RU2002121649A

RU2002121649A - Рекомбинантные антитела к человеческому интерлейкину 1β

Info

Publication number: RU2002121649A
Application number: RU2002121649/13A
Authority: RU
Inventors: Герман ГРАМ (DE); Герман ГРАМ; Франко Э. ДИ-ПАДОВА (CH); Франко Э. ДИ-ПАДОВА
Original assignee: Новартис АГ (CH); Новартис Аг
Priority date: 2000-01-21
Filing date: 2001-01-19
Publication date: 2004-03-10
Also published as: EP1248804B2; TR200201780T2; EP1248804B1; NO329816B1; US20030124617A1; NO20023266L; DK1248804T4; SI1248804T1; PL356297A1; NO20023266D0; DK1248804T3; SK10352002A3; SK288054B6; IL150551A0; PE20011219A1; GB0001448D0; CN1395581A; MXPA02007091A; CZ302738B6; DE60124863D1

Claims

1. Связывающая IL-1β молекула, которая включает антиген-связывающий сайт, содержащий по меньшей мере один вариабильный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (V_H), который содержит в последовательности гипервариабельные участки CDR1, CDR2 и CDR3, причем упомянутый CDR1 имеет аминокислотную последовательность Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, упомянутый CDR2 имеет аминокислотную последовательность Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-GIn-Gly, и упомянутый CDR3 имеет аминокислотную последовательность Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile, и ее прямые эквиваленты.

2. Связывающая IL-1β молекула, содержащая вариабельные домены как тяжелой (V_H), так и легкой цепи (V_L), где упомянутая связывающая IL-1β молекула содержит по меньшей мере один антиген-связывающий сайт, включающий (а) вариабельный домен тяжелой цепи иммуноглобулина (V_H), который содержит в последовательности гипервариабельные участки CDR1, CDR2 и CDR3, причем упомянутый CDR1 имеет аминокислотную последовательность Ser-Tyr-Trp-Ile-Gly, упомянутый CDR2 имеет аминокислотную последовательность Ile-Ile-Tyr-Pro-Ser-Asp-Ser-Asp-Thr-Arg-Tyr-Ser-Pro-Ser-Phe-Gln-Gly, и упомянутый CDR3 имеет аминокислотную последовательность Tyr-Thr-Asn-Trp-Asp-Ala-Phe-Asp-Ile, и (б) вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (V_L), который содержит гипервариабельный участок CDR3’, имеющий аминокислотную последовательность Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro, и ее прямые эквиваленты.

3. Связывающая IL-1β молекула по п.2, в которой вариабельный домен легкой цепи иммуноглобулина (V_L) содержит в последовательности гипервариабельные участки CDR1’, CDR2’ и CDR3’, причем упомянутый CDR1', имеет аминокислотную последовательность Arg-Ala-Ser-Gln-Ser-Val-Ser-Ser-Tyr-Leu-Ala, упомянутый CDR2’ имеет аминокислотную последовательность Asp-Ala-Ser-Asn-Arg-Ala-Thr, и упомянутый CDR3’ имеет аминокислотную последовательность Gln-Gln-Arg-Ser-Asn-Trp-Met-Phe-Pro, и ее прямые эквиваленты.

4. Связывающая IL-1β молекула по пп.1, 2 или 3, которая является человеческим антителом.

5. Связывающая IL-1β молекула, которая содержит по меньшей мере один антиген-связывающий сайт, включающий или первый домен, имеющий аминокислотную последовательность, по существу идентичную той, которая приведена в SEQ. ID. №1, начиная с аминокислоты в положении 1 и кончая аминокислотой в положении 128, или первый домен, который описан выше, и второй домен, имеющий аминокислотную последовательность, по существу идентичную той, которая приведена в SEQ. ID. №2, начиная с аминокислоты в положении 1 и кончая аминокислотой в положении 107.

6. Связывающая IL-1β молекула по любому пп.1-5 для применения в лечении опосредованного IL-1 заболевания или нарушения.

7. Первая конструкция ДНК, кодирующая тяжелую цепь или ее фрагмент и включающая (а) первую часть, которая кодирует вариабельный домен, содержащий альтернативно каркасный и гипервариабельные участки, причем упомянутые гипервариабельные участки находятся в последовательности CDR1, CDR2 и CDR3, аминокислотные последовательности которых показаны в SEQ. ID. №1; эта первая часть начинается с кодона, кодирующего первую аминокислоту вариабельного домена и оканчивается кодоном, кодирующим последнюю аминокислоту вариабельного домена, и (б) вторую часть, кодирующую константную часть тяжелой цепи или ее фрагмент, который начинается с кодона, кодирующего первую аминокислоту константной части тяжелой цепи, и оканчивается кодоном, кодирующим последнюю аминокислоту константной части, или ее фрагмента, за которым следует терминирующий кодон.

8. Вторая конструкция ДНК, кодирующая легкую цепь или ее фрагмент, которая включает (а) первую часть, которая кодирует вариабельный домен, включая альтернативно каркасный и гипервариабельные участки, причем упомянутыми гипервариабельными участками являются CDR3’ и необязательно CDR1’ и CDR2’, аминокислотные последовательности которых показаны в SEQ. ID. №2, эта первая часть начинается с кодона, кодирующего первую аминокислоту вариабельного домена, и оканчивается кодоном, кодирующим последнюю аминокислоту вариабельного домена, и (б) вторую часть, кодирующую константную часть легкой цепи или ее фрагмент, который начинается с кодона, кодирующего первую аминокислоту константной части легкой цепи, и оканчивается кодоном, кодирующим последнюю аминокислоту константной части, или ее фрагмент, за которым следует терминирующий кодон.

9. Экспрессионный вектор, способный реплицировать в прокариотической или эукариотической линии клеток, который включает по меньшей мере одну конструкцию ДНК по п.7 или 8.

10. Способ получения связывающей IL-1β молекулы, который включает (i) культивирование организма, трансформированного экспрессионным вектором по п.9, и (ii) выделение связывающей IL-1β молекулы из культуры.

11. Антитело к IL-1β, которое обладает антиген-связывающей специфичностью антигенного эпитопа зрелого человеческого IL-1β, которое включает петлю, содержащую остатки Gly 22, Pro 23, Tyr 24 и Glu 25, и которое способно ингибировать связывание IL-1β с его рецептором.

12. (i) Применение антитела к IL-1β, которое обладает антиген-связывающей специфичностью антигенного эпитопа зрелого человеческого IL-1β, которое включает петлю, содержащую остатки Gly 22, Pro 23, Tyr 24 и Glu 25, и которое способно ингибировать связывание IL-1β с его рецептором, для лечения опосредованного IL-1 заболевания или нарушения, (ii) способ лечения опосредованного IL-1 заболевания или нарушения у пациента, включающий введение пациенту эффективного количества антитела к IL-1β, которое обладает антиген-связывающей специфичностью антигенного эпитопа зрелого человеческого IL-1β, которое включает петлю, содержащую остатки Gly 22, Pro 23, Tyr 24 и Glu 25, и которое способно ингибировать связывание IL-1β с его рецептором, (iii) фармацевтическая композиция, включающая антитело к IL-1β, которое обладает антиген-связывающей специфичностью антигенного эпитопа зрелого человеческого IL-1β, которое включает петлю, содержащую остатки Gly 22, Pro 23, Tyr 24 и Glu 25, и которое способно ингибировать связывание IL-1β с его рецептором, в комбинации с фармацевтически приемлемым наполнителем, разбавителем или носителем, и (iv) применение антитела к IL-1β, которое обладает антиген-связывающей специфичностью антигенного эпитопа зрелого человеческого IL-1β, которое включает петлю, содержащую остатки Gly 22, Pro 23, Tyr 24 и Glu 25, и которое способно ингибировать связывание IL-1β с его рецептором, с целью получения препарата для лечения опосредованного IL-1 заболевания или нарушения.