PT1509537E - Acumulação celular de análogos de fosfonato de compostos inibidores da protease do vih e os próprios compostos - Google Patents

Acumulação celular de análogos de fosfonato de compostos inibidores da protease do vih e os próprios compostos Download PDF

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Hongtao Liu
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Xiaowu Chen
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Description

1
DESCRIÇÃO "ACUMULAÇÃO CELULAR DE ANÁLOGOS DE FOSFONATO DE COMPOSTOS INIBIDORES DA PROTEASE DO VIH E OS PRÓPRIOS COMPOSTOS" 0 presente pedido não provisório reivindica o beneficio do pedido provisório 60/375 622, depositado a 26 de Abril de 2002; pedido provisório n° 60/375 779, depositado a 26 de Abril de 2002; pedido provisório n° 60/375 834, depositado a 26 de Abril de 2002, e pedido provisório n° 60/375 665, depositado a 26 de Abril de 2002.
CAMPO DA INVENÇÃO A invenção refere-se geralmente a compostos com actividade antiviral e mais especificamente com propriedades anti-protease do VIH.
ANTECEDENTES DA INVENÇÃO A SIDA é o maior problema de saúde pública do mundo. Apesar de fármacos marcando vírus VIH estarem em ampla utilização e terem mostrado eficácia, a toxicidade e o desenvolvimento de estirpes resistentes têm limitado sua utilidade. Métodos de ensaio capazes de determinar a presença, ausência ou a quantidade de vírus VIH têm utilidade prática na procura de inibidores, bem como no diagnóstico da presença de VIH. A infecção pelo vírus da imunodeficiência humana (VIH) e doença associada é o maior problema de saúde pública no mundo. O retrovírus do vírus da imunodeficiência humana tipo 1 (VIH-1), um membro da família do lentivírus de primatas (DeClercq E. (1994), Annals of the New York 2
Academy of Sciences, 724:438-456; Barre-Sinoussi F. (1996), Lancet, 348:31-35) é geralmente aceite como sendo o agente causativo da síndroma da imunodeficiência adquirida (SIDA) (Tarrago et al. FASEB Journal 1994, 8:497-503). A SIDA é o resultado da replicação repetida de VIH-1 e um decréscimo na capacidade imune, mais proeminentemente uma queda no número de linfócitos CD4+. O vírus maduro tem um genoma de ARN de cadeia simples que codifica 15 proteínas (Frankel et al. (1998), Annual Review of Biochemistry, 67:1-25; Katz et al. (1994), Annual Review of Biochemistry, 63:133-173), incluindo três enzimas fundamentais: (i) protease (prt) (von der Helm K. (1996), Biological Chemistry, 377:765-774); (ii) transcriptase reversa (RT) (Hottiger et al. (1996), Biological Chemistry Hoppe-Seyler, 377:97-120), uma enzima única em retrovírus; e (iii) integrase (Asante et al. (1999), Advances in Vírus Research 52:351-369; Wlodawer A. (1999), Advances in Vírus Research 52:335-350; Esposito et al. (1999), Advances in Virus Research 52:319-333). A protease é responsável pelo processamento de poliproteínas precursoras virais, a integrase é responsável pela integração da forma de ADN de cadeia dupla do genoma virai em ADN hospedeiro e RT é a enzima fundamental na replicação do genoma virai. Em replicação virai, RT age tanto como ADN polimerase dependente de ARN como de ADN, para converter o genoma de ARN de cadeia simples em ADN de cadeia dupla. Uma vez que a transcriptase reversa (RT) viralmente codificada intervém indirectamente em reacções específicas durante a reprodução natural do vírus, a inibição de VIH-RT é uma marcação terapêutica importante para o tratamento de infecção por VIH e doenças associadas. 3 A análise da sequência dos genomas completos de vários isolados de VIH infecciosos e não infecciosos irradia uma luz considerável acerca da constituição do virus e dos tipos de moléculas que são essenciais para a sua replicação e maturação numa espécie infecciosa. A Protease do VIH é essencial para o processamento dos polipeptidos gag e gag-pol virais nas proteínas de viriões maduras. L. Ratner et al., Nature, 313:277-284 (1985); L. H. Pearl e W. R. Taylor, Nature, 329:351 (1987). 0 VIH inibe a mesma organização gag/pol/env observada noutros retrovírus. L. Ratner et al., supra; S. Wain-Hobson et al., Cell, 40:9-17 (1985); R.
Sanchez-Pescador et al., Science, 227:484-492 (1985), e M. A. Muesing et al., Nature, 313:405-458 (1985). O encaminhamento terapêutico para o alvo na SIDA implica a inibição da protease virai (ou proteinase) que é essencial para processar precursores de polipeptidos de fusão de VIH. Em VIH e vários outros retrovírus, a maturação proteolítica dos polipeptidos gag e gag/pol (um processo indispensável para geração de partículas virais infecciosas) mostrou ser mediada por uma protease que é, por si mesma, codificada pela região pol do genoma virai, Y. Yoshinaka et al., Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 82:1618-1622 (1985); Y. Yoshinaka et al., J. Virol, 55:870-873 (1985); Y. Yoshinaka et al., J. Virol, 57:826-832 (1986), e K. von der Helm, Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 74:911-915 (1977). Demonstrou-se que a inibição da protease inibia o processamento de p55 de VIH em células de mamíferos e a replicação de VIH em linfócitos T. T. J. McQuade et al., Science, 247: 454 (1990).
Os fármacos aprovados nos E.U.A. para a terapia de SIDA compreendem inibidores nucleosídicos de RT (Smith et 4 al. (1994) Clinicai Investigator, 17: 226-243), inibidores de protease e inibidores de RT não nucleosídicos (NNRTI), (Johnson et ai. (2000) Advances in Internai Medicine, 45:1— 40; Porche DJ (1999) Nursing Clinics of North America, 34:95-112) . A protease (ou proteinase), consistindo de somente 99 aminoácidos, está entre as menores enzimas conhecidas, e a sua homologia demonstrada em aspartil-proteases como pepsina e renina (L. H. Pearl e W. R. Taylor, Nature, 329:351-354 (1987), e I. Katoh et al., Nature, 329:654-656 (1987) ), levou a inferências a respeito da estrutura tridimensional e do mecanismo da enzima (L. H. Pearl e W. R. Taylor, supra) que desde então tinha sido criada experimentalmente. A protease do VIH activa foi expressa em bactérias (ver, por exemplo, P.L. Darke et al., J. Biol. Chem., 264:2307-2312 (1989)) e quimicamente sintetizada (J. Schneider e S.B. Kent, Cell, 54:363-368 (1988), e R.F. Nutt et al., Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 85:7129-7133 (1988)). A mutagénese dirigida ao local (P.L. Darke et al., supra), e N.E. Kohl et al., Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 85:4686-4690 (1988)) e a inibição de pepstatina (P. L. Darke et al., J. Biol. Chem., 264: 2308-2312 (1989); S. Seelmeier et al., Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 85: 6612-6616 (1988); C.-Z. Giam e I. Borsos, J. Biol. Chem., 263:14617-14720 (1988) , e J. Hansen et al., EMBO J., 7:1785-1791 (1988)) proporcionam provas da função mecânica da protease do VIH como uma aspartil-protease. Um estudo demonstrou que a protease cliva nos locais previstos em péptidos modelados após as regiões actualmente clivadas pela enzima nas proteínas precursoras gag e pol durante a maturação virai. P.L. Darke et al., Biochem. Biophys. Res. Communs., 5 156:297-303 (1988). Análises cristalográficas por raios X da protease do VIH (M.A. Navia et al., Nature, 337:615-620 (1989)) e uma enzima retroviral congénere do virus de sarcoma Rous (M. Miller et al., Nature, 337:576-579 (1989)) revelam um local activo no dímero de protease que é idêntico ao observado noutras aspartil-proteases, suportando, assim, a suposição (L. H. Pearl e W. R. Taylor, supra) de que a enzima de VIH é activa como um dimero. Ver também Joseph A. Martin, "Recent Advances in the Design of HIV Proteinase Inhibitors", Antiviral Research, 17 (1992) 265-278. Na obra 'J. HIV Ther.', 2001, 6(4) 96-99, encontra-se descrito o composto GW 433 908, o qual é um derivado de fosfonato do amprenavir, que é inibidor da protease do VIH, e satisfaz a fórmula estrutural
A publicação 'NLM 11968788 Medline Print-out' (de Abril de 2002) (Revista Japonesa de Medicina Clinica) descreve, em termos genéricos e específicos, os inibidores da protease do VIH atazanavir, GW 433908, L-756 423, mozenavir (DMP-450) e tipranavir.
Os inibidores da protease do VIH são úteis para limitar o estabelecimento e a progressão de infecções por administração terapêutica, bem como em ensaios de diagnóstico para VIH. Os fármacos inibidores de protease, aprovados pela FDA, compreendem: 6 saquinavir (Invirase®, Fortovase®, Hoffman-La Roche, EP 00432695 e EP-00432694) ritonavir (Norvir®, Abbot Laboratories) indinavir (Crixivan®, Merck & Co.) nelfinavir (Viracept®, Pfizer) amprenavir (Agenerase®, GlaxoSmithKline, Vertex Pharmaceuticals) . lopinavir/ritonavir (Kaletra®, Abbot
Laboratories)
Os fármacos experimentais inibidores de protease compreendem: . fosamprenavir (GlaxoSmithKline, Vertex
Pharmaceuticals) . tipranavir (Boehringer Ingelheim) atazanavir (Bristol-Myers Squibb).
Existe uma necessidade de agentes terapêuticos anti-VIH, isto é, fármacos com propriedades farmacocinéticas e antivirais melhoradas e com actividade melhorada contra o desenvolvimento de resistência ao VIH, biodisponibilidade oral melhorada, maior potência e período de vida eficaz ín vivo prolongado. Os novos inibidores da protease do VIH (PI) devem ser activos contra estirpes de VIH mutantes, ter perfis de resistência distintos, efeitos secundários reduzidos, programação de dosagem menos complicada e ser oralmente activos. Em particular, existe uma necessidade de um regime de dosagem menos dispendioso, tal como uma pílula uma vez ao dia. Apesar de os fármacos dirigidos à protease do VIH serem amplamente utilizados e demonstrarem eficácia, particularmente quando utilizadas em combinação, a toxicidade e o desenvolvimento de estirpes resistentes têm 7 limitado a sua utilidade (Palella et al., N. Engl. J. Med. (1998) 338: 853-860; Richman, D. D. Nature (2001) 410: 995-1001). A terapia de combinação de inibidores de PI e RT prova ser altamente eficaz na supressão de replicação virai em níveis não quantificáveis durante um período de tempo sustentado. Também, a terapia de combinação com inibidores de RT e de protease mostra efeitos sinérgicos na supressão de replicação de VIH. Infelizmente, actualmente muitos pacientes não respondem à terapia de combinação devido ao desenvolvimento de resistência ao fármaco, não aderência aos regimes de dosagem complicados, interacções farmacocinéticas, toxicidade e falta de potência. Consequentemente, existe uma necessidade de novos inibidores da protease do VIH que são sinérgicos em combinação com outros inibidores de VIH. A melhoria da administração de fármacos e outros agentes para marcar células e tecidos é o foco de pesquisa considerável durante muitos anos. Embora muitas tentativas tenham sido feitas para desenvolver métodos eficazes para importar moléculas biologicamente activas para o interior de células, tanto in vivo como in vitro, nenhum demonstrou ser inteiramente satisfatório. Optimizar a associação do fármaco inibitório com o seu alvo celular, minimizando simultaneamente a redistribuição do fármaco, por exemplo, em células próximas, é frequentemente difícil ou ineficaz. A maior parte dos agentes actualmente administrados a um paciente por via parentérica não são específicos, resultando na administração sistémica do agente em células e tecidos do corpo em que é desnecessário e muitas vezes indesejável. Isto pode resultar em efeitos secundários do fármaco adversos e muitas vezes limita a dose de um fármaco (por exemplo, agentes citotóxicos e outros fármacos anticancerigenos ou antivirais) que pode ser administrada. Em comparação, apesar da administração oral de fármacos ser geralmente reconhecida como um método de administração conveniente e económico, a administração oral pode resultar (a) na absorção do fármaco através de barreiras celulares e de tecidos, por exemplo, sangue/cérebro, epiteliais, membranas celulares, resultando na distribuição sistémica indesejável, ou (b) na permanência temporária do fármaco no tracto gastrointestinal. Consequentemente, um objectivo principal consiste em desenvolver métodos para visar especificamente agentes em células e tecidos. Os benefícios de tal tratamento compreendem impedir os efeitos fisiológicos gerais da libertação inadequada destes agentes noutras células e tecidos, tais como células não infectadas. A definição de alvos intracelulares pode ter lugar através de métodos e composições que permitem a acumulação ou retenção de agentes biologicamente activos no interior das células.
DESCRIÇÃO ABREVIADA DA INVENÇÃO A presente invenção proporciona novos compostos com actividade de protease do VIH, isto é, novos inibidores de protease retroviral humana. Assim, os compostos da invenção podem inibir proteases retrovirais e, deste modo, inibir a replicação do vírus. São úteis para tratar pacientes humanos infectados com um retrovírus humano, tal como o vírus da imunodeficiência humana (estirpes VIH-1 ou VIH-2) ou vírus de leucemia de células T (HTLV-I ou HTLV-II) que resulta na síndrome de imunodeficiência adquirida (SIDA) 9 e/ou doenças associadas. A presente invenção compreende novos compostos de fosfonato inibidores da protease do VIH (PI) e análogos de fosfonato de inibidores de protease conhecidos, experimentais e aprovados. Os compostos da invenção proporcionam facultativamente a acumulação celular, tal como adiante se descreve. A presente invenção diz geralmente respeito à acumulação ou retenção de compostos terapêuticos no interior das células. Mais particularmente, a invenção diz respeito à obtenção de concentrações elevadas de moléculas contendo fosfonato em células infectadas com VIH. A determinação de alvos intracelulares pode ter lugar através de métodos e composições que permitem a acumulação ou retenção de agentes biologicamente activos no interior das células. Tal determinação de alvos eficazes pode ser aplicável a uma variedade de procedimentos e formulações terapêuticas.
As composições da invenção compreendem novos compostos de PI tendo pelo menos um grupo fosfonato. A invenção compreende todos os inibidores de protease conhecidos, experimentais e aprovados, pelo menos com um grupo fosfonato.
De acordo com um aspecto, a invenção compreende compostos de fórmulas I, II, III, IV, V e VI.
10
I»
IV
Λ1 e
V
VI
As fórmulas I-VI são substituídos com um ou mais grupos covalentemente fixados, incluindo pelo menos um grupo fosfonato. As fórmulas I-Vm são "complementos", isto é, substruturas que são comuns aos compostos específicos englobados nas mesmas.
De acordo com outro aspecto, a invenção proporciona uma combinação farmacêutica incluindo uma quantidade eficaz de um composto seleccionado entre as fórmulas I-VIII e um segundo composto tendo propriedades anti-VIH.
De acordo com outro aspecto, a invenção proporciona a utilização dos compostos de fórmulas I-VI para a preparação de uma composição farmacêutica para o tratamento ou para a prevenção dos sintomas ou efeitos de uma infecção com VIH. A invenção proporciona uma composição farmacêutica incluindo uma quantidade eficaz de um composto seleccionado entre as fórmulas I-VI, ou um seu sal farmaceuticamente aceitável, em combinação com um veículo ou solvente farmaceuticamente aceitável. 11 A presente invenção tem por objectivo aumentar a acumulação celular e a retenção dos compostos do fármaco, melhorando, assim, seu valor terapêutico e de diagnóstico. A invenção também proporciona a utilização dos compostos de fórmulas I.VI para a preparação de uma composição farmacêutica para inibir VIH. Os compostos de fórmulas I-VIII são eficazes para inibir o crescimento de células infectadas com VIH. A invenção também proporciona um composto seleccionado entre as fórmulas I-VIII para utilização em terapia clinica (preferencialmente, para utilização no tratamento de cancro, por exemplo, tumores sólidos), bem como a utilização de um composto de fórmulas I-VIII para a preparação de um medicamento útil para o tratamento de cancro, por exemplo, tumores sólidos. A invenção também proporciona processos e novos intermediários aqui descritos que são úteis para preparar os compostos da invenção. Alguns dos compostos de fórmulas I-VI são úteis para preparar outros compostos de fórmulas I-VI.
De acordo com outro aspecto da invenção, a actividade da protease do VIH é inibida por um método que compreende o passo que consiste em tratar uma amostra suspeita de conter virus VIH com um composto ou composição da invenção.
De acordo com outro aspecto, a invenção proporciona um método para inibir a actividade da protease do VIH, que compreende o passo que consiste em fazer contactar uma amostra suspeita de conter virus VIH com uma composição da invenção.
De acordo com outros aspectos, a invenção proporciona novos métodos para análises de síntese, separação, 12 isolamento, purificação, caracterização e ensaio dos compostos da presente invenção.
DESCRIÇÃO MINUCIOSA DAS FORMAS DE REALIZAÇÃO EXEMPLIFICATIVAS
Será feita agora referência a certas formas de realização da invenção, exemplos das quais são ilustrados na descrição, estruturas e fórmulas anexas. Embora a invenção seja descrita em conjunto com as formas de realização enumeradas, faz-se observar que não se pretende limitar a invenção a tais formas de realização. Pelo contrário, a invenção pretende abranger todas as alternativas, modificações e equivalentes que podem ser incluídos no âmbito da presente invenção, tal como definido pelas reivindicações.
DEFINIÇÕES
Salvo se indicado de outro modo, os seguintes termos e expressões, tal como aqui utilizados, pretendem ter os significados seguintes.
Os termos "fosfonato" e "grupo fosfonato" designam um grupo ou radical funcional numa molécula que compreende pelo menos uma ligação fósforo-carbono e pelo menos uma ligação dupla fósforo-oxigénio. 0 átomo de fósforo é ainda substituído com oxigénio, enxofre e substituintes de azoto. Tais substituintes podem ser parte de um radical de pró-fármaco. Tal como aqui definido, os termos "fosfonato" e "grupo fosfonato" compreendem moléculas com grupos funcionais de ácido fosfónico, monoéster fosfónico, diéster fosfónico, fosfonamidato, fosfondiamidato e fosfontioato. 0 termo "pró-fármaco", tal como aqui utilizado, designa qualquer composto que, quando administrado a um 13 sistema biológico, gera a substância do fármaco, isto é, o ingrediente activo, como resultado de reacção(ões) química (s) espontânea (s), reacção (ões) química(s) catalisada (s) com enzima, fotólise e/ou reacção (ões) química(s) metabólica (s) . Assim, um pró-fármaco é um análogo covalentemente modificado ou forma latente de um composto terapeuticamente activo. A expressão "pró-fármaco farmaceuticamente aceitável" designa um composto que é metabolizado no hospedeiro, por exemplo, hidrolisado ou oxidado, tanto pela acção enzimática como por solvólise geral com ácido ou base, para formar um ingrediente activo. Exemplos típicos de pró-fármacos dos compostos da invenção têm grupos de protecção biologicamente lábeis num radical funcional do composto. Os pró-fármacos compreendem compostos que podem ser oxidados, reduzidos, aminados, desaminados, esterificados, desesterificados, alquilodos, desalquilodos, acilodos, desacilodos, fosforilados, desfosforilados, fotolizados, hidrolisados ou submetidos a outra conversão ou permuta de grupo funcional implicando ruptura ou formação de ligações químicas no pró-fármaco. A expressão "radical de pró-fármaco" designa um grupo funcional lábil que se separa do composto inibitório activo durante metabolismo, sistemicamente, no interior de uma célula, por hidrólise, clivagem enzimática ou por alguns outros processos (Bundgaard, Hans, "Design and Application of Prodrugs" em Textbook of Drug Design and Development (1991), P. Krogsgaard-Larsen e H. Bundgaard, Eds. Harwood Academic Publishers, págs. 113-191). Enzimas que são capazes de um mecanismo de activação enzimática com os compostos do pró-fármaco de fosfonato da invenção 14 compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, amidases, esterases, enzimas microbianas, fosfolipases, colinoesterases e fosfases. Os radicais de pró-fármacos podem servir para melhorar a solubilidade, a absorção e a lipofilicidade, para assim optimizar a administração, biodisponibilidade e eficácia do fármaco.
Exemplos de radicais de pró-fármacos compreendem os ésteres aciloximetilicos -CH20C(=0)R9 e aciloximetil carbonatos -CH2OC(=0)OR9 lábeis ou hidroliticamente sensíveis, em que o símbolo R9 representa alquilo (Ci-Cê), alquilo (Ci-Cê) substituído, arilo (C6-C20) ou arilo (C6-C20) substituído. 0 éster aciloxialquílico foi utilizado primeiramente como uma estratégia de pró-fármaco para ácidos carboxílicos e depois aplicado a fosfatos e fosfonatos por Farquhar et al. (1983) J. Pharm. Sei., 72: 324; também as patentes de invenção norte-americanas n— 4816750, 4968788, 5663159 e 5792756. Em certos compostos da invenção, um radical de pró-fármaco é parte de um grupo fosfonato. Subsequentemente, o éster aciloxialquílico foi utilizado para administrar ácidos fosfónicos através de membranas celulares e para melhorar a biodisponibilidade oral. Uma variante próxima do éster aciloxialquílico, o éster alcoxicarboniloxialquílico (carbonato), também pode melhorar a biodisponibilidade oral enquanto radical de pró-fármaco nos compostos das combinações da invenção. Um exemplo de éster aciloximetílico é pivailoxi-metoxi (POM) -CH20C (=0)C(CH3) 3. Um exemplo de radical de pró-fármaco carbonato de aciloximetilo é carbonato de pivailoximetilo (P0C)-CH20C(=0)0C(CH3)3. 0 grupo fosfonato pode ser um radical do pró-fármaco de fosfonato. 0 radical de pró-fármaco pode ser sensível a 15 hidrólise, tal como, mas sem que isso constitua qualquer limitação, um grupo carbonato de pivailoximetilo (POC) ou POM. Em alternativa, o radical de pró-fármaco pode ser sensível a clivagem enzimática potencializada, tal como um grupo éster de lactato ou éster-fosfonamidato.
Descreve-se que ésteres arílicos de grupos fósforo, especialmente ésteres fenílicos, melhoram a bio-disponibilidade oral (DeLambert et al. (1994) J. Med. Chem. 37:498). Ésteres fenílicos contendo um éster carboxílico orto no fosfato também são descritos (Khamnei e Torrence, (1996) J. Med. Chem. 39:4109-4115). Descreve-se que ésteres benzílicos geram o ácido fosfónico original. Em alguns casos, substituintes na posição orto ou para podem acelerar a hidrólise. Análogos de benzilo com um fenol acilodo ou um fenol alquilado podem gerar o composto fenólico através da acção das enzimas, por exemplo, esterases, oxidases, etc.., que, por sua vez, passam por clivagem na ligação C-0 benzílica para gerar o ácido fosfórico e o intermediário de metida de quinona. Exemplos de tal classe de pró-fármacos são descritos por Mitchell et al. (1992) J. Chem. Soc. Perkin Trans. I 2345; Brook et al. WO 91/19721. Ainda outras pró-fármacos benzílicas são descritas que contêm um grupo contendo éster carboxílico fixado ao metileno benzílico (Glazier et al. WO 91/19721). Descreve-se que pró-fármacos contendo tio são úteis para a libertação intracelular de fármacos fosfonato. Tais pró-ésteres contêm um grupo etiltio, em que o grupo tiol tanto é esterificado com um grupo acilo como combinado com outro grupo tiol para formar um dissulfureto. Desesterificação ou redução do dissulfureto gera o intermediário tio livre que, subsequentemente, se degrada no ácido fosfórico e 16 epissulfureto (Puech et al. (1993) Antiviral Res., 22:155-174; Benzaria et al. (1996) J. Med. Chem. 39:4958). Ésteres de fosfonatos cíclicos também são descritos como pró-fármacos de compostos contendo fósforo (Erion et al., patente de invenção norte-americana n° 6312662). A expressão "grupo de protecção" designa um radical de um composto que dissimula ou altera as propriedades de um grupo funcional ou as propriedades do composto como um todo. A estrutura química de um grupo de protecção varia amplamente. Uma função de um grupo de protecção é servir como intermediário na síntese de substância de fármacos originais. Grupos de protecção químicos e estratégias para protecção/desprotecção são bem conhecidos na especialidade. Ver: "Protective Groups in Organic Chemistry", Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque, 1991. Os grupos de protecção são muitas vezes utilizados para dissimular a reactividade de certos grupos funcionais, para auxiliar na eficácia de reacções químicas desejadas, por exemplo, estabelecer e quebrar ligações químicas de um modo ordenado e planeado. Protecção de grupos funcionais de um composto altera outras propriedades físicas além da reactividade dos grupos funcionais protegidos, como a polaridade, lipofilicidade (hidrofobicidade) e outras propriedades que podem ser medidas por ferramentas analíticas comuns. Intermediários quimicamente protegidos podem, por si mesmos, ser biologicamente activos ou inactivos.
Os compostos protegidos também podem demonstrar propriedades alteradas e, em alguns casos, optimizadas in vitro e in vivo, como passagem através de membranas celulares e resistência a sequestro ou degradação enzimática. Nesta função, os compostos protegidos com efeitos terapêuticos 17 pretendidos podem ser referidos como pró-fármacos. Outra função de um grupo de protecção é converter o fármaco original num pró-fármaco, em que o fármaco original é libertado quando da conversão do pró-fármaco in vivo. Devido aos pró-fármaco activas poderem ser absorvidos mais eficazmente do que o fármaco original, pró-fármacos podem possuir maior potência in vivo do que o fármaco original. Os grupos de protecção são removidos tanto in vitro, no caso de intermediários químicos, como in vivo, no caso de pró-fármacos. Com intermediários químicos, não é particularmente importante que os produtos resultantes após a desprotecção, por exemplo, álcoois, sejam fisiologicamente aceitáveis, apesar de geralmente ser mais desejável que os produtos sejam farmacologicamente inócuos.
Qualquer referência a qualquer um dos compostos da invenção também compreende uma referência a um sal fisiologicamente aceitável dos mesmos. Exemplos de sais fisiologicamente aceitáveis dos compostos da invenção compreendem sais obtidos a partir de uma base adequada, como um metal alcalino (por exemplo, sódio), um metal alcalino-terroso (por exemplo, magnésio), amónio e NX4+ (em que X é alquilo (C1-C4)) . Os sais fisiologicamente aceitáveis de um átomo de hidrogénio ou um grupo amino compreendem sais de ácidos carboxílicos orgânicos, tais como ácidos acético, benzóico, láctico, fumárico, tartárico, maleico, malónico, málico, isetiónico, lactobiónico e succínico; ácidos sulfónicos orgânicos, tais como ácidos metanossulfónico, etanossulfónico, benzenossulfónico e p-toluenossulfónico; e ácidos inorgânicos, tais como ácidos clorídrico, sulfúrico, fosfórico e sulfâmico. Os sais fisiologicamente aceitáveis 18 de um composto de um grupo hidroxi compreendem o anião de referido composto em combinação com um catião adequado, tal como Na+ e NX4+ (em que X é seleccionado independentemente entre H ou um grupo alquilo(C1-C4) ) .
Para utilização terapêutico, sais de ingredientes activos dos compostos da invenção serão fisiologicamente aceitáveis, isto é, serão obtidos a partir de uma base ou ácido fisiologicamente aceitável. No entanto, sais de ácidos ou bases que não são fisiologicamente aceitáveis podem também encontrar uso, por exemplo, na preparação ou purificação de um composto fisiologicamente aceitável. Todos os sais, obtidos ou não a partir de uma base ou ácido fisiologicamente aceitável, estão abrangidos no âmbito da presente invenção. 0 termo "alquilo" designa hidrocarboneto C1-C18 contendo átomos de carbono normais, secundários, terciários ou cíclicos. Como exemplos refere-se metilo (Me, -CH3), etilo (Et, -CH2CH3) , 1-propilo (n-Pr, n-propilo, CH2CH2CH3) , 2-propilo (i-Pr, i-propilo, -CH(CH3)2), 1-butilo (n-Bu, n-butilo, -CH2CH2CH2CH3) , 2-metil-l-propilo (i-Bu, i-butilo, -CH2CH(CH3) 2), 2-butilo (s-Bu, £-butilo, CH (CH3) CH2CH3), 2-metil-2-propilo (t-Bu, t-butilo, C(CH3)3) , 1-pentilo (n-pentilo, -CH2CH2CH2CH2CH3) , 2-pentilo (-CH (CH3) CH2CH2CH3) , 3-pentilo (-CH (CH2CH3) 2) , 2-metil-2-butilo (-C(CH3)2CH2CH3) , 3-metil-2-butilo (-CH (CH3) CH (CH3) 2) , 3-metil-l-butilo (-CH2CH2CH (CH3) 2) , 2-metil-l-butilo (CH2CH (CH3) CH2CH3) , 1-hexilo (-CH2CH2CH2CH2CH2CH3) , 2-hexilo (-CH (CH3) CH2CH2CH2CH3) , 3-hexilo (-CH (CH2CH3) (CH2CH2CH3) ) , 2- metil-2-pentilo (-C (CH3) 2CH2CH2CH3), 3-metil-2-pentilo (-CH (CH3) CH (CH3) CH2CH3) , 4-metil-2-pentilo (- CH (CH3) CH2CH (CH3) 2) , 3-metil-3-pentilo (-C (CH3) (CH2CH3) 2) , 2- 19 metil-3-pentilo (-CH(CH2CH3)CH (CH3) 2), 2,3-dimetil-2-butilo (-C(CH3)2CH(CH3)2) , 3,3-dimetil-2-butilo (-CH (CH3) C (CH3) 3) . 0 termo "alcenilo" designa hidrocarboneto C2-C18 contendo átomos de carbono normais, secundários, terciários ou ciclicos pelo menos com um local de insaturação, isto é, uma ligação dupla sp2 carbono-carbono. Como exemplos refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação: etileno ou vinilo (-CH=CH2) , alilo (-CH2CH=CH2) , ciclopentenilo (-C5H7) e 5-hexenilo (-CH2 CH2CH2CH2CH=CH2) . 0 termo "alcinilo" designa hidrocarboneto C2-C18 contendo átomos de carbono normais, secundários, terciários ou cíclicos, pelo menos com um local de insaturação, isto é, uma ligação tripla sp carbono-carbono. Como exemplos refere-se, mas sem que isso constitua qualquer limitação: acetilénico (-OCH) e propargilo (-CH2C=CH). 0 termo "alquileno" designa um radical hidrocarboneto saturado, de cadeia linear ou ramificada, ou cíclico com 1-18 átomos de carbono, e tendo dois centros de radicais monovalentes derivados pela remoção de dois átomos de hidrogénio dos mesmos ou dois átomos de carbono diferentes de um alcano original. Radicais alquileno típicos compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação: metileno (-CH2-) 1,2-etilo (-CH2CH2-), 1,3-propilo (-CH2CH2CH2-), 1,4-butilo (-CH2CH2CH2CH2-) e outros. 0 termo "alcenileno" designa um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia linear ou ramificada, ou cíclico com 2-18 átomos de carbono e tendo dois centros de radicais monovalentes obtidos por remoção de dois átomos de hidrogénio dos mesmos ou dois átomos de carbono diferentes de um alceno original. Radicais alcenileno típicos 20 compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação: 1,2-etileno (-CH=CH-) . O termo "alcinileno" designa um radical hidrocarboneto insaturado, de cadeia linear ou ramificada, ou cíclico de 2-18 átomos de carbono e tendo dois centros de radicais monovalentes obtidos por remoção de dois átomos de hidrogénio dos mesmos ou dois átomos de carbono diferentes de um alcino original. Radicais alcinileno típicos compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação: acetileno (—C=C—) , propargilo (-CH2OC-} e 4-pentinilo (-CH2CH2CH2CsCH-) . O termo "arilo" designa um radical hidrocarboneto aromático monovalente de 6-20 átomos de carbono derivado pela remoção de um átomo de hidrogénio de um átomo de carbono único de um sistema de anel aromático original. Grupos arilo típicos compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, radicais derivados de benzeno, benzeno substituído, naftaleno, antraceno, bifenilo e outros. O termo "arilalquilo" refere-se a um radical alquilo acíclico em que um dos átomos de hidrogénio ligados a um átomo de carbono, tipicamente um átomo de carbono terminal ou sp3, é substituído com um radical arilo. Grupos arilalquilo típicos compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, benzilo, 2-feniletano-l-ilo, 2-fenileteno-l-ilo, naftilmetilo, 2-naftiletano-l-ilo, 2-naftileteno-l-ilo, naftobenzilo, 2-naftofeniletano-l-ilo e outros. O grupo arilalquilo compreende 6 a 20 átomos de carbono, por exemplo, o radical alquilo, incluindo grupos alcanilo, alcenilo ou alcinilo, do grupo arilalquilo possui 21 1 a 6 átomos de carbono e o radical arilo possui 5 a 14 átomos de carbono.
Os termos "alquilo substituído", "arilo substituído" e "arilalquilo substituído" designam alquilo, arilo e arilalquilo, respectivamente, em que um ou mais átomos de hidrogénio são cada um independentemente substituídos com um substituinte. Os substituintes típicos compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, -X, -R, -0-, -OR, -SR, -S-, -NR2, -NR3, =NR, -CX3, -CN, -OCN, -SCN, -N=C=0, -NCS, -NO, -N02, =N2, -N3, NC (=0)R, -C(=0)R, -C (=0) NRR -S(=0)20-, -S(=0)20H, -S (=0) 2R, -0S(=0)20R, S(=0)2NR, -S(=0)R, -0P(=0)02RR, -P(=0)02RR, -P (=0) (0”) 2, -P(=0)(0H)2, =C(=0)R, -C(=0)X, -C(S)R, -C(0)0R, -C(0)0- C (S) OR, -C (0) SR, -C (S) SR, -C(0)NRR, -C(S)NRR, -C (NR) NRR, em que cada X é independentemente um halogénio: F, Cl, Br ou I; e cada R é independentemente -H, alquilo, arilo, heterociclo, grupo de protecção ou radical de pró-fármaco. Grupos alquileno, alcenileno e alcinileno também podem ser similarmente substituídos. 0 termo "heterociclo", tal como aqui utilizado, compreende, a título exemplificativo e não limitativo, os heterociclos descritos por Paquette, Leo A.: "Principies of Modern Heterocyclic Chemistry" (W.A. BenjamiN,Nova Iorque, 1968), particularmente os capítulos 1, 3, 4, 6, 7 e 9; "The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A Series of Monographs" (John Wiley & Sons, Nova Iorque, 1950 até ao presente), em particular os volumes 13, 14, 16, 19 e 28; e J. Am. Chem. Soc. (1960)82: 5566.
Exemplos de heterociclos compreendem, a título exemplificativo e não limitativo, piridilo, di-hidropiridilo, tetra-hidropiridilo (piperidilo), tiazolilo, tetra- 22 hidrotiofenilo, tetra-hidrotiofenilo oxidado com enxofre, pirimidinilo, furanilo, tienilo, pirrolilo, pirazolilo, imidazolilo, tetrazolilo, benzofuranilo, tianafftalenilo, indolilo, indolenilo, quinolinilo, isoquinolinilo, benzimidazolilo, pirrolidinilo, hidrofuranilo, hidropiranilo, hidroquinolila, hidroquinolinilo, piperidinilo, 4-piperidonilo, 2-pirrolidonilo, pirrolinilo, tetra-bis-tetra-hidrofuranilo, tetra- bis-tetra-hidropiranilo, tetra- tetra-hidroisoquinolinilo, deca- octa-hidroisoquinolinilo, azocinilo, triazinilo, 6H-1,2,5-tiadiazinilo, 2H,6H-1,5,2-ditiazinilo, tienilo, tiantrenilo, piranilo, isobenzofuranilo, cromenilo, xantenilo, fenoxatinilo, 2H-pirrolilo, isotiazolilo, isoxazolilo, pirazinilo, piridazinilo, indolizinilo, isoindolilo, 3H-indolilo, lH-indazolilo, purinilo, 4H-quinolizinilo, ftalazinilo, naftiridinilo, quinoxalinilo, quinazolinilo, cinolinilo, pteridinilo, 4aH-carbazolilo, carbazolilo, β-carbolinilo, fenantridinilo, acridinilo, pirimidinilo, fenantrolinilo, fenazinilo, fenotiazinilo, furazanilo, fenoxazinilo, isocromanilo, cromanilo, imidazolidinilo, imidazolinilo, pirazolidinilo, pirazolinilo, piperazinilo, indolinilo, isoindolinilo, quinuclidinilo, morfolinilo, oxazolidinilo, benzotriazolilo, benzisoxazolilo oxindolilo, benzoxazolinilo e isatinoilo.
De acordo com uma forma de realização, o grupo bis--tetra-hidrofuranilo é:
23 A título exemplificativo e não limitativo, heterociclos ligados a carbono são ligados na posição 2, 3, 4, 5 ou 6 de uma piridina, posição 3, 4, 5 ou 6 de uma piridazina, posição 2, 4, 5 ou 6 de uma pirimidina, posição 2, 3, 5 ou 6 de uma pirazina, posição 2, 3, 4 ou 5 de um furano, tetrahidrofurano, tiofurano, tiofeno, pirrol ou tetra-hidropirrol, posição 2, 4 ou 5 de um oxazol, imidazol ou tiazol, posição 3, 4 ou 5 de um isoxazol, pirazol ou isotiazol, posição 2 ou 3 de uma aziridina, posição 2, 3 ou 4 de uma azetidina, posição 2, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 de uma quinolina ou posição 1, 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 de uma isoquinolina. Ainda mais tipicamente, heterociclos ligados a carbono compreendem 2-piridilo, 3-piridilo, 4-piridilo, 5-piridilo, β-piridilo, 3-piridazinilo, 4-piridazinilo, 5-piridazinilo, 6-piridazinilo, 2-pirimidinilo, 4-pirimidinilo, 5-pirimidinilo, 6-pirimidinilo, 2-pirazinilo, 3-pirazinilo, 5-pirazinilo, 6-pirazinilo, 2-tiazolilo, 4- -tiazolilo ou 5-tiazolilo. A título exemplificativo e não limitativo, heterociclos ligados a azoto são ligados na posição 1 de uma aziridina, azetidina, pirrol, pirrolidina, 2-pirrolina, 3-pirrolina, imidazol, imidazolidina, 2-imidazolina, 3-imidazolina, pirazol, pirazolina, 2-pirazolina, 3-pirazolina, piperidina, piperazina, indol, indolina, 1H-indazol, posição 2 de um isoindol, ou isoindolina, posição 4 de uma morfolina, e posição 9 de um carbazol ou β-carbolina. Ainda mais tipicamente, heterociclos ligados a azoto compreendem 1-aziridilo, 1-azetedilo, 1-pirrolilo, 1-imidazolilo, 1-pirazolilo e 1-piperidinilo. 0 termo "carbociclo" designa um anel aromático ou saturado, insaturado tendo 3 a 7 átomos de carbono, tal 24 como um monociclo, ou 7 a 12 átomos de carbono, tal como um biciclo. Carbociclos monocíclicos têm 3 a 6 átomos no anel, ainda mais tipicamente 5 ou 6 átomos no anel. Carbociclos biciclicos têm 7 a 12 átomos no anel, por exemplo, arranjados como um sistema biciclo [4,5], [5,5], [5,6] ou [6,6], ou 9 ou 10 átomos no anel arranjados como um sistema biciclo [5,6] ou [6,6]. Exemplos de carbociclos monociclicos compreendem ciclopropilo, ciclobutilo, ciclopentilo, 1-ciclo-pent-l-enilo, l-ciclopent-2-enilo, 1-ciclopent-3-enilo, ciclo-hexilo, 1-ciclo-hex-l-enilo, 1-ciclo-hex-2-enilo, l-ciclo-hex-3-enilo, fenilo, espirilo e naftilo. O termo "ligador" ou "ligação" designa um radical químico incluindo uma ligação covalente ou uma cadeia de átomos que fixa covalentemente um grupo fosfonato a um fármaco. Os ligadores compreendem radicais dos substituintes A1 e A3 enumerados na fórmula 1, ou substituintes A1 e A3 apresentados na fórmula II, que compreendem radicais como: unidades de repetição de alquiloxi (por exemplo, poli-etilenoxi, PEG, polimetilenoxi) e alquilamino (por exemplo, polietilenoamino, Jeffamine™); e éster e amidas de diácido, incluindo succinato, succinamida, diglicolato, malonato e caproamida. O termo "quiral" designa moléculas que têm a propriedade de não sobreposicionamentto do parceiro de imagem de espelho, ao passo que o termo "aquiral" designa moléculas que são sobreposicionáveis no parceiro de imagem de espelho. 25 0 termo "estereoisómeros" designa compostos que têm constituições químicas idênticas, mas diferem no que respeita ao arranjo dos átomos ou grupos no espaço. 0 termo "diastereómero" designa um estereoisómero com dois ou mais centros de quiralidade e cujas moléculas não são imagens de espelho umas das outras. Diastereómeros têm propriedades físicas diferentes, por exemplo, pontos de fusão, pontos de ebulição, propriedades espectrais e reactividades. Misturas de diastereómeros podem separar-se em procedimentos analíticos de alta resolução, tais como electroforese e cromatografia. 0 termo "enantiómeros" designa dois estereoisómeros de um composto que são imagens de espelho não sobreposi-cionáveis entre si.
As definições estereoquímicas e conversões aqui utilizadas estão geralmente de acordo com S.P. Parker, Ed., McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms (1984) McGraw-Hill Book Company, Nova Iorque; e Eliel, E. e Wilen, S., Stereochemistry of Organic Compounds (1994) John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque. Muitos compostos orgânicos existem nas formas opticamente activas, isto é, têm a capacidade de girar o plano da luz polarizada no plano. Na descrição de um composto opticamente activo, os prefixos D e L ou R e S são utilizados para significar a configuração absoluta da molécula em torno de seus centro (s) quiral(ais). Os prefixos d e 1, D e L, ou (+) e (-) são utilizados para designar o sinal de rotação da luz polarizada no plano pelo composto, com (-) ou 1 significando que o composto é levorrotatório. Um composto com prefixo (+) ou d é dextrorrotatório. Para uma dada estrutura, tais estereoisómeros são idênticos, mas são imagens de espelho 26 um dos outros. 0 estereoisómero específico também pode ser referido como um enantiómero e uma mistura de tais isómeros é frequentemente designada por mistura enantiomérica. Uma mistura a 50:50 de enantiómeros é designada por mistura racémica, ou racemato, e pode ocorrer em que não houve nenhuma estereosselecção ou estereospecificidade numa reacção ou processo químico. Os termos "mistura racémica" e "racemato" designam uma mistura equimolar de duas espécies enantioméricas desprovidas de actividade óptica.
Compostos inibidores da protease do VIH
Os compostos da invenção compreendem os compostos com actividade inibitória da protease do VIH. Em particular, os compostos compreendem inibidores da protease do VIH. Os compostos da invenção suportam um grupo fosfonato, que pode ser um radical de pró-fármaco.
Sempre que um composto aqui descrito é substituído com mais de um grupo idêntico designado, por exemplo, "R1" ou "R6a", então far-se-á observar que os grupos podem ser iguais ou diferentes, isto é, cada grupo é independentemente seleccionado. As linhas onduladas indicam o local de fixações da ligação covalente aos grupos, radicais ou átomos adjacentes.
Os compostos da invenção são especificados nos esquemas, exemplos, descrições e reivindicações abaixo e a invenção compreende compostos tendo as Fórmulas I, II, III, IV, V e VI. 27
em que A1 é:
A3 é: 28
Y1 é independentemente 0, S, N(RX), N(0)(Rx), N (ORx) , N(O) (ORx) ou N(N(RX) (Rx) ) ; Y2 é independentemente uma ligação, 0, N(RX), N(0) (Rx) , N (0RX) , N (0) (0RX) , N (N (Rx) (Rx) ) -S(0)M2-, ou -S (0) M2-S (0) M2-;
Rx é independentemente H, R1, W3, um grupo de protecção, ou a fórmula:
Ry é independentemente H, W3, R2 ou um grupo de protecção; R1 é independentemente H ou alquilo com 1 a 18 átomos de carbono; R2 é independentemente H, R3 ou R4, em que cada R4 é independentemente substituído com 0 a 3 grupos R3, ou, considerados em conjunto num átomo de carbono, dois grupos R2 formam um anel com 3 a 8 átomos de carbono e o anel pode ser substituído com 0 a 3 grupos R3; R3 é R3a, R3b, R3c ou R3c1, desde que quando R3 é ligado a um heteroátomo, então R3 é R3c ou R3d; R3a é F, Cl, Br, I, -CN,N3 ou -N02; R3b é Y1; R3c é -Rx, -N(RX)(RX), -SRX, -S (0) Rx, -S(0)2Rx, -S (0) (0RX) , S(0)2(0Rx), -0C(Y4)Rx, -0C(Y4)0Rx, -OCÍY1) (N(RX) (Rx) ) , 29 SCÍY^R*, -SCfY^OR*, -SC (Y1) (N(RX) (Rx) ) , -N (Rx) C (Y1) Rx, -ISKR^CÍY^OR* ou NÍR^CÍY1) (N(RX)RX)); R3ci é -C(Y1)RX, -C (Y1) ORx ou -C(Y4) (N(RX) (Rx) ) ; R4 é um alquilo com 1 a 18 átomos de carbono, alcenilo com 2 a 18 átomos de carbono ou alcinilo com 2 a 18 átomos de carbono; R5 é R4 em que cada R4 é substituído com 0 a 3 qrupos R3; W3 é W4 ou W5; W4 é R5, -C (Y1) R5, -C(Y1)W5, -S02R5, ou -S02W5; W5 é carbociclo ou heterociclo, em que W5 é independentemente substituído com 0 a 3 grupos R2; W6 é W3 independentemente substituído com 1, 2, ou 3 grupos A3; M2 é 0, 1 ou 2; M12a é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12; M12b é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, OY co 10, 11 ou 12; Mia, Mlc, e Mld são i ndependentemente 0 ou 1 e Ml2c é 0, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o τ—1 11 ou 12; seus enantiómeros e diastereómeros, bem como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.
Os carbociclos W5 e W5a e heterociclos W5 e W5a podem ser independentemente substituídos com 0 a 3 grupos R2. W5 pode ser um anel saturado, insaturado ou aromático, incluindo um carbociclo ou heterociclo monocíclico ou bicíclico. W5 pode ter 3 a 10 átomos no anel, por exemplo, 3 a 7 átomos no anel. Os anéis W5 são saturados quando contendo 3 átomos no anel, saturados ou mono-insaturados quando contendo 4 átomos no anel, saturados, ou mono- ou di-insaturados quando contendo 5 átomos no anel, e 30 saturados, mono- ou di-insaturados, ou aromáticos quando contendo 6 átomos no anel.
Um heterociclo W5 pode ser um monociclo tendo 3 a 7 membros no anel (2 a 6 átomos de carbono e 1 a 3 heteroátomos seleccionados dentre N, 0, P, e S) ou um biciclo tendo 7 a 10 membros no anel (4 a 9 átomos de carbono e 1 a 3 heteroátomos seleccionados dentre N t 0, P, e S) . Os monociclos heterocíclicos W5 podem ter 3 a 6 átomos no anel (2 a 5 átomos de carbono e 1 a 2 heteroátomos seleccionados dentre N, 0, e S); ou 5 ou 6 átomos no anel (3 a 5 átomos de carbono e 1 a 2 heteroátomos seleccionados dentre N e S) . Os biciclos heterocíclicos W5 têm 7 a 10 átomos no anel (6 a 9 átomos de carbono e 1 a 2 heteroátomos seleccionados dentre N, O, e S), dispostos como sistema biciclo [4,5], [5,5], [5,6], ou [6,6], ou 9 a 10 átomos no anel (8 a 9 átomos de carbono e 1 a 2 heteroátomos seleccionados dentre N e S) dispostos como um sistema biciclo [5,6] ou [6,6]. O heterociclo W5 pode ser ligado a Y2 através de um átomo de carbono, azoto, enxofre ou outro átomo por uma ligação covalente estável.
Os heterociclos W5 compreendem, por exemplo, piridilo, isómeros de di-hidropiridilo, piperidina, piridazinilo, pirimidinilo, pirazinilo, s-triazinilo, oxazolilo, imidazolilo, tiazolilo, isoxazolilo, pirazolilo, isotiazolilo, furanilo, tiofuranilo, tienilo e pirrolilo. W5 também compreende, mas sem que isso constitua qualquer limitação, exemplos como
I 31
-Ν
Os carbociclos e heterociclos Ψ podem independentemente substituídos com 0 a 3 grupos R2, como definido antes. Por exemplo, carbociclos substituídos compreendem: ser tal W5
Mm l
Exemplos de carbociclos substituídos com fenilo compreendem:
32
As formas de realização de A1 compreendem:
e em que um ou mais Y2 são uma ligação, tais como:
As formas de realização de A3 compreendem aqueles em que M2 é 0, tal como: 33
e em que M12b é 1, Y1 é oxigénio e Y2b é ou azoto (N (Rx) ) , tal como: oxigénio (0)
Uma forma de realização de A3 compreende:
R1 pode ser H em que Y2c é 0, N (Ry) ou S. Por exemplo, e n pode ser 1.
Outra forma de realização de A3 compreende: 34
em que W5 é um carbociclo, tal como fenilo ou fenilo substituído. Tais formas de realização compreendem:
5, 6, 7 ou grupos R2. aminoácido alanato e em que Y2b 8; e o fenil-carbociclo é substituído com 0 a 3 Tais formas de realização de A3 compreendem fosfonamidato de fenilo, por exemplo, ésteres ésteres fosfonato-lactato de fenilo:
lactato pode ser de configuração R ou S ou a mistura racémica. 35
Formas de realização de Rx compreendem grupos éster, carbamato, carbonato, tioéster, amida, tioamida e ureia; 35
As formas de realização de A2 compreendem aquelas em que W3 é W5, tal como:
benzilo, benzilo substituído, piridilo ou piridilo substituído.
As formas de realização exemplificativos de compostos de fórmula II compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, as estruturas:
um grupo fosfonato. 36
Forma de realização de acumulação celular
Outra forma de realização da invenção diz respeito a um composto inibidor da protease do VIH capaz de se acumular em PBMC humanos. A acumulação em PBMC humanos é descrita nos presentes exemplos. Tipicamente, os compostos da presente forma de realização ainda compreendem um fosfonato ou pró-fármaco de fosfonato. Mais tipicamente, o fosfonato ou pró-fármaco de fosfonato tem a estrutura A3 como aqui descrito. Cada uma das formas de realização preferidas de A3 descritas aqui é uma forma de realização preferida de A3 na presente forma de realização.
Facultativamente, os compostos da presente forma de realização demonstram uma melhor semi-vida intracelular dos compostos ou metabolitos intracelulares dos compostos em PBMC humanos quando comparados com análogos dos compostos que não têm o fosfonato ou pró-fármaco de fosfonato. Tipicamente, a semi-vida é melhorada pelo menos em cerca de 50%, mais tipicamente pelo menos no intervalo entre 50% e 100%, ainda mais tipicamente pelo menos cerca de 100%, mais tipicamente ainda superior a cerca de 100%.
Numa forma de realização preferida, a semi-vida intracelular de um metabolito do composto em PBMC humanos é melhorada quando comparada com um análogo do composto não tendo o fosfonato ou pró-fármaco de fosfonato. Em tais formas de realização, o metabolito é tipicamente gerado intracelularmente e mais tipicamente é gerado dentro dos PBMC humanos. Ainda mais tipicamente, o metabolito é um produto da clivagem de um pró-fármaco de fosfonato dentro de PBMC humanos. De uma forma ainda mais típica, o pró-fármaco de fosfonato é clivado para formar um metabolito tendo pelo menos uma carga negativa a pH fisiológico. Mais 37 tipicamente, o pró-fármaco de fosfonato é enzimaticamente clivado dentro dos PBMC humanos para formar um fosfonato tendo pelo menos um átomo de hidrogénio activo da forma ΡΟΗ.
De acordo com outro aspecto da invenção, A3 satisfaz a fórmula:
M12a é diferente de 0 e pelo menos um grupo fosfonato presente no composto não está ligado directamente a W3. Mais tipicamente, o fosfonato não está ligado directamente a W5. Em tal forma de realização, o átomo de fósforo do fosfonato não está ligado directamente a um átomo de carbono de um anel.
De acordo com outro aspecto da invenção, um inibidor de fosfonato-protease semelhante a Amprenavir, tal como descrito antes na memória descritiva e adiante nas reivindicações, contém um grupo A3 de fórmula:
Ml2a é diferente de 0 e pelo menos um grupo fosfonato presente no composto não está ligado directamente a W3. Mais tipicamente, o fosfonato não está ligado directamente a W5. Em tal forma de realização, o átomo de fósforo do 38 fosfonato não está ligado directamente a um átomo de carbono de um anel.
Uma forma de realização de um inibidor de fosfonato-protease semelhante a Amprenavir, tal como descrito antes na memória descritiva e adiante nas reivindicações, exclui compostos das fórmulas:
ou
De acordo com outro aspecto da invenção, A3 satisfaz a fórmula:
39 M12a é 0 e pelo menos um grupo fosfonato presente no composto está ligado directamente a W3. Mais tipicamente, o fosfonato está ligado directamente a W5. Em tal forma de realização, o átomo de fósforo do fosfonato está ligado directamente a um átomo de carbono de um anel.
De acordo com outro aspecto da invenção um inibidor de fosfonato-protease semelhante a Amprenavir, tal como descrito antes na memória descritiva e adiante nas reivindicações, contém um grupo A3 da fórmula:
r M12a é 0 e pelo menos um grupo fosfonato presente no composto está ligado directamente a W3. Mais tipicamente, o fosfonato está ligado directamente a W5. Em tal forma de realização, o átomo de fósforo do fosfonato está ligado directamente a um átomo de carbono de um anel.
Uma forma de realização de um inibidor de fosfonato-protease semelhante a Amprenavir, tal como descrito antes na memória descritiva e adiante nas reivindicações, diz respeito a compostos de fórmulas: 40
Substituintes recursivos
Os substituintes seleccionados dentre os compostos da invenção estão presentes num grau recursivo. No presente contexto, "substituinte recursivo" significa que um substituinte se pode referir a outro caso de si mesmo. Devido à natureza recursiva deste substituintes, teoricamente, um grande número de compostos pode estar presente numa dada forma de realização. Por exemplo, Rx contém um substituinte Ry. Ry pode ser R2, que por sua vez pode ser R3. Se R3 for seleccionado para ser R3c, então um segundo caso de Rx pode ser seleccionado. O especialista na matéria de química médica entende que o número total de cada substituinte está razoavelmente limitado pelas propriedades desejadas do 41 composto pretendido. Tais propriedades compreendem, a titulo exemplificativo e não limitativo, propriedades físicas, tais como peso molecular, solubilidade ou log P, propriedades de aplicação, tais como actividade contra o alvo pretendido, e propriedades práticas, tais como a facilidade de síntese. A título exemplificativo e não limitativo, W3, Ry e R3 são todos substituintes recursivos em algumas formas de realização. Tipicamente, cada um destes pode ocorrer independentemente 20, 19, 18, 17, 16, 15, 14, 13, 12, 11, 10, 9, 8, 7, 6, 5, 4, 3, 2, louO vezes numa dada forma de realização. Mais tipicamente, cada um destes pode ocorrer independentemente 12 ou menos vezes numa dada forma de realização. Mais tipicamente ainda, W3 irá ocorrer 0 a 8 vezes, Ry irá ocorrer 0 a 6 vezes e R3 irá ocorrer 0 a 10 vezes numa dada forma de realização. Ainda mais tipicamente, W3 irá ocorrer 0 a 6 vezes, Ry irá ocorrer 0 a 4 vezes e R3 irá ocorrer 0 a 8 vezes numa dada forma de realização.
Os substituintes recursivos são um aspecto pretendido da invenção. Um especialista na matéria de química médica entende a versatilidade destes substituintes. No grau em que os substituintes recursivos estão presentes numa forma de realização da invenção, o número total será determinado como especificado antes.
Grupos de protecção
No contexto da presente invenção, formas de realização de grupos de protecção compreendem radicais de pró-fármacos e grupos de protecção químicos. 42
Os grupos de protecção estão disponíveis, são vulgarmente conhecidos e utilizados e são facultativamente utilizados para evitar reacções secundárias com o grupo protegido durante procedimentos sintéticos, isto é, vias ou métodos para preparar os compostos da invenção. Na sua maior parte, a decisão sobre os grupos a proteger, quando o fazer e a natureza do grupo de protecção químico "PRT", irá depender da química da reacção contra a qual se pretende conferir protecção (por exemplo, condições acídicas, básicas, oxidativas, redutivas ou outras) e a direcção pretendida da síntese. Os grupos PRT não precisam de ser e geralmente não são iguais se o composto for substituído com múltiplos PRT. Geralmente, PRT será utilizado para proteger grupos funcionais, tais como grupos carboxilo, hidroxilo ou amino, e assim evitar reacções secundárias ou de qualquer outra forma facilitar a eficácia sintética. A ordem de desprotecção para se obter grupos desprotegidos é dependente da direcção pretendida da síntese e as condições de reacção a serem encontradas, e podem ocorrer segundo qualquer ordem, como determinado pelo especialista. Vários grupos funcionais dos compostos da invenção podem ser protegidos. Por exemplo, grupos de protecção para grupos -OH (seja de funções hidroxilo, ácido carboxílico, ácido fosfónico ou outras funções) são formas de realização de "grupos formadores de éter ou éster". Os grupos formadores de éter ou éster são capazes de funcionar como grupos de protecção químicos nos esquemas de síntese especificados aqui. No entanto, alguns grupos de protecção hidroxilo e tio não são grupos formadores nem de éter nem de éster, como será do conhecimento dos especialistas na 43 matéria, e são incluídos com amidas, tal como adiante se descreve.
Um número muito grande de grupos de protecção hidroxilo e grupos formadores de amida e correspondentes reacções são descritos em "Protective Groups in Organic Chemistry", Theodora W. Greene (John Wiley & Sons, Inc., Nova Iorque, 1991, ISBN 0-471-62301-6) ("Greene") . Ver também Kocienski, Filip J.; "Protection Groups" (Georg Thieme Verlag Stuttgart, Nova Iorque, 1994), que aqui se considera incorporado por referência na sua totalidade. Particularmente, Capítulo 1, Grupos de protecção: uma abordagem, páginas 1-20, Capítulo 2, Grupos de protecção de Hidroxilo, páginas 21-94, Capítulo 3, Grupos de protecção de Diol, páginas 95-117, Capítulo 4, Grupos de protecção de Carboxilo, páginas 118-154, Capítulo 5, grupos de protecção de carbonilo, páginas 155-184. Sobre grupos de protecção de ácido carboxílico, ácido fosfónico, fosfonato, ácido sulfónico e outros grupos de protecção de ácidos, veja-se Greene como especificado abaixo. Tais grupos compreendem, a título exemplificativo e não limitativo, ésteres, amidas, hidrazidas e outros.
Grupos de protecção formadores de éter e éster
Os grupos formadores de éster compreendem: (1) grupos formadores de éster fosfonato, tais como ésteres de fosfonamidato, ésteres de fosforotioato, ésteres de fosfonato e fosfónio-bis-amidatos; (2) grupos formadores de ésteres carboxílicos e (3) grupos formadores de éster de enxofre, tais como sulfonato, sulfato e sulfinato.
Os radicais fosfonato dos compostos da invenção podem ou não ser radicais de pró-fármacos, isto é, podem ou não 44 ser susceptíveis a clivagem ou modificação hidrolitica ou enzimática. Alguns radicais fosfonato são estáveis na maior parte ou quase todas as condições metabólicas. Por exemplo, um fosfonato de dialquilo em que os grupos alquilo têm dois ou mais átomos de carbono, podem ter estabilidade apreciável ín vivo devido a uma baixa velocidade de hidrólise.
No do contexto de radicais de pró-fármaco de fosfonato, foi descrito um grande número de pró-fármacos estruturalmente diversos para ácidos fosfónicos (Freeman e Ross em Proqress in Medicinal Chemistry 34:112-147 (1997)) e estão abrangidos no âmbito da presente invenção. Uma forma de realização exemplificativa de um grupo formador de fosfonato é o fenil-carbociclo na substrutura A3 que possui a fórmula:
O em que ml é 1, 2. 3, 4, 5, 6, 7 ou 8 e o grupo fenil-carbociclo é substituído com 0 a 3 grupos R2. Também, nesta forma de realização, quando Y1 é 0, um éster lactato é formado. Em alternativa, quando Y1 é N(R2), N(0R2) ou N(N(R2)2, então resultam ésteres fosfonamidato. R1 pode ser H ou alquilo(C1-C12) . A substrutura exemplo corolário A3 é incluída na invenção com substituintes Y1, R1 e R2. 45
Na sua função de formador de éster, um grupo de protecção tipicamente é ligado a qualquer grupo acidico, tal como, a titulo exemplificativo e não limitativo, um grupo -C02H ou -C(S)OH, assim resultando -C02Rx, em que Rx é tal como aqui definido. Rx também inclui, por exemplo, os grupos éster enumerados no documento WO 95/07920.
Como exemplos de grupos de protecção refere-se: heterociclo (C3-Ci2) (descrito antes) ou arilo. Tais grupos aromáticos facultativamente são policiclicos ou monociclicos. Como exemplos refere-se fenilo, espirilo, 2-e 3-pirrolilo, 2- e 3-tienilo, 2- e 4-imidazolilo, 2-, 4- e 5- oxazolilo, 3- e 4-isoxazolilo, 2-, 4- e 5-tiazolilo, 3-, 4- e 5-isotiazolilo, 3- e 4-pirazolilo, 1-, 2-, 3- e 4-piridinilo e 1-, 2-, 4- e 5-pirimidinilo, heterociclo (C3—C22) ou arilo substituídos com halo, R1, R1-0-alquileno (C1-C12), alcoxi (C1-C12), CN,NC>2, OH, carboxi, carboxiéster, tiol, tioéster, haloalquilo(C1-C12) (1-6 átomos de halogénio), alcenilo (C2-Ci2) ou alcinilo (C2-Ci2) . Tais grupos compreendem 2-, 3- e 4-alcoxifenilo (alquilo (C1-C12)), 2-, 3- e 4-metoxifenilo, 2-, 3- e 4-etoxifenilo, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- e 3,5- dietoxifenilo, 2- e 3-carboetoxi-4-hidroxifenilo, 2- e 3-etoxi-4-hidroxifenilo, 2- e 3-etoxi-5-hidroxifenilo, 2- e 3-etoxi-6-hidroxifenilo, 2-, 3- e 4-O-acetilfenilo, 2-, 3-e 4-dimetilaminofenilo, 2-, 3- e 4-metilmercaptofenilo, 2-, 3- e 4-halofenilo (incluindo 2-, 3- e 4-fluorofenilo e 2-, 3- e 4-clorofenilo) . 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- e 3,5-dimetilfenilo, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- e 3,5- biscarboxietilfenilo, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- e 3,5-dimetoxifenilo, 2,3-, 2,4-, 2,5-, 2,6-, 3,4- e 3,5-di- halofenilo (incluindo 2,4-difluorofenilo e 3,5-difluoro- 46 fenilo), 2-, 3- e 4-haloalquilfenilo (1 a 5 átomos de halogénio, alquilo (C1-C12), incluindo 4-trifluorometil-fenilo), 2-, 3- e 4-cianofenilo, 2-, 3- e 4-nitrofenilo, 2-, 3- e 4-haloalquilbenzilo (1 a 5 átomos de halogénio, alquilo (C1-C12), incluindo 4-trifluorometilbenzilo e 2-, 3-e 4-triclorometilfenilo e 2-, 3- e 4-triclorometilfenilo), 4- N-metilpiperidinilo, 3-N-metilpiperidinilo, 1- etilpiperazinilo, benzilo, alquilsalicilfenilo (alquilo(Ci— C4) , incluindo 2-, 3- e 4-etilsalicilfenilo), 2-, 3- e 4-acetilfenilo, 1,8-di-hidroxinaftilo (-Ci0H6-OH) e ariloxi etilo arilo(C6-C9) (incluindo fenoxietilo)], 2,2'-di- hidroxibifenilo, 2-, 3- e 4-N, N-dialquilaminofenol, C6H4CH2-N(CH3) 2, trimetoxibenzilo, trietoxibenzilo, 2-alquilpiridinilo (alquilo(C1-C4));
ésteres C4-C8 de 2-carboxifenilo e alquil(C1-C4)eno-arilo(C3~C6) (incluindo benzilo, -CH2-pirrolilo, -CH2-tienilo, -CH2-imidazolilo, -CH2-oxazolilo, -CH2-isoxazolilo, -CH2-tiazolilo, -CH2-isotiazolilo, -CH2-pirazolilo, -CH2-piridinilo e -CH2-pirimidinilo) substituídos no radical arilo por 3 a 5 átomos de halogénio ou 1 a 2 átomos ou grupos seleccionados dentre halogénio, alcoxi (C1-C12) (incluindo metoxi e etoxi), ciano, nitro, OH, haloalquilo (C1-C12) (1 a 6 átomos de halogénio; incluindo - CH2CCI3), alquilo (C1-C12) (incluindo metilo e etilo), alcenilo (C2-C12) ou alcinilo (C2-C12); alcoxietilo [alquil (Ci— 47 Οε), incluindo -CH2-CH2-0-CH3 (metoxietilo) ]; alquilo substituídos por qualquer um dos grupos especificados antes para arilo, em particular OH, ou por 1 a 3 átomos de halo (incluindo -CH3, -CH(CH3)2, -C(CH3)3, -CH2CH3, -(CH2)2CH3, (CH2)3CH3, -(CH2)4CH3, -(CH2)5CH3, CH2CH2F, -CH2CH2C1, - CH2CF3, e -CH2CC13);
Ν-2-propilmorfolino, 2,3-di-hidro-6-hidroxiindeno, sesamol, monoéster de catecol, -CH2-C (0)-N (Ri) 2, -CH2-S (0) (Ri), -CH2-S (0) 2 (Ri) , -CH2-CH (OC (0) CH2Ri) -CH2 (OC (0) CH2Pi) , colesterilo, piruvato de enol (HOOC-C(=CH2)-) , glicerol; monossacarídeo, dissacarídeo ou oligossacarideo de 5 ou 6 átomos de carbono (3 a 9 resíduos monossacarídicos); triglicéridos, tais como α-D-B-diglicéridos (em que os ácidos gordos que compõem os lípidos são geralmente ácidos gordos C6-C26, Cê-Cie ou Cê-Cio, saturados ou insaturados que ocorrem naturalmente, tais como linoleico, láurico, mirístico, palmítico, esteárico, oleico, palmitoleico, linolenico e outros ácidos gordos) ligados a acilo dos compostos originais através de um átomo de oxigénio de glicerilo do triglicérido; fosfolípidos ligados ao grupo carboxilo através do fosfato do fosfolípido; ftalidilo (mostrado na Fig. 1 de Clayton et al., Antimicrob. Agents Chemo. (1974) 5(6) :670-671; carbonatos cíclicos, tais como ésteres de (5-Rd-2-oxo-1,3-dioxoleno-4-il)-metilo (Sakamoto et al., Chem. Pharm. Buli. (1984) 32(6)2241-2248), em que Rd é R1, R4 ou arilo; e 48 /™Λ CHâC(D)M Ο
Os grupos hidroxilo dos compostos da presente invenção são facultativamente substituídos com um dos grupos III, IV ou V descritos em WO 94/21604 ou com isopropilo.
Como outras formas de realização, o quadro A relaciona exemplos de radicais éster de grupo de protecção que por exemplo, podem ser ligados via oxigénio a grupos -C(0)0- e -P (O) (0-)2 . Vários amidatos também são mostrados como estando ligados directamente a -C(O)- ou -P(0)2. Ésteres de estruturas 1-5, 8-10 e 16, 17, 19-22 são sintetizados por reacção do composto da invenção, que possui um hidroxilo livre, com o halogeneto correspondente (cloreto ou cloreto de acilo e semelhantes) e N,N-diciclo-hexilo-N- morfolinacarboxamidina (ou outra base como DBU, trietilamina, CSCO3, Ν,Ν-dimetilanilina e outros) em DMF (ou outros solventes, tais como acetonitrilo ou N- metilpirrolidona). Quando o composto que se pretende proteger é um fosfonato, os ésteres de estruturas 5-7, 11, 12, 21 e 23-26 são sintetizados por reacção do álcool ou sal alcóxido (ou as correspondentes aminas, no caso de compostos tais como 13, 14 e 15) com o monoclorofosfonato ou diclorofosfonato (ou outro fosfonato activado). 49 QUADRO A 1. -CHz-CÍOJ-NÍRiJz* 10. -CH2-0-C (0) -C (CH3) 3 2. -CH2-S(0) (Ri) 11. -ch2-cci3 3. -CH2-S(0)z(Ri) 12. -c6h5 4 . -CH2-0-C(0)-CH2-C6H5 13. -nh-ch2-c (0) o-ch2ch3 5. 3-colesterilo 14 . -N (CH3)-ch2-c (0) o-ch2ch3 6. 3-piridilo 15. -NHR2 7. N-etilmorfolino 16. -CH2-O-C(O)-C10H15 8. -CH2-0-C(0)-C6H5 17. -CH2-0-C(0)-CH(CH3)2 9. -ch2-o-c(0)-ch2ch3 18. -CH2-C#H (OC (0) CH2Ri) -ch2- (OC (0)0¾¾) * / \*a%c(OM o19. 20,
22.
Outros ésteres que são adequados para utilização na invenção estão descritos em EP 632048.
Os grupos de protecção também compreendem pró-funcionalidades formadoras de "éster duplo", tais como 50
Ο -CH2OC (0) OCH3, -CH2SCOCH3, -CH2OCON (CH3) 2 OU grupos alquilou aril-aciloxialquilo de estrutura -CH (R1 ou W5) 0 ( (CO) R37) ou -CH (R1 ou W5) ((CO)OR38) (ligados ao átomo de oxigénio do grupo acídico) em que R37 e R38 são grupos alquilo, arilo ou alquilarilo (ver patente de invenção norte-americana n° 4 968 7 88) . Frequentemente, R37 e R38 são grupos volumosos como alquilo de cadeia ramificada, arilo orto-substituído, arilo meta-substituído ou suas combinações, incluindo alquilos normais, secundários, iso- e terciários com 1-6 átomos de carbono. Um exemplo é o grupo pivaloiloximetilo. Tais são de particular uso com pró-fármacos para administração oral. Exemplos de tais grupos de protecção úteis são ésteres de alquilaciloximetilo e seus derivados, incluindo CH (CH2CH2OCH3) OC (0) C (CH3) 3,
O -CH2OC(O)C10H15, -CH20C(0)C(CH3)3, -CH(CH20CH3)0C(0)C(CH3)3, -CH (CH (CH3) 2) OC (0) C (CH3) 3, -CH20C (0) CH2CH (CH3) 2, -CH20C (0) C6HU, -CH20C(0)C6H5, -CH2OC(0)CioHi5, -CH20C (0) CH2CH3, -CH20C(0)CH(CH3)2, -CH20C(0)C(CH3)3 e -CH20C (0)CH2C6H5.
Para fins de pró-fármacos, o éster tipicamente escolhido é um até agora utilizado paro fármacos antibióticos, em particular os carbonatos cíclicos, ésteres duplos ou ésteres de ftalidilo, arilo ou alquilo. Em algumas formas de realização, o grupo acídico protegido é um éster do grupo acídico e é o resíduo de uma funcionalidade contendo 51 hidroxilo. Noutras formas de realização, um composto amino é utilizado para proteger a funcionalidade acidica. Os resíduos de funcionalidades contendo grupos hidroxilo ou amino adequados são tal como descritos supra ou encontram-se descritos em WO 95/07920. De particular interesse são os resíduos de aminoácidos, ésteres de aminoácidos, polipeptidos ou álcoois arílicos. Os resíduos típicos de aminoácido, polipeptido e aminoácidos esterificados com carboxilo estão descritos nas páginas 11-18 e texto afim do documento WO 95/07920, tais como grupos LI ou L2. WO 95/07920 descreve expressamente os amidatos de ácidos fosfónicos, mas far-se-á observar que estes amidatos são formados com qualquer um dos grupos ácido aqui especificados e os resíduos de aminoácidos especificados no documento WO 95/07920.
Os ésteres típicos para proteger as funcionalidades acídicas são também descritos em WO 95/07920, fazendo-se novamente observar que os mesmos ésteres podem aqui ser formados com os grupos acídicos tal como o eram com o fosfonato da publicação WO 95/07920. Os grupos éster típicos são definidos pelo menos nas páginas 89-93 de WO 95/07920 (sob R31 ou R35) , no quadro da página 105 e nas páginas 21-23 (como R) . De particular interesse são os ésteres de arilo insubstituídos, tais como fenilo, ou arilalquilo, tal como benzilo, ou hidroxi-, halo-, alcoxi-, carboxi- e/ou alquil-éster arílico ou alquilarílico substituído com carboxi, especialmente fenilo, orto-etoxifenilo ou alquil (C1-C4)-éster de carboxifenilo (ésteres salicilato de alquilo (C1-C12)) .
Os grupos acídicos protegidos, particularmente quando se utiliza os ésteres ou amidas de WO 95/07920, são úteis 52 como pró-fármacos para administração oral. No entanto, não é essencial que o grupo acidico seja protegido para que os compostos da presente invenção sejam eficazmente administrados por via oral. Quando os compostos da invenção com grupos protegidos, em particular amidatos de aminoácidos ou ésteres de arilo substituídos e insubstituídos são administrados sistemicamente ou oralmente, então são capazes de clivagem hidrolítica in vivo para se obter o ácido livre.
Uma ou mais dos grupos hidroxilo livres são protegidos. Se mais de um hidroxilo acidico for protegido, então utiliza-se o mesmo grupo de protecção ou um grupo diferente, por exemplo, os ésteres podem ser diferentes ou iguais ou pode ser utilizado um amidato misto ou éster.
Os grupos de protecção típicos descritos em Greene (páginas 14-118) compreendem éteres de metilo e alquilo substituído, éteres de benzilo substituído, éteres de sililo, ésteres, incluindo ésteres de ácido sulfónico, e carbonatos. Por exemplo: éteres (metilo, t-butilo, alilo); éteres metílicos substituídos (metoximetilo, metiltiometilo, t-butiltiometilo, (fenildimetilsilil)-metoximetilo, benziloximetilo, p-metoxibenziloximetilo, (4-metoxifenoxi)-metilo, guaiacolmetilo, t-butoximetilo, 4-penteniloximetilo, siloximetilo, 2-metoxietoximetilo, 2,2,2-tricloroetoximetilo, bis(2-cloroetoxi)-metilo, 2-(trimetilsilil)-etoximetilo, tetra-hidropiranilo, 3-bromotetra-hidropiranilo, tetra-hidrotiopiranilo, 1-metoxiciclo-hexilo, 4-metoxitetra-hidropiranilo, 4-metoxitetra-hidrotiopiranilo, S,S-dióxido de 4-metoxitetra-hidrotiopiranilo, l-[(2-cloro-4-metil)- 53 fenil]-4-metoxipiperidina-4-ilo, 1,4-dioxano-2-ilo, tetra-hidrofuranilo, tetra-hidrotiofuranilo, 2, 3, 3a, 4,5, 6, 7,7a-octahidro-7,8,8-trimetil-4,7 metanobenzofurano-2-ilo)); éteres etílicos substituídos (1-etoxietilo, 1- (2-cloroetoxi)-etilo, 1-metil-l-metoxietilo, 1-metil-l-benziloxietilo, l-metil-l-benziloxi-2-fluoroetilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetilsililetilo, 2-(fenilselenil)-etilo, p-clorofenilo, p-metoxifenilo, 2,4-dinitrofenilo, benzilo); éteres benzílicos substituídos (p-metoxibenzilo, 3,4-dimetoxibenzilo, o-nitrobenzilo, p-nitrobenzilo, p-halobenzilo, 2, β-diclorobenzilo, p-cianobenzilo, p-fenilbenzilo, 2- e 4-picolilo, N-óxido de 3-metil-2-picolilo, difenilmetilo, p,p'-dinitrobenzidrilo, 5-dibenzossuberila, trifenilmetilo, a-naftildifenilmetilo, p-metoxifenildifenilmetilo, di (p-metoxifenil)-fenilmetilo, tri(p-metoxifenil)-metilo, 4-(4'-bromofenaciloxi)-fenil-difenilmetilo, 4,4',4''-tris(4,5-dicloroftalimidofenil)-metilo, 4, 4 ' , 4' '-tris (levulinoiloxifenil) -metilo, 4,4',4"-tris (benzoiloxifenil)-metilo, 3-(imidazol-l-ilmetil)-bis(4',4''-dimetoxifenil)-metilo, 1,1-bis(4-metoxifenil)-1'-pirenilmetilo, 9-antrilo, 9-(9-fenil)xantenilo, 9—(9— fenil-l-oxo)-antrila, 1,3-benzoditiolano-2-ilo, S,S-dióxido de benzisotiazolilo); éteres silílicos (trimetilsililo, trietilsililo, triisopropilsililo, dimetilisopropilsililo, dietilisopropilsililo, dimetil-hexilsililo, t-butildimetilsililo, t-butildifenilsililo, tribenzilsililo, tri-p-xililsililo, trifenilsililo, difenilmetilsililo, t-butilmetoxifenilsililo; 54 ésteres (formato benzoilformato acetato cloroacetato dicloroacetato tricloroacetato trifluoroacetato, metoxi acetato, trifenilmetoxiacetato, fenoxiacetato fenilocetato p-clorofenoxiacetato 3-fenilpropionato, p-poli- 4-oxopentanoate (levulinato), 4,4-(etilenoditio)-pentanoato, pivaloato, adamantoato, crotonato, 4-metoxicrotonato, benzoato, p-fenilbenzoato, 2,4,6-trimetilbenzoate (mesitoato)); carbonatos (metilo, 9-fluorenilmetilo, etilo, 2,2,2-tricloroetilo, 2-(trimetilsilil)-etilo, 2-(fenilsulfonil)-etilo, 2-(trifenilfosfónio)-etilo, isobutilo, vinilo, alilo, p-nitrofenilo, benzilo, p-metoxibenzilo, 3,4-dimetoxi-benzilo, o-nitrobenzilo, p-nitrobenzilo, tiocarbonato de s-benzilo, 4-etoxi-l-naftilo, ditiocarbonato de metilo); grupos com clivagem assistida (2-iodobenzoato, 4-azidobutirato, 4-nitro-4-metilpentanoato, o-(dibromometil)-benzoato, 2-formilbenzenossulfonato, carbonato de 2-(metiltiometoxi)-etilo, 4-(metiltiometoxi)-butirato, 2-(metiltiometoximetil)-benzoato); ésteres mistos (2,6-dicloro-4-metilfenoxiacetato, 2,6-dicloro-4-(1,1,3,3-tetrametilbutil)-fenoxiacetato, 2,4-bis(1,1-dimetilpropil)-fenoxiacetato, clorodifenilocetato, isobutirato, mono-succinato, (E)-2-metil-2-butenoate (tigloato), o-(metoxi-carbonil)-benzoato, p-polibenzoato, α-naftoato, nitrato, Ν,Ν,Ν',N'-tetrametilfosforodiamidato de alquilo , n-fenil-carbamato, borato, dimetilfosfinotioilo, 2,4-dinitrofenil-sulfenato. e sulfonatos (sulfato, metanossulfonato (mesilato), benzilsulfonato, tosilato).
Os grupos de protecção 1,2-diol típicos (assim, geralmente quando dois grupos OH são considerados em 55 conjunto com a funcionalidade de protecção) são descritos por Greene nas páginas 118-142 e compreendem acetais e cetais ciclicos (metileno, etilideno, 1-t-butiletilideno, 1-feniletilideno, tricloroetilideno, (4-metoxifenil)-etilideno, 2,2,2-acetonida (isopropilideno), ciclopentilideno, ciclo-hexilideno, ciclo-heptilideno, benzilideno, p-metoxibenzilideno, 2,4-dimetoxibenzilideno, 3,4-dimetoxibenzilideno, 2-nitrobenzilideno); orto-ésteres cíclicos (metoximetileno, etoximetileno, dimetoximetileno, 1- metoxietilideno, 1-etoxietilidina, 1,2-dimetoxietilideno, a-metoxibenzilideno, derivado de 1-(N,N-dimetilamino)-etilideno, derivado de α-(N,N-dimetilamino)-benzilideno, 2- oxaciclopentilideno; derivados de sililo (grupo di-t-butilsilileno, 1,3-(1,1,3,3-tetraisopropildissiloxanilideno) e tetra-t-butoxidissiloxano-1,3-diilideno), carbonatos cíclicos, boronatos cíclicos, boronato de etilo e boronato de fenilo.
Mais tipicamente, os grupos de protecção 1,2-diol compreendem os mostrados na quadro B, ainda mais tipicamente, epóxidos, acetonetos, cetais cíclicos e acetais de arilo.
Quadro B
56
Ο T 1 o o
,0 R9t em que R9 é alquilo (Ci-C6) .
Grupos de protecção de amino
Outro conjunto de grupos de protecção compreende qualquer um dos grupos de protecção de amino típicos, descritos por Greene nas páginas 315-385. Tais grupos compreendem: carbamatos (metilo e etilo, 9-fluorenilmetilo, 9-(2-sulfo)-fluorenilmetilo, 9-(2,7-dibromo)-fluorenilmetilo, 2,7-di-t-butil-[9-(10,10-dioxo-10,10,10,10-tetra-hidrotio-xantil)]-metilo, 4-metoxifenacilo); etilo substituído (2,2,2-tricloroetilo, 2-trimetil-sililetilo, 2-feniletilo, 1-(1-adamantil)-1-metiletilo, 1,l-dimetil-2-haloetilo, 1,l-dimetil-2,2-dibromoetilo, 1,1-dimetil-2,2,2-tricloroetilo, 1-metil-l-(4-bifenilil)-etilo, 1-(3, 5-di-t-butilfenil)-1-metiletilo, 2-(2'- e 4'-piridil)-etilo, 2-(N,N-diciclo-hexilcarboxamido)-etilo, t-butilo, 1-adamantilo, vinilo, alilo, 1-isopropilalilo, cinamilo, 4-nitrocinamilo, 8-quinolilo, N-hidroxipiperidinilo, alquilditio, benzilo, p-metoxibenzilo, p-nitrobenzilo, p-bromobenzilo, p-clorobenzilo, 2,4-diclorobenzilo, 4-metilsulfinilbenzilo, 9-antrilmetilo, difenilmetilo); grupos com clivagem assistida (2-metiltioetilo, 2-metilsulfoniletilo, 2-(p-toluenossulfonil)-etilo, [2- (1,3-ditianil)]-metilo, 4-metiltiofenilo, 2,4- dimetiltiofenilo, 2-fosfonoetilo, 2-trifenil- 57 fosfonoisopropilo, 1,l-dimetil-2-cianoetilo, m-cloro-p-aciloxibenzilo, p-(di-hidroxiboril)-benzilo, 5-benzisoxazolilmetilo, 2-(trifluorometil)-6-cromonilmetilo); grupos capazes de clivagem fotolítica (m-nitrofenilo, 3,5-dimetoxibenzilo, o-nitrobenzilo, 3,4-dimetoxi-6-nitrobenzilo, fenil(o-nitrofenil)-metilo; derivados de tipo ureia (fenotiazinil-(10)-carbonilo, N'-p-toluenossulfonilominocarbonilo, N'-fenilaminotiocarbonilo); carbamatos mistos (t-amilo, tiocarbamato de S-benzilo, p-cianobenzilo, ciclobutilo, ciclo-hexilo, ciclopentilo, ciclopropilmetilo, p-deciloxibenzilo, diisopropilmetilo, 2,2-dimetoxicarbonilvinilo, o-(N,N-dimetil-carboxamido)-benzilo, 1, l-dimetil-3-(N,N-dimetilcarboxamido)-propilo, 1,1-dimetilpropinilo, di(2-piridil)-metilo, 2-furanil-metilo, 2-iodoetilo, isobornila, isobutilo, isonicotinila, p-(p'-metoxifenilazo)-benzilo, 1-metilciclobutilo, 1-metilciclo-hexilo, 1-metil-l-ciclopropilmetilo, 1-metil-l-(3,5-dimetoxifenil)-etilo, 1-metil-l-(p-fenilazofenil)-etilo, 1-metil-l-feniletilo, 1-metil-l-(4-piridil)-etilo, fenilo, p-(fenilazo)-benzilo, 2,4,6-tri-t-butilfenilo, 4-(trimetilamónio)-benzilo, 2,4,6-trimetilbenzilo); amidas (N-formilo, N-acetilo, N-cloroacetilo, N-tricoroacetilo, N-trifluoroacetilo, N-fenilocetilo, N-3-fenilpropionilo, N-picolinoilo, IV-3-piridilcarboxamida, N-benzoilfenilolanila, N-benzoilo, N-p-fenilbenzoilo); amidas com clivagem assistida (N-o-nitrofenil-acetilo, N-o-nitrofenoxiacetilo, N-acetoacetilo, (N'-ditiobenziloxicarbonilamino)-acetilo, N-3-(p-hidroxifenil)-propionilo, N-3-(o-nitrofenil)-propionilo, N-2-metil-2-(o-nitrofenoxi)-propionilo, N-2-metil-2-(o-fenilazofenoxi)-propionilo, Ν-4-clorobutirilo, N-3-metil-3-nitrobutirilo, 58 N-o-nitrocinamoílo, N-acetilmetionina, N-o-nitrobenzoílo, N-o-(benzoiloximetil)-benzoílo, 4,5-difenil-3-oxazolina-2-ona) ; derivados de imida cíclicos: (N-ftalimida, N- ditiassuccinoílo, N-2,3-difenilmaleoílo, N-2,5- dimetilpirrolilo, aducto de N-l,1,4,4-tetrametil-dissililazaciclopentano, 1, 3-dimetil-l, 3,5-triazaciclo-hexano-2-ona substituída na posição 5, 1,3-dibenzil-l,3-5-triazaciclo-hexano-2-ona substituída na posição 5, 3,5- dinitro-4-piridonilo substituído na posição 1); N-alquil- e N-aril-aminas (N-metilo, N-alilo, N-[2-(trimetilsilil)-etoxi]-metilo, Ν-3-acetoxipropilo, N-(l-isopropil-4-nitro-2-oxo-3-pirrolina-3-ilo), sais de amónio quaternário, N-benzilo, N-di(4-metoxifenil)-metilo, N-5-dibenzossuberilo, W-trifenilmetilo, N-(4-metoxifenil)-difenilmetilo, Ν-9-fenilfluorenilo, N-2,7-dícloro-9-fluorenilmetileno, N-ferrocenilmetilo, Ν'-óxido de N-2-picolilamina); derivados de imina (N-l, 1-dimetiltiometileno, N-benzilideno, N-p-metoxibenzilideno, N-difenilmetileno, N-[ (2-piridil) -mesitil] -metileno, N/W/^-dimetilaminometileno, N,N'-isopropilideno, N-p- nitrobenzilideno, N-salicilideno, Ν-5-clorossalicilideno, N-(5-cloro-2-hidroxifenil)-fenil-metileno, N-ciclo-hexilideno); derivados de enamina (N-(5,5-dimetil-3-oxo-l-ciclo-hexenilo)); derivados de N-metal (derivados de N-borano, derivados de ácido Λί-difenilborínico, N-[fenil (pentacarbonilcromo- ou -tungsténio)]-carbenilo, quelato de N-cobre ou N-zinco); derivados de N-N (N-nitro, N-nitroso, N-oxido); 59 derivados de N-P (N-difenilfosfinilo, N-dimetiltiofosfinilo, N-difeniltiofosfinilo, N-dialquil-fosforilo, N-dibenzil-fosforilo, N-difenil-fosforilo); derivados de N-Si, derivados de N-S e ferivados de N-sulfenilo (N-benzenossulfenilo, N-o-nitrobenzenossulfenilo, N-2,4-dinitrobenzenossulfenilo, N-pentaclorobenzenossul-fenilo, N-2-nitro-4-metoxibenzenossulfenilo, N-trifenil-metilsulfenilo, Ν-3-nitropiridinossulfenilo) e derivados de N-sulfonilo (N-toluenossulfonilo, N-benzenossulfonilo, N-2,3,6-trimetil-4-metoxibenzenossul-fonilo, N-2,4,6-trimetoxibenzenossulfonilo, N-2,6-dimetil-4-metoxibenzenossulfonilo, N-pentametilbenzenossulfonilo, N-2,3,5,6,-tetra-metil-4-metoxibenzenossulfonilo, N-4-metoxibenzenossulfonilo, N-2,4,6-trimetilbenzenossulfonilo, N-2,6-dimetoxi-4-metitbenzenossulfonilo, N-2,2,5,7,8-pentametilcromano-6-sulfonilo, N-metanossulfonilo, Ν-β-trimetilsilietanossulfonilo, Ν-9-antracenossulfonilo, N-4-(4',8'-dimetoxinaftilmetil) benzenossulfonilo, N-benzil-sulfonilo, N-trifluorometilsulfonilo, N-fenacilsulfonilo).
Os grupos amino protegidos compreendem carbamatos, amidas e amidinas, por exemplo, -NHC(0)0R1, -NHC(0)R1 ou -N=CRN(R1)2. Outro grupo de protecção que também é útil como um pró-fármaco para amino ou -NH(R5) é:
Ver, por exemplo, Alexander, J. et al. (1996) J. Med. Chem. 39:480-486. 60
Grupo de protecção de aminoácido e polipeptido e conjugados
Um grupo de protecção de aminoácido e polipeptido de um composto da invenção tem a estrutura R15NHCH (R16) C (O) em que R15 é H, um resíduo de aminoácido ou polipeptido ou R5 e R16 é tal como adiante definido. R16 é alquilo inferior ou alquilo inferior (Ci-C6) substituído com amino, carboxilo, amida, éster de carboxilo, hidroxilo, arilo (C6-C7), guanidinilo, imidazolilo, indolilo, sulfidrilo, sulfóxido e/ou fosfato de alquilo. R16 também é considerado em conjunto com o aminoácido a,-N que ocorre naturalmente para formar um resíduo prolina (Rlê = -(CH2)3-). No entanto, Rlê é geralmente o grupo lateral de um aminoácido que ocorre naturalmente, tal como H, -CH3, -CH(CH3)2, -CH2-CH (CH3) 2, -CHCH3-CH2-CH3, -ch2-c6h5, -ch2ch2-s-ch3, -CH2OH, -CH(OH)-CH3, -ch2-sh, -ch2-c6h4oh, -ch2-co-nh2, -ch2-ch2-co-nh2, -ch2-cooh, -CH2-CH2-COOH, - (CH2) 4-NH2 e - (CH2) 3-NH-C (NH2) -NH2. R16 também compreende l-guanidinoprop-3-ilo, benzilo, 4-hidroxi-benzilo, imidazol-4-ilo, indol-3-ilo, metoxifenilo e etoxifenilo
Outro conjunto de grupos de protecção compreende o resíduo de um composto contendo amino, em particular um aminoácido, um polipeptido, um grupo de protecção, -NHS02R, NHC(0)R, -N(R)2, NH2 ou -NH (R) (H) , pelo que, por exemplo, um ácido carboxílico é reagido, isto é, acoplado, com a amina para formar uma amida, tal como em C(0)NR2. Um ácido fosfónico pode ser reagido com a amina para formar um fosfonamidato, tal como em -P(O) (OR) (NR2) .
Os aminoácidos têm a estrutura R17C (0) CH (R16) NH-, em que R17 é -OH, -OR, um resíduo de aminoácido ou de um polipeptido. Os aminoácidos são compostos de baixo peso 61 molecular, com um PM inferior a cerca de 1000, e que contêm pelo menos um grupo amino ou imino e pelo menos um grupo carboxilo. Geralmente, os aminoácidos serão encontrados na natureza, isto é, podem ser detectados em material biológico como bactérias ou outros micróbios, animais ou ser humano. Os aminoácidos adequados tipicamente são (X-aminoácidos, isto é, compostos caracterizados por um átomo de azoto amino ou imino separado do átomo de carbono de um grupo carboxilo por um átomo de carbono α substituído ou insubstituído. De particular interesse são os resíduos hidrofóbicos, tais como mono- ou di-alquil- ou -aril-aminoácidos, cicloalquilaminoácidos e outros. Tais resíduos contribuem para a permeabilidade da célula por aumento do coeficiente de divisão do fármaco original. Tipicamente, o resíduo não contém um substituinte sulfidrilo ou guanidino.
Os resíduos de aminoácidos que ocorre naturalmente são os resíduos encontrados naturalmente em plantas, animais ou micróbios, especialmente proteínas dos mesmos. Os polipeptidos mais tipicamente serão praticamente compostos de tais resíduos de aminoácidos que ocorre naturalmente. Tais aminoácidos são glicina, alanina, valina, leucina, isoleucina, serina, treonina, cisteína, metionina, ácido glutâmico, ácido aspártico, lisina, hidroxilisina, arginina, histidina, fenilalanina, tirosina, triptofano, prolina, asparagina, glutamina e hidroxiprolina. Adicionalmente, aminoácidos não naturais, por exemplo, valanina, fenilglicina e homoarginina são também incluídos. Os aminoácidos vulgarmente encontrados que não são codificados por genes também podem ser utilizados na presente invenção. Todos os aminoácidos utilizados na presente invenção podem ser o isómero óptico ou D- ou L- . 62
Além disso, outros simuladores peptidicos são também úteis na presente invenção. Para um estudo geral, ver Spatola, A. F., em Chemistry and Biochemistry of Amino acids, Peptídes and Proteins, B. Weinstein, eds., Mareei Dekker, Nova Iorque, pág. 267 (1983).
Quando os grupos de protecção são resíduos de aminoácidos ou polipeptidos individuais, facultativamente são substituídos em R3 de substituintes A1, A2 ou A3 na Fórmula I, ou substituídos em R3 de substituintes Al, A2 ou A3 em Fórmula II. Tais conjugados são geralmente produzidos por formação de uma ligação entre um grupo carboxilo do aminoácido (ou aminoácido do terminal C de um polipeptido, por exemplo). Em alternativa, conjugados são formados entre R (Formula I) ou R3 (Formula II) e um grupo amino de um aminoácido ou polipeptido. Geralmente, apenas um de qualquer um dos locais no composto complementar semelhante ao fármaco é amidado com um aminoácido tal como aqui descrito, embora a invenção também abranja no seu âmbito a introdução de aminoácidos em mais de um local permitido. Geralmente, um grupo carboxilo de R3 é amidado com um aminoácido. Geralmente, o grupo α-amino ou Oí-carboxilo do aminoácido ou o grupo do terminal amino ou carboxilo de um polipeptido é ligado às funcionalidades complementares originais. Os grupos carboxilo ou amino nas cadeias laterais do aminoácido geralmente podem ser utilizadas para formar uma ligação ao composto original ou pode ser necessário proteger estes grupos durante a síntese dos conjugados tal como adiante se descreve.
Em relação às cadeias laterais contendo carboxilo de aminoácidos ou polipeptidos, far-se-á observar que o grupo carboxilo facultativamente será bloqueado, por exemplo, por 63 R1, esterificado com R5 ou amidado. Similarmente, as cadeias laterais amino R16 facultativamente serão bloqueadas com R1 ou substituídos com R5.
Tais ligações éster ou amida com grupos amino ou carboxilo de cadeia lateral, como os ésteres ou amidas da molécula original, facultativamente são hidrolisáveis in vivo ou in vitro sob condições acídicas (pH <3) ou básicas (pH >10). Em alternativa, são bastante estáveis no tracto gastrointestinal de seres humanos, mas são hidrolisadas enzimaticamente no sangue ou em meios intracelulares. Os ésteres ou amidatos de aminoácido ou polipeptido também são úteis como intermediários para a preparação da molécula original contendo os grupos livres amino ou carboxilo. O ácido ou base livre do composto original, por exemplo, é prontamente formado a partir dos ésteres ou conjugados de aminoácidos ou polipeptidos da presente invenção por procedimentos de hidrólise convencionais.
Quando um resíduo de aminoácido contém um ou mais centros quirais, é possível utilizar qualquer racemato ou escalemato D, L, meso, treo ou eritro (conforme adequado) ou suas misturas. Geralmente, se os intermediários devem ser hidrolisados não enzimaticamente (como seria o caso em que as amidas são utilizadas como intermediários químicos para os ácidos livres ou aminas livres) os isómeros D são úteis. Por outro lado, os isómeros L são mais versáteis porque podem ser susceptíveis a hidrólise enzimática e não enzimática e são mais eficientemente transportados por sistemas de transporte de aminoácido ou dipeptidilo no tracto gastrointestinal.
Exemplos de aminoácidos adequados, cujos resíduos são representados por Rx ou Ry, compreendem os seguintes: 64 glicina; ácidos aminopolicarboxílicos, por exemplo, ácido aspártico, ácido β-hidroxiaspártico, ácido glutâmico, ácido β-hidroxiglutâmico, ácido β-metilospártico, ácido β-metilglutâmico, ácido β,β-dimetilospártico, ácido γ-hidroxiglutâmico, ácido β,γ-di-hidroxiglutâmico, ácido β-fenilglutâmico, ácido γ-metilenoglutâmico, ácido 3-aminoadípico, ácido 2-aminopimélico, ácido 2-aminossubérico e ácido 2-aminossebácico; amidas de aminoácidos, tais como glutamina e asparagina; ácidos poliamino- ou polibásicos-carboxílicos, tais como arginina, lisina, β-aminoalanina, γ-aminobutirina, ornitina, citrulina, homoarginina, homocitrulina, hidroxilisina, alohidroxilsina e ácido diaminobutírico; outros resíduos de aminoácidos, tais como histidina; ácidos diaminodicarboxílicos, tais como α,α'-di-aminossuccínico, ácido a,a'-diaminoglutárico, ácido α,a'--diaminoadípico, ácido α, a'-diaminopimélico, ácido α,a'--diamino-β-hidroxipimélico, ácido α,a'-diaminossubérico, ácido α,α'-diaminoazelaico e ácido α,a'-diaminossebácico; iminoácidos. tais como prolina, hidroxiprolina, alo-hidroxiprolina, γ-metilprolina, ácido pipecólico, ácido 5-hidroxipipecólico e ácido azetidina-2-carboxílico; um mono- ou di-alquil-(tipicamente Ci-Cs, de cadeia ramificada ou normal)-aminoácido, tal como alanina, valina, leucina, alilglicina, butirina, norvalina, norleucina, heptilina, α-metilserina, ácido a-amino-a-metil-γ-hidroxivalérico, ácido OC-amino-oc-metil-ô-hidroxivalérico, 65 ácido a-amino-a-metil-t-hidroxicapróico, isovalina, a-metilglutâmico, ácido a-aminoisobutírico, ácido oc-aminodietilacético, ácido α-aminodiisopropilacético, ácido α-aminodi-n-propilacético, ácido a-aminodiisobutilacético, ácido oc-aminodi-n-butilacético, ácido oc- aminoetilisopropilacético, ácido a-amino-n-propilacético, ácido α-aminodiisoamiacético, ácido a-metilospártico, ácido oc-metilglutâmico, ácido 1-aminociclopropano-l-carboxílico, isoleucina, aloisoleucina, terc-leucina, β-metiltriptofano e ácido a-amino-P-etil-p-feniipropiónico; β-fenilserinila; α-amino-β-hidroxi-ácidos alifáticos, tais como serina, β-hidroxileucina, β-hidroxinorleucina, β-hidroxinorvalina, e ácido OC-amino^-hidroxiesteárico; α-amino-, a-, γ-, δ- ou ε-hidroxi-ácidos, tais como homosserina, δ-hidroxinorvalina, γ-hidroxinorvalinha e resíduos de ε-hidroxinorleucina, canavina e canalina; γ-hidroxiornitina; ácidos 2-hexosamínicos, tais como ácido D-glucosamínico ou ácido D-galactosamínico; α-amino-β-tióis, tais como penicilamina, β-tiolnorvalinha ou β-tiolbutirina; outros resíduos de aminoácidos contendo enxofre, incluindo cisteína; homocistina, β-fenilmetionina, metionina, sulfóxido de S-alil-L-cisteína, 2-tiol-histidina, cistationina e éteres tiólicos de cisteína ou homocisteína; 66 fenilalanina, triptofano e α-aminoácidos substituídos no anel, tais como os fenil- ou ciclo-hexil-aminoácidos, ácido α-aminofenilacético, ácido a-aminociclo-hexilacético e ácido a-amino-p-ciclo-hexilopropiónico, análogos de fenilalanina e derivados incluindo arilo, alquilo inferior, hidroxi, guanidino, éter oxialquílico, nitro, enxofre ou fenilo halo-substituído (por exemplo, tirosina, metiltirosina e o-cloro-, p-cloro-, 3,4-dicloro-, o-, m- ou p-metil-, 2,4,6-trimetil-, 2-etoxi-5-nitro-, 2-hidroxi-5-nitro- e p-nitro-fenilalanina); furil-, tienil-, piridil-, pirimidinil-, purinil- ou naftil-alaninas; e análogos de triptofano e derivados, incluindo quinurenina, 3-hidroxiquinurenina, 2-hidroxitriptofano e 4-carboxitriptofano; α-amino-aminoácidos substituídos, incluindo sarcosina (N-metilglicina), N-benzilglicina, N-metil-alanina, N-benzilalanina, N-metilfenilalanina, N-benzilfenil-alanina, N-metilvalinha e N-benzilvalina; e α-hidroxi-aminoácidos e a-hidroxi-aminoácidos substituídos, incluindo serina, treonina, alotreonina, fosfosserina e fosfotreonina.
Polipeptidos são polímeros de aminoácidos em que um grupo carboxilo de um monómero de aminoácido é ligado a um grupo amino ou imino do monómero subsequente de aminoácido por uma ligação amida. Polipeptidos compreendem dipeptidos, polipeptidos de baixo peso molecular (PM entre cerca de 1500 e 5000) e proteínas. Proteínas facultativamente contem 3, 5, 10, 50, 75, 100 ou mais resíduos, e de modo adequado são praticamente homólogos em termos de sequência com proteínas de animais, plantas ou microbianas. Compreendem 67 enzimas (por exemplo, hidrogénio-peroxidase), assim como os imunogénios, tais como KLH, ou anticorpos ou proteínas de qualquer tipo contra os quais se deseja criar uma resposta imunitária. A natureza e identidade do polipeptido podem variar amplamente.
Os amidatos de polipeptido são úteis como imunogénios para criar anticorpos contra ou o polipeptido (se for imunogénico no animal ao qual se pretende administrar) ou contra os epítopos do restante do composto da presente invenção,
Os anticorpos capazes de se ligar ao composto original não peptidílico são utilizados para separar o composto original das misturas, por exemplo, em diagnóstico ou para a preparação do composto original. Os conjugados de composto original e polipeptido geralmente são mais imunogénicos do que os polipeptidos em animais intimamente homólogos e assim tornam o polipeptido mais imunogénico, facilitando a criação de anticorpos contra o mesmo. Consequentemente, o polipeptido ou proteína pode ser imunogénico num animal tipicamente utilizado para criar anticorpos, por exemplo, coelho, murganho, cavalo ou rato. 0 polipeptido facultativamente contém um local de clivagem de enzima peptidolítica na ligação peptídica entre o primeiro e segundo resíduos adjacentes ao heteroátomo acídico. Tais locais de clivagem são flanqueados por estruturas de reconhecimento enzimático, por exemplo, uma sequência particular de resíduos reconhecida por uma enzima peptidolítica.
As enzimas peptidolíticas para clivagem dos conjugados de polipeptido da presente invenção são bem conhecidas e em particular compreendem carboxipeptidases que digerem 68 polipeptidos por remoção de resíduos do terminal C, e são específicas em muitos casos para particulares sequências do terminal C. Tais enzimas e suas exigências de substratos geralmente são bem conhecidas. Por exemplo, um dipeptido (com um dado par de resíduos e um terminal carboxilo livre) é covalentemente ligado através de seu grupo α-amino em fósforo ou átomos de carbono dos presentes compostos. Em certas formas de realização, a grupo fosfonato substituído com um aminoácido ou péptido será clivado pela enzima peptidolítica adequada, deixando a carboxilo do resíduo de aminoácido proximal clivar autocataliticamente a ligação fosfonoamidato.
Os grupos dipeptidilo adequados (des ignados por seu código de letra única) são AA, AR, AN, AD, AC, AE, AQ, AG, AH, AI, AL, AK, AM, AF, AP, AS, AT, AW, AY, AV, RA, RR, RN, RD, RC, RE, RQ, RG, RH, RI, RL, RK, RM, RF, RP, RS, RT, RW, RY, RV, NA, NR, NN, ND, NC, NE, NQ, NG, NH, NI, NL, NK, NM, NF, NP, NS, NT, NW, NY, NV, DA, DR, DN, DD, DC, DE, DQ, DG, DH, Dl, DL, DK, DM, DF, DP, DS, DT, DW, DY, DV, CA, CR, CN, CD, CC, CE, CQ, CG, CH, ci, CL, CK, CM, CF, CP, CS, CT, CW, CY, CV, EA, ER, EN, ED, EC, EE, EQ, EG, EH, EI, EL, EK, EM, EF, EP, ES, ET, EW, EY, EV, QA, QR, QN, QD, QC, QE, QQ, QG, QH, QI, QL, QK, QM, QF, QP, QS, QT, QW, QY, QV, GA, GR, GN, GD, GC, GE, GQ, GG, GH, GI, GL, GK, GM, GF, GP, GS, GT, GW, GY, GV, HA, HR, HN, HD, HC, HE, HQ, HG, HH, Hl, HL, HK, HM, HF, HP, HS, HT, HW, HY, HV, IA, IR, IN, ID, ic, IE, IQ, IG, IH, II, IL, IK, IM, IF, IP, is, IT, IW, IY, IV, LA, LR, LN, LD, LC, LE, LQ, LG, LH, LI, LL, LK, LM, LF, LP, LS, LT, LW, LY, LV, KA, KR, KN, KD, KC, KE, KQ, KG, KH, Kl, KL, KK, KM, KF, KP, KS, KT, KW, KY, KV, MA, MR, MN, MD, MC, ME, MQ, MG, MH, MI, ML, MK, MM, MF, MP, MS, MT, MW, MY, MV, FA, FR, FN, 69 FD, FC, FE, FQ, FG, FH, FI, FL, FK, FM, FF, FP, FS, FT, FW, FY, FV, PA, PR, PN, PD, PC, PE, PQ, PG, PH, PI, PL, PK, PM, PF, PP, PS, PT, PW, PY, PV, SA, SR, SN, SD, SC, SE, SQ, SG, SH, SI, SL, SK, SM, SF, SP, SS, ST, SW, SY, SV, TA, TR, TN, TD, TC, TE, TQ, TG, TH, TI, TL, TK, TM, TF, TP, TS, TT, TW, TY, TV, WA, WR, WN, WD, WC, WE, WQ, WG, WH, WI, WL, WK, WM, WF, WP, WS, WT, WW, WY, WV, YA, YR, YN, YD, YC, YE, YQ, YG, YH, YI, YL, YK, YM, YF, YP, YS, YT, YW, YY, YV, VA, VR, VN, VD, VY VC, e W VE, VQ, VG, VH, VI, VL, VK, VM, VF, VP, VS, VT, VW,
Os resíduos tripeptídicos são também úteis como grupos de protecção. Quando um fosfonato deve ser protegido, a sequência -X4-pro-X5- (em que X4 é qualquer resíduo de aminoácido e X5 é um resíduo de aminoácido, um éster carboxílico de prolina ou hidrogénio) será clivado por luminal-carboxipeptidase para se obter X4 com um carboxilo livre, que por sua vez se espera que clive auto-cataliticamente a ligação fosfonoamidato. 0 grupo carboxi de X5 é facultativamente esterificado com benzilo.
As espécies de dipeptidos ou tripeptidos podem ser seleccionadas com base nas propriedades de transporte conhecidas e/ou susceptibilidade às peptidases que podem afectar o transporte até às células da mucosa intestinal ou outros tipos de células. Dipeptidos e tripeptidos aos quais falta um grupo a-amino são substratos de transporte para o transportador de péptido encontrado na membrana epitelial estriada das células da mucosa intestinal (Bai, J.P.F., (1992) Pharm Res. 9:969-978). Os péptidos competentes para transporte podem ser assim utilizados para melhorar a biodisponibilidade dos compostos amidato. Di- ou tripeptidos com um ou mais aminoácidos na configuração D podem 70 ser compatíveis com o transporte de péptidos. Aminoácidos na configuração D podem ser utilizados para reduzir a susceptibilidade de um di- ou tri-peptidos para hidrólise por proteases comuns ao epitélio estriado, tais como aminopeptidase N. Além disso, em alternativa, os di- ou tri-peptidos são seleccionados com base na sua resistência relativa à hidrólise por proteases encontradas no lúmen do intestino. Por exemplo, tripeptidos ou polipeptidos aos quais faltam asp e/ou glu são substratos pobres para aminopeptidase A; di- ou tri-peptidos aos quais faltam resíduos de aminoácidos no lado do terminal N de aminoácidos hidrofóbicos (leu, tir, phe, vai, trp) são substratos fracos para endopeptidase e péptidos aos quais falta um resíduo pro na penúltima posição no terminal carboxilo livre são substratos fracos para carboxipeptidase P. Similares considerações também ser também aplicadas À selecção de péptidos que são relativamente resistentes ou relativamente susceptíveis a hidrólise por peptidases citosólica, renal, hepática, sérica ou outras. Tais amidatos de polipeptidos fracamente clivados são imunogénios ou são úteis para ligação a proteínas a fim de preparar imunogénios.
Análogos de fosfonato de fármacos inibidores de protease conhecidos, experimentais ou aprovados
Os fármacos inibidores de protease conhecidos, experimentais ou aprovados, que podem ser obtidos como derivados de acordo com presente invenção, devem conter pelo menos um grupo funcional capaz de ligação, isto é, ligação ao átomo de fósforo no radical fosfonato. Os derivados de fosfonato de Fórmulas I-VI podem se clivar in 71 vivo, por fases, depois de terem alcançado o local desejado de acção, isto é, o interior de uma célula. Um mecanismo de acção dentro de uma célula pode acarretar uma primeira clivagem, por exemplo, por esterase, de modo a proporcionar um intermediário "enclausurado" negativamente carregado. A clivagem do agrupamento de éster terminal em Fórmulas I-VI assim proporciona um intermediário instável que libera um intermediário "enclausurado" negativamente carregado.
Após a passagem dentro de uma célula, a clivagem enzimática intracelular ou modificação do composto de pró-fármaco de fosfonato pode resultar numa acumulação intracelular de composto clivado ou modificado por um mecanismo de "aprisionamento". 0 composto clivado ou modificado pode ser então "enclausurado" na célula, isto é, pode acumular-se na célula por uma mudança significativa da carga, polaridade ou de outra propriedade física que diminui a velocidade a que o composto clivado ou modificado pode sair da célula em relação à velocidade a que entrou sob a forma de pró-fármaco de fosfonato. Também podem estar funcionais outros mecanismos pelos quais um efeito terapêutico é obtido. As enzimas que são capazes de um mecanismo de activação enzimática com os compostos de pró-fármaco de fosfonato da invenção compreendem, mas sem que isso constitua qualquer limitação, amidases, esterases, enzimas microbianas, fosfolipases, colinesterases e fosfatases.
Em casos seleccionados em que o fármaco é de tipo nucleosídico, como no caso de zidovudina e numerosos outros agentes antirretrovirais, sabe-se que o fármaco é activado in vivo por fosforilação. Tal activação pode ocorrer no presente sistema por conversão enzimática do intermediário 72 "enclausurado", com fosfocinase, no fosfonato difosfato activo e/ou por fosforilação do próprio fármaco após a sua libertação do intermediário "travado", tal como descrito antes. Em ambos os casos, o fármaco de tipo nucleosidico original será convertido, por meio dos derivados da presente invenção, nas espécies fosforiladas activas. A partir do anterior, será evidente que muitos fármacos inibidores da protease do VIH conhecidos e estruturalmente diferentes, aprovados e experimentais, podem ser transformados de acordo com a presente invenção. Numerosos destes fármacos são especificamente aqui mencionados. No entanto, faz-se observar que a descrição de famílias de fármacos e seus membros específicos para transformação de acordo com esta invenção não se destina a ser exaustiva, mas apenas ilustrativa.
Como outro exemplo, quando o fármaco seleccionado contém funções de hidroxilo reactivas múltiplas, uma mistura de intermediários e produtos finais pode novamente ser obtida. No caso invulgar em que todos os grupos hidroxi são quase igualmente reactivos, não se espera obter um único produto predominante, já que cada produto mono-substituído será obtido em quantidades aproximadamente iguais, embora também se obtenha uma quantidade menor de produto substituído múltiplas vezes. Em termos gerais, no entanto, um dos grupos hidroxilo será mais susceptível à substituição do que o(s) outro (s), por exemplo, um hidroxilo primário será mais reactivo do que um hidroxilo secundário, um hidroxilo não obstruído será mais reactivo do que um obstruído. Consequentemente, o produto principal será mono-substituído, em que o hidroxilo mais reactivo foi transformado, embora se possa obter outros produtos mono- 73 substituídos ou substituídos múltiplas vezes como produtos menores.
Compostos de fórmulas I a VI com um núcleo 2-hidroxilo, 3-amino-propilamida ou 2-hidroxi-l,3-amino-propilaminossulfona incluem um inibidor de fosfonato-protease semelhante a Amprenavir (AMLPPI). Os compostos da invenção compreendem análogos de fosfonato de outros compostos PI conhecidos com um núcleo 2-hidroxi-3-amido-propilamida ou 2-hidroxi-3-amido-propilaminossulfona que foram identificados como Droxinavir, Telinavir, Iddb51 (Searle); Ph4556 (WO 95/29922); Ph5145 (WO 96/31527); DPC-681, DPC-684 (DuPont); VB-11328 (Vertex); TMC-114 (Tibotech/Johnson & Johnson). Os compostos também compreendem análogos de fosfonato de fosamprenavir em que 2-hidroxi é fosforilado, isto é, tendo um núcleo 2-fosfato-1,3-amino-propilaminossulfona (patente de invenção norte-americana n° 6 436 989).
As formas de realização da invenção também compreendem os seguintes análogos de fosfonato, representados como Fórmulas Ila-Ig: f
descrito como "(1)" em: WO 94/05639 (publicado a 17 de Março de 1994) na página 4, linha 15 a página 6, linha 27, página 15, linha 21 a página 17, linha 33 e reivindicação 1; patente de invenção norte-americana n° 5 585 397 (publicada a 17 de Dezembro de 1996) na coluna 2, linha 45 a coluna 3, linha 53 e coluna 8, linha 1 a coluna 9, linha 12; patente de invenção norte-americana n° 5 783 701 (publicada a 21 Julho de 1998) na coluna 2, linha 43 a 74 coluna 3, linha 64, coluna 8, linha 13 a coluna 9, linha 33 e reivindicação 1; patente de invenção norte-americana n° 5 856 353 (publicada a 5 de Janeiro de 1999) na coluna 2, linha 45 a coluna 3, linha 65; coluna 8, linha 14 a coluna 9, linha 37 e reivindicação 1; patente de invenção norte-americana n° 5 977 137 (publicada a 2 de Novembro de 1999) na coluna 2, linha 43 a coluna 3, linha 65; coluna 8, linha 15 a coluna 9, linha 38 e reivindicação 1, e patente de invenção norte-americana n° 6 004 957 (publicada a 21 de Dezembro de 1999) na coluna 2, linha 47 a coluna 4, linha 3, coluna 8, linha 18 a coluna 9, linha 41 e reivindicação 1. ? Γ ?' t descrito como "(1)" em: WO 96/33184 (publicado em 24 de Outubro de 1996) na página 4, linha 19 a página 6, linha 5, página 17, linha 11 a página 19, linha 31 e reivindicação 1; e patente de invenção norte-americana n° 5 723 490 (publicada a 3 de Março de 1998) na coluna 2, linha 49 a coluna 3, linha 39, coluna 8, linha 66 a coluna 10, linha 36 e reivindicação 1. f descrito como "(1)" em: WO 96/33187 (publicado em 24 de Outubro de 1996) na página 4, linha 23 a página 6, linha 18, página 18, linha 8 a página 21, linha 18 e Reivindicações 1 e 6; patente de invenção norte-americana n° 5 691 372 (publicada a 25 de Novembro de 1997) na coluna 2, linha 43 a coluna 3, linha 47, coluna 9, linha 21 a coluna 11, linha 5 e reivindicações 1 e 5, e patente de 75 invenção norte-americana n° 5 990 155 (publicada a 23 de Novembro de 1999) na coluna 2, linha 46 a coluna 3, linha 55, coluna 9, linha 25 a coluna 11, linha 13 e reivindicações 1 e 3. 75A,
π
D M r descrito como "(1)" em: WO 99/33793 (publicado em 8 de Julho de 1999) na página 4, linha 1 a página 7, linha 29, página 17, linha 1 a página 20, linha 33 e reivindicação 1.
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He descrito como "(1)" em: WO 99/33815 (publicado em 8 de Julho de 1999) na página 4, linha 1 a página 7, linha 19, página 12, linha 18 a página 16, linha 7 e reivindicação 1; e WO 99/65870 (publicado em 23 de Dezembro de 1999) na página 4, linha 7 a página 8, linha 4, página 12, linha 7 a página 16, linha 4 e reivindicação 1.
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Hf f descrito como "(1)" em: WO 00/47551 (publicado em 17 de Agosto de 2000) na página 4, linha 10 a página 8, linha 29, página 13, linha 14 a página 17, linha 32 e reivindicação 1. 76
descrito como "(1)" em: WO 00/76961 (publicado em 21 de Dezembro de 2000) na página 5, linha 1 a página 10, linha 24, página 14, linha 28 a página 20, linha 21 e reivindicação 1.
G Q
Hb descrito como "(1)" em: WO 99/33792 (publicado em 8 de Julho de 1999) na página 4, linha 5 a página 7, linha 35, página 17, linha 10 a página 21, linha 6 e reivindicação 1; WO 95/24385 (publicado em 14 de Setembro de 1995) na página 4, linha 24 a página 7, linha 14, página 16, linha 20 a página 19, linha 8 e reivindicações 1 e 29, e patente de invenção norte-americana n° 6 127 372 (publicada a 3 de Outubro de 2000) na coluna 2, linha 58 a coluna 4, linha 28, coluna 8, linha 66 a coluna 10, linha 37 e reivindicação 1.
Estereoisómeros
Os compostos da invenção podem ter centros quirais, por exemplo, átomos de carbono ou fósforo quirais. Assim, os compostos da invenção compreendem misturas racémicas de todos os estereoisómeros, incluindo enantiómeros, diastereómeros, e atropisómeros. Além disso, os compostos da invenção compreendem isómeros ópticos enriquecidos ou resolvidos em qualquer um ou todos os átomos quirais 77 assimétricos. Noutras palavras, os centros quirais apresentados nas ilustrações assumem a forma de isómeros quirais ou misturas racémicas. As misturas racémicas e diastereoméricas, assim como os isómeros ópticos individuais ou sintetizados, praticamente isentos de seus parceiros enantioméricos ou diastereoméricos, estão abrangidos no âmbito da invenção. As misturas racémicas são separadas nos seus isómeros individuais, praticamente puros sob o ponto de vista óptico, por meio de técnicas bem conhecidas, tais como, por exemplo, a separação de sais diastereoméricos formados com adjuntos opticamente activos, por exemplo, ácidos ou bases, seguindo-se a reconversão nas substâncias opticamente activas. Na maior parte dos casos, o isómero óptico desejado é sintetizado por meio de reacções estereospecificas, começando com o estereoisómero adequado do material de partida desejado.
Os compostos da invenção podem também existir como isómeros tautoméricos em alguns casos. Apesar de somente uma estrutura de ressonância deslocalizada poder ser ilustrada, todas tais formas estão contempladas no âmbito da invenção. Por exemplo, tautómeros enamina podem existir para sistemas purina, pirimidina, imidazol, guanidina, amidina e tetrazol e todas as suas formas tautoméricas possíveis estão abrangidos no âmbito da invenção.
Sais e hidratos
As composições da presente invenção compreendem facultativamente sais dos presentes compostos, em especial sais não tóxicos e farmaceuticamente aceitáveis, contendo, por exemplo, Na+, Li+, K+, Ca+2 e Mg+2. Tais sais podem compreender os obtidos por combinação de catiões adequados 78 como iões de metal alcalino ou metal alcalino-terroso ou iões de amónio quaternário e amino com radical de anião de ácido, tipicamente um ácido carboxilico. Sais monovalentes são preferidos no caso de se desejar um sal solúvel em água.
Tipicamente, os sais de metal são preparados por reacção de hidróxido de metal com um composto da presente invenção. Os exemplos de sais de metal que são preparados deste modo são sais contendo Li+, Na+ e K+. Um sal de metal menos solúvel pode ser precipitado a partir da solução de um sal mais solúvel por adição de composto de metal adequado.
Além disso, os sais podem ser formados por adição de ácido de alguns ácidos orgânicos e inorgânicos, por exemplo, HC1, HBr, H2SO4, H3PO4 ou ácidos sulfónicos orgânicos a centros básicos, tipicamente aminas, ou a grupos acidicos. Finalmente, faz-se observar que as presentes composições compreendem compostos da invenção em sua forma não ionizada, assim como de ião simétrico, e combinações com quantidades estequiométricas de água, tais como em hidratos.
Também estão abrangidos no âmbito da invenção os sais de compostos originais com um ou mais aminoácidos. Qualquer um dos aminoácidos descritos antes é adequado, em especial os aminoácidos que ocorrem naturalmente, presentes como componentes de proteina, apesar de, tipicamente, o aminoácido ser tal que contenha uma cadeia lateral com um grupo básico ou acidico, por exemplo, lisina, arginina ou ácido glutâmico, ou um grupo neutro, tal como glicina, serina, treonina, alanina, isoleucina ou leucina. 79
Métodos de inibição da protease do VIH
Outro aspecto da invenção diz respeito a métodos para inibir a actividade da protease do VIH que compreendem o passo que consiste em tratar uma amostra sobre a qual se suspeita que contenha VIH com a composição da invenção.
As composições da invenção podem actuar como inibidores da protease do VIH, como intermediários para estes inibidores ou têm outras utilidades, tal como adiante se descreve. Os inibidores irão ligar-se a locais na superfície ou na cavidade de uma Protease do VIH com uma geometria singular para Protease do VIH. As composições que se ligam a Protease do VIH podem se ligar com variados graus de reversibilidade. Os compostos que se ligam de modo praticamente irreversível são candidatos ideais para utilização neste método da invenção. Uma vez marcadas, as composições que se ligam de modo praticamente irreversível são úteis como sondas para a detecção da protease do VIH. Consequentemente, a invenção refere-se a métodos para detectar a Protease do VIH numa amostra sobre a qual se suspeita que contenha a Protease do VIH incluindo os passos que consistem em: tratar uma amostra sobre a qual se suspeita que contenha a Protease do VIH com uma composição que contenha um composto da invenção ligado a um identificador e observar o efeito da amostra sobre a actividade do identificador. Os identificadores adequados são bem conhecidos no campo de diagnóstico e compreendem radicais livres estáveis, fluoróforos, radioisótopos, enzimas, grupos quimiluminescentes e cromogénios. Os presentes compostos são marcados de um modo convencional, utilizando grupos funcionais, tais como hidroxilo, carboxilo, sulfidrilo ou amino. 80
No contexto da invenção, as amostras sobre a qual se suspeita que contenham a Protease do VIH compreendem materiais naturais ou feitos pelo ser humano, tais como organismos vivos; culturas de tecido ou célula, amostras biológicas, tais como amostras de material biológico (sangue, soro, urina, fluido cerebrospinal, lágrimas, esputo, saliva, amostras de tecido e outros); amostras de laboratório, alimentos, água ou amostras de ar; amostras de bioprodutos, tais como extractos de células, particularmente células recombinantes que sintetizam uma glicoproteina desejada, e outros. Tipicamente, a amostra será suspeita de conter um organismo que produz Protease do VIH e frequentemente um organismo patogénico como VIH. As amostras podem estar contidas em qualquer meio incluindo água e misturas de solvente orgânico/água. As amostras compreendem organismos vivos, tais como seres humanos, e materiais feitos pelo ser humano, tais como culturas de células. O passo de tratamento da invenção compreende a adição da composição da invenção à amostra ou a adição de um precursor da composição à amostra. O passo de adição compreende qualquer método de administração como descrito antes.
Se desejado, a actividade da protease do VIH após aplicação da composição pode ser observada por qualquer método, incluindo métodos directos e indirectos de detecção de actividade da protease do VIH. Os métodos quantitativos, qualitativos e semiquantitativos de determinação da actividade da protease do VIH estão todos contemplados. Tipicamente, um dos métodos de pesquisa descrito antes é aplicado; no entanto, qualquer outro método, como a 81 observação das propriedades fisiológicas de um organismo vivo, também é aplicável.
Os organismos que contêm Protease do VIH compreendem o vírus VIH. Os compostos da presente invenção são úteis para o tratamento ou para a profilaxia de infecções por VIH em animais ou no ser humano.
No entanto, na pesquisa de compostos capazes de inibir os vírus da imunodeficiência humana, deve ser considerado que os resultados dos ensaios enzimáticos podem não estar correlacionados com os ensaios em cultura celular. Assim, um ensaio de base celular deve ser a ferramenta de pesquisa principal.
Pesquisas de inibidores da protease do VIH
As composições da invenção são pesquisadas quanto à actividade inibidora da protease do VIH por meio de qualquer uma das técnicas convencionais para se avaliar a actividade da enzima. No contexto da invenção, tipicamente as composições são primeiro pesquisadas quanto à inibição da protease do VIH in vitro e as composições mostrando actividade inibidora são depois pesquisadas quanto à actividade in vivo. As composições com Ki in vitro (constantes inibidoras) inferiores a cerca de 5 χ 10-6 M, tipicamente inferiores a cerca de 1 χ 10-7 M e preferencialmente inferiores a cerca de 5 χ 10-8 M são preferidas para utilização in vivo.
As pesquisas úteis in vitro foram descritas pormenorizadamente e não serão elaboradas aqui. No entanto, os exemplos descrevem ensaios in vitro adequados.
Formulações farmacêuticas 82
Os compostos da presente invenção são formulados com veículos e excipientes convencionais que serão seleccionados de acordo com a prática convencional. Os comprimidos irão conter excipientes, agentes de deslizamento, cargas, aglutinantes e outros. As formulações aquosas são preparadas no estado estéril e, quando pretendidas para uma via de administração diferente da oral, serão isotónicas. Todas as formulações irão facultativamente conter excipientes tais como os especificados em "Handbook of Pharmaceutical Excipients", (1986). Os excipientes compreendem ácido ascórbico e outros antioxidantes, agentes quelantes, tais como EDTA, hidratos de carbono, tais como dextrano, hidroxialquilcelulose, hidroxialquilmetilcelulose, ácido esteárico e outros. 0 pH das formulações está compreendido no intervalo entre cerca de 3 e cerca de 11, mas vulgarmente está compreendida entre cerca de 7 e 10.
Embora seja possível administrar os ingredientes activos por si sós, pode ser preferível apresentar os mesmos sob a forma de formulações farmacêuticas. As formulações da invenção, tanto para utilização veterinária como em seres humanos, compreendem pelo menos um ingrediente activo, tal como definido antes, em conjunto com um ou mais veículos aceitáveis para os mesmos e facultativamente outros ingredientes terapêuticos. 0(s) veículo(s) deve(m) ser "aceitável(eis)" no sentido de ser(em) compatível(eis) com os outros ingredientes da formulação e fisiologicamente inócuo (s) para o paciente.
As formulações compreendem as adequadas para as vias de administração anteriores. As formulações podem ser convenientemente apresentadas numa forma de dosagem unitária e podem ser preparadas por qualquer um dos métodos 83 bem conhecidos na especialidade farmacêutica. As técnicas e formulações geralmente estão descritas em Remington's Pharmaceutical Sciences (Mack Publishing Co. Easton, PA) . Tais métodos compreendem o passo que consiste em associar o ingrediente activo ao veiculo que constitui um ou mais ingredientes acessórios. Geralmente, as formulações são preparadas associando, uniforme e intimamente, o ingrediente activo com os veiculos líquidos ou veículos sólidos finamente divididos, ou ambos, e dando depois formar ao produto.
As formulações da presente invenção adequadas para administração oral podem ser apresentadas como unidades discretas, tais como cápsulas, pastilhas ou comprimidos, em que cada uma delas contém uma quantidade predeterminada de ingrediente activo; um pó ou grânulos; uma solução ou uma suspensão num líquido aquoso ou não aquoso, ou uma emulsão líquida de tipo óleo-em-água ou uma emulsão líquida de tipo água-em-óleo. 0 ingrediente activo também pode ser administrado como uma injecção em ampola grande, um electuário ou uma pasta.
Um comprimido é feito por compressão ou moldagem, facultativamente com um ou mais ingredientes acessórios. Os comprimidos prensados podem ser preparados por compressão, numa máquina adequada, do ingrediente activo numa forma de grânulos soltos, tal como um pó ou grânulos, facultativamente misturados com um aglutinante, lubrificante, diluente inerte, conservante, tensioactivo ou agente dispersante. Os comprimidos moldados podem ser feitos por moldagem, numa máquina adequada, de uma mistura de um ingrediente activo em pó humedecida com um diluente líquido inerte. Os comprimidos podem facultativamente ser 84 revestidos ou entalhados e facultativamente são formulados de modo a proporcionarem uma libertação lenta ou controlada do ingrediente activo a partir dos mesmos.
Para infecções do olho ou outros tecidos externos, por exemplo, boca e pele, as formulações são preferencialmente aplicadas como um unguento ou creme tópico contendo o(s) ingrediente(s) activo(s) numa quantidade, por exemplo, entre 0,075% e 20% p/p (incluindo o(s) ingrediente (s) activo (s) entre 0,1% e 20% em acréscimos de 0,1% p/p, tal como 0,6% p/p, 0,7% p/p, etc.), preferencialmente entre 0,2% e 15% p/p e mais preferencialmente entre 0,5% e 10% p/p. Quando formulados num unguento, os ingredientes activos podem ser utilizados com uma base para unguento que seja parafínica ou miscivel em água. Em alternativa, os ingredientes activos podem ser formulados num creme com uma base para cremes de tipo óleo-em-água.
Se desejado, a fase aquosa da base para creme pode compreender, por exemplo, pelo menos 30% p/p de um álcool poliidrico, isto é, um álcool tendo dois ou mais grupos hidroxilo, tal como propileno-glicol, butano-1,3-diol, manitol, sorbitol, glicerol e polietileno-glicol (incluindo PEG 400) e misturas dos mesmos. As formulações tópicas podem desejavelmente compreender um composto que melhora a absorção ou penetração do ingrediente activo através da pele ou outras zonas afectadas. Os exemplos de tais intensificadores da penetração dérmica compreendem dimetil-sulfóxido e análogos relacionados. A fase oleosa das emulsões da presente invenção pode ser constituída por ingredientes conhecidos de um modo conhecido. Apesar de a fase poder compreender apenas um emulsionante (também conhecido por emulgente) , compreende, 85 de um modo desejável, uma mistura pelo menos de um emulsionante com uma gordura ou um óleo ou ambos. Preferencialmente, um emulsionante hidrofílico é incluído em conjunto com um emulsionante lipofílico que actua como um estabilizador. Também é preferível que compreenda um óleo e uma gordura. Em conjunto, o(s) emulsionante(s) , com ou sem estabilizador(es), completa(m) a chamada cera emulsionante e a cera, em conjunto com o óleo e a gordura, fazem a chamada base emulsionante para unguento que forma a fase dispersa oleosa das formulações em creme.
Os emulgentes e estabilizadores de emulsão adequados para utilização na formulação da invenção compreendem Tween® 60, Span ® 80, álcool cetostearílíco, álcool benzílico, álcool miristílico, monostearato de glicerilo e lauril-sulfato de sódio. A escolha de óleos ou gorduras adequados para a formulação tem por base a obtenção das propriedades cosméticas desejadas. O creme deve ser preferencialmente um produto não gorduroso, que não mancha, e é lavável, com uma consistência adequada para evitar fugas dos tubos ou outros recipientes. Os ésteres de alquilo mono- ou di-básicos, de cadeia linear ou ramificada, tais como di-isoadipato, estearato de isocetilo, diéster de propileno-glicol de ácidos gordos de coco, miristato de isopropilo, oleato de decilo, palmitato de isopropilo, estearato de butilo, palmitato de 2-etil-hexilo ou uma mistura de ésteres de cadeia ramificada conhecida por 'Crodamol CAP', podem ser utilizados, sendo preferidos os últimos três ésteres. Podem ser utilizados por si sós ou em combinação, dependendo das propriedades requeridas. Em alternativa, lípidos de elevado 86 ponto de fusão, tais como parafina mole e/ou parafina liquida, ou outros óleos minerais, são utilizados.
As formulações farmacêuticas de acordo com a presente invenção compreendem uma combinação de acordo com a invenção em conjunto com um ou mais veículos ou excipientes farmaceuticamente aceitáveis e facultativamente outros agentes terapêuticos. As formulações farmacêuticas contendo o ingrediente activo podem estar em qualquer forma adequada para o método de administração pretendido. Quando utilizados para administração oral, por exemplo, podem ser preparados comprimidos, pastilhas, pastilhas expectorantes, suspensões aquosas ou oleosas, pós dispersáveis ou grânulos, emulsões, cápsulas duras ou moles, xaropes ou elixires. As composições para utilização oral podem ser preparadas de acordo com qualquer método bem conhecido na especialidade para a preparação de composições farmacêuticas e tais composições podem conter um ou mais agentes, incluindo agentes edulcorantes, agentes aromatizantes, agentes corantes e agentes conservantes, a fim de proporcionar uma preparação agradável ao paladar. Os comprimidos contendo o ingrediente activo em mistura com excipientes farmaceuticamente aceitáveis e não tóxicos, adequados para a preparação de comprimidos, são aceitáveis. Tais excipientes podem ser, por exemplo, diluentes inertes, tais como carbonato de cálcio ou sódio, lactose, fosfato de cálcio ou sódio, agentes granuladores e desintegradores, tais como amido de milho, ou ácido algínico; agentes aglutinantes, tais como amido, gelatina ou acácia, e agentes lubrificantes, tais como estearato de magnésio, ácido esteárico ou talco. Os comprimidos podem ser não revestidos ou podem ser revestidos por técnicas conhecidas, 87 incluindo microencapsulação, para retardar a desintegração e a adsorção no tracto gastrointestinal e assim proporcionar uma acção sustentada durante um período mais longo. Por exemplo, um material retardador, tal como monostearato de glicerilo ou distearato de glicerilo, por si só ou com uma cera, podem ser utilizados.
As formulações para utilização oral podem também assumir a forma de cápsulas de gelatina dura, em gue o ingrediente activo é misturado com um diluente sólido inerte, por exemplo, fosfato de cálcio ou caulino, ou de cápsulas de gelatina mole, em que o ingrediente activo é misturado com água ou um meio oleoso, tal como óleo de amendoim, parafina líquida ou azeite.
As suspensões aquosas da invenção contêm os materiais activos em mistura com excipientes adequados para a preparação de suspensões aquosas. Tais excipientes incluem um agente de suspensão, como carboximetilcelulose de sódio, metil celulose, hidroxipropilmetilcelulose, alginato de sódio, polivinilpirrolidona, goma de alcatira e goma de acácia, e agentes de dispersão ou humectantes, tais como fosfatidos que ocorrem naturalmente (por exemplo, lecitina), um produto de condensação de um óxido de alquileno com um ácido gordo (por exemplo, estearato de polioxietileno), um produto de condensação de óxido de etileno com um álcool alifático de cadeia longa (por exemplo, heptadecaetilenoxicetanol) , um produto de condensação de óxido de etileno com um éster parcial derivado de um ácido gordo e um anidrido de hexitol (por exemplo, monoleato de polioxietileno sorbitano). A suspensão aquosa pode também conter um ou mais conservantes, tais como p-hidroxibenzoato de etilo ou n- propilo, um ou mais agentes corantes, um ou mais agentes aromatizantes e um ou mais agentes edulcorantes, tais como sacarose ou sacarina.
As suspensões em óleo podem ser formuladas por suspensão do ingrediente activo num óleo vegetal, como óleo de amendoim, azeite, óleo de sésamo ou óleo de coco, ou num óleo mineral, tal como parafina liquida. As suspensões orais podem conter um agente espessante, tal como cera de abelha, parafina dura ou álcool cetilico. Os agentes edulcorantes, tal como os especificados antes, e agentes aromatizantes podem ser adicionados para proporcionar uma preparação oral agradável ao paladar. Tais composições podem ser conservadas por adição de um antioxidante, tal como ácido ascórbico.
Os pós e grânulos dispersáveis da invenção adequados para a preparação de uma suspensão aquosa por adição de água proporcionam o ingrediente activo em mistura com um agente dispersante ou humectante, um agente de suspensão e um ou mais conservantes. Os agentes dispersantes ou humectantes adequados e os agentes de suspensão são exemplificados pelos que foram descritos antes. Os excipientes suplementares, por exemplo, agentes edulcorantes, aromatizantes e corantes, também podem estar presentes.
As composições farmacêuticas da invenção também podem assumir a forma de emulsões de tipo óleo-em-água. A fase oleosa pode ser um óleo vegetal, tal como azeite, ou óleo de amendoim, um óleo mineral, tal como parafina liquida, ou uma sua mistura. Os agentes emulsionantes adequados compreendem gomas que ocorrem naturalmente, tais como goma de acácia e goma de alcatira, fosfatidos que ocorrem 89 naturalmente, tais como lecitina de soja, ésteres ou ésteres parciais obtidos a partir de ácidos gordos e anidridos de hexitol, tais como monoleato de sorbitano, e produtos de condensação de tais ésteres parciais com óxido de etileno, tais como sorbitano monoleato de polioxietileno. As emulsões também podem conter agentes edulcorantes e aromatizantes. Os xaropes e elixires podem ser formulados com agentes edulcorantes, tais como glicerol, sorbitol ou sacarose. Tais formulações também podem conter um calmante, um conservante, um aromatizante ou um agente corante.
As composições farmacêuticas da invenção podem estar na forma de uma preparação injectável estéril, tal como uma suspensão aquosa ou oleaginosa injectável estéril. Tal suspensão pode ser formulada de acordo com as técnicas conhecidas, utilizando os agentes dispersantes ou humectantes adequados e agentes de suspensão que foram referidos antes. A preparação injectável estéril pode ser também uma solução ou suspensão injectável estéril num solvente ou diluente não tóxico, parentericamente aceitável, tal como uma solução em 1,3-butanodiol, ou preparada como um pó liofilizado. Entre os veículos e solventes aceitáveis que podem ser utilizados refere-se água, solução de Ringer e solução de cloreto de sódio isotónica. Além disso, óleos fixos estéreis podem ser convencionalmente utilizados como solvente ou meio de suspensão. Para este fim, qualquer óleo fixo suave pode ser utilizado incluindo mono- ou di-glicéridos sintéticos. Além disso, ácidos gordos, tais como ácido oleico, podem do mesmo modo ser utilizados na preparação de injectáveis. 90 A quantidade de ingrediente activo que pode ser combinada com o veiculo para produzir uma única forma de dosagem irá variar dependendo do hospedeiro tratado e do modo particular de administração. Por exemplo, uma formulação de libertação controlada para administração oral a seres humanos pode conter aproximadamente 1 a 1000 mg de composto activo com uma quantidade adequada e conveniente de veiculo que pode variar entre cerca de 5% e cerca de 95% das composições totais (peso; peso) . A composição farmacêutica pode ser preparada para proporcionar quantidades facilmente mensuráveis para administração. Por exemplo, uma solução aquosa destinada para infusão intravenosa pode conter entre cerca de 3 μς e 500 μς do ingrediente activo por mililitro de solução a fim de que uma infusão de um volume adequado num caudal de cerca de 30 mL/h pode ocorrer.
As formulações adequadas para administração tópica ao olho também compreendem colírios em que o ingrediente activo é dissolvido ou colocado em suspensão num veículo adequado, especialmente um solvente aquoso para o ingrediente activo. O ingrediente activo está preferencialmente presente em tais formulações numa concentração de 0,5% a 20%, vantajosamente 0,5% a 10% e particularmente cerca de 1,5% p/p.
As formulações adequadas para administração tópica à boca compreendem pastilhas incluindo o ingrediente activo numa base aromatizada, geralmente sacarose e acácia ou alcatira, pastilhas incluindo o ingrediente activo numa base inerte, tal como gelatina ou glicerina, ou sacarose e acácia, e colutórios que compreendem o ingrediente activo num veículo líquido adequado. 91
As formulações para administração rectal podem ser apresentadas como um supositório com uma base adequada incluindo, por exemplo, manteiga de cacau ou um salicilato.
As formulações adequadas para administração intrapulmonar ou nasal têm um tamanho de partícula, por exemplo, no intervalo entre 0,1 e 500 μιη, tal como 0,5, 1, 30, 35 μιη etc., sendo administrados por inalação rápida através da passagem nasal ou por inalação através da boca, de modo a alcançar os sacos alveolares. As formulações adequadas compreendem soluções aquosas ou oleosas do ingrediente activo. As formulações adequadas para administração em aerossol ou pó seco podem ser preparadas de acordo com os métodos convencionais e podem ser libertadas com outros agentes terapêuticos, como compostos até agora utilizados no tratamento ou profilaxia de infecções por VIH, tal como adiante se descreve.
As formulações adequadas para administração vaginal podem ser apresentadas como pessários, tampões, cremes, geles, pastas, espumas ou formulações em pulverização, contendo além do ingrediente activo, os veículos que são bem conhecidos na especialidade como adequados.
As formulações adequadas para administração parentérica compreendem soluções para injecção estéreis, aquosas e não aquosas, que podem conter antioxidantes, tampões, bacteriostatos, e solutos que tornam as formulações isotónicas com o sangue do paciente pretendido, e suspensões estéreis, aquosas e não aquosas, que podem compreender agentes de suspensão e agentes espessantes.
As formulações são apresentadas em embalagens de dose única ou doses múltiplas, por exemplo, ampolas e frasquinhos estanques, e podem ser armazenadas em estado 92 liofilizado requerendo apenas a adição de veículo líquido estéril, por exemplo, água para injecção, imediatamente antes da utilização. As soluções para injecção extemporâneas e suspensões são preparadas a partir de pós estéreis, grânulos e comprimidos do tipo previamente descrito. As formulações de dosagem unitária preferidas são as contendo uma dose diária ou subdose diária unitária, como antes descrito, ou uma sua fracção adequada, do ingrediente activo.
Faz-se observar que, para além dos ingredientes particularmente referidos antes, as formulações da presente invenção podem compreender outros agentes convencionais na especialidade tendo em conta o tipo de formulação em questão, por exemplo, as adequadas para administração oral podem compreender agentes aromatizantes. A invenção ainda proporciona composições veterinárias incluindo pelo menos um ingrediente activo, tal como definido antes, em conjunto com um veículo veterinário.
Os veículos veterinários são materiais úteis para administração da composição e podem ser materiais sólidos, líquidos ou gasosos que são, de outra forma, inertes ou aceitáveis na especialidade veterinária e são compatíveis com o ingrediente activo. Tais composições veterinárias podem ser administradas oralmente, parentericamente ou por qualquer outra via desejada.
Os compostos da invenção são utilizados para proporcionar formulações farmacêuticas de libertação controlada contendo, como ingrediente activo, um ou mais compostos da invenção ("formulações de libertação controlada") em que a libertação do ingrediente activo é controlada e regulada para permitir uma dosagem de menor frequência ou 93 para melhorar a farmacocinética ou perfil de toxicidade de um dado ingrediente activo. A dose eficaz de ingrediente activo depende pelo menos da natureza do estado patológico que se pretende tratar, da toxicidade, se o composto está sendo utilizado profilacticamente (doses menores) ou contra uma infecção virai activa, do método de administração e da formulação farmacêutica e será determinada pelo médico, utilizando estudos de escalonamento de dose convencionais. Pode-se prever que esteja compreendida entre cerca de 0,0001 e cerca de 100 mg/kg de peso corporal, por dia. Tipicamente, entre cerca de 0,01 e cerca de 10 mg/kg de peso corporal, por dia. Mais tipicamente, entre cerca de 0,01 e cerca de 5 mg/kg de peso corporal, por dia. Mais tipicamente, entre cerca de 0,05 e cerca de 0,5 mg/kg de peso corporal, por dia. Por exemplo, a dose elegível diária para um ser humano adulto aproximadamente com 70 kg de peso corporal estará compreendida no intervalo entre 1 mg e 1000 mg e de preferência entre 5 mg e 500 mg e pode assumir a forma de dose única ou doses múltiplas.
Vias de administração
Um ou mais compostos da invenção (aqui designados por ingredientes activos) são administrados por qualquer via adequada à condição sendo tratada. As vias adequadas compreendem oral, rectal, nasal, tópica (incluindo bucal e sublingual), vaginal e parentérica (incluindo subcutânea, intramuscular, intravenosa, intradérmica, intratecal e epidural) e outros. Faz-se observar que a via preferida pode variar, por exemplo, em função do estado patológico do paciente. Uma vantagem dos compostos da invenção é o facto 94 de serem oralmente biodisponíveis e poderem ser administrados por via oral.
Terapia de combinação
As composições da invenção são também utilizadas em combinação com outros ingredientes activos. Tais combinações são seleccionadas com base na condição sendo tratada, reactividades cruzadas de ingredientes e propriedades farmacológicas da combinação. Por exemplo, quando tratando infecções virais, as composições da invenção podem ser combinadas com outros antivirais, tais como outros inibidores de protease, inibidores nucleosidicos de transcriptase reversa, inibidores não nucleosidicos de transcriptase reversa ou inibidores de integrases do VIH. É possivel combinar qualquer composto da invenção com um ou mais ingredientes activos diferentes numa forma de dosagem unitária para administração simultânea ou sequencial para um paciente infectado com VIH. A terapia de combinação pode ser administrada como um regime simultâneo ou sequencial. Quando administrada sequencialmente, a combinação pode ser administrada em duas ou mais administrações. Segundos e terceiros ingredientes activos na combinação podem ter actividade anti-VIH. Os ingredientes activos exemplificativos a serem administrados em combinação com compostos da invenção são inibidores de protease, inibidores nucleosidicos de transcriptase reversa, inibidores não nucleosidicos de transcriptase reversa e inibidores de integrases do VIH. A terapia de combinação pode proporcionar "sinergia" e "efeito sinérgico", isto é, o efeito obtido quando os 95 ingredientes activos são utilizados em conjunto é superior à soma dos efeitos obtidos com a utilização dos compostos separadamente. Um efeito sinérgico pode ser atingido quando os ingredientes activos são (1) co-formulados e administrados ou libertados simultaneamente numa formulação combinada; (2) administrados alternadamente ou em paralelo, como formulações separadas; ou (3) administrados por qualquer outro regime. Quando a libertação é alternada, um efeito sinérgico pode ser atingido quando os compostos são administrados ou libertados sequencialmente; por exemplo, em comprimidos, pílulas ou cápsulas separados, ou por diferentes injecções em seringas separadas. Geralmente, durante a terapia alternada, uma dosagem eficaz de cada ingrediente activo é administrada sequencialmente, isto é, em série, ao passo que na terapia combinada, dosagens eficazes de dois ou mais ingredientes activos são administradas em conjunto. Um efeito antiviral sinérgico denota um efeito antiviral que é superior aos efeitos puramente aditivos previstos dos compostos individuais da combinação.
Metabolitos dos compostos da invenção
Também estão abrangidos no âmbito da presente invenção os produtos metabólicos in vivo dos compostos aqui descritos, tendo em conta que estes produtos são novos e não óbvios em relação à técnica anterior. Tais produtos podem resultar, por exemplo, da oxidação, redução, hidrólise, amidação, esterificação e semelhantes, do composto administrado, primariamente devido a processos enzimáticos. Consequentemente, a invenção compreende compostos novos e não óbvios produzidos pelo processo que 96 compreende fazer contactar um composto da presente invenção com um mamífero durante um período suficiente para se obter um produto metabólico do mesmo. Tais produtos tipicamente são identificados por preparação de composto radiomarcados (por exemplo, com 14C ou 3H) da invenção, administrando o mesmo parentericamente numa dose detectável (por exemplo, superior a cerca de 0,5 mg/kg) a um animal, tal como um rato, murganho, cobaia, macaco ou ser humano, deixando decorrer um período suficiente para o metabolismo ocorrer (tipicamente cerca de 30 segundos a 30 horas) e isolando os seus produtos de conversão a partir da urina, do sangue ou de outras amostras biológicas. Tais produtos são facilmente isolados porque estão marcados (outros são isolados utilizando anticorpos capazes de se ligar a epítopos que sobrevivem no metabolito) . As estruturas de metabolito são determinadas em modo convencional, por exemplo, por análise MS ou RMN. Geralmente, análise de metabolitos é feita do mesmo modo que os estudos de metabolismo de fármacos convencionais bem conhecidos pelos especialistas na matéria. Os produtos de conversão, desde que não sejam de outra forma encontrados in vivo, são úteis em ensaios diagnósticos para dosagem terapêutica dos compostos da invenção mesmo se não possuírem nenhuma actividade de inibidores da protease do VIH por si sós.
As receitas e os métodos para a determinação da estabilidade dos compostos em secreções gastrointestinais substitutos são conhecidos. Os compostos são aqui definidos como estáveis no tracto gastrointestinal, em que menos de cerca de 50% molar dos grupos protegidos são desprotegidos no suco gástrico ou intestinal, após a incubação durante 1 hora a 37 °C. Simplesmente porque os compostos são estáveis 97 no tracto gastrointestinal não significa gue não podem ser hidrolisados in vivo. Tipicamente, os pró-fármacos de fosfonato da invenção serão estáveis no sistema digestivo, mas podem ser praticamente hidrolisados para se obter o fármaco original no lúmen digestivo, figado ou outro órgão metabólico ou dentro das células em geral. Métodos exemplificativos para preparar compostos da invenção A invenção proporciona muitos métodos para preparar as composições da invenção. As composições são preparadas por qualquer uma das técnicas aplicáveis de síntese orgânica. Muitas de tais técnicas são bem conhecidas na especialidade, tais como as descritas em "Compendium of Organic Synthetic Methods" (John Wiley & Sons, NY,) vol. 1, Ian T. Harrison e Shuyen Harrison, 1971; Vol. 2, Ian T. Harrison e Shuyen Harrison 1974; vol. 3, Louis S. Hegedus e Leroy Wade 1977, vol. 4, Leroy G. Wade Jr. 1980; vol. 5, Leroy G. Wade Jr. 1984, e vol. 6, Michael B. Smith, assim como March, J "Advanced Organic Chemistry, Third Edition" (John Wiley & Sons, Nova Iorque, 1985), "Comprehensive Organic Synthesis. SelectivitY, Strategy & Efficiency in Modem Organic Chemistry, in 9 volumes", Barry M. Trost. Editor (Pergamon Press, Nova Iorque, impressão de 1993) .
Os dialquilfosfonatos podem ser preparados de acordo com os métodos de Quast et al. (1974), Synthesis 490, Stowell et al. (1990) Tetrahedron Lett., 3261, e patente de invenção norte-americana n° 5 663 159.
Geralmente, a síntese de ésteres fosfonato é obtida por acoplamento de uma amina ou álcool nucleofílico com o precursor electrofílico de fosfonato activado correspondente. Por exemplo, a adição de clorofosfonato ao 98 grupo 5'-hidroxi nucleosídico é um método bem conhecido para a preparação de monoésteres de fosfato nucleosídico. 0 precursor activado pode ser preparado por vários métodos bem conhecidos. Os clorofosfonatos úteis para síntese de pró-fármacos são preparados a partir de 1,3-propanodiol substituído (Wissner et al., (1992), J. Med. Chem. 35:1650). Os clorofosfonatos são preparados por oxidação dos clorofosfolanos correspondentes (Anderson et al., (1984), J. Org. Chem. 49:1304), que são obtidos por reacção de diol substituído com tricloreto de fósforo. Em alternativa, o agente clorofosfonato é feito por tratamento de 1,3-dióis substituídos com oxicloreto de fósforo (Patois et al., 1990, J. Chem. Soc. Perkin Trans. I, 1577) . A espécie clorofosfonato pode ser também gerada in situ a partir de fosfitos cíclicos correspondentes (Silverburg et al. (1996) Tetrahedron Lett, 37: 771- 774), que pode ser, por sua vez, preparado a partir do intermediário fosforamidato ou clorofosfolano. O intermediário fosforofluoridato preparado a partir de pirofosfato ou de ácido fosfórico também pode actuar como precursor na preparação de pró-fármacos cíclicos (Watanabe et al., (1988), Tetrahedron Lett 29: 5763-66). Cuidado: os compostos fluorofosfonatos podem ser altamente tóxicos!
Os pró-fármacos de fosfonato da presente invenção também podem ser preparados a partir do ácido livre do precursor por reacções de Mitsunobu (Mitsunobu, (1981), Synthesis, 1; Campbell, (1992), J. Org. Chem. 52:6331) e outros reagentes de acoplamento, incluindo, mas sem que isso constitua qualquer limitação, carbodiimidas (Alexander et al. (1994) Collect Czech. Chem. Commun. 59:1853, Casara, et al., (1992), Bioorg. Med. Chem. Lett., 2:145, Ohashi et 99 al., (1988) Tetrahedron Lett., 29:1189) e sais de benzotriazoliloxitris-(dimetilamino)-fosfónio (Campagne et al., (1993), Tetrahedron Lett., 34:6743).
Os halogenetos de arilo sofrem reacção catalisada por Ni+2 com derivados de fosfito para se obter compostos contendo arilfosfonato (Balthazar et al. (1980), J. Org. Chem. 45:5425). Os fosfonatos também podem ser preparados a partir do clorofosfonato na presença de um catalisador de paládio, utilizando triflatos aromáticos (Petrakis et al. (1987), J. Am. Chem. Soc. 109:2831; Lu et al. (1987), Synthesis, 726). Noutro método, os ésteres de arilfosfonato são preparados a partir de arilfosfonatos sob condições de rearranjo aniónico (Melvin (1981) Tetrahedron Lett., 22:3375, Cateel et al., (1991), Synthesis 691). Os sais de N-alcoxiarilo com derivados de metais alcalinos de alquilfosfonato ciclico proporcionam a sintese geral para ligadores de heteroaril-2-fosfonato (Redmore (1970), J. Org. Chem. 35:4114). Tais métodos antes mencionados também podem ser estendidos a compostos em que o grupo W5 é um heterociclo. As pró-fármacos ciclicas 1,3-propanila de fosfonatos são também sintetizadas a partir de diácidos fosfónicos e propano-1,3-dióis substituídos, utilizando um reagente de acoplamento, tal como 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (DCC), na presença de uma base (por exemplo, piridina) . Outros agentes de acoplamento à base de carbodiimida, tal como 1,3-disopropilcarbodiimida, ou reagente solúvel em água, cloridrato de l-(3- dimetil-aminopropil)-3-etilcarbodiimida (EDCI), também podem ser utilizados para a síntese de pró-fármacos de fosfonato cíclico. 100 O grupo carbamoílo pode ser formado por reacção de um grupo hidroxi de acordo com os métodos bem conhecidos na especialidade, incluindo os ensinamentos de Ellis, US 2002/0103378 Al e Hajima, patente US 6 018 049.
Esquemas e exemplos
Seguidamente, apresentar-se-ão vários métodos exemplificativos para a preparação das composições da invenção. Tais métodos pretendem ilustrar a natureza de tais preparações e não limitar o âmbito dos métodos aplicáveis.
Os aspectos gerais de tais métodos exemplificativos são descritos a seguir e nos exemplos. Cada um dos produtos dos seguintes métodos é facultativamente separado, isolado e/ou purificado antes da sua utilização em métodos subsequentes.
Geralmente, as condições de reacção, tais como temperatura, tempo de reacção, solventes, procedimentos de processamento e outros, serão os vulgarmente utilizados na especialidade para a reacção particular que se pretende realizar. O material de referência citado, em conjunto com material aqui citado, contém descrições detalhadas de tais condições. Tipicamente, as temperaturas serão de -100°C a 200°C, os solventes serão apróticos ou próticos, e os tempos de reacção estarão compreendidos entre 10 segundos e 10 dias. O processamento tipicamente consiste na extinção de quaisquer reagentes que não reagiram, seguindo-se a uma repartição entre um sistema de água/fase orgânica (extracção) e a separação da fase contendo o produto.
As reacções de oxidação e redução são tipicamente realizadas em temperaturas próximas da temperatura ambiente 101 (cerca de 20°C), embora para reduções com hidretos de metais a temperatura seja frequentemente reduzida para um valor compreendido entre 0°C e -100°C, os solventes são tipicamente apróticos para as reduções e podem ser ou próticos ou apróticos para oxidações. Os tempos de reacção são ajustados para obter as conversões desejadas.
As reacções de condensação são tipicamente realizadas em temperaturas próximas da temperatura ambiente, apesar de para condensações controladas cineticamente, não equilibradas, temperaturas reduzidas (0°C a -100°C) são também comuns. Os solventes podem ser próticos (comuns em reacções de equilíbrio) ou apróticos (comuns em reacções cineticamente controladas).
As técnicas de síntese convencionais, tais como remoção azeotrópica de subprodutos de reacção e utilização de condições de reacção anidras (por exemplo, meios de gás inerte), são comuns na especialidade e serão utilizadas, sempre que aplicável.
Os termos "tratado", "tratamento", "tratar" e semelhantes significam contactar, misturar, reagir, deixar reagir, afazer contactar e outros termos comuns na especialidade para indicar que uma ou várias entidades químicas são tratadas de modo a serem convertidas numa ou várias entidades químicas diferentes. Isto significa que "tratar o composto um com um composto dois" é sinónimo de "deixar o composto um reagir com o composto dois", "fazer contactar o composto um com composto dois", "reagir o composto um com composto dois" e outras expressões comuns na especialidade de síntese orgânica para indicar, de modo razoável, que o composto um foi "tratado", "reagiu", "deixado reagir" etc., com o composto dois. 102 "Tratamento" indica o modo razoável e comum como os produtos químicos orgânicos reagem. As concentrações normais (0,01M a 10 M, tipicamente 0,1M a 1M), temperaturas (-100°C a 250°C, tipicamente -78°C a 150°C, mais tipicamente -78°C a 100°C e ainda mais tipicamente 0 a 100°C) , recipientes de reacção (tipicamente vidro, plástico, metal), solventes, pressões, atmosferas (tipicamente ar para reacções insensíveis a água e oxigénio ou azoto ou árgon para reacções sensíveis a água ou oxigénio), etc., são pretendidos, salvo quando indicado em contrário. O conhecimento de reacções similares conhecidas na especialidade de síntese orgânica são utilizados para a selecção das condições e aparelhos para "tratamento" num dado processo. Particularmente, um especialista na matéria de síntese orgânica selecciona as condições e aparelhos para os quais se prevê que realizem com êxito razoável as reacções químicas dos processos descritos com base no conhecimento na especialidade.
As modificações de cada um dos esquemas exemplificativos antes e nos exemplos (adiante "esquemas exemplificativos") resulta na produção de vários análogos de materiais exemplificativos específicos. As citações anteriores descrevendo métodos adequados de síntese orgânica são aplicáveis a tais modificações.
Em cada um dos esquemas exemplificativos, pode ser vantajoso separar os produtos de reacção um do outro e/ou dos materiais de partida. Os produtos desejados de cada passo ou série de passos são separados e/ou purificados (doravante, separados) até ao grau desejado de homogeneidade pelas técnicas bem conhecidas dos especialistas na matéria. Tipicamente, tais separações implicam extracção em múltipla 103 fase, cristalização de um solvente ou mistura de solvente, destilação, sublimação, ou cromatografia. A cromatografia pode implicar qualquer número de métodos e aparelhos, incluindo, por exemplo, fase reversa e fase normal; exclusão dimensiona, permuta iónica, métodos de cromatografia em liquido a pressão alta, média e baixa; cromatografia analítica em escala pequena, leito móvel simulado (SMB) e preparativa de camada fina ou espessa, assim como técnicas de cromatografia cintilante e em camada fina a pequena escala.
Outra classe de métodos de separação implica o tratamento de uma mistura com um reagente seleccionado para ligar ou de outra forma tornar separável um produto desejado, material de partida que não reagiu, produto secundário de reacção ou outros. Tais reagentes compreendem adsorventes ou absorventes como carvão activado, crivos moleculares, meios de permuta iónica ou outros. Em alternativa, os reagentes podem ser ácidos no caso de um material básico, bases no caso de um material ácido, reagentes de ligação como anticorpos, proteínas de ligação, quelantes selectivos, tais como éteres coroa, reagentes de extracção de iões liquido/líquido (LIX) ou outros. A selecção de métodos adequados de separação depende da natureza dos materiais envolvidos. Por exemplo, ponto de ebulição e peso molecular em destilação e sublimação, presença ou ausência de grupos funcionais polares em cromatografia, estabilidade de materiais em meio ácido e básico em extracção de múltiplas fases, e outros. Um especialista na matéria irá aplicar técnicas com as quais haja maior probabilidade de se obter a separação desejada. 104
Um estereoisómero único, por exemplo, um enantiómero, praticamente isento de seu estereoisómero pode ser obtido por resolução da mistura racémica utilizando um método, tal como a formação de diastereómeros com agentes de resolução opticamente activos ("Stereochemistry of Carbon Compounds", (1962), por E.L. Eliel, McGraw Hill, Lochmuller, C.H. (1975), J. Chromatogr. 113 (3), 283-302). As misturas racémicas de compostos quirais da invenção podem ser separadas e isoladas por qualquer método adequado, incluindo: (1) formação de sais diastereoméricos iónicos, com compostos quirais e separação por cristalização fraccionada ou outros métodos, (2) formação de compostos diastereoméricos com reagentes de transformação quirais, separação dos diastereómeros e conversão em estereoisómeros puros e (3) separação dos estereoisómeros enriquecidos, ou praticamente puros, directamente sob condições quirais.
No método (1), os sais diastereoméricos podem ser formados por reacção de bases quirais enantiomericamente puras, tais como brucina, quinina, efedrina, estricnina, a-metil-p-feniletilamina (anfetamina) e outros, com compostos assimétricos contendo funcionalidade ácido, tais como ácido carboxilico e ácido sulfónico. Os sais diastereoméricos podem ser induzidos a separar-se por cristalização fraccionada ou cromatografia iónica. Para a separação de isómeros ópticos de compostos amino, a adição de ácidos carboxilico ou sulfónico quirais, tais como ácido canforsulfónico, ácido tartárico, ácido mandélico ou ácido láctico, pode resultar na formação de sais diastereoméricos.
Em alternativa, pelo método (2), faz-se reagir o substrato a ser resolvido com um enantiómero de um composto 105 quiral para formar um par diastereomérico (Eliel, E. e Wilen, S. (1994) Stereochemistry of Orqanic Compounds, John Wiley & Sons, Inc., pág. 322). Os compostos diastereoméricos podem ser formados por reacçâo de compostos assimétricos com reagentes de transformação quirais enantiomericamente puros, tais como derivados de mentilo, seguindo-se a separação dos diastereómeros e hidrólise para se obter o xanteno livre e enantiomericamente enriquecido. Um método de determinação de pureza óptica implica fazer ésteres quirais, como éster mentilico, por exemplo, cloroformato de (-)-mentilo, na presença de uma base, ou éster Mosher, acetato de a-metoxi-α-(trifluorometil)-fenilo (Jacob III, (1982), J. Org. Chem. 47:4165) da mistura racémica e analisando o espectro de RMN quanto à presença de dois diastereómeros atropisoméricos. Os diastereómeros estáveis de compostos atropisoméricos podem ser separados e isolados por cromatografia de fase normal ou reversa seguindo os métodos para separação de naftilisoquinolinas atropisoméricas (Hoye, T. WO 96/15111). Pelo método (3), uma mistura racémica de dois enantiómeros pode ser separada por cromatografia, utilizando uma fase estacionária quiral (Chiral Liguid Chromatography (1989), W. J. Lough Ed. Chapman e Hall, Nova Iorque; Okamoto, (1990), J. of Chromatogr. 513: 375-378). Os enantiómeros enriquecidos ou purificados podem ser distinguidos por métodos utilizados para distinguir outras moléculas quirais com átomos de carbono assimétricos, como rotação óptica e dicroismo circular.
Todas as citações da literatura e patentes são aqui expressamente incorporadas por referência aos locais de sua citação. As secções ou páginas especificamente citadas dos processamentos antes citados são incorporadas por 106 referência com especificidade. A invenção foi descrita em detalhes suficientes para permitir ao especialista na matéria fazer e usar o assunto das seguintes formas de realização. Será evidente que algumas modificações dos métodos e composições nas seguintes formas de realização podem ser feitas no âmbito e no espirito da invenção.
Secção geral de exemplos
Os seguintes exemplos referem-se aos esquemas.
Alguns exemplos foram realizados múltiplas vezes. Em exemplos repetidos, as condições de reacção como tempo, temperatura, concentração e outros, e rendimentos estão dentro dos intervalos experimentais normais. Em exemplos repetidos, em que modificações significativas foram feitas, estes foram notados em que os resultados variaram de modo significativo em relação aos descritos. Nos exemplos, em que diferentes materiais de partida foram utilizados, estes são notados. Quando os exemplos repetidos se referem a análogo "correspondente" de um composto, como "éster de etilo correspondente", isto significa que se assume que um grupo de outra forma presente, neste caso tipicamente um éster de metilo, é o mesmo grupo modificado, tal como indicado.
Em vários dos seguintes esquemas, o termo "etc." aparece como um substituinte nas estruturas químicas e como um termo dentro dos esquemas. Quando utilizado nos gráficos, o termo é definido para cada gráfico. Quando o termo "etc." aparece num esquema e não é um substituinte numa estrutura química, significa "e semelhantes". 107
Inibidores de fosfonato-protease semelhantes a Amprenavir (AMLPPI)
Preparação dos ésteres de fosfonato intermediários 1 a 13
As estruturas dos ésteres de fosfonato intermediários 1 a 13 e as estruturas para os grupos componentes R1, R5 e X da presente invenção estão ilustradas nos gráficos 1-2. As estruturas dos componentes R2NH2 estão ilustradas no gráfico 3; as estruturas dos componentes R3C1 estão ilustradas no gráfico 4; as estruturas dos componentes R4COOH estão ilustradas no gráfico 5a-c e as estruturas dos componentes R9CH2NH2 estão ilustradas no gráfico 6.
Os estereoisómeros específicos de algumas das estruturas são ilustrados nos gráficos 1-6; no entanto, todos os estereoisómeros são utilizados nas sínteses dos compostos 1 a 13. Subsequentes modificações químicas para os compostos 1 a 10, tal como aqui descrito, permitem a síntese dos compostos finais da presente invenção.
Os compostos intermediários 1 a 10 incorporam um radical fosfonato (R10)2P(O) ligado ao núcleo por meio de um grupo de ligação variável designado por "link" nas estruturas anexas. Os gráficos 7 e 8 ilustram exemplos dos grupos de ligação presentes nas estruturas 1-10.
Os esquemas 1 a 99 ilustram a síntese dos compostos fosfonato intermediários da presente invenção, 1-10, e dos compostos intermediários necessários para sua síntese. A preparação dos ésteres de fosfonato 11, 12 e 13, em que o radical fosfonato é incorporado num dos grupos R4, R3 e R2, respectivamente, também se encontra descrita a seguir. 108 Gráfico 1 Η a s OM 8* 0 v„ T /ív U *v- s 3 ! YNy^S; Η 5H f * V^Ny-S^tf i^l^íÔKOB^
imk^fQ)(oa^ aii O «* U gH ** f* st » “ ? «
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l V
X R1 = H, alquilo, haloalquilo, alcenilo, aralquilo, arilo X = S ou ligação directa R5 = alquilo, CH2S02CH3, C (CH3) 2S02CH3, CH2CONH2, CH2SCH3, imidaz-4-ilmetilo, CH2NHAc, CH2NHCOCF3, terc-butilo 109 Gráfico 2
o
H H fH f NV'·^-./^^ ί'ΡΐΟϊίΟΏΙϊ
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í %S-:J 10 H 9« f H §H S** yv^ ®γ«χΑΑ^ Ô γ q kc Jx A kJ kj i®5, — R^ que contém fosfonato R?4 »R® que contém fosfonato 13 ia H OH pf O ix
R43 * R4 que contém fosfonato 11 R1 = H, alquilo, haloalquilo, alcenilo, aralquilo, arilo X = S ou ligação directa R5 = alquilo, CH2S02CH3, C (CH3) 2S02CH3, CH2C0NH2, CH2SCH3, imidaz-4-ilmetilo, CH2NHAc, CH2NHCOCF3, terc-butilo 110
Gráfico 3 - Estruturas que contêm os componentes R2-NH2
Gráfico 4 - Estruturas que contêm os componentes R-Cl
O O cr &
qp \vé
111
Gráfico 5a - Estruturas dos componentes R4-COOH
R5 = alquilo, CH2S02CH3, C (CH3) 2S02CH3, CH2CONH2, CH2SCH3, imidaz-4-ilmetilo, CH2NHAc, CH2NHCOCF3í terc-butilo
112Gráfico 5b - Estruturas dos componentes R4-COOH
R5 = alquilo, CH2S02CH3, C (CH3) 2S02CH3, CH2CONH2, CH2SCH3, imidaz-4-ilmetilo, CH2NHAc , CH2NHCOCF3, terc-butilo 113
Gráfico 5c - Estruturas dos componentes R4-COOH 113
¢4¾ mi 044 cm Sjí XX> BQ G 0 hct -o HcAq^’ C48 047 C4S C4t
Gráfico 6 - Estruturas dos componentes R9-CH2NH2
X
X = F, Br. Cl; Y = H, F, Br. Cl 114 Gráfico 7 fite. ligação directa
OH ...NNete r etex carbono único I τ•yVS A l m n
X P|0}|OR%. múltiplos carbonos - l! 1 fo 5 (rrofepjp^. .-^te
O heter oãt omo |Ssoyo^. o. 9 vtc..
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Xí^ «KHstei yv^PfOKOR1»* 115
Gráfico 8 115 aiilo
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/*“P{OÍ(OR^g
HHefc h íimitlíi
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Protecção de substituintes reactivos
Dependendo das condições de reacção utilizadas, pode ser necessário proteger alguns substituintes reactivos de reacções indesejadas por protecção antes da sequência descrita, e desproteger os substituintes depois, de acordo com o conhecimento dos especialistas na matéria. Protecção 116 e desprotecção de grupos funcionais são descritas, por exemplo, em 'Protective Groups in Organic Synthesis', por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, segunda edição 1990 ou terceira edição 1999. Substituintes reactivos que podem ser protegidos são mostrados nos esquemas anexos como, por exemplo, [OH], [SH], etc..
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 1, em que X é uma ligação directa.
Os intermediários de ésteres de fosfonato 1, em que o grupo A está ligado ao radical arilo, o grupo R4COOH não contém uma amina secundária e, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH] , Br, etc., são preparados como ilustrado nos esquemas 1-2. O epóxido 1.1, em que o substituinte A é o grupo link-P(0) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, é preparado como descrito nos esquemas 56-59, infra. Tratamento do epóxido 1.1 com amina 1.2 proporciona amino-álcool 1.3. A preparação de aminoálcoois por reacção entre uma amina e epóxido é descrita, por exemplo, em Advanced Organic Chemistry, por J. March, McGraw Hill, 1968, pág. 334. Num procedimento típico, quantidades equimolares dos reagentes são combinadas num solvente polar, como um álcool ou dimetilformamida e outros, entre a temperatura ambiente e cerca de 100°C, durante 1 a 24 horas, para se obter o produto 1.3. O amino-álcool 1.3 é então tratado com agente de acilação 1.4 para se obter o produto 1.5. O agente de acilação é tipicamente um cloroformato ou um cloreto de sulfonilo, como ilustrado no gráfico 4. Condições de acoplamento para aminas com cloreto de sulfonilo estão descritas em Protective Groups in Organic Synthesis, por 117 T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Terceira edição 1999 págs. 603-615, ou para cloroformatos, p494ff. De preferência, a amina 1.3 é tratada com cloreto de sulfonilo 1.4, na presença de uma base, tal como piridina, carbonato de potássio, etc., e THF/água para se obter o produto 1.5. Produto 1.5 é desprotegido, utilizando condições descritas em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Terceira edição 1999 p. 503ff. De preferência, a BOC-amina é tratada com TFA num solvente aprótico, tal como THF. Conversão em amida 1.8 é realizada, utilizando condições convencionais de acoplamento entre um ácido 1.7 e a amina. A preparação de amidas a partir de ácidos carboxilicos e derivados é descrita, por exemplo, em Organic Functional Group Preparations, por S.R. Sandler e W. Karo, Academic Press, 1968, pág. 274. O ácido carboxilico é reagido com amina, na presença de um agente de activação, tal como, por exemplo, diciclo-hexilcarbodiimida ou diisopropilcarbodiimida, facultativamente na presença, por exemplo, de hidroxi-benzotriazol, num solvente não prótico, tal como, por exemplo, piridina, DMF ou diclorometano, para se obter a amida.
Em alternativa, o ácido carboxilico pode ser primeiro convertido num derivado activado, como o cloreto ou anidrido de ácido, e então reagido com amina, na presença de uma base orgânica, tal como, por exemplo, piridina, para se obter a amida. A conversão de um ácido carboxilico no correspondente cloreto de ácido é efectuada por tratamento do ácido carboxilico com um reagente, tal como, por exemplo, cloreto 118 de tionilo ou cloreto de oxalilo, num solvente orgânico inerte, como diclorometano.
De preferência, o ácido carboxilico 1.7 é reagido com uma quantidade equimolar da amina 1.6, na presença de diciclo-hexilcarbodiimida e hidroxi-benzotriazol, num solvente aprótico, tal como, por exemplo, tetrahidrofurano, a cerca da temperatura ambiente, para se obter o produto amida 1.8. 0 composto 1.8 e os produtos análogos de acilação descritos adiante, em que o ácido carboxilico R4COOH é um dos derivados de ácido carbónico C38-C49, como definido no Gráfico 5c, são carbamatos. Métodos para a preparação de carbamatos são descritos adiante, Esquema 98.
Esquema 2 ilustra um método alternativo para a preparação de intermediários ésteres de fosfonato 1, em que o grupo A está ligado ao radical arilo, o grupo R4COOH não contém uma amina secundária e, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. A oxazolidinona 2.1, preparada como descrito nos esquemas 60-62, é primeiro activada, como ilustrado em 2.2, e então tratada com amina 1.2 para se obter uma amina secundária 2.3. O grupo hidroxilo pode ser activado por conversão num derivado de bromo, por exemplo, por reacção com trifenilfosfina e tetrabrometo de carbono, como descrito em J. Am. Chem. Soc. 92, 2139, 1970, ou um derivado de metanossulfoniloxi, por reacção com cloreto de metanossulfonilo e uma base ou, preferencialmente, no derivado 4-nitrobenzenossulfoniloxi 2.2, por reacção num solvente, tal como acetato de etilo ou tetrahidrofurano, com cloreto de 4-nitrobenzenossulfonilo e uma base, tal como trietilamina ou N-metilmorfolina, como descrito em WO9607642. O produto nosilato 2.2 é então reagido com o 119 componente amina 1.2 para se obter o produto de deslocamento 2.3. Quantidades equimolares dos reagentes são combinados num solvente inerte, tal como dimetilformamida, acetonitrilo ou acetona, facultativamente na presença de uma base orgânica ou inorgânica, tal como trietilamina ou carbonato de sódio, entre cerca de 0°C e 100°C, para se obter o produto amina 2.3. De preferência, a reacção é realizada em metil-isobutil-cetona a 80°C, na presença de carbonato de sódio, como descrito em WO 9607642. Tratamento do produto amina 2.3 com cloreto de R3 1.4, como descrito no esquema 1, proporciona então o produto 2.4. O grupo oxazolidinona presente no produto 2.4 é então hidrolisado para se obter a hidroxi-amina 2.5. A reacção de hidrólise é efectuada, na presença de solução aquosa de uma base, tal como um hidróxido de metal alcalino, facultativamente na presença de um co-solvente orgânico. De preferência, o composto oxazolidinona 2.4 é reagido com hidróxido de sódio etanólico aquoso, à temperatura de refluxo, como descrito em WO 9607642, para se obter a amina 2.5. Este produto é então reagido com o ácido carboxílico R4COOH ou seu derivado activado 1.7 para se obter o produto 1.8. A reacção de formação de amida é efectuada nas mesmas condições descritas antes (Esquema 1).
Esquema 1 120 Η JO, tBuOv_ JL· «yk. o '
HS:N 13
O H OH ψ ff tBtfO.
13 :H ÇH f O s
1,7 R^OOOH QH ψ u
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Esquema 2 Q,/H HNY^CHgOH O. •^ΛνΑ^Λϊ0í
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Esquema 3 ilustra a preparação de ésteres de fosfonato intermediários 1, em que o grupo A está ligado ao radical
arilo e o grupo R4COOH contém uma amina secundária e, em que o substituinte A é 0 grupo link-P (0) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH] , [SH] , [NH], Br, etc.. A 121 dibenzilamina 3.2 é preparada a partir de epóxido 3.1 e amina 1.2, de acordo com os mesmos procedimentos descritos no Esquema 1 para a preparação de 1.3. Epóxido 3.1 é preparado como descrito adiante nos esquemas 56a. A amina 3.2 é então convertida na amina 3.4, como descrito em US6391919. De preferência, a amina é primeira protegida como o BOC carbamato e então tratada com hidróxido de paládio sobre carvão (20%) em metanol, sob hidrogénio a pressão elevada, para se obter a amina 3.4. Tratamento de 3.4 com ácido R4COOH 1.7 que contém uma . amina secundária ou primária, sob condições convencionais de formação de ligações amida, como descrito antes no Esquema 1, proporciona então a amida 3.5. De preferência, o ácido 1.7, EDC e N-hidroxibenzotriazole em DMF é tratado com amina 3.4 para se obter a amida 3.5. Remoção do grupo BOC, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Terceira edição 1999 p. 520-525 proporciona então a amina 3.6. De preferência, a amina BOC 3.5 é tratada com HC1 em dioxano e água para se obter a amina livre 3.6. A amina 3.6 é então tratada com um agente de acilação, tal como um ácido, cloroformato ou cloreto de sulfonilo, para se obter o produto final 1.8. As condições de acoplamento convencionais para aminas com ácidos ou cloreto de sulfonilo estão indicadas antes no Esquema 1. De preferência, a amina 3.6 é tratada com cloreto de nitro-sulfonilo em THF e água, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, para se obter sulfonamida 1.8.
As reacções apresentadas nos Esquemas 1-3 ilustram a preparação do composto 1.8, em que o substituinte A é o grupo link-P(0)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], 122 [NH], Br, etc.. Esquema 4 mostra a conversão de 1.8, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., no éster de fosfonato 1, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, 1.8 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 1. Também, nos esquemas precedentes e seguintes, os reagentes de sulfonamida substituída com amino são tipicamente introduzidos como reagentes nitro-sulfonamida. Assim, sempre que adequado, o passo suplementar de redução de grupo nitro, como descrito em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, 2a Ed, 1999, p.821 ff, é realizado para se obter produtos amino finais.
Esquema 3
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3.2 O Síi OH ψ s 3.3
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123 Esquema 4
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Esquema 5 ilustra um método alternativo para a preparação do composto 1, em que o grupo A está ligado ao radical arilo, o grupo R4COOH contém uma amina primária ou secundária e, em que o substituinte A é o grupo link-P(0)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc.. A amina 3.4 (Esquema 3) é tratada com aminoácido 5.1 sob condições típicas de formação de ligação amida para se obter a amida 5.2, como descrito antes, Esquema 1. De preferência, o ácido 5.1 é primeiro tratado com EDO e n-hidroxi-benzotriazol em DMF e então a amina 3.4 é adicionada em DMF, seguido por N-metilmorfolina para se obter a amida 5.2. Redução de amida sob as 5 mesmas condições de hidrogenação catalítica, como descrito antes no Esquema 3, proporciona a amina livre 5.3. A amina é ainda tratada com cloreto de cloro-acetilo para proporcionar o composto de cloro 5.4. De preferência, tratamento com cloreto de cloroacetilo é realizado em acetato de etilo e água, na presença de uma base, tal como hidrogeno-carbonato de potássio. 0 composto de cloro 5.4 é tratado com ácido clorídrico em dioxano e acetato de etilo para se obter sal da amina livre 5.5. 0 sal 5.5 é então tratado com cloreto de nitro-sulfonilo 1.4 em THF e água, 124 na presença de uma base, tal como carbonato de potássio para se obter sulfonamida 5.6. Em alternativa, a amina livre 5.5 é tratada com cloro-formato 1.4, na presença de uma base, tal como trietilamina para se obter carbamato. Métodos para a preparação de carbamatos são também descritos adiante, Esquema 98. Composto 5.6 é então tratado com amina 5.7 para se obter amina secundária 5.8. De preferência, o cloreto é refluxado na presença da amina 5.7 em THF.
As reacções apresentadas no Esquema 5 ilustram a preparação do composto 5.8, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH] , Br, etc.. Esquema 6 mostra a conversão de 5.8, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., no éster de fosfonato 1, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, 5.8 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 1.
Nos esquemas precedentes e seguintes, a conversão de vários substituintes no grupo link-P(0) (OR1) 2 pode ser efectuada em qualquer fase conveniente da sequência de síntese ou no passo final. A selecção de um passo adequado para a introdução do substituinte fosfonato é feita após consideração dos procedimentos químicos requeridos e a estabilidade dos substratos a estes procedimentos. Pode ser necessário proteger grupos reactivos, por exemplo, hidroxilo, durante a introdução do grupo link-P(0) (OR1) 2-
Nos exemplos precedentes e sucessivos, a natureza do grupo de éster de fosfonato pode variar, antes ou depois da incorporação na estrutura, por meio de transformações químicas. As transformações e os métodos pelos quais são realizadas estão descritos adiante (Esquema 99). 125 Es<Iuema 5
1.4
Esquema 6
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 1, em que X é um átomo de enxofre
Os ésteres de fosfonato intermediários 1, em que X é enxofre, o grupo R4COOH não contém um grupo amina e, em que substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., são preparados como ilustrado nos esquemas 7-9. 126
Esquema 7 ilustra um método para preparação dos compostos 1, em que o substituinte X é S, e, em que o grupo A é o grupo link-P(O) (OR1^ ou um seu precursor, tal como [OH], [SH], Br, etc.. Nesta sequência, éster 2-benzoiloxicarbonilamino-2-(2,2-dimetil-[1,3]dioxolano-4-il)-etílico do ácido metanossulfónico 7.1, preparado como descrito em J. Org. Chem, 2000, 65, 1623, é reagido com tiol 7.2 para se obter o tioéter 7.3. A preparação de tiol 7.2 é descrita nos esquemas 63-72. A reacção é efectuada num solvente adequado como, por exemplo, piridina, DMF e outros, na presença de uma base inorgânica ou orgânica, entre 0°C e 80°C, durante 1-12 horas, para se obter o tioéter 7.3. De preferência, o mesilato 7.1 é reagido com uma quantidade equimolar do tiol, numa mistura de solvente orgânico imiscível em água como tolueno, e água, na presença de um catalisador de transferência de fase, como, por exemplo, brometo de tetrabutil-amónio, e uma base inorgânica, tal como hidróxido de sódio, a cerca de 50°C, para se obter o produto 7.3. O grupo de protecção 1,3-dioxolano presente no composto 7.3 é então removido por hidrólise catalisada por ácido ou por permuta com um composto carbonilo reactivo para se obter o diol 7.4. Métodos para conversão de 1,3-dioxolanos em correspondente dióis são descritos em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Segunda edição 1990, pl91. Por exemplo, o composto 1,3-dioxolano 7.3 é hidrolisado por reacção com uma quantidade catalítica de um ácido numa mistura de solvente orgânico aquoso. De preferência, o 1,3-dioxolano 7.3 é dissolvido em metanol aquoso contendo ácido clorídrico e aquecido a cerca de 50°C para se obter o produto 7.4. O grupo hidroxilo primário do 127 diol 7.4 é então selectivamente acilado por reacção com um halogeneto de acilo de remoção de electrões, como, por exemplo, cloreto de pentafluorobenzoílo ou cloreto de mono-ou di-nitrobenzoílo. A reacção é efectuada num solvente inerte, tal como diclorometano e outros, na presença de uma base inorgânica ou orgânica.
De preferência, quantidades equimolares do diol 7.4 e cloreto de 4-nitrobenzoílo são reagidas num solvente, tal como acetato de etilo, na presença de uma base orgânica terciária, tal como 2-picolina, à temperatura ambiente, para se obter o éster hidroxi 7.5. 0 éster hidroxi é a seguir reagido com um cloreto de sulfonilo como cloreto de metanossulfonilo, cloreto de 4-toluenossulfonilo e outros, na presença de uma base, num solvente polar aprótico, a baixa temperatura, para se obter o correspondente éster de sulfonilo 7.6. De preferência, quantidades equimolares do carbinol 7.5 e cloreto de metanossulfonilo são reagidas em conjunto em trietilamina contendo acetato de etilo, a cerca de 10°C, para se obter o mesilato 7.6. O composto 7.6 é então submetido a uma reacção de ciclização-hidrólise para se obter o oxirano 7.7. O mesilato ou grupo removível análogo presente em 7.6 é deslocado por ião hidróxido, e o carbinol assim produzido, sem isolamento, transforma-se espontaneamente no oxirano 7.7 com eliminação de 4-nitrobenzoato. Para efectuar esta transformação, o éster de sulfonilo 7.6 é reagido com um hidróxido de metal alcalino ou hidróxido de tetra-alquilamónio num solvente orgânico aquoso. De preferência, o mesilato 7.6 é reagido com hidróxido de potássio em dioxano aquoso, à temperatura ambiente, durante cerca de 1 hora, para se obter o oxirano 7.7. 128 0 composto oxirano 7.7 é então submetido a reacção de abertura de anel regiospecífica por tratamento com uma amina secundária 1.2, para se obter aminoálcool 7.8. A amina e o oxirano são reagidos num solvente orgânico prótico, facultativamente na presença adicional de água, entre 0°C e 100°C, na presença de uma base inorgânica, durante 1 a 12 horas, para se obter o produto 7.8. De preferência, quantidades equimolares dos reagentes 7.7 e 1.2 são reagidas em metanol aquoso a cerca de 60°C, na presença de carbonato de potássio, durante cerca de 6 horas, para se obter aminoálcool 7.8. A amina livre é então substituída por tratamento com ácido, cloroformato ou cloreto de sulfonilo, como descrito antes no Esquema 1 para se obter a amina 7.9. O grupo de protecção carbobenziloxi (cbz) no produto 7.9 é removido para se obter a amina livre 7.10. Métodos para remoção de grupos cbz são descritos, por exemplo, em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Segunda edição, pág. 335. Os métodos incluem hidrogenação catalítica e hidrólise básica ou ácida. Por exemplo, a amina protegida com cbz 7.9 é reagida com hidróxido de metal alcalino ou alcalino-terroso, num solvente aquoso orgânico ou alcoólico, para se obter a amina livre 7.10. De preferência, o grupo cbz é removido por reacção de 7.9 com hidróxido de potássio num álcool, tal como isopropanol, a cerca de 60 °C, para se obter a amina 7.10. A amina 7.10, assim obtida, é a seguir acilada com um ácido carboxílico ou derivado activado 1.7, utilizando as condições descritas antes no Esquema 1 para se obter o produto 7.11.
Esquema 7 129
Esquema 8 ilustra uma preparação alternativa dos compostos 1, em que o substituinte X é S, e, em que o grupo A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um seu precursor, tal como [OH], [SH] Br, etc.. Nesta sequência, 4-amino-tetra-hidro-furan-3-ol, 8.1, cuja preparação é descrita em Tet. Lett., 2000, 41, 7017, é reagido com um ácido carboxilico ou seu derivado activado, R4COOH, 1.7, utilizando as condições descritas antes para Esquema 1 para a preparação de amidas, para se obter a amida 8.2. O produto amida 8.2 é então transformado, utilizando a sequência de reacções ilustrada no Esquema 8, no composto isoxazolina 8.5. O grupo hidroxilo no radical tetrahidrofurano em 8.2 é convertido num grupo removível como p-toluenosulfonilo ou outros, por 130 reacção com um cloreto de sulfonilo num solvente aprótico, tal como piridina ou diclorometano. De preferência, hidroxi-amida 8.2 é reagida com uma quantidade equimolar de cloreto de metanossulfonilo em piridina, à temperatura ambiente, para se obter éster de metanossulfonilo 8.3. O produto 8.3, contendo um grupo removível adequado de éster sulfonílico, é então submetido a rearranjo catalisado por ácido para se obter isoxazolina 8.4. Uma reacção de rearranjo é efectuada, na presença de um agente de acilação, tal como anidrido carboxílico, na presença de um catalisador de ácido forte. De preferência, o mesilato 8.3 é dissolvido em agente de acilação como anidrido acético a cerca de 0°C, na presença de cerca de 5% molar do ácido forte, como ácido sulfúrico, para se obter mesilato de isoxazolina 8.4. O grupo removível, por exemplo, um grupo mesilato é a seguir submetido a uma reacção de deslocamento com amina. O composto 8.4 é reagido com uma amina 1.2, como definido no Gráfico 3, em solvente prótico, tal como um álcool, na presença de uma base orgânica ou inorgânica, para se obter o produto de deslocamento 8.5. De preferência, o composto mesilato 8.4 é reagido com uma quantidade equimolar da amina 1.2, na presença de um excesso de uma base inorgânica, tal como carbonato de potássio, à temperatura ambiente, para se obter o produto 8.5. O produto 8.5 é então tratado com R3C1, gráfico 6, como descrito antes no Esquema 1 para se obter amina 8.6. O composto 8.6 é então reagido com tiol 7.2 para se obter o tioéter 7.11. A reacção é efectuada num solvente polar, tal como DMF, piridina ou um álcool, na presença de uma base orgânica ou inorgânica fraca, para se obter o produto 7.11. De preferência, isoxazolina 8.6 é reagida, em metanol, com 131 uma quantidade equimolar do tiol 7.2, na presença de um excesso de uma base, tal como bicarbonato de potássio, à temperatura ambiente, para se obter o tioéter 7.11.
Os procedimentos ilustrados em Esquema 7-8 mostram a preparação dos compostos 7.11, em que X é S e, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (0R1)2 ou um seu precursor, tal como [OH], [SH] Br, etc., como adiante se descreve. Esquema 9 ilustra a conversão de compostos 7.11, em que A é um precursor para o grupo link-P(O) (OR1) 2 no composto 1, em que X=S. Procedimentos para a conversão do substituinte A no grupo link-P(0) (OR1)2 são ilustrados adiante (Esquemas 47 - 99).
Esquema 9a-9b mostra a preparação de ésteres de fosfonato 1, em que X é enxofre, o grupo R4COOH não contém um grupo amina, e, em que substituinte A é o grupo link-P(0) (0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. A amina 7.10 preparada no Esquema 7 é tratada com amina protegida com CBZ 5.1, utilizando as mesmas condições descritas no Esquema 5 para a preparação de 5.2 para se obter CBZ amina 9a.1. Remoção do grupo CBZ, como descrito no esquema 5 para se obter 9a.2 seguido por tratamento com cloreto de cloroacetilo, como descrito no esquema 5 proporciona 0 cloreto 9a.3. 0 cloreto 9a.3 é então tratado com amina 5.7 para se obter a amina 9a.4, como descrito no esquema 5.
As reacções apresentadas no Esquema 9a ilustram a preparação do composto 9a.4, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 9b mostra a conversão de 9a. 4, em que A é [OH], [SH], [NH] , Br, etc., no éster de fosfonato 1, em que X é enxofre. Neste procedimento, 9a.4 é 132 convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 1.
Esquema 8 , H 0 92
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Esquema 9
Esquema 9a 133
Esquema 9b
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 2 e 3, em que X é uma ligação directa
Esquemas 10-12 ilustram a preparação dos ésteres de fosfonato 2 e 3, em que X é uma ligação directa e o grupo R4COOH não contém um grupo amina primária ou secundária. Conforme ilustrado no esquema 10, o epóxido 10.1, preparado como descrito em J. Med. Chem 1994, 37, 1758 é reagido com amina 10.2 ou 10.5, em que 0 substituinte A é 0 grupo link-P (0) (OR1) 2 OU um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., para se obter a amina 10.3 e 10.6, respectivamente. A 134 reacção é realizada sob as mesmas condições descritas antes, Esquema 1 para preparação da amina 1.3. A preparação das aminas 10.2 é descrita nos esquemas 73-75 e aminas 10.5 em Esquemas 76-78. Os produtos 10.3 e 10.6 são então transformados, utilizando a sequência de reacções descrita antes, Esquema 1, para a conversão da amina 1.3 numa amida 1.8, em aminoamida 10.4 e 10.7, respectivamente.
Uma via alternativa para as aminas 10.4 e 10.7 é como ilustrado no Esquema 11, em que o éster de sulfonilo 11.1, preparado de acordo com Chimia 1996, 50, 532, é tratado sob as condições descritas no Esquema 2 com aminas 10.2 ou 10.5 para se obter aminas 11.2 ou 11.3, respectivamente.
Estes produtos amina são então convertidos, como descrito antes, Esquema 2, nas amidas 10.4 e 10.7, respectivamente.
As reacções apresentadas no Esquema 10 e 11 ilustram a preparação dos compostos 10.4 e 10.7, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1^ ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 12 mostra a conversão destes compostos 10.4 e 10.7, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., nos ésteres de fosfonato 2 e 3, respectivamente, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, as aminas 10.4 e 10.7 são convertidas, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, nos compostos 2 e 3, respectivamente.
Esquema 10 135 19.2 η $Η r η §« f /
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Esquema 11
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19.7
Esquema 12 136
Esquemas 13-14 ilustram a preparação dos ésteres de fosfonato 2 e 3, em que X é uma ligação directa e o grupo R4COOH contém uma amina. 0 epóxido 13.1, preparado como descrito em US 6391919B1 ou J. Org. Chem. 1996, 61, 3635, é reagido, como descrito antes (Esquema 1), com amina 10.2 ou 10.5, em que substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., para se obter amino-álcoois 13.2 e 13.4, respectivamente. Estas aminas são então convertidas, como descrito no esquema 3 para a conversão de 3.2 em 3.4 e Esquema 5 para a conversão de 3.4 em 5.8, nos produtos amina 13.3 e 13.5, respectivamente.
As reacções apresentadas no Esquema 13 ilustram a preparação dos compostos 13.3 e 13.5, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 14 mostra a conversão dos compostos 13.3 e 13.5, em que A é [OH], [SH] , [NH] , Br, 137 etc., nos ésteres de fosfonato 2 e 3, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, os compostos 13.3 e 13.5 são convertidos, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 2 e 3, respectivamente.
Esquema 13
Esquema 14
138
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 2 e 3, em que X é um átomo de enxofre
Os ésteres de fosfonato intermediários 2 e 3, em que o grupo A está fixado ao radical arilo ligado a enxofre e o grupo R4COOH não contém um grupo amina, são preparados como ilustrado nos esquemas 15-17. No Esquema 15, epóxido 15.1 é preparado a partir de mesilato 7.1, utilizando as condições descritas no Esquema 7 para a preparação de 7.7 a partir de 7.1., excepto incorporando tiofenol para tiol 7.2. 0 epóxido 15.1 é então tratado com amina 10.2 ou amina 10.5, em que substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1^ ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., como descrito no esquema 7, para se obter aminas 15.2 e 15.4. Outra aplicação de Esquema 7 às aminas 15.2 e 15.4 produz os álcoois 15.3 e 15.5, respectivamente. Em alternativa, Esquema 16 mostra a preparação de 15.3 e 15.5, utilizando o mesilato 8.4. As aminas 10.2 e 10.5 são reagidas com mesilato 8.4 sob as condições descritas no Esquema 8 para se obter aminas 16.1 e 16.2, respectivamente. Outra modificação de 16.1 e 16.2, de acordo com as condições descritas no Esquema 8, proporciona álcoois 15.3 e 15.5, respectivamente.
As reacções apresentadas nos Esquemas 15-16 ilustram a preparação dos compostos 15.3 e 15.5, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 17 mostra a conversão de 15.3 e 15.5, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., no éster de fosfonato 2 e 3, em que X é enxofre. Neste procedimento, 15.3 ou 15.5 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, nos compostos 2 e 3. 139 Esquema 15
A
Esquema 17 140 Ο
15.5
Esquemas 18-19 mostram a preparação de ésteres de fosfonato 2 e 3, em que o grupo A está ligado ao radical arilo ligada a enxofre, e o grupo C4COOH contém um grupo amina. As aminas 15.2 e 15.4, em que substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., preparado no Esquema 15, são convertidas, utilizando as mesmas condições descritas no Esquema 7 para preparação da amina 7.10 a partir de 7.8 e Esquema 9a para a preparação de 9a.4 a partir de 7.10 para se obter 18.1 e 18.2, respectivamente.
As reacções apresentadas no Esquema 18 ilustram a preparação do composto 18.1 e 18.2, em que o substituinte A é o grupo link-P (O) (OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 19 mostra a conversão de 18.1 e 18.2, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., no éster de fosfonato 2 e 3, respectivamente, em que X é enxofre. Neste 141 procedimento, 18.1 e 18.2 são convertidos, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, nos compostos 2 e 3.
Esquema 18
Esquema 19
142
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 4, em que X é uma ligação directa
Esquemas 20-22 ilustram a preparação dos ésteres de fosfonato 4, em que X é uma ligação directa e o grupo R não contém um grupo amina primária ou secundária. Conforme ilustrado no esquema 20, a amina 20.1 é reagida com cloreto de sulfonilo 20.2, em que o substituinte A é o grupo link-P(0)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., para se obter o produto 20.3. A reacção é realizada sob as mesmas condições descritas antes, Esquema 1 para preparação da sulfonamida 1.5. A amina 20.1 é preparada por tratamento de epóxido 10.1 com amina 1.2, como descrito no esquema 1 para a preparação de 1.3. A preparação de cloreto de sulfonilo 20.2 é descrita nos esquemas 92-97. O produto 20.3 é então transformado, utilizando a sequência de reacções descrita antes no Esquema 1 para a conversão de amida 1.5 numa amida 1.8, no produto 20.4.
Uma via alternativa para o produto 20.4 está ilustrada no Esquema 21, em que amina 11.1 é tratada sob as condições descritas no Esquema 2 com amina 1.2 para se obter a amina 21.1. A amina 21.1 é então sulfonilada com 20.2, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH], Br, etc., como descrito no esquema 2, para se obter o produto 21.2. 0 produto 21.2 é então convertido como descrito antes no Esquema 2, na sulfonamida 20.4.
As reacções apresentadas nos Esquemas 20 e 21 ilustram a preparação do composto 20.4, em que o substituinte A é o grupo link-P(0) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 22 mostra a conversão deste composto 20.4, em que A é [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., nos 143 ésteres de fosfonato 4, respectivamente, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, as aminas 20.4 são convertidas, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 4.
Esquema 20
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20.4 ma
Esquema 21
Esquema 22
Esquema 23 ilustra a preparação dos ésteres de fosfonato 4, em que X é uma ligação directa e o grupo R4COOH contém um grupo amina. A amina 23.1, preparada a partir do epóxido 13.1 e uma amina 1.2, como descrito no esquema 13 para a síntese de 13.2 a partir de 13.1, é 144 reagida com cloreto de sulfonilo 20.2, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH] , Br, etc., como descrito nos esquemas 1 para a síntese de 1.5, para se obter o produto 23.2. O produto 23.2 é então reduzido em amina 23.3 de acordo com as condições descritas no Esquema 3 para a preparação de 3.4 a partir de 3.3. O produto amina é então convertido, como descrito no esquema 5 no cloreto 23.4. O cloreto é tratado com amina 5.7 para se obter amina 23.5, como descrito no esquema 5 para a preparação de 5.8 a partir de 5.7.
As reacções apresentadas no Esquema 23 ilustram a preparação do composto 23.5, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH] , Br, etc.. Esquema 24 mostra a conversão do composto 23.5, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., nos ésteres de fosfonato 4, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, o composto 23.5 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 4.
Esquema 23 145
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23.¾
Esquema 24 O fi®
χ^:
aYtYX rft
H
4
23.S
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 4, em que X é um átomo de enxofre 0 éster de fosfonato intermediário 4, em que o grupo A está ligado ao radical arilo ligada a enxofre e o grupo R4COOH não contém uma amina é preparado como ilustrado nos Esquemas 25-27. Amina 25.1 preparada a partir de epóxido 15.1 e amina 1.2, como descrito no esquema 15 é tratada com sulfonamida 20.2, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., utilizando as condições descritas no Esquema 7, para se obter sulfonamida 25.2. A sulfonamida 25.2 é convertida, como descrito no esquema 7 para a conversão de 7.9 em 7.10, e Esquema 9a para a conversão de 7.10 em 9a.4, no produto 146 25.3. Em alternativa, Esquema 26 ilustra como uma amina 8.5 preparada de acordo com Esquema 8 é reagida com 20.2 sob as condições descritas no Esquema 8 para a preparação de 8.6 a partir de 8.5, para se obter sulfonamida 26.1. Outra modificação de acordo com as condições descritas no Esquema 8 para a preparação de 7.11, proporciona sulfonamida 25.3.
As reacções apresentadas nos Esquemas 25-26 ilustram a preparação dos compostos sulfonamida 25.3, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1^ ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 27 mostra a conversão de 25.3, em que A é [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., no fosfonato 4, em que X é enxofre. Neste procedimento, 25.3 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 4.
Preparação de éster de fosfonato intermediário 4, em que o grupo A está fixado ao radical arilo ligado a enxofre e o grupo R4COOH contém uma amina, é tal como ilustrada nos esquemas 28-29. A amina 25.2 (Esquema 25), em que o substituinte A é o grupo link-P (O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., é convertida em 28.1, como descrito no esquema 7 para preparação da amina 7.10 a partir de 7.9 e no Esquema 9a para a preparação de 9a. 4 a partir de 7.10.
As reacções apresentadas no Esquema 28 ilustram a preparação dos compostos sulfonamida 28.1, em que o substituinte A é o grupo link-P(0)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 29 mostra a conversão de 28.1, em que A é [OH], [SH] , [NH], Br, etc., no fosfonato 4, em que X é enxofre. Neste procedimento, 28.1 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 4. 147 Esquema 25
Esquema 26
2SJ 4 148 Esquema 28
Esquema 29
4
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 5, em que X é uma ligação directa
Esquema 30 ilustra a preparação dos ésteres de fosfonato, em que X é uma ligação directa e o grupo R não contém um grupo amina primária ou secundária. Conforme ilustrado no esquema 30, a amina 23.1 (Esquema 23) é reagida com o álcool 30.1, em que o substituinte A é o 149 grupo link-P(0) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH] , Br, etc., para se obter o carbamato 30.2. A reacção é realizada sob as condições descritas adiante, Esquema 98, para preparar carbamatos a partir de aminas e álcoois. A preparação do 30.1 é descrita nos esquemas 83-86. O carbamato 30.2 é então desprotegido, utilizando condições descritas no Esquema 3 para remoção de grupos de benzilo ara dar 30.3. Tratamento de 30.3 com R4COOH ácido 1.7, utilizando as condições descritas no Esquema 1, proporciona então a amida 30.4.
As reacções apresentadas no Esquema 30 ilustram a preparação do composto 30.4, em que o substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 31 mostra a conversão deste compostos 30.4, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., nos ésteres de fosfonato 5, respectivamente, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, a amina 30.4 é convertida, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 5.
Esquema 32 ilustra a preparação dos ésteres de fosfonato, em que X é uma ligação directa e o grupo R4COOH
contém uma amina. 0 carbamato 30.2, em que o substituinte A é 0 grupo link-P (0) (OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., é convertido no cloreto de 32.1, utilizando as condições descritas no esquema 9a. Cloreto 32.1 é então tratado com amina 5.7 para se obter a amina 32.2, como descrito no esquema 9a para a conversão de 7.10 em 9a.3.
As reacções apresentadas no Esquema 32 ilustram a preparação do composto 32.2, em que o substituinte A é o grupo link-P(0)(OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], 150 [ΝΗ], Br, etc.. Esquema 33 mostra a conversão do composto 32.2, em que A é [OH], [SH] , [NH], Br, etc., nos ésteres de fosfonato 5, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, o composto 32.2 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 5. 150 Esquema 30 ψί m f
......... •'.'iV'·"·^Ό· . H QM
h4cooh \ 1J ís.1 mi um 30.4
Esquema 31 . Η ψ* f H ff
Esquema 32
151
Esquema 33
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 5, em que X é um átomo de enxofre 0 éster de fosfonato intermediário 5, em que o grupo A está ligado ao radical arilo ligada a enxofre, é preparado como ilustrado no Esquemas 34-36. Amina 25.1, preparada de acordo com Esquema 25, é tratada com álcool 30.1, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., utilizando as condições descritas adiante, Esquema 98, para se obter o carbamato 34.1. O carbamato 34.1 é então convertido, como descrito no esquema 7 para a conversão de 7.9 em 7.11, no produto 34.2. Em alternativa, a amina 8.5, preparada de acordo com Esquema 8, pode ser reagida com um álcool 30.1 sob as condições descritas no Esquema 98 para se obter o carbamato 35.1. Outra modificação de acordo com as condições descritas no Esquema 8, excepto incorporando tiofenol, proporciona então sulfonamida 34.2.
As reacções apresentadas nos Esquemas 34-35 ilustram a preparação dos compostos sulfonamida 34.2, em que o substituinte A é o grupo link-P(0) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 36 mostra a conversão de 34.2, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., no fosfonato 5, em que X é enxofre. Neste procedimento, 34.2 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 5. 152 A preparação de éster de fosfonato intermediário 5, em que o grupo A está ligado no radical arilo ligado a enxofre e o grupo R4COOH contém uma amina, é tal como ilustrada nos esquemas 37-38. Carbamato 34.1 (Esquema 35), em que o substituinte A é o grupo link-P(0) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., é convertido em 37.1, como descrito no esquema 7 para preparação da amina 7.10 a partir de 7.9 e Esquema 9a para a preparação de 9a.4 a partir de 7.10.
As reacções apresentadas no Esquema 37 ilustram a preparação dos compostos sulfonamida 37.1, em que o substituinte A é 0 grupo link-P(0)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc.. Esquema 38 mostra a conversão de 37.1, em que A é [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., no fosfonato 5, em que X é enxofre. Neste procedimento, 37.1 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 5.
Esquema 34
A
Esquema 35
153
Esquema 37
Esquema 38 B9^
Á
5 154
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 6 e 7, em que X é uma ligação directa
Esquemas 39-40 ilustram a preparação dos ésteres de fosfonato 6 e 7, em que X é uma ligação directa. Conforme ilustrado no esquema 39, o epóxido 13.1, preparado como descrito no esquema 13, é convertido no cloreto 39.1, como descrito no esquema 3 para a preparação de 3.4 e Esquema 5 para a conversão de 3.4 em 5.6. O cloreto de 39.1 é então reagido com amina 39.2 ou 39.4, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., para se obter a amina 39.3 e 39.5, respectivamente. A reacção é realizada sob as mesmas condições descritas antes, Esquema 5 para preparação da amina 5.8 a partir de 5.6. A preparação de aminas 39.2 e 39.4, em que A é link-P(O)(OR1)2, é tal como se ilustra nos Esquemas 79-80 e Esquemas 81-82, respectivamente.
As reacções apresentadas no Esquema 39 ilustram a preparação dos compostos 39.3 e 39.5, em que o substituinte A é o grupo link-P(0)(0R1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 40 mostra a conversão destes compostos 39.3 e 39.5, em que A é [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., nos ésteres de fosfonato 6 e 7, respectivamente, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, as aminas 39.3 e 39.5 são convertidas, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, nos compostos 6 e 7, respectivamente.
Esquema 39 155
Esquema 40
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 6 e 7, em que X é um átomo de enxofre
Os ésteres de fosfonato intermediários 6 e 7, em que o grupo A está ligado ao radical arilo ligada a enxofre, são preparados Conforme ilustrado nos esquemas 41-42. A amina 25.1 (Esquema 25) é convertida no cloreto 41.1, como descrito no esquema 7 para a preparação de 7.10 a partir de 7.8, e Esquema 9a para conversão de 7.10 em 9a3. O cloreto 41.1 é então tratado com amina 39.2 ou amina 39.4, em que substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1^ ou um precursor, 156 tal como [OH], [SH] , [NH], Br, etc., como descrito no esquema 5, para se obter aminas 41.2 e 41.3, respectivamente.
As reacções apresentadas no Esquema 41 ilustram a preparação dos compostos 41.2 e 41.3, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1)2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 42 mostra a conversão de 41.2 e 41.3, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., nos ésteres de fosfonato 6 e 7, em que X é enxofre. Neste procedimento, 41.2 ou 41.3 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, nos compostos 6 e 7.
Esquema 41
41.3
Esquema 42 157
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 8-10, em que X é uma ligação directa
Esquemas 43-44 ilustram a preparação dos ésteres de fosfonato 8-10, em que X é uma ligação directa. Conforme ilustrado no esquema 43, a amina 43.1, preparada a partir de 10.1 ou 21.2, é reagida com ácido 43.2, 43.4 ou 43.6, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1^ ou um precursor, tal como [OH], [SH] , [NH] , Br, etc., para se obter a amida 43.3, 43.5 e 43.7, respectivamente. A reacção é realizada sob as mesmas condições descritas antes no Esquema 1 para preparação da amida 1.8. Amina 43.1 é preparada a partir de epóxido 10.1, utilizando as condições descritas no Esquema 1 excepto utilizando 10.1 em vez de 1.1. Amina 43.1 é preparada a partir de 21.2 de acordo com as condições descritas no Esquema 2, excepto utilizando 21.2 em vez de 2.1. A preparação do ácido 43.2 é descrita nos esquemas 47-51, do ácido 43.4 é descrita nos esquemas 87-91 e do ácido 43.6 é descrita nos esquemas 52-55.
As reacções apresentadas no Esquema 43 ilustram a preparação dos compostos 43.3, 43.5 e 43.7, em que o 158 substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 44 mostra a conversão destes compostos 43.3, 43.5, e 43.7, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., nos ésteres de fosfonato 8, 9 e 10, respectivamente, em que X é uma ligação directa. Neste procedimento, as aminas 43.3, 43.5 e 43.7 são convertidas, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, no composto 8, 9, e 10, respectivamente.
Esquema 43
Esquema 44 159
0 Η QH ψ
A 1«
Preparação dos intermediários de éster de fosfonato 8-10, em que X é um átomo de enxofre
Os ésteres de fosfonato intermediários 8-10, em que o grupo A está ligado ao radical arilo ligada a enxofre, são preparados como ilustrado nos esquemas 45-46. No Esquema 45, epóxido 15.1 é preparado a partir de mesilato 7.1, utilizando as condições descritas no Esquema 7, excepto incorporando tiofenol para o tiol 7.2. 0 epóxido 15.1 é então convertido em amina 45.1 de acordo com as condições descritas no Esquema 7 para a preparação de 7.10 a partir de 7.7. Amina 45.1 é então tratada com ácidos 43.2, 43.4 ou 43.6, em que substituinte A é o grupo link-P(O)(OR1^ ou um precursor, tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc., como descrito no esquema 7, para se obter as amidas 45.2, 45.3, e 45.4, respectivamente.
As reacções apresentadas no Esquema 45 ilustram a preparação dos compostos 45.2, 45.3 e 45.4, em que o substituinte A é o grupo link-P (O) (OR1)2 ou um precursor, 160 tal como [OH], [SH], [NH], Br, etc.. Esquema 46 mostra a conversão de 45.2, 45.3 e 45.4, em que A é [OH], [SH], [NH], Br, etc., no éster de fosfonato 8, 9 e 10, respectivamente, em que X é enxofre. Neste procedimento, 45.2, 45.3 e 45.4 é convertido, utilizando os procedimentos descritos adiante, Esquemas 47-99, nos compostos 8, 9 e 10, respectivamente.
Esquema 45
Esquema 46 161
Preparação de ácidos hidroxi-metil-benzóicos contendo fosfonato 43.2.
Esquemas 47-51 ilustram métodos para a preparação de ácidos hidroxi-metil-benzóicos contendo fosfonato 43.2 que são utilizados na preparação dos ésteres de fosfonato 8.
Esquema 47 ilustra um método para a preparação de reagentes ácido hidroxi-metil-benzóico, em que o radical fosfonato está ligado directamente no anel fenilo. Neste método, ácido bromo-hidroxi-metil-benzóico adequadamente protegido 47.1 é submetido a permuta de halogénio-metilo para se obter intermediário organometálico 47.2. Este composto é reagido com fosfito de clorodialquilo 47.3 para 162 se obter éster fenílico de fosfonato 47.4, que, após a desprotecção, proporciona o ácido carboxilico 47.5.
Por exemplo, ácido 4-bromo-3-hidroxi-2-metilbenzóico 47.6, preparado por bromação de ácido 3-hidroxi-2-metilbenzóico, como descrito, por exemplo, J. Am. Chem. Soc. 55, 1676, 1933, é convertido no cloreto de ácido, por exemplo, por reacção com cloreto de tionilo. 0 cloreto de ácido é então reagido com 3-metil-3-hidroximetiloxetano 47.7, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T. W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley, 1991, págs. 268, para se obter o éster 47.8. Este composto é tratado com trifluoreto de boro a 0°C para efectuar rearranjo do ortoéster 47.9, conhecido como éster 0B0. Este material é tratado com reagente de sililação, por exemplo, terc-butil-clorodimetilsilano, na presença de uma base, tal como imidazol, para se obter o éter sililico 47.10. Permuta de halogénio-metal é realizada por reacção do substrato 47.10 com butil-litio e o intermediário litiado é então acoplado com fosfito de clorodialquilo 47.3 para produzir o fosfonato 47.11. Desprotecção, por exemplo, por tratamento com ácido 4-toluenosulfónico em piridina aquosa, como descrito em Can. J. Chem., 61, 712, 1983, remove tanto o éster OBO como o grupo sililo, para produzir o ácido carboxilico 47.12.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 47.6, diferentes compostos bromo 47.1, são obtidos os produtos correspondentes 47.5.
Esquema 48 ilustra a preparação de derivados de ácido hidroxi-metil-benzóico, em que o radical fosfonato está ligado por meio de uma ligação de um carbono. 163
Neste método, ácido dimetil-hidroxi-benzóico adequadamente protegido, 48.1, é reagido com agente de bromação para efectuar a bromação benzilica. 0 produto 48.2 é reagido com dialquil-fosfito de sódio 48.3, como descrito em J. Med. Chem., 1992, 35, 1371, para deslocar o brometo benzilico para se obter o fosfonato 48.4. Desprotecção da função carboxilo então produz o ácido carboxilico 48.5.
Por exemplo, ácido 2,5-dimetil-3-hidroxi-benzóico, 48.6, cuja preparação é descrita em Can. J. Chem., 1970, 48, 1346, é reagido com excesso de cloreto de metoximetilo, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Segunda edição 1990, p.17, para se obter o éster de éter 48.7. A reacção é realizada num solvente inerte, tal como diclorometano, na presença de uma base orgânica, tal como N-metilmorfolina ou diisopropiletilamina. O produto 48.7 é então reagido com agente de bromação, por exemplo, N-bromossuccinimida, num solvente inerte, tal como, por exemplo, acetato de etilo, ao refluxo, para se obter o produto bromo-metilo 48.8. Este composto é então reagido com dialquil-fosfito de sódio 48.3 em tetrahidrofurano, como descrito antes, para se obter o fosfonato 48.9. Desprotecção, por exemplo, por breve tratamento com vestígios de ácido mineral em metanol, como descrito em J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1974, 298, produz o ácido carboxilico 48.10. Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de composto metilo 48.6, diferentes compostos metilo 48.1, são obtidos os produtos correspondentes 48.5.
Esquema 49 ilustra a preparação de ácidos hidroxi-metilbenzóicos contendo fosfonato, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de um átomo de oxigénio ou enxofre. 164
Neste método, ácido hidroxi-metil-benzóico substituído com hidroxi ou mercapto e adequadamente protegido 49.1 é reagido, sob as condições de reacção de Mitsonobu, com hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 49.2 para se obter o produto acoplado 49.3, que, após a desprotecção, proporciona o ácido carboxílico 49.4.
Por exemplo, ácido 3,6-di-hidroxi-2-metilbenzóico 49.5, cuja preparação é descrita em Yakugaku Zasshi 1971, 91, 257, é convertido no éster difenilmetílico 49.6, por tratamento com difenildiazometano, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T. W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley, 1991, págs. 253. 0 produto é então reagido com um equivalente de reagente de sililação, como, por exemplo, terc-butilclorodimetilsilano, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p 77, para se obter éter de mono-silílico 49.7. Este composto é então reagido com hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 49.2, sob as condições de reacção de Mitsonobu. A preparação de éteres aromáticos por reacção de Mitsonobu é descrita, por exemplo, em Comprehensive Organic Transformations, por R.C. Larock, VCH, 1989, pág. 448, e em Advanced Organic Chemistry, Parte B, por F.A. Carey e R.J. Sundberg, Plenum, 2001, págs. 153-4. O fenol ou tiofenol e o componente álcool são reagidos em conjunto num solvente aprótico, tal como, por exemplo, tetrahidrofurano, na presença de um azodicarboxilato de dialquilo e triarilfosfina, para se obter os produtos éter ou tioéter. O procedimento é também descrito em Org. React, 1992, 42, 335-656. A reacção proporciona o produto acoplado 49.8. Desprotecção, por exemplo, por tratamento com ácido trifluoroacético, à 165 temperatura ambiente, como descrito em J. Chem. Soc. C, 1191, 1966, proporciona então o ácido fenólico carboxilico 49.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do fenol 49.3, diferentes fenóis ou tiofenóis 49.1, são obtidos os produtos correspondentes 49.4
Esquema 50 mostra a preparação de ésteres de fosfonato ligados ao radical ácido hidroxi-metil-benzóico por meio de cadeias de carbono insaturadas ou saturadas.
Neste método, um alcenilfosfonato de dialquilo 50.2 é acoplado, por reacção de Heck catalisada por paládio, com ácido hidroxi-metil-benzóico substituído com bromo e adequadamente protegido 50.1. O acoplamento de halogenetos de arilo com olefinas por meio da reacção de Heck é descrito, por exemplo, em Advanced Organic Chemistry, por F. A. Carey e R. J. Sundberg, Plenum, 2001, p. 503ff e em Acc. Chem. Res., 12, 146, 1979. O brometo de arilo e a olefina são acoplados num solvente polar, tal como dime-tilformamida ou dioxano, na presença de um catalisador de paládio (0), tal como catalisador de tetraquis(trifenilfosfina)-paládio (0), ou um catalisador de paládio(II), tal como acetato de paládio (11), e facultativamente na presença de uma base, tal como trietilamina ou carbonato de potássio. O produto 50.3 é desprotegido para se obter o fosfonato 50.4; o último composto é submetido a hidrogenação catalítica para se obter ácido carboxilico saturado 50.5.
Por exemplo, ácido 5-bromo-3-hidroxi-2-metíl-benzóico 50.6, preparado como descrito em WO 9218490, é convertido, como descrito antes, no éster OBO do éter silílico 50.7, 166 como descrito antes. Este composto é acoplado, por exemplo, com um 4-buteno-l-ilfosfonato de dialquilo 50.8, cuja preparação é descrita em J. Med. Chem., 1996, 39, 949, utilizando as condições descritas antes, para se obter o produto 50.9. Desprotecção ou hidrogenação/desprotecção deste composto, como descrito antes, proporciona então, respectivamente, os produtos insaturados ou saturados 50.10 e 50.11.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 50.6, diferentes compostos bromo 50.1 e/ou diferentes fosfonatos 50.2, são obtidos os produtos correspondentes 50.4 e 50.5.
Esquema 51 ilustra a preparação de ésteres de fosfonato ligados ao radical de ácido hidroxi-metil-benzóico por meio de um anel aromático.
Neste método, ácido hidroxi-metil-benzóico substituído com bromo e adequadamente protegido 51.1 é convertido em correspondente ácido borónico 51.2, por metalação com butil-lítio e boronação, como descrito em J. Organomet. Chem., 1999, 581, 82. O produto é submetido a uma reacção de Suzuki de acoplamento com bromofenil-fosfonato de dialquilo 51.3. O produto 51.4 é então desprotegido para se obter produto fosfonato de diarilo 51.5.
Por exemplo, o éster OBO 51,6, preparado como descrito antes (Esquema 47), a partir do ácido 5-bromo-3-hidroxi-benzóico, cuja preparação é descrita em J. Labelled. Comp. Radiopharm., 1992, 31, 175, é convertido no ácido borónico 51.7, como descrito antes. Este material é acoplado com 4-bromofenil-fosfonato de dialquilo 51.8, preparado como descrito em J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1977, 2, 789, utilizando tetraquis(trifenilfosfina)-paládio(0) como 167 catalisador, na presença de bicarbonato de sódio, como descrito, por exemplo, em Palladium reagents and catalysts J. Tsuji, Wiley 1995, pág 218, para se obter fosfonato de diarilo 51.9. Desprotecção, como descrito antes, proporciona então ácido benzóico 51.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 51.6, diferentes compostos bromo 51.1 e/ou diferentes fosfonatos 51.3, são obtidos correspondentes produtos de ácido carboxilico 51.5.
Esquema 47 Método
Esquema 48 Método 101*1
fAa 48.1
icogrç mjt cHjef WíOjÉÕfHa 48.3
PC Y Me
COQH Me mã 168 Exemplo
m o 48. tO
*»®WOMOR1)b |OHI
ICOOHj . 49,3
Esquema 49 Método m fQHT "'Y^íCOQHl Mb m x=o,e XCH^(ONOR% HQ'- Υ ΐΰΟΗ Ms 49.4
Exemplo
Esquema 50 Método 169 γ OiHSP^ÍQpiTi
Ρ1Γ γ '{CCOM] S<ÍJ2 ίΟΗΓ' MS
HO" γ COOH fete SOJ 50,3
"jCOOHJ
S&4 59,1
Exemplo
ψ· wmm
MJ
^^'Ρ{0}(0β% J3H
m o MM wamcr
50,9
Esquema 51 Método ,.Br Matu Exemplo
MO®k 512 íoht γ 'i:coqh| ÍVfe
170
Preparação de ácidos quinolina-2-carboxílicos 43.6 incorporando radicais fosfonato.
As sequências de reacção mostradas nos Esquemas 43 -46 para a preparação dos ésteres de fosfonato 10 utilizam um reagente de ácido quinolina-2-carboxíiico 43.8, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um seu precursor, tal como [OH], [SH] Br, etc.. Vários ácidos quinolina-2-carboxílicos adequadamente substituídos estão comercialmente disponíveis ou estão descritos na literatura química. Por exemplo, as preparações de ácidos 6-hidroxi-, 6-amino- e 6-bromo-quinolina-2-carboxílicos são descritas, respectivamente em DE 3004370,. J. Het. Chem., 1989, 26, 929, e J. Labelled Comp. Radiopharm., 1998, 41, 1103, e a preparação de ácido 7-aminoquinolina-2-carboxílico é descrita em J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 620. Ácidos quinolina-2-carboxílicos adequadamente substituídos também podem ser preparados por procedimentos conhecidos dos especialistas na matéria. A síntese de quinolinas substituídas de vários modos é descrita, por exemplo, em Chemistry of Heterocyclic Compounds, Vof. 32, G. Jones, ed., Wiley, 1977, p 93ff. Ácidos quinolina-2-carboxílicos podem ser preparados por meio da reacção de Friedlander que é descrita em Chemistry 171 of Heterocyclic Compounds, Vol. 4, R.C. Elderfield, ed., Wiley, 1952, pág. 204.
Esquema 52 ilustra a preparação de ácidos quinolina~2-carboxílicos por meio da reacçâo de Friedlander e outras transformações dos produtos obtidos. Nesta sequência de reacção, um 2-aminobenzaldeído substituído 52.1 é reagido com éster de piruvato de alquilo 52.2, na presença de uma base orgânica ou inorgânica, para se obter éster quinolina-2-carboxílico substituído 52.3. Hidrólise de éster, por exemplo, utilizando base aquosa, proporciona então o correspondente ácido carboxílico 52.4. O produto de ácido carboxílico 52.4, em que X é NH2, pode ser ainda transformado nos correspondentes compostos 52.6, em que Z é OH, SH ou Br. As últimas transformações são efectuadas por reacção de diazotação. A conversão de aminas aromáticas nos correspondentes fenóis e brometos por meio de reacção de diazotação é descrita, respectivamente em Synthetic Organic Chemistry, R.B. Wagner, H. D. Zook, Wiley, 1953, páginas 167 e 94; a conversão de aminas nos correspondentes tióis é descrita em Sulfur Lett, 2000, 24, 123. A amina é primeiro convertida no sal diazónio por reacção com ácido nitroso. O sal diazónio, preferencialmente tetrafluoborato de diazónio, é então aquecido em solução aquosa, por exemplo, como descrito em Organic Functional Group Preparations, por S.R. Sandler e W. Karo, Academic Press, 1968, pág. 83, para se obter correspondente fenol 52.6, Y = OH. Em alternativa, o sal diazónio é reagido em solução aquosa com brometo cuproso e brometo de lítio, como descrito em Organic
Functional Group Preparations, por S.R. Sandler e W. Karo, Academic Press, 1968, p. 138, para se obter 0 correspondente composto de bromo, 52.6, Y = Br. Em 172 alternativa, tetrafluoborato de diazónio é reagido em solução de acetonitrilo com resina de permuta iónica de sulfidrilo, como descrito em Sulfur Lett., 2000, 24, 123, para se obter o tiol 52.6, Y = SH. Facultativamente, as reacções de diazotação descritas antes podem ser realizadas nos ésteres carboxilicos 52.3 em vez de ácidos carboxilicos 52.5.
Por exemplo, 2,4-diaminobenzaldeido 52.7 (Apin Chemicals) é reagido com um equivalente molar de piruvato de metilo 52.2 em metanol, na presença de uma base, tal como piperidina, para se obter 7-aminoquinolina-2-carboxilato de metilo 52.8. Hidrólise básica do produto, utilizando um equivalente molar de hidróxido de lítio em metanol aquoso, então produz o ácido carboxilico 52.9. O ácido carboxilico substituído com amino é então convertido no tetrafluoborato de diazónio 52.10 por reacção com nitrito de sódio e ácido tetrafluoroborico. O sal diazónio é aquecido em solução aquosa para se obter ácido 7-hidroxi-quinolina-2-carboxílico, 52.11, Z = OH. Em alternativa, tetrafluoroborato de diazónio é aquecido na solução orgânica aquosa com um equivalente molar de brometo cuproso e brometo de lítio para se obter ácido 7-bromoquinolina-2-carboxílico 52.11, Z = Br. Em alternativa, tetrafluoborato de diazónio 52.10 é reagido em solução de acetonitrilo com forma sulfidrilo de uma resina de permuta iónica, como descrito em Sulfur Lett, 2000, 24, 123, para preparar ácido 7-mercaptoquinolina-2-carboxílico 52.11, Z = SH.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 2,4-diaminobenzaldeído 52.7, diferentes aminobenzaldeídos 52.1, os correspondentes ácidos quinolina-2-carboxílicos substituídos com amino, 173 hidroxi, bromo ou mercapto 52.6 são obtidos. Os ácidos e ésteres quinolina-carboxílicos substituídos de vários modos podem ser então transformados, como aqui descrito (Esquemas 53 - 55), em derivados contendo fosfonato.
Esquema 53 mostra a preparação de ácidos quinolina-2-carboxílicos incorporando um radical fosfonato fixada ao anel quinolina por meio de um átomo oxigénio ou de enxofre. Neste procedimento, éster quinolina-2-carboxilato substituído com amino 53.1 é transformado, através de um procedimento de diazotação, como descrito antes (Esquema 52), no correspondente fenol ou tiol 53.2. Este último composto é então reagido com hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 53.3, sob as condições de reacção de Mitsonobu, para se obter o éster fosfonato 53.4. A preparação de éteres aromáticos por meio da reacção de Mitsonobu é descrita, por exemplo, em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, pág. 448, e em Advanced Organic Chemistry, Parte B, por F.A. Carey e R. J. Sundberg, Plenum, 2001, p. 153-4. O fenol ou tiofenol e o componente álcool são reagidos em conjunto num solvente aprótico, tal como, por exemplo, tetrahidrofurano, na presença de azodicarboxilato de dialquilo e triarilfosfina, para se obter os produtos éter ou tioéter 53.4. Hidrólise básica do grupo éster, por exemplo, utilizando um equivalente molar de hidróxido de lítio em metanol aquoso, então produz o ácido carboxílico 53.5. O produto é então acoplado com derivado de aminoácido adequadamente protegido 53.6 para se obter a amida 53.7. A reacção é realizada sob condições semelhantes ás descritas antes, Esquema 1. O grupo de protecção éster é então removido para se obter o ácido carboxílico 53.8. 174
Por exemplo, 6-amino-2-quinolina-carboxilato de metilo 53.9, preparado como descrito em J. Het. Chem., 1989, 26, 929, é convertido, por meio do procedimento de diazotação descrito antes, em 6-mercaptoquinolina-2-carboxilato de metilo 53.10. Este material é reagido com hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 53.11 (Aldrich), na presença de azodicarboxilato de dietilo e trifenilfosfina em solução de tetrahidrofurano, para se obter o tioéter 53.12. Hidrólise básica proporciona então o ácido carboxilico 53.13. Este último composto é então convertido, como descrito antes, no derivado de aminoácido 53.16.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 6-amino-2-quinolina-carboxilato de metilo 53.9, diferentes ésteres aminoquinolina-carboxilicos 53.1 e/ou diferentes hidroxi-metil-fosfonatos de dialquilo 53.3. os correspondentes produtos de éster fosfonato 53.8 são obtidos.
Esquema 54 ilustra a preparação de ácidos quinolina-2-carboxílicos incorporando ésteres de fosfonato fixados ao anel quinolina por meio de uma cadeia de carbono saturada ou insaturada. Nesta sequência de reacção, um éster quinolina-carboxilico substituído com bromo 54.1 é acoplado, por reacção de Heck catalisada por paládio, com alcenilfosfonato de dialquilo 54.2. O acoplamento de halogenetos de arilo com olefinas por meio da reacção de Heck é descrito, por exemplo, em Advanced Organic Chemistry, por F. A. Carey e R. J. Sundberg, Plenum, 2001, p. 503ff. O brometo de arilo e a olefina são acoplados num solvente polar, tal como dimetilformamida ou dioxano, na presença de um catalisador de paládio (0) como um catalisador de tetraquis(trifenilfosfina)-paládio (0) ou 175 paládio (II), tal como acetato de paládio (II), e facultativamente na presença de uma base, tal como trietilamina ou carbonato de potássio. Assim, acoplamento de Heck do composto de bromo 54.1 e a olefina 54.2 proporciona o éster olefinico 54.3. Hidrólise, por exemplo, por reacção com hidróxido de litio em metanol aquoso, ou por tratamento com esterase de fígado de suínos, então produz o ácido carboxílico 54.4. Este último composto é então transformado, como descrito antes, no homólogo 54.5. Facultativamente, o ácido carboxílico insaturado 54.4 pode ser reduzido para se obter o análogo saturado 54.6. A reacção de redução pode ser efectuada quimicamente, por exemplo, utilizando diimida ou diborano, como descrito em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, p. 5, ou cataliticamente. 0 produto 54.6 é então convertido, como descrito antes (Esquema 53) no derivado de aminoácido 54.7.
Por exemplo, 7-bromoquinolina-2-carboxilato de metilo 54.8, preparado como descrito em J. Labelled Comp. Radiopharm., 1998, 41, 1103, é reagido em dimetilformamida a 60° com vinilfosfonato de dialquilo 54.9 (Aldrich), na presença de 2% molar de tetraquis(trifenilfosfina)-paládio e trietilamina, para se obter o produto acoplado 54.10. O produto é então reagido com hidróxido de litio em tetrahidrofurano aquoso para produzir o ácido carboxílico 54.11. Este último composto é reagido com diimida, preparada por hidrólise básica de azodicarboxilato de dietilo, como descrito em Angew. Chem. Int Ed., 4, 271, 19g5, para se obter o produto saturado 54.12. Este último composto é então convertido, como descrito antes, no 176 derivado de aminoácido 54.13. 0 produto insaturado 54.11 é semelhantemente convertido no análogo 54.14.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 6-bromo-2-quinolinacarboxilato 54.8, diferentes ésteres bromoquinolina-carboxílicos 54.1 e/ou diferentes alcenilfosfonatos de dialquilo 54.2, os correspondentes produtos de éster fosfonato 54.5 e 54.7 são obtidos.
Esquema 52 Método
y^NfNwoK
YsOHSRS*
MJ
Exemplo
Z*OH,SM,8r $2.;i
Esquema 53 Método 177
Hp^lCOOHÍ X -5 ffí-o)sP(QMc«5y(
mã O R® s&b i» i o Pê mj
Ijj rfc
Exemplo HOCHsPf0lfQR% S3.11
Q «Ό 6 S3J S&HJ $3,12
0 R® sais
Esquema 54 Método 178
;R*0>jP{0)(CHj^CHsCMqr' 54.2 54.3
(T?10)j(P{OXCHj]jpH^CH—···
;0g« CQOH
S4>$ wemmwat -•t
S4.7
Exemplo
Esquema 55 mostra a preparação de derivados de ácido quinolina-2-carboxílico 55.5, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de átomo de azoto e uma cadeia alquileno. Nesta sequência de reacção, aminoquinolina-2-carboxilato de metilo 55.1 é reagido com aldeído fosfonato 55.2 sob condições de aminação redutiva, para se obter o produto aminoalquilo 55.3. A preparação de aminas por meio de procedimentos de aminação redutiva é descrita, por exemplo, em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, p 421, e em Advanced Organic Chemistry, Parte B, por F.A. Carey e R. J. Sundberg, Plenum, 2001, pág. 269. Neste procedimento, o componente amina e o componente aldeído ou cetona são reagidos em conjunto, na presença de um agente redutor, tal 179 como, por exemplo, borano, cianoboro-hidreto de sódio, triacetoxiboro-hidreto de sódio ou hidreto de diisobultil-alumínio, facultativamente na presença de um ácido de Lewis, como tetraisopropóxido de titânio, como descrito em J. Org. Chem., 55, 2552, 1990. O produto éster 55.3 é então hidrolisado para se obter o ácido carboxílico livre 55.4. Este último composto é então convertido, como descrito antes, no derivado de aminoácido 55.5.
Por exemplo, 7-aminoquinolina-2-carboxilato de metilo 55.6, preparado como descrito em J. Am. Chem. Soc. 1987, 109, 620, é reagido com formilmetilfosfonato de dialquilo 55.7 (Aurora) em solução de metanol, na presença de boro-hidreto de sódio, para se obter o produto alquilado 55.8. O éster é então hidrolisado, como descrito antes, para se obter o ácido carboxílico 55.9. Este último composto é então convertido, como descrito antes, no derivado de aminoácido 55.10. Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de fosfonato de formilmetilo 55.7, diferentes fosfonatos de formilalquilo 55.2 e/ou diferentes aminoquinolinas 55.1, os produtos correspondentes 55.5 são obtidos.
Esquema 55 Método
5&1 O
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Exemplo 180(8’α&Ρ{0){α%)#ίΗ
SB& ° ^WiOKCHáíNH
ί^Ο^ΟΚΟΗ^ΜΗ
5S.9 O (R^OltíFtOSCHíCHO >Ma "> 55,7
35.10 O B5
Preparação de derivados de fenilalanina 1.1 incorporando radicais fosfonato
Esquema 56 ilustra a conversão de derivados de fenilalanina substituídos de vários modos 56.1 em epóxidos I. 1, cuja incorporação em compostos 1 é ilustrada nos esquemas 1 e 3. Vários compostos 56.1 ou 56.2, por exemplo, aqueles em que X é 2-, 3- ou 4-OH ou X é 4-NH2, estão comercialmente disponíveis. As preparações de diferentes compostos 56.1 ou 56.2 são descritas na literatura. Por exemplo, a preparação de compostos 56.1 ou 56.2, em que X é 3-SH, 4-SH, 3-NH2, 3-CH20H ou 4-CH2OH, é descrita, respectivamente em WO0036136, J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 7173, Helv. Chim. Acta, 1978, 58, 1465, Acta Chem. Scand., 1977, B31, 109 e Syn. Com., 1998, 28, 4279. Resolução de compostos 56.1, se requerido, pode ser obtida por métodos convencionais, por exemplo, como descrito em Recent Dev. Synth. Org. Chem., 1992, 2, 35.
Os aminoácidos substituídos de vários modos 56.2 são protegidos, por exemplo, por conversão do derivado BOC 56.3, por tratamento com anidrido BOC, como descrito em J. Med. Chem., 1998, 41, 1034. 0 produto 56.3 é então convertido no éster metílico 56.4, por exemplo, por tratamento com diazometano etéreo. 0 substituinte X em 56.4 181 é então transformado, utilizando os métodos descritos adiante, Esquemas 57-59, no grupo A. Os produtos 56.5 são então convertidos, através dos intermediários 56.6-56.9, nos epóxidos 1.1. 0 éster metilico 56.5 é primeiro hidrolisado, por exemplo, por tratamento com um equivalente molar de hidróxido de litio aquoso metanólico ou por hidrólise enzimática, utilizando, por exemplo, esterase de figado de suinos, para se obter o ácido carboxilico 56.6. A conversão do ácido carboxilico 56.6 no epóxido 1.1, por exemplo, utilizando a sequência de reacções que é descrita em J. Med. Chem., 1994, 37, 1758, é então efectuada. 0 ácido carboxilico é primeiro convertido no cloreto de ácido, por exemplo, por tratamento com cloreto de oxalilo, ou em anidrido misto, por exemplo, por tratamento com cloroformato de isobutila, e o derivado activado assim obtido é reagido com diazometano etéreo para se obter a diazocetona 56.7. A diazocetona é convertida em clorocetona 56.8 por reacção com cloreto de hidrogénio anidro, num solvente adequado, como éter dietilico. Este último composto é então reduzido, por exemplo, utilizando boro-hidreto de sódio, para produzir uma mistura de cloridrinas a partir da qual o desejado diastereómero 2S,3S 56.9 é separado por cromatografia. Este material é reagido com hidróxido de potássio etanólico, à temperatura ambiente, para se obter o epóxido 1.1. Facultativamente, a série de reacções antes descrita pode ser realizada no éster metilico 56.4, para se obter o epóxido 1.1, em que A é OH, SH, NH, N-alquilo ou CH2OH. Métodos para a transformação dos compostos 56.4, em que X é um grupo precursor para 0 substituinte link-P(0)(0R1)2; são ilustrados nos Esquemas 57-59. 182
Esquema 56a ilustra a conversão de derivados de fenilalanina substituídos de vários modos 56a.1 em epóxidos 3.1, cuja incorporação nos compostos 1 está ilustrada no esquema 3. Partindo dos mesmos reagentes descritos antes, Esquema 56, o composto 56.2 é convertido no epóxido 56a.6, como descrito em J. Org. Chem 1996, 61, 3635. 0 aminoácido 56.2 é convertido no triéster benzílico 56a.3 por tratamento com brometo de benzilo em etanol, na presença de carbonato de potássio. 0 substituinte X em 56a.3 é então transformado, utilizando os métodos descritos adiante, Esquemas 57-59, no grupo A, composto 56a.4. Estes métodos descrevem procedimentos, em que a amina é protegida com BOC. No entanto, os mesmos procedimentos são aplicáveis a outros grupos de protecção de amina, como dibenzilo. Os produtos 56a. 4 são então convertidos através dos intermediários 56a.5 no epóxidos 3.1. 0 éster 56a.4 é reduzido com hidreto de lítio e alumínio para o álcool que é então oxidado em aldeído 56a.4 por tratamento com trióxido de piridina e enxofre em DMSO e trietilamina. 0 aldeído 56a,4 é então convertido no epóxido 3.1 por tratamento com brometo de clorometilo e excesso de lítio em THF, a -65°C. Uma mistura de isómeros é produzida que são separados por cromatografia.
Esquema 57 mostra a preparação de epóxidos 57.4 incorporando um grupo fosfonato ligado no anel fenilo por meio de heteroátomo 0, S ou N. Neste procedimento, o fenol 5 tiol, amina ou carbinol 57.1 é reagido com derivado de hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 57.2. A reacção é obtida, na presença de uma base, cuja natureza depende da natureza do substituinte X. Por exemplo, se X é OH, SH, NH2 ou NH-alquilo, uma base inorgânica, tal como carbonato de 183 césio, ou uma base orgânica, tal como diazabiciclononeno, pode ser utilizada. Se X é CH2OH, uma base, tal como hexametildissililazida de litio ou outros, pode ser utilizada. A reacção de condensação proporciona o éster substituído por fosfonato 57.3, que, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 56 ou 56a, é transformado no epóxido 57.4.
Por exemplo, éster metílico de ácido 2-terc-butoxicarbonilamino-3-(4-hidroxi-fenil)-propiónico 57.5 (Fluka) é reagido com trifluorometanossulfoniloxi-fosfonato de dialquilo 57.6, preparado como descrito em Tet. Lett., 5 1986, 27, 1477, na presença de carbonato de césio, em dimetilformamida, a cerca de 60°, para se obter o produto éter 57.5. Este último composto é então convertido, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 56, no epóxido 57.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando diferentes fenóis, tióis, aminas e carbinóis 57.1 em vez de 57.5 e/ou diferentes fosfonatos 57.2, os produtos correspondentes 57.4 são obtidos.
Esquema 58 ilustra a preparação de um radical fosfonato que está ligada na estrutura de fenilalanina por meio de heteroátomo e uma cadeia de múltiplos carbonos.
Neste procedimento, derivado fenilalanina substituída 58.1 é reagido com bromoalquil-fosfonato de dialquilo 58.2 para se obter o produto 58.3. A reacção é efectuada num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida ou acetonitrilo, na presença de uma base adequada, como hidreto de sódio ou carbonato de césio. O produto é então transformado, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 56, no epóxido 58.4. 184
Por exemplo, um aminoácido protegido 58.5, preparado como descrito antes (Esquema 56) a partir de 3-mercaptofenilalanina, cuja preparação é descrita em WO 0036136, é reagido com 2-bromoetil-fosfonato de dialquilo 58.6, preparado como descrito em Synthesis, 1994, 9, 909, na presença de carbonato de césio, em dimetilformamida a cerca de 60°, para se obter o produto tioéter 58.7, Este último composto é então convertido, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 56, no epóxido 58.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando diferentes fenóis, tióis e aminas 58.1 em vez de 58.5 e/ou diferentes fosfonatos 58.2, os produtos correspondentes 58.4 são obtidos.
Esquema 59 mostra a preparação de derivados de fenilalanina substituídos por fosfonato, em que o radical fosfonato está ligado por meio de cadeia alquileno incorporando um heteroátomo.
Neste procedimento, fenilalanina protegida e substituída com hidroximetilo 59.1 é convertida no composto substituído com halometilo 59.2. Por exemplo, o carbinol 59.1 é tratado com trifenilfosfina e tetrabrometo de carbono, como descrito em J. Am. Chem. Soc. 108, 1035, 1986 para se obter o produto 59.2, em que Z é Br. O composto de bromo é então reagido com alquilfosfonato de dialquilo terminalmente heterossubstituído 59.3. A reacção é realizada na presença de uma base, cuja natureza depende da natureza do substituinte X. Por exemplo, se X é SH, NH2 ou NHalquilo, uma base inorgânica, tal como carbonato de césio, ou uma base orgânica, tal como diazabiciclononeno, pode ser utilizada. Se X é OH, uma base forte, como hexametildissililazida de lítio ou e outros, pode ser 185 utilizada. A reacção de condensação proporciona o éster substituído por fosfonato 59.4, que, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 56, é transformado no epóxido 59.5.
Por exemplo, o derivado de fenilalanina protegido e substituído com 4-hidroxi-metilo 59.8, obtido a partir de 4-hidroxi-metil-fenilalanina, cuja preparação é descrita em Syn. Comm., 1998, 28, 4279, é convertido no derivado de bromo 59.7, como descrito antes. 0 produto é então reagido com 2-aminoetil-fosfonato de dialquilo 50.8, cuja preparação é descrita em J. Org. Chem., 2000, 65, 676, na presença de carbonato de césio em dimetilformamida, à temperatura ambiente, para se obter o produto amina 59.9. Este último composto é então convertido, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 56, no epóxido 59.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando diferentes carbinóis 59.1 em vez de 59.6 e/ou diferentes fosfonatos 59.3, os produtos correspondentes 59.5 são obtidos.
Esquema 56
ΌΟΗ*
X ® OH. MHa* NH ii qui i o * CHgQH
186Esquema 57 Método
BOCNH 9 O"Λ >Ό OCH-, S0CNH^<4 S7J X ~ OH, SH, NH ii qui í o, iDHjQHExemplo
X 57,1 XCHRFfl){OH. 5j 57$
^CHRPPP8’fe 57,4 VT) CHj TfQ0H5S»(0MG^k
OaotPíH^X HO'
BOCNH
S?J 57;$ ξΗΌ^Ορ*
57,7
S7.S
Esquema 56a
Ηϊ>^· n* 56.2 0
O
1
X OH, SH NH&, HHalquilo ,CH^SH 0
N
<D
A 3,1
Esquema 58 Método 187 "«sAlW, ς _ X«0K,5HM%HHil quilo &Λ
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Preparação de derivados de fenilalanina incorporando porções fosfonato 2.1 ou seus precursores. 188
Esquema 60 ilustra a preparação do derivado hidroxi-metil-oxazolidina 2.1, em que o substituinte A é o grupo link-P(O) (OR1) 2 ou um seu precursor, tal como [OH], [SH] Br, etc.. Nesta sequência de reacção, a fenilalanina substituída 60.1, em que A é como definido antes, é transformada, através dos intermediários 60.2-60.9, no produto hidroxi-metilo 2.1. Neste procedimento, a fenilalanina, ou seu derivado substituído, 60.1, é convertida no derivado ftalimida 60.2. A conversão de aminas em derivado ftalimida é descrita, por exemplo, em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. 358. A amina é reagida com anidrido ftálico, cloreto de 2-carbo-etoxibenzoílo ou N-carboetoxiftalimida, facultativamente na presença de uma base, tal como trietilamina ou carbonato de sódio, para se obter a amina protegida 60.2. De preferência, o aminoácido é reagido com anidrido ftálico em tolueno ao refluxo para se obter o produto ftalimida. O ácido carboxílico é então transformado num derivado activado, como o cloreto de ácido 60.3, em que X é Cl. A conversão de um ácido carboxílico no correspondente cloreto de ácido pode ser efectuada por tratamento do ácido carboxílico com um reagente, como, por exemplo, cloreto de tionilo ou cloreto de oxalilo, num solvente orgânico inerte, tal como diclorometano, facultativamente na presença de uma quantidade catalítica de uma amida terciária, como dimetilformamida. De preferência, o ácido carboxílico é transformado no cloreto de ácido por reacção com cloreto de oxalilo e a quantidade catalítica de dimetilformamida, em solução de tolueno à temperatura ambiente, como descrito em WO 9607642. O cloreto de ácido 189 60.3, X = Cl, é então convertido no aldeído 60.4 por meio de uma reacção de redução. Este procedimento é descrito, por exemplo, em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, pág. 620. A transformação pode ser efectuada por meio de hidrogenação catalítica, um procedimento que é referido como a reacção de Rosenmund, ou por redução química empregando, por exemplo, borohidreto de sódio, tri-terc-butoxi-hidreto de lítio e alumínio ou trietilsilano. De preferência, o cloreto de ácido 60.3 X = Cl, é hidrogenado em solução de tolueno num catalisador paládio sobre carvão a 5%, na presença de óxido de butileno, como descrito em WO 9607642, para se obter o aldeído 60.4. 0 aldeído 60.4 é então transformado no derivado de cianidrina 60.5. A conversão de aldeídos em cianidrinas é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. 211. Por exemplo, o aldeído 60.4 é convertido na cianidrina 60.5 por reacção com cianeto de trimetilsililo num solvente inerte, tal como diclorometano, seguido por tratamento com um ácido orgânico como ácido cítrico, como descrito em WO 9607642, ou por métodos alternativos aqui descritos. A cianidrina é então submetida a hidrólise ácida, para efectuar conversão do grupo ciano no correspondente grupo carboxi, com concomitante hidrólise do substituinte ftalimido para se obter o aminoácido 60.6 As reacções de hidrólise são efectuadas, utilizando ácido mineral aquoso. Por exemplo, o substrato 60.5 é reagido com ácido clorídrico aquoso ao refluxo, como descrito em WO 9607642, para se obter o produto ácido carboxílico 60.6. O aminoácido é então convertido num carbamato, por exemplo, carbamato de etilo 60.7. A conversão de aminas em 190 carbamatos é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. 317. A amina é reagida com cloroformato, por exemplo, cloroformato de etilo, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, para se obter o carbamato 60.7. Por exemplo, o aminoácido 60.6 é reagido, em solução aquosa, com cloroformato de etilo e suficiente hidróxido de sódio aquoso para manter um pH neutro, como descrito em WO 9607642, para proporcionar o carbamato 60.7. Este último composto é então transformado na oxazolidinona 60.8, por exemplo, por tratamento com hidróxido de sódio aquoso à temperatura ambiente, como descrito em WO 9607642. O ácido carboxílico resultante é transformado no éster metilico 60.9 por meio de uma reacção de esterificação convencional. A conversão de ácidos carboxílicos em ésteres é descrita por exemplo, em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, p. 966. A conversão pode ser efectuada por meio de reacção catalisada por ácido entre o ácido carboxilico e um álcool ou por meio de uma reacção catalisada por base entre o ácido carboxilico e um halogeneto de alquilo, por exemplo, brometo de alquilo. Por exemplo, o ácido carboxilico 60.8 é convertido no éster metilico 60.8 por tratamento com metanol à temperatura de refluxo, na presença de uma quantidade catalítica de ácido sulfúrico, como descrito em WO 9607642. O grupo carbometoxilo presente no composto 60.9 é então reduzido para se obter correspondente carbinol 2.1. A redução de ésteres carboxílicos nos carbinóis é descrita em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, p. 550. A transformação pode ser efectuada, utilizando agentes redutores, como dimetilsulfureto de 191 borano, boro-hidreto de lítio, hidreto de diisobutil-alumínio, hidreto de lítio e alumínio e outros. Por exemplo, o éster 60.9 é reduzido no carbinol 2.1 por reacção com boro-hidreto de sódio em etanol à temperatura ambiente, como descrito em WO 9607642. A conversão do substituinte A no grupo link-P(O) (OR1) 2 pode ser efectuada em qualquer passo conveniente numa sequência de reacção, ou após o reagente 2.1 ter sido incorporado nos intermediários 1. Exemplos específicos de preparação do reagente hidroxi-metil oxazolidinona 2.1 são mostrados adiante (Esquemas 61-62}.
Esquema 61 mostra a preparação de hidroxi-metiloxazolidinonas 61.9, em que o radical do éster de fosfonato está ligado directamente no anel fenilo. Neste procedimento, fenilalanina substituída com bromo 61.1 é convertida, utilizando a série de reacções ilustrada no Esquema 60, na bromofeniloxazolidinona 61.2. O composto de bromofenilo é então acoplado, na presença de um catalisador de paládio (0), com um fosfito de dialquilo 61.3, para se obter o produto fosfonato 61.4. A reacção entre brometo de arilo e fosfitos de dialquilo para se obter fosfonatos de arilo é descrita em Synthesis, 56, 1981, e em J. Med. Chem., 1992, 35, 1371. A reacção é efectuada num solvente inerte, tal como tolueno ou xileno, a cerca de 100°C, na presença de um catalisador de paládio (0) como tetraquis(trifenilfosfina) paládio e a base orgânica terciária, tal como trietilamina. O substituinte carbometoxi no resultante éster de fosfonato 61.4 é então reduzido com boro-hidreto de sódio em correspondente derivado de hidroxi-metilo 61.5, utilizando o procedimento descrito antes (Esquema 60). 192
Por exemplo, 3-bromofenilalanina 61.6, preparada como descrito em Pept. Res., 1990, 3, 176, é convertida, utilizando a sequência de reacções como ilustrado no Esquema 60, em éster metilico de ácido 4-(3-bromo-benzil)-2-oxo-oxazolidina-5-carboxílico 61.7. Este composto é então acoplado com um fosfito de dialquilo 61.3, em solução de tolueno ao refluxo, na presença de uma quantidade catalítica de catalisador de tetraquis(trifenilfosfina)-paládio (0) e trietilamina, para se obter o éster fosfonato 61.8. O substituinte carbometoxi é então reduzido com boro-hidreto de sódio, como descrito antes, para se obter o produto hidroxi-metilo 61.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 3-bromofenilalanina 61.6 diferentes bromofenilalaninas 61.1 e/ou diferentes fosfitos de dialquilo 61.3, os produtos correspondentes 61.5 são obtidos.
Esquema 62 ilustra a preparação de hidroxi-metil-oxazolidinonas contendo fosfonato 62.9 e 62.12, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de heteroátomo e uma cadeia de carbono. Nesta sequência de reacções, a fenilalanina substituída com hidroxi ou tio 62.1 é convertida no éster benzílico 62.2 por meio de reacção convencional de esferificação catalisada por ácido. O grupo hidroxilo ou mercapto é então protegido. A protecção de grupos fenil-hidroxilo e tiol é descrita, respectivamente, em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. 10, e p. 277. Por exemplo, substituintes hidroxilo e tiol podem ser protegidos como grupos trialquilsililoxi. Grupos trialquilsililo são introduzidos por reacção do fenol ou 193 tiofenol com clorotrialquilsilano e uma base, tal como imidazol, por exemplo, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. 10, p. 68-86. Em alternativa, substituintes tiol podem ser protegidos por conversão em tioéteres de terc-butil ou adamantil ou tioéteres de 4-metoxibenzilo preparados por reacção entre o tiol e cloreto de 4-metoxibenzilo, na presença de hidróxido de amónio, como descrito em Buli. Chem. Soc. Jpn., 37, 433, 1974 . O éster protegido 62.3 é então reagido com anidrido ftálico, como descrito antes (Esquema 60) para se obter ftalimida 62.4. O éster benzílico é então removido, por exemplo, por hidrogenação catalítica ou por tratamento com base aquosa, para se obter o ácido carboxílico 62.5. Este composto é transformado, por meio de série de reacções como ilustrado no Esquema 60, na carbometoxi oxazolidinona 62.6, utilizando em cada passo as mesmas condições como descritas antes (Esquema 60) . O grupo protegido OH ou SH é então desprotegido. Desprotecção de fenóis e tiofenóis é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. Por exemplo, éteres ou tioéteres de trialquilsililo podem ser desprotegidos por tratamento com fluoreto de tetra-alquil-amónio num solvente inerte, tal como tetrahidrofurano, como descrito em J. Am. Chem. Soc. 94, 6190, 1972. Tioéteres de terc-butilo ou adamantilo podem ser convertidos nos correspondentes tióis por tratamento com trifluoroacetato mercúrico em ácido acético aquoso à temperatura ambiente, como descrito em Chem. Pharm. Buli., 26, 1576, 1978. O fenol ou tiol resultante 62.7 é então reagido com fosfonato de hidroxi-alquilo 62.20 sob as condições de reacção de 194
Mitsonobu, como descrito antes (Esquema 49), para se obter o éter ou tioéter 62.8. Este último composto é então reduzido com boro-hidreto de sódio, como descrito antes (Esquema 60) para se obter análogo de hidroxi-metilo 62.9.
Em alternativa, o fenol ou tiofenol 62.7 é reagido com fosfonato de dialquilbromoalquilo 62.10 para se obter o produto de alquilação 62.11. A reacção de alquilação é realizada num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida, acetonitrilo e outros, facultativamente na presença de iodeto de potássio, e, na presença de uma base inorgânica, tal como carbonato de potássio ou césio, ou uma base orgânica, tal como diazabiciclononeno ou dimetilaminopiridina. O produto éter ou tioéter é então reduzido com boro-hidreto de sódio para se obter composto hidroxi-metilo 62.12.
Por exemplo, 3-hidroxi-fenilalanina 62.13 (Fluka) é convertida no éster benzilico 62.14 por meio de reacção convencional de esterificação catalisada por ácido. O éster é então reagido com terc-butilclorodimetilsilano e imidazol em dimetilformamida para se obter o éter sililico 62.15. O éter protegido é então reagido com anidrido ftálico, tal como descrito antes (Esquema 60) , para se obter composto protegido com ftalimido 62.16. Hidrólise básica, por exemplo, por reacção com hidróxido de litio em metanol aquoso, proporciona então o ácido carboxilico 62.17. Este composto é então transformado, por meio de série de reacções como ilustrado no Esquema 60, em oxazolidinona substituída com carbometoxi 62.18. O grupo de protecção sililo é então removido por tratamento com fluoreto de tetrabutilamónio em tetrahidrofurano à temperatura ambiente, para produzir o fenol 62.19. Este último composto 195 é reagido com hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 62.20 azodicarboxilato de dietilo e trifenilfosfina, por meio da reacção de Mitsonobu. A preparação de éteres aromáticos por meio da reacção de Mitsonobu é descrita, por exemplo, em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, p. 448, e em Advanced Organic Chemistry, Parte B, por F.A, Carey e R. J. Sundberg, Plenum, 2001, págs. 153-4 e em Org. React, 1992, 42, 335. O fenol ou tiofenol e o componente álcool são reagidos em conjunto num solvente aprótico, tal como, por exemplo, tetrahidrofurano, na presença de uma azodicarboxilato de dialquilo e triarilfosfina, para se obter os produtos éter ou tioéter. O procedimento é também descrito em Org. React., 1992, 42, 335-656. A reacção produz o éter fenólico 62.21. O grupo carbometoxi é então reduzido por reacção com boro-hidreto de sódio, como descrito antes, para se obter o carbinol 62.22.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 3-hidroxi-fenilalanina 62.13, diferentes fenilalaninas substituídas com hidroxi ou mercapto 62.1 e/ou diferentes hidroxi-alquil-fosfonatos de dialquilo 62.20, os produtos correspondentes 62.9 são obtidos.
Como um outro exemplo dos métodos ilustrados no Esquema 62, 4-mercaptofenilalanina 62.23, preparada como descrito em J. Am. Chem. Soc. 1997, 119, 7173, é convertida no éster benzilico 62.24 por meio de reacção convencional de esterificação catalisada por ácido. O grupo mercapto é então protegido por conversão no grupo S-adamantilo, por reacção com 1-adamantanol e ácido trifluoroacético, à temperatura ambiente, como descrito em Chem. Pharm. Buli., 196 26, 1576, 1978. 0 grupo amino é então convertido no grupo ftalimido, como descrito antes, e o radical éster é hidro-lisado com base aquosa para se obter o ácido carboxilico 62.27. Este último composto é então transformado, por meio de série de reacções, como ilustrado no Esquema 60, na carbometoxi-oxazolidinona 62.28. O grupo de protecção adamantilo é então removido por tratamento do tioéter 62.28 com acetato mercúrico em ácido trifluoroacético a 0o, como descrito em Chem. Pharm. Buli., 26, 1576, 1978, para produzir o tiol 62.29. O tiol é então reagido com um equivalente molar de bromoetilfosfonato de dialquilo 62.30 (Aldrich) e carbonato de césio em dimetilformamida a 70°C para se obter o produto tioéter 62.31. O grupo carbometoxi é então reduzido com boro-hidreto de sódio, como descrito antes, para preparar o carbinol 62.32.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 4-mercaptofenilalanina 62.23, diferentes fenilalaninas substituídas hidroxi ou mercapto 62.1 e/ou diferentes bromoalquil-fosfonatos de dialquilo 62.10, os produtos correspondentes 62.12 são obtidos.
Esquema 60
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Esquema 61 197 Método
Esquema 62 Método
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Esquema 62 Exemplo 1 198
Esquema 62 Exemplo 2
Preparação de derivados de tiofenol contendo fosfonato 7.2
Esquemas 63 - 83 descrevem a preparação de derivados de tiofenol contendo fosfonato 7.2 que são utilizados, como descrito antes (Esquemas 7-9) na preparação dos intermediários de éster de fosfonato 1 que X é enxofre. 199
Esquema 63 mostra a preparação de derivados de tiofenol, em que o radical fosfonato está ligado directamente no anel fenilo. Neste procedimento, tiofenol substituído com halo 63.1 é protegido para se obter o produto 63.2. A protecção de grupos fenil-tiol é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p. 277. Por exemplo, substituintes tiol podem ser protegidos como grupos trialquilsililoxi. Grupos trialquilsililo são introduzidos por reacção do tiofenol com cloro-trialquilsilano e uma base, tal como imidazol, por exemplo, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, pág. 10, págs. 68-86. Em alternativa, substituintes tiol podem ser protegidos por conversão em tioéteres de terc-butilo ou adamantilo ou tioéteres de 4-metoxibenzilo, preparados por reacção entre o tiol e cloreto de 4-metoxibenzilo, na presença de hidróxido de amónio, como descrito em Buli. Chem. Soc. Jpn., 37, 433, 1974. O produto é então acoplado, na presença de trietilamina e tetraquis(trifenilfosfina)paládio(0), como descrito em J. Med. Chem., 35, 1371, 1992, com um fosfito de dialquilo 63.3, para se obter o éster fosfonato 63.4. O tiol grupo de protecção é então removido, como descrito antes, para se obter o tiol 63.5.
Por exemplo, 3-bromotiofenol 63.6 é convertido no derivado 9-fluorenilmetilo (Fm) 63.7 por reacção com cloreto de 9-fluorenilmetilo e diisopropiletilamina em dimetilformamida, como descrito em Int. J. Pept. Protein Res., 20, 434, 1982. O produto é então reagido com um fosfito de dialquilo 63.3, como descrito antes, para se 200 obter o éster fosfonato 63.8. O grupo de protecção Fm é então removido por tratamento do produto com piperidina em dimetilformamida à temperatura ambiente, como descrito em J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1501, 1986, para se obter o tiol 63.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 3-bromotiofenol 63.6, diferentes tiofenóis 63.1 e/ou diferentes fosfitos de dialquilo 63.3, os produtos correspondentes 63.5 são obtidos.
Esquema 64 ilustra um método alternativo para obter tiofenóis com grupo fosfonato directamente fixado. Neste procedimento, tiofenol substituído com halo e adequadamente protegido 64.2 é metalado, por exemplo, por reacção com magnésio ou por transmetalação com um reagente de alquil lítio, para se obter o derivado metalado 64.3. Este último composto é reagido com halofosfito de dialquilo 64.4 para se obter o produto 64.5; desprotecção proporciona então o tiofenol 64.6
Por exemplo, 4-bromotiofenol 64.7 é convertido no derivado S-trifenilmetilo (tritilo) 64.8, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T. W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley, 1991, págs. 287. 0 produto é convertido no derivado litio 64.9 por reacção com butil-lítio num solvente etéreo em baixa temperatura e o composto lítio resultante é reagido com clorofosfito de dialquilo 64.10 para se obter o fosfonato 64.11. Remoção do grupo tritilo, por exemplo, por tratamento com ácido clorídrico diluído em ácido acético, como descrito em J. Org. Chem., 31, 1118, 1966, proporciona então o tiol 64.12.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 64.7, diferentes 201 compostos halo 64.1 e/ou diferentes halofosfitos de dialquilo 64.4, são obtidos correspondentes tióis 64.6.
Esquema 65 ilustra a preparação de tiofenóis substituídos com fosfonato, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de uma ligação de carbono. Neste procedimento, tiofenol substituído com metilo e adequadamente protegido 65.1 é submetido a bromação de radical livre para se obter um produto bromometilo 65.2. Este composto é reagido com dialquil-fosfito de sódio 65.3 ou um fosfito de trialquilo, para se obter o produto de deslocamento ou rearranjo 65.4, que, após a desprotecção, proporciona o tiofenol 65.5.
Por exemplo, 2-metiltiofenol 65.6 é protegido por conversão no derivado benzoílo 65.7, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T. W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley, 1991, págs. 298. O produto é reagido com N-bromossuccinimida em acetato de etilo para se obter o produto bromometilo 65.8. Este material é reagido com dialquil-fosfito de sódio 65.3, como descrito em J. Med, Chem., 35, 1371, 1992, para se obter o produto 65.9. Em alternativa, o composto de bromometilo 65.8 é convertido no fosfonato 65.9 por meio da reacção de Arbuzov, por exemplo, como descrito em Handb. Organophosphorus Chem., 1992, 115. Neste procedimento, o composto de bromometilo 65.8 é aquecido com fosfato de trialquilo P(OR1)3 a cerca de 100° para produzir o fosfonato 65.9. Desprotecção do fosfonato 65.9, por exemplo, por tratamento com amónia aquosa, como descrito em J. Am. Chem. Soc. 85, 1337, 1963, proporciona então o tiol 65.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de composto de bromometilo 65.8, 202 diferentes compostos bromometilo 65.2, são obtidos correspondentes tióis 65.5.
Esquema 66 ilustra a preparação de tiofenóis contendo um grupo fosfonato ligado ao núcleo fenilo por oxigénio ou enxofre. Neste procedimento, hidroxi ou tiofenol substituído com tio e adequadamente protegido 66.1 é reagido com hidroxi-alquilfosfonato de dialquilo 66.2 sob as condições de reacção de Milsonobu, por exemplo, como descrito em Org. React, 1992, 42, 335, para se obter o produto acoplado 66.3. Desprotecção então produz os produtos ligados a O ou S 66.4.
Por exemplo, o substrato 3-hidroxi-tiofenol 66.5, é convertido no éter monotritílico 66.6 por reacção com um equivalente de cloreto de tritilo, como descrito antes. Este composto é reagido com azodicarboxilato de dietilo, trifenilfosfina e 1-hidroxi-metil-fosfonato de dialquilo 66.7 em benzeno, como descrito em Synthesis, 4, 327, 1998, para se obter o éter composto 66.8. Remoção do grupo de protecção tritilo, como descrito antes, proporciona então o tiofenol 66.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de fenol 66.5, diferentes fenóis ou tiofenóis 66.1, são obtidos correspondentes tióis 66.4.
Esquema 63 Método
63.1 63.4 63.5 Ha = halogénio mâ
203Exemplo SH "Sr SS.S
SFm 63,7 Fm = 9-fluorenilmetilo
SH A«m fA’
Esquema 64Método mΆ,
HS^OKOR*)^ 64,4 fsí-g
SH SÍf
64,7 64,6 PWifOR*}* 64.6 acf% 1 6r 64.8
SCRfc y 64J
Esquema 65 Método ÍSH3: c im Pm. HaPíOMOR^feg^ í£., «... 65-5
SH CH» 6S,1 CHgSt 60
bHjPSOUOH^a CHÈF{OKÓR )g 65,4 SS.S
Exemplo
SH
SSJ SCOPh,Μθ
63,7 SDOPh
SGCPh N#P)(QSV 65J 65,3 $5.6
SH
ftOMpR^fe mis
Esquema 66 204 Método SH]
Xa®, $ 6S.1
Exemplo
(S5L8
Esquema 67 ilustra a preparação de tiofenóis 67.4 contendo um grupo fosfonato ligado ao núcleo fenilo por oxigénio, enxofre ou azoto. Neste procedimento, tiofenol substituído com O, S ou N e adequadamente protegido 67.1 é reagido com éster activado, por exemplo, trifluorometanossulfonato 67.2 de hidroxi-alquil-fosfonato de dialquilo, para se obter o produto acoplado 67.3. Desprotecção proporciona então o tiol 67.4.
Por exemplo, 4-metilominotiofenol 67.5 é reagido em solução de diclorometano com um equivalente de cloreto de acetilo e uma base, tal como piridina, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T. W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley, 1991, págs. 298, para se obter produto 205 S-acetilo 67.6. Este material é então reagido com trifluorometanossulfonilmetilfosfonato de dialquilo 67.7, cuja preparação é descrita em Tet. Lett, 1986, 27, 1477, para se obter o produto de deslocamento 67.8. De preferência, quantidades equimolares do fosfonato 67.7 e a amina 67.6 são reagidas em conjunto num solvente aprótico, tal como diclorometano, na presença de uma base, tal como 2,6-lutidina, à temperatura ambiente, para se obter o produto fosfonato 67.8. Desprotecção, por exemplo, por tratamento com hidróxido de sódio aquoso diluido durante dois minutos, como descrito em J. Am. Chem. Soc. 85, 1337, 1963, proporciona então o tiofenol 67.9. Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de tioamina 67.5, diferentes fenóis, tiofenóis ou aminas 67.1 e/ou diferentes fosfonatos 67.2, são obtidos os produtos correspondentes 67.4.
Esquema 68 ilustra a preparação de ésteres de fosfonato ligados a um núcleo tiofenol por meio de heteroátomo e uma cadeia de carbonos múltiplos, utilizando uma reacção de deslocamento nucleofilica num bromoalquil-fosfonato de dialquilo 68.2. Neste procedimento, tiofenol substituído com hidroxi, tio ou amino e adequadamente protegido 68.1 é reagido com bromo-alquil-fosfonato de dialquilo 68.2 para se obter o produto 68.3. Desprotecção proporciona então o tiofenol livre 68.4.
Por exemplo, 3-hidroxi-tiofenol 68.5 é convertido no composto S-tritilo 68.6, como descrito antes. Este composto é então reagido como por exemplo, um 4-bromo-butil-fosfonato de dialquilo 68.7, cuja sintese é descrita em Synthesis, 1994, 9, 909. A reacção é efectuada num solvente aprótico dipolar, por exemplo, dimetilformamida, na 206 presença de uma base, tal como carbonato de potássio, e facultativamente na presença de uma quantidade catalítica de iodeto de potássio, a cerca de 50°, para se obter o produto éter 68.8. Desprotecção, como descrito antes, proporciona então o tiol 68.9. Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de fenol 68.5, diferentes fenóis, tiofenóis ou aminas 68.1 e/ou diferentes fosfonatos 68.2, são obtidos os produtos correspondentes 68.4.
Esquema 69 mostra a preparação de ésteres de fosfonato ligados a um núcleo tiofenol por meio de cadeias de carbono insaturadas e saturadas. A ligação por cadeia carbono é formada por meio de reacção de Heck catalisada por paládio, em que um fosfonato olefínico 69.2 é acoplado com um composto de bromo aromático 69.1. 0 acoplamento de halogenetos de arilo com olefinas por reacção de Heck é descrito, por exemplo, em Advanced Organic Chemistry, por F. A. Carey e R. J. Sundberg, Plenum, 2001, p. 503ff e em Acc. Chem. Res., 12, 146, 1979. 0 brometo de arilo e a olefina são acoplados num solvente polar, tal como dimetilformamida ou dioxano, na presença de um catalisador de paládio (0) como um catalisador de tetraquis-(trifenilfosfina)-paládio (0) ou paládio (II), tal como acetato de paládio (II), e facultativamente na presença de uma base, tal como trietilamina ou carbonato de potássio, para se obter o produto acoplado 69.3. Desprotecção, ou hidrogenação da ligação dupla seguido por desprotecção, proporciona, respectivamente o fosfonato insaturado 69.4, ou o análogo saturado 69.6.
Por exemplo, 3-bromotiofenol é convertido no derivado S-Fm 69.7, como descrito antes, e este composto é reagido 207 com 1-butenil-fosfonato de dialquilo 69.8, cuja preparação é descrita em J. Med. Chem., 1996, 39, 949, na presença de uma catalisador de paládio (II), por exemplo, cloreto de bis(trifenilfosfina) paládio (II), como descrito em J. Med. Chem, 1992, 35, 1371. A reacção é efectuada num solvente dipolar aprótico, tal como, por exemplo, dimetilformamida, na presença de trietilamina, a cerca de 100° para se obter o produto acoplado 69.9. Desprotecção, como descrito antes, proporciona então o tiol 69.10. Facultativamente, o fosfonato insaturado inicialmente formado 69.9 é submetido a redução, por exemplo, utilizando diimida, como descrito antes, para se obter o produto saturado 69.11, que, após a desprotecção, proporciona o tiol 69.12.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 69.7, diferentes compostos bromo 69.1 e/ou diferentes fosfonatos 69.2, são obtidos os produtos correspondentes 69.4 e 69.6.
Esquema 67 Método
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Exemplo
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Esquema 68 Método 208fsHi , \m I Br<eStí^P(0« k „
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Esquema 69 Método
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Exemplo
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Esquema 70 ilustra a preparação de éster fosfonato ligado a arilo 70.4 por meio de reacção catalisada por paládio (0) ou paládio(II) de acoplamento entre bromobenzeno e um ácido fenil-borónico, como descrito em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, p. 57. 0 ácido fenil borónico substituído com enxofre 70.1 é obtido por meio de sequência de metalação boronação aplicada tiofenol protegido e substituído com bromo, por exemplo, como descrito em J. Org. Chern., 49, 5237, 1984. Uma reacção de acoplamento proporciona então o produto diarilo 70.3 que é desprotegido para se obter o tiol 70.4.
Por exemplo, protecção de 4-bromotiofenol por reacção com terc-butilclorodimetilsilano, na presença de uma base, tal como imidazol, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T. W. Greene e P.G.M. Wuts, Wiley, 1991, p. 297, seguido por metalação com butil-lítio e boronação, como descrito em J. Organomet. Chem., 1999, 581, 82, proporciona boronato 70.5. Este material é reagido com 4-bromofenilfosfonato de dialquilo 70.6, cuja preparação é descrita em J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1977, 2, 789, na presença de tetraquis(trifenilfosfina) paládio (0) e uma base inorgânica, tal como carbonato de sódio, para se obter 210 o produto acoplado 70.7. Desprotecção, por exemplo, utilizando fluoreto de tetrabutilamónio em tetrahidrofurano anidro, então produz o tiol 70.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de boronato 70.5, diferentes boronatos 70.1 e/ou diferentes fosfonatos 70.2, são obtidos os produtos correspondentes 70.4.
Esquema 71 mostra a preparação de dialquil fosfonatos, em que o radical fosfonato é ligado a um grupo tiofenilo por meio de uma cadeia que incorpora um anel aromático ou heteroaromático. Neste procedimento, tiofenol substituído com O, S ou N e adequadamente protegido 71.1 é reagido com aril- ou heteroaril-fosfonato de dialquilo substituído com bromometilo 71.2, preparado, por exemplo, por reacção de Arbuzov entre quantidades equimolares de composto aromático substituído com bis (bromo-metilo) e um fosfito de trialquilo. Um produto de reacção 71.3 é então desprotegido para se obter o tiol 71.4. Por exemplo, 1,4-dimercaptobenzeno é convertido no monoéster de benzoílo 71.5 por reacção com um equivalente molar de cloreto de benzoílo, na presença de uma base, tal como piridina. O tiol monoprotegido 71.5 é então reagido com 4-(bromometil)-fenilfosfonato de dialquilo 71.6, cuja preparação é descrita em Tetrahedron, 1998, 54, 9341. A reacção é efectuada num solvente, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, a cerca de 50°. O produto tioéter 71.7 assim obtido é desprotegido, como descrito antes, para se obter o tiol 71.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de tiofenol 71.5, diferentes fenóis, 211 tiofenóis ou aminas 71.1 e/ou diferentes fosfonatos 71.2, são obtidos os produtos correspondentes 71.4.
Esquema 72 ilustra a preparação de tiofenóis contendo fosfonato, em que a cadeia de fosfonato fixado forma um anel com o radical tiofenol.
Neste procedimento, tiofenol adequadamente protegido 72.1, por exemplo, indolina (em que X-Y é (CH2)2), um indol (X-Y é CH=CH) ou uma tetra-hidroquinolina (X-Y é (CH2)3) é reagido com trifluorometanossulfoniloximetil-fosfonato de dialquilo 72.2, na presença de uma base orgânica ou inorgânica, um solvente aprótico polar, tal como, por exemplo, dimetilformamida, para se obter o éster fosfonato 72.3. Desprotecção, como descrito antes, proporciona então o tiol 72.4. A preparação de indolinas substituídas com tio é descrita em EP 209751. Indóis, indolinas e tetra-hidroquinolinas substituídos com tio também podem ser obtidos a partir de correspondentes compostos substituídos com hidroxi, por exemplo, por rearranjo térmico dos ésteres de dimetiltiocarbamoílo, como descrito em J. Org. Chem., 31, 3980, 1966. A preparação de indóis substituídos com hidroxi é descrita em Syn., 1994, 10, 1018; preparação de indolinas substituídas com hidroxi é descrita em Tet. Lett, 1986, 27, 4565, e a preparação de tetra-hidroquinolinas substituídas com hidroxi é descrita em J. Het. Chem., 1991, 28, 1517, e em J. Med. Chem., 1979, 22, 599. Indóis, indolinas e tetra-hidroquinolinas substituídos com tio também podem ser obtidos a partir de correspondentes compostos amino e bromo, respectivamente por diazotação, como descrito em Sulfur Letters, 2000, 24, 123, ou por reacção de derivado organolítio ou magnésio com enxofre, como descrito em Comprehensive Organic Functional Group 212
Preparations, A.R. Katritzky et al., eds, Pergamon, 1995, Vol. 2, pág. 707.
Por exemplo, 2,3-di-hidro-lH-indol-5-tiol 72.5, cuja preparação é descrita em EP 209751, é convertido no éster benzoílico 72.6, como descrito antes, e o éster é então reagido com trifluorometanossulfonato 72.7, num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, para se obter o fosfonato 72.8. Desprotecção, por exemplo, por reacção com amónia aquosa diluída, como descrito antes, proporciona então o tiol 72.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do tiol 72.5, diferentes tióis 72.1 e/ou diferentes triflatos 72.2, são obtidos os produtos correspondentes 72.4.
Esquema 70 Método P{0}(QR\
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PtOKOR1}* 70.7 70.S P<0)PR’}2 70.® 213 Esquema 71 Método ,ΡΙΟ’ΗΟ^
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Exemplo
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Preparação de análogos de isobutilamina contendo fosfonato 10.2.
Esquemas 73 - 75 ilustram a preparação do análogos de isobutilamina contendo fosfonato que são utilizados na preparação dos ésteres de fosfonato 2.
Esquema 73 mostra a preparação de fosfonatos que estão ligados a isobutilamina por meio de ligação amida. Neste procedimento, um aminoácido 73.1 é protegido para se obter o produto 73.2. A protecção de grupos amino é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, 309. Grupos amino são protegidos, por exemplo, por conversão em carbamatos como o derivado terc-butoxicarbamato (BOC), ou por reacção com anidrido ftálico para se obter derivado ftalimido (phth). O aminoácido protegido com amina 73.2 é então acoplado com aminoalquil-fosfonato de dialquilo 73.3 para 214 se obter a amida 73.4. A preparação de amidas a partir de ácidos carboxilicos e derivados é descrita, por exemplo, em Organic Functional Group Preparations, por S.R. Sandler e W. Karo, Academic Press, 1968, pág. 274, e Comprehensive Organic Transformafions, por R. C. Larock, VCH, 1989, pág. 972 e seguintes. 0 ácido carboxilico é reagido com a amina, na presença de um agente de activação, tal como, por exemplo, diciclo-hexilcarbodiimida ou diisopropilcarbodiimida, facultativamente na presença, por exemplo, de hidroxi-benzotriazol, N-hidroxissuccinimida ou N-hidroxipiridona, um solvente não prótico, tal como, por exemplo, piridina, DMF ou diclorometano, para proporcionar a amida.
Em alternativa, o ácido carboxilico pode ser primeiro convertido num derivado activado como o cloreto de ácido, anidrido, anidrido misto, imidazolida e outros, e então reagido com amina, na presença de uma base orgânica, tal como, por exemplo, piridina, para se obter a amida. 0 grupo de protecção é então removido para se obter a amina 73.5. Desprotecção de aminas é descrita em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, pág. 309ff. Por exemplo, grupos BOC são removidos por tratamento com ácidos como ácido trifluoroacético, e grupos ftalimido são removidos por reacção com hidrato de hidrazina.
Por exemplo, ácido 2-metil-4-aminobutírico 73.6 (Acros) é reagido com anidrido ftálico em tolueno ao refluxo, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, pág. 358, para se obter derivado ftalimida 73.7. O produto é acoplado com aminoetil-fosfonato de 215 dialquilo 73.8, cuja preparação é descrita em J. Org. Chem., 2000, 65, 676, na presença de diciclo-hexilcarbodiimida, para se obter a amida 73.0. O grupo de protecção é removido por reacção do produto com hidrazina etanólica à temperatura ambiente, como descrito em Protective Groups in Organic Synthesis, por T.W. Greene e P.G.M Wuts, Wiley, Segunda edição 1990, p 358, para se obter a amina 73.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de ácido 73.6, diferentes ácidos 73.1 e/ou diferentes aminas 73.3, correspondentes amidas 73.5 são obtidas.
Esquema 74 mostra a preparação de isobutilamina fosfonatos, em que o fosfonato está ligado por meio de anel aromático. Neste procedimento, 2-metil-but-3-enilamina 74.1, preparada como descrito em Org. Prep. Proc. Int. 1976, 8, 75, é acoplada, na presença de um catalisador de paládio, como descrito antes (Esquema 50) com bromofenil-fosfonato de dialquilo 74.2 para se obter o produto olefinico 74.3. Facultativamente, o produto é reduzido para se obter o análogo saturado 74.4. A redução é efectuada cataliticamente, por exemplo, utilizando catalisador de paládio, ou quimicamente, por exemplo, utilizando diimida.
Por exemplo, a amina 74.1 é acoplada com 4-bromofenil-fosfonato de dialquilo 74.5, preparado como descrito em J. Organomet. Chem., 1999, 581, 62, para se obter o produto 74.0. Hidrogenação catalítica em etanol, utilizando um catalisador de paládio a 5%, proporciona então composto saturado 74.7. 216
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de fosfonato 74.5, diferentes fosfonatos 74.2, os produtos correspondentes 74.3 e 74.4 são obtidos.
Esquema 75 ilustra a preparação de isobutilamina fosfonatos, em que o grupo fosfonato está ligado por meio da cadeia alquileno. Neste procedimento, bromoamina 75.1 é protegida, como descrito no esquema 73, para se obter derivado 75.2. 0 produto é então reagido com um fosfito de trialquilo 75.3, por reacção de Arbuzov, como descrito no esquema 65, para se obter o fosfonato 75.4. Desprotecção proporciona então a amina 75.5.
Por exemplo, 4-bromo-2-metil-butilamina 75.6, preparada como descrito em Tet, 1998, 54, 2365, é convertida, como descrito antes, no derivado ftalimido 75.7. 0 produto é então aquecido a 110° com um fosfito de trialquilo 75.3 para se obter o fosfonato 75.8, que, após a reacção com hidrazina etanólica, proporciona a amina 75.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de brometo 75.6, diferentes brometos 75.1 e/ou diferentes fosfitos 75.3, os produtos correspondentes 75.5 são obtidos.
Esquema 72 Método
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Exemplo 217
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Esquema 73 Método
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Esquema 74 Método
74.1
74 J 74,7 218 Esquema 75 Método ^CHuy* 1 NHj py |ΝΗίΓ 7S.1 7SJ 75.4 Exemplo jCHsSr 7S..3 r NHp)#í NHptrtíi 75.8 l&J 7SA fJHg 75.$ ns
Preparação de ciclopentilmetilonina-fosfonatos.
Esquemas 76-78 ilustram a preparação de ciclopentilmetilonina-fosfonatos que são utilizados, como ilustrado nos esquemas 10 - 12, na preparação dos ésteres de fosfonato 3.
Esquema 76 mostra a preparação de fosfonatos fixados ao anel ciclopentilo directamente ou por meio de ligação alcoxi. Neste procedimento, ciclopentilmetilonina substituída com hidroxi 76.1 é convertida no brometo 76.3, por exemplo, por tratamento com tetrabrometo de carbono e trifenilfosfina, como descrito no esquema 59. O composto de bromo é então reagido com um fosfito de trialquilo 76.4 em reacção de Arbuzov, como descrito antes, para se obter o fosfonato 76.5 que é então desprotegido para se obter a amina 76.6. Em alternativa, a amina protegida 76.2 é reagida com bromo-alquil-fosfonato de dialquilo 76.7 para se obter o éter 76.8. A reacção de alquilação é efectuada a cerca de 100° num solvente orgânico polar, tal como 219 dimetilformamida, na presença de uma base, tal como hidreto de sódio ou hexametildissililazida de lítio. 0 produto é então desprotegido para se obter a amina 76.9.
Por exemplo, 3-aminometil-ciclopentanol 76.10, preparado como descrito em Tet, 1999, 55, 10815, é convertido, como descrito antes, no derivado ftalimido 76.11. O produto é então convertido, como descrito antes, no análogo bromo 76.12. Este último composto é reagido a cerca de 120° com um fosfito de trialquilo 76.4 para se obter o fosfonato 76.13, que, após a desprotecção, por reacção com hidrazina produz a amina 76.14.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de brometo 76.12, diferentes brometos 76.3 e/ou diferentes fosfitos 76.4 os produtos correspondentes 70.0 são obtidos.
Em alternativa, 2-aminometil-ciclopentanol 76.15, preparado como descrito em Tet., 1999, 55, 10815, é convertido no derivado ftalimido 76.16. O produto é então reagido em solução de dimetilformamida com uma quantidade equimolar de bromopropil-fosfonato de dialquilo 76.17, preparado como descrito em J. Am. Chem. Soc. 2000, 122, 1554, e hidreto de sódio, para se obter o éter 76.18. Desprotecção, como descrito antes, proporciona então a amina 76.19.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do carbinol 76.15, diferentes carbinóis 76.1 e/ou diferentes fosfonatos 76.7, os produtos correspondentes 76.9 são obtidos.
Esquema 77 ilustra a preparação de ciclopentil-metilaminas, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de grupo amida. Neste procedimento, ciclopentilmetilamina 220 substituída com carboxialquilo 77.1 é protegida para se obter derivado 77.2. O produto é então acoplado, como descrito antes (Esquema 1), com aminoalquil-fosfonato de dialquilo 77.3 para se obter a amida 77.4. Desprotecçâo proporciona então a amina 77.5.
Por exemplo, ácido 3-aminometil-ciclopentano-carboxílico 77.8 preparado como descrito em J. Chem. Soc. Perkin 2, 1995, 1381, é convertido no derivado BOC 77.7, por reacção com anidrido BOC em hidróxido de sódio aquoso, como descrito em Proc. Nat. Acad. Sei., 69, 730, 1972. O produto é então acoplado, na presença de diciclo-hexil-carbodiimida, com aminopropil-fosfonato de dialquilo 77.8 para produzir a amida 77.9. Remoção do grupo BOC, por exemplo, por tratamento com cloreto de hidrogénio em acetato de etilo, proporciona então a amina 77.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do ácido carboxílico 77.6, diferentes ácidos carboxílicos 77.1 e/ou diferentes fosfonatos 77.3, os produtos correspondentes 77.5 são obtidos.
Esquema 78 ilustra a preparação de ciclopentilmetilaminas, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de grupo aminoalquilo. Neste procedimento, o grupo amino mais reactivo de ciclopentilmetilamina substituída com amino 78.1 é protegido, para se obter derivado 78.2. O produto é então acoplado, por meio de reacção de aminação redutiva, como descrito no esquema 55, com formilalquil-fosfonato de dialquilo 78.3 para se obter o produto amina 73.4, que, após a desprotecçâo, proporciona a amina 78.5.
Por exemplo, 2-aminometil-ciclopentilamina 78.6, preparada como descrito em WO 9811052, é reagida com um 221 equivalente molar de anidrido ftálico em tetrahidrofurano ao refluxo, para se obter derivado ftalimido 78.7. Este último composto é reagido, na presença de cianoboro-hidreto de sódio, com formilmetil-fosfonato de dialquilo 78.8, preparado como descrito em Zh. Obschei. Khim., 1987, 57, 2793, para se obter o produto 78.9. Desprotecção, como descrito antes, então produz a amina 78.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de diamina 78.6, diferentes diaminas 78.1 e/ou diferentes fosfonatos 78.3, os produtos correspondentes 78.5 são obtidos.
Esquema 76 Método
Exemplo 1
75UO NMí&tft MHjshSh NM* 76.12 76.13 MM mu
Exemplo 2 222
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Esquema 77 Método NHj 77,1
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77.4 77J Exemplo
Esquema 78 Método
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Exemplo 223
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Preparação de fluorobenzilaminas substituídas com fosfonatos 39.2
Esquemas 79 e 80 ilustram a preparação de 3-fluorobenzilaminas substituídas com fosfonato 39.2 que são utilizadas na preparação dos ésteres de fosfonato 6.
Esquema 79 mostra a preparação de fluorobenzilaminas, em que o fosfonato está ligado por meio de uma ligação amida ou aminoalquilo. Neste procedimento, o grupo amino mais reactivo da 3-fluorobenzilamina substituída com amino 79.1 é protegido. O produto 79.2 é então acoplado com carboxialquil-fosfonato de dialquilo 79.3 para se obter a amida 79.4, que, após a desprotecção, produz a amina livre 79.5. Em alternativa, a diamina monoprotegida 79.2 é acoplada, sob condições de aminação redutiva, com formilalquil-fosfonato de dialquilo 79.6 para produzir a amina 79.7, que, após a desprotecção, proporciona a benzilamina 79.8.
Por exemplo, 4-amino-3-fluorobenzilamina 79.9, preparada como descrito em WO 9417035, é reagida em solução de piridina com um equivalente molar de anidrido acético, para se obter produto acetilamino 79.10. O produto é reagido com carboxietil-fosfonato de dialquilo 79.11, (Epsilon) e diciclo-hexilcarbodiimida para se obter a amida 79.12. Desprotecção, por exemplo, por reacção com hidrazina a 85%, como descrito em J. Org. Chem, 43, 4593, 1978, proporciona então a amina 79.13. 224
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de diamina 79.9, diferentes diaminas 79.1 e/ou diferentes fosfonatos 79.3, os produtos correspondentes 79.5 são obtidos. Como outro exemplo, a diamina monoprotegida 79.10 é reagida, como descrito antes, com formil-fosfonato de dialquilo 79.13 (Aurora) e cianoboro-hidreto de sódio para se obter o produto de aminação 79.14. Desprotecção proporciona então a amina 79.15.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de diamina 79.10 diferentes diaminas 79.2 e/ou diferentes fosfonatos 79.6, os produtos correspondentes 79.8 são obtidos.
Esquema 80 mostra a preparação de fluorobenzilaminas, em que o fosfonato está ligado directamente ou por meio de ligação alquileno saturada ou insaturada. Neste procedimento, a 3-fiuorobenzilamina substituída com bromo 80.1 é protegida. O produto 80.2 é acoplado por meio de reacção de Heck catalisada por paládio, como descrito no esquema 50, com alcenil-fosfonato de dialquilo 80.3 para se obter produto olefínico 80.4 que, após a desprotecção, proporciona a amina 80.5. Facultativamente, a dupla ligação é reduzida, por exemplo, por hidrogenação catalítica num catalisador de paládio, para se obter o análogo saturado 80.9. Em alternativa, a bromo-benzilamina protegida 80.6 é acoplada, como descrito no esquema 61, na presença de um catalisador de paládio, com um fosfito de dialquilo 80.6 para produzir o fosfonato 80.7. Desprotecção proporciona então a amina 80.8.
Por exemplo, 2-bromo-5-fIuorobenzilamina 80.10, (Esprix Fine Chemicals) é convertida, como descrito antes, 225 no derivado N-acetilo 80.11. O produto é acoplado em solução de dimetilformamida com vinil-fosfonato de dialquilo 80.12, (Fluka), na presença de acetato de paládio (II) e trietilamina, para se obter o produto acoplado 80.13. Desprotecção proporciona então a amina 80.14 e hidrogenação de último composto produz o análogo saturado 80.15.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 80.10 diferentes compostos bromo 80.1 e/ou diferentes fosfonatos 80.3, os produtos correspondentes 80.5 e 80.9 são obtidos.
Como outro exemplo, a amina protegida 80.11 é acoplada em tolueno, a 100°, com um fosfito de dialquilo 80.6, na presença de tetraquis(trifenilfosfina)-paládio e uma base orgânica terciária, como trietilamina, para se obter o fosfonato 80.16. Desprotecção proporciona então a amina 80.17.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 80.11, diferentes compostos bromo 80.2 e/ou diferentes fosfitos 80.6, os produtos correspondentes 80.8 são obtidos.
Esquema 79 Método
ms 226Exemplo 1
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Exemplo 2 {^OfePpJÇHQ (R °y {rfomoiãizNht^, 79.10 p-A^V^fíNAc 79.14
79.15
Esquema 80 Método
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Exemplo 1
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10.15 89,14 227
Exemplo 2
227 P
NHAé mu
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Preparação de fluorobenzilaminas substituídas com fosfonato 39.4
Esquemas 81 e 82 ilustram a preparação de 3-fluorobenzilaminas substituídas com fosfonato 39.4 que são utilizadas na preparação dos ésteres de fosfonato 7.
Esquema 81 mostra a preparação de 3-fluorobenzilaminas, em que o qrupo fosfonato está ligado por meio de uma ligação amida. Neste procedimento, 3-fluorofenilalanina 81.1 (Alfa Aesar) é convertida no derivado BOC 81.2. 0 produto é então acoplado com aminoalquil-fosfonato de dialquilo 81.3 para se obter a amida 81.4, que, após a desprotecção, proporciona a amina 81.5.
Por exemplo, o aminoácido BOC-protegido 81.2 é acoplado, na presença de diciclo-hexilcarbodiimida, com aminometil-fosfonato de dialquilo 81.6 (Interchim) para preparar a amida 81.7. Desprotecção proporciona então a amina 81.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez da amina 81.6, diferentes aminas 81.3, os produtos correspondentes 81.5 são obtidos.
Esquema 82 ilustra a preparação de derivados de fluorobenzilamina, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de cadeia alquilo ou alcoxi. Neste procedimento, 3-fluorobenzilamina substituída com hidroxialquilo 82.1 é 228 convertida no derivado BOC 82.2. Este composto é então reagido com bromoalquil-fosfonato de dialquilo 82.3 para se obter o éter 82.4. A reacção de alquilação é efectuada num solvente orgânico polar, tal como N-metilpirrolidinona, na presença de uma base forte como bis(trimetilsilil)-amida de sódio. Desprotecção do produto proporciona então a amina 82.5. Em alternativa, carbinol N-protegido 82.2 é convertido no correspondente brometo 82.6, por exemplo, por reacção com N-bromoacetamtda e trifenilfosfina. 0 composto de bromo é então reagido com um fosfito de trialquilo por reacção de Arbuzov, como descrito antes, para se obter o fosfonato 82.8, que, após a desprotecção, proporciona a amina 82.9.
Por exemplo, 2-amino-2-(3-fluoro-fenil)-etanol 82.10, preparado como descrito em DE 4443892, é convertido no derivado BOC 82.11. Este último composto é então reagido em dimetilformamida a 100°C com bromoetil-fosfonato de dialquilo 82.12 (Aldrich) e hidreto de sódio para se obter o produto éter 82.13. Remoção do grupo BOC então produz a amina 82.14.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do carbinol 82.10, diferentes carbinóis 82.1 e/ou diferentes fosfonatos 82.3 os produtos correspondentes 82.5 são obtidos.
Como outro exemplo, o carbinol BOC-protegido 82.11 é reagido com tetrabrometo de carbono e trifenilfosfina para produzir o composto de bromo 82.15. Este material é aquecido a 120°C com excesso de um fosfito de trialquilo 82.7 para se obter o fosfonato 82.16. Desprotecção então produz a amina 82.17. 229
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do carbinol 82.11, diferentes carbinóis 82.2 e/ou diferentes fosfonatos 82.7, os produtos correspondentes 82.9 são obtidos.
Esquema 81 Método
Exemplo
Esquema 82 Método
8&S S&6 màvpmmh UM NHBQC t&4
„i#)a UM
Exemplo 1 230 230
8&14 .«HBOC * '0(CH^(0s(0R1“5$ t3íGHs)sPíOHORí
Preparação de derivados terc-butanol contendo fosfonato 30.1
Esquemas 83 - 86 ilustram a preparação dos derivados de terc-butanol 30.1 que são utilizados na preparação dos ésteres fosfonato 5.
Esquema 83 mostra a preparação de derivados de terc-butanol, em que o fosfonato está ligado por meio da cadeia alquileno. Neste procedimento, bromoalquil-carbinol 83.1 é reagido com um fosfito de trialquilo 83.2 por reacção de Arbuzov, para se obter o fosfonato 83.3. Por exemplo, 4-bromo-2-metil-butan-2-ol 83.4, preparado como descrito em Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001, 9, 525, e um fosfito de trialquilo 83.2 são aquecidos a cerca de 120°C para produzir o fosfonato 83.5.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do composto de bromo 83.4, diferentes compostos de bromo 83.1 e/ou diferentes fosfitos 83.2 os produtos correspondentes 83.3 são obtidos.
Esquema 84 mostra a preparação de derivados terc-butanol, em que o fosfonato está ligado por meio de ligação amida. Neste procedimento, um ácido carboxilico 84.1 é acoplado com aminoalquil-fosfonato de dialquilo 84.2 para proporcionar a amida 84.3. A reacção é efectuada sob as condições previamente descritas (Esquema 1) para a preparação de amidas.
Por exemplo, quantidades equimolares de ácido 3-hidroxi-3-metil-butírico 84.4 (Fluka) e aminoetil-fosfonato 231 de dialquilo 84.5, cuja preparação é descrita em J. Org. Chem., 2000, 65, 676, são reagidas em tetrahidrofurano, na presença de diciclo-hexilcarbodiimida para se obter a amida 84.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do ácido carboxilico 84.4, diferentes ácidos 84.1 e/ou diferentes aminas 84.2 os produtos correspondentes 84.3 são obtidos.
Esquema 85 mostra a preparação de derivados de terc-butanol, em que o fosfonato está ligado por meio de um heteroátomo e uma cadeia alquileno. Neste procedimento, carbinol substituído com hidroxi, mercapto ou amino 85.1 é reagido com bromo-alquil-fosfonato de dialquilo 85.2 para se obter o produto éter, tioéter ou amina 85.3. A reacção é efectuada num solvente orgânico polar, na presença de base adequada, como hidreto de sódio ou carbonato de césio.
Por exemplo, 4-mercapto-2-metil-butan-2-ol 85.4, preparado como descrito em Bioorg. Med. Chem, Lett., 1999, 9, 1715, é reagido em tetrahidrofurano contendo carbonato de césio com bromobutil-fosfonato de dialquilo 85.5, cuja preparação é descrita em Synthesis, 1994, 9, 909, para se obter o tioéter 85.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do tiol 85.4, diferentes álcoois, tiol ou aminas 85.1 e/ou diferentes brometos 85.2 os produtos correspondentes 85.3 são obtidos.
Esquema 86 mostra a preparação de derivados terc-butanol, em que o fosfonato está ligado por meio de um azoto e uma cadeia alquileno. Neste procedimento, hidroxi-aldeído 86.1 é reagido com a aminoalquil-fosfonato de 232 dialquilo 86.2 sob condições de aminação redutiva, como descrito antes (Esquema 55), para se obter a amina 86.3.
Por exemplo, 3-hidroxi-3-metil-butiraleido 86.4 e aminoetil-fosfonato de dialquilo 86.5, cuja preparação é descrita em J. Org. Chem., 2000, 65, 676, são reagidos juntos, na presença de triacetoxiboro-hidreto de sódio, para se obter a amina 86.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do aldeído 86.4, diferentes aldeídos 86.1 e/ou diferentes aminas 86.2 os produtos correspondentes 86.3 são obtidos.
Esquema 82 Exemplo 2
Esquema 83 Método
Exemplo
83,4
Esquema 84 Método
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Exemplo m&Kjm (R?o}£P{0)í.cH2)gNHs Hff^CHjOOOH MS*" HCrSHíCONHÍOHjfcPiOSjOR^
Esquema 85 Método »«1. ^ HO^íCHafeKH HO^ÍOH^XÍCH^PÍOKOR^ »,1 85.3
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Exemplo ÍR^PfQKCNgWâr mm :—;—^ mm Qmi HO^^SH ®SJ @S4 85,6
Esquema 86 Método
Me Mé NÔ^fÇH^CHQ 86,1 86.2
Me Me NO'X"'(CH,W1NH{CH2)mP{OKOR\.
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Exemplo 234 Me fite HO*-0»
m HG’ UÂ
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Preparação de carbamatos de benzilo contendo fosfonato 43.4
Esquemas 87 - 91 ilustram métodos para a preparação de carbamatos de benzilo 43.4 que são utilizados na preparação dos ésteres fosfonato 9. Os álcoois benzilicos são obtidos por redução de correspondentes benzaldeidos, cuja preparação é descrita nos esquemas 87 - 90.
Esquema 87 ilustra a preparação de benzaldeido-fosfonatos 87.3, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de cadeia alquileno incorporando um átomo de azoto. Neste procedimento, benzeno-dialdeido 87.1 é reagido com um equivalente molar de aminoalquil-fosfonato de dialquilo 87.2, sob condições de aminação redutiva, como descrito antes no Esquema 55, para se obter o produto fosfonato 87.3.
Por exemplo, benzeno-1,3-dialdeído 87.4 é reagido com aminopropil-fosfonato de dialquilo 87.5, (Acros) e triacetoxiboro-hidreto de sódio, para se obter o produto 87.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de benzeno-1,3-dicarboxaldeido 87.4, diferentes benzeno-dialdeidos 87.1 e/ou diferentes fosfonatos 87.2, os produtos correspondentes 87.3 são obtidos.
Esquema 88 ilustra a preparação de benzaldeído-fosfonatos ligados directamente ao anel benzeno ou ligados por meio de cadeia de carbono saturada ou insaturada. Neste 235 procedimento, bromobenzaldeído 88.1 é acoplado, como descrito antes, com alcenilfosfonato de dialquilo 88.2 para se obter fosfonato de alcenilo 88.3. Facultativamente, o produto é reduzido para se obter o éster de fosfonato saturado 88.4. Em alternativa, o bromobenzaldeído é acoplado, como descrito antes, com um fosfito de dialquilo 88.5 para se obter o formilfenilfosfonato 88.6.
Por exemplo, como ilustrado no Exemplo 1, 3-bromobenzaldeído 88.7 é acoplado com propenilfosfonato de dialquilo 88.8 (Aldrich) para se obter o produto propenilo 88.9. Facultativamente, o produto é reduzido, por exemplo, utilizando diimida, para se obter fosfonato de propilo 88.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 3-bromobenzaldeído 88.7, diferentes bromobenzaldeidos 88.1 e/ou diferentes fosfonatos de alcenilo 88.2, os produtos correspondentes 88.3 e 88.4 são obtidos.
Em alternativa, como ilustrado no Exemplo 2, 4-bromobenzaldeído é acoplado, na presença de um catalisador de paládio, com um fosfito de dialquilo 88.5 para se obter o produto 4-formilfenil-fosfonato 88.12.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 4-bromobenzaldeido 88.11, diferentes bromobenzaldeidos 88.1, os produtos correspondentes 88.6 são obtidos.
Esquema 89 ilustra a preparação de formilfenil-fosfonatos, em que o radical fosfonato está ligado por meio da cadeia alquileno incorporando dois heteroátomos de 0, S ou N. Neste procedimento, formilfenoxi-, feniltio- ou fenilamino-alcanol, -alcanotiol ou -alquilamina 89.1 são 236 reagidos com uma quantidade equimolar de haloalquil-fosfonato de dialquilo 89.2 para se obter produto fenoxi-, feniltio- ou fenilamino-fosfonato 89.3. A reacção de alquilação é efectuada num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida ou acetonitrilo, na presença de uma base. A base utilizada depende da natureza de nucleófilo 89.1. Nos casos em que Y é 0, uma base forte, tal como hidreto de sódio ou hexametildissilazida de litio, é utilizada. Nos casos em que Y é S ou N, uma base, tal como carbonato de césio ou dimetilaminopiridina, é utilizada.
Por exemplo, 2-(4-formilfeniltio)-etanol 89.4, preparado como descrito em Macromolecules, 1991, 24, 1710, é reagido em acetonitrilo a 60°C com um equivalente molar de iodometil-fosfonato de dialquilo 89.5 (Lancaster) para se obter o produto éter 89.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do carbinol 89.4, diferentes carbinóis, tióis ou aminas 89.1 e/ou diferentes fosfonatos de haloalquilo 89.2, os produtos correspondentes 89.3 são obtidos.
Esquema 90 ilustra a preparação de formilfenil-fosfonatos, em que o grupo fosfonato está ligado ao anel benzeno por meio de um anel aromático ou heteroaromático. Neste procedimento, ácido formilbenzeno-borónico 90.1 é acoplado, na presença de um catalisador de paládio, com um equivalente molar de dibromoareno 90.2, em que o grupo Ar é um grupo aromático ou heteroaromático. 0 acoplamento de boronatos de arilo com brometos de arilo para se obter compostos diarilo é descrito em Palladium Reagents and Catalysts, por J. Tsuji, Wiley 1995, pág. 218. Os componentes são reagidos num solvente polar, tal como 237 dimetilformamida, na presença de um catalisador de paládio (0) e bicarbonato de sódio. O produto 90.3 é então acoplado, como descrito antes (Esquema 50), com um fosfito de dialquilo 90.4 para se obter o fosfonato 90.5.
Por exemplo, ácido 4-formilbenzenoborónico 90.6 é acoplado com 2,5-dibromotiofeno 90.7 para se obter produto feniltiofeno 90.8. Este composto é então acoplado com fosfito de dialquilo 90.4 para se obter o fosfonato de tienilo 90.9.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de dibromotiofeno 90.7, diferentes dibromoarenos 90.2 e/ou diferentes boronatos de formilfenilo 90.1, os produtos correspondentes 90.5 são obtidos.
Esquema 91 ilustra a preparação dos carbamatos de benzilo 43.4 que são utilizados na preparação dos ésteres de fosfonato 9. Neste procedimento, os benzaldeidos substituídos 91.1, preparados como ilustrado nos Esquemas 87-90, são convertidos nos correspondentes álcoois benzílicos 91.2. A redução de aldeídos para se obter álcoois é descrita em Comprehensive Organic Transformations, por R. C. Larock, VCH, 1989, p. 527ff. A transformação é efectuada, utilizando agentes redutores, tais como boro-hidreto de sódio, tri-terc-butoxi-hidreto de alumínio e lítio, hidreto de diisobutil-alumínio e outros. O álcool benzílico resultante é então reagido com aminoéster 91.3 para se obter o carbamato 91.4. A reacção é realizada sob as condições descritas adiante no Esquema 98. Por exemplo, o álcool benzílico é reagido com carbonildiimidazol para produzir um intermediário benziloxicarbonilimidazol e o intermediário é reagido com aminoéster 91.3 para se obter o 238 carbamato 91.4. 0 éster metílico é então hidrolisado para se obter o ácido carboxílico 43.4.
Esquema 87 Método
Exemplo O-íO 1
i úm 87.4
Esquema 88 Método
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Exemplo 1 239
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Exemplo
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Esquema Método 89
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Exemplo
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Esquema 90 Método 240
Esquema 91
CHG $11
A
$1.2 $1.4
O H 43.4
Preparação de cloretos de benzenossulfonilo contendo fosfonato 20.2
Esquemas 92-97 ilustram métodos para a preparação do cloreto de sulfonilo 20.2 que são utilizados na preparação dos ésteres fosfonato 4. Ácidos sulfónicos e/ou halogenetos de sulfonilo são obtidos por oxidação de correspondentes tióis, como descrito em Synthetic Organic Chemistry, R.B. Wagner, H.D. Zook, Wiley, 1953, pág. 813, e em Tet. 1965, 21, 2271. Por exemplo, os tióis contendo fosfonato que são preparados de acordo com os esquemas 63-72 são 241 transformados nos correspondentes ácidos sulfónicos por oxidação com bromo em solução aquosa orgânica, como descrito em J. Am. Chem. Soc., 59, 811, 1937, ou por oxidação com peróxido de hidrogénio, como descrito em Rec. Trav. Chim., 54, 205, 1935, ou por reacção com oxigénio em solução alcalina, como descrito em Tet. Let., 1963, 1131, ou utilizando superóxido de potássio, como descrito em Aust. J. Chem., 1984, 37, 2231. Esquemas 92-96 descrevem a preparação de ácidos benzenossulfónicos substituídos com fosfonato. Esquema 97 descreve a conversão de ácidos sulfónicos nos correspondentes cloretos de sulfonilo. Em alternativa, os tióis intermediários, quando produzidos, podem ser directamente convertidos no cloreto de sulfonilo, como descrito no esquema 97a.
Esquema 92 mostra a preparação de ácidos benzenossulfónicos substituídos de vários modos, em que o grupo fosfonato está directamente ligado ao anel benzeno. Neste procedimento, benzenotiol substituído com bromo 92.1 é protegido, como previamente descrito. Um produto protegido 92.2 é então reagido, na presença de um catalisador de paládio, com um fosfito de dialquilo 92.3 para se obter o correspondente fosfonato 92.4. O grupo tiol é então desprotegido para se obter o tiol 92.5 e este composto é oxidado para se obter ácido sulfónico 92.6.
Por exemplo, 4-bromobenzenotiol 92.7 é convertido no derivado de S-adamantilo 92.8 por reacção com 1-adamantanol em ácido trifluoroacético, como descrito em Chem. Pharm. Buli., 26, 1576, 1978. O produto é então reagido com um fosfito de dialquilo e catalisador de paládio, como descrito previamente, para se obter o fosfonato 92.9. O grupo adamantilo é então removido por reacção com acetato 242 mercúrico em ácido trifluoroacético, como descrito em Chem. Pharm. Buli., 26, 1576, 1978, para se obter o tiol 92.10. O produto é então reagido com bromo em solução aquosa para preparar o ácido sulfónico 92.11.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do tiol 92.7, diferentes tióis 92.1 e/ou diferentes fosfitos de dialquilo 92.3, os produtos correspondentes 92.6 são obtidos.
Esquema 93 ilustra a preparação de ácidos benzenossulfónicos substituídos com amino, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de um grupo alcoxi. Neste procedimento, ácido benzenossulfónico substituído com hidroxiamino 93.1 é reagido com bromo-alquil-fosfonato de dialquilo 93.2 para se obter o éter 93.3. A reacção é realizada num solvente polar, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio. O rendimento do produto 93.3 é aumentado por tratamento do produto de reacção impuro com uma base aquosa diluída de modo a hidrolisar quaisquer ésteres sulfónicos que sejam produzidos.
Por exemplo, ácido 3-amino-4-hidroxi-benzenossulfónico 93.4 (Fluka) é reagido com bromopropil-fosfonato de dialquilo 93.5, preparado como descrito em J. Am. Chem. Soc, 2000, 122, 1554, em dimetilformamida contendo carbonato de potássio, seguido pela adição de água, para produzir o éter 93.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de fenol 93.4, diferentes fenóis 93.1 e/ou diferentes fosfonatos 93.2, os produtos correspondentes 93.3 são obtidos. 243
Esquema 94 ilustra a preparação de ácidos benzenossulfónicos substituídos com metoxilo, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de um grupo amida. Neste procedimento, ácido benzenossulfónico substituído com metoxiamino 94.1 é reagido, como descrito previamente para a preparação de amidas, com carboxialquil-fosfonato de dialquilo 94.2 para produzir a amida 94.3.
Por exemplo, ácido 3-amino-4-metoxibenzenossulfónico 94.4 (Acros) é reagido em solução de dimetilformamida com ácido dialquil-fosfonoacético 94.2 (Aldrich) e diciclo-hexilcarbodiimida para produzir a amida 94.6.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez da amina 94.4, diferentes aminas 94.1 e/ou diferentes fosfonatos 94.2, os produtos correspondentes 94.3 são obtidos.
Esquema 95 ilustra a preparação de ácidos benzenossulfónicos substituídos, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de grupo alquileno saturado ou insaturado. Neste procedimento, ácido benzenossulfónico substituído com halo 95.1 é acoplado, numa reacção de Heck catalisada por paládio, com alcenil-fosfonato de dialquilo 95.2 para se obter o fosfonato 95.3. Facultativamente, o produto é reduzido, por exemplo, por hidrogenação catalítica sobre um catalisador de paládio, para se obter o análogo saturado 95.4.
Por exemplo, ácido 4-amino-3-clorobenzenossulfónico 95.5 (Acros) é reagido em solução de N-metilpirrolidinona a 80°C com vinilfosfonato de dialquilo 95.6 (Aldrich), cloreto de paládio(II), bis(acetonitrilo), acetato de sódio e cloreto de tetrafenilfosfónio, como descrito em Ang. Chem. Int. Ed. Engl., 37, 481, 1998, para produzir o 244 produto olefínico 95.7. Hidrogenação catalítica, utilizando um catalisador de paládio a 5% sobre carvão, proporciona então o análogo saturado 95.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de composto de cloro 95.5, diferentes cloretos 95.1 e/ou diferentes fosfonatos 95.2, os produtos correspondentes 95.3 e 95.4 são obtidos.
Esquema 96 mostra a preparação de ácidos benzenossulfónicos, em que o grupo fosfonato está ligado por meio de ligação amida. Neste procedimento, benzenotiol substituído com aminocarboxi 96.1 é acoplado com aminoalquil-fosfonato de dialquilo 96.2 para produzir a amida 96.3. 0 produto é então oxidado, como descrito antes, para se obter correspondente ácido sulfónico 96.4.
Por exemplo, ácido 2-amino-5-mercaptobenzóico 96.5 preparado como descrito em Pharmazie, 1973, 28, 433, é reagido com aminoetil-fosfonato de dialquilo 96.6 e diciclo-hexilcarbodiimida para preparar a amida 96.7. 0 produto é então oxidado com peróxido de hidrogénio aquoso para se obter ácido sulfónico 96.8.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez do ácido carboxílico 96.5, diferentes ácidos 96.1 e/ou diferentes fosfonatos 96.2, os produtos correspondentes 96.4 são obtidos.
Esquema 97 ilustra a conversão de ácidos benzenossulfónicos nos correspondentes cloretos de sulfonilo. A conversão de ácidos sulfónicos em cloreto de sulfonilo é descrita em Synthetic Organic Chemistry, R. B. Wagner, H, D. Zook, Wiley, 1953, pág. 821. A transformação é efectuada, utilizando reagentes, tais como cloreto de tionilo ou pentacloreto de fósforo. 245
Por exemplo, como ilustrado no Esquema 97, ácidos benzenossulfónicos contendo fosfonato substituídos de vários modos 97.1, preparados como descrito antes, são tratados com cloreto de tionilo, cloreto de oxalilo, pentacloreto de fósforo, oxicloreto de fósforo e outros para preparar correspondente cloreto de sulfonilo 97.2.
Esquema 97a ilustra a conversão de tióis no correspondente cloreto de sulfonilo que pode ser aplicado a qualquer um dos intermediários tiol nos esquemas 92-96. 0 tiol é oxidado, tal como descrito em Synthesis 1987, 4, 409, ou J. Med. Chem. 1980, 12, 1376, para se obter o cloreto de sulfonilo directamente. Por exemplo, tratamento de tiol protegido 97a.1, preparado a partir de 96.7, utilizando grupos de protecção convencionais para aminas, como descrito em Greene e Wuts, 3a. ed., cap. 7, com HC1 e cloro proporciona cloreto de sulfonilo 97a. 2. Em alternativa, tratamento de 92.10 nas mesmas condições proporciona o cloreto de sulfonilo 97a.3.
Esquema 92 Método
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Esquema 93 Método
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Esquema 94 Método
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Preparação de carbamatos
Os ésteres de fosfonato 1-4, em que R4 é formalmente obtido a partir de ácidos carboxilicos, tal como ilustrado no gráfico 5c, e os ésteres de fosfonato 5 e 9 contêm uma ligação carbamato. A preparação de carbamatos é descrita em Comprehensive Organic Functional Group Transformations, A., R. Katritzky, ed., Pergamon, 1995, Vol. 6, p. 416ff, e em Organic Functional Group Preparations, por S. R. Sandler e W. Karo, Academic Press, 1986, p. 260ff.
Esquema 98 ilustra vários métodos de síntese da ligação carbamato. Conforme ilustrado no esquema 98, na reacção geral para geração de carbamatos, um carbinol 98.1 é convertido no derivado activado 98.2, em que Lv é um grupo removível, tal como halo, imidazolilo, benztriazolilo e outros, como descrito adiante. 0 derivado activado 98.2 é 249 então reagido com uma amina 98.3 para se obter o produto carbamato 98.4. Exemplos 1-7 do Esquema 98 mostram métodos de realização da reacção geral. Exemplos 8-10 ilustram métodos alternativos para a preparação de carbamatos.
Esquema 98, Exemplo 1 ilustra a preparação de carbamatos utilizando um derivado de cloroformilo do carbinol 98.1. Neste procedimento, o carbinol é reagido com fosgénio, num solvente inerte, tal como tolueno, a cerca de 0°C, como descrito em Org. Syn. Coll., Vol. 3, 167, 1965, ou com um reagente equivalente, tal como triclorometoxicloroformato, como descrito em Org. Syn. Coll., Vol. 6, 715, 1988, para se obter o cloroformato 98.6. Este último composto é então reagido com o componente amina 98.3, na presença de uma base orgânica ou inorgânica, para se obter o carbamato 98.7. Por exemplo, o composto de cloroformilo 98.6 é reagido com amina 98.3 em solvente miscivel em água, tal como tetrahidrofurano, na presença de hidróxido de sódio aquoso, como descrito em Org. Syn. Coll. Vol. 3, 167, 1965, para se obter o carbamato 98.7. Em alternativa, a reacção é realizada em diclorometano, na presença de uma base orgânica, tal como diisopropiletilamina ou dimetilaminopiridina.
Esquema 98, Exemplo 2 mostra a reacção do composto cloroformato 98.6 com imidazol para produzir imidazolida 98.8. O produto imidazolida é então reagido com amina 98.3 para se obter o carbamato 98.7. A preparação da imidazolida é realizada num solvente aprótico, tal como diclorometano, a 0o, e a preparação do carbamato é efectuada num solvente semelhante, à temperatura ambiente, facultativamente na presença de uma base, tal como dimetilaminopiridina, como descrito em J. Med. Chem., 1989, 32, 357. 250
Esquema 98, Exemplo 3, mostra a reacção do cloroformato 98.6 com composto activado hidroxilo R13OH para se obter o éster de carbonato misto 98.10. A reacção é efectuada num solvente orgânico inerte, tal como éter ou diclorometano, na presença de uma base, tal como diciclo-hexilamina ou trietilamina. O componente hidroxilo R13OH é seleccionado entre o grupo de compostos 98.19-98.24 como ilustrado no Esquema 98 e compostos semelhantes. Por exemplo, se o componente R13OH é hidroxibenzotriazol 98.19, N-hidroxissuccinimida 98.20 ou pentaclorofenol 98.21, o carbonato misto 98.10 é obtido por reacção do cloroformato com o composto hidroxilo num solvente etéreo, na presença de diciclo-hexilamina, como descrito em Can. J. Chem., 1982, 60, 976. Uma reacção semelhante, em que o componente R13OH é pentafluorofenol 93.22 ou 2-hidroxipiridina 98.23, é realizada num solvente etéreo, na presença de trietilamina, como descrito em Syn., 1986, 303, e Chem. Ber. 118, 468, 1985.
Esquema 98 Exemplo 4 ilustra a preparação de carbamatos, em que o alquiloxicarbonilimidazol 98.8 é utilizado. Neste procedimento, um carbinol 98.5 é reagido com uma quantidade equimolar de carbonildiimidazol 98.11 para preparar o intermediário 98.8. A reacção é efectuada num solvente orgânico aprótico, tal como diclorometano ou tetrahidrofurano. O aciloximidazol 98.8 é então reagido com uma quantidade equimolar da amina R1NH2 para se obter o carbamato 98.7. A reacção é realizada num solvente orgânico aprótico, tal como diclorometano, como descrito em Tet. Lett., 42, 2001, 5227, para se obter o carbamato 98.7.
Esquema 98, Exemplo 5 ilustra a preparação de carbamatos por meio de intermediário 251 alcoxicarbonilbenzotriazol 98.13. Neste procedimento, um carbinol ROH é reagido à temperatura ambiente com uma quantidade equimolar de cloreto de benzotriazolcarbonilo 98.12 para se obter produto alcoxicarbonilo 98.13. A reacção é realizada num solvente orgânico, tal como benzeno ou tolueno, na presença de uma amina orgânica terciária, tal como trietilamina, como descrito em Syn., 1977, 704. O produto é então reagido com amina R1NH2 para se obter o carbamato 98.7. A reacção é efectuada em tolueno ou etanol, entre a temperatura ambiente e cerca de 80°, como descrito em Syn., 1977, 704 .
Esquema 98, Exemplo 6 ilustra a preparação de carbamatos, em que um carbonato (RnO)2CO 98.14 é reagido com um carbinol 98.5 para se obter o intermediário alquiloxicarbonilo 98.15. Este último reagente é então reagido com amina R1NH2 para se obter o carbamato 98.7. O procedimento em que o reagente 98.15 é obtido a partir de hidroxi-benzotriazol 98.19 está descrito em Synthesis, 1993, 908; o procedimento em que o reagente 98.15 é obtido a partir de N-hidroxi succinimida 98.20 está descrito em Tet. Lett., 1992, 2781; o procedimento em que o reagente 98.15 é obtido a partir de 2-hidroxipiridina 98.23 está descrito em Tet. Lett., 1991, 4251; o procedimento em que o reagente 98.15 é obtido a partir de 4-nitrofenol 98.24 está descrito em Syn. 1993, 199. A reacção entre quantidades equimolares do carbinol ROH e o carbonato 98.14 é efectuada num solvente orgânico inerte à temperatura ambiente.
Esquema 98, Exemplo 7 ilustrara a preparação de carbamatos a partir de alcoxicarbonil-azidas 98.16. Neste procedimento, um cloroformato de alquilo 98.6 é reagido com uma azida, por exemplo, azida de sódio, para se obter 252 alcoxicarbonil-azida 98.16. Este último composto é então reagido com uma quantidade equimolar da amina R1NH2 para se obter o carbamato 98.7. A reacção é efectuada à temperatura ambiente um solvente aprótico polar, tal como dimetilsulfóxido, por exemplo, como descrito em Syn., 1982, 404 .
Esquema 98, Exemplo 8 ilustra a preparação de carbamatos por meio da reacção entre um carbinol ROH e o derivado cloroformilo de uma amina 98.17. Neste procedimento, que é descrito em Synthetic Organic Chemistry, R. B. Wagner, H. D. Zook, VViley, 1953, pág. 647, os reagentes são combinados à temperatura ambiente num solvente aprótico, tal como acetonitrilo, na presença de uma base, tal como trietilamina, para se obter o carbamato 98.7.
Esquema 98, Exemplo 9 ilustra a preparação de carbamatos por meio da reacção entre um carbinol ROH e um isocianato 98.18. Neste procedimento, que é descrito em Synthetic Organic Chemistry, R.B. Wagner, H.D. Zook, Wiley, 1953, pág. 645, os reagentes são combinados à temperatura ambiente num solvente aprótico, tal como éter ou diclorometano e outros, para se obter o carbamato 98.7.
Esquema 98, Exemplo 10 ilustra a preparação de carbamatos por meio da reacção entre um carbinol ROH e uma amina R1NH2. Neste procedimento, que é descrito em Chem. Lett. 1972, 373, os reagentes são combinados à temperatura ambiente num solvente orgânico aprótico, tal como tetrahidrofurano, na presença de uma base terciária como trietilamina e selénio. Monóxido de carbono é passado através da solução e a reacção prossegue para se obter o carbamato 98.7. 253Esquema 98 Reacção geral mn-—,—rocolv . ^ mmmmse. í mi SM m*
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Interconversões dos fosfonatos R-link-P-(0) (OR1) 2, R-link-P(0) (OR1) (OH) e R-link-P (0) (0H)2
Esquemas 1-97 descrevem as preparações de ésteres de fosfonato de estrutura geral R-link-P(0)(0R1)2, em que os grupos R, cujas estruturas são definidas no gráficos 1 e 2, podem ser iguais ou diferentes. Os grupos R1 ligados aos ésteres de fosfonato 1-13, ou aos seus precursores, podem ser alterados por meio de transformações químicas consagradas. As reacções de interconversão dos fosfonatos estão ilustradas no Esquema 99. 0 grupo R no Esquema 99 representa a subestrutura à qual o substituinte link-P(0)(0R1)2 está ligado, quer nos compostos 1 a 13 quer nos seus precursores. 0 grupo R1 pode ser alterado, utilizando os procedimentos descritos adiante, quer nos compostos precursores quer nos ésteres 1-13. Os métodos utilizados para uma dada transformação de fosfonato dependem da natureza do substituinte R1. As operações de preparação e hidrólise de ésteres de fosfonato estão descritas em Organic Phosphorus Compounds, G.M. Kosolapoff, L. Maeir, eds, Wiley, 1976, pág. 9ff. A conversão de um diéster de fosfonato 99.1 no correspondente monoéster de fosfonato 99.2 (Esquema 99, reacção 1) é realizada por vários métodos. Por exemplo, o éster 99.1, em que R1 é um grupo aralquilo, tal como benzilo, é convertido no composto monoéster 99.2 por reacção com base orgânica terciária, tal como diazabiciclooctano (DABCO) ou quinuclidina, como descrito em J. Org. Chem., 1995, 60, 2946. A reacção é realizada num solvente hidrocarboneto inerte, tal como tolueno ou xileno, a cerca de 110°C. A conversão do diéster 99.1, em que R1 é um grupo arilo, tal como fenilo, ou um grupo alcenilo, tal 255 como alilo, no monoéster 99.2 é efectuada por tratamento do éster 99.1 com uma base, tal como hidróxido de sódio aquoso em acetonitrilo ou hidróxido de litio em tetrahidrofurano aquoso. Diésteres de fosfonato 99.1, em que um dos qrupos R1 é aralquilo, tal como benzilo, e o outro é alquilo, são convertidos nos monoésteres 99.2, em que R1 é alquilo, por hidroqenação, por exemplo, utilizando um catalisador de paládio sobre carvão. Diésteres de fosfonato, em que ambos os grupos R1 são alcenilo, tal como alilo, são convertidos no monoéster 99.2, em que R1 é alcenilo, por tratamento com cloro-tris(trifenilfosfina)-ródio (catalisador de Wilkinson) em etanol aquoso ao refluxo, facultativamente na presença de diazabiciclooctano, por exemplo, utilizando o procedimento descrito em J. Org. Chem., 38, 3224, 1973 para a clivagem de carboxilatos de alilo. A conversão de um diéster de fosfonato 99.1 ou um monoéster de fosfonato 99.2 no correspondente ácido fosfónico 99.3 (Esquema 99, reacções 2 e 3) é efectuada por reacção do diéster ou monoéster com brometo de trimetil-sililo, como descrito em J. Chem. Soc., Chem. Comm., 739, 1979. A reacção é efectuada num solvente inerte, tal como, por exemplo, diclorometano, facultativamente na presença de um agente de sililação, tal como bis(trimetilsilil)-trifluoroacetamida, à temperatura ambiente. Um monoéster de fosfonato 99.2, em que R1 é aralquilo, tal como benzilo, é convertido no correspondente ácido fosfónico 99.3 por hidrogenação num catalisador de paládio ou por tratamento com cloreto de hidrogénio num solvente etéreo, tal como dioxano. Um monoéster de fosfonato 99.2, em que R1 é alcenilo, tal como, por exemplo, alilo, é convertido no ácido fosfónico 99.3 por reacção com catalisador de 256
Wilkinson num solvente orgânico aquoso, por exemplo, em acetonitrilo aquoso a 15% ou em etanol aquoso, por exemplo, utilizando o procedimento descrito em Helv. Chim. Acta., 68, 618, 1985. Hidrogenólise, catalisada por paládio, de ésteres de fosfonato 99.1, em que R1 é benzilo, está descrita em J. Org. Chem., 24, 434, 1959. Hidrogenólise, catalisada por platina, de ésteres de fosfonato 99.1, em que R1 é fenilo é descrita em J. Am. Chem. Soc., 78, 2336, 1956. A conversão de um monoéster de fosfonato 99.2 num diéster de fosfonato 99.1 (Esquema 99, reacção 4), em que o grupo R1 recentemente introduzido é alquilo, aralquilo, haloalquilo, tal como cloroetilo, ou aralquilo, é efectuada por várias reacções, em que o substrato 99.2 é reagido com um composto hidroxi R1OH, na presença de um agente de acoplamento. Os agentes de acoplamento adequados são os utilizados para a preparação de ésteres de carboxilato e incluem carbodiimida, tal como diciclo-hexilcarbodiimida, caso esse em que a reacção é preferencialmente efectuada num solvente orgânico básico, tal como piridina, ou hexafluorofosfato de (benzotriazol-l-iloxi)-tripirrolidino-fosfónio (PYBOP, Sigma), caso esse em que a reacção é realizada num solvente polar, tal como dimetilformamida, na presença de uma base orgânica terciária, tal como diisopropiletilamina, ou Aldrithiol-2 (Aldrich), caso esse em que a reacção é efectuada num solvente básico, tal como piridina, na presença de uma triarilfosfina, tal como trifenilfosfina. Em alternativa, a conversão do monoéster de fosfonato 99.2 no diéster 90.1 é efectuada por reacção de Mitsonobu, como descrito antes no Esquema 49. O substrato é reagido com o composto hidroxi R1OH, na 257 presença de azodicarboxilato de dietilo e triarilfosfina, tal como trifenilfosfina. Em alternativa, o monoéster de fosfonato 99.2 é transformado no diéster de fosfonato 99.1, em que o grupo R1 introduzido é alcenilo ou aralquilo, por reacção de monoéster com o halogeneto R1Br, em que R1 é alcenilo ou aralquilo. A reacção de alquilação é conduzida num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida ou acetonitrilo, na presença de uma base, tal como carbonato de césio. Em alternativa, o monoéster de fosfonato é transformado no diéster de fosfonato no procedimento de dois passos. No primeiro passo, o monoéster de fosfonato 99.2 é transformado no análogo de cloro RP(O) (0R1)C1 por reacção com cloreto de tionilo ou cloreto de oxalilo e outros, como descrito em Organic Phosphorus Compounds, G.M. Kosolapoff, L. Maeir, eds., Wiley, 1976, pág. 17, e o produto assim obtido, RP(0) (OR1) Cl, é então reagido com o composto hidroxi R10H, na presença de uma base, tal como trietilamina, para se obter o diéster de fosfonato 99.1.
Um ácido fosfónico R-link-P(0)(OH)2 é transformado num monoéster de fosfonato RP(0) (OR1) (OH) (Esquema 99, reacção 5) por meio dos métodos descritos antes para a preparação do diéster de fosfonato R-link-P(0) (OR1) 2 90.1, com a excepção de apenas uma proporção molar do componente R10H ou R1Br ser utilizada.
Um ácido fosfónico R-link-P(0) (0H) 2 99.3 é transformado num diéster de fosfonato R-link-P(0) (0R1) 2 99.1 (Esquema 99, reacção 6) por uma reacção de acoplamento com o composto hidroxi R10H, na presença de um agente de acoplamento, tal como Aldrithiol-2 (Aldrich) e trifenilfosfina. A reacção é efectuada num solvente básico, tal como piridina. Em alternativa, ácidos fosfónicos 99.3 258 são transformados em ésteres fosfónicos 99.1, em que R1 é arilo, por meio de reacção de acoplamento utilizando, por exemplo, diciclo-hexilcarbodiimida em piridina, a cerca de 70°C. Em alternativa, ácidos fosfónicos 99.3 são transformados em ésteres fosfónicos 99.1, em que R1 é alcenilo, por reacção de alquilação. 0 ácido fosfónico é reaqido com o brometo de alcenilo R1Br num solvente orgânico polar, tal como solução de acetonitrilo, à temperatura de refluxo, na presença de uma base, tal como carbonato de césio, para se obter o éster fosfónico 99.1.
Esquema 99 p ' .
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Aplicabilidade geral de métodos para introdução de substituintes de fosfonato.
Os procedimentos descritos para introdução de radicais fosfonato (Esquemas 47-97) são, com modificações adequadas conhecidas pelo especialista na matéria, transferíveis para diferentes substratos químicos. Assim, os métodos descritos antes para introdução de grupos fosfonato em ácidos hidroxi-metil-benzóicos (Esquemas 47-51) são aplicáveis à introdução de radicais fosfonato em quinolinas, tiofenóis, isobutilaminas, ciclopentilaminas, terc-butanóis, álcoois benzílicos, fenilalaninas, benzilaminas e ácidos 259 benzenossulfónicos e os métodos descritos para introdução de radicais fosfonato nos substratos supramencionados (Esquemas 52-97) são aplicáveis à introdução de radicais fosfonato em substratos de ácido hidroxi-metil-benzóico.
Preparação de intermediários de fosfonato 11-13 com radicais fosfonato incorporados nos grupos R2, R3 ou R4
As transformações químicas descritas nos esquemas 1-90 ilustram a preparação de compostos 1-10, em que o radical do éster de fosfonato está ligado às subestruturas enumeradas supra. Os vários métodos químicos utilizados para a introdução do grupo éster de fosfonatos nos radicais supramencionados podem, com modificações adequadas conhecidas dos especialistas na matéria, ser aplicados à introdução de um grupo de éster de fosfonato no composto R4C00H, R3C1, R2NH2. Os análogos contendo fosfonato resultantes, designados por R4aC00H, R3aCl e NH2R2a' são então utilizados para a preparação dos compostos 11, 12 e 13, utilizando os procedimentos descritos antes. Os procedimentos requeridos para utilização de análogos contendo fosfonato são iguais aos descritos antes para a utilização dos compostos R2NH2, R3C1 e R4COOH.
Secção geral de esquemas
Os aspectos gerais destes métodos exemplificativos são descritos adiante e nos exemplos. Cada um dos produtos dos seguintes processos é facultativamente separado, isolado e/ou purificado antes da sua utilização nos processos subsequentes.
Os termos "tratado", "tratando", "tratamento" e outros significam contactar, misturar, reagir, fazer reagir, fazer 260 contactar e outros termos comuns na especialidade para indicar que uma ou várias entidades químicas são tratadas de tal modo que sejam convertidas numa ou em várias entidades químicas diferentes. Isto significa que "tratar o composto um com o composto dois" é sinónimo de "fazer o composto um reagir com o composto dois", "fazer contactar o composto um com o composto dois", "reagir o composto um com o composto dois" e outras expressões comuns na especialidade de síntese orgânica para indicar razoavelmente que o composto um foi "tratado", "reagiu", "feito reagir", etc., com o composto dois. "Tratar" indica o modo razoável e comum de fazer reagir os produtos químicos orgânicos. Concentrações normais (0,01M a 10M, tipicamente 0,1M a 1M) , temperaturas (-100°C a 250°C, tipicamente -78°C a 150°C, mais tipicamente -78°C a 100°C e ainda mais tipicamente 0°C a 100°C), recipientes de reacção (tipicamente vidro, plástico, metal), solventes, pressões, atmosferas (tipicamente, ar para reacções insensíveis a oxigénio e água ou azoto ou árgon para reacções sensíveis a oxigénio e água), etc., são pretendidos, salvo quando indicado em contrário. O conhecimento de reacções similares conhecidas na especialidade de síntese orgânica são utilizados para a selecção das condições e aparelhos para "tratamento" num dado processo. Particularmente, um especialista na matéria de síntese orgânica selecciona as condições e aparelhos para os quais se prevê que realizem com êxito razoável as reacções químicas dos processos descritos com base no conhecimento na especialidade.
As modificações de cada um dos esquemas exemplificativos antes e nos exemplos (adiante "esquemas exemplificativos") resulta na produção de vários análogos 261 de materiais exemplificativos específicos. As citações anteriores descrevendo métodos adequados de síntese orgânica são aplicáveis a tais modificações.
Em cada um dos esquemas exemplificativos, pode ser vantajoso separar os produtos de reacção um do outro e/ou dos materiais de partida. Os produtos desejados de cada passo ou série de passos são separados e/ou purificados (doravante, separados) até ao grau desejado de homogeneidade pelas técnicas bem conhecidas dos especialistas na matéria. Tipicamente, tais separações implicam extracção em múltipla fase, cristalização de um solvente ou mistura de solvente, destilação, sublimação, ou cromatografia. A cromatografia pode implicar qualquer número de métodos e aparelhos, incluindo, por exemplo, fase reversa e fase normal; exclusão dimensiona, permuta iónica, métodos de cromatografia em líquido a pressão alta, média e baixa; cromatografia analítica em escala pequena, leito móvel simulado (SMB) e preparativa de camada fina ou espessa, assim como técnicas de cromatografia cintilante e em camada fina a pequena escala.
Outra classe de métodos de separação implica o tratamento de uma mistura com um reagente seleccionado para ligar ou de outra forma tornar separável um produto desejado, material de partida que não reagiu, produto secundário de reacção ou outros. Tais reagentes compreendem adsorventes ou absorventes como carvão activado, crivos moleculares, meios de permuta iónica ou outros. Em alternativa, os reagentes podem ser ácidos no caso de um material básico, bases no caso de um material ácido, reagentes de ligação como anticorpos, proteínas de ligação, 262 quelantes selectivos, tais como éteres coroa, reagentes de extracção de iões liquido/liquido (LIX) ou outros. A selecção de métodos adequados de separação depende da natureza dos materiais envolvidos. Por exemplo, ponto de ebulição e peso molecular em destilação e sublimação, presença ou ausência de grupos funcionais polares em cromatografia, estabilidade de materiais em meio ácido e básico em extracção de múltiplas fases, e outros. Um especialista na matéria irá aplicar técnicas com as quais haja maior probabilidade de se obter a separação desejada.
Considera-se todas as citações de referências literárias e de patentes aqui expressamente incorporadas por referência aos locais da sua citação. As secções ou páginas especificamente citadas dos processamentos antes citados são incorporadas por referência com especificidade. A invenção foi descrita em detalhes suficientes para permitir ao especialista na matéria fazer e usar o assunto das seguintes formas de realização. Será evidente que algumas modificações dos métodos e composições nas seguintes formas de realização podem ser feitas no âmbito e no espirito da invenção.
Esquema 1001 263ο R-tjnk —— OR1 27,1 P FMink—P-OR1 «*► R-Hnk R-Smk- O i^tsl P tf 27,1
O p8oR1 FHfnfc—ífNh
OH
P i R-iink—R-OR \)H 4 P * / .Asl
W 27.2 // ,0 mm—e^-oh <♦* R-link-
P R-fink—j&-QH R-tink......... w 27,1 0 esquema 1001 mostra as interconversões de certos compostos fosfonato: ácidos - (P(0)(0H)2; mono-ésteres - p (0) (ORi) (OH) e diésteres -P(0) (ORih, em que os grupos R1 são independentemente seleccionados, e aqui definidos antes, e o átomo de fósforo está ligado através de um radical carbono ("link", isto é, ligador) que está ligado ao resto da molécula, por exemplo, fármaco ou intermediário de fármaco (R) . Os grupos R1 ligados aos ésteres de fosfonato no esquema 1001 podem ser modificados por meio de transformações químicas consagradas. As interconversões podem ser realizadas nos compostos precursores dos produtos 264 finais, utilizando os métodos descritos adiante. Os métodos utilizados para uma dada transformação de fosfonato dependem da natureza do substituinte R1. A preparação e hidrólise de ésteres de fosfonato são descritas em Orqanic Phosphorus Compounds, G.M. Kosolapoff, L. Maeir, eds., Wiley, 1976, p. 9ff. A conversão de um diéster de fosfonato 27.1 no monoéster de fosfonato 27.2 (Esquema 1001, reacção 1) pode ser realizada por vários métodos. Por exemplo, o éster 27.1, em que R1 é um grupo arilalquilo, tal como benzilo, pode ser convertido no composto monoéster 27.2 por reacção com uma base orgânica terciária, tal como diazobiciclooctano (DABCO) ou quinuclidina, como descrito em J. Org. Chem., 1995, 60:2946. A reacção é realizada num solvente hidrocarboneto inerte, tal como tolueno ou xileno, a cerca de 110°C. A conversão do diéster 27.1, em que R1 é um grupo arilo, tal como fenilo, ou um grupo alcenilo, tal como alilo, no monéster 27.2 pode ser efectuada por tratamento do éster 27.1 com uma base, tal como hidróxido de sódio aquoso em acetonitrilo ou hidróxido de litio em tetrahidrofurano aquoso. Diésteres de fosfonato 27.2, em que um dos grupos R1 é arilalquilo, como benzilo, e o outro é alquilo, podem ser convertidos nos monoésteres 27.2, em que R1 é alquilo, por hidrogenação, por exemplo, utilizando um catalisador de paládio sobre carvão. Diésteres de fosfonato, em que ambos os grupos R1 são alcenilo, tal como alilo, podem ser convertidos no monoéster 27.2, em que R1 é alcenilo, por tratamento com clorotris(trifenilfosfino)-ródio (catalisador de Wilkinson) em etanol aquoso ao refluxo, facultativamente na presença de diazabiciclo-octano, por exemplo, utilizando o procedimento descrito em 265 J. Org. Chem., 38:3224, 1973, para a clivagem de carboxilatos de alilo. A conversão de um diéster fosfonato 27.1 ou um monoéster fosfonato 27.2 no correspondente ácido fosfónico 27.3 (Esquema 1001, reacções 2 e 3) pode ser efectuada por reacção do diéster ou do monoéster com brometo de trimetilsililo, como descrito em J. Chem. Soc. Chem. Comm., 739, 1979. A reacção é efectuada num solvente inerte, tal como, por exemplo, diclorometano, facultativamente na presença de um agente de sililação, tal como bis(trimetil-silil)-trifluoroacetamida, à temperatura ambiente. Um monoéster fosfonato 27.2, em que R1 é arilalquilo, tal como benzilo, pode ser convertido no correspondente ácido fosfónico 27.3 por hidrogenação sobre um catalisador de paládio ou por tratamento com cloreto de hidrogénio num solvente etéreo, tal como dioxano. Um monoéster fosfonato 27.2, em que R1 é alcenilo, tal como, por exemplo, alilo, pode ser convertido no correspondente ácido fosfónico 27.3 por reacção com catalisador de Wilkinson num solvente orgânico aquoso, por exemplo, em acetonitrilo aquoso a 15% ou em etanol aquoso, por exemplo, utilizando o procedimento descrito em Helv. Chim. Acta., 68:618, 1985. Hidrogenólise catalisada com paládio de ésteres de fosfonato 27.1, em que R1 é benzilo, é descrita em J. Org. Chem., 24:434, 1959. Hidrogenólise catalisada com paládio de ésteres de fosfonato 27.1, em que R1 é fenilo, é descrita em J. Am. Chem. Soc, 78:2336, 1956. A conversão de um monoéster de fosfonato 27.2 num diéster de fosfonato 27.1 (Esquema 1001, reacção 4), em que o grupo R1 recentemente introduzido é alquilo, arilalquilo ou haloalquilo, tal como cloroetilo, pode ser efectuada por 266 diversas reacções, em que o substrato 27.2 é reagido com um composto hidroxi 1^0¾, na presença de um agente de acoplamento. Agentes de acoplamento adequados são os utilizados para a preparação de ésteres de carboxilato e incluem uma carbodiimida, tal como diciclo-hexilcarbodiimida, caso esse em que a reacção é preferencialmente efectuada num solvente orgânico básico, tal como piridina, ou hexafluorofosfato de (benzotriazol-1-iloxi)-tripirrolidinofosfónio (PYBOP, Sigma), em que a reacção é realizada num solvente polar, tal como dimetilformamida, na presença de uma base orgânica terciária, tal como diisopropiletilamina, ou Aldrithiol-2 (Aldrich) , caso esse em que a reacção é efectuada num solvente básico, tal como piridina, na presença de uma triarilfosfina, tal como trifenilfosfina. Em alternativa, a conversão do monoéster de fosfonato 27.1 no diéster 27.1 pode ser efectuada por reacção de Mitsunobu. 0 substrato é reagido com o composto hidroxi F^OH, na presença de azodicarboxilato de dietilo e uma triarilfosfina, tal como trifenilfosfina. Em alternativa, o monoéster de fosfonato 27.2 pode ser transformado no diéster de fosfonato 27.1, em que o grupo R1 introduzido é alcenilo ou arilalquilo, por reacção do monoéster com o halogeneto R^r, em que R1 é como alcenilo ou arilalquilo. A reacção de alquilação é efectuada num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida ou acetonitrilo, na presença de uma base, tal como carbonato de césio. Em alternativa, o monoéster de fosfonato pode ser transformado no diéster de fosfonato num procedimento em dois passos. No primeiro passo, o monoéster de fosfonato 27.2 é transformado no análogo de cloro-P(0) (0R1)C1 por reacção com cloreto de tionilo ou cloreto 267 de oxalilo e outros, como descrito em Organic Phosphorus Compounds, G.M. Kosolapoff, L. Maeir, eds., Wiley, 1976, pág. 17, e o produto -P(0) (OR^Cl, assim obtido, é então reagido com o composto hidroxi R10H, na presença de uma base, tal como trietilamina, para se obter o diéster de fosfonato 27.1.
Um ácido fosfónico -P(0)(0H)2 pode ser transformado num monoéster de fosfonato -P(0) (OR1) (OH) (Esquema 1001, reacção 5) por meio dos métodos descritos antes para a preparação do diéster de fosfonato PÍOMOR1) 2 27.1, excepto pelo facto de apenas uma proporção molar do componente R^H ou R1Br ser utilizada.
Um ácido fosfónico -P(0)(0H)2 27.3 pode ser transformado num diéster de fosfonato -P(0)(0R1)2 27.1 (Esquema 1, reacção 6) por uma reacção de acoplamento com o composto hidroxi R10H, na presença de um agente de acoplamento, tal como Aldrithiol-2 (Aldrich) e trifenilfosfina. A reacção é efectuada num solvente básico, tal como piridina. Em alternativa, ácidos fosfónicos 27.3 podem ser transformados em ésteres fosfónicos 27.1, em que R1 é arilo, tal como fenilo, por meio de uma reacção de acoplamento utilizando, por exemplo, fenol e diciclo-hexilcarbodiimida em piridina, a cerca de 70°C. Em alternativa, ácidos fosfónicos 27.3 podem ser transformados em ésteres fosfónicos 27.1, em que R1 é alcenilo, por meio de uma reacção de alquilação. 0 ácido fosfónico é reagido com o brometo de alcenilo R^r num solvente orgânico polar, tal como solução de acetonitrilo, à temperatura de refluxo, na presença de uma base, tal como carbonato de césio, para se obter o éster fosfónico 27.1.
Os compostos aminoalquil-fosfonato 809: 268
são um representante genérico dos compostos 811, 813, 814, 816 e 818. Alguns métodos para preparar as formas de realização de 809 são ilustrados no esquema 1002. O ácido aminofosfónico comercial 810 foi protegido como carbamato 811. O ácido fosfónico 811 foi convertido em fosfonato 812 por tratamento com ROH na presença de DCC ou outros reagentes de acoplamento convencionais. Acoplamento de ácido fosfónico 811 com ésteres de aminoácidos 820 proporcionou bisamidato 817. A conversão de ácido 811 em bisfenil-fosfonato e subsequente hidrólise proporcionou ácido monofosfónico 814 (Cbz - C6H5CH2C (O)2), que foi então transformado em amidato monofosfónico 815. Carbamatos 813, 816 e 818 foram convertidos nas correspondentes aminas por hidrogenação. Os compostos 811, 813, 814, 816 e 818 são intermediários úteis para formar os compostos fosfonato da invenção.
Preparação de bisamidatos, monoamidatos, diésteres e monoésteres de fosfonato substituídos com carboalcoxi Vários métodos estão disponíveis para a conversão de ácidos fosfónicos em amidatos e ésteres. Num grupo de métodos, o ácido fosfónico tanto é convertido num intermediário activado isolado, tal como cloreto de fosforilo, como o ácido fosfónico é activado in situ para reacção com amina ou um composto hidroxi. A conversão de ácidos fosfónicos em cloretos de fosforilo é realizada por reacção com cloreto de tionilo, 269 por exemplo, como descrito em J. Gen. Chem. USSR, 1983, 53, 480, Zh. Obschei Khim., 1958, 28, 1063, ou J. Org. Chem., 1994, 59, 6144, ou por reacção com cloreto de oxalilo, como descrito em J. Am. Chem. Soc, 1994, 116, 3251, ou J. Org. Chem., 1994, 59, 6144, ou por reacção com pentacloreto de fósforo, como descrito em J. Org. Chem., 2001, 66, 329, ou em J. Med. Chem., 1995, 38, 1372. Os cloretos de fosforilo resultantes são então reagidos com aminas ou compostos hidroxi, na presença de uma base, para se obter os produtos amidato ou éster.
Os ácidos fosfónicos são convertidos em derivados de imidazolilo activados, por reacção com carbonildiimidazol, como descrito em J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1991, 312, ou Nucleosides Nucleotides 2000, 19, 1885. Derivados de sulfoniloxi activados são obtidos por reacção de ácidos fosfónicos com cloreto de triclorometilsulfonilo, como descrito em J. Med. Chem. 1995, 38, 4958, ou com cloreto de triisopropilbenzenossulfonilo, como descrito em Tet. Lett, 1996, 7857, ou Bioorg. Med. Chem. Lett, 1998, 8, 663. Os derivados de sulfoniloxi activados são então reagidos com aminas ou compostos hidroxi para se obter amidatos ou ésteres. Em alternativa, o ácido fosfónico e a amina ou reagente hidroxi são combinados na presença do agente de acoplamento diimida. A preparação de amidatos fosfónicos e ésteres por reacções de acoplamento, na presença de diciclo-hexilcarbodiimida é descrita, por exemplo, em J. Chem., Soc. Chem. Comm., 1991, 312, ou J. Med. Chem., 1980, 23, 1299, ou Coll. Czech. Chem. Comm, 1987, 52, 2792. A utilização de dimetilaminopropiletil-carbodiimida para activação e acoplamento de ácidos fosfónicos é descrita em 270
Tet. Lett, 2001, 42, 8841, ou Nucleosides Nucleotides, 2000, 19, 1885. Vários reagentes de acoplamento suplementares são descritos para a preparação de amidatos e ésteres de ácidos fosfónicos. Os agentes incluem 'Aldrithiol-2' e PYBOP e BOP, como descrito em J. Org. Chem., 1995, 60, 5214, e J. Med. Chem., 1997, 40, 3842, mesitileno-2-sulfonil-3-nitro-1,2,4-triazol (MSNT), como descrito em J. Med. Chem., 1998, 39, 4958, difenilfosforilazida, como descrito em J. Org.
Chem., 1984, 49, 1158, 1-(2,4,6-triisopropilbenze- nossulfonil-3-nitro-l,2,4-triazol (TPSNT), como descrito em Bioorg. Med. Chem. Lett, 1998, 8, 1013, hexafluorofosfato de bromotris(dimetileno)-fosfónio (BroP) , como descrito em Tet. Lett, 1996, 37, 3997, 2- cloro-5,5-dimetil-2-oxo-l,3,2-dioxafosfinano, como descrito em Nucleosides Nucleotides 1995, 14, 871, e clorofosfato de difenilo, como descrito em J. Med. Chem., 1988, 31, 1305. Ácidos fosfónicos são convertidos em amidatos e ésteres por meio da reacção de Mitsonobu, em que o ácido fosfónico e a amina ou reagente hidroxi são combinados, na presença de uma triarilfosfina e um azodicarboxilato de dialquilo. O procedimento é descrito em Org. Lett., 2001, 3, 643, ou J. Med. Chem., 1997, 40, 3842. Ésteres fosfónicos também são obtidos por reacção entre ácidos fosfónicos e compostos halo, na presença de uma base adequada. O método é descrito, por exemplo, em Anal. Chem., 1987, 59, 1056, ou J. Chem. Soc. Perkin Trans., I, 1993, 19, 2303, ou J. Med. Chem., 1995, 38, 1372, ou Tet. Lett, 2002, 43, 1161.
Os esquemas 1-4 ilustram a conversão de ésteres de fosfonato e ácidos fosfónicos em fosforobisamidatos 271 (Esquema 1), fosforoamidatos (Esquema 2), monoésteres de fosfonato (Esquema 3) e diésteres de fosfonato (Esquema 4) substituídos com carboalcoxi. 0 esquema 1 ilustra vários métodos para a conversão de diésteres de fosfonato 1.1 em fosforobisamidatos 1.5. 0 diéster 1.1, preparado como descrito anteriormente, é hidrolisado, tanto no monoéster 1.2 como no ácido fosfónico 1.6. Os métodos utilizados para estas transformações são descritos antes. 0 monoéster 1.2 é convertido no monoamidato 1.3 por reacção com um aminoéster 1.9, em que o grupo R2 é H ou alquilo, o grupo R4 é um radical alquileno, tal como, por exemplo, CHCH3, CHPr1, CH(CH2Ph), CH2CH(CH3) e outros, ou um grupo presente em aminoácidos naturais ou modificados, e o grupo R5 é alquilo. Os reagentes são combinados, na presença de um agente de acoplamento, tal como carbodiimida, por exemplo, diciclo-hexilcarbodiimida, como descrito em J. Am. Chem. Soc, 1957, 79, 3575, facultativamente na presença de um agente de activação, tal como hidroxibenzotriazol, para se obter o produto amidato 1.3. A reacção de formação de amidato também é efectuada na presença de agentes de acoplamento, tais como BOP, como descrito em J. Org. Chem., 1995, 60, 5214, 'Aldrithiol', PYBOP e agentes de acoplamento semelhantes usados para a preparação de amidas e ésteres. Em alternativa, os reagentes 1.2 e 1.9 são transformados no monoamidato 1.3 por meio de uma reacção de Mitsonobu. A preparação de amidatos por meio da reacção de Mitsonobu é descrita em J. Med. Chem., 1995, 38, 2742. Quantidades equimolares dos reagentes são combinadas num solvente inerte, tal como tetrahidrofurano, na presença de uma triarilfosfina e um azodicarboxilato de dialquilo. 0 éster de monoamidato 1.3 272 assim obtido é então transformado em amidato de ácido fosfónico 1.4. As condições utilizadas para a reacção de hidrólise dependem da natureza do grupo R1, como descrito anteriormente. 0 amidato de ácido fosfónico 1.4 é então reagido com um aminoéster 1.9, como descrito antes, para se obter o produto bisamidato 1.5, em que os substituintes amino são iguais ou diferentes.
Um exemplo deste procedimento é ilustrado no esquema 1, Exemplo 1. Neste procedimento, um fosfonato de dibenzilo 1.14 é reagido com diazabiciclooctano (DABCO) em tolueno ao refluxo, como descrito em J. Org. Chem., 1995, 60, 2946, para se obter o fosfonato de monobenzilo 1.15. O produto é então reagido com quantidades equimolares de alaninato de etilo 1.16 e diciclo-hexilcarbodiimida em piridina para se obter o produto amidato 1.17. O grupo benzilo é então removido, por exemplo, por hidrogenólise num catalisador de paládio, para se obter o produto monoácido 1.18. Este composto é então submetido a reacção de Mitsonobu com leucinato de etilo 1.19, trifenilfosfina e azodicarboxilato de dietilo, como descrito em J. Med. Chem., 1995, 38, 2742, para produzir o produto bisamida 1.20.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de leucinato de etilo 1.19 ou alaninato de etilo 1.16, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos.
Em alternativa, o ácido fosfónico 1.6 é convertido no bisamidato 1.5, utilizando das reacções de acoplamento descritas antes. A reacção é realizada num passo, caso em que os substituintes associados a azoto presentes no produto 1.5 são iguais, ou em dois passos, caso em que os substituintes associados a azoto podem ser diferentes. 273
Um exemplo do método é ilustrado no esquema 1, Exemplo 2. Neste procedimento, um ácido fosfónico 1.6 é reagido em solução de piridina com excesso de fenilalaninato de etilo 1.21 e diciclo-hexilcarbodiimida, por exemplo, como descrito em J. Chem. Soc, Chem. Comm., 1991, 1063, para se obter o produto bisamidato 1.22.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando em vez de fenilalaninato de etilo, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos.
Como uma outra alternativa, o ácido fosfónico 1.8 é convertido no derivado mono- ou bis-activado 1.7, em que Lv é um grupo removível, tal como cloro, imidazolilo, triisopropilbenzenossulfoniloxi, etc.. A conversão de ácidos fosfónicos em cloretos 1.7 (Lv - Cl) é efectuada por reacção com cloreto de tionilo ou cloreto de oxalilo e outros, como descrito em Organic Phosphorus Compounds, G.M. Kosolapoff, L. Maeir, eds., Wiley, 1976, pág. 17. A conversão de ácidos fosfónicos em monoimidazolida 1.7 (Lv = imidazolilo) é descrita em J. Med. Chem., 2002, 45, 1284, e em J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1991, 312. Em alternativa, o ácido fosfónico é activado por reacção com cloreto de triisopropilbenzenossulfonilo, como descrito em Nucleosides and Nucleotides, 2000, 10, 1885. O produto activado é então reagido com o aminoéster 1.9, na presença de uma base, para se obter o bisamidato 1.5. A reacção é realizada num passo, caso, em que os substituintes azoto presentes no produto 1.5 são iguais, ou em dois passos, através do intermediário 1.11, caso, em que os substituintes azoto podem ser diferentes.
Exemplos destes métodos são ilustrados no esquema 1, Exemplos 3 e 5. No procedimento ilustrado no Esquema 1, 274
Exemplo 3, um ácido fosfónico 1.6 é reagido com dez equivalentes molares de cloreto de tionilo, como descrito em Zh. Obschei Khim., 1958, 28, 1063, para se obter o composto diclorado 1.23. O produto é então reagido à temperatura de refluxo num solvente aprótico polar, tal como acetonitrilo, e na presença de uma base, tal como trietilamina, com serinato de butilo 1.24 para se obter o produto bisamidato.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de serinato de butilo 1.24, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos.
No procedimento ilustrado no Esquema 1, Exemplo 5, o ácido fosfónico 1.6 é reagido, como descrito em J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1991, 312, com carbonildiimidazol, para se obter a imidazolida 1.32. O produto é então reagido em solução de acetonitrilo, à temperatura ambiente, com um equivalente molar de alaninato de etilo 1.33, para se obter o produto de monossubstituição 1.34. Este último composto é então reagido com carbonildiimidazol para produzir o intermediário activado 1.35 e o produto é então reagido, nas mesmas condições, com N-metilolaninato de etilo 1.33a para se obter o produto bisamidato 1.36.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de alaninato de etilo 1.33 ou N-metilolaninato de etilo 1.33a, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos. O monoamidato intermediário 1.3 também é separado do monoéster 1.2 convertendo, primeiramente, o monoéster no derivado activado 1.8, em que Lv é um grupo removível como halo, imidazolilo, etc., utilizando os procedimentos 275 descritos antes. 0 produto 1.8 é então reagido com um aminoéster 1.9, na presença de uma base, tal como piridina, para se obter um produto monoamidato intermediário 1.3. Este último composto é então convertido, por remoção do grupo R1 e acoplamento do produto com o aminoéster 1.9, como descrito antes, no bisamidato 1.5.
Um exemplo deste procedimento, em que o ácido fosfónico é activado por conversão do derivado de cloro 1.26, é ilustrado no esquema 1, Exemplo 4. Neste procedimento, o éster monobenzilico fosfónico 1.15 é reagido, em diclorometano, com cloreto de tionilo, como descrito em Tet. Lett, 1994, 35, 4097, para se obter o cloreto de fosforilo 1.26. O produto é então reagido em solução de acetonitrilo à temperatura ambiente com um equivalente molar de 3-amino-2-metilpropionato 1.27 para se obter o produto monoamidato 1.28. Este último composto é hidrogenado em acetato de etilo num catalisador de paládio a 5% sobre carvão para produzir o produto monoácido 1.29. O produto é submetido a um procedimento de acoplamento de Mitsonobu, com quantidades equimolares de alaninato de butilo 1.30, trifenilfosfina, azodicarboxilato de dietilo e trietilamina em tetrahidrofurano, para se obter o produto bisamidato 1.31.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 3-amino-2-metilpropionato 1.27 ou alaninato de butilo 1.30, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos. O derivado de ácido fosfónico activado 1.7 também é convertido no bisamidato 1.5 através do composto diamino 1.10. A conversão de derivado de ácido fosfónico activado como cloretos de fosforilo nos análogos amino 276 correspondentes 1.10, por reacção com amónia é descrita em Organic Phosphorus Compounds, G.M Kosolapoff, L. Maeir, eds., Wiley, 1976. O composto diamino 1.10 é então reagido a temperatura elevada com um haloéster 1.12, num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como dimetilaminopiridina ou carbonato de potássio, para se obter o bisamidato 1.5. Um exemplo deste procedimento é ilustrado no esquema 1, Exemplo 6. Neste método, um diclorofosfonato 1.23 é reagido com amónia para se obter a diamida 1.37. A reacção é realizada em solução alcoólica ou alcoólica aquosa, à temperatura de refluxo. O composto diamino resultante é então reagido com dois equivalentes molares de 2-bromo-3-metilbutirato de etilo 1.38, num solvente orgânico polar, tal como N-metil-pirrolidinona a cerca de 150°C, na presença de uma base, tal como carbonato de potássio, e facultativamente na presença de uma quantidade catalítica de iodeto de potássio, para se obter o produto bisamidato 1.39.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 2-bromo-3-metilbutirato de etilo 1.38, diferentes haloésteres 1.12, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos.
Os procedimentos ilustrados no esquema 1 também são aplicáveis à preparação de bisamidatos, em que o radical aminoéster incorpora diferentes grupos funcionais. Esquema 1, Exemplo 7, ilustra a preparação de bisamidatos derivados de tirosina. Neste procedimento, a monoimidazolida 1.32 é reagida com tirosinato de propilo 1.40, como descrito no Exemplo 5, para se obter o monoamidato 1.41. O produto é reagido com carbonildiimidazol para se obter a imidazolida 1.42, e este material é reagido com um outro equivalente 277 molar de tirosinato de propilo para produzir o produto bisamidato 1.43.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de tirosinato de propilo 1.40, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 1.5 são obtidos. Os aminoésteres utilizados nas duas fases do procedimento anterior podem ser iguais ou diferentes, de modo que são preparados bisamidatos com os substituintes amino iguais ou diferentes. O esquema 2 ilustra métodos para a preparação de monoamidatos de fosfonato. Num procedimento, um monoéster de fosfonato 1.1 é convertido, como descrito no Esquema 1, no derivado activado 1.8. Este composto é então reagido, como descrito antes, com um aminoéster 1.9, na presença de uma base, para se obter o produto monoamidato 2.1. O procedimento é ilustrado no Esquema 2, Exemplo 1. Neste método, um fosfonato de monofenilo 2.7 é reagido com, por exemplo, cloreto de tionilo, como descrito em J. Gen. Chem. USSR., 1983, 32, 367, para se obter o produto cloro 2.8. 0 produto é então reagido, como descrito no Esquema 1, com alaninato de etilo 2.9, para se obter o amidato 2.10.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de alaninato de etilo 2.9, diferentes aminoésteres 1.9, os produtos correspondentes 2.1 são obtidos.
Em alternativa, o monoéster de fosfonato 1.1 é acoplado, como descrito no Esquema 1, com um aminoéster 1.9 para produzir o amidato 2.1. Se necessário, o substituinte R1 é então alterado por clivagem inicial para se obter o ácido fosfónico 2.2. Os procedimentos para esta transformação dependem da natureza do grupo R1 e estão 278 descritos antes. 0 ácido fosfónico é então transformado no produto éster de amidato 2.3, por reacção com o composto hidroxi R3OH, em que o grupo R3 é arilo, heteroarilo, alquilo, cicloalquilo, haloalquilo, etc., utilizando os mesmos procedimentos de acoplamento (carbodiimida, 'Aldrithiol-2', PYBOP, reacção de Mitsonobu, etc.) descritos no Esquema 1 para o acoplamento de aminas e ácidos fosfónicos.
Esquema 1
Esquema 1 - Exemplo 1
Ou
CQOÊí 1.20 279 Esquema 1 - Exemplo 2 H2HCH(BritCO FMfik—4-OM -—* Esquema 1 OH 1.6 - Exemplo 3 p O n, i· τ .jf·.* Λ1 R-55nk“ R45nk—'{%-C jrM OH I.6 %A 1,28 Esquema 1 - Exemplo 4 B-ink—:IÇ-«H w HaNCHgCHp#}C^fô Q ,P 1JS? ** R-li!ik™'’R"j08n ·*' 8»0 y~oooe COÕEt 1.22
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Esquema 1 - Exemplo 5 280ρ1.6
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Esquema 1 - Exemplo 7
Exemplos deste método são ilustrados no esquema 2, Exemplos 2 e 3. Na sequência ilustrada no Exemplo 2, um fosfonato de monobenzilo 2.11 é transformado por reacçâo com alaninato de etilo, utilizando um dos métodos descritos antes, no monoamidato 2.12. 0 qrupo benzilo é então removido por hidrogenação catalítica em solução de acetato de etilo num catalisador de paládio a 5% sobre carvão, para se obter o amidato de ácido fosfónico 2.13. 0 produto é então reagido em solução de solução de diclorometano à 281 temperatura ambiente com quantidades equimolares de 1-(dimetilaminopropil)-3-etilcarbodiimida e trifluoroetanol 2.14, por exemplo, como descrito em Tet. Lett., 2001, 42, 8841, para se obter o éster de amidato 2.15.
Na sequência mostrada no Esquema 2, Exemplo 3, o monoamidato 2.13 é acoplado, em solução de tetrahidrofurano à temperatura ambiente, com quantidades equimolares de diciclo-hexilcarbodiimida e 4-hidroxi-N-metilpiperidina 2.16 para produzir o produto éster de amidato 2.17.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de alaninato de etilo 2.12, diferentes monoácidos 2.2, e em vez de trifluoroetanol 2.14 ou 4-hidroxi-N-metilpiperidina 2.16, diferentes compostos hidroxi R3OH, os produtos correspondentes 2.3 são obtidos.
Em alternativa, o éster de fosfonato activado 1.8 é reagido com amónia para se obter o amidato 2.4. O produto é então reagido, como descrito no Esquema 1, com um haloéster 2.5, na presença de uma base, para produzir o produto amidato 2.6. Se adequado, a natureza do grupo R1 é modificada, utilizando os procedimentos descritos antes, para se obter o produto 2.3. O método é ilustrado no Esquema 2, Exemplo 4. Nesta sequência, o cloreto de monofenil-fosforilo 2.18 é reagido, como descrito no Esquema 1, com amónia, para se obter o produto amino 2.19. Este material é então reagido em solução de N-metilpirrolidinona a 170°C com 2-bromo-3-fenilpropionato de butilo 2.20 e carbonato de potássio, para se obter o produto amidato 2.21., Utilizando os procedimentos anteriores mas utilizando, em vez de 2-bromo-3-fenilpropionato de butilo 2.20, diferentes haloésteres 2.5, os produtos correspondentes 2.6 são obtidos. 282
Os produtos monoamidato 2.3 também são preparados a partir dos derivados de fosfonato duplamente activados 1.7. Neste procedimento, exemplos do qual estão descritos em Synlett., 1998, 1, 73, o intermediário 1.7 é reagido com uma quantidade limitada do aminoéster 1.9 para se obter o produto monossubstituido 1.11. Este último composto é então reagido com o composto hidroxi R3OH num solvente orgânico polar, tal como dimetilformamida, na presença de uma base, tal como uma diisopropiletilamina, para se obter o éster de monoamidato 2.3. 0 método é ilustrado no Esquema 2, Exemplo 5. Neste método, o dicloreto de fosforilo 2.22 é reagido em solução de diclorometano com um equivalente molar de N-metil-tirosinato de etilo 2.23 e dimetilaminopiridina para gerar o monoamidato 2.24. 0 produto é então reagido com fenol 2.25 em dimetilformamida contendo carbonato de potássio, para se obter o produto éster de amidato 2.26.
Utilizando estes procedimento, mas utilizando, em vez de N-metil-tirosinato de etilo 2.23 ou fenol 2.25, os aminoésteres 1.9 e/ou os compostos hidroxi R3OH, os produtos correspondentes 2.3 são obtidos.
Esquema 2 283 Ο
Lv T.9 1,7 -** Mnk—P^N, 1.11 R-fek* 1,1 0 if-OR1 ———m. 0 rôs—íf-OR1 -----------------*· 0 QM 1,3 fi-ϊ-ψ M N-R2 ÍR4) €0·^ C%RS m a R^k—P-OR1 Lv m β 12
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Esquema 2 - Exemplo 1
2.7
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Esquema 2 - Exemplo 2
P R-lir*·—$-OB« · OH P RRink—ff-OSnm >fek—fftsH l^oCHaPff, í~{ 2.11 0¾¾ 112 NH QQ*B 2.13 2.14
MH 2.15
Esquema 2 - Exemplo 3 fNSnk·» p POH )íH ,0 R-íir.k—^P-0· NH C0#t 111 cos r~~\ N-Mé 113 2.17 284
Esquema 2 - Exemplo 4 284 0 #-01% ^R.iink—f('OPh 2x18 2.19
BrCN{Sn)C02eu 2JZ0
Esquema 2 - Exemplo 5
2.26 0 esquema 3 ilustra métodos para a preparação de diésteres de fosfonato substituídos com carboalcoxi, em que um dos grupos éster incorpora um substituinte carboalcoxi. Num procedimento, um monoéster 1.1, preparado como descrito antes, é acoplado, utilizando um dos métodos descritos acima, com um hidroxiéster 3.1, em que os grupos R4 e R5 são tal como descritos no Esquema 1. Por exemplo, quantidades equimolares dos reagentes são acopladas, na presença de uma carbodiimida, tal como diciclo-hexilcarbodiimida, como descrito em Aust. J. Chem., 1963, 609, facultativamente na presença de dimetilaminopiridina, como descrito em Tet., 1999, 55, 12997. A reacção é efectuada num solvente inerte à temperatura ambiente. O procedimento é ilustrado no Esquema 3, Exemplo 1. Neste método, um fosfonato de monofenilo 3,9 é acoplado em solução de diclorometno, na presença de diciclo- 285 hexilcarbodiimida, com 3-hidroxi-2-metilpropionato de etilo 3.10 para se obter um diéster misturado com fosfonato
Utilizando este procedimento, mas utilizando, em vez de 3-hidroxi-2-metilpropionato de etilo 3.10, diferentes hidroxiésteres 3.1, os produtos correspondentes 3.2 são obtidos. A conversão de um monoéster de fosfonato 1.1 num diéster misturado 3.2 também é realizada por meio de uma reacção de acoplamento de Mitsonobu com o hidroxiéster 3.1, como descrito em Org. Lett., 2001, 643. Neste método, os reagentes 1.1 e 3.1 são combinados num solvente polar, tal como tetrahidrofurano, na presença de uma triarilfosfina e um azodicarboxilato de dialquilo, para se obter o diéster misturado 3.2. O substituinte R1 varia por clivagem, utilizando os métodos descritos anteriormente, para se obter o produto monoácido 3.3. O produto é então acoplado, por exemplo, utilizando métodos descritos antes, com o composto hidroxi R3OH, para se obter o produto diéster 3.4. O procedimento é ilustrado no Esquema 3, Exemplo 2. Neste método, um fosfonato de monoalquilo 3.12 é acoplado em solução de tetrahidrofurano, na presença de trifenilfosfina e dietilazodicarboxilato, com lactato de etilo 3.13 para se obter o diéster misturado 3.14. O produto é reagido com cloreto de tris(trifenilfosfina)-ródio (catalisador de Wilkinson) em acetonitrilo, como descrito anteriormente, para remover o grupo alilo e produzir o produto monoácido 3.15. Este último composto é então acoplado, em solução de piridina à temperatura ambiente, na presença de diciclo-hexilcarbodiimida, com um equivalente molar de 3-hidroxipiridina 3.16 para se obter o diéster misturado 3.17. 286
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de lactato de etilo 3.13 ou 3- hidroxipiridina, um hidroxiéster diferente 3.1 e/ou um composto hidroxi R3OH diferente, os produtos correspondentes 3.4 são obtidos.
Os diésteres mistos 3.2 também são obtidos a partir dos monoésteres 1.1 via intermediação dos monoésteres 3.5 activados. Neste procedimento, o monoéster 1.1 é convertido no composto activado 33 por reacção, por exemplo, com pentacloreto de fósforo, como descrito em J. Org. Chem., 2001, 66, 329, ou com cloreto de tionilo ou cloreto de oxalilo (Lv-Ci), ou com cloreto de tri-isopropilbenzenossulfonilo em piridina, como descrito em Nucleosides and Nucleotides, 2000, 19, 1885, ou com carbonildiimidazol, como descrito em J. Med. Chem., 2002, 45, 1284. 0 monoéster activado resultante é então reagido com o hidroxiéster 3.1, como descrito antes, para se obter o diéster misturado 3.2. O procedimento é ilustrado no Esquema 3, Exemplo 3. Nesta sequência, um fosfonato de monofenilo 3.9 é reagido, em solução de acetonitrilo 5 a 70°C, com dez equivalentes de cloreto de tionilo, de modo a produzir o cloreto de fosforilo 3.19. 0 produto é então reagido com 4-carbamoil-2-hidroxibutirato de etilo 3.20 em diclorometano contendo trietilamina, para se obter o diéster 3.21 misturado.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de 4-carbamoil-2-hidroxibutirato de etilo 3.20 diferentes hidroxiésteres 3.1, os produtos correspondentes 3.2 são obtidos.
Os diésteres de fosfonato misturados também são obtidos por uma via alternativa para incorporação do grupo 287 R30 nos intermediários 3.3, em que o radical hidroxiéster já está incorporado. Neste procedimento, o monoácido intermediário 3.3 é convertido no derivado activado 3.6, em que Lv é um grupo removível como cloro, imidazol e outros, como anteriormente descrito. 0 intermediário activado é então reagido com o composto hidroxi R3OH, na presença de uma base, para se obter o produto diéster misturado 3.4. 0 método é ilustrado no Esquema 3, Exemplo 4. Nesta sequência, o monoácido de fosfonato 3.22 é reagido com cloreto de triclorometanossulfonilo em tetrahidrofurano contendo colidina, como descrito em J. Med. Chem., 1995, 38, 4648, para produzir o produto triclorometanossulfoniloxi 3.23. Este composto é reagido com 3-(morfolinometil)-fenol 3.24 em diclorometano contendo trietilamina, para se obter o produto diéster misturado.
Utilizando os procedimentos anteriores, mas utilizando, em vez de com 3-(morfolinometil)-fenol 3.24, diferentes carbinóis R3OH, os correspondentes produtos 3.4 são obtidos.
Os ésteres de fosfonato 3.4 também são obtidos por meio de reacções de alquilação realizadas nos monoésteres 1.1. A reacção entre o monoácido 1.1 e o haloéster 3.7 é realizada num solvente polar, na presença de uma base, tal como diisopropiletilamina, como descrito em Anal. Chem., 1987, 59, 1056, ou trietilamina, como descrito em J. Med. Chem., 1995, 38, 1372, ou num solvente não polar, tal como benzeno, na presença de 18-coroa-6, como descrito em Syn. Comm, 1995, 25, 3565. O método é ilustrado no Esquema 3, Exemplo 5. Neste procedimento, o monoácido 3.26 é reagido com 2-bromo-3-fenilpropionato de etilo 3.27 e diisopropiletilamina em 288 dimetilformamida a 80°C para se obter o produto diéster misturado 3.28.
Utilizando o procedimento antes, mas utilizando, em vez de 2-bromo-3-fenilpropionato de etilo 3.27, diferentes haloésteres 3.7, os correspondentes produtos 3.4 são obtidos.
Esquema 3 ÍWWf Mi w HarR^^GÕOF!83,? 3.1
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Esquema 3 - Exemplo 1
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Esquema 3 - Exemplo 2
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Esquema 3 - Exemplo 3
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Esquema 3 - Exemplo 4
Esquema 3 - Exemplo 5 9 íf OCH{8fl)CO^ÍI OCHgCFs 3.28
Esquema 4 ilustra métodos para a preparação de diésteres fosfonato, em que ambos os substituintes éster incorporam grupos carboalcoxi.
Os compostos são preparados directamente ou indirectamente a partir de ácidos fosfónicos 1.6. Numa alternativa, o ácido fosfónico é acoplado com hidroxiéster 4.2, utilizando as condições descritas previamente nos esquemas 1-3, tais como reacções de acoplamento, utilizando diciclo-hexilcarbodiimida ou semelhantes reagentes, ou sob as condições de reacção de Mitsonobu para se obter o 290 produto diéster 4.3, em que os substituintes de éster são idênticos.
Este método é ilustrado no Esquema 4, Exemplo 1. Neste procedimento, o ácido fosfónico 1.6 é reagido com três equivalentes molares de lactato de butilo 4.5, na presença de 'Aldrithiol-2' e trifenilfosfina em piridina a cerca de 70°C, para se obter o diéster 4.6.
Utilizando o procedimento antes, mas utilizando, em vez de lactato de butilo 4.5, diferentes hidroxiésteres 4.2, os produtos correspondentes 4.3 são obtidos.
Em alternativa, os diésteres 4.3 são obtidos por alquilação do ácido fosfónico 1.6 com um haloéster 4.1. A reacção de alquilação é realizada, como descrito no Esquema 3 para a preparação dos ésteres 3.4.
Este método é ilustrado no Esquema 4, Exemplo 2. Neste procedimento, o ácido fosfónico 1.6 é reagido com 3-bromo-2-metilpropionato de etilo em excesso 4.7 e diisopropiletilamina em dimetilformamida a cerca de 80°C, como descrito no Anal. Chem., 1987, 59, 1058, para produzir o diéster 4.8.
Utilizando o procedimento antes, mas utilizando, em vez de 3-5-bromo-2-metilpropionato de etilo 4.7, diferentes haloésteres 4.1, os produtos correspondentes 4.3 são obtidos.
Os diésteres 4.3 são também obtidos por reacções de deslocamento de derivados activados 1.7 do ácido fosfónico com os hidroxiésteres 4.2. A reacção de deslocamento é realizada num solvente polar, na presença de uma base adequada, como descrito no Esquema 3. A reacção de deslocamento é realizada, na presença de um excesso do hidroxiéster, para se obter o produto diéster 4.3, em que 291 os substituintes éster são idênticos, e sequencialmente com quantidades limitadas de diferentes hidroxiésteres, para preparar diésteres 4,3, em que os substituintes éster são diferentes. Os métodos são ilustrados no Esquema 4, Exemplos 3 e 4. Como ilustrado no Exemplo 3, o dicloreto de fosforilo 2.22 é reagido com três equivalentes molares de 3-hidroxi-2-(hidroximetil)-propionato de etilo 4.6 em tetrahidrofurano contendo carbonato de potássio, para obter o produto diéster 4.10.
Utilizando o procedimento antes, mas utilizando, em vez de 3-hidroxi-2-(hidroximetil)propionato de etilo 4.9, diferentes hidroxiésteres 4.2, os produtos correspondentes 4.3 são obtidos.
Esquema 4, Exemplo 4, mostra a reacção de deslocamento entre quantidades equimolares de dicloreto de fosforilo 2.22 e 2-metil-3-hidroxipropionato de etilo 4.11, para se obter o produto monoéster 4.12. A reacção é efectuada em acetonitrilo a 70°C, na presença de diisopropiletilamina. O produto 4.12 é então reagido sob as mesmas condições, com um molar equivalente de lactato de etilo 4.13, para se obter o produto diéster 4.14.
Utilizando o procedimento antes, mas utilizando, em vez de 2-metil-3-hidroxipropionato de etilo 4.11 e lactato de etilo 4.13, reacções sequenciais com diferentes hidroxiésteres 4.2, os produtos correspondentes 4.3 são obtidos.
Esquema 4 292
Esquema 4 - Exemplo 1 P HO CH (C p ^ R-ljnk—}Í-CíCH(CH^CO£3u OH 4S OC H (C OCoEkí l.S 4«€
Esquema 4 - Exemplo 2 P SrCHgCHfCH^C<^€t ,0 B-Sak—'#-OH -to. RHsi*—#OO^CH|CH3)CC^€l
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Esquema 4 - Exemplo 3
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Esquema 4 - Exemplo 4 2930 HôeHgeHíCHgJCQaB ρ HÓC^aHsjC^EÍ 0 Η.;ίηΚ_^-0ί .........- -···*· R-ίink™^0CH;iCH:(CH$0¾ £t -.....-·-·*- R-W —í^-DCHgCH^ri^CO-Eí
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Esquema 1002
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De acordo com procedimentos semelhantes, a substituição de ésteres de aminoácidos 820 com lactatos 821 (esquema 1003) por lactatos mono-fosfónicos 823. Os lactatos 823 são intermediários úteis para formar os compostos fosfonato da invenção. 295EequejTi&.1003
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Exemplo 1 A uma solução de ácido 2-aminoetilfosfónico (1,28 g, 10,1 mmol) em NaOH 2N (10,1 mL, 20,2 mmol) foi adicionado cloroformato de benzilo (1,7 mL, 12,1 mmol). Após a mistura de reacção ser agitada durante 2 dias à temperatura ambiente, a mistura foi repartida entre Et20 e água. A fase 296 aquosa foi acidificada com HC1 6N até pH 2. O sólido incolor resultante foi dissolvido em MeOH (75 mL) e tratado com 'Dowex 50WX8-200' (7 g) . Após a mistura ser agitada durante 30 minutos, foi filtrada e evaporada sob pressão reduzida para se obter carbamato 28 (2,37 g, 91%) com o aspecto de um sólido incolor (Esquema 1005) . A uma solução de carbamato 28 (2,35 g, 9,1 mmol) em piridina (40 mL) foi adicionado fenol (8,53 g, 90,6 mmol) e 1,3-diciclohexiicarbodiimida (7,47 g, 36,2 mmol). Após a mistura de reacção ser aquecida a 70°C e agitada durante 5 horas, a mistura foi diluida com CH3CN e filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e diluido com EtOAc. A fase orgânica foi lavada com NH4CI saturado, NaHC03 saturado e salmoura, seca sobre Na2SC>4, filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi submetido a cromatografia em gel de silica duas vezes (efectuando a eluição com EtOAc 40-60%/hexano) para se obter fosfonato 29 (2,13 g, 57%) com o aspecto de um sólido incolor. A uma solução de fosfonato 20 (262 mg, 0,637 mmol) em iPrOH (5 mL) foi adicionado TFA (0,05 mL, 0,637 mmol) e Pd a 10%/C (26 mg) . Após a mistura de reacção ser agitada em atmosfera de H2 (balão) durante 1 h, a mistura foi filtrada através de Celite. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para se obter amina 30 (249 mg, 100%) com o aspecto de um óleo incolor (Esquema 1005) .
Secção A de Esquemas Métodos exemplificativos para preparar os compostos da invenção são ilustrados nos esquemas 1-7 abaixo. Uma 297 descrição detalhada dos métodos é encontrada adiante na secção experimental.
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Secção B dos esquemas Os métodos alternativos exemplificativos para preparar os compostos da invenção são ilustrados nos esquemas 101-113 abaixo. 305 305 isquem» 101 - Η ο wr η Η ΟΗ
MaN;í \ ^ ^ ^ . BnB?/Baâô Ο Ο ^ OBrs4V τΑ-Ν= Ο \ pph;i Η 08η .,α ,ν, Α .;··!: t Β ) " ° \..... ο tAt·! ...cr w,“4 \J \ Λ· «· νA. ο - f % ,Οίνίβ \ ί --5--0 Ο ,ΟΒη ΟΒπ ..•.}Ά'Λ“ίί·ί5ί ί. / μ Ό-Βη 4-0 (.3 Básií \ ί"; y X ΧΎ Ό
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10 14 A sulfonamida 11 é facilmente alquilada com o iodeto 8 (J. Med. Chem., 35, 2958, 1992) para se obter o intermediário 12, Abertura regiosseletiva de epóxido (JP -9124630) do epóxido 1 com 12 proporciona o intermediário 13. Desprotecção do grupo BOC e subsequente tratamento de carbonato de bisfuranilo 8 proporciona o intermediário 14 que é submetido a hidrogenação para proporcionar o composto 10. 308
16 13 O epóxido 1 é convertido no derivado amino-hidroxilo 15 utilizando o procedimento conhecido (J. Med. Chem., 37, 1758, 1994) . Sulfonilação de 15 utilizando cloreto de benzeno sulfonilo proporciona o composto 16. A instalação de uma cadeia lateral para obter o intermediário 13 é realizada por alquilação do átomo de azoto de sulfonamida com iodeto 6. O intermediário 13 é convertido no composto 10, utilizando a mesma sequência ilustrada no Esquema 102. 309 />, ..OfoU! H OBr^f - jí\,0, >h A ,M MJ L --\ ií 1 V - foi ,Ρ-ρΟΒιι ::í"· O&n O ΡτΌΒη OB·! //.......ΐ\ ,v \y η o
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ApH H OH ( a.AA-,.,.-Nv.AA l ' !> r\ w o o GO / v>. \ / vs**?v A sulfonamida 5 é alquilada sob condições básicas, utilizando o brometo de alilo 17 (Chem. Pharm. Buli., 30, 111, 1982) para se obter o intermediário 18. Uma transformação semelhante é descrita na literatura (J. Med. Chem., 40, 2525, 1997). Hidrólise do grupo BOC com TFA e acilação da amina resultante 19 com carbonato de bisfuranilo 8 proporciona o composto 20. Hidrogenação catalisada com Pd/C em atmosfera de H2 proporciona o ácido fosfónico 21.
310 IfE
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Esquema 18§ (conf) m.
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A sulfonamida 5 é convertida em 22 via hidrólise de grupo BOC com TFA e acilação com carbonato de bisfuranilo 8. A sulfonamida 22 é alquilada com brometo 23 (J. Med. Chem., 40, 2525, 1997) para obter o composto 24, que, após a hidrogenólise, proporciona o catecol 25. A alquilação de grupos fenólicos, utilizando dibenzil-hidroximetil-fosfonato (J. Org. Chem., 53, 3457, 1988), proporciona os compostos regioisoméricos 26 e 27. Estes compostos 26 e 27 são hidrogenados para obter os ácidos fosfónicos 28 e 29, respectivamente. Os ácidos fosfónicos ciclicos individuais 30 e 31 são obtidos sob condições básicas (como NaH) (US 5886179) e subsequente hidrogenólise dos derivados de ésteres benzilicos 26 e 27. 312
Esquema 106
Nesta via, o composto 25 é obtido por reacção entre o epóxido 32 e a sulfonamida 33, utilizando as condições descritas na patente JP n° 9124630.
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HW v^'do 33 o./ wv.-s C'vA O (1-.—.·( \ _ / f 'V ,À V Άΐ / S •A>. * 0 ¢. 7 V Á . ,ϋΗΐί ,Uh 0 epóxido 32 e a sulfonamida 33 são sintetizados utilizando metodologia semelhante descrita na mesma patente de invenção.
Λ f, W·..·' .0·., sf""Á l f VO § i-o <j í 1. OH CHO \ 0'H h i , ΐΜ;> 3i;> Λ%·. .-0.. iV ri 1 'f A-AÀH Y\ Q \ 0:/ r\ v y y\ o Ck/ \ \^,s .# v ··> N / 34 OH úK> V* A VOH H OH | A>,· Q | íj ; 3, V"\ U V ..<? W-, i \ y... O u o,,/ / \
W 313 0 composto 34 é obtido a partir de 32, utilizando uma sequência semelhante descrita em J. Med. Chem., 37, 1758, 1994. Aminação redutiva (para transformação semelhante ver WO 00/47551) do composto 34 com aldeído 35 proporciona o intermediário 36 que é convertido no composto 25 por sulfonilação e subsequente hidrogenação. 313O Ri f Vorjí OR, u-./ M U ,'9 / v·1·. X í" + V ' .·'··' ‘V. i 'i 1, /V. W:/ .'w\ b ãh ^v,OMe 32 5 \ ÍW" H OH i f\ 5 \/ \
O o o p — Ρ:ί'Ό£$^· íjs '.·> uí 01 ΓνΙ? ΌΒ»>·,<2”Η
O 0 tratamento de epóxido 32 com sulfonamidas 37 e/ou 38, sob condições descritas na patente JP n° 9124630, proporciona 26 e 27.
Esquema 109 A aminação redutiva de intermediário amino-hidroxilo 34 com os aldeídos 39 e 40, tal como descrito na patente de invenção WO 00/47551, proporciona 41 e 42 que sofrem uma sulfonilação suave para proporcionar 26 e 27. 314 o-y 34
μ OH ^Ον,ΝνΑ..,ΜΟ " s: \ Q .// nrt .04, ( VOít jV * V\ 4 VOR, ' / CHQ ...........nV- 2-,-0 κ oh( a í ‘Λ D O 4’ 8 0 O 39 R, Χ'ΟΒπ; Rj ::: H 41 p S8 ãõ i! X -V, 0 l· 0 .RrOBrt 4ij R2 < OBn; R; a H v-W 42 >! „ .. R* 0 Oí3S'i; Rj - H .. Ρ^ / V.-OR.,. α ,k.Ju 4 i ,041¾ r \ v" \ âk o,y o ··· o võ Ubír 0 it
Esquema 110
Uma abordagem alternativa, em que epóxido 32 é aberto com benzilaminas 43 e 44 sob condições descritas antes, proporciona 41 e 42, respectivamente. Transformações semelhantes foram descritas na patente JP n° 9124630.
315 Q U í Η n 0 0-,/
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r ou i 6" I kG^Av---A:A,?À^ O tí A d 1 x Ί O-/' // Á K } 45 %.ABr ' Ά~~0ΒΤ3 .ORO;
R H ÇH í .,-.,0.,, μ A-K hjRA S 1 q-4 μd 0 --Br , / Ί4 AR f avRMe aí 9h i r 4 f.A.A¥V A" >.....A3 ,.0.. 4? 316 A aminação redutiva do bromoaldeído 45 (J. Organomet
Chem., FR; 122, 123, 1976) com a amina 34 proporciona 46 que então é submetido a sulfonilação para proporcionar 47. 0 derivado de bromo 47 é convertido no fosfonato 48 sob condições de reacção de Michaelis-Arbuzov (Bioorg. Med. Chem. Lett, 9, 3069, 1999). A hidrogenação final de 48 proporciona o ácido fosfónico 49. P'·'"
Sc Βί- Ο Β···03κ Ό&ΐ N OHΉ4 ’ Sí òv./ 34 51
Ο Ί' Ϊ *\ o H OH i .....A..,N ic.7 q. j A í á r \ ' \ á q o·./ r\ S>' '>· 45 O intermediário 48 é também obtido como ilustrado no esquema 112. A aminação redutiva do aldeído 52 com a amina 34 proporciona o fosfonato 52 e a sulfonilação deste intermediário proporciona 48.
317 NH L g-OBn
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Em alternativa, o composto 52 é obtido a partir do epóxido 32 por uma reacção de abertura de anel com o aminofosfonato 53 (Esquema 113).
Secção C de esquemas 0 esquema 9 está descrito nos exemplos. 318 /" v -A·. Y-? r ϊ :•......:;. o oh f C> ,0 /-"'000 cf Y'Yf ——"i$s ;.....'·. 0 0...-' 'OH ,ΐοΓ'.Λ //' q /Λ (S '0 0.1 ?H f"x...
OCH .-•O-, .-Oo Ί-r roo Om 30 y\ H OH ^ /X .VJ, ,-ÍM, ,m. /......\ o r li : .....-·, o a. / i ; λ\../ Ίί 2 -í- vfy->^ PhO' OH 32 s,1, OH H i λΟ, .0. -,-v ;··: O' T 1' 0’ ·%'"2 ,ΐ·'··Ο·0Κ·> 2 / k i :-2vhP >y ' 0 o,. —, O o Phtí ir "Cíl-iRj, H ' 319
Secção D de esquemas
Os esquemas seguintes estão descritos nos exemplos. Íí
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Soí: HM.. Λο 0 }· í 8nC});A 0 BifYOjjP ..x. OBt, 6 k .1 i. |1 Ί íT"tXPí0^fsV. \ V ": ' 0 ;ΗΟΒΐ':Η rj f 0 ! ·. 1 0 fj ar- BocHN^ . O,. ,MH ....... B0(ÍOO...x-’V..,Í < ,Ο ΐ,ρ· s. í: 1 ' ν’ X> .ν''···. ·'·>., 0 1 J Í J 8 XX' '"0 10 320 0" O/r. / 3 \... ''" 3 0 ¥ v-\ \S ; \ / I ·· NO- Λ 1 5 0' o <y ..-'λ , > s .. s r ^ Η. λ . ?4 o r ϊ r s,. }......\ 0 .. (-o, ò,j 12 0 •C" ,! ΊΓ o OH "ϊΓ*
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Secção E de esquemas
Os esquemas 1 a 3 estão descritos nos exemplos 324 qyym® 1
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íψ rv*, ... fctocHul.^ //.....OH Ο "Ό Ό...Η" OH f " /:.,,,,, BôçHN (..^-<.ί€Η;!Ρ0;0&η!2
OH Η·:Ν,. "\ sKr-Λ 0-OOHíPOíOBn}, o”’xb ; Λ H 9H f ' - ' /Xy~\ ,-N ν,·-'·χ.,'Ν ·,,·-Α /--'OC:i-isP()(OB φ o y' o V I j· Õ, ./ 0 ,*., ^ ÍJ â xo Ç)H í' n^S^oA /Hwoíohj* •.3 · ; ,0k \.....o ,,.0' '0 325 H í"' x /--.¾A,v.,4 dT'j .. .,.···. v. ..A, ..,m. ^ ..a, ., h. ,.,.,4 /—0/> ν' i í: : ' .:.. V-4 o s . 0" D....... a. > B A 4 Ví λΟ. 1 / 4 0 V ' ' Ά <* -/ „ O 0 V ^; V‘'‘LV>"'‘ li ,i Esquema 3
o Sí BAT P-GH ÒH O Vi 0' ΌΕΙ 4 hO'" " p-obi) è· - 0 100^4-0¾ 0\., a
H A j. <r ΌΒϊ 0 Y ·. >0, / f-om
Y a "0 Ί n j ··. I á.a
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Secção F de esquemas OS esquemas 1 a 5 estão descritos nos exemplos. 326 BnÔ”' 1
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327 Esquema 2 OH 9 rv--,. . BoO'" TCV·, 0u-lb:t y HO"’ " ..-x'COsEt 'O" CO>R 8 O __ ΤίΠ''"ν·'ρ9'!.,--9^0?Ε;? '0' "CO® H /-, ACk -N. Cl ! il . ·. 0 0. /
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Esquema 3 CQíEt0 ,.VJ “ BísO"' xv Ot-% ΟΰνΒ Ο , j Hcr"^0Ph 1 i 12 ·· .9.0'" ™ KOPh CO>B i "
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Secção G de esquemas Os esquemas 1 a 9 estão descritos nos exemplos. 330 .v A..# Ο fi-oe 1 a
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I. P(OEt)3/I2O°C; II. H2/Pd a 10%/C; III. Ver o esquema 13 da secção H de esquemas, composto 48 /NaBH3CN/HOAc/MeOH; IV. A. TFA; b. n-Bu4NF; V. bisfuranocarbonato/DMAP; VI. HCHO/NaBH3CN/HOAc/MeOH 331
ί r: I.a. TMSBr; b. SOC12/60°C; c. BnOH/Et3N; II. Zn/HOAc; III. Ver o esquema 13 da secção H de esquemas, composto 4 8 /NaBH3CN/HOAc/MeOH; IV. a. TFA; b. n-BU4NF; V. bisfuranocarbonato/DMAP; VI. H2/Pd a 10%-C; VIII. RNH3/PPh3/aldrithiol 332 BíXV·····.. /•\ ίίΟΰΝ·-·'···^· oí-í........ 15 "?\ OO S""'N5 po® te w /\ 15 PEí |-oa
IV gíisín""' ίΓ'^γfííiçHp,, JN*. .A, ..y ,.p. is Ψ f ίΎ'^..λ..αλ> V τ 'v ,¾ o t)
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sD I.a. NaH; b. MTMC1; II.a. SOCl2; b. P (OEt)3/120°C; III. TFA; IV. Ver o esquema 13 da secção H de esquemas, composto 48 /NaBH3CN/HOAc/MeOH; V. a. TFA; b. n-BuíNF; VI. bisfuranocarbonato/DMAP; 333 ,A\ XS \ / ' -V'· QH xov·;... .,,4 ,,o
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Xo, j : .. ;>g 2? I. NaBH4/THF/H20; II. KOH/EtOH; III.a. isobutilamina/isopropanol/80°C; b. cloreto de 4-metoxibenzenossulf onilo/Et3N; IV. BBr3/CH2Cl2; V. Boc20/NaHC03; VI. TfOCH2PO(OEt)2/Cs2C03 334 &qy<âíM § 3? OH ϊ" a, ΑΧ ,ν, Λ ,hΰ ? f Τ ?ν ο X, ...,¾.. Ο !·-·
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33 I.a. TMSCl/Et3N; b. bisfuranocarbonato/DMAP; c. n-Bu4NF/HOAc; II. TfOCH2PO (OBn) 2/Cs2C03; III. Zn/HOAc 336
S I. H2/Pd a 10%-C; II. RNH2/PPh3/Aldrithiol/ diisopropiletilamina/piridina 337
Esípsíisa 3 337
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RHR I. RNH2/PPh3/Aldrithiol/ diisopropiletilamina/piridina J Vj; \' 3 (7 :.P .A, /\
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Secção H de esquemas
Os esquemas 1 a 14 estão descritos nos exemplos. X 339 Escama 1.......<ϊ
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Secção I de esquemas Os esquemas 1 a 3 estão descritos nos exemplos. 353
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Secção J de esquemas Os esquemas 1 a 4 estão descritos nos exemplos. 356
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Secção K de esquemas
Os esquemas 1-9 estão descritos nos exemplos. 360
Esquema 1 5?í{c-
5 361
Esquema 3
362 Esquema 5
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Fenol OCC 70^0, piiitlina
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Esquema 6 H OH:
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„OPh nOH 363 Esquema 7
OH mjf?· ^ 08(1 12 THF, r.t
Esquema 8
14 364 Esquema 9
1«
Secção L de esquemas
Os esquemas 1 a 9 estão descritos nos exemplos. 365
Esquema 1 Síntese de éster Pl-fosfónico
4 366 Esquema 2
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OH
r° t
9oPh $ 367 Esquema 3 Síntese de éster P2'-amino-Pl-fosfónico
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QBíi 6
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11
Composto R1 r2: 16a Gly-£t Oty-Et Gíy-Bu Gly-Bu 16j Phe-Bu Ptia-Bu -6k NHEt NHEt 369Esquema 5 Síntese de monoamidatos
Composto R1 ^2; 30a OPh Ala-Me m ΟΡΙΊ Ala-Ei 30c OPh (OpAlaoPF 30d OPh Ala-Bu 30s OBn Ala-El 370 Esquema 6
Esquema 7 Síntese de Lactatos
371 Esquema δ
Composto R( Rg DPh Lac;-Í?T 31b oph Lae-Et 31c OPh Lac-Bu 31 d OPh (RH.ac-Me 31 ô oph íRi-Lac-E;
372
Esquema 9 Síntese de bis-lactato
Exemplos
Os seguintes exemplos referem-se aos Esquemas.
Alguns exemplos foram realizados múltiplas vezes. Em exemplos repetidos, as condições de reacção como tempo, temperatura, concentração e outros, e rendimentos, estão nos intervalos experimentais normais. Em exemplos repetidos, em que modificações significativas foram feitas, estes foram notados em que os resultados variaram de modo significativo em relação aos descritos. Nos exemplos, em que diferentes materiais de partida foram utilizados, estes são notados. Quando os exemplos repetidos se referem a 373 análogo "correspondente" de um composto, como "éster de etilo correspondente", isto significa que se assume que um grupo de outra forma presente, neste caso tipicamente um éster de metilo, é o mesmo grupo modificado, tal como indicado.
Secção A de exemplos
Exemplo 1
Diazocetona 1: a uma solução de N-terc-butoxicarbonil-O-benzil-L-tirosina (11 g, 30 mmol, Fluka) em THF anidro (55 mL) a -25-30°C (temperatura de banho externa) foi adicionado cloroformato de isobutilo (3,9 mL, 30 mmol), seguindo-se a adição lenta de N-metilmorfolina (3,3 mL, 30 mmol). A mistura foi agitada durante 25 min, filtrada enquanto fria e o massa da filtração foi enxaguada com THF frio (0°C) (50 mL) . O filtrado foi arrefecido até -25°C e diazometano (-50 mmol, gerado a partir de 15 g Diazald de acordo com Aldrichimica Acta 1983, 16, 3) em éter (~150 mL) foram vertidos na solução de anidrido misto. A mistura de reacção foi agitada durante 15 min e foi então colocada num banho de gelo a 0°C, deixando o banho aquecer à temperatura ambiente, mantendo a agitação de um dia para o outro durante 15 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o residuo foi dissolvido em EtOAc, lavado com água, NaHC03 saturado, NaCl saturado, seco (MgS04) , filtrado e evaporado em sólido amarelo pálido. O sólido impuro foi colocado em suspensão em hexano, filtrado e seco para se obter diazocetona (10,9 g, 92%) que foi utilizada directamente no passo subsequente.
Exemplo 2 374
Clorocetona 2: a uma suspensão de diazocetona 1 (10,8 g, 27 mmol) em éter (600 mL) a 0°C foi adicionado HC1 4M em dioxano (7,5 mL, 30 mmol). A solução foi removida do banho de arrefecimento e deixada aquecer até à temperatura ambiente, momento esse em que a reacção foi agitada durante lh. O solvente de reacção foi evaporado sob pressão reduzida para se obter um resíduo sólido que foi dissolvido em éter e passado através de uma coluna curta de gel de sílica. O solvente foi evaporado para se obter clorocetona (10,7 g, 97%) com o aspecto de um sólido.
Exemplo 3
Cloroálcool 3: a uma solução de clorocetona 2 (10,6 g, 26 mmol) em THF (90 mL) foi adicionada água (10 mL) e a solução foi arrefecido a 3-4°C (temperatura interna). Uma solução de NaBH4 (1,5 g, 39 mmol) em água (5 mL) foi adicionada, gota a gota, durante um período de 10 min. A mistura foi agitada durante lh a 0°C e KHS04 saturado foi lentamente adicionado até pH <4, seguindo-se a adição de NaCl saturado. A fase orgânica foi lavada com NaCl saturado, seca (MgS04) filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro era constituído por uma mistura a 70:30 de diastereómeros por análise por HPLC (fase móvel, CH3CN:H20 a 77:25; caudal: 1 mL/min; detecção: 254 nm; volume de amostra: 20 pL; coluna: 5G C18, 4, 6 x 250 mm, Varian; tempos de retenção: diastereómero principal 3, 5,4 min, diastereómero secundário 4, 6,1 min). O resíduo foi recristalizado a partir de EtOAc/hexano, duas vezes, para se obter o cloro-álcool 3 (4,86g, >99% pureza diastereomérica por análise por HPLC) com o aspecto de um sólido branco. 375
Exemplo 4
Epóxido 5: uma solução de cloro álcool 3 (4,32 g, 10,6 mmol) em EtOH (250 mL) e THF (100 mL) foi tratada com K2CO3 (4,4g, malha 325, 31,9 mmol) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 20 h. A mistura de reacção foi filtrada e foi evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre EtOAc e água e a fase orgânica foi lavada com NaCl saturado, seca (MgSCh) , filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi submetido a cromatografia em gel de sílica para se obter o epóxido (3,68 g, 94%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 5
Sulfonamida 6: a uma suspensão de epóxido 5 (2,08 g, 5,6 mmol) em 2-propanol (20 mL) foi adicionada isobutilamina (10,7 mL, 108 mmol) e a solução foi mantida ao refluxo durante 30 min. A solução foi evaporada sob pressão reduzida e o sólido impuro foi dissolvido em CH2CI2 (20 mL) e arrefecido a 0°C. N,N-diisopropiletilamina (1,96 mL, 11,3 mmol) foi adicionada, seguindo-se a adição de cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo (1,45 g, 7 mmol) em CH2C12 (5 mL) , e a solução foi agitada durante 40 min a 0°C, aquecida à temperatura ambiente e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre EtOAc e NaHC03 saturado. A fase orgânica foi lavada com NaCl saturado, seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi recristalizado a partir de EtOAc/hexano para se obter sulfonamida (2,79 g, 81%) como agulhas brancas pequenas: p.f. 122-124°C (não corrigido). 376
Exemplo 6
Carbamato 7: uma solução de sulfonamida 6 (500 mg, 0,82 mmol) em CH2C12 (5 mL) a 0°C foi tratada com ácido trifluoroacético (5 mL). A solução foi agitada a 0°C durante 30 min e foi removida do banho frio, agitando-se durante mais 30 min. Os produtos voláteis foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo foi repartido entre CH2C12 e NaHC03 saturado. A fase aquosa foi extraída duas vezes com CH2C12 e os extractos orgânicos combinados foram lavados com NaCl saturado, secos (MgS04), filtrados e evaporados sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em CH3CN (5 mL) e foi tratado com carbonato de (3R, 3aR, 6aS)-hexahidrofuro[2,3-b]furan-2-il 4-nitrofenilo (263 mg, 0,89 mmol, preparado de acordo com Ghosh et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 3278) e N, N-dimetilaminopiridina (197 mg, 1,82 mmol). Depois de se agitar durante l,5h à temperatura ambiente, o solvente de reacção foi evaporado sob pressão reduzida e 0 resíduo foi repartido entre EtOAc e ácido cítrico a 5%. A fase orgânica foi lavada duas vezes com K2C03 a 1%, DEPOIS foi lavada com NaCl saturado, seca (MgS04) , filtrada e evaporada sob pressão reduzida. 0 produto impuro foi purificado por cromatografia em gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/1) para se obter o carbamato (454 mg, 83%) com o aspecto de um sólido: p.f. 128-129°C (MeOH, não corrigido).
Exemplo 7
Fenol 8: uma solução de carbamato 7 (1,15 g, 1,7 mmol) em EtOH (50 mL) e EtOAc (20 mL) foi tratada com Pd a 10%/C (115 mg) e foi agitada em atmosfera de H2 (balão) durante 377 18h. A solução de reacção foi purgada com N2, filtrada através de um filtro de 0,45 μΜ e foi evaporada sob pressão reduzida para se obter o fenol com o aspecto de um sólido que continha solvente residual: p.f. 131-134°C (EtOAc/hexano, não corrigido).
Exemplo 8
Dibenzil-fosfonato 10: uma solução de fosfonato de dibenzilhidroximetilo (527 mg, 1,8 mmol) em CH2CI2 (5 mL) foi tratada com 2,6-lutidina (300 pL, 2,6 mmol) e o recipiente de reacção foi arrefecido até -50°C (temperatura externa). Anidrido trifluorometanossulfónico (360 pL, 2,1 mmol) foi adicionado, a mistura de reacção foi agitada durante 15 min e então o banho de arrefecimento foi deixado aquecer até 0°C durante 45 min. A mistura de reacção foi repartida entre éter e água arrefecida com gelo. A fase orgânica foi lavada com H3PO4 1M frio, NaCl saturado, seca (MgS04) , filtrada e evaporada sob pressão reduzida para se obter o triflato 9 (697 mg, 91%) com o aspecto de um óleo que foi utilizado directamente sem qualquer outra purificação. A uma solução de fenol 8 (775 mg, 1,3 mmol) em THF (5 mL) foram adicionados CS2CO3 (423 mg, 1,3 mmol) e triflato 9 (710 mg, 1,7 mmol) em THF (2 mL). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 min à temperatura ambiente, novas quantidades de Cs2C03 (423 mg, 1,3 mmol) e triflato (178 mg, 0,33 mmol) foram adicionadas e a mistura foi agitada durante 3,5h. A mistura de reacção foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi repartido entre EtOAc e NaCl saturado. A fase orgânica foi seca (MgSCh) , filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi submetido a cromatografia em gel de 378 sílica, efectuando a eluição (5% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter dibenzil-fosfonato com o aspecto de um óleo que solidificou em repouso. 0 sólido foi dissolvido em EtOAc, éter foi adicionado e o sólido foi precipitado à temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se arrefecer até 0°C, o sólido foi filtrado e lavado com éter frio para se obter dibenzil-fosfonato (836 mg, 76%) com o aspecto de um sólido branco: RM!!-1!! (CDC13) δ 7,66 (d, 2H), 7,31 (s, 10H), 7,08 (d, 2H) , 6,94 (d, 2H) , 6,76 (d, 2H) , 5,59 (d, 1H) , 5,15-4,89 (m, 6H) , 4,15 (d, 2H) , 3,94-3,62 (m, 10H), 3,13-2,69 (m, 7H) , 1,78 (m, 1H) , 1,70-1,44 (m, 2H) , 0,89-0,82 (2d, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 18,7; MS (ESI) 853 (M+H).
Exemplo 9 Ácido fosfónico 11: uma solução de dibenzil-fosfonato 10 (0,81 g) foi dissolvida em EtOH/ EtOAc (30 mL/10 mL) , tratada com 10% Pd/G (80 mg) e foi agitada em atmosfera de H2 (boião) durante l,5h. A reacção foi purgada com N2 e o catalisador foi removido por filtração através de celite. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida, o resíduo foi dissolvido em MeOH e filtrado através de um filtro de 0,45 μΜ. Após evaporação do filtrado, o resíduo foi triturado com éter e o sólido foi recolhido por filtração para se obter ácido fosfónico (634 mg, 99%) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1 H (CDC13) δ 7,77 ' (d, , 2H) , 7, .19 (d, 2H) , 7,09 (d, 2H) , 6, 92 (d, 2H), 5 , 60 (d, 1H) , 4, 95 (m, 1H) , 4,17 (d, 2H) , 3,94 (m, 1H) , 3 ,89 (s, 3H) , 3, 85- -3,68 (m, 5H) , 3,42 (dd, 1H) , 3,16-3,06 (m, 2H) , 2,96 -2, 84 (m, 3H) , 2,50 (m, 1H) , 2,02 1—1 S" \—1 εΓ 58 (m, 1H) , 1,4 0 (dd, 1H) , 379 0,94 (d, 3H) , 0,89 (d, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 16,2; MS (ESI) 671 (M-H).
Exemplo 10
Fosfonato de dietilo 13: triflato 12 foi preparado a partir de hidroximetilfosfonato de dietilo (2g, 11,9 mmol), 2,6-lutidina (2,1 mL, 17,9 mmol), e anidrido trifluoro-metanossulfónico (2,5 mL, 14,9 mmol) como descrito para um composto 9. A uma solução de fenol 8 (60 mg, 0,10 mmol) em THF (2 mL) foram adicionados CS2CO3 (65 mg, 0,20 mmol) e triflato 12 (45 mg, 0,15 mmol) em THF (0,25 mL). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante 2h e mais triflato (0,15 mmol) em THF (0,25 mL) foi adicionado. Após 2h, a mistura de reacção foi repartida entre EtOAc e NaCl saturado. A fase orgânica foi seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi submetido a cromatografia em gel de sílica (EtOAc) para se obter um resíduo que foi purificado por cromatografia em gel de sílica (5% 2-propanol/CH2Cl2) para se obter fosfonato de dietilo com o aspecto de uma espuma: RMN-1H (CDC13) δ 7,66 (d, 2H), 7,10 (d, 2H) , 6,94 (d, 2H), (d, 2H), 5,60 (d, 1H) , 4,97 (d, 2H), 4,23-4,13 (m, 3, 93-3,62 (m, 10H), 3,12-2,68 (m, 7H), 1,84-1,44 (m, 1,31 (t, 6H) , 0, 88-0,82 (2d, 6H) ; RMN-31P (CDC13) Ô 17,7; MS (ESI) 729 (M+H).
Exemplo 11
Difenil-fosfonato 14: a uma solução de 11 (100 mg, 0,15 mmol) e fenol (141 mg, 1,5 mmol) em piridina (1,5 mL) foi adicionada N, N-diisopropilcarbodiimida (50 μΕ, 0,38 mmol). A solução foi agitada durante 31 h à temperatura ambiente e durante 20h a 50°C. O solvente foi evaporado sob pressão 380 reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica, efectuando a eluição (EtOAc) para proporcionar difenil-fosfonato 14 (16 mg) como uma espuma: RMN-31P (CDC13) δ 10,9; MS (ESI) 847 (M+Na) .
Exemplo 12
Bis-Poc-fosfonato 15: a uma solução de 11 (50 mg, 0,74 mmol) e carbonato de isopropilclorometilo (29 mg, 0,19 mmol) em DMF (0,5 mL) foi adicionada trietilamina (26 μL 0,19 mmol) e a solução foi aquecida a 70°C (temperatura do banho) durante 4,5h. A reacção foi concentrada sob pressão reduzida e o resíduo foi purificado por cromatografia em camada preparativa (2% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter 15 (7 mg): RMN-1]! (CDC13) δ 7,71 (d, 2H) , 7,15 (d, 2H) ; 7,01 (d, 2H) , 6,93 (d, 2H) , 5,80-5,71 (m, 4H) , 5,67 (d, 1H) , 5,07-4,87 (m, 4H) , 4,35 (d, 2H) , 4,04-3, 68 (m, 10H) , 3,13 (dd, 1H), 3,04-2,90 (m, 5H), 2,79 (dd, 1H), 1,88-1,50 (m, 3H+pico de H20), 1,30 (m, 12H), 0,93 (d, 3H), 0,88 (d, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19,6.
Exemplo 13 Síntese de bisamidatos 16a-j. Procedimento representativo, bisamidato 16f: uma solução de ácido fosfónico 11 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato de éster butílico de ácido (S)—2— aminobutírico (116 mg, 0,59 mmol) foi dissolvido em piridina (5 mL) e o solvente foi destilado sob pressão reduzida a 40-60°C. O resíduo foi tratado com uma solução de Ph3P (117 mg, 0,45 mmol) e dissulfureto de 2,2'- dipiridilo (98 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL), agitando durante 20h à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado sob 30 pressão reduzida e o resíduo foi submetido 381 a cromatografia em gel de sílica (1% a 5% de 2-propanol/ /CH2C12) . 0 produto purificado foi colocado em suspensão em éter e foi evaporado sob pressão reduzida para se obter bisamidato 16f (106 mg, 75%) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDC13) δ 7,72 (d, 2H); 7,15 (d, 2H), 7,01 (d, 2H), 6,87 (d, 2H), 5,67 (d, 1H), 5,05 (m, 1H), 4,96 (d, 1H) , 4,19-3,71 (s em sobreposição, 18H,) , 3,42 (t, 1H) , 3,30 (t, 1H), 3,20 (dd, 1H), 3,20-2,97 (m, 4H)( 2,80 (ddf 2H) , 1,87-1, 54 (m, 19H), 1, 42-1, 35 (4H), 0, 97-0,88 (m, 18H); RMN-31P (CDC13) δ 20,3; MS (ESI) 955 (M+H) .
Composto Bi: Ammoacido 1êa H Ff Gly 18b H Bu <3ly 16o m Et Ala 16d Ms Bu Ala 18® ii Et Aba1 iet a Bu Alia1 IBu EI Leu 18h ÍBu Bu Leu 16i Bfi EI Pite iêf Bn Bu Phe 1 Alta, ácido 2-aminoltutírico
Exemplo 14
Diazocetona 17: a uma solução de N-terc-butoxicarbonil-p-bromo-L-fenilalanina (9,9 g, 28,8 mmol, Synthetech) em THF anidro (55 mL) entre -25°C e 30°C (temperatura de banho externa) foi adicionado cloroformato de isobutilo (3,74 mL, 28,8 mmol), seguindo-se a adição lenta de N-metilmorfolina (3,16 mL, 28,8 mmol). A mistura foi agitada durante 25 min, filtrada, enquanto fria, e o filtrado foi enxaguado com THF 382 frio (0°C) THF (50 mL). O filtrado foi arrefecido a -25°C e diazometano (~50 mmol, gerado a partir de 15 g de diazaldeído, de acordo com Aldrichimica Acta 1983, 16, 3) em éter (~150 mL) foram vertidos na solução de anidrido misto. A reacção foi agitada durante 15 min e foi então colocada num banho de gelo a 0°C, deixando o banho aquecer até à temperatura ambiente, mantendo a agitação de um dia para o outro durante 15 h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi colocado em suspensão em éter, lavado com água, NaHC03 saturado, NaCl saturado, seco (MgS04) , filtrado e evaporado para se obter um sólido amarelo pálido. O sólido impuro foi colocado em suspensão em hexano, filtrado e seco para se obter diazocetona 17 (9,73 g, 90%) que foi utilizada directamente no passo subsequente.
Exemplo 15
Clorocetona 18: A uma solução de diazocetona 17 (9,73 g, 26 mmol) em éter (500 mL) a 0°C foi adicionado 4M HC1 em dioxano (6,6 mL, 26 mmol). A solução foi agitada durante 1 h a 0°C e HC1 4M em dioxano (1 mL) foram adicionados. Após lh, o solvente de reacção foi evaporado sob pressão reduzida para se obter clorocetona 18 (9,79 g, 98%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 16
Cloroálcool 19: uma solução de clorocetona 18 (9,79 g, 26 mmol) em THF (180 mL) e água (16 mL) foi arrefecida a 0°C (temperatura interna). NaBH4 sólido (2,5 g, 66 mmol) foi adicionado em várias porções durante um período de 15 min, mantendo a temperatura interna abaixo de 5°C. A mistura foi 383 agitada durante 45 min e KHSO4 saturado foi lentamente adicionado até pH<3. A mistura foi repartida entre EtOAc e água. A fase aquosa foi extraída com EtOAc e os extractos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos (MgS04), filtrados e evaporados sob pressão reduzida. 0 resíduo foi dissolvido em EtOAc, foi passado através de uma coluna curta de gel de sílica e o solvente foi evaporado. 0 resíduo sólido foi recristalizado a partir de EtOAc/hexano para se obter cloro álcool 19 (3,84g) como um sólido branco.
Exemplo 17
Epóxido 21: uma suspensão parcial de cloro álcool 19 (1,16 g, 3,1 mmol) em EtOH (50 mL) foi tratada com K2C03 (2 g, 14,5 mmol) e a mistura foi agitada durante 4 h à temperatura ambiente. A mistura de reacção foi diluída com EtOAc, filtrada e os solventes foram evaporados sob pressão reduzida. 0 resíduo foi repartido entre EtOAc e NaCl saturado e a fase orgânica foi seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida para se obter epóxido 21 (1,05 g, 92%) com o aspecto de um sólido cristalino branco.
Exemplo 18
Sulfonamida 22: a uma solução de epóxido 21 (1,05 g, 3,1 mmol) em 2-propanol (40 mL) foi adicionada isobutilamina (6 mL, 61 mmol) e a solução foi mantida ao refluxo durante 30 min. A solução foi evaporada sob pressão reduzida e 0 sólido impuro foi dissolvido em CH2CI2 (20 mL) e arrefecido até 0°C. Trietilamina (642 μΕ, 4,6 mmol) foi adicionada, seguindo-se a adição de (634 mg, 3,4 mmol) em CH2C12 (5 mL) e a solução foi agitada durante 2h a 0°C, após o que a 384 solução de reacção foi tratada com mais trietilamina (1,5 mmol) e cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo (0,31 mmol). Após 1,5 h, a solução de reacção foi evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre EtOAc e H3P04 1M frio, A fase orgânica foi lavada com NaHC03 saturado, NaCl saturado, seca (MgS04), filtrada e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. 0 produto impuro foi purificado em gel de sílica (CH2C12 a 15/1/EtOAc) para se obter l,67g de um sólido que foi recristalizado a partir de EtO-Ac/hexano para se obter sulfonamida 22 (l,54g, 86%) como um sólido cristalino branco.
Exemplo 19 Éter silílico 23: a uma solução de sulfonamida 22 (l,53g, 2,6 mmol) em CH2C12 (12 mL) a 0°C foi adicionada N,N-diisopropiletilamina (0,68 mL, 3,9 mmol) e depois trifluorometanossulfonato de terc-butildimetilsililo (0,75 mL, 3,3 mmol). A solução de reacção foi agitada durante 1 h a 0°C e foi aquecida à temperatura ambiente, agitada durante 17 h. Mais N,N-diisopropiletilamina (3,9 mmol) e trifluorometanossulfonato de terc-butildimetilsililo (1,6 mmol) foram adicionados, agitados durante 2,5h e depois aquecidos ao refluxo durante 3h e agitados à temperatura ambiente durante 12 h. A mistura de reacção foi repartida entre EtOAc e frio H3P04 1M. A fase orgânica foi lavada com NaHC03 saturado, NaCl saturado e foi seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado em gel de sílica (hexano/éter a 2/1) para se obter éter silílico 23 (780 mg, 43%) com o aspecto de um óleo. 385
Exemplo 20
Fosfonato 24: uma solução de 23 (260 mg, 0,37 mmol) , trietilamina (0,52 mL, 3,7 mmol) e fosfito de dietilo (0,24 mmol, 1,85 mmol) em tolueno (2 mL) foi purgada com árgon e à solução foi adicionado (Ph3P)4Pd (43 mg, 10 moi%). A mistura de reacção foi aquecida a 110°C (temperatura do banho) durante 6 h e foi então deixada agitar à temperatura ambiente durante 12h. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi dividido entre éter e água. A fase aquosa foi extraída com éter e os extractos orgânicos combinados foram lavados com NaCl saturado, secos (MgS04), filtrados e o solvente foi evaporado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado por cromatografia em gel de sílica (acetato de etilo a 2/1/hexano) para se obter fosfonato de dietilo 24 (153 mg, 55%).
Exemplo 21 Ácido fosfónico 26: a uma solução de 24 (143 mg) em MeOH (5 mL) foi adicionado 4N HC1 (2 mL) . A solução foi agitada a temperatura ambiente durante 9h e foi evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi triturado com éter e o sólido foi recolhido por filtração para proporcionar sal cloridrato 25 (100 mg, 92%) como um pó branco. A uma solução de X (47 mg, 0,87 mmol) em CH3CN (1 mL) a 0°C foi adicionado TMSBr (130 μί, 0,97 mmol). A reacção foi aquecida à temperatura ambiente e agitada durante 6,5h quando TMSBr (0,87 mmol) foi adicionado e se manteve sob agitação durante 16h. A solução foi arrefecida a 0°C e foi arrefecida bruscamente com várias gotas de água arrefecida com gelo. Os solventes foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em vários mililitros de MeOH e tratado com óxido 386 de propileno (2 mL) . A mistura foi aquecida em ebulição suave e evaporada. 0 resíduo foi triturado com acetona e o sólido foi recolhido por filtração para se obter ácido fosfónico 26 (32 mg, 76%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 22
Fosfonato 27: a uma suspensão de 26 (32 mg, 0,66 mmol) em CH3CN (1 mL) foi adicionada bis(trimetilsilil)-acetamida (100 μΐ, 0,40 mmol) e a solução foi agitada durante 30 min à temperatura ambiente. O solvente foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em CH3CN (130 mL) . A esta solução foi adicionado 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (20 mg, 0,069 mmol, preparado de acordo com Ghosh et al. J. Med. Chem. 1996, 39, 3278,), N,N-diisopropiletilamina (35 μΐ, 0,20 mmol) e N,N-dimetilaminopiridina (quantidade catalítica). A solução foi agitada durante 22h à temperatura ambiente, diluída com água (0,5 mL) e foi agitada com resina de permuta iónica IR 120 (325 mg, forma H+) até o pH ser <2. A resina foi removida por filtração, lavada com metanol e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. O resíduo foi dissolvido em água, tratado com NaHC03 sólido até pH~8 e foi evaporado até à secura. O resíduo foi dissolvido em água e foi purificado em cromatografia de fase reversa C18, efectuando a eluição com água e depois com 5%, 10% e 20% de MeOH em água, para se obter sal dissódico 27 (24 mg) com o aspecto de um sólido amarelo pálido: RMN-1]! (D20) δ 7,72 (d, 2H), 7,52 (dd, 2H), 7,13 (dd, 2H), 7,05 (d, 2H) , 5,58 (d, 1H) , 4,87 (m, 1H) , 3, 86-3, 53 (m sobreposição s, 10H), 3,22 (dd, 1H) , 3,12-2,85 387 (6Η), 2,44(m, 1H), l,83(m, 1H) , 1,61 (m, 1H), l,12(dd, 1H), 0,77 (m, 6H); RMN-31P (D20) δ 11,23; MS (ESI) 641 (M-H).
Exemplo 23
Dietilfosfonato 28: a uma solução de 25 (16 mg, 0,028 mmol) em CH3CN (0,5 mL) foi adicionado 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furan-2-ilo (9 mg, 0,031 mmol), N,N-diisopropiletilamina (20 μ]1, 0,11 mmol) e N,N-dimetilaminopiridina (quantidade catalítica). A solução foi agitada a temperatura ambiente durante 48 h e foi então concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre EtOAc e NaHCCb saturado, A fase orgânica foi lavada com NaHC03 saturado, NaCl saturado e foi seca (MgS04) , filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado por cromatografia através de sílica gel (2,5-5% de 2-propanol/CH2Cl2) . O resíduo obtido foi ainda purificado por cromatografia de camada preparativa (5% de MeOH/CH2Cl2) e subsequente cromatografia em coluna através sílica gel (10% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter fosfonato de dietilo 28 (7 mg) como uma espuma: RMN-1]! (CDCI3) δ 7,72-7, 66 (m, 4H) , 7,32-7,28 (2H) , 6,96 (d, 2H) , 5,60 (d, 1H), 4,97 (m, 2H), 4,18-4,01 (m, 4H), 3,94-3,60 (m sobreposição s, 10H), 3,15-2,72 (m, 7H), 1,78 (m, 1H) , 1,61 (m+H20, ~3H), 1,28 (t, 6H) , 0,86 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 18,6; MS (ESI) 699 (M+H).
Exemplo prospectivo 24
Difenil-fosfonato 14 é tratado com hidróxido de sódio aquoso para proporcionar fosfonato de monofenilo 29, de acordo com o método descrito em J. Med. Chem. 1994, 37, 1857. Fosfonato de monofenilo 29 é então convertido em 388 monoamidato 30 por reacção com éster aminoácido na presença de Ph3 e dissulfureto de 2,2'-dipiridilo, como descrito na síntese de bisamidato 16f. Alternativamente, monoamidato 30 é preparado por tratamento 29 com éster de aminoácido e DCC. Condições de acoplamento deste tipo são encontradas em Buli. Chem. Soc. Jpn. 1988, 61, 4491.
Exemplo 25
Diazocetona 1: a uma solução de N-terc-butoxicarbonil-O-benzil-L-tirosina (25 g, 67 mmol, Fluka) em THF anidro (150 mL) a -25-30°C (temperatura de banho externa) foi adicionado cloroformato de isobutilo (8,9 mL, 69 mmol), seguindo-se a adição lenta de N-metilmorfolina (37,5 mL, 69 mmol). A mistura foi agitada durante 40 min e diazometano (170 mmol, gerado a partir de 25 g l-metil-3-nitro-l-nitroso-guanidina de acordo com Aldrichimica Acta 1983, 16, 3) em éter (400 mL) foi vertido na solução de anidrido misto. A mistura de reacção foi agitada durante 15 min, deixando o banho aquecer até à temperatura ambiente, agitando durante a noite durante 4 h. A mistura foi borbulhada com N2 durante 30 min., lavada com água, NaHCC3 saturado, NaCl saturado, seca (MgS04), filtrada e evaporada para se obter um sólido amarelo pálido. O sólido impuro foi colocado em suspensão em hexano, filtrado e seco para se obter diazocetona (26,8 g, 99%) que foi utilizada directamente no passo subsequente.
Exemplo 26
Clorocetona 2: a uma suspensão de diazocetona 1 (26,8 g, 67 mmol) em éter/THF (750 mL, 3/2) a 0°C foi adicionado HC1 4M em dioxano (16,9 mL, 67 mmol). A solução foi agitada a 0°C 389 durante 2 h. 0 solvente de reacção foi evaporado sob pressão reduzida para se obter clorocetona (27,7 g, 97%) com o aspecto de um sólido.
Exemplo 27
Cloroálcool 3: a uma solução de clorocetona 2 (127,1 g, 67 mmol) em THF (350 mL) foi adicionada água (40 mL) e a solução foi arrefecida até 3°C-4°C (temperatura interna). NaBH4 (6,3 g, 168 mmol) foi adicionado em porções. A mistura foi agitada durante lh a 0°C e os solventes foram removidos. A mistura foi diluída com acetato de etilo e saturado KHSO4 foi lentamente adicionado até pH<4, seguindo-se a adição de NaCl saturado. A fase orgânica foi lavada com NaCl saturado, seca (MgSCp) filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro era constituído por uma mistura a 70:30 de diastereómeros, determinado por análise por HPLC (fase móvel, CH3CN:H20 a 77:25; caudal: 1 mL/min; detecção: 254 nm; volume de amostra: 20 pL; coluna: 5μ, C18, 4,6X250 mm, Varian; tempos de retenção: diastereómero principal 3, 5,4 min, diastereómero secundário 4, 6,1 min). O resíduo foi recristalizado a partir de EtOAc/hexano duas vezes para se obter cloro álcool 3 (12,2g, >96% de pureza diastereomérica por análise HPLC) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 28
Epóxido 5: a uma solução de cloro álcool 3 (12,17 g, 130 mmol) em EtOH (300 mL) foi adicionada solução de KOH/EtOH (0,71 N, 51 mL, 36 mmol). A mistura foi agitada à temperatura ambiente durante l,5h. A mistura de reacção foi evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido 390 entre EtOAc e água e a fase orgânica foi lavada com saturado NH4C1, seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida para se obter epóxido (10,8 g, 97%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 29
Sulfonamida 6: a uma suspensão de epóxido (10,8 g, 30 mmol) em 2-propanol (100 mL) foi adicionada isobutilamina (129,8 mL, 300 mmol) e a solução foi mantida ao refluxo durante 1 hora. A solução foi evaporada sob pressão reduzida para se obter um sólido impuro. O sólido (42 mmol) foi dissolvido em CH2CI2 (200 mL) e arrefecido a 0°C. Trietilamina (11,7 mL, 84 mmol) foi adicionada, seguindo-se a adição de cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo (8,68 g, 42 mmol), e a solução foi agitada durante 40 min a 0°C, aguecida à temperatura ambiente e evaporada sob pressão reduzida. O resíduo foi repartido entre EtOAc e NaHC03 saturado. A fase orgânica foi lavada com NaCl saturado, seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi recristalizado a partir de EtOAc/hexano para se obter sulfonamida (23,4 g, 91%) como agulhas brancas pequenas: p.f. 122-124°C (não corrigido).
Exemplo 30
Carbamato 7: uma solução de sulfonamida 8 (6,29 mg, 10,1 mmol) em CH2C12 (20 mL) foi tratada com ácido trifluoroacético (10 mL) . A solução foi agitada durante 3 hora. Os produtos voláteis foram evaporados sob pressão reduzida e o resíduo foi repartido entre EtOAc e NaOH 0,5N. A fase orgânica foi lavada com NaOH 0,5N (2x), água (2x) e NaCs saturado, seca (MgS04) , filtrada e evaporada sob 391 pressão reduzida. 0 resíduo foi dissolvido em CH3CN (60 mL) , arrefecido a 0°C e foi tratado com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]-furan-2-ilo (298,5 g, 10 mmol, preparado de acordo com Ghosh et al. J. Med. Chem, 1996, 39, 3278) e N,N-dimetilaminopiridina (2,4 g, 20 mmol) . Depois de se agitar durante lh a 0°C, o solvente de reacção foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi repartido entre EtOAc e 5% ácido cítrico. A fase orgânica foi lavada duas vezes com K2CO3 a 1% e então foi lavada com NaCl saturado, seca (MgS04) , filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi purificado por cromatografia em gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/1) para se obter carbamato (5,4 g, 83%) como um sólido: p.f. 128-129°C (MeOH, não corrigido).
Exemplo 31
Fenol 8: uma solução de carbamato 7 (5,4 g, 8,0 mmol) em
EtOH (260 mL) e EtOAc (130 mL) foi tratada com Pd a 10%/C (540 mg) e foi agitada em atmosfera de H2 (balão) durante 3h. A solução de reacção foi agitada com Celite durante 10 min. e passada através de uma camada de Celite. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para se obter fenol, com o aspecto de um sólido (4,9 g), que continha solvente residual: p.f. 131-134°C (EtOAc/hexano, não corrigido).
Exemplo 32
Dibenzil-fosfonato 10: uma solução de dibenzil- hidroximetil-fosfonato (3,1 g, 10,6 mmol) em CH2CI2 (30 mL) foi tratada com 2,6-lutidina (1,8 mL, 15,6 mmol) e o frasco de reacção foi arrefecido a -50°C (temperatura externa). Anidrido trifluorometanossulfónico (2,11 mL, 12,6 mmol) foi 392 adicionado e a mistura de reacção foi agitada durante 15 min e então o banho de arrefecimento foi deixado aquecer a 0°C durante 45 min. A mistura de reacção foi repartida entre éter e água arrefecida com gelo. A fase orgânica foi lavada com H3P04 1M frio, NaCl saturado, seca (MgS04), filtrada e evaporada sob pressão reduzida para se obter triflato 9 (3,6 g, 80%) com o aspecto de um óleo, que foi utilizado directamente sem qualquer outra purificação. A uma solução de fenol 8 (3,61 g, 6,3 mmol) em THF (90 mL) foi adicionado CS2CO3 (4,1 g, 12,6 mmol) e triflato 9 (4,1 g, 9,5 mmol) em THF (10 mL) . Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 min à temperatura ambiente, mais CS2CO3 (6,96 g, 3 mmol) e triflato (1,26 g, 3 mmol) foram adicionados e a mistura foi agitada durante 3,5h. A mistura de reacção foi evaporada sob pressão reduzida e o resíduo foi repartido entre EtOAc e NaCl saturado. A fase orgânica foi seca (MgS04) , filtrada e evaporada sob pressão reduzida. O produto impuro foi submetido a cromatografia em sílica gel, efectuando a eluição (5% de 2-propanol/CH2Cl2), para se obter dibenzil-fosfonato como um óleo que solidificou em repouso. O sólido foi dissolvido em EtOAc, éter foi adicionado, e o sólido foi precipitado a temperatura ambiente de um dia para o outro. Depois de se arrefecer até 0°C o sólido foi filtrado e lavado com éter frio para se obter dibenzil-fosfonato (3,43 g, 64%) como um sólido branco: RMN-1H-1H (CDC13) δ 7,66 (d, 2H) , 7,31 (s, 10H), 7,08 (d, 2H), 6,94 (d,2H), 6,76 (d, 2H) , 5,59 (d, 1H), 5,15-4,89 (m, 6H) , 4,15 (d, 2H) , 3, 94-3, 62 (m, 10H) , 3,13-2,69 (m, 7H) , 1,78 (m, 1H) , 1,70-1, 44 (m, 2H) , 0,89- 0,82 (2d, 6H); RMN-31P (CDC13) δ 18,7; MS (ESI) 853 (M+H) . 393
Exemplo 33 Ácido fosfónico 11: uma solução de dibenzil-fosfonato 10 (3,43 g) foi dissolvida em EtOH/EtOAc (150 mL/50 mL) , tratada com Pd a 10%/C (350 mg) e agitada em atmosfera de H2 (balão) durante 3 h. A mistura de reacção foi agitada com Celite e o catalisador foi removido por filtração através de Celite. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida e o resíduo foi dissolvido em MeOH e filtrado através um filtro de 0,45 μΜ. Após a evaporação do filtrado, o resíduo foi triturado com éter e o sólido foi recolhido por filtração para se obter ácido fosfónico (2,6 g, 94%) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CDCI3) δ 7,77 (d, 2H) , 7,19 (d, 2H) , 7,09 (d, 2H) , 6,92 (d, 2H) , 5,60 (d, 1H) , 4,95 (m, 1H) , 4,17 (d, 2H), 3,94 (m, 1H), 3,89 (s, 3H), 3, 85-3,68 (m, 5H) , 3,42 (dd, 1H), 3,16-3,06 (m, 2H), 2,96-2,84 (m, 3H) , 2,50 (m, 1H) , 2,02 (m, 1H) , 1,58 (m, 1H) , 1,40 (dd, 1H) , 0,94 (d, 3H) , 0,89 (d, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 16,2; MS (ESI) 671 (M-H) .
Secção B de exemplos
No presente pedido de patente de invenção não existe secção B.
Secção C de exemplos
Exemplo 1
Difenil-fosfonato 31: A uma solução de ácido fosfónico 30 (11 g, 16,4 mmol) e fenol (11 g, 117 mmol) em piridina (100 mL) foi adicionada 1, 3-diciclo-hexilcarbodiimida (13,5 g, 65,5 mmol). A solução foi agitada à temperatura ambiente durante 5 min e então a 70°C durante 2h. A mistura de 394
reacção foi arrefecida à temperatura ambiente, diluída com acetato de etilo (100 mL) e filtrada. O filtrado foi evaporado sob pressão reduzida para remover piridina. O resíduo foi dissolvido em acetato de etilo (250 mL) e acidificado a pH - 4 por adição de HC1 (0,5 N) a 0°C. A mistura foi agitada a 0°C durante 0,5 h, filtrada e a fase orgânica foi separada e lavada com salmoura, seca sobre MgS04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. O resíduo foi purificado em gel de sílica para proporcionar dif enil-fosfonato 31 (9 g, 67%) como um sólido. RMN-31P (CDC13) δ 12,5.
Exemplo 2
Fosfonato de monofenilo 32: A uma solução de difenilfosfonato 31 (9,0 g, 10,9 mmol) em acetonitrilo (400 mL) foi adicionado NaOH (IN, 27 mL) a 0°C. A mistura de reacção foi agitada a 0°C durante lhe então tratada com Dowex (50VVX8-200, 12 g). A mistura foi agitada durante 0,5 h a 0°C e então filtrada. O filtrado foi concentrado sob pressão reduzida e co-evaporado com tolueno. O resíduo foi dissolvido em acetato de etilo e hexano foi adicionado para precipitar fosfonato de monofenilo 32 (8,1 g, 100%). RMN-31P (CDCI3) δ 18,3.
Exemplo 3
Monoamidato 33a (Ri = Me, R2 = n-Bu): A um balão carregado com fosfonato de monofenilo 32 (4,0 g, 5,35 mmol), foi adicionado éster n-butílico do cloridrato de L-alanina (4,0 g, 22 mmol), 1, 3-diciclo-hexilcarbodiimida (6,6 g, 32 mmol) e finalmente piridina (30 mL) sob uma atmosfera de azoto. A mistura resultante foi agitada a 60 - 70°C durante 395 1 h, então arrefecida a temperatura ambiente e diluída com acetato de etilo. A mistura foi filtrada e o filtrado foi concentrado sob pressão reduzida. 0 resíduo foi repartido entre acetato de etilo e HC1 (0,2N) e a fase orgânica foi separada. A fase de acetato de etilo foi lavada com água, NaHC03 saturado, seca em MgS04, filtrada e concentrada sob pressão reduzida. 0 resíduo foi purificado em sílica gel (pré-tratado com 10% de Me0H/CH3C02Et, eluindo com 40% de CH2Cl2/CH3CC>2Et e CH3C02Et) para se obter dois isómeros de 33a num rendimento total de 51%. Isómero A (1,1 g) : RMN-1]! (CDC13) Ô 0,38 (m, 9H) , 1,3 (m, 2H) , 1,35 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1,55 (m, 2H), 1,55-1,7 (m, 2H), 1,8 (m, 1H) , 2,7-3,2 (m, 7H) , 3,65-4,1 (m, 9H) , 3,85 (s, 3H) , 4,2 (m, 1H) , 4,3 (d, J = 9,6 Hz, 2H), 5,0 (m, 2H), 5,65 (d, J = 5,4 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,0 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,1-7,3 (m, 7H) , 7,7 (d, J = 8,7 Hz, 2H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,5.
Isómero B (1,3 g) RMN-1H (CDC13) δ 0,88 (m, 9H) , 1,3 (m, 2H) , 1,35 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1,55 (m, 2H) , 1,55-1,7 (m, 2H) , 1,8 (m, 1H), 2,7-3,2 (m, 7H) , 3,65-4,1 (m, 9H), 3,85 (s, 3H) , 4,2-4,35 (m, 3H) , 5,0 (m, 2H) , 5,65 (d, J = 5,4
Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,0 (d, J = 8,7 Hz, 2H), 7,1-7,3 (m, 7H) , 7,7 (d, J = 8,7 Hz, 2H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19, 4 .
Exemplo 4
Monoamidato 33b (Ri = Me, R2 = t-Pr) foi sintetizado de um modo idêntico ao composto 33a com 77% rendimento.
Isómero A ; : RMN-1H (CDCI3) δ 0,9 (2d, J = 6, 3Hz, 6H) , 1,2 (d, J = 7 Hz, 6H) , 1,38 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1,55-1,9 (m, 3H), 2,7-3, 2 (m, 7H) , 3,65-4,1 (m, 8H) , 3,85 (s, 3H), 4,2 396 (m, 1H) , 4,3 (d, J = 9,6 Hz, 2H) , 5,0 (m, 2H) , 5,65 (d , J = 5,4 Hz, 1H) , 6,85 (d, J = 8, 7 Hz, 2H) , 7, ,0 (d , J : = 8, 7 Hz, 2H), 7, -1-7,3 ! (m, , 7H), 7, 7 (d, J = 8,7 Hz, 2H) ; RMN-31P (CDCls) δ 20 ,4, Isómero B RMN-1H (CDCI3 .) δ 0,9 (2d, J = 6,3Hz, 6H) , 1,2 (d, J = 7 Hz QH), 1, 38 (d, J = 7 Hz, 3H) , 1,55-1, 9 (m, 3H) , 2,7-3,2 (m, 7H) , 3 ,65- 4,1 (m, 8H) , 3,85 (s, 3H) , 4,2 (m, 1H), 4,3 (d , J = 9,6 Hz, 2H), 5,0 (m, 2H) , 5,65 (d , J = 5,4 Hz, 1H), 6, 85 (d, J = = 8, 7 Hz, 2H) , 7, 0 (d, J = 8,7 Hz, 2H) , 7,1-7,3 (m, 7H) , 7,7 (d, , J - 8,7 Hz, 2H) ; rmn-31p (CDC1 3) δ 19,5. Secção D de i exemplos Exemplo 1
Anidrido cíclico 1 (6,57 g, 51,3 mmol) foi tratado de acordo com o procedimento de Brown et al., J. Amer. Chem. Soc. 1955, 77, 1089-1091, para se obter aminoálcool 3 (2,00 g, 33%) . Para o intermediário 2 : RMN-1]! (CD3OD) δ 2,40 (S, 2H), 1,20 (s, 6H).
Exemplo 2 O aminoálcool 3 (2,0 g, 17 mmol) foi agitado em 30 mL de uma mistura a 1:1 de THP:água. Bicarbonato de sódio (7,2 g, 86 mmol) foi adicionado e depois Boc-anidrido (4,1 g, 19 mmol). A mistura de reacção foi agitada durante 1 hora, período esse após o que a análise por TLC em 5% metanol/DCM com coloração ninidrina demonstrou que a reacção estava completa. A mistura de reacção foi repartida entre água e acetato de etilo. A fase orgânica foi seca e concentrada e a mistura resultante foi submetida a cromatografia através de sílica, utilizando hexano:acetato de etilo a 1:1, para se obter duas fracções, "superior" e "inferior", cada uma 397 tendo a massa correcta. Por RMN-1]!, o produto correcto 4 era "inferior" (0,56 15 g, 14%) RMN-1]! (CDC13) δ 3,7 (t, 2H) , 3,0 (d,2H), 1,45 (t, 2H) 1,4 (s, 9H), 0,85 (s, 6H) . MS (ESI): 240 (M+23).
Exemplo 3
Num balão de três entradas, hidreto de sódio (60% emulsão em óleo) foi adicionado a uma solução de álcool 4 (1,lg, 5,2 mmol) em DMF anidro, sob uma atmosfera de azoto anidro. Depois triflato 35 (2,4 g, 5,7 mmol) foi adicionado, sob agitação, durante 1,5 horas. A análise por espectrometria de massa mostrou a presença do material de partida (240, M+23) e consequentemente mais 100 mg de emulsão a 60% de hidreto de sódio e mais 1 g de triflato foram adicionados com mais uma hora de agitação. A mistura de reacção foi arrefecida bruscamente por adição de NaHC03 saturado e dividida entre acetato de etilo e água. A fase orgânica foi seca com salmoura e MgS04 e eluida em sílica com hexano:acetato de etilo a 1:1 para se obter 5 (0,445 g, 15%). O espectro de RMN mostrou alguma contaminação com álcool 4 de partida. ΚΜΝ-1]! (CDC13) : δ 7,28 (s, 10H) , 5,00 (m, 4H) , 3,70 (t, 2H) , 2,94, (d, 2H) , 1,44 (t, 2H) , 1,40 (S, 9H), 0,83 (s, 6H). MS (ESI): 514 (M+23).
Exemplo 4 Éster de fosfonato 5 (0,445 g, 0,906 mmol) foi agitado com TFA a 20% em DCM (5 mL). A análise TLC demonstrou que a reacção estava completa ao fim de 1 hora. A mistura de reacção foi destilada azeotropicamente com tolueno e depois aplicada a uma coluna de gel de sílica com 10% de metanol em DCM. Subsequentemente, o produto foi dissolvido em 398 acetato de etilo e agitado com bicarbonato de sódio saturado: água (a 1:1) e seco com salmoura e sulfato de magnésio para se obter a amina livre 6 (30 mg, 8,5%) . RMN-(CDC13) : δ 7,30 (s, 10H) , 5,00 (m, 4H) , 3,67 (d, 2H) .
3,47, (t, 2H) ( 2,4-2,6 (brs) 1,45 (t, 2H), 0,82 (s, 6H) , MS (ESI): 393 (M+l).
Exemplo 5
Amina 6 (30 mg, 0,08 mmol) e epóxido 7 (21 mg, 0,08 mmol) foram dissolvidos em 2 mL de IprOH, aquecidos ao refluxo durante 1 hr e depois monitorizados por TLC em 10% de MeOH/DGM. Foram adicionados mais ~20 mg de epóxido 7, mantendo o refluxo durante 1 hora. Arrefeceu-se até à temperatura ambiente, diluiu-se com acetato de etilo, agitou-se com água e salmoura e secou-se com sulfato de magnésio. A cromatografia em silica gel, utilizando primeiro 5% e do 10% de MeOH em EtOAc, proporcionou a amina 8 (18 mg, 36%). ΚΜΝ^Η (CDC13) : δ 7,30 (s, 10H) , 7,20-7-14 (m, 5H), 5,25-4,91 (m, 4H)f 3,83, (m, 1H), 3,71 (d, 2H) 3,64 (m, 1H) , 3,54 (t, 2H) , 3,02-2,61 (m, 5H) , 2,65-2,36 (dd, 2H) (t, 2H), 1,30 (s, 9H) 0,93 (s, 9H) 0,83 (t, 2H) MS (ESI) 655 (M+l).
Exemplo 6
A amina 8 (18 mg, 0,027 mmol) foi dissolvida em 1 mL de DCM, depois cloreto de ácido 9 (6 mg, 0,2 mmol) e finalmente se trietilamina (0,004 mL, 0,029 mmol). A mistura de reacção foi monitorizada por TLC. Depois de se verificar que estava completa, a mistura de reacção foi diluida com DCM misturado com 5% ácido citrico, bicarbonato de sódio saturado e salmoura e seco com MgS04. A 399 purificação através de sílica (hexano:EtOAc a 1:1) proporcionou a sulfonamida 10 (10,5 mg, 46%). ΚΜΝ-1!! (CDC13) : δ 7,69 (d,2H) 7,30 (s, 10H) , 7,24-7-18 (m, 5H) , 5,00 (m, 4H) , 4,73, (d, 1H) , 4,19 (s, 1H) 3,81 (m, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,71 (d,2H), 3,57 (t, 2H), 3,11-2,95 (m, 5H) 2,75 (m, 1H) , 1,25 (s, 1H) , 0,90 (s, 6H) . MS (ESI): 847 (M+Na+) .
Exemplo 7 A sulfonamida 10 (10,5 mg, 0,013 mmol) foi agitada à temperatura ambiente em 20% de TFA/DCM. Depois de se verificar que a desprotecção de BOC estava completa, por TLC (hexano:EtOAc a 1:1) e MS, a reacção foi destilada azeotropicamente com tolueno. O sal de TFA da amina foi dissolvido em acetonitrilo (0,5 mg) e a este composto foram adicionados carbonato 11 (4,3 mg, 0,014 mmol) e depois DMAP (4,6 mg, 0,038 mg). Agitou-se à temperatura ambiente até a análise por TLC (hexano:EtOAc a 1:1) mostrar que estava completa. O solvente foi evaporado e o resíduo foi redissolvido em EtOAc e depois agitado com NaHCC>3 saturado. A fase orgânica foi lavada com água e salmoura e a seguir seca com MgSCh. A purificação através de sílica com hexano:EtOAc proporcionou o composto 12 (7,1 mg, 50%). RMN-ΧΗ (CDCla) : δ 10 7,75 (d, 2H) 7,24-7,35 (15H) 6,98 (d, 2H), 5,62 (d, 1H) 5,04 (m, 4H) 4,98 (m, 1H) 4,03 (m, 1H) , 3,85 (s, 3H), 3,61-3,91 (9H), 3,23-3,04 (5H) 2,85 (m, 1H), 2,74 (m, 1H) 1,61 (d, 2H) , 1,55 (m, 1H) 1,36 (m, 1H) 0,96 (d, 6H). MS (ESI): 903 (M+23).
Exemplo 8 400 O composto 12 (6,1 mg, 0,007 mmol) foi dissolvido em 1 mL de EtOH:EtoAc a 3:1. Catalisador de paládio (a 10% sobre C, 1 mg) foi adicionado e a mistura foi purgada três vezes, sob uma pressão hipobárica, em ambiente de hidrogénio gasoso à pressão de 1 atmosfera, utilizando um balão. A mistura de reacção foi agitada durante 2 horas, momento esse em que a análise por MS e TLC mostrou que a reacção estava completa. A mistura de reacção foi filtrada através de Celite com lavagem de EtOH e todo o solvente foi evaporado para se obter o composto final 13 (5 mg, 100%) . RMN (CD3OD) : δ 7 ,79 (d, , 2H) 7, Γ- 1 1—1 24 (5H) 7, 09 (d, 2H) 5,58 (d , 1H) 4, , 92 i [m, 1H) 3, 97 (m, 1H) r 3,92 (dd , 1H) 3,89 (s, 3H) 3,66-3 ,78 (8 H) 3 ,40 (d, 1H) , 3, 37 (dd, 1H) , 3,15 (m, 1H) 3,12 (dd, 1H) 2 , 96 (d, 1H) , 2 ,87 (m, 1H) , 2,74 (m, 1H) 2,53 (m, 1H) 1,70 (m, 2H) , 1,53 (m l, 1H) 1, 32 (m, 1H) 1,04 (d, 6H). MS (ESI): 723 (M+23).
Exemplo 9 O aminoálcool 14 (2,67 g, 25,9 mmol) foi dissolvido em THF com agitação e o anidrido BOC (6,78 g, 31,1 mmol) foi adicionado. Ocorreu a libertação de calor e gás. TEA (3,97 mL, 28,5 mmol) foi adicionado e a reacção foi agitada de um dia para o outro. No dia seguinte, a reacção foi arrefecida bruscamente por adição de NaHC03 saturado. A fase orgânica foi separada e agitada com água, seca com salmoura e MgS04 para se obter o composto 15, que foi utilizado sem mais purificação, (rendimento de 100%) (alguma contaminação): ΪΙΜΝ-1!! (CDC13) : δ 3,76 (t, 1H) 3,20, (d, 2H) , 2,97 (d, 2H) , 1,44 (s, 9H), 0,85 (s, 6H).
Exemplo 10 401
Preparou-se uma solução do álcool 15 (500 mg, 2,45 mmol) em THF anidro e arrefeceu-se sob uma atmosfera de N2 anidro, com agitação. A esta solução, adicionou-se n-butil-lítio (1,29 mL, 2,71 mmol), sob a forma de uma solução em hexano, de um modo idêntico ao descrito em Tetrahedron. 1995, 51 #35, 9737-9746. Adicionou-se triflato 35 (1,15 g, 2,71 mmol) puro com uma seringa calibrada. Agitou-se a mistura de reacção durante quatro horas e depois extinguiu-se com NaHC03 saturado. Repartiu-se então a mistura entre água e EtOAc. Secou-se a fase orgânica com salmoura e MgS04 e depois submeteu-se a cromatografia sobre sílica em hexano :EtOAc a 1:1 para se obter o fosfonato 16 (445 mg, 38%) ΚΜΝ-^ (CDC13) : 6 7,37 (m, 10H), 5,09 (m, 4H), 3,73- 3,75 (m, 2H) , 3,24 (s, 2H) , 3,02 (d, 2H) , 1,43 (s, 9H) , 0,86 (s, 6H).
Exemplo 11
Agitou-se fosfonato 16 (249 mg, 0,522 mmol) em 20% de TFA/DCM durante 1 hora. Depois destilou-se azeotropicamente a mistura de reacção com tolueno. Dissolveu-se o resíduo novamente em EtOAc, depois agitou-se com água:NaHC03 saturado (a 1:1). Secou-se a fase orgânica com salmoura e MgS04 e removeu-se o solvente para se obter a amina 17 (143 mg, 73%) ΚΜΝ^Η (CDC13) : 6 7,30 (s, 10H) , 5,05-4, 99 (m, 4H) , 3,73 (d, 2H) , 3,23 (s, 2H) , 2,46 (slr, 2H) , 0,80 (s, 6H) RMN-31P (CDC13) : 6 23, 77 (s) .
Exemplo 12
Dissolveu-se a amina 17 (143 mg, 0,379 mmol) e o epóxido 7 (95 mg, 0,360 mmol) em 3 mL de IprOH e aqueceu-se até 85°C durante 1 hora. Arrefeceu-se a mistura de reacção 402 até à temperatura ambiente de um dia para o outro e no dia seguinte aqueceu-se até 85°C durante mais 1 hora. Depois diluiu-se a mistura de reacção com EtOAc, agitou-se com água, secou-se com salmoura e MgS04 e concentrou-se. Efectuou-se a eluição do resíduo sobre sílica num gradiente entre 5% e 10% de MeOH em DCM para se obter o composto 18 (33 mg, 14%) .
Exemplo 13
Misturou-se o composto 18 (33 mg, 0,051 mmol) e
composto de clorossulfonilo 9 (11 mg, 0,054 mmol) em 2 mL de DCM, depois adicionou-se TEA (0,0075 mL, 0,054 mmol) e agitou-se durante 5 horas. A análise por TLC em
EtOAc:hexano a 1:1 mostrou que a reacção não estava completa. Guardou-se no frigorífico de um dia para o outro. No dia seguinte, retirou-se do frigorífico, agitou-se durante 2 horas e analisou-se por TLC concluindo-se que a reacção estava completa. Processou-se com ácido cítrico a 5%, NaHC03 saturado e depois secou-se com salmoura e MgS04. Concentrou-se a mistura de reacção e submeteu-se a cromatografia numa coluna 'Monster Pipette' em hexano:EtOAc a 1:1 e depois hexano:EtOAc a 7:3 para se obter o composto 19 (28 mg, 67%) RMN-1!! (CDC13) : 07,37 (d, 2H) , 7,20 (m, 15H), 6,90 (d, 2H), 5,07-4,93 (m, 4H), 4,16 (slr, 1H), 3,80 (s, 3H), 3,75-3, 37 (m, 4H) , 3,36 (d, 1H) , 3,20-2, 93 (m, 6H), 2,80-2,75 (dd, 1H).
Exemplo 14
Agitou-se o composto 19 (28 mg, 0,35 mmol) em 4 mL de DCM com adição de 1 mL de TFA. Agitou-se durante 45 minutos, período esse ao fim do qual complete se comprovou 403 a desprotecção por TLC e MS. Destilou-se azeotropicamente com tolueno. Dissolveu-se o resíduo em 1 mL de CH3CN e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se bis-furano-para-nitro-fenol-carbonato 11 (12 mg, 0,038 mmol), dimetilaminopiridina (1 mg, 0,008 mmol) e diisopropiletilamina (0,018 mL, 0,103 mmol). Agitou-se a mistura, deixou-se aquecer até à temperatura ambiente e agitou-se se verificar, por análise por TLC em hexano:EtOAc a 1:1, que a reacção estava completa. Concentrou-se a mistura de reacção e repartiu-se o resíduo entre NaHCCb saturado e EtOAc. Secou-se a fase orgânica com salmoura e MgS04 e depois submeteu-se a cromatografia sobre sílica com hexano:EtOAc para se obter 0 composto 20 (20 mg, 67%) . RMN- 2H (CDCI3) : δ 7,76 (d, 2H), 7,34-7,16 (m, 15H), 7,07 (d, 2H) , 5,56 (d, 1H) , 5,09 (m, 4H), 4,87 (m, 1H) , 4,01 (m, 1H) , 3,91 (m, 2H) , 3,87 (s, 3H), 3,86 (m, 1H), 3,69 (m, 1H) , 3,67 (m, 1H) 3,60 (d, 2H) 3,28 (m, 1H) 3,25 (d, 2H), 3,32 (d, 1H), 3,13 (m, 1H), 3,02 (m, 1H) 2,85 (d, 1H) , 2,83 (m, 1H) 2,52 (m, 1H) 1,47 (m, 1H) , 1,31 (m, 1H) 0,98 (s, 3H), 0,95 (s, 3H).
Exemplo 15
Tratou-se o composto 20 (7 mg, 0,008 mmol) de um modo idêntico ao descrito no exemplo 8 para se obter o composto 21 (5 mg, 90%) RMN-1]! (CDC13) : δ7,80 (d, 2H) , 7,25-7,16 (m, 5H), 7,09 (d, 2H), 5,58 (d, 1H), 4,92 (m, 1H), 3,99 (m, 1H), 3,92 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H) , 3,86 (m, 1H) , 3,77 (m, 1H), 3,75 (m, 1H), 3,73 (m, 1H), 3,71 (m, 1H) 3,71 (m, 1H), 3,68 (m, 1H), 3,57 (d,1H), 3,41 (d, 1H), 3,36 (m, 1H), 3,29 (d, 1H), 3,25 (d, 2H), 3,18 (m, 1H), 3,12 (m, 1H), 3,01 (d, 404 1Η) 2,86 (m, 1H), 2,53 (m, 1H) 1,50 (m, 1H), 1,33 (m, 1H), 1,02 (s, 3H), 0,99 (s, 3H).
Exemplo 16
Tratou-se o composto 15 (1,86 g, 9,20 mmol) com triflato 22, de um modo idêntico ao descrito no exemplo 10, para se obter o composto 23 (0,71 g, 21,8%) RMN-1H (CDC13) : δ 5,21 (slr, 1H) 4,16-4,07 (m, 4H), 3,71-3,69 (d, 2H) , 3,24 (s, 2H), 1,43 (s, 9H), 1,34-1,28 (m, 6H) 0,86 (s, 6H) .
Exemplo 17
Dissolveu-se o composto 23 (151 mg, 0,427 mmol) em 10 mL de DCM e adicionou-se 1,0 mL de TFA. Agitou-se a mistura de reacção até se verificar que a reacção estava completa. Destilou-se a mistura de reacção azeotropicamente com tolueno e depois dissolveu-se o resíduo em THF e tratou-se com esferas de resina 'Dowex" básica. A seguir, removeu-se as esferas por filtração e removeu-se o solvente para se obter o composto 24 (100 mg, 92%) RMN-1]! (CDC13) : 04,15- 4,05 (m, 4H) , 3, 72-3, 69 (d, 2H) , 3,27 (s, 2H) , 1,30-1,26 (m, 6H) 0,81 (s, 6H).
Exemplo 18
Tratou-se o composto 24 (100 mg, 0,395 mmol) de um modo idêntico ao descrito no exemplo 12 para se obter o composto 25 (123 mg, 60%). RMN-1!! (CDCI3) : 0 7,26-7,13 (m, 5H), 4,48-4,83 (d, 1H) 4,17-4,06 (m, 4H), 3,75 (d, 2H) 3,56 (slr, 1H), 3,33 (s, 2H), 2,93-2,69 (m, 4H), 2,44-2,55 (dd, 2H) 1,32 (m, 6H), 0,916 (s, 6H).
Exemplo 19 405
Tratou-se o composto 25 (88 mg, 0,171 mmol) de um modo idêntico ao descrito no exemplo 13 para se obter o composto 26 (65 mg, 55%) ΚΜΝ-^ (CDC13) : 07,26-7,13 (m, 5H) , 4,48- 4,83 (d, 1H) 4,17-4,06 (m, 4H) , 3,75 (d, 2H) 3,56 (slr, 1H) , 3,33 (s, 2H), 2,93-2,69 (m, 4H) , 2,44-2,55 (dd, 2H) 1,32 (m, 6H), 0,916 (s, 6H).
Exemplo 20
Tratou-se o composto 26 (65 mg, 0,171 mmol) de um modo idêntico ao descrito no exemplo 14 para se obter o composto 27 (49 mg, 70%) RMN-1!!: (CDC13) : δ 7,75 (d, 2H) , 7,25-7,24 (m,4H), 7,18 (m, 1H) 6,99 (d, 2H) , 5,63 (d, 1H) , 5,01 (m, 1H) , 4,16 (m, 4H) , 3,94 (m, 1H) , 3,88 (m, 1H) , 3,88 (s, 3H), 3,84 (m, 1H) , 3,81 (m, 1H) , 3,74 (m, 2H) , ), 3,70 (m, 1H), 3,69 (m, 1H) 3,43 (m, 1H) , 3,24 (m, 1H), 3,22 (m, 2H) 3,21 (m, 2H) 3,12 (m, 1H) , 3,02 (m, 1H) 2,86 (m, 1H) , 2,72 (m, 1H) , 1,54 (m, 1H) , 1,38 (m, 1H) , 1,35 (m, 6H) 1,00 (s, 3H) , 0,96 (s, 3H) .
Exemplo 21
Dissolveu-se a amina protegida com Boc 28 (103 mg, 0,153 mmol) em DCM (5 mL). Arrefeceu-se a solução agitada até 0°C. adicionou-se BBr3,sob a forma de uma solução 1,0 M em DCM (0,92 mL, 0,92 mmol), gota a gota, ao longo de 10 minutos e manteve-se a mistura de reacção sob agitação a 0°C durante 20 minutos. Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e manteve-se sob agitação durante 2 horas. Depois arrefeceu-se a mistura de reacção até 0°C e extinguiu-se por adição, gota a gota, de MeOH (1 mL) . Evaporou-se a mistura de reacção e preparou-se uma suspensão do resíduo em metanol, o qual foi removido sob 406 pressão reduzida. Repetiu-se o procedimento com EtOAc e finalmente com tolueno para se obter o sal de HBr da amina livre 29 (107 mg, >100%), que se utilizou sem mais purificação.
Exemplo 22
Preparou-se uma suspensão do sal de HBr de amina 29 (50 mg, 0,102 mmol) em 2 mL CH3CN, sob agitação, depois arrefeceu-se até 0°C, adicionou-se DMAP (25 mg, 0,205 mmol) e depois o carbonato 11. Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1,5 horas e depois deixou-se aquecer até à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura de reacção de um dia para o outro. Adicionou-se à mistura de reacção algumas gotas de ácido acético, concentrou-se, diluiu-se novamente com acetato de etilo, agitou-se com ácido cítrico a 10% e depois com NaHC03 saturado. Secou-se a fase orgânica com salmoura e MgS04 e efectuou-se a sua eluição sobre sílica para se obter 0 di- fenol 30 (16 mg, 28%) RMN-1H (CD3OD) : δ 7, 61 , (d, 2H) , 7,01 . (d, 2H) , 6,87 (d, , 2H), 6, 62 (d, 2H), 5,55 (d, 1H), 4,93 (m, 1H) , 3,92 (m, 2H), 3,79 (m, 5H) , 3,35 (m, 1H) , 3,07 (m, 2H) , 2,88 (m, 3H), 2,41 (m, 1H) , 2,00 (m, 1H), 1,54 (m, 1H) , 1,31 (dd, 1H) 0,89-0 , 82 (dd, 6H) .
Exemplo 23
Preparou-se uma solução de di-fenol 30 (100 mg, 0,177 mmol) em CH3CN, seco sobre K2C03. Adicionou-se o triflato (0,084 mL, 0,23 mmol) e depois CS2CO3 (173 mg, 0,531 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 1 hora. A análise por TLC (IprOH a 5%/DCM) revelou 2 manchas já sem materiais de partida. Evaporou-se o solvente e repartiu-se o resíduo 407 entre EtOAc e água. Lavou-se a fase orgânica com NaHC03 saturado, depois secou-se com salmoura e MgS04. Separou-se a mistura por cromatografia em coluna através silica com 3% de IprOH em DCM. Confirmou-se que a mancha superior 31 (90 mg, 46%) era o produto de bis-alquilação. Foi necessário purificar melhor a mancha inferior, em placas de gel de silica, para se obter um único produto de produto de mono-alquilação 32 (37 mg, 26%) . O outro possível produto de alquilação não foi observado. RMN-1]! (CDCI3) : para 31: δ 7,55 ' (d, 2H) , 7,37 (m, 10H) 7 ,03 (d, 2H) , 6, 99 (d, 2H) , 6,73 (d, 2H) , 5, 69 (d, 1H), 5, ,15- -5, 09 (m, 4H), 5,10 (m, 1H) , 4,32 (d, 2H), 4 , 02 (d, 1H), 3, 82 (m, 1H) 3,81 (m, 1H) , 3, 93- 3,81 (m, 2H) , 3, 74 (d, 1H), 3,06 (m, 1H) , 3,00 (m, 1H) , 2,96 (m, 1H), : 2, 91 (m, 1H) 2, 77 (i m, 1H) 2,64 (m, 1H) 2,47 (m, 1H) : 1,82 (m, 2H) 1,79 (m, 1H) , 0,94· -0,86 (dd, 6H) para 32: δ 7,68 (d, 2H) , 7,33-7, 35 (m, 20H) , 7,11 (d, 2H), 6, 96 (d, 2H) , 6,80 (d, 2H), 5, 26 (d, 1H) , 5,11 (m, 8H), 5, 00 (m, 1H) 4,23 (d, 2H), 4, 19 (d, 2H), 3,93 (m, 1H), 3,82- 3,83 (m, 3H) , 3, 68 1-3,69 (m, 2H) 3,12- 2, 75 (m, 7H) , 1,82 (m, 1H) , 1,62-1 , 52 (d, 2H), 0, 89-0, 86 (dd, 6H)
Exemplo 24
Ref: J. Med. Chem. 1992, 35 10,1681-1701. A uma solução de fosfonato 32 (100 mg, 0,119 mmol) em dioxano anidro adicionou-se Cs2CC>3 (233 mg, 0,715 mmol) e depois o sal cloridrato do cloreto de 2-(dimetilamino)-etilo (69 mg, 0,48 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente e monitorizou-se por TLC. Depois de se determinar que ainda existia material de partida, adicionou-se mais CS2CO3 (233 mg, 0,715 mmol) e sal de amina (69 mg, 0,48 mmol) e agitou-se a mistura de reacção 408 de um dia para o outro a 60°C. No dia seguinte, depois de se verificar por TLC que a reacção estava completa, arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto de amina 33 (40 mg, 37%) sobre sílica. Observou-se a decomposição à medida que as manchas inferiores ficavam visíveis, utilizando 15% de MeOH em DCM sobre sílica.
Exemplo 25
Dissolveu-se a amina 33 (19 mg, 0,021 mmol) em 1,5 mL DCM. Agitou-se esta solução em banho de gelo. Adicionou-se ácido metanossulfónico (0,0015 mL, 0,023 mmol) e agitou-se a mistura de reacção durante 20 minutos. Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e agitou-se durante 1 hora. Fez-se precipitar o produto, sal mesilato de amina 34 (20 mg, 95%), por adição de hexano. ΙΙΜΝ-1!! (CD3OD) : δ 7, 69 (d, 2H) , 7,35 (m, 10H) , 7,15 (m, 4H) 6,85 (m, 2H), 5,49 (d, 1H), 5,10 (m, 4H), 4,83 (m, 1H) , 4,62 (d, 2H) , 4,22 (m, 2H) , 3,82 (m, 1H) , 3,56 (m, 1H) , 3,48 (m, 2H) , 3,35 (m, 1H), 2,99 (m, 1H), 2,95 (m, 1H), 2,84 (s, 6H), 2,78 (m, 1H), 2,75 (m, 1H), 2,70 (m, 1H), 2,40 (m, 1H) 1,94 (m, 1H), 1,43 (m, 1H), 1,27 (m, 1H), 0,77 (dd, 6H).
Secção E de exemplos
Esquema 1 409 409 Ό «ínX^P-01"^*
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Exemplo 1
A uma solução de fenol 3 (336 mg, 0,68 mmol) em THF (10 mL) adicionou-se CS2CO3 (717 mg, 2,2 mmol) e triflato (636 mg, 1,5 mmol) em THF (3 mL) . Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 minutos à temperatura 410 ambiente, repartiu-se a mistura entre EtOAc e água. Secou-se a fase orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica (efectuando a eluição com 40%-50% de EtOAc/hexano) para se obter dibenzil-fosfonato 4 (420 mg, 80%) com o aspecto de um óleo incolor.
Exemplo 2
A uma solução de dibenzil-fosfonato 4 (420 mg, 0,548 mmol) em CH2C12 (10 mL) adicionou-se TFA (0,21 mL, 2,74 mmol). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 2 h à temperatura ambiente, adicionou-se mais TFA (0,84 mL, 11 mmol) e agitou-se a mistura durante 3 horas. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHC03 1M. Secou-se a fase orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter a amina 5 (325 mg, 89%).
Exemplo 3
411 A uma solução de carbonato (79 mg, 0,27 mmol), amina 5 (178 mg, 0,27 mmol) e CH3CN (10 mL) adicionou-se DMAP (66 mg, 0,54 mmol) a 0°C. Depois de se aquecer a mistura de reacção até à temperatura ambiente e de se agitar durante 16 horas, concentrou-se a mistura sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (efectuando a eluição com 60%—90% de EtOAc/hexano) para se obter uma mistura de carbamato 6 e carbonato de partida. Purificou-se ainda a mistura por HPLC numa coluna C18 de fase inversa (efectuando a eluição com 60% de CH3CN/água) para se obter o carbamato 6 (49 mg, 22%) com o aspecto de um óleo incolor. RMN-1H (300 MHz, CDC13) δ 7,68 (d, 2H) , 7,22 (m, 15H) , 6,95 (d, 2H) , 5,62 (d, 1H) , 5,15 (dt, 4H) , 5,00 (m, 2H), 4,21 (d, 2H) , 3,88 (m, 4H) , 3,67 (m, 3H), 3,15 (m, 2H), 2,98 (m, 3H), 2,80 (m, 2H), 1,82 (m, 1H), 1,61 (m, 1H), 0,93 (d, 3H), 0,88 (d, 3H) .
Exemplo 4
A uma solução de carbamato 6 (21 mg, 0,026 mmol) em EtOH/EtOAc (2 mL/Ι mL) adicionou-se Pd a 10%/C (11 mg) .
Depois de se agitar a mistura de reacção em ambiente de H2 (balão) durante 2 horas, filtrou-se a mistura através de Celite. Evaporou-se, sob pressão reduzida, o filtrado para se obter ácido fosfónico 7 (17 mg, 100%) com o aspecto de um sólido incolor. RMN-1]! (300 MHz, CD3OD) 0 7,73 (d, 2H) , 7,19 (m, 5H), 7,13 (d, 2H) , 5,53 (d, 1H) , 4,26 (d, 2H) , 412 3,86 (m, 1H) , 3, 64 (m, 5H) , 3,38 (d, 1H) , 3,13 (d, 1H), 3, 03 (dd, 1H) , 2,86 (m, 3H), 2,48 (m, 1H) , 1, 97 (m, 1H) , 1,47 (m, 1H) , 1,28 (m, 2H), 1,13 (t, 1H) , 0,88 (d, 3H), 0,83 (d, 3H). Esquema 2
Exemplo 5
A uma solução de fenol 8 (20 mg, 0,036 mmol) e triflato (22 mg, 0,073 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se CS2CO3 (29 mg, 0,090 mmol). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 minutos à temperatura ambiente, repartiu-se a mistura entre EtOAc e água. Secou-se a fase orgânica sobre Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia preparativa em camada fina (efectuando a eluição com 80% de 413
EtOAc/hexano) para se obter o fosfonato de dietilo 9 (21 mg, 83%) com o aspecto de um óleo incolor. RMN-1!! (300 MHz, CDCls) δ 7,73 (d, 2H) , 7,25 (m, 5H) , 7,07 (d, 2H) , 5,64 (d, 1H), 5,01 (m, 2H), 4,25 (m, 6H) , 3,88 (m, 4H) , 3,70 (m, 3H) , 2,97 (m, 6H) , 1,70 (m, 4H) , 1,38 (t, 6H) , 0,92 (d, 3H) , 0,88 (d, 3H) . RMN-31P (300 MHz, CDC13) δ 18,1.
Esquema 3
10
Exemplo 6
A uma solução de ácido fosfónico 10 (520 mg, 2,57 mmol) em CH3CN (5 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (0,75 mL, 10,3 mmol) e aqueceu-se até 70°C em banho de óleo. Depois de se agitar a mistura de reacção durante 2 horas a 414 70°C, concentrou-se a mistura e destilou-se azeotropicamente com tolueno. A uma solução do cloridrato impuro em tolueno (5 mL) adicionou-se tetrazole (18 mg, 0,26 mmol) a 0°C. A esta mistura adicionou-se fenol (121 mg, 1,28 mmol) e trietilamina (0,18 mL, 1,28 mmol) em tolueno (3 mL) a 0°C. Depois de se aquecer a mistura de reacção até à temperatura ambiente e de se agitar durante 2 horas, adicionou-se lactato de etilo (0,29 mL, 2,57 mmol) e trietilamina (0,36 mL, 2,57 mmol) em tolueno (2,5 mL) . Agitou-se a mistura de reacção durante 16 horas à temperatura ambiente, periodo esse ao fim do qual se repartiu a mistura entre EtOAc e NH4C1 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NH4CI saturado, NaHCCh 1M e salmoura, depois secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de silica (efectuando a eluição com 20%—40% de EtOAc/hexano) para se obter dois diastereómeros de fosfonato 11 (66 mg, 109 mg, 18% total) com o aspecto de óleos incolores.
Exemplo 7A
A uma solução de isómero A de fosfonato 11 (66 mg, 0,174 mmol) em EtOH (2 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (13 mg). Depois de se agitar a mistura de reacção em ambiente de H2 (balão) durante 6 horas, filtrou-se a mistura através de Celite. Evaporou-se, sob pressão reduzida, o filtrado para 415 se obter o isómero A do álcool 12 (49 mg, 98%) com o aspecto de um óleo incolor.
Exemplo 7B A uma solução de isómero B do fosfonato 11 (110 mg, 0,291 mmol) em EtOH (3 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (22 mg). Depois de se agitar a mistura de reacção em ambiente de H2 (balão) durante 6 horas, filtrou-se através de Celite. Evaporou-se, sob pressão reduzida, o filtrado para se obter o isómero B do álcool 12 (80 mg, 95%) com o aspecto de um óleo incolor.
Exemplo 8A
A uma solução de isómero A do álcool 12 (48 mg, 0,167 mmol) em CH2CI2 (2 mL) adicionou-se 2,6-lutidina (0,03 mL, 0,250 mmol) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,04 mL, 0,217 mmol) a -40°C (banho de neve carbónica-CH3CN) . Depois de se agitar a mistura de reacção durante 15 minutos a 40°C, aqueceu-se a mistura até 0°C e repartiu-se entre Et20 e H3PC>4 1M. Lavou-se a fase orgânica com H3P04 1M (3 vezes), secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter isómero A do triflato 13 (70 mg, 100%) com o aspecto de um óleo amarelo pálido.
Exemplo 8B A uma solução de isómero B do álcool 12 (80 mg, 0,278 mmol) em CH2C12 (3 mL) adicionou-se 2,6-lutidina (0,05 mL, 416 0,417 mmol) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,06 mL, 0,361 mmol) a -40°C (banho de neve carbónica-CH3CN) . Depois de se agitar a mistura de reacção durante 15 minutos a -40°C, aqueceu-se a mistura até 0°C e repartiu-se entre Et20 e H3P04 1M. Lavou-se a fase orgânica com H3P04 1M (3 vezes), secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter o isómero B do triflato 13 (115 mg, 98%) com o aspecto de um óleo amarelo pálido.
Exemplo 9A
A uma solução de fenol (64 mg, 0,111 mmol):
e isómero A do triflato 13 (70 mg, 0,167 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se CS2CO3 (72 mg, 0,222 mmol). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 minutos à temperatura ambiente, repartiu-se a mistura entre EtOAc e água. Secou-se a fase orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica (efectuando a eluiçâo com 60%-80% de EtOAc/hexano) para se obter uma 417 mistura. Purificou-se ainda a mistura por HPLC numa coluna C18 de fase inversa (efectuando a eluição com 55% de CH3CN/água) para se obter isómero A do fosfonato 14 (30 mg, 32%) com o aspecto de um sólido incolor. ΗΜΝ^Η (300 MHz, CDC13) δ 7,71 (d, 2H) , 7,26 (m, 6H) , 7,00 (m, 5H) , 5,65 (d, 1H), 5,14 (m, 1H) , 5,00 (m, 2H), 4,54 (dd, 1H), 4,44 (dd, 1H), 4,17 (m, 2H) , 3,96 (dd, 1H), 3,86 (m, 5H) , 3,72 (m, 3H) , 3,14 (m, 1H), 2,97 (m, 4H), 2,79 (m, 2H), 1,83 (m, 1H) , 1,62 (m, 3H) , 1,50 (d, 3H), 1,25 (m, 3H) , 0,93 (d, 3H) , 0,88 (d, 3H) . RMN-31P (300 MHz, CDCI3) Ô 17,4.
Exemplo 9B A uma solução de fenol (106 mg, 0,183 mmol):
e isómero B do triflato 13 (115 mg, 0,274 mmol) em THF (2 mL) adicionou-se Cs2C03 (119 mg, 0,366 mmol). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 minutos à temperatura ambiente, repartiu-se a mistura entre EtOAc e água. Secou-se a fase orgânica sobre Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de silica (efectuando a eluição com 60-80% de EtOAc/hexano) para se obter uma mistura. Purificou-se ainda a mistura por HPLC numa coluna C18 de fase inversa (efectuando a eluição com 55% de CH3CN/água) para se obter isómero B do fosfonato 14 (28 mg, 18%) com 0 aspecto de um sólido incolor. RMN-1H (300 MHz, CDC13) δ 7,71 (d, 2H) , 7,26 (m, 6H) , 6,94 (m, 5H) , 5,66 (d, 418 1H) , 5,17 (m, 1H) , 4,99 (m, 2H) , 4,55 (m, 1H) , 4,42 (m, 1H) , 4,16 (m, 2H) , 3,97 (m, 1H) , 3, 85 (m, 5H) , 3,72 (m, 3H) , 3,13 (m, 1H) , 2,97 (m, 4H) , 2,80 (m, 2H) , 1,83 (m, 1H) , 1,60 (m, 6H) , 1,22 (m, 3H) , 0, 93 (d, 3H) , 0,88 (d, 3Η) . RMN-31P (300 MHz, CDC13) δ 15,3.
Resolução de diastereómeros do composto 14 A análise foi efectuada numa coluna analítica 'Alltech Econosil', nas condições adiante descritas, injectando-se na coluna um total de cerca de 0,5 mg de composto 14. Este lote era uma mistura de diastereómeros principais e secundários, em que 0 carbono do éster lactato apresenta uma mistura de configurações R e S. Foi possível efectuar a resolução de 2 mg na coluna analítica. Foram realizadas injecções em maior escala (até 50 mg de composto 14) numa coluna semipreparativa 'Alltech Econosil', nas condições adiante descritas.
Extraiu-se até à secura as fracções diastereoméricas isoladas, utilizando um evaporador rotativo, a funcionar sob uma pressão hipobárica, seguindo-se uma extracção final sob vácuo intenso, utilizando para tal uma bomba de vácuo. Antes da extracção final sob vácuo intenso, os solventes cromatográficos foram deslocados por duas porções de diclorometano, para ajudar a remover os solventes vestigiais e para se obter uma espuma frágil.
Grande parte da operação de resolução diastereomérica foi realizada com n-heptano, em substituição dos hexanos, por razões de segurança.
Dissolução da amostra: embora a seguir se descreva uma mistura de solventes bastante polares, a amostra pode ser dissolvida numa fase móvel à qual se adicionou uma 419 quantidade mínima de álcool etílico para dissolver a amostra.
Í0 Μ ««
Terço de eluição minutos
CONDIÇÕES DE HPLC
Coluna : 'Alltech Econosil', 5 μιη, 4, 6 x 250 mm
Fase móvel : hexanos - Álcool isopropílico (a 90:10)
Caudal : 1,5 mL/minuto
Tempo de execução: 50 minutos
Detecção : UV a 242 nm
Temperatura : ambiente
Volume de injecção: 100 μό
Prep. da amostra: 5 mg/mL, dissolvida em hexanos-álcool etílico (a75:25)
Tempos de retenção: 14-22 minutos : 14-29 minutos : impureza menos polar -19 minutos 420
Coluna semi-preparativa, injecção de 50 mg, n-heptano-IPA (a 84:16)
CONDIÇÕES DE HPLC
Coluna : 'Alltech Econosil', 10 μιη, 22 x 250 mm
Fase móvel : n-heptano - álcool isopropílico (a 84:16)
Caudal : 10 mL/minuto
Tempo de execução: 65 minutos
Detecção : UV a 257 nm
Temperatura : ambiente
Quantidade de injecção: 50 mg
Dissolução : 5 mL de fase móvel mais 0,75 mL de álcool etílico
Tempos de retenção: 14-41 minutos : 14-54 minutos : impureza menos polar não resolvida
Secção F de exemplos 421
Exemplo 1 Ácido fosfónico 2: a uma solução de composto 1 (A. Flohr et al. , J. Med. Chem., 42, 12, 1999; 2633-2640) (4,45 g, 17 mmol) em CH2C12 (50 mL) , à temperatura ambiente, adicionou-se bromotrimetilsilano (1,16 mL, 98,6 mmol). Agitou-se a solução durante 19 horas. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida para se obter o ácido oleoso fosfónico 2 (3,44 g, 100%). RMN-1]! (CDC13) δ 7,30 (m, 5H) , 4,61 (s, 2H), 3,69 (d, 2H).
Exemplo 2
Composto 3: a uma solução de ácido fosfónico 2 (0,67 g, 3,3 mmol) em CH3CN (5 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (1 mL, 13,7 mmol) e aqueceu-se a solução a 70°C durante 2,5 horas. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um dicloreto de fosfonilo oleoso. Dissolveu-se o intermediário de cloreto impuro em CH2C12 (20 mL) e arrefeceu-se em banho de gelo/água. Adicionou-se, gota a gota, lactato de etilo (1,5 mL, 13,2 mmol) e trietilamina (1,8 mL, 13,2 mmol). Agitou-se a mistura durante 4 horas à temperatura ambiente e diluiu-se com mais CH2C12 (100 mL) . Lavou-se a solução orgânica com HC1 0,1N, solução aquosa saturada de NaHCCL e salmoura, secou-se (MgSCh) , filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de silica para se obter o composto 3 oleoso (0, 548 g, 41%). ΚΜΝ-1!! (CDCI3) δ 7,30 (m, 5H) , 5, 00-5, 20 (m, 2H) , 4,65 (m, 2H) , 4,20 (m, 4H), 3,90 (d, 2H), 1,52 (t, 6H), 1,20 (t, 6H) .
Exemplo 3 422 Álcool 4: preparou-se uma solução de composto 3 (0,54 g, 1,34 mmol) em EtOH (15 mL) e tratou-se com Pd a 10%/C (0,1 g) em ambiente de H2 (100 psi) durante 4 horas. Filtrou-se a mistura e tratou-se o filtrado com Pd a 10%/C recente (0,1 g) em ambiente de H2 (1 atmosfera) durante 18 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para se obter o álcool 4 (0,395 g, 94%) com o aspecto de um óleo. ΡΜΝ-1!} (CDC13) δ4,90-5,17 (m, 2H) , 4,65 (q, 2H) , 4,22 (m, 4H) , 4,01 (m, 2H), 1,55 (t, 6H) , 1,21 (t, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 22,8.
Exemplo 4
Triflato 5: a uma solução de álcool 4 (122,8 mg, 0,393 mmol) em CH2C12 (5 mL) a -40°C adicionou-se 2,6-lutidina (0,069 mL, 0,59 mmol) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,086 mL, 0,51 mmol). Manteve-se sob agitação a 0°C durante 2 horas e repartiu-se a mistura entre CH2C12 e
NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 0,1N,
NaCl saturado, secou-se (MgSCh), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. O produto impuro 5 (150 mg, 87%) foi utilizado no passo subsequente sem mais purificação. ΡΜΝ-1!! (CDC13) 05,0-5,20 (m, 2H) , 4,93 (d, 2H) , 4,22 (m, 4H) , 1,59 (m, 6H), 1,29 (t, 6H).
Exemplo 5
Fosfonato 6: preparou-se uma solução de fenol 8 (ver secção A dos esquemas, esquema 1 e 2) (32 mg, 0,055 mmol) e triflato 5 (50 mg, 0,11 mmol) em THF (1,5 mL) à temperatura ambiente e tratou-se com Cs2C03 (45,6 mg, 0,14 mmol). Agitou-se a mistura durante 2,5 horas e repartiu-se entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 423 Ο,ΙΝ, NaCl saturado, secou-se (MgS04), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de silica (30% — 70% de EtOAc/hexano) para se obter o fosfonato 6 (41 mg, 84%) com o aspecto de um sólido. RMN-1H (CDCI3) δ 7,71 (d, 2H), 7,13 (d, 2H) , 7,00 (d, 2H) , 6,90 (d, 2H) , 5,65 (d, 1H) , 4, 90-5,22 (m, 3H) , 4,40 (m, 2H) , 4,20 (m, 4H) , 3,90 (s, 3H) , 3,65-4,00 (m, 5H) , 2,70-3,20 (m, 6H) , 1,52-1,87 (m, 12H), 1,25 (m, 6H) , 0,85-0, 90 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,0 .
Exemplo 6
Composto 7: a uma solução de ácido fosfónico 2 (0,48 g, 2,37 mmol) em CH3CN (4 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (0,65 mL, 9,48 mmol) e aqueceu-se a solução a 70°C durante 2,5 horas. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um dicloreto de fosfonilo oleoso. Dissolveu-se o intermediário de cloreto impuro em CH2CI2 (5 mL) e arrefeceu-se em banho de gelo/água. Adicionou-se, gota a gota, glicolato de etilo (0,9 mL, 9,5 mmol) e trietilamina (1,3 mL, 9,5 mmol). Agitou-se a mistura durante 2 horas à temperatura ambiente e diluiu-se com mais CH2CI2 (100 mL) . Lavou-se a solução orgânica com HC1 0,1N, solução aquosa saturada de NaHC03 e NaCl saturado, secou-se (MgS04) , filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de silica para se obter o composto 7 oleoso (0,223 g, 27%). RMN-1]! (CDC13) δ 7,30 (m, 5H) , 4,65 (m, 6H) , 4,25 (q, 4H) , 3,96 (d, 2H), 1,27 (t, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 24,0. 424
Exemplo 7 Álcool 8: preparou-se uma solução de composto 7 (0,22 g, 0,65 mmol) em EtOH (8 mL) e tratou-se com Pd a 10%/C (0,04 g) em ambiente de H2 (1 atmosfera) durante 4 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para se obter o álcool 8 (0,156 g, 96%) com o aspecto de um óleo. RMN-1]! (CDC13) δ 4,66 (m, 4H) , 4,23 (q, 4H) , 4,06 (d, 2H) , 1,55 (t, 6H) , 1,26 (t, 6H); RMN-31P (CDC13) δ 26,8.
Exemplo 8
Triflato 9: a uma solução de álcool 8 (156 mg, 0,62 mmol) em CH2CI2 (5 mL) a -40°C adicionou-se 2,6-lutidina (0,11 mL, 0,93 mmol) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,136 mL, 0,8 mmol). Manteve-se sob agitação a 0°C durante 2 horas e repartiu-se a mistura em CH2CI2 e NaHCCh saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 0,1N, NaCl saturado, secou-se (MgSO-j) , filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. 0 produto impuro 9 (210 mg, 88%) foi utilizado no passo subsequente sem mais purificação. ΚΜΝ-1!! (CDCI3) 6 4,90 (d, 2H) , 4,76 (d, 4H) , 4,27 (q, 4H) , 1,30 (t, 6H) .
Exemplo 9
Fosfonato 10: preparou-se uma solução de fenol 8 (30 mg, 0, 052 mmol) e triflato 9 (30 mg, 0,078 mmol) em THF (1,5 mL) à temperatura ambiente e tratou-se com Cs2C03 (34 mg, 0,1 mmol). Agitou-se a mistura durante 2,5 horas e repartiu-se entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 0,1N, NaCl saturado, secou-se (MgSCh), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (30-70% de EtOAc/hexano) para se obter o fenol que não 425 reagiu ( xx) ( 12 mg, r 40%) 1 e c ) fosfonato 10 (16,6 mg, 38%) com 0 aspecto de um sói: ido. REÍN-1!! (CDC13) δ 7,71 (d, 2H) , 7, 13 (d, 2H) , 7, 00 (d, 2H), 6,90 (d, 2H) , 5, 65 (d, 1H), 5, 00 (m, 2H) , 4, 75 (m, 4H), 4,48 (d, 2H) , 4,23 (q, 4H) , 3, 90 (s, 3H) , 3, 65' -4,00 (m, 5H) , 2 ,70- 3,20 (m, 6H) , 2,23 (b . s ., 2H), 1, , 52- 1, 87 (m , 4H) , 1,25 (t, 6H) , , 0,85 -0,90 (m, 6Η) ; RMN-31P (CDC13) δ 22,0.
Exemplo 10
Composto 11: a uma solução de ácido fosfónico 2 (0,512 g, 2,533 mmol) em CH3CN (5 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (0,74 mL, 10 mmol) e aqueceu-se a solução a 70°C durante 2,5 horas. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um dicloreto de fosfonilo oleoso. Dissolveu-se o intermediário de cloreto impuro em tolueno (8 mL) e arrefeceu-se em banho de gelo/água. Adicionou-se uma quantidade catalítica de tetrazol (16 mg, 0,21 mmol), seguindo-se a adição de uma solução de trietilamina (0,35 mL, 2,53 mmol) e fenol (238 mg, 2,53 mmol) em tolueno (5 mL) . Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 3 horas. Adicionou-se, gota a gota, uma solução de glicolato de etilo (0,36 mL, 3,8 mmol) e trietilamina (0,53 mL, 3,8 mmol) em tolueno (3 mL) . Agitou-se a mistura durante 18 horas à temperatura ambiente e repartiu-se entre EtOAc e HC1 0,1N. Lavou-se a solução orgânica com solução aquosa saturada de NaHC03 e NaCl saturado, secou-se (MgS04), filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica para se obter difenil-fosfonato como produto secundário (130 mg) e composto 11 (0,16 g, 18%). ΚΜΝ-1!! 426 (CDC13) 57,15-7,40 (m, 10H) , 4,58-4,83 (m, 4H) , 4,22 (q, 2H), 4,04 (dd, 2H), 1,24 (t, 3H).
Exemplo 11 Álcool 12: preparou-se uma solução de composto 11 (0,16 g, 0,44 mmol) em EtOH (5 mL) e tratou-se com Pd a 10%/C (0,036 g) em ambiente de H2 (1 atmosfera) durante 22 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para se obter o álcool 12 (0,112 g, 93%) com o aspecto de um óleo. ΙΙΜΝ-1!! (CDCls) 0 7,15-7,36 (m, 5H) , 4,81 (dd, 1H) , 4,55 (dd, 1H) , 4,22 (q, 2H), 4,12 (m, 2H), 3,78 (b.s., 1H), 1,26 (t, 6H); RMN-31P (CDCla) 6 22,9.
Exemplo 12
Triflato 13: a uma solução de álcool 12 (112 mg, 0,41 mmol) em CH2CI2 (5 mL) a -40°C adicionou-se 2,6-lutidina (0,072 mL, 0,62 mmol) e anidrido trifluorometanossulfónico (0,09 mL, 0,53 mmol). Manteve-se sob agitação a 0°C durante 3 horas e repartiu-se a mistura entre CH2C12 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 0,1N e NaCl saturado, secou-se (MgS04) , filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de silica (30% de
EtOAc/hexano) para se obter o triflato 13 (106 mg, 64%) .
RMN-1]! (CDC13) 6 7,36 (m, 2H) , 7,25 (m, 3H) , 4,80-5,10 (m, 3H), 4,60 (dd, 1H), 4,27 (q, 2H) , 1,28 (t, 3H) ; RMN-31P (CDC13) 611,1.
Exemplo 13 427
Fosfonato 14: peparou-se uma solução de fenol 8 (32 mg, 0,052 mmol) e triflato 13 (32 mg, 0,079 mmol) em CH3CN (1,5 mL) à temperatura ambiente e atou-se com Cs2C03 (34 mg, 0,1 mmol). Agitou-se a mistura durante 1 hora e repartiu-se entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se (MgS04) , filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de silica (70% de
EtOAc/hexano) para se obter o fosfonato 14 (18 mg, 40%) . RMN- (CDC13) δ 7,71 (d, 2H) , 6,75-7,35 (m, 11H , 5, 65 (d, 1H) , 5, 00 (m, 2H), 4,50 -4,88 (m, 3H), 4,20 (q, 2H) r 3,84 (S, 3H) t 3, 65- eT o o 5H) , 2,70-3,20 (m, 6H) , 1,52- 1,87 (m, 6H) r 1,25 (t, 3H), na & o o 1 LO co o RMN- 31p (CDCls) δ 17, 9, 17 ,7.
Exemplo 14
Piperidina 16: preparou-se uma solução de composto 15 (3,1 g, 3,673 mmol) em MeOH (100 mL) e tratou-se com Pd a 10%/C (0,35 g) em ambiente de H2 (1 atmosfera) durante 18 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para se obter o fenol 16 (2 g, 88%). ΚΜΝ-^ (CD3OD) δ 7,76 (d, 2H) , 7,08 (d, 2H), 7,04 (d, 2H) , 6,65 (d, 2H), 5,59 (d, 1H), 4,95 (m, 1H) , 3,98 (s, 3H), 3,65-4,00 (m, 5H) , 3, 30-3, 50 (m, 3H) , 2,80-3,26 (m, 5H) , 2,40-2,70 (m, 3H) , 1,35-2,00 (m, 7H) , 1,16 (m, 2H); MS (ESI) 620 (M+H).
Exemplo 15
Formamida 17: tratou-se a piperidina 16 obtida antes (193 mg, 0,3118 mmol) em DMF (4 mL) com ácido fórmico (0,035 mL, 0,936 mmol), trietilamina (0,173 mL, 1,25 mmol) e EDCI (179 mg, 0,936 mmol) à temperatura ambiente. Agitou-se a mistura 428 durante 18 horas e repartiu-se entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se (MgS04), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de silica (EtOAC/hexano) para se obter a formamida 17 (162 mg CJ> OO '%). ΡΜΝ-1!! (CDC13) δ 7, 96 (s, 1H) , 7, 68 (d, 2H) , 7,04 (d, 2H) , 6,97 (d, 2H) , 6, 76 (d, 2H) , 5, 63 (d, 1H) , 5,37 ( :si, 1H) , 5,04 (m, 1H) , 4, 36 (m, 1H) , 3, 93 (s, 3H) , 3,52-3 ,95 (m, 7H), 2 ,70- 3,20 (m, 8H) , 1,48- 2,00 (m, 7H), 1,02 (m, 2H).
Exemplo 16
Dibenzil-fosfonato 18: preparou-se uma solução de fenol 17 (123 mg, 0,19 mmol) e trifluorometanossulfoniloxi-metanodibenzil-fosfonato YY (120 mg, 0,28 mmol) em CH3CN (1,5 mL) à temperatura ambiente e tratou-se com CS2CO3 (124 mg, 0,38 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 horas e repartiu-se entre CH2CI2 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 0,1N e NaCl saturado, secou-se (MgS04), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de silica (10% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fosfonato 18 (154 mg, 88%). ΚΜΝ-^ (CDC13) δ 7,96 (s, 1H) , 7,68 (d, 2H) , 7,35 (m, 10H), 7,10 (d, 2H), 6,97 (d, 2H) , 6,80 (d, 2H) , 5,63 (d, 1H) , 4,96-5,24 (m, 6H) , 4,37 (m, 1H) , 4,20 (d, 2H) , 3,84 (s, 3H), 3,52-3, 95 (m, 7H), 2,55-3,20 (m, 8H) , 1,48-2,00 (m, 7H) , 1,02 (m, 2H) . RMN-31P (CDCI3) δ20,3.
Exemplo 17 Ácido fosfónico 19: preparou-se uma solução de fosfonato 18 (24 mg, 0,026 mmol) em MeOH (3 mL) e tratou-se com Pd a 429 10%/C (5 mg) em ambiente de H2 (1 atmosfera) durante 4 horas. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado para se obter ácido fosfónico 19 com o aspecto de um sólido (18 mg, 93%). RMN-1!! (CD3OD) δ 8,00 (s, 1H) , 7,67 (d, 2H) , 7,18 (d, 2H), 7,09 (d, 2H), 6,90 (d, 2H), 5,60 (d, 1H) , 4,30 (m, 1H) , 4,16 (d, 2H), 3,88 (s, 3H) , 3, 60-4,00 (m, 7H) , 3,04-3,58 (m, 5H) , 2,44-2, 92 (m, 5H) , 1,28-2,15 (m, 5H) , 1,08 (m, 2H) . RMN-31P (CDC13) δ 16,3.
Exemplo 18
Fosfonato de dietilo 20: preparou-se uma solução de fenol 17 (66 mg, 0,1 mmol) e trifluorometanossulfoniloxi- metanofosfonato de dietilo XY (46 mg, 0,15 mmol) em CH3CN (1,5 mL) à temperatura ambiente e tratou-se com Cs2C03 (66 mg, 0,2 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 horas e repartiu-se entre CH2C12 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com HC1 0,1N e NaCl saturado, secou-se (MgS04), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (10% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o composto 17 que não reagiu (17 mg, 26%) e fosfonato de dietilo 20 (24,5 mg, 41%). ΡΜΝ-3Η (CDC13) 0 8,00 (s, 1H) , 7,70 (d, 2H) , 7,16 (d, 2H) , 7,00 (d, 2H), 6,88 (d, 2H) , 5,66 (d, 1H) , 4,98-5,10 (m, 2H), 4,39 (m, 1H) , 4,24 (m, 5H) , 3,89 (s, 3H) , 3, 602-3,98 (m, 7H) , 2,55-3,16 (m, 8H) , 1,50-2, 00 (m, 7H) , 1,36 (t, 6H) , 1,08 (m, 2H) . RMN-31P (CDC13) δ 19,2.
Exemplo 19 N-metil-pepiridina-fosfonato de dietilo 21: preparou-se uma solução de composto 20 (22,2 mg, 0,0278 mmol) em THF (1,5 mL) a 0°C e tratou-se com uma solução de borano em THF (1M, 430 0,083 mL) . Agitou-se a mistura durante 2 horas à temperatura ambiente, tendo o material de partida sido totalmente consumido, conforme verificado por TLC. Arrefeceu-se a mistura de reacção em banho de gelo/água e adicionou-se um excesso de metanol (1 mL) para extinguir a reacção. Concentrou-se a solução sob uma pressão hipobárica e submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de silica, com MeOH/EtOAc, para se obter o composto 21 (7 mg, 32%). RMN-1H (CDC13) δ 7,70 (d, 2H) , 7,16 (d, 2H) , 7,00 (d, 2H) , 6,88 (d, 2H) , 5,66 (d, 1H) , 4,98-5,10 (m, 2H), 4,24 (m, 4H), 3,89 (s, 3H), 3, 602-3,98 (m, 7H) , 2,62-3,15 (m, 9H), 2,26 (s, 3H) , 1,52-2,15 (m, 10H) , 1,36 (t, 6H) . RMN-31P (CDCI3) δ 19, 3.
Secção G de exemplos
Exemplo 1
Composto 1: a uma solução de brometo de 4-nitrobenzilo (21,6 g, 100 mmol) em tolueno (100 mL) adicionou-se fosfito de trietilo (17,15 mL, 100 mL). Aqueceu-se a mistura a 120°C durante 14 horas. A evaporação sob pressão reduzida proporcionou um óleo castanho, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (entre hexano/EtOAc = 2/1 e 100% de EtOAc) para se obter o composto 1.
Exemplo 2
Composto 2: a uma solução de composto 1 (1,0 g) em etanol (60 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (300 mg) . Hidrogenou-se a mistura durante 14 horas. Adicionou-se Celite e agitou-se a mistura durante 5 minutos. Filtrou-se a mistura através de 431 uma camada de celite e lavou-se com etanol. Por concentração obteve-se o composto 2.
Exemplo 3
Composto 3: a uma solução de composto 3 (292 mg, 1,2 mmol) e aldeído (111 mg, 0,2 mmol) em metanol (3 mL) adicionou-se ácido acético (48 μί, 0,8 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (25 mg, 0,4 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas e removeu-se o metanol sob pressão reduzida. Adicionou-se água e extraiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com uma solução de NaOH 0,5N (lx) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3) proporcionou o composto 3.
Exemplo 4
Composto 4: a uma solução de composto 3 (79 mg, 0,1 mmol) em CH2C12 (5 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (1 mL). Agitou-se a mistura durante 2 horas, e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Por co-evaporação com EtOAc e CH2C12 obteve-se um óleo. Dissolveu-se o óleo em THF (1 mL) e adicionou-se fluoreto de tetrabutil-amónio (0,9 mL, 0,9 mmol). Agitou-se a mistura durante 1 hora e removeu-se o solvente. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/7) proporcionou o composto 4.
Exemplo 5
Composto 5: a uma solução de composto 4 (0,1 mmol) em acetonitrilo (1 mL) a 0°C adicionou-se DMAP (22 mg, 0,18 mmol) e depois bisfuranocarbonato (27 mg, 0,09 mmol). 432
Agitou-se a mistura durante 3 horas a 0°C e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (2x) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3 a 100/5) proporcionou o composto 5 (50 mg) : ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,70 (2 H, d, J=8,9 Hz), 7,11 (2H, d, J=8,5 Hz), 6,98 (2H, d, J=8,9 Hz), 6,61 (2H, d, J=8,5 Hz), 5,71 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,45 (1H, m) , 5,13 (1H, m) , 4,0 (6H, m) , 3, 98-3,70 (4H, m) , 3,86 (3H, s) , 3,38 (2H, m) , 3,22 (1H, m,), 3,02 (5H, m) , 2,8 (1H, m), 2,0-1,8 (3H, m), 1,26 (6H, t, J=7,0 Hz), 0,95 (3H, d, J=6,7 Hz), 0,89 (3H, d, J=6,7 Hz) .
Exemplo 6
Composto 6: a uma solução de composto 5 (30 mg, 0,04 mmol) em MeOH (0,8 mL) adicionou-se formaldeido a 37% (30 μΕ, 0,4 mmol) e depois ácido acético (23 μΕ, 0,4 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (25 mg, 0,4 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 14 horas e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (2x), água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3) proporcionou o composto 6 (11 mg): RMN-1H (CDCI3) δ 7,60 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,17 (2H, m), 6,95 (2H, d, J=8,9 Hz), 6,77 (2H, d, J=8,5 Hz), 5,68 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,21 (1H, m), 5,09 (1H, m), 4,01 (6H, m), 3,87 (3H, s), 3,8-3,3 (4H, m), 3,1-2,6 (7H, m) , 2,90 (3H, s) , 1,8 (3H, m) , 1,25 (6H, m), 0,91 (6H, m) .
Exemplo 7 433
Composto 7: a uma solução de composto 1 (24,6 g, 89,8 mmol) em acetonitrilo (500 mL) adicionou-se TMSBr (36 mL, 269 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 14 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com MeOH (2x), tolueno (2x), EtOAc (2x) e CH2C12 para se obter um sólido amarelo (20 g) . À suspensão do sólido amarelo anterior (15,8 g, 72,5 mmol) em tolueno (140 mL) adicionou-se DMF (1,9 mL) e depois cloreto de tionilo (53 mL, 725 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção a 60°C durante 5 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x), EtOAc e CH2C12 (2x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido castanho em CH2C12, a 0°C, adicionou-se álcool benzilico (29 mL, 290 mmol), seguindo-se a adição lenta de piridina (35 mL, 435 mmol). Deixou-se a mistura de reacção aquecer até 25°C e agitou-se durante 14 horas. Removeu-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSO,}. Por concentração obteve-se um óleo escuro, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2/1 e 1/1) para se obter o composto 7.
Exemplo 8
Composto 8: a uma solução de composto 7 (15,3 g) em ácido acético (190 mL) adicionou-se zinco em pó (20 g). Agitou-se a mistura durante 14 horas e adicionou-se Celite. Filtrou-se a suspensão através de uma camada de celite e lavou-se com EtOAc. Concentrou-se a solução até à secura, sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc e lavou-se com NaOH 2N (2x), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se 434 sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se o composto 8 com o aspecto de um óleo (15 g) .
Exemplo 9
Composto 9: a uma solução de composto 8 (13,5 g, 36,8 mmol) e aldeído (3,9 g, 7,0 mmol) em metanol (105 mL) adicionou-se ácido acético (1,68 mL, 28 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (882 mg, 14 mmol) . Agitou-se a mistura durante 14 horas e removeu-se o metanol sob pressão reduzida. Adicionou-se água e extraiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (lx), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCL. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3) proporcionou o composto 9 (6,0 g).
Exemplo 10
Composto 10: a uma solução de composto 9 (6,2 g, 6,8 mmol) em CH2C12 (100 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (20 mL) . Agitou-se a mistura durante 2 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Por co-evaporação com EtOAc e CH2C12 obteve-se um óleo. Dissolveu-se o óleo em THF (1 mL) e adicionou-se fluoreto de tetrabutil-amónio (0,9 mL, 0,9 mmol). Agitou-se a mistura durante 1 hora e removeu-se o solvente. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/7) proporcionou o composto 10,
Exemplo 11
Composto 11: a uma solução de composto 10 (5,6 mmol) em acetonitrilo (60 mL) a 0°C adicionou-se DMAP (1,36 g, 11,1 mmol) e depois bisfuranocarbonato (1,65 g, 5,6 mmol). 435
Agitou-se a mistura durante 3 horas a 0°C e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (2x), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3 a 100/5) proporcionou o composto 11 (3,6 g) : ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,70 (2H, d, J=8, 9 Hz), 7,30 (10H, m) , 7,07 (2H, m) , 6,97 (2H, d, J=8,9 Hz), 6,58 (2H, d, J=8,2 Hz), 5,70 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,42 (1H, m) , 5,12 (1H, m) , 4,91 (4H, m),4,0-3,7 (6H, m) , 3,85 (3H, s) , 3,4 (2H, m) , 3,25 (1H, m) , 3,06 (2H, d, J=21 Hz), 3,0 (3H, m) , 2,8 (1H, m) , 1,95 (1H, m), 1,82 (2H, m), 0,91 (6H, m).
Exemplo 12
Composto 12: a uma solução de composto 11 (3,6 g) em etanol (175 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (1,5 g) . Hidrogenou-se a mistura de reacção durante 14 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 12 com o aspecto de um sólido branco (2,8 g) : RMN-1H (DMSO-d6) δ 7,68 (2H, m) , 7,08 (2H, m) , 6,93 (2H, m) , 6,48 (2H, m) , 5,95 (1H, m) , 5,0 (2H, m) , 3,9-3,6 (6H, m), 3,82 (3H, s), 3,25 (3H, m), 3,05 (4H, m) , 2,72 (2H, d, J=20,l Hz), 2,0-1,6 (3H, m), 0,81 (6H, m) .
Exemplo 13
Composto 13: submeteu-se o composto 12 (2,6 g, 3,9 mmol) e cloridrato do éster etilico de L-alanina (3,575 g, 23 mmol) a co-evaporação com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (20 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (4,1 mL, 23 mmol). À mistura anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (3,46 g, 15,6 mmol) e trifenilfosfina 436 (4,08 g, 15,6 g) em piridina (20 mL). Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com solução de NaOH 0,5N (2x), água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgSCh. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um óleo amarelo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/5 a 100/10) para se obter o composto 13 (750 mg): RMN- (CDC13) 67, 71 (2H, d, j=í 3,8 Hz ) , 7, 13 (2H, m) , 6,98 (2H, d, J=8,8 Hz) , 6,61 (2H, d, J=8, 0 Hz) , 5 ,71 (1H, d, J=5,2 Hz) , 5,54 (1H, m) , 5, 16 (1H , m) , 4, 15 (6H , m), 4,1-3,6 (6H, m), 3, 86 (3H, s), 3 ,4-: 3,2 (3H, m) 1 , 3,1- -2,8 (8H, m), 2,0 (1H , m) , 1, 82 (2H, m) , 1 ,3 (12H, m) , 0 ,92 (6H, m) .
Exemplo 14
Composto 14: a uma solução de 4-hidroxipiperidina (19,5 g, 193 mmol) em THF a 0°C adicionou-se uma solução de hidróxido de sódio (160 mL, 8,10 g, 203 mmol) e depois dicarbonato de di-terc-butilo (42,1 g, 193 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Removeu-se o THF sob pressão reduzida e extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (2x). Lavou-se a camada orgânica combinada com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgSCh. Por concentração obteve-se um composto 14 com o aspecto de um sólido branco (35 g).
Exemplo 15
Composto 15: a uma solução de álcool 14 (5,25 g, 25 mmol) em THF (100 mL) adicionou-se hidreto de sódio (1,2 g, 30 mmol, 60%) . Agitou-se a suspensão durante 30 minutos e adicionou-se metil-sulfureto de clorometilo (2,3 mL, 27,5 437 mmol). 0 álcool de partida 14 continuava presente ao fim de 12 horas. Adicionou-se dimetilsulfóxido (50 mL) e mais metil-sulfureto de clorometilo (2,3 mL, 27,5 mmol). Agitou-se a mistura durante mais 3 horas e removeu-se o THF sob pressão reduzida. Extinguiu-se a reacção com água e extraiu-se com acetato de etilo. Lavou-se a fase orgânica com água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc=8/l) proporcionou o composto 15 (1,24 g) . •kicicicicicicic-k-k-k-k-k-k-k-kicicicicicicicicicic
Exemplo 16
Composto 16: a uma solução de composto 15 (693 mg, 2,7 mmol) em CH2C12 (50 mL) a -78°C adicionou-se uma solução de cloreto de sulfurilo (214 μΐ, 2,7 mmol) em CH2C12 (5 mL) . Manteve-se a mistura de reacção a -78°C durante 3 horas e removeu-se os solventes para se obter um sólido branco. Dissolveu-se o sólido branco em tolueno (7 mL) e adicionou-se fosfito de trietilo (4,5 mL, 26,6 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção a 120°C durante 12 horas. Removeu-se o solvente e o excesso de reagente sob pressão reduzida para se obter o composto 16.
Exemplo 17
Composto 17: a uma solução de composto 17 (600 mg) em CH2C12 (10 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (2 mL) . Agitou-se a mistura durante 2 horas e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um óleo. Diluiu-se o óleo com cloreto de metileno e adicionou-se resina básica. Filtrou-se a suspensão e concentrou-se a fase orgânica para se obter o composto 17. 438
Exemplo 18
Composto 18: a uma solução de composto 17 (350 mg, 1,4 mmol) e aldeído (100 mg, 0,2 mmol) em metanol (4 mL) adicionou-se ácido acético (156 μί, 2,6 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (164 mg, 2,6 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas e removeu-se o metanol sob pressão reduzida. Adicionou-se água e extraiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (lx), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3) proporcionou o composto 18 (62 mg).
Exemplo 19
Composto 19: a uma solução de composto 18 (62 mg, 0,08 mmol) em THF (3 mL) adicionou-se ácido acético (9 μί, 0,15 mmol) e fluoreto de tetrabutil-amónio (0,45 mL, 1,0 N, 0,45 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 horas e removeu-se o solvente. Por purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/5) obteve-se um óleo. A uma solução do óleo anterior em CH2C12 (2 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (2 mL) . Agitou-se a mistura durante 1 hora e concentrou-se sob pressão reduzida. A co-evaporação com EtOAc e CH2C12 proporcionou o composto 19.
Exemplo 20
Composto 20: a uma solução de composto 19 (55 mg 0,08 mmol) em acetonitrilo (1 mL) a 0°C adicionou-se DMAP (20 mg, 0,16 mmol) e depois bisfuranocarbonato (24 mg, 0,08 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 horas a 0°C e diluiu-se com 439
EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (2x) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3 a 100/5) proporcionou o composto 20 (46 mg): RMN-1H (CDCI3) δ 7,70 (2H, d, J=8, 9 Hz), 7,01 (2H, d, J=8, 9 Hz), 5,73 (1H, d, J=5,1 Hz) , 5, 51 (1H, m) , 5,14 (1H , m) , 4,16 (1H, m), 4,06 (1H, m) , - 3,' 94 (3H, m) , 3,86 (3H, , s) , 3,80 (1H, m) , 3,75 (2H, d, J=9, 1 Hz) , 3,58 (1H, m) , 3,47 (1H, m) , 3, 30 (1H, m) , 3,Ι- -2,6 (8 H, m ), 2, 3 (2H , m ), 2,1-1,8 (5H, m) , 1,40 (2H, γπ) , 1,36 (6H, t, J=7, ,0 Hz) , 0, 93 (3H, d, J=6, 7 Hz) , 0,86 (3h , d, J=6 ,7 Hz) .
Exemplo 21
Composto 21: o composto 21 foi preparado a partir de Boc-4-nitro-L-fenilalanina (Fluka) de acordo com o procedimento descrito para o composto 2 no esquema 1 da secção A de esquemas.
Exemplo 22
Composto 22: a uma solução de clorocetona 21 (2,76 g, 8 mmol) em THF (50 mL) e água (6 mL) a 0°C (temperatura interna) adicionou-se NaBH4 sólido (766 mg, 20 mmol) em várias porções, ao longo de um período de 15 minutos, mantendo a temperatura interna inferior a 5°C. Agitou-se a mistura durante 1,5 horas a 0°C e removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Extinguiu-se a mistura com KHSO3 saturado e extraiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com água e salmoura e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um sólido que se deixou recristalizar a partir de EtOAc/hexano (1/1) para se obter o cloro álcool 22 (1,72 g) · 440
Exemplo 23
Composto 23: a uma suspensão de cloro álcool 22 (1,8 g, 5,2 mmol) em EtOH (50 mL) adicionou-se uma solução de KOH em etanol (8,8 mL, 0,71 N, 6,2 mmol). Agitou-se a mistura durante 2 horas à temperatura ambiente e removeu-se o etanol sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura de reacção com EtOAc, lavou-se com água (2x), NH4C1 saturado (2x) , água e salmoura e secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se o epóxido 23 (1,57 g) com o aspecto de um sólido cristalino branco.
Exemplo 24
Composto 24: a uma solução de epóxido 23 (20 g, 65 mmol) em 2-propanol (250 mL) adicionou-se isobutilamina (65 mL) e manteve-se a solução ao refluxo durante 90 minutos. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e submeteu-se a co-evaporação com MeOH, CH3CN e CH2C12 para se obter um sólido branco. A uma solução do sólido branco em CH2C12 (300 mL) a 0°C adicionou-se trietilamina (19 mL, 136 mmol), seguindo-se a adição de cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo (14,1 g, 65 mmol) em CH2C12 (50 mL) . Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos, aqueceu-se até à temperatura ambiente e agitou-se durante mais 2 horas. Concentrou-se a solução de reacção sob pressão reduzida e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com NaHC03 saturado, água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 24 com o aspecto de um sólido branco (37,5 g). 441
Exemplo 25
Composto 25: a uma solução de composto 24 (37,5 g, 68 mmol) em CH2C12 (100 mL) a 0°C adicionou-se uma solução de tribromoborano em CH2C12 (340 mL, 1,0 N, 340 mmol). Manteve-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora, aqueceu-se até à temperatura ambiente e agitou-se durante mais 3 horas. Arrefeceu-se a mistura até 0°C e adicionou-se lentamente metanol (200 mL). Agitou-se a mistura durante 1 hora e removeu-se os solventes sob pressão reduzida para se obter um óleo castanho. Submeteu-se o óleo castanho a co-evaporação com EtOAc e tolueno para se obter o composto 25 com o aspecto de um sólido castanho, que se secou sob uma pressão hipobárica durante 48 horas.
Exemplo 26
Composto 26: a uma solução de composto 25 em THF (80 mL) adicionou-se uma solução saturada de bicarbonato de sódio (25 mL) , seguindo-se uma solução de Boc20 (982 mg, 4,5 mmol) em THF (20 mL) . Agitou-se a mistura de reacção durante 5 horas. Removeu-se o THF sob pressão reduzida e extraiu-se a fase aquosa com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre
MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1/1) proporcionou o composto 26 (467 mg).
Exemplo 27
Composto 27: a uma solução de composto 26 (300 mg, 0,56 mmol) em THF (6 mL) adicionou-se Cs2C03 (546 mg, 1,68 mmol), seguindo-se uma solução de triflato (420 mg, 1,39 mmol) em THF (2 mL). Agitou-se a mistura de reacção durante 1,5 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água 442 (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc=l/l to 1/3) proporcionou o composto 27 (300 mg).
Exemplo 28
Composto 28: a uma solução de composto 27 (300 mg, 0,38 mmol) em CH2C12 (2 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (2 mL). Agitou-se a mistura durante 2,5 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com solução de NaOH 0,5N (3x), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um sólido branco. À solução do anterior sólido branco em acetonitrilo (3 mL) a 0°C adicionou-se DMAP (93 mg, 0,76 mmol) e depois bisfuranocarbonato (112 mg, 0,38 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 horas a 0°C e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (2x) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre
MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3 to 100/5) proporcionou o composto 28 (230 mg) : RMN- -ΧΗ (CDC13) δδ, 16 (2H, d , J= =8, 5 Hz) , 7,73 (2H, d, J= =9,2 Hz) , 7, 42 (2H , d, J=8, 5 Hz ), ' 7,10 (2H, d, J=9, 2 Hz) , 5,65 (1H , d, J=4,8 Hz) , 5,0 (2H, m) , 4,34 (2H, - d, J=10 Hz) , 4,25 (4H , m), 4,0- -3,6 (6H, m] 1 , 3,2 -2,8 (7H, m), 1,82 (1H, m) , : 1,6 (2H, m) , 1 ,39 (6H, t, J= 7,0 Hz), 0,95 (6H , m) .
Exemplo 29
Composto 29: a uma solução de composto 28 (50 mg) em etanol (5 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg) . Hidrogenou-se a mistura durante 5 horas. Adicionou-se Celite e agitou-se a mistura durante 5 minutos. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. A concentração sob pressão 443 reduzida proporcionou o composto 29 (50 mg) : ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,72 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,07 (2H, 2H, d, J=8,8 Hz), 7,00 (2H, d, J=8,5 Hz), 6,61 (2H, d, J=8,5 Hz), 5,67 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,05 (1H, m) , 4,90 (1H, m), 4,34 (2H, d, J=10,3 Hz), 4,26 (2H, m), 4,0-3,7 (6H, m), 3,17 (1H, m) , 2,95 (4H, m), 2,75 (2H, m) , 1,82 (1H, m) , 1,65 (2H, m) , 1,39 (6H, t, J=7,0 Hz), 0,93 (3 h, d, J=6,4 Hz), 0,87 (3H, d, J=6,4 Hz).
Exemplo 30
Composto 30: a uma solução de composto 29 (50 mg, 0,07 mmol) e formaldeido (52 μΕ, 37%, 0,7 mmol) em metanol (1 mL) adicionou-se ácido acético (40 FL, 0,7 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (44 mg, 0,7 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas e removeu-se o metanol sob pressão reduzida. Adicionou-se água e extraiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N (lx), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCh. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/3) proporcionou o composto 30 (40 mg): RMN-1H (CDC13) δ 7,73 (2 H, d, J=8,9 Hz), 7,10 (4H, m) , 6,66 (2H, d, J=8,2 Hz), 5,66 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,02 (1H, m) , 4,88 (1H, m) , 4,32 (2H, d, J=10,l Hz), 4,26 (4H, m) , 3,98 (1H, m) , 3,85 (3H, m), 3,75 (2H, m) , 3,19 (1H, m) , 2,98 (4 H. m) , 2,93 (6H, s), 2,80 (2H, m), 1,82 (1H, m) , 1,62 (2H, m) , 1,39 (6H, t, J=7,0 Hz), 0,90 (6H, m).
Exemplo 31
Composto 31: a uma suspensão de composto 25 (2,55 g, 5 mmol) em CH2CI2 (20 mL) a 0°C adicionou-se trietilamina (2,8 mL, 20 mmol) e depois TMSC1 (1,26 mL, 10 mmol). 444
Agitou-se a mistura a 0°C durante 30 minutos, aqueceu-se até 25°C e agitou-se durante mais 1 hora. A concentração proporcionou um sólido amarelo. Dissolveu-se o sólido amarelo em acetonitrilo (30 mL) e arrefeceu-se até 0°C. A esta solução adicionou-se DMAP (1,22 g, 10 mmol) e bisfuranocarbonato (1,48 g, 5 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 2 horas e durante mais 1 hora a 25°C. Removeu-se o acetonitrilo sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com ácido cítrico a 5% (2x) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um sólido amarelo. Dissolveu-se o sólido amarelo em THF (40 mL) e adicionou-se ácido acético (1,3 mL, 20 mmol) e fluoreto de tetrabutil-amónio (8 mL, 1,0 N, 8 mmol). Agitou-se a mistura durante 20 minutos e removeu-se o THF sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexenos/EtOAc = 1/1) proporcionou o composto 31 (1,5 g).
Exemplo 32
Composto 32: a uma solução de composto 31 (3,04 g, 5,1 mmol) em THF (75 mL) adicionou-se CS2CO3 (3,31 g, 10,2 mmol), seguindo-se uma solução de triflato (3,24 g, 7,65 mmol) em THF (2 mL). Agitou-se a mistura de reacção durante 1,5 horas e removeu-se o THF sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1/1 a 1/3) proporcionou o composto 32 (2,4 g) : RMN-1H (CDC13) δ 8,17 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,70 (2H, J=9,2 Hz), 7,43 (2H, d, J=8,5
Hz), 7,37 (10H, m) , 6,99 (2H, d, J=9,2 Hz), 5,66 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,15 (4H, m) , 5,05 (2H, m), 4,26 (2H, d, J=10,2 445
Hz), 3,9-3,8 (4H, m) , 3,75 (2H, m) , 3,2-2,8 (7H, m) , 1,82 (1H, m), 1,62 (2H, m), 0,92 (6H, m).
Exemplo 33
Composto 33: a uma solução de composto 32 (45 mg) em ácido acético (3 mL) adicionou-se zinco (200 mg) . Agitou-se a mistura durante 5 horas. Adicionou-se Celite, filtrou-se a mistura e lavou-se com EtOAc. Concentrou-se a solução até à secura e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de NaOH 0,5N, água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/isopropanol = 100/5) proporcionou o composto 33 (25 mg): RMN-1H (CDC13) δ 7,67 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,36 (10H, m) , 6,98 (4H, m), 6,60 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,67 (1H, d, J=4,9
Hz), 5,12 (4H, m), 5,05 (1H, m), 4,90 (1H, m), 4,24 (2H, d, J=10,4 Hz), 4,0-3,6 (6H, m) , 3,12 (1H, m) , 3,95 (4H, m) , 2,75 (2H, m), 1,80 (1H, m), 1,2 (2H, m), 0,9 (6H, m).
Exemplo 34
Composto 34: a uma solução de composto 32 (2,4 g) em etanol (140 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (1,0 g) . Hidrogenou-se a mistura durante 14 horas. Adicionou-se Celite e agitou-se a mistura durante 5 minutos. Filtrou-se a pasta através de uma camada de celite e lavou-se com piridina. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 34: RMN-1H (DMSO-d6) δ 7, 67 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,14 (2H, d, J=8,9 Hz), 6,83 (2H, d, J=8,0 Hz), 6,41 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,51 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,0-4,8 (2H, m) , 4,15 (2H, d, J=10,0 Hz), 3,9-3,2 (8H, m), 3,0 (2H, m) , 2,8 (4H, m) , 2,25 (1H, m), 1,4 (2H, m), 0,8 (6H, m). 446
Exemplo 35
Composto 35: submeteu-se o composto 34 (1,62 g, 2,47 mmol) e cloridrato do éster butílico de L-alanina (2,69 g, 14,8 mmol) a co-evaporaçâo com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (12 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (2,6 mL, 14,8 mmol). À mistura anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (3,29 g, 14,8 mmol) e trifenilfosfina (3,88 g, 14,8 g) em piridina (12 mL) . Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com solução de NaOH 0,5N (2x), água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgSCh. A concentração sob pressão reduzida proporcionou um óleo amarelo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CfbCWMeOH = 100/5 a 100/15) para se obter o composto 35 (1,17 g) : RMN-1H (CDC13) δ 7,70 (2H, d, J=8,6
Hz), 7,05 (2H, d, J=8,6 Hz), 6,99 (2H, d, J=8,0 Hz), 6,61 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,67 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,05 (1H, m) , 4,96 (1H, m), 4,28 (2H, m), 4,10 (6H, m), 4,0-3,6 (6H, m) , 3,12 (2H, m) , 2,92 (3H, m) , 2,72 (2H, m) , 1,82 (1H, m) , 1,75-1, 65 (2H, m) , 1,60 (4H, m) , 1,43 (6H, m) , 1,35 (4H, m) , 0,91 (12H, m) .
Exemplo 36
Composto 37: submeteu-se o composto 36 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do éster butilico de L-alanina (109 mg, 0,60 mmol) a co-evaporação com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (1 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (105 μL, 0,6 mmol). À mistura anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (100 mg, 0,45 mmol) e trifenilfosfina (118 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL) . 447
Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um óleo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/5 a 100/15) para se obter o composto 37 (21 mg): ΚΜΝ^Η (CDCI3) δ7,71 (2H, d, J=8,8
Hz), 7,15 (2H, d, J=8,2 Hz), 7,01 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,87 (2H, d, J=8,2 Hz), 5,66 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,03 (1H, m) , 4,95 (1H, m),4,2-4,0 (8H, m) , 3,98 (1H, m) , 3,89 (3H, s) , 3, 88-3, 65 (5H, m) , 3,15 (1H, m) , 2,98 (4H, m) , 2,82 (2H, m) , 1,83 (1H, m) , 1,63 (4H, m) , 1,42 (6H, m) , 1,35 (4H, m) , 0, 95 (12H, m) .
Exemplo 37
Composto 38: submeteu-se o composto 36 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do éster etílico de L-leucina (117 mg, 0,60 mmol) a co-evaporação com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (1 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (105 μ]7, 0,6 mmol). À mistura anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (100 mg, 0,45 mmol) e trifenilfosfina (118 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL) . Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgSCL. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um óleo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/5 a 100/15) para se obter o composto 38 (12 mg): RMN-1H (CDCI3) hl ,12 (2H, d, J=8,5 Hz), 7,14 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,00 (2H, d, J=8,5 Hz), 6,86 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,66 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,05 (1H, m) , 448 4,95 (1Η, m), 4,2-4,0 (8H, m), 4,0-3,68 (6H, m), 3,88 (3H, s), 3,2-2,9 (5H, m), 2,80 (2H, m), 1,80 (1H, m), 1,65 (4H, m), 1,65-1,50 (4H, m), 1,24 (6H, m), 0,94 (18H, m).
Exemplo 38
Composto 39: submeteu-se o composto 36 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do éster butílico de L-leucina (117 mg, 0,60 mmol) a co-evaporação com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (1 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (105 mL, 0,6 mmol). À mistura anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (100 mg, 0,45 mmol) e trifenilfosfina (118 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL) . Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas, e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgSCt. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um óleo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/5 a 100/15) para se obter o composto 39 (32 mg) : ΕΜΝ^Η (CDC13) 6 7,72 (2H, d, J=8,8 Hz), 7,15 (2H, d, J=8,0 Hz), 7,0 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,89 (2H, d, J=8,0 Hz), 5,66 (lH,d, J=4,3 Hz), 5,07 (1H, m), 4,94 (1H, m), 4,2-4,0 (8H, m) , 3,89 (3H, s), 4,0-3,6 (6H, m) , 3,2-2,9 (5H, m) , 2,8 (2H, m) , 1,81 (1H, m), 1,78-1,44 (10H, m), 1,35 (4H, m), 0,95 (24H, m).
Exemplo 39
Composto 41: submeteu-se o composto 40 (82 mg, 0,1 mmol) e cloridrato do éster isopropilico de L-alanina (92 mg, 0,53 mmol) a co-evaporação com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (1 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (136 μί, 0,78 mmol). À mistura 449 anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (72 mg, 0,33 mmol) e trifenilfosfina (87 mg, 0,33 mmol) em piridina (1 mL) . Agitou-se a mistura de reacção a 75°C durante 20 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgSCh. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um óleo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/1 a 100/3) para se obter o composto 41 (19 mg) : ΚΜΝ^Η (CDCI3) δ 7,71 (2H t d, Oh co II •d Hz) , 7,2 -7,35 (5H, r m) , 7,15 (2 H, m ) , 7, 01 (2 H, d , J: -8,9 Hz) , 6, 87 (2H, m) , 5, 65 (1H, d, J = 5 ,4 Hz) , 5,05· -4 , 93 (2H, m) , 4,3 (2 H, m) , 4,19 (1H, m) , 3, 98 (1H, m) , 3, 88 (3H, s) , 3,80 (2H, m) , 3,70 (3 H, m) , 3, 18 (1H, m) , 2, 95 (4H, m) , 2,78 (2 H, m) , 1,82 (1H, m), 1, 62 (2 H, m) , 1, 35 (3H, m) , 1,25 -1,17 (6H , m) , 0,93 (3H, f d, J=6,4 Hz), 0,88 (3, d, J=6,4 Hz).
Exemplo 40
Composto 42: submeteu-se o composto 40 (100 mg, 0,13 mmol) e cloridrato do éster butilico de L-glicina (88 mg, 0,53 mmol) a co-evaporação com piridina (2x). Dissolveu-se a mistura em piridina (1 mL) e adicionou-se diisopropiletilamina (136 mL, 0,78 mmol). À mistura anterior adicionou-se uma solução de Aldrithiol (72 mg, 0,33 mmol) e trifenilfosfina (87 mg, 0,33 mmol) em piridina (1 mL) . Agitou-se a mistura de reacção a 75°C durante 20 horas e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um óleo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/MeOH = 100/1 a 450 100/3) para se obter o composto 42 (18 mg) : RMN-1]! (CDCI3) δ 7,71 (2H, d, J=9,2 Hz), 7,35-7,24 (5H, m) , 7,14 (2H, m) , 7,00 (2 H, d, J=8,8 Hz), 6,87 (2H, m) , 5,65 (1H, d, J=5,2
Hz), 5,04 (1H, m) , 4,92 (1H, m) , 4,36 (2H, m) , 4,08 (2H, m) , 3,95 (3H, m) , 3,88 (3H, s) , 3,80 (2H, m) , 3,76 (3H, m) , 3,54 (1H, m) , 3,15 (1H, m) , 2,97 (4H, m) , 2,80 (2H, m) , 1.82 (1H, m) , 1,62 (4H, m) , 1,35 (2H, m) , 0,9 (9H, m) .
Secção H de exemplos
Exemplo 1
Sulfonamida 1: a uma suspensão de epóxido (20 g, 54,13 mmol) em 2-propanol (250 mL) adicionou-se isobutilamina (54 mL, 541 mmol) e manteve-se a solução ao refluxo durante 30 minutos. Evaporou-se a solução sob pressão reduzida, dissolveu-se 0 sólido impuro em CH2CI2 (250 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (15,1 mL, 108,26 mmol), seguindo-se a adição de cloreto de 4-nitrobenzenossulfonilo (12 g, 54,13 mmol), agitou-se a solução durante 40 minutos a 0°C, aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 2 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHCCh saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Deixou-se o produto impuro recristalizar a partir de EtOAc/hexano para se obter a sulfonamida (30,59 g, 90%) com 0 aspecto de um sólido esbranquiçado.
Exemplo 2
Fenol 2: preparou-se uma solução de sulfonamida 1 (15,58 g, 24.82 mmol) em EtOH (450 mL) e CH2C12 (60 mL) e tratou-se 451 com Pd a 10%/C (6 g). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 24 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (6% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fenol (11,34 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 3
Dibenzil-fosfonato 3: a uma solução de fenol 2 (18,25 g, 35, 95 mmol) em CH3CN (200 mlL) adicionou-se Cs2C03 (23,43 g, 71,90 mmol) e triflato (19,83 g, 46,74 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 2/1) para se obter o dibenzil-fosfonato (16,87 g, 60%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 4
Amina 4: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato (16,87 g, 21,56 mmol) em CH2CI2 (60 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (30 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), água (2x) e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para 452 se obter a amina (12,94 g, 88%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 5
Carbonato 5: a uma solução de (S)-(+)-3- hidroxitetrahidrofurano (5,00 g, 56,75 mmol) em CH2C12 (80 mL) adicionou-se trietilamina (11,86 mL, 85,12 mmol) e carbonato de bis(4-nitrofenilo) (25,90 g, 85,12 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 24 horas e repartiu-se entre CH2C12 e NaHC03 saturado. Secou-se a fase de CH2C12 com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 2/1) para se obter o carbonato (8,62 g, 60%) com o aspecto de um óleo amarelo pálido, que solidificou por refrigeração.
Exemplo 6
Carbamato 6: foram utilizados dois métodos. Método 1: a uma solução de 4 (6,8 g, 9,97 mmol) e 5 (2,65 g, 10,47 mmol) em CH3CN (70 mL) a 0°C adicionou-se 4- (dimetilamino)-piridina (2,44 g, 19,95 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 3 horas e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com NaOH 0,5N, NaHC03 saturado e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o carbamato (3,97 g, 50%) com o aspecto de um sólido amarelo pálido. Método 2: a uma solução de 4 (6,0 g, 8,80 mmol) e 5 (2,34 g, 9,24 mmol) em CH3CN (60 mL) a 0°C adicionou-se 4- 453 (dimetilamino)-piridina (0,22 g, 1,76 mmol) e N,N-diisopropiletilamina (3,07 mL, 17,60 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora e aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Dissolveu-se o produto impuro em EtOAc, lavou-se com NaOH 0,5N, NaHC03 saturado e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o carbamato (3,85 g, 55%) com o aspecto de um sólido amarelo pálido.
Exemplo 7 Ácido fosfónico 7: a uma solução de 6 (7,52 g, 9,45 mmol) em MeOH (350 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (3 g). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 48 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (5,24 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 8
Cbz-amida 8: a uma solução de 7 (5,23 g, 8,50 mmol) em
CH3CN (50 mL) adicionou-se N,O-bis(trimetilsilil)-acetamida (16,54 mL, 68 mmol) e depois aqueceu-se até 70°C durante 3 horas. Arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter intermediário sililado, o qual foi utilizado directamente, sem mais purificação. A uma solução de intermediário sililado em CH2C12 (40 mL) a 0°C 454 adicionou-se piridina (1,72 mL, 21,25 mmol) e cloroformato de benzilo (1,33 mL, 9,35 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora e aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Preparou-se uma solução de MeOH (50 mL) , adicionou-se solução aquosa de HC1 a 1% (150 mL) a 0°C e agitou-se durante 30 minutos. Adicionou-se CH2CI2 e separou-se duas fases. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se, concentrou-se, efectuou-se a co-evaporação com tolueno e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter a Cbz-amida (4,46 g, 70%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado.
Exemplo 9
Difenil-fosfonato 9: preparou-se uma solução de 8 (4,454 g, 5,94 mmol) e fenol (5,591 g, 59,4 mmol) em piridina (40 mL) , aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (4,903 g, 23,76 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 4 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Adicionou-se EtOAc e removeu-se por filtração 0 produto secundário 1,3-diciclo-hexil-ureia. Concentrou-se o filtrado e dissolveu-se em CH3CN (20 mL) a 0°C. Tratou-se a mistura com resina de permuta iónica 'DOWEX 50W x 8-400' e agitou-se durante 30 minutos a 0°C. Removeu-se a resina por filtração e concentrou-se o filtrado. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter 0 difenil-fosfonato (2,947 g, 55%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 10 455 Ácido monofosfónico 10: a uma solução de 9 (2,945 g, 3,27 mmol) em CH3CN (25 mL) a 0°C adicionou-se NaOH IN (8,2 mL, 8,2 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora. Adicionou-se resina de permuta iónica 'DOWEX 50W x 8-400' e agitou-se a mistura de reacção durante 30 minutos a 0°C. Removeu-se a resina por filtração, concentrou-se o filtrado e submeteu-se a co-evaporação com tolueno. Triturou-se o produto impuro com EtOAc/hexano (1/2) para se obter o ácido monofosfónico (2,427 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 11
Monofosfonamidato protegido com Cbz 11: preparou-se uma solução de 10 (2,421 g, 2,93 mmol) e cloridrato do éster isopropilico de L-alanina (1,969 g, 11,73 mmol) em piridina (20 mL), aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (3,629 g, 17,58 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e NaHC03 saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monoamidato (1,569 g, 57%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 12
Monofosfoamidato 12: a uma solução de 11 (1,569 g, 1,67 mmol) em EtOAc (80 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (0,47 g) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à 456 temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (entre CH2CI2 e l%-8% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfoamidato 12a (1,12 g, 83%, GS 108577, mistura diastereomérica A/B a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CDC13) δ 7,45 (dd, 2H) , 7,41-7,17 (m, 7H) , 6,88 (dd, 2H), 6,67 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5,16 (s largo, 1H), 4,95 (m, 1H), 4,37-4,22 (m, 5H) , 3,82-3, 67 (m, 7H), 2,99-2,70 (m, 6H), 2,11-1,69 (m, 3H) , 1,38 (m, 3H) , 1,19 (m, 6H) , 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,86 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN- 31P (CDCI3) δ 20,5, 19,6, 12b (29 mg, 2%, GS108578, diastereómero A) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7,43 (d, J=7,8 Hz, 2H) , 7,35-7,17 (m, 7H) , 6,89 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,67 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 5,16 (s largo, 1H) , 4,96 (m, 1H) , 4,38-4,32 (m, 4H) , 4,20 (m, 1H) , 3,82- 3,69 (m, 7H) , 2,99-2,61 (m, 6H) , 2,10 (m, 1H) , 1,98 (m, 1H), 1,80 (, 11H) , 1,38 (d, J=7,2 Hz, 3H) , 1,20 (d, J=6,3 Hz, 6H) , 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,86 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 20,5, 12c (22 mg, 1,6%, GS 108579, diastereómero B) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7,45 (d, J=8,1 Hz, 2H), 7, 36-7,20 (m, 7H), 6,87 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,67 (d, J=8,4 Hz 2H) , 5,15 (s largo, 1H) , 4,95 (m, 1H), 4,34-4,22 (m, 5H) , 3, 83-3, 67 (m, 7H) , 2,99-2, 64 (m, 6H) , 2,11-1,68 (m, 3H) , 1,33 (d, J=6,9 Hz, 3H), 1,20 (d, J=6,0 Hz, 6H) , 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,86 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19,6,
Exemplo 13 457
Sulfonamida 13: a uma suspensão de epóxido (1,67 g, 4,52 mmol) em 2-propanol (25 mL) adicionou-se isobutilamina (4,5 mL, 45,2 mmol) e manteve-se a solução ao refluxo durante 30 minutos. Evaporou-se a solução sob pressão reduzida, dissolveu-se o sólido impuro em CH2C12 (20 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (1,26 mL, 9,04 mmol), seguindo-se o tratamento com cloreto de 3- nitrobenzenossulfonilo O O T—1 4,52 mmol). Agitou-se a solução durante 40 minutos a 0°C, aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 2 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHCCb saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/1) para se obter a sulfonamida (1,99 g, 70%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 14
Fenol 14: preparou-se uma suspensão da sulfonamida 13 (1,50 g, 2,39 mmol) em HOAc (40 mL) e HC1 concentrado (20 mL) e aqueceu-se até ao refluxo durante 3 horas. Arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e concentrou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o produto impuro entre 10% de MeOH/CH2Cl2 e NaHC03 saturado. Lavou-se as fases orgânicas com NaHCCR e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se para se obter um sólido amarelo. Dissolveu-se o produto impuro em CHCI3 (20 mL) e tratou-se com trietilamina (0,9 mL, 6,45 mmol), seguindo-se a adição de Boc20 (0,61 g, 2,79 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 6 horas. Repartiu-se o produto 458 entre CHC13 e H20. Lavou-se a fase de CHC13 com NaHC03 e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (l%-5% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fenol (0,52 g, 45%) com o aspecto de um sólido amarelo pálido.
Exemplo 15
Dibenzil-fosfonato 15: a uma solução de fenol 14 (0,51 g, 0,95 mmol) em CH3CN (8 mL) adicionou-se Cs2C03 (0,77 g, 2,37 mmol) e triflato (0,8 g, 1,90 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1,5 horas e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (0,62 g, 80%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 16
Amina 16: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 15 (0,61 g, 0,75 mmol) em CH2C12 (8 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (2 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x) , água (2x) e NaCl saturado, secou-se (Na2S04), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida 459 para se obter a amina (0,48 g, 90%), a qual foi utilizada directamente, sem mais purificação.
Exemplo 17
Carbamato 17: tratou-se uma solução de amina 16 (0,48 g, 0,67 mmol) em CH3CN (8 mL) a 0°C com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (0,2 g, 0,67 mmol, preparado tal como descrito por Ghosh et al. J. Med. Chem. 1996, 39, 3278) e 4-(dimetilamino)-piridina (0,17 g, 1,34 mmol). Depois de se agitar durante 2 horas a 0°C, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o residuo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), ácido cítrico a 5% (2x) e NaHC03 saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o carbamato (0,234 g, 40%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 18
Analina 18: a uma solução de carbamato 17 (78 mg, 0,09 mmol) em 2 mL de HOAc adicionou-se zinco em pó. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1,5 horas e filtrou-se através de uma pequena camada de celite. Concentrou-se o filtrado e submeteu-se a co-evaporação com tolueno. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (5% de 2-propanaol/CH2Cl2) para se obter a analina (50 mg, 66%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 19 460 Ácido fosfónico 19: a uma solução de analina (28 mg, 0,033 mmol) em MeOH (1 mL) e HOAc (0,5 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (14 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 6 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma pequena camada de celite. Concentrou-se o filtrado, efectuou-se a co-evaporação com tolueno e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (15 mg, 68%, GS 17424) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (DMSO-d6) δ7,16-6,82 (m, 8H) , 5,50 (d, 1H) , 4,84 (m, 1H) , 3,86-3,37 (m, 9H) , 2,95-2,40 (m, 6H) , 1,98 (m, 1H) , 1,42-1,23 (m, 2H) , 0,84 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,79 (d, J=6,3 Hz,3H). MS (ESI) 657 (M-H).
Exemplo 20
Fenol 21: preparou-se uma suspensão de sal aminobromidrato 20 (22,75 g, 44 mmol) em CH2C12 (200 mL) a 0°C e tratou-se com trietilamina (24,6 mL, 176 mmol), seguindo-se a adição lenta de clorotrimetilsilano (11,1 mL, 88 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 1 hora. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida para se obter um sólido amarelo. Dissolveu-se o produto impuro em CH2C12 (300 mL) e tratou-se com trietilamina (18,4 mL, 132 mmol) e Boc20 (12 g, 55 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e H20. Lavou-se a fase de CH2C12 com NaHCCb e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Dissolveu-se o produto impuro em THF (200 mL) e tratou-se com TBAF 1,0M (102 mL, 102 mmol) e HOAc (13 mL) . Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora 461 e concentrou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o residuo entre CH2CI2 e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (l%-3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter 0 fenol (13,75 g, 58%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 21
Dibenzil-fosfonato 22: a uma solução de fenol 21 (13,70 g, 25, 48 mmol) em THF (200 mL) adicionou-se CS2CO3 (16,61 g, 56,96 mmol) e triflato (16,22 g, 38,22 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (17,59 g, 85%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 22
Amina 23: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 22 (17,58 g, 21,65 mmol) em CH2C12 (60 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (30 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 1,5 horas. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), água (2x) e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para 462 se obter a amina (14,64 g, 95%), a qual foi utilizada directamente, sem mais purificação.
Exemplo 23
Carbamato 24: tratou-se uma solução de amina 23 (14,64 g, 20, 57 mmol) em CH3CN (200 mL) a 0°C com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (6,07 g, 20,57 mmol, preparado tal como descrito por Ghosh et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 3278,) e 4-(dimetilamino)-piridina (5,03 g, 41,14 mmol). Depois de se agitar durante 2 horas a 0°C, evaporou-se o solvente de reacçâo sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), ácido cítrico a 5% (2x) e NaHC03 saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o carbamato (10 g, 56%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 24 Ácido fosfónico 25: a uma solução de carbamato 24 (8 g, 9,22 mmol) em EtOH (500 mL adicionou-se Pd a 10%/C (4 g) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 30 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite.
Preparou-se uma suspensão da pasta de celite em piridina, agitou-se durante 30 minutos e filtrou-se. Repetiu-se duas vezes este processo. Concentrou-se a solução combinada, sob pressão reduzida, para se obter o ácido fosfónico (5,46 g, 90%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado. 463
Exemplo 25
Cbz-amida 26: a uma solução de 25 (5,26 g, 7,99 mmol) em CH3CN (50 mL) adicionou-se N,O-bis(trimetilsilil)-acetamida (15,6 mL, 63,92 mmol) e depois aqueceu-se até 70°C durante 3 horas. Arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter intermediário sililado, o qual foi utilizado directamente, sem mais purificação. A uma solução de intermediário sililado em CH2C12 (40 mL) a 0°C adicionou-se piridina (1,49 mL, 18,38 mmol) e cloroformato de benzilo (1,25 mL, 8,79 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora e aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Preparou-se uma solução de MeOH (50 mL), adicionou-se solução aquosa de HC1 a 1% (150 mL) a 0°C e agitou-se durante 30 minutos. Adicionou-se CH2C12 e separou-se duas fases. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se, concentrou-se, efectuou-se a co-evaporação com tolueno e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter a Cbz-amida (4,43 g, 70%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado.
Exemplo 26
Difenil-fosfonato 27: preparou-se uma solução de 26 (4,43 g, 5,59 mmol) e fenol (4,21 g, 44,72 mmol) em piridina (40 mL) , aqueceu-se até 70°C e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (4,62 g, 22,36 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 36 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Adicionou-se EtOAc e removeu-se por filtração o produto secundário, 1,3-diciclo-hexil-ureia. Concentrou-se o filtrado e dissolveu-se em CH3CN (20 mL) a 0°C. Tratou-se a 464 mistura com resina de permuta iónica 'DOWEX 50W x 8-400' e agitou-se durante 30 minutos a 0°C Removeu-se a resina por filtração e concentrou-se o filtrado. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (entre EtOAc/hexano a 2/1 e EtOAc) para se obter o difenil-fosfonato (2,11 g, 40%) com o aspecto de um sólido amarelo pálido.
Exemplo 27 Ácido monofosfónico 28: a uma solução de 27 (2,11 g, 2,24 mmol) em CH3CN (15 mL) a 0°C adicionou-se NaOH IN (5,59 mL, 5,59 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora. Adicionou-se resina de permuta iónica 'DOWEX 50W x 8-400' e agitou-se a mistura de reacção durante 30 minutos a 0°C. Removeu-se a resina por filtração, concentrou-se o filtrado e submeteu-se a co-evaporação com tolueno. Triturou-se o produto impuro com EtOAc/hexano (1/2) para se obter o ácido monofosfónico (1,75 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 28
Monofosfonamidato protegido com Cbz 29: preparou-se uma solução de 28 (1,54 g, 1,77 mmol) e cloridrato do éster isopropilico de L-alanina (2,38 g, 14,16 mmol) em piridina (15 mL) , aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (2,20 g, 10,62 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C de um dia para o outro e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e repartiu-se o residuo entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e NaHC03 saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. 465
Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o monofosfoamidato (0,70 g, 40%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado.
Exemplo 29
Monofosfoamidato 30a-b: a uma solução de 29 (0,70 g, 0,71 mmol) em EtOH (10 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (0,3 g) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 6 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma pequena camada de celite. Concentrou-se o filtrado e purificou-se os produtos impuros por cromatografia em coluna através de gel de silica (7%-10% de MeOH/CH2Cl2) para se obter os monoamidatos 30a (0,106 g, 18%, GS 77369, mistura diastereomérica a 1/1) com 0 aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7, 71 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73- -7,16 (m, 5H) , 7,10-6,98 9 m, 4H) t 6,61 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 5,67 (d, J=4, 8 Hz, 1H), 5,31-4, 91 (m, 2H), 4,44 (m, 2H), 4,20 (m, 1H) , 4,00-3,61 (m, 6H) , 3 ,18- 2,74 (m, 7H) , 1,86- -1,64 (m, 3H) , 1,38 (n4 3H) , 1, 20 (m, 6H), 0,93 (d, J=6, 6 Hz, 3H), 0,81 ' (d, J=6,6 Hz, 3H) r RMN- 31P (CDC13) Ô 19,1, 18; MS (ESI) 869 (M+Na) . 30b (0,200 g, 33%, GS 77425, mistura diastereomérica a 1/1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDCI3) δ 7,73 (dd, J=8,7 Hz, J=l| ,5 Hz, 2H) , 7,36 -7,16 (m, 5H), 7, 09 -7,00 (m, 4H), 6 ,53 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,66 (d, J=5, 4 Hz, 1H) , 5,06 -4,91 (m, 2H) , , 4,40 (m, 2H) , 4,20 (m, 1H), 4, 00- -3,60 (m, 6H) , 3 ,14 (m, 3H) , 3,00- -2, 65 (m, 6H) , 1,86- -1, 60 (m, 3H) , 1,35 (m, 3H) , , 1,20 (m, 9H), 0, 92 (d, J=6, 6 Hz r 3H), 0,87 (d, J= 6,6 Hz, 3H) ; RMN-31 p (CDCI3) δ 19, 0, 17, 9, M£ ; (ESI) 897 (M+Na).
Exemplo 30 Síntese de bisamidatos 32: preparou-se uma solução de ácido fosfónico 31 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do éster etílico de L-valina (108 mg, 0,60 mmol), dissolveu-se em piridina (5 mL) e destilou-se o solvente sob pressão reduzida a 40°C-60°C. Tratou-se o resíduo com uma solução de Ph3P (117 mg, 0,45 mmol) e dissulfureto de 2,2'-dipiridilo (98 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL) , seguindo-se a adição de N, N-diisopropiletilamina (0,1 mL, 0,60 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante dois dias. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna através de gel de sílica para se obter o bisamidato (73 mg, 53%, GS 17389) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,15
(d, J=8,1 Hz, 2 H) , 7, ,00 (d, J=8, 7 Hz, 2H), 6,86 (d, J= ‘8,1 Hz, 2H) , 5,66 (d, J= = 4,! 3 Hz , 1H), 5,05 (m, 1H) , 4, 95 (d, J=8, 7 Hz, 1H) , 4, 23- -4, 00 (m, 4H ,), 3,97- 3,68 (m, 11H), 3,39 -2,77 (m, 9H), 2, ,16 (m, 2H) , 1,82-1,60 (m, 3H) , 1, 31- CO T-1 T-1 (m, 6H) , 1,01- -o, 87 (m, 18H) ; RMN-31P (CDC13) δ 21 ,3; MS (ESI) 950 (M+Na).
Exemplo 31
Triflato 34: a uma solução de fenol 33 (2,00 g, 3,46 mmol) em THF (15 mL) e CH2C12 (5 mL) adicionou-se N-feniltrifluorometanossulfonimida (1,40 g, 3,92 mmol) e carbonato de césio (1,40 g, 3,92 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro e concentrou-se. Repartiu-se o produto impuro entre CH2C12 e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por 467 cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o triflato (2,09 g, 85%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 32
Aldeído 35: a uma suspensão de triflato 34 (1,45 g, 2,05 mmol) , acetato de paládio (II) (46 mg, 0,20 mmol) e 1,3- bis (difenilfosfino)-propano (84 mg, 0,2 mmol) em DMF (8 mL) , sob uma atmosfera de CO (balão), adicionou-se lentamente trietilamina (1,65 mL, 11,87 mmol) e trietilsilano (1,90 mL, 11,87 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até 70°C, sob uma atmosfera de CO (balão), e agitou-se de um dia para o outro. Concentrou-se o solvente sob pressão reduzida e repartiu-se entre CH2C12 e H20. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o aldeído (0,80 g, 66%). com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 33 Álcool benzílico substituído 36: a uma solução de aldeído 35 (0,80 g, 1,35 mmol) em THF (9 mL) e H20 (1 mL) a -10°C adicionou-se NaBH4 (0,13 g, 3,39 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 1 hora a -10°C e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em CH2C12, lavou-se com NaHS04, H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (6% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o álcool (0,56 g, 70%) com o aspecto de um sólido branco. 468
Exemplo 34
Brometo de benzilo substituído 37: a uma solução de álcool 36 (77 mg, 0,13 mmol) em THF (1 mL) e CH2C12 (1 mL) a 0°C adicionou-se trietilamina (0,027 mL, 0,20 mmol) e cloreto de metanossulfonilo (0,011 mL, 0,14 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 3 horas. Adicionou-se brometo de lítio (60 mg, 0,69 mmol) e agitou-se durante 45 minutos. Concentrou-se a mistura de reacção, repartiu-se o resíduo entre CH2C12 e H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (2% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o brometo (60 mg, 70%) .
Exemplo 35
Fosfonato de dietilo 38: preparou-se uma solução de brometo 37 (49 mg, 0,075 mmol) e fosfito de trietilo (0,13 mL, 0,75 mmol) em tolueno (1,5 mL), aqueceu-se até 120°C e agitou-se de um dia para o outro. Arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (6% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fosfonato de dietilo (35 mg, 66%, GS 191338) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,27-7,16 (m, 4H) , 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,66 (d, J=5,1 Hz, 1H), 5,00 (m, 2H) , 4,04-3, 73 (m, 13H) , 3,13-2,80 (m, 9H) , 1,82-1, 64 (m, 3H) , 1,25 (t, J=6,9 Hz, 6H), 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) Ô 26,4; MS (ESI) 735 (M+Na) . 469
Exemplo 36 N-terc-butoxicarbonil-O-benzil-L-serina 39: a uma solução de Boc-L-serina (15 g, 73,09 mmol) em DMF (300 mL) a 0°C adicionou-se NaH (6,43 g, 160,80 mmol, a 60% em óleo mineral) e agitou-se durante 1,5 horas a 0°C. Após a adição de brometo de benzilo (13,75 g, 80,40 mmol), aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e agitou-se de um dia para o outro. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo em H20. Repartiu-se o produto impuro entre H20 e Et20. Acidificou-se a fase aquosa até pH < 4, utilizando HC1 3N, e extraiu-se três vezes com EtOAc. Lavou-se a solução combinada de EtOAc com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se para se obter a N-terc-butoxicarbonil-O-benzil-L-serina (17,27 g, 80%) .
Exemplo 37
Diazocetona 40: a uma solução de N-terc-butoxicarbonil-O-benzil-L-serina 39 (10 g, 33,86 mmol) em THF anidro (120 mL) a -15°C adicionou-se 4-metilmorfolina (3,8 mL, 34,54 mmol), seguindo-se a adição lenta de cloroformiato de isobutilo (4,40 mL, 33,86 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 30 minutos e verteu-se diazometano (50 mmol, gerado a partir de 15 g Diazald de acordo com Aldrichimica Acta 1983, 16, 3) em éter (150 mL) sobre a solução de anidrido misto. Agitou-se a mistura de reacção durante 15 minutos, colocou-se depois em banho de gelo a 0°C e agitou-se durante 1 hora. Deixou-se a mistura de reacção aquecer até à temperatura ambiente e agitou-se de um dia para o outro. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com 470 água, NaHC03 saturado e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna (EtOAc/hexano) para se obter a diazocetona (7,50 g, 69%) com o aspecto de um óleo amarelo.
Exemplo 38
Clorocetona 41: a uma suspensão de diazocetona 40 (7,50 g, 23, 48 mmol) em éter (160 mL) a 0°C adicionou-se HC1 4N em dioxano (5,87 mL, 23,48 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora. Evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida para se obter a clorocetona, a qual foi utilizada directamente, sem mais purificação.
Exemplo 39
Cloroálcool 42: a uma solução de clorocetona 41 (7,70 g, 23, 48 mmol) em THF (90 mL) adicionou-se água (10 mL) e arrefeceu-se a solução até 0°C. Adicionou-se, gota a gota, uma solução de NaBH4 (2,67 g, 70,45 mmol) em água (4 mL) ao longo de um período de 10 minutos. Agitou-se a mistura durante 1 hora a 0°C e adicionou-se lentamente KHS04 saturado até pH<4, seguindo-se a adição de NaCl saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/4) para se obter o cloro álcool (6,20 g, 80%) sob a forma de uma mistura diastereomérica.
Exemplo 40
Epóxido 43: preparou-se uma solução de cloro álcool 42
(6,20 g, 18,79 mmol) em EtOH (150 mL) , tratou-se com KOH 471 Ο,71Μ (1,27 g, 22,55 mmol) e agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e água. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/6) para se obter o epóxido desejado 43 (2,79 g, 45%) e uma mistura de diastereómeros 44 (1,43 g, 23%) .
Exemplo 41
Sulfonamida 45: a uma suspensão de epóxido 43 (2,79 g, 8,46 mmol) em 2-propanol (30 mL) adicionou-se isobutilamina (8,40 mL, 84,60 mmol) e manteve-se a solução ao refluxo durante 1 hora. Evaporou-se a solução sob pressão reduzida, dissolveu-se o sólido impuro em CH2C12 (40 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (2,36 mL, 16,92 mmol), seguindo-se a adição de cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo (1,75 g, 8,46 mmol). Agitou-se a solução durante 40 minutos a 0°C, aqueceu-se até à temperatura ambiente e evaporou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. O produto impuro foi utilizado directamente, sem mais purificação.
Exemplo 42 Éter silílico 46: preparou-se uma solução de sulfonamida 45 (5,10 g, 8,46 mmol) em CH2C12 (50 mL) e tratou-se com trietilamina (4,7 mL, 33,82 mmol) e TMSOTf (3,88 mL, 16,91 472 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora e repartiu-se entre CH2CI2 e NaHC03 saturado. Extraiu-se a fase aquosa duas vezes com CH2C12, lavou-se os extractos combinados orgânicos com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (EtOAc/hexano a 1/6) para se obter o éter sililico (4,50 g, 84%) com o aspecto de um óleo espesso.
Exemplo 43 Álcool 47: a uma solução de éter sililico 46 (4,5 g, 7,14 mmol) em MeOH (50 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (0,5 g) .
Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 2 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o álcool (3,40 g, 85%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 44
Aldeido 48: a uma solução de álcool 47 (0,60 g, 1,07 mmol) em CH2C12 (6 mL) a 0°C adicionou-se reagente de Dess Martin (0,77 g, 1,82 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 3 horas e repartiu-se entre CH2C12 e NaHC03. Lavou-se a fase orgânica com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (EtOAc/hexano a 1/4) para se obter 0 aldeido (0,45 g, 75%) com o aspecto de um sólido amarelo pálido. 473
Exemplo 45
Sulfonamida 50: a uma suspensão de epóxido (2,00 g, 5,41 mmol) em 2-propanol (20 mL) adicionou-se amina 49 (4,03 g, 16,23 mmol) (composto preparado em três passos, partindo de 4-(aminometil)-piperidina, de acordo com Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001, 11, 1261). Aqueceu-se a mistura de reacção até 80°C e agitou-se durante 1 hora. Evaporou-se a solução sob pressão reduzida, dissolveu-se o sólido impuro em CH2CI2 (20 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (4,53 mL, 32,46 mmol), seguindo-se a adição de cloreto de 4-metoxibenzenossulfonilo (3,36 g, 16,23 mmol). Agitou-se a solução durante 40 minutos a 0°C, aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 1,5 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o residuo entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida (2,50 g, 59%).
Exemplo 46
Amina 51: preparou-se uma solução de sulfonamida 50 (2,50 g, 3,17 mmol) em CH2C12 (6 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (3 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 1,5 horas. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), água (2x) e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter 474 a amina (1,96 g, 90%), a qual foi utilizada directamente, sem mais purificação.
Exemplo 47
Carbamato 52: tratou-se uma solução de amina 51 (1,96 g, 2,85 mmol) em CH3CN (15 mL) a 0°C com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (0,84 g, 2,85 mmol, preparado tal como descrito por Ghosh et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 3278,) e 4-(dimetilamino)-piridina (0,70 g, 5,70 mmol). Depois de se agitar durante 2 horas a 0°C, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o residuo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), ácido cítrico a 5% (2x) e NaHC03 saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o carbamato (1,44 g, 60%) com o aspecto de um sólido branco.
Secção I de exemplos
Exemplo 1
Carbonato 2: a uma solução de (R)-(+)-3- hidroxitetrahidrofurano (1,23 g, 14 mmol) em CH2C12 (50 mL) adicionou-se trietilamina (2,9 mL, 21 mmol) e carbonato de bis(4-nitrofenilo) (4,7 g, 15,4 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 24 horas e repartiu-se entre CH2C12 e NaHC03 saturado, Secou-se a fase de CH2C12 com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 2/1) para se obter o 475 carbonato (2,3 g, 65%) com o aspecto de um óleo amarelo pálido, que solidificou em repouso.
Exemplo 2
Carbamato 3: a uma solução de 1 (0,385 g, 0,75 mmol) e 2 (0,210 g, 0,83 mmol) em CH3CN (7 mL) à temperatura ambiente adicionou-se N,N-diisopropiletilamina (0,16 mL, 0,90 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 44 horas. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Dissolveu-se o produto impuro em EtOAc, lavou-se com NaHC03 saturado, salmoura, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (EtOAc/hexano a 1/1) para se obter o carbamato (0,322 g, 69%) com o aspecto de um sólido branco: p.f. 98°C-100°C (não corrigido).
Exemplo 3
Fenol 4: a uma solução de 3 (0,31 g, 0,49 mmol) em EtOH (10 mL) e EtOAc (5 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (30 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 15 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o fenol (0,265 g) com um rendimento quantitativo.
Exemplo 4
Fosfonato de dietilo 5: a uma solução de fenol 4 (100 mg, 0,19 mmol) em THF (3 mL) adicionou-se CS2CO3 (124 mg, 0,38 mmol) e triflato (85 mg, 0,29 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 4 horas e evaporou- 476 se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (5% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o fosfonato de dietilo (63 mg, 49%, GS 16573) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CDCI3) δ 7,65 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,21 (d, J=8,7 Hz, 2H), 6,95 (d, J=9 Hz, 2H), 6,84 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5,06 (s largo, 1H), 4,80 (d, J=7,5 Hz, 1H), 4,19 (m, 6H), 3,83 (s, 3H) , 3,80-3,70 (m, 6H) , 3,09- 2,72 (m, 6H) , 2,00 (m, 1H) , 1,79 (m, 2H) , 1,32 (t, J=7,5
Hz, 6H) , 0,86 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,83 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P δ 17, 8 .
Exemplo 5
Dibenzil-fosfonato 6: a uma solução de fenol 4 (100 mg, 0,19 mmol) em THF (3 mL) adicionou-se CS2CO3 (137 mg, 0,42 mmol) e triflato (165 mg, 0,39 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 6 horas e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (5% de 2- propanol/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (130 mg, 84%, GS 16574) com 0 aspecto de um sólido branco: RMN-3H (CDCI3) δ 7,65 (d, J=9 Hz, 2H), 7,30 (m, 10H) , 7,08 (d, J=8,4 Hz, 2H), 6,94 (d, J=9 Hz, 2H) , 6,77 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,16-5,04 (m, 5H) , 4,80 (d, J=8,l Hz, 1H) , 4,16 (d, J=10,2 Hz, 2H), 3,82 (s, 3H), 3,75-3,71 (m, 6H), 3,10-2,72 477 (m, 6H), 2,00 (m, 1H) , 1,79 (m, 2H), 0,86 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,83 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 18,8.
Exemplo 6 Ácido fosfónico 7: a uma solução de 6 (66 mg, 0,08 mmol) em EtOH (3 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (12 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 15 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida e triturou-se com EtOAc para se obter o ácido fosfónico (40 mg, 78%, GS 16575) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 7
Carbonato 8: a uma solução de (S)-(+)-3- hidroxitetrahidrofurano (2 g, 22,7 mmol) em CH3CN (50 mL) adicionou-se trietilamina (6,75 mL, 48,4 mmol) e carbonato de N,N'-dissuccinimidilo (6,4 g, 25 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 5 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e H20. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc como eluente), seguindo-se a recristalização (EtOAc/hexano), para se obter o carbonato (2,3 g, 44%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 8
Carbamato 9: a uma solução de 1 (0,218 g, 0,42 mmol) e 8 (0,12 g, 0,53 mmol) em CH3CN (3 mL) à temperatura ambiente adicionou-se N,N-diisopropiletilamina (0,11 mL, 0,63 mmol). 478
Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas. Evaporou-se o solvente e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/1) para se obter o carbamato (0,176 g, 66%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 9
Fenol 10: a uma solução de 9 (0,176 g, 0,28 mmol) em EtOH (10 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 4 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o fenol (0,151 g, GS 10) com um rendimento quantitativo.
Exemplo 10
Fosfonato de dietilo 11: a uma solução de fenol 10 (60 mg, 0,11 mmol) em THF (3 mL) adicionou-se Cs2C03 (72 mg, 0,22 mmol) e triflato (66 mg, 0,22 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 4 horas e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (5% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o fosfonato de dietilo (38 mg, 49%, GS 11) com o aspecto de um sólido branco. 479
Secção J de exemplos
Exemplo 1
Triflato 1: a uma solução de A (4 g, 6,9 mmol) em THF (30 mL) e CH2CI2 (10 mL) adicionou-se CS2CO3 (2,7 g, 8 mmol) e N-feniltrifluorometanossulfonimida (2,8 g, 8,0 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo duas vezes entre CH2CI2 e salmoura saturada. Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio e utilizou-se na reacção subsequente sem mais purificação.
Exemplo 2
Aldeído 2: preparou-se uma solução de triflato anterior impuro 1 (~6,9 mmol) em DMF (20 mL) e desgaseificou-se (vácuo intenso durante 5 minutos, purga de árgon, repetir 3 vezes). A esta solução adicionou-se rapidamente Pd(0Ac)2 (120 mg, 266 μιηοΐ) e bis (difenilfosfino)-propano (dppp, 220 mg, 266 μιηοΐ) e aqueceu-se até 70°C. Nesta mistura de reacção introduziu-se rapidamente monóxido de carbono e agitou-se à temperatura ambiente sob uma pressão atmosférica de monóxido de carbono, seguindo-se a adição lenta de TEA (5,4 mL, 38 mmol) e trietilsilano (3 mL, 18 mmol). Agitou-se a mistura resultante a 70°C durante 16 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente, concentrou-se sob pressão reduzida e repartiu-se entre CH2C12 e salmoura saturada. Concentrou-se a fase orgânica sob pressão reduzida e purificou-se em coluna através de gel de sílica para se obter o aldeído 2 (2,1 g, 51%) com o aspecto de um sólido branco. 480
Exemplo 3
Compostos 3a-3e: Procedimento representativo, 3c. Preparou-se uma solução de aldeído 2 (0,35 g, 0,59 mmol), cloridrato do éster isopropílico de L-alanina (0,2 g, 1,18 mmol) e ácido acético glacial (0,21 g, 3,5 mmol) em 1,2-dicloroetano (10 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 16 horas, seguindo-se a adição de ciano-boro-hidreto de sódio (0,22 g, 3,5 mmol) e metanol (0,5 mL) . Agitou-se a solução resultante à temperatura ambiente durante uma hora. Lavou-se a mistura de reacção com uma solução de bicarbonato de sódio e salmoura saturada e submeteu-se a cromatografia através de gel de sílica para se obter 3c (0,17 g, 40%). (CDC13) : δ 7,72 (d, 2H), 7,26 (d, 2H), 7,20 (d, 2H) , 7,0 (d, 2H) , 5,65 (d, 1H), 4, 90-5,30 (m, 3H) , 3,53-4,0 (m sobreposição s, 13H), 3,31 (q, 1H), 2,70-3, 20 (m, 7H) , 1,50-1,85 (m, 3H) , 1,25-1,31 (m, 9H), 0,92 (d, 3H), 0,88 (d, 3H). MS: 706 (M+l).
Composto *1 R* Aminoácido 3 a Me Me Ala 3b Me Et Ala 3c Me iPr Ala 3d Mê Bn Ala 3e iPr Et Vai
Exemplo 4
Sulfonamida 1: a uma solução de amina impura A (1 g, 3 mmol) em CH2C12 adicionou-se TEA (0,6 g, 5,9 mmol) e cloreto de 3-metoxibenzenossulfonilo (0,6 g, 3 mmol). Agitou-se a solução resultante à temperatura ambiente durante 5 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. 481
Submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica para se obter a sulfonamida 1 (1,0 g, 67%).
Exemplo 5
Amina 2: tratou-se uma solução a 0°C de sulfonamida 1 (0,85 g, 1,6 mmol) em CH2C12 (40 mL) com BBr3 em CH2C12 (10 mL de solução 1M, 10 mmol). Agitou-se a solução a 0°C durante 10 minutos, depois agueceu-se até à temperatura ambiente e agitou-se durante 1,5 horas. Extinguiu-se a mistura de reacção com CH3OH, concentrou-se sob pressão reduzida e destilou-se azeotropicamente com CH3CN, três vezes. A amina impura 2 foi utilizada na reacção subsequente sem mais purificação.
Exemplo 6
Carbamato 3: preparou-se uma solução de amina impura 2 (0,83 mmol) em CH3CN (20 mL) e tratou-se com 4-nitrofenil-carbonato de (3R, 3aR, 6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (245 mg, 0,83 mmol, preparado tal como descrito por Ghosh et al., J. Med. Chem. 1996, 39, 3278,) e N,N- dimetilaminopiridina (202 mg, 1,7 mmol). Depois de se agitar durante 16 horas à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre CH2C12 e NaHC03 saturado, três vezes. Evaporou-se a fase orgânica sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica para se obter o carbamato 3 (150 mg, 33%) com o aspecto de um sólido.
Exemplo 7 482
Fosfonato de dietilo 4: a uma solução de carbamato 3(30 mg, 54 μιηοΐ) em THF (5 mL) adicionou-se CS2CO3 (54 mg, 164 μιηοΐ) e triflato # (33 mg, 109 μιηοΐ) . Depois de se agitar a mistura de reacção durante 30 minutos à temperatura ambiente, adicionou-se mais CS2CO3 (20 mg, 61 μιηοΐ) e triflato (15 mg, 50 μιηοΐ) e agitou-se a mistura durante mais 1 hora. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre CH2CI2 e água. Secou-se a fase orgânica (Na2S04) , filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica e purificou-se novamente por HPLC (50% de CH3CN-50% de H20 em coluna C18) para se obter o fosfonato de dietilo 4 (15 mg, 39%) . RMN-1]! (CDCI3) : Ô 7,45 (m, 3H) , 7,17-7,30 (m, 6H) , 5,64 (d, 1H) , 5,10 (d, 1H), 5,02 (q, 1H) , 4,36 (d, 2H) , 4,18-4,29 (2 q sobreposição, 4H) , 3, 60-3,98 (m, 7H) , 2,70-3,10 (m, 7H), 1,80-1,90 (m, 1H), 1,44-1,70 (m, 2H+H20), 1,38 (t, 6H),
0,94 (d, 3H), 0,90 (d, 3H) . RMN-31P (CDC13) : 18,7 ppm; MS (ESI) 699 (M+H).
Exemplo 8
Dibenzil-fosfonato 5: a uma solução de carbamato 3 (100 mg, 182 μπιοί) em THF (10 mL) adicionou-se CS2CO3 (180 mg, 550 μιηοΐ) e triflato do dibenzil-hidroximetil-fosfonato, secção A, esquema 2, composto 9 (150 mg, 360 μπιοί) . Depois de se agitar a mistura de reacção durante 1 hora à temperatura ambiente, Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre CH2C12 e água. Secou-se a fase orgânica (Na2SC>4) , filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC (50% 483 de CH3CN-50% de H20 em coluna C18) para se obter o dibenzil-fosfonato 5 (110 mg, 72%). ΕΜΝ-1!! (CDCI3) : δ 7,41 (d, 2H), 7,35 (s, 10H), 7,17-7,30 (m, 6H) , 7,09-7,11 (m, 1H) , 5,64 (d, 1H), 4,90-5,15 (m, 6H), 4,26 (d, 2H), 3,81- 3.95 (m, 4H), 3, 64-3,70 (m, 2H), 2,85-3,25 (m, 7H) , 1,80- 1.95 (m, 1H), 1,35-1,50 (m, 1H) , 0,94 (d, 3H) , 0,91 (d, 3H) . ΕΜΝ-^-31? (CDC13) δ 19,4 ppm; MS (ESI): 845 (M+Na) , 1666 (2M+Na).
Exemplo 9 Ácido fosfónico 6: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 5 (85 mg, 0,1 mmol), dissolveu-se em MeOH (10 mL) , tratou-se com Pd a 10%/C (40 mg) e agitou-se em ambiente de H2 (balão) de um dia para o outro. Purgou-se a mistura de reacção com N2 e removeu-se o catalisador por filtração através de celite. Evaporou-se, sob pressão reduzida, o filtrado para se obter ácido fosfónico 6 (67 mg, quantitativo). RMN-1]! (CD3OD) : 07,40-7,55 (m, 3H) , 7,10-7,35 (m, 6H) , 5,57 (d, 1H), 4,32 (d, 2H), 3,90-3,95 (m, 1H) , 3, 64-3, 78 (m, 5H) , 3,47 (m, 1H) , 2,85-3,31 (m, 5H) , 2,50-2,60 (m, 1H) , 2, 00-2,06 (m, 1H) , 1,46-1,60 (m,
1H) , 1,30-1,34 (m, 1H) , 0,9 (d, 3H) , 0,90 (d, 3H) . RMN-31P (CD3OD) : 16,60 ppm; MS (ESI): 641 (M-H) .
Exemplo 10
Sulfonamida 1: a uma solução de amina impura A (0,67 g, 2 mmol) em CH2C12 (50 mL) adicionou-se TEA (0,24 g, 24 mmol) e cloreto de 3-acetoxi-4-metoxibenzenossulfonilo impuro (0,58 g, 2,1 mmol, preparado tal como descrito por Kratzl et al., Monatsh. Chem. 1952, 83, 1042-1043), agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 4 horas e evaporou- 484 se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica para se obter a sulfonamida 1 (0,64 g, 54%). MS: 587 (M+Na), 1150 (2M+Na)
Fenol 2: tratou-se a sulfonamida 1 (0,64 g, 1,1 mmol) com NH3 saturado em MeOH (15 mL) à temperatura ambiente durante 15 minutos e depois evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo em coluna através de gel de sílica para se obter o fenol 2 (0,57 g, 96%).
Exemplo 11
Dibenzil-fosfonato 3a: a uma solução de fenol 2 (0,3 g, 0,57 mmol) em THF (8 mL) adicionou-se CS2CO3 (0,55 g, 1,7 mmol) e triflato do dibenzil-hidroximetil-fosfonato (0,5 g, 1,1 mmol). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 1 hora à temperatura ambiente, extinguiu-se a mistura de reacção com água e repartiu-se entre CH2C12 e solução aquosa saturada de cloreto de amónio. Secou-se a fase orgânica (Na2S04), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (40% de EtOAc/60% hexano) para se obter o dibenzil-fosfonato 3a (0,36 g, 82%). ΕΜΝ^Η (CDC13) : 8l,20- 7,40 (m, 17H) , 6,91 (d, 1H), 5,10-5,25 (2 q (ab) sobreposição, 4H), 4,58-4 ,70 (m, 1H), 4,34 (d, 2H) , 3, 66- 3,87 (m+s, 5H), 2,85-3,25 (m, LO \—1 1 0 OO \—1 1H) , 1,58 (s, 9H), 0,86-0,92 (2d, 6H).
Exemplo 12
Fosfonato de dietilo 3b: a uma solução de fenol 2 (0,15 g, 0,28 mmol) em THF (4 mL) adicionou-se Cs2C03 (0,3 g, 0,92 mmol) e triflato do hidroximetil-fosfonato de dietilo (0,4 485 g, 1,3 mmol). Depois de se agitar a mistura de reacção durante 1 hora à temperatura ambiente, extinguiu-se a mistura de reacção com água e repartiu-se entre CH2C12 e Solução aquosa saturada de NaHC03. Secou-se a fase orgânica (Na2SC>4), filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (1% de CH30H-CH2C12) para se obter o fosfonato de dietilo 3b (0,14 g, 73%).
Exemplo 13
Amina 4a: tratou-se a uma solução de 3a (0,35 g, 0,44 mmol) em CH2C12 (10 mL) com TFA (0,75 g, 6,6 mmol) à temperatura ambiente durante 2 horas. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida, destilou-se azeotropicamente com CH3CN, duas vezes, e secou-se para se obter amina impura 4a. Este composto 4a impuro foi utilizado na reacção subsequente sem mais purificação.
Exemplo 14
Amina 4b: tratou-se a uma solução de 3b (60 mg, 89 μιηοΐ) em CH2C12 (1 mL) com TFA (0,1 mL, 1,2 mmol) à temperatura ambiente durante 2 horas. Evaporou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida, destilou-se azeotropicamente com CH3CN, duas vezes, e secou-se para se obter amina impura 4b (68 mg). Este composto 4b impuro foi utilizado na reacção subsequente sem mais purificação.
Exemplo 15
Carbamato 5a: submeteu-se uma solução, arrefecida com gelo, de amina impura 4a (0,44 mmol) em CH3CN (10 mL) a tratamento com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa- 486 hidrofuro[2,3-b]furano-2-ilo (120 mg, 0,4 mmol) e N,N-dimetilaminopiridina (DMAP, 110 mg, 0,88 mmol). Decorridas 4 horas, adicionou-se mais DMAP (0,55 g, 4,4 mmol) à mistura de reacçâo. Depois de se agitar durante 1,5 horas à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre CH2C12 e NaHC03 saturado. Evaporou-se a fase orgânica sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica para se obter o carbamato impuro 5a (220 mg) que continha algum p-nitrofenol. Purificou-se novamente por HPLC (50% de CH3CN/50% de H20) o composto 5a impuro para se obter o carbamato puro 5a (176 mg, 46%, 2 passos) . RMN-1]! (CDC13) : δ 7,20-7,36 (m, 1H), 6,94 (d, 1H), 5,64 (d, 1H) , 5,10-5,25 (2 q(ab) sobreposição, 4H) , 4,90-5,10 (m, 1H) , 4,90 (d, 1H), 4,34 (d, 2H), 3,82-3,91 (m+s, 6H), 3,63-3,70 (m, 3H), 2,79-3,30 (m, 7H), 1,80-1,90 (m, 1H), 1,40-1,50 (m, 1H) , 0,94 (d, 3H) , 0,89 (d, 3H) . RMN-31P (CDC13) : 17,2 ppm.
Exemplo 16
Carbamato 5b: submeteu-se uma solução, arrefecida com gelo, da amina impura 4b (89 μπιοί)) em CH3CN (5 mL) a tratamento com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro [2,3-b] furano-2-ilo (26 mg, 89 μιηοΐ) e N,N-dimetilaminopiridina (DMAP, 22 mg, 0,17 mmol). Ao fim de 1 hora a 0°C, adicionou-se mais DMAP (10 mg. 82 μιηοΐ) à mistura de reacção. Depois de se agitar durante 2 horas à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre CH2C12 e NaHC03 saturado. Evaporou-se a fase orgânica sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC (coluna C18, 45% 487 de CH3CN/55% de H20) para se obter o carbamato puro 5b (18,8 mg, 29%, 3 passos). RMN-1]! (CDC13) : δ 7,38 (d, 2H), 7,20-7,36 (m, 6H), 7,0 (d, 1H), 5,64 (d, 1H), 4,96-5,03 (m, 2H) , 4,39 (d, 2H) , 4,20-4,31 (2q sobreposição, 4H) 3,80 — 4,00 (sobreposição de s com m, 7H) , 3, 60-3,73 (m, 2H) , 3, 64-3,70 (m, 2H) , 2,85-3, 30 (m, 7H) , 1, 80-1, 95 (m, 1H) , 1,55-1,75 (m, 1H), 1,35-1,50 (sobreposição de s com m, 7H), 0,94 (d, 3H), 0,88 (d, 3H) . RMN-31P (CDC13) : 18,1 ppm.
Exemplo 17 Ácido fosfónico 6: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 5a (50 mg, 58 μιηοΐ) , dissolveu-se em MeOH (5 mL) e EtOAc (3 mL), tratou-se com Pd a 10%/C (25 mg) e agitou-se à temperatura ambiente em ambiente de H2 (balão), durante 8 horas. Removeu-se o catalisador por filtração. Concentrou-se o filtrado, dissolveu-se novamente em MeOH (5 mL), tratou-se com Pd a 10%/C (25 mg) e agitou-se à temperatura ambiente, em ambiente de H2 (balão), de um dia para o outro. Removeu-se o catalisador por filtração. Evaporou-se, sob pressão reduzida, o filtrado para se obter ácido fosfónico 6 (38 mg, quantitativo) . RMN-1H (CD3OD) : δ 7,42 (m, 1H), 7,36 (s, 1H) , 7,10-7,25 (m, 6H) , 5,58 7 (d, 1H) , 4,32 (d, 2H), 3,90 (s, 3H) , 3, 60-3, 80 (m, 6H) , 3,38 (d, 1H) , 2,85-3, 25 (m, 5H) , 2,50-2,60 (m, 1H) , 1,95-2,06 (m, 1H), 1,46-1, 60 (m, 1H) , 1,30-1,40 (m, 1H) , 0,93 (d, 3H) , 0,89 (d, 3H) . RMN-31P (CD3OD) : 14,8 ppm; MS (ESI): 671 (M-H).
Exemplo 18
Amina 7: tratou-se uma solução, a 0°C, de fosfonato de dietilo 3b (80 mg, 0,118 mmol) em CH2C12 com BBr3 em CH2C12 488 (0,1 mL de solução 1M, 1 mmol) . Agitou-se a solução a 0°C 10 minutos, depois aqueceu-se até à temperatura ambiente e agitou-se durante 3 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida. Dissolveu-se o residuo novamente em CH2CI2 (que continha um pouco de CH3OH), concentrou-se e destilou-se azeotropicamente com CH3CN, três vezes. A amina impura 7 foi utilizada na reacção subsequente sem mais purificação.
Exemplo 19
Carbamato 8: submeteu-se uma solução, arrefecida com gelo, da amina impura 7 (0,118 mmol) em CH3CN (5 mL) a tratamento com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (35 mg, 0,118 mmol) e N,N-dimetilaminopiridina (29 mg, 0,24 mmol) e aqueceu-se até à temperatura ambiente. Depois de se agitar durante 1 hora à temperatura ambiente, adicionou-se mais DMAP (20 mg, 0,16 mmol) à mistura de reacção. Depois de se agitar durante 2 horas à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o residuo entre CH2C12 e NaHC03 saturado, Evaporou-se a fase orgânica sob pressão reduzida. Purificou-se o residuo por HPLC em coluna C18 (CH3CN-55% de H20) para se obter o carbamato desejado 8 (11,4 mg, 13,4%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado. RMN-1]! (CDCI3) : δ 7,20- 7,40 (m, 7H) , 7, ,00 (d, 1H) , 5,64 (d, 1H) , 5 ,00-5, 31 (m, 2H) , 4, 35 (d, 2H) f 4,19- 4,30 (2q sobreposição, 4H), 3, co 0 1 ,00 (m, 4H) , 3, 68- 3,74 (m, 2H) , 3,08-3, 20 (m, 3H), 2, ,75-3 ,00 (m, 4H) , 1, .80- -1, 90 (m, 1H), 1,55-1, 75 (m, 1H), 1 ,38 (t, 6H) , 0, 91 (2d sobreposição, 6H) . RMN-31P (CD3OD) : 819,5 ppm. •k -k -k 489
Secção K de exemplos
Exemplo 1
Monofenil-monolactato 3: preparou-se uma mistura de monoácido 1 (0,500 g, 0,7 mmol), álcool 2 (0,276 g, 2,09 mmol) e diciclo-hexilcarbodiimida (0,431 g, 2,09 mmol) em piridina anidra (4 mL) introduziu-se em banho de óleo a 70°C e aqueceu-se durante duas horas. Monitorizou-se a reacção por análise por TLC (SÍO2, 70% de acetato de etilo em hexanos como eluente, Fr do produto = 0,68, visualização por UV). Arrefeceu-se o conteúdo da mistura de reacção até à temperatura ambiente com o auxilio de um banho de arrefecimento e diluiu-se com diclorometano (25 mL) . A análise por TLC pode mostrar a presença de material de partida. Filtrou-se a mistura de reacção diluída para se remover os sólidos. Depois arrefeceu-se o filtrado até 0°C e introduziu-se HC1 0,1N (10 mL) . Agitou-se a mistura, de pH = 4, durante 10 minutos e verteu-se funil de separação para deixar separar as fases. Recolheu-se a fase orgânica inferior e secou-se sobre sulfato de sódio. Removeu-se por filtração o agente de secagem e concentrou-se o filtrado até se obter um óleo, utilizando um evaporador rotativo, (banho de aquecimento <30°C) . Purificou-se o óleo impuro sobre gel de sílica pré-tratado (desactivado utilizando 10% de metanol em diclorometano, seguindo-se o enxaguamento com 60% de acetato de etilo em diclorometano). Efectuou-se a eluição do produto com 60% de acetato de etilo em diclorometano para se obter o produto monofenil-monolactato 3 com o aspecto de uma espuma branca (0,497 g, rendimento de 86%). ΒΜΝ-1^ (CDC13) 0 7,75 (d, 2H) , 7,40-7,00 (m, 14H) , 5,65 (d, 1H) , 5,20-4,90 (m, 4H) , 4,70 (d, 1H) , 4,55-4,50 490 (m, 11H), 4,00-3, 80 (m, 4H), 3, 80-3, 60 (m, 3H) , 3,25-2,75 (m, 7H) , 1,50 (d, 3H) , 1, 30-1,20 (m, 7H) , 0,95 (d, 3H) , 0,85 (d, 3H) . RMN-31P (CDCla) δ 16,2, 13,9.
Exemplo 2
Monofenil-monoamidato 5: preparou-se uma mistura de monoácido 1 (0,500 g, 0,70 mmol), cloridrato de amina 4 (0,467 g, 2,78 mmol) e diciclo-hexilcarbodiimida (0,862 g, 4,18 mmol) em piridina anidra (8 mL) introduziu-se em banho de óleo a 60°C e aqueceu-se durante uma hora (a esta temperatura, o produto degrada-se se prolongarmos o aquecimento por mais tempo). Monitorizou-se a reacção por análise por TLC (Si02, 70% de acetato de etilo em hexanos como eluente, Fr do produto=0,39, visualização por UV) . Arrefeceu-se o conteúdo até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo (15 mL) para fazer precipitar um sólido branco. Filtrou-se a mistura para remover os sólidos e concentrou-se o filtrado, utilizando um evaporador rotativo, para se obter um óleo. Diluiu-se o óleo com diclorometano (20 mL) e lavou-se com HC1 0,1N (2x20 mL), água (1x20 mL) e bicarbonato de sódio diluído (1x20 mL). Secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se para se obter um óleo, utilizando um evaporador rotativo. Dissolveu-se o óleo impuro em diclorometano (10 mL) . Introduziu-se hexano lentamente na solução agitada, até ficar turva. Agitou-se a mistura turva durante alguns minutos até aa análise por TLC demonstrar que a fase de diclorometano/hexano não continha nenhum produto. Decantou-se a fase de diclorometano/hexanos, purificou-se melhor o sólido através de gel de sílica, em primeiro lugar, pré-tratada com 10% de 491 metanol em acetato de etilo e depois enxaguada com 50% de acetato de etilo em hexanos. Efectuou-se a eluição do produto 5 com 50% de acetato de etilo em hexanos para se obter uma espuma branca (0,255 g, rendimento de 44%) após a remoção dos solventes. RMN-1H (CDCI3) δ 7,75 (d, 2H), 7,40- 7,15 (m, 10H), 7,15- -7, 00 (t, 2H), 5, 65 (d, 1H), 5,10- •4,90 (m, 3H), 4,50-4,35 (m, , 2H), 4,25- -4,10 (m, 1H) , 4,00- 3, 60 (m, 8H) , 3,20-2,75 (m , 7H) , 1,40- -1,20 (m, 1H) , 0,95 (d, 3H) , 0,85 (d, 3H) . RMN-31P (CDC13) δΐ9,1, 18,0.
Exemplo 3
Bisamidato 8: preparou-se uma solução de trifenilfosfina (1,71 g, 6,54 mmol) e aldrithiol (1,44 g, 6,54 mmol) em piridina anidra (5 mL), agitada pelo menos durante 20 minutos à temperatura ambiente, e introduziu-se numa solução de diácido 6 (1,20 g, 1,87 mmol) e cloridrato de amina 7 (1,30 g, 7,47 mmol) em piridina anidra (10 mL) .
Depois adicionou-se diisopropiletilamina (0,97 g, 7,48 mmol) a esta solução combinada e agitou-se o conteúdo à temperatura ambiente durante 20 horas. Monitorizou-se a reacção por análise por TLC (Si02, 5:5:1 acetato de etilo/hexanos/metanol como eluente, Fr do produto=0,29, visualização por UV) . Concentrou-se a mistura de reacção, utilizando um evaporador rotativo, e dissolveu-se em diclorometano (50 mL). Introduziu-se salmoura (25 mL) para lavar a fase orgânica. Extraiu-se novamente a fase aguosa com diclorometano (1x50 mL) . Secou-se as fases orgânicas combinadas sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se, utilizando um evaporador rotativo, para se obter um óleo. Purificou-se o óleo impuro através de gel de sílica, utilizando 4% de isopropanol em diclorometano como eluente. 492
As fracções combinadas que contêm o produto podem estar contaminadas com amina residual. Nesse caso, concentrou-se as frcções, utilizando um evaporador rotativo, e purificou-se novamente por cromatografia através de gel de sílica, utilizando um gradiente entre acetato de etilo/hexanos a 1:1 e solução de acetato de etilo/hexanos/metanol a 5:5:1 como eluente, para se obter o produto 8 com o aspecto de uma espuma (0,500 g, rendimento de 30%).
Exemplo 4
Diácido 6: numa solução de dibenzil-fosfonato 9 (8,0 g, 9,72 mmol) em etanol (160 mL) e acetato de etilo (65 mL), sob uma atmosfera de azoto e à temperatura ambiente, introduziu-se Pd a 10%/C (1,60 g, 20% em peso). Agitou-se a mistura, evacuou-se sob uma pressão hipobárica e purgou-se várias vezes com hidrogénio. Depois colocou-se o conteúdo em ambiente de hidrogénio, à pressão atmosférica, utilizando um balão. Monitorizou-se a reacção por análise por TLC (Si02, diclorometano/metanol/hidróxido de amónio a 7:2,5:0,5 como eluente, Fr do produto=0,05, visualização por UV) e ao fim de 4 a 5 horas considerou-se completa. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite para se remover o Pd/C e enxaguou-se a pasta de filtração com uma mistura de etanol/acetato de etilo (50 mL) . Concentrou-se o filtrado por evaporação rotativa, seguindo-se várias operações de co-evaporação, utilizando acetato de etilo (3x50 mL) para se remover o etanol. O diácido 6 semi-sólido, isento de etanol, foi utilizado no passo subsequente, sem mais purificação.
Exemplo 5 493
Difenil-fosfonato 10: numa solução de diácido 6 (5,6 g, 8,71 mmol) em piridina (58 mL) à temperatura ambiente introduziu-se fenol (5,95 g, 63,1 mmol). A esta mistura, sob agitação, adicionou-se diciclo-hexilcarbodiimida (7,45 g, 36,0 mmol). Colocou-se a mistura amarela e turva resultante em banho de óleo a 70°C-80°C. Monitorizou-se a reacção por análise por TLC (Si02, diclorometano/metanol/hidróxido de amónio a 7:2,5:0,5 como eluente, Fr do diácido =0,05, visualização por UV do desaparecimento de material de partida. Si02, 60% de acetato de etilo em hexanos como eluente, Fr do difenil = 0,40, visualização por UV) e considerou-se completa ao fim de 2 horas. À mistura de reacção adicionou-se acetato de isopropilo (60 mL) para se obter um precipitado branco. Filtrou-se a pasta através de uma camada de celite para se remover o precipitado branco e enxaguou-se a pasta de filtração com acetato de isopropilo (25 mL) . Concentrou-se o filtrado utilizando um evaporador rotativo. Ao óleo amarelo resultante adicionou-se uma solução previamente misturada de água (58 mL) e HC1 IN (55 mL) e depois acetato de isopropilo (145 mL). Agitou-se a mistura durante uma hora em banho de gelo. Depois da separação das fases, extraiu-se novamente a fase aquosa com acetato de etilo (2x50 mL) . Secou-se as fases orgânicas combinadas sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se utilizando um evaporador rotativo. Purificou-se o óleo impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica, utilizando 50% de acetato de etilo em hexanos como eluente, para se obter o produto 10 com o aspecto de uma espuma branca (3,52 g, rendimento de 51%). ΡΜΝ-1!! (CDC13) δ 7,75 (d, 2H), 7, 40-7,20 (m, 15H) , 7,10 (d, 2H) , 5,65 (d, 1H) , 494 5,10-4,90 (m, 2H) , 4,65 (d, 2H), 4,00-3, 80 (m, 4H), 3,75-3,65 (m, 3H), 3,25-2,75 (m, 7H), 1,90-1,75 (m, 1H), 1,70-1,60 (m, 1H), 1,50-140 (m, 1H) , 0,90 (d, 3H) , 0,85 (d, 3H) . RMN-31P (CDC13) δ 10, 9.
Exemplo 6
Monofenilo 1: a uma solução de difenilo 10 (3,40 g, 4,28 mmol) em acetonitrilo (170 mL) a 0°C adicionou-se hidróxido de sódio IN (4,28 mL). Monitorizou-se a reacção por análise por TLC (Si02, diclorometano/metanol/hidróxido de amónio a 7:2,5:0,5 como eluente, Fr do difenilo = 0,65, visualização por UV do desaparecimento de material de partida. Fr do produto monofenilo = 0,80, visualização por UV). Adicionou-se mais NaOH IN (se necessário) até se considerar que a reacção estava completa. Ao conteúdo da mistura de reacção a 0°C adicionou-se Dowex H+ ('Dowex 50WX8-200') (4,42 g) e agitou-se durante 30 minutos, período esse ao fim do qual o pH da mistura atingiu o valor de 1 (monitorizou-se por papel de pH). Filtrou-se a mistura para se remover a resina Dowex e concentrou-se o filtrado por evaporação rotativa (banho de água <40°C). Efectuou-se a co-evaporação da solução resultante com tolueno para se remover a água (3x50 mL) . Dissolveu-se a espuma branca em acetato de etilo (8 mL), seguindo-se a adição lenta de hexanos (16 mL) ao longo de 30 minutos para induzir a precipitação. Adicionou-se uma solução previamente misturada de hexanos/acetato de etilo a 2:1 (39 mL) ao material precipitado e agitou-se. Filtrou-se o produto 1, enxaguou-se com uma solução previamente misturada de hexanos/acetato de etilo a 2:1 (75 mL) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um pó branco (2,84 g, rendimento de 92%). RMN-1]! (CD3OD) 6 7,80 495 (d, 2H) , O -7,30 (m, ; 2H) , 7,20 -7,15 (m, 11H) , 5,55 (d, 1H) , 4,50 (d, 2H) , 3,95- -3,85 1 (m, 1H), 3,80 -3,60 (m, 5H) , 3,45 (bd, 1H) , 3,25- -3,15 (m, 2H) , 3,00-2,80 (m, 3H), 2 , 60- 2,45 (m, 1H) , 2, ΙΟ 1,95 (m, 2H) , 1,85-1,60 (m, 2H), 1 , 50- 1,40 (m, 1H) , Ι,40- -1,30 (m, 1H) , 0,95 (d, 3H) , 0,85 (d, 3H) . RMN- _31p (CDC1; j) δ 13, 8 . 0 produto monofenilo 1 é sensível a gel de sílica. Ao contactar com gel de sílica o produto 1 é convertido num composto desconhecido com um desvio químico de 8 ppm no espectro de RMN-31P. No entanto, o produto monofenilo 1 desejado pode ser regenerado por tratamento do composto desconhecido com NaOH 2,5M em acetonitrilo a 0°C durante uma hora, seguindo-se o tratamento com Dowex H+, conforme descrito antes.
Exemplo 7
Dibenzil-fosfonato 9: a uma solução de fenol 11 (6,45 g, 11,8 mmol) em tetrahidrofurano (161 mL) à temperatura ambiente adicionou-se reagente triflato 12 (6,48 g, 15,3 mmol). Adicionou-se carbonato de césio (11,5 g, 35,3 mmol), agitou-se a mistura e monitorizou-se por análise por TLC (Si02, 5% de metanol em diclorometano como eluente, Fr do produto dibenzilo = 0,26, visualização por UV ou contrastação com ninidrina e aquecimento). Adicionou-se mais CS2CO3 até se considerar que a reacção estava completa. Ao conteúdo da mistura de reacção adicionou-se água (160 mL) e extraiu-se a mistura com acetato de etilo (2x160 mL). Secou-se a fase orgânica combinada sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se, utilizando um evaporador rotativo, para se obter um óleo viscoso. Purificou-se 0 óleo impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica, utilizando um gradiente entre 496 100% de diclorometano e 1% de metanol em diclorometano, para se obter o produto 9 com o aspecto de uma espuma branca (8,68 g, rendimento de 90%). ΚΜΝ-1!! (CDCI3) 01,15 (d, 2H) , 7, 40-7,20 (m, 16H) , 6,95 (d, 2H) , 5,65 (d, 1H), 5,20-4, 90 (m, 6H) , 4,25 (d, 2H), 4,00-3, 80 (m, 4H), 3,75- 3,65 (m, 3H), 3,20-2,75 (m, 7H), 1,90-1,75 (m, 1H), 1,30- 1,20 (m, 1H), 0,90 (d, 3H) , 0,85 (d, 3H) . RMN-31P (CDC13) δ 19,1.
Exemplo 7a
Hidroxifenilsulfonamida 14: a uma solução de metoxifenilsulfonamida 13 (35,9 g, 70,8 mmol) em diclorometano (3,5 L) a 0°C adicionou-se tribrometo de boro (1M em DCM, 40,1 mL, 425 mmol). Deixou-se o conteúdo da mistura de reacção aquecer até à temperatura ambiente, agitou-se durante duas horas e monitorizou-se por análise por TLC (S1O2, 10% metanol em diclorometano como eluente,
Fr do produto dibenzilo = 0,16, visualização por UV) . Ao conteúdo a 0°C adicionou-se lentamente óxido de propileno (82 g, 1,42 mmol). Adicionou-se metanol (200 mL) e concentrou-se a mistura de reacção, utilizando um evaporador rotativo, para se obter um óleo viscoso. Purificou-se a mistura de produtos impuros por cromatografia em coluna através de gel de sílica, utilizando 10% de metanol em diclorometano, para se obter o produto 14 com o aspecto de uma espuma (22 g, rendimento de 80%) . RMN- (DMSO) δ 7, 60 (d, 2H) , 7,30- -7,20 (m, 5H), 6,95 (d, 2H), 3,90-3,75 (m, 1H), 3,45- -3,20 (m, 5H) , 3,00- •2,55 (m, 5H), 2,50-2,40 (m, 1H) , 1,95- -1,85 (m, 1H) , 0,85 (d, 3H) , 0,80 (d, 3H). 497
Exemplo 8
Carbamato de cisfurano 16: a uma solução de amina 14 (20,4 g, 52,0 mmol) em acetonitrilo (600 mL) à temperatura ambiente adicionou-se dimetilaminopiridina (13,4 g, 109 mmol) e depois reagente p-nitrofenilcarbonato de cisfurano 15 (14,6 g, 49,5 mmol). Agitou-se a solução resultante à temperatura ambiente pelo menos durante 48 horas e monitorizou-se por análise por TLC (Si02, 10% metanol em diclorometano como eluente, Fr do produto cisfurano = 0,34, visualização por UV) . Concentrou-se a mistura de reacção, utilizando um evaporador rotativo. Purificou-se a mistura de produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica, utilizando um gradiente entre 60% de acetato de etilo em hexanos e 70% de acetato de etilo em hexanos, para se obter o produto 16 com o aspecto de um sólido (18,2 g, rendimento de 64%). RMN-1H (DMSO) δ 10,4 (sl, 1H), 7,60 (d, 211), 7,30-7,10 (m, 6H) , 6,95 (d, 2H) , 5,50 (d, 1H), 4,85 (m, 1H) , 3,85 (m, 11H) , 3,70 (m, 1H) , 3,65-3,50 (m, 4H) , 3,30 (d, 1H), 3,05-2,95 (m, 2H) , 2,80-2,65 (m, 3H) , 2,50-2,40 (m, 1H) , 2,00-1, 90 (m, 1H) , 1,45-1,20 (m, 2H) , 0,85 (d, 3H), 0,80 (d, 3H).
Secção L de exemplos
Exemplo 1
Monobenzil-fosfonato 2. Dissolve-se uma solução de dibenzil-fosfonato 1 (150 mg, 0, 175 mmol) em tolueno (1 mL) , tratou-se com DABCO (20 mg, 0,178 mmol) e manteve-se ao refluxo, sob uma atmosfera de N2 (balão), durante 3 horas. Removeu-se o solvente e dissolveu-se o resíduo em HC1 aquoso (5%) . Extraiu-se a fase aquosa com acetato de 498 etilo e secou-se a fase orgânica sobre sulfato de sódio. Após a evaporação obteve-se o monobenzil-fosfonato 2 (107 mg, 80%) com o aspecto de um pó branco. RMN-1]! (CD3OD) δ 7,75 (d, J=5,4 Hz, 2H) , 7,42-7,31 (m, 5H) 7,16 (d, J=5,4 Hz, 2H) , 7,01 (d, J=5,4 Hz, 2H) , 6,86 (d, J=5,4 Hz, 2H) , 5,55 (d, J=3,3 Hz, 1H), 5,14 (d, J=5,l Hz, 2H) , 4,91 (m, 1H) , 4,24-3, 66 (m, sobreposição s, 11H), 3,45 (m, 2H), 3,14-2,82 (m, 6H) , 2,49 (m, 1H), 2,01 (m, 1H), 1,51-1,34 (m, 2H) , 0,92 (d, J=3,9 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=3,9 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD30D) δ 20,5; MS (ESI) 761 (M-H) .
Exemplo 2
Monobenzil-fosfonato de etilo 3. A uma solução de
monobenzil-fosfonato 2 (100 mg, 0,13 mmol) em THF anidro (5 mL) , à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se Ph3P (136 mg, 0,52 mmol) e etanol (30 μΐι, 0,52 mmol). Arrefeceu-se até 0°C e depois adicionou-se DEAD (78 μίν 0,52 mmol). Agitou-se a mistura durante 20 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (entre 10% e 30% de acetato de etilo/hexano) para se obter o monobenzil-fosfonato de etilo 3 (66 mg, 64%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDC13) 7,70 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,43-7,34 (m, 5H) 7,14 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,84 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5,56 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,19 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,00 (m, 2H), 4,22-3, 67 (m sobreposição s, 13H), 3,18-2,76 (m, 7H) , 1,82-1,54 (m, 3H) , 1,33 (t, J=7,0 Hz, 3H) , 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6, 6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19,8; MS (ESI) 813 (M+Na) . 499
Exemplo 3
Monoetil-fosfonato 4. Dissolveu-se uma solução de monobenzil-fosfonato de etilo 3 (60 mg) em EtOAc (2 mL) , tratou-se com Pd a 10%/C (6 mg) e agitou-se em ambiente de H2 (balão) durante 2 horas. Removeu-se o catalisador por filtração através de celite. Evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida, triturou-se o resíduo com éter e recolheu-se o sólido por filtração para se obter o monoetil-fosfonato 4 (50 mg, 94%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1]! (CD3OD) 7,76 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,18 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,89 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5,58 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,90 (m, H), 4,22-3,67 (m sobreposição s, 13H), 3,18-2,50 (m, 7H) , 1,98 (m, 1H) , 1,56 (m, 2H) , 1,33 (t, J=6,9 Hz, 3H) , 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=6, 6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 18, 7; MS (ESI) 700 (M-H).
Exemplo 4
Monofenil-fosfonato de etilo 5. A uma solução de ácido fosfónico 11 (800 mg, 1,19 mmol) e fenol (1,12 g, 11,9 mmol) em piridina (8 11L) adicionou-se etanol (69 μΐ^ 1,19 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (1 g, 4,8 mmol). Agitou-se a solução a 70°C durante 2 horas. Arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente, depois diluiu-se com acetato de etilo (10 mL) e filtrou-se. Evaporou-se, sob pressão reduzida, o filtrado para se remover a piridina. Dissolveu-se o resíduo em acetato de etilo, separou-se a fase orgânica e lavou-se com salmoura, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se.
Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de 500 sílica para se obter o monofenil-fosfonato de etilo 5 (600 mg, 65%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDCI3) 7,72 (d, J=9 Hz, 2H), 7,36-7,18 (m, 5H), 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,98 (d, J=9 Hz, 2H) , 6,87 (d, J=8,7 Hz, 2H), 5,64 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,00 (m, 2H) , 4,34 (m, 4H) , 3, 94-3, 67 (m sobreposição s, 9H), 3,18-2,77 (m, 7H), 1,82-1,54 (m, 3H), 1,36 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=6, 6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 16,1; MS (ESI) 799 (M+Na) .
Exemplo 5
Sulfonamida 6. A uma suspensão de epóxido 5 (3 g, 8,12 mmol) em 2-propanol (30 mL) adicionou-se isobutilamina (8 mL, 81,2 mmol) e agitou-se a solução a 80°C durante 1 hora. Evaporou-se a solução sob pressão reduzida, dissolveu-se o sólido impuro em CH2C12 (40 mL) e após o arrefecimento até 0°C. Adicionou-se TEA (2,3 mL, 16,3 mmol), seguindo-se a adição de cloreto de 4-nitrobenzenossulfonilo (1,8 g, 8,13 mmol) em CH2C12 (5 mL), agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C, aqueceu-se até à temperatura ambiente e evaporou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Deixou-se o produto impuro recristalizar a partir de EtOAc/hexano para se obter a sulfonamida 6 (4,6 g, 91%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado. MS (ESI) 650 (M+Na).
Exemplo 6
Fenol 7. Preparou-se uma solução de sulfonamida 6 (4,5 g, 50 mL). Agitou-se a solução a 0°C até à 7,1 mmol) em CH2C12 (50 mL) a 0°C e tratou-se com BBr3 (1M em CH2C12, 501 temperatura ambiente durante 48 horas. Adicionou-se cuidadosamente CH3OH (10 mL). Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (10% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fenol 7 (2,5 g, 80%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado. MS (ESI) 528 (M+H).
Exemplo 7
Carbamato 8. Preparou-se uma solução de sulfonamida 7 (2,5 g, 5,7 mmol) em CH3CN (100 mL) e tratou-se com esponja protónica (3 g, 14 mmol) e depois com 4-nitrofenil- carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3—b]furano-2-ilo (1,7 g, 5,7 mmol) a 0°C Depois de se agitar durante 48 horas à temperatura ambiente, evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e 10% HC1. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (10% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o carbamato 8 (2, 1 g, 62%) com o aspecto de um sólido branco. MS (ESI) 616 (M+Na).
Exemplo 8
Fosfonato de dietilo 9. A uma solução de carbamato 8 (2,1 g, 3,5 mmol) em CH3CN (50 mL) adicionou-se Cs2C03 (3,2 g, 9,8 mmol) e triflato de dietilo (1,6 g, 5,3 mmol). Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 1 hora. Após a remoção do solvente, repartiu-se o resíduo entre EtOAc e 502
NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica sobre Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica (1% a 5% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fosfonato de dietilo 9 com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDC13) δ 8,35 (d, J=9 Hz, 2H), 7,96 (d, J=9 Hz, 2H) , 7,13 (d, J=8, 4 Hz, 2H) , 6,85 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5, 63 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 5,18- -5,01 (m, 2H), 4,27-4,17 (m, 6H) , 3, 94 -3,67 (m, 7H), 3,20-2,73 (m, 7H) , 1,92-1,51 (m, 3H), 1,35 (t, J=7,2 Hz, 6H), 0,88-0,85 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19,2; MS (ESI) 756 (M+Na).
Exemplo 9
Amina 10. Preparou-se uma solução de fosfonato de dietilo 9 (1 g) , dissolveu-se em EtOH (100 mL), tratou-se com Pd a 10%/C (300 mg) e agitou-se em ambiente de H2 (balão) durante 3 horas. Purgou-se a mistura de reacção com N2 e removeu-se o catalisador por filtração através de celite. Após a evaporação do filtrado, triturou-se o resíduo com éter e recolheu-se o sólido por filtração para se obter a amina 10 (920 mg, 96%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDC13) RMN-3H (CDC13) δ 7,41 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,17 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,88 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,88 (d, J=8,4
Hz, 2H) , 5,67 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,13-5,05 (m, 2H) , 4,42 (s, 2H), 4,29-4,20 (m, 6H) , 4,00-3, 69 (m, 7H) , 3,00-2,66 (m, 7H), 1, 80-1, 69 (m, 3H) , 1,38 (m, 6H) , 0,94 (d, J=6,4
Hz, 3H), 0,86 (d, J=6,4 Hz, 6H); RMN-31P (CDC13) δ 19,4; MS (ESI) 736 (M+Na). 503
Composto Ri. £ -6a Gly-Et GE^Et Ifífc Oiy-Bu Qly-Bu ISj Phe-Bu Ptie-Bu 16k N:H£t NHEt
Exemplo 10
Sintese de bisamidatos 16a. Preparou-se uma solução de ácido fosfónico 11 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do éster etílico de L-alanina (84 mg, 0,6 mmol), dissolveu-se em piridina (5 mL) e destilou-se o solvente sob pressão reduzida a 40°C-60°C. Tratou-se o resíduo com uma solução de Ph3P (118 mg, 0,45 mmol) e dissulfureto de 2,2'-dipiridilo (99 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL), sob agitação durante 20 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (1% a 5% de 2- propanol/CH2Cl2). Preparou-se uma suspensão do produto purificado em éter e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter o bisamidato 16a (90 mg, 72%) com o aspecto de um sólido branco: ΚΜΝ^Η (CDCI3) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,87 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,68 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 5,05 (m, 1H) , 4,25 (d, J=9,9 Hz, 2H) , 4,19 (q, 4H), 3, 99-3, 65 (m sobreposição s, 13H,), 3,41 (m, 1H), 3,20-2,81 (m, 7H), 1,85-1, 60 (m, 3H) , 1,27 (t, J=7,2 Hz, 6H), 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,89 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 21,8; MS (ESI) 843 (M+H) .
Exemplo 11 Síntese de bisamidatos 16b. Preparou-se uma solução de ácido fosfónico 11 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do 504 éster n-butílico de L-alanina (101 mg, 0,6 mmol), dissolveu-se em piridina (5 mL) e destilou-se o solvente sob pressão reduzida a 40°C-60°C. Tratou-se o resíduo com uma solução de Ph3P (118 mg, 0,45 mmol) e dissulfureto de 2,2'-dipiridilo (99 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL), sob agitação durante 20 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (1% a 5% de 2- propanol/CH2Cl2). Preparou-se uma suspensão do produto purificado em éter e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter bisamidato 16b (100 mg, 74%) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDC13) δ 7,72 (d, J=9 Hz, 2H) , 7,15 (d, J=9 Hz, 2H), 7,01 (d, J=9 Hz, 2H) , 6,87 (d, J=9 Hz, 2H), 5,67 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,05 (m, 1H) , 4,96 (m, 1H) , 4,25 (d, J=9,9 Hz, 2H), 4,11 (t, J=6,9 Hz, 4H), 3,99-3,71 (m sobreposição s, 13H,), 3,41 (m, 1H), 3,20-2,80 (m, 7H), 1,87-1, 60 (m, 7H) , 1,42 (m, 4H) , 0, 96-0,88 (m, 12H) ; 3 p RMN (CDC13) δ 21,8; MS (ESI) 890 (M+H) .
Exemplo 12 Síntese de bisamidatos 16j. Preparou-se uma solução de ácido fosfónico 11 (100 mg, 0,15 mmol) e cloridrato do éster n-butílico de L-fenilalanina (155 mg, 0,6 mmol), dissolveu-se em piridina (5 mL) e destilou-se o solvente sob pressão reduzida a 40°C-60°C. Tratou-se o resíduo com uma solução de Ph3P (118 mg, 0,45 mmol) e dissulfureto de 2,2'-dipiridilo (99 mg, 0,45 mmol) em piridina (1 mL) , sob agitação durante 36 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (1% a 5% de 2-propanol/CH2Cl2). Preparou-se uma suspensão do produto 505 purificado em éter e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter o bisamidato 16j (106 mg, 66%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1]! (CDCI3) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,31-7,10 (m, 12H) , 7,01 (d, J=9 Hz, 2H) , 6,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,67 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,05 (m, 1H) , 4,96 (m, 1H) , 4,35-3,98 (m, 7H) , 3,90-3,61 (m sobreposição s, 10H,), 3,19-2,78 (m, 11H) , 1,87-1,25 (m, 11H), 0, 96-0, 88 (m, 12H); RMN-31P (CDCI3) δ 19,3; MS (ESI) 1080 (M+H) .
Exemplo 13 Síntese de bisamidatos 16k. Preparou-se uma solução de ácido fosfónico 11 (80 mg, 0,12 mmol) e etilamina (0,3 mL, 2M em THF, 0,6 mmol), dissolveu-se em piridina (5 mL) e destilou-se o solvente sob pressão reduzida a 40°C-60°C. Tratou-se 0 resíduo com uma solução de PI13P (109 mg, 0,42 mmol) e dissulfureto de 2,2' -dipiridilo (93 mg, 0,42 mmol) em piridina (1 mL) , mantendo sob agitação 48 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e submeteu-se 0 resíduo a cromatografia através de gel de sílica (1% a 5% de 2-propanol/CH2Cl2) . Preparou-se uma suspensão do produto purificado em éter e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter o bisamidato 16k (60 mg, 70%) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,87 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,67 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,05-4,95 (m, 2H) , 4,15 (d, J=9,6 Hz, 2H) , 3,99-3,72 (m sobreposição s, 9H,), 3,18-2,81 (m, 11H), 2,55 (lr, 1H), 1,85-1,65 (m, 3H) , 1,18 (t, J=7,2 Hz, 6H) , 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H), 0,89 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) 0 21,6; MS (ESI) 749 (M+Na). 506
Composto *1 30a OPh Alaste 30b OPh Ala^t 30c OPh íD}-A(a4Pr 3ÕCÍ OPh Â)â-Bu 30& Ο'6-η Afa-Et
Exemplo 14
Monoamidato 30a (RI = OPh, R2 = Ala-Me). Num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 29 (75 mg, 0,1 mmol), cloridrato do éster metilico de L-alanina (4,0 g, 22 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (84 mg, 0,6 mmol) e depois adicionou-se piridina (1 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Repartiu-se o resíduo entre acetato de etilo e HC1 (0,2 N), lavou-se a fase de acetato de etilo com água e NaHC03, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1:5) para se obter 30a (25 mg, 30%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73-7,24 (m, 5H) 7,19-7,15 (m, 2H), 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6, 90-6,83 (m, 2H) , 5,65 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 5,01 (m, 2H) , 4,30 (m, 2H) , 3,97-3,51 (m sobreposição s, 12H), 3,20-2,77 (m, 7H), 1,81 (m, 1H), 1,58 (m, 3H), 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H); RMN-31P (CDC13) 0 2,04 e 19,3; MS (ESI) 856 (M+Na) .
Exemplo 15 507
Monoamidato 30b (RI = OPh, R2 = Ala-Et) foi sintetizado de um modo idêntico com um rendimento de 35%. RMN-1H (CDCI3) hl ,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73-7,24 (m, 5H) 7,19-7,15 (m, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6, 90-6,83 (m, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,01 (m, 3H) , 4,30-3, 67 (m sobreposição s,
14H) , 3,18-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,35 (m, 6H) , 1,22 (m, 3H) , 0,92 (d, J=6, 3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 20,4 e 19,3; MS (ESI) 870 (M+Na) .
Exemplo 16
Monoamidato 30c (Rl = OPh, R2 = (D) -Ala-iPr) foi sintetizado de um modo idêntico com um rendimento de 52%. Isómero A ΡΜΝ-3Η (CDC13) hl,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73-7,24 (m, 5H) 7,19-7,15 (m, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,90 — 6,83 (m, 2H) , 5,66 (m, 1H) , 5,01 (m, 3H) , 4,30-3, 67 (m sobreposição s, 14H), 3,18-2,77 (m, 7H), 1,81-1,35 (m, 6H), 1,23 (m, 6H) , 0,92 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,3 Hz,
3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 2 0,4; MS (ESI) 884 (M+Na). Isómero B RMN-3H (CDCI3) hl,12 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,73-7,24 (m, 5H) 7,19-7,15 (m, 2H) , J=8,7 Hz, 2H) , 6, 90-6,83 (m, 2H) , 5,66 (m, 1H) , 5,01 (m, 3H) , 4,30-3, 67 (m sobreposição s, 14H) , 3,18-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,35 (m, 6H) , 1,23 (m, 6H) , 0,92 (d, J=6, 3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19,3; MS (ESI) 884 (M+Na).
Exemplo 17
Monoamidato 30d (Rl = OPh, R2 = Ala-Bu) foi sintetizado de um modo idêntico com um rendimento de 25%. RMN-1H (CDCI3) hl ,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73-7,24 (m, 5H) 7,19-7,15 (m, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6, 90-6,83 (m, 2H) , 5,65 (d, 508
J= 5,4 Hz, 1H), 5,01 (m, 3H), 4,30-3, 67 (m sobreposição s, 16H), 3,18-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,35 (m, 8H) , 1,22 (m, 3H) , 0,92 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,4 e 19,4; MS (ESI) 898 (M+Na) .
Exemplo 18
Monoamidato 30e (RI = OBn, R2 = Ala-Et). Num balão introduziu-se monobenzil-fosfonato 2 (76 mg, 0,1 mmol), cloridrato do éster metilico de L-alanina (4,0 g, 22 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (84 mg, 0,6 mmol) e depois adicionou-se piridina (1 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Repartiu-se o resíduo entre acetato de etilo e HC1 (0,2 N), lavou-se a fase de acetato de etilo com água e NaHC03, secou-se sobre Na2S04 filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1:5) para se obter 30a (25 mg, 30%) com o aspecto de um sólido branco. ΗΜΝ^Η (CDCls) Ô 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,38-7, 34 (m, 5H) , 7,13 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6, 86-6,80 (m, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,15-5,01 (m, 5H) , 4,30-3,67 (m sobreposição s, 14H), 3,18-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,35 (m, 6H), 1,22 (m, 3H) , 0,92 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3
Hz, 3H); RMN-31P (CDC13) δ 23,3 e 22,4; MS (ESI) 884 (M+Na). 509
Composto Ht R-. 31a OPh LctcHPf 31b OPh LaoEt 31c OPh Lac-Bu 31 d OPh (RRLae-Me 31 e OPh iRí-_ctc-Et.
Exemplo 19
Monolactato 31a (RI = OPh, R2 = Lac-iPr). Num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 29 (1,5 g, 2 mmol), isopropil-(s)-lactato (0,88 mL, 6,6 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (1,36 g, 6,6 mmol)e depois adicionou-se piridina (15 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Lavou-se o resíduo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4C1, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/CH2Cl2 a 1:5) para se obter 31a (1,39 g, 81%) com o aspecto de um sólido branco. Isómero A RMN-1!! (CDC13) hl,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73-7,19 (m, 5H) , 7,15 (d, J= 8, 4 Hz, 2 H) , 7 ,00 (d, J= 8, 7 Hz, 2H) , 6, 92 (d, J= 8,4 Hz, 2H) , 5,65 (d, J-- =5,4 Hz, 1H) , 5,15- 5,00 (m ., 4H) , 4,56-4,44 (m, 2H) , 3,96- 3, 68 (m sobreposição s, 9H), 3, 13- 2,78 (m, 7H) , 1,81- 1,23 (m , 6H), 1,22 (m, 6H) , 0, 92 (d, J. = 6,6 Hz , 3H), 0, 88 (d, J= 6,6 Hz, 3H) ; RMN-31 P (CDCI3) δ 17,4; MS (ESI) 885 (M+Na) . Isómero B RMN-1H (CDCI3) δ 7 ,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73 -7, ,19 (m, 5H) , 7,14 (d, J= 8 Hz, 2H), 7,00 (d, J=8, 7 Hz, 2H), 6,88 (d, J= 8,4 Hz, 2H) , 5 , 64 510 (d, J=5, 4 Hz, \—1 O O LO 1 LO \—1 LO (m, 4H) , , 4,53- -4,4 1 (m, 2H) , 3, 96- -3, 68 (m sobreposição s, 9H) , 3, 13 '<-2,18 (m, 7H) , 1,81- 1,23 (m, 6H) , 1,22 (m, 6H), 0, 92 (d, J= 6, 6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6, 6 Hz , 3H) ; rmn-31p (CDC1 3) l >15,3; MS (ESI) 885 (M+Na).
Exemplo 20
Monolactato 31b (RI = OPh, R2 = Lac-Et) foi sintetizado de um modo idêntico com um rendimento de 75%. ΡΜΝ^Η (CDCI3) hl ,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,73-7,14 (m, 7H) , 6,99 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,88 (d, J=8,l Hz, 2H) , 5,63 (m, 1H) , 5,19-4,95 (m, 3H), 4, 44-4,40 (m, 2H) , 4,17-4,12 (m, 2H) , 3,95-3, 67 (m sobreposição s, 9H), 3,15-2,77 (m, 7H), 1,81-1,58 (m, 6H), 1,23 (m, 3H) , 0,91 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,87 (d, J= 6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 17,5 e 15,4; MS (ESI) 872 (M+Na).
Exemplo 21
Monolactato 31c (RI = OPh, R2 = Lac-Bu) foi sintetizado de um modo idêntico com um rendimento de 58%. Isómero A RMN-1H (CDCI3) hl ,12 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,73-7,19 (m, 5H) , 7,14 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,90 (d, J=8,4
Hz, 2H), 5,63 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,15-5,00 (m, 3H) , 4,56- 4,51 (m, 2H), 4,17-4,10 (m, 2H), 3,95-3,67 (m sobreposição s, 9H) , 3,10-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,23 (m, 10H) , 1,23 (m,
6H) , 0,91 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,87 (d, J= 6,6 Hz 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 17,3; MS (ESI) 899 (M+Na). Isómero B RMN-1H (CDCI3) hl ,12 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,73-7,19 (m, 5H) , 7,14 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,90 (d, J=8,4
Hz, 2H), 5,64 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,15-5,00 (m, 3H) , 4,44- 4,39 (m, 2H), 4,17-4,10 (m, 2H), 3,95-3,67 (m sobreposição 511 s, 9H) , 3,10-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,23 (m, 10H), 1,23 (m, 6H) , 0,91 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 1,53; MS (ESI) 899 (M+Na) .
Exemplo 22
Monolactato 31d (RI = OPh, R2 = (R)-Lac-Me). A uma solução agitada de monofenil-fosfonato 29 (100 mg, 0,13 mmol) em 10 mL de THF, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se (s)-lactato de metilo (54 mg, 0,52 mmol) e Ph3P (136 mg g, 0,52 mmol), seguindo-se DEAD (82 μΐϋ, 0,52 mmol). Decorridas 2 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se a mistura impura resultante por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1:1) para se obter 31d (33 mg, 30%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,73-7,14 (m, 7H) , 6,99 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,88 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 5,63 (m, 1H) , 5,19-4,95 (m, 3H) , 4,44- 4,40 (m, 2H), 3,95-3,64 (m sobreposição s, 12H), 3,15-2,77 (m, 7H), 1,81-1,55 (m, 4H) , 0,91 (d, J=6,6 Hz, 3H), 0,87 (d, J= 6,6 Hz, 3H); RMN-31P (CDCI3) δ 17,4 e 15,3; MS (ESI) 857 (M+Na).
Exemplo 23
Monolactato 31e (RI = OPh, R2 = (R)-Lac-Et). A uma solução agitada de monofenil-fosfonato 29 (50 mg, 0,065 mmol) em 2,5 mL de THF, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se (s)-lactato de etilo (31 mg, 0,52 mmol) e PhsP (68 mg g, 0,26 mmol), seguindo-se DEAD (41 μΗ, 0,52 mmol). Decorridas 2 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se a mistura impura resultante 512 por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1:1) para se obter 31e (28 mg, 50%) com o aspecto de um sólido branco. ΕΜΝ^Η (CDCI3) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,73-7,14 (m, 7H) , 6,99 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,85 (m, 2H), 5,63 (m, 1H) , 5,19-4,95 (m, 3H) , 4,44-4,40 (m, 2H) , 4,17-4,12 (m, 2H) , 3, 95-3, 67 (m sobreposição s, 9H) , 3,15-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,58 (m, 6H) , 1,23 (m, 3H) , 0,91 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) Ô17,5 e 15,4; MS (ESI) 872 (M+Na).
Exemplo 24
Monolactato 32 (RI = OBn, R2 = (S)-Lac-Bn). A uma solução agitada de monobenzil-fosfonato 2 (76 mg, 0,1 mmol) em 0,5 mL de DMF, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se (s)-lactato de benzilo (27 mg, 0,15 mmol) e PyBOP (78 mg, 0,15 mmol), seguindo-se DIEA (70 μΐ,, 0,4 mmol). Decorridas 3 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se a mistura impura resultante por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1:1) para se obter 32 (46 mg, 50%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDCI3) δ 7,72 (d, J= 8,7 Hz, 2H) 7,38-7, 44 (m, 10H) , 7,13 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,99 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,81 (m, 2H) , 5,63 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,23-4, 92 (m, 7H) , 4, 44-22 (m, 2H) , 3,96-3, 67 (m sobreposição s, 9H), 3,15-2,77 (m, 7H), 1,81-1,58 (m, 6H), 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H), 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 20,8 e 19,6; MS (ESI) 947 (M+Na).
Exemplo 25 513
Monolactato 33 (RI = OBn, R2 = (R)-Lac-Bn). A uma solução agitada de monobenzil-fosfonato 2 (76 mg, 0,1 mmol) em 5 mL de THF, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se (s)-lactato de benzilo (72 mg, 0,4 mmol) e Ph3P (105 mg g, 0,4 mmol), seguindo-se DEAD (60 μΐ^ 0,4 mmol). Decorridas 20 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se a mistura impura resultante por cromatografia através de gel de silica (acetato de etilo/hexano a 1:1) para se obter 33 (44 mg, 45%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1]! (CDCI3) δ 7,72 (d, J=8,7
Hz, 2H) , 7,38-7 ,44 (m, 10H), 7 ,13 (m, 2H), 6,99 (d, J=Q, 7 Hz, 2 H) , 6,81 (m, 2H) , 5, 63 ( m, 1H) , 5, 23-4,92 (m, 7H) , 4,44 -22 (m, 2H) , 3 ,96-3, 67 (m sobrepo sição s, 9H) , 3, 15- 2,77 (m, 7H), 1 .,81- -1,58 (m, 6H), 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN _31 P (CDCI3 1) δ 20,8 e 19, 6; MS (ESI) 947 (M+Na).
Exemplo 26 Ácido monofosfónico 34: preparou-se uma solução de monobenzil-lactato 32 (20 mg) , dissolveu-se em EtOH/EtOAc (3 mL/Ι mL), tratou-se com Pd a 10%/C (4 mg) e agitou-se em ambiente de H2 (balão) durante 1,5 horas. Removeu-se o catalisador por filtração através de celite. Evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida, triturou-se o resíduo com éter e recolheu-se o sólido por filtração para se obter o ácido monofosfónico 33 (15 mg, 94%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1]! (CD3OD) 6 7,76 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,18 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,08 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,90 (d, J= 8,7
Hz, 2H) , 5,69 (d, J=5,7 Hz, 1H) , 5, 03-4,95 (m, 2H) , 4,20 (m, 2H) , 3, 90-3,65 (m sobreposição s, 9H) , 3,41 (m, 2H) , 3,18-2,78 (m, 5H) , 2,44 (m, 1H) , 2,00 (m, 1H) , 1,61-1,38 514 (m, 5H), 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 18,0; MS (ESI) 767 (M+Na) .
Exemplo 27 Ácido monofosfónico 35: preparou-se uma solução de monobenzil-lactato 33(20 mg), dissolveu-se em EtOH (3 mL), tratou-se com Pd a 10%/C (4 mg) e agitou-se em ambiente de H2 (balão) durante 1 hora. Removeu-se o catalisador por filtração através de celite. Evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida, triturou-se o resíduo com éter e recolheu-se o sólido por filtração para se obter o ácido monofosfónico 35 (15 mg, 94%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CD3OD) δ 7,76 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,18 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,08 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,90 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,69 (d, J=5,7 Hz, 1H) , 5,03-4,95 (m, 2H) , 4,20 (m, 2H), 3,90-3,65 (m sobreposição s, 9H), 3,41 (m, 2H), 3,18-2,78 (m, 5H) , 2,44 (m, 1H) , 2,00 (m, 1H) , 1,61-1,38 (m, 5H) , 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) 618,0; MS (ESI) 767 (M+Na).
Exemplo 28 Síntese de bislactato 36: preparou-se uma solução de ácido fosfónico 11 (100 mg, 0,15 mmol) isopropil-(S)-lactato (79 mg, 0,66 mmol) dissolveu-se em piridina (1 mL) e destilou- se 0 solvente sob pressão reduzida a 40°C-600 C Tratou-se 0 resíduo com uma solução de Ph3P (137 mg, 0,53 mmol) e dissulfureto de 2,2'-dipiridilo (116 mg, 0 ,53 mmol) em piridina (1 mL) , sob agitação durante 20 horas à temperatura ambiente. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica (1% a 5% de 2-propanol/CH2Cl2) . Preparou-se 515 uma suspensão do produto purificado em éter e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter bislactato 36 (42 mg, 32%) com o aspecto de um sólido branco: ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,14 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,01 (d, J=8,7 Hz, 2H), 6,89 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,66 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,05 (m, 3H), 4,25 (d, J= 9,9 Hz, 2H) , 4,19 (q, 4H) , 3,99-3,65 (m sobreposição s, 9H,), 3,41 (m, 1H), 3,20-2,81 (m, 7H), 1,85-1, 60 (m, 3H),1,58 (m, 6H) , 1,26 (m, 12H),
0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,89 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 21,1; MS (ESI) 923 (M+Na) .
Exemplo 29
Derivado de triflato 1: fez-se reagir uma solução em THF-CH2C12 (30 mL-10 mL) de 8 (4 g, 6,9 mmol), carbonato de césio (2,7 g, 8 mmol) e N-feniltrifluorometanossulfonimida (2,8 g, 8 mmol) de um dia para o outro. Processou-se a mistura de reacção e concentrou-se até à secura para se obter derivado de triflato impuro 1.
Aldeido 2: Dissolveu-se triflato impuro 1 (4,5 g, 6,9 mmole) em DMF (20 mL) e desgaseificou-se a solução (vácuo intenso durante 2 minutos, Purga de Ar, repetir 3 vezes) . Adicionou-se Pd(OAc)2 (0,12 g, 0,27 mmol) e bis(difenilfosfino)-propano (dppp, 0,22 g, 0,27 mmol) e aqueceu-se a solução até 70°C. Fez-se borbulhar monóxido de carbono rapidamente através da solução e depois sob 1 atmosfera de monóxido de carbono. A esta solução adicionou-se lentamente TEA (5,4 mL, 38 mmol) e trietilsilano (3 mL, 18 mmol) . Agitou-se a solução resultante de um dia para o outro à temperatura ambiente. Processou-se a mistura de reacção e purificou-se por cromatografia em coluna através 516 de gel de sílica para se obter o aldeído 2 (2,1 g, 51%). (Hostetler, et al. J. Org. Chem., 1999, 64, 178-185). Pró-fármaco de lactato 4: o composto 4 tal como descrito no procedimento anterior para 3a-e por aminação redutiva entre 2 e 3 com NaBH3CN em 1,2-dicloroetano na presença de HOAc. 516
CO, PdíOAcfe rippp, DMFf7G&C
3
Exemplo 30
Preparação de composto 3, (ciano(dimetil)-metil)-fosfonato de dietilo 5: preparou-se uma solução em THF (30 mL) de NaH (3,4 g de dispersão a 60% em óleo, 85 mmole), arrefeceu-se até -10°C, seguindo-se a adição de (cianometil)-fosfonato de dietilo (5 g, 28,2 mmol) e iodometano (17 g, 112 mmol). Agitou-se a solução resultante a -10°C durante 2 horas e 517 depois a 0°C durante 1 hora, processou-se e purificou-se para se obter o derivado de dimetilo 5 (5 g, 86%) . (2-amino-1,1-dimetil-etil)-fosfonato de dietilo 6: o composto 5 foi reduzido para se obter derivado de amina 6 por meio do procedimento descrito (J. Med. Chem. 1999, 42, 5010 — 5019). Preparou-se uma solução em etanol (150 mL) e HC1 IN aquoso (22 mL) de 5 (2,2 g, 10,7 mmol) e hidrogenou-se a 1 atmosfera na presença de Pt02 (1,25 g) , à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se o catalisador através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado até à secura para se obter o composto 6 impuro (2,5 g, como sal de HC1) . Ácido 2-amino-l,1-dimetil-etil-fosfónico 7: preparou-se uma solução em CH3CN (30 mL) de composto 6 impuro (2,5 g) , arrefeceu-se até 0°C e tratou-se com TMSBr (8 g, 52 mmol) durante 5 horas. Agitou-se a mistura de reacção com metanol durante 1,5 horas à temperatura ambiente, concentrou-se, introduziu-se novamente metanol e concentrou-se até à secura para se obter o composto 7 impuro, que foi utilizado na reacção subsequente, sem mais purificação.
Lactato do fenil-(2-amino-l,1-dimetil-etil)-fosfonato 3: o composto 3 é sintetizado de acordo com os procedimentos descritos num esquema anterior para a preparação de um lactato de fenil-2-aminoetil-fosfonato. O composto 7 é protegido com CBZ, seguindo-se a reacção com cloreto de tionilo a 70°C. Faz-se reagir o diclorodato protegido por CBZ com fenol, na presença de DIPEA. A remoção de um fenol e subsequente acoplamento L-lactato de etilo proporciona o derivado de N-CBZ-2-amino-l,1-dimetil-etil-fosfonato. Por hidrogenação do derivado N-CBZ a 1 atmosfera, na presença 518 de Pd a 10%/C e 1 equivalente de TFA, obtém-se o composto 3 como sal de TFA. pto2, m hcí,
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Mel. NâH, » .....""r '*» - .. THF, -KfC XggEí 5
TMS-Br w lí 1CBZCI ¥ ;β2ΗΝ'>ς;Ρ^ Ct%ÇM 7 " t a. ma2, ?oçc a FhOH, DIPEA 1 NaOH, GH3CN CBZHN^Xl,OPb h2i 1 o%pmt H?N^3<prOPb 2. Reagente BOp DIPEA, L-actato éster etílico f-OUC TFA (1 eq.) .1» R_ 3 EtOGC
Secção M de exemplos
Esquema 1
519 BocHH
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Esquema 2 520 T{O^Pp)(OBn}2 1 ’ ►
CsaCOãf CMgCN (1) TFA, CHgClg^ «ϊΟ-80»0 TEA, CHA>
521
Esquema 3 521
Pef/CA MeOR rtf* mm CHgCig (2)F“^HS02Ci TEAfCRCfe
522 Esquema 4
Pd/Ç, Hg
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OCPi {1)TPA, CHgOig _ HCS.fev (2) \J“SOaCí ΤΈΚ CHsCíg ru f V[ ng
MÍOíTMcoT 1S ÚB182041
523
Esquema 5
523 Í1UF4CH%GU
TEÂ, CHjCfe
Pd/0,1½ _BOM, ri *
(1) BSA, OHaCN, refluxo
Morf olina, NaBH^CN HOAc, BOM
R
Exemplo 1
Cbz-Amida 1: a uma suspensão de epóxido (34 g, 92,03 mmol) em 2-propanol (300 mL) adicionou-se isobutilamina (91,5 mL, 920 mmol) e manteve-se a solução ao refluxo durante 1 hora. Evaporou-se a solução sob pressão reduzida e secou-se o sólido impuro sob uma pressão hipobárica para se obter a amina (38,7 g, 95%), a qual se dissolveu em CH2C12 (300 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (18,3 mL, 524 131 mmol), seguindo-se a adição de cloroformato de benzilo (13,7 mL, 96,14 mmol), e agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C, aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro e evaporou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o residuo entre EtOAc e H3P04 0,5M. Lavou-se a fase orgânica com NaHC03 saturado e salmoura, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (EtOAc/hexano a 1/2) para se obter a Cbz-amida (45, 37 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 2
Amina 2: preparou-se uma solução de Cbz-amida 1 (45,37 g, 78, 67 mmol) em CH2C12 (160 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (80 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Evaporou-se as substâncias voláteis sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), água (2x) e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter a amina (35,62 g, 95%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 3
Carbamato 3: preparou-se uma solução de amina 2 (20,99 g, 44,03 mmol) em CH3CN (250 mL) a 0°C e tratou-se com 4-nitrofenil-carbonato de (3R,3aR,6aS)-hexa-hidrofuro[2,3-b]furano-2-ilo (13,00 g, 44,03 mmol, preparado tal como descrito por Ghosh et al. J. Med. Chem. 1996, 39, 3278), 525 N,N-diisopropiletilamina (15,50 mL, 88, 06 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (1,08 g, 8,81 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Evaporou-se o solvente de reacção sob pressão reduzida e repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaOH 0,5N. Lavou-se a fase orgânica com NaOH 0,5N (2x), ácido cítrico a 5% (2x) e NaHC03 saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o carbamato (23,00 g, 83%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 4
Amina 4: a uma solução de 3 (23,00 g, 36,35 mmol) em EtOH (200 mL) e EtOAc (50 mL) adicionou-se Pd(OH)2 a 20%/C (2,30 g) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 3 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter a amina (14,00 g, 94%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 5
Fenol 5: a uma solução de amina 4 (14,00 g, 34,27 mmol) em H20 (80 mL) e 1,4-dioxano (80 mL) a 0°C adicionou-se Na2C03 (5,09 g, 47,98 mmol) e dicarbonato de di-terc-butilo (8,98 g, 41,13 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 2 horas e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e H20. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se 526 e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter o fenol (15,69 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 6
Dibenzil-fosfonato 6: a uma solução de fenol 5 (15,68 g, 30,83 mmol) em CH3CN (200 mL) adicionou-se Cs2C03 (15, 07 g, 46,24 mmol) e triflato (17,00 g, 40,08 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora, removeu-se o sal por filtração e evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaCl saturado. Secou-se a fase orgânica com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (15,37 g, 73%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 7
Sulfonamida 7: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,21 g, 0,26 mmol) em CH2C12 (0,5 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,25 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x), e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C Adicionou-se trietilamina (0,15 mL, 1,04 mmol), seguindo-se o tratamento com cloreto de benzenossulfonilo (47 mg, 0,26 527 mmol). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e repartiu-se o produto entre CH2CI2 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida 7 (0,12 g, 55%, GS 191477) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDCI3) δ 7,79 (dd, 2H) , 7,61-7,56 (m, 3H) , 7,38-7,36 (m, 10H), 7,13 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,81 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,18 (m, 4H) , 5,05 (m, 1H) , 4,93 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 4,20 (d, J=10,2 Hz, 2H) , 4,0-3,67 (m, 7H) , 3,15-2,8 (m, 7H) , 1,84 (m, 1H) , 1,65-1,59 (m, 2H) ,
0,93 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) 0 20,36.
Exemplo 8 Ácido fosfónico 8: a uma solução de 7 (70 mg, 0,09 mmol) em MeOH (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (49 mg, 90% GS 191478) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD3OD) δ 7,83 (dd, 2H) , 7,65-7,56 (m, 3H) , 7,18 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,91 (d, J= 7,8
Hz, 2H) , 5,59 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 4,96 (m, 1H) , 4,15 (d, J= 9,9 Hz, 2H) , 3, 95-3, 68 (m, 6H) , 3,44 (dd, 2H) , 3,16 (m, 2H) , 2, 99-2,84 (m, 4H), 2,48 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,6 (m, 1H) , 1,37 (m, 1H) , 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=6,3
Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 17, 45, 528
Exemplo 9
Sulfonamida 9: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,24 g, 0,31 mmol) em CH2C12 (0,5 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,25 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,17 mL, 1,20 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-cianocloreto de benzenossulfonilo (61,4 mg, 0,30 mmol). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e repartiu-se o produto entre CH2C12 e NaHCCb saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida 9 (0,20 g, 77%, GS 191717) com o aspecto de um sóli do branco : RMN [-½ (CDC13) δ 7, 90 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,83 (d, J= 7,8 Hz, 2H) , - 7, 36 (m, 10H) , 7,11 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,82 (d, , J= 8, 7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5, 2-4,9 (m, 5H) , 4,8 (d, 1H) , 4,2 (d, J= =9,9 Hz, 2H) , 3,99 (m 1H), 3,94 (m, 3H) , 3,7 (m, 2H) , 3,48 (s largo, 1H), 3,18 -2,78 (m, 7H) , 1,87 (m, 1H) , i, 66-1,4' 7 (m , 2H), 0,91 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,87 (d, J= 6, 3 Hz , 3H) ; RMN- •31P (CDC13) δ 20, 3 .
Exemplo 10
Sulfonamida 10: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,23 g, 0,29 mmol) em CH2C12 (0,5 mL) a 0°C e 529 tratou-se com ácido trifluoroacético (0,25 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o residuo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,16 mL, 1,17 mmol) adicionou-se, seguindo-se o tratamento com 4-trifluorometil cloreto de benzenossulfonilo (72 mg, 0,29 mmol). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e repartiu-se o produto entre CH2C12 e NaHCCb saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida (0,13 g, 50%, GS 191479) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDC13) δ 7,92 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 7,81 (d, J=8,l Hz, 2H) , 7,36 (m, 10H), 7,12 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,81 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 5,20-4,89 (m, 6H) , 4,20 (d, J=9,9 Hz, 2H), 3,95 (m, 1H) , 3,86 (m, 3H) , 3,71 (m, 2H) , 3,19-2,78 (m, 7H), 1,86 (m, 1H), 1,65 (m, 2H), 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H), 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,3.
Exemplo 11 Ácido fosfónico 11: a uma solução de 10 (70 mg, 0,079 mmol) em MeOH (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de 530 reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (50 mg, 90%, GS 191480) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CD30D) δ 8,03 (dd, 2H) , 7,90 (dd, 2H), 7,17 (d, J=8,l Hz, 2H) , 6,91 (d, J=7,8 Hz, 2H) , 5,59 (d, J=5,7 Hz, 1H), 4,94 (m, 1H), 4,15 (d, J=10,2
Hz, 2H), 3,94-3,72 (m, 6H), 3,48 (m, 1H), 3,2-3,1 (m, 3H), 3,0-2,9 (m, 2H), 2,47 (m, 1H), 2,06 (m, 1H), 1,56 (m, 1H), 1,37 (m, 1H), 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 17, 5.
Exemplo 12
Sulfonamida 12: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,23 g, 0,29 mmol) em CH2C12 (0,5 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,25 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o residuo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,16 mL, 1,17 mmol) adicionou-se, seguindo-se o tratamento com 4-fluorocloreto de benzenossulfonilo (57 mg, 0,29 mmol). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e repartiu-se o produto entre CH2C12 e NaHCCh saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida (0,13 g, 55%, 531 GS 191482) com 0 aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) Ô 7,81 (m, 2H), 7,38 (m, 10H), 7,24 (m, 2H), 7,12 (d, J=8,1 Hz, 2H), 6,82 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,17 (m, 4H) , 5 i,0 (m, 1H), 4,90 (d, 1H), 4,20 (d, J=9,9 Hz, 2H), 3,97 (m, 1H) , 3,86 (m, 3H), 3,73 (m, 2H) , 3,6 (s largo, 1H) , 3,13 (m, 1H), 3,03-2,79 (m, 6H), 1,86 1 I-1 1—1 ê 1,58 (m, 2H) , 0,92 (d, J=6, 6 Hz, 3H), 0,88 (d, J=6,6 Hz, 3H); RMN-31P (CDC13) 0 20,3,
Exemplo 13 Ácido fosfónico 13: a uma solução de 12 (70 mg, 0,083 mmol) em MeOH (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter 0 ácido fosfónico (49 mg, 90%, GS 191483) com 0 aspecto de um sólido branco: RMN-1 H (CD3OD) δ 7,89 (m, 2H) , 7,32 (rr b 2H), 7,18 (d, J=8,4 Hz, 2H), 6,9 (d, J= 8, 1 Hz, 2H), 5, 59 (d, J=5,l Hz, 1H) , 4,94 (m, 1H), 4,16 (d, J= 9, 9 Hz, 2H) , 3,94 (m, 1H) , 3, 85- 3,7 (m, 5H) , 3,43 (dd, 1H) , 3,15-2, 87 (m, 5H), 2,48 (m, 1H) , 2,03 (m, 1H) , 1,59-1,36 (m, 2H) , 0, 93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,87 (d, J= 6, 3 Hz, 3H) ; rmn-31p (CD3OD) δ 17,5.
Exemplo 14
Sulfonamida 14: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,21 g, 0,26 mmol) em CH2C12 (0,5 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,25 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a 532
mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,15 mL, 1,04 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-trifluorometoxicloreto de benzenossulfonilo (69 mg, 0,26 mmol). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e repartiu-se o produto entre CH2C12 e NaHCCh saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida (0,17 g, 70%, GS 191508) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDC1; 3) δ 7,84 (d, J= =9 Hz, 2H) , 7 ,36 (m, 12H), 7,12 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 6,81 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J= 5, 4 Hz, 1H), 5,16 (m, 4H), 5,03 (m, 1H) , 4, 89 (d , 1H), 4,2 (d, J= 9,9 Hz, 2H), 3,97 (m, 1H) , 3,85 (m, 3H) , 3,7 (m, 2H) , 3,59 (s largo, 1H) , 3,18 (m, 1H) , 3, 1-3,0 (m, 3H), 2 , 96- 2,78 (m, 3H), 1,86 (m, 1H) , 1,66 -1, 5 (m, 2H), 0, 93 (d, J=6, 6 Hz, 3H)j , 0,88 (d, J= 6 ,6 Hz, 3H) ; RMN-31 P (CDCI3) δ 20,3
Exemplo 15 Ácido fosfónico 15: a uma solução de 14 (70 mg, 0,083 mmol) em MeOH (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se 533 obter o ácido fosfónico (50 mg, 90%, GS 192041) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CD3OD) δ 7,95 (dd, 2H), 7,49 (dd, 2H), 7,17 (dd, 2H) , 6,92 (dd, 2H) , 5,58 (d, J=5,4 Hz, 1H), 4,89 (m, 1H) , 4,17 (d, J= 9 Hz, 2H) , 3,9 (m, 1H) , 3,82-3,7 (m, 5H), 3,44 (m, 1H), 3,19-2,9 (m, 5H) , 2,48 (m, 1H) , 2,0 (m, 1H), 1,6 (m, 1H) , 1,35 (m, 1H) , 0,93 (d, J=6,0 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,0 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 17,4,
Exemplo 16
Sulfonamida 16: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,59 g, 0,76 mmol) em CH2C12 (2,0 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (1,0 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,53 mL, 3,80 mmol), seguindo-se o tratamento com sal cloridrato de cloreto de 3-piridinilsulfonilo (0,17 g, 0,80 mmol, preparado tal como descrito por Karaman, R. et ai. J. Am. Chem. Soc. 1992, 114, 4889). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida (0,50 g, 80%, GS 273805) com o aspecto de um 534 sólido branco: RMN· (CDCI3) δ 9, 0 (d, J=l,5 Hz, 1H) , CO CO (dd, 1H), 8,05 (d, J= 8,7 Hz, 1H) t 7,48 (m, 1H) , 7,36 (m, 10H) , 7,12 (d, J= 8, ,4 Hz, 2H) , 6,82 (d, J=9, 0 Hz, 2H), 5, 65 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5, 18 (m, 4H), f 5,06 (m, 1H) , 4,93 (d, 1H) , 4,21 (d, J=8, 4 Hz, 2H) , 3,97 (m, 1H) , 3,86 (m, 3H) , 3,74 (m, 2H) , 3,2 (m, 1H) , 3, 1-2, 83 (m, 5H) , 2,76 (m, 1H), 1,88 (m, 1H), 1,62 (m , 2H), 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H); RMN- _31p (CDCI3) δ 20,3.
Exemplo 17 Ácido fosfónico 17: a uma solução de 16 (40 mg, 0,049 mmol) em MeOH (3 mL) e AcOH (1 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (10 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (28 mg, 90%, GS 273845) com o aspecto de um sólido branco: ΗΜΝ^Η (CD3OD) δ 8,98 (s, 1H), 8,77 (s largo, 1H) , 8,25 (dd, 1H) , 7,6 (m, 1H) , 7,15 (m, 2H) , 6,90 (m, 2H) , 5,6 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 4,98 (m, 1H), 4,15 (d, 2H) , 3,97-3,7 (m, 6H), 3, 45-2,89 (m, 6H) , 2,50 (m, 1H) , 2,0 (m, 1H) , 1,6-1,35 (m, 2H) , 0,9 (m, 6H) .
Exemplo 18
Sulfonamida 18: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (0,15 g, 0,19 mmol) em CH2CI2 (0,60 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,30 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão 535 reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (2 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,11 mL, 0,76 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-formilcloreto de benzenossulfonilo (43 mg, 0,21 mmol). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e NaHCC>3 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2- propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida (0,13 g, 80%, GS 278114) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CDCI3) δ 10,1 (s, 1H), 8,04 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 7,94 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 7,35 (m, 10H) , 7,13 (m, J=8,l Hz, 2H) , 6,82 (d, J=8,1 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,17 (m, 4H) , 5,06 (m, 1H) , 4,93 (m, 1H), 4,2 (d, J=9,9 Hz, 2H) , 3,94 (m, 1H) , 3,85 (m, 3H), 3,7 (m, 2H), 3,18-2,87 (m, 5H), 2,78 (m, 1H) , 1,86 (m, 1H) , 1, 67-1,58 (m, 2H) , 0,93 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6, 6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) 0 20,3,
Exemplo 19 Ácido fosfónico 19: a uma solução de 18 (0,12 g, 0,15 mmol) em EtOAc (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 6 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (93 mg, 95%) com o aspecto de um sólido branco. 536
Exemplo 20 Ácidos fosfónicos 20 e 21: dissolveu-se o composto 19 (93 mg, 0,14 mmol) em CH3CN (2 mL) . Adicionou-se N,0- bis(trimetilsilil)-acetamida (BSA, 0,28 g, 1,4 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até ao refluxo durante 1 hora, arrefeceu-se até à temperatura ambiente e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e clorofórmio e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um semi-sólido que se dissolveu em EtOAc (2 mL) .
Adicionou-se morfolina (60 μΕ, 0,9 mmol), AcOH (32 μΕ, 0,56 mmol) e NaBH3CN (17 mg, 0,28 mmol) e agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro.
Extinguiu-se a reacção com H20, agitou-se durante 2 horas, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por HPLC para se obter o ácido fosfónico 20 (10 mg, GS 278118) com o aspecto de um sólido branco: ΚΜΝ-1]! (CD3OD) δ 7,80 (d, J=7,8 Hz, 2H), 7,56 (d, J=7,5 Hz, 2H) , 7,17 (d, J=7,8 Hz, 2H), 6,91 (d, J=7,5 Hz, 2H) , 5,59 (d, J=5,l Hz, 1H), 5,06 (m, 1H), 4,7 (s, 2H) , 4,15 (d, J=10,2 Hz, 2H) , 3,92 (m, 1H), 382-3,7 (m, 5H) , 3,43 (dd, 1H), 3,11-2,89 (m, 6H), 2,50 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,6-1,35 (m, 2H), 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 17,3. Ácido fosfónico 21 (15 mg, GS 278117) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD30D) 0 7,8-7,7 (m, 4H) , 7,20 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,95 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 5,62 (d, J=5,l
Hz, 1H), 5,00 (m, 1H), 4,42 (s, 2H) , 4,20 (dd, 2H) , 3,98-3,68 (m, 9H) , 3,3-2,92 (m, 11H), 2,6 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,6 (m, 2H), 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 16, 2. 537Esquema 6 Η ψ rj y ϊ 0 1 I | Pd/Ç, Η? /^v^y^N^x^-WSoe 0 γ\ “βπτ ν4 I * %Α0Λρ.0Βη £ 9 Ο-Χ <f %OBr àj Η 32
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Etil-(S)-H-lactato ...........-- --- · -----------III---|i' DCC/Pitidina, ?£PC /Y^VV> ° n õ-y s^X0^p^0Ph * /Va cQgm
OH
Esquema 7 25 538
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Esquema 8
η
mCPBA
PáJG, HgIíohTv
Esquema 9 540
Esquema 10 541
Esquema 11 542
Exemplo 21 Ácido fosfónico 22: a uma solução de dibenzil-fosfonato 6 (5,00 g, 6,39 mmol) em EtOH (100 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (1,4 g) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (3,66 g, 95%) com o aspecto de um sólido branco. 543
Exemplo 22
Difenil-fosfonato 23: preparou-se uma solução de 22 (3,65 g, 6,06 mmol) e fenol (5,70 g, 60,6 mmol) em piridina (30 mL), aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (5,00 g, 24,24 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Adicionou-se EtOAc e removeu-se por filtração o produto secundário, 1,3-diciclo-hexil-ureia. Concentrou-se o filtrado e dissolveu-se em CH3CN (20 mL) a 0°C Tratou-se a mistura com Resina de permuta iónica 'DOWEX 50W x 8-400' e agitou-se durante 30 minutos a 0°C Removeu-se a resina por filtração e concentrou-se o filtrado. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o difenil-fosfonato (2,74 g, 60%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 23 Ácido monofosfónico 24: a uma solução de 23 (2,74 g, 3,63 mmol) em CH3CN (40 mL) a 0°C adicionou-se NaOH IN (9,07 mL, 9,07 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora. Adicionou-se resina de permuta iónica 'DOWEX 50W x 8-400' e agitou-se a mistura de reacção durante 30 minutos a 0°C Removeu-se a resina por filtração e concentrou-se o filtrado e submeteu-se a co-evaporação com tolueno. Triturou-se o produto impuro com EtOAc/hexano (1/2) para se obter o ácido monofosfónico (2,34 g, 95%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 24 544
Monofosfolactato 25: preparou-se uma solução de 24 (2,00 g, 2,95 mmol) e etil-(S)-(-)-lactato (1,34 mL, 11,80 mmol) em piridina (20 mL), aqueceu-se até 70°C e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (2,43 g, 11,80 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Preparou-se uma suspensão do residuo em EtOAc removeu-se por filtração a 1,3-diciclo-hexil-ureia. Repartiu-se o produto entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (1,38 g, 60%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 25
Monofosfolactato 26: preparou-se uma solução de 25 (0,37 g, 0,48 mmol) em CH2C12 (0,80 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,40 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal de triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,27 mL, 1,92 mmol), seguindo-se o tratamento com cloreto de benzenossulfonilo (84 mg, 0,48 mmol). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. 545
Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e HC1 0,2N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,33 g, 85%, GS 192779, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CDCI3) 6 7,78 (dd, 2H) , 7,59 (m, 3H) , 7,38-7,18 (m, 7H), 6,93 (dd, 2H), 5,66 (m, 1H), 5,18-4,93 (m, 3H), 4,56— 4,4 (m, 2H), 4,2 (m, 2H) , 4,1-3,7 (m, 6H) , 3,17 (m, 1H) , 3,02-2,8 (m, 6H), 1,84 (m, 1H), 1,82-1,5 (m, 5H) , 1,27 (m, 3H) , 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) 617,4, 15,3.
Exemplo 26
Monofosfolactato 27: preparou-se uma solução de 25 (0,50 g, 0,64 mmol) em CH2CI2 (1,0 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,5 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (4 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,36 mL, 2,56 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-fluorocloreto de benzenossulfonilo (0,13 g, 0,64 mmol). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e HC1 0,2N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com 546
Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,44 g, 81%, GS 192776, mistura diastereomérica a 3/2) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDCla) 0 7,80 (m, 2H) , 7,38-7,15 (m, 9H) , 6,92 (m, 2H) , 5,66 (m, 1H), 5,2-4,9 (m, 3H) , 4,57-4,4 (m, 2H), 4,2 (m, 2H), 4,1-3,7 (m, 6H), 3,6 (s largo, 1H), 3,17 (m, 1H), 3,02-2,75 (m, 6H), 1,85 (m, 1H), 1,7-1,5 (m, 5H), 1,26 (m, 3H) , 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) Ô17,3, 15,2.
Exemplo 27
Monofosfolactato 28: preparou-se uma solução de 25 (6,50 g, 0,64 mmol) em CH2C12 (1,0 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,5 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,45 mL, 3,20 mmol), seguindo-se o tratamento com sal cloridrato de cloreto de 3-piridinilsulfonilo (0,14 g, 0,65 mmol). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e H20. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel 547 de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,41 g, 79%, GS 273806, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN- 3H (CDCI3) δ 9,0 (s, 1H) , 8 , 83 (dd , 1H), 8 , 06 (d, J=7,8 Hz, 1H) , 7,5 (m, 1H) , 7 ,38- 7,1! 5 (m , 7H) , 6,92 (m, 2H) , 5,66 (m, 1H) , 5,18 -4,95 (m, 3H) , 4, 6-4, 41 (m, 2H), 4, 2 (m , 2H), 4,0 (m, 1H) , 3,95-3,76 (m, 6H) , 3, 23- 2,8 (m, 7H) , 1, 88 (m, 1H) , 1, 7-1,5 (m, 5H) , 1 ,26 (m, 3H) , 0, 93 (d, J= 6, 6 Hz , 3H), 0,83 (d , J=6, 6 Hz, 3H); RMN _31p (CDCI3) δ 17,3, 15, 3.
Exemplo 28
Monofosfolactato 29: preparou-se uma solução de composto 28 (0,82 g, 1,00 mmol) em CH2C12 (8 mL) a 0°C e tratou-se com mCPBA (1,25 eq). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 6 horas. Repartiu-se a mistura de reacção entre CH2CI2 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (10% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,59 g, 70%, GS 273851, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDCI3) δ 8,63 (dd, 1H), 8,3 (dd, 1H) , 7,57 (m, 1H) , 7,44 (m, 1H) , 7,38-7,13 (m, 7H), 6,92 (m, 2H), 5,66 (m, 1H), 5,2-5,05 (m, 2H), 4,57-4,4 (m, 2H), 4,2 (m, 2H) , 4,0-3,73 (m, 6H) , 3,2 (m, 2H) , 3,0 (m, 4H), 2,77 (m, 1H), 1,92 (m, 1H), 1,7-1,49 (m, 5H), 1,26 (m, 3H) , 0,91 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,3, 15,3.
Exemplo 29 548
Monofosfolactato 30: preparou-se uma solução de composto 28 (71 mg, 0,087 mmol) em CHCI3 (1 mL) e tratou-se com MeOTf (18 mg, 0,11 mmol). Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 1 hora. Concentrou-se a mistura de reacção, submeteu-se a co-evaporação com tolueno (2x) e CHCI3 (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o monofosfolactato (81 mg, 95%, GS 273813, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN- 3H (CDCI3) δ 9 , 0 (dd, 1H), 8,76 (m, 2H) , 8,1 (m, 1H) , 7,35 -7, 1 (rn, 7H), 6,89 (m, 2H) , 5,64 (m, 1H) , 5,25-5, 0 (m, 3H) , 4, 6-4,41 (m, 5H), 4,2 (m, 2H) , 3, 92- 3, 72 (m, 6H) , 3,28 (m, 2H) , 3,04 -2,85 (m, 3H) , 2, 62 (rn, 1H), : 1, 97 (m, 1H) , 1, 62 -1, 5 (m, 5H) , 1,25 (m, 3H) , 0, 97 (m, 6H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 17,4, 15, 4 .
Exemplo 30
Dibenzil-fosfonato 31: preparou-se uma solução de composto 16 (0,15 g, 0,18 mmol) em CHC13 (2 mL) e tratou-se com
MeOTf (37 mg, 0,23 mmol). Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 2 horas. Concentrou-se a mistura de reacção e submeteu-se a co-evaporação com tolueno (2x), CHCI3 (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o dibenzil-fosfonato (0,17 g, 95%, GS 273812) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CDCI3) δ 9,0 (dd, 1H), 8,73 (m, 2H), 8,09 (m, 1H) , 7,35 (m, 10H) , 7,09 (d, J=8,4
Hz, 2H), 6,79 (d, J=8,l Hz, 2H) , 5,61 (d, J=4,2 Hz, 1H) , 5,2-4,96 (m, 6H), 4,54 (s, 3H), 4,2 (dd, 2H) , 3, 92-3, 69 (m, 6H), 3,3 (m, 2H), 3,04-2,6 (m, 5H) , 1,97 (m, 1H) , 1,6 (m, 2H) , 0,98 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,4.
Exemplo 31 549
Dibenzil-fosfonato 32: preparou-se uma solução de composto 16 (0,15 g, 0,18 mmol) em CH2CI2 (3 mL) a 0°C e tratou-se com mCPBA (1,25 eq) . Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Repartiu-se a mistura de reacção entre 10% de 2-propanol/CH2Cl2 e NaHC03 saturado. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (10% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (0,11 g, 70%, GS 277774) com o aspecto de um sólido branco: ΚΜΝ-1]! (CDC13) δ 8,64 (m, 1H) , 8,27 (d, J= 6,9
Hz, 1H), 7,57 (d, J=8,4 Hz, 1H) , 7,36 (m, 11H) , 7,10 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,81 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,22-5, 02 (m, 6H) , 4,21 (dd, 2H) , 3, 99-3, 65 (m, 6H) , 3,2 (m, 2H), 3,03-2,73 (m, 5H), 1,90 (m, 1H), 1,66-1,56 (m, 2H) , 0,91 (m 6H); RMN-31P (CDC13) 0 20,3.
Exemplo 32 Ácido fosfónico 33: a uma solução de dibenzil-fosfonato 32 (0,1 g, 0,12 mmol) em MeOH (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 1 hora. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e purificou-se por HPLC para se obter o ácido fosfónico (17 mg, GS 277775) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD3OD) δ 8,68 (s, 1H), 8,47 (d, j=6,0 Hz, 1H), 7,92 (d, J= 7,8 Hz, 1H) , 7,68 (m, 1H) , 7,14 (m, 2H) , 6,90 (d, J= 7,8 Hz, 2H), 5,58 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,00 (m, 1H) , 4,08 (d, J= 9,9 Hz, 2H) , 3, 93-3, 69 (m, 6H) , 3,4-2,9 (m, 550 7Η) , 2,5 (m, 1H), 2,04 (m, 1H), 1,6-1,35 (m, 2H), 0,92 (m, 6H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 15, 8.
Exemplo 33
Monofosfolactato 34: preparou-se uma solução de 25 (2,50 g, 3,21 mmol) em CH2CI2 (5,0 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (2,5 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (30 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (1,79 mL, 12,84 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-formilcloreto de benzenossulfonilo (0,72 g, 3,53 mmol) e agitou-se a solução a 0°C durante 1 hora. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e 5% HC1. Lavou-se a fase orgânica com H20, NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (2,11 g, 77%, GS 278052, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN- 3H (CDCI3) δ 10, 12 (s, 1H), 8,05 (d, J= 8,7 Hz , 2H), 7, 95 (d, =7,5 Hz, 2H) , 7 ,38- 7,15 (m, 7H), 6, 94 (m, 2H) , 5, 67 (m, 1H) , 5,18- 4, 91 (m , 3H), 4,57- 4,4 (m , 2H) , 4 , 2 (m, 2H) , 4,Ο 3, 69 (m, 6H) , 3, 57 (s largo , 1H) , 3,19 -2, 8 (m, 7H) , Ι, 87 (m, 1H) , 1,69-1 ,48 (m, 5), 1,25 (m, 3H) , 0,93 (d, J=6, 3 Hz, 3H) , o, 88 (d , J=6,3 Hz, 3H); RMN- -31P (CDCI3) δ 17,3, 15,2. 551
Exemplo 34
Monofosfolactato 35: preparou-se uma solução de 34 (0,60 g, 0,71 mmol) e morfolina (0,31 mL, 3,54 mmol) em EtOAc (8 mL) e tratou-se com HOAc (0,16 mL, 2,83 mmol) e NaBH3CN (89 mg, 1,42 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 4 horas. Repartiu-se o produto entre EtOAc e H20. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (6% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,46 g, 70%, GS 278115, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: ΗΜΝ^Η (CDC13) δ 7,74 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,52 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,38-7,15 (m, 7H) , 6,92 (m, 2H) , 5,66 (m, 1H) , 5,2-5,0 (m, 2H), 4,57-4,4 (m, 2H) , 4,2 (m, 2H), 3, 97-3,57 (m, 12H) , 3,2-2,78 (m, 7H) , 2,46 (s largo, 4H) , 1,87 (m, 1H) , 1,64-1,5 (m, 5H) , 1,25 (m, 3H) , 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,3, 15,3,
Exemplo 35
Monofosfolactato 37: preparou-se uma solução de 25 (0,50 g, 0,64 mmol) em CH2C12 (2,0 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (1 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (3 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se 552 trietilamina (0,45 mL, 3,20 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-benziloxicloreto de benzenossulfonilo (0,18 g, 0,64 mmol, preparado tal como descrito por Toja, E. et al. Eur. J. Med. Chem. 1991, 26, 403) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até a temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e HC1 0,1N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,51 g, 85%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 36
Monofosfolactato 38: a uma solução de 37 (0,48 g, 0,52 mmol) em EtOH (15 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (0,10 g) .
Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (5% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,38 g, 88%, GS 273838, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: ΕΜΝ^Η (CDCI3) δ 8,86 (dd, 1H), 7,42-7,25 (m, 9H) , 6,91 (m, 4H) , 5,73 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,42 (m, 1H) , 5,18 (m, 2H) , 4,76-4,31 (m, 2H) , 4,22 (m, 2H) , 4,12-3,75 (m, 6H) , 3,63 (s largo, 1H), 3,13 (m, 3H), 2,87 (m, 1H), 2,63 (m, 1H), 2,4 (m, 1H), 2,05 (m, 2H), 1,9 (m, 1H) , 1,8 (m, 1H) , 1,6 (m, 3H) , 1,25 (m, 3H) , 0,95 (d, J=6,6 Hz, 3H), 0,85 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,1, 15,7. 553
Exemplo 37
Monofosfolactato 40: preparou-se uma solução de 25 (0,75 g, 0,96 mmol) em CH2C12 (2,0 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (1 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (4 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,67 mL, 4,80 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-(4'-benziloxicarbonil-piperazinil)-cloreto de benzenossulfonilo (0,48 g, 1,22 mmol, preparado tal como descrito por Toja, E. et al. Arzneim. Forsch. 1994, 44, 501) . Agitou-se a solução a 0°C durante 1 hora e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre 10% de 2-propanol/CH2Cl2 e HC1 0,1N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,63 g, 60%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 38
Monofosfolactato 41: a uma solução de 40 (0, 62 g, 0,60 mmol) em MeOH (8 mL) e EtOAc (2 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (0,20 g) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se 554 a mistura de reacção através de uma camada de celite. Tratou-se o filtrado com 1,2 equivalentes de TFA, efectuou-se a co-evaporação com CHC13 e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o monofosfolactato (0,55 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 39
Monofosfolactato 42: preparou-se uma solução de 41 (0,54 g, 0,53 mmol) e formaldeido (0,16 mL, 5,30 mmol) em EtOAc (10 mL) e tratou-se com HOAc (0,30 mL, 5,30 mmol) e NaBH3CN (0,33 g, 5,30 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Repartiu-se o produto entre EtOAc e H20. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (6% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (97,2 mg, 20%, GS 277937, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CDC13) δ 7, 64 (d, J=9,0 Hz, 2H) , 7,38-7,17 (m, 7H) , 6, 95-6, 88 (m, 4H), 5,67 (m, 1H), 5,2-4,96 (m, 2H) , 4,57-4,4 (m, 2H), 4,2 (m, 2H), 3,97-3,64 (m, 8H), 3,49-3,37 (m, 4H), 3, 05-2,78-(m, 12H) , 1,88-1, 62 (m, 3H) , 1,58 (m, 3H) , 1,25 (m, 3H), 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H), 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 17,3, 15,3.
Exemplo 40
Monofosfolactato 45: preparou-se uma solução de 43 (0,12 g, 0,16 mmol) e lactato 44 (0,22 g, 1,02 mmol) em piridina (1 mL), aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,17 g, 0,83 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 4 horas e arrefeceu-se até à 555 temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Preparou-se uma suspensão do resíduo em EtOAc removeu-se por filtração a 1,3-diciclo-hexil-ureia. Repartiu-se o produto entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (45 mg, 26%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 41 Álcool 46: a uma solução de 45 (40 mg, 0,042 mmol) em EtOAc (2 mL) adicionou-se 20% Pd(OH)2/C (10 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 3 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado secou-se o produto sob uma pressão hipobárica para se obter o álcool (33 mg, 90%, GS 278809, mistura diastereomérica a 3/2) com o aspecto de um sólido branco: ΕΜΝ-1]! (CDC13) δ 7, 72 (d, J=8, Ί Hz , 2H) , 7,39-7,15 (m, 7H) , 7,02 -6 ,88 (m, 4H) , 5,66 (d, J=4, 5 Hz, 1H) , 5,13-5 .,02 (m, 2H) , 4, 54-4 ,10 (m, 4H) , 4,00- -3,69 (m, 11H) , 3,14 (m, 1H) , 3,02- -2 ,77 (m, 6H) , 1.85· -1,6 (m, 6H), 0,94 (d, J= =6,3 Hz, 3H) , 0 ,89 (d, J= 6 ,3 Hz, 3H) ; RMN- •31P (CDC13) δ 17,4, 15, 9.
Esquema 12 556
c I I â mjFA.CHgCfg fír Η §Η
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Esquema 13 557
Esquema 14 558 48 <1)TFA,CHaCk
TÊA, CHgCíg
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Pd / C, Hg eiõHr.t'
48 (t)TFA/CHfeaa (2}T1A/ CH^Cig
Pd/a H* "ΈαΓΚΓ^
Esquema 15
559
Na8H4, ~1S°G THF/H$0(S/1?
Ester ase, tarçao PBS CH3CN / 0^80,40^
Exemplo 42
Monobenzilfosfonato 47: preparou-se uma solução de 6 (2,00 g, 2,55 mmol) e DABC0 (0,29 g, 2,55 mmol) em tolueno (10 mL) e aqueceu-se até ao refluxo durante 2 horas. Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com H20, NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e 560 concentrou-se. Secou-se o produto impuro sob uma pressão hipobárica para se obter o monobenzilfosfonato (1,68 g, 95%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 43
Monofosfolactato 48: a uma solução de 47 (2,5 g, 3,61 mmol) e benzil-(S)-(-)-lactato (0,87 mL, 5,42 mmol) em DMF (12 mL) adicionou-se PyBop (2,82 g, 5,42 mmol) e N,N-diisopropiletilamina (2,51 mL, 14,44 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 3 horas e concentrou-se. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com H2O, NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (1,58 g, 51%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 44
Monofosfolactato 49: preparou-se uma solução de 48 (0,30 g, 0,35 mmol) em CH2CI2 (0,6 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,3 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (2 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,20 mL, 1,40 mmol), seguindo-se o tratamento com cloreto de benzenossulfonilo (62 mg, 0,35 mmol). 561
Agitou-se a solução a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e HC1 0,1N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,17 g, 53%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 45
Metabolito X 50: a uma solução de 49 (80 mg, 0,09 mmol) em EtOH (6 mL) e EtOAc (2 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 8 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado, efectuou-se a co-evaporação com CHCI3 e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o metabolito X (61 mg, 95%, GS 224342) com o aspecto de um sólido branco: RMN-3H (CD3OD) δ 7,83 (d, J=6,9 Hz, 2H), 7, 65-7,58 (m, 3H), 7,18 (d, J=7,8 Hz, 2H), 6,90 (d, J=7,8 Hz, 2H) , 5,59 (d, J=4,8 Hz, 1H), 5,0 (m, 1H) , 4,27 (d, J=10,2 Hz, 2H) , 3,95-3,68 (m, 6H), 3,45 (dd, 1H) , 3,18-2,84 (m, 6H) , 2,50 (m, 1H) , 2,02 (m, 1H), 1,6-1,38 (m, 5H) , 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H); RMN-31P (CD3OD) , δ 18,0.
Exemplo 46
Monofosfolactato 51: preparou-se uma solução de 48 (0,28 g, 0,33 mmol) em CH2C12 (0,6 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,3 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de 562 reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x), secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (2 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,18 mL, 1,32 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-fluorocloreto de benzenossulfonilo (64 mg, 0,33 mmol). Agitou-se a solução a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e HC1 0,1N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,16 g, 52%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 47
Metabolito X 52: a uma solução de 51 (80 mg, 0,09 mmol) em EtOH (6 mL) e EtOAc (2 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg). Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 8 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado, efectuou-se a co-evaporação com CHCI3 e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o metabolito X (61 mg, 95%, GS 224343) com o aspecto de um sólido branco: RMN-3H (CD3OD) δ 7,9 (dd, 2H), 7,32 (m, 2H) , 7,18 (dd, 2H) , 6,90 (dd, 2H) , 5,59 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,0 (m, 1H) , 4,28 (d, J=10,2 Hz, 2H), 3,95-3,72 (m, 6H), 3,44 (dd, 1H), 3,15-2,85 (m, 6H), 2,5 (m, 1H), 2,02 (m, 1H), 1,55-1,38 (m, 5H), 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,3 Hz, 3H) . RMN-31P (CD3OD) δ 18,2. 563
Exemplo 48
Monofosfolactato 53: preparou-se uma solução de 48 (0,20 g, 0,24 mmol) em CH2C12 (0,6 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,3 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (2 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,16 mL, 1,20 mmol), seguindo-se o tratamento com sal cloridrato de cloreto de 3-piridinilsulfonilo (50 mg, 0,24 mmol). Agitou-se a solução a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se o produto entre CH2C12 e H20. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,11 g, 53%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 49
Metabolito X 54: a uma solução de 53 (70 mg, 0,09 mmol) em EtOH (5 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 5 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado, efectuou-se a co-evaporação com CHCI3 e secou-se sob uma 564 pressão hipobárica para se obter o metabolito X (53 mg, 95%, GS 273834) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1!! (CD3OD) δ 8,99 (s, 1H), 8,79 (d, J=4,2 Hz, 1H) , 8,29 (d, J=7,5 Hz, 1H) , 7,7 (m, 1H) , 7,15 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,9 (d, J= 7,8 Hz, 2H) , 5,59 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,0 (m, 1H) , 4,28 (d, J=9, 9 Hz, 2H), 3, 97-3, 70 (m, 6H), 3,44 (dd, 1H), 3,17- 2,85 (m, 6H), 2,5 (m, 1H), 2,03 (m, 1H), 1,65-1,38 (m, 5H),
0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,3 Hz, 3H) . RMN-31P (CD3OD) δ 17,8 .
Exemplo 50
Monofosfolactato 55: preparou-se uma solução de 48 (0,15 g, 0,18 mmol) em CH2C12 (1 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,5 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (2 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (0,12 mL, 0,88 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-benziloxicloreto de benzenossulfonilo (50 mg, 0,18 mmol). Agitou-se a solução a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 30 minutos. Repartiu-se 0 produto entre CH2C12 e HC1 0,1N. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,11 g, 63%) com o aspecto de um sólido branco. 565
Exemplo 51
Metabolito X 56: a uma solução de 55 (70 mg, 0,07 mmol) em EtOH (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (20 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 4 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado, efectuou-se a co-evaporação com CHC13 e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o metabolito X (46 mg, 90%, GS 273847) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CD30D) , hi, 91 (s, 1H) , 7, 65 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,17 (d, J= 8, 1 Hz , 2H), 6,91 (m, 4H) , 5,59 (d, J=5,l Hz, 1H), 5,0 (m, 1H) , 4,27 (d, J=10, 2 Hz, 2H) , 3,97-3,74 (m, 6H) , 3,4 (dd, 1H) , 3,17 -2,8 (m, 6), 2, 5 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), : 1,6- 1,38 (m, 5H) , 0,93 (d, J=6, 3 Hz, 3H), 0,88 (d, J=6, 3 Hz, 3H) ; RMN- -31P (CD3OD) δ 17, 9.
Exemplo 52
Metabolito X 57: a uma suspensão de 29 (40 mg, 0,05 mmol) em CH3CN (1 mL) , DMSO (0,5 mL) e tampão de PBS 1,0M (5 mL) adicionou-se esterase (200 μΕ) . Aqueceu-se a suspensão até 40°C durante 48 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, colocou-se em suspensão em MeOH e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e purificou-se por HPLC para se obter o metabolito X (20 mg, 57%, GS 277777) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CD3OD) δ 8,68 (s, 1H) , 8,47 (d, J=6,0
Hz, 1H), 7,93 (d, J= 7,8 Hz, 1H) , 7,68 (m, 1H) , 7,15 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,9 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 5,59 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,0 (m, 1H) , 4,23 (d, J=10,5 Hz, 2H) , 3, 97-3,68 (m, 6H) , 3,45 (dd, 1H), 3,15-2,87 (m, 6H) , 2,46 (m, 1H) , 2,0 566 (m, 1H), 1,6-1,38 (m, 5H) , 0,95 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H); RMN-31P (CD3OD) δ 17,2.
Exemplo 53 [1484] Metabolito X 58: a uma suspensão de 35 (60 mg, 0,07 mmol) em CH3CN (1 mL), DMSO (0,5 mL) e tampão de PBS 1,0M (5 mL) adicionou-se esterase (400 μΗ) . Aqueceu-se a suspensão até 40°C durante 3 dias. Concentrou-se a mistura de reacção, colocou-se em suspensão em MeOH e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e purificou-se por HPLC para se obter o metabolito X (20 mg, 38%, GS 278116) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD3OD) δ 7,74 (d, J= 6,9 Hz, 2H) , 7,63 (d, J=7,5 Hz, 2H) , 7,21 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 6,95 (d, J=8,l Hz, 2H), 5,64 (d, J=5,l Hz 1H), 5,0 (m, 2H), 4,41 (m, 2H), 4,22 (m, 2H) , 3, 97-3, 65 (m, 12H), 3,15-2,9 (m, 8H), 2,75 (m, 1H), 2,0 (m, 1H), 1,8 (m, 2H), 1,53 (d, J=6,9 Hz, 3H), 0,88 (m, 6H).
Exemplo 54
Monofosfolactato 59: preparou-se uma solução de 34 (2,10 g, 2,48 mmol) em THF (72 mL) e H20 (8 mL) a -15°C e tratou-se com NaBH4 (0,24 g, 6,20 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 10 minutos a -15°C. Extinguiu-se a reacção com uma solução aquosa de NaHS03 a 5% e extraiu-se com CH2C12 (3x). Lavou-se as fases orgânicas combinadas com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (5% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter monofosfolactato (1,89 g, 90%, GS 278053, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDC13) δ 7,64 (m, 2H), 7,51 (m, 2H) , 7,38-7,19 (m, 567 7Η) , 6,92 (m, 2H) , 5,69 (d, J= 4,8 Hz, 1H) , 5,15 (m, 2H) , 4,76 (s, 2H), 4,54 (d, J=10,5 Hz, 1H) , 4,44 (m, 1H) , 4,2 (m, 2H), 4, 04-3,68 (m, 6H) , 3, 06-2,62 (m, 7H), 1,8 (m, 3H), 1,62-1,5 (dd, 3H), 1,25 (m, 3H) , 0,94 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,87 (d, J=6,3 Hz, 3H); RMN-31P (CDC13) δ 17,4, 15,4.
Exemplo 55
Metabolito X 60: a uma suspensão de 59 (70 mg, 0,08 mmol) em CH3CN (1 mL), DMSO (0,5 mL) e tampão de PBS 1,0M (5 mL) adicionou-se esterase (600 μΐΟ . Aqueceu-se a suspensão até 40°C durante 36 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, colocou-se em suspensão em MeOH e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e purificou-se por HPLC para se obter o metabolito X (22 mg, 36%, GS 278764) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD3OD) δ 7,78 (dd, 2H) , 7,54 (dd, 2H), 7,15 (m, 2H) , 6,9 (m, 2H) , 5,57 (d, 1H) , 5,0 (m, 2H) , 4,65 (m, 4H), 4,2 (m, 2H), 3,9-3,53 (m, 6H), 3,06-2,82 (m, 6H) , 2,5 (m, 1H), 2,0 (m, 2H), 1, 62-1,35 (m, 3H), 0,94 (m, 6H) .
Esquema 16 62 (1) 568 62 (1) 568
OH**
61
BSA/CH|GR refluxo
(2) NaBN^CN, HOAc, EíOAc {3} 2% HF, CH3CN HGHO, HaBHsCNt HOÂC, EíOAc, r.t
Esquema 17 569 569
οι**'
8SA /CH3CN {2} NaBHaCN, HQÃe**
EtOAc, r,t.
<1) BSA/CHaCN, refluxo (2} NaBH3CN, HCHO HGÂe, EtOAc, r.t
Esquema 18 570
Exemplo 56 Ácido fosfónico 63: dissolveu-se o composto 62 (0,30 g, 1,12 mmol) em CH3CN (5 mL). Adicionou-se N,0- bis(trimetilsilil)-acetamida (BSA, 2,2 mL, 8,96 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até ao refluxo durante 2 horas, arrefeceu-se até à temperatura ambiente, e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e clorofórmio e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um óleo espesso que se dissolveu em EtOAc (4 mL) e se arrefeceu até 0°C Aldeído 61 (0,20 g, 0,33 mmol). Adicionou-se AcOH (0,18 mL, 3,30 mmol) e NaBHaCN (0,20 g, 3,30 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e agitou-se de um dia para o outro. Extinguiu-se a reacção com H20, agitou-se durante 30 min, filtrou-se e concentrou-se. Dissolveu-se o produto impuro 571 em CH3CN (13 mL) e solução aquosa de HF a 48% (0,5 mL) .
Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por HPLC para se obter o ácido fosfónico (70 mg, 32%, GS 277929) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD30D) δ 7, 92 (dd, 2H) , 7,73 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,63 (dd, 2H) , 7,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,68 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,13 (m, 1H), 4,4 (m, 2H), 4,05-3,89 (m, 8H), 3,75 (m, 1H), 3,5 (m, 1H), 3,37 (m, 1H), 3,23-3,0 (m, 3H), 2,88-2,7 (m, 2H), 2,2 (m, 1H) , 1,8 (m, 2H) , 0,92 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,85 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 14,5,
Exemplo 57 Ácido fosfónico 64: preparou-se uma solução de 63 (50 mg, 0,07 mmol) e formaldeido (60 mg, 0,70 mmol) em EtOAc (2 mL) e tratou-se com HOAc (43 μΗ, 0,70 mmol) e NaBH3CN (47 mg, 0,7 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 26 horas. Extinguiu-se a reacção com H20, agitou-se durante 20 minutos e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por HPLC para se obter o ácido fosfónico (15 mg, 29%, GS 277935) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CD3OD) δ 7, 93 (m, 2H), 7,75 (m, 2H) , 7,62 (m, 2H), 7,11 (m, 2H) , 5,66 (m, 1H), 5,13 (m, 1H), 4,4 (m, 2H) , 4,05-3,89 (m, 8H), 3,75 (m, 2H), 3, 09-2,71 (m, 6H) , 2,2 (m, 1H), 1,9 (m, 5H), 0,92 (d, J=6,3 Hz, 3H), 0,85 (d, J=6,3
Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 14,0.
Exemplo 58 Ácido fosfónico 66: dissolveu-se ácido 2-aminoetil-fosfónico (2,60 g, 21,66 mmol) em CH3CN (40 mL) . Adicionou- 572 se N,O-bis(trimetilsilil)-acetamida (BSA, 40 mL) . Aqueceu-se a mistura de reacção até ao refluxo durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e clorofórmio e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um óleo espesso que se dissolveu em EtOAc (40 mL) . Adicionou-se aldeído 65 (1,33 g, 2,25 mmol), AcOH (1,30 mL, 22,5 mmol) e NaBH3CN (1,42 g, 22,5 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Extinguiu-se a reacção com H20, agitou-se durante 1 h, filtrou-se e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em MeOH e filtrou-se. Purificou-se o produto impuro por HPLC para se obter o ácido fosfónico (1,00 g, 63%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 59
Ácido fosfónico 67: dissolveu-se ác. fosfónico 66 (0,13 g, 0,19 mmol) em CH3CN (4 mL) . Adicionou-se N,Gibis (trimetilsilil)-acetamida (BSA, 0,45 mL, 1,90 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até ao refluxo durante 2 horas, arrefeceu-se até à temperatura ambiente e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e clorofórmio e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um óleo espesso que se dissolveu em EtOAc (3 mL) . Adicionou-se formaldeído (0,15 mL, 1,90 mmol), AcOH (0,11 mL, 1,90 mmol) e NaBH3CN (63 mg, 1,90 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Extinguiu-se a reacção com H20, agitou-se durante 6 horas, filtrou-se e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em MeOH e filtrou-se. Purificou-se o produto impuro por HPLC para se obter o ácido fosfónico (40 mg, 30%, GS 573 277957) com o aspecto de um sólido branco: ΗΜΝ^Η (CD3OD) δ 7,78 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,4 (m, 4H) , 7,09 (d, J=8,4 Hz, 2H), 5,6 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 4,33 (m, 2H) , 3, 95-3, 65 (m, 9H) , 3,5-3,05 (m, 6H), 2,91-2,6 (m, 7H), 2,0 (m, 3H), 1,5 (m, 2H), 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H) , 0,87 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) Ô 19, 7.
Exemplo 60
Metabolito X 69: dissolveu-se monofosfolactato 68 (1,4 g, 1,60 mmol) em CH3CN (20 mL) e H20 (20 mL) . Adicionou-se
NaOH 1,0 N (3,20 mL, 3,20 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1,5 horas e arrefeceu-se até 0°C. Acidificou-se a mistura de reacção até pH = 1-2 com HC1 2N (1,6 mL, 3,20 mmol). Evaporou-se o solvente sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por HPLC para se obter o metabolito X (0,60 g, 49%, GS 273842) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (DMSO-d6) δ 7,72 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,33 (m, 4H) , 7,09 (d, J=9,0
Hz, 2H) , 5,52 (d, J= 5,7 Hz, 1H) , 5,1 (s largo, 1H) , 4,85 (m, 1H) , 4,63 (m, 1H) , 4,13 (m, 2H) , 3,8 (m, 5H) , 3,6 (m, 4H), 3,36 (m, 1H), 3,03 (m, 4H), 2,79 (m, 3H), 2,5 (m, 1H), 2,0 (m, 3H), 1,5-1,3 (m, 5H), 0,85 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,79 (d, J=6, 6 Hz, 3H) ; RMN-31P (DMSO-de) δ 21, 9.
Esquema 19 574 Q|t*·
Esquema 20
Boc-L-valina _ TFA, CH2Q13 ~
Esquema 21 576 576
íslHCte:
NHObz ¢1) BSA, CHaCN. refluxo (2) CbzCI, Piridina CH^Cíg, 0®C to r.t
Dibenzildiisopoipil-fosforamidite IH-tetrazole, r.t. (2) (1) Pd /Ct Ha ΒΟΗ/ΕΪΟΑο iSSs#
Exemplo 61
Monofosfolactato 70: preparou-se uma solução de 59 (1,48 g, 1,74 mmol) e Boc-L-valina (0,38 g, 1,74 mmol) em CH2CI2 (30 mL) a 0°C e tratou-se com 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,45 g, 2,18 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (26 mg, 0,21 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora 577 e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 2 horas. Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e HC1 0,2N. Lavou-se a fase orgânica com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (1,65 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 62
Monofosfolactato 71: preparou-se uma solução de 70 (1,65 g, 1,57 mmol) em CH2C12 (8 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (4 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se 0 produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (10% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (1,42 g, 85%, GS 278635, mistura diastereomérica a 2/3) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7,73 (m, 2H) , 7,49 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 7,4-7,1 (m, 7H) , 6,89 (m, 2H) , 5,64 (m, 1H) , 5,47 (m, 1H) , 5,33-5,06 (m, 4H), 4,57-4,41 (m, 2H), 4,2 (m, 2H), 3,96-3,7 (m, 7H), 3,15-2,73 (m, 7H), 2,38 (m, 1H), 1,9 (m, 1H), 1,7 (m, 1H), 1,63-1,5 (m, 4H) , 1,24 (m, 3H) , 1,19 (m, 6H) , 0,91 (d, 3H) , 0,88 (d, 3H); RMN-31P (CDC13) δ 17,3, 15,4.
Exemplo 63
Monofosfolactato 73: preparou-se uma solução de 72 (0,43 g, 0,50 mmol) e Boc-L-valina (0,11 g, 0,50 mmol) em CH2C12 (6 mL) e tratou-se com 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,13 g, 0,63 mmol) e 4-dimetilaminopiridina (62 mg, 0,5 mmol). 578
Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e HC1 0,2N. Lavou-se a fase orgânica com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (2% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,45 g, 85%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 64
Monofosfolactato 74: preparou-se uma solução de 73 (0,44 g, 0,42 mmol) em CH2C12 (1 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,5 mL) . Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (10% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (0,40 g, 90%, GS 278785, mistura diastereomérica a 1:1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-" lh (CDCI3) 6 7,69 (d , J= 8,4 Hz, 2H) , 7,34- -7,2 (m, 7H), 6, 98 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 4,2 (m, 3H) , (m, 2H) , 1—1 (m, 1H), 5, 64 (m, 1H) , 5,46 (m, 1H) , 5,2-5 , 0 (m 2H) , 4,5 (m, 2H) , 4, 2 (m, 3H), 4, 0-3, 4 (m, , 9H) , 3,3 ( \—1 e , 3,0 1 N9 CO (m, 5H) , 2, 5 (m, 1H), 1 , 83 (m, 1H) , 1,6-1, 5 (m, 5H) , 125 (m, 3H) , 1, 15 (m, 6H) , 0,82 (d, J= 6 ,0 Hz, 3H) , 0 ,76 (d, J O II Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) Ô17,3, 15,5.
Exemplo 65
Cbz-amida 76: dissolveu-se o composto 75 (0,35 g, 0,69 mmol) em CH3CN (6 mL) . Adicionou-se N,O-bis(trimetilsilil)-acetamida (BSA, 0,67 mL, 2,76 mmol). Aqueceu-se a mistura 579 de reacção até ao refluxo durante 1 hora, arrefeceu-se até à temperatura ambiente, e concentrou-se. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno e clorofórmio e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter um óleo espesso que se dissolveu em CH2CI2 (3 mL) e se arrefeceu até 0°C adicionou-se piridina (0,17 mL, 2,07 mmol) e cloroformato de benzilo (0,12 mL, 0,83 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Extinguiu-se a reacção com MeOH (5 mL) e 10% HC1 (20 mL) a 0°C e agitou-se durante 1 hora. Extraiu-se o produto com CH2CI2, lavou-se com salmoura, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a Cbz-amida (0,40 g, 90%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 66
Dibenzil-fosfonato 77: preparou-se uma solução de 76 (0,39 g, 0,61 mmol) e lH-tetrazole (54 mg, 0,92 mmol) em CH2CI2 (8 mL), tratou-se com dibenzildiisopropilfosforamidite (0,32 g, 0,92 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente de um dia para o outro. Arrefeceu-se a solução até 0°C, tratou-se com mCPBA, agitou-se durante 1 hora a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante 1 hora. Verteu-se a mistura de reacção numa mistura de solução aquosa de Na2S03 e NaHCCb e extraiu-se com CH2C12, Lavou-se a fase orgânica com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 580 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (0,42 g, 76%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 67
Sal dissódico de ácido fosfónico 78: a uma solução de 77 (0,18 g, 0,20 mmol) em EtOH (20 mL) e EtOAc (4 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (40 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à temperatura ambiente, durante 4 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (0,11 g, 95%) que se dissolveu em H20 (4 mL) e se tratou com NaHCCh (32 mg, 0,38 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora e liofilizou-se de um dia para o outro para se obter o sal dissódico de ácido fosfónico (0,12 g, 99%, GS 277962) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (D20) δ 7,55 (dd, 2H), 7,2 (m, 5H), 7,77 (dd, 2H), 4,65 (m, 1H) , 4,24 (m, 1H) , 4,07 (m, 1H) , 3,78-2,6 (m, 12H) , 1,88-1,6 (m, 3H), 0,75 (m, 6H).
Secção N de exemplos
Esquema 1 581
I. H2/Pd a 10%-C/EtOAc-EtOH; II. Tf2NPh/Cs2C03; III. Bu3SnCH=CH2/PdCl2 (PPh3) 2/LiCl/DMF/90°C; IV. a. TFA/CH2C12; b. Bisfuranocarbonato/i-Pr2NEt/DMAP; V. NaI04/0s04/Et0Ac-H20
Exemplo 1 0 composto 1 foi preparado pelos métodos aqui descritos nos exemplos.
Exemplo 2
Composto 2: a uma solução de composto 1 (47,3 g) em
EtOH/EtOAc (1000 mL/500 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (5 g) . Hidrogenou-se a mistura durante 19 horas. Adicionou-se 582
Celite e agitou-se a mistura durante 10 minutos. Filtrou-se a mistura através de uma camada de celite e lavou-se com acetato de etilo. Por concentração obteve-se o composto 2 (42,1 g).
Exemplo 3
Composto 3: a uma solução de composto 2 (42,3 g, 81 mmol) em CH2C12 (833 mL) adicionou-se N- feniltrifluorometanossulfonimida (31,8 g, 89 mmol), seguindo-se carbonato de césio (28,9 g, 89 mmol). Agitou-se a mistura durante 24 horas. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e adicionou-se acetato de etilo. Lavou-se a mistura de reacção com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCç. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/EtOAc = 13/1) proporcionou o composto 3 (49,5 g) com o aspecto de um pó branco.
Exemplo 4
Composto 4: a uma solução de composto 3 (25,2, 38,5 mmol) em DMF (240 mL) adicionou-se cloreto de litio (11,45 g, 270 mmol), seguindo-se diclorobis(trifenilfosfina)-paládio(II) (540 mg, 0,77 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 minutos sob vácuo intenso e recarregou-se com azoto. À solução anterior adicionou-se tributilvinil-estanho (11,25 mL). Aqueceu-se a mistura de reacção a 90°C durante 6 horas e arrefeceu-se até 25°C. Adicionou-se água à mistura de reacção e extraiu-se a mistura com acetato de etilo (3x) . Lavou-se a fase orgânica combinada com água (6x) e salmoura e secou-se sobre MgSCh · Por concentração obteve-se um óleo. Diluiu-se o óleo com diclorometano (40 mL) e adicionou-se água (0, 693 mL, 38,5 mmol) e DBU (5,76 mL, 38,5 mmol). 583
Agitou-se a mistura durante 5 minutos e submeteu-se a cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2,5/1). Obteve-se o composto 4 com o aspecto de um sólido branco (18,4 g).
Exemplo 5
Composto 5: a uma solução de composto 4 (18,4 g, 34,5 mmol) em CH2C12 (70 mL) a 0°C adicionou-se ácido trifluoroacético (35 mL) . Agitou-se a mistura a 0°C durante 2 horas, e evaporou-se os solventes sob pressão reduzida. Extinguiu-se a mistura de reacção com solução saturada de carbonato de sódio e extraiu-se com acetato de etilo (3x). Lavou-se a fase orgânica combinada com solução saturada de carbonato de sódio (lx) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCL. Por concentração obteve-se um sólido. A uma solução do sólido anterior em acetonitrilo (220 mL) a 0°C adicionou-se bisfuranocarbonato (10,09 g, 34,2 mmol), seguindo-se di-isopropiletilamina (12,0 mL, 69,1 mmol) e DMAP (843 mg, 6,9 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Removeu-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com água (2x), ácido clorídrico a 5% (2x), água (2x), em hidróxido de sódio (2x), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCL. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1/1)) proporcionou o composto 5 (13,5 g).
Exemplo 6
Composto 6: a uma solução de composto 5 (13,5 g, 23 mmol) em acetato de etilo (135 mL) adicionou-se água (135 mL), seguindo-se 2,5% tetraóxido de ósmio/terc-butanol (17 mL). 584
Adicionou-se progressivamente periodato de sódio (11,5 g) ao longo de 2 minutos. Agitou-se a mistura durante 90 minutos e diluiu-se com acetato de etilo. Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1/2) proporcionou o composto 6 com o aspecto de um pó branco (12 g) : RMN-1]! (CDC13) δ 9,98 (1H, s), 7,82 (2H, m), 7,75 (2H, m) , 7,43 (2H, m) , 6,99 (2H, m) , 5,64 (1H, m), 5,02 (2H, m) , 4,0-3,8 (9H, m) , 3,2-2,7 (7H, m) , 1,9-1,4 (3H, m), 0,94 (6H, m).
Esquema 2
I.a. SOCl2/tolueno/600C; b. PhOH/piridina; II.a. Na0H/THF/H20; b. HCl; III.b. SOCl2/tolueno/60°C; c. lactato de etilo/piridina; IV. H2/Pd a 10%-C/EtOAc
Esquema 3 585
I.a. TFA/CH2C12; b. bisfuranocarbonato/i-Pr2NEt/DMAP; II. a. EtaSiCl/ imidazole/DMF; b. H2/Pd(OH)2 a 20%-C/iPrOH; III. Reagente de Des-Martin/CH2C12
Esquema 4
11 + 1S
1? 586 I.a. NaBH3CN/HOAc/EtOAc; b. HF a 2%/CH3CN; II. HCHO/NaBH3CN/HOAc/EtOAc
Exemplo 8
Composto 8: à suspensão de composto 7 (15,8 g, 72,5 mmol) em tolueno (140 mL) adicionou-se DMF (1,9 mL), seguindo-se cloreto de tionilo (53 mL, 725 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção a 60°C durante 5 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x), EtOAc e CH2CI2 (2x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido castanho em CH2C12 a 0°C adicionou-se fenol (27,2 g, 290 mmol), seguindo-se a adição lenta de piridina (35 mL, 435 mmol). Deixou-se a mistura de reacção aquecer até 25°C e agitou-se durante 14 horas. Removeu-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um óleo escuro, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 4/1 a 1/1) para se obter o composto 8 (12,5 g).
Exemplo 9
Composto 9: a uma solução de composto 8 (2,21 g, 6 mmol) em THF (30 mL) adicionou-se 12 mL de solução de NaOH 1,0N. Agitou-se a mistura a 25°C durante 2 horas e removeu-se o THF sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com água e ácido acético (343 mL, 6 mmol) . Lavou-se a fase aquosa com EtOAc (3x) e depois acidificou-se com HC1 concentrado até pH = 1. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (3x). Lavou-se a fase orgânica combinada com água (lx) e salmoura (lx) e 587 secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 9 com o aspecto de um sólido (1,1 g) .
Exemplo 10
Composto 10: a uma suspensão de composto 9 (380 mg, 1,3 mmol) em tolueno (2,5 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (1 mL, 13 mmol), seguindo-se DMF (1 gota). Aqueceu-se a mistura a 60°C durante 2 horas. Removeu-se o solvente e o reagente sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x) e CH2CI2 para se obter um sólido branco. À solução do sólido anterior em CH2CI2 (5 ml) a -20°C adicionou-se lactato de etilo (294 μΕ, 2,6 mmol), seguindo-se piridina (420 μΡ, 5,2 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida para se obter um sólido amarelo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida para gerar o composto 10 (427 mg).
Exemplo 11
Composto 11: a uma solução de composto 10 (480 mg) em EtOAc (20 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (80 mg) . Hidrogenou-se a mistura de reacção durante 6 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos, e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 11 (460 mg) .
Exemplo 12 O composto 12 foi preparado pelos métodos aqui descritos nos exemplos. 588
Exemplo 13
Composto 13: a uma solução de composto 12 (536 mg, 1,0 mmol) em CH2C12 (10 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (2 mL). Agitou-se a mistura durante 2 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o liquido a co-evaporação com CH2C12 (3x) e EtOAc (3x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido castanho anterior em acetonitrilo (6,5 mL) a 0°C adicionou-se bisfuranocarbonato (295 mg, 1,0 mmol), seguindo-se diisopropiletilamina (350 μL, 2,0 mmol) e DMAP (24 mg). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc e lavou-se sequencialmente com água (2x), HC1 0,5N (2x), água (2x), solução de NaOH 0,5N (2x), água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1/1) proporcionou o composto 13 (540 mg) .
Exemplo 14
Composto 14: a uma solução de composto 13 (400 mg, 0,67 mmol) em DMF (3 mL) adicionou-se imidazole (143 mg, 2,10 mmol), seguindo-se trietilclorossilano (224 μΐ, 1,34 mmol). Agitou-se a mistura durante 12 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (5x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2/1) proporcionou um sólido branco (427 mg) . À solução do sólido anterior em isopropanol (18 mL) adicionou-se hidróxido de paládio(II) a 20% sobre carvão (120 mg) . Hidrogenou-se a mistura durante 12 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 14 (360 mg). 589
Exemplo 15
Composto 15: a uma solução de composto 14 (101 mg, 0,18 mmol) em CH2C12 (5 mL) adicionou-se periodiano de Dess-Martin (136 mg, 0,36 mmol). Agitou-se a mistura durante 1 hora. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2/1) proporcionou o composto 15 (98 mg).
Exemplo 16
Composto 16: a uma solução de composto 15 (50 mg, 0,08 mmol) em EtOAc (0,5 mL) adicionou-se composto 11 (150 mg, 0,41 mmol). Arrefeceu-se a mistura até 0°C, adicionou-se ácido acético (19 μΕ, 0,32 mmol), seguindo-se ciano-boro-hidreto de sódio (10 mg, 0,16 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 14 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um óleo. À solução do óleo anterior em acetonitrilo (2,5 mL) adicionou-se HF a 48%/CH3CN (0,1 mL) . Agitou-se a mistura durante 30 minutos e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/3) proporcionou o composto 16 (50 mg): RMN-1H (CDC13) hl ,12 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,15-7,05 (7H, m) , 7,30 (2H, d, J=8,9 Hz), 6,64 (2H, m) , 5,73 (1H, m) , 5,45 (1H, m) , 5,13 (1H, m), 4,93 (1H, m), 4,22-3,75 (11H, m) , 3,4 (4H, m) , 3,35-2,80 (5H, m), 2,1-1,8 (3H, m), (3H, m), 1,40-1,25 (6H, m) , 0, 94 (6H, m) .
Exemplo 17 590
Composto 17: a uma solução de composto 16 (30 mg, 0,04 mmol) em EtOAc (0,8 mL) adicionou-se formaldeido a 37% (26 mL, 0,4 mmol). Arrefeceu-se a mistura até 0°C e adicionou-se ácido acético (20 tL, 0,4 mmol), seguindo-se ciano-boro-hidreto de sódio (22 mg, 0,4 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 14 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/3) proporcionou o composto 17 (22 mg) : RMN- -1Η (CDC13) i δ 7,63 (2H, m) , CO 1 σ\ (9H, m), 6,79 (2H, m) , 5,68 (1H, m) , 5,2 (1H, m) , 5,10 (1H, m), 4,95 (1H, m), 4,22 (2H, m), 4,2-3,7 (21H, , m) , 2,0-1,7 (3H, m), 1,4-1,2 (6H, m), 0,93 (6H, m). Esquema 5 591
21
Boc20/Na2C03; HBr/120°C; d. II.a. Tf2NPh/Cs2C03; b.
Bu3SnCH=CH2/LiCl/PdCl2 (PPh3) 2/90°C; III.a. NaI04/0s04; b. NaBH4; IV.a. CBr4/PPh3; b. (BnO) 2P0H/Cs2C03; V. H2/Pd a 10%-C; VI.a. PhOH/DCC; b. NaOH; c. HC1; VII. Lactato de etilo/BOP; VIII. TFA/CH2C12; VIII. Composto 15/NaBH3CN/HOAc
Exemplo 18
Composto 18: o composto 18 foi adquirido a Aldrich. 592
Exemplo 19
Composto 19: ao composto 18 (12,25 g, 81,1 mmol) adicionou-se lentamente formaldeido a 37% (6,15 mL, 82,7 mmol).
Aqueceu-se a mistura a 100°C durante 1 hora. Arrefeceu-se a mistura até 25°C, diluiu-se com benzeno e lavou-se com água (2x) . A concentração sob pressão reduzida proporcionou um óleo amarelo. Ao óleo anterior adicionou-se HC1 a 20% (16 mL) e aqueceu-se a mistura a 100°C durante 12 horas. Alcalinizou-se a mistura com uma solução de KOH a 40% a 0°C e extraiu-se com EtOAc (3x). Lavou-se a fase orgânica combinada com água e salmoura e secou-se sobre MgSCh. Por concentração obteve-se um óleo. Ao óleo adicionou-se HBr a 48% (320 mL) e aqueceu-se a mistura a 120°C durante 3 horas. Removeu-se a água a 100°C sob pressão reduzida para se obter um sólido castanho. À solução do sólido anterior em água/dioxano (200 mL/200 mL) a 0°C adicionou-se lentamente carbonato de sódio (25,7 g, 243 mmol), seguindo-se dicarbonato de di-terc-butilo (19,4 g, 89 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Removeu-se o dioxano sob pressão reduzida e extraiu-se a parte restante com EtOAc (3x) . Lavou-se a fase orgânica combinada com água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 4/1 to 3/1) proporcionou o composto 19 com o aspecto de um sólido branco (13,6 g).
Exemplo 20
Composto 20: a uma solução de composto 19 (2,49 g, 10 mmol) em CH2CI2 (100 mL) adicionou-se N- feniltrifluorometanossulfonimida (3,93 g, 11 mmol), seguindo-se carbonato de césio (3,58 g, 11 mmol). Agitou-se 593 a mistura durante 48 horas. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida e adicionou-se acetato de etilo. Lavou-se a mistura de reacção com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 6/1) obteve-se um sólido branco (3,3 g). À solução do sólido anterior (2,7 g, 7,1 mmol) em DMF (40 mL) adicionou-se cloreto de litio (2,11 g, 49,7 mmol), seguindo-se diclorobis(trifenilfosfina)-paládio(II) (100 mg, 0,14 mmol). Agitou-se a mistura durante 3 minutos sob vácuo intenso e recarregou-se com azoto. À solução anterior adicionou-se tributilvinil-estanho (2,07 mL, 7,1 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção a 90°C durante 3 horas e arrefeceu-se até 25°C Adicionou-se água à mistura de reacção, e extraiu-se a mistura com acetato de etilo (3x) . Lavou-se a fase orgânica combinada com água (6*) e salmoura e secou-se sobre MgSCh. Por concentração obteve-se um óleo. Diluiu-se o óleo com CH2C12 (5 mL) e adicionou-se água (128 μL, 7,1 mmol) e DBU (1 mL, 7,1 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e submeteu-se a cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 9/1). Obteve-se o composto 20 com o aspecto de um sólido branco (1,43 g).
Exemplo 21
Composto 21: a uma solução de composto 20 (1,36 g, 5,25 mmol) em acetato de etilo (16 mL) adicionou-se água (16 mL), seguindo-se 2,5% tetraóxido de ósmio/terc-butanol (2,63 mL). Adicionou-se progressivamente periodato de sódio (2,44 g) ao longo de 2 minutos. Agitou-se a mistura durante 45 minutos e diluiu-se com acetato de etilo. Separou-se a fase orgânica, lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um sólido castanho. 594 À solução do sólido anterior em metanol (100 mL) a 0°C adicionou-se boro-hidreto de sódio. Agitou-se a mistura durante 1 hora a 0°C e extinguiu-se com NH4C1 saturado (40 mL). Removeu-se o metanol sob pressão reduzida e extraiu-se a parte restante com EtOAc (3x) . Lavou-se a fase orgânica combinada com água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2/1) proporcionou o composto 21 (1,0 g).
Exemplo 22
Composto 22: a uma solução de composto 21 (657 mg, 2,57 mmol) em CH2CI2 (2 mL) adicionou-se uma solução de tetra-bromocarbono (1,276 g, 3,86 miriol) em CH2CI2 (2 mL) . À mistura anterior adicionou-se uma solução de trifenilfosfina (673 mg, 2,57 mmol) em CH2CI2 (2 mL) ao longo de 30 minutos. Agitou-se a mistura durante 2 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 9/1) proporcionou o intermediário brometo (549 mg) . À solução do brometo anterior (548 mg, 1,69 mmol) em acetonitrilo (4,8 mL) adicionou-se fosfito de dibenzilo (0,48 mL, 2,19 mmol), seguindo-se carbonato de césio (828 mg, 2,54 mmol). Agitou-se a mistura durante 48 horas, diluiu-se com EtOAc.
Lavou-se a mistura com água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 3/1 to 100% de EtOAc) proporcionou 0 composto 22 (863 mg).
Exemplo 23
Composto 23: a uma solução de composto 22 (840 mg) em etanol (80 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (200 595 mg) . Hidrogenou-se a mistura durante 2 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 23 (504 mg) .
Exemplo 24
Composto 24: a uma solução de composto 23 (504 mg, 1,54 mmol) em piridina (10,5 mL) adicionou-se fenol (1,45 g, 15,4 mmol), seguindo-se DCC (1,28 g, 6,2 mmol). Aqueceu-se a mistura a 65°C durante 3 horas e removeu-se a piridina sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc (5 ml), e filtrou-se e lavou-se com EtOAc (2*5 mL) . A concentração proporcionou um óleo, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/isopropanol = 100/3) para se obter difenil-fosfonato intermediário (340 mg). A uma solução do composto anterior (341 mg, 0,71 mmol) em THF (1 mL) adicionou-se 0,85 mL de solução de NaOH 1,0N. Agitou-se a mistura a 25°C durante 3 horas e removeu-se o THF sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com água, e lavou-se com EtOAc (3x) e depois acidificou-se com HC1 concentrado até pH = 1. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (3x). Lavou-se a fase orgânica combinada com água (lx) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 24 com o aspecto de um sólido (270 mg).
Exemplo 25
Composto 25: a uma solução de composto 24 (230 mg, 0,57 mmol) em DMF (2 mL) adicionou-se (s)-lactato de etilo (130 μΐ, 1,14 mmol), seguindo-se diisopropiletilamina (400 μΐ, 2,28 mmol) e hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitris- 596 (dimetilamino)-fosfónio (504 mg, 1,14 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas e depois diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com água (5-) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCL. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CíbC^/isopropanol = 100/3) proporcionou o composto 25 (220 mg).
Exemplo 26
Composto 26: a uma solução de composto 25 (220 mg) em CH2C12 (2 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (1 mL) . Agitou-se a mistura durante 2 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com solução saturada de carbonato de sódio, água e salmoura e secou-se sobre MgS04, Por concentração obteve-se o composto 26 (170 mg).
Exemplo 27
Composto 27: a uma solução de composto 15 (258 mg, 0,42 mmol) em EtOAc (2,6 mL) adicionou-se composto 26 (170 mg, 0,42 mmol), seguindo-se ácido acético (75 mL, 1,26 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (53 mg, 0,84 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc, e lavou-se com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/4 a 100/6) proporcionou o intermediário (440 mg). À solução do composto anterior (440 mg) em acetonitrilo (10 mL) adicionou-se HF a 48%/CH3CN (0,4 mL) . Agitou-se a mistura durante 2 horas e removeu-se o acetonitrilo sob pressão reduzida. Diluiu-se a parte restante com EtOAc, lavou-se 597 com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2CÍ2/iPrOH = 100/5) proporcionou o composto 27 (120 mg): ΪΙΜΝ-1!! (CDC13) δ 7, 70 (2H, m), 7,27 (2 H, m) , 7,15 (5 H, m) , 6,95 (3H, m) , 5,73 (1H, nf 'vt1 LO 1 LO (1H, m) , 5,16 (1H, m) , 4,96 (1H, m) , 4,22-3,60 (13H, m), 3, 42 (2H, m) , 3,4 -2,6 (1H, m), 2,1-3,8 (3H, m) , 1,39 (3H, m) , 1,24 (3H, m) , 0,84 (6H, m) . Esquema 6 598
õ I. TfOCH2PO (OBn) 2/Cs2C03; II. H2/Pd a 10%-C; III.a. TFA/CH2C12; b. CbzCl/NaOH; VI.a. SOC12/60°C; b.
PhOH/piridina; V.a. NaOH/THF; b. HC1; c. SOC12/60°C; d. (S)-lactato de etilo/piridina; VI. H2/Pd a 10%-C/ HOAc; VII. a. composto 15/NaBH3CN/HOAc; b. HF a 1%/CH3CN; VIII. Esterase/tampão de PBS 1,0/CH3CN/DMSO
Exemplo 28 599
Composto 28: a uma solução de composto 19 (7,5 g, 30 mmol) em acetonitrilo (420 mL) adicionou-se dibenzil-triflato (17,8 g, 42 mmol), seguindo-se carbonato de césio (29,4 g, 90 mmol). Agitou-se a mistura durante 2,5 horas e filtrou-se. Removeu-se o acetonitrilo sob pressão reduzida e diluiu-se a parte restante com EtOAc. Lavou-se a mistura com água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2/1 a 1/1) proporcionou o composto 28 (14,3 g).
Exemplo 29
Composto 29: a uma solução de composto 28 (14,3 g) em etanol (500 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (1,45 g) . Hidrogenou-se a mistura durante 2 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 29 (9,1 g).
Exemplo 30
Composto 30: a uma solução de composto 29 (9,1 g) em CH2C12 (60 mL) adicionou-se ácido trifluoroacético (30 mL). Agitou-se a mistura durante 4 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com CH2C12 (3x) e tolueno e secou-se sob vácuo intenso para se obter um sólido branco. Dissolveu-se o sólido branco em solução de NaOH 2,0N (45 mL, 90 mmol) e arrefeceu-se até 0°C. À solução anterior adicionou-se lentamente uma solução de cloroformato de benzilo (6,4 mL, 45 mmol) em tolueno (7 mL) . Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 6 horas. Adicionou-se hidróxido de sódio 2,0N à solução 600 anterior até pH = 11. Extraiu-se a fase aquosa com éter etílico (3x) e arrefeceu-se até 0°C. À fase aquosa anterior a 0°C adicionou-se HC1 concentrado até pH = 1. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (3x). Lavou-se as fases orgânicas combinadas com salmoura e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se o composto 30 (11,3 g) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 31
Composto 31: À suspensão de composto 30 (11,3 g, 30 mmol) em tolueno (150 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (13 μΐ, 180 mmol), seguindo-se DMF (algumas gotas). Aqueceu-se a mistura de reacção a 65°C durante 4,5 horas e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido castanho em CH2CI2 (120 ml) a 0°C adicionou-se fenol (11,28 g, 120 mmol), seguindo-se a adição lenta de piridina (14,6 mL, 180 mmol). Deixou-se a mistura de reacção aquecer até 25°C e agitou-se durante 14 horas. Removeu-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, e lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se um óleo escuro, que se purificou por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 3/1 to 1/1) para se obter o composto 31 (9,8 g).
Exemplo 32
Composto 32: a uma solução de composto 31 (9,8 g, 18,5 mmol) em THF (26 mL) adicionou-se 20,3 mL de solução de NaOH 1,0N. Agitou-se a mistura a 25°C durante 2,5 horas e removeu-se o THF sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura 601 com água, e lavou-se com EtOAc (3x). Arrefeceu-se a fase aquosa até 0°C e acidificou-se com HC1 concentrado até pH = 1. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (3x). Lavou-se a fase orgânica combinada com água (lx) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida obteve-se um sólido (8,2 g) . A uma suspensão do sólido anterior (4,5 g, 10 mmol) em tolueno (50 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (4,4 mL, 60 mmol), seguindo-se DMF (0,2 mL). Aqueceu-se a mistura a 70°C durante 3,5 horas. Removeu-se o solvente e o reagente sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x) para se obter um sólido branco. À solução do sólido anterior em CH2CI2 (40 mL) a 0°C adicionou-se (s)-lactato de etilo (2,3 mL, 20 mmol), seguindo-se piridina (3,2 mL, 40 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida, diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com 1 N HC1, água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 2/1 a 1/1) proporcionou o composto 32 (4,1 g) .
Exemplo 33
Composto 33: a uma solução de composto 32 (3,8 g, 6,9 mmol) em EtOAc/EtOH (30 mL/30 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (380 mg) , seguindo-se ácido acético (400 μΕ, 6,9 mmol). Hidrogenou-se a mistura durante 3 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 33 (3,5 g).
Exemplo 34 602
Composto 34: a uma solução de composto 15 (1,70 g, 2,76 mmol) em EtOAc (17 mL) adicionou-se composto 33 (3, 50 g, 6,9 mmol). Agitou-se a mistura durante 5 minutos, arrefeceu-se até 0°C e adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (347 mg, 5,52 mmol). Agitou-se a mistura durante 6 horas. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatograf ia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/6) proporcionou o intermediário (3,4 g). À solução do composto anterior (3,4 g) em acetonitrilo (100 mL) adicionou-se HF a 48%/CH3CN (4 mL) . Agitou-se a mistura durante 2 horas e removeu-se o acetonitrilo sob pressão reduzida. Diluiu-se a parte restante com EtOAc, lavou-se com solução saturada de carbonato de sódio, água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/5) proporcionou o composto 34 (920 mg): RMN-1H (CDC13) 67,71 (2H, m) , 7,38-7,19 (5H, m) , 6,92 (3H, m) , 6,75 (2H, m) , 5,73 (1H, m) , 5,57-5, 35 (1H, m) , 5,16 (2H, m) , 4,5 (2H, m) , 4,2-3,6 (13H, m) , 3,25-2,50 (11H, m) , 2,0-1,8 (3H, m) , 1,5 (3H, m), 1,23 (3H, m), 0,89 (6H, m) .
Exemplo 35
Composto 35: a uma solução de composto 34 (40 mg) em CH3CN/DMSO (1 mL/0,5 mL) adicionou-se tampão de PBS 1,0M (5 mL), seguindo-se esterase (200 μL) . Aqueceu-se a mistura a 40°C durante 48 horas. Purificou-se a mistura por HPLC de fase inversa para se obter o composto 35 (11 mg).
Esquema 7 603
li PO{OBh 38 37
O
I.a. SOCl2/tolueno/60°C; b. P (OEt)3/tolueno/120°C; II.a. composto 14/Tf20; b. NaBH4/EtOH/HOAc; c. HF a 2%/CH3CN
Exemplo 36
Composto 36: o composto 36 foi adquirido a Aldrich.
Exemplo 37
Composto 37: a uma solução de composto 36 (5,0 g, 40 mmol) em clorofórmio (50 mL) adicionou-se lentamente cloreto de tionilo (12 mL) . Aqueceu-se a mistura a 60°C durante 2,5 horas. Concentrou-se a mistura sob pressão reduzida para se obter um sólido amarelo. À suspensão do sólido anterior (5,2 g, 37 mmol) em tolueno (250 mL) adicionou-se fosfito de trietilo (19 mL, 370 mmol). Aqueceu-se a mistura a 120°C durante 4 horas e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter um sólido castanho. Dissolveu-se o sólido em EtOAc e alcalinizou-se com 1,0 N NaOH. Separou-se a fase orgânica e lavou-se com água (2x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. 604 A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 9/1) proporcionou o composto 37 (4,8 g) .
Exemplo 38
Composto 38: a uma solução de composto 14 (100 mg, 0,16 mmol) e composto 37 (232 mg, 0,74 mmol) em CH2C12 (1 mL) a -40°C adicionou-se lentamente anidrido triflico (40 μΕ, 0,24 mmol). Aqueceu-se a mistura lentamente até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Concentrou-se a mistura e diluiu-se com EtOH/EtOAc (2 mL/0,4 mL) . À solução anterior a 0°C adicionou-se boro-hidreto de sódio (91 mg) em porções. Agitou-se a mistura a 0°C durante 3 horas, diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a mistura com bicarbonato de sódio saturado, água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/5 a 100/10) proporcionou o intermediário (33 mg). À solução do intermediário anterior em acetonitrilo (2,5 mL) adicionou-se HF a 48%/CH3CN (0,1 mL). Agitou-se a mistura durante 30 minutos e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a solução orgânica com hidróxido de sódio 0,5N, água e salmoura, secou-se sobre MgS04. A purificação por HPLC inversa proporcionou o composto 38 (12 mg): RMN-1H (CDC13) hl,12 (2H, d, J=8, 9 Hz), 7,02 (2H, d, J=8,9 Hz), 5,70 (1H, m), 5,45 (1H, m), 5,05 (1H, m), 4,2-3,4 (19H, m), 3,4-2,8 (5H, m), 2,45-2,20 (4H, m), 2,15-1,81 (5H, m), 1,33 (6H, m), 0,89 (6H, m).
Esquema 8 605
I.a. SOCl2/tolueno/60°C; b. ArOH/piridina; II.a. NaOH/THF/H20; b. HC1; III.b. SOCl2/tolueno/60°C; c. lactato de etilo/piridina; IV. H2/Pd a 10%-C/EtOAc/HOAc; V.a. composto 6/MgS04; b. HOAc/NaCNBH3.
Exemplo 39 O composto 39 foi preparado pelos métodos descritos nos exemplos anteriores.
Exemplo 40
Composto 40: À suspensão de composto 39 (4,25 g, 16,4 mmol) em tolueno (60 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (7,2 mL, 99 mmol), seguindo-se DMF (algumas gotas). Aqueceu-se a mistura de reacção a 65°C durante 5 horas e evaporou-se sob 606 pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido castanho em CH2C12 (60 ml) a 0°C adicionou-se 2,6-dimetilfenol (8,1 g, 66 mmol), seguindo-se a adição lenta de piridina (8 mL, 99 mmol). Deixou-se a mistura de reacção aquecer até 25°C e agitou-se durante 14 horas. Removeu-se os solventes sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água (3x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgSCh. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 3/1 a 1/1) proporcionou o composto 40 (1,38 g) .
Exemplo 41
Composto 41: a uma solução de composto 40 (1, 38 g, 1,96 mmol) em THF (6 mL) adicionou-se 3,55 mL de solução de NaOH 1,0N. Agitou-se a mistura a 25°C durante 24 horas e removeu-se o THF sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com água e lavou-se com EtOAc (3x) . Arrefeceu-se a fase aquosa até 0°C e acidificou-se com HC1 concentrado até pH = 1. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (3x). Lavou-se a fase orgânica combinada com água (lx) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 41 com o aspecto de um sólido branco (860 mg).
Exemplo 42
Composto 42: a uma suspensão de composto 41 (1,00 g, 2,75 mmol) em tolueno (15 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (1,20 mL, 16,5 mmol), seguindo-se DMF (3 gotas). Aqueceu-se a mistura a 65°C durante 5 horas. Removeu-se o solvente e o reagente sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co- 607 evaporação com tolueno (2x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido anterior em CH2CI2 (11 mL) a 0°C adicionou-se (s)-lactato de etilo (1,25, 11 mmol), seguindo-se piridina (1,33 mL, 16,6 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com 1 N HC1, água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1,5/1 a 1/1) proporcionou o composto 42 (470 mg).
Exemplo 43
Composto 43: a uma solução de composto 42 (470 mg) em EtOH (10 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (90 mg), seguindo-se ácido acético (150 μΐ). Hidrogenou-se a mistura durante 6 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos, e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 43 (400 mg).
Exemplo 44
Composto 44: a uma solução de composto 6 (551 mg, 0,93 mmol) em 1,2-dicloroetano (4 mL) adicionou-se composto 43 (400 mg, 1,0 mmol), seguindo-se MgS04 (1 g) . Agitou-se a mistura durante 3 horas e adicionou-se sequencialmente ácido acético (148 μΐ) e ciano-boro-hidreto de sódio (117 mg, 1,86 mmol). Agitou-se a mistura durante 1 hora. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (EtOAc a EtOAc/EtOH = 9/1) proporcionou o composto 608 44. Dissolveu-se o composto 44 em CH2C12 (25 mL) e adicionou-se ácido trifluoroacético (100 μΐ7 . Concentrou-se a mistura para se obter o composto 44 como sal de TFA (560 mg): RNUS!-1!! (CDC13) δ 7,74 (2H, m) , 7,39 (2H, m) , 7,20 (2H, m), 7,03 (5H, m), 5,68 (1H, m), 5,43 (1H, m), 5,01 (1H, m), 4,79 (1H, m) 4,35-4,20 (4H, m) , 4,18-3,4 (11H, m), 3,2-2,6 (9H, m) , 2,30 (6H, m) , 1,82 (1H, m) , 1,70 (2H, m) , 1,40- 1,18 (6H, m), 0,91 (6H, m).
Esquema 9
609 I.b. SOCl2/tolueno/60°C; b. (s)-lactato de propilo//piridina; IV. H2/Pd a 10%-C/EtOAc/HOAc; V.a. composto 6/MgS04,· b. HOAc/NaCNBH3.
Exemplo 45
Composto 45: a uma suspensão de composto 41 (863 mg, 2,4 mmol) em tolueno (13 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (1,0 mL, 14,3 mmol), seguindo-se DMF (3 gotas). Aqueceu-se a mistura a 65°C durante 5 horas. Removeu-se o solvente e o reagente sob pressão reduzida. Submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x) para se obter um sólido castanho. À solução do sólido anterior em CH2C12 (10 mL) a 0°C adicionou-se (s)-lactato de propilo (1,2 mL, 9,6 mmol), seguindo-se trietilamina (2,0 mL, 14,4 mmol). Aqueceu-se a mistura até 25°C e agitou-se durante 12 horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1,5/1 to 1/1) proporcionou o composto 45 (800 mg).
Exemplo 46
Composto 46: a uma solução de composto 45 (785 mg) em EtOH (17 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (150 mg), seguindo-se ácido acético (250 μΐ). Hidrogenou-se a mistura durante 16 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração sob pressão reduzida proporcionou o composto 46 (700 mg).
Exemplo 47 610
Composto 47: a uma solução de composto 6 (550 mg, 0,93 mmol) em 1,2-dicloroetano (4 mL) adicionou-se composto 43 (404 mg, 1,0 mmol), seguindo-se MgS04 (1 g) . Agitou-se a mistura durante 3 horas e adicionou-se sequencialmente ácido acético (148 μΐΟ e ciano-boro-hidreto de sódio (117 mg, 1,86 mmol). Agitou-se a mistura durante 1 hora. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com uma solução saturada de bicarbonato de sódio, água (3x) e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (EtOAc a EtOAc/EtOH = 9/1) proporcionou o composto 47. Dissolveu-se o composto 47 em CH2C12 (25 mL) e adicionou-se ácido trifluoroacético (100 μΕ). Concentrou-se a mistura para se obter o composto 47 como sal de TFA (650 mg): ΚΜΝ^Η (CDC13) δ7,74 (2H, m) , 7,41 (2H, m) , 7,25-7,1 (2H, m), 7,02 (5H, m), 5,65 (1H, m), 5,50 (1H, m), 5,0-4,75 (2H, m) . 4,25-4,05 (4H, m), 4,0-3,4 (11H, m) , 3,2-2,6 (9H, m), 2,31 (6H, m), 1,82-1,51 (3H, m) , 1,45-1,2 (5H, m), 0,93 (9H, m) .
Esquema 10
tf /
I. DCC/piridina/60°C 611
Exemplo 48 0 composto 48 foi preparado pelos métodos descritos nos exemplos anteriores.
Exemplo 49
Composto 49: a uma solução de composto 48 (100 mg, 0,13
mmol) em piridina (0,75 mL) adicionou-se cloridrato do éster metilico de L-alanina (73 mg, 0,52 mmol), seguindo-se DCC (161 mg, 0,78 mmol). Aqueceu-se a mistura a 60°C durante 1 hora. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com HC1 0,2N, água, 5% bicarbonato de sódio e salmoura e secou-se sobre MgSCg. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2CÍ2/iPrOH = 100/5) proporcionou o composto 49 (46 mg): RMN-1!! (CDC13) δ 7,73 (2H, m) , 7,38-7,18 (7H, m) , 7,03 (2H, m) , 6,89 (2H, m) , 5,68 (1H, m) , 5,05 (1H, m) , 4,95 (1H, m), 4,30 (3H, m), 4,0-3,6 (12H, m), 3,2-2,8 (7H, m) , 1,84-1, 60 (3H, m), 1,38 (3H, m), 0,93 (6H, m).
Exemplo 50
Composto 50: a uma solução de composto 48 (100 mg, 0,13 mmol) em piridina (0,75 mL) adicionou-se (s)-lactato de metilo (41 mg, 0,39 mmol), seguindo-se DCC (81 mg, 0,39 mmol). Aqueceu-se a mistura a 60°C durante 2 horas, e removeu-se a piridina sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc (5 mL) e filtrou-se. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CfhC^/iPrOH = 100/5) proporcionou o composto 50 (83 mg): ΚΜΝ-1!! (CDCI3) 67,74 (2H, m), 7,38-7,14 (7H, m) , 7,02 (2H, m) , 6,93 (2H, m) , 5,67 (1H, m), 5,18 (1H, m), 5,04 (1H, m), 4,92 (1H, m), 4,5 612 (2Η, m) , 4,0-3,68 (12H, m) , 3,2-2,75 (7H, m), 1,82 (1H, m), 1,75-1,50 (5H, m), 0,93 (6H, m).
Esquema 11
I. Hexafluorofosfato de benzotriazol-1- iloxitripirrolidinofosfónio/ ROH/iPr2NEt; II. HF a 15%/CH3CN; III. Composto 48/DCC/piridina/60°C; IV.a. H2/Pd a 10%-C; b. NaBH3CN/HCHO/HOAc
Exemplo 51
Composto 51: a uma solução de (s)-lactato de benzilo (4,0 g, 20 mmol) em DMF (40 mL) adicionou-se imidazole (2,7 g, 20 mmol), seguindo-se cloreto de terc-butildimetilsililo 613 (3,3 g, 22 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com solução de HC1 1,0N (2x) , água (2x) e salmoura (lx) e secou-se sobre MgS04. Por concentração obteve-se o lactato intermediário (6,0 g) . À solução do intermediário anterior em EtOAc (200 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (700 mg). Hidrogenou-se a mistura durante 2 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. Por concentração obteve-se o composto 51 (3,8 g).
Exemplo 52
Composto 52: a uma solução de composto 51 (1,55 g, 7,6 mmol) em CH2C12 (20 mL) adicionou-se 4-benziloxicarbonilpiperidina-etanol (2,00 g, 7,6 mmol), seguindo-se hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirrolidino-fosfónio (4,74 g, 9,1 mmol) e diisopropiletilamina (1,58 mL, 9,1 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas e removeu-se o diclorometano. Diluiu-se a mistura com EtOAc e lavou-se com salmoura e secou-se com MgS04. A purificação por cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 10/1) proporcionou o composto 52 (1, 50 g) .
Exemplo 53
Composto 53: a uma solução de composto 52 (1,50 g) em CH3CN adicionou-se 58% HF/CH3CN (5 mL) . Agitou-se a mistura durante 30 minutos e removeu-se o acetonitrilo sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc, lavou-se com água e salmoura e secou-se sobre MgS04. A purificação por 614 cromatografia em coluna rápida (hexanos/EtOAc = 1/1) proporcionou o composto 53 (1,00 g).
Exemplo 54
Composto 54: a uma solução de composto 48 (769 mg, 1,0 mmol) em piridina (6,0 mL) adicionou-se composto 53 (1,0 g, 3,0 mmol), seguindo-se DCC (618 mg, 3,0 mmol). Aqueceu-se a mistura a 60°C durante 2 horas e removeu-se a piridina sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc (5 mL) e filtrou-se. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CtbC^/iPrOH = 100/4) proporcionou o composto 54 (630 mg).
Exemplo 55
Composto 55: a uma solução de composto 54 (630 mg, 0,58 mmol) em EtOAc (30 mL) adicionou-se paládio a 10% sobre carvão (63 mg), seguindo-se ácido acético (80 μΕ) . Hidrogenou-se a mistura durante 2 horas. Agitou-se a mistura com celite durante 5 minutos e filtrou-se através de uma camada de celite. A concentração proporcionou o intermediário. À solução do intermediário anterior em EtOAc (10 mL) adicionou-se formaldeido a 37% (88 μL, 1,18 mmol), seguindo-se ácido acético (101 μΕ, 1,77 mmol). Arrefeceu-se a mistura até 0°C adicionou-se e ciano-boro-hidreto de sódio (74 mg, 1,18 mmol). Agitou-se a mistura a 25°C durante 80 minutos e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se a mistura com água e salmoura e secou-se sobre MgSOí. Por concentração obteve-se o composto 55 com o aspecto de um sólido branco (530 mg): RMN-1!! (CDC13) 0 7,74 (2H, m) , 7,40-7,15 (7H, m) , 7,03 (2H, m), 6,92 (2H, m), 5,66 (1H, m), 615 5,20-5,00 (3Η, m) , 4,58-4,41 (2H, m), 4,16 (2H, m) , 4,0-3,7 (9H, m) , 3,4-2,6 (14H, m) , 1,90-1,50 (13H, m), 0,92 (6H, m) .
Esquema 12
I. R2NOH/DCC/piridina
Exemplo 56 0 composto 56 foi preparado pelos métodos descritos nos exemplos anteriores.
Exemplo 57
Composto 57: a uma solução de composto 56 (100 mg, 0,12 mmol) em piridina (0,6 mL) adicionou-se N-hidroximorfolina 616 (50 mg, 0,48 mmol), seguindo-se DCC (99 mg, 0,48 mmol) . Agitou-se a mistura durante 14 horas e removeu-se a piridina sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc e filtrou-se. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/5) proporcionou o composto 57 (53 mg): ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,71 (2H, d, J= 8,6
Hz), 7,15 (2H, d, J= 7,6 Hz), 6,99 (2H, d, J=8,8 Hz), 6,90 (2H, m) , 5,67 (1H, m) , 5,18 (1H, m) , 5,05 (1H, m), 4,95 (1H, m) , 4,58-4,38 (2H, m) , 4,21 (2H, m) , 4,02-3, 80 (13H, m) , 3,55-3, 38 (2H, m) , 3,2-2,78 (9H, m) , 1,9-1,8 (1H, m) , 1,8-0,95 (5H, m), 1,29 (3H, m) , 0,93 (6H, m).
Exemplo 58
Composto 58: a uma solução de composto 56 (100 mg, 0,12 mmol) em piridina (0,6 mL) adicionou-se cloridrato de N,N-dimetil-hidroxilamina (47 mg, 0,48 mmol), seguindo-se DCC (99 mg, 0,48 mmol). Agitou-se a mistura durante 6 horas, e removeu-se a piridina sob pressão reduzida. Diluiu-se a mistura com EtOAc e filtrou-se. A purificação por cromatografia em coluna rápida (CH2Cl2/iPrOH = 100/5) proporcionou o composto 58 (35 mg). RMN-1H (CDCI3) δ 7,71 (2H, d, J= 8,9 Hz), 7,15 (2H, d, J=8,2 Hz), 6,99 (2H, d, J=8,4 Hz), 6,89 (2H, m) , 5,65 (1H, d, J=5,2 Hz), 5,15 (1H, m) , 4,98 (2H, m) , 4,42 (2H, m) , 4,18 (2H, m) , 4,0-3,6 (9H, m) , 3,2-2,7 (13H, m) , 1,92-1,45 (6H, m), 1,25 (3H, m), 0,90 (6H, m) .
Esquema 13 617
R = Me, Et, Pr, i-Pr; Rx = H, Me, Et, i-Pr; Ar = fenilo, 2,6-dimetil-fenilo I. a. CbzCl/NaOH; b. SOCl2/tolueno/60°C; c. ArOH/piridina; II. a. NaOH/ THF/HsO; b. HC1; III.a. SOCl2/tolueno/60°C; b. lactato de alquilo/ piridina; IV. H2/Pd a 10%-C/EtOAc/HOAc; V.a. composto 6/MgS04; b. HOAc/ NaCNBH3 0 ácido aminometil-fosfónico 59 é sob a forma de benzil-carbamato. Trata-se o ácido fosfónico com cloreto de tionilo para gerar dicloridrato, o qual reage com fenol ou 2,6-dimetilfenol para se obter o composto 60. Hidrolisa-se 0 composto 60 com hidróxido de sódio, seguindo-se a acidificação, para se obter monoácido 61 Trata-se 0 monoácido 61 com cloreto de tionilo para gerar monocloridrato, o qual reage com diferentes (s)-lactatos de 618 alquilo para formar o composto 62. Hidrogena-se o composto 62 com Pd a 10%/C, na presença de ácido acético, para se obter o composto 63. 0 composto 63 reage com aldeido 6 na presença de MgS04 para formar a imina, que é reduzida com ciano-boro-hidreto de sódio para gerar o composto 64.
Esquema 14
I.a. n-BuLi; b. composto 15; II. H2/Pd a 10%-C/HOAc; IV. PPh3/DEAD 619 0 composto 65 é preparado a partir de 2-hidroxi-5-bromopiridina por alquilação. J. Med. Chem. 1992, 35, 3525. Trata-se o composto 65 com n-butil-lítio para gerar o aril-lítio, que reage com aldeído 15 para formar o composto 66. J. Med. Chem 1994, 37, 3492. Hidrogena-se o composto 66 com Pd a 10%/C, na presença de ácido acético, para se obter o composto 67. J. Med. Chem. 2000, 43, 721. O composto 68 é preparado a partir de composto 67 com o correspondente álcool, em condições de reacção de Mitsunobu. Bioorg. Med. Chem. Lett. 1999, 9, 2747.
Secção O de exemplos
Esquema 1 620
ÇH 8ôcHN^ X
BôêHN^A^XI BocHN.
OH
Exemplo 1 2-(S)-(dimetiletoxicarbonilamino)-3-(4-piridil)-propanoato de metilo (2) : preparou-se uma solução de N-terc-butoxicarbonil-4-piridilalanina (1, 9,854 g, 37 mmol,
Peptech), 4-dimetilaminopiridina (4,52 g, 37 mmol, Aldrich) 621 e diciclo-hexilcarbodiimida (15,30 g, 74,2 mmol, Aldrich) em metanol (300 mL) e agitou-se a 0°C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 12 horas. Depois de se remover os sólidos por filtração, concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Removeu-se mais diciclo-hexilureia por trituração repetitiva do resíduo concentrado em EtOAc, seguindo-se a filtração. Submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica para se obter o éster metílico 2 (9,088 g, 88%) : ΗΜΝ^Η (CDCI3) δ8,53 (d, 2H, J=5,7 Hz), 7,09 (d, 2H, J=5,7 Hz), 5,04 (lr, 1H) , 4,64 (lr, 1H), 3,74 (s, 3H) , 3,16 (dd, 1H, J=13,5 e 5,7 Hz), 3,02 (dd, 1H, J=13,5 e 6,3 Hz), 1,42 (s, 9H) ; MS (ESI) 281 (M+H).
Exemplo 2 l-Cloro-3-(S)-(dimetiletoxicarbonilamino)-4-(4-piridil) -2- (S)-butanol (3): preparou-se uma solução de
diisopropilamina (37,3 mL, 266 mmol, Aldrich) em THF (135 mL) e agitou-se a -78°C à medida que se adicionava uma solução de n-butil-lítio (102 mL de solução 2,3M e 18 mL de solução 1,4M, 260 mmol, Aldrich) em hexano. Decorridos 10 minutos, removeu-se o banho de arrefecimento e agitou-se a solução durante 10 minutos à temperatura ambiente. Arrefeceu-se a solução novamente até -78°C e agitou-se, à medida que se adicionava uma solução de ácido cloroacético (12,255 g, 130 mmol, Aldrich) em THF (50 mL) ao longo de 20 minutos. Depois de se agitar a solução durante 15 minutos, transferiu-se esta solução dianiónica para uma solução agitada do éster metílico 2 (9,087 g, 32,4 mmol) em THF (100 mL) a 0°C, ao longo de 15 minutos. Agitou-se a pasta amarela resultante a 0°C durante 10 minutos e arrefeceu-se 622 até -78°C. Preparou-se uma solução de ácido acético (29 mL, 507 mmol, Aldrich) em THF (29 mL), adicionou-se rapidamente à pasta e agitou-se a pasta resultante a -78°C durante 30 minutos, a 0°C durante 30 minutos e à temperatura ambiente durante 15 minutos. Dissolveu-se a pasta resultante em Solução saturada de NaHC03 (750 mL) e EtOAc (500 mL) . Extraiu-se a fase aquosa separada com EtOAc (300 mL*2) e lavou-se as fracções orgânicas combinadas com água (750 mL*2) e Solução saturada de NaCl (250 mL) . Secou-se a solução resultante (MgSCu) e evaporou-se sob pressão reduzida.
Preparou-se uma solução do residuo em THF (170 mL) e água (19 mL) agitou-se a 0°C as NaBH4 (3,375 g, 89,2 mmol,
Aldrich). Decorridos 30 minutos, evaporou-se a solução sob pressão reduzida e dissolveu-se o residuo em EtOAc. Acidificou-se com solução aquosa de NaHS04 e depois neutralizou-se por adição de solução aquosa saturada de NaHC03. Extraiu-se a fracção aquosa separada com EtOAc (100 mL) e lavou-se as fracções orgânicas combinadas com água (500 mL) e solução saturada de NaCl (100 mL) . Secou-se a solução (MgS04) e evaporou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o residuo a cromatografia através de gel de silica para se obter a cloridrina 3 e 4 (4,587 g, 47%) sob a forma de uma mistura de dois diastereómeros (3 4:1). Deixou-se a mistura obtida recristalizar a partir de EtOAc-hexano, duas vezes, para se obter o diastereómero puro desejado 3 (2,444 g, 25%) com o aspecto de cristais amarelos: ΚΜΝ^Η (CDC13) 0 8,53 (d, 2H, J= 5,7 Hz), 7,18 (d, 2H, J=5,7 Hz), 4,58 (lr, 1H), 3,94 (m, 1H), 3,87 (lr, 1H) , 3,75-3, 54 (m, 2H), 3,05 (dd, 1H, J=13,8 e 3,9 Hz), 2,90 623 (dd, 1H, j=13,8 e 8,4 Hz), 1,36 (s, 9H); MS (ESI) 301 (M+H).
Exemplo 3 O epóxido 5: preparou-se uma solução da cloridrina 3 (1,171 g, 3,89 mmol) em etanol (39 mL) e agitou-se à temperatura ambiente as KOH 0,71M em etanol (6,6 mL) . Decorridas 1,5 horas, concentrou-se a mistura sob pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo em EtOAc (60 mL) e água (60 mL) . Extraiu-se a fracção aquosa separada com EtOAc (60 mL), lavou-se as fracções orgânicas combinadas com solução saturada de NaCl, secou-se (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter o epóxido (1,058 g, quantitativo): RMN-1H (CDCI3) δ 8,52 (d, 2H, J=6,0 Hz), 7,16 (d, 2H, J=6,0 Hz), 4,57 (d, 1H, J=7,8 Hz), 3,76 (lr, 1H) , 3, 02-2, 92 (m, 2H) , 2,85-2,79 (m, 2H) , 2, 78-2, 73 (m, 1H) , 1,37 (s, 9H); MS (ESI) 265 (M+H).
Exemplo 4 A hidroxi-amina 6: preparou-se uma solução do epóxido 5 obtido antes e i-BuNH2 (3,9 mL, 39,2 mmol, Aldrich) em 58 mL de i-PrOH agitou-se a 65°C durante 2 horas e concentrou-se a solução sob pressão reduzida. Removeu-se o i-PrOH residual por dissolução do resíduo em tolueno e concentração da solução, duas vezes: ΡΜΝ^Η (CDC13) δ 8,51 (d, 2H, J=6,0 Hz), 7,18 (d, 2H, J=6,0 Hz), 4,70 (d, 1H, J=9,6 Hz), 3,86 (lr, 1H) , 3,46 (q, 1H, J=5,8 Hz), 3,06 (dd, 1H, J=14,l e 3,9 Hz), 2,79 (dd, 1H, J=14,l e 9,0 Hz), 2,76-2,63 (m, 3H), 2,43 (m, 2H, J= 6,9 Hz), 1,73 (m, 1H, J= 6,6
Hz), 1,36 (s, 9H), 0,93 (d, 3H, J=6,6 Hz), 0,92 (d, 3H, J= 6,6 Hz); MS (ESI) 338 (M+H). 624
Exemplo 5 A sulfoamida 7: preparou-se uma solução do composto 6 impuro 6 e cloreto de p-metoxibenzenossulfonilo (890 mg, 4,31 mmol, Aldrich) em CH2CI2 (24 mL) e agitou-se a 0°C durante 2 horas e à temperatura ambiente durante 13 horas. Lavou-se a solução com solução saturada de NaHC03 e extraiu-se os produtos aquosos da lavagem com CH2C12 (60 mL). Após a secagem das fracções orgânicas combinadas (MgSCp) e a concentração sob pressão reduzida, purificou-se o residuo por cromatografia através de gel de sílica para se obter a sulfoamida 7 (1,484 g, 75%) : ΚΜΝ^Η^Η (CDC13) δ 8,51 (d, 2H, J=5,7 Hz), 7,73 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,21 (d, 2H, J=5,7 Hz), 7,00 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 4,68 (d, 1H, J=8,l
Hz), 4,08 (lr, 1H), 3,88 (s, 3H) , 3,83 (lr, 2H) , 3,09 (d, 2H, J=5,l Hz), 3, 06-2,80 (m, 4H) , 1,85 (m, 1H, J=7,0 Hz), 1,34 (s, 9H) , 0,92 (d, 3H, J= 6,3 Hz), 0,89 (d, 3H, J=6,6 Hz); MS (ESI) 508 (M+H).
Exemplo 6 O bisfuranocarbamato 9: preparou-se uma solução da sulfoamida 7 (1,484 g, 2,92 mmol) e ácido trifluoroacético (6,8 mL, 88,3 mmol, Aldrich) em CH2CI2 (18 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 2 horas. Após a evaporação da solução sob pressão reduzida, dissolveu-se o resíduo em acetonitrilo (10 mL) e tolueno (10 mL) e evaporou-se até à secura, duas vezes, para se obter a amina impura como sal de TFA. Preparou-se uma solução da amina impura, dimetilaminopiridina (72 mg, 0,59 mmol, Aldrich) e diisopropiletilamina (2,55 mL, 14,6 mmol, Aldrich) em acetonitrilo e agitou-se a 0°C, à medida que se adicionava 625 progressivamente o bisfuranocarbonato 8 (907 mg, 3,07 mmol, fornecido por Azar). Agitou-se a solução a 0°C durante 1 hora e à temperatura ambiente durante 19 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em EtOAc (60 mL) e lavou-se com Solução saturada de NaHC03 (60 mL). Depois da extracção dos produtos aquosos da lavagem com EtOAc (60 mL) , lavou-se as fracções orgânicas combinadas com NaHC03 saturado (60 mL) e solução saturada de NaCl (60 mL) , secou-se (MgSOí) e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica para se obter o carbamato 9 (1,452 g, 88%) : RMN-1H (CDC13) δ 8,50 (d, 2H, J=5,7 Hz), 7,72 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,19 (d, 2H, J=5,7 Hz), 7,01 (d, 2H, J=8,7
Hz), 5,65 (d, 1H, J=5,1 Hz), 5,12 (d, 1H, J=9,3 Hz), 5,02 (q, 1H, J=6,7 Hz), 4,01-3,77 (m, 4H) , 3,88 (s, 3H) , 3,76-3,63 (m, 2H) , 3,18-2,76 (m, 7H), 1, 95-1, 77 (m, 1H), 1,77- 1,56 (m, 2H), 1,56-1,41 (m, 1H) , 0,94 (d, 3H, J=6,6 Hz), 0,90 (d, 3H, J=6,9 Hz); MS (ESI) 564 (M+H).
Esquema 2
1) TKXH2PO(OEl)a(ia) 2} NaBHt, AcOH, IfôH
Exemplo 7 O tetra-hidropiridina-fosfonato de dietilo 11: preparou-se uma solução da piridina 9 (10,4 mg, 0,018 mmol) e do 626 triflato 10 (8,1 mg, 0,027 mmol) em acetona-d6 (0,75 mL), guardou-se à temperatura ambiente durante 9 horas e concentrou-se a solução sob pressão reduzida: RMN-31P (acetona-d3) δ 14,7; MS (ESI) 714 (M+). Dissolveu-se em etanol (2 mL) o sal de piridinio impuro concentrado e agitou-se à temperatura ambiente, à medida que se adicionava ocasionalmente NaBH4 (10 mg, Aldrich) ao longo de 4 horas. Adicionou-se à mistura uma solução de ácido acético (0,6 mL, Aldrich) em etanol (3 mL) até o pH da mistura atingir 3-4. Adicionou-se mais NaBH e ácido acético até se completar a reacção. Concentrou-se a mistura cuidadosamente sob pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo em solução saturada de NaHC03 (10 mL) . Extraiu-se o produto utilizando EtOAc (10 mLx3), lavou-se com solução saturada de NaCl, secou-se (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica para se obter o produto 11 (8,5 mg, 64%) : RMN- -3Η (CDC13) δ 7, 73 (d, 2H, J=8,7 Hz) O O (d, 2H, J= 8, 7 Hz) , 5,71 (d, 1H, J= 5 ,1 Hz) , 5,41 (lr, 1H), 5 ,15- 5,08 (m, 1H), 5,00 dr, 1H) , 4, 14 (dq, 4H, J=7,2 Hz), 4 ,06- 3, 94 (m, 2H), 3,88 (s, 3H) , , 3 ,92 -3,80 (m, 2H), 3,75 (dd, 1H, J= 9, 6 e 6, ,6 Hz) , 3, 79-3, r 61 (m, , 1H) , 3,24-2,94 (m, 6H) , 2,85 (d, 2H, J=ll,7 Hz), 2,88-2,76 (m, 2H), 2,75-2,63 (m, 1H), 2,38-2,29 (m, 1H), 2,24-2,2,12 (m, 2H), 2,12-1,78 (m, 4H) , 1,30 (t, 6H, J=7,1 Hz), 0,94 (d, 3H, J=6,6 Hz), 0,91 (d, 3H, J= 6,3 Hz); RMN-31P (CDC13) δ 24,6; MS (ESI) 740 (M+Na).
Esquema 3 627 627
1) T®0N#0{0enfe{12) 3 .......—......--..........
2) MaBH4s AcOH, EtOH
% PálC ................... SOHeOác {1/4}
Exemplo 8 0 tetra-hidropiridina-dibenzil-fosfonato 13: o composto 13 foi obtido pelo procedimento descrito para o composto 11, utilizando a piridina 9 (10,0 mg, 0,018 mmol) e o triflato 12 (9,4 mg, 0,022 mmol). Purificou-se o produto 13 por TLC preparativa para se obter o dibenzil-fosfonato 13 (8,8 mg, 59%) : RMN-1]! (CDC13) 6 7,73 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,35 (s, 10H), 7,00 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 5,65 (d, 1H2H, J=5,l Hz), 5,39 (lr, 1H), 5,15-4,92 (m, 6H), 4,03-3, 77 (m, 6H) , 3,77-3,62 (m, 2H) , 3,56 (lr, 1H) , 3,24-2,62 (m, 9H) , 2,32 (d, 1H, J=13,5 Hz), 2,24-1,75 (m, 6H) , 0,94 (d, 3H, J=6,6 Hz), 0,89 (d, 3H, J=6,3 Hz); RMN-31P (CDC13) 6 25, 5; MS (ESI) 842 (M+H).
Exemplo 9 628 0 ácido fosfónico 14: preparou-se uma mistura do dibenzil-fosfonato 13 (8,8 mg, 0,011 mmol) e Pd a 10%/C em EtOAc (2 mL) e EtOH (0,5 mL) e agitou-se em ambiente de H2 durante 10 horas, à temperatura ambiente. Depois de se filtrar a mistura através de celite, concentrou-se o filtrado até à secura para se obter o produto 14 (6,7 mg, quantitativo): ΡΜΝ^Η (CD3OD) δ 7,76 (d, 2H, J=9,0 Hz), 7,10 (d, 2H, J=9,0
Hz), 5,68 (d, 1H, J=5,1 Hz), 5,49 (lr, 1H) , 5,11 (m, 1H) , 3,90 (s, 3H), 4,04-3,38 (m, 10H), 3,22 (d, 2H, J=12,9 Hz), 3,18-3,00 (m, 2H) , 2,89-2, 75 (m, 2H) , 2, 68-2, 30 (m, 3H) , 2,21-1,80 (m, 4H) , 0,92 (d, 3H, J=6,3 Hz), 0,85 (d, 3H, J=6,3 Hz); RMN-31P (CD3OD) 06,29; MS (ESI) 662 (M+H) .
Esquema 4 629 629
_1)30Cb
Ο OPh 16
X Ha. Pd/C O'^'COOEí“,||5h^ O HO. Jí Awiwu U*t
ia OPh 10 T%0,2,frltótóiw Tl
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1| 8 2) mmA> EtQH, AúOH
Exemplo 10
Benziloximetilfosfonato de difenilo 15: a uma solução de fosfito de difenilo (46,8 g, 200 mmol, Aldrich) em acetonitrilo (400 mL) (à temperatura ambiente) adicionou-se carbonato de potássio (55,2 g, 400 mmol), seguindo-se a adição lenta de éter clorometil-benzilico (42 mL, 300 mmol, 630 a cerca de 60%, Fluka). Agitou-se a mistura de um dia para o outro e concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com água e NaCl saturado, secou-se (Na2S04) , filtrou-se e evaporou-se. Submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica para se obter o éter benzílico (6,8 g, 9,6%) com o aspecto de um líquido incolor.
Exemplo 11
Monoácido 16: a uma solução de benziloximetilfosfonato de difenilo 15 (6,8 g, 19,1 mmol) em THF (100 mL), à
temperatura ambiente, adicionou-se NaOH IN em água (21 mL, 21 mmol). Agitou-se a solução durante 3 horas. Evaporou-se o THF sob pressão reduzida e adicionou-se água (100 mL) . Arrefeceu-se a solução aquosa até 0°C, neutralizou-se até pH 7 com HC1 3N e lavou-se com EtOAc. Arrefeceu-se novamente a solução aquosa até 0°C, acidificou-se com HC1 3N até pH 1, saturou-se com cloreto de sódio e extraiu-se com EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com salmoura, secou-se (Na2SC>4), filtrou-se, evaporou-se e depois efectuou-se a co-evaporação com tolueno para se obter o monoácido (4,0 g, 75%) com o aspecto de um líquido incolor. RMN-1H (CDC13) 5 7,28-7,09 (m, 10H) , 4,61 (s, 2H) , 3,81 (d, 2H) . RMN-31P (CDC13) δ 20,8 .
Exemplo 12
Lactato de fosfonato de etilo 18: a uma solução de monoácido 16 (2,18 g, 7,86 mmol) em acetonitrilo anidro (50 mL) , sob uma atmosfera de azoto, adicionou-se lentamente cloreto de tionilo (5,7 mL, 78 mmol). Agitou-se a solução em banho de óleo a 70°C durante três horas, arrefeceu-se 631 até à temperatura ambiente e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em diclorometano anidro (50 mL), arrefeceu-se esta solução até 0°C e agitou-se sob uma atmosfera de azoto. À solução agitada adicionou-se (S)-(-)-lactato de etilo (2,66 mL, 23,5 mmol) e trietilamina (4,28 mL, 31,4 mmol). Aqueceu-se a solução até à temperatura ambiente e manteve-se sob agitação durante uma hora. Diluiu-se a solução com acetato de etilo, lavou-se com água, salmoura, ácido cítrico e novamente com salmoura, secou-se (MgSCt) , filtrou-se através de Celite, concentrou-se sob pressão reduzida e submeteu-se a cromatografia através de gel de sílica, utilizando 30% de acetato de etilo em hexano. Reuniu-se os dois diastereómeros. RMN-1]! (CDC13) 6 7,40-7, 16 (m, 20H), 5,18-5,13 (m, 2H) , 4,73 (s, 2H) , 4,66 (d, 2H) , 4,28-4,11 (m, 5H) , 4,05 (d, 2H) , 3,95 (d, 2H) , 1,62 (d, 3H) , 1,46 (d, 3H), 1,30-1,18 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) 619,6, 17,7.
Exemplo 13
Lactato de fosfonato de etilo com álcool livre 19: dissolveu-se lactato de fosfonato de etilo 18 em EtOH (50 mL) e adicionou-se, sob uma atmosfera de azoto, Pd a 10%/C (aproximadamente 20% em peso). Substituiu-se a atmosfera de azoto por hidrogénio (1 atm) e agitou-se a suspensão durante duas horas. Adicionou-se mais Pd a 10%/C (20% em peso) e agitou-se a suspensão durante mais cinco horas. Adicionou-se celite, filtrou-se a mistura de reacção através de Celite e concentrou-se o filtrado para se obter 1,61 g (71% a partir de monoácido 16) do álcool com o aspecto de um líquido incolor. ΡΜΝ-1!! (CDC13) 6 7,40-7, 16 (m, 10H), 5,16-5,03 (m, 2H) , 4,36-4,00 (m, 8H) , 1,62 (d, 632 3Η) , 1,46 (d, 3H) , 1,30-1,22 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 22,3, 20,0.
Exemplo 14
Triflato 20: a uma solução de lactato de fosfonato de etilo com álcool livre 19 (800 mg, 2,79 mmol) em diclorometano anidro (45 mL), arrefecida para -40°C, sob uma atmosfera de azoto, adicionou-se anidrido triflico (0,516 mL, 3,07 mmol) e 2-6 lutidina (0,390 mL, 3,34 mmol). Agitou-se a solução durante 3 horas, depois aqueceu-se até -20°C e agitou-se mais uma hora. Adicionou-se 0,1 equivalente de anidrido triflico e 2,6-lutidina e manteve-se sob agitação durante mais 90 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com diclorometano arrefecido com gelo, lavou-se com água arrefecida com gelo, lavou-se com salmoura arrefecida com gelo, secou-se a fase orgânica (MgS04) e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e submeteu-se a cromatografia através de gel de silica, utilizando 30% de EtOAc em hexano como eluente, para se obter 602 mg (51%) dos diastereómeros de triflato com o aspecto de um liquido transparente e ligeiramente cor-de-rosa. RMN-1H (CDC13) 0 7,45-7,31 (m, 4H), 7,31-7,19 (m, 6H) , 5,15-4,75 (m 6H) , 4,32-4,10 (4H), 1,62 (d, 3H) , 1,50 (d, 3H), 1, 30-1,22 (m, 6H); RMN-31P (CDC13) Ô 10,3, 8,3.
Exemplo 15
O pró-fármaco de tetra-hidropiridina 21: preparou-se uma solução da piridina 9 (11,1 mg, 0,020 mmol) e do triflato 20 (11,4 mg, 0,027 mmol) em acetona-d6 (0,67 mL, Aldrich) , guardou-se à temperatura ambiente durante 7 horas e concentrou-se a solução sob pressão reduzida: RMN-31P 633 (acetona-d6) δ 11,7, 10,9; MS (ESI) 838 (M+H). Dissolveu-se o sal de piridínio impuro concentrado em etanol (1 mL) e adicionou-se 2-3 gotas de uma solução de ácido acético (0,6 mL, Aldrich) em etanol (3 mL). Agitou-se a solução a 0°C, à medida que se adicionava NaBH4 (7 8 mg, Aldrich) .
Adicionou-se mais solução de ácido acético para ajustar o pH da mistura de reacção até 3-4. Repetiu-se a adição de NaBH4 e da solução de ácido acético até se completar a reacção. Concentrou-se a mistura cuidadosamente, sob pressão reduzida, e purificou-se o resíduo por cromatografia em coluna C18 de fase inversa, seguindo-se a TLC preparativa, utilizando uma placa C18 de fase inversa, para se obter o pró-fármaco 21 (13,6 mg, 70%) sob a forma de uma mistura a 2:3 de dois diastereómeros: RMN-1]! (CD3CN) δ 7,78 (d, 2H, J=9,0 Hz), 7, 48-7,42 (m, 2H) , 7,35-7,27 (m, 3H) , 7,10 (d, 2H, J=9,0 Hz), 5,86 (m, 1H) , 5,60 (m, 1H) , 5,48 (lr, 1H), 5,14-5,03 (m, 2H), 4,29-4,13 (m, 2H), 3,89 (s, 3H), 3, 97-3, 32 (m, 12H) , 5,48 (lr, 3,24 (lr, 0,6H), 3, 02-2,82 (m, 4H) , 2,64-2,26 (m, 3H) , 2,26-2,08 (m, 1H) , 1,94-1,76 (m, 3H), 1,57 (d, 1,8H, J=6,9 Hz), 1,46 (d, 1,2H, J=6,9 Hz), 1,28 (d, 1,2H, J=6, 9 Hz), 1,21 (d, 1,8H, J=7,2 Hz), 0,92-0,88 (m, 6H) ; RMN-31P (CD3CN) δ 14,4 (0,4P), 13,7 (0,6P); MS (ESI) 838 (M+H).
Exemplo 16
Metabolito 22: a uma solução do pró-fármaco 21 (10,3 mg,
0,011 mmol) em DMSO (0,1 mL) e acetonitrilo (0,2 mL) adicionou-se tampão PBS 0,1M (3 mL) e misturou-se muito bem para se obter uma suspensão. À suspensão adicionou-se suspensão de esterase do fígado de suíno (0,05 mL, EC3,1,1,1, Sigma). Depois de se manter a suspensão a 37°C 634 durante 1,5 horas, centrifugou-se a mistura e recolheu-se o sobrenadante. Purificou-se o produto por HPLC e liofilizou-se a fracção recolhida para se obter o produto 22 sob a forma do sal de ácido trifluoroacético (7,9 mg, 86%): RMN-ΧΗ (D20) 6 7,70 (d, 1H), 7,05 (d, 2H) , 5,66 (d, 1H) , 5,40 (lr, 1H), 5,02 (lr, 1H), 4,70 (lr, 1H), 3,99-3,89 (m, 2H), 3,81 (s, 3H), 3,83-3,50 (m, 8H), 3,34-2,80 (m, 7H), 2,50- 2,18 (m, 3H), 2,03 (m, 1H) , 1,92-1, 70 (m, 3H), 1,39 (d, 3H), 0,94 (d, 3H), 0,93 (d, 3H) ; RMN-31P (D20) δ 9,0, 8,8; MS (ESI) 734 (M+H). EMI519,0
Esquema 5
Exemplo 17
Triflato 24: o triflato 24 de um modo idêntico ao triflato 20, com a excepção de se ter utilizado dimetil-hidroxietilfosfonato 23 (Aldrich) em vez de lactato de fosfonato de etilo com álcool livre 19. 635
Exemplo 18
Tetra-hidropiridina 25: a tetra-hidropiridina 25 foi preparada de um modo idêntico à tetra-hidropiridina 30, com a excepção de se ter utilizado o triflato 24 em vez do triflato 29. ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7, 71 (d, 2H) , 7,01 (d, 2H) , 5,71 (d, 2H) , 5,43 (sl, 1H), 5, 07-4, 87 (m, 1H), 4,16-3,46 (m, 13H), 3,34-3,18 (m, 3H), 3,16-2,80 (m, 5H), 2,52-1,80 (m, 12H), 1,28-1,04 (m, pico 3H+H2O) , 0, 98-0, 68 (m, 6H).
Esquema 6 HQPfOSnfe26
1)0*ifíaiSr HO'
27 26 T%CX 2,64ut5dÍne I ----— chscí2 J1Q é\29 1) 92) NaBH4, MeOH, AcOH3) H2> Pd/C, EíÔH/ItOAc (1A$
Exemplo 19
Dibenzil-fosfonato com ligação dupla 27: a uma solução agitada de brometo de alilo (4,15 g, 34 mmol, Aldrich) e fosfito de dibenzilo (6 g, 23 mmol, Aldrich) em acetonitrilo (25 mL) adicionou-se carbonato de potássio 636 (6,3 g, 46 mmol, pó, malha 325, Aldrich) para criar uma suspensão, a qual se aqueceu até 65°C e se agitou durante 72 horas. Arrefeceu-se a suspensão até à temperatura ambiente, diluiu-se com acetato de etilo, filtrou-se, lavou-se o filtrado com água e depois com salmoura, secou-se (MgS04) , concentrou-se e utilizou-se directamente no passo subsequente.
Exemplo 20
Dibenzil-hidroxietilfosfonato 28: dissolveu-se dibenzil-fosfonato com ligação dupla 27 em metanol (50 mL), arrefeceu-se até -78°C, agitou-se e submeteu-se a ozono, fazendo borbulhar ozono através da solução durante três horas, até a solução ficar azul pálido. Interrompeu-se o fluxo de ozono e fez-se borbulhar oxigénio durante 15 minutos até a solução ficar incolor. Adicionou-se, lenta e progressivamente, boro-hidreto de sódio (5 g, excesso). Depois de ter terminado a libertação de gás, deixou-se a solução aquecer até à temperatura ambiente, concentrou-se, diluiu-se com acetato de etilo, acidificou-se com ácido acético e água e repartiu-se. Lavou-se a fase de acetato de etilo com água e depois com salmoura, secou-se (MgS04) , filtrou-se, concentrou-se e submeteu-se a cromatografia através de gel de silica efectuando a eluição com um gradiente entre 50% de acetato de etilo em hexano e 100% de acetato de etilo, para se obter 2,76 g do produto desejado. RMN-1H (CDC13) δ 7,36 (m, 10H), 5,16-4,95 (m, 4H), 3,94-3,80 (dt, 2H), 2,13-2,01 (dt, 2H); RMN-31P (CDC13) δ 31,6.
Exemplo 21 637
Dibenzil-fosfonato 30: preparou-se uma solução do álcool 28 (53,3 mg, 0,174 mmol) e 2,6-lutidina (0,025 mL, 0,215 mmol, Aldrich) em CH2C12 (1 mL) e agitou-se a -45°C, à medida que se adicionava anidrido trifluorometanossulfónico (0,029 mL, 0,172 mmol, Aldrich). Agitou-se a solução durante 1 hora a -45°C e evaporou-se sob pressão reduzida para se obter o triflato impuro 29.
Preparou-se uma solução do triflato impuro 29, 2,6-lutidina (0,025 mL, 0,215 mmol, Aldrich) e a piridina 9 em acetona-d6 (1,5 mL, Aldrich) e guardou-se à temperatura ambiente durante 2 horas. Concentrou-se a solução sob pressão reduzida para se obter produto de piridínio impuro. RMN-31P (acetona-d6) δ 25,8; MS (ESI) 852 (M+) . A uma solução do sal de piridinio impuro em etanol (2 mL) adicionou-se 7-8 gotas de uma solução de ácido acético (0,4 mL, Aldrich) em etanol (2 mL) . Agitou-se a solução a 0°C, à medida que se adicionava NaBH4 (7 8 mg) . Manteve-se a solução a pH 3-4 por adição de solução de ácido acético. Adicionou-se mais NaBH4 e ácido acético até se completar a redução. Decorridas 4 horas, concentrou-se a mistura e dissolveu-se o resíduo restante em NaHC03 saturado (10 mL) . Extraiu-se o produto com EtOAc (10 mL*3), secou-se (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia repetitiva através de gel de sílica, seguindo-se a Purificação por HPLC. A liofilização da fracção recolhida proporcionou o produto 30 (13,5 mg, 26%) sob a forma do sal de ácido trifluoroacético: RMN-1]! (CDC13) δ 7,72 (d, 2H, J= 8,7 Hz), 7,36 (lr, 10H) , 7,00 (d, 2H, J=8,7 Hz), 5,69 (d, 1H, J=5,l Hz), 5,41 (lr, 1H) , 5,13-4,93 (m, 6H), 4,05-2,5 (m, 19H), 3,88 (s, 3H), 2,5-1,9 (m, 638
5Η) , 1, 90-1,74 (m, 2H) , 0,88 (d, 6H, J=6,l Hz); RMN-31P (CDC13) δ 25,8; MS (ESI) 856 (M+H) .
Exemplo 22 Ácido fosfónico 31: preparou-se uma mistura do dibenzil-fosfonato 30 (9,0 mg, 0, 009 mmol) e Pd a 10%/C (5,2 mg,
Aldrich) em EtOAc (2 mL) e etanol (0,5 mL) e agitou-se em ambiente de H2 durante 3 horas à temperatura ambiente.
Depois de se filtrar a mistura através de celite, adicionou-se uma gota de ácido trifluoroacético (Aldrich) ao filtrado e concentrou-se o filtrado até à secura para se obter o produto 31 (6,3 mg, 86%) : RMN-1H (CD3OD) 07,76 (d, 2H, J=9,0 Hz), 7,11 (d, 2H, J=9,0 Hz), 5,69 (d, 1H, J=5,l
Hz), 5,54 (lr, 1H), 5,09 (lr, 1H), 4,05-3,84 (m, 4H), 3,89 (s, 3H), 3,84-3,38 (m, 9H), 3,07 (dd, 2H, J=13,5 e 8,4 Hz), 2,9-2,31 (m, 5H) , 2,31-1,83 (m, 6H) , 0,92 (d, 3H, J= 6,3
Hz), 0,85 (d, 3H, J= 6,9 Hz); RMN-31P (CD3OD) δ 21,6; MS (ESI) 676 (M+H).
Esquema 7 639 Ο Ο
Hcr^r00"* m
TfOH, CHs03 1)30¾
BnO' -OCH3 OCHg
MeCN Β«0
ψ-m -OH
2} FhOH "QPh
ffeOH βησ
-OH 35 OPfi 33 34 OFh
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X P—O COOEl
Og „ - F?~0 COOEt OFh 37 1)3 2} Na8H4< MeOH, AçQHÍ à &
TfsOí 2tí>lsff(í]ns
03277356 , OFh t.imitio PBSÍ DJVtS® M&CH
OCHs 40 SS27?Í3®
"COOH OH
Exemplo 23 Éter benzílico 32: preparou-se uma solução de hidroxietilfosfonato de dimetilo (5,0 g, 32,5 mmol, Across) e 2,2,2-tricloroacetimidato de benzilo (97, 24 mL, 39,0 mmol, Aldrich) em CH2C12 (100 mL) , a O O O e sob uma atmosfera de azoto, e tratou- se com ácido 640 trifluorometanossulfónico (0,40 mL). Agitou-se durante três horas a 0°C e depois deixou-se aquecer a mistura de reacção até à temperatura ambiente, sob agitação continuada. Deixou-se reagir durante 15 horas, depois diluiu-se a mistura de reacção com diclorometano, lavou-se com bicarbonato de sódio saturado, lavou-se com salmoura, secou-se (MgS04) , concentrou-se sob pressão reduzida e submeteu-se a cromatografia através de gel de sílica efectuando a eluição com um gradiente entre 60% de EtOAc em hexano e 100% de EtOAc para se obter 4,5 g, (57%) do éter benzílico com o aspecto de um líquido incolor. RMN-31P (CDC13) δ 31,5 .
Exemplo 24
Diácido 33: dissolveu-se uma solução de éter benzílico 32 (4,5 g, 18,4 mmol) em acetonitrilo anidro (100 mL), arrefeceu-se até 0°C sob uma atmosfera de azoto e tratou-se com brometo de TMS (9,73 mL, 74 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e depois de se agitar durante 15 horas concentrou-se repetidamente com MeOH/água para se obter o diácido, o qual foi utilizado directamente no passo subsequente. RMN-31P (CDC13) δ 31,9.
Exemplo 25
Difenil-fosfonato 34: Dissolveu-se o diácido 33 (6,0 g, 27 mmol) em tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida, três vezes, dissolveu-se em acetonitrilo anidro, agitou-se sob uma atmosfera de azoto e tratou-se por adição lenta de cloreto de tionilo (20 mL, 270 mmol). Aqueceu-se a solução até 70°C durante duas horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente, concentrou-se, dissolveu-se em 641 diclorometano anidro, arrefeceu-se até -78°C e tratou-se com fenol (15 g, 162 mmol) e trietilamina (37 mL, 270 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente, agitou-se durante 15 horas, depois diluiu-se com diclorometano arrefecido com gelo, lavou-se com NaOH IN arrefecido com gelo, lavou-se com água arrefecida com gelo, secou-se (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. O residuo resultante foi utilizado directamente no passo subsequente. RMN-1H (CDC13) δ 7,40-7,16 (d, 15H), 4,55 (s, 2H) , 3,98-3, 84 (m, 2H) , 2,55-2,41 (m, 2H) ; RMN-31P (CDC13) Ô 22,1.
Exemplo 26
Monoácido 35: o monoácido 35 foi preparado utilizando condições idênticas às descritas para a preparação de monoácido 16, com a excepção de se ter utilizado difenil-fosfonato 34 em vez de éter benzílico 15. RMN-1]! (CDCI3) δ7,38-7,16 (d, 10H) , 4,55 (s, 2H) , 3,82-3, 60 (m, 3H) , 2,33-2,21 (m, 2H) ; RMN-31P (CDC13) δ29,0.
Exemplo 27
Lactato de fosfonato de etilo 36: 0 lactato de fosfonato de etilo 36 foi preparado de um modo idêntico ao lactato de fosfonato de etilo 18, com a excepção de se ter utilizado o monoácido 35 em vez do monoácido 16. RMN-31P (CDC13) Ô 27,0, 25, 6.
Exemplo 28
Lactato de fosfonato de etilo com álcool livre 37: 0 lactato de fosfonato de etilo com álcool livre 37 foi 642 preparado de um modo idêntico ao lactato de fosfonato de etilo com álcool livre 19, com a excepção de se ter utilizado lactato de fosfonato de etilo 36 em vez de lactato de fosfonato de etilo 18. RMN-31P (CDC13) δ 28,9, 26,8.
Exemplo 29
Triflato 38: preparou-se uma solução do álcool 37 (663 mg, 2,19 mmol) e 2,6-lutidina (0,385 mL, 3,31 mmol, Aldrich) em CH2C12 (5 mL) e agitou-se a -45°C, à medida que se adicionava anidrido trifluorometanossulfónico (0,48 mL, 2,85 mmol, Aldrich). Agitou-se a solução durante 1,5 horas a -45°C, diluiu-se com água arrefecida com gelo (50 mL) e extraiu-se com EtOAc (30 mL*2). Lavou-se os extractos combinados com água arrefecida com gelo (50 mL), secou-se (MgSCt) e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter uma mistura impura de dois diastereómeros (910 mg, 96%, 1:3 ratio) : ΡΜΝ-1!! (acetona-d6) 0 7,48-7, 37 (m, 2H) , 7,37-7,18 (m, 3H), 5,2-4,95 (m, 3H) , 4,3-4,02 (m, 2H), 3,38-3,0 (m, 1H) , 3,0-2,7 (m, 2H) , 2,1-1,9 (m, 1H) , 1,52 (d, 1H) , 1,4 (d, 2H) , l,4-l,l)m, 3H) ; RMN-31P (acetona-dg) δ21,8 (0,75P), 20,5 (0,25P) .
Exemplo 30 O pró-fármaco 39: preparou-se uma solução do triflato impuro 38 (499 mg, 1,15 mmol) e da piridina 9 (494 mg, 0,877 mmol) em acetona (5 mL) e agitou-se à temperatura ambiente durante 16,5 horas. Concentrou-se a solução sob pressão reduzida para se obter o sal de piridinio impuro. A uma solução do sal de piridinio impuro em etanol (10 mL) adicionou-se 5 gotas de uma solução de ácido acético (1 mL) 643 em etanol (5 mL) . Agitou-se a solução a 0°C, à medida que se adicionava NaBH4 (10 mg, Aldrich). Manteve-se a solução a pH 3-4 por adição de solução de ácido acético. Adicionou-se mais NaBH4 e ácido acético até se completar a redução. Após 5,5 h, Concentrou-se a mistura sob pressão reduzida e dissolveu-se o resíduo restante em solução saturada de NaHC03 arrefecida com gelo (50 mL) . Extraiu-se o produto com EtOAc arrefecido com gelo (30 mLx2), lavou-se os extractos combinados com solução saturada a 50% de NaHCCL (50 mL) , secou-se (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica, seguindo-se uma cromatografia em coluna C18 de fase inversa. Por liofilização da fracção recolhida obteve-se a mistura de produto 39 (376 mg, 50%, 2,5:1 ratio) sob a forma do sal de ácido trifluoroacético: ΕΜΝ^Η (CD3CN+TFA) δ 7,78 (d, 2H, J= 8,7 Hz) , . 7,52- -7,42 (m, 2H) ; 7,37- 7,22 (m 3H), 7,10 (d , 2H, J=8, 7 Hz) , 5,78 (d t 1H, J=9,0 Hz) , r 5,64 (m, 1H) , 5, 50 (lr, 1H) , 5,08 (m, 2H), 4 ,31- 4,12 (m, 2H), 4,04 -3,42 (m, 11H) , 3, 90 (s, 3H) , 3, 29 (m 2H) , 3,23 -3,16 (m, 1H) , 3, ,08-2,7( 3 (m , 6H) , 2,76- -2,27 (m, 5H) , 2,23 -2,11 (m, 1H) ; 2, 08-1,77 (m, 3H), 1,58 (d, 0 ,9H, J=7,2 Hz) , 1,45 (d ., 2,1H, J=6, 6 Hz) , , 1,32- -1,20 (m, 3H), 0,95- 0,84 (m, 6H) ; RMN-31 P (CD3CN+TFA) δ 24,1 e 23, 8, 22 , 2 e 22,1; MS (ESI) 852 (M+H).
Exemplo 31
Metabolito 40: a uma solução do pró-fármaco 39 (35,4 mg, 0,037 mmol) em DMSO (0,35 mL) e acetonitrilo (0,70 mL) adicionou-se tampão PBS 0,1M (10,5 mL) e misturou-se muito bem para se obter uma suspensão. À suspensão adicionou-se suspensão de esterase do fígado de suíno (0,175 mL, 644 EC3.1.1.1, Sigma). Depois de se manter a suspensão a 37°C durante 6,5 horas, filtrou-se a mistura através de filtro de membrana com 0,45 μιη e purificou-se o filtrado por HPLC. Liofilizou-se a fracção recolhida para se obter o produto 40 sob a forma do sal de ácido trifluoroacético (28,8 mg, 90%) : RMN-1]! (D20) δ 7, 96 (d, 2H, J=8,7 Hz), 7,32 (d, 2H, J=8,7 Hz), 5,89 (d, 1H, J=5,l Hz), 5,66 (lr, 1H) , 5,27 (m, 1H) , 4,97 (m, 1H), 4,23-4,12 (m, 2H), 4,08 (s, 3H) , 4,06-3,10 (m, 14H) , 3,03 (dd, 1H, J=14,l e 6,6 Hz), 2,78-1,97 (m, 9H) , 1,66 (d, 3H, J=6,9 Hz), 1,03 (d, 3H, J=7,5 Hz), 1,01 (d, 3H, J=6, 9 Hz); RMN-31P: (CD3CN+TFA) δ 20,0, 19,8; MS (ESI) 748 (M+H).
Esquema 8
43 OH 645
om
48A; um diastereòmero secundíi io {0$27?^í2} 40B; um tliastereomero piincipal{GS377033}
Exemplo 32
Composto 42: tratou-se o dibenzil-fosfonato 41 (947 mg, 1,21 mmol) se com DABCO (140,9 mg, 1,26 mmol, Aldrich) em 4,5 mL de tolueno para se obter o monoácido (890 mg, 106%). Secou-se o monoácido impuro (890 mg) por evaporação com tolueno, duas vezes, e dissolveu-se em DMF (5,3 mL) com (s)-lactato de etilo (0,3 mL, 2,65 mmol, Aldrich) e pyBOP (945 mg, 1,82 mmol, Aldrich) à temperatura ambiente. Depois 646 de se adicionar diisopropiletilamina (0,85 mL, 4,88 mmol, Aldrich), agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 4 horas e concentrou-se sob pressão reduzida até metade do seu volume. Diluiu-se a solução resultante com solução aquosa a 5% de HC1 (30 mL) e extraiu-se o produto com EtOAc (30 mLx3). Após a secagem (MgS04) dos extractos combinados e a concentração, submeteu-se o resíduo a cromatografia através de gel de sílica para se obter o composto 42 (686 mg, 72%) sob a forma de uma mistura de dois diastereómeros (2:3 ratio) : RMN-1]! (CDCI3) 07,46-7,32 (m, 5H) , 7,13 (d, 2H, J=8,l Hz), 6,85 (t, 2H, J=8,l Hz), 5,65 (m, 1H), 5, 35-4,98 (m, 4H) , 4,39 (d, 0,8H, J=10,2H), 4,30-4,14 (m, 3,2H), 3,98 (dd, 1H, J=9,3 e 6,0 Hz), 3,92-3,78 (m, 3H) , 3, 78-3, 55 (m, 3H) , 3,16-2,68 (m, 6H) , 1,85 (m, 1H), 1,74-1,55 (m, 2H) , 1,56 (d, 1,8H, J=7,2 Hz), 1,49 (d, 1,2H) , 1,48 (s, 9H) , 1,30-1,23 (m, 3H) , 0,88 (d, 3H, J= 6,3 Hz), 0,87 (d, 3H, J= 6,3 Hz); RMN-31P (CDCI3) 0 20,8 (0, 4P) , 19,5 (0, 6P) ; MS (ESI) 793 (M+H) .
Exemplo 33
Composto 45: preparou-se uma solução de composto 42 (101 mg, 0,127 mmol) e ácido trifluoroacético (0,27 mL, 3,5 mmol, Aldrich) em CH2CI2 (0,6 mL), agitou-se a 0°C durante 3,5 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Secou-se o resíduo resultante sob uma pressão hipobárica para se obter a amina impura como sal de TFA.
Preparou-se uma solução do sal de amina impura e trietilamina (0,072 mL, 0,52 mmol, Aldrich) em CH2CI2 (1 mL) e agitou-se a 0°C, à medida que se adicionava o cloreto de sulfonilo 42 (37 mg, 0,14 mmol). Depois de se agitar a solução a 0°C durante 4 horas e 0,5 hora à temperatura 647 ambiente, diluiu-se a mistura de reacção com NaHC03 saturado (20 mL) e extraiu-se com EtOAc (20 mLxl; 15 mLx2). Lavou-se as fracções orgânicas combinadas com solução saturada de NaCl, secou-se (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. A purificação por cromatografia através de gel de silica proporcionou a sulfonamida 45 (85 mg, 72%) sob a forma de uma mistura de dois diastereómeros ( 1:2 ratio ) : RMN-1H (CDC13) 1 57, 45-7,31 (m, 7H) , 7,1 9 (d, \—1 J= 8,4 Hz) , 7,12 (d, 2H, J= 7,8 Hz) , 6, 85 (m, 2H) , 5,65 (d, •V) i—1 =5,4 Hz), 5,34-5,16 (m, 2H), 5,16 5-4, 97 (m, 2H), 4 ,97- CO (m, 1H), 4,38 (d, 0 ,7H, J= dO, 8 Hz) , 4,29-4,12 (m, 3, 3H) , 3, 96 (dd, 1H, J=[ 5,3 e 6,3 Hz) , 3,89 (s, 3H) , 3 ,92- 3,76 (m, 3H), 3,76-3,64 (m, 2H), 3,64- 3,56 ( lr, 1H), 3 ,34- 3,13 (m, 1H), 3,11-2,70 (m, 6H) , 2 ,34 (s, 3H) , 1, 86 (m, 1H, J=7,0 Hz) , 1,75-1,58 (m, 2H) , 1,56 ; (d, 2H, J =7,2 Hz) , 1,49 (d, 1H, J=1,2 Hz), 1,29 -1, 22 (m, 3H) , 0, 94 (d, 3H, J =6, 6 Hz) , 0,90 (d, 3H, J=6,9 Hz ) ; RMN- 31P 1 ICDCI3) δ 20 ,7 (0, 3P), 19,5 (0,7P); MS (ESI) 921 (M+H) .
Exemplo 34
Composto 46: agitou-se o composto 45 (257 mg, 0,279 mmol) numa solução saturada de amónia em etanol (5 mL) a 0°C durante 15 minutos e concentrou-se a solução sob pressão reduzida. A purificação do resíduo por cromatografia através de gel de sílica proporcionou o composto 46 (2,6 mg, 84%) : RMN-1!! (CDC13) 0 7,48-7,34 (m, 4H) , 7,22-7,05 (m, 5H) , 7,01 (d, 1H, J=8,l Hz), 6, 87-6,80 (m, 2H) , 5,68 (d, 1H, J=4,8 Hz), 5,32 (dd, 13H, J= 8,7 e 1,8 Hz), 5,22 (d, 0,7H, J=9,0 Hz), 5,11-5,00 (m, 3H), 4,47-4,14 (m, 4H), 4,00 (dd, 1H, J=9,9 e 6,6 Hz), 3,93 (s, 3H), 3,95-3, 63 (m, 5H), 3, 07-2, 90 (m, 4H) , 2,85-2,75 (m, 1H) , 2,75-2, 63 (m, 2H) , 648 1,88-1,67 (m, 3H), 1, 65-1, 55 (m, 2H), 1,57 (d, 2H, J= 6,9 Hz), 1,50 (d, 1H, J=7,2 Hz), 1,31-1,20 (m, 3H) , 0,95 (d, 3H, J= 6,6 Hz), 0,88 (d, 3H, J=6,3 Hz); RMN-31P (CDC13) δ 20,7 (0,3P), 19,6 (0,7P); MS (ESI) 879 (M+H) .
Exemplo 35
Composto 47: preparou-se uma mistura de composto 46 (176 mg, 0,200 mmol) e Pd a 10%/C (9,8 mg, Aldrich) em EtOAc (4 mL) e etanol (1 mL) agitou-se em ambiente de H2 durante 3 horas à temperatura ambiente. Depois de se filtrar a mistura através de celite, concentrou-se o filtrado até à secura para se obter o composto 47 (158 mg, 100%) com o aspecto de um pó branco: ΚΜΝ^Η (CDCI3) 0 7,30-7,16 (m, 2H), 7,12 (d, 2H, J=7,5 Hz), 7,01 (d, 1H, J=7,8 Hz), 6,84 (d, 2H, J=7,5 Hz), 5,66 (d, 1H, J=4,5 Hz), 5,13-4,97 (m, 2H) , 4,38-4,10 (m, 4H) , 3,93 (s, 3H) , 4,02-3, 66 (m, 6H) , 3,13- 2,69 (m, 7H) , 1, 96-1,50 (m, 3H) , 1,57 (d, 3H, J=6,6 Hz), 1,26 (t, 3H, J= 7,2 Hz), 0,93 (d, 3H, J=6,0 Hz), 0,88 (d, 3H, J=6,0 Hz); RMN-31P (CDC13) δ 20,1; MS (ESI) 789 (M+H).
Exemplo 36
Composto 48A e 48B: preparou-se uma solução de pyBOP (191 mg, 0,368 mmol, Aldrich) e diisopropiletilamina (0,1 mL, 0,574 mmol, Aldrich) em DMF (35 mL) e agitou-se à temperatura ambiente, à medida que se adicionava uma solução de composto 47 (29 mg, 0,036 mmol) em DMF (5,5 mL) ao longo de 16 horas. Após a adição, agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 3 horas e concentrou-se sob pressão reduzida. Dissolveu-se o resíduo em água arrefecida com gelo e extraiu-se com EtOAc (20 mLxl; 10 mLx2). Secou-se os extractos combinados (MgS04) e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o residuo por cromatografia através de gel de sílica e depois por TLC preparativa para se obter dois isómeros de estrutura 48 (1,0 mg, 3,6% e 3, 6 mg, 13%) . Isómero 48A: : RMN-1 H (CDCI3) δ 7,39 (m, 1H), 7,12 (lr, 1H), 7,01 (d, 2H, , J=8,1 Hz), 6, 98 (lr, 1H) , 6,60 (d, 2H, J= 8,1 Hz) , 5,75 (d, 1H, J=5,1 Hz), 5,37 -5,28 (m, 2H), 5,18 (q, 1H, J= 8,7 ' Hz), 4,71 (dd , 1H, J=14 ,1 e 7,5 Hz) , 4,29 (m, ; 3H), 4,15- 4,06 (m, 1H), 3 ,99 (s , 3H) , 4, ,05-3,6 (m, 5H) , 3,35 (m, 1H) , 3,09 (lr, 1H) , 2,90- -2,78 (m, 3H) , 2,2- 2,0 (m, 3H), 1, 71 (d, 3H, J= 6,6 Hz), 1,34 (t, 3H, J= 6,9 Hz) , 1,01 (d, 3H, J=6,3 Hz) , 0,95 (d, 3H, J =6,3 i Hz); RMN- 31P i (CDCI3) δ 17,8; 1 MS (ESI) 793 (M+Na); Isómero 48B: RMN-XH (CDC13) δ 7,46 (d, 1H, J =9,3 Hz) , 7,24 (lr, 1H) , 7,00 (d, 2H, J=8,7 Hz) , 6,91 (d, 1H, J=8,7 Hz) , 6,53 (d, 2H, J= 8,7 Hz) , 5,74 (d, 1H, J=5,l . Hz) , 5,44 (m, 1H), 5, 35 (d, 1H, J= 9, 0 Hz) , 5, 18 (q , 1H, J=7, 2 Hz) , 4,6£ i (dd , 1H, J=14 ,4 e 6,3 Hz) , 4,23 (m, 3H) , 4,10 (m, : LH), 4 ,04 (s, 3H) , 3 ,77- 4,04 (m, 6H) , 3,46 (dd, 1H, J=12, 9 e 11,4 1 Iz), 3,08 (lr, 1H) , 2,85 (m, 2H) , 2,76 (dd, , 1H, J=12, 9 e - 4,8 Hz), 1 ,79- 2,11 (m, 3H) , 1,75 (d, 3H, J= 6,6 Hz) , 1,70 (m, 2H) , 1,27 (t, 3H, J=6, 9 Hz) , 1,01 (d, 3H, J 6,6 Hz) , 0, 93 (d, 3H, J= 6,6 Hz); RMN-31P (CDC13) δ15,4; MS (ESI) 793 (M+Na) . 650
Secção P de exemplos 650 Exemplo 1
2 3 R^CH3 E =
Exemplo IA Éster dimetilfosfónico 2 (R-CH3) : num balão introduziu-se ácido fosfónico 1 (67 mg, 0,1 mmol) , metanol (0,1 mL, 2,5 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (83 mg, 0,4 mmol) e depois adicionou-se piridina (1 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Diluiu-se o residuo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4C1, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia através de gel de sílica (isopropanol/CH2Cl2, 1% a 7%) para se obter 2 (39 mg, 56%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1]! (CDCI3) Ô 7,71 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,87 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 5,10-4,92 (m, 4H) , 4,26 (d, J=9,9 Hz, 2H), 3,96-3,65 (m, sobreposição s, 15H), 3,14-2,76 (m, 7H), 1,81-1,55 (m, 3H), 0,91 (d, J=6,6 Hz, 3H), 0,88 (d, J=6,6
Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ21,7; MS (ESI) 723 (M+Na) . 651
Exemplo 1B 0 éster diisopropilfosfónico 3 (R-CH (CH3)2) foi sintetizado de um modo idêntico com um rendimento de 60%.
Exemplo 2
RMN- 3H (CDC13) δ 7, 71 (d, J= 8, 7 Hz, 2H) , 7,15 (d, J= 8 ,7 Hz, 2H) , 7, 15 (d, J=8, 7 Hz, 2H) , 6, 99 (d, J= 8, 7 Hz, 2H) CO --j (d, J=8 ’r 7 Hz, 2H) , 5, 66 (d, J=5,1 Hz, 1H) , 5,08 -4, 92 (m, 3H) , 4, 16 (d, J=10 ,5 Hz, 2H) , , 3,98 -3,68 ! (m sobreposi ção s, 9H) , 3, 16' N3 CO (m, 7H) , CM OO \—1 -1,56 (m, 3H) , 1,37 (t, J= 6, 3 Hz, 6H) r 0, 93 (d, J= 6, 6 Hz, 3H) , O CO CO (d, J= 6, 6 Hz , 3H); RMN-31P (CDCla) δ 17,3; MS (ESI) 779 (M+Na) .
Composto Ri % Sa OFh mk-Hba-Eí Sb OPh (SfHb^Et 5ε OPh (S)-Hba-tBu m OPh (SpHte-EtMar Sê OPh (RPHfoa-Et
Exemplo 2A
Monolactato 5a (Rl-OPh, R2-Hba-Et): num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 4 (250 mg, 0,33 mmol), éster etílico do ácido 2-hidroxi-n-butírico (145 mg, 1,1 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (226 mg, 1,1 mmol) e depois adicionou-se piridina (2,5 mL) sob uma atmosfera de N2. 652
Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Diluiu-se o resíduo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4C1, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOAc/CH2Cl2, 1:1) para se obter 5a (150 mg, 52%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDCI3) δ 7,70 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,37-7,19 (m, 5H, 7,14 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,91 (d, J= 8,7 Hz, 1H) , 6,86 (d, J=8,7 Hz, 1H), 5,65 (m, 1H) , 5,10-4,95 (m, 3H) , 4,57-4,39 (m, 2H), 4,26 (m, 2H), 3, 96-3, 68 (m sobreposição s, 9H), 3,15-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,55 (m, 5H) , 1,21 (m, 3H) , 1,04-0,86 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,5 e 15,1; MS (ESI) 885 (M+Na).
Exemplo 2B
Monolactato 5b (RI = OPh, R2 = (S)-Hba-Et): num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 4 (600 mg, 0,8 mmol), (éster etílico do ácido S)-2-hidroxi-n-butírico (317 mg, 2,4 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (495 mg, 2,4 mmol) e depois adicionou-se piridina (6 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Diluiu-se o resíduo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4CI, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se 0 resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOAc/CH2Cl2, 1:1) para se obter 653 5b (360 mg, 52%) com o aspecto de um sólido branco. ΗΜΝ^Η (CDC13) δ 7,71 (d, J=Q, 7 Hz, 2H) , 7,37-7,19 (m, 5H) , 7,15 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,92 (d, J=8,7
Hz, 1H) , 6,86 (d, J-Q, 7 Hz, 1H) , 5,65 (m, 1H) , 5,10-4,95 (m, 3H) , 4,57-4,39 (m, 2H) , 4,26 (m, 2H) , 3, 96-3, 68 (m sobreposição s, 9H), 3,15-2,77 (m, 7H), 1,81-1,55 (m, 5H), 1,23 (m, 3H), 1, 04-0,86 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δΐ7,5 e 15,2; MS (ESI) 885 (M+Na).
Exemplo 2C
Monolactato 5c (Rl = OPh, R2 = (S)-Hba-tBu) : num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 4 (120 mg, 0,16 mmol), (S)-2-hidroxibutirato de terc-butilo (77 mg, 0,48 mmol) e 1.3- diciclo-hexilcarbodiimida (99 mg, 0,48 mmol) e depois adicionou-se piridina (1 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Diluiu-se o residuo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4CI, salmoura e água, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia através de gel de silica (EtOAc/CH2Cl2, 1:1) para se obter 5c (68 mg, 48%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDC13) δ 7,71 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,37-7,19 (m, 5H) , 7,14 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,93 (d, J= 8,7 Hz, 1H) , 6,86 (d, J=8,7 Hz, 1H), 5,64 (m, 1H) , 5,10-4,95 (m, 3H) , 4,57-4,39 (m, 2H) , 4,26 (m, 2H) , 3, 96-3, 68 (m sobreposição s, 9H) , 3,15-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,55 (m, 5H), 1,44 (d, J=ll Hz, 9H, 1.04- 0,86 (m, 9H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17, 5 e 15,2; MS (ESI) 913 (M+Na). 654
Exemplo 2D
Monolactato 5d (RI = OPh, R2 = (S)-Lac-EtMor) : num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 4 (188 mg, 0,25 mmol), éster etilmorfolinico de (S)-lactato (152 mg, 0,75 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (155 mg, 0,75 mmol) e depois adicionou-se piridina (2 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Lavou-se o residuo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4CI, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia através de gel de silica (isopropanol/CH2Cl2, 1:9) para se obter 5d (98 mg, 42%) com 0 aspecto de um sólido branco. ΡΜΝ^Η (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,34-7,20 (m, 5H), 7,15 (d, J=8,7
Hz, 2H), 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,92 (d, J= 8,7 Hz, 1H) , 6,87 (d, J= 8,7 Hz, 1H) , 5,65 (m, 1H) , 5,21-4,99 (m, 3H) , 4,57-4,20 (m, 4H), 3,97-3,63 (m sobreposição s, 13H), 3,01-2,44 (m, 13H), 1,85-1,50 (m, 6H) , 0,92 (d, J=6,5 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,5, 3H); RMN-31P (CDC13) δ 17,4 e 15,3; MS (ESI) 934 (M) .
Exemplo 2E
Monolactato 5e (Rl = OPh, R2 = (R)-Hba-Et): num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 4 (600 mg, 0,8 mmol),
éster etílico do ácido (R)-2-hidroxi-n-butírico (317 mg, 2,4 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (495 mg, 2,4 mmol) e depois adicionou-se piridina (2 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C 655
durante 2 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Diluiu-se o resíduo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4CI, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOAc/CH2Cl2, 1:1) para se obter 5e (345 mg, 50%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDCI3) δ 7,70 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,37- -7,19 (m, 5H) , 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 6,92 (d, J=8,7 Hz, 1H), 6,86 (d, J=8,7 Hz, 1H) , 5,65 (m, 1H), 5,10-4,95 (m, 3H), 4,57 -4,39 (m, 2H) , 4,26 (m, 2H) , 3,96-3,68 (m sobreposição s, 9H), 3,15-2,77 (m, 7H), 1,81-1,55 (m, 5H), 1,23 (m, 3H), 1,04-0,86 (m, 6H; RMN-31P (CDC13) δ 17,5 e 15,1; MS (ESI) 885 (M+Na).
Exemplo 3
Monoamidato 6: num balão introduziu-se monofenil-fosfonato 4 (120 mg, 0,16 mmol), cloridrato do éster etílico do ácido L-alanina-butírico (160 mg, 0,94 mmol) e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (132 mg, 0,64 mmol) e depois adicionou-se piridina (2 mL) sob uma atmosfera de N2. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas, depois 656 arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com acetato de etilo. Filtrou-se a mistura e evaporou-se o filtrado. Diluiu-se o resíduo com acetato de etilo, lavou-se a fase orgânica combinada com NH4C1, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (isopropanol/CH2Cl2, 1:9) para se obter 6 (55 mg, 40%) com o aspecto de um sólido branco. ΚΜΝ^Η (CDC13) 6 7,72 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,37-7,23 (m, 5H) , 7,16 (d, J=8,7
Hz, 2H), 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6, 90-6, 83 (m, 2H) , 5,65 (d, J=5,l Hz, 1H), 5,10-4,92 (m, 3H) , 4,28 (m, 2H) , 3,96-3,68 (m sobreposição s, 9H) , 3,15-2,77 (m, 7H) , 1,81-1,55 (m, 5H) , 1,23 (m, 3H) , 1,04-0, 86 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) 6 20,7 e 19,6; MS (ESI) 884 (M+Na) .
COGH § 657
Exemplo 4A
Composto 8: a uma solução agitada de monobenzil-fosfonato 7 (195 mg, 0,26 mmol) em 1 mL de DMF, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se (s)-lactato de benzilo (76 mg, 0,39 mmol) e PyBOP (203 mg, 0,39 mmol), seguindo-se DIEA (181 μΐϋ, 1 mmol) . Decorridas 3 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se a mistura impura resultante por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano 1:1) para se obter 8 (120 mg, 50%) com 0 aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDCls) δ 7,71 (d, J=8,7 Hz, 2H), 7,38-7,34 (m, 5H) , 7,12 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,99 (d, J=8,7 Hz, 2H); 6,81 (d, J=8,7 Hz, 2H), 5,64 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,24-4,92 (m, 7H) , 4,28 (m, 2H), 3,96- -3, 67 (m sobreposição s, 9H) , 3,16-2, 76 (m, 7H) , 1,95-1,62 (m, 5H), 0, 99-0,87 (m, 9H) ; rmn-31p (CDCI3) δ21,0 e 19,7; MS (ESI) 962 (M+Na) .
Exemplo 4B
Composto 9: preparou-se uma solução de composto 8 (100 mg), dissolveu-se em EtOH/EtOAc (9 mL/3 mL), tratou-se com Pd a 10%/C (10 mg) e agitou-se em ambiente de H2 (balão) durante 1,5 horas. Removeu-se o catalisador por filtração através de celite. Evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida, triturou-se o resíduo com éter e recolheu-se o sólido por filtração para se obter o composto 9 (76 mg, 94%) com o aspecto de um sólido branco. ΡΜΝ-1!! (CD3OD) δ 7,76 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,18 (d, J=8, 7 Hz, 2H) , 7,08 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,90 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,59 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,03-4,95 (m, 2H) , 4,28 (m, 2H) , 3, 90-3, 65 (m sobreposição s, 9H) , 3,41 (m, 2H), 3,18-2,78 (m, 5H) , 2,44 (m, 1H) , 1,96 (m, 3H) , 1,61 (m, 2H), 1,81 (m, 3H) , 0,93 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 658 0,87 (d, J= 6,3 Hz, 3H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 18,3; MS (ESI) 782 (M+Na) .
Exemplo 5A
Composto 11: a uma solução agitada de composto 10 (1 g, 1,3 mmol) em 6 mL de DMF, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se 3-hidroxibenzaldeído (292 mg, 2,6 mmol) e PyBOP (1 g, 1,95 mmol), seguindo-se DIEA (0,9 mL, 5,2 mmol). Decorridas 5 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e purificou-se a mistura impura resultante por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1:1) para se obter 11 (800 mg, 70%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDCI3) δ 9,98 (s, 1H), 7,79-6, 88 (m, 12H), 5,65 (m, 1H), 5,21-4,99 (m, 3H) , 4,62-4,16 (m, 4H) , 3,99-3,61 (m sobreposição s, 9H) , 3,11-2,79 (m, 5H) , 1,85-1,53 (m, 3H) , 1,25 (m, 3H) , 659 0,90 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,9 e 15,9; MS (ESI) 899 (M+Na).
Exemplo 5B
Composto 12: a uma solução agitada de composto 11 (920 mg, 1,05 mmol) em 10 mL de acetato de etilo, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se morfolina (460 mg, 5,25 mmol) e ácido acético (0,25 mL, 4,2 mmol), seguindo-se ciano-boro-hidreto de sódio (132 mg, 2,1 mmol). Decorridas 20 horas, removeu-se o solvente sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com acetato de etilo e lavou-se a fase orgânica combinada com NH4C1, salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (isopropanol/CH2Cl2, 6%) para se obter 12 (600 mg, 60%) com o aspecto de um sólido branco. ΚΜΝ^Η (CDCI3) δ 7,71 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,27 (m, 4H) , 7,15 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,95 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 6,89 (m, 2H) , 5,65 (m, 1H) , 5,21-5,02 (m, 3H), 4,58-4,38 (m, 2H), 4,21-4,16 (m, 2H), 3,99-3,63 (m sobreposição s, 15H), 3,47 (s, 2H), 3,18-2,77 (m, 7H) , 2,41 (s, 4H) , 1, 85-1,53 (m, 6H) , 1,25 (m, 3H) , 0,90 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,4 e 15,2; MS (ESI) 971 (M+Na). 660
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Exemplo 6A
Composto 14: a uma solução agitada de composto 13 (1 g, 3 mmol) em 30 mL de acetonitrilo 15, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se cloreto de tionilo (0,67 mL, 9 mmol). Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 0,5 h. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e adicionou-se ao resíduo 30 mL de DCM, seguindo-se DIEA (1,7 mL, 10 mmol), cloridrato do éster etílico do ácido L-alanina-butírico (1,7 g, 10 mmol) e TEA (1,7 mL, 12 mmol). Decorridas 4 horas à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com DCM, lavou-se com salmoura e água, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (hexano/EtOAc a 1:1) 661 para se obter 14 (670 mg, 50%) com o aspecto de um óleo amarelo. RMN-1]! (CDC13) δ 7,33-7,11 (m, 10H) , 5,70 (m, 1H) , 5,10 (s, 2H), 4,13-3,53 (m, 5H), 2,20-2,10 (m, 2H), 1,76-1,55 (m, 2H) , 1,25-1,19 (m, 3H) , 0,85-0,71 (m, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 30,2 e 29,9; MS (ESI) 471 (M+Na).
Exemplo 6B
Composto 15: dissolveu-se uma solução de composto 14 (450 mg) em 9 mL de EtOH e depois adicionou-se 0,15 mL de ácido acético e Pd a 10%/C (90 mg). Agitou-se a mistura resultante em ambiente de H2 (balão) durante 4 horas. Após a filtração através de celite, evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida para se obter o composto 15 (300 mg, 95%) com o aspecto de um óleo incolor. ΚΜΝ-1!! (CDC13) 0 7,29-7,12 (m, 5H) , 4,13-3,53 (m, 5H) , 2,20-2,10 (m, 2H) , 1,70-1,55
(m, 2H) , 1,24-1,19 (m, 3H) , 0,84-0,73 (m, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 29,1 e 28,5; MS (ESI) 315 (M+l) .
Exemplo 6C
Monoamdidato 17: a uma solução agitada de composto 16 (532 mg, 0,9 mmol) em 4 mL de 1,2-dicloroetano adicionou-se composto 15 (300 mg, 0,96 mmol) e MgSCU (50 mg). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente e em atmosfera de árgon durante 3 horas e depois adicionou-se ácido acético (1,3 mL, 23 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (1,13 g, 18 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1 hora em atmosfera de árgon. Depois adicionou-se solução aquosa de NaHC03 (50 mL) , extraiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se as fases orgânicas combinadas com salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o 662 resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOH/EtOAc, 1/9) para se obter 17 (600 mg, 60%) com o aspecto de um sólido branco. ΚΜΝ^Η (CDCI3) δ 7,73 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,33-7,13 (m, 9H) , 7,00 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,11-4,98 (m, 2H), 4,22-3, 68 (m sobreposição s, 15H), 3,20-2,75 (m, 9H), 2,21-2,10 (m, 2H), 1,88-1,55(m, 5H) , 1,29-1,19 (m, 3H) , 0, 94-0,70 (m, 9H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 31,8 e 31,0; MS (ESI) 889 (M) .
Exemplo 7
Exemplo 7A
Composto 19: a uma solução agitada de composto 18 (3,7 g, 14,3 mmol) em 70 mL de acetonitrilo, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se cloreto de tionilo (6,3 mL, 86 mmol). Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 2 horas. Após o arrefecimento até à 663 temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida, e adicionou-se o resíduo 150 mL de DCM, seguindo-se TEA (12 mL, 86 mmol) e 2-etoxifenol (7,2 mL, 57,2 mmol). Ao fim de 20 horas à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com acetato de etilo, lavou-se com salmoura e água, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (DCM/EtOAc 9:1) para se obter 19 (4,2 g, 60%) com o aspecto de um óleo amarelo. RM!!-1]! (CDCI3) 0 7,32-6, 83 (m, 13H) , 5,22 (m, 1H) , 5,12 (s, 2H) , 4,12-3,73 (m, 6H) , 2,52-2,42 (m, 2H), 1,41-1,37 (m, 6H) ; RMN-31P (CDCI3) δ25,4; MS (ESI) 522 (M+Na).
Exemplo 7B
Composto 20: dissolveu-se uma solução de composto 19(3 g, 6 mmol) em 70 mL de acetonitrilo a 0°C e depois adicionou-se, gota a gota, NaOH 2N (12 mL, 24 mmol) . Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Depois removeu-se o solvente sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com água e extraiu-se com acetato de etilo.
Acidificou-se a fase aquosa com HC1 concentrado até pH = 1, depois extraiu-se com acetato de etilo, combinou-se a fase orgânica, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se para se obter o composto 20 (2 g, 88%) com o aspecto de um sólido esbranquiçado. Ρ,ΜΝ-1!! (CDCI3) 0 7, 33-6,79 (m, 9H), 5,10 (s, 2H), 4,12-3,51 (m, 6H), 2,15-2,05 (m, 2H), 1,47- 1,33 (m, 3H); RMN-31P (CDC13) 0 30,5; MS (ESI) 380 (M+l) .
Exemplo 7C 664
Composto 21: a uma solução agitada de composto 20 (1 g, 2,6 mmol) em 20 mL de acetonitrilo, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se cloreto de tionilo (1,1 mL, 15,6 mmol). Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 45 minutos. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e adicionou-se ao resíduo 25 mL de DCM, seguindo-se TEA (1,5 mL, 10,4 mmol) e éster etílico de (S)-lactato (0,9 mL, 7,8 mmol). Ao fim de 20 horas à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida, diluiu-se o resíduo com DCM, lavou-se com salmoura e água, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (DCM/EtOAc 3:1) para se obter 21 (370 mg, 30%) com o aspecto de um óleo amarelo. ΡΜΝ-1!! (CDCI3) 0 7, 33-6,84 (m, 9H) , 6,17-6,01 (m, 1H) , 5,70 (m, 1H) , 5,18-5,01 (m, 3H) , 4,25-4, 04 (m, 4H) , 3, 78-3, 57 (m, 2H) , 2, 38-2,27 (m, 2H) , 1,5-1,23 (m, 9H) ; RMN-31P (CDC13) δ 29,2 e 27,3; MS (ESI) 502 (M+Na).
Exemplo 7D
Composto 22: dissolveu-se uma solução de composto 21 (370 mg) em 8 mL de EtOH e depois adicionou-se 0,12 mL de ácido acético e Pd a 10%/C (72 mg). Agitou-se a mistura resultante em ambiente de H2 (balão) durante 4 horas. Após a filtração através de celite, evaporou-se 0 filtrado sob pressão reduzida para se obter o composto 22 (320 mg, 96%) com o aspecto de um óleo incolor. RMN-1]! (CDCI3) 7,27-6,86 (m, 4H) , 5,98 (s, 2H) , 5,18-5,02 (m, 1H), 4,25- •vO O v. 4H) , 3,34-3,24 (m, 2H) , 2,44-2,30 (m, 2H) , 1,62- -1,24 (m, 9H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 28,3 e 26,8; MS (ESI) 346 (M+l) . 665
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Exemplo 8A 2$ 666
Composto 24: o composto 23 foi purificado utilizando um sistema de HPLC 'Dynamax SD-200' . A fase móvel era constituída por acetonitrilo: água (65:35, v/v) com um caudal de 7 0 mL/min. O volume de injecção foi de 4 mL. Efectuou-se a detecção por fluorescência a 245 nm e utilizou-se as proporções das áreas dos picos para fins de quantificação. O tempo de retenção foi de 8,2 minutos para p composto 24 com o aspecto de um óleo amarelo. ΚΜΝ-1!! (CDC13) 5 7,36-7, 19 (m, 10H) , 5,88 (m, 1H) , 5,12 (s, 2H) , 4, 90-4, 86 (m, 1H) , 4,26-4,12 (m, 2H) , 3,72-3,61(m, 2H) , 2,36-2,29 (m, 2H) , 1,79-1,74 (m, 2H) ; 1,27 (t, J=7,72 Hz,
3H) , 0,82 (t, J=7,2 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) 5 28,3; MS (ESI) 472 (M+Na).
Exemplo 8B O composto 25 foi purificado de um modo idêntico e o tempo de retenção foi de 7,9 minutos para o composto 25 com o aspecto de um óleo amarelo. RMN-1H (CDC13) 5 7,34-7,14 (m, 10H), 5,75 (m, 1H), 5,10 (s, 2H), 4,96-4,91 (m, 1H), 4,18-4,12 (m, 2H), 3,66-3,55 (m, 2H), 2,29-2,19 (m, 2H), 1,97-1,89 (m, 2H); 1,21 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 0,97 (t, J=7,2 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) 526,2; MS (ESI) 472 (M+Na).
Exemplo 8C
Composto 26: dissolveu-se composto 24 (1 g) em 20 mL de
EtOH e depois adicionou-se 0,3 mL de ácido acético e Pd a 10%/C (200 mg). Agitou-se a mistura resultante em ambiente de H2 (balão) durante 4 horas. Após a filtração através de celite, evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida para se obter o composto 26 (830 mg, 99%) com o aspecto de um óleo incolor. RMN-1H (CDC13) 5 7, 46-7, 19 (m, 5H) , 4,92-4,81 (m, 667 1Η) , 4,24-4,21 (m, 2H) , 3,14-3,28 (m, 2H) , 2,54-2,38 (m, 2H) , 1,79-1,74 (m, 2H) , 1,27 (t, J=7,2 Hz, 3H) , 0,80 (t, J=7,2 Hz, 3H); RMN-31P (CDC13) δ 26,9; MS (ESI) 316 (M+l) .
Exemplo 8D
Composto 27: dissolveu-se composto 25 (700 g) em 14 mL de EtOH e depois adicionou-se 0,21 mL de ácido acético e Pd a 10%/C (140 mg). Agitou-se a mistura resultante em ambiente de H2 (balão) durante 4 horas. Após a filtração através de celite, evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida para se obter o composto 27 (510 mg, 98%) com o aspecto de um óleo incolor. RMN-1H (CDCI3) 6 7,39-7,18 (m, 5H) , 4,98-4,85 (m, 1H) , 4,25-4,22 (m, 2H) , 3, 43-3,28 (m, 2H) , 2,59-2,41 (m, 2H) , 1, 99-1,85 (m, 2H) , 1,28 (t, J= 7,2 Hz, 3H) , 1,02 (t, J=7,2 Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 24,2; MS (ESI) 316 (M+l).
Exemplo 8E
Composto 28: a uma solução agitada de composto 16 (1,18 g, 2 mmol) em 9 mL de 1,2-dicloroetano adicionou-se composto 26 (830 mg, 2,2 mmol) e MgS04 (80 mg). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente em atmosfera de árgon durante 3 horas e depois adicionou-se ácido acético (0,34 mL, 6 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (251 mg, 4 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas em atmosfera de árgon. A seguir adicionou-se solução aquosa de NaHCCh (50 mL), extraiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se as fases orgânicas combinadas com salmoura e água, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOH/EtOAc, 1/9) para se obter 28 (880 mg, 50%) com o aspecto de um sólido 668 branco. RMN-1H (CDC13) δ 7,71 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,35-7,16 (m, 9H) , 6,99 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,64 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5.03- 4,85 (m, 3H), 4,24-3,67 (m, sobreposição s, 15H), 3,14-2,70 (m, 9H) , 2,39-2,28 (m, 2H) , 1,85-1,51 (m, 5H), 1,29-1,25 (m, 3H) , 0,93-0,78 (m, 9H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 29,2; MS (ESI) 912 (M+Na) .
Exemplo 8F
Composto 29: a uma solução agitada de composto 16 (857 g, 1,45 mmol) em 7 mL de 1,2-dicloroetano adicionou-se composto 27 (600 mg, 1,6 mmol) e MgS04 (60 mg). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente em atmosfera de árgon durante 3 horas e depois adicionou-se ácido acético (0,23 mL, 3 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (183 mg, 2,9 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas em atmosfera de árgon. A seguir adicionou-se solução aquosa de NaHC03 (50 mL), extraiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se as fases orgânicas combinadas com salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOH/EtOAc, 1/9) para se obter 29 (650 mg, 50%) com o aspecto de um sólido branco. RMN-1H (CDC13) δ 7,72 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,35-7,16 (m, 9H), 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,64 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5.03- 4,90 (m, 3H), 4,17-3,67 (m sobreposição s, 15H), 3,16— 2,77 (m, 9H), 2,26-2,19 (m, 2H), 1,94-1,53 (m, 5H), 1,26-
1,18 (m, 3H) , 1, 00-0,87 (m, 9H) ; RMN-31P (CDC13) 627,4; MS (ESI) 912 (M+Na). 669
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35 670
Exemplo 9A
Composto 31: a uma solução agitada de composto 30 (20 g, 60 mmol) em 320 mL de tolueno, à temperatura ambiente e sob uma atmosfera de N2, adicionou-se cloreto de tionilo (17,5 mL, 240 mmol) e algumas gotas de DMF. Agitou-se a mistura resultante a 60°C-70°C durante 3 horas. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida e adicionou-se ao residuo 280 mL de DCM, seguindo-se TEA (50 mL, 360 mmol) e éster etilico de (S)-lactato (17 mL, 150 mmol). Ao fim de 20 horas à temperatura ambiente, removeu-se o solvente sob pressão reduzida, diluiu-se o residuo com DCM, lavou-se com salmoura e água, secou-se sobre Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o residuo por cromatografia através de gel de silica (DCM/EtOAc, 1:1) para se obter 31 (24 g, 92%) com o aspecto de um óleo amarelo. RMN-1H (CDC13) δ7,33-7,18 (m, 10H) , 5, 94-6, 63 (m, 1H) , 5,70 (m, 1H) , 5,12-4,95 (m, 3H) , 4,24-4,14 (m, 2H), 3,72-3,59 (m, 2H) , 2,35-2,20 (m, 2H) , 1,58-1,19 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 28,2 e 26,2; MS (ESI) 458 (M+Na) .
Exemplo 9B
Composto 32: o composto 31 foi purificado utilizando um sistema de HPLC 'Dynamax SD-200'. A fase móvel era constituída por acetonitrilo: água (60:40, v/v) com um caudal de 70 mL/min. O volume de injecção foi de 3 mL. Efectuou-se a detecção por fluorescência a 245 nm e utilizou-se as proporções das áreas dos picos para fins de quantificação. O tempo de retenção foi de 8,1 minutos para composto 32 com o aspecto de um óleo amarelo. RMN-1!! (CDCI3) 07,33-7,18 (m, 10H) , 5, 94-6, 63 (m, 1H) , 5,70 (m, 1H) , 5,12-4,95 (m, 3H), 4,24-4,14 (m, 2H), 3,72-3,59 (m, 671 2Η) , 2,35-2,20 (m, 2Η) , 1,58-1,19 (m, 6Η) ; RMN-31P (CDC13) 6 28,2; MS (ESI) 458 (M+Na).
Exemplo 9C O composto 33 foi purificado de um modo idêntico e o tempo de retenção foi de 7,9 minutos para o composto 33 com o aspecto de um óleo amarelo. ΗΜΝ-1!! (CDC13) 0 7,33-7,18 (m, 10H), 5, 94-6, 63 (m, 1H) , 5,70 (m, 1H) , 5,12-4,95 (m, 3H) , 4,24-4,14 (m, 2H) , 3, 72-3, 59 (m, 2H) , 2,35-2, 20 (m, 2H) , 1,58-1,19 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 26,2; MS (ESI) 458 (M+Na).
Exemplo 9D
Composto 34: dissolveu-se uma solução de composto 33 (3,2 g) em 60 mL de EtOH, depois 0,9 mL de ácido acético e Pd a 10%/C (640 mg). Agitou-se a mistura resultante em ambiente de H2 (balão) durante 4 horas. Após a filtração através de celite, evaporou-se o filtrado sob pressão reduzida para se obter o composto 34 (2,7 g, 99%) com o aspecto de um óleo incolor. ΗΜΝ-^ (CDC13) 0 7,42-7,18 (m, 5H) , 6,10 (s, 1H) , 5,15-5,02 (m, 1H) , 4,24-4,05 (m, 2H) , 3,25-3,16 (m, 2H) , 2,36-2,21 (m, 2H) , 1,61-1,58 (m, 3H) , 1,35-1,18, m, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 26,1; MS (ESI) 302 (M+l) .
Exemplo 9E
Composto 35: a uma solução agitada de composto 16 (8,9 g, 15 mmol) em 70 mL de 1,2-dicloroetano adicionou-se composto 34 (8,3 g, 23 mmol) e MgS04 (80 mg). Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente em atmosfera de árgon for 2,5 horas e depois adicionou-se ácido acético (3 mL, 52,5 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (1,9 g, 30 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente 672 durante 1,5 horas em atmosfera de árgon. A seguir adicionou-se solução aquosa de NaHC03 (100 mL), extraiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se as fases orgânicas combinadas com salmoura e água, secou-se sobre Na2SC>4, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (EtOH/EtOAc, 1/9) para se obter 35 (8,4 g, 64%) com o aspecto de um sólido branco. ΡΜΝ^Η (CDC13) δ 7,73 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,36-7,17 (m, 9H) , 7,00 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,64 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,07-4,97 (m, 3H), 4,19-3,67 (m sobreposição s, 13H), 3,15-2,78 (m, 9H), 2,25-2,19 (m, 2H), 1,91-1,54 (m, 6H), 1,24-1,20 (m, 3H) , 0, 94-0,87 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ27,4; MS (ESI) 876 (M+l).
Resolução de diastereómeros do composto 35 A análise foi efectuada numa coluna analítica 'Daicel Chiralcel OD', nas condições adiante descritas, injectando-se na coluna um total de cerca de 3,5 mg de base livre do composto 35. Este lote era uma mistura de diastereómeros principais e secundários a 3:1, em que o carbono do éster lactato apresenta uma mistura a 3:1 de configurações R e S. Cada uma das duas injecções de 3,8 mg e 3,5 mg foi realizada nas condições descritas adiante. Evaporou-se até à secura as fracções de diasterómero principal, utilizando um evaporador rotativo, a funcionar sob uma pressão hipobárica. Os solventes cromatográficos foram deslocados por duas porções de acetato de etilo e depois por uma única porção de acetato de etilo-ácido trifluoroacético (a cerca de 95:5), seguindo-se uma extracção final sob vácuo intenso para ajudar a remover os solventes vestigiais. Obteve-se assim o diastereómero principal de sal trifluoroacetato com o aspecto de um sólido gomoso. 673
Isolou-se o diastereómero secundário resolvido para fins de avaliação biológica por meio de uma injecção de 11 mg numa coluna analítica 'Daicel Chiralcel OD', utilizando as condições descritas adiante. Isolou-se o diasterómero secundário do composto 35 sob a forma do sal trifluoro-acetato nas condições adiante descritas.
Foram realizadas injecções em maior escala (300 mg de composto 35 por cada injecção) numa coluna semipreparativa 'Daicel Chiralcel OD' com uma pré-coluna, nas condições adiante descritas. Adicionou-se uma quantidade minima de álcool isopropilico a heptano para dissolver a mistura diastereomérica a 3:1 de composto 35 e amostra diastereomérica resolvida e refrigerou-se as fracções isoladas até à extracção da fase móvel eluida.
Coluna analítica, injecção de ~4 mg, heptano-EtOH (20:80) inicial
CONDIÇÕES DE HPLC
Coluna : 'Chiralcel OD', 10 μιη, 4,6 x 250 mm
Fase móvel : heptano - álcool etilico (a 20:10, inicial) 674 : 100% de álcool etílico (final)
Nota: o final teve início após a eluição do primeiro pico
Caudal : 1,0 mL/minuto
Tempo de execução: o necessário Detecção : UV a 250 nm
Temperatura : ambiente
Injecção : ~4 mg na coluna
Prep. da amostra: 5 mg/mL, dissolvida em ~1 mL de heptano- -álcool etílico (a 50:50)
Tempos de retenção: 35 secundário ~14 minutos : 35 principal ~25 minutos
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Terço de eluição minutos
CONDIÇÕES DE HPLC
Coluna : 'Chiralcel OD', 10 μιη, 4, 6 x 250 mm
Fase móvel : heptano - álcool etílico (a 65:35, inicial) 675 : heptano - álcool etílico (a 57,5:42,5, intermédio)
Nota: o intermédio teve início após a eluição dos picos de impurezas : heptano - álcool etílico (a 20:80, final) Nota: a fase móvel final teve início após a eluição do diastereómero secundário Caudal : 1,0 mL/minuto
Tempo de execução: o necessário Detecção : UV a 250 nm
Temperatura : ambiente
Injecção : ~4 mg na coluna
Prep. da amostra: 5 mg/mL, dissolvida em ~1 mL de heptano- -álcool etílico (a 50:50)
Tempos de retenção: 35 secundário ~14 minutos : 35 principal ~40 minutos
Coluna semi-preparativa, injecção de ~300 mg, heptano-EtOH (a 65:35), inicial
676
CONDIÇÕES DE HPLC
Coluna : 'Chiralcel OD', 20 μιη, 21 x 50 mm (pré-coluna) : 'Chiralcel OD', 20 μιη, 21 x 250 mm Fase móvel : heptano-álcool etílico (a 65:35, inicial) : heptano-álcool etílico (a 50:50, intermédio) Nota: o intermédio teve início após a eluiçâo do pico do diastereómero secundário : heptano - álcool etílico (a 20:80, final) Nota: a fase móvel final teve início depois de o diastereómero principal começar a eluir Caudal : 10,0 mL/minuto
Tempo de execução: o necessário
Detecção : UV a 260 nm Temperatura : ambiente Inj ecção : ~300 mg na coluna
Prep. da amostra: 5 mg/mL, dissolvida em ~3,5 mL de heptano-álcool etílico (a 70:30) Tempos de retenção: 35 secundário ~14 minutos : 35 principal ~40 minutos 677 CG, ,Α Η OH f Ο
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Exemplo 29
Derivado de triflato 1: fez-se reagir uma solução em THF-CH2C12 (30 mL-10 mL) de 8 (4 g, 6,9 mmol), carbonato de césio (2,7 g, 8 mmol) e N-feniltrifluorometanossulfonimida (2,8 g, 8 mmol) de um dia para o outro. Processou-se a mistura de reacção e concentrou-se até à secura para se obter derivado de triflato impuro 1.
Aldeído 2: dissolveu-se triflato impuro 1 (4,5 g, 6,9 mmol) em DMF (20 mL) e desgaseificou-se a solução (vácuo intenso durante 2 minutos, purga de Ar, repetir 3 vezes) . Adicionou-se Pd(OAc)2 (0,12 g, 0,27 mmol) e bis (difenilfosfino)-propano (dppp, 0,22 g, 0,27 mmol), aqueceu-se a solução até 70°C. Fez-se borbulhar monóxido de carbono rapidamente através da solução e depois sob 1 atmosfera de monóxido de carbono. A esta solução adicionou-se lentamente TEA (5,4 mL, 38 mmol) e trietilsilano (3 ml), 18 mmol) . Agitou-se a solução resultante de um dia para o outro à temperatura ambiente. Processou-se a mistura de reacção e purificou-se por cromatografia em coluna através de gel de sílica para se obter aldeído 2 (2,1 g, 51%). (Hostetler, et ai J. Org. Chem., 1999, 64, 178-185).
Pró-fármaco de lactato 4: o composto 4 foi preparado tal como descrito no procedimento anterior para o composto 35 do exemplo 9Epor aminação redutiva entre 2 e 3 com NaBH3CN em 1,2-dicloroetano, na presença de HOAc.
Exemplo 30 Preparação de Composto 3 (Ciano(dimetil)-metil)-fosfonato de dietilo 5: preparou-se uma solução em THF (30 mL) de NaH (3,4 g de dispersão a 60% em óleo, 85 mmol) e arrefeceu-se até -10°C, seguindo-se a adição de (cianometil)-fosfonato de dietilo (5 g, 28,2 679 mmol) e iodometano (17 g, 112 mmol). Agitou-se a solução resultante a -10°C durante 2 horas e depois a 0°C durante 1 hora, processou-se e purificou-se para se obter o derivado de dimetilo 5 (5 g, 86%). (2-amino-l,1-dimetil-etil)-fosfonato de dietilo 6: reduziu-se o composto 5 para se obter o derivado de amina 6 pelo procedimento descrito (J. Med. Chem. 1999, 42, 5010-5019). Preparou-se uma solução de etanol (150 mL) e solução aquosa de HC1 IN (22 mL) de 5 (2,2 g, 10,7 mmol) e hidrogenou-se a 1 atmosfera na presença de PtC>2 (1,25 g) , à temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se o catalisador através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado até à secura, para se obter o composto 6 impuro (2,5 g, como sal de HC1). Ácido 2-amino-l,1-dimetil-etil-fosfónico 7: preparou-se uma solução em CH3CN (30 mL) de composto 6 impuro (2,5 g) , arrefeceu-se até 0°C e tratou-se com TMSBr (8 g, 52 mmol) durante 5 horas. Agitou-se a mistura de reacção com metanol durante 1,5 horas à temperatura ambiente, concentrou-se, recarregou-se com metanol e concentrou-se até à secura para se obter o composto 7 impuro, que foi utilizado na reacção subsequente, sem mais purificação.
Lactato do (2-amino-l, 1-dimetil-etil)-fosfonato de fenilo 3: o composto 3 é sintetizado de acordo com os procedimentos descritos no Exemplo 9D, Composto 34, para a preparação de lactato do 2-aminoetil-fosfonato de fenilo 34. O composto 7 é protegido com CBZ, seguindo-se a reacção com cloreto de tionilo a 70°C. Faz-se reagir o dicloridato protegido por CBZ com fenol, na presença de DIPEA. Por remoção de um fenol e subsequente acoplamento com L-lactato de etilo proporciona o derivado de N-CBZ-2-amino-l,1- 680 dimetil-etil-fosfonato. A hidrogenação do derivado N-CBZ a 1 atmosfera, na presença de Pd a 10%/C e 1 eq. de TFA, proporciona o composto 3 sob a forma de sal de TFA.
Secção Q de exemplos
Esquema 1
681
Exemplo 1
Monofenol-alilfosfonato 2: a uma solução de dicloreto arilfosfónico (4 g, 25,4 mmol) e fenol (5,2 g, 55,3 mmol) em CH2C12 (40 mL) a 0°C adicionou-se TEA (8,4 mL, 60 mmol). Depois de se agitar à temperatura ambiente durante 1,5 horas, diluiu-se a mistura com hexano-acetato de etilo e lavou-se com HC1 (0,3 N) e água. Secou-se a fase orgânica sobre MgSCt, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Filtrou-se o resíduo através de uma camada de gel de sílica (efectuou-se a eluição com 2:1 hexano-acetato de etilo) para se obter o produto difenol-alilfosfonato 1 impuro (7,8 g, contendo o fenol em excesso) com o aspecto de um óleo, o qual foi utilizado directamente, sem mais purificação. Dissolveu-se o material impuro em CH3CN (60 mL) e adicionou-se NaOH (4,4N, 15 mL) a 0°C Agitou-se a mistura resultante à temperatura ambiente durante 3 horas, depois neutralizou-se com ácido acético até pH = 8 e concentrou-se sob pressão reduzida para se remover a maior parte do acetonitrilo. Dissolveu-se o resíduo em água (50 mL) e lavou-se com CH2C12 (3x25 mL) . Acidificou-se a fase aquosa com HC1 concentrado a 0°C e extraiu-se com acetato de etilo. Secou-se a fase orgânica sobre MgS04, filtrou-se, evaporou-se e submeteu-se a co-evaporação com tolueno sob pressão reduzida para se obter de o monofenol-alilfosfonato 2 desejado (4,75 g. 95%) com o aspecto de um óleo.
Exemplo 2
Monolactato de alilfosfonato 4: a uma solução de monofenol-alilfosfonato 2 (4,75 g, 24 mmol) em tolueno (30 mL) adicionou-se S0C12 (5 mL, 68 mmol) e DMF (0,05 mL) . Depois de se agitar a 65°C durante 4 horas, verificou-se que a 682 reacção estava completa, conforme demonstrado por RMN-31P. Evaporou-se a mistura de reacção e submeteu-se a co-evaporação com tolueno sob pressão reduzida para se obter o monocloreto 3 (5,5 g) com o aspecto de um óleo. A uma solução de cloreto 3 em CH2CI2 (25 mL) a 0°C adicionou-se (s)-lactato de etilo (3,3 mL, 28,8 mmol) , seguindo-se TEA. Agitou-se a mistura a 0°C durante 5 minutos e depois à temperatura ambiente durante 1 hora e concentrou-se sob pressão reduzida. Repartiu-se o resíduo entre acetato de etilo e HC1 (0,2N). Lavou-se a fase orgânica com água, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica para se obter o monolactato 4 desejado (5,75 g, 80%) com o aspecto de um óleo (mistura a 2:1 de dois isómeros) : ΡΜΝ-1!! (CDC13) 0 7,1-7,4 (m, 5H) , 5,9 (m, 1H), 5,3 (m, 2H) , 5,0 (m, 1H) , 4,2 (m, 2H) , 2,9 (m, 2H) , 1,6; 1,4 (d, 3H) , 1,25 (m, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ25,4, 23, 9.
Exemplo 3
Aldeído 5: preparou-se uma solução de alilfosfonato 4 (2,5 g, 8,38 mmol) em CH2C12 (30 mL) , fez-se borbulhar com ozono a -78°C até a solução ficar azul e depois fez-se borbulhar azoto até a coloração azul desaparecer. Adicionou-se sulfureto de metilo (3 mL) a -78°C. Aqueceu-se a mistura até à temperatura ambiente, agitou-se durante 16 horas e concentrou-se sob pressão reduzida para se obter o aldeído 5 desejado (3,2 g, como mistura 1:1 de DMSO) : ΕΜΝ-1!! (CDC13) δ 9,8 (m, 1H), 7,1-7,4 (m, 5H), 5,0 (m, 1H), 4,2 (m, 2H), 3,4 (m, 2H) , 1,6; 1,4 (d, 3H) , 1,25 (m, 3H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 17,7, 15,4. 683
Exemplo 4
Composto 7: a uma solução de anilina 6 (descrita antes) (1,62 g, 2,81 mmol) em THF (40 mL) adicionou-se ácido acético (0,8 mL, 14 mmol), seguindo-se aldeído 5 (1,3 g, 80%, 3,46 mmol) e MgS04 (3 g) . Agitou-se a mistura à temperatura ambiente durante 0,5 hora e depois adicionou-se NaBH3CN (0,4 g, 6,37 mmol). Depois de se agitar durante 1 hora, filtrou-se a mistura de reacção. Diluiu-se o filtrado com acetato de etilo, lavou-se com NaHC03, secou-se sobre MgS04, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica para se obter o composto 6 (1,1 g, 45%) sob a forma de uma mistura a 3:2 de dois isómeros, que foram separados por HPLC (fase móvel, 70% de CH3CN/H20; caudal: 70 mL/minuto; detecçâo: 254 nm; coluna: 8μ C18, 41x250 mm,
Varian) . Isómero A (0,39 g) : RMN-1]! (CDC13) δ 7,75 (d, 2H), 7,1-7,4 (m, 5H) , 7,0 (m, 4H) , 6,6 (d, 2H) , 5,65 (d, 1H) , 5,05 (m, 2H), 4,9 (d, 1H), 4,3 (slr, 1H), 4,2 (q, 2H), 3,5- 4,0 (m, 6H), 3,9 (s, 3H), 2,6-3,2 (m, 9H), 2,3 (m, 2), 1,6-1,9 (m, 5H) , 1,25 (t, 3H) , 0,9 (2d, 6H) ; RMN-31P (CDC13) Ô 2 6,5; MS (ESI): 862 (M+H) . Isómero B (0,59 g) : ΡΜΝ-3Η (CDC13) δ 7,75 (d, 2H) , 7,1-7,4 (m, 5H) , 7,0 (m, 4H) , 6,6 (d, 2H), 5,65 (d, 1H), 5,05 (m, 2H), 4,9 (d, 1H), 4,5 (slr, 1H), 4,2 (q, 2H), 3,5-4,0 (m, 6H), 3,9 (s, 3H), 2,7-3,2 (m, 9H) , 2,4 (m, 2), 1,6-1,9 (m, 2H) , 1,4 (d, 3H) , 1,25 (t, 3H) , 0,9 (2d, 6H); RMN-31P (CDC13) Ô 2 8,4; MS (ESI): 862 (M+H). 684
Exemplo 5 Ácido 8: a uma solução de composto 7 (25 mg, 0,029 mmol) em acetonitrilo (1 mL) a 0°C adicionou-se NaOH (IN, 0, 125 mL). Agitou-se a mistura a 0°C durante 0,5 hora e à temperatura ambiente durante 1 hora. Extinguiu-se a reacção 685 com ácido acético e purificou-se por HPLC para se obter ácido 8 (10 mg, 45%). ΡΜΝ-^Ή (CD3OD) δ 7,8 (d, 2H) , 7,5 (d, 2H), 7,4 (d, 2H), 7,1 (d, 2H) , 5,6 (d, 1H) , 4,9 (m, 3H) , 3,2-4,0 (m, 6H), 3,9 (s, 3H), 2,6-3,2 (m, 9H), 2,05 (m, 2), 1,4-1,7 (m, 2H), 1,5 (d, 3H) , 0,9 (2d, 6H) ; RMN-31P (CD3OD) Ô20,6; MS (ESI): 758 (M+H).
Exemplo 6
Diácido 10: a uma solução de triflato 9 (94 mg, 0,214 mmol) em CH2CI2 (2 mL) adicionou-se uma solução de anilina 6 (100 mg, 0,173 mmol) em CH2C12 (2 mL) a -40°C, seguindo-se 2,6-lutidina (0,026 mL) . Aqueceu-se a mistura até à temperatura ambiente e agitou-se durante 1 hora. Adicionou-se carbonato de césio (60 mg) e agitou-se a mistura de reacção durante mais 1 hora. Diluiu-se a mistura com acetato de etilo, lavou-se com HC1 (0,2N), secou-se sobre MgSCh, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC para se obter dibenzil-fosfonato (40 mg) . A uma solução deste dibenzil-fosfonato em etanol (3 mL) e acetato de etilo (1 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (40 mg). Agitou-se a mistura em ambiente de hidrogénio (balão) durante 4 horas. Diluiu-se a mistura de reacção com metanol, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Lavou-se o resíduo com acetato de etilo e secou-se para se obter o produto diácido 10 desejado (20 mg). ΡΜΝ^Η (CD3OD) δ 7,8 (d, 2H) , 7,3 (d, 2H), -7,1 (2d, 4H), 5,6 (d, 1H) , 4,9 (m, 2H) , 3,4-4,0 (m, 6H), 3,9 (s, 3H), 2,5-3,2 (m, 9H), 2,0 (m, 2), 1,4-1,7 (m, 2H), 0,9 (2d, 6H) ; RMN-31P (CD3OD) δ 22,1; MS (ESI): 686 (M+H). 686 Esquema 3
687 A síntese do composto 19 está ilustrada no esquema 3. A condensação de 2-metil-2-propanossulfinamida com acetona proporciona a sulfinil-imina 11 (J. Org. Chem. 1999, 64, 12). Por adição de metilfosfonato de dimetil-lítio ao composto 11 obtém-se o composto 12. A metanólise acídica do composto 12 proporciona a amina 13. Por protecção da amina com o grupo Cbz e remoção dos grupos metilo obtém-se o ácido fosfónico 14, que pode ser convertido no composto 15 desejado, utilizando os métodos descritos antes. Também está ilustrada no esquema 3 uma síntese alternativa do composto 14. Converte-se 2-amino-2-metil-l-propanol, comercialmente disponível, nas aziridinas 16 de acordo com os métodos descritos na literatura (J. Org. Chem. 1992, 57, 5813, e Syn. Lett. 1997, 8, 893). A abertura da aziridina com fosfito proporciona o composto 17 (Tetrahedron Lett. 1980, 21, 1623) . Por desprotecção (e nova protecção, se necessário) do composto 17 obtém-se o composto 14- A aminação redutiva da amina 15 e do aldeído 18 proporciona o composto 19. 688
Secção R de exemplos
Exemplo 1 Éster etílico do ácido 2-{ [2-(4-{2-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furano-3-iloxicarbonilamino)-3-hidroxi-4-[isobutil-4-metoxi-benzenossulfonilo)-amino]-butil}-benzilamino)-etil]-fenoxi-fosfinoiloxi}-propiónico 2 (Composto 35, Exemplo 9E anterior). 689
Dissolveu-se 1 (2,07 g, 3,51 mmol) e 4 (1,33 g, 3,68 mmol de uma mistura a 4:1 de dois diastereómeros no centro de fósforo) em 14 mL de (CH2C12)2 para proporcionar uma solução límpida. Por adição de MgS04 (100 mg) à solução obteve-se uma mistura branca turva. Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 3 horas e depois adicionou-se ácido acético (0,80 mL, 14,0 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (441 mg, 7,01 mmol). A monitorização da reacção por TLC mostrou o consumo completo do materiais de partida de aldeído ao fim de 1 hora. Processou-se a mistura de reacção por adição de 200 mL de solução aquosa saturada de NaHC03 e 400 mL de CH2CI2. Extraiu-se a fase aquosa com CH2C12 mais duas vezes (2x300 mL). Secou-se os extractos orgânicos combinados sob uma pressão hipobárica e purificou-se por cromatografia em coluna (EtOAc-10% de MeOHrEtOAc) para se obter 0 produto desejado com 0 aspecto de uma espuma. Recolheu-se o primeiro composto a eluir a partir da coluna e caracterizou-se como sendo álcool 3 (810 mg, 39%) . A adição de TFA (3x1 mL) gerou o sal de TFA, que foi liofilizado a partir de 50 mL de uma mistura a 1:1 de CH3CN:H20 para proporcionar 1,63 g (47%) do produto 2 com o aspecto de um pó branco. RMN-1H (CD3CN) δ 8,23 (s lr, 2H), 7,79 (d, J=8,4 Hz, 2H), 7,45-7,13 (m, 9H) , 7,09 (d, j=8,4 Hz, 2H) , 5,86 (d, J=9,0 Hz, 1H) , 5,55 (d, J=4,8 Hz, 1H) 5, 05-4, 96 (m, 1H) , 4, 96-4, 88 (m, 1H) , 4,30-4,15 (m, 4H) , 3,89 (s, 3H), 3,86-3,76 (m, 4H), 3,70-3,59 (m, 4H), 3,56- 3,40 (m, 2H), 3,34 (d, J=15 Hz, 1H) , 3,13 (d, J=13,5 Hz, 1H) , 3,06-2,93 (m, 2H) , 2, 92-2,80 (m, 2H) , 2,69-2,43 (m, 3H), 2,03-1, 86 (m, 1H), 1, 64-1, 48 (m, 1H) , 1,53 e 1,40 (d, J=6,3 Hz, J=6,6 Hz, 3H) , 1,45-1,35 (m, 1H) , 1,27 e 1,23 (t, 690 690 6H) . rmn-31p
J= 6,9 Hz, J=7,2 Hz, 3H) , 0,90 (t, J^g Q y Hz (CD3CN) δ 2 4, 4 7, 22,86, ESI (M+H)+ 876,4,
Exemplo 2
8. HOác. NaCN8H3 lil TFÂ MF-1S12-G?
O CFe
O
Ester etílico do ácido 2-{ [2-(4-{2-(hexa-hidro-furo[2,3-b]furano-3-iloxicarbonilamino)-3-hidroxi-4-[isobutil-(4-metoxi-benzenossulfonilo)-amino]-butil}-benzilamino)-etil]-fenoxi-fosfinoiloxi}-propiónico (MF-1912-68).
Preparou-se uma solução de MF-1912-67 (0,466 g, 0,789 mmol) e ZY-1751-125 (0,320 g, 0,789 mmol de uma mistura a 1:1 de dois diastereómeros no centro de fósforo) e dissolveu-se em 3,1 mL de (CH2C1)2 para se obter uma solução límpida. A adição de MgSCh (20 mg) a solução proporcionou uma mistura branca turva. Agitou-se a solução à temperatura ambiente durante 3 horas e depois adicionou- 691 se ácido acético (0,181 mL, 3,16 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (99 mg, 1,58 mmol). A monitorização da reacção por TLC mostrou o consumo completo dos materiais de partida de aldeido ao fim de 1,5 horas. Processou-se a mistura de reacção por adição de 50 mL de solução aquosa saturada de NaHC03 e 200 mL de CH2C12. Extraiu-se a fase aquosa com CH2C12 mais duas vezes (2x200 mL) . Secou-se os extractos orgânicos combinados sob uma pressão hipobárica e purificou-se por cromatografia em coluna (EtOAc-10% de MeOH: EtOAc) para se obter o produto desejado com o aspecto de uma espuma. Recolheu-se o primeiro composto a eluir a partir da coluna e caracterizou-se como sendo o álcool MF-1912-48b (190 mg, 41%) . A adição de TFA (3x1 mL) gerou o sal de TFA , que foi liofilizado a partir de 50 mL de uma mistura a 1:1 de CH3CN:H20 para proporcionar 0,389 g (48%) do produto com o aspecto de um pó branco. RMN-1]! (CD3CN) δ 8,39 (s lr, 2H) , 7,79 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,40 (d, J= 7,5 Hz, 2H), 7,34 (d, J=8,l Hz, 2H) , 7,26-7,16 (m, 2H) , 7,10 (d, J=9 Hz, 3H) , 7,01-6,92 (m, 1H) , 5,78 (d, J=9,0 Hz, 1H) , 5,55 (d, J=5,1 Hz, 1H), 5,25-5,03 (m, 1H) , 4,95-4,88 (m, 1H) , 4,30-4,17 (m, 4H) , 4,16-4,07 (m, 2H) , 3,90 (s, 3H) , 3, 88-3,73 (m, 4H) , 3, 72-3, 60 (m, 2H) , 3, 57-3, 38 (m, 2H) , 3,32 (br d, J=15,3 Hz, 1H) , 3,13 (br d, J=14,7 Hz, 1H), 3, 05-2, 92 (m, 2H) , 2,92-2,78 (m, 2H) , 2, 68-2, 48 (m, 3H) , 2,03-1, 90 (m, 1H) , 1,62-1,51 (m, 1H) , 1,57 e 1,46 (d, J=6,9 Hz, J= 6,9 Hz, 3H) , 1,36-1,50 (m, 1H) , 1, 43-1,35 (m, 4H) , 1,33-1,22 (m, 3H) , 0,91 (t, J=6,6 Hz, 6H) . RMN-31P (CD3OD) δ 25,27, 23, 56, ESI (M+H)+ 920,5.
Secção S de exemplos 692 692
Esquema 1
Esquema 2 693
Exemplo 1
Mono-lactato de mono-etilo3: a uma solução de 1 (96 mg, 0,137 mmol) e lactato de etilo 2 (0,31 mL, 2,7 mmol) em piridina (2 mL) adicionou-se N,N-diciclo-hexilcarbodiimida (170 mg, 0,822 mmol). Agitou-se a solução durante 18 horas a 70°C. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e 694 diluiu-se com diclorometano. Removeu-se o sólido por filtração e concentrou-se o filtrado. Preparou-se uma suspensão do resíduo em éter dietílico/diclorometano e filtrou-se novamente. Concentrou-se o filtrado e submeteu-se a mistura a cromatografia através de gel de sílica, efectuando a eluição com EtOAc/hexano, para se obter o composto 3 (43 mg, 4 0%) com o aspecto de uma espuma: RM!!-1!! (CDC13) δ 7,71 (d, 2H), 7,00 (d, 2H) ; 7,00 (d, 2H) , 6,88 (d, 2H) , 5, 67 (d, 1H) , 4,93- 5, 07 (m, 2H) , 4,15- -4,39 (m, 6H), 3,70- -3, 99 (m, 10H) , 2,76- -3,13 (m, 7H), 1,55 -1, 85 (m, 9H), 1,23- -1,41 (m, 6H) , 0, 90 (dd, 6H) ; RMN- _31p (CDC13) δ 19,1, 20,2; MS (ESI) 823 (M+Na) .
Exemplo 2
Bis-2,2,2-trifluoroetil-fosfonato 6: a uma solução de 4 (154 mg, 0,228 mmol) e 2,2,2-trifluoroetanol 5 (1 mL, 13,7 mmol) em piridina (3 mL) adicionou-se N,N-diciclo-hexilcarbodiimida (283 mg, 1,37 mmol). Agitou-se a solução durante 6,5 horas a 70°C. Arrefeceu-se a mistura até à temperatura ambiente e diluiu-se com diclorometano. Removeu-se o sólido por filtração e concentrou-se o filtrado. Preparou-se uma suspensão do resíduo em diclorometano e filtrou-se novamente. Concentrou-se o filtrado e submeteu-se a mistura a cromatografia através de gel de sílica, efectuando a eluição com EtOAc/hexano, para se obter o composto 6 (133 mg, 70%) com o aspecto de uma
espuma: RMN-1]! (CDCI3) 67,71 (d, 2H), 7,21 (d, 2H) ; 7,00 (d, 2H) , 6, 88 (dd, 2H) , 5,66 (d, 1H), 4,94-5,10 (m, 3H) , 4,39-4, 56 (m, 6H), 3,71-4,00 (m, 10H), 2,77-3,18 (m, 7H), 1,67-1, 83 (m, 2H), 0,91 (dd, 4H) ; RMN-31P (CDCI3) δ 22, 2; MS (ESI) 859 (M+Na). 695
Exemplo 3
Mono-2,2,2-trifluoroetil-fosfonato 7: a uma solução de 6 (930 mg, 1,11 mmol) em THF (14 mL) e água (10 mL) adicionou-se uma solução aquosa de NaOH em água (IN, 2,2 mL). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C. Adicionou-se uma quantidade em excesso de resina 'Dowex' (H+) até pH = 1. Filtrou-se a mistura e concentrou-se o filtrado sob pressão reduzida. Destilou-se azeotropicamente a solução concentrada com EtOAc/tolueno, três vezes, e secou-se o pó branco sob uma pressão hipobárica para se obter o composto 7 (830 mg, 100 %) . RMN-1H : (Cdci3) 6 7,71 (d, 2H), 7,11 (d, 2H) ; 6,99 (d, 2H), 6,85 (d, 2H), 5,63 (d, 1H), 5,26 (m, 1H) , 5,02 (m, 1H), 4,40 (m, 1H), 4,14 (m, 4H) , 3,60- 3, 95 (m, 12H) , 2,62- -3,15 (m, 15H) , 1,45-1,84 (m, 3H), 1,29 (m, 4H) , 0,89 (d, 6H) ; RMN- (CDCI3) 619,9; MS (ESI) 723 (M+Na) .
Exemplo 4
Mono-lactato de mono-2,2,2-trifluoroetilo 8: a uma solução de 7 (754 mg, 1 mmol) e N, N-diciclo-hexilcarbodiimida (1,237 g, 6 mmol) em piridina (10 mL) adicionou-se lactato de etilo (2,26 mL, 20 mmol). Agitou-se a solução durante 4,5 horas a 70°C. Concentrou-se a mistura e preparou-se uma suspensão do resíduo em éter dietílico (5 mL) e diclorometano (5 mL) e filtrou-se. Lavou-se o sólido algumas vezes com éter dietílico. Concentrou-se o filtrado combinado e submeteu-se o produto impuro a cromatografia através de gel de sílica, efectuando a eluição com EtOAc e hexano, para se obter o composto 8 (610 mg, 71%) com o aspecto de uma espuma. ΚΜΝ-1!! (CDC13) 6 7,71 (d, 2H), 7,16 696 (d, 2H) ; 6,99 (d, 2H) , 6,88 (dd, , 2H), 5,66 (d, 1H) , 4,95- Oó O LO (m, 2H) , 4,19 -4,65 (m, 6H) , , 3,71-4,00 (m, 9H) , 2,76- 3,13 (m, 6H) , 1,57 -1,85 (m, 7H) , 1,24-1,34 (m, 4H) , 0,91 (dd, 6H) ; RMN _31p (CDCI3) δ 20, 29, 21,58; MS (ESI) 855 (M+l).
Secção Τ de exemplos
Exemplo 1
Hidroxilamina protegida com Boc 1: preparou-se uma solução de triflato do hidroximetil-fosfonato de dietilo (0,582 g, 1,94 mmol) em diclorometano (19,4 mL) e tratou-se com trietilamina (0,541 mL, 3,88 mmol). Adicionou-se N-hidroxi-carbamato de terc-butilo (0,284 g, 2,13 mmol) e agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente de um dia para o outro. Repartiu-se a mistura entre diclorometano e água. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se (MgSCt) e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 1/1) para se obter a hidroxilamina protegida com BOC 1 (0,41 g, 75%) com o aspecto de um óleo: ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,83 (s, 1H) , 4,21 (d, 2H) , 4,18 (q, 4H) , 1,47 (s, 9H) , 1,36 (t, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 19, 3 .
Exemplo 2
Hidroxilamina 2: preparou-se uma solução de hidroxilamina protegida com BOC 1 (0, 305 g, 1,08 mmol) em diclorometano (2,40 mL) e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,829 mL, 10,8 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 1,5 horas à temperatura ambiente e depois evaporou-se as 697 substâncias voláteis sob pressão reduzida com tolueno para se obter a hidroxilamina 2 (0,318 g, 100%) sob a forma do sal de TFA, o qual foi utilizado directamente, sem mais purificação: ίΙΜΝ-1]! (CDCI3) δ 10,87 (s, 2H) , 4,45 (d, 2H) , 4,24 (q, 4H), 1,38 (t, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 16,9; MS (ESI) 184 (M+H).
Exemplo 3
Oxima 4: a uma solução de aldeído 3 (96 mg, 0,163 mmol) em 1,2-dicloroetano (0,65 mL) adicionou-se hidroxilamina 2 (72,5 mg, 0,244 mmol), trietilamina (22,7 μ]1, 0,163 mmol) e MgSCç (10 mg). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas e depois repartiu-se a mistura entre diclorometano e água. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se (MgSCh) e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia através de gel de sílica (acetato de etilo/hexano a 90/10) para se obter o composto GS-277771, a oxima 4 (0,104 g, 85%) com o aspecto de um sólido: RMN-1H (CDCI3) δ 8,13 (s, 1H) , 7,72 (d, 2H), 7,51 (d, 2H) , 7,27 (d, 2H) , 7,00 (d, 2H) , 5,67 (d, 1H), 5,02 (m, 2H) , 4,54 (d, 2H) , 4,21 (m, 4H) , 3,92 (m, 1H), 3,89 (s, 3H) , 3,88 (m, 1H) , 3,97-3,71 (m, 2H), 3, 85-3, 70 (m, 2H) , 3,16-2,99 (m, 2H) , 3,16-2,81 (m, 7H) , 1,84 (m, 1H) , 1, 64-1,48 (m, 2H) , 1,37 (t, 6H) , 0, 94-0, 90 (dd, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,0; MS (ESI) 756 (M+H).
Esquema 1 698 h
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BOCMHOH TÊÁt DCM
2
Secção U de exemplos
Esquema 1
699 I. (S)-(-)-lactato de etilo/Hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidinofosfónio/DIPEA/EtOAc; II. H2/Pd a 20%-C/EtOAc-EtOH; III. ROH/Hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio/DIPEA/EtOAc
Exemplo 1 0 composto 1 foi preparado de acordo com os métodos descritos nos esquemas anteriores.
Exemplo 2
Composto 2: a uma solução de composto 1 (5,50 g, 7,30 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (5,70 g, 10,95 mmol) e (S) -(-)lactato de etilo (1,30 g, 10,95 mmol) em DMF (50 mL) adicionou-se diisopropiletilamina (5,08 mL, 29,2 mmol). Agitou-se a mistura durante 7 horas e depois diluiu-se em EtOAc. Lavou-se a fase orgânica com H20 (5x) e salmoura, secou-se sobre MgS04 e concentrou-se sob uma pressão hipobárica.
Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/4) para se obter 3,45 g de composto 2. 700
Exemplo 3
Composto 3: à mistura de composto 2 (3,45 g) em EtOH/EtOAc (300 mL/100 mL) adicionou-se Pd a 20%/C (0,700 g) .
Hidrogenou-se a mistura durante 1 hora. Adicionou-se Celite e agitou-se a mistura durante 10 minutos. Filtrou-se a mistura através de uma camada de celite e lavou-se com etanol. A concentração proporcionou 2,61 g de composto 3.
Exemplo 4
Composto 4: a uma solução de composto 3 (1,00 g, 1,29 mmol) em dimetilformamida anidra (5 mL) adicionou-se éster benzilico do ácido 3-hidroxi-benzóico (0,589 g, 2,58 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (1,34 g, 2,58 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (900 μί, 5,16 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/3) para se obter 67,3 mg de composto 4: RMN-1H (CDC13) δ 7,91 (2H,d, J=8,9 Hz), 7,75 (2H, m), 7,73-7,3 (13H,m), 7,25 (2H, m), 7,21-6,7 (6H, m) , 5,87 (1H, m), 5,4-4,8 (6H, m) , 4,78-4,21 (4H, m) , 3,98 (3H, s), 2,1-1,75 (8H, m), 1,55 (3H, m), 1,28 (3H, m), 0,99 (6H, m) .
Exemplo 5
Composto 5: a uma solução de composto 3 (1,40 g, 1,81 mmol) em dimetilformamida anidra (5 mL) adicionou-se éster terc-butílico do ácido (4-hidroxi-benzil)-carbâmico (0,80 g, 701 3,62 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirrolidino-fosfónio (1,74 g, 3,62 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (1,17 ml, 7,24 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/3,5) para se obter 770 mg de composto 5: ΗΜΝ^Η (CDC13) δ 7,8 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,4 (2H, m) , 7,3-6,8 (8H, m) , 5,75 (1H, m) , 5,3-5,1 (2H, m) , 4,6-4,23 (4H,m), 3,98 (3H, s) , 3,7-2,6 (15H, m) , 2,2-1,8 (12H, m) , 1,72 (3H, s) , 1,58 (3H, m) , 1,25 (3H, m), 0,95 (6H, m).
Exemplo 6
Composto 6: a uma solução de composto 3 (1,00 g, 1,29 mmol) em dimetilformamida anidra (6 mL) adicionou-se 3-hidroxibenzaldeído (0,320 g, 2,60 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (1,35 g, 2,60 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (901 μ]1, 5,16 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/5) para se obter 880 mg de composto 6,
Exemplo 7
Composto 7: a uma solução de composto 3 (150 mg, 0,190 mmol) em dimetilformamida anidra (1 mL) adicionou-se 2- 702 etoxi-fenol (48,0 μΐ^ 0,380 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (198 mg, 0,380 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (132 μίν 0,760 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/4) para se obter 84,7 mg de composto 7: RMN-1]! (CDC13) δ 7,73 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,15 (2H, m), 7,01-6,9 (8H, m), 5,66 (1H, m), 5,22-5,04 (2H, m), 4.56- 4,2 (6H, m) , 4,08 (2H, m) , 3,89 (3H, m) , 3,85-3,69 (6H, m), 3,17-2,98 (7H, m), 2,80 (3H, m) 1,86 (1H, m), 1,65 (2H, m) , 1, 62-1,22 (6H, m), 0,92 (6H, m).
Exemplo 8
Composto 8: a uma solução de composto 3 (50,0 mg, 0,0650 mmol) em dimetilformamida anidra (1 mL) adicionou-se 2 —(1 — metilbutil)-fenol (21,2 mg, 0,130 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (67,1 mg, 0,130 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (45,0 μί, 0,260 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se 0 resíduo por HPLC de fase inversa para se obter 8,20 mg de composto 8: RMN-1H (CDCI3) δ7,73 (2H, d, J= 8,9 Hz), 7,25 (2H, m), 7,21-6,89 (8H, m) , 5,7 (1H, m), 5,29-4,9 (2H, m), 4.56- 4,2 (6H, m), 3,89 (3H, m) , 3,85-3, 69 (6H, m) , 3,17- 703 2,89 (8Η, m) , 2,85 (3H, m) , 2,3-1,65 (4H, m) , 1,55-1,35 (6H, m), 0,92 (6H, m).
Exemplo 9
Composto 9: a uma solução de composto 3 (50,0 mg, 0,0650 mmol) em dimetilformamida anidra (1 mL) adicionou-se) 4-N-butilfenol (19,4 mg, 0,130 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (67,1 mg, 0,130 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (45,0 μΐ, 0,260 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC de fase inversa para se obter 9,61 mg de composto 9: RMN-1]! (CDC13) δ 7,8 (2H, d, J= 8,9 Hz), 7,4 (2H, m) , 7,3-6,8 (8H, m) , 5,75 (1H, m) , 5,3-4,5 (4H, m) , 4,3-3,4,1 (4H, m) , 3,9 (3H, m) , 3,3-2,59 (11H, m) , 2,25 (2H, m), 1,85-1,5 (5H, m), 1,4-1,1 (10H, m), 0,95 (9H, m).
Exemplo 10
Composto 10: a uma solução de composto 3 (50,0 mg, 0,0650 mmol) em dimetilformamida anidra (1 mL) adicionou-se 4-octilfenol (26,6 mg, 0,130 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (67,1 mg, 0,130 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (45,0 μΕ, 0,260 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC de fase inversa para se obter 7,70 mg de composto 10: RMN-1H (CDC13) δ 7, 75 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,3 704 (2Η, m), 7,2-6,8 (8H, m), 5,70 (1H, m), 5,3-4,9 (4H, m), 4,6-3,9 (4H, m) , 3,89 (3H, m) , 3,85-2,59 (12H, m) , 2,18- 1,75 (10H, m), 1, 69-1,50 (8H, m) , 1,4-1,27 (6H,m) , 0,95 (9H, m) .
Exemplo 11
Composto 11: a uma solução de composto 3 (100 mg, 0,120 mmol) em dimetilformamida anidra (1 mL) adicionou-se isopropanol (20,0 μΐ^ 0,240 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (135 mg, 0,240 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (83,0 μίν 0,480 mmol). Agitou-se a mistura durante 14 horas, diluiu-se o resíduo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/4) para se obter 12,2 mg de composto 11: ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,71 (2H, d, J= 8,9 Hz), 7,15 (2H, m) , 7,0 (2H, m), 6,89 (2H, m), 5,65 (1H, m), 5,03-4,86 (4H, m) , 4,34-4,19 (3H, m) , 3,89 (3H, s) , 3,88 (1H, m) , 3,82 (2H, m) , 3,65 (4H, m), 3,2-2,9 (11H, m) , 2,80 (3H, m) 1,65 (2H, m), 1,86 (1H, m) , 1,6 (3H, m) , 1,30 (3H,m), 0,92 (6H, m) .
Exemplo 12
Composto 12: a uma solução de composto 3 (100 mg, 0,120 mmol) em dimetilformamida anidra (1 mL) adicionou-se 4-hidroxi-l-metilpiperidina (30,0 mg, 0,240 mmol), hexafluorofosfato de benzotriazol-l-iloxitripirrolidino-fosfónio (135 mg, 0,240 mmol), seguindo-se a adição de diisopropiletilamina (83,0 μΕ, 0,480 mmol). Agitou-se a 705 mistura durante 14 horas, diluiu-se o residuo resultante em EtOAc, lavou-se com salmoura (3x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o residuo por HPLC de fase inversa para se obter 50,1 mg de composto 12: ΚΜΝ-’ή (CDCI3) δ 7,73 (2H, d, J= 8,9 Hz), 7,18 (2 H, m) , 7,0 (2H, m) , 6,9 (2H, m) , 5,67 (1H, m), 5,2-4,9 (4H, m), 4,30-4,11 (4H, m) , 3,98 (1H, m), 3,89 (3H, s), 3,87 (1H, m) , 3,75 (2H, m) , 3,5-3,3 (4H, m), 3,2-2,9 (14H, m) , 2,80 (3H, m) 1,65 (2H, m) , 1,86 (1H, m) , 1,6 (3H, m), 1,30 (3H,m), 0,92 (6H, m).
Esquema 2
I. H2/Pd a 10%-C/EtOAc Esquema 3
I.a: TFA/CH2C12/0oC; b: HCHO/HOac/NaBH3CN/EtOAc/0°C
Esquema 4 706
I. R2NH/HOAc/NaBH3CN/EtOAc Exemplo 13
Composto 13: a uma solução de composto 4 (4,9 g) em EtOAc (150 ml) adicionou-se Pd a 20%/C (0,90 g), hidrogenou-se a mistura de reacção durante 1 hora. Adicionou-se celite e agitou-se a mistura durante 10 minutos. Filtrou-se a mistura através de uma camada de celite e lavou-se com etanol. A concentração proporcionou 4,1 g de composto 13: ΚΜΝ-1]! (CDC13) δ 7, 91 (2H,d, J=8,9 Hz), 7,75 (2H, m) , 7,73-7,3 (8H, m) , 7,25 (2H, m) , 7,21-6,7 (6H, m) , 5,4-4,8 (6H, m), 4,78-4,21 (4H, m), 3,98 (3H,s), 2,1-1,75 (8H, m), 1,55 (3H, m), 1,28 (3H, m), 0,99 (6H, m).
Exemplo 14
Composto 14: a uma solução de composto 5 (0,770 g, 0,790 mmol) em diclorometano (10 mL), sob arrefecimento com gelo, adicionou-se ácido trifluoroacético (5 mL) e agitou-se a mistura resultante a 25°C durante duas horas. Concentrou-se a mistura de reacção sob pressão reduzida e submeteu-se o resíduo a co-evaporação com EtOAc para se obter um óleo amarelo. A uma solução do óleo anterior em (10 mL) de EtOAc, sob arrefecimento com gelo e agitação, adicionou-se formaldeído (210 μΕ, 2,86 mmol) e ácido acético (252 μΕ, 4,30 mmol), seguindo-se ciano-boro-hidreto de sódio (178 707 mg, 2,86 mmol) . Manteve-se a mistura sob agitação a 25°C durante mais 2 horas. Concentrou-se a mistura anterior, diluiu-se com EtOAc, lavou-se com H20 (3x), salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por HPLC de fase inversa para se obter 420 mg de composto 14: RMN-1H (CDC13) δ 7,8 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,4 (2H, m) , 7,3-6,8 (8H, m) , 5,75 (1H, m) , 5,3-5,1 (2H, m) , 4,6-4,23 (4H,m), 3,98 (3H, s), 3,7-2,6 (15H, m) , 2,2-1,8 (8H, m) , 1,72 (3H, s) , 1,58 (3H, m), 1,25 (3H, m), 0,95 (6H, m).
Exemplo 15
Composto 15: a uma solução de composto 6 (100 mg, 0,114 mmol) em EtOAc (1 mL) adicionou-se 1-metil-piperazina (63,2 mg, 0,570 mmol), ácido acético (34,0 μΐ, 0,570 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (14,3 mg, 0,228 mmol). Agitou-se a mistura a 25°C durante 14 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, diluiu-se com EtOAc, lavou-se com H20 (5*), salmoura (2x), secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia sobre gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/6,5) para se obter 5,22 mg de composto 15: RMN-1H (CDC13) δ 7,73 (2H, d, J= 8,9 Hz), 7,4- 7,18 (8H, m) , 7,1-6,89 (2H, m) , 5,67 (1H, m) , 5,2-4,9 (4H, m), 4,30-4,11 (4H, m) , 3,98 (1H, m) , 3,89 (3H, s) , 3,87 (1H, m), 3,75 (2H, m) , 3,5-3,3 (4H, m) , 3,2-2,9 (10H, m), 2,80-2,25 (8H,m), 1,65 (2H, m) , 1,86 (1H, m), 1,6 (3H, m), 1,30 (3H,m), 0,92 (6H, m). 708
Esquema 5 708
Esquema 6
I. a: R2NH/HOAc/NaBH3CN/EtOAc; b: HF a 2%/CH3CN
Exemplo 16
Composto 16: a uma solução de composto 3 (100 mg, 0,120 mmol) em piridina (600 μΕ) adicionou-se piperidina-l-ol (48,5 mg, 0,480 mmol), seguindo-se N,N-diciclo-hexilcarbodiimida (99,0 mg, 0,480 mmol). Agitou-se a mistura durante 6 horas e concentrou-se o solvente sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo resultante por cromatografia através de gel de sílica (CH2Cl2/Metanol = 100/5) para se obter 17 mg de composto 16: ΚΜΝ^Η (CDC13) δ 7,73 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,16 (2H, m) , 7,0 (2H, m) , 6,9 (2H, m), 5,68 (1H, m), 5,17 (1H, m) , 5,04 (1H, m), 4,5-4,2 (4H, m), 3,90 (3H, s), 3,75 (2H, m) , 3,5-3,3 (4H, m) , 3,2- 709 2,9 (1 OH, m) , 2,80 (3H, m) 1,65 (2H, m), 1,86 (1H, m), 1,6 (3H, m) , 1,5-1,27 (9H,m), 0,92 (6H, m) .
Exemplo 17
Composto 18: a uma solução de composto 17 (148 mg, 0,240 mmol) em 4 mL de metanol adicionou-se éster dietilico do ácido (1,2,3,4-tetra-hidro-isoquinolina-6-ilmetil)-fosfónico (70,0 mg, 0,240 mmol) e ácido acético (43,0 μί, 0,720 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 3 minutos, seguindo-se a adição de Ciano-boro-hidreto de sódio (75,3 mg, 1,20 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 25°C durante 14 horas. Diluiu-se a mistura de reacção com EtOAc, lavou-se com H20 (3x), salmoura, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia sobre gel de sílica (CH2Cl2/isopropanol = 100/5) para se obter 59 mg de intermediário protegido com TES. Adicionou-se 83 μΐ de solução de HF a 48% a acetonitrilo (4 mL) para se preparar a solução de HF a 2%. Adicionou-se a solução de HF a 2% anterior ao intermediário protegido com TES (47 mg, 0,053 mmol) e agitou-se a mistura de reacção durante 2 horas. Concentrou-se o solvente, diluiu-se o resíduo com EtOAc, secou-se sobre sulfato de sódio, filtrou-se e concentrou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o resíduo por cromatografia sobre gel de sílica (CH2Cl2/Metanol = 100/10) para se obter 35,2 mg de composto 18: RMN-1H (CDCI3) δ 7,73 (2H, d, J=8,9 Hz), 7,05 (2H, m) , 6,89 (2H, m) , 6,76 (1H, m), 5,75 (1H, m), 5,67 (1H, m), 5,3 (2H, m), 4,2-3,6 (12 H, m), 3,4-2,4 (11 H, m) , 2,1-1,8 (6H, m) , 1,4-1,28 (8H, m) , 0, 92 (6H, m) . 710
Esquema 7 710
I. Isopropanol/ Hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirro-lidinofosfÓnio/DIPEA/DMF; II. H2/Pd a 10%-C/EtoAc-EtOH; III. RNH2/ 'Aldrithiol-2' /PPhs/iPr2NEt/Piridina O composto 19 é preparado de acordo com o procedimento descrito para o composto 2, utilizando o monoácido 1. O composto 20 é preparado por hidrogenação do composto 19. O monoácido 20 reage com os correspondentes amino-ésteres na presença de 'Aldrithiol-2' e trifenilfosfina para formar o composto 21.
Esquema 8 •V 711
m
I.a. SOC12/60°C; b. (S)-lactato de alquilo/Et3N; li. H2/Pd a 10%-C/EtOAc-HOAc; III.a. composto 25/MgS04; b. HOAc/NaBH3CN
Trata-se o monoácido 22 com cloreto de tionilo a 60°C para formar o monocloridrato, que reage com o correspondente (s)-lactato de alquilo para gerar o monolactato 23. Submete-se o monolactato 23 a hidrogenação com Pd a 10%/C na presença de ácido acético para formara amina 24. 0 aldeido 25 reage com a amina 24 na presença de MgSC>4 para formar o intermediário imina, o qual é reduzido com ciano-boro-hidreto de sódio para se obter o composto 26.
Seccão V de exemplos
Esquema 1
i° H
S
Gb2HN''^<T0H S OH ií
CbEHH1 ΪOPft OPh 3
o
OJzHN
H#
O ,t! Ú^JX vi v 7
5 FUH S K«Me
Reagentes e condições: i. CbzCl, NaOH, tol/H20, 100%; ii.a. S0C12, DMF, tol, 65 °C; b. PhOH, Et3N, Ch2Cl2, 71%; iii. NaOH aq., CH3CN, 79%; iv.a. S0C12, DMF, tol, 65°C; b. lactato de etilo, Et3N, CH2C12, (5) 85%; éster etílico do ácido 2-hidroxibutírico, Et3N, CH2C12, (6) 75%; v. H2, AcOH,
Pd a 10%/C, EtOH, 94%; vi.a. 7 + 8, 1,2-DCE, MgS02; b. 713
NaBH3CN, AcOH, 50%; vii. Esterase de fígado de suíno, 20% de DMSO/PBS, 40°C, 25%.
Exemplo 1
Composto 2: num balão de três entradas com a capacidade de 3 L, equipado com uma agitadora mecânica e um funil de adição, introduziu-se ácido 2-aminoetil-fosfónico (60,0 g, 480 mmol). Adicionou-se hidróxido de sódio 2N (480 mL, 960 mmol) e arrefeceu-se o balão até 0°C. Adicionou-se, gota a gota, cloroformato de benzilo (102,4 g, 600 mmol) em tolueno (160 mL) , sob agitação vigorosa. Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e depois à temperatura ambiente durante 4 horas. Adicionou-se hidróxido de sódio 2N (240 mL, 480 mmol) e depois cloroformato de benzilo (20,5 g, 120 mmol) e agitou-se vigorosamente a mistura de reacção durante 12 horas. Lavou-se a mistura de reacção com éter dietílico (3x) . Acidificou-se a fase aquosa até pH 2 com HC1 concentrado para se obter um precipitado branco. Adicionou-se acetato de etilo à mistura e acrescentou-se HC1 concentrado (80 mL, 960 mmol). Extraiu-se a fase aquosa com acetato de etilo, secou-se (MgS04) a fase orgânica combinada e concentrou-se para se obter um sólido branco ceroso (124 g, 479 mmol, 100%). ΙΜΝ^Η (300 MHz, CD3OD) : 0 7,45-7,30 (m, 5H, Ar), 5,06 (d, J=14,7 Hz, 2H, CJÍ2Ph) , 3,44-3,31 (m, 2H, NCH2CH2) , 2,03-1,91 (m, 2H, CH2CH2P) ; RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : δ 26,3.
Exemplo 2
Composto 3: a uma mistura de composto 2 (50,0 g, 193 mmol) em tolueno (1,0 L) adicionou-se DMF (1,0 mL) e depois 714 cloreto de tionilo (56 mL, 768 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção a 65°C durante 3-4 horas, sob uma corrente de árgon. Arrefeceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente e concentrou-se. Residual removeu-se o solvente sob vácuo intenso durante 1 hora. Dissolveu-se o resíduo em CH2C12 (1,0 L) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se trietilamina (161 mL, 1158 mmol), seguindo-se fenol (54,5 g, 579 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente de um dia para o outro, depois lavou-se com HC1 1,0N, solução saturada de NaHC03 e salmoura e secou-se (MgS04) . Concentrou-se e purificou-se (gel de sílica, EtOAc/Hex a 1:1) para se obter um sólido amarelo pálido (56 g, 136 mmol, 71%) . RMN-1]! (300MHz, CDCI3) : 07,40-7,10 (m, 15H, Ar), 5,53 (s lr, 1H, NÍ7) , 5,11 (s lr, 2H, CH2Ph) , 3, 72-3,60 (m, 2H, NCH2CH2) , 2,49-2,30 (m, 2H, CH2CH2P) ; RMN-31P (121 MHz, CDCI3) : δ 22, 9.
Exemplo 3
Composto 4: a uma solução de composto 3 (64 g, 155,6 mmol) em acetonitrilo (500 mL) a 0°C adicionou-se hidróxido de sódio 2,0M. Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e depois à temperatura ambiente durante 2,5 horas. Concentrou-se a mistura de reacção até 100 mL e diluiu-se com H20 (500 mL) . Lavou-se a solução aquosa com EtOAc (3*300 mL) . Acidificou-se a fase aquosa até pH 1 com HC1 concentrado, obtendo-se um precipitado branco. Extraiu-se a mistura com EtOAc (4*300 mL), lavou-se a fase orgânica combinada com salmoura e secou-se (MgS04) . A concentração proporcionou um sólido, o qual se deixou recristalizar a partir de EtOAc quente (450 mL) para se obter um sólido branco (41,04 g, 122 mmol, 79%). ΚΜΝ-1!! (300 MHz, CD3OD) : 715 07,45-7, 10 (m, 10H, Ar), 5,09 (s, 2H, CH2Ph) , 3,53-3, 30 (m, 2H, NCH2CH2) , 2,25-2,10 (m, 2H, CH2CH2P) ; RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : δ 24,5 .
Exemplo 4
Composto 5: a uma mistura de composto 4 (28 g, 83 mmol) em tolueno (500 mL) adicionou-se DMF (1,0 mL), seguindo-se cloreto de tionilo (36,4 mL, 499 mmol). Aqueceu-se a mistura a 65°C durante 2 horas para se obter uma solução amarela pálida. Concentrou-se a mistura de reacção e secou-se durante 45 minutos sob vácuo intenso. Dissolveu-se o residuo em CH2C12 anidro (350 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se lentamente trietilamina (45,3 mL, 332 mmol), seguindo-se a adição, gota a gota, de lactato de etilo (18,8 μΐ, 166 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Diluiu-se a mistura de reacção com CH2C12, lavou-se com 1 N HC1, solução saturada de NaHC03 e salmoura e secou-se (MgS04) . Por concentração e purificação (gel de silica, EtOAc/Hex entre 1:5 e 1:0) obteve-se um óleo amarelo pálido (30,7 g, 71 mmol, 85%) sob a forma de uma mistura de diastereómeros que são separados por HPLC (coluna de fase inversa C18 'Dynamax', 60% de acetonitrilo/H20) . Diastereómero mais polar: ΡΜΝ^Η (300 MHz, CDCI3) : 0 7,40-7,10 (m, 10H, Ar), 5,65 (s, 1H, N H) f 5,12 (s, 2H, CH2Ph), 5,10-5,00 (m, 1H, OCHC) 4,17 (q, J=6,9 Hz, 2H, OCH2CH3) 3,62 (dt, Jx = 20,4 Hz, J2 = 6,0 Hz, 2H, NCH2CH2), 2,25 (dt, Ji = 18,0 Hz, J2 = 6,0 Hz, 2H, CH2CH2P) , 1,60 (dd, Ji = J2 = 6,9 Hz, 3H, CHCH3) , 1,23 (t, J=6,9 Hz, 3H, OCH2CH3) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 26,2. Diastereómero 716 menos polar: RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ 7, 40-7,10 (m, 10H,
Ar), 5,87 (s, 1H, NA), 5,13 (s, 2H, CH2Ph) , 5,10-5,00 (dq, Ji=J2=6,9 Hz, 1H, OCAC) 4,22 (q, J=7,2 Hz, 2H, OCH2CH3) , 3,68 (dt, Ji = 21,6 Hz, J2 = 6,9 Hz, 2H, NCH2CH2) , 2,40-2,20 (m, 2H, CH2CH2P) , 1,49 (dd, Ji = 70,2 Hz, J2 = 6,9 Hz, 3H, CHCH3) , 1,28 (t, J= 6,9 Hz, 3H, OCH2CH3) ; RMN-31P (121 MHz, CDCI3) : δ 28,3 .
Exemplo 5
Composto 6: preparou-se éster etílico do ácido 2-hidroxi-butírico tal como a seguir se descreve: a uma solução de Ácido L-2-aminobutírico (100 g, 970 mmol) em H2SC>4 1,0N (2 L) a 0°C adicionou-se NaN02 (111 g, 1610 mmol) em H20 (400 mL) ao longo de 2 horas. Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 18 horas. Extraiu-se a mistura de reacção extraiu-se com EtOAc (4x), secou-se a fase orgânica combinada (MgS04) e concentrou-se para se obter um sólido amarelo (41,5 g) . Dissolve-se este sólido em etanol absoluto (500 mL) e adicionou-se HC1 concentrado (3,27 mL, 39,9 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até 80°C. Ao fim de 24 horas, adicionou-se HC1 concentrado (3 mL) e a reacção prosseguiu durante 24 horas. Concentrou-se a mistura de reacção e destilou-se o produto para se obter um óleo incolor (31 g, 235 mmol, 59%). A uma mistura de composto 4 (0,22 g, 0,63 mmol) em acetonitrilo anidro (3,0 mL) adicionou-se cloreto de tionilo (0,184 mL, 2,52 mmol). Aqueceu-se a mistura a 65°C durante 1,5 horas, obtendo-se uma solução amarela pálida. Concentrou-se a mistura de reacção e secou-se durante 45 minutos sob vácuo intenso. Dissolveu-se o resíduo em CH2C12 anidro (3,3 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se 717 lentamente trietilamina (0,26 mL, 1,89 mmol), seguindo-se a adição, gota a gota, de éster etílico do ácido 2-hidroxi-butírico (0,167 mL, 1,26 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 5 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente de um dia para o outro. Concentrou-se a mistura de reacção, dissolveu-se em EtOAc, lavou-se com HC1 1,0N, solução saturada de NaHC03 e salmoura e secou-se (MgS04) . Por concentração e purificação (gel de sílica, 3:2 EtOAc/Hex) obteve-se um óleo amarelo pálido (0,21 g, 0,47 mmol, 75%) . Para o diastereómero principal, RMN-1]! (300 MHz, CDC13) : 0 7,35-7,10 (m, 10H, Ar), 5,91 (s, 1H, N H) , 5,12 (s, 2H, CH2Ph), 4,94-4,83 (m, 1H, OCHC) , 4,27-4,12 (m, 2H, OCH2CH3), 3,80-3,50 (m, 2H, NCH2CH2) , 2,39-2,19 (m, 2H, CH2CH2P) , 1,82-1,71 (m, 2H, CHCH2CH3) , 1,30-1,195 (m, 3H, OCH2CH3), 0,81 (t, J=1,5 Hz, 3H, CHCH2CH3) ; RMN-31P (120 MHz, CDCI3) : δ 28,3, Para 0 diastereómero secundário, RMN-1H (300 MHz, CDCI3) : 07,35-7,10 (m, 10H, Ar), 5,74 (s, 1H, NA), 5,11 (s, 2H, CH2Ph), 4,98-4,94 (m, 1H, OCHC), 4,27-4,12 (m, 2H, OCH2CH3), 3, 80-3,50 (m, 2H, NCH2CH2) , 2,39-2,19 (m, 2H, CH2CH2P), 1, 98-1,82 (m, 2H, CHCH2CH3) , 1,30-1,195 (m, 3H, OCH2CH3), 1,00 (t, J=7,5 Hz, 3H, CHCH2CH3) ; RMN-31P (121 MHz, CDCI3) : δ 26,2 .
Exemplo 6
Composto 7: preparou-se uma mistura de composto 6 (0,53 g, 1,18 mmol), ácido acético (0,135 mL, 2,36 mmol) e paládio a 10% sobre carvão activado (0,08 g) em etanol absoluto (12 mL) e agitou-se em ambiente de hidrogénio (1 atm) durante 3 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de Celite, concentrou-se e submeteu-se novamente a condições de reacção idênticas. Decorridas 2 horas, adicionou-se Celite 718 à mistura de reacção, agitou-se a mistura durante 2 minutos, depois filtrou-se através de uma camada de celite e concentrou-se. Secou-se sob vácuo intenso para se obter o sal acetato diastereomérico com o aspecto de um óleo (0,42 g, 1,11 mmol, 94%). RM!]-1]! (300 MHz, CDC13) : δ 7,40-7,10 (m, 5H, Ar), 5,00-4,80 (m, 1H, OCffC), 4,28-4,10 (m, 2H, OCH2CH2), 3,32-3,14 (m, 2H, NCH2CH2) , 2, 45-2,22 (m, 2H, CH2CH2P), 1,97 (s, 3H, Ac), 1,97-1,70 (m, 2H, CHCH2CH3) , 1,30-1,18 (m, 3H, OCH2CH3) , 1,00 (t, J=7,5 Hz, 1H, CHCH2CH3), 0,80 (t, J=7,5 Hz, 2H, CHCH2CH3) ; RMN-31P (121 MHz, CDCI3): δ 27,6 (principal, 1,85), 26, 0 (secundário, 1,01) .
Exemplo 7
Composto 9: preparou-se uma solução de aldeído 8 (0,596 g, 1,01 mmol) e composto 7 (0,42 g, 1,11 mmol) e agitou-se em 1,2-dicloroetano (4,0 mL) na presença de MgS04 durante 3 horas. Adicionou-se ácido acético (0,231 mL, 4,04 mmol) e ciano-boro-hidreto de sódio (0,127 g, 2,02 mmol) e agitou-se a mistura de reacção durante 50 minutos à temperatura ambiente. Extinguiu-se a mistura de reacção com solução saturada de NaHC03, diluiu-se com EtOAc e agitou-se vigorosamente durante 5 minutos. Adicionou-se salmoura e extraiu-se com EtOAc (2x). Secou-se a fase orgânica combinada (MgS04) , concentrou-se e purificou-se (gel de sílica, EtOAc, depois 10% de EtOH/EtOAc) para se obter uma espuma incolor. Adicionou-se acetonitrilo (4 mL) e ácido trifluoroacético (0,06 mL) e concentrou-se até um volume de 1 mL. Adicionou-se H20 (10 mL) e liof ilizou-se para se obter o sal de TFA com 0 aspecto de um pó branco (0,51 g, 0,508 mmol, 50%). RMN-1H (300 MHz, CD3CN) : 6 7,79 (d, J=8,4 719
Hz, 2H, (S02C(C H) 2), 7,43-7,20 (m, 9H, Ar), 7,10 (d, J=8,4
Hz, 2H, (CH) 2COCH3) , 5,85 (d, J=8,4 Hz, 1H, NH) , 5,55 (d, J=4,5 Hz, 1H, OCffO), 5, 00-4,75 (m, 2H, CH2CHOC (O) , POCHC), 4,39-4,05 (m, 2H, PhCH2N, OCH2CH3) , 3,89 (s, 3H, OCH3) , 3, 88-3,30 (m, 9H) , 3,15-2,84 (m, 5H) , 2, 65-2,42 (m, 3H) , 2,10-1,68 (m, 5H) , 1,65-1,15 (m, 5H) , 1,05-0, 79 (m, 9H) ; RMN-31P (121 MHz, CD3CN) : δ 24,8 (principal, 1,85), 23,1 (secundário, 1,01) .
Exemplo 8
Composto 10: dissolveu-se o composto 9 (0,041 g, 0,041 mmol) em DMSO (1,9 mL) e adicionou-se a esta solução soluto salino tamponado com fosfato, pH 7,4 (10 mL) e esterase do fígado de suíno (Sigma, 0,2 mL). Agitou-se a mistura de reacção durante 24 horas a 40°C. Ao fim de 24 horas, adicionou-se mais esterase (0,2 mL) e a reacção prosseguiu durante 24 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, colocou-se novamente em suspensão em metanol e filtrou-se. Concentrou-se o filtrado e purificou-se por cromatografia de fase inversa para se obter um pó branco, após a liofilização (8 mg, 0,010 mmol, 25%). RMN-1H (500 MHz, CD3OD) : Ô 7,78 (d, J=8,9 Hz, 2H, (S02C (CH) 2) , 7,43-7,35 (m, 4H, Ar), 7,11 (d, J= 8,9 Hz, 2H, (CH) 2COCH3) , 5,62 (d, J=5,2 Hz, 1H, OCHO) , 4, 96-4,77 (m, 2H, CH2CHOC (0) , POCHC), 4,21 (s lr, 2H, PhCH2N) , 3,97-3, 70 (m, 6H) , 3,90 (s, 3H, OCH3) , 3, 50-3,30 (m, 3H) , 3,26-3, 02 (m, 2H) , 2, 94-2,58 (m, 4H) , 2,09-1, 78 (m, 5H) , 1,63-1,52 (m, 2H) , 1,05-0, 97 (m, 3H) ;
0,94 (d, J= 6,7 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,7 Hz, 3H) ; RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : δ 20,8.
Esquema 2 12 720 9 11 ο η
S
Reagentes e condições: i. etileno-glicol, Mg(OtBu)2, DMF, 48%; ii.a. Tf20, 2,6-lutidina, CH2C12, -78°C; b. 13, CsC03, CH3CN, entre 0°C e temperatura ambiente, 65%; ii. H2, Pd/C, EtOH, 107%; iv. DCC, PhOH, pir, 70°C, 31%; v.a. NaOH, CH3CN, 0°C; b. DCC, lactato de etilo, pir, 70°C, 52%; vi. CH3CN, DMSO, PBS, esterase de figado de suino, 38°C, 69%.
Exemplo 9 721
Composto 12: a uma solução de composto 11 (4,10 g, 9,66 mmol) e etileno-glicol anidro (5,39 mL, 96,6 mmol) em DMF anidra (30 mL) a 0°C adicionou-se terc-butóxido de magnésio em pó (2,05 g, 12,02 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1,5 horas e depois concentrou-se. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e H20 e lavou-se com 1 N HC1, solução saturada de NaHC03 e salmoura. Secou-se a fase orgânica (MgS04) , concentrou-se e purificou-se (gel de sílica, 4% de MeOH/CH2Cl2) para se obter um óleo incolor (1,55 g, 48%). RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ 7,37 (s, 10H, Ar), 5, 40-5, 05 (m, 4H, CH2Ph) , 3,84 (d, J=8,l Hz, 2H, PCH20) , 3, 70-3, 60 (m, 4H, OCH2CH2O, 0CH2CH20) ; RMN-31P (121 MHz, CDCI3) : δ22,7.
Exemplo 10
Composto 14: a uma solução de composto 12 (0,75 g, 2,23 mmol) e 2,6-lutidina (0,78 mL, 6,69 mmol) em CH2C12 (20 mL) a -78°C adicionou-se anidrido trifluorometanossulfónico (0,45 mL, 2,68 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a -78°C durante 40 minutos, depois diluiu-se com CH2C12, lavou-se com HC1 IN e NaHC03 saturado e secou-se (MgS04) . A concentração proporcionou um óleo amarelo que se dissolveu em acetonitrilo anidro (20 mL). Adicionou-se fenol 13 (1,00 g, 1,73 mmol) à solução, a qual se arrefeceu até 0°C Adicionou-se carbonato de césio (0,619 g, 1,90 mmol) e agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 2 horas e depois à temperatura ambiente durante 1,5 horas. Adicionou-se mais carbonato de césio (0,200 g, 0,61 mmol), a reacção prosseguiu durante 1,5 horas e depois filtrou-se. Por concentração do filtrado e purificação (gel de sílica, 3% de MeOH/CH2C12) obteve-se uma goma amarela (1, 005 g, 65%). RMN-1H (300 MHz, CDC13) : 0 7,71 (d, J=8,7 Hz, 2H, S02C(CH) 2) , 722 7,34 (s, 10H, PhCH20) , 7,11 (d, J=8,l Hz, 2H, CH2C(CÍ/)2(CH)2) , 6,98 (d, J=8,7 Hz, 2H, (CH) 2COCH3) , 6,78 (d, J=8,7 Hz, 2H, (Ctf)2COCH2) , 5,62 (d, J=5,4 Hz, 1H, OCHO) , 5,16-4,97 (m, 6H), 4,05-3, 65 (m, 12H), 3,86 (s, 3H, OCH3), 3,19-2,66 (m, 7H) , 1,95-1,46 (m, 3H) , 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H, CH(CH3)2), 0,88 (d, J= 6,6 Hz, 3H, CH(CH3)2); RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ21, 9.
Exemplo 11
Composto 15: preparou-se uma mistura de composto 14 (0,410 g, 0,457 mmol) e paládio a 10% sobre carvão (0,066 g) em etanol (5,0 mL) e agitou-se em ambiente de hidrogénio (1 atm) durante 16 horas. Adicionou-se celite, agitou-se a mistura durante 5 minutos, depois filtrou-se através de celite e concentrou-se para se obter uma espuma (0,350 g, 107%). RMN-1H (300 MHz, CD3OD) : δ 7,76 (d, J=8,7 Hz, 2H, S02C(CH)2), 7,15 (d, J=8,4 Hz, 2H, CH2C (CH) 2 (CH) 2) , 7,08 (d, J=8,4 Hz, 2H, (CH)2 COCH3), 6,82 (d, J=8,4 Hz, 2H, (CH)2COCH2) , 5,59 (d, J=5,4 Hz, 1H, OCHO), 5,16-4,97 (dissimulado por CD3OH , 1H) , 4,09-4,02 (m, 2H), 3,99-3,82 (m, 10H) , 3, 88 (s, 3H, OCH3), 3,52-3,32 (m, 1H) , 3,21-2,75 (m, 5H) , 2,55-2,40 (m, 1H) , 2,10-195 (m, 1H) , 1,75-1,25 (m, 2H) , 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH(CH3)2), 0,88 (d, J= 6,6 Hz, 3H, CH (CH3) 2) ; RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : δ 19, 5.
Exemplo 12
Composto 16: submeteu-se o composto 15 (0,350 g, 0,488 mmol) a co-evaporação com piridina anidra (3x10 mL), carregando com N2 de cada uma das vezes. Dissolveu-se o residuo em piridina anidra (2,5 mL) e fenol (0,459 g, 4,88 mmol). Aqueceu-se esta solução até 70°C, depois adicionou- 723 se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,403 g, 1,93 mmol) e aqueceu-se a mistura de reacção a 70°C durante 7 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, efectuou-se a co-evaporação com tolueno e diluiu-se o resíduo obtido com EtOAc, fazendo precipitar 1,3-diciclo-hexilureia. Filtrou-se a mistura, concentrou-se o filtrado e purificou-se o resíduo obtido (gel de sílica, 2% de MeOH/CH2Cl2, depois outra coluna com 75% de EtOAc/Hex) para se obter um óleo límpido (0,1324 g, 31%). ΕΜΝ^Η (300 MHz, CDC13) : 6 7,71 (d, J= 8,7 Hz, 2H, S02C(C H) 2) , 7,41-7,18 (m, 10H, Ar), 7,14 (d, J=8,4 Hz, 2H, CH2C (CH) 2 (CH) 2) , 6,99 (d, J=9,0 Hz, 2H, (CH)2COCH3), 6,83 (d, J=8,4 Hz, 2H, (CH) 2COCH2) , 5,64 (d, J=5,1 Hz, 1H, OCfíO), 5,16-4,92 (m, 2H), 4,32-3,62 (m, 12H), 3,87 (s, 3H, OCH3) , 3,22-2,73 (m, 7H) , 1,95-1,75 (m, 3H) , 0,93 (d, J=6,6 Hz, 3H, CH(CH3)2), 0,88 (d, J=6,6 Hz, 3H, CH (CH3) 2) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : 6 14,3.
Exemplo 13
Composto 17: a uma solução de composto 16 (0,132 g, 0,152 mmol) em acetonitrilo (1,5 mL) a 0°C adicionou-se NaOH 1,0M (0,38 mL, 0,381 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 2 horas a 0°C, depois adicionou-se resina 'Dowex 50 (H+)' até pH = 1. Removeu-se a resina por filtração, concentrou-se o filtrado, lavou-se com EtOAc/Hex (1:2, 25 mL) e depois secou-se sob vácuo intenso para se obter uma película límpida (0,103 g, 85%). Submeteu-se esta película a co-evaporação com piridina anidra (3x5 mL), carregando com N2. Dissolveu-se o resíduo em piridina anidra (1 mL), adicionou-se lactato de etilo (0,15 mL, 1,30 mmol) e aqueceu-se a mistura de reacção a 70°C. Ao fim de 5 minutos, adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,107 724 g, 0,520 mmol) e agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2,5 horas. Adicionou-se mais 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,055 g, 0,270 mmol) e a reacção prosseguiu durante mais 1,5 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, efectuou-se a co-evaporação com tolueno e diluiu-se com EtOAc, fazendo precipitar 1,3-diciclo-hexilureia. Filtrou-se a mistura, concentrou-se o filtrado e purificou-se o resíduo obtido (gel de sílica, entre 80 e 100% de EtOAc/Hex) para se obter uma espuma branca (0,0607 g, 52%). RMN-1]! (300 MHz, CDC13) : δ 7,71 (d, J=8,7 Hz, 2H, S02C{CH)2), 7,39-7,16 (m, 5H, Ar), 7,13 (d, J=8,l Hz, 2H, CH2C (Cií) 2 (CH) 2) , 6,99 (d, J=9,0 Hz, 2H, (CH) 2COCH3) , 6,82 (d, J=8,4 Hz, 2H, (CH) 2COCH2) , 5,64 (d, J=5,l Hz, 1H, OCHO) , 5,16-4,92 (m, 3H), 4,35-3, 65 (m, 14H), 3,87 (s, 3H, OCH3), 3,22-2,13 (m, 7H), 1, 95-1, 80 (m, 3H), 1,59 (d, J=6,9 Hz, 1,5H, CCHCH3), 1,47 (d, J=l,2 Hz, 1,5H, CCHCH3) , 1,37-1,18 (m, 3H) , 0,92 (d, J= 6,6 Hz, 3H, CH(CH3)2), 0,88 (d, J=6, 6 Hz, 3H, CH(CH3)2); RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 19,2, 17,2.
Exemplo 14
Composto 18: dissolveu-se o composto 17 (11,5 mg, 0,013 mmol) em DMSO (0,14 mL) e acetonitrilo (0,29 mL). Adicionou-se lentamente PBS (pH 7,4, 1,43 mL) sob agitação. Adicionou-se esterase do fígado de suíno (Sigma, 0,1 mL) e agitou-se a mistura de reacção lentamente a 38°C. Ao fim de 24 horas, adicionou-se mais esterase do fígado de suíno (0,1 mL) e DMSO (0,14 mL) e agitou-se a mistura de reacção durante 48 horas a 38°C. Concentrou-se a mistura de reacção e adicionou-se metanol para precipitar a enzima. Filtrou-se a mistura, concentrou-se e purificou-se por cromatografia 725 de fase inversa para se obter um pó branco, após a liofilização (7,1 mg, 69%). ΡΜΝ^Η (300 MHz, CD3OD) : δ 7,76 (d, J=8,7 Hz, 2H, S02C (CH) 2) , 7,15 (d, J=8,4 Hz, 2H, CH2C {CH) 2 (CH) 2) , 7,08 (d, J= 9,0 Hz, 2H, (CH)2COCH3), 6,83 (d, J=8,7 Hz, 2H, (Cíí)2COCH2) , 5,59 (d, J=5,l Hz, 1H, OCHO), 5,16-4,90 (dissimulado por CD3OH, 2H), 4,19-3,65 (m, 12H) , 3,88 (s, 3H, OCH3) , 3, 50-3,27 (m, 1H), 3,20-2,78 (m, 5H) , 2,55-2,40 (m, 1H) , 2,05-1,90 (m, 1H) , 1,75-1,30 (m, 2H) , 1,53 (d, J=6,6 Hz, 3H, CCHCH3) , 0,93 (d, J= 6,6 Hz, 3H, CH(CH3)2), 0,88 (d, J= 6,6 Hz, 3H, CH(CH3)2); RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : Ô 16, 7 .
Em alternativa, o composto 17 foi preparado conforme adiante se descreverá (esquema 3).
Esquema 3 14
I
Reagentes e condições: i.a. 14, DABCO, tol, refluxo. B. lactato de etilo, PyBOP, DIPEA, DMF, 59%; ii.a. H2, Pd/C, EtOH; b. PhOH, PiBOP, DIPEA, DMF, 35%
Exemplo 15
Composto 19: a uma solução de composto 14 (0,945 g, 1,05 mmol) em tolueno anidro (10,0 mL) adicionou-se 1,4-diazobiciclo[2,2,2]octano (0,130 g, 1,16 mmol) e manteve-se a mistura de reacção ao refluxo durante 2 horas. Após o arrefecimento até à temperatura ambiente, diluiu-se a mistura de reacção com EtOAc, lavou-se com HC1 1,0N e 726 secou-se (MgS04) A concentração proporcionou uma espuma branca (0,785 g, 93%). Dissolveu-se o resíduo em DMF anidra (10,0 mL) e a esta solução adicionou-se (s)-lactato de etilo (0,23 mL, 2,00 mmol) e diisopropiletilamina (0,70 mL, 4,00 mmol), seguindo-se hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirroldinofosfónio (1,041 g, 2,00 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas, depois concentrou-se, dissolveu-se o resíduo em EtOAc, lavou-se com HC1 1,0N, NaHCCh saturado e salmoura e secou-se (MgSOí) . Por concentração e purificação (gel de sílica, 2% de MeOH/CH2Cl2) obteve-se uma espuma esbranquiçada (0,520 g, 59%). ΙΙΜΝ^Η (300 MHz, CDC13) : hl,12 (d, J=7,5 Hz, 2H, S02C(CH) 2), 7,50-7,27 (m, 4H, Ar), 7,12 (d, J=8,l Hz, 2H, CH2C (Cíf) 2 (CH) 2) , 7,00 (d, J=6,6 Hz, 2H, (CH) 2COCH3) , 6,81 (d, J= 8,4 Hz, 2H, (Ctf)2COCH2) , 5,64 (d, J=5,l Hz, 1H, OCHO), 5,37-4,90 (m, 5H), 4,35-3,65 (m, 14H), 3,88 (s, 3H, OCH3) 3,24-2,70 (m, 7H) , 1, 90-1,70 (m, 3H) , 1,54 (d, J= 6,9 Hz, 1,5H, CCHCH3), 1,47 (d, J= 6,9 Hz, 1,5H, CCHCH3) , 1,37-1,22 (m, 3H) , 0,93 (d, J=6,3 Hz, 3H, CH(CH3)2), 0,89 (d, J=6,0 Hz, 3H, CH (CH3) 2) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 22,3, 21,2.
Exemplo 16
Composto 17: preparou-se uma mistura de composto 19 (0,520 g, 0,573 mmol) e paládio a 10% sobre carvão (0,055 g) em etanol (10 mL) e agitou-se em ambiente de hidrogénio (1 atm) durante 2 horas. Adicionou-se celite à mistura de reacção, agitou-se durante 5 min, depois filtrou-se a mistura através de Celite e concentrou-se para se obter uma espuma branca (0,4649 g, 99%). Dissolveu-se o resíduo em DMF anidra (5,0 mL) e a esta solução adicionou-se fenol 727 (0,097 g, 1,03 mmol), diisopropiletilamina (0,36 mL, 2,06 mmol), seguindo-se hexafluorofosfato de benzotriazol-1-iloxitripirroldinofosfónio (0,536 g, 1,03 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 20 horas, depois concentrou-se, dissolveu-se o residuo em EtOAc, lavou-se com 1 N HC1, H20, sat. NaHC03 e salmoura e secou-se (MgS04) . Por concentração e purificação (gel de silica, 2% de MeOH/CH2Cl2) obteve-se uma espuma branca (0,180 g, 35%).
Esquema 4
Reagentes e condições: i.a. HBr a 48%, 120°C, 65%; b. H2, Pd(OH)2, EtOH, 100%; 728 ii. CbzCl, NaOH, tol/H20, 0°C a temperatura ambiente, 43%; b. 22, CsC03, CH3CN, 99%; iii. a. H2, Pd/C, AcOH, EtOAc/EtOH, 95%; b. 24, NaBH(OAc)3, 1,2-DCE, 21%; iv. HF a 4%/CH3CN, 62%.
Exemplo 17
Composto 21: aqueceu-se o composto 20 (11,5 g, 48,1 mmol) em HBr a 48% (150 mL) a 120°C durante 4 horas, depois arrefeceu-se até à temperatura ambiente e diluiu-se com EtOAc. Neutralizou-se a mistura com solução saturada de NaHC03 e NaHC03 sólido e extraiu-se com EtOAc que continha MeOH. Secou-se a fase orgânica (MgSOí) , concentrou-se e purificou-se (gel de sílica, EtOAc/Hex a 1:2 com 1% de MeOH) para se obter um sólido castanho (7,0 g, 65%). Agitou-se o composto resultante (7,0 g, 31,1 mmol) e paládio a 10% hidróxido (2,1 g) em EtOH (310 mL) em ambiente de hidrogénio durante 1 hora, depois filtrou-se através de Celite e concentrou-se para se obter um sólido esbranquiçado (4,42 <3r 100%) . RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ 7,01 (d, J= 7,8 Hz, 1H, Ar), 6,64 (s, 1H, Ar) , 6, 61 (d, J=8,1 Hz, 2H, Ar), 4,07 (s, 2H, ArCH2N) , 4,05 (s, 2H,
ArCH2N) .
Exemplo 18
Composto 22: a uma solução de composto 21 (4,42 g, 32,7 mmol) em NaOH 1,0M (98 mL, 98,25 mmol) a 0°C adicionou-se, gota a gota, cloroformato de benzilo (7,00 L, 49,13 mmol) em tolueno (7 mL) . Depois de se completar a adição, agitou-se a mistura de reacção de um dia para o outro à temperatura ambiente. Diluiu-se a mistura de reacção com 729
EtOAc e extraiu-se com EtOAc (3x). Secou-se a fase orgânica combinada (MgS04), concentrou-se e purificou-se (gel de sílica, 2% de MeOH/CH2Cl2) para se obter um sólido branco (3,786 g, 43%). Dissolveu-se o composto resultante (0,6546 g, 2,43 mmol) em acetonitrilo anidro (10 mL), e adicionou-se composto 23 (0,782 g, 2,92 mmol), seguindo-se carbonato de césio (1,583 g, 4,86 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 2 horas à temperatura ambiente, depois filtrou-se, concentrou-se e purificou-se (3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter um óleo acastanhado (1,01 g, 99%) .
Exemplo 19
Composto 25: a uma solução de composto 22 (0, 100 g, 0,238 mmol) em EtOAc/EtOH (2 mL, 1:1) adicionou-se ácido acético (14 μΕ, 0,238 mmol) e paládio a 10% sobre carvão (0,020 g) e agitou-se a mistura em ambiente de hidrogénio durante 2 horas. Adicionou-se celite à mistura de reacção, agitou-se durante 5 minutos e depois filtrou-se através de Celite. Por concentração e secagem sob vácuo intenso obteve-se uma película avermelhada (0,0777 g, 95%). Agitou-se a amina resultante (0,0777 g, 0,225 mmol) e aldeído 24 (0,126 g, 0,205 mmol) em 1,2-dicloroetano (1,2 mL) durante 5 minutos a 0°C e depois adicionou-se triacetoxiboro-hidreto de sódio (0,0608 g, 0,287 mmol). Agitou-se a mistura de reacção durante 1 hora a 0°C e depois extinguiu-se com solução saturada de NaHCCh e salmoura. Extraiu-se com EtOAc, secou-se a fase orgânica (MgS04) , concentrou-se e purificou-se (gel de sílica, 2% de MeOH/CH2Cl2) para se obter uma espuma castanha (38,7 mg, 21%). ΡΜΝ-1!! (300 MHz, CDC13) : δ 7,74 (d, J=8,7 Hz, 2H, Ar), 7,09 (d, J=8,7 Hz, 1H, Ar), 7,05-6,72 730 (m, 4H, Ar), 5, 71 (d, J=5,l Hz, 1H), 5,22-5,07 (m, 2H) , 4,22· -4,17 (m, 7H) , 4,16-3,69 (m, 9H), 3,82 (s, 3H), 3,25- 2,51 (m, 7H) , 2,22- -1,70 (m, 3H) , 1,37 (t, J= 6,9 Hz, 6H) , 1,10-0,58 (m, 21H) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 19,5.
Exemplo 20
Composto 26: a uma solução de composto 25 (38,7 mg, 0,0438 mmol) em acetonitrilo (0,5 mL) a 0°C adicionou-se HF a 48% (0,02 mL) . Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 2 horas, depois extinguiu-se com solução saturada de NaHC03 e extraiu-se com EtOAc. Separou-se a fase orgânica, secou-se (MgS04), concentrou-se e purificou-se (gel de silica, 3% a 5% de MeOH/CH2Cl2) para se obter uma película vermelha (21,2 mg, 62%) . RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ 7,73 (d, J=8,7 Hz, 2H, Ar), 7,10 (d, J=8,7 Hz, 1H, Ar), 6,97 (d, J=8,70 Hz, 2H) , 6, 90-6, 76 (m, 2H) , 5,72 (d, J=5,1 Hz, 1H), 5,41 (d, J=9,0 Hz, 1H) , 5,15 (q, J= 6,6 Hz, 1H) , 4,38-4,17 (m, 7H) , 4,16-3,65 (m, 9H) , 3,87 (s, 3H) , 3,20-2,82 (m, 7H), 2,75-1, 79 (m, 3H), 1,37 (t, J= 6,9 Hz, 6H) , 0,90 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J=6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δΐ9,3.
Esquema 5 731
Η QH ί ,r νΟ ι^*· η ^^Çj·'' W/ A s 0' * .:’ 'Ι· ^ s* __
O s. 0
O^CÔgiN 35 m
Reagentes e condições: i. Boc20, NaOH, H20, 96%; ii. a. HP(OEt)2r Et3N, (PPh3)4Pd, 90°C; b. TMSBr, CH3CN, 65%; iii. Boc20, NaOH, THF/H20, 89%; iv. PhOH, DCC, pir, 70°C, 71%; v.a. NaOH, CH3CN, 94%; b. lactato de Et, DCC, pir, 70°C, 80%; 732 vi.a. TFA, CH2C12; b. 24, AcOH, NaBH3CN, EtOH, 33%; vii. HF a 4%/CH3CN, 88%; viii. HCOH, AcOH, NaBH3CN, EtOH, 67%; ix. CH3CN, DMSO, PBS, esterase de fígado de suíno, 38°C, 21%.
Exemplo 21
Composto 28: a uma mistura de 4-bromobenzilcloridrato de amina (15,23 g, 68,4 mmol) em H20 (300 mL) adicionou-se hidróxido de sódio (8,21 g, 205,2 mmol), seguindo-se dicarbonato de di-terc-butilo (16,45 g, 75,3 mmol). Agitou-se vigorosamente a mistura de reacção durante 18 horas e depois diluiu-se com EtOAc (500 mL) . Separou-se a fase orgânica e extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (200 mL) . Secou-se a fase orgânica combinada (MgS04) , concentrou-se e secou-se sob vácuo intenso para se obter um sólido branco (18,7 g, 96%). RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ 7,41 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,12 (d, J=8,3 Hz, 2H) , 4,82 (s, 1H, NH) , 4,22 (d, J=6,1 Hz, 2H), 1,41 (s, 9H).
Exemplo 22
Composto 29: submeteu-se o composto 28 (5,00 g, 17,47 mmol) a co-evaporação com tolueno. Adicionou-se fosfito de dietilo (11,3 mL, 87,36 mmol) e submeteu-se a mistura a co-evaporação com tolueno (2x). Adicionou-se trietilamina (24,0 mL, 174,7 mmol), purgou-se a mistura com árgon durante 10 minutos e depois adicionou-se tetraquis(trifenilfosfina)-paládio(0) (4,00 g, 3,49 mmol).
Manteve-se a mistura de reacção ao refluxo durante 18 horas, arrefeceu-se, concentrou-se e diluiu-se com EtOAc. Lavou-se com HC1 0,5N, 0,5 M NaOH, H20, salmoura e secou-se 733 (MgS04) . Por concentração e purificação (gel de silica, 70% de EtOAc/Hex) obteve-se um produto de reacção impuro com o aspecto de um óleo amarelo (6,0 g) . Dissolveu-se este material (6,0 g) em acetonitrilo anidro (30 mL) e arrefeceu-se até 0°C. Adicionou-se bromotrimetilsilano (11,5 mL, 87,4 mmol) e aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente ao longo de 15 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, dissolveu-se em MeOH (50 mL) e agitou-se durante 1,5 horas. Adicionou-se EDO (1 mL) e agitou-se a mistura durante 2 horas. Concentrou-se até à secura, secou-se sob vácuo intenso e depois triturou-se com Et20 que continha 2% de MeOH para se obter um sólido branco (3,06 g, 65%). RMN-1H (300 MHz, D20) : δ 7,67 (dd, J=12,9, 7,6 Hz, 2H) , 7,45-7,35 (m, 2H) , 4,10 (s, 2H) ; RMN-31P (121 MHz, D20) : δ 12,1.
Exemplo 23
Composto 30: dissolveu-se o composto 29 (4,78 g, 17,84 mmol) em H20 (95 mL) que continha hidróxido de sódio (3,57 g, 89,20 mmol). Adicionou-se dicarbonato de di-terc-butilo (7,63 g, 34,94 mmol), seguindo-se THF (25 mL). Agitou-se a mistura de reacção límpida de um dia para o outro à temperatura ambiente e depois concentrou-se até 100 mL. Lavou-se com EtOAc, acidificou-se até pH 1 com HC1 IN e extraiu-se com EtOAc (7x). Secou-se a fase orgânica combinada (MgS04), concentrou-se e secou-se sob vácuo intenso. Por trituração com Et20 obteve-se um pó branco (4,56 g, 89%). RMN-1H (300 MHz, CD3OD) : 0 7,85-7,71 (m, 2H) , 7,39-7,30 (m, 2H) , 4,26 (s, 2H) , 1,46 (s, 9H) ; RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : δ 16, 3. 734
Exemplo 24
Composto 31: submeteu-se o composto 30 (2,96 g, 10,32 mmol) a co-evaporação com piridina anidra (3*10 mL) . A este resíduo adicionou-se fenol (9,71 g, 103,2 mmol) e submeteu-se a mistura a co-evaporação com piridina anidra (2x10 mL). Adicionou-se piridina (50 mL) e aqueceu-se a solução até 70°C. Ao fim de 5 minutos, adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (8,51 g, 41,26 mmol) e agitou-se a mistura resultante durante 8 horas a 70°C. Arrefeceu-se a mistura de reacção, concentrou-se e efectuou-se a co-evaporação com tolueno. Diluiu-se o resíduo obtido com EtOAc e removeu-se por filtração o precipitado resultante. Concentrou-se o filtrado e purificou-se (gel de sílica, 20% a 40% de EtOAc/Hex, outra coluna com 30% a 40% de EtOAc/Hex) para se obter um sólido branco (3,20 g, 71%). RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ 7,90 (dd, J=13,8, 8,2 Hz, 2H) , 7,41-7,10 (m, 14H), 5,17 (s lr, 1H, NH), 4,35 (d, J=5,2 Hz, 2H) , 1,46 (s, 9H) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 11,8.
Exemplo 25
Composto 32: a uma solução de composto 31 (3,73 g, 8,49 mmol) em acetonitrilo (85 mL) a 0°C adicionou-se NaOH 1M (21,2 mL, 21,21 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 30 minutos e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente ao longo de 4 horas. Arrefeceu-se a mistura de reacção até 0°C e adicionou-se resina 'Dowex (H+)' até pH 2. Filtrou-se a mistura, concentrou-se e triturou-se o resíduo, assim obtido, com EtOAc/Hex (1:2) para se obter um pó branco (2,889 g, 94%). Submeteu-se este composto (2,00 g, 5,50 mmol) a co-evaporação com piridina anidra (3x10 mL) . Dissolveu-se o resíduo em piridina anidra (30 mL) e 735 (s)-lactato de etilo (6,24 mL, 55 mmol) e aqueceu-se a mistura de reacção até 70°C. Ao fim de 5 minutos, adicionou-se 1,3-diciclocarbodiimida (4,54 g, 22,0 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 5 horas, depois arrefeceu-se e concentrou-se. Dissolveu-se o resíduo em EtOAc e removeu-se por filtração o precipitado. Concentrou-se o filtrado e purificou-se (25% a 35% de EtOAc/Hex, outra coluna com 40% de EtOAc/Hex) para se obter um óleo incolor (2,02 g, 80%). ΚΜΝ^Η (300 MHz, CDCI3) : δ 7, 96-7,85 (m, 2H) , 7,42-7,35 (m, 2H) , 7,35-7, 08 (m, 4H) , 5,16-5,00 (m, 1H) , 4,93 (s, 1H, NH) , 4,37 (d, J=5,5 Hz, 1H) , 4,21 (q, J=7,3 Hz, 1H) , 4,11 (dq, J=5,7, 2,2 Hz, 1H) , 1,62-1,47 (m, 3H), 1,47 (s, 9H), 1,27 (t, J=7,3 Hz, 1,5H), 1,17 (t, J=7,3 Hz, 1,5H) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 16,1, 15, 0.
Exemplo 26
Composto 33: dissolveu-se o composto 32 (2,02 g, 4,36 mmol) em CH2CI2 (41 mL) e arrefeceu-se até 0°C. A esta solução adicionou-se ácido trifluoroacético (3,5 mL) , agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 1 hora e depois à temperatura ambiente durante 3 horas. Concentrou-se a mistura de reacção, efectuou-se a co-evaporação com EtOAc e diluiu-se com H20 (400 mL) . Neutralizou-se a mistura com resina básica fraca 'Amberlite IRA-67', depois filtrou-se e concentrou-se. Por co-evaporação com MeOH e secagem sob vácuo intenso obteve-se o sal de TFA da amina como um semi-sólido (1,48 g, 94%). A uma solução da amina (1,48 g, 4,07 mmol) em etanol absoluto (20 mL) a 0°C adicionou-se aldeído 24 (1,39 g, 2,26 mmol), seguindo-se ácido acético (0,14 mL, 2,49 mmol). Depois de se agitar durante 5 minutos, adicionou- 736 se ciano-boro-hidreto de sódio (0,284 g, 4,52 mmol) e agitou-se a mistura de reacção durante 30 minutos a 0°C Extinguiu-se a reacção com solução saturada de NaHC03 e diluiu-se com EtOAc e H20. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (3x), secou-se a fase orgânica combinada (MgSCt), concentrou-se e purificou-se (gel de silica, 2% a 4% de MeOH/CH2Cl2) para se obter uma espuma branca (0,727 g, 33%). ΚΜΝ^Η (300 MHz, CDC13) : 0 7,98-7,86 (m, 2H) , 7,71 (d, J=8,6 Hz, 2H), 7,49 (s lr, 2H) , 7,38-7,05 (m, 5H) , 6,98 (d, J= 8,8 Hz, 2H) , 5,72 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,28-5, 00 (m, 2H) , 4,30-3,72 (m, 12H), 3,42-3, 58 (m, 1H) , 3,20-2, 68 (m, 7H), 2,25-1,42 (m, 6H), 1,26 (t, J=1,2 Hz, 1,5H), 1,17 (t, J=7,2 Hz, 1, 5H) , 1,08-0,50 (m, 21H) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 16,1, 15,1.
Exemplo 27
Composto 34: a uma solução de composto 33 (0, 727 g, 0,756 mmol) em acetonitrilo (7,6 mL) a 0°C adicionou-se ácido fluoridrico a 48% (0,152 mL,) agitou-se a mistura de reacção durante 40 minutos a 0°C e depois diluiu-se com EtOAc e H20. Adicionou-se NaHC03 saturado e extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (2x). Secou-se a fase orgânica combinada (MgS04), concentrou-se e purificou-se (gel de silica, 4% a 5% de MeOH/CH2Cl2) para se obter uma espuma incolor (0,5655 g, 88%). RMN-1H (300 MHz, CDC13) : δ7,95-7,82 (m, 2H), 7,67 (d, J=8,lHz, 2H), 7,41 (s lr, 2H) , 7,38-7,05 (m, 5H) , 6,95 (d, J=7,2 Hz, 2H) , 5,76 (d, J=7,9 Hz, 1H) , 5,67 (d, J=5,0 Hz, 1H) , 5,32-4,98 (m, 2H) , 4,25-3,75 (m, 13H), 3,25-2,70 (m, 7H), 2,15-1,76 (m, 3H) , 1,53-1,41 (m, 3H) , 1,25-1, 08 (m, 3H) , 0,87 (d, J=4,2 Hz, 6H) ; RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δίβ,Ι, 15,0. 737
Exemplo 28
Composto 35: a uma solução de composto 33 (0,560 g, 0,660 mmol) em etanol absoluto (13 mL) a 0°C adicionou-se formaldeído a 37% (0,54 mL, 6,60 mmol), seguindo-se ácido acético (0,378 mL, 6,60 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 0°C durante 5 minutos e depois adicionou-se ciano-boro-hidreto de sódio (0,415 g, 6,60 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até à temperatura ambiente ao longo de 2 horas e depois extinguiu-se com Solução saturada de NaHCCh. Adicionou-se EtOAc e lavou-se a mistura com salmoura. Extraiu-se a fase aquosa com EtOAc (2x), secou-se a fase orgânica combinada (MgS04) , concentrou-se e purificou-se (gel de silica, 3% de MeOH/CH2Cl2) para se obter uma espuma branca (0,384 g, 67%). RMN-1H (300 MHz, CDC1 3) : δ 7 ,95- 7,82 (m, 2H), 7, 71 (d, J=8,4 Hz , 2H) , 7, 38 (s lr, 2H), ' 7,34· -7,10 (m, , 5H) , 6, 98 (d, J=8 ,8 Hz, 2H), 5,72 (d, J= 5, 0 Hz, 1H) , 5 ,50 (s lr, 1H), 5, 19- 5, 01 (m, 2H), 4,29 -3,75 (m, 10H) , 3, 85 (s, 3H) , 3,35-2, 70 (m, 7H) , 2,23 (s, 3H) , 2 b 17- -1,79 (m, 3H), 1 ,54 (d, J=6,! 9 Hz, 1, 5H), 1,48 (d, J=6, 8 Hz, 1,5H), 1,25 (t J= =7,2 Hz, 1, 5H), 1,1' 6 (t, J=v, 2 Hz, 1,5H), 0, 92 (d, J= 6, 6 Hz , 3H), 0 ,87 (d, J=6, 6 Hz, 3H) .RMN-31P (121 MHz, CDC13) : δ 16,0, 14,8.
Exemplo 29
Composto 36: a uma solução de composto 35 (44 mg, 0,045 mmol) em acetonitrilo (1,0 mL) e DMSO (0,5 mL) adicionou-se soluto salino tamponado com fosfato (pH 7,4, 5,0 mL) para se obter uma suspensão branca turva. Adicionou-se esterase do fígado de suíno (200 μΗ) e agitou-se a mistura de reacção durante 48 horas a 38°C. Adicionou-se mais esterase 738 (600 mL) e a reacção prosseguiu durante 4 d. Concentrou-se a mistura de reacção, diluiu-se com MeOH e removeu-se por filtração o precipitado resultante. Concentrou-se o filtrado e purificou-se por HPLC de fase inversa para se obter um pó branco, após a liofilização (7,2 mg, 21%). RMN-3H (300 MHz, CD3OD) : δ 7,95 (s lr, 2H) , 7,76 (d, J=8,4 Hz, 2H) , 7,64 (s lr, 2H) , 7,13 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 5,68 (d, J=5,l Hz, 1H), 5,14 (s lr, 1H), 4,77 (S lr, 1H), 4,35-3,59 (m, 8H), 3,89 (s, 3H) , 3, 45-2, 62 (m, 10H) , 2,36-1,86 (m, 3H) , 1,44 (d, J= 6,3 Hz, 3H) , 0,92 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,84 (d, J= 6,6 Hz, 3H) ; RMN-31P (121 MHz, CD3OD) : δ 13,8.
Secção W de exemplos
Esquema 1
SS19S772 739 740 Esquema 2
ΓΛ
\ J
O 1tPGC Piridina > 70°Ç
741 741 Esquema 3
(1) TFÂ, CHgClg {2} TEA,^í/^M-SOsCS
Pd/C^H^r.t EíOAc, 2-propa.nol
742 Esquema 4
Γΐΐ Dibeiizildiisopiopil-fosforniniilite 1H-tetrazol, i.t. (2) lodobenzenodiacetato
(1) PÚ /G,Hg EtON/EtOAc {2} NaHCOa, í%0
12 743 Esquema 5
iíf Dibenzilililsopiopil-fosfei arnidite IH-tetrazol. r.t. (2) lodobenzeiiodiacetato
(1)Pd/CtH2
(2) NáHCOg, HgO
Exemplo 1
Monofosfolactato 2: preparou-se uma solução de 1 (0,11 g, 0,15 mmol) e (S)-éster etílico do ácido a-hidroxi-isovalérico (71 mg, 0,49 mmol) em piridina (2 mL), aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,10 g, 0,49 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Preparou-se uma suspensão do resíduo em EtOAc e removeu-se por filtração a 1,3-diciclo-hexil-ureia. Repartiu-se o produto entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e 744
NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de silica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (35 mg, 28%, GS 192771, mistura diastereomérica a 1/1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7,71 (d, J= 8,7 Hz, 2H) , 7,36- 7,14 (m, 7H) , 6,99 (d, J=8, 7 Hz, 2H), 6, 94- 6,84 (dd, 2H) , 5, 65 (d, J= 5, 4 Hz, 1H), 5,00-4,85 (m, 3H) , LO LO (dd, 1H) , 4,41 (dd, , 1H) , 4,22- -4,07 (m, 2H) , 3,96 -3, 68 (m, 9H), 3,12· -2,74 (m, 7H) , 2,29 (m, 1H), . 1,85- -1,57 (m, 3H) , 1,24 (m, 3H) , 1, 05 (d, J=6, 6 Hz, 3H), 0, 98 (d, J= 6, 6 Hz, 3H) , 0,9 (: m, 6H) ; RMN-31P (CDC13 ) δ 17,7, 15,1.
Exemplo 2
Monofosfolactato 3: preparou-se uma solução de 1 (0,11 g, 0,15 mmol) e (R)-éster etílico do ácido a-hidroxi-isovalérico (71 mg, 0,49 mmol) em piridina (2 mL), aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,10 g, 0,49 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Preparou-se uma suspensão do resíduo em EtOAc e removeu-se por filtração a 1,3-diciclo-hexil-ureia. Repartiu-se o produto entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (35 mg, 28%, GS 192772, mistura diastereomérica a 1/1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDC13) δ 7,71 (d, J= 8,7 Hz, 2H), 7,35-7,13 (m, 7H) , 6,98 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,93- 745 6,83 (dd, 2H) , 5,64 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5, 04-4,85 (m, 3H) , 4,54 (dd, 1H), 4,39 (dd, 1H), 4,21-4,06 (m, 2H), 3,97-3,67 (m, 9H), 3,12-2,75 (m, 7H) , 2,27 (m, 1H) , 1,83-1,57 (m, 3H) , 1,26 (m, 3H) , 1,05 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,98 (d, J=6,6 Hz, 3H) , 0,9 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 17,7, 15,1.
Exemplo 3
Monofosfolactato 4: preparou-se uma solução de 1 (0,10 g, 0,13 mmol) e 2,2-dimetil-3-hidroxipropionato de metilo (56 μίν 0,44 mmol) em piridina (1 mL) e aqueceu-se até 70°C e 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (91 mg, 0,44 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Preparou-se uma suspensão do resíduo em EtOAc e removeu-se por filtração a 1,3-diciclo-hexil-ureia. Repartiu-se o produto entre EtOAc e HC1 0,2N. Lavou-se a fase de EtOAc com HC1 0,2N, H20 e NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (72 mg, 62%, GS 191484) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) 0 7,71 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 7,34 (m, 2H), 7,25-7,14 (m, 5H) , 7,00 (d, J=9,0 Hz, 2H) , 6,87 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H) , 5,05 (m, 2H) , 4,38 (d, J= 9,6 Hz, 2H) , 4,32-4,20 (m, 2H) , 4,00 (m, 2H) , 3,87-3, 63 (m, 12H), 3,12-2,78 (m, 7H) , 1,85-1, 67 (m, 3H) , 1,20 (m, 6H), 0,91 (d, J= 6,6 Hz, 3H) , 0,88 (d, J= 6,6
Hz, 3H) ; RMN-31P (CDC13) δ 16,0.
Exemplo 4 746
Lactato 5: a uma suspensão de sal sódico do ácido láctico (5 g, 44,6 mmol) em 2-propanol (60 mL) adicionou-se cloridrato de 4-(3-cloropropil)-morfolina (8,30 g, 44,6 mmol). Aqueceu-se a mistura de reacção até ao refluxo durante 18 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Filtrou-se o sólido e deixou-se o filtrado recristalizar a partir de EtOAc/hexano para se obter o lactato (1,2 g, 12%) .
Exemplo 5
Monofosfolactato 6: preparou-se uma solução de 1 (0,10 g, 0,13 mmol) e lactato 5 (0,10 g, 0,48 mmol) em piridina (2 mL), aqueceu-se até 70°C e adicionou-se 1,3-diciclo-hexilcarbodiimida (0,10 g, 0,49 mmol). Agitou-se a mistura de reacção a 70°C durante 2 horas e arrefeceu-se até à temperatura ambiente. Removeu-se o solvente sob pressão reduzida. Preparou-se uma suspensão do resíduo em EtOAc e removeu-se por filtração a 1,3-diciclo-hexil-ureia. Repartiu-se o produto entre EtOAc e H20. Lavou-se a fase de EtOAc com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (4% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o monofosfolactato (30 mg, 24%, GS 192781, mistura diastereomérica a 1/1) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1H (CDCI3) δ 7,71 (d, J=8,7
Hz, 2H) , GO co 7,15 (m, 7H) , 7,00 (d, J= Γ ΟΟ) Hz, 2H) , 6,91 (m, 2H) , 5, 65 (d, J=3, 3Hz, 1H), 5,18 -4, , 98 (m, 3H) , 4,54 (dd, 1H) , 4,42 (dd , 1H) , 4,2 (m, 2H) , 4, . 00- 3, 67 (m, 16H), 3,13 -2,77 (m, 7H), 2,4 (m, 5H) , 1, 85-1 ,5 (m, 5H) , 1, 25 (m, 2H) , 0,93 (d, J=6, 6 Hz, 3H), 0,88 (d, J= =6,6 Hz, 3H) ; RMN- 31P (CDCI3) δ 17,4, 15,4. 747
Exemplo 6
Sulfonamida 8: preparou-se uma solução de dibenzil-fosfonato 7 (0,1 g, 0,13 mmol) em CH2C12 (0,5 mL) a 0°C e tratou-se com ácido trifluoroacético (0,25 mL). Agitou-se a solução durante 30 minutos a 0°C e depois aqueceu-se até à temperatura ambiente durante mais 30 minutos. Diluiu-se a mistura de reacção com tolueno e concentrou-se sob pressão reduzida. Submeteu-se o resíduo a co-evaporação com tolueno (2x) e clorofórmio (2x) e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o sal triflato de amónio que se dissolveu em CH2C12 (1 mL) e se arrefeceu até 0°C. Adicionou-se trietilamina (72 μΐ, 0,52 mmol), seguindo-se o tratamento com 4-metilpiperazinilcloreto de sulfonilo (25 mg, 0,13 mmol). Agitou-se a solução durante 1 hora a 0°C e repartiu-se o produto entre CH2C12 e H20. Lavou-se a fase orgânica com NaCl saturado, secou-se com Na2S04, filtrou-se e evaporou-se sob pressão reduzida. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (5% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter a sulfonamida 8 (32 mg, 30%, GS 273835) com o aspecto de um sólido branco: <1> HRMN (CDC13) Ô 7,35 (m, 10H) , 7,11 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 6,81 (d, J=8,7 Hz, 2H) , 5,65 (d, J=5,4 Hz, 1H), 5,2-4,91 (m, 4H) , 4,2 (d, J=10,2 Hz, 2H) , 4,0-3,69 (m, 6H), 3,4-3,19 (m, 5H) , 3,07-2,75 (m, 5H) , 2,45 (m, 4H) , 2,3 (s, 3H) , 1,89-1,44 (m, 7H) , 0,93 (m, 6H) ; RMN-31P (CDC13) δ 20,3.
Exemplo 7 Ácido fosfónico 9: a uma solução de 8 (20 mg, 0,02 mmol) em EtOAc (2 mL) e 2-propanol (0,2 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (5 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão), à 748 temperatura ambiente, de um dia para o outro. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico (10 mg, 64%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 8
Dibenzil-fosfonato 11: preparou-se uma solução de 10 (85 mg, 0,15 mmol) e lH-tetrazole (14 mg, 0,20 mmol) em CH2CI2 (2 mL), tratou-se com dibenzildiisopropilfosforamidita (60 μ]1, 0,20 mmol) e agitou-se à temperatura ambiente de um dia para o outro. Repartiu-se o produto entre CH2CI2 e H2O, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna para se obter o intermediário fosfito de dibenzilo (85 mg, 0,11 mmol) que se dissolveu em CH3CN (2 mL) e se tratou com iodobenzenodiacetato (51 mg, 0,16 mmol). Agitou-se a mistura de reacção à temperatura ambiente durante 3 horas e concentrou-se. Repartiu-se o resíduo entre EtOAc e NaHC03, Lavou-se a fase orgânica com H20, secou-se com Na2S04, filtrou-se e concentrou-se. Purificou-se o produto impuro por cromatografia em coluna através de gel de sílica (3% de 2-propanol/CH2Cl2) para se obter o dibenzil-fosfonato (45 mg, 52%) com o aspecto de um sólido branco.
Exemplo 9
Sal dissódico do ácido fosfónico 12: a uma solução de 11 (25 mg, 0,03 mmol) em EtOAc (2 mL) adicionou-se Pd a 10%/C (10 mg) . Agitou-se a suspensão em ambiente de H2 (balão) , à temperatura ambiente, durante 4 horas. Filtrou-se a mistura de reacção através de uma camada de celite. Concentrou-se o 749 filtrado e secou-se sob uma pressão hipobárica para se obter o ácido fosfónico que se dissolveu em H20 (1 mL) e se tratou com NaHC03 (2,53 mg, 0,06 mmol). Agitou-se a mistura de reacçâo à temperatura ambiente durante 1 hora e liofilizou-se de um dia para o outro para se obter o sal dissódico de ácido fosfónico (19,77 mg, 95%, GS 273777) com o aspecto de um sólido branco: RMN-1]! (CD3OD) δ 7,81 (d, J=9,0 Hz, 2H), 7,35 (d, J=-8,1 Hz, 2H), 7,27-7,09 (m, 5H), 5,57 (d, J=5,l Hz, 1H) , 5,07 (m, 1H) , 4,87-4,40 (m, 3H) , 3,93-3,62 (m, 6H), 3,45-2,6 (m, 6H), 2,0 (m, 2H), 1,55 (m, 1H), 0,95-0,84 (m, 6H) .
Ensaios biológicos utilizados para a caracterização de pró-
fármacos PI
Ensaio de enzima protease de VIH-1 (Ki) 0 ensaio baseia-se na detecção fluorimétrica da clivagem do substrato hexapeptidico sintético pela protease de VIH-1 num determinado tampão de reacção, conforme inicialmente descrito por M.V. Toth e G.R. Marshall, Int. J. Peptide Protein Res. 36, 544 (1990).
Substrato: (2-aminobenzoil)-Thr-Ile-Nle-(p-nitro)-Phe-Gln-Arg. Substrato fornecido por Bachem Califórnia, Inc. (Torrance, Calif.; n° H-2992 de catálogo).
Enzima: protease recombinante de VIH-1 expressa em E. Coli. Enzima fornecida por Bachem Califórnia, Inc. (Torrance, Calif.; n° H-9040 de catálogo).
Tampão de reacção: acetato de amónio 100 mM, pH 5,3
cloreto de sódio 1 M
ácido etilenodiaminatetracético 1 mM 750
ditiotreitol 1 mM 10% de dimetilsulfóxido.
Protocolo de ensaio para a determinação da constante de inibição Ki 1. Preparar uma série de soluções que contenham uma quantidade semelhante da enzima (1 nM a 2,5 nM) e um inibidor testado em concentrações diferentes no tampão de reacção. 2. Transferir as soluções (190 μΐ; de cada) para uma placa vazia de 96 cavidades. 3. Pré-incubar durante 15 minutos a 37°C. 4. Solubilizar o substrato em dimetilsulfóxido a 100% numa concentração de 800 μΜ. Dar inicio à reacção por adição de 10 μ]4 de substrato 800 μΜ a cada cavidade (concentração final de substrato de 40 μΜ). 5. Medir a cinética da reacção em tempo real a 37°C, utilizando um fluorimetro com placa de 96 cavidades 'Gemini' (Molecular Devices, Sunnyvale, Calif.) a λ(Εχ) = 330 nm e λ(Em) = 420 nm. 6. Determinar as velocidades iniciais das reacções com diferentes concentrações de inibidor e calcular o valor de Ki (em unidades picomolar de concentração), utilizando o programa 'EnzFitter' (Biosoft, Cambridge, U.K.) de acordo com um algoritmo para inibição competitiva de ligação forte descrito por Ermolieff J., Lin X., e Tang J., Biochemistry 36, 12364 (1997).
Ensaio de anti-VIH-1 em cultura de células (CE5q) 751 0 ensaio baseia-se na quantificação do efeito citopático associado a VIH-1 por detecção calorimétrica da viabilidade de células infectadas com virus na presença ou na ausência de inibidores testados. Determina-se a morte celular induzida por VIH-1, utilizando um substrato metabólico de 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil) -2H-tetrazólio-5-carboxanilida (XTT) que é convertido, apenas pelas células intactas, num produto com caracteristicas de absorção especificas, conforme descrito por Weislow O.S., Kiser R., Fine D.L., Bader J., Shoemaker R.H. e Boyd M.R., J. Natl. Câncer Inst. 81, 577 (1989).
Protocolo de ensaio para a determinação de CEso 1. Manter células MT2 em meio RPMI-1640 enriquecido com 5% de soro de bovino fetal e antibióticos. 2. Infectar as células com a estirpe de tipo natural VIH-1 IIIB (Advanced Biotechnologies, Columbia, Md.) durante 3 horas a 37°C, utilizando o inoculo virai correspondente a uma multiplicidade de infecção de 0,01. 3. Preparar um conjunto de soluções que contenham diversas concentrações do inibidor testado, fazendo diluições quíntuplas sequenciais numa placa de 96 cavidades (100 μL/cavidade). Distribuir as células infectadas pela placa de 96 cavidades (20000 células à razão de 100 μΐΐ/οθνίάοάβ) . Incluir amostras com células infectadas e não tratadas e células de contraprova pseudo-infectadas e não tratadas. 4. Manter as células a incubar durante 5 dias a 37°C. 5. Preparar uma solução de XTT (6 mL por placa de ensaio) numa concentração de 2 mg/mL em soluto salino tamponado com fosfato a pH 7,4. Aquecer a solução em banho 752 de água durante 5 minutos a 55°C. Adicionar 50 μ]0 de metassulfato de N-metilfenazónio (5 μς/πΛ) por cada 6 mL de solução de XTT. 6. Remover 100 μΐϋ de meio de cada cavidade da placa de ensaio. 7. Adicionar 100 μΐί da solução de substrato de XTT por cavidade e manter a incubar a 37°C durante 45 a 60 minutos numa incubador em ambiente de CO2. 8. Adicionar 20 μμ de Triton X-100 a 2% por cavidade para inactivar o virus. 9. Efectuar a leitura da absorvência a 450 nm, subtraindo a absorvência de referência a 650 nm. 10. Construir um gráfico da absorvência percentual em relação à contraprova não tratada e calcular o valor CE50 enquanto concentração de fármaco que dá origem a 50% de protecção das células infectadas.
Ensaio de citotoxicidade em cultura de células (CC50) O ensaio baseia-se na avaliação do efeito citotóxico dos compostos testados, utilizando um substrato metabólico de 2,3-bis(2-metoxi-4-nitro-5-sulfofenil)-2H-tetrazólio-5-carboxanilida (XTT), conforme descrito por Weislow O.S., Kiser R., Fine D.L., Bader J., Shoemaker R.H. e Boyd M.R., J. Natl. Câncer Inst. 81, 577 (1989).
Protocolo de ensaio para a determinação de CC50 1. Manter células MT-2 em meio RPMI-1640 enriquecido com 5% de soro de bovino fetal e antibióticos. 2. Preparar um conjunto de soluções que contenham diversas concentrações do inibidor testado, fazendo 753 diluições quíntuplas sequenciais numa placa de 96 cavidades (100 μL/cavidade). Distribuir as células infectadas pela placa de 96 cavidades (20000 células à razão de 100 μL/cavidade). Incluir amostras com células infectadas e não tratadas e células de contraprova pseudo-infectadas e não tratadas. 3. Manter as células a incubar durante 5 dias a 37°C. 4. Preparar uma solução de XTT (6 mL por placa de ensaio), na ausência de luz, numa concentração de 2 mg/mL em soluto salino tamponado com fosfato a pH 7,4. Aquecer a solução em banho de água durante 5 minutos a 55°C.
Adicionar 50 μΡ de metassulfato de N-metilfenazónio (5 μg/mL) por cada 6 mL de solução de XTT. 5. Remover 100 μί de meio de cada cavidade da placa de ensaio e adicionar 100 μL da solução de substrato de XTT por cavidade. Manter a incubar a 37°C durante 45 a 60 minutos numa incubador em ambiente de C02. 6. Adicionar 20 μL de Triton X-100 a 2% por cavidade para interromper a conversão metabólica de XTT. 7. Efectuar a leitura da absorvência a 450 nm, subtraindo a absorvência de referência a 650 nm. 8. Construir um gráfico da absorvência percentual em relação à contraprova não tratada e calcular o valor CC50 enquanto concentração de fármaco que dá origem a 50% de inibição do crescimento celular. Considerar a absorvência como sendo directamente proporcional ao crescimento celular.
Avaliação da resistência (diferença entre I50V e I84V/L90M) 754 0 ensaio baseia-se na determinação de uma diferença na susceptibilidade a um inibidor particular da protease do VIH entre a estirpe de tipo natural de VIH-1 e uma estirpe mutante de VIH-1 que contém mutações associadas à resistência a um fármaco especifico no gene de protease virai. A susceptibilidade absoluta de cada virus (CE50) a um determinado composto testado é medida utilizando o ensaio citopático à base de XTT, tal como descrito antes. 0 grau de resistência a um composto testado é calculado sob a forma de quantidade da diferença no valor de CE50 entre o vírus de tipo natural e o vírus mutante específico. Esta é uma metodologia convencional para a avaliação da resistência do VIH aos fármacos, conforme documentado em diversas publicações (v.g., Maguire et al.r Antimicrob. Agents Chemother. 46: 731, 2002; Gong et al., Antimicrob. Agents Chemother. 44: 2319, 2000; Vandamme e De Clercq, em Antiviral Therapy (Ed. E. De Clercq), pp. 243, ASM Press, Washington, D.C, 2001).
Estirpes de VIH-1 utilizadas para avaliação da resistência Nos ensaios de resistência, foram utilizadas duas estirpes de virus mutantes que contêm mutações de I50V no gene de protease: uma com mutações M46I/I47V/I50V (designada por I50V n°l) e a outra com mutações L10I/M46I/I50V (designada por I50V n2) no gene de protease virai. Nos ensaios de resistência também foi utilizado um terceiro vírus com mutações I84V/L90M. Os mutantes I50V n° 1 e I84V/L90M foram construídos por recombinação homóloga entre três fragmentos de ADN sobrepostos: 1. plasmídeo linearizado que contém ADN pró-viral de VIH-1 de tipo natural (estirpe HXB2D) com supressão dos genes da protease 755 e da transcriptase reversa, 2. fragmento de ADN, gerado por amplificação por PCR, que contém o gene da transcriptase reversa da estirpe HXB2D (de tipo natural), 3. fragmento de ADN com gene de protease virai mutado, o qual foi gerado por amplificação por PCR. Utilizou-se uma metodologia semelhante à descrita por Shi e Mellors em 'Antimicrob. Agents Chemother.' 41:2781-85, 1997, para a construção de virus mutantes a partir dos fragmentos de ADN gerados. Introduziu-se a mistura de fragmentos de ADN em células Sup-Tl utilizando uma técnica de electroporação convencional. Criou-se as células em cultura em meio RPMI-1640, enriquecido com 10% de soro de bovino fetal e antibióticos, até o virus recombinante emergir (normalmente, 10 a 15 dias após a electroporação) . Recolheu-se o sobrenadante da cultura celular que continha o virus recombinante e guardou-se em aliquotas. Após a verificação da sequência do gene de protease e a determinação da concentração de virus infeccioso, utilizou-se a reserva virai em estudos de resistência a fármacos. O mutante I50V n° 2 é uma estirpe de VIH-1 resistente a amprenavir seleccionada in vitro a partir da estirpe IIIB de tipo natural na presença de uma concentração crescente de amprenavir ao longo de um periodo > 9 meses, utilizando uma metodologia semelhante à descrita por Partaledis et al., J. Virol. 69: 5228-5235, 1995. Recolheu-se os virus com capacidade para crescer na presença de amprenavir 5 μΜ a partir do sobrenadante de células infectadas e utilizou-se em ensaios de resistência, após a titulação e a sequenciação do gene de protease.
Secção X de exemplos 756
Actividade dos compostos testados
No quadro 1 estão indicadas, resumidamente, a potência inibitória da enzima (Ki), a actividade antiviral (CE50) e a citotoxicidade (CC50) dos compostos testados.
Quadro 1: potência inibitória da enzima (Ki), actividade antiviral (CE50) e citotoxicidade (CC50) dos compostos testados
Subst. de fenilo (Pl) Composto Substituiç ão de fosfonato Inibição de protease de VIH-1 Ki [pM] Actividade anti-VIH-1 em cultura celular CE50 [nM] Cito-toxicida de CC50 [μΜ] nenhum Amprenav ir nenhum 45,6 ± 18,2 16 ± 2,2 nenhum 94-003 nenhum 1,46 ± 0,58 1,4 ± 0,3 fosfoni 1 27 diácido 11,8 + 6,0 >100000 >100 28 dietil 1,2 ± 0,8 5,0 ± 2,8 70 fosfoni 1 metoxi 11 diácido 2,1 + 0,2 4,800 + 1,800 >100 13 dietil 2,6 ± 1,5 3,0 ± 0 50 757 14 dibenzil 12,7 ± 1,9 2,3 ± 0,4 35 16c bis(Ala-éster etílico) 15,4 ± 0,85 105 ± 43 60 16d bis(Ala-éster butílico) 18,75 + 3,04 6,0 + 1,4 16e bis(ABA- éster etílico) 8,8 ± 1,7 12,5 ± 3,5 16f bis(ABA-éster butílico) 3,5 ± 1,4 4,8 ± 1,8 16a bis (Gly-éster etílico) 29 ± 8,2 330 ± 230 16b bis(Gly- éster butílico) 4,9 ± 1,8 17,5 ± 10,5 16g bis(Leu-éster etílico) 29 ± 9 6,8 ± 0,4 16h bis(Leu-éster butílico) 31,7 ± 19,3 120 ± 42 16i bis(Phe-éster etílico) 17 + 12 16 j bis(Phe-éster butílico) 35 ± 7 15 bis (POC) 36 825 ± 106 11 Monoetil, monoácido 0,45 ± 0,15 700 ± 0 758
Ensaio do perfil de resistência cruzada 0 ensaio baseia-se na determinação de uma diferença na susceptibilidade a um determinado inibidor da protease do VIH entre a estirpe de VIH-1 de tipo natural e uma estirpe recombinante de VIH-1 que exprime mutações associadas a resistência a um fármaco especifico no gene da protease virai. A susceptibilidade absoluta de cada virus a um determinado composto testado é medida utilizando o ensaio citopático à base de XTT, tal como descrito no exemplo B. 0 grau de resistência a um composto testado é calculado sob a forma de quantidade da diferença no valor de CE50 entre o virus de tipo natural e o virus mutante especifico.
Estirpes de VIH-1 recombinante com mutações de resistência no gene de protease
Houve um virus mutante (82T/84V) que foi fornecido por 'NIH AIDS Research e Reference Reagent Program' (Rockville, Md.). A maior parte das estirpes de VIH-1 mutante foram construídas por recombinação homóloga entre três fragmentos de ADN sobrepostos: 1. plasmideo linearizado que contém ADN pró-viral de VIH-1 de tipo natural (estirpe HXB2D) com supressão dos genes da protease e da transcriptase reversa, 2. fragmento de ADN, gerado por amplificação por PCR, que contém o gene da transcriptase reversa da estirpe HXB2D (de tipo natural), 3. fragmento de ADN, gerado por amplificação por RT-PCR, proveniente de amostras do plasma de pacientes que continham gene de protease virai com mutações especificas seleccionadas durante a terapia anti-retroviral com diversos inibidores de proteases. Foram construídas mais estirpes de VIH-1 mutante por meio de um procedimento 759 modificado que se baseia na recombinação homóloga apenas de dois fragmentos de ADN sobrepostos: 1. plasmideo linearizado que contém ADN pró-viral de VIH-1 de tipo natural (estirpe HXB2D) com supressão apenas do gene da protease e 2. fragmento de ADN, gerado por amplificação por RT-PCR, proveniente de amostras do plasma de pacientes que continham gene de protease virai com mutações especificas. Nos dois casos, introduziu-se a mistura de fragmentos de ADN em células Sup-Tl utilizando uma técnica de eletroporação convencional. Criou-se as células em cultura em meio RPMI-1640, enriquecido com 10% de soro de bovino fetal e antibióticos, até o virus recombinante emergir (normalmente, 10 a 15 dias após a electroporação). Recolheu-se o sobrenadante da cultura celular que continha o virus recombinante e guardou-se em aliquotas. Após a determinação da concentração de virus, utilizou-se a reserva virai em estudos de resistência a fármacos.
Perfil de resistência cruzada dos compostos testados
Efectuou-se a comparação entre o perfil de resistência cruzada dos inibidores de protease de VIH-1 actualmente utilizados e o dos compostos da presente invenção (Quadro 2) .
Quadro 2. Perfil de resistência cruzada dos inibidores de protease de VIH-1 760
Composto CEM [nM] HIV-I TN Difeienç» em CE50 em lelaçao * HIV-I TN 3K* m SOfii 481 101 4SV 54V 92A 461 47V SQV 10R 461 82T m 30N çíjS 82I 38D S4V 71V 925 1ftF m 71V m 90M 1« 4ev 71V S2A 90M m «V 71V 623 m «4V 71V 73S 01)M Ntetal de vírus resistentes £ Amprenavlr 20 1.25 14 a 33 4 0.8 4 n 2.5 2 10 4 Nsltnavir 14 13 11 11.5 2 8 43 12 33 27 12 65 9 Indmwir is 4 10 16 nd 7 1 10 n 23 22 43 8 ffltenavir 15 34 13 20 13 47 2 20 as 22 >53 42 10 4 1 2.5 11 1 2.5 1 2, 25 12 45 43 4 Lopinavlr 8 nd ftd 19 11 nd nd 7.6 4.S 11 6 Ttrafiíivlf SG nd 1 0.4 v.ç 5 0.5 as 3 0,3 2 IHÍ 1 94*002 0.5 nd A 0.5 23 nd 0.4 3.5 nd nd nd 3 * GS 13503 15 1.2 1 0.4 23 1 0.6 0.9 1 04 0.5. 2 0 GS 18671 2a 1,3 1 0,3 0.8 o.e 0.7 oe 0.3 0.2 Q2 0,9 0 0818937 ts 15 t 0.5 2 1 1 iU 1 0.4 ÒÁ 1 0 * Mutaçoe? aseociadjs i resistência presenftee na piotea&e wiral. As difetsnçAS evidenciadas representam mutaçães de resistência pririãiia. ^ Consideiase coito resistência uma cSferença ζ ou maie vezes supsiior no valoi CEÍO do vírus mutanto en l elaçao ao uirue deti|x> natural.
Secção Y de exemplos
Exposição de plasma e PBMC após a administração intravenosa e oral de pró-fármaco a cães beagle
Estudou-se a farmacocinética de um pró-fármaco de pró-fármaco de fosfonato GS77366 (Pl-monoLac-iPr), do seu metabolito activo (metabolito X ou GS77568) e de GS8373 em cães, após a administração intravenosa e oral do pró-fármaco .
Administração de doses e recolha de amostras A fase em vida do presente estudo foi realizada de acordo com a lei de protecção dos animais da USDA (USDA Animal Welfare Act) e a política do serviço de saúde pública quanto ao tratamento e à utilização de animais de laboratório, em conformidade com os padrões respeitantes à criação e ao tratamento de animais descritos em 'Guide for the Care e Use of Laboratory Animais', 7a edição, revista em 1996. Todas as operações de alojamento e procedimentos de estudo dos animais foram realizadas em instalações acreditadas pela 'Association for Assessment e 761
Accreditation of Laboratory Animal Care-International' (AAALAC).
Administrou-se a cada animal de um grupo de 4 cães beagle (fêmeas) uma dose em ampola grande de GS77366 (Pl — monoLac-iPr), por via intravenosa, à razão de 1 mg/kg numa formulação que continha PEG 300 a 40%, propileno-glicol a 20% e 40% de dextrose a 5%. A outro grupo de 4 cães beagle (fêmeas) administrou-se uma dose de GS77366, por sonda gástrica, à razão de 20 mg/kg numa formulação que continha Vitamina E TPGS 60%, PEG 400 a 30% e propileno-glicol a 10%.
Efectuou-se a colheita de amostras sanguíneas pré-dose e ao fim de 5 minutos, 15 minutos, 30 minutos, 1 hora, 2 horas, 4 horas, 8 horas, 12 horas e 24 horas pós-dose. Preparou-se plasma (0,5 mL a 1 mL) a partir de cada amostra e manteve-se a -70°C até à análise. Também se efectuou a colheita de amostras sanguíneas (8 mL) a partir de cada cão ao fim de 2, 8 e 24 horas pós-dose em tubos 'vacutainer' 'Becton-Dickinson CPT' . Isolou-se os PBMC do sangue por centrifugação durante 15 minutos entre 1500 e 1800 G. Após a centrifugação, transferiu-se a fracção que continha os PBMC para um tubo de centrifugação cónico de 15 mL e lavou-se os PBMC duas vezes com soluto salino tamponado com fosfato (PBS) sem Ca2+ e Mg2+. O produto resultante da lavagem final do agregado celular foi mantido a -70°C até à análise.
Medição do pró-fármaco, do metabolito X e de GS8373 no plasma e PBMC
Para a análise do plasma, processou-se as amostras por um procedimento de extracção em fase sólida (SPE), adiante 762 descrito. Foram utilizados cartuchos de extracção em fase sólida 'Speedisk C18' (1 mL, 20 mg, 10 μΜ, fornecidos por J.T. Baker) e acondicionados com 200 μΒ de metanol e depois com 200 μΒ de água. Aplicou-se uma aliquota de 200 μΒ de amostra de plasma a cada cartucho, seguindo-se dois passos de lavagem, cada um deles com 200 μΒ de água desionizada. Efectuou-se a eluição dos compostos a partir dos cartuchos por meio de um processo em dois passos, utilizando em cada um 125 μΒ de metanol. Adicionou-se 50 μΒ de água e misturou-se. Injectou-se uma aliquota de 25 μΒ da mistura num sistema de BC/MS/MS 'ThermoFinnigan TSQ Quantum'. A coluna utilizada para a cromatografia líquida foi uma coluna C18 'HyPURITY®' (50x2,1 mm, 3,5 μηι) da empresa Thermo-Hypersil. A fase móvel A continha 10% de acetonitrilo em formato de amónio 10 mM, pH 3,0. A fase móvel B continha 90% de acetonitrilo em formato de amónio 10 mM, pH 4,6. A cromatografia foi efectuada com um caudal de 250 μΒ/minuto, numa condição isocrática de 40% de fase móvel A e 60% de fase móvel B. Recorreu-se à monitorização de reacções seleccionadas (SRM) para medir GS77366, GS8373 e metabolito X com a sonda de electropulverização em modo de ionização positiva. O limite de quantificação (BOQ) foi de 1 nM para GS77366, GS8373 e GS77568 (metabolito X) em plasma.
Para a análise da amostra de PBMC, adicionou-se soluto salino tamponado com fosfato (PBS) a cada agregado de PBMC para se obter um volume total da amostra de 500 μΒ em cada amostra. Misturou-se uma aliquota de 150 μΒ de cada amostra de PBMC com um volume igual de metanol, seguindo-se a adição de 700 μΒ de ácido fórmico a 1% em água. Aplicou-se 763 a mistura resultante a um cartucho de extracção em fase sólida 'Speedisk C18' (1 mL, 20 mg, 10 μιη, fornecido por J.T. Baker) que tinha sido acondicionado conforme descrito antes. Efectuou-se a eluição dos compostos com metanol depois de se lavar o cartucho 3 vezes com metanol a 10%. Evaporou-se o solvente sob uma corrente de N2 e reconstituiu-se a amostra em 150 μ]1 de metanol a 30%. Injectou-se uma aliquota de 75 μ]1 da solução para análise por LC/MS/MS. O limite de quantificação foi de 0,1 ng/mL na suspensão de PBMC. Cálculos farmacocinéticos
Os parâmetros farmacocinéticos foram calculados utilizando 'WinNonlin'. Recorreu-se a análise não compartimentai para todos os cálculos farmacocinéticos. Calculou-se as concentrações intracelulares em PBMC a partir das concentrações medidas em suspensão de PBMC com base num volume de 0,2 picolitro/célula (B.L. Robins, R.V. Srinivas, C. Kim, N. Bischofberger e A. Fridland, (1998) Antimicrob. Agents Chemother. 42, 612).
Perfis de concentração-tempo em plasma e PBMC
Efectuou-se a comparação dos perfis de concentração-tempo de GS77366, GS77568 e GS8373 em plasma e PBMC, após administração intravenosa de GS77366, à razão de 1 mg/kg em cães. Os dados demonstraram que o pró-fármaco pode fornecer eficazmente os componentes activos (metabolito X e GS8373) às células primariamente responsáveis pela replicação de VIH e que os componentes activos nestas células tinham um periodo de semi-vida mais prolongado do que no plasma. 764
Efectua-se a comparação entre as propriedades farmacocinéticas de GS77568 em PBMC, após a administração oral de GS77366 a cães, com as de nelfinavir e amprenavir, dois inibidores comerciais da protease do VIH (quadro 3) . Esses dados demonstraram niveis sustentados do componente activo (GS77568) do pró-fármaco de fosfonato em PBMC, comparativamente com o nelfinavir e o amprenavir.
Quadro 3. Comparação de GS77568 com nelfinavir e amprenavir em PBMC após a administração oral a cães beagle Composto Dose tl/2 (h) 1 ASC (2-24 h) Nelfinavir 17,5 mg/kg 3,0 h 33000 nM.h Amprenavir 20 mg/kg 1,7 h 102000 nM.h GS77568 20 mg/kg de GS77366 >20 h 42200 nM.h
Secção de exemplos Z
Metabolismo intracelular/Estabilidade in vitro 1. Absorção e persistência em células MT2, PBMC quiescentes e estimulados
Os pró-fármacos de fosfonato inibidores de protease (PI) são rapidamente absorvidos pelas células e metabolizados para produzirem metabolitos ácidos, incluindo o ácido fosfónico original. Devido à presença de cargas, os metabolitos ácidos são bastante mais persistentes nas células do que os PI não carregados. Para se determinar os niveis intracelulares relativos dos diferentes pró-fármacos PI, utilizou-se três compostos representativos de três classes de pró-fármacos de fosfonato PI, o fosfonato bisamidato, o fenoxi-fosfonato monoamidato e o fenoxi-fosfonato monolactato (figura 1), e manteve-se a incubar na 765 concentração 10 μΜ durante 1 hora com células MT-2, células mononucleares do sangue periférico (PBMC) estimuladas e quiescentes (fase de estimulo). Após a incubação, lavou-se as células, colocou-se novamente em suspensão nos meios de culturas celulares e manteve-se a incubar durante 24 horas (fase de perseguição). Em momentos específicos, lavou-se as células, efectuou-se a citólise e analisou-se os lisados por HPLC com detecção por UV. Tipicamente, centrifugou-se os lisados celulares, misturou-se 100 μΐ* do sobrenadante com 200 \ÍL de amprenavir 7,5 μΜ (Internai Standard) em 80% de acetonitrilo/20% de água e injectou-se num sistema de HPLC (70 μι).
Condições de HPLC
Coluna analítica: 'Prodigy ODS-3', 75x4,6, 3u + pré-coluna C18 a 40°C
Gradiente:
Fase móvel A: acetato de amónio 20 mM em 10% de ACN/90% de H20
Fase móvel B: acetato de amónio 20 mM em 70% de ACN/30% de H20 30%-100% de B em 4 minutos, 100% de B durante 2 minutos, 30% de B durante 2 minutos a 2,5 mL/minuto.
Duração: 8 minutos
Detecção por UV a 245 nm.
As concentrações de metabolitos intracelulares foram calculadas com base no volume celular: 0,2 μΒ/πΛη de células para PBMC e 0,338 μΒ/πΛη (0, 676 μΕ/πΛ) para células MT-2. 766
Estruturas químicas de pró-fármacos de fosfonato de inibidores de protease seleccionados e metabolitos intracelulares:
GS Na, R1 m CEÇÇI (nM) 8373 OH OH 4,8007:1,800 18503 H NCH COOBu HNCHíCH^JCOOBu 8,0?: 1,4 16571 OPh HNC H(OHstCOQH 15:::5 17394 OPíf OC H(CHg)COOEÍ 20:· 7 18576 OPlf HNCH(CH2CH3,'COOEt 12.8.14,8 fv1*t X OH HfáGH<CHs)COOH >10.000 Met LX OH OC H(CHj;)OOOEt 17501354
Observou-se uma absorção e uma conversão significativas dos 3 compostos em todos os tipos de células (quadro 4). A absorção nas PBMC quiescentes foi 2 a 3 vezes superior à da observada nas células estimuladas. 0 GS-16503 e o GS-16571 foram metabolizados para se obter metabolito X e GS-8373 e o GS-17394 foi metabolizado para se obter o metabolito LX. Os períodos de semi-vida intracelular aparentes foram semelhantes para todos os metabolitos em todos os tipos de células (7 a 12 horas) . Observou-se a persistência de metabolitos ácidos totais pró-fármacos de inibidores de protease em PBMC estimuladas (A), PBMC quiescentes (B) e células MT-2 (C) (1 hora, estímulo de 10 μΜ, perseguição de 24 horas). 767 2. Absorção e persistência em células T estimuladas e quiescentes
Visto que o VIH visa principalmente os linfócitos T, é importante determinar a absorção, o metabolismo e a persistência dos metabolitos em células T humanas. Para se calcular os níveis intracelulares relativos de diferentes pró-fármacos PI, manteve-se GS-16503, 16571 e 17394 a incubar, na concentração de 10 μΜ, durante 1 hora com células T quiescentes e estimuladas (fase de estímulo). Efectuou-se a comparação dos pró-fármacos com um PI não pró-fármaco, o nelfinavir. Após a incubação, lavou-se as células, colocou-se novamente em suspensão nos meios de culturas celulares e manteve-se a incubar durante 4 horas (fase de perseguição). Em momentos específicos, lavou-se as células, efectuou-se a citólise e analisou-se os lisados por HPLC com detecção por UV. A preparação e a análise das amostras decorreram de um modo idêntico às descritas para as células MT-2 e PBMC quiescentes e estimulados. 0 quadro 5 mostra os níveis de metabolitos ácidos totais e correspondentes pró-fármacos em células T após as fases de estímulo/perseguição e a incubção contínua. Observou-se uma absorção celular e um metabolismo significativos nos linfócitos T. Não foi observada nenhuma diferença aparente entre os linfócitos T quiescentes e os estimulados. Observou-se uma absorção mais elevada de PI de fosfonato do que de nelfinavir. O GS17394 exibiu níveis intracelulares superiores aos dos GS16571 e GS16503. O grau de conversão em metabolitos ácidos variou entre pró-fármacos diferentes. O GS-17394 demonstrou o grau mais elevado de conversão, seguindo-se o GS-16503 e o GS-16571. 768
De um modo geral, os metabolitos eram uma mistura igual do metabolito de monoácido fosfónico e de GS-8373, com a excepção do GS-17394, em que o metabolito LX era estável, sem formação de nenhum GS-8373.
Quadro 5. Níveis intracelulares de metabolitos e pró-fármaco intacto após a incubação contínua e as fases de estímulo durante 1 hora/perseguição durante 4 horas (1' μΜ/0,7 mLn de células/1 mL) de pró-fármacos PI ΙΟμΜ e nelfinavir com células T quiescentes e estimuladas
Composto Tempo jli) Incubação contínua Estímulo 1IvPei sequição 4 li Células T quiescentes Células T estimuladas Células T quiescentes Células T estimuladas Met Ácido Pró-fármaco (μΜ) Met Ácido (μΜί Prófármaco i |iMí Met Ácido ΐμΜ) Pró-fármaco <μΜ) Met Ácido ΐμΜ) Pró-fármaco (μΜ) 0 1180 42 2278 0 29S9 40 1323 139 1S5Q9 2 9170 83 10-59 118 1867 4 1137 31 4 5252 0 3198 31 1054 119 1008 β 0 388 1392 187 1417 1042 181 858 218 18571 2 947 841 1 807 1170 82 1008 35 4 3S18 484 SI 47 474 1176 37 Θ1ΐϋ 25 0 948 1155 18S 1194 4480 14 2818 10 17394 2 7231 413 3748- 471 2888 33 1083 S1 4 10153 16.7 9867 228 1548 39 943 104 0 101 se 888 1239 Nsllmavlr 2 sss 84 S 725 770 4 9Sá 1526 171 £44 3. Absorção e metabolismo em PBMC de pró-fármacos PI seleccionados, após incubação durante 1 hora em células MT-2 a 10, 5 e 1 μΜ
Para se determinar se a absorção/o metabolismo celular era dependente da concentração, manteve-se PI seleccionados 769 a incubar com 1 mL da suspensão de células MT-2 (2,74 mLn células/mL) durante 1 hora a 37°C, em 3 concentrações diferentes: 10, 5 e 1 μΜ. Após a incubação, lavou-se as células duas vezes com o meio de cultura celular, efectuou-se a citólise e analisou-se por HPLC com detecção por UV. A preparação e a análise das amostras decorreram de um modo idêntico às descritas para as células MT-2 e PBMC quiescentes e estimulados. Calculou-se as concentrações intracelulares com base na contagem celular, um volume celular individual publicado de 0,338 pL para as células MT-2 e as concentrações de analitos em lisados celulares. Os dados estão agrupados no quadro 6.
Aparentemente, a absorção dos três PI seleccionados em células MT-2 era independente da concentração no intervalo entre 1 e 10 μΜ. Aparentemente, o metabolismo (conversão em metabolitos ácidos) era dependente da concentração no caso de GS-16503 e GS-16577 (três vezes superior a 1 μΜ em relação a 10 μΜ) , mas independente no caso de GS-17394 (monolactato). A conversão a partir de um correspondente metabolito X em GS-8373 foi independente da concentração para GS-16503 e GS-16577 (não foi observada nenhuma conversão para o metabolito LX De GS-17394).
Quadro 6. Absorção e metabolismo de pró-fármacos PI seleccionados, após incubação durante 1 hora em células MT-2, a 10, 5 e 1 μΜ 770
Composto Conceittiíição Concentração de mertabolito e pró-fármaco associada às células, ;jJ,M % de conversão extiacelulai :|J.M Metabolito X SS8373 Pró-fái maço Total em metabolitos ácidos 10 1358 0 635 1SS3 6-6 SS-17334 s 91 δ 0 449 1365 S7 1 196 ít S3 2® 76 10 478 238 2519 3235 32: 5 sso 148 821 1043 40 1 ss 3S 61 168 84 10 120 88 1 SOS 1712 12 aS-16503 5 58 60 579 697 17 1 12 10 74 104 2S * Para GS 14574, o met.ibolrto X é o ácido morio-aminobutírico 4. Absorção e metabolismo em PBMC de pró-fármacos PI seleccionados, após incubação durante 1 hora em sangue humano integral na concentração de 10 μΜ
Para se determinar os níveis intracelulares relativos dos diferentes pró-fármacos PI em condições que simulam o ambiente in vivo, utilizou-se três compostos representativos de três classes de pró-fármacos de fosfonato PI, o fosfonato bisamidato (GS-16503), o fenoxi-fosfonato monoamidato (GS—16571) e o fenoxi-fosfonato monolactato (GS-17394), e manteve-se a incubar na concentração de 10 μΜ durante 1 hora com sangue integral humano intacto a 37°C. Após a incubação, isolou-se os PBMC, depois efectuou-se a citólise e analisou-se os lisados por HPLC com detecção por UV. Os resultados da análise estão agrupados no quadro 7. Foi observada uma absorção/um metabolismo significativos após a incubação no sangue integral. Não se observou nenhuma diferença aparente na absorção entre o GS-16503 e o GS-17394. O GS-17394 exibiu níveis intracelulares bastante superiores aos de GS-16571 e GS-16503. 771 0 grau de conversão em metabolitos ácidos varia entre pró-fármacos diferentes ao fim de 1 hora de incubação. 0 GS-17394 exibiu o grau mais elevado de conversão, seguindo-se o GS-16503 e o GS-16571 (quadro 7). De um modo geral, os metabolitos eram uma mistura equimolar do metabolito de ácido mono-fosfónico e GS-8373 (ácido original) , com a excepção do GS-17394, em que o metabolito LX era estável, sem formação de nenhuma GS-8373.
Quadro 7. Absorção e metabolismo em PBMC de pró-fármacos PI seleccionados, após incubação durante 1 hora em sangue humano integral, a 10 μΜ (média ± D.P., N = 3)
GS n" Concentração intracelular de prò-fárniaco e metabolitos, Metabolitos intiacelulaies principais: Metabolito ácido Pié-fàrmaco fjAI Total, μΜ 279 ± 47 61 40 340 V 35 X, GS-8373 1S571 318112 137 í. S2 432 í 203 X. GS-8373 173S4 82B ΐ 303 6» :l 85 098 .1. 301 LX
Volume iiiti acelular PBMC = 0:2 abmlri
5. Distribuição de pró-fármacos PI em PBMC
Para se comparar a distribuição e a persistência de pró-fármacos de fosfonato PI com as dos PI não pró-fármacos, manteve-se GS-16503, GS-17394 e nelfinavir a incubar, na concentração de 10 μΜ, durante 1 hora com PBMC (fase de estimulo). Após a incubação, lavou-se as células, colocou-se novamente em suspensão nos meios de culturas celulares e manteve-se a incubar durante mais 20 horas (fase de perseguição). Em momentos específicos, lavou-se as células e efectuou-se a citólise. Separou-se o citosol celular das membranas por centrifugação a 9000 x g. Extraiu-se o citosol e as membranas com acetonitrilo e analisou-se por HPLC com detecção por UV. 772
No quadro 8 são apresentados os níveis de metabolitos ácidos totais e correspondentes pró-fármacos no citosol e nas membranas antes e depois do período de 12 horas de prseguição. OS dois pró-fármacos exibiram uma conversão completa nos metabolitos ácidos (GS-8373 e X para GS-16503 e LX para GS-17394, respectivamente). Os níveis dos metabolitos ácidos dos pró-fármacos de fosfonato PI na fracção citosólica foram 2 a 3 vezes superiores aos observados na fracção membranar ao fim de 1 hora de estímulo e 10 vezes superiores ao fim de 22 horas de perseguição. 0 nelfinavir estava presente apenas nas fracções membranares. A absorção de GS-17394 foi cerca de 3 vezes superior à de GS-16503 e 30 vezes superior à de nelfinavir. Os metabolitos eram uma mistura equimolar de metabolito X e GS-8373 (ácido original) para GS-16503 e apenas metabolito LX para GS-17394.
Quadro 8. Absorção e distribuição celular de metabolitos e pró-fármacos intactos após incubação continua e as fases de estimulo durante 1 hora/perseguição durante 22 horas de pró-fármacos PI ΙΟμΜ e nelfinavir com PBMC quiescentes GS ii° Tipo de célula Fracçao PI associado Â* células, pmolinin em células Estimulo llrferseguiçíio Oh Estímulo lliPerseguiçao 22h Metabolitos ácidos Pró-fármaco Metabolitos ácidos Pró-fàrmaco GS-1 êSS3 PBMC Membrana 0 9 õ 1 PBMC Citossol 39Ô 0 130 Q PBMC Membrana 335 0 28 ϋ GS-17394 PBMC Citosaol 8Θ4 0 249 9 Neifínavif PBMC Membrana 42 25 ftetfinaw PBMC Citossol Q 0
Mediu-se a absorção e a distribuição celular de metabolitos e pró-fármacos intactos após incubação com 773 estímulo durante 1 hora/perseguição durante 22 horas de pró-fármacos PI ΙΟμΜ e nelfinavir com PBMC quiescentes. 6. Estabilidade de pró-fármacos PI seleccionados em extracto de PBMC/plasma canino/soro humano
Determinou-se o metabolismo e a estabilidade in vitro dos pró-fármacos de fosfonato PI em extracto de PBMC, plasma canino e soro humano (quadro 9) . Transferiu-se as amostras biológicas adiante indicadas (120 μύ) para uma faixa de 8 colocada no suporte do bloco de aquecimento a 37°C feito de alumínio e manteve-se a incubar a 37°C durante 5 minutos. Transferiu-se aliquotas (2,5 μύ) de solução que continha 1 mM de compostos de ensaio em DMSO para uma faixa de 8 tubos limpa colocada no suporte do bloco de aquecimento a 37°C feito de alumínio. Introduziu-se aliquotas de 60 μύ de 80% de acetonitrilo/20% de água, que continham 7,5 μΜ De amprenavir enquanto padrão interno para análise por HPLC, em cinco faixas de 8 tubos e manteve-se em gelo/refrigerou-se antes da sua utilização. Desencadeou-se uma reacção enzimática por adição de aliquotas de 120 μΐϋ de uma amostra biológica à faixa com os compostos de ensaio, utilizando uma pipeta de vias múltiplas. Imediatamente a seguir, misturou-se a faixa por centrifugação, efectuando-se depois a amostragem da mistura de reacção (20 μΐύ e transferindo-se para a faixa de padrão interno/ACN. Considerou-se a amostra como sendo a amostra do momento zero (o tempo real foi de 1 a 2 minutos) . Depois, em momentos específicos, efectuou-se a amostragem da mistura de reacção (20 μΐ) e transferiu-se para a 774 correspondente faixa de IS/ACN. Os períodos típicos de amostragem foram de 6, 20, 60 e 120 minutos. Depois de se ter efectuado a amostragem em todos os momentos, adicionou-se uma aliquota de 80 μΕ de água a cada tubo e centrifugou-se as faixas durante 30 minutos a 3000xG. Analisou-se os sobrenadantes por HPLC nas condições a seguir indicadas. Coluna: 'Inertsil ODS-3', 75x4,6 mm, 3 μιη a 40°C Fase móvel A: acetato de amónio 20 mM em 10% de ACN/90% de água
Fase móvel B: acetato de amónio 20 mM em 70% de ACN/30% de água
Gradiente: entre 20% de B E 100% de B em 4 minutos, 2 minutos com 100% de B, 2 minutos com 20% de B Caudal: 2 mL/minuto Detecção: UV a 243 nm Período: 8 minutos.
As amostras biológicas avaliadas eram as seguintes. Preparou-se extracto celular de PBMC a partir de células recentes, utilizando uma modificação de um procedimento publicado (A. Pompon, I. Lefebvre, J-L. Imbach, S. Kahn, e D. Farquhar, Antiviral Chemistry & Chemotherapy, 5, 91-98 (1994)). Resumidamente, preparou-se o extracto do modo seguinte: separou-se as células a partir do seu meio de cultura por centrifugação (1000 x g, 15 minutos, temperatura ambiente). Colocou-se o resíduo (cerca de 100 μΐ), 3,5xl08 células) novamente em suspensão em 4 mL de um tampão (HEPES 0,010 M, pH 7,4, cloreto de potássio 50 mM, cloreto de magnésio 5 mM e dl-ditiotreitol 5 mM) e tratou-se por ultra-sons. Centrifugou-se o lisado (9000 x g, 10 minutos, 4°C) para se remover as membranas. Guardou- 775 se a camada superior (0,5 mg de proteína/mL) a -70°C. A mistura de reacção continha o extracto celular a cerca de 0,5 mg de proteína/mL.
Soro humano (soro humano normal reunido, fornecido por George King Biomedical Systems, Inc.). A concentração proteica na mistura de reacção era de cerca de 60 mg de proteina/mL.
Plasma canino (plasma canino normal reunido (EDTA), fornecido por Pel Freez, Inc.). A concentração proteica na mistura de reacção era de cerca de 60 mg de proteína/mL.
Quadro 9. Estabilidade de pró-fármacos PI seleccionados em extracto de PBMC/plasma canino/soro humano GS n" Extracto PBftlC 1 T(.2, min Plasma cao min Soro humano T (¢, min M1V CE:5q 1S503 1Θ571: 2 49 m m »>400 110 6.0::: 1.4 15 :.v 5 17394 15 144 49 30 r 7
Secção AA de exemplos
Quadro 10: dados enzimáticos e celulares
Fórmula II actividade de ALPPI
Ampretmvitr 776
£1S >10 ai < 100 > 160 aiS 1.O0Q >1,000 ec50.m +++ ++ + £&& +++ >£Ô a.áSQO ++ > SOO'a S 5,000 + > 5.000 - diferença JSÕV e ÍS4V/L90M >30 +++ > 10 a < < 3Q ++ >3 a <10 + sâ CCíQ [ |U ÍV*] <5 ++ > 5 a < 5Θ + >50
Composto Ki (pM) CEK, ínM) difereitçii J5QV (#1) diferença 1S0V !#2í diferença 184X0100 m CQsoÍMÍA) Saqumavir t+ +++ - • +++ Metfiríavir + +++ - + +++ tndiiwir + +++ + +++ Rfósnav# ++ +t+ 4+ ++ +++ Lopínaw ++ +++ + t + t+ ++ Ampranavir· + +++ + ++ +++ ++ Atazanavlr ++ +++ - - +++ Tlpranavlr ++ ++ - - + Θ4-003 +++ +++ ++ + +++ ++ + TOC 114 + ++ +++ + + + + - 777 Ácido e ésteres Pl-fosfónicos
:R1 R2 K;i {pM) CEgft (tlM) diferença (5DV (#1) diferença ÍM'/íL90M GC-goíitM) OH OH ++ + + - - QMS OMs t+ ++t OEt OEt ++ + + + + - + qch2cf3 OCH2GF3 ++ OÍPf OiPr ++ + + + - OPh OPh + ++ QMS OPh ++ +++ OEt OPh +++ + ++ QBf) OBn ++ +++ - + OEt OBn ++ + ++ ++ GPgg OPqg + OH OEt ++ OH OPh +-+4- OH OBrt + - - Ácido e ésteres Pl-fosfónicos 778
R1 R2 Ki (pfotj- CE50 (nM) diferença fS0V(#1) diferença I84WL9ÕM COc.(>fi.M GH GH + + f + Et Ei +++ +++ Ácido e ésteres Pl-fosfónicos directos
Ri R2 Ki ipM; CE50. (fiW) diferença [SOV (#1) diferença tS4V/L90M' CCgj μΜ OH OH +H- • OEt OEt +-H- +4-+ + - Ácido e ésteres Pl-CH2-fosfónicos
779 R1 R2 Kí (pM) CEçq.. ínM) diferença ÍSOV (#1) diferença IMVdQOM' Οϋ50.μΜ OE OE Ή-+ +++ + +
Pl-P-Bisamidatos
R1 R2 Kf ípMí e.E-t, (nM) diferença f&QV (#1! diferença ÍS4V..1S0M CCSÚ μΜ NHEt NHEt +++ ++ - - Gty-Et Gly-Et ++ +t ôfy-B:u Gty-Bu +++ +t+ Ata-Et ++ ++ - - Ala-fiu Ala-Bu ++ +++ 4 - Aba-Et Aba-Et +++ 4H-4 Aba Bu Afca-Bu +++ 44-4 ++ 4 Vat-Et Vai-Et + Ή-+ - - Leu· Et Leu-Et ++ +++ Leu-8u Leu-Bu ++ ++ + 4 Pbe-E: Phe-E: +t+ Pbe-Bu Pbe-Bu 4-4-+ PI-P-Bislactatos 780
RI RS Ki ;pM) CEKo {nM} diferença KOV (#1) diferença ÍS4V/L90M CC rQ μ.Μ GloEt Gle-B +t+ t - - Lac-Et Lac-Et ++ ++ - - Lac-iPr Lac-ÍPr ++ Ή-+· -
Pl-P-Monoamidatos
781 R1 m Kf (pM) CE-0 <nM) diferença I50V (#1'j diferença I84V/L90M OPh Gl>'-Bi.i ++ ++ - - OPh AIs-Mhs ++ +++ - OPh AJa-Et +++ +++ - - OPh Ala-iPr +++ - - OPh Ala-iPr +++ +++ OPh Ala-iPr ++ +++ OPh j DjAla-iFT ++ ++ + - OPh (D)Ala-SPr +++ +t+ OPh i D) Ala-iPr +++ ++ + OPh Ala-Bu ++ +++ - - OPh Ala-Bu. ++ ++ + - OPh Ala-Bu ++ +++ - OPh Âba-Et +++ CPI: Aba-Et t++ - - OPh Aba-Et ++ OPh Âba-Bu +++ + - OPh Âta-Bti ++ - - OBn .AI a-Et +++ +++ - - OH Ala· OH ++ + - OH Ateí-Bu -
Pl-P-Monolactatos (1) 782
RI R2 Kl (í>M; CE-n (nM) diferença i&CV'“li diferença 1EQV(#2) diferença [84V/L90M COe^jxíM OPI GloEt +-H- +++ + - - OPh Lat>Me ++ - dPh Lac-Eí Ή-+ - + - + OPh Lac-Et +++ +++ - - OPt Lac-Et -H- +++ - - OPh Lac-iPr ++ +++ - - OPh Lai. iPi +++ +++ OPh Lae-tPr ++ Ή-+ OPh Lac-Bu. ++ - OPh Lac-Bu ++ ++ OPh Lac-Bu ++ ++ OPh Lao-EIMor - OPh Lâc-PrMor - OPh iR)Lac-fite +++ +++ OPh iRjLac-Et "+++ +++ - - OEt Lac-Et ++ cch2cf3 Lac-Et +t OBr Lae-Bn ++ ++ OBr {RíLae-Bn OH L&c-OH +++ + - OH tR-Lac-OH + -
Pl-P-Monolactatos (2) 783
R1 FE Kf (pMj CESlí {fíM) diferença ISGV Í#1 j diferença tS4V,'19SM ccK, p.m OPh 4·+ 4+4 4 - OPh (SjHba-Eí + 4+4 OPh (SíHba-tBu +++ OH (S)Hba-OH +4 OPh (R)Ffisa-Et +4+ OPh íSfMoBJt Et +++ OPh (RtfJeBuFEt +++ OPh DiMsPro-MB ++ OPh SS)Lat>£tM»r - OPh (S)Lac-PrMer - OPh (S)Lac-B:Pffí 4 + - -
Pl-P-Monolactatos (3) 784
RI R2 Kí jpM) CEgo, diferença 1S0Vi#t> diferença 1MV«M CCS0|iM GPtihO-l· But (S)Lao-Et 4+4 Oct (S^Lae-Et 4+ But (SJLae-Et +44 OPIVíJvCOOBn (SiLaoEt 4+ GPtWtt-COOH (S)Lac-Et ++ GPh^CH£OH (S3L»EÍ 4+ - - OPI>íí)-CH2NH£ (S)Lac-Et +4 44 OPti-,n-CH2NMa2 ÍSJLae-Et + CsPh-íí*-M2Mor (S)Lac-Et +4 - - CPtwrj-CHgPip (S5La^Et ++ OPtv f^CH£NMeC2GM (SiLaoEt 4+ CPh-;>OEt • SjLaoEf +++ ONMea (SiLac-Et ++ OPiip fS5Las-Et + OMof (S)Lac-Et _
Pl-C2H4-Monolactatos 785
R1 fi2 Ki (pM) CEç.0 tnM} diferença iSÔV (#1) diferença 184V/L90M CC ς;. μΜ -ΟΟ^ΟΒη 444 OEt OEt +t+ - OPÍl: Lac-Et 44 - OH OH ++ OH Lac ++
Pl-CEpN-P-diéster e monolactato (1)
r2 Kl tpM;. CE cr, 1'lM: diferença ílSOV (#1) diferença 1S0V diferença 164V/L9M cCçq nM Et Et 4 + ++-4" - H H 4·+ - + Pt Lac-Et t+ - ++ - Ph Lac-Et + + - - Pt Lsc-EI 4 4+ • Ph Aba-Et + + - Ph-oEt Lac-Et +4 +4 - 4+ • PIkíM Lac-Et 444 4 + PJvcfM Lao-Pr 44+ H Lac 44 Pt Hba-Et ++ ++ - Pt Hba Et 44 4+ - 4 Pt Hbã-Et 44 44 • H Hba +
Pl-CEpN-P-diéster e monolactato (2) 786
:R, Rt Ki ;pM) CEç,·, (flMj diferença diferença I84V/LS0M CCg^M Ph LâC-Et + ++ 4 + H H 4"f
Pl-CH2N-P-diéster e monolactato (3)
Ri :R2 Ki fpM) CES0 (nM) idifeiença iSOV (#1) IMV/LSSM fokí chartge Et Et 4"4 Ή”4 -
Pl-N-Pl-ácido fosfónico e ésteres (1) 787
R1 Κί ipM} j'Ese i.t'M; diferença iS0V(#1) diferença ]84V/L8Dft$ 00c.;;, μΜ f>is( ++ 1-0,1;« ++ t A $ Λ ? ^ OH s r~\ 9 ΟΕΐ t+ +++ + (5 9 \ / * W/ ÍA&& ΓΛ t + +Φ * /A V |~4 W 0S& ++ +Φ+ + t /A f <A M-^HjP"OPfi u»fa: t /A s H /i-^HíP-oh W/ ).a« S /A £ W ÕM __. O t / \ ti |~N jOA AOS + +4+ +
Pl-N-Pl-ácido fosfónico e ésteres (2) 788
R1 Ki ipM) CEK («MJ dfererça f£0V í#1) diferença J84VMCW CC -,·; μ.Μ 0 ; $1 itj + + + l + + M*+ + s ++ +Ή- ÉJ ?_/—\Ι·~Αΐ<νβ r™\,/ Vb + + ++ f LftCv^t +ft o <fç\ Jh* + + +++ + Me .. f +++ +++ ++ P* QH p^Hí" + +++ +++ ^0-Lh /«s\ f l\f\ ft* *** *·“" Wá -H-+ -H- + A/Owt
Pl-N-Pl-ácido fosfónico e ésteres (3) 789
:R1 Ki tpM) CEW \nUh diferença 1-50V (#1 j diferença I84V/L9M CCç.,-.,ii M Q >N C€í + + +++ + + , /™\ VcHj-P-OPh + ++ + + + ++ + + kiP00* ^oH + JSA O t j—%, >OCHj~:P-OH 1V/ éH |O-» te
Pl-N-Pl-ácido fosfónico e ésteres (4) 790
R* Ki ipMS CE ^ tlitei eriça 1S0V (#1) iliferenp IÈ4WUM CCg^tM —0 VnHC^“P“OH W# ÇH +4+ Q + +4 +4+ P-^OSn 08fí +4 +4+ + „„ O S/“\ ! Í-NBC^2“P-"OPh; AlaàPr 4+ Ή4 K^r#c:Hii‘OTropft ASa-íPi' ++ ++ iA f K >HHCHa-P-OPh ÂÍSHpír +4+ 4++ g |& ^NHC^^QPh Lae-Et +++ +4 ? P—OPh Lâc-Et 44+ 4+ t /»s\ 9 \Jf OH Ή- i,t +4
Pl-P-monolactato cíclico 791 791 o ry-
» \ / \ I^OCHOOOSt Ο R1. Ki íplWf j CES0 (M) diferença SitíV (#1) diferença J84V/L90M &CWM: nd nd nd nd PI'-N-Pl-ácido fosfónico e ésteres 792
m R2 Ki {pM.S CEgg. (nM) diferença 160V i#1) diferença IMM» QC.„;λΜ CH$ *cf 44 +Ή- +4 + OH +4 4 - - oh2oh Vf 4+4 4+4 OBn 44+ 44+ - ' OH νγ - +4 - GBn - 4+4 * το ’ ' + + K& *">0> + 4+ 4 + OH - í P 4+ i '·χ,Ρ Pí-κπβ ιλΛ 4+ r ^wx&, *03*^ 44 ++ WA νΎΐ t· 4 PI'-ácido fosfónico e ésteres 793
R1 Ki (t>M) CE$a (nM) diferença íISOV Ç#1) diferença JS4V/L90;M OC^-j j.tM +4 4+4 +44 +44 ^COH +4+ +4+ 44+ 44+ * OH +4 4 4+4 >Co Jd3gt i ΟΚΐ 4+ 4 +4+ 44+ ·Ό B * OBn +44 +++ +4 9 'vC^.^O -Ό H Γ ÔH ++ t+ ++ t+ í> r 08o -H- +4+ 4+4 44+ P2-Monofurano-Pl-ácido fosfónico e ésteres 794
R1 R2 Ki iipfdS CEçf, <n:Mi dfferença ISOV í#1) diferença l84WL9Qy CCg^BI OMe OH - 444- OMe OEt +++1 +4~+ +4~l· + "f oy® OBn +++ 4"f +4 GMe pheriol +++ +4"b 444 4- OMe OEt ++ +++ 4+4 44 mz phenoí + ++ + :NH3 OH - + jl OBti ++ 4~+ + P2-Monofurano-Pl-P-monoamidatos
RI R2 Ki (pM) CEçq. (nM) diferença [S0¥ (#1) diferença IS4WLíN>M CCeoilM OPh Ala-iPt 44 44 4 GPh AJa-iPr 44 44 OPh AJa-iPr 4' 44 P2-outras modificações-Pl-ácido fosfónico e ésteres 795
Rt m Ki (pM j ce;H} tnm diferença ISO V (#1J diferença J84V/L80M OCs μΜ ÇCy phenyí 4 444 4+4 4+ phsftoJ + 4+ +4 4 ί-'-ν*' OH " " +4 " ? -i* OB n 4 +4 4' jcv pfrenyl 4 +4 +4+ + YS OH + ~ +4 4 OBfl + ++ +++ + «δ s píwnyl 44 +4 A mV" t:hen;.l + 4 " XX ml OH 4 " ’ - OSn +t ++ + Ρ2'-amino-Pl-ácido fosfónico e ésteres 796
Ri R1 R2 Kí φΜ) CES& Ο'ιΜ) diferença fSGV$1) difer ença JS4V/LS0M CG&pM OH p’NH2 44 4+ ’ - p-NH2 4+ 4 p-NH, 4+ +4+ ’ V V3 ifârtB j^NOg +4 44+ - ,·> NHF· +4 44+ ΚκΑ* p-NHj +4 4+4 ' - OH λϊ-ΝΗ£ +4 44 ' nafi. ff>NH2 +·+ 4 " wX s>NH2 +4 4+ " JfJ-NHs ++ 44+ - * fR-NH3 4 ++ - +4 ++ 'iw >a*s? ~m ffj-NH2 4 4+ P2'-substituído-Pl-ácido fosfónico e ésteres (1)
797 R1 X Kl (pM5 cemj íhM; dfererça S5GV (#15 diferença ifi4V/L90M CCK |j.M K4 p-OH 444 4 f^sdCi í>OM 44+ 444 ;M’.H 4·+ f>CH 444 T P-OBll 44 HfiC p-OBn Ki4 ,3-H +4 - Γ-’β-ΐ?! Í»1 p-H +4 4+4 4 P’H 444 4 4 *GL p-H 44 K& C-H 44 kr# 4 HSX3H f?-F +4 4 Kc4 (>F 44 4+4 4 HúC í> F 4+4 4 4 •iíis?w f?-F 4+ 4 4 hc4 P-F 44 ksC í:-CF, 444 4 HQV p-CFs 44 444 “ L/\fS I NS W ρ*·χκ 44 4 P»TO) OOCFj 44 +4+ 4 tò4 p-DN 44 444 p*Plp ’ " í>Pip-Mfe - - 798 Ρ2'-substituído-Pl-ácido fosfónico e ésteres (2)
R1 X Ki <}JM; cem (nM) diferença 150V #1) diferença 184V/L9M CCW ]i;M KA* m^Py + + +++ Κί?ΐ>| m-Py + + s>Py f + ++ + r *cL ίττ-Py + + ++ KA m-Py + + f'Bí»afW ff*-Py- Ms+ + «Pyx M®*· ++ kA m-Py- oxide ++ kA jn-Py- oxide + + kA, ro-Py- oxide + + ++ kA λ>Ρ>'- oxide + > y\J5 #SisíN»% tvpy- oxide - p-Py- oxide pOM© + + - NSA e-GHO Φ++ $ SB» XW: ff-CHO +++ P-CH2 OH ++4" " kA P-CH2 OM + + kA P-CH2 OM + + Hòwn S-CH2 Mor t+ - - kA &-CH2 Mor " kA P-CH2 Mor " 799 Ρ2' -alquilsulfonil-Pl-ácido fosfónico e ésteres
R1 X Ki Cífvi: CEbh ("iMj djfeienp l5QVj-#1$ diferença Í84V/L90M CCçg μ,Μ KSC, IO " KL * w + ++ P2' -carbonil-substituído-Pl-ácido fosfónico e ésteres
R1 X Ki ipMi CEç.; (:'A'D 'dferenja ISOV (-it) <liferen$a 184V/IS0M otcjj ,μ-Μ - HOCsi - ++ bOC* |^õ|- •f 800 Ρ2'-ácido fosfónico e ésteres
R Ki (pM:) ces3 m diferença ISOV i#1j · diferenfíi l@4V/L90y CCgij μΜ fO* +++ +++ ’ T tru Í-ÔH +++ + IjíJH ++ 9 tCK*« ++ +++ t+ ++ 0 L» > \ 8 "^^30 + ++ +++ +++ ^ M +++ +++ + + + ++ +++ Ή-+ ++ Γ\,# ...J*&n ^ ++ Ή- Ή- + |Λ β v\- ff !..,«»s + Φ+ Hf+ 1H-+ +t Lcfc» ++ +++ +4 ++ >*ο«* hM t++ +++ - " KVsíJU# +++ ++ + K>u + ++ + + |"C p + +++ ++ Loet f"0«4 + Ή- + ' 801 P2-P-Bisamidato, monoamidato e monolactato
Ri % Ki ípM> '-Fr,λ fnMf diferença fSOV (#1) diferença 184WL90M CCÇl>n;M Ala-8u Ala-Bu + + + ort Ala-iPr ++ ++ DPI- LasniPr + + OH AJa-OH +-f P1-N-P2'-ácido fosfónico e ésteres
Ri H, KJ tp:M) ce&-5 {nMj diferença [£OV (#1) diferença J&4WLS0M OCso jlM HOs phendl +++ - nh£ OH +-f - NHs QEt + ++ ++ nh2 OBri + + + OEÍ +H·" +++ OH OH ++ - OH OBn ++ OG2H4NMe2 OH +++ + íX£H4-WM% OBn ++ -H- 802 Ρ1-Ν-Ρ2'-P-Bisamidato e monoamidato
Pl-NEt-P2'-P-Bisamidato e monoamidato
Pró-fármaco de fosfato de ampenavir
R1 r£ Kí (pfvl) ECgn. ξπΜ) 'diferença (SOV (#1) diferença J84V/L90M CCgg μΜ cesg 803 Pró-fármaco de fosfato de 94-003
Pró-fármaco de fosfato de GS77366 (Pl-mono(S)Lac-iPr)
Rt % Kl ípM) ce6Ç, (riMj diferença I50Y (#1) diferença J84WL&QM CC^M +*++
Pró-fármaco de valina de (Pl-mono (S)Lac-Et) JLnHè Q sl |
OCHgS?"~LâC*ií QPh
Η I f A. ...Μ, R, KJ ípM i CEeb (nM) diferença |SO-V (#1) diferença IMWL90M CC%,jM ++ 804
Pró-fármaco de valina de GS278053 (Pl-mono(S)Lac-Et,P2' CH2OH)
«1 R, Ki ípMí CE秷 (rtM) diferença tSÕV (#1) diferença j:84V,ÍL9ttM ++
Embora algumas das variantes tenham sido descritas minuciosamente supra, será evidente para os especialistas na matéria que são possíveis muitas modificações das variantes sem que haja afastamento do seu âmbito. Considera-se que todas essas modificações estão abrangidas pelas reivindicações da invenção.
Lisboa, 18/10/2007

Claims (32)

1 REIVINDICAÇÕES 1. Composto seleccionado entre as fórmulas estruturais
2
Y1 é independentemente 0, S, N(RX), N(0)(Rx), N(ORx), N (O) (ORx) ou N(N(RX) (Rx) ) ; Y2 é independentemente uma ligação, 0, N(RX), N(0) (Rx) , N(0Rx), N (0) (0RX) , N (N (Rx) (Rx) ) -S(0)M2-, ou -S(0)M2- S (0) M2 ~ Rx é independentemente H, R1, W3, um grupo de protecção, ou a fórmula:
RY é independentemente H, W3, R2 ou um grupo de protecção; R1 é independentemente H ou alquilo com 1 a 18 átomos de carbono; R2 é independentemente H, R3 ou R4, em que cada R4 é independentemente substituído com 0 a 3 grupos R3, ou, considerados em conjunto num átomo de carbono, dois grupos R2 formam um anel com 3 a 8 átomos de carbono e o anel pode ser substituído com 0 a 3 grupos R3; R3 é R3a, R3b, R3c ou R3d, desde que quando R3 é ligado a um heteroátomo, então R3 é R3c ou R3d; R3a é F, Cl, Br, I, -CN, N3 ou -N02; R3b é Y1; 3 R3c é -Rx, -N(RX)(RX), -SRX, -S(0)Rx, -S(0)2Rx, -S (0) (0RX) , S(0)2(0Rx), -0C(Y1)Rx, -0C(Y1)0Rx, -OCtY1) (N(RX) (Rx) ) , - SC (Y1) Rx, -SC (Y1) 0RX, -SC (Y1) (N (Rx) (Rx) ) , -N (Rx) C (Y1) Rx, - N (Rx) C (Y1) 0RX ou N (Rx) C (Y1) (N (Rx) Rx) ) ; R3c1 é -C(Y3)Rx, -C(Y3)ORx ou -C(Y3) (N(Rx) (Rx) ) ; R4 é um alquilo com 1 a 18 átomos de carbono, alcenilo com 2 a 18 átomos de carbono ou alcinilo com 2 a 18 átomos de carbono; R5 é R4 em que cada R4 é substituído com 0 a 3 grupos R3; W3 é W4 ou W5; W4 é R5, -C(Y3)R5, -C(Y3)W5, -S02R5, ou -S02W5; W5 é carbociclo ou heterociclo, em que W5 é independentemente substituído com 0 a 3 grupos R2; W6 é W3 independentemente substituído com 1, 2, ou 3 grupos A3; M2 é 0, 1 ou 2; M12a é 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, O 1—1 11 ou 12; Ml2b é o, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, o T-1 11 ou Cs] T—1 Mia, Mlc, e Mld são i ndependentemente 0 ou 1 e M12c é o, 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 9, 10, 11 ou 12 seus enantiómeros e diastereómeros, bem como os seus sais fisiologicamente aceitáveis.
2. Composto de acordo com a reivindicação 1 que possui a fórmula estrutural
4
3. Composto de acordo com a reivindicação 1 que possui a fórmula estrutural
4. Composto de acordo com a reivindicação 3 que possui a fórmula estrutural
5. Composto de acordo com a reivindicação 4 que possui a fórmula estrutural
6. Composto de acordo com a reivindicação 5 que possui a fórmula estrutural 5
7. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
em que Ri e R2 são seleccionados independentemente entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi e O-pivaloiloximetilo.
8 em que Ri e R2 são seleccionados independentemente entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi, O-pivaloiloximetilo e um éster lactato.
8. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi e O-pivaloiloximetilo. 6
9. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi e O-pivaloiloximetilo.
10. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi e O-pivaloiloximetilo.
11. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural 7
em que Rx e R2 São seleccionados independentemente entre -NR, em que R é alquilo (Ci-C6) ou um éster de aminoácido.
12 Ο
12. Composto de acordo com a reivindicação 11, em que Rx e R2 são seleccionados independentemente entre -NMe, -NEt, Gli-Et, Ala-Et, Aba-Et, Val-Et, Leu-Et, Phe-Bu e Phe-Et.
13. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
ou
14. Composto de acordo com a reivindicação 13, em que Ri é hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, fenoxi substituído ou benziloxi e R2 é Glc-Et, Lac-Me, Lac-Et, Lac-iPr, Lac-Bu, Lac-EtMor, Lac-Me, Lac-Et, Lac-Bn, Lac-OH, Hba-Et, Hba-TBu, Hba-OH, MeBut Et ou DiMePro-Me.
15. Composto de acordo com a reivindicação 14, em que o éster lactato é de configuração (R).
16. Composto de acordo com a reivindicação 14, em que o éster lactato é de configuração (S).
17. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
em que em que Ri é fenoxi, benziloxi, etoxi, trifluoroetoxi ou hidroxilo e R2 é um éster de aminoácido. 9
18. Composto de acordo com a reivindicação 17, em que o éster de aminoácido é seleccionado entre Gli-Bu, Ala-Me, Ala-Et, Ala-iPr, (D)Ala-iPr, Ala-Bu, Aba-Et, Aba-Bu e Ala-OH.
19. Composto de acordo com a reivindicação 6 que possui a fórmula estrutural
em que Ri e R2 são seleccionados independentemente entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi, O-pivaloiloximetilo, um éster de aminoácido e um éster lactato.
20. Composto de acordo com a reivindicação 19, em que Ri é hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, fenoxi substituído ou benziloxi e R2 é um éster lactato seleccionado entre Glc-Et, Lac-Me, Lac-Et, Lac-iPr, Lac-Bu, Lac-EtMor, Lac-Me, Lac-Et, Lac-Bn, Lac-OH, Hba-Et, Hba-tBu, Hba-OH, MeBut Et e DiMePro-Me.
21. Composto de acordo com a reivindicação 19, em que Ri é hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, fenoxi substituído ou benziloxi e R2 é um éster de aminoácido seleccionado entre Gli-Bu, Ala-Me, Ala- 10 Et, Ala-iPr, (D)Ala-iPr, Ala-Bu, Aba-Et, Aba-Bu e Ala-OH.
22. Composto de acordo com a reivindicação 1 que possui a fórmula estrutural:
Ri e R2 são seleccionados independentemente entre hidroxi, metoxi, etoxi, trifluoroetoxi, isopropoxi, fenoxi, benziloxi, O-pivaloiloximetilo, um éster de aminoácido e um éster lactato e 11 W5 é seleccionado entre as fórmulas estruturais:
23. Composto de acordo com a reivindicação 22, em que A e seleccionado entre:
24. Composto de acordo com a reivindicação 22 ou 23, em que W5a é
25. Composto de acordo com qualquer uma das reivindicações 22 a 24, em que M12a é 1, 2, 3 ou 4.
26. Composto de acordo com a reivindicação 22, em que A1 é seleccionado entre as fórmulas estruturais:
27. Utilização de um composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 26 para a preparação de um medicamento para o tratamento ou para a prevenção dos sintomas ou efeitos da infecção com VIH.
28. Utilização de um composto de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 26 para a preparação de um medicamento para o tratamento de distúrbios que afectam os leucócitos.
29. Composição farmacêutica que compreende um composto de fórmulas estruturais I a IV de acordo com uma qualquer das reivindicações 1 a 26 e veículos e excipientes convencionais e facultativamente outros agentes terapêuticos, em que, nas fórmulas estruturais I a VI, os símbolos Rx e Ry não podem representar um grupo de protecção.
30. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 29, a qual compreende um segundo composto que possui propriedades anti-VIH.
31. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 30, em que o segundo composto é seleccionado entre um inibidor nucleotídico da transcriptase reversa, um inibidor não nucleosídico da transcriptase reversa, um inibidor da protease do VIH e um inibidor da integrase do VIH. 13 REFERÊNCIAS CITADAS NA DESCRIÇÃO A lista de documentos referidos pelo autor do presente pedido de patente foi elaborada apenas para informação do leitor, não sendo parte integrante do documento de patente europeia. Não obstante o cuidado na sua elaboração, o IEP não assume qualquer responsabilidade por eventuais erros ou omissões. Patentes de invenção citadas na descrição • WO 60375622 A [0001] • WO 60375779 A [0001] • WO 60375834 A [0001] • WO 60375665 A [0001] • EP 00432695 A [0009] • EP 00432694 A [0009] • US 4816570 A [0036] • US 4968788 A [0036] [0104] • US 5663159 A [0036] [0195] • US 5792756 A [0036] • WO 9119721 A, Brook [0038] [0038] • U5 6312662 B, Erion [0038] • WO 9507920 A [0099] [0106] [0106] [0106] [0106] [0107] [0107] [0108] • WO 9421604 A [0101] • EP632048A [0103] • WO 9529922 A[0141] • WO 9631527 A [0141] • US 6436989 B [0141] • WO 9405639 A [0142] • US 5585397 A [0142] • US 5783A [0142] 14 US 70ΙΑ [0142] US 5856353 A [0142] US 5977137 A [0142] US 6004957 A [0142] WO 9633184 A [0142] US 5723490 A [0142] WO 9633187 A[0142] US 5691372 A [0142] US 5990155 A [0142] WO 9933793 A [0142] WO 9933815 A [0142] WO 9965870 A [0142] WO 0047551 A [0142] [0425] [0426] WO 0076961 A [0142] WO 9933792 A [0142] WO 9524385 A [0142] US 6127372 A [0142] US 20020103378 Al, Hajima [0199] US 6018049 A [0199] WO 9615111 A, Hoye, T. [0214] [0286] WO 9607642 A [0223] [0223] [0223] [0286] [0286] [0286] [0286] [0286] [0286] [0286] US 6391919 B [0224] US 6391919 BI [0238] WO 9218490 A [0272] DE 3004370 [0275] WO 0036136 A [0281] [0284] EP 209751 A [0302] [0302] WO 9811052 A [0310] WO 9417035 A [0312] DE 4443892 [0317] 15 • JP 9124630 B [0423] [0424] [0425] [0427] • US 5886179 A [0423] Literatura citada na descrição, para além das patentes de invenção • DECLERCO E. Annals of the New York Academy of Sciences, 1994, vol. 724, 438-456 [0004] • BARRE-SINOUSSI F. Lancet, 1996, vol. 348, 31-35 [0004] • TARRAGO et al. FASEB Journal, 1994, vol. 8, 497-503 [0004] • FRANKEL et al. Annual Review of Biochemistry, 1998, vol. 67, 1-25 [0004] • KATZ et al. Annual Review of Biochemistry, 1994, vol. 63, 133-173 [0004] • HELM K. Biological Chemistry, 1996, vol. 377, 765-774 [0004] • HOTTIGER et al. Biological Chemistry Hoppe-Seyler, 1996, vol. 377, 97-120 [0004] • ASANTE et al. Advances in Virus Research, 1999, vol. 52, 351-369 [0004] • WLODAWER A. Advances in Virus Research, 1999, vol. 52, 335-350 [0004] • ESPOSITO et al. Advances in Virus Research, 1999, vol. 52, 31 9-333 [0004] • L. RATNER et al. Nature, 1985, vol. 313, 277-284 [0005] • L. H. PEARL; W. R. TAYLOR. Nature, 1987, vol. 329, 351 [0005] • S. WAIN-HOBSON et al. Cell, 1985, vol. 40, 9-17 [0005] • R. SANCHEZ-PESCADOR et al. Science, 1985, vol. 227, 484-492 [0005] 16 • Μ. A. MUESING et al. Nature, 1985, vol. 313, 450-458 [0005] • Y. YOSHINAKA et al. Proc. Natl. Acad. Sei. USA, 1985, vol. 82, 1618-1622 [0006] • Y. YOSHINAKA et al. J. Virol., 1985, vol.55,870-873 [0006] • Y. YOSHINAKA et al. J. Virol., 1986, vol.57,826-832 [0006] • K. VON DER HELM. Proc. Nat . Acad. Sei., USA, 1977, vol. 74, 911-915 [0006] • T.J. MCOUADE et al. Science, 1990, vol. 247, 454 [0006] • SMITH et al. Clinicai Investigator, 1994, vol. 17, 226-243 [0007] • JOHNSON et al. Advances in Internai Medicine, 2000, vol. 45, 1-40 [0007] • PORCHE DJ. Nursing Clinics of North America, 1999, vol. 34, 95-112 [0007] • L.H. PEARL; W.R. TAYLOR. Nature, 1987, vol. 329, 351-354 [0008] • I. KATOH et al. Nature, 1987, vol. 329, 654-656 [0008] • P.L. DARKE et al. J. Biol. Chem., 1989, vol. 264, 2307-2312 [0008] • J. SCHNEIDER; S.B. KENT. Cellf 1988, vol. 54, 363-368 [0008] • R.F. NUTT et al. Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 1988, vol. 85, 71 29-71 33 [0008] • N.E. KOHL et al. Proc. Natl. Acad. Sci.r USA, 1988, vol. 85, 4686-4690 [0008] • P.L. DARKE et al. J. Biol. Chem., 1989, vol. 264, 2307-2312 [0008] 17 • S. SEELMEIER et al. Proc. Natl. Acad. Sei., USA, 1988, vol. 85, 6612-6616 [0008] • C.-Z. GIAM; I. BORSOS. J. Biol. Chem., 1988, vol. 263, 14617-14720 [0008] • J. HANSEN et al. EMBO J., 1988, vol. 7, 1785-1791 [0008] • P. L. DARKE et al. Biochem. Biophys. Res. Communs., 1988, vol. 156, 297-303 [0008] • M.A. NAVIA et al. Nature, 1989, vol. 337, 61 5-620 [0008] • M. MILLER et al. Nature, 1989, vol. 337, 576-579 [0008] • JOSEPH A. MARTIN. Recent Advances in the Design of VIH Proteinase Inhibitors. Antiviral Research, 1992, vol. 17, 265-278 [0008] • J. VIH Ther., 2001, vol. 6 (4), 96-99 [0008] • Medline Print-out. Japanese Journal of Clinicai Medicine, Abril de 2002 [0008] • PALELLA et al. N. Engl. J. Med., 1998, vol. 338, 853-860 [0011] • RICHMAN, D.D. Nature, 2001, vol. 410, 995-1001 [0011] • Design and Application of Prodrugs. BUNDGAARD, HANS. Textbook of Drug Design and Development. Harwood Academic Publishers, 1991, 113-191 [0035] • FAROUHAR et al. J. Pharm. Sei., 1983, vol. 72, 324 [0036] • DELAMBERT et al. J. Med. Chem., 1994, vol. 37, 498 [0038] • KHAMNEI; TORRENCE. J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 4109-4115 [0038] • MITCHELL et al. J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1992, vol. I, 2345 [0038] • PUECH et al. Antiviral Res., 1993, vol. 22,155-174 [0038] • BENZARIA et al. J. Med Chem., 1996, vol.39, 4958 [0038] • THEODORA W. GREENE. Protective Groups in Organic Chemistry., John Wiley & Sons, Inc, 1991 [0039] [0095] 18 • PAQUETTE, LEO A. Principies of Modem Heterocyclic Chemistry. W.A. Benjamin, 1968 [0052] • The Chemistry of Heterocyclic Compounds, A series of Monographs. John Wiley & Sons, 1950 [0052] • J. Am. Chem. Soc., 1960, vol. 13, 1482-5566 [0052] • McGraw-Hill Dictionary of Chemical Terms. McGraw-Hill Book Company, 1984 [0063] • ELIEL, E.; WILEN, S. Stereochemistry of Organic Compounds. John Wiley & Sons, Inc, 1994 [0063] • KOCIENSKI, PHILIP J. Protecting Groups. Georg Thieme Verlag Stuttgart, 1994 [0095] • Protecting Groups: An OverView, 1-20 [0095] • Hydroxyl Protecting Groups, 21-94 [0095] • Diol Protecting Groups, 95-117 [0095] • Carboxyl Protecting Groups, 118-154 [0095] • Carbonyl Protecting Groups, 155-184 [0095] • FREEMAN; ROSS. Progress in Medicinal Chemistry, 1997, vol. 34, 112-147 [0098] • CLAYTON et al. Antimicrob. Agents Chemo., 1974, vol. 5 (6), 670-671 [0100] • SAKAMOTO et al. Chem. Pharm. Buli., 1984, vol.
32 (6), 2241-2248 [0100] • ALEXANDER, J. et al. J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 480-486 [0114] • SPATOLA, A.F. Chemistry and Biochemistry of Amino Acids, Peptides and Proteins. Mareei Dekker, 1983, 267 [0119] • BAI, J.P.F. Pharm Res., 1992, vol.9, 969-978 [0135] • Handbook of Pharmaceutical Excipients, 1986 [0158] • Remington's Pharmaceutical Sciences. Mack Publishing Co, [0160] 19 • ΙΑΝ Τ. HARRISON; SHUYEN HARRISON. Compendium of Organic Synthetic Methods. John Wiley, 1971, vol.l [0194] • ΙΑΝ T. HARRISON; SHUYEN HARRISON. COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS. JOHN WILEY, 1974, vol. 2 [0194] • LOUIS S. HEGEDUS; LEROY WADE. COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS. JOHN WILEY, 1977, vol. 3 [0194] • LEROY G. WADE, JR. COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS. JOHN WILEY, 1980, vol.4 [0194] • LEROY G. WADE, JR. COMPENDIUM OF ORGANIC SYNTHETIC METHODS. JOHN WILEY, 1984, vol.5 [0194] • MICHAEL B. SMITH; MARCH, J. Advanced Organic Chemistry, Terceira edição. John Wiley, 1985, vol. 6 [0194] • Comprehensive Organic Synthesis. Selectivity, Strategy & Efficiency in Modem Organic Chemistry. In 9 Volumes. Pergamon Press, 1993 [0194] • QUAST et al. Synthesis, 1974, 490 [0195] • STOWELL et al. Tetrahedron Lett., 1990, 3261 [0195] • WISSNER et al. J. Med Chem., 1992, vol. 35, 1650 [0196] • ANDERSON et al. J. Org. Chem., 1984, vol.49, 1304 [0196] • PATOIS et al. J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1990, vol. I, 1577 [0196] • SILVERBURG et al. Tetrahedron Lett., 1996, vol. 37, 771-774 [0196] • WATANABE et al. Tetrahedron Lett., 1988, vol. 29, 5763-66 [0196] • MITSUNOBU. Synthesis, 1981, 1 [0197] • CAMPBELL. J. Org. Chem., 1992, vol. 52, 6331 [0197] • ALEXANDER et al. Collect. Czech. Chem. Commun., 1994, vol. 59, 1853 [0197] • CASARA et al. Bioorg. Med. Chem. Lett., 1992, vol. 2, 145 [0197] 20 • OHASHI et al. Tetrahedron Lett., 1988, vol.29, 1189 [0197] • CAMPAGNE et al. Tetrahedron Lett., 1993, vol. 34, 6743 [0197] • BALTHAZAR et al . J. Org. Chem., 1980, vol. 45, 5425 [0198] • PETRAKIS et al. J. Am. Chem . Soc., 1987, vol. 109, 2831 [0198] • LU et al. Synthesis, 1987, 726 [0198] • MELVIN. Tetrahedron Lett., 1981, vol. 22, 3375 [0198] • CASTEEL et al. Synthesis, 1991, 691 [0198] • REDMORE. J. Org. Chem., 1970, vol. 35, 4114 [0198] • E. L. ELIEL. Stereochemistry of Carbon Compounds. McGraw Hill, 1962 [0212] • LOCHMULLER, C. H. J. Chromatogr., 1975, vol.113 (3), 283-302 [0212] • ELIEL, E.; WILEN, S. Stereochemistry of Organic Compounds. John Wiley & Sons, Inc, 1994, 322 [0214] • JACOB III. J. Org. Chem., 1982, vol. 47, 4165 [0214] • Chiral Liquid Chromatography. Chapman and Hall, 1989 [0214] • OKAMOTO. J. of Chromatogr. , 1990, vol. 513, 375-378 [0214] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990 [0220] [0289] • J. MARCH. Advanced Organic Chemistry. McGraw Hill, 1968, 334 [0221] • T.W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1999, 603-615 [0221] • T.W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1999, 503ff [0221] 21 • S.R.SANDLER; W. KARO. Organic Functional Group Preparations. Academic Press, 1968, 274 [0221] • J. Am. Chem Soc., 1970, vol. 92, 2139 [0223] • T.W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1999, 520-525 [0224] • Comprehensive Organic Transformations. 1999, 821ff [0225] • J. Org. Chem, 2000, vol. 65, 1623 [0231] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. 1990, 191 [0231] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. 335 [0231] • Tet. Lett.f 2000, vol. 41, 7017 [0232] • J. Med. Chem., 1994, vol. 37, 1758 [0236] [0281] [0425] • Chimia, 1996, vol. 50, 532 [0237] • J. Org. Chem., 1996, vol. 61, 3635 [0238] [0282] • J. Am. Chem. Soc., 1933, vol. 55, 1676 [0269] • T. W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1991, 268 [0269] Can. J. Chem. , 1983, vol. 61, 712 [0269] J. Med. Chem ., 1992, vol. 35, 1371 [0270] [0288] [0292] [0294] Can. J. Chem. , 1970, vol. 48, 1346 [0270] T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. 1990, 17 [0270] • J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1974, 298 [0270] • Yakugaku Zasshi 1971, vol. 91, 257 [0271] • T. W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1991, 253 [0271] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 77 [0271] 22 • R. C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 448 [0271] [0277] • F.A.CAREY; R.J. SUNDBERG. Advanced Organic Chemistry, Part B. Plenum, 2001, 153-4 [0271] [0277] [0290] • Org. React., 1992, vol. 42, 335-656 [0271] [0290] • J. CHEM. SOC., C. J. Chem. Soc., C, 1966, 1191 [0271] • F. A. CAREY; R. J. SUNDBERG. Advanced Organic Chemistry. Plenum, 2001, 503ff [0272] [0299] • Acc. Chem. Res., 1979, vol. 12, 146 [0272] • J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 949 [0272] [0299] • J. Organomet. Chem, 1999, vol. 581, 82 [0273] • J. Labelled. Comp. Radiopharm., 1992, vol. 31, 175 [0274] • J. Chem. Soc. Perkin Trans., 1977, vol.2, 789 [0274] • J. TSUJI. Palladium reagents and catalysts. Wiley, 1995, 218 [0274] • J. HET. CHEM. J. Het. Chem., 1989, vol. 26, 929 [0275] • J. LABELLED COMP. RADIOPHARM. J. Labelled Comp. Radiopharm., 1998, vol. 41, 1103 [0275] • J. Am Chem. Soc., 1987, vol. 109, 620 [0275] • Chemistry of Heterocyclic Compounds. Wiley, 1977, vol. 32, 93ff [0275] • Chemistry of Heterocyclic Compounds, 1952, vol. 4, 204 [0275] • R.B. WAGNER; H.D. ZOOK. Synthetic Organic Chemistry. Wiley, 1953, 167, 94 [0276] • Sulfur Lett., 2000, vol. 24, 123 [0276] • S.R.SANDLER; W. ÍCARO. Organic Functional Group Preparations. Academic Press, 1968, 83 [0276] • S.R.SANDLER; W. KARO. Organic Functional Group Preparations. Academic Press, 1968, 138 [0276] 23 • SULFUR LETT. Sulfur Lett., 2000, vol. 24, 123 [0276] [0276] • J. Het. Chem, 1989, vol. 26, 929 [0277] • F.A. CAREY; R.J. SUN DBERG. Advanced Organic Chemistry. Plenum, 2001, 503ff [0278] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 5 [0278] • J. Labelled Comp. Radiopharm., 1998, vol.41, 1103 [0278] • Angew. Chem. Int. 1965, vol. 4, 271 [0278] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 421 [0279] • F.A.CAREY; R.J. SUNDBERG. Advanced Organic Chemistry, Part B. Plenum, 2001, 269 [0279] • J. Org. Chem, 1990, vol. 55, 2552 [0279] • J. Am. Chem. Soc., 1987, vol. 109, 620 [0280] • J. Am Chem Soc., 1997, vol. 119, 7173 [0281] • Helv. Chim. Acta, 1978, vol. 58, 1465 [0281] • Acta Chem Scand., 1977, vol. B31, 109 [0281] • Syn. Com., 1998, vol. 28, 4279 [0281] • Recent Dev. Synth. Org. Chem., 1992, vol. 2, 35 [0281] • J. Med. Chem, 1998, vol. 41, 1034 [0281] • Tet. Lett., 1986, vol. 27, 1477 [0283] [0297] • Synthesis, 1994, vol. 9, 909 [0284] [0298] [0321] • J. Am. Chem. Soc., 1986, vol. 108, 1035 [0285] • Syn. Comm, 1998, vol. 28, 4279 [0285] • J. Org. Chem., 2000, vol. 65, 676 [0285] [0304] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 358 [0286] [0304] [0304] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 620 [0286] 24 • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 211 [0286] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 317 [0286] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 966 [0286] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 550 [0286] • Synthesis, 1981, 56 [0288] • Pept. Res., 1990, vol. 3, 176 [0288] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 10-277 [0289] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 10-6886 [0289] • Buli. Chem. Soc. Jpn., 1974, vol. 37, 433 [0289] [0292] • J. Am Chem. Soc., 1972, vol. 94, 6190 [0289] • Chem. Pharm. Buli., 1978, vol. 26, 1576 [0289] [0290] • R C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 448 [0290] • ORG. REACT. Org. React., 1992, vol. 42, 335 [0290] [0295] • J. Am. Chem. Soc., 1997, vol. 119, 7173 [0290] • Chem. Pharm Buli., 1978, vol. 26, 1576 [0290] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 277 [0292] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, vol. 10, 68-86 [0292] • Int. J. Pept. Protein Res., 1982, vol. 20, 434 [0292] • J. Chem. Soc., Chem. Comm., 1986, 1501 [0292] • T. W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1991, 287 [0293] • J. Org. Chem., 1966, vol. 31, 1118 [0293] 25 • T. W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1991,298 [0294] [0297] • Handb. Organophosphorus Chem, 1992, 115 [0294] • J. Am. Chem. Soc., 1963, vol. 85, 1337 [0294] [0297] • Synthesis, 1998, vol. 4, 327 [0295] • Acc. Chem Res., 1979, vol. 12, 146 [0299] • J. Med. Chem, 1992, vol. 35, 1371 [0299] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 57 [0300] • J. Org. Chem, 1984, vol. 49, 5237 [0300] • T. W. GREENE; P.G.M. WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1991, 297 [0300] • J. Organomet. Chem., 1999, vol. 581, 82 [0300] • J. Chem. Soc., Perkin Trans., 1977, vol.2, 789 [0300] • Tetrahedron, 1998, vol. 54, 9341 [0301] • J. Org. Chem, 1966, vol. 31, 3980 [0302] • Syn., 1994, vol. 10, 1018 [0302] • Tet. Lett., 1986, vol. 27, 4565 [0302] • J. Het. Chem, 1991, vol. 28, 1517 [0302] • J. Med. Chem, 1979, vol. 22, 599 [0302] • Sulfur Letters, 2000, vol. 24, 123 [0302] • Comprehensive Organic Functional Group Preparations. Pergamon, 1995, vol.2, 707 [0302] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis, 1990, 309 [0304] • S.R.SANDLER; W. KARO. Organic Functional Group Preparations, 1968, 274 [0304] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Trans formations, 1989, 972ff [0304] • T.W. GREENE; P.G.M WUTS. Protective Groups in Organic Synthesis. Wiley, 1990, 309ff [0304] 26 • Org. Prep. Proc. Int., 1976, vol. 8, 75 [0305] • J. Organomet. Chem, 1999, vol. 581, 62 [0305] • Tet., 1998, vol. 54, 2365 [0306] • Tet., 1999, vol. 55, 10815 [0308] [0308] • J. Am. Chem. Soc., 2000, vol. 122, 1554 [0308] • J. Chem. Soc. Perkin, 1995, vol. 2, 1381 [0309] • Proc. Nat. Acad. Sei., 1972, vol. 69, 730 [0309] • J. Org. Chem, 1978, vol. 43, 4593 [0312] • Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001, vol. 9, 525 [0319] • J. Org. Chem, 2000, vol. 65, 676 [0320] [0322] • Bioorg. Med. Chem Lett., 1999, vol. 9, 1715 [0321] • Macromolecules, 1991, vol. 24, 1710 [0326] • J. TSUJI. Palladium Reagents and Catalysts. Wiley, 1995, 218 [0327] • R.C. LAROCK. Comprehensive Organic Transformations. VCH, 1989, 527ff [0328] • R B. WAGNER; H. D. ZOOK. Synthetic Organic Chemistry. Wiley, 1953, 813 [0329] • Tet., 1965, vol. 21, 2271 [0329] • J. Am. Chem. Soc., 1937, vol. 59, 811 [0329] • Rec. Tray. Chim., 1935, vol. 54, 205 [0329] • Tet. Let., 1963, 1131 [0329] • Aust. J. Chem., 1984, vol. 37, 2231 [0329] • Chem Pharm. Buli., 1978, vol. 26, 1576 [0330] • Chem Pharm Buli., 1978, vol. 26, 1576 [0330] • J. Am. Chem Soc., 2000, vol. 122, 1554 [0331] • Ang. Chem. int. Ed. Engl., 1998, vol. 37, 481 [0333] • Pharmazie, 1973, vol. 28, 433 [0334] • R. B. WAGNER; H. D. ZOOK. Synthetic Organic Chemistry. Wiley, 1953, 821 [0335] • Synthesis, 1987, vol. 4, 409 [0336] 27 • J. Med. Chem., 1980, vol. 12, 1376 [0336] • Comprehensive Organic Functional Group Transformations. Pergamon, 1995, vol. 6, 416ff [0337] • S. R. SANDLER; W. KARO. Organic Functional Group Preparations. Academic Press, 1986, 260ff [0337] • Org. Syn. Coll., 1965, vol. 3, 167 [0338] [0338] • Org. Syn. Coll., 1988, vol. 6, 715 [0338] • J. Med. Chem., 1989, vol. 32, 357 [0338] • Can. J. Chem., 1982, vol. 60, 976 [0338] • Syn., 1986, 303 [0338] • Chem Ber., 1985, vol. 118, 468 [0338] • Tet. Lett., 2001, vol. 42, 5227 [0338] • Syn., 1977, 704 [0338] [0338] • Synthesis, 1993, 908 [0338] • Tet. Lett., 1992, 2781 [0338] • Tet. Lett., 1991, 4251 [0338] • Syn., 1993, 199 [0338] • Syn., 1982, 404 [0339] • R.B. WAGNER; H.D. ZOOK. Synthetic Organic Chemistry. Wiley, 1953, 647 [0339] • R.B. WAGNER; H.D. ZOOK. Synthetic Organic Chemistry, 1953, 645 [0339] • Chem Lett., 1972, 373 [0339] • Organic Phosphorus Compounds. Wiley, 1976, 9ff [0340] [0356] • J. Org. Chem, 1995, vol. 60, 2946 [0341] • J. Org. Chem., 1973, vol. 38, 3224 [0341] [0357] • J. Chem. Soc., Chem. Comm., 1979, 739 [0342] [0358] • Helv. Chim. Acta., 1985, vol. 68, 618 [0342] [0358] • J. Org. Chem., 1959, vol. 24, 434 [0342] [0358] • J. Am. Chem Soc., 1956, vol. 78, 2336 [0342] 28 • Organic Phosphorus Compounds. Wiley, 1976, 17 [0343] [0359] [0375] • J. Org. Chem., 1995, vol. 60, 2946 [0357] [0371] • J. Arner. Chem. Soc., 1956, vol. 78, 2336 [0358] • J. GEN. CHEM USSR. J. Gen. Chem USSR, 1983, vol. 53, 480 [0364] • Zh. ObscheiKhim., 1958, vol.28, 1063 [0364] [0376] • J. Org. Chem, 1994, vol. 59, 6144 [0364] [0364] • J. Am. Chem. Soc., 1994, vol. 116, 3251 [0364] • J. Org. Chem., 2001, vol. 66, 329 [0364] [0403] • J. Med. Chem, 1995, vol. 38, 1372 [0364] • J. Chem. Soc., Chem Comm., 1991, 312 [0365] • Nucleosides Nucleotides, 2000, vol. 19, 1885 [0365] [0365] • J. Med. Chem., 1995, vol. 38, 4958 [0365] • Tet. Lett., 1996, 7857 [0365] • Bioorg. Med. Chem. Lett., 1998, vol. 8, 663 [0365] • J. Chem. Soc., Chem. Comm., vol. 1991, 312 [0365] • J. Med. Chem, 1980, vol. 23, 1299 [0365] • COLL. CZECH. Chem Comm, 1987, vol. 52, 2792 [0365] • Tet. Lett., 2001, vol. 42, 8841 [0365] J. Org. Chem, 1995, vol. 60, 5214 [0366] [0370] J. Med. Chem., 1997, vol. , 40, 3842 [0366] [0367] J. Med. Chem., 1996, vol. , 39, 4958 [0366] J. Org. Chem., 1984, vol. , 49, 1158 [0366] Bioorg. Med. Chem Lett., 1998, vol. 8, 1013 [0366] Tet. Lett., 1996, vol. 37, 3997 [0366] Nucleosides Nucleotides, 1995, vol. 14, 871 [0366] J. Med. Chem., 1988, vol. 31, 1305 [0366] Org. Lett., 2001, vol. 3, 643 [0367] Anal. Chem, 1987, vol. 59, 1056 [0368] 29 • J. Chem Soc. Perkin Trans., 1993, vol. 1(19), 2303 [0368] • J. Med. Chem., 1995, vol. 38, 1372 [0368] [0409] • Tet. Lett., 2002, vol. 43,1161 [0368] • J. Am. Chem. Soc., 1957, vol. 79, 3575 [0370] • J. Med. Chem, 1995, vol. 38, 2742 [0370] [0371] • J. Chem. Soc., Chem Comm, 1991, 1063 [0373] • J. Med. Chem., 2002, vol. 45, 1284 [0375] [0403] • J. Chem Soc. Chem. Comm, 1991, 312 [0375] • Nucleosides and Nucleotides, 2000, vol. 10, 1885 [0375] • J. Chem. Soc. Chem. Comm., 1991, 312 [0378] • Tet. Let., 1994, vol. 35, 4097 [0381] • Organic Phosphorus Compounds, 1976 [0383] • J. Gen. Chem USSR., 1983, vol. 32, 367 [0387] • Tet. Lett., vol. 2401 (42), 8841 [0390] • Synlett., 1998, vol. 1, 73 [0394] • Aust. J. Chem, 1963, 609 [0397] • Tet., 1999, vol. 55, 12997 [0397] • Org. Lett., 2001, 643 [0400] • Nucleosides and Nucleotides, 2000, vol. 19, 1885 [0403] • J. Med. Chem., 1995, vol. 38, 4648 [0407] • AnaL Chem., 1987, vol. 59, 1056 [0409] • Syn. Comm., 1995, vol. 25, 3565 [0409] • Anal. Chem., 1987, vol. 59, 1056 [0416] • Bioorg. & Med. Chem. Lett., 1995, vol.5, 459 [0423] • Bioorg. & Med. Chem. Lett., 1997, vol.7, 1847 [0423] • J. Med. Chem., 1997, vol. 40, 2525 [0423] [0423] • J. Med. Chem, 1992, vol. 35, 2958 [0423] • J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 3278 [0423] • J. Med. Chem., 1992, vol. 35, 2958 [0423] • J. Med. Chem., 1994, vol. 37, 1758 [0423] • Chem. Pharm. Buli., 1982, vol. 30, 111 [0423] 30 • J. Med. Chem, 1997, vol. 40, 2525 [0423] • J. Org. Chem., 1988, vol. 53, 3457 [0423] • J. Organomet. Chem., FR, 1976, vol. 122, 123 [0428] • Bioorg. Med. Chem. Lett., 1999, vol. 9, 3069 [0428] • Aldrichimica Acta, 1983, vol. 16, 3 [0443] [0456] [0633] • GHOSH et al. J. Med. Chem., 1996, vol. 39, 3278 [0448] [0464] [0472] [0613] [0619] [0721] • J. Med. Chem., 1994, vol. 37, 1857 [0466] • Buli. Chem. Soc. Jpn., 1988, vol. 61, 4491 [0466] • BROWN et al. J. Amer. Chem Soc., 1955, vol. 77, 1089-1091 [0482] • Tetrahedron, 1995, vol. 51(35), 9737-9746 [0491] • J. Med. Chem., 1992, vol.35 (10), 1681-1701 [0505] • A. FLOHR et al. J. Med. Chem., 1999, vol. 42 (12), 2633-2640 [0536] • Bioorg. Med. Chem. Lett., 2001,vol. 11, 1261 [0641] • GHOSH et al. J. Med. Chem, 1996, vol. 39, 3278 [0643] [0659] • KRATZL et al. Monatsh. Chem., 1952, vol. 83, 1042-1043 [0663] • HOSTETLER et al. J. Org. Chem., 1999, vol. 64, 178-185 [0713] [0929] • J. Med. Chem., 1999, vol. 42, 5010-5019 [0715] [0931] • KARAMAN, R. et al. J. Am. Chem. Soc., 1992, vol. 114, 4889 [0734] • TOJA, E. et al. Eur. J. Med. Chem., 1991, vol. 26, 403 [0753] • J. Med. Chem., 1992, vol. 35, 3525 [0848] • J. Med. Chem, 1994, vol. 37, 3492 [0848] • J. Med. Chem., 2000, vol. 43, 721 [0848] • Bioorg. Med. Chem. Lett., 1999, vol. 9, 2747 [0848] 31 • J. Org. Chem, 1999, vol. 64, 12 [0941] • J. Org. Chem., 1992, vol. 57, 5813 [0941] • Syn. Lett., 1997, vol. 8, 893 [0941] • Tetrahedron Lett., 1980, vol. 21, 1623 [0941] • M.V.TOTH; G.R.MARSHALL. Int. J. Peptide Protein Res., 1990, vol. 36, 544 [1015] • ERMOLIEFF J. ; LIN X.; TANG J. Biochemistry, 1997, vol. 36, 12364 [1018] • WEISLOW OS; KlSER R; FINE DL; BADER J; SHOEMAKER RH; BOYD MR. J. Natl. Câncer Inst., 1989, vol. 81, 577 [1019] • WEISLOW OS; KlSER R; FINE DL; BADER J; SHOEMAKER RH; BOYD MR. J. Natl. Câncer Inst., 1989, vol. 81, 577 [1021] • MAGUIRE et al. Antimicrob. Agents Chemother., 2002, vol. 46, 731 [1023] • GONG et al. Antimicrob. Agents Chemother., 2000, vol. 44, 2319 [1023] • VANDAMME AND DE CLERCO. Antiviral Therapy. ASM Press, 2001, 243 [1023] • SHI; MELLORS. Antimicrob. Agents Chemother., 1997, vol. 41, 2781-85 [1024] • PARTALEDIS et al. J. Virol. , 1995, vol. 69, 5228-5235 [1024] • Guide for the Care and Use of Laboratory Animais. 1996 [1030] • B.L: ROBINS; R.V. SRINIVAS; C.KIM; N.BISCHOFBERGER; A.FRIDLAND. Antimicrob. Agents Chemother., 1998, vol. 42, 612 [1035] • A. POMPON; I. LEFEBVRE; J-L. IMBACH; S. KAHN; D. FAROUHAR. Antiviral Chemistry & Chemotherapy, 1994, vol. 5, 91-98 [1050] Lisboa, 18/10/2007
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Families Citing this family (130)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US20050239054A1 (en) * 2002-04-26 2005-10-27 Arimilli Murty N Method and compositions for identifying anti-HIV therapeutic compounds
AU2003231766A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-10 Gilead Sciences, Inc. Non nucleoside reverse transcriptase inhibitors
EP1565428A1 (en) * 2002-11-27 2005-08-24 Elan Pharmaceuticals, Inc. Substituted ureas and carbamates
US20060246130A1 (en) 2003-01-14 2006-11-02 Dahl Terrence C Compositions and methods for combination antiviral therapy
US7432261B2 (en) * 2003-04-25 2008-10-07 Gilead Sciences, Inc. Anti-inflammatory phosphonate compounds
WO2004096285A2 (en) * 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Anti-infective phosphonate conjugates
US20090247488A1 (en) * 2003-04-25 2009-10-01 Carina Cannizzaro Anti-inflammatory phosphonate compounds
KR20060022647A (ko) * 2003-04-25 2006-03-10 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 키나아제 억제 포스포네이트 유사체
US7470724B2 (en) 2003-04-25 2008-12-30 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate compounds having immuno-modulatory activity
US20050261237A1 (en) * 2003-04-25 2005-11-24 Boojamra Constantine G Nucleoside phosphonate analogs
ATE490788T1 (de) 2003-04-25 2010-12-15 Gilead Sciences Inc Antivirale phosphonate analoge
US7407965B2 (en) 2003-04-25 2008-08-05 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
CN101410120A (zh) * 2003-04-25 2009-04-15 吉里德科学公司 抗炎的膦酸酯化合物
WO2005047898A2 (en) * 2003-10-24 2005-05-26 Gilead Sciences, Inc. Methods and compositions for identifying therapeutic compounds
NZ542343A (en) * 2003-04-25 2009-03-31 Gilead Sciences Inc Immunomodulator phosphonate conjugates
WO2004096233A2 (en) * 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Nucleoside phosphonate conjugates
WO2004096237A2 (en) * 2003-04-25 2004-11-11 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs for treating metabolic diseases
US7452901B2 (en) * 2003-04-25 2008-11-18 Gilead Sciences, Inc. Anti-cancer phosphonate analogs
US7427636B2 (en) * 2003-04-25 2008-09-23 Gilead Sciences, Inc. Inosine monophosphate dehydrogenase inhibitory phosphonate compounds
WO2005002626A2 (en) * 2003-04-25 2005-01-13 Gilead Sciences, Inc. Therapeutic phosphonate compounds
US7491794B2 (en) * 2003-10-14 2009-02-17 Intermune, Inc. Macrocyclic compounds as inhibitors of viral replication
US7432273B2 (en) 2003-10-24 2008-10-07 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs of antimetabolites
WO2005044279A1 (en) * 2003-10-24 2005-05-19 Gilead Sciences, Inc. Purine nucleoside phosphonate conjugates
US20070281907A1 (en) * 2003-12-22 2007-12-06 Watkins William J Kinase Inhibitor Phosphonate Conjugates
JP2007515495A (ja) * 2003-12-22 2007-06-14 ギリアード サイエンシーズ， インコーポレイテッド ４’−置換カルボビル誘導体およびアバカビル誘導体ならびにｈｉｖおよびｈｃｖ抗ウイルス活性を有する関連化合物
US20050153990A1 (en) * 2003-12-22 2005-07-14 Watkins William J. Phosphonate substituted kinase inhibitors
MXPA06007095A (es) * 2003-12-22 2006-09-04 Gilead Sciences Inc Conjugados de fosfonato inhibidores de cinasa.
MXPA06007906A (es) * 2004-01-12 2007-02-14 Gilead Sciences Inc Compuestos antivirales de fosfonato de pirimidilo y metodos de uso.
CA2562713A1 (en) * 2004-04-14 2005-12-15 Gilead Sciences, Inc. Phosphonate analogs of hiv integrase inhibitor compounds
DE602005027466D1 (de) * 2004-07-27 2011-05-26 Gilead Sciences Inc Nukleosid phosphonat konjugate als anti hiv mittel
AU2011218664B2 (en) * 2004-07-27 2014-08-21 Gilead Sciences, Inc. Antiviral compounds
SG155939A1 (en) * 2004-09-17 2009-10-29 Idenix Pharmaceuticals Inc Phosphoindoles as hiv inhibitors
UA88325C2 (en) * 2004-09-17 2009-10-12 Айденикс Фармасьютикалз, Инк. Phosphoindoles as hiv inhibitors
BRPI0516132A (pt) 2004-10-07 2007-12-04 Vitae Pharmaceuticals Inc compostos, composição destes, método de antagonização de uma ou mais proteases aspárticas e método para tratar ou melhorar um distúrbio mediado por protease aspártica
JP2008520575A (ja) 2004-11-15 2008-06-19 セプタイア インコーポレイテッド プロテインチロシンホスファターゼ阻害剤およびその使用方法
US8101745B2 (en) 2004-12-16 2012-01-24 The Regents Of The University Of California Lung-targeted drugs
BRPI0607827B8 (pt) 2005-02-25 2021-05-25 Janssen R & D Ireland composto precursor de inibidor de protease, processo para a produção do referido composto e seu uso
JP2008535862A (ja) * 2005-04-08 2008-09-04 キメリクス，インコーポレイテッド ポックスウイルス感染の治療のための化合物、組成物および方法
JP2008538354A (ja) * 2005-04-08 2008-10-23 キメリクス，インコーポレイテッド ウイルス感染症およびその他の内科疾患を治療するための化合物、組成物および方法
AR053845A1 (es) 2005-04-15 2007-05-23 Tibotec Pharm Ltd 5-tiazolilmetil[(1s,2r)-3-[[(2-amino-6-benzoxazolil)sulfonil)](2-metilpropil)amino]-2-hidroxi-1-(fenilmetil)propil]carbamato como mejorador de farmacos metabolizados por el citocromo p450
TWI471145B (zh) 2005-06-13 2015-02-01 Bristol Myers Squibb & Gilead Sciences Llc 單一式藥學劑量型
TWI375560B (en) * 2005-06-13 2012-11-01 Gilead Sciences Inc Composition comprising dry granulated emtricitabine and tenofovir df and method for making the same
EP2103623A3 (en) 2005-07-25 2009-12-16 Intermune, Inc. Novel macrocyclic inhibitors of Hepatitis C virus replication
WO2007014352A2 (en) * 2005-07-27 2007-02-01 Gilead Sciences, Inc. Antiviral phosphonate conjugates for inhibition of hiv
GEP20104956B (en) * 2005-10-11 2010-04-12 Array Biopharma Inc Compounds for inhibiting hepatitis c viral replication and use thereof
TWI411607B (zh) 2005-11-14 2013-10-11 Vitae Pharmaceuticals Inc 天門冬胺酸蛋白酶抑制劑
TWI385173B (zh) 2005-11-28 2013-02-11 Tibotec Pharm Ltd 作為ｈｉｖ蛋白酶抑制劑之經取代的胺基苯基磺醯胺化合物
AR058238A1 (es) 2005-11-28 2008-01-23 Tibotec Pharm Ltd Compuestos y derivados de aminofenilsulfonamida sustituida como inhibidores de proteasa del vih
BRPI0620705A2 (pt) * 2005-12-14 2011-11-22 Cipla Ltd formulação farmacêutica em uma forma única de dosagem unitária, produto farmacêutico, uso de uma formulação farmacêutico e uso de um inibidor de transcriptase-reversa de nucleosìdeo ou derivado fisiologicamente funcional do mesmo e um inibidor de transcriptase-reversa de nucleotìdeo ou derivado fisiologicamente funcional do mesmo
US20070167422A1 (en) * 2006-01-18 2007-07-19 Yu Kwok S Pharmaceutical compositions comprising 17-allylamino-17-demethoxygeldanamycin
DK1999133T3 (da) * 2006-03-29 2013-11-25 Gilead Sciences Inc Fremgangsmåde til fremstilling af HIV-proteaseinhibitorer
US20080070910A1 (en) * 2006-07-24 2008-03-20 Desai Manoj C Therapeutic compounds and methods
CL2007002689A1 (es) 2006-09-18 2008-04-18 Vitae Pharmaceuticals Inc Compuestos derivados de piperidin-1-carboxamida, inhibidores de la renina; compuestos intermediarios; composicion farmaceutica; y uso en el tratamiento de enfermedades tales como hipertension, insuficiencia cardiaca, fibrosis cardiaca, entre otras.
KR20090077813A (ko) 2006-09-29 2009-07-15 아이데닉스 파마슈티칼스, 인코포레이티드 Ｈｉｖ 억제제로서의 거울상이성질체적으로 순수한 포스포인돌
US20100173381A1 (en) * 2006-12-18 2010-07-08 University Of Massachusetts Crystal structures of hiv-1 protease inhibitors bound to hiv-1 protease
EP2134336B1 (en) 2007-03-16 2013-12-11 Sequoia Pharmaceuticals Benzofuran-derived hiv protease inhibitors
WO2008118849A2 (en) * 2007-03-23 2008-10-02 University Of Massachusetts Hiv-1 protease inhibitors
BRPI0811020A2 (pt) * 2007-05-03 2015-07-21 Intermune Inc Composto, composição farmacêutica e métodos de inibição da atividade da protease ns3/ns4, de tratamento da fibrose hepática, de intensificação da função hepática em indivíduo com infecção do vírus da hepatite c e métodos de síntese de compostos, de administração de inibidor da infecção do vírus da hepatite c (hcv) e de distribuição de forma de dosagem oral.
WO2008151306A1 (en) * 2007-06-05 2008-12-11 Arizona Board Of Regents, A Body Corporate Of The State Of Arizona, Acting For And On Behalf Of Arizona State University Synthesis of cyclodepsipeptide compounds having antineoplastic and/or antimicrobial activity
ES2533863T3 (es) 2007-06-29 2015-04-15 Korea Research Institute Of Chemical Technology Inhibidores novedosos de la transcriptasa inversa de VIH
WO2009005693A1 (en) 2007-06-29 2009-01-08 Gilead Sciences, Inc. Novel hiv reverse transcriptase inhibitors
US7964843B2 (en) 2008-07-18 2011-06-21 The George Washington University Three-dimensional molecular imaging by infrared laser ablation electrospray ionization mass spectrometry
US20100285446A1 (en) * 2007-07-20 2010-11-11 Akos Vertes Methods for Detecting Metabolic States by Laser Ablation Electrospray Ionization Mass Spectrometry
US8067730B2 (en) 2007-07-20 2011-11-29 The George Washington University Laser ablation electrospray ionization (LAESI) for atmospheric pressure, In vivo, and imaging mass spectrometry
US8901487B2 (en) * 2007-07-20 2014-12-02 George Washington University Subcellular analysis by laser ablation electrospray ionization mass spectrometry
WO2009085797A1 (en) 2007-12-21 2009-07-09 Gilead Sciences, Inc. Processes for preparing hiv reverse transcriptase inhibitors
US8993542B2 (en) * 2008-01-25 2015-03-31 Chimerix Inc. Methods of treating viral infections
EA201071034A1 (ru) * 2008-04-15 2011-06-30 Интермьюн, Инк. Новые макроциклические ингибиторы репликаций вируса гепатита с
US9273077B2 (en) 2008-05-21 2016-03-01 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Phosphorus derivatives as kinase inhibitors
CN102105150B (zh) 2008-05-21 2014-03-12 阿里亚德医药股份有限公司 用作激酶抑制剂的磷衍生物
US8173621B2 (en) 2008-06-11 2012-05-08 Gilead Pharmasset Llc Nucleoside cyclicphosphates
CN102088850A (zh) * 2008-06-26 2011-06-08 生命医药公司 甲基2-((r)-(3-氯苯基)((r)-1-((s)-2-(甲氨基)-3((r)-四氢-2h-吡喃-3-基)丙基氨甲酰基)哌啶-3-基)甲氧基)氨基甲酸乙酯的盐
US8658617B2 (en) 2008-07-08 2014-02-25 Gilead Sciences, Inc. Salts of HIV inhibitor compounds
EA201170441A1 (ru) * 2008-10-15 2012-05-30 Интермьюн, Инк. Терапевтические противовирусные пептиды
JP5793084B2 (ja) 2008-12-23 2015-10-14 ギリアド ファーマセット エルエルシー プリンヌクレオシドの合成
MX2011006890A (es) 2008-12-23 2011-07-20 Pharmasset Inc Analogos de nucleosidos.
TW201026715A (en) 2008-12-23 2010-07-16 Pharmasset Inc Nucleoside phosphoramidates
AR075584A1 (es) * 2009-02-27 2011-04-20 Intermune Inc COMPOSICIONES TERAPEUTICAS QUE COMPRENDEN beta-D-2'-DESOXI-2'-FLUORO-2'-C-METILCITIDINA Y UN DERIVADO DE ACIDO ISOINDOL CARBOXILICO Y SUS USOS. COMPUESTO.
TWI576352B (zh) 2009-05-20 2017-04-01 基利法瑪席特有限責任公司 核苷磷醯胺
EP2270021A1 (en) 2009-06-18 2011-01-05 Centre National de la Recherche Scientifique Phosphonates synthons for the synthesis of phosphonates derivatives showing better bioavailability
WO2010151476A2 (en) * 2009-06-25 2010-12-29 Gilead Sciences, Inc. Crystalline forms of (3r, 3as, 6ar) - hexahydrofuro [2,3-b] furan-3-yl (1s,2r) - (1-{4-[ (diethoxyphosphoryl) methoxy] pheny1}-3-hydroxy-4- [4-methoxy-n- (2-methylpropyl) benzenesul - fonamido] butan-2-yl) carbamate
US7924650B2 (en) * 2009-06-30 2011-04-12 Oracle America, Inc. Dynamically controlled voltage regulator for a memory
CA2804190A1 (en) * 2009-07-02 2011-01-06 Newgen Therapeutics, Inc. Phosphorus containing quinazoline compounds and methods of use
WO2011011519A1 (en) 2009-07-21 2011-01-27 Chimerix, Inc. Compounds, compositions and methods for treating ocular conditions
AR077692A1 (es) 2009-08-06 2011-09-14 Vitae Pharmaceuticals Inc Sales de 2-((r)-(3-clorofenil) ((r)-1-((s) -2-(metilamino)-3-((r)-tetrahidro-2h-piran-3-il) propilcarbamoil) piperidin -3-il) metoxi) etilcarbamato de metilo
DE102009041443A1 (de) * 2009-09-16 2011-03-31 Archimica Gmbh Salze des 6-Chlor-4-(cyclopropylethinyl)-1,4-dihydro-4-(trifluormethyl)-2H-3,1-benzoxazin-2-ons und deren Synthese, Aufreinigung und Anwendung als Vorstufen für Efavirenz
RU2012117395A (ru) * 2009-09-28 2013-11-10 Ф.Хоффманн-Ля Рош Лтд Новые макроциклические ингибиторы репликации вируса гепатита с
US20110082182A1 (en) * 2009-10-01 2011-04-07 Intermune, Inc. Therapeutic antiviral peptides
JP2013509433A (ja) * 2009-10-30 2013-03-14 キメリクス，インコーポレイテッド ウイルス関連疾患を処置する方法
AU2011216243B2 (en) 2010-02-12 2015-07-09 Chimerix, Inc. Nucleoside phosphonate salts
PT2552930E (pt) 2010-03-31 2015-11-17 Gilead Pharmasset Llc 2-(((s)-(((2r,3r,4r,5r)-5-(2,4-dioxo-3,4-dihidropirimidin- 1-(2h)-il)-4-fluoro-3-hidroxi-4-metiltetrahidrofuran-2- il)metoxi) (fenoxi)fosforil)amino)propanoato de (s)- isopropilo cristalino
UY33310A (es) 2010-03-31 2011-10-31 Pharmasset Inc Sintesis estereoselectiva de activos que contienen fosforo
PL3290428T3 (pl) 2010-03-31 2022-02-07 Gilead Pharmasset Llc Tabletka zawierająca krystaliczny (S)-2-(((S)-(((2R,3R,4R,5R)-5-(2,4-diokso-3,4-dihydropirymidyn-1(2H)-ylo)-4-fluoro-3-hydroksy-4-metylotetrahydrofuran-2-ylo)metoksy)(fenoksy)fosforylo)amino)propanian izopropylu
CA2797601A1 (en) 2010-04-26 2011-11-10 Chimerix, Inc. Methods of treating retroviral infections and related dosage regimes
US8884027B2 (en) 2010-10-22 2014-11-11 University Of Rochester Melampomagnolide B derivatives as antileukemic and cytotoxic agents
CA2818853A1 (en) 2010-11-30 2012-06-07 Gilead Pharmasset Llc 2'-spirocyclo-nucleosides for use in therapy of hcv or dengue virus
CN102127030B (zh) * 2011-01-21 2013-05-22 天津大学 4-(取代-1,3-二炔基)-4-(三氟甲基)苯并-1,4-二氢噁嗪-2-酮类化合物及其制备方法和应用
JP5999177B2 (ja) 2011-05-04 2016-09-28 アリアド・ファーマシューティカルズ・インコーポレイテッド Ｅｇｆｒ発動性がんの細胞増殖阻害用化合物
AR086492A1 (es) 2011-05-19 2013-12-18 Gilead Sciences Inc Procedimientos e intermediarios para preparar agentes anti-hiv
JP2014524121A (ja) 2011-07-14 2014-09-18 ザ・ジョージ・ワシントン・ユニバーシティ レーザアブレーション・エレクトロスプレイイオン化質量分析用のプルームコリメーション
EP2548991B1 (en) * 2011-07-18 2014-03-05 ESSILOR INTERNATIONAL (Compagnie Générale d'Optique) Machine for coating an optical article with an anti-soiling coating composition and method for using the machine
CA3131037A1 (en) 2011-11-30 2013-06-06 Emory University Antiviral jak inhibitors useful in treating or preventing retroviral and other viral infections
CA3202964A1 (en) 2011-12-06 2013-06-13 Delta Faucet Company Ozone distribution in a faucet
AU2013204563B2 (en) 2012-05-05 2016-05-19 Takeda Pharmaceutical Company Limited Compounds for inhibiting cell proliferation in EGFR-driven cancers
CN103665043B (zh) 2012-08-30 2017-11-10 江苏豪森药业集团有限公司 一种替诺福韦前药及其在医药上的应用
JP6462659B2 (ja) 2013-03-15 2019-01-30 ザ リージェンツ オブ ザ ユニバーシティ オブ カリフォルニア 非環式ヌクレオシドホスホン酸ジエステル
US9611283B1 (en) 2013-04-10 2017-04-04 Ariad Pharmaceuticals, Inc. Methods for inhibiting cell proliferation in ALK-driven cancers
BR112016020233B1 (pt) 2014-03-14 2022-07-19 Alltech Inc. Composições de compostos seleno orgânicos e seus usos
EP3192794A4 (en) * 2014-09-11 2018-06-27 Shionogi & Co., Ltd. Sustained hiv protease inhibitor
AU2015317972B2 (en) 2014-09-15 2019-10-17 The Regents Of The University Of California Nucleotide analogs
EP3212196A4 (en) * 2014-10-29 2018-07-11 Wisconsin Alumni Research Foundation Boronic acid inhibitors of hiv protease
HUE056470T2 (hu) 2014-12-26 2022-02-28 Univ Emory Vírusellenes N4-Hidroxicitidin származékok
WO2016187788A1 (en) 2015-05-25 2016-12-01 Merck Sharp & Dohme Corp. Fused tricyclic heterocyclic compounds useful for treating hiv infection
WO2017048252A1 (en) 2015-09-15 2017-03-23 Alltech, Inc. Compositions of selenoorganic compounds and methods of use thereof
US10377782B2 (en) 2015-09-15 2019-08-13 The Regents Of The University Of California Nucleotide analogs
KR20180069067A (ko) 2015-10-30 2018-06-22 엔비이-테라퓨틱스 아게 안티-ror1 항체
WO2017087257A1 (en) 2015-11-17 2017-05-26 Merck Sharp & Dohme Corp. Amido-substituted pyridotriazine derivatives useful as hiv integrase inhibitors
US11458214B2 (en) 2015-12-21 2022-10-04 Delta Faucet Company Fluid delivery system including a disinfectant device
SG11201806120WA (en) 2016-01-20 2018-08-30 Scripps Research Inst Ror1 antibody compositions and related methods
CN107709288A (zh) * 2016-02-03 2018-02-16 四川海思科制药有限公司 一种磷酰胺衍生物及制备方法和用途
CN106045874B (zh) * 2016-05-20 2017-12-05 大连医科大学 二苯甲酮‐二酮酸类化合物，组合物及用途
JOP20190130A1 (ar) 2016-12-02 2019-06-02 Merck Sharp & Dohme مركبات حلقية غير متجانسة رباعية الحلقات مفيدة كمثبطات إنزيم مدمج لفيروس نقص المناعة البشرية (hiv)
RU2749043C2 (ru) 2016-12-02 2021-06-03 Мерк Шарп И Доум Корп. Трициклические гетероциклические соединения, полезные в качестве ингибиторов интегразы вич
EP3601331A4 (en) 2017-03-16 2021-01-20 Evolve Biologics Inc. ALBUMIN PURIFICATION PROCESS
CN109305990B (zh) * 2017-07-28 2021-02-26 四川海思科制药有限公司 一种磷酸衍生物及制备方法和用途
CN109305989B (zh) * 2017-07-28 2021-02-26 四川海思科制药有限公司 一种磷酰胺衍生物及制备方法和用途
ES2892402T3 (es) 2017-08-01 2022-02-04 Gilead Sciences Inc Formas cristalinas de ((S)-((((2R,5R)-5-(6-amino-9H-purin-9-il)-4-fluoro-2,5-dihidrofuran-2-il)oxi)metil)(fenoxi)fosforil)-L-alaninato de etilo para tratar infecciones virales
WO2019030223A1 (en) 2017-08-07 2019-02-14 Nbe-Therapeutics Ag ANTHRACYCLINE ANTIBODY-MEDICINAL CONJUGATES HAVING HIGH IN VIVO TOLERABILITY
GB2590198B (en) 2017-12-07 2022-02-23 Univ Emory N4-hydroxycytidine derivatives and anti-viral uses related thereto
US11542288B2 (en) * 2020-06-01 2023-01-03 University Of Massachusetts Antiviral compounds

Family Cites Families (61)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
IE63869B1 (en) 1986-11-06 1995-06-14 Res Dev Foundation Aerosols containing liposomes and method for their preparation
FR2611203B1 (fr) 1987-02-20 1989-06-09 Sturtz Georges Analogues gem-diphosphoniques d'amethopterine (methotrexate) et de derives deaza-n-10 amethopterine. leur preparation et les compositions pharmaceutiques qui les contiennent
US5631370A (en) * 1988-01-20 1997-05-20 Regents Of The University Of Minnesota Optically-active isomers of dideoxycarbocyclic nucleosides
DE4003574A1 (de) * 1990-02-07 1991-08-08 Bayer Ag Neue dipeptide, verfahren zu ihrer herstellung und ihre verwendung als renininhibitoren in arzneimitteln
ATE131825T1 (de) 1990-06-13 1996-01-15 Arnold Glazier Phosphorylierte prodrugs
DE69116750T2 (de) 1990-07-04 1996-11-14 Merrell Dow Pharma 9-Purinyl-Phosphonsäurederivate
US5177064A (en) * 1990-07-13 1993-01-05 University Of Florida Targeted drug delivery via phosphonate derivatives
DE4111730A1 (de) 1991-04-10 1992-10-15 Knoll Ag Neue cytarabin-derivate, ihre herstellung und verwendung
EP0531597A1 (en) 1991-09-12 1993-03-17 Merrell Dow Pharmaceuticals Inc. Novel unsaturated acyclic phosphonate derivatives of purine and pyrimidine
US5610294A (en) 1991-10-11 1997-03-11 The Du Pont Merck Pharmaceutical Company Substituted cyclic carbonyls and derivatives thereof useful as retroviral protease inhibitors
GB9126144D0 (en) 1991-12-10 1992-02-12 British Bio Technology Compounds
FR2692265B1 (fr) 1992-05-25 1996-11-08 Centre Nat Rech Scient Composes biologiquement actifs de type phosphotriesters.
IS2334B (is) 1992-09-08 2008-02-15 Vertex Pharmaceuticals Inc., (A Massachusetts Corporation) Aspartyl próteasi hemjari af nýjum flokki súlfonamíða
DE69426904T2 (de) 1993-06-29 2001-10-11 Mitsubishi Chem Corp Phosphonat-Nukleotid Ester-Derivate
AU7491694A (en) 1993-07-14 1995-02-13 Ciba-Geigy Ag Cyclic hydrazine compounds
US5446137B1 (en) 1993-12-09 1998-10-06 Behringwerke Ag Oligonucleotides containing 4'-substituted nucleotides
US5854227A (en) 1994-03-04 1998-12-29 Hartmann; John F. Therapeutic derivatives of diphosphonates
WO1997011092A1 (fr) 1994-04-07 1997-03-27 Nippon Shinyaku Co., Ltd. Derives de phosphates de cyclosporine et composition medicinale
MX9702030A (es) 1994-09-26 1997-06-28 Shionogi & Co Derivado de imidazol.
US5705524A (en) * 1994-11-04 1998-01-06 Gilead Sciences, Inc. Thiepane compounds
EP0789695A2 (en) 1994-11-04 1997-08-20 Gilead Sciences, Inc. Thiepane compounds inhibiting and detecting hiv protease
US5750493A (en) * 1995-08-30 1998-05-12 Raymond F. Schinazi Method to improve the biological and antiviral activity of protease inhibitors
US5914332A (en) * 1995-12-13 1999-06-22 Abbott Laboratories Retroviral protease inhibiting compounds
US5874577A (en) * 1996-04-03 1999-02-23 Medichem Research, Inc. Method for the preparing 9-12-(Diethoxyphosphonomethoxy)ethyl!adenine and analogues thereof
WO1998004569A1 (en) 1996-07-26 1998-02-05 Gilead Sciences, Inc. Nucleotide analogs
DE69716924T2 (de) 1996-08-13 2003-03-20 Mitsubishi Chem Corp Phosphonat-nukleotid-verbindungen
WO1998011906A1 (en) * 1996-09-17 1998-03-26 Amur Pharmaceuticals, Inc. Phospholipid drug derivatives
AU2092599A (en) * 1997-12-24 1999-07-19 Vertex Pharmaceuticals Incorporated Prodrugs of aspartyl protease inhibitors
US6436989B1 (en) * 1997-12-24 2002-08-20 Vertex Pharmaceuticals, Incorporated Prodrugs of aspartyl protease inhibitors
US6312662B1 (en) * 1998-03-06 2001-11-06 Metabasis Therapeutics, Inc. Prodrugs phosphorus-containing compounds
WO1999062921A1 (en) 1998-06-01 1999-12-09 S & T Science And Technology Inc. Antiviral phosphorus derivatives of 4'-thio-5-ethyl-2'-deoxyuridine
GB9815567D0 (en) * 1998-07-18 1998-09-16 Glaxo Group Ltd Antiviral compound
CO5261510A1 (es) * 1999-02-12 2003-03-31 Vertex Pharma Inhibidores de aspartil proteasa
US6258831B1 (en) * 1999-03-31 2001-07-10 The Procter & Gamble Company Viral treatment
AR031520A1 (es) * 1999-06-11 2003-09-24 Vertex Pharma Un compuesto inhibidor de aspartilo proteasa, una composicion que lo comprende y un metodo para tratar un paciente con dicha composicion
US6593292B1 (en) 1999-08-24 2003-07-15 Cellgate, Inc. Compositions and methods for enhancing drug delivery across and into epithelial tissues
GB9920872D0 (en) 1999-09-04 1999-11-10 Glaxo Group Ltd Benzophenones as inhibitors of reverse transcriptase
IL131887A0 (en) 1999-09-14 2001-03-19 Dpharm Ltd Phospholipid prodrugs of anti-proliferative drugs
PT1233770E (pt) * 1999-12-03 2008-04-24 Univ California At San Diego Compostos de fosfonato
CA2393359A1 (en) 1999-12-22 2001-06-28 Merck Frosst Canada & Co. Aromatic phosphonates as protein tyrosine phosphatase 1b (ptp-1b) inhibitors
US6767900B2 (en) 2000-02-29 2004-07-27 Mitsubishi Pharma Corporation Phosphonate nucleotide compound
KR20030019423A (ko) 2000-06-13 2003-03-06 시오노기세이야쿠가부시키가이샤 프로페논 유도체를 함유하는 의약 조성물
FR2810322B1 (fr) * 2000-06-14 2006-11-10 Pasteur Institut PRODUCTION COMBINATOIRE D'ANALOGUES DE NUCLEOTIDES ET NUCLEOTIDES (XiTP)
UA72612C2 (en) 2000-07-06 2005-03-15 Pyrido[2.3-d]pyrimidine and pyrimido[4.5-d]pyrimidine nucleoside analogues, prodrugs and method for inhibiting growth of neoplastic cells
US6617310B2 (en) 2000-07-19 2003-09-09 Bristol-Myers Squibb Pharma Company Phosphate esters of bis-amino acid sulfonamides containing substituted benzyl amines
SI2682397T1 (sl) 2000-07-21 2017-08-31 Gilead Sciences, Inc. Predzdravila fosfonatnih nukleotidnih analogov in postopki za selekcijo in izdelavo le-teh
US6420586B1 (en) 2000-08-15 2002-07-16 University Of Kansas Amino acid-derived cyclic phosphonamides and methods of synthesizing the same
EP2360166A1 (en) 2001-01-22 2011-08-24 Merck Sharp & Dohme Corp. Nucleoside derivatives as inhibitors of RNA-dependent RNA viral polymerase
GB0114286D0 (en) 2001-06-12 2001-08-01 Hoffmann La Roche Nucleoside Derivatives
KR20020097384A (ko) 2001-06-20 2002-12-31 미쯔비시 도꾜 세이야꾸 가부시끼가이샤 기존의 약제에 내성변이를 가지는 바이러스에 유효한 약제
RU2004101289A (ru) * 2001-06-20 2005-07-10 Нуэволюшн А/С (Dk) Способ синтеза молекулы на матрице
JP2005508924A (ja) 2001-08-30 2005-04-07 三菱ウェルファーマ株式会社 抗ウイルス剤
WO2003050129A1 (en) 2001-12-07 2003-06-19 Eli Lilly And Company Use of phosphonate nucleotide analogue for treating hepatitis b virus infections
UA77033C2 (uk) 2001-12-21 2006-10-16 Mgi Gp Inc Спосіб отримання водорозчинних фосфонооксиметильних похідних спирту та фенолу
AU2003210787B2 (en) 2002-02-01 2009-04-23 Medinol Ltd. Phosphorus-containing compounds & uses thereof
EP1472230B1 (en) 2002-02-08 2009-06-17 Conforma Therapeutic Corporation Ansamycins having improved pharmacological and biological properties
WO2003080078A1 (en) 2002-03-18 2003-10-02 Mitsubishi Pharma Corporation Treatment of pre-core hepatitis b virus mutant infections
AU2003231766A1 (en) * 2002-04-26 2003-11-10 Gilead Sciences, Inc. Non nucleoside reverse transcriptase inhibitors
US20050239054A1 (en) * 2002-04-26 2005-10-27 Arimilli Murty N Method and compositions for identifying anti-HIV therapeutic compounds
WO2005011709A1 (en) 2003-02-19 2005-02-10 Yale University Anti-viral nucleoside analogs and methods for treating viral infections, especially hiv infections
KR20060022647A (ko) 2003-04-25 2006-03-10 길리애드 사이언시즈, 인코포레이티드 키나아제 억제 포스포네이트 유사체

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Publication number Publication date
DE60315023T2 (de) 2008-04-03
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SI1509537T1 (sl) 2008-02-29
TWI332956B (en) 2010-11-11
ZA200409377B (en) 2006-03-29
WO2003090691A3 (en) 2006-02-09
WO2003090690A2 (en) 2003-11-06
BR0309573A (pt) 2005-02-01
US20070190523A1 (en) 2007-08-16

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