический диабет и диабет, вызываемый 3-клеточными токсинами. Соединения данного изобретения могут быть также полезны при лечении или предотвращении диабетических осложнений, таких как диабетическая катаракта, глаукома, ретинопатия, нефропатия (такая как микроалюминурия и прогрессивная диабетическая нефропатия), полиневропатия, гангрена ног, атеросклеротическая болезнь коронарной артерии, заболевание периферической артерии, некетотическая гипергликемическо-гиперосмолярная кома, мононейропатии, автономная нейропатия, язвы стопы, проблемы суставов и осложнения кожи или слизистой мембраны (такие как инфекция, пятнистость кожи, грибковая инфекция или липофильный некробиоз), гиперлипидемия, гипертензия, синдром инсулинорезистентности, болезнь коронарной артерии, ретинопатия, диабетическая нейропатия, полинейропатия, мононейропатия, автономная нейроптия, грибковые инфекции, бактериальные инфекции и кардиомиопатия.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения диабета.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения диабета, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения данного изобретения могут быть также полезны при лечении и предотвращении рака, включая солидные опухоли, такие как фибросаркома, миксосаркома, липосаркома, хондросаркома, остеогенная саркома, хордома, ангиосаркома, эндотелиосаркома, лимфангиосаркома, димфангиоэндотелиосаркома, синовиома, мезотелиома, опухоль Эвинга, лейомиосаркома, рабдомиосаркома, рак ободочной кишки, колоректальный рак, рак почек, рак поджелудочной железы, рак костей, рак груди, рак яичников, рак предстательный железы, эзофагеальный рак, рак желудка, рак ротовой полости, рак носовой полости, рак горла, сквамозная клеточная карцинома, базальная клеточная карцинома, аденокарцинома, карцинома потовых желез, карцинома сальных желез, сосочковая карцинома, сосочковая аденокарцинома, цистаденокарцинома, медуллярная карцинома, бронхогенная карцинома, ренальная клеточная карцинома, гепатома, карцинома желчного протока, хориокарцинома, семинома, эмбриональная карцинома, опухоль Уилмса, цервикальный рак, маточный рак, тестикулярный рак, мелкоклеточная легочная карцинома, карцинома мочевого пузыря, рак легких, эпителиальная карцинома, рак кожи, меланома, нейробластома и ретинобластома; виды рака крови, такие как острая лимфобластная лейкемия (АЬЬ), острая лимфобластная В-клеточная лейкемия, острая лимфобластная Т-клеточная лейкемия, острая миелобластная лейкемия (АМЬ), острая промиелоцитная лейкемия (АРЬ), острая монобластная лейкемия, острая эритролейкемическая лейкемия, острая мегакариобластная лейкемия, острая миеломоноцитная лейкемия, острая нелимфоцитная лейкемия, острая недифференцируемая лейкемия, хроническая миелоцитная лейкемия (СМЬ), хроническая лимфоцитная лейкемия (СЬЬ), лейкемия волосяных клеток и множественная миелома; острые и хронические лейкемии, такие как лимфобластная, миелогенная, лимфоцитная, миелоцитная лейкемии; лимфомы, такие как болезнь Ходжкина, неходжкинская лимфома, множественная миелома, макроглобулинемия Вальденстрома, заболевание тяжелой цепи (полипептидной цепи большой молекулярной массы) и красная или истинная полицитемия; виды рака ЦНС и головного мозга, такие как глиома, пилоцитная астроцитома, астроцитома, анапластическая астроцитома, глиобластома мультиформная, медуллобластома, краниофарингиома, эпендимома, пинеалома, гемангиобластома, акустическая нейрома, олигодендроглиома, менингиома, вестибуляная шваннома, аденома, метастатическая опухоль головного мозга, спинальная опухоль и медуллобластома.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединения формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения рака.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения рака, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения настоящего изобретения также могут применяться при лечении рака, который испытывает дефицит зависимой от гомологичной рекомбинации (НВ) ДНК Ό8Β восстановительной активности (см. \\'О 2006/021801).

НВ зависимый ДНК Ό8Β восстановительный путь восстанавливает двунитевые разрывы (Ό8Β) ДНК через гомологичные механизмы, реформируя непрерывную ДНК спираль (№11. Сепе1. (2001), 27(3):247-254). Компоненты НВ зависимого ДНК Ό8Β восстановительного пути включают, но не ограничиваются ими, АТМ (ММ-000051), ΒΑΌ51 (ΝΜ-002875), ΒΑϋ51Ο (ΝΜ-002877), ВАО51С (ММ-002876), ВАО51Ь3 (ΝΜ-002878), ОМС1 (ΝΜ-007068), ХВСС2 (ΝΜ-7005431), ХВСС3 (ΝΜ-005432), ВАЭ52 (ММ-002879), ВАП54Ь (ΝΜ-003579), ΒΑ^54Β (ΝΜ-012415), ΒΒСΑ-1 (ΝΜ-007295), ΒΒСΑ-2 (ММ-000059), ВАЭ5О (ΝΜ-005732), МВЫ 1А (ΝΜ-005590), ΝΒ81 (ΝΜ-002485), АЭРВТ (РАВР-1), АПРВТЬ2, (РАВР02) СТР8, ВРА, ВРА1, ВРА2, ВРА3, ,ΧΒΙλ ЕВСС1, ХРР, ММ819, ВАЭ51, ВАП51р, ВАЭ51С, ВАО5Ш, БМС1, ХВССВ, ХВСС3, ΒΒСΑ-1, ΒΒСΑ-2, ВАЭ52, ВАЭ54, ВАЭ50, МВЕ11, ΝΒ51, А'ВХ, Η1.\ΐκυ70. ВИ80, АТМ, АТВСНК1, СНК2, РАИСА, ЕΑNСΒ, ЕАИСС, ЕАИСО1, ЕАХСС2. РАИСЕ, РАЖЕ, ЕΑИС6, ЕΑИСС, ЕАХСВ1, ЕАХСШ, РАЖЕ, ЕΑИСЕ, ЕΑИС6, ВАШ и ВАШ. Другие белки, вовлеченные в НВ зависимый ДНК Ό8Β восстановительный путь, включают регуляторные факто

- 8 016079 ры, такие как ΕΜ8Υ (Се11 (2003), 115:523-535).

Рак, который испытывает дефицит НВ зависимого ДНК Ό8Β восстановления, может включать или состоять из одной или нескольких раковых клеток, которые имеют пониженную или лишены способности восстанавливать Ό8Β по этому пути по сравнению с нормальными клетками, т.е. активность НВ зависимого ДНК Ό8Β восстановительного пути может быть пониженной или разрушенной в одной или нескольких раковых клетках.

Активность одного или более компонентов НВ зависимого ДНК Ό8Β восстановительного пути может разрушаться в одной или нескольких раковых клетках индивидуума, у которого имеется рак с дефицитом НВ зависимого ДНК Ό8Β восстановления. Компоненты НВ зависимого ДНК Ό8Β восстановительного пути вполне охарактеризованы в литературе (см., например, 8с1еисе (2001), 291:1284-1289) и включают компоненты, перечисленные выше.

Настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения рака с дефицитом НВ зависимой ДНК Ό8Β восстановительной активности.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения рака с дефицитом НВ зависимой ДНК Ό8Β восстановительной активности, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

В одном варианте осуществления раковые клетки испытывают дефицит НВ зависимой ДНК Ό8Β восстановительной активности одного или более фенотипов, выбранных из ΑΤΜ (ΝΜ-000051), ВАЭ51 (ΝΜ-002875), ВАВ51Ы (ΝΜ-002877), ВАЭ51С (ΝΜ-002876), ВАО51Ь3 (ΝΜ-002878), ΌΜΟ (ΝΜ-007068), ХВСС2 (ΝΜ-7005431), ХВСС3 (ΝΜ-005432), ВАЭ52 (ΝΜ-002879), ВАП54Ь (ΝΜ-003579), ВАОМН (ΝΜ-012415), ΒВСΑ-1 (ΝΜ-007295), ΒВСΑ-2 (ΝΜ-000059), ВАЭ5О (ΝΜ-005732), ΜВΕI 1А (ΝΜ-005590), ΝΒ81 (ΝΜ-002485), АЭРВТ (РАВР-1), А1)РВТЕ2. (РАВР02) СТР8, ВРА, ВРА1, ВРА2, ВРА3, ХР1). ЕВСС1, ХРР, ΜΜ819, ВАБ51, ВАЭ51р, ВАО51С, ВАО51П, ΌΜΟ, ХВССВ, ХВСС3, ΒВСΑ-1, ΒВСΑ-2, ВАЭ52, ВАЭ54, ВАЭ50, ΜΕΕ11, ΝΒ51, АВЫ, ΒΕΜΚΠ70, ВИ80, АТН АТВСНК1, СНК2, РАМСА, РΑМСΒ, ЕАХСС. ЕАХСО1, ЕАХСО2. РАМСЕ, РАМСЕ, ЕАХС6. ЕАХСС. ЕАМСП1, ЕАХС112. РАНСЕ, РАНСЕ, ЕАНСб, ВАЭ1 и ВАЭ9.

В соответствии с еще одним вариантом осуществления раковые клетки испытывают дефицит ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2 фенотипа. Раковые клетки с данным фенотипом могут испытывать дефицит ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2, т.е. экспрессия и/или активность ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2 могут понижаться или исчезать в раковых клетках, например, под действием мутации или полиморфизма в кодирующей нуклеиновой кислоте или под действием амплификации, мутации или полиморфизма в гене, кодирующем регуляторный фактор, например, ΕΜ8Υ гене, который кодирует ΒВСΑ-2 регуляторный фактор (Се11 (2003), 115:523-535).

ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2 являются известными супрессорами опухолей, чьи аллели дикого типа часто отсутствуют в опухолях гетерозиготных носителей (Оисодеи (2002), 21(58):8981-93; Тгеибк Μο1. Μеά. (2002), 8(12):571-6). Хорошо охарактеризована ассоциация ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2 мутаций с раком груди (Ехр. Сйи. Саисег Век. (2002)). Известно, что амплификация ΕΜ8Υ гена, который кодирует ΒВСΑ-2 связующий фактор, связана с раком груди и яичников. Носители мутаций ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2 также испытывают повышенный риск рака яичников, простаты и поджелудочной железы. В данной области хорошо известна детекция вариаций в ΒВСΑ-1 и/или ΒВСΑ-2 и описана, например, в ЕР 699754, ЕР 705903, Оеие!. Тек! (1992), 1:75-83; Саисег Тгеа! Век (2002), 107:29-59; КеорЫш (2003), 50(4):246-50; Секка Суиесо1 (2003), 68(1):11-16). Определение амплификации ΒВСΑ-2 связующего фактора ΕΜ8Υ описано в Се11 115:523-535. Ингибиторы РАВР были продемонстрированы как являющиеся полезными для специфичного уничтожения опухолей с дефицитом ΒВСΑ-1 и ΒВСΑ-2 (ПаШте (2005), 434:913-916 и 917-920).

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения опухолей с дефицитом ΒВСΑ-1 или ΒВСΑ-2.

Настоящее изобретение также предоставляет способ лечения или предотвращения опухолей с дефицитом ΒВСΑ-1 или ΒВСΑ-2, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

В одном варианте осуществления ингибиторы РАВР настоящего изобретения могут применяться в профилактической терапии для устранения клеток с ΒВСΑ-2-дефицитом (см. Саисег Век. (2005), 65:10145).

Соединения данного изобретения также могут быть полезны при лечении или предотвращении нейродегенеративных заболеваний, включая связанную с расширением полиглутамина нейродегенерацию, болезнь Хангтингтона, болезнь Кеннеди, спиноцеребральную атаксию, дентато-рубро-паллидольюисову атрофию (ПВРЬА), связанную с агрегацией белка нейродегенерацию, болезнь МакадоДжозефа (Μасйаάο-^οкерй), болезнь Альцгеймера, болезнь Паркинсона, амиотрофический боковой склероз, спонгиформную энцефалопатию, связанное с прионом заболевание и рассеянный склероз (Μ8).

- 9 016079

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для лечения или предотвращения нейродегенеративных заболеваний.

Настоящее изобретение представляет также способ лечения или предотвращения нейродегенеративных заболеваний, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I).

Соединения настоящего изобретения также могут быть полезны при лечении или предотвращении ретровирусной инфекции (патент США № 5652260), ретинальных повреждений (Сигг. Еуе Кек. (2004), 29:403), старения кожи и УФ индуцируемого повреждения кожи (патент США № 5589483 и Вюсйет. Рйаттасо1 (2002), 63:921).

Соединения изобретения также полезны при лечении или предотвращении преждевременного старения и отсрочки наступления возрастной клеточной дисфункции (Р11агтасо1ощса1 Кекеатсй (2005), 52:93-99).

Соединения данного изобретения могут вводиться млекопитающим, предпочтительно людям, или как таковое, или в комбинации с фармацевтически приемлемыми носителями, эксципиентами, разбавителями, адъювантами, наполнителями, буферами, стабилизаторами, консервантами, лубрикантами, в фармацевтической композиции согласно стандартной фармацевтической практике.

Соединения данного изобретения могут вводиться субъекту любым удобным способом введения, будь то системно/периферически или местно в зависимости от желаемого действия, включающим, но не ограничивающимся ими, оральный (например, с перевариванием); топический или местный (включая, например, трансдермальный, интраназальный, окулярный, защечный и подъязычный); легочный (например, путем ингаляционной или инсуффляционной терапии с использованием, например, аэрозоля, например через рот или нос); ректальный; вагинальный; парентеральный (например, инъекцией, включая подкожную, индрадермальную, внутримышечную, внутривенную, внутриартериальную, внутрисердечную, интратекальную (внутрь синовиального влагалища сухожилия), интраспинальную, интракапсулярную, субкапсулярную, внутриглазную, интраперитонеальную, внутритрахейную, субкутикулярную, внутрисуставную, субарахноидальную и интрастернальную); и с помощью имплантирования базового трансплантата (например, подкожно или внутримышечно).

Субъектом может быть межрасовый гибрид, животное, позвоночное животное, млекопитающее, грызуны (например, морские свинки, хомяки, крысы, мыши), мышиные (например, мышь), собачьи (например, собака), кошачьи (например, кошки), лошадиные (например, лошадь), приматы, обезьяноподобные (например, обезьяны), обезьяны (например, мармозетки, бабуины), человекообразные обезьяны (например, гориллы, шимпанзе, орангутанги, гиббоны) или человек.

Изобретение также предоставляет фармацевтические композиции, содержащие одно или более соединений данного изобретения и фармацевтически приемлемый носитель.

Фармацевтические композиции, содержащие активный ингредиент, могут быть в форме, подходящей для орального применения, например в виде таблеток, пастилок, водных или масляных суспензий, диспергируемых порошков или гранул, эмульсий, твердых или мягких капсул или сиропов или эликсиров. Композиции, предназначенные для орального применения, могут быть получены в соответствии с любым методом, известным в области производства фармацевтических композиций, и такие композиции могут содержать один или более агентов, выбранных из группы, состоящей из подслащивающих, вкусовых или ароматизирующих агентов, окрашивающих агентов и консервантов, для того, чтобы получить фармацевтически мягкие и приятные на вкус препараты. Таблетки содержат активный ингредиент в смеси с нетоксичными фармацевтически приемлемыми эксципиентами, которые являются подходящими для получения таблеток. Данными эксципиентами могут быть, например, инертные разбавители, такие как карбонат кальция, карбонат натрия, лактоза, фосфат кальция или фосфат натрия; гранулирующие или дезинтегрирующие агенты, например микрокристаллическая целлюлоза, натрийкроскармелоза, кукурузный крахмал или альгиновая кислота; связующие агенты, например крахмал, желатин, поливинилпирролидон или камедь акации, и лубриканты, например стеарат магния, стеариновая кислота или тальк. Таблетки могут быть непокрытыми или могут быть покрыты известными способами для маскировки неприятного вкуса или для задержки дезинтеграции и абсорбции в желудочно-кишечном тракте, тем самым обеспечивая замедленное действие на протяжении более длительного периода. Например, можно использовать растворимый в воде маскирующий вкус материал, такой как гидроксипропилметилцеллюлоза или гидроксипропилцеллюлоза, или задерживающий время действия материал, такой как этилцеллюлоза, ацетатбутират целлюлозы.

Рецептуры для орального применения могут быть также представлены в виде твердых желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с инертным твердым разбавителем, например карбонатом кальция, фосфатом кальция или каолином, или в виде мягких желатиновых капсул, в которых активный ингредиент смешан с растворимым в воде носителем, таким как полиэтиленгликоль или масляная среда, например арахисовое масло, жидкий парафин или оливковое масло.

- 10 016079

Водные суспензии содержат активный ингредиент в смеси с эксципиентами, подходящими для получения водных суспензий. Такими эксципиентами являются суспендирующие агенты, например натрийкарбоксиметилцеллюлоза, метилцеллюлоза, гидроксипропилметилцеллюлоза, альгинат натрия, поливинилпирролидон, камедь трагаканта и камедь акации; диспергирующими или смачивающими агентами могут быть природные фосфатиды, например лецитин, или продукты конденсации алкиленоксида с жирными кислотами, например стеарат полиоксиэтилена, или продукты конденсации этиленоксида с алифатическими спиртами с длинной цепью, например гептадекаэтиленоксицетанол, или продукты конденсации этиленоксида с частичными эфирами, полученными из жирных кислот и гексита, такие как моноолеат полиоксиэтиленсорбита, или продукты конденсации этиленоксида с частичными эфирами, полученными из жирных кислот и ангидридов гексита, например полиэтиленсорбитанмоноолеат. Водные суспензии также могут содержать один или более консервантов, например этил или н-пропил п-гидроксибензоат, один или более окрашивающих агентов, один или более вкусовых агентов и один или более подслащивающих агентов, таких как сахароза, сахарин или аспартам.

Масляные суспензии могут быть сформированы путем суспендирования активного ингредиента в растительном масле, например арахисовом масле, оливковом масле, кунжутном или кокосовом масле, или в минеральном масле, таком как жидкий парафин. Масляные суспензии могут содержать загущающий агент, например пчелиный воск, твердый парафин или цетиловый спирт. Могут добавляться подслащивающие агенты, такие как агенты, представленные выше, и вкусовые или ароматизирующие агенты с обеспечением приятного на вкус орального препарата. Данные композиции могут быть консервированы путем добавления антиоксиданта, такого как бутилированный гидроксианизол или альфатокоферол.

Диспергируемые порошки и гранулы, подходящие для получения водной суспензии путем добавления воды, предоставляют активный ингредиент в смеси с диспергирующим или смачивающим агентом, суспендирующим агентом и одним или более консервантами. Подходящие диспергирующие или смачивающие агенты и суспендирующие агенты представлены примерами агентов, приведенных выше. Также могут присутствовать дополнительные эксципиенты, например подслащивающие, вкусовые и окрашивающие агенты. Данные композиции могут быть консервированы путем добавления антиоксиданта, такого как аскорбиновая кислота.

Фармацевтические композиции изобретения могут быть также в форме эмульсий масло-в-воде. Масляной фазой может быть растительное масло, например оливковое масло или арахисовое масло, или минеральное масло, например жидкий парафин или их смеси. Подходящими эмульгирующими агентами могут быть природные фосфатиды, например соевый лецитин, и сложные эфиры или частичные эфиры, полученные из жирных кислот и ангидридов гексита, например сорбитанмоноолеат, и продукты конденсации названных частичных эфиров с этиленоксидом, например полиоксиэтиленсорбитанмоноолеат. Эмульсии могут содержать также подслащивающие, вкусовые агенты, консерванты и антиоксиданты.

Сиропы и эликсиры могут быть составлены в композицию с подслащивающими агентами, например глицерином, пропиленгликолем, сорбитом или сахарозой. Такие рецептуры могут содержать также смягчающее или успокаивающее средство, консервант, придающий вкус или аромат и окрашивающий агенты и антиоксидант.

Фармацевтические композиции могут быть в форме стерильных инъецируемых водных растворов. Среди приемлемых носителей и растворителей, которые могут быть использованы, находятся вода, раствор Рингера и изотонический раствор хлорида натрия.

Стерильным инъецируемым препаратом может быть также стерильная инъецируемая микроэмульсия масло-в-воде, в которой активный ингредиент растворен в масляной фазе. Например, активный ингредиент может быть сначала растворен в смеси соевого масла и лецитина. Масляный раствор затем вводят в смесь воды и глицерина и перерабатывают с образованием микроэмульсии.

Инъецируемые растворы или микроэмульсии могут вводиться в кровоток пациента путем инъекции местного болюса. Альтернативно, может быть благоприятным вводить раствор или микроэмульсию таким образом, чтобы поддерживать постоянную циркулирующую концентрацию рассматриваемого соединения. Для того чтобы поддерживать такую постоянную концентрацию, можно использовать устройство непрерывной внутривенной доставки. Примером такого устройства является внутривенный насос Эе11ес САОП-РЬи8® модель 5400.

Фармацевтические композиции могут быть в форме стерильной инъецируемой водной или маслянистой суспензии для внутримышечного и подкожного введения. Данная суспензия может быть составлена в композицию в соответствии с известными в данной области методами с использованием таких подходящих диспергирующих или смачивающих агентов и суспендирующих агентов, которые приведены выше. Стерильным инъецируемым препаратом может быть также стерильный инъецируемый раствор или суспензия в нетоксичном парентерально приемлемом разбавителе или растворителе, например в виде раствора в 1,3-бутандиоле. В дополнение, в качестве растворителя или суспендирующей среды обычно используют стерильные фиксированные масла. Для данной цели можно использовать любое мягкое фиксированное масло, включая синтетические моно- или диглицериды. В дополнение, при получении инъецируемых препаратов находят применение жирные кислоты, такие как олеиновая кислота.

- 11 016079

Соединения формулы (I) также могут вводиться в форме суппозиториев для ректального введения. Данные композиции могут быть получены путем смешения лекарственного средства с подходящим нераздражающим эксципиентом, который является твердым при обычных температурах, но жидким при температуре прямой кишки, и, следовательно, будет расплавляться в прямой кишке, высвобождая лекарственное средство. Такие материалы включают масло какао, глицеринированный желатин, гидрированные растительные масла, смеси полиэтиленгликолей с различными молекулярными массами и полиэтиленгликолевых эфиров жирных кислот.

Для местного применения используют кремы, мази, желе, растворы или суспензии и др., содержащие соединение формулы (I). (Для целей данного изобретения местное применение предусматривает полоскание рта и горла).

Соединения настоящего изобретения могут вводиться в виде интраназальной формы с помощью местного применения подходящих интраназальных носителей и доставочных средств или трансдермальными путями с использованием форм трансдермальных кожных пластырей, хорошо известных специалистам в данной области. Чтобы быть введенным в форме трансдермальной системы доставки, введение дозы будет скорее непрерывным, чем не прерывистым, во всем режиме дозировки. Соединения настоящего изобретения также могут доставляться в виде суппозиториев с использованием основ, таких как масло какао, глицеринированный желатин, гидрированные растительные масла, смеси полиэтиленгликолей с различными молекулярными массами и полиэтиленгликолевых эфиров жирных кислот.

Когда соединение согласно данному изобретению вводят субъекту, выбираемый уровень доз будет зависеть от множества факторов, включающих, но не ограниченных ими, активность конкретного соединения, тяжесть симптомов у индивидуумов, путь введения, время введения, скорость выведения соединения, длительность лечения, другие лекарственные средства, соединения и/или материалы, используемые в комбинации, и возраст, пол, масса, состояние, общее состояние здоровья и предшествующая медицинская история болезни пациента. Количество соединения и путь введения в конечном итоге отдаются на усмотрение лечащего врача, хотя обычно доза должна быть достаточной для достижения локальных концентраций в участке действия, которые обеспечивают достижение желаемого эффекта, не вызывая существенных пагубных или вредных побочных эффектов.

Введение ίη νίνο можно проводить в виде одной дозы непрерывно или прерывисто (например, в виде разделенных доз с соответствующими интервалами) на протяжении курса лечения.

Методы определения наиболее эффективных средств и дозы введения хорошо известны специалистам в данной области и будут варьировать в зависимости от рецептуры, используемой для терапии, цели терапии, клеток мишени, подвергаемых лечению, и подвергаемого лечению субъекта. Можно осуществлять одноразовое или множественное введение с учетом уровня и характера дозы, выбираемых лечащим врачом.

Обычно подходящая доза активного соединения находится в интервале примерно от 100 мкг до примерно 250 мг на 1 кг массы тела субъекта в день. Когда активным соединением является соль, сложный эфир, пролекарство или аналогичные, вводимое количество вычисляется на основе исходного соединения, и поэтому фактически используемая масса увеличивается пропорционально.

Данные соединения полезны также в комбинации с противораковыми агентами или химиотерапевтическими агентами.

Соединения данного изобретения могут быть также полезны в качестве химио- и радиосенсибилизаторов для лечения рака. Они полезны при лечении млекопитающих, которые ранее подвергались или подвергаются в настоящее время лечению от рака. Такие предшествующие лечения включают предшествующую химиотерапию, радиационную терапию, хирургию или иммунотерапию, такую как вакцины от рака.

Таким образом, настоящее изобретение предоставляет комбинацию соединения формулы (I) и противоракового агента для одновременного, раздельного или последовательного введения.

Настоящее изобретение также предоставляет комбинацию соединения формулы (I), радиационной терапии и еще одного химиотерапевтического агента для одновременного, раздельного или последовательного введения.

Настоящее изобретение также предоставляет соединение формулы (I) для применения в производстве лекарственного средства для применения в качестве дополнения в терапии рака или для потенцирования опухолевых клеток путем комбинации с ионизирующей радиацией или химиотерапевтическими агентами.

Настоящее изобретение также предоставляет применение соединения формулы (I) в производстве лекарственного средства для применения в качестве дополнения в терапии рака или для потенцирования опухолевых клеток путем комбинации с ионизирующей радиацией и другими химиотерапевтическими агентами. Соединения также могут применяться в комбинации с ионизирующей радиацией и другими химиотерапевтическими агентами.

Настоящее изобретение также предоставляет способ химиотерапии или радиотерапии, который включает введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения формулы (I) или композиции, содержащей соединение формулы (I), в комбинации с ионизирующей радиацией или

- 12 016079 химиотерапевтическими агентами. Соединения также могут вводиться в комбинации с ионизирующей радиацией и другими химиотерапевтическими агентами.

В комбинационной терапии соединения данного изобретения могут вводиться до (например, за 5 мин, 15 мин, 30 мин, 45 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 12 ч, 24 ч, 48 ч, 72 ч, 96 ч, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 5 недель, 6 недель, 8 недель или 12 недель), параллельно с или последовательно после (например, спустя 5 мин, 15 мин, 30 мин, 45 мин, 1 ч, 2 ч, 4 ч, 6 ч, 12 ч, 24 ч, 48 ч, 72 ч, 96 ч, 1 неделю, 2 недели, 3 недели, 4 недели, 5 недель, 6 недель, 8 недель или 12 недель) введения другого противоракового агента субъекту, нуждающемуся в этом. В различных вариантах осуществления рассматриваемые соединения и еще один противораковый агент вводят с промежутком в 1 мин, 10 мин, 30 мин, менее чем 1 ч, 1-2 ч, 2-3 ч, 3-4 ч, 4-5 ч, 5-6 ч, 6-7 ч, 7-8 ч, 8-9 ч, 9-10 ч, 10-11 ч, 11-12 ч, не более чем 24 ч или не более чем 48 ч.

Соединения данного изобретения и другой противораковый агент могут действовать дополнительно или синергически. Синергическая комбинация настоящих соединений и еще одного противоракового агента может дать возможность применения более низких доз одного или обоих данных агентов и/или менее частых доз одного или обоих рассматриваемых соединений и других противораковых агентов и/или введения агентов менее часто, что может снизить любую токсичность, связанную с введением агентов субъекту, не снижая при этом эффективность агентов при лечении рака. В дополнение, синергический эффект может приводить в результате к улучшенной эффективности данных агентов при лечении рака и/или к снижению любых пагубных или нежелательных побочных эффектов, связанных с использованием каждого агента по отдельности.

Примеры противораковых агентов или химиотерапевтических агентов для применения в комбинации с соединениями настоящего изобретения можно найти в Сапсег Ргшар1е8 аиб Ргасйсе о£ Оисо1оду Ьу ν.Τ., Оеуйа аиб 8. Не11таи (ебйогк). 6^4Ь ебШои (ГеЬгиагу 15, 2001), ЫрртсоИ Абйатк & Абкнъ РиЬ118Йег8. Специалист в данной области на основании конкретных характеристик лекарственных средств и ракового заболевания, о которых идет речь, сможет различить, какие сочетания или комбинации агентов будут полезны. Такие противораковые агенты включают, но не ограничиваются ими, следующие: ингибиторы НО АС, модуляторы эстрогеновых рецепторов, модуляторы андрогеновых рецепторов, модуляторы ретиноидных рецепторов, цитотоксические/цитостатические агенты, антипролиферативные агенты, ингибиторы пренил-протеин-трансферазы, ингибиторы НМС-СоА редуктазы, ингибиторы ВИЧ протеазы, ингибиторы обратной транскриптазы и другие ингибиторы ангиогенезиса, ингибиторы клеточной пролиферации и сигнализирующие выживание, индуцирующие апоптоз агенты и агенты, которые мешают контрольным точкам клеточного цикла. Данные соединения особенно полезны, когда вводятся совместно с радиационной терапией.

Примеры ингибиторов НИАС включают субероиланилидгидроксамовую кислоту (8АНА), ЬАЦ824, ЬВН589, РХИ101, М8275, ЕК228, вальпроевую кислоту, масляную кислоту и 0-994.

Модуляторы эстрогеновых рецепторов относятся к соединениям, которые препятствуют или ингибируют связывание эстрогена с рецептором независимо от механизма. Примеры модуляторов эстрогеновых рецепторов включают, но не ограничиваются ими, тамоксифен, ралоксифен, идоксифен, ЬУ353381, ЬУ117081, торемифен, фулвестрант, 4-[7-2,2-диметил-1-оксопропокси-4-метил-2-[4-[2-(1пиперидинил)этокси] фенил]-2Н-1 -бензопиран-3 -ил] фенил-2,2-диметилпропаноат, 4,4'-дигидроксибензофенон-2,4-динитрофенилгидразон и 8Н646.

Модуляторы андрогеновых рецепторов относятся к соединениям, которые препятствуют или ингибируют связывание андрогенов с рецептором, независимо от механизма. Примеры модуляторов андрогеновых рецепторов включают финастерид и другие ингибиторы 5а-редуктазы, нилутамид, флутамид, бикалютамиид, лиарозол и абиратеронацетат.

Модуляторы ретиноидных рецепторов относятся к соединениям, которые препятствуют или ингибируют связывание ретиноидов с рецептором, независимо от механизма. Примеры таких модуляторов ретиноидных рецепторов включают бексаротен, третиноин, 13-цис-ретиноевую кислоту,

9-цис-ретиноевую кислоту, α-дифторметилорнитин, [ЦХ23-7553. транс-И-(4'-гидроксифенил)ретинамид и Ν-4-карбоксифенилретинамид.

Цитотоксические/цитостатические агенты относятся к соединениям, которые вызывают гибель клеток или ингибируют клеточную пролиферацию, прежде всего путем непосредственного вмешательства в функционирование клеток, или ингибируют или препятствуют митозу клеток, включающим алкилирующие агенты, факторы некроза опухоли, интеркаляторы, активируемые гипоксией соединения, ингибиторы микротрубочек/микротрубочки-стабилизирующие агенты, ингибиторы митотических кинезинов, ингибиторы киназ, вовлеченных в митотическое прогрессирование, антиметаболиты, модификаторы биологической ответной реакции; гормональные/антигормональные терапевтические агенты, гематопоэтические факторы роста, нацеленные на моноклональные антитела терапевтические агенты, ингибиторы топоизомеразы, ингибиторы протеасом и ингибиторы убиквитинлигазы. Примеры цитотоксических агентов включают, но не ограничиваются ими, циклофосфамид, хлорамбуцилкармустин (ВСИЛ), ломустин (СС№), бусульфан, треосульфан, сертенеф, кахектин, ифосфамид, тасонермин, лонидамин, карбопла

- 13 016079 тин, алтретамин, преднимустин, дибромдульцитол, ранимустин, фотемустин, недаплатин, ароплатин, оксалиплатин, темозоломид, метилметансульфонат, прокарбазин, дакарбазин, гептаплатин, эстрамустин, импросульфантозилат, трофосфамид, нимустин, диброспидийхлорид, пумитепу, лобаплатин, сатраплатин, профиромицин, цисплатин, ирофульвен, дексифосфамид, цис-аминдихлор(2-метилпиридин)платину, бензилгуанин, глуфосфамид, СРХ100, тетрахлорид (транс,транс,транс)-бис-му(гексан-1,6-диамин)-му-[диаминплатина(П)]-бис-[диамин(хлор)платины(П)], диаризидинилспермин, триоксид мышьяка, 1-(11-додециламино-10-гидроксиундецил)-3,7-диметилксантин, зорубицин, идарубицин, даунорубицин, бисантрен, митоксантрон, пирарубицин, пинафид, валрубицин, амрубицин, доксорубицин, эпирубицин, пирарубицин, антинеопластон, 3'-дезамино-3'-морфолино-13-дезоксо-10гидроксикарминомицин, аннамицин, галарубицин, элинафид, ΜΕΝ10755 и 4-дезметокси-3-дезамино-3азиридинил-4-мептилсульфонилдаунорубицин (см. АО 00/50032). Дополнительные примеры включают ингибиторы КаГ киназы (такие как Вау43-9006) и ингибиторы тТОК (такие как АуеШ'к ССЕ779 и Лпаб АР23573). Дополнительными примерами являются ингибиторы РКК (например, ЬУ294002).

В одном варианте осуществления соединения данного изобретения могут применяться в комбинации с алкилирующими агентами.

Примеры алкилирующих агентов включают, но не ограничиваются ими, азотные горчицы: циклофосфамид, ифосфаид, трофорфамид и хлорамбуцил; нитрозомочевины: кармустин (Βί,’Νυ) и ломустин (ί.’ί.’Νυ); алкилсульфонаты: бусульфан и треосульфан; триазены: дакарбазин, прокарбазин и темозоломид; содержащие платину комплексы: цисплатин, карбоплатин, ароплатин и оксалиплатин.

В одном из вариантов осуществления алкилирующим агентом является дакарбазин. Дакарбазин может вводиться субъекту в дозах в интервале примерно от 150 мг/м² (площади поверхности тела субъекта) до примерно 250 мг/м². В еще одном варианте осуществления дакарбазин вводится внутривенно субъекту один раз в день в течение пяти последовательных дней в дозе в интервале от примерно 150 до примерно 250 мг/м².

В одном варианте осуществления алкилирующим агентом является прокарбазин. Прокарбазин может вводиться субъекту в дозах в интервале примерно от 50 мг/м² (площади поверхности тела субъекта) до примерно 100 мг/м². В еще одном варианте осуществления прокарбазин вводится внутривенно субъекту один раз в день в течение пяти последовательных дней в дозе в интервале примерно от 50 до примерно 100 мг/м².

В еще одном из вариантов осуществления алкилирующим агентом является темозолоамид. Темозолоамид может вводиться субъекту в дозах в интервале примерно от 150 мг/м² (площади поверхности тела субъекта) до примерно 200 мг/м². В еще одном варианте осуществления темозолоамид вводится животному орально один раз в день в течение пяти последовательных дней в дозе в интервале примерно от 150 до примерно 200 мг/м².

Примеры антимитотических агентов включают аллоколхицин, халихондрин В, колхицин, производные колхицина, долстастин 10, мэйтанзин, ризоксин, тиоколхицин и тритилцистеин.

Примером активируемого гипоксией соединением является тирапазамин.

Примеры ингибиторов протеамосома включают, но не ограничиваются ими, лактацистин, бортезомиб, эпоксомицин и пептидные альдегиды, такие как МС132, МС115 и Р8к

Примеры ингибиторов микротрубочек/микротрубочки-стабилизирующих агентов включают паклитаксел, сульфат виндезина, винкристин, винбластин, винорелбин, 3',4'-дидегидро-4'-дезокси-8'норвинкалеукобластин, доцетаксол, ризоксин, доластатин, изетионат мивобулина, ауристатин, цемадотин, КРК109881, ВМЕ184476, винфлунин, криптофицин, 2,3,4,5,6-пентафтор-№(3-фтор-4метоксифенил)бензолсульфонамид, ангидровинбластин, ^№диметил-Ь-валил-Ь-валил-№метил-Ьвалил-Ь-пролил-Ь-пролин-т-бутиламид, ΤΌΧ258, эпотилоны (см., например, патенты США № 6284781 и 6288237) и ВМ8188797.

Некоторыми примерами ингибиторов топоизомеразы являются топотекан, гикаптамин, иринотекан, лубитекан, эксатекан, гиметекан, дифломотекан, силилкамптотецины, 9-аминокамптотецин, камптотецин, криснатол, митомицин С, 6-этоксипропионил-3',4'-О-экзобензилиденхартреузин,

9-метокап-^№диметил-5-нитропиразоло[3,4,5-к1]акридин-2-(6Н)пропанамин, 1-амино-9-этил-5-фтор2,3-дигидро-9-гидрокси-4-метил-1Н,12Н-бензо[бе]пирано[3',4':Ь,7]индолизино[1,2Ь]хинолин-10,13(9Н,15Н)дион, луртотекан, 7-[2-(№изопропиламино)этил]-(208)камптотецин, В№1350, ΒΝΌ11100, ΒΝ80915, ΒΝ80942, этопозидфосфат, тенипозид, собузоксан, 2'-диметиламино-2'-дезоксиэтопозид, СЬ3 31, №[2-(диметиламино)этил]-9-гидрокси-5,6-диметил-6Н-пиридо [4,3-Ь]карбазол-1 -карбоксамид, азулакрин, (5а,5аВ,8аа,9Ь)-9-[2-[№[2-(диметиламино)этил]-№метиламино]этил]-5-[4-гидрокси-3,5диметоксифенил]-5,5а,6,8,8а,9-гексогидрофуро(3',4':6,7)нафто(2,3-б)-1,3-диоксол-6-он, 2,3-(метилендиоксит)-5-метил-7-гидрокси-8-метоксибензо[с]фенантридиний, 6,9-бис-[(2-аминоэтил)амино]бензо[д]изохинолин-5,10-дион, 5-(3-аминопропиламино)-7,10-дигидрокси-2-(2-гидроксиэтиламинометил)-6Н-пиразоло[4,5,1-бе]акридин-6-он, №[1-[2-(диэтиламино)этиламино]-7-метокси-9-оксо-9Н-тиоксантен-4-илметил]формамид, №(2-(диметиламино)этил)акридин-4-карбоксамид, 6-[[2-(диметиламино)этил]амино]-3гидрокси-7Н-индено[2,1-с]хинолин-7-он и димесна; некамптотециновые ингибиторы топоизомеразы, такие как индолокарбазолы; и двойные ингибиторы топоизомеразы-! и II, такие как бензофеназины,

- 14 016079

ХК20 115761ΜΕΝ 576 и бензопиридоиндолы.

В одном варианте осуществления ингибитором топоизомеразы является иринотекан. Иринотекан может вводиться субъекту в дозах в интервале примерно от 50 мг/м² (площади поверхности тела субъекта) до примерно 150 мг/м².

В еще одном варианте осуществления иринотекан вводится внутривенно субъекту один раз в день в течение пяти последовательных дней в дозе в интервале примерно от 50 до примерно 150 мг/м² в 1-5 дни, затем снова внутривенно один раз в день в течение пяти последовательных дней в 28-32 дни в дозе в интервале примерно от 50 до около 150 мг/м², затем снова внутривенно один раз в день в течение 5 последовательных дней в 55-59 дни в дозе в интервале примерно от 50 до около 150 мг/м².

Примеры ингибиторов митотических кинезинов и, в частности, митотического кинезина К8Р человека, описаны в публикациях заявок РСТ ГСО 01/30768, ГСО 01/98278, ГСО 02/056880, ГСО 03/050064, ГСО 03/050122, ГСО 03/049527, ГСО 03/049679, ГСО 03/049678, ГСО 03/039460, ГСО 03/079973, ГСО 03/099211, ГСО 2004/039774, ГСО 03/105855, ГСО 03/106417, ГСО 2004/087050, ГСО 2004/058700, ГСО 2004/058148 и ГСО 2004/037171 и заявках США 2004/132830 и 2004/132719. В одном варианте осуществления ингибиторы митотических кинозинов включают, но не ограничиваются ими, ингибиторы К8Р, ингибиторы МКЬР1, ингибиторы ΟΕΝΡ-Ε, ингибиторы МСАК, ингибиторы Κίί14, ингибиторы МрйокрЫ и ингибиторы КаЬ6-К1ЕЕ.

Ингибиторы киназы, вовлеченные в митотическое прогрессирование, включают, но не ограничиваются ими, ингибиторы авроракиназы, ингибиторы Ро1о-подобных киназ (РЬК) (в частности, ингибиторы РЬК-1), ингибиторы ЬиЬ-1 и ингибиторы ЬиЬ-К.1.

Антипролиферативные агенты включают антисмысловые РНК и ДНК олигонуклеотиды, такие как 03139, ОЭЖ>98. РУА8КРА8. ΟΕΜ231 и ΙΝΧ3001, и антиметаболиты, такие как эноцитабин, кармофур, тегафур, пентостатин, доксифлуридин, триметрексат, флударабин, капецитабин, галоцитабин, цитарабинокфосфат, гидрат фостеавиннатрия, ралтитрексед, палтитрексид, эмитефур, тиазофурин, децитабин, нолатрексед, пеметрексед, нелзарабин, 2'-дезокси-2'-метиоиденцитидин, 2'-фторметилен-2'дезоксицитидин, Ж[5-(2,3-дигидробензофурил)сульфонил]-Ы'-(3,4-дихлорфенил)мочевину, Ν6-[4дезокси-4-[№-[2(Е),4(Е)-тетрадекадиеноил]глициламино]-Е-глицеро-В-Е-манногептопиранозил]аденин, аплидин, эктеинасцидин, троксацитабин, 4-[2-амино-4-оксо-4,6,7,8-тетрагидро-3Н-примидино[5,4Ь][1,4]тиазин-6-(8)-этил]-2,5-тиеноил-Ь-глутаминовую кислоту, аминоптерин, 5-фторурацил, аланозин, 11-ацетил-8-(карбамоилоксиметил)-4-формил-6-метокси-14-окса-1,11-диазатетрацикло(7.4.1.0.0)тетрадека-2,4,6-триен-9-иловый эфир уксусной кислоты, швайнсонин, ломотрексол, дексразоксан, метиониназу, 2'-циано-2'-дезокси-Ы4-пальмитоил-1-В-О-арабинофукранозилцитозин и 3-аминопиридин-2карбоксиальдегидтиосемикарбазон.

Примеры терапевтических агентов, нацеленных на моноклональные антитела, включают такие терапевтические агенты, которые являются цитотоксическими агентами или радоизотопами, присоединяемыми к специфичным раковым клеткам или специфичным моноклональным антителам клеток мишени. Примеры включают Веххаг.

Ингибиторы НМО-СоА редуктазы относятся к ингибиторам 3-гидрокси-3-метилглутарил-СоА редуктазы. Примеры нгибиторов НМО-СоА редуктазы, которые могут использоваться, включают, но не ограничиваются ими, ловастатин (МЕУАСОК®; см. патенты США № 4231938, 4294926 и 4319039), симвастатин (2ОСОК®; см. патенты США № 4444784, 4820850 и 4916239), правастатин (РКАУАСНОЬ®; см. патенты США № 4346227, 4537859, 4410629, 5030447 и 5180589), флувастатин (ЬЕЗСОЬ®; см. патенты США № 5354772, 4911165, 4929437, 5189164, 5118853, 5290946 и 5356896) и аторвастатин (ЫРГГОК®; см. патенты США № 5273995, 4681893, 5489691 и 5342952). Структурные формулы данных и дополнительных ингибиторов НМО-СоА редуктазы, которые могут использоваться в данных способах, описаны на с. 87 публикации М. Уа1раш, Сйо1ек1его1 Ьо^шд Огидк, СйешГСгу & Гпбикйу, р. 85-89 (5 февраля 1996 г. и в патентах США № 4782084 и 4885314.

Термин ингибитор НМО-СоА редуктазы, используемый в данном описании, включает все фармацевтически приемлемые формы лактонов и открытых кислот (т.е. в которых лактоновое кольцо раскрывается с образованием свободной кислоты), а также солевые и эфирные формы соединений, которые обладают ингибирующей НМО-СоА редуктазу активностью, и, следовательно, применение таких солей, сложных эфиров, открытых-кислотных и лактоновых форм охватывается объемом данного изобретения.

Ингибитор пренил-протеин-трансферазы относится к соединению, которое ингибирует любой один фермент или любое сочетание ферментов пренил-протеин-трансферазы, включая фарнезилпротеин-трансферазу (ЕРТ-аза), геранилгеранил-протеин-трансферазу типа I (ООРТ-аза-Ι) и геранилгеранил-протеин-трансферазу типа II (ООРТ-аза-ΙΙ, называемая также КаЬ ООРТ-азой).

- 15 016079

Примеры ингибиторов пренил-протеин-трансферазы можно найти в следующих публикациях и патентах: АО 96/30343, АО 97/18813, АО 97/21701, АО 97/23478, АО 97/38665, АО 98/28980, АО 98/29119, АО 95/32987, патенты США № 5420245, 5523430, 5532359, 5510510, 5589485, 5602098, европейские патентные публикации 0618221, 0675112, 0604181, 0696593, АО 94/19357, АО 95/08542, АО 95/11917, АО 95/12612, АО 95/12572, АО 95/10514, патент США № 5661152, АО 95/10515, АО 95/10516, АО 95/24612, АО 95/34535, АО 95/25086, АО 96/05529, АО 96/06138, АО 96/06193,

АО 96/16443, АО 96/21701, АО 96/21456, АО 96/22278, АО 96/24611, АО 96/24612, АО 96/05168,

АО 96/05169, АО 96/00736, патент США № 5571792, АО 96/17861, АО 96/33159, АО 96/34850, АО 96/34851, АО 96/30017, АО 96/30018, АО 96/30362, АО 96/30363, АО 96/31111, АО 96/31477,

АО 96/31478, АО 96/31501, АО 97/00252, АО 97/03047, АО 97/03050, АО 97/04785, АО 97/02920,

АО 97/17070, АО 97/23478, АО 97/26246, АО 97/30053, АО 97/44350, АО 98/02436 и патенте США № 5532359. Например, что касается роли ингибитора пренил-протеин-трансферазы на ангиогенез, см. Еигореап 1. ОТ Сапсег (1999), 35(9), 1394-1401.

Термин ингибиторы ангиогенеза относится к соединениям, которые ингибируют образование новых кровеносных сосудов независимо от механизма. Примеры ингибиторов ангиогенеза включают, но не ограничиваются ими, ингибиторы тирозинкиназы, такие как ингибиторы рецепторов тирозинкиназы Р1!-1 (УЕОРВ1) и Р1к-1/КЭВ (УЕОРВ2), ингибиторы факторов роста эпидермального происхождения, фибробластного или тромбоцитного происхождения, ингибиторы ММР (ингибиторы матриксной металлопротеазы), блокаторы интегрина, интерферон-α, интерлейкин-12, пентозанполисульфат, ингибиторы циклооксигеназы, включая нестероидные противовоспалительные средства (ΝδΆΓΟ), такие как аспирин и ибупрофен, а также селективные ингибиторы циклооксигеназы-2, такие как целекоксиб и рофекоксиб (ΡΝΆ8 (1992), 89:7384; № (1982), 69:475; Лгсй. Ор1йа1то1. (1990), 108:573; Лпа1. Вес. (1994), 238:68; РЕВ8 Ьебегк (1995), 372:83; С1ш. Оййор. (1995), 313:76; 1. Мо1. Епбосгто1. (1996), 16:107; 1рп. 1. Рйагтасо1. (1997), 75:105; Сапсег Век. (1997), 57:1625 (1997); Се11 (1998), 93:705; М. £). Мо1. Меб. (1998), 2:715; 1. Вю1. Сйет. (1999), 274:9116)), стероидные противовоспалительные средства (такие как кортикостероиды, минералокортикоиды, дексаметазон, преднизон, преднизолон, метилпред, бетаметазон), карбоксиамидотриазол, комбрестатин а-4, скваламин, 6-О-хлорацетилкарбонил)фумагиллол, талидомид, ангиостатин, тропонин-1, антагонисты ангиотензина II (см. 1. ЬаЬ. С1т. Меб. (1985), 105:141-145) и антитела к УЕОР (см. ΝηΙιιΐΌ В1о1йесйпо1оду (1999), 17:963-968; К1т е! а1. (1993), ΝπΙιιιό. 362:841-844 АО 00/44777; и АО 00/61186).

Другие терапевтические агенты, которые модулируют или ингибируют ангиогенез и также могут применяться в комбинации с соединениями данного изобретения, включают агенты, которые модулируют или ингибируют коагуляцию и системы фибринолиза (см. обзор в С1т. Сйет. Ьа. Меб. (2000), 38:679692). Примеры таких агентов, которые модулируют или ингибируют коагуляцию и пути фибринолиза, включают, но не ограничиваются ими, гепарин (см. ТйготЬ. Наеток!. (1998), 80:10-23), низкомолекулярные гепарины и ингибиторы карбоксипептидазы и (известные также как ингибиторы активируемого активным тромбином ингибитора фибринолиза [ТАРЫ]) (см. ТйготЬоык Век. (2001), 101:329-354). Ингибиторы ТАРЫ описаны в публикации РСТ АО 03/013526 и заявке США № 60/349925 (поданной 18 января 2002 г.).

Агенты, которые мешают или препятствуют контрольным точкам клеточного цикла, относятся к соединениям, которые ингибируют протеинкиназы, которые преобразовывают сигналы контрольной точки клеточного цикла, сенсибилизируя, тем самым, раковые клетки к ДНК повреждающим агентам. Такие агенты включают ингибиторы АТВ, АТМ, С11В1 и С11к2 киназы и ингибиторы сбк и сбс киназы, и конкретными примерами их являются 7-гидроксистауроспорин, стауроспорин, флавопиридол, СУС202 (циклацель) и ВМ8-387032.

Ингибиторы клеточной пролицерации и сигнального пути выживания относятся к фармацевтическим агентам, которые ингибируют рецепторы клеточной поверхности и каскады сигнальной трансдукции вниз по потоку рецепторов поверхности. Такие агенты включают ингибиторы ингибиторов ЕОРВ (например, гефитиниб и эрлотиниб), ингибиторы ЕВВ-2 (например, трастузумаб), ингибиторы ЮРВ (например, ингибиторы, описанные в АО 03/059951), ингибиторы цитокиновых рецепторов, ингибиторы МЕТ, ингибиторы Р13К (например, ЬУ294002), серин/треонинкиназы (включая, но не ограничиваясь ими, ингибиторы Ак!, такие как описано в АО 03/086404, АО 03/086403, АО 03/086394, АО 03/086279, АО 02/083675, АО 02/083139, АО 02/083140 и АО 02/083138), ингибиторы ВаТ киназы (например, ВАУ-43-9006), ингибиторы МЕК (например, 6.4-1040 и ΡΌ-098059) и ингибиторы тТОВ (например, Ауе111 ССГ-779 и Апаб АР23573). Такие агенты включают ингибирующие соединения с малой молекулой и антагонисты антител.

Индуцирующие апоптоз агенты включают активаторы членов семейства ТNР рецепторов (включая ТВАШ рецепторы).

В одном варианте осуществления соединения настоящего изобретения полезны при лечении рака в комбинации с одним или более, в частности одним, двумя или тремя, агентами, выбранными из темозоломида, цисплатина, карбоплатина, оксалиплатина, иринотекано и топотекана.

- 16 016079

Соединения данного изобретения могут быть полезны при лечении рака в комбинации с любым одним или несколькими следующими терапевтическими агентами: абареликс (Р1епах1к беро!®); альдеслейкин (Ргокше®); альдеслейкин (Рго1еикш®); алемтозумаб (Сатра111®); алитретиноин (РаигеБи®); аллопуринол (УуЗорпт®); альтретамин (Неха1еп®); амифостин (Е(Ъуо1®); анастрозол (Антибех®); триоксид мышьяка (Тпкепох®); аспарагиназа (Е1краг®); азацитидин (У1баха®); бевакузимаб (Ауакбп®); бексаротен в капсулах (Тагдге(ш®); бексаротен гель (Тагдгебп®); блеомицин (В1епохате®); бортезомиб (Уе1сабе®); бусульфан внутривенный (Вики1Гех®); бусульфан оральный (Му1егап®); калустерон (МеШокагЬ®); капецитабин (Хе1оба®); карбоплатин (Рагар1а1ш®); кармустин (ВСNυ®, ВКАи®); кармустин (С11абе1®); кармустин с полифепрозаном 20 Имплантат (С11абе1 АаГег®); целекоксиб (Се1еЬгех®); цетуксимаб (ЕгЬйих®); хлорамбуцил (Ьеикегап®); цисплатин (Р1а(шо1®); кладрибин (Ьеик1а11п®,

2-СбА®); клофарабин (С1о1аг®); циклофосфамид (СуЮхап®. №окаг®); циклофосфамид (СуЮхап [п_|ес(1оп®); циклофосфамид (СуЮхап в таблетках®); цитарабин (СуЮкаг-υ®); цитарабин в липосомах (ОероСу!®); дакарбазин (ОПС-Эопче®); дактиномицин, актиномицин Ό (Соктедеп®); дарбепоетин альфа (Агапекр®); даунорубицин в липосомах (ЭаипоХоте®); даунорубицин, дауномицин (ОацпогцЫсш®); даунорубицин, дауномицин (СегиЫбше®); денлейкин дифтитокс (Оп(а1®); дексразоксан ^шесагб®); доцетаксел (ТахоЮге®); доксорубицин (Абпатусю РР8®); доксорубицин (Абпатусш®, КиЬех®); доксорубицин (Абпатусш РР8 для инъекции®); доксорубицин в липосомах (ЭохП®); дромостанолонпропионат (Пгото8(апо1опе®); дромостанолонпропионат (Мак1егопе для инъекций®); раствор еллиотта В (Е11ю1'к В 8о1ц(юп(®); эпирубицин (Е11епсе®); эпоетин альфа (еродеп®); эрлотиниб (Тагсеуа®); этамустин (Етсу!®); этопозидфосфат (ЕЮрорНок®); этопозид, УР-16 (Уерек1б®); эксеместан (Аготакт®); филграстим (№иродеп®); флоксуридин (внутриартериальный) (ΡυΌΚ®); флударабин (Р1ибага®); фторурацил, 5-Ρυ (АбгисП®); фулвестрант (Рак1обех®); гефитиниб (Кекка®); гемцитабин (Сетхаг®); гемтузумаб озогамицин (Му1о(аг®); гозерелинацетат ^о1абех Ттр^!®); гозерелинацетат ^о1абех®); гистрелинацетат (Н1к(ге1ш Ш1р1ап1®); гидроксимочевина (Нубгеа®); ибритумомаб тиуксетан ^еуаИп®); идарубицин (Шатусш®); ифосфамид ЦРЕХ®); иматинибмезилат (С1ееуес®); интерферон альфа 2а (КоГегоп А®); интерферон альфа 2Ь (Югоп А®); иринотекан (СатрЮкаг®); леналидомид (Кеу11т1б®); летрозол (Ретага®); лейковорин (Ае11соуогш®) Ьеисоуогш®); лейпролидацетат (ЕНдагб®); левамизол (Егдат1ко1®); ломустин, ΟΟΝυ (СееВи®); меклоретамин, азотная горчица (Мик(агдеп®); мегестролацетат (Медасе®); мелфалан, Ь-РАМ (А1кегап®); меркаптопурин, 6-МР (Риппе11ю1®); месна (Мекпех ®); месна (Мекпех !аЬк®); метотресат (Ме11ю1геха1е®); метоксален (Шабех®); митомицин С (МШатусш®); митотан (Ьукобгеп®); митоксантрон (№уап1гопе®); нандролон фенпропионат (ПцгаЬо1ш-50®); неларабин (Аггапоп®); нофетумомаб (Уег1ита®); опрелвекин (№итеда®); оксалиплатин (Е1охаРп®); паклитаксел (Рахепе®); паклитаксел (Тахо1®); паклитакселпротеинсвязанные частицы (АЬгахапе®); палифермин (Кер1уапсе®); памидронат (Агеб1а®); пегадемаза (Абадеп (Редабетаке бычья)®); пегаспаргаза (Опсакраг®); пегфилграстим (№и1ак(а®); пеметрексед двунатриевый (А1шИа®); пентостатин (№реп1®); пипоброман (УегсуЮ®); пликамицин, митрамицин (МйРгасш®); портимер натриевый (РНоЮГпп®); прокарбазин (Ма1п1апе®); хинакрин (А(аЬпЬе®); расбуриказа (Е1йек®); ритуксимаб (Кйихап®); сарграмостин (Ьеикше®); сарграмостим (Ргокше®); сорафениб (№хауаг®); стрептозоцин ^апокаг®); сунитинибмалеат (8п1еп1®); тальк (8с1егоко1®); тамоксифен (№кабех®); темозоломид (Тетобаг®); тенипозид, УМ-26 (Уитоп®); тестолактон (Тек1ас®); тиогуанин, 6-ТС (ТЫодиапше®); тиотепа (ТЫор1ех®); топотекан (Нусатбп®); торемифен (РагекЮп®); тозитумомаб (Веххаг®); тозитутомомабЛ-131 тозитумомаб (Веххаг®); трастузумаб (Негсербп®); третиноин, АТКА (Уекапо1б®); урациловая горчица (игасй Мпк1агб в капсулах®); валрубицин (Уа1к!аг®); винбластин (Уе1Ьап®); винкристин (Опсоуш®); винорелбин (№1уе1Ьте®); вориностат ^о1шха®); золдронат ^оте(а®); нилотиниб (Так1дпа®) и дасатиниб (8ргусе1®).

Изобретение охватывает также комбинации с ЖАЮ, которые являются селективными ингибиторами СОХ-2. Для целей данного изобретения МАЮ, которые являются селективными ингибиторами СОХ-2, определяются как №АШ, которые обладают специфичностью в отношении ингибирования СОХ-2 по сравнению с СОХ-1 по меньшей мере 100-кратной, измеренной по степени Ю₅₀ в отношении СОХ-2 по сравнению с Ю₅₀ в отношении СОХ-1, оцененной с помощью клеточного или микросомного анализа. Такие соединения включают, но не ограничиваются ими, соединения, раскрытые в патентах США № 5474995, 5861419, 6001843, 6020343, 5409944, 5436265, 5536752, 5550142, 5604260, 5698584, 5710140, АО 94/15932, 5344991, 5134142, 5380738, 5393790, 5466823, 5633272 и 5932598, все из которых включены в данное описание посредством ссылки.

Ингибиторами СОХ-2, которые особенно полезны в данном способе лечения, являются 5-хлор-3-(4метилсульфонил)фенил-2-(2-метил-5-пиридинил)пиридин или его фармацевтически приемлемая соль.

Соединения, которые описаны в качестве специфичных ингибиторов СОХ-2 и, следовательно, полезны в настоящем изобретении, включают, но не ограничиваются ими, парекоксиб, СЕЬЕВКЕХ® и ВЕХТКА® или его фармацевтически приемлемую соль.

- 17 016079

Другие примеры ингибиторов ангиогенеэа включают, но не ограничиваются ими, эндостатин, украин, ранпимазу, ΙΜ862, 5-метокси-4-[2-метил-3-(3-метил-2-бутенил)оксиранил]-1-оксаспиро[2,5]окт6-ил(хлорацетил)карбамат, ацетилдинаналин, 5-амино-1-[[3,5-дихлор-4-(4-хлорбензоил)фенил]метил]1Н-1,2,3-триазол-4-карбоксамид, СМ101, скваламин, комбретастатин, КР14610, ΝΧ31838, сульфатированный маннопентаозфосфат, 7,7-(карбонил-бис-[имино-№метил-4,2-пирролокарбонилимино[№метил4,2-пиррол]карбонилимино]-бис-(1,3-нафталиндиеульфонат) и 3-[(2,4-диметилпиррол-5-ил)метилен]-2индолинон (8И5416).

Используемый выше термин блокаторы интегрина относится к соединениям, которые селективно антагонизируют, ингибируют или противодействуют связыванию физиологического лиганда с α_νβ₃ интегрином, с соединениями, которые селективно антагонизируют, ингибируют или противодействуют связыванию физиологического лиганда с α_νβ₅ интегрином, к соединениям, которые селективно антагонизируют, ингибируют или противодействуют связыванию физиологического лиганда как с α_νβ₃, так и с α_νβ₅ интегрином, и к соединениям, которые антагонизируют, ингибируют или противодействуют активности конкретного интегрина(интегринов), экспрессируемых в капиллярных эндотелиальных клетках. Данный термин относится также к антагонистам α_νβ₆, α_νβ₈, α₁β₁, α₂βι, α₅βι, α₆βι и α₆β₄ интегринов. Данный термин относится также к антагонистам любого сочетания, α_νβ₃, α_νβ₅, α_νβ₆, α_νβ₈, αιβι, α₂βι, α₅βι, α₆βι и α₆β₄ интегринов.

Некоторые конкретные примеры ингибиторов тирозинкиназы включают №(трифторметилфенил)-5-метилизоксазол-4-карбоксамид,

3- [(2,4-диметилпиррол-5-ил)метилиденил]индолин-2-он, 17-(аллиламино)-17-деметоксигелданамицин,

4- (3-хлор-4-фторфениламино)-7-метокси-6-[3-(4-морфолинил)пропоксил]хиназолин, N-(3 -этинилфенил)-6,7-бис(2-метоксиэтокси)-4-хиназолинамин,

ΒΙΒΧ1382,

2,3,9,10,11,12-гексагидро-10-(гидроксиметил)-10-гидрокси-9-метил-9,12-эпокси-1Н-дииндоло[1,2,3£д:3',2',1'-к1]пирроло [3,4-ί][1,6]-бензодиазоцин-1 -он,

8Н268, генистеин, 8ΤΙ571, СЕР2563, 4-(3-хлорфениламино)-5,6-диметил-7Н-пирроло[2,3-б]пиримидинметансульфонат, 4-(3-бром-4-гидроксифенил)амино-6,7-диметоксихиназолин, 4-(4'-гидроксифенил)амино-6,7-диметоксихиназолин, 8И6668,

8ΤΙ571Ά, №4-хлорфенил-4-(4-пиридилметил)-1-фталазинамин и

ЕМО121974.

В одном из вариантов осуществления соединения настоящего изобретения являются полезными при лечении или предотвращении появления некроза, индуцируемого селективными №-аденинметилирующими агентами, такими как МеО8О₂(СН₂)-лекситропсин (Ме-Ьех).

Комбинации с соединениями, иными чем противораковые соединения, также охватываются данными способами. Например, комбинации соединений настоящего изобретения с РРАК-γ (т.е. РРАК-гамма) агонистами и РРАК-δ (т.е. РРАК-дельта) агонистами полезны при лечении некоторых злокачественных опухолей. РРАК-γ и РРАК-α являются пероксисом-пролифератор-активируемыми рецепторами γ и α. Об экспрессии РРАК-γ в эндотелиальных клетках и его вовлечении в ангиогенез сообщалось в литературе (см. I. Сагбюуакс. Ркагтасо1. (1998), 31:909-913; I. Вю1. Скет. (1999), 274:9116-9121; 1пуе8!. ОрЫЬа1то1. У18. 8сг (2000), 41:2309-2317). Несколько позднее было показано, что РРАК-γ ингибирует ангиогенную ответную реакцию на УЕОР ίη νίΙΐΌ и троглитазон, и росиглитазонмалеат ингибирует развитие ретинальной неоваскуляризации у мышей. (Аск. Ор11111а1то1. (2001), 119:709-717). Примеры РРАК-γ агонистов и РРАК-γ/α агонистов включают, но не ограничиваются ими, тиазолидиндионы (такие как ОКР2725, С8-011, троглитазон, росиглитазон и пиоглитазон), фенофибрат, гемфиброзил, клофибрат, СА2570, 8В219994, АК-Н039242, ΤΤΤ-501, МСС-555, ОА2331, ОА409544, NN2344, ККР297, №0110, ПКР4158, ΝΝ622, ΟΙ262570, РNυ182716, ОКР552926, 2-[(5,7-дипропил-3-трифторметил-1,2-бензизоксазол-6ил)окси]-2-метилпропионовую кислоту (описана в υδδΝ 09/782856) и 2(К)-7-(3-(2-хлор-4-(4фторфенокси)фенокси)пропокси)-2-этилхроман-2-карбоновую кислоту (описана в υδδΝ 60/235708 и 60/244697).

Еще одним вариантом осуществления данного изобретения является применение описанных в настоящем изобретении соединений в комбинации с противовирусными агентами (такими как аналоги нуклеозида, включающие ганцикловир, для лечения рака. См. АО 98/04290.

Еще одним вариантом осуществления данного изобретения является применение описанных в настоящем изобретении соединений в комбинации с генной терапией для лечения рака. Что касается обзора генетических методов подхода к лечению рака, см. На11 е! а1. (Ат. I. Нит. Оепе!. (1997), 61:787-789) и Ки£е е! а1. (Сапсег Мебюте, 5^4Ь Еб., р. 876-889, ВС Эескег, НатШоп 2000). Генная терапия может использоваться для доставки любого подавляющего опухоль гена. Примеры таких генов включают, но не ограничиваются ими, р53, который может доставляться с помощью переноса гена, опосредуемого рекомбинантным вирусом (см., например, патент США № 6069134), иРА/иРАК антагонист (Абепоу1ги8-Меб1а!еб

- 18 016079

Оейуегу о£ а иРА/иРАВ Ап!адошй Апдюдепеык-Эерепйеп! Титог Сго\\И1 αηά Оккеттайоп ίη Мюе, Сепе Ткегару, Аидий (1998), 5(8):1105-13), и интерферон гамма (1. 1ттипо1. (2000), 164:217-222).

Соединения данного изобретения также могут вводиться в комбинации с ингибитором врожденной или свойственной множественной лекарственной устойчивости (МЭВ), в частности МЭВ, ассоциированного с высокими уровнями экспрессии белков переносчиков. Такие МЭВ ингибиторы включают ингибиторы р-гликопротеина (Р-др), такие как ЬУ335979, ХВ9576, ОС144-093, В101922, УХ853, верапамил и Р8С833 (валсподар).

Соединение настоящего изобретения может применяться в комбинации с противорвотными агентами для лечения тошноты или рвоты, включая острую задержанную, в поздней фазе и упреждающую рвоту, которая может быть результатом применения соединения настоящего изобретения, как такового или с радиационной терапией. Для предотвращения или лечения рвоты соединение настоящего изобретения может применяться в комбинации с другими противорвотными агентами, особенно антагонистами рецептора нейрокинина-1, антагонистами рецептора 5НТ3, такими как онданосетрон, гранисетрон, трописетрон и затисетрон, САВА_в, агонистами рецепторов, такими как баклофен, кортикостериодами, такими как декадрон (дексаметазон), кеналог, аристокорт, назалид, преферид, бенекортен или другие, такие как раскрыто в патентах США № 2789118, 2990401, 3048581, 3126375, 3929768, 3996359, 3928326 и 3749712, антидопаминергическим агентом, таким как фенотиазины (например, прохлорперазин, флуфеназин, тиоридазин и мезоридазин), метоклопрамидом или дронабинолом. В одном из вариантов осуществления противорвотный агент, выбранный из антагониста рецептора нейрокинина-1, антагониста рецептора 5НТ3 и кортикостероида, вводят в качестве адъюванта для лечения или предотвращения рвоты, которая может быть результатом введения рассматриваемых соединений.

Антагонисты рецептора нейрокинина-1 для применения в комбинации с соединениями настоящего изобретения полностью описаны, например, в патентах США № 5162339, 5232929, 5942930, 5373003, 5387595, 5459270, 5494926, 5496833, 5637699, 5719147; европейских патентных публикациях ЕР 0360390, 0394989, 0428434, 0429366, 0430771, 0436334, 0443132, 0482539, 0498069, 0499313, 0512901, 0512902, 0514273, 0514274, 0514275, 0514276, 0515681, 0517589, 0520555, 0522808, 0528495, 0532456, 0533280, 0536817, 0545478, 0558156, 0577394, 0585913,0590152, 0599538, 0610793, 0634402, 0686629, 0693489, 0694535, 0699655, 0699674, 0707006, 0708101, 0709375, 0709376, 0714891, 0723959, 0733632 и 0776893; 92/01688, 93/00331, 93/18023, 94/03429, 94/10170, 94/26740, 95/14017, 95/23798, 96/07649, 96/31214, 97/19084,

2269590, 2271774, 2292144, 2293168, 2293169 и 2302689. Получение таких соединений полностью описано в приведенных выше патентах и публикациях, которые включены в данное описание посредством ссылки.

международных патентных публикациях 92/06079, 93/01159, 93/19064, 94/03445, 94/11368, 94/29309, 95/15311, 95/26338, 96/10562, 96/32385,

97/19942 и 97/21702

92/12151,

93/01165,

93/21155,

94/04494,

94/13639,

95/02595,

95/16679,

95/28418,

96/16939,

96/37489,

92/15585,

93/01169,

93/21181,

94/04496,

94/13663,

95/04040,

95/17382,

95/30674,

96/18643,

97/01553, и в британских патентных публикациях № 2266529, 2268931, 2269170,

92/17449,

93/01170,

93/23380,

94/05625,

94/14767,

95/04042,

95/18124,

95/30687,

96/20197,

97/01554,

РСТ \\Ό

92/20661,

93/06099,

93/24465,

94/07843,

94/15903,

95/06645,

95/18129,

95/33744,

96/21661,

97/03066,

90/05525, 92/20676, 93/09116, 94/00440, 94/08997, 94/19320, 95/07886, 95/19344, 96/05181, 96/29304, 97/08144,

90/05729, 92/21677, 93/10073, 94/01402, 94/10165, 94/19323, 95/07908, 95/20575, 96/05193, 96/29317, 97/14671,

91/09844, 92/22569, 93/14084, 94/02461, 94/10167, 94/20500, 95/08549, 95/21819, 96/05203, 96/29326, 97/17362,

91/18899,

93/00330,

93/14113,

94/02595,

94/10168,

94/26735,

95/11880,

95/22525,

96/06094,

96/29328,

97/18206,

В одном из вариантов осуществления антагонист рецептора нейрокинина-1 для применения в комбинации с соединениями настоящего изобретения выбирают из 2-(В)-(1-(В)-(3,5-бис(трифторметил)фенил)этокси)-3-(8)-4-фтофенил)-4-(3-(5-оксо-1Н,4Н-1,2,4-триазоло)метил)морфолина или его фармацевтически приемлемой соли, который описан в патенте США № 5719147.

Соединение данного изобретения также может вводиться с агентом, применяемым при лечении анемии. Таким агентом лечения анемии является, например, активатор рецептора непрерывного эйтропоэза (такой как эпоетин альфа).

Соединение данного изобретения также может вводиться с агентом, применяемым при лечении нейтропении. Таким агентом лечения нейтропении является, например, гематопоэтический фактор роста, который регулирует продуцирование и функцию нейтрофилов, такой как фактор, стимулирующий гранулоцитную колонию человека, (С-С8Е). Примеры С-С8Е включают филграстим.

Соединение данного изобретения также может вводиться с усиливающим иммунологию лекарственным средством, таким как левамизол, изопринозин и задаксин.

Соединение данного изобретения также может быть полезным при лечении или предотвращении рака, включая рак костей, в комбинации с бисфосфонатами (следует понимать, что они включают бисфосфонаты, дифосфонаты, бисфосфоновые кислоты и дифосфоновые кислоты). Примеры бисфосфонатов включают, но не ограничиваются ими, этидронат (дидронел), памидронат (аредия), алендронат (фосамакс), ризедронат (актонель), золедронат (зомета), ибандронат (бонива), инкадронат или цимадронат, клодронат, ЕВ-1053, минодронат, неридронат, пиридронат и тилудронат, включая любые и все их фар- 19 016079 мацевтически приемлемые соли, производные, гидраты и их смеси.

Таким образом, объем данного изобретения охватывает применение соединений настоящего изобретения в комбинации с ионизирующими радиацию и/или в комбинации с еще одним соединением, выбранным из ингибиторов НОЛС. модуляторов эстрогенового рецептора, модулятора андрогенового рецептора, модулятора ретиноидного рецептора, циктотоксического/цитостатического агента, антипролиферативного агента, ингибитора пренил-протеин-трансферазы, ингибитора НМС-СоА редуктазы, ингибитора ангиогенеза, агониста ΡΡΑΚ.-γ, агониста ΡΡΑΚ.-5 и противовирусного агента, ингибитора свойственной устойчивости к множественному лекарственному средству, противорвотного агента, агента, применяемого при лечении анемии, агента, применяемого при лечении нейтропении, усиливающего иммунологию лекарственного средства, ингибитора клеточной пролиферации и сигнализации выживания, агента, который препятствует контрольной точке клеточного цикла, индуцирующего апоптоз агента и бисфосфоната.

Термин введение и его варианты (например, введение соединения) применительно к соединению изобретения означает введение соединения или пролекарства данного соединения в систему животного, нуждающегося в таком лечении. Когда соединение изобретения или его пролекарство предоставляется в комбинации с одним или несколькими другими активными агентами (например, цитотоксическим агентом и пр.), следует понимать, что каждый из терминов введение и его варианты включают параллельное или последовательное введение соединения или его пролекарства и других агентов.

Имеется в виду, что используемый в данном описании термин композиция охватывает продукт, содержащий конкретно указанные ингредиенты в оговоренных количествах, а также любой продукт, который является результатом, прямо или косвенно, комбинации указанных ингредиентов в указанных количествах.

Термин терапевтически эффективное количество, используемый в данном описании, означает, что количество активного соединения или фармацевтического агента, которое вызывает биологическую или медицинскую ответную реакцию в ткани, системе, животном или человеке, которое подобрано исследователем, ветеринаром, медицинским врачом или другим клиницистом.

Термин лечение относится к лечению млекопитающего, страдающего от патологического состояния, и относится к действию, которое облегчает данное состояние путем уничтожения раковых клеток, а также действие, которое приводит в результате к ингибированию прогрессирования данного состояния, и включает снижение скорости прогресса, остановку прогрессирования, улучшение состояния и излечение от патологического состояния. В изобретение также включено лечение в качестве профилактической меры (т.е. профилактика).

Термин фармацевтически приемлемый, используемый в данном описании, касается соединений, материалов, композиций и/или дозированных форм, которые являются с учетом суждений медиков подходящими для применения в контакте с тканями субъекта (например, человека) без избыточной токсичности, раздражения, аллергической ответной реакции или других проблем или осложнений, соразмеримыми с разумным соотношением польза/риск. Каждый носитель, эксципиенты и пр. также должны быть приемлемыми в смысле совместимости с другими ингредиентами рецептурной формы.

Термин дополнительный или дополнение относится к применению соединений в комбинации с известными терапевтическими средствами. Такие средства включают цитотоксические режимы лекарственных средств и/или ионизирующую радиацию, используемые при лечении различных типов рака. В частности, известно, что активные соединения потенцируют действия ряда химиотерапевтических средств для лечения рака, которые включают класс ядов топоизомеразы (например, топотекан, иринотекан, рубитекан), большинство известных алкилирующих агентов (например, ЭТЮ темозоламид) и лекарственные средства на основе платины (например, карбоплатин, цисплатин), используемых в лечении рака.

В объем пунктов формулы изобретения также включен способ лечения рака, который включает введение терапевтически эффективного количества соединения формулы (I) в комбинации с радиационной терапией и/или в комбинации с соединением, выбранным из ингибиторов НОАС, модулятора эстрогенового рецептора, модулятора андрогенового рецептора, модулятора ретиноидного рецептора, цитотоксического/цитостатического агента, антипролиферативного агента, ингибитора пренил-протеинтрансферазы, ингибитора НМС-СоА редуктазы, ингибитора ангиогенеза, агониста ΡΡΑΒ-γ, агониста РРАК.-5, противовирусного агента, ингибитора свойственной устойчивости к множественному лекарственному средству, противорвотного агента, агента, полезного при лечении анемии, агента, полезного при лечении нейтропении, усиливающего иммунологию лекарственного средства, ингибитора клеточной пролиферации и сигнализации выживания, агента, который препятствует контрольной точке клеточного цикла, индуцирующего апоптоз агента и бисфосфоната.

Данные и другие аспекты изобретения будут очевидны из описания, представленного ниже.

- 20 016079

Сокращения, используемые в химической части описания и в примерах, являются следующими: АсС1 - ацетилхлорид;

(ΒζΟ)₂ - бензоилпероксид;

СЬх-С1 - бензилхлорформиат;

ЭСМ - дихлорметан;

ΌΓΡΕΑ - диизопропилэтиламин;

ДМФА - диметилформамид;

ДМСО - диметилсульфоксид;

экв. - эквивалент;

Е8 - электрораспыление;

Е1ОАс - этилацетат;

Е1ОН - этанол;

мол. сита - молекулярные сита;

НАТи - гексафторфосфат О-(7-азабензотриазол-1-ил)-Ы,Ы,Ы',Ы'-тетраметилурония;

МеСЫ - ацетонитрил;

МеОН - метанол;

МС - масс-спектрометрия;

М\У - микроволновое облучение;

ΝΒ8 - Ν-бромсукцинимид;

ΝΜΜΟ - Ν-метилморфолин-Ы-оксид;

ЯМР - ядерный магнитный резонанс;

Рсо1 - давление колонки;

1РгОН - изопропанол;

КТ или к.т. - комнатная температура;

нас. вод. - насыщенный водный;

8ίΟ₂ - силикагель;

ТГФ - тетрагидрофуран;

ΐ-ВиОН - трет-бутанол;

КОАс - ацетат калия;

КТ КОШТЕ® 8РЕ колонка 8СХ - Международная сорбентная технология КОШТЕ® катионообменная смола экстракционной колонки в твердой фазе;

8ЕС - сверхкритическая жидкостная хроматография;

ТВТИ - тетрафторборат О-(1Н-бензотриазол-1-ил)-Ы,Ы,Ы',Ы'-тетраметилурония;

Тсо1 - температура колонки;

СЭС1₃ - дейтерированный хлороформ;

ТСХ - тонкослойная хроматография и

ТФУК - трифторуксусная кислота.

Соединения формулы (I) могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы ДА) с аммиаком

где В¹ и К² имеют значения, определенные выше;

К^х представляет С1_-балкил, такой как метил.

Реакцию обычно осуществляют с использованием водного раствора ЫН₃ в растворителе, таком как ТГФ, примерно при 70°С, в герметизированном реакционном сосуде (с осторожностью).

Альтернативно, может добавляться основание, такое как ЫаОН или КОН, для гидролиза сложного эфира в соответствующую карбоновую кислоту (В^х представляет водород), с последующим добавлением ЫН₃ в присутствии конденсирующих агентов, таких как НАТИ или ТВТИ и ОГРЕА в растворителе, таком как ДМФА, причем реакцию осуществляют примерно при комнатной температуре. Альтернативно, карбоновая кислота может быть активирована с образованием смешанного ангидрида, например с использованием Вос2О и последующим взаимодействием с бикарбонатом аммония, обычно в растворителе, таком как пиридин. Альтернативно, сложный эфир может быть преобразован в соединения формулы ДА) с использованием аммиака в растворителе, таком как МеОН, примерно при 120°С, например, при М\У.

Атом азота в пиперидиновом кольце соединений формулы ДА) может быть защищен во время описанного выше синтеза, например, группой Вос.

- 21 016079

Соединения формулы (ΙΑ) могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы (ΙΒ) с азидом

где Я¹, Я² и Я^х имеют значения, определенные выше.

Азид, такой как ΝαΝ₃. обычно можно использовать в растворителе, таком как ДМФА, примерно от 90 до 140°С. Можно использовать также добавку, такую как 2,6-лутидин. Реакцию можно осуществлять в атмосфере азота.

Соединения формулы (ΙΒ) могут быть получены путем конденсации соединения формулы (1С) с соединением формулы (ΙΌ)

где Я¹, Я² и Я^х имеют значения, определенные выше;

Ь¹ представляет уходящую группу, такую как нитро или галоген, например фтор.

Методики включают конденсацию в присутствии дегидратирующего агента, такого как Мд§0₄ или молекулярные сита, или при нагревании в спиртовом растворителе, таком как этанол, при кипячении с обратным холодильником. Реакцию можно осуществлять в атмосфере азота.

Соединение формулы (1С) может быть получено окислением соединения формулы (ΙΕ) окисляющим агентом, таким как ΝΜΜΟ

где Я¹, Я^х и Ь¹ имеют значения, определенные выше;

Ь² представляет уходящую группу, такую как галоген, например бром, обычно в растворителе, таком как МеС^ примерно при комнатной температуре.

Реакцию можно осуществлять в атмосфере азота.

Соединения формулы (ΙΕ), где Ь₂ представляет бром, могут быть получены окислением соединения формулы (ΙΕ) бромирующим агентом, таким как ΝΒ8, в присутствии инициатора радикалов, такого как бензоилпероксид

где Я¹, Я^х и Ь¹ имеют значения, определенные выше, обычно в растворителе, таком как СС1₄, при кипячении с обратным холодильником.

Реакцию можно осуществлять в атмосфере азота.

Соединения формулы (ΙΕ), где Ь¹ представляет фтор, могут быть получены путем диазотирования соединения формулы (Ю)

где Я¹ и Я^х имеют значения, определенные выше, с последующим разложением промежуточной диазониевой соли.

- 22 016079

Например, диазотирование можно осуществлять с использованием тетрафторбората нитрозония в растворителе, таком как ЭСМ, примерно при 0°С. Соответствующую тетрафторборатную соль диазония можно затем выделить с последующим разложением при повышенных температурах на соответствующее производное фторбензола (осторожно), таким образом, как нагревание до 160°С в растворителе, таком как дихлорбензол.

Соединение формулы (ΙΕ), где Ь¹ представляет нитро, может быть получено нитрованием соединения формулы (ΙΗ)

где К¹ имеет значения, определенные выше, с последующей сложной этерификацией.

Реакцию нитрования можно осуществлять в присутствии нитрата, такого как нитрат калия, и кислоты, такой как серная кислота, примерно при комнатной температуре. Стадию этерификации можно осуществлять в стандартных условиях, таких как взаимодействие с алкилгалогенидом формулы К^х-Х, где X представляет галоген, такой как йод, в присутствии основания, такого как карбонат цезия, и в растворителе, таком как ДМФА, примерно при комнатной температуре. Спирт формулы К^Х-ОН можно также использовать вместе с кислотным катализатором, таким как НС1, полученным на месте из АсС1/МеОН при нагревании с обратным холодильником. Желаемое соединение формулы (ΙΕ) может быть затем получено гидрированием нитросоединения в соответствующий анилин с использованием водорода и катализатора, такого как палладий на углероде, обычно в спиртовом растворителе, таком как МеОН.

Альтернативно, соединения формулы (Ι) могут быть получены восстановлением соединения формулы (II)

где К¹ и К² имеют значения, определенные выше.

Восстановление можно осуществлять по реакции Ео^1ег с использованием ацилхлорида, такого как СВх-Сд. и восстанавливающего агента, такого как NаΒΗ₄. Гидрирование над палладием на углероде завершает реакцию и удаляет СВх-защитную группу.

Соединения формулы (II) могут быть получены кросссочетанием соединения формулы (ΙΚ) с 3-пиридинилбороновой кислотой формулы (1Ь)

где К¹, К² и Ь² имеют значения, определенные выше.

Реакцию обычно осуществляют в условиях реакции сочетания Сузуки, таких как использование катализаторов, таких как Рб₂(бЬа) и три(трет-бутил)фосфина, вместе с основанием, таким как карбонат натрия, и растворителей, таких как ДМФА и вода, примерно при 90°С.

Соединения формулы (ΙΚ) могут быть получены путем конденсации соединения формулы (ΙΜ) с соединением формулы (ΙΝ)

где К¹, К² и Ь² имеют значения, определенные выше;

Ь³ представляет уходящую группу, такую как галоген, например фтор, обычно в растворителе, таком как ДМФА, примерно при 180°С при Μ\ν.

Также может быть добавлено основание, такое как К₂СО₃.

- 23 016079

Соединения формулы (1М) могут быть получены путем взаимодействия соединения формулы (1О)

<Ю) где К¹ и К^х имеют значения, определенные выше, с основанием, таким как КОН или ЫаОН, примерно при комнатной температуре с гидролизом сложного эфира в соответствующую карбоновую кислоту (К^х представляет водород), с последующим добавлением ΝΗ₃ в присутствии агентов сочетания, таких как НАТИ, БГРЕА и ТВТИ, в растворителе, таком как ДМФА, при этом реакцию осуществляют примерно при комнатной температуре.

Соединения формулы (1О) могут быть получены из соединения формулы (16) путем ацетилирования анилиновой группы такими реагентами, как ацетилхлорид, в растворителе, таком как 1,2-ОСЕ, примерно при 55°С. Затем можно проводить циклизацию в желаемый индазол путем обработки нитритом натрия в кислоте, например концентрированной хлористо-водородной кислоте, обычно в присутствии сорастворителя, такого как толуол и вода, примерно при 0°С.

Когда синтез промежуточных соединений и исходных веществ не описан, данные соединения являются коммерчески доступными или могут быть получены из коммерчески доступных соединений с помощью стандартных способов или путем использования описанных в данном описании синтезов, схем и примеров.

Соединения формулы (I) могут быть преобразованы в другие соединения формулы (I) с помощью известных способов или с помощью способов, описанных выше в данном описании синтезах, схемах и примерах.

Во время любых последовательностей синтеза, описанных в данном описании, может быть необходимо и/или желательно защитить восприимчивые или реакционноспособные группы в каких-либо молекулах, о которых идет речь. Это можно осуществить с помощью общепринятых защитных групп, таких как группы, описанные в Рго!есйпд бгоирк ш Огдатс 8уп!йек1к, 3^гй Еййюп, бгеепе, Т.^. апй \Уи1к. Р.6.М.; ^11еу [гИегкаепсе. 1999 и Коаепккц Р. 1. Ргойесйпд бгоирк, ТЫете, 1994. Защитные группы могут быть удалены на удобной последующей стадии с использованием известных в данной области методов. Например, когда присутствует Вос (трет-бутоксикарбонильная) или бензилкарбонильная защитная группа, она может быть удалена путем добавления растворителей, таких как ТФУК, ОСМ и/или МеС^ примерно при комнатной температуре. Соединение также можно гидрировать с использованием стандартных методов, таких как обработка катализатором, таким как Рй/С, в растворителе, таком как метанол, в атмосфере водорода. Также можно добавлять ЕЮАс в присутствии НС1 и 1,4-диоксан для удаления Вос или бензилкарбонильной защитной группы примерно при комнатной температуре.

Соединения данного изобретения получали в соответствии со следующими схемами. Все переменные в формулах имеют значения, определенные выше.

Когда соединения настоящего изобретения имеют хиральные центры, энантиомеры можно выделять из рацемических смесей стандартными методами разделения, такими как использование 8ЕС, хиральной ВЭЖХ или расщепления хиральными кислотами. Разделение можно осуществлять на любой стадии процесса получения соединений формулы (I). Так, разделение можно осуществлять на конечной стадии или, альтернативно, можно разделить промежуточные соединения и затем отдельные конкретные энантиомеры можно использовать на последующих стадиях с получением желаемых продуктов.

Схема 1.

Методика синтеза производных соединений данного изобретения показана на схеме 1, в соответствии с которой замещенные 2Н-индазолы получают с использованием способа синтеза, аналогично описанному в \УО 2005/066136. Следующее далее первоначальное преобразование производного 2-нитрол-3метилбензойной кислоты в соответствующий эфир, радикальное бромирование метильной группы с использованием реагентов, таких как Ν-бромсукцинимид и бензоилпероксид, дает ключевое производное бензилбромида. Окисление данного бензилбромида в соответствующий бензальдегид можно осуществлять, например, с использованием №метилморфолино-№оксида и молекулярных сит. Последующая конденсация альдегида с амином, замыкание кольца можно осуществлять путем обработки ключевого промежуточного соединения азидом натрия при повышенной температуре для введения концевого атома азота и последующего вытеснения азота, с получением индазольного кольца. В данную реакцию можно добавлять основание, такое как лутидин. Конечное преобразование эфира в первичный амид дает желаемые производные. Это можно осуществить или путем нагревания эфира в растворе аммиака, или преобразования в соответствующую карбоновую кислоту, с последующим присоединением амида.

- 24 016079

Схема 2.

На схеме 2 показан вариант схемы 1, и он дает возможность ввести заместители в ядра индазола. Когда требуемые производные нитробензойной кислоты не являются коммерчески доступными, они могут быть получены путем нитрования соответствующих производных бензойной кислоты, например, с использованием нитрата в концентрированной серной кислоте. Синтетические манипуляции, описанные выше, позволяют осуществить образование соответствующего анилина, который может быть или цикли зован в индазол сначала путем ацетилирования индазола и циклизации нитритом натрия в концентриро ванной НС1 при 0°С. Альтернативно, анилин может быть диазотирован тетрафторборатом нитрозия, и соответствующую тетрафторборатную соль диазония можно разложить при повышенных температурах на соответствующее дифторбензольное производное с помощью реакции 8сЫетапп (осторожно). Следующая последовательность синтеза, как приведено на схеме 1, дает возможность окисления метильной группы бензила в соответствующий альдегид и получения желаемых индазольных производных путем сочетания с (гетеро)анилином и циклизации азидом натрия.

Схема 2

Восстановление

Н₂, РЙ/С

Циклизация например Ϊ) АсС1, 55°С

η)№ΝΟ^, конц.НС!, 0°С

- 25 016079

Схема 3.

Альтернативная методика включает функционализацию индазола на последней стадии, как показано на схеме 3. В данном случае сложный эфир индазола сначала преобразовывают в соответствующий карбоксамид и подвергают нуклеофильному ароматическому замещению соответствующего фтор(гетеро)ароматического бромида. Это дает возможность получить бромидное производное, которое может быть поперечно сшито в условиях сочетания Сузуки, например, с использованием три(третбутил)фосфина и Рб₂(бЬа)₃ в качестве катализаторов в присутствии основания, такого как карбонат натрия. Преобразование в желаемый пиперидиновый фрагмент затем осуществляют путем реакции Бо\\'1ег с использованием ацилхлорида, такого как СΒζ-С1, и восстанавливающего агента, такого как боргидрид натрия. Конечная реакция гидрирования может давать соответствующие пиперидиновые производные.

Образование амида напргмэр ΝΗ3, Δ или КОН, затим твти, νη₃

Схема 3

,180°С

ЫаВНд, -65°С до к.т, ϋ) Гидрирование -лер Н₂= Ρά/С я

РАВР-1 8РА анализ.

Приведенные в качестве примеров соединения, описанные в данном описании, испытывали в данном анализе, и было обнаружено, что они имеют показатель Κ.'₅₀ менее 5 мкМ, в частности менее 50 нМ.

Используемые реагенты.

Буфер для анализа: 100 мМ Трис рН 8, 4 мМ МдС1₂, 4 мМ спермина, 200 мМ КС1, 0,04% нонидет Р-40.

Ферментная смесь: буфер для анализа (12,5 мкл), 100 мМ ЭТТ (0,5 мкл), РАВР-1 (5 нМ, Тревиген 4668-500-01), вода (до 35 мкл).

Никотинамид-аденин динуклеотид (КАИ)/ДНК смесь: |³Н-ХАО| (250 мкКю/мл, 0,4 мкл, Регк1п-Е1тег ИЕТ-443Н), МАИ (1,5 мМ, 0,05 мкл, 8ЮМА Ν-1511), Биотинилированный-МАЭ (250 мкМ, 0,03 мкл, Тревиген 4670-500-01), Активированный тимус теленка (1 мг/мл, 0,05 мкл, Атегзйат Β^08С^еηсе8 27-4575), вода (до 10 мкл).

Проявляющая смесь: стрептавидин 8РА гранулы (5 мг/мл, Атегзйат Β^08С^еηсе8 ВРЫр 0007), растворенные в 500 мМ ЕИТА.

Экспериментальная методика.

Реакцию проводят на 96-луночном микропланшете с конечным объемом 50 мкл/лунка. Добавляют 5 мкл 5% раствора ДМСО/соединения, добавляют ферментную смесь (35 мкл), начинают реакцию добавлением ХАО/ДНК смеси (10 мкл) и инкубируют в течение 2 ч при к.т. Останавливают реакцию добавлением проявляющей смеси (25 мкл) и инкубируют 15 мин при к.т. Измерения проводят с использованием прибора Паккард ТОР СОиЫТ.

Анализ пролиферации на ΒΒСΑ-1 приводимых в латентное состояние НеЬа клетках.

Сокращения:

[МЭМ - Исоуе модифицированная среда Дульбекко;

ΒРМI - Во8^е11 Рагк Метопа1 БъШШе МеФа;

МО - множественная инфекция;

СЕР - зеленый флуоресцентный белок;

РБ8 - физиологический раствор с добавлением фосфатного буфера;

РС8 - сыворотка плодного теленка и

ИМЕМ - модифицированная Дульбекко среда Игла.

Соединения настоящего изобретения испытывали также в антипролиферативном анализе на подобранной паре ΒΒСΑ-1 масс. и ΒΒСΑ-1-(8ЙРНК) НеЬа клетках. Анализ показывает, что ингибиторы РАВР способны проявлять селективность в отношении ингибирования роста ΒΒСΑ дефицитных клеток. Соединения показали величины СС₅₀ менее 5 мкМ на ΒΒСΑ-1 дефицитных клетках и более чем 10-кратную селективность в отношении ΒΒСΑ профицитных клеток.

- 26 016079

Анализ основывается на способности живых клеток превращать редокс краситель (резазурин) во флуоресцентный конечный продукт (резофурин). Количество продуцируемого резофурина прямо пропорционально числу клеток.

Клеточные линии.

НеЬа 8ЙВКСА-1-СЕР - являются НеЬа клетками, трансдуцированными при МОI 100 лентивирусом, содержащим 8ЙРНК против ВКСА-1 и экспрессионную кассету для СЕР. Латентный ВКСА-1 составляет более 80% по данным оценки анализа Тадтаи, и клетки стабильно экспрессируют СЕР.

НеЬа ТНМ-СЕР - являются НеЬа клетками, трансдуцированными при МОI 100 с контрольным вектором, не экспрессирующим какую-либо 511РНК.

Протокол.

Засеивают 300 клеток/лунка на 96-луночный видимый на просвет черный планшет в 90 мкл культуральной среды*.

Добавляют 10 мкл/лунка 10х соединения (5% ДМСО в воде).

Инкубируют в течение 168 ч при 37°С, 5% СО₂.

Добавляют 10 мкл раствора СеШйег В1ие (Рготеда С8081), предварительно разведенного 1:1 в РВ81х.

Инкубируют смесь в течение 45 мин при 37°С, 5% СО2.

Инкубируют 15 мин при к.т. в темноте.

Производят считывание планшетов с использованием флуориметра экс.: 550 нм; эм.: 590 нм.

*Культуральная среда: ΌΜΕΜ (СШСО, 41966-029), 10% ЕС8 (СШСО, 10106-169), 0,1 мг/мл пенициллин-стрептомицин (СШСО, 15140-114), 2 мМ Ь-глютамин (СШСО, 3042190).

Анализ пролиферации на природных ВКСА дефицитных клеточных линиях.

Было продемонстрировано также, что соединения настоящего изобретения ингибируют пролиферацию природных ВКСА-1 (МОА-МВ-436) и ВКСА-2 (САРА№1) дефицитных клеточных линий с показателями СС50 менее 5 мМ.

Анализ пролиферации.

Клетки высевают на 96-луночный планшет при 700 клеток/лунка в 100 мкл соответствующей среды на лунку*. На следующий день добавляют серийно разведенное соединение в конечном объеме 200 мкл/лунка. Каждое разведение анализируют в трех повторах. Спустя 6 дней оценивают жизнеспособность клеток с использованием анализа жизнеспособности клеток Се11Шег В1ие в соответствии с инструкциями производителя (Рготеда). Считывают пластины с использованием микропланшет-ридера Еиыои А1£а (Раскагб Вюкаеисе).

Для низкопролиферирующих клеточных линий (т.е. ΟΛΓΑΝ-1) пролиферацию анализируют через 14 дней после добавления соединений и замены среды один раз на 7 день (170 мкл среды на лунку аспирируют и заменяют 170 мкл свежей среды, содержащей соединения).

*Культуральная среда:

МОА-МВ-436: КРΜI (СШСО), 10% ЕВ8 (5% СО₂).

САРА№1: БИПМ (СШСО), 20% ЕВ8 (5% СО₂).

Соединения, испытанные на онкологических моделях ш у1уо, показали значительный уровень активности.

Препаративный пример.

Пример А. 2-Фенил-2Н-индазол-7-карбоксамид (А6).

Стадия 1. Метил 3-метил-2-нитробензоат (А1).

К суспензии 3-метил-2-нитро-бензойной кислоты (1,0 экв,) в МеОН (0,4 М) при 0°С по каплям добавляли АсС1 (3,0 экв.). Реакционную смесь перемешивали в течение 20 ч при температуре кипения с обратным холодильником. Содержание растворителя понижали в вакууме, остаток растворяли в ЕЮАс и несколько раз промывали насыщенным водным раствором NаНСОз, насыщенным раствором соли и сушили (№₂8О₄). Выпаривание растворителя давало соединение (А1) в виде белого твердого вещества, которое на следующей стадии использовали без дальнейшей очистки.

^!Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 7,86 (1Н, д, 1=7,5 Гц), 7,53-7,42 (2Н, м), 3,89 (3Н, с), 2,36 (3Н, с).

МС (Е8) С9Н9NО₄ вычислено: 195, найдено: 218 (М+№1)'.

Стадия 2. Метил 3-(бромметил)-2-нитробензоат (А2).

Смесь соединения (А1) (1,0 экв.), (ВхО)₂ (0,4 М) и ΝΉ8 (1,18 экв.) в СС1₄ (0,2 М, что касается А1) нагревали при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере Ν₂ в течение 12 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, разбавляли ЭСМ, концентрировали при пониженном давлении при сухой загрузке на 81О₂. Остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на 81О₂ с использованием смеси 10:90 ЕЮАс/петролейный эфир, с получением соединения (А2) в виде белого твердого вещества.

^!Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 7,93 (1Н, д, 1=7,7 Гц), 7,72 (1Н, д, 1=7,7 Гц), 7,57 (1Н, т, 1=7,7 Гц), 4,43 (2Н, с), 3,88 (3Н, с).

МС (Е8) С₉Н₈В^О₄ вычислено: 273:275, найдено: 242:244 (М-МеО)⁺, 227:229 (М-ΝΟΛ.

- 27 016079

Стадия 3. Метил 3-формил-2-нитробензоат (Α3).

К смеси соединения (А2) (1,0 экв.) и 4 А молекулярных сит (15 г) в ΜеСN (0,2 М) при комнатной температуре добавляли ΝΜΜΟ (2 экв.) и реакционную смесь перемешивали в течение 1,5 ч в атмосфере Ν₂. Затем смесь разбавляли Е10Ас, фильтровали и фильтрат промывали Н₂О, 1н. НС1, насыщенным раствором соли и сушили (№1₂80₄). Выпаривание растворителя давало соединение (А3) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

¹Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 9,96 (1Н, с), 8,26 (1Н, д, 1=7,9 Гц), 8,18 (1Н, д, 1=7,9 Гц), 7,77 (1Н, т, 1=7,9 Гц), 3,93 (3Н, с).

МС (Е8) С9Н7NΟ₅ вычислено: 209, найдено: 208 (М-Н)^-.

Стадия 4. Метил 2-нитро-3-[(фенилимино)метил]бензоат (А4).

Смесь соединения (А3) и анилина (1,05 экв.) в Е10Н (0,2 М) перемешивали при температуре кипения с обратным холодильником в атмосфере Ν₂ в течение 2 ч, до тех пор пока ТСХ не показывала завершение реакции (гексан/Е10Ас=75:25). Выпаривание растворителя давало соединение (А4) в виде белого твердого вещества, которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'|| ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 8,51 (1Н, д, 1=7,3 Гц), 8,41 (1Н, с), 8,11 (1Н, д, 1=7,8 Гц), 7,67 (1Н, т, 1=7,8 Гц), 7,43 (2Н, т, 1=7,8 Гц), 7,31 (1Н, т, 1=7,3 Гц), 7,16 (2Н, д, 1=7,8 Гц), 3, 94 (3Н, с).

Стадия 5. Метил 2-фенил-2Н-индазол-7-карбоксилат (А5).

Смесь соединения (А4) (1,0 экв.) и ΝαΝ₃ (1,05 экв.) в сухом ДМФА (0,3 М) перемешивали при 90°С в течение ночи в атмосфере Ν₂. Неочищенную смесь уменьшали в объеме в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с использованием градиента смеси Е10Ас/петролейный эфир от 10:90 до 40:60 с получением желаемого соединения (А5) в виде коричневого масла.

'Н ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 8,50 (1Н, с), 8,12 (1Н, д, 1=7,0 Гц), 7,96-7,90 (3Н, м), 7,49 (2Н, т, 1=7,6 Гц), 7,38 (1Н, т, 1=7,4 Гц), 7,15 (1Н, т, 1=7,4 Гц), 4,03 (3Н, с).

МС (Е8) С1₅Н1^₂0₂ вычислено: 252, найдено: 253 (М+Н)⁺.

Стадия 6. 2-Фенил-2Н-индазол-7-карбоксилат (А6).

Сложный эфир (А5) нагревали в смеси ТГФ и 32% водного раствора ΝΉ₃ при 70°С в течение ночи в закупоренной трубке. Растворитель уменьшали в объеме в вакууме и остаток очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с использованием градиента смеси Е10Ас/петролейный эфир от 30:70 до 50:50 с получением желаемого соединения (А6) в виде белого твердого вещества.

'|| ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 9,33 (1Н, с), 8,56 (1Н, уш.), 8,16 (2Н, д, 1=7,9 Гц), 8,08-8,00 (2Н, м), 7,88 (1Н, уш.), 7,63 (2Н, т, 1=7,7 Гц) 7,50 (1Н, т, 7,4 Гц), 7,27 (1Н, т, 1=7,9 Гц).

МС (Е8) С1₄Н1^₃0 вычислено: 237, найдено: 238 (М+Н)⁺.

Пример 1.

3-{4-[7-Аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидийхлорид (В4).

Стадия 1. трет-Бутил 3-[4-({-[3-(метоксикарбонил)-2-нитрофенил]метилен}амино)фенил]пиперидин-1-карбоксилат (В1).

Соединение (В1) получали, следуя общей методике, представленной для стадии 4 препаративного примера А, с использованием соединения А3 и трет-бутил 3-(4-аминофенил)пиперидин-1-карбоксилата, до тех пор пока ТСХ не показывала завершение реакции (петролейный эфир:Е10Ас=4:1) и использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Стадия 2. Метил 2-{4-[1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксилат (В2).

Соединение (В2) получали, следуя общей методике, представленной для стадии 5 препаративного примера А, и неочищенное вещество очищали колоночной флэш-хроматографией на силикагеле с использованием градиента смеси 20-40% Е10Ас/петролейный эфир, с получением желаемого соединения (В2) в виде желтого твердого вещества.

'|| ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 8,51 (1Н, с), 8,13 (1Н, д, 1=7,1 Гц), 7,95 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 7,91 (2Н, д, 1=8,4 Гц), 7,39 (2Н, д, 1=8,4 Гц), 7,18 (1Н, т, 1=7,2 Гц), 4,30-4,10 (2Н, м), 4,00 (3Н, с), 2,85-2,70 (3Н, м), 2,11-2,03 (1Н, м), 1,83-1,75 (1Н, м), 1,73-1,53 (2Н, перекрыто на Н₂О сигнал), 1,48 (9Н, с).

МС (Е8) С₂₅Н₂^₃0₄ вычислено: 435, найдено: 436 (М+Н)⁺.

Стадия 3. трет-Бутил 3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидин-1-карбоксилат (В3).

Соединение (В2) нагревали в 7н. ΝΉ₃ в МеОН (0,1 М) в закупоренной трубке в течение 2 дней при 60°С. Растворители удаляли в вакууме и неочищенный продукт очищали растиранием с Е1₂0 с получением желаемого соединения (В3) в виде желтого твердого вещества.

'|| ЯМР (400 МГц, СПС1₃, 300 К) δ 9,04 (1Н, уш. с), 8,51 (1Н, с), 8,31 (1Н, д, 1=6,8 Гц), 7,91 (1Н, д, 1=8,3 Гц), 7,84 (2Н, д, 1=8,2 Гц), 7,42 (2Н, д, 1=8,2 Гц), 7,31-7,22 (1Н, перекрыто на СПС1₃ сигнал), 5,95 (1Н, уш. с), 4,40-4,05 (2Н, м), 2,90-2,70 (3Н, м), 2,15-2,00 (1Н, м), 1,85-1,75 (1Н, м), 1,75-1,50 (2Н, перекрыто на Н2О сигнал), 1,48 (9Н, с).

МС (Е8) С₂₄Н₂^₄0₃ вычислено: 420, найдено: 421 (М+Н)⁺.

- 28 016079

Стадия 4. 3-{4-[7-(Аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидинийхлорид (В4).

К перемешиваемому раствору соединения (В3) (1,0 экв.) в ЕЮАс (0,2 М) добавляли 4н. раствор НС1/1,4-диоксана (10,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 3 ч. Растворитель выпаривали при пониженном давлении и неочищенный продукт очищали растиранием с ЕьО с получением желаемого соединения (В4) в виде желтого твердого вещества.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-й₆, 300 К) δ 9,32 (1Н, с), 9,12 (1Н, уш. с), 8,87 (1Н, уш. с), 8,55 (1Н, уш. с),

8,13 (2Н, д, 1=8,6 Гц), 8,06 (1Н, 1=7,0 Гц), 8,02 (1Н, д, 1=8,4 Гц), 7,89 (1Н, уш. с), 7,55 (2Н, д, 1=8,6 Гц), 7,27 (1Н, дд, 1=8,4, 7,0 Гц), 3,43-3,27 (2Н, м), 3,17-3,03 (2Н, м), 3,00-2,85 (1Н, м), 2,00-1,70 (4Н, м).

МС (Е8) С1₉Н₂1СШ₄О вычислено: 320, найдено: 321 (М+Н)⁺.

Пример 2.

2-{4[(3К)-Пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамид (С1) и 2-{4[(38)-пиперидин-3ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамид (С2).

Соединение В4 примера 1 разделяли хиральной 8ЕС (колонка: СЫга1рак А8-Н, 1x25 мм, поток: 10 мл/мин, Т_со1: 35°С, Р_со1: 100 бар, модификатор: 55% (‘РгОН+4% Εΐ₂ΝΉ)) при использовании СО₂ в качестве сверхкритического элюента с получением обоих чистых энантиомеров.

Первый элюированный энантиомер (С1), время удерживания (8ЕС): 4,80 мин, получали в виде белого порошка.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-йе, 300 К) δ 9,28 (с, 1Н), 8,57 (уш. с, 1Н), 8,06 (д, 2Н, 1=7,2 Гц), 8,04 (д, 2Н, 1=8,4 Гц), 7,88 (уш. с, 1Н), 7,49 (д, 2Н, 1=8,4 Гц), 7,27 (дд, 1Н, 1=8,4, 7,2 Гц), 3,08-2,94 (м, 2Н), 2,772,67 (м, 1Н), 2,64-2,52 (м, 1Н), 1,98-1,90 (м, 1Н), 1,75-1,47 (м, 4Н).

МС (Е8) С₁₉Н₂₀^О вычислено: 320, найдено: 321 (М+Н)⁺.

Свободное основание преобразовывали в (3К)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2ил]фенил}пиперидинийхлорид и измеряли вращение плоскости поляризации: [а]²%=+133,3 (с 0,15, МеОН).

Второй элюированный энантиомер (С2), время удерживания (8ЕС): 6,51 мин, получали в виде белого порошка.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО-йе, 300 К) δ 9,28 (с, 1Н), 8,57 (уш. с, 1Н), 8,06 (д, 2Н, 1=7,2 Гц), 8,04 (д, 2Н, 1=8,4 Гц), 7,88 (уш. с, 1Н), 7,49 (д, 2Н, 1=8,4 Гц), 7,27 (дд, 1Н, 1=8,4, 7,2 Гц), 3,08-2,94 (м, 2Н), 2,772,67 (м, 1Н), 2,64-2,52 (м, 1Н), 1,98-1,90 (м, 1Н), 1,75-1,47 (м, 4Н).

МС (Е8) С1₉Н₂₀^О вычислено: 320, найдено: 321 (М+Н)⁺.

Свободное основание преобразовывали в (38)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2ил]фенил}пиперидинийхлорид и измеряли вращение плоскости поляризации: [а]²⁰ _с=-137,9 (с 0,145, МеОН).

Пример 3.

Трифторацетат 3-{4-[7-(аминокарбонил)-5-фтор-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния (Ό4).

Стадия 1. Метил 5-фтор-1Н-индазол-7-карбоксилат (Ό1).

К раствору соединения примера 4, Е3 (1,0 экв.) в 1,2-дихлорэтане (0,1 М) добавляли АсС1 (5 экв.) и нагревали при 55°С в течение 2 ч. Затем растворитель удаляли при пониженном давлении.

Белое твердое вещество растворяли в смеси толуол/вода (5/1, 0,1 М). Раствор охлаждали до 0°С и добавляли НС1 (10 экв., 37%). Затем медленно порциями добавляли NаNО₂ (10 экв.) и смесь перемешивали в течение 3 ч при 0°С. Органическую фазу промывали водой (3х), сушили над Мд§О₄ и растворитель удаляли при пониженном давлении.

Желтый раствор в толуоле (0,1 М) нагревали затем в течение 2 ч при 90°С. Выпаривание толуола давало желаемый продукт в виде красного твердого вещества.

Ή ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 13,37 (1Н, с), 8,23 (1Н, с), 7,63 (1Н, дд, 1=8,6, 1=2,5 Гц), 7,48 (1Н, дд, 1=8,6, 1=2,5 Гц), 3,66 (3Н, с).

МС (Е8⁺) С₉К₇Е^О₂ вычислено: 194, найдено: 195 (М+Н)⁺.

Стадия 2. 5-Фтор-1Н-индазол-7-карбоксамид (Ό2).

Соединение Ό1 растворяли в смеси диоксан/вода (1/1, 0,1 М) и добавляли КОН (1,5 экв.). После перемешивания в течение 12 ч при комнатной температуре растворители удаляли при пониженном давлении. Белое твердое вещество использовали в последующем сочетании без дальнейшей очистки.

Карбоновую кислоту растворяли в ДМФА (0,1 М) и при 0°С добавляли ТВТИ (1,5 экв.). Через 15 мин добавляли ОГРЕА (2,0 экв.) и аммиак (3,0 экв., 0,5 М в диоксане) и смесь перемешивали 36 ч при комнатной температуре. Добавляли ЕЮАс и органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NаНСОз (3х) и насыщенным раствором соли (2х). Органическую фазу сушили и выпаривали при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией с использованием 1-20% МеОН/ОСМ с получением соединения (Ό2) в виде белого твердого вещества.

МС (Е8⁺) С₈Н₆Е^,О вычислено: 179, найдено 180 (М+Н)⁺.

- 29 016079

Стадия 3. 2-(4-Бромфенил)-5-фтор-2Н-индазол-7-карбоксамид (Ό3).

К раствору соединения Ό2 (1,0 экв.) в ДМФА(0,2 М) добавляли К₂СО₃ (1,3 экв.) и 4бромфторбензол (10,0 экв.) и реакционную смесь нагревали в условиях М\У при 180°С в течение 20 мин. Реакционную смесь охлаждали до комнатной температуры и разбавляли Е1ОАс. Органическую фазу промывали насыщенным раствором соли; сушили (Ыа₂8О₄). Выпаривание растворителя давало соединение (Ό3), которое очищали хроматографией на силикагеле при элюировании смесью 50-70% ЕЮАс/петролейный эфир, с получением целевого соединения в виде желтого порошка.

'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆, 300 К) δ 9,34 (1Н, с), 8,50 (1Н, уш. с), 8,17 (2Н, д, 1=9,0 Гц), 8,03 (1Н, уш. с), 7,90-7,80 (4Н, м).

МС (Е8⁺) С1₄Н₉ВгРЫ₃О вычислено: 334/336, найдено: 335/337 (М+Н)⁺.

Стадия 4. 5-Фтор-2-(4-пиридин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамид (Э4).

Смесь соединения (Ό3) (1,0 экв.) и пиридин-3-бороновой кислоты (1,3 экв.) в ДМФА (1,0 М) вместе с 2н. раствором Ыа₂СО₃ (2,0 экв.) дегазировали в токе аргона в течение 30 мин. Добавляли ‘Вц₃РН⁺ВР4 (0,05 экв.) и Рб2(бЬа)₃ (0,05 экв.) и реакционную смесь нагревали при 90°С в течение 48 ч. Смесь охлаждали до комнатной температуры, добавляли ЭСМ и органическую фазу промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО₃, насыщенным раствором соли, сушили (Ыа₂8О₄). Раствор концентрировали при пониженном давлении и остаток очищали хроматографией на силикагеле при элюировании смесью 50-90% ЕЮАс/петролейный эфир, затем 10% МеОН/ЭСМ с получением целевого соединения в виде желтого порошка.

'|| ЯМР (400 МГц, ДМСО-б₆, 300 К) δ 9,40 (1Н, с), 9,01 (1Н, д, 1=1,6 Гц), 8,63 (1Н, дд, 1=4,8, 1,6 Гц), 8,57 (1Н, уш. с), 8,32 (2Н, д, 1=8,8 Гц), 8,20 (1Н, д, 1=7,8 Гц), 8,10 (1Н, уш. с), 8,01 (2Н, д, 1=8,8 Гц), 7,887,82 (2Н, м), 7,54 (1Н, дд, 1=7,8, 4,8 Гц).

МС (Е8) С1₉Н1₃РЫ₄О вычислено: 332, найдено: 333 (М+Н⁺).

Стадия 5. Бензил 3-{4-[7-(аминокарбонил)-5-фтор-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидин-1карбоксилат (Ό5).

К перемешиваемому раствору соединения (Ό4) в сухом МеОН (0,2 М) добавляли ЫаВН₄ (1,2 экв.) и затем при -65°С по каплям добавляли 06ζ-0Ί (1,2 экв). Реакционную смесь выдерживали до достижения ею комнатной температуры (температуры окружающей среды) и затем смесь гасили водой. МеОН концентрировали при пониженном давлении и добавляли Е1ОАс. Органическую фазу промывали насыщенным водным раствором ЫаНСО₃, сушили (Ыа₂8О₄). Выпаривание растворителя давало соединение (Ό5), которое использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

МС (Е8) С₂₇Н₂₅РЫ₄О₃ вычислено: 472, найдено 473 (М+Н⁺).

Стадия 6. Трифторацетат 3-{4-[7-(аминокарбонил)-5-фтор-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния (06).

К раствору соединения (Ό5) (1,0 экв.) в МеОН (0,2 М) добавляли Рб/С 10% (0,05 экв.) и НС1 (1,0 экв.) и реакционную смесь перемешивали в атмосфере Н₂ (1 атм ) в течение 48 ч. Затем смесь фильтровали через целит и растворитель удаляли в вакууме с получением соединения (06), которое очищали ОФ-ВЭЖХ (колонка: С18), с использованием Н₂О (0,1% ТФУК) и МеСЫ (0,1% ТФУК) в качестве элюента, желаемые фракции лиофилизировали с получением целевого соединения (Ό6) в виде белого порошка.

'|| ЯМР (400 МГц, С1®С\. 300 К) δ 9,28 (1Н, с), 8,89 (1Н, уш. с), 8,60-8,50 (2Н, м), 8,13 (2Н, д, 1=8,6 Гц), 8,09 (1Н, уш. с), 7,90-7,70 (2Н, м), 7,54 (2Н, д, 1=8,6 Гц), 3,40-3,30 (2Н, м), 3,20-2,80 (3Н, м), 2,00-1,90 (2Н, м), 1,80-1,70 (2Н, м).

МС (Е8) С1₉Н1₉РЫ₄О вычислено: 338, найдено: 339 (М+Н⁺).

Пример 4.

Трифторацетат 5-фтор-2-(3-фтор-4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида (Е6).

Стадия 1. 5-Фтор-3-метил-2-нитробензойная кислота (Е1).

К раствору 3-фтор-5-метилбензойной кислоты (1,0 экв.) в конц. Н₂8О₄ медленно добавляли КЫО₃ (1,1 экв.) при 0°С. Смесь перемешивали при комнатной температуре в течение 1 ч, затем медленно вливали в ледяную воду. После перемешивания, пока полностью не расплавится лед, белый осадок отфильтровывали, промывали холодной водой и сушили при пониженном давлении. Белое твердое вещество использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 14,08 (1Н, шир. с), 7,65 (2Н, м), 2,30 (3Н, с).

Стадия 2. Метил 5-фтор-3-метил-2-нитробензоат (Е2).

К раствору соединения (Е1) и карбоната цезия (1,5 экв.) в ДМФА (0,25 М) при комнатной температуре добавляли метилйодид (1,0 экв.). Затем смесь перемешивали в течение 18 ч, добавляли насыщенный раствор соли и смесь экстрагировали ЕЮАс. Органическую фазу сушили (Ыа₂8О₄) и концентрировали при пониженном давлении. Желтое твердое вещество использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'|| ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 7,63 (2Н, м), 3,83 (3Н, с), 2,29 (3Н, с).

- 30 016079

Стадия 3. Метил 2-амино-5-фтор-3-метилбензоат (Е3).

Смесь соединения (Е2) (1,0 экв.) и Рй/С (10% в/в) в МеОН (0,25 М) перемешивали в течение 3 дней при комнатной температуре в атмосфере Н₂ (1 атм). Смесь фильтровали через Целит® и затем растворитель выпаривали при пониженном давлении. Белое твердое вещество использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

'Н ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 7,29 (1Н, дд, 1=9,5, 1=3,0 Гц), 7,12 (1Н, дд, 1=9,5, 1=3,0 Гц), 6,36 (2Н, с), 3,78 (3Н, с), 2,11 (3Н, с).

Стадия 4. Метил 2,5-дифтор-3-метилбензоат (Е4).

К раствору соединения (Е3) (1,0 экв.) в сухом ЭСМ (0,4 М) при 0°С порциями добавляли тетрафторборат нитрозония (1,3 экв.). Через 1 ч при 0°С добавляли сухой дихлорбензол (120 экв.) и реакционную смесь медленно нагревали до 160°С в то время, как ЭСМ отгонялся. Через 3 ч смесь охлаждалась до комнатной температуры, добавляли ЕЮАс и органическую фазу промывали насыщенным раствором соли (2х). После сушки над Мд§О₄ растворители удаляли при пониженном давлении. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией с использованием смеси 1-10% ЕЮАс/петролейный эфир с получением соединения (Е4) в виде желтого масла.

'Н ЯМР (400 МГц, СОСЕ 300 К) δ 7,42 (1Н, м), 7,06 (1Н, м), 3,92 (3Н, с), 2,30 (3Н, д, 1=2,3 Гц).

Стадия 5. Метил 2,5-дифтор-3-формилбензоат (Е5).

Соединение (Е5) получали из соединения (Е4), следуя общей методике, представленной на стадиях 2 и 3 препаративного примера А. Неочищенное вещество очищали флэш-хроматографией с использованием смеси 1-20% ЕЮАс/петролейный эфир, с получением белого твердого вещества.

'|| ЯМР (300 МГц, ДМСО, 300 К) δ 10,19 (1Н, д, 1=2,4 Гц), 7,98 (1Н, м), 7,86 (1Н, м), 3,89 (3Н, с).

МС (Е8⁺) С₉НбЕ₂О₃ вычислено: 200, найдено: 201 (М+Н)⁺.

Стадия 6. Трифторацетат 5-фтор-2-(3-фтор-4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида (Е6).

Соединение (Е5) преобразовывали в соответствующий индазол с использованием трет-бутил 3-(4амино-2-фторфенил)пиперидин-1-карбоксилата, следуя общей методике, представленной на стадиях 4 и 5 препаративного примера А.

Полученный метил 2-{4-[1-(трет-бутоксикарбонил)пиперидин-3-ил]-3-фторфенил}-5-фтор-2Ниндазол-7-карбоксилат преобразовывали далее в соответствующий карбоксамид путем обработки КОН (1,3 экв.) в смеси диоксан/вода (0,1 М) в течение 12 ч при комнатной температуре. Растворители удаляли при пониженном давлении. Карбоновую кислоту растворяли в ДМФА (0,1 М) и добавляли ТВТИ (1,5 экв.). Через 15 мин добавляли ЭРЕА (2,0 экв.) и аммиак (3,0 экв., 0,5 М в ТГФ) и раствор перемешивали в течение 36 ч. Смесь разбавляли ЕЮАс и затем органическую фазу промывали насыщенным водным раствором NаΗСО₃ и насыщенным раствором соли. После выпаривания растворителя остаток использовали на следующей стадии без дальнейшей очистки.

Для снятия защиты неочищенное вещество растворяли в смеси ТФУК/ОСМ (0,1 М) и перемешивали в течение 3 ч при комнатной температуре. Выпаривание растворителя давало остаток, который очищали ВЭЖХ с обращенной фазой (колонка: С18), с получением указанного в заголовке соединения (Е6).

'|| ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 9,34 (1Н, с), 8,90 (1Н, м), 8,61 (1Н, м), 8,49 (1Н, с), 8,18 (1Н, дд, 1=11,6, 2,0 Гц), 8,05 (2Н, м), 7,81 (2Н, м), 7,63 (1Н, м), 3,34 (3Н, м), 3,13 (1Н, м), 2,94 (1Н, м), 1,95-1,76 (4Н, м).

МС (Е8⁺) С1₉Н1₈ЕЖ₄О вычислено: 356, найдено: 357 (М+Н)⁺.

Пример 5.

4-Метилбензолсульфонат (38)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния (Е4).

Стадия 1. трет-Бутил (38)-3-[4-({(ГЕ)-[3-(метоксикарбонил)-2-нитрофенил]метилен}амино)фенил]пиперидин-1-карбоксилат (Е1).

Соединение (Е1) получали из соединения А3 и трет-бутил (38)-3-(4-аминофенил)пиперидин-1карбоксилата (полученного путем повторного растворения 3-(4-аминофенил)пиперидина с 2 экв. Ь-дибензоилвинной кислоты в МеОН и последующей Вос-защитой), как описано в примере 1, для соединения В1.

Стадия 2. 2-{4-[(38)-1-(трет-Бутоксикарбонил)пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоновая кислота (Е2).

Соединение (Е1) и азид натрия (1 экв.) суспендировали в ДМФА (0,25 М), инерциировали и добавляли 2,6-лутидин (1,0 зкв.). Смесь нагревали до внутренней температуры 110°С в течение 20 ч. Полученный коричневый раствор охлаждали до 20°С и добавляли ТГФ и 25 мас.% раствор ЫС1. Фазы разделяли и органическую фазу промывали затем три раза 25 мас.% раствором Ь1С1. К полученному выше органическому раствору добавляли 2,0 М №ЮН (10 экв.) и смесь нагревали до 35°С в течение 20 ч перед тем, как охладить до 20°С, и фазы разделяли. Органический слой промывали смесью 2,0 М НС1 кислоты и насыщенного раствора соли и слои разделяли, органический слой промывали затем насыщенным раствором соли и концентрировали с получением соединения (Е2), которое затем не очищали.

- 31 016079

Стадия 3. трет-Бутил (38)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидин-1карбоксилат (Е3).

Соединение Е2 растворяли в ЭСМ (0,35 М) и при комнатной температуре добавляли ди-третбутилкарбонат (1,3 экв.) и пиридин (1,0 экв.). Через 30 мин добавляли бикарбонат аммония (1,3 экв.) и перемешивание продолжали в течение 20 ч. Добавляли 1 М НС1 (5 мл/г) и фазы разделяли, органический слой промывали дважды водой и концентрировали до малого объема. Неочищенное соединение (Е3) фильтровали через слой диоксида кремния и затем кристаллизовали из метил-трет-бутилового эфира.

Стадия 4. 4-Метилбензолсульфонат (38)-3-{4-[7-(аминокарбонил)-2Н-индазол-2-ил]фенил}пиперидиния (Е4).

Соединение Е3 растворяли в ТГФ (0,15 М) и добавляли воду (5% в сравнении с ТГФ). Добавляли моногидрат паратолуолсульфоновой кислоты (2,2 экв.), смесь нагревали до 66°С и перемешивали в течение ночи. После охлаждения желаемую твердую соль выделяли фильтрованием и подтверждали, что это моногидрат (Е4).

Ί) ЯМР (400 МГц, ДМСО, 300 К) δ 9,34 (1Н, с), 9,20 (1Н, уш. с), 8,58 (1Н, с), 8,14 (2Н, д, 1=8,8 Гц), 8,05 (2Н, ддд, 1=1,2, 7,2, 16,8 Гц), 7,93 (1Н, с), 7,52 (4Н, дд, 1=8,8, 16,8 Гц), 7,27 (1Н, дд, 1=6,8, 8,0 Гц),

7,13 (2Н, д, 1=8 Гц), 3,48 (3Н, уш.), 3,10 (2Н, м), 2,90 (1Н, м), 2,30 (3Н, с), 1,89 (2Н, м), 1,75 (2Н, м).

Следующие соединения примеров получали согласно способам предыдущих примеров.

Пример	Название	ΜΝ	м+н’	Методика примера
6	трифторацетат 3-(4-(7- (аминокарбонил)-2Н-индазол-2ил]фенил}пиперидиния	320	321	1
7	5-фтор-2-(4-пиперидин-3илфенил)-2Н-индазол-7карбоксамид	338	339	3
8	(33)-3-(4-(7- (аминокарбонил)-2Н-индазол- 2- ил]фенил}пиперидинийхлорид	320	321	э
9	(ЗК)-3-{4-[7- (аминокарбонил)-2Н-индазол- 2- ил]фенил}пиперидинийхлорид	320	321	2
10	(К)-5-фтор-2-(4-пиперидин-3илфенил)-2Н-индазол-7карбоксамид	338	339	2

11	(8)-5-фтор-2-(4-пиперидин-Зилфенил)-2Н-индазол-7карбоксамид	338	339	2
12	(В)-5-фтор-2-(3-фтор-4пиперидин-3-илфенил}-2Ниндазол-7-карбоксамид	356	357	2
13	(8)-5-Фтор-2-(З-фтор-4пиперидин-3-илфенил}-2Н- индазол-7-карбоксамид)	356	357	2

- 32 016079

Claims (14)

1. ФОРМУЛА ИЗОБРЕТЕНИЯ

   1. Соединение формулы (I) где В¹ представляет водород или фтор; В² представляет водород или фтор, или его фармацевтически приемлемые соли, стереоизомеры или таутомеры.
2. 2. Соединение по п.1 формулы (II) где В¹ и В² имеют значения, определенные в п.1, или его фармацевтически приемлемые соли, стереоизомеры или таутомеры.
3. 3. Соединение по п.1 формулы (III) где В¹ и В² имеют значения, определенные в п.1, или его фармацевтически приемлемые соли или таутомеры.
4. 4. Соединение по п.1 формулы (IV) где В¹ и В² имеют значения, определенные в п.1, или его фармацевтически приемлемые соли или таутомеры.
5. 5. Соединение по любому из предшествующих пунктов, где В¹ представляет собой водород и В² представляет водород или фтор.
6. 6. Соединение по п.1, выбранное из

   2-(4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида;

   2-{4-[(3В)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида;

   2-{4-[(38)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида;

   5-фтор-2-(4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида; 5-фтор-2-{4-[(38)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида; 5-фтор-2-{4-[(3В)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида; 5-фтор-2-(3-фтор-4-пиперидин-3-илфенил)-2Н-индазол-7-карбоксамида; 5-фтор-2-{3-фтор-4-[(3В)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида; 5-фтор-2-{3-фтор-4-[(38)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида, и его фармацевтически приемлемые соли, таутомеры или стереоизомеры.
7. 7. Соединение по п.6, выбранное из

   2-{4-[(3В)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида;

   2-{4-[(38)-пиперидин-3-ил]фенил}-2Н-индазол-7-карбоксамида, и его фармацевтически приемлемые соли или таутомеры.
8. 8. Фармацевтическая композиция, содержащая соединение по любому из предшествующих пунктов или его фармацевтически приемлемую соль, таутомер или стереоизомер в комбинации с фармацевтически приемлемым носителем.
9. 9. Комбинация соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли, стереоизомера, таутомера с противораковым агентом для одновременного, раздельного или последовательного введения.
10. 10. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли, сте

    - 33 016079 реоизомера или таутомера в терапии.
11. 11. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли, стереоизомера или таутомера для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения состояний, которые могут облегчаться путем ингибирования поли(АОР-рибоза)полимеразы (РАВР).
12. 12. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли, стереоизомера или таутомера для производства лекарственного средства для лечения или предотвращения рака, воспалительных заболеваний, реперфузионных повреждений, ишемических состояний, инсульта, почечной недостаточности, сердечно-сосудистых заболеваний, сосудистых заболеваний, иных чем сердечно-сосудистые, диабета, нейродегенеративных заболеваний, ретровирусной инфекции, повреждения или старения кожи и УФ-индуцируемого повреждения кожи.
13. 13. Применение соединения по любому из пп.1-7 или его фармацевтически приемлемой соли, стереоизомера или таутомера в качестве химио- и/или радиосенсибилизатора для лечения рака.
14. 14. Способ лечения или предотвращения рака, воспалительных заболеваний, реперфузионных повреждений, ишемических состояний, инсульта, почечной недостаточности, сердечно-сосудистых заболеваний, сосудистых заболеваний, иных чем сердечно-сосудистые, диабета, нейродегенеративных заболеваний, ретровирусной инфекции, повреждения сетчатки или старения кожи и УФ-индуцируемого повреждения кожи, включающий введение пациенту, нуждающемуся в этом, эффективного количества соединения по п.1 или композиции, содержащей соединение по п.1.

    Евразийская патентная организация, ЕАПВ

    Россия, 109012, Москва, Малый Черкасский пер., 2