PL191160B1

PL191160B1 - Ekstrakty Zanthoxylum bungeanum i zawierające je kompozycje farmaceutyczne i kosmetyczne

Info

Publication number: PL191160B1
Application number: PL345262A
Authority: PL
Inventors: Ezio Bombardelli; Bruno Gabetta
Original assignee: Indena Spa
Priority date: 1998-07-07
Filing date: 1999-04-07
Publication date: 2006-03-31
Also published as: US6419950B2; KR20010053374A; JP2002520289A; HUP0104923A2; PL345262A1; AU749947B2; CA2336542C; KR100620148B1; HUP0104923A3; HU228795B1; ITMI981542A1; RU2214817C2; DE69900999T2; CZ200121A3; PT1096944E; CZ292523B6; DK1096944T3; EP1096944A1; IL140702A0; SK72001A3

Abstract

1. Ekstrakty Zanthoxylum bungeanum, znamienne tym, ze otrzymuje si e je przez ekstrakcj e owocni za pomoc a CO 2 w warunkach nadkrytycznych. PL PL PL

Description

Opis wynalazku

Wynalazek dotyczy nowych ekstraktów, otrzymywanych przez ekstrakcję dwutlenkiem węgla owocni Zanthoxylum bungeanum i zawierających je kompozycji farmaceutycznych i kosmetycznych. Ekstrakt ten ma działanie przeciwzapalne i przeciwbólowe i można go stosować do leczenia swędzenia.

Owocnie Zanthoxylum bungeanum powszechnie stosuje się w Chinach jako przyprawy do potraw. Co więcej, w chińskiej i hinduskiej medycynie ludowej tę część rośliny stosuje się jako miejscowy środek znieczulający i do leczenia czerwonki. Ten olejek eteryczny, zawierający szereg monoterpenów, takich jak 1,8-cymol, linalol, 4-terpinol, kariofillen, limonen i podobne, opisano jako silny środek odstraszający owady.

Ostatnio, w europejskim opisie patentowym nr EP 568001 ujawniono działanie przeciwwirusowe skórki tego owocu.

W opisie patentowym Stanów Zjednoczonych Ameryki nr 5137912 ujawniono, że chelkrytryna, ekstrahowana z kory korzeni Zanthoxylum simulans (synonim bungeanum) wykazuje aktywność w zapobieganiu zakrzepicy. Według japońskiego opisu patentowego nr 01294657, ekstrahowanie owocni rozpuszczalnikami organicznymi zapewnia ekstrakt, zawierający izobutyloamidy wywierające miejscowe działanie znieczulające już 30 sekund po zastosowaniu na język i trwające do 20 - 80 minut.

Obecnie nieoczekiwanie stwierdzono, że ekstrakt owocni Zanthoxylum bungeanum, sporządzony przez ekstrahowanie dwutlenkiem węgla w warunkach nadkrytycznych wykazuje znaczne działanie przeciwbólowe bez wywierania miejscowego działania znieczulającego, charakterystycznego dla ekstraktów otrzymanych za pomocą rozpuszczalników.

Przedmiotem wynalazku są ekstrakty Zanthoxylum bungeanum, które otrzymuje się je przez ekstrakcję owocni za pomocą CO2 w warunkach nadkrytycznych.

Korzystnie ekstrakty otrzymuje się otrzymuje się przez ekstrakcję CO2 w temperaturze od 35 do 55°C i pod ciśnieniem od 15 MPa do 30 MPa.

Korzystnie ekstrakty zawierają izobutyloamidy w ilości od 20% do 50% wagowych.

Ekstrakt według wynalazku wytwarza się, ekstrahując owocnię Zanthoxylum bungeanum, drobno zmieloną lub przekształconą w tabletki, dwutlenkiem węgla pod ciśnieniem najkorzystniej 8 MPa - 23 MPa, w temperaturze najkorzystniej 35 - 40°C.

Powstały ekstrakt można albo stosować jako taki, po usunięciu wody ekstrakcyjnej, albo oczyszczać dalej przez rozdzielanie w nie mieszających się ze sobą rozpuszczalnikach, takich jak alkohole alifatyczne i alifatyczne węglowodory, korzystnie n-heksan lub eter naftowy.

Powstałe ekstrakty okazują się wywierać znaczące działanie przeciwbólowe, gdy stosuje się je przez skórę u ludzi; dlatego są one cenne do stosowania zarówno w dziedzinie farmacji jak i w kosmetyce.

W dziedzinie farmacji są one przydatne do łagodzenia bólu w cukrzycowej chorobie włośniczek, bólów hemoroidalnych, w przypadku oparzeń i wszelkich postaci miejscowego bólu. Dalszym zastosowaniem ekstraktów według wynalazku jest leczenie swędzenia.

Przedmiotem wynalazku są więc również kompozycje farmaceutyczne, które jako substancję czynną zawierają ekstrakt Zanthoxylum bungeanum otrzymany przez ekstrakcję owocni za pomocą CO2 w warunkach nadkrytycznych, w mieszaninie z odpowiednimi zaróbkami.

Korzystnie kompozycje zawierają ekstrakty otrzymane przez ekstrakcję CO2 w temperaturze od 35 do 55°C i pod ciśnieniem od 15 MPa do 30 MPa.

W dziedzinie kosmetyki, ekstrakty według wynalazku są przydatne w kremach depilujących, preparatach stosowanych po opalaniu, płynach i kremach po goleniu, i we wszystkich leczeniach skóry, wymagających miejscowego działania znieczulającego i przeciw swędzeniu.

Przedmiotem wynalazku są więc również kompozycje kosmetyczne, które jako substancję czynną zawierają ekstrakt Zanthoxylum bungeanum otrzymany przez ekstrakcję owocni za pomocą CO2 w warunkach nadkrytycznych, w mieszaninie z odpowiednimi zaróbkami.

Korzystnie kompozycje zawierają ekstrakty otrzymane przez ekstrakcję CO₂ w temperaturze od 35 do 55°C i pod ciśnieniem od 15 MPa do 30 MPa.

Działanie przeciwswędzące ekstraktów według wynalazku oceniano na podstawie pomiarów elektrofizjologicznych przy użyciu eksperymentalnego modelu preparatu nerw kulszowy szczuramięsień prostujący digitorum longus (EDL) in vitro.

PL 191 160 B1

Stosowano dorosłe szczury rasy Sprague - Dawley uśmiercane przez przedawkowanie dosercowo pentotalu. Wycinano mięsień EDL z długim nerwem kulszowym i umieszczano go w pojemniku do prób elektrofizjologicznych z roztworem Ringera, który zmieniano co 10 minut. Badane ekstrakty, korzystnie z dodatkiem środka powierzchniowo czynnego, dyspergowano w różnych stężeniach, po czym doprowadzano do zetknięcia z włóknami nerwu, węzłami nerwowo-mięśniowymi i mięśniem. Do prób elektrofizjologicznych, w celu rejestrowania zjawiska elektrycznego (potencjał miniaturowej płytki końcowej, potencjały płytek końcowych, potencjały błony komórek mięśniowych) zarówno spontanicznego jak i wywołanego stymulacją nerwu, w komórkach mięśni umieszczano wewnątrzkomórkową mikroelektrodę, wypełnioną 3M roztworem KCl. W tym celu nerw łączono ze stymulatorem i ewentualnie stymulowano raz w ciągu sekundy. Zjawiska elektryczne w komórkach mięśni wykrywano za pomocą mikroelektrody połączonej ze wzmacniaczem sygnału i przedstawiano wizualnie za pomocą oscyloskopu cyfrowego.

Ekstrakty według wynalazku, badane w stężeniach od 0,0005 do 0,002%, wywierają silne, przejściowo aktywujące działanie na synaptyczną transmisję nerwowo-mięśniową, o czym świadczy wzrost częstotliwości potencjałów miniaturowych płytek końcowych i pojawienie się spontanicznych potencjałów płytek końcowych. W przeciwieństwie do tego, ekstrakty uzyskane za pomocą rozpuszczalników, wykazują miejscowe działanie znieczulające, zmniejszają i inhibitują transmisję impulsów nerwowych.

Działanie przeciwbólowe badanych ekstraktów oceniano na 10 zdrowych ochotnikach przez badania szacunkowe lub badanie wrażliwości skóry na ciepło.

Na obszarze łopatki pacjenta umieszczano progresywnie ogrzewaną sondę cieplną w 30 minut po potraktowaniu badanym produktem lub odpowiednim placebo. Mierzono wartość temperatury uznawaną za powodującą u pacjenta ból. Podawano 0,5 ml emulsji sporządzonej według przykładu VII, zawierającej 0,5% ekstraktu Zanthoxylum bungeanum, sporządzonego według przykładu I. Wyniki podane niżej pokazują działanie przeciwbólowe badanego ekstraktu.

Traktowanie T_o T₃₀ minut

Placebo 45,7 + 1,0 45,3 ± 0,4

Ekstrakt 46,0 ± 0,8 47,2 ± 0,4

Ekstrakty według wynalazku można formułować w postaci kremów, płynów, pianek, żeli, do podawania na skórę lub śluzówkę, miękkich kapsułek żelatynowych, twardych kapsułek żelatynowych, tabletek lub czopków; korzystnie ekstrakt według wynalazku formułuje się w postaci kremów lub pianek do leczenia skórnego lub w postaci miękkich kapsułek żelatynowych, tabletek do żucia lub czopków do podawania układowego.

Dawkowanie ekstraktów w preparatach wynosi od 5 do 100 mg na dawkę w preparatach do stosowania układowego, podczas gdy w preparatach do stosowania miejscowego od 0,05 do 1%.

Niżej podane przykłady ilustrują dalej wynalazek, jednak bez ograniczania jego zakresu.

P r z y k ł a d I.

Sporządzanie lipofilowego ekstraktu Zanthoxylum bungeanum.

W opisany niżej sposób, w instalacji do ekstrakcji gazem w warunkach nadkrytycznych o pojemności 25 litrów, wyposażonej w dwa rozdzielacze jako skraplacze do frakcjonowania ekstraktu, ekstrahowano 10 kg owocni Zanthoxylum bungeanum.

Mechanicznie suszono zebrane 10 kg owocni w temperaturze nie wyższej niż 60°C, wytłaczano w kostki i ekstrahowano CO2 w warunkach nadkrytycznych, stosując następujące warunki prób:

- temperatura: 35°C w ekstraktorze, 30°C w pierwszym rozdzielaczu i 20°C w drugim rozdzielaczu;

- ciśnienie: 18 MPa w ekstraktorze, 10 MPa w pierwszym rozdzielaczu i 5 MPa w drugim rozdzielaczu.

Przepływ CO2 wynosił 10 litrów na minutę w ciągu 45 minut.

Ekstrakt zatężano w drugim rozdzielaczu, podczas gdy większość wody obecnej w matrycy z materiału roślinnego była usuwana w pierwszym rozdzielaczu. Po suszeniu ekstraktu w drugim rozdzielaczu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze nie przekraczającej 40°C otrzymano 1,5 kg ekstraktu w postaci pasty, lekko zabarwionej na żółto, o intensywnym zapachu i o zawartości izobutyloamidów około 25% wagowych. Przeprowadzono analizę metodą chromatografii HPLC na kolumnie Hibar RT LiChrospher 100RP-18 z profilem eluowania (1 ml/minutę) podanym w tabeli. Wstrzykiwana ilość wynosiła 5 μΙ roztworu o stężeniu 2 mg/ml.

PL 191 160 B1

Chromatogram przedstawiono na rysunku.

T a b e l a

Czas (minut)	Woda (%)	Acetonitryl (%)	Numer krzywej gradientu
0	60	40	-
20	60	40	6
30	10	90	6
35	60	40	6
40	60	40	6

P r z y k ł a d II.

Sporządzanie lipofilowego ekstraktu Zanthoxylum bungeanum.

Zebrane 10 kg owocni mechanicznie suszono w temperaturze nie wyższej niż 60°C, wytłaczano w kostki i ekstrahowano CO2 w warunkach nadkrytycznych, stosując następujące warunki prób:

- temperatura: 40°C w ekstraktorze, 30°C w pierwszym rozdzielaczu i 20°C w drugim rozdzielaczu;

- ciśnienie: 20.5 MPa w ekstraktorze, 10 MPa w pierwszym rozdzielaczu i 5 MPa w drugim rozdzielaczu. Przepływ CO2 wynosił 10 litrów na minutę w ciągu 45 minut.

Ekstrakt zatężono w drugim rozdzielaczu, podczas gdy większość wody obecnej w matrycy z materiału roślinnego była usuwana w pierwszym rozdzielaczu. Po suszeniu ekstraktu w drugim rozdzielaczu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze nie przekraczającej 40°C otrzymano 1,5 kg ekstraktu w postaci pasty, lekko zabarwionej na żółtozielono, i o takich samych właściwościach fizykochemicznych jak ekstrakt z przykładu I, o zawartości izobutyloamidów około 20%.

P r z y k ł a d III.

Sporządzanie lipofilowego ekstraktu Zanthoxylum bungeanum.

Zebrane 10 kg owocni mechanicznie suszono w temperaturze nie wyższej niż 60°C, wytłaczano w kostki i ekstrahowano CO2 w warunkach nadkrytycznych, stosując następujące warunki prób: temperatura w ekstraktorze 40°C i ciśnienie 23 MPa. Stosunek CO2 stosowanego do ekstrakcji ekstrahowanego leku wynosił 27 - 45 kg na kg leku. Ekstrakt zatężono w rozdzielaczu pod ciśnieniem 5 MPa w temperaturze 20°C. Po wysuszeniu pod zmniejszonym ciśnieniem w temperaturze nie przekraczającej 40°C otrzymano 1,3 kg ekstraktu o lekkim żółtozielonym zabarwieniu i o takich samych właściwościach fizykochemicznych jak ekstrakt z przykładu I.

P r z y k ł a d IV.

Sporządzanie oczyszczanego lipofilowego ekstraktu Zanthoxylum bungeanum.

Lipofilowy ekstrakt owocni Zanthoxylum bungeanum w ilości 0,5 kg, sporządzony jak w przykładzie I, rozpuszczono w 2,5 litra 95% uwodnionego metanolu i ekstrahowano trzykrotnie, każdorazowo 0,5 litra n-heksanu. Fazę heksanową przemyto metanolem, stosując jako znacznik izobutyloamidy, które powinny pozostać w fazie metanolowej. Usunięto nieaktywną fazę heksanową, podczas gdy fazy metanolowe połączono, rozcieńczono 0,6 litra wody i ponownie ekstrahowano dwukrotnie 0,6 litra n-heksanu. Połączone fazy heksanowe odbarwiono 0,3% węgla drzewnego, suszono nad Na2SO4 i zatężono pod zmniejszonym ciśnieniem do oleju w temperaturze nie przekraczającej 40°C, otrzymując 0,22 kg oleistego ekstraktu o konsystencji podobnej do miodu, i o zawartości izobutyloamidów około 50%.

P r z y k ł a d V.

Roztwór alkoholowy Zanthoxylum bungeanum

100 ml roztworu zawiera:

Zanthoxylum bungeanum,

20% roztwór w alkoholu oleilowym 5,5g g

Cyclomethicone 20,00 g

Alkohol 100,0 ml

PL 191 160 B1

P r z y k ł a d VI.

Roztwór alkoholowy Zanthoxylum bungeanum 100 ml roztworu zawiera:

Zanthoxylum Bungeanum,

20% roztwór w alkoholu oleilowym PPG-26 Buteth 26 i uwodorniony olej rącznikowy PEG-40 Metylo-chloroizotiazolinon i Metylo-izotiazolinon Oczyszczona woda P r z y k ł a d VII.

Emulsja Zanthoxylum bungeanum.

100 g zawiera:

Zanthoxylum Bungeanum

20% roztwór w alkoholu oleilowym

Izoheksadekan

Gliceryna

Benzoesan (C12-15) alkilu

Cyclomethicone

Stearynian glicerylu PEG-20 i

Stearynian glicerylu

Wosk lanolinowy

Polimer sieciujący

Akrylany/(C10-30) Akrylan alkilu

Alkohol cetylowy

Imidazolidynylomocznik

Fenoksyetanol

Methyl paraben

Tokoferol

Wersenian disodowy

Woda

P r z y k ł a d VIII.

Płynna emulsja Zanthoxylum bungeanum.

100 g zawiera:

Zanthoxylum Bungeanum 20% roztwór w alkoholu oleilowym Stearynian glicerylu PEG-20 i Stearynian glicerylu Triglicerydy C1₀-1₈Gliceryna

Olej z kiełków pszenicznych

Dimetykon

PPG-25 Laureth-25

Alkohol cetylowy

Hydroksylowana lanolina

Imidazolidynylomocznik

Hectorite (e) Hydroxyethyl

Fenoksyetanol i Methylparaben i

Ethylparaben i Propylparaben i

Butylparaben

Tokoferol

Woda

0,50 g

5,00 g

0,10 g q.s. do 100,0 ml

q.s

0,50 g

5,00 g

4,00 g

2,00 g

1,00 g

0,50 g

0,30 g

0,50 g

0,20 g

0,10 g

0,10 g do 100,0 g

0,50 g

10,00 g 10,00 g 5,00 g 2,00 g 2,00 g 2,00 g 1,00 g 0,50 g 0,30 g 0,50 g

q.s

0,50 g

0,10 g do 100,0 g

PL 191 160 B1

Claims

1. Ekstrakty Zanthoxylum bungeanum, znnmiennn tym, że otrzymuje się je przez ekstrakcję owocni en pxmxcą CO2 w wnrnuSkcO undSrytycetycO.

2. Ekstraktywekłunz entrz.1,z znmieenntym, ż eotrzymujesięjeprzezekstrakcjęCC2 w temparnrnrea od 35 do 55°C i pod ciśuizuizm od 15 MPn do 30 MPn.

3. Ekstraktywekłun zentrZe 1, albu2, zzsimieenntym, że zewieraję izeoutyloomiddw ij oóśioo 20% do 50% wneowych.

4. Komupχyyjefajmuncktyyceg,zznmieenntym, żer eks sunutakgjęccyyugzewierajeekstrakt anuhOoyylnm Unueanunm ohreymnuy preae aStrraScję owocui en pomocą CO2 w wnrnuSncO uadSryryceuycO, w miasynuiuia e odpowiaduimi enróUSnmi.

5. Komupχyyje 1ajmuncktyyceg w^adjg oeatrz. O, oznmieenn tym, oe ekstrznt ZanrOoyylnm Unueaaunm orreymauy preae aStrraScję CO2 w rampararnrea od 35 do 55°C i pod ciśuiauiam od 15 MPn do 30 MPn.

6. Komupχeyjerajmuaektyycegwekługzektrz. 4, albu5, zzamieeneeym, że z ewieraję izeo^ylonmidy w ilości od 20% do 50% wneowych.

7. Komuoxyyje tym, żer jeko cceyuą zewierają ekstraM anurOoyylnm Unueknunm orreymnuy preae aStrraScję owocui en pomocą CO2 w warnuSacO uadSzyryceuycO, w miaseauiuia e odpowiaduimi earóUSami.

8. koometyccne wędlin zastrz. 7, znamienne tym, że zawierają ekstraM ZanrOoyylnm Unueaaunm orreymnuy preae aStrraScję CO2 w rampararnrea od 35 do 55°C i pod ciśuiauiam od 15 MPn do 30 MPn.

9. KomuPxeyjekoxmuryycegweZługzektrz.7, albu8, zznmieenatym. ζζζ.ι^κ5,ζ^^ i zeXutylOt nmidy w ilości od 20% do 50% wneowych.