SK284207B6

SK284207B6 - New lipid ester of nucleoside monophosphates and their use as immunosupressive drugs

Info

Publication number: SK284207B6
Application number: SK1518-96A
Authority: SK
Inventors: Dieter Herrmann; Hans-Georg Opitz; Harald Zilch; Alfred Mertens
Original assignee: Heidelberg Pharma Holding Gmbh
Priority date: 1994-05-28
Filing date: 1995-05-23
Publication date: 2004-11-03
Also published as: EP1229040A2; ES2199250T3; HUT75340A; DK1229040T3; MX9605809A; NO965054D0; CN1168735C; PL185290B1; FI964727A; TW420686B; CN1154111A; CA2190983C; KR100279087B1; NO965054L; JPH10500964A; AU688516B2; PT1229040E; CA2190983A1; DE69530197T2; UA45339C2

Description

Vynález sa týka derivátov nukleozidmonofosfátov, spôsobu ich prípravy, ich použitia a protinádorového prostriedku, ktorý ich obsahuje a je tiež vhodný na potláčanie imunity.

Doterajší stav techniky

Je známy spôsob prípravy a použitia liponukleotidov ako antivírusovo účinných látok (J. Biol. Chem. 265, str. 6112, 1990 a európsky patentový spis číslo EP 0 350 287). Boli však vyskúšané a pripravené len dimyristoylfosfatidylové a dipalmitoylfosfatidylové zvyšky kopulované na príbuzné nukleozidy, ako sú napríklad AZT (azidotymidín) a ddC (2',3'-dideoxycytidín) vrátane ich štruktúr esterov mastných kyselín.

Sú tiež známe nukleozidové konjugáty tioeterlipidov s cytidíndifosfátom (J. Med. Chem. 33, str. 1380, 1990), ktoré majú protinádorovú účinnosť a môžu sa používať v onkológii. Sú známe 5'-(3-sn-fosfatidyl)nukleozidy (Chem. Pharm. Bull. 36, str. 209, 1988), ktoré majú antileukemickú účinnosť, je tiež známy spôsob ich enzymatickej prípravy zo zodpovedajúcich nukleozidov a fosfocholínov v prítomnosti fosfolipázy D s transferázovou aktivitou. Podobne sú známe nukleozidové konjugáty (J. Med. Chem. 34, str. 1408, 1991) majúce anti-HIV-1 účinnosť, ktoré sú substituované metoxyskupinou alebo etoxyskupinou v sn-2 polohe lipidového podielu. Zverejnená svetová prihláška vynálezu WO 92/03462 opisuje tioeterlipidové konjugáty majúce protivírusovú účinnosť, najmä pre ošetrovanie HIV infekcií.

Zlúčeniny podobné ako zlúčeniny podľa vynálezu sú opísané v európskom patentovom spise číslo EP-A-0350287, ktorý sa však týka zodpovedajúcich 1,2-diesterov glycerolu. Podobných zlúčenín sa tiež týkajú ďalšie patentové spisy (napríklad EP 0122151, EP 0262876, JP 63091090, WO 92/16091 aWO 92/03462).

Zlúčeniny ďalej uvedeného všeobecného vzorca (I), kde však znamená X a Y atóm kyslíka, spôsob ich prípravy a ich použitie na výrobu farmaceutických prostriedkov sú rovnako v literatúre opísané (patentové spisy EP 0122151, EP 0262876 a JP 63091090).

Sú známe tiež protirakovinovo pôsobiace nukleozidfosfolipidové konjugáty s tioéterovými väzbami.

Sú známe tiež 6-merkaptopurínribozidové a pyrimidínové nukleozidy ako účinné látky potláčajúce imunitu (patentové spisy EP 03066845 a DE 2930904).

Je teda prirodzené, že sa v súbore takýchto tried zlúčenín hľadajú nové a účinnejšie látky, ktoré by boli vhodné na výrobu účinných liečiv. Tento vynález sa týka takéhoto úsilia.

Podstata vynálezu

Podstatou vynálezu je všeobecného vzorca derivát nukleozidmonofosfátu r¹-x-ch₂R²-Y—CH o

,ťľ).

kde znamená

R¹ lineárnu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 1 až 20 atómami uhlíka,

R² atóm vodíka alebo lineárnu, alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 1 až 20 atómami uhlíka,

R³ atóm vodíka alebo hydroxylovú skupinu,

R⁴ hydroxylovú skupinu,

R⁵ atóm vodíka alebo hydroxylovú skupinu,

X atóm síry alebo sulfonylovú skupinu,

Y atóm kyslíka,

B purínovú a/alebo pyrimidínovú skupinu všeobecného vzorca (IlI(a-d))

(llfc) (ΙΠΦ

R⁶ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu, alkenylovú alebo alkinylovú skupinu vždy s 2 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu alebo atóm halogénu,

R⁶ atóm vodíka alebo benzylovú, alebo fenyltioskupinu,

R⁷ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu alebo atóm halogénu,

R⁸ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka atóm halogénu, hydroxylovú skupinu alebo aminoskupinu, R⁹ atóm vodíka aminoskupinu alebo atóm halogénu,

R¹⁰ atóm vodíka, atóm halogénu, merkaptoskupinu, hydroxylovú skupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylmerkaptoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aminoskupinu, ktorá je prípadne monosubstituovaná alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka a/alebo cykloalkylovú skupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, skupinu arylovú, hetarylovú, aralkylovú alebo hetarylalkylovú, pričom arylový alebo hetarylový podiel je prípadne substituovaný jednou alebo niekoľkými merkaptoskupinami, skupinami hydroxylovými, alkoxyskupinami s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylovými skupinami s 1 až 6 atómami uhlíka, alebo atómom halogénu alebo znamená alkenylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, pripadne monosubstituovaná alebo disubstituovanú alkylovou skupinou alebo alkoxyskupinou, za podmienky, že aspoň jeden zo symbolov R³ alebo R⁵znamená atóm vodíka, jeho tautoméry, opticky aktívne formy a racemická zmesi a jeho fyziologicky vhodné soli anorganických a organických kyselín a/alebo zásad.

Vynález sa tiež týka spôsobu prípravy lipidových esterov nukleozidmonofosfátov všeobecného vzorca (I) a farmaceutických prostriedkov, ktoré je obsahujú.

Pretože lipidové estery nukleozidmonofosfátov všeobecného vzorca (I) obsahujú asymetrické uhlíkové atómy, týka sa vynález tiež opticky aktívnych foriem a racemických zmesí týchto zlúčenín.

Lipidové estery nukleozidmonofosfátov všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu majú hodnotné farmaceutické vlastnosti. Osobitne sú vhodné na terapiu a profylaxiu malígnych nádorov, ako sú napríklad malignancies, neoplazmy, karcinómy, sarkómy alebo leukémií v terapii nádorov. Okrem toho tieto zlúčeniny podľa vynálezu potlačujú imunitu, a preto sa môžu používať v terapii orgánovo špecifických alebo generalizovaných autoimunitných chorôb, ako sú napríklad reumatoidná artritída, systemický lupus erytromatosus a rozptýlená skleróza alebo pri prevencii alogénických alebo semialogénických odmietaní štepov, napríklad obličiek, pečene, pľúc a srdca. Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu majú okrem toho účinnosť antivírusovú, antiretrovírusovú alebo antionkologickú a sú preto vhodné na profylaxiu a terapiu virusovo a onkogénicky navodených/spôsobcných ochorení (ako je napríklad AIDS). V porovnaní s dosiaľ používanými zlúčeninami pre ošetrovanie malígnych nádorov majú zlúčeniny podľa vynálezu zvýšenú účinnosť alebo nižšiu toxicitu a preto majú širšiu terapeutickú použiteľnosť.

Z tohto dôvodu sú výhodné, pretože podávanie liečiv, obsahujúcich tieto zlúčeniny, môže byť kontinuálne po dlhší čas a je možné predchádzať tomu, že sa s podávaním musí prestať alebo sa podávanie musí prerušovať, čo je časté v prípade cytostatík dosiaľ používaných v nádorovej liečbe vzhľadom na ich nežiaduce vedľajšie účinky.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu uvedené nedostatky nemajú. Ich pôsobenie ako imunitu potlačujúce alebo protinádorové látky je bez nešpecifickej cytotoxicity v dávkach, prichádzajúcich farmakologicky do úvahy.

Podobne zlúčeniny podľa vynálezu všeobecného vzorca (I) a farmaceutické prostriedky, ktoré je obsahujú, sa môžu používať spolu s inými liečivami na ošetrovanie a profylaxiu uvedených chorôb. Ako príklady takých prostriedkov obsahujúcich ďalšie látky sa uvádzajú inhibítory mitózy, ako sú napríklad kolchicín, mitopodozid, vinblastín, alkylačné cytostatické činidlá, napríklad cyklofosfamid, melphalan, myleran alebo cisplatín, antimetabolity napríklad antagonisty kyseliny folovej (metotrexat) a antagonisty purínových a pyrimidínových zásad (merkaptopurín, 5-fluorouridín, cytarabín), cytostaticky aktívne antibiotiká, napríklad antracyklíny (napríklad doxorubicín, daunorubicin), hormóny, napríklad fosfestrol, tamoxifen, iné cytostaticky/cytotoxicky pôsobiace chemoterapeutické činidlá a iné imunitu potlačujúce látky (napríklad cyklosporíny, FK 506, rapamycíny a desoxyspergualin).

Predovšetkým sú možnými soľami zlúčenín všeobecného vzorca (I) soli alkalických kovov, kovov alkalických zemín a amóniové soli fosfátovej skupiny. Výhodnými soľami s alkalickými kovmi sú soli lítne, sodné a draselné. Ako soli kovov alkalických zemín prichádzajú do úvahy soli horečnaté a vápenaté. Amóniovými soľami sa rozumejú soli obsahujúce amóniový ión, ktorý môže byť substituovaný až štyrmi alkylovými skupinami s 1 až 4 atómami uhlíka a/alebo aralkylovými skupinami, výhodne benzylovými skupinami. Substituenty sú od seba nezávisle rovnaké alebo rôzne.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu môžu obsahovať zásadité skupiny, najmä aminoskupiny, a môžu sa preto meniť na adičné soli s výhodnými anorganickými alebo organickými kyselinami. Ako vhodné kyseliny sa príkladne uvádzajú kyselina chlorovodíková, bromovodíková, sírová, fosforečná, fumarová, jantárová, vín na, citrónová, mliečna, maleínová a metánsulfónová kyselina.

Vo všeobecnom vzorci (I) znamená R¹ výhodne alkylovú skupinu s priamym reťazcom s 8 až 15 atómami uhlíka. Predovšetkým znamená R¹ skupinu nonylovú, dccylovú, undecylovú, dodecylovú, tridecylovú alebo tetradecylovú skupinu. Vo všeobecnom vzorci (I) znamená R² výhodne alkylovú skupinu s priamym reťazcom s 8 až 15 atómami uhlíka. Predovšetkým znamená R² skupinu oktylovú, nonylovú, decylovú, undecylovú, dodecylovú, tridecylovú alebo tetradecylovú skupinu. Symbol X znamená výhodne atóm síry alebo skupinu sulfonylovú a Y znamená výhodne atóm kyslíka. Výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde znamená Y väzbu, R² atóm vodíka a R¹ alkylovú skupinu s 1 až 20 atómami uhlíka.

Symbol R⁵ znamená výhodne atóm vodíka. Symboly R³ a R⁴ znamenajú výhodne hydroxylovú skupinu. Osobitne výhodné sú zlúčeniny všeobecného vzorca (I), kde znamená R³ a R⁵ atóm vodíka.

V zásadách všeobecného vzorca (111) znamenajú R⁶ a R⁷ vždy atóm vodíka, skupinu metylovú, trifluórmetylovú, etylovú, propylovú alebo butylovú, alebo atóm halogénu ako fluóru, chlóru, brómu alebo jódu, alebo R⁶ skupinu alkenylovú alebo alkylovú prípadne substituovanú atómom halogénu.

Osobitne výhodne znamenajú R⁶ a R⁷ vždy atóm vodíka, skupinu metylovú, trifluórmetylovú, etylovú alebo atóm halogénu ako fluóru, chlóru, brómu alebo jódu, alebo R⁶skupinu vinylovú, propenylovú, etinylovú alebo propinylovú, ktorá je prípadne substituovanú atómom halogénu.

Výhodne znamená symbol R⁸ atóm vodíka, skupinu metylovú, etylovú, propylovú alebo butylovú, aminoskupinu alebo atóm halogénu ako fluóru, chlóru, brómu alebo jódu, výhodne atóm chlóru alebo brómu.

Výhodne znamená symbol R¹⁰ atóm vodíka, atóm fluóru, chlóru alebo brómu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, najmä metoxyskupinu, etoxyskupinu, propoxyskupinu, butoxyskupinu alebo hexyloxyskupinu, merkaptoskupinu, alkylmerkaptoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, osobitne metylmerkaptoskupinu, etylmerkaptoskupinu, butylmerkaptoskupinu a hexylmerkaptoskupinu alebo aminoskupinu, ktorá môže byť monosubstituovaná alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, ako je skupina metylová, etylová, butylovú alebo hexylová skupina, hydroxyalkylovou skupinou s 2 až 6 atómami uhlíka, ako je skupina hydroxyetylová, hydroxypropylová, hydroxybutylová alebo hydroxyhexylová, cykloalkylovou skupinou s 3 až 6 atómami uhlíka, ako je skupina cyklopropylová, cyklopentylová alebo cyklohexylová skupina, skupinou arylovou, výhodne fenylovou skupinou, skupinou aralkylovou, ako je najmä skupina benzylová prípadne substituovaná jednou alebo niekoľkými hydroxyskupinami alebo metoxyskupinami, alkylovými skupinami s 1 až 6 atómami uhlíka, ako je skupina metylová, etylová, propylová, butylová alebo hexylová skupina, alebo atómami halogénu napríklad fluóru, chlóru alebo brómu. Podobne môže byť substituovaná aminoskupina hetarylalkylovou skupinou alebo v hetarylovou skupinou, ako sú najmä napríklad skupina tienylová, furylová alebo pyridylovú. Výhodne je hetarylovou skupinou mienená skupina tienylmetylová, furylmetylová alebo pyridylmetylová skupina.

Výhodne sú nasledujúce nukleozidy vhodné ako kopulačné zložky na prípravu lipidnukleotidových konjugátov všeobecného vzorca (I) 6-merkaptopurín-9-3-D-ribofuranozid, 5-fluorouridin, inozín,

5-metyluridín,

2',3'-dideoxy-2',3'-difluorotymidín,

5-chlorouridín,

5-trifluorometyluridín,

5-etinyluridín,

5-etinylcytidín,

-prop-1 -eny 1 uridín,

5- prop-2-enyluridín, adenozín, guanozín,

2,6-diaminopurín-9-P-D-ribofuranozid,

2-amino-6-merkaptopurín-9-[5-D-ribofuranozid,

2-amino-6-metylmerkaptometylpurín-9-p-D-ribofuranozid,

2-amino-6-chlórpurín-9-p-D-ribofuranozid,

2'-desoxy-2'-aminoadenozín,

2'-desoxy-2'-azidoadenozín,

2'-desoxy-2'-azidocytidín,

2’-desoxy-5-fluorouridín,

2-chloroadenozín,

2-fluoroadenozín,

3'-desoxy-5-fluoroadenozín,

6- metylmerkaptopurín-9-P-D-ribofuranozid,

2-bromoadenozín,

2-fluoro-2'-desoxyadenozín.

Spôsob prípravy lipidového esteru nukleozidmonofosfátov všeobecného vzorca (I) spočíva podľa vynálezu v tom, že

1. sa necháva reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (V)

R¹-X- CH?

R^Z-Y-CH O ¹¹

CH₂—O-P-OH

OH kde R¹, R², X a Y majú uvedený význam, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VI)

kde R³, R⁴, R⁵ a B majú uvedený význam, alebo znamenajú hydroxylovú skupinu chránenú skupinou chrániacou kyslík, ktorá je známa pracovníkom v odbore, v prítomnosti aktivačného chloridu kyseliny, napríklad chloridu 2,4,6triizopropylbenzénsulfónovej kyseliny a v prítomnosti terciámej dusíkatej zásady, napríklad pyridínu alebo lutidínu, v inertnom rozpúšťadle, ako napríklad v toluéne alebo priamo v bezvodom pyridíne a prípadne následne po hydrolýze sa odstraňuje skupina chrániaca kyslík spôsobom nukleozidovej chémie, alebo

2. sa necháva reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (VII) r¹-x-ch₂

R²—Y—CH O CH₃

I |l t I

CH₂-O-P-O-CH₂-CH₂-n-OH₃ (VII), O CHj kde R¹, R², X a Y majú uvedený význam, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VI), kde R³, R⁴, R⁵ a B majú uvedený význam, v prítomnosti fosfolipázy D zo Streptomyces v inertnom rozpúšťadle, napríklad v chloroforme, v prítomnosti vhodného tlmivého roztoku a prípadne sa po reakcii odstraňuje skupina chrániaca kyslík spôsobom nukleozidovej chémie.

Zlúčeniny všeobecného vzorca (V) a (VI) sa pripravujú obdobne ako je to opísané v Lipids 22, str. 947, 1987 a J. Med. Chem. 34, str. 1377,1991.

Látky, obsahujúce ako účinnú zložku zlúčeninu všeobecného vzorca (I) podľa vynálezu na ošetrovanie vírusových infekcií, sa môžu podávať v kvapalnej alebo v pevnej forme intestinálnou alebo parenterálnou cestou. Ako bežné formy podávania sa napríklad uvádzajú tablety, kapsuly, potiahnuté tablety, sirupy, roztoky alebo suspenzie. Ako vstrekovacie prostredie sa výhodne používa voda obsahujúca prísady, ako sú napríklad stabilizátory, činidlá podporujúce rozpustnosť a tlmivé roztoky, ktoré sú bežné pre vstrekovacie prostriedky. Ako také prísady sa príkladne uvádzajú vínanové a citrátové tlmivé roztoky, etanol, komplexotvorné činidlá ako etyléndiaminotetraoctová kyselina a jej netoxické soli, vysokomolekulárne polyméry, napríklad kvapalný polyetylénoxid pre riadenie viskozity. Kvapalné nosiče na vstrekovanie roztoku musia byť sterilné. Sterilné roztoky sa plnia výhodne do ampúl. Ako pevné nosiče sa napríklad uvádzajú škrob, laktóza, manitol, metylcelulóza, mastenec, vysoko disperzné kyseliny kremičité, želatína, agar-agar, fosforečnan vápenatý, stearát horečnatý, rastlinné a živočíšne tuky a pevné vysokomolekulárne polyméry napríklad polyetylénglykol.

Farmaceutické prostriedky na orálne podanie môžu obsahovať prípadne činidlá na vylepšenie chuti alebo sladidlá.

Podávaná dávka závisí od rôznych faktorov, ako sú napríklad spôsob podania, druh, vek alebo individuálny stav.

Spravidla sa zlúčeniny všeobecného vzorca podľa vynálezu podávajú v množstve 0,1 až 100 mg, výhodne 0,2 až 80 mg denne na kg telesnej hmotnosti. Je výhodné dennú dávku rozdeliť do 2 až 5 podaní a podávať účinnú látku vo forme tabliet obsahujúcich pre každé podanie 0,5 až 500 mg. Podobne sa môžu podávať tablety s oneskoreným uvoľňovaním, ktoré znižuje počet podaní na 1 až 3 tablety za deň. Obsah účinnej látky v tabletách s pozdržaným uvoľňovaním je 2 až 1000 mg. Účinná látka sa tiež môže podávať kontinuálnou infúziou, pričom je spravidla dostatočné množstvo 5 až 1000 mg za deň.

Popri zlúčeninách uvedených v príkladoch, sú podľa vynálezu možné nasledujúce zlúčeniny všeobecného vzorca (I):

1. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-chlorouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

2. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-trifluorometyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

3. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (6-merkaptopurín-9-[!-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

4. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

5. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-prop-l-enyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

6. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-etinylcytidin)-5'-fosforečnej kyseliny,

7. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (2-amino-6-merkaptopurín-9-3-D-ribofúranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

8. (3-dodccylmcrkapto-2-dccyloxy)propylester (2,6-diaminopurín-9-[5-D-ribofuranozid)-5’-fosforečnej kyseliny,

9. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-prop-2-enyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

10. (3-dodecylsulfonyl-2-decyloxy)propylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

11. (3-dodecylsulfonyl-2-decyloxy)propylester (5-chlorouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

12. (3-dodecylsulfonyl-2-decyloxy)propylester (6-merkaptopurín-9-p-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

13. (3-dodecyloxy-2-decyloxy)propylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

14. (3-dodecyloxy-2-decyloxy)propylester (6-merkaptopurín-9-3-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

15. (3-dodecylmerkapto-2-decylmerkapto)propylester (5-flourouridín)-5 '-fosforečnej kyseliny,

16. (3-undecylmerkapto-2-undecyloxy)propylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

17. (3-undecylmerkapto-2-undecyloxy)propylester (5-triflourometyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

18. (3-undecylmerkapto-2-undecyloxy)propylester (6-merkaptopurín-9-fl-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

19. (3-decylmerkapto-2-dodecyloxy)propylester (5-triflourometyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

20. (3-undecylmerkapto-2-dodecyloxy)propylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

21. (3-undecylmerkapto-2-decyloxy)propylcstcr (5-triflourometyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

22. (3-tetradecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (6-merkaptopurín-9-P-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

23. (3-tridecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-flourouridin)-5'-fosforečnej kyseliny,

24. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (2-flouroadenozín)-5'-fosforečnej kyseliny,

25. (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (2-desoxy-2-fl ouroadenozín)-5 '-fosforečnej kysel iny,

26. dodecylester (6-merkaptopurín-9-3-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny,

27. hexadecylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

28. eicosylester (5-triflourometyluridín)-5'-fosforečnej kyseliny,

29. dodecylester (5-triflourouridm)-5'-fosforečnej kyseliny,

30. dodecylester (6-merkaptopurín-9-3-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny.

Vynález objasňujú, žiadnym spôsobom však neobmedzujú nasledujúce príklady praktického rozpracovania a pripojené obrázky.

Prehľad obrázkov na výkresoch

Na obr. 1 je diagram vplyvu 5-FU-DMDOPE na L1210 leukémiu in vivo.

Čas prežitia (Exp. 950001). Na osi x sú dni po inokulácii L 1210, na osi y prežitie v percentách jedincov, kontrola I (PBS) x 30/5 x 0 mg/kg x deň x 30/5 x 1 mg/kg x deň x 30/5 x 3 mg/kg x deň — 2 x 30/5 x 10 mg/kg x deň — kontrola II (PBS)

Na obr. 2 je diagram vplyvu 5-FU na L1210 leukémiu in vivo.

Čas prežitia (Exp. 950066, časť II). Na osi x sú dni po inokulácii L 1210, na osi y prežitie v percentách jedincov, kontrola (PBS) “ 2 x 10/5 x 0,03 mg/kg x deň _K 2 x 10/5 x 0,10 mg/kg x deň — 2 x 10/5 x 0,30 mg/kg x deň ⁶— 2 x 10/5 x 1,00 mg/kg x deň

Príklady uskutočnenia vynálezu

Príklad 1 (3-Dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-flourouridín)-5'-fosforečnej kyseliny

3,6 g (6,1 mmol) (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru fosforečnej kyseliny sa spracuje dvakrát 30 ml bezvodého pyridínu a skoncentruje sa odparením. Zvyšok sa rozpustí v 30 ml bezvodého pyridínu, spracovaného 2,76 g (9,1 mmol) chloridu 2,4,6-triizopropylbenzénsulfónovej kyseliny v prostredí dusíka a mieša sa 30 minút pri teplote miestnosti. Potom sa pridá 1,60 g (6,1 mmol) 5-fluorouridínu (Fluka) a zmes sa nechá stáť 24 hodín v prostredí dusíka.

Hydrolýza sa vykoná 15 mi vody, zmes sa mieša ďalšie 2 hodiny pri teplote miestnosti, zbaví sa rozpúšťadla vo vákuu a dvakrát sa stripuje malým množstvom toluénu. Zvyšok sa vyčisti stĺpcovou chromatografiou na LiChroprep^RRP-18 s elučným činidlom metanol/ voda s gradientom 7/1 proti metanolu. Výťažok je 3,1 g (69 % teórie) v podobe oleja, R_f= 0,24 (dichlormetán/metanol 8/2).

R_f = 0,55 (dichlormctán/metanol/voda 6,5/2,5/0,4 na doštičkách Merck 5715 TLC, silikagél 60 F.

(3-Dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester fosforečnej kyseliny sa pripraví spôsobom opísaným vo svetovom patentovom spise číslo WO 92/03462.

Príklad 2 (3-Dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (6-merkaptopurín)-9-p-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny

6,2 g (12,5 mmol) (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru fosforečnej kyseliny sa spracuje 5,7 g (18,75 mmol) chloridu 2,4-6-triizopropylbenzénsulfónovej kyseliny spôsobom opísaným v príklade 1 a následne 3,55 g (11,25 mmol) 6-nierkaptopurín-9-[l-D-ribofuianozidu a po 24 hodinách sa hydrolyzuje vodou. Potom sa pomaly prikvapká 2,85 g octanu vápenatého v 15 ml vody, čím sa vyzráža surová vápenatá soľ konjugátu. Po ďalšom miešaní zrazeniny s acetónom (1/10) sa získa 6 g amorfného surového produktu, ktorý má 72 % plochu podľa HPLC.

Vápenatá soľ sa suspenduje v 350 ml metanolu, spracuje sa 150 g Amberlitru IR 120 vo forme Na⁺ a mieša sa dva dni. Potom sa iónomenič odstráni, filtrát sa odparí a zvyšok sa vyčistí stĺpcovou chromatografiou na LiChroprep^R RP-18 s lineárnym gradientom metanol/voda 5/1 až 9/1. Frakcia, obsahujúca produkt, sa odparí vo vákuu a zvyšok sa zmieša s acetónom a vysuší sa. Výťažok: 3,52 g (41 % teórie). DC: Rf = 0,45 (izopropanol/butylacctátToncentrovaný amoniak/voda 50/30/5/15).

Príklad 3

Sodná soľ (3-dodccylmcrkapto-2-dccyloxy)propylcstcru (6-merkaptopurín)-9-3-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny

Obdobne ako podľa príkladu 2 sa nechá reagovať 41,4 g (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru fosforečnej kyseliny v 400 ml bezvodého pyridínu s 42,9 g chloridu 2,4,6-triizopropylbenzénsulfónovej kyseliny a následne s 23,7 g 6-merkaptopurín-9-3-D-ribofuranozidu. Surová vápenatá soľ, ktorá sa získa filtráciou nasávacím filtrom po hydrolýze a precipitácii s 25 g octanu vápenatého v 160 ml vody sa rozdelí medzi 500 ml MTB a 250 ml 2N kyseliny chlorovodíkovej a mieša sa až do úplného rozpustenia v organickej fáze. Organická fáza sa oddelí, premyje sa nasýteným roztokom chloridu sodného a skoncentruje sa v rotačnej odparke. Zvyšok sa vnesie do 80 g LiChroprepu RP-18 (spracuje sa roztok MTB surového produktu s RP-18, odpa rí sa a vysuší) a separuje sa po dávkach v pre-stĺpci na RP-18. Zakaždým slúži ako elučný roztok zmes 3,7 1 metanolu, 400 ml vody, 3 ml ľadovej kyseliny octovej a 2 g octanu sodného. Frakcie, obsahujúce produkt, sa spoja, žiadaná zlúčenina sa vyzráža prísadou 20 g octanu vápenatého v 100 ml vody a sfiltruje sa za odsávania. Výťažok: 32 g (43 % teórie).

Vápenatá soľ sa suspenduje v 250 ml MTB, extrahuje sa 80 ml 2N kyseliny chlorovodíkovej pretrepávanim a organická fáza sa premyje dvakrát nasýteným roztokom chloridu sodného. Po odstránení rozpúšťadla sa zvyšok rozpustí v 200 ml toluénu a hodnota pH sa nastaví na 7 proti Friscolytovej elektróde 30 % roztokom metylátu sodného. Sodná soľ sa vyzráža vmiešaním do 200 ml acetónu, reakčná zmes sa sfiltruje za odsávania a produkt sa vysuší vo vákuu. Výťažok je 29 g (37 % teórie).

R_f = 0,18 (silikagél; elučné činidlo izopropanol/butylacetát/ voda/koncentrovaný amoniak 50/30/15/5).

Príklad 4

Sodná soľ (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru (6-merkaptopurín)-9-P-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnej kyseliny

Podobne ako podľa príkladu 3 sa pripravuje surový konjugát zo 40 g 6-merkaptopurín-9-P-D-ribofuranozidu. Surový produkt sa čistí stĺpcovou chromatografiou pri použití vždy 8 g na stĺpci s fázou DIOLu (priemer 4 cm, dĺžka 25 cm) (detekcia pri 254 nm; elučné činidlo systém metanol/MTB 10/4). Použitá vzorka sa jasne rozpustila v elučnom činidle. Produkt, obsahujúci frakcie rozličného rozdelenia, sa spoja, odparia sa a vyzrážajú sa v podobe sodnej soli z toluénu a acetónu ako podľa príkladu 3.

Výťažok je 64,5 g (51 % teórie).

R_f= 0,85 (DIOLová fáza; elučné činidlo metanol).

Príklad 5

Sodná soľ (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru (6-metylmerkaptopurín)-9-p-D-ribofuranozid)-5'-fosforečnéj kyseliny

Podobne ako podľa príkladu 1 sa necháva reagovať 14,9 g 6-metylmcrkaptopurín-9-p-D-ribofuranozidu (50 mmol) so zmesovým anhydridom, pripraveným z 27,3 g (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)-propylesteru fosforečnej kyseliny a 25 g chloridu 2,4,6-triizopropylbenzénsulfónovej kyseliny v 250 ml bezvodého pyridínu, reakčný produkt sa hydrolyzuje a skoncentruje sa odparením. Obdobne ako podľa príkladu 3 sa surový produkt (HPLC: 67 % plocha) čistí chromatografiou na RP-18, vyzráža sa v podobe vápenatej soli, ktorá sa premení na sodnú soľ. Výťažok je 15,2 g (38 % teórie). R_f = 0,22 (silikagél; elučné činidlo izopropanol/butylacetát/ voda/koncentrovaný amoniak 50/30/15/5).

Príklad 6

Sodná soľ (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru (5-fluorouridin)-5'-fosforečnej kyseliny

Podobne ako podľa príkladu 1 sa premieňa 50 g 5-fluorouridinu na surový konjugát, vyzráža sa v podobe vápenatej soli spôsobom podľa príkladu 3 a premieňa sa následne na voľnú kyselinu, čistí sa v podobe surového produktu chromatografiou podobne ako podľa príkladu 4 na DIOLovej fáze pri použití systému metanol/MTB 10/4 ako elučného činidla). Sodná soľ, pripravená ako podľa príkladu 3 sa izoluje vo výťažku 69 % teórie.

R_f= 0,35 (DIOLové doštičky; elučné činidlo systém metanol/MTB 10/4).

Príklad 7

Hodnota IC₅o (pg/ml) pre azatioprin, 6-merkaptopurín (6-MP), 6-merkaptopurinribozid, BM 92.0729 a doxorubicín v skúškach CFU-E a CFU-GM

Nasledujúca tabuľka ukazuje hodnoty IC₅₀ (pg/ml) pre azatioprin, 6-merkaptopurín (6-MP), 6-merkaptopurínribozid v porovnaní so 6-merkaptopurínribozidéterlipidovým konjugátom BM 92.0729 pre in vitro cytotoxicitu pre myšie kostné dreňové stemálne bunky vrátane systému kolóny tvoriaca jednotky/erytrocyty (CFU-E) a systému kolóny tvoriace jednotky/granulocyty-makrofágy (CFU-GM). Cytostatická/cytotoxická zlúčenina doxorubicín bola použitá tiež na porovnanie. Všetky zlúčeniny sa skúšajú v troch až šiestich rôznych experimentálnych koncentráciách v závislosti od najmenej dvojnásobnej alebo trojnásobnej inkubácie na skúšanú koncentráciu.

Ako je z výsledkov zrejmé, BM 92.0700 znášajú kostné dreňové stemálne bunky oveľa lepšie ako všetky ostatné skúšané zlúčeniny a najmä ako 6-merkaptopurinribozid.

Tabuľka

Hodnota IC₅₀ (pg/ml) pre azatioprin, 6-merkaptopurín (6-MP), 6-merkaptopurínribozid, BM 92.0729 a doxorubicín v skúškach a CFU-E a CFU-GM

Zlúčenina	CFU-E	CFU-GM
Azatioprin 6-MP 6-MP-ribozid BM 92.0729 doxorubicín	0,0004 ± 0,0001 (4) 0,0003 ± 0,0001 (4) 0,0003 ± 0,0001 (4) 0,0560 ±0,0130 (5) 0,0017 ±0,0005 (4)	0,0043 ±0,00190 (3) 0,0023 ± 0,00009 (3) 0,0023 ±0,00013 (3) 0,2470 ± 0,04400 (6) 0,0500 ± 0,00400 (4)
^a stred ± SEM, n počet rôznych skúšok

Príklad 8

Toxicita pre kostnú dreň pre BM 92.0729, azatioprin, 6-merkaptopurín, 6-merkaptopurínribozid v prípade samice myši Balb/c, deň + 4 (exp. 930740)

Experiment 930740 dokladá toxicitu pre kostnú dreň pre BM 92.0729, azatioprin, 6-merkaptopurin, 6-merkaptopurínribozid in vivo v prípade samice myši Balb/c, ktorá sa ošetruje raz denne podaním p. o. počas štyroch nasledujúcich dní (deň 0 až deň + 3). Myši sa usmrtia v deň + 4 a stanovuje sa cclularita kostnej drene (bunka/stehenná kosť). Výsledky dokladajú, že neexistuje toxicita pre kostnú dreň v prípade 6-merkaptopurínribozidéterlipidového konjugátu BM 92.0729 až do najvyššej skúšanej dávky, to znamená 100 mg.kg ’.deň’¹, čo zodpovedá na molámej báze dávke 30 mg.kg '.deň’¹ 6-merkaptopurinribozidu, pričom 6-merkaptopurínribozid má na rozdiel od éterlipidového konjugátu BM 92.0729 jasné, od dávky závislé zníženie celularity kostnej drene. To samé sa pozoruje v prípade iných látok vrátane azatioprínu a 6-merkaptopurínu.

Tabuľka

Toxicita pre kostnú dreň pre BM 92.0729, azatioprin, 6-merkaptopurín a 6-merkaptopurínribozid v prípade samice myši Balb/c, deň + 4 (exp. 930740)

Zlúčenina	Dávka mg.kg . .deň'¹	Bunky/stehenná kosť 10⁶
kontrola (05 % Tylója)	-	15,9 ± 1,4(8) ^a
azatioprin	10	11,6 ±0,4 (9)*
azatioprin	30	9,6 ± 0,9 (9) **
6-merkaptopurín	10	13,0 ±1,5 (8)
6-merkaptopurín	30	6,5 ± 0,7 (9) **
6-merkaptopurínribozid	10	12,6 ±0,5 (9) **

6-merkaptopurínri- bozid	30	9,3 ± 0,5 (9) **
BM 92.0729	30	15,4 ±0,9 (9)
BM 92.0729	100	13,0 ±0,6 (9)

³ stred ± SEM, ošetrenie raz denne p. o. deň 0 až deň + 3, usmrtenie deň + 4 * p < 0,05 test Mann-Whitney ** p < 0,01 test Mann-Whitney

Príklad 9

Toxicita pre kostnú dreň pre BM 92.0729, azatioprín, 6-merkaptopurín, 6-merkaptopurínribozid a cyklosporín A v prípade samice myši Balb/c, deň + 4 (exp. 940026)

Experiment 940026 je skúška, ktorej zámerom je reprodukovať výsledky podľa experimentu 930740 (príklad 8). Pri tejto skúške sa pridáva tiež cyklosporín A ako porovnávacia zlúčenina. Experiment 940026 potvrdzuje výsledky experimentu 930740 in vivo.

Tabuľka

Zlúčenina	Dávka mg.kg’.deň’¹	Bunky/stehenna kosť 10⁶
kontrola (0,5 % Tylóza)	-	15,6 ±0,8 (10)³
azatioprín	10	11,1 ±0,6 (10)**
azatioprín	30	9,1 ±0,5 (10) **
6-merkaptopurín	10	10,9 ±0,9 (10) *
6-merkaptopurín	30	6,2 ±0,5 (10)**
6-merkaptopurínribozid	10	13,7 ± 1,4(10) *
6-merkaptopurínribozid	30	8,4 ±0,4 (10)**
BM 92.0729	30	14,3 ±0,5 (10)
BM 92.0729	100	13,0 ±0,4 (10)
cyklosporín A	5	13,1 ±0,4(10)
cyklosporín A	10	7,6 ±1,4 (10) **
³ stred ± SEM, ošetrenie raz denne p. usmrtenie deň + 4	o. deň 0 až deň + 3,
* p < 0,05 test Mann-Whitney
** p < 0,01 test Mann-Whitney

Príklad 10

Toxicita pre kostnú dreň (μΜ) pre BM 92.0700 a 5-FU v skúškach CFU-E a CFU-GM

V tabuľke, uvedenej v Encl. 4, sa uvádza stredná hodnota IC₅₀ pre 5-fluorouridín (5-FU) a 5-FU éterlipidový konjugát BM 92.0700 pre toxicitu in vitro pre kostnú dreň v skúškach CFU-E a CFU-GM. Skúšobné podmienky sú uvedené v tabuľke v príklade Ί.

Zo zistených hodnôt vyplýva, že éterlipidový konjugát 5-fluorouridínu BM 92.0700 je 610-krát menej toxický s ohľadom na erytrocytové a 238-krát menej toxický s ohľadom na granulocytové makrofágové kostné dreňové kmeňové bunky v porovnaní so samotným 5-FU.

Tabuľka

Zlúčenina CFU-E^a CFU-GM³

BM 92.0700 0,37200(3) 1,17800(7)

610x 238x

5-FU 0,00061 (3) 0,00496(10) ³ stred ± SEM, n počet rôznych skúšok

Príklad 11

Vplyv 5-FU éterlipidového konjugátu BM 92.0700 (obr. 1) a 5-FU (obr. 2) na L 1210 leukémiu in vivo: čas prežitia

Myši sa naočkujú bunkami leukémie L 1210 v deň 0 (n = počet zvierat/skupina) a ošetrujú sa raz denne i. p. od dňa 0 (+ 1 h) až do dňa + 41 (6 týždňov) v týždenných cykloch podľa obr. 1 a 2.

Z kriviek prežitia kontrolných a ošetrovaných skupín podľa Encl. 6 je zrejme, žc 5-FU má, ako uvádza literatúra, veľmi úzky profil účinnosti dávky, to znamená, že zvyšujúca sa dávka napríklad 2 x 10/5 x 0,1 mg.kg ’.den¹ až 2 x 10/5 x 0,3 mg.kg ’.deň·’ alebo ešte vyššia dávka vedie k zníženiu miery prežitia.

Naproti tomu v prípade 5-FU éterlipidového konjugátu BM 92.0700 sa dosahuje jasný vzrast miery prežitia v závislosti od dávky v porovnaní s kontrolou I a II (obr. 1), čo znamená, že ekvimoláme dávky BM 92.0700 sú jasne účinnejšie v tomto modeli leukémie ako štandardné zlúčeniny 5-FU.

Keď zoberieme do úvahu, že BM 92.0700 je oveľa účinnejší (obr. 1 a 2) a oveľa menej toxický s ohľadom na bunky kostnej drene, jc možné usúdiť, že BM 92.0700 má oveľa vyšší terapeutický index/pomer v porovnaní so štandardným cytostatickým 5-FU.

Príklad 12

Podľa známeho stavu techniky sú zlúčeninám podľa vynálezu najbližšie zlúčeniny, ktoré opísal Zilch a kol. (americký patentový spis číslo 5 563257). Je to napríklad (3-dodecylsulfanyl-2-decyloxy)propylester (3’-deoxy-3-'fluórtimidín-5'-fosforečnej kyseliny (označovaný ako BM 21.1406 na pripojenom diagrame), ktorý sa porovnáva s (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)-propylesterom 5-fluóruridín-5'-fosforečnej kyseliny podľa vynálezu (označovaným ako BM 92.0700, obr. 3). Obr. 3 dokladá vplyv BM 92.0700 na prežitie myší s naočkovanou leukémiou Ll210. Na osi x sú vyznačené dni po naočkovani Ll210, na osi y percento prežitých myší, čara s plným štvorčekom je kontrola I (PBS), čara s plným kosoštvorčekom je kontrola II (PBS), čara s prázdnym kosoštvorčekom platí pre BM 92.0700 (dávku 1), čara s plným trojuholníčkom platí pre BM 92.0700 (dávku 2). Ako je zrejmé z doložených hodnôt, majú zlúčeniny podľa vynálezu výrazne zvýšený počet prežitých myší. Test sa uskutočňuje nasledujúcim spôsobom:

Spôsobom podľa príkladu 11 sa myši naočkujú bunkami leukémie L1210. Myši sa ošetrujú i. p. 10 mg/kg/deň (dávka 1) alebo 30 mg/kg/deň (dávka 2) raz denne počínajúc od dňa 0 (jedna hodina po naočkovani nádorových buniek) počas 14 dní. Je zrejmé, že BM 21.1406 je pri nižšej dávke účinná ako kontrolná zlúčenina. Pri vyššej dávke je BM 21.1406 účinná pri 10 % myší. Na rozdiel od toho zlúčenina podľa vynálezu BM 92.0700 dramaticky zvyšuje počet prežitých myší pri obidvoch dávkach. Táto skutočnosť dokladá neočakávateľne a prekvapujúco zlepšené vlastnosti zlúčenín podľa vynálezu a teda patentovateľnosť nových zlúčenín.

Príklad 13 (3-Dodecylsulfmyl-2-decyloxy)propylester (5-íluóruridín-5'-fosforečnej kyseliny

Suspenduje sa v 50 ml ľadovej kyseliny octovej 5 g (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru (5-fluóruridín-5'-fosforečnej kyseliny a po pridaní 5 ml 30 % peroxidu vodíka sa počas štyroch hodín mieša pri teplote miestnosti. Rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnom odparovači a zvyšok sa čistí preparatívnou stĺpcovou chromatografiou na RP 18 pri použití ako elučného činidla systému metanol/Ο,ΙΜ acetátový tlmivý roztok. Frakcia, obsahujúca produkt, sa odparí, zvyšok sa mieša s acetónom a zrazenina sa odsaje. Suší sa vo vákuovej sušičke pri teplote 40 °C, čím sa získa 4,5 g sulfoxidu s teplotou topenia 214 až 216 °C (za rozkladu). Hodnota Rf = 0,27 (BuOAc/iPrOH/H₂O/NH₄OH 3:5:1:1). ³¹P-NMR. δ = 0,027 ppm.

Príklad 14 (3-Dodecylsulfonyl-2-decyloxy)propylester (5-fluóruridín-5'-fosforečnej kyseliny

Suspenduje sa v 100 ml ľadovej kyseliny octovej 10 g (3-dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylesteru (5-fluóruridín-5'-fosforečnej kyseliny a po pridaní 25 ml 30 % peroxidu vodíka sa počas šiestich hodín mieša pri teplote 50 °C. Pridá sa ďalších 13 ml peroxidu vodíka a mieša sa počas ďalších siedmich hodín. Rozpúšťadlo sa odstráni na rotačnom odparovači a zvyšok sa čistí preparatívnou stĺpcovou chromatografiou na RP 18 pri použití ako elučného činidla systému metanol/Ο,ΙΜ acetátový tlmivý roztok. Frakcia, obsahujúca produkt, sa odparí, zvyšok sa mieša s acetónom a zrazenina sa odsaje. Suší sa vo vákuovej sušičke pri teplote 40 °C, čím sa získa 8,5 g sulfoxidu s teplotou topenia 204 až 207 °C (za rozkladu).

Hodnota Rf = 0,29 (BuOAc/iPrOH/H₂O/NH₄OH 3:5:1:1). ³¹P-NMR. δ = 0,073 ppm.

Priemyselná využiteľnosť

Derivát nukleozidmonofosfátu ako účinná látka na výrobu farmaceutických prostriedkov s protinádorovou a s protivírusovou účinnosťou a na potlačovanie imunity.

Claims

PATENTOVÉ NÁROKY

1. Derivát nukleozidmonofosfátu všeobecného vzorca (I)

R¹

R²

-x-ch₂ —Y—CH O

I 11 cH₂-a-p-o·

OH kde znamená

R¹ lineárnu alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 1 až 20 atómami uhlíka,

R² atóm vodíka alebo lineárnu, alebo rozvetvenú alkylovú skupinu s 1 až 20 atómami uhlíka,

R³ atóm vodíka alebo hydroxylovú skupinu,

R⁴ hydroxylovú skupinu,

R⁵ atóm vodíka alebo hydroxylovú skupinu,

X atóm síry alebo sulfonylovú skupinu,

Y atóm kyslíka,

B purínovú a/alebo pyrimidínovú skupinu všeobecného vzorca (Ill(a-d))

ΙΙΠ») (IUt>)

O I!

(Hlc)

R⁶ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu, alkenylovú alebo alkinylovú skupinu vždy s 2 až 6 atómami uhlíka, pripadne substituovanú atómom halogénu alebo atóm halogénu,

R6' atóm vodíka alebo benzylovú, alebo fenyltioskupinu, R⁷ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu alebo atóm halogénu,

R⁸ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka atóm halogénu, hydroxylovú skupinu alebo aminoskupinu, R⁹ atóm vodíka aminoskupinu alebo atóm halogénu,

R¹⁰ atóm vodíka, atóm halogénu, merkaptoskupinu, hydroxylovú skupinu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylmerkaptoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aminoskupinu, ktorá je prípadne monosubstituovaná alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxyalkylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka a/alebo cykloalkylovú skupinu s 3 až 6 atómami uhlíka, skupinu arylovú, hetarylovú, aralkylovú alebo hetarylalkylovú, pričom arylový alebo hetarylový podiel je prípadne substituovaný jednou alebo niekoľkými merkaptoskupinami, skupinami hydroxylovými, alkoxyskupinami s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylovými skupinami s 1 až 6 atómami uhlíka, alebo atómom halogénu alebo znamená alkenylovú skupinu s 2 až 6 atómami uhlíka, prípadne monosubstituovanú alebo disubstituovanú alkylovou skupinou alebo alkoxyskupinou, za podmienky, že aspoň jeden zo symbolov R³ a R⁵ znamená atóm vodíka, jeho tautoméry, opticky aktívne formy a racemické zmesi a jeho fyziologicky prijateľné soli s anorganickými a s organickými kyselinami alebo zásadami.
2. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 všeobecného vzorca (I), kde znamená R¹ lineárnu alkylovú skupinu s 8 až 15 atómami uhlíka a ostatné symboly majú v nároku 1 uvedený význam.
3. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 alebo 2 všeobecného vzorca (I), kde znamená R² lineárnu alkylovú skupinu s 8 až 15 atómami uhlíka a ostatné symboly majú v nároku 1 alebo 2 uvedený význam.
4. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 3 všeobecného vzorca (I), kde znamená R⁵ atóm vodíka a ostatné symboly majú v nároku 1 až 3 uvedený význam.
5. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 4 všeobecného vzorca (I), kde znamená R⁶ a R⁷ od seba nezávisle atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu, atóm halogénu, alkenylovú alebo alkinylovú skupinu vždy s 2 až 6 atómami uhlíka prípadne substituovanú atómom halogénu, a ostatné symboly majú v nároku 1 až 4 uvedený význam.
6. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 5 všeobecného vzorca (I), kde znamená R⁸ atóm vodíka, alkylovú skupinu s 1 až 4 atómami uhlíka aminoskupinu alebo atóm halogénu a ostatné symboly majú v nároku 1 až 5 uvedený význam.
7. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 6 všeobecného vzorca (I), kde znamená R¹⁰ atóm vodíka, atóm halogénu, alkoxyskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka, merkaptoskupinu, alkylmerkaptoskupinu s 1 až 6 atómami uhlíka alebo aminoskupinu, ktorá je prípadne monosubstituovaná alebo disubstituovaná alkylovou skupinou s 1 až 6 atómami uhlíka, hydroxylakylovou skupinou s 2 až 6 atómami uhlíka, cykloalkylovou skupinou s 3 až 6 atómami uhlíka, skupinou arylovou, aralkylovou, pričom arylový podiel je prípadne substituovaný jednou alebo niekoľkými skupinami hydroxylovými, alkoxyskupinami s 1 až 6 atómami uhlíka, alkylovými skupinami s 1 až 6 atómami uhlíka alebo atómom halogénu, a ostatné symboly majú v nároku 1 až 6 uvedený význam.
8. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 7 všeobecného vzorca (I), kde znamená

R¹ lineárnu alkylovú skupinu s 9 až 13 atómami uhlíka, R² lineárnu alkylovú skupinu s 8 až 14 atómami uhlíka, R³ hydroxylovú skupinu, R⁴ hydroxylovú skupinu, R⁵ atóm vodíka,

R⁶ atóm vodíka, skupinu metylovú, trifluórmetylovú, etylovú, vinylovú, propenylovú, etinylovú, propmylovú, atóm fluóru, chlóru alebo brómu,

R⁶ atóm vodíka,

R⁷ atóm vodíka, skupinu metylovú, etyiovú, vinylovú, propenylovú, etinylovú, propinylovú, atóm chlóru alebo brómu,

R¹⁰ atóm vodíka, metoxyskupinu, etoxyskupinu, propoxyskupinu, butoxyskupinu, hexyloxyskupinu, merkaptoskupinu, metylmerkaptoskupinu, etylmerkaptoskupinu, butylmerkaptoskupinu, hexylmerkaptoskupinu, aminoskupinu prípadne substituovanú skupinou tienylovou, furylovou, pyridylovou, tienylmetylovou, furylmetylovou alebo pyridylmetylovou, a ostatné symboly majú v nároku 1 až 7 uvedený význam.
9. Derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 8 všeobecného vzorca (I), ktorého nukleozidový podiel je volený zo súboru zahŕňajúceho skupinu 6-merkaptopurín-9-p-D-ribofuranozidovú, 5-fluórundínovú, inozínovú, 5-metyluridínovú, 5-chlóruridínovú, 5-trifluórmetyluridínovú, 5-etinyluridínovú, 5-etinylcytidínovú, 5-prop-l-enyluridínovú, 5-prop-2-enyluridinovú, adenozinovú, guanozínovú, 2,6-diaminopurín-9-p-D-ribofuranozidovú, 2-amino-6-merkaptopurín-9-P-D-ribofuranozidovú, 2-amino-6-metylmerkaptopurín-9-P-D-ribofuranozidovú, 2-amino-6-chlórpurín-9-[J-D-ribofuranozidovú, 2-chlóradenozínovú, 2-fluóradenozínovú, 3'-desoxy-5-fluóradenozinovú, 6-metylmerkaptopurín-9-P-D-ribofuranozidovú a 2-brómadenozidovú.
10. Spôsob prípravy derivátu nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 9 všeobecného vzorca (I), kde jednotlivé symboly majú v nároku 1 až 9 uvedený význam, vyznačujúci sa tým, že

a) sa necháva reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (V) le, ako v toluéne, alebo bezprostredne v bezvodom pyridíne a prípadne sa po hydrolýze odstráni skupina chrániaca atóm kyslíka kyslou alebo alkalickou hydrolýzou, alebo hydrogenáciou, alebo

b) sa necháva reagovať zlúčenina všeobecného vzorca (VII) h’-x-ch₂ rZ-Y-ČH £ ^CHj (VII) ,

O ch₃ kde R¹, R², X a Y majú uvedený význam, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VI) kde R³, R⁴, R⁵ a B majú uvedený význam, v prítomnosti fosfolipázy D zo Streptomyces v inertnom rozpúšťadle, ako v chloroforme, v prítomnosti vhodného tlmivého roztoku a prípadne sa po reakcii odstraňuje skupina chrániaca atóm kyslíka kyslou alebo alkalickou hydrolýzou alebo hydrogenáciou.
11. Liečivo na ošetrovanie nádorov alebo ľudských autoimunitných chorôb, vyznačujúce sa tým, že obsahuje aspoň jeden derivát nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 9 všeobecného vzorca (I) a farmaceutickú pomocnú látku alebo nosič.
12. Použitie derivátu nukleozidmonofosfátu podľa nároku 1 až 9 všeobecného vzorca (I) na výrobu liečiva na ošetrovanie nádorov alebo ľudských autoimunitných chorôb.
13. (3-Dodecylmerkapto-2-decyloxy)propylester (5-fluóruridín)-5'-fosforečnej kyseliny a jeho fyziologicky prijateľné soli.

2 výkresy h1-X-CH₂rZ-y-ch O ch₂—Q-P-OH

OH (V), kde R¹, R², X a Y majú uvedený význam, so zlúčeninou všeobecného vzorca (VI) (VI) , kde R³, R⁴, R⁵ a B majú uvedený význam, alebo znamenajú hydroxylovú skupinu chránenú na atóme kyslíka, v prítomnosti aktivačného chloridu kyseliny, ako chloridu 2,4,6-triizopropylbenzénsulfónovej kyseliny a terciámej dusíkovej zásady, ako pyridínu alebo lutidínu, v inertnom rozpúšťad-