NL192914C - Werkwijze voor de bereiding van een antioxidant preparaat en daarmee verkregen preparaat. - Google Patents

Description

1 192914

Werkwijze voor de bereiding van een antioxidant preparaat en daarmee verkregen preparaat

De onderhavige uitvinding heeft betrekking op een werkwijze voor de bereiding van een antioxidant preparaat waarbij 5 a) plantaardig materiaal wordt verhit b) daaraan koji wordt toegevoegd en c) een plantaardige olie wordt toegevoegd.

Een dergelijke werkwijze is bekend uit het JP-A-60.110.269. Hierin wordt een werkwijze beschreven waarbij men verhitte rijstzemelen, tarwe, "hatomugi” (een soort Oosterse gerst), tarwekiemen, sojabonen 10 en/of groene thee waaraan een kleine hoeveelheid koji toegevoegd is 4 dagen onderdompelt in een mengsel van sesamolie en sojaolie, waarna men de olie afscheidt, daaraan azijn toevoegt en de olie in capsules brengt. In dit moment staat dat dit plantaardige preparaat een opmerkelijke SOD-achtige (SOD is het enzym ’’superoxide-dismutase) werking heeft en tegen verschillende ziekten werking heeft.

Werkwijzen voor het voorkomen en genezen van diverse ziekten zijn recent ontwikkeld en in praktijk 15 gebracht, en de gemiddelde levensduur van de mens is dienovereenkomstig omhoog gegaan. Maar ziekten van de oudere mens, zoals ateriosclerose, beroerte, hartinfarct, kanker en diabetes, en ziekten zoals kwaadaardige rheumarthritis, ziekte van Behget, ziekte van Crohn en darmontsteking met maagzweren, en ziekten door chemische stoffen hebben veel aandacht getrokken ais hoofdproblemen bij het handhaven van de gezondheid.

20 Hoewel dergelijke ziekten niet alle dezelfde oorzaak hebben is het als mechanisme van directe schade aan het menselijk lichaam bekend dat overmaat een reactieve soorten zuurstof of lipoperoxiden (hierna eenvoudigheidshalve aangeduid als ’’reactieve soorten zuurstof’) in het menselijk lichaam ontstaan door diverse soorten irritatie van buiten, waaronder luchtvervuiling, en dat ze aan schade aan de weefsels bijdragen, hetgeen tot meer ziekte leidt.

25 Het menselijk lichaam bevat een enzym ’’superoxide-dismutase” (SOD) genoemd, dat deze overmaat aan reactieve soorten zuurstof wegvangt en de weefsels van het lichaam tegen schade beschermt, zodat het enzym tot een betere gezondheid kan bijdragen en ons tegen ziekten kan beschermen.

Meer recent is aangetoond dat bij volwassenen, vooral bij die boven de 40, ziekten meer voorkomen doordat de werking van het genoemde SOD met stijgende leeftijd omlaag gaat, en dat als door chronische 30 of acute irritatie door chemische producten een overmaat aan reactieve soorten zuurstof ontstaat het menselijk lichaam tekort schiet aan SOD-werking en dan aan de genoemde ziekten gaat lijden. Daarom heeft de geneeskunde tegenwoordig veel belangstelling voor het handhaven van het SOD-peil.

Daarom is getracht ziekten ten gevolge van een toename aan reactieve soorten zuurstof of door een verlaging van de SOD-werking te genezen en te voorkomen door SOD toe te dienen.

35 De enige wijze waarop thans SOD toegediend kan worden is door injectie van SOD of van in liposomen ingekapseld SOD. In Japan en in Frankrijk wordt in toenemende mate onderkend dat deze methode opmerkelijke effecten heeft bij het behandelen van ziekten van de oude dag zoals de ziekte van Behget, kwaadaardige rheumarthritis, ziekte van Kawasaki, darmontstekingen met maagzweren, ziekte van Crohn, beroerte, hartinfarct en diabetes, en voor het voorkomen van kanker en veroudering.

40 Maar van de diverse vormen van SOD-preparaten is alleen bij injectie-preparaten medisch en wetenschappelijk enig effect onderkend, terwijl het effect van orale preparaten tot nog toe niet gebleken is. Dat komt doordat SOD door het maagzuur gedenatureerd wordt en doordat het ten gevolge van zijn molecule-gewicht van 30.000 of hoger niet uit het maagdarmkanaal geresorbeerd kan worden.

Bovendien heeft SOD het bezwaar dat het alleen op superoxide (02 ) inwerkt, slechts één van de vier 45 soorten reactieve zuurstof.

Hoewel, zoals hierboven beschreven, alleen een injectie-preparaat thans beschikbaar en doeltreffend is is het duidelijk dat orale preparaten zowel voor artsen als patiënten handzamer en prettiger in gebruik zouden zijn, vooral bij langdurige behandeling om ziekte te voorkomen en de gezondheid in stand te houden.

50 Bovendien moet men, als het SOD-product niet als medicijn maar als voedingsbestanddeel gebruikt wordt, er wel van uitgaan van het SOD-product oraal toegediend wordt en het valt te verwachten dat SOD-producten met een opmerkelijk vermogen tot wegvangen van reactieve soorten zuurstof ontwikkeld zullen worden.

Zelfs bij plantaardige preparaten zoals beschreven in de hiervoor genoemde JP-A-60.110.269 blijft het 55 nadeel dat de SOD-werking niet uit het maagdarmkanaal geresorbeerd kan worden en zelfs als het geresorbeerd zou worden zou het SOD alleen inwerken op het superoxide en blijft bijvoorbeeld het H202 schadelijk toenemen.

192914 2

Experimenteel is vastgesteld dat het bovengenoemde plantaardige materiaal een lager vermogen tot het wegvangen van reactieve zuurstof heeft dan behandeld materiaal; het is zo te zeggen niet meer dan een eenvoudige nutriënt.

De onderhavige uitvinding voorziet nu in een werkwijze volgens de aanhef, gekenmerkt doordat het 5 plantaardige materiaal, dat plantenzaden, granen en/of kiemen daarvan omvat, verhit wordt tot een temperatuur tussen 50 en 150°C, het plantaardige materiaal vervolgens wordt gefermenteerd met koji, waarna plantaardige olie wordt toegevoegd die verkregen is uit plantaardig materiaal dat verwarmd is geweest.

Het met deze werkwijze verkregen preparaat heeft een opmerkelijke werking bij het wegvangen van 10 reactieve soorten zuurstof en een opmerkelijk effect bij het behandelen of voorkomen van diverse ziekten die het gevolg zijn van overmaat aan reactieve zuurstof in het menselijk lichaam, en is ook geschikt voor het in stand houden van gezondheid en schoonheid.

In de onderhavige beschrijving wordt met ”koji” een van de schimmels van Aspergillus oryzae aangeduid die bij fermentatieomstandigheden amylase en protease produceert.

15 Het heeft de voorkeur indien met de uit plantaardig materiaal verkregen olie tevens vitamine C, een of meer derivaten van vitamine C en/of plantaardig materiaal dat het bevat wordt toegevoegd.

Plantenzaden en granen, in het bijzonder kiemen van sojabonen, sesam, ’’hatomugi” (een soort Oosterse gerst) of rijstzemelen, bevatten in het algemeen laagmoleculaire stoffen met antioxidant-werking zoals flavonoïden, polyfenolen, tannien, tocoferol, caroteen en vitamine B2. Maar daar die stoffen onderling en met 20 zichzelf reageren vindt men in het natuurlijke materiaal bijna alleen maar hoog moleculaire stoffen en vertonen de plantenzaden, granen en kiemen daarvan als zodanig slechts weinig antioxidant-werking en kunnen ze ook niet werkzaam zijn bij behandeling en het voorkomen van ziekten. Maar als die planten-zaden, granen en/of kiemen daarvan onder voortdurend roeren tot een geëigende milde temperatuur verwarmd worden komen er stoffen met antioxidant-werking uit de polymeren vrij en ontstaan er weer de 25 oorspronkelijke laagmoleculaire stoffen welke in verrassende mate antioxidant-werking vertonen, wat, vergeleken met onbehandelde plantenzaden, granen en/of kiemen daarvan, tot een sterke toename van het vermogen zuurstof weg te vangen leidt.

Als aan de andere kant de plantenzaden, granen en/of kiemen daarvan tot een hogere temperatuur verhit worden worden de daarin aanwezige stoffen met antioxidant-werking geïnactiveerd en gaat hun 30 werking omlaag.

Het is dus nodig bijzondere aandacht te schenken aan het verhitten, de temperatuur en de verhittingstijd.

Met de term ’’verhitten” wordt in deze beschrijving bedoeld dat warmte voor het activeren aangevoerd wordt zonder de bestanddelen te degraderen, en in het bijzonder dat warmte niet alleen de buitenkanten maar ook het binnenste van de materialen bereikt. De verwarmingstemperatuur kan niet uniform gedefini-35 eerd worden omdat die afhankelijk is van de gebruikte soort plant en de andere omstandigheden, maar in het algemeen ligt die tussen 50° en 150°C en in vele gevallen tussen 50° en 100°C.

Bij het verwarmen is het nodig dat zo homogeen te doen dat de temperatuurverschillen tussen binnenkant en buitenkant zo klein mogelijk zijn. Hiertoe kan men verwarmen met infrarode straling, opwarmen in een thermostatische oven en opwarmen in wervelbed toepassen, maar de uitvinding is niet tot deze 40 methoden beperkt. Bij voorkeur wordt verwarmd door middel van infrarode straling.

Tot de hierboven genoemde plantenzaden en granen behoren rijst, tarwe, gerst, mais, hatomugi, adzuki-bonen, erwten en sesamzaad, maar de uitvinding is niet beperkt tot dit plantaardige materiaal, zo lang dat maar antioxidantwerking vertoont.

Alle genoemde plantenzaden kunnen ook als kiemen gebruikt worden en daaronder hebben wij 45 rijstzemelen en tarwekiemen bijzondere voorkeur.

Als men een combinatie van plantenzaden, granen en kiemen gebruikt moet de hoeveelheid kiemen bij voorkeur 5 gew.% of meer van het totaal bedragen, en 10% of meer is nog beter.

Na het verhitten van deze plantenzaden, granen of kiemen worden ze gefermenteerd door er een microörganisme aan toe te voegen. In het algemeen vergt dat 2 tot 3 dagen. Met ’’fermenteren” wordt hier 50 fermentatie in ruime zin bedoeld, dit heeft aan dat organische stoffen door microörganismen afgebroken worden en dat geeft niet aan dat de metabolieten enkelvoudige verbindingen zijn.

Bij deze fermentatie wordt een groot deel van de bovengenoemde antioxidanten van laag molecule-gewicht vrijgemaakt door de inwerking van enzymen zoals het protease in koji, zodanig dat de antioxidant-werking toeneemt. Naast koji en gist kan men ook plantaardig materiaal gebruiken dat microörganismen 55 bevat en fermenterend vermogen heeft, zoals de buitenkanten van vijgen, de schimmels van grapefruits, rijpe ananassen en papaya.

Volgens de uitvinding wordt plantaardige olie, verkregen uit verwarmd plantaardig materiaal na het 3 192914 verhitten en fermenteren toegevoegd. Het toevoegen van deze plantaardige olie verhoogt de hoeveelheid stoffen met antioxidant-werking zoals tocoferol, en versterkt verder hun werking.

Afhankelijk van de omstandigheden valt te verwachten dat in plantaardige olie oplosbare stoffen en daarin onoplosbare stoffen van elkaar gescheiden raken zodat de beide fracties geschikt gebruikt kunnen 5 worden, afhankelijk van de ziekte.

Voorbeelden van uitgangsstoffen voor de plantaardige olie zijn sesamzaad, sojabonen, katoenzaad, mais, saffloer, sleutelbloem, rijstzemelen, raapzaad en olijven, welke veel in voeding en geneesmiddelen gebruikt worden, maar de uitgangsstoffen voor de plantaardige olie zijn hiertoe niet beperkt.

Van deze heeft sesamzaad de meeste voorkeur.

10 De uitvinding verschaft ook een preparaat met antioxidant-werking door vitamine C, één of meer derivaten van vitamine C of plantaardig materiaal dat dat bevat toe te voegen aan het materiaal verkregen door verhitten, fermenteren en toevoegen van plantaardige olie.

Vitamine C en de derivaten daarvan, die stoffen met sterk reducerend vermogen zijn, vangen reactieve zuurstof weg en beschermen het koji enz. tegen afbraak, zodat het bovengenoemde preparaat gestabili- 15 seerd wordt en de antioxidantwerking van de daarin vrijgemaakte stoffen, zoals tocoferol, polyfenolen, flavonoïden, tannien en vitamine B2, nog verder versterkt worden, wat een synergetisch effect en een sterke toename van de antioxidant-werking betekent.

Voorbeelden van derivaten van vitamine C zijn zouten zoals het natrium- en kaliumzout van vitamine C en esters zoals vitamine C-palmitaat.

20 Voorbeelden van planten die vitamine C bevatten zijn de jonge blaadjes en worteltjes van gerst en radijs, de vruchten van lemoen en citroen, groene thee en spinazie; natuurlijk is de uitvinding niet tot het gebruik van die planten beperkt. De planten mogen toegevoegd worden zoals ze zijn, of vermalen, of als sap of als poeder of gedroogd extract, zo lang het maar vitamine C of derivaat daarvan bevat.

De diverse bestanddelen kunnen in elke volgorde van elkaar gemengd worden.

25 Desgewenst kunnen hulpgeneesmiddeien en andere stoffen voor het bevorderen van de gezondheid toegevoegd worden, zoals diverse vitaminen, chemische bestanddelen die voor het menselijk lichaam nodig zijn, zoals metalen en jood, en hulpstoffen voor de bereiding of correctiemiddelen, zoals reukstoffen, tincturen, oppervlak-actieve stoffen en verdunningsmiddelen.

Het preparaat volgens de uitvinding wordt bij voorkeur niet alleen als geneesmiddel voor het behandelen 30 of voorkomen van ziekten van de oude dag gebruikt, zoals arteriosclerose, beroerte, hartinfarct, diabetes, kwaadaardige rheumarthritis, ziekten van Behpet, ziekte van Crohn, darmontstekingen met maagzweren en ziekte van Raynaud, diverse ziekten door milieu-verontreinigingen, sproeten, wratten en verwondingen, keloïd, algemene malaise, kater en constipatie, maar ook als gezondheidsvoedsel voor het in stand houden van schoonheid en gezondheid.

35 Daar het natuurproduct volgens de uitvinding op alle vier soorten reactieve zuurstof (02', H202, -OH en 102, inwerkt, mag men stellen dat ze het voordeel hebben dat hun effect groter is dan dat van superoxide-dismutase (SOD).

Daar de bovengenoemde antioxidant-werking van het product stabiel is en in aanwezigheid van maagzuur zelfs omhoog gaat, daar het product door maagzuur afgebroken wordt en daarbij laag moleculaire 40 stoffen met een sterke oxidant-werking vrijkomen (zie Niwa c.s. in inflammation 10, No. 1, 1986), kan het product bovendien bij het behandelen en voorkomen van ziekten en bij het in stand houden van de gezondheid oraal toegediend worden.

Ook is het mogelijk de producten plaatselijk toe te passen voor de behandeling van brandwonden, algemene verwondingen of dermatose.

45

Voorbeelden

Er komt nu een beschrijving van het effect van combinaties van enige monsters, maar deze uitvinding is niet tot de genoemde combinaties beperkt. De bereiding van de monsters ging als volgt:

50 Monster 1A

In een keramiek vat werd 100 g rijstzemelen geleidelijk tot ongeveer 70°C verhit, zodanig dat het niet oververhit werd; daarna werd het vermalen. Aan de vermalen rijstzemelen werd 10 mg ”koji" uit de handel toegevoegd, en het monster werd toen 72 uur bij 33°C gefermenteerd.

55 Monster IB

De bereiding van monster 1A werd herhaald, behalve dat in plaats van rijstzemelen tarwekiemen gebruikt werden.

192914 4

Monster IC

De bereiding van monster 1A werd herhaald, behalve dat in plaats van rijstzemelen tarwe gebruikt werd. Monster 1D

5 In een ijzeren vat werd een mengsel van 100 g sojabonen en 500 g zand onder roeren tot ongeveer 80°C verhit, zodanig dat het niet oververhit werd. Sojabonen en zand werden toen onder toepassing van verschil in soortelijk gewicht van elkaar gescheiden en 30 mg "koji” uit de handel werd aan de vermalen sojabonen toegevoegd, waarna het monster 72 uur bij 32°C gefermenteerd werd.

10 Monster 1E

De bereiding van monster 1A werd herhaald, behalve dat in plaats van rijstzemelen ’’hatomugi” (een soort gerst) gebruikt werd.

Monster 1F

15 In een dikke aardewerken pot werden sesamzaden tot ongeveer 80° verhit, zodanig dat ze niet oververhit werden; daarna werden ze vermalen.

Monster 2A

Monster 1F werd vermalen en olie werd eruit geperst.

20

Monster 2B

De bereiding van monster 2A werd herhaald, behalve dat in plaats van het sesamzaad verhitte sojabonen gebruikt werden.

25 Monster 3A

Groene thee in poedervorm.

Monster 3B

Uit citroen geperst sap.

30

Monster 3C

Jonge gerstebiaadjes werden uitgeperst en het sap werd gedroogd.

Monster 3D

35 Synthetisch vitamine C.

De antioxidant-werking van combinaties van de aldus verkregen preparaten en van vergelijkings-preparaten werd nagegaan met de door Niwa c.s. in Inflammation 10 (1986) 80-81 beschreven methode.

Hiertoe werd ieder monster ultrasoon bestraald en dan tot een concentratie van 1,6 mg/ml gesuspendeerd in een systeem dat actieve zuurstof genereerde, waarin men reactieve zuurstof kan meten (neutrofie-40 ien en xanthine/xanthineoxidase). De gehalten aan de diverse soorten reactieve zuurstof werden gemeten en vergeleken met preparaten die niet volgens de uitvinding waren. De genoemde dosis van 1,6 mg/ml is de concentratie die het preparaat volgens de uitvinding in bloed verondersteld wordt te bereiken indien dagelijks een dosis van 10 g preparaat door het lichaam opgenomen wordt.

De vier soorten reactieve zuurstof werden als volgt bepaald: 45 02' werd bepaald uit de reductie van ferricytochroom c door 02', wat in een Beekman spectrofotometer gevolgd wordt bij een golflengte van 550 nm; dit werd omgerekend in 02’. Voor de bepaling van H202 werd de vermindering van de fluorescentie voor scopoletine benut die H202 in aanwezig van peroxidase geeft; de fluorescentie van scopoletine werd gemeten met een Hitachi spectrofotometer bij een excitatiegolflengte van 370 nm en een fluorescentiegolflengte van 460 nm. voor de bepaling van -OH werd de reactie daarvan met 50 2-keto-3-(methylthio)boterzuur benut, waarbij etheen (C2H4) gevormd wordt; de hoeveelheid gevormd etheen werd door gaschromatografie in een apparaat van Hitachi bepaald en in -OH omgerekend. Voor de bepaling van 102 werd zijn chemiluminescentie benut, die in een vloeistofscintillatieteller gemeten werd waarbij geen luminol toegevoegd en geen licht toegelaten werd.

De verkregen uitkomsten staan in tabel A.

5 192914 TABEL A _

Prep. Samenstelling (gewichtsverhoudingen) % verlaging van no. ----- 5 02- H202 .OH 102 1 1A:2B=90:10 28 24 23 25 2 1A:2B=90:10 26 22 22 21 10 -—-- I" 3 1B:2A=90:10 30 28 25 27 4 1A:2A:3A=80:10:10 46 48 41 44 15 5 1 A: 1 C:2A:3B=15:65:10:10 51 50 47 50 •f 6 1A:1C:2A:3B=40:40:10:10 60 62 61 63 c ________—-—— I 7 1A:1B:1C:1D:1E:1F:2A:3A=13:13:13:13:13:7:12:16 75 72 77 75 20 % ---------- g 8 preparaat no. 7 met 2B in plaats van 2A 68 65 66 67 <D ___ _ _ _____—-- O) — 1 ' -' -- § 9 preparaat no. 7 waaraan 10% 3B toegevoegd was 85 80 88 87 c _______________ © ---- 25 5 10 preparaat no. 7 met 3C in plaats van 3A 77 75 72 74

Cl .. , ... — , ... η., , -— - Φ cl 11 preparaat no. 7 met 3D in plaats van 3A 70 67 68 67 1 dezelfde samenstelling als no. 1 maar niet aan verhitting en 6 5 6 4 30 fermentatie onderworpen J 2 dezelfde samenstelling als no. 7 maar niet aan verhitting en 8 8 6 6 | fermentatie onderworpen Ω. __ __ — CD -- 35 w 3 dezelfde samenstelling als no. 7, maar zonder infrarood verhit 3 2 4 2 c en met oververhitte oppervlakken E? 4 dezelfde samenstelling als no. 7 maar met olie uit niet verhit 7 8 7 9 > sesamzaad dat anders dan 2A was 40 ---

De uitkomsten van klinische proeven uitgevoerd met de in tabel A genoemde preparaten 1, 4, 7 en 9 en vergelijkingspreparaten 2 en 4 staan in tabel B.

Claims (5)

192914 6 TABEL B Aantal malen succes/aantal gevallen ziekte Rheu- Ziekte van Sproeten Kater 5 marthritis Raynaud Dosis per dag 15 g 9 g 9 g 12 g Toegediend gedurende 3 maanden 4 maanden 1 maand Éénmaal (na 10 het drinken) Prep, van de uitv. 1 2/6 2/6 1/6 3/6 4 3/6 2/5 1/6 3/6 15 - 7 11/18 4/6 6/18 13/20 9 16/22 6/8 6/15 13/20 20 Verg. prep. 2 0/8 0/5 0/6 0/4 4 0/8 0/6 0/4 1/5 25

1. Werkwijze voor de bereiding van een antioxidant-preparaat waarbij a. plantaardig materiaal wordt verhit 30 b. daaraan koji wordt toegevoegd en c. een plantaardige olie wordt toegevoegd, met het kenmerk, dat het plantaardige materiaal, dat plantenzaden, granen en/of kiemen daarvan omvat, verhit wordt tot een temperatuur tussen 50 en 150°C, het plantaardige materiaal vervolgens wordt gefermenteerd met koji, waarna plantaardige olie wordt toegevoegd die verkregen is uit plantaardig 35 materiaal dat verhit is geweest tot een temperatuur tussen 50 en 150°C.

2. Werkwijze volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat het plantaardige materiaal wordt verhit door IR straling.

3. Werkwijze volgens één der voorgaande conclusies, met het kenmerk, dat de uit plantaardig materiaal verkregen olie tevens vitamine C, een of meer derivaten daarvan en/of plantaardig materiaal dat dit bevat 40 wordt toegevoegd.

4. Preparaat verkregen met de werkwijze volgens één der conclusies 1 tot 4, met het kenmerk, dat het plantaardige materiaal rijstzemelen of tarwekiemen omvat.

5. Preparaat verkregen met de werkwijze volgens één der conclusies 1 tot 4, met het kenmerk, dat de gebruikte olie sesamolie is.