SE510812C2 - (-)-(3R)-3-metyl-4-(4-(4-(4-pyridyl)piperazin-1- yl)fenoxi)smörsyra som cellulär adhesionsinhibitor - Google Patents

Description

510 812 2 såsom ett enzym eller en receptor. De separata enantiomerema kan därför besitta olika potenser som enzyminhibitorer eller receptorantagonister. Förutom hastigheten och omfånget av absorption kan fördelning, metabolism och exkretion som observe- ras när en enantiomer doseras till ett varmblodigt djur skilja sig från vad som obser- veras när spegelbildsfonnen doseras på detta sätt, enantiomerema kan nämligen besitta olika farmakokinetiska egenskaper.

Den stereokemiska renheten hos en organisk förening kan dessutom också vara av betydelse för egenskaperna hos och omfånget av biverkningar som kan erhållas när en farmakologiskt aktiv förening doseras. En enantiomer kan sålunda vara en användbar förening, under det att den andra enantiomeren kan ge upphov till skad- liga biverkningar eller toxicitet. Det har t ex föreslagits att en av enantiomerema av talidomid var ett säkert och effektivt lugnande medel, under det att den andra enan- tiomeren styrde den recemiska blandningens teratogena biverkan.

Den optiskt aktiva föreningen enligt föreliggande uppfinning är en optisk isomer av den racemiska blandningen (3RS)-3-metyl-4-{4-[4-(4-pyridyl)piperazin-l-yl]- fenoxi}smörsyra, [nedan den (3RS)-racemiska blandningen] som beskrives som trifluorättiksyrasaltet i exempel 132 i WO 94/22834 och exempel 203 i WO 94/22835. Det beskrives där att sådana föreningar är användbara vid behandling av en mångfald sjukdomar innefattande celladhesion, såsom bildning av blodtromber efter trombocytaggregation. Blodtromber kan leda till sjukdomar, såsom trombos, stroke, trombotiska händelser som följer efter instabil angina, hjärtmuskelirifarkt, ateroskleros, tromboemboli och reocklusion under eller efter trombolytisk terapi.

Den antitrombocytaggregerande effekten hos föreningarna anges vara baserad på föreningarnas förmåga att inhibera bindningen av adhesionsmolekyler, såsom fibri- nogen och von Willebrand faktor till glykoprotein Ilb/Illa (nedan GPIIb/IIIa) som hålles i membranet i varje trombocyt. Den nödvändiga aktiveringen och dimerise- ringen av t ex det trombocytbärande fibrinogenet inträffar därigenom inte, och pro- cesser, såsom trombbildning och trombocytaggregation inhiberas. 3 510 812 Som ett möjligt hjälpmedel vid sökning av föreningar med förbättrat terapeutiskt för- hållande är det önskvärt att finna en förening med ökad potens jämfört med före- ningama beskrivna i WO 94/22834 och WO 94/22835.

Det är också känt att det finnes flera klasser av adhesionsmolekyler, såsom integri- ner, selektiner och kadheriner. Integriner återñnnes på leukocyter och tïombocyter, och selektiner återfinnes på leukocyter och endotelceller. Inom varje klass av adhe- sionsmolekyler finnes många medlemmar. lntegrinfaniiljen innefattar t ex GPIIb/IIIa som binder fibrinogen, integrin otvß; som binder vitronektin och integrin otgßl som binder fibronektin. Det antas att de mer användbara terapeutiska trombocytaggrega- tionsinhibitorema besitter en selektivitet av inhiberande effekt mellan klasser av adhesionsmolekyler och mellan familjemedlemmar av varje klass av adhesions- molekyler. Det är sålunda också önskvärt att finna en förening som besitter denna selektivitet eller som besitter högre selektivitet än kända trombocytaggregations- inhibitorer.

Det är dessutom känt att det finnes flera klasser av GPIIb/Illa-antagonister. Mono- klonala antikroppsantagonister mot GPIIb/IIIa har t ex producerats. Små molekyler som inhiberar bindningen av adhesionsmolekyler till GPIIb/IIIa är dessutom också kända, t ex från US-A-5 039 805 och 5 084 446 från CA-A-2 008 161, 2 037 153 och 2 061 661, och från Alig et al, J. Med. Chem., 1992, 35, 4393, Strukturema hos dessa föreningar är vanligen baserade på bindningsregionema i adhesionsmolekyler- na, tex aminosyrasekvensen RGD (arginylglycylaspartat) i strukturen hos fibrino- gen. Det antas att sådana föreningar kan användas för att inhibera trombocytaggre- gation och t ex trombbildning under tillräcklig tid, vilket medger läkning av skadad vävnad utan den skadliga följden av överrobusta trombocytaggregationsprocesser.

Det är en teoretisk angelägenhet avseende de olika klassema av GPIIb/IIIa-anta- gonister att inhibering av trombocytaggregation kan leda till en minskning av blod- koagulationshastigheten och därför en ökning av blödningshändelser och -tider. 510 812 4 Även om en liten ökning av blödningstidema kan vara godtagbar kan vissa kliniskt relevanta blödningshändelser, såsom intrakraniell blödning vara livshotande.

Det är sålunda önskvärt att finna en förening med fördelen med den potenta GPIIb/IIIa-antagonistverkningen beskriven för föreningen i exempel 132 i WO 94/ 22834 som inte besitter eller som i mindre utsträckning besatt nackdelarna med ökade blödningstider och/eller skadliga kliniskt relevanta blödningshändelser som har att göra med de kända GPIIb/IIla-antagonisterna.

Enligt föreliggande uppfmning tillhandahålles den optiskt aktiva föreningen (-)-(3R)-3-metyl-4-{4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1-yl]fenoxi}smörsyra eller ett farma- ceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)- (3 S)-stereoisomeren. (-)-(3 R)-föreningen besitter avsevärt bättre potens som GPIIb/IlIa-antagonist än mot- svarande (+)-(3S)-isomer (mer än IO-faldigt mer potent). (-)-(3R)-f“oreningen besitter också selektivitet för inhiberande effekt mellan klasser av adhesionsmolekyler och mellan familjemedlemmar av sådana klasser. Föreningen besitter t ex verkan mot bindningen av GPIIb/IIIa till fibrinogen (pIC50=7,65) men inte bindning av otvß; till vitronektin (pICSO lägre än 4) eller bindning av ot5ßl till fibronektin (pIC50 lägre än 4). (-)-(3R)-föreningen är följaktligen en ny, potent och selektiv fibrinogenreceptoranta- gonist som avsevärt minskar benägenheten eller möjligheten att man erhåller nega- tiva effekter, såsom överdriven blödning som har att göra med administreringen av andra fibrinogenreceptorantagonister, såsom den (3RS)-racerniska blandningen.

Användning av (-)-(3R)-föreningen eliminerar också benägenheten eller möjligheten att man erhåller negativa effekter som har att göra med administreringen av den tera- peutiskt mindre effektiva (+)-(3S)-föreningen som är en beståndsdel i den (3RS)- racemiska blandningen. Användning av (-)-(3 R)-föreningen medger en klarare 5 510 812 struktur-aktivitet-toxicitetsanalys och tillhandahåller ett förbättrat terapeutiskt förhål- lande. Det är därför önskvärt att använda (-)-(3 R)-foreningen enligt föreliggande uppfinning snarare än den (3 RS)-racemiska blandningen i exempel 132 i WO 94/22834.

Särskilda faimaceutiskt godtagbara salter av (-)-(3 R)-föreningen enligt uppfinningen innefattar t ex salter med syror som ger fysiologiskt godtagbara anjoner, såsom salter med mineralsyror, t ex en vätehalid, såsom vätekloiid eller vätebromid, svavelsyra eller fosforsyra, och salter med organiska syror, t ex trifluorättiksyra. Andra farma- ceutiskt godtagbara salter innefattar t ex salter med oorganiska baser, såsom alkali- metall- och jordalkalimetallsalter, tex natriumsalter, ammoniumsalter, och salter med organiska arniner och kvartemära baser som bildar fysiologiskt godtagbara kat- joner, såsom salter med metylamin, dimetylamin, tiimetylamin, etylendiamin, pipe- iidin, morfolin, pyrrolidin, piperazin, etanolainin, trietanolamin, lïl-metylglukamin, tetrametylamrnoniumhydroxid och bensyltrimetylaminoniumhydroxid.

Särskilda farmaceutiskt godtagbara estrar av (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen innefattar t ex esterderivat av karboxylsyragruppen i föreningen enligt uppfinningen, tex estrar bildade med alkoholer, såsom (1-6C)alkoho1er(t ex metanol, etanol, pro- panol och tert-butanol), indanol, adamantol, (l-6C)alkanoyloxi(l-4C)alkoholer (t ex pivaloyloximetanol) och (l-4C)alkoxikarbonyl-(l-4C)alkoholer (t ex metoxikarbo- nylrnetanol).

Särskilda farmaceutiskt godtagbara amider av (-)-(3R)-föreningen enligt uppfniiiing- en innefattar t ex arnidderivat av karboxylsyragruppen i föreningen enligt uppfin- ningen, t ex amider bildade med arniner, såsom ammoniak, (l-4C)alkylaminer (t ex metylarnin), di-(1-4C)alkylarniner (t ex dimetylamin, fl-etyl-fi-metylamin och di- etylamin), (1-4C)alkoxi-(2-4C)alkylarniner (t ex 2-metoxietylamin), fenyl-( 1-4C)- alkylarniner (t ex bensylamin) och aminosyror (t ex glycin eller en ester därav).

Särskilda amider av (-)-(3R)-foreningen enligt uppfinningen innefattar sålunda fi- metyl-, fl,l_\l_-dimetyl-, l_\I_.etyl-N_-metyl- och fiklfl-dietylbutyrainider. 510 812 6 Särskilda farmaceutiskt godtagbara solvat av (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen innefattar t ex hydrater, t ex ett hemihydrat, monohydrat, dihydrat eller trihydrat eller en altemativ mängd därav.

Frasen ”i huvudsak fri från (+)-(3S)-stereoisomeren”, såsom används ovan, innebär att det finnes minst 90 vikt-% av (-)-(3R)-isomeren och 10 vikt-% eller lägre av mot- svarande (+)-(3S)-isomer. Det finnes företrädesvis minst 95 vikt-% av (-)-(3R)-iso- meren och 5 vikt-% eller lägre av (+)-(3S)-isomeren. Det finnes i synnerhet minst 99 vikt-% av (-)-(3R)-isomeren och 1 vikt-% eller lägre av (+)-(3S)-isomeren. (-)-(3R)-föreniiigen enligt uppfinningen eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav kan framställas med något förfarande känt inom området för framställning av en sådan förening. Lämpliga förfaranden innefattar asymmetrisk syntes innefattande en lämplig kiral mellanprodukt och upplösning av den (3 RS)-racemiska blandningen. Sådana förfaranden utgör en ytterligare egenskap hos uppfinningen och innefattar nedanstående: a) Omsättning av 4-[4-(4-pyridyl)piperazin- l-yl]fenol, eller ett reaktivt deri- vat därav med den kirala mellanprodukten (3R)-4-hydroxi-3-metylsmörsyra eller en ester därav, eller ett reaktivt derivat därav.

Omsätmingen genomföres lämpligen i närvaro av en stark bas, såsom en alkali- metallhydrid, t ex natiiumhydrid. Lämpliga lösningsmedel innefattar amider, såsom dimetylforrnamid. Omsättningen genomföres lämpligen vid en temperatur i inter- vallet 0- l00°C.

Lämpliga estrar av den kirala mellanprodukten (3R)-4-hydroxi-3-metylsmörsyra innefattar t ex metyl-, etyl-, propyl- och tert-butylestrar. Lämpliga reaktiva derivat därav innefattar t ex (3R)-4-halogeno-3-metylsmörsyra eller en ester därav (t ex en metyl-eller etylester), såsom 4-klor- och 4-bromderivat, (3 R)-4-alkansulfonyloxi-3- 7 510 812 metylsmörsyra eller en ester därav (t ex en metyl- eller etylester), såsom 4-metan- sulfonyloxiderivatet eller (3R)-4-a1ylsulfonyloxi-3-metylsmörsyra eller en ester därav (t ex en metyl- eller etylester), såsom 4-(p-toluensulfonyloxi)derivatet. b) Omsätming av en förening med forrneln I där L är en länmande atom eller grupp, med den kirala mellanprodukten (3 R)-3- metyl-4-[4-(piperazin-1-yl)fenoxi]smörsyra eller ett syraadditionssalt därav.

Exempel på värden for L innefattar halogen, såsom klor eller brom, och cyano.

Exempel på syraadditionssalter av (3R)-3-metyl-4-[4-(piperazin~ l-yl)fenoxi]- smörsyra innefattar t ex hydroklorider.

Omsättningen kan lämpligen genomföras vid en temperatur i intervallet från -10 till l20°C, företrädesvis 10-l00°C. Lämpliga lösningsmedel innefattar t ex etrar, såsom tetrahydrofuran och dioxan, arnider, såsom dimetylformarnid, nitriler, såsom aceto- nitril, halogenerade kolväten, såsom diklorrnetan, alkoholer, såsom etanol, och VäflfCfl.

Under vissa omständigheter, tex när ett syraadditionssalt av (3R)-3-metyl-4-[4- (piperazin-1-yl)fenoxi]smörsyra används som utgångsmaterial, kan omsättningen med fördel genomföras i närvaro av en bas. Exempel på lämpliga baser irmefattar tertiära aminer, såsom trietylamin, och alkalimetallhydroxider, -karbonater och -bi- karbonater, såsom natrium- eller kaliumhydroxid, -karbonat eller -bikarbonat 510 812 s c) Sönderdelning av en ester med formeln II CH, O\/:\/CO2R WN II där R är en karboxylskyddsgrupp.

R kan vara någon konventionell karboxylskyddsgrupp som kan avlägsnas utan att det stör andra delar av molekylen. Exempel på karboxylskyddsgrupper innefattar (1- 6C)alkylgrupper (såsom metyl, etyl, propyl eller t-butyl), fenyl och bensyl, varvid fenylgruppen i någon av dessa eventuellt kan ha en eller två halogeno, (l-4C)alkyl, (1-4C)alkoxi eller nitro.

Sönderdelningen kan genomföras med användning av ett av de konventionella rea- gensen och betingelsema kända inom området för omvandling av karboxylsyraestrar till karboxylsyror. Sönderdelningen kan sålunda t ex genomföras genom baskatalyse- rad hydrolys, t ex med användning av en alkalimetallhydroxid, såsom litium-, kalium- eller natriumhydroxid, eller en tertiär arnin, såsom trietylamin, i närvaro av vatten. Den baskatalyserade hydrolysen kan genomföras i närvaro av ett lösnings- medel, såsom en alkohol, t ex metanol eller etanol, eller en eter, såsom tetrahydro- furan eller dioxan. Sönderdelningen kan altemativt genomföras genom syrakatalyse- rad hydrolys, t ex med användning av vatteninnehållande ättiksyra eller trifluorättik- syra. Temperaturen föreligger lärnpligen i intervallet från -l0 till l00°C, t ex 10- 50°C, När alkoholresten är t-butyl kan denna avlägsnas genom värmning, t ex vid en temperatur av 80-l50°C, separat eller i närvaro av ett lämpligt spädningsmedel, såsom difenyleter eller difenylsulfon. En bensylgrupp kan avlägsnas genom kataly- tisk hydrogenering, t ex genom hydrogenering i närvaro av palladium på kol vid en 9 510 812 temperatur i intervallet från -lO till l0O°C i närvaro av ett lösningsmedel, såsom en alkohol, t ex metanol eller etanol. d) Upplösning av den (3 RS)-racemiska blandningen, (3 RS)-3-metyl-4-{4-[4- (4-pyiidyl)-piperazin- l -y1]fenoxi } smörsyra.

Upplösningen av smörsyradeiivatet av den (3 RS)-racemiska blandningen kan genomföras med konventionella förfaranden, t ex genom saltbildning med använd- ning av en optiskt aktiv bas, följt av separation, t ex genom fraktionerad kristallisa- tion av de sålunda framställda två saltema och regenerering av de separerade (-)- (3R)- och (+)-(3S)-föreningariia genom surgöring av de separerade saltema.

Upplösningen av smörsyraderivatet av den (3 RS)-racemiska blandningen kan också genomföras med de konventionella förfarandena att man bildar ett diastereoisomert par av estrar genom omsättning med en optiskt aktiv alkohol, separation av estrama, t ex genom kromatografi, och regenerering av de separata (-)-(3R)- och (+)-(3 S)- föreningarna genom hydrolys av de separerade estrama. En analog väg innefattande framställningen av ett diastereoisomert par av amider kan också användas.

Framställningen av (-)-(3R)-föreningen och kirala mellanprodukter beskiives i de efterföljande icke-begränsande exemplen, vilka endast tillhandahålles i illustrations- syfte.

Vissa av de kirala mellanproduktema definierade ovan är nya, och enligt en ytterli- gare aspekt av uppfinningen tillhandahålles sålunda föreningen tert-butyl-(3R)-3- metyl-4-hydroxibutyrat eller ett reaktivt derivat därav, i huvudsak fritt från (3 S)- stereoisomeren. Ett särskilt reaktivt deiivat som kan nämnas är ten-butyl-(3R)-3- metyl-4-(p-toluensulfonyloxDbutyrat.

Frasen ”i huvudsak fri från (3S)-stereoisomeren”, som används ovan, har samma betydelse som ges i relation till (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen. 510 812 10 När ett farmaceutiskt godtagbart salt av (-)-(3 R)-föreningen enligt uppfinningen krä- ves kan det t ex erhållas genom omsättning av nämnda förening med en lärnplig syra eller bas med användning av ett konventionellt forfarande. När en farmaceutiskt godtagbar ester eller arníd av (-)-(3R)-íöreningen enligt uppfinningen kräves kan den t ex erhållas genom omsättning av nämnda förening med en lämplig alkohol eller amin, såsom lämpligt med användning av ett konventionellt forfarande.

Förmågan hos (-)-(3 R)-föreningen enligt uppfinningen att inhibera trombocytaggre- gation och att inhibera bindningen av fibrinogen till GPIlb/IIIa kan visas med användning av standardtestförfarandena (a) och (b) beskrivna i WO 94/22834, vilka testförfaranden här ges som referens. (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen besitter verkan mot den adenosindifosfat- (ADP) inducerade aggregationen av humana trombocyter med ett pAg = 7,3 och mot bindningen av fibrinogen till GPIIb/Illa med ett plC50 = 7,65.

Såsom angetts ovan, kan (-)-(3R)-föreningen enligt uppfmningen användas vid terapi eller förebyggande av sjukdomar, vid vilka celladhesion (särskilt trombocytaggrega- tion) är inblandad, t ex venös eller arteiiell trombos (t ex lungemboli, stroke och trombotiska händelser som följer efter instabil angina och transitorisk ischemisk attack), hjämnuskelinfarkt, ateroskleros, tromboemboli och reocklusion under och efter trombolytisk terapi. Föreningarna kan också vara användbara för förebyggande av reocklusion och restenos efter perkutan transluminal koronarangioplastik (PTKA) och koronaraitärbypasstransplantat. Det skall också framhållas att föreningarna kan vara användbara vid behandling av andra sjukdomar förmedlade genom bindning av adhesionsmolekyler till GPIlb/lIIa, t ex cancer.

Enligt en ytterligare aspekt av uppfinningen tillhandahållas användningen av (-)- (3R)-föreningen eller ett faimaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)-(3S)-stereoisomeren som ett läkemedel. 11 510 812 Enligt en ytterligare aspekt av uppfinningen tillhandahålles användningen av (-)-(3R)-fóreningen eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, amíd eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)-(3S)-stereoisomeren for framställning av ett läkemedel för förebyggande eller behandling av en sjukdom innefattande trombocyt- aggregation.

Enligt en ytterligare aspekt av uppfinningen tillhandahålles användningen av (-)-(3R)-föreningen eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, arnid eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)-(3S)-stereoisomeren för framställning av ett läkemedel för förebyggande eller behandling av en sjukdom innefattande bindning av fibrinogen till GPIIb/Illa.

Enligt en ytterligare aspekt av uppfinningen tillhandahålles användningen av (-)-(3R)-föreningen eller ett faimaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)-(3S)-stereoisomeren för framställning av ett läkemedel för förebyggande eller behandling av trombotiska händelser som följer efter instabil angina. (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen administreras allmänt i detta syfte genom en oral, rektal, topisk, intravenös, subkutan, intramuskulär väg eller inhalationsväg, så att en dos i intervallet 0,01-50 mg/kg kroppsvikt ges, beroende på administrerings- sättet, ålder och kön hos patienten och svårighetsgraden hos tillståndet som behand- las. (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen används allmänt i form av en läkemedels- komposition innefattande (-)-(3R)-föreningen eller ett faimaceutiskt godtagbart salt, en ester, ainid eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)-(3S)-stereoisomeren, i blandning med ett farmaeeutisktgodtagbart spädningsmedel eller en bärare. En sådan komposition tillhandahålles som en ytterligare egenskap hos uppfinningen och kan vara en mångfald doseringsfonner. Den kan t ex föreligga i form av tabletter, sin 812 12 kapslar, lösningar eller suspensioner för oral administrering, i fomi av kräm eller salvor eller en transderrnal (hud)lapp för topisk administrering, i form av ett stol- piller för rektal administrering, i form av en steril lösning eller suspension för adrni- nistrering genom intravenös eller intramuskulär injektion, i fonri av en aerosol eller nebulisatorlösning eller -suspension, för administrering genom inhalation och i form av ett pulver, tillsammans med farmaceutiskt godtagbara inerta fasta spädnings- medel, såsom laktos, för administrering genom insufflation.

Beroende på administreringssättet kan kompositionen t ex innefatta 0,1-99,9 vikt-% av (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen.

Läkemedelskompositionerna kan erhållas med konventionella förfaranden med användning av farmaceutiskt godtagbara spädningsmedel och bärare välkända inom området. Tabletter och kapslar för oral administrering kan läinpligen bildas med ett enteriskt överdrag, t ex innefattande cellulosaacetatftalat, för att minimera kontakt av (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen med magsyror. (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen kan samadministreras eller samfonnuleras med ett eller flera medel kända för att vara av värde vid sjukdomar eller tillstånd som avses att behandlas, tex en känd trombocytaggregationsinhibitor (i ex aspirin, en __- tromboxanantagonist eller en tromboxansyntasinhibitor), ett hypolipidemiskt medel, blodtrycksänkande medel, trombolytiskt medel (såsom streptokinas, urokinas, pro- urokinas, vävnadsplasminogenaktivator och derivat därav), en betablockerare eller ett kärlvidgande medel kan också med fördel finnas i en läkemedelskomposition enligt uppfinningen för användning vid behandling av en hjärt- eller kärlsjukdom eller ett tillstånd.

Förutom användning därav inom terapeutisk medicin är (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen också användbar som ett farmakologiskt verktyg vid utveckling och Standardisering av testsystem för utvärdering av effektema av adhcsionsmolekyler på laboratoriedjur, såsom katter, hundar, kaniner, apor, råttor och möss, som en del av sökandet av nya läkemedel. (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen kan också 13 510 812 användas p g a de trombocytaggregationsinhiberande egenskapema därav för att hjälpa till att lagra blod och bibehålla viabiliteten hos blod och blodkärl hos varm- blodiga djur (eller delar därav) som genomgår artificiell extrakorporeal cirkulation, t ex under extremitet- eller organtransplantationer. Vid användning i detta syfte administreras (-)-(3R)-förenirigen enligt uppfinningen allmänt så att en stabil kon- centration i intervallet t ex O, 1-10 mg/l uppnås i blodet.

Uppfmningen illustreras nu med nedanstående icke-begränsande exempel, där om inte annat anges: koncentrationer och indunstningar genomfördes genom rotationsindunst- ning under vakuum, förlopp genomfördes vid rumstemperatur, nämligen i intervallet 18-26°C, kolonnkromatografi genomfördes på kiselgel (Merck 7736) tillgänglig från E Merck och Co., Dannstadt, Tyskland, utbyten endast ges för illustration och är inte nödvändigtvis det maximala som kan erhållas genom flitig processutveckling, proton-NMR-spektra normalt bestämdes vid 200 MHz eller 250 MHz med användning av tetrarnetylsilan (TMS) som intern standard och utuyckes som kemiska skift (delta-värden) i miljondelar relativt TMS med användning av konventionella förkortningar för benämning av huvud- toppar: s, singlett, m, multiplett, t, triplett, br, bred, d, dubblett, och nedanstående förkortningar har använts för särskilda organiska lösnings- medel: THF för tetrahydrofuran, DMF för flfi-dimetylformamid och DMSO för dimetylsulfoxid. 14 510 812 Exempel 1 f -)-( 3 R)-3 -metyl-4-í 4-[4-(4-pvridvDpiperazin- 1 -vllfenoxi } smörsvrahvdroklorid Natnumhydrid (60% dispersion i mineralolja, 2,44 g) sattes till en omrörd suspen- sion av 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-l-yl]fenol (15,5 g) i torr DMF (l20 ml), och blandningen omrördes under 45 min. Tert-butyl-(3R)-3-metyl-4-(p-toluensulfonyl- oxi)butyrat (20 g) tillsattes, och blandningen omrördes under 20 timmar. Bland- ningen indunstades, och återstoden fördelades mellan diklormetan och vatten. Den organiska fasen tvättades med vatten, filtrerades genom fasseparerande papper (Whatman IPS) och indunstades. Återstoden finfördelades under dietyleter. Det sålunda erhållna fasta ämnet omkristalliserades från etylacetat, vilket gav (-)-(3 R)-3- metyl-4-{4-[4-(4-pyridyl)piperazin- 1 -yl]fenoxi}butyrat ( 10,6 g). smp i1z-113°c, [ab = 5,5° (konc. = I g/100 ml metanol, 20°C, NMR (C003) ß s,3(2H,d), 6,s9(4H,m), 6,7(zH,m), 3,79(2H,d), 3_46(4H,m), 3,28(4H,m), 2,3l-2,53(2H,m), 2,08-2,2l(1l-l,m), 1,44(9H,s), l,07(3l-l,d).

En blandning av tert-butyl-(-)-(3R)-3 -metyl-4-{4-[4-(4-pyridyl)piperazin-1- yl]fenoxi}butyrat (l0,53 g) och lN vattenlösning av saltsyra (250 ml) omrördes under 44 timmar. IN vattenlösning av natriumhydroxid (250 ml) tillsattes, och blandningen kyldes till 5°C. Blandningen filtrerades, och filtratet indunstades.

Vatten (150 ml) tillsattes, och den resulterande fallningen isolerades och tvättades i tur och ordning med vatten, aceton och dietyleter. Det sålunda erhållna materialet ornrördes med lN vattenlösning av saltsyra (25 ml) under 16 timmar. Blandningen kyldes till 5°C och filtrerades. Det sålunda erhållna fasta ämnet tvättades i tur och ordning med vatten, aceton och dietyleter och torkades, vilket gav -(-)-(3R)-3-metyl- 4-{4-[4-(4-pyridyl)piperazin- I-y1]fenoxi } smörsyrahydroklorid (7,9 g). 15 510 812 Smp. 203-205°C, [(110 = 6,2° (konc. = l g/100 m1 metanol, 20°C), NMR (dóDMSO) ö l3,8(lH,br), l2,1(lH,br), 8,72(2H,d), 7,28(2H,d), 6,9(4H,m), 3,8(6H,m), 3,18(4H,t), 2,45(lH,m), 2,23(lH,m), 2,l2(lH,m), 1,0(3H,d), rn/e 356(M+H)+, Ber. för C20H25N3O3. HCI. H20: C, 58,5, H, 6,8, N, 10,2, Funnet: C, 58,3, H, 6,9, N, l0,2%.

Det nödvändiga kirala utgångsmaterialet framställdes enligt nedanstående: Natriumbis(trimetylsilyl)arnid (IM i THF, 170 ml) sattes droppvis till en lösning av (4S)-4-isopropyl-3-propionyloxazolidin-Z-on (J. Am. Chem. Soc., 1981, 103, 2127; 28,4 g) i torr THF (500 ml) som hade kylts till -70°C och placerats under argon- atmosfär. Tillsatshastigheten justerades, så att temperaturen hos reaktionsblandning- en inte översteg -67°C. Den resulterande lösningen omrördes vid -70°C under 30 min. Tert-butylbromacetat (423 g) tillsattes droppvis, och lösningen omrördes vid - 70°C under 3 timmar. Lösningen fick sedan värmas till rumstemperatur. Lösnings- medlet indunstades. och återstoden fördelades mellan dietyleter och vatten. Den organiska fasen separerades, filtrerades genom fasseparerande papper (Whatman IPD) och indunstades. Återstoden finfördelades under hexan vid -40°C, vilket gav ett fast ämne (2l,6 g). En andra fraktion med fast ämne (4,4 g) erhölls genom indunst; ning av hexanlösningen och rening av återstoden genom filtzreringskromatogafi på kiselgel utgående från hexan och fortskridande till 1/10 etylacetat/liexan. De två sat- sema med fast ämne kombinerades och omkristalliserades från hexan, vilket gav (4S)-3-[(2R)-3-tert-butoxikarbonyl-2-metylpropionyl]-4-isopropyloxazolidin-2-on (22,5 g).

Smp. 64-65°C, NMR(CDCI3) ö 4,4l(lH,m), 4,2l(2H,m), 4, l2(lH,m), 2,79(lH,m), 2,28-2,4(2H,m), 1,41(9H,s), l,l6(3H,d), 0,9(6H,m). 510 812 16 Väteperoxid (30%, 44 ml) och litiumhydroxidmonohydrat (6,38 g) sattes i tur och ordning till en ornrörd blandning av (4S)-3-[(2R)-3-tert-butoxikarbonyl-2-metylpro- pionyl]-4-isopropyloxazolidin-2-on (22,5 g), vatten (280 ml) och THF (800 ml) som hade kylts till 5°C. Den resulterande blandningen omrördes vid 5°C under 3 timmar.

En mättad vattenlösning av natriummetabisulfit tillsattes för att förstöra överskottet av väteperoxid, och lösningsmedlet indunstades, Återstoden extraherades med diklorrnetan. Vattenlösningen surgjordes genom tillsats av en vattenlösning av citronsyra och extraherades med diklorrnetan. Extrakten kombínerades, tvättades med vatten och filtrerades genom fasseparerande papper. Filtratet indunstades, vilket gav 1-tert-butyl-(3R)-3-metylsuccinat som en olja (l2,9 g).

NMR(CDCl3) ö 2,9(lH,m), 2,64(lH,m), 2,37(lH,m), 1,4(9H,s), l,23(3H,d).

Boran-dimetylsulfidkomplex (l0M, 10,3 ml) sattes under 15 min till en ornrörd blandning av l-tert-butyl(3R)-3-metylsuccinat (l2,9 g) och THF (200 ml) som hade kylts till - l0°C och placerats under argonatinosfar. Blandningen omrördes vid -l0°C under 30 min. Blandningen fick vännas till rumstemperatur och omrördes under 1 timme. Blandningen kyldes åter till 5°C, och metanol (50 ml) tillsattes portionsvis.

Blandningen fick värmas till rumstemperatur och ornrördes under 30 min. Bland- ningen indunstades, och återstoden fördelades mellan diklonnetan (100 ml) och i vatten ( 100 ml). Den organiska fasen filtrerades genom fasseparerande papper och indunstades, vilket gav tert-butyl-(3R)-4-hydroxi-3-metylbutyrat som en olja (ll g).

NMR(CDCI3) ö 8,55(2H,m), 2,l-2,4(3H,m), I,46(9H,s), 0,98(3H_d). p-toluensulfonylklorid (l3,2 g) sattes portionsvis till en omrörd blandning av tert- butyl-(3R)-4-hydroxi-3-metylbutyrat (ll g), Uietylarnin (21 ml) och diklorrnetan (l20 ml), och blandningen omrördes under 20 timmar. Blandningen tvättades i tur och ordning med vatten och utspädd vattenlösning av natriumkarbonat. Den orga- 17 510 812 niska lösningen filtrerades genom fasseparerande papper och indunstades, vilket gav tert-butyl-(3R)-3 -metyl-4-(p-toluensulfonyloxi)butyrat som en olja (20 g).

NMR(CDCI3) 8 7,6(2H,d), 7,33(2H,d), 3,92(2H,d), 2,45(3H,s), 2, l8-2,47(2H,m), 2,0-2,15(lH,m), 1,42(9H,s), 0,95(3H,d).

Exempel 2 lllustrativa läkemedelsdosforrner lämpliga för att presentera föreningen enligt upp- finningen för terapeutisk eller profylaktisk användning innefattande nedanstående, vilka kan erhållas med konventionella förfaranden välkända inom området: a) mggtablett aktiv beståndsdel 1,0 laktos Ph. Eur. 93,25 kroskarmellosnatriurn 4,0 majsstärkelsepasta 0,75 ( 5% vikt/vol. vatteninnehållande pasta) magnesiumstearat 1,0 b) Tablett II mgjtablett aktiv beståndsdel 50 laktos Ph. Eur. 223,75 kroskarrnellosnatnum 6,0 majsstärkelse 15,0 polyvinylpyrrolidon 2,25 (5% vikt/vol. vatteninnehållande pasta) magnesíumstearat 3,0 510 812 18 c) Tablett III mgfiablett aktiv beståndsdel 100 laktos Ph. Eur. 182,75 kroskarmellosnatriurn 12,0 majsstärkelsepasta 2,25 (5% vikt/vol. vatteninnehållande pasta) magnesiumstearat 3,0 (d) Kagsel mg¿l_ aktiv beståndsdel 10 laktos Ph.Eur. 488,5 magnesiumstearat 1,5 (e) injektion mg¿ml aktiv beståndsdel (syraadditionssalt) 1,0 natriurrrldorid 9 0 renat vatten till 1,0 ml Exempel 3 Nedanstående är en beskrivning av en studie av effektema hos (-)~(3R)-föreningen enligt uppfinningen och motsvarande (3RS)-racemiska blandning i råttan. Fyra grupper om 10 Alderly Park Wistarråttor (varje grupp innefattande 5 han- och 5 honråttor) doserades oralt med den (3RS)-racemiska blandningen vid dagliga doser av O, 25, 100 eller 500 mg/kg. Doseringen fortsatte under totalt sju dygn. Djuren avlivades och undersöktes. Negativa effekter noterades i levrama hos sex i gruppen om 10 råttor doserade vid 500 mg/kg/dygn.

Fyra grupper om 10 Alderly Park Wistarråttor (varje grupp innefattande 5 han- och 5 honråttor) doserades oralt med (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen vid dagliga doser av 0, 50, 250 och 1000 mg/kg. Den högsta dosen tolererades inte. Efter fyra 19 510 812 eller fem dygn avlivades fyra av djuren från denna grupp. De återstående sex djuren doserades vid 500 mg/kg/dygn under återstoden av studien. Doseringen fortsatte under totalt fjorton dygn. Djuren avlivades och undersöktes. Inga negativa effekter noterades i levrama i gruppen om råttor doserade vid 250 mg/kg/dygn. De sex djuren doserade vid 1000 mg/kg/dygn under tre eller fyra dygn och sedan vid 500 mg/kg/- dygn under tio eller elva dygn visade inte heller någon negativ effekt på levem.

Baserat på sådana observationer framgår att (-)-(3R)-föreningen enligt uppfinningen inte orsakar nämnvärt negativ effekt på råttlevern vid 500 mg/kg/dygn.

Indirekt är (-)-(3R)-föreningen mindre toxisk än den (3RS)-racemiska blandningen.

Claims (1)

1. D.) 510 812 20 Patentkrav . Den optiskt aktiva föreningen (-)-(3R)-3-metyl-4-{4-[4-(4-py1idyl)piperazin-1- yl]fenoxi}smörsyra eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, i huvudsak fritt från (+)-(3S)-stereoisomeren. Optiskt aktiv förening enligt krav 1, varvid det finnes minst 90 vikt-% av (-)-(3R)- isomeren och 10 vikt-% eller lägre av motsvarande (+)-(3S)-isomer. Optiskt aktiv förening enligt krav 1, varvid det finnes minst 95 vikt-% av (-)-(3 R)- isomeren och 5 vikt~% eller lägre av motsvarande (+)-(3S)-isomer. Optiskt aktiv förening enligt krav 1, varvid det fmnes minst 99 vikt-% av (-)-(3R)- isomeren och l vikt-% eller lägre av motsvarande (+)-(3S)-isomer. . Optiskt aktiv förening enligt något av kraven 1-4, varvid det farmaceutiskt godtag- bara saltet föreligger i fonn av ett hydrokloridsalt. . Optiskt aktiv förening enligt något av kraven 1-4, varvid den farmaceutiskt god- tagbara estem föreligger i form av metyl-, etyl-, propyl- eller tert-butylester. . Optiskt aktiv förening enligt något av kraven 1-4, varvid den farrnaceutiskt god- tagbara arniden föreligger i form av en N-metyl-, N,N-dimetyl-, N-etyl-N-metyl- eller N,N-dietylbutyramid. . Optiskt aktiv förening enligt något av kraven 1-4, varvid det farmaceutiskt godtag- bara solvatet föreligger i form av ett hydrat. 21 510 812 9. Förfarande för framställning av den optiskt aktiva föreningen eller ett farmaceu- tiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, enligt något av föregåen- de krav, vilket innefattar: a) omsättning av 4-[4-(4-pyridyl)piperazin-l-yl]fenol, eller ett reaktivt derivat därav med den kirala mellanprodukten (3R)-4-hydroxi-3 -metylsmörsyra eller en ester därav, eller ett reaktivt derivat därav, b) omsättning av en förening med formeln I där L är en lämnande atom eller grupp, med den kirala mellanprodukten (3 R)-3- metyl-4-[4-(piperazin-l-yl)fenoxi]smörsyra eller ett syraadditionssalt därav, c) sönderdelning av en ester med formeln II “Q 0\/\/CO2R fr: där R är en karboxylskyddsgmpp, d) upplösning av den (3RS)-racemiska blandningen, (3RS)-3-metyl-4-{4-[4-(4- pyridyl)piperazín- 1 -yl]fenoxi} smörsyra, 510 812 22 och när ett faimaceutiskt godtagbart salt av (-)-(3R)-föreningen kräves, omsättning av den resulterande föreningen med en lämplig syra eller bas, och när en farmaceu- tiskt godtagbar ester eller amid av (-)-(3R)-föreningen kräves, omsättning av den resulterande föreningen med en lämplig alkohol eller amid. 10. Den optiskt aktiva föreningen tert-butyl-(3R)-3-metyl-4-hydroxibutyrat eller ett reaktivt derivat därav, i huvudsak fritt från (3 S)-stereoisomeren. 1 1. Förening enligt krav 10, varvid det reaktiva derivatet är tert-butyl-(3R)-3-metyl- 4-(p-toluensulfonyloxi)butyrat. 12. Läkemedelskomposition, innefattande den optiskt aktiva föreningen eller ett far- maceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, enligt något av kraven 1-8, i blandning med ett farmaceutiskt godtagbart spädningsmedel eller en bärare. 13. Användning av den optiskt aktiva föreningen eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, enligt något av kraven 1-8, för framställ- ning av ett läkemedel för förebyggande eller behandling av en sjukdom innefat- tande trombocytaggregation. 14. Användning av den optiskt aktiva föreningen eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, enligt något av kraven 1-8, för framställ- ning av ett läkemedel för förebyggande eller behandling av en sjukdom innefat- tande bindning av fibrinogen till GPIIb/llla. 15. Användning av den optiskt aktiva föreningen eller ett farmaceutiskt godtagbart salt, en ester, amid eller ett solvat därav, enligt något av kraven 1-8 för framställ- 510 812 23 ning av ett läkemedel för förebyggande eller behandling av trombotiska händelser som följer efter instabil angina.