SK284804B6

SK284804B6 - Výťažky zo Zanthoxylum bungeanum, farmaceutické a kozmetické prípravky s ich obsahom

Info

Publication number: SK284804B6
Application number: SK7-2001A
Authority: SK
Inventors: Ezio Bombardelli; Bruno Gabetta
Original assignee: Indena S.P.A.
Priority date: 1998-07-07
Filing date: 1999-04-07
Publication date: 2005-11-03
Also published as: ATE213949T1; HUP0104923A2; KR100620148B1; RU2214817C2; AU749947B2; IL140702A; DE69900999D1; DK1096944T3; IL140702A0; NO20010033D0; JP2002520289A; AU3420699A; SK72001A3; CZ200121A3; EP1096944A1; EP1096944B1; PT1096944E; HUP0104923A3; PL191160B1; ITMI981542A1

Abstract

Výťažky zo Zanthoxylum bungeanum, získateľné extrakciou perikarpu superkritickým oxidom uhličitým, ktoré majú zlepšené farmakologické vlastnosti a farmaceutické a kozmetické prípravky s ich obsahom s protizápalovými a analgetickými účinkami.

Description

Oblasť techniky

Vynález sa týka výťažku, získaného extrakciou perikarpu Zanthoxylum bungeanum s oxidom uhličitým; vynález sa ďalej týka farmaceutických a kozmetických prípravkov, ktoré uvedený výťažok obsahujú. Výťažok má protizápalové a analgetické účinky a možno ho použiť na liečbu svrbenia.

Doterajší stav techniky

Perikarp (oplodie) zo Zanthoxylum bungeanum sa bežne používa v Cíne ako korenie na dochucovanie jedál. V čínskej a indiánskej medicíne sa táto časť rastliny používa ako miestne anestetikum a na liečbu dyzentérie. Prchavý olej obsahuje celý rad monoterpénov, ako sú 1,8-cimol, linalol, 4-terpinol, caryofylén, limoncn a podobné a uvádza sa o ňom, že má silné repelentné účinky proti hmyzu.

V EP 568 001 sa nedávno zverejnilo, že šupka tohto ovocia má protivírusové účinky.

V patente USA 5 137 912 sa opisuje, že chelcrytrín, extrahovaný z kôry koreňa Zanthoxylum simulans (synonymum pre bungeanum) je účinný pri prevencii trombózy. Podľa japonského patentu JP 01 294 657 poskytuje extrakcia perikarpu organickými rozpúšťadlami výťažok (extrakt), ktorý obsahuje izobutylamidy, ktoré spôsobujú miestny anestetický účinok už 30 sekúnd po použití na jazyk a tento účinok trvá až do 20 až 80 minút.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je výťažok z perikarpu Zanthoxylum bungeanum, pripravený extrakciou s oxidom uhličitým v superkritických podmienkach, ktorý má významný analgetický účinok bez toho, aby pôsobil ako miestne anestetikum, čo je významným znakom výťažkov získaných s použitím rozpúšťadiel. Produkt podľa tohto vynálezu sa pripraví extrakciou jemne pomletého a peletovaného perikarpu Zanthoxylum bungeanum s oxidom uhličitým pod tlakom v rozmedzí od 15 do 30 MPa (150 do 300 bar), výhodne pod tlakom 18 až 23 MPa (180 až 230 bar) a pri teplotách v rozmedzí od 35 do 55 °C, výhodne pri 35 až 40 °C.

Výsledný extrakt možno použiť samotný, alebo po odstránení extrakčnej vody, alebo sa môže ďalej čistiť rozdelením medzi vzájomne nemiesiteľné rozpúšťadlá, ako sú napríklad alifatické alkoholy a alifatické uhľovodíky, výhodne sa použije n-hexán alebo petroléter.

Výsledné výťažky majú pri prekutánnom podávaní človekovi významný analgetický účinok; tieto výťažky sú preto cennou zložkou v oblasti farmácie aj kozmetiky.

V oblasti farmácie sú uvedené výťažky vhodné na zmiernenie bolestí pri diabetickej mikroangiopatii, pri hemoroidných bolestiach, pri popáleninách a pri všetkých formách miestnej bolesti. Ďalšie využitie uvedených výťažkov podľa tohto vynálezu je na liečbu svrbenia.

V oblasti kozmetiky sú výťažky podľa tohto vynálezu vhodné do depilačných krémov, do prípravkov na použitie po opaľovaní („after-sun“ prípravky), vody a krémy na holenie a po holení a vo všetkých prípadoch ošetrenia pokožky, kde sa vyžaduje miestny analgetický účinok a účinok proti svrbeniu.

Uvedený účinok výťažkov podľa tohto vynálezu proti svrbeniu sa hodnotil pomocou elektrofyziologických meraní s použitím experimentálneho modelu - preparátu ischia tickcho nervového svalového extenzora digitorum longus (EDL) potkana - in vitro.

Použili sa dospelé potkany Sprague-Dawley, utratené vnútrosrdcovým predávkovaním Penthotalu. Pitvou sa oddelil EDL sval s dlhým traktom ischiatického nervu a vložil sa do nádoby na elektrofyziológiu s Ringcrovým roztokom, ktorý sa vymieňal každých 10 minút. Skúšané výťažky sa dispergovali do uvedeného roztoku v rôznych koncentráciách a výhodne s pridaným tenzidom; dispergácia sa uskutočnila tak, aby skúšané látky prišli do styku s nervovými vláknami, neuromuskulámymi spojmi a svalmi. Na zaznamenávanie elektrických javov pri elektrofyziologických skúškach sa do svalových buniek vložila vnútrobunková mikroelektróda, naplnená roztokom chloridu draselného (c_KCi = 3 mol.dm^-3). Zaznamenávali sa miniatúrne koncové potenciály, koncové potenciály a membránové potenciály svalových buniek tak spontánne, ako aj indukované stimuláciou nervu. S týmto cieľom sa nerv spojil so stimulátorom a voliteľne stimuloval raz za sekundu. Elektrické javy v svalových bunkách sa snímali mikroelektródou, pripojenou na zosilňovač signálov a zobrazovali sa pomocou digitálneho osciloskopu.

Ak sa výťažky podľa tohto vynálezu skúšali v koncentráciách od 0,0005 do 0,002 % mali silný, prechodný aktivačný účinok na neuromuskulámy synaptický prestup, dokázaný zvýšením frekvencie miniatúrnych koncových potenciálov a vznikom spontánnych koncových potenciálov. Obrátene, výťažky s miestnym anestetickým účinkom, získané s rozpúšťadlami, znižovali a inhibovali prestup nervových impulzov.

Analgetický účinok skúšaných výťažkov sa v hodnotiacej štúdii hodnotil na 10 zdravých dobrovoľníkoch a citlivosťou pokožky na teplotné zmeny. Na oblasť lopatky pokusného objektu sa po 30 minútach od ošetrenia skúšanou účinnou látkou alebo vhodným placebo umiestnila progresívne ohrievaná tepelná sonda. Určovala sa teplota, ktorú subjekt považoval za bolestivú. Pri ošetrení sa podávalo vždy 0,5 ml emulzie, pripravenej podľa príkladu 7, ktorá obsahovala 0,5 % výťažku zo Zanthoxylum bungeanum, pripraveného podľa príkladu 1. Výsledky sa uvádzajú v ďalšej časti a poukazujú na analgetický účinok skúšaného výťažku.

Ošetrenie	To	T ¹30 minút
Placebo	45,7+1,0	45,3 + 0,4
Výťažok	46,0 + 0,8	47,2 ± 0,4

Výťažky podľa tohto vynálezu možno pripraviť, ako krémy, vody, peny, gély na pokožku alebo sliznice a ako mäkké želatínové kapsuly, tvrdé želatínové kapsuly, tablety alebo ako čapíky; výhodné formy výťažkov podľa tohto vynálezu zahŕňajú krémy alebo peny na ošetrenie pokožky, alebo mäkké želatínové kapsuly, žuvacie tablety alebo čapiky na systémové spôsoby podávania.

Dávkovanie výťažku v prípravkoch je v rozmedzí medzi 5 a 100 mg na dávku v prípravkoch na systémové podávanie, zatiaľ čo dávkovanie na topikálne podávanie bude v prípravkoch premenlivé od 0,05 do 1 %.

Ďalej uvádzané príklady bližšie objasňujú vynález bez toho, že by vynález obmedzovali.

Prehľad obrázkov na výkrese

Na obrázku je znázornený chromatogram lipofilného výťažku zo Zanthoxylum bungeanum z príkladu 1.

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1

Príprava lipofilného výťažku zo Zanthoxylum bungeanum kg oplodia z Zanthoxylum bungeanum sa extrahovalo ďalej uvedeným spôsobom v 25 litrovom extrakčnom zariadení na prácu so superkritickým plynom, vybavenom dvomi separátormi ako kondenzátormi na frakcionáciu extraktu.

kg oplodia Zanthoxylum bungeanum bolo po zbere vysušených pri teplote nie vyššej ako 60 °C. Suché oplodia sa extrúdovali do tvaru kociek a extrahovali oxidom uhličitým v superkritických podmienkach v nasledujúcich pokusných podmienkach:

- teplota v extraktore 35 °C, teplota v prvom separátore 30 °C, teplota v druhom separátore 20 °C;

- tlak 18 MPa (180 bar) v extraktore, 10 MPa (100 bar) v prvom separátore a 5 MPa (50 bar) v druhom separátore.

Prietok CO₂ bol 10 litrov za minútu počas 45 minút. Extrakt sa koncentroval v druhom seperátore, zatiaľ čo prítomná voda z rastlinnej matrice sa koncentrovala v prvom separátore. Po sušení extraktu v druhom separátore vo vákuu pri teplote nie vyššej ako 40 °C sa získalo 1,5 kg výťažku vo forme pasty. Výťažok bol slabo sfarbený do žlta, intenzívne voňal a mal obsah izobutylamidov približne 25 % (hmotnostných). Produkt sa analyzoval HPLC na zariadení Hibar RT LiChrospher s kolónou 100RP-18 a elučným profilom (1 ml.min^-1), uvedeným v tabuľke. Nastrekované množstvo bolo 5 μΐ roztoku s koncentráciou 2 mg.mľ¹. Chromatogram sa uvádza na obrázku.

Tabuľka - elučný profil

Čas (minúty)	Voda (%)	Acetonitril (%)	gradientová krivka, počet
0	60	40	-
20	60	40	6
30	10	90	6
35	60	40	6
40	60	40	6

Príklad 2

Príprava lipofilného výťažku zo Zanthoxylum bungeanum kg oplodia Zanthoxylum bungeanum bolo po zbere vysušených pri teplote nie vyššej ako 60 °C. Suché oplodia sa extrúdovali do tvaru kociek a extrahovali oxidom uhličitým v superkritických podmienkach v nasledujúcich pokusných podmienkach:

- teplota v extraktore 40 °C, teplota v prvom separátore 30 °C, teplota v druhom separátore 20 °C;

- tlak 20,5 MPa (205 bar) v extraktore, 10 MPa (100 bar) v prvom separátore a 5 MPa (50 bar) v druhom separátore.

Prietok CO₂ bol 10 litrov za minútu počas 45 minút. Extrakt sa koncentroval v druhom separátore, zatiaľ Čo prítomná voda z rastlinnej matrice sa koncentrovala v prvom separátore. Po sušení extraktu v druhom separátore vo vákuu pri teplote nie vyššej ako 40 °C sa získalo 1,5 kg výťažku vo forme pasty. Výťažok bol slabo sfarbený do žltozelená. Mal rovnaký fyzikálne chemický charakter ako výťažok z príkladu 1 a obsahoval približne 20 % izobutylamidov.

Príklad 3

Príprava lipofilného výťažku z Zanthoxylum bungeanum kg oplodia Zanthoxylum bungeanum bolo po zbere vysušených pri teplote nie vyššej ako 60 °C. Suché oplodia sa extrúdovali do tvaru kociek a extrahovali oxidom uhličitým v superkritických podmienkach v nasledujúcich pokusných podmienkach: teplota v extraktore v 40 °C a tlak 23 MPa (230 bar). Množstvo použitého oxidu uhličitého na extrakciu bolo 27 až 45 kg na kg extrahovanej látky. Extrakt sa skoncentroval v separátore pod tlakom 5 MPa (50 bar) pri 20 °C. Po vákuovom sušení pri teplote nie vyššej ako 40 °C sa získalo 1,3 kg výťažku vo forme pasty, ktorá mala svetlú žltozelenú farbu a rovnaký fyzikálne chemický charakter ako produkt z príkladu 1.

Príklad 4

Príprava čisteného lipofilného výťažku zo Zanthoxylum bungeanum

0,5 kg lipofilného extraktu z oplodia Zanthoxylum bungeanum, pripraveného v príklade 1 sa rozpustilo v 2,5 litroch 95 %-ného metanolu a trikrát sa extrahovalo vždy po 0,5 litra n-hexánom. Hexánová fáza sa spätne premyla metanolom, pričom sa ako značkovač použili izobutylamidy, ktoré museli ostať v metanolovej fáze. Neúčinná hexánová fáza sa odstránila, zatiaľ čo metanolové fázy sa spojili, zriedili 0,6 litrami vody a dva razy reextrahovali 0,6 litrom n-hexánu. Spojené hexánové fázy sa odfarbili pridaním 0,3 % aktívneho uhlia, sušili nad bezvodým Na₂SO₄ a skoncentrovali do olejovitej konzistencie pri teplote nie vyššej ako 40 °C vo vákuu. Získalo sa 0,22 kg olejovitého výťažku, ktorý mal konzistenciu medu a mal obsah izobutylamidov približne 50 %.

Príklad 5

Alkoholový roztok Zanthoxylum bungeanum

100 ml obsahuje:

Zanthoxylum bungeanum % roztok v oleylalkohole 0,50 g cyklomethicon 20,00 g alkohol 100,0 ml

Príklad 6

Alkoholový roztok Zanthoxylum bungeanum

100 ml obsahuje:

Zanthoxylum bungeanum 20 % roztok v oleylalkohole PPG-26 Butet 26 a PEG-40 stužený ricínový olej metylchlórizotiazolinón a metylizotiazolinón čistená voda podľa potreby do	0,50 g 5,00g 0,10 g 100,0 ml
Príklad 7
Emulzia Zanthoxylum bungeanum
100 g obsahuje:
Zanthoxylum bungeanum
20 % roztok v oleylalkohole	0,50 g
izohexadekán	5,00 g
glycerol	4,00 g
C₎₂ j5-alkyl benzoát	2,00 g
cyklomethicon	2,00 g
PEG-20 glycerol sterát a
glycerolstearát	2,00 g
lanolínový vosk	1,00 g

Akrylátový/ C_lo až30-alkyl-
akrylátový sieťovaný polymér	0,50 g
cetylalkohol	0,50 g
Imiazolidinylmočovina	0,30 g
fenoxyetanol	0,50 g
metylparabén	0,20 g
tokoferol	0,10g
EDTA, disodná soľ	0,10g
voda podľa potreby do	100,0 g

Príklad 8

Zanthoxylum bungeanum tekutá emulzia

100 g obsahuje:

Zanthoxylum bungeanum

20 % roztok v oleylalkohole	0,50 g
PEG-20 glycerolstearát a
glycerolstearát	10,00 g
Cioaž 18 triglyceridy	10,00 g
glycerol	5,00 g
olej z pšeničných klíčkov	2,00 g
dimethicon	2,00 g
PPG-25 Laureth-25	2,00 g
cetylalkohol	1,00 g
hydroxylovaný lanolín	0,50 g
imidazolidinylmočovina	0,30 g
hektorit (e) hydroxyetyl	0,50 g
fenoxyetanol a metylparabén a
etylparabén a propylparabén a
butylparabén	0,50 g
tokoferol	0,10 g
voda, podľa potreby do	100,0 g

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Výťažky zo Zanthoxylum bungeanum získateľné extrakciou perikarpu so superkritickým oxidom uhličitým.
2. Výťažky podľa nároku 1, získateľné extrakciou s oxidom uhličitým pri teplotách v rozmedzí od 35 do 55 °C pod tlakom v rozmedzí od 15 MPa do 30 MPa.
3. Výťažky podľa nároku la 2, vyznačujúce sa t ý m , že majú obsah izobutylamidov v rozmedzí od 20 % do 50 % hmotnostných.
4. Farmaceutické prípravky, vyznačujúce sa t ý m , že ako účinnú zložku obsahujú výťažok podľa nárokov 1 až 3 v zmesi s vhodnými excipientmi.
5. Kozmetické prípravky, vyznačujúce sa t ý m , že ako účinnú zložku obsahujú výťažok podľa nárokov 1 až 3 v zmesi s vhodnými excipientmi.